JP3053646B2 - グリコシル化したプロドラック、その製法と用途 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 この発明は、グリコシル化プロドラック、その製法及
び、単独又は腫瘍特異性免疫酵素コンジュゲートと共
に、特に癌の治療への用途に関する。

より詳しくは、この発明は、特に腫瘍特異性免疫酵素
コンジュゲートの作用で分解できて、腫瘍細胞に対して
活性な細胞毒性物質を与える修飾アントラサイクリン類
からなるプロドラックに関する。

治療剤としてプロドラックと酵素／モノクロナール抗
体コンジュゲートとの組合せが文献上知られている。一
般に、特異組織に指向し、プロドラックを分解しうる酵
素と共有結合する問題の抗体が、最初に適当な動物、殊
に人に注射され、その後プロドラックが投与され酵素で
活性化される。このプロドラックは、特異組織にアンカ
ーされた酵素／抗体コンジュゲートの作用により、その
組織に細胞障害効果を奏するサイトトキシンに変換され
る。

国際特許出願WO81/01145（ユニバーシティ オブ イ
リノイ ファンデーション名義）には、加水分解酵素で
活性化できるプロドラックを記載され、プロドラックの
最適効率の５つのクライテリアを定義している。すなわ
ち（１）腫瘍部位で放出される抗腫瘍剤の細胞毒レベル
に対し、腫瘍部位で十分に活性な酵素であること、
（２）プロドラックは、腫瘍部位以外の部位で活性化さ
れないこと、（３）プロドラックは、生理条件下、腫瘍
と結合した酵素の適当な基質であること、（４）プロド
ラックは、非毒性か、活性化した抗腫瘍剤より十分に毒
性が低いこと、及び（５）活性物質は、短い生物学的半
減期を有し、従って、毒性が腫瘍に限定されること。

より詳しくは、前記特許出願は、抗腫瘍剤が、薬理学
的に不活性であるが、腫瘍部位に大量存在する酵素（特
にプラスミンとプラスミノーゲン アクチベータ）で腫
瘍の部位のみで選択的に活性化できるプロドラックに、
その抗腫瘍剤を変換するペプチドの添加によって腫瘍に
特異的にすることができる旨記載している。プロドラッ
クのペプチド部分のアミノ酸シーケンスは、腫瘍の部位
で抗腫瘍剤の活性型が遊離できるように、プラスミン又
はプラスノーゲンアクチベータのようなプロテアーゼに
よって抗腫瘍剤部分から酵素的に分解しうるようなもの
である。

加水分解酵素で活性化しうるプロドラックは、ペプチ
ドと抗腫瘍剤とが、自己犠牲コネクターを介して共有結
合されている構造を有し、その分子構造が、自己犠牲コ
ネクターからペプチドの酵素分裂が、同時に抗腫瘍剤部
分との結合の分裂を起こすようなものである。

しかし、前記国際特許出願に記載のプロドラックは、
腫瘍部位で、酵素特にプロテアーゼの産生増加をきたす
癌にのみ使用できる。同出願に開示のプロドラックを分
裂しうる活性化酵素は、ヒトの癌に十分な量見出されて
いないので、そのプロドラックは、所望の選択毒性を与
えない（K.O.BAGSHAWE,Br.J.Cancer,1987,56,531）。

国際特許出願WO88/07378（キャンサー リサーチ キ
ャンペン テクノロジー リミテッド名義）には、一方
で酵素／抗体−コンジュゲートと他方に酵素で活性化で
きるプロドラックを含有する治療系を記載している。酵
素／抗体コンジュゲートの抗体が腫瘍特異抗体を認識
し、酵素がプロドラックを細胞毒剤に変換できるもので
ある。

その出願は、細胞毒性剤が内因性酵素で早期放出され
るのを防止するように、哺乳動物以外の酵素を用いるの
が好ましいと述べている。

さらに詳しくは、上記出願は、カルボキシペプチダー
ゼの存在下でナイトロゲンマスタードに変化しうるｐ−
ビス−Ｎ−（２−クロロエチル）アミノベンジルグルタ
ミン酸とその誘導体のような修飾ナイトロゲンマスター
ドと末端アミノ基がアミノ酸の存在下でアミドに変化さ
れるアンスラサイクリン類を記載している。

しかし、これらのプロドラックは、主要な欠点として
かなりの本質的な細胞毒性を保持していることである。

また、ヨーロツパ特許出願第302473号は、２成分を含
有し、腫瘍組織に局在した酵素／抗体コンジュゲートが
プロドラックを分裂し、細胞毒活性物質を与える治療シ
ステムを記載している。より詳しくは、酵素／抗体コン
ジュゲートは、アルカリホスホターゼ（AP）、ペニシリ
ンＶアミダーゼ（PVA）又はシトシンジアミダーゼ（C
D）を含み、プロドラックとして、４′−ホスフェート
エトポサイド及びその誘導体（又は７−（２−アミノエ
チル ホスフェート）マイトマイシン）と、Ｎ−（ｐ−
ヒドロキシフェノキシアセチル）アドリアマイシン又は
５−フルオロサイトシンと組合せて用いられる。

しかし、その出願に記載のシステムは、循環で早期に
プロドラックを活性化できる循環酵素、すなわちアルカ
リホスファターゼ、又は不耐性現象又は感作現象を起し
うる外因性酵素（PVA又はCD）の何れかを利用する欠点
を有する。

国際特許出願WO90/07929号（アクゾNV名義）は、活性
化剤（プロドラックを薬理学的に活性な物質に変換しう
るもの）とターゲット特異性物質のコンジュゲートを用
いてプロドラックを動物の生体内で活性化するサイト特
異性方法を記述している。活性化剤は、特に、リゾチー
ムのようなヒト由来の酵素で、循環中に存在しないか又
はごく少量存在するもので、かつその天然基質は循環中
に又は非ターゲット細胞の表面に存在しないものであ
る。ターゲット特異性物質は、殊にホスフェート特異性
抗原に対する抗体である。特にプロドラックはアンスラ
サイクリン又はグリコシル化部分上のカルボニルC₁₃で
アミノ基によりアンスラサイクリンに結合されるキチン
オリゴマーで修飾されたアンスラサイクリン（例えばド
キソルビシン）からなる。

しかし、その国際特許出願で提案されたシステムはド
キソルビシン自体ではなく、その誘導体、Dox−(GlcNA
c)₁又はDox−(GlcNAc)₃を放出する主な欠点があり、従
ってこれは厳密な意味でプロドラックではない。一方、
これらの誘導体に関しては、薬理学的及び毒性学的見地
での知見の蓄積を欠くものである。

上記のことから、従来技術のシステムの欠点は、次の
ことであることが明らかである。

１）酵素の選択について −プロドラックの望まれない分解（循環酵素）、 −腫瘍部位での大量の酵素の産生にともなうプロドラッ
クの分解、及び −不耐性現象と感作現象を起こしうる外因性酵素の使用 ２）プロドラックの選択について −プロドラックの本質的細胞毒性 −薬理学的及び毒性効果が十分に知られていないアンス
ラサイクリン誘導体の産生と −酵素分解反応に立体的又は電子的干渉を起こす欠点を
有する２つの区画（酵素様基質と細胞毒剤）とのプロド
ラックの使用。

結果として、本出願人は、適当な酵素コンジュゲート
の存在下で薬理学的に活性な物質に変換しうるプロドラ
ックを提供するもので、従来技術のプロドラックより良
好な実際上のニーズに合致し、特にそれらは安定であ
り、酵素分解反応中に立体的又は電子的干渉を生せず、
かつ腫瘍の部位でのみ活性な細胞毒性物質を放出するも
のである。

この発明は、下記式Ｉを有することで特徴付けられる
アンスラサイクリングプロドラックに関する。

式中、R₁，R₂とR₃は同一又は異なって、水素原子又は
ヒドロキシ基、R₄は水素原子、ヒドロキシ基又はメトキ
シ基、Ｒは基−CO−CH₂−Ｒ″（Ｒ″は水素原子、C₁〜C
₆アルキル基、ヒドロキシ基、アルコキシ基、Ｏ−アシ
ル基又はアリール基）、R₅とR₆は同一又は異なって、水
素原子又はヒドロキシ基、R₇は水素原子又はヒドロキシ
基、R₈は基−CH₂−OR₉又は基COOR₉（R₉はC₁〜C₃アルキ
ル基、水素原子又はアセチル基）、R₁₀とR₁₁は水素原
子、アシル保護基又はアルキル基、R₁₂はヒドロキシ
基、アミノ基、アミド基又はＯ−アシル保護基、ベンジ
ル−CH₂は、グルコシル酸素のパラ又はオルト位である
のが好ましく、Ｙは、水素原子、又はニトロ、ハロゲン
原子、基SO₂X（ＸはCH₃、C₆H₄−CH₂、NH₂、Ｎ−（C₁−C
₄アルキル）₂又はNH−C₁−C₄アルキル）、CN、アシル又
はCOOアルキルからなる群から特に選択された少なくと
も１つの電子吸引基及び／又は、Ｏ−アルキル、NHCO−
アルキル、Ｎ（アルキル）CO−アルキル、Ｓ−アルキル
又はアルキル基からなる群より選択された少なくとも１
つの電子供与基である。

この発明の用語で、アシル基とアルキル基は、１〜６
の炭素原子からなる基を意味するものとして理解され
る。

この発明の１つの有利な具体例によれば、Ｙが１以上
の電子吸引基のとき、グリコシル酸素のオルト位及び／
又はパラ位にあることが好ましく、Ｙが１以上の電子供
与基のときはメタ位にあるのが好ましい。

この発明によれば、ベンジルCH₂がグリコシル酸素の
オルト位にあるとき、Ｙはパラ位で、水素又は電子吸引
基、及び／又はメタ位で水素又は電子供与基である。

これは、フェノール基がマスクされているアンスラサ
イクリンのパラ又はオルト−ヒドロキシベンジルカルバ
メート誘導体となり、意外にも、グリコシダーゼにより
及びグリコシダーゼ／ホスフェート−特異性リガンドコ
ンジュゲートの両者で薬理学的に活性な細胞毒性のアン
スラサイクリンと炭水化物（ose）に分解でき、かつヨ
ーロッパ特許第0410366号に記載の化合物と区別でき
る。

この発明の式Ｉの化合物は、各種の異性体を含有す
る。

この発明による、３つの区分、すなわち、アンスラサ
イクリン、自己犠牲アーム（パラ又はオルト−ヒドロキ
シベンジルカルバメート）と酵素基体（炭水化物）から
なるアンスラサイクリン誘導体は、次の利点を有する。

−酵素／基質非認識の危険を防止する、 −酵素分解反応中、立体的に又は電子的干渉の問題が避
けられる、 −糖のアミノ基とＯ−ヘテロサイド結合の間の結合は、
酵素アタックされ、同時にプロドラックの細胞毒性を減
少するのに十分なかさの分子になる。

上記のように、有利なのは、中間アームは、パラ又は
オルト−ヒドロキシベンジルカルバメートであるのが好
ましく、３区画を有するプロドラックからの活性のアン
スラサイクリンの放出は、２つの工程（１）酵素加水分
解速度と（２）自己犠牲アームが酵素加水分解速度と分
離速度の両方に重要な機能を演ずる限り、実際に連結し
ている自己犠牲アームの分離速度によって決まる。それ
は次の式Ａによる。

この発明の他の有利な具体例によると、式（Ｉ）の好
ましい化合物は、特に次の基を含むものである。

R₁，R₂とR₃が水素原子、 R₄がメトキシ基、 R₅とR₆がヒドロキシ基、 Ｒが−COCH₃基又は−COCH₂OH基、 R₇が水素原子又はヒドロキシ基、 R₈が−CH₂OAc、−CH₂OH，−COOMe又はCOOH基、 R₁₀とR₁₁が同一又は異なって水素原子又はAc基、 R₁₂がヒドロキシ基又はOAc基、 前記のR₈、R₁₀、R₁₁とR₁₂は次の位置に存在するのが
好ましく、 かつＹは水素原子、又はグリコシル酸素のパラ又はオル
ト位でのNO₂基又はクロル原子及び／又はグリコシル酸
素のメタ位のOCH₃基である。

この発明は、さらに、特にグリコキシダーゼで分解で
きる上記に定義した式Ｉの化合物の製法に関し、この方
法は、 （１）式Ａ 〔Ｚはヒドロキシ基、Ｏ−トリアルキルシリル基又は基 （R₈、R₁₀、R₁₁とR₁₂は上記の定義と同じ）、Ｒ′は次
の基の１つ ベンジル−CH₂はフェノール基のパラ又はオルト位で
なるのが好ましく、修飾（グリコシル化又はシリル化）
されていてもよい。Ｙは水素原子、又はニトロ基、ハロ
ゲン原子、基SO₂X（ＸはCH₃、C₆H₄−CH₃、NH₂、Ｎ−（C
₁−C₄アルキル）₂、NH−C₁−C₄アルキル、−CN、アシル
及び−COO−アルキルからなる群より特に選択された少
なくとも１つの電子吸引基、及び／又はＯ−アルキル、
NH−CO−アルキル、Ｎ（アルキル）CO−アルキル、Ｓ−
アルキル及びアルキルからなる群より選択された少なく
とも１つの電子供与基〕 の誘導体と、式Ｂ （式中R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇とＲは上記の定義と
同じ） のアンスラサイクリンとを、任意に適当なプロモータの
存在下でカップリングさせ、 （２）得られた化合物に存在する保護基を、特に加水分
解、エステル交換又はケン化によって除去し、 （３）Ｚがヒドロキシ基又はＯ−トリアルキルシリル基
の場合に、式Ｉのアンスラサイクリンプロドラック（R₁
〜R₁₂、Ｒは前記と同一意味）とするために、適当な場
合に、次式 の炭水化物と適宜縮合させる ことからなることを特徴とする。

ＺがＯ−トリアルキルシリル基のとき、炭水化物との
縮合前に、例えば、テトラブチルアンモニウムフルオラ
イドで脱シリル化するのが有利である。

この方法の１つの有利な具体例は、式Ａの化合物が式
A₁ （式中R₈、R₁₀、R₁₁、R₁₂、Ｒ′とＹは上記の定義と同
じ）のグリコシル化ヒドロキシベンジル誘導体で、この
ものは、下記の反応式Ｉ、II、III,IV、VI、Ｘ、XI、XI
V、XVとXVIにより、式Ｂのアンスラサイクリンとのカッ
プリン後に、上記の式Ｉのアンスラサイクリンプロドラ
ックを与える。

この発明の有利な具体例によれば、工程（１）の前の
グリコシル化ｐ−ヒドロキシベンジル誘導体は、（ａ）
クレゾールと炭水化物又はパーアセチル メチル グル
クロネートとを縮合し、（ｂ）生成物をベンジルブロム
化し、（ｃ）ブロム化誘導体を溶媒分解し、（ｄ）ヒド
ロキシ基をヒドロキシサクシンイミジル又はｐ−ニトロ
フェノキシカルボニル誘導体で活性化して得られる。

その方法の他の具体例によれば、式Ａの化合物は式A₂ （式中Ｒ′は上記と同一意味、ＺはＯ−ジメチルセキシ
ルシリル基又はＯ−ｔ−ブチルジメチルシリル基） のシリル誘導体で、式Ｂのアンスラサイクリンとのカッ
プリング及び適当な炭水化物との縮合により、反応（適
当な炭水化物との縮合前のシリル化合物誘導体について
記載する）式Ｖ、VIIに従って、上記の式Ｉのアンスラ
サイクリンプロドラックを与える。

この発明の方法を行う他のモードによれば、式Ａの化
合物が式A₃ （式中R₈、R₁₀、R₁₁、R₁₂とＲ′は前記と同一意味、Ｙ
はパラ位でニトロ基又はハロゲン原子、メタ位で水素原
子又はメトキシ基）、 のグリコシル化Ｏ−ヒドロキシベンジル誘導体で、この
ものは、下記の反応式VIII、IX、XII、XIIIに従って、
式Ｂのアンスラサイクリンとの縮合後に、上記の式Ｉ
（ベンジルCH₂はグリコシル酸素に対しオルト位）のア
ンスラサイクリンプロドラックを与える。

この発明は、さらにこの発明によるアンスラサイクリ
ンプロドラックと酵素／腫瘍特異性抗体コンジュゲート
すなわち式II、Ab−Sp−Ｅ （式中Abは腫瘍に関連した抗原に対し特異性である抗体
又はそのフラグメントの１つ又は腫瘍に蓄積する傾向の
バイオモレキュール、例えばEGF（表皮細胞成長因
子）、α−TGF（α−形質転換成長因子）、PDGF（血小
板由来成長因子）、IGFI＋II（インシュリン成長因子Ｉ
＋II）又はFCFa＋ｂ（線維芽細胞生成因子ａ＋ｂ）、 Ｅは、免疫性でないが、ごく低い免疫原性のグリコキ
シダーゼ、好ましくは、α又はβ−グリコキシダーゼ、
α−ガラクトシダーゼ、α又はβ−マンノシダーゼ、α
−フコシダーゼ、Ｎ−アセチル−α−ガラクトサミニダ
ーゼ、Ｎ−アセチル−β又はＮ−アセチル−α−グリコ
サミニダーゼ又はβ−グルクロニダーゼのような哺乳動
物のグリコシダーゼ、 Sp（アーム）は式III又はIV Ｘ′（Ｓ）nY′ （III） Ｘ′（Ｓ）ｎ （IV） 〔Ｘ′又はＹ′は−CO−R₁₃−（Ｎ−サクシニミド）−
又は−Ｃ（＝R₁₄）−CH₂−CH₂−（R₁₃は−CH₂−CH₂、1,
4−シクロヘキシリデン、1,3又は1,4−フェニレン、メ
トキシカルボニル又はクロロ−1,4−フェニレン基、R₁₄
は酸素原子又はNH基、ｎは１又は２〕 のスルフィド又はジスルフィドを含有する基、 との組み合わせからなる抗腫瘍組成物に関する。この組
成物は、上記プロドラッグと酵素／腫瘍特異性抗体コン
ジュゲートとを同時に、別々に又は期間にわたって使用
される。

この発明によれば、アンスラサイクリンプロドラック
と酵素／抗体コンジュゲートは、少なくとも１つの医薬
的に受容な賦形剤と組合すことができる。

このような酵素／抗体コンジュゲートとしては、ドイ
ツ特許願第39350169号（ベーリング名義）により詳しく
記載されている。酵素と抗体、抗体フラグメント又はバ
イオモレキュールとのカップリングは文献記載の方法で
行われる（A.H.BLAIR,T.I GHOSE,Immunology Methods,1
983,59,129−143;T.I.GHOSE;Methods in Engymol.,198
3,19,280−333）。

この方法では、サクシニミジル Ｎ−マレイミド−ア
ルキレン、−シクロアルキリデン又は−アリレン−１−
カーボネートを用いて酵素をそのアミノ基を介して初期
に官能化されることが含まれ、マレイミド基の二重結合
と官能化された抗体、抗体フラグメント又はバイオモレ
キュールのHS基が反応し、チオエーテル基を生成する。

抗体／酵素コンジュゲートは、ヨーロッパ特許出願第
141079号に記載のモノクロナール抗体、好ましくは抗体
431/26、250/183、704/152と494/32を用いて作ることが
できる。

腫瘍に関連した抗原に対するこれらの抗体の特異性
は、動物及びヒトで、免疫シンチグラフィーと免疫化学
の方法で既に例証されている。

腫瘍特性酵素コンジュゲートは、同定された源から得
られ、文献記載の方法で精製される下記の酵素で作るこ
とができる。

−ヒト肝臓からのα−ガラクトシダーゼ、DEAN,K.G.and
SWEELEY,C.C.（1979）,J.Biol.Chem.,254,994−1000; −ヒト肝臓からのβ−グルコニダーゼ、HO,K.J.（198
5）,Biochim.Biophys.Acta,827,197−206; −ヒト肝臓からのα−Ｌ−フコシダーゼ、DAWSON,G.,TS
AY,（1977）,Arch.Biochem.Biophys.,184,12−23; −ヒト肝臓からのα−マンノシダーゼ、GRABOWSKI,G.A
IKONNE,J.U.,DESNICK,R.J.（1980）,Enzyme,25,13−25 −ヒト胎盤からのβ−マンノシダーゼ、NOESKE,CMERSMA
NN,G.（1983）,Hoppe Seylers Z.Physiol.Chem.,364,16
45−1651; −ヒト胃腸粘膜からのα−グルコシダーゼ、ASP,N.G.,G
UDM AND−HOEYER,E.,CHRISTIANSEN,P,M DAHLQUIST,A.
（1974）,Scand.J.Clin.Lab.Invest.,33.,239−245; −ヒト肝臓からのβ−グルコシダーゼ、DANIELS,L.B.,C
OYLE P.J.,CHIA,Y.B.,GLEW,R.H.（1981）,J.Biol.Che
m.,256,13004−13013; −ヒト胎盤からのβ−グルコセレブロシダーゼ、FURBIS
H F.S.,BLAIR,H.E.,SHILOACH,J.,PENTCHEU,P.G.,BRADY
R.O.（1977）,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,74,3560−3563; −ヒト胎盤からのα−Ｎ−アセチルグルコサミニダー
ゼ、ROEHRBORN,W.,VON FIGURA,K.（1978）,Hoppe Seyle
rs Z Physiol.Chem.,359,1353−1362; −ヒト羊膜からのβ−Ｎ−アセチルグルコサミニダーゼ
ORLACCHIO,A.,EMILIANI,C.,DI RENZO,G.C.COSMI,E.V.
（1986）,Clin.Chim.Acta,159,279−289; −サルバレらによるα−Ｎ−アセチルガラクトサミニダ
ーゼ,SALVAYRE R.,NEGRE,A.,MARET,A.,DOUSTE−BLAZY,
L.（1984）Pathol.Biol.（PARIS）,32,269−284. 酵素／腫瘍特異性抗体コンジュゲートの解糖活性は、
最適pHでｐ−ニトロフェニルグリコシドとの比較で決定
できる。

