JP2646361B2 - 抗腫瘍作用を有する酸性多糖体の製法 - Google Patents
抗腫瘍作用を有する酸性多糖体の製法Info
- Publication number
- JP2646361B2 JP2646361B2 JP22184787A JP22184787A JP2646361B2 JP 2646361 B2 JP2646361 B2 JP 2646361B2 JP 22184787 A JP22184787 A JP 22184787A JP 22184787 A JP22184787 A JP 22184787A JP 2646361 B2 JP2646361 B2 JP 2646361B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- acidic polysaccharide
- antitumor activity
- polysaccharide
- producing acidic
- fruit body
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Description
＜産業上の利用分野＞ 本発明は、抗腫瘍作用を有する酸性多糖体の製法に関
する。詳しくは、ハラタケ属（Agaricus）のキノコであ
るヒメマツタケの子実体から抗腫瘍作用を有する酸性多
糖体を製造する方法に関するものである。本発明の製法
によって得られる多糖体は抗腫瘍剤として有用である。 ＜従来の技術＞ ヒメマツタケ自体は民間でこれまで糖尿病や高血圧の
治療および抗腫瘍剤の一種として利用されてきた。また
ヒメマツタケ子実体より抗腫瘍作用を有する蛋白多糖体
の製法については、特開昭55−74797号に記載されてい
る。 ＜発明が解決しようとしている問題点＞ しかしながら、抗腫瘍活性本体を分離する方法は確立
されていない。この抗腫瘍活性本体を簡単に効率よく精
製する方法の実現が要望される。 ＜問題点を解決するための手段＞ そこで本発明は抗腫瘍活性本体である酸性多糖体の製
造方法を提供することを目的とする。本発明の目的は以
下に記載する方法によって達成される。 ヒメマツタケ子実体から有効成分を分離するのには、
方法としては生の子実体あるいは乾燥した子実体を使用
する。生の子実体の場合には千切りとし、乾燥品の場合
は粉砕するとよい。千切りあるいは粉砕した子実体はア
ルコール類あるいは20％以下の水を含有するアルコール
類によって抽出前処理することにより低分子成分を予め
除去した後、熱水で多糖体を抽出する。この熱水抽出液
を濃縮し、濃縮液にアルコールを加え、有効成分を沈澱
させる。次いで沈澱物を水に溶解し、この溶液を陰イオ
ン交換樹脂を担体とするカラムに流し、酸性多糖体を吸
着させる。吸着した酸性多糖体は塩化ナトリウムにより
溶出させ、得られる溶出液を透析脱塩し、透析内液の濃
縮液か、または、凍結乾燥したものを再度水に溶かした
液をゲル濾過用担体を充填したカラムに流し、高分子量
画分を採取する。次いで水に対し透析し、透析内液から
常法、例えば、凍結乾燥により、所望の酸性多糖体が得
られる。 このようにして得られた酸性多糖体は以下に説明する
理化学的性質を有する。 （１） 色と形状 凍結乾燥品は軽い多孔質の無味無臭の淡黄褐色粉末で
ある。 （２） 溶解性 水に可溶であるが、メタノール、エタノール、アセト
ン、エーテル、クロロホルム、酢酸エチル、ベンゼン、
およびｎ−ヘキサン等の有機溶媒に不溶である。 （３） 溶液のpH １％の水溶液はpHは約６である。 （４） 比旋光度 ▲
