JP2022514017A - 医薬の組み合わせ - Google Patents

Abstract

本発明は、ＨＤＭ２－ｐ５３相互作用阻害薬（Ｓ）－５－（５－クロロ－１－メチル－２－オキソ－１，２－ジヒドロ－ピリジン－３－イル）－６－（４－クロロ－フェニル）－２－（２，４－ジメトキシ－ピリミジン－５－イル）－１－イソプロピル－５，６－ジヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，４－ｄ］イミダゾール－４－オン［ＨＤＭ２０１］と、ＴＩＭ－３阻害剤としての抗ＴＩＭ－３抗体分子との組み合わせに関する。本発明は、癌、特に血液腫瘍の処置における前記組み合わせの使用にさらに関する。本発明は、この組み合わせ癌処置に関連する用量及び投与レジメンにさらに関する。

Description

本発明は、ＨＤＭ２－ｐ５３相互作用阻害薬（Ｓ）－５－（５－クロロ－１－メチル－２－オキソ－１，２－ジヒドロ－ピリジン－３－イル）－６－（４－クロロ－フェニル）－２－（２，４－ジメトキシ－ピリミジン－５－イル）－１－イソプロピル－５，６－ジヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，４－ｄ］イミダゾール－４－オン［ＨＤＭ２０１］と、ＴＩＭ－３阻害剤としての抗ＴＩＭ－３抗体分子との組み合わせに関する。本発明は、癌、特に血液腫瘍の処置における前記組み合わせの使用にさらに関する。本発明は、この組み合わせ癌処置に関連する用量及び投与レジメンにさらに関する。

配列表
本願は、ＡＳＣＩＩ形式で電子的に提出された配列表を含み、この配列表は、全体として参照により本明細書に援用される。前記ＡＳＣＩＩ複製物は、２０１９年１２月１６日に作成され、ＰＡＴ０５８３８１－ＷＯ－ＰＣＴ＿ＳＬ．ｔｘｔという名称であり、サイズが２３４，１２１バイトである。

ＴＩＭ－３阻害剤
ナイーブＣＤ４＋Ｔヘルパー細胞の活性化の結果、少なくとも２つの別個のエフェクター集団、Ｔｈ１細胞及びＴｈ２細胞が発生する。米国特許第７，４７０，４２８号明細書、Ｍｏｓｍａｎｎ Ｔ Ｒ ｅｔ ａｌ．（１９８６）Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １３６：２３４８－５７；Ｍｏｓｍａｎｎ Ｔ Ｒ ｅｔ ａｌ．（１９９６）Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｔｏｄａｙ １７：１３８－４６；Ａｂｂａｓ Ａ Ｋ ｅｔ ａｌ．（１９９６）Ｎａｔｕｒｅ ３８３：７８７－７９３を参照されたい。Ｔｈ１細胞は、細胞内病原体に対する細胞介在性の免疫反応、遅延型過敏反応（Ｓｈｅｒ Ａ ｅｔ ａｌ．（１９９２）Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ １０：３８５－４０９）及び臓器特異的自己免疫疾患の誘導（Ｌｉｂｌａｕ Ｒ Ｓ ｅｔ ａｌ．（１９９５）Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｔｏｄａｙ １６：３４－３８）と一般に関連するサイトカイン（例えば、インターフェロンガンマ、インターロイキン－２、腫瘍壊死因子アルファ及びリンホトキシン）を産生する。Ｔｈ２細胞は、細胞外蠕虫感染症の制御に重要であり、アトピー性及びアレルギー性疾患を促進するサイトカイン（例えば、ＩＬ－４、ＩＬ－１０及びＩＬ－１３）を産生する（Ｓｈｅｒ Ａ ｅｔ ａｌ．（１９９２）Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ １０：３８５－４０９）。疾患におけるそれらの別個の役割に加えて、Ｔｈ１及びＴｈ２細胞は、互いの拡大及び機能を交差調節する。従って、Ｔｈ２細胞の優先的な誘導は、自己免疫疾患を阻害し（Ｋｕｃｈｒｏｏ Ｖ Ｋ ｅｔ ａｌ．（１９９５）Ｃｅｌｌ ８０：７０７－１８；Ｎｉｃｈｏｌｓｏｎ Ｌ Ｂ ｅｔ ａｌ．（１９９５）Ｉｍｍｕｎｉｔｙ ３：３９７－４０５）、Ｔｈ１細胞の優勢な誘導は、喘息、アトピー及びアレルギーの誘導を調節し得る（Ｌａｃｋ Ｇ ｅｔ ａｌ．（１９９４）Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １５２：２５４６－５４；Ｈｏｆｓｔｒａ Ｃ Ｌ ｅｔ ａｌ．（１９９８）Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ １６１：５０５４－６０）。

ＴＩＭ－３は、例えば、ＩＦＮ－γを分泌するＴｈ１（Ｔヘルパー１）ＣＤ４＋細胞及び細胞傷害性ＣＤ８＋Ｔ細胞上で発現される膜貫通受容体タンパク質である。ＴＩＭ－３は、一般に、ナイーブＴ細胞上で発現されないが、むしろ活性化されたエフェクターＴ細胞上で上方制御される。ＴＩＭ－３は、インビボで免疫及び寛容性を調節することにおいて役割を有する。（Ｈａｓｔｉｎｇｓ ｅｔ ａｌ．，Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００９；３９（９）：２４９２－５０１を参照されたい）。従って、癌などの疾患を処置するための抗ＴＩＭ－３抗体分子に対する投与レジメン及び処方物を含め、ＴＩＭ－３機能及びＴＩＭ－３発現細胞の機能を調節する新規治療アプローチが必要とされている。

