JP2023529211A - Ｚｂｔｂ３２阻害剤及びその使用 - Google Patents

Ｚｂｔｂ３２阻害剤及びその使用 Download PDF

Info

Publication number
JP2023529211A
JP2023529211A JP2022575951A JP2022575951A JP2023529211A JP 2023529211 A JP2023529211 A JP 2023529211A JP 2022575951 A JP2022575951 A JP 2022575951A JP 2022575951 A JP2022575951 A JP 2022575951A JP 2023529211 A JP2023529211 A JP 2023529211A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
cell
zbtb32
inhibitor
cancer
gene
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
JP2022575951A
Other languages
English (en)
Inventor
シルバ，マリア エステベス
ガン，イェ
シュー，ユーフェイ
オーランド，エレナ
Original Assignee
ノバルティス アーゲー
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by ノバルティス アーゲー filed Critical ノバルティス アーゲー
Publication of JP2023529211A publication Critical patent/JP2023529211A/ja
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/0634—Cells from the blood or the immune system
    • C12N5/0636—T lymphocytes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/46—Cellular immunotherapy
    • A61K39/461—Cellular immunotherapy characterised by the cell type used
    • A61K39/4611—T-cells, e.g. tumor infiltrating lymphocytes [TIL], lymphokine-activated killer cells [LAK] or regulatory T cells [Treg]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/46—Cellular immunotherapy
    • A61K39/463—Cellular immunotherapy characterised by recombinant expression
    • A61K39/4631—Chimeric Antigen Receptors [CAR]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/46—Cellular immunotherapy
    • A61K39/464—Cellular immunotherapy characterised by the antigen targeted or presented
    • A61K39/4643—Vertebrate antigens
    • A61K39/4644—Cancer antigens
    • A61K39/464402—Receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • A61K39/464411—Immunoglobulin superfamily
    • A61K39/464412—CD19 or B4
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
    • C07K14/4702—Regulators; Modulating activity
    • C07K14/4703—Inhibitors; Suppressors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
    • C07K14/7051—T-cell receptor (TcR)-CD3 complex
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/40—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against enzymes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/16—Hydrolases (3) acting on ester bonds (3.1)
    • C12N9/22—Ribonucleases RNAses, DNAses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46
    • A61K2239/31—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46 characterized by the route of administration
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46
    • A61K2239/38—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K39/46 characterised by the dose, timing or administration schedule
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/569—Single domain, e.g. dAb, sdAb, VHH, VNAR or nanobody®
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
    • C07K2319/03—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a transmembrane segment
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/87—Introduction of foreign genetic material using processes not otherwise provided for, e.g. co-transformation
    • C12N15/90—Stable introduction of foreign DNA into chromosome
    • C12N15/902—Stable introduction of foreign DNA into chromosome using homologous recombination
    • C12N15/907—Stable introduction of foreign DNA into chromosome using homologous recombination in mammalian cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/10—Type of nucleic acid
    • C12N2310/11—Antisense
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/10—Type of nucleic acid
    • C12N2310/20—Type of nucleic acid involving clustered regularly interspaced short palindromic repeats [CRISPRs]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/50—Cell markers; Cell surface determinants
    • C12N2501/515—CD3, T-cell receptor complex
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2510/00—Genetically modified cells

Abstract

本開示は、癌などの疾患を処置するための組成物及び方法を提供する。本開示はまた、例えば、ＺＢＴＢ３２の発現の低下及び／又は生物学的活性の低下を伴う、改善されたＣＡＲＴ細胞療法剤を作製する方法に関する。本開示は更に、ＺＢＴＢ３２阻害剤、及びそれを単独で又はＣＡＲＴ細胞療法剤と組み合わせて使用する方法を提供する。【選択図】なし