する。詳しくは、ハラタケ属（Agaricus）のキノコであ
るヒメマツタケの子実体から抗腫瘍作用を有する酸性多
糖体を製造する方法に関するものである。本発明の製法
によって得られる多糖体は抗腫瘍剤として有用である。 ＜従来の技術＞ ヒメマツタケ自体は民間でこれまで糖尿病や高血圧の
治療および抗腫瘍剤の一種として利用されてきた。また
ヒメマツタケ子実体より抗腫瘍作用を有する蛋白多糖体
の製法については、特開昭55−74797号に記載されてい
る。 ＜発明が解決しようとしている問題点＞ しかしながら、抗腫瘍活性本体を分離する方法は確立
されていない。この抗腫瘍活性本体を簡単に効率よく精
製する方法の実現が要望される。 ＜問題点を解決するための手段＞ そこで本発明は抗腫瘍活性本体である酸性多糖体の製
造方法を提供することを目的とする。本発明の目的は以
下に記載する方法によって達成される。 ヒメマツタケ子実体から有効成分を分離するのには、
方法としては生の子実体あるいは乾燥した子実体を使用
する。生の子実体の場合には千切りとし、乾燥品の場合
は粉砕するとよい。千切りあるいは粉砕した子実体はア
ルコール類あるいは20％以下の水を含有するアルコール
類によって抽出前処理することにより低分子成分を予め
除去した後、熱水で多糖体を抽出する。この熱水抽出液
を濃縮し、濃縮液にアルコールを加え、有効成分を沈澱
させる。次いで沈澱物を水に溶解し、この溶液を陰イオ
ン交換樹脂を担体とするカラムに流し、酸性多糖体を吸
着させる。吸着した酸性多糖体は塩化ナトリウムにより
溶出させ、得られる溶出液を透析脱塩し、透析内液の濃
縮液か、または、凍結乾燥したものを再度水に溶かした
液をゲル濾過用担体を充填したカラムに流し、高分子量
画分を採取する。次いで水に対し透析し、透析内液から
常法、例えば、凍結乾燥により、所望の酸性多糖体が得
られる。 このようにして得られた酸性多糖体は以下に説明する
理化学的性質を有する。 （１） 色と形状 凍結乾燥品は軽い多孔質の無味無臭の淡黄褐色粉末で
ある。 （２） 溶解性 水に可溶であるが、メタノール、エタノール、アセト
ン、エーテル、クロロホルム、酢酸エチル、ベンゼン、
およびｎ−ヘキサン等の有機溶媒に不溶である。 （３） 溶液のpH １％の水溶液はpHは約６である。 （４） 比旋光度 ▲
【α】20 D▼＝＋132゜（Ｃ＝0.01,H2O） （５） 呈色反応 フェノール硫酸反応、アンスロン硫酸反応、カルバゾ
ール硫酸反応に陽性。Lowry法によるタンパク質の定色
反応に陽性。 （６） 紫外線吸収スペクトル 水溶液中の測定で吸収極大を示さず、末端吸収のみを
示す。 （７） 赤外線吸収スペクトル KBr錠剤法で測定し、これを第１図に示す。 （８） 分子量 セファロースCL−4Bカラムゲルクロマトグラフィーで
単一のピークを与え分子量は200万以上である。 （９） 構成糖 本多糖を1Nの硫酸によって完全に加水分解し、生成す
る単糖をアルジトール・アセテートに誘導してからガス
クロマトグラフィーによる分析でグルコース：ガラクト
ース：キシロース：アラビノース／マンノースの構成割
合が10:5:2:1.5:1（モル比）である。またウロン酸を約
20％含有する。 （10） 13C核磁気共鳴スペクトル 重水中で内部標準にTPS（トリメチルシリルプロパン
スルホネート）を使用して測定した。 δppm:63.8,71.8,72.8,73.4,74.4,76.0,77.9,78.7,80.
