JP4801880B2 - 新生仔予防接種用変異ワクシニアウイルスアンカラ - Google Patents
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Description
ヒト新産児および新産動物を、外来抗原ならびにそれぞれヒトおよび動物の疾患に関係する抗原に対して、それぞれ予防接種する手段を提供することが、本発明の目的である。具体的に述べると、新産動物およびヒト新産児の免疫系の成熟を加速させうる手段を提供することが、本発明の目的である。また、ヒトを含む新生動物をポックスウイルス感染に対して、特に天然痘に対して、予防接種することを可能にする手段を提供することも、本発明の目的である。
本発明によれば、意外なことに、ヒトを含む新生動物または出生前動物の細胞に感染する能力を持つが上記細胞内で感染性子孫ウイルスに複製される能力は持たないウイルスを用いて、ヒトを含む新生動物または出生前動物を安全にしかも効率よく予防接種及び(又は)処置できることが見いだされた。特に、本発明で使用されるウイルス、例えばMVA、とりわけMVA−BNおよびその誘導体(下記参照)は、新産仔に投与しても有害な作用を何も示さないことが明らかになった。以下に詳述するように、上記のウイルスによる動物の予防接種は、予防接種に使用したウイルスに対する特異免疫応答をもたらし、かつ/または外来抗原および腫瘍抗原に対する一般予防接種になる。さらに、本発明で使用されるウイルスは、樹状細胞数の増加およびインターフェロンなどの因子の増加を伴う、免疫系の成熟の誘導及び(又は)強化をもたらす。本発明で使用されるウイルスによる予防接種は、動物に投与される製剤がアジュバントを含んでいなくても可能である。
(i)ニワトリ胚線維芽細胞(CEF)および細胞株BHKでは増殖的に複製する能力を持つが、ヒト細胞株HaCatでは増殖的に複製する能力を持たない、
(ii)生体内では複製不能、
(iii)致死チャレンジモデルで既知の株MVA575(ECACC V00120707)よりも高い免疫原性を誘導及び(又は)
(iv)DNA初回免疫/ワクシニアウイルス追加免疫方式と比較して、ワクシニアウイルス初回免疫/ワクシニアウイルス追加免疫方式で少なくとも実質的に同レベルの免疫を誘導。
AGR129マウスの代わりに、成熟したB細胞およびT細胞を産生することができず、したがって重度の免疫無防備状態であり、複製型ウイルスに著しく感染しやすいマウス株であれば、他のどのマウス株でも使用することができる。
さらに、免疫系の成熟の加速は、好ましくは、新産動物へのMVA−BNの投与の7日後に、MVA−BNを投与されていない対照動物と比較して、血中及び(又は)脾臓中のCD11c陽性細胞数の少なくとも1.5倍の増加、好ましくは少なくとも2.0倍の増加と関連づけられる。さらに、免疫系の成熟の強化は、好ましくは、本発明のウイルスによる新生仔の予防接種の2日後に、年齢対応対照群と比較して、Flt3−L濃度の少なくとも1.5倍の増加、好ましくは少なくとも2.0倍の増加と関連づけられる。
ヒトを含む新生動物または出生前動物を予防接種または処置するための医薬の製造にウイルスを使用する方法において、当該ウイルスは、ヒトを含む上記新生動物または出生前動物の細胞に感染する能力を持つが、ヒトを含む上記新生動物または出生前動物では感染性子孫ウイルスに複製される能力を持たないことを特徴とする、上記使用する方法。
上記樹状細胞を活性化させる因子がFlt3-Lおよび/またはGM-CSFである、上記使用方法、上記処置又は予防接種方法又は上記ウイルス。
図1A:誕生後24〜48時間以内の新産マウスに、106p.f.u.のMVAまたはDISC HSV−1を1回注射するか、または対照として生理食塩水(NaCl)による処置を行った。7日齢時に、汎DCマーカーであるCD11cを使って、末梢血中のこれらの細胞を、フローサイトメトリーで決定した。3〜5回の実験の平均および標準偏差を示す。
(i)MVA−BNおよびDISC−HSVは、新産動物において、CD11c+およびCD8+表現型のDCを誘導する。
