JPH05139979A

JPH05139979A - 虫歯菌歯牙付着阻害及び脱離のための口腔用組成物

Info

Publication number: JPH05139979A
Application number: JP3328032A
Authority: JP
Inventors: Yoji Saeki; 洋二佐伯
Original assignee: Lotte Co Ltd
Current assignee: Lotte Co Ltd
Priority date: 1991-11-16
Filing date: 1991-11-16
Publication date: 1993-06-08
Anticipated expiration: 2015-02-28
Also published as: JP3013060B2

Abstract

(57)【要約】【構成】フノラン、ι−カラギーナン、ファーセレラン
及びジェランガムよりなる群から選択される多糖類を有
効成分とする虫歯菌付着阻害及び脱離のための口腔用組
成物。【効果】虫歯菌の獲得被膜への付着阻害、虫歯菌の獲得
被膜からの脱離に効果的に作用し、結局は歯垢形成を抑
制し、虫歯を予防する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】この発明は、虫歯菌歯牙付着阻害
及び脱離のための口腔用組成物に関する。

【０００２】

【従来の技術】齲蝕は、歯牙表面のエナメル質（ハイド
ロキシアパタイト）に唾液中の成分であるタンパク質が
吸着して形成された獲得被膜（ペリクル）に、虫歯菌で
あるストレプトコッカス・ミュータンス（S.mutans），
ストレプトコッカス・ソブリナス（S.sobrinus）等が獲
得被膜との相互作用により初期付着することから始ま
る。

【０００３】初期付着した虫歯菌は増加，凝集，グルカ
ン（細胞外多糖類）の産生により、歯牙表面に定着して
歯垢（プラーク）を形成し、さらに、定着した虫歯菌
は、その付着過程で生じた遊離のフルクトースやインベ
ルターゼの作用によってスクロースから生成した単糖、
あるいは食餌中の各種の糖を分解して酸を生成する。こ
の酸が歯のエナメル質（ハイドロキシアパタイト）を脱
灰し齲蝕となる。

【０００４】従来より齲蝕予防に、クロルヘキシジン，
メースエキス（ＤＨＧＡ）等の上記虫歯菌に対する抗菌
剤、ムタステイン等のグルカン形成阻害剤、デキストラ
ナーゼ等のグルカン分解酵素が使用されている。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】これら抗菌剤，阻害
剤、分解酵素等は相応の齲蝕予防効果を発現している
が、より一層の改善が待たれている。また、初期付着抑
制作用を示す物として、水溶性キチン及びキトサン類が
知られているが、食品に利用するにはまだ満足したもの
ではなかった。

【０００６】発明者らは齲蝕疾患の予防には、歯牙表面
の獲得被膜に虫歯菌が付着するのを阻害すること、ま
た、獲得被膜に付着した虫歯菌を脱離することによっ
て、歯垢の形成を抑制するのが効果的であるとの認識に
基づき鋭意研究し、特定の多糖類すなわちフノラン、ι
−カラギーナン、ファーセレラン及びジェランガムより
なる群から選択される多糖類が、虫歯菌の獲得被膜への
付着阻害、虫歯菌の獲得被膜からの脱離に効果的である
との知見を得てこの発明を完成したものである。

【０００７】

【課題を解決するための手段】この発明の虫歯菌歯牙付
着阻害及び脱離のための口腔用組成物は、フノラン、ι
−カラギーナン、ファーセレラン及びジェランガムより
なる群から選択される多糖類を有効成分とする。

【０００８】フノランは、紅藻類フノリ属の熱水抽出物
であり、粘質多糖類で、アガロースに近い構造をもち、
ゲル化力が弱く、かなりの硫酸基を有している点ではカ
ラゲナンに類似している。

【０００９】ι−カラギーナンは、紅藻類スギノリ科，
ミリン科，イバラノリ科，オキツノリ科の熱水抽出物で
あり、エステル型硫酸基（３２％），Ｃａ²⁺イオンによ
って最も堅いゲルを形成する。

【００１０】ファーセレランは、紅藻類Furcellaria fa
stigiataの熱水抽出物であり、デンマークで寒天の代用
として開発され、寒天κ- カラゲナンの中間の性質を有
し、食品関係のみに乳化剤，安定剤，濃厚剤等として利
用されている。

【００１１】ジェランガムは、水草に生息している微生
物 Pseudomonasを利用して、コーンシロップを醗酵させ
て作り出した醗酵多糖であり、分子量約６０〜７０万
で、その糖組成は、グルコース２分子、グルクロン酸と
ラムノースがそれぞれ１分子という割合の直鎖状の多糖
類で、加工食品の成分であり、基本的には、テクスチャ
ー剤，安定剤，ゲル化剤等として利用されている。

【００１２】これら特定の多糖類すなわちフノラン、ι
−カラギーナン、ファーセレラン及びジェランガムは、
いずれも、既に一般に食品に利用されているもので、安
全であり、また供給が容易であるとともに、従来の虫歯
予防物質である抗菌剤，グルカン形成阻害剤，グルカン
分解酵素等と併用すると、歯垢形成は著しく減少すると
思われ、その上、チューインガム，錠菓，飲料，アイス
クリーム及びチョコレート等の食品のほか、歯磨剤，歯
肉剤，洗口剤，口中清涼剤等の形をとることもできる。

【００１３】

【作用効果】この発明の口腔用組成物は、特定の多糖類
すなわちフノラン、ι−カラギーナン、ファーセレラン
及びジェランガムよりなる群から選択される多糖類が、
虫歯菌の獲得被膜への付着阻害、虫歯菌の獲得被膜から
の脱離に効果的に作用し、結局は歯垢形成を抑制し、虫
歯を予防する。

【００１４】これらの作用効果は、次の実験方法に基づ
いて行った実験例とその結果によって裏付けられる。実験方法；Infect.Immun. 52(2), 555(1986). を参考に
ハイドロキシアパタイトを歯牙表面代用物質として行っ
た。

【００１５】供試菌株；実験に用いた菌株は S.sobrinu
s B13 株で、［³H］-thymidineを10μCi/ml 含むTodd-H
ewitt (TH) broth 培地(BBL社製)で、定常期初期まで37
℃で嫌気的に培養した。培養後、buffered KCl(0.05M K
Cl, 1mM CaCl₂, 1mM potassium phosphate, 0.1mM MgCl
₂, pH6.0)を用い、遠心洗浄を３回繰り返す、その後 bo
vine serum albumin (BSA) (5mg/ml)含有 buffered KCl
に懸濁する。懸濁液は、2.0×10⁸ cells/ml(実験系最
終濃度1.0×10⁸ cells/ml)として、実験に供した。

【００１６】唾液処理ハイドロキシアパタイト（Ｓ−Ｈ
Ａ）の調製；ハイドロキシアパタイト（ＨＡ）ビーズ
は、ＢＤＨ Chemicals社製(BDH Chemicals, Gallard Sc
hlessinger Chemical Ltd., Poole, England) のものを
実験に供した。a round-bottom 96-well microculture
plate中で、buffered KCl一昼夜平衡化した５mgのＨＡ
ビーズに、 120μl の唾液を加え１時間混合する。 buf
feredKCl で２回洗浄後、 BSA含有buffered KCl(120μ
l)を加え３０分間混合する。その後、buffered KClで２
回洗浄し実験に供した。なお、唾液を加えずに BSA含有
buffered KClで処理したＨＡビーズには供試菌の付着が
ないことを、別途実験により確認している。

【００１７】海藻多糖溶液；フノランは、次のようにし
て調製した。フクロフノリ〔株式会社東昆より入手〕５
０ｇに水１５００ｍｌを加え、１００℃で２時間抽出
し、その濾液を濃縮し塩化セチルピリジニウム−水和物
を１％濃度になるように加え、よく分散させ、遠心分離
することにより分散物を集め、メタノールに加え、１２
時間よく撹拌した後、濾過して粉状物を得る。その後、
４M-KCl に粉状物を加え、沈澱物を遠心分離により分離
し、再度８０℃の４M-KCl に加え、溶解させる。溶解
後、４倍量のエタノールを加え沈澱物を得る。沈澱物を
少量の水に溶解し、２日間流水で透析した後、４倍量の
エタノールで沈澱させ、凍結乾燥させてフノラン１０ｇ
を得た。

【００１８】ι−カラギーナンは、シグマ社製の物を使
用した。ファーセレランは、旭東化学産業社製の物を使
用した。各海藻（紅藻）多糖類は、蒸留水で２０，２０
０μg ／ｍｌの濃度に溶解した。

【００１９】細菌産生多糖溶液；ジェランガムは、三栄
化学工業社製の物を蒸留水で２０，２００μg ／ｍｌの
濃度に溶解して使用した。

【００２０】実験例１海藻多糖類、フノラン、ι−カラギーナン、ファーセレ
ランの虫歯菌 S.sobrinus B13 株に対する歯牙への付着
阻害効果の評価。菌懸濁液(60μl)と海藻多糖溶液(60μ
l)をＳ−ＨＡに加え、室温で１時間混合（１分間に５回
転の速度で）した。その後、buffered KClで３回洗浄
し、クリアゾルII（ナカライテスク）を含むバイヤルに
移し、液体シンチレーションカウンターで測定し、Ｓ−
ＨＡに付着した菌数を求めた。対照として、海藻多糖溶
液の代わりに蒸留水を用い、同様の試験を行った場合の
付着菌数をコントロールとした。

【００２１】菌のＳ−ＨＡ付着阻害率（％）＝（コント
ロール付着菌数−サンプル添加時の付着菌数）／コント
ロール付着菌数×１００結果を表１に示す。

【００２２】

【表１】

【００２３】表１から明らかなように、これら海藻多糖
類は、0.01％(0.1mg/ml)低濃度で約９７％以上、また、
0.001％(0.01mg/ml) 低濃度でも９０％以上のの歯牙付
着阻害率を示した。

【００２４】実験例２海藻多糖類、フノラン、ι−カラギーナン、ファーセレ
ランの虫歯菌 S.sobrinus B13 株に対する歯牙からの脱
離効果の評価。菌懸濁液（60μl)と蒸留水 (60μl)をＳ
−ＨＡに加え、室温で１時間（１分間に５回転の速度
で）混合した後、buffered KClで３回洗浄した（コント
ロール付着菌数）。その後、海藻多糖溶液(60μl)と蒸
留水(60μl)を加え、室温で１時間（同じく１分間に５
回転の速度で）混合するとともに、buffered KClで３回
洗浄した（海藻多糖溶液処理後の歯牙残存付着菌数）。
各処理後のＳ−ＨＡをクリアゾルII（ナカライテスク）
を含むバイヤルに移して液体シンチレーションカウンタ
ーで測定し、Ｓ−ＨＡに付着した菌数を求めた。

【００２５】菌のＳ−ＨＡ脱離率（％）＝（コントロー
ル付着菌数−海藻多糖溶液処理後の歯牙残存付着菌数）
／コントロール付着菌数×１００結果を表２に示す。

【００２６】

【表２】

【００２７】表２から明らかなように、これら海藻多糖
類は、0.01％(0.1mg/ml)低濃度で約８９〜５０％の歯牙
付着細菌の脱離率を示した。

【００２８】実験例３細菌産生多糖類、ジェランガムの虫歯菌 S.sobrinus B1
3 株に対する歯牙への付着阻害効果の評価。菌懸濁液
（60μl)と細菌産生多糖溶液(60 μl)をＳ−ＨＡに加
え、室温で１時間混合（１分間に５回転の速度で）し
た。その後、buffered KClで３回洗浄し、クリアゾルII
（ナカライテスク）を含むバイヤルに移し、液体シンチ
レーションカウンターで測定し、Ｓ−ＨＡに付着した菌
数を求めた。対照として、細菌産生多糖溶液の代わりに
蒸留水を用い、同様の試験を行った場合の付着菌数をコ
ントロールとした。

【００２９】菌のＳ−ＨＡ付着阻害率（％）＝（コント
ロール付着菌数−サンプル添加時の付着菌数）／コント
ロール付着菌数×１００結果を表３に示す。

【００３０】

【表３】

【００３１】表３から明らかなように、この細菌産生多
糖類は、0.01％(0.1mg/ml)低濃度で約９８％、また、
0.001％(0.01mg/ml) 低濃度でも９３％の歯牙付着阻害
率を示した。

【００３２】実験例４細菌産生多糖類の虫歯菌 S.sobrinus B13 株に対する歯
牙からの脱離効果の評価。菌懸濁液(60μl)と蒸留水(60
μl)をＳ−ＨＡに加え、室温で１時間（１分間に５回転
の速度で）混合した後、buffered KClで３回洗浄した
（コントロール付着菌数）。その後、細菌産生多糖溶液
(60μl)と蒸留水(60μl)を加え、室温で１時間（同じく
１分間に５回転の速度で）混合するとともにbuffered K
Clで３回洗浄した（細菌産生溶液処理後の歯牙残存付着
菌数）。各処理後のＳ−ＨＡをクリアゾルII（ナカライ
テスク）を含むバイヤルに移して、液体シンチレーショ
ンカウンターで測定し、Ｓ−ＨＡに付着した菌数を求め
た。

【００３３】菌のＳ−ＨＡ脱離率（％）＝（コントロー
ル付着菌数−細菌産生多糖溶液処理後の歯牙残存付着菌
数）／コントロール付着菌数×１００結果を表４に示す。

【００３４】

【表４】

【００３５】表４から明らかなように、この細菌産生多
糖類は、0.01％(0.1mg/ml)低濃度で７１％の歯牙付着細
菌の脱離率を示した。

【００３６】

【実施例】

実施例１下記の処方にしたがってチューインガムを調製した。フノラン 0.2 ％ガムベース 20.0 ％砂糖 54.0 ％水飴 14.0 ％ブドウ糖 10.8 ％軟化剤 1.0 ％

【００３７】実施例２下記の処方にしたがって錠菓を調製した。ファーセレラン 0.5 ％砂糖 75.0 ％乳糖 20.0 ％グリセリン脂肪酸エステル 0.2 ％精製水 4.3 ％

【００３８】実施例３下記の処方にしたがってアイスクリームを調製した。フノラン 0.5 ％クリーム (脂肪率45％) 25.0 ％牛乳 (脂肪率 3.7％) 35.0 ％脱脂粉乳 (無糖) 24.3 ％砂糖 10.2 ％コーンシロップ 4.7 ％安定剤 0.3 ％

【００３９】実施例４下記の処方にしたがって飲料を調製した。 ι−カラギーナン 0.5 ％果糖ブドウ糖液糖 5.0 ％砂糖 4.0 ％酸味料 1.2 ％香料 0.3 ％精製水 89.0 ％

【００４０】実施例５下記の処方にしたがって洗口剤を調製した。ファ−セレラン 0.5 ％ラウリル硫酸ナトリウム 1.5 ％グリセリン 10.0 ％香料 0.8％サッカリンナトリウム 0.2 ％精製水 87.0 ％

【００４１】実施例６下記の処方にしたがって歯磨剤を調製した。フノラン 0.2 ％ファ−セレラン 0.2 ％ ι−カラギーナン 0.2 ％ラウリル硫酸ナトリウム 1.0 ％水酸化アルミニウム 35.0 ％無水ケイ酸 15.0 ％サッカリンナトリウム 0.2 ％ソルビット 0.5 ％香料 0.7 ％精製水 47.0 ％

【００４２】実施例７下記の処方にしたがってチューインガムを調製した。ジェランガム 0.2 ％ガムベース 20.0 ％砂糖 54.0 ％水飴 14.0 ％ブドウ糖 10.8 ％軟化剤 1.0 ％

【００４３】実施例８下記の処方にしたがって洗口剤を調製した。ジェランガム 0.5 ％ラウリル硫酸ナトリウム 1.5 ％グリセリン 10.0 ％香料 0.8％サッカリンナトリウム 0.2 ％精製水 87.0 ％

【００４４】実施例９下記の処方にしたがってチョコレートを調製した。フノラン 0.6 ％カカオマス 15.0 ％全脂粉乳 25.0 ％ココアバター 18.0 ％砂糖 41.0 ％乳化剤 0.3 ％香料 0.1 ％

【００４５】実施例１０下記の処方にしたがってチョコレートを調製した。ジェランガム 0.6 ％カカオマス 15.0 ％全脂粉乳 25.0 ％ココアバター 18.0 ％砂糖 41.0 ％乳化剤 0.3 ％香料 0.1 ％

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁵ 識別記号庁内整理番号ＦＩ技術表示箇所Ａ２３Ｌ 2/38 Ｆ 9162−4ＢＡ６１Ｋ 7/26 7252−4Ｃ 31/725 8314−4Ｃ

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】フノラン、ι−カラギーナン、ファーセレ
ラン及びジェランガムよりなる群から選択される多糖類
を有効成分とする虫歯菌歯牙付着阻害及び脱離のための
口腔用組成物。