JP4776615B2 - 抗体精製 - Google Patents
抗体精製 Download PDFInfo
- Publication number
- JP4776615B2 JP4776615B2 JP2007500724A JP2007500724A JP4776615B2 JP 4776615 B2 JP4776615 B2 JP 4776615B2 JP 2007500724 A JP2007500724 A JP 2007500724A JP 2007500724 A JP2007500724 A JP 2007500724A JP 4776615 B2 JP4776615 B2 JP 4776615B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- protein
- antibody
- ligand
- chromatography
- multimodal
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
- C07K1/18—Ion-exchange chromatography
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
- B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
- B01D15/38—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism involving specific interaction not covered by one or more of groups B01D15/265 - B01D15/36
- B01D15/3804—Affinity chromatography
- B01D15/3809—Affinity chromatography of the antigen-antibody type, e.g. protein A, G, L chromatography
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
- B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
- B01D15/38—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism involving specific interaction not covered by one or more of groups B01D15/265 - B01D15/36
- B01D15/3847—Multimodal interactions
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J39/00—Cation exchange; Use of material as cation exchangers; Treatment of material for improving the cation exchange properties
- B01J39/04—Processes using organic exchangers
- B01J39/07—Processes using organic exchangers in the weakly acidic form
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J39/00—Cation exchange; Use of material as cation exchangers; Treatment of material for improving the cation exchange properties
- B01J39/26—Cation exchangers for chromatographic processes
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
- B01J47/00—Ion-exchange processes in general; Apparatus therefor
- B01J47/014—Ion-exchange processes in general; Apparatus therefor in which the adsorbent properties of the ion-exchanger are involved, e.g. recovery of proteins or other high-molecular compounds
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
- C07K1/165—Extraction; Separation; Purification by chromatography mixed-mode chromatography
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
- B01D15/26—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism
- B01D15/36—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the separation mechanism involving ionic interaction
- B01D15/361—Ion-exchange
- B01D15/362—Cation-exchange
Description
「抗体」という用語と「免疫グロブリン」という用語は本明細書では同義に用いられる。
本明細書で「陽イオン交換基」という用語は、負に荷電又は荷電し得る基を意味する。
一実施形態では、芳香族又は複素芳香族環系は、環構造の構成原子として窒素原子を全く含んでおらず、炭素原子、硫黄原子及び酸素原子に限定される。そこで、好適な実施形態では、芳香族又は複素芳香族基の環形成原子は、C、S及びOからなる群から選択される。
式中、Suは担体であり、スペーサーは任意要素であり、XはO、S又はNのようなカップリング原子である。好適なスペーサー及びかかるスペーサーをもたらすカップリング化学は当技術分野で周知である。従って、この実施形態は、陽イオン交換基として作用する酸性基が芳香族基の置換基である上述の米国特許第6498236号とは実質的に異なる。例えば、本実施形態で用いる樹脂は、その構造上芳香族官能基と陽イオン官能基との間隔が広いので、目標化合物と空間的に一段と広い異なる種類の結合を与えると予測される。理論に束縛されるものではないが、このマトリックスは、抗体の吸着に対して至適化されたと記載されている米国特許第6498236号よりも、比較的大きな含抗体複合体の一段と好ましい吸着をもたらすと仮定し得る。