b組換え活性遺伝子にRAGマウス欠失(すなわち機能的なT細胞およびB細胞なし)
cIFN受容体I型(IFN−αおよびIFN−β)ならびにII型(IFN−γ)のAG129遺伝子標的破壊
(ii)MVA−BNは形質細胞様樹状細胞(pDC)を優先的に誘導する。
(iii)MVA−BNで処置した新生マウスでは血清Flt3−Lのレベルが上昇している。
(i)MVA−BN処置新生マウスは100〜500 LD50のHSV−1によるチャレンジに耐えて生き残る。
(ii)MVA−BNは成体期まで持続する特異免疫を新生仔に誘導する。
本願は、請求項1〜33に記載の発明に関するものであるが、他の態様として以下も包含し得る。
1.ヒトを含む動物を、腫瘍抗原および外来抗原から選ばれる抗原に対して保護するための医薬の製造にウイルスを使用する方法において、上記抗原は当該ウイルスに関連する抗原と異なり、そして当該ウイルスは、上記ヒトを含む動物の細胞に感染する能力を持つが、上記細胞内で感染性子孫ウイルスに複製される能力を持たないことを特徴とする、上記使用する方法。
2.上記保護効果が少なくとも14日間は発揮される、上記1記載の使用する方法。
3.ヒトを含む上記動物がヒトを含む新生動物または出生前動物である、上記1又は2記載の使用する方法。
4.上記ウイルスが変異ワクシニアウイルスアンカラ(MVA)である、上記1〜3のいずれか1つに記載の使用する方法。
5.上記MVA株が、動物細胞培養物の欧州収集所(European Collection of Animal Cell Cultures(ECACC))に受託番号V00083008として寄託されているMVA−BNおよびその誘導体である、上記4記載の使用方法。
6.ウイルスゲノムが少なくとも1種の異種核酸配列を含む、上記1〜5のいずれか1つに記載の使用する方法。
7.上記異種核酸配列が、少なくとも1種の抗原、抗原エピトープ及び(又は)治療化合物をコードする配列から選ばれる、上記6記載の使用する方法。
8.上記医薬が、経口適用、鼻腔適用、筋肉内適用、静脈内適用、腹腔内適用、皮内適用、子宮内適用及び(又は)皮下適用によって投与される、上記1〜7のいずれか1つに記載の使用する方法。
9.上記医薬が上記4〜7のいずれか1つに定義したMVAを含み、そして1回目の接種(「初回接種」)および2回目の接種(「追加接種」)において、治療上有効な量で投与される、上記1〜8のいずれか1つに記載の使用する方法。
10.上記医薬がMVAを含み、そしてヒトを含む上記動物に、少なくとも10 1 TCID 50 (組織培養感染価)のMVA量で投与される、上記1〜9のいずれか1つに記載の使用する方法。
11.上記外来抗原が感染性病原体および毒素から選ばれる、上記1〜10のいずれか1つに記載の使用する方法。
12.上記感染性病原体がウイルス、細菌、プリオンおよび真菌から選ばれる、上記11記載の使用する方法。
13.上記ウイルスがヘルペスウイルス、レトロウイルス、狂犬病ウイルス、ラブドウイルスおよびアデノウイルスから選ばれる、上記12記載の使用する方法。
14.ヒトを含む動物を予防接種または処置するための医薬の製造にウイルスを使用する方法において、当該ウイルスは、ヒトを含む上記動物の細胞に感染する能力を持つが、上記細胞内で感染性子孫ウイルスに複製される能力を持たず、そして上記予防接種または処置は、(i)免疫系の成熟を誘導または強化することにあるか、(ii)樹状細胞またはその前駆細胞を活性化及び(又は)動員(mobilize)する因子のレベルを増加させることにあるか、(iii)樹状細胞またはその前駆細胞の数を増加させることにあるか、あるいは(iv)インターフェロン(IFN)又はIL−12の産生量及び(又は)細胞含有量を増加させることにあることを特徴とする、上記使用する方法。
15.ヒトを含む上記動物が、ヒトを含む新生動物または出生前動物である、上記14記載の使用する方法。
16.樹状細胞を活性化する因子がFlt3−L及び(又は)GM−CSFである、上記14又は15記載の使用する方法。
17.上記インターフェロンがIFNα及び(又は)IFNβである、上記14〜16のいずれか1つに記載の使用する方法。
18.上記ウイルスが上記4〜7のいずれか1つに定義したウイルスである、上記14〜17のいずれか1つに記載の使用する方法。
19.上記投与が上記8〜10のいずれか1つに定義した様に行われる、上記14〜18のいずれか1つに記載の使用する方法。
20.ヒトを含む新生動物または出生前動物を予防接種または処置するための医薬の製造に変異ワクシニアウイルスアンカラ(MVA)を使用する方法において、当該ウイルスは、ヒトを含む上記新生動物または出生前動物の細胞に感染する能力を持つが、ヒトを含む上記新生動物または出生前動物では感染性子孫ウイルスに複製される能力を持たないことを特徴とする、上記使用する方法。
21.上記MVAが上記4〜7のいずれか1つに定義したウイルスである、上記20記載の使用する方法。
22.上記投与が上記8〜10のいずれか1つに定義した様に行われる、上記20から21のいずれか一項記載の使用する方法。
23.上記予防接種がポックスウイルス感染に対するものである、上記20〜22のいずれか1つに記載の使用する方法。
24.上記ポックスウイルス感染が天然痘感染である、上記23記載の使用する方法。
25.上記MVAが異種核酸配列、特に少なくとも1種の抗原及び(又は)抗原エピトープをコードする配列を含み、そして上記予防接種が上記異種核酸配列の由来となった病原体に対するものであるか又は上記少なくとも1種の抗原または抗原エピトープを含む病原体に対するものである、上記20〜24のいずれか1つに記載の使用する方法。
Claims (31)
- 新生動物の予防接種または処置のための免疫系の成熟の誘導または強化用医薬の製造に、非組換えまたは組換え変異ワクシニアウイルスアンカラ(MVA)を使用する方法であって、上記MVAが動物細胞培養物の欧州収集所(European Collection of Animal Cell Cultures(ECACC)、ソールズベリー(UK))に受託番号V00083008として寄託されているウイルスであるか、またはその誘導体であって以下の特性:
(i)ニワトリ胚線維芽細胞(CEF)では増殖的に複製できるが、ヒト細胞株では増殖的に複製することができない;および
(ii)重度の免疫無防備状態にあるマウスにおいて生体内では複製することができない、
を有する誘導体である、上記の使用する方法。 - 医薬が新生動物の単純ヘルペスウイルスおよび致死性ワクシニアウイルスの予防接種または処置のための免疫系の成熟の誘導または強化用医薬である、請求項1記載の使用する方法。
- 新生動物の予防接種または処置のための医薬の製造に非組換えまたは組換えMVAを使用する方法において、上記医薬が、(i)免疫系の成熟を誘導または強化するためのものであるか、(ii)樹状細胞またはその前駆細胞を活性化及び/又は動員(mobilize)する因子のレベルを増加させるためのものであるか、あるいは(iii)樹状細胞またはその前駆細胞の数を増加させるためのものであり、そして上記MVAが動物細胞培養物の欧州収集所(European Collection of Animal Cell Cultures(ECACC)、ソールズベリー(UK))に受託番号V00083008として寄託されているウイルスであるか、またはその誘導体であって以下の特性:
(i)ニワトリ胚線維芽細胞(CEF)では増殖的に複製できるが、ヒト細胞株では増殖的に複製することができない;および
(ii)重度の免疫無防備状態にあるマウスにおいて生体内では複製することができない、
を有する誘導体である、上記使用する方法。 - 医薬がインターフェロン(IFN)又はIL−12の産生量及び/又は細胞含有量を増加させるためのものである、請求項1〜3のいずれか1項に記載の使用する方法。
- MVAが非組換えMVAである、請求項1〜4のいずれか1項に記載の使用する方法。
- ヒト細胞株がHaCatまたはHeLaである、請求項1〜5のいずれか1項記載の使用する方法。