ＨＤＭ２０１
ｐ５３は、異常な増殖シグナル、ＤＮＡ損傷、紫外線及びプロテインキナーゼ阻害剤等の多くの潜在的な腫瘍形成過程により誘発及び活性化され（Ｍｉｌｌａｒｄ Ｍ，ｅｔ ａｌ．Ｃｕｒｒ Ｐｈａｒｍ Ｄｅｓｉｇｎ ２０１１；１７：５３６－５５９）、細胞増殖停止、ＤＮＡ修復、アポトーシス及び血管新生を制御する遺伝子を調節する（Ｂｕｌｌｏｃｋ ＡＮ＆Ｆｅｒｓｈｔ ＡＲ．Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｃａｎｃｅｒ ２００１；１：６８－７６；Ｖｏｇｅｌｓｔｅｉｎ Ｂ，ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ ２０１０；３（９）：６）。

ヒト二重微小染色体－２（ＨＤＭ２）は、ｐ５３の最も重要な調節因子の１つである。ＨＤＭ２は、ｐ５３に直接結合し、ｐ５３のトランス活性化を阻害し、その後、ｐ５３を細胞質分解に導く（Ｚｈａｎｇ Ｙ，ｅｔ ａｌ．Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ ２０１０；３８：６５４４－６５５４）。

ｐ５３は、ＴＰ５３遺伝子の直接変異（全てのヒト癌の約５０％で見られる）（Ｖｏｇｅｌｓｔｅｉｎ，Ｂ ｅｔ ａｌ．Ｎａｔｕｒｅ ２０００；４０８：３０７－３１０）又はＨＤＭ２の過剰発現等の抑制機序（Ｚｈａｏ Ｙ，ｅｔ ａｌ．ＢｉｏＤｉｓｃｏｖｅｒｙ ２０１３；８：４）の何れかを介してヒト癌で最も頻繁に不活性化されるタンパク質の１つである。

ＨＤＭ２－ｐ５３相互作用の強力且つ選択的な阻害剤（ＨＤＭ２阻害剤又はＭＤＭ２阻害剤とも称される）、例えばＮＶＰ－ＨＤＭ２０１（本明細書ではＨＤＭ２０１と称される）は、前臨床細胞モデル及びインビボモデルにおいてｐ５３の機能を回復させることが分かっている（Ｈｏｌｚｅｒ Ｐ，ｅｔ ａｌ．ＡＡＣＲ ２０１６，Ａｂｓｔｒａｃｔ ＃４８５５，Ｈｏｌｚｅｒ Ｐ，Ｃｈｉｍｉａ ２０１７，７１（１０），７１６－７２１で発表されたポスター）。

ＨＤＭ２阻害剤ＨＤＭ２０１、即ち（Ｓ）－５－（５－クロロ－１－メチル－２－オキソ－１，２－ジヒドロ－ピリジン－３－イル）－６－（４－クロロ－フェニル）－２－（２，４－ジメトキシ－ピリミジン－５－イル）－１－イソプロピル－５，６－ジヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，４－ｄ］イミダゾール－４－オン及びその調製方法は、例えば、国際公開第２０１３／１１１１０５号パンフレットで開示された。

ＨＤＭ２阻害剤に関して様々な投与レジメンが説明されており、臨床研究で試験された。例えば、米国特許出願公開第２０１３／０２４５０８９号明細書には、癌に罹患している患者を処置する方法であって、この患者に、２８日処置サイクルの１～７日目に、最大約７日の投与期間にわたり約８００～約３０００ｍｇ／日の量で４－｛［（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－４－（４－クロロ－２－フルオロ－フェニル）－３－（３－クロロ－２－フルオロ－フェニル）－４－シアノ－５－（２，２－ジメチル－プロピル）－ピロリジン－２－カルボニル］－アミノ｝－３－メトキシ－安息香酸を投与し、その後の約２１～約２３日の休止期間により患者を処置する方法が開示されている。

２０１４年５月のＢ．Ｈｉｇｇｉｎｓ ｅｔ ａｌ．によるＣｌｉｎｉｃａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈにおける論文（Ｈｉｇｇｉｎｓ Ｂ．ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｅｃｌｉｎｉｃａｌ Ｏｐｔｉｍｉｓａｔｉｏｎ ｏｆ ＭＤＭ２ Ａｎｔａｇｏｎｉｓｔ Ｓｃｈｅｄｕｌｉｎｇ ｆｏｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｂｙ Ｕｓｉｎｇ ａ Ｍｏｄｅｌ－Ｂａｓｅｄ Ａｐｐｒｏａｃｈ．Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ２０１４；２０：３７４２－３７５２）は、２８日サイクルのスケジュールを開示し、ＲＧ７３８８を週に１回で３回投与し、続いて１３日間休薬する（２８日サイクルスケジュール）か又は２８日スケジュールの５連続日にわたり薬物を投与する。

ＨＤＭ２阻害剤に対するさらなる投与レジメン、例えば断続的な高用量投与レジメン及び期間延長低用量レジメンは、国際公開第２０１５／１９８２６６号パンフレット、同第２０１８／０９２０２０号パンフレット及び同第２０１８／１７８９２５号パンフレットに開示されている。