以下のクロマトグラム(図1〜6、7及び9)では、色表示は以下の通りである。
青又は赤線(XX):A280nm、緑線(YY):蛍光、茶線(ZZ):導電率(mS/cm)、灰線(OO):pH。
以下に示すマトリックスの体積は、沈降ベッド体積をいう。グラム単位で示すマトリックスの重量は吸引(ウォーターポンプ)乾燥重量をいう。ただし、これらのマトリックスは依然として水で溶媒和した材料である。磁気攪拌子を使用するとビーズが傷つきやすいので、以下に記載の攪拌は懸架式電動攪拌機で行った。ビーズ上の官能基の分析及びイオン交換基のアリル化度、エポキシ化度又は置換度の測定は慣用法によったが、これらは当業者に周知である。以下の方法は、最終的にゲルの元素分析(特に硫黄原子についての)によって補完した。
本実施例では、3−アミノ−4−(プロピルスルホニル)チオフェン−2−カルボン酸をどのようにNHS−活性化アガロース担体にカップリングしたかについて説明する。
アリル活性化(0.3mmolアリル/ml)Sepharose(商標)6 Fast Flow(Amersham Biosciences社)ゲル100ml、4gのAcONa及び100mlの蒸留水からなる攪拌懸濁液に、黄色が現れ続けるまで臭素を添加した。次いで、懸濁液の色が完全に消えるまでギ酸ナトリウムを添加した。反応混合物を濾過し、ゲルを500mlの蒸留水で洗浄した。活性化ゲルを直ちに反応器に移し、50%NaOH水溶液でpH11.5に調整しておいた17.5mlのチオプロピオン酸(アリル基当たり6当量)と12gのNaClの水溶液(50ml蒸留水)で処理した。反応混合物を攪拌しながら50℃で18時間放置した。反応混合物を濾過し、500mlの蒸留水で洗浄して、置換度0.29mmolCO2H基/mlゲルのチオプロピオン酸Sepharoseゲルを得た。
得られたチオプロピオン酸Sepharose100mlを300mlの1M NaCl、500mlの0.1M HCl、500mlの50%アセトン水溶液、500mlのアセトンで逐次洗浄した。洗浄後、ゲルをアセトン中で沈降させ、上清を吸引除去し、沈降ビーズを20mlのアセトンを用いて反応器に移した。次いで、80mlアセトン中のN−ヒドロキシスクシンイミド(NHS)15.2gの溶液、及び別の80mlアセトン中のシクロヘキシルカルボジイミドの溶液を一緒に添加した。反応スラリーを攪拌しながら30℃で18時間放置した。濾過後、ゲルを150mlのイソプロパノールでゆっくりと(重力流)一日がかりで10回洗浄した。NH4OHとの反応後のNHS活性化度は約80%と推定されたが、これは約0.23mmol NHS官能基/mlゲルの活性化に相当する。
3−アミノ−4−(プロピルスルホニル)チオフェン−2−カルボン酸を国際公開第02/05959号(リガンド12)に記載の通り製造した。2ml蒸留水中の565mgの3−アミノ−4−(プロピルスルホニル)チオフェン−2−カルボン酸(2.27mmol)の溶液、2mlの1M NaHCO3及び2mlのエタノールの可溶性混合物を調製し、50%NaOHを注意深く添加してpH8.5に調整した。
以下の実施例1(b)〜(d)では、国際公開第03/024588号に記載の通り、D,L−ホモシテインチオラクトンを足場として用いてプロトタイプリガンドU790P65、U790P71及びU790P73を製造した。簡単に説明すると、ホモシテインチオラクトンをアシルクロリド又はアンヒドリドと反応させて結合アミドを形成した後、塩基性加水分解でチオラクトンの開環を行い、得られた化合物を活性化Sepharose(商標)6FF(Amersham Biosciences社(スウェーデン、ウプサラ))とカップリングさせた。
ジクロロメタン(DCM、120ml)中のD,L−ホモシテインチオラクトン(11.5g、75mmol)とジイソプロピルアミン(DIPEA)(26ml、150mmol)の溶液に、30mlのDCM中の塩化ベンゾイル(8.7ml、75mmol)の溶液を0℃で滴下した。混合物を室温で一晩攪拌した。溶媒を真空下で蒸発させ、反応残渣を酢酸エチル(300ml)で抽出した。有機相を10%クエン酸水溶液(w/w、200ml)、10%K2CO3水溶液(200ml)、水(200ml)で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。濾過後、溶媒を除去して白色固体(13.8g、83%)を得た。276mg(1.25mmol)の白色固体に5N水酸化ナトリウム溶液(5ml)を0℃で添加し、混合物を室温でさらに2時間攪拌した。アリル化Sepharose(商標)6 Fast Flow(250μmol/ml)から出発して周知の手順で得た臭素化Sepharose(商標)6 Fast Flow(10ml)(Amersham Biosciences社)を、リガンドのアルカリ溶液(上記)と混合して50℃に一晩加温した。反応後、ゲルを濾過し、水(2×150ml)、エタノール(2×150ml)、0.2M酢酸(2×150ml)及び水(2×150ml)で洗浄した。次いで、酸基の滴定でゲルのイオン容量を測定したところ、ゲル1ml当たり103μmolであった。
ジクロロメタン(DCM、6ml)中のD,L−ホモシテインチオラクトン(1.58g、10.3mmol)とジイソプロピルアミン(DIPEA)(3.58ml、20.6mmol)の溶液に、4mlのDCM中の3,4,5−トリメトキシベンゾイルクロリド(2.37g、10.3mmol)の溶液を0℃で滴下した。混合物を室温で一晩攪拌した。溶媒を真空下で蒸発させ、反応残渣を酢酸エチル(50ml)で抽出した。有機相を10%クエン酸水溶液(w/w、30ml)、10%K2CO3水溶液(30ml)、水(30ml)で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させた。濾過後、溶媒を除去して白色固体(2.21g、69%)を得た。0℃で、389mg(1.25mmol)の白色固体に5N水酸化ナトリウム溶液(5ml)を添加し、混合物を室温でさらに2時間攪拌した。アリル化Sepharose(商標)6 Fast Flow(250μmol/ml)から出発して周知の手順で臭素化Sepharose(商標)6 Fast Flow(10ml)(Amersham Biosciences社)を、リガンドのアルカリ溶液(上記)と混合して50℃に一晩加温した。反応後、ゲルを濾過し、水(2×150ml)、エタノール(2×150ml)、0.2M酢酸(2×150ml)及び水(2×150ml)で洗浄した。次いで、ゲルのイオン容量を測定したところ、59μmol/mlゲルであった。