- 免疫系の成熟の強化が樹状細胞およびその前駆細胞の数の増加と相関する、請求項1〜6のいずれか1項に記載の使用する方法。
- 樹状細胞の前駆細胞が形質細胞様樹状細胞前駆体である、請求項3〜7のいずれか1項に記載の使用する方法。
- 免疫系の成熟の強化が、MVAの投与の2日後の、Flt3−L濃度の少なくとも1.5倍の増加と関連づけられる、請求項1〜8のいずれか1項に記載の使用する方法。
- 上記医薬が、経口適用、鼻腔適用、筋肉内適用、静脈内適用、腹腔内適用、皮内適用、子宮内適用及び/又は皮下適用によって投与される、請求項1〜9のいずれか1項に記載の使用する方法。
- 上記医薬が1回目の接種(「初回接種」)および2回目の接種(「追加接種」)において、治療上有効な量で投与される、請求項1〜10のいずれか1項に記載の使用する方法。
- 上記医薬が動物に、少なくとも101 TCID50(組織培養感染価)のMVA量で投与される、請求項1〜11のいずれか1項に記載の使用する方法。
- ウイルスゲノムが少なくとも1種の異種核酸配列を含む、請求項1〜3または6〜12のいずれか1項に記載の使用する方法。
- 上記異種核酸配列が、少なくとも1種の抗原、抗原エピトープ及び/又は治療化合物をコードする配列から選ばれる、請求項13記載の使用する方法。
- 上記異種核酸配列が、インターフェロン、IL−12、Flt3−LおよびGM−CSFから選択されるタンパク質をコードする、請求項14記載の使用する方法。
- 処置または予防接種が腫瘍抗原または外来抗原に対して動物を保護するために行われ、腫瘍抗原または外来抗原がMVAウイルス粒子のエピトープおよび抗原とは異なっており、それゆえに、細胞がMVAウイルスに感染した場合にMVAゲノムの発現の結果として細胞表面上に提示される細胞表面上の抗原およびエピトープとは異なっている、請求項1〜15のいずれか1項に記載の使用する方法。
- 腫瘍抗原または外来抗原が感染性病原体または毒素から選ばれる、請求項16記載の使用する方法。
- 上記感染性病原体がウイルス、細菌、プリオンまたは真菌から選ばれる、請求項17記載の使用する方法。
- 上記ウイルスがヘルペスウイルス、レトロウイルス、狂犬病ウイルス、ラブドウイルスおよびアデノウイルスから選ばれる、請求項18記載の使用する方法。
- 上記保護効果が少なくとも14日間は発揮される、請求項16〜19のいずれか1項に記載の使用する方法。
- 処置または予防接種が、予防接種のために使用されるウイルスに対する特異免疫応答を誘導するために行われる、請求項1〜20のいずれか1項に記載の使用する方法。
- 処置または予防接種がポックスウイルス感染に対するものである、請求項21記載の使用する方法。
- ポックスウイルス感染が天然痘感染である、請求項22記載の使用する方法。
- 予防接種が、異種核酸配列の由来となった病原体に対する免疫応答、又は少なくとも1種の抗原もしくは抗原エピトープを含む病原体に対する免疫応答を誘導するために行われる、請求項13〜23のいずれか1項に記載の使用する方法。
- 異種核酸が腫瘍、細菌、真菌、またはMVA以外のウイルスをコードする、請求項24記載の使用する方法。
- 異種核酸が由来するウイルスがHIV−1、HIV−2、デングウイルス、ウエストナイルウイルス、日本脳炎ウイルスおよび麻疹ウイルスから選択される、請求項25記載の使用する方法。
- 異種核酸がHIV抗原をコードする、請求項26記載の使用する方法。
- 医薬がHIVに対する免疫応答を誘導するためのものである、請求項26または27記載の使用する方法。
- 樹状細胞を活性化する因子がFlt3−Lおよび/またはGM−CSFである、請求項3〜28のいずれか1項に記載の使用する方法。
- インターフェロンがIFN−αおよび/またはIFN−βである、請求項4〜28のいずれか1項に記載の使用する方法。
- 動物がヒトである、請求項1〜30のいずれか1項に記載の使用する方法。
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