JP2022524911A - 皮膚創傷治癒不全を治療するための選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター - Google Patents

皮膚創傷治癒不全を治療するための選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター Download PDF

Info

Publication number
JP2022524911A
JP2022524911A JP2021542103A JP2021542103A JP2022524911A JP 2022524911 A JP2022524911 A JP 2022524911A JP 2021542103 A JP2021542103 A JP 2021542103A JP 2021542103 A JP2021542103 A JP 2021542103A JP 2022524911 A JP2022524911 A JP 2022524911A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
segrm
pharmaceutically acceptable
glucocorticoid receptor
acceptable salt
alkyl
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
JP2021542103A
Other languages
English (en)
Other versions
JP7516394B2 (ja
Inventor
ヴォルフ－ヴィニスキー，バーバラ
シュトゥッツ，アントン
シェフマン，ニコール
デルフラー，ペトラ
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Akribes Biomedical GmbH
Original Assignee
Akribes Biomedical GmbH
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Akribes Biomedical GmbH filed Critical Akribes Biomedical GmbH
Publication of JP2022524911A publication Critical patent/JP2022524911A/ja
Application granted granted Critical
Publication of JP7516394B2 publication Critical patent/JP7516394B2/ja
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/536—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/415—1,2-Diazoles
    • A61K31/416—1,2-Diazoles condensed with carbocyclic ring systems, e.g. indazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4525—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with oxygen as a ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4704—2-Quinolinones, e.g. carbostyril
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4709—Non-condensed quinolines and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/472—Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine
    • A61K31/4725—Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5355—Non-condensed oxazines and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
    • G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
    • G01N33/502—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics for testing non-proliferative effects
    • G01N33/5023—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics for testing non-proliferative effects on expression patterns
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
    • G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
    • G01N33/502—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics for testing non-proliferative effects
    • G01N33/5041—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics for testing non-proliferative effects involving analysis of members of signalling pathways
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
    • G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
    • G01N33/5044—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics involving specific cell types
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6881—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids from skin
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/52—Assays involving cytokines
    • G01N2333/54—Interleukins [IL]
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/52—Assays involving cytokines
    • G01N2333/54—Interleukins [IL]
    • G01N2333/545—IL-1
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/78—Connective tissue peptides, e.g. collagen, elastin, laminin, fibronectin, vitronectin, cold insoluble globulin [CIG]
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/52—Predicting or monitoring the response to treatment, e.g. for selection of therapy based on assay results in personalised medicine; Prognosis

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

本発明は、対象における皮膚創傷治癒不全の治療に使用するための選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ Ｇｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｍｏｄｕｌａｔｏｒ （ＳＥＧＲＭ））またはその薬学的に許容可能な塩、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーターまたはその薬学的に許容可能な塩での治療に応答性である皮膚創傷治癒不全を患う対象を認めるインビトロでの方法、およびそれらに関連するキットおよびキットオブパーツに関する。

Description

本発明は、対象における皮膚創傷治癒不全の治療に使用するための選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ Ｇｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｍｏｄｕｌａｔｏｒ （ＳＥＧＲＭ））またはその薬学的に許容可能な塩、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーターまたはその薬学的に許容可能な塩での治療に応答性である皮膚創傷治癒不全を患う対象を認めるインビトロでの方法、およびそれらに関連するキットおよびキットオブパーツに関する。
慢性創傷は、米国一国においてでさえ６５０万人の患者が影響を受ける、世界的に重大な健康問題であり、高齢化する人口と代謝疾患の発症の増加により、増加が予想されている（非特許文献１、２）。
慢性創傷には他因子の病因を有しており、慢性創傷はａ) 基礎疾患、例えば糖尿病、動脈または静脈不全、b) 血圧、c) 年齢および栄養状態、およびd) 微生物環境、といった異なる変化する要因に依存する（非特許文献２）。
慢性創傷は、一般に、２か月以内に治癒しない創傷として理解される。これらは、世界的に重大な健康問題である。米国および欧州を含む先進国では、全人口の１から２％が、生涯において慢性創傷を経験すると推測されている（非特許文献３）。
主な慢性創傷症状は、静脈性潰瘍、褥瘡、糖尿病性足潰瘍である。静脈性潰瘍は、慢性の静脈不全による下腿の病変組織における障害であり、しばしば深部静脈血栓症を併発する。褥瘡は、体を動かすことが難しい患者における重度の組織低酸素症に起因する。糖尿病性足潰瘍は、糖尿病患者の最大２５％が生涯において影響を受け、しばしば下肢切断をすることになる。Ｇｅｒｍａｎ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｆｏｒ Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙにより推奨されるこれらすべての創傷の標準的治療（非特許文献４）は、創傷被覆、外科的および生物学的デブリードマン、感染制御および陰圧閉鎖療法を含む。Ｒｅｇｒａｎｅｘ（登録商標）（ＰＤＧＦ：血小板由来成長因子）は、長期治療のための唯一の登録された薬学的治療であったが、その治療効果は小さく、細胞ベース治療の成功も同様である。組み換えヒトＥＧＦ （ｒｈＥＧＦ）は、糖尿病性足潰瘍症状の潰瘍治療用としていくつかの国において、Ｈｅｂｅｒｐｒｏｔ－Ｐ（登録商標）として登録されている。さらに、組み換えヒト塩基性繊維芽細胞成長因子（ｒｈｂＦＧＦ）として知られるトラフェルミン（ブランド名：Ｆｉｂｌａｓｔ（登録商標））は、ヒト塩基性繊維芽細胞成長因子（ｂＦＧＦ）の組み換え体であり、日本において、皮膚潰瘍の治療用に局所用スプレーとして上市されている。
創傷の治療にかかわらず、すべての慢性創傷の３分の１において再発が問題となっている。
グルココルチコイドは、他の状況においては抗炎症性であるが、その副作用の一つが創傷治癒の実際に遅延させてしまうので、局所的グルココルチコイドは使用できない（非特許文献５）。したがって、先行技術では独断的意見として、局所的グルココルチコイドが創傷治癒を損なうと述べられている（非特許文献６、７）。さらに、非ステロイド系抗炎症剤、例えばイブプロフェン、は創傷痛の改善にのみ効果的である（非特許文献４）。
WO 2008/076048 A1 WO 2018/236749 A2 WO 2018/049255 A1 WO 2018/183947 A1 WO 2017/046096 WO 2009/023471 A2 WO 2008/027796 A2 WO 2008/033655 A2 WO 2008/005686 A2 WO 2008/021728 A2 WO 2008/021729 A2 WO 2008/154129 A1 WO 2009/042377 A1 WO 2010/123769 A1 WO 2012/170175 A1 WO 2013/126156 A WO 2003/086294 A2 WO 2004/026248 A2 WO 2004/066920 A2 WO 2004/075840 A2 WO 2004/093805 A2 WO 2009/108525 A2 WO 2009/111214 A1 WO 2010/138421 A1 WO 2010/141247 A1 WO 2011/031574 A1 WO 2011/053567 A1 WO 2005/082909 A1 WO 2006/019716 A1 WO 2009/103007 A2 WO 2000/66522 A1 RU24858 WO 2009/149139 A1 EP 2 300 472 WO 2009/065503 WO 2018/046678 WO 2018/046685 WO 2006/050998 US 8,282,909
Sen CK et al (2009) Wound Repair Regen 17: 763-771 Gould L et al (2015) Wound Repair Regen 23:1-13 Gottrup F (2004) Am J Surg 187:38S-43S Dissemond J et al (2014) JDDG 1610-0379/2014/1207:541-554 Hengge UR (2006) J Am Acad Dermatol 54:1-15 Wicke C et al (2000) Arch Surg 135:1265-1270 Anderson K et al (2014) J Am Coll Clin Wound Spec 4:84-91 Schacke et al. (2004; PNAS, 101: 227-232) Schacke et al. (2009; Br. J. Pharmacol., 158: 1088-1103) Alexander et al., 2008 Guide to receptors and channels Badarau E. et al. (European Journal of Medicinal Chemistry, 2019, 161: 354-363) Tijssen P., supra, or Diamandis, E.P. and Christopoulos, T.K. (eds.), Immunoassay, Academic Press, Boston (1996)
したがって、患者における皮膚創傷治癒不全の治療のための、信頼性が高く有効な治療が医学的に強く求められている。
本願では、実施例および対応する図にて示したように、慢性創傷患者からの創傷浸出液を用いたヒト関連ｅｘ ｖｉｖｏ（エクスビボ）創傷治癒モデルにおいて、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭｓ）は、繊維芽細胞増殖（２Ｄ）および繊維芽細胞由来マトリックス形成（３Ｄ）の顕著な増強効果を示し、I型コラーゲンおよびIII型コラーゲン発現を増加し、ＩＬ－１β分泌を抑制することを、驚くべきことに見出した。例えば、ＳＥＧＲＭの例としてマプラコラットが、ヒト創傷浸出液が８０より多く存在する条件下で、繊維芽細胞の増殖を１２０％より多く増加することを見出した。
さらに、慢性ヒト創傷からの創傷浸出液で処理した創傷において、６日から１２日の創傷スコアをマプラコラットが低下させることを見出し、および／または、創傷治癒遅延のブタモデルにおいて、ＴＬＲ ７／８アゴニストＲ８４８（レシキモド）を創傷治癒遅延のインデューサーとして見出した（図１３）。
加えて、不活性化アナログであるＢＩ－３０４７ではなく、ＢＩ－６５３０４８が、異なる攻撃的な創傷滲出液の存在下で線維芽細胞の増殖を用量依存的に増強し（図１）、これらの培養物においてＩＬ－１β分泌を抑制する（図２）ことを見出した。化学的に異なるＳＥＧＲＭである、マプラコラット、ＺＫ２１６３４８およびＨＹ１４２３４は、創傷滲出液存在下で、類似の増殖効果およびＩＬ－１β分泌またはｍＲＮＡ発現を有した（図５、８および９から１１）。質的には類似している一方、その効果の大きさはＳＥＧＲＭ化合物および各創傷滲出液によって異なった。したがって、好ましい態様として、異なる化合物に対する患者の浸出液のｉｎ ｖｉｔｒｏ（インビトロ）プレテストを伴う個別化医療アプローチは、ここで述べる発明の方法を用いることによって行われる。培地ではなく創傷滲出液を用いた繊維芽細胞増殖アッセイにおける、I型コラーゲンおよびIII型コラーゲンｍＲＮＡの発現は、ＢＩ－６５３０４８およびマプラコラットによって増加した（図３および６から８）。このような効果は、グルココルチコイド受容体アンタゴニスト、ミフェプリストンによって逆転された（図４）。
さらに、慢性の非治癒性創傷の患者からの創傷滲出液と、ＢＩ－６５３０４８（非活性アナログＢＩ－３０４７ではない）、マプラコラット、ＺＫ２１６３４８、ＡＺＤ７５９４およびＨＹ１４２３４を含む複数の構造的に異なるＳＥＧＲＭとともに培養した３Ｄ繊維芽細胞培養において、よい効果が観察された。繊維芽細胞由来マトリックス形成アッセイ（３Ｄ）同様に、繊維芽細胞増殖アッセイ（２Ｄ）は、創傷治癒のためのヒト関連ｅｘ ｖｉｖｏアッセイである。
図１Ａから図１Ｃは、患者１から３からの創傷浸出液（ＷＥ）の存在下または非存在下でのヒト皮膚繊維芽細胞増殖アッセイ（２Ｄ）における、非活性アナログＢＩ－３００４７と比較した、活性ＳＥＧＲＭ化合物ＢＩ－６５３０４８のプロファイルを示す。図１ＤはＷＥ非存在培地での繊維芽細胞増殖を示す。黒丸：段階的濃度のＢＩ－６５３０４８、白三角：段階的濃度のＢＩ－３００４７。活性化合物は創傷浸出液（ＷＥ）誘導繊維芽細胞増殖の阻害を戻したが、非活性アナログは効果がなかった。 非活性アナログＢＩ－３００４７と比較した、活性ＳＥＧＲＭ化合物ＢＩ－６５３０４８の、ＷＥ－１存在下での、繊維芽細胞増殖への効果（図２Ａ）、および上清中のＩＬ－１β分泌への効果（図２Ｂ）を示す。黒丸：段階的濃度のＢＩ－６５３０４８、白三角：段階的濃度のＢＩ－３００４７。活性化合物は創傷浸出液（ＷＥ）誘導繊維芽細胞増殖の阻害およびＩＬ－１β分泌阻害を用量依存的に戻した。非活性アナログは、増殖に対して効果がなく、ＩＬ－１β分泌への効果もより小さかった。 非活性アナログＢＩ－３００４７と比較した、活性ＳＥＧＲＭ化合物ＢＩ－６５３０４８の、ＷＥ－２存在下での、繊維芽細胞増殖アッセイにおけるＩ型コラーゲンおよびIII型コラーゲンｍＲＮＡの発現への効果を示す。黒塗カラム（図３Ａおよび３Ｂ）：ＷＥ-２存在下で７２時間インキュベーションを行った、白抜きカラム（図３Ｃおよび図３Ｄ）：ＷＥ-２非存在の培地で７２時間インキュベーションを行った。どちらの化合物も1μＭで使用された。活性化合物は、ＷＥ存在下において、Ｉ型コラーゲンおよびIII型コラーゲンのｍＲＮＡ発現を増加したが、培地中では増加しなかった。 ＷＥ－１を伴う繊維芽細胞由来マトリックス形成に関する、３Ｄ繊維芽細胞培養における、グルココルチコイド受容体アンタゴニスト、ミフェプリストン（1μＭ濃度）存在下および非存在下の両方における、段階的濃度のＳＥＧＲＭ ＢＩ－６５３０４８の効果を示す。ＢＩ－６５３０４８のマトリックス促進効果は、ミフェプリストンの追加によって止められ、これは、このような効果が、グルココルチコイド受容体により仲介されることを示す。 ＳＥＧＲＭ化合物マプラコラットおよびＢＩ－５３０４８の、ＷＥ－４存在下での繊維芽細胞増殖への効果を示す。黒丸：段階的濃度のＢＩ－５３０４８、黒四角：段階的濃度のマプラコラット。異なる濃度でではあるが、どちらの化合物も、創傷浸出液（WE）誘導繊維芽細胞増殖の阻害を用量依存的に戻した。 繊維芽細胞増殖アッセイにおけるＷＥ－１存在下での、段階的濃度のマプラコラットのI型コラーゲンｍＲＮＡへの効果を示す。黒塗りカラム（図６Ａ）：ＷＥ－１存在下で行われた７２時間インキュベーション、白抜きカラム（図６Ｂ）：ＷＥ－１非存在下で行われた７２時間インキュベーション。マプラコラットは、ＷＥ存在下でＩ型コラーゲンｍＲＮＡ発現を用量依存的に増加したが、培地中では増加しなかった。 繊維芽細胞増殖アッセイにおけるＷＥ－１存在下での、段階的濃度のマプラコラットのIII型コラーゲンｍＲＮＡへの効果を示す。横線カラム（図７Ａ）：ＷＥ－１存在下で行われた７２時間インキュベーション、白抜きカラム（図７Ｂ）：ＷＥ－１非存在下で行われた７２時間インキュベーション。３つすべての濃度でのマプラコラットは、ＷＥ存在下でIII型コラーゲンｍＲＮＡ発現を増加したが、培地中では増加しなかった。 繊維芽細胞増殖アッセイにおける、ＷＥ－１存在下での、段階的濃度のマプラコラットのＩＬ－１β ｍＲＮＡ発現への効果を示す。斜線カラム（図８Ａ）：ＷＥ－１存在下で行われた７２時間インキュベーション、白抜きカラム（図８Ｂ）：ＷＥ－１非存在下で行われた７２時間インキュベーション。マプラコラットは、ＷＥ存在下でＺＫ２１６３４８ ｍＲＮＡ発現を用量依存的に阻害した。培地中ではＩＬ－１β誘導は見られなかった。 ＷＥ－１存在下でのＳＥＧＲＭ化合物、ＺＫ２１６３４８およびＨＹ１４２３４の、繊維芽細胞増殖への効果（図９Ａ）および上清中のＩＬ－１β分泌への効果（図９Ｂ）を示す。黒丸：段階的濃度のＨＹ１４２３４、黒三角：段階的濃度のＺＫ２１６３４８。すべてのテストした化合物は、創傷浸出液（ＷＥ）誘導繊維芽細胞増殖阻害を濃度依存的に部分的に戻し、これら化合物は、同一濃度においてＩＬ－１β分泌を阻害した。ＺＫ２１６３４８の有効性はＨＹ１４２３４のように高くはなかった。 ＳＥＧＲＭ化合物、ＺＫ２１６３４８およびＨＹ１４２３４の、ＷＥ－２存在下での繊維芽細胞増殖への効果（図１０Ａ）および上清中のＩＬ－１β分泌への効果（図１０Ｂ）を示す。黒丸：段階的濃度のＨＹ１４２３４、黒三角：段階的濃度のＺＫ２１６３４８。すべてのテストした化合物は、創傷浸出液（ＷＥ）誘導繊維芽細胞増殖阻害を濃度依存的に戻したが、ＷＥ－２においては、ＩＬ－１β分泌阻害は無視できる程度であった。 ＳＥＧＲＭ化合物、ＺＫ２１６３４８およびＨＹ１４２３４の、ＷＥ－１存在下での繊維芽細胞増殖への効果（図１１Ａ）および上清中のＩＬ－１β分泌への効果（図１１Ｂ）を示す。黒丸：段階的濃度のＨＹ１４２３４、黒三角：段階的濃度のＺＫ２１６３４８。すべてのテストした化合物は、創傷浸出液（ＷＥ）誘導繊維芽細胞増殖阻害を濃度依存的に戻し、同一濃度においてＩＬ－１β分泌を阻害した。ＺＫ２１６３４８の有効性はＨＹ１４２３４のように高くはなかった。 患者番号９２からのＷＥとともに培養した３Ｄ繊維芽細胞培養における複数のＳＥＧＲＭの効果を示す。３Ｄ培養において、ＡＺＤ７５９４がテストされたＳＥＧＲＭの内最も活性が高く、マプラコラットおよびＢＩ６５３０４８が続いた。これは、グルココルチコイド受容体活性（ＥＣ50値、それぞれ、０．９ｎＭ, １．９ｎＭ および ５５ｎＭ）の有効性に一致する。不活性化合物ＢＩ３０４７はマトリックス形成を誘導しなかった。黒菱型：ＡＺＤ７５９４、黒丸：マプラコラット、黒四角：ＨＹ１４２３４、黒三角：ＢＩ６５３０４８、白抜き三角：ＢＩ３０４７、ばつ（×）印：ＺＫ２１６３４８。 創傷治癒遅延のブタモデルにおけるマプラコラット（ＭＡＰＲＡ）の効果を示す。炎症誘導物質としてＴＬＲ７／８アゴニストＲ８４８の存在下（図１３ＡからＣ）またはコントロールとしてヒト血清のみの存在下（図１３Ｄ）で、ヒト慢性創傷浸出液ＷＥ－０１およびＷＥ－０２または健常ヒト血清を用いて、ブタの背中に５日間創傷を誘導した。化合物治療を６日目に開始し、１０日まで続けた。総創傷スコア（創傷の外観、大きさ、内容、膿、痂皮、紅斑、紅斑の広さ、腫れおよび壊死）を毎日、１２日まで測定した。 創傷治癒遅延の誘導物質としてＷＥ－０１（図１３Ａ）、ＷＥ－０２（図１３Ｂ）およびＲ８４８（図１３Ｃ）の存在下で、マプラコラット（ＭＡＰＲＡ）は、１０ｍＭおよび１ｍＭで、６から１２日での創傷スコアを減少した。マプラコラットは、ヒト血清が存在するコントロール創傷（図１３Ｄ）の治癒に対してネガティブな効果を有しなかった。 一方、両方のブタにおいてマプラコラットの概括的効果は似ており、創傷スコア減少の度合いは、個々のブタ、および使用した刺激（ＷＥおよび／またはＲ８４８）に依存して異なった。番号２のブタは番号１のブタより良く応答し、マプラコラットの改善効果はＷＥ－０１よりＷＥ－０２への方がよかった。好ましい態様では、上述したような特定の薬剤に対する患者の浸出液のプレテストを含む、本明細書で述べられる方法を実施することにより、個々の患者への個別化医療アプローチが実施される。 炎症誘導物質としてＴＬＲ７／８アゴニストＲ８４８の存在下で、ＷＥ－０２を用いて、ブタの背中に５日間創傷を誘導した。化合物治療を６日目に開始し、１０日まで続けた。総創傷スコア（創傷の外観、大きさ、内容、膿、痂皮、紅斑、紅斑の広さ、腫れおよび壊死）を毎日、１２日まで測定した。 創傷治癒遅延の誘導物質としてＷＥ－０２の存在下で、マプラコラット（ＭＡＰＲＡ）は、１０ｍＭおよび１ｍＭで、６から１２日での創傷スコアを減少した。 一方、両方のブタにおいてマプラコラットの概括的効果は似ており、創傷スコア減少の度合いは、個々のブタ、および使用した刺激（ＷＥおよび／またはＲ８４８）に依存して異なった。番号２のブタは番号１のブタより良く応答し、マプラコラットの改善効果はＷＥ－０１よりＷＥ－０２への方がよかった。 炎症誘導物質としてＴＬＲ７／８アゴニストＲ８４８の存在下で、健常ヒト血清を用いて、ブタの背中に５日間創傷を誘導した。化合物治療を６日目に開始し、１０日まで続けた。総創傷スコア（創傷の外観、大きさ、内容、膿、痂皮、紅斑、紅斑の広さ、腫れおよび壊死）を毎日、１２日まで測定した。 マプラコラット（ＭＡＰＲＡ）は、１０ｍＭおよび１ｍＭで、６から１２日での創傷スコアを減少した。 コントロールとしてヒト血清のみの存在下で、ヒト慢性創傷浸出液ＷＥ－０１およびＷＥ－０２または健常ヒト血清を用いて、ブタの背中に５日間創傷を誘導した。化合物治療を６日目に開始し、１０日まで続けた。総創傷スコア（創傷の外観、大きさ、内容、膿、痂皮、紅斑、紅斑の広さ、腫れおよび壊死）を毎日、１２日まで測定した。 マプラコラット（ＭＡＰＲＡ）は、ヒト血清が存在するコントロール創傷の治癒に対してネガティブな効果を有しなかった。 活性の測定として、グルココルチコイド受容体の繊維芽細胞の細胞質（Ｃ）から核（Ｎ）への移行を示す。細胞を段階的濃度の化合物とインキュベートし、細胞内グルココルチコイド受容体の局在を、受容体に対する抗体を用いて、間接的免疫蛍光法によって測定した。 マプラコラットおよび活性ＢＩ６５３０４８の両方が、低い濃度（１から１０ｎＭ）で核内移行を示し、一方ＢＩ６５３０４８の不活性立体異性体ＢＩ３０４７では１００ｎＭまで不活性であった。ポジティブコントロールであるクロベタゾールでも同様に核内染色が見られた。 表は、ヒト患者の慢性、非治癒皮膚創傷からの多数の創傷浸出液の存在下における、繊維芽細胞増殖への１μＭマプラコラットの効果を示す。それぞれのＷＥの存在下における増殖のレベルを１００％に設定し、マプラコラットの効果の計算のための基とした。１２０％より高い（ＷＥコントロールの平均＋２ ＳＤ）すべての値を、成長が促進しているとして考える。本発明の一つの好ましい態様では、患者は、上述したように個別化された方法の治療に効果的に応答すると最も思われる患者として、本発明の方法を用いてあらかじめ選別される。 活性ＳＥＧＲＭマプラコラット（黒丸）、ＨＹ１４２３４（黒三角）およびＢＩ６５３０４８（黒四角）、不活性化合物ＢＩ３０４７（白抜き四角）、および比較としてグルココルチコイド デキサメタゾン（黒菱型）に応じた、Ｕ９３７細胞中のＬＰＳ誘導ＩＬ－８分泌（Ａ）およびヒト単球中の自発的ＩＬ－８分泌（Ｂ）の阻害を示す。活性ＳＥＧＲＭは、Ｕ９３７細胞中のＬＰＳ誘導ＩＬ－８分泌および初代ヒト単球中の自発的ＩＬ－８分泌の両方をそれぞれ阻害したが、不活性立体異性体は高い濃度でＩＬ－８分泌を誘導さえした。比較のコルチコイド、デキサメタゾンは、ＳＥＧＲＭと類似した様式でＩＬ－８を阻害した。したがって、これらの化合物の抗炎症特性を確認した。
したがって、一態様では、本発明は、対象における皮膚創傷治癒不全の治療に使用に使用するための、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）、またはその薬学的許容可能な塩、に関する。
「ＧＲ」、「ＧＣ」または「ＧＣＲ」としても示される、ヒトグルココルチコイド受容体は、ＮＲ３Ｃ１（核内受容体サブファミリー３、グループＣ、メンバー１）としても知られ、コルチゾールおよび他のグルココルチコイドに結合する受容体である。好ましい態様において、グルココルチコイド受容体はヒトグルココルチコイド受容体である。
ＧＲは体のほぼすべての細胞で発現しており、発生、代謝および免疫応答を制御する遺伝子を調節する。受容体遺伝子はいくつかの形で発現するので、体の異なる部分における多くの異なる（多面発現）効果を有する。
ＧＲがグルココルチコイドに結合するとき、その働きの主要なメカニズムは遺伝子転写の制御である。非結合受容体は細胞内のサイトゾルに存在する。受容体がグルココルチコイドに結合した後、レセプター－グルココルチコイド複合体は異なる経路を取ることができる。活性化したＧＲ複合体は核内の抗炎症タンパク質をアップレギュレートし、または、サイトゾルにおける炎症促進性の発現を抑制する（他の転写因子のサイトゾルから核内への移行を阻害することにより）。あるいは、他の転写因子が結合する同じ部位において受容体のＤＮＡへの結合により抑制が達成され、したがって、他の転写因子の効果を止める。
人において、ＧＲタンパク質は、５番染色体（５ｑ３１）に位置するＮＲ３Ｃ１遺伝子によってコードされる。様々な代替えのスプライシングされたアイソフォームが存在する。
「選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター」または「ＳＥＧＲＭ」はよく知られており、確立された化合物クラスである。選択的グルココルチコイド受容体モジュレーターは好ましくは、非ステロイド系選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）である。古い先行技術文献では、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーターはまた、「選択的グルココルチコイド受容体アゴニスト」または「ＳＥＧＲＡ」として、または「解離性グルココルチコイド受容体アゴニスト」または「ＤＩＧＲＡ」として示される。さらに、他の好ましい態様では、ＳＥＧＲＭはまたいくつかの先行文献において「ＳＧＲＭ」「ＧＲアゴニスト」または「ＳＥＤＩＧＲＡＭ」として示される。よって、好ましい態様では、「選択的グルココルチコイド受容体活性化剤」または「ＳＥＧＲＡ」はよく知られており、確立され化合物クラスである。選択的グルココルチコイド受容体活性化剤は、好ましくはステロイド系選択的グルココルチコイド受容体活性化剤（ＳＥＧＲＡ）である。他の好ましい態様では、先行技術におけるＳＥＧＲＭまたはＳＥＧＲＡを「選択的グルココルチコイド受容体活性化剤およびモジュレーター」として参照する。よって、好ましい態様において、用語「ＳＥＧＲＭ」および「ＳＥＧＲＡ」は同類語である。好ましくは、類似した意味は用語「ＳＥＧＲＭ」によっていくつかの先行技術において反映される。
グルココルチコイドは抗炎症性の特徴を示すことが知られている。しかしながら、上述したように、グルココルチコイドは、例えば、とりわけ皮膚萎縮など、重篤な副作用も示す。局所的グルココルチコイドの副作用の一つは、実際に創傷治癒を遅延させることであるので、上述したように、局所的グルココルチコイドは、例えば糖尿病性腫瘍や創傷治癒遅延を伴う皮膚創傷の他の一般的タイプに使用できない。
ＳＥＧＲＭは、グルココルチコイド受容体の作用機序のサブセットのみを誘発することにより、その選択性を達成する。特に、ＳＥＧＲＭはグルココルチコイド受容体（ＧＣ）に特異的に結合するが、ＧＣの作用機序のサブセットのみ誘発する。
非選択的グルココルチコイドおよびＳＥＧＲＭの両方は、グルココルチコイド受容体（ＧＲ）に結合し、グルココルチコイド受容体を活性化することによりその効果を示す。「トランスアクチベーション」および「トランスリプレッション」として一般的に示される少なくとも二つのシグナル伝達経路を通してＧＲを活性化するグルココルチコイドとは対照的に、ＳＥＧＲＭは、二つのおもな可能経路の一つを操作して、または主に操作して、好ましくはトランスリプレッションによって、ＧＲを活性化する。
グルココルチコイドが存在しない条件において、ＧＲはヒートショックプロテイン（ＨＳＰ）およびイムノフィリンと複合した不活性化状態でサイトゾルに存在する。ＧＲへのグルココルチコイドの結合が、ＧＲのコンフォメーション変化を引き起こすことにより、受容体を活性化し、したがってＨＳＰ結合の解離が起こる。活性化ＧＲは遺伝子発現を「トランスアクチベーション」および「トランスリプレッション」の二つの経路のうち一つを介して制御する。
トランスアクチベーション：活性化ＧＲがダイマー化し、核内に移動し、グルココルチコイド応答配列（ＧＲＥ）と呼ばれるＤＮＡの特異的配列に結合する、直接経路はトランスアクチベーションを示す。ＧＲ/ＤＮＡ複合体は、下流のＤＮＡをｍＲＮＡに転写し最終的にタンパク質に翻訳する、タンパク質をリクルートする。グルココルチコイド応答遺伝子の例には、チロシンアミノトランスフェラーゼ（ＴＡＴ）、アネキシンＡ１、Ｔ２２Ｄ３、アンジオテンシン変換酵素、中性エンドペプチダーゼ、二重特異性ホスファターゼ１、インターフェロン調節因子１、および他の抗炎症タンパク質が含まれる。
トランスリプレッション：第２、間接経路はトランスリプレッションと呼ばれ、この経路では、活性化モノマーＧＲがＮＦ－κＢおよびＡＰ－１のような他の転写因子に結合し、これらがこれらの標的遺伝子の発現をアップレギュレートすることを防ぐ。これらの標的遺伝子は、シクロオキシゲナーゼ、ＮＯシンターゼ、ホスホリパーゼＡ２、腫瘍壊死因子、トランスフォーミング増殖因子β、ＩＣＡＭ－１および複数の他の炎症促進タンパク質をコードする。
したがって、グルココルチコイドの抗炎症効果は、トランスアクチベーションおよびトランスリプレッションの両方に起因する。
よって、ＳＥＧＲＭは、トランスアクチベーションより、より強くトランスリプレッションする化合物である。
トランスリプレッションを測定するアッセイは、先行技術にてよく知られており、例えば非特許文献８にて開示されている、ＰＭＢＣ細胞からのＬＰＳ誘導サイトカインＩＬ－１２またはＴＮＦ－αの分泌、または、非特許文献９に詳細が開示されている、コラゲナーゼプロモーター活性の阻害、刺激されたヒト初代細胞におけるＩＬ－１２またはＩＦＮγのようなサイトカイン分泌の阻害、または混合リンパ球反応におけるリンパ球増殖の阻害、の測定が含まれる。
トランスアクチベーションを測定するアッセイは、先行技術にてよく知られており、例えば非特許文献８にて開示されている、肝細胞におけるチロシンアミノトランスフェラーゼ活性の誘導、または、非特許文献９に開示されているＭＭＴＶプロモーター活性の誘導、または、ＴＡＴ活性の誘導、の測定が含まれる。
好ましくは、トランスアクチベーションおよびトランスリプレッションを測定するアッセイは、非特許文献９の記載に従って行われてよい。
好ましくは、コラゲナーゼプロモーター活性の阻害は非特許文献９の記載に従って行われてよい：コラゲナーゼプロモーターをつなげたルシフェラーゼレポーター遺伝子を安定的にトランスフェクトしたＨｅＬａ細胞を、３％活性炭処理済みウシ胎児血清（ＦＣＳ）、５０ ｕｎｉｔｓ／ｍＬ ペニシリンおよび５０ ｍｇ／ｍＬ ストレプトマイシン、4 ｍｍｏｌ／Ｌ Ｌ－グルタミン、および３００ μｇ／ｍＬ ゲネチシンを補填したＤｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｅａｇｌｅ’ｓ ｍｅｄｉｕｍで２４時間培養する。細胞をその後、９６ウェルディッシュに１×１０４細胞/ウェルで播く。２４時間後、細胞を、増加する濃度（１ ｐｍｏｌ／Ｌから１ｍｍｏｌ／Ｌ）のリファレンスまたはテスト化合物の存在下、または非存在下で、炎症刺激[１０ ｎｇ／ｍＬ １２－ｏ－ｔｅｔｒａｄｅｃａｎｏｙｌｐｈｏｒｂｏｌ １３－ａｃｅｔａｔｅ（ＴＰＡ）] とともにインキュベートする。ネガティブコントロール（刺激されていない細胞）細胞を、０．１％ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）とインキュベートし、ポジティブコントロール細胞（刺激された細胞）は１０ ｍｇ／ｍＬ ＴＰＡを加えた０．１％ ＤＭＳＯでインキュベートする。１８時間後、ルシフェラーゼアッセイを行う。
好ましくは、刺激されたヒト初代細胞におけるＩＬ－１２またはＩＦＮγのようなサイトカイン分泌の阻害は、非特許文献９の記載に従って行われてよい：モノサイトでのＩＬ－１２ｐ４０の分泌への化合物の効果を、健常ドナーからの末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を１０ ｎｇ／ｍＬ リポポリサッカライド（大腸菌血清型０１２７：Ｂ８；Ｓｉｇｍａ）で刺激した後測定する。ＩＦＮγ分泌の効果は、１０μｇ／ｍＬ分裂促進レクチン、フィトヘマグルチニンでＰＢＭＣを刺激した後測定する。２４時間インキュベーション（３７℃, ５％ ＣＯ２）後、処理した細胞の上清中のサイトカイン濃度を特異的ＥＬＩＳＡキット、ＩＦＮ－γ ａｎｄ ＩＬ－１２ｐ４０ ＥＬＩＳＡ（Ｒ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓ）を用いて測定する。
好ましくは、ＭＭＴＶプロモーター活性の誘導は非特許文献９の記載に従って行われてよい：ＭＭＴＶプロモーターをルシフェラーゼレポーター遺伝子につなげ、ＨｅＬａ細胞にこのコンストラクトを安定的にトランスフェクトする。細胞を、５０ ｕｎｉｔｓペニシリンおよび３００μｇ／ｍＬ ゲネチシンを補填したＤｕｌｂｅｃｃｏ’ｓ ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｅａｇｌｅ’ｓ ｍｅｄｉｕｍで培養する。ＧＲリガンドのトランスアクチベーション活性を調べるため、細胞を３％活性炭処理済みウシ胎児血清（ＦＣＳ）で補填した培地で飼う。細胞をそして、９６ウェルディッシュに１×１０４細胞／ウェルで播く。２４時間後、増加する濃度のリファレンス（デキサメタゾン）またはテスト化合物とともにインキュベートする。ネガティブコントロール（刺激されていない細胞）として、細胞を０．１％ＤＭＳＯで処理する。細胞を１８時間化合物とインキュベートし、その後ＧＲ活性の測定としてルシフェラーゼ活性を測定する。
好ましくは、ＴＡＴ活性の誘導は非特許文献９の記載に従って行われてよい：テスト化合物によるＴＡＴの誘導は、ヒト肝細胞癌細胞株、ＨｅｐＧ２を用いてｉｎ ｖｉｔｒｏで測定する。ＨｅｐＧ２細胞を２ｍｍｏｌ／Ｌグルタマックス、１０％熱処理ずみＦＣＳおよび１％非必須アミノ酸を含む最小必須培地にて培養する。テスト化合物によるＴＡＴの誘導を調べるために、細胞を９６ウェルディッシュに１×１０５細胞／ウェルで播く。２４時間後細胞を溶解し、ＴＡＴ活性をｐ－ヒドロキシフェニルピルビン酸の変換に際する３４０ｎｍでの芳香族ｐ－ヒドロキシベンズアルデヒドの吸収を測定する。
したがって、本発明のさらに好ましい態様では、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）、またはその薬学的に許容可能な塩は、非ステロイド系選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）である。選択的グルココルチコイド受容体モジュレーターはグルココルチコイド受容体（ＧＣ）に結合する。より好ましい実施形態では、ＳＥＧＲＭは作用機序のサブセットのみを誘発することにより、１００ｎＭ，７０ｎＭ，６０ｎＭ，５０ｎＭ，４０ｎＭ，３０ｎＭ，２０ｎＭまたは１０ｎＭ未満の親和性（ＫＤ）での選択性を達成する。親和性（ＫＤ）は先行技術で知られる方法によって測定でき、例えばＢｉａｃｏｒｅ装置のような表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）測定を用いることにより測定できる。好ましくは、親和性は約２０℃または２５℃において測定する。
本発明のさらに好ましい態様では、非ステロイド系選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）は、細胞内でのグルココルチコイド受容体（ＧＣ）への結合に際しトランスリプレッションを起こし、デキサメタゾンと比較して細胞内でのグルココルチコイド受容体（ＧＣ）への結合に際しより低いトランスアクチベーションを示す。
ある好ましい態様では、本発明の使用のためのＳＥＧＲＭのトランスリプレッション活性へのＩＣ５０値は、デキサメタゾンのトランスリプレッション活性へのＩＣ５０値より、高くて、１００倍、５０倍、３０倍、高くて１０倍、高くて５倍または高くて２倍高い。一つのより好ましい態様において、ＳＥＧＲＭのトランスリプレッション活性へのＩＣ５０値は、例えばマプラコラットで見られたように、デキサメタゾンのトランスリプレッション活性へのＩＣ５０値と類似している。例えば、デキサメタゾンのトランスリプレッション活性へのＩＣ５０値は、デキサメタゾンのトランスリプレッション活性のＩＣ５０値より、２倍または５倍低い、のように低くてよい。値は、好ましくは上述したトランスリプレッションアッセイの一つで測定される。
一つの好ましい態様では、本発明の使用のためのＳＥＧＲＭのトランスリプレッション活性の有効性は、デキサメタゾンのトランスリプレッション活性の有効性の、少なくとも３０％。４０％、５０％、６０％、７０％、８０％または９０％である。値は、好ましくは上述したトランスリプレッションアッセイの一つで測定される。
一つの好ましい態様では、本発明の使用のためのＳＥＧＲＭのトランスアクチベーション活性へのＥＣ５０値は、デキサメタゾンのトランスアクチベーション活性へのＥＣ５０値より、少なくとも２０倍、４０倍、５０倍または１００倍高い。値は、好ましくは上述したトランスアクチベーションアッセイの一つで測定される。
上述したように、ＳＥＧＲＭは、グルココルチコイド受容体（ＧＲ）に結合し活性化することにより効果を示す。
よって、好ましい態様では、本発明の使用ためのＳＥＧＲＭはグルココルチコイド受容体（ＧＲ）の活性化剤である。
よって、好ましい態様では、本発明の使用ためのＳＥＧＲＭはグルココルチコイド受容体（ＧＲ）アゴニストである。
好ましくは、グルココルチコイド受容体（ＧＲ）の活性化剤、またはグルココルチコイド受容体（ＧＲ）アゴニストは、ＧＲのトランスアクチベーションおよび／またはトランスリプレッションを介してＧＲを活性化する化合物として理解される。トランスアクチベーションおよびトランスリプレッションは上記アッセイを用いて測定できる。
上述したように、本発明の使用ためのＳＥＧＲＭは、トランスアクチベーションよりより強くトランスリプレッションをする化合物である。よって、好ましい態様では、本発明の使用ためのＳＥＧＲＭは、ＧＲのトランスリプレッションと任意でトランスアクチベーションを介してＧＲを活性化する。より好ましい態様では、本発明の使用ためのＳＥＧＲＭは、ＧＲのトランスリプレッションと任意でトランスアクチベーションを介してＧＲを活性化し、ＳＥＧＲＭはトランスアクチベーションより、より強くトランスリプレッションをする。トランスアクチベーションおよびトランスリプレッションを測定するためおよびＳＥＧＲＭがトランスアクチベーションより、より強くトランスリプレッションするかどうかを測定するためのアッセイは、上述した。
好ましくは、グルココルチコイド受容体（ＧＲ）の活性化剤、または、グルココルチコイド受容体（ＧＲ）アゴニストであるＳＥＧＲＭは、実施例１．１０において述べるようにｉｎ ｖｉｔｒｏトランスロケーションアッセイにおいて明確にテストすることができる。アッセイは、グルココルチコイド受容体（ＧＲ）の活性化剤または、グルココルチコイド受容体（ＧＲ）アゴニストであるＳＥＧＲＭのための追加の明確なアッセイを意味する。特に、アッセイは、活性化グルココルチコイドと活性化ＳＥＧＲＭを区別することができず、実施例１．１０におけるアッセイ用の１０ｎＭの濃度、３７℃でのｉｎ ｖｉｔｒｏ培養における初代ヒト繊維芽細胞において、グルココルチコイドがグルココルチコイド受容体の細胞質から核内への移行をもたらすことも区別することができない。
よって、好ましい態様では、グルココルチコイド受容体（ＧＲ）の活性化剤または、グルココルチコイド受容体（ＧＲ）アゴニストである、本発明の使用のためのＳＥＧＲＭは、１０ｎＭまたは１００ｎＭのＳＥＧＲＭの濃度で、３７℃でのｉｎ ｖｉｔｒｏ培養における初代ヒト繊維芽細胞において、グルココルチコイド受容体の細胞質から核内への移行をもたらす。アッセイは実施例１．１０にて詳細に述べられている。特に、培養細胞をオーバーナイトで飢餓状態にし、３７℃で４５分間化合物とインキュベートし、室温で１０分間、４％パラホルムアルデヒドで固定し、室温で１０分間１％ＢＳＡ、ＰＢＳ中０．５％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘで透過処理する。その後、細胞をマウス抗グルココルチコイド受容体モノクローナル抗体で染色する。検出は、蛍光標識した二次抗体を用いて免疫蛍光顕微鏡検査によって行ってもよい。
本発明のさらに好ましい態様では、非ステロイド系選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）は、グルココルチコイド受容体（ＧＣ）に１００ｎＭ未満の親和性（ＫＤ）で特異的に結合する。
本発明のさらに好ましい態様では、非ステロイド系選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）は、グルココルチコイド受容体（ＧＣ）に特異的に結合する。ＳＥＧＲＭテスト化合物のＩＣ５０／参照化合物のＩＣ５０として定義される、ＳＥＧＲＭの競合係数が、グルココルチコイド受容体（ＧＣ）について２０、１０、５、４または２より低く、プロゲステロンレセプター（ＰＲ）、アンドロゲンレセプター（ＡＲ）およびミネラルコルチコイドレセプター（ＭＲ）についての競合係数が、少なくとも５、１０、１５、２０、３０、４０または５０であるの場合において、ＳＥＧＲＭはグルココルチコイド受容体に特異的に結合すると理解される。非特許文献９に述べられているように、ＧＣ用の適切な参照化合物はデキサメタゾンであり、ＰＲ用の適切な参照化合物はプロゲステロンであり、ＡＲ用の適切な参照化合物はメトリボロンであり、ＭＲ用の適切な参照化合物はアルドステロンである。
好ましくは、競合係数は非特許文献９の記載に従って測定される。
非特許文献9の記載に従って測定する受容体結合へのＩＣ５０値を測定して良い。ヒトＧＲ、プロゲステロンレセプター（ＰＲ）、アンドロゲンレセプター（ＡＲ）またはミネラルコルチコイドレセプター（ＭＲ）をコードする組み換えバキュロウイルスでインフェクションしたＳｆ９細胞からの抽出物を、非特許文献８にすでに記載のように、受容体結合アッセイに用いる。全てのレセプターの命名法は、非特許文献１０に従う。ＧＲ、ＰＲ、ＡＲおよびＭＲへの結合アッセイのために、［１，２，４，６，７－３Ｈ］デキサメタゾン（約３．１８ＧＢｑ／ｍｍｏｌ）（～２０ｎｍｏｌ／Ｌ）、［１，２，６，７，３Ｈ（Ｎ）］プロゲステロン（約３．７Ｇｂｑ／ｍｍｏｌ）［１７ａ－メチル－３Ｈ］メチルトリエノロン（約３．１８Ｇｂｑ／ｍｍｏｌ）Ｄ［１，２，６，７－３Ｈ（Ｎ）］アルドステロン（約２．８１ＧＢｑ／ｍｍｏｌ）をそれぞれ用いた。Ｓｆ９サイトゾル（１００－５００μｇ タンパク質）、テスト化合物、および結合バッファー（１０ｍｍｏｌ／Ｌ Ｔｒｉｓ／ＨＣｌ ｐＨ７．４、１．５ｍｍｏｌ／Ｌ ＥＤＴＡ、１０％グリセロール）を総体積５０μＬ中で混合し、室温で１時間インキュベートする。インキュベーション後、冷温の活性炭懸濁液５０μＬを５分間加え、混合液をマイクロタイターフィルトレーションプレートに移す。混合液をＰｉｃｏｐｌａｔｅｓ（Ｃａｎｂｅｒｒａ Ｐａｃｋａｒｄ）にいれ濾過し、２００μＬ Ｍｉｃｒｏｓｚｉｎｔ－４０（Ｃａｎｂｅｒｒａ Ｐａｃｋａｒｄ）と混合する。結合した放射活性をＰａｃｋａｒｄ Ｔｏｐ Ｃｏｕｎｔ ｐｌａｔｅ ｒｅａｄｅｒにて測定する。特異的結合を、１０μｍｏｌ／Ｌ非標識デキサメタゾン、プロゲステロン、メトリボロンまたはアルドステロンのそれぞれが非存在下で、［１，２，４，６，７－３Ｈ］デキサメタゾン、［１，２，６，７，３Ｈ（Ｎ）］プロゲステロン、［１７ａ－メチル－３Ｈ］メチルトリエノロンおよびＤ［１，２，６，７－３Ｈ（Ｎ）］アルドステロンの結合の間での違いとして定義する。特異的結合の５０％阻害（ＩＣ５０）を与えるテスト化合物の濃度を、結合曲線のヒル解析から測定する。競合係数（ＣＦ）を テスト化合物のＩＣ５０/ 参照化合物のＩＣ５０ として定義し、測定することができる。定義によると、ＣＦは参照化合物に対して１．０である。ＧＣへの参照化合物は好ましくはデキサメタゾンであり、ＰＲへの適切な参照化合物はプロゲステロン、ＡＲへの適切な参照化合物はメトリボロン、ＭＲへの適切な参照化合物はアルドステロンである。
一つの好ましい態様において、本発明の使用のための選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩は、以下のように特徴づけられる選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）である。
１００ｎＭ未満の親和性（ＫＤ）でグルココルチコイド受容体（ＧＣ）に特異的に結合する、ＳＥＧＲＭおよび／または、
ＳＥＧＲＭの競合係数がi）グルココルチコイド受容体（ＧＣ）については２０以下、および ii）プロゲステロンレセプター（ＰＲ）、アンドロゲンレセプター（ＡＲ)およびミネラルコルチコイドレセプター（ＭＲ）については少なくとも５であり、競合係数は ＳＥＧＲＭのＩＣ５０/ 参照化合物のＩＣ５０ として定義され、ＧＣ用参照化合物は好ましくはデキサメタゾンであり、ＰＲ用参照化合物はプロゲステロン、ＡＲ用参照化合物はメトリボロン、ＭＲ用参照化合物はアルドステロンである、および／または、
細胞内でのグルココルチコイド受容体（ＧＣ）への結合に際するトランスアクチベーションへのＳＥＧＲＭのＥＣ５０値は、デキサメタゾンのトランスアクチベーション活性へのＥＣ５０値より少なくとも２０倍高い、および／または、細胞内でのグルココルチコイド受容体（ＧＣ）への結合に際するトランスリプレッション活性へのＳＥＧＲＭのＩＣ５０値は、デキサメタゾンのトランスアクチベーション活性へのＩＣ５０値より最高で１００倍高い。
したがって、一つの好ましい態様では、本発明の使用のための選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩は、非ステロイド系選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）であり、
そして、
１００ｎＭ未満の親和性（ＫＤ）でグルココルチコイド受容体（ＧＣ）に特異的に結合するＳＥＧＲＭ、および／または、
ＳＥＧＲＭの競合係数がｉ）グルココルチコイド受容体（ＧＣ）については２０以下、および ｉｉ）プロゲステロンレセプター（ＰＲ）、アンドロゲンレセプター（ＡＲ）およびミネラルコルチコイドレセプター（ＭＲ）については少なくとも５であり、競合係数は ＳＥＧＲＭのＩＣ５０／参照化合物のＩＣ５０ として定義され、ＧＣ用参照化合物は好ましくはデキサメタゾンであり、ＰＲ用参照化合物はプロゲステロン、ＡＲ用参照化合物はメトリボロン、ＭＲ用参照化合物はアルドステロンである、および／または、
細胞内でのグルココルチコイド受容体（ＧＣ）への結合に際するトランスアクチベーション活性へのＳＥＧＲＭのＥＣ５０値は、デキサメタゾンのトランスアクチベーション活性へのＥＣ５０値より少なくとも２０倍高い、および／または、細胞内でのグルココルチコイド受容体（ＧＣ）への結合に際するトランスリプレッション活性へのＳＥＧＲＭのＩＣ５０値は、デキサメタゾンのトランスアクチベーション活性へのＩＣ５０値より最高で１００倍高い。
さらに好ましい態様において、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩は、１００ｎＭ未満の親和性（ＫＤ）でグルココルチコイド受容体（ＧＣ）に特異的に結合する、および／または非ステロイド系ＳＥＧＲＭである。
好ましくは、上記で定義したようにトランスアクチベーションよりより強くトランスリプレッションするＳＥＧＲＭのために、ＳＥＧＲＭの活性は、加えて、実施例１．１０、１．１１、および／または１．１２で述べるようなｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイにおいて明確にテストされる。アッセイは、トランスアクチベーションより強くトランスリプレッションするＳＥＧＲＭのための追加のポジティブアッセイを表し、アッセイは、ＢＩ－３０４７のような同じ構造の立体異性体の活性型と非活性型を区別するのに用いてよい。特に、実施例１．１０におけるトランスロケーションアッセイの場合、３７℃、グルココルチコイド１０ｎＭ濃度でのｉｎ ｖｉｔｒｏ培養における初代ヒト繊維芽細胞において、グルココルチコイド受容体が細胞質から核内に移行することをグルココルチコイドがもたらすので、アッセイは活性化グルココルチコイドと活性化ＳＥＧＲＭを区別することはできない。
よって、好ましい態様では、本発明の使用のためのＳＥＧＲＭは、３７℃でＳＥＧＲＭ濃度が１０ｎＭまたは１００ｎＭのｉｎ ｖｉｔｒｏ培養における初代ヒト繊維芽細胞において、グルココルチコイド受容体が細胞質から核内に移行することをもたらす。アッセイについては、実施例１．１０で詳細に説明する。特に、培養細胞をオーバーナイト飢餓状態にし、３７℃で４５分間化合物とインキュベートし、室温で１０分間４％パラホルムアルデヒドで固定し、室温で１０分間１％ＢＳＡ、ＰＢＳ中０．５％ＴｒｉｔｏｎＸで透過処理する。その後、細胞をマウス抗グルココルチコイド受容体モノクローナル抗体で染色する。検出は、蛍光標識した二次抗体を用いて免疫蛍光顕微鏡使用によって行う。
よって、他の好ましい態様では、本発明の使用のためのＳＥＧＲＭは、３７℃、濃度１００ｎＭで、ｉｎ ｖｉｔｒｏにおけるヒト単球からの自発的ＩＬ－８分泌を、ＳＥＧＲＭ化合物なしでインキュベートしたコントロール細胞と比較して、少なくとも２０％、３０％または５０％まで減らす。アッセイは、実施例１．１０で詳細に説明する。
よって、さらなる好ましい態様では、本発明の使用のためのＳＥＧＲＭは、３７℃、濃度１００ｎＭ、ｉｎ ｖｉｔｒｏにおいて、ＬＰＳで刺激したＵ９３７細胞からのＩＬ－８分泌を、ＳＥＧＲＭ化合物なしでインキュベートしたコントロール細胞と比較して、少なくとも２０％、３０％または５０％まで減らす。アッセイについては、実施例１．１２で詳細に説明する。
本発明の使用のための適切なＳＥＧＲＭは、技術分野で知られており、マプラコラット（ＺＫ－２４５１８６としても知られる）および関連する５位置換キノロン、およびイソキノリン誘導化合物、５－｛［（１Ｓ，２Ｓ）－１－（２－クロロ－３－フルオロ－４－メトキシフェニル)－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（メトキシメチル）プロピル）アミノ］－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オン、５－｛［（１Ｓ，２Ｓ）－１－（２－クロロ－３－フルオロ－４－メトキシフェニル)－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（ヒドロキシメチル）プロピル）アミノ］－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オン、ＢＩ６５３０４８、ＨＹ１４２３４、ＬＧＤ－５５５２、 ＭＫ－５９３２、Ｏｒｇ２１４００７－０、Ｃｏｍｐｏｕｎｄ Ａ、ＡＬ－４３８、ＺＫ－２１６３４８、ＰＦ－８０２、フォスダグロコラット、Ｃｏｍｐｏｕｎｄ １０を含む。本発明の使用のための、技術分野で知られている、さらに適切なＳＥＧＲＭは、［（３Ｓ）－１－［（３Ｒ）－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル］－３－ピペリジル］４－［（１Ｒ，２Ｓ）－１－（４－シクロプロピルフェニル）－２－［［（２Ｒ）－テトラヒドロフラン－２－カルボニル］アミノ］プロキシ］ベンゾエート、５－｛［（１Ｓ，２Ｒ）［１－（２－クロロ－３－フルオロ－４－メトキシフェニル)－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（［メチルスルファニル］メチル)プロピル］アミノ}－１Ｈ－キノリン－２－オン、ＡＺＤ－７５９４、ＡＺＤ－５４２３、ＡＺＤ－２９０６、ＪＰＴ－１１７９６８および特許文献１に開示のＳＥＧＲＭ化合物、特許文献２から４に開示のＳＥＧＲＭ化合物、ＢＩ－５４９０３、 ＢＩ－６０７８１２、ＧＷ８７００８６Ｘ、ＰＦ－００２５１８０２、ＢＯＬ－３０３２４２－Ｘ（マプラコラットと同義）、およびさらに、特許文献５から１５に開示のＤＩＧＲＡ化合物およびその剤形、特許文献１６に開示のＮＯドネーティングＤＩＧＲＡ化合物、コルチバゾール、フルオロコルチバゾール、非特許文献１１に開示のフルオロコルチバゾールのスピロ環状の類似体、特許文献１７から２７に開示のＳＥＧＲＭ化合物、特許文献２８から３２に開示の化合物が含まれる。
ダグロコラット２－(ジヒドロゲン ホスフェート)としても知られる、フォスダグロコラットは次の構造を有する。
Figure 2022524911000001
ＨＹ１４２３４は次の構造を有する。
Figure 2022524911000002
ＬＧＤ－５５５２は次の構造を有する。
Figure 2022524911000003
ＭＫ－５９３２は次の構造を有する。
Figure 2022524911000004
Ｏｒｇ２１４００７－０は次の構造を有する。
Figure 2022524911000005
Ｃｏｍｐｏｕｎｄ Ａの塩化物塩は次の構造を有する。
Figure 2022524911000006
ＡＬ－４３８は次の構造を有する。
Figure 2022524911000007
ＰＦ－８０２は次の構造を有する。
Figure 2022524911000008
Ｃｏｍｐｏｕｎｄ １０は次の構造を有する。
Figure 2022524911000009
ＡＺＤ－７５９４は、ＩＵＰＡＣ名 ３－（５－（（１Ｒ，２Ｓ）－２－（２，２－ジフルオロプロパンアミド）－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキシン－６－イル）プロキシ）－１Ｈ－インダゾール－１－イル）－Ｎ－（テトラヒドロフラン－３－イル）ベンザミドを有し、次の構造を有する。
Figure 2022524911000010


ＡＺＤ－５４２３は、ＩＵＰＡＣ名 ２，２，２－トリフルオロ－Ｎ－（（１Ｒ，２Ｓ）－１－（（１－（４－フルオロフェニル)－１Ｈ－インダゾール－５－イル）オキシ）－１－（３－メトキシフェニル）－２－プロパニル）アセトアミドを有し、次の構造を有する。
Figure 2022524911000011
ＡＺＤ－２９０６は、ＩＵＰＡＣ名 Ｎ－（（１Ｒ，２Ｓ）－１－（（１－（４－フルオロフェニル）－１Ｈ－インダゾール－５－イル）オキシ）－１－（６－メトキシピリジン－３－イル)プロパン－２－イル)シクロプロパンカルボキサミドを有し、次の構造を有する。
Figure 2022524911000012
ＪＰＴ－１１７９６８は、次の構造を有する。
Figure 2022524911000013
［（３Ｓ）－１－［（３Ｒ）－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル］－３－ピペリジル］－４－［（１Ｒ，２Ｓ）－１－（４－シクロプロピルフェニル）－２－［［（２Ｒ）－テトラヒドロフラン－２－カルボニル］アミノ］プロポキシ］ベンゾエートは、次の構造を有する。
Figure 2022524911000014
特許文献１は式（Ｉ）の化合物を開示する
Figure 2022524911000015
[式中、Ａは、Ｃ１－６アルキル、Ｃ１－６ヒドロキシアルキル、Ｃ１－６シアノアルキル、シア ノ、Ｃ１－６ニトロアルキル、ニトロ、Ｃ１－６アルキルＳ(Ｏ)ｎ、Ｃ１－６アルコキシ 、Ｃ３－７シクロアルキルＣ１－６アルキル、Ｃ３－７シクロアルキル、Ｃ３－７ヘテロシクロアルキル、Ｃ３－７ヘテロシクロアルキルＣ１－６アルキル、Ｃ１－６ハロアルキル、Ｃ１－６アルキルＣ１－６チオアルキル、Ｃ１－６チオアルキル、Ｃ１－６アルキルＯＣ１－６アルキル、Ｃ１－６アルキルＯＣ１－６アルキルＯ、Ｃ１－６アルキルＣ(Ｏ)Ｃ１－６アルキル、Ｃ１－６アルキルＣ(Ｏ)、Ｃ１－６アルキルＣ(Ｏ)ＯＣ１－６アルキル、Ｃ１－６アルキルＣ(Ｏ)Ｏ、Ｃ１－６アルキルＯＣ(Ｏ)Ｃ１－６アルキル、Ｃ１－６アルキルＯＣ(Ｏ)、ＨＯＣ(Ｏ)、ＮＲ５Ｒ６Ｃ１－６アルキル、ＮＲ５Ｒ６、ＮＲ５Ｒ６Ｃ(Ｏ)Ｃ１－６アルキル、 ＮＲ５Ｒ６Ｃ(Ｏ)、ＮＲ５Ｒ６ＯＣ(Ｏ)Ｃ１－６アルキル、ＮＲ５Ｒ６ＯＣ(Ｏ)、Ｒ７ＮＨ、Ｃ５－１０アリール、Ｃ１－３アルキル、Ｃ５－１０アリール、Ｃ５－１０ヘテロアリール、Ｃ１－３アルキルまたはＣ５－１０ヘテロアリールであり、ここで、シクロアルキル、ヘテロシクロアルキル、アリールまたはヘテロアリールは、所望によりハロ、シアノ、ヒドロキシ、Ｃ１－４アルキル、Ｃ１－４アルコキシ、Ｃ１－４ハロアルキル、Ｃ１－４アルキルＯＣ(Ｏ)、Ｃ１－４アルキルＯＣ１－４アルキル、Ｃ１－４アルキルＳ(Ｏ)２およびＣ１－４ハロアルキルＯから独立して選択される１個以上の置換基によって置換されていてもよく、かつ、Ｒｘが水素であるか、あるいは、
Ａは、Ｒｘと一体となって、所望によりＯ、ＮおよびＳから独立して選択される１個以上のさらなるヘテロ原子を有する５から６員のアザ環式環を形成し；
Ｒ１およびＲ１ａは、水素、Ｃ１－４アルキル、Ｃ１－４ヒドロキシアルキル、Ｃ１－４アルキルＯＣ１－４アルキル、Ｃ１－４アルキルＣ１－４チオアルキルおよびＣ１－４ハロアルキルから独立して選択されるか、あるいは、Ｒ１およびＲ１ａは、一体となって、オキソであり；
Ｒ２は、水素またはＣ１－４アルキルであり；
Ｒ３は、Ｃ５－１０アリール、Ｃ５－１０アリールＣ１－４アルキル、Ｃ５－１０アリールＯ、Ｃ５－１０アリールＯＣ１－４アルキルまたはＣ５－１０ヘテロアリールであり、これらは、所望によりＢから独立して選択される１個以上の置換基によって置換されていてもよく；
Ｂは、Ｃ１－３ヒドロキシアルキル、ヒドロキシ、Ｃ１－４アルキル、Ｃ１－４アルコキシ、Ｃ１－４アルキルＣ１－４チオアルキル、Ｃ１－４チオアルキル、Ｃ３－６シクロアルキルＣ１－４チオアルキル、Ｃ３－６シクロアルキルＳ、Ｃ１－３アルキルＳ(Ｏ)ｎＣ１－４アルキル、Ｃ１－３アルキルＳ(Ｏ)ｎ、Ｃ１－４ハロアルキル、Ｃ１－４ハロアルキルＯ、ハロ、ニトロ、シアノ、Ｃ１－４アルキルＯＣ１－４アルキルＯＣ１－４アルキル、Ｃ１－４アルキルＣ(Ｏ)Ｃ１－４アルキル、Ｃ１－４アルキルＣ(Ｏ)、Ｃ１－４アルキルＣ(Ｏ)ＯＣ１－４アルキル、Ｃ１－４アルキルＣ(Ｏ)Ｏ、Ｃ１－４アルキルＯＣ(Ｏ)Ｃ１－４アルキル、Ｃ１－４アルキルＯＣ(Ｏ)、ＮＲ８Ｒ９Ｃ１－４アルキル、ＮＲ８Ｒ９、ＮＲ８Ｒ９Ｃ(Ｏ)Ｃ１－４アルキル、ＮＲ８Ｒ９Ｃ(Ｏ)、ＮＲ８Ｒ９ＯＣ(Ｏ)Ｃ１－４アルキル、ＮＲ８Ｒ９ＯＣ(Ｏ)、ＮＲ８Ｒ９Ｃ(Ｏ)ＯＣ１－４アルキル、ＮＲ８Ｒ９Ｃ(Ｏ)Ｏ、Ｒ９Ｃ(Ｏ)Ｒ８ＮＣ１－４アルキル、Ｒ９Ｃ(Ｏ)Ｒ８ＮＨ、Ｃ１－４アルキルＮＨ、Ｃ１－４アルキルＯＣ(Ｏ)ＮＨ、Ｃ１－４アルキルＣ(Ｏ)ＯＣ１－４アルキルＮＨ、Ｃ１－４アルキルＣ(Ｏ)Ｃ１－４アルキルＮＨ、Ｃ１－４アルキルＣ(Ｏ)ＮＨ、ＮＲ８Ｒ９Ｓ(Ｏ)ｎＣ１－４アルキルまたはＮＲ８Ｒ９Ｓ(Ｏ)ｎであり；
ｎは、１または２であり；
Ｒ４は、水素、ヒドロキシ、ハロ、Ｃ１－４アルキルまたはＣ１－４ハロアルキルであり ；
Ｗは、水素であるか、あるいは、
フェニル、Ｃ１－４アルキル、Ｃ３－７シクロアルキル、チエニル、イソオキサゾリル、 ピラゾリル、ピリジニル、ピリダジニルまたはピリミジニルであり、これらは全て、所望 によりＣ１－３ヒドロキシアルキル、ヒドロキシ、Ｃ１－４アルキル、Ｃ１－４アルコキシ、Ｃ１－４アルキルＣ１－４チオアルキル、Ｃ１－４チオアルキル、Ｃ３－６シクロアルキルＣ１－４チオアルキル、Ｃ３－６シクロアルキルＳ、Ｃ３－６シクロアルキル、Ｃ３－６シクロアルキルＣ１－４アルキル、Ｃ３－６ヘテロシクロアルキル、Ｃ３－６ヘテロシクロアルキルＣ１－４アルキル、Ｃ１－４アルキルＳ(Ｏ)ｎＣ１－４アルキル、Ｃ１－４アルキルＳ(Ｏ)ｎ、Ｃ１－４ハロアルキル、Ｃ１－４ハロアルキルＯ、ハロ、ニトロ 、シアノ、Ｃ１－４アルキルＯＣ１－４アルキル、Ｃ１－４アルキルＯＣ１－４アルキロＣ１－４アルキル、Ｃ１－４アルキルＣ(Ｏ)Ｃ１－４アルキル、Ｃ１－４アルキルＣ(Ｏ)、Ｃ１－４アルキルＣ(Ｏ)ＯＣ１－４アルキル、Ｃ１－４アルキルＣ(Ｏ)Ｏ、Ｃ１－４アルキルＯＣ(Ｏ)Ｃ１－４アルキル、Ｃ１－４アルキルＯＣ(Ｏ)、ＮＲ１０Ｒ１１、ＮＲ１０ＲｎＣ（Ｏ）Ｃ１－４アルキル、ＮＲ１０Ｒ１１Ｃ(Ｏ)、ＮＲ１０Ｒ１１Ｃ(Ｏ)Ｏ、ＮＲ１０Ｒ１１Ｃ(Ｏ)Ｃ１－４アルキル、ＮＲ１０Ｒ１１ＯＣ(Ｏ)、Ｒ１１Ｃ(Ｏ)Ｒ１０ＮＣ１－４アルキル、Ｒ１１Ｃ(Ｏ)Ｒ１０ＮＨ、Ｃ１－４アルキルＯＣ(Ｏ)ＮＨ、Ｃ１－４アルキルＣ(Ｏ)ＯＣ１－４アルキルＮＨ、Ｃ１－４アルキルＣ(Ｏ)Ｃ１－４アルキルＮＨ、Ｃ１－４アルキルＣ(Ｏ)ＮＨ、ＮＲ１０Ｒ１１Ｓ(Ｏ)ｎＣ１－４アルキルまたはＮＲ１０Ｒ１１Ｓ(Ｏ)ｎから独立して選択される１個以上の置換基によって置換されており；
Ｘは、ＣＨ２、Ｏ、Ｓ、Ｓ(Ｏ)ｎ、ＮＨまたはＮＣ１－４アルキルであり；
Ｙは、水素、ハロ、Ｃ１－４チオアルキル、Ｃ１－４ハロアルキル、Ｃ１－４ハロアルキルＯ、ニトロ、シアノ、ヒドロキシ、Ｒ１２Ｃ(Ｏ)、Ｒ１２ＯＣ(Ｏ)、Ｒ１２Ｃ(Ｏ)Ｏ、Ｃ１－６アルキルＳ(Ｏ)ｎ、Ｒ１２Ｒ１３ＮＳ(Ｏ)ｎ、ベンジルオキシ、イミダゾリル、Ｃ１－４アルキルＮＨＣ(Ｏ)、ＮＲ１２Ｒ１３Ｃ(Ｏ)、Ｃ１－４アルキルＣ(Ｏ)ＮＨまたはＮＲ１２Ｒ１３であり；
Ｚは、ＯまたはＳであり；
Ｒ５、Ｒ６、Ｒ８、Ｒ９、Ｒ１０、Ｒ１１、Ｒ１２およびＲ１３は、水素、Ｃ１－６アルキルＣ(Ｏ)、ＮＨＲ７Ｃ(Ｏ)およびＣ１－６アルキルから独立して選択され；
Ｒ７は、水素、Ｃ１－６アルキル、Ｃ１－６アルキルＣ(Ｏ)ＯＣ１－３アルキル、Ｃ１－６アルキルＣ(Ｏ)Ｏ、Ｃ１－６アルキルＯＣ(Ｏ)Ｃ１－３アルキル、Ｃ１－６アルキルＯＣ(Ｏ)、Ｃ１－６アルキルＣ(Ｏ)、Ｃ５－１０ヘテロアリールＣ１－３アルキル、Ｃ５－１０ヘテロアリール、Ｃ５－１０アリールＣ１－３アルキル、Ｃ５－１０アリール、Ｃ３－６シクロアルキルＣ１－３アルキルまたはＣ３－６シクロアルキルである。］
の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
非特許文献１１は、本発明によって使用することができる、フルオロコルチバゾールのスピロ環状の類似体を開示する。本発明によって使用できる化合物の例とその合成は次のとおりである。
式８ａ－ｅおよび９ａ－ｅの化合物：
Figure 2022524911000016
［式中、
化合物８ａ、８ｂにおいてｎは１、Ｒはフェニルであり、
化合物８ｂ、９ｂにおいてｎは２、Ｒはジベンジルであり、
化合物８ｃ、９ｃにおいてnは３、Ｒはフェニルであり、
化合物８ｄ、９ｄにおいてnは３、Ｒはフェニルであり、
化合物８ｅ、９ｅにおいてnは３、Ｒはベンジルである。］

式１０ａ－ｃの化合物：
Figure 2022524911000017
および
式１１ａ－ｂ、 １２ａ－ｂ、１３ａ－ｂおよび１４ａの化合物：
Figure 2022524911000018
［式中、
化合物１１ａ、１２ａ、１３ａ、１４ａにおいてＲはベンジルであり、
化合物１１ｂ、１２ｂ、１３ｂにおいてＲはプロパルギルである。］
ＢＩ－５４９０３はチオトロピウム、特にそのブロマイド塩として知られる。
ＢＩ－６０７８１２は次の構造を有する。
Figure 2022524911000019
ＧＷ８７００８６Ｘは次の構造を有する。
Figure 2022524911000020
ＰＦ－００２５１８０２はフォスダグロコラットの活性化代謝物である。ＰＦ－００２５１８０２は、ダグロコラットとして知られ、次の構造を有する。
Figure 2022524911000021
コルチバゾールは次の構造を有する。
Figure 2022524911000022
フルオロコルチバゾールは先行技術で知られており、例えば、非特許文献１１に開示されている。
特許文献６から１１および１３から１５は式(Ｉ)のＤＩＧＲＡ化合物を開示する。
Figure 2022524911000023
［式中ＡおよびＱは独立に、非置換および置換アリールおよびヘテロアリール基、非置換および置換シクロアルケニルおよびヘテロシクロアルケニル基、非置換および置換シクロアルキニルおよびヘテロシクロアルキニル、および非置換および置換複素環基からなる群から選ばれ、Ｒ１およびＲ２は独立に、非置換Ｃ１－Ｃ１５（代わりにＣ１－Ｃ１０またはＣ１－Ｃ５またはＣ１－Ｃ３）直鎖または分枝鎖アルキル基、置換Ｃ１－Ｃ１５（代わりにＣ１－Ｃ１０またはＣ１－Ｃ５またはＣ３－Ｃ５）直鎖または分枝鎖アルキル基、および置換Ｃ３－Ｃ１５(代わりにＣ３－Ｃ６またはＣ３－Ｃ５)シクロアルキル基、からなる群から選ばれ、；Ｒ３は水素、非置換Ｃ１－Ｃ１５（代わりにＣ１－Ｃ１０またはＣ１－Ｃ５またはＣ１－Ｃ３）直鎖または分枝鎖アルキル基、置換Ｃ１－Ｃ１５（代わりにＣ１－Ｃ１０またはＣ１－Ｃ５またはＣ１－Ｃ３）直鎖または分枝鎖アルキル基、非置換Ｃ３－Ｃ１５ (代わりにＣ３－Ｃ６またはＣ３－Ｃ５)シクロアルキルおよびヘテロシクロアルキル基、置換Ｃ３－Ｃ１５(代わりにＣ３－Ｃ６またはＣ３－Ｃ５)シクロアルキルおよびヘテロシクロアルキル基、アリール基、ヘテロアリール基、および複素環基、からなる群アリールばれ；Ｂはカルボニル、アミノ、二価炭化水素またはヘテロ炭化水素基を含み；Ｅは水素またはアミノ基であり；およびＤはカルボニル基、－ＮＨ－、または－ＮＲ’－を含む、または含まず、ここでＲ’は非置換または置換Ｃ１－Ｃ１５ (代わりにＣ１－Ｃ１０またはＣ１－Ｃ５またはＣ１－Ｃ３)直鎖または分枝鎖アルキル基、Ｒ１およびＲ２はともに非置換または置換Ｃ３－Ｃ１５シクロアルキル基である。
ある態様では、Ｂは１以上の非置換炭素-炭素結合を含むことができる。
他の態様では、Ｂはアルキレンカルボニル、アルキレンオキシカルボニル、アルキレンカルボニルオキシ、アルキレンオキシカルボニルアミノ、アルキレンアミノ、アルケニレンカルボニル、アルケニレンオキシカルボニル、アルケニレンカルボニルオキシ、アルケニレンオキシカルボニルアミノ、アルケニレンアミノ、アルキニレンカルボニル、アルキニレンオキシカルボニル、アルキニレンカルボニルオキシ、アルキニレンオキシカルボニルアミノ、アルキニレンアミノ、アリルカルボニロキシ、アリロキシカルボニルまたはウレイド基を含むことができる。
まだ他の態様では、ＡおよびＱは独立して、アリール、少なくとも一つのハロゲン原子で置換されたヘテロアリール基、シアノ基、ヒドロキシ基、またはＣ１－Ｃ１０アルコキシ基（代わりにＣ１－Ｃ５アルコキシ基またはＣ１－Ｃ３アルコキシ基）；Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は独立に非置換または置換Ｃ１－Ｃ５アルキル基（好ましくはＣ１－Ｃ３アルキル基）からなる群から選ばれ；ＢはＣ１－Ｃ５アルキレン基（代わりにＣ１－Ｃ３アルキル基）であり；Ｄは－ＮＨ－または－ＮＲ’基、ここでＲ’はＣ１－Ｃ５アルキル基（好ましくはＣ１－Ｃ３アルキル基）であり；およびＥはヒドロキシ基である。
さらに他の態様では、Ａはハロゲン原子で置換されたジヒドロベンゾフラニル基を含み；ＱはＣ１－Ｃ１０アルキル基で置換されたキノリニルまたはイソキノリニル基を含み；Ｒ１およびＲ２は独立に非置換および置換Ｃ１－Ｃ５アルキル基（好ましくはＣ１－Ｃ３アルキル基）からなる群から選ばれ；ＢはＣ１－Ｃ３アルキレン基であり；Ｄは－ＮＨ－基であり；Ｅはヒドロキシ基であり；およびＲ３は完全にハロゲン化したＣ１－Ｃ１０アルキル基（好ましくは完全にハロゲン化したＣ１－Ｃ５アルキル基、より好ましくは、完全にハロゲン化したＣ１－Ｃ３アルキル基）を含む。
まだ他の態様では、Ａはフッ素原子で置換したジヒドロベンゾフラニル基を含み；Ｑはメチル基で置換したキノリニルまたはイソキノリニル基を含み；Ｒ１およびＲ２は独立に非置換および置換Ｃ１－Ｃ５アルキル基からなる群から選ばれ；ＢはＣ１－Ｃ３アルキレン基であり；Ｄは－ＮＨ－基であり；Ｅはヒドロキシ基であり；およびＲはトリフルオロメチル基を含む。
さらに、式（ＩＶ）のＤＩＧＲＡ化合物、つまりマプラコラット、が開示されている。
Figure 2022524911000024
特許文献１６は、ＮＯドネーティングＤＩＧＲＡ化合物を開示する。
ＢＩ６５３０４８は、（Ｒ）－２－（４－（（５－（エチルスルホニル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イル）メチル）－５，５，５－トリフルオロ－４－ヒドロキシ－２－メチルペンタン－２－イル)－５－フルオロベンザミドである。そのリン酸塩は次の構造を有する。
Figure 2022524911000025
ＢＩ６５３０４８および関連化合物、およびそれらの合成は、特許文献３３および３４に開示されている。
特許文献５は次のＳＥＧＲＭ化合物同様にその合成を開示する。特許文献５のＳＥＧＲＭ化合物は、本発明の使用に特に好ましい。
下の式（Ｉ）で示される化合物：
Figure 2022524911000026
［式中、
Ｒ1は、５および６員ヘテロアリール、(Ｃ1－Ｃ6)アルキル、(Ｃ3－Ｃ6)シクロアルキル、(４－６)員ヘテロシクロアルキルおよびフェニルからなる群から選択され、ここで、当該５および６員ヘテロアリール、(Ｃ1－Ｃ6)アルキル、(Ｃ3－Ｃ6)シクロアルキル、(４－６)員ヘテロシクロアルキルおよびフェニルは、(Ｃ1－Ｃ4)アルキル、(Ｃ1－Ｃ4)アルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシルおよびシアノから独立して選択される１個以上の置換基で置換されていてもよく；
Ｒ2は、(Ｃ1－Ｃ3)アルキルおよびハロ(Ｃ1－Ｃ3)アルキルから選択され；
Ｒ3は、フェニル、５員ヘテロアリールおよび６員ヘテロアリールから選択され、ここで、当該フェニル、５員ヘテロアリールおよび６員ヘテロアリールは、Ｒ5から独立して選択される１個以上の置換基で置換されていてもよく；
Ｒ4は、水素、ハロゲン、(Ｃ1－Ｃ4)アルキルおよびハロ(Ｃ1－Ｃ4)アルキルから選択され；
Ｒ5は、ハロゲン、シアノ、(Ｃ1－Ｃ6)アルキル、(Ｃ3－Ｃ6)シクロアルキル、(Ｃ1－Ｃ6)アルコキシ、ハロ(Ｃ1－Ｃ6)アルキル、ハロ(Ｃ1－Ｃ6)アルコキシ、ヒドロキシ(Ｃ1－Ｃ6)アルキル、フェニル、５員ヘテロアリール、６員ヘテロアリールおよび－Ｓ(Ｏ)2Ｒaから選択され、ここで、Ｒaは、(Ｃ1－Ｃ4)アルキルを表し；
Ｘ1は、ＣＨ、Ｃ(Ｒb)およびＮから選択され、ここで、Ｒbは、ハロゲン、(Ｃ1－Ｃ4)アルキルまたはハロ(Ｃ1－Ｃ4)アルキルを表し；
Ｘ2は、ＣＨおよびＮから選択され；
Ｙは、－ＮＨ－および－Ｏ－から選択され；
ｍは、０または１であり；ｎは、０または１であり；
Ｌは、結合、－Ｏ－、－ＮＨ－または－Ｎ(Ｒc)－を表し、ここで、Ｒcは、(Ｃ1－Ｃ4)アルキルを表す］、
またはその薬学的に許容される塩、水和物もしくは溶媒和物。
好ましくは本発明の使用のためのＳＥＧＲＭ化合物は、次の化合物から選択される：
Ｎ－[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ ピペリジル]－５－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(ｐ－トリル)－２－[(２,２,２－トリフルオロア セチル)アミノ]プロポキシ]ピリジン－２－カルボキサミド、
５－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－[(２,２,２－トリフルオロアセチル)アミノ]プロポキシ]－Ｎ－[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]ピリジン－２－カルボキサミド、
５－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－(２,２－ジフルオロプロパノイルアミノ)プロポキシ]－Ｎ－[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラ ン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]ピリジン－２－カルボキサミド、
Ｎ－[(１Ｓ,２Ｒ)－２－(４－シクロプロピルフェニル)－１－メチル－２－[[６－[[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]カルバモイル]－３－ピリジル]オキシ]エチル]イソチアゾール－３－カルボキサミド、
Ｎ－[(１Ｓ,２Ｒ)－２－(４－シクロプロピルフェニル)－１－メチル－２－[[６－[[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]カルバモイル]－３－ピリジル]オキシ]エチル]イソチアゾール－５－カルボキサミド、
Ｎ－[(１Ｓ,２Ｒ)－２－(４－シクロプロピルフェニル)－１－メチル－２－[[６－[[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]カルバモイル]－３－ピリジル]オキシ]エチル]オキサゾール－２－カルボキサミド、
Ｎ－[(１Ｓ,２Ｒ)－２－(４－シクロプロピルフェニル)－１－メチル－２－[[６－[[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]カルバモイル]－３－ピリジル]オキシ]エチル]チアゾール－４－カルボキサミド、
Ｎ－[(１Ｓ,２Ｒ)－２－(４－シクロプロピルフェニル)－１－メチル－２－[[６－[[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]カルバモイル]－３－ピリジル]オキシ]エチル]－３－メチル－イソオキサゾール－５－カルボキサミド、
Ｎ－[(１Ｓ,２Ｒ)－２－(４－シクロプロピルフェニル)－１－メチル－２－[[６－[[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]カルバモイル]－３－ピリジル]オキシ]エチル]オキサゾール－５－カルボキサミド、
５－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－[[(２Ｓ)－２－ヒドロキシブタノイル]アミノ]プロポキシ]－Ｎ－[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]ピリジン－２－カルボキサミド、
５－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－[[(２Ｒ)－２－ヒドロキシプロパノイル]アミノ]プロポキシ]－Ｎ－[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]ピリジン－２－カルボキサミド、
Ｎ－[(１Ｓ,２Ｒ)－２－(４－シクロプロピルフェニル)－１－メチル－２－[[６－[[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]カルバモイル]－３－ピリジル]オキシ]エチル]イソオキサゾール－５－カルボキサミド、
５－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－[[(２Ｒ)－２－ヒドロキシブタノイル]アミノ]プロポキシ]－Ｎ－[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]ピリジン－２－カルボキサミド、
５－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－[(２－メトキシアセチル)アミノ]プロポキシ]－Ｎ－[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]ピリジン－２－カルボキサミド、
５－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－[(２－ヒドロキシ－２－メチル－プロパノイル)アミノ]プロポキシ]－Ｎ－[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]ピリジン－２－カルボキサミド、
５－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－(３－ヒドロキシプロパノイルアミノ)プロポキシ]－Ｎ－[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]ピリジン－２－カルボキサミド、
５－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－[(１－ヒドロキシシクロブタンカルボニル)アミノ]プロポキシ]－Ｎ－[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]ピリジン－２－カルボキサミド、
５－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－[(１－ヒドロキシシクロプロパンカルボニル)アミノ]プロポキシ]－Ｎ－[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]ピリジン－２－カルボキサミド、
Ｎ－[(１Ｓ,２Ｒ)－２－(４－シクロプロピルフェニル)－１－メチル－２－[[６－[[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]カルバモイル]－３－ピリジル]オキシ]エチル]オキサゾール－４－カルボキサミド、
５－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－[[(２Ｓ)－テトラヒドロフラン－２－カルボニル]アミノ]プロポキシ]－Ｎ－[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]ピリジン－２－カルボキサミド、
５－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－[(２－ヒドロキシアセチル)アミノ]プロポキシ]－Ｎ－[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]ピリジン－２－カルボキサミド、
５－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－[[(２Ｒ)－テトラヒドロフラン－２－カルボニル]アミノ]プロポキシ]－Ｎ－[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]ピリジン－２－カルボキサミド、
Ｎ－[(１Ｓ,２Ｒ)－２－(４－シクロプロピルフェニル)－１－メチル－２－[[６－[[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]カルバモイル]－３－ピリジル]オキシ]エチル]イソオキサゾール－３－カルボキサミド、
[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－[(２,２,２－トリフルオロアセチル)アミノ]プロポキシ]ベンゾエート、
[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－(１,２,５－チアジアゾール－３－カルボニルアミノ)プロポキシ]ベンゾエート、
[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－[(５－メチルチアゾール－２－カルボニル)アミノ]プロポキシ]ベンゾエート、
[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－(チアゾール－５－カルボニルアミノ)プロポキシ]ベンゾエート、
[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－[(４－メチル－１,２,５－オキサジアゾール－３－カルボニル)アミノ]プロポキシ]ベンゾエート、
[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－[(５－メチルチアゾール－４－カルボニル)アミノ]プロポキシ]ベンゾエート、
[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－[(４－メチルチアゾール－５－カルボニル)アミノ]プロポキシ]ベンゾエート、
[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－[(５－メチル－１,３,４－オキサジアゾール－２－カルボニル)アミノ]プロポキシ]ベンゾエート、
[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－[(４－メチルチアジアゾール－５－カルボニル)アミノ]プロポキシ]ベンゾエート、
[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－[(４－メチルオキサゾール－５－カルボニル)アミノ]プロポキシ]ベンゾエート、
[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－[(２－メトキシアセチル)アミノ]プロポキシ]ベンゾエート、
[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－[(２－メチルピラゾール－３－カルボニル)アミノ]プロポキシ]ベンゾエート、
[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－[(２－メチルチアゾール－５－カルボニル)アミノ]プロポキシ]ベンゾエート、
[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－[[(２Ｒ)－テトラヒドロフラン－２－カルボニル)アミノ]プロポキシ]ベンゾエート、
[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－[(３－メチルトリアゾール－４－カルボニル)アミノ]プロポキシ]ベンゾエート、
[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－(１,２,４－オキサジアゾール－３－カルボニルアミノ)プロポキシ]ベンゾエート、
[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－[(l－メチルイミダゾール－２－カルボニル)アミノ]プロポキシ]ベンゾエート、
[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－[(３－メチルイソオキサゾール－５－カルボニル)アミノ]プロポキシ]ベンゾエート、
[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－[(５－メチル－１,２,４－オキサジアゾール－３－カルボニル)アミノ]プロポキシ]ベンゾエート、
[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－[(l－メチルイミダゾール－４－カルボニル)アミノ]プロポキシ]ベンゾエート、
[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－(イソチアゾール－３－カルボニルアミノ]プロポキシ]ベンゾエート、
[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－[(３－メチルイソキサゾール－４－カルボニル)アミノ]プロポキシ]ベンゾエート、
[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－(チアゾール－２－カルボニルアミノ]プロポキシ]ベンゾエート、
[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－(イソチアゾール－５－カルボニルアミノ]プロポキシ]ベンゾエート、
[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－[(５－メチルイソチアゾール－４－カルボニル)アミノ]プロポキシ]ベンゾエート、
[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－(オキサゾール－２－カルボニルアミノ)プロポキシ]ベンゾエート、
[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－(オキサゾール－５－カルボニルアミノ)プロポキシ]ベンゾエート、
[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－(イソオキサゾール－３－カルボニルアミノ)プロポキシ]ベンゾエート、
[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－(チアジアゾール－４－カルボニルアミノ)プロポキシ]ベンゾエート、
[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－[(５－メチルイソオキサゾール－３－カルボニル)アミノ]プロポキシ]ベンゾエート、
[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－(イソオキサゾール－５－カルボニルアミノ)プロポキシ]ベンゾエート、
[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－(チアゾール－４－カルボニルアミノ)プロポキシ]ベンゾエート、
[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－[(３－メチル－１,２,４－オキサジアゾール－５－カルボニル)アミノ]プロポキシ]ベンゾエート、
[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－[(１－メチルピラゾール－３－カルボニル)アミノ]プロポキシ]ベンゾエート、
[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－(２,２－ジフルオロプロパノイルアミノ)プロポキシ]ベンゾエート、
Ｎ－[(３Ｒ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－５－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(ｐ－トリル)－２－[(２,２,２－トリフルオロアセチル)アミノ]プロポキシ]ピリジン－２－カルボキサミド、
Ｎ－[(３Ｒ)－１－[(３Ｓ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－５－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(ｐ－トリル)－２－[(２,２,２－トリフルオロア セチル)アミノ]プロポキシ]ピリジン－２－カルボキサミド、
Ｎ－[(３Ｒ)－１－[(２Ｓ)－５－オキソテトラヒドロフラン－２－カルボニル]－３－ピペリジル]－５－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(ｐ－トリル)－２－[(２,２,２－トリフルオロアセチル)アミノ]プロポキシ]ピリジン－２－カルボキサミド、
Ｎ－[(３Ｒ)－１－[(２Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－２－カルボニル]－３－ピペリジル]－５－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(ｐ－トリル)－２－[(２,２,２－トリフルオロアセチル)アミノ]プロポキシ]ピリジン－２－カルボキサミド、
Ｎ－[(３Ｓ)－１－[(３Ｓ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－５－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(ｐ－トリル)－２－[(２,２,２－トリフルオロアセチル)アミノ]プロポキシ]ピリジン－２－カルボキサミド、
Ｎ－[(３Ｓ)－１－[(２Ｓ)－５－オキソテトラヒドロフラン－２－カルボニル]－３－ピペリジル]－５－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(ｐ－トリル)－２－[(２,２,２－トリフルオロアセチル)アミノ]プロポキシ]ピリジン－２－カルボキサミド、
Ｎ－[(３Ｒ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]ピロリジン－３－イル]－５－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(ｐ－トリル)－２－[(２,２,２－トリフルオロアセチル)アミノ]プロポキシ]ピリジン－２－カルボキサミド、
５－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－エチルフェニル)－２－[(２,２,２－トリフルオロアセチル)アミノ]プロポキシ]－Ｎ－[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]ピリジン－２－カルボキサミド、
５－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－ブロモフェニル)－２－[(２,２,２－トリフルオロアセチル)アミノ]プロポキシ]－Ｎ－[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]ピリジン－２－カルボキサミド、
Ｎ－[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－５－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－フェニル lフェニル)－２－[(２,２,２－トリフルオロアセチル)アミノ]プロポキシ]ピリジン－２－カルボキサミド、
Ｎ－[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(ｐ－トリル)－２－[(２,２,２－トリフルオロアセチル)アミノ]プロポキシ]ベンズアミド、
[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(ｐ－トリル)－２－[(２,２,２－トリフルオロアセチル)アミノ]プロポキシ]ベンゾエート、
Ｎ－[(３Ｓ)－１－[[(３Ｓ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－イル]カルバモイル]－３－ピペリジル]－５－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(ｐ－トリル)－２－[(２,２,２－トリフルオロアセチル)アミノ]プロポキシ]ピリジン－２－カルボキサミド、
Ｎ－[(３Ｓ)－１－[[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－イル]カルバモイル]－３－ピペリジル]－５－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(ｐ－トリル)－２－[(２,２,２－トリフルオロアセチル)アミノ]プロポキシ]ピリジン－２－カルボキサミド、
[(３Ｓ)－２－オキソテトラヒドロフラン－３－イル]（３Ｓ）－３－[[５－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(ｐ－トリル)－２－[(２,２,２－トリフルオロアセチル)アミノ]プロポキシ]ピリジン－２－カルボニル]アミノ]ピペリジン－１－カルボキシレート、
[(３Ｒ)－２－オキソテトラヒドロフラン－３－イル]（３Ｓ）－３－[[５－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(ｐ－トリル)－２－[(２,２,２－トリフルオロアセチル)アミノ]プロポキシ]ピリジン－２－カルボニル]アミノ]ピペリジン－１－カルボキシレート、
[(３Ｓ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－イル]（３Ｓ）－３－[[５－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(ｐ－トリル)－２－[(２,２,２－トリフルオロアセチル)アミノ]プロポキシ]ピリジン－２－カルボニル]アミノ]ピペリジン－１－カルボキシレート、または、
[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－イル]（３Ｓ）－３－[[５－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(ｐ－トリル)－２－[(２,２,２－トリフルオロアセチル)アミノ]プロポキシ]ピリジン－２－カルボニル]アミノ]ピペリジン－１－カルボキシレート、
またはその薬学的 に許容される塩、水和物もしくは溶媒和物。
さらに好ましい態様では、[(３Ｓ)－１－[(３Ｒ)－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル]－３－ピペリジル]－４－[(１Ｒ,２Ｓ)－１－(４－シクロプロピルフェニル)－２－[[(２Ｒ)－テトラヒドロフラン－２－カルボニル]アミノ]プロポキシ]ベンゾエートまたはその薬学的に許容可能な塩は、本発明により使用されることができる。化合物は、特許文献５の「化合物３７」に対応し、次の構造を有する。
Figure 2022524911000027
次の３つのＳＥＧＲＭ化合物およびその合成は、特許文献３５に開示されている。
５－｛［１Ｓ，２Ｓ］－１－（２－クロロ－３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３，３，３－-トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（メトキシメチル）プロピル｝アミノ｝－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オンは次の構造を有する。
Figure 2022524911000028
化合物は特許文献３５の実施例５として知られ（ラセミ体としての立体構造なし）、ヘキサン／エタノール（４：１）溶出液でＣｈｉｒａｌｐａｋ ＩＣ ５μｍを用いたキラルＨＰＬＣによるラセミ体からえることができる。
さらにこのましい態様では、５－｛［（１Ｓ，２Ｓ）－１－（２－クロロ－３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（メトキシメチル）プロピル］アミノ｝－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オン、またはその薬学的に許容可能な塩を本発明により使用することができる。
５－｛［１Ｓ，２Ｓ］［１－（２－クロロ－３－フルオロ－４－メトキシフェニル)－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－(ヒドロキシメチル)プロピル]アミノ}－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オンは次の構造を有する。
Figure 2022524911000029
化合物は特許文献３５の実施例７として知られ（ラセミ体としての立体構造なし）、ヘキサン／エタノール（４：１）溶出液でＣｈｉｒａｌｐａｋ ＩＣ ５μｍを用いたキラルＨＰＬＣにより得られるラセミ体からえることができる。
さらに好ましい態様では、５－｛［１Ｓ，２Ｓ］［１－（２－クロロ－３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（ヒドロキシメチル）プロピル］アミノ｝－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オン、またはその薬学的に許容可能な塩を本発明により使用することができる。
５－｛［１Ｓ，２Ｒ］［１－（２－クロロ－３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（［メチルスルファニル］メチル）プロピル］アミノ｝－１Ｈ－キノリン－２－オンは次の構造を有する。
Figure 2022524911000030
化合物は特許文献３５の実施例３として知られ（ラセミ体としての立体構造なし）、ヘキサン／エタノール（４：１）溶出液でＣｈｉｒａｌｐａｋ ＩＣ ５μｍを用いたキラルＨＰＬＣにより得られるラセミ体からえることができる。
さらに好ましい態様では、５－｛［１Ｓ，２Ｒ］［１－（２－クロロ－３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（［メチルスルファニル］メチル）プロピル］アミノ｝－１Ｈ－キノリン－２－オンまたはその薬学的に許容可能な塩を本発明により使用することができる。
これらＳＥＧＲＭ化合物およびその合成は特許文献３５に開示されている。
よって、一つの態様では、式(I)の化合物の使用は、本発明において好まれる。
Figure 2022524911000031
［式中、
Ｒ１及びＲ２は、互いに独立して、水素原子、ヒドロキシ基、ハロゲン原子、場合により置換された（Ｃ１－Ｃ１０）－アルキル基、場合により置換された（Ｃ１－Ｃ１０）－アルコキシ基、（Ｃ１－Ｃ１０）－アルキルチオ基、（Ｃ１－Ｃ５）－パーフルオロアルキル基、シアノ基、ニトロ基を意味し、
或いはＲ１及びＲ２は、一緒になって、－Ｏ－（ＣＨ２）ｐ－Ｏ－、－Ｏ－（ＣＨ２）ｐ－ＣＨ2－、－Ｏ－ＣＨ＝ＣＨ－、－（ＣＨ２）ｐ＋２－、－ＮＨ－（ＣＨ２）ｐ＋１、－Ｎ（Ｃ１－Ｃ３－アルキル）－（ＣＨ２）ｐ＋１、及び－ＮＨ－Ｎ＝ＣＨ－基から選択される基を意味し、ここでｐ＝１又は２であり、そして末端酸素原子及び／又は炭素原子及び／又は窒素原子は、隣接する環炭素原子と直接結合され、
或いはＮＲ６Ｒ７を意味し、ここでＲ６及びＲ７は、互いに独立して水素、Ｃ１－Ｃ５－アルキル、又は（ＣＯ）－（Ｃ１－Ｃ５）－アルキルを意味し、
Ｒ３は、水素原子、ヒドロキシ基、ハロゲン原子、シアノ基、場合により置換された（Ｃ１－Ｃ１０）－アルキル基、（Ｃ１－Ｃ１０）－アルコキシ基、（Ｃ１－Ｃ１０）－アルキルチオ基 、又は（Ｃ１－Ｃ５）－パーフルオロアルキル基を意味し、
Ｒ4は、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、（Ｃ１－Ｃ５）－アルキル、（Ｃ１－Ｃ５）アルコキシ、（Ｃ１－Ｃ５）－アルキルチオ、（Ｃ１－Ｃ５）－パーフルオロアルキル、シアノ、ニトロ、ＮＲ６Ｒ７、ＣＯＯＲ９、（ＣＯ）ＮＲ６Ｒ７又は（Ｃ１－Ｃ５－アルキレン）－Ｏ（ＣＯ）－（Ｃ１－Ｃ５）アルキル基を意味し、
Ｒ５は、
場合により部分的又は完全にハロゲン化され得る－（Ｃ１－Ｃ１０）アルキル、
－（Ｃ２－Ｃ１０）アルケニル、
－（Ｃ２－Ｃ１０）アルキニル、
（Ｃ３－Ｃ７）シクロアルキル－（Ｃ１－Ｃ８）アルキル、
（Ｃ３－Ｃ７）シクロアルキル－（Ｃ１－Ｃ８）アルケニル、
（Ｃ３－Ｃ７）シクロアルキル－（Ｃ２－Ｃ８）アルキニル、
ヘテロシクリル－（Ｃ１－Ｃ８）アルキル、
ヘテロシクリル－（Ｃ１－Ｃ８）アルケニル、
ヘテロシクリル－（Ｃ２－Ｃ８）アルキニル、
－Ｒ８、
Ｒ８－（Ｃ１－Ｃ８）アルキル、
Ｒ８－（Ｃ２－Ｃ８）アルケニル、
Ｒ８－（Ｃ２－Ｃ８）アルキニル、
－Ｓ－（Ｃ１－Ｃ１０）－アルキル、
－ＳＯ２－（Ｃ１－Ｃ１０）－アルキル、
－Ｓ－Ｒ８、
－ＳＯ2－Ｒ8、
－ＣＮ、
－Ｈａｌ、
－Ｏ－（Ｃ１－Ｃ１０）－アルキル、
Ｒ６、Ｒ７が上で定義された意味である－ＮＲ６Ｒ７、
－Ｏ－Ｒ８、
－ＯＨ
から選択される基を意味し、ただし－ＣＨ（ＣＨ３）２、又は－Ｃ（ＣＨ３）＝ＣＨ２を除いてであり、
Ｒ８は、１～３個の、ヒドロキシ、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ５－アルキル、Ｃ１－Ｃ５－アルコキシ、シアノ、ＣＦ３、ニトロ、ＣＯＯ（Ｃ１－Ｃ５－アルキル）又はＣ（Ｏ）ＯＣＨ２－フェニルによって場合により置換され得るアリール基、或いは１～３個の、アルキル基、ヒドロキシ、ハロゲン、シアノ、又はＣ１－Ｃ５－アルコキシ基によって場合により置換され得、１～３個のヘテロ原子を含み得るヘテロアリール基を意味する］
の化合物、或いはそれらの塩、溶媒和物、又は溶媒和物の塩。
より好ましくは、式（Ｉ）の化合物の使用である。ここで：
Ｒ１及びＲ２は、互いに独立して、水素原子、ヒドロキシ基、ハロゲン原子、場合により置換された（Ｃ１－Ｃ１０）－アルキル基、場合により置換された（Ｃ１－Ｃ１０）－アルコキシ基、（Ｃ１－Ｃ１０）－アルキルチオ基、（Ｃ１－Ｃ５）－パーフルオロアルキル基、シアノ基、ニトロ基を意味し、
或いは
Ｒ1及びＲ2は、一緒になって、－Ｏ－（ＣＨ２）ｐ－Ｏ－、－Ｏ－（ＣＨ２）ｐ－ＣＨ２－、－Ｏ－ＣＨ＝ＣＨ－、－（ＣＨ２）ｐ＋２－、－ＮＨ－（ＣＨ２）ｐ＋１、－Ｎ（Ｃ１－Ｃ３－アルキル）－（ＣＨ２）ｐ＋ｉ、及び－ＮＨ－Ｎ＝ＣＨ－基から選択される基を意味し、
ここでｐ＝１又は２であり、そして
末端酸素原子及び／又は炭素原子及び／又は窒素原子は 、隣接する環炭素原子と直接結合され、或いはＮＲ６Ｒ７を意味し、
ここでＲ６及びＲ７は、互いに独立して水素、Ｃ１－Ｃ５－アルキル、又は（ＣＯ）－（Ｃ１－Ｃ５）－アルキルを意味し、
Ｒ３は、水素原子、ヒドロキシ基、ハロゲン原子、シアノ基、場合により置換された（Ｃ１－Ｃ１０）－アルキル基、（Ｃ１－Ｃ１０）－アルコキシ基、（Ｃ１－Ｃ１０）－アルキルチオ基、又は（Ｃ１－Ｃ５）－パーフルオロアルキル基を意味し、
Ｒ４は、水素原子、ヒドロキシ基、ハロゲン原子を意味し、
Ｒ５は、
場合により部分的又は完全にハロゲン化され得る－（Ｃ１－Ｃ１０）アルキル、－（Ｃ２－Ｃ１０）アルケニル、
－（Ｃ２－Ｃ１０）アルキニル、
（Ｃ３－Ｃ７）シクロアルキル－（Ｃ１－Ｃ８）アルキル、
（Ｃ３－Ｃ７）シクロアルキル－（Ｃ２－Ｃ８）アルケニル、
（Ｃ３－Ｃ７）シクロアルキル－（Ｃ２－Ｃ８）アルキニル、
ヘテロシクリル－（Ｃ１－Ｃ８）アルキル、
ヘテロシクリル－（Ｃ２－Ｃ８）アルケニル、
ヘテロシクリル－（Ｃ２－Ｃ８）アルキニル、
－Ｒ８、
Ｒ８－（Ｃ１－Ｃ８）アルキル、
Ｒ８－（Ｃ２－Ｃ８）アルケニル、
Ｒ８－（Ｃ２－Ｃ８）アルキニル、
－Ｓ－（Ｃ１－Ｃ１０）－アルキル、
－Ｓ－Ｒ８、
－ＳＯ２－Ｒ８、
－ＳＯ２－（Ｃ１－Ｃ１０）－アルキル、
－ＣＮ、
－Ｈａｌ、
－Ｏ－（Ｃ１－Ｃ１０）－アルキル、
Ｒ６、Ｒ７が上で示された意味である－ＮＲ６Ｒ７、
－Ｏ－Ｒ８、
－ＯＨから選択される基を意味し、
ただし－ＣＨ（ＣＨ３）２、又は－Ｃ（ＣＨ３）＝ＣＨ２を除いてであり、
Ｒ８は、１～３個の、アルキル、ヒドロキシ、ハロゲン、シアノ、又はＣ１－Ｃ５－アルコキシ基で場合により置換され得るアリール基、或いは１～３個の、アルキル、ヒドロキシ、ハロゲン、シアノ、又はＣ１－Ｃ５－アルコキシ基で場合により置換され得、１～３個のヘテロ原子を含み得るヘテロアリール基を意味し、
ｎは、１、２、３、４、５から選択される整数を意味する、
およびそれらの塩、溶媒和物、又は溶媒和物の塩に関する。
より好ましくは、一般式Ｉの化合物の使用であって、Ｒ１及びＲ２は、互いに独立して、水素原子、ヒドロキシル基、ハロゲン原子、場合により置換された（Ｃ１－Ｃ１０）－アルキル基、場合により置換された（Ｃ１－Ｃ１０）－アルコキシ基、（Ｃ１－Ｃ５）－パーフルオロアルキル基、シアノ基、又はＮＲ６Ｒ７を意味し、ここでＲ６及びＲ７は、互いに独立して水素、Ｃ１－Ｃ５－アルキル、又は（ＣＯ）－（Ｃ１－Ｃ５）－アルキルを意味し、Ｒ３は、水素原子、ヒドロキシ基、ハロゲン原子、シアノ基、場合により置換された（Ｃ１－Ｃ１０）－アルキル基、（Ｃ１－Ｃ１０）－アルコキシ基、又は（Ｃ１－Ｃ５）－パーフルオロアルキル基を意味し、Ｒ４は、水素、Ｃ１－Ｃ３－アルキル、Ｃ１－Ｃ３－アルコキシ、ヒドロキシ、ハロゲンを意味し、Ｒ５は、場合により部分的又は完全にハロゲン化され得る－（Ｃ１－Ｃ１０）アルキル、－（Ｃ２－Ｃ１０）アルケニル、－（Ｃ２－Ｃ１０）アルキニル、－（Ｃ３－Ｃ７）シクロアルキル－（Ｃ１－Ｃ８）アルキル、－（Ｃ３－Ｃ７）シクロアルキル－（Ｃ２－Ｃ８）アルケニル、－Ｓ－（Ｃ１－Ｃ１０）－アルキル、－ＳＯ２－（Ｃ１－Ｃ１０）－アルキル、－ＣＮ、－Ｈａｌ、－Ｏ－（Ｃ１－Ｃ１０）－アルキル、Ｒ６、Ｒ７が上で定義された意味である－ＮＲ６Ｒ７、－ＯＨから選択される基を意味し、ただし－ＣＨ（ＣＨ３）２、又は－Ｃ（ＣＨ３）＝ＣＨ２を除く、前記化合物、およびそれらの塩、溶媒和物、又は溶媒和物の塩である。
本発明のさらに別の態様は、請求項１の一般式Ｉの化合物であって、ここでＲ１、Ｒ２及びＲ３は、互いに独立して、水素、フッ素、塩素、臭素、シアノ基、メトキシ基、エトキシ基、ヒドロキシ基であり、Ｒ４は水素、Ｃ１－Ｃ３－アルキル、ハロゲンであり、Ｒ５は、ヒドロキシル基、塩素、－Ｓ－ＣＨ３、－Ｓ－ＣＨ２－ＣＨ３、－Ｓ－ＣＨ２－ＣＨ２－ＣＨ３、－Ｏ－ＣＨ３、又は－Ｏ－ＣＨ２－ＣＨ３、－Ｏ－ＣＨ２－ＣＨ２－ＣＨ３、－Ｎ－（ＣＨ３）２、－Ｎ－（ＣＨ２－ＣＨ３）２である、 前記化合物、およびそれらの塩、溶媒和物、又は溶媒和物の塩である。
本発明のさらに別の態様は、請求項１の一般式Ｉの化合物であって、ここでＲ１、Ｒ２及びＲ３は、互いに独立して、水素、フッ素、塩素、臭素、シアノ基、メトキシ基、エトキシ基、ヒドロキシ基であり、Ｒ４は水素、Ｃ１－Ｃ３－アルキル、ハロゲンであり、Ｒ５は、ヒドロキシル基、塩素、－Ｓ－ＣＨ３、－Ｓ－ＣＨ２－ＣＨ３、－Ｓ－ＣＨ２－ＣＨ２－ＣＨ３、－Ｏ－ＣＨ３、－Ｏ－ＣＨ２－ＣＨ３、－Ｏ－ＣＨ２－ＣＨ２－ＣＨ３、－Ｎ－（ＣＨ３）２、である、 前記化合物、およびそれらの塩、溶媒和物、又は溶媒和物の塩である。
より好ましくは、一般式Ｉの化合物の使用であって、ここでＲ１、Ｒ２及びＲ３は、互いに独立して、水素、フッ素、塩素、臭素、シアノ基、メトキシ基、エトキシ基、ヒドロキシ基であり、Ｒ４は水素、Ｃ１－Ｃ３－アルキル、ハロゲンであり、Ｒ５は、ヒドロキシル基、塩素、－Ｓ－ＣＨ３、－Ｓ－ＣＨ２－ＣＨ３、－Ｓ－ＣＨ２－ＣＨ２－ＣＨ３、－Ｏ－ＣＨ３、または－Ｏ－ＣＨ２－ＣＨ３、－Ｏ－ＣＨ２－ＣＨ２－ＣＨ３、である、 前記化合物、およびそれらの塩、溶媒和物、又は溶媒和物の塩である。
さらに好ましくは一般式Ｉの化合物の使用であって、ここでＲ１及びＲ２は、互いに独立して、水素、フッ素、塩素、メトキシ基、ヒドロキシル基であり、Ｒ３は、水素、フッ素、塩素、又はメトキシ基であり、Ｒ４は、水素又はフッ素であり、Ｒ５は、ヒドロキシ基、塩素原子、－Ｓ－ＣＨ３、－Ｓ－ＣＨ２－ＣＨ３、－Ｏ－ＣＨ３、－Ｏ－ＣＨ２－ＣＨ３、又はＮ（ＣＨ３）２である、前記化合物、及びそれらの塩、溶媒和物、又は溶媒和物の塩である。
本発明のさらなる態様は、請求項１の一般式Ｉの化合物であって、ここでＲ１及びＲ２は、互いに独立して、水素、フッ素、塩素、メトキシ基であり、Ｒ３は、水素、フッ素、塩素、又はメトキシ基であり、Ｒ４は、水素又はフッ素であり、Ｒ５は、ヒドロキシル基、塩素原子、－Ｓ－ＣＨ３、－Ｓ－ＣＨ２－ＣＨ３、－Ｏ－ＣＨ３、又は－Ｏ－ＣＨ２－ＣＨ３、である、前記化合物、及びそれらの塩、溶媒和物、又は溶媒和物の塩である。
本発明のより好ましい態様では、使用のための化合物は、エナンチオマー的に純粋な形態である、化合物、それらの塩、溶媒和物、又は溶媒和物の塩である。
さらにより好ましい態様において、使用のための化合物は次のリストから選ばれる：
５－｛［１－（２－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（［メチルスルファニル］メチル）プロピル］アミノ｝－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛［２－（［エチルスルファニル］メチル）－１－（２－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシプロピル］アミノ｝－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛［１－（２－クロロ－３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（［メチルスルファニル］メチル）プロピル］アミノ｝－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛［１－（２－クロロ－３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－２－（［エチルスルファニル］メチル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシプロピル］アミノ｝－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛［１－（２－クロロ－３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（メトキシメチル）プロピル］アミノ｝－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛［１－（２－クロロ－３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－２－（エトキシメチル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシプロピル］アミノ｝－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛［１－（２－クロロ－３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（ヒドロキシメチル）プロピル］アミノ｝－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛［１－（５－クロロ－３－フルオロ－２－メトキシフェニル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（ヒドロキシメチル）－プロピル］アミノ｝－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛［１－（５－クロロ－３－フルオロ－２－メトキシフェニル）－２－（クロロメチル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシプロピル］アミノ｝－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛［３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（［メトキシメチル）－１－フェニルプロピル］アミノ｝－１Ｈ－キノリン－１－オン、
５－｛［１－（２－クロロ－３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－２－（ジアミノメチル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシプロピル］アミノ｝－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛［１－（４－クロロ－３－フルオロ－２－メトキシフェニル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（メトキシメチル）プロピル］アミノ｝－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛［１－（２－クロロ－３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－２－（エトキシメチル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシプロピル］アミノ｝－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛［１－（２－クロロ－３－フルオロ－４－ヒドロキシフェニル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（ヒドロキシメチル）プロピル］アミノ｝－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オン
およびそれらの塩、溶媒和物、または溶媒和物の塩。
さらにより好ましくは、化合物、特にエナンチオマー的に純粋な化合物、であり、以下から選択される：
５－｛［１－（２－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（［メチルスルファニル］メチル）プロピル］アミノ｝－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛［２－（［エチルスルファニル］メチル）－１－（２－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシプロピル］アミノ｝－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛［１－（２－クロロ－３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（［メチルスルファニル］メチル）プロピル］アミノ｝－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛［１－（２－クロロ－３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－２－（［エチルスルファニル］メチル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシプロピル］アミノ｝－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛［１－（２－クロロ－３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（メトキシメチル）プロピル］アミノ｝－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛［１－（２－クロロ－３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－２－（エトキシメチル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシプロピル］アミノ｝－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛［１－（２－クロロ－３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（ヒドロキシメチル）プロピル］アミノ｝－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛［１－（５－クロロ－３－フルオロ－２－メトキシフェニル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（ヒドロキシメチル）－プロピル］アミノ｝－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛［１－（５－クロロ－３－フルオロ－２－メトキシフェニル）－２－（クロロメチル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシプロピル］アミノ｝－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛［３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（［メトキシメチル）－１－フェニルプロピル］アミノ｝－１Ｈ－キノリン－１－オン、
およびそれらの塩、溶媒和物、または溶媒和物の塩。
さらにより好ましくは、化合物の使用であり、特にエナンチオマー的に純粋な化合物の使用であり、化合物は次のリストから選ばれる：
５－｛（１Ｓ，２Ｒ）［１－（２－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（［メチルスルファニル］メチル）プロピル］アミノ｝－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛（１Ｓ，２Ｒ）［２－（［エチルスルファニル］メチル）－１－（２－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシプロピル］アミノ｝－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛（１Ｓ，２Ｒ）［１－（２－クロロ－３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（［メチルスルファニル］メチル）プロピル］アミノ｝－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛（１Ｓ，２Ｒ）［１－（２－クロロ－３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－２－（［エチルスルファニル］メチル）－トリフルオロ－２－ヒドロキシプロピル］アミノ｝－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛（１Ｓ，２Ｓ）［１－（２－クロロ－３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（メトキシメチル）プロピル］アミノ｝－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛（１Ｓ，２Ｓ）［１－（２－クロロ－３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－２－（エトキシメチル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシプロピル］アミノ｝－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛（１Ｓ，２Ｓ）［１－（２－クロロ－３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（ヒドロキシメチル）プロピル］アミノ｝－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛（１Ｓ，２Ｓ）［１－（５－クロロ－３－フルオロ－２－メトキシフェニル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（ヒドロキシメチル）プロピル］アミノ｝－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛（１Ｓ，２Ｒ）［１－（５－クロロ－３－フルオロ－２－メトキシフェニル）－２－（クロロメチル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシプロピル］アミノ｝－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛（１Ｓ，２Ｓ）［３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（［メトキシメチル）－１－フェニルプロピル］アミノ｝－１Ｈ－キノリン－１－オン、
５－｛（１Ｓ，２Ｒ）［１－（２－クロロ－３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－２－（ジアミノメチル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシプロピル］アミノ｝－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛（１Ｓ，２Ｓ）［１－（２－クロロ－３－フルオロ－４－ヒドロキシフェニル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（ヒドロキシメチル）プロピル］アミノ｝－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オン、
およびそれらの塩、溶媒和物、または溶媒和物の塩、の使用。
さらにより好ましくは、化合物の使用であり、特にエナンチオマー的に純粋な化合物の使用であり、化合物は次のリストから選ばれる：
５－｛（１Ｓ，２Ｒ）［１－（２－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（［メチルスルファニル］メチル）プロピル］アミノ｝－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛（１Ｓ，２Ｒ）［２－（［エチルスルファニル］メチル）－１－（２－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシプロピル］アミノ｝－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛（１Ｓ，２Ｒ）［１－（２－クロロ－３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（［メチルスルファニル］メチル）プロピル］アミノ｝－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛（１Ｓ，２Ｒ）［１－（２－クロロ－３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－２－（［エチルスルファニル］メチル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシプロピル］アミノ｝－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛（１Ｓ，２Ｓ）［１－（２－クロロ－３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（メトキシメチル）プロピル］アミノ｝－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛（１Ｓ，２Ｓ）［１－（２－クロロ－３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－２－（エトキシメチル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシプロピル］アミノ｝－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛（１Ｓ，２Ｓ）［１－（２－クロロ－３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（ヒドロキシメチル）プロピル］アミノ｝－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛（１Ｓ，２Ｓ）［１－（５－クロロ－３－フルオロ－２－メトキシフェニル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（ヒドロキシメチル）プロピル］アミノ｝－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛（１Ｓ，２Ｒ）［１－（５－クロロ－３－フルオロ－２－メトキシフェニル）－２－（クロロメチル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシプロピル］アミノ｝－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オン、
５－｛（１Ｓ，２Ｓ）［３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（［メトキシメチル）－１－フェニルプロピル］アミノ｝－１Ｈ－キノリン－１－オン、
およびそれらの塩、溶媒和物、または溶媒和物の塩、の使用。
さらに好ましい態様では、式(I)の化合物が本発明により好ましい：
Figure 2022524911000032
［式中、
Ｒ１は、アリール又はヘテロアリール基（それぞれ場合により、Ｃ１－Ｃ５アルキル、アミノカルボニル、Ｃ１－Ｃ５アルキルアミノカルボニル、Ｃ１－Ｃ５ジアルキルアミノカルボニル、アミノスルホニル、Ｃ１－Ｃ５アルキルアミノスルホニル、Ｃ１－Ｃ５ジアルキルアミノスルホニル、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、及びＣ１－Ｃ５アルキルチオ（ここで、硫黄原子は、場合によりスルホキシド又はスルホンまで酸化されている）から選択される１個、２個、又は３個の置換基で独立に置換されている）であり；
Ｒ２は、Ｃ１－Ｃ５アルキルチオ（ここで、硫黄原子は、場合によりスルホキシド又はスルホンまで酸化されている、場合により、ハロゲン、ヒドロキシ、オキソ、シアノ、アルコキシアルキル、及びアミノカルボニルから選択される１個、２個、又は３個の置換
基で独立に置換されている）であり；
Ｘは、ＣＨ又はＮであり； そして
Ｙは、ＣＨ又はＮであるが、ここで、
Ｘ及びＹは、両方がＣＨであることはない］
又、その互変異性体、光学異性体、プロドラッグ、共結晶、もしくは薬学的に許容可能な塩。
好ましくは、式（Ｉ）の化合物の使用であり、
［式中、 Ｒ１は、アリール又はヘテロアリール基（それぞれ場合により、Ｃ１－Ｃ５アルキル、アミノカルボニル、Ｃ１－Ｃ５アルキルアミノカルボニル、Ｃ１－Ｃ５ジアルキルアミノカルボニル、アミノスルホニル、Ｃ１－Ｃ５アルキルアミノスルホニル、Ｃ１－Ｃ５ジアルキルアミノスルホニル、ハロゲン、ヒドロキシル、シアノ、及びＣ１－Ｃ５アルキルチオ（ここで、硫黄原子は、場合によりスルホキシド又はスルホンまで酸化されている）から選択される１個、２個、又は３個の置換基で独立に置換されている）であり；
Ｒ２は、Ｃ１－Ｃ５アルキルチオ（ここで、硫黄原子は、場合によりスルホキシド又はスルホンまで酸化されている、それぞれ場合により、ハロゲン、ヒドロキシ、オキソ、シアノ、アルコキシアルキル、及びアミノカルボニルから選択される１～３個の置換基で独立に置換されている）であり；
Ｘは、ＣＨであり；そして
Ｙは、Ｎである］、
又はその互変異性体、プロドラッグ、共結晶、もしくは薬学的に許容可能な塩、の使用である。
好ましくは、式（Ｉ）の化合物の使用であり、
［式中、
Ｒ１は、アリール基（場合により、Ｃ１、Ｃ２、又はＣ３アルキル、アミノカルボニル、ハロゲン、及びＣ１、Ｃ２、又はＣ３アルキルチオ（ここで、硫黄原子は、場合によりスルホキシド又はスルホンまで酸化されている）から独立に選択される１個、２個、又は３個の置換基で置換されている）であり；
Ｒ２は、Ｃ１、Ｃ２、又はＣ３アルキルチオ（ここで、硫黄原子は、場合によりスルホキシド又はスルホンまで酸化されている、それぞれ場合により、ハロゲン、ヒドロキシ、オキソ、シアノ、アルコキシアルキル、及びアミノカルボニルから選択される１～３個の置換基で独立に置換されている）であり；
Ｘは、ＣＨであり；そして
Ｙは、Ｎである］
又はその互変異性体、プロドラッグ、共結晶、もしくは薬学的に許容可能な塩、の使用である。
好ましくは、式（Ｉ）の化合物の使用であり、
［式中、
Ｒ１は、フェニル基（場合により、アミノカルボニル、メチル、フルオロ、クロロ、ブロモ、及びＣ１又はＣ２アルキルチオ（ここで、硫黄原子は、場合によりスルホキシド又はスルホンまで酸化されている）から独立に選択される１個又は２個の置換基で置換されている）であり；
Ｒ２は、Ｃ１、Ｃ２、又はＣ３アルキルチオ（ここで、硫黄原子は、場合によりスルホキシド又はスルホンまで酸化されている）であり；
Ｘは、ＣＨであり；そして
Ｙは、Ｎである］、
又はその互変異性体、プロドラッグ、共結晶、もしくは塩、の使用である。
より好ましくは、式（Ｉ）の化合物の使用であり、
［式中、
Ｒ１は、フェニル基（場合により、アミノカルボニル、メチル、フルオロ、クロロ、ブロモ、及びＣ１又はＣ２アルキルチオ（ここで、硫黄原子は、場合によりスルホキシド又はスルホンまで酸化されている）から独立に選択される１個又は２個の置換基で置換されている）であり；
Ｒ２は、Ｃ１又はＣ２アルキルチオ（ここで、硫黄原子は、場合によりスルホキシド又はスルホンまで酸化されている）であり；
Ｘは、ＣＨであり；そして
Ｙは、Ｎである］、
又はその互変異性体、プロドラッグ、共結晶、もしくは薬学的に許容可能な塩、の使用である。
本発明におけるこれらの化合物の適切な局所製剤は特許文献３６に開示されている。特許文献３７は、乾癬、アトピー性皮膚炎、アレルギー性接触皮膚炎のようなＴ細胞介入炎症性皮膚症の局所的治療にこのような化合物を用いることを開示する。
ＢＩ－３０４７は次の構造を有し、ＢＩ－６５３０４８の不活性アナログである。
Figure 2022524911000033
ＢＩ－３０４７はＳＥＧＲＭではない。
特に、実施例において、ＷＥ－１からＷＥ－３について図１Ａから１Ｃに示したように、ＢＩ－６５３０４８は、単層（２Ｄ）培養でのヒト初代繊維芽細胞を非治癒性の創傷滲出液による成長阻害からレスキューすることができる。この効果は最高１０μＭまで用量依存的である。対照的に、ＢＩ－６５３０４８の不活性アナログであるＢＩ－３０４７は、すべてのテストした濃度において増殖促進効果を有しなかった。ＷＥ無の条件において、両方の化合物は線維芽細胞の同じような成長阻害を示した（図１Ｄ）。
加えて、ＢＩ－３０４７ではなくＢＩ－６５３０４８は，ＷＥの存在下において，増殖を増加させるのと同じ濃度で、繊維芽細胞培養において、ＩＬ－１ベータの分泌を減少させた。
創傷治癒の過程のために、線維芽細胞によるＩ型およびＩＩＩ型コラーゲンの産生は重要である。Ｉ型およびＩＩＩ型コラーゲンのｍＲＮＡ発現は、攻撃的創傷滲出液により、減少する（例えばＷＥおよび培地の比較、Ｉ型コラーゲンについて図３Ａおよび図３Ｃに、ＩＩＩ型コラーゲンについて図３Ｂおよび図３Ｄに示す）。図３Ｂに示したように、ＢＩ－３０４７ではなく、ＢＩ－６５３０４８は、創傷滲出液の存在下でＩ型およびＩＩＩ型両方のコラーゲンのｍＲＮＡ発現を誘導した。培地の存在下ではＩ型コラーゲンｍＲＮＡに顕著な影響はなく、両方の化合物について培地存在下でＩＩＩ型コラーゲンｍＲＮＡは減少した。
繊維芽細胞由来マトリックス形成アッセイにおいて（３Ｄ繊維芽細胞培養）、図４に示したように、ＢＩ－６５３０４８は、創傷滲出液の存在下でマトリックス形成誘導に効果的であった。この効果はグルココルチコイド受容体アンタゴニスト、ミフェプリストンによって完全に止められ、ＳＥＧＲＭのマトリックス促進活性はグルココルチコイド受容体によって仲介されることが示された。
マプラコラットおよび関連する５置換キノロン、およびＺＫ－２１６３４８を含むイソキノリン誘導体、と同様にそれらの合成は特許文献３８に開示されている。特に、式(ＩＩａ)および(ＩＩｂ)の次の化合物を使用してもよい。
Figure 2022524911000034
（式中、Ｒ１およびＲ２は、互いに独立して、水素原子、Ｃ１－３アルキル基、ハロゲン原子、シアノ基、Ｃ１－３アルコキシ基またはヒドロキシ基である）
同様にそれらのラセミ体または別々に存在する立体異性体およびそれらの生理学的に適合する塩を用いてもよい。
ハロゲン原子またはハロゲンという表示は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素原子を意味する。フッ素、塩素または臭素原子が好ましい。
Ｃ１－Ｃ３アルキル基およびＣ１－Ｃ５アルキル基は、直鎖状または分枝鎖状であることができ、そしてメチル、エチル、ｎ－プロピル、イソプロピル、ｎ－ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ－ブチルまたはｎ－ペンチル、２，２－ジメチルプロピル、２－ジメチルブチルまたは３－メチルブチル基である。
メチルまたはエチル基が好ましい。
基Ｒ１およびＲ２は好ましくは水素、Ｃ１－３アルキル、ハロゲンまたはヒドロキシである。水素、メチル、塩素およびヒドロキシが特に好ましい。
したがって、Ｒ１およびＲ２が、互いに独立して、好ましくは水素、Ｃ１－３アルキル、ハロゲンまたはヒドロキシである、一般式(ＩＩａ)および(ＩＩｂ)の５置換キノロンおよびイソキノリン誘導体の使用が好ましい。
Ｒ１およびＲ２が、互いに独立して、水素、メチル、塩素またはヒドロキシである、式ＩおよびＩＩｂの化合物の５置換キノロンおよびイソキノリン誘導体の使用が特に好ましい。
より好ましくは、一般式(ＩＩａ)の５置換キノロンおよびイソキノリン誘導体の使用である。
本発明に係る使用のための、一般式(ＩＩａ)および(ＩＩｂ)の５置換キノロンおよびイソキノリン誘導体は、不斉中心が存在するため、異なる立体異性体として存在することができる。ラセミ体および別々に存在する立体異性体の両方が、本発明の主題に属する。
別々に存在する立体異性体、すなわち、（＋）－エナンチオマーおよび（－）－エナンチオマー、特に特許文献３８の実施例１、２、３、４、５、１１および１２の立体異性体が、本発明の使用に特に好ましい。
本発明に係る使用のための化合物もまた、キノリニルまたはイソキノリニル－窒素原子に対してα－位にヒドロキシ基を含有する場合、ケト－エノール－互変異性の存在により区別される。本発明における用語において、例えば実験の部において２つの互変異体のうち１つのみが記載されているとしても、両方の形態が本発明の主題の一部である。
特に、次のＳＥＧＲＭを本発明にかかる使用に用いることができる：
５－［４－（５－フルオロ－２，３－ジヒドロベンゾフラン－７－イル)－２－ヒドロキシ－４－メチル－２－トリフルオロメチル－ペンチルアミノ]－２－メチルキノリン、
５－［４－（５－フルオロ－２，３－ジヒドロベンゾフラン－７－イル)－２－ヒドロキシ－４－メチル－２－トリフルオロメチル－ペンチルアミノ]－１－メチルイソキノリン、
５－［４－（５－フルオロ－２，３－ジヒドロベンゾフラン－７－イル)－２－ヒドロキシ－４－メチル－２－トリフルオロメチル－ペンチルアミノ]イソキノル－１（２Ｈ）－オン、
５－［４－（５－フルオロ－２，３－ジヒドロベンゾフラン－７－イル)－２－ヒドロキシ－４－メチル－２－トリフルオロメチル－ペンチルアミノ]－２，６－ジメチルキノリン、
５－［４－（５－フルオロ－２，３－ジヒドロベンゾフラン－７－イル)－２－ヒドロキシ－４－メチル－２－トリフルオロメチル－ペンチルアミノ]－６－クロロ－２－メチルキノリン、
５－［４－（５－フルオロ－２，３－ジヒドロベンゾフラン－７－イル)－２－ヒドロキシ－４－メチル－２－トリフルオロメチル－ペンチルアミノ]イソキノリン、
５－［４－（５－フルオロ－２，３－ジヒドロベンゾフラン－７－イル)－２－ヒドロキシ－４－メチル－２－トリフルオロメチル－ペンチルアミノ]キノリン、
５－［４－（２，４－ジヒドロ－５－フルオロ－７－ベンゾフラニル)－２－ヒドロキシ－４－メチル－２－トリフルオロメチル－ペンチルアミノ]キノリン－２［１Ｈ］－オン、
６－フルオロ－５－［４－（５－フルオロ－２，３－ジヒドロベンゾフラン－７－イル）－２－ヒドロキシ－４－メチル－２－トリフルオロメチル－ペンチルアミノ]－２－メチルキノリン、
８－フルオロ－５－［４－（５－フルオロ－２，３－ジヒドロベンゾフラン－７－イル）－２－ヒドロキシ－４－メチル－２－トリフルオロメチル－ペンチルアミノ]－２－メチルキノリン、
５－［４－（５－フルオロ－２，３－ジヒドロベンゾフラン－７－イル）－２－ヒドロキシ－４－メチル－２－トリフルオロメチル－ペンチルアミノ]－２－メチルイソキノル-１（２Ｈ）－オン、ならびにそれらの別々のエナンチオマー:
２（Ｒ）－５－［４－（５－フルオロ－２，３－ジヒドロベンゾフラン－７－イル）－２－ヒドロキシ－４－メチル－２－トリフルオロメチル－ペンチルアミノ]－２－メチルキノリン、
２（Ｒ）－５－［４－（５－フルオロ－２，３－ジヒドロベンゾフラン－７－イル）－２－ヒドロキシ－４－メチル－２－トリフルオロメチル－ペンチルアミノ]-1-メチルイソキノリン、
２（Ｒ）－５－［４－（５－フルオロ－２，３－ジヒドロベンゾフラン－７－イル）－２－ヒドロキシ－４－メチル－２－トリフルオロメチル－ペンチルアミノ]イソキノル-１（２Ｈ）－オン、
２（Ｒ）－５－［４－（５－フルオロ－２，３－ジヒドロベンゾフラン－７－イル）－２－ヒドロキシ－４－メチル－２－トリフルオロメチル－ペンチルアミノ]－２，６－ジメチルキノリン、
２（Ｒ）－５－［４－（５－フルオロ－２，３－ジヒドロベンゾフラン－７－イル）－２－ヒドロキシ－４－メチル－２－トリフルオロメチル－ペンチルアミノ]－６－クロロ－メチルキノリン、
２（Ｒ）－５－［４－（５－フルオロ－２，３－ジヒドロベンゾフラン－７－イル）－２－ヒドロキシ－４－メチル－２－トリフルオロメチル－ペンチルアミノ]イソキノリン、
２（Ｒ）－５－［４－（５－フルオロ－２，３－ジヒドロベンゾフラン－７－イル）－２－ヒドロキシ－４－メチル－２－トリフルオロメチル－ペンチルアミノ]キノリン、
２（Ｒ）－５－［４－（５－フルオロ－２，３－ジヒドロベンゾフラン－７－イル）－２－ヒドロキシ－４－メチル－２－トリフルオロメチル－ペンチルアミノ]キノリン-２［１Ｈ］－オン、
２（Ｒ）－６－フルオロ－５－［４－（５－フルオロ－２，３－ジヒドロベンゾフラン－７－イル）－２－ヒドロキシ－４－メチル－２－トリフルオロメチル－ペンチルアミノ]－２－メチルキノリン、
２（Ｒ）－８－フルオロ－５－［４－（５－フルオロ－２，３－ジヒドロベンゾフラン－７－イル）－２－ヒドロキシ－４－メチル－２－トリフルオロメチル－ペンチルアミノ]－２－メチルキノリン、
２（Ｒ）－５－［４－（５－フルオロ－２，３－ジヒドロベンゾフラン－７－イル）－２－ヒドロキシ－４－メチル－２－トリフルオロメチル－ペンチルアミノ]－２－メチルイソキノル－１（２Ｈ）－オン、
２（Ｓ）－５－［４－（５－フルオロ－２，３－ジヒドロベンゾフラン－７－イル）－２－ヒドロキシ－４－メチル－２－トリフルオロメチル－ペンチルアミノ]－２－メチルキノリン、
２（Ｓ）－５－［４－（５－フルオロ－２，３－ジヒドロベンゾフラン－７－イル）－２－ヒドロキシ－４－メチル－２－トリフルオロメチル－ペンチルアミノ]－１－メチルイソキノリン、
２（Ｓ）－５－［４－（５－フルオロ－２，３－ジヒドロベンゾフラン－７－イル）－２－ヒドロキシ－４－メチル－２－トリフルオロメチル－ペンチルアミノ]イソキノル-１（２Ｈ）－オン、
２（Ｓ）－５－［４－（５－フルオロ－２，３－ジヒドロベンゾフラン－７－イル）－２－ヒドロキシ－４－メチル－２－トリフルオロメチル－ペンチルアミノ]－２，６－ジメチルキノリン、
２（Ｓ）－５－［４－（５－フルオロ－２，３－ジヒドロベンゾフラン－７－イル）－２－ヒドロキシ－４－メチル－２－トリフルオロメチル－ペンチルアミノ]－６－クロロ－２－メチルキノリン、
２（Ｓ）－５－［４－（５－フルオロ－２，３－ジヒドロベンゾフラン－７－イル）－２－ヒドロキシ－４－メチル－２－トリフルオロメチル－ペンチルアミノ]イソキノリン、
２（Ｓ）－５－［４－（５－フルオロ－２，３－ジヒドロベンゾフラン－７－イル）－２－ヒドロキシ－４－メチル－２－トリフルオロメチル－ペンチルアミノ]キノリン、
２（Ｓ）－５－［４－（２，３－ジヒドロ－５－フルオロ－７－ベンゾフラニル)－２－ヒドロキシ－４－メチル－２－トリフルオロメチル－ペンチルアミノ]キノリン－２［１Ｈ］－オン、
２（Ｓ）－６－フルオロ－５－［４－（５－フルオロ－２，３－ジヒドロベンゾフラン－７－イル）－２－ヒドロキシ－４－メチル－２－トリフルオロメチル－ペンチルアミノ]－２－メチルキノリン、
２（Ｓ）－８－フルオロ－５－［４－（５－フルオロ－２，３－ジヒドロベンゾフラン－７－イル）－２－ヒドロキシ－４－メチル－２－トリフルオロメチル－ペンチルアミノ]－２－メチルキノリン、
２（Ｓ）－５－［４－（５－フルオロ－２，３－ジヒドロベンゾフラン－７－イル）－２－ヒドロキシ－４－メチル－２－トリフルオロメチル－ペンチルアミノ]－２－メチルイソキノル－１（２Ｈ）－オン。
特に好ましくは、５－［４－（５－フルオロ－２，３－ジヒドロベンゾフラン－７－イル)－２－ヒドロキシ－４－メチル－２－トリフルオロメチル-ペンチルアミノ]－２－メチルキノリン、およびその別々に存在するエナンチオマー、２（Ｒ）－５－［４－（５－フルオロ－２，３－ジヒドロベンゾフラン－７－イル)－２－ヒドロキシ－４－メチル－２－トリフルオロメチル-ペンチルアミノ]－２－メチルキノリン、および、２（Ｓ）－５－［４－（５－フルオロ－２，３－ジヒドロベンゾフラン－７－イル)－２－ヒドロキシ－４－メチル－２－トリフルオロメチル-ペンチルアミノ]－２－メチルキノリン、である。
さらに好ましい態様では、マプラコラットまたはその薬学的に許容可能な塩は、本発明により使用されることができる。マプラコラットは次の式（Ｉ）の化合物のＩＮＮ名である：
Figure 2022524911000035
（Ｉ）
ＺＫ－２１６３４８は次の構造（ＩＩＩ）を有する
Figure 2022524911000036
特に、実施例において、マプラコラットがＢＩ－６５３０４８と同じように、創傷滲出液の存在下２Ｄ培養での繊維芽細胞の増殖を増強することがわかった（図５）。
段階的な濃度のマプラコラットは、創傷滲出液の存在下２Ｄ繊維芽細胞培養において、Ｉ型コラーゲンおよびＩＩＩ型コラーゲンのｍＲＮＡ発現を増強したが、培地存在下ではおこらなかった（それぞれ図６および図７）。逆に、図８Ａに示すように、マプラコラットは、これらの培養におけるＩＬ－１βのｍＲＮＡ発現を濃度依存的に阻害する（培地でのＩＬ－１βｍＲＮＡレベルは検出限界より下であった）。
さらに、創傷治癒遅延ブタモデルの、慢性ヒト創傷からの創傷滲出液および創傷治癒の遅延の誘導物質であるＴＬＲ７／８アゴニスト、Ｒ８４８で処理した創傷において、マプラコラットが６から１２日での創傷スコアを減少することが分かった。
特に、実施例では、ＺＫ－２１６３４８およびＨＹ１４２３４が創傷滲出液により誘導された増殖阻害から、２Ｄ培養において、繊維芽細胞をレスキューすることができることが分かった。（図９Ａ、１０Ａおよび１１Ａ）。ＺＫ－２１６３４８はより効果的ではなかった。ＺＫ－２１６３４８およびＨＹ１４２３４の両方が、３つの異なる創傷浸出液の存在下での繊維芽細胞培養における、創傷滲出液誘導ＩＬ－１β分泌を阻害した（図９Ｂ、１０Ｂおよび１１Ｂ）。
特に好ましい態様では、本発明の使用のためのＳＥＧＲＭは以下から選ばれる：
（ｉ）下の式(ＩＩａ)または（ＩＩｂ）の化合物：
Figure 2022524911000037
式中、
Ｒ１およびＲ２は、互いに独立して、水素原子、Ｃ１－３アルキル基、ハロゲン原子、シアノ基、Ｃ１－３アルコキシ基またはヒドロキシ基であり、
および、それらのラセミ体または別々に存在する立体異性体およびそれらの薬学的に許容可能な塩またはそれらのプロドラッグ；
（ｉｉ）化合物（Ｒ）－２－（４－（（５－（エチルスルホニル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イル）メチル）－５，５，５－トリフルオロ－４－ヒドロキシ－２－メチルペンタン－２－イル）－５－フルオロベンザミド、またはその薬学的に許容可能な塩；
（ｉｉｉ）下記の式の化合物：
Figure 2022524911000038
またはその薬学的に許容可能な塩；
（ｉｖ）下記の式の化合物：
Figure 2022524911000039
またはその薬学的に許容可能な塩；
（ｖ）下記の式（Ｉ）の化合物：
Figure 2022524911000040
［式中、
Ｒ1は、５および６員ヘテロアリール、(Ｃ1－Ｃ6)アルキル、(Ｃ3－Ｃ6)シクロアルキル、(４－６)員ヘテロシクロアルキルおよびフェニルからなる群から選択され、ここで、当該５および６員ヘテロアリール、(Ｃ1－Ｃ6)アルキル、(Ｃ3－Ｃ6)シクロアルキル、(４－６)員ヘテロシクロアルキルおよびフェニルは、(Ｃ1－Ｃ4)アルキル、(Ｃ1－Ｃ4)アルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシルおよびシアノから独立して選択される１個以上の置換 基で置換されていてもよく；
Ｒ2は、(Ｃ1－Ｃ3)アルキルおよびハロ(Ｃ1－Ｃ3)アルキルから選択され；
Ｒ3は、フェニル、５員ヘテロアリールおよび６員ヘテロアリールから選択され、ここで、当該フェニル、５員ヘテロアリールおよび６員ヘテロアリールは、Ｒ5から独立して選択される１個以上の置換基で置換されていてもよく；
Ｒ4は、水素、ハロゲン、(Ｃ1－Ｃ4)アルキルおよびハロ(Ｃ1－Ｃ4)アルキルから選択され；
Ｒ5は、ハロゲン、シアノ、(Ｃ1－Ｃ6)アルキル、(Ｃ3－Ｃ6)シクロアルキル、(Ｃ1－Ｃ6)アルコキシ、ハロ(Ｃ1－Ｃ6)アルキル、ハロ(Ｃ1－Ｃ6)アルコキシ、ヒドロキシ(Ｃ1－Ｃ6)アルキル、フェニル、５員ヘテロアリール、６員ヘテロアリールおよび－Ｓ(Ｏ)2Ｒaから選択され、ここで、Ｒaは、(Ｃ1－Ｃ4)アルキルを表し；
Ｘ1は、ＣＨ、Ｃ(Ｒb)およびＮから選択され、ここで、Ｒbは、ハロゲン、(Ｃ1－Ｃ4)アルキルまたはハロ(Ｃ1－Ｃ4)アルキルを表し；
Ｘ2は、ＣＨおよびＮから選択され；
Ｙは、－ＮＨ－および－Ｏ－から選択され；
ｍは、０または１であり；ｎは、０または１であり；
Ｌは、結合、－Ｏ－、－ＮＨ－または－Ｎ(Ｒc)－を表し、ここで、Ｒcは、(Ｃ1－Ｃ4)アルキルを表す］、
またはその薬学的に許容される塩、水和物もしくは溶媒和物。
（ｖｉ）下記の式（ＩＩＩ）の化合物：
Figure 2022524911000041
［式中、
Ｒ１及びＲ２は、互いに独立して、水素原子、ヒドロキシ基、ハロゲン原子、場合により置換された（Ｃ１－Ｃ１０）－アルキル基、場合により置換された（Ｃ１－Ｃ１０）－アルコキシ基、（Ｃ１－Ｃ１０）－アルキルチオ基、（Ｃ１－Ｃ５）－パーフルオロアルキル基、シアノ基、ニトロ基を意味し、
或いはＲ１及びＲ２は、一緒になって、－Ｏ－（ＣＨ２）ｐ－Ｏ－、－Ｏ－（ＣＨ２）ｐ－ＣＨ2－、－Ｏ－ＣＨ＝ＣＨ－、－（ＣＨ２）ｐ＋２－、－ＮＨ－（ＣＨ２）ｐ＋１、－Ｎ（Ｃ１－Ｃ３－アルキル）－（ＣＨ２）ｐ＋１、及び－ＮＨ－Ｎ＝ＣＨ－基から選択される基を意味し、ここでｐ＝１又は２であり、そして末端酸素原子及び／又は炭素原子及び／又は窒素原子は、隣接する環炭素原子と直接結合され、
或いはＮＲ６Ｒ７を意味し、ここでＲ６及びＲ７は、互いに独立して水素、Ｃ１－Ｃ５－アルキル、又は（ＣＯ）－（Ｃ１－Ｃ５）－アルキルを意味し、
Ｒ３は、水素原子、ヒドロキシ基、ハロゲン原子、シアノ基、場合により置換された（Ｃ１－Ｃ１０）－アルキル基、（Ｃ１－Ｃ１０）－アルコキシ基、（Ｃ１－Ｃ１０）－アルキルチオ基 、又は（Ｃ１－Ｃ５）－パーフルオロアルキル基を意味し、
Ｒ4は、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、（Ｃ１－Ｃ５）－アルキル、（Ｃ１－Ｃ５）アルコキシ、（Ｃ１－Ｃ５）－アルキルチオ、（Ｃ１－Ｃ５）－パーフルオロアルキル、シアノ、ニトロ、ＮＲ６Ｒ７、ＣＯＯＲ９、（ＣＯ）ＮＲ６Ｒ７又は（Ｃ１－Ｃ５－アルキレン）－Ｏ（ＣＯ）－（Ｃ１－Ｃ５）アルキル基を意味し、
Ｒ５は、
場合により部分的又は完全にハロゲン化され得る－（Ｃ１－Ｃ１０）アルキル、
－（Ｃ２－Ｃ１０）アルケニル、
－（Ｃ２－Ｃ１０）アルキニル、
（Ｃ３－Ｃ７）シクロアルキル－（Ｃ１－Ｃ８）アルキル、
（Ｃ３－Ｃ７）シクロアルキル－（Ｃ１－Ｃ８）アルケニル、
（Ｃ３－Ｃ７）シクロアルキル－（Ｃ２－Ｃ８）アルキニル、
ヘテロシクリル－（Ｃ１－Ｃ８）アルキル、
ヘテロシクリル－（Ｃ１－Ｃ８）アルケニル、
ヘテロシクリル－（Ｃ２－Ｃ８）アルキニル、
－Ｒ８、
Ｒ８－（Ｃ１－Ｃ８）アルキル、
Ｒ８－（Ｃ２－Ｃ８）アルケニル、
Ｒ８－（Ｃ２－Ｃ８）アルキニル、
－Ｓ－（Ｃ１－Ｃ１０）－アルキル、
－ＳＯ２－（Ｃ１－Ｃ１０）－アルキル、
－Ｓ－Ｒ８、
－ＳＯ2－Ｒ8、
－ＣＮ、
－Ｈａｌ、
－Ｏ－（Ｃ１－Ｃ１０）－アルキル、
Ｒ６、Ｒ７が上で定義された意味である－ＮＲ６Ｒ７、
－Ｏ－Ｒ８、
－ＯＨ
から選択される基を意味し、ただし－ＣＨ（ＣＨ３）２、又は－Ｃ（ＣＨ３）＝ＣＨ２を除いてであり、
Ｒ８は、１から３個の、ヒドロキシ、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ５－アルキル、Ｃ１－Ｃ５－アルコキシ、シアノ、ＣＦ３、ニトロ、ＣＯＯ（Ｃ１－Ｃ５－アルキル）又はＣ（Ｏ）ＯＣＨ２－フェニルによって場合により置換され得るアリール基、或いは１から３個の、アルキル基、ヒドロキシ、ハロゲン、シアノ、又はＣ１－Ｃ５－アルコキシ基によって場合により置換され得、１から３個のヘテロ原子を含み得るヘテロアリール基を意味する］
の化合物、或いはそれらの塩、溶媒和物、又は溶媒和物の塩。
さらに好ましい態様では、本発明の使用のための、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩は次の化合物から選ばれる：

Figure 2022524911000042
Figure 2022524911000043

（Ｒ）－２－４－（（５－（エチルスルホニル）－１Ｈ－ピロロ［２，３－ｃ］ピリジン－２－イル）メチル）－５，５，５－トリフルオロ－４－ヒドロキシ－２－メチルペンタン－２－イル）－５－フルオロベンザミド；

Figure 2022524911000044
Figure 2022524911000045
Figure 2022524911000046
［（３Ｓ）－１－［（３Ｒ）－５－オキソテトラヒドロフラン－３－カルボニル］－３－ピペリジル］４－［（１Ｒ，２Ｓ）－１－（４－シクロプロピルフェニル）－２－［［（２Ｒ）－テトラヒドロフラン－２－カルボニル］アミノ］プロキシ］ベンゾエート；
５－｛［（１Ｓ，２Ｓ）－１－（２－クロロ－３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（メトキシメチル）プロピル］アミノ｝－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オン；および
５－｛［（１Ｓ，２Ｓ）－１－（２－クロロ－３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３，３，３－トリフルオロ－２－ヒドロキシ－２－（ヒドロキシメチル）プロピル］アミノ｝－７－フルオロ－１Ｈ－キノリン－２－オン；
または、その薬学的に許容可能な塩。
特に、複数のＳＥＧＲＭを、患者番号９２からの創傷滲出液とともに培養した３Ｄ繊維芽細胞培養において試験した。結果は図１２に示す。３Ｄ培養において、ＡＺＤ７５９４が試験したＳＥＧＲＭのうち最も有効であり、続いてマプラコラットおよびＢＩ６５３０４８であった。これは、それらのグルココルチコイド受容体活性の効力と一致する（それぞれのＥＣ５０値は、０．９ｎＭ、１．９ｎＭおよび５５ｎＭ）。さらに、ＨＹ－１４２３４も有効であることが分かった。不活性化型アナログＢＩ３０４７はマトリックス形成を誘導しなかった。
用語「薬学的に許容可能」は、修飾された名詞が医薬品または医薬品の一部として用いるのに適切であることを意味する。薬学的に許容可能な塩には、アルカリ金属塩、および酸なしまたは塩基無の付加塩、の形に通常使用される塩が含まれる。一般にこれらの塩は、典型的には、例えば本発明に用いられる化合物と適切な酸または塩基を反応させることによる、従来の方法によって調製されてよい。
薬学的に許容可能な酸付加塩は、無機または有機酸から調製することができる。多くの場合適切な無機酸の例には、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、炭酸、硫酸、およびリン酸が含まれる。適切な有機酸には、一般に、例えば、有機酸の脂肪族、環状脂肪族、芳香族、芳香脂肪族、複素環、カルボン酸、およびスルホン酸のクラスが含まれる。多くの場合適切な有機酸の特定の例には、酢酸、トリフルオロ酢酸、ギ酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、グルコン酸、ジグルコン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸塩、クエン酸、アスコルビン酸、グルクロン酸、マレイン酸塩、フマル酸、ピルビン酸、アスパラギン酸塩、グルタミン酸、安息香酸、アントラニル酸、メシル酸、ステアリン酸、サリチル酸p-ヒドロキシ安息香酸、フェニル酢酸、マンデル酸、エンボネート（パモ酸）、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、パントテン酸、２－ヒドロキシエタンスルホン酸、スルファニル酸、シクロヘキシルアミノスルホン酸、アルゲン酸、ベータ-ヒドロキシ酪酸、ガラクタル酸、ガラクツロン酸、アジピン酸、アルギン酸、重硫酸、酪酸、樟脳酸、シクロペンタンプロピオン酸、ドデシル硫酸、グリコヘプタン酸、グリセロリン酸、ヘプタン酸、ヘキサン酸、ニコチン酸、シュウ酸、パルモエート、ペクチン酸、２－ナフタレンスルホン酸、３－フェニルプロピオン酸、ピクリン酸、ピバル酸、チオシアン酸、トシラート、およびウンデカン酸、が含まれる。
薬学的許容可能な塩基付加塩には、例えば金属塩および有機塩が含まれる。好ましい金属塩には、アルカリ金属（ＩＡ属）塩、アルカリ土類（ＩＩＡ属）塩、および他の物理的に許容可能な金属塩が含まれる。そのような塩は、アルミニウム、カルシウム、リチウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウムおよび亜鉛から作られてよい。好ましい有機塩は、トロメタミン、ジエチルアミン、Ｎ，Ｎ'－ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、メグルミン（Ｎ－メチルグルカミン）、およびプロカインのようなアミンから作られることができる。含窒素塩基は、低級アルキル（Ｃ１－Ｃ６）ハライド（例えば、メチル、エチル、プロピルおよびブチルの塩化物、臭化物、ヨウ化物）、ジアルキル硫酸塩（例えば、ジメチル、ジエチル、ジブチル、およびジアミル硫酸塩）、長鎖ハライド（例えば、ラウリル、ミリスチル、ステアリルの塩化物、臭化物、ヨウ化物）、アリルアルカリハライド（例えば、ベンジルおよびフェネチルブロマイド）および他の塩が含まれる。
好ましいマプラコラットの生理学的に許容可能な塩には、例えば、塩酸、臭化水素酸、硫酸、リン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ナフタレンジスルホン酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸、安息香酸の塩など、鉱酸、カルボン酸、スルホン酸の酸付加塩が含まれる。マプラコラットの生理学的に許容可能な塩には、例として好ましくは、アルカリ金属塩（例えばナトリウムおよびカリウム塩）、アルカリ土類塩（例えばカルシウムおよびマグネシウム塩）および、アンモニアまたは１から１６炭素原子を有する有機アミン（例として好ましくは、エチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、エチルジイソプロピルアミン、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、エチルジイソプロピルアミン、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、ジシクロヘキシルアミン、ジメチルアミノエタノール、プロカイン、ジベンジルアミン、Ｎ－メチルモルホリン、アルギニン、リシン、エチレンジアミンおよびN-メチルピペリジンなど）から誘導されるアンモニウム塩が含まれる。
Ｃ２－Ｃ８－アルケニルという用語は、例えば、ビニル、プロペン－１－イル、プロペン－２－イル（アリル）、ブタ－１－エン－１－イル、ブタ－１－エン－２－イル、ブタ－２－エン－１－イル、ブタ－２－エン－２－イル、２－メチル-プロプ－２－エン－１－イル、２－メチル-プロプ－１－エン－１－イル、ブタ－１－エン－３－イル、ブタ－３－エン－１－イルなどのＥ－またはＺ－構成の二重結合を有する異性体を含む、直鎖または分子鎖、置換鎖または非置換鎖である。アルケニル残基が２つの他の部分の間に配置されている場合、アルケニルという用語は、例えばビニレン、プロペン－１－イレン、プロペン－２－イレン（アリレン）、ブタ－１－-エン－１－イレン、ブタ－１－エン－２－イレン、ブタ－２－エン－１－イレン、ブタ－２－エン－２－イレン、２－メチル-プロプ－２－エン－１－イレン、２－メチル-プロプ－１－エン－１－イレン、ブタ－１－エン－３－イレン、ブタ－３－エン－１－イレンなどのアルケニレンを意味する。
Figure 2022524911000047
Ｃ３－Ｃ７－シクロアルキルという用語は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルから選ばれる、置換または非置換基を意味する。可能な置換基は、ヒドロキシ、ハロゲン、（Ｃ１－Ｃ５）－アルキル、（Ｃ１－Ｃ５）－アルコキシ、ＮＲ４Ｒ５、ＣＯＯ（Ｃ１－Ｃ５）－アルキル、ＣＨＯ、シアノから選ばれてよい。
Ｃ３－Ｃ７－シクロアルキル－（Ｃ１Ｃ１０）－アルキルという用語は、例えば、－（ＣＨ２）－シクロアルキル、－（Ｃ２Ｈ４）－シクロアルキル、（Ｃ３Ｈ６）－シクロアルキル、－（Ｃ４Ｈ８）－シクロアルキル、－（Ｃ５Ｈ１０）－シクロアルキル、を意味する。よってシクロアルキルは、例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルを表す。
Ｃ３－Ｃ７－シクロアルキル－（Ｃ２－Ｃ８）－アルケニルという用語は、例えば、－（ＣＨ＝ＣＨ）－シクロアルキル、－［Ｃ（ＣＨ３）＝ＣＨ］－シクロアルキル、－［ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）］－シクロアルキル、－（ＣＨ＝ＣＨ－ＣＨ２）－シクロアルキル、－（ＣＨ２－ＣＨ＝ＣＨ）－シクロアルキル、－（ＣＨ＝ＣＨ－ＣＨ２－ＣＨ２－ＣＨ２）－シクロアルキル、－（ＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ－ＣＨ２）－シクロアルキル、－（ＣＨ２－ＣＨ２－ＣＨ＝ＣＨ）－シクロアルキル、－（Ｃ（ＣＨ３）＝ＣＨ－ＣＨ２）－シクロアルキル、－（ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ３）－ＣＨ２）－シクロアルキルを意味する。よって、シクロアルキルという用語は、上に定義される。
ヘテロシクリルという用語は、例えば、ピペリジニル－、モルホリニル－、チオモルオニリル－、ピペラジニル－、テトラヒドロフラニル－、テトラヒドロチエニル－、イミダゾリヂジル－、ピロロリジニル－、を意味し、よって、ヘテロシクリル基がいずれかの可能な環原子を介して結合することができる。ヘテロシクリル基は、Ｃ１－Ｃ５－アルキル（場合によっては置換された）、ヒドロキシ－、Ｃ１－Ｃ５－アルコキシ－、ＮＲ４Ｒ５－、ハロゲン、シアノ－、ＣＯＯＲ８－、ＣＨＯ－によって置換されてよい。もし可能であれば、これらの置換基は、もしあれば、遊離窒素原子の一つに結合してもよい。Ｎ－オキシドもまた定義に含まれる。
ヘテロシクリル－（Ｃ１－Ｃ１０）－アルケニルという用語は、上記ですでに定義されたヘテロシクリル基に結合する、上記で定義されたアルキレン基を意味する。
ヘテロシクリル－（Ｃ２－Ｃ８）－アルケニルという用語は、上記ですでに定義されたヘテロシクリル基に結合する、上記で定義されたアルキレニレン基を意味する。
本発明の意味におけるアリールという用語は、例えばフェニルのような６から１４炭素原子を有する芳香または部分的に芳香炭素環であり、また例えばナフチルまたはアントラニルのような縮合二環または縮合三環を有する芳香または部分的に芳香炭素環、を意味する。さらなる例として、フェニル、ナフチル、テトラリニル、アントラニル、ベンゾキサジオン、ジヒドロインドロン、インダニルおよびインデニルが挙げられる。アリール基は、一つ又はいくつかの置換基、例えばヒドロキシ、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ５－アルキル、Ｃ１－Ｃ５－アルコキシ、シアノ、ＣＦ３、ニトロ、ＣＯＯ（Ｃ１－Ｃ５－アルキルまたはベンジル）またはヘテロアリール基のような１－３置換基、によって、安定な分子につながるいずれの位置で置換されてもよく、好ましくは１－３Ｃ１－Ｃ５－アルキル基、ヒドロキシル、ハロゲン、シアノまたはＣ１－Ｃ５－アルコキシ、によって置換されてもよい。
ヘテロアリールという用語は、窒素、酸素または硫黄から選ばれる１から３ヘテロ原子を有する芳香環システムを意味し、５員環では、ヘテロ原子の最大数は３であリ、よって二つの酸素または硫黄原子がお互いに直接結合しないならば、二つの酸素または硫黄原子のみが可能である。
可能なヘテロアリール環は、例えばチエニル、フラニル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、チアジアゾリル、ベンゾフラニル、ベンゾチエニル、ベンゾチアゾール、ベンゾオキサゾリル、ベンゾイミダゾリル、インダゾリル、インドリル、イソインドリル、ピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、トリアジニル、アザインドリジニル、ベンゾピリジル、ベンゾピリダジニル、ベンゾピリミジニル、ベンゾピラジニル、ベンゾトリアジニル、キノリル、イソキノリル、フタリジル、チオフタリジル、インドロニル、ジヒドロインドロニル、イソインドロニル、ジヒドロイソインドロニル、ベンゾフラニルまたはベンゾイミダゾリル、である。
本発明における使用のためのＳＥＧＲＭは、治療的に有効な量を対象に投与される。全身投与について、各ＳＥＧＲＭによるが、各ＳＥＧＲＭ用量は１日あたり約１０から１０００ｍｇの範囲であるだろう。ＳＥＧＲＭの皮膚または皮内剤形のような局所製剤は、約０．００００１から１０％（ｗ／ｖ）、約０．００００１から６％（ｗ／ｖ）、または約０．００００１から１％（ｗ／ｖ）、０．０００１から０．１％（ｗ／ｖ）の濃度で投与されてよく、例えば０．００１から１％（ｗ／ｖ）のクリーム、ゲル、ローション、軟膏、リポソーム製剤またはナノ粒子製剤またはそのようなものである。
例えば、マプラコラットの局所剤形には、好ましくは、０．０１重量％超過から１０、９、８、７、６、５、４、３、２、または１重量％未満の濃度のマプラコラット（０．０１重量％ ＜ マプラコラット濃度 ＜ １、２、３、４、５、６、７、８、９、１０重量％）を含み、特に、０．０１重量％超過から５、４、３、２、または１重量％未満（０．０１重量％ ＜ マプラコラット濃度 ＜ １、２、３、４、５重量％）、または０．０５重量％超過から０．１５重量％未満（０．０５重量％ ＜ マプラコラット濃度 ＜ ０．１５重量％）、または０．０２重量％超過から０．５重量％未満（０．０２重量％ ＜ マプラコラット濃度 ＜ ０．５重量％）、またはこれらの値の組み合わせの何れかの範囲の濃度のマプラコラットを含む。
例えば、特許文献３５の化合物について特許文献３６に開示された局所製剤を本発明により使用することができる。製剤は、外側脂質マトリックスおよびポリマーのような手段でゲル化した内側層を含む水のない多層性ゲルシステムに関し、その多層ゲルシステムは、
（ａ）外側脂質マトリックスを含み、および
（ｂ）少なくとも一つのポリマーによりゲル化した内側層を含み、前記ポリマーは、セルロース誘導体、アクリル酸ポリマーおよびそれらの誘導体、またはそれらの混合物からなる群から選ばれ、
有効成分は一般式（Ｉ）の化合物から選ばれる：
Figure 2022524911000048
［式中、化合物は上記で定義される］
ことを特徴とする。
特に、そのような局所製剤は、本発明における使用に好ましく、有効成分は次の３つの化合物から選ばれる。
Figure 2022524911000049
好ましくは、脂質層は、ペトロラタム、パラフィンワックス、マイクロクリスタリンワックス、スクワレン、オクタン酸セチルステアリル、オレイン酸エチル、トリカプリル酸/カプリン酸グリセリル、ミリスチン酸ミリスチル、ジカプリン酸プロピレングリコール、セチルエステル、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、モノ・ジ・トリグリセリド、エトキシル化グリセリド、ポリエチレングリコールエステル類、ソルビタンエステル、硬質脂肪、ジブチルアジペート、リノール酸エチル、クロダモール、ステアリン酸イソセチル、パルミチン酸セチル、セチルアルコール、オレアルコール、ステアリルアルコール、ジカプリルエーテル、オレイン酸、ワックス、特にヨホバワックスとミツロウ、コレステロール、ポリエチレングリコール、ラノリン、ラノリンアルコール、シリコーンオイル、およびこれらの混合物など、からなる群から選ばれる、肌なじみの良い脂質を含む。好ましくは、脂質層は、多層性ゲルシステムの重量の６０から９５％、より好ましくは６５から９２％、より好ましくは７０から９０％の割合を構成する。
好ましくは、脂質層は、
５０から９０重量％、より好ましくは５５から８５重量％、より好ましくは５８から８０重量％ペトロラタム；
０から２０重量％、より好ましくは１から１５重量％、より好ましくは５から１３重量％パラフィンオイル；
０から８重量％、より好ましくは１から６重量％、より好ましくは１から４重量％ミツロウ；
０から２０重量％、より好ましくは１から１５重量％、より好ましくは５から１３重量％硬質脂肪；および
０から８重量％、より好ましくは１から６重量％、より好ましくは１から４重量％シクロメチコン、を含み、重量は多層性ゲルシステムを基にしている。
好ましくは、内側ゲル化層は、セルロース誘導体、アクリル酸ポリマー、またはそれらの誘導体またはそれらの混物を含む群から選ばれる少なくとも一つのポリマーを含む。好ましくは、多層性ゲルシステムの重量の、５から４０％、より好ましくは８から３５％、より好ましくは１０から３０％の割合を含む。好ましくは、架橋性アクリル酸ポリマーおよびヒドロキシプロピルセルロースの組み合わせが内側ゲル化層において使用される。好ましくは、内側ゲル化層はポリオールとカルボン酸時エステルの混合物を含む。好ましくは、内側ゲル化層はプロピレングリコールおよびカルボン酸プロピレンの混合物を含む。好ましくは、内側ゲル化層は多層性ゲルシステムの重量を基にして、
０．０５から０．５重量％、より好ましくは、０．０７５から０．４重量％、より好ましくは０．１から０．３重量％の架橋性アクリル酸ポリマー；
０．０１から０．１重量％、より好ましくは０．０１から０．０８重量％、より好ましくは０．０１から０．０６重量％のセルロース誘導体、特にヒドロキシプロピルセルロース；
１から１５重量％、より好ましくは２から１３重量％、より好ましくは３から１０重量％のカルボン酸時エステル、特にカルボン酸プロポリエン；および
０．５から２０重量％、より好ましくは０．７５から１７重量％、より好ましくは１から１５受領％のポリオール、特にプロピレングリコール、を含む。
本発明は皮膚創傷治癒不全を示している皮膚創傷の異なるタイプを治療または予防するために使用されてよい。本発明により治療される皮膚創傷治癒不全を示す皮膚創傷の異なるタイプには、少なくとも一つの微生物によって感染した皮膚創傷、虚血性創傷、血液供給不足や静脈うっ滞の患者の創傷、糖尿病性潰瘍、静脈性潰瘍、動脈性潰瘍（混合性潰瘍、褥瘡などの潰瘍、神経性創傷、下腿潰瘍、外科的創傷、熱傷、裂開、腫瘍性潰瘍、表皮水疱症などの水疱性皮膚疾患、希少潰瘍などの潰瘍が含まれる。皮膚創傷に感染する微生物には、当該分野で知られたものであり、コリネバクテリア、ブドウ球菌、連鎖球菌などのバクテリアおよび真菌、およびカンジダ種などの酵母が含まれる。
したがって、本発明の好ましい態様では、皮膚創傷は、糖尿病患者の創傷、少なくとも一つの微生物によって感染された創傷、虚血性創傷、血液不足や静脈うっ滞を患う患者の創傷、糖尿病性潰瘍、静脈性潰瘍、下肢動脈潰瘍のような動脈性潰瘍、混合潰瘍、褥瘡などの潰瘍、神経因性創傷、下腿潰瘍、外科的創傷、熱傷、裂開、腫瘍性潰瘍、表皮水疱症などの水疱性皮膚疾患、希少潰瘍、から選ばれる。
対象または個体は、他には健康な個体であってよく、または、さらに疾患及び／または併存症を呈してよく、及び／または、さらなる疾患及び／または併存症のために薬物治療を受けていてもよい。好ましい態様において、対象または個体は、皮膚創傷治癒不全に加えて、他の疾患及び／または併存症を呈し、及び／または、さらなる疾患及び／または併存症のために薬物治療を受けている。
したがって、ある好ましい態様では、対象は皮膚創傷治癒不全に関連する少なくとも一つの併存症に罹患する。そのような併存症は、例えば糖尿病、移植片の移植に続く免疫抑制システム、および、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）が挙げられる。さらに、併存症には、肥満症、血圧増加、静脈うっ滞、または末梢動脈閉塞性疾患が挙げられる。さらに、併存症はグルココルチコイドで治療可能な疾患である。
併存症は、すでに発症している病気とともに起こる、一つ以上の追加の病気または疾患の存在として理解される。
したがって、本発明の他の好ましい態様では、対象は、移植片の移植を経験する、及び／または、免疫抑制治療を受ける、及び／または、少なくとも一つの免疫抑制剤で治療される。例えば、免疫抑制治療は、グルココルチコイド及び／またはカルシニューリン抑制剤を投与することによる治療である。よって、免疫抑制剤はグルココルチコイド及びカルシニューリン抑制剤から選ばれる。適切なカルシニューリン抑制剤は当該技術分野において知られており、タクロリムス、ピメクロリムスおよびシクロスポリンＡが含まれる。適切なグルココルチコイドは当該技術分野において知られており、コルチゾール、酢酸コルチゾン、プレドニゾン、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、クロロプレドニゾン、クロプレドノール、ジフルプレドナート、フルドロコルチゾン酢酸、フルオシノロン、フルペロロン、フルプレドニソロン、ロテプレドノール、プレドニカルバート、チキソコルトール、トリアムシノロン、トリアムシノロンアセトニド、デキサメタゾン、ベタメタゾン、ベクロメタゾン、酢酸デオキシコルチコステロン、アルクロメタゾン、クロベタゾール、クロベタゾン、クロコルトロン、デソキシメタゾン、ジフロラゾン、ジフルコロトロン、フルクロロロン、フルメタゾン、フルオコルチン、フルオコルトロン、デソキシメタゾン、ジフロラゾン、ジフルオコルトロン、フルクロロロン、フルメタゾン、フルオコルチン、フルコルトロン、フルプレドニデン、フルチカゾン、フルチカゾンフランカルボン酸エステル、ハロメタゾン、メプレドニゾン、モメタゾン、モメタゾンフランカルボン酸エステル、パラメタゾン、プレドニリデン、リメキソロン、ウロベタゾール、アムシノニド、ブデソニド、シクレソニド、デフラザコルト、デソニド、ホルモコルタール、フルクロロンアセトニド、フルドロキシコルチド、フルニソリド、フルオシノロンアセトニド、フルオシノニド、ハルシノニド、ヒドロキシメチルプロゲステロンおよびメドロキシプロゲステロン、またはそれらの薬学的に許容される塩が含まれる。
本発明は、対象における皮膚創傷治癒不全の予防及び／または治療のためのＳＥＧＲＭ、またはそれらの薬学的に許容可能な塩に関する。
「皮膚創傷」は、切り傷、裂傷、火傷、切れ目のような、生体の皮膚への損傷として理解される。好ましくは、皮膚創傷は、生体の皮膚の開放性創傷として理解される。皮膚は個体のどの部位に配置されていてもよく、例えば、頭、腕、脚、胸、または背中が挙げられる。さらに、個体は、一つ、二つ、三つ、四つ以上の皮膚創傷を有して良い。さらに、皮膚創傷の場所は異なってよい。好ましい態様では、皮膚創傷は創傷滲出液を形成する。他の好ましい態様では、皮膚創傷は創傷バイオフィルムを形成する。
「皮膚創傷治癒不全」とは、期待される割合で治癒しない皮膚創傷を意味する。好ましい態様では、皮膚創傷治癒不全は、治癒しない皮膚創傷または慢性的皮膚創傷である。治癒しない皮膚創傷は好ましくは、標準的療法の下で２か月以内にふさがれない皮膚創傷として理解される。好ましくは、治癒しない皮膚創傷は、創傷のふさぎの欠如、創傷の範囲および／または深さが増加、皮膚創傷のネクローシスおよび／または感染、および／または、顆粒の欠如、によって特徴づけられる。
本願において、「治癒する皮膚創傷」は期待される割合で治癒する皮膚創傷として理解され、特に、標準的療法の下で２か月以内にふさがれる皮膚創傷として理解される。好ましくは、治癒する皮膚創傷は、創傷のふさぎ、顆粒、ネクローシスの欠如および／または感染の欠如が起こることによって特徴づけられる。
「潰瘍」は、組織の崩壊を伴った、皮膚上の痛みとして理解される。潰瘍は、表皮の完全な喪失と、しばしば真皮の一部および皮下脂肪の喪失という結果になる。
「対象」または「個体」は動物、好ましくは、個体は脊椎動物であり、特に哺乳類、より好ましくはヒトである。
本発明の他の好ましい態様では、対象は糖尿病に罹患するおよび／または少なくとも一つの糖尿病性潰瘍を有する。
対象の皮膚創傷は、創傷治癒治療のための標準的療法のような治療をすでに受けていてよく、または皮膚創傷に関して治療されていなくてよい。
「標準的療法」は、皮膚創傷の医師によって一般に推奨される治療として理解され、特に、創傷被覆、外科的および生物学的（蛆）デブリードマン、感染制御、陰圧閉鎖療法および生物学的処置または細胞処置での治療から選ばれる一つ以上、と理解される。
したがって、好ましい態様の一つにおいて、対象の皮膚創傷は、創傷治癒治療のための標準的療法で治療されていない、または治療されていてよく、または、創傷治癒治療のための圧迫、創傷被覆、外科的デブリードマン、生物学的デブリードマン、感染制御、抗生物質療法、陰圧閉鎖療法、特にタンパク質成長因子のようなタンパク質、抗生物質、ペプチド、砂糖、細胞または細胞構成要素、人工皮膚、ヒト血液由来製剤、遺伝子療法、または遺伝的に工作した創面改変、薬剤、ハーブ薬、または植物抽出物からの一つ以上で治療されていてもいなくてもよい。好ましい態様の一つは、対象の皮膚創傷は、創傷治癒を治療するための標準的療法で治療されていない、または治療されていてよく、ここで、標準的療法は、タンパク質成長因子での治療を含まない。他の好ましい態様では、対象の皮膚創傷は、タンパク質成長因子での治療を含む、創傷治癒のための標準的療法で治療されない、または治療されてよい。
したがって、本発明の他の好ましい態様では、対象は、糖尿病に罹患するおよび／または少なくとも一つの糖尿病性潰瘍を有する、および／または、対象は、（ｉ）移植片の移植を経験した、および場合によっては糖尿病を罹患する、および／または、（ｉｉ）免疫抑制療法を受ける、および場合によっては糖尿病に罹患する。
さらに、実施例において、線維芽細胞増殖を基にしたアッセイと線維芽細胞由来マトリックス形成を基にしたアッセイの両方が、ＳＥＧＲＭでの治療および／または予防に応答性である皮膚創傷治癒不全に罹患する対象を認めることを可能にすることが驚くべきことにわかった。さらに、ＩＬ－１サイトカインであるＩＬ－１βの分泌が、精度が高く、予測的なマーカーであることが分かった。したがって、ＩＬ－１の測定は、線維芽細胞増殖を基にしたアッセイ、および／または線維芽細胞由来マトリックス形成を基にしたアッセイ、との組み合わせ、を用いた好ましい態様において、ＩＬ－１の測定は行われる。
アッセイは、皮膚創傷治癒不全に罹患する対象の成功的階層化および特定に使用してもよい。よって、アッセイは、個別化医療アプローチに有用である。
したがって、本発明のさらに他の好ましい態様では、対象は、次の工程ｉ）および／またはｉｉ）を実施することによって皮膚創傷治癒不全の治療に応答性であるとして認められる：
ｉ）（１）前記対象の皮膚創傷から得られた創傷浸出液サンプルまたは創傷バイオフィルムサンプル、および
（２）少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩、
の存在下で、繊維芽細胞の増殖を測定する、任意で、繊維芽細胞の上清中の少なくとも一つのＩＬ－１サイトカインマーカーの量を測定する；
ｉｉ）（１）前記対象の皮膚創傷から得られた創傷浸出液サンプルまたは創傷バイオフィルムサンプル、および
（２）少なくとも一つ選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩、
の存在下で、繊維芽細胞による繊維芽細胞由来マトリックス形成を測定する。
さらに好ましい態様では、
工程ｉ）で測定した、繊維芽細胞の増殖の値、および／または、工程ｉｉ）で測定した繊維芽細胞による繊維芽細胞由来マトリックス形成の値が、（２）の少なくとも一つ選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩が存在しない条件下で確立されたコントロール値より、少なくとも２０％高く、
任意で、工程ｉ）で得られた繊維芽細胞の上清中の少なくとも一つのＩＬ－１サイトカインマーカーの量の値が、（２）の少なくとも一つ選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩が存在しない条件下で確立されたコントロール値より低い、
場合に、対象が選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩での皮膚創傷治癒不全の治療に応答性であると認められる。
本発明の好ましい態様の一つでは、サンプルは創傷滲出液サンプルである。他の好ましい態様では、サンプルは創傷バイオフィルムサンプルである。さらに好ましい態様では、サンプルは創傷滲出液サンプルである。
対象が、同一ＳＥＧＲＭまたは異なるＳＥＧＲＭ、好ましくは同一ＳＥＧＲＭに応答性であると認められた場合、ＳＥＧＲＭを対象に投与する。
前記皮膚創傷から得られた創傷滲出液サンプルまたは創傷バイオフィルムサンプルと（２）のＳＥＧＲＭの存在下での繊維芽細胞の増殖測定は、実施例に示したように実施されてよい。アッセイは、本願において、「ＨＤＦ増殖」、「ヒト皮膚繊維芽細胞増殖」、「繊維芽細胞増殖」または「２Ｄ繊維芽細胞増殖」アッセイとして称される。アッセイのために繊維芽細胞が用いられ、線維芽細胞は初代哺乳類皮膚繊維芽細胞のような初代繊維芽細胞または繊維芽細胞細胞株でもよく、好ましくは初代繊維芽細胞が用いられる。繊維芽細胞の培養方法は当該技術分野で知られており、例えば実施例で述べられるものである。例えば、細胞はＦＣＳを含むＤＭＥＭを用いて培養されてよい。
好ましい態様では、例えば、マルチウェルプレートが使用された実施例において述べるように、細胞が支持体に接着するように、細胞は固体の支持体上でインキュベートされる。さらに、細胞は、場合によって例えば培地または生理食塩水で希釈される創傷滲出液サンプルまたは創傷バイオフィルムサンプルと（２）のＳＥＧＲＭに接触する。接触は細胞の接着が起こる前または後に実施されてよい。例えば、接触は、例えば細胞を播くときのような、接着の前、または接着の後に、任意で希釈される創傷滲出液サンプルまたは創傷バイオフィルムサンプルと（２）のＳＥＧＲＭを細胞に加えることによって実施される。接触は、例えばピペッティング、任意でやさしく混ぜることによって達成される。細胞は適切な時間インキュベートされ、例えば６時間から３００時間、より好ましくは１２時間から２００時間、更に好ましくは２４時間から１２０時間インキュベートされる。実施例では、７２時間が成功的に使用された。ネガティブコントロールサンプル用に、（２）のＳＥＧＲＭが存在しない対応する液体を創傷滲出液または創傷バイオフィルムに追加で加えてもよく、または、創傷滲出液または創傷バイオフィルムのみを加える。その後、繊維芽細胞の量、細胞外マトリックスの形成を含む、好ましくは細胞数を、細胞を固定し総タンパク質量を測定することなどによって測定する。細胞は、例えばパラホルムアルデヒドを用いて固定される。さらに、スルホローダミンＢのような適切な染色剤を、細胞外マトリックスの形成を含む、繊維芽細胞の量の測定、好ましくは細胞数の測定、に使用してよい。形成された細胞外マトリックスを含む染色された細胞を、たとえば、染色剤に依存する適切な波長で吸光または蛍光を測定することにより測定してよい。好ましくは、工程は、固体支持体上に接着する細胞を培養できるような２Ｄ細胞培養にて実施される。好ましくは、サンプルは創傷滲出液サンプルである。
したがって、他の好ましい態様では、方法の工程は次の工程を含む：
（ｉ）線維芽細胞を培養する
（ｉｉ）支持体に細胞が接着すように、支持体上で細胞インキュベートする
（ｉｉｉ）細胞を（１）場合によっては希釈される創傷滲出液サンプルまたは創傷バイオフィルムサンプル、および（２）のＳＥＧＲＭを接触させる、ここで、接触は細胞の接着が起こる前または後に実施され、（１）及び（２）の接触は同時または順番に実施されてよい、および
（ｉｖ）細胞外マトリックスの形成を含む、細胞外マトリックスの形成を含む繊維芽細胞の量、好ましくは細胞数、を、細胞を固定し総タンパク質量を測定することなどにより測定する、
ここで、好ましくは、方法は２Ｄ細胞培養において実施される。
本発明の好ましい態様の一つでは、サンプルは創傷滲出液サンプルである。他の好ましい態様では、サンプルは創傷バイオフィルムサンプルである。さらに好ましい態様では、サンプルは創傷滲出液サンプルである。
場合によっては、ｉ）における線維芽細胞の上清でのＩＬ－１サイトカインマーカーの少なくとも一つの量を測定する。
実施例において、ＩＬ－１サイトカイン、特にＩＬ－１β、は本発明において高感度であることが分かった。
「ＩＬ－１サイトカイン」は、ＩＬ－１αおよびＩＬ－１βを含むと理解される。好ましい態様では、ＩＬ－１サイトカインはＩＬ－１βである。
繊維芽細胞によって分泌される炎症促進性ＩＬ－１サイトカインの量は、創傷治癒をモニターするため同様に、治癒する皮膚創傷または治癒しない皮膚創傷の特定のために、特に予測的であることがわかった。特に、これらのサイトカインのたくさんの量が、治癒する創傷からの創傷滲出液に比較して、治癒しない創傷からの創傷滲出液の存在下において分泌されることが分かった。サイトカインＩＬ－１αおよびＩＬ－１βはタンパク質であり、好ましくは、ヒトタンパク質であり、当業者によく知られている。ＩＬ－１α（インターロイキン－１αまたはＩＬ－１アルファとして知られる）およびＩＬ－１β（インターロイキン－１βまたはＩＬ－１ベータとして知られる）は、技術分野で知られる方法によって、例えば免疫学的アッセイを用いることによって、より好ましくは実施例にて述べられるようにＥＬＩＳＡアッセイを用いることによって、または実施例にて述べられるようにＩＬ－１サイトカインｍＲＮＡを測定することによって、測定されてよい。ＩＬ－１αおよびＩＬ－１βは炎症促進性サイトカインとして知られる。
したがって、好ましい態様では、対象は、工程ｉ） 繊維芽細胞の増殖を測定する、場合によっては繊維芽細胞の上清の少なくとも一つのＩＬ－１サイトカインマーカーの量を測定する、工程を実施することにより、皮膚創傷治癒不全の治療に応答性である、として認められる。
好ましくはｉ）における繊維芽細胞の上清の少なくとも一つのＩＬ－１サイトカインマーカーの量を測定は、次の工程を含む：
（i）繊維芽細胞を培養する；
（ii）支持体に細胞が接着すように、固体支持体上で細胞インキュベートする
（iii）細胞を（１）任意で希釈される、創傷滲出液サンプルまたは創傷バイオフィルムサンプル、および（２）のＳＥＧＲＭと接触させる、ここで、接触は細胞の接着が起こる前または後に実施され、（１）及び（２）の接触は同時または順番に実施されてよい、および
（iv）細胞培養上清の少なくとも一つのＩＬ－１サイトカインマーカーの量を測定する、
ここで好ましくは、方法は２Ｄ細胞培養にて実施され、少なくとも一つのＩＬ－１サイトカインマーカーの量は、免疫学的アッセイを用いることによって、より好ましくはＥＬＩＳＡアッセイを用いることによって、および／またはＩＬ－１サイトカインｍＲＮＡを測定することによって、測定される。
本発明の好ましい態様の一つでは、サンプルは創傷滲出液サンプルである。他の好ましい態様では、サンプルは創傷バイオフィルムサンプルである。さらに好ましい態様では、サンプルは創傷滲出液サンプルである。
細胞の培養は、好ましくは約２０℃から４０℃で実施され、より好ましくは２５℃から３８℃、更により好ましくは約３７℃で実施される。
皮膚創傷から得られた創傷滲出液サンプルまたは創傷バイオフィルムサンプルの存在下で繊維芽細胞による繊維芽細胞由来マトリックス形成の測定は、実施例に示したように実施してよい。本願において、アッセイは「ＥＣＭ形成」、「繊維芽細胞由来マトリックス」または「３Ｄ繊維芽細胞由来マトリックス」アッセイとして称される。アッセイ用に、初代哺乳類皮膚繊維芽細胞のような初代繊維芽細胞であってよい繊維芽細胞、または繊維芽細胞株の繊維芽細胞が使用され、好ましくは初代繊維芽細胞が使用される。実施例において、線維芽細胞は、支持体、好ましくはゼラチンのような接着増強剤で前もってコートされた支持体上に播かれる。例えば、コーティングは、ゼラチンのような接着増強剤を含む溶液または懸濁液と支持体をインキュベートすることにより達成できる。実施例では、０．２％ゼラチン溶液が成功的に用いられた。好ましくは、細胞をコンフルエントに達するまで培養する。その後、細胞は（ｉ）マトリックス促進サプリメント、（ｉｉ）任意で希釈される、創傷滲出液サンプル、または創傷バイオフィルムサンプル、および（ｉｉｉ）（２）のＳＥＧＲＭと接触し、（ｉ）、（ｉｉ）および（ｉｉｉ）は同時にまたは順番に接触される。例えば、マトリックス促進サプリメント、好ましくはビタミンＣまたはナトリウム塩のようなビタミンCの生理学的に許容可能な塩、または、２－ホスホアスコルビン酸またはその生理的に許容可能な塩、およびＥＧＦとインスリンの組み合わせを、例えばピペッティングおよび場合によっては優しく混ぜることによって細胞に加える。任意で希釈される、創傷滲出液サンプルまたは創傷バイオフィルムサンプルは、同時にまたは順番に接触して良く、（２）のＳＥＧＲＭは同時にまたは順番に加えられる。例えば、任意で希釈される創傷滲出液サンプルまたは創傷バイオフィルムサンプルを、マトリックス促進サプリメントと混合して良く、混合物を細胞に加えてよく、（２）のＳＥＧＲＭをその後に加える。代替えとしては、任意で希釈される創傷滲出液サンプルまたは創傷バイオフィルムサンプルを、マトリックス促進サプリメントおよび／または（２）のＳＥＧＲＭと、同時に別々に、または後で別々に、または前もって別々に加えてもよい。 その後同時でなく接触させる場合、（ｉ）、（ｉｉ）および（ｉｉｉ）の構成要素を好ましくは１時間以内接触させる。細胞をその後、好ましくは１２時間から２０日インキュベートし、培地を場合によっては少なくとも一度、場合によっては希釈される創傷滲出液または創傷バイオフィルムおよびマトリックス促進サプリメントで補充された新鮮な培地で交換する。実施例では、培地をインキュベーションの４日後一度交換した。３次元繊維芽細胞由来マトリックスが形成されるように、固体支持体は好ましくは空間を埋め、３Ｄ細胞培養ができるような少なくとも一つの空洞を含む。その後、繊維芽細胞由来マトリックスを、細胞の固定と総タンパク質量を測定することにより、測定する。細胞を、例えば、パラホルムアルデヒドを用いて固定して良い。さらに、スルホローダミンＢのような適切な染色剤を、細胞外マトリックスの形成を含む、繊維芽細胞の量、好ましくは細胞数を測定するために使用して良い。細胞外マトリックスの形成を含む染色された細胞を、例えば、染色剤に依存する適切な波長で吸光または蛍光を測定することによって測定してよい。ネガティブコントロールサンプル用に、（２）のＳＥＧＲＭが存在しない対応溶液を創傷滲出液または創傷バイオフィルムの追加に加えてもよく、又は創傷滲出液または創傷バイオフィルムのみを加える。好ましくは、サンプルは創傷滲出液サンプルである。
よって、方法の工程は、好ましくは次の工程を含む：
（ｉ） 繊維芽細胞を支持体、好ましくは、ゼラチンのような接着増強剤であらかじめコートされた支持体、に播く：
（ｉｉ） 細胞を支持体上で培養する、好ましくはコンフルエントに達するまで培養する、
（ｉｉｉ） 細胞を（ｉ）マトリックス促進サプリメント、（ｉｉ）任意で希釈される、創傷滲出液サンプル、または創傷バイオフィルムサンプル、（ｉｉｉ）（２）のＳＥＧＲＭ、と接触させる、ここで、（ｉ）および（ｉｉ）は同時にまたは順番に接触してよい、
（ｉｖ） 細胞を固定し総タンパク質量を測定するなどによって、繊維芽細胞由来マトリックスの量を測定する、
好ましくは、ここで、方法は３Ｄ細胞培養において実施される。
本発明の一つの好ましい態様において、サンプルは創傷滲出液サンプルである。他の好ましい態様では、サンプルは創傷バイオフィルムサンプルである。さらに好ましい態様では、サンプルは創傷滲出液サンプルである。
「繊維芽細胞由来マトリックス」または「ＦＤＭ」は、例えばマトリックス促進サプリメントの存在下で、マトリックス形成を招く環境において、生きた繊維芽細胞によって形成される細胞外マトリックス（ＥＣＭ）として理解される。ＦＤＭは、実施例に記載のように入手可能である。特に、ＦＤＭは、（ｉ）ゼラチンのような接着増強剤であらかじめコートされた支持体に繊維芽細胞を播く、（ｉｉ）好ましくはコンフルエントに達するまで、細胞を支持体上で培養する、（ｉｉｉ）ビタミンＣまたはその生理学的に許容可能な塩、または、２－ホスホ-L-アスコルビン酸又はその生理学的に許容可能な塩、またはＥＧＦおよびインスリンの組み合わせに接触させる、ことにより得ることができる。
「マトリックス促進サプリメント」は、ｉｎ ｖｉｔｒｏ細胞培養において、生きた繊維芽細胞による、繊維芽細胞由来マトリックスの形成を促進する、化合物または組成物として理解される。適切なマトリックス促進サプリメントは、ビタミンＣまたはナトリウム塩のようなビタミンＣの生理学的に許容可能な塩、または、２－ホスホ－Ｌ－アスコルビン酸またはその生理学的に許容可能な塩、およびＥＧＦとインスリンの組み合わせ、と同様に、溶液または懸濁液のような化合物を含む組成物、である。ＥＧＦとインスリンの組み合わせは、例えばＥＧＦまたはインスリンをそれぞれ含む別々の溶液として細胞培養に別々に供給されてよく、または、例えばＥＧＦとインスリンを含む溶液として一緒に提供されてもよい。
「接着増強剤」は、細胞の生存率を実質的に邪魔しない、プラスチック支持体のような固体支持体に細胞が接着することを増強する物質である。好ましい態様では、接着増強剤は、ゼラチンまたはフィブロネクチン、より好ましくはゼラチンである。
「２Ｄ細胞培養」は、平面状または実質的に平面状の表面において細胞を培養する細胞培養として理解される。好ましい態様では、２Ｄ細胞培養は接着細胞の培養である。
「３Ｄ細胞培養」は、平面状でない、または実質的に平面状でない表面上に細胞を培養する細胞培養として理解される。好ましい態様では、３Ｄ細胞培養は、接着細胞の培養および／またはＥＣＭのような、マトリックス内の細胞培養であり、特にＦＤＭである。
「支持体」または「固体支持体」は、好ましくは、チップ、マイクロアレイやナノアレイのようなアレイ、マルチウェルプレートのようなプレート、またはディッシュから選ばれる。細胞培養への適用には、固体支持体が細胞を培養するために好ましくは適切であり、例えば支持体はプラスチック支持体であってよい。
「創傷滲出液」は皮膚創傷の内部および上部にある細胞外の液体として理解される。創傷滲出液は「リキッドバイオプシー」としても称される。
「創傷バイオフィルム」は、コロニーを形成することができる微生物による皮膚創傷の感染から生じる物質として理解される。典型的には、創傷バイオフィルムは粘着性または粘着様物質である。創傷バイオフィルムは、バクテリア、真菌類、酵母類、藻類および他の微生物から選ばれる微生物、および壊死細胞を含む。創傷バイオフィルムは、微生物の所定の種が粘着性または粘着様物質の分泌により皮膚創傷の表面に付着するとき形成される。例えば、創傷バイオフィルムサンプルは、創傷表面の鋭い外科的デブ―リードマン、または綿性の綿棒またはナイロンが集まった綿棒のような綿棒、または創傷被覆材で創傷表面をふく、ことにより得てよい。
「創傷滲出液サンプル」または「ＷＥ」は固体の皮膚創傷から得られる創傷滲出液のサンプルとして理解される。創傷滲出液サンプルを得る方法は、技術分野で知られている。例えば、創傷滲出液サンプルは、物理的または化学的方法によって得てよく、特に、陰圧ドレナージ装置を用いることによる皮膚創傷に陰圧をかけることや、毛管力を用いる方法、フィルム被覆材または膜に創傷滲出液を集めること、創傷滲出液を注射器に集めること、吸収ビーズのような吸収材またはフィルターを適用すること、綿性の綿棒またはナイロンが集まった綿棒のような綿棒を用いること、によって得てよい。ここで特に、フィルム被覆材または膜はセルロース層であり、および／または、吸収材はセルロース層である。好ましいセルロース層は、ナノセルロース層である。創傷滲出液サンプルの量は、様々であってよく、１μＬから１Ｌ、１ｍＬから１Ｌ、１０ｍＬから１Ｌのような１ｎＬから１Ｌ、１０ｎＬから１Ｌ、１００ｎＬから１Ｌの範囲であってよい。例えば、実施例で調査した創傷滲出液サンプルは４００ｍＬまでの量であり、典型的には０．１から１００ｍＬ、特に、１から５０ｍＬであった。創傷滲出液サンプルは、サンプルを得た後または保存後直接発明の方法に用いてよく、特に、発明の方法に使用する前に、－２０℃または－８０℃のような、４℃未満、０℃未満、または１０℃未満で保存されてよい。
「創傷バイオフィルムサンプル」または「ＷＢ」は固体の皮膚創傷から得られる創傷バイオフィルムのサンプルとして理解される。創傷バイオフィルムサンプルを得る方法は、技術分野で知られている。例えば、創傷バイオフィルムサンプルは、鋭い外科的デブリードマンによって、または綿性の綿棒またはナイロンが集まった綿棒のような綿棒や創傷被覆材で創傷の表面をふくこと、によって得てよい。創傷バイオフィルムサンプルの量は、様々であってよく、１μＬから１０ｍＬ、１μＬから１ｍＬ、１０μＬから１ｍＬのような１ｎＬから１Ｌ、１０ｎＬから１Ｌ、１００ｎＬから１Ｌの範囲であってよい。創傷バイオフィルムの湿重量は、様々であってよく、１ｍｇから１０ｇ、１０ｍｇから１０ｇ、１００ｍｇから１０ｇ、または１ｇから１０ｇのように、１０μｇから１０ｇ、１００μｇから１０ｇの範囲であってよい。創傷バイオフィルムサンプルは、サンプルを得た後または保存後直接発明の方法に用いてよく、特に、発明の方法に使用する前に、４℃未満、０℃未満、または１０℃未満で保存されてよい。創傷バイオフィルムサンプルは、細胞培養培地またはバッファー、特にサンプルの重量の５から１０倍の液体、のような適切な液体で抽出されることができる。
線維芽細胞の増殖および繊維芽細胞による線維芽細胞由来マトリックス形成の測定に関する上記アッセイが、本発明の上記態様の何れかの皮膚創傷治癒不全の治療および／または予防に応答性である対象を確実に認めることができることを、驚くべきことに見出した。
さらに、応答性である対象の特定の正確さは、繊維芽細胞の増殖の測定、および任意で少なくとも一つのＩＬ－１サイトカインの量の測定、の両方の場合において改善された。よって、より好ましい態様において、工程ｉ）において測定された繊維芽細胞の増殖の値、および工程ｉｉ）において測定された繊維芽細胞による繊維芽細胞由来マトリックス形成の値が、（２）のＳＥＧＲＭが存在しない条件で確立されたコントロール値を少なくとも２０％超える場合、および任意で工程 ｉ）において得られた繊維芽細胞の上清の少なくとも一つのＩＬ－１サイトカインマーカーの量の値が（２）の少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩が存在しない条件で確立されたコントロール値未満である場合に、対象は皮膚創傷治癒不全の治療に応答性であると認められる。
よって、更に好ましい態様において、工程ｉ）において測定された繊維芽細胞の増殖の値、および工程ｉｉ）において測定された繊維芽細胞による繊維芽細胞由来マトリックス形成の値が、（２）のＳＥＧＲＭが存在しない条件で確立されたコントロール値を少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、１００％またはそれ以上超える場合に、及び、任意で、工程ｉ）において得られた繊維芽細胞の上清の少なくとも一つのＩＬ－１サイトカインマーカーの量の値が（２）の少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩が存在しない条件で確立されたコントロール値未満である場合に、対象は皮膚創傷治癒不全の治療に応答性であると認められる。
よって、さらに好ましい態様では、工程ｉ）において測定された繊維芽細胞の増殖の値、および工程ｉｉ）において測定された繊維芽細胞による繊維芽細胞由来マトリックス形成の値が、（２）のＳＥＧＲＭが存在しない条件で確立されたコントロール値を少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、１００％またはそれ以上超える場合に、及び、任意で工程ｉ）において得られた繊維芽細胞の上清の少なくとも一つのＩＬ－１サイトカインマーカーの量の値が（２）の少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩が存在しない条件で確立されたコントロール値より少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、３０％、４０％、５０％またはそれ以上小さい場合に、対象は皮膚創傷治癒不全の治療に応答性であると認められる。
コントロール値は、並行して測定してよく、または独立して確立してよく、好ましくは並行で測定する。
さらに、それぞれの対象から得た創傷浸出液または創傷バイオフィルムにおいて、マクロファージ／繊維芽細胞共培養における、マクロファージＭ１およびＭ２マーカーおよび／またはサイトカインマーカーＩＬ－１α、ＩＬ－１β、および／またはＴＮＦアルファを測定する一つ以上の追加アッセイを含むことにより、正確性と確実性をさらに増加することができる。これらのＭ１およびＭ２マーカーは、細胞表面タンパク質マーカー、マクロファージの上清のタンパク質マーカーまたはマクロファージのｍＲＮＡマーカーであってよい。
マクロファージは、組織常在専門的ファゴサイトであり、抗原提示細胞（ＡＰＣ）であり、循環する末梢血単球から分化する。異なる表現型の活性化したマクロファージは、当業者により、Ｍ１マクロファージおよびＭ２マクロファージに分類される。Ｍ１マクロファージは活性化したマクロファージであり、急性の炎症表現型を有する免疫エフェクター細胞を含む。これらは、バクテリアに対して非常に攻撃的であり、多量のサイトカインを産生する。Ｍ２マクロファージは、代替え的に活性化され、抗炎症である。
「Ｍ２マーカー」はＭ２マクロファージに特異的なタンパク質マーカーとして理解される。好ましくは、マーカーはマクロファージから分泌される。適切なＭ２マーカーは当該分野で知られており、ＣＣＬ２２およびＣＣＬ１８から好ましくは選ばれる。マーカーは当該分野で知られる方法によって測定され、例えば免疫学的アッセイを用いて測定され、更に好ましくはＥＬＩＳＡアッセイを用いて測定される。
「Ｍ１マーカー」はＭ１マクロファージに特異的なタンパク質マーカーとして理解される。好ましくは、マーカーはマクロファージから分泌される。適切なＭ１マーカーは当該分野で知られており、ＣＸＣＬ１０およびＩＬ－２３ｐ１９から好ましくは選ばれる。マーカーは当該分野で知られる方法によって測定され、例えば免疫学的アッセイを用いて測定され、更に好ましくはＥＬＩＳＡアッセイを用いて測定される。
「Ｍ１細胞表面マーカー」はマクロファージの表面に発現する、Ｍ１マクロファージに特異的な、タンパク質マーカーとして理解される。適切なＭ１細胞表面マーカーは、当該分野で知られており、ＣＤ３８、ＣＤ６４およびＣＤ１９７から好ましくは選ばれる。細胞表面マーカーの量および／または細胞数頻度分布は、免疫学的アッセイおよび／または蛍光アッセイによって測定され、特にＦＡＣＳ解析、ここで典型的には細胞数頻度分布が測定される。
「Ｍ２細胞表面マーカー」はマクロファージの表面に発現する、Ｍ２マクロファージに特異的な、タンパク質マーカーとして理解される。適切なＭ２細胞表面マーカーは、当該分野で知られており、ＣＤ２００レセプター（ＣＤ２００Ｒ）、ＣＤ２０６およびＣＤ２０９から好ましくは選ばれる。細胞表面マーカーの量および／または細胞数頻度分布は、免疫学的アッセイおよび／または蛍光アッセイによって測定され、特にＦＡＣＳ解析、ここで典型的には細胞数頻度分布が測定される。
「Ｍ２マーカーｍＲＮＡ」はマクロファージによって発現される、Ｍ２マクロファージに特異的な、ｍＲＮＡとして理解される。適切なＭ２マーカーｍＲＮＡは、当該分野で知られており、ＣＤ２００レセプター（ＣＤ２００Ｒ）、ＣＤ２０６、ＣＤ２０９、ＣＣＬ２２およびＣＣＬ１８から好ましくは選ばれる。マーカーｍＲＮＡの量は当該分野で知られる方法によって測定されてよい。好ましくはその量は、任意でラベルされた、マーカーｍＲＮＡに特異的に結合するプローブを、ハイブリダイゼーションに導く条件下で、マクロファージＲＮＡに接触させ、ハイブリダイズしたプローブを検出することにより測定してよい。
「Ｍ１マーカーｍＲＮＡ」はマクロファージによって発現される、Ｍ１マクロファージに特異的な、ｍＲＮＡとして理解される。適切なＭ１マーカーｍＲＮＡは、当該分野で知られており、ＣＤ３８、ＣＤ６４、ＣＤ１９７、ＣＸＣＬ１０およびＩＬ－２３ｐ１９から好ましくは選ばれる。好ましくはその量は、任意でラベルされた、マーカーｍＲＮＡに特異的に結合するプローブを、ハイブリダイゼーションに導く条件下で、マクロファージＲＮＡに接触させ、ハイブリダイズしたプローブを検出することにより測定してよい。
Ｍ１マーカー／Ｍ２マーカーの比は、繊維芽細胞の増殖測定、繊維芽細胞による繊維芽細胞由来マトリックス（ＦＤＭ）形成の測定およびケラチノサイトの増殖測定、に関する上述した一つ以上のアッセイと組み合わせて，応答性である対象を示す。特に、上昇した、Ｍ１マーカー／Ｍ２マーカー、Ｍ１細胞表面マーカー／Ｍ２細胞表面マーカー、Ｍ１マーカーｍＲＮＡ／Ｍ２マーカーｍＲＮＡ、の比は、応答しない対象を示し、低い、Ｍ１マーカー／Ｍ２マーカー、Ｍ１細胞表面マーカー／Ｍ２細胞表面マーカー、Ｍ１マーカーｍＲＮＡ／Ｍ２マーカーｍＲＮＡ、の比は応答性である対象を示す。
さらに、マクロファージ／繊維芽細胞共培養におけるマクロファージおよび／または繊維芽細胞により分泌される炎症促進性サイトカイン、ＩＬ１アルファ、ＩＬ１ベータ、ＴＮＦ－アルファの量は、創傷治癒をモニターするためと同様に治癒する皮膚創傷または治癒しない皮膚創傷を特定するために特に予測的であることが分かった。特に、大量のこれらのサイトカインが、治癒する創傷からのＷＥに比較して、治癒しない創傷からのＷＥが存在するときに分泌されることが分かった。サイトカイン、ＩＬ１アルファ、ＩＬ１ベータ、ＴＮＦ－アルファはタンパク質であり、好ましくはヒトのタンパク質であり、当業者によく知られている。ＩＬ１アルファ（インターロイキン－１αまたはＩＬ－１αとしても知られる）、ＩＬ１ベータ（インターロイキン－１αまたはＩＬ－１βとしても知られる）、ＴＮＦ－アルファ（腫瘍壊死因子-アルファまたはＴＮＦ－αとしても知られる）は、当該分野で知られる方法によって測定されてよく、例えば、実施例で述べるように、免疫学的アッセイ、より好ましくはＥＬＩＳＡアッセイを用いることによって測定され、または、ＩＬ１アルファ、ＩＬ１ベータ、ＴＮＦ－TNF-アルファのｍＲＮＡ発現を測定することによって測定される。ＩＬ１アルファ、ＩＬ１ベータ、ＴＮＦ－アルファは炎症促進性サイトカインとして知られる。
したがって、本発明のより好ましい態様では、追加で、工程ｉｉｉａ）および／または、次の工程ｉｉｉｂ）からｉｉｉｅ）の一つ、二つ、三つ、四つを実施する：
ｉｉｉａ）ケラチノサイトの増殖を以下の存在下で測定する：
（１）前記対象の皮膚創傷から得た、創傷浸出液サンプル、または創傷バイオフィルムサンプル、および
（２）少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩
ｉｉｉｂ）以下とともにインキュベートしたマクロファージの上清における、一つ以上のＭ１マーカーおよび一つ以上のＭ２マーカーの量を測定する：
（１）前記対象の皮膚創傷から得た、創傷浸出液サンプル、または創傷バイオフィルムサンプル、および
（２）少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩
ここで、マクロファージは繊維芽細胞とともに共培養され、および、
一つ以上のＭ１マーカーはＣＸＣＬ１０およびＩＬ－２３ｐ１９から選択され、一つ以上のＭ２マーカーはＣＣＬ２２およびＣＣＬ１８から選択される、
ｉｉｉｃ）以下とともにインキュベートされたマクロファージ上の一つ以上のＭ１細胞表面マーカーおよび一つ以上のＭ２細胞表面マーカーの量および／または細胞数頻度分布を測定する：
（１）前記対象の皮膚創傷から得た、創傷浸出液サンプル、または創傷バイオフィルムサンプル、および
（２）少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩
ここでマクロファージは繊維芽細胞ととともに共培養され、および
一つ以上のＭ１細胞表面マーカーはＣＤ３８、ＣＤ６４およびＣＤ１９７から選択され、一つ以上のＭ２細胞表面マーカーはＣＤ２００レセプター、ＣＤ２０６およびＣＤ２０９から選択される、
ｉｉｉｄ）以下とともにインキュベートしたマクロファージにおける一つ以上のＭ１マーカーｍＲＮＡおよびＭ２マーカーｍＲＮＡの発現レベルを測定する：
（１）前記対象の皮膚創傷から得た、創傷浸出液サンプル、または創傷バイオフィルムサンプル、および
（２）少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩
ここでマクロファージは繊維芽細胞ととともに共培養され、および
一つ以上のＭ１マーカーｍＲＮＡはＣＤ３８、ＣＤ６４、ＣＤ１９７、ＣＸＣＬ１０およびＩＬ－２３ｐ１９から選ばれ、一つ以上のＭ２マーカーｍＲＮＡはＣＤ２００レセプター（ＣＤ２００Ｒ）、ＣＤ２０６、ＣＤ２０９、ＣＣＬ２２およびＣＣＬ１８から選ばれる、
ｉｉｉｅ）以下とともにインキュベートされるマクロファージの上清における一つ以上のサイトカインマーカーの量を測定する：
（１）前記対象の皮膚創傷から得た、創傷浸出液サンプル、または創傷バイオフィルムサンプル、および
（２）少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩
ここでマクロファージは繊維芽細胞ととともに共培養され、および
一つ以上のサイトカインマーカーはＩＬ－１α、ＩＬ－１βおよびＴＮＦ－αから選ばれ、
および
ここで、工程ｉ）において測定された繊維芽細胞の増殖の値、および工程ｉｉ）において測定された繊維芽細胞による繊維芽細胞由来マトリックス形成の値、および／または、工程ｉｉｉａ）でのケラチノサイトの増殖の値が、（２）の少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩が存在しない条件で確立されたコントロール値を少なくとも２０％超える場合に、また、任意で、工程ｉ）において得られた繊維芽細胞の上清のＩＬ－１サイトカインマーカーの少なくとも一つの量の値が（２）の選択的グルココルチコイド受容体（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩が存在しない条件で確立されたコントロール値未満である場合に、
および／または、以下の一つ以上が該当する：
ｉｉｉｂ）で得られる一つ以上のＭ２マーカーの量に対する一つ以上のＭ１マーカーの量の比が、（２）の少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩が存在しない条件で確立されたコントロール値未満である、
ｉｉｉｃ）で得られる一つ以上のＭ２細胞表面マーカーの量および／または細胞数頻度分布に対する一つ以上のＭ１細胞表面マーカーの量および／または細胞数頻度分布の比率が、（２）の少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩が存在しない条件で確立されたコントロール値未満であり、特にここで比率は、ＣＤ３８／ＣＤ２０９比率、ＣＤ１９７／ＣＤ２０９比率およびＣＤ１９７／ＣＤ２０６比率から選ばれる、
ｉｉｉｄ）で得られる一つ以上のＭ２マーカーｍＲＮＡの発現レベルに対する一つ以上のＭ１マーカーｍＲＮＡの発現レベルの比率が、（２）の少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩が存在しない条件で確立されたコントロール値未満である、
ｉｉｉｅ）で得られる値が、（２）の少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩が存在しない条件で確立されたコントロール値未満である、
場合に、
対象は、少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩での治療に応答性であると認められる。
好ましくは、工程ｉ）において測定された繊維芽細胞の増殖の値、および／または工程ｉｉ）において測定された繊維芽細胞による繊維芽細胞由来マトリックス形成の値、および／または、工程ｉｉｉａ）でのケラチノサイトの増殖の値が、（２）の少なくとも一つのＳＥＧＲＭまたはその薬学的に許容可能な塩が存在しない条件で確立されたコントロール値を少なくとも２０％超える場合に、また、任意で、工程ｉ）において得られた繊維芽細胞の上清の少なくとも一つのＩＬ－１サイトカインマーカーの量の値が（２）の少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩が存在しない条件で確立されたコントロール値より低い場合、例えば少なくとも５％，１０％、１５％、２０％、３０％、４０％、５０％、またはそれそれ以上低い場合、
および／または、
ｉｉｉｅ）で得られた値が低い、例えば少なくとも５％、１０％、１５％、２０％、３０％、４０％、５０％またはそれ以上（２）の少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩が存在しない条件で確立されたコントロール値より低い場合：
に、対象は、少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩での治療に応答性であると認められる。
より好ましい態様では、ｉｉｉｅ）でのサイトカインマーカーがＩＬ－１αおよびＩＬ－１βから選ばれ、よりさらに好ましくは、ｉｉｉｅ）でのサイトカインマーカーはＩＬ－１βである。
次のＭ１M1細胞表面マーカー／Ｍ２細胞表面マーカー比率は応答性に対して予測的であることが分かった：（２）のＳＥＧＲＭが存在しない条件で確立されたコントロール値より低いＣＤ３８／ＣＤ２０９比率、ＣＤ１９７／ＣＤ２０９比率、またはＣＤ１９７／ＣＤ２０６が、ＳＥＧＲＭでの治療に応答性である対象を認める。
したがって、他の好ましい態様では、量および／または細胞数頻度分布は、ＣＤ３８／ＣＤ２０９比率、ＣＤ１９７／ＣＤ２０９比率、およびＣＤ１９７／ＣＤ２０６比率から選ばれる。
細胞数頻度分布は、個体群内で、与えられたマーカーに陽性である細胞の百分率を測定することによって測定されてよく、ＦＡＣＳ解析において最もよく使用されるリードアウトである。代替えとしては、マーカー用にラベルされた結合物質を用いるとき、個々の細胞当たりの細胞表面上のラベルされた分子の数を代理として、細胞表面発現の量の測定によって量は測定されてよく、例えば、平均蛍光強度によって測定される。
好ましい態様では、皮膚創傷から得た創傷浸出液サンプルまたは創傷バイオフィルムサンプルとともにインキュベートしたマクロファージの上清における一つ以上のＭ１マーカーおよび一つ以上のＭ２マーカーの量の測定は次の工程を含む：
（ｉ）（ａ）２Ｄ細胞培養中のヒト皮膚繊維芽細胞、または、（ｂ）繊維芽細胞マトリックス、とともに初代ヒト単核細胞を共培養する、
（ｉｉ）マクロファージ分化が達成されるまで細胞をインキュベートする、任意でＣＤ１６３をマクロファージ分化の細胞表面マーカーとして用いる、
（ｉｉｉ）細胞を、任意で希釈される、創傷浸出液サンプルまたは創傷バイオフィルムサンプルと（２）のＳＥＧＲＭと接触させる、
（ｉｖ）細胞培養上清における一つ以上のＭ１マーカーおよび一つ以上のＭ２マーカーの量を測定する、
好ましくは、ここで、一つ以上のＭ１マーカーは、ＣＸＣＬ１０およびＩＬ－２３ｐ１９から選ばれ、および／または、一つ以上のＭ２マーカーはＣＣＬ２２およびＣＣＬ１８から選ばれ、より好ましくは、マーカーは免疫学的アッセイ、更に好ましくはＥＬＩＳＡアッセイを用いて、測定される。
本発明の好ましい態様の一つでは、サンプルは創傷浸出液サンプルである。他の好ましい態様では、サンプルは創傷バイオフィルムサンプルである。より好ましい態様では、サンプルは創傷浸出液サンプルである。
例えば、初代ヒト単核細胞は、２Ｄ細胞培養におけるヒト皮膚繊維芽細胞、または繊維芽細胞由来マトリックス、とともに共培養されてよい。繊維芽細胞由来マトリックスを生成するための方法は、実施例同様に、上述されている。その後、細胞をマクロファージが分化するまでインキュベートする。例えば、ＣＤ１６３をマクロファージ分化の細胞表面マーカーとして用いることができる。さらに、細胞を、任意で希釈される創傷浸出液サンプルまたは創傷バイオフィルムサンプルと（２）のＳＥＧＲＭと接触させ、例えば細胞に対してサンプルをピペッティングすることによって接触させ、任意で優しく攪拌する。化合物を、マクロファージが分化した後、例えば４から７日後、加える。さらに、細胞を、好ましくは１時間から１００時間、インキュベートする。その後、細胞培養上清中の一つ以上のＭ１マーカーと一つ以上のＭ２マーカーの量を測定する。上清は典型的にはこのような目的のために回収され、マーカーは免疫学的アッセイのような適切なアッセイを用いて測定される。例えばＥＬＩＳＡアッセイを使用して良い。
他の好ましい態様では、皮膚創傷から得た創傷浸出液サンプルまたは創傷バイオフィルムサンプルとインキュベートしたマクロファージ上の一つ以上のＭ１細胞表面マーカーおよび一つ以上のＭ２細胞表面マーカーの量および／または細胞数頻度分布の測定は以下の工程を含む：
（ｉ）（ａ）２Ｄ細胞培養中のヒト皮膚繊維芽細胞、または、（ｂ）繊維芽細胞マトリックス、とともに初代ヒト単核細胞を共培養する、
（ｉｉ）マクロファージ分化が達成されるまで細胞をインキュベートする、任意でＣＤ１６３をマクロファージ分化の細胞表面マーカーとして用いる、
（ｉｉｉ）細胞を、任意で希釈される、創傷浸出液サンプルまたは創傷バイオフィルムサンプルと（２）のＳＥＧＲＭと接触させる、
（ｉｖ）マクロファージ細胞表面上の一つ以上のＭ１細胞表面マーカーと一つ以上のＭ２細胞表面マーカーの量および／または細胞数頻度分布を測定する。
本発明の一つの好ましい態様では、サンプルは創傷浸出液サンプルである。他の好ましい態様では、サンプルは創傷バイオフィルムサンプルである。より好ましい態様では、サンプルは創傷浸出液サンプルである。
例えば、初代ヒト単核細胞は、２Ｄ細胞培養におけるヒト皮膚繊維芽細胞、または繊維芽細胞由来マトリックス、とともに共培養されてよい。繊維芽細胞由来マトリックスを生成するための方法は、実施例同様に、上述されている。その後、細胞をマクロファージが分化するまでインキュベートする。例えば、ＣＤ１６３をマクロファージ分化の細胞表面マーカーとして用いることができる。さらに、細胞を、任意で希釈される創傷浸出液サンプルまたは創傷バイオフィルムサンプルと（２）のＳＥＧＲＭと接触させ、例えば細胞に対してサンプルをピペッティングすることによって接触させ、任意で優しく攪拌する。化合物を、マクロファージが分化した後、例えば４から７日後、加える。さらに、細胞を、好ましくは１時間から１００時間、インキュベートする。その後、マクロファージの細胞表面上の一つ以上のＭ１マーカーと一つ以上のＭ２マーカーの量および／または細胞数頻度分布を測定する。例えば、細胞を回収し、ＦＡＣＳ解析に用いてもよい。平均蛍光強度の幾何学的平均を、表面マーカー発現を定量するために用いることができる。
好ましくは、一つ以上のＭ１細胞表面マーカーは、ＣＤ３８、ＣＤ６４、およびＣＤ１９７から選ばれ、および／または一つ以上のＭ２細胞表面マーカーは、ＣＤ２００レセプター（ＣＤ２００Ｒ）、ＣＤ２０６およびＣＤ２０９から選ばれ、より好ましくは、細胞表面マーカーの量および／または細胞数頻度分布は、免疫学的アッセイおよび／または蛍光アッセイ、特にＦＡＣＳ解析によって測定される。
次のＭ１細胞表面マーカー／Ｍ２細胞表面マーカー比率は応答性に対して予測的であることが分かった：ＣＤ３８／ＣＤ２０９比率、ＣＤ１９７／ＣＤ２０９比率、またはＣＤ１９７／ＣＤ２０６比率。（２）のＳＥＧＲＭが存在しない条件で確立されたコントロール値より低いＣＤ３８／ＣＤ２０９比率、ＣＤ１９７／ＣＤ２０９率、またはＣＤ１９７／ＣＤ２０６比率は、対象がＳＥＧＲＭでの治療に応答性であると認める。
したがって、他の好ましい態様では、量および／または細胞数頻度分布の比率は、ＣＤ３８／ＣＤ２０９比率、ＣＤ１９７／ＣＤ２０９比率、またはＣＤ１９７／ＣＤ２０６比率から選ばれる。
よって、他の好ましい態様では、一つ以上のＭ１細胞表面マーカーはＣＤ３８から選ばれ、一つ以上のＭ２細胞表面マーカーはＣＤ２０９から選ばれ、または、一つ以上のM1細胞表面マーカーはＣＤ１９７から選ばれ、一つ以上のM２細胞表面マーカーはＣＤ２０９およびＣＤ２０６から選ばれる。
一つの好ましい態様では、工程（ｉｖ）は、マクロファージを、一つ以上のＭ１細胞表面マーカーおよび一つ以上のＭ２細胞表面マーカーを特異的に認識する、結合物質、好ましくは抗体、と接触させることを含み、ここで結合物質は任意でラベルされ、特に蛍光標識でラベルされる。また工程（ｉｖ）は、マクロファージに結合する結合分子の量を測定する、特に平均蛍光強度を測定する、これにより細胞表面マーカーの量を測定することを含む。例えば、表面マーカーを特異的に認識し、蛍光ラベルを含む、抗体を使用して良い。
一つの好ましい態様では、工程（ｉｖ）は、マクロファージを、一つ以上のＭ１細胞表面マーカーおよび一つ以上のＭ２細胞表面マーカーを特異的に認識する、結合物質、好ましくは抗体、と接触させることを含み、ここで結合物質は任意でラベルされ、特に蛍光標識でラベルされる。また工程（ｉｖ）は、細胞群内での、一つ以上のＭ１細胞表面マーカーおよび一つ以上のＭ２細胞表面マーカーのそれぞれに陽性である細胞の百分率を測定し、特にＦＡＣＳ解析を実施し、これにより細胞表面マーカーの細胞数頻度分布を測定することを含む。例えば、表面マーカーを特異的に認識し、蛍光ラベルを含む、抗体を使用して良い。
マーカータンパク質の結合物質としてのタンパク質の測定は、例えばイーストツーハイブリッドスクリーニングシステムのような、タンパク質またはポリペプチドに特異的に作用するタンパク質を特定し得るための、複数の既知の方法の何れかを用いて行うことができる。マーカーを特異的に認識する結合物質は、その対応する標的分子に対して少なくとも１０７ｌ／ｍｏｌの親和性を好ましくは有する。マーカーを特異的に認識する結合物質は、その標的マーカー分子に対して、好ましくは１０８ｌ／ｍｏｌ、より好ましくは１０９ｌ／ｍｏｌの親和性を有する。当業者が認識するように、特異的という用語は、サンプル中に存在する他の生物分子が、マーカーを特異的に認識する結合物質に顕著に結合しないことを示すために用いられる。好ましくは、標的マーカー分子以外の生物分子に結合するレベルは、それぞれ、標的マーカー分子への親和性のたった１０％以下、より好ましくはたった５％以下である結合親和性となる。好ましい特異的結合物質は、特異性と同様に親和性の最小基準より上であることの両方を満たす。
マーカーを特異的に認識する結合物質は、好ましくはマーカーと反応する抗体である。抗体という用語はポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、そのような抗体の抗原結合フラグメント、単鎖抗体と同様に、抗体の結合ドメインを有する遺伝子コンストラクトを示す。用語「抗体」は、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、Ｆ（ａｂ'）２およびＦａｂフラグメントのような抗体のフラグメント、と同様に自然に生じるまたは組み換え的に生成される結合パートナーを含み、マーカータンパク質に特異的に結合する分子である。基準を満たす特異的な結合物質いずれの抗体フラグメントも使用することができる。
測定のために、個体から得たサンプルを、結合物質マーカー複合体の形成に適切な状況の下、問題のマーカーを特異的に認識する結合物質とインキュベートする。当業者は進歩的な努力なしに適切なインキュベーションコンディションが簡単にわかるので、このような状況を特定する必要はない。結合物質マーカー複合体の量は測定され、本発明の方法と使用において用いられる。当業者が認識しているように、特定の結合物質マーカー複合体の量の測定のための方法が複数あり、すべては関連するテキストブック（非特許文献１２等）に詳細が記載されている。
特に、マーカーへのモノクローナル抗体は、定量的（マーカーの量または濃度を測定する）免疫学的アッセイにおいて用いられる。
例えば、マーカーはサンドウィッチタイプのアッセイフォーマットにおいて検出されてよい。このようなアッセイにおいて、第一の特異的結合物質は当該マーカーを一側面上でとらえ、直接的または間接的に検出可能なようにラベルされた第二の特異的結合物質は他の側面上で用いられる。第二の特異的結合物質は、酵素、染料、放射性核種、発光基、蛍光基、またはビオチンなどのような、検出可能なレポーター部位またはラベルを含んでよい。いずれのレポーター部位またはラベルも、そのシグナルが洗浄後支持体上に残っている結合分子の量に直接関連または比例する限り、使用することができる。固体支持体に結合したままの第２結合物質の量を、その後、特定の検出可能なレポーター部位またはラベルのための適切な方法を用いて測定する。放射性基には、シンチレーション計測またはオートラジオグラフィー法が一般に適切である。抗体―酵素複合体は、さまざまなカップリング技術を用いて調製される。分光学的方法が、染料（例えば酵素反応の比色製品を含む）、発光基および蛍光基を検出するために用いられる。ビオチンをアビジンまたはストレプトアビジンを用いて、通常は放射性または蛍光基または酵素など、異なるレポーター基に結合させて、検出することができる。酵素レポーター基を、一般に特定の期間の時間の間、基質の追加によって検出し、反応物の分光学的、分光光度的または他の解析を続いて行う。標準および標準添加を、よく知られる技術を用いて、サンプル中の抗原レベルを測定するために用いることができる。
本願で述べるマーカータンパク質の定量測定のために、本発明のマーカータンパク質を測定するための免疫学的アッセイには、例えば、ＥＬＩＳＡ、酵素免疫測定法（ＥＩＡ）、電気化学発光免疫測定法が含まれる。
他の好ましい態様では、皮膚創傷から得た創傷浸出液サンプルまたは創傷バイオフィルムサンプルとともにインキュベートしたマクロファージでの、一つ以上のＭ１マーカーｍＲＮＡおよび一つ以上のＭ２マーカーｍＲＮＡの発現レベルを測定は、下記の工程を含む：
（ｉ）初代ヒト単球細胞を（ａ）２Ｄ細胞培養中のヒト皮膚繊維芽細胞または（ｂ）繊維芽細胞由来マトリックスとともに共培養する、
（ｉｉ）マクロファージ分化が達成されるまで細胞をインキュベートする、任意でＣＤ１６３をマクロファージ分化の細胞表面マーカーとして用いる、
（ｉｉｉ）細胞を、任意で希釈される、創傷浸出液サンプルまたは創傷バイオフィルムサンプルと（２）のＳＥＧＲＭと接触させる、
（ｉｖ）マクロファージでの一つ以上のＭ１マーカーｍＲＮＡおよび一つ以上のＭ２マーカーｍＲＮＡの発現レベルを測定する。
本発明の一つの好ましい態様では、サンプルは創傷浸出液サンプルである。他の好ましい態様では、サンプルは創傷バイオフィルムサンプルである。より好ましい態様では、サンプルは創傷浸出液サンプルである。
好ましくは、一つ以上のＭ１マーカーｍＲＮＡはＣＤ３８、ＣＤ６４、ＣＤ１９７、ＣＸＣＬ１０およびＩＬ－２３ｐ１９から選ばれ、および／または一つ以上のＭ２マーカーｍＲＮＡはＣＤ２００レセプター（ＣＤ２００Ｒ）、ＣＤ２０６、ＣＤ２０９、ＣＣＬ２２およびＣＣＬ１８から選ばれ、さらにここで、方法は、マーカーｍＲＮＡに特異的に結合するプローブ（プローブは任意でラベルされてよく）が、ハイブリダイゼーションに導く条件のもとマクロファージＲＮＡと接触することを含み、また、ハイブリダイズしたプローブを検出することを含む。
たとえば、初代ヒト単球細胞を２Ｄ細胞培養でのヒト皮膚繊維芽細胞と、または繊維芽細胞由来マトリックスと共培養してよい。繊維芽細胞由来マトリックスを生成するための方法は、上記され、同様に実施例に記される。その後、細胞をマクロファージ分化が達成されるまでインキュベートする。例えば、マクロファージ分化の細胞表面マーカーとしてＣＤ１６３を用いることができる。さらに、細胞を、任意で希釈される創傷浸出液サンプルまたは創傷バイオフィルムサンプルと（２）のＳＥＧＲＭと、例えばサンプルを細胞にピペッティングする、任意で優しく攪拌することによって、接触させる。化合物を、マクロファージが分化した後、例えば４から７日後、加える。さらに、細胞を、好ましくは１から１００時間インキュベートする。その後、マクロファージにおける一つ以上のＭ１マーカーｍＲＮＡおよび一つ以上のＭ２マーカーｍＲＮＡの発現を測定する。例えば、細胞を回収し、適切なプローブを用いてｍＲＮＡ発現レベルを測定する。例えば、アクチンやＧＡＰＤＨのようなハウスキーピング遺伝子の発現レベルを測定し、Ｍ１またはＭ２マーカーＲＮＡの発現レベルをハウスキーピング遺伝子に対する発現レベルとして測定してよい。
他の好ましい態様では、皮膚創傷から得た創傷浸出液サンプルまたは創傷バイオフィルムサンプルとインキュベートしたマクロファージの上清中の、ＩＬ－１α、ＩＬ－１βおよびＴＮＦ－αから選ばれる一つ以上のサイトカインマーカーの量の測定は以下の工程を含む：
（ｉ）初代ヒト単球細胞を（ａ）２Ｄ細胞培養中のヒト皮膚繊維芽細胞または（ｂ）繊維芽細胞由来マトリックスとともに共培養する、
（ｉｉ）マクロファージ分化が達成されるまで細胞をインキュベートする、任意でＣＤ１６３をマクロファージ分化の細胞表面マーカーとして用いる、
（ｉｉｉ）細胞を、任意で希釈される、創傷浸出液サンプルまたは創傷バイオフィルムサンプルと（２）のＳＥＧＲＭと接触させる、
（ｉｖ）細胞培養上清中の、ＩＬ－１α、ＩＬ－１βおよびＴＮＦ－αから選ばれる一つ以上のサイトカインマーカーの量を測定する、
好ましくは、ここでサイトカインマーカーを免疫学的アッセイ、より好ましくはＥＬＩＳＡアッセイを用いて測定する。
本発明の一つの好ましい態様では、サンプルは創傷浸出液サンプルである。他の好ましい態様では、サンプルは創傷バイオフィルムサンプルである。より好ましい態様では、サンプルは創傷浸出液サンプルである。
たとえば、初代ヒト単球細胞を２Ｄ細胞培養でのヒト皮膚繊維芽細胞と、または繊維芽細胞由来マトリックスと共培養してよい。繊維芽細胞由来マトリックスを生成するための方法は、上記され、同様に実施例に記される。その後、細胞をマクロファージ分化が達成されるまでインキュベートする。例えば、マクロファージ分化の細胞表面マーカーとしてＣＤ１６３を用いることができる。さらに、細胞を、任意で希釈される創傷浸出液サンプルまたは創傷バイオフィルムサンプルと（２）のＳＥＧＲＭと、例えばサンプルを細胞にピペッティングする、任意で優しく攪拌することによって、接触させる。化合物を、マクロファージが分化した後、例えば４から７日後、加える。さらに、細胞を、好ましくは１から１００時間インキュベートする。その後、細胞培養上清中の、一つ以上のＩＬ－１α、ＩＬ－１βおよびＴＮＦ－αの量を測定する。上清は、このような目的のために典型的には回収され、サイトカインマーカーを免疫学的アッセイのような適切なアッセイを用いて測定する。例えば、ＥＬＩＳＡが用いられる。好ましい態様では、サンプルは創傷浸出液サンプルである。
マクロファージの上清中のＩＬ－１α、ＩＬ－１βおよびＴＮＦ－αの量は、（２）の化合物での治療に応答性である患者を示す。よって、ＩＬ－１α、ＩＬ－１βおよびＴＮＦ－αの量として得られた値が（２）の化合物が存在しない条件で確立されたコントロール値より低い場合、患者は（２）の化合物での治療に応答性であると認められる。
本発明の治療的または予防的使用のためのＳＥＧＲＭ、または本発明のキットまたはキットオブパーツとして含まれるＳＥＧＲＭは、好ましくは薬学的組成物である。薬学的組成物は、それぞれの有効成分を含み、任意で、一つ以上の薬学的に許容可能な担体および／または薬学的に許容可能な賦形剤を含む。有効成分はＳＥＧＲＭまたはその薬学的に許容可能な塩である。
「薬学的に許容可能な担体」は、生物に著しい刺激を引き起こさず、投与した有効成分の生物学的活性と特性を止めない、担体または希釈剤を意味する。使えることができる担体は、例えば、固体、液体または気体である。固体担体の例には、ラクトース、白土、スクロース、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アカシア、ステアリン酸マグネシウムおよびステアリン酸が含まれる。液体担体の例は、砂糖シロップ、ピーナッツオイル、オリーブオイル、および水である。気体担体の例には、二酸化炭素や窒素が含まれる。
「薬学的に許容可能な賦形剤」は、化合物の投与をより簡単にするための薬学的組成物に加える不活性な物質を意味する。限定しないが、賦形剤の例には、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、各種砂糖、各種でんぷん、セルロース誘導体、ゼラチン、植物油およびポリエチレングリコールが含まれる。
本発明の上記様相の何れかの一つの好ましい態様では、ＳＥＧＲＭは全身用、好ましくは経口または静脈投与用に剤形され、又は局所投与用、特に局部、粘膜、目、皮内または皮下投与用に剤形される。例えば、マプラコラットまたはその薬学的に許容可能な塩の投与用局所製剤は、当該分野において知られており、特許文献３９に詳細が述べられている。さらに、当業者は局所投与、特に局部、粘膜、目、皮内または皮下投与のためのさらなる製剤を提供するための技術を認識している。例えば、ＳＥＧＲＭまたはその薬学的に許容可能な塩は、創傷被覆材または絆創膏に組み込まれたものとして、またはゲル、半固体ゲル、クリーム、ローション、外用薬、スプレー、フォーム、散体、軟膏、リポソーム製剤、またはナノ粒子製剤、またはマイクロニードルによる投与用に剤形されてよい。
したがって、本発明のさらに好ましい態様において、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩は、
（ｉ）全身用、好ましくは経口または静脈投与用に剤形される、または、
（ｉｉ）局所投与用、特に、局部、粘膜、目、皮内または皮下投与用、に剤形される。
本発明の一つの好ましい態様では、本発明の使用のためのＳＥＧＲＭまたはその薬学的に許容可能な塩は、局所投与用、特に、局部、粘膜、目、皮内または皮下投与用、に剤形される。
マプラコラットまたはその薬学的に許容可能な塩および関連するＳＥＧＲＭの投与用局所製剤は、当該分野において知られており、特許文献３９に詳細が記載されている。このような製剤は、少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）およびａ）オレイルアルコール、ｂ）オクタン酸セテアリル、ｃ）植物油、を含む。より好ましい態様では、ＳＥＧＲＭは特許文献３９に開示のＳＥＧＲＭであり、特にマプラコラットまたはその薬学的に許容可能な塩である。
したがって、本発明のさらに好ましい態様では、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩は、局所投与用に剤形され、医薬製剤は、少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）およびａ）オレイルアルコール、ｂ）オクタン酸セテアリル、ｃ）植物油、を含む。
より好ましい態様では、医薬製剤は、少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）およびａ）２から５０重量％のオレイルアルコール、ｂ）２から５０重量％のオクタン酸セテアリル、ｃ）２から５０重量％の植物油、を含み、
好ましくはここで、
植物油は、ダイズ油、オリーブ油、ゴマ油、ヒマシ油またはピーナッツオイル、であり、または、
医薬製剤はさらに、d)プロピレングリコールおよびe)グリセロールを含み、または、
医薬製剤は３から１５重量％のオレイルアルコールを含み、または
医薬製剤は２から１５重量％のオクタン酸セテアリルを含み、
医薬製剤は３から１５重量％の植物油を含み、または
医薬製剤はさらに、中鎖トリグリセリド、ミネラルオイル、シクロメチコン、ステアリルアルコール、ブチル化ヒドロキシトルエン、マクロゴールグリセロールヒドロキシステアレート、ポビドン、アクリル酸コポリマー、ヒドロキシエチルセルロース、アクリル酸、および／またはトロメタモール、を含み、または、
医薬製剤はさらに、d)二酸化ケイ素を含み、または、
医薬製剤はさらに、d)ステアリン酸アルミニウムを含み、または、
医薬製剤はさらに、d)ポリプロピレングリコール、e)グリセロール、およびf)噴霧剤、を含み
医薬製剤は２から１０重量％の噴霧剤を含み、または
噴霧剤は炭化水素またはヒドロフルオロアルカンであり、
少なくとも一つの医薬的に有効な化合物の水への溶解性は、２０℃で、２０ｍｇ／Ｌ以下であり、
医薬製剤は、２から５０重量％のオレイルアルコール、３から２０重量％のセテアリルオクタノアートおよび ５から２０重量％の植物油、を含み、または、
医薬製剤は、３から１５重量％のオレイルアルコール、２から１５重量％のオクタン酸セテアリル、および ３から１５重量％の植物油、を含み、または、
医薬製剤は、中鎖トリグリセリド、ミネラルオイル、シクロメチコン、ステアリルアルコール、ブチル化ヒドロキシトルエン、マクロゴールグリセロールヒドロキシステアラート、ポビドン、アクリル酸コポリマー、ヒドロキシエチルセルロース、アクリル酸、および／またはトロメタモール、を含み、または、
医薬製剤は、さらに二酸化ケイ素およびステアリン酸アルミニウムを含み、
医薬製剤は、６から８重量％の噴霧剤、好ましくは、ここで噴霧剤はプロパン、ブタン、イソブタン、ヘプタフルオロプロパン、テトラフルオロエタン、ジメチルエーテル、またはこれらの混合物、を含む。
他の好ましい態様では、医薬製剤は、少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）およａ）２から５０重量％のオレイルアルコール、ｂ）２から５０重量％のオクタン酸セテアリル、ｃ）２から５０重量％の植物油、を含み、ここでより好ましくは、
医薬製剤は、ｄ）プロピレングリコールおよびｅ）グリセロールを含み、または、
医薬製剤は、３から１５重量％のオレイルアルコール、２から１５重量％のオクタン酸セテアリル、および ３から１５重量％の植物油、を含み、または、
医薬製剤は、さらに、中鎖トリグリセリド、ミネラルオイル、シクロメチコン、ステアリルアルコール、ブチル化ヒドロキシトルエン、マクロゴールグリセロールヒドロキシステアレート、ポビドン、アクリル酸コポリマー、ヒドロキシエチルセルロース、アクリル酸、および／またはトロメタモール、を含み、または、
医薬製剤は、さらに、ｄ）プロピレングリコールおよびｅ）グリセロール、およびf)噴霧剤を含み、または
医薬製剤は、２から１０重量％の噴霧剤を含み、より好ましくは、ここで噴霧剤は炭化水素またはヒドロフルオロアルカンであり、またはここで噴霧剤はプロパン、ブタン、イソブタン、ヘプタフルオロプロパン、テトラフルオロエタン、ジメチルエーテル、またはこれらの混合物であり、または、６から８重量％の噴霧剤を含み、ここで噴霧剤はプロパン、ブタン、イソブタン、ヘプタフルオロプロパン、テトラフルオロエタン、ジメチルエーテル、またはこれらの混合物であり、または、
少なくとも一つの医薬的に有効な化合物の水への溶解性は、２０℃で、２０ｍｇ／Ｌ以下であり、
または、医薬製剤がさらに（Ｒ）－１，１，１－トリフルオロ－４－（５－フルオロ－２，３－ジヒドロベンゾフラン－７－イル)－４－メチル－２－｛［－（２－メチル－５キノリル)アミノ]メチル}ペンタン－２－オール、または、
医薬製剤が２から５０重量％のオレイルアルコール、３から２０重量％のオクタン酸セテアリル、および５から２０重量％の植物油、を含む。
特許文献３９に明確に開示されたクリーム、フォームおよびオレオゲル製剤は、特に好ましい局所製剤である。これらのクリーム、フォームおよびオレオゲル製剤は、ここに参照によって明確に組み込まれる。
Figure 2022524911000050
Figure 2022524911000051
Figure 2022524911000052
他の実施形態では、本発明は、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩での治療に応答性である皮膚創傷治癒不全に罹患する対象を認めるためのｉｎ ｖｉｔｒｏの方法に関し、方法は工程ｉ）および／またはｉｉ）を実施することを含む：
ｉ） (1)前記対象の皮膚創傷から得た、創傷浸出液サンプルまたは創傷バイオフィルムサンプル、および
(２) 少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩、
の存在下で、線維芽細胞の増殖、および任意で繊維芽細胞の上清中のＩＬ－１サイトカインマーカーの少なくとも一つの量、を測定する：
ｉｉ） (1)前記対象の皮膚創傷から得た、創傷浸出液サンプルまたは創傷バイオフィルムサンプル、および
(２) 少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩、
の存在下で、繊維芽細胞による線維芽細胞由来マトリックス形成を測定する：
ここで、工程ｉ）で測定された繊維芽細胞増殖の値、および／または工程ｉｉ）で測定された繊維芽細胞による線維芽細胞由来マトリックス形成の値が、（２）の少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩が存在しない条件において確立されたコントロール値より、少なくとも２０％より高く、任意で、工程ｉ）で測定されたＩＬ－１サイトカインマーカーの少なくとも一つの量の値が、（２）の少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩が存在しない条件において確立されたコントロール値より低い場合、対象は選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩での治療に応答性であると、認められる。
本発明のｉｎ ｖｉｔｒｏの方法の好ましい態様では、
追加で、工程ｉｉｉａ）および／または、以下の工程ｉｉｉｂ）からｉｉｉｅ）の一つ、二つ、三つまたは四つを実施する：
ｉｉｉａ）（１）前記対象の皮膚創傷から得た、創傷浸出液サンプル、または創傷バイオフィルムサンプル、および
（２）少なくとも一つの選択的グルココルチコイドレセプターモジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩、
の存在下でケラチノサイトの増殖を測定する；
ｉｉｉｂ）（１）前記皮膚創傷から得た、創傷浸出液または創傷バイオフィルムサンプル、および
（２）少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩、
とともにインキュベーションしたマクロファージの上清中の一つ以上のＭ１マーカーおよび一つ以上のＭ２マーカーの量を測定し、
ここで、マクロファージを繊維芽細胞と共培養し、
前記一つ以上のＭ１マーカーがＣＸＣＬ１０およびＩＬ－２３ｐ１９から選ばれ、前記一つ以上のＭ２マーカーがＣＣＬ２２およびＣＣＬ１８から選ばれる；
ｉｉｉｃ）（１）前記皮膚創傷から得た、創傷浸出液または創傷バイオフィルムサンプル、および
（２）少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩、
とともにインキュベーションしたマクロファージ上の、一つ以上のＭ１細胞表面マーカーおよびまたは一つ以上のＭ２細胞表面マーカーの量および／または細胞数頻度分布を測定し、
ここで、マクロファージを繊維芽細胞とともに共培養し、
前記一つ以上のＭ１細胞表面マーカーがＣＤ３８、ＣＤ６４およびＣＤ１９７から選ばれ、前記一つ以上のＭ２細胞表面マーカーがＣＤ２００受容体、ＣＤ２０６およびＣＤ２０９から選ばれる；
ｉｉｉｄ）（１）前記皮膚創傷から得た、創傷浸出液または創傷バイオフィルムサンプル、および
（２）少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩、
とともにインキュベーションしたマクロファージの、一つ以上のＭ１マーカーｍＲＮＡおよび一つ以上のＭ２マーカーｍＲＮＡの発現量を測定し、
ここで、マクロファージを繊維芽細胞とともに共培養し、
前記一つ以上のＭ１マーカーｍＲＮＡがＣＤ３８、ＣＤ６４、ＣＤ１９７、ＣＸＣＬ１０およびＩＬ－２３ｐ１９から選ばれ、前記一つ以上のＭ２マーカーｍＲＮＡがＣＤ２００受容体（ＣＤ２００Ｒ）、ＣＤ２０６、ＣＤ２０９、ＣＣＬ２２およびＣＣＬ１８から選ばれる；
ｉｉｉｅ）（１）前記皮膚創傷から得た、創傷浸出液または創傷バイオフィルムサンプル、および
（２）少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩、
とともにインキュベーションしたマクロファージの上清中の、ＩＬ－１α、ＩＬ－１βおよびＴＮＦ－αから選ばれる、一つ以上のサイトカインマーカーの量を測定し、
ここで前記対象は、工程ｉ）で測定した、繊維芽細胞の増殖の値、および／または、工程ｉｉ）で測定した繊維芽細胞による繊維芽細胞由来マトリックス形成の値、および／または、工程ｉｉｉ）で測定したケラチノサイトの増殖の値が、（２）の少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩が存在しない条件で確立されたコントロール値より、少なくとも２０％高い場合に、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩での皮膚創傷治癒不全の治療に応答性であると認められ、
および／または、下記条件、
・ ｉｉｉｂ）で得られた一つ以上のＭ２マーカーの量に対する一つ以上のＭ１マーカーの量の比率が、（２）の少なくとも一つ選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩が存在しない条件下で確立されたコントロール値より低い、
・ ｉｉｉｃ）で得られた一つ以上のＭ２細胞表面マーカーの量および／または細胞数頻度分布に対する、一つ以上のＭ１細胞表面マーカーの量および／または細胞数頻度分布の比率が、（２）の少なくとも一つ選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩が存在しない条件下で確立されたコントロール値より低く、特に、前記比率が、ＣＤ３８／ＣＤ２０９比率、ＣＤ１９７／ＣＤ２０９比率およびＣＤ１９７／ＣＤ２０６比率から選ばれる、
・ ｉｉｉｄ）で得られた一つ以上のＭ２マーカーｍＲＮＡの発現レベルに対する一つ以上のＭ１マーカーｍＲＮＡの発現レベルの比率が、（２）の少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩が存在しない条件下で確立されたコントロール値より低い、
・ ｉｉｉｅ）で得られた値が（２）の少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩が存在しない条件下で確立されたコントロール値より低い、
の一つ以上が該当する場合に、前記対象は、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩での皮膚創傷治癒不全の治療に応答性であると認められる、
ことを特徴とする、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩。
好ましい態様では、本発明のｉｎ ｖｉｔｒｏの方法は、本発明の使用のための、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩の好ましい態様の特徴により特徴づけられる。
さらに他の態様では、本発明はキットまたはキットオブパーツに関し、
（ａ）少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩を含む薬学的組成物、および
（ｂ）ｉ）繊維芽細胞、
ｉｉ）複数の区切られた領域または穴を有する支持体、ここで領域または穴のサブセットは（ｉ）接着増強剤でコートされ、および／または、（ｉｉ）繊維芽細胞由来マトリックス（ＦＤＭ）で充填されている、
ｉｉｉ）マトリックス促進サプリメント、
の一つ以上を含む診断キット、
を含む。
好ましい態様では、本発明のキットまたはキットオブパーツは、本発明の使用のための、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩の好ましい態様の特徴により特徴づけられる。
よって、本発明の他の態様に関して述べられる好ましい態様は、本発明のこの態様にも当てはまると理解される。
薬学的組成物、細胞、マトリックス促進サプリメントは、容器、バイアル、注射器、アンプルまたはそのようなものの中に供給されてよい。
（ｂ）の診断キットは、任意でさらに、下記の一つ以上を含む：
ｉｖ）ケラチノサイト
ｖ）マトリックス促進サプリメント
ｖｉ）単球細胞、および
ｖｉｉ）結合物質、好ましくは一つ以上のＭ１マーカーおよび一つ以上のＭ２マーカーを特異的に認識する抗体、および／または、結合物質、好ましくは一つ以上のＭ１表面マーカーおよび一つ以上のＭ２表面マーカーを特異的に認識する抗体、および／または、一つ以上のＭ１マーカーｍＲＮＡおよび一つ以上のＭ２マーカーｍＲＮＡを特異的に認識するプローブ
ｖｉｉｉ）結合物質、好ましくはＩＬ－１α、ＩＬ－１βおよびＴＮＦ－αから選ばれる一つ以上のサイトカインマーカーを特異的に認識する抗体、またはＩＬ－１α、ＩＬ－１βおよびＴＮＦ－αから選ばれるサイトカインマーカーｍＲＮＡに特異的にハイブリダイズするハイブリダイゼーションプローブ。
より好ましい態様では、（ｂ）の診断キットはさらに、viii) 結合物質、好ましくはＩＬ－１α、ＩＬ－１βおよびＴＮＦ－αから選ばれる一つ以上のサイトカインマーカーを特異的に認識する抗体、またはＩＬ－１α、ＩＬ－１βおよびＴＮＦ－αから選ばれるサイトカインマーカーｍＲＮＡに特異的にハイブリダイズするハイブリダイゼーションプローブ、をさらに含む。
より好ましい態様では、サイトカインマーカーは、ＩＬ－１α、ＩＬ－１βおよびＴＮＦ－αから選ばれ、特にＩＬ－１βである。
好ましいＭ１およびＭ２マーカー、細胞表面マーカー、および／または、マーカーｍＲＮＡは上述される。
一つの好ましい態様では、上記vii)の結合物質、好ましくは、抗体は、結合物質、好ましくは、一つ以上のＭ１細胞表面マーカーおよび一つ以上のＭ２細胞表面マーカーを特異的に認識する抗体であり、一つ以上のＭ１細胞表面マーカーはＣＤ３８、ＣＤ６４およびＣＤ１９７から選ばれ、一つ以上のＭ２細胞表面マーカーはＣＤ２００レセプター、ＣＤ２０６およびＣＤ２０９から選ばれ、そして任意で、
結合物質、好ましくは一つ以上のＭ１マーカーおよび一つ以上のＭ２マーカーを特的に認識する抗体、および／または、一つ以上のＭ１マーカーｍＲＮＡおよび一つ以上のＭ２マーカーｍＲＮＡを認識するプローブであり、ここでＭマーカーはＣＸＣＬ１０およびＩＬ－２３ｐ１９から選ばれ、一つ以上のＭ２マーカーはＣＣＬ２２およびＣＣＬ１８から選ばれ、一つ以上のＭ１マーカーｍＲＮＡはＣＤ３８、ＣＤ６４、ＣＤ１９７、ＣＸＣＬ１０および ＩＬ－２３ｐ１９から選ばれ、一つ以上のＭ２マーカーｍＲＮＡはＣＤ２００レセプター（ＣＤ２００Ｒ）、ＣＤ２０６、ＣＤ２０９、ＣＣＬ２２およびＣＣＬ１８から選ばれる。
よって、他の好ましい態様では、一つ以上のＭ１細胞表面マーカーはＣＤ３８から選ばれかつ一つ以上のＭ２細胞表面マーカーはＣＤ２０９からから選ばれ、または、一つ以上のＭ１細胞表面マーカーはＣＤ１９７からから選ばれかつ一つ以上のＭ２細胞表面マーカーはＣＤ２０９およびＣＤ２０６から選ばれる。
一つの好ましい態様では、ケラチノサイトはＨａＣａＴ細胞および初代ケラチノサイトから選ばれ、特にヒト初代ケラチノサイトである。
より好ましい態様では、本発明で使用されるケラチノサイトは、ＨａＣａＴ細胞である。
繊維芽細胞由来マトリックス（ＦＤＭ）は、（ｉ）ゼラチンのような接着増強物質で前もってコートされた支持体上に初代ヒト皮膚繊維芽細胞を播く、（ｉｉ）好ましくはコンフルエントに達するまで支持体上で細胞を培養する、（ｉｉｉ）ビタミンＣCまたはその薬学的に許容可能な塩、または２－ホスホ－Ｌ－アスコルビン酸またはその薬学的に許容可能な塩、またはＥＧＦおよびインスリンの組み合わせ、のようなマトリックス促進サプリメントに細胞を接触させる、ことによって得ることができる。ＦＤＭは、ｉｎ ｓｉｔｕで形成されてよく、または形成後支持体に移されてもよい。
さらに、本発明のインビトロの方法または本発明の医薬的使用の方法工程を実施できる、チップのような支持体が好ましい。例えば、ＳＥＧＲＭまたはその薬学的に許容可能な塩での創傷治癒不全の治療に応答性である対象を認めることができるチップが提供される。
したがって、他の好ましい態様では、本発明は本発明のキットまたはキットオブパーツに関し、ここで、診断キット（ｂ）の支持体ｉｉ）は、本発明の方法または本発明の医薬的使用の方法工程を実施するために適切であり、支持体が複数の区切られた領域又は穴を有し、ここで、
ａ）領域または穴のサブセットは接着増強剤でコートされ、
ｂ）領域または穴のサブセットは接着増強剤でコートされ、および／または、繊維芽細胞由来マトリックス（ＦＤＭ）で充填され、
ｃ）領域または穴のサブセットは処理されず、
ｄ）任意で：
ｄ１）領域または穴のサブセットは結合物質、好ましくは一つ以上のＭ１マーカーを特異的に認識する抗体を含み、および
ｄ２）領域または穴のサブセットは結合物質、好ましくは一つ以上のＭ２マーカーを特異的に認識する抗体を含み、
ｅ）e) 任意で：
ｅ１）領域または穴のサブセットは結合物質、好ましくは一つ以上のＭ１細胞表面マーカーを特異的に認識する抗体を含み、
ｅ２）領域または穴のサブセットは結合物質、好ましくは一つ以上のＭ２細胞表面マーカーを特異的に認識する抗体を含み、
ｆ）任意で：
ｆ１）領域または穴のサブセットは結合物質、好ましくは一つ以上のＭ１マーカーｍＲＮＡを特異的に認識するプローブを含み、
ｆ２）領域または穴のサブセットは結合物質、好ましくは一つ以上のＭ２マーカーｍＲＮＡを特異的に認識するプローブを含み、および、
ｇ） 任意で：領域または穴のサブセットは結合物質、好ましくはＩＬ－１α、ＩＬ－１βおよびＴＮＦ－αから選ばれる、一つ以上のサイトカインマーカーを特異的に認識する抗体を含み、
ここで、サブセットａ）からｇ）は重複せず、
好ましくは、
（ｘ）少なくともいくつかの領域または穴はａ）さらに繊維芽細胞を含む、に従い、および／または、
（ｘｉ）少なくともいくつかの領域または穴は（ｘ）またはｂ）さらに単球細胞を含む、に従い、および／または、
（ｘｉｉ）少なくともいくつかの領域または穴はｃ）さらに繊維芽細胞を含む、に従い、および／または、
（ｘｉｉｉ）少なくともいくつかの領域または穴はｃ）さらにケラチノサイトを含み、に従い、ここで領域または穴は、（ｘｉｉ）および（ｘｉｉｉ）は重複しない、に従う。
一つの好ましい態様では、一つ以上のＭ１マーカーはＣＸＣＬ１０およびＩＬ－２３ｐ１９から選ばれ、一つ以上のＭ２マーカーはＣＣＬ２２およびＣＣＬ１８から選ばれる。
一つの好ましい態様では、一つ以上のＭ１細胞表面マーカーはＣＤ３８、ＣＤ６４およびＣＤ１９７から選ばれ、一つ以上のＭ２細胞表面マーカーはＣＤ２００レセプター、ＣＤ２０６およびＣＤ２０９から選ばれる。
一つの好ましい態様では、一つ以上のＭ１マーカーｍＲＮＡは、ＣＤ３８、ＣＤ６４、ＣＤ１９７、ＣＸＣＬ１０およびＩＬ－２３ｐ１９から選ばれ、一つ以上のＭ２マーカーｍＲＮＡは、ＣＤ２００レセプター（ＣＤ２００Ｒ）、ＣＤ２０６、ＣＤ２０９、ＣＣＬ２２およびＣＣＬ１８から選ばれる。
一つの好ましい態様では、キットまたはキットオブパーツの支持体は、チップ、マイクロアレイまたはナノアレイのようなアレイ、マルチウェルプレートのようなプレート、またはディッシュであり、および／または、支持体はプラスチック支持体である。
キットまたはキットオブパーツの固体支持体は、好ましくは複数の区別された穴を有する。穴では空間の充填ができ、したがって３Ｄ培養することができる。例えば、複数の区別された穴を含むマルチウェルプレートまたはマイクロアレイまたはナノアレイが使用されてよい。例えば、マルチウェルプレートが成功的に使用される。好ましくは、固体支持体は、細胞の生存を実質的に邪魔せず、および／または、細胞培養に適している、例えばプラスチック支持体である。３Ｄ培養のために、固体支持体は複数の区切られた穴を有して良い。例えば、マルチウェルプレートが利用されてよい。一つの好ましい態様では、支持体は、２、３、４、５、６、７、８、９、１０またはそれ以上の区切られた領域または穴を有し、例えば、２、３、４、５、６、７、８、９または１０から１０５、２、３、４、５、６、７、８、９または１０から１０４、２、３、４、５、６、７、８、９または１０から１０３、または２、３、４、５、６、７、８、９または１０から１０２区切られた領域または穴を有する。
さらなる態様では、本発明は対象の皮膚創傷治癒不全を予防または治療する方法に関し、それを必要とする対象に治療的に有効量のＳＥＧＲＭまたはその薬学的に許容可能な塩を投与することを含む。
「有効量」は、所望の生物学的、薬学的、または治療的結果を対象において誘導するのに十分な量を意味する。化合物の治療的有効量は、双性イオンとして、または薬学的許容可能な塩として仕える。治療的有効量は、合理的な利益／危険の割合でいずれの医学治療にあてはまる、皮膚損傷治癒不全を治療または予防するための化合物の十分な量を意味する。しかしながら、本発明の化合物および組成物の一日の総使用量は、健全な医学的判断の範囲内で主治医により決定されるであろう。いずれの特定の患者への、特異的な治療的有効投与量レベルは、治療される疾患および疾患の重症度、使用する特定の化合物の活性、使用する特定の組成物、患者の年齢、体重、一般的健康状態、性別および食事、投与する時間、投与経路、使用する特定の化合物の排泄率、治療期間、組み合わせて用いられる薬剤、または使用する特定の化合物との併用、および医学分野でしられるそのような因子を含む様々な因子に依存する。
実施例１：発明に用いられるアッセイ
略語
略語 詳述
ＤＭＳＯ ジメチルスルホキシド
ＦＡＣＳ 蛍光活性化細胞選別機
ＦＣＳ ウシ胎仔血清
ＦＤＭ 繊維芽細胞由来マトリックス
ＨａＣａＴ ヒトケラチノサイト細胞株
ＨＢＳＳ ハンクス平衡塩溶液
ＨＤＦ ヒト皮膚繊維芽細胞
ＨＧＦ 肝細胞増殖因子
Ｍ－ＣＳＦ マクロファージコロニー刺激因子
ＰＢＳ リン酸緩衝食塩水
ＲＰＭＩ ロズウェルパーク記念研究所培地
ＳＲＢ スルホローダミンＢ
ＴＧＦｂｅｔａ トランスフォーミング増殖因子β
ＷＥ 創傷浸出液
実施例１．１および１．２は、皮膚創傷治癒のための予測的モデルを表す。さまざまな患者から得たほとんどの非治癒創傷浸出液（ＷＥ）は、実施例１．１に述べられるように、アッセイにおいて、初代ヒト繊維芽細胞（ＨＤＦ）の増殖を抑制し、実施例１．２に述べられるように３Ｄにおいて繊維芽細胞由来マトリック（ＦＤＭ）の形成も阻害する。
実施例１．１ 繊維芽細胞増殖アッセイ：皮膚創傷、特に慢性ヒト皮膚創傷、から得た損傷滲出液サンプルの存在下における、繊維芽細胞増殖およびＩＬ－１βの分泌の測定
初代ヒト皮膚繊維芽細胞（ＨＤＦ）をＣＥＬＬｎＴＥＣ社（Ｂｅｒｎ，Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）から購入した。細胞を、１０％ＦＣＳ、２ｍＭグルタミン、および１００ Ｕ／ｍＬペニシリン／１００μｇ／ｍＬストレプトマイシンを含むダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）で日常的に育てた。培地、抗生物質およびグルタミンはＬｏｎｚａ社から購入した。細胞を継代数５から１５で使用した。細胞をトリプシン処理し、培地で様々に希釈したフィルターで滅菌したＷＥとともに、またはＷＥのない培地とともに、段階的な化合物濃度の存在下または非存在下において、３８４ウェルプレートの内側ウェルに３０μＬ、２５００細胞／ウェルで播種した。コントロールサンプル用に、特定の刺激の代わりに３０μＬ培地を加えた。外側のウェルには滅菌水を充填した。細胞を７２時間、３７℃でインキュベーションした。
インキュベーション期間の最後に、ＩＬ－１βの測定用に上清を取り除き、細胞を４％パラホルムアルデヒド（Ｍｏｒｐｈｉｓｔｏ社）で１５分間、室温で固定し、ＰＢＳで３回洗浄した。細胞を一晩接着（１日目）した後に、コントロールプレートを固定して、開始細胞数を測定した。
総細胞タンパク質を、固定した細胞をスルホローダミンＢ（ＳＲＢ）（Ｓｉｇｍａ社）で染色することにより細胞数の計数として測定した。１％酢酸中の０．４％ＳＲＢ溶液をウェルに３０分間加えた。その後ウェルを、洗浄液が透明のままになるまで１％酢酸で洗浄した。乾燥後、染色を１０ｍＭ Ｔｒｉｓ・ＨＣｌ、ｐＨ８．５で溶出し、低細胞密度または高細胞密度についてそれぞれ５５０ｎｍまたは４９２ｎｍのいずれかで吸光度を測定した。１日目の開始細胞数を示すサンプルの平均吸光度を、ＷＥ処理細胞の吸光度の値から差し引いた。
ＩＬ－１βレベルを市販のＥＬＩＳＡキットで測定した。細胞によって分泌されたサイトカインを測定するために、細胞に添加した創傷浸出液中に含まれるＩＬ－１βの量を、上清中の総ＩＬ－１βから差し引いた。
すべての実験を、それぞれのサンプルおよび濃度用にトリプリケートで行い、平均±標準偏差（ＳＤ）を実験の評価用に用いた。結果を、非刺激細胞用コントロール値の百分率として表した。
図１５の表は、ヒト患者の慢性、非治癒性皮膚創傷からの、多数の異なる創傷浸出液の存在下における、繊維芽細胞増殖に対する１μＭマプラコラットの効果を示す。それぞれのＷＥの存在下での増殖レベルを１００％に設定し、マプラコラットの効果の計算用の基を作成した。１２０％より高い（ＷＥコントロールの平均＋２ ＳＤ）すべての値は、成長が促進されていると考えられる。
さらなる結果を下記表１に示す。
Figure 2022524911000053
前記表は、複数の異なる創傷浸出液の存在下における、繊維芽細胞増殖への１μＭ ＡＺＤ７５９４の効果を示す。それぞれのＷＥの存在下での増殖レベルを１００％に設定し、ＡＺＤ７５９４の効果の計算用の基を作成した。１２０％より高い（ＷＥコントロールの平均＋２ ＳＤ）すべての値は、成長が促進されていると考えられる。ＡＺＤ７５９４の有効性をマプラコラットの効果と比較した（図１５参照）。
実施例１．２： 繊維芽細胞による繊維芽細胞由来マトリックス形成（ＦＤＭ）の測定：皮膚創傷から得た創傷浸出液サンプル、特に慢性ヒト創傷浸出液サンプル、存在下での繊維芽細胞による線維芽細胞由来マトリックス形成の測定
ヒト皮膚繊維芽（ＨＤＦ）細胞を、０．２％ゼラチン溶液（Ｓｉｇｍａ）で１時間、３７℃でプレコーティングした３８４ウェル組織培養プレートに、－３日目に、１２５０細胞／ウェルで播種した。細胞がコンフルエントに達したとき（＝０日目）、HDF増殖アッセイで記載したように、マトリックス促進サプリメント（ビタミンＣ：２－ホスホ－Ｌ－アスコルビン酸三ナトリウム塩、１００μｇ／ｍＬ；Ｓｉｇｍａ）をＴＧＦ－β１または段階的濃度の化合物－／＋ＷＥを含むテストサンプルとともに加えた。４日後、培地をビタミンＣと刺激物と化合物とを含む新鮮な培地で交換し、０日目で開始した条件を維持した。ＴＧＦ－β１をＦＤＭ形成促進のポジティブコントロールとして含んだ。総インキュベーション時間７から８日後、ＦＤＭ生成をＳＲＢ染色で固定した培養中で測定し、上記に述べたように評価した。いくつかの場合では、実験を止め、４日目に評価した。
実験結果は、例えば図１２に示されている。図１２は、患者番号９２からのＷＥとともに培養した３Ｄ繊維芽細胞培養における複数のＳＥＧＲＭの効果を示す。ＡＺＤ７５９４は３Ｄ培養でテストしたもっとも活性が高いＳＥＧＲＭで、マプラコラットおよびＢＩ６５３０４８がこれに続く。これは、グルココルチコイド受容体活性（ＥＣ５０値、それぞれ、０．９ｎＭ、１．９ｎＭおよび５５ｎＭ）の効力を示す。ＳＥＧＲＭではない、不活性化合物ＢＩ３０４７はマトリックス形成を誘導しなかった。
実施例１．３ ケラチノサイト増殖アッセイ：皮膚創傷、特に慢性ヒト皮膚創傷から得た創傷浸出液サンプルの存在下でのケラチノサイト増殖の測定
ＨａＣａＴケラチノサイト細胞株を、１０％ＦＣＳ、２ｍＭグルタミン、および１００ｕ／ｍＬペニシリン／１００μｇ／ｍＬストレプトマイシンを含むＤＭＥＭで日常的に培養した。増殖アッセイは、ＨＤＦ用に述べたように実施した。初代ヒトケラチノサイトを、ラット尾部コラーゲン（４０μｇ／ｍＬ；Ｇｉｂｃｏ）またはゼラチン（０．２％；Ｓｉｇｍａ）でコーティングしたプラスチック上に成長因子（Ｌｏｎｚａ）で補充した０．０６ｍＭカルシウムを含むＫＢＭ培地（Ｌｏｎｚａ）で増殖させた。抗生物質は使用しなかった。増殖アッセイをＨＤＦ細胞用に述べたように実施した。
実施例１．４ 初代ヒトマクロファージ刺激アッセイ：サイトカイン生成の測定
初代ヒトマクロファージを、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）から単離された単球から分化させた。ＰＢＭＣを赤十字（ウィーン）から得たバフィーコートからＬｙｍｐｈｏＰｒｅｐ（Ｔｅｃｈｎｏｃｌｏｎｅ社）を用いて単離した。３０ｍＬのバフィー濃縮物をＰＢＳで１：２に希釈し、５０ｍＬのファルコンチューブに１５ｍＬのＬｙｍｐｈｏＰｒｅｐで穏やかに下層にし、２１℃、１８００ｒｐｍ、２５分間遠心分離した。中間層を慎重に新しいファルコンチューブに移し、氷冷ＰＢＳで５０ｍＬにまで満たした。もう一度の遠心分離工程（４℃、１２００ｒｐｍ、１０分）後、細胞ペレットをＰＢＳで３回洗浄し、２０％ＦＣＳおよび１０％ＤＭＳＯを含むＲＰＭＩ培地に懸濁し、液体窒素中で凍結した。単球を、製造元の説明書に従ってａｕｔｏＭＡＣＳ－Ｓｏｒｔｅｒ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ社）上でＣＤ１４ビーズキット（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ社）を用いてポジティブ選択を用いて、凍結アリコートから単球を調製した。
培養とマクロファージへの分化用に、単球を６ウェルプレート（Ｎｕｎｃ社）に３－５×１０６単球／ウェルで播種し、１ウェルあたり５ｍＬの総容量、１０％ＦＣＳ、２ｍＭグルタミンおよび１００ｕ／ｍＬペニシリン／１００μｇ／ｍＬストレプトマイシンを含むＲＰＭＩ中で２０ｎｇ／ｍＬ Ｍ－ＣＳＦ（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ社）とともにインキュベーションした。２日後、上清２ｍＬを除去し、２０ｎｇ／ｍＬ Ｍ－ＣＳＦを含む新鮮な培地２．５ｍＬ／ウェルで置き換えた。３日目の顕微鏡観察で、接着性でしばしば伸長した細胞へ分化したことが分かった。
マクロファージを回収し、９６ウェルプレートまたは３８４ウェルプレート上それぞれに、２００μＬまたは５０μＬ血清なし培地中にもう一度播種し、様々に希釈されたフィルター滅菌済みＷＥ存在下または非存在下で、テスト化合物の段階的濃度と細胞を混合した。
１００ｎｇ／ｍＬ ＬＰＳ（Ｓｉｇｍａ社）および５０ｎｇ／ｍＬ ＩＦＮ－γ（ＰｅｐｒｏＴｅｃｈ）の組み合わせを、サイトカイン分泌の誘導用ポジティブコントロールとして用いた。ネガティブコントロールサンプル用に、特定の刺激の代わりに培地を添加した。
２４時間後、上清を新しいプレートに移し、将来のサイトカイン（ＩＬ－１α、ＩＬ－１β、ＴＮＦ－α）分析用に―２０℃で凍結した。ＷＥ誘導サイトカイン刺激を計算するために、上清レベルから投入ＷＥのサイトカイン濃度を差し引いた。
実施例１．５：ヒト皮膚におけるマクロファージ挙動を反映するインビトロモデルとしてのヒト単球－皮膚繊維芽細胞共培養：（a）マクロファージが繊維芽細胞と共培養され、皮膚創傷から得られた創傷浸出液サンプルとともにインキュベーションしたマクロファージの上清中の一または複数のＭ１マーカーおよび一または複数のＭ２マーカーの量を測定、（b）マクロファージが繊維芽細胞と共培養され、皮膚創傷から得られた創傷浸出液サンプルとともにインキュベーションしたマクロファージ上の一または複数のＭ１細胞表面マーカーおよび一または複数のＭ２細胞表面マーカーの量および／または細胞数頻度分布を測定、（ｃ）マクロファージが繊維芽細胞と共培養され、皮膚創傷から得られた創傷浸出液サンプルとともにインキュベーションしたマクロファージ中の一または複数のＭ１マーカーｍＲＮＡおよび一または複数のＭ２マーカーｍＲＮＡの発現量を測定、（ｄ）マクロファージが繊維芽細胞と共培養され、皮膚創傷から得られた創傷浸出液サンプルとともにインキュベーションしたマクロファージの上清中のＩＬ－１α、ＩＬ－１βおよびＴＮＦ－αから選ばれる一または複数のサイトカインマーカーの量を測定
磁気ビーズ分離によって健常ドナーのＰＢＭＣから単離したＣＤ１４＋単球を、単独または初代ヒト線維芽細胞（ＣｅｌｌＩＮＴｅｃ社）または繊維芽細胞由来マトリックス（ＦＤＭ）存在下でインキュベーションした。ＦＤＭは、初代ヒト線維芽細胞を成長サプリメントであるビタミンＣまたはインスリンおよびＥＧＦ（ビタミンＣ：２－ホスホ－Ｌ－アスコルビン酸三ナトリウム塩、１００μｇ／ｍＬ；ヒトＥＧＦ、５ｎｇ／ｍＬ；インスリン、５μｇ／ｍＬ）とともに３週間インキュベーションすることによって、生成された。代わりとして、単層の線維芽細胞培養も同様に使用することができる。４日から１週間、Ｍ－ＣＳＦ（２５ｎｇ／ｍＬ）の存在下または非存在下でマクロファージを分化させた後、さまざまに希釈されたフィルター滅菌済みＷＥの存在下または非存在下で、段階的濃度のテスト化合物とともに一晩培養を刺激した。ＩＦＮ－γ（５０ｎｇ／ｍＬ）、ＬＰＳ（１００ｎｇ／ｍＬ）およびＩＬ－４（２５ｎｇ／ｍＬ）またはこれらの組み合わせをＭ１およびＭ２マクロファージ誘導のコントロールとして用いた。ネガティブコントロールサンプル用に、培地を特異的刺激の代わりに添加した。化合物を伴うＷＥまたは伴わないＷＥを、希釈範囲１：２５から１：１００で、一晩刺激の培養液に添加した。
上清を、ＥＬＩＳＡによるサイトカイン測定用に回収し、凍結した。細胞を回収し、ＦＡＣＳ解析に用い、単球集団をゲーティングした。Ｇｅｏｍｅｔｒｉｃ ｍｅａｎ（各時間間隔で通過した細胞の値の積を細胞数でルート算出した値）または平均蛍光強度（ＭＦＩ）を表面マーカー発現の定量に用いた。
評価には、ａ）ＦＡＣＳ解析の最も一般的に使われるリードアウトである、集団内における所定のマーカーにポジティブである細胞のパーセンテージ、または、ｂ）平均蛍光強度によって測定される、細胞表面発現の量（個々の細胞当たりの細胞表面上のラベルされた分子の数の代替えとしたもの）、の二つを用いることが可能である。
特異的ｍＲＮＡレベルをハウスキーピング遺伝子と比較した値として特定した。得られた値は、「ハウスキーピング遺伝子に相対的な発現」である。
次のリードアウトが用いられた：
ＦＡＣＳ: Ｍ１マクロファージ用にＣＤ３８、ＣＤ６４、およびＣＤ１９７、Ｍ２マクロファージ用にＣＤ２００レセプター（ＣＤ２００Ｒ）、ＣＤ２０６およびＣＤ２０９、マクロファージ分化のマーカーとしてＣＤ１６３。Ｍ１／Ｍ２細胞表面マーカー発現の比率を計算した。
ＥＬＩＳＡ: Ｍ１マクロファージ用にＣＸＣＬ１０およびＩＬ－２３ｐ１９、Ｍ２マクロファージ用にＣＣＬ２２およびＣＣＬ１８、一つのM1Ｍ１表現型を示す炎症促進マーカーとしてＩＬ－１α、ＩＬ－１β、およびＴＮＦ－α。
ｍＲＮＡ: Ｍ１マクロファージ用にＣＤ３８、ＣＤ６４、およびＣＤ１９７、Ｍ２マクロファージ用にＣＤ２００レセプター（ＣＤ２００Ｒ）、ＣＤ２０６およびＣＤ２０９、マクロファージ分化のマーカーとしてＣＤ１６３。
実施例１．６： ＣＣＬ１８の測定
ＷＥとマクロファージ上清中のＣＣＬ１８を、Ｆ９６ Ｍａｘｉｓｏｒｐ Ｎｕｎｃ Ｉｍｍｕｎｏ ｐｌａｔｅｓ （Ｎｕｎｃ社, ＃４３９４５４）中でＲ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ社 (＃ＤＹ３９４)からのｈＣＣＬ１８／ＰＡＲＣ ＤｕｏＳｅｔ ＥＬＩＳＡ Ｋｉｔを用いて、製造社の説明書に従って測定した。酵素反応と測定をIＬ－１αで述べたように行った。
実施例１．７：フローサイトメトリーによるマクドファージ表面マーカーの解析
細胞を回収し、ＦＡＣＳバッファー（２％ＦＣＳ含有ＰＢＳ）に再懸濁した。非特異的抗体結合を、氷上で１０分間、ヒトＴｒｕｓｔａｉｎ ＦＣＲ ブロッキング溶液(Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ、＃４２２３０２)とともにインキュベーションすることにより防いだ。ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ社（現在はＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社）の以下の蛍光色素結合抗体（ＣＤ３８－ＰｅｒＣＰｅＦｌｕｏｒ７１０(＃４６－０３８８－４２)、ＣＤ１９７－ＡＰＣ(＃１７－１９７９－４２)、ＣＤ２０６－ＡＦ４８８(＃５３－２０６９－４２)、ＣＤ２０９－ＰｅｒＣＰ Ｃｙ５．５(＃４５－２０９９－４２)）を使用して、氷上で３０分間染色することにより、特異的表面マーカーを検出した。共培養から解析する際に、ＣＤ４５ ｅＦｌｕｏｒ（＃５０６ ６９－０４５９－４２）での共染色を、マクロファージと初代ヒト繊維芽細胞とを区別するために用いた。細胞をＦＡＣＳバッファーで洗浄後、１％パラホルムアルデヒド含有ＰＢＳで固定し、その後、データをＢｅｃｋｍａｎ Ｃｏｕｌｔｅｒ社のＧｌｌｉｏｓフローサイトメーター上で取得し、Ｋａｌｕｚａ解析ソフトウェア１．３で解析するまで、暗所にて４℃で保管した。
実施例１．８：繊維芽細胞培養におけるｍＲＮＡ発現の解析
細胞を２４ウェルプレートに播種し、創傷浸出液の存在下、または非存在下にて、７２時間化合物とともにインキュベーションした。トータルＲＮＡをＲＮｅａｓｙ Ｍｉｎｉ Ｋｉｔ(ＱＩＡＧＥＮ ＃７４１０６)を用いて製造社のプロトコールに則って単離した。各サンプルのＲＮＡ純度と濃度を、Ｑｕｂｉｔ Ｆｌｕｏｒｏｍｅｔｅｒで確認および測定した。そして、各ＲＮＡサンプルをヌクレアーゼ非含有２回蒸留水に２ｎｇ／μＬになるように希釈した。
２０ngのトータルＲＮＡをｃＤＮＡに逆転写し、ＲＯＸ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社 ＃１１７４５）とともにＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔ ＩＩＩ ＲＴ／Ｐｌａｔｉｎｕｍ Ｏｎｅ－Ｓｔｅｐ Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ＲＴ－ＰＣＲ Ｓｙｓｔｅｍを用いたＰＣＲ増幅に、直ちにかけた。ｑＲＴ－ＰＣＲを９μＬ ２×Ｒｅａｃｔｉｏｎ Ｍｉｘ ｗｉｔｈ ＲＯＸ、０．４μＬ ＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔ ＩＩＩ ＲＴ／Ｐｌａｔｉｎｕｍ Ｔａｑ Ｍｉｘおよび１μＬ プライマー（最終９００ｎＭ、Ｔａｑｍａｎ Ｇｅｎｅ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ａｓｓａｙ Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を含む２０μＬ反応で実施した。
プログラムは、４８℃３０分間の逆転写、９５℃５分間の初期変性、９５℃１５秒間の変性４０サイクル、６０℃６０秒のアニーリングを含む。反応は９６ウェルフォーマットＰＣＲプレート（Ｐｅｑｌａｂ社 ＃７３２－２８７９）にセットし、ＭＸ３００５Ｐ Ｒｅａｌ－Ｔｉｍｅ ＰＣＲ ＤＥｔｅｃｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ（Ｓｔｒａｔｅｇｅｎ社）にて行った。
確証されている遺伝子に特異的な、あらかじめ最適化されたプローブとプライマーのセットを含む、Ｔａｑｍａｎ Ｇｅｎｅ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ａｓｓａｙｓ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社)を用いた。配列およびＩＤ番号は下記のとおりである。
（ＥＦ１ａ：伸長因子１ａ、Ｃｏｌｌａｇｅｎ １ａ：Ｉ型コラーゲン、Ｃｏｌｌａｇｅｎ ３ａ：ＩＩＩ型コラーゲン）
Figure 2022524911000054
ハウスキーピング遺伝子である伸長因子１ａ（ＥＦ１ａ）を参照遺伝子として用いた。ノーマライズした発現を、比較Ｃｔ（またはΔＣｔ）法を用いて計算し、ｆｏｌｄ ｃｈａｎｇｅ（倍率変化）を各遺伝子の２－ΔΔＣｔから得た。対応する測定した遺伝子のＣｔ値からＥＦ１ａＣｔ値を差し引くことにより計算した相対Ｃｔ値を用いてグラフを作成した。
実施例１．９：豚モデルにおける創傷治癒遅延
動物実験は、政府当局によって承認された。２匹の若い農場のブタ（１０から１２ｋｇ）に麻酔をかけ、６ｍｍ生検パンチを用いて全層切除創傷を発症させた。創傷後最初の５日間、創傷は、ａ）０．０５％ Ｒ８４８（レシキモド）および５０μｌヒト創傷浸出液、ｂ）０．０５％ Ｒ８４８およびヒト血清、または ｃ）ヒト血清のみ、で刺激した。Ｒ８４８を午前中に投与し、２％ＨＰＭＣを加えることによってゲル化した５０μｌの溶液中の浸出液および血清を、６時間後、投与した。６から１０日目に、創傷をマプラコラットまたは溶媒（５０％ＰＧ／４７，５％Ｈ２Ｏ／０．５％Ｔｗｅｅｎ ８０／ ２％ＨＰＭＣ）で一日一度処理した。創傷を臨床的に毎日採点した。総創傷スコア（最大スコア＝２１）は、創傷の外観（乾性対湿性）、大きさ、創傷内容、膿、痂皮、紅斑の強度、紅斑の広さ、腫れおよび壊死からなる。報告した値は２匹のブタそれぞれの個々の値である。
実施例１．１０：初代ヒト繊維芽細胞におけるグルココルチコイド受容体の細胞質から核内への移行
初代ヒト繊維芽細胞を、実施例１．１で述べたように、３８４ウェルプレートに播き、総量５０μＬ、２５００細胞／ウェルで用いた。２４時間の接着後、細胞を血清飢餓に一晩おき、そして、３７℃で４５分間、段階的濃度のＳＥＧＲＭまたはポジティブコントロールとしてコルチコステロイドとともにインキュベーションした。その後細胞を４％パラホルムアルデヒドで、室温で１０分間固定し、続いて室温で１０分間、０．５％Ｔｔｉｔｏｎ Ｘ１００、１％ＢＳＡ含有ＰＢＳで透過処理した。処理した細胞をマウス抗グルココルチコイド受容体モノクローナル抗体（ＣｅｌｌＳｉｇｎａｌｉｎｇ社 ＃４７４１１）またはマウスＩｇＧ１－κアイソタイプコントロール（ｅ－Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ社 ＃１４－４７１４）で染色し、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ ドンキー抗マウスＩｇＧ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ社 ＃Ａ２１２０２）で現像した。細胞をＯｌｙｍｐｕｓ ＣＫＸ５３蛍光顕微鏡で調べ、グルココルチコイド受容体の局在に基づいて評価した：主として核（Ｎ），核+細胞質（Ｎ／Ｃ）、または主として細胞質（Ｃ）。
結果を下記表２に示す。
Figure 2022524911000055
表は、活性の測定として、繊維芽細胞の細胞質（Ｃ）から核（Ｎ）へのグルココルチコイド受容体の移行を示している。細胞を段階的濃度の化合物とともにインキュベーションし、細胞内グルココルチコイド受容体の局在を、レセプターに結合する抗体を用いて、間接的免疫蛍光によって測定した。０．１から１００ｎＭの範囲の化合物の濃度においてグルココルチコイド受容体の局在を、Ｎ（核）、Ｎ／Ｃ（核＞細胞質）、Ｃ／Ｎ（細胞質＞核）およびＣ（細胞質）によって表した。
実施例１．１１：初代ヒト単球サイトカイン分泌アッセイ
初代ヒト単球を、末梢血単球細胞（ＰＢＭＣ）から調製した。ＰＢＭＣをウィーンの赤十字から得たバフィーコートからＬｙｍｐｈｏＰｒｅｐ（Ｔｅｃｈｎｏｃｌｏｎｅ社）を用いて単離した。３０ｍＬのバフィー濃縮をＰＢＳで１：２に希釈し、５０ｍｌのファルコンチューブに１５ｍＬのＬｙｍｐｈｏＰｒｅｐで穏やかに下層にし、２１℃、１８００ｒｐｍ、２５分間遠心分離した。中間層を慎重に新しいファルコンチューブに移し、氷冷ＰＢＳで５０ｍＬにまで満たした。もう一度の遠心分離工程（４℃、１２００ｒｐｍ、１０分）後、細胞ペレットをＰＢＳで３回洗浄し、２０％ＦＣＳおよび１０％ＤＭＳＯを含むＲＰＭＩ培地に懸濁し、液体窒素中で凍結した。単球を、製造元の説明書に従ってａｕｔｏＭＡＣＳ－Ｓｏｒｔｅｒ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ社）上でＣＤ１４ビーズキット（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ社）を用いてポジティブ選択を使用して凍結アリコートから調製した。
細胞を３８４ウェルプレートの５０μＬ／ウェル中に８×１０５／ｍＬで播き、段階的濃度のテスト化合物と結合させた。１６時間後、上清を新しいプレートに移し、市販のＥＬＩＳＡキットを用いたＩＬ－８解析のために－２０℃で凍結した。
実施例１．１２：Ｕ９３７細胞刺激アッセイ
ヒト単球Ｕ９３７細胞株（ＡＴＣＣ ＣＲＬ １５９３）を１０％ＦＣＳおよび２ｍＭグルタミンおよび１００Ｕ／ｍＬペニシリン／１００μｇ／ｍＬストレプトマイシンで補充したＲＰＭＩ１６４０中で日常的に培養した。細胞を３８４ウェルプレートの５０μＬ／ウェル中に４×１０５／ｍＬで播き、段階的濃度のテスト化合物と１００ｎｇ／ｍＬ ＬＰＳと細胞を混合した。１６時間後、上清を新しいプレートに移し、市販のＥＬＩＳＡキットを用いたＩＬ－８解析のために－２０℃で凍結した。
創傷浸出液
静脈潰瘍、動脈潰瘍、褥瘡、糖尿病性潰瘍および外科的創傷からの創傷浸出液を、陰圧閉鎖療法またはナイロンが集まった綿棒のような綿棒（Ｃｏｐａｎ ＃５０２ＣＳ０１）によってふいたあと、ゲルのない容器に回収した。患者の説明を受け納得した上での同意（インフォームドコンセント）をヘルシンキ宣誓に従って得た。
テスト化合物
低分子化合物（表３のリスト参照）を、細胞アッセイ用に、ＤＭＳＯ（細胞培養用バイオ試薬、Ｓｉｇｍａ社）で、１０ｍＭまたは１００ｍＭで、培地中１：１０００になるように希釈した（最終ＤＭＳＯ濃度０．１％以下）。化合物は、典型的には、１０μＭから開始濃度、または１００μＭをもっとも高濃度として対数（１：１０）または半対数（１：３．３３）希釈シリーズでテストされた。
増殖アッセイにおいて細胞を７２時間、化合物とインキュベーションし、ＦＤＭアッセイにように８日までインキュベーションした。ＷＥ刺激への化合物の効果のために化合物をテストしたとき、化合物と細胞とのインキュベーションはＷＥインキュベーションと同時に開始し終了した。
Figure 2022524911000056

Claims (17)

  1. 対象における皮膚創傷治癒不全の治療における使用のための、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩。
  2. 請求項１の使用のための、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩であって、前記ＳＥＧＲＭは非ステロイド系選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）であり、
    前記ＳＥＧＲＭは、１００ｎＭ未満の親和性（ＫＤ）でグルココルチコイド受容体（ＧＣ）に特異的に結合し、および／または、
    ＳＥＧＲＭの競合係数は、ｉ）グルココルチコイド受容体（ＧＣ）については２０未満であり、ｉｉ）プロゲステロン受容体（ＰＲ）、アンドロゲン受容体（ＡＲ）およびミネラロコルチコイド受容体（ＭＲ）については少なくとも５であり、競合係数は ＳＥＧＲＭのＩＣ５０値／参照化合物のＩＣ５０値 として定義され、ＧＣ用参照化合物はデキサメタゾンであり、ＰＲ用参照化合物はプロゲステロンであり、ＡＲ用参照化合物はメトリボロンであり、ＭＲ用参照化合物はアルドステロンであり、および／または、
    細胞において、グルココルチコイド受容体（ＧＣ）に結合する際の、前記ＳＥＧＲＭのトランスアクチベーション活性についてのＥＣ５０値は、デキサメタゾンのトランスアクチベーション活性についてのＥＣ５０値より少なくとも２０倍高く、および／または、細胞において、グルココルチコイド受容体（ＧＣ）に結合する際の、前記ＳＥＧＲＭのトランスリプレッション活性についてのＩＣ５０値は、デキサメタゾンのトランスリプレッション活性のＩＣ５０値より最大で１００倍高い、
    ことを特徴とする、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩。
  3. 請求項１または２の使用のための、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩であって、
    前記ＳＥＧＲＭは、
    １００ｎＭ未満の親和性（ＫＤ）でグルココルチコイド受容体（ＧＣ）に特異的に結合し、および／または、
    非ステロイド系ＳＥＧＲＭであり、および／または、
    ３７℃、１０ｎＭのＳＥＧＲＭ濃度でのｉｎ ｖｉｔｒｏ（インビトロ）培養における初代ヒト繊維芽細胞において、グルココルチコイド受容体の細胞質から核内への移行をもたらし、および／または、
    グルココルチコイド受容体（ＧＲ）アゴニストである、
    ことを特徴とする、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩。
  4. 請求項１から３の何れかの使用のための、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩であって、
    前記皮膚創傷は、糖尿病患者の創傷、少なくとも一つの微生物が感染した皮膚創傷、虚血性創傷、血液供給不足や静脈うっ滞に罹患する患者の創傷、糖尿病性潰瘍、静脈性潰瘍、動脈性下肢潰瘍のような動脈性潰瘍、混合性潰瘍または褥瘡のような潰瘍、神経障害性創傷、下腿潰瘍、手術創、熱傷、裂開、腫瘍性潰瘍、表皮水疱症のような水疱性皮膚疾患、希少潰瘍から選ばれる、
    ことを特徴とする、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩。
  5. 請求項１から４の何れかの使用のための、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩であって、
    前記対象は、皮膚創傷治癒不全に関連する少なくとも一つの併存疾患、特に糖尿病、に罹患し、および／または、前記対象は少なくとも一つの免疫抑制剤で治療される、
    ことを特徴とする、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩。
  6. 請求項１から５の何れかの使用のための、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩であって、
    前記対象は、糖尿病に罹患する、および／または、少なくとも一つの糖尿病性潰瘍を有し、および／または、
    前記対象は、
    （ｉ）移植片の移植を経験した、および／または、
    （ｉｉ）免疫抑制療法を受け、
    および、場合によっては糖尿病に罹患する、
    ことを特徴とする、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩。
  7. 請求項１から６の何れかの使用のための、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩であって、
    前記対象は、以下の工程ｉ）および／またはｉｉ）を実施することにより皮膚創傷治癒不全の治療に応答性であると認められ、
    前記工程は、
    ｉ）（１）前記対象の皮膚創傷から得られた創傷浸出液サンプルまたは創傷バイオフィルムサンプル、および
    （２）少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩、
    の存在下で、繊維芽細胞の増殖を測定する、任意で、繊維芽細胞の上清中の少なくとも一つのＩＬ－１サイトカインマーカーの量を測定する工程、
    ｉｉ）（１）前記対象の皮膚創傷から得られた創傷浸出液サンプルまたは創傷バイオフィルムサンプル、および
    （２）少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩、
    の存在下で、繊維芽細胞による繊維芽細胞由来マトリックス形成を測定する工程、
    であることを特徴とする、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩。
  8. 請求項７の使用のための、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩であって、
    工程ｉ）で測定した、繊維芽細胞の増殖の値、および／または、工程ｉｉ）で測定した繊維芽細胞による繊維芽細胞由来マトリックス形成の値が、（２）の少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩が存在しない条件下で確立されたコントロール値より、少なくとも２０％高く、
    任意で、工程ｉ）で得られた繊維芽細胞の上清中の少なくとも一つのＩＬ－１サイトカインマーカーの量の値が、（２）の少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩が存在しない条件下で確立されたコントロール値より低い、
    場合に、
    前記対象は、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩での皮膚創傷治癒不全の治療に応答性であると認められる、
    ことを特徴とする、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩。
  9. 請求項７または８の使用のための、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩であって、
    追加で、工程ｉｉｉａ）および／または、次の工程ｉｉｉｂ）からｉｉｉｅ）の一つ、二つ、三つまたは四つを実施し、
    前記工程ｉｉｉａ）からｉｉｉｅ）は、
    ｉｉｉａ）（１）前記対象の皮膚創傷から得た、創傷浸出液サンプル、または創傷バイオフィルムサンプル、および
    （２）少なくとも一つの選択的グルココルチコイドレセプターモジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩、
    の存在下でケラチノサイトの増殖を測定する工程、
    ｉｉｉｂ）（１）前記皮膚創傷から得た、創傷浸出液または創傷バイオフィルムサンプル、および
    （２）少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩、
    とともにインキュベーションしたマクロファージの上清中の一つ以上のＭ１マーカーおよび一つ以上のＭ２マーカーの量を測定する工程であって、
    ここで、マクロファージを繊維芽細胞と共培養し、
    前記一つ以上のＭ１マーカーがＣＸＣＬ１０およびＩＬ－２３ｐ１９から選ばれ、前記一つ以上のＭ２マーカーがＣＣＬ２２およびＣＣＬ１８から選ばれる、ことを特徴とする工程、
    ｉｉｉｃ）（１）前記皮膚創傷から得た、創傷浸出液または創傷バイオフィルムサンプル、および
    （２）少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩、
    とともにインキュベーションしたマクロファージ上の、一つ以上のＭ１細胞表面マーカーおよびまたは一つ以上のＭ２細胞表面マーカーの量および／または細胞数頻度分布を測定する工程であって、
    マクロファージを繊維芽細胞とともに共培養し、
    前記一つ以上のＭ１細胞表面マーカーがＣＤ３８、ＣＤ６４およびＣＤ１９７から選ばれ、前記一つ以上のＭ２細胞表面マーカーがＣＤ２００受容体、ＣＤ２０６およびＣＤ２０９から選ばれることを特徴とする工程、
    ｉｉｉｄ）（１）前記皮膚創傷から得た、創傷浸出液または創傷バイオフィルムサンプル、および
    （２）少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩、
    とともにインキュベーションしたマクロファージの、一つ以上のＭ１マーカーｍＲＮＡおよび一つ以上のＭ２マーカーｍＲＮＡの発現レベルを測定する工程であって、
    マクロファージを繊維芽細胞とともに共培養し、
    前記一つ以上のＭ１マーカーｍＲＮＡがＣＤ３８、ＣＤ６４、ＣＤ１９７、ＣＸＣＬ１０およびＩＬ－２３ｐ１９から選ばれ、前記一つ以上のＭ２マーカーｍＲＮＡがＣＤ２００受容体（ＣＤ２００Ｒ）、ＣＤ２０６、ＣＤ２０９、ＣＣＬ２２およびＣＣＬ１８から選ばれることを特徴とする工程、
    ｉｉｉｅ）（１）前記皮膚創傷から得た、創傷浸出液または創傷バイオフィルムサンプル、および
    （２）の少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩、
    とともにインキュベーションしたマクロファージの上清中の一つ以上のサイトカインマーカーの量を測定する工程であって、
    前記マクロファージを線維芽細胞と共培養し、
    前記一つ以上のサイトカインマーカーが、ＩＬ－１α、ＩＬ－１βおよびＴＮＦ－αから選ばれ、
    工程ｉ）で測定した、繊維芽細胞の増殖の値、および／または、工程ｉｉ）で測定した繊維芽細胞による繊維芽細胞由来マトリックス形成の値、および／または、工程ｉｉｉａ）で測定したケラチノサイトの増殖の値が、（２）の少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩が存在しない条件下で確立されたコントロール値より、少なくとも２０％高い場合、
    および任意で、工程ｉ）で得られた繊維芽細胞の上清中の少なくとも一つのＩＬ－１サイトカインマーカーの量の値が、（２）の少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩が存在しない条件下で確立されたコントロール値より低い場合、
    および／または、次の条件、
    ・ ｉｉｉｂ）で得られた一つ以上のＭ２マーカーの量に対する一つ以上のＭ１マーカーの量の比率が、（２）の少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩が存在しない条件下で確立されたコントロール値より低い、
    ・ ｉｉｉｃ）で得られた一つ以上のＭ２細胞表面マーカーの量および／または細胞数頻度分布に対する、一つ以上のＭ１細胞表面マーカーの量および／または細胞数頻度分布の比率が、（２）の少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩が存在しない条件下で確立されたコントロール値より低く、特に、前記比率が、ＣＤ３８／ＣＤ２０９比率、ＣＤ１９７／ＣＤ２０９比率およびＣＤ１９７／ＣＤ２０６比率から選ばれる、
    ・ ｉｉｉｄ）で得られた一つ以上のＭ２マーカーｍＲＮＡの発現レベルに対する一つ以上のＭ１マーカーｍＲＮＡの発現レベルの比率が、（２）の少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩が存在しない条件下で確立されたコントロール値より低い、
    ・ ｉｉｉｅ）で得られた値が（２）の少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩が存在しない条件下で確立されたコントロール値より低い、
    の一つ以上が該当する場合、
    に、前記対象は、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩での皮膚創傷治癒不全の治療に応答性であると認められる、
    ことを特徴とする、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩。
  10. 請求項１から９の何れかの使用のための、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩であって、
    前記選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩は、
    （ｉ）全身用、好ましくは、経口または静脈投与用に剤形される、または、
    （ｉｉ）局所投与用、特に、局部投与、粘膜投与、点眼投与、皮内投与または皮下投与用に剤形される、
    ことを特徴とする、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩。
  11. 請求項１０の使用のための、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩であって、
    選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩は、局所投与用に剤形され、
    前記薬学的剤形は、少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）、およびａ）オレイルアルコール、ｂ）オクタン酸セテアリル、ｃ）植物油、を含む
    ことを特徴とする、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩。
  12. 請求項１から１１の何れかの使用のための、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩であって、
    前記ＳＥＧＲＭは、
    (ｉ)下記の式(IIa)または(IIb)の化合物：
    Figure 2022524911000057
    [式中、
    Ｒ1およびＲ2は、互いに独立して、水素原子、Ｃ1-3アルキル基、ハロゲン原子、シアノ基、Ｃ1-3アルコキシ基またはヒドロキシ基であり]
    および、それらのラセミ体または別々に存在する立体異性体および任意でそれらの薬学的に許容可能な塩またはそれらのプロドラッグ；
    (ｉｉ)化合物(Ｒ)-２-(４-((５-(エチルスルホニル)-１Ｈ-ピロロ[２，３-ｃ]ピリジン-２-イル)メチル)-５，５，５-トリフルオロ-４-ヒドロキシ-２-メチルペンタン-２-イル)-５-フルオロベンザミド、またはその薬学的に許容可能な塩；
    (ｉｉｉ)下記の式の化合物：
    Figure 2022524911000058
    またはその薬学的に許容可能な塩；
    (ｉｖ) 下記の式の化合物：
    Figure 2022524911000059

    またはその薬学的に許容可能な塩；
    (ｖ)下記の式(I)の化合物：
    Figure 2022524911000060
    [式中、
    Ｒ1は、５および６員ヘテロアリール、(Ｃ1－Ｃ6)アルキル、(Ｃ3－Ｃ6)シクロアルキル、(４－６)員ヘテロシクロアルキルおよびフェニルからなる群から選択され、ここで、前記５および６員ヘテロアリール、(Ｃ1－Ｃ6)アルキル、(Ｃ3－Ｃ6)シクロアルキル、(４－６)員ヘテロシクロアルキルおよびフェニルは、任意で、(Ｃ1－Ｃ4)アルキル、(Ｃ1－Ｃ4)アルコキシ、ハロゲン、ヒドロキシルおよびシアノから独立して選択される１個以上の置換基で置換されていてもよく；
    Ｒ2は、(Ｃ1－Ｃ3)アルキルおよびハロ(Ｃ1－Ｃ3)アルキルから選択され；
    Ｒ3は、フェニル、５員ヘテロアリールおよび６員ヘテロアリールから選択され、ここで、前記フェニル、５員ヘテロアリールおよび６員ヘテロアリールは、任意で、Ｒ5から独立して選択される１個以上の置換基で置換されていてもよく；
    Ｒ4は、水素、ハロゲン、(Ｃ1－Ｃ4)アルキルおよびハロ(Ｃ1－Ｃ4)アルキルから選択され；
    Ｒ5は、ハロゲン、シアノ、(Ｃ1－Ｃ6)アルキル、(Ｃ3－Ｃ6)シクロアルキル、(Ｃ1－Ｃ6)アルコキシ、ハロ(Ｃ1－Ｃ6)アルキル、ハロ(Ｃ1－Ｃ6)アルコキシ、ヒドロキシ(Ｃ1－Ｃ6)アルキル、フェニル、５員ヘテロアリール、６員ヘテロアリールおよび－Ｓ(Ｏ)2Ｒaから選択され、ここで、Ｒaは、(Ｃ1－Ｃ4)アルキルを表し；
    Ｘ1は、ＣＨ、Ｃ(Ｒｂ)およびＮから選択され、ここで、Ｒbは、ハロゲン、(Ｃ1－Ｃ4)アルキルまたはハロ(Ｃ1－Ｃ4)アルキルを表し；
    Ｘ2は、ＣＨおよびＮから選択され；
    Ｙは、－ＮＨ－および－Ｏ－から選択され；
    ｍは、０または１であり；
    ｎは、０または１であり；
    Ｌは、結合、－Ｏ－、－ＮＨ－または－Ｎ(Ｒc)－を表し、ここで、Ｒcは、(Ｃ1－Ｃ4)アルキルを表す、]
    またはその薬学的に許容可能な塩、水和物もしくは溶媒和物；
    および
    (ｖｉ)下記の式(III)の化合物：
    Figure 2022524911000061
    [式中、
    Ｒ１及びＲ２は、互いに独立して、水素原子、ヒドロキシ基、ハロゲン原子、任意で置換された（Ｃ１－Ｃ１０）－アルキル基、任意で置換された（Ｃ１－Ｃ１０）－アルコキシ基、（Ｃ１－Ｃ１０）－アルキルチオ基、（Ｃ１－Ｃ５）－パーフルオロアルキル基、シアノ基、ニトロ基を意味し、
    或いはＲ１及びＲ２は、
    一緒になって、－Ｏ－（ＣＨ２）ｐ－Ｏ－、－Ｏ－（ＣＨ２）ｐ－ＣＨ２－、－Ｏ－ＣＨ＝ＣＨ－、－（ＣＨ２）ｐ＋２－、－ＮＨ－（ＣＨ２）Ｐ＋１、－Ｎ（Ｃ１－Ｃ３－アルキル）－（ＣＨ２）ｐ＋１、及び－ＮＨ－Ｎ＝ＣＨ－基から選択される基を意味し、
    ここでｐ＝１又は２であり、そして末端酸素原子及び／又は炭素原子及び／又は窒素原子は、隣接する環炭素原子と直接結合され、
    或いはＮＲ６Ｒ７を意味し、
    ここでＲ６及びＲ７は、互いに独立して水素、Ｃ１－Ｃ５－アルキル、又は（ＣＯ）－（Ｃ１－Ｃ５）－アルキルを意味し、
    Ｒ３は、水素原子、ヒドロキシ基、ハロゲン原子、シアノ基、任意で置換された（Ｃ１－Ｃ１０）－アルキル基、（Ｃ１－Ｃ１０）－アルコキシ基、（Ｃ１－Ｃ１０）－アルキルチオ基、又は（Ｃ１－Ｃ５）－パーフルオロアルキル基を意味し、
    Ｒ４は、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、（Ｃ１－Ｃ５）－アルキル、（Ｃ１－Ｃ５）アルコキシ、（Ｃ１－Ｃ５）－アルキルチオ、（Ｃ１－Ｃ５）－パーフルオロアルキル、シアノ、ニトロ、ＮＲ６Ｒ７、ＣＯＯＲ９、（ＣＯ）ＮＲ６Ｒ７又は（Ｃ１－Ｃ５－アルキレン）－Ｏ－（ＣＯ）－（Ｃ１－Ｃ５）アルキル基を意味し、
    Ｒ５は、
    任意で、部分的又は完全にハロゲン化され得る－（Ｃ１－Ｃ１０）アルキル、
    －（Ｃ２－Ｃ１０）アルケニル、
    －（Ｃ２－Ｃ１０）アルキニル、
    （Ｃ３－Ｃ７）シクロアルキル－（Ｃ１－Ｃ８）アルキル、
    （Ｃ３－Ｃ７）シクロアルキル－（Ｃ１－Ｃ８）アルケニル、
    （Ｃ３－Ｃ７）シクロアルキル－（Ｃ２－Ｃ８）アルキニル、
    ヘテロシクリル－（Ｃ１－Ｃ８）アルキル、
    ヘテロシクリル－（Ｃ１－Ｃ８）アルケニル、
    ヘテロシクリル－（Ｃ２－Ｃ８）アルキニル、
    －Ｒ８、
    Ｒ８－（Ｃ１－Ｃ８）アルキル、
    Ｒ８－（Ｃ２－Ｃ８）アルケニル、
    Ｒ８－（Ｃ２－Ｃ８）アルキニル、
    －Ｓ－（Ｃ１－Ｃ１０）－アルキル、
    －ＳＯ２－（Ｃ１－Ｃ１０）－アルキル、
    －Ｓ－Ｒ８、
    －ＳＯ２－Ｒ８、
    －ＣＮ、
    －Ｈａｌ、
    －Ｏ－（Ｃ１－Ｃ１０）－アルキル、
    Ｒ６、Ｒ７が上で定義された意味である－ＮＲ６Ｒ７、
    －Ｏ－Ｒ８、
    －ＯＨ
    から選択される基を意味し、ただし－ＣＨ（ＣＨ３）２、又は－Ｃ（ＣＨ３）＝ＣＨ２を除いてであり、
    Ｒ８は、１から３個の、ヒドロキシ、ハロゲン、Ｃ１－Ｃ５－アルキル、Ｃ１－Ｃ５－アルコキシ、シアノ、ＣＦ３、ニトロ、ＣＯＯ（Ｃ１－Ｃ５－アルキル）又はＣ（Ｏ）ＯＣＨ２－フェニル、またはヘテロアリール基を意味し、ここで、ヘテロアリール基は、１から３ヘテロ原子を含んでよく、任意で１－３アルキル基、ヒドロキシ、ハロゲン、シアノ、またはＣ１－Ｃ５－アルコキシ基によって置換されてよく、]
    および、それらの塩、溶媒和物、又は溶媒和物の塩、
    から選ばれる、
    ことを特徴とする、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩。
  13. 請求項１から１２の何れかの使用のための、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩であって、
    前記ＳＥＧＲＭは、
    Figure 2022524911000062
    Figure 2022524911000063
    (Ｒ)-２-(４-((５-(エチルスルホニル)-１Ｈ-ピロロ[２，３-ｃ]ピリジン-２-イル)メチル)-５，５，５-トリフルオロ-４-ヒドロキシ-２-メチルペンタン-２-イル)-５-フルオロベンザミド；

    Figure 2022524911000064
    Figure 2022524911000065
    Figure 2022524911000066
    [(３Ｓ)-1-[(３Ｒ)-５-オキソテトラヒドロフラン-３-カルボニル]-３-ピペリジル]４-[(１Ｒ，２Ｓ)-１-(４-シクロプロピルフェニル)-２-[[(２Ｒ)-テトラヒドロフラン-２-カルボニル]アミノ]プロキシ]ベンゾエート；
    ５-{[(１Ｓ，２Ｓ)-１-(２-クロロ-３-フルオロ-４-メトキシフェニル)-３，３，３-トリフルオロ-２-ヒドロキシ-２-(メトキシメチル)プロピル]アミノ}-7-フルオロ-１Ｈ-キノリン-２-オン；および
    ５-{[(１Ｓ，２Ｓ)[１-(２-クロロ-３-フルオロ-４-メトキシフェニル)-３，３，３-トリフルオロ-２-ヒドロキシ-２-(ヒドロキシメチル)プロピル]アミノ}-７-フルオロ-１Ｈ-キノリン-２-オン、
    または、その薬学的に許容可能な塩、
    から選択される、
    ことを特徴とする、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩。
  14. グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩での治療に応答する皮膚創傷治癒不全に罹患する対象を特定する、ｉｎ ｖｉｔｒｏ（インビトロ）の方法であって、工程ｉ）およびｉｉ）を実施することを含み、
    前記工程ｉ）およびｉｉ）は、
    ｉ）（１）前記対象の皮膚創傷から得た、創傷浸出液または創傷バイオフィルムサンプル、および
    （２）少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩、
    の存在下で、繊維芽細胞の増殖を測定する、および任意で、繊維芽細胞の上清中の少なくとも一つのＩＬ－１サイトカインマーカーの量を測定する、工程、
    ｉｉ）（１）前記対象の皮膚創傷から得た、創傷浸出液または創傷バイオフィルムサンプル、および
    （２）少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩、
    の存在下で、繊維芽細胞による繊維芽細胞由来マトリックス形成を測定する、工程、
    であり、
    工程ｉ）において測定した繊維芽細胞の増殖の値、および／または、工程ｉｉ）において測定した繊維芽細胞による繊維芽細胞由来マトリックス形成の値が、（２）の少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩が存在しない条件下で確立されたコントロール値より少なくとも２０％高い場合、
    および任意で、工程ｉ）において測定した繊維芽細胞の上清中の少なくとも一つのＩＬ－１サイトカインマーカーの値が、（２）の少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩が存在しない条件下で確立されたコントロール値より低い場合、
    に、前記対象は、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩での治療に応答性であると認められる、
    ことを特徴とする、インビトロの方法。
  15. 請求項１４に記載のインビトロの方法であって、
    追加で、工程ｉｉｉａ）および／または、一つ、二つ、三つまたは四つの次の工程ｉｉｉｂ）からｉｉｉｅ）を実施し、
    工程ｉｉｉａ）からｉｉｉｅ）は、
    ｉｉｉａ）（１）前記対象の皮膚創傷から得た、創傷浸出液または創傷バイオフィルムサンプル、および
    （２）少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩、
    の存在下で、ケラチノサイトの増殖を測定する、工程、
    ｉｉｉｂ）（１）前記皮膚創傷から得た、創傷浸出液または創傷バイオフィルムサンプル、および
    （２）少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩、
    とともにインキュベーションしたマクロファージの上清中の、一つ以上のＭ１マーカーおよび一つ以上のＭ２マーカーの量を測定し、
    マクロファージを繊維芽細胞と共培養し、
    前記一つ以上のＭ１マーカーがＣＸＣＬ１０およびＩＬ－２３ｐ１９から選ばれ、前記一つ以上のＭ２マーカーがＣＣＬ２２およびＣＣＬ１８から選ばれる、ことを特徴とする工程、
    ｉｉｉｃ）（１）前記皮膚創傷から得た、創傷浸出液または創傷バイオフィルムサンプル、および
    （２）少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩、
    とともにインキュベーションしたマクロファージの、一つ以上のＭ１細胞表面マーカーおよび一つ以上のＭ２細胞表面マーカー、の量および／または細胞数頻度分布を測定し、
    マクロファージを繊維芽細胞と共培養し、
    前記一つ以上のＭ１細胞表面マーカーがＣＤ３８、ＣＤ６４およびＣＤ１９７から選ばれ、前記一つ以上のＭ２細胞表面マーカーがＣＤ２００受容体、ＣＤ２０６およびＣＤ２０９から選ばれる、ことを特徴とする工程、
    ｉｉｉｄ）（１）前記皮膚創傷から得た、創傷浸出液または創傷バイオフィルムサンプル、および
    （２）少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩、
    とともにインキュベーションしたマクロファージの、一つ以上のＭ１マーカーｍＲＮＡおよび一つ以上のＭ２マーカーｍＲＮＡの発現レベルを測定し、
    マクロファージを繊維芽細胞と共培養し、
    前記一つ以上のＭ１マーカーｍＲＮＡがＣＤ３８、ＣＤ６４、ＣＤ１９７、ＣＸＣＬ１０およびＩＬ－２３ｐ１９から選ばれ、一つ以上のＭ２マーカーｍＲＮＡがＣＤ２００受容体（ＣＤ２００Ｒ）、ＣＤ２０６、ＣＤ２０９、ＣＣＬ２２およびＣＣＬ１８から選ばれる、ことを特徴とする工程、
    ｉｉｉｅ）（１）前記皮膚創傷から得た、創傷浸出液または創傷バイオフィルムサンプル、および
    （２）少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩、
    とともにインキュベーションしたマクロファージの上清中の一つ以上のサイトカインマーカーの量を測定する工程であって、
    ｉ）で測定した、繊維芽細胞の増殖の値、および／または、工程ｉｉ）で測定した繊維芽細胞による繊維芽細胞由来マトリックス形成の値、および／または、工程ｉｉｉａ）で測定したケラチノサイトの増殖の値、が、（２）の少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩が存在しない条件下で確立されたコントロール値より、少なくとも２０％高い場合、
    および／または、下記条件、
    ・ ｉｉｉｂ）で得られた一つ以上のＭ２マーカーの量に対する一つ以上のＭ１マーカーの量の比率が、（２）の少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩が存在しない条件下で確立されたコントロール値より低い、
    ・ ｉｉｉｃ）で得られた一つ以上のＭ２細胞表面マーカーの量および／または細胞数頻度分布に対する一つ以上のＭ１細胞表面マーカーの量および／または細胞数頻度分布の比率が、（２）少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩が存在しない条件下で確立されたコントロール値より低く、特に、前記比率が、ＣＤ３８／ＣＤ２０９比率、ＣＤ１９７／ＣＤ２０９比率およびＣＤ１９７／ＣＤ２０６比率から選ばれる、
    ・ ｉｉｉｄ）で得られた一つ以上のＭ２マーカーｍＲＮＡの発現レベルに対する一つ以上のＭ１マーカーｍＲＮＡの発現レベルの比率が、（２）の少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩が存在しない条件下で確立されたコントロール値より低い、
    ・ ｉｉｉｅ）で得られた値が（２）の少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩が存在しない条件下で確立されたコントロール値より低い、
    が該当する場合、
    に、前記対象は、選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩での皮膚創傷治癒不全の治療に応答性であると認められる、
    ことを特徴とする、インビトロの方法。
  16. キットまたはキットオブパーツであって、
    （ａ）少なくとも一つの選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター（ＳＥＧＲＭ）またはその薬学的に許容可能な塩、および
    （ｂ）一つ以上の次のｉ）からｉｉｉ）を含む診断キット、を含み、
    ｉ）からｉｉｉ）は、
    ｉ）繊維芽細胞、
    ｉｉ）複数の定められた領域又は穴を有する支持体であり、領域又は穴のサブセットが、（ｉ）接着増強剤でコートされている、および／または、（ｉｉ）繊維芽細胞由来マトリックス（ＦＤＭ）で充填されている、
    ｉｉｉ）マトリックス促進補足剤、
    であることを特徴とする、キットまたはキットオブパーツ。
  17. 請求項１４または１５のインビトロの方法、または請求項１６のキットまたはキットオブパーツであって、請求項２から１３の何れかの特徴によって特徴づけられる、インビトロの方法またはキットまたはキットオブパーツ。
JP2021542103A 2019-01-22 2020-01-22 皮膚創傷治癒不全を治療するための選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター Active JP7516394B2 (ja)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP19153026.0 2019-01-22
EP19153026 2019-01-22
EP19170117 2019-04-18
EP19170117.6 2019-04-18
PCT/EP2020/051457 WO2020152193A1 (en) 2019-01-22 2020-01-22 Selective glucocorticoid receptor modifiers for treating impaired skin wound healing

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JP2022524911A true JP2022524911A (ja) 2022-05-11
JP7516394B2 JP7516394B2 (ja) 2024-07-16

Family

ID=

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2018077792A1 (en) * 2016-10-24 2018-05-03 Akribes Biomedical Gmbh Methods for identifying a non-healing skin wound and for monitoring the healing of a skin wound
WO2018230713A1 (ja) * 2017-06-16 2018-12-20 学校法人同志社 カスパーゼ阻害活性を有する化合物、これらの化合物を含む、角膜内皮の症状、障害または疾患を治療または予防するための医薬およびその応用

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2018077792A1 (en) * 2016-10-24 2018-05-03 Akribes Biomedical Gmbh Methods for identifying a non-healing skin wound and for monitoring the healing of a skin wound
WO2018230713A1 (ja) * 2017-06-16 2018-12-20 学校法人同志社 カスパーゼ阻害活性を有する化合物、これらの化合物を含む、角膜内皮の症状、障害または疾患を治療または予防するための医薬およびその応用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
JOURNAL OF SURGICAL RESEARCH, vol. 155, JPN6023039159, 2009, pages 301 - 305, ISSN: 0005158895 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN113382730A (zh) 2021-09-10
EP3914249C0 (en) 2024-05-01
SG11202107075RA (en) 2021-08-30
KR20210119980A (ko) 2021-10-06
AU2020211303A1 (en) 2021-07-15
EP3914249A1 (en) 2021-12-01
EP3914249B1 (en) 2024-05-01
CA3123490A1 (en) 2020-07-30
US20220047602A1 (en) 2022-02-17
WO2020152193A1 (en) 2020-07-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Lu et al. PPARγ regulates hypoxia-induced Nox4 expression in human pulmonary artery smooth muscle cells through NF-κB
Ray et al. The IL-6 trans-signaling-STAT3 pathway mediates ECM and cellular proliferation in fibroblasts from hypertrophic scar
Zhou et al. Spatiotemporal expression of periostin during skin development and incisional wound healing: lessons for human fibrotic scar formation
CN1187053C (zh) 糖皮质素受体拮抗剂用于制造治疗精神病药物的用途
Makino et al. Blockade of PDGF receptors by crenolanib has therapeutic effect in patient fibroblasts and in preclinical models of systemic sclerosis
TW200803896A (en) Method of improvement of cognitive function
TWI794885B (zh) 全身紅斑性狼瘡之治療
EP3615034B1 (en) Rucaparib, talazoparib, veliparib, olaparib and azd 2461 for treating impaired skin wound healing
Fotsch et al. Blockade of glucocorticoid excess at the tissue level: inhibitors of 11β-hydroxysteroid dehydrogenase type 1 as a therapy for type 2 diabetes
US20190160067A1 (en) Anti-htlv-1 drug and therapeutic agent for htlv-1-associated myelopathy/tropical spastic paraparesis (ham/tsp)
JP2003516327A (ja) アテローム性動脈硬化の予防および／または治療方法
TW201102068A (en) Treatment of ophthalmologic disorders mediated by alpha-carbonic anhydrase isoforms
Solanilla et al. The transport of high amounts of vascular endothelial growth factor by blood platelets underlines their potential contribution in systemic sclerosis angiogenesis
US20220047602A1 (en) Selective glucocorticoid receptor modifiers for treating impaired skin wound healing
EP3615026B1 (en) A parp inhibitor in combination with a glucocorticoid and/or ascorbic acid and/or a protein growth factor for the treatment of impaired wound healing
Ahluwalia et al. Novel mechanisms and signaling pathways of esophageal ulcer healing: the role of prostaglandin EP2 receptors, cAMP, and pCREB
JP7516394B2 (ja) 皮膚創傷治癒不全を治療するための選択的グルココルチコイド受容体モジュレーター
US9517241B2 (en) Amelioration of intestinal fibrosis and treatment of Crohn's disease
JP2004508401A (ja) シクロオキシゲナーゼ−２阻害剤およびインテグリンアルファ−ｖアンタゴニストの組合せを用いる炎症の治療
CN104822392B (zh) 抑制活化的t‑细胞中il‑22表达的方法
CA3212316A1 (en) Treatment of hidradenitis suppurativa with orismilast
KR20220041847A (ko) 섬유성 병리를 치료하기 위한 화합물 및 방법
TW201021808A (en) Composition containing tanshinone I and uses thereof
JP2024511349A (ja) タンパク質キナーゼ阻害剤としてのヘテロ環化合物の新規塩およびこれらの用途
JP2024516299A (ja) 結節性痒疹の治療のためのルキソリチニブ

Legal Events

Date Code Title Description
A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20220927

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20230926

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20231212

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821

Effective date: 20231213

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20240319

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20240408

A01 Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01

Effective date: 20240625