酵素／抗体コンジュゲートとプロドラックの連続的使
用及び併用の効果をテストするには、コンジュゲートを
移植マウスに投与し、次いで、血漿酵素値が実質的にゼ
ロにもどった後に、修飾アンスラサイクリン（プロドラ
ック）を投与し、腫瘍発育の停止があるかどうか、退行
が行われているかどうかが観察される。

プロドラック7,14,48b,49b,60及び75b、及び生体内で
酵素によって上記のプロドラックの１つに加水分解する
アセテート6,13,48a,49a,59と75aは、α−ガラクトサイ
ドであり、プロドラック22、27c、54e、64c、70C、78b
及び83cはβ−グルクロニドであり、プロドラック37と
そのアセテートはβ−グルコシドである。これらのプロ
ドラックは、場合により、上記の適当なコンジュゲート
の存在下で、分解されてダウノルビシン又はドキソルビ
シンを与える。

３つの区分を有するプロドラックとコンジュゲート
（その中の酵素はヒト源の非循環酵素である）とを組合
せてなるこの発明による組成物は、意外にも、免疫学的
耐性の問題と腫瘍の部位での作用の特異性の問題の両者
を解決することが可能で、かつ上述のように酵素分解
中、立体又は電子的干渉が避けられるものがある。

また、この発明によるプロドラックは、意外にも、活
性化したマクロファージ、顆粒細胞、栓球又はヒト腫瘍
細胞で分解できる。

実際に、これらの活性化した細胞は、グルクロニル／
自己犠牲アーム／ドラック化合物を効果的に（加水分解
により）分解しうるグルクロニダーゼを放出する。

従って、このようなプロドラックは、活性化したマク
ロファージ、顆粒細胞、栓球又はヒト腫瘍細胞を含む疾
患の治療薬として直接用いることができる。

先の条項はさておき、本発明はまた、本願発明の主題
を形成する方法をどのように行うかの実施例に関連する
以下の説明から明らかとなる他の条項をも包含する。

それは明確に理解されるはずであるが、これら実施例
は単に本発明の主題を例示したものであり、限定される
ものではない。

実施例1:N−（４−ヒドロキシベンジルオキシカルボニ
ル）−ダウノルビシン α−Ｄ−ガラクトピラノシド
（７）の合成 反応式Ｉに基づいて、ペンタ−Ｏ−アセチル−Ｄ−ガ
ラクトピラノースとパラクレゾールとのカップリング
を、ZnCl₂又はAcOH/Ac₂O混合物中のZnCl₂存在下での溶
融によって行った。

得られた化合物（１）のベンジルプロミネーション
は、Ｎ−−ブロモサクシニミド（NBS）と光化学活性化
剤のいずれかの存在下、化合物２のみを得るために、又
はNBSと過酸化ベンジルの存在下、主に化合物２と少量
のアルデヒド誘導体３を得るために行われる。

誘導体２からの臭素の置換を、アセトン又は(Bu₃Sn)₂
Oとともに（あるいはなしで）エーテル／アセトン存在
下で行い、誘導体４を得る。よって、アルデヒド誘導体
３の水素化ナトリウムホウ素での還元は、さらに化合物
４を与える。

誘導体４におけるOH基の活性化は、Ｎ−サクシニミジ
ルクロロホルマート又はジサクシニミジルカーボネート
（DSC）を用いて行う。

次いで、誘導体５のダウノルビシンとのカップリング
を、Et₃Nの存在下でのDMF中で行い、Ｎ−ヒドロキシベ
ンジルカルボニル誘導体６を、エステル交換反応によっ
て脱保護し、所望の誘導体７を得る。

１）４−メチルフェニル2,3,4,6−テトラ−Ｏ−アセチ
ル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド（１） 製法； 方法I:ヘルフェリッチ（HELFERICH）法に従って、ｐ−
クレゾール8.9g、ペンタ−Ｏ−アセチル−Ｄ−ガラクト
ピラノース8.9g及びZnCl₂0.56gを混合し、160℃に加熱
し、この温度で30分間保持する。60℃に冷却したのち、
反応媒質を400mlのCH₂Cl₂で採取し、400mlの水で２回、
その後、水相がほぼ無色になるまで水酸化ナトリウム溶
液（＝1N）で洗浄する。有機相は、最終的に２回400ml
の水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、さらに水
槽（温度:35−40℃）で乾燥状態に蒸発させ、7.08g（収
率:70％）の残留物を得る。60Hシリカのカラムにおける
クロマトグラフィ（溶液：ヘキサン／エチルアセテー
ト:90/10v/v）で、2.9gの化合物１（収率:29％）と1.17
gのそのβアノマー（収率:12％）を得る。

方法II:ペンタ−Ｏ−アセチル−Ｄ−ガラクトピラノ
ース11g、ｐ−クレゾール11g及びZnCl₂2.4gを、酢酸及
び無水酢酸（95/5v/v）の混合液8mlに溶解し、120℃に
加熱する。還流を２時間保持する。

減圧下、溶媒を蒸発させたのち、残留物を120mlのCH₂
Cl₂で採取する。有機溶液を無水硫酸ナトリウムで乾燥
し、減圧下、乾燥状態に蒸発させる前に、水、その後、
水酸化ナトリウム溶液（＝1N）、最後に水で洗浄する。
これにより7gの粗残留物（収率:64％）を得る。60Hシリ
カのカラムにおける精製（溶媒：ヘキサン／エチルアセ
テート:70/30v/v）後、生成物１を収率13％で、そのβ
アノマーを収率6.5％で得る。

−化合物1:C₂₁H₂₆O₁₀.M＝438.M.p.＝163−165℃．
［α］_D ²⁰＝＋164°（cl,CHCl₃）．¹H NMR（270MHz,CDC
l₃）：δppm:1.90（s,3H）,2.02（s,3H）,2.08（s,3
H）,2.19（s,3H）,2.28（s,3H）,4.00（dd,1H,J＝12,
J′＝7Hz）,4.09（dd,1H,J＝12,J′＝6Hz）,4.40（ddd,
1H,J＝7,J′＝5,J″＝1Hz）,5.27（dd,1H,J＝10,J′＝4
Hz）,5.54（dd,1H,J＝4,J′＝1Hz）,5.57（dd,1H,J＝1
0,J′＝4Hz）,5.73（d,1H,J＝4Hz）,6.90（d.2H,J＝8H
z）,7.10（d,2H,J＝8Hz）.MS（DIC/NH₃）:m/z:456(M+NH
₄)⁺,331. ２）４−ブロモメチルフェニル2,3,4,6−テトラ−Ｏ−
アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド（２） 製造； １）光化学活性化 Ｎ−ブロモサクシニミド1.02gを四塩化炭素の100mlに
おける化合物１（2.5g）の溶液に加え、その混合物を80
℃で、光（1000W）照射下、15分間還流する。冷却後、
反応媒体を濾過して、沈殿したサクシニミドを除去し、
次いで、ろ液を減圧下蒸発させ、3.23gの乾燥残留物を
得る。2.45gの化合物２を60Hシリカのカラムにおける精
製（溶媒：ヘキサン／エチルアセテート:70/30v/v）
後、分離する（収率:83％）。

２）過酸化ベンゾイル活性化 Ｎ−ブロモサクシニミド0.8gと0.08gの過酸化ベンゾ
イルを40mlの四塩化炭素中、生成物１の1g溶液に加え
る。反応媒体を３時間還流する。冷却後、反応媒体を濾
過して、沈殿したサクシニミドを除去し、次いで、ろ液
を減圧下蒸発させ、1.64gの生成物を得る。フラッシュ
クロマトグラフィ（溶媒：ヘキサン／エチルアセテー
ト:80/20v/v）で、モノ臭素化誘導体２及び対応ジ臭素
化誘導体の混合物1.74gを得、0.08gの純粋化合物３を分
離することができる。

−化合物2:C₂₁H₂₅O₁₀Br.M＝517.M.p.＝187℃（CCl₄）．
［α］_D ²⁰＝＋26°（cl,CHCl₃）．¹H NMR（270MHz,CDCl
₃）：δppm:1.94（s,3H）,2.03（s,3H）,2.07（s,3H）,
2.17（s,3H）,4.06（dd,1H,J＝12,J′＝7Hz）,4.12（d
d,1H,J＝12,J′＝6Hz）,4.32（ddd,1H,J＝7,J′＝6,J″
＝1Hz）,4.49（s,2H）,5.29（dd,1H,J＝10,J′＝4Hz）,
5.55（dd,1H,J＝4,J′＝1Hz）,5.60（dd,1H,J＝10,J′
＝4Hz）,5.78（d,1H,J＝4Hz）,7.02（d.2H,J＝8Hz）,7.
33（d,2H,J＝8Hz）.MS（DIC/NH₃）:m/z:536(M+NH₄)⁺,53
4(M+NH₄)⁺,456,331. ３）４−ホルミルフェニル2,3,4,6−テトラ−Ｏ−アセ
チル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド（３） C₂₁H₂₄O₁₁.M＝452.¹H NMR（270MHz,CDCl₃）：δppm:1.9
1（s,3H）,2.03（s,3H）,2.06（s,3H）,2.20（s,3H）,
4.09（m,2H）,4.28（ddd,1H,J＝7,J′＝6,J″＝1Hz）,
5.30（dd,1H,J＝10,J′＝4Hz）,5.52（m,2H）,5.88（d,
1H,J＝4Hz）,7.17（d,2H,J＝8Hz）,7.83（d,2H,J＝8H
z）,9.89（s,1H）.MS（DIC/NH₃）:m/z:470(M+NH₄)⁺,33
1. ４）４−ヒドロキシメチルフェニル2,3,4,6−テトラ−
Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド（４） 製造； 80mlアセトンにおける化合物２の1.89g溶液を、同量
の0.1N硝酸銀水溶液と混合する。混合物を25°にて２時
間攪拌し、その後、減圧下でアセトンを蒸発させ、残留
水相をCH₂Cl₂で抽出し、抽出物を水で洗浄し、さらに無
水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧下蒸発乾燥さ
せる。次いで、得られた乾燥残留物（1.52g）をシリカ
のカラム（溶媒：ヘキサン／エチルアセテート:60/40v/
v）におけるフラッシュクロマトグラフィにより精製す
る。生成物４（0.94g）が収率56％で得られる。

C₂₁H₂₆O₁₁.M＝454.M.p.＝153℃（CH₂Cl₂）．［α］_D ²⁰
＝＋144.5°（c1,CHCl₃）．¹H NMR（270MHz,CDCl₃）：
δppm:1.73（1H,exch.D₂O）,1.96（s,3H）,2.03（s,3
H）,2.08（s,3H）,2.17（s,3H）,4.07（dd,1H,J＝12,
J′＝7Hz）,4.09（dd,1H,J＝12,J′＝6Hz）,4.35（ddd,
1H,J＝7,J′＝6,J″＝1Hz）,4.64（s,2H）,5.28（dd,1
H,J＝10,J′＝4Hz）,5.51（dd,1H,J＝4,J′＝1Hz）,5.5
4（dd,1H,J＝10,J′＝4Hz）,5.60（d,1H,J＝4Hz）,7.04
（d,2H,J＝8Hz）,7.30（d,2H,J＝8Hz）.MS（DIC/NH₃）:
m/z:472(M+NH₄)⁺,331. ５）2,5−ジオキソピロリジン−１−イル ４−（2,3,
4,6−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノ
シル）ベンジル カーボネート（５） 化合物４を、サクリニミジル クロロホルマートとカ
ップリングすることによりサクシニミド カーボネート
に転換させる。

ａ）サクシニミジル クロロホルマートの製造； 11mlエタノールにおける2gのＮ−ヒドロキシサクシニミ
ドの溶液を、30mlエタノールにおける1g水酸化カリウム
に混合する。形成された生成物を濾過し、エーテルで洗
浄し、40℃、真空下で一晩乾燥し、2.40gのヒドロキシ
サクシニミドのナトリウム塩を得る（収率:94％）。

Ｎ−ヒドロキシサクシニミドのカリウム塩200mgを、
トルエンにおけるCOCl₂の20％溶液の3mlに、５℃にて攪
拌しながら加える。２時間攪拌後、形成された塩化カリ
ウムを濾過し、ろ液を減圧下蒸発させる。残留物をエー
テルに溶解し、ジサクシニミジルカーボネートからなる
白色固体を析出させ、濾過する。ろ液を減圧下乾燥状態
に蒸発させ、サクシニミジルクロロホルマート150mgを
得る（収率:54％）。

ｂ）サクシニミドカーボネートの製造； 150mgの化合物４を、エチルアセテート8ml中、サクシ
ニミジルクロロホルマート117mg及びピリジン0.05mlに
加える。混合物を48時間、室温にて攪拌し、濾過し、ろ
液を減圧下蒸発させ、189mgの化合物５を得る（収率:96
％）。C₂₆H₂₉O₁₅N,M＝595、ラック ［α］_D ²⁰＝＋142°（c0.3,CHCl₃）．¹H NMR（270MHz,C
DCl₃）：δppm:1.90（s,3H）,2.03（s,3H）,2.07（s,3
H）,2.16（s,3H）,2.83（s,4H）,4.07（dd,1H,J＝12,
J′＝7Hz）,4.11（dd,1H,J＝12,J′＝6Hz）,4.30（ddd,
1H,J＝7,J′＝6,J″＝1Hz）,5.26（s,2H）,5.29（dd,1
H,J＝10,J′＝4Hz）,5.51（dd,1H,J＝4,J′＝1Hz）,5.5
5（dd,1H,J＝10,J′＝4Hz）,5.77（d,1H,J＝4Hz）,7.07
（d,2H,J＝8Hz）,7.33（d,2H,J＝8Hz）.MS（DIC/NH₃）:
m/z:613(M+NH₄)⁺,437,348,331. ６）Ｎ−〔４−（2,3,4,6−テトラ−Ｏ−アセチル−α
−Ｄ−ガラクトピラノシル）−ベンジルオキシカルボニ
ル〕ダウノルビシン（６） 製造； 20mgダウノルビシンを0.8mlジメチルホルムアミドに
溶解する。化合物５の23mgとトリエチルアミン１滴とを
この溶液に加え、アルゴン下、10分間室温にて攪拌す
る。

反応媒質をエチルアセテートで採取し、次いでNaClの
飽和溶液で抽出する。

有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、減圧
下蒸発乾燥させる。50mgの得られた乾燥残留物（1.59
g）を60Hシリカのカラム（溶液：ヘキサン／エチルアセ
テート:45/55v/v）において精製し、13mgの所望の生成
物６を得る（収率:32％）。

化合物6:C₄₉H₅₃NO₂₂.M＝1007.非晶形 ［α］_D ²⁰＝＋278°（c0.7,CHCl₃）．¹H NMR（270MHz,D
MSO）：δppm:1.08（d,3H,J＝7Hz）,1.40−2.20（m,4
H）,1.76（s,3H）,1.91（s,3H）,1.96（s,3H）,2.08
（s,3H）,2.20（s,3H）,2.91（s,2H）,3.31（m,1H）,3.
66（ddt,1H,J＝12,J′＝8,J″＝4Hz）,3.93−4.00（m,5
H）,4.13（dd,1H,J＝7,J′＝4Hz）,4.30（ddd,J＝7,J′
＝6,J″＝1Hz）,4.70（d,1H,J＝6Hz）,4.88（m,3H）,5.
10（dd,1H,J＝10,J′＝4Hz）,5.17（m,1H）,5.37（m,2
H）,5.53（s,1H）,5.74（d,1H,J＝4Hz）,6.84（d,1H,J
＝8Hz）,7.03（d,2H,J＝8Hz）,7.26（d,2H,J＝8Hz）,7.
64（m,1H）,7.88（m,2H）.MS（DIC/NH₃）:m/z:1025(M+N
H₄)⁺,376. ７）Ｎ−〔４−（α−Ｄ−ガラクトピラノシル）ベンジ
ルオキシカルボニル〕ダウノルビシン（７） 製造； 1mlの0.1Nナトリウムメタノレートにおける６の9mgの
溶液を攪拌し、０℃で15分間保持する。媒質を、アンバ
ーライトIRC120H⁺樹脂の添加により中和し、次いで濾過
する。ろ液を減圧下、乾燥状態に蒸発させ、6.7mgの純
粋化合物７を得る（収率:89％）。

化合物7:C₄₁H₄₅NO₁₈.M＝839.非晶形 ［α］_D ²⁰＝＋243°（c0.01,MeOH）．¹H NMR（270MHz,C
D₃OD）：δppm:1.34（d,3H）,1.50−4.00（m,11H）,4.5
0−5.50（m,9H）,7.06（d,2H,J＝8Hz）,7.23（d,2H,J＝
8Hz）,7.30−7.60（m,3H）.MS（DIC/NH₃）:m/z:571,55
4,459,383,286,164. 実施例2:N−〔２−（α−Ｄ−ガラクトピラノシル）−
ベンジルオキシカルボニル〕ダウノルビシン（14）の合
成 反応式IIに基づいて、出発物質としてグリコシド８を
用い、実施例１に述べられた同様の反応順序、つまり、
（ｉ）ベンジルブロミネーション、（ii）ブロモ化され
た誘導体の加溶媒分解、（iii）サクシニミジルクロロ
ホルマートでのOH基の活性化及び（iv）ダウノルビシン
での12のカップリングと糖残留物におけるOH基の脱保
護、を用いて所望の生成物（14）を得る。

１）２−ブロモメチルフェニル−2,3,4,6−テトラ−Ｏ
−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド（９） 製造； NBS/CCl₄を用いて、２−メチルフェニル2,3,4,6−テ
トラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド８
（参照：ピー・エム・デイ（P.M.DEY）、化学と産業（C
hemistry and Industry）（ロンドン）、39,1637,196
7）から（収率:80％）。

−化合物9:C₂₁H₂₅BrO₁₀.M＝517.¹H NMR（200MHz,CDC
l₃）：δppm:1.96（s,3H）,2.04（s,3H）,2.11（s,3
H）,2.19（s,3H）,4.14（m,2H）,4.40（t,1H,J＝6Hz）,
4.60（ABq,2H,J＝9Hz）,5.38（dd,1H,J＝11and4Hz）,5.
50−5.75（m,2H）,5.85（d,1H,J＝4Hz）,7.00−7.40
（m,4H）． ２）２−ヒドロキシメチルフェニル−2,3,4,6−テトラ
−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド（11） 製造； ａ）AgNO₃を用いて９から（収率:21％）。

ｂ）NaBH₄/THF/MeOHを用いて10から（収率:80％）。

−化合物11:C₂₁H₂₆O₁₁.M＝454.M.p.＝96°C.¹H NMR（20
0MHz,CDCl₃）：δppm:1.98（s,3H）,2.03（s,3H）,2.09
（s,3H）,2.19（s,3H）,4.15（m,2H）,4.43（t,1H,J＝6
Hz）,4.57（d,1H,J＝12.5Hz）,4.89（d,1H,J＝12.5H
z）,5.30−5.60（m,3H）,5.72（d,1H,J＝4Hz）,7.00−
7.40（m,4H）． ３）２−ホルミルフェニル2,3,4,6−テトラ−Ｏ−アセ
チル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド（10） 製造； 臭素化、次いでAgNO₃を用いて８から（収率:52％）。