ジクロロメタン(DCM、6ml)中のD,L−ホモシテインチオラクトン(1.58g、10.3mmol)とジイソプロピルアミン(DIPEA)(3.58ml、20.6mmol)の溶液に、4mlのDCM中のフェニルグルタル酸無水物(1.96g、10.3mmol)の溶液を0℃で滴下した。混合物を室温で一晩攪拌した。溶媒を真空下で蒸発させ、反応残渣を直ちに5N水酸化ナトリウム溶液(10ml)で処理し、室温でさらに2時間攪拌した。アリル化Sepharose(商標)6 Fast Flow(250μmol/ml)から出発して周知の手順で臭素化Sepharose(商標)6 Fast Flow(10ml)(Amersham Biosciences社(スウェーデン、ウプサラ))を、上述のリガンドのアルカリ溶液1.4mlと混合して50℃に一晩加温した。反応後、ゲルを濾過し、水(2×150ml)、エタノール(2×150ml)、0.2M酢酸(2×150ml)及び水(2×150ml)で洗浄した。次いで、ゲルのイオン容量を測定したところ110μmol/mlゲルであったが、これは55μmol/mlゲルのリガンド置換度に相当する。
材料
クロマトグラフィーシステム: UNICORN v.4.0ソフトウェアを備えたAKTA(商標)Explorer 100(Amersham Biosciences)。
分光光度計: Ultrospec(商標)3000pro(Amersham Biosciences)。
蛍光分光計: JY Horiba社(米国ニュージャージー州エジソン)製SPEX Fluorolog−3。
酢酸: Merckカタログ番号1.00063(米国ペンシルバニア州)(Pro Analysi)。
コハク酸Na BDH、カタログ番号30219。
NaCl: Merckカタログ番号1.06404(米国ペンシルバニア州)。
Tris: Merckカタログ番号1.08382(米国ペンシルバニア州)。
NaOH: Merckカタログ番号1.06469(米国ペンシルバニア州)。
MES: SIGMAカタログ番号M3671。
Na2CO3: Merckカタログ番号1.06392.1000(米国ペンシルバニア州)。
水: MilliQ水を使用。
Cy5反応性色素: Amersham Biosciences。
SP Sepharose(商標)Fast Flow(対照): Amersham Biosciences。
Superdex(商標)200 10/300(ゲル濾過): Amersham Biosciences。
緩衝液A(平衡):100mM酢酸、20mM コハク酸NapH4.5〜5.0。
緩衝液B:100mM酢酸、20mM コハク酸Na、1.5M NaCl pH6.4。
緩衝液A:50mM MES、1M NaCl pH7。
緩衝液B:50mM MES 0.1M NaCl pH7.0。
50mM リン酸緩衝液、0.150M NaCl、pH7.0。
カラム充填及び試験: ゲルスラリーをHR5/5カラムに流し込み、MilliQ水で部分的に満たした。ゲルを圧縮せずにゲル表面に向かってトップアダプターを下げた。次いで、ゲルを1.2ml/分でベッドが安定するまでパックした。次いで、アダプターを下げてゲル表面に接触させた。2%アセトン25μlを注入して、充填性能(すなわち、プレート数及び非対称性)を評価した。
式中、
C=IgGの濃度、
A=280nmでの吸光度、
l=光路長、
ε=MAbのモル吸光係数、mgml−1=1.46。
回収した画分中の相対的プロテインA濃度の測定は、蛍光分光計(SPEX Fluorolog−3)を用いて実施した。Cy5の励起は630nmで行い、蛍光発光の検出は670nmで行った。
平衡化:2カラム体積(CV)緩衝液(初回用)。
平衡化:0.1CV緩衝液(ラン間)。
サンプル注入:100μl。イソクラティック溶出:1.2CV緩衝液。
蛍光標識プロテインAを、上記のMAb溶液と混合した。蛍光標識が、プロテインAのクロマトグラフィーの特性に影響を及ぼさなかったことを確認するため、及びAKTA(商標)Explorer(Amersham Biosciences)における正確な遅れ値を設定するために、3種の異なる対照実験を以下のように実施した。
プロテインA溶液を媒体プロトタイプU790P73(上記の実施例1(b)参照)に注入した点を除いて、対照2と同様。マルチモーダル媒体プロトタイプを用いてもA280曲線と蛍光発光とはよく一致しており(図3)、非標識プロテインAと標識プロテインAとの分離は得られなかった。
結合モードでのMAbとMAb−プロテインA凝集体との分離
MAb−プロテインA混合物2mlを種々の媒体プロトタイプに注入した。勾配溶出及び画分回収は上記の通りであった。MAbとMAb−プロテインA凝集体の溶出は280nmでの吸光度及び溶出導電率のモニターリング、及び回収画分での蛍光測定によって追跡した。各プロトタイプについて吸光度曲線と蛍光発光との間での保持体積の差を計算した。結果を表2及び図4に示す。データ点数が少なく、変動が比較的大きい場合にも、溶出導電率が高いほど、UVピークと蛍光ピークとの間(すなわち、MAbとMAb−プロテインA凝集体との間)の良好な分離が得られると結論付けられる。対照マトリックスSP Sepharose(商標)Fast Flowでは分離は得られなかった。
フロースルーモードでのMAbとMAb−プロテインA凝集体との分離
非標識プロテインA及び蛍光標識プロテインAの添加を用いて、フロースルーモードでの2通りの実験を行った(条件:97%B=0.13M NaCl)。結果は、クロマトグラムはほとんど同一であった(図7)。上述の通り、Superdex(商標)200でのゲル濾過によって様々な画分を分析した(図8A〜B)。MAb−プロテインA凝集体は溶出ピークで検出できたが、フロースルーでは検出できなかった。さらに、Superdex(商標)画分での蛍光発光は、クロマトグラムの2つの小さなピークでは検出できたが、メインMAbピークでは検出できなかった(図8C)。従って、これらの結果は、MAb−プロテインA凝集体とMAbをフロースルーモードで分離できることを示す。従って、プロテインA−抗体凝集体の大半は吸着するが、約95%のMAbはカラムを素通りした。
Claims (12)
