JP3013060B2 - 虫歯菌歯牙付着阻害及び脱離のための口腔用組成物 - Google Patents

虫歯菌歯牙付着阻害及び脱離のための口腔用組成物

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JP3013060B2 JP3328032A JP32803291A JP3013060B2 JP 3013060 B2 JP3013060 B2 JP 3013060B2 JP 3328032 A JP3328032 A JP 3328032A JP 32803291 A JP32803291 A JP 32803291A JP 3013060 B2 JP3013060 B2 JP 3013060B2
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【発明の詳細な説明】
【0001】
【産業上の利用分野】この発明は、虫歯菌歯牙付着阻害
及び脱離のための口腔用組成物に関する。
【0002】
【従来の技術】齲蝕は、歯牙表面のエナメル質(ハイド
ロキシアパタイト)に唾液中の成分であるタンパク質が
吸着して形成された獲得被膜(ペリクル)に、虫歯菌で
あるストレプトコッカス・ミュータンス(S.mutans),
ストレプトコッカス・ソブリナス(S.sobrinus)等が獲
得被膜との相互作用により初期付着することから始ま
る。
【0003】初期付着した虫歯菌は増加,凝集,グルカ
ン(細胞外多糖類)の産生により、歯牙表面に定着して
歯垢(プラーク)を形成し、さらに、定着した虫歯菌
は、その付着過程で生じた遊離のフルクトースやインベ
ルターゼの作用によってスクロースから生成した単糖、
あるいは食餌中の各種の糖を分解して酸を生成する。こ
の酸が歯のエナメル質(ハイドロキシアパタイト)を脱
灰し齲蝕となる。
【0004】従来より齲蝕予防に、クロルヘキシジン,
メースエキス(DHGA)等の上記虫歯菌に対する抗菌
剤、ムタステイン等のグルカン形成阻害剤、デキストラ
ナーゼ等のグルカン分解酵素が使用されている。
【0005】
【発明が解決しようとする課題】これら抗菌剤,阻害
剤、分解酵素等は相応の齲蝕予防効果を発現している
が、より一層の改善が待たれている。また、初期付着抑
制作用を示す物として、水溶性キチン及びキトサン類が
知られているが、食品に利用するにはまだ満足したもの
ではなかった。
【0006】発明者らは齲蝕疾患の予防には、歯牙表面
の獲得被膜に虫歯菌が付着するのを阻害すること、ま
た、獲得被膜に付着した虫歯菌を脱離することによっ
て、歯垢の形成を抑制するのが効果的であるとの認識に
基づき鋭意研究し、特定の多糖類すなわちフノラン、フ
ァーセレラン及びジェランガムよりなる群から選択され
る多糖類が、虫歯菌の獲得被膜への付着阻害、虫歯菌の
獲得被膜からの脱離に効果的であるとの知見を得てこの
発明を完成したものである。
【0007】
【課題を解決するための手段】この発明の虫歯菌歯牙付
着阻害及び脱離のための口腔用組成物は、フノラン、フ
ァーセレラン及びジェランガムよりなる群から選択され
る多糖類を有効成分とする。
【0008】フノランは、紅藻類フノリ属の熱水抽出物
であり、粘質多糖類で、アガロースに近い構造をもち、
ゲル化力が弱く、かなりの硫酸基を有している点ではカ
ラゲナンに類似している。
【0009】ファーセレランは、紅藻類Furcellaria fa
stigiataの熱水抽出物であり、デンマークで寒天の代用
として開発され、寒天κ- カラゲナンの中間の性質を有
し、食品関係のみに乳化剤,安定剤,濃厚剤等として利
用されている。
【0010】ジェランガムは、水草に生息している微生
物 Pseudomonasを利用して、コーンシロップを醗酵させ
て作り出した醗酵多糖であり、分子量約60〜70万
で、その糖組成は、グルコース2分子、グルクロン酸と
ラムノースがそれぞれ1分子という割合の直鎖状の多糖
類で、加工食品の成分であり、基本的には、テクスチャ
ー剤,安定剤,ゲル化剤等として利用されている。
【0011】これら特定の多糖類すなわちフノラン、フ
ァーセレラン及びジェランガムは、いずれも、既に一般
に食品に利用されているもので、安全であり、また供給
が容易であるとともに、従来の虫歯予防物質である抗菌
剤,グルカン形成阻害剤,グルカン分解酵素等と併用す
ると、歯垢形成は著しく減少すると思われ、その上、チ
ューインガム,錠菓,飲料,アイスクリーム及びチョコ
レート等の食品のほか、歯磨剤,歯肉剤,洗口剤,口中
清涼剤等の形をとることもできる。
【0012】
【作用効果】この発明の口腔用組成物は、特定の多糖類
すなわちフノラン、ファーセレラン及びジェランガムよ
りなる群から選択される多糖類が、虫歯菌の獲得被膜へ
の付着阻害、虫歯菌の獲得被膜からの脱離に効果的に作
用し、結局は歯垢形成を抑制し、虫歯を予防する。
【0013】これらの作用効果は、次の実験方法に基づ
いて行った実験例とその結果によって裏付けられる。 実験方法; Infect.Immun. 52(2), 555(1986). を参考にハイドロキ
シアパタイトを歯牙表面代用物質として行った。
【0014】供試菌株; 実験に用いた菌株は S.sobrinus B13 株で、[3H]-thy
midineを10μCi/ml 含むTodd-Hewitt (TH) broth 培地
(BBL社製)で、定常期初期まで37℃で嫌気的に培養し
た。培養後、buffered KCl(0.05M KCl, 1mM CaCl2, 1mM
potassium phosphate, 0.1mM MgCl2, pH6.0)を用い、
遠心洗浄を3回繰り返す、その後 bovine serum albumi
n (BSA) (5mg/ml)含有 buffered KCl に懸濁する。懸濁
液は、2.0×108 cells/ml(実験系最終濃度1.0×108 cel
ls/ml)として、実験に供した。
【0015】唾液処理ハイドロキシアパタイト(S−H
A)の調製; ハイドロキシアパタイト(HA)ビーズは、BDH Che
micals社製(BDH Chemicals, Gallard Schlessinger Che
mical Ltd., Poole, England) のものを実験に供した。
a round-bottom 96-well microculture plate中で、buf
fered KCl一昼夜平衡化した5mgのHAビーズに、 120
μl の唾液を加え1時間混合する。 bufferedKCl で2
回洗浄後、 BSA含有buffered KCl(120μl)を加え30分
間混合する。その後、buffered KClで2回洗浄し実験に
供した。なお、唾液を加えずに BSA含有buffered KClで
処理したHAビーズには供試菌の付着がないことを、別
途実験により確認している。
【0016】海藻多糖溶液; フノランは、次のようにして調製した。フクロフノリ
〔株式会社東昆より入手〕50gに水1500mlを加
え、100℃で2時間抽出し、その濾液を濃縮し塩化セ
チルピリジニウム−水和物を1%濃度になるように加
え、よく分散させ、遠心分離することにより分散物を集
め、メタノールに加え、12時間よく攪拌した後、濾過
して粉状物を得る。その後、4M-KCl に粉状物を加え、
沈澱物を遠心分離により分離し、再度80℃の4M-KCl
に加え、溶解させる。溶解後、4倍量のエタノールを加
え沈澱物を得る。沈澱物を少量の水に溶解し、2日間流
水で透析した後、4倍量のエタノールで沈澱させ、凍結
乾燥させてフノラン10gを得た。
【0017】ファーセレランは、旭東化学産業社製の物
を使用した。各海藻(紅藻)多糖類は、蒸留水で20,
200μg /mlの濃度に溶解した。
【0018】細菌産生多糖溶液; ジェランガムは、三栄化学工業社製の物を蒸留水で2
0,200μg /mlの濃度に溶解して使用した。
【0019】実験例 1 海藻多糖類、フノラン、ファーセレランの虫歯菌 S.sob
rinus B13 株に対する歯牙への付着阻害効果の評価。菌
懸濁液(60μl)と海藻多糖溶液(60μl)をS−HAに加
え、室温で1時間混合(1分間に5回転の速度で)し
た。その後、buffered KClで3回洗浄し、クリアゾルII
(ナカライテスク)を含むバイヤルに移し、液体シンチ
レーションカウンターで測定し、S−HAに付着した菌
数を求めた。対照として、海藻多糖溶液の代わりに蒸留
水を用い、同様の試験を行った場合の付着菌数をコント
ロールとした。
【0020】菌のS−HA付着阻害率(%)=(コント
ロール付着菌数−サンプル添加時の付着菌数)/コント
ロール付着菌数×100結果を表1に示す。
【0021】
【表1】
【0022】表1から明らかなように、これら海藻多糖
類は、0.01%(0.1mg/ml)低濃度で約97%以上、また、
0.001%(0.01mg/ml) 低濃度でも90%以上のの歯牙付
着阻害率を示した。
【0023】実験例 2 海藻多糖類、フノラン、ファーセレランの虫歯菌 S.sob
rinus B13 株に対する歯牙からの脱離効果の評価。菌懸
濁液(60μl)と蒸留水 (60μl)をS−HAに加え、室温
で1時間(1分間に5回転の速度で)混合した後、buff
ered KClで3回洗浄した(コントロール付着菌数)。
【0024】その後、海藻多糖溶液(60μl)と蒸留水(60
μl)を加え、室温で1時間(同じく1分間に5回転の速
度で)混合するとともに、buffered KClで3回洗浄した
(海藻多糖溶液処理後の歯牙残存付着菌数)。各処理後
のS−HAをクリアゾルII(ナカライテスク)を含むバ
イヤルに移して液体シンチレーションカウンターで測定
し、S−HAに付着した菌数を求めた。
【0025】菌のS−HA脱離率(%)=(コントロー
ル付着菌数−海藻多糖溶液処理後の歯牙残存付着菌数)
/コントロール付着菌数×100結果を表2に示す。
【0026】
【表2】
【0027】表2から明らかなように、これら海藻多糖
類は、0.01%(0.1mg/ml)低濃度で約89〜50%の歯牙
付着細菌の脱離率を示した。
【0028】実験例 3 細菌産生多糖類、ジェランガムの虫歯菌 S.sobrinus B1
3 株に対する歯牙への付着阻害効果の評価。菌懸濁液
(60μl)と細菌産生多糖溶液(60 μl)をS−HAに加
え、室温で1時間混合(1分間に5回転の速度で)し
た。その後、buffered KClで3回洗浄し、クリアゾルII
(ナカライテスク)を含むバイヤルに移し、液体シンチ
レーションカウンターで測定し、S−HAに付着した菌
数を求めた。対照として、細菌産生多糖溶液の代わりに
蒸留水を用い、同様の試験を行った場合の付着菌数をコ
ントロールとした。
【0029】菌のS−HA付着阻害率(%)=(コント
ロール付着菌数−サンプル添加時の付着菌数)/コント
ロール付着菌数×100結果を表3に示す。
【0030】
【表3】
【0031】表3から明らかなように、この細菌産生多
糖類は、0.01%(0.1mg/ml)低濃度で約98%、また、
0.001%(0.01mg/ml) 低濃度でも93%の歯牙付着阻害
率を示した。
【0032】実験例 4 細菌産生多糖類の虫歯菌 S.sobrinus B13 株に対する歯
牙からの脱離効果の評価。菌懸濁液(60μl)と蒸留水(60
μl)をS−HAに加え、室温で1時間(1分間に5回転
の速度で)混合した後、buffered KClで3回洗浄した
(コントロール付着菌数)。その後、細菌産生多糖溶液
(60μl)と蒸留水(60μl)を加え、室温で1時間(同じく
1分間に5回転の速度で)混合するとともにbuffered K
Clで3回洗浄した(細菌産生溶液処理後の歯牙残存付着
菌数)。各処理後のS−HAをクリアゾルII(ナカライ
テスク)を含むバイヤルに移して、液体シンチレーショ
ンカウンターで測定し、S−HAに付着した菌数を求め
た。
【0033】菌のS−HA脱離率(%)=(コントロー
ル付着菌数−細菌産生多糖溶液処理後の歯牙残存付着菌
数)/コントロール付着菌数×100結果を表4に示
す。
【0034】
【表4】
【0035】表4から明らかなように、この細菌産生多
糖類は、0.01%(0.1mg/ml)低濃度で71%の歯牙付着細
菌の脱離率を示した。
【0036】
【実施例】実施例1 下記の処方にしたがってチューインガムを調製した。 フノラン 0.2 % ガムベース 20.0 % 砂糖 54.0 % 水飴 14.0 % ブドウ糖 10.8 % 軟化剤 1.0 %
【0037】実施例2 下記の処方にしたがって錠菓を調製した。 ファーセレラン 0.5 % 砂糖 75.0 % 乳糖 20.0 % グリセリン脂肪酸エステル 0.2 % 精製水 4.3 %
【0038】実施例3 下記の処方にしたがってアイスクリームを調製した。 フノラン 0.5 % クリーム (脂肪率45%) 25.0 % 牛乳 (脂肪率 3.7%) 35.0 % 脱脂粉乳 (無糖) 24.3 % 砂糖 10.2 % コーンシロップ 4.7 % 安定剤 0.3 %
【0039】実施例4 下記の処方にしたがって洗口剤を調製した。 ファ−セレラン 0.5 % ラウリル硫酸ナトリウム 1.5 % グリセリン 10.0 % 香料 0.8 % サッカリンナトリウム 0.2 % 精製水 87.0 %
【0040】実施例5 下記の処方にしたがってチューインガムを調製した。 ジェランガム 0.2 % ガムベース 20.0 % 砂糖 54.0 % 水飴 14.0 % ブドウ糖 10.8 % 軟化剤 1.0 %
【0041】実施例6 下記の処方にしたがって洗口剤を調製した。 ジェランガム 0.5 % ラウリル硫酸ナトリウム 1.5 % グリセリン 10.0 % 香料 0.8 % サッカリンナトリウム 0.2 % 精製水 87.0 %
【0042】実施例7 下記の処方にしたがってチョコレートを調製した。 フノラン 0.6 % カカオマス 15.0 % 全脂粉乳 25.0 % ココアバター 18.0 % 砂糖 41.0 % 乳化剤 0.3 % 香料 0.1 %
【0043】実施例8 下記の処方にしたがってチョコレートを調製した。 ジェランガム 0.6 % カカオマス 15.0 % 全脂粉乳 25.0 % ココアバター 18.0 % 砂糖 41.0 % 乳化剤 0.3 % 香料 0.1 %
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 FI A23L 2/38 A23L 2/38 F A61K 7/26 A61K 7/26 31/715 31/725 (58)調査した分野(Int.Cl.7,DB名) A61K 31/715 ACK A61K 7/26 A61K 31/725

Claims (1)

    (57)【特許請求の範囲】
  1. 【請求項1】フノラン、ファーセレラン及びジェランガ
    ムよりなる群から選択される多糖類を有効成分とする虫
    歯菌歯牙付着阻害及び脱離のための口腔用組成物。
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