JP5204947B2 - リン酸受容体化合物の使用、ならびにリン酸受容体化合物を含んでいる、薬学的組成物、スキンケア用の組成物、およびキット - Google Patents
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Description
本発明は、炎症や腫瘍などの、リン酸化反応の増大に起因する疾病及び病状(condition)を治療する方法に関する。また、本発明は、細胞、組織、及び器官内におけるリン酸化の増進を阻害する方法に関する。当該方法は、リン酸受容体化合物(PAC)を用いるものである。さらに、本発明は、PACを含有する物質に関する。
情報伝達とは、細胞外信号が、細胞表面の受容体と相互作用し、最終的に細胞の機能性に変化を及ぼす、一連のプロセスである。この情報伝達に関しては、タンパク質のリン酸化が非常に重要な役割を担っている。タンパク質のリン酸化は、タンパク質リン酸化酵素(蛋白キナーゼ)によって行われており、細胞機能の事実上ほぼ全ての特徴は、何らかの形でキナーゼ活性に依存している。驚くべきことではないが、異常なキナーゼ活性(通常は、上昇したキナーゼ活性)は、多くの疾病又は心身機能異常と関連している。
具体的には、本発明はリン酸化の増進に起因する疾病及び病状の治療を行う方法と物質を提供するものである。また、本発明は、細胞、組織、及び器官内におけるリン酸化の増進を阻害する方法及び物質にも関する。本発明の方法及び物質は、リン酸受容体化合物(PAC)を用いる。PACはリン酸化を受けることができる化合物である。PACのリン酸化は、キナーゼによる本来の基質のリン酸化に用いることができるATP及びリン酸基を減少させ、その結果、不必要なリン酸化の増進を阻害する効果がある。従って、PACの同定は重要ではない。また、どの特定のキナーゼが不必要なリン酸化の増進を引き起こすのに関与しているかを知る必要はない。
図1は、インターロイキンの分量と治療との関係を示した棒グラフである。
本明細書において、「リン酸受容体化合物」又は「PAC」は、リン酸化を受けることができる化合物である。PACは、細胞外PAC(EPAC)又は細胞内PAC(IPAC)である。
付帯的な「細胞外」とは、リン酸化に関与する細胞内経路と相互作用するほど、細胞外リン酸受容体化合物(EPAC)が細胞内部まで十分に浸透(貫通)しないことを意味している。このような物質が細胞内部に浸透(貫通)すると、細胞に深刻な損傷を与える、又は細胞を死なせる場合がある。EPACは、リン酸化に関与する細胞内経路と相互作用できるという意味で、細胞膜に浸透しない限りは、完全に細胞外にとどまっていても、細胞膜上もしくは細胞膜内部に存在する受容体及び/又はその他の分子と、結合もしくは相互作用してもよく、また、細胞膜に浸透さえしてもよい。
(Xaa1)m[Ac−Lys(Xaa1)nXaa2]p(Xaa1)m 又は、
(Xaa1)m[Ac−Lys(Xaa1)nXaa2Xaa2(Xaa1)nLys−Ac]p(Xaa1)m
という配列であり、当該配列においては、
Acはアシル基であり、
Xaa1はどのようなアミノ酸であってもよく、
Xaa2はセリン、スレオニン、又はチロシンであり、
mは0〜10であり、
nは1〜3であり、
pは1〜5であり、さらに、
m、n、pは、全アミノ酸数が少なくとも約20になるように選択され、及び/又は、Xaa1は、上記ペプチドが親水性となるように選択される。
「細胞内」とは、リン酸化に関与する細胞内経路と相互作用するように、細胞内リン酸受容体化合物(IPAC)が十分に細胞内へと浸透(貫通)することを意味している。上記IPACは、細胞膜に浸透し、細胞質に到達することが好ましい。
(Xaa1)m[Ac−Lys(Xaa1)nXaa2]p(Xaa1)m、又は
(Xaa1)m[Ac−Lys(Xaa1)nXaa2Xaa2(Xaa1)nLys−Ac]p(Xaa1)m
という配列であって、当該配列においては、
Acはアシル基であり、
Xaa1はどのようなアミノ酸であってもよく、
Xaa2はセリン、スレオニン、又はチロシンであり、
mは0〜10であり、
nは1〜3であり、
pは1〜5であり、さらに、
m、n、pは、全アミノ酸数が約20以下になるように選択され、さらに、Xaa1は、上記ペプチドが疎水性となるように選択される。
動物にPACを投与する場合、PACは、選択された細胞、組織、又は器官にターゲティングされる。PACのターゲティングは、標的細胞、標的組織又は標的器官にその効果を集中させ、有害な副作用が発生する可能性を減少させ、さらに、必要なPACの投与量を減少させる。また、IPACの場合、IPACが全身投与されるときには、ターゲティングされることが特に好ましい。また、ターゲティングすることで、IPACがその他の投与形態が使用される場合でも、不必要な細胞損傷又は細胞死を、減少又は防止することができる。
本発明により、リン酸化の増進に起因する疾病及び病状を治療する方法が提供される。上記のようなあらゆる疾病及び病状の治療に、EPACを用いることができる。IPACは、癌のような細胞死が望ましい、又は細胞死を黙認できる疾病及び病状の治療にのみ用いられるべきである。また、本発明により、PACを含む医薬品が提供される。
(1)デンプン、乳糖、ショ糖、グルコース、マンニトール、及び/又はケイ酸などの賦形剤又は増量剤、
(2)カルボキシメチルセルロース、アルギン酸塩、ゼラチン、ポリビニルピロリドン、ショ糖、及び/又はアカシアゴムなどの結合剤、
(3)グリセロールなどの湿潤剤、
(4)寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモ又はタピオカのデンプン、アルギン酸、特定のケイ酸塩、及び炭酸ソーダなどの崩壊剤(disintegrating agent)、
(5)パラフィンなどの溶液緩染剤(solution retarding agents)、
(6)第4級アンモニウム化合物などの吸収促進剤、
(7)セチルアルコール及びグリセロールモノステアレートなどの湿潤剤、
(8)カオリンやベントナイト粘土などの吸収剤、
(9)滑石、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体のポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、及びこれらの混合物などの潤滑剤、並びに、
(10)着色剤から任意のものが含まれる。
本発明のEPACは、動物から取り出された細胞、組織又は器官におけるリン酸化の増進を阻害するために用いることができる。炎症のために、リン酸化の増進が、細胞、組織、又は器官で見出されることがある。組織又は器官におけるリン酸化の増進を阻害するために、上記組織又は器官を、本発明のEPAC又はEPACの混合物を効果的な分量含んでいる溶液に接触させる。上記組織又は器官と上記溶液とを接触させる方法としては、(例えば、上記組織又は器官を溶液中に配置する方法、及び/又は、上記溶液で器官(腎臓など)を満たす方法を用いることができる。上記の溶液に加えられるEPACの効果的な分量は、経験的に決定することができる。なお、分量を経験的に決定することは当技術分野における技能の範疇内である。摘出された組織又は器官は、その後、受容動物への組織移植、又は研究用途(灌流された肝臓を薬剤の選別に用いることなど)に用いることができる。本発明のEPACは、単独で用いられても、その他の化合物、薬剤、又は物質と組み合わせて用いられてもよい。
本発明のEPACは、口腔ケア製品として、動物に投与されてもよい。上記口腔ケア製品は、口腔ケア組成物及び口腔ケアデバイスを含んでいる。本発明の口腔ケア製品への利用に適したEPACは、少なくとも部分的に脱リン酸化されたホスビチン及びカゼインである。
本発明のEPACは、パーソナルケア製品(personal care products)として、動物に投与されてもよい。パーソナルケア製品には、パーソナルケア組成物(personal care compositions)及びパーソナルケアデバイス(personal care device)が含まれる。
〔実施例1:脱リン酸化ホスビチンによるIL−8の阻害〕
ホスビチンは、鶏卵の卵黄から抽出された。その方法は、「Losso and Nakai, Egg Uses And Processing Technologies」、「New Developments, pages 150-157 (Sim and Nakai, eds., Cab International, Oxon, UK, 1994)」に記されている。その後、「Reimerdes and Klostermeyer, Methods in Enzymology, Volume 45, pages 26-28 (1976)」に示された方法で、ホスビチンの脱リン酸化を行った。このホスビチン調製物は、約20%〜約50%が脱リン酸化されているものと推定された。
蒸留水に溶解したニワトリのホスビチン(Sigma)(0.5g/100ml)に、0.4N NaOHを加え、37℃で3時間、脱リン酸化を行った(Jiang et al., J. Agric. Food Chem., 48: 990-994 (2000))。脱リン酸化の後、0.1N HClを用いて、ホスビチン溶液のpHを7.8に調整した。ガリウムカラムを用いて、このホスビチン調製物の73%が脱リン酸化されていることを確認した。
カゼインキナーゼIの基質(アミノ酸配列:Arg Arg Lys Asp Leu His Asp Asp Glu Glu Asp Glu Ala Met Ser Ile Thr Ala[配列番号3])及び、カゼインキナーゼIIの基質(アミノ酸配列:Arg Arg Arg Ala Asp Asp Ser Asp [配列番号4])を、Sigma Aldrich(St.Louis、MO)から購入した。それらは、リン酸化されていなかったので、製造業者から購入したときの状態のままでこれら基質を利用した。
Claims (23)
- リン酸化の増進に起因する疾病または病状を治療するための局所投与用医薬品の製造における、リン酸受容体化合物の使用であって、
(A)上記リン酸受容体化合物は、リン酸化を受けることが可能であり、当該リン酸受容体化合物のリン酸化は、リン酸化の増進を阻害することによって上記疾病または病状を処置し、
(B)上記リン酸受容体化合物は、少なくとも70%が脱リン酸化されているホスビチンであり、
(C)上記疾病または病状が、皮膚の疾病もしくは病状であり、当該皮膚の疾病もしくは病状が湿疹、皮膚炎、乾癬、角化症または弾性線維症である、使用。 - IL−8を阻害するための医薬品の製造における、リン酸受容体化合物の使用であって、
(A)上記リン酸受容体化合物は、リン酸化を受けることが可能であり、
(B)上記リン酸受容体化合物は、リン酸化されていないホスビチン;
Arg Arg Lys Asp Leu His Asp Asp Glu Glu
Asp Glu Ala Met Ser Ile Thr Ala(配列番号3)の配列からなるカゼインキナーゼ基質のペプチド;または
Arg Arg Arg Ala Asp Asp Ser Asp(配列番号4)の配列からなるカゼインキナーゼ基質のペプチドである、使用。 - 上記ホスビチンは、ニワトリのホスビチンである、請求項1または2に記載の使用。
- 上記ホスビチンは、少なくとも90%が脱リン酸化されている、請求項1または3に記載の使用。
- 上記カゼインキナーゼ基質のペプチドが、Arg Arg Lys Asp Leu His Asp Asp Glu Glu Asp Glu Ala Met Ser Ile Thr Ala(配列番号3)の配列からなる、請求項2に記載の使用。
- 上記カゼインキナーゼ基質のペプチドが、Arg Arg Arg Ala Asp Asp Ser Asp(配列番号4)の配列からなる、請求項2に記載の使用。
- 上記医薬品は、クリーム、ローション、軟膏、ペースト、ゲル、溶液、スプレーまたは滴下剤である、請求項1〜6のいずれか1項に記載の使用。
- リン酸受容体化合物および薬学的に許容可能なキャリアを含んでいる、皮膚の疾病もしくは病状を治療するための局所投与用薬学的組成物であって、
(A)上記リン酸受容体化合物は、リン酸化を受けることが可能であり、
(B)上記リン酸受容体化合物は、少なくとも70%が脱リン酸化されているホスビチンであり;
上記皮膚の疾病もしくは病状が湿疹、皮膚炎、乾癬、角化症または弾性線維症である、薬学的組成物。 - 上記ホスビチンは、ニワトリのホスビチンである、請求項8に記載の薬学的組成物。
- 上記ホスビチンは、少なくとも90%が脱リン酸化されている、請求項8または9に記載の薬学的組成物。
- クリーム、ローション、軟膏、ペースト、ゲル、溶液、スプレーまたは滴下剤である、請求項8〜10のいずれか1項に記載の薬学組成物。
- 動物の皮膚における皮膚の疾病もしくは病状を治療するための局所投与用医薬品の製造における、リン酸受容体化合物の使用であって、
(A)上記リン酸受容体化合物は、リン酸化を受けることが可能であり、当該リン酸受容体化合物のリン酸化は、動物の皮膚におけるリン酸化の増進を阻害し、
(B)上記リン酸受容体化合物は、少なくとも70%が脱リン酸化されているホスビチンであり、
上記皮膚の疾病もしくは病状が病状が湿疹、皮膚炎、乾癬、角化症または弾性線維症である、使用。 - リン酸受容体化合物および薬学的に許容可能なキャリアを含んでいる、皮膚の疾病もしくは病状を治療するためのスキンケア用の局所投与用組成物であって、
(A)上記リン酸受容体化合物は、リン酸化を受けることが可能であり、
(B)上記リン酸受容体化合物は、少なくとも70%が脱リン酸化されているホスビチンであり、
上記皮膚の疾病もしくは病状が病状が湿疹、皮膚炎、乾癬、角化症または弾性線維症である、組成物。 - クリームまたはローションである、請求項13に記載の組成物。
- ゲルまたは軟膏である、請求項13に記載の組成物。
- 上記ホスビチンは、ニワトリのホスビチンである、請求項13〜15のいずれか1項に記載の組成物。
- 上記ホスビチンは、少なくとも90%が脱リン酸化されている、請求項13〜16のいずれか1項に記載の組成物。
- リン酸受容体化合物を含んでいる局所投与用スキンケア製品を備えている、皮膚の疾病もしくは病状を治療するためのキットであって、
(A)上記リン酸受容体化合物は、リン酸化を受けることが可能であり、
(B)上記リン酸受容体化合物は、少なくとも70%が脱リン酸化されているホスビチンであり、
上記皮膚の疾病もしくは病状が病状が湿疹、皮膚炎、乾癬、角化症または弾性線維症である、キット。 - リン酸受容体化合物および薬学的に許容可能なキャリアを含んでいるスキンケア用の局所投与用組成物を備えている、皮膚の疾病もしくは病状を治療するためのキットであって、
(A)上記リン酸受容体化合物は、リン酸化を受けることが可能であり、
(B)上記リン酸受容体化合物は、少なくとも70%が脱リン酸化されているホスビチンであり、
上記皮膚の疾病もしくは病状が病状が湿疹、皮膚炎、乾癬、角化症または弾性線維症である、キット。 - 上記組成物がクリームまたはローションである、請求項19に記載のキット。
- 上記組成物がゲルまたは軟膏である、請求項19に記載のキット。
- 上記ホスビチンは、ニワトリのホスビチンである、請求項18〜21のいずれか1項に記載のキット。
- 上記ホスビチンは、少なくとも90%が脱リン酸化されている、請求項18〜22のいずれか1項に記載のキット。
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