7,100.9,102.7,105.7 本発明方法により得られる酸性多糖体は後記試験例で
示すように顕著な抗腫瘍作用を有する。 以下に本発明の実施例を挙げて具体的に説明するが、
本発明は本例のみに限定されるものではない。 ＜実施例１＞ （１） ヒメマツタケ子実体乾燥品を粉砕し、このうち
の200Gを85％エタノール（２×３回）で80℃で抽出前
処理し、得られた抽出残渣を熱水２で３回抽出処理し
た。得られた抽出液を合わせ、２まで濃縮した。この
濃縮液をあらかじめ冷しておき、冷エタノールを撹拌し
ながら徐々に加え、水溶液中のエタノール濃度が80％に
なったときに添加をやめ、生成した沈澱を遠心分離によ
り採取し、13gの褐色粉末を得た。 （２） 上記（１）で得られた粉末10gを水に溶解し、D
EAE−トヨパール650Mゲル（東洋曹達工業社製）を充填
したカラム（４×50cm）に注いだ。次いで水で溶出を行
い、フェノール硫酸法により糖の発色がなくなるまで溶
出を行った。次いで塩化ナトリウムによる濃度勾配溶出
を行い、０→0.5Mの塩化ナトリウム濃度で溶出してくる
糖の画分を集め、透析し、凍結乾燥し、5gの淡褐色粉末
を得た。 （３） 上記（２）で得られた粉末2gを0.2M塩化ナトリ
ウム溶液に溶解し、トヨパール55Sゲル（東洋曹達工業
社製）を充填したカラム（４×50cm）に注いだ。次いで
0.2M塩化ナトリウムで溶出を行いフェノール硫酸法によ
り、最初に溶出してくる糖画分を集め、透析し、凍結乾
燥し、酸性多糖体0.4gを得た。 ＜試験例１＞ （腹腔内投与法） サルコーマ180固形ガンに対する効果。 ICRマウス腹腔中で継代されているサルコーマ180の腹
水ガンを腋窩部皮下に移植し、移植24時間後より、本発
明の酸性多糖体を腹腔内に投与した。投与回数は１日１
回10日間とし移植３週間後に腫瘍直径を測定し、それを
対照群と比較して腫瘍抑制率を算出した。また６週間後
には腫瘍完全消失割合と生存割合を調べた。その結果を
第１表に示す。 ＜試験例２＞ （経口投与法） サルコーマ180固形ガンに対する効果。 試験例１と同じようにサルコーマ180をマウスに移植
し、移植24時間後より、本発明の抗腫瘍剤を経口で投与
した。投与回数は１日２回10日間とし、移植３週間後に
腫瘍直径を測定し、それを対照群と比較して腫瘍抑制率
を算出した。また５週間後には腫瘍完全消失割合と生存
割合を調べた。その結果を第２表に示す。
ール硫酸反応に陽性。Lowry法によるタンパク質の定色
反応に陽性。 （６） 紫外線吸収スペクトル 水溶液中の測定で吸収極大を示さず、末端吸収のみを
示す。 （７） 赤外線吸収スペクトル KBr錠剤法で測定し、これを第１図に示す。 （８） 分子量 セファロースCL−4Bカラムゲルクロマトグラフィーで
単一のピークを与え分子量は200万以上である。 （９） 構成糖 本多糖を1Nの硫酸によって完全に加水分解し、生成す
る単糖をアルジトール・アセテートに誘導してからガス
クロマトグラフィーによる分析でグルコース：ガラクト
ース：キシロース：アラビノース／マンノースの構成割
合が10:5:2:1.5:1（モル比）である。またウロン酸を約
20％含有する。 （10） 13C核磁気共鳴スペクトル 重水中で内部標準にTPS（トリメチルシリルプロパン
スルホネート）を使用して測定した。 δppm:63.8,71.8,72.8,73.4,74.4,76.0,77.9,78.7,80.
7,100.9,102.7,105.7 本発明方法により得られる酸性多糖体は後記試験例で
示すように顕著な抗腫瘍作用を有する。 以下に本発明の実施例を挙げて具体的に説明するが、
本発明は本例のみに限定されるものではない。 ＜実施例１＞ （１） ヒメマツタケ子実体乾燥品を粉砕し、このうち
の200Gを85％エタノール（２×３回）で80℃で抽出前
処理し、得られた抽出残渣を熱水２で３回抽出処理し
た。得られた抽出液を合わせ、２まで濃縮した。この
濃縮液をあらかじめ冷しておき、冷エタノールを撹拌し
ながら徐々に加え、水溶液中のエタノール濃度が80％に
なったときに添加をやめ、生成した沈澱を遠心分離によ
り採取し、13gの褐色粉末を得た。 （２） 上記（１）で得られた粉末10gを水に溶解し、D
EAE−トヨパール650Mゲル（東洋曹達工業社製）を充填
したカラム（４×50cm）に注いだ。次いで水で溶出を行
い、フェノール硫酸法により糖の発色がなくなるまで溶
出を行った。次いで塩化ナトリウムによる濃度勾配溶出
を行い、０→0.5Mの塩化ナトリウム濃度で溶出してくる
糖の画分を集め、透析し、凍結乾燥し、5gの淡褐色粉末
を得た。 （３） 上記（２）で得られた粉末2gを0.2M塩化ナトリ
ウム溶液に溶解し、トヨパール55Sゲル（東洋曹達工業
社製）を充填したカラム（４×50cm）に注いだ。次いで
0.2M塩化ナトリウムで溶出を行いフェノール硫酸法によ
り、最初に溶出してくる糖画分を集め、透析し、凍結乾
燥し、酸性多糖体0.4gを得た。 ＜試験例１＞ （腹腔内投与法） サルコーマ180固形ガンに対する効果。 ICRマウス腹腔中で継代されているサルコーマ180の腹
水ガンを腋窩部皮下に移植し、移植24時間後より、本発
明の酸性多糖体を腹腔内に投与した。投与回数は１日１
回10日間とし移植３週間後に腫瘍直径を測定し、それを
対照群と比較して腫瘍抑制率を算出した。また６週間後
には腫瘍完全消失割合と生存割合を調べた。その結果を
第１表に示す。 ＜試験例２＞ （経口投与法） サルコーマ180固形ガンに対する効果。 試験例１と同じようにサルコーマ180をマウスに移植
し、移植24時間後より、本発明の抗腫瘍剤を経口で投与
した。投与回数は１日２回10日間とし、移植３週間後に
腫瘍直径を測定し、それを対照群と比較して腫瘍抑制率
を算出した。また５週間後には腫瘍完全消失割合と生存
割合を調べた。その結果を第２表に示す。
第１図は、本発明の製法によって得た酸性多糖体の赤外
線吸収スペクトルを示す。
線吸収スペクトルを示す。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 伊藤 均 三重県津市城山２―３―10 (72)発明者 志村 圭志郎 三重県松阪市垣鼻町1586番地 (72)発明者 川出 光生 三重県亀山市渋倉町306番地 (72)発明者 萩原 俊彦 東京都豊島区巣鴨１―12―２ (72)発明者 中村 卓二 埼玉県所沢市上山口1865―29 審査官 弘實 謙二
Claims (1)
- 【請求項１】ハラタケ属のキノコであるヒメマツタケの
子実体を熱水で抽出し、該抽出液をアルコール沈澱法、
イオン交換クロマトグラフィーおよびゲル濾過法により
精製することにより得られる抗腫瘍作用を有する酸性多
糖体の製法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP22184787A JP2646361B2 (ja) | 1987-09-07 | 1987-09-07 | 抗腫瘍作用を有する酸性多糖体の製法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP22184787A JP2646361B2 (ja) | 1987-09-07 | 1987-09-07 | 抗腫瘍作用を有する酸性多糖体の製法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6467194A JPS6467194A (en) | 1989-03-13 |
| JP2646361B2 true JP2646361B2 (ja) | 1997-08-27 |
Family
ID=16773117
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP22184787A Expired - Fee Related JP2646361B2 (ja) | 1987-09-07 | 1987-09-07 | 抗腫瘍作用を有する酸性多糖体の製法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2646361B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101717452B (zh) * | 2009-09-14 | 2011-08-03 | 西北工业大学 | 一种在绞股蓝中制备中性多糖的方法 |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1069650C (zh) * | 1995-12-29 | 2001-08-15 | 中国科学院上海药物研究所 | 香菇多糖的分离纯化方法 |
| JP3051073B2 (ja) * | 1996-12-20 | 2000-06-12 | 住友林業株式会社 | 抗腫瘍活性物質 |
| JP2001240603A (ja) * | 2000-02-29 | 2001-09-04 | Toei Shinyaku Kk | β−１，３分岐β−１，６−グルカンとアガリクス茸アルカリ抽出エキス |
| JP3502613B2 (ja) | 2001-04-03 | 2004-03-02 | 株式会社サン・クロレラ | 飲食用組成物及び飲食料品 |
| CN103254321B (zh) * | 2012-02-20 | 2016-09-07 | 瑞阳制药有限公司 | 药用真菌瓦尼木层孔菌多糖的提取纯化方法 |
| CN102838684B (zh) * | 2012-09-28 | 2014-12-03 | 淮海工学院 | 球等鞭金藻胞外多糖的分离纯化工艺 |
| JP2019194168A (ja) * | 2018-05-02 | 2019-11-07 | 鈴木 昇 | ヒト癌型Ｋｒａｓ遺伝子発現型癌に有効な抗腫瘍剤の製法 |
| CN109232761A (zh) * | 2018-09-28 | 2019-01-18 | 甘肃省人民医院 | 一种秦巴硒菇粗多糖的分离纯化方法 |
-
1987
- 1987-09-07 JP JP22184787A patent/JP2646361B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101717452B (zh) * | 2009-09-14 | 2011-08-03 | 西北工业大学 | 一种在绞股蓝中制备中性多糖的方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6467194A (en) | 1989-03-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA2412600A1 (en) | Potent immunostimulatory polysaccharides extracted from microalgae | |
| JP2646361B2 (ja) | 抗腫瘍作用を有する酸性多糖体の製法 | |
| US4855284A (en) | Calcium and magnesium complexes of phytohemagglutinin-polyheteroglycans, their preparation and pharmaceutical formulations | |
| WO2017133465A1 (zh) | 一种黄芩苷镁化合物及其制备方法与它的用途 | |
| CN111892663B (zh) | 一种猴头菌多糖及其制备方法及其用途 | |
| WO2010029915A1 (ja) | サポゲニン高含有組成物の製造方法 | |
| US4229570A (en) | Method of producing nitrogen-containing polysaccharides | |
| JP2630783B2 (ja) | 抗腫瘍作用を有する中性多糖体の製法 | |
| JP6034293B2 (ja) | イカリソウの多糖、その画分、及びワクチンアジュバントとしてのその使用 | |
| JPH0539305A (ja) | アストラガルス・メンブラナセウスから抽出した免疫 変調性多糖類及びこれらを含有する薬剤組成物 | |
| US4614733A (en) | Polysaccharides pharmaceutical compositions and the use thereof | |
| JPH0278630A (ja) | 抗腫瘍剤 | |
| CN110229244B (zh) | 一种枝瑚菌多糖及其制备方法和应用 | |
| WO2014173058A1 (zh) | 一种槐耳多糖蛋白及其制备方法和用途 | |
| WO2014173056A1 (zh) | 槐耳多糖蛋白及其制备方法和用途 | |
| CN111620963B (zh) | 一种多糖及其制备方法和应用 | |
| WO2014173059A1 (zh) | 一种槐耳多糖蛋白及其制备方法和用途 | |
| KR101133739B1 (ko) | 고 함량의 진세노이드 Ｒｇ3를 함유한 산가수분해 백삼 추출물의 제조방법 | |
| CN115028752B (zh) | 一种均一的水溶性多糖及其制备方法和应用 | |
| JPH0680703A (ja) | キノコに由来する水不溶性多糖類、その製造方法及び該水不溶性多糖類を主剤とする抗腫瘍剤 | |
| WO2014173057A1 (zh) | 一种槐耳多糖蛋白及其制备方法和用途 | |
| JP7479537B1 (ja) | 咳を止め、痰を減らし、免疫力を向上させるイナゴマメ多糖類およびその調製方法と使用 | |
| CN113754737B (zh) | 治疗铅中毒的药物及其所用糖肽和该糖肽的制备方法 | |
| JPH0248000B2 (ja) | ||
| JPH0467958B2 (ja) |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |