JP3163171B2

JP3163171B2 - ＩｇＡ産生促進剤

Info

Publication number: JP3163171B2
Application number: JP18819392A
Authority: JP
Inventors: 守冨田; 誠一島村; 興三川瀬; 光徳高瀬; 恒治山内
Original assignee: Morinaga Milk Industry Co Ltd
Current assignee: Morinaga Milk Industry Co Ltd
Priority date: 1992-07-15
Filing date: 1992-07-15
Publication date: 2001-05-08
Anticipated expiration: 2016-05-08
Also published as: JPH0632743A

Description

【発明の詳細な説明】

【産業上の利用分野】この発明は、ＩｇＡ産生促進剤に
関するものである。さらに詳しくは、この発明は、特定
のペプチド類、またはこのペプチド類とビフィドバクテ
リウム属に属する微生物（以下ビフィズス菌と記載する
ことがある）の生菌とからなり、人および哺乳動物の感
染症の防御、並びにアレルギー発症の予防に有効な新し
いＩｇＡ産生促進剤に関するものである。

【従来の技術】ＩｇＡは血清中に存在する免疫グロブリ
ン（immunoglobulin）の一種であり、微生物または異種
の蛋白質等が気管支や小腸等の粘膜から体の中に侵入す
るのを防御する作用を有する。特に、新生児の腸管に存
在するＩｇＡは感染防御または異種蛋白質によるアレル
ギー発症の予防等に寄与することが知られている。乳児
においてＩｇＡは母乳からの摂取、および自らが生産・
分泌することにより供給されるが、ＩｇＡの人乳汁中含
量は高く、母乳の特長の一つとされている。このため、
母乳を摂取することのできない人工栄養児においては、
腸管内でのＩｇＡが不足するため、ＩｇＡの分泌を促進
する物質が広く検索されてきた。たとえば、ラルフ等
［ジャーナル・オブ・イミュノロジー（Journal of Imm
unology) 第132巻、第1858ページ、1984年。以下文献１
と記載する］は、フィトヘマグルチニンとともに培養し
て得られたヒト末梢血リンパ球培養上清から、また、メ
イヤー等［ジャーナル・オブ・エクスペリメンタル・メ
デイシン（Journal of Experimental Medicine) 第156
巻、第1860ページ、1982年。以下文献２と記載する］
は、人乳から得られたＴリンパ球およびマクロファージ
混合物の培養液から分離したＢリンパ球刺激因子（ＢＡ
Ｆ）によるＩｇＡの分泌促進を報告している。さらに、
新本等（特開昭６４−２００８３号公報。以下文献３と
記載する）は、ヒトラクトフェリンによりヒトＢリンパ
球をＩｇＡ分泌細胞へ分化、誘導させる方法を開示して
いる。一方、保井等（日本農芸化学会誌、第65巻、第62
3ページ、1991年。以下文献４と記載する）は、ヒト糞
便由来のビフィズス菌をマウスに投与し、マウス腸管に
おけるＩｇＡ誘導性の高い特定の菌株をスクリーニング
したことを報告している。また、この発明の発明者等は
先に牛ラクトフェリンとビフィズス菌および／または乳
酸菌とからなる有用細菌の腸内定着を促進する組成物を
発明し、特許出願した（特開平１−２２１３１９号公
報）。

【発明が解決しようとする課題】しかしながら、前記文
献１、２および３に開示された方法は、いずれも試験管
内で得られた結果であり、実際に生体内でＩｇＡ産生を
誘導することを証明したものではない。また、前記文献
４に開示された方法は、特定のビフィズス菌菌株にＩｇ
Ａ誘導性の活性があることを示しているにすぎず、あら
ゆるビフィズス菌に普遍的にＩｇＡを誘導し得るもので
はない。以上のように、生体内でＩｇＡ産生を確実、か
つ普遍的に誘導する薬剤は従来知られておらず、感染防
御またはアレルギー発症の予防の観点からそのような薬
剤の開発が強く要請されていた。この発明は、以上のと
おりの事情に鑑みてなされたものであり、副作用がな
く、人および哺乳動物の生体内でＩｇＡを効率的、かつ
普遍的に産生する薬剤を提供することを目的としてい
る。

