KR20220041847A - 섬유성 병리를 치료하기 위한 화합물 및 방법 - Google Patents

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alkylamino
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KR1020227004066A
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다니엘 제이 춤퍼린
앤드류 제이 하아크
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메이오 파운데이션 포 메디칼 에쥬케이션 앤드 리써치
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Abstract

본 출원은 조직 섬유증과 관련된 질환 및 병태를 치료하거나 예방하기 위한 방법을 제공한다.

Description

섬유성 병리를 치료하기 위한 화합물 및 방법
우선권 주장
본 출원은 2019년 7월 30일자로 출원된 미국 가출원 번호 제62/880,494호 및 2019년 7월 30일자로 출원된 미국 가출원 번호 제62/880,594호에 대한 우선권을 주장하고, 이의 전체 내용은 본원에 참조로 포함된다.
본 발명은 섬유아세포에서 YAP/TAZ를 억제하고 조직 섬유증과 관련된 질환 및 병태를 치료하는데 유용한 화합물 (예를 들어, 이소크로만 화합물)에 관한 것이다.
모든 장기에 걸친 조직 섬유증은 수많은 사람들에게 영향을 미친다. 미국에서만 50만명이 넘는 사람들이 간 (>400k)과 폐 (>100k) 섬유증의 영향을 받는다. 이러한 질환은 임상적으로 치료하기가 매우 어렵다. 특발성 폐 섬유증 (IPF) 및 경피증과 같은 예에서, 치료 옵션은 매우 제한적이다. 사실, 이 질환 군의 경우, 5년 생존율은 많은 후기 단계 공격성 암만큼이나 비관적일 수 있다.
조직 섬유증은 섬유 결합 조직 단백질의 제어되지 않은 침착 및 감소된 소거율을 특징으로 하고, 궁극적으로 치명적인 말기 기관 반흔을 유도한다. Yes-관련된 단백질 1 (YAP), 및 PDZ-결합 모티프를 갖는 전사 보조 활성인자 (TAZ)는 조직 섬유증을 유발하는 중간엽 세포 활성화에 역할을 한다 (참조문헌 1-4). YAP 및 TAZ는 중간엽 세포에서 다발성 전구섬유화 (pro-fibrotic) 자극의 다운스트림 전사 이펙터이고 (참조문헌 5), 다른 세포 및 조직에서의 이들의 발현은 재생 및 항상성에 필수적이고 (참조문헌 6), 이들을 치료학적으로 표적화하려는 노력을 복잡하게 한다 (참조문헌 7).
하나의 일반적인 양상에서, 본 출원은 중간엽 세포에서 GPCR 효능작용을 통해 YAP 및 TAZ를 억제하기 위한 방법을 제공한다. 본원에 제시된 데이터는 폐 및 간 섬유증의 뮤린 모델에서 이러한 접근법의 효능을 입증한다. GαS-커플링된 도파민 수용체 D1은 이들 기관의 다른 주요 상주 세포에 비해 폐 및 간 중간엽세포에서 우선적으로 발현된다. D1 수용체의 효능작용은 중간엽 세포에서 YAP/TAZ 기능을 선택적으로 억제하고, YAP/TAZ 의존성 방식으로 이들의 표현형을 전구섬유화로부터 섬유증-해소로 전환시켜 시험관내 세포외 매트릭스 축적 및 경직 (stiffening), 및 생체내 조직 섬유증을 효과적으로 역전시킨다. 이 발견은 조직 섬유증을 유발하는 표적을 억제하는 세포-선택적 접근법을 입증하고, 섬유증-해소 중간엽 표현형을 생성하기 위한 전략으로서 Gαs 효능작용을 확립한다.
하나의 일반적인 양상에서, 본 출원은 하기 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다:
Figure pct00001
상기 식에서 R1 및 R3는 본원에 기재된 바와 같다.
또 다른 일반적인 양상에서, 본 개시내용은 하기 화학식 (II)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다:
Figure pct00002
상기 식에서 R1, R2, R3, R4 및 R5는 본원에 기재된 바와 같다.
또 다른 일반적인 양상에서, 본 개시내용은 하기 화학식 (III)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다:
Figure pct00003
상기 식에서 X1, R1, R3, 및 R4는 본원에 기재된 바와 같다.
또 다른 일반적인 양상에서, 본 개시내용은 하기 화학식 (IV)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다:
Figure pct00004
상기 식에서 X1, X2, R1, R2, R4 및 R5는 본원에 기재된 바와 같다.
또 다른 일반적인 양상에서, 본 개시내용은 본원에 기재된 화학식 중 어느 하나의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다.
또 다른 일반적인 양상에서, 본 출원은 세포에서 Gαs　단백질 커플링된 수용체를 효능화시키는 방법을 제공하고, 상기 방법은 세포와 유효량의 본원에 기재된 화학식 중 어느 하나의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 접촉시키는 단계를 포함한다.
또 다른 일반적인 양상에서, 본 출원은 세포에서 YAP/TAZ 인산화를 촉진시키는 방법을 제공하고, 상기 방법은 세포와 유효량의 본원에 기재된 화학식 중 어느 하나의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 접촉시키는 단계를 포함한다.
또 다른 일반적인 양상에서, 본 출원은 세포에서 YAP/TAZ 기능을 억제하는 방법을 제공하고, 상기 방법은 세포와 유효량의 본원에 기재된 화학식 중 어느 하나의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 접촉시키는 단계를 포함한다.
또 다른 일반적인 양상에서, 본 출원은 세포에서 전구섬유화 유전자의 발현을 억제하는 방법을제공하고, 상기 방법은 세포와 유효량의 본원에 기재된 화학식 중 어느 하나의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 접촉시키는 단계를 포함한다.
또 다른 일반적인 양상에서, 본 출원은 세포에서 YAP/TAZ의 핵 국소화를 감소시키는 방법을 제공하고, 상기 방법은 세포와 유효량의 본원에 기재된 화학식 중 어느 하나의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 접촉시키는 단계를 포함한다.
또 다른 일반적인 양상에서, 본 출원은 세포에서 α-평활근 액틴 (αSMA)의 발현을 억제하는 방법을 제공하고, 상기 방법은 세포와 유효량의 본원에 기재된 화학식 중 어느 하나의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 접촉시키는 단계를 포함한다.
또 다른 일반적인 양상에서, 본 출원은 세포에 의한 세포외 매트릭스 생성 및 침착을 억제하는 방법ㅇ르 제공하고, 상기 방법은 세포와 유효량의 본원에 기재된 화학식 중 어느 하나의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 접촉시키는 단계를 포함한다.
또 다른 일반적인 양상에서, 본 출원은 세포에 의한 세포외 매트릭스 분해를 증진시키는 방법을 제공하고, 상기 방법은 세포와 유효량의 본원에 기재된 화학식 중 어느 하나의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 접촉시키는 단계를 포함한다.
또 다른 일반적인 양상에서, 본 출원은 섬유성 병리를 치료하거나 예방하는 방법을 제공하고, 상기 방법은 치료학적 유효량의 본원에 기재된 화학식 중 어느 하나의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 또는 이를 포함하는 약제학적 조성물을 이를 필요로하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.
달리 정의되지 않는 한, 본원에 사용된 모든 기술 및 과학 용어들은 본 출원이 속하는 기술 분야의 통상의 기술 자에 의해 통상적으로 이해되는 바와 동일한 의미를 갖는다. 본 출원에 사용하기 위한 방법 및 재료가 본원에 기재되어 있고; 당업계에 공지된 다른 적합한 방법 및 재료가 또한 사용될 수 있다. 재료, 방법 및 실시예는 예시일뿐이고 제한하려는 의도는 아니다. 본원에 언급된 모든 공보, 특허 출원, 특허, 서열, 데이터베이스 항 목 및 다른 참조문헌은 그들의 전문이 참조로 포함된다. 상충되는 경우에, 정의를 포함한 본 명세서가 우선할 것이다.
본 출원의 다른 특성 및 이점은 하기의 상세한 설명과 도면 및 청구범위로부터 명백할 것이다.
도 1은 전사 인자 YAP/TAZ가 조직 섬유증을 촉진하는 분자 메커니즘의 개략도를 포함한다. YAP/TAZ 핵 국소화 및 활성은 여러 전구섬유화 신호전달 경로에 의해 매개된다. D1 도파민 수용체의 활성화는 섬유아세포에서 YAP/TAZ의 핵 국소화 및 활성을 억제한다.
도 2는 Gαs-커플링된 도파민 수용체 D1이 폐 섬유아세포에서 선택적으로 발현되는 것을 도시하는 도식을 포함한다. 이 도식은 GPCR 신호전달에 의한 YAP/TAZ 전사 보조인자 활성의 조절을 도시한다. Gαs에 커플링되는 수용체는 cAMP를 상승시키고 핵 국소화를 차단하는 YAP/TAZ의 인산화를 유도한다. Galphαi/q/12에 커플링되는 수용체는 예를 들어 Rho-키나제 (ROCK)를 통해 YAP/TAZ의 핵 국소화 및 활성을 촉진시킨다.
도 3은 배양된 인간 폐포 상피 세포 및 정상 인간 폐 섬유아세포의 GPCR 발현 프로파일링을 도시하는 선 플롯을 포함한다. 도파민 수용체 D1 (DRD1) 전사체는 섬유아세포에서 고도로 발현되고 상피 세포에서는 검출되지 않는다. 적색 점은 Gαs에 선택적으로 커플링되는 GPCR를 나타낸다. 오렌지색 대각선은 10배 우선적 발현을 나타내고, 청색 선은 100배 우선적 발현을 나타낸다.
도 4는 배양된 비-IPF 관련 섬유아세포, IPF 환자-유래된 섬유아세포, 정상 인간 폐포 상피 세포 (NHAEpC), 및 정상 인간 미세혈관 내피 세포 (NHMVEC)에서의 DRD1 발현, 6회 이하 계대를 도시하는 막대 그래프를 포함한다. NHAEpC 및 NHMVEC, n=2. 비-IPF FB 및 IPF FB, n=6.
도 5는 새롭게 단리된 마우스 폐 섬유아세포 (FB), 상피 세포 (EpC), 내피 세포 (EC), 및 백혈구 (Leuk)에서 DRD1의 발현을 도시한다. 건강한 COL1A1-GFP 발현 마우스로부터의 폐를 효소적으로 분해하고, 이어서 섬유아세포 (GFP+, CD140a+), 상피 세포 (CD326+), 내피 세포 (CD31+), 및 백혈구 (CD45+)의 마커에 대해 분류하고, 이어서 RNA를 단리하여 선택적 집단 및 Drd1의 발현을 입증한다.
도 6는 도파민 수용체 D1 효능작용이 YAP/TAZ 핵 국소화를 차단함을 도시한다. 다양한 효능을 갖는 도파민 수용체 D1의 선택적 효능제는 YAP/TAZ 핵 국소화를 억제하고; 이 효과는 DRD1 수용체 길항제 (SCH 39166, 3 μM), (디하이드렉시딘, 10 μM)로 처리하여 극복될 수 있다. IMR-90 세포는 고정화 2시간 전에 처리하였다. N=4 (0.1% DMSO 비히클 대조군 대비 **** p < 0.0001). 스케일 막대는 100 μm를 나타낸다.
도 7은 DRD1 발현과 일관되게, D1 효능제 (예를 들어, DHX)가 섬유아세포 (IPF-FB)에서만 YAP/TAZ를 억제하지만 상피 (NHEpC) 또는 내피 (NHMVEC) 세포에서는 그렇지 않은 것을 도시한다. N=4 (0.1% DMSO 비히클 대조군 대비 **** p < 0.0001)
도 8은 YAP/TAZ 국소화가 Galphαi/q/12, 엔도텔린 1 (ET-1: 100 nM), 리소포스파티드산 (LPA: 10 μM), 및 세로토닌 (5-HT: 1 μM)에 커플링된 수용체를 자극하는 다중 리간드를 통해 유도되는 것을 도시한다. 각각의 경우, DHX 처리 (10 μM)는 YAP/TAZ에 대한 이 효과를 역전시킬 수 있다. IMR-90 세포는 0.1% FBS를 함유하는 배지에서 24시간 동안 플라스틱 세포 배양 플레이트 상에 고밀도로 분주하고, 고정화 전 2시간 동안 처리하였다. N=4 (0.1% DMSO 비히클 대조군 대비 **** p < 0.0001), (각각의 자극된 효능제 ET-1, LPA, 또는 5-HT 대비 ++++ p < 0.0001). 스케일 막대는 100 μm를 나타낸다.
도 9는 DHX (10 μM) +/- SCH 39166 (3 μM)를 사용하여 20분 동안 처리된 IPF 환자-유래된 섬유아세포에서 측정된 cAMP를 도시하는 막대 그래프를 포함한다. N=3 (0.1% DMSO 비히클 대조군 대비 ** p < 0.01).
도 10은 Rho-키나제 억제제 Y27632 (20 μM), 직접적인 cAMP 자극인자 포르스콜린 (10 μM), 또는 DHX (10 μM)에 의한 YAP의 인산화를 도시한다. IMR-90 세포는 0.1% FBS를 함유하는 배지에서 24시간 동안 배양하고, 고정화 전 2시간 동안 처리하였다. N=3 (0.1% DMSO 비히클 대조군 대비 *** p < 0.001).
도 11은 D1 효능제 (예를 들어, DHX)가 섬유아세포 매트릭스 침착, 수축 및 경직을 역전시킴을 도시한다. DHX는 IPF 환자-유래된 섬유아세포에서 전구섬유화 유전자 발현을 차단한다. 결합 조직 성장 인자 (CTGF), 콜라겐 I (COL1A1), αSMA (ACTA2), 및 피브로넥틴 (FN1)을 암호화하는 유전자는 DHX (10μM), +/- SCH 39166 (3 μM)을 사용한 24시간 처리에 의해 감소된다. N=3 (0.1% DMSO 비히클 대조군 대비 **** p < 0.0001, *** p < 0.001, * p < 0.05).
도 12는 D1 효능제 (예를 들어, DHX)가 TGFβ-유도된 αSMA+ 스트레스 섬유 형성을 역전시킴을 도시한다. IMR-90 세포는 48시간 동안 2 ng/mL TGFβ로 사전 자극하고, 이어서 고정화 전 추가 24시간 동은 DHX (10 μM) + 2 ng/mL TGFβ로 처리하였다. αSMA에 대해 양성인 세포는 맹검 연구자에 의해 정량화하고 우측 하단 모서리에 나타내고, 각각의 실험에서 최소 300개의 세포를 정량화하였다. N=3.
도 13은 D1 효능제 (예를 들어, DHX)가 TGFβ-유도된 세포외 매트릭스 축적을 역전시킴을 도시한다. 컨플루언스에서 성장한 IPF 환자-유래된 섬유아세포는 48시간 동안 2 ng/mL로 사전 자극하고, 이어서 고정화 전 추가 24시간 동안 DHX (10 μM)+2ng/mL TGFβ로 처리하였다. 세포 유래된 매트릭스는 콜라겐 I 및 피브로넥틴에 대한 항체를 사용하여 측정하였다. N=3 (0.1% DMSO 비히클 대조군 대비 **** p < 0.0001, *** p < 0.001, ** p < 0.01)
도 14는 D1 효능제 (예를 들어, DHX)가 견인력 현미경으로 측정된 IPF 환자-유래된 섬유아세포 수축성을 약화시킴을 도시한다. 대표적인 견인 맵은 지정된 농도의 DHX로 처리된 6.4 kPa 매트릭스 상에 분주된 세포로부터 나타난다. RMS 견인은 2개의 독립적인 실험에서 결정되었고; 박스 및 위스커 플롯은 하나의 대표적인 실험으로부터 최소에서 최대, 사분위 및 평균을 보여준다 (0.1% DMSO 비히클 대조군 대비 **** p < 0.0001, * p < 0.05).
도 15는 D1 효능제 (예를 들어, DHX)가 세포외 매트릭스 경직을 역전시킴을 도시한다. 젤라틴-코팅된 조직 배양 플레이트 상에 분주된 NIH-3T3 세포는 강성도 (탄성률)를 측정하기 위해 AFM 마이크로압입 분석 전 72시간 동안 2 ng/mL TGFβ및 20 μM 아스코르브산을 갖는 매트릭스에 침착하도록 자극하였다. 이어서, 동일한 디쉬를 추가 72시간 동안 동일한 배지에서 +/- 10 μM DHX를 처리하고 AFM 분석하였다. 매트릭스를 탈세포화시키고 계대 3 NHLF를 매트릭스 상에 분주하고; 24시간 후 RNA를 수거하고 전구섬유화 유전자의 발현을 분석하였다. 각각의 플레이트에 대해 AFM 분석 N=2.75 압입 측정을 수행하였다. 박스 및 위스커 플롯은 하나의 대표적인 실험으로부터 최소에서 최대, 사분위 및 평균을 보여준다 (0.1% DMSO 비히클 대조군 대비 **** p < 0.0001) (처음 72시간 항온처리한 후 동일한 배양 플레이트 대비 ++ p < 0.01, + p < 0.05). 탈세포화된 매트릭스 상에 분주된 세포로부터의 RNA의 측정 N=3. (0.1% DMSO 비히클 대조군 대비 * p < 0.05).
도 16은 D1 효능제 (예를 들어, DHX)가 매트릭스 분해 유전자 프로그램 대비 매트릭스 침착을 조절함을 도시한다. 0.1% FBS를 함유하는 배지에서 배양된 IPF 환자-유래된 섬유아세포는 RNA 단리 전 2 ng/mL TGFβ및 10 μM DHX로 24시간 동안 자극하였다. ECM 가교결합을 위해 트랜스글루타미나제 2 (TGM2), 리실 옥시다제 및 리실 옥시다제-유사 효소 (LOX 및 LOXL1-4)를 암호화하고, ECM 분해를 위해 uPA (PLAU), tPa (PLAT), 카뎁신 K (CTSK), 및 매트릭스 메탈로프로테아제-14 (MMP14) 및 ECM 프로테아제 억제 제를 암호화하고: 메탈로프로테아제 억제제 3 (TIMP3), 및 플라스미노겐 활성인자 억제제 1 (SERPINE1)을 암호화하는 유전자를 측정하였다. N=3. (0.1% DMSO 비히클 대조군 비-TGFβ 처리 대비 **** p < 0.0001, *** p < 0.001, ** p < 0.01, * p < 0.05), (0.1% DMSO 비히클 대조군 TGFβ처리 대비 ++++ p < 0.0001, ++ p < 0.01, + p < 0.05).
도 17은 D1 효능제 (예를 들어, DHX)가 블레오마이신-유도된 폐 섬유증을 치료학적으로 역전시킴을 도시한다. 블레오마이신 유도된 폐 손상 및 DHX 치료학적 이득의 결과로서 체중 변화. 암컷 마우스에 0일에 블레오마이신을 기관내 투여하였고; 치료는 10 일에 개시하였고 (매일 5 mg/kg DHX) 24일 까지 계속하였다.
도 18은 콜라겐 및 구조 변화를 시각화하기 위한 H&E 염색을 도시한다. 파라핀 포매된 폐 절편을 염색하고 폐 병리학자에 의한 맹검 방식으로 분석하고 애쉬크로프트 방법 (Ashcroft method)을 사용하여 점수를 매겼다.
도 19는 폐에서 콜라겐 침착을 측정하기 위한 하이드록시프롤린 검정 결과를 도시한다. 급속 동결된 폐 조직은 하이드록시프롤린 검정을 사용하여 콜라겐 풍부함에 대해 생화학적으로 분석하였다.
도 20은 αSMA 및 Yap/Taz에 대한 폐 절편의 면역형광 이미지화를 포함한다. 폐 절편은 αSMA 및 Yap/Taz에 대해 면역 탐지하여 염색하였다. αSMA 및 Yap/Taz 둘 다에 대해 이중 양성인 세포는 자동화 소프트웨어를 사용하여 정량화하였다.
도 21은 전구섬유화 유전자 발현에서의 변화, 전체 폐 균질물 중 Yap 및 Taz (Wwtr1)를 도시한다. 샴 대조군 N=15, 블레오 대조군 N=17, 및 블레오 DHX N=17. (샴 대조군 대비 **** p < 0.0001, *** p < 0.001, ** p < 0.01, * p < 0.05) (각각의 블레오 대조군 대비 ++ p < 0.01, + p < 0.05).
도 22는 기관내 투여된 YAP/TAZ siRNA가 블레오마이신 유도된 폐 손상 및 섬유증을 악화시킴을 도시한다. 마우스에 0일에 블레오마이신을 투여하고, 이어서 14일에 Yap 및 Taz에 대해 siRNA를 기관내 투여하였다. 21일에 BAL 유체를 수거하고 분석을 위해 폐를 수거하였다. Yap/Taz siRNA는 콜라겐 침착을 증진시켰다. 샴 처리된 마우스 N=4, 블레오 처리된 마우스 N=6 (샴 NT-siRNA 대비 **** p < 0.0001, *** p < 0.001, ** p < 0.01, * p < 0.05).
도 23a는 블레오마이신 및 YAP/TAZ siRNA로 처리된 폐의 이미지를 포함한다. 도 23b는 샴- 및 블레오-처리된 폐의 중량을 도시하는 막대 그래프를 포함한다. 도 23c는 샴- 및 블레오-처리된 폐에서 총 BAL 유체 단백질을 도시하는 막대 그래프를 포함한다.
도 24는 D1 효능제 (예를 들어, DHX)가 다중 조직으로부터의 섬유아세포에서. 폐 (IMR-90 및 IPF-FB) 간성상 세포 (HSC), 인간 성인 심장 섬유아세포, (HACF) 및 인간 피부 섬유아세포 (HDF)로부터 유래된 중간엽 세포를 0.1% FBS를 함유하는 배지에서 24시간 동안 플라스틱 세포 배양 플레이트 상에 고밀도로 (컨플루언트) 또는 희박하게 (대조군 및 모든 나머지 조건) 분주하고, Rho 키나제 억제제 Y27632, 아데닐레이트 사이클라제 활성화제 포르스콜린 및 DHX로 2시간 동안 처리하였다. N=4, 핵 YAP/TAZ에 대해 양성인 세포는 자동화된 이미지 분석에 의해 정량화하였다.
도 25는 YAP/TAZ 핵 국소화의 억제를 위한 D1 효능제 (예를 들어, DHX)의 시간 과정을 도시한다. IMR-90 세포, N=3 (0.1% DMSO 비히클 대조군 대비 *** p < 0.001).
도 26은 D1 효능제 (예를 들어, DHX)가 PGE2와 달리, IPF 유래된 섬유아세포에서 효력을 상실하지 않는 것을 도시한다. N=3.
도 27은 D1 효능제 (예를 들어, DHX)가 DRD1 효능작용을 통한 전구섬유화 유전자 발현을 억제함을 도시한다. DRD1을 녹다운시키기 위한 siRNA 처리.
도 28은 DRD1-siRNA 처리된 세포에서 YAP/TAZ 핵 국소화 및 전구섬유화 유전자 발현의 감소된 D1 효능제 (예를 들어, DHX)-매개된 억제를 도시한다. DHX로 2시간 (b) 또는 24시간 (c) 처리 전에 72시간 동안 DRD1 또는 NT siRNA를 표적화하는 siRNA로 형질감염된 IMR-90 세포. 모두에 대해 N=2 (NTsiRNA 대비 **** p < 0.0001, ** p < 0.01, * p < 0.05).
도 29는 전구섬유화 유전자 발현 및 매트릭스 침착의 D1 효능제 (예를 들어, DHX) 억제가 YAP/TAZ의 억제를 요구함을 도시한다. DHX는 섬유아세포가 항상성 활성 돌연변이체 TAZ (TAZ4SA)를 발현하는 경우 전구섬유화 유전자 발현을 억제하지 않는다. TAZ4SA 발현은 10μM 또는 지시된 농도의 디하이드렉시딘으로의 처리 전 72시간 동안 100 ng/mL의 독시사이클린으로 유도하였다. 유전자 발현 실험의 경우, NIH-3T3 세포 내 DHX의 효능은 TGFβ(24시간, 2 ng/mL) 유도된 유전자 발현에 대한 DHX (10 μM) 효과에 의해 입증되었다. 모두에 대해 N=2.
도 30은 전구섬유화 유전자 발현 및 매트릭스 침착의 D1 효능제 (예를 들어, DHX) 억제가 YAP/TAZ의 억제를 요구함을 도시한다. 섬유아세포가 항상성 활성 돌연변이체 TAZ (TAZ4SA)를 발현하는 경우 ECM 침착을 억제하지 않는다. TAZ4SA 발현은 10μM 또는 지시된 농도의 디하이드렉시딘으로의 처리 전 72시간 동안 100 ng/mL의 독시사이클린으로 유도하였다. 유전자 발현 실험의 경우, NIH-3T3 세포 내 DHX의 효능은 TGFβ(24시간, 2 ng/mL) 유도된 유전자 발현에 대한 DHX (10 μM) 효과에 의해 입증되었다. 모두에 대해 N=2.
도 31은 D1 효능제 (예를 들어, DHX) 단독이 폐 매트릭스 함량 또는 전구섬유화 유전자 발현에 영향을 미치지 않는 것을 도시한다. 정상의 건강한 마우스에서, DHX는 체중을 변화시키지 않았다. 그룹 당 n = 6마리 마우스.
도 32는 정상의 건강한 마우스에서 D1 효능제 (예를 들어, DHX)가 폐 조직학을 변화시키지 않은 것을 도시한다. 그룹 당 n = 6마리 마우스.
도 33은 정상의 건강한 마우스에서 D1 효능제 (예를 들어, DHX)가 폐 콜라겐 침착을 변화시키지 않은 것을 도시한다. 그룹 당 n = 6마리 마우스.
도 34는 정상의 건강한 마우스에서 D1 효능제 (예를 들어, DHX) Ctgf, Col1a1, Acta2, 및 Fn1의 발현을 변화시키지 않은 것을 도시한다. 그룹 당 n = 6마리 마우스.
도 35는 D1 효능제 (예를 들어, DHX)가 간성상 세포 활성화 및 생체내 간 섬유증을 역전시킴을 도시한다. DRD1는 배양된 인간 간 성상 세포 (HSC): ACTA2, PDGFRA 양성, 배양된 인간 간세포 (Hep)에 상대적인: ALB 양성. N=1.
도 36은 D1 효능제 (예를 들어, DHX)가 시험관내 TGFβ-매개된 간 성상 세포 활성화를 억제함을 도시한다. HSC는 αSMA 및 피브로넥틴의 총 단백질 단리 및 웨스턴 블롯 분석 전에 48 시간 동안 TGFβ +/-DHX (10 μM)로 자극하였다. N=3 (대조군 + TGFβ 대비 *** p < 0.001, ** p < 0.01, * p < 0.05).
도 37은 D1 효능제 (예를 들어, DHX)가 트리크롬 염색에 의해 측정된 생체내 담관 결찰 (BDL)-매개된 섬유증을 역전시킴을 도시한다. 샴 대조군 N=5, BDL 대조군 N=7, 및 BDL DHX N=8 (BDL 대조군 대비 ** p < 0.01).
도 38은 D1 효능제 (예를 들어, DHX)가 하이드록시프롤린에 의해 측정된 생체내 담관 결찰 (BDL)-매개된 섬유증을 역전시킴을 도시한다. 샴 대조군 N=5, BDL 대조군 N=7, 및 BDL DHX N=8 (BDL 대조군 대비 ** p < 0.01).
도 39는 YAP 인산화가 pYAP의 핵 국소화를 차단함을 도시한다.
도 40은 동일한 수용체를 표적화하고 다양한 구조를 갖는 D1 수용체 효능제가 유사한 효과를 생성함을 도시한다.
도 41은 D1 효능제 (예를 들어, DHX)에 의한 YAP 불활성화가 D1 수용체 활성에 기초함을 도시한다.
도 42는 D1 수용체 효능제가 IPF를 갖는 환자로부터의 섬유아세포에서 다중 전구섬유화 유전자의 발현을 감소시킴을 도시한다.
도 43은 D1 수용체 효능제 (예를 들어, DHX)가 IPF 섬유아세포에서 증식을 선택적으로 느리게 함을 도시한다. IPF 섬유아세포 및 정상 폐 섬유아세포 공동-배양 증식. 세포는 형광 염료 (적색 및 녹색)로 사전 표지화시키고, 이어서 96 웰 플 레이트에서 1:1의 비율로 공동 배양하였다. 세포 계수는 24시간 마다 결정하고 IPF/HLF 세포의 비율로서 플롯팅한다. 대조군 웰에서, IPF 세포는 과성장하고 웰을 넘쳐난다. N=2.
도 44는 YAP/TAZ가 매트릭스 강성도-의존성 섬유아세포 활성화에 필요함을 도시한다.
도 45는 돌연변이체 YAP/TAZ가 NIH 3T3 섬유아세포에서 연질의 매트릭스 상에서 활성임을 도시한다.
도 46는 YAP/TAZ가 생체내 섬유조직발생 잠재력을 부여함을 도시한다.
도 47은 글로벌 YAP/TAZ 표적화가 가능하지 않음을 도시한다.
도 48은 IPF 환자 유래된 섬유아세포, 정상 인간 폐포 상피 세포 (NHAEpC), 및 정상 인간 미세혈관 내피 세포로부터 D1 도파민 수용체의 웨스턴 블롯 단백질 발현을 도시한다. NHAEpC 및 NHMVEC, N=2. 비-IPF FB 및 IPF FB, N=3 상이한 공여자 라인.
도 49는 1차 배양된 인간 폐 미세혈관 내피 세포 및 정상 인간 폐 섬유아세포의 GPCR 발현 프로파일링을 도시한다. 적색 점은 Gαs에 선택적으로 커플링되는 GPCR을 나타낸다. 청색 선은 100배 우선적 발현을 나타낸다. 프로스타글란딘 수용체 PTGER2 및 PTGDR (DRD1 바로 위의 적색 점)은 또한 섬유아세포 대 내피 세포에서 선택적으로 발현되었지만, 이들 수용체 둘 다는 상피 세포에서 고도로 발현되었다.
도 50a는 도파민 수용체 D1 효능작용이 YAP/TAZ 핵 국소화를 차단함을 도시한다. D1 수용체 선택적 효능제는 YAP/TAZ 핵 국소화를 억제한다. IPF 환자-유래된 폐 섬유아세포는 다양한 도파민성 효능제 (10 μM)로 고정화 2시간 전에 처리하였다. N=4 상이한 환자 샘플. YAP/TAZ의 %핵 국소화는 자동화된 이미지화 소프트웨어를 사용하여 결정하였다. 스케일 막대는 100 μm를 나타낸다.
도 50b는 D1 수용체 효능제 (예를 들어, DHX)로 20분 동안 처리된 IPF 환자-유래된 섬유아세포에서 측정된 cAMP를 도시한다. N=3.
도 50c는 D1 수용체 효능제 (예를 들어, DHX)가 다중 기관으로부터의 섬유아세포; 간 성상 세포 (HSC), 인간 성인 심장 섬유아세포 (HACF), 및 인간 피부 섬유아세포 (HDF)에서 YAP/TAZ 핵 국소화를 억제하지만 폐 폐포 상피 (NHAEp) 또는 내피 (NHMVE) 세포에서는 그렇지 않은 것을 도시한다. N=3 (0.1% DMSO 비히클 대조군 대비 **** p < 0.0001).
도 51은 D1 수용체 효능제 (예를 들어, DHX)가 섬유아세포 매트릭스 침착, 수축 및 경직을 역전시킴을 도시한다. D1 수용체 선택적 효능제는 섬유아세포 활성화를 억제한다 (대표적인 이미지: 1μM 디하이드렉시딘 (DHX). IPF 환자-유래된 폐 섬유아세포 세포는 다양한 혼합 선택성 도파민성 효능제 (1μM) + TGFβ의 라이브러리로 고정화 전 72시간 동안 처리하였다. N=4 상이한 환자 샘플. αSMA 강도는 자동화된 이미지화 소프트웨어를 사용하여 결정하였다. 스케일 막대는 100μm를 나타낸다.
도 52는 D1 수용체 효능제 (예를 들어, DHX)가 견인력 현미경으로 측정된 IPF 섬유아세포 수축성을 약화시킴을 도시한다. (0.1% DMSO 비히클 대조군 대지 **** p < 0.0001, * p < 0.05).
도 53은 D1 수용체 효능제 (예를 들어, DHX)가 세포외 매트릭스 축적을 역전시킴을 도시한다. IPF 환자-유래된 섬유아세포는 48시간 동안 2 ng/mL TGFβ로 사전 자극하고, 이어서 추가 24시간 동안 DHX +2 ng/mL TGFβ로 처리하였다. N=3 (0.1% DMSO 비히클 대조군 대비 **** p < 0.0001, *** p < 0.001, ** p < 0.01)
도 54는 D1 수용체 효능제 (예를 들어, DHX) 및 YAP/TAZ siRNA가 매트릭스 가교결합 및 분해 유전자 프로그램을 조절함을 도시한다. IPF 섬유아세포는 2 ng/mL TGFβ +/- 10 μM DHX 또는 YAP 및 TAZ siRNA (>90% 녹다운)로 24시간 처리하였다. N=3. 히트 맵은 비자극된 대조군에 상대적인 % 변화를 나타낸다.
도 55는 D1 수용체 효능제 (예를 들어, DHX)가 세포외 매트릭스 경직을 역전시킴을 도시한다. IPF 환자 유래된 섬유아세포 및 이들의 세포-유래된 매트릭스는 히트 맵은 72시간 후 구형 팁을 사용하여 AFM 마이크로압입에 의해 특징 분석하고, 이어서 추가 72시간 동안 매트릭스 침착 배지에서 +/- 10 μM DHX로 처리하고, 다시 특징 분석하였다. N=5 상이한 환자 샘플. (0.1% DMSO 비히클 대조군 대비 * p < 0.05).
도 56은 DHX가 생체내 폐 섬유아세포에서 YAP/TAZ 표적 유전자의 발현을 선택적으로 차단함을 도시한다. 2개 그룹의 마우스는 0일에 블레오마이신으로 기관내 손상시키고, 10일에 하나의 그룹에는 2회 용량의 DHX (폐 수거 전 2시간 및 24시간)를 투여하고, 나머지 그룹에는 비히클 대조군을 투여하였다. 11일에 폐를 수거하여 섬유아세포, 상피 및 내피 세포를 유동 분류하였다.
도 57은 새롭게 단리된 세포로부터의 YAP/TAZ 표적 유전자의 RNA 발현에서의 변화를 도시한다.
도 58a는 DRD1 효능작용이 폐 섬유아세포에서 YAP/TAZ의 국소화 및 활성을 선택적으로 차단함을 도시한다. IPF 유래된 폐 섬유아세포, 폐 폐포 상피 (NHAEp) 및 내피 (NHMVE) 세포는 DRD1 선택적 효능제 (예를 들어, DHX)로 2시간 동안 처리하였다.
도 58b는 IPF 유래된 폐 섬유아세포, 폐 폐포 상피 (NHAEp) 및 내피 (NHMVE) 세포를 RNA 단리 및 YAP/TAZ 표적 유전자의 측정 전에 DRD1 선택적 효능제로 24시간 동안 처리한 실험 결과를 도시한다. N=2 기술적 리플리케이트.
도 58c는 IPF 유래된 폐 섬유아세포, 폐 폐포 상피 (NHAEp) 및 내피 (NHMVE) 세포를 부타프로스트 (EP2 수용체 효능제)로 2시간 동안 처리한 실험 결과를 도시한다. DRD1 수용체는 섬유아세포에서만 발현되는 반면, cAMP를 또한 상승시키는 EP2 수용체는 3개 세포 유형 모두에서 발현된다.
도 58d는 IPF 유래된 폐 섬유아세포, 폐 폐포 상피 (NHAEp) 및 내피 (NHMVE) 세포를 RNA 단리 및 YAP/TAZ 표적 유전자의 측정 전에 부타프로스트 (EP2 수용체 효능제)로 24시간 동안 처리한 실험 결과를 도시한다. N=2 기술적 리플리케이트.
도 59a는 D1 수용체 효능제 (예를 들어, DHX) 활성이 DRD1 수용체에 의존함을 도시한다.
도 59b는 D1 수용체 효능제 (예를 들어, DHX) 활성이 DRD1 수용체에 의존함을 도시한다.
도 59c는 DRD1 siRNA 처리가 cAMP의 DHX 상승을 차단함을 도시한다. N=3, IMR-90 폐 섬유아세포.
도 59d는 DRD1 siRNA 처리가 YAP/TAZ 핵 국소화의 억제를 차단함을 도시한다. N=3, IMR-90 폐 섬유아세포.
도 59e는 DRD1 siRNA 처리가 YAP/TAZ 표적 유전자의 억제를 도시한다. N=3, IMR-90 폐 섬유아세포.
도 59f는 도파민 수용체 D1 길항제 SCH-39166 및 LE-300가 cAMP의 DHX 상승을 차단함을 도시한다. N=3, IMR-90 폐 섬유아세포.
도 59g는 도파민 수용체 D1 길항제 SCH-39166 및 LE-300가 YAP/TAZ 핵 국소화의 DHX 억제를 차단함을 도시한다. N=3, IMR-90 폐 섬유아세포.
도 59h는 도파민 수용체 D1 길항제 SCH-39166 및 LE-300가 YAP/TAZ 표적 유전자의 DHX 억제를 차단함을 도시한다. N=3, IMR-90 폐 섬유아세포.
도 60a는 DHX가 증식을 차단하고 아폽토시스를 위해 폐 섬유아세포를 프라이밍함을 도시한다. 폐 섬유아세포 (IMR-90 세포)의 증식은 GPCR 효능제 ET-1 (100 nM) 및 LPA (10 μM) +/- 10 μM DHX의 존재하에 4일 동안 측정하였다. 세포를 고정화시키고 각각의 날의 말기에 DAPI로 계수하였다. N= 3 기술적 트리플리케이트.
도 60b는 폐 섬유아세포 (IPF 환자-유래된 폐 섬유아세포)의 증식을 GPCR 효능제 ET-1 (100 nM) 및 LPA (10 μM) +/- 10 μM DHX의 존재 하에 4일 동안 측정한 실험 결과를 도시한다. 세포를 고정화시키고 각각의 날의 말기에 DAPI로 계수하였다. N= 3 기술적 트리플리케이트.
도 60c는 폐 섬유아세포 (IMR-90 세포)의 증식을 성장 인자 TGFβ (2 ng/mL) +/- 10 μM DHX의 존재 하에 4일 동안 측정한 실험 결과를 도시한다. 세포를 고정화시키고 각각의 날의 말기에 DAPI로 계수하였다. N= 3 기술적 트리플리케이트.
도 60d는 폐 섬유아세포 (IPF 환자-유래된 폐 섬유아세포)의 증식을 성장 인자 CTGF (100 ng/mL) +/- 10 μM DHX의 존재 하에 4일 동안 측정한 실험 결과를 도시한다. 세포를 고정화시키고 각각의 날의 말기에 DAPI로 계수하였다. N= 3 기술적 트리플리케이트.
도 60e는 아폽토시스 촉진 인자 BIM의 RNA 발현을 DHX (10 μM)로 24회 처리 후 평가한 실험 결과를 도시한다. N=4. IMR-90 세포.
도 60f는 아폽토시스 촉진 인자 BIM의 RNA 발현을 DHX (10 μM)로 24회 처리 후 평가한 실험 결과를 도시한다. N=4. IPF 환자-유래된 폐 섬유아세포.
도 60g는 항-아폽토시스 인자 BCL2의 RNA 발현을 DHX (10 μM)로 24회 처리 후 평가한 실험 결과를 도시한다. N=4. IMR-90 세포.
도 60h는 항-아폽토시스 인자 BCL2의 RNA 발현을 DHX (10 μM)로 24회 처리 후 평가한 실험 결과를 도시한다. N=4. IPF 환자-유래된 폐 섬유아세포.
도 61a DOPA 데카복실라제는 IPF에서 감소하고 악화된 질환 중증도와 상호관련된다. DDC 및 DRD1에 대한 발현 수준은 IPF (n=134) 및 대조군 (n=108) 폐의 마이크로어레이 분석으로부터 조사하였다. 각각의 데이터 포인트는 개체로부터의 발현 수준을 나타낸다. 막대는 평균 및 표준 편차를 나타낸다.
도 61b는 웨스턴 블롯팅을 사용하여 IPF (n=10) 및 대조군 (n=11) 폐로부터의 전체 폐 균질물에서 DDC 단백질 발현을 검출한 실험 결과를 도시한다. 막대는 평균 및 표준 편차를 나타낸다.
도 61c는 강제 폐활량 (FVC) 및 일산화탄소에 대한 폐의 확산능력 (DLCO)과 DDC 발현의 상호관계의 단변량 분석을 피어슨 (Pearson) 상관 계수 (r)를 사용하여 수행한 실험 결과를 도시한다. 각각의 데이터 포인트는 개체로부터의 발현 수준 및 폐 기능 (연령, 성별 및 이상적인 체중을 기준으로 예측된 퍼센트로 나타냄)을 나타낸다. P 값은 각각의 도면 패널에 대해 나타낸 바와 같다.
도 62a는 항-섬유화 효과를 촉진시킨다. 도파민은 조직 배양 플라스틱 상에 분주된 저밀도 IPF-환자 유래된 섬유아세포에서 YAP/TAZ 핵 국소화를 억제한다. N=2.
도 62b는 도파민이 견인력 현미경으로 측정된 IPF 섬유아세포 수축성을 약화시킴을 도시한다. (나타낸 그룹 대비 **** p < 0.0001, *** p < 0.001, ** p < 0.01, * p < 0.05).