Description

関連出願
本出願は、２０２０年６月１１日に出願された米国仮特許出願第６３／０３７，８２６号に対する優先権を主張し、その内容全体が参照により本明細書に組み込まれる。
配列表
本出願は、ＡＳＣＩＩ形式で電子的に提出された配列表を含み、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。２０２１年６月１１日に作成された前記ＡＳＣＩＩコピーは、Ｎ２０６７－７１７４ＷＯ＿ＳＬ．ｔｘｔという名称であり、サイズが１，３８８，３３４バイトである。
本開示は、一般に、ＺＢＴＢ３２阻害剤及び癌を処置するためのそれらの使用に関する。
Ｔ細胞を癌細胞上の適切な細胞表面分子に再指向させることに依存する、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）修飾Ｔ細胞（ＣＡＲＴ）治療を用いた最近の開発は、癌を処置する免疫系の力の活用に有望な結果を示している（例えば、非特許文献１を参照されたい）。癌などの疾患を標的とするための改善された戦略に対する継続的な必要性を考慮すると、ＣＡＲＴ療法の改善を含む、癌を処置するための新しい組成物及び方法が非常に望ましい。
Ｓａｄｅｌａｉｎら、Ｃａｎｃｅｒ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ３：３８８～３９８（２０１３）
本明細書では、とりわけ、ＺＢＴＢ３２の発現及び／又は生物学的活性が低下したＣＡＲ発現細胞、ＣＡＲ発現細胞を作製する方法、及び本明細書に記載の疾患又は障害を有する対象を処置するためのＣＡＲ発現細胞を使用する方法が提供される。また、ＺＢＴＢ３２の発現及び／又は生物学的活性が低下したＣＡＲ発現細胞を含む核酸、ベクター、及び組成物も本明細書に開示される。更に、本開示は、とりわけ、ＺＢＴＢ３２阻害剤を使用した、癌を処置する方法、他の治療剤又はモダリティーの有効性を高める方法、及び免疫応答を高める方法を提供する。
ＺＢＴＢ３２が低下したＣＡＲ発現細胞及びそれに関連する方法
一態様において、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する細胞（例えば、細胞の集団）、例えば、免疫エフェクター細胞が本明細書に提供され、ここで、ＣＡＲは、抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン、及び細胞内シグナル伝達ドメインを含み、細胞は、ＺＢＴＢ３２の発現が低下し、及び／又は生物学的活性が低下している。
一実施形態において、細胞は、検出可能なＺＢＴＢ３２の発現及び／又は生物学的活性を有しない。
一実施形態において、細胞はＺＢＴＢ３２阻害剤を含むか、又は細胞はＺＢＴＢ３２阻害剤と接触していたか、若しくは接触している。
一実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤は、小分子を含む。
一実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤は、（１）ＺＢＴＢ３２遺伝子又はその１つ以上の成分を標的とする遺伝子編集系；（２）遺伝子編集系の１つ以上の成分をコードする核酸；又は（３）（１）及び（２）の組み合わせを含む。一実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤は、（１）ＺＢＴＢ３２遺伝子又はその１つ以上の成分を標的とする遺伝子編集系を含む。一実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤は、（２）遺伝子編集系の１つ以上の成分をコードする核酸を含む。一実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤は、（１）及び（２）の組み合わせを含む。
別の態様において、細胞におけるＺＢＴＢ３２の発現及び／又は生物学的活性を低下させ、それにより、ＣＡＲ発現細胞の治療有効性を高めることを含む、ＣＡＲ発現細胞、例えば先の請求項のいずれかに記載の細胞、例えばＣＡＲ１９発現細胞（例えばＣＴＬ０１９又はＣＴＬ１１９）の治療有効性を高める方法が本明細書に開示される。
更に別の態様において、細胞をＺＢＴＢ３２阻害剤、例えば本明細書に記載のＺＢＴＢ３２阻害剤と接触させ、それにより、ＣＡＲ発現細胞の治療有効性を高めることを含む、ＣＡＲ発現細胞、例えば先の請求項のいずれかに記載の細胞、例えばＣＡＲ１９発現細胞（例えばＣＴＬ０１９又はＣＴＬ１１９）の治療有効性を高める方法が本明細書に提供される。
一実施形態において、阻害剤は、（ａ）ＺＢＴＢ３２の発現及び／又は生物学的活性を低下させる小分子；（ｂ）ＺＢＴＢ３２遺伝子を標的とする遺伝子編集系；（ｃ）ＺＢＴＢ３２の発現を阻害する核酸（例えば、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、又はＡＳＯ）；（ｄ）ＺＢＴＢ３２遺伝子によってコードされるタンパク質（例えば、ドミナントネガティブ）、又はＺＢＴＢ３２遺伝子によってコードされるタンパク質の結合パートナー；（ｅ）ＺＢＴＢ３２遺伝子によってコードされるタンパク質に結合する抗体分子（例えば、単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）又はナノボディ）；（ｆ）（ｂ）若しくはその成分又は（ｃ）～（ｄ）のいずれかをコードする核酸；又は（ｇ）（ａ）～（ｆ）の任意の組み合わせである。
一実施形態において、細胞は、エクスビボでＺＢＴＢ３２阻害剤と接触させる。
一実施形態において、細胞は、インビボでＺＢＴＢ３２阻害剤と接触させる。
一実施形態において、ＣＡＲをコードする核酸を細胞内に送達する前に、細胞をインビボでＺＢＴＢ３２阻害剤と接触させる。
一実施形態において、細胞は、それを必要とする対象に投与した後、インビボでＺＢＴＢ３２阻害剤と接触させる。
一実施形態において、方法は、細胞をＴｅｔ２阻害剤と接触させることを更に含む。
一実施形態において、方法は、細胞をＩＫＺＦ２阻害剤と接触させることを更に含む。
一実施形態において、細胞は、Ｔｅｔ２阻害剤と接触していた。
一実施形態において、細胞は、ＩＫＺＦ２阻害剤、例えば、本明細書に記載のＩＫＺＦ２阻害剤と接触していた。
一態様において、対象の癌を処置するための方法が本明細書に提供され、方法は、有効量の本明細書に記載のＣＡＲ発現細胞を対象に投与することを含む。
関連する態様において、本開示は、対象における癌の処置に使用するための、本明細書に記載のＣＡＲ発現細胞を提供する。
別の態様において、それを必要とする対象の処置における使用のためのＣＡＲ発現細胞療法が本明細書に提供され、ここで、ＣＡＲ発現細胞療法は、ＺＢＴＢ３２阻害剤、例えば、本明細書に記載のＺＢＴＢ３２阻害剤と組み合わせて使用される。
一実施形態において、対象は、ＣＡＲ発現細胞療法の開始前に、ＺＢＴＢ３２阻害剤の前処置を受ける。
一実施形態において、対象は、ＺＢＴＢ３２阻害剤及びＣＡＲ発現細胞療法による同時処置を受ける。
一実施形態において、対象は、ＣＡＲ発現細胞療法後にＺＢＴＢ３２阻害剤による処置を受ける。
一実施形態において、対象は、腫瘍抗原（例えば、本明細書に記載の腫瘍抗原）の発現に関連する疾患、例えば、増殖性疾患、前癌状態、癌、及び前記腫瘍抗原の発現に関連する非癌関連の徴候を有する。
一実施形態において、使用は、細胞におけるＺＢＴＢ３２の発現及び／又は生物学的活性を決定することを更に含む。
一態様において、対象を処置する方法が本明細書に提供され、方法は、有効量のＺＢＴＢ３２阻害剤、例えば本明細書に記載のＺＢＴＢ３２阻害剤を対象に投与し、それにより、対象を処置することを含み、ここで、対象は、ＣＡＲ発現細胞を含む治療を受けたか、受けているか、又は受けるところである。
関連する態様において、本開示は、対象の処置における使用のための、ＺＢＴＢ３２阻害剤、例えば、本明細書に記載のＺＢＴＢ３２阻害剤を提供し、ここで、対象は、ＣＡＲ発現細胞を含む治療を受けたか、受けているか、又は受けるところである。
更に別の態様において、ＺＢＴＢ３２の発現及び／又は生物学的活性が低下するように、前記核酸（又はそのＣＡＲコード部分）が細胞のゲノムに組み込まれるように、ＣＡＲをコードする核酸を細胞に導入し、それにより、前記ＣＡＲ発現細胞を製造することを含む、ＣＡＲ発現細胞を製造する方法が本明細書に提供される。
一実施形態において、核酸は、ＺＢＴＢ３２遺伝子内（例えば、ＺＢＴＢ３２遺伝子のイントロン又はエクソン内）に組み込まれる。
一実施形態において、核酸は、ＺＢＴＢ３２遺伝子以外の遺伝子内（例えば、他の遺伝子のイントロン又はエクソン内）に組み込まれる。
一実施形態において、ＣＡＲ発現細胞は、例えば、本明細書に記載されるような、ＣＡＲ発現細胞の製造又は産生の方法に従って製造される。
一態様において、ＣＡＲ発現細胞をエクスビボでＺＢＴＢ３２阻害剤、例えば本明細書に記載のＺＢＴＢ３２阻害剤と接触させ、それにより、ＣＡＲ発現細胞を製造することを含む、ＣＡＲ発現細胞を製造する方法が本明細書に提供される。
一実施形態において、ＣＡＲ発現細胞は、エクスビボでＺＢＴＢ３２阻害剤と接触していない同じＣＡＲ発現細胞と比較して、改善された特性、例えば、本明細書に記載の改善された特性を有する。
一実施形態において、改善された特性は、Ｔ細胞媒介性抗腫瘍応答の強化、増殖及び／又はサイトカイン産生の増加、Ｔ細胞枯渇の低下、枯渇に対する耐性の強化及びインビボでの長期的な免疫保護の強化、ＭＨＣＩＩ及び／又はＭＨＣＩＩトランス活性化因子ＣＩＩＴＡの発現の増加、インビボでのより高い増殖率、改善された免疫記憶表現型、又はそれらの任意の組み合わせを含む。
一実施形態において、ＣＡＲ発現細胞は、例えば、本明細書に記載されるような、ＣＡＲ発現細胞の製造又は産生の方法に従って製造される。
別の態様において、本開示は、ＣＡＲをコードするヌクレオチド配列と、ＺＢＴＢ３２阻害剤をコードするヌクレオチド配列とを含むベクターを提供する。
一実施形態において、阻害剤は、（ａ）ＺＢＴＢ３２遺伝子を標的とする遺伝子編集系；（ｂ）ＺＢＴＢ３２の発現を阻害する核酸（例えば、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、又はＡＳＯ）；（ｃ）ＺＢＴＢ３２遺伝子によってコードされるタンパク質（例えば、ドミナントネガティブ）、又はＺＢＴＢ３２遺伝子によってコードされるタンパク質の結合パートナー；（ｄ）ＺＢＴＢ３２遺伝子によってコードされるタンパク質に結合する抗体分子（例えば、単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）又はナノボディ）；又は（ｅ）（ａ）～（ｄ）の任意の組み合わせである。
一実施形態において、ＣＡＲをコードするヌクレオチド配列及び阻害剤をコードするヌクレオチド配列は、２Ａ部位によって分離される。
別の態様において、ＺＢＴＢ３２阻害剤、例えば、本明細書に記載のＺＢＴＢ３２阻害剤を含む、ＣＡＲ発現細胞のエクスビボ製造のための組成物が本明細書に開示される。
一実施形態において、阻害剤は、（ａ）ＺＢＴＢ３２遺伝子を標的とする遺伝子編集系；（ｂ）ＺＢＴＢ３２の発現を阻害する核酸（例えば、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、又はＡＳＯ）；（ｃ）ＺＢＴＢ３２遺伝子によってコードされるタンパク質（例えば、ドミナントネガティブ）、又はＺＢＴＢ３２遺伝子によってコードされるタンパク質の結合パートナー；（ｄ）ＺＢＴＢ３２遺伝子によってコードされるタンパク質に結合する抗体分子（例えば、単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）又はナノボディ）；又は（ｅ）（ａ）～（ｄ）の任意の組み合わせである。
一実施形態において、ＣＡＲをコードするヌクレオチド配列及び阻害剤をコードするヌクレオチド配列は、２Ａ部位によって分離される。
一態様において、本明細書に記載の１つ以上のＣＡＲ発現細胞を含む細胞の集団が本明細書に提供され、ここで、細胞の集団は、細胞の参照集団よりも高い（例えば、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０倍高い）パーセンテージの、本明細書に記載の表現型を有するか、又は本明細書に記載のマーカーを発現する（例えば、セントラルメモリーＴ（ＴＣＭ）細胞又は幹メモリーＴ（ＴＳＣＭ）細胞に関連する表現型又はマーカー）細胞を含む。
更に別の態様において、本明細書に記載の１つ以上のＣＡＲ発現細胞を含む細胞の集団が本明細書に提供され、ここで、集団中のサイトカイン産生細胞のパーセンテージは、細胞の参照集団よりも少なくとも５０％（例えば、少なくとも６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、９７％、又は９９％）高い。
一実施形態において、細胞の参照集団は、細胞におけるＺＢＴＢ３２の発現及び／又は生物学的活性が低下した１つ以上の細胞を含まない細胞の集団である。
更なる態様において、本明細書に記載の１つ以上のＣＡＲ発現細胞を含む細胞の集団が本明細書に提供され、ここで、細胞集団の少なくとも５０％（例えば、少なくとも６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、９７％、又は９９％）は、本明細書に記載の表現型を有するか、又は本明細書に記載のマーカーを発現する（例えば、セントラルメモリーＴ（ＴＣＭ）細胞又は幹メモリーＴ（ＴＳＣＭ）細胞に関連する表現型又はマーカー）。
本明細書に開示されるＣＡＲ発現細胞、方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、遺伝子編集系は、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ系、ジンクフィンガーヌクレアーゼ系、ＴＡＬＥＮ系、又はメガヌクレアーゼ系である。一実施形態において、遺伝子編集系は、ＺＢＴＢ３２遺伝子中の標的配列に結合する。一実施形態において、遺伝子編集系は、ＺＢＴＢ３２遺伝子の初期エクソン又はイントロンの標的配列に結合する。一実施形態において、遺伝子編集系は、ＺＢＴＢ３２遺伝子の標的配列に結合し、標的配列はエクソン４の上流、例えばエクソン１、エクソン２、又はエクソン３にある。一実施形態において、遺伝子編集系は、ＺＢＴＢ３２遺伝子の後期エクソン又はイントロンの標的配列に結合する。一実施形態において、遺伝子編集系は、ＺＢＴＢ３２遺伝子の最後から４番目のエクソンの下流にある、例えば、最後から３番目のエクソン、最後から２番目のエクソン、又は最後のエクソンにある、標的配列に結合する。一実施形態において、遺伝子編集系は、ＺＢＴＢ３２遺伝子のスプライスジャンクションを含む標的配列に結合する。一実施形態において、遺伝子編集系は、ＺＢＴＢ３２遺伝子のコード領域の標的配列に結合する。一実施形態において、遺伝子編集系は、ＺＢＴＢ３２遺伝子の非コード領域の標的配列に結合する。一実施形態において、遺伝子編集系は、ＺＢＴＢ３２遺伝子の調節エレメントの標的配列に結合する。一実施形態において、遺伝子編集系は、ＺＢＴＢ３２遺伝子の標的配列にハイブリダイズする標的化配列を含むガイドＲＮＡ（ｇＲＮＡ）分子を含むＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ系である。
本明細書に開示されるＣＡＲ発現細胞、方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤は、ＺＢＴＢ３２遺伝子を標的とする低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）若しくは低分子ヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、又はｓｉＲＮＡ若しくはｓｈＲＮＡをコードする核酸を含む。一実施形態において、ｓｉＲＮＡ又はｓｈＲＮＡは、ＺＢＴＢ３２遺伝子のｍＲＮＡの配列に相補的なヌクレオチド配列を含む。一実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤は、ＺＢＴＢ３２遺伝子を標的とするアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）、又はＡＳＯをコードする核酸を含む。一実施形態において、ＡＳＯは、ＺＢＴＢ３２遺伝子のｍＲＮＡの配列に相補的なヌクレオチド配列を含む。
本明細書に開示されるＣＡＲ発現細胞、方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤はタンパク質を含む。一実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤は、ＺＢＴＢ３２遺伝子によってコードされるタンパク質のドミナントネガティブ変異体、又はドミナントネガティブ変異体をコードする核酸を含む。一実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤は、ＺＢＴＢ３２遺伝子によってコードされるタンパク質のドミナントネガティブ結合パートナー、又はドミナントネガティブ結合パートナーをコードする核酸を含む。
本明細書に開示されるＣＡＲ発現細胞、方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤は、ＺＢＴＢ３２遺伝子によってコードされるタンパク質に結合する抗体分子、例えば単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）若しくはナノボディ、又は抗体分子をコードする核酸を含む。
本明細書に開示されるＣＡＲ発現細胞、方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤はＺＢＴＢ３２遺伝子によってコードされるタンパク質に結合する単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）又はナノボディをコードする核酸を含む。
本明細書に開示されるＣＡＲ発現細胞、方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、細胞は、参照細胞と比較して、ＺＢＴＢ３２の発現が低下しており、例えば、少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９８％、又は９９％低下している。一実施形態において、ＺＢＴＢ３２タンパク質のレベルが低下する。一実施形態において、ＺＢＴＢ３２タンパク質の安定性が低下する。一実施形態において、ＺＢＴＢ３２ ｍＲＮＡのレベルが低下する。一実施形態において、ＺＢＴＢ３２ ｍＲＮＡの安定性が低下する。
一実施形態において、細胞はＺＢＴＢ３２転写が低下している。一実施形態において、細胞はＺＢＴＢ３２翻訳が低下している。
本明細書に開示されるＣＡＲ発現細胞、方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、ＺＢＴＢ３２ゲノム遺伝子座が変更される（例えば、破壊される）。一実施形態において、ＺＢＴＢ３２遺伝子は、欠失又は挿入、例えば、ＺＢＴＢ３２ゲノム遺伝子座のオープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）又はＣＬＬスーパーエンハンサーを破壊する欠失又は挿入を含む。一実施形態において、ＺＢＴＢ３２遺伝子は、エピゲノム修飾、例えば、ＺＢＴＢ３２の発現を低下させるエピゲノム修飾を含む。
本明細書に開示されるＣＡＲ発現細胞、方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、細胞は、参照細胞と比較して、ＺＢＴＢ３２の生物学的活性が低下しており、例えば、少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９８％、又は９９％低下している。一実施形態において、ＺＢＴＢ３２の転写抑制機能が低下する。一実施形態において、ＺＢＴＢ３２と１つ以上の結合パートナーとの間の相互作用が低下する。一実施形態において、１つ以上の結合パートナーは、ファンコニ貧血相補群Ｃ（ＦＡＮＣＣ）、チオレドキシン相互作用タンパク質（ＴＸＮＩＰ）、ビタミンＤ３上方制御タンパク質１（ＶＤＵＰ１）、ジンクフィンガー及びＢＴＢドメイン含有タンパク質１６（Ｚｂｔｂ１６）、ジンクフィンガー肘関連プロリンドメインタンパク質２（Ｚｐｏ２）、ＧＡＴＡ結合タンパク質３（Ｇａｔａ３）、ＧＡＴＡ結合タンパク質２（Ｇａｔａ２）、又はＢ細胞リンパ腫６（Ｂｃｌ－６）を含む。
本明細書に開示されるＣＡＲ発現細胞、方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、細胞は、増強されたＴ細胞媒介性抗腫瘍応答を有する。
本明細書に開示されるＣＡＲ発現細胞、方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、細胞は、増殖及び／又はサイトカイン産生が増加している。
本明細書に開示されるＣＡＲ発現細胞、方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、細胞は、改変されたＴ細胞状態、例えば、機能不全性Ｔ細胞の改変された状態、例えば、低下したＴ細胞枯渇を有する。
本明細書に開示されるＣＡＲ発現細胞、方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、細胞は、枯渇に対する強化された耐性、及び強化されたインビボでの長期的な免疫保護を有する。
本明細書に開示されるＣＡＲ発現細胞、方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、細胞は、ＭＨＣＩＩ及び／又はＭＨＣＩＩトランス活性化因子ＣＩＩＴＡの発現が増加している。
本明細書に開示されるＣＡＲ発現細胞、方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、細胞は、参照細胞と比較してインビボでより高い速度で増殖する。
本明細書に開示されるＣＡＲ発現細胞、方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、細胞は、改善された免疫記憶表現型、例えばＢ細胞記憶表現型を有する。
本明細書に開示されるＣＡＲ発現細胞、方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、細胞は、免疫エフェクター細胞（例えば、免疫エフェクター細胞の集団）である。
本明細書に開示されるＣＡＲ発現細胞、方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、免疫エフェクター細胞は、Ｔ細胞、Ｂ細胞、又はＮＫ細胞である。一実施形態において、免疫エフェクター細胞は、Ｔ細胞である。一実施形態において、Ｔ細胞は、アルファベータＴ細胞（αβＴ細胞）である。一実施形態において、Ｔ細胞は、ＣＤ４＋Ｔ細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞、又はそれらの組み合わせである。一実施形態において、Ｔ細胞は、ＣＤ８＋Ｔ細胞又はレギュレーターＴ細胞（Ｔｒｅｇ）、例えば、腫瘍浸潤、機能不全性ＣＤ８＋Ｔ細胞又はＴｒｅｇである。一実施形態において、細胞はガンマデルタＴ細胞（γδＴ細胞）である。一実施形態において、細胞はＢ細胞である。一実施形態において、細胞はＮＫ細胞である。
本明細書に開示されるＣＡＲ発現細胞、方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、細胞は、キメラ抗原受容体Ｔ（ＣＡＲＴ）細胞、例えば、非応答者の製造されたＣＡＲＴ細胞である。
本明細書に開示されるＣＡＲ発現細胞、方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、細胞は、ヒト細胞である。
本明細書に開示されるＣＡＲ発現細胞、方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、細胞は更に、Ｔｅｔ２の発現が低下し、及び／又は生物学的活性が低下している。
本明細書に開示されるＣＡＲ発現細胞、方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、細胞は更に、ＩＫＺＦ２の発現が低下し、及び／又は生物学的活性が低下している。
本明細書に開示されるＣＡＲ発現細胞、方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、抗原結合ドメインは、ＴＳＨＲ、ＣＤ１９、ＣＤ１２３、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ１７１、ＣＳ－１、ＣＬＬ－１、ＣＤ３３、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＧＤ２、ＧＤ３、ＢＣＭＡ、Ｔｎ Ａｇ、ＰＳＭＡ、ＲＯＲ１、ＦＬＴ３、ＦＡＰ、ＴＡＧ７２、ＣＤ３８、ＣＤ４４ｖ６、ＣＥＡ、ＥＰＣＡＭ、Ｂ７Ｈ３、ＫＩＴ、ＩＬ－１３Ｒａ２、メソテリン、ＩＬ－１１Ｒａ、ＰＳＣＡ、ＰＲＳＳ２１、ＶＥＧＦＲ２、ルイスＹ、ＣＤ２４、ＰＤＧＦＲ－β、ＳＳＥＡ－４、ＣＤ２０、葉酸受容体α、ＥＲＢＢ２（Ｈｅｒ２／ｎｅｕ）、ＭＵＣ１、ＥＧＦＲ、ＮＣＡＭ、Ｐｒｏｓｔａｓｅ、ＰＡＰ、ＥＬＦ２Ｍ、エフリンＢ２、ＩＧＦ－Ｉ受容体、ＣＡＩＸ、ＬＭＰ２、ｇｐ１００、ｂｃｒ－ａｂｌ、チロシナーゼ、ＥｐｈＡ２、フコシルＧＭ１、ｓＬｅ、ＧＭ３、ＴＧＳ５、ＨＭＷＭＡＡ、ｏ－アセチル－ＧＤ２、葉酸受容体β、ＴＥＭ１／ＣＤ２４８、ＴＥＭ７Ｒ、ＣＬＤＮ６、ＧＰＲＣ５Ｄ、ＣＸＯＲＦ６１、ＣＤ９７、ＣＤ１７９ａ、ＡＬＫ、ポリシアル酸、ＰＬＡＣ１、ＧｌｏｂｏＨ、ＮＹ－ＢＲ－１、ＵＰＫ２、ＨＡＶＣＲ１、ＡＤＲＢ３、ＰＡＮＸ３、ＧＰＲ２０、ＬＹ６Ｋ、ＯＲ５１Ｅ２、ＴＡＲＰ、ＷＴ１、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＬＡＧＥ－１ａ、ＭＡＧＥ－Ａ１、レグマイン、ＨＰＶ Ｅ６、Ｅ７、ＭＡＧＥ Ａ１、ＥＴＶ６－ＡＭＬ、精子タンパク質１７、ＸＡＧＥ１、Ｔｉｅ ２、ＭＡＤ－ＣＴ－１、ＭＡＤ－ＣＴ－２、Ｆｏｓ関連抗原１、ｐ５３、ｐ５３変異体、プロステイン、サバイビン及びテロメラーゼ、ＰＣＴＡ－１／ガレクチン８、ＭｅｌａｎＡ／ＭＡＲＴ１、Ｒａｓ変異体、ｈＴＥＲＴ、肉腫転座切断点、ＭＬ－ＩＡＰ、ＥＲＧ（ＴＭＰＲＳＳ２ ＥＴＳ融合遺伝子）、ＮＡ１７、ＰＡＸ３、アンドロゲン受容体、サイクリンＢ１、ＭＹＣＮ、ＲｈｏＣ、ＴＲＰ－２、ＣＹＰ１Ｂ１、ＢＯＲＩＳ、ＳＡＲＴ３、ＰＡＸ５、ＯＹ－ＴＥＳ１、ＬＣＫ、ＡＫＡＰ－４、ＳＳＸ２、ＲＡＧＥ－１、ヒトテロメラーゼ逆転写酵素、ＲＵ１、ＲＵ２、腸カルボキシルエステラーゼ、ｍｕｔ ｈｓｐ７０－２、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ７２、ＬＡＩＲ１、ＦＣＡＲ、ＬＩＬＲＡ２、ＣＤ３００ＬＦ、ＣＬＥＣ１２Ａ、ＢＳＴ２、ＥＭＲ２、ＬＹ７５、ＧＰＣ３、ＦＣＲＬ５及びＩＧＬＬ１からなる群から選択される腫瘍抗原に結合する。
一実施形態において、腫瘍抗原はＣＤ１９、ＢＣＭＡ、ＣＤ２０、又はＣＤ２２である。一実施形態において、腫瘍抗原はＣＤ１９である。一実施形態において、腫瘍抗原はＢＣＭＡである。一実施形態において、腫瘍抗原はＣＤ２０である。一実施形態において、腫瘍抗原はＣＤ２２である。
一実施形態において、抗原結合ドメインは、例えば、国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレット又は国際公開第２０１４／１５３２７０号パンフレットに記載される抗原又は抗体断片である。
本明細書に開示されるＣＡＲ発現細胞、方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、膜貫通ドメインは、国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレットの配列番号１２のアミノ酸配列の少なくとも１、２若しくは３つの修飾であるが、２０、１０又は５つ以下の修飾を有するアミノ酸配列、又は国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレットの配列番号１２のアミノ酸配列と９５～９９％の同一性を有する配列、又は国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレットの配列番号１２のアミノ酸配列を含む。
一実施形態において、抗原結合ドメインは、ヒンジ領域によって膜貫通ドメインに結合され、前記ヒンジ領域は、国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレットの配列番号２若しくは配列番号６又はそれと９５～９９％の同一性を有する配列を含む。
本明細書に開示されるＣＡＲ発現細胞、方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、細胞内シグナル伝達ドメインは、一次シグナル伝達ドメイン及び／又は共刺激シグナル伝達ドメインを含み、一次シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ζ、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、共通ＦｃＲγ（ＦＣＥＲ１Ｇ）、ＦｃＲβ（ＦｃεＲ１ｂ）、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、ＦｃγＲＩＩａ、ＤＡＰ１０又はＤＡＰ１２から選択されるタンパク質の機能的シグナル伝達ドメインを含む。一実施形態において、一次シグナル伝達ドメインは、国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレットの配列番号１８若しくは配列番号２０のアミノ酸配列の少なくとも１、２若しくは３つの修飾であるが、２０、１０若しくは５つ以下の修飾を有するアミノ酸配列、又は国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレットの配列番号１８若しくは配列番号２０と９５～９９％の同一性を有する配列、又は国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレットの配列番号１８若しくは配列番号２０のアミノ酸配列を含む。
本明細書に開示されるＣＡＲ発現細胞、方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、細胞内シグナル伝達ドメインは、共刺激シグナル伝達ドメイン又は一次シグナル伝達ドメイン及び共刺激シグナル伝達ドメインを含み、共刺激シグナル伝達ドメインは、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＰＤ－１、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦＡ－１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３と特異的に結合するリガンド、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ－１、ＧＩＴＲ、ＢＡＦＦＲ、ＨＶＥＭ（ＬＩＧＨＴＲ）、ＳＬＡＭＦ７、ＮＫｐ８０（ＫＬＲＦ１）、ＣＤ１６０、ＣＤ１９、ＣＤ４、ＣＤ８α、ＣＤ８β、ＩＬ２Ｒβ、ＩＬ２Ｒγ、ＩＬ７Ｒα、ＩＴＧＡ４、ＶＬＡ１、ＣＤ４９ａ、ＩＴＧＡ４、ＩＡ４、ＣＤ４９Ｄ、ＩＴＧＡ６、ＶＬＡ－６、ＣＤ４９ｆ、ＩＴＧＡＤ、ＣＤ１１ｄ、ＩＴＧＡＥ、ＣＤ１０３、ＩＴＧＡＬ、ＣＤ１１ａ、ＬＦＡ－１、ＩＴＧＡＭ、ＣＤ１１ｂ、ＩＴＧＡＸ、ＣＤ１１ｃ、ＩＴＧＢ１、ＣＤ２９、ＩＴＧＢ２、ＣＤ１８、ＬＦＡ－１、ＩＴＧＢ７、ＴＮＦＲ２、ＴＲＡＮＣＥ／ＲＡＮＫＬ、ＤＮＡＭ１（ＣＤ２２６）、ＳＬＡＭＦ４（ＣＤ２４４、２Ｂ４）、ＣＤ８４、ＣＤ９６（Ｔａｃｔｉｌｅ）、ＣＥＡＣＡＭ１、ＣＲＴＡＭ、Ｌｙ９（ＣＤ２２９）、ＣＤ１６０（ＢＹ５５）、ＰＳＧＬ１、ＣＤ１００（ＳＥＭＡ４Ｄ）、ＣＤ６９、ＳＬＡＭＦ６（ＮＴＢ－Ａ、Ｌｙ１０８）、ＳＬＡＭ（ＳＬＡＭＦ１、ＣＤ１５０、ＩＰＯ－３）、ＢＬＡＭＥ（ＳＬＡＭＦ８）、ＳＥＬＰＬＧ（ＣＤ１６２）、ＬＴＢＲ、ＬＡＴ、ＧＡＤＳ、ＳＬＰ－７６、ＰＡＧ／Ｃｂｐ、ＮＫｐ４４、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４６及びＮＫＧ２Ｄからなる群から選択されるタンパク質の機能的シグナル伝達ドメインを含む。一実施形態において、共刺激シグナル伝達ドメインは、国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレットの配列番号１４若しくは配列番号１６のアミノ酸配列の少なくとも１、２若しくは３つの修飾であるが、２０、１０若しくは５つ以下の修飾を有する国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレットのアミノ酸配列又は配列番号１４若しくは配列番号１６と９５～９９％の同一性を有する配列を含む。一実施形態において、共刺激シグナル伝達ドメインは、国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレットの配列番号１４又は配列番号１６の配列を含む。一実施形態において、細胞内ドメインは、国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレットの配列番号１４又は配列番号１６の配列及び配列番号１８又は配列番号２０の配列を含み、細胞内シグナル伝達ドメインを含む配列は、同じフレームにおいて且つ単一のポリペプチド鎖として発現される。
本明細書に開示されるＣＡＲ発現細胞、方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、ＣＡＲは、国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレットの配列番号２の配列を含むリーダー配列を更に含む。
本明細書に開示されるＣＡＲ発現細胞、方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、癌は、血液癌である。一実施形態において、癌は、リンパ腫、骨髄腫、又は白血病である。一実施形態において、癌は、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性リンパ系白血病（ＡＬＬ）、Ｂ細胞急性リンパ系白血病（Ｂ－ＡＬＬ）、Ｔ細胞急性リンパ系白血病（Ｔ－ＡＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、Ｂ細胞前リンパ球性白血病、芽球性形質細胞様樹状細胞の新生物、バーキットリンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、ヘアリーセル白血病、小細胞型又は大細胞型濾胞性リンパ腫、悪性のリンパ増殖性状態、ＭＡＬＴリンパ腫、マントル細胞リンパ腫、辺縁帯リンパ腫、多発性骨髄腫、脊髄形成異常及び骨髄異形成症候群、非ホジキンのリンパ腫、ホジキンのリンパ腫、形質芽細胞リンパ腫、形質細胞様樹状細胞の新生物、ワルデンシュトレーム型マクログロブリン血症、又は前白血病である。
一実施形態において、癌は、Ｂ細胞悪性腫瘍、例えば、Ｂ細胞リンパ腫又は白血病である。
一実施形態において、癌は、リンパ腫、例えば、非ホジキンリンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、例えば、活性化Ｂ細胞（ＡＢＣ）ＤＬＢＣＬ又は胚中心Ｂ細胞（ＧＣＢ）ＤＬＢＣＬである。一実施形態において、癌は、骨髄腫、例えば多発性、骨髄腫（ＭＭ）である。一実施形態において、癌は、白血病、例えば、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）又は慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）である。
本明細書に開示されるＣＡＲ発現細胞、方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、癌は、固形腫瘍である。一実施形態において、固形腫瘍は、免疫細胞浸潤に関連する。一施形態において、癌は、結腸癌、直腸癌、腎細胞癌、肝臓癌、肺の非小細胞癌、小腸癌、食道癌、黒色腫、骨癌、膵臓癌、皮膚癌、頭頸部癌、皮膚又は眼内の悪性黒色腫、子宮癌、卵巣癌、直腸癌、肛門部癌、胃癌、精巣癌、子宮癌、卵管癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、膣の癌、外陰癌、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、内分泌系癌、甲状腺癌、副甲状腺癌、副腎癌、軟部組織肉腫、尿道癌、陰茎癌、小児固形腫瘍、膀胱癌、腎臓癌又は尿管癌、腎盂癌、中枢神経系（ＣＮＳ）新生物、原発性ＣＮＳリンパ腫、腫瘍血管新生、脊髄軸腫瘍、脳幹神経膠腫、下垂体腺腫、カポジ肉腫、類表皮癌、扁平上皮癌、Ｔ細胞リンパ腫、環境的に誘発された癌、又はその転移性病変である。
本明細書に開示されるＣＡＲ発現細胞、方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、癌は、例えば、本明細書に記載の方法によって決定される、より高いレベルのＺＢＴＢ３２を発現する。
いくつかの実施形態において、本明細書に開示される方法又は使用は、対象に第２の治療剤又はモダリティー、例えば本明細書に記載の癌療法剤を投与することを更に含む。
いくつかの実施形態において、本明細書に開示される方法又は使用は、ＺＢＴＢ３２阻害剤、例えば本明細書に記載のＺＢＴＢ３２阻害剤を対象に投与することを更に含む。
ＺＢＴＢ３２阻害剤の使用に関する方法
一態様において、本開示は、有効量のＺＢＴＢ３２阻害剤及び第２の治療剤又はモダリティーを対象に投与し、それにより、対象の癌を処置すること（ｔｈｒｅａｔｉｎｇ）を含む、対象の癌を処置する方法を提供する。
一実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤は、第２の治療剤又はモダリティーの投与前、投与と同時に、又は投与後に投与される。一実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤は、小分子を含む。
一実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤は、（１）ＺＢＴＢ３２遺伝子又はその１つ以上の成分を標的とする遺伝子編集系；（２）遺伝子編集系の１つ以上の成分をコードする核酸；又は（３）（１）及び（２）の組み合わせを含む。
関連する態様において、対象の癌の処置における使用のためのＺＢＴＢ３２阻害剤が本明細書に提供され、ここで、ＺＢＴＢ３２阻害剤は、第２の処置剤又はモダリティーと組み合わせて使用される。
一実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤は、第２の治療剤又はモダリティーの投与前、投与と同時に、又は投与後に投与される。一実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤は、小分子を含む。
一実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤は、（１）ＺＢＴＢ３２遺伝子又はその１つ以上の成分を標的とする遺伝子編集系；（２）遺伝子編集系の１つ以上の成分をコードする核酸；又は（３）（１）及び（２）の組み合わせを含む。
一態様において、有効量のＺＢＴＢ３２阻害剤、例えば本明細書に記載のＺＢＴＢ３２阻害剤を対象に投与し、それにより、モダリティーの治療剤の有効性を高めることを含む、治療剤又はモダリティーの有効性を高める方法が本明細書に提供される。
一実施形態において、対象は、癌、例えば、本明細書に記載の癌を有する。
一実施形態において、治療剤又はモダリティーは、免疫療法又は細胞療法、例えば、本明細書に記載の免疫療法又は細胞療法を含む。
関連する態様において、対象における治療剤又はモダリティーの有効性を高める際に使用するためのＺＢＴＢ３２阻害剤、例えば、本明細書に記載のＺＢＴＢ３２阻害剤が本明細書に提供される。
一実施形態において、対象は、癌、例えば、本明細書に記載の癌を有する。
一実施形態において、治療剤又はモダリティーは、免疫療法又は細胞療法、例えば、本明細書に記載の免疫療法又は細胞療法を含む。
一態様において、有効量のＺＢＴＢ３２阻害剤、例えば、本明細書に記載のＺＢＴＢ３２阻害剤を対象に投与し、それにより、対象における免疫応答を増加させることを含む、対象における免疫応答を増加させる方法が本明細書に提供される。一実施形態において、対象は、癌、例えば、本明細書に記載の癌を有する。一実施形態において、治療剤又はモダリティーは、免疫療法又は細胞療法、例えば、本明細書に記載の免疫療法又は細胞療法を含む。
関連する態様において、本開示は、対象における免疫応答を増加させる際に使用するための、ＺＢＴＢ３２阻害剤、例えば、本明細書に記載のＺＢＴＢ３２阻害剤を提供する。一実施形態において、対象は、癌、例えば、本明細書に記載の癌を有する。一実施形態において、治療剤又はモダリティーは、免疫療法又は細胞療法、例えば、本明細書に記載の免疫療法又は細胞療法を含む。
更に別の態様において、細胞（例えば、免疫細胞）をＺＢＴＢ３２阻害剤、例えば、本明細書に記載のＺＢＴＢ３２阻害剤と接触させること；及び任意選択により、細胞を第２の治療剤又はモダリティーと更に接触させること；それにより、細胞を処置することを含む、ＺＢＴＢ３２の発現及び／又は生物学的活性を阻害する方法が本明細書に提供される。
一実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤は、インビトロ、エクスビボ、又はインビボで細胞と接触させる。
一態様において、本開示は、本明細書に記載のＺＢＴＢ３２遺伝子を標的とする遺伝子編集系を提供する。
一実施形態において、系は、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ遺伝子編集系、ジンクフィンガーヌクレアーゼ系、ＴＡＬＥＮ系、又はメガヌクレアーゼ系を含む。
一実施形態において、系は、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ遺伝子編集系を含む。
一実施形態において、系は、ＺＢＴＢ３２遺伝子の配列に特異的な標的配列を含むｇＲＮＡ分子、及びＣａｓ９タンパク質；ＺＢＴＢ３２遺伝子の配列に特異的な標的配列を含むｇＲＮＡ分子、及びＣａｓ９タンパク質をコードする核酸；ＺＢＴＢ３２遺伝子の配列に特異的な標的配列を含むｇＲＮＡ分子をコードする核酸、及びＣａｓ９タンパク質；又はＺＢＴＢ３２遺伝子の配列に特異的な標的配列を含むｇＲＮＡ分子をコードする核酸、及びＣａｓ９タンパク質をコードする核酸を含む。
一実施形態において、系はテンプレートＤＮＡを更に含む。一実施形態において、テンプレートＤＮＡは、ＣＡＲ、例えば本明細書に記載のＣＡＲをコードする核酸配列を含む。
本明細書に開示される方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、遺伝子編集系は、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ系、ジンクフィンガーヌクレアーゼ系、ＴＡＬＥＮ系、又はメガヌクレアーゼ系である。一実施形態において、遺伝子編集系は、ＺＢＴＢ３２遺伝子中の標的配列に結合する。一実施形態において、遺伝子編集系は、ＺＢＴＢ３２遺伝子の初期エクソン又はイントロンの標的配列に結合する。一実施形態において、遺伝子編集系は、ＺＢＴＢ３２遺伝子の標的配列に結合し、標的配列はエクソン４の上流、例えばエクソン１、エクソン２、又はエクソン３にある。一実施形態において、遺伝子編集系は、ＺＢＴＢ３２遺伝子の後期エクソン又はイントロンの標的配列に結合する。一実施形態において、遺伝子編集系は、ＺＢＴＢ３２遺伝子の最後から４番目のエクソンの下流にあり、例えば、最後から３番目のエクソン、最後から２番目のエクソン、又は最後のエクソンにある、標的配列に結合する。一実施形態において、遺伝子編集系は、ＺＢＴＢ３２遺伝子のスプライスジャンクションを含む標的配列に結合する。一実施形態において、遺伝子編集系は、ＺＢＴＢ３２遺伝子のコード領域の標的配列に結合する。一実施形態において、遺伝子編集系は、ＺＢＴＢ３２遺伝子の非コード領域の標的配列に結合する。一実施形態において、遺伝子編集系は、ＺＢＴＢ３２遺伝子の調節エレメントの標的配列に結合する。一実施形態において、遺伝子編集系は、ＺＢＴＢ３２遺伝子の標的配列にハイブリダイズする標的化配列を含むガイドＲＮＡ（ｇＲＮＡ）分子を含むＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ系である。
本明細書に開示される方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤は、ＺＢＴＢ３２遺伝子を標的とする低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）若しくは低分子ヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、又はｓｉＲＮＡ若しくはｓｈＲＮＡをコードする核酸を含む。一実施形態において、ｓｉＲＮＡ又はｓｈＲＮＡは、ＺＢＴＢ３２遺伝子のｍＲＮＡの配列に相補的なヌクレオチド配列を含む。一実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤は、ＺＢＴＢ３２遺伝子を標的とするアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）、又はＡＳＯをコードする核酸を含む。一実施形態において、ＡＳＯは、ＺＢＴＢ３２遺伝子のｍＲＮＡの配列に相補的なヌクレオチド配列を含む。
本明細書に開示される方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤はタンパク質を含む。一実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤は、ＺＢＴＢ３２遺伝子によってコードされるタンパク質のドミナントネガティブ変異体、又はドミナントネガティブ変異体をコードする核酸を含む。一実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤は、ＺＢＴＢ３２遺伝子によってコードされるタンパク質のドミナントネガティブ結合パートナー、又はドミナントネガティブ結合パートナーをコードする核酸を含む。
本明細書に開示される方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤は、ＺＢＴＢ３２遺伝子によってコードされるタンパク質に結合する抗体分子、例えば単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）若しくはナノボディ、又は抗体分子をコードする核酸を含む。
本明細書に開示される方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤はＺＢＴＢ３２遺伝子によってコードされるタンパク質に結合する単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）又はナノボディをコードする核酸を含む。
本明細書に開示される方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、細胞は、参照細胞と比較して、ＺＢＴＢ３２の発現が低下しており、例えば、少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９８％、又は９９％低下している。一実施形態において、ＺＢＴＢ３２タンパク質のレベルが低下する。一実施形態において、ＺＢＴＢ３２タンパク質の安定性が低下する。一実施形態において、ＺＢＴＢ３２ ｍＲＮＡのレベルが低下する。一実施形態において、ＺＢＴＢ３２ ｍＲＮＡの安定性が低下する。
一実施形態において、細胞はＺＢＴＢ３２転写が低下している。一実施形態において、細胞はＺＢＴＢ３２翻訳が低下している。
本明細書に開示される方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、ＺＢＴＢ３２ゲノム遺伝子座が変更される（例えば、破壊される）。一実施形態において、ＺＢＴＢ３２遺伝子は、欠失又は挿入、例えば、ＺＢＴＢ３２ゲノム遺伝子座のオープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）又はＣＬＬスーパーエンハンサーを破壊する欠失又は挿入を含む。一実施形態において、ＺＢＴＢ３２遺伝子は、エピゲノム修飾、例えば、ＺＢＴＢ３２の発現を低下させるエピゲノム修飾を含む。
本明細書に開示される方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、細胞は、参照細胞と比較して、ＺＢＴＢ３２の生物学的活性が低下しており、例えば、少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９８％、又は９９％低下している。一実施形態において、ＺＢＴＢ３２の転写抑制機能が低下する。一実施形態において、ＺＢＴＢ３２と１つ以上の結合パートナーとの間の相互作用が低下する。一実施形態において、１つ以上の結合パートナーは、ファンコニ貧血相補群Ｃ（ＦＡＮＣＣ）、チオレドキシン相互作用タンパク質（ＴＸＮＩＰ）、ビタミンＤ３上方制御タンパク質１（ＶＤＵＰ１）、ジンクフィンガー及びＢＴＢドメイン含有タンパク質１６（Ｚｂｔｂ１６）、ジンクフィンガー肘関連プロリンドメインタンパク質２（Ｚｐｏ２）、ＧＡＴＡ結合タンパク質３（Ｇａｔａ３）、ＧＡＴＡ結合タンパク質２（Ｇａｔａ２）、又はＢ細胞リンパ腫６（Ｂｃｌ－６）を含む。
本明細書に開示される方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、細胞は、増強されたＴ細胞媒介性抗腫瘍応答を有する。
本明細書に開示される方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、細胞は、増殖及び／又はサイトカイン産生が増加している。
本明細書に開示される方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、細胞は、改変されたＴ細胞状態、例えば、機能不全性Ｔ細胞の改変された状態、例えば、低下したＴ細胞枯渇を有する。
本明細書に開示される方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、細胞は、枯渇に対する強化された耐性、及び強化されたインビボでの長期的な免疫保護を有する。
本明細書に開示されるＣＡＲ発現細胞、方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、細胞は、ＭＨＣＩＩ及び／又はＭＨＣＩＩトランス活性化因子ＣＩＩＴＡの発現が増加している。
本明細書に開示される方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、阻害剤は、インビボでより高い細胞増殖速度をもたらす。
本明細書に開示される方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、阻害剤は、免疫記憶表現型、例えばＢ細胞記憶表現型を改善する。
本明細書に開示される方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、癌は、血液癌である。一実施形態において、癌は、リンパ腫、骨髄腫、又は白血病である。一実施形態において、癌は、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性リンパ系白血病（ＡＬＬ）、Ｂ細胞急性リンパ系白血病（Ｂ－ＡＬＬ）、Ｔ細胞急性リンパ系白血病（Ｔ－ＡＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、Ｂ細胞前リンパ球性白血病、芽球性形質細胞様樹状細胞の新生物、バーキットリンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、ヘアリーセル白血病、小細胞型又は大細胞型濾胞性リンパ腫、悪性のリンパ増殖性状態、ＭＡＬＴリンパ腫、マントル細胞リンパ腫、辺縁帯リンパ腫、多発性骨髄腫、脊髄形成異常及び骨髄異形成症候群、非ホジキンのリンパ腫、ホジキンのリンパ腫、形質芽細胞リンパ腫、形質細胞様樹状細胞の新生物、ワルデンシュトレーム型マクログロブリン血症、又は前白血病である。
一実施形態において、癌は、Ｂ細胞悪性腫瘍、例えば、Ｂ細胞リンパ腫又は白血病である。
一実施形態において、癌は、リンパ腫、例えば、非ホジキンリンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、例えば、活性化Ｂ細胞（ＡＢＣ）ＤＬＢＣＬ又は胚中心Ｂ細胞（ＧＣＢ）ＤＬＢＣＬである。一実施形態において、癌は、骨髄腫、例えば多発性、骨髄腫（ＭＭ）である。一実施形態において、癌は、白血病、例えば、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）又は慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）である。
本明細書に開示される方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、癌は、固形腫瘍である。一実施形態において、固形腫瘍は、免疫細胞浸潤に関連する。一実施形態において、癌は、結腸癌、直腸癌、腎細胞癌、肝臓癌、肺の非小細胞癌、小腸癌、食道癌、黒色腫、骨癌、膵臓癌、皮膚癌、頭頸部癌、皮膚又は眼内の悪性黒色腫、子宮癌、卵巣癌、直腸癌、肛門部癌、胃癌、精巣癌、子宮癌、卵管癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、膣の癌、外陰癌、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、内分泌系癌、甲状腺癌、副甲状腺癌、副腎癌、軟部組織肉腫、尿道癌、陰茎癌、小児固形腫瘍、膀胱癌、腎臓癌又は尿管癌、腎盂癌、中枢神経系（ＣＮＳ）新生物、原発性ＣＮＳリンパ腫、腫瘍血管新生、脊髄軸腫瘍、脳幹神経膠腫、下垂体腺腫、カポジ肉腫、類表皮癌、扁平上皮癌、Ｔ細胞リンパ腫、環境的に誘発された癌、又はその転移性病変である。
本明細書に開示される方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、癌は、例えば、本明細書に記載の方法によって決定される、より高いレベルのＺＢＴＢ３２を発現する。
本明細書に開示される方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、対象は、免疫応答の増加を必要としている。
いくつかの実施形態において、本明細書に開示される方法又は使用は、免疫応答の増加を必要としている対象を特定することを更に含む。
いくつかの実施形態において、本明細書に開示される方法又は使用は、細胞におけるＺＢＴＢ３２の発現及び／又は生物学的活性を決定することを更に含む。
いくつかの実施形態において、本明細書に開示される方法又は使用は、ＣＡＲＴ療法応答不良に関連する特性を決定することを更に含む。
本明細書に開示される方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、第２の治療剤又はモダリティーは、免疫療法を含む。
本明細書に開示される方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、第２の治療剤又はモダリティーは、免疫チェックポイント阻害剤、例えば、本明細書に記載の免疫チェックポイント阻害剤を含む。一実施形態において、第２の治療剤又はモダリティーは、ＰＤ－１阻害剤、ＴＩＭ－３阻害剤、ＬＡＧ－３阻害剤、ＣＴＬＡ－４阻害剤、ＴＩＧＩＴ阻害剤、ＧＩＴＲアゴニスト、ＰＤ－Ｌ１阻害剤、サイトカイン、キメラ抗原受容体、エストロゲン受容体アンタゴニスト、ＣＤＫ４／６阻害剤、ＣＸＣＲ２阻害剤、ＣＳＦ－１／１Ｒ結合剤、Ａ２Ａｒアンタゴニスト、ＩＤＯ阻害剤、ＳＴＩＮＧアゴニスト、ガレクチン阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、ｃ－ＭＥＴ阻害剤、ＴＧＦ－ｂ阻害剤、ＩＬ－１ｂ阻害剤又はＭＤＭ２阻害剤を含む。
本明細書に開示される方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、第２の治療剤又はモダリティーは、細胞療法、例えば、Ｔ細胞療法、例えば、本明細書に記載のＣＡＲ発現細胞療法を含む。
本明細書に開示される方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、第２の治療剤又はモダリティーは、標的療法を含む。
本明細書に開示される方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、第２の治療剤又はモダリティーは、化学療法を含む。
本明細書に開示される方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、第２の治療剤又はモダリティーは、放射線療法を含む。
本明細書に開示される方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、第２の治療剤又はモダリティーは、手術を含む。
本明細書に開示される方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、第２の治療剤又はモダリティーは、ホルモン療法を含む。
本明細書に開示される方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、第２の治療剤又はモダリティーは、血管新生阻害剤を含む。
本開示の実施又は試験では、本明細書に記載されるものと同様の又は均等な方法及び材料を使用し得るが、好適な方法及び材料を以下に記載する。本明細書に記載の全ての刊行物、特許出願、特許及び他の参考文献（例えば、配列データベース参照番号）は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。例えば、本明細書で（例えば、本明細書の任意の表において）言及される全てのＧｅｎＢａｎｋ、Ｕｎｉｇｅｎｅ、及びＥｎｔｒｅｚ配列は、参照により組み込まれる。特に指定がない限り、本明細書で指定されている配列受託番号は、２０２０年６月１１日現在のデータベースエントリーを参照する。１つの遺伝子又はタンパク質が複数の配列受託番号を参照する場合、全ての配列変異体が包含される。
加えて、材料、方法、及び例は、例示に過ぎず、限定することを意図するものではない。見出し、副見出し、又は番号若しくは文字が振られた要素、例えば（ａ）、（ｂ）、（ｉ）等は、単に読みやすくするために提示されている。本明細書で見出し又は番号若しくは文字が振られた要素を使用しても、工程若しくは要素がアルファベット順に実施される必要はなく、又は工程若しくは要素が必ず互いに別個のものである必要はない。本開示の他の特徴、目的、及び利点は、説明及び図面、並びに特許請求の範囲から明らかとなるであろう。
本特許又は出願ファイルには、カラーで作成された少なくとも１つの図面が含まれている。カラーの図面を伴う本特許又は特許出願公開の複写は、請求及び必要な料金の支払いに応じて特許庁によって提供されるであろう。
Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ Ｌｉｎｅ Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａデータベースの９００を超える癌細胞株におけるＺＢＴＢ３２遺伝子発現を示す。線は、１０の１００万あたりの転写物（ＴＰＭ）を示す。 ＺＢＴＢ３２編集及びＣＡＲ１９発現を示す。図２Ａは、１０日目のＧＦＰ及びＣＡＲ１９表面発現のフローサイトメトリー分析を示す。ＰＥコンジュゲート抗ＣＤ１９ ＣＡＲイディオタイプ抗体を使用して、細胞表面ＣＡＲ１９を染色した。図２Ｂは、Ｔ７Ｅ１によるＺＢＴＢ３２ ｇＲＮＡ６及びｇＲＮＡ７編集ＤＮＡの効率的な切断を示すゲル画像である。図２Ｃは、ＺＢＴＢ３２ ｇＲＮＡ６及びｇＲＮＡ７の編集効率を確認するＮＧＳの結果を示す。「ｘ」はヌクレオチドの挿入を示す。 ＺＢＴＢ３２ＫＯ ＣＡＲＴ細胞の抗原依存性増殖及びサイトカイン発現を示す。図３Ａは、インビトロでのｗｔ及びＺＢＴＢ３２ＫＯ ＣＡＲＴ細胞の抗原依存性増殖を実証する％ＧＦＰ＋細胞のフローサイトメトリー分析を提供する。図３Ｂは、インビトロでのＴＭＤ８－Ｌｕｃ細胞のｗｔ及びＺＢＴＢ３２ＫＯ ＣＡＲＴ細胞媒介性死滅を示す発光分析を示す。図３Ｃは、インビトロでＴＭＤ８－Ｌｕｃ細胞と共培養した場合、ＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴにより、ｗｔＣＡＲＴ細胞よりも高レベルのサイトカイン産生を伴う炎症促進性サイトカインの発現を示す。 ＺＢＴＢ３２ＫＯ ＣＡＲＴ細胞の抗原依存性増殖及びサイトカイン発現を示す。図３Ａは、インビトロでのｗｔ及びＺＢＴＢ３２ＫＯ ＣＡＲＴ細胞の抗原依存性増殖を実証する％ＧＦＰ＋細胞のフローサイトメトリー分析を提供する。図３Ｂは、インビトロでのＴＭＤ８－Ｌｕｃ細胞のｗｔ及びＺＢＴＢ３２ＫＯ ＣＡＲＴ細胞媒介性死滅を示す発光分析を示す。図３Ｃは、インビトロでＴＭＤ８－Ｌｕｃ細胞と共培養した場合、ＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴにより、ｗｔＣＡＲＴ細胞よりも高レベルのサイトカイン産生を伴う炎症促進性サイトカインの発現を示す。 ＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴ細胞又はｗｔ ＣＡＲＴ細胞で処置したマウスの腫瘍動態を示す。図４Ａは、平均腫瘍動態を示し、図４Ｂは、経時的なマウスの全ての群についての個々の腫瘍動態を示す。ＧＦＰｗｔ（非ＣＡＲ）、ｗｔ及びＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴ細胞を、１０日目にマウス１匹あたり１×１０６個のＣＡＲ＋細胞の用量で注射した（点線で示す）。 ＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴ細胞又はｗｔ ＣＡＲＴ細胞で処置したマウスの腫瘍動態を示す。図４Ａは、平均腫瘍動態を示し、図４Ｂは、経時的なマウスの全ての群についての個々の腫瘍動態を示す。ＧＦＰｗｔ（非ＣＡＲ）、ｗｔ及びＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴ細胞を、１０日目にマウス１匹あたり１×１０６個のＣＡＲ＋細胞の用量で注射した（点線で示す）。 ＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴ細胞又はｗｔ ＣＡＲＴ細胞で処置したマウスの腫瘍動態を示す。図５Ａは、平均腫瘍動態を示し、図５Ｂは、経時的なマウスの全ての群についての個々の腫瘍動態を示す。ｗｔ及びＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴ細胞を、９日目にマウス１匹あたり２×１０６個のＣＡＲ＋細胞の用量で注射した（点線で示す）。ＰＢＳで処置された腫瘍は、２５日目にコンプライアンスを超えて成長する。 ＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴ細胞又はｗｔ ＣＡＲＴ細胞で処置されたＴＭＤ８－Ｌｕｃ腫瘍の生物発光を示す。図６Ａは、経時的なＴＭＤ８－Ｌｕｃ腫瘍の生物発光（ｐ／ｓ）を示す。ｗｔ及びＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴ細胞を、９日目にマウス１匹あたり２×１０６ＣＡＲ＋細胞の用量で注射した。実線のバーは、各時点での各群の生物発光の中央値を示す。図６Ｂは、ＰＢＳ、ＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴ細胞、及びｗｔ ＣＡＲＴ細胞で処置されたマウスへの腫瘍移植後２１日目に取得された画像を示す。 ビヒクル（ＰＢＳ）ＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴ細胞又はｗｔ ＣＡＲＴ細胞で処置したマウスにおける腫瘍体積及び腫瘍負荷を示す。図７Ａは、各群の平均±ＳＥＭとして腫瘍体積を示し、図７Ｂは、個々のマウスの腫瘍体積を示し、図７Ｃは、各群の中央（ｍｅｄｉａｍ）生物発光（ｐ／ｓ）を示し、図７Ｄは、経時的な個々のマウスの生物発光（ｐ／ｓ）を示す。ｗｔ及びＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴ細胞を、９日目にマウス１匹あたり０．４×１０６個のＣＡＲ＋細胞の用量で注射した（点線で示す）。ＰＢＳで処置された腫瘍は、２３日目にコンプライアンスを超えて成長する。パネルＤの矢印は、ｗｔ ＣＡＲＴ処置マウスにおける再発腫瘍を示す。パネルＤの星印は、ＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴで処置した１匹のマウスが安定した生物発光シグナルを示しているが、腫瘍を有しないことを示す。 ビヒクル（ＰＢＳ）ＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴ細胞又はｗｔ ＣＡＲＴ細胞で処置したマウスにおける腫瘍体積及び腫瘍負荷を示す。図７Ａは、各群の平均±ＳＥＭとして腫瘍体積を示し、図７Ｂは、個々のマウスの腫瘍体積を示し、図７Ｃは、各群の中央（ｍｅｄｉａｍ）生物発光（ｐ／ｓ）を示し、図７Ｄは、経時的な個々のマウスの生物発光（ｐ／ｓ）を示す。ｗｔ及びＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴ細胞を、９日目にマウス１匹あたり０．４×１０６個のＣＡＲ＋細胞の用量で注射した（点線で示す）。ＰＢＳで処置された腫瘍は、２３日目にコンプライアンスを超えて成長する。パネルＤの矢印は、ｗｔ ＣＡＲＴ処置マウスにおける再発腫瘍を示す。パネルＤの星印は、ＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴで処置した１匹のマウスが安定した生物発光シグナルを示しているが、腫瘍を有しないことを示す。 ｗｔ ＣＡＲＴ細胞及びＺＢＴＢ３２ＫＯ ＣＡＲＴ細胞におけるＴ細胞転写因子の発現を示す。図８Ａ及び８Ｂは、血液サンプル中の全ＣＡＲＴ細胞及びＣＤ８ ＣＡＲＴ細胞におけるＴＣＦ７レベルのフローサイトメトリー分析を示す。図８Ｃ及び８Ｄは、血液サンプル中の全ＣＡＲＴ細胞及びＣＤ８ ＣＡＲＴ細胞におけるＥｏｍｅｓレベルを示す。ＷＴ、ＺＢＴＢ３２ＫＯ ｇＲＮＡ６及びＺＢＴＢ３２ＫＯ ｇＲＮＡ７ ＣＡＲＴ細胞を、１０日目にマウス１匹あたり１×１０６ＣＡＲ＋細胞の用量で注射した。血液サンプルは、ＣＡＲＴ注射の４週間後及び５週間後に収集された。実線のバーは、各時点での各群の中央値を示す。一元配置分散分析で、＊：Ｐ＜０．０５、＊＊＊：Ｐ＜０．００１、＊＊＊＊：Ｐ＜０．０００１。 血液１μｌあたりの全ＣＡＲＴ細胞（図９Ａ）、ＣＤ４＋ＣＡＲＴ細胞（図９Ｂ）及びＣＤ８＋ＣＡＲＴ細胞（図９Ｃ）数のフローサイトメトリー分析を示す。ＷＴ、ＺＢＴＢ３２ＫＯ ｇＲＮＡ６及びＺＢＴＢ３２ＫＯ ｇＲＮＡ７ ＣＡＲＴ細胞を、１０日目にマウス１匹あたり１×１０６ＣＡＲ＋細胞の用量で注射した。血液サンプルは、ＣＡＲＴ注射の２週間後及び３週間後に収集された。実線のバーは、各時点での各群の中央値を示す。 サイトカインのフローサイトメトリー分析を示す。図１０Ａ及び１０Ｄは、血液１μｌあたりのＩＬ２陽性ＣＤ４及びＣＤ８ ＣＡＲＴ細胞数を示す。図１０Ｂ及び１０Ｅは、血液１μｌあたりのＩＦＮγ陽性ＣＤ４及びＣＤ８ ＣＡＲＴ細胞数を示す。図１０Ｃ及び１０Ｆは、血液１μｌあたりのＴＮＦα陽性ＣＤ４及びＣＤ８ ＣＡＲＴ細胞数を示す。ＷＴ、ＺＢＴＢ３２ＫＯ ｇＲＮＡ６及びＺＢＴＢ３２ＫＯ ｇＲＮＡ７ ＣＡＲＴ細胞を、１０日目にマウス１匹あたり１×１０６ＣＡＲ＋細胞の用量で注射した。血液サンプルは、ＣＡＲＴ注射の３週間後及び５週間後に収集された。実線のバーは、各時点での各群の中央値を示す。 血液サンプル中のＣＡＲＴ細胞における細胞表面ＰＤ１（図１１Ａ及びＢ）及びＴＩＭ３（図１１Ｃ及び１１Ｄ）レベルのフローサイトメトリー分析を示す。ＷＴ、ＺＢＴＢ３２ＫＯ ｇＲＮＡ６及びＺＢＴＢ３２ＫＯ ｇＲＮＡ７ ＣＡＲＴ細胞を、１０日目にマウス１匹あたり１×１０６ＣＡＲ＋細胞の用量で注射した。血液サンプルは、ＣＡＲＴ注射の３週間後に収集された。実線のバーは、各群の中央値レベルを示す。一元配置分散分析で、＊＊：Ｐ＜０．０１、＊＊＊：Ｐ＜０．００１、＊＊＊＊：Ｐ＜０．０００１。ＭＦＩ：蛍光強度の中央値。 無腫瘍マウスの脾臓におけるＣＡＲＴ細胞の数を示す。ＷＴ、ＺＢＴＢ３２ＫＯ ｇＲＮＡ６及びＺＢＴＢ３２ＫＯ ｇＲＮＡ７ ＣＡＲＴ細胞を、１０日目にマウス１匹あたり１×１０６ＣＡＲ＋細胞の用量で注射した。５３日目に、１４～１５匹の無腫瘍マウスの脾臓からＣＡＲＴ細胞を単離した。同じ群の４～５個の脾臓をプールし、脾臓あたりの総ＣＡＲＴ細胞数を計算した。図１２Ａは、ＣＡＲＴ細胞の総数を示す。図１２Ｂは、ＣＤ４＋ＣＡＲＴ細胞の総数を示す。図１２Ｃは、ＣＤ８＋ＣＡＲＴ細胞の総数を示す。データは、平均±ＳＥＭとして示される。 血液サンプル中のＣＡＲＴ細胞におけるＴＣＦ７（図１３Ａ）、Ｅｏｍｅｓ（図１３Ｂ）及びＴＯＸ（図１３Ｃ）レベルのフローサイトメトリー分析を示す。ＷＴ及びＺＢＴＢ３２ＫＯ ｇＲＮＡ６ ＣＡＲＴ細胞を、９日目にマウス１匹あたり０．４×１０６ＣＡＲ＋細胞の用量で注射した。血液サンプルは、ＣＡＲＴ注射の２０日後に収集された。ｔ検定で、＊：Ｐ＜０．０５、＊＊：Ｐ＜０．０１、＊＊＊：Ｐ＜０．００１。ＭＦＩ：蛍光強度の中央値。実線のバーは、各群の中央値を示す。 細胞表面ＰＤ１、ＴＩＭ３及びＬＡＧ３のフローサイトメトリー分析を示す。図１４Ａ及び１４Ｄは、血液サンプル中のＣＡＲＴ細胞におけるＰＤ１レベルを示す。図１４Ｂ及び１４Ｅは、血液サンプル中のＣＡＲＴ細胞におけるＴＩＭ３レベルを示す。図１４Ｃ及び１４Ｆは、血液サンプル中のＣＡＲＴ細胞におけるＬＡＧ３レベルを示す。ＷＴ及びＺＢＴＢ３２ＫＯ ｇＲＮＡ６ ＣＡＲＴ細胞を、９日目にマウス１匹あたり０．４×１０６ＣＡＲ＋細胞の用量で注射した。血液サンプルは、ＣＡＲＴ注射の２０日後に収集された。ｔ検定で、＊：Ｐ＜０．０５、＊＊：Ｐ＜０．０１、＊＊＊：Ｐ＜０．００１、＊＊＊＊：Ｐ＜０．０００１。ＭＦＩ：蛍光強度の中央値。実線のバーは、各群の中央値を示す。 対照及びＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＴＭＤ８細胞の細胞増殖を示す。図１５Ａは、対照ＴＭＤ８細胞（ｇＲＮＡ ＮＴ）及びＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＴＭＤ８細胞のインビトロ増殖を示す。図１５Ｂ－１５Ｃは、対照ＴＭＤ８細胞（ｇＲＮＡ ＮＴ）及びＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＴＭＤ８細胞のインビボ腫瘍増殖を示す。経時的なマウスの各コホートの個々（図１５Ｂ）及び平均（図１５Ｃ）の腫瘍成長動態が示される。
本明細書における開示は、少なくとも部分的に、免疫細胞及び癌細胞に対するＺＢＴＢ３２阻害の効果の発見に基づく。理論に拘束されることを望むものではないが、いくつかの実施形態において、ＺＢＴＢ３２の阻害がＴ細胞媒介性抗腫瘍応答を増強し得ると考えられる。特定の実施形態において、ＺＢＴＢ３２の阻害は、ＣＡＲＴ細胞活性、例えば、細胞増殖、サイトカイン産生、持続性、枯渇に対する耐性、及びインビボでの抗腫瘍活性を増強する。他の実施形態において、ＺＢＴＢ３２の阻害は、インビトロ及びインビボで癌細胞増殖を低下させる。
したがって、本明細書における開示は、ＺＢＴＢ３２阻害剤を使用して、ＣＡＲ発現細胞の治療有効性を高める方法、及びＣＡＲ発現細胞を製造する方法を含むが、これらに限定されない。関連するＣＡＲ発現細胞、治療剤、核酸、ベクター、及び組成物も開示される。本明細書における開示はまた、ＺＢＴＢ３２阻害剤を使用した、癌を処置する方法、他の治療剤又はモダリティーの有効性を高める方法、及び免疫応答を高める方法を含むが、これらに限定されない。
定義
特に定義されない限り、本明細書で使用される全ての科学技術用語は、本開示が関係する技術分野の当業者が一般に理解するのと同じ意味を有する。
用語「１つの（ａ）」及び「１つの（ａｎ）」は、その冠詞の文法上の指示対象の１つ又は１つより多い（即ち少なくとも１つ）を指す。例として、「要素」は、１つの要素又は１つより多い要素を意味する。
用語「約」は、量、時間的な継続期間などの計測可能な値を参照するとき、指定される値から±２０％又は一部の例では±１０％、又は一部の例では±５％、又は一部の例では±１％、又は一部の例では±０．１％の変動が、かかる変動が本開示の方法の実施に適切であるものとして包含されることを意味する。
「キメラ抗原受容体」又は代替的に「ＣＡＲ」という用語は、少なくとも、細胞外抗原結合ドメインと、膜貫通ドメインと、以下に定義するとおりの刺激分子に由来する機能性シグナル伝達ドメインを含む細胞質シグナル伝達ドメイン（本明細書では「細胞内シグナル伝達ドメイン」とも称される）とを含む組換えポリペプチドコンストラクトを指す。いくつかの実施形態において、ＣＡＲポリペプチドコンストラクトのドメインは、同じポリペプチド鎖にあり、例えばキメラ融合タンパク質を含む。いくつかの実施形態において、ＣＡＲポリペプチドコンストラクトのドメインは、互いに連続しておらず、例えば本明細書に記載されるとおりのＲＣＡＲに提供されるように、例えば異なるポリペプチド鎖にある。いくつかの実施形態において、「ＣＡＲ」及び「ＣＡＲ分子」という用語は、互換的に使用される。
いくつかの実施形態において、細胞質シグナル伝達ドメインは、一次シグナル伝達ドメイン（例えば、ＣＤ３－ζの一次シグナル伝達ドメイン）を含む。いくつかの実施形態において、細胞質シグナル伝達ドメインは、下に定義するような少なくとも１つの共刺激性分子に由来する１つ以上の機能的シグナル伝達ドメインを更に含む。いくつかの実施形態において、共刺激性分子は、４１ＢＢ（即ちＣＤ１３７）、ＣＤ２７、ＩＣＯＳ、及び／又はＣＤ２８から選択される。いくつかの実施形態において、ＣＡＲ分子は、細胞外抗原認識ドメインと、膜貫通ドメインと、刺激分子に由来する機能性シグナル伝達ドメインを含む細胞内シグナル伝達ドメインとを含むキメラ融合タンパク質を含む。いくつかの実施形態において、ＣＡＲ分子は、細胞外抗原認識ドメインと、膜貫通ドメインと、共刺激分子に由来する機能性シグナル伝達ドメイン及び刺激分子に由来する機能性シグナル伝達ドメインを含む細胞内シグナル伝達ドメインとを含むキメラ融合タンパク質を含む。いくつかの実施形態において、ＣＡＲ分子は、細胞外抗原認識ドメインと、膜貫通ドメインと、１つ以上の共刺激分子に由来する２つの機能性シグナル伝達ドメイン及び刺激分子に由来する機能性シグナル伝達ドメインを含む細胞内シグナル伝達ドメインとを含むキメラ融合タンパク質を含む。いくつかの実施形態において、ＣＡＲ分子は、細胞外抗原認識ドメインと、膜貫通ドメインと、１つ以上の共刺激分子に由来する少なくとも２つの機能性シグナル伝達ドメイン及び刺激分子に由来する機能性シグナル伝達ドメインを含む細胞内シグナル伝達ドメインとを含むキメラ融合タンパク質を含む。いくつかの実施形態において、ＣＡＲ分子は、ＣＡＲ融合タンパク質のアミノ末端（Ｎ－ｔｅｒ）に任意選択のリーダー配列を含む。いくつかの実施形態において、ＣＡＲ分子は、細胞外抗原結合ドメインのＮ末端にリーダー配列を更に含み、リーダー配列は、任意選択により、細胞プロセシング及びＣＡＲ分子の細胞膜局在化中に抗原認識ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ）から切断される。
特定の腫瘍マーカーＸ（ここで、Ｘは、本明細書に記載されるような腫瘍マーカーであり得る）を標的とする、抗原結合ドメイン（例えば、ｓｃＦｖ、単一ドメイン抗体、又はＴＣＲ（例えば、ＴＣＲアルファ結合ドメイン又はＴＣＲベータ結合ドメイン））を含むＣＡＲ分子は、ＸＣＡＲとも称される。例えば、ＣＤ１９を標的とする抗原結合ドメインを含むＣＡＲ分子は、ＣＤ１９ＣＡＲと称される。ＣＡＲ分子は、本明細書に記載されるとおりの任意の細胞、例えば免疫エフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞又はＮＫ細胞）で発現させることができる。
「シグナル伝達ドメイン」という用語は、二次メッセンジャーを生成するか又はかかるメッセンジャーに応答してエフェクターとして機能することにより定義されたシグナル伝達経路を介して細胞活性を調節するように細胞内で情報を伝えることにより機能するタンパク質の機能性の一部分を指す。
「抗体」という用語は、本明細書で使用されるとき、抗原と特異的に結合する免疫グロブリン分子に由来するタンパク質又はポリペプチド配列を指す。抗体は、ポリクローナル又はモノクローナル、多重鎖又は単鎖又はインタクトな免疫グロブリンであり得、且つ天然の供給源又は組換え供給源に由来し得る。抗体は、免疫グロブリン分子の四量体であり得る。
「抗体断片」という用語は、インタクトな抗体又はその組換え変異体の少なくとも一部分を指し、及び抗原などの標的に対する抗体断片の認識及び特異的結合をもたらすのに十分である、インタクトな抗体の抗原結合ドメイン、例えば抗原決定可変領域を指す。抗体断片の例は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、及びＦｖ断片、ｓｃＦｖ抗体断片、線形抗体、ｓｄＡｂなどの単一ドメイン抗体（ＶＬ又はＶＨのいずれか）、ラクダ科ＶＨＨドメイン、並びにヒンジ領域でジスルフィド架橋により連結した２個以上の、例えば２個のＦａｂ断片若しくは２個以上の、例えば２個の単離ＣＤＲを含む二価断片などの抗体断片から形成される多特異性分子又は架橋した抗体の他のエピトープ結合断片を含むが、これらに限定されない。抗体断片は、シングルドメイン抗体、マキシボディ、ミニボディ、ナノボディ、イントラボディ、ダイアボディ、トリアボディ、テトラボディ、ｖ－ＮＡＲ及びビス－ｓｃＦｖにも取り込まれ得る（例えば、Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ ａｎｄ Ｈｕｄｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ２３：１１２６－１１３６，２００５を参照されたい）。抗体断片は、フィブロネクチンＩＩＩ型（Ｆｎ３）などのポリペプチドをベースとする足場にもグラフトされ得る（フィブロネクチンポリペプチドミニボディについて記載している米国特許第６，７０３，１９９号明細書を参照されたい）。
用語「ｓｃＦｖ」は、軽鎖の可変領域を含む少なくとも１つの抗体断片と、重鎖の可変領域を含む少なくとも１つの抗体断片とを含む融合タンパク質を指し、軽鎖及び重鎖可変領域は、短い可動性ポリペプチドリンカーによって近接して連結されており、単鎖ポリペプチドとして発現することが可能であり、及びｓｃＦｖは、その由来であるインタクトな抗体の特異性を保持している。指定されない限り、本明細書で使用されるとき、ｓｃＦｖは、ＶＬ及びＶＨ可変領域を例えばポリペプチドのＮ端側及びＣ端側末端に対していずれの順序でも有し得、ｓｃＦｖは、ＶＬ－リンカー－ＶＨを含み得るか又はＶＨ－リンカー－ＶＬを含み得る。
「相補性決定領域」又は「ＣＤＲ」という用語は、本明細書で使用されるとき、抗原特異性及び結合親和性を付与する抗体可変領域内にあるアミノ酸の配列を指す。例えば、一般に、各重鎖可変領域に３つのＣＤＲ（例えば、ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３）及び各軽鎖可変領域に３つのＣＤＲ（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３）がある。ある所与のＣＤＲの厳密なアミノ酸配列境界は、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．（１９９１），「Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ」，５ｔｈ Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ（「Ｋａｂａｔ」番号付けスキーム）、Ａｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉ ｅｔ ａｌ．，（１９９７）ＪＭＢ ２７３，９２７－９４８（「Ｃｈｏｔｈｉａ」番号付けスキーム）により記載のもの、又はその組み合わせを含む、多くの周知のスキームのいずれかを使用して決定できる。Ｋａｂａｔ番号付けスキームでは、いくつかの実施形態において、重鎖可変ドメイン（ＶＨ）のＣＤＲアミノ酸残基には、３１～３５（ＨＣＤＲ１）、５０～６５（ＨＣＤＲ２）、及び９５～１０２（ＨＣＤＲ３）の番号が付され、軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）のＣＤＲアミノ酸残基には、２４～３４（ＬＣＤＲ１）、５０～５６（ＬＣＤＲ２）、及び８９～９７（ＬＣＤＲ３）の番号が付される。Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けスキームでは、いくつかの実施形態において、ＶＨのＣＤＲアミノ酸には、２６～３２（ＨＣＤＲ１）、５２～５６（ＨＣＤＲ２）、及び９５～１０２（ＨＣＤＲ３）の番号が付され、ＶＬのＣＤＲアミノ酸残基には、２６～３２（ＬＣＤＲ１）、５０～５２（ＬＣＤＲ２）、及び９１～９６（ＬＣＤＲ３）の番号が付される。ＫａｂａｔとＣｈｏｔｈｉａを組み合わせた番号付けスキームでは、いくつかの実施形態において、ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ ＣＤＲの一部、Ｃｈｏｔｈｉａ ＣＤＲの一部、又はその両方であるアミノ酸残基に対応する。例えば、いくつかの実施形態において、ＣＤＲは、ＶＨ、例えば哺乳類ＶＨ、例えばヒトＶＨのアミノ酸残基２６～３５（ＨＣＤＲ１）、５０～６５（ＨＣＤＲ２）、及び９５～１０２（ＨＣＤＲ３）、及びＶＬ、例えば哺乳類ＶＬ、例えばヒトＶＬのアミノ酸残基２４～３４（ＬＣＤＲ１）、５０～５６（ＬＣＤＲ２）、及び８９～９７（ＬＣＤＲ３）に対応する。
抗体又はその抗体断片を含む本開示のＣＡＲ組成物の一部分は、種々の形態で存在し得、例えば、抗原結合ドメインは、例えば、シングルドメイン抗体断片（ｓｄＡｂ）、単鎖抗体（ｓｃＦｖ）、又は例えばヒト化抗体を含む、ポリペプチド鎖の一部として発現する（Ｈａｒｌｏｗ ｅｔ ａｌ．，１９９９，Ｕｓｉｎｇ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，ＮＹ；Ｈａｒｌｏｗ ｅｔ ａｌ．，１９８９，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ；Ｈｏｕｓｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，１９８８，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８５：５８７９－５８８３；Ｂｉｒｄ ｅｔ ａｌ．，１９８８，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４２：４２３－４２６）。いくつかの実施形態において、本開示のＣＡＲ組成物の抗原結合ドメインは、抗体断片を含む。いくつかの実施形態において、ＣＡＲ分子は、ｓｃＦｖを含む抗体断片を含む。
本明細書で使用されるとき、「結合ドメイン」又は「抗体分子」という用語（本明細書では「抗標的結合ドメイン」ともいう）は、少なくとも１つの免疫グロブリン可変ドメイン配列を含むタンパク質、例えば免疫グロブリン鎖又はその断片を指す。用語「結合ドメイン」又は「抗体分子」は、抗体及び抗体断片を包含する。いくつかの実施形態において、抗体分子は、多重特異性抗体分子であり、例えば、これは、複数個の免疫グロブリン可変ドメイン配列を含み、ここで、複数個のうちの第１の免疫グロブリン可変ドメイン配列が第１のエピトープに対する結合特異性を有し、複数個のうちの第２の免疫グロブリン可変ドメイン配列が第２のエピトープに対する結合特異性を有する。いくつかの実施形態において、多重特異性抗体分子は、二重特異性抗体分子である。二重特異性抗体は、２つ以下の抗原に対して特異性を有する。二重特異性抗体分子は、第１のエピトープに対して結合特異性を有する第１の免疫グロブリン可変ドメイン配列及び第２のエピトープに対して結合特異性を有する第２の免疫グロブリン可変ドメイン配列によって特徴付けられる。用語「抗体重鎖」は、その天然に存在するコンホメーションをとる抗体分子に存在する２種類のポリペプチド鎖の大きい方を指し、通常、これが抗体の属するクラスを決定する。
用語「抗体軽鎖」は、その天然に存在するコンホメーションをとる抗体分子に存在する２種類のポリペプチド鎖の小さい方を指す。カッパ（κ）及びラムダ（λ）軽鎖が２つの主要な抗体軽鎖アイソタイプを指す。
用語「組換え抗体」は、例えば、バクテリオファージ又は酵母発現システムによって発現される抗体など、組換えＤＮＡ技術を用いて作成される抗体を指す。この用語は、抗体をコードするＤＮＡ分子であって、抗体タンパク質を発現するＤＮＡ分子又はその抗体を指定するアミノ酸配列の合成によって作成された抗体を意味するとも解釈されるべきであり、ＤＮＡ又はアミノ酸配列は、当技術分野において利用可能な周知の組換えＤＮＡ又はアミノ酸配列技術を用いて得られたものである。
用語「抗原」又は「Ａｇ」は、免疫応答を引き起こす分子を指す。この免疫応答には、抗体産生又は特異的免疫適格細胞の活性化のいずれか又は両方が含まれ得る。当業者は、任意の巨大分子が、事実上あらゆるタンパク質又はペプチドを含め、抗原となり得ることを理解するであろう。更に、抗原は、組換えＤＮＡ又はゲノムＤＮＡに由来し得る。当業者は、従って、免疫応答を生じさせるタンパク質をコードするヌクレオチド配列又は部分的ヌクレオチド配列を含む任意のＤＮＡが、その用語が本明細書において使用される通りの「抗原」をコードすることを理解するであろう。更に、当業者は、抗原がある遺伝子の完全長ヌクレオチド配列によってのみコードされる必要はないことを理解するであろう。本開示には、限定されないが、２つ以上の遺伝子の部分的ヌクレオチド配列の使用が含まれること及びそれらのヌクレオチド配列が所望の免疫応答を生じさせるポリペプチドをコードするように様々な組み合わせで配列されることが容易に明らかである。更に、当業者は、抗原が「遺伝子」によってコードされる必要は全くないことを理解するであろう。抗原は、合成して作成され得、又は生体試料から得られ得、又はポリペプチド以外の巨大分子である可能性もあることが容易に明らかである。かかる生体試料には、限定されないが、組織試料、腫瘍試料、細胞又は体液が他の生物学的成分と共に含まれ得る。
用語「抗腫瘍効果」は、限定されないが、例えば腫瘍容積の減少、腫瘍細胞数の減少、転移数の減少、平均余命の増加、腫瘍細胞増殖の減少、腫瘍細胞生存の減少又は癌性病態に関連する様々な生理学的症状の改善を含め、様々な手段によって明らかになり得る生物学的効果を指す。「抗腫瘍効果」は、そもそも腫瘍の発生を防ぐことにおける本開示のペプチド、ポリヌクレオチド、細胞及び抗体の能力によっても明らかになり得る。
「抗癌効果」という用語は、限定されないが、例えば腫瘍容積の減少、癌細胞数の減少、転移数の減少、平均余命の増加、癌細胞増殖の減少、癌細胞生存の減少、又は癌性病態に関連する様々な生理学的症状の改善を含め、様々な手段によって明らかになり得る生物学的効果を指す。「抗癌効果」は、そもそも癌の発生を防ぐことにおけるペプチド、ポリヌクレオチド、細胞及び抗体の能力によっても明らかになり得る。「抗腫瘍効果」という用語は、例えば、腫瘍体積減少、腫瘍細胞数減少、腫瘍細胞増殖減少又は腫瘍細胞生存減少を含むが、これらに限定されない種々の手段により顕在化され得る生物学的効果を指す。「自己」という用語は、同じ個体に由来する任意の材料であって、後にその個体に再導入されることになる材料を指す。
「同種異系」という用語は、材料が導入される個体と同じ種の異なる動物に由来する任意の材料を指す。２つ以上の個体は、１つ以上の遺伝子座の遺伝子が同一でないとき、互いに同種異系であると言われる。いくつかの実施形態において、同じ種の個体からの同種異系材料は、抗原的に相互作用するのに十分に遺伝的に異なり得る。
「異種」という用語は、異なる種の動物に由来する移植片を指す。
「アフェレーシス」という用語は、本明細書で使用されるとき、ドナー又は患者の血液をドナー又は患者から取り出し、装置に通過させて１つ又は複数の選択された特定の構成成分を選り除き、残りを例えば返血法によってドナー又は患者の循環に戻すという当技術分野で認められている体外プロセスを指す。従って、「アフェレーシスサンプル」の文脈では、アフェレーシスを用いて得られるサンプルを指す。
「組み合わせ」という用語は、一投与単位形態の固定的組み合わせ又は本開示の化合物及び組み合わせパートナー（例えば、「治療剤」又は「併用剤」とも称される、以下に説明するような別の薬剤）を、独立して同時に又は一定間隔で、特に組み合わせパートナーが協調的、例えば相乗的な効果を示すことを可能にする間隔で別々に投与され得る、組み合わせ投与を指す。単一の成分がキットに又は別々に包装され得る。成分（例えば、粉末又は液体）の一方又は両方が投与前に所望の用量に再構成又は希釈され得る。「共投与」又は「組み合わせ投与」などの用語は、本明細書で利用されるとき、それを必要としている単一の対象（例えば、患者）への選択の組み合わせパートナーの投与を包含することが意味され、薬剤が必ずしも同じ投与経路によって又は同じ時点で投与されない治療レジメンを含むことが意図される。「薬学的組み合わせ」という用語は、本明細書で使用されるとき、２つ以上の活性成分を混合し又は組み合わせることにより得られる生成物を意味し、活性成分の固定的組み合わせ及び非固定的組み合わせの両方を含む。「固定的組み合わせ」という用語は、活性成分、例えば本開示の化合物と組み合わせパートナーとが両方とも単一の実体又は投薬量の形態で同時に患者に投与されることを意味する。「非固定的組み合わせ」という用語は、活性成分、例えば本開示の化合物と組み合わせパートナーとが両方とも別個の実体として特定の時間制限なしに同時に、並行して、又は逐次的に患者に投与されることを意味し、ここで、そのような投与は、患者の体内において２つの化合物の治療上有効なレベルを提供する。後者は、カクテル療法、例えば３つ以上の活性成分の投与にも適用される。
「併用」又は「～と併用して」とは、療法又は治療用薬剤が同じ時点で投与されなければならないこと、及び／又は一緒に送達されるように製剤化されなければならないことを含意するよう意図するものではなく、とはいえ、これらの送達方法は、本明細書に記載される範囲の中に含まれる。併用での治療用薬剤は、１つ以上の他の追加的な療法又は治療用薬剤と並行して、それより前に、又はそれに続いて投与することができる。治療用薬剤又は治療用プロトコルは、いずれの順番で投与されてもよい。一般に、各薬剤は、当該の薬剤について決められた用量で、及び／又はタイムスケジュールに則って投与されることになる。更に、この併用で利用される追加の治療用薬剤は、単一の組成物で一緒に投与されてもよく、又は異なる組成物で別個に投与されてもよいことが理解されるであろう。一般に、併用で利用される追加の治療用薬剤は、それらが個別に利用されるレベルを超えないレベルで利用されることが予想される。一部の実施形態において、併用で利用されるレベルは、個別に利用されるレベルよりも低くなる。
実施形態において、追加の治療用薬剤は、治療用量で、又は治療用量よりも低い用量で投与される。特定の実施形態において、阻害、例えば、成長阻害を実現するために必要な第２の治療用薬剤の濃度は、その第２の治療用薬剤が第１の治療用薬剤と併用して投与されるとき、第２の治療用薬剤が個別に投与されるときよりも低い。特定の実施形態において、阻害、例えば成長阻害を実現するために必要な第１の治療用薬剤の濃度は、その第１の治療用薬剤が第２の治療用薬剤と併用して投与されるとき、第１の治療用薬剤が個別に投与されるときよりも低い。特定の実施形態において、併用療法では、阻害、例えば成長阻害を実現するために必要な第２の治療用薬剤の濃度は、単剤療法としての第２の治療用薬剤の治療用量よりも低く、例えば、１０～２０％、２０～３０％、３０～４０％、４０～５０％、５０～６０％、６０～７０％、７０～８０％、又は８０～９０％低い。特定の実施形態において、併用療法では、阻害、例えば成長阻害を実現するために必要な第１の治療用薬剤の濃度は、単剤療法としての第１の治療用薬剤の治療用量よりも低く、例えば、１０～２０％、２０～３０％、３０～４０％、４０～５０％、５０～６０％、６０～７０％、７０～８０％、又は８０～９０％低い。
「阻害」、「阻害薬」、又は「拮抗薬」という用語は、所与の分子のある種のパラメータ、例えば、活性の低減を含む。例えば、この用語には、活性の少なくとも５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９８％、９９％又はそれ以上の阻害が含まれる。このように、阻害は１００％でなくてもよい。
「活性化」、「アクティベーター」、又は「アゴニスト」という用語は、所与の分子の特定のパラメータ、例えば活性の増加を含む。例えば、少なくとも５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、若しくはそれを超える、又は少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０倍、若しくはそれを超える活性の増加がこの用語に含まれる。
用語「癌」は、異常細胞の急速な及び無制御の成長によって特徴付けられる疾患を指す。癌細胞は、局所的に又は血流及びリンパ系を通じて体の他の部位に広がり得る。様々な癌の例が本明細書に記載され、限定されないが、乳癌、前立腺癌、卵巣癌、子宮頸癌、皮膚癌、膵癌、結腸直腸癌、腎癌、肝癌、脳癌、リンパ腫、白血病、肺癌などが挙げられる。本明細書に記載の方法によって処置される好ましい癌には、多発性骨髄腫、ホジキンリンパ腫、又は非ホジキンリンパ腫が含まれる。
用語「腫瘍」及び「癌」は、本明細書では同義的に使用され、例えば両方の用語とも固形及び液性、例えばびまん性又は循環性腫瘍を包含する。本明細書で使用されるとき、用語「癌」又は「腫瘍」は、前癌性並びに悪性の癌及び腫瘍を含む。
「由来する」は、この用語が本明細書で使用される場合、第１の分子と第２の分子との間の関係を指す。これは、概して、第１の分子と第２の分子との間の構造的類似性に言及するものであり、第２の分子に由来する第１の分子に関する方法又は供給源を限定することを含意又は包含しない。例えば、ＣＤ３ζ分子に由来する細胞内シグナル伝達ドメインの場合、細胞内シグナル伝達ドメインは、求められる機能、即ち適切な条件下でシグナルを生成する能力を有するような十分なＣＤ３ζ構造を保持している。これは、細胞内シグナル伝達ドメインの特定の作製方法に限定することを含意又は包含せず、例えば細胞内シグナル伝達ドメインを提供するためにＣＤ３ζ配列で開始して不要な配列を欠失させ、又は変異を付与して細胞内シグナル伝達ドメインに至らせなければならないことを意味しない。
「抗原、例えば腫瘍抗原の発現に関連する疾患」という語句には、限定されないが、例えば癌若しくは悪性腫瘍などの増殖性疾患又は骨髄形成異常、骨髄異形成症候群若しくは前白血病などの前癌病態を含めた、抗原（例えば、野生型又は変異体抗原）を発現する細胞に関連する疾患又は抗原（例えば、野生型又は変異体抗原）を発現する細胞に関連する病態、又は抗原（例えば、野生型又は変異体抗原）を発現する細胞に関連する非癌関連徴候が含まれる。誤解を避けるために、抗原の発現に関連する疾患は、例えば、抗原を標的とする分子であるが、ある時点で抗原を発現していた分子を用いた処置によって、抗原の発現が下方制御されているため、現在抗原を発現していない細胞に関連する状態を含み得る。いくつかの実施形態において、抗原、例えば腫瘍抗原の発現に関連する疾患は、癌（例えば、固形癌又は血液癌）、ウイルス感染症（例えば、ＨＩＶ、真菌感染症、例えばＣ．ネオフォルマンス（Ｃ．ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ））、自己免疫疾患（例えば、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ又はループス）、尋常性天疱瘡、及びシェーグレン症候群、炎症性腸疾患、潰瘍性大腸炎、粘膜免疫に関連する移植関連アロ特異的免疫障害、及び体液性免疫が重要な場合の生物製剤（例えば、第ＶＩＩＩ因子）に対する望ましくない免疫応答）である。
「保存的配列改変」という用語は、そのアミノ酸配列を含む抗体又は抗体断片の結合特性が大きい影響又は変化を被ることのないアミノ酸改変を指す。かかる保存的改変には、アミノ酸置換、付加及び欠失が含まれる。改変は、部位特異的突然変異誘発及びＰＣＲ媒介性突然変異誘発など、当技術分野において公知の標準技法によって本開示の抗体又は抗体断片に導入することができる。保存的置換は、アミノ酸残基が同様の側鎖を有するアミノ酸残基に置き換えられるものである。同様の側鎖を有するアミノ酸残基のファミリーは、当技術分野において定義されている。これらのファミリーには、塩基性側鎖（例えば、リジン、アルギニン、ヒスチジン）、酸性側鎖（例えば、アスパラギン酸、グルタミン酸）、非荷電極性側鎖（例えば、グリシン、アスパラギン、グルタミン、セリン、スレオニン、チロシン、システイン、トリプトファン）、非極性側鎖（例えば、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、フェニルアラニン、メチオニン）、β分枝側鎖（例えば、スレオニン、バリン、イソロイシン）及び芳香族側鎖（例えば、チロシン、フェニルアラニン、トリプトファン、ヒスチジン）を有するアミノ酸が含まれる。従って、本開示のＣＡＲ分子内の１つ以上のアミノ酸残基は、同じ側鎖ファミリーからの他のアミノ酸残基に置き換えることができ、及び変化したＣＡＲ分子は、本明細書に記載される機能アッセイを用いて試験することができる。
「刺激」という用語は、刺激性分子（例えば、ＴＣＲ／ＣＤ３複合体）とその同族のリガンドとの結合によって誘導される一次応答を指し、それにより、限定されないが、ＴＣＲ／ＣＤ３複合体を介したシグナル伝達を媒介する。刺激は、ＴＧＦ－βの下方制御など、ある種の分子の発現の変化、及び／又は細胞骨格構造の認識などを媒介することができる。
「刺激分子」という用語は、Ｔ細胞シグナル伝達経路の少なくとも一部の側面について刺激的方法でＴＣＲ複合体の一次活性化を調節する１つ又は複数の一次細胞質シグナル伝達配列を提供するＴ細胞によって発現される分子を指す。いくつかの実施形態において、ＣＡＲ分子内のＩＴＡＭ含有ドメインは、内因性ＴＣＲ複合体とは独立して、一次ＴＣＲのシグナル伝達を再現する。いくつかの実施形態において、一次シグナルは、例えば、ＴＣＲ／ＣＤ３複合体とペプチドが負荷されたＭＨＣ分子との結合によって惹起され、これは、限定されないが、増殖、活性化、分化などを含めたＴ細胞応答の媒介につながる。刺激性方向に作用する初代細胞質シグナル伝達配列（「一次シグナル伝達ドメイン」とも称される）は、免疫受容体チロシンベースの活性化モチーフ又はＩＴＡＭとして知られるシグナル伝達モチーフを含み得る。本開示において特に有用であるＩＴＡＭ含有初代細胞質シグナル伝達配列の例には、ＴＣＲζ、ＦｃＲγ、ＦｃγＲＩＩａ、ＦｃＲβ、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ５、ＣＤ２２、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ２７８（「ＩＣＯＳ」としても知られる）、ＦｃεＲＩ及びＣＤ６６ｄ、ＤＡＰ１０及びＤＡＰ１２由来のものが含まれるが、これらに限定されない。本開示の具体的なＣＡＲ分子において、本開示の任意の１つ以上のＣＡＲ分子の細胞内シグナル伝達ドメインは、細胞内シグナル伝達配列、例えばＣＤ３－ζの一次シグナル伝達配列を含む。「抗原提示細胞」又は「ＡＰＣ」という用語は、その表面上に主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）と複合体化した外来抗原を提示するアクセサリー細胞などの免疫系細胞（例えば、Ｂ細胞、樹状細胞など）を指す。Ｔ細胞は、そのＴ細胞受容体（ＴＣＲ）を用いてこうした複合体を認識し得る。ＡＰＣは、抗原をプロセシングしてそれをＴ細胞に提示する。
「細胞内シグナル伝達ドメイン」は、この用語が本明細書で使用されるとき、分子の細胞内部分を指す。実施形態において、細胞内シグナルドメインはエフェクター機能シグナルを伝達し、細胞が特化した機能を果たすように仕向ける。細胞内シグナル伝達ドメイン全体が用いられ得るが、多くの場合、鎖全体を使用する必要はない。細胞内シグナル伝達の切断された一部を使用する範囲内で、このような切断された一部を、それがエフェクター機能シグナルを伝達する限り、完全鎖の代わりに使用してよい。細胞内シグナル伝達ドメインという用語は、それゆえに、エフェクター機能シグナルの伝達に十分な細胞内シグナル伝達ドメインのあらゆる切断された一部を含むことを意図する。
細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＡＲ含有細胞、例えばＣＡＲＴ細胞の免疫エフェクター機能を促進するシグナルを生成する。例えば、ＣＡＲＴ細胞における免疫エフェクター機能の例としては、細胞溶解活性及びサイトカインの分泌を含めたヘルパー活性が挙げられる。
いくつかの実施形態において、細胞内シグナル伝達ドメインは、一次細胞内シグナル伝達ドメインを含み得る。例示的一次細胞内シグナル伝達ドメインには、一次刺激又は抗原依存性刺激に関与する分子に由来するものが含まれる。いくつかの実施形態において、細胞内シグナル伝達ドメインは、共刺激細胞内ドメインを含み得る。例示的共刺激細胞内シグナル伝達ドメインには、共刺激シグナル又は抗原非依存性刺激に関与する分子に由来するものが含まれる。例えば、ＣＡＲＴの場合、一次細胞内シグナル伝達ドメインがＴ細胞受容体の細胞質配列を含むことができ、且つ共刺激細胞内シグナル伝達ドメインが共受容体又は共刺激分子からの細胞質配列を含むことができる。
一次細胞内シグナル伝達ドメインは、免疫受容活性化チロシンモチーフ又はＩＴＡＭとして知られるシグナル伝達モチーフを含むことができる。ＩＴＡＭを含む一次細胞質シグナル伝達配列の例には、限定されないが、ＣＤ３ζ、ＦｃＲγ、ＦｃＲβ、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ５、ＣＤ２２、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ２７８（「ＩＣＯＳ」としても知られる）、ＦｃεＲＩ、ＣＤ６６ｄ、ＤＡＰ１０及びＤＡＰ１２に由来するものが含まれる。
「ゼータ」又は代替的に「ゼータ鎖」、「ＣＤ３ゼータ」又は「ＴＣＲゼータ」という用語は、ＣＤ２４７を指す。Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ受託番号Ｐ２０９６３は、例示的なヒトＣＤ３ゼータアミノ酸配列を提供する。「ゼータ刺激ドメイン」又は代替的に「ＣＤ３ゼータ刺激ドメイン」又は「ＴＣＲゼータ刺激ドメイン」は、ＣＤ３ゼータの刺激ドメイン又はその変異体（例えば、変異、例えば、点変異、フラグメント、挿入、又は欠失、を有する分子）を指す。いくつかの実施形態において、ゼータの細胞質ドメインは、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＢＡＧ３６６６４．１の残基５２～１６４又はその変異体（例えば、変異、例えば、点変異、フラグメント、挿入、又は欠失、を有する分子）を含む。いくつかの実施形態において、「ゼータ刺激ドメイン」又は「ＣＤ３ゼータ刺激ドメイン」は、配列番号１０３４若しくは１０３７として提供される配列、又はその変異体（例えば、変異、例えば、点変異、フラグメント、挿入、又は欠失、を有する分子）を指す。
「共刺激分子」という用語は、共刺激リガンドと特異的に結合して、ひいてはＴ細胞による共刺激応答、限定はされないが増殖などを媒介するＴ細胞上のコグネイト結合パートナーを指す。共刺激分子は、抗原受容体以外の細胞表面分子又はそのリガンドであり、効率的な免疫応答に必要である。共刺激分子としては、限定はされないが、ＭＨＣクラスＩ分子、ＴＮＦ受容体タンパク質、免疫グロブリン様タンパク質、サイトカイン受容体、インテグリン、シグナル伝達リンパ球活性化分子（ＳＬＡＭタンパク質）、活性化型ＮＫ細胞受容体、ＢＴＬＡ、Ｔｏｌｌリガンド受容体、ＯＸ４０、ＣＤ２、ＣＤ７、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ－１、ＬＦＡ－１（ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８）、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ－１、ＩＣＯＳ（ＣＤ２７８）、ＧＩＴＲ、ＢＡＦＦＲ、ＬＩＧＨＴ、ＨＶＥＭ（ＬＩＧＨＴＲ）、ＫＩＲＤＳ２、ＳＬＡＭＦ７、ＮＫｐ８０（ＫＬＲＦ１）、ＮＫｐ４４、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４６、ＣＤ１９、ＣＤ４、ＣＤ８α、ＣＤ８β、ＩＬ２Ｒβ、ＩＬ２Ｒγ、ＩＬ７Ｒα、ＩＴＧＡ４、ＶＬＡ１、ＣＤ４９ａ、ＩＴＧＡ４、ＩＡ４、ＣＤ４９Ｄ、ＩＴＧＡ６、ＶＬＡ－６、ＣＤ４９ｆ、ＩＴＧＡＤ、ＣＤ１１ｄ、ＩＴＧＡＥ、ＣＤ１０３、ＩＴＧＡＬ、ＣＤ１１ａ、ＬＦＡ－１、ＩＴＧＡＭ、ＣＤ１１ｂ、ＩＴＧＡＸ、ＣＤ１１ｃ、ＩＴＧＢ１、ＣＤ２９、ＩＴＧＢ２、ＣＤ１８、ＬＦＡ－１、ＩＴＧＢ７、ＮＫＧ２Ｄ、ＮＫＧ２Ｃ、ＴＮＦＲ２、ＴＲＡＮＣＥ／ＲＡＮＫＬ、ＤＮＡＭ１（ＣＤ２２６）、ＳＬＡＭＦ４（ＣＤ２４４、２Ｂ４）、ＣＤ８４、ＣＤ９６（Ｔａｃｔｉｌｅ）、ＣＥＡＣＡＭ１、ＣＲＴＡＭ、Ｌｙ９（ＣＤ２２９）、ＣＤ１６０（ＢＹ５５）、ＰＳＧＬ１、ＣＤ１００（ＳＥＭＡ４Ｄ）、ＣＤ６９、ＳＬＡＭＦ６（ＮＴＢ－Ａ、Ｌｙ１０８）、ＳＬＡＭ（ＳＬＡＭＦ１、ＣＤ１５０、ＩＰＯ－３）、ＢＬＡＭＥ（ＳＬＡＭＦ８）、ＳＥＬＰＬＧ（ＣＤ１６２）、ＬＴＢＲ、ＬＡＴ、ＧＡＤＳ、ＳＬＰ－７６、ＰＡＧ／Ｃｂｐ、ＣＤ１９ａ、ＣＤ２８－ＯＸ４０、ＣＤ２８－４－１ＢＢ、及びＣＤ８３と特異的に結合するリガンドが挙げられる。
共刺激細胞内シグナル伝達ドメインは、共刺激分子の細胞内部分を指す。
細胞内シグナル伝達ドメインは、その由来である分子の細胞内部分全体、又は天然の細胞内シグナル伝達ドメイン全体、又はその機能性断片を含み得る。
「４－１ＢＢ」という用語は、ＣＤ１３７又は腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーメンバー９を指す。Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ受託番号Ｐ２０９６３は、例示的なヒト４－１ＢＢアミノ酸配列を提供する。「４－１ＢＢ共刺激ドメイン」は、４－１ＢＢの共刺激ドメイン、又はその変異体（例えば、変異、例えば、点変異、フラグメント、挿入、又は欠失を有する分子）を指す。いくつかの実施形態において、「４－１ＢＢ共刺激ドメイン」は、配列番号１０２９として提供される配列、又はその変異体（例えば、変異、例えば、点変異、フラグメント、挿入、又は欠失、を有する分子）を指す。
「免疫エフェクター細胞」は、この用語が本明細書で使用されるとき、免疫応答、例えば免疫エフェクター応答の促進に関与する細胞を指す。免疫エフェクター細胞の例としては、Ｔ細胞、例えばα／β Ｔ細胞及びγ／δ Ｔ細胞、Ｂ細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、ナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞、肥満細胞及び骨髄由来食細胞が挙げられる。
「免疫エフェクター機能又は免疫エフェクター応答」は、この用語が本明細書で使用されるとき、標的細胞の免疫攻撃を亢進させる又は促進する例えば免疫エフェクター細胞の機能又は応答を指す。例えば、免疫エフェクター機能又は応答は、標的細胞の死滅又は成長若しくは増殖阻害を促進するＴ細胞又はＮＫ細胞の特性を指す。Ｔ細胞の場合、一次刺激及び共刺激が免疫エフェクター機能又は応答の例である。
「エフェクター機能」という用語は、細胞の特殊化された機能をいう。Ｔ細胞のエフェクター機能は、例えば、細胞溶解活性又はサイトカインの分泌を含むヘルパー活性であり得る。
「コードする」という用語は、定義付けられたヌクレオチド配列（例えば、ｒＲＮＡ、ｔＲＮＡ及びｍＲＮＡ）又は定義付けられたアミノ酸配列のいずれかを有する生物学的過程における他のポリマー及び巨大分子の合成の鋳型としての役割を果たす、遺伝子、ｃＤＮＡ又はｍＲＮＡなど、ポリヌクレオチド内の特異的ヌクレオチド配列の固有の特性及びそれによってもたらされる生物学的特性を指す。従って、遺伝子、ｃＤＮＡ又はＲＮＡは、その遺伝子に対応するｍＲＮＡの転写及び翻訳によって細胞又は他の生体系のタンパク質が産生される場合にタンパク質をコードする。そのヌクレオチド配列がｍＲＮＡ配列と同一の且つ通常配列表に提供されるものであるコード鎖及び遺伝子又はｃＤＮＡの転写鋳型として使用される非コード鎖の両方は、その遺伝子のｃＤＮＡのタンパク質又は他の産物をコードすると称することができる。
特記されない限り、「アミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列」は、互いの縮重バージョンであり、同じアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列の全てを含む。タンパク質又はＲＮＡをコードするヌクレオチド配列という語句には、そのタンパク質をコードするヌクレオチド配列が何らかのバージョンで１つ又は複数のイントロンを含み得る限りにおいて、イントロンも含まれ得る。
「有効量」又は「治療有効量」という用語は、本明細書では同義的に使用され、本明細書に記載される通りの化合物、製剤、材料又は組成物が特定の生物学的結果を達成するのに有効な量を指す。
「内因性」という用語は、生物、細胞、組織又は系由来の又はその内部で産生される任意の材料を指す。
「外因性」という用語は、生物、細胞、組織又は系の外側から導入されるか又はその外側で産生される任意の材料を指す。
「発現」という用語は、特定のヌクレオチド配列の転写及び／又は翻訳を指す。いくつかの実施形態において、発現は、細胞に導入されたｍＲＮＡの翻訳を含む。
「トランスファーベクター」という用語は、単離核酸を含む組成物であって、細胞内部への単離核酸の送達に使用し得る組成物を指す。当技術分野では、限定されないが、線状ポリヌクレオチド、イオン性又は両親媒性化合物に関連するポリヌクレオチド、プラスミド及びウイルスを含め、多くのベクターが公知である。従って、用語「トランスファーベクター」には自己複製プラスミド又はウイルスが含まれる。この用語は、例えば、ポリリジン化合物、リポソームなど、細胞への核酸のトランスファーを促進する非プラスミド及び非ウイルス化合物も更に含むものと解釈されなければならない。ウイルストランスファーベクターの例としては、限定されないが、アデノウイルスベクター、アデノ随伴ウイルスベクター、レトロウイルスベクター、レンチウイルスベクターなどが挙げられる。
「発現ベクター」という用語は、発現させるヌクレオチド配列に作動可能に連結した発現制御配列を含む組換えポリヌクレオチドを含むベクターを指す。発現ベクターは、発現に十分なシス作用エレメントを含み、他の発現用エレメントは、宿主細胞によって供給されるか又はインビトロ発現系に供給され得る。発現ベクターには、組換えポリヌクレオチドを組み込むコスミド、プラスミド（例えば、ネイキッド又はリポソームに含まれる）及びウイルス（例えば、レンチウイルス、レトロウイルス、アデノウイルス及びアデノ随伴ウイルス）を含め、当技術分野において公知のもの全てが含まれる。
「レンチウイルス」という用語は、レトロウイルス科（Ｒｅｔｒｏｖｉｒｉｄａｅ）の属を指す。レンチウイルスは、非分裂細胞を感染させることができる点でレトロウイルスの中でユニークであり、レンチウイルスは、宿主細胞のＤＮＡに多量の遺伝情報を送達することができ、そのため、遺伝子デリバリーベクターの最も効率的な方法の１つである。ＨＩＶ、ＳＩＶ及びＦＩＶは、全てレンチウイルスの例である。
「レンチウイルスベクター」という用語は、特に、Ｍｉｌｏｎｅ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．１７（８）：１４５３－１４６４（２００９）に提供される通りの自己不活性化レンチウイルスベクターを含め、レンチウイルスゲノムの少なくとも一部分に由来するベクターを指す。臨床で使用し得るレンチウイルスベクターの他の例としては、限定されないが、例えばＯｘｆｏｒｄ ＢｉｏＭｅｄｉｃａからのＬＥＮＴＩＶＥＣＴＯＲ（登録商標）遺伝子デリバリー技術、ＬｅｎｔｉｇｅｎからのＬＥＮＴＩＭＡＸ（商標）ベクターシステムなどが挙げられる。非臨床タイプのレンチウイルスベクターも利用可能であり、当業者に公知であろう。
「相同」又は「同一性」という用語は、２つのポリマー分子間、例えば２つのＤＮＡ分子又は２つのＲＮＡ分子など、２つの核酸分子間又は２つのポリペプチド分子間におけるサブユニット配列同一性を指す。２つの分子の両方におけるサブユニット位置が同じ単量体サブユニットによって占有されるとき、例えば２つのＤＮＡ分子の各々の位置がアデニンによって占有される場合、それらは、その位置で相同又は同一である。２つの配列間の相同性は、一致する位置又は相同な位置の数の直接の関数である。例えば、２つの配列における位置の半分（例えば、１０サブユニット長のポリマーにおける５個の位置）が相同である場合、それらの２つの配列は、５０％相同である。位置の９０％（例えば、１０個中９個）が一致するか又は相同である場合、それらの２つの配列は、９０％相同である。
「ヒト化」形態の非ヒト（例えば、マウス）抗体は、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小配列を含むキメラ免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖又はその断片（抗体のＦｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２又は他の抗原結合部分配列など）である。ほとんどの場合、ヒト化抗体及びその抗体断片は、ヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体又は抗体断片）においてレシピエントの相補決定領域（ＣＤＲ）からの残基が所望の特異性、親和性及び能力を有するマウス、ラット又はウサギなどの非ヒト種（ドナー抗体）のＣＤＲからの残基に置き換えられているものである。一部の例では、ヒト免疫グロブリンのＦｖフレームワーク領域（ＦＲ）残基が対応する非ヒト残基に置き換えられる。更に、ヒト化抗体／抗体断片は、レシピエント抗体にも、移入されるＣＤＲ又はフレームワーク配列にも見られない残基を含むことができる。これらの改変は抗体又は抗体断片の性能を更に精緻化及び最適化し得る。一般に、ヒト化抗体又はその抗体断片は、少なくとも１つ及び典型的には２つの可変ドメインの実質的に全てを含むことになり、ＣＤＲ領域の全て又は実質的に全てが非ヒト免疫グロブリンのものに対応し、且つＦＲ領域の全て又は大部分がヒト免疫グロブリン配列のものである。ヒト化抗体又は抗体断片は、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）、典型的にはヒト免疫グロブリンのＦｃの少なくとも一部分も含むことができる。更なる詳細については、Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３２１：５２２－５２５，１９８６；Ｒｅｉｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３３２：３２３－３２９，１９８８；Ｐｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．，２：５９３－５９６，１９９２を参照されたい。
「完全にヒト」は、分子全体がヒト起源であるか、又はヒト形態の抗体又は免疫グロブリンと同一のアミノ酸配列からなる抗体又は抗体断片などの免疫グロブリンを指す。
「単離されている」という用語は、自然状態から改変されているか又は取り出されていることを意味する。例えば、生きている動物に天然に存在する核酸又はペプチドは、「単離されている」のではないが、その自然状態の共存する材料から部分的又は完全に分離された同じ核酸又はペプチドは、「単離されている」。単離核酸又はタンパク質は、実質的に精製された形態で存在することができ、又は例えば宿主細胞など、非天然環境中に存在することができる。
本開示との関連において、一般的に存在する核酸塩基に関して以下の略称が使用される。「Ａ」は、アデノシンを指し、「Ｃ」は、シトシンを指し、「Ｇ」は、グアノシンを指し、「Ｔ」は、チミジンを指し、及び「Ｕ」は、ウリジンを指す。
「作動可能に連結された」又は「転写制御」という用語は、調節配列と異種核酸配列との間における後者の発現をもたらす機能的な連結を指す。例えば、第１の核酸配列が第２の核酸配列と機能的に関係した状態に置かれているとき、第１の核酸配列は、第２の核酸配列と作動可能に連結されている。例えば、プロモーターがコード配列の転写又は発現に影響を及ぼす場合、プロモーターは、コード配列に作動可能に連結されている。作動可能に連結されるＤＮＡ配列は、互いに連続し得、例えば２つのタンパク質コード領域をつなぎ合わせる必要がある場合、同じリーディングフレーム内にある。
免疫原性組成物の「非経口」投与という用語は、例えば、皮下（ｓ．ｃ．）、静脈内（ｉ．ｖ．）、筋肉内（ｉ．ｍ．）、又は胸骨内注射、腫瘍内、又は輸注技法を含む。
「核酸」又は「ポリヌクレオチド」という用語は、一本鎖又は二本鎖の形態のデオキシリボ核酸（ＤＮＡ）又はリボ核酸（ＲＮＡ）及びそれらのポリマーを指す。具体的に限定しない限り、この用語には、参照核酸と同様の結合特性を有し、且つ天然に存在するヌクレオチドと同じように代謝される、天然ヌクレオチドの既知の類似体を含む核酸が包含される。特に指示されない限り、ある詳細な核酸配列は、黙示的に、その保存的に改変された変異体（例えば、縮重コドン置換、例えば保存的置換）、アレル、オルソログ、ＳＮＰ及び相補配列並びに明示的に指示される配列も包含する。具体的には、縮重コドン置換、例えば保存的置換は、１つ以上の選択の（又は全ての）コドンの３番目の位置が混合塩基及び／又はデオキシイノシン残基で置換されている配列を作成することによって達成し得る（Ｂａｔｚｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄ Ｒｅｓ．１９：５０８１（１９９１）；Ｏｈｔｓｕｋａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６０：２６０５－２６０８（１９８５）；及びＲｏｓｓｏｌｉｎｉ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｐｒｏｂｅｓ ８：９１－９８（１９９４））。
「ペプチド」、「ポリペプチド」及び「タンパク質」という用語は、同義的に使用され、ペプチド結合によって共有結合的に連結したアミノ酸残基で構成される分子を指す。タンパク質又はペプチドは、少なくとも２つのアミノ酸を含有しなければならず、タンパク質の配列又はペプチドの配列を含むことのできるアミノ酸の最大数に制限はない。ポリペプチドは、互いにペプチド結合によってつなぎ合わされた２つ以上のアミノ酸を含む任意のペプチド又はタンパク質を含む。本明細書で使用されるとき、この用語は、当技術分野では一般に例えばペプチド、オリゴペプチド及びオリゴマーとも称される短鎖と、当技術分野では概してタンパク質と称される、多数の種類があるより長い鎖との両方を指す。「ポリペプチド」には、例えば、生物学的に活性な断片、実質的に相同なポリペプチド、オリゴペプチド、ホモ二量体、ヘテロ二量体、ポリペプチドの変異体、修飾ポリペプチド、誘導体、類似体、融合タンパク質が特に含まれる。ポリペプチドには、天然ペプチド、組換えペプチド又はこれらの組み合わせが含まれる。
「プロモーター」という用語は、ポリヌクレオチド配列の特異的転写を開始させるのに必要である、細胞の合成機構又は導入された合成機構によって認識されるＤＮＡ配列を指す。
「プロモーター／調節配列」という用語は、そのプロモーター／調節配列に作動可能に連結された遺伝子産物の発現に必要な核酸配列を指す。一部の例では、この配列は、コアプロモーター配列であり得、他の例では、この配列は、エンハンサー配列及び遺伝子産物の発現に必要な他の調節エレメントも含み得る。プロモーター／調節配列は、例えば、遺伝子産物を組織特異的に発現するものであり得る。
「構成的」プロモーターという用語は、遺伝子産物をコードするか又はそれを指定するポリヌクレオチドと作動可能に連結されているとき、細胞のほとんど又は全ての生理条件下で細胞において遺伝子産物の産生を生じさせるヌクレオチド配列を指す。
「誘導性」プロモーターという用語は、遺伝子産物をコードするか又はそれを指定するポリヌクレオチドと作動可能に連結されているとき、実質的にプロモーターに対応する誘発物質が細胞に存在する場合に限り細胞において遺伝子産物の産生を生じさせるヌクレオチド配列を指す。
「組織特異的」プロモーターという用語は、遺伝子をコードするか又はそれによって指定されるポリヌクレオチドと作動可能に連結されているとき、実質的に細胞がプロモーターに対応する組織型の細胞である場合に限り細胞において遺伝子産物の産生を生じさせるヌクレオチド配列を指す。
「癌関連抗原」又は「腫瘍抗原」という用語は、同義的に、癌細胞の表面上に完全に又は代わりに断片（例えば、ＭＨＣ／ペプチド）として発現する分子（典型的にはタンパク質、炭水化物又は脂質）であって、癌細胞への薬理学的薬剤の優先的なターゲティングに有用な分子を指す。いくつかの実施形態において、腫瘍抗原は、正常細胞及び癌細胞の両方が発現するマーカー、例えば系列マーカー、例えばＢ細胞上のＣＤ１９である。いくつかの実施形態において、腫瘍抗原は、正常細胞と比較して癌細胞で過剰発現する（例えば、正常細胞と比較して１倍の過剰発現、２倍の過剰発現、３倍の過剰発現又はそれを超える）細胞表面分子である。いくつかの実施形態において、腫瘍抗原は、癌細胞で不適切に合成される細胞表面分子、例えば正常細胞に発現する分子と比較して欠失、付加又は変異を含む分子である。いくつかの実施形態において、腫瘍抗原は癌細胞の細胞表面にのみ、完全に又は代わりに断片（例えば、ＭＨＣ／ペプチド）として発現することになり、正常細胞の表面に合成されないか又は発現しない。いくつかの実施形態において、本開示のＣＡＲ分子は、ＭＨＣ提示ペプチドに結合する抗原結合ドメイン（例えば、抗体又は抗体断片）を含むＣＡＲ分子を含む。通常、内因性タンパク質に由来するペプチドは、主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）クラスＩ分子のポケットに嵌まり、ＣＤ８＋Ｔリンパ球上のＴ細胞受容体（ＴＣＲ）によって認識される。ＭＨＣクラスＩ複合体は、あらゆる有核細胞によって構成的に発現される。癌では、ウイルス特異的及び／又は腫瘍特異的ペプチド／ＭＨＣ複合体が免疫療法用のユニークなクラスの細胞表面標的となる。ヒト白血球抗原（ＨＬＡ）－Ａ１又はＨＬＡ－Ａ２のコンテクストでウイルス又は腫瘍抗原由来のペプチドを標的とするＴＣＲ様抗体が記載されている（例えば、Ｓａｓｔｒｙ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｖｉｒｏｌ．２０１１ ８５（５）：１９３５－１９４２；Ｓｅｒｇｅｅｖａ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，２０１１ １１７（１６）：４２６２－４２７２；Ｖｅｒｍａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２０１０ １８４（４）：２１５６－２１６５；Ｗｉｌｌｅｍｓｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ ２００１ ８（２１）：１６０１－１６０８；Ｄａｏ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉ Ｔｒａｎｓｌ Ｍｅｄ ２０１３ ５（１７６）：１７６ｒａ３３；Ｔａｓｓｅｖ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ ２０１２ １９（２）：８４－１００を参照されたい）。例えば、ＴＣＲ様抗体は、ヒトｓｃＦｖファージディスプレイライブラリなど、ライブラリのスクリーニングによって同定することができる。
「腫瘍支持抗原」又は「癌支持抗原」という用語は、互換的に、それ自体癌性ではないが、例えば増殖又は生存、例えば免疫細胞に対する抵抗性を促進することにより、癌細胞を支持する、細胞の表面に発現される分子（典型的には、タンパク質、炭水化物又は脂質）を指す。この型の例示的な細胞は、間質細胞及び骨髄由来サプレッサー細胞（ＭＤＳＣ）を含む。腫瘍支持抗原自体は、抗原が癌細胞を支持する細胞上に存在する限り、腫瘍細胞を支持する役割を果たさなくてもよい。
「可動性ポリペプチドリンカー」又は「リンカー」という用語は、ｓｃＦｖとの関連で使用されるとき、可変重鎖領域と可変軽鎖領域とを共に連結するために単独又は組み合わせで使用されるグリシン及び／又はセリン残基などのアミノ酸からなるペプチドリンカーを指す。いくつかの実施形態において、可動性ポリペプチドリンカーは、Ｇｌｙ／Ｓｅｒリンカーであり、アミノ酸配列（Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ）ｎ（式中、ｎは、１つ以上の正の整数、例えばｎ＝１、ｎ＝２、ｎ＝３、ｎ＝４、ｎ＝５及びｎ＝６、ｎ＝７、ｎ＝８、ｎ＝９及びｎ＝１０である（配列番号１００９））を含む。いくつかの実施形態において、可動性ポリペプチドリンカーには、限定されないが、（Ｇｌｙ４ Ｓｅｒ）４（配列番号１０１０）又は（Ｇｌｙ４ Ｓｅｒ）３（配列番号１０１１）が含まれる。いくつかの実施形態において、リンカーは、（Ｇｌｙ２Ｓｅｒ）、（ＧｌｙＳｅｒ）又は（Ｇｌｙ３Ｓｅｒ）（配列番号１０１２）の複数の繰り返しを含む。また、国際公開第２０１２／１３８４７５号パンフレット（参照により本明細書に援用される）に記載されるリンカーも本開示の範囲内に含まれる。
本明細書で使用されるとき、５’キャップ（ＲＮＡキャップ、ＲＮＡ７－メチルグアノシンキャップ又はＲＮＡ ｍ７Ｇキャップとも称される）は、転写開始直後に真核生物メッセンジャーＲＮＡの「前」又は５’末端に付加された修飾グアニンヌクレオチドである。５’キャップは、１番目の転写ヌクレオチドに連結される末端基からなる。その存在は、リボソームによる認識及びＲＮアーゼからの保護に重要である。キャップ付加は転写と結び付いており、それぞれが他方に影響を与えるようにして同時転写的に起こる。転写開始直後、合成されているｍＲＮＡの５’末端に、ＲＮＡポリメラーゼに関連するキャップ合成複合体が結合する。この酵素複合体は、ｍＲＮＡキャッピングに必要な化学反応を触媒する。合成は、多段階生化学反応として進行する。キャッピング部分は、ｍＲＮＡのその安定性又は翻訳効率などの機能を調整するために改変することができる。
本明細書で使用されるとき、「インビトロ転写ＲＮＡ」は、インビトロ合成されたＲＮＡ、好ましくはｍＲＮＡを指す。概して、インビトロ転写ＲＮＡは、インビトロ転写ベクターから作成される。インビトロ転写ベクターは、インビトロ転写ＲＮＡの作成に使用される鋳型を含む。
本明細書で使用されるとき、「ポリ（Ａ）」は、ポリアデニル化によってｍＲＮＡに付加される一連のアデノシンである。一過性発現用のコンストラクトのいくつかの実施形態において、ポリＡは、５０～５０００（配列番号１０１３）、好ましくは６４より多く、より好ましくは１００より多く、最も好ましくは３００又は４００より多い。ポリ（Ａ）配列は、局在性、安定性又は翻訳効率などのｍＲＮＡ機能を調整するために化学的又は酵素的に改変することができる。
本明細書で使用されるとき、「ポリアデニル化」は、メッセンジャーＲＮＡ分子へのポリアデニリル部分又はその改変変異体の共有結合を指す。真核生物では、ほとんどのメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）分子が３’末端でポリアデニル化される。３’ポリ（Ａ）テールは、酵素、ポリアデニル酸ポリメラーゼの作用によってｍＲＮＡ前駆体に付加されるアデニンヌクレオチドの長い配列（多くの場合に数百個）である。高等真核生物では、ポリ（Ａ）テールは、特異的配列、ポリアデニル化シグナルを含む転写物に付加される。ポリ（Ａ）テール及びそれに結合したタンパク質は、ｍＲＮＡをエキソヌクレアーゼによる分解から保護するのに役立つ。ポリアデニル化は、転写終結、ｍＲＮＡの核外移行及び翻訳にも重要である。ポリアデニル化は、ＤＮＡからＲＮＡへの転写直後に核内で起こるが、更に後に細胞質でも起こり得る。転写が終結した後、ＲＮＡポリメラーゼに関連するエンドヌクレアーゼ複合体の作用によってｍＲＮＡ鎖が切断される。切断部位は、通常、切断部位近傍の塩基配列ＡＡＵＡＡＡの存在によって特徴付けられる。ｍＲＮＡが切断された後、切断部位の遊離３’末端にアデノシン残基が付加される。
本明細書で使用されるとき、「一過性」は、数時間、数日間又は数週間の期間にわたる組み込まれないトランス遺伝子の発現を指し、この発現期間は、宿主細胞においてゲノムに組み込まれた場合又は安定プラスミドレプリコン中に含まれている場合の遺伝子の発現期間よりも短い。
本明細書で使用される場合、「処置する」、「処置」及び「処置している」という用語は、１つ以上の療法（例えば、本開示の１つ以上の療法剤）の投与によってもたらされる増殖性障害の進行、重症度及び／若しくは持続期間の低減若しくは改善又は増殖性障害の１つ以上の症状（好ましくは１つ以上の認識し得る症状）の改善を指す。具体的な実施形態において、用語「処置する」、「処置」及び「処置している」は、患者には必ずしも認識できない、腫瘍の成長などの増殖性障害の少なくとも１つの計測可能な理学的パラメータの改善を指す。他の実施形態において、用語「処置する」、「処置」及び「処置している」は、増殖性障害の進行の物理的な、例えば認識し得る症状の安定化による阻害、生理学的な、例えば理学的パラメータの安定化による阻害のいずれか又は両方を指す。他の実施形態において、用語「処置する」、「処置」及び「処置している」は、腫瘍サイズ又は癌性細胞数の低減又は安定化を指す。
「シグナル伝達経路」という用語は、細胞のある部分から細胞の別の部分へのシグナルの伝達において役割を果たす種々のシグナル伝達分子間の生化学的関係を指す。「細胞表面受容体」という語句は、シグナルを受け取り、且つ細胞の膜を越えてシグナルを伝える能力を有する分子及び分子複合体を含む。
「対象」という用語は、免疫応答を生じさせることのできる生きている生物（例えば、哺乳類、ヒト）を含むことが意図される。
用語の「実質的に精製された」細胞は、他の細胞型を本質的に含まない細胞を指す。実質的に精製された細胞とは、その天然に存在する状態でそれが通常結び付いている他の細胞型と分離されている細胞も指す。一部の例では、実質的に精製された細胞集団とは、均質な細胞集団を指す。他の例では、この用語は、単に、その自然状態でそれが天然に結び付いている細胞から分離されている細胞を指す。いくつかの実施形態において、細胞は、インビトロで培養される。他の実施形態において、細胞は、インビトロで培養されない。
「療法的」という用語は、本明細書で使用されるとき、治療を意味する。療法的効果は疾患状態の低減、抑制、寛解又は根絶によって達成される。
「予防」という用語は、本明細書で使用されるとき、疾患又は疾患状態の予防又はそれに対する予防的治療を意味する。
本開示との関連において、「腫瘍抗原」、又は「過剰増殖性障害抗原」、又は「過剰増殖性障害に関連する抗原」は、特異的な過剰増殖性障害に共通する抗原を指す。特定の実施形態において、本開示の過剰増殖性障害抗原は、原発性又は転移性黒色腫、胸腺腫、リンパ腫、肉腫、肺癌、肝臓癌、非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、白血病、子宮癌、子宮頸癌、膀胱癌、腎臓癌、及び乳癌、前立腺癌（例えば、去勢抵抗性若しくは治療抵抗性の前立腺癌、又は転移性前立腺癌）などの腺癌、卵巣癌、膵臓癌など、又は形質細胞増殖性障害、例えば、無症候性骨髄腫（くすぶり型多発性骨髄腫又は無痛性骨髄腫）、意義不明の単クローン性高ガンマグロブリン血症（ＭＧＵＳ）、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、形質細胞腫（例えば、形質細胞異常増殖症、孤立性骨髄腫、孤立性形質細胞腫、髄外形質細胞腫、及び多発性形質細胞腫）、全身性アミロイド軽鎖アミロイドーシス、及びＰＯＥＭＳ症候群（クロウ・深瀬症候群、高月病、及びＰＥＰ症候群としても知られる）を含むがこれらに限定されない癌に由来する。
「トランスフェクトされた」、又は「形質転換された」、又は「形質導入された」という用語は、外因性核酸を宿主細胞に移入させるか又は導入するプロセスを指す。「トランスフェクトされた」、又は「形質転換された」、又は「形質導入された」細胞は、外因性核酸をトランスフェクト、形質転換又は形質導入されたものである。細胞には初代対象細胞及びその子孫が含まれる。
「特異的に結合する」という用語は、サンプル中に存在するコグネイト結合パートナー（例えば、Ｔ細胞上に存在する刺激及び／又は共刺激分子）タンパク質を認識し、結合する抗体、又はリガンドであって、しかし、サンプル中の他の分子は、実質的に認識又は結合しない、抗体又はリガンドを指す。
本明細書で使用されるとおりの「調節可能なキメラ抗原受容体（ＲＣＡＲ）」は、免疫エフェクター細胞内にあるとき、標的細胞、典型的には癌細胞に対する特異性、及び細胞内シグナル生成を細胞に付与するポリペプチドの組、最も単純な実施形態において典型的には２つのポリペプチドを指す。いくつかの実施形態において、ＲＣＡＲは、少なくとも、細胞外抗原結合ドメインと、膜貫通ドメインと、ＣＡＲ分子に関連して本明細書に定義されるとおりの刺激分子及び／又は共刺激分子に由来する機能性シグナル伝達ドメインを含む細胞質シグナル伝達ドメイン（本明細書では「細胞内シグナル伝達ドメイン」とも称される）とを含む。いくつかの実施形態において、ＲＣＡＲのポリペプチドの組は、互いに連続しておらず、例えば異なるポリペプチド鎖にある。いくつかの実施形態において、ＲＣＡＲは、二量化スイッチを含み、このスイッチは、二量化分子の存在を受けてポリペプチドを互いにカップリングすることができ、例えば抗原結合ドメインを細胞内シグナル伝達ドメインにカップリングすることができる。いくつかの実施形態において、ＲＣＡＲは、本明細書に記載されるとおりの細胞（例えば、免疫エフェクター細胞）、例えばＲＣＡＲ発現細胞（本明細書では「ＲＣＡＲＸ細胞」とも称される）に発現する。いくつかの実施形態において、ＲＣＡＲＸ細胞は、Ｔ細胞であり、ＲＣＡＲＴ細胞と称される。いくつかの実施形態において、ＲＣＡＲＸ細胞は、ＮＫ細胞であり、ＲＣＡＲＮ細胞と称される。ＲＣＡＲは、ＲＣＡＲ発現細胞に標的細胞、典型的には癌細胞に対する特異性、及び調節可能な細胞内シグナル生成又は増殖を付与することができ、これがＲＣＡＲ発現細胞の免疫エフェクター特性を最適化し得る。実施形態において、ＲＣＡＲ細胞は、抗原結合ドメインによって結合される抗原を含む標的細胞に対する特異性を付与するために、少なくとも一部には抗原結合ドメインに依存する。
「膜アンカー」又は「膜繋留ドメイン」は、この用語が本明細書で使用されるとき、細胞外又は細胞内ドメインを細胞膜にアンカリングするのに十分なポリペプチド又は部分、例えばミリストイル基を指す。
「スイッチドメイン」は、この用語が本明細書で例えばＲＣＡＲに言及する場合に使用されるとき、二量化分子の存在下で別のスイッチドメインと会合する実体、典型的にはポリペプチドベースの実体を指す。この会合の結果、第１のスイッチドメインに連結、例えば融合した第１の実体と、第２のスイッチドメインに連結、例えば融合した第２の実体との機能的カップリングが生じる。第１及び第２のスイッチドメインは、まとめて二量化スイッチと称される。実施形態において、第１及び第２のスイッチドメインは、互いに同じであり、例えば、これらは、同じ一次アミノ酸配列を有するポリペプチドであり、まとめてホモ二量化スイッチと称される。実施形態において、第１及び第２のスイッチドメインは、互いに異なり、例えば、これらは、異なる一次アミノ酸配列を有するポリペプチドであり、まとめてヘテロ二量化スイッチと称される。実施形態において、スイッチは、細胞内である。実施形態において、スイッチは、細胞外である。実施形態において、スイッチドメインは、ポリペプチドベースの実体、例えばＦＫＢＰ又はＦＲＢベースであり、二量化分子は、小分子、例えばラパログである。実施形態において、スイッチドメインは、ポリペプチドベースの実体、例えばｍｙｃペプチドに結合するｓｃＦｖであり、二量化分子は、ポリペプチド、その断片又はポリペプチドの多量体、例えば１つ以上のｍｙｃ ｓｃＦｖに結合するｍｙｃリガンド又はｍｙｃリガンドの多量体である。実施形態において、スイッチドメインは、ポリペプチドベースの実体、例えばｍｙｃ受容体であり、二量化分子は、抗体又はその断片、例えばｍｙｃ抗体である。
「二量化分子」は、この用語が本明細書で例えばＲＣＡＲに言及する場合に使用されるとき、第１のスイッチドメインと第２のスイッチドメインとの会合を促進する分子を指す。実施形態において、二量化分子は、対象に天然に存在しないか、又は有意な二量化をもたらし得る濃度で存在しない。実施形態において、二量化分子は、小分子、例えばラパマイシン又はラパログ、例えばＲＡＤ００１である。
「生物学的に均等」という用語は、参照用量又は参照量の参照化合物（例えば、ＲＡＤ００１）によって生じる効果と均等な効果を生じさせるのに必要な量の参照化合物（例えば、ＲＡＤ００１）以外の薬剤を指す。いくつかの実施形態において、効果は、例えば、Ｐ７０ Ｓ６キナーゼ阻害によって測定したときの、例えばインビボ又はインビトロアッセイで評価したときの、例えば本明細書に記載されるアッセイ、例えばブーレイ（Ｂｏｕｌａｙ）アッセイ、又はウェスタンブロットによるリン酸化Ｓ６レベルの測定によって測定したときのｍＴＯＲ阻害レベルである。いくつかの実施形態において、効果は、細胞選別によって測定したときのＰＤ－１陽性／ＰＤ－１陰性Ｔ細胞の比の変化である。いくつかの実施形態において、ｍＴＯＲ阻害剤の生物学的に均等な量又は用量は、参照用量又は参照量の参照化合物と同じレベルのＰ７０ Ｓ６キナーゼ阻害を達成する量又は用量である。いくつかの実施形態において、ｍＴＯＲ阻害剤の生物学的に均等な量又は用量は、参照用量又は参照量の参照化合物と同じレベルのＰＤ－１陽性／ＰＤ－１陰性Ｔ細胞の比の変化を達成する量又は用量である。
「低免疫増強用量」という用語は、ｍＴＯＲ阻害剤、例えばアロステリックｍＴＯＲ阻害剤、例えばＲＡＤ００１又はラパマイシン又は触媒ｍＴＯＲ阻害剤と併せて使用されるとき、例えばＰ７０ Ｓ６キナーゼ活性の阻害によって測定したときのｍＴＯＲ活性を、完全ではないが、部分的に阻害するｍＴＯＲ阻害剤の用量を指す。ｍＴＯＲ活性の、例えばＰ７０ Ｓ６キナーゼの阻害による評価方法は、本明細書で考察される。用量は、完全な免疫抑制をもたらすには不十分であるが、免疫応答を増強するには十分である。いくつかの実施形態において、ｍＴＯＲ阻害剤の低免疫増強用量は、ＰＤ－１陽性免疫エフェクター細胞、例えばＴ細胞若しくはＮＫ細胞の数の減少及び／又はＰＤ－１陰性免疫エフェクター細胞、例えばＴ細胞若しくはＮＫ細胞の数の増加、又はＰＤ－１陰性免疫エフェクター細胞（例えばＴ細胞若しくはＮＫ細胞）／ＰＤ－１陽性免疫エフェクター細胞（例えばＴ細胞若しくはＮＫ細胞）の比の増加をもたらす。
いくつかの実施形態において、ｍＴＯＲ阻害剤の低免疫増強用量は、ナイーブＴ細胞の数の増加をもたらす。いくつかの実施形態において、ｍＴＯＲ阻害剤の低免疫増強用量は、以下の１つ以上をもたらす：
例えばメモリーＴ細胞上、例えばメモリーＴ細胞前駆体上の以下のマーカー：ＣＤ６２Ｌｈｉｇｈ、ＣＤ１２７ｈｉｇｈ、ＣＤ２７＋及びＢＣＬ２の１つ以上の発現の増加；
例えばメモリーＴ細胞上、例えばメモリーＴ細胞前駆体上のＫＬＲＧ１の発現の減少；及び
メモリーＴ細胞前駆体、例えば以下の特性：ＣＤ６２Ｌｈｉｇｈの増加、ＣＤ１２７ｈｉｇｈの増加、ＣＤ２７＋の増加、ＫＬＲＧ１の減少及びＢＣＬ２の増加のいずれか１つ又は組み合わせを有する細胞の数の増加。
ここで、上記に記載される変化のいずれも、例えば未処置対象と比較した場合、例えば少なくとも一過性に起こる。
「難治性」は、本明細書で使用される場合、処置に応答しない疾患、例えば癌を指す。実施形態において、難治性癌は、処置の開始前又は開始時点で処置に抵抗性であり得る。他の実施形態において、難治性癌は、処置中に抵抗性になり得る。難治性癌は、抵抗性癌とも称される。
「再発した」又は「再発する」は、本明細書で使用されるとき、改善又は応答期間後、例えば療法、例えば癌療法の前治療後における疾患（例えば、癌）又は癌などの疾患の徴候及び症状の再出現を指す。例えば、応答性の期間は、癌細胞のレベルの、特定の閾値未満、例えば、２０％、１５％、１０％、５％、４％、３％、２％又は１％未満への低下を含み得る。再出現は、癌細胞のレベルの、ある閾値を越える、例えば２０％、１５％、１０％、５％、４％、３％、２％又は１％を超える増加を含み得る。
いくつかの実施形態において、治療の「応答者」は、治療を受けた後に完全応答、非常に良好な部分応答、又は部分応答を有する対象であり得る。いくつかの実施形態において、治療の「非応答者」は、治療を受けた後に軽度の応答、安定した疾患、又は進行性の疾患を有する対象であり得る。いくつかの実施形態において、対象は多発性骨髄腫を有し、多発性骨髄腫治療に対する対象の応答は、その全体が参照により本明細書に組み込まれるＫｕｍａｒ，ｅｔ ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ Ｏｎｃｏｌ．１７，ｅ３２８－３４６（２０１６）に記載されるように、ＩＭＷＧ ２０１６基準に基づいて決定される。
範囲：本開示全体を通じて、本開示の様々な実施形態が範囲の形式で提示され得る。範囲の形式での記載は、単に便宜上及び簡潔にするためのものであり、本開示の範囲に対する確固たる限定と解釈されてはならないことが理解されるべきである。従って、範囲の記載は、具体的に開示される全ての可能な部分範囲並びにその範囲内にある個々の数値を有すると考えられなければならない。例えば、１～６などの範囲の記載は、１～３、１～４、１～５、２～４、２～６、３～６などの具体的に開示される部分範囲並びにその範囲内にある個々の数値、例えば１、２、２．７、３、４、５、５．３及び６を有すると考えられなければならない。別の例として、９５～９９％の同一性などの範囲は、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％の同一性を有するものを含み、且つ９６～９９％、９６～９８％、９６～９７％、９７～９９％、９７～９８％及び９８～９９％の同一性などの部分範囲を含む。これは、範囲の幅に関わらず適用される。
本明細書で使用される用語「遺伝子編集系」は、前記系により標的とされる遺伝子ＤＮＡの部位又はその近辺の１つ以上の核酸の改変、例えば欠失を導き及び実施する、系、例えば１つ以上の分子を指す。遺伝子編集系は当技術分野において公知であり、以下により詳細に記載する。
「同族抗原分子」という用語は、本明細書に記載の任意の抗原を指す。いくつかの実施形態において、これは、ＣＡＲポリペプチド、例えば、本明細書に記載の任意の標的ＣＡＲ分子によって、結合、例えば、認識又は標的化される抗原を指す。いくつかの実施形態において、これは、本明細書に記載の癌関連抗原を指す。いくつかの実施形態において、同族抗原分子は組換え分子である。
本明細書で定義される基、ラジカル、又は部分において、多くの場合、炭素原子の数は基の前に指定され、例えば、（Ｃ１～Ｃ１０）アルキルは、１～１０個の炭素原子を有するアルキル基又はラジカルを意味する。一般に、２つ以上のサブグループを含む基については、最後に挙げられる基がラジカル結合点であり、例えば、「アルキルアリール」は、式アルキル－アリール－の一価ラジカルを意味し、「アリールアルキル」は、式アリール－アルキル－の一価ラジカルを意味する。更に、二価ラジカルが適切である場合に一価ラジカルを指定する用語の使用は、それぞれの二価ラジカルを指定すると解釈されるものとし、逆もまた同様である。別段の指定がない限り、全ての式及び基において、制御及び従来の安定原子価という用語の従来の定義が推定され、達成される。「ａ」及び「ａｎ」という冠詞は、その冠詞の文法上の目的語の１つ又は複数（例えば、少なくとも１つ）を指す。例として、「要素」は、１つの要素又は１つより多い要素を意味する。
「及び／又は」という用語は、別段の指示がない限り、「及び」又は「又は」のいずれかを意味する。
「任意選択により置換された」という用語は、所与の化学部分（例えば、アルキル基）が他の置換基（例えば、ヘテロ原子）に結合できる（が、それを要しない）ことを意味する。例えば、任意選択により置換されたアルキル基は、完全に飽和したアルキル鎖（例えば、純粋な炭化水素）であり得る。或いは、任意選択により置換された同じアルキル基は、水素とは異なる置換基を有し得る。例えば、鎖に沿った任意の点で、ハロゲン原子、ヒドロキシル基、又は本明細書に記載の他の置換基に結合することができる。したがって、「任意選択により置換された」という用語は、所与の化学部分が他の官能基を含む可能性を有するが、必ずしも更なる官能基を有するわけではないことを意味する。記載された基の任意選択による置換に使用される適切な置換基には、限定されないが、ハロゲン、オキソ、－ＯＨ、－ＣＮ、－ＣＯＯＨ、－ＣＨ２ＣＮ、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルコキシ、－Ｏ－（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル、－Ｏ－（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル、（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル、（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル、－ＯＨ、－ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、－ＯＣ（Ｏ）（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、－Ｃ（Ｏ）（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、－ＯＣ（Ｏ）Ｏ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、－ＮＨ２、－ＮＨ（（Ｃ１～Ｃ６）アルキル）、－Ｎ（（Ｃ１～Ｃ６）アルキル）２、－ＮＨＣ（Ｏ）（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、－Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、－Ｓ（Ｏ）２（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、－Ｓ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、及びＳ（Ｏ）Ｎ（（Ｃ１～Ｃ６）アルキル）２が含まれる。置換基は、それ自体、任意選択により置換され得る。本明細書で使用される「任意選択により置換された」はまた、その意味が以下に記載される置換又は非置換を指す。
「置換された」という用語は、指定された基又は部分が１つ以上の適切な置換基を担持し、置換基が１つ以上の位置で指定された基又は部分に結合し得ることを意味する。例えば、シクロアルキルで置換されたアリールは、シクロアルキルが、結合によって、又はアリールと融合し、２つ以上の共通の原子を共有することによって、アリールの１つの原子に結合することを示し得る。
「非置換」という用語は、特定の基が置換基を担持しないことを意味する。
特に定義しない限り、「アリール」は、フェニル、ビフェニル、又はナフチルなどの単環式又は二環式基を含む、１～３個の芳香環を有する環状芳香族炭化水素基を意味する。２つの芳香環（二環式など）を含む場合、アリール基の芳香環は、任意選択により、一点で結合する（例えば、ビフェニル）か、又は縮合する（例えば、ナフチル）。アリール基は、任意の結合点で、１つ以上の置換基、例えば１～５個の置換基によって、任意選択により置換されている。例示的な置換基には、－Ｈ、ハロゲン、－ＣＮ、－Ｏ－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、－Ｏ－（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル、－Ｏ－（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル、（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル、（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル、－ＯＨ、－ＯＰ（Ｏ）（ＯＨ）２、－ＯＣ（Ｏ）（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、－Ｃ（Ｏ）（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、－ＯＣ（Ｏ）Ｏ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、ＮＨ２、ＮＨ（（Ｃ１～Ｃ６）アルキル）、Ｎ（（Ｃ１～Ｃ６）アルキル）２、－Ｓ（Ｏ）２－（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、－Ｓ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、及びＳ（Ｏ）Ｎ（（Ｃ１～Ｃ６）アルキル）２が含まれるが、これらに限定されない。置換基は、それ自体、任意選択により置換される。更に、２つの縮合環を含む場合、アリール基は、完全飽和環と縮合した不飽和又は部分飽和環を任意選択により有する。これらのアリール基の例示的な環系には、フェニル、ビフェニル、ナフチル、アントラセニル、フェナレニル、フェナントレニル、インダニル、インデニル、テトラヒドロナフタレニル、テトラヒドロベンゾアンヌレニルなどが含まれるが、これらに限定されない。
特に定義しない限り、「ヘテロアリール」は、Ｎ、Ｏ、又はＳから選択される１つ以上の環ヘテロ原子を含み、残りの環原子がＣである、５～２４個の環原子の一価単環式芳香族ラジカル又は多環式芳香族ラジカルを意味する。本明細書で定義されるヘテロアリールは、ヘテロ原子がＮ、Ｏ、又はＳから選択される二環式ヘテロ芳香族基も意味する。芳香族ラジカルは、任意選択により、本明細書に記載の１つ以上の置換基で独立して置換されている。例には、ウリル、チエニル、ピロリル、ピリジル、ピラゾリル、ピリミジニル、イミダゾリル、イソオキサゾリル、オキサゾリル、オキサジアゾリル、ピラジニル、インドリル、チオフェン－２－イル、キノリル、ベンゾピラニル、イソチアゾリル、チアゾリル、チアジアゾール、インダゾール、ベンズイミダゾリル、チエノ［３，２－ｂ］チオフェン、トリアゾリル、トリアジニル、イミダゾ［１，２－ｂ］ピラゾリル、フロ［２，３－ｃ］ピリジニル、イミダゾ［１，２－ａ］ピリジニル、インダゾリル、ピロロ［２，３－ｃ］ピリジニル、ピロロ［３，２－ｃ］ピリジニル、ピラゾロ［３，４－ｃ］ピリジニル、チエノ［３，２－ｃ］ピリジニル、チエノ［２，３－ｃ］ピリジニル、チエノ［２，３－ｂ］ピリジニル、ベンゾチアゾリル、インドリル、インドリニル、インドリノニル、ジヒドロベンゾチオフェニル、ジヒドロベンゾフラニル、ベンゾフラン、クロマニル、チオクロマニル、テトラヒドロキノリニル、ジヒドロベンゾチアジン、ジヒドロベンゾキサニル、キノリニル、イソキノリニル、１，６－ナフチリジニル、ベンゾ［ｄｅ］イソキノリニル、ピリド［４，３－ｂ］［１，６］ナフチリジニル、チエノ［２，３－ｂ］ピラジニル、キナゾリニル、テトラゾロ［１，５－ａ］ピリジニル、［１，２，４］トリアゾロ［４，３－ａ］ピリジニル、イソインドリル、ピロロ［２，３－ｂ］ピリジニル、ピロロ［３，４－ｂ］ピリジニル、ピロロ［３，２－ｂ］ピリジニル、イミダゾ［５，４－ｂ］ピリジニル、ピロロ［１，２－ａ］ピリミジニル、テトラヒドロピロロ［１，２－ａ］ピリミジニル、３，４－ジヒドロ－２Ｈ－１Δ２－ピロロ［２，１－ｂ］ピリミジン、ジベンゾ［ｂ，ｄ］チオフェン、ピリジン－２－オン、フロ［３，２－ｃ］ピリジニル、フロ［２，３－ｃ］ピリジニル、１Ｈ－ピリド［３，４－ｂ］［１，４］チアジニル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、フロ［２，３－ｂ］ピリジニル、ベンゾチオフェニル、１，５－ナフチリジニル、フロ［３，２－ｂ］ピリジン、［１，２，４］トリアゾロ［１，５－ａ］ピリジニル、ベンゾ［１，２，３］トリアゾリル、イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジニル、［１，２，４］トリアゾロ［４，３－ｂ］ピリダジニル、ベンゾ［ｃ］［１，２，５］チアジアゾリル、ベンゾ［ｃ］［１，２，５］オキサジアゾール、１，３－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－オン、３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ピラゾロ［１，５－ｂ］［１，２］オキサジニル、４，５，６，７－テトラヒドロピラゾロ［１，５－ａ］ピリジニル、チアゾロ［５，４ ｄ］チアゾリル、イミダゾ［２，１－ｂ］［１，３，４］チアジアゾリル、チエノ［２，３－ｂ］ピロリル、３Ｈ－インドリル、及びそれらの誘導体が含まれるが、これらに限定されない。更に、２つの縮合環を含む場合、本明細書で定義されるアリール基は、完全飽和環と縮合した不飽和又は部分飽和環を有し得る。これらのヘテロアリール基の例示的な環系には、インドリニル、インドリノニル、ジヒドロベンゾチオフェニル、ジヒドロベンゾフラン、クロマニル、チオクロマニル、テトラヒドロキノリニル、ジヒドロベンゾチアジン、３，４－ジヒドロ－１Ｈ－イソキノリニル、２，３－ジヒドロベンゾフラン、インドリニル、インドリル、及びジヒドロベンゾキサニルが含まれる。
ハロゲン又は「ハロ」は、フッ素、塩素、臭素、又はヨウ素を意味する。
「アルキル」は、１～１２個の炭素原子を含む直鎖又は分岐の飽和炭化水素を意味する。（Ｃ１～Ｃ６）アルキル基の例には、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、イソプロピル、イソブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、イソペンチル、ネオペンチル、及びイソヘキシルが含まれるが、これらに限定されない。
「アルコキシ」は、鎖中に末端「Ｏ」を含む１～１２個の炭素原子を含む直鎖又は分岐の飽和炭化水素、例えば、－Ｏ（アルキル）を意味する。アルコキシ基の例には、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、ｔ－ブトキシ、又はペントキシ基が挙げられるが、これらに限定されない。
「アルケニル」は、２～１２個の炭素原子を含む直鎖又は分岐の不飽和炭化水素を意味する。「アルケニル」基は、鎖中に少なくとも１つの二重結合を含む。アルケニル基の二重結合は、別の不飽和基にコンジュゲートしていないか、又はコンジュゲートしている可能性がある。アルケニル基の例には、エテニル、プロペニル、ｎ－ブテニル、イソブテニル、ペンテニル、又はヘキセニルが含まれる。アルケニル基は、非置換であっても置換であってもよく、直鎖であっても分岐であってもよい。
「アルキニル」は、２～１２個の炭素原子を含む直鎖又は分岐の不飽和炭化水素を意味する。「アルキニル」基は、鎖中に少なくとも１つの三重結合を含む。アルケニル基の例には、エチニル、プロパルギル、ｎ－ブチニル、イソブチニル、ペンチニル、又はヘキシニルが含まれる。アルキニル基は、非置換であっても置換であってもよい。
「アルキレン」又は「アルキレニル」は、二価のアルキルラジカルを意味する。任意の上記の一価アルキル基は、アルキルからの第２の水素原子の引き抜きによるアルキレンであり得る。本明細書で定義されるように、アルキレンは、（Ｃ１～Ｃ６）アルキレンであってもよい。アルキレンは更に、（Ｃ１～Ｃ４）アルキレンであってもよい。典型的なアルキレン基には、－ＣＨ２－、－ＣＨ（ＣＨ３）－、－Ｃ（ＣＨ３）２－、－ＣＨ２ＣＨ２－、－ＣＨ２ＣＨ（ＣＨ３）－、－ＣＨ２Ｃ（ＣＨ３）２－、ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２－、－ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ－などが含まれるが、これらに限定されない。
「シクロアルキル」又は「カルボシクリル」は、３～１８個の炭素原子を含む単環式又は多環式飽和又は部分不飽和炭素環を意味し、ここで、環炭素間で共有される非局在化ｎ電子（芳香族性）は存在しない。シクロアルキル基の例には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプタニル、シクロオクタニル、ノルボラニル、ノルボレニル、ビシクロ［２．２．２］オクタニル、又はビシクロ［２．２．２］オクテニル及びそれらの誘導体が含まれるが、これらに限定されない。（Ｃ３～Ｃ８）シクロアルキルは、３～８個の炭素原子を含むシクロアルキル基である。シクロアルキル基は、縮合（例えば、デカリン）又は架橋（例えば、ノルボルナン（ｎｏｒｂｏｍａｎｅ））することができる。
「ヘテロシクリル」又は「ヘテロシクロアルキル」は、炭素と、酸素、窒素、又は硫黄（Ｏ、Ｎ、又はＳ）から選択される少なくとも１つのヘテロ原子とを含む、飽和又は部分飽和の単環式又は多環式環を意味し、ここで、環炭素又はヘテロ原子間で共有される非局在化ｎ電子（芳香族性）は存在しない。ヘテロシクロアルキル環構造は、１つ以上の置換基によって置換されていてもよい。置換基は、それ自体、任意選択により置換され得る。ヘテロシクリル環の例には、オキセタニル、アゼタジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、ピロリジニル、オキサゾリニル、オキサゾリジニル、チアゾリニル、チアゾリジニル、ピラニル、チオピラニル、テトラヒドロピラニル、ジオキサリニル、ピペリジニル、モルホリニル、チオモルホリニル、チオモルホリニルＳ－オキシド、チオモルホリニルＳ－ジオキシド、ピペラジニル、アゼピニル、オキセピニル、ジアゼピニル、トロパニル、オキサゾリジノニル、１，４－ジオキサニル、ジヒドロフラニル、１，３－ジオキソラニル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、ジチオラニル、及びホモトロパニルが含まれるが、これらに限定されない。
「ヒドロキシアルキル」は、１つ以上の－ＯＨ基で置換されたアルキル基を意味する。ヒドロキシアルキル基の例には、ＨＯ－ＣＨ２－、ＨＯ－ＣＨ２ＣＨ２－、及びＣＨ２－ＣＨ（ＯＨ）－が含まれる。
「ハロアルキル」は、１つ以上のハロゲンで置換されたアルキル基を意味する。ハロアルキル基の例には、トリフルオロメチル、ジフルオロメチル、ペンタフルオロエチル、トリクロロメチルなどが含まれるが、これらに限定されない。
「ハロアルコキシ」は、１つ以上のハロゲンで置換されたアルコキシ基を意味する。ハロアルキル基の例には、トリフルオロメトキシ、ジフルオロメトキシ、ペンタフルオロエトキシ、トリクロロメトキシなどが含まれるが、これらに限定されない。
「シアノ」は、三重結合によって窒素原子に結合した炭素原子を有する置換基、例えば、Ｃ≡Ｎを意味する。
「アミノ」は、少なくとも１個の窒素原子を含む置換基（例えば、ＮＨ２）を意味する。
「アルキルアミノ」は、水素の１つがアルキル基で置換されたアミノ基又はＮＨ２基、例えば、－ＮＨ（アルキル）を意味する。アルキルアミノ基の例には、メチルアミノ（例えば、－ＮＨ（ＣＨ３））、エチルアミノ、プロピルアミノ、イソプロピルアミノ、ｎ－ブチルアミノ、ｓｅｃ－ブチルアミノ、ｔｅｒｔ－ブチルアミノなどが含まれるが、これらに限定されない。
「ジアルキルアミノ」は、両方の水素がアルキル基で置換されたアミノ基又はＮＨ２基、例えば、－Ｎ（アルキル）２を意味する。アミノ基上のアルキル基は、同一又は異なるアルキル基である。ジアルキルアミノ基の例には、ジメチルアミノ（例えば、－Ｎ（ＣＨ３）２）、ジエチルアミノ、ジプロピルアミノ、ジイソプロピルアミノ、ジ－ｎ－ブチルアミノ、ジ－ｓｅｃ－ブチルアミノ、ジ－ｔｅｒｔ－ブチルアミノ、メチル（エチル）アミノ、メチル（ブチルアミノ）などが含まれるが、これらに限定されない。
「スピロシクロアルキル」又は「スピロシクリル」は、両方の環が単一の原子を介して結合した、炭素生成二環式環系を意味する。環は、サイズ及び性質が異なっていてもよく、サイズ及び性質が同一であってもよい。例には、スピロペンタン、スピロヘキサン、スピロヘプタン、スピロオクタン、スピロノナン、又はスピロデカンが含まれる。スピロ環の一方又は両方の環は、別の炭素環、複素環、芳香環、又は複素芳香環に縮合することができる。（Ｃ３～Ｃ１２）スピロシクロアルキルは、３～１２個の炭素原子を含むスピロ環である。
「スピロヘテロシクロアルキル」又は「スピロヘテロシクリル」は、環の少なくとも１つがヘテロ環であるスピロ環を意味し、炭素原子の１つ以上がヘテロ原子で置換され得る（例えば、環の少なくとも１つにおいて、炭素原子の１つ以上がヘテロ原子で置換され得る）。スピロヘテロ環の一方又は両方の環は、別の炭素環、複素環、芳香環、又は複素芳香環に縮合することができる。
「ＺＢＴＢ３２」という用語は、ジンクフィンガー及びＢＴＢドメイン含有３２を指し、Ｒｏｇ、ＦＡＸＦ、ＦＡＺＦ、ＴＺＦＰ、ＺＮＦ５３８、又はジンクフィンガー及びＢＴＢドメイン含有タンパク質３２としても知られる。ＧｅｎＢａｎｋ受託番号：ＮＭ＿００１３１６９０２．２、ＮＭ＿００１３１６９０３．２、及びＮＭ＿０１４３８３．３は、例示的なＺＢＴＢ３２ヌクレオチド配列を提供する。ＧｅｎＢａｎｋ受託番号：ＮＰ＿０５５１９８．１、ＮＰ＿００１３０３８３１．１、及びＮＰ＿００１３０３８３２．１は、例示的なＺＢＴＢ３２アミノ酸配列を提供する。
本明細書で使用される「ＩＬ－１５受容体分子」という用語は、全長の天然に存在するＩＬ－１５受容体アルファ（ＩＬ－１５Ｒａ）（例えば、哺乳動物ＩＬ－１５Ｒａ、例えば、ヒトＩＬ－１５Ｒａ、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＡＡＩ２１１４１．１）、ＩＬ－１５Ｒａの機能的フラグメント、又はＩＬ－１５Ｒａの天然に存在する野生型ポリペプチド又はそのフラグメントと少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％の配列同一性を有する活性変異体を指す。いくつかの実施形態において、変異体は、野生型ポリペプチド又はそれをコードする核酸の誘導体、例えば変異体である。いくつかの実施形態において、ＩＬ－１５Ｒａ変異体、例えばＩＬ－１５Ｒａの活性変異体は、野生型ＩＬ－１５Ｒａポリペプチドの少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％の活性を有する。いくつかの実施形態において、ＩＬ－１５Ｒａ分子は、１つ以上の翻訳後修飾を含む。本明細書で使用される場合、ＩＬ－１５Ｒ及びＩＬ－１５Ｒａという用語は互換的である。
本明細書で使用される「ＩＬ－１５分子」という用語は、全長の天然に存在するＩＬ－１５（例えば、哺乳動物ＩＬ－１５、例えば、ヒトＩＬ－１５、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＡＡＩ００９６３．１）、ＩＬ－１５の機能的フラグメント、又はＩＬ－１５の天然に存在する野生型ポリペプチド又はそのフラグメントと少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％の配列同一性を有する活性変異体を指す。いくつかの実施形態において、変異体は、野生型ポリペプチド又はそれをコードする核酸の誘導体、例えば変異体である。いくつかの実施形態において、ＩＬ－１５変異体、例えばＩＬ－１５の活性変異体は、野生型ＩＬ－１５ポリペプチドの少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％の活性を有する。いくつかの実施形態において、ＩＬ－１５分子は、１つ以上の翻訳後修飾を含む。
本明細書で使用される場合、サイトカイン分子の「活性変異体」は、少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％の、例えば当技術分野で認識されているアッセイにより測定されるような、野生型サイトカインの活性を有するサイトカイン変異体を指す。
本明細書の組成物及び方法の様々な実施形態を、以下で更に詳細に説明する。更なる定義は、明細書全体に記載されている。
ＺＢＴＢ３２
ジンクフィンガー及びＢＴＢドメイン含有タンパク質３２は、ヒトではＺＢＴＢ３２遺伝子によってコードされるタンパク質である。ＺＢＴＢ３２タンパク質は、ファンコニ貧血ジンクフィンガータンパク質（ＦＡＺＦ）、精巣ジンクフィンガータンパク質（ＴＺＦＰ）、ＦＡＮＣＣ相互作用タンパク質（ＦＡＸＰ）、ジンクフィンガータンパク質５３８（ＺＮＦ５３８）、ＧＡＴＡ３の転写抑制因子（ＲＯＧ）、及び前骨髄球性白血病ジンクフィンガー及びｚｂｔｂ１６（ＰＬＺＦ）様ジンクフィンガータンパク質（ＰＬＺＰ）としても知られている。これには、Ｎ末端ＢＴＢ／ＰＯＺドメイン（ＩＰＲ０００２１０）又はＳＫＰ１／ＢＴＢ／ＰＯＺドメイン（ＩＰＲ０１１３３３）、及び３つのＣ末端ジンクフィンガー、Ｚｎｆ＿Ｃ２Ｈ２＿ｓｆ．（ＩＰＲ０３６２３６）、Ｚｎｆ＿Ｃ２Ｈ２＿ｔｙｐｅドメイン（ＩＰＲ０１３０８７）、Ｚｎｆ＿ＲＩＮＧ／ＦＹＶＥ／ＰＨＤドメイン（ＩＰＲ０１３０８３）、それに続く推定ＵＢＺ４ドメイン（Ｒｉｚｚｏ ｅｔ ａｌ．（２０１４）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ５３（３７）：５８９５－９０６）が含まれる。これは、ポックスウイルス及びジンクフィンガー（ＰＯＺ）及びＫｒｕｐｐｅｌ（ＰＯＫ）ファミリーのタンパク質のメンバーであり、免疫細胞の腫瘍形成又は免疫細胞の発達のいずれかに関与する複数のスクリーニングで同定された（Ｈｏａｔｌｉｎ ｅｔ ａｌ．（１９９９）Ｂｌｏｏｄ．９４（１１）：３７３７－４７）。
ＺＢＴＢ３２タンパク質は転写抑制因子として機能し得る。例えば、ＺＢＴＢ３２タンパク質は、ヒストン修飾酵素をクロマチンに動員して遺伝子活性化に影響を与えることができる（Ｙｏｏｎ ｅｔ ａｌ．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．１８９（５）：２３９３－４０３）。ＺＢＴＢ３２は、核内受容体補助抑制因子（ＮＣｏＲ）及びヒストン脱アセチル化酵素（ＨＤＡＣ）などの補助抑制因子をその標的遺伝子に動員し、抑制的クロマチン状態を誘導し、Ｂｌｉｍｐ－１などの他のタンパク質と協調して作用して遺伝子の転写を抑制することもできる。
ＺＢＴＢ３２タンパク質は、例えば、ファンコニ貧血相補群Ｃ（Ｆａｎｃｃ）、チオレドキシン相互作用タンパク質（Ｔｘｎｉｐ）、ビタミンＤ３上方制御タンパク質１（ＶＤＵＰ１）、ジンクフィンガー及びＢＴＢドメイン含有タンパク質１６（Ｚｂｔｂ１６）、ジンクフィンガー肘関連プロリンドメインタンパク質２（Ｚｐｏ２）、及びＧＡＴＡ結合タンパク質２（ＧＡＴＡ２）及び（ＧＡＴＡ３）を含む、多くのタンパク質と相互作用できる（Ｈｏａｔｌｉｎ ｅｔ ａｌ．（１９９９）Ｂｌｏｏｄ．９４（１１）：３７３７－４７；Ｔｓｕｚｕｋｉ ｅｔ ａｌ．（２００２）Ｂｌｏｏｄ．９９：３４０４－３４１０；Ｍｉａｗ ｅｔ ａｌ（２０００）Ｉｍｍｕｎｉｔｙ．１２：３２３－３３３）。
ＺＢＴＢ３２遺伝子は、活性化されるとＴ細胞及びＢ細胞で発現するが、精巣でも高度に発現する。ＺＢＴＢ３２の発現は、ナチュラルキラー細胞の炎症性サイトカインによって誘導される（Ｂｅａｕｌｉｅｕ ｅｔ ａｌ．（２０１４）．Ｎａｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５：５４６－５５５）。ＺＢＴＢ３２は、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）において高度に発現し、ＭＨＣクラスＩＩトランス活性化因子（ＣＩＩＴＡ）に結合してその発現を抑制し、その結果、ＭＨＣＩＩ遺伝子に結合してその発現を抑制するようである（Ｙｏｏｎ ｅｔ ａｌ．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ（２０１２）．１８９：２３９３－２４０３）。Ｚｐｏ２は、Ｚｂｔｂ３２媒介性ＧＡＴＡ３抑制によって侵襲性乳癌を駆動する（Ｓｈａｈｉ ｅｔ ａｌ．（２０１７）．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ Ｕ Ｓ Ａ．１１４（１２）：３１６９－３１７４）。ＺＢＴＢ３２は、ＤＮＡメチル化相関ネットワークにおける候補バイオマーカーの生存分析に基づいて結腸癌でも同定されている（Ｚｈａｎｇ ｅｔ ａｌ．（２０１５）．ＰＬｏＳ Ｏｎｅ．１０（３）：ｅ０１２０３６１）。Ｚｂｔｂ３２の発現は、シスプラチンへの曝露後に上方制御される（Ｓｏｕｒｉｓｓｅａｕ ｅｔ ａｌ．（２０１６）．Ｃｅｌｌ Ｃｙｃｌｅ．１５（２）：２９５－３０２）。
本明細書に開示される組成物、方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、ＺＢＴＢ３２タンパク質は、配列番号２２６５、２２６７、又は２２６９のアミノ酸配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、ＺＢＴＢ３２タンパク質は、配列番号２２６５、２２６７、又は２２６９のアミノ酸配列を含む。
本明細書に開示される組成物、方法又は使用のいずれかのいくつかの実施形態において、ＺＢＴＢ３２タンパク質は、配列番号２２６６、２２６８、又は２２７０のヌクレオチド配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、又は９９％の配列同一性を有するヌクレオチド配列によってコードされる。いくつかの実施形態において、ＺＢＴＢ３２タンパク質は、配列番号２２６６、２２６８、又は２２７０のヌクレオチド配列によってコードされる。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載される免疫エフェクター細胞、例えばＣＡＲ発現免疫エフェクター細胞は、配列番号２２６６、２２６８、又は２２７０の配列を含む、核酸配列、例えば導入遺伝子を含む。
例示的なＺＢＴＢ３２アミノ酸及びヌクレオチド配列
アイソフォーム１（転写変異体１）
アミノ酸：ＮＰ＿０５５１９８．１（配列番号２２６５）
Figure 2023529211000001
 コード配列：ＮＭ＿０１４３８３．３（配列番号２２６６）
Figure 2023529211000002
 アイソフォーム２（転写変異体２）
アミノ酸：ＮＰ＿００１３０３８３１．１（配列番号２２６７）
Figure 2023529211000003
 コード配列：ＮＭ＿００１３１６９０２．２（配列番号２２６８）
Figure 2023529211000004
 アイソフォーム３（転写変異体３）
アミノ酸：ＮＰ＿００１３０３８３２．１（配列番号２２６９）
Figure 2023529211000005
 コード配列：ＮＭ＿００１３１６９０３．２（配列番号２２７０）
Figure 2023529211000006
遺伝子編集系
本開示によると、遺伝子編集系をＺＢＴＢ３２阻害剤として使用することができる。ＺＢＴＢ３２遺伝子を標的とする遺伝子編集系の１つ以上の成分をコードする核酸の使用も、本開示によって企図される。
ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９遺伝子編集系
天然に存在するＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ系は、配列決定された真正細菌ゲノムの約４０％及び配列決定された古細菌の９０％に見られる。Ｇｒｉｓｓａ ｅｔ ａｌ．（２００７）ＢＭＣ Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ ８：１７２。この系は、プラスミド及びファージなどの外来遺伝的要素に対する抵抗性を付与する一種の原核生物免疫系であり、後天性免疫の型を提供する。Ｂａｒｒａｎｇｏｕ ｅｔ ａｌ．（２００７）Ｓｃｉｅｎｃｅ ３１５：１７０９－１７１２；Ｍａｒｒａｇｉｎｉ ｅｔ ａｌ．（２００８）Ｓｃｉｅｎｃｅ ３２２：１８４３－１８４５。
ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ系は、マウス又は霊長類などの真核生物における遺伝子編集（特定の遺伝子のサイレンシング、増強又は変更）に使用するために改変されている。Ｗｉｅｄｅｎｈｅｆｔ ｅｔ ａｌ．（２０１２）Ｎａｔｕｒｅ ４８２：３３１－８。これは、例えば、特別に設計したＣＲＩＳＰＲ及び１つ以上の適切なＣａｓを含むプラスミドを真核細胞に導入することにより達成される。
ＣＲＩＳＰＲ座位と呼ばれることもあるＣＲＩＳＰＲ配列は、交互の反復及びスペーサーを含む。天然に存在するＣＲＩＳＰＲにおいて、スペーサーは、通常、細菌に対して外来であるプラスミド又はファージ配列などの配列を含み、ＺＢＴＢ３２遺伝子を標的とする例示的なＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ系において、スペーサーは、ＺＢＴＢ３２遺伝子配列又はその調節エレメントの配列に由来する。
ＣＲＩＳＰＲ座位からのＲＮＡは、構成的に発現され、小ＲＮＡへと処理される。これらは、反復配列が隣接したスペーサーを含む。ＲＮＡは、他のＣａｓタンパク質をＲＮＡ又はＤＮＡレベルで外来性遺伝的要素に対して発現抑制するように導く。Ｈｏｒｖａｔｈ ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ｓｃｉｅｎｃｅ ３２７：１６７－１７０；Ｍａｋａｒｏｖａ ｅｔ ａｌ．（２００６）Ｂｉｏｌｏｇｙ Ｄｉｒｅｃｔ １：７。スペーサーは、そのため、ｓｉＲＮＡに類似して、ＲＮＡ分子のテンプレートとしての役割を果たす。Ｐｅｎｎｉｓｉ（２０１３）Ｓｃｉｅｎｃｅ ３４１：８３３－８３６。
多くの異なるタイプの細菌で自然に生じるように、ＣＲＩＳＰＲの正確な配置及び構造、Ｃａｓ遺伝子の機能及び数及びそれらの産物は、種毎にいくぶん異なる。Ｈａｆｔ ｅｔ ａｌ．（２００５）ＰＬｏＳ Ｃｏｍｐｕｔ．Ｂｉｏｌ．１：ｅ６０；Ｋｕｎｉｎ ｅｔ ａｌ．（２００７）Ｇｅｎｏｍｅ Ｂｉｏｌ．８：Ｒ６１；Ｍｏｊｉｃａ ｅｔ ａｌ．（２００５）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｅｖｏｌ．６０：１７４－１８２；Ｂｏｌｏｔｉｎ ｅｔ ａｌ．（２００５）Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．１５１：２５５１－２５６１；Ｐｏｕｒｃｅｌ ｅｔ ａｌ．（２００５）Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．１５１：６５３－６６３；及びＳｔｅｒｎ ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ｔｒｅｎｄｓ．Ｇｅｎｅｔ．２８：３３５－３４０。例えば、Ｃｓｅ（Ｃａｓサブタイプ、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ））タンパク質（例えば、ＣａｓＡ）は、機能的複合体、Ｃａｓｃａｄｅを形成し、これは、ＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ転写物を、Ｃａｓｃａｄｅが保持するスペーサー－反復単位に処理する。Ｂｒｏｕｎｓ ｅｔ ａｌ．（２００８）Ｓｃｉｅｎｃｅ ３２１：９６０－９６４。他の原核生物において、Ｃａｓ６は、ＣＲＩＳＰＲ転写物を加工する。大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）におけるＣＲＩＳＰＲベースのファージ不活性化は、Ｃａｓｃａｄｅ及びＣａｓ３を必要とするが、Ｃａｓ１又はＣａｓ２を必要としない。パイロコッカス・フリオサス（Ｐｙｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆｕｒｉｏｓｕｓ）及び他の原核生物におけるＣｍｒ（Ｃａｓ ＲＡＭＰモジュール）タンパク質は、小ＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡと機能的複合体を形成し、これは、相補性標的ＲＮＡを認識し、切断する。より単純なＣＲＩＳＰＲ系は、二重らせんの各鎖のための２活性切断部位を有するヌクレアーゼであるタンパク質Ｃａｓ９に依存する。Ｃａｓ９と修飾ＣＲＩＳＰＲ遺伝子座ＲＮＡとの組み合わせを遺伝子編集のための系に使用できる。Ｐｅｎｎｉｓｉ（２０１３）Ｓｃｉｅｎｃｅ ３４１：８３３－８３６。
したがって、改変、例えば、１つ以上の核酸、ＺＢＴＢ３２遺伝子、又はＺＢＴＢ３２遺伝子の遺伝子調節エレメントの欠失、又はＺＢＴＢ３２遺伝子の機能の発現を低下させる中途停止の導入のためにＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ系を使用することができる。或いは、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ系をＲＮＡ干渉のように使用し、ＺＢＴＢ３２遺伝子を可逆性にオフにすることができる。哺乳動物細胞において、例えば、ＲＮＡは、Ｃａｓタンパク質をＺＢＴＢ３２遺伝子のプロモーターに誘導し、ＲＮＡポリメラーゼを立体的に遮断することができる。
真核生物細胞における遺伝子編集のためのＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ系は、典型的には、（１）標的化配列（ゲノムＤＮＡ標的配列にハイブリダイズすることができる）及びＣａｓ、例えばＣａｓ９酵素と結合することができる配列を含むガイドＲＮＡ分子（ｇＲＮＡ）、及び（２）Ｃａｓ、例えばＣａｓ９、タンパク質を含む。標的化配列及びＣａｓ、例えばＣａｓ９酵素に結合することができる配列は、同じ又は異なる分子上に配置され得る。異なる分子上に配置されている場合、それぞれは、例えば、ハイブリダイゼーションにより、分子が会合することを可能にするハイブリダイゼーションドメインを含む。
本開示の例示的なｇＲＮＡ分子は、配列（ここで、「ｎ」は、標的化配列（例えば、本明細書、例えば表３に記載のもの）の残基を指し、１５～２５ヌクレオチドからなり得、例えば２０ヌクレオチドからなる）：
ｎｎｎｎｎｎｎｎｎｎｎｎｎｎｎｎｎｎｎｎＧＵＵＵＵＡＧＡＧＣＵＡＵＧＣＵＧＵＵＵＵＧ（配列番号３０２２）；
及び次の配列を有する第２の核酸配列：
ＡＡＣＵＵＡＣＣＡＡＧＧＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＡＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣ
であって、任意選択により、３’末端に１、２、３、４、５、６又は７（例えば、４又は７、例えば７）の更なるＵヌクレオチドを有する配列（配列番号３０２４）を有する第１の核酸を含む、例えばそれからなる。
代わりに、第２の核酸分子は、上記配列の断片からなり得、ここで、そのような断片は、第１の核酸とハイブリダイズできる。このような第２の核酸分子の例は、
ＡＡＣＡＧＣＡＵＡＧＣＡＡＧＵＵＡＡＡＡＵＡＡＧＧＣＵＡＧＵＣＣＧＵＵＡＵＣＡＡＣＵＵＧＡＡＡＡＡＧＵＧＧＣＡＣＣＧＡＧＵＣＧＧＵＧＣ
であり、任意選択により、３’末端に１、２、３、４、５、６又は７（例えば、４又は７、例えば７）の更なるＵヌクレオチドを有する（配列番号３０２６）。
本開示の別の例示的なｇＲＮＡ分子は、配列（ここで、「ｎ」は、標的化配列（例えば、本明細書、例えば、表３に記載のもの）の残基を指し、１５～２５ヌクレオチドからなってよく、例えば、２０ヌクレオチドからなる）：
Figure 2023529211000007
 を有する第１の核酸を含み、例えば、それからなり、任意選択により、３’末端に１、２、３、４、５、６、又は７（例えば４又は７、例えば４）の更なるＵヌクレオチドを有する。当技術分野で公知の技術、例えば、米国特許出願公開第２０１４００６８７９７号明細書、国際公開第２０１５／０４８５７７号パンフレット、及びＣｏｎｇ（２０１３）Ｓｃｉｅｎｃｅ ３３９：８１９－８２３に記載のものを使用して、ＺＢＴＢ３２遺伝子を阻害する人工ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ系を生成することができる。例えば、Ｔｓａｉ（２０１４）Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，３２：６ ５６９－５７６、米国特許第８，８７１，４４５号明細書；同第８，８６５，４０６号明細書；同第８，７９５，９６５号明細書；同第８，７７１，９４５号明細書；及び同第８，６９７，３５９号明細書（これらの内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されるものなどの、ＺＢＴＢ３２遺伝子を阻害する当技術分野において公知の他の人工ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ系も生成することができる。ＺＢＴＢ３２遺伝子を阻害するこのような系は、例えば、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ系を、標的遺伝子、例えば、ＺＢＴＢ３２遺伝子の配列とハイブリダイズする標的配列を含むｇＲＮＡ分子を含むように操作することにより、生成され得る。実施形態において、ｇＲＮＡは、標的遺伝子、例えば、ＺＢＴＢ３２遺伝子の、１５～２５ヌクレオチド、例えば、２０ヌクレオチドと完全に相補性である標的配列を含む。実施形態において、標的遺伝子、例えば、ＺＢＴＢ３２遺伝子の１５～２５ヌクレオチド、例えば、２０ヌクレオチドは、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ系（例えば、ここで、系は、Ｓ．ピオゲネス（Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ）Ｃａｓ９タンパク質を含み、ＰＡＭ配列は、ＮＧＧを含み、ここで、ＮはＡ、Ｔ、Ｇ又はＣのいずれかであり得る）のＣａｓタンパク質により認識されるプロトスペーサー隣接モチーフ（ＰＡＭ）配列の５’にすぐ配置される。
一実施形態において、外来ＤＮＡを、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ系、例えばＣＡＲ（例えば、本明細書に記載のもの）をコードするＤＮＡと共に細胞に導入することができ、外来ＤＮＡの配列及び染色体配列に応じて、この過程は、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ系により標的化される部位又はその近辺でのＣＡＲ（例えば、本明細書に記載のもの）をコードするＤＮＡを組み込むのに使用され得る。本明細書に記載されるように、しかし、理論に拘束されることなく、例において、そのような組み込みは、ＣＡＲの発現及びＺＢＴＢ３２遺伝子の破壊をもたらし得る。このような外来ＤＮＡ分子は、本明細書において「テンプレートＤＮＡ」と称される。実施形態において、テンプレートＤＮＡは、目的の１つ又は複数の分子をコードする（例えば、本明細書に記載のＣＡＲをコードする）テンプレートＤＮＡの核酸に対するホモロジーアーム５’、３’又は５’及び３’の両方を更に含み、ここで、前記ホモロジーアームは、標的配列に隣接するゲノムＤＮＡ配列に相補的である。
一実施形態において、本開示のＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ系は、Ｃａｓ９、例えば、Ｓ．ピオゲネス（Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ）Ｃａｓ９、及びＺＢＴＢ３２遺伝子の配列とハイブリダイズする標的配列を含むｇＲＮＡを含む。一実施形態において、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ系は、ＺＢＴＢ３２遺伝子に特異的なｇＲＮＡをコードする核酸、及びＣａｓタンパク質、例えば、Ｃａｓ９、例えば、Ｓ．ピオゲネス（Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ）Ｃａｓ９をコードする核酸を含む。一実施形態において、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ系は、ＺＢＴＢ３２遺伝子に特異的なｇＲＮＡ、及びＣａｓタンパク質、例えば、Ｃａｓ９、例えば、Ｓ．ピオゲネス（Ｓ．ｐｙｏｇｅｎｅｓ）Ｃａｓ９をコードする核酸を含む。
ＴＡＬＥＮ遺伝子編集系
ＴＡＬＥＮは、ＴＡＬエフェクターＤＮＡ結合ドメインとＤＮＡ切断ドメインを融合することにより人工的に産生される。転写アクティベーター様効果（ＴＡＬＥ）は、ＨＬＡ又はＴＣＲ遺伝子の部分を含む、任意の所望のＤＮＡ配列に結合するように操作できる。操作されたＴＡＬＥとＤＮＡ開裂ドメインを合わせることにより、ＨＬＡ又はＴＣＲ配列を含む、任意の所望のＤＮＡ配列に特異的な制限酵素を産生できる。次いで、これらを細胞に導入でき、そこで、それらは、ゲノム編集のために使用され得る。Ｂｏｃｈ（２０１１）Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ．２９：１３５－６；及びＢｏｃｈ ｅｔ ａｌ．（２００９）Ｓｃｉｅｎｃｅ ３２６：１５０９－１２；Ｍｏｓｃｏｕ ｅｔ ａｌ．（２００９）Ｓｃｉｅｎｃｅ ３２６：３５０１。
ＴＡＬＥは、ザントモナス細菌により分泌されるタンパク質である。ＤＮＡ結合ドメインは、１２番目及び１３番目のアミノ酸以外、反復した高度に保存的な３３～３４アミノ酸配列を含む。これらの２箇所は、高度に可変であり、特定のヌクレオチド認識と強い相関を示す。それらは、従って、所望のＤＮＡ配列と結合するように操作され得る。
ＴＡＬＥＮを産生するために、ＴＡＬＥタンパク質を例えば野生型又は変異ＦｏｋＩエンドヌクレアーゼであるヌクレアーゼ（Ｎ）と融合する。ＴＡＬＥＮにおいて使用するために、ＦｏｋＩについていくつかの変異が行われており、これらは、例えば、切断特異性又は活性の改善を含む。Ｃｅｒｍａｋ ｅｔ ａｌ．（２０１１）Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．３９：ｅ８２；Ｍｉｌｌｅｒ ｅｔ ａｌ．（２０１１）Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ．２９：１４３－８；Ｈｏｃｋｅｍｅｙｅｒ ｅｔ ａｌ．（２０１１）Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ．２９：７３１－７３４；Ｗｏｏｄ ｅｔ ａｌ．（２０１１）Ｓｃｉｅｎｃｅ ３３３：３０７；Ｄｏｙｏｎ ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｔｈｏｄｓ ８：７４－７９；Ｓｚｃｚｅｐｅｋ ｅｔ ａｌ．（２００７）Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ．２５：７８６－７９３；及びＧｕｏ ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２００：９６。
ＦｏｋＩドメインは、二量体として機能し、適切な配向及び間隔を有する標的ゲノムにおける部位のための独特なＤＮＡ結合ドメインを有する２つの構築物を必要とする。ＴＡＬＥ ＤＮＡ結合ドメインとＦｏｋＩ切断ドメインとの間のアミノ酸残基数及び２の個々のＴＡＬＥＮ結合部位の間の塩基数の両方が高レベルの活性を達成するために重要なパラメータであると考えられる。Ｍｉｌｌｅｒ ｅｔ ａｌ．（２０１１）Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ．２９：１４３－８。
ＺＢＴＢ３２遺伝子に特異的なＴＡＬＥＮを細胞内で使用して、二重鎖切断（ＤＳＢ）を産生できる。変異は、修復機構が切断を非相同末端結合により不適切に修復する場合、切断部位に導入できる。例えば、不適切な修復は、フレームシフト変異を導入し得る。代わりに、外来ＤＮＡを、ＴＡＬＥＮ、例えばＣＡＲ（例えば、本明細書に記載のもの）をコードするＤＮＡと共に細胞に導入することができ、外来ＤＮＡの配列及び染色体配列に応じて、この過程は、ＴＡＬＥＮにより標的化される部位又はその近辺でのＣＡＲ（例えば、本明細書に記載のもの）をコードするＤＮＡを組み込むのに使用され得る。本明細書に記載されるように、しかし、理論に拘束されることなく、例において、そのような組み込みはＣＡＲの発現及びＺＢＴＢ３２遺伝子の破壊をもたらし得る。このような外来ＤＮＡ分子は、本明細書において「テンプレートＤＮＡ」と称される。実施形態において、テンプレートＤＮＡは、目的の１つ又は複数の分子をコードする（例えば、本明細書に記載のＣＡＲをコードする）テンプレートＤＮＡの核酸に対するホモロジーアーム５’、３’又は５’及び３’の両方を更に含み、ここで、前記ホモロジーアームは、標的配列に隣接するゲノムＤＮＡ配列に相補的である。
ＺＢＴＢ３２遺伝子における配列に特異的なＴＡＬＥＮは、モジュラー成分を使用する種々のスキームを含む、当技術分野において公知の任意の方法を使用して構築できる。Ｚｈａｎｇ ｅｔ ａｌ．（２０１１）Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈ．２９：１４９－５３；Ｇｅｉｂｌｅｒ ｅｔ ａｌ．（２０１１）ＰＬｏＳ ＯＮＥ ６：ｅ１９５０９；米国特許第８，４２０，７８２号明細書；米国特許第８，４７０，９７３号明細書、その内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
ジンクフィンガーヌクレアーゼ
「ＺＦＮ」又は「ジンクフィンガーヌクレアーゼ」とは、所望の核酸配列、例えばＺＢＴＢ３２遺伝子を改変する、例えば１つ以上の核酸を欠失させるために使用できる人工ヌクレアーゼであるジンクフィンガーヌクレアーゼを指す。
ＴＡＬＥＮと同様、ＺＦＮは、ＤＮＡ結合ドメインに融合したＦｏｋＩヌクレアーゼドメイン（又はその誘導体）を含む。ＺＦＮの場合、ＤＮＡ結合ドメインは、１つ以上のジンクフィンガーを含む。Ｃａｒｒｏｌｌ ｅｔ ａｌ．（２０１１）Ｇｅｎｅｔｉｃｓ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｏｆ Ａｍｅｒｉｃａ １８８：７７３－７８２；及びＫｉｍ ｅｔ ａｌ．（１９９６）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９３：１１５６－１１６０。
ジンクフィンガーは、１つ以上の亜鉛イオンにより安定化される小タンパク質構造モチーフである。ジンクフィンガーは、例えば、Ｃｙｓ２Ｈｉｓ２を含むことができ、約３ｂｐ配列を認識できる。既知特異性の種々のジンクフィンガーを合わせて、約６ｂｐ、９ｂｐ、１２ｂｐ、１５ｂｐ又は１８ｂｐ配列を認識する多フィンガーポリペプチドを産生できる。ファージディスプレイ、酵母ワンハイブリッド系、細菌ワンハイブリッド及びツーハイブリッド系及び哺乳動物細胞を含む、特異的配列を認識するジンクフィンガー（及びそれらの組み合わせ）を産生するための種々の選択及びモジュラーアセンブリー技術が利用可能である。
ＴＡＬＥＮと同様、ＺＦＮは、ＤＮＡを切断するために二量体化しなければならない。そのため、ＺＦＮの対が非パリンドロームＤＮＡ部位を標的とすることが必要である。２の各々のＺＦＮは、そのヌクレアーゼが適切に離れて、ＤＮＡの逆の鎖に結合しなければならない。Ｂｉｔｉｎａｉｔｅ ｅｔ ａｌ．（１９９８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９５：１０５７０－５。
またＴＡＬＥＮと同様、ＺＦＮは、ＤＮＡに二重鎖切断を創製でき、これは、不適切に修復された場合にフレームシフト変異を創製でき、細胞におけるＺＢＴＢ３２遺伝子の発現の減少に至る。ＺＦＮは、ＺＢＴＢ３２遺伝子を変異させるため、又は標的配列若しくはその近辺の部位にＣＡＲをコードする核酸を導入するために相同組換えと共に使用することができる。上述のように、ＣＡＲをコードする核酸は、テンプレートＤＮＡの一部としても導入され得る。実施形態において、テンプレートＤＮＡは、目的の１つ又は複数の分子をコードする（例えば、本明細書に記載のＣＡＲをコードする）テンプレートＤＮＡの核酸に対するホモロジーアーム５’、３’又は５’及び３’の両方を更に含み、ここで、前記ホモロジーアームは、標的配列に隣接するゲノムＤＮＡ配列に相補的である。
ＺＢＴＢ３２遺伝子における配列に特異的なＺＦＮは、当技術分野において公知の任意の方法を使用して構築できる。例えば、その内容が全体として参照により本明細書に組み込まれるＰｒｏｖａｓｉ（２０１１）Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄ．１８：８０７－８１５；Ｔｏｒｉｋａｉ（２０１３）Ｂｌｏｏｄ １２２：１３４１－１３４９；Ｃａｔｈｏｍｅｎ ｅｔ ａｌ．（２００８）Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．１６：１２００－７；及びＧｕｏ ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４００：９６；米国特許出願公開第２０１１／０１５８９５７号明細書；及び米国特許出願公開第２０１２／００６０２３０号明細書を参照されたい。実施形態において、ＺＦＮ遺伝子編集系は、ＺＦＮ遺伝子編集系、例えばＺＢＴＢ３２遺伝子を標的とするＺＦＮ遺伝子編集系の１つ以上の成分をコードする核酸も含み得る。
理論に拘束されることを望まないが、ＺＢＴＢ３２遺伝子を標的とする遺伝子編集系（例えば、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ遺伝子編集系）は、例えば、切断型ＺＢＴＢ３２遺伝子の発現をもたらす編集事象を引き起こすことによって、ＺＢＴＢ３２遺伝子の１つ以上の機能を調節（例えば、阻害）することを可能にし得ると考えられる。また、理論に拘束されるものではないが、そのような切断型ＺＢＴＢ３２遺伝子産物は、ＺＢＴＢ３２遺伝子産物の１つ以上の機能（例えば、足場機能）を保存する一方で、ＺＢＴＢ３２遺伝子産物の１つ以上の他の機能（例えば、触媒機能）を阻害し得、そのため、好ましい場合がある。ＺＢＴＢ３２遺伝子の後期エクソン又はイントロンを標的とする遺伝子編集系は、この点で、特に好ましいものであり得る。一態様において、本開示の遺伝子編集系は、ＺＢＴＢ３２遺伝子の後期エクソン又はイントロンを標的とする。一態様において、本開示の遺伝子編集系は、エクソン又はエクソン８の下流のイントロンを標的とする。一態様において、遺伝子編集系は、ＺＢＴＢ３２遺伝子のエクソン８又はエクソン９、例えばエクソン９を標的とする。
理論に拘束されるものではないが、他の実施形態において、ＺＢＴＢ３２遺伝子の初期エクソン又はイントロンを標的とすること、例えば、遺伝子産物の発現をもたらさないか、又は完全に非機能性の遺伝子産物の発現をもたらす、標的遺伝子に未成熟終止コドンを導入することも好ましい場合がある。ＺＢＴＢ３２遺伝子の初期エクソン又はイントロンを標的とする遺伝子編集系は、この点で、特に好ましいものであり得る。一態様において、本開示の遺伝子編集系は、ＺＢＴＢ３２遺伝子の初期エクソン又はイントロンを標的とする。一態様において、本開示の遺伝子編集系は、エクソン、又はエクソン４の上流のイントロンを標的とする。実施形態において、遺伝子編集系は、ＺＢＴＢ３２遺伝子のエクソン１、エクソン２、又はエクソン３、例えばエクソン３を標的とする。
理論に拘束されるものではないが、他の実施形態において、ＺＢＴＢ３２遺伝子の配列を標的とすることも好ましい場合があり、これは、遺伝子の１以上のアイソフォームに特異的であるが、遺伝子の１以上の他のアイソフォームには影響しない。実施形態において、触媒ドメインを含むＺＢＴＢ３２遺伝子のアイソフォームを特異的に標的とすることが好ましい場合がある。
二重鎖ＲＮＡ、例えば、ＳｉＲＮＡ又はＳｈＲＮＡ、阻害剤
本開示によると、二本鎖ＲＮＡ（「ｄｓＲＮＡ」）、例えばｓｉＲＮＡ又はｓｈＲＮＡをＺＢＴＢ３２阻害剤として使用することができる。また、前記ｄｓＲＮＡ阻害剤をコードする核酸の使用も本開示により企図される。
一実施形態において、ＺＢＴＢ３２遺伝子のモジュレーター（例えば、阻害剤）は、核酸、例えばｄｓＲＮＡ、例えばＺＢＴＢ３２遺伝子産物をコードする核酸に特異的なｓｉＲＮＡ又はｓｈＲＮＡ、例えば、ＺＢＴＢ３２遺伝子産物をコードするゲノムＤＮＡ又はｍＲＮＡである。
本開示の一態様は、ＺＢＴＢ３２遺伝子の配列、核酸配列（例えば、ＺＢＴＢ３２遺伝子産物をコードするゲノムＤＮＡ又はｍＲＮＡ）に相補的（例えば、１００％相補的）である、少なくとも１５の連続ヌクレオチド、例えば、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４又は２５の連続ヌクレオチド、例えば、２１の連続ヌクレオチドを含む、ｄｓＲＮＡ、例えばｓｉＲＮＡ又はｓｈＲＮＡを含む組成物を提供する。分子が依然としてＲＮＡ干渉を媒介できる場合、標的配列及び／又はｓｈＲＮＡ分子の一部はＤＮＡとして提示されるが、これらの配列を標的とする又はこれらの配列を含むｄｓＲＮＡ剤は、ＲＮＡ、又は本明細書に開示される及び／又は当技術分野で公知の任意のヌクレオチド、修飾ヌクレオチド又は置換物であり得ると考えられる。
一実施形態において、ＺＢＴＢ３２遺伝子の発現を阻害するｄｓＲＮＡ分子をコードする核酸分子を、ＺＢＴＢ３２遺伝子の発現を阻害するｄｓＲＮＡ分子が、発現、例えば、ＣＡＲ発現細胞内で発現されるようにプロモーター、例えば、Ｈ１又はＵ６駆動プロモーターに操作可能に連結する。例えば、Ｔｉｓｃｏｒｎｉａ Ｇ．，“Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ Ｌｅｎｔｉｖｉｒａｌ Ｖｅｃｔｏｒｓ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ｓｉＲＮＡ，”Ｃｈａｐｔｅｒ ３，ｉｎ Ｇｅｎｅ Ｔｒａｎｓｆｅｒ：Ｄｅｌｉｖｅｒｙ ａｎｄ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＤＮＡ ａｎｄ ＲＮＡ（ｅｄｓ．Ｆｒｉｅｄｍａｎｎ ａｎｄ Ｒｏｓｓｉ）を参照されたい。Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ，ＵＳＡ，２００７；Ｂｒｕｍｍｅｌｋａｍｐ ＴＲ，ｅｔ ａｌ．（２００２）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２９６：５５０－５５３；Ｍｉｙａｇｉｓｈｉ Ｍ，ｅｔ ａｌ．（２００２）Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１９：４９７－５００。一実施形態において、ＺＢＴＢ３２遺伝子の発現を阻害するｄｓＲＮＡ分子をコードする核酸分子は、ＣＡＲの成分、例えば要素の全てをコードする核酸分子を含む同じベクター、例えばレンチウイルスベクター上に存在する。このような実施形態において、ＺＢＴＢ３２遺伝子の発現を阻害するｄｓＲＮＡ分子をコードする核酸分子は、ＣＡＲの成分、例えば、成分の全てをコードする核酸の５’又は３’に位置するベクター、例えば、レンチウイルスベクター上に位置する。ＺＢＴＢ３２遺伝子の発現を阻害するｄｓＲＮＡ分子をコードする核酸分子は、ＣＡＲの成分、例えば、成分の全てをコードする核酸と同一又は異なる方向で転写され得る。一実施形態において、ＺＢＴＢ３２遺伝子の発現を阻害するｄｓＲＮＡ分子をコードする核酸分子は、ＣＡＲの成分、例えば成分の全てをコードする核酸分子を含むベクター以外のベクター上に存在する。一実施形態において、ＺＢＴＢ３２遺伝子の発現を阻害するｄｓＲＮＡ分子をコードする核酸分子は、ＣＡＲ発現細胞内で一過性に発現される。一実施形態において、ＺＢＴＢ３２遺伝子の発現を阻害するｄｓＲＮＡ分子をコードする核酸分子は、ＣＡＲ発現細胞のゲノムに安定して組み込まれる。
ｓｈＲＮＡ配列をコードする核酸配列の例を以下に提供する。標的配列は、ＺＢＴＢ３２ゲノムＤＮＡ（又は周囲のＤＮＡ）内の配列を指す。ＺＢＴＢ３２ ｓｈＲＮＡをコードする核酸は、本開示において有用なｓｈＲＮＡ分子をコードする。実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤は、以下に列挙される標的配列に特異的な、又はそのｍＲＮＡ相補体に特異的なｓｉＲＮＡ又はｓｈＲＮＡである。
抗体分子、例えば単一ドメイン抗体
本開示によると、抗体分子をＺＢＴＢ３２阻害剤として使用することができる。ＺＢＴＢ３２遺伝子によってコードされるタンパク質を標的とする抗体分子をコードする核酸の使用も、本開示によって企図される。
いくつかの実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤は、ナノボディとしても知られる単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）である。他の実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤は、単一ドメイン抗体をコードする核酸である。
単一ドメイン抗体は、相補性決定領域が単一ドメインポリペプチドの一部である抗体を含み得る。例としては、限定はされないが、重鎖抗体、天然で軽鎖を欠いている抗体、従来の４本鎖抗体に由来する単一ドメイン抗体、改変抗体及び抗体に由来するもの以外の単一ドメイン足場が挙げられる。単一ドメイン抗体は、当該技術分野の任意のものであってもよく、又は任意の将来の単一ドメイン抗体であってもよい。単一ドメイン抗体は、限定はされないが、マウス、ヒト、ラクダ、ラマ、魚類、サメ、ヤギ、ウサギ、及びウシを含めた任意の種に由来し得る。本開示の別の態様によれば、単一ドメイン抗体は、軽鎖を欠いている重鎖抗体として知られる天然に存在する単一ドメイン抗体である。かかる単一ドメイン抗体については、例えば、国際公開第９４／０４６７８号パンフレットに開示されている。明確にするために言えば、天然で軽鎖を欠いている重鎖抗体に由来するこの可変ドメインは、４本鎖免疫グロブリンの従来のＶＨとそれを区別するため、本明細書ではＶＨＨ又はナノボディとして知られる。かかるＶＨＨ分子は、ラクダ科（Ｃａｍｅｌｉｄａｅ）種、例えば、ラクダ、ラマ、ヒトコブラクダ、アルパカ及びグアナコで生じる抗体に由来することができる。ラクダ科（Ｃａｍｅｌｉｄａｅ）以外の他の種も、天然で軽鎖を欠いている重鎖抗体を産生し得る；かかるＶＨＨは、本開示の範囲内にある。
キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）
いくつかの実施形態において、ＣＡＲ分子（例えば、本明細書に記載されるようなもの）を発現し、ＺＢＴＢ３２の発現及び／又は生物学的活性の低下を有する免疫エフェクター細胞（例えば、免疫エフェクター細胞の集団）を作製及び使用する方法が本明細書に開示される。いくつかの実施形態において、例示的ＣＡＲ構築物は、任意選択のリーダー配列（例えば、本明細書に記載されるリーダー配列）、抗原結合ドメイン（例えば、本明細書に記載される抗原結合ドメイン）、ヒンジ（例えば、本明細書に記載されるヒンジ領域）、膜貫通ドメイン（例えば、本明細書に記載される膜貫通ドメイン）、及び細胞内刺激ドメイン（例えば、本明細書に記載される細胞内刺激ドメイン）を含む。いくつかの実施形態において、例示的ＣＡＲ構築物は、任意選択のリーダー配列（例えば、本明細書に記載されるリーダー配列）、細胞外抗原結合ドメイン（例えば、本明細書に記載される抗原結合ドメイン）、ヒンジ（例えば、本明細書に記載されるヒンジ領域）、膜貫通ドメイン（例えば、本明細書に記載される膜貫通ドメイン）、細胞内共刺激シグナル伝達ドメイン（例えば、本明細書に記載される共刺激シグナル伝達ドメイン）及び／又は細胞内一次シグナル伝達ドメイン（例えば、本明細書に記載される一次シグナル伝達ドメイン）を含む。
本明細書に記載のＣＡＲ分子の一部となり得る様々な成分の非限定的な例の配列を表１及び表２に列挙する。表中、「ａａ」はアミノ酸を表し、「ｎａ」は対応するペプチドをコードする核酸を表す。
Figure 2023529211000008
Figure 2023529211000009
Figure 2023529211000010
Figure 2023529211000011
Figure 2023529211000012
Figure 2023529211000013
Figure 2023529211000014
Figure 2023529211000015
ＣＡＲ抗原結合ドメイン
いくつかの実施形態において、抗原結合ドメインを含むＣＡＲ分子の部分は、腫瘍抗原、例えば本明細書に記載される腫瘍抗原を標的とする抗原結合ドメインを含む。いくつかの実施形態では、抗原結合ドメインは、ＣＤ１９；ＣＤ１２３；ＣＤ２２；ＣＤ３０；ＣＤ１７１；ＣＳ－１；Ｃ型レクチン様分子－１；ＣＤ３３；上皮成長因子受容体変異体ＩＩＩ（ＥＧＦＲｖＩＩＩ）；ガングリオシドＧ２（ＧＤ２）；ガングリオシドＧＤ３；ＴＮＦ受容体ファミリーメンバーＢ細胞成熟抗原（ＢＣＭＡ）；Ｔｎ抗原（（Ｔｎ Ａｇ）又は（ＧａｌＮＡｃα－Ｓｅｒ／Ｔｈｒ））；前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）；受容体チロシンキナーゼ様オーファン受容体１（ＲＯＲ１）；Ｆｍｓ様チロシンキナーゼ３（ＦＬＴ３）；腫瘍関連糖タンパク質７２（ＴＡＧ７２）；ＣＤ３８；ＣＤ４４ｖ６；癌胎児性抗原（ＣＥＡ）；上皮細胞接着分子（ＥＰＣＡＭ）；Ｂ７Ｈ３（ＣＤ２７６）；ＫＩＴ（ＣＤ１１７）；インターロイキン－１３受容体サブユニットα－２；メソテリン；インターロイキン１１受容体α（ＩＬ－１１Ｒａ）；前立腺幹細胞抗原（ＰＳＣＡ）；プロテアーゼセリン２１；血管内皮成長因子受容体２（ＶＥＧＦＲ２）；ルイス（Ｙ）抗原；ＣＤ２４；血小板由来成長因子受容体β（ＰＤＧＦＲ－β）；ステージ特異的胎児抗原－４（ＳＳＥＡ－４）；ＣＤ２０；葉酸受容体α；受容体チロシン－プロテインキナーゼＥＲＢＢ２（Ｈｅｒ２／ｎｅｕ）；ムチン１、細胞表面関連（ＭＵＣ１）；上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）；神経細胞接着分子（ＮＣＡＭ）；プロスターゼ（Ｐｒｏｓｔａｓｅ）；前立腺酸性ホスファターゼ（ＰＡＰ）；伸長因子２突然変異型（ＥＬＦ２Ｍ）；エフリンＢ２；線維芽細胞活性化タンパク質α（ＦＡＰ）；インスリン様成長因子１受容体（ＩＧＦ－Ｉ受容体）、炭酸脱水酵素ＩＸ（ＣＡＩＸ）；プロテアソーム（プロソーム、マクロパイン）サブユニット、ベータ型、９（ＬＭＰ２）；糖タンパク質１００（ｇｐ１００）；切断点クラスター領域（ＢＣＲ）及びエーベルソンマウス白血病ウイルス性癌遺伝子ホモログ１（Ａｂｌ）からなる癌遺伝子融合タンパク質（ｂｃｒ－ａｂｌ）；チロシナーゼ；エフリンＡ型受容体２（ＥｐｈＡ２）；フコシルＧＭ１；シアリルルイス接着分子（ｓＬｅ）；ガングリオシドＧＭ３；トランスグルタミナーゼ５（ＴＧＳ５）；高分子量メラノーマ関連抗原（ＨＭＷＭＡＡ）；ｏ－アセチル－ＧＤ２ガングリオシド（ＯＡｃＧＤ２）；葉酸受容体β；腫瘍内皮マーカー１（ＴＥＭ１／ＣＤ２４８）；腫瘍内皮マーカー７関連（ＴＥＭ７Ｒ）；クローディン６（ＣＬＤＮ６）；甲状腺刺激ホルモン受容体（ＴＳＨＲ）；Ｇタンパク質共役受容体クラスＣグループ５、メンバーＤ（ＧＰＲＣ５Ｄ）；Ｘ染色体オープンリーディングフレーム６１（ＣＸＯＲＦ６１）；ＣＤ９７；ＣＤ１７９ａ；未分化リンパ腫キナーゼ（ＡＬＫ）；ポリシアル酸；胎盤特異的１（ＰＬＡＣ１）；グロボＨグリコセラミドの六糖部分（グロボＨ）；乳腺分化抗原（ＮＹ－ＢＲ－１）；ウロプラキン２（ＵＰＫ２）；Ａ型肝炎ウイルス細胞受容体１（ＨＡＶＣＲ１）；アドレノセプターβ３（ＡＤＲＢ３）；パネキシン３（ＰＡＮＸ３）；Ｇタンパク質共役受容体２０（ＧＰＲ２０）；リンパ球抗原６複合体、遺伝子座Ｋ９（ＬＹ６Ｋ）；嗅覚受容体５１Ｅ２（ＯＲ５１Ｅ２）；ＴＣＲγ代替リーディングフレームタンパク質（ＴＡＲＰ）；ウィルムス腫瘍タンパク質（ＷＴ１）；癌／精巣抗原１（ＮＹ－ＥＳＯ－１）；癌／精巣抗原２（ＬＡＧＥ－１ａ）；メラノーマ関連抗原１（ＭＡＧＥ－Ａ１）；ＥＴＳ転座変異体遺伝子６、染色体１２ｐに位置する（ＥＴＶ６－ＡＭＬ）；精子タンパク質１７（ＳＰＡ１７）；Ｘ抗原ファミリー、メンバー１Ａ（ＸＡＧＥ１）；アンギオポエチン結合細胞表面受容体２（Ｔｉｅ ２）；メラノーマ癌精巣抗原－１（ＭＡＤ－ＣＴ－１）；メラノーマ癌精巣抗原－２（ＭＡＤ－ＣＴ－２）；Ｆｏｓ関連抗原１；腫瘍タンパク質ｐ５３（ｐ５３）；ｐ５３突然変異体；プロステイン；サーバイビング；テロメラーゼ；前立腺癌腫瘍抗原－１、Ｔ細胞によって認識されるメラノーマ抗原１；ラット肉腫（Ｒａｓ）突然変異体；ヒトテロメラーゼ逆転写酵素（ｈＴＥＲＴ）；サルコーマ転座切断点；メラノーマアポトーシス阻害因子（ＭＬ－ＩＡＰ）；ＥＲＧ（膜貫通型プロテアーゼ、セリン２（ＴＭＰＲＳＳ２）ＥＴＳ融合遺伝子）；Ｎ－アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼＶ（ＮＡ１７）；ペアードボックスタンパク質Ｐａｘ－３（ＰＡＸ３）；アンドロゲン受容体；サイクリンＢ１；ｖ－ｍｙｃトリ骨髄球腫症ウイルス性癌遺伝子神経芽細胞腫由来ホモログ（ＭＹＣＮ）；ＲａｓホモログファミリーメンバーＣ（ＲｈｏＣ）；チロシナーゼ関連タンパク質２（ＴＲＰ－２）；シトクロムＰ４５０ １Ｂ１（ＣＹＰ１Ｂ１）；ＣＣＣＴＣ結合因子（ジンクフィンガータンパク質）様、Ｔ細胞によって認識される扁平上皮癌抗原３（ＳＡＲＴ３）；ペアードボックスタンパク質Ｐａｘ－５（ＰＡＸ５）；プロアクロシン結合タンパク質ｓｐ３２（ＯＹ－ＴＥＳ１）；リンパ球特異的プロテインチロシンキナーゼ（ＬＣＫ）；Ａキナーゼアンカータンパク質４（ＡＫＡＰ－４）；滑膜肉腫、Ｘ切断点２（ＳＳＸ２）；後期糖化最終産物受容体（ＲＡＧＥ－１）；腎臓遍在性１（ＲＵ１）；腎臓遍在性２（ＲＵ２）；レグマイン；ヒトパピローマウイルスＥ６（ＨＰＶ Ｅ６）；ヒトパピローマウイルスＥ７（ＨＰＶ Ｅ７）；腸カルボキシルエステラーゼ；熱ショックタンパク質７０－２突然変異型（ｍｕｔ ｈｓｐ７０－２）；ＣＤ７９ａ；ＣＤ７９ｂ；ＣＤ７２；白血球関連免疫グロブリン様受容体１（ＬＡＩＲ１）；ＩｇＡ受容体のＦｃ断片（ＦＣＡＲ又はＣＤ８９）；白血球免疫グロブリン様受容体サブファミリーＡメンバー２（ＬＩＬＲＡ２）；ＣＤ３００分子様ファミリーメンバーｆ（ＣＤ３００ＬＦ）；Ｃ型レクチンドメインファミリー１２メンバーＡ（ＣＬＥＣ１２Ａ）；骨髄間質細胞抗原２（ＢＳＴ２）；ＥＧＦ様モジュール含有ムチン様ホルモン受容体様２（ＥＭＲ２）；リンパ球抗原７５（ＬＹ７５）；グリピカン－３（ＧＰＣ３）；Ｆｃ受容体様５（ＦＣＲＬ５）；又は免疫グロブリンλ様ポリペプチド１（ＩＧＬＬ１）に結合する。
抗原結合ドメインは、限定されないが、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、組換え抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体及びその機能性断片、例えば、限定されないが、重鎖可変ドメイン（ＶＨ）、軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）及びラクダ科動物由来ナノボディの可変ドメイン（ＶＨＨ）などのシングルドメイン抗体及び組換えフィブロネクチンドメイン、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）又はその断片、例えば単鎖ＴＣＲなど、抗原結合ドメインとして機能することが当技術分野において公知の代替的足場を含め、抗原に結合する任意のドメインであり得る。一部の例では、抗原結合ドメインは、ＣＡＲ分子が最終的に使用されることになる同じ種に由来することが有益である。例えば、ヒトでの使用には、ＣＡＲ分子の抗原結合ドメインが抗体又は抗体断片の抗原結合ドメインにヒト又はヒト化残基を含むことが有益であり得る。
一実施形態において、ＣＤ１９ ＣＡＲは、米国特許第８，３９９，６４５号明細書；米国特許第７，４４６，１９０号明細書；Ｘｕ ｅｔ ａｌ．，Ｌｅｕｋ Ｌｙｍｐｈｏｍａ．２０１３ ５４（２）：２５５－２６０（２０１２）；Ｃｒｕｚ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ １２２（１７）：２９６５－２９７３（２０１３）；Ｂｒｅｎｔｊｅｎｓ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，１１８（１８）：４８１７－４８２８（２０１１）；Ｋｏｃｈｅｎｄｅｒｆｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ １１６（２０）：４０９９－１０２（２０１０）；Ｋｏｃｈｅｎｄｅｒｆｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ １２２（２５）：４１２９－３９（２０１３）；又は１６ｔｈ Ａｎｎｕ Ｍｅｅｔ Ａｍ Ｓｏｃ Ｇｅｎ Ｃｅｌｌ Ｔｈｅｒ（ＡＳＧＣＴ）（Ｍａｙ １５－１８，Ｓａｌｔ Ｌａｋｅ Ｃｉｔｙ）２０１３，Ａｂｓｔ １０（それぞれその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されたＣＤ１９ ＣＡＲである。一実施形態において、ＣＤ１９に対する抗原結合ドメインは、例えば、国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレット（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載のＣＡＲ、抗体又はその抗原結合断片の抗原結合部分、例えばＣＤＲ分子である。一実施形態において、ＣＤ１９に対する抗原結合ドメインは、例えば、国際公開第２０１４／１５３２７０号パンフレット；Ｋｏｃｈｅｎｄｅｒｆｅｒ，Ｊ．Ｎ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．３２（７），６８９－７０２（２００９）；Ｋｏｃｈｅｎｄｅｒｆｅｒ，Ｊ．Ｎ．，ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，１１６（２０），４０９９－４１０２（２０１０）；国際公開第２０１４／０３１６８７号パンフレット；Ｂｅｊｃｅｋ，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，５５，２３４６－２３５１，１９９５；又は米国特許第７，４４６，１９０号明細書（それぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載のＣＡＲ、抗体又はその抗原結合断片の抗原結合部分、例えばＣＤＲ分子である。
一実施形態において、メソテリンに対する抗原結合ドメインは、例えば、国際公開第２０１５／０９０２３０号パンフレットに記載の抗体、抗原結合断片又はＣＡＲ分子の、抗原結合ドメイン、例えばＣＤＲ、ｓｃＦｖ又はＶＨ及びＶＬであるか又はそれに由来し得る（一実施形態において、ＣＡＲ分子は国際公開第２０１５／０９０２３０号パンフレットに記載のＣＡＲであり、その内容は、その全体が本明細書に組み込まれる）。いくつかの実施形態において、メソテリンに対する抗原結合ドメインは、例えば、国際公開第１９９７／０２５０６８号パンフレット、国際公開第１９９９／０２８４７１号パンフレット、国際公開第２００５／０１４６５２号パンフレット、国際公開第２００６／０９９１４１号パンフレット、国際公開第２００９／０４５９５７号パンフレット、国際公開第２００９／０６８２０４号パンフレット、国際公開第２０１３／１４２０３４号パンフレット、国際公開第２０１３／０４０５５７号パンフレット又は国際公開第２０１３／０６３４１９号パンフレット（それぞれその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されている抗体、抗原結合断片又はＣＡＲ分子の抗原結合部分、例えばＣＤＲ、ｓｃＦｖ又はＶＨ及びＶＬであるか又はそれに由来する。
一実施形態において、ＣＤ１２３に対する抗原結合ドメインは、例えば、国際公開第２０１４／１３０６３５号パンフレット（参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）に記載の抗体、抗原結合断片又はＣＡＲ分子の抗原結合部分、例えばＣＤＲ、ｓｃＦｖ又はＶＨ及びＶＬであるか又はそれに由来する。一実施形態において、ＣＤ１２３に対する抗原結合ドメインは、例えば、国際公開第２０１６／０２８８９６号パンフレット（参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）に記載の抗体、抗原結合断片又はＣＡＲ分子の抗原結合部分、例えばＣＤＲ、ｓｃＦｖ又はＶＨ及びＶＬであるか又はそれに由来し、いくつかの実施形態において、ＣＡＲ分子は国際公開第２０１６／０２８８９６号パンフレットに記載のＣＡＲ分子である。一実施形態において、ＣＤ１２３に対する抗原結合ドメインは、例えば、国際公開第１９９７／０２４３７３号パンフレット、国際公開第２００８／１２７７３５号パンフレット（例えば、２６２９２、３２７０１、３７７１６又は３２７０３のＣＤ１２３結合ドメイン）、国際公開第２０１４／１３８８０５号パンフレット（例えば、ＣＳＬ３６２のＣＤ１２３結合ドメイン）、国際公開第２０１４／１３８８１９号パンフレット、国際公開第２０１３／１７３８２０号パンフレット、国際公開第２０１４／１４４６２２号パンフレット、国際公開第２００１／６６１３９号パンフレット、国際公開第２０１０／１２６０６６号パンフレット（例えば、Ｏｌｄ４、Ｏｌｄ５、Ｏｌｄ１７、Ｏｌｄ１９、Ｎｅｗ１０２又はＯｌｄ６のいずれかのＣＤ１２３結合ドメイン）、国際公開第２０１４／１４４６２２号パンフレット又は米国特許国際公開第２００９／０２５２７４２号明細書（それぞれその全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載の抗体、抗原結合断片又はＣＡＲ分子の抗原結合部分、例えばＣＤＲ、ｓｃＦｖ又はＶＨ及びＶＬであるか、又はこれらに由来する。
一実施形態において、ＣＤ２２に対する抗原結合ドメインは、例えば、Ｈａｓｏ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，１２１（７）：１１６５－１１７４（２０１３）；Ｗａｙｎｅ ｅｔ ａｌ．，Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ １６（６）：１８９４－１９０３（２０１０）；Ｋａｔｏ ｅｔ ａｌ．，Ｌｅｕｋ Ｒｅｓ ３７（１）：８３－８８（２０１３）；Ｃｒｅａｔｉｖｅ ＢｉｏＭａｒｔ（ｃｒｅａｔｉｖｅｂｉｏｍａｒｔ．ｎｅｔ）：ＭＯＭ－１８０４７－Ｓ（Ｐ）に記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＣＳ－１に対する抗原結合ドメインは、エロツズマブ（ＢＭＳ）の抗原結合部分、例えばＣＤＲであり、例えばＴａｉ ｅｔ ａｌ．，２００８，Ｂｌｏｏｄ １１２（４）：１３２９－３７；Ｔａｉ ｅｔ ａｌ．，２００７，Ｂｌｏｏｄ．１１０（５）：１６５６－６３を参照されたい。
一実施形態において、ＣＬＬ－１に対する抗原結合ドメインは、例えば、国際公開第２０１６／０１４５３５号パンフレット（その内容は全体として本明細書に組み込まれる）に記載の抗体、抗原結合断片又はＣＡＲ分子の抗原結合部分、例えばＣＤＲ又はＶＨ及びＶＬである。一実施形態において、ＣＬＬ－１に対する抗原結合ドメインは、例えば、Ｒ＆Ｄ、ｅｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ａｂｃａｍから入手可能な抗体、例えばＰＥ－ＣＬＬ１－ｈｕ Ｃａｔ＃３５３６０４（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）；及びＰＥ－ＣＬＬ１（ＣＬＥＣ１２Ａ）Ｃａｔ＃５６２５６６（ＢＤ）の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＣＤ３３に対する抗原結合ドメインは、例えば、Ｂｒｏｓｓ ｅｔ ａｌ．，Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ７（６）：１４９０－１４９６（２００１）（Ｇｅｍｔｕｚｕｍａｂ Ｏｚｏｇａｍｉｃｉｎ，ｈＰ６７．６）、Ｃａｒｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ５２（２４）：６７６１－６７６７（１９９２）（Ｌｉｎｔｕｚｕｍａｂ，ＨｕＭ１９５）、Ｌａｐｕｓａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｖｅｓｔ Ｎｅｗ Ｄｒｕｇｓ ３０（３）：１１２１－１１３１（２０１２）（ＡＶＥ９６３３）、Ａｉｇｎｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｌｅｕｋｅｍｉａ ２７（５）：１１０７－１１１５（２０１３）（ＡＭＧ３３０，ＣＤ３３ ＢｉＴＥ）、Ｄｕｔｏｕｒ ｅｔ ａｌ．，Ａｄｖ ｈｅｍａｔｏｌ ２０１２：６８３０６５（２０１２）及びＰｉｚｚｉｔｏｌａ ｅｔ ａｌ．，Ｌｅｕｋｅｍｉａ ｄｏｉ：１０．１０３８／Ｌｕｅ．２０１４．６２（２０１４）に記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。ＣＤ３３を標的とする例示的なＣＡＲ分子は本明細書に記載されており、国際公開第２０１６／０１４５７６号パンフレット、例えば国際公開第２０１６／０１４５７６号パンフレットの表２（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に提供される。
一実施形態において、ＧＤ２に対する抗原結合ドメインは、例えば、Ｍｕｊｏｏ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．４７（４）：１０９８－１１０４（１９８７）；Ｃｈｅｕｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ４５（６）：２６４２－２６４９（１９８５）、Ｃｈｅｕｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ ５（９）：１４３０－１４４０（１９８７）、Ｃｈｅｕｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ １６（９）：３０５３－３０６０（１９９８）、．Ｈａｎｄｇｒｅｔｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ ３５（３）：１９９－２０４（１９９２）に記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。いくつかの実施形態において、ＧＤ２に対する抗原結合ドメインは、ｍＡｂ １４．１８、１４Ｇ２ａ、ｃｈ１４．１８、ｈｕ１４．１８、３Ｆ８、ｈｕ３Ｆ８、３Ｇ６、８Ｂ６、６０Ｃ３、１０Ｂ８、ＭＥ３６．１及び８Ｈ９（例えば、国際公開第２０１２０３３８８５号パンフレット、国際公開第２０１３０４０３７１号パンフレット、国際公開第２０１３１９２２９４号パンフレット、国際公開第２０１３０６１２７３号パンフレット、国際公開第２０１３１２３０６１号パンフレット、国際公開第２０１３０７４９１６号パンフレット及び国際公開第２０１３８５５５２号パンフレットを参照されたい）から選択される抗体の抗原結合部分である。いくつかの実施形態において、ＧＤ２に対する抗原結合ドメインは、米国特許出願公開第２０１００１５０９１０号明細書又は国際公開第２０１１１６０１１９号パンフレットに記載されている抗体の抗原結合部分である。
一実施形態において、ＢＣＭＡに対する抗原結合ドメインは、例えば、国際公開第２０１２１６３８０５号パンフレット、国際公開第２００１１２８１２号パンフレット及び国際公開第２００３０６２４０１号パンプレットに記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。いくつかの実施形態において、更なる例示的なＢＣＭＡ ＣＡＲ構築物は、国際公開第２０１２／０１６３８０５号パンフレット（その内容が全体として参照により本明細書に組み込まれる）からの抗原結合ドメイン、例えばＣＤＲ、ｓｃＦｖ又はＶＨ及びＶＬ配列を用いて産生される。いくつかの実施形態において、更なる例示的なＢＣＭＡ ＣＡＲ構築物は、国際公開第２０１６／０１４５６５号パンフレット（その内容が全体として参照により本明細書に組み込まれる）からの抗原結合ドメイン、例えばＣＤＲ、ｓｃＦｖ又はＶＨ及びＶＬ配列を用いて産生される。いくつかの実施形態において、更なる例示的なＢＣＭＡ ＣＡＲ構築物は、国際公開第２０１４／１２２１４４号パンフレット（その内容が全体として参照により本明細書に組み込まれる）からの抗原結合ドメイン、例えばＣＤＲ、ｓｃＦｖ又はＶＨ及びＶＬ配列を用いて産生される。いくつかの実施形態において、更なる例示的なＢＣＭＡ ＣＡＲ構築物は、国際公開第２０１６／０１４７８９号パンフレット（その内容が全体として参照により本明細書に組み込まれる）からのＣＡＲ分子及び／又はＢＣＭＡ結合ドメイン（例えば、ＣＤＲ、ｓｃＦｖ又はＶＨ及びＶＬ配列）を用いて産生される。いくつかの実施形態において、更なる例示的なＢＣＭＡ ＣＡＲ構築物は、国際公開第２０１４／０８９３３５号パンフレット（その内容が全体として参照により本明細書に組み込まれる）からのＣＡＲ分子及び／又はＢＣＭＡ結合ドメイン（例えば、ＣＤＲ、ｓｃＦｖ又はＶＨ及びＶＬ配列）を用いて産生される。いくつかの実施形態において、更なる例示的なＢＣＭＡ ＣＡＲ構築物は、国際公開第２０１４／１４０２４８号パンフレット（その内容が全体として参照により本明細書に組み込まれる）からのＣＡＲ分子及び／又はＢＣＭＡ結合ドメイン（例えば、ＣＤＲ、ｓｃＦｖ又はＶＨ及びＶＬ配列）を用いて産生される。