【課題を解決するための手段】この発明の発明者等は上
記の課題を解決するために鋭意研究を重ねた結果、ペプ
チド類単独、またはビフィズス菌とペプチド類とからな
る組成物が、人および哺乳動物のＩｇＡ産生を効率的、
かつ普遍的に誘導することを見出し、この発明を完成し
た。すなわち、この発明は、ウシラクトフェリンを蛋白
質分解酵素または酸により加水分解したペプチド混合物
から単離した配列番号１のペプチド、化学的に合成した
配列番号１のペプチド、そのペプチドの薬理学的に許容
される塩類、およびこれらの混合物からなる群より選択
されたペプチド類からなるＩｇＡ産生促進剤を提供す
る。さらにこの発明は、ウシラクトフェリンを蛋白質分
解酵素または酸により加水分解したペプチド混合物から
単離した配列番号１のペプチド、化学的に合成した配列
番号１のペプチド、そのペプチドの薬理学的に許容され
る塩類、およびこれらの混合物からなる群より選択され
たペプチド類と、ビフィドバクテリウムに属する微生物
の生菌とからなり、微生物の生菌数に対するペプチド類
の割合が特定の範囲であるＩｇＡ産生促進剤を提供す
る。次にこの発明について詳しく説明する。この発明の
出発物質として使用するラクトフェリン類は、ウシの乳
汁から公知の方法で分離したままのラクトフェリン、こ
のラクトフェリンを公知の方法により化学的に処理した
ラクトフェリン亜鉛、ラクトフェリン鉄、ラクトフェリ
ン銅、ラクトフェリン・マンガン、アポラクトフェリ
ン、またはこれらの混合物であり、市販品または公知の
方法により調製することができる。すなわち、ラクトフ
ェリンは市販品、または公知の方法（例えば特開昭６３
−１５２４００号等）により、アポラクトフェリンは、
例えば特開昭６２−２４９９３１号記載の方法等によ
り、ラクトフェリン亜鉛、ラクトフェリン銅、およびラ
クトフェリン・マンガンは、例えば特開平２−１９１２
０５号記載の方法等により、それぞれ調製することもで
きる。ペプチド類は、ウシラクトフェリンを公知の方法
（例えばヨーロッパ特許出願公開第４３８７５０号）に
より蛋白分解酵素または酸により加水分解して得られる
ペプチド混合物から公知の方法（例えば高速液体クロマ
トグラフ等）により単離した配列番号１のペプチド、公
知の方法［例えばペプチド自動合成装置（例えば、ファ
ルマシアＬＫＢバイオテクノロジー社製。ＬＫＢ Bioly
nk 4170等）を用いた固相ペプチド合成法（ジャーナル
・オブ・ケミカル・ソサイエティー・パーキンＩ（Jour
nal of Chemical Society Perkin Ｉ）、第538ページ、
1981年）等］により化学的に合成した配列番号１のペプ
チド、これらの薬理学的に許容される塩類、またはこれ
らの混合物である。なお、配列番号１のペプチドは、本
発明者等が既に特許出願（特願平２−１２８３６４号、
および特願平３−４８１９６号）しているものである。
この発明の製剤においては、配列番号１のペプチドを単
独で使用することもできる。ペプチド類は粉末状である
ことが望ましい。この発明に使用するビフィズス菌は、
ビフィドバクテリウム（Bifidobacterium；以下B.と略
記することがある）属に属し、例えばATCC等から容易に
入手できる公知の微生物であり、ビフィドバクテリウム
・インファンティス（Bifidobacterium infantis）、ビ
フィドバクテリウム・ロンガム（Bifidobacterium long
um）、ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Bifidobacter
ium breve）、ビフィドバクテリウム・アドレッセンテ
ィス（Bifidobacterium adolescentis）およびビフィド
バクテリウム・ビフィダム（Bifidobacterium bifidu
m）等に属する菌株を例示することができる。これらの
ビフィズス菌を公知の方法（例えば特開平１−２２１３
１９号等）により培養し、凍結乾燥または真空乾燥し、
乾燥ビフィズス菌生菌が得られる。この発明に使用する
ビフィズス菌生菌の形態としては、一定の生菌を含有し
ている凍結乾燥粉末であることが望ましい。この発明の
製剤は、ペプチド類単独、またはペプチド類とビフィズ
ス菌生菌とを特定の割合で含有する。ペプチド類とビフ
ィズス菌生菌とを併用する場合は、後記する試験例から
明らかなように、ビフィズス菌の生菌数に対する各ペプ
チド類の割合を次のとおりとする。［ペプチド(mg)／ビフィズス菌生菌数］×１０⁹＝０．
０５〜５この発明の製剤は、ペプチド類、またはペプチド類とビ
フィズス菌生菌とを公知の方法により前記の割合で均一
に混合し、粉剤、カプセル剤に加工することができ、必
要に応じて賦形剤、その他の薬剤も混合することもでき
る。また、この発明の製剤を乳幼児用の各種用途の粉乳
等の食品に添加することもできる。この発明の製剤の投
与量は、後記する試験例から明らかなように、ペプチド
は０．０２５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ以上であって、ビフィ
ズス菌は生菌として５×１０⁷個／ｋｇ／ｄａｙ以上で
ある。次に試験例を示してこの発明を詳述する。（試験例１）この試験は、人ラクトフェリン由来のペプチド混合物と
ビフィズス菌生菌数の適正な割合および投与量を調べる
ために実施した。３週令のマウス１２５匹を各群５匹ず
つ２５群に分け、ペプチド混合物（実施例３と同一の方
法により調製した）とビフィドバクテリウム・ロンガム
（B.longum ATCC15707）の凍結乾燥粉末（実施例１と同
一の方法により調製した。１ｇ当り１０¹⁰個の生菌を含
む標品）とを表１に示した割合で精製水１ｍｌに溶解
し、これらの溶液を、１ｍｌ／ｋｇの投与量でそれぞれ
の群に１日１回、３週間連続して投与した。３週間後、
糞便中のＩｇＡ含量を酵素抗体法（ＥＬＩＳＡ）により
測定した。この試験の結果は表１に示したとおりであ
り、ペプチド混合物単独の場合は１．５ｍｇ／ｋｇ／ｄ
ａｙ以上、ペプチド混合物とビフィズス菌の併用の場合
はペプチド混合物を０．５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ以上およ
びビフィドバクテリウム・ロンガム凍結乾燥粉末５ｍｇ
／ｋｇ／ｄａｙ以上投与したとき、糞便中のＩｇＡ含量
が顕著に増加することが認められた。また、各試験動物
において副作用は全く認められなかった。この試験に使
用したビフィドバクテリウム・ロンガム凍結乾燥粉末５
ｍｇ中には、生菌が５×１０⁷個含まれていた。なお、
ペプチド混合物およびビフィズス菌の種類を変更して試
験したが、ほぼ同様の結果が得られた。

【表１】（試験例２）この試験は、牛ラクトフェリン由来のペプチド混合物と
ビフィズス菌生菌数の適正な割合および投与量を調べる
ために実施した。３週令のマウス１２５匹を各群５匹ず
つ２５群に分け、ペプチド混合物（実施例１と同一の方
法により調製）とビフィドバクテリウム・ロンガム（B.
longum ATCC15707）の凍結乾燥粉末（実施例１と同一の
方法により調製した。１ｇ当り１×１０¹⁰個の生菌を含
む標品）とを表２に示した割合で精製水１ｍｌに溶解
し、これらの溶液を、１ｍｌ／ｋｇの投与量でそれぞれ
の群に１日１回、３週間連続して投与した。３週間後、
糞便中のＩｇＡ含量をＥＬＩＳＡにより測定した。この
試験の結果は表２に示したとおりであり、ペプチド混合
物単独の場合は１．５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ以上、ペプチ
ド混合物とビフィズス菌の併用の場合はペプチド混合物
を５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ以上およびビフィドバクテリウ
ム・ロンガムの菌体を５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ投与した場
合に、糞便中のＩｇＡ含量が顕著に増加することが認め
られた。また、各試験動物において副作用は全く認めら
れなかった。この試験に使用したビフィドバクテリウム
・ロンガムの凍結乾燥粉末５ｍｇ中には、生菌が５×１
０⁷個含まれていた。なお、ペプチド混合物およびビフ
ィズス菌の種類を変更して試験したが、ほぼ同様の結果
が得られた。

【表２】（試験例３）この試験は、合成したペプチドとビフィズス菌生菌数の
適正な割合および投与量を調べるために実施した。３週
令のマウス１２５匹を各群５匹ずつ２５群に分け、配列
番号１のペプチド（実施例４と同一の方法により調製し
た）とビフィドバクテリウム・ロンガム（B.longum ATC
C15707）の凍結乾燥粉末（実施例１と同一の方法により
調製した。１ｇ当り１０¹⁰個の生菌を含む標品）とを表
３に示した割合で精製水１ｍｌに溶解し、これらの溶液
を、１ｍｌ／ｋｇの投与量でそれぞれの群に１日１回、
３週間連続して投与した。３週間後、糞便中のＩｇＡ含
量をＥＬＩＳＡにより測定した。この試験の結果は表３
に示したとおりであり、このペプチド単独の場合は０．
０７５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ以上、ペプチドとビフィズス
菌の併用の場合はこのペプチドを０．０２５ｍｇ／ｋｇ
／ｄａｙ以上およびビフィドバクテリウム・ロンガムの
凍結乾燥粉末を５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ投与した場合に、
糞便中のＩｇＡ含量が顕著に増加することが認められ
た。また、各試験動物において副作用は全く認められな
かった。この試験に使用したビフィドバクテリウム・ロ
ンガムの凍結乾燥粉末５ｍｇ中には、生菌が５×１０⁷
個含まれていた。なお、ペプチドおよびビフィズス菌の
種類を変更して試験したが、ほぼ同様の結果が得られ
た。

【表３】（試験例４）この試験は各種ビフィズス菌のＩｇＡ産生に及ぼす影響
を調べるために実施した。３週令のマウス１００匹を各
群５匹ずつ２０群に分け、０．５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの
ペプチド混合物（実施例１と同一の方法で調製した）と
表４に示す各種ビフィズス菌の凍結乾燥粉末（菌株を変
更した以外は実施例１と同一の方法で調製した）とを種
々の量で精製水に溶解し、これらの溶液を、それぞれの
群に１日１回、３週間連続して投与した。３週間後、糞
便中のＩｇＡ含量をＥＬＩＳＡにより測定した。結果は
表４に示したとおりであり、ペプチド混合物を０．５ｍ
ｇ／ｋｇ／ｄａｙ投与した場合、ビフィズス菌の各凍結
乾燥粉末を５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ以上、生菌として５×
１０⁷個／ｋｇ／ｄａｙ投与した場合に、糞便中のＩｇ
Ａ含量が顕著に増加することが認められた。また、各試
験動物において副作用は全く認められなかった。この試
験に使用したビフィズス菌の各凍結乾燥粉末５ｍｇ中に
は、生菌が５×１０⁷個含まれていた。なお、他のペプ
チド混合物を用いて試験したが、ほぼ同様の結果が得ら
れた。

【表４】（試験例５）この試験は、ペプチド混合物およびペプチドの混合物
と、ビフィズス菌との併用について効果を比較するため
に行った。３週令のマウス８５匹を各群５匹ずつ１７群
に分け、ペプチド混合物（実施例２と同様の方法で調整
した）および／または配列番号１のペプチド（実施例４
と同一の方法で調製した）と、ビフィドバクテリウム・
ロンガム（B.longum ATCC15707）の凍結乾燥粉末（実施
例１と同一の方法で調製した。１ｇ当り１０¹⁰個の生菌
を含む標品）とを表５に示した割合で精製水１ｍｌに溶
解し、これらの溶液を、１ｍｌ／ｋｇの投与量でそれぞ
れの群に１日１回、３週間連続して投与した。３週間
後、糞便中のＩｇＡ含量をＥＬＩＳＡにより測定した。
この試験の結果は表５に示したとおりである。ビフィド
バクテリウム・ロンガムを５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙ投与し
た場合、ペプチド混合物またはペプチドから一種類を選
んで投与すると、ペプチド混合物は０．５ｍｇ／ｋｇ／
ｄａｙ、ペプチドは０．０２５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの投
与でＩｇＡの産生を促進した。また、ペプチド混合物と
ペプチドとを併用した試験結果から次のことが明らかに
なった。試験番号３と試験番号５の結果とを比較すれ
ば、ペプチド混合物を０．５ｍｇから０．３ｍｇに減少
させたとき、ペプチドを０．００５ｍｇ添加したので
は、十分なＩｇＡ産生が得られない。これに対して試験
番号３と試験番号６および８の結果とを比較すれば、ペ
プチド混合物を０．５ｍｇから０．３ｍｇおよび０．１
ｍｇに減少させたとき、ペプチドを０．０１ｍｇおよび
０．０２ｍｇ添加した場合に十分なＩｇＡ産生が得られ
る。従って、ペプチド混合物０．１部はペプチド０．０
０５部とほぼ同等の効果を有しており、ペプチド混合物
をこの割合でペプチドと代替し得る。なお、ペプチド類
およびビフィズス菌の種類を変更して試験したが、ほぼ
同様の結果が得られた。

【００３０】

【表５】

【実施例】次に実施例を示してこの発明を更に詳述する
が、この発明は以下の実施例に限定されるものではな
い。実施例１牛乳から分離したままの市販のラクトフェリン（ベルギ
ーのオレオフィナ社製）５０ｇを精製水９５０ｇに溶解
し、得られた溶液に１規定の塩酸を添加してｐＨを２に
調整し、１２０℃で１５分間加熱し、次いで冷却し、ペ
プチド混合物を含有する溶液（ペプチド混合物濃度：５
％）約１０００ｇを得た。このペプチド混合物の分解度
は９％であった。この溶液に１規定の苛性ソーダを添加
してｐＨを６．０に調整し、生じた沈殿を濾過により除
去し、凍結乾燥し、粉末のペプチド混合物約４２ｇを得
た。ビフィドバクテリウム・ロンガム（B.longum ATCC1
5708）をブリックス・リバー・ブロスにおいて１０代継
代培養し、グルコース、酵母エキス、ペプトンおよびリ
ン酸塩からなる滅菌した合成培地５０ｌに接種し、３７
℃で１４時間培養した。培養液を遠心分離し、菌体を集
め、得られた菌液１ｌに市販のグルタミン酸１００ｇ、
およびしょ糖５０ｇを含む分散媒５００ｍｌを添加し、
凍結乾燥した。得られた粉末２７５ｇに市販の乳糖２ｋ
ｇおよび乾燥コーンスターチ２．５ｋｇを加え、均一に
混合して倍散し、粉末１ｇ当り１×１０¹⁰個のビフィズ
ス菌生菌を含む標品約４．７ｋｇを得た。前記の粉末の
ペプチド混合物１０ｇに、前記のビフィズス菌生菌を含
む標品１００ｇを均一に混合し、ＩｇＡ産生促進剤を調
製した。実施例２牛乳から分離したままの市販のラクトフェリン（ベルギ
ーのオレオフィナ社製）１ｋｇを精製水９ｋｇに溶解
し、２モル濃度のクエン酸を添加してｐＨを２．５に調
整し、市販の豚ペプシン（１：１０，０００。和光純薬
工業社製）３０ｇを添加して均一に混合し、３７℃に１
８０分間保持し、１規定の苛性ソーダを添加してｐＨを
６．０に調整し、８５℃で１０分間加熱して酵素を失活
させ、次いで冷却し、ペプチド混合物を含有する溶液
（ペプチド混合物濃度：１０％）約１０ｋｇを得た。こ
のペプチド混合物の分解度は１１．３％であった。この
ペプチド混合物含有溶液を減圧濃縮し、凍結乾燥し、粉
末のペプチド混合物約９６０ｇを得た。この粉末のペプ
チド混合物１００ｇに、実施例１と同一の方法で調製し
た生菌数が１×１０¹⁰個／ｇのビフィドバクテリウム・
ロンガム（B.longum ATCC15708）の生菌を含む標品３０
００ｇを均一混合し、ＩｇＡ産生促進剤を調製した。実
施例３人乳から分離したままの市販のラクトフェリン（米国シ
グマ社製）３ｇを精製水１００ｇに溶解し、２モル濃度
のクエン酸を添加してｐＨを２．５に調整し、市販の豚
ペプシン（１：１０，０００。和光純薬工業社製）１０
０ｍｇを添加して均一に混合し、３７℃に１８０分間保
持し、１モルの苛性ソーダでｐＨを７．０に調整し、８
５℃で１０分間加熱して酵素を失活させ、次いで冷却
し、ペプチド混合物を含有する溶液（ペプチド混合物濃
度：１０％）約１００ｇを得た。このペプチド混合物の
分解度は１１．３％であった。このペプチド混合物含有
溶液を減圧濃縮し、凍結乾燥し、粉末のペプチド混合物
約３ｇを得た。この粉末のペプチド混合物３ｇに、実施
例１と同一の方法で調製した生菌数が１×１０¹⁰個／ｇ
のビフィドバクテリウム・ロンガム（B.longum ATCC157
08）の生菌を含む標品３０ｇを均一混合し、ＩｇＡ産生
促進剤を調製した。実施例４市販の牛ラクトフェリン（シグマ社製）５０ｍｇを精製
水０．９ｍｌに溶解し、０．１規定の塩酸でｐＨを２．
５に調整し、のち市販の豚ペプシン（シグマ社製）１ｍ
ｇを添加し、３７℃で６時間加水分解した。次いで０．
１規定の水酸化ナトリウムでｐＨを７．０に調整し、８
０℃で１０分間加熱して酵素を失活させ、室温に冷却
し、１５，０００ｒｐｍで３０分間遠心分離し、透明な
上清を得た。この上清１００μｌをＴＳＫゲルＯＤＳ−
１２０Ｔ（東ソー社製）を用いた高速液体クロマトグラ
フィーにかけ、０．８ｍｌ／分の流速で試料注入後１０
分間０．０５％ＴＦＡ（トリフルオロ酢酸）を含む２０
％アセトニトリルで溶出し、次いで３０分間０．０５％
ＴＦＡを含む２０〜６０％のアセトニトリルのグラジエ
ントで溶出し、２４〜２５分の間に溶出する画分を集
め、真空乾燥した。この乾燥物を２％（Ｗ／Ｖ）の濃度
で精製水に溶解し、再度ＴＳＫゲルＯＤＳ−１２０Ｔ
（東ソー社製）を用いた高速液体クロマトグラフィーに
かけ、０．８ｍｌ／分の流速で試料注入後１０分間０．
０５％ＴＦＡを含む２４％アセトニトリルで溶出し、の
ち３０分間０．０５％ＴＦＡを含む２４〜３２％のアセ
トニトリルのグラジエントで溶出し、３３．５〜３５．
５分の間に溶出する画分を集めた。上記の操作を２５回
反復し、真空乾燥し、ペプチド約１．５ｍｇを得た。こ
のペプチドを６Ｎ塩酸で加水分解し、アミノ酸分析計を
用いて常法によりアミノ酸組成を分析した。同一の試料
を気相シークェンサー（アプライド・バイオシステムズ
社製）を用いて２５回のエドマン分解を行ない、２５個
のアミノ酸残基の配列を決定した。またＤＴＮＢ（５，
５−ジチオ−ビス（２−ニトロベンゾイック・アシ
ド））を用いたジスルフィド結合分析法［アナリティカ
ル・バイオケミストリー（Analytical Biochemistr
y）、第67巻、第493頁、1975年］によりジスルフィド結
合が存在することを確認した。その結果、このペプチド
は、２５個のアミノ酸残基からなり、３番目と２０番目
のシステイン残基がジスルフィド結合し、３番目のシス
テイン残基からＮ−末端側に２個のアミノ酸残基が、２
０番目のシステイン残基からＣ−末端側に５個のアミノ
酸残基が、それぞれ結合した、配列番号１のアミノ酸配
列を有していることが確認された。このペプチド粉末１
０ｍｇに、ビフィドバクテリウム・ビフィダム（B.bifi
dum ATCC15696）を用いたことを除き、実施例１と同一
の方法で調製した生菌数が１×１０¹⁰個／ｇのビフィド
バクテリウム・ビフィダムの生菌を含む標品２０ｇを均
一混合し、ＩｇＡ産生促進剤を調製した。実施例５実施例２と同一の方法で調製したペプチド混合物３００
ｍｇ、実施例４と同一の方法で調製したペプチド１０ｍ
ｇ、およびビフィドバクテリウム・ブレーベ（B.breve
ATCC15799）を用いたことを除き実施例１と同一の方法
で調製した生菌数が１×１０¹⁰個／ｇのビフィドバクテ
リウム・ブレーベの生菌を含む標品２ｇを均一混合し、
ＩｇＡ産生促進剤を調製した。実施例６実施例１と同一の方法で調製した１×１０¹⁰個／ｇのビ
フィドバクテリウム・ロンガム（B.longum ATCC15707）
の生菌を含む標品、実施例２と同一の方法で調製した粉
末のペプチド混合物、市販の乳糖、乾燥コーンスター
チ、および脱脂粉乳を次の配合比率でＶ型混合機を用い
て均一に混合し、ＩｇＡ産生促進剤を調製した。ビフィドバクテリウム・ロンガムの標品１０（ｇ）粉末のペプチド混合物１乳糖４０乾燥コーンスターチ１９脱脂粉乳３０

【発明の効果】この発明によって奏せられる効果は、次
のとおりである。 (1)人および哺乳動物の生体内で確実にＩｇＡの産生を
促進することができる。(2)Bifidobacterium属に属する
如何なる微生物を使用しても生体内で確実にＩｇＡ抗体
の産生を促進することができる。 (3)この発明の製剤投与による副作用は全く認められな
い。

【配列表】配列番号：１配列の長さ：２５配列の型：アミノ酸トポロジー：直鎖状配列の種類：ペプチド配列の特徴：このペプチド、およびこのペプチドをフラグメントとして含むペプチド。下記配列において、３番のCysと２０番のCysがジスルフィド結合している。配列： Phe Lys Cys Arg Arg Trp Gln Trp Arg Met Lys Lys Leu Gly Ala 1 5 10 15 Pro Ser Ile Thr Cys Val Arg Arg Ala Phe 20 25

フロントページの続き (72)発明者山内恒治神奈川県鎌倉市玉縄４−２−２ガーデンハイツ鎌倉玉縄405 (56)参考文献特開昭64−20083（ＪＰ，Ａ) 特開平２−280059（ＪＰ，Ａ) (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) A61K 38/00 - 38/58 A61K 35/74 ＣＡ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ) ＭＥＤＬＩＮＥ（ＳＴＮ)

Claims

(57)【特許請求の範囲】

【請求項１】ウシラクトフェリンを蛋白質分解酵素ま
たは酸により加水分解したペプチド混合物から単離した
配列番号１のペプチド、化学的に合成した配列番号１の
ペプチド、そのペプチドの薬理学的に許容される塩類、
およびこれらの混合物からなる群より選択されたペプチ
ド類からなるＩｇA産生促進剤。
【請求項２】ウシラクトフェリンを蛋白質分解酵素ま
たは酸により加水分解したペプチド混合物から単離した
配列番号１のペプチド、化学的に合成した配列番号１の
ペプチド、そのペプチドの薬理学的に許容される塩類、
およびこれらの混合物からなる群より選択されたペプチ
ド類と、ビフィドバクテリウムに属する微生物の生菌と
からなり、微生物の生菌数に対するペプチド類の割合
が、［ペプチド（mg）／ビフィドバクテリウム属に属する微
生物の生菌数］ ×１０⁹＝０．０５〜５であり、有効投与量がペプチド０．０２５ｍｇ／ｋｇ／
ｄａｙ以上、およびビフィドバクテリウム属に属する微
生物の生菌５×１０⁷個／ｋｇ／ｄａｙ以上であるＩｇ
Ａ産生促進剤。