도 62C는 도파민이 αSMA+ 스트레스 섬유 형성을 역전시킴을 도시한다. IPF-환자 유래된 섬유아세포는 48시간 동안 2 ng/mL TGFβ로 사전 자극하고, 이어서 추가 24시간 동안 도파민 (1 μM) + 2 ng/mL TGFβ으로 처리하였다. N=4. 스케일 막대는 500 mm를 나타낸다.
도 63는 DRD1 효능작용이 인간 피부 섬유아세포에서 전구섬유화 유전자 발현을 차단함을 도시한다. 인간 피부 섬유아세포는 24 시간동안 +/- 2 ng/mL TGFβ 및 D1 효능제: RNA 단리 전 DHX 및 A68930으로 처리하였다. N=2.
도 64는 디하이드렉시딘 (DHX) 효능이 도파민 수용체 (DRD1, DRD5)와 같이 D1의 발현에 의존함을 도시한다. IMR-90 폐 섬유아세포는 자궁 섬유종으로부터 유래된 중간엽 세포 보다 더 높은 수준의 DRD1 및 DRD5를 발현하며, 이는 이들 세포에서 DHX에 의한 YAP/TAZ 핵 국소화의 주변부 억제를 초래한다. ND는 검출되지 않는 유전자를 지칭한다.
도 65는 D1 효능제 디하이드렉시딘 (DHX), A-68930, (R)-(-)-아포모르핀, 및 R(-)-2,10,11-트리하이드록시아포르핀에 의한 핵 YAP/TAZ/DAPI 억제를 도시하는 막대 그래프를 포함한다. (10 μM) N=4 IPF-환자 유래된 폐 섬유아세포.
도 66은 화합물 CTC-3이 YAP/TAZ 핵 국소화를 억제함을 도시하는 선 플롯을 포함한다. 성인 폐 섬유아세포 (N=2)를 96-웰 플레이트에 희박하게 분주하였다. YAP/TAZ에 대한 고정화 및 면역염색 전에 화합물로 2시간 동안 처리하였다. 핵 YAP/TAZ의 이미지화 및 정량화는 Cytation 5를 이용한 자동화를 통해 수행하였다. (IC50는 102 nM이다).
도 67은 화합물 CTC-6이 YAP/TAZ 핵 국소화를 억제함을 도시하는 선 플롯을 포함한다. 성인 폐 섬유아세포 (N=2)를 96-웰 플레이트에 희박하게 분주하였다. YAP/TAZ에 대한 고정화 및 면역염색 전에 화합물로 2시간 동안 처리하였다. 핵 YAP/TAZ의 이미지화 및 정량화는 Cytation 5를 이용한 자동화를 통해 수행하였다. (IC50는 62 nM이다).
도 68은 화합물 CTC-3이 섬유아세포 증식을 억제함을 도시하는 선 플롯을 포함한다. 성인 폐 섬유아세포를 96-웰 플레이트에 분주하고, 2 ng/mL TGFβ및 표시된 농도의 화합물로 자극하였다. Cytation 5를 사용하여 DAPI 핵을 고정화시키고 계수하여 증식을 결정하였다. N=2.
도 69는 화합물 CTC-6이 섬유아세포 증식을 억제함을 도시하는 선 플롯을 포함한다. 성인 폐 섬유아세포를 96-웰 플레이트에 분주하고, 2 ng/mL TGFβ및 표시된 농도의 화합물로 자극하였다. Cytation 5를 사용하여 DAPI 핵을 고정화시키고 계수하여 증식을 결정하였다. N=2.
도 70은 화합물 CTC-3이 섬유아세포 활성화를 억제함을 도시하는 선 플롯을 포함한다. 성인 폐 섬유아세포는 96-웰 플레이트에 분주하고, 96시간 동안 2 ng/mL TGFβ로 자극하고 48시간 마다 지시된 농도의 화합물로 처리하였다. αSMA 강도의 이미지화 및 정량화는 Cytation 5를 사용한 자동화를 통해 수행하였다. (IC50는 0.3 μM이다).
도 71은 화합물 CTC-6 이 섬유아세포 활성화를 억제함을 도시하는 선 플롯을 포함한다. 성인 폐 섬유아세포는 96-웰 플레이트에 분주하고, 96시간 동안 2 ng/mL TGFβ로 자극하고 48시간 마다 지시된 농도의 화합물로 처리하였다. αSMA 강도의 이미지화 및 정량화는 Cytation 5를 사용한 자동화를 통해 수행하였다. (IC50는 0.1 μM이다).
도 72는 화합물 CTC-3이 콜라겐 I 침착을 억제함을 도시하는 선 플롯을 포함한다. 성인 폐 섬유아세포는 96-웰 플레이트에 분주하고, 96시간 동안 2 ng/mL TGFβ로 자극하고 48시간 마다 지시된 농도의 화합물로 처리하였다. 콜라겐 I 강도의 이미지화 및 정량화는 LI-COR 오딧세이를 사용한 자동화를 통해 수행하였다. (IC50는 0.7 μM이다).
도 73은 화합물 CTC-6 이 콜라겐 I 침착을 억제함을 도시하는 선 플롯을 포함한다. 성인 폐 섬유아세포는 96-웰 플레이트에 분주하고, 96시간 동안 2 ng/mL TGFβ로 자극하고 48시간 마다 지시된 농도의 화합물로 처리하였다. 콜라겐 I 강도의 이미지화 및 정량화는 LI-COR 오딧세이를 사용한 자동화를 통해 수행하였다. (IC50는 0.4 μM이다).
도 74는 화합물 CTC-1이 YAP/TAZ 핵 국소화를 억제함을 도시하는 선 플롯을 도시한다. 성인 폐 섬유아세포 (N=2)를 96-웰 플레이트에 희박하게 분주하였다. YAP/TAZ에 대한 고정화 및 면역염색 전에 화합물로 2시간 동안 처리하였다. 핵 YAP/TAZ의 이미지화 및 정량화는 Cytation 5를 이용한 자동화를 통해 수행하였다. (IC50는 285 nM이다).
도 75는 화합물 CTC-2 이 YAP/TAZ 핵 국소화를 억제함을 도시하는 선 플롯을 도시한다. 성인 폐 섬유아세포 (N=2)를 96-웰 플레이트에 희박하게 분주하였다. YAP/TAZ에 대한 고정화 및 면역염색 전에 화합물로 2시간 동안 처리하였다. 핵 YAP/TAZ의 이미지화 및 정량화는 Cytation 5를 이용한 자동화를 통해 수행하였다. (IC50는 490 nM이다).
도 76은 화합물 CTC-1 및 CTC-2에 의한 전구섬유화 유전자 발현의 억제를 도시하는 막대 그래프를 포함한다. 지시된 농도의 화합물로 24시간 동안 처리된 IMR-90 폐 섬유아세포. N=3.
도 77a는 디하이드렉시딘 (DHX)의 구조 및 YAP/TAZ 억제 효능을 포함한다. 인간 폐 섬유아세포는 YAP/TAZ 국소화의 이미지화 및 정량화 전에 지시된 농도의 디하이드렉시딘으로 2시간 동안 처리하였다.
도 77b는 TPSA 및 WLOGP 특성을 사용하여 DHX에 대한 예측된 BBB 침투의 계란 프라이 모델의 이미지를 포함한다. "노른자"에 맞는 화합물은 CNS에 들어갈 것으로 예측된다. 이러한 예측은 BBB 침투의 시험관내 모델과 상관관계가 있다.
도 78은 A-68930의 유사체를 함유하는 페닐에 대한 구조 및 효능 데이터를 포함한다. 3-치환된 A68930 유사체의 효력 및 효능. 미국 특허 제 5,621,133호에 따라 금붕어 망막 또는 랫트 선조체를 사용하여 측정값을 얻었다.
도 79는 A-68930 및 본 개시내용의 D1 효능제 간의 대조적인 YAP/TAZ 핵 국소화 억제를 포함한다. 성인 폐 섬유아세포 (N=2)를 96-웰 플레이트에 희박하게 분주하였다. YAP/TAZ에 대한 고정화 및 면역염색 전에 화합물로 2시간 동안 처리하였다. 핵 YAP/TAZ의 이미지화 및 정량화는 Cytation 5를 이용한 자동화를 통해 수행하였다. A-68390는 광학적으로 순수한 입체 이성질체로 테스트하였다. CTC-3 및 CTC-6는 모두 활성 또는 비활성 입체 이성질체의 1:1 혼합물이다 (관찰된 효력는 2배 더 높음). A-68930의 주요 단점은 cAMP를 증진시키는 완전한 효능이 없다는 것이다.
도 80은 시험관내 CTC-6 효능의 선 플롯을 포함한다. A. 폐 섬유아세포에서 YAP/TAZ 국소화 를억제하는 CTC-6에 대한 용량-반응 곡선. B. 인간 폐 섬유아세포를 2ng/mL TGFβ로 4일 동안 자극하고 지시된 농도의 CTC-6로 처리된 고정 세포로부터 DAPI 핵을 계수함으로써 세포 수를 매일 측정하였다. C. 면역세포화학에 의해 측정된 αSMA 강도의 발현. D. 본원 발명자들 그룹이 개발한 "인-세포 웨스턴 블롯 (in-cell Western blot)" 기술을 사용하여 측정된 콜라겐 침착. 참고 사항: 이 데이터는 CTC-6의 라세미 혼합물을 사용하여 수집하였다. 활성 입체 이성질체는 비활성 입체 이성질체보다 2배 더 강력하다.
도 81a는 TPSA 및 WLOGP 특성을 사용하여 예측된 BBB 침투의 계란 프라이 모델을 포함한다. "노른자"에 맞는 화합물은 CNS에 들어갈 것으로 예측된다. DHX 및 CTC-6는 본 개시내용의 다른 화합물과 함께 플롯팅된다.
도 81b는 TPSA 및 WLOGP 특성을 사용하여 예측된 BBB 침투의 계란 프라이 모델을 포함한다. "노른자"에 맞는 화합물은 CNS에 들어갈 것으로 예측된다. A-68930 및 CTC-6는 본 개시내용의 다른 화합물과 함께 플롯팅된다.
도 82는 DHX의 사이클로헥산 및 사이클로옥탄 유도체로부터의 화합물 구조 및 데이터를 포함한다. 효력은 유지되는 것으로 보이며 효능은 사이클로옥탄에서 극적으로 증가하였다. 측정값은 공개된 특허 및 원고에 따라 금붕어 망막 또는 쥐 선조체를 사용하여 얻었다.
도 83은 화학식 (I)의 R1　위치에 다양한 헤테로사이클을 갖는 실시예 9의 화합물에 대한 TPSA 및 WLOGP 특성을 사용하여 예측된 BBB 침투의 예측된 계란 프라이 모델을 포함한다.
도 84는 DHX 보다 더 강력하고 A-68930 보다 더 효과적인 디나프솔린/A-68930 하이브리드 스캐폴드 (scaffold) (3)를 갖는 화합물을 개시한다. 디나프솔린/A-68930 하이브리드 스캐폴드는 2010년에 퍼듀 대학교 (Purdue University)의 한 그룹에 의해 이전에 설명되었다. 이 하이브리드는 DHX 보다 ~6X 더 강력하고 cAMP를 높이는데 완전한 효능을 보여준다.
도 85는 실시예 2의 화합물의 TPSA 및 WLOGP 특성을 사용하여 예측된 BBB 침투의 계란 프라이 모델을 도시한다. 화합물의 화학 구조 또한 도시되어 있다.
도 86는 디나프솔린 및 디녹실린이 디하이드렉시딘과 유사한 D1 결합 친화성을 나타냄을 도시한다. 도면에 도시되지 않았지만, 세 가지 화합물 모두 공개된 원고에서 전체 규모의 cAMP 반응 (전체 효능)을 생성하였다. 디나프솔린 (DNS) 및 디녹실린 (DNX)은 1990년대 후반과 2000년대 초반에 퍼듀 대학교의 같은 그룹이 발견한 디하이드렉시딘 (DHX) 프레임워크 모방체이다`
도 87은 실시예 1의 화합물과 디나프솔린 (DNS), 디녹실린 (DNX), 및 디하이드렉시딘 (DHX)의 TPSA 및 WLOGP 특성을 사용하여 예측된 BBB 침투의 예측된 계란 프라이 모델을 도시한다. 실시예 1의 화합물의 화학 구조 또한 도시되어 있다.
도 88은 인간 폐 섬유아세포 및 인간 폐포 상피 세포에서 화합물 CTC-3에 대한 %핵 YAP/TAZ를 도시하는 선 플롯을 포함한다.
도 89는 인간 폐 섬유아세포 및 인간 폐포 상피 세포에서 화합물 CTC-6에 대한 %핵 YAP/TAZ를 도시하는 선 플롯을 포함한다.
도 90은 화합물 1의 화학 구조 및 화합물 1이 섬유아세포 증식을 억제함을 도시하는 선 플롯 또한 포함한다. 성인 폐 섬유아세포를 96-웰 플레이트에 분주하고, 2 ng/mL TGFβ및 표시된 농도의 화합물로 자극하였다. Cytation 5를 사용하여 DAPI 핵을 고정화시키고 계수하여 증식을 결정하였다. N=2.
도 91a는 화합물 1이 섬유아세포 활성화를 억제함을 도시하는 선 플롯을 포함한다. 성인 폐 섬유아세포는 96-웰 플레이트에 분주하고, 96시간 동안 2 ng/mL TGFβ로 자극하고 48시간 마다 지시된 농도의 화합물로 처리하였다. αSMA 강도의 이미지화 및 정량화는 Cytation 5를 사용한 자동화를 통해 수행하였다.
도 91b는 화합물 1이 콜라겐 I 침착을 억제함을 도시하는 선 플롯을 포함한다. 성인 폐 섬유아세포는 96-웰 플레이트에 분주하고, 96시간 동안 2 ng/mL TGFβ로 자극하고 48시간 마다 지시된 농도의 화합물로 처리하였다. 콜라겐 I 강도의 이미지화 및 정량화는 LI-COR 오딧세이를 사용한 자동화를 통해 수행하였다.
도 92a는 화합물 1 (MS-9)의 시험관내 효능을 도시한다. 인간 폐 섬유아세포 및 폐포 상피 세포는 MS-9fh 처리하고 YAP/TAZ 국소화에 대한 영향을 결정하였다.
도 92b는 화합물 1 (MS-9)의 시험관내 효능이 TGFβ의 발현을 차단함을 도시한다.
도 92c는 화합물 1 (MS-9)의 1 μM 및 10 μM에 대한 세포 계수 (FOV)를 도시하는 선 플롯을 포함한다.
조직 섬유증은 심장, 폐, 간, 및 신장을 포함한 다중 중요 기관에서 일어날 수 있다. 섬유증은 여러 메커니즘을 통해 정상적인 건강한 기관을 구조적으로 및 기능적으로 손상된 조직으로 변형시키는 진행성 과정이다. 임상적 관점으로부터, 이들은 치료 옵션이 최소한으로 유지되고 예후가 일반적으로 매우 나쁘기 때문에 심각한 문제를 나타낸다. 중추 신경계의 일부로서 거의 독점적으로 연구되고 있는 도파민 수용체는 실제로 신체의 선택된 조직 및 세포에서뿐만 아니라 말초에서 고도로 발현된다. 이들 수용체는 조직 섬유증에서 중요한 역할을 수행하는 다운스트림 경로를 통해 신호를 전달한다. 이러한 수용체의 한 예는 Gαs-커플링된 수용체, 예컨데 도파민 수용체 D1 (DRD1)이다. 본 개시내용에 기재된 바와 같이, 효능화된 도파민 수용체는 다중 기관에서 조직 섬유증의 치료 또는 예방을 유도한다.
YAP 및 TAZ는 히포 (Hippo) 경로의 전사 공동-활성인자 및 중추 이펙터이다 (참조문헌 8). 조직 형태형성 동안에 기관 성장 및 크기 조절에서 이들의 역할을 기반으로 본래 확인된 히포 경로 및 성인 조직 내 YAP/TAZ는 상피 및 내피 항상성(참조문헌 9-13), 줄기 세포 기능(참조문헌 14-16) 및 조직 재생(참조문헌 9, 17, 18)을 조절한다. 폐 및 간(참조문헌 2)을 포함한 다중 기관(참조문헌 19-22)에서 중간엽 세포 활성화 및 섬유증에서 YAP 및 TAZ에 대한 역할을 나타냈다. 일련의 기계적 및 생화학적 신호는 YAP 및 TAZ의 업스트림 조절인자로서 매트릭스 강성도를 포함한 다중 전구섬유화 자극, 잠재적으로 모두 신호전달에 관여하는 TGFβ/SMAD, MRTF/SRF, 및 WNT(참조문헌 5, 23, 24)와 연루되어 있다.
G 단백질 커플링된 수용체는 4개 주요 부류의 G-단백질 (예를 들어, Gα12/13, Gαq/11, Gαi/o 또는 Gαs)로부터의 이펙터 단백질에 연결된다. 일부 경우에, G 단백질 커플링된 수용체는 YAP/TAZ 핵 전좌 및 전사 활성을 자극한다. 다른 경우에, G 단백질 커플링된 수용체는 cAMP의 상승을 통해 YAP/TAZ 핵 국소화 및 활성을 억제한다 (예를 들어, 도 1, 2 참조).
일부 구현예에서, G 단백질 커플링된 수용체의 활성화 (효능작용)는 생리학적 조건하에서 YAP/TAZ 과인산화 및 불활성화를 초래한다 (예를 들어, 수용체의 효능작용은 YAP/TAZ 핵 국소화를 예방한다). 이것은 YAP/TAZ 핵 전좌 및 전사 활성을 자극하는 G 단백질 커플링된 수용체의 불활성화 (길항작용)와 대조적이며, 이는 Acta2 (αSMA), Ctgf (결합 조직 성장 인자), Fn1 (피브로넥틴), Col1a1 (콜라겐 I), 및 Col1a2 (콜라겐 II)와 같은 전구섬유화 유전자의 발현을 초래한다.
일부 구현예에서, 본 개시내용은 세포에서 G 단백질 커플링된 수용체를 효능화시키는 방법을 제공하고, 상기 방법은 상기 세포와 본원에 기재된 화합물 중 어느 하나, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 접촉시키는 단계를 포함한다. 일부 구현예에서, 화합물은 Gαs　수용체를 선택적으로 효능화시킨다 (예를 들어, 화합물은 Gα12/13, Gαq/11　또는 Gαi/o　단백질 커플링된 수용체, 또는 상기 언급된 것의 임의의 조합과 비교하여 Gαs　단백질 커플링된 수용체에 대해 100배, 50배 또는 10배 선택적이다).
일부 구현예에서, 세포는 중간엽 세포이다 (예를 들어, G 단백질 커플링된 수용체는 중간엽 세포에서 발현된다). 일부 구현예에서, 중간엽 세포는 섬유아세포 (예를 들어, 폐, 심장, 간, 신장 또는 피부 섬유아세포) 또는 성상 세포 (예를 들어, 췌장 성상 세포, 간 성상 세포, 족세포, 또는 골세포)이다. 일부 구현예에서, G 단백질 커플링된 수용체는 조직 (예를 들어 폐 조직 또는 간 조직)의 상피 또는 내피 세포와 비교하여 중간엽 세포에서 우선적으로 발현된다. 하나의 예에서, G 단백질 커플링된 수용체는 폐포 상피 세포보다 폐 섬유아세포에서 우선적으로 발현된다. 또 다른 예에서, G 단백질 커플링된 수용체는 간세포보다 간 성상 세포에서 우선적으로 발현된다.
일부 구현예에서, G 단백질 커플링된 수용체는 Gαs　수용체이다. 하나의 예에서, Gαs 수용체는 중간엽 세포에서 우선적으로 발현된다. 일부 구현예에서, Gαs　단백질 커플링된 수용체는 도파민 수용체 (예를 들어, D1, D2, D3, D4, 또는 D5 도파민 수용체)이다. 일부 구현예에서 도파민 수용체는 도파민 수용체 D1 (DRD1)이다. 하나의 예에서, 본 개시내용의 방법은 도파민 수용체 D1을 선택적으로 효능화시키는 단계를 포함한다. (예를 들어, 화학식 (I)의 화합물은 D2, D3, D4, 또는 D5 수용체, 또는 상기 언급된 것의 임의의 조합과 비교하여 D1 도파민 수용체에 대해 100배, 50배, 또는 10배 선택적이다).
도 1 및 2를 참조하면, 이론에 얽매이지 않고, G 단백질 커플링된 수용체의 효능작용은 세포에서 YAP/TAZ 인산화 및 후속적 분해를 초래하는 것으로 여겨진다. 일부 구현예에서, YAP/TAZ 인산화는 YAP 세린 127의 인산화를 포함한다. 일부 구현예에서, YAP/TAZ 인산화는 TAZ 세린 89의 인산화를 포함한다. 일부 구현예에서, YAP/TAZ 인산화는 YAP 세린 127의 인산화 및 TAZ 세린 89의 인산화를 포함한다. 따라서, 일부 구현예에서, 본 개시내용은 세포에서 YAP 인산화를 촉진시키는 방법을 제공하고, 상기 방법은 세포와 본원에 기재된 화합물 중 어느 하나, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 접촉시키는 단계를 포함한다. 본 개시내용의 화합물이 YAP/TAZ 단백질 매트릭스의 분해를 촉진하기 때문에, 일부 구현예에서, 본 개시내용은 세포에서 YAP/TAZ 핵 국소화를 감소시키는 방법을 제공하고, 상기 방법은 세포와 본 개시내용의 화합물 중 어느 하나, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 접촉시키는 단계를 포함한다. 따라서, 본 개시내용의 화합물은 YAP/TAZ가 세포 기능을 수행할 수 없도록 한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 세포에서 YAP/TAZ 기능을 억제시키는 방법을 제공하고, 상기 방법은 세포와 본 개시내용의 화합물 중 어느 하나, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 접촉시키는 단계를 포함한다. YAP/TAZ 세포 기능의 예로는 세포에서 전구섬유화 유전자의 발현과 세포에 의한 섬유성 생체분자 (예를 들어, 액틴, 콜라겐)의 생성을 들 수 있다. 일반적으로, 이러한 섬유성 생체분자는 세포를 둘러싸고 있는 세포외 매트릭스를 구성한다. 전구섬유화 유전자의의 적절한 예로는 Acta2 (αSMA), Ctgf (결합 조직 성장 인자), Fn1 (피브로넥틴), Col1a1 (콜라겐 I), 및 Col1a2 (콜라겐 II)이 있다. 일부 구현예에서, 본 개시내용은 세포에서 α-평활근 액틴 (αSMA)의 발현을 억제하는 방법을 제공하고, 상기 방법은 세포와 본 개시내용의 화합물 중 어느 하나, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 접촉시키는 단계를 포함한다. 부수적으로, 일부 구현예에서, 본 개시내용은 세포에 의한 세포외 매트릭스의 생성 및 침착을 억제하는 방법을 제공하고, 상기 방법은 세포와 본 개시내용의 화합물 중 어느 하나, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 접촉시키는 단계를 포함한다. 일부 구현예에서, 본 개시내용의 화합물에 의해 세포에서 YAP/TAZ 기능을 억제하면 조직에서 세포외 매트릭스의 축적이 방지된다.
이론에 얽매이지 않고, G 단백질 커플링된 수용체의 효능작용은 섬유 형성 및 세포외 매트릭스 축적을 역전시키는 것으로 여겨진다 (예를 들어, G 단백질 커플링된 수용체 효능작용은 조직으로부터 섬유 및 세포외 매트릭스의 제거를 유도한다). 따라서, 일부 구현예에서, 본 개시내용은 세포에 의한 세포외 매트릭스 분해를 증진시키는 방법을 제공하고, 상기 방법은 세포와 본 개시내용의 화합물 중 어느 하나, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 접촉시키는 단계를 포함한다.
일부 구현예에서, 섬유 형성, 또는 섬유증은 외상 또는 조직 손상에 의해 조직에서 유도된다. 정상적으로, 세포는 단지 적절한 양의 조직을 생성하여 오래된 조직을 대체하거나 조직 손상을 복구한다. 과도한 결합 조직 생성 (예를 들어, 외상 또는 손상에 응답하여)은 기관 또는 조직 비후 및 반흔을 유도하는 섬유성 조직 (예를 들어, 세포외 매트릭스 단백질)의 병리학적 축적을 초래한다.
일부 구현예에서, 본 개시내용은 대상체에서 섬유성 병리를 치료하거나 예방하는 방법을 제공하고, 상기 방법은 치료학적 유효량의 본원에 기재된 화합물 중 어느 하나, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다. 일부 구현예에서, 섬유성 병리의 치료를 필요로 하는 대상체는 치료 담당의에 의해 섬유성 병리로 진단된다.
일부 구현예에서, 섬유성 병리는 간질성 폐 질환 (ILD)이다. 일부 구현예에서, 섬유성 병리는 폐 조직 섬유증, 예를 들어, 폐 섬유증 (PF) 또는 특발성 폐 섬유증 (IPF)이다. 거론되었음에도 불구하고, 낭포성 섬유증은 간질성 폐 질환 또는 주요 섬유성 병리로 간주되지 않는다. 낭포성 섬유증은 손상된 이온 수송, 점액 기능부전, 및 기도로부터 효과적으로 병원체를 제거하지 못하여 초래되며, 결국 기도와 폐의 반흔을 초래한다.
일부 구현예에서, 섬유성 병리는 간 조직 섬유증, 예를 들어, 간경변 또는 담도 폐쇄증이다. 일부 구현예에서, 섬유성 병리는 심장 조직 섬유증 (심장 섬유증), 예를 들어, 동맥 섬유증, 심근내막 섬유증, 또는 심근경색 후반흔이다. 일부 구현예에서, 섬유성 병리는 뇌 조직 섬유증, 예를 들어, 심경교 반흔이다. 일부 구현예에서, 섬유성 병리는 동맥 강성, 관절섬유증 (무릎, 어깨, 팔꿈치, 또는 기타 관절), 신장 섬유증 (예를 들어, 만성 신장 질환 및 섬유증), 간 섬유증, 비알콜성 지방간, 비알콜성 지방간염, 크론 (Crohn) 질환 (장 반흔), 듀피이트렌 (Dupuytren) 구축 (손 또는 손가락의 반흔 조직), 피부 조직 섬유증, 예를 들어, 켈로이드 (피부 상에 반흔), 종격 섬유증 (종격의 연질 조직), 페이로니 (Peyronie) 질환 (음경 조직 내 반흔), 신성 전신 섬유증, 진행성 거대 섬유증, 복막후 섬유증 (복막후의 연질 조직 상에 반흔) 또는 유착성 관절낭염이다.
일부 구현예에서, 섬유성 병리의 예방을 필요로하는 대상체는 치료 담당의에 의해 조직 외상 또는 손상으로 진단된다. 조직 손상의 적합한 예로는 흡입된 물질 (예를 들어, 실리카 또는 석면)에 의해 유발된 손상, 약물-유도된 손상 (항생제 또는 항암 약물에 의해 유발된 손상), 자가면역 질환에 의해 유발된 조직 손상 (예를 들어, 류마티스 관절염, 경화증, 예컨데 전신 경화증, 루푸스) 감염에 의해 유발된 손상 (예를 들어, 결핵, 폐렴, 호흡기 바이러스), 또는 사르코이드증 (sarcoidosis)이 있다.
예시적인 치료 화합물
화학식 (I)의 화합물
일부 구현예에서, 본 개시내용은 하기 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다:
Figure pct00005
상기 식에서,
R1은 HO-C1-6　알킬, NH2-C1-6　알킬, N, O, 및 S로부터 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 포함하는 5-6-원 헤테로아릴 고리, 및 N, O, 및 S로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 포함하는 3-10-원 헤테로사이클로알킬 고리로부터 선택되고;
여기서 상기 헤테로아릴 고리 및 헤테로사이클로알킬 고리는 각각 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환되고;
각각의 R2는 독립적으로 할로, OH, C1-3　알콕시, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, C1-3　알콕시, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환되고; 그리고
R3는 H 및 할로로부터 선택된다.
일부 구현예에서, 본 개시내용은 하기 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다:
Figure pct00006
상기 식에서,
R1은 HO-C1-6　알킬, NH2-C1-6　알킬, N, O, 및 S로부터 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 5-6-원 헤테로아릴 고리, 및 N, O, 및 S로부터 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 3-7-원 헤테로사이클로알킬 고리로부터 선택되고;
여기서 상기 헤테로아릴 고리 및 헤테로사이클로알킬 고리는 각각 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환되고; 그리고
각각의 R2는 독립적으로 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R1은 N, O, 및 S로부터 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 포함하는 5-6-원 헤테로아릴 고리이고, 상기 헤테로아릴 고리는 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R1은 N, O, 및 S로부터 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 5-6-원 헤테로아릴 고리이고, 상기 헤테로아릴 고리는 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R1은 N, O, 및 S로부터 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 5-원 헤테로아릴 고리이고, 상기 헤테로아릴 고리는 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R1은 티에닐, 푸릴, 피롤릴, 이미다졸릴, 티아졸릴, 옥사졸릴, 피라졸릴, 이소티아졸릴, 이속사졸릴, 1,2,3-트리아졸릴, 테트라졸릴, 1,2,3-티아디아졸릴, 1,2,3-옥사디아졸릴, 1,2,4-트리아졸릴, 1,2,4-옥사디아졸릴, 1,3,4-트리아졸릴, 1,3,4-티아디아졸릴, 및 1,3,4-옥사디아졸릴로부터 선택되고, 이들 각각은 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R1은 1 또는 2개의 N 원자를 포함하는 6-원 헤테로아릴 고리이고, 상기 헤테로아릴 고리는 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R1은 피리디닐, 피리미디닐, 피라지닐, 디아지닐, 트리아지닐, 테트라지닐, 및 펜타지닐로부터 선택되고, 이들 각각은 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R1은 피리딜, 피라지닐, 피리미디닐, 및 피라다지닐로부터 선택되고, 이들 각각은 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R1은 피리디닐, 피리미디닐, 및 피라지닐로부터 선택되고, 이들 각각은 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R1은 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된 피리디닐이다.
일부 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물은:
Figure pct00007
, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다.
일부 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물은:
Figure pct00008
, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다.
일부 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물은:
Figure pct00009
, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다.
일부 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물은:
Figure pct00010
, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다.
일부 구현예에서, R1은 N, O, 및 S로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 포함하는 3-10-원 헤테로사이클로알킬 고리이고, 상기 헤테로사이클로알킬 고리는 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R1은 N, O, 및 S로부터 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 3-7-원 헤테로사이클로알킬 고리이고, 상기 헤테로사이클로알킬 고리는 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R1은 N, O, 및 S로부터 선택된 1개의 헤테로원자를 포함하는 3-원 헤테로사이클로알킬 고리이고, 상기 헤테로사이클로알킬 고리는 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다. 이러한 고리의 예는 아지리디닐 및 옥시라닐을 포함한다.
일부 구현예에서, R1은 N, O, 및 S로부터 선택된 1개의 헤테로원자를 포함하는 4-원 헤테로사이클로알킬 고리이고, 상기 헤테로사이클로알킬 고리는 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다. 이러한 고리의 예는 옥세타닐 및 아제티디닐을 포함한다.
일부 구현예에서, R1은 N, O, 및 S로부터 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 5-원 헤테로사이클로알킬 고리이고, 상기 헤테로사이클로알킬 고리는 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다. 이러한 고리의 예는 테트라하이드로푸라닐, 피롤리디닐, 이속사졸리디닐, 이미다졸리디닐, 및 티아졸리디닐을 포함한다.
일부 구현예에서, R1은 N, O, 및 S로부터 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 6-원 헤테로사이클로알킬 고리이고, 상기 헤테로사이클로알킬 고리는 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다. 이러한 고리의 예는 모르폴리닐, 티오모르폴리닐, 테트라하이드로피라닐, 피페라지닐, 및 피페리디닐을 포함한다.
일부 구현예에서, R1은 N, O, 및 S로부터 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 7-원 헤테로사이클로알킬 고리이고, 상기 헤테로사이클로알킬 고리는 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R1은 N, O, 및 S로부터 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 8-원 헤테로사이클로알킬 고리이고, 상기 헤테로사이클로알킬 고리는 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R1은 N, O, 및 S로부터 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 9-원 헤테로사이클로알킬 고리이고, 상기 헤테로사이클로알킬 고리는 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R1은 N, O, 및 S로부터 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 10-원 헤테로사이클로알킬 고리이고, 상기 헤테로사이클로알킬 고리는 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R1은 테트라하이드로피라닐, 피페리디닐, 테트라하이드로푸라닐, 피롤리디닐, 피라닐, 모르폴리닐, 옥사지닐, 디옥사닐, 디옥시닐, 디아지나닐, 트리아지나닐, 트리옥사닐, 아제파닐, 아제피닐, 옥세파닐, 옥세피닐, 디아제파닐, 디아제피닐, 아조카닐, 아조시닐, 옥소카닐, 옥소시닐, 아조나닐, 아조니닐, 옥소나닐, 및 옥소니닐로부터 선택되고, 이들 각각은 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R1은 테트라하이드로피라닐, 피페리디닐, 테트라하이드로푸라닐, 및 피롤리디닐로부터 선택되고, 이들 각각은 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R1은 테트라하이드로피라닐 및 피페리디닐로부터 선택되고, 이들 각각은 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R1은 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된, 테트라하이드로피라닐이다.
일부 구현예에서, R1은 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된, 피페리디닐이다.
일부 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물은:
Figure pct00011
, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다.
일부 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물은:
Figure pct00012
, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다.
일부 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물은:
Figure pct00013
, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다.
일부 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물은:
Figure pct00014
, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다.
일부 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물은:
Figure pct00015
, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다.
일부 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물은:
Figure pct00016
, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다.
일부 구현예에서, R1은 HO-C1-6　알킬 및 NH2-C1-6　알킬로부터 선택된다.
일부 구현예에서, R1은 HO-C1-6　알킬이다.
일부 구현예에서, R1은 NH2-C1-6　알킬이다.
일부 구현예에서, R2는 할로, OH, C1-3　알콕시, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 독립적으로 선택된다.
일부 구현예에서, R2는 OH, NH2, C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R2는 OH 및 NH2로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R2는 OH이다. 일부 구현예에서, R2는 NH2이다. 일부 구현예에서, R2는 C1-3　알킬이다. 일부 구현예에서, R2는 HO-C1-3　알킬이다. 일부 구현예에서, R2는 NH2-C1-3　알킬이다.
일부 구현예에서, R3는 H이다.
일부 구현예에서, R3는 할로이다.
일부 구현예에서, R3는 Cl, F, 및 Br로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R3는 Cl이다. 일부 구현예에서, R3는 F이다. 일부 구현예에서, R3는 Br이다.
일부 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물은 하기 화합물 중 어느 하나로부터 선택되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다:
Figure pct00017
Figure pct00018
.
일부 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물은 하기 화합물 중 어느 하나로부터 선택되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다:
Figure pct00019
.
일부 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물은 하기 화합물 중 어느 하나로부터 선택되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다:
Figure pct00020
.
화학식 (II)의 화합물
일부 구현예에서, 본 개시내용은 하기 화학식 (II)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다:
Figure pct00021
상기 식에서,
R1은 H 및 C1-3　알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 또는 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환되고;
R2, R3, 및 R4는 각각 독립적으로 H, OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환되고; 그리고
R5는 H 및 할로로부터 선택된다.
화학식 (II)의 화합물의 일부 구현예에서, R5가 H이면:
(i) R2, R3, 및 R4 중 적어도 하나는 H가 아니고;
(ii) R2가 H이고 R3가 OH인 경우, R4는 H 또는 OH가 아니고; 그리고
(iii) R2가 OH인 경우, R3 및 R4중 적어도 하나는 H가 아니다.
일부 구현예에서, 본 개시내용은 하기 화학식 (II)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다:
Figure pct00022
상기 식에서,
R1은 H 및 C1-3　알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 또는 디(C1-3　알킬)아미노로부터 임의로 치환되고; 그리고
R2, R3, 및 R4는 각각 독립적으로 H, OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환된다.
화학식 (II)의 화합물의 일부 구현예에서, R2, R3, 및 R4 중 적어도 하나는 H가 아니다. 화학식 (II)의 화합물의 일부 구현예에서, R2가 H이고 R3가 OH인 경우, R4는 H 또는 OH가 아니다. 화학식 (II)의 화합물의 일부 구현예에서, R2가 OH인 경우, R3 및 R4는 중 적어도 하나는 H가 아니다.
화학식 (II)의 화합물의 일부 구현예에서:
(i) R2, R3, 및 R4 중 적어도 하나는 H가 아니고;
(ii) R2가 H이고 R3가 OH인 경우, R4는 H 또는 OH가 아니고; 그리고
(iii) R2가 OH인 경우, R3 및 R4중 적어도 하나는 H가 아니다.
일부 구현예에서, R1는 H이다.
일부 구현예에서, R1은 C1-3　알킬 (예를 들어, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필)이다.
일부 구현예에서, R1은 HO-C1-3　알킬 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R1은 HO-C1-3　알킬이다. 일부 구현예에서, R1은 NH2-C1-3　알킬이다.
일부 구현예에서, R2, R3, 및 R4 중 적어도 하나는 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R2, R3, 및 R4 중 적어도 하나는 SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R2, R3, 및 R4 중 적어도 하나는 NH2, C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택된다.
일부 구현예에서, R2, R3, 및 R4 중 적어도 하나는 C1-3　알킬이다.
일부 구현예에서, R2는 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R2는 SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R2는 OH, NH2, C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R2는 NH2, C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R2는 C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R2는 C1-3　알킬 및 HO-C1-3　알킬로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R2는 C1-3　알킬 (예를 들어, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필)이다. 일부 구현예에서, R2는 HO-C1-3　알킬이다. 일부 구현예에서, R2는 NH2-C1-3　알킬이다. 일부 구현예에서, R2는 OH 이다. 일부 구현예에서, R2는 NH2 이다. 일부 구현예에서, R2는 H이다.
일부 구현예에서, R3는 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R3는 SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R3는 OH, NH2, C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R3는 NH2, C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R3는 C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R3는 C1-3　알킬 및 HO-C1-3　알킬로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R3는 C1-3　알킬 (예를 들어, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필)이다. 일부 구현예에서, R3는 HO-C1-3　알킬이다. 일부 구현예에서, R3는 NH2-C1-3　알킬이다. 일부 구현예에서, R3는 OH이다. 일부 구현예에서, R3는 NH2이다. 일부 구현예에서, R3는 H이다.
일부 구현예에서, R4는 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R4는 SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R4는 OH, NH2, C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R4는 NH2, C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R4는 C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R4는 C1-3　알킬 및 HO-C1-3　알킬로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R4는 C1-3　알킬 (예를 들어, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필)이다. 일부 구현예에서, R4는 HO-C1-3　알킬이다. 일부 구현예에서, R4는 NH2-C1-3　알킬이다. 일부 구현예에서, R4는 OH이다. 일부 구현예에서, R4는 NH2이다. 일부 구현예에서, R4는 H이다.
일부 구현예에서:
R3는 OH이고; 그리고
R2는 SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서:
R3는 OH이고; 그리고
R2는 OH, NH2, C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택된다.
일부 구현예에서:
R3는 OH이고; 그리고
R4는 SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서:
R3는 OH이고; 그리고
R4는 NH2, C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택된다.
일부 구현예에서:
R4는 OH이고; 그리고
R3는 H, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서:
R4는 OH이고; 그리고
R3는 H, NH2, C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택된다. 일부 구현예에서:
R2는 OH이고; 그리고
R3 및 R4 중 적어도 하나는 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서:
R2는 OH이고; 그리고
R3 및 R4 중 적어도 하나는 OH, NH2, C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택된다.
일부 구현예에서, R3는 OH이고 R2는 C1-3　알킬이다. 일부 구현예에서, R3는 C1-3　알킬이고 R2는 OH이다. 일부 구현예에서, R3는 OH이고 R4는 C1-3　알킬이다. 일부 구현예에서, R3는 C1-3　알킬이고 R4는 OH이다.
일부 구현예에서:
R5는 할로이고; 그리고
R2, R3, 및 R4는 각각 독립적으로 H, OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R2, R3, 및 R4는 각각 독립적으로 H, OH, 및 C1-3　알킬로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R2, R3, 및 R4는 각각 H이다.
일부 구현예에서, R5는 H이다. 일부 구현예에서, R5는 할로이다. 일부 구현예에서, R5는 Cl, Br, 및 F로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R5는 Cl이다. 일부 구현예에서, R5는 Br이다. 일부 구현예에서, R5는 F이다.
일부 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물은 하기 화학식의 화합물:
Figure pct00023
(화합물 1), 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다.
일부 구현예에서, 화학식 (I)의 화합물은 하기 화학식의 화합물:
Figure pct00024
(화합물 2), 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다.
일부 구현예에서, 화학식 (II)의 화합물은 하기 화합물 중 어느 하나로부터 선택되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다:
Figure pct00025
.
화학식 (III)의 화합물
일부 구현예에서, 본 개시내용은 화학식 (III)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다:
Figure pct00026
상기 식에서,
X1은 CH2 및 O로부터 선택되고;
R1은 HO-C1-6　알킬, NH2-C1-6　알킬, N, O, 및 S로부터 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 포함하는 5-6-원 헤테로아릴 고리, 및 N, O, 및 S로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 포함하는 3-10-원 헤테로사이클로알킬 고리로부터 선택되고;
여기서 상기 헤테로아릴 고리 및 헤테로사이클로알킬 고리는 각각 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환되고;
각각의 R2는 독립적으로 할로, OH, C1-3　알콕시, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, C1-3　알콕시, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환되고;
R3는 H 및 할로로부터 선택되고; 그리고
R4는 H 및 C1-3　알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 또는 디(C1-3　알킬)아미노로부터 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, X1은 CH2이다. 일부 구현예에서, X1은 O이다.
일부 구현예에서, R3는 H이다. 일부 구현예에서, R3는 할로이다. 일부 구현예에서, R3는 Cl, Br, 및 F로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R3는 Cl이다. 일부 구현예에서, R3는 Br이다. 일부 구현예에서, R3는 F이다.
일부 구현예에서, R4는 H 및 C1-3　알킬로부터 선택된다.
일부 구현예에서, R4는 H이다. 일부 구현예에서, R4는 C1-3　알킬이다.
일부 구현예에서, R1은 N, O, 및 S로부터 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 포함하는 5-6-원 헤테로아릴 고리이고, 상기 헤테로아릴 고리는 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R1은 N, O, 및 S로부터 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 5-6-원 헤테로아릴 고리이고, 상기 헤테로아릴 고리는 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R1은 N, O, 및 S로부터 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 5-원 헤테로아릴 고리이고, 상기 헤테로아릴 고리는 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R1은 티에닐, 푸릴, 피롤릴, 이미다졸릴, 티아졸릴, 옥사졸릴, 피라졸릴, 이소티아졸릴, 이속사졸릴, 1,2,3-트리아졸릴, 테트라졸릴, 1,2,3-티아디아졸릴, 1,2,3-옥사디아졸릴, 1,2,4-트리아졸릴, 1,2,4-옥사디아졸릴, 1,3,4-트리아졸릴, 1,3,4-티아디아졸릴, 및 1,3,4-옥사디아졸릴로부터 선택되고, 이들 각각은 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R1은 1 또는 2개의 N 원자를 포함하는 6-원 헤테로아릴 고리이고, 상기 헤테로아릴 고리는 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R1은 피리디닐, 피리미디닐, 피라지닐, 디아지닐, 트리아지닐, 테트라지닐, 및 펜타지닐로부터 선택되고, 이들 각각은 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R1은 피리딜, 피라지닐, 피리미디닐, 및 피라다지닐로부터 선택되고, 이들 각각은 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R1은 피리디닐, 피리미디닐, 및 피라지닐로부터 선택되고, 이들 각각은 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R1은 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된, 피리디닐이다.
일부 구현예에서, 화학식 (III)의 화합물은 하기 화학식을 갖는 화합물:
Figure pct00027
, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다.
일부 구현예에서, 화학식 (III)의 화합물은 하기 화학식을 갖는 화합물:
Figure pct00028
, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다.
일부 구현예에서, R1은 N, O, 및 S로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 포함하는 3-10-원 헤테로사이클로알킬 고리이고, 상기 헤테로사이클로알킬 고리는 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R1은 N, O, 및 S로부터 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 3-7-원 헤테로사이클로알킬 고리이고, 상기 헤테로사이클로알킬 고리는 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R1은 N, O, 및 S로부터 선택된 1개의 헤테로원자를 포함하는 3-원 헤테로사이클로알킬 고리이고, 상기 헤테로사이클로알킬 고리는 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다. 이러한 고리의 예는 아지리디닐 및 옥시라닐을 포함한다.
일부 구현예에서, R1은 N, O, 및 S로부터 선택된 1개의 헤테로원자를 포함하는 4-원 헤테로사이클로알킬 고리이고, 상기 헤테로사이클로알킬 고리는 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다. 이러한 고리의 예는 옥세타닐 및 아제티디닐을 포함한다.
일부 구현예에서, R1은 N, O, 및 S로부터 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 5-원 헤테로사이클로알킬 고리이고, 상기 헤테로사이클로알킬 고리는 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다. 이러한 고리의 예는 테트라하이드로푸라닐, 피롤리디닐, 이속사졸리디닐, 이미다졸리디닐, 및 티아졸리디닐을 포함한다.
일부 구현예에서, R1은 N, O, 및 S로부터 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 6-원 헤테로사이클로알킬 고리이고, 상기 헤테로사이클로알킬 고리는 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다. 이러한 고리의 예는 모르폴리닐, 티오모르폴리닐, 테트라하이드로피라닐, 피페라지닐, 및 피페리디닐을 포함한다.
일부 구현예에서, R1은 N, O, 및 S로부터 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 7-원 헤테로사이클로알킬 고리이고, 상기 헤테로사이클로알킬 고리는 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R1은 N, O, 및 S로부터 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 8-원 헤테로사이클로알킬 고리이고, 상기 헤테로사이클로알킬 고리는 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R1은 N, O, 및 S로부터 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 9-원 헤테로사이클로알킬 고리이고, 상기 헤테로사이클로알킬 고리는 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R1은 N, O, 및 S로부터 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 10-원 헤테로사이클로알킬 고리이고, 상기 헤테로사이클로알킬 고리는 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R1은 테트라하이드로피라닐, 피페리디닐, 테트라하이드로푸라닐, 피롤리디닐, 피라닐, 모르폴리닐, 옥사지닐, 디옥사닐, 디옥시닐, 디아지나닐, 트리아지나닐, 트리옥사닐, 아제파닐, 아제피닐, 옥세파닐, 옥세피닐, 디아제파닐, 디아제피닐, 아조카닐, 아조시닐, 옥소카닐, 옥소시닐, 아조나닐, 아조니닐, 옥소나닐, 및 옥소니닐로부터 선택되고, 이들 각각은 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R1은 테트라하이드로피라닐, 피페리디닐, 테트라하이드로푸라닐, 및 피롤리디닐로부터 선택되고, 이들 각각은 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R1은 테트라하이드로피라닐 및 피페리디닐로부터 선택되고, 이들 각각은 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R1은 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된, 테트라하이드로피라닐이다. 일부 구현예에서, R1은 화학식 (I)에 대해 본원에 기재된 R1　중 어느 하나이다.
일부 구현예에서, 화학식 (III)의 화합물은 하기 화학식을 갖는 화합물:
Figure pct00029
,
또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다.
일부 구현예에서, 화학식 (III)의 화합물은 하기 화학식을 갖는 화합물:
Figure pct00030
,
또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다.
일부 구현예에서, R1은 HO-C1-6　알킬 및 NH2-C1-6　알킬로부터 선택된다.
일부 구현예에서, R1은 HO-C1-6　알킬이다.
일부 구현예에서, R1은 NH2-C1-6　알킬이다.
일부 구현예에서, 각각의 R2는 독립적으로 할로, OH, C1-3　알콕시, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R2는 화학식 (I)의 화합물에 대해 본원에 기재된 임의의 R2　기이다. 일부 구현예에서, R2는 OH, NH2, C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R2는 OH 및 NH2로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R2는 OH이다. 일부 구현예에서, R2는 NH2이다. 일부 구현예에서, R2는 C1-3　알킬이다. 일부 구현예에서, R2는 HO-C1-3　알킬이다. 일부 구현예에서, R2는 NH2-C1-3　알킬이다.
일부 구현예에서, 화학식 (III)의 화합물은 하기 화합물 중 어느 하나로부터 선택되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다:
Figure pct00031
Figure pct00032
.
화학식 (IV)의 화합물
일부 구현예에서, 본 개시내용은 화학식 (IV)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 제공한다:
Figure pct00033
상기 식에서,
X1은 CH2 및 O로부터 선택되고;
X2는 CR3 및 N로부터 선택되고;
R1은 H 및 C1-3　알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 또는 디(C1-3　알킬)아미노로부터 임의로 치환되고;
R5는 H 및 할로로부터 선택되고; 그리고
R2, R3, 및 R4는 각각 독립적으로 H, OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환된다.
화학식 (IV)의 화합물의 일부 구현예에서, R5가 H이고 X2가 CR3인 경우, R2, R3, 및 R4 중 적어도 하나는 H가 아니다.
일부 구현예에서, X1은 CH2이다. 일부 구현예에서, X1은 O이다.
일부 구현예에서, R1은 H 및 C1-3　알킬로부터 선택된다.
일부 구현예에서, R1은 H이다. 일부 구현예에서, R1은 C1-3　알킬 (예를 들어, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필)이다. 일부 구현예에서, R1은 HO-C1-3　알킬 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R1은 HO-C1-3　알킬이다. 일부 구현예에서, R1은 NH2-C1-3　알킬이다.
일부 구현예에서, R5는 H이다. 일부 구현예에서, R5는 할로이다. 일부 구현예에서, R5는 Cl, Br, 및 F로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R5는 Cl이다. 일부 구현예에서, R5는 Br이다. 일부 구현예에서, R5는 F이다.
일부 구현예에서, X2는 N이다. 일부 구현예에서, X2는 CR3이다.
일부 구현예에서, R2, R3, 및 R4 중 적어도 하나는 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R2, R3, 및 R4 중 적어도 하나는 SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R2, R3, 및 R4 중 적어도 하나는 NH2, C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택된다.
일부 구현예에서, R2, R3, 및 R4 중 적어도 하나는 C1-3　알킬이다.
일부 구현예에서, R2는 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R2는 SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R2는 OH, NH2, C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R2는 NH2, C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R2는 C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R2는 C1-3　알킬 및 HO-C1-3　알킬로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R2는 C1-3　알킬 (예를 들어, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필)이다. 일부 구현예에서, R2는 HO-C1-3　알킬이다. 일부 구현예에서, R2는 NH2-C1-3　알킬이다. 일부 구현예에서, R2는 OH이다. 일부 구현예에서, R2는 NH2이다. 일부 구현예에서, R2는 H이다.
일부 구현예에서, R3는 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R3는 SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R3는 OH, NH2, C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R3는 NH2, C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R3는 C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R3는 C1-3　알킬 및 HO-C1-3　알킬로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R3는 C1-3　알킬 (예를 들어, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필)이다. 일부 구현예에서, R3는 HO-C1-3　알킬이다. 일부 구현예에서, R3는 NH2-C1-3　알킬이다. 일부 구현예에서, R3는 OH이다. 일부 구현예에서, R3는 NH2이다. 일부 구현예에서, R3는 H이다.
일부 구현예에서, R4는 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R4는 SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R4는 OH, NH2, C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R4는 NH2, C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R4는 C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R4는 C1-3　알킬 및 HO-C1-3　알킬로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R4는 C1-3　알킬 (예를 들어, 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필)이다. 일부 구현예에서, R4는 HO-C1-3　알킬이다. 일부 구현예에서, R4는 NH2-C1-3　알킬이다. 일부 구현예에서, R4는 OH이다. 일부 구현예에서, R4는 NH2이다. 일부 구현예에서, R4는 H이다.
일부 구현예에서, 화학식 (IV)의 화합물은 하기 화학식을 갖는 화합물:
Figure pct00034
,
또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다.
일부 구현예에서:
R5는 할로이고; 그리고
R2, R3, 및 R4는 각각 독립적으로 H, OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환된다.
일부 구현예에서, R2, R3, 및 R4는 각각 독립적으로 H, OH, 및 C1-3　알킬로부터 선택된다. 일부 구현예에서, R2, R3, 및 R4는 각각 H이다.
일부 구현예에서:
R3는 H이고;
R5는 H이고; 그리고
R2 및 R4는 각각 독립적으로 OH 및 C1-3　알킬로부터 선택된다.
일부 구현예에서, 화학식 (IV)의 화합물은 하기 화학식을 갖는 화합물:
Figure pct00035
,
또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다.
일부 구현예에서, R2 및 R4는 각각 독립적으로 H, 할로, OH, C1-3　알콕시, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택된다.
일부 구현예에서, 화학식 (IV)의 화합물은 하기 화합물 중 어느 하나로부터 선택되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다:
Figure pct00036
Figure pct00037
.
일부 구현예에서, 상술한 화학식 중 어느 하나의 화합물은 친수성이다. 이러한 구현예에서, 화합물의 구조는 G 단백질 커플링된 수용체의 활성 부위 내 물 분자 및 아미노산과 수소 결합을 형성할 수 있는 수소 결합 공여자 (HBD) 원자를 함유한다. 일부 구현예에서, 상술한 화학식 중 어느 하나의 화합물은 적어도 2, 3, 4, 5, 또는 6개의 HBD 원자 (예를 들어, 헤테로원자, 예컨데 O, N 또는 S)를 함유한다. 일부 구현예에서, 상술한 화학식 중 어느 하나의 화합물은 적어도 하나의 하이드록실 기 (예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6개의 하이드록실 기)를 함유한다. 일부 구현예에서, 상술한 화학식 중 어느 하나의 화합물은 아미노 기 (예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6개의 아미노 기)를 함유한다.
일부 구현예에서, 상술한 화학식 중 어느 하나의 화합물은 혈뇌 장벽을 관통하지 못하거나 단지 유의적이지 않은 양의 상술한 화학식 중 어느 하나의 화합물이 대상체에게 투여된 후 혈뇌 장벽을 관통한다 (예를 들어, 대상체에게 투여되는 화합물 양의 약 0.1 wt.%, 약 1 wt.%, 약 5 wt.%, 약 10 wt.%, 또는 약 20 wt.% 이하가 혈뇌 장벽을 관통한다). 하나의 예에서, 상술한 화학식 중 어느 하나의 화합물은 친수성이고 혈뇌 장벽을 관통할 수 없기 때문에 중추 신경계 (CNS) 장애를 치료하는데 효과가 없거나 단지 약하게 효과적이다.
약제학적 조성물 및 제형
본 출원은 또한 유효량의 본 개시내용의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다. 약제학적 조성물은 또한 기재된 어느 하나의 추가 치료제 중 적어도 하나를 포함할 수 있다. 특정 구현예에서, 본 출원은 또한 본원에 기재된 어느 하나의 추가 치료제 (예를 들어, 키트 내)를 포함하는 약제학적 조성물 및 투여 형태를 제공한다. 담체(들)는 제형의 다른 성분들과 상용성이라는 의미에서 "허용되는" 것이고, 약제학적으로 허용되는 담체의 경우, 약제에 사용되는 양으로 이의 수용자에게 유해하지 않다.
본 출원의 약제학적 조성물에 사용될 수 있는 약제학적으로 허용되는 담체, 보조제 및 비히클은 이온 교환제, 알루미나, 알루미늄 스테아레이트, 레시틴, 혈청 단백질, 예컨대 인간 혈청 알부민, 완충 물질, 예컨대 포스페이트, 글리신, 소르브산, 칼륨 소르베이트, 포화 식물성 지방산의 부분 글리세리드 혼합물, 물, 염 또는 전해질, 예컨대 프로타민 설페이트, 인산 수소 이나트륨, 인산 수소 칼륨, 염화나트륨, 아연염, 콜로이드성 실리카, 마그네슘 트리실리케이트, 폴리비닐 피롤리돈, 셀룰로스계 물질, 폴리에틸렌 글리콜, 나트륨 카르복시메틸셀룰로스, 폴리아크릴레이트, 왁스, 폴리에틸렌-폴리옥시프로필렌-블록 중합체, 폴리에틸렌 글리콜 및 양모 지방 (wool fat)를 포함한다.
조성물 또는 투여 형태는 0.005% 내지 100%의 범위로 본원에 기재된 화합물 및 치료제 중 어느 하나를 함유할 수 있고 잔량은 적합한 약제학적으로 허용되는 부형제로 구성된다. 고려되는 조성물은 본원에 제공된 화합물 및 치료제 중 어느 하나를 0.001% 내지 100%를 함유할 수 있고, 하나의 구현예에서, 0.1 내지 95%를 함유할 수 있고, 또 다른 구현예에서 75 내지 85%를 함유할 수 있고, 추가의 구현예에서, 20 내지 80%를 함유할 수 있고, 여기서, 잔량은 본원에 기재된 임의의 약제학적으로 허용되는 부형제 또는 이들 부형제의 임의의 조합으로 구성될 수 있다.
투여 경로 및 투여 형태
본 출원의 약제학적 조성물은 임의의 허용되는 투여 경로에 적합한 것들을 포함한다. 허용되는 투여 경로는 협측, 피부, 자궁경내, 부비동내, 기관내, 장, 경막외, 간질, 복부내, 동맥내, 기관지내, 점액내, 뇌내, 수조내, 관상동맥내, 피내, 관내, 십이지장내, 경막내, 상피내, 식도내, 위내, 질내, 회장내, 림프관내, 척수내, 뇌막내, 근육내, 비강내, 난소내, 복막내, 전립선내, 폐내, 부비강내, 척수내, 윤활액내, 고환내, 수막공간내, 관내, 종양내, 자궁내, 혈관내, 정맥내, 비강, 비위, 경구, 비경구, 경피, 경막주위, 직장, 호흡기 (흡입), 피하, 설하, 점막하, 국소, 경피, 경점막, 기관경유, 요관, 요도 및 질을 포함한다.
본원에 기재된 조성물 및 제형은 편리하게는 단위 투여 형태, 예를 들어, 정제, 캡슐 (예를 들어, 경질 또는 연질 젤라틴 캡슐), 서방성 캡슐, 및 리포좀으로 제공될 수 있고, 약학 분야에 잘 알려진 임의의 방법에 의해 제조될 수 있다. 예를 들어, 문헌 Remington: The Science 및 Practice of Pharmacy, Lippincott Williams & Wilkins, Baltimore, MD (20th ed. 2000)을 참조한다. 이러한 제조 방법은 투여될 분자와 하나 이상의 보조 성분을 구성하는 담체와 같은 성분들을 회합하는 단계를 포함한다. 일반적으로, 조성물은 활성 성분을 액체 담체, 리포좀 또는 미분된 고체 담체, 또는 둘 모두와 균일하고 친밀하게 회합시킨 다음, 필요한 경우 생성물을 성형함으로써 제조된다.
일부 구현예에서, 본원에 개시된 화합물 및 치료제 중 어느 하나는 경구로 투여된다. 경구 투여에 적합한 본 출원의 조성물은 각각 소정량 (예를 들어, 유효량)의 활성 성분을 함유하는 개별 단위, 예컨대 캡슐, 사쉐제, 과립 또는 정제; 분말 또는 과립; 수용액 또는 비수용액 중의 용제 또는 현탁액; 수중유 액체 에멀젼; 유중수 액체 에멀젼; 리포좀으로 포장; 또는 볼러스 등으로서 제공될 수 있다. 연질 젤라틴 캡슐은 화합물 흡수율을 유리하게 증가시킬 수 있는 이러한 현탁액을 함유하는데 유용할 수 있다. 경구 사용을 위한 정제의 경우에, 통상적으로 사용되는 담체는 락토스, 슈크로스, 글루코스, 만니톨, 및 규산 및 전분을 포함한다. 다른 허용되는 부형제는 a) 충전제 또는 증량제, 예컨대 전분, 락토스, 수크로스, 글루코스, 만니톨 및 규산, b) 결합제, 예컨대 카르복시메틸셀룰로스, 알기네이트, 젤라틴, 폴리비닐피롤리디논, 수크로스 및 아카시아, c) 보습제, 예컨대 글리세롤, d) 붕해제, 예컨대 한천-한천 (agar-agar), 탄산칼슘, 감자 또는 타피오카 전분, 알긴산, 특정 규산염 및 탄산나트륨, e) 용액 지연제, 예컨대 파라핀, f) 흡수 촉진제, 예컨대 4차 암모늄 화합물, g) 습윤제, 예컨대 세틸 알콜 및 글리세롤 모노스테아레이트, h) 흡수제, 예컨대 카올린 및 벤토나이트 점토 및 i) 윤활제, 예컨대 탈크, 칼슘 스테아레이트, 마그네슘 스테아레이트, 고체 폴리에틸렌 글리콜, 나트륨 라우릴 설페이트 및 이들의 혼합물을 포함할 수 있다. 캡슐 형태로 경구 투여를 위해, 유용한 희석제는 락토스 및 건조 옥수수 전분을 포함한다. 수성 현탁액이 경구로 투여되는 경우, 활성 성분은 유화제 및 현탁제와 조합된다. 원하는 경우, 특정 감미제 및/또는 향제 및/또는 착색제는 첨가될 수 있다. 경구 투여에 적합한 조성물은 향 첨가 기반의 성분, 일반적으로 슈크로스 및 아카시아 또는 트라가칸트를 포함하는 로젠지; 및 불활성 기반의 활성 성분, 예컨대 젤라틴 및 글리세린, 또는 슈크로스 및 아카시아를 포함하는 향정 (pastille)을 포함한다.
비경구 투여에 적합한 조성물은 항산화제, 완충제, 정균제 및 제형을 의도된 수용자의 혈액과 등장성으로 만드는 용질을 함유할 수 있는 수성 및 비수성의 멸균 주사액 또는 주입액; 및 현탁제 및 증점제를 포함할 수 있는 수성 및 비수성 멸균 현탁액을 포함한다. 제형은 단일 용량 또는 다회 용량 컨테이너, 예를 들어, 밀봉된 앰풀 및 바이알에 제공될 수 있고, 사용 직전에 멸균 액체 담체, 예를 들어, 주사용수, 식염수 (예를 들어, 0.9% 식염수 용액) 또는 5% 덱스트로스 용액의 첨가만을 필요로 하는 동결 건조 (freeze dried) (동결 건조 (lyophilized)) 상태로 저장될 수 있다. 즉석 주사 용액 및 현탁액은 멸균 분말, 과립 및 정제로부터 제조될 수 있다. 주사 용액은, 예를 들어, 멸균 주사 가능한 수성 또는 유성 현탁액 형태일 수 있다. 이 현탁액은 적합한 분산제 또는 습윤제 및 현탁제를 사용하여 당업계에 공지된 기술에 따라 제형화될 수 있다. 멸균 주사 가능한 제제는 또한, 예를 들어, 1,3-부탄디올 중 용액으로서 비독성의 비경구적으로 허용되는 희석제 또는 용매 중의 멸균 주사 가능한 용액 또는 현탁액일 수 있다. 사용할 수 있는 허용되는 비히클과 용매 중에는, 만니톨, 물, 링거액 및 등장성 염화나트륨 용액이 있다. 또한, 멸균 고정유는 통상적으로 용매 또는 현탁 매질로서 사용된다. 이 목적을 위해, 합성 모노- 또는 디글리세리드를 포함한 임의의 블랜드 (bland) 고정유가 사용될 수 있다. 지방산, 예컨대 올레산 및 이의 글리세리드 유도체는 천연 약제학적으로 허용되는 오일, 예컨대 올리브유 또는 피마자유로서, 특히 이들의 폴리옥시에틸화된 버전으로 주사제의 제조에 유용하다. 이들 오일 용액 또는 현탁액은 또한 장쇄 알콜 희석제 또는 분산제를 함유할 수 있다.
본 출원의 약제학적 조성물은 직장 투여용 좌제 형태로 투여될 수 있다. 이들 조성물은 본 출원의 화합물을, 실온에서는 고체이지만 직장 온도에서는 액체여서 직장에서 용해되어 활성 성분을 방출할 적합한 비자극성 부형제와 혼합함으로써 제조될 수 있다. 이러한 재료는 코코아 버터, 밀랍 및 폴리에틸렌 글리콜을 포함한다.
본 출원의 약제학적 조성물은 비강 에어로졸 또는 흡입에 의해 투여될 수 있다. 이러한 조성물은 약제 제형 분야에 잘 알려진 기술에 따라 제조되고, 벤질 알콜 또는 다른 적합한 보존제, 생체유용성을 증진시키기 위한 흡착 촉진제, 플루오로카본 및/또는 당업계에 알려진 다른 가용화제 또는 분산제를 사용하여 식염수 중 용액으로서 제조될 수 있다. 예를 들어, 미국 특허 제6,803,031호를 참조한다. 비강내 투여를 위한 추가 제형 및 방법은 문헌 Ilium, L., J Pharm Pharmacol, 56:3-17, 2004 및 Ilium, L., Eur J Pharm Sci 11:1-18, 2000에서 발견된다.
본 개시내용의 국소 조성물은 에어로졸 분무제, 크림, 에멀젼, 고체, 액체, 분산제, 발포제, 오일, 겔, 하이드로겔, 로션, 무스, 연고, 분말, 패치제, 포마드, 용제, 펌프 분무제, 스틱, 타월렛, 비누, 또는 국소 투여 분야에서 통상적으로 사용되는 기타 형태 및/또는 화장품 및 피부 케어 제형 형태로 제조되고 사용될 수 있다. 국소 조성물은 에멀젼 형태일 수 있다. 본 출원의 약제학적 조성물의 국소 투여는 원하는 치료가 국소 적용에 의해 용이하게 접근 가능한 영역 또는 기관을 포함하는 경우 특히 유용하다. 일부 구현예에서, 국소 조성물은 본원에 개시된 화합물 및 치료제 중 어느 하나와, 하나 이상의 추가 성분, 담체, 부형제, 또는 흡착 제를 포함한 희석제, 항-자극제, 항-여드름제, 보존제, 항산화제, 착색제/안료, 연화제 (보습제), 유화제, 필름-형성/유지제 (holding agent), 향제, 리브-온 각질 제거제 (leave-on exfoliant), 처방 약물, 보존제, 스크럽제, 실리콘, 피부-동일/복구제 (skin-identical/repairing agent), 슬립제, 선스크린 활성제, 계면활성제/세제 세정제, 침투 향상제, 및 증점제의 조합을 포함한다.
본 출원의 화합물 및 치료제는 이식 가능한 의료 장치, 예컨대 보철물, 인공 판막, 혈관 이식편, 스텐트 또는 카테터를 코팅하기 위한 조성물에 혼입될 수 있다. 적합한 코팅 및 코팅된 이식 가능한 장치의 일반적인 제조는 당업계에 알려져 있고, 미국 특허 제6,099,562호; 제5,886,026호; 및 제5,304,121호에 예시되어 있다. 코팅은 전형적으로 생체적합성 중합체 재료, 예컨대 하이드로겔 중합체, 폴리메틸디실록산, 폴리카프로락톤, 폴리에틸렌 글리콜, 폴리락트산, 에틸렌 비닐 아세테이트 및 이들의 혼합물이다. 코팅은 임의로 플루오로실리콘, 폴리사카라이드, 폴리에틸렌 글리콜, 인지질 또는 이들의 조합의 적합한 탑코트에 의해 추가로 덮혀 조성물에서 제어 방출 특징을 부여할 수 있다. 침습성 장치를 위한 코팅은 이들 용어들이 본원에 사용된 바와 같이, 약제학적으로 허용되는 담체, 보조제 또는 비히클의 정의 내에 포함되어야 한다.
또 다른 구현예에 따르면, 본 출원은 화합물 또는 치료제가 함침되어 있거나 이를 함유하는 이식 가능한 약물 방출 장치, 또는 본 출원의 화합물 또는 치료제를 포함하는 조성물을 제공하여, 상기 화합물 또는 치료제가 상기 장치로부터 방출되어 치료적으로 활성이도록 한다.
용량 및 용법
본 출원의 약제학적 조성물에서, 치료 화합물은 유효량 (예를 들어, 치료학적 유효량)으로 존재한다.
유효량은 치료되는 질환, 질환의 중증도, 투여 경로, 대상체의 성별, 연령 및 일반적인 건강 상태, 부형제 사용, 다른 제제의 사용과 같은 다른 치료법와의 동시 사용 가능성 및 치료 담당의의 판단에 따라 달라질 수 있다.
일부 구현예에서, 치료 화합물의 유효량은, 예를 들어, 약 0.001 mg/kg 내지 약 500 mg/kg (예를 들어, 약 0.001 mg/kg 내지 약 200 mg/kg; 약 0.01 mg/kg 내지 약 200 mg/kg; 약 0.01 mg/kg 내지 약 150 mg/kg; 약 0.01 mg/kg 내지 약 100 mg/kg; 약 0.01 mg/kg 내지 약 50 mg/kg; 약 0.01 mg/kg 내지 약 10 mg/kg; 약 0.01 mg/kg 내지 약 5 mg/kg; 약 0.01 mg/kg 내지 약 1 mg/kg; 약 0.01 mg/kg 내지 약 0.5 mg/kg; 약 0.01 mg/kg 내 지 약 0.1 mg/kg; 약 0.1 mg/kg 내지 약 200 mg/kg; 약 0.1 mg/kg 내지 약 150 mg/kg; 약 0.1 mg/kg 내지 약 100 mg/kg; 약 0.1 mg/kg 내지 약 50 mg/kg; 약 0.1 mg/kg 내지 약 10 mg/kg; 약 0.1 mg/kg 내지 약 5 mg/kg; 약 0.1 mg/kg 내지 약 2 mg/kg; 약 0.1 mg/kg 내지 약 1 mg/kg; 또는 약 0.1 mg/kg 내지 약 0.5 mg/kg)의 범위일 수 있다.
일부 구현예에서, 치료 화합물의 유효량은 약 0.1 mg/kg, 약 0.5 mg/kg, 약 1 mg/kg, 약 2 mg/kg, 또는 약 5 mg/kg이다.
이전의 용량은 매일 기준으로 (예를 들어, 단일 용량으로 또는 2회 이상의 분할된 용량으로, 예를 들어, 매일 1회, 매일 2회 및 매일 3회) 또는 비-매일 기준으로 (예를 들어, 격일, 2일 마다, 3일 마다, 매주 1회, 매주 2회, 2주마다 1회, 1개월에 1회) 투여될 수 있다. 본원에 기재된 화합물 및 조성물은 임의의 순서로 대상체에 게 투여될 수 있다. 본 개시내용의 화합물과 같은 제1 치료제는, 치료를 필요로 하는 대상체에게 제2 치료제, 예컨데 본원에 기재된 항-섬유화제 (anti-fibrotic agent)의 투여 전에 또는 후에 (예를 들어, 5분, 15분, 30분, 45분, 1시간, 2시간, 4시간, 6시간, 12시간, 24시간, 48시간, 72시간, 96시간, 1주, 2주, 3주, 4주, 5주, 6주, 8주, 또는 12주 전 또는 후) 또는 이와 동시에 투여될 수 있다. 따라서, 본 개시내용의 화합물 또는 상기 화합물을 함유하는 조성물은 제2 치료제, 예컨대 본원에 기재된 항-섬유화제와 별도로, 순차적으로 또는 동시에 투여될 수 있다. 본 개시내용의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 및 제2 또는 제3 치료제가 대상체에게 동시에 투여되는 경우, 치료제는 단일 투여 형태 (예를 들어, 정제, 캡슐, 또는 주사 또는 주입 용제)로 투여될 수 있다.
일부 구현예에서, 제2 (추가) 치료제는 섬유성 병리를 치료하거나 예방하는데 유용한 약물이다. 이러한 약물의 적합한 예는 닌테다닙, 피르페니돈, 또는 프레드니손, 또는 면역억제제, 예컨대 사이클로포스파미드, 아자 티오프린, 메토트렉세이트, 페니실라민 및 사이클로스포린을 포함한다.
일부 구현예에서, 추가 치료제는 도파민 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다.
일부 구현예에서, 추가 치료제는 도파민 수용체 효능제이다. 일부 구현예에서, 도파민 수용체 효능제는: ABT-413, A-86929, 디하이드렉시딘 (DHX), 디나프솔린, 디녹실린, 독산트린, SKF-81297, SKF-82958, SKF-38393, 페놀도팜, 6-Br-APB, 스테폴리딘, A-68930, A-77636, CY-208-243, SKF-89145, SKF-89626, 7,8-디하이드록시-5-페닐-옥타하이드로벤조[h]이소퀴놀린, 카버골린, 퍼골라이드, R(-)-2,10,11-트리하이드록시아포르핀, (R)-(-)-아포모르핀, R(-)-프로필노르아포모르핀, R(+)-6-브로모-APB, R(-)-2,10,11-트리하이드록시-N-프로필-노르아포르핀, 6,7-ADTN, 메술러진, N- 메틸도파민, 4- 하이드록시페네틸아민, 카버골린, 3- 하이드록시펜에틸아민, 프라미펙솔, PD-168077, 페놀도팜, (±)-PD 128-907, (±)-2-(N- 페닐에틸-N-프로필) 아미노-5-하이드록시테트랄린, 브로모크립틴, 로피니롤, LY-163-502, 디프로필도파민, B-HT 920, 피리베딜, (+)-UH 232, 퍼골라이드, (-)-퀸피롤, R(-)-2,11-디하이드록시-10-메톡시아포모르핀, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염으로부터 선택된다.
일부 구현예에서, 제2 (추가) 치료제는 항염증 약물이다. 이러한 약물의 적합한 예로는 NSAID, 예컨데 셀레콕시브, 로페콕시브, 이부프로펜, 나프록센, 아스피린, 디클로페낙, 술린닥, 옥사프로진, 피록시캄, 인도메타신, 멜록시캄, 페노프로펜, 디플루니살, 메토트렉세이트, BAY 11-7082, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이 있다. 스테로이드 항염증제의 적합한 예로는 코르티솔, 코르티코스테론, 하이드로코르티손, 알도스테론, 데옥시코르티코스테론, 트리암시놀론, 바르독솔론, 바르독솔론 메틸, 트리암시놀론, 코르티손, 프레드니손 및 메틸프레드니솔론, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이 있다.
키트
본 발명은 또한, 예를 들어, 본원에 언급된 장애, 질환 및 병태의 치료에 유용한 약제학적 키트를 포함하고, 이는 치료학적 유효량의 본 개시내용의 화합물을 포함하는 약제학적 조성물을 함유하는 하나 이상의 컨테이너를 포함한다. 이러한 키트는, 원하는 경우, 하나 이상의 다양한 통상적인 약제학적 키트 성분, 예컨대 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 담체를 갖는 컨테이너, 추가 컨테이너 등을 추가로 포함할 수 있다. 삽입물 또는 라벨로서 투여될 성분들의 양을 나타내는 지침서, 투여용 가이드라인 및/또는 성분들을 혼합하기 위한 가이드라인이 또한 키트에 포함될 수 있다.
정의
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "약"은 "대략" (예를 들어, 나타낸 값의 + 또는 - 대략 10%)을 의미한다.
본원에 사용된 바와 같이, 본원에 사용된 용어 "화합물"은 명명되거나 도시된 구조의 모든 입체이성체, 기하학적 이성체, 토토머, 및 동위원소를 포함하는 것으로 의미된다. 하나의 특정 토토머 형태로 명칭 또는 구조로 확인된 본원의 화합물은 달리 명시되지 않는 한, 다른 토토머 형태를 포함하는 것으로 의도된다.
본원에 사용된 용어 "약제학적" 및 "약제학적으로 허용되는"은 건전한 의학적 판단 범위 내에서 과도한 독성, 자극, 알레르기 반응 또는 다른 문제 또는 합병증 없이, 합리적인 유익/위험 비율에 적합한, 인간 및 동물의 조직과의 접촉에 사용하기에 적합한 화합물, 재료, 조성물 및/또는 투여 형태를 지칭하기 위해 본원에 사용된다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "세포"는 시험관내, 생체외 또는 생체내인 세포를 지칭하기 위해 의미된다. 일부 구현예에서, 생체외 세포는 유기체, 예컨대 포유동물로부터 절단된 조직 샘플의 일부일 수 있다. 일부 구현예에서, 시험관내 세포는 세포 배양물에서의 세포일 수 있다. 일부 구현예에서, 생체내 세포는 유기체, 예컨대 포유동물에서 생존하는 세포이다. 일부 구현예에서, 세포는 중간엽 세포이다. 일부 구현예에서, 세포는 섬유아세포 (예를 들어, 심장, 피부 또는 폐 섬유아세포)이다. 일부 구현예에서, 세포는 간성상 세포이다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "접촉시키는"은 시험관내 시스템, 생체외 시스템, 또는 생체내 시스템에 나타낸 모이어티 또는 아이템을 함께 결합시키는 것을 의미한다. 예를 들어, 본원에 제공된 화합물과 세포를 "접촉시키는" 것은 그 세포를 함유하는 포유동물 (예를 들어, 인간)에게 투여하는 것뿐만 아니라, 예를 들어 그 화합물을 그 세포를 함유하는 세포 배양물에 도입하는 행위를 포함한다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "포유동물"은 마우스, 랫트, 기타 설치류, 토끼, 개, 고양이, 돼지, 소, 양, 말, 코끼리, 사슴, 인간이 아닌 영장류 (예를 들어, 원숭이 및 유인원), 가정용 애완동물 및 인간을 포함하지만 이에 한정되지는 않는다.
본원에 사용된 바와 같이, 문구 "유효량" 또는 "치료학적 유효량"은 연구원, 수의사, 의사 또는 기타 임상의가 찾고 있는 조직, 시스템, 포유동물 또는 인간에서 생물학적 또는 의학적 반응을 유발하는 활성 화합물 또는 약제의 양을 지칭한다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "치료하는" 또는 "치료"는 1) 질환을 억제하는 것; 예를 들어, 질환, 병태 또는 장애의 병리 또는 증상을 경험하거나 나타내는 개체에서 질환, 병태 또는 장애를 억제하는 것 (즉, 병리 및/또는 증상의 추가 발병을 저지함)을 지칭하거나, 또는 2) 질환을 개선하는 것; 예를 들어, 질환, 병태 또는 장애의 병리 또는 증상을 경험하거나 나타내는 개체에서 질환, 병태 또는 장애를 개선하는 것 (즉, 병리 및/또는 증상을 역전시키는 것)을 지칭한다.
본원에 사용된 바와 같이, 질환, 병태 또는 장애를 "예방하는" 또는 "예방"이라는 용어는 대상체 또는 대상체 그룹 (예를 들어, 질환, 병태 또는 장애에 대한 성향이 있거나 이에 감수성인 대상체 또는 대상체 그룹)에서 질환, 병태 또는 장애의 발병 위험을 감소시키는 것을 지칭한다. 일부 구현예에서, 질환, 병태 또는 장애를 예방하는 것은 질환, 병태 또는 장애 및/또는 이와 관련된 증상을 획득할 가능성을 감소시키는 것을 지칭한다. 일부 구현예에서, 질환, 병태 또는 장애를 예방하는 것은, 질환, 병태 또는 장애가 발병하는 것을 완전히 또는 거의 완전히 중지시키는 것을 지칭한다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "약제학적으로 허용되는 염"은 화합물의 산성 또는 염기성 기, 예컨대 화합물의 아미노 기능성 기, 염기 및 산성 기, 예컨대 카르복실 기능성 기 사이에 형성되는 염을 지칭한다. 일부 구현예에서, 화합물은 약제학적으로 허용되는 산 부가염이다. 일부 구현예에서, 본원에 기재된 치료 화합물의 약제학적으로 허용되는 염을 형성하기 위해 통상적으로 사용되는 산은 무기산, 예컨대 이황화수소, 염산, 브롬화수소산, 요오드화수소산, 황산 및 인산, 및 유기산, 예컨대 파라-톨루엔설폰산, 살리실산, 타르타르산, 비타르타르산, 아스코르브산, 말레산, 베실산, 푸마르산, 글루콘산, 글루쿠론산, 포름산, 글루탐산, 메탄설폰산, 에탄 설폰산, 벤젠설폰산, 락트산, 옥살산, 파라-브로모페닐설폰산, 카본산, 숙신산, 시트르산, 벤조산 및 아세트산, 및 관련 무기 및 유기산을 포함한다. 따라서, 그러한 약제학적으로 허용되는 염은 설페이트, 피로설페이트, 비설페이트, 설파이트, 비설파이트, 포스페이트, 모노하이드로겐포스페이트, 디하이드로겐포스페이트, 메타포스페이트, 피로포스페이트, 클로라이드, 브로마이드, 요오다이드, 아세테이트, 프로피오네이트, 데카노에이트, 카프릴레이트, 아크릴레이트, 포르메이트, 이소부티레이트, 카프레이트, 헵타노에이트, 프로피올레이트, 옥살레이트, 말로네이트, 숙시네이트, 수베레이트, 세바케이트, 푸마레이트, 말레에이트, 부틴-1,4-디오에이트, 헥신-1,6-디오에이트, 벤조에이트, 클로로벤조에이트, 메틸벤조에이트, 디니트로벤조에이트, 하이드록시벤조에이트, 메톡시벤조에이트, 프탈레이트, 테레프탈레이트, 설포네이트, 크실렌 설포네이트, 페닐아세테이트, 페닐 프로피오네이트, 페닐부티레이트, 시트레이트, 락테이트, β-하이드록시부티레이트, 글리콜레이트, 말레에이트, 타르트레이트, 메탄설포네이트, 프로판설포네이트, 나프탈렌-1-설포네이트, 나프탈렌-2-설포네이트, 만델레이트 및 기타 염을 포함한다. 하나의 구현예에서, 약제학적으로 허용되는 산 부가염은 무기산, 예컨대 염산 및 브롬화수소산으로 형성된 것들 및 특히 유기산, 예컨대 말레산으로 형성된 것들을 포함한다.
일부 구현예에서, 본원에 기재된 치료 화합물의 약제학적으로 허용되는 염을 형성하기 위해 통상적으로 사용되는 염기는 나트륨, 칼륨, 및 리튬을 포함한 알칼리 금속의 수산화물; 알칼리 토금속, 예컨대 칼슘 및 마그네슘의 수산화물; 다른 금속, 예컨대 알루미늄 및 아연의 수산화물; 암모니아, 유기 아민, 예컨대 비치환되거나 하이드록실-치환된 모노-, 디- 또는 트리-알킬아민, 디사이클로헥실아민; 트리부틸아민; 피리딘; N-메틸, N-에틸 아민; 디에틸아민; 트리에틸아민; 모노-, 비스-, 또는 트리스-(2-OH-(C1-C6)-알킬아민), 예컨대 N,N-디메틸-N-(2-하이드록시에틸)아민 또는 트리-(2-하이드록시에틸)아민; N-메틸-D-글루카민; 모르폴린; 티오모르폴린; 피페 리딘; 피롤리딘; 및 아미노산, 예컨대 아르기닌, 라이신 등을 포함한다.
본원에 사용된 바와 같이, 문구 "임의로 치환된"은 비치환되거나 치환된 것을 의미한다. 치환기는 독립적으로 선택되며, 치환은 화학적으로 접근 가능한 임의의 위치에 있을 수 있다. 본원에 사용된 바와 같이, 용어 "치환된"은 수소 원자가 제거되고 치환기로 대체됨을 의미한다. 단일 2가 치환기, 예를 들어 옥소는 2개의 수소 원자를 대체할 수 있다. 주어진 원자에서의 치환은 원자가에 의해 제한된다는 것을 이해해야 한다.
정의 전반에 걸쳐, 용어 "Cn-m"은 끝점을 포함하는 범위를 나타내며, 여기서 n 및 m은 정수이고 탄소수를 나타낸다. 예로는 C1-4, C1-6 등이 있다.
본원에 사용된 바와 같이, 단독 또는 다른 용어와 조합하여 사용되는 용어 "Cn-m　알킬"은 n 내지 m개의 탄소를 갖는 직쇄 또는 분지형일 수 있는 포화 탄화수소 기를 지칭한다. 알킬 모이어티의 예는 화학기, 예컨데 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, tert-부틸, 이소부틸, sec-부틸; 고급 동소체 (higher homologs), 예컨데 2-메틸-1-부틸, n-펜틸, 3-펜틸, n-헥실, 1,2,2-트리메틸프로필 등을 포함하지만 이에 한정되지는 않는다. 일부 구현예에서, 알킬 기는 1 내지 6개의 탄소 원자, 1 내지 4개의 탄소 원자, 1 내지 3개의 탄소 원자, 또는 1 내지 2개의 탄소 원자를 함유한다.
본원에 사용된 바와 같이, 단독 또는 다른 용어와 조합하여 사용되는 용어 "Cn-m　할로알킬"은 동일하거나 상이할 수 있는 1개의 할로겐 원자 내지 2s+1개의 할로겐 원자를 갖는 알킬 기를 지칭하고, 여기서 "s"는 알킬 기의 탄소 원자수이고, 여기서 알킬 기는 n 내지 m 개의 탄소 원자를 갖는다. 일부 구현예에서, 할로알킬 기는 단지 플루오르화된다. 일부 구현예에서, 알킬 기는 1 내지 6개, 1 내지 4개, 또는 1 내지 3개의 탄소 원자를 갖는다..
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "아미노"는 화학식-NH2 기를 지칭한다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "Cn-m　알킬아미노"는 화학식 -NH(알킬) 기를 지칭하고, 여기서 알킬 기는 n 내지 m개의 탄소 원자를 갖는다. 일부 구현예에서, 알킬 기는 1 내지 6개, 1 내지 4개, 또는 1 내지 3개의 탄소 원자를 갖는다. 알킬아미노 기의 적합한 예는 N-메틸아미노, N-에틸아미노, N-프로필아미노 (예를 들어, N-(n-프로필)아미노 및 N-이소프로필아미노), N-부틸아미노 (예를 들어, N-(n-부틸)아미노 및 N-(tert-부틸)아미노 등을 포함한다.
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "디 Cn-m　알킬아미노'는 화학식 -N(알킬)2 기를 지칭하고, 여기서 각각의 알킬기는 독립적으로 n 내지 m 개의 탄소 원자를 갖는다. 일부 구현예에서, 각각의 알킬 기는 1 내지 6개, 1 내지 4개, 또는 1 내지 3개의 탄소 원자를 갖는다. 디알킬아미노 기의 적합한 예는 N,N-메틸에틸아미노, N,N-디에틸아미노, N,N-프로필에틸아미노, N,N-부틸이소프로필아미노 등을 포함한다.
본원에 사용된 바와 같이, 단독 또는 다른 용어와 조합하여 사용되는 용어 "Cn-m　알콕시"는 화학식 -O-알킬 기를 지칭하고, 여기서 알킬 기는 n 내지 m개의 탄소를 갖는다. 예시적인 알콕시 기는 메톡시, 에톡시, 프로폭시 (예를 들어, n-프로폭시 및 이소프로폭시), 부톡시 (예를 들어, n-부톡시 및 tert-부톡시) 등을 포함한다. 일부 구현예에서, 알킬 기는 1 내지 6개, 1 내지 4개, 또는 1 내지 3개의 탄소 원자를 갖는다..
본원에 사용된 바와 같이, 용어 "HO-C1-3　알킬"은 화학식 -(C1-3　알킬렌)-O 기를 지칭한다. 본원에 사용된 바와 같이, 용어 "NH2-C1-3　알킬"은 화학식 -(C1-3　알킬렌)-NH2 기를 지칭한다.
본원에 사용된 바와 같이, "할로"는 F, Cl, Br, 또는 I를 지칭한다. 일부 구현예에서, 할로는 F, Cl, 또는 Br이다.
본원에 사용된 바와 같이, "헤테로아릴"은 황, 산소, 및 질소로부터 선택되는 적어도 하나의 헤테로원자 환원 (ring member)을 갖는 단환 또는 다환 방향족 헤테로사이클을 지칭한다. 일부 구현예에서, 헤테로아릴 고리는 질소, 황, 및 산소로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3, 또는 4개의 헤테로원자 환원을 갖는다. 일부 구현예에서, 헤테로아릴 모이어티에서 임의의 고리-형성 N은 N-옥사이드일 수 있다. 일부 구현예에서, 헤테로아릴은 질소, 황, 및 산소로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3, 또는 4개의 헤테로원자 환원을 갖는 5-10 원 단환 또는 이환 헤테로아릴이다. 일부 구현예에서, 헤테로아릴은 질소, 황, 및 산소로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자 환원을 갖는 5-6 단환 헤테로아릴이다. 일부 구현예에서, 헤테로아릴은 5-원 또는 6-원 헤테로아릴 고리이다. 5-원 헤테로아릴 고리는 4개의 고리 원자를 갖는 고리가 있는 헤테로아릴이고, 여기서 하나 이상의 (예를 들어, 1, 2, 또는 3개) 고리 원자는 N, O, 및 S로부터 독립적으로 선택된다. 예시적 5-원 고리 헤테로아릴은 티에닐, 푸릴, 피롤릴, 이미다졸릴, 티아졸릴, 옥사졸릴, 피라졸릴, 이소티아졸릴, 이속사졸릴, 1,2,3-트리아졸릴, 테트라졸릴, 1,2,3-티아디아졸릴, 1,2,3-옥사디아졸릴, 1,2,4-트리아졸릴, 1,2,4-티아디아졸릴, 1,2,4-옥사디아졸릴, 1,3,4-트리아졸릴, 1,3,4-티아디아졸릴, 및 1,3,4-옥사디아졸릴을 포함하지만, 이에 한정되지는 않는다. 6-원 헤테로아릴 고리는 6개의 고리 원자를 갖는 고리가 있는 헤테로아릴이고, 여기서 하나 이상의 (예를 들어, 1, 2, 또는 3개) 고리 원자는 N, O, 및 S로부터 독립적으로 선택된다. 예시적인 6-원 고리 헤테로아릴은 피리딜, 피라지닐, 피리미디닐, 트리아지닐, 및 피리다지닐을 포함하지만, 이에 한정되지는 않는다.
본원에 사용된 바와 같이, "헤테로사이클로알킬"은 O, N, 또는 S로부터 선택된 하나 이상의 고리 형성 헤테로원자를 갖는 비-방향족 단환 또는 다환 헤테로사이클을 지칭한다. 헤테로사이클로알킬에는 단환 4-, 5-, 6-, 7-, 8-, 9-, 또는 10-원 헤테로사이클로알킬 기가 포함된다. 헤테로사이클로알킬 기는 또한 스피로사이클을 포함할 수 있다. 예시적 헤테로사이클로알킬 기는 피롤리딘-2-온, 1,3-이속사졸리딘-2-온, 피라닐, 테트라하이드로피란, 옥세타닐, 아제티디닐, 모르폴리노, 티오모르폴리노, 피페라지닐, 테트라하이드로푸라닐, 테트라하이드로티에닐, 피페리디닐, 피롤리디닐, 이속사졸리디닐, 이소티아졸리디닐, 피라졸리디닐, 옥사졸리디닐, 티아졸리디닐, 이미다졸리디닐, 아제파닐, 벤자자펜 등을 포함하지만, 이에 한정되지는 않는다. 헤테로사이클로알킬 기의 고리-형성 탄소 원자 및 헤테로원자는 1 또는 2개의 독립적으로 선택된 옥소 또는 설피도 기 (예를 들어, C(O), S(O), C(S), 또는 S(O)2, 등)에 의해 임의로 치환될 수 있다. 헤테로사이클로알킬 기는 고리-형성 탄소 원자 또는 고리-형성 헤테로원자를 통해 부착될 수 있다. 일부 구현예에서, 헤테로사이클로알킬 기는 0 내지 3개의 이중 결합을 함유한다. 일부 구현예에서, 헤테로사이클로알킬 기는 0 내지 2개의 이중 결합을 함유한다. 헤테로사이클로알킬의 정의에는 사이클로알킬 고리에 축합된 (득, 공통 결합을 갖는) 하나 이상의 방향족 고리를 갖는 모이어티, 예를 들어, 피페리딘, 포르폴린, 아제핀 등의 벤조 또는 티에닐 유도체 또한 포함된다. 축합된 방향족 고리를 함유하는 헤테로사이클로알킬 기는 축합된 방향족 고리의 고리-형성 원자를 포함하는 임의의 고리-형성 원자를 통해 부착될 수 있다. 일부 구현예에서, 헤테로사이클로알킬은 질소, 산소, 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자는 가지며 하나 이상의 산화된 환원을 갖는 단환 4-6 원 헤테로사이클로알킬이다. 일부 구현예에서, 헤테로사이클로알킬은 질소, 산소, 또는 황으로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 3, 또는 4개의 헤테로원자를 가지며 하나 이상의 산화된 환원을 갖는 단환 또는 이환 4-10 원 헤테로사이클로알킬이다.
실시예
재료 및 방법
세포 배양: 세포는 달리 언급되지 않는 한, 10% FBS를 함유하는 EMEM (ATCC)에서 모두 유지하였다. IMR-90 배아 폐 섬유아세포 및 NIH-3T3 마우스 섬유아세포는 ATCC로부터 구입하였다. TAZ4SA를 발현하는 독시사이클린-유도성 Tet-On NIH3T3 또는 대조군 공 벡터는 이전에 기재되었다. 정상 인간 폐포 상피 세포 (NHAEpC), 정상 인간 미세혈관 내피 세포 (NHMVEC), 정상 인간 폐 섬유아세포 (NHLF), 및 인간 피부 섬유아세포 (HDF)는 Lonza으로부터 구입하였고, Lonza의 추천에 따라 상표 등록된 배지에서 배양하였다. 인간 성인 심장 섬유아세포 (HACF) 및 간성상 세포 (HSC)는 ScienCell으로부터 구입하였고, ScienCell의 추천에 따라 상표 등록된 배지에서 배양하였다. 간세포는 Samsara로부터 구입하였고, Samsara의 추천에 따라 상표 등록된 배지에서 배양하였다. 폐 섬유아세포를 사용한 모든 추가 실험은 폐 이식을 받은 IPF로 진단된 대상체 또는 미네소타 대학교 기관 감사 위원회 (University of Minnesota Institutional Review Board)에 의해 승인된 프로토콜 하에 미네소타 대학교의 피터 비트맨 (Peter Bitteman) 및 크레이그 헨케 (Craig Henke)에 의해 관대하게 제공된, 기관 이식이 거부된 공여자 (비-IPF)의 폐로부터의 외이식 배양에 의해 단리된 1차 인간 폐 섬유아세포를 사용하였다. 모든 1차 세포 배양 실험은 6회 이하로 계대된 세포를 사용하여 수행하였다.
화학물질 및 시약: 디메틸 설폭사이드 (DMSO), Y-27632, 엔도텔린 1 (ET-1), 및 아스코르브산은 Sigma-Aldrich로부터 구입하였다. 디하이드렉시딘 (DHX), SKF-81297, 페놀도팜, 포르스콜린, 및 프로스타글란딘 E2는 Tocris Bioscience로부터 구입하였다. 리소포스파티드산 (LPA), 및 세로토닌 (5-HT)은 Cayman Chemical로부터 구입하였다. SCH 39166는 Santa Cruz Biotechnology로부터 구입하였다. TGFβ1는 eBioscience로부터 구입하였다.
GPCRome 프로파일링 및 qPCR: GPCRome 프로파일링은 제조업자의 제안 (Qiagen)에 따라 수행되었다. 세포는 제조업자의 지침에 따라 Rneasy 플러스 미니 키트 (Qiagen)를 사용하여 RNA 단리 전 24시간 동안 이들의 추천된 성장 배지에서 성장시켰다. 이어서, 단리된 RNA (1000 ng)를 사용하여 RT2　제1 가닥 키트 (Qiagen)를 사용하여 cDNA를 합성하였고, G 단백질 커플링된 수용체 384HT PCR 어레이는 LightCycler 480 (Roche)를 사용하여 분석하였다. 데이터는 1/Ct (도 3)로서 나타내고, 섬유아세포 및 상피 세포 데이터세트에 대한 GAPDH는 거의 동일하였다 (각각17.39 및 17.41). 모든 수용체에 대한 원시 Ct 값을 사용할 수 있다 (표 1).
[표 1]
(*)표시된 수용체는 Gαs에 독점적으로 커플링되는 것으로 확인되었다 (참조문헌 21).
Figure pct00038
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모든 다른 시험관내 실험의 경우, 세포는 제조업자의 지침에 따라 RNeasy 플러스 미니 키트 (Qiagen)를 사용하여 RNA 단리 전 나타낸 바와 같이 처리하였다. 이어서, 단리된 RNA (250 ng)를 SuperScript VILO (Invitrogen)를 사용하여 cDNA를 합성하기 위해 사용하였다. 정량적 PCR을 FastStart 필수 DNA 그린 마스터 (Roche)를 사용하여 수행하였고, LightCycler 96 (Roche)을 사용하여 분석하였다. 데이터는 GAPDH에 상대적인 ΔΔCt에 의한 배수 변화로서 표현하였다. 생체내 실험의 경우, 조직은 즉시 동결되었고, -80℃에서 보관하였다. RNA 단리, cDNA 합성 및 qPCR 분석은 상기와 같이 수행하였다. qPCR을 위해 사용되는 프라이머는 표 2에 나타내었다.
[표 2]
Figure pct00052
Figure pct00053
세포 분류: FACS: PBS 관류된 마우스 폐를 0.2 mg/ml Liberase DL (Roche) 및 100 U/ml DNase I (Roche)를 함유하는 1 mL의 냉 DMEM 배지 중 100 mm 페트리 디쉬에서 면도날로 미세하게 다졌다. 혼합물을 15 ml의 튜브로 옮기고 수 욕조에서 37℃에서 30분 동안 항온처리하였다. 효소 분해는 10% 태아 소 혈청을 함유하는 DMEM 배지를 첨가함으로써 불활성화시켰다. 세포 현탁액을 40 μm 세포 스트레이너 (Fisher)에 1회 통과시켜 다세포 잔해를 제거하였다. 이어서, 세포를 4℃에서 10분 동안 1,300 r.p.m으로 원심분리하고, PBS 중에서 1회 세척하고, 0.2 ml의 FACS 완충액 (PBS 중 1% BSA, 0.5 μM EDTA pH 7.4)에 재현탁시켰다. 이어서, 단일 세포 현탁액을 얼음에서 20분 동안 항-CD45-PerCp-Cy5.5, 항-CD31-PE, 항-PDGFRα-APC 및 항-EpCAM-BV421 항체 (1:200) (Biolegend)와 함께 항온처리하였다. 항온처리 후, 세포를 빙냉 FACS 완충액으로 세척하고, 1 ml의 FACS 완충 액에 재현탁시켰다. FACS 분류는 BD FACS Aria II (BD Biosciences)를 사용하여 수행하였다. FACS-분류된 상피 세포, 내피 세포 및 섬유아세포는 RLT 용해 완충액 (Qiagen)을 함유하는 1.5 ml 에펜도르프 튜브에 수거하고, 이를 mRNA 추출, 상보적 DNA 합성 및 RT-PCR 분석에 적용하였다. MACS: PBS 관류된 마우스 폐를 MACS 마우스 폐 분해 키트에 기재된 1 ml의 MAC 분해 용액 중에 100 mm 페트리 디쉬에서 면도날로 미세하게 다졌다. 혼합물을 15 ml의 튜브로 옮기고, 수 욕조에서 37℃에서 30분 동안 항온처리하였다. 효소 분해는 10% 태아 소 혈청을 함유하는 DMEM 배지를 첨가함으로써 불활성화시켰다. 세포 현탁액을 40 μm 세포 스트레이너 (Fisher) 에 1회 통과시켜 다세포 잔해를 제거하였다. 이어서, 세포를 4℃에서 10분 동안 1,350 r.p.m으로 원심분리하고, 상등액을 흡인하였다. 샘플을 0.1 ml 15% BSA-autoMACS 세정 용액에 재현탁시켰다. 이어서, 단일 세포 현탁액을 4-8℃에서 15분 동안 마우스 항-CD45 MicroBead (1:10)와 함께 항온처리하였다. 이어서, 세포를 LS 컬럼 (Miltenyi Biotec)을 사용하여 자기적으로 여과하였다. 양성으로 선택된 세포를 4℃에서 1350 r.p.m으로 펠렛화하고, RLT 용해 완충액 (Qiagen)에 재현탁시켰다. 이어서, 샘플은 mRNA 추출, 상보성 DNA 합성 및 RT-PCR 분석에 적용하였다.
면역형광 현미경: 세포를 이들의 특정 성장 배지에서 96웰 플레이트 (Corning 3603)에 분주하고 부착 (8시간)되도록 한다. 이어서, 배지를 각각의 실험에 대해 나타낸 조건으로 교환하였다. 세포를 3.7% 포르말린 (Sigma-Aldrich)에 고정화시키고, 0.25% Triton X-100 (Sigma-Aldrich)에 투과시킨 다음, 1시간 동안 1% BSA로 차단하였다. 세포 또는 조직 절편을 PBS 중에서 1% BSA로 1:200 희석된, αSMA에 대한 마우스 모노클로날 항체 (Sigma-Aldrich F3777) 및/또는 YAP/TAZ에 대한 토끼 모노클로날 항체 (Cell Signaling D24E4)로 밤새 항온처리하였다. 이어서, 세포를 세척하고, 1:1000으로 희석된 형광-접합된 2차 항체 (Invitrogen) 및 DAPI (Thermo Fisher Scientific)에 노출시켰다. 이미지는 Cytation5 (BioTek) 현미경으로 촬영하였다. αSMA 양성 세포 (도 12)를 점수 매기기 위해, 처리 조건에 맹검인 관찰자는 밝은 섬유성 염색을 위한 가시적 역치를 사용하여 αSMA-양성 세포를 계수하였고; 최소 200개 세포는 각각의 조건에 대해 계수하였다. YAP/TAZ 국소화는 Gen 5 (Biotek) 소프트웨어를 사용하여 정량화하였다 (도 6-10, 24-26, 및 29-30). 이미지는 DAPI 및 YAP/TAZ 염색 둘 다의 4X 배율로 촬영하였다. 대상은 DAPI 채널을 사용하여 동정되었고 YAP/TAZ 핵 양성 세포의 서브집단은 YAP/TAZ 채널의 평균 픽셀 강도가 대조군 처리된 세포에서 모든 핵의 평균 픽셀 강도의 85% 초과인 핵을 기준으로 계수하였다. 폐 조직 절편으로부터의 이중 양성 (YAP/TAZ 및 αSMA) 세포의 정량화 (도 17-21)는 유사하게 수행하였지만; 별도의 역치는 YAP/TAZ 및 αSMA 둘 다에 대해 확립하였다. 최소 4000개 세포를 각각의 마우스에 대해 정량화하였다.
견인력 현미경: 견인 분석은 이전에 기재된 바와 같이 수행하였다. 간략하게, 6.4 kPa의 전단 탄성률을 갖는 폴리아크릴아미드 기질을 제조하고, 형광 설페이트-변형된 라텍스 미소구 (0.2 μm, 505/515 ex/em) (FluoSpheres, Life Technologies)를 50 mM HEPES 용액 (pH 8.5) 중에서 1 mg/ml의 도파민 하이드로클로라이드 (Sigma-Aldrich)로 처리한 후 겔 표면에 접합시켰다. IPF 환자 유래된 섬유아세포는 밤새 겔 상에 분주하고, 견인력 측정 전에 나타낸 바와 같이 처리하였다. 표면-접합된 형광 비드의 이미지는 x 10 배율로 Nikon ECLIPSE Ti 현미경을 사용하여 트립신 처리 전후에 각각의 세포에 대해 획득하였다. 견인력은 비드 변위 필드 (bead displacement field)를 측정하고, TractionsForAll (이의 기질 상에 접착 세포에 의해 나타나는 2-D 견인을 계산하는 자유롭게 분포된 프로그램)을 사용하여 상응하는 견인 필드를 계산함으로써 평가하였다.
cAMP 검정: IPF 환자 유래된 섬유아세포를 10% FBS를 함유하는 EMEM에 밤새 분주하였다. 배지는 0.1% FBS를 함유하는 EMEM으로 24시간 동안 교환하였다. cAMP는 제조업자의 제안에 따라 cAMP-GloTM 검정 (Promega)을 사용하여 측정하였다. 세포 용해 20분 전에, 배지를 제거하고 세포는 비선택적 포스포디에스테라제 억제제 및 나타낸 농도의 화합물(들)을 함유하는 "유도 완충액"으로 처리하였다. 발광은 Flexstation 3 (Molecular Devices) 플레이트 판독기에서 측정하였다.
웨스턴 블롯팅: 세포를 10% FBS를 함유하는 EMEM에 밤새 분주하였다. 배지는0.1% FBS를 함유하는 EMEM으로 24 시간 동안 교환하였다. 단백질 분리 전, 세포를 나타낸 시간 동안 나타낸 농도의 화합물들로 처리하였다. 총 단백질은 피어스 (Pierce) 포스파타제 억제제 (Thermo) 및 핼트 (Halt) 프로테아제 억제제 칵테일 (Thermo)을 함유하는 RIPA 완충액 (pH 8.0)을 사용하여 단리하였다. 용해물 총 단백질 농도를 피어스 BCA 단백질 검정 키트 (Thermo)를 사용하여 결정하고, 샘플은 10% 폴리아크릴아미드 겔 상에서 실행하였다. 블롯은 Li-Cor 오딧세이 차단 완충액 중에서 1:1000으로 희석된 1차 항체: pYAP (Ser 127, 세포 신호전달 D9W21), YAP/TAZ (세포 신호전달 D24E4), GAPDH (세포 신호전달 14C10), HSC70 (Santa Cruz sc-7298), αSMA (Abcam ab5694), 및 피브로넥틴 (Santa Cruz sc-9068)으로 밤새 항온처리하였다. 블롯은 1:10,000으로 희석된 IR-염료-접합된 2차 항체 (Li-Cor)로 60분 항온처리 전에 TBS-Tween으로 세척하였다. 플레이트는 밀도측정기를 통해 정량화를 수행한 Li-Cor 오딧세이XL 시스템을 통해 이미지화하였다.
면역-ECM: 이전에 공개된 방법으로부터 적응하여, IPF 환자-유래된 섬유아세포를 분주하여 투명-바닥 96-웰 플레이트에서 컨플루언스되도록 하였다. 세포가 부착된 후, 배지를 0.1% FBS ± 2 ng/mL TGF-β를 함유하는 EMEM 으로 교체하였다. 48시간 후 나타낸 농도의 DHX 또는 DMSO 대조군을 각각의 웰에 첨가하고 24시간 동안 항온처리하였다. WST-1 생존능 시약을 각각의 웰 (Sigma-Aldrich)에 첨가하고 Flexstation 3 (Molecular Devices) 플레이트 판독기에서 측정하였다. 이어서, 세포를 3.7% 포르말린 (Sigma-Aldrich)에 고정화시키고, 0.25% Triton X-100 (Sigma-Aldrich)에 투과시켰다. 웰은 tris-완충 식염수 (TBS)로 세척하고 차단 완충액 중에서 1:200으로 희석된 피브로넥틴 (Sigma sc-9068) 또는 콜라겐 I (Novus Nb600-408)에 대한 폴리클로날 토끼 항체 중에서 밤새 항온처리하기 전에 60분 동안 Li-Cor 오딧세이 차단 완충액으로 차단하였다. 웰은 1:400으로 희석된 IR-염료-접합된 2차 항체 (Li-Cor #926-32211)와 함께 항온처리 45분 전에 TBS-Tween으로 세척하였다. 플레이트는 밀도측정기를 통해 정량화를 수행한 Li-Cor 오딧세이XL 시스템을 통해 이미지화하였다. 데이터는 임의의 잠재적인 화합물 독성을 설명하기 위해 WST-1 신호 흡광도에 상대적인 IR 강도로서 표현된다.
원자간력 현미경에 의해 측정된 매트릭스 리모델링: NIH-3T3 세포를 분주하여 10% FBS를 함유하는 DMEM 중에서 겔라틴 코팅된 (Cell Biologics) AFM 상용성 조직 배양 디쉬 (Willco) 상으로 컨플루언스되도록 하였다. 세포를 밤새 부착시킨 후, 배지는 2% FBS, 2 ng/mL TGFβ, 및 20 μg/mL 아스코르브산을 함유하는 DMEM으로 대체하여 매트릭스 침착을 촉진시켰다. 72시간 후, BioScope 촉매 AFM (Bruker, MA, USA)을 사용하여 측정하였다. 마이크로압입은 용추철 상수가 열 변동 방법에 의해 약 100 pN/nm에서 결정된 2.5 μm 반경 구형-팁 프로브 (Novascan, IA, USA)를 사용하여 수행하였다. 각각의 디쉬에 대해, 3개의 상이한 영역을 분석하였다. 힘 곡선을 상이한 지점에서 20 μm/s의 압입 속도와 10 μm의 램프 크기에서 MIRO 2.0 (NanoScope 9.1; Bruker)을 사용하여 획득하였다. 75 힘 곡선은 세포 디쉬 당 (면적당 25개) 수행하였다. 영 탄성률 (Young's modulus) E를 NanoScope 분석 소프트웨어 (Bruker)를 사용하고 0.5의 피어슨 비율을 고려하는 헤르쯔 모델에 의한 힘 곡선의 피팅에 의해 결정하였다. 배지를 나타낸 농도의 DHX 또는 0.1%의 DMSO (비히클 대조군)와 함께 2% FBS, 2 ng/mL TGFβ, 및 20 μg/mL 아스코르브산을 함유하는 새로운 DMEM으로 교환하였다. 또 다른 72시간 후, 이전과 같이 AFM을 측정하였다. 이어서, 생성된 세포-유래된 매트릭스를 0.5% (v/v) Triton X-100 (Sigma-Aldrich) 및 20 mM NH4OH (LabChem Inc.)를 함유하는 포스페이트-완충 식염수 (Gibco)로 탈세포화하였다. 매트릭스를 PBS로 3회 세척한 다음, RNA 단리 전 24시간 동안 낮은 계대 (P3)의 NHLF와 함께 분주하였다.
RNA 간섭: 세포를 25 nM siGENOME siRNA SMARTpool (Dharmacon) 표적화 DRD1 (L-005477-00-0005) 또는 비표적화 SMARTpool (D-001810-10-05)과 함께 리포펙타민 RNAiMAX (Life Technologies)를 사용하여 형질감염시켰다. 세포는 RNA를 수거하기 전에 72시간 동안 배양하였다. YAP/TAZ 국소화 실험을 위해, 세포를 면역형광 검정을 위해 96-웰 플레이트에 재-분주하기 전에 이들의 6-웰 플레이트에서 48시간 동안 형질감염시켰다. 생체내 siRNA 방법에 대해 아래를 참조한다.
블레오마이신 마우스 연구: 초기 생체내 siRNA 연구 (도 22 및 23a-23c)에서, 6 내지 8주령의 성체 수컷 연령-일치된 C57BL/6N 마우스는 미국 국립 암 연구소(National Cancer Institute, NCI)-프레드릭 마우스 리포지토리 (Frederick Mouse Repository) (Frederick, MD, USA))으로부터 구입하였다. 모든 실험은 국립 보건원 지침 및 연구 동물 관리에 관한 매사추세츠 종합 병원 소위원회 (Massachusetts General Hospital Subcommittee)에 의해 승인된 프로토콜에 따라 수행하였고, 모든 마우스는 미국 실험 기관 인증 협회 (American Association for Accreditation of Laboratory Animal Care, AAALAC)에 의해 승인된 특정 병원균-부재 (SPF) 환경에서 유지하였다. 6 내지 8주령 마우스를 기관에 노출하기 전에 케타민 및 크실라진으로 마취하였다. 폐 섬유증은 0일에 블레오마이신 (1.2 U/kg으로 50 μl) 또는 포스페이트 완충 식염수 (PBS; 대조군으로서)의 기관내 주사에 의해 유도하였다. 14일 후 마우스 Yap (L-046247-01-0005) 또는 Taz (L-058248-01-0005) mRNA (Dharmacon)를 표적화하거나 대조군 siRNA를 표적화하지 않는 소형 간섭 RNA (siRNA) 듀 플렉스는 마우스 당 25 μg (각각 siRNA)의 단일 용량으로 기관내 점적에 의해 생체내 투여하였다. 21일에, 마우스를 희생시키고 콜라겐 결정 및 생화학적 분석을 위해 폐를 수거하였다. 총 단백질 농도 결정을 위한 BAL 샘플을 수득하기 위해, 폐는 6개 0.5 mL 분취량의 PBS로 세척하였다. BAL 샘플을 4℃에서 20분 동안 3,000 g에서 원심분리하고, 후속 분석을 위해 상등액을 실리콘화된 저-결합 에펜도르프 튜브 (PGC Scientifics)로 옮겼다. BAL 유체의 총 단백질 농도를 BCA 단백질 검정 키트 (Pierce)에 의해 결정하였다. 디하이드렉시딘 처리 연구 (도 17-21)에서, 8주령의 암컷 C57/BL6 마우스를 제조원 (Charles River Laboratories)으로부터 구입하였 다. 마우스 폐 섬유증은 MicroSprayer® 분무기 (Aerosolizer) (Penn-Century)를 사용하여 폐로 기관내 (3 U/kg)로 전달된 블레오마이신 (BLEO; Fresenius Kabi)으로 유도하였다. 샴 마우스에 동일한 방법을 사용하는 대신에 멸균 0.9% 식염수를 투여하였다. 마우스를 24시간 마다 체중을 칭량하고, 이어서 그룹 둘 다를 10일에 체중 변화 정도가 일치하는 DHX 및 대조군 처리 그룹으로 무작위화하였다. DHX (5 mg/kg)는 14일 동안 폐포로의 확산을 돕는 것으로 이전에 나타난 계면활성제 (infasurf)에 용해된 비강내 (i.n.)로 매일 투여하였다. 마우스의 대조군 그룹에 균등한 비히클 용량의 계면활성제를 투여하였다. 최종 DHX 처리 후, 마우스를 희생시키고, 우측 폐를 4% 파라포름알데하이드 (PFA)로 부풀리고, 파라핀 포매를 위한 처리 전에 24시간 동안 4% PFA에서 추가로 항온처리하였다. 폐의 좌엽은 RNA 단리 및 하이드록시프롤린 검정을 위해 액체 질소에 급속 동결시켰다. 실험 과정은 마요 클리닉 동물 실험 윤리 위원회 (Mayo Clinic Institutional Animal Care and Use Committee)에 의해 승인되었고, 동물을 이들의 지침에 따라 취급하였다.
담관 결찰: BDL은 이전에 기재된 바와 같이 수행하였다. 간략하게, 8 내지 10주 노령 암컷 C57BL/6N은 BDL 또는 샴 수술을 진행하였다. 마우스는 IACUC 프로토콜에 따라 0일에 마취시키고, 담관은 멸균 3/0 실크 결찰사를 사용하여 결찰하였다. 샴 수술은 실크 결찰사를 담관 아래로 통과시켜 수행하였다. 7일째부터 시작하여, DHX (5 mg/kg) 또는 비히클 대조군은 14일 동안 매일 복막내 (i.p.)로 투여하였다. 최종 DHX 처리 후, 마우스를 희생시키고, 간은 섬유증 분석을 위해 수거하였다.
조직학적 점수매김: 5 μm의 두께의 절편을 파라핀 포매된 폐 조직으로부터 절단하고, 상기 절편을 헤마톡실린 및 에오신 (H&E) 또는 매이슨의 트리크롬 염색 키트 (Masson's Trichrome stain kit) (Abcam)로 염색하였다. 모든 H&E-염색된 슬라이드 및 트리크롬-염색된 슬라이드는 흉부 병리학자에 의해 맹검 방식으로 검토하였다. 간질성 및 세기관지주위 폐 미성숙 및 성숙 섬유증의 중증도는 애쉬크로프트 등에 따라 수치 척도로 추정하였다. 점수 매김 목적을 위해, 모든 H&E 염색된 슬라이드를 100x 배율로 전신 스캐닝하였고, 연속 100x 필드를 점수 매겼다. 점수 매김은 하기 척도를 기반으로 하였다: 0 (섬유증 없음), 1 (섬유증으로 인한 최소 간질성 및/또 는 세기관지주위 비후), 3 (명백한 구조적 염좌 없이 중간 정도의 비후), 5 (섬유성 띠 및/또는 작은 매쓰의 형 성과 함께 증가된 섬유증), 7 (큰 면적의 섬유증 및 벌집모양 변화 면적과 함께 중증의 구조적 염좌) 및 8 (필드의 총 섬유성 소멸). 각각의 필드에 대한 우세한 점수를 기록하였다. 모든 점수의 평균은 각각의 경우에 대 해 계산하였다. 간 트리크롬 염색된 절편은 이미지 J 소프트웨어를 사용하여 계산적으로 측정하였다. RGB 스택에서 각각의 이미지를 전환시킨 후, 역치를 조정하고 모든 이미지에 대해 동일한 수준으로 유지하였다.
하이드록시프롤린: 하이드록시프롤린 함량은 제조 지침에 따라 약간의 수정을 가하여 하이드록시프롤린 검정 키트 (Biovision)를 사용하여 측정하였다. 폐 조직을 칭량하고, 멸균수 (100 μL H2O 당 10 mg의 조직)에서 균질 화시키고 3시간 동안 120℃에서 압밀된 테플론 캡핑된 바이알에서 12 N HCl에서 가수분해시킨 다음, 45 μm Spin-X® 원심분리 튜브 필터 (Corning)를 통해 여과하였다. 10 μL의 가수분해된 샘플은 2시간 동안 스피트백 (Speed-Vac)에서 건조시킨 다음, 실온에서 5분 동안 100 μL의 클로라민 T 시약 및 60℃에서 90분 동안 100 μL의 4□(디메틸아미노) 벤즈알데하이드 (DMAB)와 함께 항온처리하였다. 산화된 하이드록시프롤린의 흡광도는 560 nm에서 결정하였다. 하이드록시프롤린 농도는 알려진 농도의 트랜스-4-하이드록실-L-프롤린을 사용하여 생성된 표준 곡선으로부터 계산하였다. 칭량된 조직으로부터 단리된 단백질의 총량은 단백질 검정 키트 (Bio-Rad, 595 nm에서 흡광도)를 사용하여 결정하였다. 콜라겐의 양은 μg/mg 총 단백질로 나타낸다.
통계: 그룹은 일원분석 ANOVA에 의해 터키 (Tukey) 다중 비교 시험과 비교하였다. 모든 통계 시험은 통계적 유의성이 p < 0.05로 정의된 GraphPad Prism 6을 사용하여 수행하였다. 결과는 평균 ± 평균의 표준 오차 (SEM)으로 나타낸다.
실시예 1 - Gα s 　수용체를 효능화시킴으로써 선택적 YAP 및 TAZ 표적화
비선택적 YAP 및 TAZ 표적화가 폐 섬유증의 모델에서 효과적인지 여부를 테스트하기 위해, YAP 및 TAZ siRNA를 폐 섬유증의 표준 모델인 블레오마이신 손상 후 마우스에 기관내 투여하였다 (도 17-21). 이와 관련하여 YAP/TAZ의 비-선택적 표적화는 섬유증 (하이드록시프롤린 검정에 의해 측정됨)을 증폭시켰으며 또한 폐 손상 및 혈관 누출을 증가시켰다. 대조적으로, YAP 및 TAZ의 섬유아세포 선택적 유전가 결실은 신장 섬유증 모델에서 가능성을 나타내었다 (참조문헌 25).
G 단백질-커플링된 수용체 (GPCR)는 인간 게놈에서 최대 계열의 막 수용체를 구성하고, 다산성 치료 표적이 되었고, 이들의 리간드는 모든 임상적으로 승인된 약물의 >30%를 차지한다 (참조문헌 26). GPCR는 4개의 주요 부류의 G-단백질로부터의 이펙터 단백질에 연결된다. Gα12/13, Gαq/11 및 Gαi/o에 커플링되는 수용체의 활성화는 YAP/TAZ 핵 전좌 및 전사 활성을 자극한다. 대조적으로, Gαs에 커플링되는 수용체는 YAP/TAZ 핵 국소화 및 cAMP의 상승을 통한 활성을 억제한다 (참조문헌 27-30)(도 1, 2).
GPCR 발현은 기관에 걸쳐 그리고 심지어 동일한 조직에서 인접한 세포 유형 내에서 다양하다 (참조문헌 31). 따라서, GPCRome의 RNA 발현은 1차 성인 인간 폐 섬유아세포 및 폐포 상피 세포 둘 다에서 프로파일링되었고 (도 3), 독점적으로 Gαs　(참조문헌 32)에 커플링되고 (적색으로 강조됨, 도 3) 섬유아세포에서 선택적으로 발현되는 수용체를 모색한다. 28개의 Gαs 커플링된 수용체 중에서, 도파민 수용체 D1 (DRD1)의 발현은 폐포 상피 세포와 비교하여 섬유아세포에서 상대적으로 고발현 및 현저한 풍부함을 나타냈다 (도 3). 배양된 정상 인간 폐 섬유아세포 및 특발성 폐 섬유증을 갖는 환자로부터 유래된 섬유아세포에서 DRD1에 대해 풍부한 전사체는 qPCR에 의해 결정하였고, 1차 인간 폐포 상피 세포와 미세혈관 내피 세포 둘 다에서 DRD1의 전사체 수준은 검출 불가능하였다 (도 4). 새롭게 단리된 폐 세포 집단에서 본 발명의 발견을 추가로 입증하기 위해, 본원 발명자들은 마우스 폐 조직을 중간엽, 상피, 내피 및 백혈구 집적된 분획으로 분류하였다 (도 5). 배양된 인간 세포에서와 같이, 본원 발명자들은 새롭게 단리된 중간엽 세포에서 DRD1의 강력한 발현을 관찰하였지만, 다른 폐 세포 집단에서는 검출 가능하지 않은 수준이었다.
실시예 2 - DRD1 효능제는 중간엽 세포에서 YAP 및 TAZ 국소화를 선택적으로 억제한다
3개의 선택적 DRD1 효능제 (디하이드렉시딘, SKF-81297, 페놀도팜)는 YAP/TAZ 핵 국소화를 억제하는 이들의 능력에 대해 시험하였다 (도 6, 24). 섬유아세포는 단단한 매트릭스 (플라스틱)에 분주하고 세포 접촉 억제의 부재는 YAP/TAZ의 풍부한 핵 국소화를 갖는다 (참조문헌 2). 3개의 화합물 모두는 YAP/TAZ의 핵 국소화를 감소시켰고, 이들의 효능은 이전에 기재된 이들 리간드의 고유 활성과 일치하였다 (참조문헌 33).
디하이드렉시딘 (DHX)에 의한 YAP/TAZ 핵 국소화의 억제는 DRD1 선택적 길항제를 사용하여 (도 24-26) 또는 세포를 DRD1-siRNA로 처리하여 (도 27-28) 약화될 수 있고, 이로 DHX의 수용체-특이적 효과를 확인한다. 이전에 정의된 기 전과 일치하여, YAP/TAZ 핵 국소화는 세린 잔기의 cAMP-의존성 인산화에 의해 제어되고, 이는 세포질 체류 또는 분해를 촉진하고, DHX는 cAMP를 상승시키고 YAP 세린 127 인산화를 촉진시킨다 (참조문헌 27-30)(도 9, 10). DHX는 심장 및 피부 섬유아세포 및 간성상 세포를 포함한 중간엽 세포 유형의 패널에 걸쳐 YAP/TAZ 핵 국소화를 억제하는데 효과적이었고 (도 24-26), 이는 YAP 및 TAZ의 중간엽 세포 표적화에 대한 이 리간드의 잠재적으로 광범위한 관련성을 시사한다. YAP/TAZ 핵 국소화의 DHX-매개된 억제는 상대적으로 지속적이었고, 폐에서 알려된 항-섬유화 효과를 갖는 또 다른 GPCR 리간드 (PGE2)의 감소된 효력과 달리, 정상 폐 섬유아세포 및 IPF를 갖는 환자로부터 유래된 것들에서도 균등하게 강력하였다 (도 24-26)(참조문헌 34). 이러한 관찰과 대조적으로, DHX는 폐 상피 및 내피 세포에서 YAP/TAZ 국소화에 영향을 미치지 않았고 (도 7), 이러한 세포 유형에서 DRD1에 대한 검출 가능한 전사체의 부재와 일치한다. 섬유증을 촉진시키는 것으로 알려진 다중 GPCR 리간드는 Gαi, Gαq, 및 Gα12에 커플링하고, 이는 이어서 섬유아세포에서 YAP/TAZ 핵 국소화를 증진시키는 것으로 예상된다 (참조문헌 28, 33). 이것은 달리 YAP/TAZ의 감소된 핵 국소화를 나타내는 컨플루언트 섬유아세포에서 확인되었고, 이는 엔도텔린-1, 리소포스파티드산 및 세로토닌, 섬유증의 촉진에 관여하는 모든 GPCR 리간드(참조문헌 35)가 YAP/TAZ 핵 국소화를 증진시킴을 보여준다. DHX는 이들 리간드 세 가지 모두에 응답하여 YAP/TAZ의 핵 국소화를 차단하였고, 이는 섬유아세포에서 YAP/TAZ에 대한 GPCR 리간드의 광범위한 효과를 입증하고, YAP/TAZ 핵 국소화의 기계적 (단단한 매트릭스) 및 생화학적 조절 둘 다를 억제하기 위한 효과적인 전략으로서 DHX, 및 GαS/cAMP의 자극을 동정한다 (도 8). YAP/TAZ 핵 국소화를 억제하는 선택된 도파민 수용체 효능제의 능력은 표 3에 나타내었다.
[표 3]
Figure pct00054
αSMA의 발현을 억제하는 선택된 도파민 수용체 효능제의 능력은 표 4에 나타내었다.
[표 4]
Figure pct00055
실시예 3 - 도파민 수용체 효능제 (예를 들어, DHX)는 섬유아세포 활성화 및 매트릭스 침착을 감소시킨다
YAP/TAZ 핵 국소화의 DHX-매게된 억제가 중간엽 세포 활성화로 해독되는지 여부를 테스트하기 위해, 본원 발명자들은 먼저, 특징적인 전구섬유화 유전자 CTGF, COL1A1, ACTA2, 및 FN1의 발현이 DHX 처리에 의한 IPF 환자-유래된 폐 섬유아세포에서 감소되었음을 입증하였고, 이는 YAP/TAZ 녹다운의 효과를 개괄하였다 (참조문헌 1-4)(도 11). 이러한 효과는 DRD1-siRNA (도 27-28) 뿐만 아니라 DRD1 길항제 (도 11)로 차단될 수 있다. TGFβ로 72시간 동안 단단한 조직 배양 플라스틱 상에서 배양된 섬유아세포의 자극은 αSMA+ 스트레스 섬유에 의해 검출된 바와 같이 이들의 근섬유아세포 전이를 증진시키고; TGFβ의 존재하에 48 내지 72시간 동안 DHX로 섬유아세포의 처리는 이 전이를 역전시킨다 (도 12). 유사하게, DHX는 용량-의존적으로 콜라겐 I 및 피브로넥틴의 섬유아세포-매개된 TGFβ-자극된 축적을 역전시켰다 (도 13). 이 효과가 YAP/TAZ의 억제에 의존하는지를 검증하기 위해, 독시사이 클린-유도성, 항상성 활성, 돌연변이체 TAZ (TAZ4SA)를 안정적으로 발현하는 NIH-3T3 세포를 사용하였다 (참조문헌 2, 36). 이들 세포에서, DHX는 전구섬유화 유전자 발현 또는 특정 매트릭스 축적에 영향을 미치지 않았다 (도 29, 30). 최종적으로, 견인력 현미경 (TFM)은 DHX가 유의적으로 및 용량의존적으로 섬유아세포에 의해 생성된 수축력을 감소 시켰음을 입증하였다 (도 14).
실시예 4 - 도파민 수용체 효능제 (예를 들어, DHX)에 의한 세포외 매트릭스 리모델링
상기 결과는 섬유아세포 전구섬유화 활성화의 주요 양상을 약화시킬 뿐만 아니라 잠재적으로 이들의 표현형을 섬유증 제거 및 해소를 촉진시키는 쪽으로 전환시키는 DHX와 일치하였다. 이 개념을 직접적으로 시험하기 위해, 시험관내 매트릭스 리모델링 검정을 개발하였다. 섬유아세포 (NIH-3T3 세포)는 먼저 세포-유래된 매트릭스를 연구하기 위해 개발된 접근법에 따라 컨플루언스에서 분주하였다 (도 15에서 A 및 B). 두 플레이트 상의 세포를 TGFβ 및 아스코르브산으로 항온처리하여 매트릭스 합성 및 침착을 촉진시켰다. 72시간 후, 세포 및 이들의 세포-유래된 매트릭스의 강성도를 원자간력 현미경 (AFM)을 사용하여 측정하였다. 72시간 후, 세포 및 이들의 세포-유래된 매트릭스의 강성도를 원자간력 현미경 (AFM)을 사용하여 측정하였다. 세포-매개된 매트릭스 리모델링을 유도하는 DHX의 능력을 시험하기 위해, TGFβ 및 아스코르브산을 유지하였지만 또한 DHX를 AFM으로 매트릭스를 다시 탐지하기 전에 추가 72시간 동안 B에 첨가하였다 (비히클 대조군을 A에 첨가하였다). 대조군 플레이트 A 내 세포 및 매트릭스는 시간 경과에 따라 계속 강화되었지만, DHX 처리는 이러한 경향을 효과적으로 역전시키고 관찰된 강성도를 유의적으로 감소시켰다. DHX가 매트릭스 리모델링 효과를 도입했는지를 확인하기 위해, 매트릭스를 탈세포화하고 24시간 동안 낮은 계대의 1차 인간 성인 폐 섬유아세포를 탈세포화된 매트릭스 상으로 분주한 다음, RNA를 단리하여 전구섬유화 유전자 발현에서의 변화를 측정하였다. CTGF, COL1A1, ACTA2 및 FN1 발현은 이전에 DHX로 처리된 매트릭스 상에 분주된 세포에서 모두 감소하였고, 세포 리모델링에 의한 세포외 매트릭스에 남겨진 약물-풋프린트 (pharmaco-footprint)를 동정하였다.
DHX의 이들 매트릭스 리모델링 효과에 기반하여, 이 경로의 효능이 단순히 이의 진행을 늦추기 (섬유아세포의 중요한 유용성) 보다는 질환을 역전시킬 수 있는 섬유아세포에서 매트릭스 분해/리모델링 작용을 유도하는 것으로 확장되는지를 결정하였다. 먼저, DHX의 효과는 매트릭스 리모델링과 관련된 유전자의 발현에 대해 조사하였다 (도 3f). TGFβ로 처리된 IPF 환자 유래된 섬유아세포는 매트릭스 가교결합 유전자 및 매트릭스 프로테아제 효소 억제제의 증진된 발현을 보여주었지만, 또한 매트릭스 제거와 관련된 여러 유전자의 감소된 발현을 보여주었다 (도 16). 각각의 경우에, DHX 처리는 TGFβ의 효과를 역전시켜 가교결합 및 프로테아제 억제제의 발현을 감소시키지만 매트릭스 분해 관련된 효소의 발현을 증진시켰다. DHX가 매트릭스 리모델링에 영향을 미치는 단일 드라이버 유전자가 존재하는 것으로 보이지 않고, 이는 관찰된 효과가 보다 광범위한 섬유아세포 프로그램 전환임을 시사한다.
실시예 5 - 생체내 도파민 수용체 효능제 (예를 들어, DHX) 효능
폐 섬유증의 블레오마이신 모델을 사용하여 실험 섬유증에서 생체내 DHX의 효능을 테스트하였다. 마우스를 0일에 블레오마이신을 기관내 투여하였다. 10일에, 손상 및 염증은 전형적으로 진정되고 섬유증은 계속된다. 10일에, 마우스를 2개의 그룹으로 무작위화하고, 하나에 DHX (하루 1회 5 mg/kg i.n)를 투여하고, 다른 하나에 비히클 대조군이었다. 블레오 DHX 그룹은 블레오 대조군 그룹 보다 훨씬 적게 감량되었다 (도 17). 24일에, 마우스를 희생시키고 조직학, 하이드록시프롤린 및 qPCR을 사용하여 비교하였다. 조직학적으로, 블레오 DHX 그룹은 맹검 병리학자에 의해 평가된 바와 같이, 블레오 대조군 그룹 및 샴 비손상 마우스와 비교하여 폐 리모델링으로부터 완전히 보호하였다 (도 18). 블레오 DHX 마우스의 폐에서 총 콜라겐은 샴 처리된 마우스와 거의 동일하였고 블레오 대조군 마우스와 비교하여 유의적으로 감소하였다 (도 19). 블레오마이신은 폐에서 YAP 및 TAZ에 대한 염색을 증가시켰고 이것은 DHX 처리에 의해 약화되었다 (도 20). 블레오 대조군 그룹은 또한 Yap 및 Taz 자체뿐만 아니라 전구섬유화 유전자 Acta2, Ctgf, Fn1, Col1a1, 및 Col1a2에 대한 증진된 전사체 수준을 보여주었고 이들 모두는 블레오 DHX 그룹에서 유의적으로 약화되었다 (도 21). DHX가 섬유증의 부재하에 폐 리모델링에 악영향을 미치는지 여부를 평가하기 위해, 본원 발명자들은 또한 동일한 시간 과정 및 노출 경로에 따라 대조군 마우스를 DHX에 노출시켰다. 샴 DHX 마우스의 폐는 임의의 이러한 측정을 사용한 대조군 마우스의 폐와 상이하지 않았다 (도 31-34).
실시예 6 - 간성상 세포에 대한 도파민 수용체 효능제 (예를 들어, DHX)의 효과
일련의 중간엽 세포에 걸쳐 YAP/TAZ 핵 국소화를 약화시키는데 있어서 DHX의 효능을 기반으로, 본원 발명자는 본원 발명자의 발견을 간성상 세포와 간 섬유증까지 확장하려고 노력하였다. 간세포와 비교하여 간성상 세포 (HSC)에서 DRD1의 우선적 발현이 확인되었고 (도 35-38), 결과는 이전 실시예에서 폐 조직에 대해 얻은 결과와 유사하였다. 이어서, SMA 및 FN 단백질의 TGFβ-매개된 HSC 발현을 감소시키는 DHX의 능력은 웨스턴 블로팅에 의해 테스트하였고 둘 다의 관찰된 유의한 역전을 관찰하였다. 이어서, 담즙정체 손상 및 간 섬유증의 담관 결찰 모델에서 DHX의 효능을 테스트하였다. 담관 결찰은 0일에 수행하였고 DHX 또는 비히클을 사용한 처리는 7일에 개시하고 14일 동안 계속하였다. DHX는 BDL에 의해 유발된 조직학적 섬유증을 유의적으로 개선시켰고 감소된 콜라겐 침착 경향을 나타내었다 (도 35-38).
이전 연구는 TAZ가 비-알콜성 지방간염의 모델에서 간 세포에서의 섬유성 효과를 매개하고(참조문헌 37), 버테포르핀 (YAP/TAZ-TEAD 상호작용의 억제제)이 간 섬유증 모델에서 제한된 이로운 효과를 갖고 (참조문헌 19), YAP/TAZ가 간 재생에서 필수적임을 입증하였다 (간에서 비특이적 YAP 분해는 간세포 괴사를 촉진시킨다 (참조문헌 38)). 본원의 결과는 실험적인 간 섬유증에서 YAP/TAZ의 선택적 억제에 대한 GPCR-기반 접근법의 효능을 처음으로 입증하였다.
실시예 7 - DOPA 데카르복실라제는 IPF에서 감소하였고 악화되는 질환 중증도와 상호관련이 있다
IIPF 환자 폐는 비-IPF 폐 보다 적게 도파 데카복실라제 (DDC) (도파민 합성에 관여하는 효소)를 발현하고 보다 낮은 수준의 DDC 발현이 폐 섬유증에서 상실된 도파민 신호전달에 대한 내인성 보호성 역할과 일치하는, 감소된 폐 기능과 상호관련이 있는 것으로 밝혀졌다 (도 61a-c). 이를 뒷받침하기 위해, 도파민은 또한 섬유아세포 활성의 시험관내 평가에서 항섬유성인 것으로 나타났다 (도 62a-c).
종합하면, 실시에 1 내지 7에 제시된 실험 결과 및 데이터는 GPCR 효능작용이 조직 섬유증에 대한 이로운 효과를 발휘하기 위한 선택적 세포 집단에서 YAP 및 TAZ를 약리학적으로 표적화하기 위해 사용될 수 있음을 입증한다. Gαs 효능작용 (예를 들어, 도파민 수용체 효능작용) 및 YAP/TAZ 억제는 매트릭스 침착 및 활성화된 섬유아세포의 강화 표현형을 섬유증 해결을 촉진시키는 매트릭스 리모델링 표현형으로 역전시키고, 이는 Gαs　효능작용 (예를 들어, 도파민 수용체 효능작용) 및 YAP/TAZ 억제가 섬유성 질환을 갖는 환자를 치료하기 위한 가치 있는 접근법임을 보여준다.
실시예 8 - 화합물 CTC-1, CTC-2, CTC-3, CTC-6, 및 CTC-7은 조직 섬유증의 모델을 강력하게 억제한다
도 66-76에 도시한 바와 같이, 화합물 CTC-1, CTC-2, CTC-3, 및 CTC-6은 YAP/TAZ 핵 국소화를 억제하고, 섬유아세포 증식을 억제하고, 섬유아세포 활성화를 억제하고, 콜라겐 I 침착을 억제하고, 전구섬유화 유전자 발현의 억제를 억제한다.
실시예 9 - 예시된 화합물의 생물활성
본 개시내용에 기재된 화합물은 특발성 폐 섬유증의 치료를 위한 D1 도파민 수용체 효능제로서 유용하다. 이 수용체는 다른 주요 상주 세포 유형에 비해 폐 섬유아세포에서 우선적으로 발현되어 항섬유증/친화성 표현형을 촉진하기 위해 폐 섬유아세포에서 YAP/TAZ 전사 프로그램을 선택적으로 억제하는 메커니즘을 제공한다 이전의 실시예에 나타낸 바와 같이, 화합물 CTC-3 및 CTC-6는 배양된 폐 섬유아세포 (IC50 50-100nM)에서 YAP/TAZ의 국소화를 강력하게 억제하고 이들의 물리적 및 화학적 특성은 혈액-뇌-장벽을 통과하는 한계 능력을 시사한다. 이 실시예의 화합물은 D1 수용체에서 고유 활성 (효능)을 향상시키면서 CTC-3/6의 효력을 유지하거나 향상시킨다.
본 개시내용의 대부분의 예시된 D1 수용체 효능제는 카테콜 모이어티를 함유한다. 생리학적 pH에서 카테콜은 때때로 빠르게 퀴논으로 산화되며, 여러 D1 효능제의 경우 대부분의 약물 제거는 간 대사가 아니라 이러한 산화의 결과이다. 페놀도팜은 염화물 치환된 카테콜 고리를 함유하는 급성 고혈압 치료를 위해 임상적으로 승인된 도파민 수용체 효능제이다. 염소 치환은 때때로 페놀도팜이 생리학적 pH에서 안정하고 산화를 통한 대사가 보고되지 않도록 하는 보호 효과를 갖는다. 참고로, 이 부위의 염화물 치환도 도파민 수용체 효력을 향상시킨다. 요약하면, 예시된 화합물에서 카테콜 부분에 대한 할로겐 치환은 예를 들어 산화를 방지함으로써 이들의 효능 및 혈장 안정성을 증진시킨다. 예시된 화합물의 화학 구조를 하기 표에 나타내었다.
[표 9a]
Figure pct00056
[표 9b]
Figure pct00057
[표 9c]
Figure pct00058
[표 9d]
Figure pct00059
[표 9e]
Figure pct00060
[표 9f]
Figure pct00061
[표 9g]
Figure pct00062
[표 9h]
Figure pct00063
실시예 10 - 화합물 1 (MS-9)은 조직 섬유증의 모델을 강력하게 억제한다
도 90에 도시한 바와 같이, 화합물 1 (MS-9) 섬유아세포 증식을 강력하게 억제한다. 섬유아세포를 2ng/mL TGFβ 로 자극하고 지시된 농도 (0.1 μM, 1 μM, 및 10 μM)에서 화합물 1 (MS-9) 로 처리하였다. Cytation을 사용하여 DAPI 핵을 고정화하고 계수하여 증식을 결정하였다.
알파-평활근 액틴 (αSMA) 염색은 상처 치유 및 조직 섬유증에서 관찰되는 섬유아 세포 활성화의 잘 정의된 마커이다. 도 91a에 도시한 바와 같이, 화합물 1 (MS-9)은 섬유아세포 활성화를 강력하게 억제한다. 섬유아세포를 2 ng/mL TGFβ로 자극하고 48시간 마다 지시된 농도의 화합물 1 (MS-9)로 처리하였다 (IC50는1.1 μM이다). Cytation 5를 사용한 자동화를 통해 αSMA 강도의 이미지 및 정량화를 수행하였다.
도 91b에 도시한 바와 같이, 화합물 1 (MS-9))은 콜라겐 1 침착을 강력하게 억제한다. 섬유아세포를 2 ng/mL TGFβ로 자극하고 48시간 마다 지시된 농도의 화합물 1로 처리하였다 (IC50는 0.7 μM이다). 콜라겐 I 강도의 이미지화 및 정량화를 LI-COR 오딧세이를 사용한 자동화를 통해 수행하였다.
세포 배양 연구에서, MS-9는 섬유아세포에서 YAP/TAZ 핵 국소화를 강력하게 차단하지만 상피 세포에서 YAP/TAZ 핵 국소화를 촉진하고 폐 섬유증의 모델에서 섬유아세포 활성화를 억제한다. 도 92a-92C를 참조한다.
생리학적 pH에서 아포모르핀은 대사의 대부분을 나타내는 비활성 퀴논으로 산화된다:
Figure pct00064
MS-21-9에는 도파민 수용체 효력을 증진시키면서 카테콜을 안정화시키는 염화물 치환을 갖는다. 이와 같이, MS-21-9는 카테콜 모이어티에 할로겐이 없는 화합물에 비해 반감기가 더 길다.
추가 예시된 화합물을 하기 표에 나타내었다:
Figure pct00065
참조문헌
1. Tschumperlin, D. J., Liu, F. & Tager, A. M. Biomechanical regulation of mesenchymal cell function. Curr Opin Rheumatol 25, 92-100, doi:10.1097/BOR.0b013e32835b13cd (2013).
2. Liu, F. et al. Mechanosignaling through YAP and TAZ drives fibroblast activation and fibrosis. Am J Physiol-Lung C 308, L344-L357, doi:10.1152/ajplung.00300.2014 (2015).
3. Martin, K. et al. PAK proteins and YAP-1 signalling downstream of integrin beta-1 in myofibroblasts promote liver fibrosis. Nat Commun 7, 12502, doi:10.1038/ncomms12502 (2016).
4. Szeto, S. G. et al. YAP/TAZ Are Mechanoregulators of TGF-beta-Smad Signaling and Renal Fibrogenesis. J Am Soc Nephrol, doi:10.1681/ASN.2015050499 (2016).
5. Piersma, B., Bank, R. A. & Boersema, M. Signaling in Fibrosis: TGF-beta, WNT, and YAP/TAZ Converge. Front Med (Lausanne) 2, 59, doi:10.3389/fmed.2015.00059 (2015).
6. Hansen, C. G., Moroishi, T. & Guan, K. L. YAP and TAZ: a nexus for Hippo signaling and beyond. Trends Cell Biol 25, 499-513, doi:10.1016/j.tcb.2015.05.002 (2015).
7. Zanconato, F., Battilana, G., Cordenonsi, M. & Piccolo, S. YAP/TAZ as therapeutic targets in cancer. Curr Opin Pharmacol 29, 26-33, doi:10.1016/j.coph.2016.05:002 (2016).
8. Zhao, B., Li, L., Lei, Q. & Guan, K. L. The Hippo-YAP pathway in organ size control and tumorigenesis: an updated version. Genes Dev 24, 862-874, doi:24/9/862 [pii] 10.1101/gad.1909210 (2010).
9. Elbediwy, A., Vincent-Mistiaen, Z. I. & Thompson, B. J. YAP and TAZ in epithelial stem cells: A sensor for cell polarity, mechanical forces and tissue damage. Bioessays 38, 644-653, doi:10.1002/bies.201600037 (2016).
10. Lin, C. W. et al. YAP is essential for mechanical force production and epithelial cell proliferation during lung branching morphogenesis. Elife 6, doi:ARTN e21130 10.7554/eLife.21130 (2017).
11. Imajo, M., Ebisuya, M. & Nishida, E. Dual role of YAP and TAZ in renewal of the intestinal epithelium. Nature Cell Biology 17, 7-+, doi:10.1038/ncb3084 (2015).
12. Kim, J. et al. YAP/TAZ regulates sprouting angiogenesis and vascular barrier maturation. J Clin Invest 127, 3441-3461, doi:10.1172/JCI93825 (2017).
13. Wang, L. et al. Integrin-YAP/TAZ-JNK cascade mediates atheroprotective effect of unidirectional shear flow. Nature, doi:10.1038/nature20602 (2016).
14. Tang, Y. & Weiss, S. J. Snail/Slug-YAP/TAZ complexes cooperatively regulate mesenchymal stem cell function and bone formation. Cell Cycle 16, 399-405, doi:10.1080/15384101.2017.1280643 (2017).
15. Levasseur, A., St-Jean, G., Paquet, M., Boerboom, D. & Boyer, A. Targeted disruption of YAP and TAZ impairs the maintenance of the adrenal cortex. Endocrinology, doi:10.1210/en.2017-00098 (2017).
16. Totaro, A. et al. YAP/TAZ link cell mechanics to Notch signalling to control epidermal stem cell fate. Nat Commun 8, 15206, doi:10.1038/ncomms15206 (2017).
17. Grove, M. et al. YAP/TAZ initiate and maintain Schwann cell myelination. Elife 6, doi:10.7554/eLife.20982 (2017).
18. Elbediwy, A. et al. Integrin signalling regulates YAP and TAZ to control skin homeostasis. Development 143, 1674-1687, doi:10.1242/dev.133728 (2016).
19. Martin, K. et al. PAK proteins and YAP-1 signalling downstream of integrin beta-1 in myofibroblasts promote liver fibrosis. Nat Commun 7, 12502, doi:10.1038/ncomms12502 (2016).
20. Zhang, K. et al. omega-3 PUFAs ameliorate liver fibrosis and inhibit hepatic stellate cells proliferation and activation by promoting YAP/TAZ degradation. Sci Rep 6, 30029, doi:10.1038/srep30029 (2016).
21. Perumal, N., Perumal, M., Halagowder, D. & Sivasithamparam, N. Morin attenuates diethylnitrosamine-induced rat liver fibrosis and hepatic stellate cell activation by co-ordinated regulation of Hippo/Yap and TGF-beta 1/Smad signaling. Biochimie 140, 10-19, doi:10.1016/j.biochi.2017.05.017 (2017).
22. Liang, M. et al. Yap/Taz Deletion in Gli+ Cell-Derived Myofibroblasts Attenuates Fibrosis. J Am Soc Nephrol, doi:10.1681/ASN.2015121354 (2017).
23. Miranda, M. Z. et al. TGF-beta1 regulates the expression and transcriptional activity of TAZ protein via a Smad3-independent, myocardin-related transcription factor-mediated mechanism. J Biol Chem 292, 14902-14920, doi:10.1074/jbc.M117.780502 (2017).
24. Szeto, S. G. et al. YAP/TAZ Are Mechanoregulators of TGF-beta-Smad Signaling and Renal Fibrogenesis. J Am Soc Nephrol 27, 3117-3128, doi:10.1681/ASN.2015050499 (2016).
25. Liang, M. et al. Yap/Taz Deletion in Gli(+) Cell-Derived Myofibroblasts Attenuates Fibrosis. J Am Soc Nephrol 28, 3278-3290, doi:10.1681/ASN.2015121354 (2017).
26. Hauser, A. S., Attwood, M. M., Rask-Andersen, M., Schioth, H. B. & Gloriam, D. E. Trends in GPCR drug discovery: new agents, targets and indications. Nat Rev Drug Discov, doi:10.1038/nrd.2017.178 (2017).
27. Zhou, X., Wang, Z., Huang, W. & Lei, Q. Y. G protein-coupled receptors: bridging the gap from the extracellular signals to the Hippo pathway. Acta Biochim Biophys Sin (Shanghai) 47, 10-15, doi:10.1093/abbs/gmu108 (2015).
28. Yu, F. X. et al. Regulation of the Hippo-YAP pathway by G-protein-coupled receptor signaling. Cell 150, 780-791, doi:10.1016/j.cell.2012.06.037 (2012).
29. Yu, F. X. et al. Protein kinase A activates the Hippo pathway to modulate cell proliferation and differentiation. Genes Dev 27, 1223-1232, doi:10.1101/gad.219402.113 (2013).
30. Kim, M. et al. cAMP/PKA signalling reinforces the LATS-YAP pathway to fully suppress YAP in response to actin cytoskeletal changes. Embo J 32, 1543-1555, doi:10.1038/emboj.2013.102 (2013).
31. Insel, P. A. et al. GPCR expression in tissues and cells: Are the optimal receptors being used as drug targets? Brit J Pharmacol 165, 1613-1616, doi:10.1111/j.1476-5381.2011.01434.x (2012).
32. Flock, T. et al. Selectivity determinants of GPCR-G-protein binding. Nature 545, 317-322, doi:10.1038/nature22070 (2017).
33. Southan, C. et al. The IUPHAR/BPS Guide to PHARMACOLOGY in 2016: towards curated quantitative interactions between 1300 protein targets and 6000 ligands. Nucleic Acids Res 44, D1054-D1068, doi:10.1093/nar/gkv1037 (2016).
34. Wilborn, J. et al. Cultured Lung Fibroblasts Isolated from Patients with Idiopathic Pulmonary Fibrosis Have a Diminished Capacity to Synthesize Prostaglandin E(2), and to Express Cyclooxygenase-2. Journal of Clinical Investigation 95, 1861-1868, doi:Doi 10.1172/Jci117866 (1995).
35. Snead, A. N., He, S. & Insel, P. A. G protein-coupled receptor (GPCR) regulation of cardiac fibrosis. Faseb J 26 (2012).
36. Jorgenson, A. J. et al. TAZ activation drives fibroblast spheroid growth, expression of profibrotic paracrine signals, and context-dependent ECM gene expression. Am J Physiol Cell Physiol 312, C277-C285, doi:10.1152/ajpcell.00205.2016 (2017).
37. Wang, X. B. et al. Hepatocyte TAZ/WWTR1 Promotes Inflammation and Fibrosis in Nonalcoholic Steatohepatitis. Cell Metab 24, 848-862, doi:10.1016/j.cmet.2016.09.016 (2016).
38. Bai, H. et al. Yes-associated protein regulates the hepatic response after bile duct ligation. Hepatology 56, 1097-1107, doi:10.1002/hep.25769 (2012).
39. LeWitt, P.A., Subcutaneously administered apomorphine: pharmacokinetics and metabolism. Neurology, 2004. 62(6 Suppl 4): p. S8-11.
40. Trissel, L.A., Y. Zhang, and M.B. Baker, Stability of fenoldopam mesylate in two infusion solutions. Am J Health Syst Pharm, 2002. 59(9): p. 846-8.
41. Brogden, R.N. and A. Markham, Fenoldopam: a review of its pharmacodynamic and pharmacokinetic properties and intravenous clinical potential in the management of hypertensive urgencies and emergencies. Drugs, 1997. 54(4): p. 634-50.
42. Klecker, R.W. and J.M. Collins, Stereoselective metabolism of fenoldopam and its metabolites in human liver microsomes, cytosol, and slices. J Cardiovasc Pharmacol, 1997. 30(1): p. 69-74.
43. Andersen, P.H. and J.A. Jansen, Dopamine receptor agonists: selectivity and dopamine D1 receptor efficacy. Eur J Pharmacol, 1990. 188(6): p. 335-47.
44. Hahn, R.A., et al., Characterization of the peripheral and central effects of SK&F 82526, a novel dopamine receptor agonist. J Pharmacol Exp Ther, 1982. 223(2): p. 305-13.
넘버링된 패러그래프
일부 구현예에서, 본 개시내용의 발명은 다음의 넘버링된 패러그래프를 참조하여 설명될 수 있다:
패러그래프 1. 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
Figure pct00066
상기 식에서,
R1은 HO-C1-6　알킬, NH2-C1-6　알킬, N, O, 및 S로부터 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 5-6-원 헤테로아릴 고리, 및 N, O, 및 S로부터 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 3-7-원 헤테로사이클로알킬 고리로부터 선택되고; 여기서 상기 헤테로아릴 고리 및 헤테로사이클로알킬 고리는 각각 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환되고; 그리고
각각의 R2는 독립적으로 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환된다.
패러그래프 2. 패러그래프 1에 있어서, R1은 N, O, 및 S로부터 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 5-6-원 헤테로아릴 고리이고, 상기 헤테로아릴 고리는 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환되는, 화합물.
패러그래프 3. 패러그래프 2에 있어서, R1은 피리디닐, 피리미디닐, 및 피라지닐로부터 선택되고, 이들 각각은 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환되는, 화합물.
패러그래프 4. 패러그래프 2에 있어서, R1은 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된 피리디닐인, 화합물.
패러그래프 5. 패러그래프 4에 있어서, 상기 화학식 (I)의 화합물은 하기로부터 선택되는 화합물:
Figure pct00067
또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
패러그래프 6. 패러그래프 1에 있어서, R1은 N, O, 및 S로부터 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 3-7-원 헤테로사이클로알킬 고리이고, 상기 헤테로사이클로알킬 고리는 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환되는, 화합물.
패러그래프 7. 패러그래프 6에 있어서, R1은 테트라하이드로피라닐, 피페리디닐, 테트라하이드로푸라닐, 및 피롤리디닐로부터 선택되고, 이들 각각은 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환되는, 화합물.
패러그래프 8. 패러그래프 6에 있어서, R1은 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된 테트라하이드로피라닐인, 화합물.
패러그래프 9. 패러그래프 8에 있어서, 상기 화학식 (I)의 화합물은 하기로부터 선택되는 화합물:
Figure pct00068
또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
패러그래프 10. 패러그래프 1에 있어서, R1은 HO-C1-6　알킬 및 NH2-C1-6　알킬로부터 선택되는, 화합물.
패러그래프 11. 패러그래프 1에 있어서, R1은 HO-C1-6　알킬인, 화합물.
패러그래프 12. 패러그래프 1 내지 9 중 어느 하나에 있어서, 각각의 R2는 독립적으로 OH, NH2, C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택되는, 화합물.
패러그래프 13. 패러그래프 1에 있어서, 상기 화학식 (I)의 화합물은 하기 화합물 중 어느 하나로부터 선택되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
Figure pct00069
.
패러그래프 14. 패러그래프 1 내지 13 중 어느 하나의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물.
패러그래프 15.
· 세포에서 Gαs 단백질 커플링된 수용체를 효능화시키고; 그리고/또는
· 세포에서 YAP/TAZ 인산화를 촉진시키고; 그리고/또는
· 세포에서 YAP/TAZ 기능을 억제하고; 그리고/또는
· 세포에서 전구섬유화 유전자의 발현을 억제하고; 그리고/또는
· 세포에서 YAP/TAZ의 핵 국소화를 감소시키고; 그리고/또는
· 세포에서 α-평활근 액틴 (αSMA)의 발현을 억제하고; 그리고/또는
· 세포에 의한 세포외 매트릭스 생성 및 침착을 억제하고; 그리고/또는
· 세포에 의한 세포외 매트릭스 분해를 증진시키는 방법으로서,
상기 방법은 세포와 유효량의 패러그래프 1 내지 13 중 어느 하나의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 접촉시키는 단계를 포함하는, 방법.
패러그래프 16. 패러그래프 15에 있어서, 상기 전구섬유화 유전자는 CTGF, COL1A1, ACTA2, 및 FN로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
패러그래프 17. 패러그래프 15 또는 16에 있어서, 상기 Gαs　단백질 커플링된 수용체는 도파민 수용체인, 방법.
패러그래프 18. 패러그래프 17에 있어서, 상기 도파민 수용체는 도파민 수용체 D1 (DRD1)인, 방법.
패러그래프 19. 패러그래프 18에 있어서, 상기 방법은 D2, D3, D4, 또는 D5 도파민 수용체, 또는 이의 임의의 조합과 비교하여 D1 도파민 수용체를 선택적으로 효능화시키는 단계를 포함하는, 방법.
패러그래프 20. 패러그래프 15 내지 19 중 어느 하나에 있어서, 상기 세포는 중간엽 세포인, 방법.
패러그래프 21. 패러그래프 20에 있어서, 상기 중간엽 세포는 섬유아세포 및 성상 세포로부터 선택되는, 방법.
패러그래프 22. 섬유성 병리를 치료하거나 예방하는 방법으로서, 상기 방법은 치료학적 유효량의 패러그래프 1 내지 13 중 어느 하나의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 또는 패러그래프 14의 약제학적 조성물을 이를 필요로하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
패러그래프 23. 패러그래프 22에 있어서, 상기 섬유성 병리는 간질성 폐 질환 (ILD)인, 방법.
패러그래프 24. 패러그래프 22에 있어서, 상기 섬유성 병리는 폐 섬유증 (PF) 및 특발성 폐 섬유증 (IPF)으로부터 선택되는, 방법.
패러그래프 25. 패러그래프 22에 있어서, 상기 섬유성 병리는 간 조직 섬유증, 심장 섬유증, 신장 섬유증, 및 피부 조직 섬유증으로부터 선택되는, 방법.
패러그래프 26. 패러그래프 22 내지 25 중 어느 하나에 있어서, 섬유성 병리를 치료하는데 유용한 치료학적 유효량의 추가 치료제를 상기 대상체에게 투여하는 단계를 추가로 포함하는, 방법.
패러그래프 27. 패러그래프 26에 있어서, 상기 추가 치료제는 도파민, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염인, 방법.
패러그래프 28. 패러그래프 26에 있어서, 상기 추가 치료제는 도파민 수용체 효능제인, 방법.
패러그래프 29. 패러그래프 28에 있어서, 상기 도파민 수용체 효능제는 ABT-413, A-86929, 디하이드렉시딘 (DHX), 디나프솔린, 디녹실린, 독산트린, SKF-81297, SKF-82958, SKF-38393, 페놀도팜, 6-Br-APB, 스테폴리딘, A-68930, A-77636, CY-208-243, SKF-89145, SKF-89626, 7,8-디하이드록시-5-페닐-옥타하이드로벤조[h]이소퀴놀린, 카버골린, 퍼골라이드, R(-)-2,10,11-트리하이드록시아포르핀, (R)-(-)-아포모르핀, R(-)-프로필노르아포모르핀, R(+)-6-브로모-APB, R(-)-2,10,11-트리하이드록시-N-프로필-노르아포르핀, 6,7-ADTN, 메술러진, N-메틸도파민, 4-하이드록시페네틸아민, 카버골린, 3-하이드록시펜에틸아민, 프라미펙솔, PD-168077, 페놀도팜, (±)-PD 128-907, (±)-2-(N-페닐에틸-N-프로필)아미노-5-하이드록시테트랄린, 브로모크립틴, 로피니롤 , LY-163-502, 디프로필도파민, B-HT 920, 피리베딜, (+)-UH 232, 퍼골라이드, (-)-퀸피롤, R(-)-2,11-디하이드록시-10-메톡시아포모르핀, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염으로부터 선택되는, 방법.
패러그래프 30. 화학식 (II)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
Figure pct00070
상기 식에서,
R1은 H 및 C1-3　알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 또는 디(C1-3　알킬)아미노로부터 임의로 치환되고;
R2, R3, 및 R4는 각각 독립적으로 H, OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환되고;
(i) R2, R3, 및 R4 중 적어도 하나는 H가 아니고;
(ii) R2가 H이고 R3가 OH인 경우, R4는 H 또는 OH가 아니고; 그리고
(iii) R2가 OH인 경우, R3 및 R4중 적어도 하나는 H가 아니다.
패러그래프 31. 패러그래프 30에 있어서, R1은 H인, 화합물.
패러그래프 32. 패러그래프 30에 있어서, R1은 C1-3　알킬인, 화합물.
패러그래프 33. 패러그래프 30에 있어서, R1은 HO-C1-3　알킬 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택되는, 화합물.
패러그래프 34. 패러그래프 30 내지 33 중 어느 하나에 있어서, R2, R3, 및 R4 중 적어도 하나는 SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환되는, 화합물.
패러그래프 35. 패러그래프 30 내지 33 중 어느 하나에 있어서, R2, R3, 및 R4 중 적어도 하나는 NH2, C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택되는, 화합물.
패러그래프 36. 패러그래프 30 내지 33 중 어느 하나에 있어서, R2, R3, 및 R4 중 적어도 하나는 C1-3　알킬인, 화합물.
패러그래프 37. 패러그래프 30 내지 33 중 어느 하나에 있어서,
R3는 OH이고; 그리고
R2는 SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환되는, 화합물.
패러그래프 38. 패러그래프 30 내지 33 중 어느 하나에 있어서,
R3는 OH이고; 그리고
R2는 OH, NH2, C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택되는, 화합물.
패러그래프 39. 패러그래프 30 내지 33 중 어느 하나에 있어서,
R3는 OH이고; 그리고
R4는 SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환되는, 화합물.
패러그래프 40. 패러그래프 30 내지 33 중 어느 하나에 있어서,
R3는 OH이고; 그리고
R4는 NH2, C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택되는, 화합물.
패러그래프 41. 패러그래프 30 내지 33 중 어느 하나에 있어서,
R4는 OH이고; 그리고
R3는 H, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환되는, 화합물.
패러그래프 42. 패러그래프 30 내지 33 중 어느 하나에 있어서,
R4는 OH이고; 그리고
R3는 H, NH2, C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택되는, 화합물.
패러그래프 43. 패러그래프 30 내지 33 중 어느 하나에 있어서,
R2는 OH이고; 그리고
R3 및 R4　중 적어도 하나는 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환되는, 화합물.
패러그래프 44. 패러그래프 30 내지 33 중 어느 하나에 있어서,
R2는 OH이고; 그리고
R3 및 R4 중 적어도 하나는 OH, NH2, C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택되는, 화합물.
패러그래프 45. 패러그래프 30에 있어서, 상기 화학식 (II)의 화합물은 하기 화학식의 화합물:
Figure pct00071
(화합물 1), 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
패러그래프 46. 패러그래프 30에 있어서, 상기 화학식 (II)의 화합물은 하기 화학식의 화합물:
Figure pct00072
(화합물 2), 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
패러그래프 47. 패러그래프 30 내지 46 중 어느 하나의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물.
패러그래프 48.
· 세포에서 Gαs 단백질 커플링된 수용체를 효능화시키고; 그리고/또는
· 세포에서 YAP/TAZ 인산화를 촉진시키고; 그리고/또는
· 세포에서 YAP/TAZ 기능을 억제하고; 그리고/또는
· 세포에서 전구섬유화 유전자의 발현을 억제하고; 그리고/또는
· 세포에서 YAP/TAZ의 핵 국소화를 감소시키고; 그리고/또는
· 세포에서 α-평활근 액틴 (αSMA)의 발현을 억제하고; 그리고/또는
· 세포에 의한 세포외 매트릭스 생성 및 침착을 억제하고; 그리고/또는 세포에 의한 세포외 매트릭스 분해를 증진시키는 방법으로서,
상기 방법은 세포와 유효량의 패러그래프 30 내지 46 중 어느 하나의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 접촉시키는 단계를 포함하는, 방법.
패러그래프 49. 패러그래프 48에 있어서, 상기 전구섬유화 유전자는 CTGF, COL1A1, ACTA2, 및 FN로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
패러그래프 50. 패러그래프 48 또는 49에 있어서, 상기 Gαs 단백질 커플링된 수용체는 도파민 수용체인, 방법.
패러그래프 51. 패러그래프 50에 있어서, 상기 도파민 수용체는 도파민 수용체 D1 (DRD1)인, 방법.
패러그래프 52. 패러그래프 51에 있어서, 상기 방법은 D2, D3, D4, 또는 D5 도파민 수용체, 또는 이의 임의의 조합과 비교하여 D1 도파민 수용체를 선택적으로 효능화시키는 단계를 포함하는, 방법.
패러그래프 53. 패러그래프 48 내지 52 중 어느 하나에 있어서, 상기 세포는 중간엽 세포인, 방법.
패러그래프 54. 패러그래프 53에 있어서, 상기 중간엽 세포는 섬유아세포 및 성상 세포로부터 선택되는, 방법.
패러그래프 55. 섬유성 병리를 치료하거나 예방하는 방법으로서, 상기 방법은 치료학적 유효량의 패러그래프 30 내지 46 중 어느 하나의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 또는 패러그래프 47의 약제학적 조성물을 이를 필요로하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
패러그래프 56. 패러그래프 55에 있어서, 상기 섬유성 병리는 간질성 폐 질환 (ILD)인, 방법.
패러그래프 57. 패러그래프 56에 있어서, 상기 섬유성 병리는 폐 섬유증 (PF) 및 특발성 폐 섬유증 (IPF)으로부터 선택되는, 방법.
패러그래프 58. 패러그래프 55에 있어서, 상기 섬유성 병리는 간 조직 섬유증, 심장 섬유증, 신장 섬유증, 및 피부 조직 섬유증으로부터 선택되는, 방법.
패러그래프 59. 패러그래프 55 내지 58 중 어느 하나에 있어서, 섬유성 병리를 치료하는데 유용한 치료학적 유효량의 추가 치료제를 상기 대상체에게 투여하는 단계를 추가로 포함하는, 방법.
패러그래프 60. 패러그래프 59에 있어서, 상기 추가 치료제는 도파민, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염인, 방법.
패러그래프 61. 패러그래프 59에 있어서, 상기 추가 치료제는 도파민 수용체 효능제인, 방법.
패러그래프 62. 패러그래프 61에 있어서, 상기 도파민 수용체 효능제는 ABT-413, A-86929, 디하이드렉시딘 (DHX), 디나프솔린, 디녹실린, 독산트린, SKF-81297, SKF-82958, SKF-38393, 페놀도팜, 6-Br-APB, 스테폴리딘, A-68930, A-77636, CY-208-243, SKF-89145, SKF-89626, 7,8-디하이드록시-5-페닐-옥타하이드로벤조[h]이소퀴놀린, 카버골린, 퍼골라이드, R(-)-2,10,11-트리하이드록시아포르핀, (R)-(-)-아포모르핀, R(-)-프로필노르아포모르핀, R(+)-6-브로모-APB, R(-)-2,10,11-트리하이드록시-N-프로필-노르아포르핀, 6,7-ADTN, 메술러진, N-메틸도파민, 4-하이드록시페네틸아민, 카버골린, 3-하이드록시펜에틸아민, 프라미펙솔, PD-168077, 페놀도팜, (±)-PD 128-907, (±)-2-(N-페닐에틸-N-프로필)아미노-5-하이드록시테트랄린, 브로모크립틴, 로피니롤 , LY-163-502, 디프로필도파민, B-HT 920, 피리베딜, (+)-UH 232, 퍼골라이드, (-)-퀸피롤, R(-)-2,11-디하이드록시-10-메톡시아포모르핀, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염으로부터 선택되는, 방법.
기타 실시예
본 출원은 이의 상세한 설명과 함께 기재되지만 이전의 개시내용은 첨부된 청구항의 범위에 의해 한정되는, 본 출원의 범위를 예시하고자 하는 것이지 이를 제한하고자 하는 것이 아님을 이해해야 한다. 다른 양상, 이점 및 변형은 하기 청구항의 범위 내에 있다.
SEQUENCE LISTING <110> Mayo Foundation for Medical Education and Research <120> Compounds And Methods For Treating Fibrotic Pathologies <130> 07039-1920WO1 <150> US 62/880,494 <151> 2019-07-30 <160> 54 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 22 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 1 cccagcccta tcagtcatat tg 22 <210> 2 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 2 aggattcatc tgcgagttca g 21 <210> 3 <211> 17 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 3 gtccagcacg aggctca 17 <210> 4 <211> 17 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 4 tcgccttcgt ggtcctc 17 <210> 5 <211> 23 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 5 aagggacaca gaggtttcag tgg 23 <210> 6 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 6 cagcaccagt agcaccatca tttc 24 <210> 7 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 7 gtgaagaaga ggacagcact g 21 <210> 8 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 8 cccattccca ccatcacc 18 <210> 9 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 9 tgtcagtcaa agcaagcccg 20 <210> 10 <211> 24 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 10 ttaggacgct cataagtgtc accc 24 <210> 11 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 11 tcagctacaa tgggatcttg g 21 <210> 12 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 12 tcagctacaa tgggatcttg g 21 <210> 13 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 13 acattcgcta cacaggacat c 21 <210> 14 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 14 ttcccacttc agaacaccag 20 <210> 15 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 15 tgccagtgga tcgacataac 20 <210> 16 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 16 gaaacgtagc gacctgtgta g 21 <210> 17 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 17 gtgcagcgac aaaaggattc 20 <210> 18 <211> 19 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 18 gcggtaggtt gagaggatg 19 <210> 19 <211> 19 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 19 agcgaaaaga gggtcaacg 19 <210> 20 <211> 22 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 20 tgtcattggc acgatagaac tc 22 <210> 21 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 21 gtggcagagt cagatttctc c 21 <210> 22 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 22 ttgttcctga gacgctgttc 20 <210> 23 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 23 gggagatgaa gtttgaggtg g 21 <210> 24 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 24 agatggtctg tatagtccgg g 21 <210> 25 <211> 22 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 25 aaacccagat cgagactcaa ag 22 <210> 26 <211> 20 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 26 acccattccc aaagtagcag 20 <210> 27 <211> 23 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 27 ctccttccag ttttacagca aag 23 <210> 28 <211> 19 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 28 tttccccagt tttctcccc 19 <210> 29 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 29 tgcctaccga caagattgat g 21 <210> 30 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 30 atcccttccc agactttgat g 21 <210> 31 <211> 21 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23 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 39 gacagagtta gtgaatggag acc 23 <210> 40 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 40 aaaagttcgg agagtgtagg c 21 <210> 41 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 41 gagaagccca gccagtcg 18 <210> 42 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 42 ctcttgctct gggcttca 18 <210> 43 <211> 17 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 43 cctgcgaccc acacaag 17 <210> 44 <211> 18 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 44 gacccaccga agacacag 18 <210> 45 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 45 ccagcagcat gatcaaaaca c 21 <210> 46 <211> 22 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> synthetic oligonucleotide primer <400> 46 ggtggctaca tgttagagtg tc 22 <210> 47 <211> 22 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Claims (105)

  1. 하기 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염으로서,
    Figure pct00073

    상기 식에서,
    R1은 HO-C1-6　알킬, NH2-C1-6　알킬, N, O, 및 S로부터 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 포함하는 5-6-원 헤테로아릴 고리, 및 N, O, 및 S로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 포함하는 3-10-원 헤테로사이클로알킬 고리로부터 선택되고;
    여기서 상기 헤테로아릴 고리 및 헤테로사이클로알킬 고리는 각각 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환되고;
    각각의 R2는 독립적으로 할로, OH, C1-3　알콕시, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, C1-3　알콕시, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환되고; 그리고
    R3는 H 및 할로로부터 선택되는, 화합물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 화학식 (I)의 화합물은 하기 화학식
    Figure pct00074
    ,
    을 갖는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
    상기 식에서,
    R1은 HO-C1-6　알킬, NH2-C1-6　알킬, N, O, 및 S로부터 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 5-6-원 헤테로아릴 고리, 및 N, O, 및 S로부터 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 3-7-원 헤테로사이클로알킬 고리로부터 선택되고;
    여기서 상기 헤테로아릴 고리 및 헤테로사이클로알킬 고리는 각각 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환되고; 그리고 각각의 R2는 독립적으로 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환되는, 화합물.
  3. 제1항에 있어서, R1은 N, O, 및 S로부터 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 포함하는 5-6-원 헤테로아릴 고리이고, 이는 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환되는, 화합물.
  4. 제1항 또는 제2항에 있어서, R1은 N, O, 및 S로부터 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 5-6-원 헤테로아릴 고리이고, 이는 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환되는, 화합물.
  5. 제1항에 있어서, R1은 피리디닐, 피리미디닐, 피라지닐, 디아지닐, 트리아지닐, 테트라지닐, 및 펜타지닐로부터 선택되고, 이들 각각은 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환되는, 화합물.
  6. 제1항 또는 제2항에 있어서, R1은 피리디닐, 피리미디닐, 및 피라지닐로부터 선택되고, 이들 각각은 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환되는, 화합물.
  7. 제1항 또는 제2항에 있어서, R1은 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된 피리디닐인, 화합물.
  8. 제7항에 있어서, 상기 화학식 (I)의 화합물은 하기로부터 선택되는 화합물:
    Figure pct00075

    또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
  9. 제7항에 있어서, 상기 화학식 (I)의 화합물은 하기로부터 선택되는 화합물:
    Figure pct00076

    또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
  10. 제1항에 있어서, R1은 N, O, 및 S로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 포함하는 3-10-원 헤테로사이클로알킬 고리이고, 이는 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환되는, 화합물.
  11. 제1항 또는 제2항에 있어서, R1은 N, O, 및 S로부터 선택된 1 또는 2개의 헤테로원자를 포함하는 3-7-원 헤테로사이클로알킬 고리이고, 이는 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환되는, 화합물.
  12. 제10항에 있어서, R1은 테트라하이드로피라닐, 피페리디닐, 테트라하이드로푸라닐, 피롤리디닐, 피라닐, 모르폴리닐, 옥사지닐, 디옥사닐, 디옥시닐, 디아지나닐, 트리아지나닐, 트리옥사닐, 아제파닐, 아제피닐, 옥세파닐, 옥세피닐, 디아제파닐, 디아제피닐, 아조카닐, 아조시닐, 옥소카닐, 옥소시닐, 아조나닐, 아조니닐, 옥소나닐, 및 옥소니닐로부터 선택되고, 이들 각각은 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환되는, 화합물.
  13. 제11항에 있어서, R1은 테트라하이드로피라닐, 피페리디닐, 테트라하이드로푸라닐, 및 피롤리디닐로부터 선택되고, 이들 각각은 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환되는, 화합물.
  14. 제11항에 있어서, R1은 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된 테트라하이드로피라닐인, 화합물.
  15. 제14항에 있어서, 상기 화학식 (I)의 화합물은 하기로부터 선택되는 화합물:
    Figure pct00077

    또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
  16. 제14항에 있어서, 상기 화학식 (I)의 화합물은 하기로부터 선택되는 화합물:
    Figure pct00078

    또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
  17. 제12항에 있어서, 상기 화학식 (I)의 화합물은 하기로부터 선택되는 화합물:
    Figure pct00079

    또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
  18. 제1항 또는 제2항에 있어서, R1은 HO-C1-6　알킬 및 NH2-C1-6　알킬로부터 선택되는, 화합물.
  19. 제1항 또는 제2항에 있어서, R1은 HO-C1-6　알킬인, 화합물.
  20. 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 R2는 독립적으로 할로, OH, C1-3　알콕시, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되는, 화합물.
  21. 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 R2는 독립적으로 OH, NH2, C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택되는, 화합물.
  22. 제1항에 있어서, R3는 H인, 화합물.
  23. 제1항에 있어서, R3는 Cl, F, 및 Br로부터 선택되는, 화합물.
  24. 제1항에 있어서, 상기 화학식 (I)의 화합물은 하기 화합물 중 어느 하나로부터 선택되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
    Figure pct00080

    Figure pct00081
  25. 제1항에 있어서, 상기 화학식 (I)의 화합물은 하기 화합물 중 어느 하나로부터 선택되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
    Figure pct00082
    .
  26. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 화학식 (I)의 화합물은 하기 화합물 중 어느 하나로부터 선택되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
    Figure pct00083
    ,
  27. 하기 화학식 (II)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
    Figure pct00084

    상기 식에서,
    R1은 H 및 C1-3　알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 또는 디(C1-3　알킬)아미노로부터 임의로 치환되고;
    R2, R3, 및 R4는 각각 독립적으로 H, OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3 알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 및 디(C1-　3 알킬)아미노로 임의로 치환되고; 그리고
    R5는 H 및 할로로부터 선택되고;
    R5가 H인 경우:
    (i) R2, R3, 및 R4 중 적어도 하나는 H가 아니고;
    (ii) R2가 H이고 R3가 OH인 경우, R4는 H 또는 OH가 아니고; 그리고
    (iii) R2가 OH인 경우, R3 및 R4중 적어도 하나는 H가 아닌, 화합물.
  28. 제27항에 있어서, 하기 화학식을 갖는 화합물:
    Figure pct00085

    또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
    상기 식에서,
    R1은 H 및 C1-3　알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 또는 디(C1-3　알킬)아미노로부터 임의로 치환되고;
    R2, R3, 및 R4는 각각 독립적으로 H, OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3 알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 및 디(C1-　3 알킬)아미노로 임의로 치환되고;
    (i) R2, R3, 및 R4 중 적어도 하나는 H가 아니고;
    (ii) R2가 H이고 R3가 OH인 경우, R4는 H 또는 OH가 아니고; 그리고
    (iii) R2가 OH인 경우, R3 및 R4중 적어도 하나는 H가 아닌, 화합물.
  29. 제27항 또는 제28항에 있어서, R1은 H인, 화합물.
  30. 제27항 또는 제28항에 있어서, R1은 C1-3　알킬인, 화합물.
  31. 제27항 또는 제28항에 있어서, R1은 HO-C1-3　알킬 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택되는, 화합물.
  32. 제27항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서, R2, R3, 및 R4 중 적어도 하나는 SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환되는, 화합물.
  33. 제27항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서, R2, R3, 및 R4 중 적어도 하나는 NH2, C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택되는, 화합물.
  34. 제27항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서, R2, R3, 및 R4 중 적어도 하나는 C1-3　알킬인, 화합물.
  35. 제27항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서,
    R3는 OH이고; 그리고
    R2는 SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환되는, 화합물.
  36. 제27항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서,
    R3는 OH이고; 그리고
    R2는 OH, NH2, C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택되는, 화합물.
  37. 제27항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서,
    R3는 OH이고; 그리고
    R4는 SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환되는, 화합물.
  38. 제27항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서,
    R3는 OH이고; 그리고
    R4는 NH2, C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택되는, 화합물.
  39. 제27항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서,
    R4는 OH이고; 그리고
    R3는 H, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환되는, 화합물.
  40. 제27항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서,
    R4는 OH이고; 그리고
    R3는 H, NH2, C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택되는, 화합물.
  41. 제27항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서,
    R2는 OH이고; 그리고
    R3 및 R4　중 적어도 하나는 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환되는, 화합물.
  42. 제27항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서,
    R2는 OH이고; 그리고
    R3 및 R4 중 적어도 하나는 OH, NH2, C1-3　알킬, HO-C1-3　알킬, 및 NH2-C1-3　알킬로부터 선택되는, 화합물.
  43. 제27항에 있어서,
    R5는 할로이고; 그리고
    R2, R3, 및 R4는 각각 독립적으로 H, OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 및 디(C1-　3　알킬)아미노로 임의로 치환되는, 화합물.
  44. 제43항에 있어서,
    R2, R3, 및 R4는 각각 독립적으로 H, OH, 및 C1-3　알킬로부터 선택되는, 화합물.
  45. 제43항에 있어서,
    R2, R3, 및 R4는 각각 H인, 화합물.
  46. 제27항에 있어서, R5는 H인, 화합물.
  47. 제27항에 있어서, R5는 Cl, Br, 및 F로부터 선택되는, 화합물.
  48. 제27항에 있어서, 상기 화학식 (II)의 화합물은 하기 화학식의 화합물:
    Figure pct00086
    (화합물 1), 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
  49. 제27항에 있어서, 상기 화학식 (II)의 화합물은 하기 화학식의 화합물:
    Figure pct00087
    (화합물 2), 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
  50. 제27항에 있어서, 상기 화학식 (II)의 화합물은 하기 화합물 중 어느 하나로부터 선택되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
    Figure pct00088
    .
  51. 하기 화학식 (III)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
    Figure pct00089

    상기 식에서,
    X1은 CH2 및 O로부터 선택되고;
    R1은 HO-C1-6　알킬, NH2-C1-6　알킬, N, O, 및 S로부터 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 포함하는 5-6-원 헤테로아릴 고리, 및 N, O, 및 S로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 포함하는 3-10-원 헤테로사이클로알킬 고리로부터 선택되고;
    여기서 상기 헤테로아릴 고리 및 헤테로사이클로알킬 고리는 각각 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환되고;
    각각의 R2는 독립적으로 할로, OH, C1-3　알콕시, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, C1-3　알콕시, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환되고;
    R3는 H 및 할로로부터 선택되고; 그리고
    R4는 H 및 C1-3　알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 또는 디(C1-3　알킬)아미노로부터 임의로 치환되는, 화합물.
  52. 제51항에 있어서, X1은 CH2인, 화합물.
  53. 제51항에 있어서, X1은 O인, 화합물.
  54. 제51항 내지 제53항 중 어느 한 항에 있어서, R3는 H인, 화합물.
  55. 제51항 내지 제53항 중 어느 한 항에 있어서, R3는 할로인, 화합물.
  56. 제51항 내지 제55항 중 어느 한 항에 있어서, R4는 H 및 C1-3　알킬로부터 선택되는, 화합물.
  57. 제56항에 있어서, R4는 H인, 화합물.
  58. 제56항에 있어서, R4는 C1-3　알킬인, 화합물.
  59. 제51항에 있어서, R1은 N, O, 및 S로부터 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 포함하는 5-6-원 헤테로아릴 고리이고, 이는 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환되는, 화합물.
  60. 제51항에 있어서, R1은 피리디닐, 피리미디닐, 피라지닐, 디아지닐, 트리아지닐, 테트라지닐, 및 펜타지닐로부터 선택되고, 이들 각각은 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환되는, 화합물.
  61. 제51항에 있어서, R1은 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된 피리디닐인, 화합물.
  62. 제61항에 있어서, 상기 화학식 (III)의 화합물은 하기로부터 선택되는 화합물:
    Figure pct00090

    또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
  63. 제51항에 있어서, R1은 N, O, 및 S로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 헤테로원자를 포함하는 3-10-원 헤테로사이클로알킬 고리이고, 이는 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환되는, 화합물.
  64. 제63항에 있어서, R1은 테트라하이드로피라닐, 피페리디닐, 테트라하이드로푸라닐, 피롤리디닐, 피라닐, 모르폴리닐, 옥사지닐, 디옥사닐, 디옥시닐, 디아지나닐, 트리아지나닐, 트리옥사닐, 아제파닐, 아제피닐, 옥세파닐, 옥세피닐, 디아제파닐, 디아제피닐, 아조카닐, 아조시닐, 옥소카닐, 옥소시닐, 아조나닐, 아조니닐, 옥소나닐, 및 옥소니닐로부터 선택되고, 이들 각각은 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환되는, 화합물.
  65. 제63항에 있어서, R1은 테트라하이드로피라닐, 피페리디닐, 테트라하이드로푸라닐, 및 피롤리디닐로부터 선택되고, 이들 각각은 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환되는, 화합물.
  66. 제63항에 있어서, R1은 R2로부터 독립적으로 선택된 1, 2, 또는 3개의 치환기로 임의로 치환된 테트라하이드로피라닐인, 화합물.
  67. 제51항에 있어서, 상기 화학식 (III)의 화합물은 하기로부터 선택되는 화합물:
    Figure pct00091

    또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
  68. 제51항에 있어서, R1은 HO-C1-6　알킬 및 NH2-C1-6　알킬로부터 선택되는, 화합물.
  69. 제68항에 있어서, R1은 HO-C1-6　알킬인, 화합물.
  70. 제51항 내지 제69항 중 어느 한 항에 있어서, 각각의 R2는 독립적으로 할로, OH, C1-3　알콕시, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되는, 화합물.
  71. 제51항에 있어서, 상기 화학식 (III)의 화합물은 하기 화합물 중 어느 하나로부터 선택되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
    Figure pct00092

    Figure pct00093

    Figure pct00094
    .
  72. 화학식 (IV)의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
    Figure pct00095

    상기 식에서,
    X1은 CH2 및 O로부터 선택되고;
    X2는 CR3 및 N로부터 선택되고;
    R1은 H 및 C1-3　알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 또는 디(C1-3　알킬)아미노로부터 임의로 치환되고;
    R5는 H 및 할로로부터 선택되고;
    R2, R3, 및 R4는 각각 독립적으로 H, OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3 알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환되고;
    R5가 H이고 X2가 CR3인 경우, R2, R3, 및 R4 중 적어도 하나는 H가 아닌, 화합물.
  73. 제72항에 있어서, X1은 CH2인, 화합물.
  74. 제72항에 있어서, X1은 O인, 화합물.
  75. 제71항 내지 제74항 중 어느 한 항에 있어서, R1는 H 및 C1-3　알킬로부터 선택되는, 화합물.
  76. 제75항에 있어서, R1은 H인, 화합물.
  77. 제75항에 있어서, R1은 C1-3　알킬인, 화합물.
  78. 제72항 내지 제77항 중 어느 한 항에 있어서, R5는 H인, 화합물.
  79. 제72항 내지 제77항 중 어느 한 항에 있어서, R5는 Cl, Br, 및 F로부터 선택되는, 화합물.
  80. 제72항 내지 제79항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화학식 (IV)의 화합물은 하기 화학식을 갖는 화합물:
    Figure pct00096
    ,
    또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
  81. 제80항에 있어서,
    R5는 할로이고; 그리고
    R2, R3, 및 R4는 각각 독립적으로 H, OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 디(C1-3　알킬)아미노, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되고, 여기서 상기 C1-3　알킬은 OH, SH, NH2, C1-3　알킬아미노, 및 디(C1-3　알킬)아미노로 임의로 치환되는, 화합물.
  82. 제81항에 있어서,
    R2, R3, 및 R4는 각각 독립적으로 H, OH, 및 C1-3　알킬로부터 선택되는, 화합물.
  83. 제81항에 있어서,
    R2, R3, 및 R4는 각각 H인, 화합물.
  84. 제80항에 있어서,
    R3는 H이고;
    R5는 H이고; 그리고
    R2 및 R4는 각각 독립적으로 OH 및 C1-3　알킬로부터 선택되는, 화합물.
  85. 제72항 내지 제79항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 화학식 (IV)의 화합물은 하기 화학식을 갖는 화합물:
    Figure pct00097
    ,
    또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
  86. 제85항에 있어서, R2 및 R4는 각각 독립적으로 H, 할로, OH, C1-3　알콕시, C1-3　알킬, 및 C1-3　할로알킬로부터 선택되는, 화합물.
  87. 제72항에 있어서, 상기 화학식 (IV)의 화합물은 하기 화합물 중 어느 하나로부터 선택되는 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염:
    Figure pct00098

    Figure pct00099
    .
  88. 제1항 내지 제87항 중 어느 한 항에 따른 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물.
  89. · 세포에서 Gαs 단백질 커플링된 수용체를 효능화시키고; 그리고/또는
    · 세포에서 YAP/TAZ 인산화를 촉진시키고; 그리고/또는
    · 세포에서 YAP/TAZ 기능을 억제하고; 그리고/또는
    · 세포에서 전구섬유화 유전자의 발현을 억제하고; 그리고/또는
    · 세포에서 YAP/TAZ의 핵 국소화를 감소시키고; 그리고/또는
    · 세포에서 α-평활근 액틴 (αSMA)의 발현을 억제하고; 그리고/또는
    · 세포에 의한 세포외 매트릭스 생성 및 침착을 억제하고; 그리고/또는
    · 세포에 의한 세포외 매트릭스 분해를 증진시키는 방법으로서,
    상기 방법은 세포를 유효량의 제1항 내지 제87항 중 어느 한 항의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염과 접촉시키는 단계를 포함하는, 방법.
  90. 제89항에 있어서, 상기 YAP/TAZ 인산화는 YAP 세린 127의 인산화를 포함하는, 방법.
  91. 제89항 또는 제90항에 있어서, 상기 YAP/TAZ 인산화는 TAZ 세린 89의 인산화를 포함하는, 방법.
  92. 제89항 내지 제91항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 전구섬유화 유전자는 CTGF, COL1A1, ACTA2, 및 FN로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
  93. 제89항 내지 제91항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 Gαs　단백질 커플링된 수용체는 도파민 수용체인, 방법.
  94. 제93항에 있어서, 상기 도파민 수용체는 도파민 수용체 D1 (DRD1)인, 방법.
  95. 제94항에 있어서, 상기 방법은 D2, D3, D4, 또는 D5 도파민 수용체, 또는 이의 임의의 조합과 비교하여 D1 도파민 수용체를 선택적으로 효능화시키는 단계를 포함하는, 방법.
  96. 제89항 내지 제95항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 세포는 중간엽 세포인, 방법.
  97. 제96항에 있어서, 상기 중간엽 세포는 섬유아세포 및 성상 세포로부터 선택되는, 방법.
  98. 섬유성 병리를 치료하거나 예방하는 방법으로서, 상기 방법은 치료학적 유효량의 제1항 내지 제87항 중 어느 한 항의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염, 또는 제88항의 약제학적 조성물을 이를 필요로하는 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  99. 제98항에 있어서, 상기 섬유성 병리는 간질성 폐 질환 (ILD)인, 방법.
  100. 제98항에 있어서, 상기 섬유성 병리는 폐 섬유증 (PF) 및 특발성 폐 섬유증 (IPF)으로부터 선택되는, 방법.
  101. 제98항에 있어서, 상기 섬유성 병리는 간 조직 섬유증, 심장 섬유증, 신장 섬유증, 및 피부 조직 섬유증으로부터 선택되는, 방법.
  102. 제98항 내지 제101항 중 어느 한 항에 있어서, 섬유성 병리를 치료하는데 유용한 치료학적 유효량의 추가 치료제를 상기 대상체에게 투여하는 단계를 추가로 포함하는, 방법.
  103. 제102항에 있어서, 상기 추가 치료제는 도파민, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염인, 방법.
  104. 제102항에 있어서, 상기 추가 치료제는 도파민 수용체 효능제인, 방법.
  105. 제104항에 있어서, 상기 도파민 수용체 효능제는 ABT-413, A-86929, 디하이드렉시딘 (DHX), 디나프솔린, 디녹실린, 독산트린, SKF-81297, SKF-82958, SKF-38393, 페놀도팜, 6-Br-APB, 스테폴리딘, A-68930, A-77636, CY-208-243, SKF-89145, SKF- 89626, 7,8-디하이드록시-5-페닐-옥타하이드로벤조[h]이소퀴놀린, 카버골린, 퍼골라이드, R(-)-2,10,11-트리하이드록시아포르핀, (R)-(-)-아포모르핀, R(-)- 프로필노르아포모르핀, R(+)-6-브로모-APB, R(-)-2,10,11-트리하이드록시-N- 프로필-노르아포르핀, 6,7-ADTN, 메술러진, N-메틸도파민, 4- 하이드록시페네틸아민, 카버골린, 3-하이드록시펜에틸아민, 프라미펙솔, PD-168077, 페놀도팜, (±)-PD 128-907, (±)-2-(N- 페닐에틸-N-프로필)아미노-5-하이드록시테트랄린, 브로모크립틴, 로피니롤 , LY-163-502, 디프로필도파민, B-HT 920, 피리베딜, (+)-UH 232, 퍼골라이드, (-)-퀸피롤, R(-)-2,11-디하이드록시-10-메톡시아포모르핀, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염으로부터 선택되는, 방법.
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Publication number Priority date Publication date Assignee Title
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US4963568A (en) 1989-05-31 1990-10-16 Abbott Laboratories Dopamine agonists
US5304121A (en) 1990-12-28 1994-04-19 Boston Scientific Corporation Drug delivery system making use of a hydrogel polymer coating
US5994341A (en) 1993-07-19 1999-11-30 Angiogenesis Technologies, Inc. Anti-angiogenic Compositions and methods for the treatment of arthritis
US6099562A (en) 1996-06-13 2000-08-08 Schneider (Usa) Inc. Drug coating with topcoat
WO1996038435A1 (en) * 1995-05-30 1996-12-05 Abbott Laboratories Dopamine agonists
US6004982A (en) * 1997-09-15 1999-12-21 Hoechst Marion Roussel, Inc. 4-piperidinyl) H-2-benzopyran derivatives useful as antipsychotic agents
EP1392262A1 (en) 2001-05-24 2004-03-03 Alexza Molecular Delivery Corporation Delivery of drug esters through an inhalation route
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