一実施形態において、Ｔｎ抗原に対する抗原結合ドメインは、例えば、米国特許出願公開第２０１４／０１７８３６５号明細書、米国特許第８，４４０，７９８号明細書、Ｂｒｏｏｋｓ ｅｔ ａｌ．，ＰＮＡＳ １０７（２２）：１００５６－１００６１（２０１０）及びＳｔｏｎｅ ｅｔ ａｌ．，ＯｎｃｏＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ １（６）：８６３－８７３（２０１２）に記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＰＳＭＡに対する抗原結合ドメインは、例えば、Ｐａｒｋｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｘｐｒ Ｐｕｒｉｆ ８９（２）：１３６－１４５（２０１３）、米国特許出願公開第２０１１０２６８６５６号明細書（Ｊ５９１ ＳｃＦｖ）；Ｆｒｉｇｅｒｉｏ ｅｔ ａｌ，Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ ４９（９）：２２２３－２２３２（２０１３）（ｓｃＦｖＤ２Ｂ）；国際公開第２００６１２５４８１号パンフレット（ｍＡｂｓ ３／Ａ１２，３／Ｅ７及び３／Ｆ１１）に記載されている抗体及び単鎖抗体断片（ｓｃＦｖ Ａ５及びＤ７）の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＲＯＲ１に対する抗原結合ドメインは、例えば、Ｈｕｄｅｃｅｋ ｅｔ ａｌ．，Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ １９（１２）：３１５３－３１６４（２０１３）；国際公開第２０１１１５９８４７号パンフレット；及び米国特許出願公開第２０１３０１０１６０７号明細書に記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＦＬＴ３に対する抗原結合ドメインは、例えば、国際公開第２０１１０７６９２２号パンフレット、米国特許第５７７７０８４号明細書、欧州特許第０７５４２３０号明細書、米国特許出願公開第２００９０２９７５２９号明細書及びいくつかの市販カタログ抗体（Ｒ＆Ｄ、ｅｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ａｂｃａｍ）に記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＴＡＧ７２に対する抗原結合ドメインは、例えば、Ｈｏｍｂａｃｈ ｅｔ ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ １１３（４）：１１６３－１１７０（１９９７）に記載されている抗体；及びＡｂｃａｍ ａｂ６９１の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＦＡＰに対する抗原結合ドメインは、例えば、Ｏｓｔｅｒｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ １４：４５８４－４５９２（２００８）（ＦＡＰ５）、米国特許出願公開第２００９／０３０４７１８号明細書；シブロツズマブ（例えば、Ｈｏｆｈｅｉｎｚ ｅｔ ａｌ．，Ｏｎｃｏｌｏｇｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ２６（１），２００３を参照されたい）；及びＴｒａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ ２１０（６）：１１２５－１１３５（２０１３）に記載の抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＣＤ３８に対する抗原結合ドメインは、ダラツムマブ（例えば、Ｇｒｏｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ １１６（２１）：１２６１－１２６２（２０１０）；ＭＯＲ２０２（例えば、米国特許第８，２６３，７４６号明細書を参照されたい）；又は米国特許第８，３６２，２１１号明細書に記載の抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＣＤ４４ｖ６に対する抗原結合ドメインは、例えば、Ｃａｓｕｃｃｉ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ １２２（２０）：３４６１－３４７２（２０１３）に記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＣＥＡに対する抗原結合ドメインは、例えば、Ｃｈｍｉｅｌｅｗｓｋｉ ｅｔ ａｌ．，Ｇａｓｔｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ １４３（４）：１０９５－１１０７（２０１２）に記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＥＰＣＡＭに対する抗原結合ドメインは、例えば、ＭＴ１１０、ＥｐＣＡＭ－ＣＤ３二特異性Ａｂ（例えば、ｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｉａｌｓ．ｇｏｖ／ｃｔ２／ｓｈｏｗ／ＮＣＴ００６３５５９６を参照されたい）；エドレコロマブ；３６２２Ｗ９４；ＩＮＧ－１；及びアデカツムマブ（ＭＴ２０１）から選択される抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＰＲＳＳ２１に対する抗原結合ドメインは、米国特許第８，０８０，６５０号明細書に記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、Ｂ７Ｈ３に対する抗原結合ドメインは、例えば、抗体ＭＧＡ２７１（Ｍａｃｒｏｇｅｎｉｃｓ）の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＫＩＴに対する抗原結合ドメインは、例えば、米国特許第７９１５３９１号明細書、米国特許出願公開第２０１２０２８８５０６号明細書に記載されている抗体及びいくつかの市販のカタログ抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＩＬ－１３Ｒａ２に対する抗原結合ドメインは、例えば、国際公開第２００８／１４６９１１号パンフレット、国際公開第２００４０８７７５８号パンフレット、いくつかの市販カタログ抗体及び国際公開第２００４０８７７５８号パンフレットに記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＣＤ３０に対する抗原結合ドメインは、例えば、米国特許第７０９０８４３Ｂ１号明細書及び欧州特許第０８０５８７１号明細書に記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＧＤ３に対する抗原結合ドメインは、例えば、米国特許第７２５３２６３号明細書；米国特許第８，２０７，３０８号明細書；米国特許出願公開第２０１２０２７６０４６号明細書；欧州特許第１０１３７６１号明細書；国際公開第２００５０３５５７７号パンフレット；及び米国特許第６４３７０９８号明細書に記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＣＤ１７１に対する抗原結合ドメインは、例えば、Ｈｏｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ ３７（２）：９３－１０４（２０１４）に記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＩＬ－１１Ｒａに対する抗原結合ドメインは、Ａｂｃａｍ（カタログ番号ａｂ５５２６２）又はＮｏｖｕｓ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓｓ（カタログ番号ＥＰＲ５４４６）から入手可能な抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。別の実施形態において、ＩＬ－１１Ｒａに対する抗原結合ドメインは、ペプチドであり、例えばＨｕａｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ７２（１）：２７１－２８１（２０１２）を参照されたい。
一実施形態において、ＰＳＣＡに対する抗原結合ドメインは、例えば、Ｍｏｒｇｅｎｒｏｔｈ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｓｔａｔｅ ６７（１０）：１１２１－１１３１（２００７）（ｓｃＦｖ ７Ｆ５）；Ｎｅｊａｔｏｌｌａｈｉ ｅｔ ａｌ．，Ｊ ｏｆ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ ２０１３（２０１３），ａｒｔｉｃｌｅ ＩＤ ８３９８３１（ｓｃＦｖ Ｃ５～ＩＩ）；及び米国特許出願公開第２００９０３１１１８１号明細書に記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＶＥＧＦＲ２に対する抗原結合ドメインは、例えば、Ｃｈｉｎｎａｓａｍｙ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ １２０（１１）：３９５３－３９６８（２０１０）に記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ルイスＹに対する抗原結合ドメインは、例えば、Ｋｅｌｌｙ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｂｉｏｔｈｅｒ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ ２３（４）：４１１－４２３（２００８）（ｈｕ３Ｓ１９３ Ａｂ（ｓｃＦｖｓ））；Ｄｏｌｅｚａｌ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ １６（１）：４７－５６（２００３）（ＮＣ１０ ｓｃＦｖ）に記載の抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＣＤ２４に対する抗原結合ドメインは、例えば、Ｍａｌｉａｒ ｅｔ ａｌ．，Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ １４３（５）：１３７５－１３８４（２０１２）に記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＰＤＧＦＲβに対する抗原結合ドメインは、抗体Ａｂｃａｍ ａｂ３２５７０の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＳＳＥＡ－４に対する抗原結合ドメインは、抗体ＭＣ８１３（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ）又は他の市販の抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＣＤ２０に対する抗原結合ドメインは、抗体リツキシマブ、オファツムマブ、オクレリズマブ、ベルツズマブ若しくはＧＡ１０１の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、葉酸受容体αに対する抗原結合ドメインは、抗体ＩＭＧＮ８５３又は米国特許出願公開第２０１２０００９１８１号明細書；米国特許第４８５１３３２号明細書、ＬＫ２６：米国特許第５９５２４８４号明細書に記載の抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＥＲＢＢ２に対する抗原結合ドメイン（Ｈｅｒ２／ｎｅｕ）は、抗体トラスツズマブ又はペルツズマブの抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＭＵＣ１に対する抗原結合ドメインは、抗体ＳＡＲ５６６６５８の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＥＧＦＲに対する抗原結合ドメインは、抗体セツキシマブ、パニツムマブ、ザルツムマブ、ニモツズマブ又はマツズマブの抗原結合部分、例えばＣＤＲである。一実施形態において、ＥＧＦＲｖＩＩＩに対する抗原結合ドメインは、例えば、国際公開第２０１４／１３０６５７号パンフレットに記載の抗体、抗原結合断片又はＣＡＲ分子の、抗原結合ドメイン、例えばＣＤＲ、ｓｃＦｖ又はＶＨ及びＶＬであるか又はそれに由来し得る（一実施形態において、ＣＡＲ分子は国際公開第２０１４／１３０６５７号パンフレットに記載のＣＡＲ分子であり、その内容は、その全体が本明細書に組み込まれる）。
一実施形態において、ＮＣＡＭに対する抗原結合ドメインは、抗体クローン２－２Ｂ：ＭＡＢ５３２４（ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、エフリンＢ２に対する抗原結合ドメインは、例えば、Ａｂｅｎｇｏｚａｒ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ １１９（１９）：４５６５－４５７６（２０１２）に記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＩＧＦ－Ｉ受容体に対する抗原結合ドメインは、例えば、米国特許第８３４４１１２Ｂ２号明細書；欧州特許出願公開第２３２２５５０Ａ１号明細書；国際公開第２００６／１３８３１５号パンフレット又はＰＣＴ／ＵＳ２００６／０２２９９５号明細書に記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＣＡＩＸに対する抗原結合ドメインは、抗体クローン３０３１２３（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＬＭＰ２に対する抗原結合ドメインは、例えば、米国特許第７，４１０，６４０号明細書又は米国特許出願公開第２００５０１２９７０１号明細書に記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ｇｐ１００に対する抗原結合ドメインは、抗体ＨＭＢ４５、ＮＫＩｂｅｔａＢ、又は国際公開第２０１３１６５９４０号パンフレット、又は米国特許出願公開第２０１３０２９５００７号明細書に記載の抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、チロシナーゼに対する抗原結合ドメインは、例えば、米国特許第５８４３６７４号明細書；又は米国特許出願公開第１９９５０５０４０４８号明細書に記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＥｐｈＡ２に対する抗原結合ドメインは、例えば、Ｙｕ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ ２２（１）：１０２－１１１（２０１４）に記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＧＤ３に対する抗原結合ドメインは、例えば、米国特許第７２５３２６３号明細書；米国特許第８，２０７，３０８号明細書；米国特許出願公開第２０１２０２７６０４６号明細書；欧州特許出願公開第１０１３７６１Ａ３号明細書；２０１２０２７６０４６；国際公開第２００５０３５５７７号パンフレット；又は米国特許第６４３７０９８号明細書に記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、フコシルＧＭ１に対する抗原結合ドメインは、例えば、米国特許出願公開第２０１００２９７１３８号明細書；又は国際公開第２００７／０６７９９２号パンフレットに記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ｓＬｅに対する抗原結合ドメインは、抗体Ｇ１９３（ルイスＹについて）の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。Ｓｃｏｔｔ ＡＭ ｅｔ ａｌ，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ６０：３２５４－６１（２０００）を参照されたく、Ｎｅｅｓｏｎ ｅｔ ａｌ，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｍａｙ ２０１３ １９０（Ｍｅｅｔｉｎｇ Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ）１７７．１０にも記載される。
一実施形態において、ＧＭ３に対する抗原結合ドメインは、抗体ＣＡ２５２３４４９（ｍＡｂ １４Ｆ７）の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＨＭＷＭＡＡに対する抗原結合ドメインは、Ｋｍｉｅｃｉｋ ｅｔ ａｌ．，Ｏｎｃｏｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ３（１）：ｅ２７１８５（２０１４）（ＰＭＩＤ：２４５７５３８２）（ｍＡｂ９．２．２７）；米国特許第６５２８４８１号明細書；国際公開第２０１００３３８６６号パンフレット；又は米国特許出願公開第２０１４０００４１２４号明細書に記載の抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ｏ－アセチル－ＧＤ２に対する抗原結合ドメインは、抗体８Ｂ６の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＴＥＭ１／ＣＤ２４８に対する抗原結合ドメインは、例えば、Ｍａｒｔｙ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｌｅｔｔ ２３５（２）：２９８－３０８（２００６）；Ｚｈａｏ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ ３６３（２）：２２１－２３２（２０１１）に記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＣＬＤＮ６に対する抗原結合ドメインは、抗体ＩＭＡＢ０２７（Ｇａｎｙｍｅｄ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。例えば、ｃｌｉｎｉｃａｌｔｒｉａｌ．ｇｏｖ／ｓｈｏｗ／ＮＣＴ０２０５４３５１を参照されたい。
一実施形態において、ＴＳＨＲに対する抗原結合ドメインは、例えば、米国特許第８，６０３，４６６号明細書；米国特許第８，５０１，４１５号明細書；又は米国特許第８，３０９，６９３号明細書に記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＧＰＲＣ５Ｄに対する抗原結合ドメインは、抗体ＦＡＢ６３００Ａ（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）；又はＬＳ－Ａ４１８０（Ｌｉｆｅｓｐａｎ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＣＤ９７に対する抗原結合ドメインは、例えば、米国特許第６，８４６，９１１号明細書；ｄｅ Ｇｒｏｏｔ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １８３（６）：４１２７－４１３４（２００９）に記載されている抗体；又はＲ＆Ｄ：ＭＡＢ３７３４からの抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＡＬＫに対する抗原結合ドメインは、例えば、Ｍｉｎｏ－Ｋｅｎｕｄｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ １６（５）：１５６１－１５７１（２０１０）に記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ポリシアル酸に対する抗原結合ドメインは、例えば、Ｎａｇａｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２８８（４７）：３３７８４－３３７９６（２０１３）に記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＰＬＡＣ１に対する抗原結合ドメインは、例えば、Ｇｈｏｄｓ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ Ａｐｐｌ Ｂｉｏｃｈｅｍ ２０１３ ｄｏｉ：１０．１００２／ｂａｂ．１１７７に記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＧｌｏｂｏＨに対する抗原結合ドメインは、抗体ＶＫ９；又は例えばＫｕｄｒｙａｓｈｏｖ Ｖ ｅｔ ａｌ，Ｇｌｙｃｏｃｏｎｊ Ｊ．１５（３）：２４３－９（１９９８），Ｌｏｕ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ １１１（７）：２４８２－２４８７（２０１４）；ＭＢｒ１：Ｂｒｅｍｅｒ Ｅ－Ｇ ｅｔ ａｌ．Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２５９：１４７７３－１４７７７（１９８４）に記載されている抗体の抗原結合部分である。
一実施形態において、ＮＹ－ＢＲ－１に対する抗原結合ドメインは、例えば、Ｊａｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ａｐｐｌ Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍ Ｍｏｌ Ｍｏｒｐｈｏｌ １５（１）：７７－８３（２００７）に記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＷＴ－１に対する抗原結合ドメインは、例えば、Ｄａｏ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉ Ｔｒａｎｓｌ Ｍｅｄ ５（１７６）：１７６ｒａ３３（２０１３）；又は国際公開第２０１２／１３５８５４号パンフレットに記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＭＡＧＥ－Ａ１に対する抗原結合ドメインは、例えば、Ｗｉｌｌｅｍｓｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １７４（１２）：７８５３－７８５８（２００５）（ＴＣＲ様ｓｃＦｖ）に記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、精子タンパク質１７に対する抗原結合ドメインは、例えば、Ｓｏｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｔａｒｇｅｔ Ｏｎｃｏｌ ２０１３ Ａｕｇ １４（ＰＭＩＤ：２３９４３３１３）；Ｓｏｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｄ Ｏｎｃｏｌ ２９（４）：２９２３－２９３１（２０１２）に記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、Ｔｉｅ２に対する抗原結合ドメインは、抗体ＡＢ３３（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＭＡＤ－ＣＴ－２に対する抗原結合ドメインは、例えば、ＰＭＩＤ：２４５０９５２；米国特許第７６３５７５３号明細書に記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、Ｆｏｓ関連抗原１に対する抗原結合ドメインは、抗体１２Ｆ９（Ｎｏｖｕｓ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ）の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＭｅｌａｎＡ／ＭＡＲＴ１に対する抗原結合ドメインは、欧州特許第２５１４７６６Ａ２号明細書；又は米国特許第７，７４９，７１９号明細書に記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、肉腫転座切断点に対する抗原結合ドメインは、例えば、Ｌｕｏ ｅｔ ａｌ，ＥＭＢＯ Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．４（６）：４５３－４６１（２０１２）に記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＴＲＰ－２に対する抗原結合ドメインは、例えば、Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ，Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ．１８４（６）：２２０７－１６（１９９６）に記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＣＹＰ１Ｂ１に対する抗原結合ドメインは、例えば、Ｍａｅｃｋｅｒ ｅｔ ａｌ，Ｂｌｏｏｄ １０２（９）：３２８７－３２９４（２００３）に記載されている抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＲＡＧＥ－１に対する抗原結合ドメインは、抗体ＭＡＢ５３２８（ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ヒトテロメラーゼ逆転写酵素に対する抗原結合ドメインは、抗体カタログ番号：ＬＳ－Ｂ９５－１００（Ｌｉｆｅｓｐａｎ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、腸カルボキシルエステラーゼに対する抗原結合ドメインは、抗体４Ｆ１２：カタログ番号：ＬＳ－Ｂ６１９０－５０（Ｌｉｆｅｓｐａｎ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ｍｕｔ ｈｓｐ７０－２に対する抗原結合ドメインは、抗体Ｌｉｆｅｓｐａｎ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ：モノクローナル：カタログ番号：ＬＳ－Ｃ１３３２６１－１００（Ｌｉｆｅｓｐａｎ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＣＤ７９ａに対する抗原結合ドメインは、Ａｂｃａｍから入手可能な抗体抗ＣＤ７９ａ抗体［ＨＭ４７／Ａ９］（ａｂ３１２１）；Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙから入手可能な抗体ＣＤ７９Ａ抗体番号３３５１；又はＳｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈから入手可能なウサギにおいて産生した抗ＣＤ７９Ａ抗体である抗体ＨＰＡ０１７７４８の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＣＤ７９ｂに対する抗原結合ドメインは、抗体ポラツズマブベドチン、Ｄｏｒｎａｎ ｅｔ ａｌ．，“Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｏｆ ａｎ ａｎｔｉ－ＣＤ７９ｂ ａｎｔｉｂｏｄｙ－ｄｒｕｇ ｃｏｎｊｕｇａｔｅ，ａｎｔｉ－ＣＤ７９ｂ－ｖｃ－ＭＭＡＥ，ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｎｏｎ－Ｈｏｄｇｋｉｎ ｌｙｍｐｈｏｍａ”Ｂｌｏｏｄ．２００９ Ｓｅｐ ２４；１１４（１３）：２７２１－９．ｄｏｉ：１０．１１８２／ｂｌｏｏｄ－２００９－０２－２０５５００．Ｅｐｕｂ ２００９ Ｊｕｌ ２４に記載の抗ＣＤ７９ｂ又は“４５０７ Ｐｒｅ－Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔ Ｃｅｌｌ－Ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ Ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ａｎｔｉ－ＣＤ７９ｂ／ＣＤ３ Ａｓ ａ Ｐｏｔｅｎｔｉａｌ Ｔｈｅｒａｐｙ ｆｏｒ Ｂ Ｃｅｌｌ Ｍａｌｉｇｎａｎｃｉｅｓ”Ａｂｓｔｒａｃｔｓ ｏｆ ５６ｔｈ ＡＳＨ Ａｎｎｕａｌ Ｍｅｅｔｉｎｇ ａｎｄ Ｅｘｐｏｓｉｔｉｏｎ，Ｓａｎ Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ，ＣＡ Ｄｅｃｅｍｂｅｒ ６－９ ２０１４に記載の二特異性抗体抗ＣＤ７９ｂ／ＣＤ３の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＣＤ７２に対する抗原結合ドメインは、Ｍｙｅｒｓ及びＵｃｋｕｎ，“Ａｎ ａｎｔｉ－ＣＤ７２ ｉｍｍｕｎｏｔｏｘｉｎ ａｇａｉｎｓｔ ｔｈｅｒａｐｙ－ｒｅｆｒａｃｔｏｒｙ Ｂ－ｌｉｎｅａｇｅ ａｃｕｔｅ ｌｙｍｐｈｏｂｌａｓｔｉｃ ｌｅｕｋｅｍｉａ．”Ｌｅｕｋ Ｌｙｍｐｈｏｍａ．１９９５ Ｊｕｎ；１８（１－２）：１１９－２２に記載の抗体Ｊ３－１０９又はＰｏｌｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，“Ａｎｔｉｂｏｄｙ－Ｄｒｕｇ Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｎｏｎ－Ｈｏｄｇｋｉｎ’ｓ Ｌｙｍｐｈｏｍａ：Ｔａｒｇｅｔ ａｎｄ Ｌｉｎｋｅｒ－Ｄｒｕｇ Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ”Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ Ｍａｒｃｈ １５，２００９ ６９；２３５８に記載の抗ＣＤ７２（１０Ｄ６．８．１，ｍＩｇＧ１）の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＬＡＩＲ１に対する抗原結合ドメインは、ＰｒｏＳｐｅｃから入手可能な抗体ＡＮＴ－３０１ ＬＡＩＲ１抗体；又はＢｉｏＬｅｇｅｎｄから入手可能な抗ヒトＣＤ３０５（ＬＡＩＲ１）抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＦＣＡＲに対する抗原結合ドメインは、Ｓｉｎｏ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｃ．から入手可能な抗体ＣＤ８９／ＦＣＡＲＡｎｔｉｂｏｄｙ（カタログ番号１０４１４－Ｈ０８Ｈ）の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＬＩＬＲＡ２に対する抗原結合ドメインは、Ａｂｎｏｖａから入手可能な抗体ＬＩＬＲＡ２モノクローナル抗体（Ｍ１７）、クローン３Ｃ７又はＬｉｆｅｓｐａｎ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓから入手可能なマウス抗ＬＩＬＲＡ２抗体、モノクローナル（２Ｄ７）の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＣＤ３００ＬＦに対する抗原結合ドメインは、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄから入手可能な抗体マウス抗ＣＭＲＦ３５様分子１抗体、モノクローナル［ＵＰ－Ｄ２］又はＲ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓから入手可能なラット抗ＣＭＲＦ３５様分子１抗体、モノクローナル［２３４９０３］の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＣＬＥＣ１２Ａに対する抗原結合ドメインは、抗体二特異性Ｔ細胞エンゲージャー（ＢｉＴＥ）ｓｃＦｖ抗体及びＮｏｏｒｄｈｕｉｓ ｅｔ ａｌ．，“Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｏｆ ＣＬＥＣ１２Ａ Ｉｎ Ａｃｕｔｅ Ｍｙｅｌｏｉｄ Ｌｅｕｋｅｍｉａ ｂｙ Ａｎｔｉｂｏｄｙ－Ｄｒｕｇ－Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ ａｎｄ Ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ ＣＬＬ－１ｘＣＤ３ ＢｉＴＥ Ａｎｔｉｂｏｄｙ”５３ｒｄＡＳＨ Ａｎｎｕａｌ Ｍｅｅｔｉｎｇ ａｎｄ Ｅｘｐｏｓｉｔｉｏｎ，Ｄｅｃｅｍｂｅｒ １０－１３，２０１１に記載のＡＤＣ及びＭＣＬＡ－１１７（Ｍｅｒｕｓ）の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＢＳＴ２（ＣＤ３１７とも称される）に対する抗原結合ドメインは、Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ－Ｏｎｌｉｎｅから入手可能な抗体マウス抗ＣＤ３１７抗体、モノクローナル［３Ｈ４］又はＲ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓから入手可能なマウス抗ＣＤ３１７抗体、モノクローナル［６９６７３９］の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＥＭＲ２（ＣＤ３１２とも称される）に対する抗原結合ドメインは、Ｌｉｆｅｓｐａｎ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓから入手可能な抗体マウス抗ＣＤ３１２抗体、モノクローナル［ＬＳ－Ｂ８０３３］又はＲ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓから入手可能なマウス抗ＣＤ３１２抗体、モノクローナル［４９４０２５］の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＬＹ７５に対する抗原結合ドメインは、ＥＭＤ Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅから入手可能な抗体マウス抗リンパ球抗原７５抗体、モノクローナル［ＨＤ３０］又はＬｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓから入手可能なマウス抗リンパ球抗原７５抗体、モノクローナル［Ａ１５７９７］の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＧＰＣ３に対する抗原結合ドメインは、Ｎａｋａｎｏ Ｋ，Ｉｓｈｉｇｕｒｏ Ｔ，Ｋｏｎｉｓｈｉ Ｈ，ｅｔ ａｌ．Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｈｕｍａｎｉｚｅｄ ａｎｔｉ－ｇｌｙｐｉｃａｎ ３ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｂｙ ＣＤＲ ｇｒａｆｔｉｎｇ ａｎｄ ｓｔａｂｉｌｉｔｙ ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ．Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｄｒｕｇｓ．２０１０ Ｎｏｖ；２１（１０）：９０７－９１６に記載の抗体ｈＧＣ３３、又はＭＤＸ－１４１４、ＨＮ３、又はＹＰ７の抗原結合部分、例えばＣＤＲであり、これら３つは、全てＦｅｎｇ ｅｔ ａｌ．，“Ｇｌｙｐｉｃａｎ－３ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ａ ｎｅｗ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｔａｒｇｅｔ ｆｏｒ ｌｉｖｅｒ ｃａｎｃｅｒ．”ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ．２０１４ Ｊａｎ ２１；５８８（２）：３７７－８２に記載される。
一実施形態において、ＦＣＲＬ５に対する抗原結合ドメインは、Ｅｌｋｉｎｓ ｅｔ ａｌ．，“ＦｃＲＬ５ ａｓ ａ ｔａｒｇｅｔ ｏｆ ａｎｔｉｂｏｄｙ－ｄｒｕｇ ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｍｙｅｌｏｍａ”Ｍｏｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ．２０１２ Ｏｃｔ；１１（１０）：２２２２－３２に記載の抗ＦｃＲＬ５抗体の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、ＩＧＬＬ１に対する抗原結合ドメインは、Ｌｉｆｅｓｐａｎ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓから入手可能な抗体マウス抗免疫グロブリンλ様ポリペプチド１抗体、モノクローナル［ＡＴ１Ｇ４］、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄから入手可能なマウス抗免疫グロブリンλ様ポリペプチド１抗体、モノクローナル［ＨＳＬ１１］の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。
一実施形態において、抗原結合ドメインは、上に列挙した、抗体からの１つ、２つ、３つ（例えば、３つ全て）の重鎖ＣＤＲ、ＨＣ ＣＤＲ１、ＨＣ ＣＤＲ２及びＨＣ ＣＤＲ３並びに／又は上に列挙した抗体からの１つ、２つ、３つ（例えば、３つ全て）の軽鎖ＣＤＲ、ＬＣ ＣＤＲ１、ＬＣ ＣＤＲ２及びＬＣ ＣＤＲ３を含む。一実施形態において、抗原結合ドメインは、上に列挙した抗体の重鎖可変領域及び／又は軽鎖可変領域を含む。
別の態様において、抗原結合ドメインは、ヒト化抗体又は抗体断片を含む。一部の態様において、非ヒト抗体は、ヒト化であり、抗体の特定の配列又は領域は、ヒトで天然に産生される抗体又はその断片との類似性が増すように改変される。一態様において、抗原結合ドメインは、ヒト化である。
ヒト化抗体は、ＣＤＲ移植（例えば、それぞれその全体が参照により本明細書に組み込まれる欧州特許第２３９，４００号明細書；国際公開第９１／０９９６７号パンフレット；及び米国特許第５，２２５，５３９号明細書、同第５，５３０，１０１号明細書及び同第５，５８５，０８９号明細書を参照されたい）、ベニアリング又はリサーフェシング（例えば、それぞれその全体が参照により本明細書に組み込まれる欧州特許第５９２，１０６号明細書及び欧州特許第５１９，５９６号明細書；Ｐａｄｌａｎ，１９９１，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２８（４／５）：４８９－４９８；Ｓｔｕｄｎｉｃｋａ ｅｔ ａｌ．，１９９４，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，７（６）：８０５－８１４；及びＲｏｇｕｓｋａ ｅｔ ａｌ．，１９９４，ＰＮＡＳ，９１：９６９－９７３を参照されたい）、鎖シャッフリング（例えば、その全体が参照により本明細書に組み込まれる米国特許第５，５６５，３３２号明細書を参照されたい）及び例えばそれぞれその全体が参照により本明細書に組み込まれる米国特許出願公開第２００５／００４２６６４号明細書、米国特許出願公開第２００５／００４８６１７号明細書、米国特許第６，４０７，２１３号明細書、米国特許第５，７６６，８８６号明細書、国際公開第９３１７１０５号パンフレット、Ｔａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１６９：１１１９－２５（２００２）、Ｃａｌｄａｓ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ．，１３（５）：３５３－６０（２０００）、Ｍｏｒｅａ ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ，２０（３）：２６７－７９（２０００）、Ｂａｃａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２７２（１６）：１０６７８－８４（１９９７）、Ｒｏｇｕｓｋａ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ．，９（１０）：８９５－９０４（１９９６）、Ｃｏｕｔｏ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，５５（２３ Ｓｕｐｐ）：５９７３ｓ－５９７７ｓ（１９９５）、Ｃｏｕｔｏ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，５５（８）：１７１７－２２（１９９５）、Ｓａｎｄｈｕ Ｊ Ｓ，Ｇｅｎｅ，１５０（２）：４０９－１０（１９９４）及びＰｅｄｅｒｓｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２３５（３）：９５９－７３（１９９４）に記載の技術を含むが、これらに限定されない、当技術分野で公知の多様な方法を使用して産生できる。多くの場合、フレームワーク領域におけるフレームワーク残基を、抗原結合を変える、例えば改善するためにＣＤＲドナー抗体からの対応する残基で置換する。これらのフレームワーク置換は、当技術分野で周知の方法、例えば抗原結合に重要なフレームワーク残基を同定するためのＣＤＲとフレームワーク残基の相互作用のモデリング及び特定の位置の異常フレームワーク残基を同定するための配列比較により同定される。（例えば、参照により本明細書に組み込まれるＱｕｅｅｎ ｅｔ ａｌ．、米国特許第５，５８５，０８９号明細書；及びＲｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，１９８８，Ｎａｔｕｒｅ，３３２：３２３を参照されたい）。
ヒト化抗体又は抗体断片は、非ヒトである供給源から残留している１つ以上のアミノ酸残基を有する。これらの非ヒトアミノ酸残基は、多くの場合、典型的には「インポート」可変ドメインからとられる「インポート」残基という。本明細書に提供されるように、ヒト化抗体又は抗体断片は、フレームワークが完全に又は大部分ヒト生殖細胞系に由来する、非ヒト免疫グロブリン分子及びフレームワーク領域からの１つ以上のＣＤＲを含む。抗体又は抗体断片のヒト化のための多数の技術が当技術分野で周知であり、本質的に、Ｗｉｎｔｅｒ ａｎｄ ｃｏ－ｗｏｒｋｅｒｓ（Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３２１：５２２－５２５（１９８６）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３３２：３２３－３２７（１９８８）；Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２３９：１５３４－１５３６（１９８８））の方法に従い、齧歯類ＣＤＲ又はＣＤＲ配列をヒト抗体の対応する配列に置換することにより、即ちＣＤＲ移植（欧州特許第２３９，４００号明細書；国際公開第９１／０９９６７号パンフレット；及び米国特許第４，８１６，５６７号；第６，３３１，４１５号；第５，２２５，５３９号；第５，５３０，１０１号；第５，５８５，０８９号；第６，５４８，６４０号明細書、これらの内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる）により実施できる。このようなヒト化抗体及び抗体断片において、実質的に１つより少ない無傷のヒト可変ドメインは、非ヒト種からの対応する配列により置換されている。ヒト化抗体は、多くの場合、あるＣＤＲ残基及びおそらくあるフレームワーク（ＦＲ）残基が齧歯類抗体における類似部位からの残基により置換される、ヒト抗体である。抗体及び抗体断片のヒト化は、ベニアリング又はリサーフェシング（欧州特許第５９２，１０６号明細書；欧州特許第５１９，５９６号明細書；Ｐａｄｌａｎ，１９９１，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２８（４／５）：４８９－４９８；Ｓｔｕｄｎｉｃｋａ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，７（６）：８０５－８１４（１９９４）；及びＲｏｇｕｓｋａ ｅｔ ａｌ．，ＰＮＡＳ，９１：９６９－９７３（１９９４））又は鎖シャッフリング（米国特許第５，５６５，３３２号明細書）によっても達成でき、その内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
ヒト化抗体を製造するために使用する軽及び重両者のヒト可変ドメインの選択は、抗原性を低下させるためである。いわゆる「ベストフィット」法により、齧歯類抗体の可変ドメインの配列を既知ヒト可変ドメイン配列のライブラリ全体に対してスクリーニングする。齧歯類に最も近いヒト配列を、その後、ヒト化抗体のためのヒトフレームワーク（ＦＲ）として受け入れる（Ｓｉｍｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５１：２２９６（１９９３）；Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９６：９０１（１９８７）、これらの内容は、その全体が参照によりその全体を本明細書に組み込まれる）。別の方法は、特定のサブグループの軽鎖又は重鎖の全抗体のコンセンサス配列由来の特定のフレームワークを使用する。同じフレームワークは、数種の異なるヒト化抗体のために使用し得る（例えば、その内容が全体として参照により本明細書に組み込まれるＮｉｃｈｏｌｓｏｎ ｅｔ ａｌ．Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎ．３４（１６－１７）：１１５７－１１６５（１９９７）；Ｃａｒｔｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８９：４２８５（１９９２）；Ｐｒｅｓｔａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５１：２６２３（１９９３）を参照されたい）。いくつかの実施形態において、重鎖可変領域のフレームワーク領域、例えば４つ全てのフレームワーク領域は、ＶＨ４＿４－５９生殖細胞系配列由来である。一実施形態において、フレームワーク領域は、例えば、対応するマウス配列のアミノ酸からの１つ、２つ、３つ、４つ又は５つの改変、例えば置換を含み得る。一実施形態において、軽鎖可変領域のフレームワーク領域、例えば全部で４つのフレームワーク領域は、ＶＫ３＿１．２５生殖細胞系配列由来である。一実施形態において、フレームワーク領域は、例えば、対応するマウス配列のアミノ酸からの１つ、２つ、３つ、４つ又は５つの改変、例えば置換を含み得る。
いくつかの態様において、本開示のＣＡＲ組成物の抗体断片を含む部分は、標的抗原に対する高親和性及び他の有利な生物学的特性を維持しながらヒト化される。本開示の一態様によると、ヒト化抗体及び抗体断片は、親及びヒト化配列の三次元モデルを使用して、親配列及び種々の概念的ヒト化産物の分析の過程により製造される。三次元免疫グロブリンモデルは、一般に利用可能であり、当業者に熟知されている。選択した候補免疫グロブリン配列の可能性のある三次元立体構造的構造を説明及び提示するコンピュータープログラムが利用可能である。これらのディスプレイの検査は、候補免疫グロブリン配列の機能における残基の可能性のある役割の分析、例えば候補免疫グロブリンの標的抗原への結合能に影響する残基の分析を可能にする。この方法で、ＦＲ残基は、標的抗原に対する親和性増加などの所望の抗体又は抗体断片時調が達成されるように、レシピエント及びインポート配列から選択及び組み合わせできる。一般に、ＣＤＲ残基は、抗原結合の直接的且つ最も実質的な影響に関与する。
ヒト化抗体又は抗体断片は、例えば、本開示における元の抗体と同様の抗原特異性、本明細書に記載されるようなヒト癌関連抗原に結合する能力を保持し得る。いくつかの実施形態において、ヒト化抗体又は抗体断片は、本明細書に記載の癌関連抗原に結合する改善された親和性及び／又は特異性を有し得る。
一態様において、本開示の抗原結合ドメインは、抗体又は抗体断片の特定の機能的特徴又は特性によって特徴付けられる。例えば、一態様において、抗原結合ドメインを含む本開示のＣＡＲ組成物の部分は、本明細書に記載の腫瘍抗原に特異的に結合する。
一態様において、本明細書に記載の抗癌抗原結合ドメインは、断片、例えば単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）である。一態様において、本明細書に記載の抗癌関連抗原結合ドメインは、Ｆｖ、Ｆａｂ、（Ｆａｂ’）２又は二機能性（例えば、二特異性）ハイブリッド抗体（例えば、Ｌａｎｚａｖｅｃｃｈｉａ ｅｔ ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１７，１０５（１９８７））である。一態様において、本開示の抗体及びその断片は、野生型又は増強した親和性で本明細書に記載の癌関連抗原に結合する。
ある例において、ｓｃＦｖｓは、当技術分野で公知の方法により製造できる（例えば、Ｂｉｒｄ ｅｔ ａｌ．，（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４２：４２３－４２６及びＨｕｓｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８５：５８７９－５８８３を参照されたい）。ＳｃＦｖ分子は、可動性ポリペプチドリンカーを使用して、ＶＨ領域とＶＬ領域とを一緒に連結することにより産生できる。ｓｃＦｖ分子は、最適長及び／又はアミノ酸組成を有するリンカー（例えば、Ｓｅｒ－Ｇｌｙリンカー）を含む。リンカー長は、ｓｃＦｖの可変領域がどのように折りたたまれ、相互作用するかに大きく影響し得る。実際、短ポリペプチドリンカーを用いる場合、（例えば、５～１０アミノ酸）、鎖内折りたたみは阻止される。鎖内折りたたみは、２可変領域が一体となって機能的エピトープ結合部位を形成させるためにも必要である。リンカー方向及びサイズの例は、例えば、参照により本明細書に組み込まれるＨｏｌｌｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．１９９３ Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．９０：６４４４－６４４８、米国特許出願公開第２００５／０１００５４３号、第２００５／０１７５６０６号、第２００７／００１４７９４号明細書及び国際公開第２００６／０２０２５８号パンフレット及び国際公開第２００７／０２４７１５号パンフレットを参照されたい。
ｓｃＦｖは、そのＶＬ領域とＶＨ領域との間に少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０又はそれを超えるアミノ酸残基のリンカーを含み得る。リンカー配列は、あらゆる天然に存在するアミノ酸を含み得る。いくつかの実施形態において、リンカー配列は、アミノ酸グリシン及びセリンを含む。別の実施形態において、リンカー配列は、（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）ｎ（ここで、ｎは、１つ以上の正の整数である）などの一連のグリシン及びセリン反復を含む（配列番号３０００）。一実施形態において、リンカーは、（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）４（配列番号３００１）又は（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）３（配列番号３００２）であり得る。リンカー長の変動は、活性を維持又は増強し、活性試験において優れた有効性を生じ得る。
別の態様において、抗原結合ドメインは、Ｔ細胞受容体（「ＴＣＲ」）又はその断片、例えば単鎖ＴＣＲ（ｓｃＴＣＲ）である。そのようなＴＣＲを作製する方法は、当技術分野で公知である。例えば、ｉｌｌｅｍｓｅｎ ＲＡ ｅｔ ａｌ，Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ ７：１３６９－１３７７（２０００）；Ｚｈａｎｇ Ｔ ｅｔ ａｌ，Ｃａｎｃｅｒ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ １１：４８７－４９６（２００４）；Ａｇｇｅｎ ｅｔ ａｌ，Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ．１９（４）：３６５－７４（２０１２）（参考文献は、その全体が本明細書に組み込まれる）を参照されたい。例えば、リンカー（例えば、柔軟なペプチド）によって連結されたＴ細胞クローン由来のＶα及びＶβ遺伝子を含むｓｃＴＣＲを操作することができる。このアプローチは、それ自体が細胞内にある癌関連標的にとって非常に有用であるが、そのような抗原（ペプチド）の断片は、ＭＨＣによって癌細胞の表面に提示される。
一実施形態において、ＥＧＦＲｖＩＩＩに対する抗原結合ドメインは、例えば国際公開第２０１４／１３０６５７号パンフレット又は米国特許出願公開第２０１４／０３２２２７５Ａ１号明細書に記載される、ＣＡＲ分子、抗体又はその抗原結合フラグメントの抗原結合部分、例えばＣＤＲである。一実施形態において、ＣＡＲ分子は、ＥＧＦＲｖＩＩＩ ＣＡＲ、又は参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２０１４／１３０６５７号パンフレットの表２若しくは配列番号１１による抗原結合ドメイン、又はそれと実質的に同一（例えば、それと少なくとも８５％、９０％、９５％又はそれを超えて同一）の配列を含む。ＥＧＦＲｖＩＩＩ ＣＡＲ分子及び抗原結合ドメイン（例えば、Ｋａｂａｔ又はＣｈｏｔｈｉａによる１つ、２つ、３つのＶＨ ＣＤＲ、及び１つ、２つ、３つのＶＬ ＣＤＲを含む）をコードするアミノ酸及びヌクレオチド配列は、国際公開第２０１４／１３０６５７号パンフレットに指定される。
一実施形態において、メソテリンに対する抗原結合ドメインは、例えば国際公開第２０１５／０９０２３０号パンフレットに記載される、抗体、抗原結合フラグメント又はＣＡＲ分子の抗原結合部分、例えばＣＤＲである。一実施形態において、メソテリンに対する抗原結合ドメインは、例えば、国際公開第１９９７／０２５０６８号パンフレット、国際公開第１９９９／０２８４７１号パンフレット、国際公開第２００５／０１４６５２号パンフレット、国際公開第２００６／０９９１４１号パンフレット、国際公開第２００９／０４５９５７号パンフレット、国際公開第２００９／０６８２０４号パンフレット、国際公開第２０１３／１４２０３４号パンフレット、国際公開第２０１３／０４０５５７号パンフレット又は国際公開第２０１３／０６３４１９号パンフレットに記載される、抗体、抗原結合フラグメント又はＣＡＲ分子の抗原結合部分、例えば、ＣＤＲである。
一実施形態において、ＣＡＲ分子は、本明細書に記載のメソテリンＣＡＲ、例えば国際公開第２０１５／０９０２３０号パンフレット（参照により本明細書に組み込まれる）に記載のメソテリンＣＡＲを含む。いくつかの実施形態において、メソテリンＣＡＲは、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２０１５／０９０２３０号パンフレットに示されるアミノ酸を含むか又はヌクレオチド配列、若しくは前記配列のいずれかと実質的に同一（例えば、前記メソテリンＣＡＲ配列のいずれかと少なくとも８５％、９０％、９５％又はそれを超えて同一）の配列を有する。一実施形態において、ＣＡＲ分子は、メソテリンＣＡＲ、又は参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２０１５／０９０２３０号パンフレットの表２～３による抗原結合ドメイン、又はそれと実質的に同一（例えば、それと少なくとも８５％、９０％、９５％又はそれを超えて同一）の配列を含む。メソテリンＣＡＲ分子及び抗原結合ドメイン（例えば、Ｋａｂａｔ又はＣｈｏｔｈｉａによる１つ、２つ、３つのＶＨ ＣＤＲ、及び１つ、２つ、３つのＶＬ ＣＤＲを含む）をコードするアミノ酸及びヌクレオチド配列は、国際公開第２０１５／０９０２３０号パンフレットに指定される。
ＣＡＲ膜貫通ドメイン
膜貫通ドメインに関して、種々の実施形態において、ＣＡＲ分子は、ＣＡＲ分子の細胞外ドメインに結合する膜貫通ドメインを含むように設計できる。膜貫通ドメインは、膜貫通領域に隣接した１つ以上の更なるアミノ酸、例えば膜貫通が由来するタンパク質の細胞外領域と関係する１つ以上のアミノ酸（例えば、細胞外領域の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０～最大で１５のアミノ酸）及び／又は膜貫通タンパク質が由来するタンパク質の細胞内領域と関係する１つ以上のアミノ酸（例えば、細胞内領域の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０～最大で１５のアミノ酸）を含み得る。一実施形態において、膜貫通ドメインは、ＣＡＲ分子の他のドメインの１つと関連するものである。別の態様において、膜貫通ドメインは、ＣＡＲの任意の別のドメインが由来するものと同じタンパク質に由来しない。ある例において、膜貫通ドメインは、このようなドメインが、同一又は異なる表面膜タンパク質の膜貫通ドメインと結合するのを避けるように、例えば受容体複合体の他のメンバーとの相互作用を最小化するように選択され又はアミノ酸置換による改変ができる。いくつかの実施形態において、膜貫通ドメインは、ＣＡＲ発現細胞の細胞表面上の別のＣＡＲ分子とホモ二量体化できる。いくつかの実施形態において、膜貫通ドメインのアミノ酸配列は、同じＣＡＲＴに存在する天然結合パートナーの結合ドメインとの相互作用を最小化するように改変又は置換され得る。
膜貫通ドメインは、天然由来又は組み換え源由来であり得る。源が天然であるとき、ドメインは、あらゆる膜結合又は膜貫通タンパク質由来であり得る。いくつかの実施形態において、膜貫通ドメインは、ＣＡＲ分子が標的に結合したときは常に細胞内ドメインにシグナル伝達できる。本開示において特に有用な膜貫通ドメインは、例えば、Ｔ細胞受容体のα、β又はζ鎖、ＣＤ２８、ＣＤ２７、ＣＤ３ε、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ１５４の少なくとも膜貫通領域を含み得る。一実施形態において、膜貫通ドメインは、例えば、ＫＩＲ２ＤＳ２、ＯＸ４０、ＣＤ２、ＣＤ２７、ＬＦＡ－１（ＣＤ１１ａ、ＣＤ１８）、ＩＣＯＳ（ＣＤ２７８）、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＧＩＴＲ、ＣＤ４０、ＢＡＦＦＲ、ＨＶＥＭ（ＬＩＧＨＴＲ）、ＳＬＡＭＦ７、ＮＫｐ８０（ＫＬＲＦ１）、ＮＫｐ４４、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４６、ＣＤ１６０、ＣＤ１９、ＩＬ２Ｒβ、ＩＬ２Ｒγ、ＩＬ７Ｒα、ＩＴＧＡ１、ＶＬＡ１、ＣＤ４９ａ、ＩＴＧＡ４、ＩＡ４、ＣＤ４９Ｄ、ＩＴＧＡ６、ＶＬＡ－６、ＣＤ４９ｆ、ＩＴＧＡＤ、ＣＤ１１ｄ、ＩＴＧＡＥ、ＣＤ１０３、ＩＴＧＡＬ、ＣＤ１１ａ、ＬＦＡ－１、ＩＴＧＡＭ、ＣＤ１１ｂ、ＩＴＧＡＸ、ＣＤ１１ｃ、ＩＴＧＢ１、ＣＤ２９、ＩＴＧＢ２、ＣＤ１８、ＬＦＡ－１、ＩＴＧＢ７、ＴＮＦＲ２、ＤＮＡＭ１（ＣＤ２２６）、ＳＬＡＭＦ４（ＣＤ２４４、２Ｂ４）、ＣＤ８４、ＣＤ９６（Ｔａｃｔｉｌｅ）、ＣＥＡＣＡＭ１、ＣＲＴＡＭ、Ｌｙ９（ＣＤ２２９）、ＣＤ１６０（ＢＹ５５）、ＰＳＧＬ１、ＣＤ１００（ＳＥＭＡ４Ｄ）、ＳＬＡＭＦ６（ＮＴＢ－Ａ、Ｌｙ１０８）、ＳＬＡＭ（ＳＬＡＭＦ１、ＣＤ１５０、ＩＰＯ－３）、ＢＬＡＭＥ（ＳＬＡＭＦ８）、ＳＥＬＰＬＧ（ＣＤ１６２）、ＬＴＢＲ、ＰＡＧ／Ｃｂｐ、ＮＫＧ２Ｄ、ＮＫＧ２Ｃの少なくとも膜貫通領域を含み得る。
ある例において、膜貫通ドメインは、ヒンジ、例えばヒトタンパク質からのヒンジを介して、ＣＡＲ分子の細胞外領域、例えばＣＡＲ分子の抗原結合ドメインに結合できる。例えば、いくつかの実施形態において、ヒンジは、ヒトＩｇ（免疫グロブリン）ヒンジ（例えば、ＩｇＧ４ヒンジ又はＣＤ８ａヒンジであり得る。いくつかの実施形態において、ヒンジ又はスペーサーは、配列番号１０１８のアミノ酸配列を含む（例えば、これからなる）。いくつかの実施形態において、膜貫通ドメインは、配列番号１０２６の膜貫通ドメインを含む（例えば、これからなる）。
いくつかの実施形態において、ヒンジ又はスペーサーは、ＩｇＧ４ヒンジを含む。例えば、いくつかの実施形態において、ヒンジ又はスペーサーは、配列番号１０２０のアミノ酸配列のヒンジを含む。いくつかの実施形態において、ヒンジ又はスペーサーは、配列番号１０２１のヌクレオチド配列によってコードされるヒンジを含む。
いくつかの実施形態において、ヒンジ又はスペーサーは、ＩｇＤヒンジを含む。例えば、いくつかの実施形態において、ヒンジ又はスペーサーは、配列番号１０２２のアミノ酸配列のヒンジを含む。いくつかの実施形態において、ヒンジ又はスペーサーは、配列番号１０２３のヌクレオチド配列によってコードされるヒンジを含む。
いくつかの実施形態において、膜貫通ドメインは組み換えであり得、その場合、ロイシン及びバリンなどの疎水性残基を優勢に含む。いくつかの実施形態において、フェニルアラニン、トリプトファン及びバリンのトリプレットを、組み換え膜貫通ドメインの各末端に見ることができる。
任意選択により、２～１０アミノ酸長の短オリゴ又はポリペプチドリンカーが、ＣＡＲ分子の膜貫通ドメインと細胞質領域の間に結合を形成し得る。グリシン－セリンダブレットは特に適当なリンカーを提供する。例えば、いくつかの実施形態において、リンカーは、配列番号１０２４のアミノ酸配列を含む。一実施形態において、リンカーは、配列番号１０２５のヌクレオチド配列によりコードされる。
いくつかの実施形態において、ヒンジ又はスペーサーは、ＫＩＲ２ＤＳ２ヒンジを含む。
細胞質ドメイン
本ＣＡＲ分子の細胞質ドメイン又は領域は、細胞内シグナル伝達ドメインを含む。細胞内シグナル伝達ドメインは、一般的に、ＣＡＲ分子が導入されている免疫細胞の正常エフェクター機能の少なくとも１つの活性化を担う。
本発明のＣＡＲ分子において使用する細胞内シグナル伝達ドメインの例は、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）及び抗原受容体結合後にシグナル伝達を開始するために協調して機能する共受容体の細胞質配列並びにこれらのあらゆる誘導体又はバリアント及び同じ機能的能力を有するあらゆる組み換え配列を含む。
ＴＣＲ単独により産生されたシグナルはＴ細胞の完全活性化には不十分であり、二次及び／又は共刺激性シグナルも必要であることが知られている。そのため、Ｔ細胞活性化は、２つの異なるクラスの細胞質シグナル伝達配列が介在するということができる：ＴＣＲ（初代細胞内シグナル伝達ドメイン）を介して抗原依存性一次活性化を開始するもの及び二次又は共刺激性シグナル（二次細胞質ドメイン、例えば共刺激ドメイン）を提供するように抗原非依存的方法で作用するもの。
一次シグナル伝達ドメインは、ＴＣＲ複合体の一次活性化を刺激性方向又は阻害性方向のいずれかで制御する。刺激性方向で作用する初代細胞内シグナル伝達ドメインは、免疫受容体チロシンベースの活性化モチーフ又はＩＴＡＭとして知られるシグナル伝達モチーフを含み得る。
本開示において特に有用であるＩＴＡＭ含有初代細胞内シグナル伝達ドメインの例は、ＴＣＲゼータ、ＦｃＲガンマ、ＦｃＲベータ、ＣＤ３ガンマ、ＣＤ３デルタ、ＣＤ３イプシロン、ＣＤ５、ＣＤ２２、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ２７８（「ＩＣＯＳ」としても知られる）、ＦｃεＲＩ、ＤＡＰ１０、ＤＡＰ１２及びＣＤ６６ｄのものを含む。いくつかの実施形態において、本開示のＣＡＲ分子は、細胞内シグナル伝達ドメイン、例えば、ＣＤ３－ゼータの一次シグナル伝達ドメイン、例えば、本明細書に記載のＣＤ３－ゼータ配列を含む。
いくつかの実施形態において、一次シグナル伝達ドメインは、天然ＩＴＡＭドメインと比較して改変された（例えば、増加又は減少した）活性を有する、修飾ＩＴＡＭドメイン、例えば変異ＩＴＡＭドメインを含む。いくつかの実施形態において、一次シグナル伝達ドメインは、修飾ＩＴＡＭ含有初代細胞内シグナル伝達ドメイン、例えば最適化及び／又は切断されたＩＴＡＭ含有初代細胞内シグナル伝達ドメインを含む。いくつかの実施形態において、一次シグナル伝達ドメインは、１つ、２つ、３つ、４つ又はそれを超えるＩＴＡＭモチーフを含む。
共刺激シグナル伝達ドメイン
ＣＡＲ分子の細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ζシグナル伝達ドメインをそれ自体で含むことができるか、又は本開示のＣＡＲ分子に関連して、有用な任意の他の所望の細胞内シグナル伝達ドメインと組み合わせ得る。例えば、ＣＡＲの細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ζ鎖部分及び共刺激性シグナル伝達ドメインを含み得る。共刺激性シグナル伝達ドメインは、共刺激性分子の細胞内ドメインを含むＣＡＲ分子の部分を指す。いくつかの実施形態において、細胞内ドメインは、ＣＤ３ゼータのシグナル伝達ドメイン及びＣＤ２８のシグナル伝達ドメインを含むように設計される。いくつかの実施形態において、細胞内ドメインは、ＣＤ３ゼータのシグナル伝達ドメイン及びＩＣＯＳのシグナル伝達ドメインを含むように設計される。
共刺激性分子は、リンパ球の抗原に対する効率的応答に必要である、抗原受容体又はそのリガンド以外の細胞表面分子であり得る。そのような分子の例には、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＰＤ－１、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦＡ－１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３及びＣＤ８３と特異的に結合するリガンド等が含まれる。例えば、ＣＤ２７共刺激は、インビトロでヒトＣＡＲＴ細胞の増殖、エフェクター機能及び生存を増強し、インビボでヒトＴ細胞残留性及び抗腫瘍活性を増強することが示されている（Ｓｏｎｇ ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ．２０１２；１１９（３）：６９６－７０６）。更なるこのような共刺激性分子の例は、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ－１、ＧＩＴＲ、ＢＡＦＦＲ、ＨＶＥＭ（ＬＩＧＨＴＲ）、ＳＬＡＭＦ７、ＮＫｐ８０（ＫＬＲＦ１）、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４４、ＮＫｐ４６、ＣＤ１６０、ＣＤ１９、ＣＤ４、ＣＤ８α、ＣＤ８β、ＩＬ２Ｒβ、ＩＬ２Ｒγ、ＩＬ７Ｒα、ＩＴＧＡ４、ＶＬＡ１、ＣＤ４９ａ、ＩＴＧＡ４、ＩＡ４、ＣＤ４９Ｄ、ＩＴＧＡ６、ＶＬＡ－６、ＣＤ４９ｆ、ＩＴＧＡＤ、ＣＤ１１ｄ、ＩＴＧＡＥ、ＣＤ１０３、ＩＴＧＡＬ、ＣＤ１１ａ、ＬＦＡ－１、ＩＴＧＡＭ、ＣＤ１１ｂ、ＩＴＧＡＸ、ＣＤ１１ｃ、ＩＴＧＢ１、ＣＤ２９、ＩＴＧＢ２、ＣＤ１８、ＬＦＡ－１、ＩＴＧＢ７、ＴＮＦＲ２、ＴＲＡＮＣＥ／ＲＡＮＫＬ、ＤＮＡＭ１（ＣＤ２２６）、ＳＬＡＭＦ４（ＣＤ２４４、２Ｂ４）、ＣＤ８４、ＣＤ９６（Ｔａｃｔｉｌｅ）、ＣＥＡＣＡＭ１、ＣＲＴＡＭ、Ｌｙ９（ＣＤ２２９）、ＣＤ１６０（ＢＹ５５）、ＰＳＧＬ１、ＣＤ１００（ＳＥＭＡ４Ｄ）、ＣＤ６９、ＳＬＡＭＦ６（ＮＴＢ－Ａ、Ｌｙ１０８）、ＳＬＡＭ（ＳＬＡＭＦ１、ＣＤ１５０、ＩＰＯ－３）、ＢＬＡＭＥ（ＳＬＡＭＦ８）、ＳＥＬＰＬＧ（ＣＤ１６２）、ＬＴＢＲ、ＬＡＴ、ＧＡＤＳ、ＳＬＰ－７６、ＮＫＧ２Ｄ、ＮＫＧ２Ｃ、及びＰＡＧ／Ｃｂｐを含む。
ＣＡＲ分子の細胞質部分内の細胞内シグナル伝達配列は、互いに無作為に又は特定の順序で連結し得る。任意選択により、例えば、２～１０アミノ酸（例えば、２、３、４、５、６、７、８、９又は１０アミノ酸）長の短オリゴ又はポリペプチドリンカーは、細胞内シグナル伝達配列間に結合を形成し得る。いくつかの実施形態において、グリシン－セリンダブレットを適当なリンカーとして使用できる。いくつかの実施形態において、単一アミノ酸、例えばアラニン、グリシンを適当なリンカーとして使用できる。
いくつかの実施形態において、細胞内シグナル伝達ドメインは、２つ以上、例えば２つ、３つ、４つ、５つ又はそれを超える共刺激性シグナル伝達ドメインを含むように設計される。いくつかの実施形態において、２つ以上、例えば２つ、３つ、４つ、５つ又はそれを超える共刺激性シグナル伝達ドメインは、リンカー分子、例えば本明細書に記載のリンカー分子により分けられる。いくつかの実施形態において、細胞内シグナル伝達ドメインは、２つの共刺激性シグナル伝達ドメインを含む。いくつかの実施形態において、リンカー分子はグリシン残基である。一実施形態において、リンカー分子はアラニン残基である。
いくつかの実施形態において、細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ζのシグナル伝達ドメイン及びＣＤ２８のシグナル伝達ドメインを含むように設計される。いくつかの実施形態において、細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ζのシグナル伝達ドメイン及び４－１ＢＢのシグナル伝達ドメインを含むように設計される。いくつかの実施形態において、４－１ＢＢのシグナル伝達ドメインは、配列番号１０２９のシグナル伝達ドメインである。いくつかの実施形態において、ＣＤ３－ζのシグナル伝達ドメインは、配列番号１０３４のシグナル伝達ドメインである。
いくつかの実施形態において、細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ζのシグナル伝達ドメイン及びＣＤ２７のシグナル伝達ドメインを含むように設計される。いくつかの実施形態において、ＣＤ２７のシグナル伝達ドメインは、配列番号１０３２のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、ＣＤ２７のシグナル伝達ドメインは、配列番号１０３３の核酸配列によりコードされる。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載のＣＡＲ細胞は、第２のＣＡＲ分子、例えば同じ標的又は異なる標的（例えば、本明細書に記載の癌関連抗原以外の標的又は本明細書に記載の異なる癌関連抗原、例えばＣＤ１９、ＣＤ３３、ＣＬＬ－１、ＣＤ３４、ＦＬＴ３又は葉酸受容体β）に対する、例えば異なる抗原結合ドメインを含む第２のＣＡＲ分子を更に含み得る。いくつかの実施形態において、第２のＣＡＲ分子は、癌関連抗原と同じ癌細胞型を発現する標的に対する抗原結合ドメインを含む。いくつかの実施形態において、ＣＡＲ発現細胞は、第１の抗原を標的とし共刺激シグナル伝達ドメインを有するが、一次シグナル伝達ドメインを有しない細胞内シグナル伝達ドメインを含む第１のＣＡＲ分子、及び第２の異なる抗原を標的とし一次シグナル伝達ドメインを有するが、共刺激シグナル伝達ドメインを有しない細胞内シグナル伝達ドメインを含む第２のＣＡＲ分子を含む。理論に拘束されることを望まないが、第１のＣＡＲ分子への共刺激シグナル伝達ドメイン、例えば４－１ＢＢ、ＣＤ２８、ＩＣＯＳ、ＣＤ２７又はＯＸ－４０及び一次シグナル伝達ドメイン、例えばＣＤ３ζの第２のＣＡＲ分子への配置は、両標的が発現される細胞に対してＣＡＲ活性を制限する。いくつかの実施形態において、ＣＡＲ発現細胞は、本明細書に記載の標的抗原に結合する抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン及び共刺激ドメインを含む第１の癌関連抗原ＣＡＲ及び異なる標的抗原（例えば、第１の標的抗原と同一の癌細胞型に発現される抗原）を標的とし、抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン及び一次シグナル伝達ドメインを含む第２のＣＡＲ分子を含む。いくつかの実施形態において、ＣＡＲ発現細胞は、本明細書に記載の標的抗原に結合する抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン及び一次シグナル伝達ドメインを含む第１のＣＡＲ分子、及び第１の標的抗原以外の抗原（例えば、第１の標的抗原と同一の癌細胞型に発現される抗原）を標的とし、抗原に対する抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン及び共刺激シグナル伝達ドメインを含む第２のＣＡＲ分子を含む。
いくつかの実施形態において、本開示は、ＣＡＲ細胞、例えば、ＣＡＲＴ細胞の集団を特徴とする。いくつかの実施形態において、ＣＡＲ細胞の集団は、異なるＣＡＲ分子を発現する細胞の混合物を含む。例えば、いくつかの実施形態において、ＣＡＲＴ細胞の集団は、本明細書に記載の癌関連抗原に対する抗原結合ドメインを有するＣＡＲ分子を発現する第１の細胞、及び異なる抗原結合ドメイン、例えば、本明細書に記載の異なる癌関連抗原に対する抗原結合ドメイン、例えば、第１の細胞によって発現されるＣＡＲ分子の抗原結合ドメインによって結合された癌関連抗原とは異なる、本明細書に記載の癌関連抗原に対する抗原結合ドメイン、を有するＣＡＲ分子を発現する第２の細胞を含み得る。別の例として、ＣＡＲ細胞の集団は、本明細書に記載の癌関連抗原に対する抗原結合ドメインを含むＣＡＲ分子を発現する第１の細胞及び本明細書に記載の癌関連抗原以外の標的に対する抗原結合ドメインを含むＣＡＲ分子を発現する第２の細胞を含み得る。いくつかの実施形態において、ＣＡＲ細胞の集団は、例えば、初代細胞内シグナル伝達ドメインを含むＣＡＲ分子を発現する第１の細胞及び二次シグナル伝達ドメインを含むＣＡＲ分子を発現する第２の細胞を含む。
いくつかの実施形態において、本開示は細胞の集団を特徴とし、ここで、集団内の少なくとも１つの細胞は、本明細書に記載の癌関連抗原に対する抗原結合ドメインを有するＣＡＲ分子を発現し、第２の細胞は、他の薬剤、例えばＣＡＲ発現細胞の活性を増強する薬剤を発現する。例えば、いくつかの実施形態において、薬剤は、阻害分子を阻害する薬剤であり得る。阻害分子、例えばＰＤ－１は、ＣＡＲ発現細胞が免疫エフェクター応答を開始する能力を減少させ得る。阻害分子の例は、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＣＴＬＡ４、ＴＩＭ３、ＣＥＡＣＡＭ（ＣＥＡＣＡＭ－１、ＣＥＡＣＡＭ－３、及び／又はＣＥＡＣＡＭ－５）、ＬＡＧ３、ＶＩＳＴＡ、ＢＴＬＡ、ＴＩＧＩＴ、ＬＡＩＲ１、ＣＤ１６０、２Ｂ４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、Ｂ７－Ｈ３（ＣＤ２７６）、Ｂ７－Ｈ４（ＶＴＣＮ１）、ＨＶＥＭ（ＴＮＦＲＳＦ１４又はＣＤ２７０）、ＫＩＲ、Ａ２ａＲ、ＭＨＣクラスＩ、ＭＨＣクラスＩＩ、ＧＡＬ９、アデノシン及びＴＧＦ（例えば、ＴＧＦベータ）を含む。いくつかの実施形態において、阻害分子を阻害する薬剤は、細胞に正のシグナルを提供する第２のポリペプチド、例えば本明細書に記載の細胞内シグナル伝達ドメインに結合した、第１のポリペプチド、例えば阻害分子を含む。いくつかの実施形態において、薬剤は、例えば、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＣＴＬＡ４、ＴＩＭ３、ＣＥＡＣＡＭ（ＣＥＡＣＡＭ－１、ＣＥＡＣＡＭ－３及び／又はＣＥＡＣＡＭ－５）、ＬＡＧ３、ＶＩＳＴＡ、ＢＴＬＡ、ＴＩＧＩＴ、ＬＡＩＲ１、ＣＤ１６０、２Ｂ４及びＴＧＦβ又はこれらのいずれかの断片などの阻害分子の第１のポリペプチド及び本明細書に記載の細胞内シグナル伝達ドメインである第２のポリペプチド（例えば、共刺激ドメイン（例えば、本明細書に記載のような例えば４１ＢＢ、ＣＤ２７、ＯＸ４０又はＣＤ２８）及び／又は一次シグナル伝達ドメイン（例えば、本明細書に記載のＣＤ３ζシグナル伝達ドメインを含む）である第２のポリペプチドを含む。いくつかの実施形態において、薬剤は、ＰＤ－１又はその断片の第１のポリペプチド及び本明細書に記載の細胞内シグナル伝達ドメインの第２のポリペプチド（例えば、本明細書に記載のＣＤ２８シグナル伝達ドメイン及び／又は本明細書に記載のＣＤ３ζシグナル伝達ドメイン）を含む。
ＣＤ１９ ＣＡＲ及びＣＤ１９結合配列
いくつかの実施形態において、本明細書に記載のＣＡＲ又はＣＡＲ発現細胞は、ＣＤ１９ ＣＡＲ発現細胞（例えば、ヒトＣＤ１９に結合するＣＡＲ分子を発現する細胞）である。
いくつかの実施形態において、ＣＤ１９ ＣＡＲの抗原結合ドメインは、Ｎｉｃｈｏｌｓｏｎ ｅｔ ａｌ．Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎ．３４（１６－１７）：１１５７－１１６５（１９９７）に記載のＦＭＣ６３ ｓｃＦｖフラグメントと同一又は類似の結合特異性を有する。いくつかの実施形態において、ＣＤ１９ ＣＡＲの抗原結合ドメインは、Ｎｉｃｈｏｌｓｏｎ ｅｔ ａｌ．Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎ．３４（１６－１７）：１１５７－１１６５（１９９７）に記載されるｓｃＦｖフラグメントを含む。
いくつかの実施形態において、ＣＤ１９ ＣＡＲは、参照により本明細書に組み込まれる、国際公開第２０１４／１５３２７０号パンフレットの表３に記載の抗原結合ドメイン（例えば、ヒト化抗原結合ドメイン）を含む。国際公開第２０１４／１５３２７０号パンフレットはまた、様々なＣＡＲ構築物の結合及び有効性をアッセイする方法を記載している。
いくつかの実施形態において、親マウスｓｃＦｖ配列は、国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレット（参照により本明細書に組み込まれる）に提供されるＣＡＲ１９構築物である。いくつかの実施形態において、抗ＣＤ１９結合ドメインは、国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレットに記載されるｓｃＦｖである。
いくつかの実施形態において、ＣＡＲ分子は、国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレットにおいて配列番号１２として提供される融合ポリペプチド配列を含み、これは、ヒトＣＤ１９に特異的に結合するマウス起源のｓｃＦｖフラグメントを提供する。
いくつかの実施形態において、ＣＤ１９ ＣＡＲは、国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレットで配列番号１２として提供されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、アミノ酸配列は、
Figure 2023529211000016
 、又はそれと実質的に相同な配列である。シグナルペプチドの任意選択による配列は、大文字及び括弧で示される。
いくつかの実施形態において、アミノ酸配列は、
Figure 2023529211000017
 、又はそれと実質的に相同な配列である。
いくつかの実施形態において、ＣＡＲ分子は、以下のアミノ酸配列：
Figure 2023529211000018
 を含む、ヒト化ＣＤ１９ ＣＡＲである。
いくつかの実施形態において、ＣＡＲ分子は、以下のアミノ酸配列：
Figure 2023529211000019
 を含む、ヒト化ＣＤ１９ ＣＡＲである。
いくつかの実施形態において、ＣＤ１９ ＣＡＲは、ＵＳＡＮ名ＴＩＳＡＧＥＮＬＥＣＬＥＵＣＥＬ－Ｔを有する。実施形態において、ＣＴＬ０１９は、Ｔ細胞の遺伝子改変によって作製され、この改変は、ＥＦ－１アルファプロモーターの制御下のＣＴＬ０１９導入遺伝子を含有する自己不活性化、複製欠損レンチウイルス（ＬＶ）ベクターでの形質導入による安定的挿入によって媒介される。ＣＴＬ０１９は、パーセント導入遺伝子陽性Ｔ細胞に基づいて対象に送達される導入遺伝子陽性Ｔ細胞と導入遺伝子陰性Ｔ細胞の混合物であってもよい。
いくつかの実施形態において、ＣＤ１９と特異的に結合するＣＡＲ Ｔ細胞は、ＩＮＮ名アキシカブタジェン・シロルーセル（Ａｘｉｃａｂｔａｇｅｎｅ ｃｉｌｏｌｅｕｃｅｌ）を有する。一実施形態において、ＣＤ１９と特異的に結合するＣＡＲ Ｔ細胞は、ＵＳＡＮ名ブレクスカブタジェン・アウトルーセル（ｂｒｅｘｕｃａｂｔａｇｅｎｅ ａｕｔｏｌｅｕｃｅｌ）を有する。いくつかの実施形態において、アキシカブタジェン・シロルーセル（Ａｘｉｃａｂｔａｇｅｎｅ ｃｉｌｏｌｅｕｃｅｌ）は、ＹＥＳＣＡＲＴＡ（登録商標）、Ａｘｉ－ｃｅｌ、又はＫＴＥ－Ｃ１９としても知られている。いくつかの実施形態において、ブレクスカブタジェン・アウトルーセル（ｂｒｅｘｕｃａｂｔａｇｅｎｅ ａｕｔｏｌｅｕｃｅｌ）は、ＫＴＥ－Ｘ１９又はＴＥＣＡＲＴＵＳ（登録商標）としても知られている。
一実施形態において、ＣＤ１９と特異的に結合するＣＡＲ Ｔ細胞は、ＩＮＮ名リソカブタジェン・マラルーセル（Ｌｉｓｏｃａｂｔａｇｅｎｅ ｍａｒａｌｅｕｃｅｌ）を有する。いくつかの実施形態において、リソカブタジェン・マラルーセル（Ｌｉｓｏｃａｂｔａｇｅｎｅ ｍａｒａｌｅｕｃｅｌ）は、ＪＣＡＲ０１７としても知られている。
他の実施形態において、ＣＤ１９ ＣＡＲは、参照により本明細書に組み込まれる、国際公開第２０１４／１５３２７０号パンフレットの表３に記載の抗原結合ドメイン（例えば、ヒト化抗原結合ドメイン）を含む。
マウスＣＤ１９抗体のヒト化は、ＣＡＲＴ１９処置、すなわち、ＣＡＲ１９構築物が形質導入されたＴ細胞での処置を受けている患者において、マウス特異的な残基がヒト抗マウス抗原（ＨＡＭＡ）応答を誘導することが可能な臨床条件にとって望ましい。ヒト化ＣＤ１９ ＣＡＲ配列の産生、特徴付け及び有効性は、実施例１～５（１１５～１５９頁）を含め、その全体が参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２０１４／１５３２７０号パンフレットに記載される。
いくつかの実施形態において、ＣＤ１９ ＣＡＲ構築物は、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレットに記載されており、マウスＣＤ１９ ＣＡＲ及びｓｃＦｖ構築物のアミノ酸配列は、以下の表３に示されているか、又は前述の配列のいずれかと実質的に同一（例えば、本明細書に記載の配列のいずれかと少なくとも８５％、９０％、９５％又はそれを超えて同一）の配列である。
Figure 2023529211000020
Figure 2023529211000021
Figure 2023529211000022
Figure 2023529211000023
Figure 2023529211000024
Figure 2023529211000025
Figure 2023529211000026
Figure 2023529211000027
Figure 2023529211000028
Figure 2023529211000029
Figure 2023529211000030
Figure 2023529211000031
Figure 2023529211000032
Figure 2023529211000033
Figure 2023529211000034
Figure 2023529211000035
Figure 2023529211000036
Figure 2023529211000037
Figure 2023529211000038
ヒト化抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖドメインを含むＣＤ１９ ＣＡＲ構築物は、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２０１４／１５３２７０号パンフレットに記載されている。
抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖドメインのマウス及びヒト化ＣＤＲ配列の配列を、重鎖可変ドメインについては表４に、軽鎖可変ドメインについては表５に示す。配列番号は、表３に記載されるものを指す。
Figure 2023529211000039
Figure 2023529211000040
当技術分野における任意の公知のＣＤ１９ ＣＡＲ、例えば、任意の公知のＣＤ１９ ＣＡＲのＣＤ１９抗原結合ドメインは、本開示に従って使用することができる。例えば、ＬＧ－７４０；米国特許第８，３９９，６４５号明細書に記載のＣＤ１９ ＣＡＲ；米国特許第７，４４６，１９０号明細書；Ｘｕ ｅｔ ａｌ．，Ｌｅｕｋ Ｌｙｍｐｈｏｍａ．２０１３ ５４（２）：２５５－２６０（２０１２）；Ｃｒｕｚ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ １２２（１７）：２９６５－２９７３（２０１３）；Ｂｒｅｎｔｊｅｎｓ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，１１８（１８）：４８１７－４８２８（２０１１）；Ｋｏｃｈｅｎｄｅｒｆｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ １１６（２０）：４０９９－１０２（２０１０）；Ｋｏｃｈｅｎｄｅｒｆｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ １２２（２５）：４１２９－３９（２０１３）；及び１６ｔｈ Ａｎｎｕ Ｍｅｅｔ Ａｍ Ｓｏｃ Ｇｅｎ Ｃｅｌｌ Ｔｈｅｒ（ＡＳＧＣＴ）（Ｍａｙ １５－１８，Ｓａｌｔ Ｌａｋｅ Ｃｉｔｙ）２０１３，Ａｂｓｔ １０。
例示的なＣＤ１９ ＣＡＲは、本明細書、例えば本明細書の１つ以上の表に記載される、ＣＤ１９ ＣＡＲ、又はＸｕ ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ １２３．２４（２０１４）：３７５０－９；Ｋｏｃｈｅｎｄｅｒｆｅｒ ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ １２２．２５（２０１３）：４１２９－３９，Ｃｒｕｚ ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ １２２．１７（２０１３）：２９６５－７３、ＮＣＴ００５８６３９１、ＮＣＴ０１０８７２９４、ＮＣＴ０２４５６３５０、ＮＣＴ００８４０８５３、ＮＣＴ０２６５９９４３、ＮＣＴ０２６５０９９９、ＮＣＴ０２６４０２０９、ＮＣＴ０１７４７４８６、ＮＣＴ０２５４６７３９、ＮＣＴ０２６５６１４７、ＮＣＴ０２７７２１９８、ＮＣＴ００７０９０３３、ＮＣＴ０２０８１９３７、ＮＣＴ００９２４３２６、ＮＣＴ０２７３５０８３、ＮＣＴ０２７９４２４６、ＮＣＴ０２７４６９５２、ＮＣＴ０１５９３６９６、ＮＣＴ０２１３４２６２、ＮＣＴ０１８５３６３１、ＮＣＴ０２４４３８３１、ＮＣＴ０２２７７５２２、ＮＣＴ０２３４８２１６、ＮＣＴ０２６１４０６６、ＮＣＴ０２０３０８３４、ＮＣＴ０２６２４２５８、ＮＣＴ０２６２５４８０、ＮＣＴ０２０３０８４７、ＮＣＴ０２６４４６５５、ＮＣＴ０２３４９６９８、ＮＣＴ０２８１３８３７、ＮＣＴ０２０５０３４７、ＮＣＴ０１６８３２７９、ＮＣＴ０２５２９８１３、ＮＣＴ０２５３７９７７、ＮＣＴ０２７９９５５０、ＮＣＴ０２６７２５０１、ＮＣＴ０２８１９５８３、ＮＣＴ０２０２８４５５、ＮＣＴ０１８４０５６６、ＮＣＴ０１３１８３１７、ＮＣＴ０１８６４８８９、ＮＣＴ０２７０６４０５、ＮＣＴ０１４７５０５８、ＮＣＴ０１４３０３９０、ＮＣＴ０２１４６９２４、ＮＣＴ０２０５１２５７、ＮＣＴ０２４３１９８８、ＮＣＴ０１８１５７４９、ＮＣＴ０２１５３５８０、ＮＣＴ０１８６５６１７、ＮＣＴ０２２０８３６２、ＮＣＴ０２６８５６７０、ＮＣＴ０２５３５３６４、ＮＣＴ０２６３１０４４、ＮＣＴ０２７２８８８２、ＮＣＴ０２７３５２９１、ＮＣＴ０１８６０９３７、ＮＣＴ０２８２２３２６、ＮＣＴ０２７３７０８５、ＮＣＴ０２４６５９８３、ＮＣＴ０２１３２６２４、ＮＣＴ０２７８２３５１、ＮＣＴ０１４９３４５３、ＮＣＴ０２６５２９１０、ＮＣＴ０２２４７６０９、ＮＣＴ０１０２９３６６、ＮＣＴ０１６２６４９５、ＮＣＴ０２７２１４０７、ＮＣＴ０１０４４０６９、ＮＣＴ００４２２３８３、ＮＣＴ０１６８０９９１、ＮＣＴ０２７９４９６１、又はＮＣＴ０２４５６２０７に記載される抗ＣＤ１９ ＣＡＲを含み、それぞれ、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
ＢＣＭＡ ＣＡＲ及びＢＣＭＡ結合配列
いくつかの実施形態において、本明細書に記載のＣＡＲ又はＣＡＲ発現細胞は、ＢＣＭＡ ＣＡＲ発現細胞（例えば、ヒトＢＣＭＡに結合するＣＡＲ分子を発現する細胞）である。例示的なＢＣＭＡ ＣＡＲ分子は、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２０１６／０１４５６５号パンフレットの表１又は１６に開示される配列を含み得る。ＢＣＭＡ ＣＡＲ構築物は、任意選択によるリーダー配列；任意選択によるヒンジドメイン、例えばＣＤ８ヒンジドメイン；膜貫通ドメイン、例えばＣＤ８膜貫通ドメイン；細胞内ドメイン、例えば４－１ＢＢ細胞内ドメイン；及び機能的シグナル伝達ドメイン、例えばＣＤ３ゼータドメインを含み得る。いくつかの実施形態において、ドメインは、単一の融合タンパク質を形成するように、隣接し、同じリーディングフレーム内にある。他の実施形態において、ドメインは、例えば、本明細書に記載のようなＲＣＡＲ分子におけるような、別々のポリペプチドにある。
例示的なＢＣＭＡ ＣＡＲ分子又はそのフラグメントの配列を表６～８に開示する。いくつかの実施形態において、全長ＢＣＭＡ ＣＡＲ分子は、表Ｕ、Ｖ、Ｗ、及びＸに開示される、ＢＣＭＡ－１、ＢＣＭＡ－２、ＢＣＭＡ－３、ＢＣＭＡ－４、ＢＣＭＡ－５、ＢＣＭＡ－６、ＢＣＭＡ－７、ＢＣＭＡ－８、ＢＣＭＡ－９、ＢＣＭＡ－１０、ＢＣＭＡ－１１、ＢＣＭＡ－１２、ＢＣＭＡ－１３、ＢＣＭＡ－１４、ＢＣＭＡ－１５、１４９３６２、１４９３６３、１４９３６４、１４９３６５、１４９３６６、１４９３６７、１４９３６８、１４９３６９、ＢＣＭＡ＿ＥＢＢ－Ｃ１９７８－Ａ４、ＢＣＭＡ＿ＥＢＢ－Ｃ１９７８－Ｇ１、ＢＣＭＡ＿ＥＢＢ－Ｃ１９７９－Ｃ１、ＢＣＭＡ＿ＥＢＢ－Ｃ１９７８－Ｃ７、ＢＣＭＡ＿ＥＢＢ－Ｃ１９７８－Ｄ１０、ＢＣＭＡ＿ＥＢＢ－Ｃ１９７９－Ｃ１２、ＢＣＭＡ＿ＥＢＢ－Ｃ１９８０－Ｇ４、ＢＣＭＡ＿ＥＢＢ－Ｃ１９８０－Ｄ２、ＢＣＭＡ＿ＥＢＢ－Ｃ１９７８－Ａ１０、ＢＣＭＡ＿ＥＢＢ－Ｃ１９７８－Ｄ４、ＢＣＭＡ＿ＥＢＢ－Ｃ１９８０－Ａ２、ＢＣＭＡ＿ＥＢＢ－Ｃ１９８１－Ｃ３、ＢＣＭＡ＿ＥＢＢ－Ｃ１９７８－Ｇ４、Ａ７Ｄ１２．２、Ｃ１１Ｄ５．３、Ｃ１２Ａ３．２若しくはＣ１３Ｆ１２．１の１つ以上のＣＤＲ、ＶＨ、ＶＬ、ｓｃＦｖ、又は全長配列、又はそれと実質的に（例えば、９５～９９％）同一の配列を含む。
抗ＢＣＭＡ ＣＡＲ構築物で使用できる更なる例示的なＢＣＭＡ標的配列は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる国際公開第２０１７／０２１４５０号パンフレット、国際公開第２０１７／０１１８０４号パンフレット、国際公開第２０１７／０２５０３８号パンフレット、国際公開第２０１６／０９０３２７号パンフレット、国際公開第２０１６／１３０５９８号パンフレット、国際公開第２０１６／２１０２９３号パンフレット、国際公開第２０１６／０９０３２０号パンフレット、国際公開第２０１６／０１４７８９号パンフレット、国際公開第２０１６／０９４３０４号パンフレット、国際公開第２０１６／１５４０５５号パンフレット、国際公開第２０１５／１６６０７３号パンフレット、国際公開第２０１５／１８８１１９号パンフレット、国際公開第２０１５／１５８６７１号パンフレット、米国特許第９，２４３，０５８号明細書、米国特許第８，９２０，７７６号明細書、米国特許第９，２７３，１４１号明細書、米国特許第７，０８３，７８５号明細書、米国特許第９，０３４，３２４号明細書、米国特許出願公開第２００７／００４９７３５号明細書、米国特許出願公開第２０１５／０２８４４６７号明細書、米国特許出願公開第２０１５／００５１２６６号明細書、米国特許出願公開第２０１５／０３４４８４４号明細書、米国特許出願公開第２０１６／０１３１６５５号明細書、米国特許出願公開第２０１６／０２９７８８４号明細書、米国特許出願公開第２０１６／０２９７８８５号明細書、米国特許出願公開第２０１７／００５１３０８号明細書、米国特許出願公開第２０１７／００５１２５２号明細書、米国特許出願公開第２０１７／００５１２５２号明細書、国際公開第２０１６／０２０３３２号パンフレット、国際公開第２０１６／０８７５３１号パンフレット、国際公開第２０１６／０７９１７７号パンフレット、国際公開第２０１５／１７２８００号パンフレット、国際公開第２０１７／００８１６９号パンフレット、米国特許第９，３４０，６２１号明細書、米国特許出願公開第２０１３／０２７３０５５号明細書、米国特許出願公開第２０１６／０１７６９７３号明細書、米国特許出願公開第２０１５／０３６８３５１号明細書、米国特許出願公開第２０１７／００５１０６８号明細書、米国特許出願公開第２０１６／０３６８９８８号明細書、及び米国特許出願公開第２０１５／０２３２５５７号明細書に開示されている。いくつかの実施形態において、更なる例示的なＢＣＭＡ ＣＡＲ構築物は、国際公開第２０１２／０１６３８０５号パンフレット（その内容が全体として参照により本明細書に組み込まれる）からのＶＨ及びＶＬ配列を用いて生成される。
Figure 2023529211000041
Figure 2023529211000042
Figure 2023529211000043
Figure 2023529211000044
Figure 2023529211000045
Figure 2023529211000046
Figure 2023529211000047
Figure 2023529211000048
Figure 2023529211000049
Figure 2023529211000050
Figure 2023529211000051
Figure 2023529211000052
Figure 2023529211000053
Figure 2023529211000054
Figure 2023529211000055
Figure 2023529211000056
Figure 2023529211000057
Figure 2023529211000058
Figure 2023529211000059
Figure 2023529211000060
Figure 2023529211000061
Figure 2023529211000062
Figure 2023529211000063
Figure 2023529211000064
Figure 2023529211000065
Figure 2023529211000066
Figure 2023529211000067
Figure 2023529211000068
Figure 2023529211000069
Figure 2023529211000070
Figure 2023529211000071
Figure 2023529211000072
Figure 2023529211000073
Figure 2023529211000074
Figure 2023529211000075
Figure 2023529211000076
Figure 2023529211000077
Figure 2023529211000078
Figure 2023529211000079
Figure 2023529211000080
Figure 2023529211000081
Figure 2023529211000082
Figure 2023529211000083
Figure 2023529211000084
Figure 2023529211000085
Figure 2023529211000086
Figure 2023529211000087
Figure 2023529211000088
Figure 2023529211000089
Figure 2023529211000090
Figure 2023529211000091
Figure 2023529211000092
Figure 2023529211000093
Figure 2023529211000094
Figure 2023529211000095
Figure 2023529211000096
Figure 2023529211000097
Figure 2023529211000098
Figure 2023529211000099
Figure 2023529211000100
Figure 2023529211000101
Figure 2023529211000102
Figure 2023529211000103
ＣＤ２０ ＣＡＲ及びＣＤ２０結合配列
いくつかの実施形態において、本明細書に記載のＣＡＲ又はＣＡＲ発現細胞は、ＣＤ２０ ＣＡＲ発現細胞（例えば、ヒトＣＤ２０に結合するＣＡＲ分子を発現する細胞）である。いくつかの実施形態において、ＣＤ２０ ＣＡＲ発現細胞は、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２０１６／１６４７３１号パンフレット及びＰＣＴ／ＵＳ２０１７／０５５６２７号による抗原結合ドメインを含む。例示的なＣＤ２０結合配列又はＣＤ２０ ＣＡＲ配列は、例えば、ＰＣＴ／ＵＳ２０１７／０５５６２７号の表１～５に開示されている。いくつかの実施形態において、ＣＤ２０結合配列又はＣＤ２０ ＣＡＲは、ＰＣＴ／ＵＳ２０１７／０５５６２７号又は国際公開第２０１６／１６４７３１号パンフレットに開示されているＣＤ２０ ＣＡＲのＣＤＲ、可変領域、ｓｃＦｖ、又は全長配列を含む。
いくつかの実施形態において、ＣＡＲ分子は、ＣＤ２０に特異的に結合する抗原結合ドメイン（ＣＤ２０ ＣＡＲ）を含む。いくつかの実施形態において、抗原結合ドメインは、ヒトＣＤ２０を標的とする。いくつかの実施形態において、抗原結合ドメインは、本明細書に記載の単鎖Ｆｖ配列を含む。ヒトＣＤ２０ ＣＡＲの配列を以下に提供する。
Figure 2023529211000104
Figure 2023529211000105
Figure 2023529211000106
Figure 2023529211000107
Figure 2023529211000108
Figure 2023529211000109
Figure 2023529211000110
Figure 2023529211000111
Figure 2023529211000112
Figure 2023529211000113
Figure 2023529211000114
Figure 2023529211000115
Figure 2023529211000116
Figure 2023529211000117
Figure 2023529211000118
Figure 2023529211000119
Figure 2023529211000120
Figure 2023529211000121
Figure 2023529211000122
Figure 2023529211000123
Figure 2023529211000124
Figure 2023529211000125
Figure 2023529211000126
Figure 2023529211000127
Figure 2023529211000128
Figure 2023529211000129
Figure 2023529211000130
Figure 2023529211000131
Figure 2023529211000132
Figure 2023529211000133
Figure 2023529211000134
Figure 2023529211000135
Figure 2023529211000136
Figure 2023529211000137
Figure 2023529211000138
Figure 2023529211000139
Figure 2023529211000140
Figure 2023529211000141
Figure 2023529211000142
Figure 2023529211000143
Figure 2023529211000144
Figure 2023529211000145
Figure 2023529211000146
Figure 2023529211000147
Figure 2023529211000148
Figure 2023529211000149
Figure 2023529211000150
Figure 2023529211000151
Figure 2023529211000152
Figure 2023529211000153
Figure 2023529211000154
Figure 2023529211000155
Figure 2023529211000156
Figure 2023529211000157
Figure 2023529211000158
Figure 2023529211000159
Figure 2023529211000160
Figure 2023529211000161
Figure 2023529211000162
Figure 2023529211000163
Figure 2023529211000164
Figure 2023529211000165
Figure 2023529211000166
Figure 2023529211000167
Figure 2023529211000168
Figure 2023529211000169
Figure 2023529211000170
Figure 2023529211000171
Figure 2023529211000172
Figure 2023529211000173
いくつかの実施形態において、抗原結合ドメインは、表９に列挙される重鎖結合ドメインアミノ酸配列のいずれかのＨＣ ＣＤＲ１、ＨＣ ＣＤＲ２及びＨＣ ＣＤＲ３を含む。実施形態において、抗原結合ドメインは、ＬＣ ＣＤＲ１、ＬＣ ＣＤＲ２及びＬＣ ＣＤＲ３を更に含む。実施形態において、抗原結合ドメインは、表９に列挙されるＬＣ ＣＤＲ１、ＬＣ ＣＤＲ２及びＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態において、抗原結合ドメインは、表９に記載される軽鎖結合ドメインアミノ酸配列のいずれかのＬＣ ＣＤＲ１、ＬＣ ＣＤＲ２及びＬＣ ＣＤＲ３の１、２又は全て、及び表９に記載される重鎖結合ドメインアミノ酸配列のいずれかのＨＣ ＣＤＲ１、ＨＣ ＣＤＲ２及びＨＣ ＣＤＲ３の１、２又は全てを含む。
いくつかの実施形態において、ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ番号付けスキーム、Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けスキーム、又はそれらの組み合わせに従って定義される。
ＣＤ２２ ＣＡＲ及びＣＤ２２結合配列
いくつかの実施形態において、本明細書に記載のＣＡＲ又はＣＡＲ発現細胞は、ＣＤ２２ ＣＡＲ発現細胞（例えば、ヒトＣＤ２２に結合するＣＡＲ分子を発現する細胞）である。いくつかの実施形態において、ＣＤ２２ ＣＡＲ発現細胞は、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２０１６／１６４７３１号パンフレット及びＰＣＴ／ＵＳ２０１７／０５５６２７号による抗原結合ドメインを含む。例示的なＣＤ２２結合配列又はＣＤ２２ ＣＡＲ配列は、例えば、国際公開第２０１６／１６４７３１号パンフレットの表６Ａ、６Ｂ、７Ａ、７Ｂ、７Ｃ、８Ａ、８Ｂ、９Ａ、９Ｂ、１０Ａ、及び１０Ｂ、並びにＰＣＴ／ＵＳ２０１７／０５５６２７号の表６～１０に開示されている。いくつかの実施形態において、ＣＤ２２結合配列又はＣＤ２２ ＣＡＲ配列は、ＰＣＴ／ＵＳ２０１７／０５５６２７号又は国際公開第２０１６／１６４７３１号パンフレットに開示されているＣＤ２２ ＣＡＲのＣＤＲ、可変領域、ｓｃＦｖ、又は全長配列を含む。
実施形態において、ＣＡＲ分子は、ＣＤ２２に特異的に結合する抗原結合ドメイン（ＣＤ２２ ＣＡＲ）を含む。いくつかの実施形態において、抗原結合ドメインは、ヒトＣＤ２２を標的とする。いくつかの実施形態において、抗原結合ドメインは、本明細書に記載の単鎖Ｆｖ配列を含む。
例示的なヒトＣＤ２２ ＣＡＲの配列を以下に提供する。いくつかの実施形態において、ヒトＣＤ２２ＣＡＲはＣＡＲ２２－６５である。
例示的なヒトＣＤ２２ ＣＡＲ ｓｃＦｖ配列
Figure 2023529211000174
例示的なヒトＣＤ２２ ＣＡＲ重鎖可変領域
Figure 2023529211000175
例示的なヒトＣＤ２２ ＣＡＲ軽鎖可変領域
ＱＳＡＬＴＱＰＡＳＡＳＧＳＰＧＱＳＶＴＩＳＣＴＧＴＳＳＤＶＧＧＹＮＹＶＳＷＹＱＱＨＰＧＫＡＰＫＬＭＩＹＤＶＳＮＲＰＳＧＶＳＮＲＦＳＧＳＫＳＧＮＴＡＳＬＴＩＳＧＬＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣＳＳＹＴＳＳＳＴＬＹＶＦＧＴＧＴＱＬＴＶＬ（配列番号２２５５）
Figure 2023529211000176
Figure 2023529211000177
いくつかの実施形態において、抗原結合ドメインは、表１０に列挙される重鎖結合ドメインアミノ酸配列のいずれかのＨＣ ＣＤＲ１、ＨＣ ＣＤＲ２及びＨＣ ＣＤＲ３を含む。実施形態において、抗原結合ドメインは、ＬＣ ＣＤＲ１、ＬＣ ＣＤＲ２及びＬＣ ＣＤＲ３を更に含む。実施形態において、抗原結合ドメインは、表１１に列挙されるＬＣ ＣＤＲ１、ＬＣ ＣＤＲ２及びＬＣ ＣＤＲ３アミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態において、抗原結合ドメインは、表１１に記載される軽鎖結合ドメインアミノ酸配列のいずれかのＬＣ ＣＤＲ１、ＬＣ ＣＤＲ２及びＬＣ ＣＤＲ３の１、２又は全て、及び表１０に記載される重鎖結合ドメインアミノ酸配列のいずれかのＨＣ ＣＤＲ１、ＨＣ ＣＤＲ２及びＨＣ ＣＤＲ３の１、２又は全てを含む。
いくつかの実施形態において、ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ番号付けスキーム、Ｃｈｏｔｈｉａ番号付けスキーム、又はそれらの組み合わせに従って定義される。
実施形態において、ＶＬ及びＶＨドメインがｓｃＦｖにおいて出現する順番は変えることができ（すなわち、ＶＬ－ＶＨ又はＶＨ－ＶＬ方向）、各サブユニットが配列ＧＧＧＧＳ（配列番号１０３９）（例えば、（Ｇ４Ｓ）３（配列番号１０１１）又は（Ｇ４Ｓ）４（配列番号１０１０））を含む、「Ｇ４Ｓ」（配列番号１０３９）サブユニットの１、２、３又は４コピーのいずれかは、可変ドメインに結合して、ｓｃＦｖドメイン全体を作ることができる。或いは、ＣＡＲ構築物は、例えば、配列ＧＳＴＳＧＳＧＫＰＧＳＧＥＧＳＴＫＧを含むリンカーを含み得る（配列番号２２６３）。或いは、ＣＡＲ構築物は、例えば、配列ＬＡＥＡＡＡＫを含むリンカーを含み得る（配列番号２２６４）。いくつかの実施形態において、ＣＡＲ構築物は、ＶＬドメインとＶＨドメインの間にリンカーを含まない。
これらのクローンは、全て、ＣＤ３ゼータ鎖由来の共刺激性ドメインのシグナルドメインにＱ／Ｋ残基変化を含んでいた。
ＲＮＡトランスフェクション
インビトロで転写されたＲＮＡ ＣＡＲ分子の製造方法が本明細書に開示される。本開示は、細胞に直接遺伝子導入できるＲＮＡ構築物をコードするＣＡＲ構築物も含む。トランスフェクションに使用するためのｍＲＮＡを産生する方法は、特異的に設計したプライマーを用いる鋳型のインビトロ転写（ＩＶＴ）、続くポリＡ付加を含み、３’及び５’非翻訳配列（「ＵＴＲ」）、５’キャップ及び／又は配列内リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、発現させる核酸及びポリＡテールを含む構築物、典型的には５０～２０００塩基長（配列番号１４６８）を産生し得る。このように産生されたＲＮＡは、異なる種の細胞において効率的に翻訳され得る。いくつかの実施形態において、鋳型は、ＣＡＲ構築物の配列を含む。
いくつかの実施形態において、ＣＡＲ分子は、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）によってコードされている。いくつかの実施形態において、ＣＡＲ分子をコードするｍＲＮＡは、ＣＡＲ発現細胞、例えばＣＡＲＴ細胞又はＣＡＲ発現ＮＫ細胞の産生のために免疫エフェクター細胞、例えばＴ細胞又はＮＫ細胞に導入される。
いくつかの実施形態において、インビトロ転写ＲＮＡ ＣＡＲを一過性トランスフェクションの形態として細胞に導入できる。ＲＮＡは、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）産生鋳型を使用するインビトロ転写により産生される。任意の供給源からの目的のＤＮＡを、適切なプライマー及びＲＮＡポリメラーゼを使用してインビトロｍＲＮＡ合成のための鋳型にＰＣＲにより直接変換できる。ＤＮＡの供給源は、例えば、ゲノムＤＮＡ、プラスミドＤＮＡ、ファージＤＮＡ、ｃＤＮＡ、合成ＤＮＡ配列又はＤＮＡのあらゆる他の適切な供給源であり得る。インビトロ転写のための所望の鋳型は本開示のＣＡＲである。例えば、ＲＮＡ ＣＡＲの鋳型は、抗腫瘍抗体の単鎖可変ドメインを含む細胞外領域、ヒンジ領域、膜貫通ドメイン（例えば、ＣＤ８ａの膜貫通ドメイン）；及び細胞内シグナル伝達ドメイン、例えばＣＤ３－ζのシグナル伝達ドメイン及び４－１ＢＢのシグナル伝達ドメインを含むものを含む細胞質領域を含む。
いくつかの実施形態において、ＰＣＲに使用するＤＮＡは、オープンリーディングフレームを含む。ＤＮＡは、生物のゲノムからの天然に存在するＤＮＡ配列由来であり得る。いくつかの実施形態において、核酸は、５’及び／又は３’非翻訳領域（ＵＴＲ）のいくらか又は全てを含み得る。核酸は、エクソン及びイントロンを含み得る。いくつかの実施形態において、ＰＣＲに使用するＤＮＡは、ヒト核酸配列である。いくつかの実施形態において、ＰＣＲに使用するＤＮＡは、５’及び３’ＵＴＲを含むヒト核酸配列である。ＤＮＡは、代わりに、天然に存在する生物で通常発現されない人工ＤＮＡ配列であり得る。例示的な人工ＤＮＡ配列は、融合タンパク質をコードするオープンリーディングフレームを形成するようにライゲートされた遺伝子の部分を含むものである。ライゲートされたＤＮＡの部分は、単一生物由来又は１つを超える生物由来であり得る。
ＰＣＲを使用して、トランスフェクションに使用するｍＲＮＡのインビトロ転写のための鋳型を産生する。ＰＣＲを実施する方法は、当技術分野で周知である。ＰＣＲにおいて使用するプライマーは、ＰＣＲのための鋳型として使用するＤＮＡの領域に実質的に相補的である領域を有するように設計する。本明細書で使用する「実質的に相補的」は、プライマー配列の残基の大部分又は全てが相補的であるか又は１つ以上の塩基が非相補的又はミスマッチである、ヌクレオチドの配列を指す。実質的に相補的な配列は、ＰＣＲに使用するアニーリング条件下においてＤＮＡ標的とアニール又はハイブリダイズできる。プライマーは、ＤＮＡ鋳型の任意の部分と実質的に相補的であるように設計できる。例えば、プライマーは、５’及び３’ＵＴＲを含む、細胞において通常転写される（オープンリーディングフレーム）核酸の部分を増幅するように設計できる。プライマーは、目的の特定のドメインをコードする核酸の部分を増幅するようにも設計できる。いくつかの実施形態において、プライマーは、５’及び３’ＵＴＲの全て又は一部を含む、ヒトｃＤＮＡのコーディング領域を増幅するように設計される。ＰＣＲに有用なプライマーは、当技術分野で周知の合成法により産生できる。「順方向プライマー」は、増幅するＤＮＡ配列の上流であるＤＮＡ鋳型上にヌクレオチドに対して実質的に相補的であるヌクレオチドの領域を含むプライマーである。「上流」は、コード鎖に対して、増幅するＤＮＡ配列に対する５位を指すために本明細書で使用する。「逆方向プライマー」は、増幅するＤＮＡ配列の下流である、二本鎖ＤＮＡ鋳型に対して実質的に相補的なヌクレオチドの領域を含むプライマーである。「下流」は、コード鎖に対して、増幅するＤＮＡ配列に対する３’位を指すために本明細書で使用する。
ＰＣＲに有用なあらゆるＤＮＡポリメラーゼを本明細書に開示する方法で使用できる。試薬及びポリメラーゼは、多数の供給元から市販されている。
安定性及び／又は翻訳効率を促進する能力を有する化学構造も使用し得る。ＲＮＡは、好ましくは、５’及び３’ＵＴＲを有する。いくつかの実施形態において、５’ＵＴＲは、１～３０００ヌクレオチド長である。コーディング領域に付加する５’及び３’ＵＴＲ配列の長さは、ＵＴＲの異なる領域をアニールするＰＣＲのためのプライマーの設計を含むが、これに限定されない異なる方法により変わり得る。このアプローチを使用して、当業者は、転写ＲＮＡのトランスフェクション後、最適翻訳効率を達成するのに必要な５’及び３’ＵＴＲ長を修飾できる。
５’及び３’ＵＴＲは、目的の核酸のための天然に存在する内在性５’及び３’ＵＴＲであり得る。代わりに、目的の核酸に対して内在性ではないＵＴＲ配列を順方向及び逆方向プライマーへのＵＴＲ配列の取り込みにより又は鋳型の任意の他の修飾により付加できる。目的の核酸に対して内在性ではないＵＴＲ配列の使用は、ＲＮＡの安定性及び／又は翻訳効率の修飾のために有用であり得る。例えば、３’ＵＴＲ配列のＡＵリッチ要素は、ｍＲＮＡの安定性を低下させ得ることが知られる。従って、３’ＵＴＲを、当技術分野で周知であるＵＴＲの特性に基づき、転写されたＲＮＡの安定性を増加するように選択及び設計できる。
いくつかの実施形態において、５’ＵＴＲは、内在性核酸のＫｏｚａｋ配列を含み得る。代わりに、目的の核酸に対して内在性ではない５’ＵＴＲを上記のようにＰＣＲにより付加するとき、コンセンサスＫｏｚａｋ配列を５’ＵＴＲ配列の付加により再設計できる。Ｋｏｚａｋ配列は、あるＲＮＡ転写物の翻訳効率を上げることができるが、効率的翻訳を可能とするために全ＲＮＡで必要であるように見えない。多くのｍＲＮＡについてのＫｏｚａｋ配列に対する必要性は、当技術分野で公知である。他の実施形態において、５’ＵＴＲは、ＲＮＡゲノムが細胞で安定であるＲＮＡウイルスの５’ＵＴＲであり得る。他の実施形態において、種々のヌクレオチドアナログを、ｍＲＮＡのエキソヌクレアーゼ分解を妨害するために３’又は５’ＵＴＲにおいて使用できる。
遺伝子クローニングの必要性なしにＤＮＡ鋳型からのＲＮＡの合成を可能にするために、転写のプロモーターは、転写する配列の上流のＤＮＡ鋳型に結合すべきである。ＲＮＡポリメラーゼのプロモーターとして機能する配列が順方向プライマーの５’末端に追加されるとき、ＲＮＡポリメラーゼプロモーターは、転写されるオープンリーディングフレームの上流のＰＣＲ産物に取り込まれる。いくつかの実施形態において、プロモーターは、本明細書の他の箇所に記載するような、Ｔ７ポリメラーゼプロモーターである。他の有用なプロモーターは、Ｔ３及びＳＰ６ ＲＮＡポリメラーゼプロモーターを含むが、これらに限定されない。Ｔ７、Ｔ３及びＳＰ６プロモーターのコンセンサスヌクレオチド配列が当技術分野で公知である。
いくつかの実施形態において、ｍＲＮＡは、リボソーム結合、翻訳開始及び細胞におけるｍＲＮＡの安定性を決定する、５’末端及び３’ポリ（Ａ）テールの両者にキャップを有する。環状ＤＮＡ鋳型、例えばプラスミドＤＮＡ上において、ＲＮＡポリメラーゼは、真核細胞における発現に適しない長いコンカテマー産物を産生する。３’ＵＴＲの末端で直線化されたプラスミドＤＮＡの転写は、転写後ポリアデニル化されても、真核トランスフェクションに有効ではない正常サイズのｍＲＮＡを生じる。
直鎖状ＤＮＡ鋳型で、ファージＴ７ ＲＮＡポリメラーゼは、鋳型の最後の塩基を越えて転写物の３’末端を伸長できる（Ｓｃｈｅｎｂｏｒｎ ａｎｄ Ｍｉｅｒｅｎｄｏｒｆ，Ｎｕｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．，１３：６２２３－３６（１９８５）；Ｎａｃｈｅｖａ ａｎｄ Ｂｅｒｚａｌ－Ｈｅｒｒａｎｚ，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，２７０：１４８５－６５（２００３））。
ＤＮＡ鋳型に伸びるポリＡ／Ｔの組込みの慣用法は、分子クローニングである。しかしながら、プラスミドＤＮＡに統合されたポリＡ／Ｔ配列は、プラスミド不安定性を生じ得、これは、細菌細胞から得たプラスミドＤＮＡ鋳型が多くの場合に欠失及び他の異常で高度に汚染されている理由である。これにより、クローニング工程は、困難で時間がかかるだけでなく、多くの場合に信頼できないものとなる。これが、クローニングを伴わないポリＡ／Ｔ ３’ストレッチを有するＤＮＡ鋳型の産生を可能にする方法が非常に望ましい理由である。
転写ＤＮＡ鋳型のポリＡ／Ｔセグメントは、１００ＴテールなどのポリＴテールを含む逆方向プライマーを使用するＰＣＲ中（配列番号１４６９）（サイズは、５０～５０００Ｔであり得る（配列番号１４７０））又はＤＮＡライゲーション若しくはインビトロ組み換えを含むが、これらに限定されない任意の他の方法によりＰＣＲ後に産生できる。ポリ（Ａ）テールはまた、ＲＮＡに安定性を提供し、その分解を減らす。一般に、ポリ（Ａ）テールの長さは、転写されたＲＮＡの安定性と正に相関する。いくつかの実施形態において、ポリ（Ａ）テールは、１００～５０００アデノシンである（配列番号１４７１）。
ＲＮＡのポリ（Ａ）テールは、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）ポリＡポリメラーゼ（Ｅ－ＰＡＰ）のなどのポリ（Ａ）ポリメラーゼの使用により、インビトロ転写後更に伸長できる。いくつかの実施形態において、ポリ（Ａ）テールの１００ヌクレオチドから３００～４００ヌクレオチドへの長さの延長（配列番号１４７２）は、ＲＮＡの翻訳効率の約２倍増加を生じる。更に、３’末端への異なる化学基の付加は、ｍＲＮＡ安定性を増加させ得る。このような結合は、修飾／人工ヌクレオチド、アプタマー及び他の化合物を含み得る。例えば、ＡＴＰアナログは、ポリ（Ａ）ポリメラーゼを使用してポリ（Ａ）テールに取り込まれ得る。ＡＴＰアナログは、ＲＮＡの安定性を更に高め得る。
５’キャップもＲＮＡ分子に安定性を提供する。いくつかの実施形態において、本明細書に開示する方法により産生されたＲＮＡは、５’キャップを含む。５’キャップは、当技術分野で公知であり、本明細書に記載の技術を使用して提供される（Ｃｏｕｇｏｔ，ｅｔ ａｌ．，Ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｃｉ．，２９：４３６－４４４（２００１）；Ｓｔｅｐｉｎｓｋｉ，ｅｔ ａｌ．，ＲＮＡ，７：１４６８－９５（２００１）；Ｅｌａｎｇｏ，ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．，３３０：９５８－９６６（２００５））。
本明細書に開示する方法により産生されたＲＮＡは、配列内リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）配列も含み得る。ＩＲＥＳ配列は、ｍＲＮＡへのキャップ非依存的リボソーム結合を開始し、翻訳開始を促進するあらゆるイルス、染色体又は人工設計配列であり得る。糖、ペプチド、脂質、タンパク質、抗酸化剤及び界面活性剤などの細胞透過性及び生存能を促進する因子を含有し得る、細胞電気穿孔に適した任意の溶質が含まれ得る。
ＲＮＡを、多数の異なる方法、例えば商業的に利用可能な方法のいずれかを使用して標的細胞に導入でき、これは、電気穿孔（Ａｍａｘａ Ｎｕｃｌｅｏｆｅｃｔｏｒ－ＩＩ（Ａｍａｘａ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，Ｃｏｌｏｇｎｅ，Ｇｅｒｍａｎｙ））、（ＥＣＭ ８３０（ＢＴＸ）（Ｈａｒｖａｒｄ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，Ｂｏｓｔｏｎ，Ｍａｓｓ．）又はＧｅｎｅ Ｐｕｌｓｅｒ ＩＩ（ＢｉｏＲａｄ，Ｄｅｎｖｅｒ，Ｃｏｌｏ．）、Ｍｕｌｔｉｐｏｒａｔｏｒ（Ｅｐｐｅｎｄｏｒｔ，Ｈａｍｂｕｒｇ Ｇｅｒｍａｎｙ）、リポフェクションを使用するカチオン性リポソーム介在トランスフェクション、ポリマー封入、ペプチド介在トランスフェクション又は「遺伝子銃」などの微粒子銃粒子送達系（例えば、Ｎｉｓｈｉｋａｗａ，ｅｔ ａｌ．Ｈｕｍ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ．，１２（８）：８６１－７０（２００１）を参照されたい）を含むが、これらに限定されない。
非ウイルス送達方法
いくつかの実施形態において、非ウイルス方法を使用して、本明細書に記載のＣＡＲ分子をコードする核酸を細胞又は組織又は対象に送達できる。
いくつかの実施形態において、非ウイルス方法は、トランスポゾン（転位因子とも呼ばれる）の使用を含む。いくつかの実施形態において、トランスポゾンは、ゲノムの位置にそれ自体挿入できるＤＮＡの断片、例えば自己複製性であり、そのコピーをゲノムに挿入することができるＤＮＡの断片又は長い核酸の外にスプライシングされ、ゲノムの別の場所に挿入されることができるＤＮＡの断片である。例えば、トランスポゾンは、転位のための逆位反復フランキング遺伝子からなるＤＮＡ配列を含む。
例示的なトランスポゾンを使用する核酸送達法は、Ｓｌｅｅｐｉｎｇ Ｂｅａｕｔｙトランスポゾン系（ＳＢＴＳ）及びｐｉｇｇｙＢａｃ（ＰＢ）トランスポゾン系を含む。例えば、Ａｒｏｎｏｖｉｃｈ ｅｔ ａｌ．Ｈｕｍ．Ｍｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．２０．Ｒ１（２０１１）：Ｒ１４－２０；Ｓｉｎｇｈ ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．１５（２００８）：２９６１－２９７１；Ｈｕａｎｇ ｅｔ ａｌ．Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．１６（２００８）：５８０－５８９；Ｇｒａｂｕｎｄｚｉｊａ ｅｔ ａｌ．Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．１８（２０１０）：１２００－１２０９；Ｋｅｂｒｉａｅｉ ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ．１２２．２１（２０１３）：１６６；Ｗｉｌｌｉａｍｓ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｔｈｅｒａｐｙ １６．９（２００８）：１５１５－１６；Ｂｅｌｌ ｅｔ ａｌ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｔｏｃ．２．１２（２００７）：３１５３－６５；及びＤｉｎｇ ｅｔ ａｌ．Ｃｅｌｌ．１２２．３（２００５）：４７３－８３（これらの全ては、参照により本明細書に組み込まれる）を参照されたい。
ＳＢＴＳは２つの成分：１）導入遺伝子を含むトランスポゾン、及び２）トランスポサーゼ酵素の供給源を含む。トランスポサーゼは、担体プラスミド（又は他のドナーＤＮＡ）から、宿主細胞染色体／ゲノムなどの標的ＤＮＡにトランスポゾンを転位できる。例えば、トランスポサーゼは、担体プラスミド／ドナーＤＮＡに結合し、トランスポゾン（導入遺伝子含有）をプラスミドの外に切り出し、宿主細胞のゲノムに入れる。例えば、Ａｒｏｎｏｖｉｃｈ ｅｔ ａｌ．上掲を参照されたい。
例示的なトランスポゾンは、ｐＴ２ベースのトランスポゾンを含む。例えば、全て参照により本明細書に組み込まれるＧｒａｂｕｎｄｚｉｊａ ｅｔ ａｌ．Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．４１．３（２０１３）：１８２９－４７；及びＳｉｎｇｈ ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．６８．８（２００８）：２９６１－２９７１を参照されたい。例示的なトランスポサーゼは、Ｔｃ１／ｍａｒｉｎｅｒ型トランスポサーゼ、例えばＳＢ１０トランスポサーゼ又はＳＢ１１トランスポサーゼを含む（例えば、サイトメガロウイルスプロモーターから発現できる機能亢進トランスポサーゼ）。例えば、全て参照により本明細書に組み込まれるＡｒｏｎｏｖｉｃｈ ｅｔ ａｌ．；Ｋｅｂｒｉａｅｉ ｅｔ ａｌ．；及びＧｒａｂｕｎｄｚｉｊａ ｅｔ ａｌ．を参照されたい。
ＳＢＴＳの使用は、導入遺伝子、例えば本明細書に記載のＣＡＲ分子をコードする核酸の効率的組込み及び発現を可能にする。例えば、ＳＢＴＳなどのトランスポゾン系を使用する、本明細書に記載のＣＡＲ分子を安定に発現する細胞、例えばＴ細胞又はＮＫ細胞を産生する方法が本明細書に提供される。
本明細書に記載の方法により、いくつかの実施形態において、ＳＢＴＳ成分を含む１つ以上の核酸、例えばプラスミドが細胞に送達される（例えば、Ｔ細胞又はＮＫ細胞）。例えば、核酸は、核酸（例えば、プラスミドＤＮＡ）送達の標準法、例えば本明細書に記載の方法、例えば電気穿孔、トランスフェクション又はリポフェクションにより送達される。いくつかの実施形態において、核酸は、導入遺伝子、例えば本明細書に記載のＣＡＲ分子をコードする核酸を含むトランスポゾンを含む。いくつかの実施形態において、核酸は、導入遺伝子（例えば、本明細書に記載のＣＡＲ分子をコードする核酸）を含むトランスポゾン並びにトランスポサーゼ酵素をコードする核酸配列を含む。他の実施形態において、例えばデュアルプラスミド系、例えば第１のプラスミドが導入遺伝子を含むトランスポゾンを含み、第２のプラスミドがトランスポサーゼ酵素をコードする核酸配列を含む、２核酸の系が提供される。例えば、第１及び第２の核酸は、宿主細胞に共送達される。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載のＣＡＲ分子を発現する細胞、例えばＴ細胞又はＮＫ細胞は、ヌクレアーゼ（例えば、亜鉛フィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）、転写アクティベーター様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ系又は操作されたメガヌクレアーゼ再操作ホーミングエンドヌクレアーゼ）を使用するＳＢＴＳ及び遺伝子編集の遺伝子挿入の組み合わせを使用して産生される。
いくつかの実施形態において、非ウイルス送達方法の使用は、細胞、例えばＴ細胞又はＮＫ細胞の再プログラミング及び対照への細胞の直接注入を可能にする。非ウイルスベクターの利点は、患者集団に見合うために必要な十分量の産生が容易且つ比較的安価であること、保存中の安定性及び免疫原性の欠如を含むが、これらに限定されない。
ＣＡＲ分子をコードする核酸構築物
本開示は、本明細書に記載の１つ以上のＣＡＲ構築物をコードする核酸分子も提供する。いくつかの実施形態において、核酸分子は、メッセンジャーＲＮＡ転写物として提供される。いくつかの実施形態において、核酸分子は、ＤＮＡ構築物として提供される。
したがって、いくつかの実施形態において、本発明は、ＣＡＲ分子をコードする単離核酸分子に関し、ここで、ＣＡＲ分子は、抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン、並びに刺激ドメイン、例えば、共刺激シグナル伝達ドメイン及び／又は一次シグナル伝達ドメイン、例えば、ゼータ鎖を含む、細胞内シグナル伝達ドメインを含む。
所望の分子をコードする核酸配列は、標準技術を使用して、例えば遺伝子を発現する細胞からのライブラリのスクリーニングにより、それを含むことが知られるベクターからの遺伝子を誘導化することにより又はそれを含むことが知られる細胞及び組織から直接単離することによるような、組み換え当技術分野で知られる方法を使用して得ることができる。代わりに、目的の遺伝子をクローン化ではなく合成により産生できる。
本開示は、本開示のＤＮＡが挿入されているベクターも提供する。レンチウイルスなどのレトロウイルス由来のベクターは、それらが導入遺伝子の長期の安定した組み込み及び娘細胞への伝播を可能にするため、長期遺伝子導入を達成するのに適するツールである。レンチウイルスベクターは、肝細胞などの非増殖細胞を形質導入できる点で、マウス白血病ウイルスなどのオンコ－レトロウイルス由来のベクターを超える更なる利点を有する。それらは、低免疫原性であるという更なる利点も更に有する。レトロウイルスベクターは、例えば、γレトロウイルスベクターでもあり得る。γレトロウイルスベクターは、例えば、プロモーター、パッケージングシグナル（ψ）、プライマー結合部位（ＰＢＳ）、１つ以上の（例えば、２）末端反復配列（ＬＴＲ）及び目的の導入遺伝子、例えばＣＡＲ分子をコードする遺伝子を含み得る。γレトロウイルスベクターは、ｇａｇ、ｐｏｌ及びｅｎｖなどのウイルス構造的遺伝子を欠き得る。例示的なγレトロウイルスベクターは、マウス白血病ウイルス（ＭＬＶ）、脾フォーカス形成ウイルス（ＳＦＦＶ）及び骨髄増殖性肉腫ウイルス（ＭＰＳＶ）及びそれら由来のベクターを含む。他のγレトロウイルスベクターは、例えば、Ｔｏｂｉａｓ Ｍａｅｔｚｉｇ ｅｔ ａｌ．，“Ｇａｍｍａｒｅｔｒｏｖｉｒａｌ Ｖｅｃｔｏｒｓ：Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ”Ｖｉｒｕｓｅｓ．２０１１ Ｊｕｎ；３（６）：６７７－７１３に記載される。
いくつかの実施形態において、所望の本開示のＣＡＲ分子をコードする核酸を含むベクターは、アデノウイルスベクター（Ａ５／３５）である。いくつかの実施形態において、ＣＡＲ ＩＬ－１５Ｒ／ＩＬ－１５をコードする核酸の発現は、ｓｌｅｅｐｉｎｇ ｂｅａｕｔｙ、ＣＲＩＳＰＥＲ、ＣＡＳ９及びジンクフィンガーヌクレアーゼなどのトランスポゾンを使用して達成できる。参照により本明細書に包含される下記のＪｕｎｅ ｅｔ ａｌ．２００９ Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ９．１０：７０４－７１６を参照されたい。
概説すると、天然又は合成核酸ＣＡＲの発現は、典型的には、ＣＡＲポリペプチドをコードする核酸又はその一部をプロモーターに操作可能に連結させ、その構築物を発現ベクターに取り込むことにより達成される。ベクターは、真核生物での複製及び組み込みに適し得る。典型的クローニングベクターは、所望の核酸配列の発現の制御に有用な転写及び翻訳ターミネーター、開始配列及びプロモーターを含む。
本開示の構築物の発現は、標準遺伝子送達プロトコルを使用する核酸免疫化及び遺伝子治療にも使用し得る。遺伝子送達のための方法が当技術分野で知られている。例えば、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる米国特許第５，３９９，３４６号明細書、同第５，５８０，８５９号明細書、同第５，５８９，４６６号明細書を参照されたい。いくつかの実施形態において、本開示は、遺伝子治療ベクターを提供する。
核酸は、多数のタイプのベクターにクローン化できる。例えば、核酸は、プラスミド、ファージミド、ファージ誘導体、動物ウイルス及びコスミドを含むが、これらに限定されないベクターにクローン化できる。特に興味深いベクターは、発現ベクター、複製ベクター、プローブ産生ベクター及びシーケンシングベクターを含む。
更に、発現ベクターは、ウイルスベクターの形態で細胞に提供され得る。ウイルスベクター技術は、当技術分野で周知であり、例えばＳａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．，２０１２，ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ ＣＬＯＮＩＮＧ：Ａ ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＹ ＭＡＮＵＡＬ，ｖｏｌｕｍｅｓ １ －４，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｐｒｅｓｓ，ＮＹ及び他のウイルス学及び分子生物学マニュアルに記載されている。ベクターとして有用なウイルスは、レトロウイルス、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、ヘルペスウイルス及びレンチウイルスを含むが、これらに限定されない。一般に、適当なベクターは、少なくとも１生物で機能的な複製起点、プロモーター配列、便利な制限エンドヌクレアーゼ部位及び１つ以上の選択可能マーカーを含む（例えば、国際公開第０１／９６５８４号パンフレット；国際公開第０１／２９０５８号パンフレット；及び米国特許第６，３２６，１９３号明細書）。
多数のウイルスベースの系が哺乳動物細胞への遺伝子移入のために開発されている。例えば、レトロウイルスは、遺伝子送達系のための簡便なプラットフォームを提供する。選択した遺伝子を、当技術分野で知られる技術を使用して、ベクターに挿入し、レトロウイルス粒子に包装できる。次いで、組み換えウイルスが単離され、対象の細胞にインビボ又はエクスビボで送達され得る。多数のレトロウイルス系が当技術分野で知られている。いくつかの実施形態において、アデノウイルスベクターを使用する。多数のアデノウイルスベクターが当技術分野で知られている。いくつかの実施形態において、レンチウイルスベクターを使用する。
更なるプロモーター要素、例えばエンハンサーは、転写開始の頻度を制御する。典型的には、これらは、開始部位の上流３０～１１０ｂｐの領域に位置するが、多数のプロモーターが同様に開始部位の下流に機能的要素を含むことが示されている。プロモーター要素間の空間は、多くの場合、可動性であり、そのため、要素が互いに逆になったとき又は移動したときにプロモーター機能が保持される。チミジンキナーゼ（ｔｋ）プロモーターにおいて、プロモーター要素間の空間は、活性が落ち始める前、５０ｂｐ離れるまで増加し得る。プロモーターにより、個々の要素は、転写を活性化するために協調的又は独立的に機能できるように見える。
哺乳動物Ｔ細胞においてＣＡＲ導入遺伝子を発現することができるプロモーターの例は、ＥＦ１ａプロモーターである。天然ＥＦ１ａプロモーターは、アミノアシルｔＲＮＡのリボソームへの酵素送達を担う伸長因子－１複合体のαサブユニットの発現を駆動する。ＥＦ１ａプロモーターは、哺乳動物発現プラスミドで広く使用されており、レンチウイルスベクターにクローン化された導入遺伝子からＣＡＲ発現を駆動するのに有効であることが示されている。例えば、Ｍｉｌｏｎｅ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒ．１７（８）：１４５３－１４６４（２００９）を参照されたい。
プロモーターの別の例は、最初期サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーター配列である。このプロモーター配列は、それに操作可能に連結したあらゆるポリヌクレオチド配列の高レベルの発現を駆動できる強い構成的プロモーター配列である。しかしながら、サルウイルス４０（ＳＶ４０）初期プロモーター、マウス乳房腫瘍ウイルス（ＭＭＴＶ）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）末端反復配列（ＬＴＲ）プロモーター、ＭｏＭｕＬＶプロモーター、トリ白血病ウイルスプロモーター、エプスタイン・バーウイルス最初期プロモーター、ラウス肉腫ウイルスプロモーターを含むが、これらに限定されない他の構成的プロモーター配列並びにアクチンプロモーター、ミオシンプロモーター、伸長因子－１プロモーター、ヘモグロビンプロモーター及びクレアチンキナーゼプロモーターなど、しかし、これらに限定されないヒト遺伝子プロモーターも使用し得る。更に、本開示は、構成的プロモーターの使用に限定すべきではない。誘導性プロモーターも本開示の一部であるとして意図される。誘導性プロモーターの使用は、操作可能に連結したポリヌクレオチド配列の発現を、発現が望まれるときに活性化し、発現が望まれないときに遮断することができる分子スイッチを提供する。誘導性プロモーターの例は、メタロチオネインプロモーター、グルココルチコイドプロモーター、プロゲステロンプロモーター及びテトラサイクリンプロモーターを含むが、これらに限定されない。
プロモーターの別の例は、ホスホグリセラートキナーゼ（ＰＧＫ）プロモーターである。実施形態において、切断型ＰＧＫプロモーター（例えば、野生型ＰＧＫプロモーター配列と比較したとき、１つ以上の、例えば、１、２、５、１０、１００、２００、３００又は４００ヌクレオチド欠失を有するＰＧＫプロモーター）が望ましい場合がある。ＰＧＫプロモーター例のヌクレオチド配列を下に提供する。
例示的なＷＴ ＰＧＫプロモーター
Figure 2023529211000178
例示的な切断型ＰＧＫプロモーター：
ＰＧＫ１００：
ＡＣＣＣＣＴＣＴＣＴＣＣＡＧＣＣＡＣＴＡＡＧＣＣＡＧＴＴＧＣＴＣＣＣＴＣＧＧＣＴＧＡＣＧＧＣＴＧＣＡＣＧＣＧＡＧＧＣＣＴＣＣＧＡＡＣＧＴＣＴＴＡＣＧＣＣＴＴＧＴＧＧＣＧＣＧＣＣＣＧＴＣＣＴＴＧＴＣＣＣＧＧＧＴＧＴＧＡＴＧＧＣＧＧＧＧＴＧ（配列番号１４７４）
ＰＧＫ２００：
Figure 2023529211000179
 ＰＧＫ３００：
Figure 2023529211000180
 ＰＧＫ４００：
Figure 2023529211000181
ベクターは、例えば、分泌を促進するためのシグナル配列、ポリアデニル化シグナル及び転写ターミネーター（例えば、ウシ成長ホルモン（ＢＧＨ）遺伝子から）、エピソーム複製及び原核生物における複製を可能にする要素（例えば、ＳＶ４０起源及びＣｏｌＥ１又は当技術分野で知られる他のもの）及び／又は選択を可能にする要素（例えば、アンピシリン耐性遺伝子及び／又はゼオシンマーカー）も含み得る。
ＣＡＲポリペプチド又はその一部の発現を評価するために、細胞に導入する発現ベクターは、ウイルスベクターによる導入又は感染が探求される細胞集団からの発現細胞の同定及び選択を容易にするために、選択可能マーカー遺伝子又はレポーター遺伝子又は両方を含み得る。他の実施形態において、選択可能マーカーは、ＤＮＡの別の断面に担持され、共トランスフェクション法において使用され得る。選択可能マーカー及びレポーター遺伝子のいずれも、宿主細胞における発現が可能であるように適切な制御配列に隣接し得る。有用な選択可能マーカーは、例えば、ｎｅｏなどの抗生物質耐性遺伝子を含む。
レポーター遺伝子は、恐らく遺伝子導入されている細胞を同定し、制御配列の機能性を評価するために使用される。一般に、レポーター遺伝子は、レシピエント生物又は組織に存在又は発現されず、発現がある容易に検出可能な特性、例えば酵素活性により顕在化されるポリペプチドをコードする遺伝子である。レポーター遺伝子の発現を、ＤＮＡがレシピエント細胞に導入されてから適当な時間後にアッセイする。適当なレポーター遺伝子は、ルシフェラーゼ、β－ガラクトシダーゼ、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ、分泌型アルカリホスファターゼ又は緑色蛍光タンパク質遺伝子をコードする遺伝子を含み得る（例えば、Ｕｉ－Ｔｅｉ ｅｔ ａｌ．，２０００ ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔｅｒｓ ４７９：７９－８２）。適当な発現系は、周知であり、既知技術により製造できるか又は商業的に入手できる。一般に、レポーター遺伝子の最高レベルの発現を示す最小５’フランキング領域を有する構築物をプロモーターとして同定する。このようなプロモーター領域は、レポーター遺伝子に連結し、プロモーター駆動転写を調節する能力について薬剤を評価するのに使用され得る。
いくつかの実施形態において、ベクターは、更に、第２のＣＡＲ分子をコードする核酸を含み得る。いくつかの実施形態において、第２のＣＡＲ分子は、例えば、ＣＤ１２３、ＣＤ３４、ＣＬＬ－１、葉酸受容体ベータ、若しくはＦＬＴ３などの、急性骨髄白血病細胞に発現される標的；又はＢ細胞上に発現される標的、例えば、ＣＤ１０、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３４、ＣＤ１２３、ＦＬＴ－３、ＲＯＲ１、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ１７９ｂ、若しくはＣＤ７９ａ、に対する抗原結合ドメインを含む。いくつかの実施形態において、ベクターは、第１の抗原に特異的に結合し、共刺激シグナル伝達ドメインを有するが一次シグナル伝達ドメインを有しない細胞内シグナル伝達ドメインを含む、第１のＣＡＲ分子をコードする核酸配列と、第２の異なる抗原に特異的に結合し、一次シグナル伝達ドメインを有するが共刺激シグナル伝達ドメインを有しない細胞内シグナル伝達ドメインを含む、第２のＣＡＲ分子をコードする核酸とを含む。
いくつかの実施形態において、ベクターは、本明細書に記載のＣＡＲ分子をコードする核酸及び阻害性ＣＡＲ分子をコードする核酸を含む。いくつかの実施形態において、阻害性ＣＡＲ分子は、正常細胞で見られるが、癌細胞で見られない抗原と結合する抗原結合ドメインを含む。いくつかの実施形態において、阻害性ＣＡＲ分子は、抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン及び阻害分子の細胞内ドメインを含む。例えば、阻害性ＣＡＲ分子の細胞内ドメインは、ＰＤ１、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＣＴＬＡ４、ＴＩＭ３、ＣＥＡＣＡＭ（例えば、ＣＥＡＣＡＭ－１、ＣＥＡＣＡＭ－３及び／又はＣＥＡＣＡＭ－５）、ＬＡＧ３、ＶＩＳＴＡ、ＢＴＬＡ、ＴＩＧＩＴ、ＬＡＩＲ１、ＣＤ１６０、２Ｂ４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、Ｂ７－Ｈ３（ＣＤ２７６）、Ｂ７－Ｈ４（ＶＴＣＮ１）、ＨＶＥＭ（ＴＮＦＲＳＦ１４又はＣＤ２７０）、ＫＩＲ、Ａ２ａＲ、ＭＨＣクラスＩ、ＭＨＣクラスＩＩ、ＧＡＬ９、アデノシン及びＴＧＦベータの細胞内ドメインであり得る。
実施形態において、ベクターは、ＣＡＲ分子、例えば本明細書に記載のＣＡＲ分子、及び第２のＣＡＲ分子、例えば阻害性ＣＡＲ分子又は異なる抗原に特異的に結合するＣＡＲ分子をコードする、２つ以上の核酸配列を含み得る。このような実施形態において、ＣＡＲ分子をコードする２つ以上の核酸配列は、同じフレームにおいて単一核分子により且つ単一ポリペプチド鎖としてコード化される。いくつかの実施形態において、２つ以上のＣＡＲ分子は、例えば、１以上のペプチド開裂部位により分離され得る（例えば、自己開裂部位又は細胞内プロテアーゼの基質）。ペプチド開裂部位の例は、次のものを含み、ここで、ＧＳＧ残基は、任意選択である。
Ｔ２Ａ：（ＧＳＧ）ＥＧＲＧＳＬＬＴＣＧＤＶＥＥＮＰＧＰ（配列番号１４７８）
Ｐ２Ａ：（ＧＳＧ）ＡＴＮＦＳＬＬＫＱＡＧＤＶＥＥＮＰＧＰ（配列番号１４７９）
Ｅ２Ａ：（ＧＳＧ）ＱＣＴＮＹＡＬＬＫＬＡＧＤＶＥＳＮＰＧＰ（配列番号１４８０）
Ｆ２Ａ：（ＧＳＧ）ＶＫＱＴＬＮＦＤＬＬＫＬＡＧＤＶＥＳＮＰＧＰ（配列番号１４８１）
細胞に遺伝子を導入し、発現させる方法は、当技術分野で知られている。発現ベクターに関連して、ベクターは、当技術分野の任意の方法により、宿主細胞、例えば哺乳動物、細菌、酵母又は昆虫細胞に容易に導入できる。例えば、発現ベクターは、物理的、化学的又は生物学的手段により、宿主細胞に移入され得る。
宿主細胞にポリヌクレオチドを導入するための物理的方法は、リン酸カルシウム沈殿、リポフェクション、微粒子銃、微量注入、エレクトロポレーションなどを含む。ベクター及び／又は外来性核酸を含む細胞を産生する方法は、当技術分野で周知である。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．，２０１２，ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ ＣＬＯＮＩＮＧ：Ａ ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＹ ＭＡＮＵＡＬ，ｖｏｌｕｍｅｓ １－４，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｐｒｅｓｓ，ＮＹを参照されたい）。宿主細胞へのポリヌクレオチドの導入に好ましい方法は、リン酸カルシウムトランスフェクションである。
宿主細胞に目的のポリヌクレオチドを導入するための生物学的方法は、ＤＮＡ及びＲＮＡベクターの使用を含む。ウイルスベクター、特にレトロウイルスベクターは、哺乳動物、例えばヒト細胞への遺伝子挿入に最も広く使用される方法となってきている。他のウイルスベクターは、レンチウイルス、ポックスウイルス、単純ヘルペスウイルスＩ、アデノウイルス及びアデノ関連ウイルスなどに由来し得る。例えば、米国特許第５，３５０，６７４号明細書及び同第５，５８５，３６２号明細書を参照されたい。
宿主細胞にポリヌクレオチドを導入するための化学的手段は、巨大分子複合体、ナノカプセル、マイクロスフェア、ビーズ及び水中油型エマルジョン、ミセル、混合ミセル及びリポソームを含む脂質ベースの系などのコロイド分散体系を含む。インビトロ及びインビボで送達媒体として使用するための代表的コロイド系は、リポソーム（例えば、人工膜小胞）である。標的化ナノ粒子又は他の適当なサブミクロンサイズの送達系を用いるポリヌクレオチドの送達など、最新式の核酸の標的化送達の他の方法が利用可能である。
非ウイルス送達系を利用する場合、代表的送達媒体は、リポソームである。脂質製剤の使用は、宿主細胞への核酸の導入のために意図される（インビトロ、エクスビボ又はインビボ）。いくつかの実施形態において、核酸は、脂質と結合され得る。脂質と結合した核酸は、リポソームの水性内部への被包、リポソームの脂質二重層内への分散、リポソームとオリゴヌクレオチドの両方と結合する連結分子を介するリポソームへの結合、リポソームへの封入、リポソームとの複合体化、脂質含有溶液への分散、脂質との混合、脂質との組み合わせ、脂質中の懸濁液としての包含、ミセル内への包含又は複合体化又は他の方法で脂質と結合する。脂質、脂質／ＤＮＡ又は脂質／発現ベクター結合組成物は、溶液中の何らかの特定の構造に限定されない。例えば、それらは、二重層構造において、ミセルとして又は「崩壊」構造を有して存在し得る。それらは、単に溶液に分散され、恐らくサイズ又は形状が均一ではない凝集体も形成し得る。脂質は、天然に存在する又は合成脂質であり得る脂肪物質である。例えば、脂質は、細胞質に天然に生じる脂肪滴並びに脂肪酸、アルコール、アミン、アミノアルコール及びアルデヒドなどの長鎖脂肪族炭化水素を含む化合物群及びその誘導体を含む。
使用に適する脂質は、商業的供給源から得ることができる。例えば、ジミリスチルホスファチジルコリン（「ＤＭＰＣ」）は、Ｓｉｇｍａ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯから得ることができ、リン酸ジセチル（「ＤＣＰ」）は、Ｋ＆Ｋ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｐｌａｉｎｖｉｅｗ，ＮＹ）から得ることができ；コレステロール（「Ｃｈｏｉ」）は、Ｃａｌｂｉｏｃｈｅｍ－Ｂｅｈｒｉｎｇから得ることができ、ジミリスチルホスファチジルグリセロール（「ＤＭＰＧ」）及び他の脂質は、Ａｖａｎｔｉ Ｐｏｌａｒ Ｌｉｐｉｄｓ，Ｉｎｃ．（Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍ，ＡＬ．）から得ることができる。クロロホルム又はクロロホルム／メタノール中の脂質の原液を約－２０℃で保存できる。クロロホルムを、メタノールよりも容易に揮発するために唯一の溶媒として使用する。「リポソーム」は、封入された脂質二重層又は凝集体の産生により形成される多様な単及び多層状脂質媒体を包含する一般的用語である。リポソームは、リン脂質二重層膜及び内部水性媒体を伴う小胞構造を有することにより特徴付けられ得る。多層状リポソームは、水性媒体により分離された、複数の脂質層を有する。それらは、リン脂質が過剰の水溶液に懸濁されたときに自然に形成される。脂質要素は、閉構造形成前に自己凝集し、水及び溶解した溶質を脂質二重層の間に封入する（Ｇｈｏｓｈ ｅｔ ａｌ．，１９９１ Ｇｌｙｃｏｂｉｏｌｏｇｙ ５：５０５－１０）。しかしながら、通常の小胞構造と異なる構造を溶液で有する組成物も包含される。例えば、脂質は、ミセル構造であるか又は単に脂質分子の不均一凝集体として存在すると考えられ得る。リポフェクタミン－核酸複合体も考慮される。
外来性核酸を宿主細胞に導入するか又はそうでなければ細胞を本開示の阻害剤に曝露する方法に関係なく、宿主細胞における組み換えＤＮＡ配列の存在を確認するために多様なアッセイを行い得る。このようなアッセイは、例えば、サザン及びノーザンブロッティング、ＲＴ－ＰＣＲ及びＰＣＲなどの当業者に周知の「分子生物学的」アッセイ、薬剤の同定に使用するための、例えば免疫学的手段（ＥＬＩＳＡ及びウェスタンブロット）により、特定のペプチドの存在又は不在を検出するような「生化学的」アッセイ又は本開示の範囲内に入る本明細書に記載のアッセイを含む。
本開示は、ＣＡＲ分子コード化核酸分子を含むベクターを更に提供する。いくつかの実施形態において、ＣＡＲベクターを細胞、例えばＴ細胞又はＮＫ細胞に直接形質導入することができる。いくつかの実施形態において、ベクターは、クローニング又は発現ベクター、例えば１つ以上のプラスミド（例えば、発現プラスミド、クローニングベクター、ミニサークル、ミニベクター、二重微小染色体）、レトロウイルス及びレンチウイルスベクター構築物を含むが、これらに限定されないベクターである。いくつかの実施形態において、ベクターはマルチシストロン性ベクターである。いくつかの実施形態において、ベクターは、哺乳動物Ｔ細胞又はＮＫ細胞においてＣＡＲ構築物を発現することができる。いくつかの実施形態において、哺乳動物Ｔ細胞はヒトＴ細胞である。いくつかの実施形態において、哺乳動物ＮＫ細胞はヒトＮＫ細胞である。いくつかの実施形態において、Ｔ細胞は自己由来である。いくつかの実施形態において、Ｔ細胞は同種異系である。
細胞の供給源
増殖及び遺伝的改変前に、細胞、例えば免疫エフェクター細胞（例えばＴ細胞又はＮＫ細胞）の供給源を対象から得る。用語「対象」は、免疫応答が惹起できる生存生物（例えば、哺乳動物）を含むことを意図する。対象の例は、ヒト、イヌ、ネコ、マウス、ラット及びそれらのトランスジェニック種を含む。Ｔ細胞は、末梢血単核細胞、骨髄、リンパ節組織、臍帯血、胸腺組織、感染部位からの組織、腹水、胸水、脾臓組織及び腫瘍を含む多数の供給源から得ることができる。
本開示の特定の実施形態において、当技術分野で利用可能な任意の数の免疫エフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞又はＮＫ細胞）系が使用され得る。本開示の特定の実施形態において、Ｔ細胞は、Ｆｉｃｏｌｌ（商標）分離などの、当業者に知られるあらゆる技術を使用して、対象から収集した血液の単位から得ることができる。いくつかの実施形態において、個体の循環血液からの細胞をアフェレーシスにより得る。アフェレーシス産物は、典型的にはＴ細胞、単球、顆粒球、Ｂ細胞、他の有核白血球を含むリンパ球、赤血球及び血小板を含む。いくつかの実施形態において、アフェレーシスにより採取した細胞は、血漿画分を除去し、細胞を続くプロセシング過程のために適切な緩衝液又は媒体に入れるためにするために洗浄され得る。本開示のいくつかの実施形態において、細胞をリン酸緩衝化食塩水（ＰＢＳ）で洗浄する。いくつかの実施形態において、洗浄溶液は、カルシウムを欠き、マグネシウムを欠き得るか、又は全てではないにしても多くの二価カチオンを欠き得る。
カルシウム非存在下の初期活性化過程は、活性化の増強に至り得る。当業者に容易に認識されるように、洗浄工程は、製造業者の指示に従う半自動化「フロースルー」遠心分離（例えば、Ｃｏｂｅ ２９９１ ｃｅｌｌ ｐｒｏｃｅｓｓｏｒ、Ｂａｘｔｅｒ ＣｙｔｏＭａｔｅ又はＨａｅｍｏｎｅｔｉｃｓ Ｃｅｌｌ Ｓａｖｅｒ ５）により達成され得る。洗浄後、細胞を、例えば無Ｃａ、無ＭｇＰＢＳ、ＰｌａｓｍａＬｙｔｅ Ａ又は他の緩衝剤を含む又は含まない食塩水溶液など、多様な生体適合性緩衝液に再懸濁し得る。代わりに、アフェレーシス試料の望ましくない要素を除去し、細胞を培養培地に直接再懸濁し得る。
本出願の方法は、５％以下、例えば２％の、ヒトＡＢ血清を含む培養培地条件を利用でき、既知培養培地条件及び組成物、例えばＳｍｉｔｈ ｅｔ ａｌ．，“Ｅｘ ｖｉｖｏ ｅｘｐａｎｓｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｆｏｒ ａｄｏｐｔｉｖｅ ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ ｎｏｖｅｌ Ｘｅｎｏ－ｆｒｅｅ ＣＴＳ Ｉｍｍｕｎｅ Ｃｅｌｌ Ｓｅｒｕｍ Ｒｅｐｌａｃｅｍｅｎｔ”Ｃｌｉｎｉｃａｌ＆Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（２０１５）４，ｅ３１；ｄｏｉ：１０．１０３８／ｃｔｉ．２０１４．３１に記載のものを用い得ることが認識される。
いくつかの実施形態において、Ｔ細胞は、赤血球を溶解し、例えばＰＥＲＣＯＬＬ（商標）勾配による遠心分離又は向流遠心溶出法により単球を枯渇させることにより、末梢血リンパ球から単離する。ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、ＣＤ４５ＲＡ＋、及び／又はＣＤ４５ＲＯ＋Ｔ細胞などのＴ細胞の特異的下位集団を、陽性又は陰性選択技術により更に単離し得る。例えば、いくつかの実施形態において、Ｔ細胞を、所望のＴ細胞の陽性選択に十分な時間、ＤＹＮＡＢＥＡＤＳ（登録商標）Ｍ－４５０ ＣＤ３／ＣＤ２８ Ｔなどの抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８（例えば、３×２８）コンジュゲートビーズとインキュベーションすることにより単離することができる。いくつかの実施形態において、時間は約３０分である。いくつかの実施形態において、時間は、３０分～３６時間又はそれより長い範囲及びその間の任意の整数値である。いくつかの実施形態において、時間は、少なくとも１時間、２時間、３時間、４時間、５時間又は６時間である。いくつかの実施形態において、時間は、１０～２４時間である。いくつかの実施形態において、インキュベーション時間は２４時間である。腫瘍組織又は免疫不全状態個体から腫瘍浸潤性リンパ球（ＴＩＬ）を単離するような、他の細胞型と比較してＴ細胞が少ないあらゆる状況において、Ｔ細胞を単離するために長いインキュベーション時間が使用され得る。更に、長いインキュベーション時間の使用は、ＣＤ８＋Ｔ細胞の捕獲効率を高め得る。そのため、単にＴ細胞をＣＤ３／ＣＤ２８ビーズと結合させる時間を短くするか若しくは長くし、且つ／又はビーズ対Ｔ細胞比を増加若しくは減少させる（更に本明細書に記載の通り）ことにより、Ｔ細胞の亜集団は、培養開始時又は過程中の他の時点で優先的に選択され得る。更に、ビーズ又は他の表面上の抗ＣＤ３及び／又は抗ＣＤ２８抗体比を増加又は減少させることにより、Ｔ細胞の亜集団は、培養開始時又は工程中の他の時点で優先的に選択され得る。当業者は、本開示の文脈において、複数回の選択も使用できることを認識するであろう。特定の実施形態において、選択手順を実施し、「未選択」細胞を活性化及び増殖プロセスで使用することが望ましい場合がある。「未選択」細胞も更なる選択に供することができる。
陰性選択によるＴ細胞集団の濃縮は、陰性に選択される細胞に独特な表面マーカーを指向する抗体の組み合わせにより達成できる。一つの方法は、陰性に選択される細胞に存在する細胞表面マーカーを指向するモノクローナル抗体のカクテルを使用する陰性磁気免疫粘着又はフローサイトメトリーによる細胞選別及び／又は選択である。例えば、陰性選択によりＣＤ４＋細胞を濃縮するために、モノクローナル抗体カクテルは、典型的にはＣＤ１４、ＣＤ２０、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１６、ＨＬＡ－ＤＲ及びＣＤ８に対する抗体を含む。特定の実施形態において、典型的にはＣＤ４＋、ＣＤ２５＋、ＣＤ６２Ｌｈｉ、ＧＩＴＲ＋及びＦｏｘＰ３＋を発現する制御性Ｔ細胞について濃縮又は陽性選択することが望ましい場合がある。特定の実施形態において、ＣＤ１２７ｌｏｗである細胞を濃縮することが望ましい場合がある。或いは、特定の実施形態において、Ｔ制御性細胞は、抗Ｃ２５コンジュゲートビーズ又は他の類似選択法により枯渇される。
本明細書に記載の方法は、例えば、本明細書に記載の、例えば、陰性選択技術を使用する、例えば、Ｔ制御性細胞枯渇集団、ＣＤ２５＋枯渇細胞である、免疫エフェクター細胞の特異的下位集団、例えば、Ｔ細胞の選択を含み得る。好ましくは、Ｔ制御性枯渇細胞の集団は３０％、２５％、２０％、１５％、１０％、５％、４％、３％、２％、１％未満のＣＤ２５＋細胞を含む。
いくつかの実施形態において、Ｔ制御性細胞、例えば、ＣＤ２５＋Ｔ細胞は、抗ＣＤ２５抗体又はそのフラグメント又はＣＤ２５結合リガンド、ＩＬ－２を使用して集団から除去される。いくつかの実施形態において、抗ＣＤ２５抗体又はそのフラグメント又はＣＤ２５結合リガンドは、基質、例えば、ビーズにコンジュゲートするか又は他に基質、例えば、ビーズ上に被覆される。いくつかの実施形態において、抗ＣＤ２５抗体又はそのフラグメントは、本明細書に記載の基質にコンジュゲートされる。
いくつかの実施形態において、Ｔ制御性細胞、例えば、ＣＤ２５＋Ｔ細胞は、Ｍｉｌｔｅｎｙｉ（商標）からのＣＤ２５枯渇剤を使用して集団から除去される。いくつかの実施形態において、細胞対ＣＤ２５枯渇剤の比は、１ｅ７細胞対２０μＬ又は１ｅ７細胞対１５μＬ又は１ｅ７細胞対１０μＬ又は１ｅ７細胞対５μＬ又は１ｅ７細胞対２．５μＬ又は１ｅ７細胞対１．２５μＬである。いくつかの実施形態において、例えば、Ｔ制御性細胞、例えば、ＣＤ２５＋枯渇のために、５億細胞／ｍｌを超える細胞が使用される。いくつかの実施形態において、６億、７億、８億、又は９億細胞／ｍｌの細胞濃度が使用される。
いくつかの実施形態において、枯渇される免疫エフェクター細胞の集団は、約６×１０９個のＣＤ２５＋Ｔ細胞を含む。他の実施形態において、枯渇される免疫エフェクター細胞の集団は、約１×１０９～１×１０１０（及びその間の任意の整数値）個のＣＤ２５＋Ｔ細胞を含む。いくつかの実施形態において、得られたＴ制御性枯渇細胞集団は、２×１０９個又はそれ未満のＴ制御性細胞、例えば、ＣＤ２５＋細胞（例えば、１×１０９、５×１０８、１×１０８、５×１０７、１×１０７個又はそれ未満のＣＤ２５＋細胞）を含む。
いくつかの実施形態において、Ｔ制御性細胞、例えば、ＣＤ２５＋細胞は、例えば、チュービング１６２－０１などの、枯渇チュービングセットと共にＣｌｉｎｉＭＡＣ系を使用して集団から除去される。いくつかの実施形態において、ＣｌｉｎｉＭＡＣ系は、例えば、ＤＥＰＬＥＴＩＯＮ２．１などの枯渇設定で実行される。
特定の理論に縛られることを望まないが、アフェレーシス前又はＣＡＲ発現細胞産物の製造中の対象における免疫細胞の負のレギュレーターのレベルの減少（例えば、望まない免疫細胞、例えば、ＴＲＥＧ細胞の数の減少）は、対象の再発リスクを減らし得る。例えば、ＴＲＥＧ細胞を枯渇する方法は当技術分野で公知である。例えば、ＴＲＥＧ細胞を減少させる方法は、シクロホスファミド、抗ＧＩＴＲ抗体（抗ＧＩＴＲ本明細書に記載の抗体）、ＣＤ２５枯渇及びそれらの組み合わせを含むが、これらに限定されない。
いくつかの実施形態において、製造法は、ＣＡＲ発現細胞製造前のＴＲＥＧ細胞の数の減少（例えば、枯渇）を含む。例えば、製造法は、例えば、サンプル、例えば、アフェレーシスサンプルと抗ＧＩＴＲ抗体及び／又は抗ＣＤ２５抗体（又はそのフラグメント又はＣＤ２５結合リガンド）を接触させ、ＣＡＲ発現細胞（例えば、Ｔ細胞、ＮＫ細胞）産物の製造前にＴＲＥＧ細胞を枯渇させることを含む。
いくつかの実施形態において、対象は、ＣＡＲ発現細胞産物製造のための細胞収集前にＴＲＥＧ細胞を減らす１つ以上の治療で前処置されており、それにより対象がＣＡＲ発現細胞処置を再び必要とするリスクが軽減される。いくつかの実施形態において、ＴＲＥＧ細胞を減少させる方法は、対象へのシクロホスファミド、抗ＧＩＴＲ抗体、ＣＤ２５枯渇又はこれらの組み合わせの１つ以上の投与を含むが、これらに限定されない。シクロホスファミド、抗ＧＩＴＲ抗体、ＣＤ２５枯渇又はこれらの組み合わせの１つ以上の投与は、ＣＡＲ発現細胞産物注入前、注入中又は注入後に行われ得る。
いくつかの実施形態において、対象は、ＣＡＲ ＩＬ－１５Ｒ／ＩＬ－１５発現細胞産物製造のための細胞の収集前にシクロホスファミドで前処置され、それにより対象がＣＡＲ ＩＬ－１５Ｒ／ＩＬ－１５発現細胞処置に対し再発するリスクを軽減する。いくつかの実施形態において、対象は、ＣＡＲ ＩＬ－１５Ｒ／ＩＬ－１５発現細胞産物製造のための細胞の収集前に抗ＧＩＴＲ抗体で前処置され、それにより対象がＣＡＲ ＩＬ－１５Ｒ／ＩＬ－１５発現細胞処置に対し再発するリスクを軽減する。
いくつかの実施形態において、除去される細胞の集団は、制御性Ｔ細胞又は腫瘍細胞ではなく、ＣＡＲ ＩＬ－１５Ｒ／ＩＬ－１５ Ｔ細胞の増殖及び／又は機能に対し、その他の点で悪影響を与える細胞、例えば、ＣＤ１４、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ３３、ＣＤ１５又は潜在的免疫抑制性細胞により発現される他のマーカーを発現する細胞である。いくつかの実施形態において、このような細胞は、制御性Ｔ細胞及び／又は腫瘍細胞と同時に又は前記枯渇後に又は別の順番で除去されることが想定される。
本明細書に記載の方法は、１を超える選択工程、例えば、１を超える枯渇工程を含み得る。陰性選択によるＴ細胞集団の濃縮は、例えば、陰性に選択される細胞に独特な表面マーカーを指向する抗体の組み合わせにより達成できる。一つの方法は、陰性に選択される細胞に存在する細胞表面マーカーを指向するモノクローナル抗体のカクテルを使用する陰性磁気免疫粘着又はフローサイトメトリーによる細胞選別及び／又は選択である。例えば、陰性選択によりＣＤ４＋細胞を濃縮するために、モノクローナル抗体カクテルは、ＣＤ１４、ＣＤ２０、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１６、ＨＬＡ－ＤＲ及びＣＤ８に対する抗体を含み得る。
本明細書に記載の方法は、更に腫瘍抗原、例えば、ＣＤ２５を含まない腫瘍抗原、例えば、ＣＤ１９、ＣＤ３０、ＣＤ３８、ＣＤ１２３、ＣＤ２０、ＣＤ１４又はＣＤ１１ｂを発現する細胞の集団からの除去を含み、それによりＣＡＲ分子、例えば、本明細書に記載のＣＡＲ分子の発現に適するＴ制御性枯渇、例えば、ＣＤ２５＋枯渇及び腫瘍抗原枯渇細胞の集団を提供する。いくつかの実施形態において、腫瘍抗原発現細胞は、Ｔ制御性、例えば、ＣＤ２５＋細胞と同時に除去される。例えば、抗ＣＤ２５抗体又はそのフラグメント及び抗腫瘍抗原抗体又はそのフラグメントを同じ基質、例えば、ビーズに結合でき、これを、細胞の除去に使用でき又は抗ＣＤ２５抗体又はそのフラグメント及び抗腫瘍抗原抗体又はそのフラグメントを別のビーズに結合でき、その混合物を細胞の除去に使用できる。他の実施形態において、Ｔ制御性細胞、例えば、ＣＤ２５＋細胞の除去及び腫瘍抗原発現細胞の除去は逐次的であり、例えば、いずれの順番で生じてもよい。
チェックポイント阻害剤、例えば、本明細書に記載のチェックポイント阻害剤を発現する細胞、例えば、ＰＤ１＋細胞、ＬＡＧ３＋細胞及びＴＩＭ３＋細胞の１つ以上の集団からの除去を含み、それによりＴ制御性枯渇、例えば、ＣＤ２５＋枯渇細胞及びチェックポイント阻害剤枯渇細胞、例えば、ＰＤ１＋、ＬＡＧ３＋及び／又はＴＩＭ３＋枯渇細胞の集団を提供する方法も提供される。例示的なチェックポイント阻害剤は、ＰＤ１、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＣＴＬＡ４、ＴＩＭ３、ＣＥＡＣＡＭ（例えば、ＣＥＡＣＡＭ－１、ＣＥＡＣＡＭ－３及び／又はＣＥＡＣＡＭ－５）、ＬＡＧ３、ＶＩＳＴＡ、ＢＴＬＡ、ＴＩＧＩＴ、ＬＡＩＲ１、ＣＤ１６０、２Ｂ４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、Ｂ７－Ｈ３（ＣＤ２７６）、Ｂ７－Ｈ４（ＶＴＣＮ１）、ＨＶＥＭ（ＴＮＦＲＳＦ１４又はＣＤ２７０）、ＫＩＲ、Ａ２ａＲ、ＭＨＣクラスＩ、ＭＨＣクラスＩＩ、ＧＡＬ９、アデノシン及びＴＧＦベータを含む。実施形態において、チェックポイント阻害剤は、ＰＤ１又はＰＤ－Ｌ１である。いくつかの実施形態において、チェックポイント阻害剤発現細胞は、Ｔ制御性、例えば、ＣＤ２５＋細胞と同時に除去される。例えば、抗ＣＤ２５抗体又はそのフラグメント及び抗チェックポイント阻害剤抗体又はそのフラグメントを同じビーズに結合でき、それを細胞の除去に使用でき又は抗ＣＤ２５抗体又はそのフラグメント及び抗チェックポイント阻害剤抗体又はそのフラグメントを別のビーズに結合でき、その混合物を細胞の除去に使用できる。他の実施形態において、Ｔ制御性細胞、例えば、ＣＤ２５＋細胞の除去及びチェックポイント阻害剤発現細胞の除去は逐次的であり、例えば、いずれ順序の順番で生じてもよい。
いくつかの実施形態において、ＩＦＮ－γ、ＴＮＦα、ＩＬ－１７Ａ、ＩＬ－２、ＩＬ－３、ＩＬ－４、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－１０、ＩＬ－１３、グランザイムＢ及びパーフォリン又は他の適切な分子、例えば他のサイトカインの１つ以上を発現するＴ細胞集団を選択できる。細胞発現についてスクリーニングする方法は、例えば、国際公開第２０１３／１２６７１２号パンフレットに記載する方法により決定できる。
陽性又は陰性選択により所望の細胞集団を単離するために、細胞及び表面（例えば、ビーズなどの粒子）の濃度は、変わり得る。一実施形態において、細胞とビーズとの最大接触を確実にするために、ビーズと細胞とを一緒に混合する体積を有意に減少させる（例えば、細胞濃度を増加させる）ことが望まれ得る。例えば、いくつかの実施形態において、２０億細胞／ｍｌの濃度を使用する。いくつかの実施形態において、１０億細胞／ｍｌの濃度を使用する。いくつかの実施形態において、１億細胞／ｍｌ超が使用される。いくつかの実施形態において、１０００万、１５００万、２０００万、２５００万、３０００万、３５００万、４０００万、４５００万又は５０００万細胞／ｍｌの細胞濃度が使用される。更なる態様において、７５００万、８０００万、８５００万、９０００万、９５００万又は１億細胞／ｍｌからの細胞濃度が使用される。更なる実施形態において、１億２５００万又は１億５０００万細胞／ｍｌの濃度を使用することができる。高濃度を使用して細胞収率、細胞活性化及び細胞増殖を増加することができる。更に、高細胞濃度の使用は、ＣＤ２８陰性Ｔ細胞などの目的の標的抗原を弱く発現し得る細胞の、又は多くの腫瘍細胞が存在する試料（例えば、白血病性血液、腫瘍組織など）からのより効率的な捕獲を可能にする。このような細胞集団は、治療的価値を有し得、取得することが望ましい。例えば、高濃度細胞の使用は、通常ＣＤ２８発現が弱いＣＤ８＋Ｔ細胞のより効率的な選択を可能にする。
いくつかの実施形態において、低濃度の細胞を使用することが望ましいことがある。Ｔ細胞と表面（例えば、ビーズなどの粒子）との混合物を有意に希釈することにより、粒子と細胞との相互作用が最小化される。これは、粒子に結合する所望の抗原を高量で発現する細胞で選択する。例えば、ＣＤ４＋Ｔ細胞は、高レベルのＣＤ２８を発現し、希釈濃度でＣＤ８＋Ｔ細胞より効率的に捕獲される。いくつかの実施形態において、使用する細胞の濃度は５×１０６／ｍｌである。他の実施形態において、使用する濃度は約１×１０５／ｍｌ～１×１０６／ｍｌ及びその間の任意の整数値であり得る。
他の実施形態において、細胞を、種々の長さの時間、種々の速度で２～１０℃又は室温においてローテータでインキュベートし得る。
刺激のためのＴ細胞は、洗浄工程後にも凍結され得る。理論に拘束されることを望まないが、凍結と続く解凍工程は、細胞集団から顆粒球及びある程度単球を除去することにより、より均一な産物を提供する。血漿及び血小板を除去する洗浄工程後、細胞を凍結溶液に懸濁し得る。多くの凍結溶液及びパラメータが当技術分野で知られ、これに関連して有用であるが、ある方法は、２０％ＤＭＳＯ及び８％ヒト血清アルブミンを含むＰＢＳ又は１０％Ｄｅｘｔｒａｎ ４０及び５％デキストロース、２０％ヒト血清アルブミン及び７．５％ＤＭＳＯ又は３１．２５％Ｐｌａｓｍａｌｙｔｅ－Ａ、３１．２５％デキストロース５％、０．４５％ＮａＣｌ、１０％Ｄｅｘｔｒａｎ ４０及び５％デキストロース、２０％ヒト血清アルブミン及び７．５％ＤＭＳＯを含む培養培地又は例えばＨｅｓｐａｎ及びＰｌａｓｍａＬｙｔｅ Ａを含む他の適当な細胞凍結媒体を使用し、次いで細胞を１°／分の速度で－８０℃に凍結し、気相の液体窒素貯蔵タンクに保存する。制御凍結の他の方法並びに直接－２０℃又は液体窒素の非制御凍結も使用できる。
一実施形態において、凍結保存細胞を本明細書に記載のように解凍し、洗浄し、本開示の方法を使用する活性化前に室温で１時間休息させる。
本開示に関連して、本明細書に記載の増殖細胞が必要となり得る時点の前の期間における対象からの血液試料又はアフェレーシス産物の収集も企図されている。従って、増殖する細胞の供給源を必要な任意の時点で採取することができ、免疫エフェクター細胞、例えばＴ細胞又はＮＫ細胞などの所望の細胞を、本明細書に記載のものなどの細胞療法、例えばＴ細胞療法からの利益があるであろう任意の数の疾患及び状態について、細胞療法、例えばＴ細胞療法におけるその後の使用のために単離及び凍結できる。いくつかの実施形態において、血液試料又はアフェレーシスを一般に健常対象から採取する。一実施形態において、血液試料又はアフェレーシスを、一般に、疾患を発症するリスクにあるが、依然として疾患を発症していない健常対象から採取し、目的の細胞をその後の使用のために単離及び凍結する。一実施形態において、免疫エフェクター細胞（例えばＴ細胞又はＮＫ細胞）をその後の時点で増殖、凍結及び使用し得る。一実施形態において、試料を、本明細書に記載の特定の疾患の診断の直後に、しかし、何らかの処置前に患者から採取する。いくつかの実施形態において、ナタリズマブ、エファリズマブ、抗ウイルス剤、化学療法剤、放射線、シクロスポリン、アザチオプリン、メトトレキサート、ミコフェノレート及びＦＫ５０６などの免疫抑制剤、ＣＡＭＰＡＴＨ、抗ＣＤ３抗体、シトキサン、フルダラビン、シクロスポリン、ＦＫ５０６、ラパマイシン、ミコフェノール酸、ステロイド、ＦＲ９０１２２８及び照射などの抗体又は他の免疫除去剤による処置を含むが、これらに限定されない、任意の数の関連する処置モダリティの前に対象からの血液試料又はアフェレーシスから細胞を単離する。
本開示のいくつかの実施形態において、Ｔ細胞を、対象に機能的Ｔ細胞を残す処置後、患者から直接得る。ある癌処置、特に免疫系を損傷させる薬物での処置後、処置の直後、患者が、通常、その処置から回復するまでの間、得られるＴ細胞の品質がエクスビボで増殖する能力について最適であり得るか又は改善され得ることが観察されている。同様に、本明細書に記載の方法を使用するエクスビボ操作後、これらの細胞は、生着及びインビボ増殖増強について好ましい状態であり得る。そのため、本開示に関連して、Ｔ細胞、樹状細胞又は造血細胞系統の他の細胞を含む血液細胞をこの回復期に採取することが企図される。更に、一実施形態において、可動化（例えば、ＧＭ－ＣＳＦでの可動化）及びコンディショニングレジメンを使用して、特定の細胞型の再増殖、再循環、再生及び／又は増殖に好都合である条件を、特に治療後の定められた時間枠中に対象に形成できる。細胞型の例は、Ｔ細胞、Ｂ細胞、樹状細胞及び免疫系の他の細胞を含む。
いくつかの実施形態において、免疫エフェクターＣＡＲ分子を発現する細胞、例えば本明細書に記載のＣＡＲ分子は、低い免疫増強用量のｍＴＯＲ阻害剤を受けた対象から得る。いくつかの実施形態において、ＣＡＲ分子を発現するように操作される免疫エフェクター細胞集団、例えばＴ細胞を、対象又は対象から採取したＰＤ１陰性免疫エフェクター細胞、例えばＴ細胞のレベル又はＰＤ１陰性免疫エフェクター細胞、例えばＴ細胞／ＰＤ１陽性免疫エフェクター細胞、例えばＴ細胞の比が少なくとも一過性に増加するように、低い免疫増強用量のｍＴＯＲ阻害剤の投薬から十分な時間後又は十分な用量の後に採取する。
他の実施形態において、ＣＡＲ分子を発現するように操作されているか又は操作する免疫エフェクター細胞、例えばＴ細胞集団を、ＰＤ１陰性免疫エフェクター細胞、例えばＴ細胞の数を増やすか又はＰＤ１陰性免疫エフェクター細胞、例えばＴ細胞／ＰＤ１陽性免疫エフェクター細胞、例えばＴ細胞の比を増やす量のｍＴＯＲ阻害剤と接触させることにより、エクスビボで処理できる。
いくつかの実施形態において、Ｔ細胞集団は、ジアシルグリセロールキナーゼ（ＤＧＫ）欠損である。ＤＧＫ欠損細胞は、ＤＧＫ ＲＮＡ又はタンパク質を発現しないか、又はＤＧＫ活性が低下した又は阻害された細胞である。ＤＧＫ欠損細胞は、ＤＧＫ発現を低減又は阻止するための遺伝的方法、例えばＲＮＡ干渉剤、例えばｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡの投与により産生できる。代わりに、ＤＧＫ欠損細胞は、本明細書に記載のＤＧＫ阻害剤での処置により産生できる。
いくつかの実施形態において、Ｔ細胞集団は、イカロス欠損である。イカロス欠損細胞は、イカロスＲＮＡ又はタンパク質を発現しないか、又はイカロス活性が低下した又は阻害された細胞を含み、イカロス欠損細胞は、イカロス発現を低減又は阻止するための遺伝的方法、例えばＲＮＡ干渉剤、例えばｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡの投与により産生できる。代わりに、イカロス欠損細胞は、イカロス阻害剤、例えばレナリドマイドでの処置により産生できる。
実施形態において、Ｔ細胞集団は、ＤＧＫ欠損及びイカロス欠損であり、例えばＤＧＫ及びイカロスを発現せず、又はＤＧＫ及びイカロス活性が低下又は阻害されている。このようなＤＧＫ及びイカロス欠損細胞は、本明細書に記載の方法のいずれかにより産生できる。
いくつかの実施形態において、ＮＫ細胞を対象から得る。いくつかの実施形態において、ＮＫ細胞は、ＮＫ細胞株、例えばＮＫ－９２細胞株（Ｃｏｎｋｗｅｓｔ）である。
同種異系ＣＡＲ細胞を含むＣＡＲ細胞の改変
本明細書に記載の実施形態において、免疫エフェクター細胞は、同種異系免疫エフェクター細胞、例えば、Ｔ細胞又はＮＫ細胞であり得る。例えば、細胞は、同種異系Ｔ細胞、例えば、機能的Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）及び／又はヒト白血球抗原（ＨＬＡ）、例えば、ＨＬＡクラスＩ及び／又はＨＬＡクラスＩＩ、及び／又はベータ２ミクログロブリン（β２ｍ）の発現を欠く同種異系Ｔ細胞である。同種異系ＣＡＲの組成物及びその方法は、例えば、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる国際公開第２０１６／０１４５６５号パンフレットの２２７～２３７ページに記載されている。
いくつかの実施形態において、細胞、例えばＴ細胞又はＮＫ細胞は、例えば、本明細書に記載の方法、例えば、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、群生性等間隔短回文反復配列（ＣＲＩＳＰＲ）転写アクティベーター様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）又は亜鉛フィンガーエンドヌクレアーゼ（ＺＦＮ）を使用して、ＴＣＲ、及び／又はＨＬＡ、及び／又はβ２ｍ、及び／又は本明細書に記載の阻害分子（例えば、ＰＤ１、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＣＴＬＡ４、ＴＩＭ３、ＣＥＡＣＡＭ（例えば、ＣＥＡＣＡＭ－１、ＣＥＡＣＡＭ－３及び／又はＣＥＡＣＡＭ－５）、ＬＡＧ３、ＶＩＳＴＡ、ＢＴＬＡ、ＴＩＧＩＴ、ＬＡＩＲ１、ＣＤ１６０、２Ｂ４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、Ｂ７－Ｈ３（ＣＤ２７６）、Ｂ７－Ｈ４（ＶＴＣＮ１）、ＨＶＥＭ（ＴＮＦＲＳＦ１４又はＣＤ２７０）、ＫＩＲ、Ａ２ａＲ、ＭＨＣクラスＩ、ＭＨＣクラスＩＩ、ＧＡＬ９、アデノシン及びＴＧＦベータ）の発現を低減するために改変される。
いくつかの実施形態において、細胞、例えばＴ細胞又はＮＫ細胞は、テロメラーゼサブユニット、例えばテロメラーゼの触媒サブユニット、例えばＴＥＲＴ、例えばｈＴＥＲＴを発現するように操作される。いくつかの実施形態において、そのような改変は、患者における細胞の持続性を改善する。
ＣＡＲ製造／産生の方法
本開示はまた、本明細書に開示される細胞を作製する方法、例えば、本明細書に記載のＣＡＲ構築物、例えばＣＤ１９ＣＡＲ構築物をコードする、核酸分子を発現するように、Ｔ細胞又はＮＫ細胞を操作する方法も提供する。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の製造プロセスのいずれかによって作製された細胞の集団（例えば免疫エフェクター細胞、例えばＴ細胞又はＮＫ細胞）が本明細書に提供される。
活性化プロセス
いくつかの実施形態において、本明細書に開示される方法は、２４時間未満でＣＡＲを発現するように操作された免疫エフェクター細胞を製造し得る。理論に拘束されることを望むものではないが、本明細書で提供される方法は、製造プロセス中にナイーブＴ細胞などのＴ細胞の未分化表現型を保存する。未分化の表現型を有するこれらのＣＡＲ発現細胞は、注入後にインビボでより長く持続し、且つ／又はより良好に増殖し得る。いくつかの実施形態において、本明細書で提供される製造方法によって産生されたＣＡＲＴ細胞は、例えばｓｃＲＮＡ－ｓｅｑを使用して測定されるように、従来の製造プロセスによって産生されたＣＡＲＴ細胞と比較して、より高いパーセンテージの幹細胞メモリーＴ細胞を含む。いくつかの実施形態において、本明細書で提供される製造方法によって産生されたＣＡＲＴ細胞は、例えばｓｃＲＮＡ－ｓｅｑを使用して測定されるように、従来の製造プロセスによって産生されたＣＡＲＴ細胞と比較して、より高いパーセンテージのエフェクターＴ細胞を含む。いくつかの実施形態において、本明細書で提供される製造方法によって産生されたＣＡＲＴ細胞は、例えばｓｃＲＮＡ－ｓｅｑを使用して測定されるように、従来の製造プロセスによって産生されたＣＡＲＴ細胞と比較して、Ｔ細胞の幹細胞性をより良好に保存する。いくつかの実施形態において、本明細書で提供される製造方法によって産生されたＣＡＲＴ細胞は、例えばｓｃＲＮＡ－ｓｅｑを使用して測定されるように、従来の製造プロセスによって産生されたＣＡＲＴ細胞と比較して、より低いレベルの低酸素症を示す。いくつかの実施形態において、本明細書で提供される製造方法によって産生されたＣＡＲＴ細胞は、例えばｓｃＲＮＡ－ｓｅｑを使用して測定されるように、従来の製造プロセスによって産生されたＣＡＲＴ細胞と比較して、より低いレベルのオートファジーを示す。
いくつかの実施形態において、本明細書に開示される方法は、Ｄｙｎａｂｅａｄｓ（登録商標）（例えば、ＣＤ３／ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓ（登録商標））などのビーズの使用を含まず、ビーズ除去工程を含まない。いくつかの実施形態において、本明細書に開示される方法によって製造されたＣＡＲＴ細胞は、最小限のエクスビボ増殖、例えば、１日未満、１２時間未満、８時間未満、６時間未満、４時間未満、３時間未満、２時間未満、１時間未満、又はエクスビボ増殖なしで対象に投与され得る。したがって、本明細書に記載の方法は、対象の疾患の処置における使用のための改善されたＣＡＲ発現細胞産物を作製する迅速な製造プロセスを提供する。
いくつかの実施形態において、本開示は、（ｉ）細胞の集団（例えば、Ｔ細胞、例えば、凍結又は新鮮な白血球除去製品から単離されたＴ細胞）を、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤と接触させること；（ｉｉ）細胞の集団（例えば、Ｔ細胞）を、ＣＡＲをコードする核酸分子（例えば、ＤＮＡ又はＲＮＡ分子）と接触させ、それにより、核酸分子を含む細胞（例えば、Ｔ細胞）の集団を提供すること、及び（ｉｉｉ）保存（例えば、凍結保存培地中の細胞の集団の再製剤化）又は投与のために細胞の集団（例えば、Ｔ細胞）を回収することを含む、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する細胞（例えば、Ｔ細胞）の集団を作製する方法を提供し、ここで、（ａ）工程（ｉｉ）は、工程（ｉ）と一緒に、又は工程（ｉ）の開始後２０時間以内、例えば、工程（ｉ）の開始後１２、１３、１４、１５、１６、１７、又は１８時間以内、例えば、工程（ｉ）の開始後１８時間以内に実施され、工程（ｉｉｉ）は、工程（ｉ）の開始後２６時間以内、例えば、工程（ｉ）の開始後、２２、２３、又は２４時間以内、例えば、工程（ｉ）の開始後２４時間以内に実施され；（ｂ）工程（ｉｉ）は、工程（ｉ）と一緒に、又は工程（ｉ）の開始後２０時間以内、例えば、工程（ｉ）の開始後１２、１３、１４、１５、１６、１７、又は１８時間以内、例えば、工程（ｉ）の開始後１８時間以内に実施され、工程（ｉｉｉ）は、工程（ｉｉ）の開始後３０時間以内、例えば、工程（ｉｉ）の開始後、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、又は３０時間以内に実施され；又は（ｃ）工程（ｉｉｉ）からの細胞の集団は、例えば、生細胞の数によって評価されるように、工程（ｉ）の開始時の細胞の集団と比較して、増殖していないか、又は５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、若しくは４０％以下、例えば、１０％以下だけ増殖している。いくつかの実施形態において、工程（ｉｉ）の核酸分子はＤＮＡ分子である。いくつかの実施形態において、工程（ｉｉ）の核酸分子はＲＮＡ分子である。いくつかの実施形態において、工程（ｉｉ）の核酸分子は、ウイルスベクター、例えば、レンチウイルスベクター、アデノウイルスベクター、又はレトロウイルスベクターから選択されるウイルスベクター上にある。いくつかの実施形態において、工程（ｉｉ）の核酸分子は、非ウイルスベクター上にある。いくつかの実施形態において、工程（ｉｉ）の核酸分子はプラスミド上にある。いくつかの実施形態において、工程（ｉｉ）の核酸分子は、どのベクター上にもない。いくつかの実施形態において、工程（ｉｉ）は、ＣＡＲをコードする核酸分子を含むウイルスベクターを細胞（例えば、Ｔ細胞）の集団に形質導入することを含む。
いくつかの実施形態において、細胞（例えば、Ｔ細胞）の集団は、対象からのアフェレーシスサンプル（例えば、白血球アフェレーシスサンプル）から収集される。
いくつかの実施形態において、アフェレーシスサンプル（例えば、白血球アフェレーシスサンプル）は対象から収集され、凍結サンプル（例えば、凍結保存サンプル）として細胞製造施設に輸送される。次いで、凍結したアフェレーシスサンプルを解凍し、Ｔ細胞（例えば、ＣＤ４＋Ｔ細胞及び／又はＣＤ８＋Ｔ細胞）は、例えば、細胞選別機（例えば、ＣｌｉｎｉＭＡＣＳ（登録商標）Ｐｒｏｄｉｇｙ（登録商標）デバイス）を使用して、アフェレーシスサンプルから選択される。次いで、選択されたＴ細胞（例えば、ＣＤ４＋Ｔ細胞及び／又はＣＤ８＋Ｔ細胞）を、本明細書に記載の活性化プロセスを使用してＣＡＲＴ製造のために播種する。いくつかの実施形態において、選択されたＴ細胞（例えば、ＣＤ４＋Ｔ細胞及び／又はＣＤ８＋Ｔ細胞）は、ＣＡＲＴ製造のために播種される前に、１ラウンド以上の凍結融解を受ける。
いくつかの実施形態において、アフェレーシスサンプル（例えば、白血球アフェレーシスサンプル）は、対象から収集され、新鮮産物（例えば、凍結されていない産物）として細胞製造施設に輸送される。Ｔ細胞（例えば、ＣＤ４＋Ｔ細胞及び／又はＣＤ８＋Ｔ細胞）は、例えば、細胞選別機（例えば、ＣｌｉｎｉＭＡＣＳ（登録商標）Ｐｒｏｄｉｇｙ（登録商標）デバイス）を使用して、アフェレーシスサンプルから選択される。次いで、選択されたＴ細胞（例えば、ＣＤ４＋Ｔ細胞及び／又はＣＤ８＋Ｔ細胞）を、本明細書に記載の活性化プロセスを使用してＣＡＲＴ製造のために播種する。いくつかの実施形態において、選択されたＴ細胞（例えば、ＣＤ４＋Ｔ細胞及び／又はＣＤ８＋Ｔ細胞）は、ＣＡＲＴ製造のために播種される前に、１ラウンド以上の凍結融解を受ける。
いくつかの実施形態において、アフェレーシスサンプル（例えば、白血球アフェレーシスサンプル）は、対象から収集される。Ｔ細胞（例えば、ＣＤ４＋Ｔ細胞及び／又はＣＤ８＋Ｔ細胞）は、例えば、細胞選別機（例えば、ＣｌｉｎｉＭＡＣＳ（登録商標）Ｐｒｏｄｉｇｙ（登録商標）デバイス）を使用して、アフェレーシスサンプルから選択される。次いで、選択されたＴ細胞（例えば、ＣＤ４＋Ｔ細胞及び／又はＣＤ８＋Ｔ細胞）は、凍結サンプル（例えば、凍結保存サンプル）として細胞製造施設に輸送される。選択されたＴ細胞（例えば、ＣＤ４＋Ｔ細胞及び／又はＣＤ８＋Ｔ細胞）は後に解凍され、本明細書に記載の活性化プロセスを使用してＣＡＲＴ製造のために播種される。
いくつかの実施形態において、細胞（例えば、Ｔ細胞）を抗ＣＤ３抗体及び抗ＣＤ２８抗体と、例えば１２時間接触させた後、ＣＡＲをコードするベクター（例えば、レンチウイルスベクター）（例えば、１つ以上のベクター）により形質導入する。培養開始から２４時間後、細胞を洗浄し、保存又は投与のために製剤化する。
理論に拘束されることを望むものではないが、短時間のＣＤ３及びＣＤ２８刺激は、自己再生Ｔ細胞の効率的な形質導入を促進し得る。従来のＣＡＲＴ製造アプローチと比較して、本明細書で提供される活性化プロセスは、長期のエクスビボ増殖を要しない。サイトカインプロセスと同様に、本明細書で提供される活性化プロセスも、ＣＡＲＴ製造中に未分化Ｔ細胞を保存する。
いくつかの実施形態において、細胞の集団を、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤と接触させる。
いくつかの実施形態において、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤は、ＣＤ３を刺激する薬剤である。いくつかの実施形態において、共刺激分子を刺激する薬剤は、ＣＤ２８、ＩＣＯＳ、ＣＤ２７、ＨＶＥＭ、ＬＩＧＨＴ、ＣＤ４０、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＤＲ３、ＧＩＴＲ、ＣＤ３０、ＴＩＭ１、ＣＤ２、ＣＤ２２６、又はそれらの任意の組み合わせを刺激する薬剤である。いくつかの実施形態において、共刺激分子を刺激する薬剤は、ＣＤ２８を刺激する薬剤である。いくつかの実施形態において、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤は、抗体（例えば、単一ドメイン抗体（例えば、重鎖可変ドメイン抗体）、ペプチボディ、Ｆａｂフラグメント、又はｓｃＦｖ）、小分子、又はリガンド（例えば、天然、組換え、又はキメラリガンド）から選択される。いくつかの実施形態において、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤は抗体である。いくつかの実施形態において、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤は抗ＣＤ３抗体である。いくつかの実施形態において、共刺激分子を刺激する薬剤は、抗体（例えば、単一ドメイン抗体（例えば、重鎖可変ドメイン抗体）、ペプチボディ、Ｆａｂフラグメント、又はｓｃＦｖ）、小分子、又はリガンド（例えば、天然、組換え、又はキメラリガンド）から選択される。いくつかの実施形態において、共刺激分子を刺激する薬剤は抗体である。いくつかの実施形態において、共刺激分子を刺激する薬剤は抗ＣＤ２８抗体である。いくつかの実施形態において、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤又は共刺激分子を刺激する薬剤は、ビーズを含まない。いくつかの実施形態において、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤は、コロイドポリマーナノマトリックスに共有結合した抗ＣＤ３抗体を含む。いくつかの実施形態において、共刺激分子を刺激する薬剤は、コロイドポリマーナノマトリックスに共有結合した抗ＣＤ２８抗体を含む。いくつかの実施形態において、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び共刺激分子を刺激する薬剤は、Ｔ Ｃｅｌｌ ＴｒａｎｓＡｃｔ（商標）を含む。
いくつかの実施形態において、マトリックスは、ポリマー、例えば、生分解性又は生体適合性の不活性材料、例えば、細胞に対して非毒性であるものを含むか、又はそれからなる。いくつかの実施形態において、マトリックスは親水性ポリマー鎖から構成され、これは、鎖の水和により水溶液中で最大の移動度を得る。いくつかの実施形態において、可動マトリックスは、コラーゲン、精製タンパク質、精製ペプチド、多糖類、グリコサミノグリカン、又は細胞外マトリックス組成物であり得る。多糖類には、例えば、セルロースエーテル、デンプン、アラビアゴム、アガロース、デキストラン、キトサン、ヒアルロン酸、ペクチン、キサンタン、グアーガム又はアルギン酸塩が含まれ得る。他のポリマーには、ポリエステル、ポリエーテル、ポリアクリレート、ポリアクリルアミド、ポリアミン、ポリエチレンイミン、ポリクオタニウムポリマー、ポリホスファゼン、ポリビニルアルコール、ポリビニルアセテート、ポリビニルピロリドン、ブロックコポリマー、又はポリウレタンが含まれ得る。いくつかの実施形態において、可動マトリックスはデキストランのポリマーである。
いくつかの実施形態において、細胞の集団を、ＣＡＲをコードする核酸分子と接触させる。いくつかの実施形態において、細胞の集団は、ＣＡＲをコードするＤＮＡ分子で形質導入される。
いくつかの実施形態において、ＣＡＲをコードする核酸分子との細胞の集団の接触は、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤との細胞の集団の接触と同時に起こる。いくつかの実施形態において、ＣＡＲをコードする核酸分子との細胞の集団の接触は、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤との細胞の集団の接触の開始から３０、２９、２８、２７、２６、２５、２４、２３、２２、２１、２０、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、５、４、３、２、１、又は０．５時間以内に起こる。いくつかの実施形態において、ＣＡＲをコードする核酸分子との細胞の集団の接触は、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤との細胞の集団の接触の開始から２０時間以内に起こる。いくつかの実施形態において、ＣＡＲをコードする核酸分子との細胞の集団の接触は、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤との細胞の集団の接触の開始から１９時間以内に起こる。いくつかの実施形態において、ＣＡＲをコードする核酸分子との細胞の集団の接触は、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤との細胞の集団の接触の開始から１８時間以内に起こる。いくつかの実施形態において、ＣＡＲをコードする核酸分子との細胞の集団の接触は、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤との細胞の集団の接触の開始から１７時間以内に起こる。いくつかの実施形態において、ＣＡＲをコードする核酸分子との細胞の集団の接触は、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤との細胞の集団の接触の開始から１６時間以内に起こる。いくつかの実施形態において、ＣＡＲをコードする核酸分子との細胞の集団の接触は、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤との細胞の集団の接触の開始から１５時間以内に起こる。いくつかの実施形態において、ＣＡＲをコードする核酸分子との細胞の集団の接触は、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤との細胞の集団の接触の開始から１４時間以内に起こる。いくつかの実施形態において、ＣＡＲをコードする核酸分子との細胞の集団の接触は、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤との細胞の集団の接触の開始から１４時間以内に起こる。いくつかの実施形態において、ＣＡＲをコードする核酸分子との細胞の集団の接触は、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤との細胞の集団の接触の開始から１３時間以内に起こる。いくつかの実施形態において、ＣＡＲをコードする核酸分子との細胞の集団の接触は、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤との細胞の集団の接触の開始から１２時間以内に起こる。いくつかの実施形態において、ＣＡＲをコードする核酸分子との細胞の集団の接触は、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤との細胞の集団の接触の開始から１１時間以内に起こる。いくつかの実施形態において、ＣＡＲをコードする核酸分子との細胞の集団の接触は、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤との細胞の集団の接触の開始から１０時間以内に起こる。いくつかの実施形態において、ＣＡＲをコードする核酸分子との細胞の集団の接触は、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤との細胞の集団の接触の開始から９時間以内に起こる。いくつかの実施形態において、ＣＡＲをコードする核酸分子との細胞の集団の接触は、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤との細胞の集団の接触の開始から８時間以内に起こる。いくつかの実施形態において、ＣＡＲをコードする核酸分子との細胞の集団の接触は、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤との細胞の集団の接触の開始から７時間以内に起こる。いくつかの実施形態において、ＣＡＲをコードする核酸分子との細胞の集団の接触は、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤との細胞の集団の接触の開始から６時間以内に起こる。いくつかの実施形態において、ＣＡＲをコードする核酸分子との細胞の集団の接触は、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤との細胞の集団の接触の開始から５時間以内に起こる。いくつかの実施形態において、ＣＡＲをコードする核酸分子との細胞の集団の接触は、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤との細胞の集団の接触の開始から４時間以内に起こる。いくつかの実施形態において、ＣＡＲをコードする核酸分子との細胞の集団の接触は、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤との細胞の集団の接触の開始から３時間以内に起こる。いくつかの実施形態において、ＣＡＲをコードする核酸分子との細胞の集団の接触は、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤との細胞の集団の接触の開始から２時間以内に起こる。いくつかの実施形態において、ＣＡＲをコードする核酸分子との細胞の集団の接触は、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤との細胞の集団の接触の開始から１時間以内に起こる。いくつかの実施形態において、ＣＡＲをコードする核酸分子との細胞の集団の接触は、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤との細胞の集団の接触の開始から３０分以内に起こる。
いくつかの実施形態において、細胞の集団は、保存又は投与のために回収される。
いくつかの実施形態において、細胞の集団は、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤との細胞の集団の接触の開始から７２、６０、４８、３６、３２、３１、３０、２９、２８、２７、２６、２５、２４、２３、２２、２１、２０、１９、又は１８時間以内に、保存又は投与のために回収される。いくつかの実施形態において、細胞の集団は、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤との細胞の集団の接触の開始から２６時間以内に、保存又は投与のために回収される。いくつかの実施形態において、細胞の集団は、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤との細胞の集団の接触の開始から２５時間以内に、保存又は投与のために回収される。いくつかの実施形態において、細胞の集団は、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤との細胞の集団の接触の開始から２４時間以内に、保存又は投与のために回収される。いくつかの実施形態において、細胞の集団は、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤との細胞の集団の接触の開始から２３時間以内に、保存又は投与のために回収される。いくつかの実施形態において、細胞の集団は、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤との細胞の集団の接触の開始から２２時間以内に、保存又は投与のために回収される。
いくつかの実施形態において、細胞の集団は、エクスビボで増殖されない。
いくつかの実施形態において、細胞の集団は、例えば、生細胞の数によって評価される場合、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤と接触させる前の細胞の集団と比較して、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、又は６０％以下だけ増殖する。いくつかの実施形態において、細胞の集団は、例えば、生細胞の数によって評価される場合、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤と接触させる前の細胞の集団と比較して、５％以下だけ増殖する。いくつかの実施形態において、細胞の集団は、例えば、生細胞の数によって評価される場合、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤と接触させる前の細胞の集団と比較して、１０％以下だけ増殖する。いくつかの実施形態において、細胞の集団は、例えば、生細胞の数によって評価される場合、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤と接触させる前の細胞の集団と比較して、１５％以下だけ増殖する。いくつかの実施形態において、細胞の集団は、例えば、生細胞の数によって評価される場合、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤と接触させる前の細胞の集団と比較して、２０％以下だけ増殖する。いくつかの実施形態において、細胞の集団は、例えば、生細胞の数によって評価される場合、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤と接触させる前の細胞の集団と比較して、２５％以下だけ増殖する。いくつかの実施形態において、細胞の集団は、例えば、生細胞の数によって評価される場合、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤と接触させる前の細胞の集団と比較して、３０％以下だけ増殖する。いくつかの実施形態において、細胞の集団は、例えば、生細胞の数によって評価される場合、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤と接触させる前の細胞の集団と比較して、３５％以下だけ増殖する。いくつかの実施形態において、細胞の集団は、例えば、生細胞の数によって評価される場合、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は上記の細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤と接触させる前の細胞の集団と比較して、４０％以下だけ増殖する。
いくつかの実施形態において、細胞の集団は、例えば、生細胞の数によって評価される場合、上記の１つ以上のサイトカインと接触させる前の細胞の集団と比較して、１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１６、２０、２４、３６、又は４８時間以下だけ増殖する。
いくつかの実施形態において、活性化プロセスは、無血清細胞培地で行われる。いくつかの実施形態において、活性化プロセスは、ＩＬ－２、ＩＬ－１５（例えば、ｈｅｔＩＬ－１５（ＩＬ１５／ｓＩＬ－１５Ｒａ））、又はＩＬ－６（例えば、ＩＬ－６／ｓＩＬ－６Ｒａ）から選択される１つ以上のサイトカインを含む細胞培地中で実施される。いくつかの実施形態において、ｈｅｔＩＬ－１５は、
Figure 2023529211000182
 のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、ｈｅｔＩＬ－１５は、配列番号３００３に対して少なくとも約７０、７５、８０、８５、９０、９５、又は９９％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、活性化プロセスは、ＬＳＤ１阻害剤を含む細胞培地で行われる。いくつかの実施形態において、活性化プロセスは、ＭＡＬＴ１阻害剤を含む細胞培地中で実施される。いくつかの実施形態において、無血清細胞培地は、血清代替物を含む。いくつかの実施形態において、血清代替物は、ＣＴＳ（商標）免疫細胞血清代替物（ＩＣＳＲ）である。いくつかの実施形態において、ＩＣＳＲのレベルは、例えば、最大５％、例えば、約１％、２％、３％、４％、又は５％であり得る。
いくつかの実施形態において、本開示は、（ａ）対象から収集されたアフェレーシスサンプル（例えば、新鮮な又は凍結保存された白血球アフェレーシスサンプル）を提供すること；（ｂ）アフェレーシスサンプルからＴ細胞を選択すること（例えば、陰性選択、陽性選択、又はビーズを使用しない選択を使用する）；（ｃ）単離されたＴ細胞を、例えば、１×１０６～１×１０７細胞／ｍＬで、播種すること；（ｄ）Ｔ細胞を、Ｔ細胞を刺激する薬剤、例えば、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤及び／又は細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤と接触させること（例えば、Ｔ細胞を抗ＣＤ３及び／又は抗ＣＤ２８抗体と接触させること、例えば、Ｔ細胞をＴｒａｎｓＡｃｔと接触させること）；（ｅ）例えば、６～４８時間、例えば、２０～２８時間にわたって、Ｔ細胞を、ＣＡＲをコードする核酸分子（例えば、ＤＮＡ又はＲＮＡ分子）と接触させること（例えば、Ｔ細胞を、ＣＡＲをコードする核酸分子を含むウイルスと接触させること）；及び（ｆ）保存（例えば、凍結保存培地でのＴ細胞の再製剤化）又は投与のために、Ｔ細胞を洗浄及び回収することを含む、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する細胞（例えば、Ｔ細胞）の集団を作製する方法を提供する。いくつかの実施形態において、工程（ｆ）は、工程（ｄ）又は（ｅ）の開始後３０時間以内、例えば、工程（ｄ）又は（ｅ）の開始後、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、又は３０時間以内に実施される。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載の製造プロセス（例えば、本明細書に記載の活性化プロセス）のいずれかによって作製された細胞の集団（例えば免疫エフェクター細胞、例えばＴ細胞又はＮＫ細胞）が本明細書に提供される。
いくつかの実施形態において、製造プロセス終了時（例えば、サイトカインプロセス又は本明細書に記載の活性化プロセスの終了時）の細胞の集団中の、ナイーブ細胞、例えばナイーブＴ細胞、例えばＣＤ４５ＲＡ＋ ＣＤ４５ＲＯ－ ＣＣＲ７＋ Ｔ細胞のパーセンテージは、製造プロセス開始時（例えば、サイトカインプロセス又は本明細書に記載の活性化プロセスの開始時）の細胞の集団中の、ナイーブ細胞、例えばナイーブＴ細胞、例えばＣＤ４５ＲＡ＋ ＣＤ４５ＲＯ－ ＣＣＲ７＋細胞のパーセンテージと比較して、（１）同じであるか、（２）異なっている、例えば、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、又は１５％以下だけ異なっているか、又は（３）増加している、例えば、少なくとも５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、又は２５％だけ増加している。いくつかの実施形態において、製造プロセス終了時（例えば、サイトカインプロセス又は本明細書に記載の活性化プロセスの終了時）の細胞の集団は、例えば、２６時間を超えて持続する（例えば、５、６、７、８、９、１０、１１、又は１２日を超えて持続する）か、又は例えば、３日を超えてインビトロで細胞の集団を増殖させること（例えば、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、又は１５日間にわたり、インビトロで細胞の集団を増殖させること）を含む以外は同様の方法で作製された細胞と比較して、より高い（例えば、少なくとも５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０、３５、４０、４５、又は５０％高い）ナイーブ細胞、例えばナイーブＴ細胞、例えばＣＤ４５ＲＡ＋ ＣＤ４５ＲＯ－ ＣＣＲ７＋ Ｔ細胞のパーセンテージを示す。
いくつかの実施形態において、製造プロセス終了時（例えば、サイトカインプロセス又は本明細書に記載の活性化プロセスの終了時）の細胞の集団中の、ナイーブ細胞、例えばナイーブＴ細胞、例えばＣＤ４５ＲＡ＋ ＣＤ４５ＲＯ－ ＣＣＲ７＋ Ｔ細胞のパーセンテージは、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、又は６０％以上である。
いくつかの実施形態において、製造プロセス終了時（例えば、サイトカインプロセス又は本明細書に記載の活性化プロセスの終了時）の細胞の集団中の、セントラルメモリー細胞、例えばセントラルメモリーＴ細胞、例えばＣＤ９５ＲＡ＋セントラルメモリーＴ細胞のパーセンテージは、製造プロセス開始時（例えば、サイトカインプロセス又は本明細書に記載の活性化プロセスの開始時）の細胞の集団中の、セントラルメモリー細胞、例えばセントラルメモリーＴ細胞、例えばＣＤ９５ＲＡ＋セントラルメモリーＴ細胞のパーセンテージと比較して、（１）同じであるか、（２）異なっている、例えば、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、又は１５％以下だけ異なっているか、又は（３）減少している、例えば、少なくとも５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、又は２５％だけ減少している。いくつかの実施形態において、製造プロセス終了時（例えば、サイトカインプロセス又は本明細書に記載の活性化プロセスの終了時）の細胞の集団は、例えば、２６時間を超えて持続する（例えば、５、６、７、８、９、１０、１１、又は１２日を超えて持続する）か、又は例えば、３日を超えてインビトロで細胞の集団を増殖させること（例えば、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、又は１５日間にわたり、インビトロで細胞の集団を増殖させること）を含む以外は同様の方法で作製された細胞と比較して、より低い（例えば、少なくとも５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０、３５、４０、４５、又は５０％低い）セントラルメモリー細胞、例えばセントラルメモリーＴ細胞、例えばＣＤ９５ＲＡ＋セントラルメモリーＴ細胞のパーセンテージを示す。
いくつかの実施形態において、製造プロセス終了時（例えば、サイトカインプロセス又は本明細書に記載の活性化プロセスの終了時）の細胞の集団中の、セントラルメモリー細胞、例えばセントラルメモリーＴ細胞、例えばＣＤ９５ＲＡ＋セントラルメモリーＴ細胞のパーセンテージは、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、又は８０％以下である。
いくつかの実施形態において、製造プロセス終了時（例えば、サイトカインプロセス又は本明細書に記載の活性化プロセスの終了時）の細胞の集団は、例えば、２６時間を超えて持続する（例えば、５、６、７、８、９、１０、１１、又は１２日を超えて持続する）か、又は例えば、３日を超えてインビトロで細胞の集団を増殖させること（例えば、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、又は１５日間にわたり、インビトロで細胞の集団を増殖させること）を含む以外は同様の方法で作製された細胞と比較して、インビボで投与された後、より長く持続するか、又はより高い（例えば、少なくとも２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、又は９０％高い）レベルで増殖する。
いくつかの実施形態において、細胞の集団は、製造プロセスの開始前（例えば、サイトカインプロセス又は本明細書に記載の活性化プロセスの開始前）に、ＩＬ６Ｒ発現細胞（例えば、ＩＬ６Ｒα及び／又はＩＬ６Ｒβに対して陽性である細胞）について濃縮されている。いくつかの実施形態において、細胞の集団は、製造プロセスの開始時（例えば、サイトカインプロセス又は本明細書に記載の活性化プロセスの開始時）に、例えば、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、又は８０％以上のＩＬ６Ｒ発現細胞（例えば、ＩＬ６Ｒα及び／又はＩＬ６Ｒβに対して陽性である細胞）を含む。
サイトカインプロセス
いくつかの実施形態において、本開示は、（１）細胞の集団を、ＩＬ－２、ＩＬ－７、ＩＬ－１５、ＩＬ－２１、ＩＬ－６、又はそれらの組み合わせから選択されるサイトカインと接触させること、（２）細胞の集団（例えば、Ｔ細胞）を、ＣＡＲをコードする核酸分子（例えば、ＤＮＡ又はＲＮＡ分子）と接触させ、それにより、核酸分子を含む細胞（例えば、Ｔ細胞）の集団を提供すること、及び（３）保存（例えば、凍結保存培地中の細胞の集団の再製剤化）又は投与のために細胞の集団（例えば、Ｔ細胞）を回収することを含む、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する細胞（例えば、Ｔ細胞）の集団を作製する方法を提供し、ここで、（ａ）工程（２）は、工程（１）と一緒に、又は工程（１）の開始後５時間以内、例えば、工程（１）の開始後、１、２、３、４、又は５時間以内に実施され、工程（３）は、工程（１）の開始後２６時間以内、例えば、工程（１）の開始後、２２、２３、又は２４時間以内、例えば、工程（１）の開始後２４時間以内に実施され、又は（ｂ）工程（３）からの細胞の集団は、例えば、生細胞の数によって評価されるように、工程（１）の開始時の細胞の集団と比較して、増殖していないか、又は５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、若しくは４０％以下、例えば、１０％以下だけ増殖している。いくつかの実施形態において、工程（２）の核酸分子はＤＮＡ分子である。いくつかの実施形態において、工程（２）の核酸分子はＲＮＡ分子である。いくつかの実施形態において、工程（２）の核酸分子は、ウイルスベクター、例えば、レンチウイルスベクター、アデノウイルスベクター、又はレトロウイルスベクターから選択されるウイルスベクター上にある。いくつかの実施形態において、工程（２）の核酸分子は、非ウイルスベクター上にある。いくつかの実施形態において、工程（２）の核酸分子はプラスミド上にある。いくつかの実施形態において、工程（２）の核酸分子は、どのベクター上にもない。いくつかの実施形態において、工程（２）は、細胞（例えば、Ｔ細胞）の集団を、ＣＡＲをコードする核酸分子を含むウイルスベクターで形質導入することを含む。
いくつかの実施形態において、細胞（例えば、Ｔ細胞）の集団は、対象からのアフェレーシスサンプル（例えば、白血球アフェレーシスサンプル）から収集される。
いくつかの実施形態において、アフェレーシスサンプル（例えば、白血球アフェレーシスサンプル）を対象から収集され、凍結サンプル（例えば、凍結保存サンプル）として細胞製造施設に輸送される。次いで、凍結したアフェレーシスサンプルを解凍し、Ｔ細胞（例えば、ＣＤ４＋Ｔ細胞及び／又はＣＤ８＋Ｔ細胞）は、例えば、細胞選別機（例えば、ＣｌｉｎｉＭＡＣＳ（登録商標）Ｐｒｏｄｉｇｙ（登録商標）デバイス）を使用して、アフェレーシスサンプルから選択される。次いで、選択されたＴ細胞（例えば、ＣＤ４＋Ｔ細胞及び／又はＣＤ８＋Ｔ細胞）を、本明細書に記載のサイトカインプロセスを使用してＣＡＲＴ製造のために播種する。いくつかの実施形態において、サイトカインプロセスの最後に、ＣＡＲ Ｔ細胞を凍結保存し、後に解凍し、対象に投与する。いくつかの実施形態において、選択されたＴ細胞（例えば、ＣＤ４＋Ｔ細胞及び／又はＣＤ８＋Ｔ細胞）は、ＣＡＲＴ製造のために播種される前に、１ラウンド以上の凍結融解を受ける。
いくつかの実施形態において、アフェレーシスサンプル（例えば、白血球アフェレーシスサンプル）は、対象から収集され、新鮮産物（例えば、凍結されていない産物）として細胞製造施設に輸送される。Ｔ細胞（例えば、ＣＤ４＋Ｔ細胞及び／又はＣＤ８＋Ｔ細胞）は、例えば、細胞選別機（例えば、ＣｌｉｎｉＭＡＣＳ（登録商標）Ｐｒｏｄｉｇｙ（登録商標）デバイス）を使用して、アフェレーシスサンプルから選択される。次いで、選択されたＴ細胞（例えば、ＣＤ４＋Ｔ細胞及び／又はＣＤ８＋Ｔ細胞）を、本明細書に記載のサイトカインプロセスを使用してＣＡＲＴ製造のために播種する。いくつかの実施形態において、選択されたＴ細胞（例えば、ＣＤ４＋Ｔ細胞及び／又はＣＤ８＋Ｔ細胞）は、ＣＡＲＴ製造のために播種される前に、１ラウンド以上の凍結融解を受ける。
いくつかの実施形態において、アフェレーシスサンプル（例えば、白血球アフェレーシスサンプル）は、対象から収集される。Ｔ細胞（例えば、ＣＤ４＋Ｔ細胞及び／又はＣＤ８＋Ｔ細胞）は、例えば、細胞選別機（例えば、ＣｌｉｎｉＭＡＣＳ（登録商標）Ｐｒｏｄｉｇｙ（登録商標）デバイス）を使用して、アフェレーシスサンプルから選択される。次いで、選択されたＴ細胞（例えば、ＣＤ４＋Ｔ細胞及び／又はＣＤ８＋Ｔ細胞）は、凍結サンプル（例えば、凍結保存サンプル）として細胞製造施設に輸送される。選択されたＴ細胞（例えば、ＣＤ４＋Ｔ細胞及び／又はＣＤ８＋Ｔ細胞）は後に解凍され、本明細書に記載のサイトカインプロセスを使用してＣＡＲＴ製造のために播種される。
いくつかの実施形態において、細胞（例えば、Ｔ細胞）が播種された後、１つ以上のサイトカイン（例えば、ＩＬ－２、ＩＬ－７、ＩＬ－１５（例えば、ｈｅｔＩＬ－１５（ＩＬ１５／ｓＩＬ－１５Ｒａ））、ＩＬ－２１、又はＩＬ－６（例えば、ＩＬ－６／ｓＩＬ－６Ｒ）から選択される１つ以上のサイトカイン）、及びＣＡＲをコードするベクター（例えば、レンチウイルスベクター）（例えば、１つ以上のベクター）が、細胞に添加される。２０～２４時間のインキュベーション後、細胞を洗浄し、保存又は投与のために製剤化する。
従来のＣＡＲＴ製造アプローチとは異なり、本明細書で提供されるサイトカインプロセスは、ＣＤ３及び／又はＣＤ２８刺激、又はエクスビボＴ細胞増殖を含まない。抗ＣＤ３及び抗ＣＤ２８抗体と接触し、エクスビボで広範囲に増殖したＴ細胞は、セントラルメモリー表現型への分化を示す傾向がある。理論に拘束されることを望むものではないが、本明細書で提供されるサイトカインプロセスは、ＣＡＲＴ製造中にＴ細胞の未分化表現型を保存し、又は増加させ、対象に注入された後により長く持続し得るＣＡＲＴ産物を生成する。
いくつかの実施形態において、細胞の集団を、１つ以上のサイトカイン（例えば、ＩＬ－２、ＩＬ－７、ＩＬ－１５（例えば、ｈｅｔＩＬ－１５（ＩＬ１５／ｓＩＬ－１５Ｒａ））、ＩＬ－２１、又はＩＬ－６（例えば、ＩＬ－６／ｓＩＬ－６Ｒａ）から選択される１つ以上のサイトカイン）と接触させる。
いくつかの実施形態において、細胞の集団をＩＬ－２と接触させる。いくつかの実施形態において、細胞の集団をＩＬ－７と接触させる。いくつかの実施形態において、細胞の集団をＩＬ－１５（例えば、ｈｅｔＩＬ－１５（ＩＬ１５／ｓＩＬ－１５Ｒａ））と接触させる。いくつかの実施形態において、細胞の集団をＩＬ－２１と接触させる。いくつかの実施形態において、細胞の集団をＩＬ－６（例えば、ＩＬ－６／ｓＩＬ－６Ｒａ）と接触させる。いくつかの実施形態において、細胞の集団をＩＬ－２及びＩＬ－７と接触させる。いくつかの実施形態において、細胞の集団をＩＬ－２及びＩＬ－１５（例えば、ｈｅｔＩＬ－１５（ＩＬ１５／ｓＩＬ－１５Ｒａ））と接触させる。いくつかの実施形態において、細胞の集団をＩＬ－２及びＩＬ－２１と接触させる。いくつかの実施形態において、細胞の集団をＩＬ－２及びＩＬ－６（例えば、ＩＬ－６／ｓＩＬ－６Ｒａ）と接触させる。いくつかの実施形態において、細胞の集団をＩＬ－７及びＩＬ－１５（例えば、ｈｅｔＩＬ－１５（ＩＬ１５／ｓＩＬ－１５Ｒａ））と接触させる。いくつかの実施形態において、細胞の集団をＩＬ－７及びＩＬ－２１と接触させる。いくつかの実施形態において、細胞の集団をＩＬ－７及びＩＬ－６（例えば、ＩＬ－６／ｓＩＬ－６Ｒａ）と接触させる。いくつかの実施形態において、細胞の集団をＩＬ－１５（例えば、ｈｅｔＩＬ－１５（ＩＬ１５／ｓＩＬ－１５Ｒａ））及びＩＬ－２１と接触させる。いくつかの実施形態において、細胞の集団をＩＬ－１５（例えば、ｈｅｔＩＬ－１５（ＩＬ１５／ｓＩＬ－１５Ｒａ））及びＩＬ－６（例えば、ＩＬ－６／ｓＩＬ－６Ｒａ）と接触させる。いくつかの実施形態において、細胞の集団をＩＬ－２１及びＩＬ－６（例えば、ＩＬ－６／ｓＩＬ－６Ｒａ）と接触させる。いくつかの実施形態において、細胞の集団をＩＬ－７、ＩＬ－１５（例えば、ｈｅｔＩＬ－１５（ＩＬ１５／ｓＩＬ－１５Ｒａ））、及びＩＬ－２１と接触させる。いくつかの実施形態において、細胞の集団をＬＳＤ１阻害剤と更に接触させる。いくつかの実施形態において、細胞の集団をＭＡＬＴ１阻害剤と更に接触させる。
いくつかの実施形態において、細胞の集団を、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２１０、２２０、２３０、２４０、２５０、２６０、２７０、２８０、２９０、又は３００Ｕ／ｍｌのＩＬ－２と接触させる。いくつかの実施形態において、細胞の集団を１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０ｎｇ／ｍｌのＩＬ－７と接触させる。いくつかの実施形態において、細胞の集団を１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０ｎｇ／ｍｌのＩＬ－１５と接触させる。
いくつかの実施形態において、細胞の集団は、ＣＡＲをコードする核酸分子（例えば、１つ以上の核酸分子）と接触させる。いくつかの実施形態において、細胞の集団は、ＣＡＲをコードするＤＮＡ分子で形質導入される。
いくつかの実施形態において、ＣＡＲをコードする核酸分子との細胞の集団の接触は、上記の１つ以上のサイトカインとの細胞の集団の接触と同時に起こる。いくつかの実施形態において、ＣＡＲをコードする核酸分子との細胞の集団の接触は、上記の１つ以上のサイトカインとの細胞の集団の接触の開始後、１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９、９．５又は１０時間以内に起こる。いくつかの実施形態において、ＣＡＲをコードする核酸分子との細胞の集団の接触は、上記の１つ以上のサイトカインとの細胞の集団の接触の開始後５時間以内に起こる。いくつかの実施形態において、ＣＡＲをコードする核酸分子との細胞の集団の接触は、上記の１つ以上のサイトカインとの細胞の集団の接触の開始後４時間以内に起こる。いくつかの実施形態において、ＣＡＲをコードする核酸分子との細胞の集団の接触は、上記の１つ以上のサイトカインとの細胞の集団の接触の開始後３時間以内に起こる。いくつかの実施形態において、ＣＡＲをコードする核酸分子との細胞の集団の接触は、上記の１つ以上のサイトカインとの細胞の集団の接触の開始後２時間以内に起こる。いくつかの実施形態において、ＣＡＲをコードする核酸分子との細胞の集団の接触は、上記の１つ以上のサイトカインとの細胞の集団の接触の開始後１時間以内に起こる。
いくつかの実施形態において、細胞の集団は、保存又は投与のために回収される。
いくつかの実施形態において、細胞の集団は、上記の１つ以上のサイトカインとの細胞の集団の接触の開始後、７２、６０、４８、３６、３２、３１、３０、２９、２８、２７、２６、２５、２４、２３、２２、２１、２０、１９、又は１８時間以内に、保存又は投与のために回収される。いくつかの実施形態において、細胞の集団は、上記の１つ以上のサイトカインとの細胞の集団の接触の開始後２６時間以内に、保存又は投与のために回収される。いくつかの実施形態において、細胞の集団は、上記の１つ以上のサイトカインとの細胞の集団の接触の開始後２５時間以内に、保存又は投与のために回収される。いくつかの実施形態において、細胞の集団は、上記の１つ以上のサイトカインとの細胞の集団の接触の開始後２４時間以内に、保存又は投与のために回収される。いくつかの実施形態において、細胞の集団は、上記の１つ以上のサイトカインとの細胞の集団の接触の開始後２３時間以内に、保存又は投与のために回収される。いくつかの実施形態において、細胞の集団は、上記の１つ以上のサイトカインとの細胞の集団の接触の開始後２２時間以内に、保存又は投与のために回収される。
いくつかの実施形態において、細胞の集団は、エクスビボで増殖されない。
いくつかの実施形態において、細胞の集団は、例えば、生細胞の数によって評価される場合、上記の１つ以上のサイトカインと接触させる前の細胞の集団と比較して、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、又は６０％以下だけ増殖する。いくつかの実施形態において、細胞の集団は、例えば、生細胞の数によって評価される場合、上記の１つ以上のサイトカインと接触させる前の細胞の集団と比較して、５％以下だけ増殖する。いくつかの実施形態において、細胞の集団は、例えば、生細胞の数によって評価される場合、上記の１つ以上のサイトカインと接触させる前の細胞の集団と比較して、１０％以下だけ増殖する。いくつかの実施形態において、細胞の集団は、例えば、生細胞の数によって評価される場合、上記の１つ以上のサイトカインと接触させる前の細胞の集団と比較して、１５％以下だけ増殖する。いくつかの実施形態において、細胞の集団は、例えば、生細胞の数によって評価される場合、上記の１つ以上のサイトカインと接触させる前の細胞の集団と比較して、２０％以下だけ増殖する。いくつかの実施形態において、細胞の集団は、例えば、生細胞の数によって評価される場合、上記の１つ以上のサイトカインと接触させる前の細胞の集団と比較して、２５％以下だけ増殖する。いくつかの実施形態において、細胞の集団は、例えば、生細胞の数によって評価される場合、上記の１つ以上のサイトカインと接触させる前の細胞の集団と比較して、３０％以下だけ増殖する。いくつかの実施形態において、細胞の集団は、例えば、生細胞の数によって評価される場合、上記の１つ以上のサイトカインと接触させる前の細胞の集団と比較して、３５％以下だけ増殖する。いくつかの実施形態において、細胞の集団は、例えば、生細胞の数によって評価される場合、上記の１つ以上のサイトカインと接触させる前の細胞の集団と比較して、４０％以下だけ増殖する。
いくつかの実施形態において、細胞の集団は、例えば、生細胞の数によって評価される場合、上記の１つ以上のサイトカインと接触させる前の細胞の集団と比較して、１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１６、２０、２４、３６、又は４８時間以下だけ増殖する。
いくつかの実施形態において、細胞の集団は、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤（例えば、抗ＣＤ３抗体）及び／又は細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤（例えば、抗ＣＤ２８抗体）とインビトロで接触されないか、又は接触させる場合、接触工程は、１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、又は５時間未満である。
いくつかの実施形態において、細胞の集団を、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体を刺激する薬剤（例えば、抗ＣＤ３抗体）及び／又は細胞表面上の共刺激分子を刺激する薬剤（例えば、抗ＣＤ２８抗体）とインビトロで２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、又は２８時間接触させる。
いくつかの実施形態において、本明細書で提供されるサイトカインプロセスを使用して製造された細胞の集団は、ＣＡＲ発現細胞の中で、細胞の集団を、例えば、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体に結合する薬剤（例えば、抗ＣＤ３抗体）及び／又は細胞表面上の共刺激分子に結合する薬剤（例えば、抗ＣＤ２８抗体）と接触させることを更に含む以外は同様の方法で作製された細胞と比較して、より高い（例えば、少なくとも５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、又は６０％高い）ナイーブ細胞のパーセンテージを示す。
いくつかの実施形態において、本明細書で提供されるサイトカインプロセスは、０、０．５、１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、又は８％以下の血清を含む細胞培地中で行われる。いくつかの実施形態において、本明細書で提供されるサイトカインプロセスは、ＬＳＤ１阻害剤、ＭＡＬＴ１阻害剤、又はそれらの組み合わせを含む細胞培地で行われる。
追加の例示的な製造方法
いくつかの実施形態において、細胞、例えば、Ｔ細胞又はＮＫ細胞は、例えば、Ｄｙｎａｂｅａｄｓ（登録商標）で被覆された抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８抗体を使用して活性化され、ＣＡＲをコードする１つ以上の核酸分子と接触され、次いで、インビトロで、例えば、７、８、９、１０、又は１１日間にわたって増殖される。いくつかの実施形態において、細胞、例えば、Ｔ細胞又はＮＫ細胞は、例えば陽性又は陰性選択を使用して、新鮮な又は凍結保存された白血球アフェレーシスサンプルから選択される。いくつかの実施形態において、細胞を、ＣＡＲ、例えばＣＤ１９ ＣＡＲをコードする核酸分子と接触させる。
水簸
いくつかの実施形態において、本明細書に記載の方法は、望ましくない細胞、例えば単球及び芽球を除去し、それによりＣＡＲ発現に適した所望の免疫エフェクター細胞の濃縮の改善をもたらす、水簸方法を特徴とする。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の水簸方法は、以前に凍結されていたサンプル、例えば、解凍されたサンプルからのＣＡＲ発現に適した所望の免疫エフェクター細胞の濃縮のために最適化される。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の水簸方法は、当技術分野で公知の水簸プロトコルから収集された細胞の調製物と比較して改善された純度を有する細胞の調製物を提供する。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の水簸方法は、特定の等張溶液（例えば、ＰＢＳ）で希釈することにより、出発サンプル、例えば細胞サンプル、例えば解凍された細胞サンプルの最適化された粘度を使用すること、並びに水簸装置によって収集された各画分につき、流速及び収集体積の最適化された組み合わせを使用することを含む。本開示に適用され得る例示的な水簸法は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる国際公開第２０１７／１１７１１２号パンフレットの４８～５１ページに記載されている。
密度勾配遠心
養子細胞治療製品の製造は、末梢血アフェレーシス出発材料に存在する血液細胞及び血液要素の複合混合物から離れて、所望の細胞、例えば、免疫エフェクター細胞を、プロセシングすることを必要とする。末梢血由来のリンパ球サンプルは、フィコール溶液による密度勾配遠心分離を使用した分離に成功している。しかしながら、フィコールは臨床使用に適格ではないため、フィコールは治療用途で細胞を分離するための好ましい試薬ではない。更に、フィコールはグリコールを含有し、これは細胞に対して毒性を有する可能性がある。更に、凍結保存後に解凍したアフェレーシス産物のフィコール密度勾配遠心分離は、準最適なＴ細胞産物をもたらす。例えば、フィコール溶液による密度勾配遠心分離によって分離された細胞調製物では、非Ｔ細胞、特に望ましくないＢ細胞、芽細胞及び単球の相対的な増加を伴う、最終製品でのＴ細胞の喪失が観察された。
理論に拘束されることを望むものではないが、免疫エフェクター細胞、例えば、Ｔ細胞は、凍結保存中に脱水して、新鮮な細胞よりも密度が高くなると考えられている。理論に拘束されることを望むものではないが、免疫エフェクター細胞、例えば、Ｔ細胞は、他の血液細胞よりも長い間密度が高いままであり、したがって、他の細胞と比較してより容易にフィコール密度勾配分離中に失われると考えられている。したがって、理論に拘束されることを望むものではないが、フィコールより大きい密度の培地は、フィコール、又はフィコールと同じ密度、例えば、１．０７７ｇ／ｍＬの他の培地と比較して、望ましい免疫エフェクター細胞の分離の改善を提供すると考えられている。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載の密度勾配遠心分離法は、イオジキサノールを含む密度勾配媒体の使用を含む。いくつかの実施形態において、密度勾配媒体は、水中に約６０％のイオジキサノールを含む。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載の密度勾配遠心分離法は、フィコールより大きい密度を有する密度勾配媒体の使用を含む。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の密度勾配遠心分離法は、１．０７７ｇ／ｍＬ超、例えば１．０７７ｇ／ｍＬ超、１．１ｇ／ｍＬ超、１．１５ｇ／ｍＬ超、１．２ｇ／ｍＬ超、１．２５ｇ／ｍＬ超、１．３ｇ／ｍＬ超、１．３１ｇ／ｍＬ超の密度を有する密度勾配媒体の使用を含む。いくつかの実施形態において、密度勾配媒体は、約１．３２ｇ／ｍＬの密度を有する。
密度勾配遠心分離の更なる実施形態は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる国際公開第２０１７／１１７１１２号パンフレットの５１～５３ページに記載されている。
選択による濃縮
ＣＡＲ発現に適した所望の免疫エフェクター細胞の濃縮を改善するための特定の細胞の選択方法が本明細書に提供される。いくつかの実施形態において、選択は、陽性選択、例えば、所望の免疫エフェクター細胞の選択を含む。いくつかの実施形態において、選択は、陰性選択、例えば望ましくない細胞の選択、例えば望ましくない細胞の除去を含む。実施形態において、本明細書に記載される陽性又は陰性選択方法は、フロースルー装置、例えば本明細書に記載のフロースルー装置を使用することによって、流動条件下で実施される。例示的な陽性及び陰性選択は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる国際公開第２０１７／１１７１１２号パンフレットの５３～５７ページに記載されている。選択方法は、流動条件下で、例えば、細胞プロセシング系とも称されるフロースルー装置を使用して、ＣＡＲ発現に適切な所望の免疫エフェクター細胞、例えば、Ｔ細胞の細胞調製物を更に濃縮することによって実施することができる。例示的なフロースルー装置は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる国際公開第２０１７／１１７１１２号パンフレットの５７～７０ページに記載されている。例示的な細胞分離及びビーズ除去方法は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる国際公開第２０１７／１１７１１２号パンフレットの７０～７８ページに記載されている。
選択手順は、国際公開第２０１７／１１７１１２号パンフレットの５７～７０ページに記載されているものに限定されない。カラム技術（ＣｌｉｎｉＭＡＣＳ（登録商標）Ｐｌｕｓ又はＣｌｉｎｉＭＡＣＳ（登録商標）Ｐｒｏｄｉｇｙ（登録商標））と組み合わせた、ＣＤ１９、ＣＤ１４、及びＣＤ２６ Ｍｉｌｔｅｎｙｉビーズを用いた不要な細胞の除去による陰性Ｔ細胞選択、又はＣＤ４及びＣＤ８ Ｍｉｌｔｅｎｙｉビーズとカラム技術（ＣｌｉｎｉＭＡＣＳ（登録商標）Ｐｌｕｓ又はＣｌｉｎｉＭＡＣＳ（登録商標）Ｐｒｏｄｉｇｙ（登録商標））を組み合わせた、陽性Ｔ細胞選択を使用することができる。或いは、放出可能なＣＤ３ビーズ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を使用したカラムフリー技術を使用できる。
更に、ＴｈｅｒｍｏＧｅｎｅｓｉｓ Ｘ－ｓｅｒｉｅｓデバイスなどのビーズフリー技術も利用できる。
臨床適用
本明細書の全てのプロセスは、臨床適正製造実務（ｃＧＭＰ）基準に従って実施され得る。
プロセスは、細胞の精製、濃縮（ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ）、回収、洗浄、濃縮（ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）、又は製造プロセスの開始時、及び細胞療法のための細胞の選択又は増殖のための製造プロセス中の、細胞培地の交換、特に出発原料（特に細胞）の収集中に使用され得る。
細胞は、任意の複数の細胞を含み得る。細胞は、同じ細胞型であってもよく、混合細胞型であってもよい。更に、細胞は、自己ドナー又は細胞療法のための単一の同種異系ドナーなどの１ドナーからのものであり得る。細胞は、例えば、白血球アフェレーシス又はアフェレーシスによって患者から得てもよい。細胞は、Ｔ細胞を含んでもよく、例えば、５０％を超えるＴ細胞、６０％を超えるＴ細胞、７０％を超えるＴ細胞、８０％を超えるＴ細胞、又は９０％のＴ細胞を有する集団を含んでもよい。
選択プロセスは、培養及び増殖の前に細胞を選択するのに特に有用であり得る。例えば、抗ＣＤ３及び／又は抗ＣＤ２８で被覆された常磁性粒子は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）又は他のタンパク質をコードする核酸の増殖又は導入についてＴ細胞を選択するために使用され得る。このようなプロセスは、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）の処置用のＣＴＬ０１９ Ｔ細胞を産生するために使用される。
本明細書に開示されるビーズ除去プロセス及びモジュールは、細胞療法のための細胞の製造、例えば、培養及び増殖の前又は後の細胞の精製において特に有用であり得る。例えば、抗ＣＤ３及び／又は抗ＣＤ２８抗体で被覆された常磁性粒子は、Ｔ細胞、例えば、ＣＡＲがＴ細胞によって発現されるように、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）又は他のタンパク質をコードする核酸の導入によって改変されたか、又は改変される、Ｔ細胞を選択的に増殖させるために使用され得る。そのようなＴ細胞の製造中に、ビーズ除去プロセス又はモジュールを使用して、Ｔ細胞を常磁性粒子から分離し得る。このようなビーズ除去プロセス又はモジュールは、例えば、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）の処置のためのＣＴＬ０１９Ｔ細胞を産生するために使用される。
例として本明細書に示されるそのようなプロセスの１つにおいて、細胞、例えばＴ細胞は、アフェレーシス（例えば、白血球アフェレーシス）を介してドナー（例えば、自己キメラ抗原受容体Ｔ細胞産物で処置される患者）から収集される。次いで、収集された細胞は、例えば、水簸工程によって、又は標的細胞（例えば、Ｔ細胞）の陽性又は陰性選択によって、任意選択により精製され得る。次いで、常磁性粒子、例えば、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８被覆常磁性粒子を細胞集団に添加して、Ｔ細胞を増殖することができる。プロセスはまた、１つ以上の所望のタンパク質、例えばＣＡＲ、例えばＣＤ１９を標的とするＣＡＲ、をコードする核酸が細胞に導入される、形質導入工程を含んでもよい。核酸は、レンチウイルスベクターに導入され得る。次いで、細胞、例えばレンチウイルス形質導入細胞は、例えば１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０日間、又はそれを超える期間にわたって、例えば適切な媒体の存在下で、増殖され得る。増殖後、本明細書に開示されるビーズ除去プロセス／モジュールを使用して、所望のＴ細胞を常磁性粒子から分離し得る。プロセスは、本開示のプロセスによる１つ以上のビーズ除去工程を含んでもよい。次いで、ビーズを取り除いた細胞は、患者への投与のために製剤化され得る。ＣＡＲＴ細胞及びそれらの製造の例は、例えば、その全体が参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレットに更に記載されている。本開示の系及び方法は、国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレットに記載され、又はそれと関連する、任意の細胞分離／精製／脱ビーズプロセスに使用され得る。追加のＣＡＲ Ｔ製造プロセスは、例えば、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる国際公開第２０１６１０９４１０号パンフレット及び国際公開第２０１７１１７１１２号パンフレットに記載されている。
本明細書の系及び方法は、従来の系と比較して、化学物質への曝露が少ないか又は曝露がない状態で、より少ない望ましい細胞を浪費し、より少ない細胞外傷を引き起こし、細胞から磁性粒子及び任意の非常磁性粒子をより確実に除去することにより、他の細胞療法製品に同様に利益をもたらし得る。
本開示の例示的な実施形態のみを上記に具体的に説明したが、本開示の精神及び意図した範囲から逸脱することなく、これらの例の修正及び変形が可能であることが理解されよう。例えば、磁気モジュール及びそれらを含む系は、記載したものに加えて、様々な形態で配置及び使用され得る。また、非磁性モジュールも利用できる。更に、系及び方法は、本明細書で具体的に記載されていない更なる成分及び工程を含み得る。例えば、方法はプライミングを含んでもよく、最初に流体がコンポーネントに導入されて気泡が除去され、細胞懸濁液又は緩衝液の動きに対する抵抗が低下する。更に、実施形態は、本明細書に記載の方法で使用するために、本明細書に記載の系の一部のみを含み得る。例えば、実施形態は、細胞を分離又はビーズ除去して細胞産物を産生することができる完全な系を形成するための、非使い捨て設備内で使用可能な使い捨てモジュール、ホースなどに関連し得る。
本開示と組み合わせることができる更なる製造方法及びプロセスは、当技術分野で説明されている。例えば、国際公開第２０１７／１１７１１２号パンフレットの８６～９１ページは、改善された洗浄工程及び改善された製造プロセスを記載している。
Ｔ細胞の活性化及び増殖
Ｔ細胞は、例えば、米国特許第６，３５２，６９４号明細書；同第６，５３４，０５５号明細書；同第６，９０５，６８０号明細書；同第６，６９２，９６４号明細書；同第５，８５８，３５８号明細書；同第６，８８７，４６６号明細書；同第６，９０５，６８１号明細書；同第７，１４４，５７５号明細書；同第７，０６７，３１８号明細書；同第７，１７２，８６９号明細書；同第７，２３２，５６６号明細書；同第７，１７５，８４３号明細書；同第５，８８３，２２３号明細書；同第６，９０５，８７４号明細書；同第６，７９７，５１４号明細書；同第６，８６７，０４１号明細書；及び米国特許出願公開第２００６０１２１００５号明細書に記載する方法を使用して、一般的に活性化及び増殖できる。
一般に、本開示のＴ細胞を、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体結合シグナルを刺激する薬剤が結合したその表面と、Ｔ細胞の表面上の共刺激性分子を刺激するリガンドを接触させることにより増殖できる。特に、Ｔ細胞集団は、表面上に固定された抗ＣＤ３抗体若しくはその抗原結合断片又は抗ＣＤ２抗体との接触又はカルシウムイオノフォアと組み合わせたタンパク質キナーゼＣアクティベータ（例えば、ブリオスタチン）との接触により、本明細書に記載のように刺激し得る。Ｔ細胞表面上のアクセサリー分子の共刺激のために、アクセサリー分子と結合するリガンドである。例えば、Ｔ細胞集団を、Ｔ細胞の増殖刺激に適する条件下で抗ＣＤ３抗体及び抗ＣＤ２８抗体と接触させ得る。ＣＤ４＋Ｔ細胞又はＣＤ８＋Ｔ細胞の増殖を刺激するために、抗ＣＤ３抗体及び抗ＣＤ２８抗体を使用できる。抗ＣＤ２８抗体の例は、９．３、Ｂ－Ｔ３、ＸＲ－ＣＤ２８を含み（Ｄｉａｃｌｏｎｅ，Ｂｅｓａｎｃｏｎ，Ｆｒａｎｃｅ）、当技術分野で一般に知られる他の方法のように使用できる（Ｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ Ｐｒｏｃ．３０（８）：３９７５－３９７７，１９９８；Ｈａａｎｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１９０（９）：１３１９１３２８，１９９９；Ｇａｒｌａｎｄ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｍｅｔｈ．２２７（１－２）：５３－６３，１９９９）。
一実施形態において、Ｔ細胞のための一次刺激シグナル及び共刺激シグナルは、異なるプロトコルにより提供され得る。例えば、各シグナルを提供する薬剤は、溶液中でも表面と結合し得る。表面に結合しているとき、薬剤は、同じ表面（即ち「シス」形態）又は別の表面（即ち「トランス」形態）に結合し得る。代わりに、一方の薬剤が表面に結合し、他方が溶液にあり得る。いくつかの実施形態において、共刺激シグナルを提供する薬剤は、細胞表面に結合し、一次活性化シグナルを提供する薬剤は、溶液中であるか又は表面と結合する。いくつかの実施形態において、両剤は、溶液中にあり得る。いくつかの実施形態において、薬剤は、不溶性形態であり、Ｆｃ受容体又は抗体又は薬剤と結合する他の結合剤を発現する細胞などの表面に架橋され得る。この点に関して、例えば本開示におけるＴ細胞の活性化及び増殖のために意図される人工抗原提示細胞（ａＡＰＣ）について、米国特許出願公開第２００４０１０１５１９号明細書及び同第２００６００３４８１０号明細書を参照されたい。
いくつかの実施形態において、２剤は、ビーズに、同じビーズ、即ち「シス」又は別のビーズ、即ち「トランス」で固定化される。例として、一次活性化シグナルを提供する薬剤は、抗ＣＤ３抗体又はその抗原結合断片であり、共刺激シグナルを提供する薬剤は、抗ＣＤ２８抗体又はその抗原結合断片であり、両剤は、均等な分子量で同じビーズに共固定化される。いくつかの実施形態において、ＣＤ４＋Ｔ細胞増殖及びＴ細胞増殖のためのビーズに結合した１：１比の各抗体を使用する。本開示の特定の実施形態において、１：１比を使用して観察された増殖と比較して、Ｔ細胞増殖の増殖が観察されるように、ビーズに結合した抗ＣＤ３：ＣＤ２８抗体の比を使用する。いくつかの実施形態において、１：１比を使用して観察された増殖と比較して約１～約３倍増加が観察される。いくつかの実施形態において、ビーズに結合したＣＤ３：ＣＤ２８抗体比は、１００：１～１：１００及びその間の全ての整数値の範囲である。本開示のいくつかの実施形態において、抗ＣＤ３抗体より多くの抗ＣＤ２８抗体が粒子に結合しており、即ちＣＤ３：ＣＤ２８比が１未満である。本開示の特定の実施形態において、ビーズに結合した抗ＣＤ２８抗体対抗ＣＤ３抗体比は、２：１より大きい。本開示のいくつかの実施形態において、ビーズに結合した１：１００ ＣＤ３：ＣＤ２８比の抗体を使用する。いくつかの実施形態において、ビーズに結合した１：７５ ＣＤ３：ＣＤ２８比の抗体を使用する。いくつかの実施形態において、ビーズに結合した１：５０ ＣＤ３：ＣＤ２８比の抗体を使用する。いくつかの実施形態において、ビーズに結合した１：３０ ＣＤ３：ＣＤ２８比の抗体を使用する。いくつかの実施形態において、ビーズに結合した１：１０ ＣＤ３：ＣＤ２８比の抗体を使用する。いくつかの実施形態において、ビーズに結合した１：３ ＣＤ３：ＣＤ２８比の抗体を使用する。いくつかの実施形態において、ビーズに結合した３：１ ＣＤ３：ＣＤ２８比の抗体を使用する。
１：５００～５００：１及びその間の任意の整数値の粒子対細胞比をＴ細胞又は他の標的細胞の刺激のために使用し得る。当業者に容易に認識され得るように、粒子対細胞比は、標的細胞に対する粒子径に依存し得る。例えば、小さいサイズのビーズは、少ない細胞にのみ結合でき、大きいビーズは、多く結合できる。一実施形態において、細胞対粒子比は、１：１００～１００：１及びその間の任意の整数値の範囲であり、更なる実施形態において１：９～９：１及びその間の任意の整数値からなる比をＴ細胞刺激に使用し得る。Ｔ細胞刺激をもたらす抗ＣＤ３及び抗ＣＤ２８結合粒子対Ｔ細胞の比は、上記のように変わり得るが、しかしながら、ある好ましい値は、１：１００、１：５０、１：４０、１：３０、１：２０、１：１０、１：９、１：８、１：７、１：６、１：５、１：４、１：３、１：２、１：１、２：１、３：１、４：１、５：１、６：１、７：１、８：１、９：１、１０：１及び１５：１を含み、１つの好ましい比は少なくとも１：１粒子対Ｔ細胞である。いくつかの実施形態において、１：１以下の粒子対細胞比を使用する。いくつかの実施形態において、好ましい粒子：細胞比は、１：５である。更なる実施形態において、粒子対細胞比は、刺激の日により変わり得る。例えば、いくつかの実施形態において、粒子対細胞比は、１日目は１：１～１０：１であり、更なる粒子をその後１０日目まで連日又は隔日で細胞に添加し、最終比１：１～１：１０である（添加の比の細胞数に基づく）。いくつかの実施形態において、粒子対細胞比は、刺激１日目に１：１であり、刺激３日目及び５日目に１：５に調節する。いくつかの実施形態において、粒子を、１日目の１：１及び刺激３日目及び５日目の１：５の最終比に基づき、連日又は隔日で添加する。いくつかの実施形態において、粒子対細胞比は、刺激１日目は２：１であり、刺激３日目及び５日目に１：１０に調節する。いくつかの実施形態において、粒子を、１日目の１：１及び３日目及び５日目の１：１０の最終比に基づき、連日又は隔日で添加する。当業者は、多様な他の比が本発明における使用に適し得ることを認識する。特に、比は、粒子径並びに細胞サイズ及びタイプによる。いくつかの実施形態において、使用するための最も典型的な比は、１日目の１：１、２：１及び３：１付近である。
本開示の更なる実施形態において、Ｔ細胞などの細胞を薬剤被覆ビーズと組み合わせ、ビーズ及び細胞をその後分離し、次いで細胞を培養する。いくつかの実施形態において、培養前に薬剤被覆ビーズ及び細胞を分離するが、一緒に培養する。いくつかの実施形態において、ビーズ及び細胞を磁気力などの力の適用によりまず濃縮し、細胞表面マーカーのライゲーションを増加させ、それにより細胞刺激を誘導する。
例として、細胞表面タンパク質を、抗ＣＤ３及び抗ＣＤ２８が結合した常磁性ビーズ（３ｘ２８ビーズ）とＴ細胞を接触させることにより、ライゲートし得る。いくつかの実施形態において、細胞（例えば、１０４～１０９Ｔ細胞）及びビーズ（例えば、ＤＹＮＡビーズＳ（登録商標）Ｍ－４５０ ＣＤ３／ＣＤ２８ Ｔ常磁性ビーズを１：１比）を緩衝液、例えばＰＢＳ（カルシウム及びマグネシウムなどの二価カチオンなし）中で合わせる。再び、任意の細胞濃度を使用し得ることが当業者に容易に認識され得る。例えば、標的細胞は、試料中で極めて稀であり、試料の０．０１％のみが含まれるか又は試料全体（即ち１００％）が目的の標的細胞で構成され得る。従って、あらゆる細胞数が本開示に関連して一体となる。いくつかの実施形態において、細胞と粒子との最大接触を確実にするために、粒子及び細胞を混合する体積を有意に減少させる（即ち細胞の濃度を高める）ことが望ましいことがある。例えば、いくつかの実施形態において、約１００億細胞／ｍｌ、９０億細胞／ｍｌ、８０億細胞／ｍｌ、７０億細胞／ｍｌ、６０億細胞／ｍｌ、５０億細胞／ｍｌ又は２０億細胞／ｍｌの濃度を使用する。一態様において、１億細胞／ｍｌ超を使用する。いくつかの実施形態において、１０００万、１５００万、２０００万、２５００万、３０００万、３５００万、４０００万、４５００万又は５０００万細胞／ｍｌの細胞濃度を使用する。更なる態様において、細胞の７５００万、８０００万、８５００万、９０００万、９５００万又は１億細胞／ｍｌの濃度を使用する。いくつかの実施形態において、１億２５００万又は１億５０００万細胞／ｍｌの濃度を使用できる。高濃度を使用して、細胞収率、細胞活性化及び細胞増殖を増加できる。更に、高細胞濃度の使用は、ＣＤ２８陰性Ｔ細胞などの目的の標的抗原を弱く発現し得る細胞のより効率的な捕獲を可能にする。このような細胞集団は、治療的価値を有し得、且つ特定の実施形態では得ることが望ましいであろう。例えば、高濃度細胞の使用は、通常、ＣＤ２８発現が弱いＣＤ８＋Ｔ細胞のより効率的な選択を可能にする。
いくつかの実施形態において、ＣＡＲ分子、例えば本明細書に記載のＣＡＲ分子をコードする核酸が形質導入された細胞を例えば本明細書に記載の方法により増殖する。いくつかの実施形態において、細胞を数時間（例えば、約２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、１５時間、１８時間、２１時間）～約１４日（例えば、１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日又は１４日）の期間の培養により増殖する。いくつかの実施形態において、細胞は、４～９日の期間増殖される。いくつかの実施形態において、細胞は、８日以下、例えば７日、６日又は５日の期間増殖される。いくつかの実施形態において、細胞、例えば本明細書に記載のＣＡＲ発現細胞は、５日の培養により増殖され、得られた細胞は、同じ培養条件において９日間培養で増殖された同じ細胞よりも強力である。効力は、例えば、多様なＴ細胞機能、例えば増殖、標的細胞死、サイトカイン産生、活性化、遊走又はそれらの組み合わせにより規定され得る。いくつかの実施形態において、５日増殖された細胞、例えば本明細書に記載のＣＡＲ発現細胞は、同じ培養条件下において９日間培養で増殖された同じ細胞と比較して、抗原刺激による細胞倍加の少なくとも１倍、２倍、３倍又は４倍増加を示す。いくつかの実施形態において、細胞、例えば本明細書に記載のＣＡＲ分子を発現する細胞は、５日の培養により増殖され、得られた細胞は、同じ培養条件下において９日間培養で増殖された同じ細胞と比較して、高い炎症誘発性サイトカイン産生、例えばＩＦＮ－γ及び／又はＧＭ－ＣＳＦレベルを示す。いくつかの実施形態において、５日増殖された細胞、例えば本明細書に記載のＣＡＲ発現細胞は、同じ培養条件下において９日間培養で増殖された同じ細胞と比較して、炎症誘発性サイトカイン産生、例えばＩＦＮ－γ及び／又はＧＭ－ＣＳＦレベルのｐｇ／ｍｌで少なくとも１倍、２倍、３倍、４倍、５倍、１０倍又はそれを超えて増加する。
本開示のいくつかの実施形態において、混合物は、数時間（約３時間）～約１４日又はその間の任意の時間的整数値にわたって培養され得る。いくつかの実施形態において、混合物は２１日間培養され得る。本開示のいくつかの実施形態において、ビーズ及びＴ細胞は、約８日間一緒に培養される。いくつかの実施形態において、ビーズ及びＴ細胞を一緒に２～３日培養する。Ｔ細胞の培養期間が６０日以上となり得るような数サイクルの刺激も望まれ得る。Ｔ細胞培養に適する条件は、血清（例えば、胎児ウシ又はヒト血清）、インターロイキン－２（ＩＬ－２）、インスリン、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－４、ＩＬ－７、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＴＧＦβ及びＴＮＦ－α又は当業者に知られる細胞増殖のための任意の他の添加剤を含む、増殖及び生存能に必要な因子を含み得る、適切な培地（例えば、最小必須培地又はＲＰＭＩ培地１６４０又はＸ－ｖｉｖｏ １５（Ｌｏｎｚａ））を含む。細胞の増殖のための他の添加剤は、界面活性剤、プラスマネート、及びＮ－アセチル－システイン、及び２－メルカプトエタノールなどの還元剤を含むが、これらに限定されない。培地は、無血清又は適切な量の血清（又は血漿）が添加されたか、又は規定されたセットのホルモン及び／又はＴ細胞の増殖及び拡大に十分な量のサイトカインが添加されたＲＰＭＩ １６４０、ＡＩＭ－Ｖ、ＤＭＥＭ、ＭＥＭ、α－ＭＥＭ、Ｆ－１２、Ｘ－Ｖｉｖｏ１５及びＸ－Ｖｉｖｏ２０、Ｏｐｔｉｍｉｚｅｒを含み得る。抗生物質、例えばペニシリン及びストレプトマイシンは、実験的培養においてのみ包含され、対象に注入すべき細胞の培養に含まれない。標的細胞は、増殖を支持するのに必要な条件、例えば適切な温度（例えば、３７℃）及び雰囲気（例えば、空気＋５％ＣＯ２）で維持される。
いくつかの実施形態において、細胞は、例えば、フローサイトメトリーなどの本明細書に記載の方法により測定して、１４日の増殖期間にわたり、細胞の少なくとも２００倍（例えば、２００倍、２５０倍、３００倍、３５０倍）増加をもたらす１つ以上のインターロイキンを含む適切な培地（例えば、本明細書に記載の培地）で増殖させる。いくつかの実施形態において、細胞は、ＩＬ－１５及び／又はＩＬ－７（例えば、ＩＬ－１５及びＩＬ－７）の存在下で増殖させる。
実施形態において、本明細書に記載の方法、例えばＣＡＲ発現細胞製造法は、Ｔ制御性細胞、例えばＣＤ２５＋Ｔ細胞を、例えば抗ＣＤ２５抗体又はその断片又はＣＤ２５結合リガンド、ＩＬ－２を使用して細胞集団から除去することを含む。細胞集団からＴ制御性細胞、例えばＣＤ２５＋Ｔ細胞を除去する方法は、本明細書に記載される。実施形態において、方法、例えば製造法は、細胞集団（例えば、ＣＤ２５＋Ｔ細胞などのＴ制御性細胞が枯渇されている細胞集団；又は抗ＣＤ２５抗体、その断片又はＣＤ２５結合リガンドと前に接触された細胞集団）とＩＬ－１５及び／又はＩＬ－７との接触を更に含む。例えば、細胞集団（例えば、抗ＣＤ２５抗体、その断片又はＣＤ２５結合リガンドと先に接触されている）をＩＬ－１５及び／又はＩＬ－７の存在下で増殖させる。
一部の実施形態において、本明細書に記載のＣＡＲ発現細胞を、インターロイキン－１５（ＩＬ－１５）ポリペプチド、インターロイキン－１５受容体α（ＩＬ－１５Ｒａ）ポリペプチド又はＩＬ－１５ポリペプチドとＩＬ－１５Ｒａポリペプチドの組み合わせ、例えばｈｅｔＩＬ－１５を含む組成物とＣＡＲ発現細胞の製造中に例えばエクスビボで接触させる。実施形態において、本明細書に記載のＣＡＲ発現細胞をＣＡＲ発現細胞の製造中に例えばエクスビボで、ＩＬ－１５ポリペプチドを含む組成物と接触させる。実施形態において、本明細書に記載のＣＡＲ発現細胞をＣＡＲ発現細胞の製造中に例えばエクスビボで、ＩＬ－１５ポリペプチド及びＩＬ－１５Ｒａポリペプチドの両方の組み合わせを含む組成物と接触させる。実施形態において、本明細書に記載のＣＡＲ発現細胞をＣＡＲ発現細胞の製造中に例えばエクスビボで、ｈｅｔＩＬ－１５を含む組成物と接触させる。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載のＣＡＲ発現細胞を、エクスビボ増殖中、ｈｅｔＩＬ－１５を含む組成物と接触させる。いくつかの実施形態において、本明細書に記載のＣＡＲ発現細胞を、エクスビボ増殖中、ＩＬ－１５ポリペプチドを含む組成物と接触させる。いくつかの実施形態において、本明細書に記載のＣＡＲ発現細胞を、エクスビボ増殖中、ＩＬ－１５ポリペプチド及びＩＬ－１５Ｒａポリペプチドの両方を含む組成物と接触させる。いくつかの実施形態において、接触は、リンパ球亜集団、例えばＣＤ８＋Ｔ細胞の生存及び増殖をもたらす。
種々の刺激時間に曝されているＴ細胞は、異なる特徴を示し得る。例えば、典型的な血液又はアフェレーシスした末梢血単核細胞産物は、細胞毒性又はサプレッサーＴ細胞集団より大きいヘルパーＴ細胞集団（ＴＨ、ＣＤ４＋）を有する。ＣＤ３及びＣＤ２８受容体での刺激によるＴ細胞のエクスビボ増殖は、約８～９日目前まで主にＴＨ細胞からなるＴ細胞集団を産生するが、約８～９日目後、Ｔ細胞集団は、徐々に大きくなるＴＣ細胞集団を含む。従って、処置の目的により、主にＴＨ細胞を含むＴ細胞集団を対象に注入することは有利であり得る。同様に、ＴＣ細胞の抗原特異的サブセットが単離されている場合、このサブセットを大きい程度まで増殖させることが有利であり得る。
更に、ＣＤ４及びＣＤ８マーカーに加えて、他の表現型マーカーは、細胞増殖過程の経過中、有意に、しかし、主に再現性よく変化する。そうして、このような再現性は、特定の目的のために活性化Ｔ細胞産物をもたらす能力を可能とする。
ＣＡＲ分子が構築されると、適切なインビトロ及び動物モデルにおける抗原刺激後にＴ細胞を増殖させる能力、再刺激の非存在下でのＴ細胞増殖の持続及び抗癌活性など、しかし、これらに限定されない分子の活性を評価するために種々のアッセイが使用され得る。ＣＡＲ分子の効果を評価するためのアッセイは、以下に更に詳細に記載される。
初代Ｔ細胞におけるＣＡＲ分子発現のウエスタンブロット分析を、単量体及び二量体の存在を検出するために使用できる。例えば、Ｍｉｌｏｎｅ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｔｈｅｒａｐｙ １７（８）：１４５３－１４６４（２００９）を参照されたい。極めて簡潔には、ＣＡＲ分子を発現するＴ細胞（ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞の１：１混合物）をインビトロで１０日超増殖させ、続いて溶解及び還元条件下のＳＤＳ－ＰＡＧＥを行う。全長ＴＣＲ－ζ細胞質ドメイン及び内因性ＴＣＲ－ζ鎖を含むＣＡＲ分子を、ＴＣＲ－ζ鎖に対する抗体を使用するウェスタンブロッティングにより検出する。同じＴ細胞サブセットを、共有結合性二量体形成の評価を可能とするために非還元条件下のＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析に使用する。
抗原刺激後のＣＡＲＴ細胞のインビトロ増殖をフローサイトメトリーにより測定できる。例えば、ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞の混合物をαＣＤ３／αＣＤ２８ ａＡＰＣで刺激し、続いて分析すべきプロモーターの制御下において、ＧＦＰを発現するレンチウイルスベクターで形質導入する。代表的プロモーターは、ＣＭＶ ＩＥ遺伝子、ＥＦ－１α、ユビキチンＣ又はホスホグリセロキナーゼ（ＰＧＫ）プロモーターを含む。ＧＦＰ蛍光を、ＣＤ４＋及び／又はＣＤ８＋Ｔ細胞サブセットの培養６日目にフローサイトメトリーにより評価する。例えば、Ｍｉｌｏｎｅ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｔｈｅｒａｐｙ １７（８）：１４５３－１４６４（２００９）を参照されたい。代わりに、ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞の混合物を０日目にαＣＤ３／αＣＤ２８被覆磁気ビーズで刺激し、２Ａリボソームスキッピング配列を使用するＣＡＲとｅＧＦＰを発現するマルチシストロン性レンチウイルスベクターを使用して、１日目にＣＡＲを形質導入する。培養物を、その抗原を発現する多発性骨髄腫細胞株又はＫ５６２などの抗原発現細胞で再刺激し、続いて洗浄する。外来性ＩＬ－２を１００ＩＵ／ｍｌにおいて隔日で培養物に添加する。ＧＦＰ＋Ｔ細胞を、ビーズベースの計数を使用するフローサイトメトリーにより数える。例えば、Ｍｉｌｏｎｅ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｔｈｅｒａｐｙ １７（８）：１４５３－１４６４（２００９）を参照されたい。
再刺激非存在下の持続するＣＡＲ＋Ｔ細胞増殖も測定できる。例えば、Ｍｉｌｏｎｅ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｔｈｅｒａｐｙ １７（８）：１４５３－１４６４（２００９）を参照されたい。簡潔には、平均Ｔ細胞体積（ｆｌ）を、０日目のαＣＤ３／αＣＤ２８被覆磁気ビーズでの刺激及び１日目の記載するＣＡＲの形質導入後、培養８日目にＣｏｕｌｔｅｒ Ｍｕｌｔｉｓｉｚｅｒ ＩＩＩ粒子カウンター、Ｎｅｘｃｅｌｏｍ Ｃｅｌｌｏｍｅｔｅｒ Ｖｉｓｉｏｎ又はＭｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｓｃｅｐｔｅｒを使用して測定する。
動物モデルもＣＡＲＴ活性の測定に使用できる。例えば、免疫不全マウスにおける初代ヒト多発性骨髄腫を処置するために、ヒト抗原特異的ＣＡＲ＋Ｔ細胞を使用する異種移植モデルを使用することができる。例えば、Ｍｉｌｏｎｅ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｔｈｅｒａｐｙ １７（８）：１４５３－１４６４（２００９）を参照されたい。極めて簡潔には、ＭＭ確立後、マウスを処置群に無作為化する。異なる数のＣＡＲＴ細胞を、ＭＭを担持する免疫不全マウスに注射することができる。動物は、１週間間隔で疾患の進行及び腫瘍負荷について評価される。ログ・ランク検定を使用して、群の生存曲線を比較する。更に、免疫欠失マウスへのＴ細胞注射４週間後の絶対的末梢血ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞数も分析し得る。マウスに多発性骨髄腫細胞を注射し、３週間後、ＣＡＲ分子を発現するように操作されたＴ細胞を注射する。Ｔ細胞を、注入ＧＦＰ＋Ｔ細胞の４５～５０％に、注射前に偽形質導入細胞と混合することにより標準化し、フローサイトメトリーにより確認する。動物を１週間間隔で白血病について評価する。ＣＡＲ＋Ｔ細胞群の生存曲線を、ログ・ランク検定を使用して比較する。
細胞増殖及びサイトカイン産生の評価は、例えば、Ｍｉｌｏｎｅ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｔｈｅｒａｐｙ １７（８）：１４５３－１４６４（２００９）に以前に記載されている。簡潔には、ＣＡＲ ＩＬ－１５Ｒ／ＩＬ－１５媒介増殖の評価を、洗浄したＴ細胞と、抗原を発現するＫ５６２細胞又は他の抗原発現骨髄腫細胞とを混合することによりマイクロタイタープレートにおいて実施する。Ｋ５６２細胞を使用前にγ線で照射する。抗ＣＤ３（クローンＯＫＴ３）及び抗ＣＤ２８（クローン９．３）モノクローナル抗体を、これらのシグナルがエクスビボでの長期ＣＤ８＋Ｔ細胞増殖を支持するため、刺激Ｔ細胞増殖について陽性対照として役立つＫＴ３２－ＢＢＬ細胞の培養物に添加する。Ｔ細胞を、製造者により記載の通りＣｏｕｎｔＢｒｉｇｈｔ（商標）蛍光ビーズ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，ＣＡ）及びフローサイトメトリーを使用して培養において数える。ＣＡＲ Ｔ細胞を、ｅＧＦＰ－２Ａ連結ＣＡＲ発現レンチウイルスベクターで操作されたＴ細胞を使用するＧＦＰ発現により同定する。ＧＦＰを発現しないＣＡＲ Ｔ細胞について、ＣＡＲ＋Ｔ細胞をビオチニル化組み換え抗原タンパク質及び二次アビジン－ＰＥコンジュゲートにより検出する。Ｔ細胞のＣＤ４＋及びＣＤ８＋発現も、特異的モノクローナル抗体（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用して同時に検出する。サイトカイン測定を、製造業者の指示に従ってヒトＴＨ１／ＴＨ２サイトカイン細胞数測定ビーズアレイキット（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を使用して再刺激２４時間後に回収した上清で実施する。ＦＡＣＳｃａｌｉｂｕｒフローサイトメーターを使用して蛍光を評価し、データを製造業者の指示に従って分析する。
細胞毒性を標準的５１Ｃｒ放出アッセイにより評価できる。例えば、Ｍｉｌｏｎｅ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｔｈｅｒａｐｙ １７（８）：１４５３－１４６４（２００９）を参照されたい。簡潔には、標的細胞（例えば、抗原を発現するＫ５６２株及び初代多発性骨髄腫細胞）に５１Ｃｒ（ＮａＣｒＯ４として、Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｎｕｃｌｅａｒ，Ｂｏｓｔｏｎ，ＭＡ）を３７℃で２時間、頻繁に撹拌しながら充填し、完全ＲＰＭＩで２回洗浄し、マイクロタイタープレートに播種する。エフェクターＴ細胞をウェル中で完全ＲＰＭＩ中に標的細胞と種々のエフェクター細胞：標的細胞（Ｅ：Ｔ）比で混合する。更なる培地のみ（自発的放出、ＳＲ）又はｔｒｉｔｏｎ－Ｘ １００洗剤１％溶液（全放出、ＴＲ）を含むウェルも調製する。３７℃で４時間のインキュベーション後、各ウェルから上清を回収する。放出された５１Ｃｒを、次いでγ粒子カウンター（Ｐａｃｋａｒｄ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔ Ｃｏ．，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）を使用して測定する。各条件を少なくとも３回行い、溶解のパーセントを式：溶解％＝（ＥＲ－ＳＲ）／（ＴＲ－ＳＲ）（式中、ＥＲは、各実験条件で放出された平均５１Ｃｒを示す）を使用して計算する。或いは、Ｂｒｉｇｈｔ－Ｇｌｏ（商標）ルシフェラーゼアッセイを使用して細胞毒性を評価することもできる。
造影技術を使用して、腫瘍担持動物モデルにおけるＣＡＲ発現細胞の特異的輸送及び増殖を評価できる。このようなアッセイは、例えば、Ｂａｒｒｅｔｔ ｅｔ ａｌ．，Ｈｕｍａｎ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ ２２：１５７５－１５８６（２０１１）に記載されている。簡潔には、ＮＯＤ／ＳＣＩＤ／γｃ－／－（ＮＳＧ）マウス又は他の免疫欠失に多発性骨髄腫細胞をＩＶ注射し、７日後、ＣＡＲ又はＣＡＲ構築物でエレクトロポレーションから４時間後にＣＡＲＴ細胞を注射する。Ｔ細胞は、ホタルルシフェラーゼを発現するようにレンチウイルス構築物で安定にトランスフェクトされ、マウスをバイオルミネセンスについて造影する。代わりに、多発性骨髄腫異種移植モデルにおけるＣＡＲ＋Ｔ細胞の単回注射の治療有効性及び特異性を次のように測定できる。ＮＳＧマウスに、ホタルルシフェラーゼを安定に発現するように形質導入した多発性骨髄腫細胞を注射し、続いてＣＡＲ構築日後に電気穿孔したＴ細胞を１回尾静脈注射する。動物を注射後の種々の時点で造影する。例えば、５日目（処置２日前）及び８日目（ＣＡＲ＋ＰＢＬ後２４時間）に代表的マウスにおけるホタルルシフェラーゼ陽性腫瘍の光子密度ヒートマップを作成できる。
或いは、又は本明細書に開示される方法と組み合わせて、ＣＡＲリガンドの使用を含む、ＣＡＲ細胞（例えば、インビトロ又はインビボ（例えば、臨床モニタリング））、免疫細胞増殖及び／又は活性化及び／又はＣＡＲ特異的選択の１つ以上の検出及び／又は定量のための方法及び組成物が開示される。いくつかの実施形態において、ＣＡＲリガンドは、ＣＡＲ分子に結合する、例えば、ＣＡＲの細胞外抗原結合ドメインに結合する抗体である（例えば、抗原結合ドメインに結合する抗体、例えば、抗イディオタイプ抗体；又は細胞外結合ドメインの定常領域に結合する抗体）。他の実施形態において、ＣＡＲリガンドは、ＣＡＲ抗原分子である（例えば、本明細書に記載のような）。
いくつかの実施形態において、ＣＡＲ発現細胞を検出及び／又は定量する方法が開示される。例えば、ＣＡＲリガンドは、インビトロ又はインビボでＣＡＲ細胞の検出及び／又は定量に使用することができる（例えば、患者におけるＣＡＲ発現細胞の臨床モニタリング又は患者への投薬）。方法は、
ＣＡＲリガンド（任意選択により、標識ＣＡＲリガンド、例えば、タグ、ビーズ、放射活性又は蛍光標識を含むＣＡＲリガンド）を提供すること；
ＣＡＲ発現細胞を取得すること（例えば、製造サンプル又は臨床サンプルなどのＣＡＲ細胞含有サンプルを取得すること）；
ＣＡＲ発現細胞とＣＡＲリガンドを、結合が生じる条件下で接触させ、それにより、存在するＣＡＲ発現細胞のレベル（例えば、量）を検出することを含む。ＣＡＲ発現細胞とＣＡＲリガンドの結合は、ＦＡＣＳ、ＥＬＩＳＡなどのような標準技術を使用して検出できる。
いくつかの実施形態において、細胞（例えば、免疫エフェクター細胞）を増殖及び／又は活性化する方法が開示される。方法は、
ＣＡＲ発現細胞（例えば、第１ＣＡＲ発現細胞又は一過性に発現されるＣＡＲ細胞）を提供し；
前記ＣＡＲ発現細胞とＣＡＲリガンド、例えば、本明細書に記載のようなＣＡＲリガンドを、免疫細胞増殖及び／又は増殖が生じる条件下で接触させ、それにより、活性化及び／又は増殖集団を産生することを含む。
いくつかの実施形態において、ＣＡＲリガンドは、上に存在する（例えば、基質、例えば、天然に存在しない基質に固定化又は結合される）。いくつかの実施形態において、基質は、非細胞基質である。非細胞基質は、例えば、プレート（例えば、マイクロタイタープレート）、膜（例えば、ニトロセルロース膜）、マトリックス、チップ又はビーズから選択される固体支持体であり得る。実施形態において、ＣＡＲリガンドは、基質に存在する（例えば、基質表面上）。ＣＡＲリガンドを、基質に共有非共有（例えば、架橋）により固定、結合又は会合させ得る。いくつかの実施形態において、ＣＡＲリガンドは、ビーズに結合（例えば、共有結合）する。前記実施形態において、免疫細胞集団をインビトロ又はエクスビボで増殖できる。方法は、更に、例えば、本明細書に記載の方法のいずれかを使用して、ＣＡＲ分子のリガンド存在下、免疫細胞の集団を培養することを更に含む。
他の実施形態において、細胞を増殖及び／又は活性化する方法は、更に第二刺激性分子、例えば、ＣＤ２８の添加を含む。例えば、ＣＡＲリガンド及び第二刺激性分子を基質、例えば、１つ以上のビーズに固定し、それにより細胞増殖及び／又は活性化を増加させ得る。
いくつかの実施形態において、ＣＡＲ発現細胞を選択又は濃縮する方法が提供される。方法は、ＣＡＲ発現細胞と本明細書に記載されるようなＣＡＲリガンドを接触させ、ＣＡＲリガンドの結合に基づき細胞を選択することを含む。
更に他の実施形態において、ＣＡＲ発現細胞を枯渇、減少及び／又は死滅させる方法が提供される。方法は、ＣＡＲ発現細胞と本明細書に記載されるようなＣＡＲリガンドを接触させ；そして細胞を、ＣＡＲリガンドの結合に基づきターゲティングし、それによりＣＡＲ発現細胞の数を減らす及び／又は殺傷することを含む。いくつかの実施形態において、ＣＡＲリガンドは、毒性剤と結合する（例えば、毒素又は細胞除去剤）。いくつかの実施形態において、抗イディオタイプ抗体は、エフェクター細胞活性、例えば、ＡＤＣＣ又はＡＤＣ活性を生じ得る。
本明細書に開示する方法において使用できる例示的な抗ＣＡＲ抗体は、例えば、国際公開第２０１４／１９０２７３号パンフレット及びＪｅｎａ ｅｔ ａｌ．，「Ｃｈｉｍｅｒｉｃ Ａｎｔｉｇｅｎ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ（ＣＡＲ）－Ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ ｔｏ Ｄｅｔｅｃｔ ＣＤ１９－Ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｎ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｔｒｉａｌｓ」，ＰＬＯＳ Ｍａｒｃｈ ２０１３ ８：３ ｅ５７８３８に記載され、その内容を引用により本明細書に組み込まれる。いくつかの実施形態において、抗イディオタイプ抗体分子は、抗ＣＤ１９抗体分子、例えば、抗ＣＤ１９ ｓｃＦｖを認識する。例えば、抗イディオタイプ抗体分子は、Ｊｅｎａ ｅｔ ａｌ．，ＰＬＯＳ Ｍａｒｃｈ ２０１３ ８：３ ｅ５７８３８に記載のＣＤ１９特異的ＣＡＲ ｍＡｂクローン番号１３６．２０．１と結合について競合でき；ＣＤ１９特異的ＣＡＲ ｍＡｂクローン番号１３６．２０．１と同じＣＤＲ（例えば、Ｋａｂａｔ定義、Ｃｈｏｔｈｉａ定義又はＫａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａ定義の組み合わせを使用して１つ以上の、例えば、全ての、ＶＨ ＣＤＲ１、ＶＨ ＣＤＲ２、ＣＨ ＣＤＲ３、ＶＬ ＣＤＲ１、ＶＬ ＣＤＲ２及びＶＬ ＣＤＲ３）を有し得て；ＣＤ１９特異的ＣＡＲ ｍＡｂクローン番号１３６．２０．１のような１つ以上の（例えば、２）可変領域を有し得るか又はＣＤ１９特異的ＣＡＲ ｍＡｂクローン番号１３６．２０．１を含み得る。いくつかの実施形態において、抗イディオタイプ抗体は、Ｊｅｎａ ｅｔ ａｌ．に記載の方法により製造した。いくつかの実施形態において、抗イディオタイプ抗体分子は、国際公開第２０１４／１９０２７３号パンフレットに記載の抗イディオタイプ抗体分子である。いくつかの実施形態において、抗イディオタイプ抗体分子は、１３６．２０．１などの国際公開第２０１４／１９０２７３号パンフレットに記載の抗体分子と同じＣＤＲ（例えば、１つ以上の、例えば、全ての、ＶＨ ＣＤＲ１、ＶＨ ＣＤＲ２、ＣＨ ＣＤＲ３、ＶＬ ＣＤＲ１、ＶＬ ＣＤＲ２及びＶＬ ＣＤＲ３）を有し；国際公開第２０１４／１９０２７３号パンフレットの抗体分子の１つ以上の（例えば、２）可変領域を有してよく又は１３６．２０．１などの国際公開第２０１４／１９０２７３号パンフレットに記載の抗体分子を含み得る。他の実施形態において、抗ＣＡＲ抗体は、例えば、国際公開第２０１４／１９０２７３号パンフレットに記載のようなＣＡＲ分子の細胞外結合ドメインの定常領域に結合する。いくつかの実施形態において、抗ＣＡＲ抗体は、ＣＡＲ分子の細胞外結合ドメインの定常領域、例えば、重鎖定常領域（例えば、ＣＨ２－ＣＨ３ヒンジ領域）又は軽鎖定常領域に結合する。例えば、いくつかの実施形態において、抗ＣＡＲ抗体は、国際公開第２０１４／１９０２７３号パンフレットに記載の２Ｄ３モノクローナル抗体と結合について競合し、２Ｄ３と同じＣＤＲ（例えば、１つ以上の、例えば、全ての、ＶＨ ＣＤＲ１、ＶＨ ＣＤＲ２、ＣＨ ＣＤＲ３、ＶＬ ＣＤＲ１、ＶＬ ＣＤＲ２及びＶＬ ＣＤＲ３）を有し又は２Ｄ３の１つ以上の（例えば、２）可変領域を有し又は国際公開第２０１４／１９０２７３に記載のような２Ｄ３を含む。
いくつかの実施形態において、本明細書における組成物及び方法は、例えば、その全体を引用により本明細書に組み込まれる、２０１４年７月３１日出願の米国特許出願第６２／０３１，６９９号明細書に記載されるような、Ｔ細胞の特定のサブセットのために最適化される。いくつかの実施形態において、Ｔ細胞の最適化サブセットは、対照Ｔ細胞、例えば、同じ構築物を発現する異なるタイプ（例えば、ＣＤ８＋又はＣＤ４＋）のＴ細胞と比較して、残留性の増強を示す。
いくつかの実施形態において、ＣＤ４＋Ｔ細胞は、本明細書に記載のＣＡＲ分子を含み、この分子ＣＡＲは、ＣＤ４＋Ｔ細胞に適した（例えば、最適化、例えば、残留性の増強に至る）細胞内シグナル伝達ドメイン、例えば、ＩＣＯＳドメインを含む。いくつかの実施形態において、ＣＤ８＋Ｔ細胞は、本明細書に記載のＣＡＲ分子を含み、このＣＡＲ分子は、ＣＤ８＋Ｔ細胞に適する（例えば、最適化、例えば、残留性の増強に至る）細胞内シグナル伝達ドメイン、例えば、４－１ＢＢドメイン、ＣＤ２８ドメイン又はＩＣＯＳドメイン以外の共刺激ドメインを含む。
いくつかの実施形態において、対象、例えば、癌を有する対象を処置する方法が本明細書に記載される。方法は、前記対象に、有効量の：
１）ＣＡＲ分子を含むＣＤ４＋Ｔ細胞（ＣＡＲＣＤ４＋）
であって、
抗原結合ドメイン、例えば、本明細書に記載の抗原結合ドメイン；
膜貫通ドメイン；及び
細胞内シグナル伝達ドメイン、例えば第１の共刺激ドメイン、例えばＩＣＯＳドメインを含むもの；並びに
２）ＣＡＲ分子を含むＣＤ８＋Ｔ細胞（ＣＡＲＣＤ８＋）であって、
抗原結合ドメイン、例えば、本明細書に記載の抗原結合ドメイン；
膜貫通ドメイン；及び
細胞内シグナル伝達ドメイン、例えば第２の共刺激ドメイン、例えば４－１ＢＢドメイン、ＣＤ２８ドメイン、又はＩＣＯＳドメイン以外の別の共刺激ドメインを含むもの；
を投与することを含み、ここで、ＣＡＲＣＤ４＋とＣＡＲＣＤ８＋は互いに異なる。
任意選択により、方法は、
３）ＣＡＲを分子含む第２のＣＤ８＋Ｔ細胞（第２のＣＡＲＣＤ８＋）であって、
抗原結合ドメイン、例えば、本明細書に記載の抗原結合ドメイン；
膜貫通ドメイン；及び
第２のＣＡＲＣＤ８＋が、ＣＡＲＣＤ８＋上に存在しない細胞内シグナル伝達ドメイン、例えば共刺激シグナル伝達ドメインを含み、任意選択により、ＩＣＯＳシグナル伝達ドメインを含まない、細胞内シグナル伝達ドメイン
を含むものを投与することを更に含む。
当技術分野で公知のものを含む他のアッセイもまた、本開示のＣＡＲ分子を評価するために使用することができる。
ＣＡＲ細胞との組み合わせ治療
本明細書に記載のＣＡＲ発現細胞は、他の公知の薬剤及び治療と組み合わせて使用され得る。本明細書で使用する「組み合わせて」投与するとは、２つの（又はそれを超える）異なる処置を、対象が障害を患っている過程中に対象に送達することを意味し、例えば２つ以上の処置を、対象が障害と診断された後に且つ障害が治癒又は撲滅される前に、又は処置が他の理由で中止される前に送達される。一実施形態において、投与期間の重複があるように、一方の処置の送達は、第２の処置の送達開始時に依然として行われている。これは、本明細書では「同時（ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ）」又は「同時（ｃｏｎｃｕｒｒｅｎｔ）送達」ということがある。他の実施形態において、一方の処置の送達は、他の処置の送達が始まる前に終わる。いずれかの場合の一実施形態において、処置は、組み合わせ投与のためにより有効である。例えば、第２の処置剤は、より有効である、例えば等しい効果が少ない第２の処置剤で見られるか、又は第２の処置剤は、第２の処置剤を第１の処置剤の非存在下で投与したときに見られるよりも大きい程度で症状を軽減するか又は第１の処置剤で同様の状況が見られる。一実施形態において、送達、障害と関係する症状又は他のパラメータの減少は、他方の処置剤の非存在下において一方の処置剤の送達で観察されるより大きい。２つの処置の効果は、一部相加的、完全相加的又は相加的より大きいものであり得る。送達は、送達した第１の処置の効果が第２の薬剤の送達時になお検出可能であるようなものであり得る。
本明細書に記載のＣＡＲ発現細胞及び少なくとも１つの更なる治療剤を同時に、同じ又は別の組成物で又は逐次的に投与できる。逐次投与について、本明細書に記載のＣＡＲ発現細胞をまず投与し得、更なる薬剤を次に投与し得、又は投与の順番が逆であり得る。
ＣＡＲ治療及び／又は他の治療剤、方法又はモダリティを活動性障害の期間又は寛解又は低活動性疾患の期間に投与できる。ＣＡＲ治療を他の処置の処置前、処置と同時に、処置後又は障害の寛解中に投与できる。
組み合わせて投与するとき、ＣＡＲ治療及び更なる薬剤（例えば、第２又は第３の薬剤）又は全てを、個々に、例えば単剤療法として使用する各薬剤の量又は投与より高い、低い又は同じ量又は用量で投与できる。いくつかの実施形態において、ＣＡＲ治療、更なる薬剤（例えば、第２又は第３の薬剤）又は全ての投与される量又は用量は、個々に、例えば単剤療法として使用する各薬剤の量又は用量より低い（例えば、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％又は少なくとも５０％）。他の実施形態において、所望の効果（例えば、癌の処置）を生じるＣＡＲ治療、更なる薬剤（例えば、第２又は第３の薬剤）又は全ての投与される量又は用量は、同じ治療効果を達成するのに必要である、個々に、例えば単剤療法として使用する各薬剤の量又は用量より低い（例えば、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％又は少なくとも５０％低い）。
いくつかの実施形態において、本開示は、本明細書に記載のＣＡＲ発現細胞療法、本明細書に記載のＲＮＡ分子（又はＲＮＡ分子をコードする核酸分子）、及び更なる治療剤を含む、組み合わせ療法を開示する。
バイオポリマーＣＡＲ送達方法
いくつかの実施形態において、本明細書に開示する１つ以上のＣＡＲ発現細胞をバイオポリマー足場、例えばバイオポリマーインプラントにより対象に投与又は送達し得る。バイオポリマー足場は、本明細書に記載のＣＡＲ発現細胞の送達、増殖及び／又は分散を支持又は増強することができる。バイオポリマー足場は、生体適合性（例えば、炎症性若しくは免疫応答を実質的に誘発しない）及び／又は天然に存在し得るか若しくは合成であり得る生分解性ポリマーを含む。
適当なバイオポリマーの例は、寒天、アガロース、アルギン酸、アルギン酸／リン酸カルシウムセメント（ＣＰＣ）、β－ガラクトシダーゼ（β－ＧＡＬ）、（１，２，３，４，６－ペンタアセチルａ－Ｄ－ガラクトース）、セルロース、キチン、キトサン、コラーゲン、エラスチン、ゼラチン、ヒアルロン酸コラーゲン、ヒドロキシアパタイト、ポリ（３－ヒドロキシブチレート－コ－３－ヒドロキシ－ヘキサノエート）（ＰＨＢＨＨｘ）、ポリ（ラクチド）、ポリ（カプロラクトン）（ＰＣＬ）、ポリ（ラクチド－コ－グリコリド）（ＰＬＧ）、ポリエチレンオキシド（ＰＥＯ）、ポリ（乳酸－コ－グリコール酸）（ＰＬＧＡ）、ポリプロピレンオキシド（ＰＰＯ）、ポリビニルアルコール）（ＰＶＡ）、絹、大豆タンパク質及び大豆タンパク質単離体の、単独で又は任意の他のポリマー組成物とのあらゆる濃度及びあらゆる比での混合物を含むが、これらに限定されない。バイオポリマーは、接着又は遊走促進分子、例えばリンパ球のコラーゲン受容体に結合するコラーゲン模倣ペプチド及び／又は送達する細胞の送達、増殖又は機能、例えば抗癌活性を増強する刺激分子で増強又は改変され得る。バイオポリマー足場は、注射可能な例えばゲル又は半固体又は固体組成物であり得る。
いくつかの実施形態において、本明細書に記載のＣＡＲ発現細胞を、対象への送達前にバイオポリマー足場上に播種する。実施形態において、バイオポリマー足場は、例えば、足場のバイオポリマーに取り込まれた又はコンジュゲートされた、更に本明細書に記載の１つ以上の更なる治療剤（例えば、別のＣＡＲ発現細胞、抗体又は小分子）又はＣＡＲ発現細胞の活性を増強する薬剤を含む。実施形態において、バイオポリマー足場を例えば腫瘍内に注射するか、又は腫瘍若しくは抗腫瘍効果を媒介するのに十分に腫瘍に近位に外科的にインプラントする。バイオポリマー組成物及びその送達のための方法の更なる例は、Ｓｔｅｐｈａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１５，３３：９７－１０１；及び国際公開第２０１４／１１０５９１号パンフレットに記載される。
ＣＡＲ細胞に関連する医薬組成物及び処置
本開示の医薬組成物は、本明細書に記載のように、ＣＡＲ発現細胞、例えば複数のＣＡＲ発現細胞を１つ以上の薬学的に又は生理学的に許容される担体、希釈剤又は添加物と組み合わせて含む。このような組成物は、中性緩衝化食塩水、リン酸緩衝化食塩水などの緩衝液；グルコース、マンノース、スクロース又はデキストラン、マンニトールなどの炭水化物；タンパク質；グリシンなどのポリペプチド又はアミノ酸；抗酸化剤；ＥＤＴＡ又はグルタチオンなどのキレート剤；アジュバント（例えば、水酸化アルミニウム）；及び防腐剤を含み得る。本開示の組成物は、いくつかの実施形態において静脈内投与用に製剤される。
本開示の医薬組成物を、処置する（又は予防する）疾患に適する方法で投与し得る。投与の量及び頻度は、患者の状態及び患者の疾患のタイプ及び重症度などの因子により決定されるが、適切な用量は、臨床試験により決定され得る。
いくつかの実施形態において、医薬組成物は、例えば、エンドトキシン、マイコプラズマ、複製可能レンチウイルス（ＲＣＬ）、ｐ２４、ＶＳＶ－Ｇ核酸、ＨＩＶ ｇａｇ、残留抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８被覆ビーズ、マウス抗体、貯留ヒト血清、ウシ血清アルブミン、ウシ血清、培養培地要素、ベクターパッケージング細胞又はプラスミド成分、細菌及び真菌からなる群から選択される汚染物が実質的になく、例えば検出可能なレベルで存在しない。いくつかの実施形態において、細菌は、アルガリゲネス・フェカリス（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ ｆａｅｃａｌｉｓ）、カンジダ・アルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）、エシェリキア・コリ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）、ヘモフィルス・インフルエンザ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａ）、ナイセリア・メニンギティディス（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｅｓ）、シュードモナス・エルジノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａ）及びストレプトコッカス・ピオゲネス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ）Ａ群からなる群から選択される少なくとも１つである。
「免疫学的に有効量」、「抗腫瘍有効量」、「腫瘍阻害有効量」又は「治療量」が示されるとき、本開示の組成物の投与すべき正確な量は、年齢、体重、腫瘍サイズ、感染の程度又は転移及び患者（対象）の状態の個体差を考慮して医師が決定できる。本明細書に記載のＴ細胞を含む医薬組成物を、１０４～１０９細胞／ｋｇ体重、いくつかの例において１０５～１０６細胞／ｋｇ体重の範囲の用量（これらの範囲内の全整数値を含む）で投与し得ると一般に述べることができる。Ｔ細胞組成物をまたこの用量で複数回投与し得る。細胞を、免疫療法において一般に知られる注入技術を使用して投与できる（例えば、Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．，Ｎｅｗ Ｅｎｇ．Ｊ．ｏｆ Ｍｅｄ．３１９：１６７６，１９８８を参照されたい）。
いくつかの実施形態において、活性化Ｔ細胞を対象に投与し、続いて血液を採り（又はアフェレーシスを実施し）、本開示に従ってそれからのＴ細胞を活性化し、これらの活性化し、増殖させたＴ細胞を患者に再注入することが望ましいことがある。この過程を数週間毎に複数回実施できる。一実施形態において、Ｔ細胞を、１０ｃｃ～４００ｃｃの採血した血液から活性化できる。一実施形態において、Ｔ細胞を、２０ｃｃ、３０ｃｃ、４０ｃｃ、５０ｃｃ、６０ｃｃ、７０ｃｃ、８０ｃｃ、９０ｃｃ又は１００ｃｃの採血した血液から活性化する。
対象組成物の投与は、エアロゾル吸入、注射、摂取、輸注、留置又は移植を含む任意の簡便な方法により実施し得る。本明細書に記載の組成物を患者に経動脈的に、皮下に、皮内に、腫瘍内に、節内に、髄内に、筋肉内に、静脈内（ｉ．ｖ．）注射により又は腹腔内に投与し得る。いくつかの実施形態において、本発明のＴ細胞組成物を患者に皮内又は皮下注射により投与する。いくつかの実施形態において、本開示のＣＡＲ発現細胞（例えばＴ細胞又はＮＫ細胞）組成物をｉ．ｖ．注射により投与する。ＣＡＲ発現細胞（例えば、Ｔ細胞又はＮＫ細胞）の組成物を腫瘍、リンパ節又は感染部位に直接注射し得る。
いくつかの実施形態において、対象は、白血球を採取し、エクスビボで富化又は枯渇させて、目的の細胞、例えば免疫エフェクター細胞（例えばＴ細胞、又はＮＫ細胞）を選択及び／又は単離する白血球除去を受け得る。これらの免疫エフェクター細胞（例えばＴ細胞、又はＮＫ細胞）単離体を当技術分野で知られる方法により増殖させ、１つ以上の本開示のＣＡＲ構築物が導入され、それにより本開示のＣＡＲ発現細胞（例えばＴ細胞、又はＮＫ細胞）が創製されるように処理し得る。処置を必要とする対象を、その後、高用量の化学療法剤と続く末梢血幹細胞移植の標準的処置に付し得る。一実施形態において、移植後又は移植と同時に、対象は、増殖させた本開示のＣＡＲ発現細胞（例えばＣＡＲ Ｔ細胞又はＮＫ細胞）の注入を受ける。いくつかの実施形態において、増殖細胞を手術前又は後に投与する。
実施形態において、リンパ枯渇は、例えば、本明細書に記載のＣＡＲ分子を発現する１つ以上の細胞を投与する前に、対象に対して実施される。実施形態において、リンパ枯渇は、メルファラン、サイトキサン、シクロホスファミド、及びフルダラビンのうちの１つ以上を投与することを含む。
患者に投与すべき上記処置の用量は、処置する状態の正確な性質及び処置のレシピエントにより変わる。ヒト投与のためのスケーリングは、当技術分野で認識されている習慣に従って実施できる。ＣＡＭＰＡＴＨの用量は、例えば、概して成人患者に１～約１００ｍｇの範囲であり、通常、連日で１～３０日の期間にわたって投与する。好ましい１日用量は、１～１０ｍｇ／日であるが、いくつかの例において最大４０ｍｇ／日までの高用量を使用し得る（米国特許６，１２０，７６６号明細書に記載）。
いくつかの実施形態において、ＣＡＲ分子を、例えばインビトロ転写を使用して免疫エフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞又はＮＫ細胞）に導入し、対象（例えば、ヒト）は、本開示のＣＡＲ免疫エフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞又はＮＫ細胞）の初期投与及びその後の本発明の免疫エフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞又はＮＫ細胞）の１回以上の投与を受け、ここで、その後の１回以上の投与は、先の投与後、１５日、例えば１４日、１３日、１２日、１１日、１０日、９日、８日、７日、６日、５日、４日、３日又は２日未満で行う。いくつかの実施形態において、本開示のＣＡＲ免疫エフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞又はＮＫ細胞）の１回を超える投与を対象（例えば、ヒト）に１週間当たりに行い、例えば本発明のＣＡＲ免疫エフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞又はＮＫ細胞）の２、３又は４投与を１週間当たりに投与する。いくつかの実施形態において、対象（例えば、ヒト対象）は、ＣＡＲ免疫エフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞又はＮＫ細胞）の１週間当たり１回を超える投与を受け（例えば、１週間当たり２回、３回又は４回投与）（本明細書ではサイクルとも称される）、続いて１週間、ＣＡＲ免疫エフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞又はＮＫ細胞）を投与されず、その後、更にＣＡＲ免疫エフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞又はＮＫ細胞）の１回以上の更なる投与（例えば、１週間当たりでＣＡＲ免疫エフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞、ＮＫ細胞）の１回を超える投与）を対象に投与する。いくつかの実施形態において、対象（例えば、ヒト対象）は、ＣＡＲ免疫エフェクター発現細胞（例えば、Ｔ細胞又はＮＫ細胞）の１回を超えるサイクルの投与を受け、各サイクル間の期間は、１０日、９日、８日、７日、６日、５日、４日又は３日より短い。いくつかの実施形態において、ＣＡＲ免疫エフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞又はＮＫ細胞）を隔日で１週間３回投与する。いくつかの実施形態において、本発明のＣＡＲ免疫エフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞又はＮＫ細胞）を少なくとも２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間又はそれを超えて投与する。
いくつかの実施形態において、ＣＡＲ発現細胞（例えばＣＡＲＴ又はＣＡＲ発現ＮＫ細胞）を、レンチウイルスなどのレンチウイルスウイルスベクターを使用して産生する。この方法で産生したＣＡＲ発現細胞（例えばＣＡＲＴ又はＣＡＲ発現ＮＫ細胞）は、安定なＣＡＲ発現を有する。
いくつかの実施形態において、ＣＡＲ発現細胞、例えばＣＡＲＴを、γレトロウイルスベクター、例えば本明細書に記載のγレトロウイルスベクターなどのウイルスベクターを使用して産生する。これらのベクターを使用して産生されたＣＡＲＴは、安定なＣＡＲ発現を有し得る。
いくつかの実施形態において、ＣＡＲ発現細胞（例えば、ＣＡＲＴ又はＣＡＲ発現ＮＫ細胞）は、形質導入４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、１４日、１５日後、ＣＡＲベクターを一過性に発現する。ＣＡＲ分子の一過性発現は、ＲＮＡ ＣＡＲベクター送達により行われ得る。いくつかの実施形態において、ＣＡＲ ＲＮＡは、電気穿孔法により、細胞、例えば、Ｔ細胞又はＮＫ細胞に形質導入される。
一過性に発現するＣＡＲ発現細胞（例えば、ＣＡＲＴ又はＣＡＲ発現ＮＫ細胞）（特にマウスｓｃＦｖ担持ＣＡＲ発現細胞（例えば、ＣＡＲＴ又はＣＡＲ発現ＮＫ細胞）を伴う）を使用して処置される患者で生じ得る可能性のある問題は、複数処置後のアナフィラキシーである。
この理論に拘束されることを望まないが、このようなアナフィラキシー応答は、液性抗ＣＡＲ応答を発達させる患者、即ち抗ＩｇＥアイソタイプを有する抗ＣＡＲ抗体が原因であると考えられる。細胞を産生する患者の抗体は、抗原への暴露の１０～１４日の中断があるとき、ＩｇＧアイソタイプ（これはアナフィラキシーを生じない）からＩｇＥアイソタイプへのクラススイッチを受けると考えられる。
患者が一過性ＣＡＲ療法（例えばＲＮＡ形質導入により完成されたものなど）の過程で抗ＣＡＲ抗体応答を生じるリスクが高い場合、ＣＡＲ発現細胞（例えば、ＣＡＲＴ又はＣＡＲ発現ＮＫ細胞）注入中断は１０～１４日を超えて継続してはならない。
ＣＡＲ有効性、対象適合性、又はサンプル適合性を評価するためのバイオマーカーを使用する方法
いくつかの実施形態において、本開示は、対象（例えば、癌を有する対象）におけるＣＡＲ発現細胞療法の有効性を評価又はモニタリングする方法に関する。方法は、ＣＡＲ療法に対する有効性、対象適合性、又はサンプル適合性の値を取得することを含み、ここで、前記値は、ＣＡＲ発現細胞療法の有効性又は適合性を示す。
本明細書に開示される方法のいずれかのいくつかの実施形態において、対象は、ＣＡＲ発現細胞療法を受ける前、受けている間、又は受けた後に評価される。
本明細書に開示される方法のいずれかのいくつかの実施形態において、応答者（例えば、完全応答者）は、非応答者と比較して、ＧＺＭＫ、ＰＰＦ１ＢＰ２、又はナイーブＴ細胞の１つ、２つ、又はそれを超える数（全て）の、より高いレベル又は活性を有するか、又はそれを有すると認識される。
本明細書に開示される方法のいずれかのいくつかの実施形態において、非応答者は、応答者と比較して、ＩＬ２２、ＩＬ－２ＲＡ、ＩＬ－２１、ＩＲＦ８、ＩＬ８、ＣＣＬ１７、ＣＣＬ２２、エフェクターＴ細胞、又は制御性Ｔ細胞の１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、又はそれを超える数（例えば、全て）の、より高いレベル又は活性を有するか、又は有すると認識される。
いくつかの実施形態において、再発者は、非再発者と比較して、以下の遺伝子：ＭＩＲ１９９Ａ１、ＭＩＲ１２０３、ｕｃ０２１ｏｖｐ、ＩＴＭ２Ｃ、及びＨＬＡ－ＤＱＢ１、の１つ以上（例えば、２つ、３つ、４つ、又は全て）の発現レベルの増加、及び／又は非再発者と比較して、以下の遺伝子：ＰＰＩＡＬ４Ｄ、ＴＴＴＹ１０、ＴＸＬＮＧ２Ｐ、ＭＩＲ４６５０－１、ＫＤＭ５Ｄ、ＵＳＰ９Ｙ、ＰＲＫＹ、ＲＰＳ４Ｙ２、ＲＰＳ４Ｙ１、ＮＣＲＮＡ００１８５、ＳＵＬＴ１Ｅ１、及びＥＩＦ１ＡＹ、の１つ以上（例えば、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ、１０個、１１個、又は全て）の発現レベルの減少を有するか、又はそれを有すると認識される患者である。
本明細書に開示される方法のいずれかのいくつかの実施形態において、非応答者は、より大きいパーセンテージの免疫細胞枯渇マーカー、例えば、１つ、２つ、又はそれを超える数の免疫チェックポイント阻害剤（例えば、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＴＩＭ－３及び／又はＬＡＧ－３）を有するか、又はそれを有すると認識される。いくつかの実施形態において、非応答者は、応答者からのＰＤ－１又はＬＡＧ－３を発現する免疫エフェクター細胞のパーセンテージと比較して、より大きいパーセンテージのＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、又はＬＡＧ－３を発現する免疫エフェクター細胞（例えば、ＣＤ４＋Ｔ細胞及び／又はＣＤ８＋Ｔ細胞）（例えば、ＣＡＲ発現ＣＤ４＋細胞及び／又はＣＤ８＋Ｔ細胞）を有するか、又はそれを有すると認識される。
いくつかの実施形態において、非応答者は、より大きいパーセンテージの、枯渇した表現型を有する免疫細胞、例えば、少なくとも２つの枯渇マーカーを共発現する、例えば、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１及び／又はＴＩＭ－３を共発現する免疫細胞を有するか、又はそれを有すると認識される。他の実施形態において、非応答者は、より大きいパーセンテージの、枯渇した表現型を有する免疫細胞、例えば、少なくとも２つの枯渇マーカーを共発現する、例えば、ＰＤ－１及びＬＡＧ－３を共発現する免疫細胞を有するか、又はそれを有すると認識される。
本明細書に開示される方法のいずれかのいくつかの実施形態において、非応答者は、ＣＡＲ発現細胞療法に対する応答者（例えば、完全応答者）と比較して、ＣＡＲ発現細胞集団における、より大きいパーセンテージのＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１＋／ＬＡＧ－３＋細胞を有するか、又はそれを有すると認識される。
本明細書に開示される方法のいずれかのいくつかの実施形態において、部分的応答者は、ＣＡＲ発現細胞集団において、応答者より高いパーセンテージのＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１＋／ＬＡＧ－３＋細胞を有するか、又はそれを有すると認識される。
本明細書に開示される方法のいずれかのいくつかの実施形態において、非応答者は、ＰＤ１／ＰＤ－Ｌ１＋ＣＡＲ＋の枯渇した表現型、及びＣＡＲ発現細胞集団におけるＬＡＧ３の共発現を有するか、又はそれを有すると認識される。
本明細書に開示される方法のいずれかのいくつかの実施形態において、非応答者は、応答者（例えば、完全応答者）と比較して、ＣＡＲ発現細胞集団における、より大きいパーセンテージのＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１＋／ＴＩＭ－３＋細胞を有するか、又はそれを有すると認識される。
本明細書に開示される方法のいずれかのいくつかの実施形態において、部分的応答者は、ＣＡＲ発現細胞集団において、応答者より高いパーセンテージのＰＤ－１／ＰＤ－Ｌ１＋／ＴＩＭ－３＋細胞を有するか、又はそれを有すると認識される。
本明細書に開示される方法のいずれかのいくつかの実施形態において、アフェレーシスサンプル中のＣＤ８＋ＣＤ２７＋ＣＤ４５ＲＯ－Ｔ細胞の存在は、ＣＡＲ発現細胞療法に対する対象の応答の正の予測因子である。
本明細書に開示される方法のいずれかのいくつかの実施形態において、アフェレーシスサンプル中のＰＤ１＋ＣＡＲ＋及びＬＡＧ３＋又はＴＩＭ３＋Ｔ細胞の高いパーセンテージは、ＣＡＲ発現細胞療法に対する対象の応答の予後不良の予測因子である。
本明細書に開示される方法のいずれかのいくつかの実施形態において、応答者（例えば、完全又は部分的応答者）は、以下のプロファイルの１つ、２つ、３つ、又はそれを超える数（又は全て）を有する：
（ｉ）参照値、例えば、非応答者のＣＤ２７＋免疫エフェクター細胞数と比較して大きい数のＣＤ２７＋免疫エフェクター細胞を有する；
（ｉｉ）参照値、例えば、非応答者のＣＤ８＋Ｔ細胞数と比較して大きい数のＣＤ８＋Ｔ細胞を有する；
（ｉｉｉ）参照値、例えば、１つ以上のチェックポイント阻害剤を発現する非応答者の細胞数と比較して小さい数の、１つ以上のチェックポイント阻害剤、例えば、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＬＡＧ－３、ＴＩＭ－３、又はＫＬＲＧ－１、若しくはそれらの組み合わせから選択されるチェックポイント阻害剤を発現する免疫細胞数を有する；又は
（ｉｖ）参照値、例えば、休止ＴＥＦＦ細胞、休止ＴＲＥＧ細胞、ナイーブＣＤ４細胞、未刺激のメモリー細胞、又は初期メモリーＴ細胞の非応答者数と比較して、より大きい数の、１つ、２つ、３つ、４つ又はそれを超える数（全て）の休止ＴＥＦＦ細胞、休止ＴＲＥＧ細胞、ナイーブＣＤ４細胞、未刺激のメモリー細胞若しくは初期メモリーＴ細胞、又はそれらの組み合わせを有する。
本明細書に開示される方法のいずれかのいくつかの実施形態において、サイトカインレベル又は活性は、サイトカインＣＣＬ２０／ＭＩＰ３ａ、ＩＬ１７Ａ、ＩＬ６、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＦＮγ、ＩＬ１０、ＩＬ１３、ＩＬ２、ＩＬ２１、ＩＬ４、ＩＬ５、ＩＬ９、ＴＮＦα、又はそれらの組み合わせの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、又はそれを超える数（又は全て）から選択される。サイトカインは、ＩＬ－１７ａ、ＣＣＬ２０、ＩＬ２、ＩＬ６又はＴＮＦａの１、２、３、４又はそれ以上（全て）から選択できる。いくつかの実施形態において、サイトカインのレベル又は活性の増加は、ＩＬ－１７ａ及びＣＣＬ２０の一方又は両方から選択され、応答性の増加又は再発の減少を示す。
実施形態において、本明細書の方法によって認識された応答者、非応答者、再発者又は非再発者は、臨床基準に従って更に評価することができる。例えば、完全応答者は、疾患（例えば、癌）を有するか、又はそれを有する対象として認識され、処置に対する完全応答、例えば、完全寛解を示す。完全応答は、本明細書に記載されるように、例えば、ＮＣＣＮ Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ（登録商標）、又はＣｈｅｓｏｎ ｅｔ ａｌ，Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ １７：１２４４（１９９９）及びＣｈｅｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，“Ｒｅｖｉｓｅｄ Ｒｅｓｐｏｎｓｅ Ｃｒｉｔｅｒｉａ ｆｏｒ Ｍａｌｉｇｎａｎｔ Ｌｙｍｐｈｏｍａ”，Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ ２５：５７９－５８６（２００７）（これらは両方、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）を使用して、認識され得る。部分的応答者は、疾患（例えば、癌）を有するか、又はそれを有する対象として識別され、処置に対する部分的応答、例えば、部分的寛解を示す。部分的応答は、例えば、ＮＣＣＮ Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ（登録商標）、又は本明細書に記載されているようなＣｈｅｓｏｎ基準を使用して同定され得る。非応答者は、疾患（例えば、癌）を有するか、又はそれを有する対象として識別され、処置に応答を示さず、例えば、患者は、安定した疾患又は進行性の疾患を有する。非応答者は、例えば、ＮＣＣＮ Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅｓ（登録商標）、又は本明細書に記載されているようなＣｈｅｓｏｎ基準を使用して同定され得る。
或いは、又は本明細書に開示される方法と組み合わせて、前記値に応答して、以下の１つ、２つ、３つ、４つ、又はそれ以上を実施する：
例えば、応答者又は非再発者に、ＣＡＲ発現細胞療法を投与すること；
ＣＡＲ発現細胞療法の変更された投与量を投与すること；
ＣＡＲ発現細胞療法のスケジュール又は時間経過を変更すること；
ＣＡＲ発現細胞療法と組み合わせた更なる薬剤、例えば、チェックポイント阻害剤、例えば、本明細書に記載のチェックポイント阻害剤を、例えば、非応答者又は部分的応答者に投与すること；
非応答者又は部分的応答者に、ＣＡＲ発現細胞療法での処置前に対象の若いＴ細胞の数を増加させる治療を投与すること；
ＣＡＲ発現細胞療法の製造プロセスを変更すること、例えば、ＣＡＲ分子をコードする核酸を導入する前により若いＴ細胞を濃縮すること、又は、形質導入効率を、例えば、非応答者又は部分的応答者として認識された対象につき、高めること；
例えば、非応答者又は部分的応答者又は再発者に対して、別の治療を投与すること；又は
対象が非応答者又は再発者であるか、又はそう認識された場合、ＴＲＥＧ細胞集団及び／又はＴＲＥＧ遺伝子シグネチャーを、例えば、ＣＤ２５枯渇、シクロホスファミド、抗ＧＩＴＲ抗体、又はそれらの組み合わせの投与の１つ以上によって、減少させること。
いくつかの実施形態において、対象は抗ＧＩＴＲ抗体で前処置される。いくつかの実施形態において、対象は、注入又は再注入の前に抗ＧＩＴＲ抗体で処置される。
ＺＢＴＢ３２阻害剤を使用して癌を処置する方法
一態様において、本開示は、ＺＢＴＢ３２阻害剤（例えば、本明細書に記載のＺＢＴＢ３２阻害剤）を単独で、又は第２の治療剤若しくはモダリティー（例えば、本明細書に開示される治療剤又はモダリティー）と組み合わせて使用した、インビボでの対象の処置、又は癌性腫瘍の増殖が阻害又は低減されるような、本明細書に開示される組み合わせを含む組成物又は製剤に関する。
一実施形態において、本明細書に開示されるＺＢＴＢ３２阻害剤又は組み合わせは、インビボでの癌の処置に適している。例えば、ＺＢＴＢ３２阻害剤又は組み合わせは、癌性腫瘍の増殖を阻害するために使用することができる。ＺＢＴＢ３２阻害剤又は組み合わせは、本明細書の障害を処置するための、標準治療処置（例えば、癌又は感染症用）、ワクチン（例えば、治療的癌ワクチン）、細胞療法、放射線療法、手術、又はその他の治療剤又はモダリティーの１つ以上と組み合わせて使用することもできる。例えば、抗原特異的な免疫増強を達成するために、組み合わせを目的の抗原と共に投与することができる。本明細書に開示される組み合わせは、順番に又は同時に投与することができる。
別の態様において、対象を処置する、例えば、対象における過増殖性状態又は障害（例えば、癌）、例えば、固形腫瘍、血液癌、軟部組織腫瘍又は転移性病変を軽減又は緩和する方法が提供される。方法は、ＺＢＴＢ３２阻害剤（例えば、本明細書に記載のＺＢＴＢ３２阻害剤）を単独で、又は第２の治療剤若しくはモダリティー（例えば、本明細書に開示される治療剤又はモダリティー）と組み合わせて、又は本明細書に開示される組み合わせを含む組成物又は製剤を、例えば、本明細書に開示される投与レジメンに従って、対象に投与することを含む。
本明細書で使用される場合、「癌」という用語は、病理組織学的型又は侵襲性のステージとは無関係に、全ての型の癌性増殖又は発癌プロセス、転移性組織又は悪性形質転換細胞、組織又は器官を含むことを意味する。癌性障害の例には、固形腫瘍、血液癌、軟部組織腫瘍、及び転移病変が含まれるが、これらに限定されない。固形腫瘍の例には、肝臓、肺、乳房、リンパ系、消化管（例えば、結腸）、尿生殖路（例えば、腎臓、尿路上皮、膀胱細胞）、前立腺、ＣＮＳ（例えば、脳、神経又はグリア細胞）、皮膚、膵臓、及び咽頭に影響を及ぼすものなどの、様々な器官系の悪性腫瘍、例えば、肉腫、及び癌腫（腺癌及び扁平上皮癌を含む）が含まれる。腺癌には、大部分の結腸癌、直腸癌、腎細胞癌、肝臓癌、肺の非小細胞癌、小腸の癌及び食道の癌などの悪性腫瘍が含まれる。扁平上皮癌には、例えば、肺、食道、皮膚、頭頸部領域、口腔、肛門、及び子宮頸部における悪性腫瘍が含まれる。前述の癌の転移性病変もまた、本開示の方法及び組成物を使用して処置又は予防することができる。
いくつかの実施形態において、癌は、乳癌、膵臓癌、結腸直腸癌、皮膚癌、胃癌、又はＥＲ＋癌から選択される。いくつかの実施形態において、皮膚癌は、黒色腫（例えば、難治性黒色腫）である。いくつかの実施形態において、ＥＲ＋癌はＥＲ＋乳癌である。いくつかの実施形態において、癌は、エプスタイン・バーウイルス（ＥＢＶ）陽性の癌である。
本明細書に開示される組み合わせを使用して増殖を阻害することができる例示的な癌には、典型的には、免疫療法に応答する癌が含まれる。処置のための典型的な癌の非限定的な例は、黒色腫（例えば、転移性悪性黒色腫）、腎臓癌（例えば、明細胞癌）、前立腺癌（例えば、ホルモン難治性前立腺腺癌）、乳癌、結腸癌及び肺癌（例えば、非小細胞肺癌）を含む。更に、難治性又は再発性悪性腫瘍は、本明細書に記載の抗原分子を使用して処置することができる。
処置され得る他の癌の例には、基底細胞癌、胆道癌；膀胱癌；骨癌；脳及びＣＮＳの癌；原発性ＣＮＳリンパ腫；中枢神経系（ＣＮＳ）の新生物；乳癌；子宮頸癌；絨毛癌；結腸直腸癌；結合組織癌；消化器系の癌；子宮内膜癌；食道癌；眼癌；頭頸部の癌；胃癌；上皮内新生物；腎臓癌；喉頭癌；白血病（急性骨髄性白血病、慢性骨髄性白血病、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ球性白血病、慢性又は急性白血病を含む）；肝臓癌；肺癌（例えば、小細胞及び非小細胞）；ホジキン及び非ホジキンリンパ腫を含むリンパ腫；リンパ球性リンパ腫；黒色腫、例えば、皮膚又は眼内の悪性黒色腫；骨髄腫；神経芽細胞腫；口腔癌（例えば、唇、舌、口、及び咽頭）；卵巣癌；膵臓癌；前立腺癌；網膜芽細胞腫；横紋筋肉腫；直腸癌；呼吸器系の癌；肉腫；皮膚癌；胃癌；精巣癌；甲状腺癌；子宮癌；泌尿器系の癌、肝細胞癌、肛門部癌、卵管の癌、膣の癌、外陰部の癌、小腸の癌、内分泌系の癌、副甲状腺の癌、副腎の癌、軟部組織肉腫、尿道の癌、陰茎の癌、小児固形腫瘍、脊髄軸腫瘍、脳幹神経膠腫、下垂体腺腫、カポジ肉腫、類表皮癌、扁平上皮癌、Ｔ細胞リンパ腫、アスベストによって誘発されるものを含む環境誘発性の癌、並びに他の癌及び肉腫、並びに前記癌の組み合わせが含まれるが、これらに限定されない。
いくつかの実施形態において、障害は、癌、例えば、本明細書に記載の癌である。特定の実施形態において、癌は、固形腫瘍である。いくつかの実施形態において、癌は、脳腫瘍、例えば神経膠芽腫、神経膠肉腫、又は再発性脳腫瘍である。いくつかの実施形態において、癌は、膵臓癌、例えば進行性膵臓癌である。いくつかの実施形態において、癌は、皮膚癌、例えば、黒色腫（例えば、ステージＩＩ～ＩＶ黒色腫、ＨＬＡ－Ａ２陽性黒色腫、切除不能黒色腫、又は転移性黒色腫）、又はメルケル細胞癌である。いくつかの実施形態において、癌は、腎癌、例えば、腎細胞癌（ＲＣＣ）（例えば、転移性腎細胞癌）又は処置未経験の転移性腎癌である。いくつかの実施形態において、癌は、乳癌、例えば、転移性乳癌又はステージＩＶ乳癌、例えば、トリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）である。いくつかの実施形態において、癌は、ウイルス関連癌である。いくつかの実施形態において、癌は、肛門管癌（例えば、肛門管の扁平上皮癌）である。いくつかの実施形態において、癌は、子宮頸癌（例えば、子宮頸部の扁平上皮癌）である。いくつかの実施形態において、癌は、胃癌（例えば、エプスタイン・バーウイルス（ＥＢＶ）陽性胃癌、又は胃癌又は胃食道接合部癌）である。いくつかの実施形態において、癌は、頭頸部癌（例えば、ＨＰＶ陽性及び陰性の頭頸部扁平上皮癌（ＳＣＣＨＮ））である。いくつかの実施形態において、癌は、鼻咽頭癌（ＮＰＣ）である。いくつかの実施形態において、癌は、陰茎癌（例えば、陰茎の扁平上皮癌）である。いくつかの実施形態において、癌は、膣又は外陰癌（例えば、膣又は外陰の扁平上皮癌）である。いくつかの実施形態において、癌は、結腸直腸癌、例えば、再発性結腸直腸癌、転移性結腸直腸癌、例えば、マイクロサテライト不安定性結腸直腸癌、マイクロサテライト安定性結腸直腸癌、ミスマッチ修復熟練結腸直腸癌、又はミスマッチ修復欠損結腸直腸癌である。いくつかの実施形態において、癌は、肺癌、例えば非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）である。特定の実施形態において、癌は、血液癌である。いくつかの実施形態において、癌は、白血病である。いくつかの実施形態において、癌は、リンパ腫、例えば、ホジキンリンパ腫（ＨＬ）又はびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）（例えば、再発性又は難治性のＨＬ又はＤＬＢＣＬ）である。いくつかの実施形態において、癌は、骨髄腫である。いくつかの実施形態において、癌は、高ＭＳＩ（ＭＳＩ－Ｈ）癌である。いくつかの実施形態において、癌は、転移性癌である。他の実施形態において、癌は、進行癌である。他の実施形態において、癌は、再発性又は難治性の癌である。
一実施形態において、癌は、メルケル細胞癌である。他の実施形態において、癌は、黒色腫である。他の実施形態において、癌は、乳癌、例えばトリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）又はＨＥＲ２陰性乳癌である。他の実施形態において、癌は、腎細胞癌（例えば、明細胞腎細胞癌（ＣＣＲＣＣ）又は非明細胞腎細胞癌（ｎｃｃＲＣＣ））である。他の実施形態において、癌は、甲状腺癌、例えば、未分化甲状腺癌（ＡＴＣ）である。他の実施形態において、癌は、神経内分泌腫瘍（ＮＥＴ）、例えば、非定型肺カルチノイド腫瘍、又は膵臓、胃腸（ＧＩ）管、若しくは肺におけるＮＥＴである。特定の実施形態において、癌は、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）（例えば、扁平上皮ＮＳＣＬＣ又は非扁平上皮ＮＳＣＬＣ）である。特定の実施形態において、癌は、卵管癌である。特定の実施形態において、癌は、マイクロサテライト高不安定性結腸直腸癌（高ＭＳＩＣＲＣ）又はマイクロサテライト安定性結腸直腸癌（ＭＳＳ ＣＲＣ）である。
他の実施形態において、癌は、白血病又はリンパ腫を含むがこれらに限定されない血液悪性腫瘍又は癌である。例えば、組み合わせは、例えば、急性白血病、例えば、Ｂ細胞急性リンパ性白血病（「ＢＡＬＬ」）、Ｔ細胞急性リンパ性白血病（「ＴＡＬＬ」）、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）；慢性白血病、例えば、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）；更なる血液癌又は血液学的状態、例えば、Ｂ細胞前リンパ球性白血病、芽球性形質細胞様樹状細胞の新生物、バーキットリンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、ヘアリーセル白血病、小細胞型又は大細胞型濾胞性リンパ腫、悪性のリンパ増殖性状態、ＭＡＬＴリンパ腫、マントル細胞リンパ腫、辺縁帯リンパ腫、多発性骨髄腫、脊髄形成異常及び骨髄異形成症候群、非ホジキンリンパ腫、形質芽細胞リンパ腫、形質細胞様樹状細胞の新生物、ワルデンシュトレーム型マクログロブリン血症、及び骨髄の血液細胞の無効な産生（又は異形成）を併せもつ血液学的な状態の多様な集合体である「前白血病状態」などを含むがこれらに限定されない、癌及び悪性腫瘍を処置するために使用することができる。
本明細書で使用される場合、「対象」という用語は、ヒト及び非ヒト動物を含むことを意図している。いくつかの実施形態において、対象は、ヒト対象、例えば、異常な免疫チェックポイント機能を特徴とする障害又は状態を有するヒト患者である。例えば、対象は、抗ＰＤ－１抗体分子によって結合されるＰＤ－１エピトープを含む、少なくともいくつかのＰＤ－１タンパク質、例えば、ＰＤ－１への抗体結合をサポートするのに十分に高いレベルのタンパク質及びエピトープを有する。「非ヒト動物」という用語は、非ヒト霊長類などの哺乳動物及び非哺乳動物を含む。いくつかの実施形態において、対象はヒトである。いくつかの実施形態において、対象は、免疫応答の増強を必要とするヒト患者である。本明細書に記載の方法及び組成物は、免疫応答を調節する（例えば、増強又は阻害する）ことによって処置できる障害を有するヒト患者を処置するのに適している。特定の実施形態において、癌は、免疫応答が欠損した癌又は免疫原性癌である。
本明細書に開示される方法及び組成物は、前述の癌に関連する転移病変を処置するのに有用である。
いくつかの実施形態において、方法は、腫瘍サンプルがＰＤ－Ｌ１、ＣＤ８、及びＩＦＮ－γの１つ以上に対して陽性であるかどうか、及び腫瘍サンプルがマーカーの１つ以上、例えば２つ、又は３つ全てに対して陽性であるかどうかを決定すること、次いで、本明細書に記載の治療剤の組み合わせの治療有効量を患者に投与することを更に含む。
いくつかの実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤又は組み合わせは、本明細書に開示されるバイオマーカーの１つ以上を発現する癌を処置するために使用される。特定の実施形態において、対象又は癌は、本明細書に開示される１つ以上のバイオマーカーの存在の決定に応じて処置される。
他の実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤又は組み合わせは、高マイクロサテライト不安定性（ＭＳＩ－Ｈ）又はミスマッチ修復欠損（ｄＭＭＲ）を特徴とする癌を処置するために使用される。患者のＭＳＩ－Ｈ又はｄＭＭＲ腫瘍状態の同定は、例えば、ＭＳＩ－Ｈ状態につきポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）試験、又はｄＭＭＲにつき免疫組織化学（ＩＨＣ）試験を使用して決定できる。ＭＳＩ－Ｈ又はｄＭＭＲ腫瘍状態の同定のための方法は、例えば、Ｒｙａｎ ｅｔ ａｌ．Ｃｒｉｔ Ｒｅｖ Ｏｎｃｏｌ Ｈｅｍａｔｏｌ．２０１７；１１６：３８－５７；Ｄｉｅｔｍａｉｅｒ ａｎｄ Ｈｏｆｓｔａｄｔｅｒ．Ｌａｂ Ｉｎｖｅｓｔ ２００１，８１：１４５３－１４５６；Ｋａｗａｋａｍｉ ｅｔ ａｌ．Ｃｕｒｒ Ｔｒｅａｔ Ｏｐｔｉｏｎｓ Ｏｎｃｏｌ．２０１５；１６（７）：３０に記載されている。
本明細書に記載の組み合わせ療法は、１つ以上の更なる治療剤、例えば、１つ以上の抗癌剤、細胞傷害剤又は細胞分裂阻害剤、ホルモン処置剤、ワクチン、及び／又は他の免疫療法剤と共製剤化及び／又は共投与される本開示の組成物を含み得る。他の実施形態において、組み合わせは、手術、放射線、凍結手術、及び／又は温熱療法を含む、他の治療的処置モダリティーと組み合わせて更に投与又は使用される。このような組み合わせ療法は、投与される治療剤の投与量をより低くすることが有利であり、これにより、様々な単剤療法に関連する毒性又は合併症の可能性を回避することができる。
組み合わせて投与される場合、治療剤は、例えば単剤療法として、個別に使用される各薬剤の量又は投与量より多いか、少ないか又は同じ量又は用量で投与することができる。特定の実施形態において、治療剤の投与される量又は用量は、個々に、例えば単剤療法として使用される各薬剤の量又は用量より低い（例えば、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、又は少なくとも５０％）。他の実施形態において、所望の効果（例えば、癌の処置）をもたらす処置剤の量又は投与量は、より低い（例えば、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、又は少なくとも５０％低い）。
ＺＢＴＢ３２阻害剤との組み合わせ治療
本開示のＺＢＴＢ３２阻害剤は、１つ以上の治療剤（薬学的組み合わせ）又はモダリティー、例えば、非薬物療法との組み合わせ療法において、治療有効量で投与することができる。例えば、相乗効果は、他の癌剤で発生し得る。本開示のＺＢＴＢ３２阻害剤が他の療法と併せて投与される場合、同時投与されるＺＢＴＢ３２阻害剤の投与量は、当然のことながら、使用される共薬物の種類、使用される特定の薬物、処置される状態などに応じて変化する。
ＺＢＴＢ３２阻害剤は、他の薬物療法又は処置モダリティーと同時に（単一の調製物又は別個の調製物として）、連続して、別々に、又はある期間にわたって投与することができる。一般に、組み合わせ治療は、治療の単一サイクル又はコース中に２つ以上の薬物を投与することを想定している。治療剤は、例えば、化合物、ペプチド、抗体、抗体フラグメント、又は核酸であり、これは、本開示の化合物と組み合わせて患者に投与された場合、治療的に活性であるか、又は治療活性を増強する。
一態様において、本開示のＺＢＴＢ３２阻害剤、又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体は、他の抗癌剤、抗アレルギー剤、制吐剤（又は制吐剤）、鎮痛剤、細胞保護剤及びこれらの組み合わせなどの他の治療剤と組み合わせることができる。
いくつかの実施形態において、本開示のＺＢＴＢ３２阻害剤、又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体は、疾患、例えば癌を処置するために、ＰＤ－１阻害剤、ＰＤ－Ｌ１阻害剤、ＬＡＧ－３阻害剤、サイトカイン、Ａ２ａＲアンタゴニスト、ＧＩＴＲアゴニスト、ＴＩＭ－３阻害剤、ＳＴＩＮＧアゴニスト、ＣＴＬＡ－４阻害剤、ＴＩＧＩＴ阻害剤、キメラ抗原受容体、エストロゲン受容体アンタゴニスト、ＣＤＫ４／６阻害剤、ＣＸＣＲ２阻害剤、ＣＳＦ－１／１Ｒ結合剤、ＩＤＯ阻害剤、ガレクチン阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、ｃ－ＭＥＴ阻害剤、ＴＧＦ－ｂ阻害剤、ＩＬ－１ｂ阻害剤、ＭＤＭ２阻害剤、及びＴＬＲ７アゴニストから選択される１つ以上の第２の薬剤と組み合わせて投与される。
いくつかの実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤は、ＯＸ４０、ＣＤ２、ＣＤ２７、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ－１、ＬＦＡ－１（ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８）、ＩＣＯＳ（ＣＤ２７８）、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＧＩＴＲ、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＢＡＦＦＲ、ＨＶＥＭ、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、ＳＬＡＭＦ７、ＮＫｐ８０、ＣＤ１６０、Ｂ７－Ｈ３又はＣＤ８３リガンドの１つ以上から選択される共刺激分子のアゴニストと組み合わせて使用される。
いくつかの実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤は、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＣＴＬＡ－４、ＴＩＭ－３、ＬＡＧ－３、ＣＥＡＣＡＭ－１、ＣＥＡＣＡＭ－５、ＶＩＳＴＡ、ＢＴＬＡ、ＴＩＧＩＴ、ＬＡＩＲ１、ＣＤ１６０、２Ｂ４、又はＴＧＦβの１つ以上から選択される免疫チェックポイント分子の阻害剤と組み合わせて使用される。
別の実施形態において、１つ以上の化学療法剤は、ＺＢＴＢ３２阻害剤、又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体と組み合わせて、疾患、例えば癌を処置するために使用され、ここで、前記化学療法剤は、アナストロゾール（アリミデックス（登録商標））、ビカルタミド（カソデックス（登録商標））、硫酸ブレオマイシン（Ｂｌｅｎｏｘａｎｅ（登録商標））、ブスルファン（マイレラン（登録商標））、ブスルファン注（ブスルフェクス（登録商標））、カペシタビン（ゼローダ（登録商標））、Ｎ４－ペントキシカルボニル－５－デオキシ－５－フルオロシチジン、カルボプラチン（パラプラチン（登録商標））、カルムスチン（ＢｉＣＮＵ（登録商標））、クロラムブシル（リューケラン（登録商標））、シスプラチン（Ｐｌａｔｉｎｏｌ（登録商標））、クラドリビン（ロイスタチン（登録商標））、シクロホスファミド（シトキサン（登録商標）又はＮｅｏｓａｒ（登録商標））、シタラビン、シトシンアラビノシド（Ｃｙｔｏｓａｒ－Ｕ（登録商標））、シタラビンリポソーム注射（ＤｅｐｏＣｙｔ（登録商標））、ダカルバジン（ＤＴＩＣ－Ｄｏｍｅ（登録商標））、ダクチノマイシン（アクチノマイシンＤ、Ｃｏｓｍｅｇａｎ）、塩酸ダウノルビシン（Ｃｅｒｕｂｉｄｉｎｅ（登録商標））、クエン酸ダウノルビシンリポソーム注射（ＤａｕｎｏＸｏｍｅ（登録商標））、デキサメサゾン、ドセタキセル（タキソテール（登録商標））、塩酸ドキソルビシン（アドリアマイシン（登録商標）、Ｒｕｂｅｘ（登録商標））、エトポシド（ベプシド（登録商標））、リン酸フルダラビン（フルダラ（登録商標））、５－フルオロウラシル（アドルシル（登録商標）、エフデックス（登録商標））、フルタミド（Ｅｕｌｅｘｉｎ（登録商標））、テザシチビン、ゲムシタビン（ジフルオロデオキシシチジン）、ヒドロキシ尿素（ハイドレア（登録商標））、イダルビシン（イダマイシン（登録商標））、イホスファミド（ＩＦＥＸ（登録商標））、イリノテカン（Ｃａｍｐｔｏｓａｒ（登録商標））、Ｌ－アスパラギナーゼ（ＥＬＳＰＡＲ（登録商標））、ロイコボリンカルシウム、メルファラン（アルケラン（登録商標））、６－メルカプトプリン（ピュリネソール（登録商標））、メトトレキサート（Ｆｏｌｅｘ（登録商標））、ミトキサントロン（ノバントロン（登録商標））、マイロターグ、パクリタキセル（タキソール（登録商標））、ｐｈｏｅｎｉｘ（イットリウム９０／ＭＸ－ＤＴＰＡ）、ペントスタチン、ポリフェプロザン２０とカルムスチンインプラント（グリアデル（登録商標））、クエン酸タモキシフェン（ノルバデックス（登録商標））、テニポシド（Ｖｕｍｏｎ（登録商標））、６－チオグアニン、チオテパ、チラパザミン（Ｔｉｒａｚｏｎｅ（登録商標））、注射用塩酸トポテカン（ハイカムチン（登録商標））、ビンブラスチン（Ｖｅｌｂａｎ（登録商標））、ビンクリスチン（オンコビン（登録商標））及びビノレルビン（ナベルビン（登録商標））、エピルビシン（Ｅｌｌｅｎｃｅ（登録商標））、オキサリプラチン（Ｅｌｏｘａｔｉｎ（登録商標））、エキセメスタン（Ａｒｏｍａｓｉｎ（登録商標））、レトロゾール（Ｆｅｍａｒａ（登録商標））、及びフルベストラント（Ｆａｓｌｏｄｅｘ（登録商標））を含むが、これらに限定されない。
他の実施形態において、本開示のＺＢＴＢ３２阻害剤、又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体は、１つ以上の他の抗ＨＥＲ２抗体、例えば、上記のトラスツズマブ、ペルツズマブ、マルゲツキシマブ、若しくはＨＴ－１９と、又はアドトラスツズマブエムタンシン（Ｋａｄｃｙｌａ（登録商標）、又はＴ－ＤＭ１としても知られる）などの１つ以上の他の抗ＨＥＲ２コンジュゲートと組み合わせて使用される。
他の実施形態において、本開示のＺＢＴＢ３２阻害剤、又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体は、疾患、例えば癌を処置するための、ＥＧＦＲ阻害剤、Ｈｅｒ３阻害剤、ＩＧＦＲ阻害剤、及びＭｅｔ阻害剤を含むがこれらに限定されない、１つ以上のチロシンキナーゼ阻害剤と組み合わせて使用される。
例えば、チロシンキナーゼ阻害剤には、エルロチニブ塩酸塩（Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標））；リニファニブ（Ｎ－［４－（３－アミノ－１Ｈ－インダゾール－４－イル）フェニル］－Ｎ’－（２－フルオロ－５－メチルフェニル）ウレア、ＡＢＴ８６９としても知られ、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈから入手可能）；リンゴ酸スニチニブ（Ｓｕｔｅｎｔ（登録商標））；ボスチニブ（４－［（２，４－ジクロロ－５－メトキシフェニル）アミノ］－６－メトキシ－７－［３－（４－メチルピペラジン－１－イル）プロポキシ］キノリン－３－カルボニトリル、ＳＫＩ－６０６、米国特許第６，７８０，９９６号明細書に記載される）；ダサチニブ（Ｓｐｒｙｃｅｌ（登録商標））；パゾパニブ（Ｖｏｔｒｉｅｎｔ（登録商標））；ソラフェニブ（Ｎｅｘａｖａｒ（登録商標））；Ｚａｃｔｉｍａ（ＺＤ６４７４）；及びイマチニブ又はメシル酸イマチニブ（Ｇｉｌｖｅｃ（登録商標）及びＧｌｅｅｖｅｃ（登録商標））が含まれるが、これらに限定されない。
上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）阻害剤には、エルロチニブ塩酸塩（Ｔａｒｃｅｖａ（登録商標））、ゲフィチニブ（Ｉｒｅｓｓａ（登録商標））；Ｎ－［４－［（３－クロロ－４－フルオロフェニル）アミノ］－７－［［（３’’Ｓ’’）－テトラヒドロ－３－フラニル］オキシ］－６－キナゾリニル］－４（ジメチルアミノ）－２－ブテンアミド、Ｔｏｖｏｋ（登録商標）；バンデタニブ（Ｃａｐｒｅｌｓａ（登録商標））；ラパチニブ（Ｔｙｋｅｒｂ（登録商標））；（３Ｒ，４Ｒ）－４－アミノ－１－（（４－（（３－メトキシフェニル）アミノ）ピロロ［２，１－ｆ］［１，２，４］トリアジン－５－イル）メチル）ピペリジン－３－オール（ＢＭＳ６９０５１４）；カネルチニブ二塩酸塩（ＣＩ－１０３３）；６－［４－［（４－エチル－１－ピペラジニル）メチル］フェニル］－Ｎ－［（１Ｒ）－１－フェニルエチル］－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－４－アミン（ＡＥＥ７８８、ＣＡＳ４９７８３９－６２－０）；ムブリチニブ（ＴＡＫ１６５）；ペリチニブ（ＥＫＢ５６９）；アファチニブ（ジロトリフ（登録商標））；ネラチニブ（ＨＫＩ－２７２）；Ｎ－［４－［［１－［（３－フルオロフェニル）メチル］－１Ｈ－インダゾール－５－イル］アミノ］－５－メチルピロロ［２，１－ｆ］［１，２，４］トリアジン－６－イル］－カルバミン酸、（３Ｓ）－３－モルホリニルメチルエステル（ＢＭＳ５９９６２６）；Ｎ－（３，４－ジクロロ－２－フルオロフェニル）－６－メトキシ－７－［［（３ａα、５β、６ａα）－オクタヒドロ－２－メチルシクロペンタ［ｃ］ピロール－５－イル］メトキシ］－４－キナゾリンアミン（ＸＬ６４７、ＣＡＳ ７８１６１３－２３－８）；及び４－［４－［［（１Ｒ）－１－フェニルエチル］アミノ］－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－６－イル］－フェノール（ＰＫＩ１６６、ＣＡＳ１８７７２４－６１－４）が含まれるが、これらに限定されない。
ＥＧＦＲ抗体には、セツキシマブ（Ｅｒｂｉｔｕｘ（登録商標））、パニツムマブ（Ｖｅｃｔｉｂｉｘ（登録商標））；マツズマブ（ＥＭＤ－７２０００）；ニモツズマブ（ｈＲ３）；ザルツムマブ；ＴｈｅｒａＣＩＭ ｈ－Ｒ３；ＭＤＸ０４４７（ＣＡＳ３３９１５１－９６－１）；及びｃｈ８０６（ｍＡｂ－８０６、ＣＡＳ９４６４１４－０９－１）が含まれるが、これらに限定されない。
他のＨＥＲ２阻害剤には、ネラチニブ（ＨＫＩ－２７２、（２Ｅ）－Ｎ－［４－［［３－クロロ－４－［（ピリジン－２－イル）メトキシ］フェニル］アミノ］－３－シアノ－７－エトキシキノリン－６－イル］－４－（ジメチルアミノ）ブト－２－エナミド、国際公開第０５／０２８４４３号パンフレットに記載）；ラパチニブ又はラパチニブ二トシル酸塩（Ｔｙｋｅｒｂ（登録商標））；（３Ｒ，４Ｒ）－４－アミノ－１－（（４－（（３－メトキシフェニル）アミノ）ピロロ［２，１－ｆ］［１，２，４］トリアジン－５－イル）メチル）ピペリジン－３－オール（ＢＭＳ６９０５１４）；（２Ｅ）－Ｎ－［４－［（３－クロロ－４－フルオロフェニル）アミノ］－７－［［（３Ｓ）－テトラヒドロ－３－フラニル］オキシ］－６－キナゾリニル］－４－（ジメチルアミノ）－２－ブテンアミド（ＢＩＢＷ－２９９２、ＣＡＳ８５０１４０－７２－６）；Ｎ－［４－［［１－［（３－フルオロフェニル）メチル］－１Ｈ－インダゾール－５－イル］アミノ］－５－メチルピロロ［２，１－ｆ］［１，２，４］トリアジン－６－イル］－カルバミン酸、（３Ｓ）－３－モルホリニルメチルエステル（ＢＭＳ５９９６２６、ＣＡＳ７１４９７１－０９－２）；カネルチニブ二塩酸塩（ＰＤ１８３８０５又はＣＩ－１０３３）；及びＮ－（３，４－ジクロロ－２－フルオロフェニル）－６－メトキシ－７－［［（３ａα、５β、６ａα）－オクタヒドロ－２－メチルシクロペンタ［ｃ］ピロール－５－イル］メトキシ］－４－キナゾリンアミン（ＸＬ６４７、ＣＡＳ ７８１６１３－２３－８）が含まれるが、これらに限定されない。
ＨＥＲ３阻害剤には、ＬＪＭ７１６、ＭＭ－１２１、ＡＭＧ－８８８、ＲＧ７１１６、ＲＥＧＮ－１４００、ＡＶ－２０３、ＭＰ－ＲＭ－１、ＭＭ－１１１、及びＭＥＨＤ－７９４５Ａが含まれるが、これらに限定されない。
ＭＥＴ阻害剤には、カボザンチニブ（ＸＬ１８４、ＣＡＳ ８４９２１７－６８－１）；フォレチニブ（ＧＳＫ１３６３０８９、以前はＸＬ８８０、ＣＡＳ８４９２１７－６４－７）；チバンチニブ（ＡＲＱ１９７、ＣＡＳ１０００８７３－９８－２）；１－（２－ヒドロキシ－２－メチルプロピル）－Ｎ－（５－（７－メトキシキノリン－４－イルオキシ）ピリジン－２－イル）－５－メチル－３－オキソ－２－フェニル－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ピラゾール－４－カルボキサミド（ＡＭＧ４５８）；クリゾチニブ（Ｘａｌｋｏｒｉ（登録商標）、ＰＦ－０２３４１０６６）；（３Ｚ）－５－（２，３－ジヒドロ－１Ｈ－インドール－１－イルスルホニル）－３－（｛３，５－ジメチル－４－［（４－メチルピペラジン－１－イル）カルボニル］－１Ｈ－ピロール－２－イル｝メチレン）－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－インドール－２－オン（ＳＵ１１２７１）；（３Ｚ）－Ｎ－（３－クロロフェニル）－３－（｛３，５－ジメチル－４－［（４－メチルピペラジン－１－イル）カルボニル］－１Ｈ－ピロール－２－イル｝メチレン）－Ｎ－メチル－２－オキソインドリン－５－スルホンアミド（ＳＵ１１２７４）；（３Ｚ）－Ｎ－（３－クロロフェニル）－３－｛［３，５－ジメチル－４－（３－モルホリン－４－イルプロピル）－１Ｈ－ピロール－２－イル］メチレン｝－Ｎ－メチル－２－オキソインドリン－５－スルホンアミド（ＳＵ１１６０６）；６－［ジフルオロ［６－（１－メチル－１Ｈピラゾール－４－イル）－１，２，４－トリアゾロ［４，３－ｂ］ピリダジン－３－イル］メチル］－キノリン（ＪＮＪ３８８７７６０５、ＣＡＳ９４３５４０－７５－８）；２－［４－［１－（キノリン－６－イルメチル）－１Ｈ－［１，２，３］トリアゾロ［４，５－ｂ］ピラジン－６－イル］－１Ｈ－ピラゾール－１－イル］エタノール（ＰＦ０４２１７９０３、ＣＡＳ９５６９０５－２７－４）；Ｎ－（（２Ｒ）－１，４－ジオキサン－２－イルメチル）－Ｎ－メチル－Ｎ’－［３－（１－メチル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）－５－オキソ－５Ｈ－ベンゾ［４，５］シクロヘプタ［１，２－ｂ］ピリジン－７－イル］スルファミド（ＭＫ２４６１、ＣＡＳ９１７８７９－３９－１）；６－［［６－（１－メチル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）－１，２，４－トリアゾロ［４，３－ｂ］ピリダジン３－イル］チオ］－キノリン（ＳＧＸ５２３、ＣＡＳ１０２２１５０－５７－７）；及び（３Ｚ）－５－［［（２，６－ジクロロフェニル）メチル］スルホニル］－３－［［３，５－ジメチル－４－［［（２Ｒ）－２－（１－ピロリジニルメチル）－１－ピロリジニル］カルボニル］－１Ｈ－ピロール－２－イル］メチレン］－１，３－ジヒドロ－２Ｈ－インドール－２－オン（ＰＨＡ６６５７５２、ＣＡＳ４７７５７５－５６－７）が含まれるが、これらに限定されない。
ＩＧＦＲ阻害剤には、ＢＭＳ－７５４８０７、ＸＬ－２２８、ＯＳＩ－９０６、ＧＳＫ０９０４５２９Ａ、Ａ－９２８６０５、ＡＸＬ１７１７、ＫＷ－２４５０、ＭＫ０６４６、ＡＭＧ４７９、ＩＭＣＡ１２、ＭＥＤＩ－５７３、及びＢＩ８３６８４５が含まれるが、これらに限定されない。例えば、総説につき、Ｙｅｅ，ＪＮＣＩ，１０４；９７５（２０１２）を参照されたい。
別の実施形態において、本開示のＺＢＴＢ３２阻害剤は、疾患、例えば癌を処置するために、ＭＥＫ阻害剤、ＢＲＡＦ阻害剤、ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ阻害剤、ＳＨＰ２阻害剤、また、ｍＴＯＲ阻害剤、及びＣＤＫ阻害剤を含むがこれらに限定されない１つ以上の増殖シグナル伝達経路阻害剤と組み合わせて使用される。
例えば、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＥＫ）阻害剤には、ＸＬ－５１８（ＧＤＣ－０９７３としても知られ、ＣＡＳ番号１０２９８７２－２９－４、ＡＣＣ Ｃｏｒｐ．から入手可能）；２－［（２－クロロ－４－ヨードフェニル）アミノ］－Ｎ－（シクロプロピルメトキシ）－３，４－ジフルオロ－ベンズアミド（ＣＩ－１０４０又はＰＤ１８４３５２としても知られ、国際公開第２００００３５４３６号パンフレットに記載）；Ｎ－［（２Ｒ）－２，３－ジヒドロキシプロポキシ］－３，４－ジフルオロ－２－［（２－フルオロ－４－ヨードフェニル）アミノ］－ベンズアミド（ＰＤ０３２５９０１としても知られ、国際公開第２００２００６２１３号パンフレットに記載）；２，３－ビス［アミノ［（２－アミノフェニル）チオ］メチレン］－ブタンジニトリル（Ｕ０１２６としても知られ、米国特許第２，７７９，７８０号明細書に記載）；Ｎ－［３，４－ジフルオロ－２－［（２－フルオロ－４－ヨードフェニル）アミノ］－６－メトキシフェニル］－１－［（２Ｒ）－２，３－ジヒドロキシプロピル］－シクロプロパンスルホンアミド（ＲＤＥＡ１１９又はＢＡＹ８６９７６６としても知られ、国際公開第２００７０１４０１１号パンフレットに記載）；（３Ｓ，４Ｒ，５Ｚ，８Ｓ，９Ｓ，１１Ｅ）－１４－（エチルアミノ）－８，９，１６－トリヒドロキシ－３，４－ジメチル－３，４，９，１９－テトラヒドロ－１Ｈ－２－ベンゾオキサシクロテトラデシン－１，７（８Ｈ）－ジオン］（Ｅ６２０１としても知られて、国際公開第２００３０７６４２４号パンフレットに記載）；２’－アミノ－３’－メトキシフラボン（ＰＤ９８０５９としても知られ、Ｂｉａｆｆｉｎ ＧｍｂＨ＆Ｃｏ．，ＫＧ，Ｇｅｒｍａｎｙから入手可能）；（Ｒ）－３－（２，３－ジヒドロキシプロピル）－６－フルオロ－５－（２－フルオロ－４－ヨードフェニルアミノ）－８－メチルピリド［２，３－ｄ］ピリミジン－４，７（３Ｈ，８Ｈ）－ジオン（ＴＡＫ－７３３、ＣＡＳ１０３５５５５－６３－５）；ピマセルチブ（ＡＳ－７０３０２６、ＣＡＳ１２０４５３１－２６－９）；及びトラメチニブジメチルスルホキシド（ＧＳＫ－１１２０２１２、ＣＡＳ１２０４５３１－２５－８０）が含まれるが、これらに限定されない。
ＢＲＡＦ阻害剤には、ベムラフェニブ（又はＺｅｌｂｏｒａｆ（登録商標）、ＰＬＸ－４０３２、ＣＡＳ９１８５０４－６５－１）、ＧＤＣ－０８７９、ＰＬＸ－４７２０（Ｓｙｍａｎｓｉｓから入手可能）、ダブラフェニブ（又はＧＳＫ２１１８４３６）、ＬＧＸ８１８、ＣＥＰ－３２４９６、ＵＩ－１５２、ＲＡＦ２６５、レゴラフェニブ（ＢＡＹ７３－４５０６）、ＣＣＴ２３９０６５、又はソラフェニブ（又はトシル酸ソラフェニブ、又はＮｅｘａｖａｒ（登録商標））が含まれるが、これらに限定されない。
ホスホイノシチド３－キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤には、４－［２－（１Ｈ－インダゾール－４－イル）－６－［［４－（メチルスルホニル）ピペラジン－１－イル］メチル］チエノ［３，２－ｄ］ピリミジン－４－イル］モルホリン（ＧＤＣ０９４１、ＲＧ７３２１、ＧＮＥ０９４１、ピクトレリシブ、又はピクチリシブとしても知られ、国際公開第０９／０３６０８２号パンフレット及び国際公開第０９／０５５７３０号パンフレットに記載）；トザセルチブ（ＶＸ６８０又はＭＫ－０４５７、ＣＡＳ６３９０８９－５４－６）；（５Ｚ）－５－［［４－（４－ピリジニル）－６－キノリニル］メチレン］－２，４－チアゾリジンジオン（ＧＳＫ１０５９６１５、ＣＡＳ９５８８５２－０１－２）；（１Ｅ，４Ｓ，４ａＲ，５Ｒ，６ａＳ，９ａＲ）－５－（アセチルオキシ）－１－［（ジ－２－プロペニルアミノ）メチレン］－４，４ａ，５，６，６ａ，８，９，９ａ－オクタヒドロ－１１－ヒドロキシ－４－（メトキシメチル）－４ａ，６ａ－ジメチルシクロペンタ［５，６］ナフト［１，２－ｃ］ピラン－２，７，１０（１Ｈ）－トリオン（ＰＸ８６６、ＣＡＳ５０２６３２－６６－８）；８－フェニル－２－（モルホリン－４－イル）－クロメン－４－オン（ＬＹ２９４００２、ＣＡＳ１５４４４７－３６－６）；（Ｓ）－Ｎ１－（４－メチル－５－（２－（１，１，１－トリフルオロ－２－メチルプロパン－２－イル）ピリジン－４－イル）チアゾール－２－イル）ピロリジン－１，２－ジカルボキサミド（ＢＹＬ７１９又はアルペリシブとしても知られる）；２－（４－（２－（１－イソプロピル－３－メチル－１Ｈ－１，２，４－トリアゾール－５－イル）－５，６－ジヒドロベンゾ［ｆ］イミダゾ［１，２－ｄ］［１，４］オキサゼピン－９－イル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－２－メチルプロパンアミド（ＧＤＣ００３２、ＲＧ７６０４、又はタセリシブとしても知られる）が含まれるが、これらに限定されない。
例示的なｍＴＯＲ阻害剤は、例えば、テムシロリムス（Ｔｏｒｉｓｅｌ（登録商標））；リダフォロリムス（以前はデフェロリムスとして既知、（１Ｒ，２Ｒ，４Ｓ）－４－［（２Ｒ）－２－［（１Ｒ，９Ｓ，１２Ｓ，１５Ｒ，１６Ｅ，１８Ｒ，１９Ｒ，２１Ｒ、２３Ｓ，２４Ｅ，２６Ｅ，２８Ｚ，３０Ｓ，３２Ｓ，３５Ｒ）－１，１８－ジヒドロキシ－１９，３０－ジメトキシ－１５，１７，２１，２３、２９，３５－ヘキサメチル－２，３，１０，１４，２０－ペンタオキソ－１１，３６－ジオキサ－４－アザトリシクロ［３０．３．１．０４，９］ヘキサトリアコンタ－１６，２４，２６，２８－テトラエン－１２－イル］プロピル］－２－メトキシシクロヘキシルジメチルホスフィネート、ＡＰ２３５７３及びＭＫ８６６９としても知られ、国際公開第０３／０６４３８３に記載）；エベロリムス（アフィニトール（登録商標）又はＲＡＤ００１）；ラパマイシン（ＡＹ２２９８９、シロリムス（登録商標））；セマピモド（ＣＡＳ １６４３０１－５１－３）；（５－｛２，４－ビス［（３Ｓ）－３－メチルモルホリン－４－イル］ピリド［２，３－ｄ］ピリミジン－７－イル｝－２－メトキシフェニル）メタノール（ＡＺＤ８０５５）；２－アミノ－８－［ｔｒａｎｓ－４－（２－ヒドロキシエトキシ）シクロヘキシル］－６－（６－メトキシ－３－ピリジニル）－４－メチル－ピリド［２，３－ｄ］ピリミジン－７（８Ｈ）－オン（ＰＦ０４６９１５０２、ＣＡＳ １０１３１０１－３６－４）；及びＮ２－［１，４－ジオキソ－４－［［４－（４－オキソ－８－フェニル－４Ｈ－１－ベンゾピラン－２－イル）モルホリニウム－４－イル］メトキシ］ブチル］－Ｌ－アルギニルグリシル－Ｌ－α－アスパルチルＬ－セリン－（配列番号３２０１）、分子内塩（ＳＦ１１２６、ＣＡＳ ９３６４８７－６７－１）を含むが、これらに限定されない。
ＣＤＫ阻害剤には、限定されないが、パルボシクリブ（ＰＤ－０３３２９９１、Ｉｂｒａｎｃｅ（登録商標）、６－アセチル－８－シクロペンチル－５－メチル－２－｛［５－（１－ピペラジニル）－２－ピリジニル］アミノ｝ピリド［２，３－ｄ］ピリミジン－７（８Ｈ）－オンとしても知られる）が含まれる。
更に別の実施形態において、本開示のＺＢＴＢ３２阻害剤、又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体は、疾患、例えば癌の処置のために、ＩＡＰ阻害剤、ＢＣＬ２阻害剤、ＭＣＬ１阻害剤、ＴＲＡＩＬ剤、ＣＨＫ阻害剤を含むがこれらに限定されない、１つ以上のアポトーシス促進剤と組み合わせて使用される。
例えば、ＩＡＰ阻害剤には、ＬＣＬ１６１、ＧＤＣ－０９１７、ＡＥＧ－３５１５６、ＡＴ４０６、及びＴＬ３２７１１が含まれるが、これらに限定されない。ＩＡＰ阻害剤の他の例には、限定されないが、国際公開第０４／００５２８４号パンフレット、国際公開第０４／００７５２９号パンフレット、国際公開第０５／０９７７９１号パンフレット、国際公開第０５／０６９８９４号パンフレット、国際公開第０５／０６９８８８号パンフレット、国際公開第０５／０９４８１８号パンフレット、米国特許出願公開第２００６／００１４７００号明細書、米国特許出願公開第２００６／００２５３４７号明細書、国際公開第０６／０６９０６３号パンフレット、国際公開第０６／０１０１１８号パンフレット、国際公開第０６／０１７２９５号パンフレット、及び国際公開第０８／１３４６７９号パンフレットに開示されるものが含まれ、これらは全て、参照により本明細書に組み込まれる。
ＢＣＬ－２阻害剤には、４－［４－［［２－（４－クロロフェニル）－５，５－ジメチル－１－シクロヘキセン－１－イル］メチル］－１－ピペラジニル］－Ｎ－［［４－［［（１Ｒ）－３－（４－モルホリニル）－１－［（フェニルチオ）メチル］プロピル］アミノ］－３－［（トリフルオロメチル）スルホニル］フェニル］スルホニル］ベンズアミド（ＡＢＴ－２６３としても知られ、国際公開第０９／１５５３８６号パンフレットに記載）；テトロカルシンＡ；アンチマイシン；ゴシポール（（－）ＢＬ－１９３）；オバトクラックス；エチル－２－アミノ－６－シクロペンチル－４－（１－シアノ－２－エトキシ－２－オキソエチル）－４Ｈクロモン－３－カルボキシレート（ＨＡ１４－１）；オブリメルセン（Ｇ３１３９、Ｇｅｎａｓｅｎｓｅ（登録商標））；Ｂａｋ ＢＨ３ペプチド；（－）－ゴシポール酢酸（ＡＴ－１０１）；４－［４－［（４’－クロロ［１，１’－ビフェニル］－２－イル）メチル］－１－ピペラジニル］－Ｎ－［［４－［［（１Ｒ）－３－（ジメチルアミノ）－１－［（フェニルチオ）メチル］プロピル］アミノ］－３－ニトロフェニル］スルホニル］－ベンズアミド（ＡＢＴ－７３７、ＣＡＳ８５２８０８－０４－９）；及びナビトクラックス（ＡＢＴ－２６３、ＣＡＳ９２３５６４－５１－６）が含まれるが、これらに限定されない。
プロアポトーシス受容体アゴニスト（ＰＡＲＡ）は、ＤＲ４（ＴＲＡＩＬＲ１）及びＤＲ５（ＴＲＡＩＬＲ２）を含み、デュラネルミン（ＡＭＧ－９５１、ＲｈＡｐｏ２Ｌ／ＴＲＡＩＬ）；マパツムマブ（ＨＲＳ－ＥＴＲ１、ＣＡＳ６５８０５２－０９－６）；レキサツムマブ（ＨＧＳ－ＥＴＲ２、ＣＡＳ８４５８１６－０２－６）；アポマブ（Ａｐｏｍａｂ（登録商標））；コナツムマブ（ＡＭＧ６５５、ＣＡＳ８９６７３１－８２－１）；及びチガツズマブ（ＣＳ１００８、ＣＡＳ９４６４１５－３４－５、第一三共から入手可能）を含むが、これらに限定されない。
チェックポイントキナーゼ（ＣＨＫ）阻害剤には、７－ヒドロキシスタウロスポリン（ＵＣＮ－０１）；６－ブロモ－３－（１－メチル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）－５－（３Ｒ）－３－ピペリジニルピラゾロ［１，５－ａ］ピリミジン－７－アミン（ＳＣＨ９００７７６、ＣＡＳ８９１４９４－６３－６）；５－（３－フルオロフェニル）－３－ウレイドチオフェン－２－カルボン酸Ｎ－［（Ｓ）－ピペリジン－３－イル］アミド（ＡＺＤ７７６２、ＣＡＳ８６０３５２－０１－８）；４－［（（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクト－３－イル）アミノ］－３－（１Ｈ－ベンゾイミダゾール－２－イル）－６－クロロキノリン－２（１Ｈ）－オン（ＣＨＩＲ１２４、ＣＡＳ４０５１６８－５８－３）；７－アミノダクチノマイシン（７－ＡＡＤ）、イソグラヌラチミド、デブロモヒメニアルジシン；Ｎ－［５－ブロモ－４－メチル－２－［（２Ｓ）－２－モルホリニルメトキシ］－フェニル］－Ｎ’－（５－メチル－２－ピラジニル）ウレア（ＬＹ２６０３６１８、ＣＡＳ９１１２２２－４５－２）；スルホラファン（ＣＡＳ４４７８－９３－７、４－メチルスルフィニルブチルイソチオシアネート）；９，１０，１１，１２－テトラヒドロ－９，１２－エポキシ－１Ｈ－ジインドロ［１，２，３－ｆｇ：３’，２’，１’－ｋｌ］ピロロ［３，４－ｉ］［１，６］ベンゾジアゾシン－１，３（２Ｈ）－ジオン（ＳＢ－２１８０７８、ＣＡＳ１３５８９７－０６－２）；及びＴＡＴ－Ｓ２１６Ａ（ＹＧＲＫＫＲＲＱＲＲＲＬＹＲＳＰＡＭＰＥＮＬ（配列番号３３））、及びＣＢＰ５０１（（ｄ－Ｂｐａ）ｓｗｓ（ｄ－Ｐｈｅ－Ｆ５）（ｄ－Ｃｈａ）ｒｒｒｑｒｒ）が含まれるが、これらに限定されない。
更なる実施形態において、本開示のＺＢＴＢ３２阻害剤、又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体は、疾患、例えば癌の処置のために、１つ以上の免疫調節剤（例えば、１つ以上の共刺激分子のアクティベーター又は免疫チェックポイント分子の阻害剤）と組み合わせて使用される。
特定の実施形態において、免疫調節剤は、共刺激分子のアクティベーターである。一実施形態において、共刺激分子のアゴニストは、ＯＸ４０、ＣＤ２、ＣＤ２７、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ－１、ＬＦＡ－１（ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８）、ＩＣＯＳ（ＣＤ２７８）、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＧＩＴＲ、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＢＡＦＦＲ、ＨＶＥＭ、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、ＳＬＡＭＦ７、ＮＫｐ８０、ＣＤ１６０、Ｂ７－Ｈ３又はＣＤ８３リガンドのアゴニスト（例えば、アゴニスト抗体又はその抗原結合フラグメント、又は可溶性融合物）から選択される。
ＧＩＴＲアゴニスト
いくつかの実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、ＺＢＴＢ３２阻害剤、又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体と組み合わせて、疾患、例えば癌を処置するために使用される。いくつかの実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、ＧＷＮ３２３（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＢＭＳ－９８６１５６、ＭＫ－４１６６又はＭＫ－１２４８（Ｍｅｒｃｋ）、ＴＲＸ５１８（Ｌｅａｐ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、ＩＮＣＡＧＮ１８７６（Ｉｎｃｙｔｅ／Ａｇｅｎｕｓ）、ＡＭＧ２２８（Ａｍｇｅｎ）又はＩＮＢＲＸ－１１０（Ｉｎｈｉｂｒｘ）である。
例示的なＧＩＴＲアゴニスト
一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、抗ＧＩＴＲ抗体分子である。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、その全体が参照により組み込まれる、２０１６年４月１４日に公開された「Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ ａｎｄ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｆ Ｕｓｅ ｆｏｒ Ａｕｇｍｅｎｔｅｄ Ｉｍｍｕｎｅ Ｒｅｓｐｏｎｓｅ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ」と題する国際公開第２０１６／０５７８４６号パンフレットに記載されている抗ＧＩＴＲ抗体分子である。
一実施形態において、抗ＧＩＴＲ抗体分子は、表１２に示されるアミノ酸配列を含む重鎖及び軽鎖可変領域からの（例えば、表１２に開示されるＭＡＢ７の重鎖及び軽鎖可変領域配列からの）、又は表１２に示されるヌクレオチド配列によってコードされる、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、又は６つの相補性決定領域（ＣＤＲ）（又は集合的に全てのＣＤＲ）を含む。いくつかの実施形態において、ＣＤＲは、Ｋａｂａｔの定義に従う（例えば、表１２に示されるとおり）。いくつかの実施形態において、ＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａの定義に従う（例えば、表１２に示されるとおり）。一実施形態において、１つ以上のＣＤＲ（又は集合的に全てのＣＤＲ）は、表１２に示される、又は表１２に示されるヌクレオチド配列によってコードされる、アミノ酸配列に対して、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ又はそれを超える変化、例えば、アミノ酸置換（例えば、保存的アミノ酸置換）又は欠失を有する。
一実施形態において、抗ＧＩＴＲ抗体分子は、それぞれ表１２に開示される、配列番号９のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号１１のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、及び配列番号１３のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；並びに配列番号３０１６のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号１６のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、及び配列番号１８のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。
一実施形態において、抗ＧＩＴＲ抗体分子は、配列番号１のアミノ酸配列、又は配列番号１と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＨを含む。一実施形態において、抗ＧＩＴＲ抗体分子は、配列番号２のアミノ酸配列、又は配列番号２と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＬを含む。一実施形態において、抗ＧＩＴＲ抗体分子は、配列番号１のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号２のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一実施形態において、抗体分子は、配列番号５のヌクレオチド配列、又は配列番号５と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるヌクレオチド配列によってコードされる、ＶＨを含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号６のヌクレオチド配列、又は配列番号６と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるヌクレオチド配列によってコードされる、ＶＬを含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号５のヌクレオチド配列によってコードされるＶＨ、及び配列番号６のヌクレオチド配列によってコードされるＶＬを含む。
一実施形態において、抗ＧＩＴＲ抗体分子は、配列番号３のアミノ酸配列、又は配列番号３と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるアミノ酸配列を含む、重鎖を含む。一実施形態において、抗ＧＩＴＲ抗体分子は、配列番号４のアミノ酸配列、又は配列番号４と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるアミノ酸配列を含む、軽鎖を含む。一実施形態において、抗ＧＩＴＲ抗体分子は、配列番号３のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号４のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
一実施形態において、抗体分子は、配列番号７のヌクレオチド配列、又は配列番号７と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるヌクレオチド配列によってコードされる、重鎖を含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号８のヌクレオチド配列、又は配列番号８と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるヌクレオチド配列によってコードされる、軽鎖を含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号７のヌクレオチド配列によってコードされる重鎖、及び配列番号８のヌクレオチド配列によってコードされる軽鎖を含む。
本明細書に記載の抗体分子は、その全体が参照により組み込まれる国際公開第２０１６／０５７８４６号パンフレットに記載のベクター、宿主細胞、及び方法によって作製することができる。
Figure 2023529211000183
Figure 2023529211000184
Figure 2023529211000185
他の例示的なＧＩＴＲアゴニスト
一実施形態において、抗ＧＩＴＲ抗体分子は、ＢＭＳ９８６１５６又はＢＭＳ９８６１５６としても知られるＢＭＳ－９８６１５６（Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）である。ＢＭＳ－９８６１５６及び他の抗ＧＩＴＲ抗体は、例えば、参照によりその全体が組み込まれる米国特許第９，２２８，０１６号明細書及び国際公開第２０１６／１９６７９２号パンフレットに開示されている。一実施形態において、抗ＧＩＴＲ抗体分子は、ＢＭＳ－９８６１５６の１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列、又は重鎖若しくは軽鎖配列（例えば、表１３に開示されるようなもの）を含む。
一実施形態において、抗ＧＩＴＲ抗体分子は、ＭＫ－４１６６又はＭＫ－１２４８（Ｍｅｒｃｋ）である。ＭＫ－４１６６、ＭＫ－１２４８及び他の抗ＧＩＴＲ抗体は、例えば、参照によりその全体が組み込まれる米国特許第８，７０９，４２４号明細書、国際公開第２０１１／０２８６８３号パンフレット、国際公開第２０１５／０２６６８４号パンフレット、及びＭａｈｎｅ ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．２０１７；７７（５）：１１０８－１１１８に開示されている。一実施形態において、抗ＧＩＴＲ抗体分子は、ＭＫ－４１６６又はＭＫ－１２４８の１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列、又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
一実施形態において、抗ＧＩＴＲ抗体分子は、ＴＲＸ５１８（ＬｅａｐＴｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）である。ＴＲＸ５１８及び他の抗ＧＩＴＲ抗体は、例えば、参照によりその全体が組み込まれる米国特許第７，８１２，１３５号明細書、米国特許第８，３８８，９６７号明細書、米国特許第９，０２８，８２３号明細書、国際公開第２００６／１０５０２１号パンフレット、及びＰｏｎｔｅ Ｊ ｅｔ ａｌ．（２０１０）Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ；１３５：Ｓ９６に開示されている。一実施形態において、抗ＧＩＴＲ抗体分子は、ＴＲＸ５１８の１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列、又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
一実施形態において、抗ＧＩＴＲ抗体分子は、ＩＮＣＡＧＮ１８７６（Ｉｎｃｙｔｅ／Ａｇｅｎｕｓ）である。ＩＮＣＡＧＮ１８７６及び他の抗ＧＩＴＲ抗体は、例えば、参照によりその全体が組み込まれる米国特許出願公開第２０１５／０３６８３４９号明細書及び国際公開第２０１５／１８４０９９号パンフレットに開示されている。一実施形態において、抗ＧＩＴＲ抗体分子は、ＩＮＣＡＧＮ１８７６の１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列、又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
一実施形態において、抗ＧＩＴＲ抗体分子は、ＡＭＧ２２８（Ａｍｇｅｎ）である。ＡＭＧ２２８及び他の抗ＧＩＴＲ抗体は、例えば、参照によりその全体が組み込まれる米国特許第９，４６４，１３９号明細書及び国際公開第２０１５／０３１６６７号パンフレットに開示されている。一実施形態において、抗ＧＩＴＲ抗体分子は、ＡＭＧ ２２８の１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列、又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
一実施形態において、抗ＧＩＴＲ抗体分子は、ＩＮＢＲＸ－１１０（Ｉｎｈｉｂｒｘ）である。ＩＮＢＲＸ－１１０及び他の抗ＧＩＴＲ抗体は、例えば、参照によりその全体が組み込まれる米国特許出願公開第２０１７／００２２２８４号明細書及び国際公開第２０１７／０１５６２３号パンフレットに開示されている。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、ＩＮＢＲＸ－１１０の１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列、又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニスト（例えば、融合タンパク質）は、ＭＥＤＩ１８７３としても知られるＭＥＤＩ １８７３（ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ）である。ＭＥＤＩ１８７３及び他のＧＩＴＲアゴニストは、例えば、参照によりその全体が組み込まれる米国特許出願公開第２０１７／００７３３８６号明細書、国際公開第２０１７／０２５６１０号パンフレット、及びＲｏｓｓ ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２０１６；７６（１４ Ｓｕｐｐｌ）：Ａｂｓｔｒａｃｔ ｎｒ ５６１に開示されている。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、ＭＥＤＩ１８７３のグルココルチコイド誘導性ＴＮＦ受容体リガンド（ＧＩＴＲＬ）のＩｇＧＦｃドメイン、機能的多量体化ドメイン、及び受容体結合ドメインのうちの１つ以上を含む。
更なる公知のＧＩＴＲアゴニスト（例えば、抗ＧＩＴＲ抗体）には、例えば、その全体が参照により組み込まれる国際公開第２０１６／０５４６３８号パンフレットに記載されているものが含まれる。
一実施形態において、抗ＧＩＴＲ抗体は、本明細書に記載の抗ＧＩＴＲ抗体の１つとの結合について競合する、及び／又はＧＩＴＲ上の同じエピトープに結合する、抗体である。
一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、ＧＩＴＲシグナル伝達経路を活性化するペプチドである。一実施形態において、ＧＩＴＲアゴニストは、定常領域（例えば、免疫グロブリン配列のＦｃ領域）に融合されたイムノアドヘシン結合フラグメント（例えば、ＧＩＴＲＬの細胞外又はＧＩＴＲ結合部分を含むイムノアドヘシン結合フラグメント）である。
Figure 2023529211000186
特定の実施形態において、免疫調節剤は、免疫チェックポイント分子の阻害剤である。一実施形態において、免疫調節剤は、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＣＴＬＡ４、ＴＩＭ３、ＬＡＧ３、ＶＩＳＴＡ、ＢＴＬＡ、ＴＩＧＩＴ、ＬＡＩＲ１、ＣＤ１６０、２Ｂ４及び／又はＴＧＦＲベータの阻害剤である。一実施形態において、免疫チェックポイント分子の阻害剤は、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＬＡＧ－３、ＴＩＭ－３、若しくはＣＴＬＡ４、又はそれらの任意の組み合わせを阻害する。「阻害」又は「阻害剤」という用語は、所与の分子、例えば免疫チェックポイント阻害剤の、特定のパラメータ、例えば活性の低下を含む。例えば、少なくとも５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％又はそれを超える活性、例えばＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１活性の阻害は、この用語に含まれる。したがって、阻害は１００％である必要はない。
阻害分子の阻害は、ＤＮＡ、ＲＮＡ、又はタンパク質レベルで実施できる。いくつかの実施形態において、阻害核酸（例えば、ｄｓＲＮＡ、ｓｉＲＮＡ又はｓｈＲＮＡ）を使用して、阻害分子の発現を阻害することができる。他の実施形態において、阻害シグナルの阻害剤は、阻害分子に結合する、ポリペプチド、例えば可溶性リガンド（例えば、ＰＤ－１－Ｉｇ又はＣＴＬＡ－４Ｉｇ）、又は抗体若しくはその抗原結合フラグメント；例えば、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＣＴＬＡ４、ＴＩＭ３、ＬＡＧ３、ＶＩＳＴＡ、ＢＴＬＡ、ＴＩＧＩＴ、ＬＡＩＲ１、ＣＤ１６０、２Ｂ４及び／又はＴＧＦＲベータに結合する、抗体又はその断片（本明細書では「抗体分子」とも称される）又はそれらの組み合わせである。
一実施形態において、抗体分子は、全長抗体又はそのフラグメント（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖフラグメント（ｓｃＦｖ））である。更に他の実施形態において、抗体分子は、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＤ、及びＩｇＥの重鎖定常領域から選択される、特に、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４の重鎖定常領域、更に特に、ＩｇＧ１又はＩｇＧ４（例えば、ヒトＩｇＧ１又はＩｇＧ４）の重鎖定常領域から選択される重鎖定常領域（Ｆｃ）を有する。一実施形態において、重鎖定常領域は、ヒトＩｇＧ１又はヒトＩｇＧ４である。一実施形態において、定常領域は、抗体分子の特性を改変するために（例えば、Ｆｃ受容体結合、抗体グリコシル化、システイン残基の数、エフェクター細胞機能、又は補体機能の１つ以上を増加又は減少させるために）、変更、例えば変異される。
特定の実施形態において、抗体分子は、二重特異性又は多重特異性抗体分子の形態である。一実施形態において、二重特異性抗体分子は、ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１に対する第１の結合特異性、及び第２の結合特異性、例えば、ＴＩＭ－３、ＬＡＧ－３、又はＰＤ－Ｌ２に対する第２の結合特異性を有する。一実施形態において、二重特異性抗体分子は、ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１及びＴＩＭ－３に結合する。別の実施形態において、二重特異性抗体分子は、ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１及びＬＡＧ－３に結合する。別の実施形態において、二重特異性抗体分子は、ＰＤ－１及びＰＤ－Ｌ１に結合する。更に別の実施形態において、二重特異性抗体分子は、ＰＤ－１及びＰＤ－Ｌ２に結合する。別の実施形態において、二重特異性抗体分子は、ＴＩＭ－３及びＬＡＧ－３に結合する。前述の分子の任意の組み合わせは、多重特異性抗体分子、例えば、ＰＤ－１又はＰＤ－１に対する第１の結合特異性と、ＴＩＭ－３、ＬＡＧ－３、又はＰＤ－Ｌ２の２つ以上に対する第２及び第３の結合特異性とを含む、三重特異性抗体で行うことができる。
特定の実施形態において、免疫調節剤は、ＰＤ－１、例えばヒトＰＤ－１の阻害剤である。別の実施形態において、免疫調節剤は、ＰＤ－Ｌ１、例えばヒトＰＤ－Ｌ１の阻害剤である。一実施形態において、ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１の阻害剤は、ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１に対する抗体分子である。ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１阻害剤は、単独で、又は他の免疫調節剤と組み合わせて、例えばＬＡＧ－３、ＴＩＭ－３又はＣＴＬＡ４の阻害剤と組み合わせて投与することができる。例示的な実施形態において、ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１の阻害剤、例えば抗ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１抗体分子は、ＬＡＧ－３阻害剤、例えば抗ＬＡＧ－３抗体分子と組み合わせて投与される。別の実施形態において、ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１の阻害剤、例えば抗ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１抗体分子は、ＴＩＭ－３阻害剤、例えば抗ＴＩＭ－３抗体分子と組み合わせて投与される。更に他の実施形態において、ＰＤ－１又はＰＤ－Ｌ１の阻害剤、例えば抗ＰＤ－１抗体分子は、ＬＡＧ－３阻害剤、例えば抗ＬＡＧ－３抗体分子、及びＴＩＭ－３阻害剤、例えば抗ＴＩＭ－３抗体分子と組み合わせて投与される。
ＰＤ－１阻害剤（例えば、ＰＤ－Ｌ２、ＣＴＬＡ４、ＴＩＭ３、ＬＡＧ３、ＶＩＳＴＡ、ＢＴＬＡ、ＴＩＧＩＴ、ＬＡＩＲ１、ＣＤ１６０、２Ｂ４及び／又はＴＧＦＲの１つ以上）との免疫調節剤の他の組み合わせも、本開示の範囲内である。当技術分野で公知であるか、又は本明細書に開示されている任意の抗体分子は、チェックポイント分子の阻害剤の前述の組み合わせで使用することができる。
ＣＴＬＡ－４阻害剤
いくつかの実施形態において、本開示のＺＢＴＢ３２阻害剤、又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体は、疾患、例えば癌を処置するためにＣＴＬＡ－４阻害剤と組み合わせて使用される。いくつかの実施形態において、ＰＤ－１阻害剤は、イピリムマブ（ＭＤＸ－０１０、ＭＤＸ－１０１、又はヤーボイ，Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）、トレメリルマブ（チシリムマブ，Ｐｆｉｚｅｒ／ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、ＡＧＥＮ１１８１（Ａｇｅｎｕｓ）、ザリフレリマブ（ＡＧＥＮ１８８４、Ａｇｅｎｕｓ）、ＩＢＩ３１０（Ｉｎｎｏｖｅｎｔ Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ）から選択される。
ＰＤ－１阻害剤
いくつかの実施形態において、本開示のＺＢＴＢ３２阻害剤、又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体は、疾患、例えば癌を処置するためにＰＤ－１阻害剤と組み合わせて使用される。いくつかの実施形態において、ＰＤ－１阻害剤は、ＰＤＲ００１（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ニボルマブ（Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）、ペンブロリズマブ（Ｍｅｒｃｋ＆Ｃｏ）、ピジリズマブ（ＣｕｒｅＴｅｃｈ）、ＭＥＤＩ０６８０（Ｍｅｄｉｍｍｕｎｅ）、セミプリマブ（ＲＥＧＮ２８１０、Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ）、ドスタルリマブ（ＴＳＲ－０４２、Ｔｅｓａｒｏ）、ＰＦ－０６８０１５９１（Ｐｆｉｚｅｒ）、チスレリズマブ（ＢＧＢ－Ａ３１７、Ｂｅｉｇｅｎｅ）、ＢＧＢ－１０８（Ｂｅｉｇｅｎｅ）、ＩＮＣＳＨＲ１２１０（Ｉｎｃｙｔｅ）、バルスチリマブ（ＡＧＥＮ２０３５、Ａｇｅｎｕｓ）、シンチリマブ（ＩｎｎｏＶｅｎｔ）、トリパリマブ（Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｊｕｎｓｈｉ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）、カムレリズマブ（Ｊｉａｎｇｓｕ Ｈｅｎｇｒｕｉ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｃｏ．）、又はＡＭＰ－２２４（Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ）から選択される。
例示的なＰＤ－１阻害剤
一実施形態において、ＰＤ－１阻害剤は、抗ＰＤ－１抗体分子である。一実施形態において、ＰＤ－１阻害剤は、引用によりその全体が本明細書に組み込まれる、「Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ ｔｏ ＰＤ－１ ａｎｄ Ｕｓｅｓ Ｔｈｅｒｅｏｆ」と題された２０１５年７月３０日公開の米国特許出願公開第２０１５／０２１０７６９号明細書に記載されるような抗ＰＤ－１抗体分子である。
一実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、表１４に示されるアミノ酸配列を含む重鎖及び軽鎖可変領域からの（例えば、表１４に開示されるＢＡＰ０４９－クローン－Ｅ又はＢＡＰ０４９－クローン－Ｂの重鎖及び軽鎖可変領域配列からの）、又は表１４に示されるヌクレオチド配列によってコードされる、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、又は６つの相補性決定領域（ＣＤＲ）（又は集合的に全てのＣＤＲ）を含む。いくつかの実施形態において、ＣＤＲは、Ｋａｂａｔの定義に従う（例えば、表１４に示されるとおり）。いくつかの実施形態において、ＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａの定義に従う（例えば、表１４に示されるとおり）。いくつかの実施形態において、ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａの両方の組み合わせたＣＤＲ定義に従う（例えば、表１４に示されるとおり）。一実施形態において、ＶＨ ＣＤＲ１のＫａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａ ＣＤＲの組み合わせは、アミノ酸配列ＧＹＴＦＴＴＹＷＭＨ（配列番号３１９８）を含む。一実施形態において、１つ以上のＣＤＲ（又は集合的に全てのＣＤＲ）は、表１４に示される、又は表１４に示されるヌクレオチド配列によってコードされる、アミノ酸配列に対して、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ又はそれを超える変化、例えば、アミノ酸置換（例えば、保存的アミノ酸置換）又は欠失を有する。
一実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、それぞれ表１４に開示される、配列番号２２のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号３０１８のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、及び配列番号３０１９のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；並びに配列番号３１のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号３２のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、及び配列番号２８６のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。
一実施形態において、抗体分子は、それぞれ表１４に開示される、配列番号３０３１のヌクレオチド配列によってコードされるＶＨＣＤＲ１、配列番号３０３２のヌクレオチド配列によってコードされるＶＨＣＤＲ２、及び配列番号３０３３のヌクレオチド配列によってコードされるＶＨＣＤＲ３を含む、ＶＨ；並びに配列番号３０３６のヌクレオチド配列によってコードされるＶＬＣＤＲ１、配列番号３０３７のヌクレオチド配列によってコードされるＶＬＣＤＲ２、及び配列番号３０３８のヌクレオチド配列によってコードされるＶＬＣＤＲ３を含む、ＶＬを含む。
一実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、配列番号２７のアミノ酸配列、又は配列番号２７と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＨを含む。一実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、配列番号３０２４のアミノ酸配列、又は配列番号３０２４と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＬを含む。一実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、配列番号３７のアミノ酸配列、又は配列番号３７と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＬを含む。一実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、配列番号２７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号３０２４のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、配列番号２７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号３７のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一実施形態において、抗体分子は、配列番号２８のヌクレオチド配列、又は配列番号２８と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるヌクレオチド配列によってコードされる、ＶＨを含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号３０２７又は３８のヌクレオチド配列、又は配列番号３０２７又は３８と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるヌクレオチド配列によってコードされる、ＶＬを含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号２８のヌクレオチド配列によってコードされるＶＨ、及び配列番号３０２７又は３８のヌクレオチド配列によってコードされるＶＬを含む。
一実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、配列番号２９のアミノ酸配列、又は配列番号２９と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるアミノ酸配列を含む、重鎖を含む。一実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、配列番号３０２９のアミノ酸配列、又は配列番号３０２９と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるアミノ酸配列を含む、軽鎖を含む。一実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、配列番号３９のアミノ酸配列、又は配列番号３９と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるアミノ酸配列を含む、軽鎖を含む。一実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、配列番号２９のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３０２９のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。一実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、配列番号２９のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３９のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
一実施形態において、抗体分子は、配列番号３０のヌクレオチド配列、又は配列番号３０と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるヌクレオチド配列によってコードされる、重鎖を含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号３０３０又は３０２３のヌクレオチド配列、又は配列番号３０３０又は３０２３と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるヌクレオチド配列によってコードされる、軽鎖を含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号３０のヌクレオチド配列によってコードされる重鎖、及び配列番号３０３０又は３０２３のヌクレオチド配列によってコードされる軽鎖を含む。
本明細書に記載の抗体分子は、その全体が参照により組み込まれる米国特許出願公開第２０１５／０２１０７６９号明細書に記載のベクター、宿主細胞、及び方法によって作製することができる。
Figure 2023529211000187
Figure 2023529211000188
Figure 2023529211000189
Figure 2023529211000190
Figure 2023529211000191
Figure 2023529211000192
Figure 2023529211000193
他の例示的なＰＤ－１阻害剤
いくつかの実施形態において、抗ＰＤ－１抗体はニボルマブ（ＣＡＳ登録番号：９４６４１４－９４－４）である。ニボルマブの別名には、ＭＤＸ－１１０６、ＭＤＸ－１１０６－０４、ＯＮＯ－４５３８、ＢＭＳ－９３６５５８、ＯＰＤＩＶＯ（登録商標）などが含まれる。ニボルマブは完全ヒトＩｇＧ４モノクローナル抗体であり、ＰＤ１を特異的に遮断する。ＰＤ１に特異的に結合するニボルマブ（クローン５Ｃ４）及び他のヒトモノクローナル抗体は、参照によりその全体が組み込まれる米国特許第８，００８，４４９明細書号及び国際公開第２００６／１２１１６８号パンフレットに開示されている。一実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、ニボルマブの１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列、又は重鎖若しくは軽鎖配列（例えば、表１５に開示されるようなもの）を含む。
他の実施形態において、抗ＰＤ－１抗体はペンブロリズマブである。ペンブロリズマブ（商品名ＫＥＹＴＲＵＤＡ、以前はランブロリズマブ、メルク３７４５、ＭＫ－３４７５、又はＳＣＨ－９００４７５としても知られる）は、ＰＤ１に結合するヒト化ＩｇＧ４モノクローナル抗体である。ペンブロリズマブは、例えば、参照によりその全体が組み込まれるＨａｍｉｄ，Ｏ．ｅｔ ａｌ．（２０１３）Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ３６９（２）：１３４－４４、国際公開第２００９／１１４３３５号パンフレット、及び米国特許第８，３５４，５０９号明細書に開示されている。一実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、ペンブロリズマブの１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列、又は重鎖若しくは軽鎖配列（例えば、表１５に開示されるようなもの）を含む。
いくつかの実施形態において、抗ＰＤ－１抗体はピジリズマブである。ピジリズマブ（ＣＴ－０１１；Ｃｕｒｅ Ｔｅｃｈ）は、ＰＤ１に結合するヒト化ＩｇＧ１ｋモノクローナル抗体である。ピジリズマブ及び他のヒト化抗ＰＤ－１モノクローナル抗体は、参照によりその全体が組み込まれる国際公開第２００９／１０１６１１号パンフレットに開示されている。一実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、ピジリズマブの１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列、又は重鎖若しくは軽鎖配列（例えば、表１５に開示されるようなもの）を含む。
他の抗ＰＤ１抗体は、米国特許第８，６０９，０８９号明細書、米国特許出願公開第２０１００２８３３０号明細書、及び／又は米国特許出願公開第２０１２０１１４６４９号明細書に開示されており、参照によりその全体が組み込まれる。他の抗ＰＤ１抗体は、ＡＭＰ５１４（Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ）を含む。
一実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、ＡＭＰ－５１４としても知られるＭＥＤＩ０６８０（Ｍｅｄｉｍｍｕｎｅ）である。ＭＥＤＩ０６８０及び他の抗ＰＤ－１抗体は、参照によりその全体が組み込まれる米国特許第９，２０５，１４８号明細書及び国際公開第２０１２／１４５４９３号パンフレットに開示されている。一実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、ＭＥＤＩ０６８０の１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列、又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
一実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、ＲＥＧＮ２８１０としても知られるセミプリマブ（Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ）である。一実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、ＲＥＧＮ２８１０の１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列、又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
一実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、ＰＦ－０６８０１５９１（Ｐｆｉｚｅｒ）である。一実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、ＰＦ－０６８０１５９１の１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列、又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
一実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、ＢＧＢ－Ａ３１７又はＢＧＢ－１０８としても知られるチスレリズマブ（Ｂｅｉｇｅｎｅ）である。一実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、ＢＧＢ－Ａ３１７又はＢＧＢ－１０８の１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列、又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
一実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、ＩＮＣＳＨＲ０１２１０又はＳＨＲ－１２１０としても知られるＩＮＣＳＨＲ１２１０（Ｉｎｃｙｔｅ）である。一実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、ＩＮＣＳＨＲ１２１０の１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列、又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
一実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、ＴＳＲ－０４２としても知られ、ＡＮＢ０１１としても知られるドスタルリマブ（Ｔｅｓａｒｏ）である。一実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、ＴＳＲ－０４２の１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列、又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
一実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、ＡＧＥＮ２０３５としても知られるバルスチリマブ（Ａｇｅｎｕｓ）である。一実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、バルスチリマブの１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列、又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
一実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、シンチリマブ（ＩｎｎｏＶｅｎｔ）である。一実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、シンチリマブの１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列、又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
一実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、トリパリマブ（Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｊｕｎｓｈｉ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）である。一実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、トリパリマブの１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列、又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
一実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、カムレリズマブ（Ｊｉａｎｇｓｕ Ｈｅｎｇｒｕｉ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｃｏ．）である。一実施形態において、抗ＰＤ－１抗体分子は、カムレリズマブの１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列、又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
更なる公知の抗ＰＤ－１抗体には、例えば、参照によりその全体が組み込まれる国際公開第２０１５／１１２８００号パンフレット、国際公開第２０１６／０９２４１９号パンフレット、国際公開第２０１５／０８５８４７号パンフレット、国際公開第２０１４／１７９６６４号パンフレット、国際公開第２０１４／１９４３０２号パンフレット、国際公開第２０１４／２０９８０４号パンフレット、国際公開第２０１５／２００１１９号パンフレット、米国特許第８，７３５，５５３号明細書、米国特許第７，４８８，８０２号明細書、米国特許第８，９２７，６９７号明細書、米国特許第８，９９３，７３１号明細書、及び米国特許第９，１０２，７２７号明細書に記載されるものが含まれる。
一実施形態において、抗ＰＤ－１抗体は、本明細書に記載の抗ＰＤ－１抗体の１つとの結合について競合する、及び／又はＰＤ－１上の同じエピトープに結合する、抗体である。
一実施形態において、ＰＤ－１阻害剤は、例えば、参照によりその全体が組み込まれる米国特許第８，９０７，０５３号明細書に記載されているように、ＰＤ－１シグナル伝達経路を阻害するペプチドである。いくつかの実施形態において、ＰＤ－１阻害剤は、イムノアドヘシン（例えば、定常領域（例えば、免疫グロブリン配列のＦｃ領域）に融合されたＰＤ－Ｌ１又はＰＤ－Ｌ２の細胞外又はＰＤ－１結合部分を含むイムノアドヘシン）である。いくつかの実施形態において、ＰＤ－１阻害剤は、ＡＭＰ－２２４（Ｂ７－ＤＣＩｇ（Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ）、例えば、参照によりその全体が組み込まれる国際公開第２０１０／０２７８２７号パンフレット及び国際公開第２０１１／０６６３４２号パンフレットに開示される）である。
Figure 2023529211000194
ＰＤ－Ｌ１阻害剤
いくつかの実施形態において、本開示のＺＢＴＢ３２阻害剤、又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体は、疾患、例えば癌を処置するためにＰＤ－Ｌ１阻害剤と組み合わせて使用される。いくつかの実施形態において、ＰＤ－Ｌ１阻害剤は、ＦＡＺ０５３（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、アテゾリズマブ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｒｏｃｈｅ）、アベルマブ（Ｍｅｒｃｋ Ｓｅｒｏｎｏ及びＰｆｉｚｅｒ）、デュルバルマブ（ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ／ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、又はＢＭＳ－９３６５５９（Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）から選択される。
例示的なＰＤ－Ｌ１阻害剤
一実施形態において、ＰＤ－Ｌ１阻害剤は、抗ＰＤ－Ｌ１抗体分子である。一実施形態において、ＰＤ－Ｌ１阻害剤は、引用によりその全体が本明細書に組み込まれる、「“Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ ｔｏ ＰＤ－Ｌ１ ａｎｄ Ｕｓｅｓ Ｔｈｅｒｅｏｆ”」と題された２０１６年４月２１日公開の米国特許出願公開第２０１６／０１０８１２３号明細書に開示されるような抗ＰＤ－Ｌ１抗体分子である。
一実施形態において、抗ＰＤ－Ｌ１抗体分子は、表１６に示されるアミノ酸配列を含む重鎖及び軽鎖可変領域からの（例えば、表１６に開示されるＢＡＰ０５８－クローンＯ又はＢＡＰ０５８－クローンＮの重鎖及び軽鎖可変領域配列からの）、又は表１６に示されるヌクレオチド配列によってコードされる、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、又は６つの相補性決定領域（ＣＤＲ）（又は集合的に全てのＣＤＲ）を含む。いくつかの実施形態において、ＣＤＲは、Ｋａｂａｔの定義に従う（例えば、表１６に示されるとおり）。いくつかの実施形態において、ＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａの定義に従う（例えば、表１６に示されるとおり）。いくつかの実施形態において、ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａの両方の組み合わせたＣＤＲ定義に従う（例えば、表１６に示されるとおり）。一実施形態において、ＶＨ ＣＤＲ１のＫａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａＣＤＲの組み合わせは、アミノ酸配列ＧＹＴＦＴＳＹＷＭＹ（配列番号３１９９）を含む。一実施形態において、１つ以上のＣＤＲ（又は集合的に全てのＣＤＲ）は、表１６に示される、又は表１６に示されるヌクレオチド配列によってコードされる、アミノ酸配列に対して、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ又はそれを超える変化、例えば、アミノ酸置換（例えば、保存的アミノ酸置換）又は欠失を有する。
一実施形態において、抗ＰＤ－Ｌ１抗体分子は、それぞれ表１６に開示される、配列番号３０４８のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号３０４９のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、及び配列番号３０５０のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；並びに配列番号３０５６のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号３０５７のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、及び配列番号３０５８のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。
一実施形態において、抗ＰＤ－Ｌ１抗体分子は、それぞれ表１６に開示される、配列番号３０７５のヌクレオチド配列によってコードされるＶＨＣＤＲ１、配列番号３０７６のヌクレオチド配列によってコードされるＶＨＣＤＲ２、及び配列番号３０７７のヌクレオチド配列によってコードされるＶＨＣＤＲ３を含む、ＶＨ；並びに配列番号３０８０のヌクレオチド配列によってコードされるＶＬＣＤＲ１、配列番号３０８１のヌクレオチド配列によってコードされるＶＬＣＤＲ２、及び配列番号３０８２のヌクレオチド配列によってコードされるＶＬＣＤＲ３を含む、ＶＬを含む。
一実施形態において、抗ＰＤ－Ｌ１抗体分子は、配列番号３０５３のアミノ酸配列、又は配列番号３０５３と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＨを含む。一実施形態において、抗ＰＤ－Ｌ１抗体分子は、配列番号３０６３のアミノ酸配列、又は配列番号３０６３と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＬを含む。一実施形態において、抗ＰＤ－Ｌ１抗体分子は、配列番号３０６７のアミノ酸配列、又は配列番号３０６７と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＨを含む。一実施形態において、抗ＰＤ－Ｌ１抗体分子は、配列番号３０７１のアミノ酸配列、又は配列番号３０７１と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＬを含む。一実施形態において、抗ＰＤ－Ｌ１抗体分子は、配列番号３０５３のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号３０６３のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一実施形態において、抗ＰＤ－Ｌ１抗体分子は、配列番号３０６７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号３０７１のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一実施形態において、抗体分子は、配列番号３０５４のヌクレオチド配列、又は配列番号３０５４と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるヌクレオチド配列によってコードされる、ＶＨを含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号３０６４のヌクレオチド配列、又は配列番号３０６４と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるヌクレオチド配列によってコードされる、ＶＬを含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号３０６８のヌクレオチド配列、又は配列番号３０６８と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるヌクレオチド配列によってコードされる、ＶＨを含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号３０７２のヌクレオチド配列、又は配列番号３０７２と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるヌクレオチド配列によってコードされる、ＶＬを含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号３０５４のヌクレオチド配列によってコードされるＶＨ、及び配列番号３０６４のヌクレオチド配列によってコードされるＶＬを含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号３０６８のヌクレオチド配列によってコードされるＶＨ、及び配列番号３０７２のヌクレオチド配列によってコードされるＶＬを含む。
一実施形態において、抗ＰＤ－Ｌ１抗体分子は、配列番号３０５５のアミノ酸配列、又は配列番号３０５５と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるアミノ酸配列を含む、重鎖を含む。一実施形態において、抗ＰＤ－Ｌ１抗体分子は、配列番号３０６５のアミノ酸配列、又は配列番号３０６５と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるアミノ酸配列を含む、軽鎖を含む。一実施形態において、抗ＰＤ－Ｌ１抗体分子は、配列番号３０６９のアミノ酸配列、又は配列番号３０６９と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるアミノ酸配列を含む、重鎖を含む。一実施形態において、抗ＰＤ－Ｌ１抗体分子は、配列番号３０７３のアミノ酸配列、又は配列番号３０７３と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるアミノ酸配列を含む、軽鎖を含む。一実施形態において、抗ＰＤ－Ｌ１抗体分子は、配列番号３０５５のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３０６５のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。一実施形態において、抗ＰＤ－Ｌ１抗体分子は、配列番号３０６９のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３０７３のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
一実施形態において、抗体分子は、配列番号３０６２のヌクレオチド配列、又は配列番号３０６２と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるヌクレオチド配列によってコードされる、重鎖を含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号３０６６のヌクレオチド配列、又は配列番号３０６６と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるヌクレオチド配列によってコードされる、軽鎖を含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号３０７０のヌクレオチド配列、又は配列番号３０７０と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるヌクレオチド配列によってコードされる、重鎖を含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号３０７４のヌクレオチド配列、又は配列番号３０７４と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるヌクレオチド配列によってコードされる、軽鎖を含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号３０６２のヌクレオチド配列によってコードされる重鎖、及び配列番号３０６６のヌクレオチド配列によってコードされる軽鎖を含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号３０７０のヌクレオチド配列によってコードされる重鎖、及び配列番号３０７４のヌクレオチド配列によってコードされる軽鎖を含む。
本明細書に記載の抗体分子は、その全体が参照により組み込まれる米国特許出願公開第２０１６／０１０８１２３号明細書に記載のベクター、宿主細胞、及び方法によって作製することができる。
Figure 2023529211000195
Figure 2023529211000196
Figure 2023529211000197
Figure 2023529211000198
Figure 2023529211000199
Figure 2023529211000200
Figure 2023529211000201
他の例示的なＰＤ－Ｌ１阻害剤
いくつかの実施形態において、ＰＤ－Ｌ１阻害剤は抗ＰＤ－Ｌ１抗体である。いくつかの実施形態において、抗ＰＤ－Ｌ１阻害剤は、例えば国際公開第２０１３／０１７９１７４号パンフレットに開示される、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＭＥＤＩ－４７３６、又はＭＤＸ－１１０５ＭＳＢ－００１０７１８Ｃ（Ａ０９－２４６－２とも称される）から選択され、本明細書に開示される配列（又はそれと実質的に同一若しくは類似の配列、例えば、特定の配列と少なくとも８５％、９０％、９５％同一であるか、又はそれを超えて同一である配列）を有する。
一実施形態において、ＰＤ－Ｌ１阻害剤はＭＤＸ－１１０５である。ＢＭＳ－９３６５５９としても知られるＭＤＸ－１１０５は、国際公開第２００７／００５８７４号パンフレットに記載される抗ＰＤ－Ｌ１抗体である。
一実施形態において、ＰＤ－Ｌ１阻害剤は、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０である。ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０抗体は、国際公開第２０１０／０７７６３４号パンフレットに記載の抗ＰＤ－Ｌ１である。
一実施形態において、ＰＤ－Ｌ１阻害剤は、アテゾリズマブ、ＲＧ７４４６、ＲＯ５５４１２６７、ＹＷ２４３．５５．Ｓ７０、又はＴＥＣＥＮＴＲＩＱ（商標）としても知られるＭＤＰＬ３２８０Ａ（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｒｏｃｈｅ）である。ＭＤＰＬ３２８０Ａは、ＰＤ－Ｌ１に結合するヒトＦｃ最適化ＩｇＧ１モノクローナル抗体である。ＰＤ－Ｌ１に対するＭＤＰＬ３２８０Ａ及び他のヒトモノクローナル抗体は、その全体が参照により組み込まれる米国特許第７，９４３，７４３号明細書及び米国特許出願公開２０１２００３９９０６号明細書に開示される。一実施形態において、抗ＰＤ－Ｌ１抗体分子は、アテゾリズマブの１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列、又は重鎖若しくは軽鎖配列（例えば、表１７に開示されるようなもの）を含む。
他の実施形態において、ＰＤ－Ｌ２阻害剤はＡＭＰ－２２４である。ＡＭＰ－２２４は、ＰＤ１とＢ７－Ｈ１の相互作用を遮断するＰＤ－Ｌ２ Ｆｃ融合可溶性受容体である（Ｂ７－ＤＣＩｇ；Ａｍｐｌｉｍｍｕｎｅ；例えば、国際公開第２０１０／０２７８２７号パンフレット及び国際公開第２０１１／０６６３４２号パンフレットに開示される）。
一実施形態において、ＰＤ－Ｌ１阻害剤は、抗ＰＤ－Ｌ１抗体分子である。一実施形態において、抗ＰＤ－Ｌ１抗体分子は、ＭＳＢ００１０７１８Ｃとしても知られるアベルマブ（Ｍｅｒｃｋ Ｓｅｒｏｎｏ及びＰｆｉｚｅｒ）である。アベルマブ及び他の抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、参照によりその全体が組み込まれる国際公開第２０１３／０７９１７４号パンフレットに開示されている。一実施形態において、抗ＰＤ－Ｌ１抗体分子は、アベルマブの１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列、又は重鎖若しくは軽鎖配列（例えば、表１７に開示されるようなもの）を含む。
一実施形態において、抗ＰＤ－Ｌ１抗体分子は、ＭＥＤＩ４７３６としても知られるデュルバルマブ（ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ／ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）である。デュルバルマブ及び他の抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、参照によりその全体が組み込まれる米国特許第８，７７９，１０８号に開示されている。一実施形態において、抗ＰＤ－Ｌ１抗体分子は、デュルバルマブの１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列、又は重鎖若しくは軽鎖配列（例えば、表１７に開示されるようなもの）を含む。
一実施形態において、抗ＰＤ－Ｌ１抗体分子は、ＭＤＸ－１１０５又は１２Ａ４としても知られるＢＭＳ－９３６５５９（Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）である。ＢＭＳ－９３６５５９及び他の抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、参照によりその全体が組み込まれる米国特許第７，９４３，７４３号明細書及び国際公開第２０１５／０８１１５８号パンフレットに開示されている。一実施形態において、抗ＰＤ－Ｌ１抗体分子は、ＢＭＳ－９３６５５９の１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列、又は重鎖若しくは軽鎖配列（例えば、表１７に開示されるようなもの）を含む。
更なる公知の抗ＰＤ－Ｌ１抗体には、例えば、参照によりその全体が組み込まれる国際公開第２０１５／１８１３４２号パンフレット、国際公開第２０１４／１０００７９号パンフレット、国際公開第２０１６／０００６１９号パンフレット、国際公開第２０１４／０２２７５８号パンフレット、国際公開第２０１４／０５５８９７号パンフレット、国際公開第２０１５／０６１６６８号パンフレット、国際公開第２０１３／０７９１７４号パンフレット、国際公開第２０１２／１４５４９３号パンフレット、国際公開第２０１５／１１２８０５号パンフレット、国際公開第２０１５／１０９１２４号パンフレット、国際公開第２０１５／１９５１６３号パンフレット、米国特許第８，１６８，１７９号明細書、米国特許第８，５５２，１５４号明細書、米国特許第８，４６０，９２７号明細書、及び米国特許第９，１７５，０８２号明細書に記載されるものが含まれる。
一実施形態において、抗ＰＤ－Ｌ１抗体は、本明細書に記載の抗ＰＤ－Ｌ１抗体の１つとの結合について競合する、及び／又はＰＤ－Ｌ１上の同じエピトープに結合する、抗体である。
Figure 2023529211000202
ＬＡＧ－３阻害剤
いくつかの実施形態において、本開示のＺＢＴＢ３２阻害剤、又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体は、疾患、例えば癌を処置するためにＬＡＧ－３阻害剤と組み合わせて使用される。いくつかの実施形態において、ＬＡＧ－３阻害剤は、ＬＡＧ５２５（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＢＭＳ－９８６０１６（Ｂｒｉｓｔｏｌ－ＭｙｅｒｓＳｑｕｉｂｂ）、又はＴＳＲ－０３３（Ｔｅｓａｒｏ）から選択される。
例示的なＬＡＧ－３阻害剤
一実施形態において、ＬＡＧ－３阻害剤は、抗ＬＡＧ－３抗体分子である。一実施形態において、ＬＡＧ－３阻害剤は、引用によりその全体が本明細書に組み込まれる、「Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ ｔｏ ＬＡＧ－３ ａｎｄ Ｕｓｅｓ Ｔｈｅｒｅｏｆ」と題された２０１５年９月１７日公開の米国特許出願公開第２０１５／０２５９４２０号明細書に開示されるような抗ＬＡＧ－３抗体分子である。
一実施形態において、抗ＬＡＧ－３抗体分子は、表１８に示されるアミノ酸配列を含む重鎖及び軽鎖可変領域からの（例えば、表１８に開示されるＢＡＰ０５０－クローンＩ又はＢＡＰ０５０－クローンＪの重鎖及び軽鎖可変領域配列からの）、又は表１８に示されるヌクレオチド配列によってコードされる、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、又は６つの相補性決定領域（ＣＤＲ）（又は集合的に全てのＣＤＲ）を含む。いくつかの実施形態において、ＣＤＲは、Ｋａｂａｔの定義に従う（例えば、表１８に示されるとおり）。いくつかの実施形態において、ＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａの定義に従う（例えば、表１８に示されるとおり）。いくつかの実施形態において、ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａの両方の組み合わせたＣＤＲ定義に従う（例えば、表１８に示されるとおり）。一実施形態において、ＶＨ ＣＤＲ１のＫａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａＣＤＲの組み合わせは、アミノ酸配列ＧＦＴＬＴＮＹＧＭＮ（配列番号３１５８）を含む。一実施形態において、１つ以上のＣＤＲ（又は集合的に全てのＣＤＲ）は、表１８に示される、又は表１８に示されるヌクレオチド配列によってコードされる、アミノ酸配列に対して、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ又はそれを超える変化、例えば、アミノ酸置換（例えば、保存的アミノ酸置換）又は欠失を有する。
一実施形態において、抗ＬＡＧ－３抗体分子は、それぞれ表１８に開示される、配列番号３０９４のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号３０９５のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、及び配列番号３０９６のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；並びに配列番号３１０３のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号３１０４のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、及び配列番号３１０５のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。
一実施形態において、抗ＬＡＧ－３抗体分子は、それぞれ表１８に開示される、配列番号３１２９又は３１３０のヌクレオチド配列によってコードされるＶＨＣＤＲ１、配列番号３１３１又は３１３２のヌクレオチド配列によってコードされるＶＨＣＤＲ２、及び配列番号３１３３又は３１３４のヌクレオチド配列によってコードされるＶＨＣＤＲ３を含む、ＶＨ；並びに配列番号３１３９又は３１４０のヌクレオチド配列によってコードされるＶＬＣＤＲ１、配列番号３１４１又は３１４２のヌクレオチド配列によってコードされるＶＬＣＤＲ２、及び配列番号３１４３又は３１４４のヌクレオチド配列によってコードされるＶＬＣＤＲ３を含む、ＶＬを含む。一実施形態において、抗ＬＡＧ－３抗体分子は、それぞれ表１８に開示される、配列番号３１５０又は３１３０のヌクレオチド配列によってコードされるＶＨＣＤＲ１、配列番号３１５１又は３１３２のヌクレオチド配列によってコードされるＶＨＣＤＲ２、及び配列番号３１５２又は３１３４のヌクレオチド配列によってコードされるＶＨＣＤＲ３を含む、ＶＨ；並びに配列番号３１３９又は３１４０のヌクレオチド配列によってコードされるＶＬＣＤＲ１、配列番号３１４１又は３１４２のヌクレオチド配列によってコードされるＶＬＣＤＲ２、及び配列番号３１４３又は３１４４のヌクレオチド配列によってコードされるＶＬＣＤＲ３を含む、ＶＬを含む。
一実施形態において、抗ＬＡＧ－３抗体分子は、配列番号３０９９のアミノ酸配列、又は配列番号３０９９と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＨを含む。一実施形態において、抗ＬＡＧ－３抗体分子は、配列番号３１１１のアミノ酸配列、又は配列番号３１１１と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＬを含む。一実施形態において、抗ＬＡＧ－３抗体分子は、配列番号３１１７のアミノ酸配列、又は配列番号３１１７と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＨを含む。一実施形態において、抗ＬＡＧ－３抗体分子は、配列番号３１２３のアミノ酸配列、又は配列番号３１２３と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＬを含む。一実施形態において、抗ＬＡＧ－３抗体分子は、配列番号３０９９のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号３１１１のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一実施形態において、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、配列番号３１１７のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号３１２３のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一実施形態において、抗体分子は、配列番号３１００又は３１０１のヌクレオチド配列、又は配列番号３１００又は３１０１と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるヌクレオチド配列によってコードされる、ＶＨを含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号３１１２又は３１１３のヌクレオチド配列、又は配列番号３１１２又は３１１３と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるヌクレオチド配列によってコードされる、ＶＬを含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号３１１８又は３１１９のヌクレオチド配列、又は配列番号３１１８又は３１１９と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるヌクレオチド配列によってコードされる、ＶＨを含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号３１２４又は３１２５のヌクレオチド配列、又は配列番号３１２４又は３１２５と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるヌクレオチド配列によってコードされる、ＶＬを含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号３１００又は３１０１のヌクレオチド配列によってコードされるＶＨ、及び配列番号３１１２又は３１１３のヌクレオチド配列によってコードされるＶＬを含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号３１１８又は３１１９のヌクレオチド配列によってコードされるＶＨ、及び配列番号３１２４又は３１２５のヌクレオチド配列によってコードされるＶＬを含む。
一実施形態において、抗ＬＡＧ－３抗体分子は、配列番号３１０２のアミノ酸配列、又は配列番号３１０２と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるアミノ酸配列を含む、重鎖を含む。一実施形態において、抗ＬＡＧ－３抗体分子は、配列番号３１１４のアミノ酸配列、又は配列番号３１１４と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるアミノ酸配列を含む、軽鎖を含む。一実施形態において、抗ＬＡＧ－３抗体分子は、配列番号３１２０のアミノ酸配列、又は配列番号３１２０と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるアミノ酸配列を含む、重鎖を含む。一実施形態において、抗ＬＡＧ－３抗体分子は、配列番号３１２６のアミノ酸配列、又は配列番号３１２６と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるアミノ酸配列を含む、軽鎖を含む。一実施形態において、抗ＬＡＧ－３抗体分子は、配列番号３１０２のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３１１４のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。一実施形態において、抗ＬＡＧ－３抗体分子は、配列番号３１２０のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３１２６のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
一実施形態において、抗体分子は、配列番号３１０９又は３１１０のヌクレオチド配列、又は配列番号３１０９又は３１１０と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるヌクレオチド配列によってコードされる、重鎖を含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号３１１５又は３１１６のヌクレオチド配列、又は配列番号３１１５又は３１１６と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるヌクレオチド配列によってコードされる、軽鎖を含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号３１２１又は３１２２のヌクレオチド配列、又は配列番号３１２１又は３１２２と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるヌクレオチド配列によってコードされる、重鎖を含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号３１２７又は３１２８のヌクレオチド配列、又は配列番号３１２７又は３１２８と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるヌクレオチド配列によってコードされる、軽鎖を含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号３１０９又は３１１０のヌクレオチド配列によってコードされる重鎖、及び配列番号３１１５又は３１１６のヌクレオチド配列によってコードされる軽鎖を含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号３１２１又は３１２２のヌクレオチド配列によってコードされる重鎖、及び配列番号３１２７又は３１２８のヌクレオチド配列によってコードされる軽鎖を含む。
本明細書に記載の抗体分子は、その全体が参照により組み込まれる米国特許出願公開第２０１５／０２５９４２０号明細書に記載のベクター、宿主細胞、及び方法によって作製することができる。
Figure 2023529211000203
Figure 2023529211000204
Figure 2023529211000205
Figure 2023529211000206
Figure 2023529211000207
Figure 2023529211000208
Figure 2023529211000209
Figure 2023529211000210
Figure 2023529211000211
Figure 2023529211000212
Figure 2023529211000213
他の例示的なＬＡＧ－３阻害剤
一実施形態において、ＬＡＧ－３阻害剤は、抗ＬＡＧ－３抗体分子である。一実施形態において、ＬＡＧ－３阻害剤は、ＢＭＳ９８６０１６としても知られるＢＭＳ－９８６０１６（Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）である。ＢＭＳ－９８６０１６及び他の抗ＬＡＧ－３抗体は、参照によりその全体が組み込まれる国際公開第２０１５／１１６５３９号パンフレット及び米国特許第９，５０５，８３９号明細書に開示されている。一実施形態において、抗ＬＡＧ－３抗体分子は、ＢＭＳ－９８６０１６の１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列、又は重鎖若しくは軽鎖配列（例えば、表１９に開示されるようなもの）を含む。
一実施形態において、抗ＬＡＧ－３抗体分子は、ＴＳＲ－０３３（Ｔｅｓａｒｏ）である。一実施形態において、抗ＬＡＧ－３抗体分子は、ＴＳＲ－０３３の１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列、又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
一実施形態において、抗ＬＡＧ－３抗体分子は、ＩＭＰ７３１又はＧＳＫ２８３１７８１（ＧＳＫ及びＰｒｉｍａ ＢｉｏＭｅｄ）である。ＩＭＰ７３１及び他の抗ＬＡＧ－３抗体は、参照によりその全体が組み込まれる国際公開第２００８／１３２６０１号パンフレット及び米国特許第９，２４４，０５９号明細書に開示されている。一実施形態において、抗ＬＡＧ－３抗体分子は、ＩＭＰ７３１の１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列、又は重鎖若しくは軽鎖配列（例えば、表１９に開示されるようなもの）を含む。一実施形態において、抗ＬＡＧ－３抗体分子は、ＧＳＫ２８３１７８１の１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列、又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
一実施形態において、抗ＬＡＧ－３抗体分子は、ＩＭＰ７６１（Ｐｒｉｍａ ＢｉｏＭｅｄ）である。一実施形態において、抗ＬＡＧ－３抗体分子は、ＩＭＰ７６１の１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列、又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
更なる公知の抗ＬＡＧ－３抗体には、例えば、参照によりその全体が組み込まれる国際公開第２００８／１３２６０１号パンフレット、国際公開第２０１０／０１９５７０号パンフレット、国際公開第２０１４／１４０１８０号パンフレット、国際公開第２０１５／１１６５３９号パンフレット、国際公開第２０１５／２００１１９号パンフレット、国際公開第２０１６／０２８６７２号パンフレット、米国特許第９，２４４，０５９号明細書、米国特許第９，５０５，８３９号明細書に記載されるものが含まれる。
一実施形態において、抗ＬＡＧ－３抗体は、本明細書に記載の抗ＬＡＧ－３抗体の１つとの結合について競合する、及び／又はＬＡＧ－３上の同じエピトープに結合する、抗体である。
一実施形態において、抗ＬＡＧ－３阻害剤は、可溶性ＬＡＧ－３タンパク質、例えば、ＩＭＰ３２１（Ｐｒｉｍａ ＢｉｏＭｅｄ）であり、例えば、その全体が参照により組み込まれる国際公開第２００９／０４４２７３号パンフレットに開示されている。
Figure 2023529211000214
ＴＩＭ－３阻害剤
特定の実施形態において、免疫チェックポイント分子の阻害剤は、ＴＩＭ－３の阻害剤である。いくつかの実施形態において、本開示のＺＢＴＢ３２阻害剤、又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体は、疾患、例えば癌を処置するためにＴＩＭ－３阻害剤と組み合わせて使用される。いくつかの実施形態において、ＴＩＭ－３阻害剤は、ＭＧＢ４５３（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＬＹ３３２１３６７（Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ）、Ｓｙｍ０２３（Ｓｙｍｐｈｏｇｅｎ）、ＢＧＢ－Ａ４２５（Ｂｅｉｇｅｎｅ）、ＩＮＣＡＧＮ－２３９０（Ａｇｅｎｕｓ／Ｉｎｃｙｔｅ）、ＭＢＳ－９８６２５８（ＢＭＳ／Ｆｉｖｅ Ｐｒｉｍｅ）、ＲＯ－７１２１６６１（Ｒｏｃｈｅ）、ＬＹ－３４１５２４４（Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ）、又はＴＳＲ－０２２（Ｔｅｓａｒｏ）である。
例示的なＴＩＭ－３阻害剤
一実施形態において、ＴＩＭ－３阻害剤は、抗ＴＩＭ－３抗体分子である。一実施形態において、ＴＩＭ－３阻害剤は、引用によりその全体が本明細書に組み込まれる、「Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ ｔｏ ＴＩＭ－３ ａｎｄ Ｕｓｅｓ Ｔｈｅｒｅｏｆ」と題された２０１５年８月６日公開の米国特許出願公開第２０１５／０２１８２７４号明細書に開示されるような抗ＴＩＭ－３抗体分子である。
一実施形態において、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、表２０に示されるアミノ酸配列を含む重鎖及び軽鎖可変領域からの（例えば、表２０に開示されるＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ１１又はＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ０３の重鎖及び軽鎖可変領域配列からの）、又は表２０に示されるヌクレオチド配列によってコードされる、少なくとも１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、又は６つの相補性決定領域（ＣＤＲ）（又は集合的に全てのＣＤＲ）を含む。いくつかの実施形態において、ＣＤＲは、Ｋａｂａｔの定義に従う（例えば、表２０に示されるとおり）。いくつかの実施形態において、ＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａの定義に従う（例えば、表２０に示されるとおり）。一実施形態において、１つ以上のＣＤＲ（又は集合的に全てのＣＤＲ）は、表２０に示される、又は表２０に示されるヌクレオチド配列によってコードされる、アミノ酸配列に対して、１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ又はそれを超える変化、例えば、アミノ酸置換（例えば、保存的アミノ酸置換）又は欠失を有する。
一実施形態において、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、それぞれ表２０に開示される、配列番号３１５９のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号３１６０のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、及び配列番号３１６１のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；並びに配列番号３１６８のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号３１６９のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、及び配列番号３１７０のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。一実施形態において、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、それぞれ表２０に開示される、配列番号３１５９のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号３１７８のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列、及び配列番号３１６１のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）；並びに配列番号３１６８のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号３１６９のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列、及び配列番号３１７０のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む。
一実施形態において、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、配列番号３１６４のアミノ酸配列、又は配列番号３１６４と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＨを含む。一実施形態において、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、配列番号３１７４のアミノ酸配列、又は配列番号３１７４と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＬを含む。一実施形態において、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、配列番号３１８０のアミノ酸配列、又は配列番号３１８０と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＨを含む。一実施形態において、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、配列番号３１８４のアミノ酸配列、又は配列番号３１８４と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるアミノ酸配列を含む、ＶＬを含む。一実施形態において、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、配列番号３１６４のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号３１７４のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一実施形態において、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、配列番号３１８０のアミノ酸配列を含むＶＨ、及び配列番号３１８４のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。
一実施形態において、抗体分子は、配列番号３１６５のヌクレオチド配列、又は配列番号３１６５と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるヌクレオチド配列によってコードされる、ＶＨを含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号３１７５のヌクレオチド配列、又は配列番号３１７５と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるヌクレオチド配列によってコードされる、ＶＬを含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号３１８１のヌクレオチド配列、又は配列番号３１８１と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるヌクレオチド配列によってコードされる、ＶＨを含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号３１８５のヌクレオチド配列、又は配列番号３１８５と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるヌクレオチド配列によってコードされる、ＶＬを含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号３１６５のヌクレオチド配列によってコードされるＶＨ、及び配列番号３１７５のヌクレオチド配列によってコードされるＶＬを含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号３１８１のヌクレオチド配列によってコードされるＶＨ、及び配列番号３１８５のヌクレオチド配列によってコードされるＶＬを含む。
一実施形態において、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、配列番号３１６６のアミノ酸配列、又は配列番号３１６６と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるアミノ酸配列を含む、重鎖を含む。一実施形態において、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、配列番号３１７６のアミノ酸配列、又は配列番号３１７６と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるアミノ酸配列を含む、軽鎖を含む。一実施形態において、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、配列番号３１８２のアミノ酸配列、又は配列番号３１８２と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるアミノ酸配列を含む、重鎖を含む。一実施形態において、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、配列番号３１８６のアミノ酸配列、又は配列番号３１８６と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるアミノ酸配列を含む、軽鎖を含む。一実施形態において、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、配列番号３１６６のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３１７６のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。一実施形態において、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、配列番号３１８２のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号３１８６のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。
一実施形態において、抗体分子は、配列番号３１６７のヌクレオチド配列、又は配列番号３１６７と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるヌクレオチド配列によってコードされる、重鎖を含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号３１７７のヌクレオチド配列、又は配列番号３１７７と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるヌクレオチド配列によってコードされる、軽鎖を含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号３１８３のヌクレオチド配列、又は配列番号３１８３と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるヌクレオチド配列によってコードされる、重鎖を含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号３１８７のヌクレオチド配列、又は配列番号３１８７と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％又はそれを超えて同一であるヌクレオチド配列によってコードされる、軽鎖を含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号３１６７のヌクレオチド配列によってコードされる重鎖、及び配列番号３１７７のヌクレオチド配列によってコードされる軽鎖を含む。一実施形態において、抗体分子は、配列番号３１８３のヌクレオチド配列によってコードされる重鎖、及び配列番号３１８７のヌクレオチド配列によってコードされる軽鎖を含む。
本明細書に記載の抗体分子は、その全体が参照により組み込まれる米国特許出願公開第２０１５／０２１８２７４号明細書に記載のベクター、宿主細胞、及び方法によって作製することができる。
Figure 2023529211000215
Figure 2023529211000216
Figure 2023529211000217
Figure 2023529211000218
Figure 2023529211000219
他の例示的なＴＩＭ－３阻害剤
一実施形態において、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、ＴＳＲ－０２２（ＡｎａｐｔｙｓＢｉｏ／Ｔｅｓａｒｏ）である。一実施形態において、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、ＴＳＲ－０２２の１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列、又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。一実施形態において、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、ＡＰＥ５１３７又はＡＰＥ５１２１の１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列、又は重鎖若しくは軽鎖配列（例えば、表２１に開示されるようなもの）を含む。ＡＰＥ５１３７、ＡＰＥ５１２１、及び他の抗ＴＩＭ－３抗体は、参照によりその全体が組み込まれる国際公開第２０１６／１６１２７０号パンフレットに開示されている。
一実施形態において、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、抗体クローンＦ３８－２Ｅ２である。一実施形態において、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、Ｆ３８－２Ｅ２の１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列、又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
一実施形態において、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、ＬＹ３３２１３６７（Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ）である。一実施形態において、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、ＬＹ３３２１３６７の１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖可変領域配列及び／又は軽鎖可変領域配列、又は重鎖配列及び／又は軽鎖配列を含む。
一実施形態において、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、Ｓｙｍ０２３（Ｓｙｍｐｈｏｇｅｎ）である。一実施形態において、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、Ｓｙｍ０２３の１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖可変領域配列及び／又は軽鎖可変領域配列、又は重鎖配列及び／又は軽鎖配列を含む。
一実施形態において、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、ＢＧＢ－Ａ４２５（Ｂｅｉｇｅｎｅ）である。一実施形態において、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、ＢＧＢ－Ａ４２５の１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖可変領域配列及び／又は軽鎖可変領域配列、又は重鎖配列及び／又は軽鎖配列を含む。
一実施形態において、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、ＩＮＣＡＧＮ－２３９０（Ａｇｅｎｕｓ／Ｉｎｃｙｔｅ）である。一実施形態において、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、ＩＮＣＡＧＮ－２３９０の１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖可変領域配列及び／又は軽鎖可変領域配列、又は重鎖若しくは軽鎖配列を含む。
一実施形態において、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、ＢＭＳ－９８６２５８（ＢＭＳ／Ｆｉｖｅ Ｐｒｉｍｅ）である。一実施形態において、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、ＢＭＳ－９８６２５８の１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖可変領域配列及び／又は軽鎖可変領域配列、又は重鎖配列及び／又は軽鎖配列を含む。
一実施形態において、抗ＴＩＭ－３抗体又は阻害剤分子は、ＲＯ－７１２１６６１（Ｒｏｃｈｅ）である。一実施形態において、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、ＲＯ－７１２１６６１のＴＩＭ－３結合アームの１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖可変領域配列及び／又は軽鎖可変領域配列、又は重鎖配列及び／又は軽鎖配列を含む。
一実施形態において、抗ＴＩＭ－３抗体又は阻害分子は、ＬＹ－３４１５２４４（Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ）である。一実施形態において、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、ＬＹ－３４１５２４４のＴＩＭ－３結合アームの１つ以上のＣＤＲ配列（又は集合的に全てのＣＤＲ配列）、重鎖可変領域配列及び／又は軽鎖可変領域配列、又は重鎖配列及び／又は軽鎖配列を含む。
更なる公知の抗ＴＩＭ－３抗体には、例えば、参照によりその全体が組み込まれる国際公開第２０１６／１１１９４７号パンフレット、国際公開第２０１６／０７１４４８号パンフレット、国際公開第２０１６／１４４８０３号パンフレット、米国特許第８，５５２，１５６号明細書、米国特許第８，８４１，４１８号明細書、及び米国特許第９，１６３，０８７号明細書に記載されているものが含まれる。
一実施形態において、抗ＴＩＭ－３抗体は、本明細書に記載の抗ＴＩＭ－３抗体の１つとの結合について競合する、及び／又はＴＩＭ－３上の同じエピトープに結合する、抗体である。
Figure 2023529211000220
サイトカイン
更に別の実施形態において、本開示のＺＢＴＢ３２阻害剤、又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体は、インターフェロン、ＩＬ－２、ＩＬ－１５、ＩＬ－７、又はＩＬ２１を含むがこれらに限定されない１つ以上のサイトカインと組み合わせて使用される。特定の実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤、又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体は、ＩＬ－１５／ＩＬ－１５Ｒａ複合体と組み合わせて投与される。いくつかの実施形態において、ＩＬ－１５／ＩＬ－１５Ｒａ複合体は、ＮＩＺ９８５（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＡＴＬ－８０３（Ａｌｔｏｒ）又はＣＹＰ０１５０（Ｃｙｔｕｎｅ）から選択される。
例示的なＩＬ－１５／ＩＬ－１５Ｒａ複合体
一実施形態において、サイトカインは、可溶性形態のＩＬ－１５受容体アルファ（ＩＬ－１５Ｒａ）と複合体形成したＩＬ－１５である。ＩＬ－１５／ＩＬ－１５Ｒａ複合体は、ＩＬ－１５Ｒａの可溶性形態に共有結合又は非共有結合したＩＬ－１５を含み得る。特定の実施形態において、ヒトＩＬ－１５は、ＩＬ－１５Ｒａの可溶性形態に非共有結合している。特定の実施形態において、参照によりその全体が組み込まれる国際公開第２０１４／０６６５２７号パンフレットに記載されるように、製剤のヒトＩＬ－１５は、表２２の配列番号３１９２のアミノ酸配列、又は配列番号３１９２と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％同一であるか、又はそれを超えて同一であるアミノ酸配列を含み、ヒトＩＬ－１５Ｒａの可溶形態は、表２２の配列番号３１９３のアミノ酸配列、又は配列番号３１９３と少なくとも８５％、９０％、９５％、若しくは９９％同一であるか、又はそれを超えて同一であるアミノ酸配列を含む。本明細書に記載の分子は、その全体が参照により組み込まれる国際公開第２００７０８４３４２号パンフレットに記載のベクター、宿主細胞、及び方法によって作製することができる。
Figure 2023529211000221
他の例示的なＩＬ－１５／ＩＬ－１５Ｒａ複合体
一実施形態において、ＩＬ－１５／ＩＬ－１５Ｒａ複合体は、ＡＬＴ－８０３、ＩＬ－１５／ＩＬ－１５Ｒａ Ｆｃ融合タンパク質（ＩＬ－１５Ｎ７２Ｄ：ＩＬ－１５ＲａＳｕ／Ｆｃ可溶性複合体）である。ＡＬＴ－８０３は、参照によりその全体が組み込まれる国際公開第２００８／１４３７９４号パンフレットに記載されている。一実施形態において、ＩＬ－１５／ＩＬ－１５Ｒａ Ｆｃ融合タンパク質は、表２３に開示される配列を含む。
一実施形態において、ＩＬ－１５／ＩＬ－１５Ｒａ複合体は、ＩＬ－１５Ｒａのスシドメイン（ＣＹＰ０１５０、Ｃｙｔｕｎｅ）に融合したＩＬ－１５を含む。ＩＬ－１５Ｒａのスシドメインは、ＩＬ－１５Ｒａのシグナルペプチドの後の最初のシステイン残基で始まり、前記シグナルペプチドの後の４番目のシステイン残基で終わるドメインを指す。ＩＬ－１５Ｒａのスシドメインに融合したＩＬ－１５の複合体は、参照によりその全体が組み込まれる国際公開第２００７／０４６０６号パンフレット及び国際公開第２０１２／１７５２２２号パンフレットに記載されている。一実施形態において、ＩＬ－１５／ＩＬ－１５Ｒａスシドメイン融合物は、表２３に開示される配列を含む。
Figure 2023529211000222
更に別の実施形態において、本開示のＺＢＴＢ３２阻害剤、又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体は、トール様受容体（ＴＬＲ、例えば、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９）の１つ以上のアゴニストと組み合わせて、疾患、例えば癌を処置するために使用される。いくつかの実施形態において、本開示の化合物は、ＴＬＲ７アゴニスト又はＴＬＲ７アゴニストコンジュゲートと組み合わせて使用することができる。
いくつかの実施形態において、ＴＬＲ７アゴニストは、その全体が参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２０１１／０４９６７７号パンフレットに開示されている化合物を含む。いくつかの実施形態において、ＴＬＲ７アゴニストは、３－（５－アミノ－２－（４－（２－（３，３－ジフルオロ－３－ホスホノプロポキシ）エトキシ）－２－メチルフェネチル）ベンゾ［ｆ］［１，７］ナフチリジン－８－イル）プロパン酸を含む。いくつかの実施形態において、ＴＬＲ７アゴニストは、式：
Figure 2023529211000223
 の化合物を含む。
別の実施形態において、本開示のＺＢＴＢ３２阻害剤、又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体は、癌を処置するために１つ以上の血管新生阻害剤と組み合わせて使用され、例えば、ベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（登録商標））、アキシチニブ（Ｉｎｌｙｔａ（登録商標））；ブリバニブアラニネート（ＢＭＳ－５８２６６４、（Ｓ）－（（Ｒ）－１－（４－（４－フルオロ－２－メチル－１Ｈ－インドール－５－イルオキシ）－５－メチルピロロ［２，１－ｆ］［１，２，４］トリアジン－６－イルオキシ）プロパン－２－イル）２－アミノプロパノエート）；ソラフェニブ（Ｎｅｘａｖａｒ（登録商標））；パゾパニブ（Ｖｏｔｒｉｅｎｔ（登録商標））；リンゴ酸スニチニブ（Ｓｕｔｅｎｔ（登録商標））；セディラニブ（ＡＺＤ２１７１、ＣＡＳ ２８８３８３－２０－１）；Ｖａｒｇａｔｅｆ（ＢＩＢＦ１１２０、ＣＡＳ ９２８３２６－８３－４）；フォレチニブ（ＧＳＫ１３６３０８９）；テラチニブ（ＢＡＹ５７－９３５２、ＣＡＳ ３３２０１２－４０－５）；アパチニブ（ＹＮ９６８Ｄ１、ＣＡＳ ８１１８０３－０５－１）；イマチニブ（Ｇｌｅｅｖｅｃ（登録商標））；ポナチニブ（ＡＰ２４５３４、ＣＡＳ ９４３３１９－７０－８）；チボザニブ（ＡＶ９５１、ＣＡＳ ４７５１０８－１８－０）；レゴラフェニブ（ＢＡＹ７３－４５０６、ＣＡＳ ７５５０３７－０３－７）；バタラニブ二塩酸塩（ＰＴＫ７８７、ＣＡＳ ２１２１４１－５１－０）；ブリバニブ（ＢＭＳ－５４０２１５、ＣＡＳ ６４９７３５－４６－６）；バンデタニブ（Ｃａｐｒｅｌｓａ（登録商標）又はＡＺＤ６４７４）；モテサニブ二リン酸塩（ＡＭＧ７０６、ＣＡＳ ８５７８７６－３０－３、Ｎ－（２，３－ジヒドロ－３，３－ジメチル－１Ｈ－インドール－６－イル）－２－［（４－ピリジニルメチル）アミノ］－３－ピリジンカルボキサミド、ＰＣＴ国際公開第０２／０６６４７０号パンフレットに記載）；ドビチニブ二乳酸塩（ＴＫＩ２５８、ＣＡＳ ８５２４３３－８４－２）；リンファニブ（ＡＢＴ８６９、ＣＡＳ ７９６９６７－１６－３）；カボザンチニブ（ＸＬ１８４、ＣＡＳ ８４９２１７－６８－１）；レスタウルチニブ（ＣＡＳ １１１３５８－８８－４）；Ｎ－［５－［［［５－（１，１－ジメチルエチル）－２－オキサゾリル］メチル］チオ］－２－チアゾリル］－４－ピペリジンカルボキサミド（ＢＭＳ３８７０３、ＣＡＳ ３４５６２７－８０－７）；（３Ｒ，４Ｒ）－４－アミノ－１－（（４－（（３－メトキシフェニル）アミノ）ピロロ［２，１－ｆ］［１，２，４］トリアジン－５－イル）メチル）ピペリジン－３－オール（ＢＭＳ６９０５１４）；Ｎ－（３，４－ジクロロ－２－フルオロフェニル）－６－メトキシ－７－［［（３ａα、５β、６ａα）－オクタヒドロ－２－メチルシクロペンタ［ｃ］ピロール－５－イル］メトキシ］－４－キナゾリンアミン（ＸＬ６４７、ＣＡＳ ７８１６１３－２３－８）；４－メチル－３－［［１－メチル－６－（３－ピリジニル）－１Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－４－イル］アミノ］－Ｎ－［３－（トリフルオロメチル）フェニル］－ベンズアミド（ＢＨＧ７１２、ＣＡＳ ９４０３１０－８５－０）；又はアフリベルセプト（Ｅｙｌｅａ（登録商標））である。
別の実施形態において、本開示のＺＢＴＢ３２阻害剤、又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体は、１つ以上の癌を処置するための熱ショックタンパク質阻害剤、例えば、タネスピマイシン（１７－アリルアミノ－１７－デメトキシゲルダナマイシン、ＫＯＳ－９５３及び１７－ＡＡＧとしても知られ、ＳＩＧＭＡから入手可能であり、米国特許第４，２６１，９８９号に記載）；レタスピマイシン（ＩＰＩ５０４）、ガネテスピブ（ＳＴＡ－９０９０）；［６－クロロ－９－（４－メトキシ－３，５－ジメチルピリジン－２－イルメチル）－９Ｈ－プリン－２－イル］アミン（ＢＩＩＢ０２１又は－ＣＮＦ２０２４、ＣＡＳ８４８６９５－２５－０）；トランス－４－［［２－（アミノカルボニル）－５－［４，５，６，７－テトラヒドロ－６，６－ジメチル－４－オキソ－３－（トリフルオロメチル）－１Ｈ－インダゾール－１－イル］フェニル］アミノ］シクロヘキシルグリシンエステル（ＳＮＸ５４２２又はＰＦ０４９２９１１３、ＣＡＳ９０８１１５－２７－５）；５－［２，４－ジヒドロキシ－５－（１－メチルエチル）フェニル］－Ｎ－エチル－４－［４－（４－モルホリニルメチル）フェニル］－３－イソキサゾールカルボキサミド（ＡＵＹ９２２、ＣＡＳ７４７４１２－４９－３）；又は１７－ジメチルアミノエチルアミノ－１７－デメトキシゲルダナマイシン（１７－ＤＭＡＧ）と組み合わせて使用される。
更に別の実施形態において、本開示のＺＢＴＢ３２阻害剤、又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体は、１つ以上のＨＤＡＣ阻害剤又は他のエピジェネティック修飾因子と組み合わせて使用される。例示的なＨＤＡＣ阻害剤には、ボニノスタット（ゾリンザ（登録商標））；ロミデプシン（Ｉｓｔｏｄａｘ（登録商標））；トレコスタチンＡ（ＴＳＡ）；オキサムフラチン；ボリノスタット（ゾリンザ（登録商標）、スベロイルアニリドヒドロキサム酸）；ピロキサミド（シベロイル－３－アミノピリジンアミドヒドロキサム酸）；トラポキシンＡ（ＲＦ－１０２３Ａ）；トラポキシンＢ（ＲＦ－１０２３８）；シクロ［（αＳ，２Ｓ）－α－アミノ－η－オキソ－２－オキシランオクタノイル－Ｏ－メチル－Ｄ－チロシル－Ｌ－イソロイシル－Ｌ－プロリル］（Ｃｙｌ－１）；シクロ［（αＳ，２Ｓ）－α－アミノ－η－オキソ－２－オキシランオクタノイル－Ｏ－メチル－Ｄ－チロシル－Ｌ－イソロイシル－（２Ｓ）－２－ピペリジンカルボニル］（Ｃｙｌ－２）；環状［Ｌ－アラニル－Ｄ－アラニル－（２Ｓ）－η－オキソ－Ｌ－α－アミノオキシランオクタノイル－Ｄ－プロリル］（ＨＣ－毒素）；シクロ［（αＳ，２Ｓ）－α－アミノ－η－オキソ－２－オキシランオクタノイル－Ｄ－フェニルアラニル－Ｌ－ロイシル－（２Ｓ）－２－ピペリジンカルボニル］（ＷＦ－３１６１）；クラミドシン（（Ｓ）－環状（２－メチルアラニル－Ｌ－フェニルアラニル－Ｄ－プロリル－η－オキソ－Ｌ－α－アミノオキシランオクタノイル）；アピシジン（シクロ（８－オキソ－Ｌ－２－アミノデカノイル－１－メトキシ－Ｌ－トリプトフィル－Ｌ－イソロイシル－Ｄ－２－ピペリジンカルボニル）；ロミデプシン（Ｉｓｔｏｄａｘ（登録商標）、ＦＲ－９０１２２８）；４－フェニルブチレート；スピルコスタチンＡ；ミルプロイン（バルプロ酸）；エンチノスタット（ＭＳ－２７５、Ｎ－（２－アミノフェニル）－４－［Ｎ－（ピリジン－３－イル－メトキシカルボニル）－アミノ－メチル］－ベンズアミド）；デプデシン（４，５：８，９－ジアンヒドロ－１，２，６，７，１１－ペンタデオキシ－Ｄ－トレオ－Ｄ－イド－ウンデカ－１，６－ジエニトール）；４－（アセチルアミノ）－Ｎ－（２－アミノフェニル）－ベンズアミド（ＣＩ－９９４としても知られる）；Ｎ１－（２－アミノフェニル）－Ｎ８－フェニル－オクタンジアミド（ＢＭＬ－２１０としても知られる）；４－（ジメチルアミノ）－Ｎ－（７－（ヒドロキシアミノ）－７－オキソヘプチル）ベンズアミド（Ｍ３４４としても知られる）；（Ｅ）－３－（４－（（（２－（１Ｈ－インドール－３－イル）エチル）（２－ヒドロキシエチル）アミノ）－メチル）フェニル）－Ｎ－ヒドロキシアクリルアミド；パノビノスタット（Ｆａｒｙｄａｋ（登録商標））；モセチノスタット、及びベリノスタット（ＰＸＤ１０１、Ｂｅｌｅｏｄａｑ（登録商標）、又は（２Ｅ）－Ｎ－ヒドロキシ－３－［３－（フェニルスルファモイル）フェニル］プロプ－２－エンアミドとしても知られる）、又はチダミド（ＣＳ０５５又はＨＢＩ－８０００としても知られる、（Ｅ）－Ｎ－（２－アミノ－５－フルオロフェニル）－４－（（３－（ピリジン－３－イル）アクリルアミド）メチル）ベンズアミド）が含まれるが、これらに限定されない。他の後成的修飾因子には、ＥＺＨ２（ｚｅｓｔｅホモログ２のエンハンサー）、ＥＥＤ（胚性外胚葉発生）、又はＬＳＤ１（リジン特異的ヒストン脱メチル化酵素１Ａ又はＫＤＭ１Ａ）の阻害剤が含まれるが、これらに限定されない。
更に別の実施形態において、本開示のＺＢＴＢ３２阻害剤、又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体は癌を処置するために、１つ以上のインドールアミン－ピロール２，３－ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）の阻害剤、例えば、インドキシモド（ＮＬＧ－８１８９としても知られる）、α－シクロヘキシル－５Ｈ－イミダゾ［５，１－ａ］イソインドール－５－エタノール（ＮＬＧ９１９としても知られる）、又は（４Ｅ）－４－［（３－クロロ－４－フルオロアニリノ）－ニトロソメチリデン］－１，２，５－オキサジアゾール－３－アミン（ＩＮＣＢ０２４３６０としても知られる）と組み合わせて使用される。
キメラ抗原受容体
本開示は、本明細書に記載のキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）免疫エフェクター細胞、例えばＴ細胞、又はキメラＴＣＲ形質導入免疫エフェクター細胞、例えばＴ細胞などの、養子免疫療法及び試薬と組み合わせた使用のための、ＺＢＴＢ３２阻害剤、又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体を提供する。
エストロゲン受容体アンタゴニスト
いくつかの実施形態において、エストロゲン受容体アンタゴニストは、ＺＢＴＢ３２阻害剤、又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体と組み合わせて、疾患、例えば癌を処置するために使用される。いくつかの実施形態では、エストロゲン受容体アンタゴニストは、選択的エストロゲン受容体分解剤（ＳＥＲＤ）である。ＳＥＲＤは、受容体に結合して受容体の例えば分解又は下方制御を生じさせるエストロゲン受容体アンタゴニストである（Ｂｏｅｒ Ｋ．ｅｔ ａｌ．，（２０１７）Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ ９（７）：４６５－４７９）。ＥＲは、例えば、ヒト生殖器系の成長、発生及び生理に重要なホルモン活性化転写因子である。ＥＲは、例えばホルモンエストロゲン（１７βエストラジオール）によって活性化される。ＥＲ発現及びシグナル伝達は、癌（例えば、乳癌）、例えばＥＲ陽性（ＥＲ＋）乳癌に関係があるとされている。いくつかの実施形態では、ＳＥＲＤは、ＬＳＺ１０２、フルベストラント、ブリラネストラント、又はエラセストラントから選ばれる。
例示的エストロゲン受容体アンタゴニスト
いくつかの実施形態では、ＳＥＲＤは、その全体が参照によって本明細書に引用される国際公開第２０１４／１３０３１０号パンフレットに開示される化合物を含む。いくつかの実施形態では、ＳＥＲＤはＬＳＺ１０２を含む。ＬＳＺ１０２は、化学名：（Ｅ）－３－（４－（（２－（２－（１，１－ジフルオロエチル）－４－フルオロフェニル）－６－ヒドロキシベンゾ［ｂ］チオフェン－３－イル）オキシ）フェニル）アクリル酸を有する。
他の例示的エストロゲン受容体アンタゴニスト
いくつかの実施形態では、ＳＥＲＤは、フルベストラント（ＣＡＳ登録番号：１２９４５３－６１－８）、又はその全体が参照によって本明細書に引用される国際公開第２００１／０５１０５６号パンフレットに開示される化合物を含む。フルベストラントは、ＩＣＩ １８２７８０、ＺＭ １８２７８０、ＦＡＳＬＯＤＥＸ（登録商標）、又は（７α，１７β）－７－｛９－［（４，４，５，５，５－ペンタフルオロペンチル）スルフィニル］ノニル｝エストラ－１，３，５（１０）－トリエン－３，１７－ジオールとしても知られる。フルベストラントは、ＩＣ５０が０．２９ｎＭの高親和性エストロゲン受容体アンタゴニストである。
いくつかの実施形態では、ＳＥＲＤは、エラセストラント（ＣＡＳ登録番号：７２２５３３－５６－４）、又はその全体が参照によって本明細書に引用される米国特許第７，６１２，１１４号明細書に開示される化合物を含む。エラセストラントは、ＲＡＤ１９０１、ＥＲ－３０６３２３又は（６Ｒ）－６－｛２－［エチル（｛４－［２－（エチルアミノ）エチル］フェニル｝メチル）アミノ］－４－メトキシフェニル｝－５，６，７，８－テトラヒドロナフタレン－２－オールとしても知られる。エラセストラントは、経口投与で生体利用可能な非ステロイド系の複合選択的エストロゲン受容体調節剤（ＳＥＲＭ）且つＳＥＲＤである。エラセストラントは、例えば、Ｇａｒｎｅｒ Ｆ ｅｔ ａｌ．，（２０１５）Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｄｒｕｇｓ ２６（９）：９４８－５６にも開示されている。
いくつかの実施形態では、ＳＥＲＤは、ブリラネストラント（ＣＡＳ登録番号：１３６５８８８－０６－７）、又はその全体が参照によって本明細書に引用される国際公開第２０１５／１３６０１７号パンフレットに開示される化合物である。ブリラネストラントは、ＧＤＣ－０８１０、ＡＲＮ８１０、ＲＧ－６０４６、ＲＯ－７０５６１１８又は（２Ｅ）－３－｛４－［（１Ｅ）－２－（２－クロロ－４－フルオロフェニル）－１－（１Ｈ－インダゾール－５－イル）ブタ－１－エン－１－イル］フェニル｝プロパ－２－エン酸としても知られる。ブリラネストラントは、ＩＣ５０が０．７ｎＭの、次世代の経口投与で生体利用可能な選択的ＳＥＲＤである。ブリラネストラントは、例えば、Ｌａｉ Ａ．ｅｔ ａｌ．（２０１５）Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ５８（１２）：４８８８－４９０４にも開示されている。
いくつかの実施形態では、ＳＥＲＤは、例えば、ＭｃＤｏｎｅｌｌ ｅｔ ａｌ．（２０１５）Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ５８（１２）４８８３－４８８７に開示されるとおり、ＲＵ ５８６６８、ＧＷ７６０４、ＡＺＤ９４９６、バゼドキシフェン、ピペンドキシフェン、アルゾキシフェン、ＯＰ－１０７４、又はアコルビフェンから選ばれる。他の例示的エストロゲン受容体アンタゴニストについては、例えば、国際公開第２０１１／１５６５１８号パンフレット、国際公開第２０１１／１５９７６９号パンフレット、国際公開第２０１２／０３７４１０号パンフレット、国際公開第２０１２／０３７４１１号パンフレット及び米国特許出願公開第２０１２／００７１５３５号明細書に開示されており、これらはすべて、その全体が参照により本明細書に引用される。
ＣＤＫ４／６阻害剤
いくつかの実施形態において、サイクリン依存性キナーゼ４又は６（ＣＤＫ４／６）の阻害剤は、ＺＢＴＢ３２阻害剤、又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体と組み合わせて、疾患、例えば癌を処置するために使用される。いくつかの実施形態において、ＣＤＫ４／６阻害剤は、リボシクリブ、アベマシクリブ（Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ）、又はパルボシクリブから選択される。
例示的ＣＤＫ４／６阻害剤
いくつかの実施形態では、ＣＤＫ４／６阻害剤は、リボシクリブ（ＣＡＳ登録番号：１２１１４４１－９８－３）、又はその全体が参照によって本明細書に引用される米国特許第８，４１５，３５５号明細書及び同第８，６８５，９８０号明細書に開示される化合物を含む。
いくつかの実施形態では、ＣＤＫ４／６阻害剤は、その全体が参照によって本明細書に引用される国際公開第２０１０／０２０６７５号パンフレット及び米国特許第８，４１５，３５５号明細書及び同第８，６８５，９８０号明細書に開示される化合物を含む。
いくつかの実施形態では、ＣＤＫ４／６阻害剤は、リボシクリブ（ＣＡＳ登録番号：１２１１４４１－９８－３）を含む。リボシクリブは、ＬＥＥ０１１、ＫＩＳＱＡＬＩ（登録商標）、又は７－シクロペンチル－Ｎ，Ｎ－ジメチル－２－（（５－（ピペラジン－１－イル）ピリジン－２－イル）アミノ）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－６－カルボキサミドとしても知られる。
他の例示的ＣＤＫ４／６阻害剤
いくつかの実施形態では、ＣＤＫ４／６阻害剤は、アベマシクリブ（ＣＡＳ登録番号：１２３１９２９－９７－７）を含む。アベマシクリブは、ＬＹ８３５２１９又はＮ－［５－［（４－エチル－１－ピペラジニル）メチル］－２－ピリジニル］－５－フルオロ－４－［４－フルオロ－２－メチル－１－（１－メチルエチル）－１Ｈ－ベンズイミダゾール－６－イル］－２－ピリミジンアミンとしても知られる。アベマシクリブは、ＣＤＫ４及びＣＤＫ６に選択的なＣＤＫ阻害剤であり、例えば、Ｔｏｒｒｅｓ－Ｇｕｚｍａｎ Ｒ ｅｔ ａｌ．（２０１７）Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ １０．１８６３２／ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ．１７７７８に開示されている。
いくつかの実施形態では、ＣＤＫ４／６阻害剤は、パルボシクリブ（ＣＡＳ登録番号：５７１１９０－３０－２）を含む。パルボシクリブは、ＰＤ－０３３２９９１、ＩＢＲＡＮＣＥ（登録商標）又は６－アセチル－８－シクロペンチル－５－メチル－２－｛［５－（１－ピペラジニル）－２－ピリジニル］アミノ｝ピリド［２，３－ｄ］ピリミジン－７（８Ｈ）－オンとしても知られる。パルボシクリブは１１ｎＭのＩＣ５０でＣＤＫ４を阻害し、１６ｎＭのＩＣ５０でＣＤＫ６を阻害し、例えば、Ｆｉｎｎ ｅｔ ａｌ．（２００９）Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ １１（５）：Ｒ７７に開示されている。
ＣＸＣＲ２阻害剤
いくつかの実施形態において、ケモカイン（Ｃ－Ｘ－Ｃモチーフ）受容体２（ＣＸＣＲ２）の阻害剤は、ＺＢＴＢ３２阻害剤、又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体と組み合わせて、疾患、例えば癌を処置するために使用される。いくつかの実施形態において、ＣＸＣＲ２阻害剤は、６－クロロ－３－（（３，４－ジオキソ－２－（ペンタン－３－イルアミノ）シクロブト－１－エン－１－イル）アミノ）－２－ヒドロキシ－Ｎ－メトキシ－Ｎ－メチルベンゼンスルホンアミド、ダニリキシン、レパリキシン、又はナバリキシンから選択される。
例示的ＣＸＣＲ２阻害剤
いくつかの実施形態では、ＣＸＣＲ２阻害剤は、米国特許第７９８９４９７号明細書、同第８２８８５８８号明細書、同第８３２９７５４号明細書、同第８７２２９２５号明細書、同第９１１５０８７号明細書、米国特許出願公開第２０１０／０１５２２０５号明細書、同第２０１１／０２５１２０５号明細書及び同第２０１１／０２５１２０６号明細書並びに国際公開第２００８／０６１７４０号パンフレット、同第２００８／０６１７４１号パンフレット、同第２００８／０６２０２６号パンフレット、同第２００９／１０６５３９号パンフレット、同第２０１０／０６３８０２号パンフレット、同第２０１２／０６２７１３号パンフレット、同第２０１３／１６８１０８号パンフレット、同第２０１０／０１５６１３号パンフレット及び同第２０１３／０３０８０３号パンフレットに開示される化合物を含む。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＲ２阻害剤は、６－クロロ－３－（（３，４－ジオキソ－２－（ペンタン－３－イルアミノ）シクロブタ－１－エン－１－イル）アミノ）－２－ヒドロキシ－Ｎ－メトキシ－Ｎ－メチルベンゼンスルホンアミド又はそのコリン塩を含む。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＲ２阻害剤は、６－クロロ－３－（（３，４－ジオキソ－２－（ペンタン－３－イルアミノ）シクロブタ－１－エン－１－イル）アミノ）－２－ヒドロキシ－Ｎ－メトキシ－Ｎ－メチルベンゼンスルホンアミドコリン塩を含む。いくつかの実施形態では、ＣＸＣＲ２阻害剤は、２－ヒドロキシ－Ｎ，Ｎ，Ｎ－トリメチルエタン－１－アミニウム３－クロロ－６－（｛３，４－ジオキソ－２－［（ペンタン－３－イル）アミノ］シクロブタ－１－エン－１－イル｝アミノ）－２－（Ｎ－メトキシ－Ｎ－メチルスルファモイル）フェノラート（すなわち、６－クロロ－３－（（３，４－ジオキソ－２－（ペンタン－３－イルアミノ）シクロブタ－１－エン－１－イル）アミノ）－２－ヒドロキシ－Ｎ－メトキシ－Ｎ－メチルベンゼンスルホンアミドコリン塩）であり、以下の化学構造：
Figure 2023529211000224
 を有する。
他の例示的ＣＸＣＲ２阻害剤
いくつかの実施形態では、ＣＸＣＲ２阻害剤は、ダニリキシン（ＣＡＳ登録番号：９５４１２６－９８－８）を含む。ダニリキシンは、ＧＳＫ１３２５７５６又は１－（４－クロロ－２－ヒドロキシ－３－ピペリジン－３－イルスルホニルフェニル）－３－（３－フルオロ－２－メチルフェニル）尿素としても知られる。ダニリキシンについては、例えば、Ｍｉｌｌｅｒ ｅｔ ａｌ．Ｅｕｒ Ｊ Ｄｒｕｇ Ｍｅｔａｂ Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔ（２０１４）３９：１７３－１８１；及びＭｉｌｌｅｒ ｅｔ ａｌ．ＢＭＣ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ（２０１５），１６：１８に開示される。
いくつかの実施形態では、ＣＸＣＲ２阻害剤は、レパリキシン（ＣＡＳ登録番号：２６６３５９－８３－５）を含む。レパリキシンは、レペルタキシン又は（２Ｒ）－２－［４－（２－メチルプロピル）フェニル］－Ｎ－メチルスルホニルプロパンアミドとしても知られる。レパリキシンは、ＣＸＣＲ１／２の非競合的アロステリック阻害剤である。レパリキシンについては、例えば、Ｚａｒｂｏｃｋ ｅｔ ａｌ．Ｂｒ Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２００８；１５５（３）：３５７－６４に開示されている。
いくつかの実施形態では、ＣＸＣＲ２阻害剤はナバリキシンを含む。ナバリキシンは、ＭＫ－７１２３、ＳＣＨ ５２７１２３、ＰＳ２９１８２２、又は２－ヒドロキシ－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－［［２－［［（１Ｒ）－１－（５－メチルフラン－２－イル）プロピル］アミノ］－３，４－ジオキソシクロブテン－１－イル］アミノ］ベンズアミドとしても知られる。ナバリキシンについては、例えば、Ｎｉｎｇ ｅｔ ａｌ．Ｍｏｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ．２０１２；１１（６）：１３５３－６４に開示されている。
ＣＳＦ－１／１Ｒ結合剤
いくつかの実施形態において、ＣＳＦ－１／１Ｒ結合剤は、ＺＢＴＢ３２阻害剤、又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体と組み合わせて、疾患、例えば癌を処置するために使用される。いくつかの実施形態では、ＣＳＦ－１／１Ｒ結合剤は、マクロファージコロニー刺激因子（Ｍ－ＣＳＦ）の阻害剤、例えばＭ－ＣＳＦに対するモノクローナル抗体又はＦａｂ（例えば、ＭＣＳ１１０）、ＣＳＦ－１Ｒチロシンキナーゼ阻害剤（例えば、４－（（２－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－ヒドロキシシクロヘキシル）アミノ）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－イル）オキシ）－Ｎ－メチルピコリンアミド又はＢＬＺ９４５）、受容体型チロシンキナーゼ阻害剤（ＲＴＫ）（例えば、ペキシダルチニブ）、又はＣＳＦ－１Ｒを標的化する抗体（例えば、エマクツズマブ又はＦＰＡ００８）から選ばれる。いくつかの実施形態では、ＣＳＦ－１／１Ｒ阻害剤はＢＬＺ９４５である。いくつかの実施形態では、ＣＳＦ－１／１Ｒ結合剤はＭＣＳ１１０である。他の実施形態では、ＣＳＦ－１／１Ｒ結合剤はペキシダルチニブである。
例示的ＣＳＦ－１結合剤
いくつかの実施形態では、ＣＳＦ－１／１Ｒ結合剤は、マクロファージコロニー刺激因子（Ｍ－ＣＳＦ）の阻害剤を含む。Ｍ－ＣＳＦは、時にＣＳＦ－１としても知られる。特定の実施形態では、ＣＳＦ－１／１Ｒ結合剤は、ＣＳＦ－１に対する抗体（例えば、ＭＣＳ１１０）である。他の実施形態では、ＣＳＦ－１／１Ｒ結合剤は、ＣＳＦ－１Ｒの阻害剤（例えば、ＢＬＺ９４５）である。
いくつかの実施形態では、ＣＳＦ－１／１Ｒ結合剤は、Ｍ－ＣＳＦに対するモノクローナル抗体又はＦａｂ（例えば、ＭＣＳ１１０／Ｈ－ＲＸ１）、又は国際公開第２００４／０４５５３２号パンフレット及び同第２００５／０６８５０３号パンフレット（Ｈ－ＲＸ１又は５Ｈ４（例えば、Ｍ－ＣＳＦに対する抗体分子又はＦａｂ断片）を含む）並びに米国特許第９０７９９５６号明細書に開示されるＣＳＦ－１への結合剤を含み、これらの出願及び特許は参照により本明細書に引用される。
Figure 2023529211000225
別の実施形態において、ＣＳＦ－１／１Ｒ結合剤は、ＣＳＦ－１Ｒチロシンキナーゼ阻害剤、４－（（２－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－ヒドロキシシクロヘキシル）アミノ）ベンゾ［ｄ］チアゾール－６－イル）オキシ）－Ｎ－メチルピコリンアミド（ＢＬＺ９４５）、又は国際公開第２００７／１２１４８４号パンフレット、及び米国特許第７，５５３，８５４号明細書、同第８，１７３，６８９号明細書、及び同第８，７１０，０４８号明細書に開示される化合物を含み、これらは参照によりその全体が組み込まれる。
他の例示的ＣＳＦ－１／１Ｒ結合剤
いくつかの実施形態では、ＣＳＦ－１／１Ｒ結合剤は、ペキシダルチニブ（ＣＡＳ登録番号１０２９０４４－１６－３）を含む。ペキシダルチニブは、ＰＬＸ３３９７又は５－（（５－クロロ－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－３－イル）メチル）－Ｎ－（（６－（トリフルオロメチル）ピリジン－３－イル）メチル）ピリジン－２－アミンとしても知られる。ペキシダルチニブは、ＫＩＴ、ＣＳＦ１Ｒ及びＦＬＴ３の小分子受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）阻害剤である。ＦＬＴ３、ＣＳＦ１Ｒ及びＦＬＴ３は多くの癌細胞種で過剰発現するか、又は突然変異し、腫瘍細胞増殖及び転移において大きい役割を果たす。ＰＬＸ３３９７は、幹細胞因子受容体（ＫＩＴ）、コロニー刺激因子－１受容体（ＣＳＦ１Ｒ）及びＦｍｓ様チロシンキナーゼ３（ＦＬＴ３）に結合し、そのリン酸化を阻害することができ、それが腫瘍細胞増殖の阻害並びに溶骨性転移疾患に関与するマクロファージ、破骨細胞及びマスト細胞の下方制御をもたらし得る。
いくつかの実施形態では、ＣＳＦ－１／１Ｒ結合剤はエマクツズマブである。エマクツズマブは、ＲＧ７１５５又はＲＯ５５０９５５４としても知られる。エマクツズマブは、ＣＳＦ１Ｒを標的化するヒト化ＩｇＧ１ ｍＡｂである。いくつかの実施形態では、ＣＳＦ－１／１Ｒ結合剤はＦＰＡ００８である。ＦＰＡ００８は、ＣＳＦ１Ｒを阻害するヒト化ｍＡｂである。
Ａ２ａＲアンタゴニスト
いくつかの実施形態において、アデノシンＡ２ａ受容体（Ａ２ａＲ）アンタゴニスト（例えば、Ａ２ａＲ経路の阻害剤、例えば、アデノシン阻害剤、例えば、Ａ２ａＲ又はＣＤ－７３の阻害剤）は、ＺＢＴＢ３２阻害剤、又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体と組み合わせて、疾患、例えば癌を処置するために使用される。いくつかの実施形態では、Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＰＢＦ５０９（ＮＩＲ１７８）（Ｐａｌｏｂｉｏｆａｒｍａ／Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＣＰＩ４４４／Ｖ８１４４４（Ｃｏｒｖｕｓ／Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、ＡＺＤ４６３５／ＨＴＬ－１０７１（ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ／Ｈｅｐｔａｒｅｓ）、ビパデナント（Ｒｅｄｏｘ／Ｊｕｎｏ）、ＧＢＶ－２０３４（Ｇｌｏｂａｖｉｒ）、ＡＢ９２８（Ａｒｃｕｓ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、テオフィリン、イストラデフィリン（協和発酵工業）、トザデナント／ＳＹＮ－１１５（Ａｃｏｒｄａ）、ＫＷ－６３５６（協和発酵工業）、ＳＴ－４２０６（Ｌｅａｄｉａｎｔ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）及びプレラデナント／ＳＣＨ ４２０８１４（Ｍｅｒｃｋ／Ｓｃｈｅｒｉｎｇ）から選択される。
例示的Ａ２ａＲアンタゴニスト
いくつかの実施形態では、Ａ２ａＲアンタゴニストは、ＰＢＦ５０９（ＮＩＲ１７８）又はその全体が参照によって本明細書に引用される米国特許第８，７９６，２８４号明細書若しくは国際公開第２０１７／０２５９１８号パンフレットに開示される化合物を含む。ＰＢＦ５０９（ＮＩＲ１７８）はＮＩＲ１７８としても知られる。
他の例示的Ａ２ａＲアンタゴニスト
特定の実施形態では、Ａ２ａＲアンタゴニストはＣＰＩ４４４／Ｖ８１４４４を含む。ＣＰＩ－４４４及び他のＡ２ａＲアンタゴニストについては、その全体が参照によって本明細書に引用される国際公開第２００９／１５６７３７号パンフレットに開示されている。特定の実施形態では、Ａ２ａＲアンタゴニストは、（Ｓ）－７－（５－メチルフラン－２－イル）－３－（（６－（（（テトラヒドロフラン－３－イル）オキシ）メチル）ピリジン－２－イル）メチル）－３Ｈ－［１，２，３］トリアゾロ［４，５－ｄ］ピリミジン－５－アミンである。特定の実施形態では、Ａ２ａＲアンタゴニストは、（Ｒ）－７－（５－メチルフラン－２－イル）－３－（（６－（（（テトラヒドロフラン－３－イル）オキシ）メチル）ピリジン－２－イル）メチル）－３Ｈ－［１，２，３］トリアゾロ［４，５－ｄ］ピリミジン－５－アミン、又はそのラセミ化合物である。特定の実施形態では、Ａ２ａＲアンタゴニストは、７－（５－メチルフラン－２－イル）－３－（（６－（（（テトラヒドロフラン－３－イル）オキシ）メチル）ピリジン－２－イル）メチル）－３Ｈ－［１，２，３］トリアゾロ［４，５－ｄ］ピリミジン－５－アミンである。
特定の実施形態では、Ａ２ａＲアンタゴニストはＡＺＤ４６３５／ＨＴＬ－１０７１である。Ａ２ａＲアンタゴニストについては、その全体が参照によって本明細書に引用される国際公開第２０１１／０９５６２５号パンフレットに開示されている。特定の実施形態では、Ａ２ａＲアンタゴニストは、６－（２－クロロ－６－メチルピリジン－４－イル）－５－（４－フルオロフェニル）－１，２，４－トリアジン－３－アミンである。
特定の実施形態では、Ａ２ａＲアンタゴニストはＳＴ－４２０６（Ｌｅａｄｉａｎｔ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）である。特定の実施形態では、Ａ２ａＲアンタゴニストは、その全体が参照によって本明細書に引用される米国特許第９，１３３，１９７号明細書に記載されるＡ２ａＲアンタゴニストである。
特定の実施形態では、Ａ２ａＲアンタゴニストは、その全体が参照によって本明細書に引用される米国特許第８，１１４，８４５号明細書及び同第９，０２９，３９３号明細書、米国特許出願公開第２０１７／００１５７５８号明細書及び同第２０１６／０１２９１０８号明細書に記載されるＡ２ａＲアンタゴニストである。
いくつかの実施形態では、Ａ２ａＲアンタゴニストはイストラデフィリン（ＣＡＳ登録番号：１５５２７０－９９－８）である。イストラデフィリンは、ＫＷ－６００２又は８－［（Ｅ）－２－（３，４－ジメトキシフェニル）ビニル］－１，３－ジエチル－７－メチル－３，７－ジヒドロ－１Ｈ－プリン－２，６－ジオンとしても知られる。イストラデフィリンについては、例えば、ＬｅＷｉｔｔ ｅｔ ａｌ．（２００８）Ａｎｎａｌｓ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ ６３（３）：２９５－３０２）に開示されている。
いくつかの実施形態では、Ａ２ａＲアンタゴニストはトザデナント（Ｂｉｏｔｉｅ）である。トザデナントは、ＳＹＮ１１５又は４－ヒドロキシ－Ｎ－（４－メトキシ－７－モルホリン－４－イル－１，３－ベンゾチアゾール－２－イル）－４－メチルピペリジン－１－カルボキサミドとしても知られる。トザデナントは、Ａ２ａ受容体における内因性アデノシンの効果を遮断し、Ｄ２受容体におけるドーパミンの効果の増強及びｍＧｌｕＲ５受容体におけるグルタミン酸塩の効果の阻害をもたらす。いくつかの実施形態では、Ａ２ａＲアンタゴニストはプレラデナント（ＣＡＳ登録番号：３７７７２７－８７－２）である。プレラデナントは、ＳＣＨ ４２０８１４又は２－（２－フラニル）－７－［２－［４－［４－（２－メトキシエトキシ）フェニル］－１－ピペラジニル］エチル］７Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｅ］［１，２，４］トリアゾロ［１，５－ｃ］ピリミジン－５－アミンとしても知られる。プレラデナントは、アデノシンＡ２Ａ受容体における強力で選択的なアンタゴニストとして作用する薬物として開発された。
いくつかの実施形態では、Ａ２ａＲアンタゴニストはビパデナントである。ビパデナントは、ＢＩＩＢ０１４、Ｖ２００６、又は３－［（４－アミノ－３－メチルフェニル）メチル］－７－（フラン－２－イル）トリアゾロ［４，５－ｄ］ピリミジン－５－アミンとしても知られる。他の例示的Ａ２ａＲアンタゴニストとしては、例えば、ＡＴＬ－４４４、ＭＳＸ－３、ＳＣＨ－５８２６１、ＳＣＨ－４１２，３４８、ＳＣＨ－４４２，４１６、ＶＥＲ－６６２３、ＶＥＲ－６９４７、ＶＥＲ－７８３５、ＣＧＳ－１５９４３及びＺＭ－２４１，３８５が挙げられる。
いくつかの実施形態では、Ａ２ａＲアンタゴニストはＡ２ａＲ経路アンタゴニスト（例えば、ＣＤ－７３阻害剤、例えば、抗ＣＤ７３抗体）であり、ＭＥＤＩ９４４７である。ＭＥＤＩ９４４７は、ＣＤ７３に特異的なモノクローナル抗体である。ＣＤ７３によってアデノシンの細胞外産生が標的化されると、アデノシンの免疫抑制効果が低下し得る。ＭＥＤＩ９４４７は、例えば、ＣＤ７３エクトヌクレオチダーゼ活性の阻害、ＡＭＰ媒介性リンパ球抑制の緩和及び同系腫瘍成長の阻害など、様々な活性を有することが報告された。ＭＥＤＩ９４４７は、腫瘍微小環境内で骨髄性及びリンパ性の両方の浸潤白血球集団の変化をドライブすることができる。これらの変化には、例えば、ＣＤ８エフェクター細胞及び活性化マクロファージの増加並びに骨髄系由来サプレッサー細胞（ＭＤＳＣ）及び制御性Ｔリンパ球の割合の低下が含まれる。
ＩＤＯ阻害剤
いくつかの実施形態では、疾患、例えば癌の処置に、ＺＢＴＢ３２阻害薬、又はその薬学的に許容可能な塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体との組み合わせで、インドールアミン２，３－ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）及び／又はトリプトファン２，３－ジオキシゲナーゼ（ＴＤＯ）の阻害剤が使用される。いくつかの実施形態では、ＩＤＯ阻害剤は、（４Ｅ）－４－［（３－クロロ－４－フルオロアニリノ）－ニトロソメチリデン］－１，２，５－オキサジアゾール－３－アミン（エパカドスタット又はＩＮＣＢ２４３６０としても知られる）、インドキシモド（）、（１－メチル－Ｄ－トリプトファン）、α－シクロヘキシル－５Ｈ－イミダゾ［５，１－ａ］イソインドール－５－エタノール（ＮＬＧ９１９としても知られる）、インドキシモド及びＢＭＳ－９８６２０５（旧Ｆ００１２８７）から選ばれる。
例示的ＩＤＯ阻害剤
いくつかの実施形態では、ＩＤＯ／ＴＤＯ阻害剤はインドキシモド（Ｎｅｗ Ｌｉｎｋ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）である。１－メチル－トリプトファンのＤ異性体であるインドキシモドは、腫瘍が免疫介在性の破壊を逃れるための機構を破壊する経口投与型の小分子インドールアミン２，３－ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）経路阻害剤である。
いくつかの実施形態では、ＩＤＯ／ＴＤＯ阻害剤はＮＬＧ９１９（Ｎｅｗ Ｌｉｎｋ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ）である。ＮＬＧ９１９は、無細胞アッセイでＫｉ／ＥＣ５０が７ｎＭ／７５ｎＭの強力なＩＤＯ（インドールアミン－（２，３）－ジオキシゲナーゼ）経路阻害剤である。
いくつかの実施形態では、ＩＤＯ／ＴＤＯ阻害剤はエパカドスタット（ＣＡＳ登録番号：１２０４６６９－５８－８）である。エパカドスタットは、ＩＮＣＢ２４３６０又はＩＮＣＢ０２４３６０（Ｉｎｃｙｔｅ）としても知られる。エパカドスタットは、ＩＤＯ２又はトリプトファン２，３－ジオキシゲナーゼ（ＴＤＯ）などの他の関連性のある酵素と比べて高度に選択的な、ＩＣ５０が１０ｎＭの強力且つ選択的なインドールアミン２，３－ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ１）阻害剤である。
いくつかの実施形態では、ＩＤＯ／ＴＤＯ阻害剤はＦ００１２８７（Ｆｌｅｘｕｓ／ＢＭＳ）である。Ｆ００１２８７は、インドールアミン２，３－ジオキシゲナーゼ１（ＩＤＯ１）の小分子阻害剤である。
ＳＴＩＮＧアゴニスト
いくつかの実施形態では、疾患、例えば癌の処置に、ＺＢＴＢ３２阻害薬又はその塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体との組み合わせで、ＳＴＩＮＧアゴニストが使用される。いくつかの実施形態では、ＳＴＩＮＧアゴニストは、環状ジヌクレオチド、例えば、プリン又はピリミジン核酸塩基（例えば、アデノシン、グアニン、ウラシル、チミン、又はシトシン核酸塩基）を含む環状ジヌクレオチドである。いくつかの実施形態では、環状ジヌクレオチドの核酸塩基は同じ核酸塩基又は異なる核酸塩基を含む。
いくつかの実施形態では、ＳＴＩＮＧアゴニストはアデノシン又はグアノシン核酸塩基を含む。いくつかの実施形態では、ＳＴＩＮＧアゴニストは１つのアデノシン核酸塩基と１つのグアノシン核酸塩基とを含む。いくつかの実施形態では、ＳＴＩＮＧアゴニストは２つのアデノシン核酸塩基又は２つのグアノシン核酸塩基を含む。
いくつかの実施形態では、ＳＴＩＮＧアゴニストは、例えば、修飾された核酸塩基、修飾されたリボース、又は修飾されたリン酸結合を含む修飾された環状ジヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態では、修飾された環状ジヌクレオチドは、修飾されたリン酸結合、例えばチオホスフェートを含む。
いくつかの実施形態では、ＳＴＩＮＧアゴニストは、２’，５’又は３’，５’リン酸結合を有する環状ジヌクレオチド（例えば、修飾された環状ジヌクレオチド）を含む。いくつかの実施形態では、ＳＴＩＮＧアゴニストは、リン酸結合に関してＲｐ又はＳｐ立体化学を有する環状ジヌクレオチド（例えば、修飾された環状ジヌクレオチド）を含む。
いくつかの実施形態では、ＳＴＩＮＧアゴニストはＭＫ－１４５４（Ｍｅｒｃｋ）である。ＭＫ－１４５４は、ＳＴＩＮＧ経路を活性化させるインターフェロン遺伝子の環状ジヌクレオチド刺激剤（ＳＴＩＮＧ）アゴニストである。例示的ＳＴＩＮＧアゴニストについては、例えば、国際公開第２０１７／０２７６４５号パンフレットに開示されている。
ガレクチン阻害剤
いくつかの実施形態では、疾患、例えば癌の処置に、ＺＢＴＢ３２阻害薬、又はその塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体との組み合わせで、ガレクチン阻害剤、例えば、ガレクチン－１又はガレクチン－３阻害剤が使用される。いくつかの実施形態では、この組み合わせは、ガレクチン－１阻害剤とガレクチン－３阻害剤とを含む。いくつかの実施形態では、この組み合わせは、ガレクチン－１及びガレクチン－３の両方を標的化する二重特異性阻害剤（例えば、二重特異性抗体分子）を含む。いくつかの実施形態では、ガレクチン阻害剤は、抗ガレクチン抗体分子、ＧＲ－ＭＤ－０２（Ｇａｌｅｃｔｉｎ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、ガレクチン－３Ｃ（Ｍａｎｄａｌ Ｍｅｄ）、アンギネックス（Ａｎｇｉｎｅｘ）、又はＯＴＸ－００８（ＯｎｃｏＥｔｈｉｘ、Ｍｅｒｃｋ）から選ばれる。ガレクチンは、βガラクトシダーゼ糖類に結合するタンパク質ファミリーである。
ガレクチンタンパク質ファミリーは、ガレクチン－１、ガレクチン－２、ガレクチン－３、ガレクチン－４、ガレクチン－７及びガレクチン－８を少なくとも含む。ガレクチンはＳ型レクチンとも称され、例えば細胞内及び細胞外機能を有する可溶性タンパク質である。
ガレクチン－１及びガレクチン－３は、様々な腫瘍型で高発現である。ガレクチン－１及びガレクチン－３は血管新生を促進し、且つ／又は骨髄系細胞を腫瘍促進性の表現型に向かって再プログラム化し、例えば、骨髄系細胞からの免疫抑制を亢進させることができる。可溶性ガレクチン－３は、浸潤Ｔ細胞に結合し、且つ／又はそれを不活性化させることもできる。
例示的ガレクチン阻害剤
いくつかの実施形態では、ガレクチン阻害剤は抗体分子である。ある実施形態では、抗体分子は単一特異性抗体分子であり、単一のエピトープに結合する。例えば、各々が同じエピトープに結合する複数の免疫グロブリン可変ドメイン配列を有する単一特異性抗体分子。ある実施形態では、ガレクチン阻害剤は抗ガレクチン、例えば、抗ガレクチン－１又は抗ガレクチン－３抗体分子である。いくつかの実施形態では、ガレクチン阻害剤は抗ガレクチン－１抗体分子である。いくつかの実施形態では、ガレクチン阻害剤は抗ガレクチン－３抗体分子である。
ある実施形態において、抗体分子は多重特異性抗体分子であり、例えばそれは複数の免疫グロブリン可変ドメイン配列を含み、ここで、複数のうちの第１の免疫グロブリン可変ドメイン配列が第１のエピトープに対して結合特異性を有し、複数のうちの第２の免疫グロブリン可変ドメイン配列が第２のエピトープに対して結合特異性を有する。ある実施形態では、第１及び第２のエピトープは、同じ抗原上、例えば、同じタンパク質（又は多量体タンパク質のサブユニット）上にある。ある実施形態では、第１及び第２のエピトープは重複する。ある実施形態では、第１及び第２のエピトープは重複しない。ある実施形態では、第１及び第２のエピトープは、異なる抗原上、例えば、異なるタンパク質（又は多量体タンパク質の異なるサブユニット）上にある。ある実施形態では、多重特異性抗体分子は、第３、第４又は第５の免疫グロブリン可変ドメインを含む。ある実施形態では、多重特異性抗体分子は、二重特異性抗体分子、三重特異性抗体分子、又は四重特異性抗体分子である。
ある実施形態では、ガレクチン阻害剤は多重特異性抗体分子である。ある実施形態では、多重特異性抗体分子は二重特異性抗体分子である。二重特異性抗体は、２つ以下の抗原に対して特異性を有する。二重特異性抗体分子は、第１のエピトープに対して結合特異性を有する第１の免疫グロブリン可変ドメイン配列と、第２のエピトープに対して結合特異性を有する第２の免疫グロブリン可変ドメイン配列とによって特徴付けられる。ある実施形態では、第１及び第２のエピトープは、同じ抗原上、例えば、同じタンパク質（又は多量体タンパク質のサブユニット）上にある。ある実施形態では、第１及び第２のエピトープは重複する。ある実施形態では、第１及び第２のエピトープは重複しない。ある実施形態では、第１及び第２のエピトープは、異なる抗原上、例えば、異なるタンパク質（又は多量体タンパク質の異なるサブユニット）上にある。ある実施形態において、二重特異性抗体分子は、第１のエピトープに対して結合特異性を有する重鎖可変ドメイン配列及び軽鎖可変ドメイン配列と、第２のエピトープに対して結合特異性を有する重鎖可変ドメイン配列及び軽鎖可変ドメイン配列とを含む。ある実施形態では、二重特異性抗体分子は、第１のエピトープに対して結合特異性を有するハーフ抗体と、第２のエピトープに対して結合特異性を有するハーフ抗体とを含む。ある実施形態では、二重特異性抗体分子は、第１のエピトープに対して結合特異性を有するハーフ抗体、又はその断片と、第２のエピトープに対して結合特異性を有するハーフ抗体、又はその断片とを含む。ある実施形態では、二重特異性抗体分子は、第１のエピトープに対して結合特異性を有するｓｃＦｖ、又はその断片と、第２のエピトープに対して結合特異性を有するｓｃＦｖ、又はその断片とを含む。ある実施形態では、ガレクチン阻害剤は二重特異性抗体分子である。ある実施形態では、第１のエピトープはガレクチン－１に位置し、第２のエピトープはガレクチン－３に位置する。
二重特異性又はヘテロ二量体抗体分子の生成プロトコルは、限定はされないが、例えば、米国特許第５７３１１６８号明細書に記載される「ノブ・イン・ホール（ｋｎｏｂ ｉｎ ａ ｈｏｌｅ）」手法；例えば、国際公開第０９／０８９００４号パンフレット、国際公開第０６／１０６９０５号パンフレット及び国際公開第２０１０／１２９３０４号パンフレットに記載されるとおりの、静電気ステアリングＦｃ対合；例えば、国際公開第０７／１１０２０５号パンフレットに記載されるとおりの、鎖交換改変ドメイン（Ｓｔｒａｎｄ Ｅｘｃｈａｎｇｅ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ Ｄｏｍａｉｎ：ＳＥＥＤ）ヘテロ二量体形成；例えば、国際公開第０８／１１９３５３号パンフレット、国際公開第２０１１／１３１７４６号パンフレット及び国際公開第２０１３／０６０８６７号パンフレットに記載されるとおりの、Ｆａｂアーム交換；例えば、米国特許第４４３３０５９号明細書に記載されるとおりの、例えば、アミン反応基及びスルフヒドリル反応基を有するヘテロ二官能性試薬を使用した二重特異性構造を生成するための抗体架橋結合による、二重抗体コンジュゲート；例えば、米国特許第４４４４８７８号明細書に記載されるとおりの、２本の重鎖間のジスルフィド結合の還元酸化サイクルを通じた、異なる抗体からのハーフ抗体（重鎖－軽鎖対又はＦａｂ）の組換えにより生成される二重特異性抗体決定基；例えば、米国特許第５２７３７４３号明細書に記載されるとおりの、三官能性抗体、例えば、スルフヒドリル反応基を通じて架橋された３つのＦａｂ’断片；例えば、米国特許第５５３４２５４号明細書に記載されるとおりの、生合成結合タンパク質、例えば、Ｃ末端テールを通じて、好ましくはジスルフィド又はアミン反応性化学的架橋結合を通じて架橋されたｓｃＦｖの対；例えば、米国特許第５５８２９９６号明細書に記載されるとおりの、二官能性抗体、例えば、定常ドメインを置き換えたロイシンジッパー（例えば、ｃ－ｆｏｓ及びｃ－ｊｕｎ）を通じて二量体化された異なる結合特異性を有するＦａｂ断片；例えば、米国特許第５５９１８２８号明細書に記載されるとおりの、二重特異性及びオリゴ特異性一価及びオリゴ価受容体、例えば、典型的には関連する軽鎖を有する一方の抗体のＣＨ１領域と他方の抗体のＶＨ領域との間のポリペプチドスペーサーを介して連結された２つの抗体（２つのＦａｂ断片）のＶＨ－ＣＨ１領域；例えば、米国特許第５６３５６０２号明細書に記載されるとおりの、二重特異性ＤＮＡ－抗体コンジュゲート、例えば、ＤＮＡの二本鎖片を介した抗体又はＦａｂ断片の架橋結合；例えば、米国特許第５６３７４８１号明細書に記載されるとおりの、二重特異性融合タンパク質、例えば、間に親水性ヘリカルペプチドリンカーを有する２つのｓｃＦｖ及び完全な定常領域を含有する発現コンストラクト；例えば、米国特許第５８３７２４２号明細書に記載されるとおりの、概してダイアボディと称される、多価及び多特異性結合タンパク質、例えば、Ｉｇ重鎖可変領域の結合領域を含む第１のドメインと、Ｉｇ軽鎖可変領域の結合領域を含む第２のドメインとを有するポリペプチドの二量体（二重特異性、三重特異性、又は四重特異性分子を作り出す高次構造も開示される；例えば、米国特許第５８３７８２１号明細書に記載されるとおりの、二量体化して二重特異性／多価分子を形成することのできる、抗体ヒンジ領域及びＣＨ３領域にペプチドスペーサーでさらに接続した連結されたＶＬ及びＶＨ鎖を有するミニボディコンストラクト；二量体を形成して二重特異性ダイアボディを形成することができる、いずれかの向きでショートペプチドリンカー（例えば、５又は１０アミノ酸）によるか又はリンカーは全くなしに連結されるＶＨ及びＶＬドメイン；例えば、米国特許第５８４４０９４号明細書に記載されるとおりの、三量体及び四量体；例えば、米国特許第５８６４０１９号明細書に記載されるとおりの、Ｃ末端の架橋基がＶＬドメインとさらに会合して一連のＦＶ（又はｓｃＦｖ）を形成するペプチド結合によって接続したＶＨドメイン（又はファミリーメンバー中のＶＬドメイン）のストリング；及び例えば米国特許第５８６９６２０号明細書に記載されるとおりの、ペプチドリンカーで連結されたＶＨ及びＶＬの両方のドメインを有する単鎖結合ポリペプチドが、非共有結合性の又は化学的な架橋結合を通じて多価構造に組み合わされ、例えば、ｓｃＦＶ型又はダイアボディ型の両方のフォーマットを用いてホモ二価、ヘテロ二価、三価及び四価構造を形成するものを例えば含め、当技術分野において公知である。さらなる例示的多重特異性及び二重特異性分子並びにそれらの作製方法は、例えば、米国特許第５９１０５７３号明細書、米国特許第５９３２４４８号明細書、米国特許第５９５９０８３号明細書、米国特許第５９８９８３０号明細書、米国特許第６００５０７９号明細書、米国特許第６２３９２５９号明細書、米国特許第６２９４３５３号明細書、米国特許第６３３３３９６号明細書、米国特許第６４７６１９８号明細書、米国特許第６５１１６６３号明細書、米国特許第６６７０４５３号明細書、米国特許第６７４３８９６号明細書、米国特許第６８０９１８５号明細書、米国特許第６８３３４４１号明細書、米国特許第７１２９３３０号明細書、米国特許第７１８３０７６号明細書、米国特許第７５２１０５６号明細書、米国特許第７５２７７８７号明細書、米国特許第７５３４８６６号明細書、米国特許第７６１２１８１号明細書、米国特許出願公開第２００２／００４５８７Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００２／０７６４０６Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００２／１０３３４５Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００３／２０７３４６Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００３／２１１０７８Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００４／２１９６４３Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００４／２２０３８８Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００４／２４２８４７Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００５／００３４０３Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００５／００４３５２Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００５／０６９５５２Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００５／０７９１７０Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００５／１００５４３Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００５／１３６０４９Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００５／１３６０５１Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００５／１６３７８２Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００５／２６６４２５Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００６／０８３７４７Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００６／１２０９６０Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００６／２０４４９３Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００６／２６３３６７Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００７／００４９０９Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００７／０８７３８１Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００７／１２８１５０Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００７／１４１０４９Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００７／１５４９０１Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００７／２７４９８５Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００８／０５０３７０Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００８／０６９８２０Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００８／１５２６４５Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００８／１７１８５５Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００８／２４１８８４Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００８／２５４５１２Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００８／２６０７３８Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００９／１３０１０６Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００９／１４８９０５Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００９／１５５２７５Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００９／１６２３５９Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００９／１６２３６０Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００９／１７５８５１Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００９／１７５８６７Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００９／２３２８１１Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００９／２３４１０５Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００９／２６３３９２Ａ１号明細書、米国特許出願公開第２００９／２７４６４９Ａ１号明細書、欧州特許出願公開第３４６０８７Ａ２号明細書、国際公開第００／０６６０５Ａ２号パンフレット、国際公開第０２／０７２６３５Ａ２号パンフレット、国際公開第０４／０８１０５１Ａ１号パンフレット、国際公開第０６／０２０２５８Ａ２号パンフレット、国際公開第２００７／０４４８８７Ａ２号パンフレット、国際公開第２００７／０９５３３８Ａ２号パンフレット、国際公開第２００７／１３７７６０Ａ２号パンフレット、国際公開第２００８／１１９３５３Ａ１号パンフレット、国際公開第２００９／０２１７５４Ａ２号パンフレット、国際公開第２００９／０６８６３０Ａ１号パンフレット、国際公開第９１／０３４９３Ａ１号パンフレット、国際公開第９３／２３５３７Ａ１号パンフレット、国際公開第９４／０９１３１Ａ１号パンフレット、国際公開第９４／１２６２５Ａ２号パンフレット、国際公開第９５／０９９１７Ａ１号パンフレット、国際公開第９６／３７６２１Ａ２号パンフレット、国際公開第９９／６４４６０Ａ１号パンフレットに見られる。上に参照した出願の内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
他の実施形態では、抗ガレクチン抗体分子、例えば、抗ガレクチン－１又は抗ガレクチン－３抗体分子（例えば、単一特異性、二重特異性、又は多重特異性抗体分子）は、別のパートナー、例えばタンパク質に、例えば、融合分子、例えば融合タンパク質として共有結合的に連結され、例えば融合される。一実施形態では、二重特異性抗体分子は、第１の標的（例えば、ガレクチン－１）に対する第１の結合特異性と、第２の標的（例えば、ガレクチン－３）に対する第２の結合特異性とを有する。
本開示は、上記の抗体分子をコードする単離核酸分子、そのベクター及び宿主細胞を提供する。核酸分子としては、限定はされないが、ＲＮＡ、ゲノムＤＮＡ及びｃＤＮＡが挙げられる。
いくつかの実施形態では、ガレクチン阻害剤は、ガレクチン、例えばガレクチン－１又はガレクチン－３に結合し、且つその機能を阻害することのできるペプチド、例えばタンパク質である。いくつかの実施形態では、ガレクチン阻害剤は、ガレクチン－３に結合し、且つその機能を阻害することのできるペプチドである。いくつかの実施形態では、ガレクチン阻害剤は、ペプチドガレクチン－３Ｃである。いくつかの実施形態では、ガレクチン阻害剤は、その全体が参照によって本明細書に引用される米国特許第６，７７０，６２２号明細書に開示されるガレクチン－３阻害剤である。
ガレクチン－３Ｃは、ガレクチン－３のＮ末端トランケート型タンパク質であり、例えばガレクチン－３の競合阻害剤として機能する。ガレクチン－３Ｃは、例えば、癌細胞の表面上に例えばあるラミニン及び細胞外マトリックス（ＥＣＭ）内の他のβ－ガラクトシダーゼグリココンジュゲートに内因性ガレクチン－３が結合するのを妨げる。ガレクチン－３Ｃ及びペプチドを阻害する他の例示的ガレクチンについては、米国特許第６，７７０，６２２号明細書に開示されている。
いくつかの実施形態では、ガレクチン－３Ｃは、配列番号２７９のアミノ酸配列、又はそれと実質的に同一の（例えば、９０、９５又は９９％）同一のアミノ酸を含む。
Figure 2023529211000226
いくつかの実施形態では、ガレクチン阻害剤は、ガレクチン－１に結合し、且つその機能を阻害することのできるペプチドである。いくつかの実施形態では、ガレクチン阻害剤はペプチドアンギネックス（Ａｎｇｉｎｅｘ）である：アンギネックス（Ａｎｇｉｎｅｘ）は、ガレクチン－１に結合する抗血管新生ペプチドである（Ｓａｌｏｍｏｎｓｓｏｎ Ｅ，ｅｔ ａｌ．，（２０１１）Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２８６（１６）：１３８０１－１３８０４）。アンギネックス（Ａｎｇｉｎｅｘ）がガレクチン－１に結合すると、例えば、ガレクチン－１の血管新生促進効果が干渉を受け得る。
いくつかの実施形態では、ガレクチン阻害剤、例えば、ガレクチン－１又はガレクチン－３阻害剤は、非ペプチド性トポミメティクス分子である。いくつかの実施形態では、非ペプチド性トポミメティクスガレクチン阻害剤は、ＯＴＸ－００８（ＯｎｃｏＥｔｈｉｘ）である。いくつかの実施形態では、非ペプチド性トポミメティクスは、その全体が参照によって本明細書に引用される米国特許第８，２０７，２２８号明細書に開示される非ペプチド性トポミメティクスである。ＯＴＸ－００８、別名ＰＴＸ－００８又はカリックスアレーン０１１８は、ガレクチン－１の選択的アロステリック阻害剤である。ＯＴＸ－００８は、化学名：Ｎ－［２－（ジメチルアミノ）エチル］－２－｛［２６，２７，２８－トリス（｛［２－（ジメチルアミノ）エチル］カルバモイル｝メトキシ）ペンタシクロ［１９．３．１．１，７．１，．１５，］オクタコサ－１（２５），３（２８），４，６，９（２７），１０１２，１５，１７，１９（２６），２１，２３－ドデカエン－２５－イル］オキシ｝アセトアミドを有する。
いくつかの実施形態では、ガレクチン、例えば、ガレクチン－１又はガレクチン－３阻害剤は、炭水化物ベースの化合物である。いくつかの実施形態では、ガレクチン阻害剤はＧＲ－ＭＤ－０２（Ｇａｌｅｃｔｉｎ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）である。
いくつかの実施形態では、ＧＲ－ＭＤ－０２はガレクチン－３阻害剤である。ＧＲ－ＭＤ－０２は、例えばガラクトアラビノ－ラムノガラクツロネートとも称されるガラクトース分枝多糖である。ＧＲ－ＭＤ－０２及び他のガラクトース分枝ポリマー、例えば、ガラクトアラビノ－ラムノガラクツロネートについて、米国特許第８，２３６，７８０号明細書及び米国特許出願公開第２０１４／００８６９３２号明細書に開示されており、これらはその内容全体が参照により本明細書に引用される。
ＭＥＫ阻害剤
いくつかの実施形態では、疾患、例えば癌の処置に、ＺＢＴＢ３２阻害薬、又はその塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体との組み合わせでＭＥＫ阻害剤が使用される。いくつかの実施形態では、ＭＥＫ阻害剤は、トラメチニブ、セルメチニブ、ＡＳ７０３０２６、ＢＩＸ ０２１８９、ＢＩＸ ０２１８８、ＣＩ－１０４０、ＰＤ０３２５９０１、ＰＤ９８０５９、Ｕ０１２６、ＸＬ－５１８、Ｇ－３８９６３、又はＧ０２４４３７１４から選ばれる。いくつかの実施形態では、ＭＥＫ阻害剤はトラメチニブである。
例示的ＭＥＫ阻害剤
いくつかの実施形態では、ＭＥＫ阻害剤はトラメチニブである。トラメチニブは、ＪＴＰ－７４０５７、ＴＭＴ２１２、Ｎ－（３－｛３－シクロプロピル－５－［（２－フルオロ－４－ヨードフェニル）アミノ］－６，８－ジメチル－２，４，７－トリオキソ－３，４，６，７－テトラヒドロピリド［４，３－ｄ］ピリミジン－１（２Ｈ）－イル｝フェニル）アセトアミド、又はメキニスト（Ｍｅｋｉｎｉｓｔ）（ＣＡＳ名８７１７００－１７－３）としても知られる。
他の例示的ＭＥＫ阻害剤
いくつかの実施形態では、ＭＥＫ阻害剤は、化学名：（５－［（４－ブロモ－２－クロロフェニル）アミノ］－４－フルオロ－Ｎ－（２－ヒドロキシエトキシ）－１－メチル－１Ｈ－ベンズイミダゾール－６－カルボキサミドを有するセルメチニブを含む。セルメチニブは、例えば国際公開第２００３０７７９１４号パンフレットに記載されるとおり、ＡＺＤ６２４４又はＡＲＲＹ １４２８８６としても知られる。
いくつかの実施形態では、ＭＥＫ阻害剤は、ＡＳ７０３０２６、ＢＩＸ ０２１８９又はＢＩＸ ０２１８８を含む。
いくつかの実施形態では、ＭＥＫ阻害剤は、例えば国際公開第２００００３５４３６号パンフレット）に記載されるとおり、２－［（２－クロロ－４－ヨードフェニル）アミノ］－Ｎ－（シクロプロピルメトキシ）－３，４－ジフルオロ－ベンズアミド（別名ＣＩ－１０４０又はＰＤ１８４３５２）を含む。
いくつかの実施形態では、ＭＥＫ阻害剤は、例えば国際公開第２００２００６２１３号パンフレット）に記載されるとおり、Ｎ－［（２Ｒ）－２，３－ジヒドロキシプロポキシ］－３，４－ジフルオロ－２－［（２－フルオロ－４－ヨードフェニル）アミノ］－ベンズアミド（別名ＰＤ０３２５９０１）を含む。
いくつかの実施形態では、ＭＥＫ阻害剤は、Ｂｉａｆｆｉｎ ＧｍｂＨ＆Ｃｏ．，ＫＧ、独国から入手可能な２’－アミノ－３’－メトキシフラボン（別名ＰＤ９８０５９）を含む。
いくつかの実施形態では、ＭＥＫ阻害剤は、例えば米国特許第２，７７９，７８０号明細書）に記載されるとおり、２，３－ビス［アミノ［（２－アミノフェニル）チオ］メチレン］－ブタンジニトリル（別名Ｕ０１２６）を含む。
いくつかの実施形態では、ＭＥＫ阻害剤は、ＣＡＳ番号１０２９８７２－２９－４を有する、且つＡＣＣ Ｃｏｒｐ．から入手可能なＸＬ－５１８（別名ＧＤＣ－０９７３）を含む。
いくつかの実施形態では、ＭＥＫ阻害剤はＧ－３８９６３を含む。
いくつかの実施形態では、ＭＥＫ阻害剤はＧ０２４４３７１４（別名ＡＳ７０３２０６）を含む。
ＭＥＫ阻害剤のさらなる例は、その全体が参照によって本明細書に引用される国際公開第２０１３／０１９９０６号パンフレット、国際公開第０３／０７７９１４号パンフレット、国際公開第２００５／１２１１４２号パンフレット、国際公開第２００７／０４４１５号パンフレット、国際公開第２００８／０２４７２５号パンフレット及び国際公開第２００９／０８５９８３号パンフレットに開示される。ＭＥＫ阻害剤のさらなる例としては、限定はされないが、２，３－ビス［アミノ［（２－アミノフェニル）チオ］メチレン］－ブタンジニトリル（別名Ｕ０１２６及び米国特許第２，７７９，７８０号明細書に記載される）；（３Ｓ，４Ｒ，５Ｚ，８Ｓ，９Ｓ，１１Ｅ）－１４－（エチルアミノ）－８，９，１６－トリヒドロキシ－３，４－ジメチル－３，４，９、１９－テトラヒドロ－１Ｈ－２－ベンゾオキサシクロテトラデシン－１，７（８Ｈ）－ジオン］（別名Ｅ６２０１、国際公開第２００３０７６４２４号パンフレットに記載される）；ベムラフェニブ（ＰＬＸ－４０３２、ＣＡＳ ９１８５０４－６５－１）；（Ｒ）－３－（２，３－ジヒドロキシプロピル）－６－フルオロ－５－（２－フルオロ－４－ヨードフェニルアミノ）－８－メチルピリド［２，３－ｄ］ピリミジン－４，７（３Ｈ，８Ｈ）－ジオン（ＴＡＫ－７３３、ＣＡＳ １０３５５５５－６３－５）；ピマセルチブ（ＡＳ－７０３０２６、ＣＡＳ １２０４５３１－２６－９）；２－（２－フルオロ－４－ヨードフェニルアミノ）－Ｎ－（２－ヒドロキシエトキシ）－１，５－ジメチル－６－オキソ－１，６－ジヒドロピリジン－３－カルボキサミド（ＡＺＤ ８３３０）；及び３，４－ジフルオロ－２－［（２－フルオロ－４－ヨードフェニル）アミノ］－Ｎ－（２－ヒドロキシエトキシ）－５－［（３－オキソ－［１，２］オキサジナン－２－イル）メチル］ベンズアミド（ＣＨ４９８７６５５号明細書又はＲｏ４９８７６５５号明細書）が挙げられる。
ｃ－ＭＥＴ阻害剤
いくつかの実施形態では、疾患、例えば癌の処置に、ＺＢＴＢ３２阻害薬、又はその塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体との組み合わせでｃ－ＭＥＴ阻害剤が使用される。多くの腫瘍細胞型に過剰発現し又は突然変異する受容体チロシンキナーゼであるｃ－ＭＥＴは、腫瘍細胞増殖、生存、浸潤、転移及び腫瘍血管新生において主要な役割を果たす。ｃ－ＭＥＴを阻害すると、ｃ－ＭＥＴタンパク質を過剰発現するか、又は構成的に活性化したｃ－ＭＥＴタンパク質を発現する腫瘍細胞において細胞死が誘導され得る。
いくつかの実施形態では、ｃ－ＭＥＴ阻害剤は、カプマチニブ（ＩＮＣ２８０）、ＪＮＪ－３８８７６０５、ＡＭＧ ３３７、ＬＹ２８０１６５３、ＭＳＣ２１５６１１９Ｊ、クリゾチニブ、チバンチニブ、又はゴルバチニブから選ばれる。
例示的ｃ－ＭＥＴ阻害剤
いくつかの実施形態では、ｃ－ＭＥＴ阻害剤は、カプマチニブ（ＩＮＣ２８０）、又はその全体が参照によって本明細書に引用される米国特許第７，７６７，６７５号明細書及び同第８，４６１，３３０号明細書に記載される化合物を含む。
他の例示的ｃ－ＭＥＴ阻害剤
いくつかの実施形態では、ｃ－ＭＥＴ阻害剤はＪＮＪ－３８８７７６０５を含む。ＪＮＪ－３８８７７６０５は、ｃ－Ｍｅｔの経口投与可能な小分子阻害剤である。ＪＮＪ－３８８７７６０５はｃ－ＭＥＴに選択的に結合し、それによりｃ－ＭＥＴリン酸化を阻害し、ｃ－Ｍｅｔシグナル伝達経路を破壊する。
いくつかの実施形態では、ｃ－Ｍｅｔ阻害剤はＡＭＧ ２０８である。ＡＭＧ ２０８は、ｃ－ＭＥＴの選択的小分子阻害剤である。ＡＭＧ ２０８は、ｃ－ＭＥＴのリガンド依存的及びリガンド非依存的活性化を阻害してそのチロシンキナーゼ活性を阻害し、それによりｃ－Ｍｅｔを過剰発現する腫瘍に細胞成長阻害を生じさせ得る。
いくつかの実施形態では、ｃ－Ｍｅｔ阻害剤はＡＭＧ ３３７を含む。ＡＭＧ ３３７は、ｃ－Ｍｅｔの経口投与で生体利用可能な阻害剤である。ＡＭＧ ３３７はｃ－ＭＥＴに選択的に結合し、それによりｃ－ＭＥＴシグナル伝達経路を破壊する。
いくつかの実施形態では、ｃ－Ｍｅｔ阻害剤はＬＹ２８０１６５３を含む。ＬＹ２８０１６５３は、ｃ－Ｍｅｔの経口投与可能な小分子阻害剤である。ＬＹ２８０１６５３はｃ－ＭＥＴに選択的に結合し、それによりｃ－ＭＥＴリン酸化を阻害し、ｃ－Ｍｅｔシグナル伝達経路を破壊する。
いくつかの実施形態では、ｃ－Ｍｅｔ阻害剤はＭＳＣ２１５６１１９Ｊを含む。ＭＳＣ２１５６１１９Ｊは、ｃ－Ｍｅｔの経口投与で生体利用可能な阻害剤である。ＭＳＣ２１５６１１９Ｊはｃ－ＭＥＴに選択的に結合し、それによりｃ－ＭＥＴリン酸化が阻害され、ｃ－Ｍｅｔ媒介性シグナル伝達経路が破壊される。
いくつかの実施形態では、ｃ－ＭＥＴ阻害剤はカプマチニブである。カプマチニブはＩＮＣＢ０２８０６０としても知られる。カプマチニブは、ｃ－ＭＥＴの経口投与で生体利用可能な阻害剤である。カプマチニブはｃ－Ｍｅｔに選択的に結合し、それによりｃ－Ｍｅｔリン酸化を阻害し、ｃ－Ｍｅｔシグナル伝達経路を破壊する。
いくつかの実施形態では、ｃ－ＭＥＴ阻害剤はクリゾチニブを含む。クリゾチニブはＰＦ－０２３４１０６６としても知られる。クリゾチニブは、受容体チロシンキナーゼ未分化リンパ腫キナーゼ（ＡＬＫ）及びｃ－Ｍｅｔ／肝細胞増殖因子受容体（ＨＧＦＲ）の経口投与可能なアミノピリジンベースの阻害剤である。クリゾチニブは、ＡＴＰ競合的に、ＡＬＫキナーゼ及びＡＬＫ融合タンパク質に結合し、それを阻害する。加えて、クリゾチニブはｃ－Ｍｅｔキナーゼを阻害し、ｃ－Ｍｅｔシグナル伝達経路を破壊する。まとめると、この薬剤は腫瘍細胞成長を阻害する。
いくつかの実施形態では、ｃ－ＭＥＴ阻害剤はゴルバチニブを含む。ゴルバチニブは、潜在的な抗新生物活性を有するｃ－ＭＥＴ及びＶＥＧＦＲ－２の経口投与で生体利用可能なデュアルキナーゼ阻害剤である。ゴルバチニブはｃ－ＭＥＴ及びＶＥＧＦＲ－２の両方に結合し、それらの活性を阻害するものであり、これにより、これらの受容体チロシンキナーゼを過剰発現する腫瘍細胞の腫瘍細胞成長及び生存が阻害され得る。
いくつかの実施形態では、ｃ－ＭＥＴ阻害剤はチバンチニブである。チバンチニブは、ＡＲＱ １９７としても知られる。チバンチニブは、ｃ－ＭＥＴの経口投与で生体利用可能な小分子阻害剤である。チバンチニブはｃ－ＭＥＴタンパク質に結合し、ｃ－Ｍｅｔシグナル伝達経路を破壊するものであり、これにより、ｃ－ＭＥＴタンパク質を過剰発現するか、又は構成的に活性化したｃ－Ｍｅｔタンパク質を発現する腫瘍細胞において細胞死が誘導され得る。
ＴＧＦ－β阻害剤
いくつかの実施形態において、形質転換成長因子ベータ（ＴＧＦ－β ＴＧＦβ、ＴＧＦｂ、又はＴＧＦ－ベータとしても知られ、本明細書では互換的に使用される）阻害剤は、ＺＢＴＢ３２阻害剤、又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体と組み合わせて、疾患、例えば癌を処置するために使用される。特定の実施形態において、本明細書に記載の組み合わせは、形質転換成長因子ベータ（ＴＧＦ－β ＴＧＦβ、ＴＧＦｂ、又はＴＧＦ－ベータとしても知られ、本明細書では互換的に使用される）阻害剤を含む。
ＴＧＦ－βは、例えば、骨形成タンパク質（ＢＭＰ）、成長及び分化因子、アクチビン並びにインヒビンを含む、構造的に関連するサイトカインの大きいファミリーに属している。いくつかの実施形態において、本明細書に記載のＴＧＦ－β阻害剤は、ＴＧＦ－βの１つ以上のアイソフォーム（例えば、ＴＧＦ－β１、ＴＧＦ－β２、又はＴＧＦ－β３の１つ、２つ、又は全て）に結合及び／又はそれを阻害することができる。
通常の条件下では、ＴＧＦ－βは恒常性を維持し、例えば抗増殖反応及びアポトーシス反応の誘導を通じて、上皮細胞、内皮細胞、神経細胞及び造血細胞系統の成長を制限する。標準及び非標準のシグナル伝達経路は、ＴＧＦ－βに対する細胞応答に関与している。ＴＧＦ－β／Ｓｍａｄ標準経路の活性化は、ＴＧＦ－βの抗増殖効果を媒介することができる。非標準ＴＧＦ－β経路は、更なる細胞内経路、例えば、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ（ＭＡＰＫ）、ホスファチジルイノシトール３キナーゼ／プロテインキナーゼＢ、Ｒｈｏ様ＧＴＰａｓｅ（Ｔｉａｎ ｅｔ ａｌ．Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌ．２０１１；２３（６）：９５１－６２；Ｂｌｏｂｅ ｅｔ ａｌ．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．２０００；３４２（１８）：１３５０－８）を活性化し、したがって、上皮間葉転換（ＥＭＴ）及び／又は細胞運動性を調節することができる。
ＴＧＦ－βシグナル伝達経路の変化は、ヒトの疾患、例えば、癌、心血管疾患、線維症、生殖障害、創傷治癒に関連している。理論に拘束されることを望むものではないが、いくつかの実施形態において、癌におけるＴＧＦ－βの役割は、疾患状況（例えば、腫瘍の病期及び遺伝子変化）及び／又は細胞状況に依存すると考えられる。例えば、癌の末期では、ＴＧＦ－βは、例えば、腫瘍成長の促進（例えば、ＥＭＴの誘導）、抗腫瘍免疫応答の遮断、腫瘍関連線維症の増加、又は血管新生の増強によって、癌関連プロセスを調節することができる（Ｗａｋｅｆｉｅｌｄ ａｎｄ Ｈｉｌｌ Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｃａｎｃｅｒ．２０１３；１３（５）：３２８－４１）。特定の実施形態において、本明細書に記載のＴＧＦ－β阻害剤を含む組み合わせは、末期の癌、転移癌、又は進行性癌を処置するために使用される。
前臨床のエビデンスは、ＴＧＦ－βが免疫調節において重要な役割を果たしていることを示す（Ｗｏｊｔｏｗｉｃｚ－Ｐｒａｇａ Ｉｎｖｅｓｔ Ｎｅｗ Ｄｒｕｇｓ．２００３；２１（１）：２１－３２；Ｙａｎｇ ｅｔ ａｌ．Ｔｒｅｎｄｓ Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０１０；３１（６）：２２０－７）。ＴＧＦ－βは、いくつかの機構、例えば、ＴヘルパーバランスのＴｈ２免疫表現型へのシフト；抗腫瘍Ｔｈ１型応答及びＭ１型マクロファージの阻害；細胞毒性ＣＤ８＋Ｔリンパ球（ＣＴＬ）、ＮＫリンパ球及び樹状細胞機能の抑制、ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｔ調節細胞の生成；又は免疫抑制性サイトカイン（例えば、ＩＬ１０又はＶＥＧＦ）、炎症誘発性サイトカイン（例えば、ＩＬ６、ＴＮＦα、又はＩＬ１）の分泌、及び遺伝毒性作用を有する活性酸素種（ＲＯＳ）の生成によって媒介される、腫瘍促進活性による、Ｍ２型マクロファージの促進を介して、宿主免疫応答を下方制御できる（Ｙａｎｇ ｅｔ ａｌ．Ｔｒｅｎｄｓ Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０１０；３１（６）：２２０－７；Ｔｒｕｔｙ ａｎｄ Ｕｒｒｕｔｉａ Ｐａｎｃｒｅａｔｏｌｏｇｙ．２００７；７（５－６）：４２３－３５；Ａｃｈｙｕｔ ｅｔ ａｌ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ．２０１１；１４１（４）：１１６７－７８）。
例示的なＴＧＦ－β阻害剤
いくつかの実施形態において、ＴＧＦ－β阻害剤は、ＸＯＭＡ０８９、又は参照によりその全体が組み込まれる国際出願公開第２０１２／１６７１４３号パンフレットに開示される化合物を含む。
ＸＯＭＡ ０８９は、ＸＰＡ．４２．０８９としても知られている。ＸＯＭＡ ０８９は、ＴＧＦ－ベータ１及び２リガンドに特異的に結合し中和する完全ヒトモノクローナル抗体である。
ＸＯＭＡ０８９の重鎖可変領域は、ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＧＴＦＳＳＹＡＩＳＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＧＩＩＰＩＦＧＴＡＮＹＡＱＫＦＱＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＬＷＥＶＲＡＬＰＳＶＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号２８４）（国際公開第２０１２／１６７１４３号パンフレットで配列番号６として開示される）のアミノ酸配列を有する。ＸＯＭＡ０８９の軽鎖可変領域は、ＳＹＥＬＴＱＰＰＳＶＳＶＡＰＧＱＴＡＲＩＴＣＧＡＮＤＩＧＳＫＳＶＨＷＹＱＱＫＡＧＱＡＰＶＬＶＶＳＥＤＩＩＲＰＳＧＩＰＥＲＩＳＧＳＮＳＧＮＴＡＴＬＴＩＳＲＶＥＡＧＤＥＡＤＹＹＣＱＶＷＤＲＤＳＤＱＹＶＦＧＴＧＴＫＶＴＶＬＧ（配列番号２８５）（国際公開第２０１２／１６７１４３号パンフレットにおいて配列番号８として開示される）のアミノ酸配列を有する。
ＸＯＭＡ０８９は、ヒトＴＧＦ－βアイソフォームに高い親和性で結合する。一般に、ＸＯＭＡ０８９は、ＴＧＦ－β１及びＴＧＦ－β２に高い親和性で結合し、ＴＧＦ－β３にはそれほど結合しない。Ｂｉａｃｏｒｅアッセイにおいて、ヒトＴＧＦ－βに対するＸＯＭＡ ０８９のＫＤは、ＴＧＦ－β１では１４．６ｐＭ、ＴＧＦ－β２では６７．３ｐＭ、ＴＧＦ－β３では９４８ｐＭである。３つ全てのＴＧＦ－βアイソフォームへの高親和性結合を考慮すると、特定の実施形態において、ＸＯＭＡ０８９は、本明細書に記載のＸＯＭＡ０８９の用量で、ＴＧＦ－β１、２及び３に結合すると予想される。ＸＯＭＡ０８９は、げっ歯類及びカニクイザルＴＧＦ－βと交差反応し、インビトロ及びインビボで機能的活性を示し、げっ歯類及びカニクイザルを毒性学研究に適した種とする。
他の例示的なＴＧＦ－β阻害剤
いくつかの実施形態において、ＴＧＦ－β阻害剤は、フレソリムマブ（ＣＡＳ登録番号：９４８５６４－７３－６）を含む。フレソリムマブは、ＧＣ１００８としても知られている。フレソリムマブは、ＴＧＦ－ベータアイソフォーム１、２、及び３に結合して阻害するヒトモノクローナル抗体である。
フレソリムマブの重鎖は、
Figure 2023529211000227
 のアミノ酸配列を有する。
フレソリムマブの軽鎖は、
Figure 2023529211000228
 のアミノ酸配列を有する。
フレソリムマブは、例えば、国際出願公開第２００６／０８６４６９号パンフレット、並びに米国特許第８，３８３，７８０号明細書及び同第８，５９１，９０１号明細書に開示されており、これらは参照によりその全体が組み込まれる。
ＩＬ－１β阻害剤
インターロイキン－１（ＩＬ－１）サイトカインファミリーは、炎症及び免疫応答において中心的な役割を有する一群の分泌型多面的サイトカインである。癌を含めた複数の臨床セッティングでＩＬ－１の増加が観察される（Ａｐｔｅ ｅｔ ａｌ．（２００６）Ｃａｎｃｅｒ Ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ Ｒｅｖ．ｐ．３８７－４０８；Ｄｉｎａｒｅｌｌｏ（２０１０）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．ｐ．５９９－６０６）。ＩＬ－１ファミリーは、とりわけ、ＩＬ－１ベータ（ＩＬ－１ｂ）及びＩＬ－１アルファ（ＩＬ－１ａ）を含む。ＩＬ－１ｂは、肺癌、乳癌及び結腸直腸癌で上昇し（Ｖｏｒｏｎｏｖ ｅｔ ａｌ．（２０１４）Ｆｒｏｎｔ Ｐｈｙｓｉｏｌ．ｐ．１１４）、予後不良に関連する（Ａｐｔｅ ｅｔ ａｌ．（２０００）Ａｄｖ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．ｐ．２７７－８８）。理論によって拘束されることを望むものではないが、いくつかの実施形態では、腫瘍微小環境に由来する及び悪性細胞によって得られる分泌型ＩＬ－１ｂは、一部には抑制性好中球を動員することにより、腫瘍細胞増殖を促進し、侵襲性を増加させ、且つ抗腫瘍免疫応答を減退させると考えられる（Ａｐｔｅ ｅｔ ａｌ．（２００６）Ｃａｎｃｅｒ Ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ Ｒｅｖ．ｐ．３８７－４０８；Ｍｉｌｌｅｒ ｅｔ ａｌ．（２００７）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．ｐ．６９３３－４２）。実験データからは、ＩＬ－１ｂを阻害すると腫瘍負荷及び転移が減少することが示される（Ｖｏｒｏｎｏｖ ｅｔ ａｌ．（２００３）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．ｐ．２６４５－５０）。
いくつかの実施形態では、疾患、例えば癌の処置に、ＺＢＴＢ３２阻害薬、又はその塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体との組み合わせでインターロイキン－１ベータ（ＩＬ－１β）阻害剤が使用される。いくつかの実施形態では、ＩＬ－１β阻害剤は、カナキヌマブ、ゲボキズマブ、アナキンラ、又はリロナセプトから選ばれる。いくつかの実施形態では、ＩＬ－１β阻害剤はカナキヌマブである。
例示的ＩＬ－１β阻害剤
いくつかの実施形態では、ＩＬ－１β阻害剤はカナキヌマブである。カナキヌマブはＡＣＺ８８５又はＩＬＡＲＩＳ（登録商標）としても知られる。カナキヌマブは、ヒトＩＬ－１βの生物活性を中和するヒトモノクローナルＩｇＧ１／κ抗体である。
カナキヌマブについては、例えば、国際公開第２００２／１６４３６号パンフレット、米国特許第７，４４６，１７５号明細書及び欧州特許第１３１３７６９号明細書に開示されている。カナキヌマブの重鎖可変領域は、
Figure 2023529211000229
 （米国特許第７，４４６，１７５号明細書に配列番号１として開示される）のアミノ酸配列を有する。カナキヌマブの軽鎖可変領域は、
ＭＬＰＳＱＬＩＧＦＬＬＬＷＶＰＡＳＲＧＥＩＶＬＴＱＳＰＤＦＱＳＶＴＰＫＥＫＶＴＩＴＣＲＡＳＱＳＩＧＳＳＬＨＷＹＱＱＫＰＤＱＳＰＫＬＬＩＫＹＡＳＱＳＦＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＮＳＬＥＡＥＤＡＡＡＹＹＣＨＱＳＳＳＬＰＦＴＦＧＰＧＴＫＶＤＩＫ（配列番号２８３）（米国特許第７，４４６，１７５号明細書に配列番号２として開示される）のアミノ酸配列を有する。
カナキヌマブは、例えば、成人及び小児のクリオピリン関連周期性症候群（ＣＡＰＳ）の処置、全身性若年性特発性関節炎（ＳＪＩＡ）の処置、成人の急性痛風関節炎発作の対症療法及び他のＩＬ－１βによってドライブされる炎症性疾患に使用されている。理論によって拘束されることを望むものではないが、いくつかの実施形態では、ＩＬ－１β阻害剤、例えばカナキヌマブは、例えば、腫瘍微小環境への免疫抑制性好中球の動員、腫瘍血管新生の刺激及び／又は転移の促進を含めたＩＬ－１ｂの１つ以上の機能を例えば遮断することにより、抗腫瘍免疫応答を増加させることができると考えられる（Ｄｉｎａｒｅｌｌｏ（２０１０）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．ｐ．５９９－６０６）。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載される組み合わせは、ＩＬ－１β阻害剤、カナキヌマブ、又は国際公開第２００２／１６４３６号パンフレットに開示される化合物と、免疫チェックポイント分子の阻害剤、例えばＰＤ－１の阻害剤（例えば抗ＰＤ－１抗体分子）とを含む。ＩＬ－１は、炎症及び免疫応答において中心的な役割を有する分泌型多面的サイトカインである。癌を含めた複数の臨床セッティングでＩＬ－１の増加が観察される（Ａｐｔｅ ｅｔ ａｌ．（２００６）Ｃａｎｃｅｒ Ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ Ｒｅｖ．ｐ．３８７－４０８；Ｄｉｎａｒｅｌｌｏ（２０１０）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．ｐ．５９９－６０６）。ＩＬ－１ｂは、肺癌、乳癌及び結腸直腸癌で上昇し（Ｖｏｒｏｎｏｖ ｅｔ ａｌ．（２０１４）Ｆｒｏｎｔ Ｐｈｙｓｉｏｌ．ｐ．１１４）、予後不良に関連する（Ａｐｔｅ ｅｔ ａｌ．（２０００）Ａｄｖ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．ｐ．２７７－８８）。理論によって拘束されることを望むものではないが、いくつかの実施形態では、腫瘍微小環境に由来する及び悪性細胞によって得られる分泌型ＩＬ－１ｂは、一部には抑制性好中球を動員することにより、腫瘍細胞増殖を促進し、侵襲性を増加させ、及び抗腫瘍免疫応答を減少させると考えられる（Ａｐｔｅ ｅｔ ａｌ．（２００６）Ｃａｎｃｅｒ Ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ Ｒｅｖ．ｐ．３８７－４０８；Ｍｉｌｌｅｒ ｅｔ ａｌ．（２００７）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．ｐ．６９３３－４２）。実験データからは、ＩＬ－１ｂを阻害すると腫瘍負荷及び転移が低下することが示される（Ｖｏｒｏｎｏｖ ｅｔ ａｌ．（２００３）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．ｐ．２６４５－５０）。カナキヌマブはＩＬ－１ｂに結合し、ＩＬ－１媒介性シグナル伝達を阻害することができる。従って、特定の実施形態では、ＩＬ－１β阻害剤、例えばカナキヌマブは、ＰＤ－１の阻害剤（例えば、抗ＰＤ－１抗体分子）の免疫介在性抗腫瘍効果を亢進させ、又はそれを亢進させるために使用される。
いくつかの実施形態では、ＩＬ－１β阻害剤、カナキヌマブ、又は国際公開第２００２／１６４３６号パンフレットに開示される化合物と、免疫チェックポイント分子の阻害剤、例えばＰＤ－１の阻害剤（例えば抗ＰＤ－１抗体分子）とは、各々が、組み合わせで所望の抗腫瘍活性を実現する用量及び／又はタイムスケジュールで投与される。
ＭＤＭ２阻害剤
いくつかの実施形態では、疾患、例えば癌の処置に、ＺＢＴＢ３２阻害薬、又はその塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体との組み合わせでマウス二重微小染色体２ホモログ（ＭＤＭ２）阻害剤が使用される。ＭＤＭ２のヒトホモログはＨＤＭ２としても知られる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＭＤＭ２阻害剤はＨＤＭ２阻害剤としても知られる。いくつかの実施形態では、ＭＤＭ２阻害剤は、ＨＤＭ２０１又はＣＧＭ０９７から選ばれる。
ある実施形態において、ＭＤＭ２阻害剤は、障害、例えば本明細書に記載される障害の処置のため、（Ｓ）－１－（４－クロロフェニル）－７－イソプロポキシ－６－メトキシ－２－（４－（メチル（（（１ｒ，４Ｓ）－４－（４－メチル－３－オキソピペラジン－１－イル）シクロヘキシル）メチル）アミノ）フェニル）－１，２－ジヒドロイソキノリン－３（４Ｈ）－オン（別名ＣＧＭ０９７）又は国際公開第２０１１／０７６７８６号パンフレットに開示される化合物を含む）。一実施形態では、本明細書に開示される治療薬はＣＧＭ０９７と組み合わせて使用される。
ある実施形態では、ＭＤＭ２阻害剤は、ｐ５３及び／又はｐ５３／Ｍｄｍ２相互作用の阻害剤を含む。ある実施形態では、ＭＤＭ２阻害剤は、障害、例えば本明細書に記載される障害の処置のため、（Ｓ）－５－（５－クロロ－１－メチル－２－オキソ－１，２－ジヒドロピリジン－３－イル）－６－（４－クロロフェニル）－２－（２，４－ジメトキシピリミジン－５－イル）－１－イソプロピル－５，６－ジヒドロピロロ［３，４－ｄ］イミダゾール－４（１Ｈ）－オン（別名ＨＤＭ２０１）、又は国際公開第２０１３／１１１１０５号パンフレットに開示される化合物を含む。一実施形態では、本明細書に開示される治療薬はＨＤＭ２０１と組み合わせて使用される。いくつかの実施形態では、ＨＤＭ２０１は経口投与される。
一実施形態では、本明細書に開示される組み合わせは、インビボでの癌の処置に好適である。例えば、本組み合わせは、癌性腫瘍の成長の阻害に使用することができる。本組み合わせは、本明細書における障害の処置のため、標準ケア処置（例えば、癌又は感染性障害に対するもの）、ワクチン（例えば、治療用癌ワクチン）、細胞療法、放射線療法、手術又は任意の他の治療薬又はモダリティのうちの１つ以上と組み合わせて使用することもできる。例えば、免疫を抗原特異的に亢進させることを実現するため、本組み合わせを目的の抗原と共に投与することができる。
多重特異性結合分子
いくつかの実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤、又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体は、多重特異性結合分子（「ＭＢＭ」）と組み合わせて使用される。本明細書で使用される場合、「ＭＢＭ」という用語は、２つ以上の異なるエピトープを認識する結合分子を指す。ＭＢＭの例には、２つの異なるエピトープを認識する二重特異性結合分子（「ＢＢＭ」）、及び３つの異なるエピトープを認識する三重特異性結合分子（「ＴＢＭ」）が含まれる。エピトープは、同じ標的又は異なる標的上に存在することができる。
したがって、本開示のＺＢＴＢ３２阻害剤と組み合わせて使用又は投与するのに適したＭＢＭは、異なるエピトープに結合する少なくとも２つの抗原結合ドメイン（「ＡＢＤ」）を含む。本明細書で使用される「抗原結合ドメイン」又は「ＡＢＤ」という用語は、非共有結合的に、可逆的に及び特異的にエピトープに結合する能力を有するＭＢＭの部分を指す。
一般に、癌の処置のために、本開示のＺＢＴＢ３２阻害剤と組み合わせて有用なＭＢＭは、少なくとも１つの腫瘍関連抗原（「ＴＡＡ」）に結合する。本明細書において使用される場合、「腫瘍関連抗原」又は「ＴＡＡ」という用語は、癌細胞の表面において全体的に又はフラグメント（例えば、ＭＨＣ／ペプチド）として発現され、癌細胞に対する薬剤の優先的な標的化のために有用である分子（典型的にタンパク質、炭水化物、脂質又はそれらのいくつかの組合せ）を指す。ＴＡＡは、正常細胞及び癌細胞の両方によって発現され得るマーカー、例えば系列マーカー、例えばＢ細胞におけるＣＤ１９である。ＴＡＡはまた、正常細胞と比較して癌細胞で過剰発現する（例えば、正常細胞と比較して１倍の過剰発現、２倍の過剰発現、３倍の過剰発現又はそれを超える）細胞表面分子であり得る。ＴＡＡは、癌細胞で不適切に合成される細胞表面分子、例えば正常細胞に発現する分子と比較して欠失、付加又は変異を含む分子である。特定のＴＡＡは、癌細胞の細胞表面のみにおいて全体的に又はフラグメント（例えば、ＭＨＣ／ペプチド）として発現され、正常細胞の表面において合成又は発現されない場合がある。したがって、「ＴＡＡ」という用語は、当技術分野で場合により腫瘍特異的抗原（「ＴＳＡ」）として知られている、癌細胞に特異的な抗原を包含する。更に、本明細書で使用される場合、「癌」という用語は、異常細胞の制御されない（且つ多くの場合、急速な）成長を特徴とする疾患を指す。癌細胞は、局所的に又は血流及びリンパ系を通じて体の他の部位に広がり得る。様々な癌の例は、本明細書に記載されており、限定はされないが、白血病、多発性骨髄腫、無症候性骨髄腫、ホジキンリンパ腫、及び非ホジキンリンパ腫が挙げられる。いくつかの実施形態において、ＴＡＡは、癌性Ｂ細胞上で発現される。「癌性Ｂ細胞」という用語は、無制御の増殖を起こしているか又は起こしたＢ細胞を指す。
本開示のＺＢＴＢ３２阻害剤と組み合わせて有用なＭＢＭ（例えば、ＢＢＭ又はＴＢＭ）によって標的とすることができるＴＡＡの例は、ＴＳＨＲ、ＣＤ１７１、ＣＳ－１、ＣＬＬ－１、ＧＤ３、Ｔｎ Ａｇ、ＦＬＴ３、ＣＤ３８、ＣＤ４４ｖ６、Ｂ７Ｈ３、ＫＩＴ、ＩＬ－１３Ｒａ２、ＩＬ－１１Ｒａ、ＰＳＣＡ、ＰＲＳＳ２１、ＶＥＧＦＲ２、ＬｅｗｉｓＹ、ＣＤ２４、ＰＤＧＦＲ－ベータ、ＳＳＥＡ－４、ＭＵＣ１、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＮＣＡＭ、ＣＡＩＸ、ＬＭＰ２、ＥｐｈＡ２、フコシルＧＭ１、ｓＬｅ、ＧＭ３、ＴＧＳ５、ＨＭＷＭＡＡ、ｏ－アセチル－ＧＤ２、ＧＤ２、葉酸受容体アルファ、葉酸受容体ベータ、ＴＥＭ１／ＣＤ２４８、ＴＥＭ７Ｒ、ＣＬＤＮ６、ＧＰＲＣ５Ｄ、ＣＸＯＲＦ６１、ＣＤ９７、ＣＤ１７９ａ、ＡＬＫ、ポリシアル酸、ＰＬＡＣ１、ＧｌｏｂｏＨ、ＮＹ－ＢＲ－１、ＵＰＫ２、ＨＡＶＣＲ１、ＡＤＲＢ３、ＰＡＮＸ３、ＧＰＲ２０、ＬＹ６Ｋ、ＯＲ５１Ｅ２、ＴＡＡＲＰ、ＷＴ１、ＥＴＶ６－ＡＭＬ、精子タンパク質１７、ＸＡＧＥ１、Ｔｉｅ ２、ＭＡＤ－ＣＴ－１、ＭＡＤ－ＣＴ－２、Ｆｏｓ関連抗原１、ｐ５３変異型、ｈＴＥＲＴ、肉腫転座ブレークポイント、ＭＬ－ＩＡＰ、ＥＲＧ（ＴＭＰＲＳＳ２ ＥＴＳ融合遺伝子）、ＮＡ１７、ＰＡＸ３、アンドロゲン受容体、サイクリンＢ１、ＭＹＣＮ、ＲｈｏＣ、ＣＹＰ１Ｂ１、ＢＯＲＩＳ、ＳＡＲＴ３、ＰＡＸ５、ＯＹ－ＴＥＳ１、ＬＣＫ、ＡＫＡＰ－４、ＳＳＸ２、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ７２、ＬＡＩＲ１、ＦＣＡＲ、ＬＩＬＲＡ２、ＣＤ３００ＬＦ、ＣＬＥＣ１２Ａ、ＢＳＴ２、ＥＭＲ２、ＬＹ７５、ＧＰＣ３、ＦＣＲＬ５、ＩＧＬＬ１、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ３０、ＥＲＢＢ２、ＲＯＲ１、ＦＬＴ３、ＴＡＡＧ７２、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＧＤ２、ＢＣＭＡ、ｇｐ１００Ｔｎ、ＦＡＰ、チロシナーゼ、ＥＰＣＡＭ、ＣＥＡ、Ｉｇｆ－Ｉ受容体、カドヘリン１７、ＣＤ３２ｂ、ＧＰＮＭＢ、ＧＰＲ６４、ＨＥＲ３、ＬＲＰ６、ＬＹＰＤ８、ＮＫＧ２Ｄ、ＳＬＣ３４Ａ２、ＳＬＣ３９Ａ６、ＳＬＩＴＲＫ６、ＴＡＣＳＴＤ２、及びＥｐｈＢ２を含む。
特定の態様において、ＴＡＡは、癌性血液細胞、例えば、癌性Ｂ細胞上で発現される。癌性Ｂ細胞に発現されるＴＡＡの例は、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ１２３、ＢＣＭＡ、ＣＤ３３、ＣＬＬ１、ＣＤ１３８（シンデカン－１、ＳＤＣ１としても知られている）、ＣＳ１、ＣＤ３８、ＣＤ１３３、ＦＬＴ３、ＣＤ５２、ＴＮＦＲＳＦ１３Ｃ（当技術分野において、ＢＡＦＦＲ：Ｂ細胞活性化因子受容体とも呼ばれるＴＮＦ受容体スーパーファミリーメンバー１３Ｃ）、ＴＮＦＲＳＦ１３Ｂ（当技術分野において、ＴＡＣＩ：膜貫通アクティベーター及びＣＡＭＬ相互作用体とも呼ばれるＴＮＦ受容体スーパーファミリーメンバー１３Ｂ）、ＣＸＣＲ４（Ｃ－Ｘ－Ｃモチーフケモカイン受容体４）、ＰＤ－Ｌ１（プログラム細胞死リガンド１）、ＬＹ９（当技術分野において、ＣＤ２２９とも呼ばれるリンパ球抗原９）、ＣＤ２００、ＦＣＧＲ２Ｂ（当技術分野において、ＣＤ３２ｂとも呼ばれるＩｇＧ受容体ｌｉｂのＦｃフラグメント）、ＣＤ２１、ＣＤ２３、ＣＤ２４、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ７２、ＣＤ７９ａ及びＣＤ７９ｂを含むが、これらに限定されない。
ＴＡＡへの結合に加えて、本開示のＺＢＴＢ３２阻害剤と組み合わせて有用なＭＢＭは、免疫系、例えばＴ細胞又はＮＫ細胞に会合することができる。Ｔ細胞の会合は、ＣＤ３又はＴＣＲ複合体の他の成分、例えばＴＣＲ－α、ＴＣＲ－β、又はＴＣＲ－α／β二量体を標的とすることによって達成することができる。ＣＤ３又はＴＣＲ複合体の他の成分を認識する例示的なＡＢＤは、国際公開第２０２０／０５２６９２号パンフレット及び国際公開第２０１９／１０４０７５号パンフレットに記載されている（例えば、参照により本明細書に組み込まれる、国際公開第２０２０／０５２６９２号パンフレットのセクション７．８．１、７．８．２及び７．８．３、並びに国際公開第２０１９／１０４０７５号パンフレットのセクション６．５を参照）。ＭＢＭは、例えば国際公開第２０１９／１０４０７５号パンフレットに一般的に開示されているように、ＣＤ２に結合するＡＢＤを更に含み得る。いくつかの実施形態において、ＣＤ２は、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２０１９／１０４０７５号パンフレットのセクション６．６．２に記載されるように、そのリガンドＣＤ５８及びそのＣＤ２結合部分をＡＢＤとして使用することによって標的とすることができる。ＮＫ細胞の会合は、ＣＤ１６、ＮＫｐ４６、ＮＫＧ２Ｄ、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４４、ＮＫｐ４６、又はそれらの組み合わせ、例えば、ＣＤ１６とＮＫｐ４６の組み合わせを標的とすることによって達成することができる。例えば、Ｈｕ ｅｔ ａｌ．，２０１９，Ｆｒｏｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１０：１２０５、Ｇａｕｔｈｉｅｒ ｅｔ ａｌ．，２０１９，Ｃｅｌｌ １７７（７）：１７０１－１７１３を参照されたい。
いくつかの実施形態において、ＭＢＭは、Ｂ細胞成熟抗原又はＢＣＭＡに結合するＢＢＭであり、ＴＣＲ複合体の成分、好ましくはＣＤ３である。他の実施形態において、ＭＢＭは、ＢＣＭＡ、ＴＣＲ複合体の成分、好ましくはＣＤ３、並びに第２のＴＡＡ又はＣＤ２のいずれかに（例えば、ＣＤ５８ベースのＡＢＤ、例えば、ＣＤ５８のアミノ酸残基３０～１２３を含むＡＢＤを介して）結合するＢＢＭである。ＢＣＭＡの発現は、多くの癌、自己免疫疾患及び感染症と関連付けられている。ＢＣＭＡの増加した発現を有する癌としては、多発性骨髄腫、ホジキンリンパ腫及び非ホジキンリンパ腫、様々な白血病、及び膠芽細胞腫などの、いくつかの血液癌が挙げられる。国際公開第２０１９／２２９７０１号パンフレットは、ヒトＢＣＭＡに特異的に結合する多数のＭＢＭ、並びにＢＣＭＡに結合するＭＢＭに含まれ得る例示的なＢＣＭＡ結合配列の配列を記載している（例えば、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２０１９／２２９７０１号パンフレットの段落［０１４９］及び表１に開示されるＢＣＭＡ結合配列セットを参照）。国際公開第２０１９／２２９７０１号パンフレットはまた、ＢＣＭＡ及びＣＤ３に向けられたＢＢＭについても記載している（例えば、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２０１９／２２９７０１号パンフレットのセクション７．３．３．１を参照）。
他の実施形態において、ＭＢＭは、ＣＤ１９及びＴＣＲ複合体の成分、好ましくはＣＤ３に結合するＢＢＭである。他の実施形態において、ＭＢＭは、ＣＤ１９、ＴＣＲ複合体の成分、好ましくはＣＤ３、並びに第２のＴＡＡ又はＣＤ２のいずれかに（例えば、ＣＤ５８ベースのＡＢＤ、例えば、ＣＤ５８のアミノ酸残基３０～１２３を含むＡＢＤを介して）結合するＢＢＭである。ＣＤ１９、ＣＤ３及びＣＤ２に結合するＴＢＭ（例えば、ＣＤ５８ベースのＡＢＤ、例えばＣＤ５８のアミノ酸残基３０～１２３を含むＡＢＤを介して）は、国際公開第２０１９／１０４０７５号パンフレットの図１Ｄに示される一般的な形態を有し得、例えば、図１ＤのＸがＣＤ１９ ＡＢＤである場合、ＸはＣＤ３ ＡＢＭであり、ＺはＣＤ２ ＡＢＭであり、より具体的には、国際公開第２０１９／１０４０７５号パンフレットの図１２Ａ、１２Ｂ及び１２Ｃに示される形態であり、これらの図及び付随する文書は全て、参照により本明細書に組み込まれる。ＣＤ１９は、初期のプレＢ細胞発生中に発現され、形質細胞分化まで保持される。ＣＤ１９は、正常Ｂ細胞及び異常な増殖がＢ細胞リンパ腫を引き起こし得る悪性Ｂ細胞の両方において発現される。例えば、ＣＤ１９は、非ホジキンリンパ腫（Ｂ－ＮＨＬ）、慢性リンパ性白血病及び急性リンパ性白血病を含むが、これらに限定されないＢ細胞系統の悪性腫瘍で発現する。
癌治療のために開発されている多数のＭＢＭは、典型的には、ＴＡＡに向けられる１つ以上のＡＢＤ、及び免疫細胞の会合を促進できる１つ以上のＡＢＤを含むが、本開示のＺＢＴＢ３２阻害剤と組み合わせて有用なＭＢＭは、Ｔ細胞又はＮＫ細胞などの免疫細胞に会合することを要しない。例えば、ＭＢＭは、例えばＶＥＧ－Ｆ、並びにデルタ様リガンド４（ＤＬＬ－４）、Ｎｏｔｃｈ受容体の膜貫通リガンド又はアンジオポエチン２（ＡＮＧ－２）などの別の抗原を標的とすることにより、血管新生経路を阻害するために使用することができる。
例示的な種類のＡＢＤは、非共有結合的に、可逆的に及び特異的に抗原に結合する能力を保持する、抗原結合フラグメント並びに免疫グロブリン及び非免疫グロブリンの両方に基づく足場の部分を含む。したがって、本明細書で使用される場合、「抗原結合ドメイン」という用語は、非共有結合的に、可逆的に及び特異的に抗原に結合する能力を保持する抗体フラグメントを包含する。結合フラグメントの例は、一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、Ｆａｂフラグメント、ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ及びＣＨ１ドメインからなる１価フラグメント；ＶＨ及びＣＨ１ドメインからなるＦｄフラグメント；抗体の単一アームのＶＬ及びＶＨドメインからなるＦｖフラグメント；ＶＨドメインからなるｄＡｂフラグメント；及び単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）を含むが、これらに限定されない。したがって、「抗体フラグメント」という用語は、抗体のタンパク質分解フラグメント（例えば、Ｆａｂ及びＦ（ａｂ）２フラグメント）並びに抗体の１つ以上の部分（例えば、ｓｃＦｖ）を含む改変タンパク質を包含する。Ｆａｂ－、ｓｃＦｖ－などの免疫グロブリンベースのＡＢＤ、及び上記のものなどの他の抗体フラグメントベースのＡＢＤに加えて、本開示のＭＢＭは、非免疫グロブリンベースのＡＢＤ、又は免疫グロブリンと非免疫グロブリンベースのＡＢＤの組み合わせも含み得る。使用できる免疫グロブリンベースのＡＢＤは、国際公開第２０１９／１０４０７５号パンフレット及び国際公開第２０１９／２２９７０１号パンフレットに記載されている（例えば、参照により本明細書に組み込まれる、国際公開第２０１９／２２９７０１号パンフレットのセクション７．２及び７．３．１並びに国際公開第２０１９／１０４０７５号パンフレットのセクション６．２．１を参照）。クニッツドメイン、アドネキシン、アフィボディ、ＤＡＲＰｉｎ、アビマー、アンチカリン、リポカリン、フィブロネクチン足場、アフィマー、及びフィノマーを含む、非免疫グロブリンベースのＡＢＤは、国際公開第２０１９／１０４０７５号パンフレット及び国際公開第２０１９／２２９７０１号パンフレットに記載される（例えば、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２０１９／２２９７０１号パンフレットのセクション７．４及び国際公開第２０１９／１０４０７５号パンフレットのセクション６．３及びＨｏｂｅｒ ｅｔ ａｌ．，２０１９，Ｍｅｔｈｏｄｓ １５４：１４３－１５２の図２及び表１を参照）。ＣＤ２を標的とするＭＢＭについて、適切なＡＢＤは、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２０１９／１０４０７５号パンフレットのセクション６．６．２に記載されているように、ＣＤ５８又はそのフラグメントである。
ＢＢＭは少なくとも２つのＡＢＤを含むが、２つを超えるＡＢＤを含んでもよい。ＢＢＭが、１つのエピトープに結合できる少なくとも１つのＡＢＤと、異なるエピトープに結合できる少なくとも１つのＡＢＤとを有する場合、２つのＡＢＤのみを含むＢＢＭは２価と見なされ、ＢＢＭは、３つのＡＢＤ（すなわち３価）、４つのＡＢＤ（すなわち４価）、又はそれを超えるＡＢＤを有し得る。例示的な二価、三価、及び四価のＢＢＭ形態は、国際公開第２０１９／２２９７０１号パンフレット（例えば、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２０１９／２２９７０１号パンフレットの図１及びセクション７．５及び国際公開第２０１９／２２９７０１号パンフレットのセクション７．５）に記載されている。国際公開第２０１９／２２９７０１号パンフレットは、本開示のＺＢＴＢ３２阻害剤と組み合わせて適切に使用できるＢＣＭＡ結合分子に関するが、そこに記載されているＢＢＭ形式は、任意のエピトープ／抗原対、例えば任意のＴＡＡ及びＴ細胞受容体成分対、又はＴＡＡ及びＣＤ１６、ＮＫｐ４６、ＮＫＧ２Ｄ、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４４又はＮＫｐ４６などのＮＫ細胞活性化受容体にも適用可能である。
同様に、ＴＢＭは少なくとも３つのＡＢＤを有する（すなわち、ＴＢＭは少なくとも３価である）が、３つを超えるＡＢＤを含んでもよい。ＴＢＭが、１つのエピトープに結合できる少なくとも１つのＡＢＤと、第２のエピトープに結合できる少なくとも１つのＡＢＤと、第３のエピトープに結合できる少なくとも１つのＡＢＤとを有する場合、例えば、ＴＢＭは、４つのＡＢＭ（すなわち４価である）、５つのＡＢＤ（すなわち５価である）又は６つのＡＢＤ（すなわち６価である）を有することができる。例示的な３価、４価、５価及び６価ＴＢＭ形態は、国際公開第２０１９／１０４０７５号パンフレット及び国際公開第２０１９／１９５５３５号パンフレット（例えば、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２０１９／１０４０７５号パンフレットの図１及びセクション６．４、及び国際公開第２０１９／１９５５３５号パンフレットの図１及びセクション７．４）に記載されている。国際公開第２０１９／１０４０７５号パンフレットは、ＣＤ２、ＣＤ３（又は別のＴ細胞受容体成分）及び腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）に結合するＴＢＭに関するものであり、国際公開第２０１９／１９５５３５号パンフレットは、ＣＤ３（又は別のＴ細胞受容体成分）及び２つのＴＡＡに結合するＴＢＭに関し、どちらも本開示のＺＢＴＢ３２阻害剤と組み合わせて適切に使用できるＢＣＭＡ結合分子に関するが、そこに記載されているＴＢＭ形式は、３つのエピトープ又は抗原の任意の組み合わせにも適用可能である。例えば、ＴＢＭは、ＴＡＡ及び２つのＮＫ細胞活性化受容体、例えば、ＣＤ１６、ＮＫｐ４６、ＮＫＧ２Ｄ、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４４又はＮＫｐ４６のうちの任意の２つを標的とすることができる。特定の実施形態において、本開示のＺＢＴＢ３２阻害剤と組み合わせて有用なＴＢＭは、ＴＡＡ、ＣＤ１６、及びＮＫｐ４６を標的とすることができる（例えば、Ｇａｕｔｈｉｅｒ ｅｔ ａｌ．，２０１９，Ｃｅｌｌ １７７（７）：１７０１－１７１３を参照）。
ＭＢＭのＡＢＤ（又はその部分）は、例えば、短鎖ペプチドリンカー又はＦｃドメインによって互いに連結することができる。ＭＢＭを形成するためにＡＢＤを結合する方法は、国際公開第２０１９／１０４０７５号パンフレット及び国際公開第２０１９／２２９７０１号パンフレットに記載されている（例えば、参照により本明細書に組み込まれる、国際公開第２０１９／２２９７０１号パンフレットのセクション７．３．２及び国際公開第２０１９／１０４０７５号パンフレットのセクション６．２．２を参照）。
ＭＢＭは、２つのＦｃドメインの会合によって形成されるＦｃ領域を有し得る。Ｆｃドメインは、ホモ二量体又はヘテロ二量体であり得る。ノブ・イントゥ・ホール及びポーラーブリッジ形式を含む、例示的なヘテロ二量体化戦略は、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２０１９／１０４０７５号パンフレットの表２及びセクション６．３．１．５及びそのサブセクションに記載されている。Ｆｃ領域は、エフェクター機能を変更することができる。「エフェクター機能」という用語は、通常、エフェクター分子の結合によって媒介される、抗原結合ドメイン以外の抗体のドメインを介した結合によって媒介される抗体分子の活性を指す。エフェクター機能は、例えば、抗体への補体のＣ１成分の結合によって媒介される補体媒介性エフェクター機能を含む。補体の活性化は、細胞病原体のオプソニン化及び溶解において重要である。補体の活性化は、炎症反応も刺激し、自己免疫過敏性にも関与し得る。エフェクター機能は、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）媒介性エフェクター機能も含み、これは、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）への抗体の定常ドメインの結合時に引き起こされ得る。細胞表面におけるＦｃ受容体への抗体の結合は、抗体で被覆された粒子の貪食及び破壊、免疫複合体のクリアランス、キラー細胞による抗体で被覆された標的細胞の溶解（抗体依存性細胞媒介細胞毒性又はＡＤＣＣと呼ばれる）、炎症性メディエータの放出、胎盤通過及び免疫グロブリン産生の制御を含む、多くの重要及び多様な生物学的応答を引き起こす。抗体のエフェクター機能は、Ｆｃ受容体又は補体成分などのエフェクター分子に対する抗体の親和性を改変、例えば増強又は低減することによって改変され得る。エフェクター機能が変更されたＦｃ領域は、例えば、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２０１９／１０４０７５号パンフレットのセクション６．３．１．１から６．３．１．５に記載されており、例えば、野生型Ｆｃ領域と比較した、ＦｃＲＮなどの１つ以上のＦｃ受容体への結合の変更、ジスルフィド結合構造の変更、又はグリコシル化パターンの変更を含み得る。
本開示のＺＢＴＢ３２阻害剤と組み合わせて使用できる更なるＭＢＭ形式は、とりわけ、Ｓｕｕｒｓ ｅｔ ａｌ．，２０１９，Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ＆Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ ２０１：１０３－１１９の図１、Ｌａｂｒｉｊｎ ｅｔ ａｌ．，２０１９，Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ．１８（８）：５８５－６０８の図２；Ｋｒｉｓｈｎａｍｕｒｔｈｙ ａｎｄ Ｊｉｍｅｎｏ，２０１８，Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ １８５：１２２－１３４の図４；Ｓｅｄｙｋｈ ｅｔ ａｌ．，２０１８，Ｄｒｕｇ Ｄｅｓｉｇｎ，Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｙ １２：１９５－２０８の図３；Ｓｐｉｅｓｓ ｅｔ ａｌ．，２０１５，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ６７：９５－１０６の図１；Ｂｒｉｎｋｍａｎｎ＆Ｋｏｎｔｅｒｍａｎｎ，２０１７，ｍＡｂｓ，９：２，１８２－２１２の図２；Ｋｌｅｉｎ ｅｔ ａｌ．，２０１６，ｍＡｂｓ，８：６，１０１０－１０２０の図３；及びＫｌｅｉｎ ｅｔ ａｌ．，２０１９，Ｍｅｔｈｏｄｓ １５４：２１－３１の図２に開示されており、これらの図及び付随する文書は全て、参照により本明細書に組み込まれる。
多数のＭＢＭが、様々な癌の処置のために開発されてきたか、又は開発中であり、本開示のＺＢＴＢ３２阻害剤と組み合わせて使用することができる。例えば、Ｌａｂｒｉｊｎ ｅｔ ａｌ．，２０１９，Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ．１８（８）：５８５－６０８の表１及び２；Ｋｒｉｓｈｎａｍｕｒｔｈｙ ａｎｄ Ｊｉｍｅｎｏ，２０１８，Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ １８５：１２２－１３４の表１及び２；Ｓｕｕｒｓ ｅｔ ａｌ．，２０１９，Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ＆Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ ２０１：１０３－１１９の図３；Ｗｅｉｄｌｅ ｅｔ ａｌ．，２０１４，Ｓｅｍｉｎａｒｓ ｉｎ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ ４１：６５３－６６０の表１、Ｓｅｄｙｋｈ ｅｔ ａｌ．，２０１８，Ｄｒｕｇ Ｄｅｓｉｇｎ，Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ Ｔｈｅｒａｐｙ １２：１９５－２０８の表Ｉ；Ｓｐｉｅｓｓ ｅｔ ａｌ．，２０１５，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ６７：９５－１０６の表１；Ｄａｈｌｅｎ ｅｔ ａｌ．，２０１８，Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｖａｃｃｉｎｅｓ ａｎｄ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ ６（１）３－１７の表１；及びＢｒｉｎｋｍａｎｎ＆Ｋｏｎｔｅｒｍａｎｎ，２０１７，ｍＡｂｓ，９（２）：１８２－２１２の表３を参照されたい。このような表及び図及び付随する文書は全て、参照により本明細書に組み込まれる。本開示のＺＢＴＢ３２阻害剤と組み合わせて使用することができる例示的なＭＢＭは、前述の表及び図、並びに以下の［表２５］に記載されている。
Figure 2023529211000230
Figure 2023529211000231
Figure 2023529211000232
Figure 2023529211000233
Figure 2023529211000234
Figure 2023529211000235
Figure 2023529211000236
したがって、本開示の分子は、例えば、上記の［表２５］でそのＭＢＭについて示された癌を処置するために、［表２５］に記載の任意のＭＢＭと組み合わせて投与することができる。
他の実施形態において、［表２５］に記載のＭＢＭは、ＢＣＭＡ、例えば、ＡＭＧ７０１、ＡＭＧ７０１、ＣＣ－９３２６９、ＪＮＪ－６４００７９５７、ＰＦ－０６８６３１３５、又はＲＥＧＮ５４５８に結合する。本開示の分子は、多発性骨髄腫、ホジキンリンパ腫及び非ホジキンリンパ腫、様々な白血病、及び膠芽細胞腫などの、血液癌を処置するために、前述のＢＣＭＡ標的ＭＢＭのいずれかと組み合わせて使用することができる。
他の実施形態において、［表２５］に記載のＭＢＭはＣＤ１９に結合し、例えば、ＭＢＭはＡ－３１９、ＡＭＧ５６２、ブリナツモマブ、ＭＧＤ０１１、又はＯＸＳ－１５５０である。本開示の分子は、非ホジキンリンパ腫（Ｂ－ＮＨＬ）、慢性リンパ性白血病、及び急性リンパ性白血病などの血液癌を処置するために、前述のＣＤ１９標的ＭＢＭのいずれかと組み合わせて使用することができる。
他の治療剤
別の実施形態において、本開示のＺＢＴＢ３２阻害剤、又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体は、癌を処置するために１つ以上の、表２６に列挙された、又は表２６に引用された特許及び特許出願に列挙された、治療剤と組み合わせて使用される。表２６に列挙された各刊行物は、その中の全ての構造式を含めて、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
Figure 2023529211000237
Figure 2023529211000238
Figure 2023529211000239
Figure 2023529211000240
Figure 2023529211000241
Figure 2023529211000242
Figure 2023529211000243
Figure 2023529211000244
Figure 2023529211000245
ＺＢＴＢ３２阻害剤の医薬組成物
別の態様において、本開示は、単独で、又は第２の治療剤（例えば、本明細書に記載の治療剤）と組み合わせた、ＺＢＴＢ３２阻害剤（例えば、本明細書に記載のＺＢＴＢ３２阻害剤）を含み、薬学的に許容される担体と共に製剤化される、組成物、例えば、薬学的に許容される組成物を提供する。本明細書で使用されるとき、「薬学的に許容可能な担体」には、生理的に適合性のあるあらゆる溶媒、分散媒、等張剤及び吸収遅延剤などが含まれる。担体は、静脈内、筋肉内、皮下、非経口、直腸、脊髄又は表皮投与（例えば注射又は注入による）に好適であり得る。
本開示に記載される組成物は、種々の形態であり得る。これには、例えば、液状溶液（例えば、注射用及び注入用溶液）、分散液又は懸濁液、リポソーム及び坐薬など、液体、半固形及び固形投薬形態が含まれる。好ましい形態は、意図される投与様式及び治療適用に依存する。典型的な組成物は、注射用又は注入用溶液の形態であり得る。一実施形態において、投与様式は非経口（例えば、静脈内、皮下、腹腔内、又は筋肉内）である。ある実施形態において、組成物は、静脈内注入又は注射によって投与される。別の実施形態において、組成物は、筋肉内又は皮下注射によって投与される。
語句「非経口投与」及び「非経口的に投与される」は、本明細書で使用されるとき、通常は注射による、経腸及び局所投与以外の投与様式を意味し、限定なしに、静脈内、筋肉内、動脈内、髄腔内、嚢内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、被膜下、くも膜下、脊髄内、硬膜上及び胸骨内注射及び注入が挙げられる。
治療組成物は、典型的には、無菌で、且つ製造及び貯蔵条件下で安定していなければならない。組成物は、溶液、マイクロエマルション、分散液、リポソーム、又は高い抗体濃度に好適な他の秩序構造として製剤化することができる。滅菌注射用溶液は、適切な溶媒に、必要に応じて上記に挙げる成分のうちの１つ又は組み合わせと共に必要量の活性化合物（すなわち、抗体又は抗体部分）を配合し、続いてろ過滅菌することによって調製し得る。概して、分散液は、基本分散媒及び上記に挙げるものからの必要な他の成分を含有する無菌媒体に活性化合物を配合することによって調製される。滅菌注射用溶液の調製用の滅菌粉末の場合、好ましい調製方法は真空乾燥及び凍結乾燥であり、これにより、活性成分＋任意の追加的な所望の成分の粉末が、予め滅菌ろ過しておいたそれらの溶液から生じる。溶液の適切な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティングの使用、分散液の場合には必要な粒径の維持、及び界面活性剤の使用によって維持することができる。注射用組成物の持続的吸収は、吸収を遅延させる薬剤、例えば、モノステアリン酸塩及びゼラチンを組成物に含めることによってもたらされ得る。
いくつかの実施形態において、単独で、又は第２の治療剤（例えば、本明細書に記載の治療剤）と組み合わせた、ＺＢＴＢ３２阻害剤（例えば、本明細書に記載のＺＢＴＢ３２阻害剤）は、本明細書に記載の対象への投与（例えば、静脈内投与）に適した製剤（例えば、用量製剤又は剤形）に製剤化することができる。
治療剤、例えば阻害剤、アンタゴニスト又は結合剤は、当技術分野で公知の様々な方法によって投与することができるが、多くの治療用途では、好ましい投与経路／様式は、静脈内注射又は注入である。当業者は理解するであろうとおり、投与経路及び／又は様式は、所望の結果に応じて異なることになる。特定の実施形態において、活性化合物は、インプラント、経皮パッチ、及びマイクロカプセル化送達システムを含め、制御放出製剤などの化合物を急激な放出から保護するであろう担体と共に調製することができる。エチレン酢酸ビニル、ポリ無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル類、及びポリ乳酸など、生分解性生体適合性ポリマーを使用することができる。かかる製剤の調製方法の多くが特許を付与されているか、又は当業者に概して公知である。例えば、Ｓｕｓｔａｉｎｅｄ ａｎｄ Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｊ．Ｒ．Ｒｏｂｉｎｓｏｎ，ｅｄ．，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９７８を参照のこと。
特定の実施形態において、治療剤又は化合物は、例えば、不活性希釈剤又は同化可能な食用担体と共に経口的に投与することができる。化合物（及び必要であれば、他の成分）はまた、硬質又は軟質シェルゼラチンカプセルに封入されるか、錠剤に圧縮されるか、又は対象の食事に直接取り込まれてもよい。経口治療投与には、化合物は賦形剤と共に取り込まれ、経口摂取可能な錠剤、バッカル錠、トローチ、カプセル、エリキシル、懸濁液、シロップ、オブラートなどの形態で使用され得る。本開示の化合物を非経口投与以外によって投与するためには、化合物をその不活性化を防ぐ材料でコーティングするか、又はそれと共に化合物を共投与する必要があり得る。治療組成物はまた、当該技術分野において公知の医療器具で投与することもできる。
投薬量レジメンは、最適な所望の応答（例えば、治療応答）をもたらすように調整される。例えば、単回ボーラスが投与されてもよく、数回に分割した用量が時間をかけて投与されてもよく、又は治療状況の急迫性が示すところに従い用量が比例的に減量若しくは増量されてもよい。特に、投与し易さ及び投薬量の均一性から、非経口組成物を投薬量単位形態で製剤化することが有利である。投薬量単位形態とは、本明細書で使用されるとき、治療下の対象への単位投薬量として適した物理的に個別の単位を指す；各単位が、必要な医薬担体に付随して所望の治療効果を生み出すように計算された所定量の活性化合物を含有する。本開示の投薬量単位形態の規格は、（ａ）活性化合物の独自の特徴及び達成しようとする詳細な治療効果、及び（ｂ）個体の過敏症治療用の活性化合物など、化合物化する技術に固有の限界によって決まり、及びこれらに直接依存する。
本開示の医薬組成物は、本開示の化合物の「治療有効量」又は「予防有効量」を含み得る。「治療有効量」は、所望の治療結果を実現するのに必要な投薬量及び時間で、それに有効な量を指す。化合物の治療有効量は、個体の疾患状態、年齢、性別、及び体重などの要因、並びにその化合物が個体において所望の応答を引き出す能力によって異なり得る。治療有効量はまた、化合物の任意の毒性効果又は有害効果を、治療上有益な効果が上回るものでもある。「治療上有効な投薬量」は、好ましくは、測定可能なパラメータ、例えば、腫瘍成長速度を、未治療の対象と比べて少なくとも約２０％、より好ましくは少なくとも約４０％、更により好ましくは少なくとも約６０％、及び更により好ましくは少なくとも約８０％阻害する。化合物が測定可能なパラメータ、例えば、癌を阻害する能力は、ヒト腫瘍における有効性の予測指標となる動物モデルシステムにおいて評価することができる。或いは、組成物のこの特性は、化合物が阻害する能力を調べることによって評価されてもよく、かかる阻害はインビトロで当業者に公知のアッセイによる。
「予防有効量」は、所望の予防結果を実現するのに必要な投薬量及び時間で、それに有効な量を指す。典型的には、予防用量は疾患前又は疾患の初期段階の対象で使用されるため、予防有効量は治療有効量未満となるであろう。
バイオマーカー
特定の実施形態において、本明細書に開示される方法のいずれかは、対象（例えば、癌、例えば、本明細書に記載の癌を有する対象）における、本明細書に記載の療法（例えば、単剤療法又は組み合わせ療法）の有効性を評価又はモニタリングすることを更に含む。方法は、治療に対する有効性の値を取得することを含み、前記値は、治療の有効性を示す。
実施形態において、治療に対する有効性の値は、以下のうちの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、９つ又はそれを超える（例えば、全て）の測定値を含む：
（ｉ）腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）表現型のパラメータ；
（ｉｉ）骨髄細胞集団のパラメータ；
（ｉｉｉ）表面発現マーカーのパラメータ；
（ｉｖ）免疫応答のバイオマーカーのパラメータ；
（ｖ）全身性サイトカイン調節のパラメータ；
（ｖｉ）循環遊離ＤＮＡ（ｃｆＤＮＡ）のパラメータ；
（ｖｉｉ）全身性免疫調節のパラメータ；
（ｖｉｉｉ）マイクロバイオームのパラメータ；
（ｉｘ）循環免疫細胞中の活性化のマーカーのパラメータ；又は
（ｘ）循環サイトカインのパラメータ。
いくつかの実施形態において、ＴＩＬ表現型のパラメータは、対象において、例えば、対象からのサンプル（例えば、腫瘍サンプル）において、ＴＩＬカウント、ＣＤ８、ＦＯＸＰ３、ＣＤ４、又はＣＤ３についてのヘマトキシリン及びエオシン（Ｈ＆Ｅ）染色の１つ、２つ、３つ、４つ又はそれを超える数（例えば、全て）のレベル又は活性を含む。
いくつかの実施形態において、骨髄細胞集団のパラメータは、対象における、例えば、対象からのサンプル（例えば、腫瘍サンプル）における、ＣＤ６８又はＣＤ１６３の一方又は両方のレベル又は活性を含む。
いくつかの実施形態において、表面発現マーカーのパラメータは、対象中、例えば、対象からのサンプル（例えば、腫瘍サンプル）中の、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＬＡＧ－３、ＴＩＭ－３、又はＧＩＴＲの１つ以上（例えば、２つ、３つ、４つ、又は全て）のレベル又は活性を含む。特定の実施形態において、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＬＡＧ－３、ＴＩＭ－３、又はＧＩＴＲのレベルは、免疫組織化学（ＩＨＣ）によって決定される。
いくつかの実施形態において、免疫学的応答のバイオマーカーのパラメータは、対象、例えば、対象からのサンプル（例えば、腫瘍サンプル）における、１つ以上の核酸ベースのマーカーのレベル又は配列を含む。
いくつかの実施形態において、全身性サイトカイン調節のパラメータは、対象における、例えば、対象からのサンプル（例えば、血液サンプル、例えば、血漿サンプル）における、ＩＬ－１８、ＩＦＮ－γ、ＩＴＡＣ（ＣＸＣＬ１１）、ＩＬ－６、ＩＬ－１０、ＩＬ－４、ＩＬ－１７、ＩＬ－１５、又はＴＧＦ－ベータの１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、６つ、７つ、８つ、又はそれを超える数（例えば、全て）のレベル又は活性を含む。
いくつかの実施形態において、ｃｆＤＮＡのパラメータは、対象において、例えば、対象からのサンプル（例えば、血液サンプル、例えば、血漿サンプル）における、１つ以上の循環腫瘍ＤＮＡ（ｃｆＤＮＡ）分子（例えば、腫瘍変異負荷）の配列又はレベルを含む。
いくつかの実施形態において、全身性免疫調節のパラメータは、対象において、例えば、対象からのサンプル（例えば、血液サンプル、例えば、ＰＢＭＣサンプル）における、活性化された免疫細胞、例えば、ＣＤ３発現細胞、ＣＤ８発現細胞、又はその両方の表現型の特徴付けを含む。
いくつかの実施形態において、マイクロバイオームのパラメータは、対象中、例えば、対象からのサンプル（例えば、糞便サンプル）中の、マイクロバイオームの１つ以上の遺伝子の配列又は発現レベルを含む。
いくつかの実施形態において、循環免疫細胞中の活性化のマーカーのパラメータは、サンプル（例えば、血液サンプル、例えば、血漿サンプル）中の、循環ＣＤ８＋、ＨＬＡ－ＤＲ＋Ｋｉ６７＋、Ｔ細胞、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－１８、又はＣＸＣＬ１１（ＩＦＮ－γ誘導ＣＣＫ）発現細胞の１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、又はそれを超える数（例えば、全て）のレベル又は活性を含む。
いくつかの実施形態において、循環サイトカインのパラメータは、対象における、例えば、対象からのサンプル（例えば、血液サンプル、例えば、血漿サンプル）における、ＩＬ－６のレベル又は活性を含む。
本明細書に開示される方法のいずれかのいくつかの実施形態において、治療は、本明細書に記載の組み合わせ（例えば、本明細書に記載のＰＤ－１阻害剤の治療有効量を含む組み合わせ）を含む。
本明細書に開示される方法のいずれかのいくつかの実施形態において、（ｉ）～（ｘ）のうち１つ以上の測定値は、対象から取得されたサンプルから得られる。いくつかの実施形態において、サンプルは、腫瘍サンプル、血液サンプル（例えば、血漿サンプル又はＰＢＭＣサンプル）、又は糞便サンプルから選択される。
本明細書に開示される方法のいずれかのいくつかの実施形態において、対象は、治療を受ける前、受けている間、又は受けた後に評価される。
本明細書に開示される方法のいずれかのいくつかの実施形態において、（ｉ）～（ｘ）のうち１つ以上の測定値は、遺伝子発現、フローサイトメトリー又はタンパク質発現のうち１つ以上のプロファイルを評価する。
本明細書に開示される方法のいずれかのいくつかの実施形態において、対象又はサンプルにおける、循環ＣＤ８＋、ＨＬＡ－ＤＲ＋Ｋｉ６７＋、Ｔ細胞、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－１８、又はＣＸＣＬ１１（ＩＦＮ－γ誘導ＣＣＫ）発現細胞の１つ、２つ、３つ、４つ、５つ、又はそれを超える数（例えば、全て）の増加したレベル又は活性の存在、及び／又はＩＬ－６の減少したレベル又は活性の存在は、治療の有効性の正の予測因子である。
或いは、又は本明細書に開示される方法と組み合わせて、前記値に応答して、以下の１つ、２つ、３つ、４つ、又はそれ以上（例えば、全て）を実施する：
（ｉ）対象に治療剤を投与すること；
（ｉｉ）変更された投与量の治療剤を投与すること；
（ｉｉｉ）治療のスケジュール又は時間経過を変更すること；
（ｉｖ）治療剤と組み合わせて追加の薬剤（例えば、本明細書に記載の治療剤）を対象に投与すること；又は
（ｖ）対象に代替の治療剤を投与すること。
ＺＢＴＢ３２阻害剤のキット
本明細書に開示される治療剤の組み合わせは、キットで提供することができる。治療剤は、一般に、バイアル又は容器中に提供される。必要に応じて、治療剤は、液体又は乾燥（例えば、凍結乾燥）形態であり得る。キットは、本明細書に開示される組み合わせの治療剤の２つ以上（例えば、３つ、４つ、５つ、又は全て）を含み得る。いくつかの実施形態において、キットは、薬学的に許容される希釈剤を更に含む。治療剤は、同一又は別個の製剤で（例えば、混合物として、又は別個の容器で）、キットで提供することができる。キットは、１回以上の用量を提供する治療剤のアリコートを含み得る。複数回投与のためのアリコートが提供される場合、用量は均一であるか、又は変動し得る。必要に応じて、多様な投与レジメンを漸増又は漸減することができる。組み合わせにおける治療剤の投与量は、独立して均一であるか、又は変動し得る。キットは、使用説明書；他の試薬、例えば、標識、又は治療用薬剤を標識若しくは治療用薬剤にキレート化するか若しくはカップリングするのに有用な薬剤、又は放射線防護組成物；投与用の抗体を調製するための装置又は他の材料；薬学的に許容可能な担体；及び対象への投与のための装置又は他の材料を含め、１つ以上の他の要素を含み得る。
ＩＫＺＦ２阻害剤
いくつかの実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤、又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体は、ＣＡＲ発現細胞、例えばＣＡＲ発現免疫エフェクター細胞を作製するために、又は疾患、例えば癌を処置するために、ＩＫＡＲＯＳファミリージンクフィンガー２（ＩＫＺＦ２）の阻害剤と組み合わせて使用することができる。
いくつかの実施形態において、ＩＫＺＦ２阻害剤は、式（Ｉ’）の化合物
Figure 2023529211000246
 （式中、
Ｘ１及びＸ２は、それぞれ独立して、Ｈ、（Ｃ１～Ｃ４）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１～Ｃ４）ハロアルキル、
（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルコキシ、（Ｃ３～Ｃ７）シクロアルキル、ハロゲン、－ＣＮ、－ＯＨ、又は－ＮＨ２であり；
Ｒｘは、Ｈ又はＤであり；
Ｒ１は、
Figure 2023529211000247
 であり；
各Ｒ２は、出現ごとに独立して、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルコキシ、（Ｃ３～Ｃ７）シクロアルキル、ハロゲン、－ＣＮ、－ＯＨ、又は－ＮＨ２であるか；又は
２つのＲ２は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、（Ｃ３～Ｃ７）シクロアルキル、又はＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む４～７員のヘテロシクロアルキル環を形成するか；又は２つのＲ２は、隣接する炭素原子上にある場合、一緒になって、フェニル、又はＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５員若しくは６員のヘテロアリール環を形成するか；又は
Ｒ２及びＲ６は、それらが結合している炭素原子及び窒素原子と一緒になって、任意選択により、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～２個の更なるヘテロ原子を含み、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、ハロゲン、－ＯＨ、－ＣＮ、及び－ＮＨ２からそれぞれ独立して選択される１～４個の置換基で任意選択により置換された、４～６員のヘテロシクロアルキル環を形成し；
各Ｒ３は、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルコキシ、ハロゲン、－ＯＨ、又は－ＮＨ２であり；
Ｒ４は、－ＯＲ５又は－ＮＲ６Ｒ６’であり；
Ｒ５は、Ｈ、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ３～Ｃ７）シクロアルキル、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロシクロアルキル、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、又はＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリールであり、アルキルは、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、及びＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリールから独立して選択される１～３個の置換基で任意選択により置換されており；
Ｒ６及びＲ６’は、それぞれ独立して、Ｈ、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ２～Ｃ６）ヒドロキシアルキル、（Ｃ３～Ｃ７）シクロアルキル、又はＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロシクロアルキル、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、又はＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリールであり、アルキルは、１～３個のＲ７で任意選択により置換されており、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、及びヘテロアリールは、１～４個のＲ１２で任意選択により置換されているか；又は
Ｒ６及びＲ６’は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、任意選択により、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～２個の更なるヘテロ原子を含み、１～４個のＲ８で任意選択により置換された、４～８員のヘテロシクロアルキル環を形成するか；又は
Ｒ２及びＲ６は、それらが結合している炭素原子及び窒素原子と一緒になって、任意選択により、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～２個の更なるヘテロ原子を含み、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、ハロゲン、－ＯＨ、－ＣＮ、及び－ＮＨ２からそれぞれ独立して選択される１～４個の置換基で任意選択により置換された、４～６員のヘテロシクロアルキル環を形成し；
各Ｒ７は、（Ｃ３～Ｃ７）シクロアルキル、又はＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む４～７員のヘテロシクロアルキル環、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、又はＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリールであり、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、及びヘテロアリールは、１～４個のＲ９で任意選択により置換されており；
各Ｒ８は、出現ごとに独立して、ハロゲン、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルコキシ、－ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＲ１３Ｒ１４、－ＮＨ２、－Ｏ（Ｃ３～Ｃ７）シクロアルキル、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む４～７員の－Ｏ－ヘテロシクロアルキル環、－Ｏ（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、又はＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員の－Ｏ－ヘテロアリールであり、アルコキシは、１～３個のＲ１０で任意選択により置換されており、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、及びヘテロアリールは、１～３個のＲ１１で任意選択により置換されているか；又は
２つのＲ８は、それらが結合している原子と一緒になって、（Ｃ４－Ｃ７）シクロアルキル、又は任意選択により２つのＲ１５で置換された、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～２個のヘテロ原子を含む４～７員のヘテロシクロアルキル環を形成するか；又は２つのＲ８は、隣接する原子上にある場合、それらが結合している原子と一緒になって、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、又はＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリールを形成するか；又は２つのＲ８は、それらが結合している同じ原子と一緒になって、＝（Ｏ）を形成し；
各Ｒ９は、出現ごとに独立して、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルコキシ、ハロゲン、（Ｃ３～Ｃ６）シクロアルキル、－ＯＨ、－ＣＮ、－ＮＨ２、又は－ＮＲ１３Ｒ１４であるか；又は
２つのＲ９は、それらが結合している原子と一緒になって、（Ｃ４－Ｃ７）シクロアルキル、又は任意選択により（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、ハロゲン、－ＯＨ、－ＣＮ、及び－ＮＨ２からそれぞれ独立して選択される１つ以上の置換基で置換された、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～２個のヘテロ原子を含む５～７員のヘテロシクロアルキル環を形成するか；又は２つのＲ９は、隣接する原子上にある場合、それらが結合している原子と一緒になって、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、又はＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリールを形成し；
各Ｒ１０は、出現ごとに独立して、（Ｃ３～Ｃ７）シクロアルキル、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む４～７員のヘテロシクロアルキル環、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、及びＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリールから選択され、
各Ｒ１１は、出現ごとに独立して、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルコキシ、ハロゲン、－ＯＨ、－ＣＮ、及び－ＮＨ２から選択され；
各Ｒ１２は、出現ごとに独立して、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルコキシハロゲン、－ＯＨ、－ＣＮ、又は－ＮＨ２であり；
２つのＲ１２は、それらが結合している原子と一緒になって、（Ｃ４～Ｃ７）シクロアルキル、又はＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～２個のヘテロ原子を含む４～７員のヘテロシクロアルキル環を形成し；
Ｒ１３及びＲ１４は、それぞれ独立して、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ３～Ｃ７）シクロアルキル、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む４～７員のヘテロシクロアルキル環、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、及びＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリールから選択され、
２つのＲ１５は、それらが結合している原子と一緒になって、（Ｃ４～Ｃ７）シクロアルキル、又はＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～２個のヘテロ原子を含む４～７員のヘテロシクロアルキル環を形成し；
ｍ及びｍ１は、それぞれ独立して０、１又は２であり；
ｎ１は、０、１、２、又は３であり；
各ｓ及びｎは、独立して１、２、又は３であり、ｓ＋ｎは４以下である）
又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、及び互変異性体を含む。
いくつかの実施形態において、化合物は式（Ｉ）
Figure 2023529211000248
 （式中、
Ｒｘは、Ｈ又はＤであり；
Ｒ１は、
Figure 2023529211000249
 であり；
各Ｒ２は、出現ごとに独立して、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルコキシ、ハロゲン、－ＣＮ、－ＯＨ、又は－ＮＨ２であるか；又は
２つのＲ２は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、（Ｃ３～Ｃ７）シクロアルキル、又はＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む４～７員のヘテロシクロアルキル環を形成するか；又は２つのＲ２は、隣接する炭素原子上にある場合、一緒になって、フェニル、又はＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５員若しくは６員のヘテロアリール環を形成するか；又は
Ｒ２及びＲ６は、それらが結合している炭素原子及び窒素原子と一緒になって、任意選択により、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～２個の更なるヘテロ原子を含み、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、ハロゲン、－ＯＨ、－ＣＮ、及び－ＮＨ２からそれぞれ独立して選択される１～４個の置換基で任意選択により置換された、５又は６員のヘテロシクロアルキル環を形成し；
各Ｒ３は、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルコキシ、ハロゲン、－ＯＨ、又は－ＮＨ２であり；
Ｒ４は、－ＯＲ５又は－ＮＲ６Ｒ６’であり；
Ｒ５は、Ｈ、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ３～Ｃ７）シクロアルキル、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロシクロアルキル、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、又はＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリールであり、アルキルは、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、及びＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリールから独立して選択される１～３個の置換基で任意選択により置換されており；
Ｒ６及びＲ６’は、それぞれ独立して、Ｈ、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ３～Ｃ７）シクロアルキル、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロシクロアルキル、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、又はＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリールであり、アルキルは、任意選択により１～３個のＲ７で置換されているか；又は
Ｒ６及びＲ６’は、それらが結合している窒素原子と一緒になって、任意選択により、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～２個の更なるヘテロ原子を含み、１～４個のＲ８で任意選択により置換された、４～７員のヘテロシクロアルキル環を形成し；
Ｒ２及びＲ６は、それらが結合している炭素原子及び窒素原子と一緒になって、任意選択により、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～２個の更なるヘテロ原子を含み、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、ハロゲン、－ＯＨ、－ＣＮ、及び－ＮＨ２からそれぞれ独立して選択される１～４個の置換基で任意選択により置換された、５又は６員のヘテロシクロアルキル環を形成し；
各Ｒ７は、（Ｃ３～Ｃ７）シクロアルキル、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む４～７員のヘテロシクロアルキル環、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、又はＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリールであり、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリール、及びヘテロアリールは、１～４個のＲ９で任意選択により置換されており；
各Ｒ８は、出現ごとに独立して、ハロゲン、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルコキシ、－ＣＮ、－ＯＨ、又は－ＮＨ２であり、アルコキシは、任意選択により、（Ｃ３～Ｃ７）シクロアルキル、又はＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む４～７員のヘテロシクロアルキル環、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、及びＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリールから独立して選択される１～３個の置換基で任意選択により置換されているか；又は
２つのＲ８は、それらが結合している原子と一緒になって、（Ｃ５～Ｃ７）シクロアルキル、又はＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～２個のヘテロ原子を含む４～７員のヘテロシクロアルキル環を形成し；
各Ｒ９は、出現ごとに独立して、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、ハロゲン、－ＯＨ、－ＣＮ、又は－ＮＨ２であるか；又は
２つのＲ９は、それらが結合している原子と一緒になって、（Ｃ５～Ｃ７）シクロアルキル、又は任意選択により（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、ハロゲン、－ＯＨ、－ＣＮ、及び－ＮＨ２からそれぞれ独立して選択される１つ以上の置換基で置換された、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～２個のヘテロ原子を含む５～７員のヘテロシクロアルキル環を形成し；
ｍ及びｍ１は、それぞれ独立して０、１、又は２であり；
ｎ１は、０、１、２、又は３であり；
各ｓ及びｎは、独立して１、２、又は３であり、ｓ＋ｎは４以下である）
又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、及び互変異性体を有する。
いくつかの実施形態において、Ｒ１は、
Figure 2023529211000250
 である。
いくつかの実施形態において、ｎ１は、０、１、又は２である。いくつかの実施形態において、ｍ１は、０である。いくつかの実施形態において、ｍ１は、２である。
いくつかの実施形態において、Ｒ１は、
Figure 2023529211000251
 である。いくつかの実施形態において、ｎは２であり、ｓは１又は２である。いくつかの実施形態において、ｍは、０又は１である。
いくつかの実施形態において、化合物は、式（Ｉａ）又は式（Ｉｂ）：
Figure 2023529211000252
 又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、及び互変異性体を有する。
いくつかの実施形態において、化合物は、式（Ｉｃ）、式（Ｉｄ）、式（Ｉｅ）、式（Ｉｆ）、式（Ｉｇ）、式（Ｉｈ）、式（Ｉｉ）、又は式（Ｉｊ）：
Figure 2023529211000253
 又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、及び互変異性体を有する。
いくつかの実施形態において、化合物は、式（Ｉｋ）、式（ＩＩ）、式（Ｉｍ）、式（Ｉｎ）、式（Ｉｏ）、又は式（Ｉｐ）：
Figure 2023529211000254
 又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、及び互変異性体を有する。
いくつかの実施形態において、Ｒ４は、－ＯＲ５である。いくつかの実施形態において、Ｒ４は、－ＮＲ６Ｒ６’である。
いくつかの実施形態において、化合物は、式（Ｉｑ）、式（Ｉｒ）、式（Ｉｓ）、又は式（Ｉｔ）：
Figure 2023529211000255
 又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、及び互変異性体を有する。
いくつかの実施形態において、化合物は、
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（２，２－ジフルオロエチル）（エチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（２，２－ジフルオロエチル）（エチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（２，２－ジフルオロエチル）（エチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（２，２－ジフルオロエチル）（エチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（２，２－ジフルオロエチル）（エチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（ベンジルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（ベンジルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（ベンジルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（ベンジルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（ベンジルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（１－メチルオクタヒドロシクロペンタ［ｂ］ピロール－６－イル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－メトキシシクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－メトキシシクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－メトキシシクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－メトキシシクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－メトキシシクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（３－ヒドロキシアゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（３－ヒドロキシアゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（３－ヒドロキシアゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（３－ヒドロキシアゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（３－ヒドロキシアゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－ヒドロキシシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－ヒドロキシシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－ヒドロキシシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－ヒドロキシシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－ヒドロキシシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（イソブチルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（イソブチルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（イソブチルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（イソブチルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（イソブチルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（４，４－ジフルオロピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（４，４－ジフルオロピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（４，４－ジフルオロピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（４，４－ジフルオロピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（４，４－ジフルオロピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（ベンジルオキシ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（ベンジルオキシ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（ベンジルオキシ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（ベンジルオキシ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（ベンジルオキシ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（ジエチルアミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（ジエチルアミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（ジエチルアミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（ジエチルアミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（ジエチルアミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（１－（トリフルオロメチル）シクロプロピル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（（１－（トリフルオロメチル）シクロプロピル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（（１－（トリフルオロメチル）シクロプロピル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（（１－（トリフルオロメチル）シクロプロピル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（２－（（（１－（トリフルオロメチル）シクロプロピル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－アミノシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－アミノシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－アミノシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－アミノシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－アミノシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（ジエチルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（ジエチルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（ジエチルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（ジエチルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（ジエチルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－アミノシクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－アミノシクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－アミノシクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－アミノシクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－アミノシクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（３－アザビシクロ［３．２．１］オクタン－３－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（３－アザビシクロ［３．２．１］オクタン－３－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（３－アザビシクロ［３．２．１］オクタン－３－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（３－アザビシクロ［３．２．１］オクタン－３－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（３－アザビシクロ［３．２．１］オクタン－３－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（１，４－ジオキサ－８－アザスピロ［４．５］デカン－８－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（１，４－ジオキサ－８－アザスピロ［４．５］デカン－８－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（１，４－ジオキサ－８－アザスピロ［４．５］デカン－８－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（１，４－ジオキサ－８－アザスピロ［４．５］デカン－８－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（１，４－ジオキサ－８－アザスピロ［４．５］デカン－８－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（８－オキサ－３－アザビシクロ［３．２．１］オクタン－３－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（８－オキサ－３－アザビシクロ［３．２．１］オクタン－３－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（８－オキサ－３－アザビシクロ［３．２．１］オクタン－３－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（８－オキサ－３－アザビシクロ［３．２．１］オクタン－３－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（８－オキサ－３－アザビシクロ［３．２．１］オクタン－３－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－フェノキシシクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－フェノキシシクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－フェノキシシクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－フェノキシシクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（２－フェノキシシクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（ベンジルアミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（ベンジルアミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（ベンジルアミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（ベンジルアミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（ベンジルアミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（３Ｓ，４Ｓ）－３－（ベンジルアミノ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（３Ｒ，４Ｓ）－３－（ベンジルアミノ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（３Ｒ，４Ｒ）－３－（ベンジルアミノ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（３Ｓ，４Ｒ）－３－（ベンジルアミノ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（３－（ベンジルアミノ）テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（ベンジルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（ベンジルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（ベンジルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（ベンジルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（ベンジルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（Ｒ）－１－フェニルエチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（（Ｒ）－１－フェニルエチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（（Ｒ）－１－フェニルエチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（（Ｒ）－１－フェニルエチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（２－（（（Ｒ）－１－フェニルエチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（エチル（２－フルオロエチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（エチル（２－フルオロエチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（エチル（２－フルオロエチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（エチル（２－フルオロエチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（エチル（２－フルオロエチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（エチル（イソプロピル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（エチル（イソプロピル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（エチル（イソプロピル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（エチル（イソプロピル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（エチル（イソプロピル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－メトキシシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－メトキシシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－メトキシシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－メトキシシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－メトキシシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－ヒドロキシシクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（エチルアミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（エチルアミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（エチルアミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（エチルアミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（エチルアミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（ビス（シクロプロピルメチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（ビス（シクロプロピルメチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（ビス（シクロプロピルメチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（ビス（シクロプロピルメチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（ビス（シクロプロピルメチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（ピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（ピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（ピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（ピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（２－（ピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－モルホリノシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－モルホリノシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－モルホリノシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－モルホリノシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－モルホリノシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（ジベンジルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（ジベンジルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（ジベンジルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（ジベンジルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（ジベンジルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
シス－３－（５－（（２－（ジエチルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
トランス－３－（５－（（２－（ジエチルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（メチルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（メチルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（メチルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（メチルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（メチルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
１－（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロペンチル）－４－メチルピペリジン－４－カルボニトリル；
１－（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロペンチル）－４－メチルピペリジン－４－カルボニトリル；
１－（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロペンチル）－４－メチルピペリジン－４－カルボニトリル；
１－（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロペンチル）－４－メチルピペリジン－４－カルボニトリル；
１－（２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロペンチル）－４－メチルピペリジン－４－カルボニトリル；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（ベンジル（メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（ベンジル（メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（ベンジル（メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（ベンジル（メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（ベンジル（メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（３Ｓ，４Ｓ）－３－アミノテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（３Ｒ，４Ｓ）－３－アミノテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（３Ｒ，４Ｒ）－３－アミノテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（３Ｓ，４Ｒ）－３－アミノテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（３－アミノテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（ベンジルアミノ）シクロブトキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（ベンジルアミノ）シクロブトキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（ベンジルアミノ）シクロブトキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（ベンジルアミノ）シクロブトキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（２－（ベンジルアミノ）シクロブトキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（３Ｒ，４Ｓ）－４－アミノテトラヒドロフラン－３－イル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（３Ｒ，４Ｒ）－４－アミノテトラヒドロフラン－３－イル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（３Ｓ，４Ｒ）－４－アミノテトラヒドロフラン－３－イル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（３Ｓ，４Ｓ）－４－アミノテトラヒドロフラン－３－イル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（４－アミノテトラヒドロフラン－３－イル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（３Ｒ，４Ｓ）－４－（ジエチルアミノ）テトラヒドロフラン－３－イル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（３Ｒ，４Ｒ）－４－（ジエチルアミノ）テトラヒドロフラン－３－イル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（３Ｓ，４Ｒ）－４－（ジエチルアミノ）テトラヒドロフラン－３－イル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（３Ｓ，４Ｓ）－４－（ジエチルアミノ）テトラヒドロフラン－３－イル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（４－（ジエチルアミノ）テトラヒドロフラン－３－イル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（エチルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（エチルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（エチルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（エチルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（エチルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
４－（（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）ベンゾニトリル；
４－（（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）ベンゾニトリル；
４－（（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）ベンゾニトリル；
４－（（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）ベンゾニトリル；
４－（（（２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）ベンゾニトリル；
３－（５－（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（ジエチルアミノ）シクロブトキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（ジエチルアミノ）シクロブトキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（ジエチルアミノ）シクロブトキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（ジエチルアミノ）シクロブトキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（２－（ジエチルアミノ）シクロブトキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（エチル（（３－フルオロビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（エチル（（３－フルオロビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（エチル（（３－フルオロビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（エチル（（３－フルオロビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（エチル（（３－フルオロビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）ベンゾニトリル；
３－（（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）ベンゾニトリル；
３－（（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）ベンゾニトリル；
３－（（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）ベンゾニトリル；
３－（（（２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）ベンゾニトリル；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（イソプロピルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（イソプロピルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（イソプロピルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（イソプロピルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（イソプロピルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
２－（（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）ベンゾニトリル；
２－（（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）ベンゾニトリル；
２－（（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）ベンゾニトリル；
２－（（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）ベンゾニトリル；
２－（（（２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）ベンゾニトリル；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（３－フルオロビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（（３－フルオロビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（（３－フルオロビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（（３－フルオロビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（（３－フルオロビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（４－ヒドロキシ－４－メチルピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（４－ヒドロキシ－４－メチルピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（４－ヒドロキシ－４－メチルピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（４－ヒドロキシ－４－メチルピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（４－ヒドロキシ－４－メチルピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（４－ヒドロキシ－４－（トリフルオロメチル）ピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（４－ヒドロキシ－４－（トリフルオロメチル）ピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（４－ヒドロキシ－４－（トリフルオロメチル）ピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（４－ヒドロキシ－４－（トリフルオロメチル）ピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（４－ヒドロキシ－４－（トリフルオロメチル）ピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
１－（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロペンチル）－４－（トリフルオロメチル）ピペリジン－４－カルボニトリル；
１－（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロペンチル）－４－（トリフルオロメチル）ピペリジン－４－カルボニトリル；
１－（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロペンチル）－４－（トリフルオロメチル）ピペリジン－４－カルボニトリル；
１－（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロペンチル）－４－（トリフルオロメチル）ピペリジン－４－カルボニトリル；
１－（２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロペンチル）－４－（トリフルオロメチル）ピペリジン－４－カルボニトリル；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（２－オキサ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（２－オキサ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（２－オキサ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（２－オキサ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（２－オキサ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（３－（２，２，２－トリフルオロエトキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（３－（２，２，２－トリフルオロエトキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（３－（２，２，２－トリフルオロエトキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（３－（２，２，２－トリフルオロエトキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（２－（３－（２，２，２－トリフルオロエトキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（３－（２，２－ジフルオロエトキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（３－（２，２－ジフルオロエトキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（３－（２，２－ジフルオロエトキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（３－（２，２－ジフルオロエトキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（３－（２，２－ジフルオロエトキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（３－（シクロプロピルメトキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（３－（シクロプロピルメトキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（３－（シクロプロピルメトキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（３－（シクロプロピルメトキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（３－（シクロプロピルメトキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（３－（ベンジルオキシ）アゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（３－（ベンジルオキシ）アゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（３－（ベンジルオキシ）アゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（３－（ベンジルオキシ）アゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（３－（ベンジルオキシ）アゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（３－イソプロポキシアゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（３－イソプロポキシアゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（３－イソプロポキシアゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（３－イソプロポキシアゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（３－イソプロポキシアゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（３－エトキシアゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（３－エトキシアゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（３－エトキシアゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（３－エトキシアゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（３－エトキシアゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（３－（ベンジルオキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（３－（ベンジルオキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（３－（ベンジルオキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（３－（ベンジルオキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（３－（ベンジルオキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（３－エトキシアゼチジン－１－イル）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（３－エトキシアゼチジン－１－イル）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（３－エトキシアゼチジン－１－イル）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（３－エトキシアゼチジン－１－イル）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（３－エトキシアゼチジン－１－イル）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（３－（３，３－ジフルオロシクロブトキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（３－（３，３－ジフルオロシクロブトキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（３－（３，３－ジフルオロシクロブトキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（３－（３，３－ジフルオロシクロブトキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（３－（３，３－ジフルオロシクロブトキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（４－ヒドロキシピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（４－ヒドロキシピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（４－ヒドロキシピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（４－ヒドロキシピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（４－ヒドロキシピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（４－オキソピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（３－ヒドロキシピロリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（３－ヒドロキシピロリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（３－ヒドロキシピロリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（３－ヒドロキシピロリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（３－ヒドロキシピロリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（３－ヒドロキシ－３－メチルアゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（３－ヒドロキシ－３－メチルアゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（３－ヒドロキシ－３－メチルアゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（３－ヒドロキシ－３－メチルアゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（３－ヒドロキシ－３－メチルアゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（イソブチルアミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（イソブチルアミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（イソブチルアミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（イソブチルアミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（イソブチルアミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（エチル（メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（エチル（メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（エチル（メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（エチル（メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（エチル（メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（３ａＲ，６ａＳ）－テトラヒドロ－１Ｈ－フロ［３，４－ｃ］ピロール－５（３Ｈ）－イル）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（３ａＲ，６ａＳ）－テトラヒドロ－１Ｈ－フロ［３，４－ｃ］ピロール－５（３Ｈ）－イル）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（３ａＲ，６ａＳ）－テトラヒドロ－１Ｈ－フロ［３，４－ｃ］ピロール－５（３Ｈ）－イル）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（３ａＲ，６ａＳ）－テトラヒドロ－１Ｈ－フロ［３，４－ｃ］ピロール－５（３Ｈ）－イル）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（２－（（３ａＲ，６ａＳ）－テトラヒドロ－１Ｈ－フロ［３，４－ｃ］ピロール－５（３Ｈ）－イル）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（２－（テトラヒドロ－１Ｈ－フロ［３，４－ｃ］ピロール－５（３Ｈ）－イル）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（ピリジン－２－イルメチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（ピリジン－２－イルメチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（ピリジン－２－イルメチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（ピリジン－２－イルメチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（２－（（ピリジン－２－イルメチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（ピロリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（ピロリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（ピロリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（ピロリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（２－（ピロリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（２－オキサ－６－アザスピロ［３．３］ヘプタン－６－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（２－オキサ－６－アザスピロ［３．３］ヘプタン－６－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（２－オキサ－６－アザスピロ［３．３］ヘプタン－６－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（２－オキサ－６－アザスピロ［３．３］ヘプタン－６－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（２－オキサ－６－アザスピロ［３．３］ヘプタン－６－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（ビス（（３－メチルオキセタン－３－イル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（ビス（（３－メチルオキセタン－３－イル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（ビス（（３－メチルオキセタン－３－イル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（ビス（（３－メチルオキセタン－３－イル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（ビス（（３－メチルオキセタン－３－イル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（４－メチルピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（４－メチルピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（４－メチルピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（４－メチルピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（４－メチルピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（ピリジン－３－イルメチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（ピリジン－３－イルメチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（ピリジン－３－イルメチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（ピリジン－３－イルメチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（２－（（ピリジン－３－イルメチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（ピリジン－４－イルメチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（ピリジン－４－イルメチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（ピリジン－４－イルメチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（ピリジン－４－イルメチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（２－（（ピリジン－４－イルメチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（４－メトキシ－４－メチルピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（４－メトキシ－４－メチルピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（４－メトキシ－４－メチルピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（４－メトキシ－４－メチルピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（４－メトキシ－４－メチルピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（４，４－ジメチルピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（４，４－ジメチルピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（４，４－ジメチルピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（４，４－ジメチルピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（４，４－ジメチルピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（４－メトキシピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（４－メトキシピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（４－メトキシピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（４－メトキシピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（４－メトキシピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（エチル（オキセタン－３－イルメチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（エチル（オキセタン－３－イルメチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（エチル（オキセタン－３－イルメチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（エチル（オキセタン－３－イルメチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（エチル（オキセタン－３－イルメチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（イソインドリン－２－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（イソインドリン－２－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（イソインドリン－２－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（イソインドリン－２－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（イソインドリン－２－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（３－メトキシアゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（３－メトキシアゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（３－メトキシアゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（３－メトキシアゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（３－メトキシアゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（４－エトキシ－４－メチルピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（４－エトキシ－４－メチルピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（４－エトキシ－４－メチルピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（４－エトキシ－４－メチルピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（４－エトキシ－４－メチルピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（（１Ｒ，４Ｓ）－４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（（（１Ｒ，４Ｒ）－４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（（（１Ｒ，４Ｒ）－４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（（（１Ｒ，４Ｓ）－４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（（（１Ｒ，４Ｒ）－４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（（４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
（１Ｓ，４Ｒ）－４－（（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロペンチル）アミノ）メチル）シクロヘキサン－１－カルボニトリル；
（１Ｒ，４ｒ）－４－（（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロペンチル）アミノ）メチル）シクロヘキサン－１－カルボニトリル；
（１Ｒ，４ｒ）－４－（（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロペンチル）アミノ）メチル）シクロヘキサン－１－カルボニトリル；
（１Ｓ，４ｒ）－４－（（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロペンチル）アミノ）メチル）シクロヘキサン－１－カルボニトリル；
（１ｒ，４ｒ）－４－（（（２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロペンチル）アミノ）メチル）シクロヘキサン－１－カルボニトリル；
４－（（（２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロペンチル）アミノ）メチル）シクロヘキサン－１－カルボニトリル；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（（４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（（４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（（４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（（４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（２－オキサ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（２－オキサ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（２－オキサ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（２－オキサ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（２－オキサ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロペンチル）（エチル）アミノ）メチル）－１－メチルシクロブタン－１－カルボニトリル；
（１Ｓ，３Ｒ）－３－（（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロペンチル）（エチル）アミノ）メチル）－１－メチルシクロブタン－１－カルボニトリル；
（１Ｒ，３Ｓ）－３－（（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロペンチル）（エチル）アミノ）メチル）－１－メチルシクロブタン－１－カルボニトリル；
トランス－３－（（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロペンチル）（エチル）アミノ）メチル）－１－メチルシクロブタン－１－カルボニトリル；
シス－３－（（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロペンチル）（エチル）アミノ）メチル）－１－メチルシクロブタン－１－カルボニトリル；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（４－フルオロピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（４－フルオロピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（４－フルオロピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（４－フルオロピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（４－フルオロピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（１，５－オキサゾカン－５－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（１，５－オキサゾカン－５－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（１，５－オキサゾカン－５－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（１，５－オキサゾカン－５－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（１，５－オキサゾカン－５－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（３，３－ジメチルピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（３，３－ジメチルピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（３，３－ジメチルピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（３，３－ジメチルピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（３，３－ジメチルピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（エチル（（（１Ｒ，４Ｓ）－４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（（１Ｒ，４Ｓ）－４－メトキシシクロヘキシル）メチル）（メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
トランス－３－（５－（（２－（ジエチルアミノ）－４，４－ジメチルシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
シス－３－（５－（（２－（ジエチルアミノ）－４，４－ジメチルシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（ジエチルアミノ）－４，４－ジメチルシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（ジエチルアミノ）－４，４－ジメチルシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（ジエチルアミノ）－４，４－ジメチルシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（ジエチルアミノ）－４，４－ジメチルシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（ジエチルアミノ）－４，４－ジメチルシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（４，４－ジフルオロシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（（４，４－ジフルオロシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（（４，４－ジフルオロシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（（４，４－ジフルオロシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（（４，４－ジフルオロシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（１Ｈ－インドール－５－イル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（（１Ｈ－インドール－５－イル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（（１Ｈ－インドール－５－イル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（（１Ｈ－インドール－５－イル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（（１Ｈ－インドール－５－イル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）ピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）ピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）ピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）ピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（４－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）ピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（２－オキサ－８－アザスピロ［４．５］デカン－８－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（２－オキサ－８－アザスピロ［４．５］デカン－８－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（２－オキサ－８－アザスピロ［４．５］デカン－８－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（２－オキサ－８－アザスピロ［４．５］デカン－８－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（２－オキサ－８－アザスピロ［４．５］デカン－８－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（３－（２－クロロフェノキシ）アゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（３－（２－クロロフェノキシ）アゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（３－（２－クロロフェノキシ）アゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（３－（２－クロロフェノキシ）アゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（３－（２－クロロフェノキシ）アゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（３－（２－メトキシフェノキシ）アゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（３－（２－メトキシフェノキシ）アゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（３－（２－メトキシフェノキシ）アゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（３－（２－メトキシフェノキシ）アゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（３－（２－メトキシフェノキシ）アゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（６－アザスピロ［３．５］ノナン－６－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（６－アザスピロ［３．５］ノナン－６－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（６－アザスピロ［３．５］ノナン－６－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（６－アザスピロ［３．５］ノナン－６－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（６－アザスピロ［３．５］ノナン－６－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（エチル（（（１Ｓ，３Ｒ）－３－メトキシシクロブチル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（エチル（（（１ｓ，３Ｓ）－３－メトキシシクロブチル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（エチル（（（１ｓ，３Ｓ）－３－メトキシシクロブチル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（エチル（（（１ｓ，３Ｒ）－３－メトキシシクロブチル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（エチル（（（１ｓ，３ｓ）－３－メトキシシクロブチル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（ジエチルアミノ）－４，４－ジメチルシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（ジエチルアミノ）－４，４－ジメチルシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（ジエチルアミノ）－４，４－ジメチルシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（ジエチルアミノ）－４，４－ジメチルシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（ジエチルアミノ）－４，４－ジメチルシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（エチル（（（１Ｒ，３Ｓ）－３－メトキシシクロブチル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（エチル（（（１ｒ，３Ｒ）－３－メトキシシクロブチル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（エチル（（（１ｒ，３Ｒ）－３－メトキシシクロブチル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（エチル（（（１ｒ，３Ｓ）－３－メトキシシクロブチル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（エチル（（（１ｒ，３ｒ）－３－メトキシシクロブチル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（８－オキサ－２－アザスピロ［４．５］デカン－２－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（８－オキサ－２－アザスピロ［４．５］デカン－２－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（８－オキサ－２－アザスピロ［４．５］デカン－２－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（８－オキサ－２－アザスピロ［４．５］デカン－２－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（８－オキサ－２－アザスピロ［４．５］デカン－２－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－チオモルホリノシクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－チオモルホリノシクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－チオモルホリノシクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－チオモルホリノシクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（２－チオモルホリノシクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（１，４－オキサゼパン－４－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（１，４－オキサゼパン－４－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（１，４－オキサゼパン－４－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（１，４－オキサゼパン－４－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（１，４－オキサゼパン－４－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（４－イソプロポキシピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（４－イソプロポキシピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（４－イソプロポキシピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（４－イソプロポキシピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（４－イソプロポキシピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（４－（シクロプロピルメトキシ）ピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（４－（シクロプロピルメトキシ）ピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（４－（シクロプロピルメトキシ）ピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（４－（シクロプロピルメトキシ）ピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（４－（シクロプロピルメトキシ）ピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（３ａＲ，４Ｒ，７Ｓ，７ａＳ）－オクタヒドロ－２Ｈ－４，７－エポキシイソインドール－２－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（３ａＲ，４Ｒ，７Ｓ，７ａＳ）－オクタヒドロ－２Ｈ－４，７－エポキシイソインドール－２－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（３ａＲ，４Ｒ，７Ｓ，７ａＳ）－オクタヒドロ－２Ｈ－４，７－エポキシイソインドール－２－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（３ａＲ，４Ｒ，７Ｓ，７ａＳ）－オクタヒドロ－２Ｈ－４，７－エポキシイソインドール－２－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（３ａＲ，４Ｒ，７Ｓ，７ａＳ）－オクタヒドロ－２Ｈ－４，７－エポキシイソインドール－２－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（４－エトキシピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（４－エトキシピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（４－エトキシピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（４－エトキシピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（４－エトキシピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（７，８－ジヒドロ－１，６－ナフチリジン－６（５Ｈ）－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（７，８－ジヒドロ－１，６－ナフチリジン－６（５Ｈ）－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（７，８－ジヒドロ－１，６－ナフチリジン－６（５Ｈ）－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（７，８－ジヒドロ－１，６－ナフチリジン－６（５Ｈ）－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（７，８－ジヒドロ－１，６－ナフチリジン－６（５Ｈ）－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（（１Ｓ，４Ｒ）－４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（（（１ｓ，４Ｓ）－４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（（（１ｓ，４Ｓ）－４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（（（１ｓ，４Ｒ）－４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（（（１ｓ，４ｓ）－４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（Ｒ）－３－メトキシピロリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（Ｒ）－３－メトキシピロリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（Ｒ）－３－メトキシピロリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（Ｒ）－３－メトキシピロリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（Ｒ）－３－メトキシピロリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（Ｓ）－３－メトキシピロリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（Ｓ）－３－メトキシピロリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（Ｓ）－３－メトキシピロリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（Ｓ）－３－メトキシピロリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（Ｓ）－３－メトキシピロリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（３，３－ジフルオロシクロブチル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（（３，３－ジフルオロシクロブチル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（（３，３－ジフルオロシクロブチル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（（３，３－ジフルオロシクロブチル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（（３，３－ジフルオロシクロブチル）メチル）アミノ）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（４－（ジフルオロメトキシ）ピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（４－（ジフルオロメトキシ）ピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（４－（ジフルオロメトキシ）ピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（４－（ジフルオロメトキシ）ピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（４－（ジフルオロメトキシ）ピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（１，３－ジヒドロ－２Ｈ－ピロロ［３，４－ｃ］ピリジン－２－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（１，３－ジヒドロ－２Ｈ－ピロロ［３，４－ｃ］ピリジン－２－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（１，３－ジヒドロ－２Ｈ－ピロロ［３，４－ｃ］ピリジン－２－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（１，３－ジヒドロ－２Ｈ－ピロロ［３，４－ｃ］ピリジン－２－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（１，３－ジヒドロ－２Ｈ－ピロロ［３，４－ｃ］ピリジン－２－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（プロピルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（プロピルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（プロピルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（プロピルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（２－（プロピルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（ジプロピルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（ジプロピルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（ジプロピルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（ジプロピルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（ジプロピルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（ピリジン－４－イルメチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（ピリジン－４－イルメチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（ピリジン－４－イルメチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（ピリジン－４－イルメチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（２－（（ピリジン－４－イルメチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（２－オキサ－６－アザスピロ［３．３］ヘプタン－６－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（２－オキサ－６－アザスピロ［３．３］ヘプタン－６－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（２－オキサ－６－アザスピロ［３．３］ヘプタン－６－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（２－オキサ－６－アザスピロ［３．３］ヘプタン－６－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（２－オキサ－６－アザスピロ［３．３］ヘプタン－６－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（ピリジン－３－イルメチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（ピリジン－３－イルメチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（ピリジン－３－イルメチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（ピリジン－３－イルメチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（２－（（ピリジン－３－イルメチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（１－エチル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（（１－エチル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（（１－エチル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（（１－エチル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（（１－エチル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（１－イソプロピル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（（１－イソプロピル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（（１－イソプロピル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（（１－イソプロピル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（（１－イソプロピル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（エチル（メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（エチル（メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（エチル（メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（エチル（メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（エチル（メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（ジメチルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（ジメチルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（ジメチルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（ジメチルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（ジメチルアミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（オキセタン－３－イルメチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（オキセタン－３－イルメチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（オキセタン－３－イルメチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（オキセタン－３－イルメチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（オキセタン－３－イルメチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（２－ヒドロキシエチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（２－ヒドロキシエチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（２－ヒドロキシエチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（２－ヒドロキシエチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（２－ヒドロキシエチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（ピロリジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（ピロリジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（ピロリジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（ピロリジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（２－（ピロリジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－モルホリノシクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－モルホリノシクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－モルホリノシクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－モルホリノシクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－モルホリノシクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（ピリジン－２－イルメチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（ピリジン－２－イルメチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（ピリジン－２－イルメチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（ピリジン－２－イルメチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（２－（（ピリジン－２－イルメチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（３－ヒドロキシ－３－メチルブチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（３－ヒドロキシ－３－メチルブチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（３－ヒドロキシ－３－メチルブチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（３－ヒドロキシ－３－メチルブチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（３－ヒドロキシ－３－メチルブチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（３－メチルオキセタン－３－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（（３－メチルオキセタン－３－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（（３－メチルオキセタン－３－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（（３－メチルオキセタン－３－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（（３－メチルオキセタン－３－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（４－メトキシ－４－メチルピペリジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（４－メトキシ－４－メチルピペリジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（４－メトキシ－４－メチルピペリジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（４－メトキシ－４－メチルピペリジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（４－メトキシ－４－メチルピペリジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（３－メトキシアゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（３－メトキシアゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（３－メトキシアゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（３－メトキシアゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（３－メトキシアゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（６－メチルピリジン－２－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（（６－メチルピリジン－２－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（（６－メチルピリジン－２－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（（６－メチルピリジン－２－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（（６－メチルピリジン－２－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（５－メトキシピリジン－２－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（（５－メトキシピリジン－２－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（（５－メトキシピリジン－２－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（（５－メトキシピリジン－２－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（（５－メトキシピリジン－２－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（６－メトキシピリジン－３－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（（６－メトキシピリジン－３－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（（６－メトキシピリジン－３－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（（６－メトキシピリジン－３－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（（６－メトキシピリジン－３－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（２－ヒドロキシ－２－メチルプロピル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（２－ヒドロキシ－２－メチルプロピル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（２－ヒドロキシ－２－メチルプロピル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（２－ヒドロキシ－２－メチルプロピル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（２－ヒドロキシ－２－メチルプロピル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）－１－メチルシクロブタン－１－カルボニトリル；
３－（（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）－１－メチルシクロブタン－１－カルボニトリル；
３－（（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）－１－メチルシクロブタン－１－カルボニトリル；
３－（（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）－１－メチルシクロブタン－１－カルボニトリル；
３－（（（２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）－１－メチルシクロブタン－１－カルボニトリル；
（１Ｓ，３Ｒ）－３－（（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）－１－メチルシクロブタン－１－カルボニトリル；
（１Ｒ，３Ｒ）－３－（（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）－１－メチルシクロブタン－１－カルボニトリル；
（１Ｒ，３Ｒ）－３－（（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）－１－メチルシクロブタン－１－カルボニトリル；
（１Ｓ，３ｒ）－３－（（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）－１－メチルシクロブタン－１－カルボニトリル；
（１ｒ，３ｒ）－３－（（（２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）－１－メチルシクロブタン－１－カルボニトリル；
（１Ｒ，３Ｓ）－３－（（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）－１－メチルシクロブタン－１－カルボニトリル；
（１Ｓ，３ｓ）－３－（（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）－１－メチルシクロブタン－１－カルボニトリル；
（１Ｓ，３ｓ）－３－（（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）－１－メチルシクロブタン－１－カルボニトリル；
（１Ｒ，３ｓ）－３－（（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）－１－メチルシクロブタン－１－カルボニトリル；
（１ｓ，３ｓ）－３－（（（２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）－１－メチルシクロブタン－１－カルボニトリル；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（ピペリジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（ピペリジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（ピペリジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（ピペリジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（２－（ピペリジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（２－（（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（３－メトキシシクロブチル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（（３－メトキシシクロブチル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（（３－メトキシシクロブチル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（（３－メトキシシクロブチル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（（３－メトキシシクロブチル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（（１Ｓ，３Ｒ）－３－メトキシシクロブチル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（（（１ｓ，３Ｓ）－３－メトキシシクロブチル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（（（１ｓ，３Ｓ）－３－メトキシシクロブチル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（（（１ｓ，３Ｒ）－３－メトキシシクロブチル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（（（１ｓ，３ｓ）－３－メトキシシクロブチル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（シス－３－メトキシシクロブチル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（（シス－３－メトキシシクロブチル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（（シス－３－メトキシシクロブチル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（（シス－３－メトキシシクロブチル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（（シス－３－メトキシシクロブチル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（（１Ｒ，３Ｓ）－３－メトキシシクロブチル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（（（１ｓ，３Ｓ）－３－メトキシシクロブチル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（（（１ｓ，３Ｓ）－３－メトキシシクロブチル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（（（１ｓ，３Ｒ）－３－メトキシシクロブチル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（（（１ｓ，３ｓ）－３－メトキシシクロブチル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（トランス－３－メトキシシクロブチル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（（トランス－３－メトキシシクロブチル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（（トランス－３－メトキシシクロブチル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（（トランス－３－メトキシシクロブチル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（（トランス－３－メトキシシクロブチル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（（１ｒ，４Ｓ）－４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（（（１ｒ，４Ｒ）－４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（（（１ｒ，４Ｒ）－４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（（（１ｒ，４Ｓ）－４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（（（１ｒ，４ｒ）－４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（４－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（（４－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（（４－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（（４－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（（４－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（ピリミジン－５－イルメチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（ピリミジン－５－イルメチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（ピリミジン－５－イルメチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（ピリミジン－５－イルメチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（２－（（ピリミジン－５－イルメチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（２－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）エチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（２－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）エチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（２－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）エチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（２－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）エチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（２－（（２－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）エチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（２－オキサ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（２－オキサ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（２－オキサ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（２－オキサ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（２－オキサ－７－アザスピロ［３．５］ノナン－７－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（４－メトキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（（４－メトキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（（４－メトキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（（４－メトキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（（４－メトキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（２，２－ジメチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（（２，２－ジメチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（（２，２－ジメチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（（２，２－ジメチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（（２，２－ジメチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（７－オキサスピロ［３．５］ノナン－２－イル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（７－オキサスピロ［３．５］ノナン－２－イル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（７－オキサスピロ［３．５］ノナン－２－イル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（７－オキサスピロ［３．５］ノナン－２－イル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（７－オキサスピロ［３．５］ノナン－２－イル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
１－（（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）シクロブタン－１－カルボニトリル；
１－（（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）シクロブタン－１－カルボニトリル；
１－（（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）シクロブタン－１－カルボニトリル；
１－（（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）シクロブタン－１－カルボニトリル；
１－（（（２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）シクロブタン－１－カルボニトリル；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（３－（２－クロロフェノキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（３－（２－クロロフェノキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（３－（２－クロロフェノキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（３－（２－クロロフェノキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（３－（２－クロロフェノキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（３－（２－メトキシフェノキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（３－（２－メトキシフェノキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（３－（２－メトキシフェノキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（３－（２－メトキシフェノキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（３－（２－メトキシフェノキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（ピラゾロ［１，５－ａ］ピリミジン－６－イルメチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（ピラゾロ［１，５－ａ］ピリミジン－６－イルメチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（ピラゾロ［１，５－ａ］ピリミジン－６－イルメチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（ピラゾロ［１，５－ａ］ピリミジン－６－イルメチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（２－（（ピラゾロ［１，５－ａ］ピリミジン－６－イルメチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（４，４－ジフルオロシクロヘキシル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（４，４－ジフルオロシクロヘキシル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（４，４－ジフルオロシクロヘキシル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（４，４－ジフルオロシクロヘキシル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（４，４－ジフルオロシクロヘキシル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（２，４－ジフルオロベンジル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（２，４－ジフルオロベンジル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（２，４－ジフルオロベンジル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（２，４－ジフルオロベンジル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（２，４－ジフルオロベンジル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（２－メトキシシクロペンチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（２－メトキシシクロペンチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（２－メトキシシクロペンチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（２－メトキシシクロペンチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（２－メトキシシクロペンチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－メトキシシクロペンチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－メトキシシクロペンチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－メトキシシクロペンチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－メトキシシクロペンチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－メトキシシクロペンチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－メトキシシクロペンチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－メトキシシクロペンチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－メトキシシクロペンチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－メトキシシクロペンチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－メトキシシクロペンチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）ビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－カルボニトリル；
３－（（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）ビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－カルボニトリル；
３－（（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）ビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－カルボニトリル；
３－（（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）ビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－カルボニトリル；
３－（（（２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）ビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－カルボニトリル；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（３－（３－フルオロフェノキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（３－（３－フルオロフェノキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（３－（３－フルオロフェノキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（３－（３－フルオロフェノキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（３－（３－フルオロフェノキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（３，３－ジフルオロシクロブチル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（（３，３－ジフルオロシクロブチル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（（３，３－ジフルオロシクロブチル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（（３，３－ジフルオロシクロブチル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（（３，３－ジフルオロシクロブチル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（（１Ｓ，４Ｒ）－４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（（（１ｓ，４Ｓ）－４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（（（１ｓ，４Ｓ）－４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（（（１ｓ，４Ｒ）－４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（（（１ｓ，４ｓ）－４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（シス－４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（トランス－４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（ビス（（（１Ｒ，４Ｓ）－４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（ビス（（（１ｒ，４Ｒ）－４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（ビス（（（１ｒ，４Ｒ）－４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（ビス（（（１ｒ，４Ｓ）－４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（ビス（（（１ｒ，４Ｒ）－４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
４－（（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）ベンゾニトリル；
４－（（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）ベンゾニトリル；
４－（（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）ベンゾニトリル；
４－（（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）ベンゾニトリル；
４－（（（２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）アミノ）メチル）ベンゾニトリル；
４－（（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）（メチル）アミノ）メチル）ベンゾニトリル；
４－（（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）（メチル）アミノ）メチル）ベンゾニトリル；
４－（（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）（メチル）アミノ）メチル）ベンゾニトリル；
４－（（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）（メチル）アミノ）メチル）ベンゾニトリル；
４－（（（２－（（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）オキシ）シクロヘキシル）（メチル）アミノ）メチル）ベンゾニトリル；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（３－フルオロビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（（３－フルオロビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（（３－フルオロビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（（３－フルオロビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（（３－フルオロビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）メチル）アミノ）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（３，３－ジフルオロピロリジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（３，３－ジフルオロピロリジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（３，３－ジフルオロピロリジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（３，３－ジフルオロピロリジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（３，３－ジフルオロピロリジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（エチルアミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（エチルアミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（エチルアミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（エチルアミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（エチルアミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（ベンジルアミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（ベンジルアミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（ベンジルアミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（ベンジルアミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（ベンジルアミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（ジエチルアミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（ジエチルアミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（ジエチルアミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（ジエチルアミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（ジエチルアミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（４－メトキシ－４－メチルピペリジン－１－イル）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（４－メトキシ－４－メチルピペリジン－１－イル）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（４－メトキシ－４－メチルピペリジン－１－イル）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（４－メトキシ－４－メチルピペリジン－１－イル）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（４－メトキシ－４－メチルピペリジン－１－イル）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（イソブチルアミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（イソブチルアミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（イソブチルアミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（イソブチルアミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（イソブチルアミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（プロピルアミノ）シクロヘプチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（プロピルアミノ）シクロヘプチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（プロピルアミノ）シクロヘプチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（プロピルアミノ）シクロヘプチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（２－（プロピルアミノ）シクロヘプチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（２－オキサ－６－アザスピロ［３．３］ヘプタン－６－イル）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（２－オキサ－６－アザスピロ［３．３］ヘプタン－６－イル）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（２－オキサ－６－アザスピロ［３．３］ヘプタン－６－イル）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（２－オキサ－６－アザスピロ［３．３］ヘプタン－６－イル）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（２－オキサ－６－アザスピロ［３．３］ヘプタン－６－イル）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（（１Ｒ，４Ｓ）－４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（（（１ｒ，４Ｒ）－４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（（（１ｒ，４Ｒ）－４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（（（１ｒ，４Ｓ）－４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（（（１ｒ，４ｒ）－４－メトキシシクロヘキシル）メチル）アミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘプチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘプチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘプチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘプチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（２－（（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）メチル）アミノ）シクロヘプチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（３－メチルオキセタン－３－イル）メチル）アミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（（３－メチルオキセタン－３－イル）メチル）アミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（（３－メチルオキセタン－３－イル）メチル）アミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（（３－メチルオキセタン－３－イル）メチル）アミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（（３－メチルオキセタン－３－イル）メチル）アミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（３－フルオロビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）メチル）アミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（（３－フルオロビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）メチル）アミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（（３－フルオロビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）メチル）アミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（（３－フルオロビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）メチル）アミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（（３－フルオロビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）メチル）アミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（３－メトキシアゼチジン－１－イル）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（３－メトキシアゼチジン－１－イル）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（３－メトキシアゼチジン－１－イル）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（３－メトキシアゼチジン－１－イル）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（３－メトキシアゼチジン－１－イル）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（（（３，３－ジフルオロシクロブチル）メチル）アミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（（（３，３－ジフルオロシクロブチル）メチル）アミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（（（３，３－ジフルオロシクロブチル）メチル）アミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（（（３，３－ジフルオロシクロブチル）メチル）アミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（（（３，３－ジフルオロシクロブチル）メチル）アミノ）シクロヘプチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（ジエチルアミノ）－３－メチルシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（ジエチルアミノ）－３－メチルシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（ジエチルアミノ）－３－メチルシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（ジエチルアミノ）－３－メチルシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（ジエチルアミノ）－３－メチルシクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（３－（ピリダジン－３－イルオキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（３－（ピリダジン－３－イルオキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（３－（ピリダジン－３－イルオキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（３－（ピリダジン－３－イルオキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（２－（３－（ピリダジン－３－イルオキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（３－イソプロポキシアゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（３－イソプロポキシアゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（３－イソプロポキシアゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（３－イソプロポキシアゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（３－イソプロポキシアゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（３－（２，２，２－トリフルオロエトキシ）アゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（３－（２，２，２－トリフルオロエトキシ）アゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（３－（２，２，２－トリフルオロエトキシ）アゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（３－（２，２，２－トリフルオロエトキシ）アゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（２－（３－（２，２，２－トリフルオロエトキシ）アゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（３，３－ジメチルピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（３，３－ジメチルピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（３，３－ジメチルピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（３，３－ジメチルピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（３，３－ジメチルピペリジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（３－イソプロポキシアゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（３－イソプロポキシアゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（３－イソプロポキシアゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（３－イソプロポキシアゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（３－イソプロポキシアゼチジン－１－イル）シクロペンチル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）－３－（３－エトキシアゼチジン－１－イル）ビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－イル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｒ）－３－（３－エトキシアゼチジン－１－イル）ビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－イル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｒ）－３－（３－エトキシアゼチジン－１－イル）ビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－イル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ）－３－（３－エトキシアゼチジン－１－イル）ビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－イル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，４Ｒ）－３－（３－エトキシアゼチジン－１－イル）ビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－イル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）－３－（３－エトキシアゼチジン－１－イル）ビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－イル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ）－３－（３－エトキシアゼチジン－１－イル）ビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－イル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ）－３－（３－エトキシアゼチジン－１－イル）ビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－イル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ，３Ｓ，４Ｓ）－３－（３－エトキシアゼチジン－１－イル）ビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－イル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，４Ｓ）－３－（３－エトキシアゼチジン－１－イル）ビシクロ［２．２．１］ヘプタン－２－イル）オキシ）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（３－（ピラジン－２－イルオキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（３－（ピラジン－２－イルオキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（３－（ピラジン－２－イルオキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（３－（ピラジン－２－イルオキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（（２－（３－（ピラジン－２－イルオキシ）アゼチジン－１－イル）シクロヘキシル）オキシ）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－アミノシクロペンチル）オキシ）－４－フルオロ－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－アミノシクロペンチル）オキシ）－４－フルオロ－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－アミノシクロペンチル）オキシ）－４－フルオロ－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－アミノシクロペンチル）オキシ）－４－フルオロ－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－アミノシクロペンチル）オキシ）－４－フルオロ－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（ジエチルアミノ）シクロペンチル）オキシ）－４－フルオロ－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（ジエチルアミノ）シクロペンチル）オキシ）－４－フルオロ－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（ジエチルアミノ）シクロペンチル）オキシ）－４－フルオロ－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（ジエチルアミノ）シクロペンチル）オキシ）－４－フルオロ－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－（ジエチルアミノ）シクロペンチル）オキシ）－４－フルオロ－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－アミノシクロペンチル）オキシ）－６－フルオロ－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－アミノシクロペンチル）オキシ）－６－フルオロ－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－アミノシクロペンチル）オキシ）－６－フルオロ－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－アミノシクロペンチル）オキシ）－６－フルオロ－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２－アミノシクロペンチル）オキシ）－６－フルオロ－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｓ）－２－（ジエチルアミノ）シクロペンチル）オキシ）－６－フルオロ－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｓ，２Ｒ）－２－（ジエチルアミノ）シクロペンチル）オキシ）－６－フルオロ－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｒ）－２－（ジエチルアミノ）シクロペンチル）オキシ）－６－フルオロ－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（ジエチルアミノ）シクロペンチル）オキシ）－６－フルオロ－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；及び
３－（５－（（２－（ジエチルアミノ）シクロペンチル）オキシ）－６－フルオロ－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン、
又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、及び互変異性体から選択される。
他のＩＫＺＦ２阻害剤は、その全体が参照により組み込まれる国際公開第２０２０／０１２３３４号パンフレットに記載される。
いくつかの実施形態において、ＩＫＺＦ２阻害剤は、式（Ｉ）
Figure 2023529211000256
 の化合物又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、又は互変異性体を含み、
式中、
Ｘ１は、ＣＲ３であり；
Figure 2023529211000257
 は、Ｘ１がＣＲ３であり、Ｒ３が存在しない場合、任意選択により二重結合であり；
各Ｒ１は、独立して、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ヒドロキシアルキル、若しくはハロゲンであるか、又は
２つのＲ１は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、５又は６員のヘテロシクロアルキル環を形成するか、又は
２つのＲ１は、隣接する原子上にある場合、それらが結合している原子と一緒になって、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール環、又はＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリール環を形成し；
Ｒ２は、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、－Ｃ（Ｏ）（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、－Ｃ（Ｏ）（ＣＨ２）０～３（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、－Ｃ（Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）０～３（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリール、又は（Ｃ３～Ｃ８）シクロアルキルであり、アルキルは、任意選択により、１つ以上のＲ４で置換されており；アリール、ヘテロアリール、及びシクロアルキルは、任意選択により１つ以上のＲ５で置換されているか、又は
Ｒ１及びＲ２は、隣接する原子上にある場合、それらが結合している原子と一緒になって、５又は６員のヘテロシクロアルキル環を形成し；
Figure 2023529211000258
 が二重結合である場合、Ｒ３はＨであるか、又はＲ３は存在せず；
各Ｒ４は独立して、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ６、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ６Ｒ６’、－ＮＲ６Ｃ（Ｏ）Ｒ６’、ハロゲン、－ＯＨ、－ＮＨ２、ＣＮ、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～４個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリール、（Ｃ３～Ｃ８）シクロアルキル、及びＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５～７員のヘテロシクロアルキル環から選択され、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、及びヘテロシクロアルキル基は、任意選択により１つ以上のＲ７で置換されており；
各Ｒ５は独立して、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル、（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ヒドロキシアルキル、ハロゲン、－ＯＨ、－ＮＨ２、ＣＮ、（Ｃ３～Ｃ７）シクロアルキル、又はＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５～７員のヘテロシクロアルキル、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、及びＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリールから選択されるか、又は
２つのＲ５は、隣接する原子上にある場合、それらが結合している原子と一緒になって、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール環、又は任意選択により１つ以上のＲ１０で置換された、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリール環を形成するか、又は
２つのＲ５は、隣接する原子上にある場合、それらが結合している原子と一緒になって、（Ｃ５～Ｃ７）シクロアルキル環、又は任意選択により１つ以上のＲ１０で置換された、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５～７員のヘテロシクロアルキル環を形成し；
Ｒ６及びＲ６’は、それぞれ独立して、Ｈ、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、又は（Ｃ６～Ｃ１０）アリールであり；
各Ｒ７は独立して、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル、（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルコキシ、－Ｃ（Ｏ）Ｒ８、－（ＣＨ２）０～３Ｃ（Ｏ）ＯＲ８、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ８Ｒ９、－ＮＲ８Ｃ（Ｏ）Ｒ９、－ＮＲ８Ｃ（Ｏ）ＯＲ９、－Ｓ（Ｏ）ｐＮＲ８Ｒ９、－Ｓ（Ｏ）ｐＲ１２、（Ｃ１～Ｃ６）ヒドロキシアルキル、ハロゲン、－ＯＨ、－Ｏ（ＣＨ２）１－３ＣＮ、－ＮＨ２、ＣＮ、－Ｏ（ＣＨ２）０～３（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、アダマンチル、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員の－Ｏ（ＣＨ２）０～３－ヘテロアリール、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む、５～１０員の単環式又は二環式ヘテロアリール、（Ｃ３～Ｃ７）シクロアルキル、及びＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５～７員のヘテロシクロアルキルから選択され、アルキルは、任意選択により１つ以上のＲ１１で置換されており、アリール、ヘテロアリール、及びヘテロシクロアルキルは、ハロゲン、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、及び（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシからそれぞれ独立して選択される１つ以上の置換基で任意選択により置換されているか、又は
２つのＲ７は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、＝（Ｏ）を形成するか、又は
２つのＲ７は、隣接する原子上にある場合、それらが結合している原子と一緒になって、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール環、又は任意選択により１つ以上のＲ１０で置換された、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリール環を形成するか、又は
２つのＲ７は、それらが結合している原子と一緒になって、（Ｃ５～Ｃ７）シクロアルキル環、又は任意選択により１つ以上のＲ１０で置換された、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５～７員のヘテロシクロアルキル環を形成し；
Ｒ８及びＲ９は、それぞれ独立して、Ｈ又は（Ｃ１～Ｃ６）アルキルであり；
各Ｒ１０は独立して、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ヒドロキシアルキル、ハロゲン、－ＯＨ、－ＮＨ２、及びＣＮから選択されるか、又は
２つのＲ１０は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、＝（Ｏ）を形成し；
各Ｒ１１は独立して、ＣＮ、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、及び又はＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５～７員のヘテロシクロアルキルから選択され、アリール及びヘテロシクロアルキルは、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ヒドロキシアルキル、ハロゲン、－ＯＨ、－ＮＨ２、及びＣＮからそれぞれ独立して選択される１つ以上の置換基で任意選択により置換され；
Ｒ１２は、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、又はＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５～７員のヘテロシクロアルキルであり；
Ｒｘは、Ｈ又はＤであり；
ｐは、０、１、又は２であり；
ｎは、０、１、又は２であり；
ｎ１は、１又は２であり、ｎ＋ｎ１≦３であり；
ｑは、０、１、２、３、又は４である。
いくつかの実施形態において、化合物は式（Ｉ）
Figure 2023529211000259
 又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、又は互変異性体を有し、
式中、
Ｘ１は、ＣＲ３であり；
Figure 2023529211000260
 は、Ｘ１がＣＲ３であり、Ｒ３が存在しない場合、任意選択により二重結合であり；
各Ｒ１は、独立して、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ヒドロキシアルキル、若しくはハロゲンであり；
Ｒ２は、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリール、又は（Ｃ３～Ｃ８）シクロアルキルであり、アルキルは、任意選択により１つ以上のＲ４で置換されており；アリール、ヘテロアリール、及びシクロアルキルは、１つ以上のＲ５で任意選択により置換され；
Figure 2023529211000261
 が二重結合である場合、Ｒ３はＨであるか、又はＲ３は存在せず；
各Ｒ４は独立して、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ６、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ６Ｒ６’、－ＮＲ６Ｃ（Ｏ）Ｒ６’、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリール、（Ｃ３～Ｃ８）シクロアルキル、及びＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５～７員のヘテロシクロアルキルから選択され、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、及びヘテロシクロアルキル基は、任意選択により１つ以上のＲ７で置換されており；
各Ｒ５は独立して、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル、（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ヒドロキシアルキル、ハロゲン、－ＯＨ、－ＮＨ２、ＣＮ、（Ｃ３～Ｃ７）シクロアルキル、又はＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５～７員のヘテロシクロアルキル、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、及びＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリールから選択されるか、又は
２つのＲ５は、隣接する原子上にある場合、それらが結合している原子と一緒になって、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール環、又は任意選択により１つ以上のＲ１０で置換された、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリール環を形成するか、又は
２つのＲ５は、隣接する原子上にある場合、それらが結合している原子と一緒になって、（Ｃ５～Ｃ７）シクロアルキル環、又は任意選択により１つ以上のＲ１０で置換された、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５～７員のヘテロシクロアルキル環を形成し；
Ｒ６及びＲ６’は、それぞれ独立して、Ｈ又は（Ｃ１～Ｃ６）アルキルであり；
各Ｒ７は独立して、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル、（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルコキシ、－Ｃ（Ｏ）Ｒ８、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ８、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ８Ｒ９、－ＮＲ８Ｃ（Ｏ）Ｒ９、（Ｃ１～Ｃ６）ヒドロキシアルキル、ハロゲン、－ＯＨ、－ＮＨ２、ＣＮ、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリール、（Ｃ３～Ｃ７）シクロアルキル、及びＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５～７員のヘテロシクロアルキルから選択されるか；又は
２つのＲ７は、隣接する原子上にある場合、それらが結合している原子と一緒になって、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール環、又は任意選択により１つ以上のＲ１０で置換された、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリール環を形成するか；又は
２つのＲ７は、隣接する原子上にある場合、それらが結合している原子と一緒になって、（Ｃ５～Ｃ７）シクロアルキル環、又は任意選択により１つ以上のＲ１０で置換された、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５～７員のヘテロシクロアルキル環を形成し；
Ｒ８及びＲ９は、それぞれ独立して、Ｈ又は（Ｃ１～Ｃ６）アルキルであり；
各Ｒ１０は独立して、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ヒドロキシアルキル、ハロゲン、－ＯＨ、－ＮＨ２、及びＣＮから選択され；
Ｒｘは、Ｈ又はＤであり；
ｎは１又は２であり；
ｑは、０、１、２、３、又は４である。
いくつかの実施形態において、ｎは、１である。いくつかの実施形態において、ｎは、２である。いくつかの実施形態において、ｑは、０、１、又は２である。いくつかの実施形態において、Ｘ１は、ＣＨである。いくつかの実施形態において、Ｒｘは、Ｈである。いくつかの実施形態において、Ｒ２は、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、又は（Ｃ３～Ｃ８）シクロアルキルであり、ここで、アリール、ヘテロアリール、及びシクロアルキルは、任意選択により１～３個のＲ５で置換されている。いくつかの実施形態において、Ｒ２は、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール又は（Ｃ３～Ｃ８）シクロアルキルである。いくつかの実施形態において、Ｒ２は、任意選択により１～３個のＲ４で置換された、（Ｃ１～Ｃ６）アルキルである。
いくつかの実施形態において、化合物は、式（Ｉａ）、式（Ｉｂ）、式（Ｉｃ）、又は式（Ｉｄ）：
Figure 2023529211000262
 を有する。
いくつかの実施形態において、Ｒ２は、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール又は（Ｃ３～Ｃ８）シクロアルキルであり、ここで、アリール及びシクロアルキルは、任意選択により１～３個のＲ５で置換されている。いくつかの実施形態において、Ｒ２は、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール又は（Ｃ３～Ｃ８）シクロアルキルである。いくつかの実施形態において、Ｒ２は、任意選択により１～３個のＲ４で置換された、（Ｃ１～Ｃ６）アルキルである。
いくつかの実施形態において、化合物は、
３－（５－（１－エチルピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－プロピルピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（シクロプロピルメチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－イソブチルピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（シクロブチルメチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（オキサゾール－２－イルメチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（チアゾール－２－イルメチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（シクロペンチルメチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（５－クロロチオフェン－２－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（２－クロロチアゾール－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（シクロヘキシルメチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（２－（ピロリジン－１－イル）エチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－フェネチルピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３－フルオロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３－クロロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２－フルオロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２－クロロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（２－（ピペリジン－１－イル）エチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（３，５－ジメチルイソオキサゾール－４－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１，３－ジメチル－１Ｈ－ピラゾール－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（６－メチルピリジン－２－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３－モルホリノプロピル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２，６－ジフルオロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２，６－ジクロロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３，５－ジフルオロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３，５－ジブロモベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３－クロロ－５－フルオロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２，５－ジフルオロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２，５－ジクロロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
４－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）ベンゾニトリル；
３－（５－（１－（４－（ヒドロキシメチル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３，４－ジクロロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－クロロ－２－フルオロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２－クロロ－４－フルオロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）ベンゾニトリル；
３－（５－（１－（２，３－ジフルオロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
２－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）ベンゾニトリル；
３－（５－（１－（４－メトキシベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２，５－ジメチルベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３，４－ジメチルベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２，４－ジメチルベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１Ｈ－インダゾール－４－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－イソプロピルベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
５－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）フラン－２－カルボン酸メチル；
３－（５－（１－（ナフタレン－２－イルメチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（キノリン－２－イルメチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（ナフタレン－１－イルメチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１－メチル－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（４－（トリフルオロメトキシ）ベンジル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－（１Ｈ－ピロール－１－イル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－（１Ｈ－１，２，４－トリアゾール－１－イル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（３－（トリフルオロメトキシ）ベンジル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（２－（トリフルオロメトキシ）ベンジル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－ベンジルピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（ピリジン－２－イルメチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（ピリジン－３－イルメチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（ピリジン－４－イルメチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（ピリミジン－５－イルメチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（１－フェニルエチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－（フルオロメチル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３，４－ジフルオロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
２－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）ピリミジン－５－カルボニトリル；
３－（５－（１－（４－エチルベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２－メトキシベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（２－メトキシピリミジン－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３－フルオロ－４－メチルベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－（ジフルオロメチル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
４－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）ベンズアミド；
４－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）安息香酸；
３－（５－（１－（３－（ジフルオロメチル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）安息香酸；
３－（１－オキソ－５－（１－（４－プロピルベンジル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－（ジフルオロメトキシ）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（５－（トリフルオロメチル）ピリジン－２－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３－（ジフルオロメトキシ）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２－（ジフルオロメトキシ）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－シクロブチルベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキシン－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキシン－６－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－（ｔｅｒｔ－ブチル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－イソブチルベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
Ｎ－（４－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）フェニル）アセトアミド；
３－（５－（１－（（２，２－ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキセピン－７－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（４－（ｔｅｒｔ－ペンチル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（［１，１’－ビフェニル］－４－イルメチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－（１Ｈ－ピラゾール－１－イル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－（１Ｈ－イミダゾール－１－イル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３－（１Ｈ－ピラゾール－１－イル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－シクロヘキシルベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（ピリミジン－２－イルメチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－ブロモベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－クロロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３，５－ジクロロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン
３－（５－（１－（４－クロロ－３－フルオロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３－クロロ－４－フルオロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２，４－ジフルオロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３－メトキシベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（ベンゾ［ｃ］［１，２，５］オキサジアゾール－５－イルメチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２－シクロプロピルベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１，３－ジヒドロイソベンゾフラン－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（２－（トリフルオロメチル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３－イソプロポキシベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（４－（チオフェン－３－イル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－シクロペンチルベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（４－（ピロリジン－１－イル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－フルオロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２，４－ジクロロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（キノリン－８－イルメチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１－メチル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１Ｈ－ピラゾール－４－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１－メチル－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１Ｈ－ピロール－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１Ｈ－イミダゾール－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１－エチル－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（２－アミノピリミジン－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（６－アミノピリジン－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（５－アミノ－１－メチル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（６－メチルイミダゾ［２，１－ｂ］チアゾール－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（イミダゾ［１，２－ａ］ピラジン－３－イルメチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（［１，２，４］トリアゾロ［１，５－ａ］ピリジン－５－イルメチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（ピラゾロ［１，５－ａ］ピリジン－４－イルメチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１，４－ジメチル－１Ｈ－イミダゾール－２－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（ベンゾ［ｄ］チアゾール－５－イルメチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（ピラゾロ［１，５－ａ］ピリミジン－６－イルメチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イルメチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イルメチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１－シクロブチル－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（４，５，６，７－テトラヒドロピラゾロ［１，５－ａ］ピリジン－２－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１Ｈ－インドール－２－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１Ｈ－インダゾール－６－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）ベンズアミド；
３－（５－（１－（（１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－６－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］チアジン－６－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（２－（ピロリジン－１－イル）ピリミジン－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（２－（ｔｅｒｔ－ブチル）チアゾール－４－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（２－（チオフェン－２－イル）チアゾール－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（５－シクロプロピル－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（２－モルホリノピリミジン－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（３－フェニル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（６－メチル－１Ｈ－インドール－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
４－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）－１Ｈ－ピロール－２－カルボン酸メチル；
３－（１－オキソ－５－（１－（（３－（ピリジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（５－（ピリジン－２－イル）－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３，５－ジフルオロ－４－ヒドロキシベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２－メチルベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－メチルベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３，５－ジメチルベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２Ｓ）－１－ベンジル－２－メチルピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２Ｒ）－１－ベンジル－２－メチルピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－ベンジル－２－メチルピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－メチル－１，２，３，６－テトラヒドロピリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（５，６，７，８－テトラヒドロナフタレン－１－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（アゼパン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（Ｒ）－アゼパン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（Ｓ）－アゼパン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（１，２，３，４－テトラヒドロナフタレン－１－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
２－（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）酢酸メチル；
３－（１－オキソ－５－（１－フェニルピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３－メチルベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２，６－ジメチルベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（５，６，７，８－テトラヒドロナフタレン－２－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
２－（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）酢酸エチル；
２－（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）酢酸ｔｅｒｔ－ブチル；
２－（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）酢酸；
３－（１－オキソ－５－（１－（３，３，３－トリフルオロプロピル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
２－（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）－Ｎ－フェニルアセトアミド；
３－（５－（１－（３－フルオロプロピル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
４－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）安息香酸ｔｅｒｔ－ブチル；
３－（５－（１－ベンジル－３，３－ジメチルピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－ベンジル－３－メチルピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２－ヒドロキシ－１－フェニルエチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（Ｓ）－１－ベンジルアゼパン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－ベンジル－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－３－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－ベンジル－２－オキソピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－ベンジル－１，２，３，４－テトラヒドロキノリン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１－ベンジル－１Ｈ－テトラゾール－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（５－フェニル－１，３，４－オキサジアゾール－２－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（ベンゾ［ｄ］チアゾール－２－イルメチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（３－（ピリジン－２－イル）－１Ｈ－ピラゾール－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（Ｒ）－２－ヒドロキシ－１－フェニルエチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１，２，４－オキサジアゾール－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－ヒドロキシ－３－（（４－メチルピペラジン－１－イル）メチル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
２－（４－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）フェニル）アセトニトリル；
３－（５－（１－（（７－ヒドロキシ－２－メチルピラゾロ［１，５－ａ］ピリミジン－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２，２－ジフルオロ－１－フェニルエチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（３－フルオロビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２－フルオロ－１－フェニルエチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（４－オキソ－３，４－ジヒドロチエノ［３，２－ｄ］ピリミジン－２－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（キノリン－４－イルメチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３，５－ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
６－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）ピコリノニトリル；
２－（４－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）フェノキシ）アセトニトリル；
３－（５－（１－（（１Ｈ－インダゾール－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２，２－ジフルオロエチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（７－メチル－４－オキソ－４Ｈ－ピリド［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－カルボン酸ベンジル；
３－（１－オキソ－５－（１－（２－フェニルアセチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（２，２，２－トリフルオロ－１－フェニルエチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－（５－メチルベンゾ［ｄ］チアゾール－２－イル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（イソキノリン－１－イルメチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－（４－メトキシピペリジン－１－イル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－（イソプロピルチオ）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（Ｓ）－１－フェニルエチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
２－（４－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）フェニル）酢酸；
３－（５－（１－（（７－フルオロキノリン－２－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（２－アミノ－４－（トリフルオロメチル）チアゾール－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）－１，２，４－オキサジアゾール－５－カルボキサミド；
３－（５－（１－（３－（モルホリノスルホニル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
４－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）－Ｎ，Ｎ－ジメチルベンゼンスルホンアミド；
３－（１－オキソ－５－（１－（チアゾール－４－イルメチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（キノキサリン－６－イルメチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－（ｔｅｒｔ－ブチル）ベンゾイル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－（（４－フルオロベンジル）オキシ）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（３－メチルイソオキサゾール－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（イソオキサゾール－３－イルメチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－（メトキシメチル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（Ｓ）－２－ヒドロキシ－１－フェニルエチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（フェニルスルホニル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（５－メチル－３－フェニルイソオキサゾール－４－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－（（ジフルオロメチル）スルホニル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（２，２，２－トリフルオロエチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
２－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）オキサゾール－４－カルボン酸メチル；
３－（１－オキソ－５－（１－（４－（ピリジン－２－イルメトキシ）ベンジル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－アセチルピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－ベンジルピロリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
（Ｒ）－３－（５－（（Ｒ）－１－ベンジルアゼパン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
（Ｓ）－３－（５－（（Ｓ）－１－ベンジルアゼパン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－ベンジルアゼパン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－メチル－２，３，６，７－テトラヒドロ－１Ｈ－アゼピン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（８－ベンジル－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（８－アザビシクロ［３．２．１］オクタン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－アセチル－１，２，５，６－テトラヒドロピリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
（Ｒ）－３－（５－（（Ｒ）－１－アセチルピロリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－アセチル－１，２，３，６－テトラヒドロピリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（オクタヒドロインドリジン－７－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
（Ｒ）－３－（５－（（Ｓ）－１－ベンジルアゼパン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（Ｒ）－１－ベンジルアゼパン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－アセチル－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－３－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－メチルアゼパン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
（Ｓ）－３－（５－（（Ｒ）－１－ベンジルアゼパン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
（Ｓ）－３－（５－（（Ｒ）－１－アセチルピロリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（６－イソプロポキシピリジン－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（１－フェニル－１Ｈ－ピラゾール－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－エトキシベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（１－フェニル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１－イソプロピル－１Ｈ－ピラゾール－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（イソチアゾール－５－イルメチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１－イソプロピル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１Ｈ－ピラゾール－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（５－イソプロポキシピリジン－２－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（１－（ピリジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾール－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（１－（ピリジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
５－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）－２－フルオロベンゾニトリル；
３－（５－（１－（（５－フルオロピリジン－２－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１－エチル－３－（ピリジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
トランス－３－（１－オキソ－５－（１－（（４－（トリフルオロメチル）シクロヘキシル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
シス－３－（１－オキソ－５－（１－（（４－（トリフルオロメチル）シクロヘキシル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
トランス－３－（５－（１－（（４－メトキシシクロヘキシル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；及び
３－（５－（１－（（６－メトキシピリジン－２－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体から選択される。
他のＩＫＺＦ２阻害剤は、米国特許第１０，４１４，７５５号明細書に記載されており、その全体が参照により組み込まれる。
いくつかの実施形態において、ＩＫＺＦ２阻害剤は、式（Ｉｃ）
Figure 2023529211000263
 の化合物又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、又は互変異性体を含み、
式中、
各Ｒ１は独立して、（Ｃ１～Ｃ６）アルキルであり；
Ｒ２は、１～３個のＲ４で置換された（Ｃ１～Ｃ６）アルキルであり；
各Ｒ４は独立して、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール及び（Ｃ３～Ｃ８）シクロアルキルから選択され、アリール及びシクロアルキル基は、任意選択により１つ以上のＲ７で置換されており；
各Ｒ７は独立して、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル、（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルコキシ、－Ｃ（Ｏ）Ｒ８、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ８、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ８Ｒ９、－ＮＲ８Ｃ（Ｏ）Ｒ９、（Ｃ１～Ｃ６）ヒドロキシアルキル、ハロゲン、－ＯＨ、－ＮＨ２、ＣＮ、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリール、（Ｃ３～Ｃ７）シクロアルキル、及びＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５～７員のヘテロシクロアルキルから選択されるか；又は
２つのＲ７は、隣接する原子上にある場合、それらが結合している原子と一緒になって、
（Ｃ６～Ｃ１０）アリール環、又は任意選択により１つ以上のＲ１０で置換された、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリール環を形成するか；又は
２つのＲ７は、隣接する原子上にある場合、それらが結合している原子と一緒になって、（Ｃ５～Ｃ７）シクロアルキル環、又は任意選択により１つ以上のＲ１０で置換された、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５～７員のヘテロシクロアルキル環を形成し；
Ｒ８及びＲ９は、それぞれ独立して、Ｈ又は（Ｃ１～Ｃ６）アルキルであり；
各Ｒ１０は独立して、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ヒドロキシアルキル、ハロゲン、－ＯＨ、－ＮＨ２、及びＣＮから選択され；
ｑは、０である。
いくつかの実施形態において、Ｒ４は、任意選択により１～３個のＲ７で置換された、フェニル又は（Ｃ３～Ｃ８）シクロアルキルである。いくつかの実施形態において、Ｒ４は、任意選択により１～３個のＲ７で置換された、フェニルである。いくつかの実施形態において、Ｒ４は、任意選択により１～３個のＲ７で置換された、（Ｃ３～Ｃ８）シクロアルキルである。
いくつかの実施形態において、ＩＫＺＦ２阻害剤は、
Figure 2023529211000264
 又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体から選択される化合物を含む。
いくつかの実施形態において、化合物は、化合物（Ｉ－１５６）：
Figure 2023529211000265
 又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体である。
いくつかの実施形態において、化合物は、化合物（Ｉ－５７）：
Figure 2023529211000266
 又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体である。
いくつかの実施形態において、化合物は、化合物（Ｉ－８７）：
Figure 2023529211000267
 又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体である。
いくつかの実施形態において、化合物は、化合物（Ｉ－８８）：
Figure 2023529211000268
 又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体である。
いくつかの実施形態において、化合物は、化合物（Ｉ－１１２）：
Figure 2023529211000269
 又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体である。
いくつかの実施形態において、化合物は、化合物（Ｉ－３０３）：
Figure 2023529211000270
 又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体である。
いくつかの実施形態において、化合物は、化合物（Ｉ－１１）：及び
Figure 2023529211000271
 又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体である。
いくつかの実施形態において、ＩＫＺＦ２阻害剤は、式（Ｉｃ）
Figure 2023529211000272
 の化合物又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、又は互変異性体を含み、
式中、
各Ｒ１は独立して、（Ｃ１～Ｃ６）アルキルであり；
Ｒ２は、１～３個のＲ４で置換された（Ｃ１～Ｃ６）アルキルであり；
各Ｒ４は独立して、フェニル、又はＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～４個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリールから選択され、フェニル及びヘテロアリール基は、任意選択により、１～３個のＲ７で置換されており；
各Ｒ７は独立して、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル、（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルコキシ、－Ｃ（Ｏ）Ｒ８、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ８、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ８Ｒ９、－ＮＲ８Ｃ（Ｏ）Ｒ９、（Ｃ１～Ｃ６）ヒドロキシアルキル、ハロゲン、－ＯＨ、－ＮＨ２、ＣＮ、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリール、（Ｃ３～Ｃ７）シクロアルキル、及びＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５～７員のヘテロシクロアルキルから選択されるか；又は
２つのＲ７は、隣接する原子上にある場合、それらが結合している原子と一緒になって、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール環、又は任意選択により１つ以上のＲ１０で置換された、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリール環を形成するか；又は
２つのＲ７は、隣接する原子上にある場合、それらが結合している原子と一緒になって、（Ｃ５～Ｃ７）シクロアルキル環、又は任意選択により１つ以上のＲ１０で置換された、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５～７員のヘテロシクロアルキル環を形成し；
Ｒ８及びＲ９は、それぞれ独立して、Ｈ又は（Ｃ１～Ｃ６）アルキルであり；
各Ｒ１０は独立して、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ヒドロキシアルキル、ハロゲン、－ＯＨ、－ＮＨ２、及びＣＮから選択され；
ｑは、０である。
いくつかの実施形態において、Ｒ４は、１～３個のＲ７で置換されたフェニルである。いくつかの実施形態において、Ｒ４は、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含み、任意選択により１～３個のＲ７で置換された、５員ヘテロアリールである。いくつかの実施形態において、Ｒ４は、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含み、任意選択により１～３個のＲ７で置換された、６員ヘテロアリールである。
いくつかの実施形態において、化合物は、
Figure 2023529211000273
 又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体から選択される。
いくつかの実施形態において、ＩＫＺＦ２阻害剤は、式（Ｉ）：
Figure 2023529211000274
 の化合物又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、又は互変異性体を含み、
式中、
Ｘ１は、ＣＲ３であり；
Figure 2023529211000275
 は、Ｘ１がＣＲ３であり、Ｒ３が存在しない場合、任意選択により二重結合であり；
各Ｒ１は、独立して、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ヒドロキシアルキル、若しくはハロゲンであるか、又は
２つのＲ１は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、５又は６員のヘテロシクロアルキル環を形成するか、又は
２つのＲ１は、隣接する原子上にある場合、それらが結合している原子と一緒になって、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール環、又はＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリール環を形成し；
Ｒ２は、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、－Ｃ（Ｏ）（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、－Ｃ（Ｏ）（ＣＨ２）０～３（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、－Ｃ（Ｏ）Ｏ（ＣＨ２）０～３（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリール、（Ｃ３～Ｃ８）シクロアルキル、又はＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５～７員のヘテロシクロアルキルであり、アルキルは、任意選択により、１つ以上のＲ４で置換されており；アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、及びヘテロシクロアルキルは、任意選択により、１つ以上のＲ５で置換されているか、又は
Ｒ１及びＲ２は、隣接する原子上にある場合、それらが結合している原子と一緒になって、５又は６員のヘテロシクロアルキル環を形成し；
Figure 2023529211000276
 が二重結合である場合、Ｒ３はＨであるか、又はＲ３は存在せず；
各Ｒ４は独立して、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ６、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ６Ｒ６’、－ＮＲ６Ｃ（Ｏ）Ｒ６’、ハロゲン、－ＯＨ、－ＮＨ２、ＣＮ、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～４個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリール、（Ｃ３～Ｃ８）シクロアルキル、及びＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５～７員のヘテロシクロアルキル環から選択され、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、及びヘテロシクロアルキル基は、任意選択により１つ以上のＲ７で置換されており；
各Ｒ５は独立して、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル、（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ヒドロキシアルキル、ハロゲン、－ＯＨ、－ＮＨ２、ＣＮ、
（Ｃ３～Ｃ７）シクロアルキル、又はＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５～７員のヘテロシクロアルキル、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、及びＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリール、から選択されるか；又は
２つのＲ５は、隣接する原子上にある場合、それらが結合している原子と一緒になって、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール環、又は任意選択により１つ以上のＲ１０で置換された、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリール環を形成するか、又は
２つのＲ５は、隣接する原子上にある場合、それらが結合している原子と一緒になって、（Ｃ５～Ｃ７）シクロアルキル環、又は任意選択により１つ以上のＲ１０で置換された、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５～７員のヘテロシクロアルキル環を形成し；
Ｒ６及びＲ６’は、それぞれ独立して、Ｈ、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、又は（Ｃ６～Ｃ１０）アリールであり；
各Ｒ７は独立して、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル、（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルコキシ、－Ｃ（Ｏ）Ｒ８、－（ＣＨ２）０～３Ｃ（Ｏ）ＯＲ８、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ８Ｒ９、－ＮＲ８Ｃ（Ｏ）Ｒ９、－ＮＲ８Ｃ（Ｏ）ＯＲ９、－Ｓ（Ｏ）ｐＮＲ８Ｒ９、－Ｓ（Ｏ）ｐＲ１２、（Ｃ１～Ｃ６）ヒドロキシアルキル、ハロゲン、－ＯＨ、－Ｏ（ＣＨ２）１－３ＣＮ、－ＮＨ２、ＣＮ、－Ｏ（ＣＨ２）０～３（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、アダマンチル、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員の－Ｏ（ＣＨ２）０～３－ヘテロアリール、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む、５～１０員の単環式又は二環式ヘテロアリール、（Ｃ３～Ｃ７）シクロアルキル、及びＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５～７員のヘテロシクロアルキルから選択され、アルキルは、任意選択により１つ以上のＲ１１で置換されており、アリール、ヘテロアリール、及びヘテロシクロアルキルは、ハロゲン、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、及び（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシからそれぞれ独立して選択される１つ以上の置換基で任意選択により置換されているか、又は
２つのＲ７は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、＝（Ｏ）を形成するか、又は
２つのＲ７は、隣接する原子上にある場合、それらが結合している原子と一緒になって、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール環、又は任意選択により１つ以上のＲ１０で置換された、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリール環を形成するか；又は
２つのＲ７は、それらが結合している原子と一緒になって、（Ｃ５～Ｃ７）シクロアルキル環、又は任意選択により１つ以上のＲ１０で置換された、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５～７員のヘテロシクロアルキル環を形成し；
Ｒ８及びＲ９は、それぞれ独立して、Ｈ又は（Ｃ１～Ｃ６）アルキルであり；
各Ｒ１０は独立して、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ヒドロキシアルキル、ハロゲン、－ＯＨ、－ＮＨ２、及びＣＮから選択されるか；又は
２つのＲ１０は、それらが結合している炭素原子と一緒になって、＝（Ｏ）を形成し；
各Ｒ１１は独立して、ＣＮ、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、及び又はＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５～７員のヘテロシクロアルキルから選択され、アリール及びヘテロシクロアルキルは、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ヒドロキシアルキル、ハロゲン、－ＯＨ、－ＮＨ２、及びＣＮからそれぞれ独立して選択される１つ以上の置換基で任意選択により置換され；
Ｒ１２は、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、又はＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５～７員のヘテロシクロアルキルであり；
Ｒｘは、Ｈ又はＤであり；
ｐは、０、１、又は２であり；
ｎは、０、１、又は２であり；
ｎ１は、１又は２であり、ｎ＋ｎ１≦３であり；
ｑは、０、１、２、３、又は４である。
いくつかの実施形態において、化合物は式（Ｉ）：
Figure 2023529211000277
 又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、又は互変異性体を有し、
式中、
Ｘ１は、ＣＲ３であり；
Figure 2023529211000278
 は、Ｘ１がＣＲ３であり、Ｒ３が存在しない場合、任意選択により二重結合であり；
各Ｒ１は、独立して、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ヒドロキシアルキル、若しくはハロゲンであり；
Ｒ２は、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリール、（Ｃ３～Ｃ８）シクロアルキル、又はＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５～７員のヘテロシクロアルキルであり、アルキルは、任意選択により１つ以上のＲ４で置換されており；アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、及びヘテロシクロアルキルは、任意選択により１つ以上のＲ５で置換されており；
Figure 2023529211000279
 が二重結合である場合、Ｒ３はＨであるか、又はＲ３は存在せず；
各Ｒ４は独立して、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ６、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ６Ｒ６’、－ＮＲ６Ｃ（Ｏ）Ｒ６’、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリール、（Ｃ３～Ｃ８）シクロアルキル、及びＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５～７員のヘテロシクロアルキルから選択され、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、及びヘテロシクロアルキル基は、任意選択により１つ以上のＲ７で置換されており；
各Ｒ５は独立して、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル、（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ヒドロキシアルキル、ハロゲン、－ＯＨ、－ＮＨ２、ＣＮ、（Ｃ３～Ｃ７）シクロアルキル、又はＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５～７員のヘテロシクロアルキル、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、及びＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリールから選択されるか、又は
２つのＲ５は、隣接する原子上にある場合、それらが結合している原子と一緒になって、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール環、又は任意選択により１つ以上のＲ１０で置換された、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリール環を形成するか、又は
２つのＲ５は、隣接する原子上にある場合、それらが結合している原子と一緒になって、（Ｃ５～Ｃ７）シクロアルキル環、又は任意選択により１つ以上のＲ１０で置換された、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５～７員のヘテロシクロアルキル環を形成し；
Ｒ６及びＲ６’は、それぞれ独立して、Ｈ又は（Ｃ１～Ｃ６）アルキルであり；
各Ｒ７は独立して、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ２～Ｃ６）アルケニル、（Ｃ２～Ｃ６）アルキニル、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルコキシ、－Ｃ（Ｏ）Ｒ８、－Ｃ（Ｏ）ＯＲ８、－Ｃ（Ｏ）ＮＲ８Ｒ９、－ＮＲ８Ｃ（Ｏ）Ｒ９、（Ｃ１～Ｃ６）ヒドロキシアルキル、ハロゲン、－ＯＨ、－ＮＨ２、ＣＮ、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリール、（Ｃ３～Ｃ７）シクロアルキル、及びＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５～７員のヘテロシクロアルキルから選択されるか；又は
２つのＲ７は、隣接する原子上にある場合、それらが結合している原子と一緒になって、
（Ｃ６～Ｃ１０）アリール環、又は任意選択により１つ以上のＲ１０で置換された、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５又は６員のヘテロアリール環を形成するか；又は
２つのＲ７は、隣接する原子上にある場合、それらが結合している原子と一緒になって、（Ｃ５～Ｃ７）シクロアルキル環、又は任意選択により１つ以上のＲ１０で置換された、Ｏ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５～７員のヘテロシクロアルキル環を形成し；
Ｒ８及びＲ９は、それぞれ独立して、Ｈ又は（Ｃ１～Ｃ６）アルキルであり；
各Ｒ１０は独立して、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルキル、（Ｃ１～Ｃ６）ハロアルコキシ、（Ｃ１～Ｃ６）ヒドロキシアルキル、ハロゲン、－ＯＨ、－ＮＨ２、及びＣＮから選択され；
Ｒｘは、Ｈ又はＤであり；
ｎは１又は２であり；
ｑは、０、１、２、３、又は４である。
いくつかの実施形態において、ｎは、１である。いくつかの実施形態において、ｎは、２である。いくつかの実施形態において、ｑは、０、１、又は２である。いくつかの実施形態において、Ｘ１は、ＣＨである。いくつかの実施形態において、Ｒｘは、Ｈである。
いくつかの実施形態において、Ｒ２は、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、（Ｃ３～Ｃ８）シクロアルキル、又はＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５～７員のヘテロシクロアルキルであり、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、及びヘテロシクロアルキルは、任意選択により１～３個のＲ５で置換されている。いくつかの実施形態において、Ｒ２は、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、（Ｃ３～Ｃ８）シクロアルキル、又はＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５～７員のヘテロシクロアルキルである。いくつかの実施形態において、Ｒ２は、任意選択により１～３個のＲ４で置換された、（Ｃ１～Ｃ６）アルキルである。
いくつかの実施形態において、化合物は、式（Ｉａ）、式（Ｉｂ）、式（Ｉｃ）、又は式（Ｉｄ）：
Figure 2023529211000280
 を有する。
いくつかの実施形態において、Ｒ２は、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、（Ｃ３～Ｃ８）シクロアルキル、又はＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５～７員のヘテロシクロアルキルであり、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル、及びヘテロシクロアルキルは、任意選択により１～３個のＲ５で置換されている。いくつかの実施形態において、Ｒ２は、（Ｃ６～Ｃ１０）アリール、（Ｃ３～Ｃ８）シクロアルキル、又はＯ、Ｎ、及びＳから選択される１～３個のヘテロ原子を含む５～７員のヘテロシクロアルキルである。いくつかの実施形態において、Ｒ２は、任意選択により１～３個のＲ４で置換された、（Ｃ１～Ｃ６）アルキルである。
いくつかの実施形態において、化合物は、
３－（５－（１－エチルピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－プロピルピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（シクロプロピルメチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－イソブチルピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（シクロブチルメチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（オキサゾール－２－イルメチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（チアゾール－２－イルメチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（シクロペンチルメチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（５－クロロチオフェン－２－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（２－クロロチアゾール－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（シクロヘキシルメチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（２－（ピロリジン－１－イル）エチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－フェネチルピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３－フルオロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３－クロロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２－フルオロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２－クロロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（２－（ピペリジン－１－イル）エチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（３，５－ジメチルイソオキサゾール－４－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１，３－ジメチル－１Ｈ－ピラゾール－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（６－メチルピリジン－２－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３－モルホリノプロピル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２，６－ジフルオロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２，６－ジクロロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３，５－ジフルオロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３，５－ジブロモベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３－クロロ－５－フルオロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２，５－ジフルオロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２，５－ジクロロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
４－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）ベンゾニトリル；
３－（５－（１－（４－（ヒドロキシメチル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３，４－ジクロロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－クロロ－２－フルオロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２－クロロ－４－フルオロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）ベンゾニトリル；
３－（５－（１－（２，３－ジフルオロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
２－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）ベンゾニトリル；
３－（５－（１－（４－メトキシベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２，５－ジメチルベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３，４－ジメチルベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２，４－ジメチルベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１Ｈ－インダゾール－４－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－イソプロピルベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
５－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）フラン－２－カルボン酸メチル；
３－（５－（１－（ナフタレン－２－イルメチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（キノリン－２－イルメチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（ナフタレン－１－イルメチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１－メチル－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－２－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（４－（トリフルオロメトキシ）ベンジル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－（１Ｈ－ピロール－１－イル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－（１Ｈ－１，２，４－トリアゾール－１－イル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（３－（トリフルオロメトキシ）ベンジル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（２－（トリフルオロメトキシ）ベンジル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－ベンジルピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（ピリジン－２－イルメチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（ピリジン－３－イルメチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（ピリジン－４－イルメチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（ピリミジン－５－イルメチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（１－フェニルエチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－（フルオロメチル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３，４－ジフルオロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
２－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）ピリミジン－５－カルボニトリル；
３－（５－（１－（４－エチルベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２－メトキシベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（２－メトキシピリミジン－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３－フルオロ－４－メチルベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－（ジフルオロメチル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
４－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）ベンズアミド；
４－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）安息香酸；
３－（５－（１－（３－（ジフルオロメチル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）安息香酸；
３－（１－オキソ－５－（１－（４－プロピルベンジル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（４－（トリフルオロメチル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－（ジフルオロメトキシ）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（５－（トリフルオロメチル）ピリジン－２－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３－（ジフルオロメトキシ）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２－（ジフルオロメトキシ）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－シクロブチルベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキシン－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキシン－６－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－（ｔｅｒｔ－ブチル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－イソブチルベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
Ｎ－（４－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）フェニル）アセトアミド；
３－（５－（１－（（２，２－ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキセピン－７－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（４－（ｔｅｒｔ－ペンチル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（［１，１’－ビフェニル］－４－イルメチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－（１Ｈ－ピラゾール－１－イル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－（１Ｈ－イミダゾール－１－イル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３－（１Ｈ－ピラゾール－１－イル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－シクロヘキシルベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（ピリミジン－２－イルメチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－ブロモベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－クロロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３，５－ジクロロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン
３－（５－（１－（４－クロロ－３－フルオロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３－クロロ－４－フルオロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２，４－ジフルオロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３－メトキシベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（ベンゾ［ｃ］［１，２，５］オキサジアゾール－５－イルメチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２－シクロプロピルベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１，３－ジヒドロイソベンゾフラン－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（２－（トリフルオロメチル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３－イソプロポキシベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（４－（チオフェン－３－イル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－シクロペンチルベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（４－（ピロリジン－１－イル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－フルオロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２，４－ジクロロベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（キノリン－８－イルメチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１－メチル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１Ｈ－ピラゾール－４－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１－メチル－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１Ｈ－ピロール－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１Ｈ－イミダゾール－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１－エチル－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（２－アミノピリミジン－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（６－アミノピリジン－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（５－アミノ－１－メチル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（６－メチルイミダゾ［２，１－ｂ］チアゾール－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（イミダゾ［１，２－ａ］ピラジン－３－イルメチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（［１，２，４］トリアゾロ［１，５－ａ］ピリジン－５－イルメチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（ピラゾロ［１，５－ａ］ピリジン－４－イルメチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１，４－ジメチル－１Ｈ－イミダゾール－２－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（ベンゾ［ｄ］チアゾール－５－イルメチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（ピラゾロ［１，５－ａ］ピリミジン－６－イルメチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－３－イルメチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（イミダゾ［１，２－ａ］ピリミジン－２－イルメチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１－シクロブチル－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（４，５，６，７－テトラヒドロピラゾロ［１，５－ａ］ピリジン－２－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１Ｈ－インドール－２－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１Ｈ－インダゾール－６－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）ベンズアミド；
３－（５－（１－（（１Ｈ－ピロロ［２，３－ｂ］ピリジン－６－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（３，４－ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］チアジン－６－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（２－（ピロリジン－１－イル）ピリミジン－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（２－（ｔｅｒｔ－ブチル）チアゾール－４－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（２－（チオフェン－２－イル）チアゾール－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（５－シクロプロピル－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（２－モルホリノピリミジン－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（３－フェニル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（６－メチル－１Ｈ－インドール－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
４－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）－１Ｈ－ピロール－２－カルボン酸メチル；
３－（１－オキソ－５－（１－（（３－（ピリジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（５－（ピリジン－２－イル）－１Ｈ－ピラゾール－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３，５－ジフルオロ－４－ヒドロキシベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２－メチルベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－メチルベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３，５－ジメチルベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２Ｓ）－１－ベンジル－２－メチルピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（２Ｒ）－１－ベンジル－２－メチルピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－ベンジル－２－メチルピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－メチル－１，２，３，６－テトラヒドロピリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（５，６，７，８－テトラヒドロナフタレン－１－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（アゼパン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（Ｒ）－アゼパン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（Ｓ）－アゼパン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（１，２，３，４－テトラヒドロナフタレン－１－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
２－（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）酢酸メチル；
３－（１－オキソ－５－（１－フェニルピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３－メチルベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２，６－ジメチルベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（５，６，７，８－テトラヒドロナフタレン－２－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
２－（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）酢酸エチル；
２－（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）酢酸ｔｅｒｔ－ブチル；
２－（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）酢酸；
３－（１－オキソ－５－（１－（３，３，３－トリフルオロプロピル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
２－（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）－Ｎ－フェニルアセトアミド；
３－（５－（１－（３－フルオロプロピル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
４－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）安息香酸ｔｅｒｔ－ブチル；
３－（５－（１－ベンジル－３，３－ジメチルピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－ベンジル－３－メチルピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２－ヒドロキシ－１－フェニルエチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（Ｓ）－１－ベンジルアゼパン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－ベンジル－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－３－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－ベンジル－２－オキソピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－ベンジル－１，２，３，４－テトラヒドロキノリン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１－ベンジル－１Ｈ－テトラゾール－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（５－フェニル－１，３，４－オキサジアゾール－２－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（ベンゾ［ｄ］チアゾール－２－イルメチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（３－（ピリジン－２－イル）－１Ｈ－ピラゾール－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（Ｒ）－２－ヒドロキシ－１－フェニルエチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１－メチル－１Ｈ－インダゾール－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１，２，４－オキサジアゾール－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－ヒドロキシ－３－（（４－メチルピペラジン－１－イル）メチル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
２－（４－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）フェニル）アセトニトリル；
３－（５－（１－（（７－ヒドロキシ－２－メチルピラゾロ［１，５－ａ］ピリミジン－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２，２－ジフルオロ－１－フェニルエチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（３－フルオロビシクロ［１．１．１］ペンタン－１－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２－フルオロ－１－フェニルエチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（４－オキソ－３，４－ジヒドロチエノ［３，２－ｄ］ピリミジン－２－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（キノリン－４－イルメチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（３，５－ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
６－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）ピコリノニトリル；
２－（４－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）フェノキシ）アセトニトリル；
３－（５－（１－（（１Ｈ－インダゾール－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（２，２－ジフルオロエチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（７－メチル－４－オキソ－４Ｈ－ピリド［１，２－ａ］ピリミジン－２－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－カルボン酸ベンジル；
３－（１－オキソ－５－（１－（２－フェニルアセチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（２，２，２－トリフルオロ－１－フェニルエチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－（５－メチルベンゾ［ｄ］チアゾール－２－イル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（イソキノリン－１－イルメチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－（４－メトキシピペリジン－１－イル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－（イソプロピルチオ）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（Ｓ）－１－フェニルエチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
２－（４－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）フェニル）酢酸；
３－（５－（１－（（７－フルオロキノリン－２－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（２－アミノ－４－（トリフルオロメチル）チアゾール－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）－１，２，４－オキサジアゾール－５－カルボキサミド；
３－（５－（１－（３－（モルホリノスルホニル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
４－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）－Ｎ，Ｎ－ジメチルベンゼンスルホンアミド；
３－（１－オキソ－５－（１－（チアゾール－４－イルメチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（キノキサリン－６－イルメチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－（ｔｅｒｔ－ブチル）ベンゾイル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－（（４－フルオロベンジル）オキシ）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（３－メチルイソオキサゾール－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（イソオキサゾール－３－イルメチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－（メトキシメチル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（Ｓ）－２－ヒドロキシ－１－フェニルエチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（フェニルスルホニル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（５－メチル－３－フェニルイソオキサゾール－４－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－（（ジフルオロメチル）スルホニル）ベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（２，２，２－トリフルオロエチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
２－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）オキサゾール－４－カルボン酸メチル；
３－（１－オキソ－５－（１－（４－（ピリジン－２－イルメトキシ）ベンジル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－アセチルピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（２－オキソ－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｄ］イミダゾール－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－ベンジルピロリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
（Ｒ）－３－（５－（（Ｒ）－１－ベンジルアゼパン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
（Ｓ）－３－（５－（（Ｓ）－１－ベンジルアゼパン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－ベンジルアゼパン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－メチル－２，３，６，７－テトラヒドロ－１Ｈ－アゼピン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（８－ベンジル－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（８－アザビシクロ［３．２．１］オクタン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－アセチル－１，２，５，６－テトラヒドロピリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
（Ｒ）－３－（５－（（Ｒ）－１－アセチルピロリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－アセチル－１，２，３，６－テトラヒドロピリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（オクタヒドロインドリジン－７－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
（Ｒ）－３－（５－（（Ｓ）－１－ベンジルアゼパン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（（Ｒ）－１－ベンジルアゼパン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－アセチル－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－３－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－メチルアゼパン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
（Ｓ）－３－（５－（（Ｒ）－１－ベンジルアゼパン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
（Ｓ）－３－（５－（（Ｒ）－１－アセチルピロリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（６－イソプロポキシピリジン－３－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（１－フェニル－１Ｈ－ピラゾール－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（４－エトキシベンジル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（１－フェニル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１－イソプロピル－１Ｈ－ピラゾール－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（イソチアゾール－５－イルメチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１－イソプロピル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１Ｈ－ピラゾール－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（５－イソプロポキシピリジン－２－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（１－（ピリジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾール－５－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（１－オキソ－５－（１－（（１－（ピリジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
５－（（４－（２－（２，６－ジオキソピペリジン－３－イル）－１－オキソイソインドリン－５－イル）ピペリジン－１－イル）メチル）－２－フルオロベンゾニトリル；
３－（５－（１－（（５－フルオロピリジン－２－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
３－（５－（１－（（１－エチル－３－（ピリジン－３－イル）－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
トランス－３－（１－オキソ－５－（１－（（４－（トリフルオロメチル）シクロヘキシル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
シス－３－（１－オキソ－５－（１－（（４－（トリフルオロメチル）シクロヘキシル）メチル）ピペリジン－４－イル）イソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
トランス－３－（５－（１－（（４－メトキシシクロヘキシル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；及び
３－（５－（１－（（６－メトキシピリジン－２－イル）メチル）ピペリジン－４－イル）－１－オキソイソインドリン－２－イル）ピペリジン－２，６－ジオン；
又はその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物、プロドラッグ、立体異性体、若しくは互変異性体から選択される。
追加の例示的なＩＫＺＦ２阻害剤は、米国特許第１０，４１４，７５５号明細書及び同第１０，６４０，４８９号明細書、米国特許出願公開第２０１９／０３６７４８３号明細書及び同第２０１９／０３５９５９４号明細書、並びに国際公開第２０２０／０１２３３４号パンフレット及び同第２０１９／０３８７１７号パンフレットにも記載されており、これらは参照によりその全体が組み込まれる。
いくつかの実施形態において、ＺＢＴＢ３２阻害剤及びＩＫＺＦ２阻害剤は、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、黒色腫、トリプルネガティブ乳癌（ＴＮＢＣ）、上咽頭癌（ＮＰＣ）、マイクロサテライト安定性結腸直腸癌（ｍｓｓＣＲＣ）、胸腺腫、カルチノイド、又は消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）を処置するために組み合わせて使用される。
本開示を、次の実験的実施例を参照して更に詳細に記載する。これらの実施例は、説明のみを目的として提供し、特に断らない限り限定を意図しない。従って、本開示は、決して次の実施例に限定されると解釈してはならず、むしろ本明細書に提供する教示の結果として明らかとなる任意且つ全ての変形形態を含むと解釈すべきである。
更なる説明がなくとも、当業者は、前述の説明及び以下の説明的な実施例を使用して、本開示の組成物を作製及び利用し、特許請求される方法を実施できると考えられる。次の実施例は、本開示の様々な実施形態を特に示すものであり、本開示を限定するものと解釈されるべきでない。
実施例１：癌細胞株におけるＺＢＴＢ３２の発現
この実施例は、癌細胞株におけるＺＢＴＢ３２発現を説明する。
様々な癌細胞株におけるＺＢＴＢ３２遺伝子発現データは、Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ Ｌｉｎｅ Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ（ＣＣＬＥ）データベースから取得した（Ｇｈａｎｄｉ，Ｍ ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ，２０１９，５６９：５０３－５０８）。図１は、ＲＮＡｓｅｑ分析からの特定の細胞株におけるＺＢＴＢ３２発現を示す。図１及び表２７に示されるように、高レベルのＺＢＴＢ３２を発現する細胞は、主に造血及びリンパ組織由来であり、リンパ腫、多発性骨髄腫及び白血病系統にある。
Figure 2023529211000281
Figure 2023529211000282
Figure 2023529211000283
ＺＢＴＢ３２は、他のＤＬＢＣＬ型と比較して、ＤＬＢＣＬ（ＡＢＣ－ＤＬＢＣＬ）患者の活性化Ｂ細胞サブタイプにおいて最も一貫して差次的に発現される遺伝子の１つであることが示されている（Ｃａｒｅ ｅｔ ａｌ．ＰＬｏＳ Ｏｎｅ．２０１３；８（２）：ｅ５５８９５）。したがって、ＲＮＡ配列決定分析は、胚中心Ｂ細胞ＤＬＢＣＬ（ＧＣＢ－ＤＬＢＣＬ）細胞株よりもＡＢＣ－ＤＬＢＣＬにおいてはるかに高いレベルのＺＢＴＢ３２発現を示した（表２８）。
Figure 2023529211000284
実施例２：ＺＢＴＢ３２ノックアウトで増強されたＣＡＲＴ活性
この実施例は、ＣＡＲＴ細胞においてＺＢＴＢ３２がノックアウトされた場合のインビボでの増強されたＣＡＲＴ細胞増殖、サイトカイン産生、持続性、枯渇に対する抵抗性及び抗腫瘍活性を説明する。
材料及び方法
ＣＡＲＴ生成
以前に新鮮な血液から単離された凍結Ｔ細胞を解凍し、０日目に、１：３の細胞対ビーズ比のＣＤ３／ＣＤ２８ビーズ（Ｔｈｅｒｍｏｆｉｓｈｅｒ）で活性化した。翌日、１０×１０６個の細胞を、抗生物質を含まない５ｍＬのＴ細胞培地中の６ウェルプレートにプレーティングし、ＧＦＰ（ＣＡＲコード配列を欠く）又はＣＡＲ１９－ＧＦＰウイルスを滴下した（ＭＯＩ＝１）。３日目に、ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ９電気穿孔法を実施して、以下のようにＣＡＲ１９－ＧＦＰ形質導入細胞のＺＢＴＢ３２をノックアウトした。別のチューブでｔｒＲＮＡ及びｇＲＮＡを９８℃で２分間加熱してＲＮＡの二次構造を変性させ、温度を３８℃まで徐々に下げてアニーリングする。別のチューブで、Ｃａｓ９緩衝液、Ｃａｓ９タンパク質、ｔｒＲＮＡ、ｇＲＮＡを順番に添加し、添加するたびによく混合して、ＲＮＰ混合物を作製する。Ｃａｓ９：ｔｒａｃｅｒＲＮＡ：ｇＲＮＡの最終比率は、１：２：２である。細胞を調製する間、サンプルを３７℃で１０分間インキュベートする。Ｔ細胞を収集し、スピンダウンし、温ＯＰＴＩ－ＭＥＭで洗浄し、スピンダウンし、２０×１０６細胞／ｍｌでＴ緩衝液（Ｎｅｏｎ Ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ）に再懸濁する。１００ｕＬのＴ細胞を５０ｕＬのＲＮＰミックスと混合し、室温で５分間インキュベートする。Ｎｅｏｎ装置を使用して、１６００Ｖ、１０ｍｓ、３パルスの設定を使用して細胞を電気穿孔し、完全Ｔ細胞培地とともに６ウェルプレートに移した。ＺＢＴＢ３２ ｇＲＮＡ６配列：ＣＣＡＧＣＣＧＡＴＣＡＧＡＧＣＣＡＴＡＧ（配列番号３００４）。ＺＢＴＢ３２ ｇＲＮＡ７配列：ＧＣＴＣＴＧＧＡＧＣＣＡＧＡＡＣＣＡＧＴ（配列番号３００５）。４日目以降、新鮮な培地を隔日で加えて細胞を増殖させた。細胞サイズが４００ｆｍに達したとき、ＣＳ１０凍結培地を使用して細胞を凍結した。
次世代シーケンシング（ＮＧＳ）及びＴ７エンドヌクレアーゼＩ（Ｔ７Ｅ１）アッセイ
凍結前に細胞を回収し、ＰｕｒｅＬｉｎｋ Ｇｅｎｏｍｉｃ ＤＮＡ Ｍｉｎｉ Ｋｉｔ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を使用してゲノムＤＮＡを単離した。編集部位周辺のＤＮＡフラグメントは、Ｑ５ハイフィデリティマスターミックス（ＮＥＢ）を使用したＰＣＲによって増幅された。ＺＢＴＢ３２ ｇＲＮＡ６ ＮＧＳ Ｆ：５’－ＣＣＡＣＡＧＧＣＴＴＧＡＡＡＴＧＡＧＡＴＧ－３’（配列番号３００６）、ＺＢＴＢ３２ ｇＲＮＡ６ ＮＧＳ Ｒ：５’－ＣＡＴＡＣＡＣＡＡＡＧＴＴＣＡＧＧＡＧＣ－３’（配列番号３００７）、ＺＢＴＢ３２ ｇＲＮＡ７ ＮＧＳ Ｆ：５’－ ＧＡＣＡＡＧＡＡＧＣＴＧＣＴＧＣＣＡＣＡ－３’（配列番号３００８）、ＺＢＴＢ３２ ｇＲＮＡ７ ＮＧＳ Ｒ：５’－ＧＧＡＡＣＣＴＧＧＡＡＧＧＡＡＣＡＧＴＧ－３’（配列番号３００９）。Ｑｉａｇｅｎ ＰＣＲ精製キットを使用してＰＣＲ産物を精製し、ＮＧＳに提出した。Ｔ７Ｅ１アッセイを実施するために、Ｑ５ハイフィデリティマスターミックス（ＮＥＢ）を使用して、編集部位周辺のＤＮＡフラグメントをＰＣＲで増幅した。ＺＢＴＢ３２ ｇＲＮＡ６ Ｔ７ Ｆ：５’－ ＡＴＴＴＣＣＡＴＴＣＴＣＴＣＧＣＣＡＣＣ－３’（配列番号３０１０）、ＺＢＴＢ３２ ｇＲＮＡ６ Ｔ７ Ｒ：５’－ ＣＴＧＧＧＣＡＡＡＧＧＴＡＧＡＡＧＧＧＣ－３’（配列番号３０１１）、ＺＢＴＢ３２ ｇＲＮＡ７ Ｔ７ Ｆ：５’－ ＧＧＴＣＴＡＧＴＧＣＴＣＴＧＣＣＴＣＣＡ－３’（配列番号３０１２）、ＺＢＴＢ３２ ｇＲＮＡ７ Ｔ７ Ｒ：５’－ＧＣＧＣＣＡＡＣＴＣＡＣＴＧＴＡＣＣＡＴＴ－３’（配列番号３０１３）。ＰＣＲ産物を精製し、２００ｎｇの精製ＤＮＡを変性させ、１０Ｘ ＮＥＢｕｆｆｅｒ２を使用してゆっくりとアニーリングさせた。Ｔ７エンドヌクレアーゼＩ（ＮＥＢ）を、３７℃で１５分間インキュベートした、アニーリングしたＰＣＲ産物に添加した。未切断対照には、Ｔ７Ｅ１酵素を添加しなかった。編集が発生したかを決定するために、切断及び未切断サンプルを電気泳動ゲルにかけた。
抗原依存性増殖アッセイ
ＴＭＤ８細胞を１０，０００ｒａｄで照射し、５０，０００個の照射細胞を９６ウェルプレート中の１００ｕｌのＴ細胞培地にプレーティングした。ＧＦＰ（非ＣＡＲ）Ｔ細胞又はＣＡＲＴ細胞を解凍し、様々なエフェクター対標的細胞（Ｅ：Ｔ）比（１０：１、５：１、２．５：１、１．２５：１、０．６２５：１、及び０．３１２５：１）で段階希釈し、照射ＴＭＤ８細胞上の１００ｕｌのＴ細胞培地中にプレーティングした。細胞を３日間及び５日間インキュベートし、ｌｉｖｅ／ｄｅａｄ、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、及びＧＦＰ染色を使用してフローサイトメトリーで分析した。ＧＦＰ％は、抗原依存性増殖速度を決定するために使用される。
抗原依存性死滅アッセイ
ＴＭＤ８－ルシフェラーゼ細胞を、９６ウェルプレート中の１００ｕｌのＴ細胞培地にプレーティングした（２５，０００／ウェル）。ＣＡＲＴ細胞を解凍し、様々なＥ：Ｔ比（１０：１、５：１、２．５：１、１．２５：１、０．６２５：１、及び０．３１２５：１）で段階希釈し、ＴＭＤ８－ルシフェラーゼ細胞上の１００ｕｌのＴ細胞培地中にプレーティングした。細胞を４８時間及び７２時間インキュベートした。各時点で、製造元の指示に従ってＭＳＤのために１００ｕｌの培地を収集し、１００ｕｌのＢｒｉｇｈｔ Ｇｌｏ試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ）を添加し、発光を読み取る前に室温で１０分間インキュベートした。ＴＭＤ８－ルシフェラーゼ細胞のみを０％死滅対照として使用した。
ＴＭＤ８モデルを用いたインビボ有効性研究
ＴＭＤ８細胞を解凍し、自社で対数培養し、０日目に移植用に収集した。回収時に細胞を洗浄し、１：１の比率のＣａＣｌ２又はＭｇＣｌ２を含まないＰＢＳ及びマトリゲルに再懸濁し、移植用に１００μｌあたり５×１０６細胞の濃度にした。免疫不全状態のＮＳＧマウス（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ）の右側腹部に細胞を皮下移植した。ベースライン体重も移植時に記録した。９日目に、腫瘍体積に基づいて、腫瘍をキャリパー測定し、無作為化した。平均腫瘍体積は１７８．３ｍｍ３であった。ＣＡＲＴ注入は１０日目に投与された。ＧＦＰ ｗｔ（非ＣＡＲ）Ｔ細胞及びＣＡＲＴ細胞を解凍し、ＲＰＭＩ１６４０＋１０％熱不活化ウシ胎児血清（ＦＢＳ）で洗浄した。細胞をＣｅｌｌｏｍｅｔｅｒ Ｖｉｓｉｏｎ（Ｎｅｘｃｅｌｃｏｍ）で計数し、注射用にＰＢＳに再懸濁する前に再度洗浄した。各サンプルのＧＦＰ陽性パーセントに基づき、ＰＢＳ１００μｌあたり１×１０６ＣＡＲ＋細胞の最終濃度になるように細胞を再懸濁した。インビボ注射は、マウスの尾静脈に静脈内送達された。マウスの１つの群は、陰性対照として１００μｌのＰＢＳ注射を受けた。その後、腫瘍体積及び体重を週に２～３回モニターした。
血液は、ＣＡＲＴ注入の２週間後に側部尾静脈穿刺によって収集され、その後第６週まで継続した。各時点で、およそ５０μｌの全血をＥＤＴＡ被覆毛細管チューブに収集した。３０μｌの血液をプレーティングしてフローサイトメトリー用に染色し、残りの血液を１３，０００ｒｐｍで５分間スピンダウンした。血漿をチューブから抽出し、プレーティングし、サイトカイン評価のために－８０℃で保存した。
ＴＭＤ８－ルシフェラーゼモデルを用いたインビボ有効性研究
Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙから６週齢のメスのＮＳＧマウスを受け取った。動物識別用の電子トランスポンダーは、腫瘍移植の１日前に左側腹部に移植された。ＴＭＤ８－Ｌｕｃ細胞は、１０％ウシ胎児血清及び１％Ｌ－グルタミンを含むＲＭＰＩ－１６４０培地で培養した。対数増殖期の細胞を回収し、冷滅菌ＰＢＳで１回洗浄した。細胞を１：１の比率のＰＢＳとマトリゲル中、２５×１０６／ｍｌの濃度で再懸濁し、氷上に置き、マウスの右側腹部に２００ｕｌで皮下注射した。マウス１匹あたりの総細胞数は５ｘ１０６個であった。腫瘍移植の９日後、マウスを無作為化した。野生型又はＺＢＴＢ３２ＫＯ ｇＲＮＡ６ ＣＡＲＴ細胞を解凍し、ＲＰＭＩ１６４０＋１０％熱不活化ウシ胎児血清（ＦＢＳ）で洗浄し、Ｃｅｌｌｏｍｅｔｅｒ Ｖｉｓｉｏｎ（Ｎｅｘｃｅｌｃｏｍ）で計数した。ＣＡＲＴ細胞を３００ｇで１０分間遠心分離し、冷ＰＢＳにそれぞれの濃度で再懸濁し、注射まで氷上に維持した。マウスに尾静脈から２００μｌのＰＢＳ（ビヒクル）又は２×１０６若しくは０．４×１０６の野生型若しくはＺＢＴＢ３２ＫＯ ｇＲＮＡ６ ＣＡＲ Ｔ細胞を含有する２００μｌのＰＢＳを静脈内注射した。その後、腫瘍及び体重を週に２～３回モニターした。ＴＭＤ８－Ｌｕｃ細胞は、ルシフェラーゼを発現する。ルシフェラーゼシグナルを測定するために、マウスに１５ｍｇ／ｍｌのルシフェリン基質を２００ｕｌ用量でＩＰ注射し、１０分後に定量化のために画像を撮影した。
フローサイトメトリー分析
血液サンプルを９６ウェルＵ底プレートに移し（各パネルに１０～３０ｕｌの血液）、ウェルあたり１５０ｕｌのＡＣＫ溶解緩衝液（Ｑｕａｌｉｔｙ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ、カタログ番号１１８－１５６－７２１）を添加して、赤血球を溶解した。室温で２分間インキュベーションした後、１００ｕｌのダルベッコリン酸緩衝生理食塩水（ＤＰＢＳ）を各ウェルに添加し、細胞を１５００ｒｐｍで５分間スピンダウンし、２００ｕｌのＤＰＢＳで洗浄した。細胞表面及び転写因子パネルについては、細胞を処理して直接以下に説明する染色手順を行った。サイトカインパネルについては、サイトカイン発現を刺激するために、細胞を、ＰＭＡ（Ｓｉｇｍａ、最終濃度：１０ｎｇ／ｍｌ）及びイオノマイシン（Ｓｉｇｍａ、最終濃度：１ｕｇ／ｍｌ）を含む、２００ｕｌのＴ細胞培養培地（ＲＰＭＩ１６４０＋１０％ＦＢＳ＋１ｘピルビン酸ナトリウム＋１ｘＮＥＡＡ＋１ｘＬ－グルタミン＋１ｘＨＥＰＥＳ＋１ｘ２－メルカプトエタノール＋１Ｘペニシリン／ストレプトマイシン）に再懸濁し、３７℃のインキュベーターで３時間インキュベートした。ブレフェルジンＡ（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ、最終濃度：１０ｕｇ／ｍＬ）を各ウェルに添加し、細胞を更に３７℃インキュベーターで１時間インキュベートした。細胞を１５００ｒｐｍで５分間スピンダウンし、２００ｕｌのＤＰＢＳで洗浄した。
次いで、細胞を、ＤＰＢＳ中の１００μｌのＺｏｍｂｉｅ ＮＩＲ（１：１５００）で再懸濁した。暗所、室温で１５分間インキュベーションした後、細胞を１８００ｒｐｍで３分間スピンダウンし、ＦＡＣＳ緩衝液（１０００ｍＬのＤＰＢＳ＋４０ｍＬの熱不活化ＦＢＳ＋１ｍＬの０．５Ｍ ＥＤＴＡ ｐＨ８．０）で洗浄した。
細胞表面染色のために、マウスＦｃ遮断抗体（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ、カタログ番号１３０－０９２－５７５、１：２５希釈）及びヒトＦｃ遮断抗体（ＢＤ、カタログ番号５６４２２０、１：１０希釈）を含有する５０ｕｌのＦＡＣＳ緩衝液で細胞を再懸濁し、暗所、室温で２０分間インキュベートした。次いで、ＦＡＣＳ緩衝液中の２×表面抗体混合物５０ｕｌを添加し、混合し、暗所、室温で３０分間インキュベートした。細胞をＦＡＣＳ緩衝液で２回洗浄し、ＢＤ Ｆｏｒｔｅｓｓａフローサイトメーターを使用して分析した。
細胞内染色のために、細胞を２００ｕｌの１×固定／透過化緩衝液（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、カタログ番号００－５５２３－００）で再懸濁し、混合し、暗所、室温で３０分間インキュベートした。細胞を２００ｕｌの１×透過緩衝液で２回洗浄し、１×透過緩衝液中の１００ｕｌの１×細胞内抗体混合物で再懸濁し、暗所、室温で３０分間インキュベートした。細胞を２００ｕｌの１×透過緩衝液で洗浄し、室温で３０分間、ＤＰＢＳ中の２００ｕＬの０．０５％パラホルムアルデヒドで固定した。固定後、細胞をスピンダウンしてパラホルムアルデヒドを除去し、２００ｕＬのＦＡＣＳ緩衝液に再懸濁して、ＢＤ Ｆｏｒｔｅｓｓａフローサイトメーターを使用して分析した。
Figure 2023529211000285
脾臓からのＣＡＲＴ単離
エンドポイント（５３日目）で、残りの１４～１５匹の無腫瘍マウスを全て屠殺し、その脾臓を収集した。脾臓を、７０μｍフィルターを通して粉砕し、５０ｍｌコニカルチューブ内の約１０ｍｌ培地（ＲＰＭＩ＋１０％ＦＢＳ）中に入れた。フィルターを培地で洗浄して、脾臓細胞がコニカルチューブに確実に収集されるようにした。４つ又は５つの脾臓を１つにプールした。収集チューブを１５００ｒｐｍで５分間回転させ、細胞パレットを１ｍｌのＡＣＫ溶解緩衝液（Ｑｕａｌｉｔｙ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ、カタログ番号１１８－１５６－７２１）で再懸濁し、室温で２分間インキュベートした。細胞をＤＰＢＳで洗浄し、ｌｉｖｅ／ｄｅａｄで染色し、処理して、ＦＡＣＳＡｒｉａソーターを使用してＧＦＰ陽性生細胞を選別した。
統計分析
ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用して、一元配置分散分析及び非対ｔ検定を実施して、統計的差異を決定した。
結果
ヒトＴ細胞媒介性抗腫瘍免疫応答におけるＺＢＴＢ３２の役割を調べるために、野生型（ｗｔ）及びＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲ１９－ＧＦＰ Ｔ細胞を生成した。ＣＡＲ陽性は、ＧＦＰ及び抗ＣＤ１９ ＣＡＲイディオタイプ抗体染色フローサイトメトリー分析によって決定され（図２Ａ）、遺伝子編集効率は、Ｔ７Ｅ１切断アッセイ及びＮＧＳによって検証された（図２Ｂ～２Ｃ）。図２Ａに示すように、ＣＡＲ１９は、ＺＢＴＢ３２破壊のない野生型細胞と比較して、ＺＢＴＢ３２ノックアウト細胞において同様のレベルで発現される。ＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴ細胞はまた、インビトロでｗｔ ＣＡＲＴ細胞と比較して、同様の抗原（ＣＤ１９）依存性増殖及び癌細胞死滅を有していた（図３Ａ及び３Ｂ）。ＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴ細胞は、インビトロで癌細胞と共培養すると、より高いレベルの炎症促進性サイトカインＩＦＮγ、ＩＬ２、及びＴＮＦアルファを産生した（図３Ｃ）。
次に、ＴＭＤ８及びＴＭＤ８ルシフェラーゼ腫瘍モデルを使用してインビボ研究を実施し、ｗｔ及びＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴ媒介性抗腫瘍免疫応答のインビボ有効性を評価した。ＴＭＤ８モデルでは、マウスあたり１×１０６ＣＡＲ＋細胞を移植し、ＴＭＤ８ルシフェラーゼ腫瘍モデルでは、０．４×１０６ＣＡＲ＋細胞／マウス及び０．４×１０６ＣＡＲ＋細胞／マウスを移植した。これらの実験からのデータは、図４～７に示されている。
ＴＭＤ８モデルでの最初の実験では、ＧＦＰｗｔ（非ＣＡＲ）、ｗｔ、又はＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴ細胞を、マウス１匹あたり１×１０６ＣＡＲ＋細胞の用量で１０日目に注射した。図４Ａ～４Ｂに示されるように、ＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴ細胞（ｇＲＮＡ６又はｇＲＮＡ７）で処置された動物は、ｗｔ ＣＡＲＴ細胞で処置された動物と比較して、より早い時点（２５～３９日目の時点の間）でより低い腫瘍体積を有していた。データは、ＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴ細胞が、ｗｔ ＣＡＲＴ細胞と比較して、より迅速な腫瘍制御を有することを示す。
ＴＭＤ８－Ｌｕｃモデルを用いた次の実験では、ｗｔ又はＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴ細胞を、マウス１匹あたり２×１０６ＣＡＲ＋細胞の用量で９日目に注射した。図５Ａ～５Ｂに示されるように、ＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴ細胞で処置された腫瘍担持動物は、ｗｔ ＣＡＲＴ細胞で処置された動物と比較して、より低い腫瘍体積を有していた。データは、ＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴ細胞による、ｗｔ ＣＡＲＴ細胞よりも迅速な腫瘍制御を示す。ＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴ細胞で処置したＴＭＤ８－Ｌｕｃ腫瘍を担持する動物の生物発光イメージングは、ＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴ細胞による、ｗｔ ＣＡＲＴ細胞よりも迅速な腫瘍制御（図６Ａ）、及びＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴ細胞で処置したマウスにおける、ｗｔ ＣＡＲＴ細胞で処置したマウスよりも有意に低い、２１日目の生物発光（図６Ｂ）を示した。同様に、腫瘍担持マウスをマウス１匹あたり０．４×１０６ＣＡＲ＋細胞で処置した場合、ＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴ細胞によって、ｗｔ ＣＡＲＴ細胞よりも迅速な腫瘍制御が観察された（図７Ａ～７Ｄ）。更に、５匹のｗｔ ＣＡＲＴ細胞処置マウスのうち３匹が腫瘍再発を示したが、ＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴ細胞処置マウスは腫瘍再発を示さず、ＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴ細胞による免疫保護のより良好な持続性を強調した（図７Ａ～７Ｄ）。これらの実験からのデータは、インビボで、ｗｔ ＣＡＲＴ細胞と比較して、ＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴ細胞が、腫瘍細胞の死滅においてより強力であり、腫瘍細胞をより迅速に排除し、腫瘍の再発を防ぐためにより優れた長期免疫保護を有することを一貫して示している（図４～７）。
Ｔ細胞の状態は、一連の転写因子によって動的に制御される。ＴＣＦ７は、幹細胞メモリー様Ｔ細胞（Ｔｓｃｍ）状態に重要な主要転写因子である。腫瘍内のＴＣＦ７＋ＣＤ８＋Ｔ細胞の頻度が、多くのヒトの癌におけるＰＤ－１遮断後の応答及び患者の生存率の向上を予測することが示されている。転写因子Ｅｏｍｅｓの発現はＴｓｃｍ細胞では低く、枯渇又は最終分化したＣＤ８＋Ｔ細胞では増加する。最近の研究では、ＣＤ８ Ｔ細胞を後成的に再プログラミングして、慢性ウイルス感染及び癌の際にＴ細胞枯渇を駆動する転写因子として、ＴＯＸが同定された。
ＺＢＴＢ３２とＴ細胞の状態の関係を調べるために、ＣＡＲＴ細胞におけるＴ細胞転写因子の発現に対するＺＢＴＢ３２ノックアウトの効果を評価した。フローサイトメトリー分析は、ＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴ細胞が、より高いレベルのＴＣＦ７及び低下したレベルのＥｏｍｅｓを有することを示した（図８Ａ～８Ｄ及び図１３Ａ～１３Ｂ）。ＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴ細胞では、ＴＯＸのレベルも低かった（図１３Ｃ）。このデータは、ＺＢＴＢ３２がインビボでの抗腫瘍免疫応答中にＴ細胞の状態を調節することを示唆している。
ｗｔ ＣＡＲＴ細胞と比較して、血液中の総ＺＢＴＢ３２ＫＯ ＣＡＲＴ細胞（ＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞）は、より多かった（図９Ａ～９Ｃ）。ＣＤ４＋Ｔ細胞集団（図１０Ａ～１０Ｃ）及びＣＤ８＋Ｔ細胞集団（図１０Ｄ～１０Ｆ）の両方において、ＺＢＴＢ３２ＫＯ ＣＡＲＴ細胞を産生するより多くの数のＩＬ２、ＩＦＮｇ及びＴＮＦアルファサイトカインも観察された。
重要なことに、ＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴ細胞は、ｗｔ ＣＡＲＴ細胞と比較して、ＰＤ１、ＴＩＭ３、及びＬＡＧ３などの枯渇マーカーのレベルが有意に低かった（図１１Ａ～１１Ｄ及び図１４Ａ～１４Ｆ）。このデータは、ＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＣＡＲＴ細胞がインビボで枯渇に対してより耐性があることを示唆している。更に、マウスにおいて腫瘍が除去された場合、ｗｔ ＣＡＲＴ細胞の数と比較して、マウスの脾臓において３～５倍多い数のＺＢＴＢ３２ＫＯ ＣＡＲＴ細胞が観察された（図１２Ａ）。マウスの脾臓において、ＣＤ４＋ＣＡＲＴ細胞及びＣＤ８＋ＣＡＲＴ細胞の両方について、細胞総数の増加も観察された（図１２Ｂ～１２Ｃ）。腫瘍クリアランス後のマウスにおけるＺＢＴＢ３２ＫＯ ＣＡＲＴ細胞数のこの増加は、インビボでのＺＢＴＢ３２ＫＯ ＣＡＲＴ細胞の持続性の増強を示す。
概要
ＣＡＲＴ細胞におけるＺＢＴＢ３２ノックアウトは、ＣＡＲＴ細胞の増殖、サイトカイン産生、持続性、枯渇に対する耐性を高め、最終的にインビボでのより強力で優れた長期の抗腫瘍活性を高める。主要なＴ細胞転写因子、枯渇遺伝子、及びＴ細胞状態に対するＺＢＴＢ３２の調節を考慮すると、ＣＡＲＴ細胞におけるこの有益な効果は、ＺＢＴＢ３２阻害単独、又は標的若しくは他のＩＯ療法と組み合わせて、固形腫瘍にも適用できる。
実施例３：癌細胞に対するＺＢＴＢ３２ノックアウトの効果
この実施例は、癌細胞の増殖に対するＺＢＴＢ３２ノックアウトの効果を説明する。
ＴＭＤ８－ｃａｓ９安定細胞は、Ｃａｓ９含有レンチウイルス形質導入によって作製され、２０ｕｇ／ｍｌブラストサイジンで選択された。次いで、ＴＭＤ８－ｃａｓ９細胞を、非標的ｇＲＮＡ（ｇＲＮＡ ＮＴ、ＧＴＡＧＣＧＡＡＣＧＴＧＴＣＣＧＧＣＧＴ（配列番号３０１４））又はＺＢＴＢ３２ ｇＲＮＡ６（ＣＣＡＧＣＣＧＡＴＣＡＧＡＧＣＣＡＴＡＧ（配列番号３００４））を含むレンチウイルスに感染させ、０．５μｇ／ｍｌのピューロマイシンで選択した。
インビトロでの細胞成長動態を測定するために、ＴＭＤ８ ｇＲＮＡ ＮＴ又はＴＭＤ８ ＺＢＴＢ３２ ｇＲＮＡ６安定細胞を３８４ウェルプレートに播種し、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ発光細胞生死判別キットを使用して、０、１、２、３及び４日目に細胞成長を決定した。図１５Ａに示すように、ＴＭＤ８細胞におけるＺＢＴＢ３２のノックアウトは、対照細胞と比較してインビトロでの細胞増殖の低下をもたらした。
インビボでの腫瘍成長動態を決定するために、ＴＭＤ８ ｇＲＮＡ ＮＴ及びＴＭＤ８ ＺＢＴＢ３２ ｇＲＮＡ６細胞を、１：１の比率のＣａＣｌ２又はＭｇＣｌ２を含まないＰＢＳ及びマトリゲルに再懸濁した。細胞を収集し、１５００ｒｐｍで５分間回転させた後、移植のために１００μｌあたり５×１０６細胞の濃度になるように細胞を再懸濁した。細胞は、０日目にＮＳＧマウスの右側腹部の皮下に移植された（マウス１匹あたり５×１０６細胞、１群あたりマウス２０匹）。週に２～３回、キャリパー測定により腫瘍をモニターした。マウスは、腫瘍体積がエンドポイント（＞１０００ｍｍ３）に近づいたときに終了させた。エンドポイント（２３日目）では、対照（ｇＲＮＡ ＮＴ）及びＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＴＭＤ８腫瘍群にそれぞれ７匹及び１２匹のマウスが残っていた。
対照（ｇＲＮＡ ＮＴ）ＴＭＤ８腫瘍は、一貫して、ＺＢＴＢ３２ＫＯ腫瘍よりもわずかに速く成長した。２３日目に対照群の平均腫瘍体積がわずかに減少したのは、前の２１日目の測定で、腫瘍がエンドポイントに近づいた（＞１０００ｍｍ３）何匹かのマウスが屠殺されたことが原因であり得る。図１５Ｂ～１５Ｃは、ＺＢＴＢ３２ ＫＯ ＴＭＤ８腫瘍が、一貫して、経時的にインビボで成長動態の遅延を示したことを示す。
均等物
本明細書に引用するそれぞれの及び全ての特許、特許出願及び刊行物の開示は、その全体が参照により本明細書に援用される。本開示は、具体的実施形態を参照して開示しているが、本開示の他の実施形態及び変形形態は、本開示の真の趣旨及び範囲から逸脱することなく他の当業者によって考案され得ることが明らかである。下記の特許請求の範囲は、全てのこのような実施形態及び均等な変形形態を含むと解釈されることを意図する。

Claims (222)

  1. キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する細胞（例えば、細胞の集団）、例えば免疫エフェクター細胞であって、
    前記ＣＡＲは、抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン及び細胞内シグナル伝達ドメインを含み、
    前記細胞は、ＺＢＴＢ３２の低下した発現及び／又は低下した生物学的活性を有する、細胞（例えば、細胞の集団）、例えば免疫エフェクター細胞。
  2. 前記細胞が、検出可能なＺＢＴＢ３２の発現及び／又は生物学的活性を有しない、請求項１に記載の細胞。
  3. 前記細胞が、ＺＢＴＢ３２阻害剤を含むか、又は前記細胞が、ＺＢＴＢ３２阻害剤と接触していたか、若しくは接触している、請求項１又は２に記載の細胞。
  4. 前記ＺＢＴＢ３２阻害剤が、小分子を含む、請求項３に記載の細胞。
  5. 前記ＺＢＴＢ３２阻害剤が、
    （１）前記ＺＢＴＢ３２遺伝子又はその１つ以上の成分を標的とする遺伝子編集系；
    （２）前記遺伝子編集系の１つ以上の成分をコードする核酸；又は
    （３）（１）及び（２）の組み合わせ
    を含む、請求項３に記載の細胞。
  6. 前記遺伝子編集系は、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ系、ジンクフィンガーヌクレアーゼ系、ＴＡＬＥＮ系又はメガヌクレアーゼ系である、請求項５に記載の細胞。
  7. 前記遺伝子編集系が、前記ＺＢＴＢ３２遺伝子中の標的配列に結合する、請求項５又は６に記載の細胞。
  8. 前記遺伝子編集系が、前記ＺＢＴＢ３２遺伝子の初期エクソン又はイントロンの標的配列に結合する、請求項５～７のいずれか一項に記載の細胞。
  9. 前記遺伝子編集系は、前記ＺＢＴＢ３２遺伝子の標的配列に結合し、前記標的配列は、エクソン４の上流、例えばエクソン１、エクソン２又はエクソン３にある、請求項５～８のいずれか一項に記載の細胞。
  10. 前記遺伝子編集系は、前記ＺＢＴＢ３２遺伝子の後期エクソン又はイントロンの標的配列に結合する、請求項５～９のいずれか一項に記載の細胞。
  11. 前記遺伝子編集系は、最後から４番目のエクソンの下流にある、例えば最後から３番目のエクソン、最後から２番目のエクソン、又は最後のエクソンの下流にある、標的配列に結合する、請求項５～１０のいずれか一項に記載の細胞。
  12. 前記遺伝子編集系が、前記ＺＢＴＢ３２遺伝子のスプライスジャンクションを含む標的配列に結合する、請求項５～１１のいずれか一項に記載の細胞。
  13. 前記遺伝子編集系が、前記ＺＢＴＢ３２遺伝子のコード領域の標的配列に結合する、請求項５～１２のいずれか一項に記載の細胞。
  14. 前記遺伝子編集系が、前記ＺＢＴＢ３２遺伝子の非コード領域の標的配列に結合する、請求項５～１３のいずれか一項に記載の細胞。
  15. 前記遺伝子編集系が、前記ＺＢＴＢ３２遺伝子の調節エレメントの標的配列に結合する、請求項５～１４のいずれか一項に記載の細胞。
  16. 前記遺伝子編集系が、前記ＺＢＴＢ３２遺伝子の標的配列にハイブリダイズする標的化配列を含むガイドＲＮＡ（ｇＲＮＡ）分子を含むＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ系である、請求項５～１５のいずれか一項に記載の細胞。
  17. 前記ＺＢＴＢ３２阻害剤が、前記ＺＢＴＢ３２遺伝子を標的とする低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）若しくは低分子ヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、又は前記ｓｉＲＮＡ若しくはｓｈＲＮＡをコードする核酸を含む、請求項５～１５のいずれか一項に記載の細胞。
  18. 前記ｓｉＲＮＡ又はｓｈＲＮＡが、前記ＺＢＴＢ３２遺伝子のｍＲＮＡの配列に相補的なヌクレオチド配列を含む、請求項１７に記載の細胞。
  19. 前記ＺＢＴＢ３２阻害剤が、前記ＺＢＴＢ３２遺伝子を標的とするアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）、又は前記ＡＳＯをコードする核酸を含む、請求項５～１５のいずれか一項に記載の細胞。
  20. 前記ＡＳＯが、前記ＺＢＴＢ３２遺伝子のｍＲＮＡの配列に相補的なヌクレオチド配列を含む、請求項１９に記載の細胞。
  21. 前記ＺＢＴＢ３２阻害剤が、タンパク質を含む、請求項５～１５のいずれか一項に記載の細胞。
  22. 前記ＺＢＴＢ３２阻害剤が、前記ＺＢＴＢ３２遺伝子によってコードされるタンパク質のドミナントネガティブ変異体、又は前記ドミナントネガティブ変異体をコードする核酸を含む、請求項５～１５のいずれか一項に記載の細胞。
  23. 前記ＺＢＴＢ３２阻害剤が、前記ＺＢＴＢ３２遺伝子によってコードされるタンパク質のドミナントネガティブ結合パートナー、又は前記ドミナントネガティブ結合パートナーをコードする核酸を含む、請求項５～１５のいずれか一項に記載の細胞。
  24. 前記ＺＢＴＢ３２阻害剤が、前記ＺＢＴＢ３２遺伝子によってコードされるタンパク質に結合する抗体分子、例えば単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）若しくはナノボディ、又は前記抗体分子をコードする核酸を含む、請求項５～１５のいずれか一項に記載の細胞。
  25. 前記ＺＢＴＢ３２阻害剤が、前記ＺＢＴＢ３２遺伝子によってコードされるタンパク質に結合する単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）又はナノボディをコードする核酸を含む、請求項５～１５又は２４のいずれか一項に記載の細胞。
  26. 前記細胞が、参照細胞と比較して、ＺＢＴＢ３２の発現が低下しており、例えば、少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９８％、又は９９％低下している、請求項１～２５のいずれか一項に記載の細胞。
  27. 前記ＺＢＴＢ３２タンパク質のレベルが低下している、請求項２６に記載の細胞。
  28. 前記ＺＢＴＢ３２タンパク質の安定性が低下している、請求項２６又は２７に記載の細胞。
  29. 前記ＺＢＴＢ３２ ｍＲＮＡのレベルが低下している、請求項２６～２８のいずれか一項に記載の細胞。
  30. 前記ＺＢＴＢ３２ ｍＲＮＡの安定性が低下している、請求項２６～２９のいずれか一項に記載の細胞。
  31. 前記細胞が、低下したＺＢＴＢ３２転写を有する、請求項２６～３０のいずれか一項に記載の細胞。
  32. 前記細胞が、低下したＺＢＴＢ３２翻訳を有する、請求項２６～３１のいずれか一項に記載の細胞。
  33. 前記ＺＢＴＢ３２ゲノム遺伝子座が変更されている（例えば、破壊されている）、請求項２６～３２のいずれか一項に記載の細胞。
  34. 前記ＺＢＴＢ３２遺伝子が、欠失又は挿入、例えば、前記ＺＢＴＢ３２ゲノム遺伝子座のオープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）又はＣＬＬスーパーエンハンサーを破壊する欠失又は挿入を含む、請求項３３に記載の細胞。
  35. 前記ＺＢＴＢ３２遺伝子が、エピゲノム修飾、例えば、前記ＺＢＴＢ３２の発現を低下させるエピゲノム修飾を含む、請求項３３又は３４に記載の細胞。
  36. 前記細胞が、参照細胞と比較して、ＺＢＴＢ３２の生物学的活性が低下しており、例えば、少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９８％、又は９９％低下している、請求項１～３５のいずれか一項に記載の細胞。
  37. 前記ＺＢＴＢ３２の転写抑制機能が低下している、請求項３６に記載の細胞。
  38. 前記ＺＢＴＢ３２と１つ以上の結合パートナーとの間の相互作用が低下している、請求項３６又は３７に記載の細胞。
  39. 前記１つ以上の結合パートナーが、ファンコニ貧血相補群Ｃ（ＦＡＮＣＣ）、チオレドキシン相互作用タンパク質（ＴＸＮＩＰ）、ビタミンＤ３上方制御タンパク質１（ＶＤＵＰ１）、ジンクフィンガー及びＢＴＢドメイン含有タンパク質１６（Ｚｂｔｂ１６）、ジンクフィンガー肘関連プロリンドメインタンパク質２（Ｚｐｏ２）、ＧＡＴＡ結合タンパク質３（Ｇａｔａ３）、ＧＡＴＡ結合タンパク質２（Ｇａｔａ２）、又はＢ細胞リンパ腫６（Ｂｃｌ－６）を含む、請求項３８に記載の細胞。
  40. 前記細胞が、増強されたＴ細胞媒介性抗腫瘍応答を有する、請求項１～３９のいずれか一項に記載の細胞。
  41. 前記細胞が、増加した増殖及び／又はサイトカイン産生を有する、請求項１～４０のいずれか一項に記載の細胞。
  42. 前記細胞が、改変されたＴ細胞状態、例えば、機能不全性Ｔ細胞の改変された状態、例えば、低下したＴ細胞枯渇を有する、請求項１～４１のいずれか一項に記載の細胞。
  43. 前記細胞が、枯渇に対する強化された耐性、及び強化されたインビボでの長期的な免疫保護を有する、請求項１～４２のいずれか一項に記載の細胞。
  44. 前記細胞が、増加したＭＨＣＩＩ及び／又はＭＨＣＩＩトランス活性化因子ＣＩＩＴＡの発現を有する、請求項１～４３のいずれか一項に記載の細胞。
  45. 前記細胞が、参照細胞と比較してインビボでより高い速度で増殖する、請求項１～４４のいずれか一項に記載の細胞。
  46. 前記細胞が、改善された免疫記憶表現型、例えばＢ細胞記憶表現型を有する、請求項１～３９のいずれか一項に記載の細胞。
  47. 前記細胞が、免疫エフェクター細胞（例えば、免疫エフェクター細胞集団）である、請求項１～４６のいずれか一項に記載の細胞。
  48. 前記免疫エフェクター細胞が、Ｔ細胞、Ｂ細胞、又はＮＫ細胞である、請求項４７に記載の細胞。
  49. 前記免疫エフェクター細胞が、Ｔ細胞である、請求項４７又は４８に記載の細胞。
  50. 前記Ｔ細胞が、アルファベータＴ細胞（αβＴ細胞）である、請求項４９に記載の細胞。
  51. 前記Ｔ細胞が、ＣＤ４＋Ｔ細胞、ＣＤ８＋Ｔ細胞、又はそれらの組み合わせである、請求項４９又は５０に記載の細胞。
  52. 前記Ｔ細胞が、ＣＤ８＋Ｔ細胞又はレギュレーターＴ細胞（Ｔｒｅｇ）、例えば、腫瘍浸潤、機能不全性ＣＤ８＋Ｔ細胞又はＴｒｅｇである、請求項４９～５１のいずれか一項に記載の細胞。
  53. 前記細胞が、ガンマデルタＴ細胞（γδＴ細胞）である、請求項４９に記載の細胞。
  54. 前記細胞が、キメラ抗原受容体Ｔ（ＣＡＲＴ）細胞、例えば、非応答者の製造されたＣＡＲＴ細胞である、請求項１～５３のいずれか一項に記載の細胞。
  55. 前記細胞が、Ｂ細胞である、請求項４７又は４８に記載の細胞。
  56. 前記細胞が、ＮＫ細胞である、請求項４７又は４８に記載の細胞。
  57. 前記細胞が、ヒト細胞である、請求項１～５６のいずれか一項に記載の細胞。
  58. 前記細胞は更に、Ｔｅｔ２の発現が低下し、及び／又は生物学的活性が低下している、請求項１～５７のいずれか一項に記載の細胞。
  59. 前記細胞は更に、ＩＫＺＦ２の発現が低下し、及び／又は生物学的活性が低下している、請求項１～５８のいずれか一項に記載の細胞。
  60. 前記抗原結合ドメインは、ＴＳＨＲ、ＣＤ１９、ＣＤ１２３、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ１７１、ＣＳ－１、ＣＬＬ－１、ＣＤ３３、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＧＤ２、ＧＤ３、ＢＣＭＡ、Ｔｎ Ａｇ、ＰＳＭＡ、ＲＯＲ１、ＦＬＴ３、ＦＡＰ、ＴＡＧ７２、ＣＤ３８、ＣＤ４４ｖ６、ＣＥＡ、ＥＰＣＡＭ、Ｂ７Ｈ３、ＫＩＴ、ＩＬ－１３Ｒａ２、メソテリン、ＩＬ－１１Ｒａ、ＰＳＣＡ、ＰＲＳＳ２１、ＶＥＧＦＲ２、ルイスＹ、ＣＤ２４、ＰＤＧＦＲ－β、ＳＳＥＡ－４、ＣＤ２０、葉酸受容体α、ＥＲＢＢ２（Ｈｅｒ２／ｎｅｕ）、ＭＵＣ１、ＥＧＦＲ、ＮＣＡＭ、Ｐｒｏｓｔａｓｅ、ＰＡＰ、ＥＬＦ２Ｍ、エフリンＢ２、ＩＧＦ－Ｉ受容体、ＣＡＩＸ、ＬＭＰ２、ｇｐ１００、ｂｃｒ－ａｂｌ、チロシナーゼ、ＥｐｈＡ２、フコシルＧＭ１、ｓＬｅ、ＧＭ３、ＴＧＳ５、ＨＭＷＭＡＡ、ｏ－アセチル－ＧＤ２、葉酸受容体β、ＴＥＭ１／ＣＤ２４８、ＴＥＭ７Ｒ、ＣＬＤＮ６、ＧＰＲＣ５Ｄ、ＣＸＯＲＦ６１、ＣＤ９７、ＣＤ１７９ａ、ＡＬＫ、ポリシアル酸、ＰＬＡＣ１、ＧｌｏｂｏＨ、ＮＹ－ＢＲ－１、ＵＰＫ２、ＨＡＶＣＲ１、ＡＤＲＢ３、ＰＡＮＸ３、ＧＰＲ２０、ＬＹ６Ｋ、ＯＲ５１Ｅ２、ＴＡＲＰ、ＷＴ１、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＬＡＧＥ－１ａ、ＭＡＧＥ－Ａ１、レグマイン、ＨＰＶ Ｅ６、Ｅ７、ＭＡＧＥ Ａ１、ＥＴＶ６－ＡＭＬ、精子タンパク質１７、ＸＡＧＥ１、Ｔｉｅ ２、ＭＡＤ－ＣＴ－１、ＭＡＤ－ＣＴ－２、Ｆｏｓ関連抗原１、ｐ５３、ｐ５３変異体、プロステイン、サバイビン及びテロメラーゼ、ＰＣＴＡ－１／ガレクチン８、ＭｅｌａｎＡ／ＭＡＲＴ１、Ｒａｓ変異体、ｈＴＥＲＴ、肉腫転座切断点、ＭＬ－ＩＡＰ、ＥＲＧ（ＴＭＰＲＳＳ２ ＥＴＳ融合遺伝子）、ＮＡ１７、ＰＡＸ３、アンドロゲン受容体、サイクリンＢ１、ＭＹＣＮ、ＲｈｏＣ、ＴＲＰ－２、ＣＹＰ１Ｂ１、ＢＯＲＩＳ、ＳＡＲＴ３、ＰＡＸ５、ＯＹ－ＴＥＳ１、ＬＣＫ、ＡＫＡＰ－４、ＳＳＸ２、ＲＡＧＥ－１、ヒトテロメラーゼ逆転写酵素、ＲＵ１、ＲＵ２、腸カルボキシルエステラーゼ、ｍｕｔ ｈｓｐ７０－２、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、ＣＤ７２、ＬＡＩＲ１、ＦＣＡＲ、ＬＩＬＲＡ２、ＣＤ３００ＬＦ、ＣＬＥＣ１２Ａ、ＢＳＴ２、ＥＭＲ２、ＬＹ７５、ＧＰＣ３、ＦＣＲＬ５及びＩＧＬＬ１からなる群から選択される腫瘍抗原に結合する、請求項１～５９のいずれか一項に記載の細胞。
  61. 前記腫瘍抗原が、ＣＤ１９、ＢＣＭＡ、ＣＤ２０又はＣＤ２２である、請求項１～６０のいずれか一項に記載の細胞。
  62. 前記腫瘍抗原が、ＣＤ１９である、請求項１～６１のいずれか一項に記載の細胞。
  63. 前記腫瘍抗原が、ＢＣＭＡである、請求項１～６１のいずれか一項に記載の細胞。
  64. 前記腫瘍抗原が、ＣＤ２０である、請求項１～６１のいずれか一項に記載の細胞。
  65. 前記腫瘍抗原が、ＣＤ２２である、請求項１～６１のいずれか一項に記載の細胞。
  66. 前記抗原結合ドメインが、例えば国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレット又は国際公開第２０１４／１５３２７０号パンフレットに記載される、抗原又は抗体フラグメントである、請求項１～６５のいずれか一項に記載の細胞。
  67. 前記膜貫通ドメインは、国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレットの配列番号１２のアミノ酸配列の少なくとも１、２若しくは３つの修飾であるが、２０、１０若しくは５つ以下の修飾を有するアミノ酸配列、又は国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレットの配列番号１２のアミノ酸配列と９５～９９％の同一性を有する配列、又は国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレットの配列番号１２の配列を含む、請求項１～６６のいずれか一項に記載の細胞。
  68. 前記抗原結合ドメインは、ヒンジ領域によって前記膜貫通ドメインに結合され、前記ヒンジ領域は、国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレットの配列番号２若しくは配列番号６又はそれと９５～９９％の同一性を有する配列を含む、請求項１～６７のいずれか一項に記載の細胞。
  69. 前記細胞内シグナル伝達ドメインは、一次シグナル伝達ドメイン及び／又は共刺激シグナル伝達ドメインを含み、前記一次シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ζ、ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、共通ＦｃＲγ（ＦＣＥＲ１Ｇ）、ＦｃＲβ（ＦｃεＲ１ｂ）、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、ＦｃγＲＩＩａ、ＤＡＰ１０又はＤＡＰ１２から選択されるタンパク質の機能的シグナル伝達ドメインを含む、請求項１～６８のいずれか一項に記載の細胞。
  70. 前記一次シグナル伝達ドメインは、国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレットの配列番号１８若しくは配列番号２０のアミノ酸配列の少なくとも１、２若しくは３つの修飾であるが、２０、１０若しくは５つ以下の修飾を有する国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレットのアミノ酸配列、又は配列番号１８若しくは配列番号２０のアミノ酸配列と９５～９９％の同一性を有する配列、又は国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレットの配列番号１８若しくは配列番号２０のアミノ酸配列を含む、請求項６９に記載の細胞。
  71. 前記細胞内シグナル伝達ドメインは、共刺激シグナル伝達ドメイン又は一次シグナル伝達ドメイン及び共刺激シグナル伝達ドメインを含み、前記共刺激シグナル伝達ドメインは、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＰＤ－１、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦＡ－１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３と特異的に結合するリガンド、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ－１、ＧＩＴＲ、ＢＡＦＦＲ、ＨＶＥＭ（ＬＩＧＨＴＲ）、ＳＬＡＭＦ７、ＮＫｐ８０（ＫＬＲＦ１）、ＣＤ１６０、ＣＤ１９、ＣＤ４、ＣＤ８α、ＣＤ８β、ＩＬ２Ｒβ、ＩＬ２Ｒγ、ＩＬ７Ｒα、ＩＴＧＡ４、ＶＬＡ１、ＣＤ４９ａ、ＩＴＧＡ４、ＩＡ４、ＣＤ４９Ｄ、ＩＴＧＡ６、ＶＬＡ－６、ＣＤ４９ｆ、ＩＴＧＡＤ、ＣＤ１１ｄ、ＩＴＧＡＥ、ＣＤ１０３、ＩＴＧＡＬ、ＣＤ１１ａ、ＬＦＡ－１、ＩＴＧＡＭ、ＣＤ１１ｂ、ＩＴＧＡＸ、ＣＤ１１ｃ、ＩＴＧＢ１、ＣＤ２９、ＩＴＧＢ２、ＣＤ１８、ＬＦＡ－１、ＩＴＧＢ７、ＴＮＦＲ２、ＴＲＡＮＣＥ／ＲＡＮＫＬ、ＤＮＡＭ１（ＣＤ２２６）、ＳＬＡＭＦ４（ＣＤ２４４、２Ｂ４）、ＣＤ８４、ＣＤ９６（Ｔａｃｔｉｌｅ）、ＣＥＡＣＡＭ１、ＣＲＴＡＭ、Ｌｙ９（ＣＤ２２９）、ＣＤ１６０（ＢＹ５５）、ＰＳＧＬ１、ＣＤ１００（ＳＥＭＡ４Ｄ）、ＣＤ６９、ＳＬＡＭＦ６（ＮＴＢ－Ａ、Ｌｙ１０８）、ＳＬＡＭ（ＳＬＡＭＦ１、ＣＤ１５０、ＩＰＯ－３）、ＢＬＡＭＥ（ＳＬＡＭＦ８）、ＳＥＬＰＬＧ（ＣＤ１６２）、ＬＴＢＲ、ＬＡＴ、ＧＡＤＳ、ＳＬＰ－７６、ＰＡＧ／Ｃｂｐ、ＮＫｐ４４、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４６及びＮＫＧ２Ｄからなる群から選択されるタンパク質の機能的シグナル伝達ドメインを含む、請求項１～７０のいずれか一項に記載の細胞。
  72. 前記共刺激シグナル伝達ドメインは、国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレットの配列番号１４若しくは配列番号１６のアミノ酸配列の少なくとも１、２若しくは３つの修飾であるが、２０、１０若しくは５つ以下の修飾を有するアミノ酸配列又は国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレットの配列番号１４若しくは配列番号１６のアミノ酸配列と９５～９９％の同一性を有する配列を含む、請求項７１に記載の細胞。
  73. 前記共刺激シグナル伝達ドメインは、国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレットの配列番号１４又は配列番号１６の配列を含む、請求項７１又は７２に記載の細胞。
  74. 前記細胞内ドメインは、国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレットの配列番号１４又は配列番号１６の配列及び国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレットの配列番号１８又は配列番号２０の配列を含み、前記細胞内シグナル伝達ドメインを含む前記配列は、同じフレームにおいて及び単一のポリペプチド鎖として発現される、請求項１～７３のいずれか一項に記載の細胞。
  75. 国際公開第２０１２／０７９０００号パンフレットの配列番号２の配列を含むリーダー配列を更に含む、請求項１～７４のいずれか一項に記載の細胞。
  76. 細胞におけるＺＢＴＢ３２の発現及び／又は生物学的活性を低下させること、
    それにより、ＣＡＲ発現細胞の治療有効性を高めること
    を含む、ＣＡＲ発現細胞、例えば請求項１～７５のいずれか一項に記載の細胞、例えばＣＡＲ１９発現細胞（例えばＣＴＬ０１９又はＣＴＬ１１９）の治療有効性を高める方法。
  77. 前記細胞を、ＺＢＴＢ３２阻害剤、例えば、本明細書に記載のＺＢＴＢ３２阻害剤と接触させること、
    それにより、ＣＡＲ発現細胞の治療有効性を高めること
    を含む、ＣＡＲ発現細胞、例えば請求項１～７５のいずれか一項に記載の細胞、例えばＣＡＲ１９発現細胞（例えばＣＴＬ０１９又はＣＴＬ１１９）の治療有効性を高める方法。
  78. 前記阻害剤が、
    （ａ）前記ＺＢＴＢ３２の発現及び／又は生物学的活性を低下させる小分子；
    （ｂ）前記ＺＢＴＢ３２遺伝子を標的とする遺伝子編集系；
    （ｃ）ＺＢＴＢ３２の発現を阻害する核酸（例えば、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、又はＡＳＯ）；
    （ｄ）前記ＺＢＴＢ３２遺伝子によってコードされるタンパク質（例えば、ドミナントネガティブ）、又は前記ＺＢＴＢ３２遺伝子によってコードされるタンパク質の結合パートナー；
    （ｅ）前記ＺＢＴＢ３２遺伝子によってコードされるタンパク質に結合する抗体分子（例えば、単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）又はナノボディ）；
    （ｆ）（ｂ）若しくはその成分又は（ｃ）～（ｄ）のいずれかをコードする核酸；又は
    （ｇ）（ａ）～（ｆ）の任意の組み合わせ
    である、請求項７７に記載の方法。
  79. 前記細胞が、エクスビボでＺＢＴＢ３２阻害剤と接触される、請求項７７又は７８に記載の方法。
  80. 前記細胞が、インビボで前記ＺＢＴＢ３２阻害剤と接触される、請求項７７又は７８に記載の方法。
  81. 前記細胞が、ＣＡＲをコードする核酸の前記細胞への送達前にインビボで前記ＺＢＴＢ３２阻害剤と接触される、請求項８０に記載の方法。
  82. 前記細胞が、それを必要とする対象に投与された後にインビボで前記ＺＢＴＢ３２阻害剤と接触される、請求項８０又は８１に記載の方法。
  83. 前記細胞をＴｅｔ２阻害剤と接触させることを更に含む、請求項７６～８２のいずれか一項に記載の方法。
  84. 前記細胞をＩＫＺＦ２阻害剤と接触させることを更に含む、請求項７６～８３のいずれか一項に記載の方法。
  85. 前記細胞が、Ｔｅｔ２阻害剤と接触していた、請求項７６～８４のいずれか一項に記載の方法。
  86. 前記細胞が、ＩＫＺＦ２阻害剤、例えば、本明細書に記載のＩＫＺＦ２阻害剤と接触していた、請求項７６～８５のいずれか一項に記載の方法。
  87. 対象における癌を処置するための方法であって、請求項１～７５のいずれか一項に記載の細胞の有効量を前記対象に投与することを含む方法。
  88. 対象の癌の処置における使用のための、請求項１～７５のいずれか一項に記載の細胞。
  89. 前記癌が、血液癌であり、任意選択により、前記癌が、リンパ腫、骨髄腫、又は白血病である、請求項８７に記載の方法、又は請求項８８に記載の使用のための細胞。
  90. 前記癌が、Ｂ細胞悪性腫瘍、例えば、Ｂ細胞リンパ腫又は白血病である、請求項８７若しくは８９に記載の方法、又は請求項８８若しくは８９に記載の使用のための細胞。
  91. 前記癌が、リンパ腫、例えば、非ホジキンリンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、例えば、活性化Ｂ細胞（ＡＢＣ）ＤＬＢＣＬ又は胚中心Ｂ細胞（ＧＣＢ）ＤＬＢＣＬである、請求項８７、８９若しくは９０のいずれか一項に記載の方法、又は請求項８８～９０のいずれか一項に記載の使用のための細胞。
  92. 前記癌が、骨髄腫、例えば多発性骨髄腫（ＭＭ）である、請求項８７、８９若しくは９０のいずれか一項に記載の方法、又は請求項８８～９０のいずれか一項に記載の使用のための細胞。
  93. 前記癌が、白血病、例えば、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）又は慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）である、請求項８７、８９若しくは９０のいずれか一項に記載の方法、又は請求項８８～９０のいずれか一項に記載の使用のための細胞。
  94. 前記癌が、固形腫瘍であり、任意選択により、前記固形腫瘍が、免疫細胞浸潤に関連する、請求項８７に記載の方法、又は請求項８８に記載の使用のための細胞。
  95. 前記癌が、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性リンパ系白血病（ＡＬＬ）、Ｂ細胞急性リンパ系白血病（Ｂ－ＡＬＬ）、Ｔ細胞急性リンパ系白血病（Ｔ－ＡＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、Ｂ細胞前リンパ球性白血病、芽球性形質細胞様樹状細胞の新生物、バーキットリンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、ヘアリーセル白血病、小細胞型又は大細胞型濾胞性リンパ腫、悪性のリンパ増殖性状態、ＭＡＬＴリンパ腫、マントル細胞リンパ腫、辺縁帯リンパ腫、多発性骨髄腫、脊髄形成異常及び骨髄異形成症候群、非ホジキンのリンパ腫、ホジキンのリンパ腫、形質芽細胞リンパ腫、形質細胞様樹状細胞の新生物、ワルデンシュトレーム型マクログロブリン血症、又は前白血病である、請求項８７に記載の方法、又は請求項８８に記載の使用のための細胞。
  96. 前記癌が、結腸癌、直腸癌、腎細胞癌、肝臓癌、肺の非小細胞癌、小腸癌、食道癌、黒色腫、骨癌、膵臓癌、皮膚癌、頭頸部癌、皮膚又は眼内の悪性黒色腫、子宮癌、卵巣癌、直腸癌、肛門部癌、胃癌、精巣癌、子宮癌、卵管癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、膣の癌、外陰癌、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、内分泌系癌、甲状腺癌、副甲状腺癌、副腎癌、軟部組織肉腫、尿道癌、陰茎癌、小児固形腫瘍、膀胱癌、腎臓癌又は尿管癌、腎盂癌、中枢神経系（ＣＮＳ）新生物、原発性ＣＮＳリンパ腫、腫瘍血管新生、脊髄軸腫瘍、脳幹神経膠腫、下垂体腺腫、カポジ肉腫、類表皮癌、扁平上皮癌、Ｔ細胞リンパ腫、環境的に誘発された癌、又はその転移性病変である、請求項８７に記載の方法、又は請求項８８に記載の使用のための細胞。
  97. 前記癌が、例えば、本明細書に記載の方法によって決定される、より高いレベルのＺＢＴＢ３２を発現する、請求項８７若しくは８９～９６のいずれか一項に記載の方法、又は請求項８８～９６のいずれか一項に記載の使用のための細胞。
  98. 前記対象に第２の治療剤又はモダリティー、例えば本明細書に記載の癌療法剤を投与することを更に含む、請求項８７若しくは８９～９７に記載の方法、又は請求項８８～９７のいずれか一項に記載の使用のための細胞。
  99. ＺＢＴＢ３２阻害剤、例えば本明細書に記載のＺＢＴＢ３２阻害剤を前記対象に投与することを更に含む、請求項８７若しくは８９～９８に記載の方法、又は請求項８８～９８のいずれか一項に記載の使用のための細胞。
  100. ＣＡＲ発現細胞療法が、ＺＢＴＢ３２阻害剤、例えば、本明細書に記載のＺＢＴＢ３２阻害剤と組み合わせて使用される、それを必要とする対象の処置における使用のためのＣＡＲ発現細胞療法。
  101. 前記対象が、前記ＣＡＲ発現細胞療法の開始前に、前記ＺＢＴＢ３２阻害剤の前処置を受ける、請求項１００に記載の使用のためのＣＡＲ発現細胞療法。
  102. 前記対象が、前記ＺＢＴＢ３２阻害剤及び前記ＣＡＲ発現細胞療法による同時処置を受ける、請求項１００又は１０１に記載の使用のためのＣＡＲ発現細胞療法。
  103. 前記対象が、ＣＡＲ発現細胞療法後に前記ＺＢＴＢ３２阻害剤による処置を受ける、請求項１００～１０２のいずれか一項に記載の使用のためのＣＡＲ発現細胞療法。
  104. 前記対象が、腫瘍抗原（例えば、本明細書に記載の腫瘍抗原）の発現に関連する疾患、例えば、増殖性疾患、前癌状態、癌、及び前記腫瘍抗原の発現に関連する非癌関連の徴候を有する、請求項１００～１０３のいずれか一項に記載の使用のためのＣＡＲ発現細胞療法。
  105. 前記対象が、血液癌を有する、請求項１００～１０４のいずれか一項に記載の使用のためのＣＡＲ発現細胞療法。
  106. 前記対象が、リンパ腫、骨髄腫、又は白血病を有する、請求項１００～１０５のいずれか一項に記載の使用のためのＣＡＲ発現細胞療法。
  107. 前記対象が、Ｂ細胞悪性腫瘍、例えば、Ｂ細胞リンパ腫又は白血病を有する、請求項１００～１０６のいずれか一項に記載の使用のためのＣＡＲ発現細胞療法。
  108. 前記対象が、リンパ腫、例えば、非ホジキンリンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、例えば、活性化Ｂ細胞（ＡＢＣ）ＤＬＢＣＬ又は胚中心Ｂ細胞（ＧＣＢ）ＤＬＢＣＬを有する、請求項１００～１０７のいずれか一項に記載の使用のためのＣＡＲ発現細胞療法。
  109. 前記対象が、骨髄腫、例えば多発性骨髄腫（ＭＭ）を有する、請求項１００～１０７のいずれか一項に記載の使用のためのＣＡＲ発現細胞療法。
  110. 前記対象が、白血病、例えば、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）又は慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）を有する、請求項１００～１０７のいずれか一項に記載の使用のためのＣＡＲ発現細胞療法。
  111. 前記対象が、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性リンパ系白血病（ＡＬＬ）、Ｂ細胞急性リンパ系白血病（Ｂ－ＡＬＬ）、Ｔ細胞急性リンパ系白血病（Ｔ－ＡＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、Ｂ細胞前リンパ球性白血病、芽球性形質細胞様樹状細胞の新生物、バーキットリンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、ヘアリーセル白血病、小細胞型又は大細胞型濾胞性リンパ腫、悪性のリンパ増殖性状態、ＭＡＬＴリンパ腫、マントル細胞リンパ腫、辺縁帯リンパ腫、多発性骨髄腫、脊髄形成異常及び骨髄異形成症候群、非ホジキンのリンパ腫、ホジキンのリンパ腫、形質芽細胞リンパ腫、形質細胞様樹状細胞の新生物、ワルデンシュトレーム型マクログロブリン血症、又は前白血病を有する、請求項１００～１０６のいずれか一項に記載の使用のためのＣＡＲ発現細胞療法。
  112. 前記対象が、固形腫瘍を有する、請求項１００～１０４のいずれか一項に記載の使用のためのＣＡＲ発現細胞療法。
  113. 前記固形腫瘍が、免疫細胞浸潤に関連する、請求項１１２に記載の使用のためのＣＡＲ発現細胞療法。
  114. 前記対象が、結腸癌、直腸癌、腎細胞癌、肝臓癌、肺の非小細胞癌、小腸癌、食道癌、黒色腫、骨癌、膵臓癌、皮膚癌、頭頸部癌、皮膚又は眼内の悪性黒色腫、子宮癌、卵巣癌、直腸癌、肛門部癌、胃癌、精巣癌、子宮癌、卵管癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、膣の癌、外陰癌、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、内分泌系癌、甲状腺癌、副甲状腺癌、副腎癌、軟部組織肉腫、尿道癌、陰茎癌、小児固形腫瘍、膀胱癌、腎臓癌又は尿管癌、腎盂癌、中枢神経系（ＣＮＳ）新生物、原発性ＣＮＳリンパ腫、腫瘍血管新生、脊髄軸腫瘍、脳幹神経膠腫、下垂体腺腫、カポジ肉腫、類表皮癌、扁平上皮癌、Ｔ細胞リンパ腫、環境的に誘発された癌、又はその転移性病変を有する、請求項１００～１０４又は１１２～１１３のいずれか一項に記載の使用のためのＣＡＲ発現細胞療法。
  115. 前記使用が、前記細胞におけるＺＢＴＢ３２の発現及び／又は生物学的活性を決定することを更に含む、請求項１００～１１４のいずれか一項に記載の使用のためのＣＡＲ発現細胞療法。
  116. 有効量のＺＢＴＢ３２阻害剤、例えば本明細書に記載のＺＢＴＢ３２阻害剤を対象に投与すること、
    それにより、前記対象を処置すること
    を含む、対象を処置する方法であって、前記対象が、ＣＡＲ発現細胞を含む治療を受けたか、受けているか、又は受けるところである、方法。
  117. 対象が、ＣＡＲ発現細胞を含む治療を受けたか、受けているか、又は受けるところである、前記対象の処置における使用のための、ＺＢＴＢ３２阻害剤、例えば、本明細書に記載のＺＢＴＢ３２阻害剤。
  118. ＺＢＴＢ３２の発現及び／又は生物学的活性が低下するように、核酸（又はそのＣＡＲコード部分）が細胞のゲノムに組み込まれるように、ＣＡＲをコードする前記核酸を前記細胞に導入すること、
    それにより、前記ＣＡＲ発現細胞を製造すること
    を含む、ＣＡＲ発現細胞を製造する方法。
  119. 前記核酸が、前記ＺＢＴＢ３２遺伝子内（例えば、前記ＺＢＴＢ３２遺伝子のイントロン又はエクソン内）に組み込まれる、請求項１１８に記載の方法。
  120. 前記核酸が、前記ＺＢＴＢ３２遺伝子以外の遺伝子内（例えば、他の遺伝子のイントロン又はエクソン内）に組み込まれる、請求項１１８に記載の方法。
  121. 前記ＣＡＲ発現細胞が、本明細書に記載の製造又は産生の方法に従って製造される、請求項１１８～１２０のいずれか一項に記載の方法。
  122. ＣＡＲ発現細胞をエクスビボでＺＢＴＢ３２阻害剤、例えば本明細書に記載のＺＢＴＢ３２阻害剤と接触させ、それにより、前記ＣＡＲ発現細胞を製造すること
    を含む、ＣＡＲ発現細胞を製造する方法。
  123. 前記ＣＡＲ発現細胞が、エクスビボで前記ＺＢＴＢ３２阻害剤と接触していない同じＣＡＲ発現細胞と比較して、改善された特性、例えば、本明細書に記載の改善された特性を有する、請求項１２２に記載の方法。
  124. 前記改善された特性が、Ｔ細胞媒介性抗腫瘍応答の強化、増殖及び／又はサイトカイン産生の増加、Ｔ細胞枯渇の低下、枯渇に対する耐性の強化及びインビボでの長期的な免疫保護の強化、ＭＨＣＩＩ及び／又はＭＨＣＩＩトランス活性化因子ＣＩＩＴＡの発現の増加、インビボでのより高い増殖率、改善された免疫記憶表現型、又はそれらの任意の組み合わせを含む、請求項１２３に記載の方法。
  125. 前記ＣＡＲ発現細胞が、本明細書に記載の製造又は産生の方法に従って製造される、請求項１１８～１２４のいずれか一項に記載の方法。
  126. ＣＡＲをコードするヌクレオチド配列と、ＺＢＴＢ３２阻害剤をコードするヌクレオチド配列とを含む、ベクター。
  127. 前記阻害剤が、
    （ａ）前記ＺＢＴＢ３２遺伝子を標的とする遺伝子編集系；
    （ｂ）ＺＢＴＢ３２の発現を阻害する核酸（例えば、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、又はＡＳＯ）；
    （ｃ）前記ＺＢＴＢ３２遺伝子によってコードされるタンパク質（例えば、ドミナントネガティブ）、又は前記ＺＢＴＢ３２遺伝子によってコードされるタンパク質の結合パートナー；
    （ｄ）前記ＺＢＴＢ３２遺伝子によってコードされるタンパク質に結合する抗体分子（例えば、単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）又はナノボディ）；又は
    （ｅ）（ａ）～（ｄ）の任意の組み合わせ
    である、請求項１２６に記載のベクター。
  128. 前記ＣＡＲをコードする前記ヌクレオチド配列及び前記阻害剤をコードする前記ヌクレオチド配列が、２Ａ部位によって分離される、請求項１２６又は１２７に記載のベクター。
  129. ＺＢＴＢ３２阻害剤、例えば、本明細書に記載のＺＢＴＢ３２阻害剤を含む、ＣＡＲ発現細胞のエクスビボ製造のための組成物。
  130. 前記阻害剤が、
    （ａ）前記ＺＢＴＢ３２の発現及び／又は生物学的活性を低下させる小分子；
    （ｂ）前記ＺＢＴＢ３２遺伝子を標的とする遺伝子編集系；
    （ｃ）ＺＢＴＢ３２の発現を阻害する核酸（例えば、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、又はＡＳＯ）；
    （ｄ）前記ＺＢＴＢ３２遺伝子によってコードされるタンパク質（例えば、ドミナントネガティブ）、又は前記ＺＢＴＢ３２遺伝子によってコードされるタンパク質の結合パートナー；
    （ｅ）前記ＺＢＴＢ３２遺伝子によってコードされるタンパク質に結合する抗体分子（例えば、単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）又はナノボディ）；
    （ｆ）（ｂ）若しくはその成分又は（ｃ）～（ｄ）のいずれかをコードする核酸；又は
    （ｇ）（ａ）～（ｆ）の任意の組み合わせ
    である、請求項１２９に記載の組成物。
  131. 前記細胞の集団が、細胞の参照集団よりも高い（例えば、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０倍高い）パーセンテージの、本明細書に記載の表現型を有するか、又は本明細書に記載のマーカーを発現する（例えば、セントラルメモリーＴ（ＴＣＭ）細胞又は幹メモリーＴ（ＴＳＣＭ）細胞に関連する表現型又はマーカー）細胞を含む、請求項１～７５のいずれか一項に記載の１つ以上の細胞を含む、細胞の集団。
  132. 前記集団中のサイトカイン産生細胞のパーセンテージが、細胞の参照集団よりも少なくとも５０％（例えば、少なくとも６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、９７％、又は９９％）高い、請求項１～７５のいずれか一項に記載の１つ以上の細胞を含む、細胞の集団。
  133. 前記細胞の参照集団が、前記細胞におけるＺＢＴＢ３２の発現が低下した１つ以上の細胞を含まない細胞の集団である、請求項１３１又は１３２に記載の細胞の集団。
  134. 前記細胞の参照集団が、前記細胞におけるＺＢＴＢ３２の生物学的活性が低下した１つ以上の細胞を含まない細胞の集団である、請求項１３１～１３３のいずれか一項に記載の細胞の集団。
  135. 前記細胞の集団の少なくとも５０％（例えば、少なくとも６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、９７％、又は９９％）が、本明細書に記載の表現型を有するか、又は本明細書に記載のマーカー（例えば、セントラルメモリーＴ（ＴＣＭ）細胞又は幹メモリーＴ（ＴＳＣＭ）細胞に関連する表現型又はマーカー）を発現する、請求項１～７５のいずれか一項に記載の１つ以上の細胞を含む、細胞の集団。
  136. 有効量のＺＢＴＢ３２阻害剤及び第２の治療剤又はモダリティーを対象に投与すること、
    それにより、前記対象の癌を処置すること（ｔｈｒｅａｔｉｎｇ）
    を含む、対象の癌を処置する方法。
  137. ＺＢＴＢ３２阻害剤が、第２の処置剤又はモダリティーと組み合わせて使用される、対象の癌の処置における使用のためのＺＢＴＢ３２阻害剤。
  138. 前記ＺＢＴＢ３２阻害剤が、前記第２の治療剤又はモダリティーの投与前、投与と同時に、又は投与後に投与される、請求項１３６に記載の方法、又は請求項１３７に記載の使用のための阻害剤。
  139. 前記ＺＢＴＢ３２阻害剤が、小分子を含む、請求項１３６若しくは１３８に記載の方法、又は請求項１３７若しくは１３８に記載の使用のための阻害剤。
  140. 前記ＺＢＴＢ３２阻害剤が、
    （１）前記ＺＢＴＢ３２遺伝子又はその１つ以上の成分を標的とする遺伝子編集系；
    （２）前記遺伝子編集系の１つ以上の成分をコードする核酸；又は
    （３）（１）及び（２）の組み合わせ
    を含む、請求項１３６若しくは１３８に記載の方法、又は請求項１３６若しくは１３７に記載の使用のための阻害剤。
  141. 前記遺伝子編集系が、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ系、ジンクフィンガーヌクレアーゼ系、ＴＡＬＥＮ系、又はメガヌクレアーゼ系である、請求項１４０に記載の方法、又は請求項１４０に記載の使用のための阻害剤。
  142. 前記遺伝子編集系が、前記ＺＢＴＢ３２遺伝子中の標的配列に結合する、請求項１４０若しくは１４１に記載の方法、又は請求項１４０若しくは１４１に記載の使用のための阻害剤。
  143. 前記遺伝子編集系が、前記ＺＢＴＢ３２遺伝子の初期エクソン又はイントロンの標的配列に結合する、請求項１４０～１４２のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１４０～１４２のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  144. 前記遺伝子編集系が、ＺＢＴＢ３２遺伝子の標的配列に結合し、前記標的配列が、エクソン４の上流、例えばエクソン１、エクソン２、又はエクソン３にある、請求項１４０～１４３のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１４０～１４３のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  145. 前記遺伝子編集系が、前記ＺＢＴＢ３２遺伝子の後期エクソン又はイントロンの標的配列に結合する、請求項１４０～１４４のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１４０～１４４のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  146. 前記遺伝子編集系が、ＺＢＴＢ３２遺伝子の最後から４番目のエクソンの下流にあり、例えば、最後から３番目のエクソン、最後から２番目のエクソン、又は最後のエクソンにある、標的配列に結合する、請求項１４０～１４５のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１４０～１４５のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  147. 前記遺伝子編集系が、前記ＺＢＴＢ３２遺伝子のスプライスジャンクションを含む標的配列に結合する、請求項１４０～１４６のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１４０～１４６のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  148. 前記遺伝子編集系が、前記ＺＢＴＢ３２遺伝子のコード領域の標的配列に結合する、請求項１４０～１４７のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１４０～１４７のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  149. 前記遺伝子編集系が、前記ＺＢＴＢ３２遺伝子の非コード領域の標的配列に結合する、請求項１４０～１４８のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１４０～１４８のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  150. 前記遺伝子編集系が、前記ＺＢＴＢ３２遺伝子の調節エレメントの標的配列に結合する、請求項１４０～１４９のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１４０～１４９のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  151. 前記遺伝子編集系が、前記ＺＢＴＢ３２遺伝子の標的配列にハイブリダイズする標的化配列を含むガイドＲＮＡ（ｇＲＮＡ）分子を含むＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ系である、請求項１４０～１５０のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１４０～１５０のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  152. 前記ＺＢＴＢ３２阻害剤が、前記ＺＢＴＢ３２遺伝子を標的とする低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）若しくは低分子ヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、又は前記ｓｉＲＮＡ若しくはｓｈＲＮＡをコードする核酸を含む、請求項１３６若しくは１３８に記載の方法、又は請求項１３７若しくは１３８に記載の使用のための阻害剤。
  153. 前記ｓｉＲＮＡ又はｓｈＲＮＡが、前記ＺＢＴＢ３２遺伝子のｍＲＮＡの配列に相補的なヌクレオチド配列を含む、請求項１５２に記載の方法、又は請求項１５２に記載の使用のための阻害剤。
  154. 前記ＺＢＴＢ３２阻害剤が、前記ＺＢＴＢ３２遺伝子を標的とするアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）、又は前記ＡＳＯをコードする核酸を含む、請求項１３６若しくは１３８に記載の方法、又は請求項１３７若しくは１３８に記載の使用のための阻害剤。
  155. 前記ＡＳＯが、前記ＺＢＴＢ３２遺伝子のｍＲＮＡの配列に相補的なヌクレオチド配列を含む、請求項１５４に記載の方法、又は請求項１５４に記載の使用のための阻害剤。
  156. 前記ＺＢＴＢ３２阻害剤が、タンパク質を含む、請求項１３６若しくは１３８に記載の方法、又は請求項１３７若しくは１３８に記載の使用のための阻害剤。
  157. 前記ＺＢＴＢ３２阻害剤が、前記ＺＢＴＢ３２遺伝子によってコードされるタンパク質のドミナントネガティブ変異体、又は前記ドミナントネガティブ変異体をコードする核酸を含む、請求項１３６若しくは１３８に記載の方法、又は請求項１３７若しくは１３８に記載の使用のための阻害剤。
  158. 前記ＺＢＴＢ３２阻害剤が、前記ＺＢＴＢ３２遺伝子によってコードされるタンパク質のドミナントネガティブ結合パートナー、又は前記ドミナントネガティブ結合パートナーをコードする核酸を含む、請求項１３６若しくは１３８に記載の方法、又は請求項１３７若しくは１３８に記載の使用のための阻害剤。
  159. 前記ＺＢＴＢ３２阻害剤が、前記ＺＢＴＢ３２遺伝子によってコードされるタンパク質に結合する抗体分子、例えば単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）若しくはナノボディ、又は前記抗体分子をコードする核酸を含む、請求項１３６若しくは１３８に記載の方法、又は請求項１３７若しくは１３８に記載の使用のための阻害剤。
  160. 前記ＺＢＴＢ３２阻害剤が、前記ＺＢＴＢ３２遺伝子によってコードされるタンパク質に結合する単一ドメイン抗体（ｓｄＡｂ）又はナノボディをコードする核酸を含む、請求項１３６、１３８若しくは１５９に記載の方法、又は請求項１３７、１３８若しくは１５９に記載の使用のための阻害剤。
  161. 前記ＺＢＴＢ３２阻害剤が、参照細胞と比較して、ＺＢＴＢ３２の発現を低下させる、例えば、少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９８％、又は９９％低下させる、請求項１３６若しくは１３８～１６０のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１６０のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  162. 前記ＺＢＴＢ３２阻害剤が、ＺＢＴＢ３２タンパク質のレベルを低下させる、請求項１３６若しくは１３８～１６１のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１６１のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  163. 前記ＺＢＴＢ３２阻害剤が、ＺＢＴＢ３２タンパク質の安定性を低下させる、請求項１３６若しくは１３８～１６２のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１６２のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  164. 前記ＺＢＴＢ３２阻害剤が、ＺＢＴＢ３２ ｍＲＮＡのレベルを低下させる、請求項１３６若しくは１３８～１６３のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１６３のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  165. 前記ＺＢＴＢ３２阻害剤が、ＺＢＴＢ３２ ｍＲＮＡの安定性を低下させる、請求項１３６若しくは１３８～１６４のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１６４のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  166. 前記ＺＢＴＢ３２阻害剤が、ＺＢＴＢ３２転写を低下させる、請求項１３６若しくは１３８～１６５のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１６５のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  167. 前記ＺＢＴＢ３２阻害剤が、ＺＢＴＢ３２翻訳を低下させる、請求項１３６若しくは１３８～１６６のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１６６のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  168. 前記ＺＢＴＢ３２阻害剤が、前記ＺＢＴＢ３２ゲノム遺伝子座を変化させる（例えば、破壊する）、請求項１３６若しくは１３８～１６７のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１６７のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  169. 前記変化が、欠失又は挿入、例えば、前記ＺＢＴＢ３２ゲノム遺伝子座のオープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）又はＣＬＬスーパーエンハンサーを破壊する欠失又は挿入を含む、請求項１３６若しくは１３８～１６８のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１６８のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  170. 前記変化が、エピゲノム修飾、例えば、前記ＺＢＴＢ３２の発現を低下させるエピゲノム修飾を含む、請求項１３６若しくは１３８～１６９のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１６９のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  171. 前記ＺＢＴＢ３２阻害剤が、参照細胞と比較して、ＺＢＴＢ３２の生物学的活性を低下させる、例えば、少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９８％、又は９９％低下させる、請求項１３６若しくは１３８～１７０のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１７０のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  172. ＺＢＴＢ３２阻害剤が、ＺＢＴＢ３２の転写抑制機能を低下させる、請求項１３６若しくは１３８～１７１のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１７２のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  173. 前記ＺＢＴＢ３２阻害剤が、ＺＢＴＢ３２と１つ以上の結合パートナーとの間の相互作用を低下させる、請求項１３６若しくは１３８～１７２のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１７２のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  174. 前記１つ以上の結合パートナーが、ファンコニ貧血相補群Ｃ（ＦＡＮＣＣ）、チオレドキシン相互作用タンパク質（ＴＸＮＩＰ）、ビタミンＤ３上方制御タンパク質１（ＶＤＵＰ１）、ジンクフィンガー及びＢＴＢドメイン含有タンパク質１６（Ｚｂｔｂ１６）、ジンクフィンガー肘関連プロリンドメインタンパク質２（Ｚｐｏ２）、ＧＡＴＡ結合タンパク質３（Ｇａｔａ３）、ＧＡＴＡ結合タンパク質２（Ｇａｔａ２）、又はＢ細胞リンパ腫６（Ｂｃｌ－６）を含む、請求項１３６若しくは１３８～１７３のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１７３のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  175. 阻害剤が、Ｔ細胞媒介性抗腫瘍応答を強化する、請求項１３６若しくは１３８～１７４のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１７４のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  176. 前記阻害剤が、増殖及び／又はサイトカイン産生を増加させる、請求項１３６若しくは１３８～１７５のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１７５のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  177. 前記阻害剤が、Ｔ細胞状態、例えば、機能不全性Ｔ細胞の状態を改変し、例えば、Ｔ細胞枯渇を低下させる、請求項１３６若しくは１３８～１７６のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１７６のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  178. 前記阻害剤が、枯渇に対する耐性を強化し、インビボでの長期的な免疫保護を強化する、請求項１３６若しくは１３８～１７７のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１７７のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  179. 前記阻害剤が、ＭＨＣＩＩ及び／又はＭＨＣＩＩトランス活性化因子ＣＩＩＴＡの発現を増加させる、請求項１３６若しくは１３８～１７８のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１７８のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  180. 前記阻害剤が、インビボでより高い細胞増殖速度をもたらす、請求項１３６若しくは１３８～１７９のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１７９のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  181. 前記阻害剤が、免疫記憶表現型、例えばＢ細胞記憶表現型を改善する、請求項１３６若しくは１３８～１８０のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１８０のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  182. 前記癌が、血液癌である、請求項１３６若しくは１３８～１８１のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１８１のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  183. 前記癌が、リンパ腫、骨髄腫、又は白血病である、請求項１３６若しくは１３８～１８２のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１８２のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  184. 前記癌が、Ｂ細胞悪性腫瘍、例えば、Ｂ細胞リンパ腫又は白血病である、請求項１３６若しくは１３８～１８３のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１８３のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  185. 前記癌が、リンパ腫、例えば、非ホジキンリンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、例えば、活性化Ｂ細胞（ＡＢＣ）ＤＬＢＣＬ又は胚中心Ｂ細胞（ＧＣＢ）ＤＬＢＣＬである、請求項１３６若しくは１３８～１８４のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１８４のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  186. 前記癌が、骨髄腫、例えば多発性骨髄腫（ＭＭ）である、請求項１３６若しくは１３８～１８４のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１８４のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  187. 前記癌が、白血病、例えば、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）又は慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）である、請求項１３６若しくは１３８～１８４のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１８４のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  188. 前記癌が、固形腫瘍である、請求項１３６若しくは１３８～１８１のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１８１のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  189. 前記固形腫瘍が、免疫細胞浸潤に関連する、請求項１８８に記載の方法、又は請求項１８８に記載の使用のための阻害剤。
  190. 前記癌が、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性リンパ系白血病（ＡＬＬ）、Ｂ細胞急性リンパ系白血病（Ｂ－ＡＬＬ）、Ｔ細胞急性リンパ系白血病（Ｔ－ＡＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、Ｂ細胞前リンパ球性白血病、芽球性形質細胞様樹状細胞の新生物、バーキットリンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫、ヘアリーセル白血病、小細胞型又は大細胞型濾胞性リンパ腫、悪性のリンパ増殖性状態、ＭＡＬＴリンパ腫、マントル細胞リンパ腫、辺縁帯リンパ腫、多発性骨髄腫、脊髄形成異常及び骨髄異形成症候群、非ホジキンのリンパ腫、ホジキンのリンパ腫、形質芽細胞リンパ腫、形質細胞様樹状細胞の新生物、ワルデンシュトレーム型マクログロブリン血症、又は前白血病である、請求項１３６若しくは１３８～１８１のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１８１のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  191. 前記癌が、結腸癌、直腸癌、腎細胞癌、肝臓癌、肺の非小細胞癌、小腸癌、食道癌、黒色腫、骨癌、膵臓癌、皮膚癌、頭頸部癌、皮膚又は眼内の悪性黒色腫、子宮癌、卵巣癌、直腸癌、肛門部癌、胃癌、精巣癌、子宮癌、卵管癌、子宮内膜癌、子宮頸癌、膣の癌、外陰癌、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫、内分泌系癌、甲状腺癌、副甲状腺癌、副腎癌、軟部組織肉腫、尿道癌、陰茎癌、小児固形腫瘍、膀胱癌、腎臓癌又は尿管癌、腎盂癌、中枢神経系（ＣＮＳ）新生物、原発性ＣＮＳリンパ腫、腫瘍血管新生、脊髄軸腫瘍、脳幹神経膠腫、下垂体腺腫、カポジ肉腫、類表皮癌、扁平上皮癌、Ｔ細胞リンパ腫、環境的に誘発された癌、又はその転移性病変である、請求項１３６若しくは１３８～１８１のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１８１のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  192. 前記癌が、例えば、本明細書に記載の方法によって決定される、より高いレベルのＺＢＴＢ３２を発現する、請求項１３６若しくは１３８～１９１のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１９１のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  193. 前記対象が、免疫応答の増加を必要としている、請求項１３６若しくは１３８～１９２のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１９２のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  194. 免疫応答の増加を必要としている前記対象を特定することを更に含む、請求項１３６若しくは１３８～１９３のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１９３のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  195. 前記細胞におけるＺＢＴＢ３２の前記発現及び／又は生物学的活性を決定することを更に含む、請求項１３６若しくは１３８～１９４のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１９４のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  196. ＣＡＲＴ療法応答不良に関連する特性を決定することを更に含む、請求項１３６若しくは１３８～１９５のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１９５のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  197. 前記第２の治療剤又はモダリティーが、免疫療法を含む、請求項１３６若しくは１３８～１９６のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１９６のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  198. 前記第２の治療剤又はモダリティーが、免疫チェックポイント阻害剤、例えば、本明細書に記載の免疫チェックポイント阻害剤を含む、請求項１３６若しくは１３８～１９７のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１９７のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  199. 前記第２の治療剤又はモダリティーが、ＰＤ－１阻害剤、ＴＩＭ－３阻害剤、ＬＡＧ－３阻害剤、ＣＴＬＡ－４阻害剤、ＴＩＧＩＴ阻害剤、ＧＩＴＲアゴニスト、ＰＤ－Ｌ１阻害剤、サイトカイン、キメラ抗原受容体、エストロゲン受容体アンタゴニスト、ＣＤＫ４／６阻害剤、ＣＸＣＲ２阻害剤、ＣＳＦ－１／１Ｒ結合剤、Ａ２Ａｒアンタゴニスト、ＩＤＯ阻害剤、ＳＴＩＮＧアゴニスト、ガレクチン阻害剤、ＭＥＫ阻害剤、ｃ－ＭＥＴ阻害剤、ＴＧＦ－ｂ阻害剤、ＩＬ－１ｂ阻害剤又はＭＤＭ２阻害剤を含む、請求項１３６若しくは１３８～１９８のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１９８のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  200. 前記第２の治療剤又はモダリティーが、細胞療法、例えば、Ｔ細胞療法、例えば、本明細書に記載のＣＡＲ発現細胞療法を含む、請求項１３６若しくは１３８～１９９のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～１９９のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  201. 前記第２の治療剤又はモダリティーが、標的療法を含む、請求項１３６若しくは１３８～２００のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～２００のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  202. 前記第２の治療剤又はモダリティーが、化学療法を含む、請求項１３６若しくは１３８～２０１のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～２０１のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  203. 前記第２の治療剤又はモダリティーが、放射線療法を含む、請求項１３６若しくは１３８～２０２のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～２０２のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  204. 前記第２の治療剤又はモダリティーが、手術を含む、請求項１３６若しくは１３８～２０３のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～２０３のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  205. 前記第２の治療剤又はモダリティーが、ホルモン療法を含む、請求項１３６若しくは１３８～２０４のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～２０４のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  206. 前記第２の治療剤又はモダリティーが、血管新生阻害剤を含む、請求項１３６若しくは１３８～２０５のいずれか一項に記載の方法、又は請求項１３７～２０５のいずれか一項に記載の使用のための阻害剤。
  207. 有効量のＺＢＴＢ３２阻害剤、例えば本明細書に記載のＺＢＴＢ３２阻害剤を対象に投与すること、
    それにより、モダリティーの前記治療剤の有効性を高めること
    を含む、治療剤又はモダリティーの有効性を高める方法。
  208. 対象における治療剤又はモダリティーの有効性を高める際に使用するためのＺＢＴＢ３２阻害剤、例えば、本明細書に記載のＺＢＴＢ３２阻害剤。
  209. 対象が、癌、例えば、本明細書に記載の癌を有する、請求項２０７に記載の方法、又は請求項２０８に記載の使用のための阻害剤。
  210. 前記治療剤又はモダリティーが、免疫療法又は細胞療法、例えば、本明細書に記載の免疫療法又は細胞療法を含む、請求項２０７若しくは２０９に記載の方法、又は請求項２０８若しくは２０９に記載の使用のための阻害剤。
  211. 有効量のＺＢＴＢ３２阻害剤、例えば本明細書に記載のＺＢＴＢ３２阻害剤を対象に投与すること、
    それにより、対象の免疫応答を増加させること
    を含む、対象における免疫応答を増加させる方法。
  212. 対象における免疫応答を増加させる際に使用するための、ＺＢＴＢ３２阻害剤、例えば、本明細書に記載のＺＢＴＢ３２阻害剤。
  213. 対象が、癌、例えば、本明細書に記載の癌を有する、請求項２１１に記載の方法、又は請求項２１２に記載の使用のための阻害剤。
  214. 対象が、第２の治療剤又はモダリティー、例えば、本明細書に記載の第２の治療剤又はモダリティーを受けたか、受けている、請求項２１１若しくは２１３に記載の方法、又は請求項２１２若しくは２１３に記載の使用のための阻害剤。
  215. 細胞（例えば、免疫細胞）をＺＢＴＢ３２阻害剤、例えば、本明細書に記載のＺＢＴＢ３２阻害剤と接触させること；及び
    任意選択により、前記細胞を第２の治療剤又はモダリティーと更に接触させること；
    それにより、前記細胞を処置すること
    を含む、ＺＢＴＢ３２の発現及び／又は生物学的活性を阻害する方法。
  216. 前記ＺＢＴＢ３２阻害剤が、インビトロ、エクスビボ、又はインビボで細胞と接触される、請求項２１３に記載の方法。
  217. 本明細書に記載されるような、ＺＢＴＢ３２遺伝子を標的とする遺伝子編集系。
  218. ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ遺伝子編集系、ジンクフィンガーヌクレアーゼ系、ＴＡＬＥＮ系、又はメガヌクレアーゼ系である、請求項２１７に記載の遺伝子編集系。
  219. ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９遺伝子編集系である、請求項２１７又は２１８に記載の遺伝子編集系。
  220. 前記ＺＢＴＢ３２遺伝子の配列に特異的な標的配列を含むｇＲＮＡ分子、及びＣａｓ９タンパク質；
    前記ＺＢＴＢ３２遺伝子の配列に特異的な標的配列を含むｇＲＮＡ分子、及びＣａｓ９タンパク質をコードする核酸；
    ＺＢＴＢ３２遺伝子の配列に特異的な標的配列を含むｇ前記ＲＮＡ分子をコードする核酸、及びＣａｓ９タンパク質；又は
    前記ＺＢＴＢ３２遺伝子の配列に特異的な標的配列を含むｇＲＮＡ分子をコードする核酸、及びＣａｓ９タンパク質をコードする核酸
    を含む、請求項２１７～２１９に記載の遺伝子編集系。
  221. テンプレートＤＮＡを更に含む、請求項２１７～２２０のいずれか一項に記載の遺伝子編集系。
  222. 前記テンプレートＤＮＡは、ＣＡＲ、例えば本明細書に記載のＣＡＲをコードする核酸配列を含む、請求項２２１に記載の遺伝子編集系。
JP2022575951A 2020-06-11 2021-06-11 Ｚｂｔｂ３２阻害剤及びその使用 Pending JP2023529211A (ja)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US202063037826P 2020-06-11 2020-06-11
US63/037,826 2020-06-11
PCT/US2021/037048 WO2021252920A1 (en) 2020-06-11 2021-06-11 Zbtb32 inhibitors and uses thereof

Publications (1)

Publication Number Publication Date
JP2023529211A true JP2023529211A (ja) 2023-07-07

Family

ID=77071723

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2022575951A Pending JP2023529211A (ja) 2020-06-11 2021-06-11 Ｚｂｔｂ３２阻害剤及びその使用

Country Status (9)

Country Link
US (1) US20230332104A1 (ja)
EP (1) EP4165169A1 (ja)
JP (1) JP2023529211A (ja)
KR (1) KR20230024967A (ja)
CN (1) CN116096862A (ja)
AU (1) AU2021288224A1 (ja)
CA (1) CA3185455A1 (ja)
IL (1) IL298473A (ja)
WO (1) WO2021252920A1 (ja)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BR112020025048A2 (pt) 2018-06-13 2021-04-06 Novartis Ag Receptores de antígeno quimérico de bcma e usos dos mesmos
WO2023150518A1 (en) * 2022-02-01 2023-08-10 Sana Biotechnology, Inc. Cd3-targeted lentiviral vectors and uses thereof

Family Cites Families (225)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2779780A (en) 1955-03-01 1957-01-29 Du Pont 1, 4-diamino-2, 3-dicyano-1, 4-bis (substituted mercapto) butadienes and their preparation
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US4851332A (en) 1985-04-01 1989-07-25 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Choriocarcinoma monoclonal antibodies and antibody panels
US5225539A (en) 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
GB8607679D0 (en) 1986-03-27 1986-04-30 Winter G P Recombinant dna product
US6548640B1 (en) 1986-03-27 2003-04-15 Btg International Limited Altered antibodies
US6352694B1 (en) 1994-06-03 2002-03-05 Genetics Institute, Inc. Methods for inducing a population of T cells to proliferate using agents which recognize TCR/CD3 and ligands which stimulate an accessory molecule on the surface of the T cells
US6534055B1 (en) 1988-11-23 2003-03-18 Genetics Institute, Inc. Methods for selectively stimulating proliferation of T cells
US5858358A (en) 1992-04-07 1999-01-12 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy Methods for selectively stimulating proliferation of T cells
US6905680B2 (en) 1988-11-23 2005-06-14 Genetics Institute, Inc. Methods of treating HIV infected subjects
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
US5703055A (en) 1989-03-21 1997-12-30 Wisconsin Alumni Research Foundation Generation of antibodies through lipid mediated DNA delivery
US5399346A (en) 1989-06-14 1995-03-21 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Gene therapy
US5585362A (en) 1989-08-22 1996-12-17 The Regents Of The University Of Michigan Adenovirus vectors for gene therapy
GB8928874D0 (en) 1989-12-21 1990-02-28 Celltech Ltd Humanised antibodies
EP0519596B1 (en) 1991-05-17 2005-02-23 Merck & Co. Inc. A method for reducing the immunogenicity of antibody variable domains
LU91067I2 (fr) 1991-06-14 2004-04-02 Genentech Inc Trastuzumab et ses variantes et dérivés immuno chimiques y compris les immotoxines
CA2078539C (en) 1991-09-18 2005-08-02 Kenya Shitara Process for producing humanized chimera antibody
ES2136092T3 (es) 1991-09-23 1999-11-16 Medical Res Council Procedimientos para la produccion de anticuerpos humanizados.
GB9125768D0 (en) 1991-12-04 1992-02-05 Hale Geoffrey Therapeutic method
JP4157160B2 (ja) 1991-12-13 2008-09-24 ゾーマ テクノロジー リミテッド 改変抗体可変領域の調製のための方法
GB9203459D0 (en) 1992-02-19 1992-04-08 Scotgen Ltd Antibodies with germ-line variable regions
US5646253A (en) 1994-03-08 1997-07-08 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Recombinant human anti-LK26 antibodies
ES2162823T5 (es) 1992-08-21 2010-08-09 Vrije Universiteit Brussel Inmunoglobulinas desprovistas de cadenas ligeras.
US5350674A (en) 1992-09-04 1994-09-27 Becton, Dickinson And Company Intrinsic factor - horse peroxidase conjugates and a method for increasing the stability thereof
US5639641A (en) 1992-09-09 1997-06-17 Immunogen Inc. Resurfacing of rodent antibodies
US5843674A (en) 1993-11-16 1998-12-01 Pola Chemical Industries Inc. Anti-human tyrosinase monoclonal antibody
US5635388A (en) 1994-04-04 1997-06-03 Genentech, Inc. Agonist antibodies against the flk2/flt3 receptor and uses thereof
WO1995029193A2 (en) 1994-04-22 1995-11-02 The Government Of The United States Of America Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Melanoma antigens
US7175843B2 (en) 1994-06-03 2007-02-13 Genetics Institute, Llc Methods for selectively stimulating proliferation of T cells
WO1996022384A1 (en) 1995-01-18 1996-07-25 Boehringer Mannheim Gmbh Anti-cd 30 antibodies preventing proteolytic cleavage and release of membrane-bound cd 30 antigen
US5731168A (en) 1995-03-01 1998-03-24 Genentech, Inc. Method for making heteromultimeric polypeptides
US6692964B1 (en) 1995-05-04 2004-02-17 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy Methods for transfecting T cells
US7067318B2 (en) 1995-06-07 2006-06-27 The Regents Of The University Of Michigan Methods for transfecting T cells
WO1997024373A1 (en) 1995-12-29 1997-07-10 Medvet Science Pty. Limited Monoclonal antibody antagonists to haemopoietic growth factors
EP0871492B1 (en) 1996-01-05 2003-11-26 THE GOVERNMENT OF THE UNITED STATES OF AMERICA, as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Mesothelium antigen and methods and kits for targeting it
DE19608769C1 (de) 1996-03-07 1997-04-10 Univ Eberhard Karls Antikörper BV10A4H2
JP2001510987A (ja) 1996-10-25 2001-08-07 アメリカ合衆国 哺乳動物のＣＤ９７αサブユニットを含む炎症および脈管形成を阻害するための方法および組成物
AU729035B2 (en) 1997-06-12 2001-01-25 Novartis Ag Artificial antibody polypeptides
ATE317437T1 (de) 1997-12-01 2006-02-15 Us Gov Health & Human Serv Antikörper, sowie fv moleküle, und immunkonjugate mit hoher bindungsaffinität für mesothelin und methoden für deren verwendung
US6803448B1 (en) 1998-07-22 2004-10-12 Vanderbilt University GBS toxin receptor
HUP0104693A3 (en) 1998-12-16 2003-12-29 Warner Lambert Co Treatment of arthritis with mek inhibitors
US6528481B1 (en) 1999-02-16 2003-03-04 The Burnam Institute NG2/HM proteoglycan-binding peptides that home to angiogenic vasculature and related methods
BRPI0013391B8 (pt) 1999-08-17 2021-05-25 Apotech R&D S A uso de polipeptídeos bcma na preparação de uma composição farmacêutica para tratar uma doença autoimune ou um distúrbio linfoproliferativo de célula b
ES2301491T3 (es) 1999-09-30 2008-07-01 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Anticuerpo humano de trasplante con region de determinacion de la complementariedad contra gangliosido gd3 y derivados del anticuerpo contra gangliosido gd3.
EP1235842A4 (en) 1999-10-15 2003-04-23 Univ Massachusetts GENESIS OF THE RNA INTERFERENCE PATH AS AID OF TARGETED GENTIAN INTERFERENCE
US6326193B1 (en) 1999-11-05 2001-12-04 Cambria Biosciences, Llc Insect control agent
ATE373078T1 (de) 2000-02-24 2007-09-15 Xcyte Therapies Inc Gleichzeitige stimulation und konzentration von zellen
US6867041B2 (en) 2000-02-24 2005-03-15 Xcyte Therapies, Inc. Simultaneous stimulation and concentration of cells
US7572631B2 (en) 2000-02-24 2009-08-11 Invitrogen Corporation Activation and expansion of T cells
US6797514B2 (en) 2000-02-24 2004-09-28 Xcyte Therapies, Inc. Simultaneous stimulation and concentration of cells
US20040002068A1 (en) 2000-03-01 2004-01-01 Corixa Corporation Compositions and methods for the detection, diagnosis and therapy of hematological malignancies
ATE510855T1 (de) 2000-03-06 2011-06-15 Univ Kentucky Res Found Verwendung eines antikörpers oder eines immunotoxins, der bzw. das selektiv an cd123 bindet zur beeinträchtigung hämatologischer krebs-vorläuferzellen
AU2001275474A1 (en) 2000-06-12 2001-12-24 Akkadix Corporation Materials and methods for the control of nematodes
AU2001273498B2 (en) 2000-07-19 2006-08-24 Warner-Lambert Company Oxygenated esters of 4-iodo phenylamino benzhydroxamic acids
US7090843B1 (en) 2000-11-28 2006-08-15 Seattle Genetics, Inc. Recombinant anti-CD30 antibodies and uses thereof
CA2438682A1 (en) 2001-02-20 2002-08-29 Zymogenetics, Inc. Antibodies that bind both bcma and taci
CN1294148C (zh) 2001-04-11 2007-01-10 中国科学院遗传与发育生物学研究所 环状单链三特异抗体
EP2383291B1 (en) 2001-08-23 2019-04-17 Rsr Limited Epitope regions of a thyrotropin (TSH) receptor, uses thereof and antibodies thereto
EP1470159B1 (en) 2001-12-04 2013-08-07 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Antibody to latent membrane proteins and uses thereof
US7745140B2 (en) 2002-01-03 2010-06-29 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Activation and expansion of T-cells using an engineered multivalent signaling platform as a research tool
EA008379B1 (ru) 2002-02-01 2007-04-27 Ариад Джин Терапьютикс, Инк. Фосфорсодержащие соединения и их применения
EP2308861B1 (en) 2002-03-08 2017-03-01 Eisai R&D Management Co., Ltd. Macrocyclic compounds useful as pharmaceuticals
TWI275390B (en) 2002-04-30 2007-03-11 Wyeth Corp Process for the preparation of 7-substituted-3- quinolinecarbonitriles
US7446190B2 (en) 2002-05-28 2008-11-04 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Nucleic acids encoding chimeric T cell receptors
GB0215823D0 (en) 2002-07-09 2002-08-14 Astrazeneca Ab Quinazoline derivatives
EP1578777B1 (en) 2002-07-15 2008-11-26 The Trustees of Princeton University Iap binding compounds
US8501415B2 (en) 2002-11-26 2013-08-06 B.R.A.H.M.S. Gmbh Identification of TSH receptor autoantibodies using affinity-purified antibodies
WO2004056875A1 (en) 2002-12-23 2004-07-08 Wyeth Antibodies against pd-1 and uses therefor
WO2004087758A2 (en) 2003-03-26 2004-10-14 Neopharm, Inc. Il 13 receptor alpha 2 antibody and methods of use
CA2530605A1 (en) 2003-06-27 2005-05-26 Diadexus, Inc. Pro104 antibody compositions and methods of use
AU2004255216B2 (en) 2003-07-01 2010-08-19 Immunomedics, Inc. Multivalent carriers of bi-specific antibodies
AU2004263514A1 (en) 2003-08-05 2005-02-17 Morphotek, Inc. A variant cell surface molecule associated with cancer
EP2272566A3 (en) 2003-08-18 2013-01-02 MedImmune, LLC Humanisation of antibodies
US20050042664A1 (en) 2003-08-22 2005-02-24 Medimmune, Inc. Humanization of antibodies
US7399865B2 (en) 2003-09-15 2008-07-15 Wyeth Protein tyrosine kinase enzyme inhibitors
WO2005035577A1 (ja) 2003-10-08 2005-04-21 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. ガングリオシドｇｄ３に特異的に結合する抗体組成物
US7435596B2 (en) 2004-11-04 2008-10-14 St. Jude Children's Research Hospital, Inc. Modified cell line and method for expansion of NK cell
JP2007523061A (ja) 2004-01-16 2007-08-16 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ ミシガン Ｓｍａｃペプチドミメティクスおよびその使用法
CA2553874A1 (en) 2004-01-16 2005-08-04 The Regents Of The University Of Michigan Conformationally constrained smac mimetics and the uses thereof
SI2511297T1 (sl) 2004-02-06 2015-07-31 Morphosys Ag Proti -CD38 humana protitelesa in njihova uporaba
AU2005228950B2 (en) 2004-03-23 2012-02-02 Genentech, Inc. Azabicyclo-octane inhibitors of IAP
KR20080083220A (ko) 2004-04-07 2008-09-16 노파르티스 아게 Ｉａｐ 억제제
AU2005250408B2 (en) 2004-05-27 2010-09-23 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Novel artificial antigen presenting cells and uses therefor
PT1778718E (pt) 2004-07-02 2014-12-03 Genentech Inc Inibidores de iap
WO2006010118A2 (en) 2004-07-09 2006-01-26 The Regents Of The University Of Michigan Conformationally constrained smac mimetics and the uses thereof
WO2006017295A2 (en) 2004-07-12 2006-02-16 Idun Pharmaceuticals, Inc. Tetrapeptide analogs
CA2574040C (en) 2004-07-15 2014-05-06 Tetralogic Pharmaceuticals Corporation Iap binding compounds
JP2008512352A (ja) 2004-07-17 2008-04-24 イムクローン システムズ インコーポレイティド 新規な四価の二重特異性抗体
DE602005022936D1 (de) 2004-12-20 2010-09-23 Genentech Inc Pyrrolidine als inhibitoren von iap
MY146381A (en) 2004-12-22 2012-08-15 Amgen Inc Compositions and methods relating relating to anti-igf-1 receptor antibodies
ES2429340T3 (es) 2005-03-10 2013-11-14 Morphotek, Inc. Anticuerpos anti-mesotelina
DK1866339T3 (da) 2005-03-25 2013-09-02 Gitr Inc GTR-bindende molekyler og anvendelser heraf
CA2607147C (en) 2005-05-09 2018-07-17 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Human monoclonal antibodies to programmed death 1 (pd-1) and methods for treating cancer using anti-pd-1 antibodies alone or in combination with other immunotherapeutics
EP1726650A1 (en) 2005-05-27 2006-11-29 Universitätsklinikum Freiburg Monoclonal antibodies and single chain antibody fragments against cell-surface prostate specific membrane antigen
MX2007016306A (es) 2005-06-15 2008-03-07 Schering Corp Formulaciones de anticuerpo anti-igf1r.
CA2618218C (en) 2005-07-21 2015-06-30 Ardea Biosciences, Inc. N-(arylamino)-sulfonamide inhibitors of mek
MY169746A (en) 2005-08-19 2019-05-14 Abbvie Inc Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof
EA017491B1 (ru) 2005-12-08 2012-12-28 Медарекс, Инк. Человеческие моноклональные антитела к фукозил-gm1 и способы применения антифукозил-gm1 антител
EP1806365A1 (en) 2006-01-05 2007-07-11 Boehringer Ingelheim International GmbH Antibody molecules specific for fibroblast activation protein and immunoconjugates containing them
EP1996716B1 (en) 2006-03-20 2011-05-11 The Regents of the University of California Engineered anti-prostate stem cell antigen (psca) antibodies for cancer targeting
US8603466B2 (en) 2006-03-29 2013-12-10 King's College London Agonist antibodies against TSHR
TWI395754B (zh) 2006-04-24 2013-05-11 Amgen Inc 人類化之ｃ-ｋｉｔ抗體
CA2977261A1 (en) 2006-10-04 2008-04-10 Kobenhavns Universitet Generation of a cancer-specific immune response toward muc1 and cancer specific muc1 antibodies
FR2906808B1 (fr) 2006-10-10 2012-10-05 Univ Nantes Utilisation d'anticorps monoclonaux specifiques de la forme o-acetylee du ganglioside gd2 dans le traitement de certains cancers
WO2008101234A2 (en) 2007-02-16 2008-08-21 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Anti ganglioside gd3 antibodies and uses thereof
US7635753B2 (en) 2007-02-19 2009-12-22 Wisconsin Alumni Research Foundation Prostate cancer and melanoma antigens
EP2514766A3 (en) 2007-03-29 2013-06-05 Technion Research & Development Foundation Ltd. Antibodies, methods and kits for diagnosing and treating melanoma
US8163279B2 (en) 2007-04-13 2012-04-24 Stemline Therapeutics, Inc. IL3Rα antibody conjugates and uses thereof
CA2683392A1 (en) 2007-04-30 2008-11-06 Genentech, Inc. Inhibitors of iap
JP2010190572A (ja) 2007-06-01 2010-09-02 Sapporo Medical Univ ＩＬ１３Ｒａ２に対する抗体およびこれを含む診断・治療薬
CN104945508B (zh) 2007-06-18 2019-02-22 默沙东有限责任公司 针对人程序性死亡受体pd-1的抗体
CA2694990A1 (en) 2007-07-31 2009-02-05 Merck Sharp & Dohme Corp. Igf-1r specific antibodies useful in the detection and diagnosis of cellular proliferative disorders
MX338504B (es) 2007-09-12 2016-04-20 Genentech Inc Combinaciones de compuestos inhibidores de fosfoinosituro 3-cinasa y agentes quimioterapeuticos, y metodos de uso.
PL2195017T3 (pl) 2007-10-01 2015-03-31 Bristol Myers Squibb Co Ludzkie antyciała, które wiążą mezotelinę i ich zastosowania
JP5348725B2 (ja) 2007-10-25 2013-11-20 ジェネンテック， インコーポレイテッド チエノピリミジン化合物の製造方法
SI2215121T1 (sl) 2007-11-26 2016-06-30 Bayer Intellectual Property Gmbh Protitelesa anti-mezotelin in njihova uporaba
CN104548091A (zh) 2008-02-11 2015-04-29 治疗科技公司 用于肿瘤治疗的单克隆抗体
US8168757B2 (en) 2008-03-12 2012-05-01 Merck Sharp & Dohme Corp. PD-1 binding proteins
AR071891A1 (es) 2008-05-30 2010-07-21 Imclone Llc Anticuerpos humanos anti-flt3 (receptor tirosina cinasa 3 tipo fms humano)
US8168784B2 (en) 2008-06-20 2012-05-01 Abbott Laboratories Processes to make apoptosis promoters
EP2350129B1 (en) 2008-08-25 2015-06-10 Amplimmune, Inc. Compositions of pd-1 antagonists and methods of use
CA2737758C (en) 2008-09-19 2017-10-31 Soldano Ferrone Monoclonal antibodies for cspg4 for the diagnosis and treatment of basal breast carcinoma
US20110239315A1 (en) 2009-01-12 2011-09-29 Ulla Bonas Modular dna-binding domains and methods of use
EP2206723A1 (en) 2009-01-12 2010-07-14 Bonas, Ulla Modular DNA-binding domains
PL2406284T3 (pl) 2009-03-10 2017-09-29 Biogen Ma Inc. Przeciwciała anty-bcma
HUE025966T2 (en) 2009-04-27 2016-05-30 Kyowa Hakko Kirin Co Ltd Anti-IL-3RA antibody for use in the treatment of blood cancer
CN102574924A (zh) 2009-09-03 2012-07-11 先灵公司 抗-gitr抗体
US8956828B2 (en) 2009-11-10 2015-02-17 Sangamo Biosciences, Inc. Targeted disruption of T cell receptor genes using engineered zinc finger protein nucleases
CN102753194B (zh) 2009-12-02 2015-07-08 伊麦吉纳博公司 靶向人前列腺特异性膜抗原的j591微抗体和双抗体
EA027502B1 (ru) 2009-12-23 2017-08-31 Зиниммуне Гмбх Антитела против flt3 и способы их применения
IL290617B2 (en) 2010-02-24 2023-11-01 Immunogen Inc Folate receptor 1 antibodies and immunoconjugates and uses thereof
US9242014B2 (en) 2010-06-15 2016-01-26 The Regents Of The University Of California Receptor tyrosine kinase-like orphan receptor 1 (ROR1) single chain Fv antibody fragment conjugates and methods of use thereof
ES2961381T3 (es) 2010-06-19 2024-03-11 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Anticuerpos anti-GD2
CA2993567C (en) 2010-07-21 2022-06-28 Sangamo Biosciences, Inc. Methods and compositions for modification of a t-cell receptor gene
WO2012033885A1 (en) 2010-09-08 2012-03-15 Baylor College Of Medicine Immunotherapy of cancer using genetically engineered gd2-specific t cells
WO2012066058A1 (en) 2010-11-16 2012-05-24 Boehringer Ingelheim International Gmbh Agents and methods for treating diseases that correlate with bcma expression
JP5947311B2 (ja) 2010-12-09 2016-07-06 ザ トラスティーズ オブ ザ ユニバーシティ オブ ペンシルバニア 癌を治療するためのキメラ抗原受容体改変ｔ細胞の使用
JOP20210044A1 (ar) 2010-12-30 2017-06-16 Takeda Pharmaceuticals Co الأجسام المضادة لـ cd38
SG193956A1 (en) 2011-04-01 2013-11-29 Sloan Kettering Inst Cancer T cell receptor-like antibodies specific for a wt1 peptide presented by hla-a2
PL2694549T3 (pl) 2011-04-08 2019-01-31 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Chimeryczne receptory antygenowe anty-wariant III receptora czynnika wzrostu naskórka i ich zastosowanie do leczenia raka
CA2833636A1 (en) 2011-04-20 2012-10-26 Amplimmune, Inc. Antibodies and other molecules that bind b7-h1 and pd-1
US20130101599A1 (en) 2011-04-21 2013-04-25 Boehringer Ingelheim International Gmbh Bcma-based stratification and therapy for multiple myeloma patients
AR086044A1 (es) 2011-05-12 2013-11-13 Imclone Llc Anticuerpos que se unen especificamente a un dominio extracelular de c-kit y usos de los mismos
DK3415531T3 (da) 2011-05-27 2023-09-18 Glaxo Group Ltd Bcma (cd269/tnfrsf17)-bindende proteiner
UA112434C2 (uk) 2011-05-27 2016-09-12 Ґлаксо Ґруп Лімітед Антигензв'язувальний білок, який специфічно зв'язується з всма
WO2013040371A2 (en) 2011-09-16 2013-03-21 Baylor College Of Medicine Targeting the tumor microenvironment using manipulated nkt cells
US10421960B2 (en) 2011-09-16 2019-09-24 The Trustees Of The University Of Pennsylvania RNA engineered T cells for the treatment of cancer
ITMO20110270A1 (it) 2011-10-25 2013-04-26 Sara Caldrer Una cellula effettrice modificata per il trattamento di neoplasie esprimenti il disialonganglioside gd2
WO2013063419A2 (en) 2011-10-28 2013-05-02 The Trustees Of The University Of Pennsylvania A fully human, anti-mesothelin specific chimeric immune receptor for redirected mesothelin-expressing cell targeting
TWI679212B (zh) 2011-11-15 2019-12-11 美商安進股份有限公司 針對ｂｃｍａ之e3以及ｃｄ３的結合分子
WO2013074916A1 (en) 2011-11-18 2013-05-23 Board Of Regents, The University Of Texas System Car+ t cells genetically modified to eliminate expression of t- cell receptor and/or hla
US9439768B2 (en) 2011-12-08 2016-09-13 Imds Llc Glenoid vault fixation
EP2814846B1 (en) 2012-02-13 2020-01-08 Seattle Children's Hospital d/b/a Seattle Children's Research Institute Bispecific chimeric antigen receptors and therapeutic uses thereof
MX2014010183A (es) 2012-02-22 2015-03-20 Univ Pennsylvania Composiciones y metodos para generar una poblacion persistente de celulas t utiles para el tratamiento de cancer.
EP3421489B1 (en) 2012-03-23 2021-05-05 The United States of America, as represented by The Secretary, Department of Health and Human Services Anti-mesothelin chimeric antigen receptors
WO2013151649A1 (en) 2012-04-04 2013-10-10 Sialix Inc Glycan-interacting compounds
CA2869562C (en) 2012-04-11 2023-09-12 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Chimeric antigen receptors targeting b-cell maturation antigen
SG10201608307WA (en) 2012-04-20 2016-11-29 Emergent Product Dev Seattle Cd3 binding polypeptides
AR090903A1 (es) 2012-05-01 2014-12-17 Genentech Inc Anticuerpos e inmunoconjugados anti-pmel17
US9745381B2 (en) 2012-05-18 2017-08-29 Scott & White Healthcare (Swh) Bispecific scFv immunofusion (BIf)
LT2800811T (lt) 2012-05-25 2017-09-11 The Regents Of The University Of California Būdai ir kompozicijos, skirti tikslinės dnr modifikavimui, panaudojant adresuotą rnr, ir transkripcijos moduliavimui, panaudojant adresuotą rnr
WO2013192294A1 (en) 2012-06-20 2013-12-27 Boston 3T Biotechnologies, Inc. Cellular therapies for treating and preventing cancers and other immune system disorders
RU2700765C2 (ru) 2012-08-20 2019-09-19 Фред Хатчинсон Кансэр Рисёч Сентер Способ и композиции для клеточной иммунотерапии
US10189906B2 (en) 2012-11-01 2019-01-29 Max-Delrück-Centrum Für Molekulare Medizin Antibody that binds CD269 (BCMA) suitable for use in the treatment of plasma cell diseases such as multiple myeloma and autoimmune diseases
US9243058B2 (en) 2012-12-07 2016-01-26 Amgen, Inc. BCMA antigen binding proteins
TW201425336A (zh) 2012-12-07 2014-07-01 Amgen Inc Ｂｃｍａ抗原結合蛋白質
KR20150105634A (ko) 2012-12-12 2015-09-17 더 브로드 인스티튜트, 인코퍼레이티드 서열 조작을 위한 개선된 시스템, 방법 및 효소 조성물의 유전자 조작 및 최적화
US8697359B1 (en) 2012-12-12 2014-04-15 The Broad Institute, Inc. CRISPR-Cas systems and methods for altering expression of gene products
EP3825401A1 (en) 2012-12-12 2021-05-26 The Broad Institute, Inc. Crispr-cas component systems, methods and compositions for sequence manipulation
WO2014110591A1 (en) 2013-01-14 2014-07-17 Fred Hutchinson Cancer Research Center Compositions and methods for delivery of immune cells to treat un-resectable or non-resected tumor cells and tumor relapse
EP2953972B1 (en) 2013-02-05 2020-07-08 EngMab Sàrl Method for the selection of antibodies against bcma
DK2958943T3 (da) 2013-02-20 2019-12-09 Univ Pennsylvania Behandling af cancer ved anvendelse af humaniseret anti-EGFRvIII kimær antigenreceptor
WO2014130635A1 (en) 2013-02-20 2014-08-28 Novartis Ag Effective targeting of primary human leukemia using anti-cd123 chimeric antigen receptor engineered t cells
WO2014138805A1 (en) 2013-03-14 2014-09-18 Csl Limited Anti il-3r alpha agents and uses thereof
WO2014138819A1 (en) 2013-03-14 2014-09-18 Csl Limited Agents that neutralize il-3 signaling and uses thereof
US9657105B2 (en) 2013-03-15 2017-05-23 City Of Hope CD123-specific chimeric antigen receptor redirected T cells and methods of their use
AR095374A1 (es) 2013-03-15 2015-10-14 Amgen Res (Munich) Gmbh Moléculas de unión para bcma y cd3
TWI654206B (zh) 2013-03-16 2019-03-21 諾華公司 使用人類化抗－ｃｄ１９嵌合抗原受體治療癌症
US9701758B2 (en) 2013-05-24 2017-07-11 Board Of Regents, The University Of Texas System Anti-CD19 scFv (FMC63) polypeptide
AR097306A1 (es) 2013-08-20 2016-03-02 Merck Sharp & Dohme Modulación de la inmunidad tumoral
TW201605896A (zh) 2013-08-30 2016-02-16 安美基股份有限公司 Gitr抗原結合蛋白
US20160237455A1 (en) 2013-09-27 2016-08-18 Editas Medicine, Inc. Crispr-related methods and compositions
WO2015090230A1 (en) 2013-12-19 2015-06-25 Novartis Ag Human mesothelin chimeric antigen receptors and uses thereof
JOP20200094A1 (ar) 2014-01-24 2017-06-16 Dana Farber Cancer Inst Inc جزيئات جسم مضاد لـ pd-1 واستخداماتها
EP3102609A4 (en) 2014-02-04 2017-08-23 The United States of America, as represented by The Secretary, Department of Health and Human Services Methods for producing autologous t cells useful to treat b cell malignancies and other cancers and compositions thereof
AU2015248956B2 (en) 2014-04-14 2020-06-25 Cellectis BCMA (CD269) specific chimeric antigen receptors for cancer immunotherapy
SG11201608754SA (en) 2014-04-25 2016-11-29 Bluebird Bio Inc Mnd promoter chimeric antigen receptors
CA2946552A1 (en) 2014-04-25 2015-10-29 Bluebird Bio, Inc. Improved methods for manufacturing adoptive cell therapies
SG11201608415QA (en) 2014-04-30 2016-11-29 Max Delbrück Ct Für Molekulare Medizin In Der Helmholtz Gemeinschaft Humanized antibodies against cd269 (bcma)
EP3143045A1 (en) 2014-05-12 2017-03-22 Numab AG Novel multispecific molecules and novel treatment methods based on such multispecific molecules
IL293212B2 (en) 2014-05-28 2023-12-01 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Anti-GITR antibodies and methods of using them
BR112016028644B1 (pt) 2014-06-06 2019-12-03 Bluebird Bio Inc Método in vitro ou ex vivo para fabricar células t, composição compreendendo um agente de crioproteção e uma população de células efetoras imunes e usos terapêuticos dadita composição
KR101923326B1 (ko) 2014-06-06 2018-11-29 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 글루코코르티코이드-유도 종양 괴사 인자 수용체 (gitr)에 대한 항체 및 그의 용도
CN107109419B (zh) 2014-07-21 2020-12-22 诺华股份有限公司 使用cd33嵌合抗原受体治疗癌症
AR101829A1 (es) 2014-07-21 2017-01-18 Novartis Ag Tratamiento de cáncer utilizando un receptor quimérico de antígeno cll-1
CN106687483B (zh) 2014-07-21 2020-12-04 诺华股份有限公司 使用人源化抗-bcma嵌合抗原受体治疗癌症
ES2878449T3 (es) 2014-07-24 2021-11-18 2Seventy Bio Inc Receptores antigénicos quiméricos de BCMA
EP2982692A1 (en) 2014-08-04 2016-02-10 EngMab AG Bispecific antibodies against CD3epsilon and BCMA
JP7084138B2 (ja) 2014-08-19 2022-06-14 ノバルティス アーゲー 癌処置に使用するための抗ｃｄ１２３キメラ抗原受容体（ｃａｒ）
AU2015327781A1 (en) 2014-10-03 2017-04-20 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor (GITR) antibodies and methods of use thereof
MA41044A (fr) 2014-10-08 2017-08-15 Novartis Ag Compositions et procédés d'utilisation pour une réponse immunitaire accrue et traitement contre le cancer
EP3023437A1 (en) 2014-11-20 2016-05-25 EngMab AG Bispecific antibodies against CD3epsilon and BCMA
EP3029068A1 (en) 2014-12-03 2016-06-08 EngMab AG Bispecific antibodies against CD3epsilon and BCMA for use in the treatment of diseases
NZ732568A (en) 2014-12-05 2023-03-31 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Antibodies targeting b-cell maturation antigen and methods of use
BR112017011909A2 (pt) 2014-12-05 2018-02-27 Eureka Therapeutics Inc ?antígeno de maturação de célula b alvo de receptores de antígeno quimérico e usos do mesmo?
AU2015360845B2 (en) 2014-12-12 2020-11-26 2Seventy Bio, Inc. BCMA chimeric antigen receptors
EP3240803B1 (en) 2014-12-29 2021-11-24 Novartis AG Methods of making chimeric antigen receptor-expressing cells
EP3256492A4 (en) 2015-02-09 2018-07-11 University of Florida Research Foundation, Inc. Bi-specific chimeric antigen receptor and uses thereof
JP2018510160A (ja) 2015-03-20 2018-04-12 ブルーバード バイオ， インコーポレイテッド ベクター製剤
BR112017021500A2 (pt) 2015-04-08 2018-09-25 Novartis Ag terapias com cd20, terapias com cd22 e terapias de combinação com uma célula que expressa (car) receptor de antígeno quimérico de cd19
CN107980046B (zh) 2015-04-13 2021-12-24 辉瑞公司 靶向b细胞成熟抗原的嵌合抗原受体
CN114773476A (zh) 2015-04-13 2022-07-22 辉瑞公司 治疗性抗体和它们的用途
CA2988115A1 (en) 2015-06-03 2016-12-08 Bristol-Myers Squibb Company Anti-gitr antibodies for cancer diagnostics
CN107849112B (zh) 2015-06-25 2022-04-01 美商生物细胞基因治疗有限公司 嵌合抗原受体(car)、组合物及其使用方法
MX2018000344A (es) 2015-07-10 2018-03-14 Merus Nv Anticuerpo que se une a grupo de diferenciacion 3 (cd3) humano.
EP3322735A4 (en) 2015-07-15 2019-03-13 Zymeworks Inc. BISPECIFIC ANTIGEN-BINDING CONSTRUCTS CONJUGATED TO A MEDICINAL PRODUCT
MA42895A (fr) 2015-07-15 2018-05-23 Juno Therapeutics Inc Cellules modifiées pour thérapie cellulaire adoptive
JP6913682B2 (ja) 2015-07-23 2021-08-04 インヒブリックス， インコーポレイテッド 多価および多重特異性ｇｉｔｒ結合融合タンパク質
CA2992797A1 (en) 2015-08-03 2017-02-09 Engmab Sarl Monoclonal antibodies against bcma
CN105384825B (zh) 2015-08-11 2018-06-01 南京传奇生物科技有限公司 一种基于单域抗体的双特异性嵌合抗原受体及其应用
CA2994346A1 (en) 2015-08-12 2017-02-16 Medimmune Limited Gitrl fusion proteins and uses thereof
EP3337824B1 (en) 2015-08-17 2020-06-03 Janssen Pharmaceutica NV Anti-bcma antibodies, bispecific antigen binding molecules that bind bcma and cd3, and uses thereof
US20190269727A1 (en) 2015-12-28 2019-09-05 Novartis Ag Methods of making chimeric antigen receptor-expressing cells
CA3084476A1 (en) * 2017-10-19 2019-04-25 Cellectis Targeted gene integration of nk inhibitors genes for improved immune cells therapy

Also Published As

Publication number Publication date
CA3185455A1 (en) 2021-12-16
WO2021252920A1 (en) 2021-12-16
EP4165169A1 (en) 2023-04-19
US20230332104A1 (en) 2023-10-19
AU2021288224A1 (en) 2023-01-05
IL298473A (en) 2023-01-01
CN116096862A (zh) 2023-05-09
KR20230024967A (ko) 2023-02-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20230312677A1 (en) Cd28 compositions and methods for chimeric antigen receptor therapy
AU2016323985B2 (en) CAR T cell therapies with enhanced efficacy
US20200283729A1 (en) Treatment of cancer using chimeric antigen receptor
AU2015292755B2 (en) Treatment of cancer using a CD33 chimeric antigen receptor
US20200048359A1 (en) Shp inhibitor compositions and uses for chimeric antigen receptor therapy
AU2020201939A1 (en) Treatment of cancer using a CLL-1 chimeric antigen receptor
US20180298068A1 (en) Treatment of cancer using chimeric antigen receptor and protein kinase a blocker
KR20210031923A (ko) 3-(5-아미노-1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온 유도체 및 ikaros 패밀리 아연 핑거 2(ikzf2) 의존성 질환의 치료에서 이들의 용도
KR20210129672A (ko) 치환된 3-(1-옥소이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온 유도체 및 이의 용도
US20180092968A1 (en) Compositions to disrupt protein kinase a anchoring and uses thereof
KR20210129671A (ko) 3-(1-옥소-5-(피페리딘-4-일)이소인돌린-2-일)피페리딘-2,6-디온 유도체 및 이의 용도
US20210179709A1 (en) Anti-car compositions and methods
TW202135858A (zh) 抗ＴＧＦβ抗體和檢查點抑制劑用於治療增殖性疾病之用途
US20230332104A1 (en) Zbtb32 inhibitors and uses thereof
US20200390811A1 (en) Compositions to disrupt protein kinase a anchoring and uses thereof
JP2024513123A (ja) 増殖性疾患を治療するための抗ＴＧＦβ抗体及び他の治療薬の使用
CN117098776A (zh) 抗TGFβ抗体和其他治疗剂用于治疗增殖性疾病的用途