JP3134235B2 - ２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物の製造方法 - Google Patents
２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物の製造方法Info
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H17/00—Compounds containing heterocyclic radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H17/04—Heterocyclic radicals containing only oxygen as ring hetero atoms
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、２−Ｏ−α−Ｄ−グル
コピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物の製造方法
に関し、詳細には、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル
−Ｌ−アスコルビン酸とともに直接還元性を示すＬ−ア
スコルビン酸糖誘導体を含有する溶液からの２−Ｏ−α
−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物
の製造方法に関する。
コピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物の製造方法
に関し、詳細には、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル
−Ｌ−アスコルビン酸とともに直接還元性を示すＬ−ア
スコルビン酸糖誘導体を含有する溶液からの２−Ｏ−α
−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物
の製造方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ
−アスコルビン酸は、特開平３−１３５９９２号公報、
特開平３−１３９２８８号公報などで開示されているよ
うに、化Ｉで示される化学構造を有し、直接還元性を示
さず、安定性に優れ、しかも生体内で容易に加水分解さ
れ、Ｌ−アスコルビン酸本来の生理活性を発揮するＬ−
アスコルビン酸の新規糖誘導体である。
−アスコルビン酸は、特開平３−１３５９９２号公報、
特開平３−１３９２８８号公報などで開示されているよ
うに、化Ｉで示される化学構造を有し、直接還元性を示
さず、安定性に優れ、しかも生体内で容易に加水分解さ
れ、Ｌ−アスコルビン酸本来の生理活性を発揮するＬ−
アスコルビン酸の新規糖誘導体である。
【０００３】
【化１】
【０００４】その工業的製造方法は、特開平３−１８３
４９２号公報に開示されているように、例えば、Ｌ−ア
スコルビン酸とα−グルコシル糖化合物とを含有する溶
液に糖転移酵素または糖転移酵素とグルコアミラーゼと
を作用させて得られる２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシ
ル−Ｌ−アスコルビン酸とともにそれ以外の夾雑物を含
有する溶液を原料溶液として、強酸性カチオン交換樹脂
を用いるカラムクロマトグラフィーを行ない、この溶出
液の２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコル
ビン酸高含有画分を採取することにより、２−Ｏ−α−
Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物含
有溶液を製造しうること、更に、これを濃縮して過飽和
とし、結晶２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−ア
スコルビン酸を製造しうることが開示されている。
４９２号公報に開示されているように、例えば、Ｌ−ア
スコルビン酸とα−グルコシル糖化合物とを含有する溶
液に糖転移酵素または糖転移酵素とグルコアミラーゼと
を作用させて得られる２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシ
ル−Ｌ−アスコルビン酸とともにそれ以外の夾雑物を含
有する溶液を原料溶液として、強酸性カチオン交換樹脂
を用いるカラムクロマトグラフィーを行ない、この溶出
液の２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコル
ビン酸高含有画分を採取することにより、２−Ｏ−α−
Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物含
有溶液を製造しうること、更に、これを濃縮して過飽和
とし、結晶２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−ア
スコルビン酸を製造しうることが開示されている。
【０００５】しかしながら、本発明者等は、２−Ｏ−α
−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物
の製造方法について研究を続けていたところ、原料溶液
である２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコ
ルビン酸とともにそれ以外の夾雑物を含有する溶液に
は、強酸性カチオン交換樹脂を用いるカラムクロマトグ
ラフィーにおいて、Ｌ−アスコルビン酸、グルコースな
どのように、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−
アスコルビン酸との分離が比較的容易な夾雑物以外に、
分離が困難で２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−
アスコルビン酸高含有画分の純度向上を妨げ、更に、過
飽和溶液からの結晶２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル
−Ｌ−アスコルビン酸の析出を阻害する比較的少量の未
知夾雑物が混在していることを見いだした。
−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物
の製造方法について研究を続けていたところ、原料溶液
である２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコ
ルビン酸とともにそれ以外の夾雑物を含有する溶液に
は、強酸性カチオン交換樹脂を用いるカラムクロマトグ
ラフィーにおいて、Ｌ−アスコルビン酸、グルコースな
どのように、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−
アスコルビン酸との分離が比較的容易な夾雑物以外に、
分離が困難で２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−
アスコルビン酸高含有画分の純度向上を妨げ、更に、過
飽和溶液からの結晶２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル
−Ｌ−アスコルビン酸の析出を阻害する比較的少量の未
知夾雑物が混在していることを見いだした。
【０００６】更に、本未知物質は、結晶２−Ｏ−α−Ｄ
−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸を分離除去し
た母液中に蓄積され、母液からの結晶２−Ｏ−α−Ｄ−
グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸の析出を阻害
し、２番晶、３番晶の析出量を著しく低下させることを
見いだした。
−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸を分離除去し
た母液中に蓄積され、母液からの結晶２−Ｏ−α−Ｄ−
グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸の析出を阻害
し、２番晶、３番晶の析出量を著しく低下させることを
見いだした。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】糖転移反応により得ら
れた２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコル
ビン酸含有溶液に混在する未知夾雑物を解明し、併せ
て、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコル
ビン酸とともに夾雑物を含有する溶液からその夾雑物を
容易に除去し、より高純度の２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピ
ラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物を工業的により
高収率で大量生産する方法の確立が望まれる。
れた２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコル
ビン酸含有溶液に混在する未知夾雑物を解明し、併せ
て、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコル
ビン酸とともに夾雑物を含有する溶液からその夾雑物を
容易に除去し、より高純度の２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピ
ラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物を工業的により
高収率で大量生産する方法の確立が望まれる。
【０００８】
【課題を解決するための手段】本発明者等は、糖転移反
応により得られた２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−
Ｌ−アスコルビン酸とともにそれ以外の夾雑物を含有す
る溶液を用いて、強酸性カチオン交換樹脂を用いるカラ
ムクロマトグラフィーにより、より高純度の２−Ｏ−α
−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物
を工業的に容易に製造する方法の確立を目指して鋭意研
究を続けた。
応により得られた２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−
Ｌ−アスコルビン酸とともにそれ以外の夾雑物を含有す
る溶液を用いて、強酸性カチオン交換樹脂を用いるカラ
ムクロマトグラフィーにより、より高純度の２−Ｏ−α
−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物
を工業的に容易に製造する方法の確立を目指して鋭意研
究を続けた。
【０００９】その結果、強酸性カチオン交換樹脂を用い
るカラムクロマトグラフィーにおいて、２−Ｏ−α−Ｄ
−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸との分離が困
難で、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコ
ルビン酸高含有画分の純度向上を妨げ、更に、過飽和溶
液からの結晶２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−
アスコルビン酸の析出を阻害する夾雑物として、５−Ｏ
−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸およ
び６−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビ
ン酸を見い出した。
るカラムクロマトグラフィーにおいて、２−Ｏ−α−Ｄ
−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸との分離が困
難で、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコ
ルビン酸高含有画分の純度向上を妨げ、更に、過飽和溶
液からの結晶２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−
アスコルビン酸の析出を阻害する夾雑物として、５−Ｏ
−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸およ
び６−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビ
ン酸を見い出した。
【００１０】５−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−
アスコルビン酸は、文献未記載の新規物質であり、６−
Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸
は、特公昭４８−３８１５８号公報に開示されている公
知物質であり、これらは、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラ
ノシル−Ｌ−アスコルビン酸の場合とは違って、直接還
元性を示すＬ−アスコルビン酸糖誘導体であることが判
明した。
アスコルビン酸は、文献未記載の新規物質であり、６−
Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸
は、特公昭４８−３８１５８号公報に開示されている公
知物質であり、これらは、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラ
ノシル−Ｌ−アスコルビン酸の場合とは違って、直接還
元性を示すＬ−アスコルビン酸糖誘導体であることが判
明した。
【００１１】更に、直接還元性を示さない２−Ｏ−α−
Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸と直接還元
性を示す５−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アス
コルビン酸、６−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−
アスコルビン酸などのＬ−アスコルビン酸糖誘導体との
性質の違いに着目して研究を続け、２−Ｏ−α−Ｄ−グ
ルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸とともに直接還元
性を示すＬ−アスコルビン酸糖誘導体を含有する溶液を
酸化処理して、直接還元性を示すＬ−アスコルビン酸糖
誘導体だけを酸化せしめ、次いで、強酸性カチオン交換
樹脂を用いるカラムクロマトグラフィーを行うことによ
り、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコル
ビン酸と直接還元性を示すＬ−アスコルビン酸糖誘導体
の酸化物とを容易に分離できることを見いだし、併せ
て、より高純度の２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−
Ｌ−アスコルビン酸高含有物を工業的規模でより高収率
で製造しうることを見いだし、本発明を完成した。
Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸と直接還元
性を示す５−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アス
コルビン酸、６−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−
アスコルビン酸などのＬ−アスコルビン酸糖誘導体との
性質の違いに着目して研究を続け、２−Ｏ−α−Ｄ−グ
ルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸とともに直接還元
性を示すＬ−アスコルビン酸糖誘導体を含有する溶液を
酸化処理して、直接還元性を示すＬ−アスコルビン酸糖
誘導体だけを酸化せしめ、次いで、強酸性カチオン交換
樹脂を用いるカラムクロマトグラフィーを行うことによ
り、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコル
ビン酸と直接還元性を示すＬ−アスコルビン酸糖誘導体
の酸化物とを容易に分離できることを見いだし、併せ
て、より高純度の２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−
Ｌ−アスコルビン酸高含有物を工業的規模でより高収率
で製造しうることを見いだし、本発明を完成した。
【００１２】また、このようにして得られるより高純度
の２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビ
ン酸高含有物の過飽和溶液は、結晶の析出が容易で収率
も高く、結晶２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−
アスコルビン酸の工業的製造方法としてきわめて有利で
あることが判明した。
の２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビ
ン酸高含有物の過飽和溶液は、結晶の析出が容易で収率
も高く、結晶２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−
アスコルビン酸の工業的製造方法としてきわめて有利で
あることが判明した。
【００１３】本発明において、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコ
ピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸とともに直接還元性を
示すＬ−アスコルビン酸糖誘導体を含有する溶液とは、
２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン
酸とともに直接還元性を示す５−Ｏ−α−Ｄ−グルコピ
ラノシル−Ｌ−アスコルビン酸、６−Ｏ−α−Ｄ−グル
コピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸などのＬ−アスコル
ビン酸糖誘導体を含有する溶液であって、例えば、Ｌ−
アスコルビン酸とα−グルコシル糖化合物とを含有する
溶液に糖転移酵素または糖転移酵素とグルコアミラーゼ
とを作用させて得られる溶液、この溶液を強酸性カチオ
ン交換樹脂を用いるカラムクロマトグラフィーにより得
られる２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコ
ルビン酸高含有溶液、または、この溶液を濃縮、過飽和
にし、結晶２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−ア
スコルビン酸を析出、分離して得られる母液などを意味
する。
ピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸とともに直接還元性を
示すＬ−アスコルビン酸糖誘導体を含有する溶液とは、
２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン
酸とともに直接還元性を示す５−Ｏ−α−Ｄ−グルコピ
ラノシル−Ｌ−アスコルビン酸、６−Ｏ−α−Ｄ−グル
コピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸などのＬ−アスコル
ビン酸糖誘導体を含有する溶液であって、例えば、Ｌ−
アスコルビン酸とα−グルコシル糖化合物とを含有する
溶液に糖転移酵素または糖転移酵素とグルコアミラーゼ
とを作用させて得られる溶液、この溶液を強酸性カチオ
ン交換樹脂を用いるカラムクロマトグラフィーにより得
られる２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコ
ルビン酸高含有溶液、または、この溶液を濃縮、過飽和
にし、結晶２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−ア
スコルビン酸を析出、分離して得られる母液などを意味
する。
【００１４】本明細書でいう直接還元性を示すとは、Ｌ
−アスコルビン酸の場合と同様に、そのままで、２，６
−ジクロルフェノールインドフェノールを還元脱色する
ことを意味する。
−アスコルビン酸の場合と同様に、そのままで、２，６
−ジクロルフェノールインドフェノールを還元脱色する
ことを意味する。
【００１５】また、本明細書でいうＬ−アスコルビン酸
とは、Ｌ−アスコルビン酸のみならず、Ｌ−アスコルビ
ン酸のアルカリ金属塩若しくはアルカリ土類金属塩など
のＬ−アスコルビン酸塩、または、それらの混合物を意
味する。
とは、Ｌ−アスコルビン酸のみならず、Ｌ−アスコルビ
ン酸のアルカリ金属塩若しくはアルカリ土類金属塩など
のＬ−アスコルビン酸塩、または、それらの混合物を意
味する。
【００１６】従って、糖転移反応に用いるＬ−アスコル
ビン酸としては、通常、遊離のＬ−アスコルビン酸だけ
でなく、必要に応じて、Ｌ−アスコルビン酸ナトリウ
ム、Ｌ−アスコルビン酸カルシウムなどが適宜用いられ
る。
ビン酸としては、通常、遊離のＬ−アスコルビン酸だけ
でなく、必要に応じて、Ｌ−アスコルビン酸ナトリウ
ム、Ｌ−アスコルビン酸カルシウムなどが適宜用いられ
る。
【００１７】また、同様に、本明細書でいう２−Ｏ−α
−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸、５−Ｏ
−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸、６
−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン
酸、α−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸などについて
も、特に不都合が生じない限り、遊離の酸のみならず、
それらの塩をも意味する。
−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸、５−Ｏ
−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸、６
−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン
酸、α−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸などについて
も、特に不都合が生じない限り、遊離の酸のみならず、
それらの塩をも意味する。
【００１８】２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−
アスコルビン酸とともに直接還元性を示すＬ−アスコル
ビン酸糖誘導体を含有する溶液を酸化処理するには、で
きるだけ、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−ア
スコルビン酸に作用することなく、直接還元性を示すＬ
−アスコルビン酸糖誘導体を優先的に酸化する条件が選
ばれ、例えば、通気撹拌などの好気的条件にさらす方法
が有利に採用できる。
アスコルビン酸とともに直接還元性を示すＬ−アスコル
ビン酸糖誘導体を含有する溶液を酸化処理するには、で
きるだけ、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−ア
スコルビン酸に作用することなく、直接還元性を示すＬ
−アスコルビン酸糖誘導体を優先的に酸化する条件が選
ばれ、例えば、通気撹拌などの好気的条件にさらす方法
が有利に採用できる。
【００１９】この際、ｐＨを弱酸性乃至アルカリ性にし
たり、銅塩、鉄塩などの金属塩、水蒸気炭、塩化亜鉛炭
などの活性炭など酸化促進剤の共存下で酸化を促進する
ことも有利に実施できる。
たり、銅塩、鉄塩などの金属塩、水蒸気炭、塩化亜鉛炭
などの活性炭など酸化促進剤の共存下で酸化を促進する
ことも有利に実施できる。
【００２０】必要ならば、過酸化水素、過マンガン酸カ
リウムなどの酸化剤を添加することも有利に実施でき
る。
リウムなどの酸化剤を添加することも有利に実施でき
る。
【００２１】このようにして得られる２−Ｏ−α−Ｄ−
グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸とともに直接還
元性を示すＬ−アスコルビン酸糖誘導体の酸化物（以
下、単にＬ−アスコルビン酸糖誘導体酸化物と略称す
る。）を含有する溶液は、強酸性カチオン交換樹脂を用
いるカラムクロマトグラフィーによって、２−Ｏ−α−
Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸とＬ−アス
コルビン酸糖誘導体酸化物とを容易に分離できることが
判明した。
グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸とともに直接還
元性を示すＬ−アスコルビン酸糖誘導体の酸化物（以
下、単にＬ−アスコルビン酸糖誘導体酸化物と略称す
る。）を含有する溶液は、強酸性カチオン交換樹脂を用
いるカラムクロマトグラフィーによって、２−Ｏ−α−
Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸とＬ−アス
コルビン酸糖誘導体酸化物とを容易に分離できることが
判明した。
【００２２】以下、本発明で採用される強酸性カチオン
交換樹脂を用いるカラムクロマトグラフィーについて、
より具体的に説明する。
交換樹脂を用いるカラムクロマトグラフィーについて、
より具体的に説明する。
【００２３】強酸性カチオン交換樹脂は、公知の、例え
ば、スルホン酸基を結合したスチレン−ジビニルベンゼ
ン架橋共重合体樹脂のＮａ＋型、Ｋ＋型などのアルカリ
金属塩型、または、Ｃａ＋＋型、Ｍｇ＋＋型などのアル
カリ土類金属塩型、またはＨ＋型などが適宜使用され、
市販品としては、例えば、ダウケミカル社製造の商品名
ダウエックス ５０Ｗ×８、ローム＆ハース社製造の商
品名アンバーライトＣＧ−１２０、東京有機化学工業社
製造の商品名 ＸＴ−１０２２Ｅ、三菱化成工業社製造
の商品名ダイヤイオン ＳＫ１０４などがある。
ば、スルホン酸基を結合したスチレン−ジビニルベンゼ
ン架橋共重合体樹脂のＮａ＋型、Ｋ＋型などのアルカリ
金属塩型、または、Ｃａ＋＋型、Ｍｇ＋＋型などのアル
カリ土類金属塩型、またはＨ＋型などが適宜使用され、
市販品としては、例えば、ダウケミカル社製造の商品名
ダウエックス ５０Ｗ×８、ローム＆ハース社製造の商
品名アンバーライトＣＧ−１２０、東京有機化学工業社
製造の商品名 ＸＴ−１０２２Ｅ、三菱化成工業社製造
の商品名ダイヤイオン ＳＫ１０４などがある。
【００２４】これら樹脂は、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピ
ラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有画分の分画に優れ
ているだけでなく、耐熱性、耐摩耗性にも優れ、２−Ｏ
−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含
有物の工業的大量生産に極めて有利である。
ラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有画分の分画に優れ
ているだけでなく、耐熱性、耐摩耗性にも優れ、２−Ｏ
−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含
有物の工業的大量生産に極めて有利である。
【００２５】原料溶液として、例えば、目的とする２−
Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸と
ともにＬ−アスコルビン酸糖誘導体酸化物、Ｄ−グルコ
ースなどの夾雑物を含有する溶液を用いる場合には、強
酸性カチオン交換樹脂を充填したカラムに原料溶液を流
し、次いで、水で溶出し、Ｌ−アスコルビン酸糖誘導体
酸化物高含有画分、Ｌ−アスコルビン酸糖誘導体酸化物
・２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビ
ン酸高含有画分、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−
Ｌ−アスコルビン酸高含有画分、２−Ｏ−α−Ｄ−グル
コピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸・Ｄ−グルコース高
含有画分、Ｄ−グルコース高含有画分などの順に複数の
画分に分画して、この２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシ
ル−Ｌ−アスコルビン酸高含有画分を採取することによ
り、容易に２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−ア
スコルビン酸高含有物が製造される。
Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸と
ともにＬ−アスコルビン酸糖誘導体酸化物、Ｄ−グルコ
ースなどの夾雑物を含有する溶液を用いる場合には、強
酸性カチオン交換樹脂を充填したカラムに原料溶液を流
し、次いで、水で溶出し、Ｌ−アスコルビン酸糖誘導体
酸化物高含有画分、Ｌ−アスコルビン酸糖誘導体酸化物
・２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビ
ン酸高含有画分、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−
Ｌ−アスコルビン酸高含有画分、２−Ｏ−α−Ｄ−グル
コピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸・Ｄ−グルコース高
含有画分、Ｄ−グルコース高含有画分などの順に複数の
画分に分画して、この２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシ
ル−Ｌ−アスコルビン酸高含有画分を採取することによ
り、容易に２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−ア
スコルビン酸高含有物が製造される。
【００２６】また、原料溶液をカラムに流して分画する
に際し、既に得られているＬ−アスコルビン酸糖誘導体
酸化物・２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アス
コルビン酸高含有画分、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノ
シル−Ｌ−アスコルビン酸・Ｄ−グルコース高含有画分
などの２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコ
ルビン酸含有画分を原料溶液の前後に、または、原料溶
液とともに流すことにより、分画に要する水の使用量を
減少させ、原料溶液から２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノ
シル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物を高濃度、高収率で
採取することも有利に実施できる。
に際し、既に得られているＬ−アスコルビン酸糖誘導体
酸化物・２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アス
コルビン酸高含有画分、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノ
シル−Ｌ−アスコルビン酸・Ｄ−グルコース高含有画分
などの２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコ
ルビン酸含有画分を原料溶液の前後に、または、原料溶
液とともに流すことにより、分画に要する水の使用量を
減少させ、原料溶液から２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノ
シル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物を高濃度、高収率で
採取することも有利に実施できる。
【００２７】本発明で使用される分画方式は固定床方
式、移動床方式、擬似移動床方式のいずれであってもよ
い。
式、移動床方式、擬似移動床方式のいずれであってもよ
い。
【００２８】このようにして得られた本発明の２−Ｏ−
α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有
物、望ましくは、純度７０％以上の高含有物は、溶液上
であっても、また濃縮してシラップ状にあっても、はる
かに安定であり、その取扱いは、容易である。
α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有
物、望ましくは、純度７０％以上の高含有物は、溶液上
であっても、また濃縮してシラップ状にあっても、はる
かに安定であり、その取扱いは、容易である。
【００２９】次に、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル
−Ｌ−アスコルビン酸高含有物とそれの結晶２−Ｏ−α
−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸の製造方
法について述べる。
−Ｌ−アスコルビン酸高含有物とそれの結晶２−Ｏ−α
−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸の製造方
法について述べる。
【００３０】本発明で使用する晶出用２−Ｏ−α−Ｄ−
グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物は、結
晶２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビ
ン酸の析出を阻害していた直接還元性を示すＬ−アスコ
ルビン酸糖誘導体を実質的に除去しているので、その結
晶の析出は、きわめて容易であり、結晶収率も高い。晶
出方法は、通常２０乃至６０℃の比較的高温の過飽和２
−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸
を助晶缶にとり、これに種晶を望ましくは、０．１乃至
１０％共存せしめて、ゆっくり撹拌しつつ徐冷し、晶出
を促してマスキットにすればよい。
グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物は、結
晶２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビ
ン酸の析出を阻害していた直接還元性を示すＬ−アスコ
ルビン酸糖誘導体を実質的に除去しているので、その結
晶の析出は、きわめて容易であり、結晶収率も高い。晶
出方法は、通常２０乃至６０℃の比較的高温の過飽和２
−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸
を助晶缶にとり、これに種晶を望ましくは、０．１乃至
１０％共存せしめて、ゆっくり撹拌しつつ徐冷し、晶出
を促してマスキットにすればよい。
【００３１】このように、本発明の結晶２−Ｏ−α−Ｄ
−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸は、過飽和２
−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸
溶液に結晶２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−ア
スコルビン酸を種晶として加えることにより容易に晶出
させることができる。
−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸は、過飽和２
−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸
溶液に結晶２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−ア
スコルビン酸を種晶として加えることにより容易に晶出
させることができる。
【００３２】晶出したマスキットから結晶２−Ｏ−α−
Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸を製造する
方法は、結晶２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−
アスコルビン酸が採取できればよく、例えば、分蜜方
法、ブロック粉砕方法、流動造粒方法、噴霧乾燥方法な
どの公知方法を利用すればよい。
Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸を製造する
方法は、結晶２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−
アスコルビン酸が採取できればよく、例えば、分蜜方
法、ブロック粉砕方法、流動造粒方法、噴霧乾燥方法な
どの公知方法を利用すればよい。
【００３３】このようにして得られる結晶２−Ｏ−α−
Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸は、その純
度、晶出率によって多少変動するものの、実質的に非吸
湿性または、難吸湿性であり、流動性であり、固着の懸
念もなく、その優れた特長は、次の通りである。
Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸は、その純
度、晶出率によって多少変動するものの、実質的に非吸
湿性または、難吸湿性であり、流動性であり、固着の懸
念もなく、その優れた特長は、次の通りである。
【００３４】（１）直接還元性を示さず、きわめて安定
である。
である。
【００３５】Ｌ−アスコルビン酸とは違って、メイラー
ド反応を起こしにくい。
ド反応を起こしにくい。
【００３６】従って、アミノ酸、ペプチド、蛋白質、脂
質、糖質、生理活性物質などが共存しても無用の反応を
起こさず、むしろ、これら物質を安定化する。
質、糖質、生理活性物質などが共存しても無用の反応を
起こさず、むしろ、これら物質を安定化する。
【００３７】（２）加水分解を受けてＬ−アスコルビン
酸を生成し、Ｌ−アスコルビン酸と同様の還元作用、抗
酸化作用を示す。
酸を生成し、Ｌ−アスコルビン酸と同様の還元作用、抗
酸化作用を示す。
【００３８】（３）体内の酵素により、Ｌ−アスコルビ
ン酸とＤ−グルコースとに容易に加水分解され、Ｌ−ア
スコルビン酸本来の生理活性を示す。
ン酸とＤ−グルコースとに容易に加水分解され、Ｌ−ア
スコルビン酸本来の生理活性を示す。
【００３９】また、ビタミンＥ、ビタミンＰなどとの併
用により、その生理活性を増強することができる。
用により、その生理活性を増強することができる。
【００４０】（４）Ｌ−アスコルビン酸とα−グルコシ
ル糖化合物などとを経口摂取することにより、生体内で
生成され、代謝される物質であることから、その安全性
は極めて高い。
ル糖化合物などとを経口摂取することにより、生体内で
生成され、代謝される物質であることから、その安全性
は極めて高い。
【００４１】（５）実質的に、非吸湿性、難吸湿性であ
るにもかかわらず、水に対して大きな溶解速度、溶解度
を有しており、粉末、顆粒、錠剤などのビタミン剤、サ
ンドクリーム、チョコレート、チューインガム、即席ジ
ュース、即席調味料など飲食物のビタミンＣ強化剤、呈
未改善剤、酸味剤、安定剤などとして有利に利用でき
る。
るにもかかわらず、水に対して大きな溶解速度、溶解度
を有しており、粉末、顆粒、錠剤などのビタミン剤、サ
ンドクリーム、チョコレート、チューインガム、即席ジ
ュース、即席調味料など飲食物のビタミンＣ強化剤、呈
未改善剤、酸味剤、安定剤などとして有利に利用でき
る。
【００４２】（６）実質的に非吸湿性または難吸湿性で
あり、固結しないことから流動性であり、その取扱いは
容易で非晶質の場合と比較して、その包装、輸送、貯蔵
に要する物的、人的経費が大幅に削減できる。
あり、固結しないことから流動性であり、その取扱いは
容易で非晶質の場合と比較して、その包装、輸送、貯蔵
に要する物的、人的経費が大幅に削減できる。
【００４３】以下、本発明を実験で詳細に説明する。
【００４４】
【実験１】 未知物質の生成と単離
【００４５】デキストリン（ＤＥ約６）３０重量部を水
４０重量部に加熱溶解し、還元下に保って、Ｌ−アスコ
ルビン酸７重量部を加え、ｐＨ５．６、６０℃に維持し
つつ、これに、シクロマルトデキストリン・グルカノト
ランスフェラーゼ（株式会社林原生物化学研究所販売）
をデキストリングラム当り２５０単位加えて、４０時間
反応させた。
４０重量部に加熱溶解し、還元下に保って、Ｌ−アスコ
ルビン酸７重量部を加え、ｐＨ５．６、６０℃に維持し
つつ、これに、シクロマルトデキストリン・グルカノト
ランスフェラーゼ（株式会社林原生物化学研究所販売）
をデキストリングラム当り２５０単位加えて、４０時間
反応させた。
【００４６】反応液を、高速液体クロマトグラフィー
［ポンプ；島津製作所ＬＣ−６Ａ，カラム；Ｗａｋｏｐ
ａｋ ＷＢ Ｔ−３３０，溶離液；０．０１Ｗ／Ｖ％硝
酸，流速；毎分０．５ミリリットル，検出；示差屈折計
ＲＩ−７５２０（エルマ），ＵＶ検出器８７５−ＵＶ
（ＪＡＳＣＯ）］で分析したところ、Ｌ−アスコルビン
酸の約６５％が、α−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸
に変換していた。
［ポンプ；島津製作所ＬＣ−６Ａ，カラム；Ｗａｋｏｐ
ａｋ ＷＢ Ｔ−３３０，溶離液；０．０１Ｗ／Ｖ％硝
酸，流速；毎分０．５ミリリットル，検出；示差屈折計
ＲＩ−７５２０（エルマ），ＵＶ検出器８７５−ＵＶ
（ＪＡＳＣＯ）］で分析したところ、Ｌ−アスコルビン
酸の約６５％が、α−グリコシル−Ｌ−アスコルビン酸
に変換していた。
【００４７】本反応液をＵＦ膜で濾過して酵素を回収除
去した後、５０℃、ｐＨ５．０に調整し、これにグルコ
アミラーゼをデキストリングラム当り１００単位加えて
６時間反応させた。
去した後、５０℃、ｐＨ５．０に調整し、これにグルコ
アミラーゼをデキストリングラム当り１００単位加えて
６時間反応させた。
【００４８】本反応液を加熱して酵素を失活させ、活性
炭で脱色濾過し、濾液を濃縮し、次いで、特開昭５８−
２３７９９号公報に開示されているカラムクロマトグラ
フィーの方法に準じて、強酸性カチオン交換樹脂（ダウ
ケミカル社製造、商品名ダウエックス ５０Ｗ×４、Ｃ
ａ＋＋型）を充填したカラムを用いてカラムクロマトグ
ラフィーを行ない、この溶出液の２−Ｏ−α−Ｄ−グル
コピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有画分を採取
し、これをカチオン交換樹脂（Ｈ＋型）で脱ミネラルし
て精製し、減圧濃縮して、濃度約７７Ｗ／Ｗ％とし、こ
れを助晶缶にとり、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル
−Ｌ−アスコルビン酸の種晶を加えて、４０℃とし、ゆ
っくり撹拌しつつ、徐冷して２日間を要して２０℃まで
下げ、更に、バスケット型遠心分離機にかけ、結晶２−
Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸を
分離除去し、一番母液を原料のＬ−アスコルビン酸に対
して固形物当り約５０％の収率で得た。
炭で脱色濾過し、濾液を濃縮し、次いで、特開昭５８−
２３７９９号公報に開示されているカラムクロマトグラ
フィーの方法に準じて、強酸性カチオン交換樹脂（ダウ
ケミカル社製造、商品名ダウエックス ５０Ｗ×４、Ｃ
ａ＋＋型）を充填したカラムを用いてカラムクロマトグ
ラフィーを行ない、この溶出液の２−Ｏ−α−Ｄ−グル
コピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有画分を採取
し、これをカチオン交換樹脂（Ｈ＋型）で脱ミネラルし
て精製し、減圧濃縮して、濃度約７７Ｗ／Ｗ％とし、こ
れを助晶缶にとり、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル
−Ｌ−アスコルビン酸の種晶を加えて、４０℃とし、ゆ
っくり撹拌しつつ、徐冷して２日間を要して２０℃まで
下げ、更に、バスケット型遠心分離機にかけ、結晶２−
Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸を
分離除去し、一番母液を原料のＬ−アスコルビン酸に対
して固形物当り約５０％の収率で得た。
【００４９】この母液を、同様に、減圧濃縮し、２−Ｏ
−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸の二
番晶を晶出させ、これを分離除去して二番母液を原料の
Ｌ−アスコルビン酸に対して固形物当り約２５％の収率
で得た。
−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸の二
番晶を晶出させ、これを分離除去して二番母液を原料の
Ｌ−アスコルビン酸に対して固形物当り約２５％の収率
で得た。
【００５０】この二番母液を高速液体クロマトグラフィ
ーで分析したところ、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシ
ル−Ｌ−アスコルビン酸が１８．７分の位置に現われ、
Ｌ−アスコルビン酸が２９．７分の位置に現われたのに
対し、この中間の２１．７分と２３．１分の位置に未知
物質のピークが認められ、それぞれ、物質Ｘ、物質Ｙと
仮に命名した。
ーで分析したところ、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシ
ル−Ｌ−アスコルビン酸が１８．７分の位置に現われ、
Ｌ−アスコルビン酸が２９．７分の位置に現われたのに
対し、この中間の２１．７分と２３．１分の位置に未知
物質のピークが認められ、それぞれ、物質Ｘ、物質Ｙと
仮に命名した。
【００５１】物質Ｘおよび物質Ｙの含量は、それぞれ、
固形物当り約１０％であり、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピ
ラノシル−Ｌ−アスコルビン酸の含量は約６５％であっ
た。
固形物当り約１０％であり、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピ
ラノシル−Ｌ−アスコルビン酸の含量は約６５％であっ
た。
【００５２】次に、二番母液から物質Ｘおよび物質Ｙを
単離するためには、大量に共存する２−Ｏ−α−Ｄ−グ
ルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸を除去する必要が
あった。
単離するためには、大量に共存する２−Ｏ−α−Ｄ−グ
ルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸を除去する必要が
あった。
【００５３】そこで、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシ
ル−Ｌ−アスコルビン酸を除去する条件を種々検討した
ところ、強酸性、高温条件で２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピ
ラノシル−Ｌ−アスコルビン酸が、物質Ｘ、物質Ｙと比
較して加水分解を受け易いことを見出し、この方法を利
用して２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコ
ルビン酸を除去した。
ル−Ｌ−アスコルビン酸を除去する条件を種々検討した
ところ、強酸性、高温条件で２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピ
ラノシル−Ｌ−アスコルビン酸が、物質Ｘ、物質Ｙと比
較して加水分解を受け易いことを見出し、この方法を利
用して２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコ
ルビン酸を除去した。
【００５４】即ち、二番母液を濃度２５Ｗ／Ｗ％とし、
これを塩酸でｐＨ１．７に調整後、１００℃に保って、
２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン
酸を優先的に加水分解した後、冷却し、アニオン交換樹
脂（ＯＨ−型）を充填したカラムに流して物質Ｘおよび
物質Ｙを吸着させ、水洗し、次いで、０．５Ｎ塩酸で溶
出し、物質Ｘおよび物質Ｙを含有する溶液を得た。
これを塩酸でｐＨ１．７に調整後、１００℃に保って、
２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン
酸を優先的に加水分解した後、冷却し、アニオン交換樹
脂（ＯＨ−型）を充填したカラムに流して物質Ｘおよび
物質Ｙを吸着させ、水洗し、次いで、０．５Ｎ塩酸で溶
出し、物質Ｘおよび物質Ｙを含有する溶液を得た。
【００５５】次いで、本溶液を調製用高速液体クロマト
グラフィー［ポンプ；Ｍｏｄｅｌ５１０（ウォーター
ズ），カラム；Ｄ−ＯＤＳ−５（ワイエムシィ），溶離
液；０．０１ＭＮａＨ２ＰＯ４−Ｈ３ＰＯ４（ｐＨ２．
０），流速；毎分４．５ミリリットル，検出；ＵＶ検出
器］にかけ、物質Ｘまたは物質Ｙの高含有画分を採取
し、脱塩装置（旭化成株式会社、マイクロアシライザー
Ｇ１、カートリッジＡＣ−１１０使用）により脱塩し、
濃縮、凍結乾燥して、粉末状の物質Ｘおよび物質Ｙを原
料母液に含まれるそれぞれに対して、約２０％の収率で
得た。
グラフィー［ポンプ；Ｍｏｄｅｌ５１０（ウォーター
ズ），カラム；Ｄ−ＯＤＳ−５（ワイエムシィ），溶離
液；０．０１ＭＮａＨ２ＰＯ４−Ｈ３ＰＯ４（ｐＨ２．
０），流速；毎分４．５ミリリットル，検出；ＵＶ検出
器］にかけ、物質Ｘまたは物質Ｙの高含有画分を採取
し、脱塩装置（旭化成株式会社、マイクロアシライザー
Ｇ１、カートリッジＡＣ−１１０使用）により脱塩し、
濃縮、凍結乾燥して、粉末状の物質Ｘおよび物質Ｙを原
料母液に含まれるそれぞれに対して、約２０％の収率で
得た。
【００５６】これを、前述の高速液体クロマトグラフィ
ーで分析したところ、物質Ｘは純度約９８％、物質Ｙは
純度約９７％の高純度品であった。
ーで分析したところ、物質Ｘは純度約９８％、物質Ｙは
純度約９７％の高純度品であった。
【００５７】
【実験２】 理化学的性質
【００５８】実験１で調製した高純度の物質Ｘおよび物
質Ｙを用いて、次に示す理化学的性質を調べた。
質Ｙを用いて、次に示す理化学的性質を調べた。
【００５９】（ａ）元素分析：Ｃ１２Ｈ１８Ｏ１１とし
て 理論値 Ｃ＝４２．６％ Ｈ＝５．３６％ 物質Ｘ実測値 Ｃ＝４２．４％ Ｈ＝５．３７％ 物質Ｙ実測値 Ｃ＝４２．５％ Ｈ＝５．３７％
て 理論値 Ｃ＝４２．６％ Ｈ＝５．３６％ 物質Ｘ実測値 Ｃ＝４２．４％ Ｈ＝５．３７％ 物質Ｙ実測値 Ｃ＝４２．５％ Ｈ＝５．３７％
【００６０】 （ｂ）グルコースとＬ−アスコルビン酸の構成比 理論値 グルコース：Ｌ−アスコルビン酸＝１：１ 物質Ｘ実測値 グルコース：Ｌ−アスコルビン酸＝１．００：１．０５ 物質Ｙ実測値 グルコース：Ｌ−アスコルビン酸＝１．００：０．９９ （注）グルコースはアンスロン硫酸法により測定し、Ｌ
−アスコルビン酸はインドフェノール・キシレン法によ
り測定した。
−アスコルビン酸はインドフェノール・キシレン法によ
り測定した。
【００６１】（ｃ）紫外線吸収スペクトル 物質Ｘ、物質Ｙともに、ｐＨ２．０で２４３ｎｍに、ｐ
Ｈ７．０で２６５ｎｍに吸収極大を示す。
Ｈ７．０で２６５ｎｍに吸収極大を示す。
【００６２】（ｄ）小腸粘膜酵素による加水分解 岡田等が日本栄養・食糧学会誌、 第４３巻、第１号、
第２３乃至２９頁（１９９０年）で報告している方法に
準じて、小腸粘膜酵素による物質Ｘまたは物質Ｙの加水
分解試験を行なったところ、物質Ｘはよく加水分解され
るのに対し、物質Ｙはほとんど加水分解されなかった。
第２３乃至２９頁（１９９０年）で報告している方法に
準じて、小腸粘膜酵素による物質Ｘまたは物質Ｙの加水
分解試験を行なったところ、物質Ｘはよく加水分解され
るのに対し、物質Ｙはほとんど加水分解されなかった。
【００６３】（ｅ）ＮＭＲ 核磁気共鳴分析（１３Ｃ−ＮＭＲ）により、１２本のシ
グナルが得られ、本物質の１２個の炭素はすべて異なる
化学シフトを示した。得られた各シグナルを、標準物
質、α−Ｄ−グルコピラノースおよびＬ−アスコルビン
酸に帰属し、両標準物質の化学シフトとともに表１に示
した。
グナルが得られ、本物質の１２個の炭素はすべて異なる
化学シフトを示した。得られた各シグナルを、標準物
質、α−Ｄ−グルコピラノースおよびＬ−アスコルビン
酸に帰属し、両標準物質の化学シフトとともに表１に示
した。
【００６４】
【表１】
【００６５】表１の結果より、物質Ｘは化２で示される
新規物質、５−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−ア
スコルビン酸の構造を有し、物質Ｙは、化３で示される
公知物質、６−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−ア
スコルビン酸の構造を有しているものと判断される。
新規物質、５−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−ア
スコルビン酸の構造を有し、物質Ｙは、化３で示される
公知物質、６−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−ア
スコルビン酸の構造を有しているものと判断される。
【００６６】
【化２】
【００６７】
【化３】
【００６８】
【実験３】 酸化処理
【００６９】実験１の方法で調製した２−Ｏ−α−Ｄ−
グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸、５−Ｏ−α−
Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸、６−Ｏ−
α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸および
二番母液を、それぞれ濃度１０Ｗ／Ｗ％、ｐＨ５．０に
調整し、それぞれに水蒸気炭を固形物当り５％加えて２
７℃で２４時間通気撹拌したところ、直接還元性を示す
Ｌ−アスコルビン酸糖誘導体である５−Ｏ−α−Ｄ−グ
ルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸、６−Ｏ−α−Ｄ
−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸および二番母
液中に含まれるこれらの直接還元性を示すＬ−アスコル
ビン酸糖誘導体は酸化され、それらが持つ特有の紫外部
吸収が消失した。
グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸、５−Ｏ−α−
Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸、６−Ｏ−
α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸および
二番母液を、それぞれ濃度１０Ｗ／Ｗ％、ｐＨ５．０に
調整し、それぞれに水蒸気炭を固形物当り５％加えて２
７℃で２４時間通気撹拌したところ、直接還元性を示す
Ｌ−アスコルビン酸糖誘導体である５−Ｏ−α−Ｄ−グ
ルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸、６−Ｏ−α−Ｄ
−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸および二番母
液中に含まれるこれらの直接還元性を示すＬ−アスコル
ビン酸糖誘導体は酸化され、それらが持つ特有の紫外部
吸収が消失した。
【００７０】これに対し、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラ
ノシル−Ｌ−アスコルビン酸は、単独溶液中、二番母液
中いずれの場合も安定で、量的にも、質的にも変化がな
かった。
ノシル−Ｌ−アスコルビン酸は、単独溶液中、二番母液
中いずれの場合も安定で、量的にも、質的にも変化がな
かった。
【００７１】
【実験４】 強酸性カチオン交換樹脂を用いるカラムクロマトグラフ
ィー
ィー
【００７２】実験１の方法で調製した二番母液未処理
液、または該母液を実験３の方法で酸化処理した後、水
蒸気炭を除去、強酸性カチオン交換樹脂（Ｈ＋型）で脱
ミネラルした溶液を原料溶液として、特開昭５８−２３
７９９号公報に開示されている強酸性カチオン交換樹脂
を用いるカラムクロマトグラフィーの方法に準じて、強
酸性カチオン交換樹脂（東京有機化学工業製造、商品名
ＸＴ−１０１６、Ｈ＋型）を充填したカラムを用いてカ
ラムクロマトグラフィーを行った。
液、または該母液を実験３の方法で酸化処理した後、水
蒸気炭を除去、強酸性カチオン交換樹脂（Ｈ＋型）で脱
ミネラルした溶液を原料溶液として、特開昭５８−２３
７９９号公報に開示されている強酸性カチオン交換樹脂
を用いるカラムクロマトグラフィーの方法に準じて、強
酸性カチオン交換樹脂（東京有機化学工業製造、商品名
ＸＴ−１０１６、Ｈ＋型）を充填したカラムを用いてカ
ラムクロマトグラフィーを行った。
【００７３】未処理液の場合には、２−Ｏ−α−Ｄ−グ
ルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸と比較的少量含ま
れている直接還元性を示す５−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラ
ノシル−Ｌ−アスコルビン酸および６−Ｏ−α−Ｄ−グ
ルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸とは同一挙動を示
し、分離困難であった。
ルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸と比較的少量含ま
れている直接還元性を示す５−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラ
ノシル−Ｌ−アスコルビン酸および６−Ｏ−α−Ｄ−グ
ルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸とは同一挙動を示
し、分離困難であった。
【００７４】これに対し、酸化処理液の場合には、溶出
液が、Ｌ−アスコルビン酸糖誘導体酸化物高含有画分、
Ｌ−アスコルビン酸糖誘導体酸化物・２−Ｏ−α−Ｄ−
グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有画分、２
−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸
高含有画分の順に溶出し、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラ
ノシル−Ｌ−アスコルビン酸とＬ−アスコルビン酸糖誘
導体酸化物との分離が達成され、工業的に実施容易であ
ることが判明した。
液が、Ｌ−アスコルビン酸糖誘導体酸化物高含有画分、
Ｌ−アスコルビン酸糖誘導体酸化物・２−Ｏ−α−Ｄ−
グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有画分、２
−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸
高含有画分の順に溶出し、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラ
ノシル−Ｌ−アスコルビン酸とＬ−アスコルビン酸糖誘
導体酸化物との分離が達成され、工業的に実施容易であ
ることが判明した。
【００７５】以下、本発明の実施例を述べる。
【００７６】
【実施例１】デキストリン（ＤＥ約６）３０重量部を水
４０重量部に加熱溶解し、還元下に保って、Ｌ−アスコ
ルビン酸７重量部を加え、ｐＨ５．６、６０℃に維持し
つつ、これに、シクロマルトデキストリン グルカノト
ランスフェラーゼをデキストリングラム当り２５０単位
加えて、４０時間反応させた。
４０重量部に加熱溶解し、還元下に保って、Ｌ−アスコ
ルビン酸７重量部を加え、ｐＨ５．６、６０℃に維持し
つつ、これに、シクロマルトデキストリン グルカノト
ランスフェラーゼをデキストリングラム当り２５０単位
加えて、４０時間反応させた。
【００７７】本反応液をＵＦ膜で濾過して酵素を回収除
去した後、５０℃、ｐＨ５．０に調整し、これにグルコ
アミラーゼをデキストリングラム当り１００単位加えて
６時間反応させた。
去した後、５０℃、ｐＨ５．０に調整し、これにグルコ
アミラーゼをデキストリングラム当り１００単位加えて
６時間反応させた。
【００７８】本反応液を加熱して酵素を失活させ、活性
炭で脱色濾過し、濾液を濃縮し、次いで、強酸性カチオ
ン交換樹脂（ダウケミカル社製造、商品名ダウエックス
５０Ｗ×４、Ｃａ＋＋型）を充填したカラムを用いて
カラムクロマトグラフィーを行ない、この溶出液の２−
Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高
含有画分を採取した。
炭で脱色濾過し、濾液を濃縮し、次いで、強酸性カチオ
ン交換樹脂（ダウケミカル社製造、商品名ダウエックス
５０Ｗ×４、Ｃａ＋＋型）を充填したカラムを用いて
カラムクロマトグラフィーを行ない、この溶出液の２−
Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高
含有画分を採取した。
【００７９】本画分を高速液体クロマトグラフィーで分
析したところ、固形物当り２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラ
ノシル−Ｌ−アスコルビン酸９０％、５−Ｏ−α−Ｄ−
グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸２．５％、およ
び６−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビ
ン酸２．５％を含有する溶液であった。
析したところ、固形物当り２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラ
ノシル−Ｌ−アスコルビン酸９０％、５−Ｏ−α−Ｄ−
グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸２．５％、およ
び６−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビ
ン酸２．５％を含有する溶液であった。
【００８０】本溶液を濃度約３６Ｗ／Ｗ％、ｐＨ４．０
に調整し、これに硫酸第二鉄を固形物当り０．１％加え
て３０℃で２０時間通気撹拌して酸化処理し、次いで、
前記方法に準じて、強酸性カチオン交換樹脂を用いるカ
ラムクロマトグラフィーを行ない、この溶出液の２−Ｏ
−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含
有画分を採取した。
に調整し、これに硫酸第二鉄を固形物当り０．１％加え
て３０℃で２０時間通気撹拌して酸化処理し、次いで、
前記方法に準じて、強酸性カチオン交換樹脂を用いるカ
ラムクロマトグラフィーを行ない、この溶出液の２−Ｏ
−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含
有画分を採取した。
【００８１】これを強酸性カチオン交換樹脂（Ｈ＋型）
で脱ミネラルして精製し、減圧濃縮して、濃度約７７Ｗ
／Ｗ％とし、これを助晶缶にとり、２−Ｏ−α−Ｄ−グ
ルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸を種晶として２％
加えて４０℃とし、ゆっくり撹拌しつつ徐冷して２日間
を要して２０℃まで下げ、更にバスケット型遠心分離機
にかけ、結晶２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−
アスコルビン酸を原料のＬ−アスコルビン酸に対して収
率約５０％で得た。
で脱ミネラルして精製し、減圧濃縮して、濃度約７７Ｗ
／Ｗ％とし、これを助晶缶にとり、２−Ｏ−α−Ｄ−グ
ルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸を種晶として２％
加えて４０℃とし、ゆっくり撹拌しつつ徐冷して２日間
を要して２０℃まで下げ、更にバスケット型遠心分離機
にかけ、結晶２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−
アスコルビン酸を原料のＬ−アスコルビン酸に対して収
率約５０％で得た。
【００８２】本品は、直接還元性を示さず、安定性、生
理活性も充分で、ビタミンＣ強化剤としてばかりでな
く、呈味改善剤、酸味剤、安定剤、品質改良剤、抗酸化
剤、生理活性剤、紫外線吸収剤、医薬原料、化学品など
として、飲食物、抗感受性疾患剤、化粧品などに有利に
利用できる。
理活性も充分で、ビタミンＣ強化剤としてばかりでな
く、呈味改善剤、酸味剤、安定剤、品質改良剤、抗酸化
剤、生理活性剤、紫外線吸収剤、医薬原料、化学品など
として、飲食物、抗感受性疾患剤、化粧品などに有利に
利用できる。
【００８３】
【実施例２】デキストリン（ＤＥ１０）９重量部を水２
０重量部に加熱溶解し、還元下に保って、Ｌ−アスコル
ビン酸３重量部を加え、ｐＨ５．５、６５℃に維持しつ
つ、これにシクロマルトデキストリン・グルカノトラン
スフェラーゼをデキストリングラム当り１５０単位加え
て４０時間反応させた。
０重量部に加熱溶解し、還元下に保って、Ｌ−アスコル
ビン酸３重量部を加え、ｐＨ５．５、６５℃に維持しつ
つ、これにシクロマルトデキストリン・グルカノトラン
スフェラーゼをデキストリングラム当り１５０単位加え
て４０時間反応させた。
【００８４】反応液を高速液体クロマトグラフィーで分
析したところ、Ｌ−アスコルビン酸の約６５％がα−グ
リコシル−Ｌ−アスコルビン酸へ変換していた。
析したところ、Ｌ−アスコルビン酸の約６５％がα−グ
リコシル−Ｌ−アスコルビン酸へ変換していた。
【００８５】本反応液を加熱して酵素を失活させた後、
５５℃、ｐＨ４．５に調整し、これにグルコアミラーゼ
をデキストリングラム当り５０単位加えて、２４時間反
応させた。
５５℃、ｐＨ４．５に調整し、これにグルコアミラーゼ
をデキストリングラム当り５０単位加えて、２４時間反
応させた。
【００８６】本反応液を加熱して酵素を失活させ、活性
炭で脱色濾過し、濾液をカチオン交換樹脂（Ｈ＋型）の
カラムにかけ脱ミネラルし、次いで、アニオン交換樹脂
（ＯＨ−型）のカラムにかけアニオンを樹脂に吸着さ
せ、水洗してＤ−グルコースなどを除去後、０．５Ｎ−
塩酸溶液で溶出、濃縮し、この濃縮液を原料溶液とし
て、強酸性カチオン交換樹脂（Ｈ＋型）を充填したカラ
ムを用いてカラムクロマトグラフィーを行ない、この溶
出液の２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコ
ルビン酸高含有画分を採取した。
炭で脱色濾過し、濾液をカチオン交換樹脂（Ｈ＋型）の
カラムにかけ脱ミネラルし、次いで、アニオン交換樹脂
（ＯＨ−型）のカラムにかけアニオンを樹脂に吸着さ
せ、水洗してＤ−グルコースなどを除去後、０．５Ｎ−
塩酸溶液で溶出、濃縮し、この濃縮液を原料溶液とし
て、強酸性カチオン交換樹脂（Ｈ＋型）を充填したカラ
ムを用いてカラムクロマトグラフィーを行ない、この溶
出液の２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコ
ルビン酸高含有画分を採取した。
【００８７】次いで、これを濃度約７６Ｗ／Ｗ％に減圧
濃縮して助晶缶にとり、結晶２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピ
ラノシル−Ｌ−アスコルビン酸を種晶として１％加えて
４０℃とし、ゆっくり撹拌しつつ徐冷して２日間を要し
て２０℃まで下げ、バスケット型遠心分離機にかけ、結
晶２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビ
ン酸を分離し、母液を固形物収率約５５％で得た。
濃縮して助晶缶にとり、結晶２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピ
ラノシル−Ｌ−アスコルビン酸を種晶として１％加えて
４０℃とし、ゆっくり撹拌しつつ徐冷して２日間を要し
て２０℃まで下げ、バスケット型遠心分離機にかけ、結
晶２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビ
ン酸を分離し、母液を固形物収率約５５％で得た。
【００８８】本母液を高速液体クロマトグラフィーで分
析したところ、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ
−アスコルビン酸約８０％、５−Ｏ−α−Ｄ−グルコピ
ラノシル−Ｌ−アスコルビン酸約５％、６−Ｏ−α−Ｄ
−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸約５％を含有
していた。
析したところ、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ
−アスコルビン酸約８０％、５−Ｏ−α−Ｄ−グルコピ
ラノシル−Ｌ−アスコルビン酸約５％、６−Ｏ−α−Ｄ
−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸約５％を含有
していた。
【００８９】本母液を濃度１８Ｗ／Ｗ％、ｐＨ５．０に
調整し、これに塩化亜鉛炭を固形物当り０．５％加えて
５０℃で２０時間通気撹拌して酸化処理し、次いで、前
記方法に準じて、強酸性カチオン交換樹脂を用いるカラ
ムクロマトグラフィーを行ない、この溶出液の２−Ｏ−
α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有
画分を採取し、これをイオン交換樹脂で脱ミネラルし、
減圧濃縮して、実施例１の方法に準じて晶出、分蜜し、
結晶２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコル
ビン酸を、母液固形物当り収率約５５％で得た。
調整し、これに塩化亜鉛炭を固形物当り０．５％加えて
５０℃で２０時間通気撹拌して酸化処理し、次いで、前
記方法に準じて、強酸性カチオン交換樹脂を用いるカラ
ムクロマトグラフィーを行ない、この溶出液の２−Ｏ−
α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有
画分を採取し、これをイオン交換樹脂で脱ミネラルし、
減圧濃縮して、実施例１の方法に準じて晶出、分蜜し、
結晶２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコル
ビン酸を、母液固形物当り収率約５５％で得た。
【００９０】本品は、実施例１の場合と同様に、飲食
物、抗感受性疾患剤、化粧品などに有利に利用できる。
物、抗感受性疾患剤、化粧品などに有利に利用できる。
【００９１】
【実施例３】実施例２の方法で調製した母液を濃度２０
Ｗ／Ｗ％、ｐＨ７．５に調整し、５０℃で４８時間通気
撹拌して酸化処理し、次いで、実施例２の方法に準じ
て、強酸性カチオン交換樹脂を用いるカラムクロマトグ
ラフィーを行ない、この溶出液の２−Ｏ−α−Ｄ−グル
コピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有画分を採取
し、これをイオン交換樹脂で脱ミネラルし、減圧濃縮し
て、実施例１の方法に準じて晶出、分蜜し、結晶２−Ｏ
−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸を母
液固形物当り収率約５３％で得た。
Ｗ／Ｗ％、ｐＨ７．５に調整し、５０℃で４８時間通気
撹拌して酸化処理し、次いで、実施例２の方法に準じ
て、強酸性カチオン交換樹脂を用いるカラムクロマトグ
ラフィーを行ない、この溶出液の２−Ｏ−α−Ｄ−グル
コピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有画分を採取
し、これをイオン交換樹脂で脱ミネラルし、減圧濃縮し
て、実施例１の方法に準じて晶出、分蜜し、結晶２−Ｏ
−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸を母
液固形物当り収率約５３％で得た。
【００９２】本品は、実施例１の場合と同様に、飲食
物、抗感受性疾患剤、化粧品などに有利に利用できる。
物、抗感受性疾患剤、化粧品などに有利に利用できる。
【００９３】
【発明の効果】本文で述べたことく、本発明において、
２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン
酸とともに直接還元性を示すＬ−アスコルビン酸糖誘導
体とを含有する溶液を酸化処理し、次いで、強酸性カチ
オン交換樹脂を用いるカラムクロマトグラフィーを行う
ことにより、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−
アスコルビン酸とＬ−アスコルビン酸糖誘導体酸化物と
が容易に分離できることから、得られる２−Ｏ−α−Ｄ
−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有画分の
純度が向上し、結晶２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル
−Ｌ−アスコルビン酸の析出が容易になり、その収率も
向上する。
２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン
酸とともに直接還元性を示すＬ−アスコルビン酸糖誘導
体とを含有する溶液を酸化処理し、次いで、強酸性カチ
オン交換樹脂を用いるカラムクロマトグラフィーを行う
ことにより、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−
アスコルビン酸とＬ−アスコルビン酸糖誘導体酸化物と
が容易に分離できることから、得られる２−Ｏ−α−Ｄ
−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有画分の
純度が向上し、結晶２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル
−Ｌ−アスコルビン酸の析出が容易になり、その収率も
向上する。
【００９４】従って、本発明は、２−Ｏ−α−Ｄ−グル
コピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物の製造方法
としての工業的意義がきわめて大きい。
コピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物の製造方法
としての工業的意義がきわめて大きい。
Claims (4)
- 【請求項１】 ２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ
−アスコルビン酸とともに直接還元性を示すＬ−アスコ
ルビン酸糖誘導体を含有する溶液から２−Ｏ−α−Ｄ−
グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物を採取
するに際し、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−
アスコルビン酸とともに直接還元性を示すＬ−アスコル
ビン酸糖誘導体を含有する溶液を酸化処理し、次いで、
強酸性カチオン交換樹脂を用いるカラムクロマトグラフ
ィーを行ない、この溶出液の２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピ
ラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有画分を採取するこ
とを特徴とする２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ
−アスコルビン酸高含有物の製造方法。 - 【請求項２】 直接還元性を示すＬ−アスコルビン酸糖
誘導体が、５−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−ア
スコルビン酸および６−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル
−Ｌ−アスコルビン酸から選ばれる１種以上の直接還元
性を示すＬ−アスコルビン酸糖誘導体であることを特徴
とする請求項１記載の２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシ
ル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物の製造方法。 - 【請求項３】 ２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ
−アスコルビン酸とともに直接還元性を示すＬ−アスコ
ルビン酸糖誘導体を含有する溶液から２−Ｏ−α−Ｄ−
グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物を採取
するに際し、２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−
アスコルビン酸とともに直接還元性を示すＬ−アスコル
ビン酸糖誘導体を含有する溶液を酸化処理し、次いで、
強酸性カチオン交換樹脂を用いるカラムクロマトグラフ
ィーを行ない、この溶出液の２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピ
ラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有画分を採取し、こ
れを濃縮、過飽和にし、結晶２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピ
ラノシル−Ｌ−アスコルビン酸を析出せしめることを特
微とする２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アス
コルビン酸高含有物の製造方法。 - 【請求項４】 直接還元性を示すＬ−アスコルビン酸糖
誘導体が、５−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−ア
スコルビン酸および６−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル
−Ｌ−アスコルビン酸から選ばれる１種以上の直接還元
性を示すＬ−アスコルビン酸糖誘導体であることを特徴
とする請求項３記載の２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシ
ル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物の製造方法。
Priority Applications (7)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP03339282A JP3134235B2 (ja) | 1991-10-23 | 1991-10-23 | ２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物の製造方法 |
| TW081108238A TW212183B (ja) | 1991-10-23 | 1992-10-16 | |
| US07/964,303 US5468850A (en) | 1991-10-23 | 1992-10-21 | Process for preparing high 2-O-α-D-glucopyranosyl-L-ascorbic acid content product |
| ES92309648T ES2071441T3 (es) | 1991-10-23 | 1992-10-22 | Procedimiento para preparar un producto con alto contenido en acido 2-o-alfa-d-glucopiranosil-l-ascorbico. |
| DE69201371T DE69201371T2 (de) | 1991-10-23 | 1992-10-22 | Verfahren zur Herstellung von 2-O-alpha-D-Glucopyranosyl-L-Ascorbicsäuren mit Hochprodukt. |
| EP92309648A EP0539196B1 (en) | 1991-10-23 | 1992-10-22 | Process for preparing high 2-O-alpha-D-glucopyranosyl-L-ascorbic acid content product |
| KR1019920019428A KR100234930B1 (ko) | 1991-10-23 | 1992-10-22 | 2-0-알파-d글루코피라노실-l-아스코르브산고 함유물의 제조방법 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP03339282A JP3134235B2 (ja) | 1991-10-23 | 1991-10-23 | ２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物の製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05117290A JPH05117290A (ja) | 1993-05-14 |
| JP3134235B2 true JP3134235B2 (ja) | 2001-02-13 |
Family
ID=18325978
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP03339282A Expired - Lifetime JP3134235B2 (ja) | 1991-10-23 | 1991-10-23 | ２−Ｏ−α−Ｄ−グルコピラノシル−Ｌ−アスコルビン酸高含有物の製造方法 |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5468850A (ja) |
| EP (1) | EP0539196B1 (ja) |
| JP (1) | JP3134235B2 (ja) |
| KR (1) | KR100234930B1 (ja) |
| DE (1) | DE69201371T2 (ja) |
| ES (1) | ES2071441T3 (ja) |
| TW (1) | TW212183B (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101819068B1 (ko) * | 2017-04-27 | 2018-01-16 | 이채연 | 초점 가변 안경 |
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|---|---|---|---|---|
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| JP4981198B2 (ja) * | 1998-03-31 | 2012-07-18 | 格 山本 | グリコシル−ｌ−アスコルビン酸のアシル化誘導体 |
| KR100440191B1 (ko) * | 2001-08-23 | 2004-07-12 | 박관화 | 항산화 효과 및 높은 안정성을 갖는 아스코르브산 유도체및 그것의 제조방법 |
| KR100440190B1 (ko) * | 2001-08-23 | 2004-07-12 | 박관화 | 아카비오신-글루코실 아스코르베이트 및 그의 제조방법 |
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| US20110172180A1 (en) * | 2010-01-13 | 2011-07-14 | Allergan Industrie. Sas | Heat stable hyaluronic acid compositions for dermatological use |
| US9114188B2 (en) | 2010-01-13 | 2015-08-25 | Allergan, Industrie, S.A.S. | Stable hydrogel compositions including additives |
| JP5856963B2 (ja) * | 2010-09-07 | 2016-02-10 | 株式会社林原 | ２−Ｏ−α−Ｄ−グルコシル−Ｌ−アスコルビン酸含水結晶及び２−Ｏ−α−Ｄ−グルコシル−Ｌ−アスコルビン酸含水結晶含有粉末とそれらの製造方法並びに用途 |
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| CA3133676A1 (en) | 2011-06-03 | 2012-12-06 | Allergan Industrie, Sas | Dermal filler compositions including antioxidants |
| CN103755756B (zh) * | 2014-02-11 | 2015-07-08 | 江苏诚信药业有限公司 | 一种制备维生素c葡萄糖苷的工艺系统及其工艺方法 |
| CN103923136B (zh) * | 2014-04-20 | 2019-01-18 | 厦门世达膜科技有限公司 | 一种抗坏血酸葡糖苷的生产方法 |
| CN105461768B (zh) * | 2014-08-25 | 2018-10-30 | 上海医药工业研究院 | 一种2-O-α-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸的制备方法 |
| EP3353311B1 (en) | 2015-09-25 | 2021-06-16 | BASF Beauty Care Solutions France SAS | Method for small molecule glycosylation |
| IL278525B2 (en) | 2018-05-09 | 2024-04-01 | Univ Johns Hopkins | Nanofiber-hydrogel composites for improved replacement and regeneration of soft tissues |
| CN112384258A (zh) | 2018-05-09 | 2021-02-19 | 约翰·霍普金斯大学 | 用于细胞和组织递送的纳米纤维-水凝胶复合物 |
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|---|---|---|---|---|
| JPS4838158B1 (ja) * | 1970-10-05 | 1973-11-15 | ||
| JPS4838158A (ja) * | 1971-09-14 | 1973-06-05 | ||
| JPS5823799A (ja) * | 1981-08-03 | 1983-02-12 | 株式会社林原生物化学研究所 | 高純度マルト−スの製造方法 |
| US4487198A (en) * | 1982-07-28 | 1984-12-11 | Kabushiki Kaisha Hayashibara Seibutsu Kagaku Kenkyujo | Process for producing a high-purity maltose |
| JP2926412B2 (ja) * | 1989-05-19 | 1999-07-28 | 株式会社林原生物化学研究所 | α―グリコシル―Ｌ―アスコルビン酸とその製造方法並びに用途 |
| ATE123306T1 (de) * | 1989-05-19 | 1995-06-15 | Hayashibara Biochem Lab | Alpha-glycosyl-l-ascorbinsäure und ihre herstellung und verwendungen. |
| JP2832848B2 (ja) * | 1989-10-21 | 1998-12-09 | 株式会社林原生物化学研究所 | 結晶２―Ｏ―α―Ｄ―グルコピラノシル―Ｌ―アスコルビン酸とその製造方法並びに用途 |
-
1991
- 1991-10-23 JP JP03339282A patent/JP3134235B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
1992
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Cited By (1)
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|---|---|---|---|---|
| KR101819068B1 (ko) * | 2017-04-27 | 2018-01-16 | 이채연 | 초점 가변 안경 |
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