JPH0680703A - キノコに由来する水不溶性多糖類、その製造方法及び該水不溶性多糖類を主剤とする抗腫瘍剤 - Google Patents
キノコに由来する水不溶性多糖類、その製造方法及び該水不溶性多糖類を主剤とする抗腫瘍剤Info
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- JPH0680703A JPH0680703A JP3162221A JP16222191A JPH0680703A JP H0680703 A JPH0680703 A JP H0680703A JP 3162221 A JP3162221 A JP 3162221A JP 16222191 A JP16222191 A JP 16222191A JP H0680703 A JPH0680703 A JP H0680703A
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Abstract
(57)【要約】 （修正有）
【目的】 中国の吉林省等の東北地方に自生する食用キ
ノコの一つであり、古くから関節炎等に効く民間薬とし
て伝承され、酒に浸漬して飲用されていたワサビタケ科
のキノコである黄磨(Hohenbuehelia serotina)の薬効成
分を効率良く得ることのできる方法を提供する。 【構成】 薬効成分である、ガラクトマンノグルカン蛋
白複合体、マンノキシログルカン蛋白複合体あるいはガ
ラクトグルカン蛋白複合体を主体とする水不溶性多糖
類、それらの製造方法および当該水不溶性多糖類を主剤
とする抗腫瘍剤。
ノコの一つであり、古くから関節炎等に効く民間薬とし
て伝承され、酒に浸漬して飲用されていたワサビタケ科
のキノコである黄磨(Hohenbuehelia serotina)の薬効成
分を効率良く得ることのできる方法を提供する。 【構成】 薬効成分である、ガラクトマンノグルカン蛋
白複合体、マンノキシログルカン蛋白複合体あるいはガ
ラクトグルカン蛋白複合体を主体とする水不溶性多糖
類、それらの製造方法および当該水不溶性多糖類を主剤
とする抗腫瘍剤。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、ワサビタケ科のキノコ
である黄▲磨▼(Hohenbuehelia serotina)に由来する水
不溶性多糖類、その製造方法及びその水不溶性多糖類を
主剤とする抗腫瘍剤に関するものである。
である黄▲磨▼(Hohenbuehelia serotina)に由来する水
不溶性多糖類、その製造方法及びその水不溶性多糖類を
主剤とする抗腫瘍剤に関するものである。
【０００２】
【従来の技術及び発明が解決しようとする問題点】黄▲
磨▼は、中国の吉林省等の東北地方に自生する食用キノ
コ（但し、栽培はされていない）の一つであり、古くか
ら関節炎等に効く民間薬として伝承され、酒に浸漬して
飲用されていた。
磨▼は、中国の吉林省等の東北地方に自生する食用キノ
コ（但し、栽培はされていない）の一つであり、古くか
ら関節炎等に効く民間薬として伝承され、酒に浸漬して
飲用されていた。
【０００３】しかしながら、現在に至るまで、その薬効
成分の化学的解析はなされておらず、不明のままであっ
た。
成分の化学的解析はなされておらず、不明のままであっ
た。
【０００４】本発明は、上述した従来技術を背景として
なされたもので、その目的は、黄▲磨▼の薬効成分を化
学的に解析し、その有効な用途を発見することにある。
なされたもので、その目的は、黄▲磨▼の薬効成分を化
学的に解析し、その有効な用途を発見することにある。
【０００５】又、本発明の他の目的は、黄▲磨▼の薬効
成分を効率良く得ることのできる方法を提供することに
ある。
成分を効率良く得ることのできる方法を提供することに
ある。
【０００６】
【課題を解決するための手段】即ち、本発明の水不溶性
多糖類は、黄▲磨▼の有機溶媒及び水系溶媒不溶画分か
ら、蓚酸アンモニウム溶液にて抽出されるガラクトマン
ノグルカン蛋白複合体であるか、或いは、黄▲磨▼の有
機溶媒及び水系溶媒不溶画分の蓚酸アンモニウム溶液抽
出残渣から、水酸化ナトリウム又は水酸化カリウム溶液
にて抽出されるマンノキシログルカン蛋白複合体、ガラ
クトグルカン蛋白複合体あるいはグルカン蛋白複合体で
あることを特徴とするものであり、又、本発明の水不溶
性多糖類の製造方法は、黄▲磨▼あるいはその乾燥物を
有機溶媒及び水系溶媒により抽出し、その抽出残渣を更
に蓚酸アンモニウム溶液で抽出するか、或いは、黄▲磨
▼あるいはその乾燥物を有機溶媒及び水系溶媒により抽
出し、その抽出残渣を蓚酸アンモニウム溶液で抽出した
後、その抽出残渣を更に水酸化ナトリウム又は水酸化カ
リウム溶液で抽出することを特徴とするものであり、更
に、本発明の抗腫瘍剤は、上記本発明の水溶性多糖類を
主剤とすることを特徴とするものである。
多糖類は、黄▲磨▼の有機溶媒及び水系溶媒不溶画分か
ら、蓚酸アンモニウム溶液にて抽出されるガラクトマン
ノグルカン蛋白複合体であるか、或いは、黄▲磨▼の有
機溶媒及び水系溶媒不溶画分の蓚酸アンモニウム溶液抽
出残渣から、水酸化ナトリウム又は水酸化カリウム溶液
にて抽出されるマンノキシログルカン蛋白複合体、ガラ
クトグルカン蛋白複合体あるいはグルカン蛋白複合体で
あることを特徴とするものであり、又、本発明の水不溶
性多糖類の製造方法は、黄▲磨▼あるいはその乾燥物を
有機溶媒及び水系溶媒により抽出し、その抽出残渣を更
に蓚酸アンモニウム溶液で抽出するか、或いは、黄▲磨
▼あるいはその乾燥物を有機溶媒及び水系溶媒により抽
出し、その抽出残渣を蓚酸アンモニウム溶液で抽出した
後、その抽出残渣を更に水酸化ナトリウム又は水酸化カ
リウム溶液で抽出することを特徴とするものであり、更
に、本発明の抗腫瘍剤は、上記本発明の水溶性多糖類を
主剤とすることを特徴とするものである。
【０００７】尚、有機溶媒及び水系溶媒による抽出残渣
を更に蓚酸アンモニウム溶液で抽出するか、その抽出残
渣を更に水酸化ナトリウム又は水酸化カリウム溶液で抽
出した後、アルコール沈殿法、イオン交換クロマト法あ
るいはアフィニティクロマト法等により、含有組成分量
の異なる水溶性多糖類を得ることもできる。
を更に蓚酸アンモニウム溶液で抽出するか、その抽出残
渣を更に水酸化ナトリウム又は水酸化カリウム溶液で抽
出した後、アルコール沈殿法、イオン交換クロマト法あ
るいはアフィニティクロマト法等により、含有組成分量
の異なる水溶性多糖類を得ることもできる。
【０００８】即ち、本発明の発明者らは、中国の山野に
自生する前記黄▲磨▼あるいはその乾燥物に含まれる成
分につき研究を続けた結果、新規な水不溶性多糖類を見
いだし、これを、サルコ−マ１８０固型癌を移植したＪ
ＣＲ／Ｓｌｃ系マウスに投与したところ、顕著な抗腫瘍
活性を示すことを知得し、更に研究を重ねた結果、上記
抗腫瘍活性を示す成分がキシロ−ス、マンノ−ス、ガラ
クト−ス等を随伴するβ−（１→６）；β−（１→３）
−Ｄ−グルカン蛋白複合体であることを見いだし、本発
明の完成に至ったものである。
自生する前記黄▲磨▼あるいはその乾燥物に含まれる成
分につき研究を続けた結果、新規な水不溶性多糖類を見
いだし、これを、サルコ−マ１８０固型癌を移植したＪ
ＣＲ／Ｓｌｃ系マウスに投与したところ、顕著な抗腫瘍
活性を示すことを知得し、更に研究を重ねた結果、上記
抗腫瘍活性を示す成分がキシロ−ス、マンノ−ス、ガラ
クト−ス等を随伴するβ−（１→６）；β−（１→３）
−Ｄ−グルカン蛋白複合体であることを見いだし、本発
明の完成に至ったものである。
【０００９】以下に本発明を詳細に説明する。
【００１０】まず、本発明製造方法について説明すれ
ば、黄▲磨▼乾燥子実体あるいはその乾燥物について、
予め有機溶媒による低分子成分の除去と、水系溶媒、例
えば熱水による水溶性高分子成分の除去を繰り返し、こ
の抽出液を除去する。尚、本発明でいう「黄▲磨▼の子
実体あるいはその乾燥物」という語には、それらのみな
らず、黄▲磨▼を人工培養（菌床栽培あるいは液体培
養）したときに得られる菌糸体あるいはその培地での生
産物をも含まれるものである。
ば、黄▲磨▼乾燥子実体あるいはその乾燥物について、
予め有機溶媒による低分子成分の除去と、水系溶媒、例
えば熱水による水溶性高分子成分の除去を繰り返し、こ
の抽出液を除去する。尚、本発明でいう「黄▲磨▼の子
実体あるいはその乾燥物」という語には、それらのみな
らず、黄▲磨▼を人工培養（菌床栽培あるいは液体培
養）したときに得られる菌糸体あるいはその培地での生
産物をも含まれるものである。
【００１１】上記有機溶媒としては、エチルエ−テル、
ヘキサン、エチルアルコ−ル、メチルアルコ−ル、アセ
トン等を例示することができ、これらのうちエチルアル
コ−ル、メチルアルコ−ル、アセトン等については約１
０〜２０％に含水しているものを使用し得る。これら有
機溶媒の使用量は、例えば約１０〜１００倍量である。
ヘキサン、エチルアルコ−ル、メチルアルコ−ル、アセ
トン等を例示することができ、これらのうちエチルアル
コ−ル、メチルアルコ−ル、アセトン等については約１
０〜２０％に含水しているものを使用し得る。これら有
機溶媒の使用量は、例えば約１０〜１００倍量である。
【００１２】次いで、上記抽出残渣をそのまま、あるい
は必要に応じ適宜に乾燥し、これを先ず蓚酸アンモニウ
ム溶液で抽出する。この場合の蓚酸アンモニウム溶液の
濃度としては、０．５〜３％という範囲を、又、抽出回
数としては、３〜１０回という範囲を、それぞれ例示す
ることができる。
は必要に応じ適宜に乾燥し、これを先ず蓚酸アンモニウ
ム溶液で抽出する。この場合の蓚酸アンモニウム溶液の
濃度としては、０．５〜３％という範囲を、又、抽出回
数としては、３〜１０回という範囲を、それぞれ例示す
ることができる。
【００１３】上記抽出液を冷却した後、その上澄液を分
離し、必要に応じ当該分離上澄液をある程度濃縮してか
ら、これに濃縮液の例えば約５倍量の高純度溶媒液を加
えて沈殿物を得、上澄液とを分離して沈殿物のみを取り
出し、当該沈殿物を洗滌し、乾燥して本発明多糖類
（１）を得るのである。
離し、必要に応じ当該分離上澄液をある程度濃縮してか
ら、これに濃縮液の例えば約５倍量の高純度溶媒液を加
えて沈殿物を得、上澄液とを分離して沈殿物のみを取り
出し、当該沈殿物を洗滌し、乾燥して本発明多糖類
（１）を得るのである。
【００１４】上記高純度溶媒としては、例えばエタノ−
ル、メタノ−ルあるいはアセトン等を挙げることがで
き、好ましくはその純度は約９９％以上である。
ル、メタノ−ルあるいはアセトン等を挙げることがで
き、好ましくはその純度は約９９％以上である。
【００１５】更に、上記多糖類（１）の粉末を、ゲル濾
過法による溶出操作によってヘテログルカン蛋白複合体
を分別操作に付し、当該複合体としての本発明多糖類
（２）を得る。
過法による溶出操作によってヘテログルカン蛋白複合体
を分別操作に付し、当該複合体としての本発明多糖類
（２）を得る。
【００１６】一方、前記蓚酸アンモニウム溶液の抽出残
渣をそのまま、あるいは必要に応じ適宜に乾燥し、これ
を水酸化ナトリウム溶液で適宜時間抽出し、その上澄液
を分離する。この場合の水酸化ナトリウム溶液の濃度と
しては、１〜５％という範囲を、又、抽出回数として
は、３〜５回という範囲を、抽出温度としては、室温〜
４０℃という範囲をそれぞれ例示することができる。
又、この水酸化ナトリウム溶液に代えて、水酸化カリウ
ム溶液を使用することもできる。
渣をそのまま、あるいは必要に応じ適宜に乾燥し、これ
を水酸化ナトリウム溶液で適宜時間抽出し、その上澄液
を分離する。この場合の水酸化ナトリウム溶液の濃度と
しては、１〜５％という範囲を、又、抽出回数として
は、３〜５回という範囲を、抽出温度としては、室温〜
４０℃という範囲をそれぞれ例示することができる。
又、この水酸化ナトリウム溶液に代えて、水酸化カリウ
ム溶液を使用することもできる。
【００１７】上記水酸化ナトリウム溶液等による抽出の
際、ナトリウムボロハイドライド（ＮａＢＨ4）を添加
することによって還元状態を維持し、酸化防止及び着色
防止をするようにしてもよい。
際、ナトリウムボロハイドライド（ＮａＢＨ4）を添加
することによって還元状態を維持し、酸化防止及び着色
防止をするようにしてもよい。
【００１８】次いで、上記分離した上澄液に高純度の酢
酸を加えて中和し、ｐＨ５〜６に調整すると、沈殿が得
られるので、当該沈殿物と上澄液とを分離して、沈殿物
のみを取り出し、当該沈殿物を洗滌透析し、乾燥するこ
とにより、本発明多糖類（３）の粉末を得る。
酸を加えて中和し、ｐＨ５〜６に調整すると、沈殿が得
られるので、当該沈殿物と上澄液とを分離して、沈殿物
のみを取り出し、当該沈殿物を洗滌透析し、乾燥するこ
とにより、本発明多糖類（３）の粉末を得る。
【００１９】そして、上記本発明多糖類（３）の粉末を
ゲル濾過法による溶出操作に付すことよってヘテログル
カン蛋白複合体を分別して、当該複合体としての本発明
多糖類（４）及び（５）を得る。
ゲル濾過法による溶出操作に付すことよってヘテログル
カン蛋白複合体を分別して、当該複合体としての本発明
多糖類（４）及び（５）を得る。
【００２０】一方、上記上澄液（酢酸を加えてｐＨ５〜
６に調整し、沈殿が得られた際の上澄液）に５倍量の高
純度溶媒液（エタノール）を加えると、沈殿を生成する
ので、当該沈殿物を分離して取り出し、沈殿物を洗滌透
析し、乾燥することにより、本発明多糖類（６）の粉末
を得る。
６に調整し、沈殿が得られた際の上澄液）に５倍量の高
純度溶媒液（エタノール）を加えると、沈殿を生成する
ので、当該沈殿物を分離して取り出し、沈殿物を洗滌透
析し、乾燥することにより、本発明多糖類（６）の粉末
を得る。
【００２１】そして、上記本発明多糖類（６）の粉末を
ゲル濾過法による溶出操作に付すことよってヘテログル
カン蛋白複合体を分別して、当該複合体としての本発明
多糖類（７）及び（８）を得る。
ゲル濾過法による溶出操作に付すことよってヘテログル
カン蛋白複合体を分別して、当該複合体としての本発明
多糖類（７）及び（８）を得る。
【００２２】上記分別操作により、例えば、以下の表１
に示すような本発明多糖類を得ることができる。
に示すような本発明多糖類を得ることができる。
【表１】
【００２３】又、本発明多糖類は、次のような理化学的
性質を有する。 （イ）色：凍結乾燥して得られる本発明水不溶性多糖類
の粉末は白色ないし灰白色を呈する。 （ロ）溶解性：１０％以上のアルカリに可溶、水、ＤＭ
ＳＯ（ジメチルスルホキシド）に難溶、有機溶媒（メタ
ノール、エタノール、エチルエーテル、アセトン）に不
溶である。 （ハ）呈色反応：フェノ−ル硫酸およびアンスロン硫酸
反応による糖の反応は陽性を示し、Ｌｏｗｒｙ法による
蛋白質（牛血清アルブミン換算）を５．５％〜２８．５
％を含有する蛋白多糖類である。 （ニ）糖含量：フェノール硫酸法による糖含量（グルコ
ース換算）は６９．０％〜８５．７％である。 （ホ）糖組成：Ｎ−硫酸で３〜６時間、１００℃で加水
分解するとき完成する構成糖をアルジトールアセテート
に誘導してからガスクロマトグラフ法で検索定量する
と、グルコース（１００）に対してガラクトース（１０
〜１２）、マンノース（１４〜１９）、キシロース（２
４）からなり、この他にアラビノース、リボースの痕跡
が検出される。 （ヘ）平均分子量：トヨパ−ルＨＷ−６５Ｆカラムを用
いるゲル濾過法（標準デキストラをマ−カ−とする）に
よって５万〜２００万であることがわかる。 （ト）赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ法）：上記本発明
多糖類（２）、（３）、（５）、（７）、及び（８）の
赤外線スペクトルは図１に示すとおりで、いずれも８９
０ｃｍ-1近辺にβ−グルコシド結合を示す吸収が認めら
れ、β−Ｄ−グルカンであることがわかる。 （チ）比旋光度 〔α〕24 D＋１１．４°〜＋７５．６°×（ｃ＝０．
５、９０％ＮａＯＨ）であり、β−結合性のＤ−グルカ
ンであることを示している。 （リ）核磁気共鳴スペクトル 本発明多糖類（２）の２０ｍｇを０．３ＭＮａＯＤ−Ｄ
2Ｏに溶解して、ＪＥＯＬ製ＧＳＸ−４００スペクトロ
メーターによって測定した結果は図２（1Ｈ−ＮＭＲ）
と図３（13Ｃ−ＮＭＲ）に示す通りであり、又、本発明
多糖類（３）、（５）及び（８）について測定した結果
（1Ｈ−ＮＭＲ）は、図４に示すとおりである。又、本
発明多糖類（３）、（５）及び（８）について固体13Ｃ
−ＮＭＲスペクトルを大塚電子固体ＮＭＲ ＣＭＸ−３
００型スペクトロメーターによって測定した結果は図５
に示す通りである。
性質を有する。 （イ）色：凍結乾燥して得られる本発明水不溶性多糖類
の粉末は白色ないし灰白色を呈する。 （ロ）溶解性：１０％以上のアルカリに可溶、水、ＤＭ
ＳＯ（ジメチルスルホキシド）に難溶、有機溶媒（メタ
ノール、エタノール、エチルエーテル、アセトン）に不
溶である。 （ハ）呈色反応：フェノ−ル硫酸およびアンスロン硫酸
反応による糖の反応は陽性を示し、Ｌｏｗｒｙ法による
蛋白質（牛血清アルブミン換算）を５．５％〜２８．５
％を含有する蛋白多糖類である。 （ニ）糖含量：フェノール硫酸法による糖含量（グルコ
ース換算）は６９．０％〜８５．７％である。 （ホ）糖組成：Ｎ−硫酸で３〜６時間、１００℃で加水
分解するとき完成する構成糖をアルジトールアセテート
に誘導してからガスクロマトグラフ法で検索定量する
と、グルコース（１００）に対してガラクトース（１０
〜１２）、マンノース（１４〜１９）、キシロース（２
４）からなり、この他にアラビノース、リボースの痕跡
が検出される。 （ヘ）平均分子量：トヨパ−ルＨＷ−６５Ｆカラムを用
いるゲル濾過法（標準デキストラをマ−カ−とする）に
よって５万〜２００万であることがわかる。 （ト）赤外線吸収スペクトル（ＫＢｒ法）：上記本発明
多糖類（２）、（３）、（５）、（７）、及び（８）の
赤外線スペクトルは図１に示すとおりで、いずれも８９
０ｃｍ-1近辺にβ−グルコシド結合を示す吸収が認めら
れ、β−Ｄ−グルカンであることがわかる。 （チ）比旋光度 〔α〕24 D＋１１．４°〜＋７５．６°×（ｃ＝０．
５、９０％ＮａＯＨ）であり、β−結合性のＤ−グルカ
ンであることを示している。 （リ）核磁気共鳴スペクトル 本発明多糖類（２）の２０ｍｇを０．３ＭＮａＯＤ−Ｄ
2Ｏに溶解して、ＪＥＯＬ製ＧＳＸ−４００スペクトロ
メーターによって測定した結果は図２（1Ｈ−ＮＭＲ）
と図３（13Ｃ−ＮＭＲ）に示す通りであり、又、本発明
多糖類（３）、（５）及び（８）について測定した結果
（1Ｈ−ＮＭＲ）は、図４に示すとおりである。又、本
発明多糖類（３）、（５）及び（８）について固体13Ｃ
−ＮＭＲスペクトルを大塚電子固体ＮＭＲ ＣＭＸ−３
００型スペクトロメーターによって測定した結果は図５
に示す通りである。
【００２４】一方、本発明の抗腫瘍剤は、上記説明した
本発明の多糖類を主剤とし、錠剤、散剤あるいはカプセ
ル剤等の経口投与剤、又は、注射剤等の非経口剤に製剤
されたものである。本発明の抗腫瘍剤における多糖類の
含有量は、当該多糖類の有効使用量が、経口投与（ｐ．
ｏ．）で１０〜１０００ｍｇ／Ｋｇ、非経口投与（腹腔
内投与、ｉ．ｐ．）で１〜１０ｍｇ／Ｋｇ（いずれもマ
ウスを使用した実験による数値）であるので、これらの
値を考慮して決定すればよい。
本発明の多糖類を主剤とし、錠剤、散剤あるいはカプセ
ル剤等の経口投与剤、又は、注射剤等の非経口剤に製剤
されたものである。本発明の抗腫瘍剤における多糖類の
含有量は、当該多糖類の有効使用量が、経口投与（ｐ．
ｏ．）で１０〜１０００ｍｇ／Ｋｇ、非経口投与（腹腔
内投与、ｉ．ｐ．）で１〜１０ｍｇ／Ｋｇ（いずれもマ
ウスを使用した実験による数値）であるので、これらの
値を考慮して決定すればよい。
【００２５】次に本発明を実施例により更に詳細に説明
する。
する。
【００２６】
【実施例】黄▲磨▼乾燥子実体の粉末をエタノール処理
（８５℃、６時間）し、次いで熱水処理（１００℃、３
時間）して得られる抽出残渣の乾燥粉末２００ｇに、１
％蓚酸アンモニウム溶液２リットルを加え、１００℃で
５時間、攪拌しつつ抽出を行う。抽出液を濾過して得ら
れる濾液に、１０リットルの９９％濃度のエタノールを
加え、生成する沈殿を透析してから真空凍結乾燥して、
本発明多糖類（１）を粉末として得る。収量２ｇ。
（８５℃、６時間）し、次いで熱水処理（１００℃、３
時間）して得られる抽出残渣の乾燥粉末２００ｇに、１
％蓚酸アンモニウム溶液２リットルを加え、１００℃で
５時間、攪拌しつつ抽出を行う。抽出液を濾過して得ら
れる濾液に、１０リットルの９９％濃度のエタノールを
加え、生成する沈殿を透析してから真空凍結乾燥して、
本発明多糖類（１）を粉末として得る。収量２ｇ。
【００２７】更に、この多糖類（１）の粉末から、トヨ
パールＨＥ−６５Ｆカラム（４×４０ｃｍ）を用いるゲ
ル濾過法（０．３Ｍ水酸化ナトリウム液にて溶出）によ
って５種類の分画を得、それらの中から本発明多糖類
（２）を粉末として得る。
パールＨＥ−６５Ｆカラム（４×４０ｃｍ）を用いるゲ
ル濾過法（０．３Ｍ水酸化ナトリウム液にて溶出）によ
って５種類の分画を得、それらの中から本発明多糖類
（２）を粉末として得る。
【００２８】前記１％蓚酸アンモニウム溶液による抽出
残渣１８５ｇに、０．０５％濃度のナトリウムボロハイ
トライドを含む５％濃度の水酸化ナトリウム溶液２リッ
トルを加えて、３０℃で２０時間、時々攪拌しつつ抽出
を行う。抽出濾液に氷酢酸を加えてｐＨ５〜６に調整す
ると、沈殿が生成するので、これを遠心分離してから、
透析し、凍結乾燥して本発明多糖類（３）を粉末として
得た。収量は４２．３ｇであった。
残渣１８５ｇに、０．０５％濃度のナトリウムボロハイ
トライドを含む５％濃度の水酸化ナトリウム溶液２リッ
トルを加えて、３０℃で２０時間、時々攪拌しつつ抽出
を行う。抽出濾液に氷酢酸を加えてｐＨ５〜６に調整す
ると、沈殿が生成するので、これを遠心分離してから、
透析し、凍結乾燥して本発明多糖類（３）を粉末として
得た。収量は４２．３ｇであった。
【００２９】更に、上記本発明多糖類（３）の粉末か
ら、トヨパールＨＥ−６５Ｆカラム（４×４０ｃｍ）を
用いるゲル濾過法（０．３Ｍ水酸化ナトリウム液にて溶
出）によって２種類の分画を得、それらの中から本発明
多糖類（４）及び（５）を粉末として得た。
ら、トヨパールＨＥ−６５Ｆカラム（４×４０ｃｍ）を
用いるゲル濾過法（０．３Ｍ水酸化ナトリウム液にて溶
出）によって２種類の分画を得、それらの中から本発明
多糖類（４）及び（５）を粉末として得た。
【００３０】一方、前述した５％水酸化ナトリウム溶液
による抽出の濾液に、氷酢酸を加え、生成した沈殿を遠
心分離して除去した上澄液に、更に５倍量の９９％濃度
のエタノールを加えると、沈殿が生成するので、この沈
殿を透析し、凍結乾燥して本発明多糖類（６）を粉末と
して得た。収量は１９．８ｇであった。
による抽出の濾液に、氷酢酸を加え、生成した沈殿を遠
心分離して除去した上澄液に、更に５倍量の９９％濃度
のエタノールを加えると、沈殿が生成するので、この沈
殿を透析し、凍結乾燥して本発明多糖類（６）を粉末と
して得た。収量は１９．８ｇであった。
【００３１】更に、上記本発明多糖類（６）の粉末か
ら、トヨパールＨＥ−６５Ｆカラム（４×４０ｃｍ）を
用いるゲル濾過法（０．３Ｍ水酸化ナトリウム液にて溶
出）によって２種類の分画を得、それらの中から本発明
多糖類（７）及び（８）を粉末として得た。上記分別操
作を、以下に示す。
ら、トヨパールＨＥ−６５Ｆカラム（４×４０ｃｍ）を
用いるゲル濾過法（０．３Ｍ水酸化ナトリウム液にて溶
出）によって２種類の分画を得、それらの中から本発明
多糖類（７）及び（８）を粉末として得た。上記分別操
作を、以下に示す。
【化１】
【００３２】薬理作用 サルコーマ１８０固形癌に対する効果について ＪＣＲ／Ｓｌｃ系の雄性マウス（５週令）の腋窩部皮下
に、ＪＣＲ／Ｓｌｃマウス腹腔内で継代されているサル
コ−マ１８０腹水ガンの癌細胞を５×１０6個移植し、
２４時間後より、本発明の多糖類（２）、（３）、
（５）、（７）及び（８）を含む抗腫瘍剤を、一日当た
り多糖類として１０ｍｇ／ｋｇとなるように、１０日間
連日して投与し、移植３週間後に固形腫瘍の短径、長径
をデジマチックキャリパーで測定し、その腫瘍体積（ｃ
ｍ3）を対照群と比較して腫瘍抑制率を算出した。ま
た、６週間後に腫瘍完全消失率と死亡率を調べた。その
結果は第２表に示す通りである。
に、ＪＣＲ／Ｓｌｃマウス腹腔内で継代されているサル
コ−マ１８０腹水ガンの癌細胞を５×１０6個移植し、
２４時間後より、本発明の多糖類（２）、（３）、
（５）、（７）及び（８）を含む抗腫瘍剤を、一日当た
り多糖類として１０ｍｇ／ｋｇとなるように、１０日間
連日して投与し、移植３週間後に固形腫瘍の短径、長径
をデジマチックキャリパーで測定し、その腫瘍体積（ｃ
ｍ3）を対照群と比較して腫瘍抑制率を算出した。ま
た、６週間後に腫瘍完全消失率と死亡率を調べた。その
結果は第２表に示す通りである。
【表２】
【００３３】上記表２に示すように、本発明の抗腫瘍剤
は、良好な腫瘍抑制率、生存率、腫瘍完全消失率を示
し、死亡率（６１日目）も低く、良好な効果を発揮する
ものである。
は、良好な腫瘍抑制率、生存率、腫瘍完全消失率を示
し、死亡率（６１日目）も低く、良好な効果を発揮する
ものである。
【００３４】急性毒性について ＪＣＲ／Ｓｌｃ系の雄性マウス（５週）の腹腔内又は経
口投与による急性毒性試験（１週間観察）において、本
発明の多糖類はいずれも１０００ｍｇ／ｋｇで死亡率は
０／６であり、飼料摂取量、体重増加量、尿検査、血液
検査結果および相対的臓器重量比等、対照群との間に統
計学的有意差は認められなかった。
口投与による急性毒性試験（１週間観察）において、本
発明の多糖類はいずれも１０００ｍｇ／ｋｇで死亡率は
０／６であり、飼料摂取量、体重増加量、尿検査、血液
検査結果および相対的臓器重量比等、対照群との間に統
計学的有意差は認められなかった。
【図１】図１は本発明多糖類（２）、（３）、（５）、
（７）及び（８）の赤外線スペクトルである。
（７）及び（８）の赤外線スペクトルである。
【図２】図２は本発明多糖類（２）の1Ｈ−ＮＭＲスペ
クトルである。
クトルである。
【図３】図３は本発明多糖類（２）の13Ｃ−ＮＭＲスペ
クトルである。
クトルである。
【図４】図４は本発明多糖類（３）、（５）及び（８）
の1Ｈ−ＮＭＲスペクトルである。
の1Ｈ−ＮＭＲスペクトルである。
【図５】図５は本発明多糖類（３）、（５）及び（８）
の13Ｃ−固体ＮＭＲスペクトルである。
の13Ｃ−固体ＮＭＲスペクトルである。
─────────────────────────────────────────────────────
【手続補正書】
【提出日】平成５年７月１６日
【手続補正３】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】発明の名称
【補正方法】変更
【補正内容】
【発明の名称】 キノコに由来する水不溶性多糖類、
その製造方法及び該水不溶性多糖類を主剤とする抗腫瘍
剤
その製造方法及び該水不溶性多糖類を主剤とする抗腫瘍
剤
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 水野 卓 静岡県藤枝市青南町５丁目５−９ (72)発明者 馬 岩 静岡県静岡市大谷836 (72)発明者 伊藤 均 三重県津市城山２丁目３−10 (72)発明者 鈴木 千春 静岡県静岡市大谷3800−211
Claims (15)
- 【請求項１】 黄▲磨▼の有機溶媒及び水系溶媒不溶画
分から、蓚酸アンモニウム溶液にて抽出されるガラクト
マンノグルカン蛋白複合体であることを特徴とする水不
溶性多糖類。 - 【請求項２】 蛋白質８．１〜８．５％と、糖８１〜９
０％（但し、糖組成は、グルコース：ガラクトース：マ
ンノース＝１００：１１〜１３：１３〜１５である）と
を含む請求項１に記載の水不溶性多糖類。 - 【請求項３】 黄▲磨▼の有機溶媒及び水系溶媒不溶画
分の蓚酸アンモニウム溶液抽出残渣から、水酸化ナトリ
ウム又は水酸化カリウム溶液にて抽出されるマンノキシ
ログルカン蛋白複合体であることを特徴とする水不溶性
多糖類。 - 【請求項４】 蛋白質２２．５〜２４．５％と、糖６
５．５〜７２．５％（但し、糖組成は、グルコース：マ
ンノース：キシロース＝１００：１８〜２０：２１〜２
７である）とを含む請求項３に記載の水不溶性多糖類。 - 【請求項５】 黄▲磨▼の有機溶媒及び水系溶媒不溶画
分の蓚酸アンモニウム溶液抽出残渣から、水酸化ナトリ
ウム又は水酸化カリウム溶液にて抽出されるガラクトグ
ルカン蛋白複合体であることを特徴とする水不溶性多糖
類。 - 【請求項６】 蛋白質２７〜３０％と、糖６７〜７５％
（但し、糖組成は、グルコース：ガラクトース＝１０
０：９〜１１である）とを含む請求項５に記載の水不溶
性多糖類。 - 【請求項７】 黄▲磨▼の有機溶媒及び水系溶媒不溶画
分の蓚酸アンモニウム溶液抽出残渣から、水酸化ナトリ
ウム又は水酸化カリウム溶液にて抽出されるグルカン蛋
白複合体であることを特徴とする水不溶性多糖類。 - 【請求項８】 蛋白質５．２〜５．８％と、糖８１〜８
９％（但し、糖組成は、主にグルコースである）とを含
む請求項７に記載の水不溶性多糖類。 - 【請求項９】 蛋白質６．３〜７．１％と、糖５９〜６
５％（但し、糖組成は、主にグルコースである）とを含
む請求項７に記載の水不溶性多糖類。 - 【請求項１０】 黄▲磨▼あるいはその乾燥物を有機溶
媒及び水系溶媒により抽出し、その抽出残渣を更に蓚酸
アンモニウム溶液で抽出することを特徴とする水不溶性
多糖類の製造方法。 - 【請求項１１】 黄▲磨▼あるいはその乾燥物を有機溶
媒及び水系溶媒により抽出し、その抽出残渣を更に蓚酸
アンモニウム溶液で抽出した後、アルコール沈殿法、イ
オン交換クロマト法あるいはアフィニティクロマト法等
により、含有組成分量の異なる水不溶性多糖類を得るこ
とを特徴とする水不溶性多糖類の製造方法。 - 【請求項１２】 黄▲磨▼あるいはその乾燥物を有機溶
媒及び水系溶媒により抽出し、その抽出残渣を蓚酸アン
モニウム溶液で抽出した後、その抽出残渣を更に水酸化
ナトリウム又は水酸化カリウム溶液で抽出することを特
徴とする水不溶性多糖類の製造方法。 - 【請求項１３】 黄▲磨▼あるいはその乾燥物を有機溶
媒及び水系溶媒により抽出し、その抽出残渣を蓚酸アン
モニウム溶液で抽出し、その抽出残渣を更に水酸化ナト
リウム又は水酸化カリウム溶液で抽出した後、アルコー
ル沈殿法、イオン交換クロマト法あるいはアフィニティ
クロマト法等により、含有組成分量の異なる水不溶性多
糖類を得ることを特徴とする水不溶性多糖類の製造方
法。 - 【請求項１４】 請求項１乃至９に記載された水不溶性
多糖類を主剤とすることを特徴とする抗腫瘍剤。 - 【請求項１５】 請求項１０乃至１３に記載された製造
方法により得られる水不溶性多糖類を主剤とすることを
特徴とする抗腫瘍剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3162221A JPH0680703A (ja) | 1991-06-05 | 1991-06-05 | キノコに由来する水不溶性多糖類、その製造方法及び該水不溶性多糖類を主剤とする抗腫瘍剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3162221A JPH0680703A (ja) | 1991-06-05 | 1991-06-05 | キノコに由来する水不溶性多糖類、その製造方法及び該水不溶性多糖類を主剤とする抗腫瘍剤 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0680703A true JPH0680703A (ja) | 1994-03-22 |
Family
ID=15750271
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3162221A Pending JPH0680703A (ja) | 1991-06-05 | 1991-06-05 | キノコに由来する水不溶性多糖類、その製造方法及び該水不溶性多糖類を主剤とする抗腫瘍剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0680703A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20030069454A (ko) * | 2002-02-20 | 2003-08-27 | 주식회사한국신약 | 펠리누스 린테우스에서 추출한 다당류와5-플루오로우라실을 포함하는 복합 항암제 |
| KR20040045794A (ko) * | 2002-11-25 | 2004-06-02 | 주식회사한국신약 | 펠리누스 린테우스에서 추출한 다당류와 아드리아마이신을포함하는 복합 항암제 |
| KR20040045795A (ko) * | 2002-11-25 | 2004-06-02 | 주식회사한국신약 | 펠리누스 린테우스에서 추출한 다당류와 마이토마이신ｃ를 포함하는 복합 항암제 |
| CN104987425A (zh) * | 2015-06-19 | 2015-10-21 | 中山鼎晟生物科技有限公司 | 一种柏树菌子实体多糖提取方法 |
-
1991
- 1991-06-05 JP JP3162221A patent/JPH0680703A/ja active Pending
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20030069454A (ko) * | 2002-02-20 | 2003-08-27 | 주식회사한국신약 | 펠리누스 린테우스에서 추출한 다당류와5-플루오로우라실을 포함하는 복합 항암제 |
| KR20040045794A (ko) * | 2002-11-25 | 2004-06-02 | 주식회사한국신약 | 펠리누스 린테우스에서 추출한 다당류와 아드리아마이신을포함하는 복합 항암제 |
| KR20040045795A (ko) * | 2002-11-25 | 2004-06-02 | 주식회사한국신약 | 펠리누스 린테우스에서 추출한 다당류와 마이토마이신ｃ를 포함하는 복합 항암제 |
| CN104987425A (zh) * | 2015-06-19 | 2015-10-21 | 中山鼎晟生物科技有限公司 | 一种柏树菌子实体多糖提取方法 |
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