−化合物10:C₂₁H₂₄O₁₁.M＝452.¹H NMR（200MHz,CDC
l₃）：δppm:2.00（s,3H）,2.06（s,3H）,2.08（s,3
H）,2.19（s,3H）,4.18（m,2H）,4.43（t,1H,J＝6Hz）,
5.38（d,1H,J＝11Hz）,5.40−5.60（m,2H）,5.84（d,1
H,J＝4Hz）,7.19（t,1H,J＝8Hz）,7.30（d,1H,J＝8H
z）,7.58（t,1H,J＝8Hz）,7.91（d,1H,J＝8Hz）,10.56
（s,1H）． ４）2,5−ジオキソピロリジン−１−イル ２−（2,3,
4,6−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノ
シル）ベンジルカーボネート（12） 製造； サクシニミジルクロロホルマートを用いて11から（参
照:5の製造；、収率:72％）。

−化合物12:C₂₆H₂₉NO₁₅.M＝595.¹H NMR（200MHz,CDC
l₃）：δppm:1.98（s,3H）,1.99（s,3H）,2.06（s,3
H）,2.17（s,3H）,2.87（bs,4H）,4.15（m,2H）,4.43
（t,1H,J＝6Hz）,5.16（d,1H,J＝12Hz）,5.33（dd,1H,J
＝12and4Hz）,5.40−5.90（m,5H）,7.10（t,1H,J＝8H
z）,7.20−7.50（m,3H）。

５）Ｎ−〔２−（2,3,4,6−テトラ−Ｏ−アセチル−α
−Ｄ−ガラクトピラノシル）ベンジルオキシカルボニ
ル〕ダウノルビシン（13） 製造； 12及び６で記載されたプロトコールによるダウノルビ
シン（収率:85％）から。

−化合物13:M.p.＝130°C.［α］_D ²⁰＝＋216°（c0.25,
CHCl₃）．C₄₉H₅₃NO₂₂.M＝1007.¹H NMR（200MHz,CDC
l₃）：δppm:1.87（s,3H）,2.00（s,3H）,2.08（s,3
H）,2.12（s,3H）,2.41（s,3H）,2.94（d,1H,J＝18H
z）,3.23（d,1H,J＝18Hz）,3.66（s,1H）,3.70−4.20
（m,6H）,4.08（s,3H）,5.10（ABq,2H,J＝9Hz）,5.20−
5.70（m,7H）,5.85（d,1H,J＝4Hz）,7.00−7.50（m,4
H）,7.78（t,1H,J＝8Hz）,8.03（d,1H,J＝8Hz）,13.28
（s,1H）,13.98（s,1H）． ６）Ｎ−〔２−（α−Ｄ−ガラクトピラノシル）ベンジ
ルオキシカルボニル〕ダウノルビシン（14） 製造； MeONa（触媒）/MeOHを用いて13から（参照:7の製造、
収率:83％）。

C₄₁H₄₅NO₁₈、Ｍ＝839、M.P.＝130℃ 実施例3:N−（４−ヒドロキシベンジルオキシカルボニ
ル）−ダウノルビシンβ−Ｄ−グルクロニド（22）の合
成 反応式IIIに基づいて、メチルパー−Ｏ−アセチル−
Ｄ−グルクロネートとパラクレゾールとのカップリング
を、触媒としてTMSOTfの存在下、CH₂Cl₂溶液中で行う。

次いで、BaOの存在下、MeOH中で混合することによっ
て行うカルボメトキシ基の付加的な脱保護を除いて、実
施例１及び２と同様の反応順序によって、誘導体22を製
造する。

１）メチル（４−ブロモメチルフェニル2,3,4−トリ−
Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド）ウロネート
（16） これは、ジー・エヌ・ボレンバック（G.N.BOLLENBAC
K）によるJ.Am.Chem.Soc.,1955,77,3310−3315に記載さ
れたように得られるメチル（４−メチルフェニル2,3,4
−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド）ウ
ロネート（15）から、２（実施例１）で述べられた方法
により得られる（収率:79％）。

C₂₀H₂₃O₁₀Br.M＝503.M.p.＝144−146℃（etha−nol）．
［α］_D ²⁰＝＋３°（c0.85,CHCl₃）.IR（CDCl₃）:1758c
m^-1（CO）．¹H NMR（90MHz,CDCl₃）：δppm:2.00（s,9
H）,3.66（s,3H）,4.16（m,1H）,4.43（s,2H）,5.03−
5.36（m,4H）,6.89−7.33（AB,4H）.MS（DIC/NH₃）:m/
z:521(M+NH₄)⁺． ２）メチル（４−ヒドロキシメチルフェニル2,3,4−ト
リ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド）ウロネ
ート（18）及びメチル（４−ホルミルフェニル2,3,4−
トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド）ウロ
ネート（17） これらは、４（実施例１）を得るために上述した方法
により16（1.2g,2.3mmol）から得られる。溶出液として
ヘキサン／エチルアセテート（2:1v/v）を用いるシリカ
ゲルにおける残留物のクロマトグラフィーは、いくらか
の出発物質16（100mg）、18（650mg、38％）さらに17
（200mg、12％）を分離することを可能にする。

−化合物18:C₂₀H₂₄O₁₁.M＝440.M.p.＝134−136℃．
［α］_D ²⁰＝−45°（c0.55,CHCl₃）.IR（KBr）:3556cm
^-1（OH）,1758cm^-1（CO）．¹H NMR（90MHz,CDCl₃）：δ
ppm:1.96（s,9H）,3.63（s,3H）,3.96−4.20（m,2H）,
4.53（s,2H）,4.96−5.33（m,4H）,7.20and6.86（AB,4
H）.MS（DIC/NH₃）:m/z:458(M+NH₄)⁺． −化合物17:C₂₀H₂₂O₁₁.M＝438.M.p.＝170−172℃．
［α］_D ²⁰＝−31°（c0.95,CHCl₃）.IR（CDCl₃）:1758c
m^-1（Ｃ＝O,ester）,1698cm^-1（Ｃ＝O,PhCHO）．¹H NMR
（90MHz,CDCl₃）：δppm:2.12（s,9H）,3.72（s,3H）,
4.21−4.39（m,1H）,5.30−5.56（m,4H）,7.07−8.03
（dd,4H）,9.91（s,1H）.MS（DIC/NH₃）:m/z:456(M+N
H₄)⁺． ３）2,5−ジオキソピロリジン−１−イル ４−（メチ
ル（2,3,4−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラ
ノシル）ウロネート）ベンジルカルボネート（19） 製造； 無水メチレンクロリド（4ml）中、18（170mg、0.39mm
ol）とトリエチルアミン（54μｌ、0.39mmol）の溶液と
をアルゴン下、アセトニトリル8ml中のDSC（197mg、0.7
7mmol）に滴下する。24時間、室温での攪拌後、媒体を
濾過し、ろ液を乾燥状態に濃縮する。生成物19が無色シ
ロップ状で得られる（117mg、52％）。

−化合物19:C₂₅H₂₇NO₁₅.M＝581.［α］_D ²⁰＝＋３°（c
0.85,CHCl₃）.IR（CDCl₃）:1747cm^-1（Ｃ＝Ｏ）．¹H NM
R（90MHz,CDCl₃）：δppm:2.08,（s,9H）,2.82（s,4
H）,3.73（s,3H）,4.24（d,1H,J＝９）,5.13−5.44（m,
6H）,6.96−7.44（m,4H）.MS（DIC/NH₃）:m/z:599(M+NH
₄)⁺． ４）Ｎ−〔４−（メチル（2,3,4−トリ−Ｏ−アセチル
−β−Ｄ−グルコピラノシル）ウロネート）ベンジルオ
キシカルボニル〕ダウノルビシン（20） 製造； ６及び13（実施例１及び２）を得るために述べられた
方法による（収率:70％）。

化合物20:アモルファス生成物、C₄₈H₅₁NO₂₂， Ｍ＝993.［α］_D ²⁰＝＋112°（c0.06,CHCl₃）．¹H NMR
（250MHz,CDCl₃）：δppm:1.32（d,3H,J＝6Hz）,1.74
（s,1H）,1.77and1.95（AB,2H,J＝5,J′＝12）,2.07（3
s,9H）,2.12−2.38（AB,2H）,2.44（s,3H）,2.97and3.2
6（AB,1H,J＝20）,3.70（m,1H）,3.73（s,3H）,3.92（b
road s,1H）,4.12（s,3H）,4.19（m,1H）,5.00（s,2
H）,5.14（d,1H,J＝７）,5.68（dd,J＝3,J′＝7,1H）,
5.53（d,1H,J＝3.5）,6.98and7.28（AB,4H,J＝８）,7.4
3（d,1H,J＝８）,7.83（t,1H,J＝Ｊ′＝８）,8.07（d,1
H,J＝８）,13.33and14.00（2s,2H）.MS（FAB）:m/z:101
6(M+Na)⁺． ５）Ｎ−〔４−（メチル（β−Ｄ−グルコピラノシル）
ウロネート）ベンジルオキシカルボニル〕ダウノルビシ
ン（21） MeONa/MeOHと20との処理による（参照:7及び14の製
造、実施例１及び２、収率:78％）。

赤色シロップ、C₄₂H₄₅NO₁₉、Ｍ＝867、〔α〕_D ²⁰＝＋14
0°（c0.02,CH₃OH）、MS（252CFPD）:m/z:890(M+Na)⁺ ６）Ｎ−（４−ヒドロキシベンジルオキシカルボニル）
ダウノルビシンβ−Ｄ−グルクトニド（22） 化合物21（2.7mg）をMeOH0.2mlに溶解し、その溶液を
３時間、室温にて酸化バリウムの存在下攪拌する。次い
で、媒体を、アンパーライトIR 50H⁺樹脂の添加により
中和し、濾過した後、減圧下濃縮する。1.8mgの純粋22
が、MeOH/Et₂O／ヘキサン混合液において、沈殿により
分離する。

C₄₁H₄₃NO₁₉.M＝853、［α］_D ²⁰＝＋２°（c 0.06、MeO
H）。

実施例4:N−〔２−（β−Ｄ−グルコピラノシル）−ウ
ロニックアシッド）ベンジルオキシカルボニル〕ダウノ
ルビシン（27c）の合成 反応式IVに基づき、ジー・エヌ・ボレンバックら（G.
N.BOLLENBACK ET AL.,）（J.Am.Chem.Soc.,1955,77,331
0）に記載されているメチル（２−メチルフェニル2,3,4
−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）ウ
ロネートから得られたメチル（２−ブロモメチルフェニ
ル2,3,4−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノ
シド）ウロネート23を生成物24（及び／又は生成物25）
に変換させ、さらに生成物24を生成物26に変換する。

この場合、アンスラサイクリンのアームに結合するた
めに、カーボネート26を商業的に入手しうる４−ニトロ
フェニルクロロホルマートにより製造する。

続いて、化合物27c（所望のプロドラッグ）を、実施
例１、２及び３に記載されたように得る。

１）メチル（２−ブロモメチルフェニル2,3,4−トリ−
Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド）ウロネート
（23） 製造； 25mlのCCl₄中、メチル（２−メチルフェニル2,3,4−
トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）ウロ
ネート（940mg、2.2mmol）（参照：ジー・エヌ・ボレン
バック（G.N.BOLLENBACK）J.Am.Chem.Soc.,77,3310−33
15,1955）、NBS（509mg、2.86mmol）及び52mgの過酸化
ベンゾイルの溶液を12時間還流する。通常の抽出及びシ
リカのカラムにおける精製の後、880mgの23を分離する
（80％）。

−化合物23:C₂₀H₂₃BrO₁₀.M＝503.¹H NMR（200MHz,CDC
l₃）：δppm:2.05,（s,3H）,2.07（s,3H）,2.11（s,3
H）,3.74（s,3H）,4.19（d,1H,J＝9Hz）,4.35and4.65
（2d,CH₂,J＝12Hz）,5.23（m,1H）,5.38（m,3H）,7.05
（m,2H）,7.32（m,2H）． ２）メチル（２−ヒドロキシメチルフェニル2,3,4−ト
リ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド）ウロネ
ート（24）及びメチル（２−ホルミルフェニル2,3,4−
トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド）ウロ
ネート（25） 製造； 14mlのアセトン／水（50/50）溶液における臭素化され
た誘導体23（690、1.37mmol）の溶液を２時間、631mg
（3.7mmol）のAgNO₃の存在下攪拌する。濾過及び通常の
抽出の後、80mgのアルデヒド25（13％）及び340mgのア
ルコール24（56％）をシリカゲルクロマトグラフィーに
より分離する。

24の特性：C₂₀H₂₄O₁₁.M＝440 M.p.＝143−147℃．［α］_D ²⁰＝−26°（c0.9,CHCl₃）.
NMR（200MHz,CDCl₃）:2.05（s,3H）,2.07（s,3H）,2.11
（s,3H）,3.72（s,3H）,4.13（d,J＝9Hz,H−５）,4.48a
nd4.77（2d,J＝12.5Hz,2H）,5.15（d,J＝7.2Hz,1H）,5.
35（m,3H）,7.02（d,J＝8Hz,1H）,7.11（t,J＝7.2Hz,1
H）,7.29（d,J＝6.8Hz,1H）,7.34（t,J＝7,4Hz,1H）pp
m.IR（CH₂Cl₂）:3540,3030,2960,1760,1605,1590,1490,
1455,1440,1375,1225,1140,1090,1075,1040cm^-1.SM（FA
B⁺）m/z:463(M+Na)⁺． −化合物25:C₂₀H₂₂O₁₁.M＝438.¹H NMR（200MHz,CDC
l₃）：δppm:2.08（s,9H）,3.75（s,3H）,4.25（d,1H,J
＝9Hz）,5.34（m,4H）,7.15（t,1H,J＝8.6Hz）,7.25
（d,1H,J＝7.3Hz）,7.58（t,1H,J＝7Hz）,7.26（d,1H,J
＝7.6Hz）,10.34（s,1H）． ３）４−ニトロフェニル ２−（メチル（2,3,4−トリ
−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）ウロネー
ト）ベンジルカーボネート（26） 製造； 0.0121mlのピリジン及び0.2mlのエチルアセテートに
おける24（33mg、0.075mmol）の溶液を12時間、室温に
て46mg（0.22mmol）のパラニトロフェニルクロロホルマ
ートの存在下、攪拌する。濾過及び溶媒の蒸発後、シリ
カプレートにおける精製で45mg（定量的収量）の26を得
る。

−化合物26:C₂₇H₂₇NO₁₅.M＝605.M.p.＝67−70℃．
［α］_D ²⁰＝＋２°（c1,CDCl₃）．¹H NMR（200MHz,CHCl
₃）：δppm:2.07（s,9H）,3.74（s,3H）,4.24（broadd,
J＝8.5Hz,H−５）,5.3（m,6H）,7.10（m,2H）,7.39（m,
4H）,8.27（d,J＝9Hz,2H）． ４）Ｎ−〔２−（メチル（2,3,4−トリ−Ｏ−アセチル
−β−Ｄ−グルコピラノシル）ウロネート）ベンジルカ
ルボニル〕ダウノルビシン（27a） 製造； 0.1mlのDMF中、ダウノルビシン（15.8mg,0.03mmo
l）、グリコシド26（1.1当量、19.8mg）及びEt₃N（3.6m
g、1.2当量）の溶液を12時間攪拌する。通常の抽出後、
シリカプレートにおける精製で20mg（67％）の27を得
る。

化合物27a:C₄₈H₅₁NO₂₂ Ｍ＝993,M.p.＝153−155℃．［α］_D ²⁰＝＋122°（c0.
4,CHCl₃）．¹H NMR（200MHz,CDCl₃）：δppm:1.31（d,3
H,J＝6.4Hz）,2.06（s,6H）,2.09（s,3H）,2.42（s,3
H）,2.91and3.24（2d,J＝19Hz,2H）,3.60（s,3H）,4.08
（s,3H）,4.20（m,2H）,5.00−5.32（m,8H）,7.05（m,2
H）,7.26（m,2H）,7.38（d,J＝7.4Hz,1H）,7.77（t,J＝
7.4Hz,1H）,8.03（d,J＝7.4Hz,1H）,13.24（s,1H）,12.
57（s,1H）.MS:[M+K]⁺＝1032. ５）Ｎ−〔２−（メチル（β−Ｄ−グルコピラノシル）
ウロネート）ベンジルオキシカルボニル〕ダウノルビシ
ン（27b） 製造； MeONa/MeOH（参照:7及び14の製造、実施例１及び２）
での27aの処理による。赤色固体。

C₄₂H₄₅O₁₉N、Ｍ＝867。

６）Ｎ−〔２−（β−Ｄ−グルコピラノシル）ウロニッ
クアシッド）ベンジルオキシカルボニル〕ダウノルビシ
ン（27c） 製造； BaO又はK₂CO₃（参照：実施例３での22の製造）との27
bの処理による。赤色固体。

C₄₁H₄₃NO₁₉、Ｍ＝853。

実施例5:N−〔２−ヒドロキシベンジルオキシカルボニ
ル〕ダウノルビシン（32）の合成 反応式Ｖに基づいて、誘導体32は、誘導体28（２−te
rt−ブチルジメチルシリルオキシベンズアルデヒド）を
NaBH₄の存在下、還元して化合物29を得、これを４−ニ
トロフェニルクロロフォルマートで活性化して化合物30
を得、次いでこれをKFとともにダウノルビシンで濃縮す
ることによって合成するか、あるいはα−ガラクトシダ
ーゼで生成物14（実施例２参照）を酵素加水分解するこ
とによって得られる。

１）Ｎ−〔２−ヒドロキシベンジルオキシカルボニル〕
ダウノルビシン（32） ａ）14の酵素加水分解： 化合物14（1mg）を0.02mlのDMFに溶解する。次いで、
蒸留水における1mlの100mMヘペス溶液を添加する。α−
ガラクトシダーゼ（2U,EC3.2.1.22,シグマ、ｎ°Ｇ−85
07）の添加の後、反応混合液を２時間、35℃にて攪拌す
る。加水分解及び抽出の後、定量的収量で化合物32を得
る。

ｂ）31の加水分解： シリル化された誘導体31（2mg、0.0025mmol）をTHF
（0.1ml）に溶解する。次いで、0.2mlのKH（0.1g/ml含
有）水溶液を添加する。室温での12時間後、通常の抽出
で32を得る。

32の特性：C₃₅H₃₅NO₁₃、Ｍ＝677。¹ H NMR（200MHz,CDCl₃）：δppm:1.26（d,J＝6Hz,3H）,
2.42（s,3H）,2.89（d,J＝20Hz,1H）,3.24（d,J＝20Hz,
1H）,3.61（s,1H）,4.07（s,3H）,4.43（s,1H）,5.00
（s,2H）,5.28（broad s,1H）,5.47（d,J＝2Hz,1H）,6.
7−7.3（m,4H）,7.40（d,J＝8Hz,1H）,7.80（t,J＝8Hz,
1H）,8.00（d,J＝8Hz,1H）,8.78（s,1H）,13.27（s,1
H）,13.96（s,1H）． 生成物32は糖とともに有効に縮合し、生成物27a、27b
又は27cを得ることができる。

２）２−tert−ブチルジメチルシリルオキシベンズアル
デヒド（28） 製造； DMFにおける２−ヒドロキシベンズアルデヒド（500m
g、0.44ml、4.09mmol）、イミダゾール（685mg）及びte
rt−ブチルジメチルシリルクロライド（680mg）の溶液
を24時間、室温にて攪拌する。加水分解及び通常の抽出
の後、クロマトグラフィーで28（890mg、93％）を得
る。

−化合物28:C₁₃H₂₀O₂Si.M＝236.¹H NMR（200MHz,CDC
l₃）：δppm:0.28（s,6H）,1.00（s,9H）,0.91（d,J＝8
Hz,1H）,7.02（t,J＝8Hz,1H）,7.46（t,J＝8Hz,1H）,7.
81（d,J＝8Hz,1H）,10.47（s,1H）． ３）２−tert−ブチルジメチルシリルオキシベンジル
アルコール（29） 製造； NaBH₄（28mg）を含有するメタノール（5.5ml）におけ
る28（200mg）の溶液を１時間、室温にて攪拌する。加
水分解及び通常の抽出の後、29（140mg、68％）を得
る。

−化合物29:C₁₃H₂₂O₂Si.M＝238.¹H NMR（200MHz,CDC
l₃）：δppm:0.30（s,6H）,1.06（s,9H）,2.67（s,1
H）,4.70（s,2H）,6.86（d,J＝8Hz,1H）,6.97（t,J＝8H
z,1H）,7.20（t,J＝8Hz,1H）,7.33（d,J＝8Hz,1H）． ４）Ｎ−ニトロフェニル ２−（tert−ブチルジメチル
シリルオキシ）ベンジルカーボネート（30） 製造； アルコール29（135mg、0.56mmol）を酢酸エチル（0.8
2ml）に溶解する。次いで、ピリジン（0.081ml）を添加
した後、４−ニトロフェニルクロロホルマート（275m
l、2.4当量）を加える。室温での一晩後、溶媒を蒸発さ
せる。シリカゲルクロマトグラフィーでカーボネート30
（206mg,91％）を得る。

30の特性：C₂₀H₂₅NO₆Si、Ｍ＝403。¹ H NMR（200MHz,CDCl₃）：δppm:0.27（s,6H）,1.03
（s,9H）,5.32（s,2H）,6.86（d,J＝8Hz,1H）,6.95（t,
J＝8Hz,1H）,7.1−7.5（m,4H）,8.21（d,J＝8Hz,2H）． ５）Ｎ−〔２−（tert−ブチルジメチルシリルオキシ）
ベンジルオキシカルボニル〕−ダウノルビシン（31） 製造； DMF（0.1ml）中、30（8.3mg、0.022mmol）、ダウノル
ビシン（9.6mg、0.018mmol）及びトリエチルアミン（0.
003ml）の溶液を４時間、室温にて攪拌する。通常の抽
出の後、クロマトグラフィで31（6mg,41％）及び32（4.
5mg、36％）を分離することができる。

−化合物31:C₄₁H₄₉NO₁₃Si.M＝791.¹H NMR（200MHz,CDCl
₃）：δppm:0.20（s,6H）,0.96（s,9H）,1.30（d,J＝6H
z,1H）,2.42（s,3H）,2.9（m,2H）,3.24（d,J＝20Hz,1
H）,3.65（broad s,1H）,3.90（broad s,1H）,4.09（s,
3H）,4.48（s,1H）,5.06（s,2H）,5.28（s,1H）,5.52
（d,J＝2Hz,1H）,6.8−7.0（m,4H）,7.42（d,J＝8Hz,1
H）,7.80（t,J＝8Hz,1H）,8.03（d,J＝8Hz,1H）,13.31
（s,1H）,14.0（s,1H）． 実施例6:N−〔４−（β−Ｄ−グルコピラノシル）ベン
ジルオキシカルボニル〕ダウノルビシン（37）の合成 反応式VIに基づき、相輸送触媒を用いてパーアセチル
−α−Ｄ−グルコースをｐ−ヒドロキシベンズアルデヒ
ドと縮合し、上記の実施例１、２、３、４又は５によっ
て、グリコシド33を化合物37に変換する。

１）４−ホルミルフェニル2,3,4,6−テトラ−Ｏ−アセ
チル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（33） 製造； 2,3,4,6−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ブロモグ
ルコース（2g,4.8mmol）を20mlのクロロホルムに溶解す
る。あらかじめ1.25N水酸化ナトリウム（10ml）溶液に
溶解した、ｐ−ヒドロキシベンズアルデヒド（585mg、
4.8mmol）及びベンジルトリエチルアンモニウム ブロ
マイド（1.1g）を上記溶液に添加し、反応媒体を24時間
還流する。抽出を50mlの水で行う。得られた有機相を1N
のNaOH溶液（２×50ml）、HCl溶液（1N）次いで水で洗
浄し、乾燥し、乾燥状態に濃縮する。次いで、粗生成物
をエタノールから再結晶し、33（0.5g,23％）を得る。

化合物33: −化合物33:C₂₁H₂₄O₁₁.M＝452.M.p.＝150−152℃．
［α］_D ²⁰＝−28°（c0.5,CHCl₃）.IR（CDCl₃）:1757cm
^-1（Ｃ＝O,ester）,1698cm^-1（Ｃ＝O,aldehyde）．¹H N
MR（90MHz,CDCl₃）：δppm:2.09（s,12H）,3.99（m,1
H）,4.22（AB,1H）,4.33（AB,1H）,5.13−5.48（m,4
H）,7.15and7.89（AB,4H,J＝12Hz）,9.96（s,1H）.MS
（DIC）:m/z:470(M+NH₄)⁺． ２）４−ヒドロキシメチルフェニル2,3,4,6−テトラ−
Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラノシド（34） 製造； これは、10から11を製造する方法（実施例２参照）に
より33から得、エタノールから再結晶する（収率:92
％）。

−化合物34:C₂₁H₂₆O₁₁.M＝454.M.p.＝102−103℃．
［α］_D ²⁰＝−18°（c0.5,CHCl₃）.IR（CDCl₃）:1757cm
^-1（Ｃ＝O,ester）．¹H NMR（200MHz,CDCl₃）：δppm:
1.98−2.03（4s,12H,4OAc）,3.75−3.84（m,1H,H−
５）,4.11（AB,J_gem＝6Hz,H−6a）,4.57（s,1H,OH）,4.
99−5.25（m,4H,H−1,H−2,H−3 and H−４）,6.92 and
7.24（AB,J_gem＝8Hz,4H,Ph）.MS（DIC）:m/z:472(M+NH
₄)⁺． ３）2,5−ジオキソピロリジン−１−イル ４−（2,3,
4,6−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシ
ル）ベンジルカーボネート（35） 製造； 方法A:サクシニジルクロロホルマート（参照:5の製造、
実施例１）での化合物34（617mg、1.36mmol）の活性化
による。純粋生成物35（780mg、95％）を得る。

方法B:DSC（参照:19の製造、実施例３）（収率:840）で
の化合物34の活性化による。

−化合物35:C₂₆H₂₉O₁₅N.M＝595.M.p.＝164℃．［α］_D
²⁰＝−18°（c0.09,CHCl₃）.IR（KBr）:1791cm^-1（Ｃ＝
Ｏ）．¹H NMR（200MHz,CDCl₃）：δppm:2.02（4s,12
H）,2.77（s,4H）,3.81（m,1H）,4.14（AB,J＝12Hz,1
H）,4.24（AB,J＝5Hz,1H）,5.02−5.31（m,6H）,6.95−
7.31（AB,J＝12Hz,4H）.MS（DIC/NH₃）:m/z:613(M+NH₄)
⁺． ４）Ｎ−〔４−（2,3,4,6−テトラ−Ｏ−アセチル−β
−Ｄ−グルコピラノシル）−ベンジルオキシバルボニ
ル〕ダウノルビシン（36） 製造； ダウノルビシン（20mg、0.04mmol）（参照:6及び13の
製造；、実施例１及び２）での化合物35（26mg、0.04mm
ol）の縮合による。純粋誘導体36（25mg、90％）を赤色
ラック状で分離する。

−化合物36:C₄₉H₅₃O₂₂N.M＝1007.［α］_D ²⁰＝135°（c
0.04,CHCl₃）.IR（CDCl₃）:3435cm^-1（OH）,1758cm
^-1（Ｃ＝Ｏ）．¹H NMR（400MHz,CDCl₃）：δppm:1.29
（d,3H,J＝5Hz）,1.79（AB,1H,J＝3.5Hz）,1.91（AB,1
H,J_gem＝14Hz）,2.07（4s,12H）,2.15（AB,1H,J＝3.5H
z）,2.35（AB,1H,J＝18Hz）,2.50（s,3H）,2.95（AB,1
H,J＝18Hz）,3.25（AB,1H,J＝18Hz）,3.70（m,1H）,3,8
4−3.90（m,1H）,3.92（1H,OH）,4.11（s,3H,OMe）,4.1
7（AB,1H,J＝2Hz）,4.24（m,1H）,4.30（AB,1H,J＝12H
z）,5.00（s,2H）,5.08（d,1H,J＝7Hz）,5.14（d,1H,J
＝8.5Hz）,5.17（t,1H,J＝Ｊ′＝10Hz）,5.24−5.34
（m,3H）,5.23（dd,1H,H−１′,J＜0.5Hz,J′＝3.5H
z）,6.96 and 7.28（AB,4H）,7.42（d,1H,J＝8Hz）,7.8
2（t,J＝Ｊ′＝8Hz）,8.07（d,1H,J＝8Hz）,13.25（s,1
H）,14.00（s,1H）.MS（DIC/NH₃）:m/z:1026(M+NH₄)⁺． ５）Ｎ−〔４−（β−Ｄ−グルコピラノシル）ベンジル
オキシカルボニル〕ダウノルビシン（37） 製造； MeONa（触媒）/MeOHと化合物36（91％）との反応によ
り、37を赤色シロップ状で得る。

C₄₁H₄₅O₁₈N.M＝839.［α］_D ²⁰＝＋200°（c0.001,CH₃O
H）.IR（KBr）:3422cm^-1（OH）,1617cm^-1（Ｃ＝Ｏ）.MS
（FAB）:m/z:838(M+1)⁺． 実施例7:N−〔４−ヒドロキシベンジルオキシカルボニ
ル〕ダウノルビシン（38）の製造； 反応式VIIに従って、誘導体38を合成するか又は実施
例５（誘導体32）による酵素加水分解により製造する。

１）Ｎ−〔４−ヒドロキシルベンジルオキシカルボニ
ル〕ダウノルビシン（38） 化合物37（3mg、3.68μmol）をpH5.5の酢酸ナトリウ
ムの緩衝液（0.46ml）に溶解し、酵素〔20μｌ、5Uのβ
−Ｄ−グルコシダーゼ（400μｌの水における20mgのβ
−Ｄ−グルコシダーゼ）と80μｌのエタノール〕の懸濁
液を15分間にわたって37℃で添加する。酵素反応を終了
させる。混合液を濾過し、溶媒を蒸発させ、次いで、残
留物をCH₂Cl₂／CH₃OH（9:1v/v）混合液によるシリカゲ
ルでのクロマトグラフィに付す。純粋誘導体38（1.5m
g、60％）を赤色シロップ液状で分離する。

C₃₅H₃₅O₁₃N、Ｍ＝676。

化合物38は、他の糖（例えば、グルクロン酸誘導体）
で有利に濃縮し、生成物20、21又は22を得ることができ
る。

２）４−ジメチル−ｔ−ヘキシルシリルオキシベンジル
アルコール（39） イミダゾール2.8g（41.2mmol）を25mlの無水DMFにお
ける４−ヒドロキシベンジルアルコール（2.55g、20.6m
mol）溶液に添加する。混合液を室温にて透明溶液が得
られるまで攪拌し、次いでアルゴン下、０℃に冷却す
る。次いで、4.4ml（22.6mmol）のｔ−ヘキシルジメチ
ルシリルクロリドを添加する。48時間、０℃にて攪拌し
たのち、有機相を水で洗浄し、Na₂SO₄で乾燥し、減圧下
蒸発させて、ゴム状の39（3.7g,68％）を得る。

C₁₅H₂₆O₂Si.M＝266.44.IR（CDCl₃）:3304cm^-1（OH）,29
60cm^-1（CH）．¹H NMR（90MHz,CDCl₃）：δppm:0.00
（s,6H,CH₃Si）,0.83（d,6H,CH₃CCSi,J＝5Hz）,0.83
（d,6H,CH₃CSi）,1.50（m,1H,CHCSi）,4.50（s,2H,CH₂P
h）,6.67−7.03（AB,J_gem＝6Hz,4H,Ph）.MS（DIC）:m/
z:284(M+NH₄)⁺． ３）2,5−ジオキソピロリジン−１−イル ４−ジメチ
ル−ｔ−ヘキシルシリルオキシベンジルカーボネート
（40） 1.85g（10mmol）の化合物35及び0.8mlピリジンを無水
酢酸エチル（50ml）におけるDSC（1.39g,5mmol）溶液に
添加する。24時間、室温にて攪拌したのち、混合液を濾
過し、ろ液を減圧下濃縮し、ゴム状の40を得る（1.84g,
91％）。

C₂₀H₂₉O₆SiN.M＝407.52.IR（CDCl₃）:2961cm^-1（CH）,1
296cm^-1（CO）．¹H NMR（90MHz,CDCl₃）：δppm:0.00
（s,6H,CH₃Si）,0.80（d,6H,CH₃CCSi,J＝5Hz）,0.80
（s,6H,CH₃CSi）,1.50（m,1H,CHCSi）,2.73（s,4H,CH₂C
O）,4.57（s,2H,CH₂Ph）,7.16（AB,4H,Ph,J_gem＝6Hz）.
MS（DIC）:m/z:425(M+NH₄)⁺． ４）Ｎ−〔４−（ジメチル−ｔ−ヘキシルシリルオキ
シ）ベンジルオキシカルボニル〕ダウノルビシン（41） トリエチルアミン76μｌ（0.73mmol）を、0.4mlの無
水DMFに溶解した40（29mg、0.073mmol）及びダウノルビ
シン（20mg、0.043mmol）の混合物に添加し、５分間、
室温にて攪拌したのち、酢酸エチルで抽出する。得られ
た溶液を塩化ナトリウムの飽和溶液で洗浄し、次いで、
Na₂SO₄で乾燥し、減圧下濃縮する。41（24mg、70％）が
赤色シロップ状で分離する。

C₄₃H₅₂SiN.M＝819.［α］_D ²⁰＝＋53°（c0.03,CHCl₃）.
IR（CDCl₃）:3597−3439cm^-1（OH）,2960cm^-1（CH）,17
62cm^-1（CO）．¹H NMR（250MHz,CDCl₃）：δppm:0.00
（m,6H,CH₃Si）,0.82（d,6H,J＝5Hz）,0.82（s,6H）,1.
27（d,3H,J＝6Hz）,1.62（m,3H）,2.36（s,3H）,2.89 a
nd 3.20（AB,2H,J＝6Hz）,3.93（s,1H）,4.04（s,3H）,
4.20（m,1H）,4.40（m,1H）,4.62（s,2H）,5.52（s,1
H）,5.33（d,1H,J＝3Hz）,5.49（dd,1H,J＝2,J′＜0.5H
z）,6.95 and 7.19（AB,4H,J＝3Hz）,7.34（d,1h,J＝9H
z）,7.78（t,1H,J＝Ｊ′＝9Hz）,8.00（d,1H,J＝9Hz）.
MS（DIC）:m/z:837(M+NH₄)⁺． 実施例8:N−〔２−（α−Ｄ−ガラクトピラノシル）−
５−ニトロベンジルオキシカルボニル〕ダウノルビシン
（48b）及びＮ−〔２−（α−Ｄ−ガラクトピラノシ
ル）−５−ニトロベンジルオキシカルボニル〕ドキソル
ビシン（49b）の合成 反応式VIIIに基づいて、５−ニトロ−Ｏ−クレゾール
をパーアセチル−Ｄ−ガラクトースで、SnCl₄−触媒下
でのグリコシド化で誘導体42を得る。

NBSのCCl₄溶液を用いるベンジルブロム化で43及び44
の混合物を得る。

二臭素化誘導体44の加水分解でアルデヒド45が得ら
れ、それはNaBH₄で誘導体46に還元することができる。
よって、誘導体43の加水分解で45及び46の混合物が得ら
れる。４−ニトロフェニルホルマートを誘導体46を活性
化するために用い、47とダウノルビシン及びドキソルビ
シンとのカップリングで、誘導体48a及び49aがそれぞれ
得られる。

１）２−メチル−４−ニトロフェニル2,3,4,6−テトラ
−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド（42） SnCl₄（0.6ml）を２−メチル−４−ニトロフェノール
〔参照：ジェー・エス・アンダーソン及びケー・シー・
ブラウン（J.S.ANDERSON AND K.C.BROWN）,Synthetic C
ommun.,13,233−236,1983）〕及び1,2,3,4,6−ペンタ−
Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトース（1g,2.56mmol）
の溶液にゆっくり添加し、室温で保持する。次いで、反
応混合液を窒素下、12時間、60℃にて攪拌する。氷水中
での加水分解の後、CH₂Cl₂で抽出し、続いて、炭酸水素
ナトリウム、次いで水で洗浄し、42を得、次いで、シリ
カゲルクロマトグラフィーにより精製する（収率:45
％）。

C₂₁H₂₅NO₁₂.M＝483.M.p.＝166℃．［α］_D ²⁰＝＋184°
（c0.56,CHCl₃）.IR（CDCl₃）:3030,2960,2925,2860,17
45,1580,1520,1490,1370,1345,1220cm^-1．¹H NMR（200M
Hz,CDCl₃）：δppm:1.96（s,3H）,2.05（s,3H）,2.09
（s,3H）,2.19（s,3H）,2.36（s,3H）,4.13（m,2H）,4.
28（m,1H）,5.85（d,J＝4Hz,1H）,7.21（d,J＝9Hz,1
H）,8.10（s,1H and d,J＝9Hz,1H）． ２）２−ブロモメチル−４−ニトロフェニル2,3,4,6−
テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド
（43） 製造； NBS（1.5当量）／CCl₄を用い42から（参照：化合物２
及び９の製造、実施例１）、収率:51％。

−化合物43:C₂₁H₂₄BrNO₁₂.M＝562.¹H NMR（200MHz,CDCl
₃）：δppm:1.96（s,3H）,2.06（s,3H）,2.12（s,3H）,
2.20（s,3H）,4.13（m,2H）,4.32（t,J＝6Hz,1H）,4.59
（ABq,J＝9Hz,2H）,5.38（dd,J＝12 and 4Hz,1H）,5.5
−5.8（m,2H）,5.99（d,J＝4Hz,1H）,7.28（d,J＝9HZ,1
H）,8.20（d,J＝9Hz,1H）,8.29（s,1H）． ３）２−ジブロモメチル−４−ニトロフェニル2,3,4,6
−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド
（44） 製造； ａ）NBS（1.5当量）／CCl₄を用い42から（収率:27
％）。

ｂ）NBS（４当量）／CCl₄を用い42から（収率:60−90
％）。

−化合物44:C₂₁H₂₃Br₂NO₁₂.M＝641.M.p＝70℃．［α］_D
²⁰＝＋143°（c0.47,CHCl₃）.IR（CHCl₃）:3030,3020,2
960,2930,2860,1745,1620,1590,1525,1480,1425,1370,1
345,1220,1130,1110,1075,1040cm^-1．¹H NMR（200MHz,C
DCl₃）：δppm:1.97（s,3H）,2.06（s,3H）,2.13（s,3
H）,2.20（s,3H）,4.13（m,2H）,4.31（t,J＝6Hz,1H）,
5.3−5.7（m,3H）,5.93（d,J＝14Hz,1H）,7.01（s,1
H）,7.29（d,J＝9Hz,1H）,8.20（d,J＝9Hz）,8.75（s,1
H）． ４）２−ホルミル−４−ニトロフェニル2,3,4,6−テト
ラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド（45） 製造； ａ）AgNO₃を用い43から（収率:15％）。

ｂ）AgNO₃を用い44から（収率:83％）。

−化合物45:C₂₁H₂₃NO₁₃.M＝497.M.p＝180℃．［α］_D ²⁰
＝＋97°（c2,CHCl₃）.IR（CHCl₃）:3030,2960,2930,28
80,2860,1745,1695,1645,1610,1590,1530,1480,1430,13
70,1345,1220,1180,1125,1110,1075,1045cm^-1．¹H NMR
（200MHz,CDCl₃）：δppm:1.98（s,3H）,2.05（s,3H）,
2.08（s,3H）,2.20（s,3H）,4.13（m,2H）,4.35（t,J＝
6Hz,1H）,5.3−5.6（m,3H）,5.99（d,J＝4H,1H）,7.46
（d,J＝9Hz,1H）,8.41（dd,J＝9 and 2Hz,1H）,10.52
（s,1H）． ５）２−ヒドロキシメチル−４−ニトロフェニル2,3,4,
6−テトラ−Ｏ−アセチル−α−ガラクトピラノシド（4
6） 製造； ａ）AgNO₃を用い43から（収率:19％）（参照:11及び18
の製造；）。

ｂ）NaBH₄/THF/MeOHを用い45から（収率:73％）。

−化合物46:C₂₁H₂₅NO₁₃.M＝499.M.p.＝140℃．［α］_D
²⁰＝＋152°（c0.42,CDCl₃）.IR（CDCl₃）:3700,3600,3
030,2970,2940,2860,1750,1630,1625,1595,1585,1370,1
350,1210,1130,1110,1075,1035cm^-1.NMR（200MHz,CHC
l₃）：δppm:1.97（s,3H）,2.05（s,3H）,2.10（s,3
H）,2.19（s,3H）,4.12（m,3H）,4.33（t,J＝6Hz,1H）,
4.71（d,J＝14H,1H）,4.89（d,J＝14Hz,1H）,5.35−5.6
（m,3H）,5.87（d,J＝2Hz,1H）,7.28（d,J＝9Hz,1H）,
8.19（dd,J＝9 and 2Hz,1H）,8.32（d,J＝2Hz,1H）． ６）４−ニトロフェニル２−（2,3,4,6−テトラ−Ｏ−
アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシル）−５−ニトロ
ベンジルカーボナート（47） 製造； 46及びｐ−ニトロフェニルクロロフォルマートから
（収率:52％）。

−化合物47:C₂₈H₂₈N₂O₁₇.M＝664.¹H NMR（200MHz,CDC
l₃）：δppm:1.93（s,3H）,2.04（s,3H）,2.09（s,3
H）,2.19（s,3H）,4.12（m,2H）,4.30（t,J＝6Hz,1H）,
5.3−5.6（m.5H）,5.93（d,J＝4Hz,1H）,7.34（d,J＝9H
z,1H）,7.44（d,J＝9Hz,1H）,8.2−8.4（m,4H）． ７）Ｎ−〔２−（2,3,4,6−テトラ−Ｏ−アセチル−α
−Ｄ−ガラクトピラノシル）−５−ニトロベンジルオキ
シカルボニル〕ダウノルビシン（48a） 製造； 47及びダウノルビシン（参照:6の製造、実施例１）か
ら、収率31％。

−化合物48:C₄₉H₅₂N₂O₂₄.M＝1052.¹H NMR（200MHz,CDCl
₃）：δppm:1.86（s,3H）,2.02（s,3H）,2.08（s,3H）,
2.14（s,3H）,2.39（s,3H）,2.94（d,J＝20Hz,1H）,3.2
3（d,J＝20Hz,1H）,3.60（s,1H）,4.08（s,3H）,5.02
（d,J＝12Hz,1H）,5.21（d,J＝12Hz,1H）,5.3−5.8（m,
H）,5.93（d,J＝4Hz,1H）,7.18（d.J＝9Hz,1H）,7.40
（d,J＝8Hz,1H）,7.80（t,J＝8Hz,1H）,8.02（d,J＝8H
z,1H）,8.17（dd,J＝9 and 2Hz,1H）,8.26（broad s,1
H）,13.30（s,1H）and 13.99（s,1H）． ８）Ｎ−〔２−（α−Ｄ−ガラクトピラノシル）−５−
ニトロベンジルオキシカルボニル〕ダウノルビシン（48
b） 製造； MeONa（触媒）/MeOHを用いて48aから（収率:83％）。

化合物48b:アモルファス、C₄₁H₄₄N₂O₂₀、Ｍ＝884、M.P.
＝140℃（分解）。

９）Ｎ−〔２−（2,3,4,6−テトラ−Ｏ−アセチル−α
−Ｄ−ガラクトピラノシル）−５−ニトロベンジルオキ
シカルボニル〕ドキソルビシン（49a） 製造； 47及びドキソルビシンから。収率:13％。

−化合物49a:C₄₉H₅₂N₂O₂₅.M＝1068.¹H NMR（200MHz,CDC
l₃）：δppm:1.86（s,3H）,2.01（s,3H）,2.09（s,3
H）,2.13（s,3H）,2.99（s,1H）,3.03（d,J＝20Hz,1
H）,3.29（d,J＝20Hz,1H）,4.10（s,3H）,4.59（s,1
H）,4.74（s,1H）,5.07（d,J＝12Hz,1H）,5.22（d,J＝1
2Hz,1H）,5.3−5.8（m.H）,5.95（d,J＝4Hz,1H）,7.17
（d,J＝9Hz,1H）,7.40（d,J＝8Hz,1H）,7.80（t,J＝8H
z,1H）,8.03（d,J＝8Hz,1H）,8.18（dd,J＝9 and 2Hz,1
H）,8.27（broad s,1H）,13.28（s,1H）,14.0（s,1
H）． 10）Ｎ−〔２−（α−Ｄ−ガラクトピラノシル）−５−
ニトロベンジルオキシカルボニル〕ドキソルビシン（49
b） 49aをMeONa/MeOHと処理することによる（参照:7及び1
4の製造、実施例１及び２）。赤色固体。C₄₁H₄₄N₂O₂₁、
Ｍ＝900。

実施例9:N−〔２−（（β−Ｄ−ガラクトピラノシル）
−ウロニックアシッド）−５−ニトロベンジルオキシカ
ルボニル〕ダウノルビシン（54c）の合成 反応式IXに基づいて、メチル（パーアセチル−β−Ｄ
−ガラクトピラノシル）ウロネートブロミドを、Ag₂Oの
存在下、室温にて２−ヒドロキシ−５−ニトロベンズア
ルデヒドで縮合する。グリコシド51（収率:46％）を誘
導体52（NaBH₄/THF/MeOH、収率:70％）及び活性化され
た誘導体52、つまり53（収率:73％）に変換し、ダウノ
ルビシンと反応させ、誘導体54aを得る（収率:62％）。

１）メチル（２−ホルミル−４−ニトロフェニル2,3,4
−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド）ウ
ロネート（51） 製造； 酸化銀（1.3g,5.6mmol）を含有する22mlのアセロニト
リル中、メチル（2,3,4−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ
−グルコピラノシル）ウロネートブロミド（1.45g,3.64
mmol）及び２−ヒドロキシ−５−ニトロベンズアルデヒ
ド（609mg、3.64mmol）の溶液を４時間、室温にて攪拌
する。反応媒質を濾過した後、ろ液を蒸発させ、フラッ
シュクロマトグラフィーで800mgの5lを得る（収率:46
％）。

−化合物51:C₂₀H₂₁NO₁₃.M＝483.M.p.＝173−174℃．
［α］_D ²⁰＝−52°（c1,CHCl₃）.IR（CH₂Cl₂）:3060,29
60,1755,1690,1590,1530cm^-1．¹H NMR（200MHz,CDC
l₃）：δppm:2.09（s,9H）,3.73（s,3H）,4.40（d,H−
5,J＝8.5Hz）,5.5（m,4H）,7.32（d,1H,J＝9.1Hz）,8.4
2（dd,1H,J＝9.1 and 3Hz）,8.67（d,1H,J＝3Hz）,10.3
1（s,1H） ２）メチル（２−ヒドロキシメチル−４−ニトロフェニ
ル2,3,4−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノ
シド）ウロネート（52） 製造； NaBH₄/THF/MeOHを用いて51から（収率:70％）。

−化合物52:C₂₀H₂₃NO₁₃.M＝485.M.p.＝137−145℃．
［α］_D ²⁰＝−34°（c0.7,CHCl₃）.IR（CH₂Cl₂）:3600,
3570,3060,2960,1755,1620,1590,1525,1485,1435,1370,
1340,1230,1075,1040,900cm^-1．¹H NMR（200MHz,CDC
l₃）：δppm:2.07（s,3H）,2.08（s,3H）,2.10（s,3
H）,2.95（OH）,3.72（s,3H）,4.30（d,H−5,J＝8.7H
z）,4.61 and 4.72（ABq,2H,J＝13.8Hz）,5.32（m,4
H）,7.08（d,1H,J＝9Hz）,8.12（dd,1H,J＝9 and J＝2.
7Hz）,8.27（d,1H,J＝2.7Hz）， SM（FAB⁺）m/z:508(M+Na)⁺ ３）４−ニトロフェニル ２−（メチル（2,3,4−トリ
−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）ウロネー
ト−５−ニトロベンジルカーボネート（53） 製造； 52及びパラニトロフェニルクロロホルマートから（収
率:73％）。

−化合物53:C₂₇H₂₆N₂O₁₆.M＝634.M.p.＝154−155℃．
［α］_D ²⁰＝−34.5°（c1,CHCl₃）.IR（CH₂Cl₂）:2960,
2880,1760,1620,1595,1525,1490,1370,1345,1230,1215,
1080,1040,860cm^-1．¹H NMR（200MHz,CDCl₃）：δppm:
2.08 and 2.09（2s,9H）,3.74（s,3H）,4.36（broad d,
1H,J＝8.7Hz）,5.36（m,6H）,7.23（d,1H,J＝9.1Hz）,
7.43（d,2H,J＝8.3Hz）,8.26（m,4H）． ４）Ｎ−〔２−（メチル（2,3,4−トリ−Ｏ−アセチル
−β−Ｄ−グルコピラノシル）ウロネート）−５−ニト
ロベンジルオキシカルボニル〕ダウノルビシン（54a） 製造； 53及びダウノルビシンから（収率:62％） −化合物54a:C₄₈H₅₀O₂₄N₂.M＝1038.M.p.＝142−145℃．
［α］_D ²⁰＝＋115°（c0.6,CHCl₃）.IR（CH₂Cl₂）:295
0,1755,1720,1710,1620,1580,1525,1345,1230,1210,111
0,1080,1035cm^-1．¹H NMR（200MHz,CDCl₃）：δppm:1.3
2（d,3H,J＝7.3Hz）,2.09 and 2.11（2s,9H）,2.43（s,
3H）,2.93 and 3.24（ABq,2H,J＝19Hz）,3.59（s,3H）,
4.30（m,2H）,4.51（s,1H）,4.96 and 5.11（ABq,2H,J
＝13Hz）,5.20 and 5.60（m,6H）,7.14（d,1H,J＝8.5H
z）,7.41（d,1H,J＝8Hz）,7.79（t,1H,J＝8Hz）,8.05
（d,1H,J＝8Hz）,8.21（2H）,12.15（s,1H）,12.91（s,
1H）． ５）Ｎ−〔２−（メチル（β−Ｄ−グルコピラノシル）
ウロネート）−５−ニトロベンジルオキシカルボニル〕
ダウノルビシン（54b） 製造； 54aとMeONa/MeOHとから（参照:7及び14の製造、実施
例１及び２）。赤色固体。C₄₂H₄₄N₂O₂₁、 Ｍ＝912.NMR（CD₃COCD₃）：δppm:2.37（s,3H）,3.70
（s,3H）,4.04（s,3H）,6.50（d,J＝7.5Hz,1H）,7.32
（d,J＝7.4Hz,1H）,7.60（d,J＝7.4Hz,1H）,7.89（m,2
H）,8.19（m,2H）,13.30（s,1H）,14.15（s,1H）． ６）Ｎ−〔２−（（β−Ｄ−グルコピラノシル）ウロニ
ックアシッド）−５−ニトロベンジルオキシカルボニ
ル〕ダウノルビシン（54c） 54b及びBaOから（参照：実施例３における22の製
造）。赤色固体。C₄₁H₄₂N₂O₂₁、Ｍ＝898。

実施例10:N−〔２−（（β−Ｄ−グルコピラノシル）ウ
ロニックアシッド）−５−ニトロベンジルオキシカルボ
ニル〕ドキソルビシン（83c）の合成 １）Ｎ−〔２−（メチル（2,3,4−トリ−Ｏ−アセチル
−β−Ｄ−グルコピラノシル）ウロネート）−５−ニト
ロ−ベンジルオキシ−カルボニル〕ドキソルビシン（83
a） 製造； 53及びドキソルビシンから（収率:65％） −化合物83a:C₄₈H₅₀N₂O₂₅.M＝1054;F＝162−167℃（de
c）；［α］_D ²⁰122°（c0.5,CHCl₃）;IR（CH₂Cl₂）:175
7,1720,1618,1580,1525,1410,1370,1344,1230cm^-1;NMR
（200MHz,CDCl₃）：δppm:1.30（d,3H,J＝7.3Hz）,2.06
et 2.08（2s,9H）,2.94 et 3.23（ABq,2H,J＝19Hz）,
3.60（s,3H）,4.06（s,3H）,4.28（d,1H,J＝9Hz）,5.03
（ABq,2H,J＝13Hz）,5.27−5.51（m,6H）,7.11（d,1H,J
＝8Hz）,7.99（d,1H,J＝8Hz）,8.15（m,2H）,12.62（s,
1H）,13.15（s,1H）． ２）Ｎ−〔２−（メチル（β−Ｄ−グルコピラノシル）
ウロネート）−５−ニトロ−ベンジルオキシ−カルボニ
ル〕ドキソルビシン（83b） 製造； 83aとMeONa/MeOHとから（参照:7及び14の製造、実施
例１及び２）。

−化合物83b:C₄₂H₄₄N₂O₂₂.M＝928;F＝180℃（dec.）；
［α］_D ²⁰０°（c0.5,CHCl₃）;NMR（200MHz,CD₃COC
D₃）：δppm:1.29（d,3H,J＝7.3Hz）,3.79（s,3H）,4.0
7（s,3H）,6.09（d,NH）,7.12（d,1H,J＝8.6Hz）,7.41
（d,1H,J＝8Hz）,7.79（t,1H,J＝8Hz）,8.00（d,1H,J＝
8Hz）,8.16（m,2H）,12.75（s,1H）,13.25（s,1H）． ３）Ｎ−〔２−（（β−Ｄ−グルコピラノシル）ウロニ
ックアシッド）−５−ニトロ−ベンジルオキシ−カルボ
ニル〕ドキソルビシン（83c） 製造； 83bとNaOH又はピグ・リバー（pig liver）エステラー
ゼとから（EC3.1.1.1.）。

化合物83c:赤色固体、C₄₁H₄₂N₂O₂₂、Ｍ＝914。

実施例11 １）２−クロロ−４−メチルフェニル2,3,4,6−テトラ
−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド（55） 製造； 2,3,4,6−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピ
ラノースと２−クロロ−４−メチルフェノール（参照:1
の製造；、収率＝40％） −化合物55:C₂₁H₂₅O₁₀Cl.M＝472.5.¹H NMR（270MHz,CDC
l₃）：δppm:2.02（s,3H）,2.06（s,3H）,2.14（s,3
H）,2.20（s,3H）,2.32（s,3H）,4.12（dd,1H,J＝12,
J′＝7Hz）,4.17（dd,1H,J＝12,J′＝6Hz）,4.54（ddd,
1H,J＝7,J′＝6,J″＝1Hz）,5.29（dd,1H,J＝10,J′＝4
Hz）,5.61（m,1H）,5.63（dd,1H,J＝10,J′＝4Hz）,5.7
6（d,1H,J＝4Hz）,7.02（dd,1H,J＝8,J′＝2Hz）,7.07
（d,1H,J＝8Hz）,7.23（d,1H,J＝2Hz）.MS（DIC/NH₃）:
m/z:490(M+NH₄)⁺,456,331. ２）２−クロロ−４−ブロモメチルフェニル 2,3,4,6
−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド
（56） 製造； 55の光化学活性化でのモノブロム（参照:2の製造、収
率＝80％）。

−化合物56:C₂₁H₂₄O₁₀ClBr.M＝551.5.¹H NMR（270MHz,C
DCl₃）：δppm:2.00（s,3H）,2.03（s,3H）,2.12（s,3
H）,2.18（s,3H）,4.09（dd,1H,J＝12,J′＝7Hz）,4.14
（dd,1H,J＝12,J′＝6Hz）,4.42（s,2H）,4.50（ddd,1
H,J＝7,J′＝6,J″＝1Hz）,5.27（dd,1H,J＝10,J′＝4H
z）,5.58（m,1H）,5.60（dd,1H,J＝10,J′＝4Hz）,5.80
（d,1H,J＝4Hz）,7.13（d,1H,J＝8Hz）,7.22（dd,1H,J
＝8,J′＝2Hz）,7.42（d,1H,J＝2Hz）.MS（DIC/NH₃）:m
/z:571(M+NH₄)⁺,569(M+NH₄)⁺,490,331. ３）２−クロロ−４−ヒドロキシメチルフェニル2,3,4,
6−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシ
ド（57） 製造； 56から（４の製造、収率＝34％）。

−化合物57:C₂₁H₂₅O₁₁Cl.M＝488.5.¹H NMR（270MHz,CDC
l₃）：δppm:1.98（s,3H）,2.04（s,3H）,2.10（s,3
H）,2.18（s,3H）,4.09（dd,1H,J＝12,J′＝7Hz）,4.14
（dd,1H,J＝12,J′＝6Hz）,4.49（ddd,1H,J＝7,J′＝6,
J″＝1Hz）,4.64（s,2H）,5.26（dd,1H,J＝10,J′＝4H
z）,5.58（m,1H）,5.60（dd,1H,J＝10,J′＝4Hz）,5.77
（d,1H,J＝4Hz）,7.15（d,1H,J＝8Hz）,7.20（dd,1H,J
＝8,J′＝2Hz）,7.42（d,1H,J＝2Hz）.MS（DIC/NH₃）:m
/z:506(M+NH₄)⁺,472,331. ４）2,5−ジオキソピロリジン−１−イル ３−クロロ
−４−（2,3,4,6−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガ
ラクトピラノシル）ベンジルカーボネート（58） 製造； 57及びジサクシニミジルカーボネート（DSC）（参照:
19の製造、実施例３）。

化合物58自身が不安定であるため、シリカのカラムに
おける精製及び分離をすることができないことに注意す
べきである。

化合物58:C₂₆H₂₈ClNO₁₅,M＝629.5。

５）Ｎ−〔３−クロロ−４−（2,3,4,6−テトタ−Ｏ−
アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシル）ベンジルオキ
シカルボニル〕ダウノルビシン（59） 製造； 58のダウノルビシンとのカップリング（参照:6の製
造、収率＝20％）。

−化合物59:C₄₉H₅₂ClNO₂₂.M＝1041.5.¹H NMR（270MHz、
DMSO）：δppm:1.12（d,3H,J＝7Hz）,1.48（m,1H）,1.8
8（m,2H）,1.98（s,3H）,2.02（s,3H）,2.04（s,3H）,
2.15（s,3H）,2.23（m,1H）,2.25（s,3H）,2.76（m,1
H）,2.96（m,1H）,3.50−4.20（m,5H）,4.00（s,3H）,
4.44（m,1H）,4.72（m,1H）,4.90（m,3H）,5.20（m,1
H）,5.32（m,1H）,5.43（m,2H）,5.53（s,1H）,5.85
（d,1H,J＝4Hz）,6.94（m,1H）,7.23（m,2H）,7.47（d,
1H,J＝2Hz）,7.66（m,1H）,7.92（m,2H）.MS（DIC/N
H₃）:m/z:1060(M+NH₄)⁺,506,331. ６）Ｎ−〔３−クロロ−４−（α−Ｄ−ガラクトピラノ
シル）ベンジルオキシカルボニル〕ダウノルビシン（6
0） 製造； 59から（参照:7の製造、収率＝91％）。

実施例12:N−〔３−ニトロ−４−（（β−Ｄ−グルコピ
ラノシル）ウロニックアシッド）ベンジルオキシカルボ
ニル〕ダウノルビシン（64c）の合成 １）メチル（４−ホルミル−２−ニトロフェニル2,3,4
−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド）ウ
ロネート（61） 製造； 51の製造；のために記載された条件下、メチル（2,3,
4−トリ−Ｏ−アセチル−Ｄ−グルコピラノシル）ウロ
ネートブロミド（5.3g）、３−ニトロ−ｐ−ヒドロキシ
ベンズアルデヒド（3.55g）及び酸化銀（15.45g）の溶
液から。フラッシュクロマトグラフィー及び結晶化の
後、5.35g（80％）の純品61を得る。

−化合物61:C₂₀H₂₁NO₁₃.M＝483.M.p.＝172−173℃．
［α］_D ²⁰＝＋10°（c1,CHCl₃）.IR（lac）:1760,1230c
m^-1．¹H NMR（250MHz、CDCl₃）：δppm:2.16（s,3H）,
2.12（s,3H）,2.07（s,3H）,3.71（s,3H,OMe）,4.33
（d,1H,J＝8.2Hz）,5.45−5.25（m,4H）,7.49（d,1H,J
＝7.5Hz）,8.08（dd,1H,J＝7.5,J′＝1.8Hz）,8.31（d
d,1H,J＝1.8Hz）,9.97（s,1H）.MS（DIC/NH₃）:m/z:501
(M+NH₄)⁺． ２）メチル（４−ヒドロキシメチル−２−ニトロフェニ
ル 2,3,4−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラ
ノシド）ウロネート（62） 製造； NaBH₄/THF/MeOHを用いて61から（収率:72％）。

−化合物62:C₂₀H₂₃NO₁₃.M＝485.M.p.＝173−174℃．
［α］_D ²⁰＝＋10°（c1,CHCl₃）．¹H NMR:δppm:2.08
（s,6H）,2.01（s,3H）,3.63（s,3H）,4.12（d,1H,J＝8
Hz）,4.62（s,2H）,5.35−5.02（m,4H）,7.21（d,1H,J
＝7Hz）,7.39（dd,1H,J＝7Hz,J′＝1.8Hz）,7.65（d,1
H,J＝1.8Hz）.MS（DIC/NH₃）:m/z:503(M+NH₄)⁺． ３）Ｎ−〔３−ニトロ−４−（メチル（2,3,4−トリ−
Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）ウロネー
ト）ベンジルオキシカルボニル〕ダウノルビシン（64
a） 製造； カーボネート63を、62とDSCから中間体として得る。
これは精製していないが、すぐに、54の製造のために記
載された条件下、ダウノルビシンと反応させる。

64aを収率50％で分離する。

−化合物64a:C₄₈H₅₀N₂O₂₄.M＝1038.M.p.＝137−138℃．
［α］_D ²⁰＝＋88°（c0.5,chloroform）.IR（CDCl₃）:1
760,1720,1220cm^-1．¹H NMR:δppm:1.30（d,3H,J＝6H
z）,1.75（m,2H）,2.12（s,3H）,2.10（s,3H）,2.13
（s,3H）,2.45（s,3H）,3.00（d,1H,J＝20Hz）,3.30
（d,1H,J＝20Hz）,3.75（s,3H）,4.14（s,3H）,4.26
（m,2H）,4.47（s,1H）,5.08（s,2H）,5.10−5.47（m,4
H）,5.58（d,1H）,7.50（1H）,7.89（1H）,8.05（1H）,
14.00（s,1H）,13.30（s,1H）． ４）Ｎ−（４−ヒドロキシ−３−ニトロベンジルオキシ
カルボニル）ダウノルビシンβ−Ｄ−グルコピラノシド
（64b） 64aとMeOH/MeONaから（参照:7及び14の製造、実施例
１及び２）。赤色固体。C₄₂H₄₄N₂O₂₁。

Ｍ＝912。

５）Ｎ−（４−ヒドロキシ−３−ニトロベンジルオキシ
カルボニル）ダウノルビシンβ−Ｄ−グルクロニド（64
c） 64bとBaO又はK₂CO₃から（参照:22の製造、実施例
３）。赤色固体。C₄₁H₄₂N₂O₂₁、Ｍ＝898。

実施例13:N−〔４−メトキシ−５−ニトロ−２（（β−
Ｄ−グルコピラノシル）ウロニックアシッド）ベンジル
オキシカルボニル〕ダウノルビシン（68c）の合成 反応式XIIに基づいて、２−ヒドロキシ−４−メトキ
シ−５−ニトロベンズアルデヒドとメチル（ペラセチル
−β−Ｄ−グルコピラノシル）−ウロネート ブロミド
のAg₂O−触媒グリコシド化で化合物65を得る。それは、
次いで、実施例９で述べられた方法により誘導体68cに
変換される。

１）メチル（２−ホルミル−５−メトキシ−４−ニトロ
フェニル 2,3,4−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グル
コピラノシド）ウロネート（65） これは51の方法で収率53％で得られる（実施例９参
照）。

−化合物65:C₂₁H₂₃NO₁₄.M＝513.M.p.＝159℃．［α］_D
²⁰＝−83°（c0.95,CHCl₃）.IR（CHCl₃）:3080,3010,17
65,1695,1620,1580,1540,1450,1375,1300,1220,1080,10
45cm^-1．¹H NMR（200MHz,CDCl₃）：δppm:2.08（s,6
H）,2.10（s,3H）,3.74（s,3H）,4.04（s,3H）,4.39
（d,1H,J＝9Hz）,5.39（m,4H）,6.92（s,1H）,8.43（s,
1H）,10.16（s,1H）． ２）メチル（２−ヒドロキシメチル−５−メトキシ−４
−ニトロフェニル 2,3,4−トリ−Ｏ−アセチル−β−
Ｄ−グルコピラノシド）ウロネート（66） NaBH₄/THF/MeOHを用い65から製造される（収率:30
％）。

−化合物66:C₂₁H₂₅NO₁₄.M＝514.M.p.＝176℃．［α］_D
＝−61°（c1.05,CHCl₃）.IR（CHCl₃）:3560,3040,296
0,1760,1625,1590,1530,1445,1375,1350,1290,1220,107
5,1040cm^-1．¹H NMR（200MHz,CDCl₃）：δppm:2.07（s,
3H）,2.09（s,3H）,2.13（s,3H）,3.72（s,3H）,3.96
（s,3H）,4.27（1H）,4.50 and 4.63（qAB,2H,J＝12.9H
z）,5.23（m,4H）,6.99（s,1H）,7.99（s,1H）． ３）４−ニトロフェニル ４−メトキシ−５−ニトロ−
２−（メチル（2,3,4−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−
グルコピラノシル）ウロネート）ベンジルカーボネート
（67） 66及び４−ニトロフェニルクロロホルマートから製造
される（収率:74％）。

−化合物67:C₂₈H₂₈N₂O₁₈.M＝680.M.p.＝90℃．［α］_D
＝−47°（c1.05,CHCl₃）.IR（CHCl₃）:3020,2960,174
5,1615,1575,1435,1340,1280,1205,1068,1030,895,852c
m^-1．¹H NMR（200MHz,CDCl₃）：δppm:2.06（s,3H）,2.
07（s,3H）,2.09（s,3H）,3.75（s,3H）,3.98（s,3H）,
4.35（1H）,5.14 and 5.24（qAB,2H,J＝12Hz）,5.39
（m,4H）,6.92（s,1H）,7.43（d,2H,J＝9.1Hz）,8.09
（s,1H）,8.30（d,2H,J＝9.1Hz）． ４）Ｎ−〔４−メトキシ−５−ニトロ−２−（メチル
（2,3,4−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノ
シル）ウロネート）ベンジルカルボニル〕ダウノルビシ
ン（68a） 67及びダウノルビシンから製造；（収率:83％） −化合物68a:C₄₉H₅₂N₂O₂₅.M＝1068.M.p.＝153℃（decom
p.）．［α］_D＝＋105°（c0.24,CHCl₃）．¹H NMR（200
MHz,CDCl₃）：δppm:1.31（d,3H,J＝7Hz）,2.07 and 2.
12（2s,9H）,2.42（s,3H）,2.91 and 3.24（qAB,2H,J＝
18.7Hz）,3.62（s,3H）,3.94（s,3H）,4.08（s,3H）,4,
93（qAB,2H）,6.88（s,1H）,7.39（d,1H,J＝8Hz）,7.77
（t,1H,J＝8Hz）,7.94（s,1H）,8.03（d,1H,J＝8Hz）,
9.59（s,1H）,10.29（s,1H）． ５）Ｎ−〔４−メトキシ−５−ニトロ−２−（メチル
（β−Ｄ−グルコピラノシル）ウロネート）ベンジルカ
ルボニル〕ダウノルビシン（68b） MeONa/MeOH（−20℃、12時間）を用いて68aから製
造；する（収率＝91％）。

−化合物68b:C₄₃H₄₆N₂O₂₂.M＝942.M.p.＝176−177℃．
［α］_D＝＋１°（c0.19,CHCl₃）.IR（CHCl₃）:3000,17
50,1720,1710,1620,1580,1520,1440,1410,1365,1345,12
80cm^-1．¹H NMR（200MHz,CD₃OD）：δppm:2.43（s,3
H）,3.10（qAB,2H）,3.79（s,3H）,3.95（s,3H）,4.08
（s,3H）,6.28（d,1H）,6.87（s,1H）,7.46（d,1H,J＝8
Hz）,7.83（d,1H,J＝8Hz）,8.02（m.2H）． SM（FAB⁺）m/z:109。

６）Ｎ−〔４−メトキシ−５−ニトロ−２−（（β−Ｄ
−グルコピラノシル）ウロニックアシッド）ベンジルオ
キシカルボニル〕ダウノルビシン（68c） Na₂CO₃/MeOH/H₂Oを用いて68bから製造；する。

化合物68c:赤色固体。C₄₂H₄₄N₂O₂₂。Ｍ＝928。

実施例14:N−〔２（（β−Ｄ−グルコピラノシル）ウロ
ニックアシッド）−５−クロロ−ベンジルオキシカルボ
ニル〕ダウノルビシン（82c）の合成 １）メチル（２−ホルミル−４−クロロフェニル2,3,4
−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド）ウ
ロネート（79） これは、51のために記載された方法（実施例９参照）
によって得られる。

−化合物79:C₂₀H₂₁ClO₁₁.M＝472.5;F＝156−157℃；
［α］_D ²⁰＝−39°（c1,CHCl₃）;IR（CH₂Cl₂）:2940,28
70,1755,1680,1585,1465cm^-1;NMR（200MHz,CDCl₃）：δ
ppm:2.09（s,9H）,3.74（s,3H）,4.25（d,1H,J＝8.5H
z）,5.30（m,4H）,7.10（d,1H,J＝8.5Hz）,7.53（dd,1
H,J＝8.5et2.5Hz）,7.80（d,1H,J＝2.5Hz）,10.27（s,1
H）． ２）メチル（２−ヒドロキシメチル−４−クロロフェニ
ル2,3,4−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グリコピラノ
シド）ウロネート（80） これは、NaBH₄/THF/MeOHを用いて79から得られる（収
率:70％）。

−化合物80:C₂₀H₂₃ClO₁₁.M＝474.5;F＝120℃；［α］_D
²⁰＝−20°（c0.9,CHCl₃）;IR（CH₂Cl₂）:3050,2980,17
50,1470,1415,1250,1220cm^-1;NMR（200MHz,CDCl₃）：δ
ppm:2.06（s,3H）,2.07（s,3H）,2.11（s,3H）,3.71
（s,3H）,4.14（d,1H,J＝9Hz）,4.3et4.72（ABq,2H,J＝
13Hz）,5.11（d,1H,J＝6.5Hz）,5.34（m,3H）,6.94（d,
1H,J＝8.7Hz）,7.23（dd,1H,J＝8.7et2.5Hz）,7.36（d,
1H,J＝2.5Hz）． ３）４−クロロフェニル ２−（メチル（2,3,4−トリ
−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）ウロネー
ト）−５−ニトロベンジルカーボネート（81） 製造； 80と４−ニトロフェニルクロロホルマートから（収率
＝50％）。

−化合物81:C₂₇H₂₆ClNO₁₄.M＝623.5;F＝136℃;NMR（200
MHz,CDCl₃）：δppm:2.08（s,9H）,3.74（s,3H）,4.22
（d large,1H,J＝8.7Hz）,5.30（m,6H）,7.03（d,1H,J
＝8.2Hz）,7.30（m,4H）,8.30（d,2H,J＝8.3Hz）． ４）Ｎ−〔２−（メチル（2,3,4−トリ−Ｏ−アセチル
−β−Ｄ−グルコピラノシル）ウロネート）−５−クロ
ロ−ベンジルオキシカルボニル〕ダウノルビシン（82
a） 製造； 81とダウノルビシンから（収率＝73％）。

−化合物81:C₄₈H₅₀ClNO₂₂;M＝1027.5;F＝155℃（de
c.）；［α］_D ²⁰125°（c0.24,CHCl₃）;IR（CH₂Cl₂）:1
755,1715,1610,1575cm^-1;NMR（200MHz,CDCl₃）：δppm:
1.31（d,3H,J＝7Hz）,2.05（s,6H）,2.08（s,3H）,2.42
（s,3H）,2.94et3.25（ABq,2H,J＝19Hz）,3.62（s,3
H）,4.06（s,3H）,4.20（m,2H）,4.53（broad s,1H）,
4.96（broad s,2H）,5.15−5.52（m,6H）,7.00（d,1H,J
＝8Hz）,7.20（m,2H）,7.40（d,1H,J＝8Hz）,7.79（t,1
H,J＝8Hz）,8.05（d,1H,J＝8Hz）． ５）Ｎ−〔２−（メチル（β−Ｄ−グルコピラノシル）
ウロネート）−５−クロロ−ベンジルオキシカルボニ
ル〕ダウノルビシン（82b） 製造 MeONa/MeOHを用いて82aから（参照:7及び14の製造、
実施例１及び２）、収率＝47％。

化合物82b:赤色固体、C₄₂H₄₄ClNO₁₉、 −化合物82b:red solid;C₄₂H₄₄ClNO₁₉;M＝901.5;F＝167
−170℃；［α］_D ²⁰０°（c0.03,MeOH）;NMR（200MHz,C
DCl₃）：δppm:2.42（s,3H）,2.96et3.23（ABq,2H,J＝1
8Hz）,3.79（s,3H）,4.07（s,3H）,5.89（d,NH）,6.99
（broad d,1H,J＝8Hz）,7.20（broad d,1H,J＝8Hz）,7.
33（s,1H）,7.41（d,1H,J＝8Hz）,7.80（t,1HJ＝8Hz）,
8.03（d,1H,J＝8Hz）． ６）Ｎ−〔２−（（β−Ｄ−グルコピラノシル）ウロニ
ックアシッド）−５−クロロ−ベンジルオキシカルボニ
ル〕ダウノルビシン（82c） 製造 Na₂CO₃を用いて82bから（参照:22の製造、実施例
３）。

化合物82c:赤色固体、C₄₁H₄₂ClNO₁₉、 Ｍ＝887.5。

実施例15:N−〔４−ヒドロキシ−３−ニトロ−ベンジル
オキシカルボニル）ドキソルビシンβ−Ｄ−グルクロニ
ド（70c）の合成 １）４−ニトロ−フェニル ４−（メチル（2,3,4−ト
リ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）ウロネ
ート）−５−ニトロベンジルカーボネート（69） 製造 62とパラニトロフェニルクロロホルマートから（収率
＝47％）。

−化合物69:C₂₇H₂₆N₂O₁₇;M＝650;F＝126℃；［α］_D ²⁰
＝＋12°（c0.1,CHCl₃）;IR(KBr)_vmax1730（CO,este
r）,1210;¹ NMR（90MHz,CDCl₃）：δppm:7.81（d,1H,J
＝5Hz）,7.54（dd,1H,J＝8.4Hz）,7.30（d,1H,J＝8.4H
z）,5.36−5.29（m,3H）,5.18（d,1H,J＝6.7Hz）,4.72
（s,2H）,4.20（d,1H,J＝8.4Hz）,3.74（s,3H）,2.12
（s,3H）,2.06（s,3H）,2.05（s,3H）.SM（DCI/NH₃）m/
z:668(M+18)⁺,608,503,443. ２）Ｎ−〔３−ニトロ−４−（メチル（2,3,4−トリ−
Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）ウロネー
ト）−ベンジルオキシカルボニル〕ドキソルビシン（70
a） 製造 69及びドキソルビシンから（収率:6％）。

−化合物70a:C₄₈H₅₀O₂₅N₂,M＝1.054;F＝114℃；［α］_D
²⁰＝＋121°（c0.05,CHCl₃）.IR(KBr)_vmax1760,1730,12
20.¹ NMR（250MHz,CDCl₃）：δppm:13.90（s,1H,OH phe
nol）,13.15（s,1H,OH phenol）,8.00−7.20（m,6H aro
m.）,5.47（s,1H）,5.29−5.16（m,5H）,4.97（s,2H）,
4.73（s,2H）,4.20−4.15（m,2H）,4.21（s,3H）,3.80
（br s,1H）,3.72（s,3H）,3.68（s,1H）,3.19（d,1H,J
＝19Hz） et 2.91）d,1H,J＝19Hz）,2.30（d,1H,J＝13.
6Hz）,2.15（s,3H）,2.10（d,1H,J＝13.6Hz）,2.07（s,
6H）,1.83（br s,2H）,1.27（d,1H,J＝5.4Hz）． ３）Ｎ−〔３−ニトロ−４−（メチル（β−Ｄ−グルコ
ピラノシル）ウロネート）−ベンジルオキシカルボニ
ル〕ドキソルビシン（70b） 製造 化合物70a（1.48g）を無水DMF（20ml）に溶解する。
次いで、200mlの無水MeOHを添加する。０℃に冷却した
のち、18mlの1MMeONaを添加する。１時間、０℃にて攪
拌したのち、媒体を０℃にて、AcOH（10％）のメタノー
ル溶液の添加により中和する。蒸発乾燥させ、フラッシ
ュクロマトグラフィーー（溶媒、CH₂Cl₂/MeOH＝90:10）
に付した後、500mgの純粋70bを分離する。

−化合物70b:C₄₂H₄₄O₂₂N₂;M＝928;F＝150℃；［α］_D ²⁰
＝＋85°（c0.05,THF）；¹ NMR（250MHz,CDCl₃）：δpp
m:13.92（s,1H）,13.22（s,1H）,7.92−7.18（m,6H）,
5.23（s,1H）,5.07（m,2H）,4.95（s,2H）,3.88（s,1
H）,4.57（s,2H）,4.07（m,2H）,3.96（s,3H）,3.64
（s,3H）,3.01（d,1H）and2.85（d,1H,J＝18Hz）（ABsy
st）,2.22（d,1H,J＝13.6Hz）,2.03（dd,1H,J＝13.6,
J′＝5Hz）,1.92−1.37（m,4H）,1.15（d,1H,J＝6.8H
z）.SM（FAB）m/e:951（Ｍ＋23）． ４）Ｎ−〔４−ヒドロキシ−３−ニトロ−ベンジルオキ
シカルボニル〕ドキソルビシンβ−Ｄ−グルクロニド
（70c） 製造 化合物70b（780mg）をTHF（75ml）に溶解し、次い
で、０℃に冷却したのち、水（〜30ml）及び2NのNaOH
（一滴ずつ）（750μｌ）を添加する。０℃にて１時間3
0分攪拌したのち、媒体をIR50H⁺樹脂の添加により中和
する。次いでろ液を蒸発させて、30mlを得、凍結乾燥す
る。750mgの純粋70cを分離する。

−化合物70c:C₄₁H₄₁O₂₂N₂;M＝914;F＝210℃；［α］_D ²⁰
＝−78°（c0.05,H₂O）．¹ NMR（250MHz,DMSO）：δpp
m:14.00（br s,2H）,8.00−6.90（m,6H）,5.48（s,1
H）,5.23（s,1H）,5.07（d,J＝6.4Hz）,4.98（m,2H）,
4.59（s,2H）,3.99（s,3H）,3.30−3.10（m,2H）,2.96
（d,1H,J＝14Hz）,2.91（d,1H,J＝14Hz）,2.20（d,1H,J
＝11.5Hz）,2.13（d,1H,J＝11.5Hz）,1.87（d,1H,J＝13
Hz）,1.48（d,1H,J＝13Hz）,1.13（d,3H,J＝6.4Hz）． 実施例16:N−４−ヒドロキシ−３−ニトロ−（ベンジル
オキシカルボニル）ドキソルビシンα−Ｄ−ガラクトピ
ラノシド（75b）の合成 １）４−メチルフェニル2,3,4,6−テトラ−OIアセチル
−α−Ｄ−ガラクトピラノシド（71） 反応式XIVに基づいて、ペンタ−Ｏ−アセチル−Ｄ−
ガラクトピラノース（36g,92mmol）とｐ−クレゾール
（30g,280mmol）とのカップリングを、ヘルフェリッチ
（Helferich）法に従って、160℃にて30分間、無水ZnCl
₂（1.8g）の存在下における溶融により行う。冷却後、6
0Hシリカのカラムにおけるクロマトグラフィー（溶媒、
ヘキサン−酢酸エチル:90/10−v/v）に、直接混合物を
付し、15g、収率:40％の４−メチルフェニル2,3,4,6−
テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシドを
得る。これはエタノールで結晶化される。分析特性は上
述したものと同一である。

２）４−ブロモメチルフェニル2,3,4,6−テトラ−Ｏ−
アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド（72） 製造 1.4g（3.2mmol）の４−メチルフェニル2,3,4,6−テト
ラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド（71）
及び0.46g（1.6mmol）の1,3−ジブロモ5,5−ジメチルヒ
ダントインを、100mlの四塩化炭素に添加し、混合物を1
5分間、光（1000W）照射の下、還流する。冷却後、反応
媒質を濾過し、次いで、ろ液を乾燥状態まで蒸発させ
る。3.5gの４−ブロモメチルフェニル2,3,4,6−テトラ
−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド（72）
を、メタノールからの再結晶により分離する（収率:76
％）。

−化合物72:C₂₁H₂₅O₁₀Br,M＝517;F＝105℃（MeOH）；
［α］_D ²⁰＝＋168°（c1,CHCl₃）;IR（KBr）cm^-1:1747
（vC＝O ester）,1222（ωCH₂Br）；¹ NMR（270MHz,CDC
l₃）：δppm:1.97（s,3H）,2.08（s,3H）,2.10（s,3
H）,2.21（s,3H）,4.05（dd,J＝11et7Hz,1H）,4.13（d
d,J＝11et6Hz,1H）,4.18（t,J＝7Hz,1H）,4.52（s,2
H）,5.28（dd,J＝11et4Hz,1H）,5.52（d,J＝3Hz,1H）,
5.58（dd,J＝11et3Hz,1H）,5.79（d,J＝4Hz,1H）,7.04
（d,J＝9Hz,2H）,7.35（d,J＝9Hz,2H）.SM（DIC/NH₃）m
/z:534/536(M+NH₄)⁺． ３）（４−ブロモメチル２−ニトロ）−フェニル2,3,4,
6−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシ
ド（73） 製造 5mlの硝酸を、無水酢酸における４−ブロモメチルフ
ェニル2,3,4,6−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラ
クトピラノシド（72）（1.5g,2.9mmol）溶液に、20℃に
て２時間で滴下する。１時間攪拌したのち、媒体を炭酸
水素ナトリウムにより中和する。通常の抽出の後、1.12
gの（４−ブロモメチル２−ニトロ）−フェニル2,3,4,6
−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド
（73）を、60Hシリカゲルにおけるクロマトグラフィー
ーにより分離する（収率:69％）。

−化合物73:C₂₁H₂₄NO₁₂Br;M＝562;F＝168℃（MeOH）；
［α］_D ²⁰＝＋165°（c1.Cl,CHCl₃）,IR（KBr）cm^-1:17
47（vC＝O ester）,1534（vasN＝Ｏ）,1222（ｖCH₂B
r），¹ NMR（270MHz,CDCl₃）：δppm:1.84（s,3H）,1.8
8（s,3H）,2.08（s,3H）,2.15（s,3H）,4.11（d,J＝7H
z,2H）,4.39（t,J＝7Hz,1H）,4.47（s,2H）,5.24（dd,J
＝11et4Hz,1H）,5.48（dd,J＝11et3Hz,1H）,5.57（d,J
＝3Hz,1H）,5.89（d,J＝4Hz,1H）,7.32（d,J＝9Hz,1
H）,7.56（dd,J＝9et2Hz,1H）,7.84（d,J＝2Hz,1H）.SM
（DIC/NH₃）m/z:579/581(M+NH₄)⁺． ４）（４−ヒドロキシメチル２−ニトロ）−フェニル2,
3,4,6−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラ
ノシド（74） 製造 アセトン15mlにおける（４−ブロモメチル２−ニト
ロ）−フェニル2,3,4,6−テトラ−Ｏ−アセチル−α−
Ｄ−ガラクトピラノシド（73）（0.3g,0.5mmol）の溶液
を、15mlの0.1N−AgNO₃水溶液の存在下、20℃にて一晩
攪拌する。濾過及びアセトンの蒸発後、（４−ヒドロキ
シメチル２−ニトロ）−フェニル2,3,4,6−テトラ−Ｏ
−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド（74）を水中
に沈殿させる。次いで、このようにして得られた生成物
を乾燥する（0.25g、収率:93％）。

−化合物74:C₂₁H₂₅NO₁₃;M＝499;F＝170℃（MeOH）；
［α］_D ²⁰＝＋174°（c1.02,CHCl₃）,IR（KBr）cm^-1:35
00（VOH）,1746（VC＝O ester）,1234（VC−OH）；¹ NM
R（270MHz,CDCl₃）：δppm:2.00（s,3H）,2.02（s,3
H）,2.11（s,3H）,2.18（s,3H）,4.13（d,J＝6Hz,2H）,
4.43（t,J＝6Hz,1H）,4.73（d,J＝5Hz,2H）,5.27（dd,J
＝11et4Hz,1H）,5.50（dd,J＝11et3Hz,1H）,5.59（d,J
＝3Hz,1H）,5.88（d,J＝4Hz,1H）,7.32（d,J＝9Hz,1
H）,7.53（dd,J＝9et2Hz,1H）,7.84（d,J＝2Hz,1H）.SM
（DIC/NH₃）m/z:517(M+NH₄)⁺． ５）Ｎ−４−ヒドロキシ−３−ニトロ（ベンジルオキシ
カルボニル）2,3,4,6−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ
−ガラクトピラノシドダウノルビシン（75a） 製造 無水ジクロロメタン（5ml）における74（0.05g,0.1mm
ol）及びトリエチルアミン（28μｌ、0.2mmol）の溶液
を、20℃、アルゴン下、2mlのアセトニトリルにおける
ジサクシニミドカーボナート（0.05g,0.2mmol）の溶液
に滴下する。90分間攪拌したのち、媒体を濾過し、ろ液
を乾燥状態に蒸発させる。ジサクシニミドカーボネート
を沈殿物の形状で得る。

3mlのジメチルホルムアミドにおけるダウノルビシン
（0.03g,0.06mmol）及びトリエチルアミン（50μｌ、0.
35mmol）溶液を、20℃、アルゴン下、先に製造した粗サ
クシニミドカーボネートの溶液に添加する。15分間反応
させ、溶媒を蒸発させたのち、Ｎ−〔４−ヒドロキシ−
３−ニトロ（2,3,4,6−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ
−ガラクトピラノシド）（ベンジルオキシカルボニ
ル）〕ダウノルビシンを、60Hシリカゲルクロマトグラ
フィー（溶媒：シクロヘキサン−アセトン:50/50−v/
v）において精製し、次いで、水で洗浄する（42.2mg、
収率:43％）。

−化合物75a:C₄₉H₅₂N₂O₂₄;M＝1052;アモルファス；
［α］_D ²⁰＝＋217°（c0.10,CHCl₃），¹ NMR（270MHz,C
DCl₃）：δppm:1.28（d,J＝7Hz,3H）,1.97（s,3H）,2.0
2（s,3H）,2.09（s,3H）,2.16（s,3H）,2.41（s,3H）,
2.69（s,1H ech/D₂O）,2.88（d,J＝12Hz,1H）,2.93（d,
J＝19Hz,1H）,3.24（d,J＝12Hz,1H）,3.24（d,H＝19Hz,
1H）,3.69（broad s,1H）,3.78（m,1H ech/D₂O）,4.09
（s,3H）,4.13（d,J＝6Hz,2H）,4.23（d,J＝7Hz,1H）,
4.39（t,J＝6Hz,1H）,4.72（s,1H,ech/D₂O）,5.01（s,2
H）,5.24（dd,J＝10et4Hz,1H）,5.27（m,2H）,5.48（d
d,J＝10et3Hz,1H）,5.50（m,1H）,5.58（d,J＝3Hz,1
H）,5.87（d,J＝4Hz,1H）,7.29（d,J＝8Hz,1H）,7.40
（d,J＝8Hz,1H）,7.48（dd,J＝8et2Hz,1H）,7.76（d,J
＝2Hz,1H）,7.79（t,J＝8Hz,1H）,8.02（d,J＝8Hz,1
H）.SM（DIC/NH₃）m/z:813(M-239)⁺,672(M-380)⁺． ６）Ｎ−４−ヒドロキシ−３−ニトロ（ベンジルオキシ
カルボニル）ダウノルビシン−α−Ｄ−ガラクトピラノ
シド（75b） 製造 2mlの0.1NナトリウムメタノレートにおけるＮ−４−
ヒドロキシ−３−ニトロ−2,3,4,6−テトラ−Ｏ−アセ
チル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド（ベンジルオキシカ
ルボニル）ダウノルビシン（17mg、0.016mmol）の溶液
を攪拌し、30分間、０℃に保持する。媒体をアンバーラ
イトIRC120H⁺樹脂の添加により中和し、次いで濾過す
る。ろ液を乾燥状態に蒸発させ、14mgのＮ−４−ヒドロ
キシ−３−ニトロ（ベンジルオキシカルボニル）ダウノ
ルビシン−α−Ｄ−ガラクトピラノシド（収率:98％）
を得る。

−化合物75b:C₄₁H₄₄N₂O₂₀;M＝884;アモルファス；
［α］_D ²⁰＝＋246°（c0.10,EtOH），¹ NMR（270MHz,CD
Cl₃）：δppm:1.22（d,J＝7Hz,3H）,1.95（m,2H）,2.28
（m,1H）,2.38（m,1H）,2.41（s,3H）,2.81（d,J＝19H
z,1H）,3.01（d,J＝19Hz,1H）,4.04（s,3H）,5.38（m,1
H）,5.82（m,1H）,7.50−7.70（m,4H）,7.90（m,2H）.S
M（FAB,テンプレート：チオグリセロール）m/z:885(M+
H)⁺． 実施例17:N−〔４−ヒドロキシ−３−クロロ−（ベンジ
ルオキシカルボニル）〕ダウノルビシン−β−Ｄ−グル
クロニド（78b）の合成 １）４−ヒドロキシ−３−クロロベンズアルデヒド2,3,
4−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−メチルグルクロニド
（76） 製造 10gの酸化銀を、無水アセトニトリル（150ml）におけ
る2g（12.8mmol）の４−ヒドロキシ−３−クロロベンズ
アルデヒド及び3.4g（8.5mmol）の2,3,4−トリ−Ｏ−ア
セチル−β−Ｄ−メチルグルクロニルブロマイド溶液に
添加する。反応媒質を４時間、20℃にて攪拌し、セライ
トにおいて濾過し、ろ液を乾燥状態に蒸発させる。次い
で、得られた乾燥残留物を、60Hシリカゲルクロマトグ
ラフィ（溶媒：シクロヘキサン−アセトン:80/20−v/
v）により精製する。このように、４−ヒドロキシ−３
−クロロベンズアルデヒド2,3,4−トリ−Ｏ−アセチル
−β−Ｄ−メチルグルクロニド（76）を得る（1.6g、収
率:40％）。

−化合物76:C₂₀H₂₁ClO₁₁;M＝475;F＝125℃；［α］_D ²⁰
＝−57°（c0.5,CHCl₃）;IR（KBr）ｖcm^-1:3030,2975,2
875,1760,1680,1595,1375,1235,1040;¹H NMR（270MHz,C
DCl₃）δppm:2.09（3H,s）,2.11（3H,s）,2.20（3H,
s）,3.73（3H,s）,4.28（1H,d,J＝9Hz）,5.25（1H,d,J
＝7Hz）,5.32−5.42（3H,m）,7.30（1H,d,J＝8Hz）,7.7
7（1H,dd,J＝8et2Hz）,7.93（1H,d,J＝2Hz）,9.90（1H,
s）.SM（DIC/NH₃）m/z:490/492(M+NH₄)⁺352,317. ２）（４−ヒドロキシメチル−２−クロロ）−フェニル
2,3,4−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−メチルグルクロ
ニド（77） 製造 シリカ（3g）及び水素化ホウ素ナトリウム（0.3g、7.
9mmoles）を、クロロホルム（35ml）及びイソプロパノ
ール（7.5ml）の混合液における76（1.56g,3.3mmol）の
溶液に、０℃にて添加する。媒質を２時間、室温に攪拌
する。濾過後、媒質をCH₂Cl₂（30ml）で希釈し、次いで
水で洗浄し（３×30ml）、Na₂SO₄で乾燥し、蒸発させて
（４−ヒドロキシメチル−２−クロロ）−フェニル2,3,
4−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−メチルグルクロニド
を得る（収率:64％）。

−化合物77:C₂₀H₂₃ClO₁₁;M＝474.5;F＝138−140℃；
［α］_D ²⁰＝−95°（c0.1,CHCl₃）;IR（KBr）ｖcm^-1:35
10,2955,1765,1740,1500,1375,1235,1100,1050,900,82
0,775;¹H NMR（270MHz,CDCl₃）δppm:2.06（3H,s）,2.0
9（3H,s）,2.12（3H,s）,3.74（3H,s）,4.15（1H,d,J＝
8Hz）,4.63（2H,s）,5.04（1H,d,J＝7Hz）,5.35（3H,
m）,7.20（2H,m）,7.38（1H,d,J＝1.5Hz）.SM（DIC/N
H₃）m/z:492/494(M+NH₄)⁺,317. ３）Ｎ−（４−ヒドロキシ−３−クロロ2,3,4−トリ−
Ｏ−アセチル−β−Ｄ−メチルグルクロニドベンジルオ
キシカルボニル）−ドキソルビシン（78a） 製造 無水ジクロロメタン（80ml）における77（1.00g,2mmo
l）及びトリアチルアミン（300μｌ、2.1mmol）の溶液
を、20℃、アルゴン下にて50mlのアセトニトリルの溶液
におけるジサクシニミドカーボネート（1.08g,4.2mmo
l）に添加する。90分間攪拌したのち、媒質を濾過し、
ろ液を乾燥状態に蒸発させ、ドキソルビシンで濃縮する
ために精製することなく、サクシニミドカーボネート
（1.3g）を得る。

40mlジメチルホルムアミドにおけるドキソルビシン
（0.882g,1.6mmol）及びトリメチルアミン（230μl,1.6
mmol）の溶液を、20℃、アルゴン下、先に製造した粗サ
クシニミドカーボネートの溶液に添加する。２時間反応
させたのち、溶媒を減圧下蒸発させる。シリカゲル60H
クロマトグラフィー（溶媒：ジクロロメタン−メタノー
ル、95/5v/v）に付したのち、得られた残留物からＮ−
（４−ヒドロキシ−３−クロロ2,3,4−トリ−Ｏ−アセ
チル−β−Ｄ−メチルグルクロニドベンジルオキシカル
ボニル）−ドキソルビシン（78a）を得る（0.691g,収
率:41％）。

−化合物78a:C₄₈H₅₀ClNO₂₃;M＝1043.5;アモルファス；
［α］_D ²⁰＝＋260°（c0.01,CH₃OH）;IR（KBR）ｖcm^-1:
3430,2960,2950,1725,1580,1460,1380,1290,1235,1125,
1070,1040,755.¹H NMR（270MHz,CDCl₃）δppm:1.30（3
H,d,J＝6.5Hz）,1.85（2H,m）,2.02（3H,s）,2.05（3H,
s）,2.09（3H,s）,2.17（1H,dd,J＝15et3.5Hz）,2.35
（1H,dd,J＝15et1Hz）,2.97（1H,d,J＝19Hz）,3.27（1
H,d,J＝19Hz）,3.67（1H,m）,3.77（3H,s）,3.86（1H,
m）,4.08（3H,s）,4.15（2H,m）,4.75（2H,s）,4.97（2
H,s）,5.02（1H,d,J＝7Hz）,5.18（3H,m）,5.50（1H,d
d,J＝3.5et1Hz）,7.18（2H,m）,7.30（1H,d,J＝1Hz）,
7.38（1H,d,J＝8Hz）,7.79（1H,t,J＝8Hz）,8.03（1H,
d,J＝8Hz）,13.15（1H,s,ech.D₂O）,13.85（1H,s,ech.D
₂O）． ４）Ｎ−（４−ヒドロキシ−３−クロロ−ベンゾキシ−
カルボニル）ドキソルビシンβ−Ｄ−グルクロニド（78
b） 製造 60mlの0.05Nのナトリウムメタノレートにおける78a
（0.280g,0.27mol）溶液を攪拌し、０℃にて45分間保持
する。媒質をアンバーライトIRC120H⁺樹脂を添加するこ
とにより中和し、次いで濾過する。ろ液を乾燥状態まで
蒸発させ、240mgのＮ−（４−ヒドロキシ−３−クロロ
−ベンゾキシカルボニル（ドキソルビシンβ−Ｄ−メチ
ルグルクロニドを得る。この化合物は、カルボキシル基
の脱保護のために精製することなしに用いられる。

先に得た粗Ｎ−（４−ヒドロキシ−３−クロロ−ベン
ゾキシカルボニル）ドキソルビシンβ−Ｄ−メチルグル
クロニドを1.2mlピグ・リバー・エステラーゼ（pig liv
er esterase）（シグマ、参照:E−3128）及び24mlアセ
トンを含有するリン酸緩衝液（48ml（pH8）に溶解す
る。この溶液を４時間、37℃にて保持する。乾燥状態ま
で蒸発させたのち、残留物をシリカゲル60Hクロマトグ
ラフィー（溶媒：アセトニトリル−水、95/5v/v）に付
すことにより精製する。化合物78bを得る（0.049g,収
率:20％）。

−化合物78b:C₄₁H₄₂ClNO₂₀;M＝903.5;アモルファス；
［α］_D ²⁰＝＋140°（c0.01,CH₃OH）;IR（KBr）ｖcm^-1:
3400,2950,1580,1510,1470,1415,1240,1215,1100,830,7
60;¹H NMR（300MHz,DMSO−d₆）δppm:1.11（3H,d,J＝6.
5Hz）,1.90（2H,m）,2.15（2H,m）,3.98（3H,s）,4.54
（2H,s）,4.87（2H,s）,4.94（1H,d,J＝7Hz）,5.20（1
H,dd,J＝3.5et1Hz）,7.18（2H,m）,7.36（1H,d,J＝1H
z）,7.70（2H,m）,7.94（1H,d,J＝8Hz）.SM（FAB,テン
プレート：ニトロベンジルアルコール）m/z:904/906(M+
H)⁺． 本発明に係るプロドラッグの薬理学的レポート 薬理学的試験 実施例Ａ 生物学的及び生化学的試験は、 ・グリコシル化されたプロドラッグの細胞毒性の評価、 ・対応酵素によるグリコシドの分解能の研究、 ・生体外でのグリコシドの消失の動力学及び、まず、グ
リコシル化されたフェノールにおける糖の切断、次い
で、自己犠牲アームの切断（図１、２、３及び４）に起
因する２つの生成物（アンスラサイクリン＋自己犠牲ア
ーム及びアンスラサイクリン）の形成の測定、 I.半減期 図１、２、３、４及び５は誘導体48b（図１）、60
（図２）、54c（図３及び４））及び70c（図５）で得ら
れた結果を図示している。これらの図は、横軸に時間、
縦軸に相対面積を示し、濃度の関数としてプロドラッグ
及びアンスラサイクリンの濃度を評価することができ
る。ダウノルビシンの出現の速度が自己犠牲アームの型
によって変化することに留意しなければならない。

誘導体48bで得られた結果： この誘導体は、α−ガラクトシダーゼ（ヒト胎盤由
来）及び0.075MのＮ−アセチルガラクトースアミンとと
もに、37℃にて、pH5（0.02Mリン酸緩衝液）でインキュ
ベートする。結果はHPLCによって測定する（ダウノルビ
シン：t_r＝8.5分、48b:t_r＝11.5分、脱グルコシド化さ
れた48b:t_r＝16.7分）。48bは１時間の半減期で加水分
解される。

pH5にて、化合物DNM/自己犠牲アーム（脱グリコシド
化される生成物）が、45時間の半減期で消失し、半減期
はpH7.3では同じ生成物が16時間より小さく、ダウノマ
イシンが媒質中に出現する。

生成物は、プラズマ中で安定である。

図１は、誘導体48bで得られた結果を示す。

図１は、時間の関数としてダウノルビシン（１）、誘
導体48b（２）（本発明のアンスラサイクリン・プロド
ラッグ）及び中間生成物ダウノルビシン＋自己犠牲アー
ム（脱グリコシド化された誘導体）（３）の濃度を示
す。

誘導体60bで得られた結果（図２）： この誘導体を、α−ガラクトシダーゼ（いっていない
コーヒー豆、0.04U/ml）とともに、37℃にて、pH6.8
（0.02Mリン酸緩衝液）でインキュベートする。

これらの結果はHPLCによって測定する（ダウノルビシ
ン：t_r＝8.5分、60:t_r＝11.0分）。誘導体60の濃度は66
0μg/mlである。

pH6.8にて、脱グリコシド化された誘導体60は、高速
で消失するため検出されない。

誘導体54cで得られた結果（図３及び４）： 図３は、誘導体54cを濃縮された組換え型ヒトβ−グ
ルクロニダーゼとともに、37℃、pH7.2でインキュベー
トした際に得られた結果を示す。54cの濃度は530μg/ml
である。結果はHPLCによって測定した（ダウノルビシ
ン：t_r＝8.8分、54c:t_r＝9.7分，脱グリコシド化された
54c:t_r＝16.0分）。

図４は1/100に希釈されたβ−グルクロニダーゼの存
在下に得られた結果を示す（他の条件は図３と同様であ
る）。

pH7.2にて、脱グリコシド化された誘導体54は5.3時間
のオーダーの半減期を有している。

誘導体70cで得られた結果（図５）： 図５は、誘導体70cをヒトβ−グルクロニダーゼ（0.4
5U/ml）とともに、37℃、pH7.2でインキュベートした際
に得られた結果を示す。

II.増殖試験 A.実験プロトコール（MTT還元） RPMI培地中、５×10³/mlの密度でL1210腫瘍細胞を、9
6ウェル有するマイクロタイター・プレート中で、本発
明の異なるプロドラッグとともに72時間インキュベート
する（37℃、５％CO₂、95％相対湿度）。

コントロールは培地にさらした腫瘍細胞である。４つ
のウェルを各アンスラサイクリン濃度及びコントロール
のために製造する。65時間後、50μｌのMTT（PBS中、2.
5mg/ml）を加える。

MTTは、生存細胞の存在下、不溶性赤色ホルマザン染
料に還元されるであろう。さらに７〜24時間（用いた細
胞による）インキュベートしたのち、上澄み液を除去す
る。ホルマザン染料を、各ウェルに100μｌのDMSOに添
加し、次いでやさしく揺らすことにより溶解する。

吸光度を、492nm（マルチスキャン340CCFa.フローフ
ォトメータ）、各ウェルで測定する。

B.結果 結果を、プロドラッグとのインキュベーション後の吸
光度とコントロールで得られた吸光度との比として示
す。変動係数は15％未満である。プロドラッグは、ドキ
ソルビシンと比較してかなり細胞毒性が減少している。

アセテート６、13及び48aは生体内で、それぞれ７、1
4及び48bに加水分解される。

III.本発明のグリコシル化されたプロドラッグとグリコ
シル化されたドラッグとの分解能の比較、及びグリコシ
ルの分解速度ならびに自己犠牲アームの消失速度におけ
るアームの構造の影響： ダウノマイシン／自己犠牲アーム／β−グルクロニ
ド、ドキソルビシン／自己犠牲アーム／β−グルクロニ
ド及びドキソルビシン／自己犠牲アーム／α−ガラクト
シドの本発明によるプロドラッグを上述した方法によっ
て合成する。

基質を組換えβ−グルクロニダーゼ（又はコーヒー豆
からのα−ガラクトシダーゼ）（1U/ml）とともに37℃
にて、pH7.2から6.8でインキュベートし、グリコシドの
消失の動力学及びダウノルビシンとドキソルビシンの形
成の動力学を逆相HPLCにより、インビトロで測定する。
グリコシドの50％分解の時間及びアンスラサイクリン／
アーム化合物がアンスラサイクリンに50％変換する時間
を以下の表Ｉに示す。これは、以下の式を参照してい
る。

比較基質であるアームを伴わないβ−グルクロニド
は、ダウノルビシン／アーム／グルクロニド化合物又は
ドキソルビシン／アーム／グルクロニド化合物よりも50
から100倍おそく分解される。これは、グルクロニド／
プロドラッグ化合物の分解のための適当な自己犠牲アー
ムの存在が断固として重要であることを示す。

さらに、この自己犠牲アームの芳香環（例えば、ハイ
ドロキシベンジルカルバマート）に存在する置換基はグ
リコシル化された誘導体の分解の動力学及び、生成物ア
ンスラサイクリン＋自己犠牲アームの分解の動力学に影
響を及ぼす。グリコシルのより迅速な分解及びアームの
より迅速な自動消失が、B₁がβ−グルクロニド及びB₄が
NO₂基又は塩素原子である本発明のプロドラッグのため
に見いだされる。他の置換基も、所望の動力学を得るこ
とが可能である。

先の説明から明らかなように、本発明はこれらの実施
モデル、より明示的に述べた実施例及び適用モデルに限
定されるものではなく、それどころか、本発明の構成又
は範囲から逸脱せず、当該分野において考えられるすべ
ての変形を包含するものである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ Ａ６１Ｋ 39/395 Ａ６１Ｐ 43/00 １２３ Ａ６１Ｐ 35/00 Ａ６１Ｋ 37/24 43/00 １２３ 37/54 (72)発明者 ゲッソン ジャン−ピエール フランス、86360 シャスヌル デュ ポワトー、モンタミーズ、“ラ ジュル モニエール”（番地なし) (72)発明者 モヌレ クロード フランス、75012 パリ、リュ ラモリ シエール ９ (72)発明者 モンドン マルティーヌ フランス、86000 ポワティエ、アペペ ラ 529、リュ デュ ポントロー ９ (72)発明者 ルヌ ブリジット フランス、86800 サン ジュリエン ラール、リニエ（番地なし) (72)発明者 フロラン ジャン−クロード フランス、91940 レ ユリ、リュ デ ス コース 23 (72)発明者 コホ ミッシェル フランス、78170 ラ セル サン ク ルー、エリゼー▲ＩＩ▼ 116 (72)発明者 ライルカン フランソワ フランス、75014 パリ、リュ デ ラ ミラル ムシェ 70 (72)発明者 セドラセック ハンス ハラルド ドイツ、3550 マールブルク、ゾンネン ハング ３ (72)発明者 ゲルケン マンフレッド ドイツ、3550 マールブルク、ワンコッ フ シュトラーセ 12 (72)発明者 コラール セネック ドイツ、3550 マールブルク、ドイチュ ハンス シュトラーセ 20 (72)発明者 ゴデエル ジルベール フランス、75013 パリ、ブルバール バンサン オリオール 155 (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) C07H 15/252 A61K 31/704 A61K 38/22 A61K 38/46 A61K 38/395 ＣＡ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ)

Claims (38)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】下記の式Ｉ （式中、R₁、R₂及びR₃は同一又は異なって、水素原子又
   はヒドロキシ基、R₄は水素原子、ヒドロキシ基又はメト
   キシ基、 Ｒは基−CO−CH₂−Ｒ″（Ｒ″は水素原子、C₁〜C₆アル
   キル基、ヒドロキシ基、アルコキシ基、Ｏ−アシル基又
   はアリール基）、 R₅とR₆は同一又は異なって、水素原子又はヒドロキシ
   基、 R₇は水素原子又はヒドロキシ基、 R₈は基−CH₂−OR₉又は基−COOR₉（R₉はC₁〜C₃アルキル
   基、水素原子又はアセチル基）、 R₁₀とR₁₁は水素原子、アシル保護基又はアルキル基、 R₁₂はヒドロキシ基、アミノ基、アミド基又はＯ−アシ
   ル保護基、 ベンジル基の置換基であるＹは、 −水素原子、 −NO₂、ハロゲン原子、基SO₂X（Ｘは−CH₃、C₆H₄−C
   H₃、NH₂、Ｎ−（C₁〜C₄アルキル）₂又はNH−C₁〜C₄アル
   キル）、−CN、アシル又はCOO−アルキルから選択され
   た電子吸引基、 −Ｏ−アルキル、NHCO−アルキル、Ｎ（アルキル）CO−
   アルキル、Ｓ−アルキル及びアルキルから選択された電
   子供与基 からなる群から選択され、ｍは１〜４の整数） で示される化合物。
2. 【請求項２】ベンジル基の−CH₂基が、グリコシル酸素
   に対してパラ又はオルト位にある請求項１に記載の化合
   物。
3. 【請求項３】Ｙが１つ以上の電子吸引基のとき、グリコ
   シル酸素に対してオルト又はパラ位、あるいはオルト及
   びパラ位の双方に存在し、Ｙが１つ以上の電子供与基の
   とき、グリコシル酸素に対してメタ位に存在する請求項
   １に記載の化合物。
4. 【請求項４】式Ｉの化合物が、 R₁、R₂及びR₃が水素原子、 R₄がメトキシ基、 R₅とR₆がヒドロキシ基、 Ｒが−COCH₃基又は−CO−CH₂OH基、 R₇が水素原子又はヒドロキシ基、 R₈が−CH₂−OAc、−CH₂OH、−COOMe又は−COOH基、 R₁₀とR₁₁が同一又は異なって水素原子又はAc基、 R₁₂がヒドロキシ基又はOAc基、 Ｙが水素原子、グリコシル酸素に対しパラ又はオルト位
   でのNO₂基又はクロル原子、又はグリコシル酸素のメタ
   位でのOCH₃基である請求項１〜３の何れか１つに記載の
   化合物。
5. 【請求項５】R₈、R₁₀、R₁₁及びR₁₂が、下記の位置 に存在する請求項４に記載の化合物。
6. 【請求項６】下記式６ を有する請求項１〜５の何れか１つに記載の化合物。
7. 【請求項７】下記式７ を有する請求項１〜５の何れか１つに記載の化合物。
8. 【請求項８】下記式13 を有する請求項１〜５の何れか１つに記載の化合物。
9. 【請求項９】下記式14 を有する請求項１〜５の何れか１つに記載の化合物。
10. 【請求項１０】下記式22 を有する請求項１〜５の何れか１つに記載の化合物。
11. 【請求項１１】下記式27c を有する請求項１〜５の何れか１つに記載の化合物。
12. 【請求項１２】下記式36 を有する請求項１〜５の何れか１つに記載の化合物。
13. 【請求項１３】下記式37 を有する請求項１〜５の何れか１つに記載の化合物。
14. 【請求項１４】下記式48a を有する請求項１〜５の何れか１つに記載の化合物。
15. 【請求項１５】下記式48b を有する請求項１〜５の何れか１つに記載の化合物。
16. 【請求項１６】下記式49a を有する請求項１〜５の何れか１つに記載の化合物。
17. 【請求項１７】下記式49b を有する請求項１〜５の何れか１つに記載の化合物。
18. 【請求項１８】下記式54c を有する請求項１〜５の何れか１つに記載の化合物。
19. 【請求項１９】下記式59 を有する請求項１〜５の何れか１つに記載の化合物。
20. 【請求項２０】下記式60 を有する請求項１〜５の何れか１つに記載の化合物。
21. 【請求項２１】下記式64c を有する請求項１〜５の何れか１つに記載の化合物。
22. 【請求項２２】下記式68c を有する請求項１〜５の何れか１つに記載の化合物。
23. 【請求項２３】下記式75a を有する請求項１〜５の何れか１つに記載の化合物。
24. 【請求項２４】下記式75b を有する請求項１〜５の何れか１つに記載の化合物。
25. 【請求項２５】下記式78a を有する請求項１〜５の何れか１つに記載の化合物。
26. 【請求項２６】下記式78b を有する請求項１〜５の何れか１つに記載の化合物。
27. 【請求項２７】下記式70 但し、70a:R＝Ac、R₁＝CH₃ 70b:R＝Ｈ、R₁＝CH₃ 70c:R＝R₁＝Ｈ を有する請求項１〜５の何れか１つに記載の化合物。
28. 【請求項２８】下記式82 但し、82a:R＝Ac、R₁＝CH₃ 82b:R＝Ｈ、R₁＝CH₃ 82c:R＝R₁＝Ｈ を有する請求項１〜５の何れか１つに記載の化合物。
29. 【請求項２９】下記式83 但し、83a:R＝Ac、R₁＝CH₃ 83b:R＝Ｈ、R₁＝CH₃ 83c:R＝R₁＝Ｈ を有する請求項１〜５の何れか１つに記載の化合物。
30. 【請求項３０】請求項１〜29の何れか１つに記載の化合
    物と、少なくとも１つの医薬的に受容な賦形剤を含有す
    る抗腫瘍組成物。
31. 【請求項３１】請求項１〜29の何れか１つに記載の化合
    物と、 式II Ab−Sp−Ｅ （II） 〔Abは、腫瘍に関連した抗原に特異性である抗体又はそ
    のフラグメントの１つ、又はEGF（表皮成長因子）、α
    −TGF（α−形質転換成長因子）、PDGF（血小板由来成
    長因子）、IGFI＋II（インスリン成長因子Ｉ＋II）又は
    FCFa＋ｂ（線維芽細胞成長因子ａ＋ｂ）からなる群から
    選択されるバイオモレキュール、 Ｅは、免疫性でないか、ほとんど免疫原性がなく、α−
    又はβ−グルコシダーゼ、α−ガラクトシダーゼ、α又
    はβ−マンノシダーゼ、α−フコシダーゼ、Ｎ−アセチ
    ル−α−ガラクトサミニダーゼ、Ｎ−アセチル−β/N−
    アセチル−α−グルコサミニダーゼ又はβ−グルクロニ
    ダーゼからなる群から選択される哺乳動物のグリコシダ
    ーゼであり、 Sp（アーム）は、式III又はIV Ｘ′（Ｓ）nY′ （III） Ｘ′（Ｓ）ｎ （IV） （Ｘ′又はＹ′は、−CO−R₁₃−（Ｎ−サクシニミド）
    −又は−Ｃ（＝R₁₄）−CH₂−CH₂−（R₁₃は−CH₂−CH₂、
    1,4−シクロヘキシリデン、1,3−又は1,4−フェニレン
    又はメトキシカルボニル、又はクロロ−1,4−フェニレ
    ン基、R₁₄は酸素原子又はNH基、ｎは１又は２）のスル
    フィド又はジスルフィドを含有する基、又はポリペプチ
    ドアームである〕の酵素／腫瘍特異性抗体コンジュゲー
    トとの組み合わせからなる抗腫瘍組成物。
32. 【請求項３２】化合物と酵素／腫瘍特異性抗体コンジュ
    ゲートとが、同時に、別々に又は期間中にわたって使用
    される請求項31に記載の抗腫瘍組成物。
33. 【請求項３３】（１）式Ａ 〔Ｚは基 （R₈、R₁₀、R₁₁とR₁₂は上記の定義と同じ）、 Ｒ′は次の基の１つ ベンジル基の置換基であるＹは、 −水素原子、 −NO₂、ハロゲン原子、基SO₂X（Ｘは−CH₃、C₆H₄−C
    H₃、NH₂、Ｎ−（C₁〜C₄アルキル）₂又はNH−C₁〜C₄アル
    キル）、−CN、アシル又はCOO−アルキルから選択され
    た電子吸引基、 −Ｏ−アルキル、NHCO−アルキル、Ｎ（アルキル）CO−
    アルキル、Ｓ−アルキル及びアルキルから選択された電
    子供与基 からなる群から選択され、ｍは１〜４の整数）］ の誘導体と、 式Ｂ （式中、R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇とＲは上記の定義
    と同じ）のアンスラサイクリンとをカップリングし、 （２）式Ｉの化合物（R₁〜R₁₂、Ｒは前記と同一意味）
    を得るために、得られた化合物に存在する保護基を除去
    する ことからなる、グルコシダーゼによって分解しうる、請
    求項１に記載の式Ｉの化合物の製法。
34. 【請求項３４】ベンジル基の−CH₂基が、−Ｏ−グリコ
    シル基に対してパラ又はオルト位に存在する請求項33に
    記載の製法。
35. 【請求項３５】（Ｉ）式Ａ 〔Ｚはヒドロキシ基又はＯ−トリアルキルシリル基、 Ｒ′は次の基の１つ ベンジル基の置換基であるＹは、 −水素原子、 −NO₂、ハロゲン原子、基SO₂X（Ｘは−CH₃、C₆H₄−C
    H₃、NH₂、Ｎ−（C₁〜C₄アルキル）₂又はNH−C₁〜C₄アル
    キル）、−CN、アシル又はCOO−アルキルから選択され
    た電子吸引基、 −Ｏ−アルキル、NHCO−アルキル、Ｎ（アルキル）CO−
    アルキル、Ｓ−アルキル及びアルキルから選択された電
    子供与基 からなる群から選択され、ｍは１〜４の整数）］ の誘導体と、 式Ｂ （式中、R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇とＲは上記の定義
    と同じ）のアンスラサイクリンとをカップリングし、 （２）得られた化合物に存在する保護基を除去し、 （３）式Ｉの化合物（R₁〜R₁₂、Ｒは前記と同一意味）
    を得るために、 次式 （R₈，R₁₀，R₁₁及びR₁₂は上記の定義と同じ）の炭水化
    物と適宜縮合させることからなる、グリコシダーゼによ
    って分解し得る、請求項１に記載の式Ｉの化合物の製
    法。
36. 【請求項３６】ベンジル基の−CH₂基が、−Ｏ−グリコ
    シル基に対してパラ又はオルト位に存在する請求項35に
    記載の製法。
37. 【請求項３７】工程（１）の前に、グリコシル化ｐ−ヒ
    ドロキシベンジル誘導体を、 （ａ）クレゾールと炭水化物又はパーアセチル化メチル
    グルクロネートとの縮合、 （ｂ）生成物をベンジルブロム化、 （ｃ）ブロム化誘導体の溶媒分解、 （ｄ）ヒドロキシ基をヒドロキシサクシンイミジル又は
    パラ−ニトロフェノキシカルボニル誘導体での活性化 によって得る請求項33〜36の何れか１つに記載の製法。
38. 【請求項３８】式２の４−ブロモメチルフェニル2,3,4,
    6−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシ
    ド、 式３の４−ホルミルフェニル2,3,4,6−テトラ−Ｏ−ア
    セチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド、 式４の４−ヒドロキシメチルフェニル2,3,4,6−テトラ
    −Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド、 式９の２−ブロモメチルフェニル2,3,4,6−テトラ−Ｏ
    −アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド、 式10の２−ホルミルフェニル2,3,4,6−テトラ−Ｏ−ア
    セチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド、 式11の２−ヒドロキシメチルフェニル2,3,4,6−テトラ
    −Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド、 式16のメチル（４−ブロモメチルフェニル2,3,4−トリ
    −Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド）ウロネー
    ト、 式17のメチル（４−ホルミルフェニル2,3,4−トリ−Ｏ
    −アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド）ウロネート、 式18のメチル（４−ヒドロキシメチルフェニル2,3,4−
    トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド）ウロ
    ネート、 式23のメチル（２−ブロモメチルフェニル,2,3,4−トリ
    −Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド）ウロネー
    ト、 式24のメチル（２−ヒドロキシメチルフェニル2,3,4−
    トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド）ウロ
    ネート、 式25のメチル（２−ホルミルフェニル2,3,4−トリ−Ｏ
    −アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド）ウロネート、 式32のＮ−〔２−ヒドロキシベンジルオキシカルボニ
    ル〕ダウノルビシン、 式38のＮ−〔４−ヒドロキシベンジルオキシカルボニ
    ル〕ダウノルビシン、 式42の２−メチル−４−ニトロフェニル2,3,4,6−テト
    ラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド、 式43の２−ブロモメチル−４−ニトロフェニル2,3,4,6
    −テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシ
    ド、 式44の２−ジブロモメチル−４−ニトロフェニル2,3,4,
    6−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシ
    ド、 式45の２−ホルミル−４−ニトロフェニル2,3,4,6−テ
    トラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド、 式46の２−ヒドロキシメチル−４−ニトロフェニル2,3,
    4,6−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノ
    シド、 式51のメチル（２−ホルミル−４−ニトロフェニル2,3,
    4−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド）
    ウロネート、 式52のメチル（２−ヒドロキシメチル−４−ニトロフェ
    ニル2,3,4−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラ
    ノシド）ウロネート、 式55の２−クロロ−４−メチルフェニル2,3,4,6−テト
    ラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシド、 式56の２−クロロ−４−ブロモメチルフェニル2,3,4,6
    −テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシ
    ド、 式57の２−クロロ−４−ヒドロキシメチルフェニル2,3,
    4,6−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノ
    シド、 式61のメチル（４−ホルミル−２−ニトロフェニル2,3,
    4−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシド）
    ウロネート、 式62のメチル（４−ヒドロキシメチル−２−ニトロフェ
    ニル2,3,4−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラ
    ノシド）ウロネート、 式73の（４−ブロモメチル−２−ニトロ）フェニル2,3,
    4,6−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノ
    シド、 式74の（４−ヒドロキシメチル−２−ニトロ）フェニル
    2,3,4,6−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピ
    ラノシド、 式76の４−ヒドロキシ−３−クロロベンズアルデヒド2,
    3,4−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−メチルグルクロニ
    ド、 式77の（４−ヒドロキシメチル−２−クロロ）フェニル
    2,3,4−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−メチルグルクロ
    ニド、 式５の2,5−ジオキソピロリジン−１−イル ４−（2,
    3,4,6−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−ガラクトピラ
    ノシル）ベンジルカーボネート、 式12の2,5−ジオキソピロリジン−１−イル ２−（2,
    3,4,6−テトラ−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラ
    ノシル）ベンジルカーボネート、 式19の2,5−ジオキソピロリジン−１−イル ４−〔メ
    チル（2,3,4−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピ
    ラノシル）ウロネート〕ベンジルカーボネート、 式26の４−ニトロフェニル ２−〔メチル（2,3,4−ト
    リ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）ウロネ
    ート〕ベンジルカーボネート、 式30の４−ニトロフェニル ２−（ｔ−ブチルジメチル
    シリルオキシ）ベンジルカーボネート、 式35の2,5−ジオキソピロリジン−１−イル ４−（2,
    3,4,6−テトラ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノ
    シル）ベンジルカーボネート、 式40の2,5−ジオキソピロリジン−１−イル ４−ジメ
    チル−ｔ−ヘキシルシリルオキシベンジルカーボネー
    ト、 式47の４−ニトロフェニル ２−（2,3,4,6−テトラ−
    Ｏ−アセチル−α−Ｄ−ガラクトピラノシル）−５−ニ
    トロベンジルカーボネート、 式53の４−ニトロフェニル ２−〔メチル（2,3,4−ト
    リ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）ウロネ
    ート〕−５−ニトロベンジルカーボネート、 式67の４−ニトロフェニル ４−メトキシ−５−ニトロ
    −２−〔メチル（2,3,4−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ
    −グルコピラノシル）ウロネート〕ベンジルカーボネー
    ト、 式69の４−ニトロフェニル ４−〔メチル（2,3,4−ト
    リ−Ｏ−アセチル−β−グルコピラノシル）ウロネー
    ト〕−５−ニトロベンジルカーボネート、 式81の４−クロロフェニル ２−〔メチル（2,3,4−ト
    リ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシル）ウロネ
    ート〕−５−ニトロベンジルカーボネート からなる群から選択された中間体を経て、式Ｉの化合物
    を製造する請求項33〜36の何れか１つに記載の製法。