- 溶液中の1種以上の夾雑物から抗体を分離する方法であって、当該方法が、1以上の陽イオン交換基と1以上の芳香族又は複素芳香族環系とを含むマルチモーダルリガンドが固定化された担体からなるクロマトグラフィー樹脂に上記溶液を接触させて樹脂に抗体及び/又は夾雑物を吸着させることを含んでおり、マルチモーダルクロマトグラフィー樹脂にかけられる溶液が、アフィニティークロマトグラフィー樹脂からの抗体含有溶出液である、方法。
- 芳香族又は複素芳香族基の環形成原子がC、S又はOから選択される、請求項1記載の方法。
- 陽イオン交換基が弱陽イオン交換体である、請求項1又は請求項2記載の方法。
- マルチモーダルクロマトグラフィー樹脂にかけられる溶液が、そのリガンドがプロテインAを含むアフィニティークロマトグラフィー樹脂からの抗体含有溶出液である、請求項1乃至請求項3のいずれか1項記載の方法。
- 夾雑物が、遊離アフィニティーリガンドと抗体との間で形成された複合体並びに/或いは遊離アフィニティーリガンド及び/又は抗体の凝集体を含む、請求項4記載の方法。
- 夾雑物がマルチモーダルクロマトグラフィー樹脂に吸着される、請求項1乃至請求項5のいずれか1項記載の方法。
- クロマトグラフィー樹脂から抗体及び/又は夾雑物を溶出することを含む、請求項1乃至請求項6のいずれか1項記載の方法。
- 抗体がモノクローナル抗体である、請求項1乃至請求項7のいずれか1項記載の方法。
- マルチモーダルクロマトグラフィー樹脂と、2種以上の異なる緩衝液と、プロテインAと抗体との間で形成された複合体及び/又はプロテインAもしくは抗体の凝集体から抗体を如何に分離するかについて記載された使用説明書とを備え、マルチモーダルリガンドが1以上の陽イオン交換基と1以上の芳香族又は複素芳香族環系とを含む、抗体精製用のキット。
- 芳香族又は複素芳香族基の環形成原子がC、S又はOから選択される、請求項9記載のキット。
- 液体から抗体を精製するシステムであって、プロテインA又はプロテインGを含むリガンドを有する樹脂が充填された第一のクロマトグラフィーカラムと、1以上の陽イオン交換基と1以上の芳香族又は複素芳香族環系とを含むマルチモーダルクロマトグラフィー樹脂が充填された第二のクロマトグラフィーカラムと、第一のカラムにサンプル及び溶出緩衝液を添加する手段と、第一のカラムに由来する溶出液を第二のカラムへ添加する手段と、ポンプ手段と、弁とを備えるシステム。
- 自動化システムである、請求項11記載のシステム。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SE0400501-3 | 2004-02-27 | ||
SE0400501A SE0400501D0 (sv) | 2004-02-27 | 2004-02-27 | Antibody purification |
PCT/SE2005/000292 WO2005082926A1 (en) | 2004-02-27 | 2005-02-24 | Antibody purification |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2008505851A JP2008505851A (ja) | 2008-02-28 |
JP4776615B2 true JP4776615B2 (ja) | 2011-09-21 |
Family
ID=32067281
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2007500724A Active JP4776615B2 (ja) | 2004-02-27 | 2005-02-24 | 抗体精製 |
Country Status (13)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US7385040B2 (ja) |
EP (1) | EP1718668B1 (ja) |
JP (1) | JP4776615B2 (ja) |
KR (1) | KR101149969B1 (ja) |
CN (2) | CN1926146B (ja) |
AT (1) | ATE440858T1 (ja) |
AU (1) | AU2005217348B2 (ja) |
CA (1) | CA2552823C (ja) |
DE (1) | DE602005016220D1 (ja) |
IL (1) | IL176635A (ja) |
NZ (1) | NZ548127A (ja) |
SE (1) | SE0400501D0 (ja) |
WO (1) | WO2005082926A1 (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US10308678B2 (en) | 2014-07-25 | 2019-06-04 | Asahi Kasei Medical Co., Ltd. | Cation exchange chromatographic support and method for using same |
Families Citing this family (52)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20160279239A1 (en) | 2011-05-02 | 2016-09-29 | Immunomedics, Inc. | Subcutaneous administration of anti-cd74 antibody for systemic lupus erythematosus and autoimmune disease |
US20160355591A1 (en) | 2011-05-02 | 2016-12-08 | Immunomedics, Inc. | Subcutaneous anti-hla-dr monoclonal antibody for treatment of hematologic malignancies |
US7589183B2 (en) * | 2006-11-28 | 2009-09-15 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Prevention of leaching of ligands from affinity-based purification systems |
US7691980B2 (en) * | 2007-01-09 | 2010-04-06 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Enhanced capacity and purification of antibodies by mixed mode chromatography in the presence of aqueous-soluble nonionic organic polymers |
US7999085B2 (en) * | 2007-01-09 | 2011-08-16 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Enhanced capacity and purification of protein by mixed mode chromatography in the presence of aqueous-soluble nonionic organic polymers |
WO2008085116A1 (en) * | 2007-01-10 | 2008-07-17 | Ge Healthcare Bio-Sciences Ab | Mult i -modal ion exchange chromotography resins |
EP2139573B1 (en) | 2007-03-28 | 2016-11-09 | DPx Holdings B.V. | Expanded bed column and disposable chromatography |
EP2152745B2 (en) * | 2007-06-01 | 2023-03-15 | F. Hoffmann-La Roche AG | Immunoglobulin purification |
US9433922B2 (en) * | 2007-08-14 | 2016-09-06 | Emd Millipore Corporation | Media for membrane ion exchange chromatography based on polymeric primary amines, sorption device containing that media, and chromatography scheme and purification method using the same |
EP2027875A1 (en) * | 2007-08-23 | 2009-02-25 | Octapharma AG | A Process for Isolation and Purification of a Target Protein free of Prion Protein (PrPSC) |
KR101163307B1 (ko) | 2007-10-26 | 2012-07-05 | 아사히 가세이 케미칼즈 가부시키가이샤 | 단백질의 정제 방법 |
US8158405B2 (en) * | 2008-06-30 | 2012-04-17 | General Electric Company | Process for concentrating and processing fluid samples |
US8546127B2 (en) * | 2008-06-30 | 2013-10-01 | General Electric Company | Bacteria/RNA extraction device |
US8753868B2 (en) | 2008-08-04 | 2014-06-17 | General Electric Company | Method and system for selective isolation of target biological molecules in a general purpose system |
US20100051554A1 (en) * | 2008-08-28 | 2010-03-04 | Dong June Ahn | Molecular basket coated micro particles |
WO2010071208A1 (ja) * | 2008-12-19 | 2010-06-24 | 武田薬品工業株式会社 | 抗体の精製方法 |
CN101797493B (zh) * | 2009-02-06 | 2014-05-21 | 上海抗体药物国家工程研究中心有限公司 | 一种在反应釜中制备亲和层析介质的方法 |
DE102009057993A1 (de) | 2009-06-13 | 2011-01-20 | Sartorius Stedim Biotech Gmbh | Polysaccharidmatrix mit aufgepfropftem Polymer, Verfahren zu ihrer Herstellung und Verwendung |
JPWO2011001963A1 (ja) * | 2009-07-03 | 2012-12-13 | 旭化成ケミカルズ株式会社 | 多孔質基材に固定されたグラフト鎖に結合しているアミノ基及びアルキル基を有する多孔膜を用いた抗体の精製方法 |
US20120208986A1 (en) * | 2009-10-20 | 2012-08-16 | Wenger Marc D | Use of mixed mode chromatography for the capture and purification of basic antibody products |
US8277649B2 (en) * | 2009-12-14 | 2012-10-02 | General Electric Company | Membranes and associated methods for purification of antibodies |
EP2695889A1 (en) * | 2009-12-29 | 2014-02-12 | Dr. Reddy's Laboratories Limited | Protein purification by ion exchange |
KR101152036B1 (ko) | 2010-04-27 | 2012-06-08 | (주)셀트리온 | 컬럼 순환 및 시료 연속주입법을 이용한 단백질 a 크로마토그래피 정제 방법 |
KR101871683B1 (ko) | 2010-07-30 | 2018-06-27 | 이엠디 밀리포어 코포레이션 | 크로마토그래피 매질 및 방법 |
EP2704751B1 (en) | 2011-05-02 | 2019-04-17 | Immunomedics, Inc. | Ultrafiltration concentration of allotype selected antibodies for small-volume administration |
JP6292718B2 (ja) * | 2011-07-01 | 2018-03-14 | エフ.ホフマン−ラ ロシュ アーゲーF. Hoffmann−La Roche Aktiengesellschaft | 凝集ポリペプチドから単量体ポリペプチドを分離するための方法 |
WO2013062841A1 (en) * | 2011-10-26 | 2013-05-02 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Removal of virucidal agents in mixed mode chromatography |
GB201202762D0 (en) | 2012-02-17 | 2012-04-04 | Autology Health Ltd | High efficiency cell capture |
CN103506079B (zh) * | 2012-06-19 | 2016-04-06 | 汪志友 | 一种用于分离纯化抗体的介质及其制备方法 |
EP2894159A4 (en) * | 2012-09-03 | 2016-01-20 | Kaneka Corp | AFFINITY SEPARATION MATRIX FOR MIXED MODE ANTIBODIES AND PURIFICATION METHOD USING THE SAME AND TARGET MOLECULE |
PL2812091T3 (pl) | 2012-09-17 | 2021-07-19 | W.R. Grace & Co. - Conn. | Podłoża chromatograficzne i urządzenia |
JP6397422B2 (ja) | 2012-11-13 | 2018-09-26 | ジーイー・ヘルスケア・バイオプロセス・アールアンドディ・アクチボラグ | マルチモーダルアニオン交換マトリックス |
CA2902180C (en) | 2013-02-26 | 2023-08-15 | Natrix Separations Inc. | Mixed-mode chromatography membranes |
AR096713A1 (es) | 2013-06-25 | 2016-01-27 | Cadila Healthcare Ltd | Proceso de purificación para anticuerpos monoclonales |
SG11201602061YA (en) | 2013-09-17 | 2016-04-28 | Kaneka Corp | Novel antibody purification method and antibody obtained therefrom, and novel antibody purification method using cation exchanger and antibody obtained therefrom |
CA2967901A1 (en) * | 2013-11-17 | 2015-05-21 | New Proteintech Inc. | Method of preparing chromatographic materials |
PL3094390T3 (pl) | 2014-01-16 | 2021-12-06 | W.R. Grace & Co. - Conn. | Nośniki do chromatografii powinowactwa i urządzenia do chromatografii |
US11389783B2 (en) | 2014-05-02 | 2022-07-19 | W.R. Grace & Co.-Conn. | Functionalized support material and methods of making and using functionalized support material |
DE102014010353A1 (de) | 2014-07-10 | 2016-01-14 | Sartorius Stedim Biotech Gmbh | Vorrichtung, Verwendung dieser Vorrichtung und Verfahren für die Stofftrennung mit verbesserter Ausnutzung der Kapazität chromatographischer Medien |
MX2017005148A (es) | 2014-11-06 | 2017-08-08 | Hoffmann La Roche | Variantes de region fc con union del receptor fc neonatal (fcrn) modificado y metodos de uso. |
WO2016093926A1 (en) | 2014-12-08 | 2016-06-16 | Emd Millipore Corporation | Mixed bed ion exchange adsorber |
KR102566292B1 (ko) | 2015-06-05 | 2023-08-10 | 더블유.알. 그레이스 앤드 캄파니-콘. | 흡착성 바이오프로세싱 정화제와 이의 제조 및 사용 방법 |
JP2019070528A (ja) * | 2016-02-26 | 2019-05-09 | Jsr株式会社 | 多孔質担体、アフィニティクロマトグラフィー用多孔質担体、標的物の精製方法、及び抗体 |
EP3448564B1 (en) * | 2016-04-29 | 2021-06-09 | Creoptix AG | Methods and assemblies for molecule recovery |
IL309453A (en) | 2016-08-16 | 2024-02-01 | Regeneron Pharma | A method for quantifying individual antibodies from a mixture |
IL289895B (en) | 2016-10-25 | 2022-09-01 | Regeneron Pharma | Methods and systems for analysis of chromatography data |
CN110352201A (zh) | 2017-04-03 | 2019-10-18 | 免疫医疗公司 | 用于癌症疗法的抗体药物缀合物的皮下施用 |
EP3762120A4 (en) * | 2018-03-08 | 2021-09-01 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | MIXED MODE ANIONIC-HYDROPHOBIC EXCHANGE CHROMATOGRAPHY RESIN |
WO2019183334A1 (en) | 2018-03-21 | 2019-09-26 | Waters Technologies Corporation | Non-antibody high-affinity-based sample preparation, sorbents, devices and methods |
JPWO2020004583A1 (ja) * | 2018-06-29 | 2021-08-05 | 三菱ケミカル株式会社 | ポリペプチドの分離方法、ポリペプチドの製造方法及びポリペプチドの精製装置 |
TW202005694A (zh) | 2018-07-02 | 2020-02-01 | 美商里珍納龍藥品有限公司 | 自混合物製備多肽之系統及方法 |
CN114040815A (zh) | 2019-09-05 | 2022-02-11 | 生物辐射实验室股份有限公司 | 阴离子交换-疏水混合模式色谱树脂 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2002053288A2 (en) * | 2000-12-31 | 2002-07-11 | Amersham Biosciences Ab | A method for the manufacture of compositions containing low concentrations of salts |
Family Cites Families (13)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
SE462046C (sv) | 1982-08-23 | 1998-02-10 | Pharmacia Biotech Ab | Hybrid-DNA-vektor innehållande DNA-sekvens från Staphylococcus aureus, förfarande för dess framställning och bakterie innehållande densamma |
US5151350A (en) | 1982-10-27 | 1992-09-29 | Repligen Corporation | Cloned genes encoding recombinant protein a |
US4983722A (en) | 1988-06-08 | 1991-01-08 | Miles Inc. | Removal of protein A from antibody preparations |
US5429746A (en) | 1994-02-22 | 1995-07-04 | Smith Kline Beecham Corporation | Antibody purification |
US6117996A (en) * | 1995-09-20 | 2000-09-12 | Novo Nordisk A/S | Triazine based ligands and use thereof |
GB9519197D0 (en) * | 1995-09-20 | 1995-11-22 | Affinity Chromatography Ltd | Novel affinity ligands and their use |
EP0921855B1 (en) | 1996-08-30 | 2003-11-19 | Upfront Chromatography A/S | Isolation of immunoglobulins |
SE0002688D0 (sv) * | 2000-07-17 | 2000-07-17 | Amersham Pharm Biotech Ab | Adsorption method and ligands |
WO2002053256A1 (en) * | 2001-01-05 | 2002-07-11 | Pro-Chem, Inc. | Devices and methods for purification |
SE0103084D0 (sv) | 2001-09-14 | 2001-09-14 | Amersham Pharm Biotech Ab | Generation of ion exchange media |
DE10155984A1 (de) | 2001-11-15 | 2003-05-28 | Boehringer Ingelheim Pharma | Verfahren zur Reduktion des Liganden-leakage von Affinitätschromatographie-Matrices |
JP4460302B2 (ja) | 2002-02-05 | 2010-05-12 | ジェネンテック インコーポレイテッド | タンパク質精製法 |
PT1601697E (pt) * | 2003-02-28 | 2007-09-04 | Lonza Biologics Plc | Purificação de anticorpos através de proteína a e cromatografia de troca iónica. |
-
2004
- 2004-02-27 SE SE0400501A patent/SE0400501D0/xx unknown
-
2005
- 2005-02-24 CN CN2005800062670A patent/CN1926146B/zh active Active
- 2005-02-24 AT AT05722174T patent/ATE440858T1/de not_active IP Right Cessation
- 2005-02-24 WO PCT/SE2005/000292 patent/WO2005082926A1/en active Application Filing
- 2005-02-24 AU AU2005217348A patent/AU2005217348B2/en active Active
- 2005-02-24 JP JP2007500724A patent/JP4776615B2/ja active Active
- 2005-02-24 DE DE602005016220T patent/DE602005016220D1/de active Active
- 2005-02-24 EP EP05722174A patent/EP1718668B1/en active Active
- 2005-02-24 NZ NZ548127A patent/NZ548127A/en not_active IP Right Cessation
- 2005-02-24 US US10/589,718 patent/US7385040B2/en active Active
- 2005-02-24 KR KR1020067017115A patent/KR101149969B1/ko active IP Right Grant
- 2005-02-24 CA CA2552823A patent/CA2552823C/en active Active
- 2005-02-25 CN CN200580006276XA patent/CN1925898B/zh active Active
-
2006
- 2006-06-29 IL IL176635A patent/IL176635A/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2002053288A2 (en) * | 2000-12-31 | 2002-07-11 | Amersham Biosciences Ab | A method for the manufacture of compositions containing low concentrations of salts |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US10308678B2 (en) | 2014-07-25 | 2019-06-04 | Asahi Kasei Medical Co., Ltd. | Cation exchange chromatographic support and method for using same |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
ATE440858T1 (de) | 2009-09-15 |
CN1925898A (zh) | 2007-03-07 |
EP1718668B1 (en) | 2009-08-26 |
JP2008505851A (ja) | 2008-02-28 |
DE602005016220D1 (de) | 2009-10-08 |
CN1925898B (zh) | 2010-09-01 |
KR20070001969A (ko) | 2007-01-04 |
WO2005082926A1 (en) | 2005-09-09 |
AU2005217348B2 (en) | 2011-03-31 |
KR101149969B1 (ko) | 2012-07-05 |
CA2552823A1 (en) | 2005-09-09 |
IL176635A0 (en) | 2006-10-31 |
CN1926146A (zh) | 2007-03-07 |
AU2005217348A1 (en) | 2005-09-09 |
US7385040B2 (en) | 2008-06-10 |
US20070112178A1 (en) | 2007-05-17 |
IL176635A (en) | 2011-07-31 |
NZ548127A (en) | 2009-09-25 |
CA2552823C (en) | 2013-11-19 |
EP1718668A1 (en) | 2006-11-08 |
SE0400501D0 (sv) | 2004-02-27 |
CN1926146B (zh) | 2010-06-16 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP4776615B2 (ja) | 抗体精製 | |
US10751645B2 (en) | Chromatography ligand | |
JP4848356B2 (ja) | 抗体精製法 | |
JP2012515160A (ja) | アフィニティークロマトグラフィーマトリックス | |
US9266041B2 (en) | Chromatography ligand | |
CN101060931B (zh) | 色谱配体 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20080222 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20101109 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20110208 |
|
RD02 | Notification of acceptance of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7422 Effective date: 20110208 |
|
RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20110208 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20110217 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20110506 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20110531 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20110628 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 4776615 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20140708 Year of fee payment: 3 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313113 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
S533 | Written request for registration of change of name |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313533 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |