JP4717726B2 - 花粉アレルゲン不活性化剤、ダニアレルゲン不活性化剤、花粉アレルゲン不活性化材及びダニアレルゲン不活性化材 - Google Patents
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Description
第2に本発明は、スターフルーツの葉部及び/又は紫米の玄米からの抽出物を有効成分として含有するダニアレルゲン不活性化剤を提供する。
第4に本発明は、担体と、前記担体に保持されたスターフルーツの葉部及び/又は紫米の玄米からの抽出物とを含むダニアレルゲン不活性化材を提供する。
〔花粉アレルゲン不活性化剤,ダニアレルゲン不活性化剤〕
本発明の花粉アレルゲン不活性化剤は、スターフルーツの葉部からの抽出物を有効成分として含有する。また、本発明のダニアレルゲン不活性化剤は、スターフルーツの葉部及び/又は紫米の玄米からの抽出物を有効成分として含有する。
ここで、「紫米」とは、糠層(搗精する際に糠となって剥落する部分)に色素(例えば、アントシアニン系の紫色の色素等)を有する有色素米の一種である。
本発明の花粉アレルゲン不活性化材は、担体と、担体に保持されたスターフルーツの葉部からの抽出物とを含む。また、本発明のダニアレルゲン不活性化材は、担体と、担体に保持されたスターフルーツの葉部及び/又は紫米の玄米からの抽出物とを含む。なお、本発明の花粉アレルゲン不活性化材において、スターフルーツの葉部からの抽出物を製剤化した花粉アレルゲン不活性化剤が担体に保持されていてもよく、また、本発明のダニアレルゲン不活性化材において、スターフルーツの葉部及び/又は紫米の玄米からの抽出物を製剤化したダニアレルゲン不活性化剤が担体に保持されていてもよい。
(1)スギ花粉アレルゲン不活性化反応
1%DMSOを含むPBS溶液に、試料1を表1に示す濃度でそれぞれ溶解し、各試料溶液を調製した。各試料溶液をそれぞれ100μLずつ96穴マイクロプレートに添加し、0.1%ウシ血清アルブミン含有PBS溶液にスギ花粉アレルゲン(製品名:精製スギ花粉抗原Cry j 1,生化学工業社製)を溶解した2ng/mLのスギ花粉アレルゲン溶液を1穴あたり100μLずつ添加し、室温で2時間振とうした。また、対照として、試料を添加していない1%DMSOを含むPBS溶液にスギ花粉アレルゲン溶液を添加した溶液についても同様に振とうした。
10μg/mLのコーティング溶液(製品名:抗Cry j 1モノクローナル抗体013,生化学工業社製)100μLをELISAプレートの各穴に添加し、室温で2時間静置した。その後、コーティング溶液を除去し、0.1%ウシ血清アルブミン含有PBS溶液を250μL添加し、4℃で一晩静置した。その後、0.1%ウシ血清アルブミン含有PBS溶液を除去し、2時間振とうさせた上記スギ花粉アレルゲン溶液100μLを添加して、室温で2時間振とうした。
スギ花粉アレルゲン不活性化率(%)=(B−A)/B×100
ただし、式中、Aは「試料添加スギ花粉アレルゲン溶液中のスギ花粉アレルゲン濃度(ng/mL)」を表し、Bは「試料無添加スギ花粉アレルゲン溶液中のスギ花粉アレルゲン濃度(ng/mL)」を表す。
上記試験の結果を表1に示す。
試料濃度(質量%) 不活性化率(%)
1.0 99.5
2.5 100.0
2000ng/mLのコーティング溶液(製品名:抗Der fIIモノクローナル抗体15E11,生化学工業社製)50μLをELISAプレートの各穴に添加し、4℃で一晩静置した。ELISAプレートを、0.05%ツイーン20を含むPBS溶液300μLで3度洗浄した後、1%ウシ血清アルブミン含有PBS溶液200μLを添加して室温で1時間静置し、ブロッキングした。ブロッキング終了後、0.05%ツイーン20を含むPBS溶液300μLで3度洗浄し、下記に示すようにダニアレルゲン不活性化反応を行った。
1%DMSOを含むPBS溶液に、試料1,2をそれぞれ表2に示す濃度になるように溶解し、各試料溶液を調製した。ブロッキングが終了し、洗浄した後のELISAプレートに各試料溶液を1穴あたり25μLずつ添加し、PBS溶液にダニアレルゲン(製品名:精製ダニ抗原Der fII,生化学工業社製)を溶解した200ng/mLのダニアレルゲン溶液を1穴あたり25μLずつ添加し、室温で2時間振とうした。また、対照として、ELISAプレートにPBS溶液を添加後、ダニアレルゲン溶液を添加して、同様に振とうした。
振とう後、0.05%ツイーン20を含むPBS溶液300μLでELISAプレートを3度洗浄した後、2000倍に希釈したダニアレルゲンモノクローナル抗体(製品名:西洋ワサビペルオキシダーゼ標識抗Der fIIモノクローナル抗体13A4PO,生化学工業社製)を50μL添加して、室温で2時間振とうした。そして、ELISAプレートを、0.05%ツイーン20を含むPBS溶液300μLで3度洗浄した後、0.3mg/mLのABTS溶液100μLを添加して室温で発色させ、10〜20分反応後にミキシングさせ、マイクロプレートリーダーにより405nmの吸光度を測定した。
ダニアレルゲン不活性化率(%)=(B−A)/B×100
式中、Aは「試料添加ダニアレルゲン溶液中のダニアレルゲン濃度(ng/mL)」を表し、Bは「試料無添加ダニアレルゲン溶液中のダニアレルゲン濃度(ng/mL)」を表す。
上記試験の結果を表2に示す。
試 料 試料濃度(質量%) 不活性化率(%)
試料1 0.25 72.2
1.0 94.7
2.5 98.2
試料2 0.25 47.0
1.0 53.8
2.5 42.5
Claims (4)
- 抽出溶媒として極性溶媒を使用して得られるスターフルーツの葉部からの抽出物を有効成分として含有する花粉アレルゲン不活性化剤。
- 抽出溶媒として極性溶媒を使用して得られるスターフルーツの葉部からの抽出物又はスターフルーツの葉部及び紫米の玄米からの抽出物を有効成分として含有するダニアレルゲン不活性化剤。
- 担体と、
前記担体に保持された、抽出溶媒として極性溶媒を使用して得られるスターフルーツの葉部からの抽出物と
を含む花粉アレルゲン不活性化材。 - 担体と、
前記担体に保持された、抽出溶媒として極性溶媒を使用して得られるスターフルーツの葉部からの抽出物又はスターフルーツの葉部及び紫米の玄米からの抽出物と
を含むダニアレルゲン不活性化材。
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