しかし、後の処置サイクルにおける骨髄芽球上での薬物効果を制限する長期血小板枯渇及び／又は疾患抵抗性は、ＨＭＤ２阻害剤を含む治療で共通する課題である。従って、有害作用を最小限にするためにこれらの抗癌薬の用量及びレジメンを最適化することが依然として必要とされている。

組み合わせ
癌単剤療法は、持続的な有効性の欠如及び／又は安全性問題によって左右されることが多い。相乗効果を示す組み合わせパターンに基づく組み合わせ癌療法は、長期有効性の実質的な向上及び安全性プロファイルの改善という長所を提供する。この理由のために、抗癌薬の組み合わせについて研究することが依然として求められている。

癌処置のための新規組み合わせ：ＨＤＭ２－ｐ５３相互作用阻害薬ＨＤＭ２０１及び抗ＴＩＭ－３抗体分子を発見された。

あるタイプの投与レジメンは、抗ＴＩＭ－３抗体分子と組み合わせたＨＤＭ２阻害剤ＨＤＭ２０１での血液腫瘍の処置に特に有用であることがさらに分かった。

具体的には、本発明は、以下の実施形態で挙げられるように、それぞれ単独で又は組み合わせて以下の態様、有利な特性及び特定の実施形態を提供する。

１．ＨＤＭ２－ｐ５３相互作用阻害薬（Ｓ）－５－（５－クロロ－１－メチル－２－オキソ－１，２－ジヒドロ－ピリジン－３－イル）－６－（４－クロロ－フェニル）－２－（２，４－ジメトキシ－ピリミジン－５－イル）－１－イソプロピル－５，６－ジヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，４－ｄ］イミダゾール－４－オン［ＨＤＭ２０１］又はその薬学的に許容可能な非共有結合誘導体（塩、溶媒和物、水和物、錯体、共結晶を含む）と、抗ＴＩＭ－３抗体分子との組み合わせ。
２．抗ＴＩＭ－３抗体分子は、配列番号８０１のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号８０２又は８２０のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列及び配列番号８０３のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）と；配列番号８１０のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号８１１のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列及び配列番号８１２のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域とを含む、実施形態１に記載の組み合わせ。
３．抗ＴＩＭ－３抗体分子は、配列番号８０１のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号８０２のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列及び配列番号８０３のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＨと；配列番号８１０のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号８１１のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列及び配列番号８１２のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬとを含む、実施形態１に記載の組み合わせ。
４．抗ＴＩＭ－３抗体分子は、配列番号８０６のアミノ酸配列を含むＶＨと、配列番号８１６のアミノ酸配列を含むＶＬとを含む、実施形態２～３の何れか１つに記載の組み合わせ。
５．抗体分子は、配列番号８０８のアミノ酸配列を含む重鎖と、配列番号８１８のアミノ酸配列を含む軽鎖とを含む、実施形態２～４の何れか１つに記載の組み合わせ。
６．抗体分子は、配列番号８０１のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号８２０のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列及び配列番号８０３のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＨと；配列番号８１０のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号８１１のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列及び配列番号８１２のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬとを含む、実施形態１～３の何れか１つに記載の組み合わせ。
７．抗体分子は、配列番号８２２のアミノ酸配列を含むＶＨと、配列番号８２６のアミノ酸配列を含むＶＬとを含む、実施形態１～３及び６の何れか１つに記載の組み合わせ。
８．抗体分子は、配列番号８２４のアミノ酸配列を含む重鎖と、配列番号８２８のアミノ酸配列を含む軽鎖とを含む、実施形態１～３及び６～７の何れか１つに記載の組み合わせ。
９．癌の処置での使用のための、実施形態１～８の何れか１つに記載の組み合わせ。
１０．癌は、血液腫瘍である、実施形態９に記載の癌の処置での使用のための組み合わせ。
１１．血液腫瘍は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、好ましくは再発／難治性ＡＭＬ又は初回（１Ｌ）ＡＭＬ（新規及び二次ＡＭＬの両方を含む）である、実施形態１０に記載の癌の処置での使用のための組み合わせ。
１２．血液腫瘍は、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、好ましくは高リスクＭＤＳ（ｒＩＰＳＳ（改定国際予後判定システム）による高及び超高リスクＭＤＳを含む）である、実施形態１１に記載の癌の処置での使用のための組み合わせ。
１３．癌は、ＴＰ５３野生型腫瘍である、実施形態９～１２の何れか１つに記載の癌の処置での使用のための組み合わせ。
１４．ＨＤＭ２０１は、２８日処置サイクルの最初の３～７日のそれぞれ、好ましくは最初の４～６日のそれぞれ、より好ましくは最初の５日のそれぞれに投与され；
ＨＤＭ２０１処置は、少なくとも３回の２８日処置サイクルから構成され、
１回目及び２回目の処置サイクル（即ち誘導サイクル）のためのＨＤＭ２０１の１日薬物用量は、５０ｍｇ～１００ｍｇ、好ましくは５０ｍｇ～８０ｍｇ、より好ましくは６０ｍｇ～８０ｍｇ、さらにより好ましくは６０ｍｇであり、且つ３回目及び任意のそれ以降の処置サイクル（即ち地固めサイクル）のための１日のＨＤＭ２０１用量は、１０ｍｇ～４５ｍｇ、好ましくは２０ｍｇ～４０ｍｇ、より好ましくは３０ｍｇ～４０ｍｇ、さらにより好ましくは４０ｍｇである、先行する実施形態１０～１３の何れか１つに記載の癌の処置での使用のための組み合わせ。
１５．ＨＤＭ２０１は、２８日処置サイクルの最初の５日のそれぞれに投与され、
ＨＤＭ２０１処置は、少なくとも３回の２８日処置サイクルから構成され、
誘導サイクル（サイクル１及び２）の１日のＨＤＭ２０１用量は、６０ｍｇ～８０ｍｇであり、地固めサイクル（サイクル３及びそれ以降）の１日のＨＤＭ２０１用量は、４０ｍｇである、実施形態１０～１３の何れか１つに記載の癌の処置での使用のための組み合わせ。
１６．抗ＴＩＭ－３抗体分子は、４週間ごとに１回４００ｍｇ、２週間ごとに１回４００ｍｇ又は４週間ごとに１回８００ｍｇ、好ましくは２週間ごとに１回４００ｍｇ又は４週間ごとに１回８００ｍｇの１日用量で投与される、実施形態９～１５の何れか１つに記載の癌の処置での使用のための組み合わせ。
１７．ＨＤＭ２０１は、２８日処置サイクルの最初の５日のそれぞれに投与され、ＨＤＭ２０１処置は、少なくとも３回の２８日処置サイクルから構成され、誘導サイクル（サイクル１及び２）の１日のＨＤＭ２０１用量は、６０ｍｇ～８０ｍｇであり、地固めサイクル（サイクル３及びそれ以降）の１日のＨＤＭ２０１用量は、４０ｍｇであり、
抗ＴＩＭ－３抗体分子は、２週間ごとに１回４００ｍｇ又は４週間ごとに１回８００ｍｇの１日用量で投与される、実施形態９～１３の何れか１つに記載の癌の処置での使用のための組み合わせ。
１８．ＨＤＭ２０１は、非共有結合誘導体として存在し、好ましくは、前記非共有結合誘導体は、塩、溶媒和物、水和物、錯体及び共結晶からなる群から選択され、より好ましくは、非共有結合誘導体は、共結晶であり、さらにより好ましくはコハク酸共結晶として、さらにより好ましくは１：１（モル比）コハク酸：ＨＤＭ２０１共結晶として存在する、実施形態１～１７の何れか１つに記載の組み合わせ又は癌の処置での使用のための組み合わせ。
１９．１つ以上の他の抗癌剤をさらに含み、好ましくは、前記抗癌剤は、癌免疫薬（例えば、ＰＤ－１［例えば、ＰＤＲ００１（Ｎｏｖａｒｔｉｓ，ＩＮＮ スパルタリズマブ）］、ＰＤ－Ｌ１、ＬＡＧ－３、ＧＴＩＲ、ＴＧＦ－ベータ、ＩＬ１５阻害剤）、ＦＬＴ３阻害剤（例えば、ギルテリニブ（ｇｉｌｔｅｒｉｎｉｂ）、キザルチニブ、ミドスタウリン）、ＢＣＬ２阻害剤（例えば、ナビトクラックス、ベネトクラックス）、他のＨＤＭ２阻害剤（例えば、イダサヌトリン、ＡＭＧ２３２、ＤＳ－３０３２Ｂ、ＡＬＲＮ６９２４／ＡＴＳＰ７０４１）、低メチル化剤（ＨＭＡ）（例えば、Ｖｉｄａｚａ［アザシチジン、５－アザシチジン］、Ｄａｃｏｇｅｎ［デシタビン］、グアデシタビン）、アントラサイクリン（例えば、イダルビシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、ルビドマイシン）；抗ＣＤ３３抗体（例えば、マイロターグ［ゲムツズマブ］、バダスツキシマブ）及び他の薬剤（例えば、ＡｒａＣ［シタラビン、アラシチン］）から選択される、実施形態１～１８の何れか１つに記載の組み合わせ又は癌の処置での使用のための組み合わせ。
２０．１つ以上の他の抗癌剤をさらに含み、好ましくは、前記抗癌剤は、シタラビン（Ａｒａ－Ｃ）、アントラサイクリン、ダウノルビシン、イダルビシン、ルビドマイシン、イダマイシン、ミドスタウリン及びアザシチジンから選択される、実施形態１～１９の何れか１つに記載の組み合わせ又は癌の処置での使用のための組み合わせ。

本発明の組み合わせ療法は、実質的な長期有効性向上及び安全性プロファイル改善という長所を提供する。

上記のような本発明の投与レジメンは、非常に好都合な治療指数、治療に関連する曝露を達成する一方、グレード３／４血小板減少症の低発生率、ｐ５３経路活性化（ＧＤＦ－１５上方制御）及び臨床活性をもたらす。

特に、上記のような本発明の投与レジメンは、その後の処置サイクル（サイクル３及びそれ以降）での安全性を効果的に管理しながら、最初の２回の処置サイクル内で良好な骨髄（ＢＭ）芽球応答を提供する。図３、変形形態２及び図６～７を参照されたい。

以下の記載では、以下の付随する図面を参照して本発明を詳細に記載する。

臨床試験ＣＨＤＭ２０１Ｘ２１０１からの個々の血小板（ＰＬＴ）プロファイル（レジメン２Ｃ、即ちｄ１－７ｑ２８ｄ、４５ｍｇ）の例を示す。 ＰＬＴプロファイルにおける投与レジメン２Ｃ（１日用量４５ｍｇ ＨＤＭ２０１でｄ１－ｄ７ｑ２８ｄ）の影響が回復なく限定されることを示す。長期血小板枯渇、ＰＬＴ（Ｇ／Ｌ）対時間（ｄ）、中央値及び四分位範囲。芽球カイネティクスにおける投与レジメンの影響をさらに示す：４５ｍｇ １日用量ＨＤＭ２０１でのレジメン２Ｃは、良好なＢＭ芽球枯渇を達成する。早期及び低い最下点。ＢＭ芽球（％）対時間（ｄ）。 レジメン２Ｃ変形形態１、２及び３に対する模擬プロファイルを示す。変形形態１：６０ｍｇ（４サイクル）；変形形態２：６０ｍｇ（２サイクル）→３０ｍｇ（２サイクル）；変形形態３：６０ｍｇ（２サイクル）→０。変形形態２～３は、続くサイクル（サイクル３及び４）において、安全性を管理しながら、最初の２サイクル内でＢＭ芽球応答を最大にするための用量を提供する。 続くサイクル（サイクル３～５）において、安全性を管理しながら、最初の２サイクル内でＢＭ芽球応答を最大にするためのＨＤＭ２０１Ｘ２１０１用量からの血小板（ＰＬＴ）及び骨髄（ＢＭ）芽球指標のシミュレーションを示す。 続くサイクル（サイクル３～５）において、安全性を管理しながら、最初の２サイクル内でＢＭ芽球応答を最大にするためのＨＤＭ２０１Ｘ２１０１用量からの血小板（ＰＬＴ）及び骨髄（ＢＭ）芽球指標のシミュレーションを示す。 続くサイクル（サイクル３～５）において、安全性を管理しながら、最初の２サイクル内でＢＭ芽球応答を最大にするためのＨＤＭ２０１Ｘ２１０１用量からの血小板（ＰＬＴ）及び骨髄（ＢＭ）芽球指標のシミュレーションを示す。 続くサイクル（サイクル３～５）において、安全性を管理しながら、最初の２サイクル内でＢＭ芽球応答を最大にするためのＨＤＭ２０１Ｘ２１０１用量からの血小板（ＰＬＴ）及び骨髄（ＢＭ）芽球指標のシミュレーションを示す。 抗ＴＩＭ３抗体とのＨＤＭ２０１の組み合わせ：カプランマイヤー生存データ ＨＤＭ２０１と抗ＴＩＭ３抗体との組み合わせにより、長期生存のマウス数が増加した。Ｂａｌｂ／ｃマウスの皮下に２×１０^５個のＣｏｌｏｎ２６細胞を移植した。細胞移植後第１０、１７及び２４日に３ｈごとに４０ｍｇ／ｋｇ×３でマウスをＨＤＭ２０１によりｐｏで処置し、第１０、１３、１７及び２０日に５ｍｇ／ｋｇ ｉｐで抗Ｔｉｍ３抗体（マウス交差反応性クローン５Ｄ１２）により処置した。エンドポイントは、１０００ｍｍ^３以上の腫瘍体積として定義した。ログランク、ｐ＜０．０５。

以下では、本発明をさらに詳細に説明し、例示する。

定義
以下において且つ本願全体を通してさらなる用語を定義する。

本明細書で使用されるとき、冠詞「１つの（ａ）」及び「１つの（ａｎ）」は、その冠詞の文法上の指示対象の１つ又は２つ以上（例えば、少なくとも１つ）を指す。

用語「又は」は、本明細書では、文脈上特に明らかに指示されない限り、用語「及び／又は」を意味して使用され、且つそれと同義的に使用される。

「約」及び「近似的に」は、概して、測定の性質又は精度を所与として測定された分量についての許容できる誤差の程度を意味するものとする。例示的な誤差の程度は、所与の値又は値の範囲の２０パーセント（％）以内、典型的には１０％以内及びより典型的には５％以内である。

「組み合わせ」又は「～と組み合わせて」とは、その療法又は治療用薬剤を同じ時点で投与しなければならず、且つ／又は一緒に送達するために製剤化しなければならないことを含意するように意図するものではないが、しかし、そうした送達方法は、本明細書に記載される範囲内にある。本組み合わせにおける治療用薬剤は、１つ以上の他の追加の療法又は治療用薬剤と同時、その前又はその後に投与することができる。治療用薬剤又は療法プロトコルは、いかなる順序でも投与することができる。一般に、各薬剤は、その薬剤について決められた用量及び／又はタイムスケジュールで投与されることになる。さらに、この組み合わせに利用される追加の治療用薬剤は、単一の組成物で一緒に投与されるか又は異なる組成物で個別に投与され得ることが理解されるであろう。一般に、組み合わせに利用される追加の治療用薬剤は、それが個々に利用されるレベルを超えないレベルで利用されることが予想される。一部の実施形態において、組み合わせに利用されるレベルは、個々に利用されるレベルよりも低くなるであろう。

「ＨＤＭ２－ｐ５３相互作用阻害剤」又は略して「ＨＤＭ２阻害剤」という用語は、「ＨＤＭ２ｉ」、「Ｈｄｍ２ｉ」、「ＭＤＭ２阻害剤」、「ＭＤＭ２ｉ」、「Ｍｄｍ２ｉ」とも呼ばれ、本明細書中では、時間分解蛍光エネルギー移動（ＴＲ－ＦＲＥＴ）アッセイにより測定して１０μＭ未満、好ましくは１μＭ未満、好ましくはｎＭの範囲のＩＣ_５０を有するＨＤＭ－２／ｐ５３又はＨＤＭ－４／ｐ５３相互作用を阻害するあらゆる化合物を指す。ｐ５３－Ｈｄｍ２及びｐ５３－Ｈｄｍ４相互作用の阻害は、時間分解蛍光エネルギー移動（ＴＲ－ＦＲＥＴ）により測定される。蛍光エネルギー移動（又はＦｏｅｒｓｔｅｒ共鳴エネルギー移動）は、ドナーとアクセプターとの間の５つの蛍光分子のエネルギー移動を述べる。このアッセイに対して、Ｃ末端ビオチン部分がタグ付加されたＭＤＭ２タンパク質（アミノ酸２～１８８）及びＭＤＭ４タンパク質（アミノ酸２～１８５）を、ドナーフルオロフォアとしての役割を果たすユーロピウム標識ストレプトアビジンと組み合わせて使用する（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ，ＵＳＡ）。ｐ５３由来のＣｙ５標識ペプチドＣｙ５－ＴＦＳＤＬＷＫＬＬ（配列番号１００７）（ｐ５３ ａａ１８～２６は、エネルギーアクセプターである。３４０ｎｍでのドナー１０分子の励起時、ＭＤＭ２又はＭＤＭ４とｐ５３ペプチドとの間の結合相互作用は、エネルギー移動及び６６５ｎｍのアクセプター発光波長での応答促進を誘導する。ＭＤＭ２又はＭＤＭ４のｐ５３結合部位への阻害剤分子結合に起因するｐ５３－ＭＤＭ２又はｐ５３－ＭＤＭ４錯体の形成の破壊の結果、６１５ｎｍでのドナー発光が増加する。比率計測ＦＲＥＴアッセイ読み取りは、時間分解モードで測定した２つの別個の蛍光シグナルの１５個の生データから計算する（カウント値６６５ｎｍ／カウント値６１５ｎｍ×１０００）。本アッセイは、以下の手順に従って行われ得る：試験は、反応緩衝液（ＰＢＳ、１２５ｍＭ ＮａＣｌ、０．００１％Ｎｏｖｅｘｉｎ（タンパク質の溶解度及び安定性を向上させるために設計された炭水化物ポリマー（Ｎｏｖｅｘｉｎポリマー）からなり；Ｎｏｖｅｘｉｎ Ｌｔｄ．，ａｍｂｒｉｄｇｅｓｈｉｒｅ，Ｕｎｉｔｅｄ Ｋｉｎｇｄｏｍ）、ゼラチン０．０１％、０．２％Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（エチルエノキシド及びプロピレンオキシドからのブロックコポリマー、ＢＡＳＦ，Ｌｕｄｗｉｇｓｈａｆｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）、１ｍＭ ＤＴＴ）中の２μＬユーロピウム２０標識ストレプトアビジン（最終濃度２．５ｎＭ）と９０％ＤＭＳＯ／１０％Ｈ２Ｏ中で希釈される１００ｎＬの化合物（３．２％最終ＤＭＳＯ濃度）を組み合わせ、続いてアッセイ緩衝液中で希釈した０．５μＬ ＭＤＭ２－Ｂｉｏ又はＭＤＭ４－Ｂｉｏ（最終濃度１０ｎＭ）を添加することにより、３．１μＬの総体積で白色１５３６ｗマイクロタイタープレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ Ｂｉｏ－Ｏｎ ＧｍｂＨ，Ｆｒｉｃｋｅｎｈａｕｓｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）で行う。この溶液を室温で１５分間予め温置し、続いてアッセイ緩衝液中の０．５μＬ Ｃｙ５－ｐ５３ペプチドを添加する（最終濃度２０ｎＭ）。プレートの読み取りを行う前に室温で１０分間温置する。試料の測定に対して、以下の設定３０でＡｎａｌｙｓｔ ＧＴマルチモードマイクロプレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）を使用する：ダイクロイックミラー３８０ｎｍ、励起３３０ｎｍ、発光ドナー６１５ｎｍ及び発光アクセプター６６５ｎｍ。ＸＬｆｉｔを用いて曲線フィッティングを行うことによりＩＣ５０値を計算する。指定されない場合、試薬は、Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ，ＵＳＡから購入する。

本発明によるＨＤＭ２阻害剤は、ＨＤＭ２０１、即ち（Ｓ）－５－（５－クロロ－１－メチル－２－オキソ－１，２－ジヒドロ－ピリジン－３－イル）－６－（４－クロロ－フェニル）－２－（２，４－ジメトキシ－ピリミジン－５－イル）－１－イソプロピル－５，６－ジヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，４－ｄ］イミダゾール－４－オンである。

ＨＤＭ２０１は、遊離分子として又は塩、溶媒和物、水和物、錯体、共結晶惜しくはそれらの混合物を含む何らかの他の非共有結合誘導体で存在し得る。ＨＤＭ２０１は、酸誘導体として存在し得る。酸誘導体は、酸とともにＨＤＭ２０１から形成される塩、又はＨＤＭ２０１酸錯体、又はＨＤＭ２０１酸共結晶としてのものであり得る。好ましくは、ＨＤＭ２０１は、共結晶として存在する。好ましくは、酸は、コハク酸である。最も好ましくは、ＨＤＭ２０１は、コハク酸共結晶として存在する。ＨＤＭ２０１の非共有結合誘導体は、国際公開第２０１３／１１１１０５号パンフレットに記載されている。

例えば、本明細書中でＨＤＭ２０１の投与量にｍｇ（ミリグラム）で言及する場合、それは、塩、溶媒和物、錯体又は共結晶と異なり、遊離塩基としてのＨＤＭ２０１の量であることを意味する。

「血液腫瘍」という用語は、本明細書中では、骨髄などの血液形成組織又は免疫系の細胞中で始まる癌を指す。血液腫瘍の例は、白血病、リンパ腫及び多発性骨髄腫である。これらは、血液癌と呼ばれることも多い。

本発明の好ましい血液腫瘍は、白血病である。より好ましくは、血液腫瘍は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）及び急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）から選択される。さらにより好ましくは、血液腫瘍は、ＡＭＬ及び／又はＭＤＳである。

本発明の特に好ましい血液腫瘍は、ＴＰ５３野生型血液腫瘍である。より好ましくは、本発明のＴＰ５３野生型血液腫瘍は、ＴＰ５３野生型白血病である。さらにより好ましくは、ＴＰ５３野生型血液腫瘍は、ＴＰ５３野生型急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、ＴＰ５３野生型骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）及びＴＰ５３野生型急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）から選択される。さらにより好ましくは、ＴＰ５３野生型血液腫瘍は、ＴＰ５３野生型ＡＭＬ及び／又はＭＤＳである。

本発明によれば、薬物ＨＤＭ２０１は、２８日（４週間）処置サイクルの最初の３～７日のそれぞれに投与され、好ましくは、薬物は、２８日処置サイクルの最初の４～６日のそれぞれ、より好ましくは２８日処置サイクルの最初の５日に投与される。

「２８日処置サイクルの最初の５日のそれぞれに」は、第１日（ｄ１）、ｄ２、ｄ３、ｄ４及びｄ５にＨＤＭ２０１が患者に投与され、その後、第６日～第２８日まで薬物投与を行わない期間（休薬期間又は休息期間とも呼ばれる）を置くことを意味する。第２９日に次の処置サイクルを開始し、その日が次のこの処置サイクルのｄ１となる。

好ましくは、薬物は、各投与日（即ち２８日周期のｄ１～ｄ５）のおよそ同じ時間に投与される。好ましくは、薬物は、各投与日に１日１回（ｑｄ）投与される。より好ましくは、薬物は、午前中に投与される。

好ましくは、薬物は、絶食状態で、即ち少なくとも食事の１時間前以前又は食事の２時間後以降に投与される。

好ましくは、薬物は、コップ１杯の水とともに且つカプセル又は錠剤を噛まずに摂取される。

患者が、複数のカプセル／錠剤を摂取する用量レベルに割り当てられる場合、カプセル／錠剤は、可能な限り短時間内、例えば５分以内に連続的に摂取すべきである。

好ましくは、薬物投与は、経口送達、即ち経口投与により、経口（ｐ．ｏ．）で行われる。

好ましくは、薬物は、経口剤形の形態、より好ましくは固形経口剤形、例えばカプセル又は錠剤の形態で提供される。

本明細書中で投与範囲が与えられる場合、例えば「１日薬物用量が５０ｍｇ～１００ｍｇである」場合、エンドポイント及びこれらのエンドポイント間のあらゆる全部のｍｇ数、例えば５０ｍｇ、５１ｍｇ、５２ｍｇ、５３ｍｇ、５４ｍｇ、５５ｍｇ、５６ｍｇ、５７ｍｇ、．．．９８ｍｇ、９９ｍｇ、１００ｍｇが本明細書により開示されることを意味するものとする。

本発明のさらなる態様として、以下のものが提供される：
本明細書中に記載のような実施形態の何れか１つに従うＨＤＭ２０１と抗ＴＩＭ－３抗体分子との組み合わせであって、他の／さらなる抗癌剤の１つ以上と組み合わされ、好ましくは、前記抗癌剤は、癌免疫薬（例えば、ＰＤ－１［例えば、ＰＤＲ００１（Ｎｏｖａｒｔｉｓ，ＩＮＮ スパルタリズマブ）］、ＰＤ－Ｌ１、ＬＡＧ－３、ＧＴＩＲ、ＴＧＦ－ベータ、ＩＬ１５阻害剤）、ＦＬＴ３阻害剤（例えば、ギルテリニブ、キザルチニブ、ミドスタウリン）、ＢＣＬ２阻害剤（例えば、ナビトクラックス、ベネトクラックス）、他のＨＤＭ２阻害剤（例えば、イダサヌトリン、ＡＭＧ２３２、ＤＳ－３０３２Ｂ、ＡＬＲＮ６９２４／ＡＴＳＰ７０４１）、低メチル化剤（ＨＭＡ）（例えば、Ｖｉｄａｚａ［アザシチジン、５－アザシチジン］、Ｄａｃｏｇｅｎ［デシタビン］、グアデシタビン）、アントラサイクリン（例えば、イダルビシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、ルビドマイシン）；抗ＣＤ３３抗体（例えば、マイロターグ［ゲムツズマブ］、バダスツキシマブ）及び他の薬剤（例えば、ＡｒａＣ［シタラビン、アラシチン］）から選択される。

好ましくは、ＨＤＭ２０１及びＭＢＧ４５３の組み合わせは、シタラビン（Ａｒａ－Ｃ）、アントラサイクリン、ダウノルビシン、イダルビシン、ルビドマイシン、イダマイシン、ミドスタウリン及びアザシチジンから選択される１つ以上の治療活性剤と組み合わされる。

他の特定の好ましい実施形態では、ＨＤＭ２０１及びＭＢＧ４５３の組み合わせは、ＢＬＣ２阻害剤、好ましくはベネトクラックスと組み合わされる。

他の／さらなる活性剤は、ＨＤＭ２０１と同じ日又はＨＤＭ２０１用量が投与されない日に投与され得る。

抗体分子
哺乳動物、例えばヒト、ＴＩＭ－３に結合する抗体分子を含む方法、組成物及び処方物が本明細書中で開示される。例えば、抗体分子は、ＴＩＭ－３上のエピトープ、例えば線状又は立体エピトープ（例えば、本明細書に記載されるとおりのエピトープ）に特異的に結合する。

本明細書で使用されるとき、用語「抗体分子」は、少なくとも１つの免疫グロブリン可変ドメイン配列を含むタンパク質、例えば免疫グロブリン鎖又はその断片を指す。用語「抗体分子」には、例えば、モノクローナル抗体（免疫グロブリンＦｃ領域を有する完全長抗体を含む）が含まれる。ある実施形態において、抗体分子は、完全長抗体又は完全長免疫グロブリン鎖を含む。ある実施形態において、抗体分子は、完全長抗体又は完全長免疫グロブリン鎖の抗原結合断片又は機能性断片を含む。ある実施形態において、抗体分子は、多重特異性抗体分子であり、例えば、それは、複数の免疫グロブリン可変ドメイン配列を含み、ここで、複数のうちの第１の免疫グロブリン可変ドメイン配列が第１のエピトープに対して結合特異性を有し、且つ複数のうちの第２の免疫グロブリン可変ドメイン配列が第２のエピトープに対して結合特異性を有する。ある実施形態において、多重特異性抗体分子は、二重特異性抗体分子である。

ある実施形態において、抗体分子は、単一特異性抗体分子であり、単一のエピトープに結合する。例えば、単一特異性抗体分子、複数の免疫グロブリン可変ドメイン配列を有し得、その各々が同じエピトープに結合する。

ある実施形態において、抗体分子は、多重特異性抗体分子であり、例えば、それは、複数の免疫グロブリン可変ドメイン配列を含み、ここで、複数のうちの第１の免疫グロブリン可変ドメイン配列が第１のエピトープに対して結合特異性を有し、且つ複数のうちの第２の免疫グロブリン可変ドメイン配列が第２のエピトープに対して結合特異性を有する。ある実施形態において、第１及び第２のエピトープは、同じ抗原上、例えば同じタンパク質（又は多量体タンパク質のサブユニット）上にある。ある実施形態において、第１及び第２のエピトープは、オーバーラップしている。ある実施形態において、第１及び第２のエピトープは、オーバーラップしていない。ある実施形態において、第１及び第２のエピトープは、異なる抗原上、例えば異なるタンパク質（又は多量体タンパク質の異なるサブユニット）上にある。ある実施形態において、多重特異性抗体分子は、第３、第４又は第５の免疫グロブリン可変ドメインを含む。ある実施形態において、多重特異性抗体分子は、二重特異性抗体分子、三重特異性抗体分子又は四重特異性抗体分子である。

ある実施形態において、多重特異性抗体分子は、二重特異性抗体分子である。二重特異性抗体は、２つ以下の抗原に対して特異性を有する。二重特異性抗体分子は、第１のエピトープに対して結合特異性を有する第１の免疫グロブリン可変ドメイン配列と、第２のエピトープに対して結合特異性を有する第２の免疫グロブリン可変ドメイン配列とによって特徴付けられる。ある実施形態において、第１及び第２のエピトープは、同じ抗原上、例えば同じタンパク質（又は多量体タンパク質のサブユニット）上にある。ある実施形態において、第１及び第２のエピトープは、オーバーラップしている。ある実施形態において、第１及び第２のエピトープは、オーバーラップしていない。ある実施形態において、第１及び第２のエピトープは、異なる抗原上、例えば異なるタンパク質（又は多量体タンパク質の異なるサブユニット）上にある。ある実施形態において、二重特異性抗体分子は、第１のエピトープに対して結合特異性を有する重鎖可変ドメイン配列及び軽鎖可変ドメイン配列と、第２のエピトープに対して結合特異性を有する重鎖可変ドメイン配列及び軽鎖可変ドメイン配列とを含む。ある実施形態において、二重特異性抗体分子は、第１のエピトープに対して結合特異性を有する半抗体と、第２のエピトープに対して結合特異性を有する半抗体とを含む。ある実施形態において、二重特異性抗体分子は、第１のエピトープに対して結合特異性を有する半抗体又はその断片と、第２のエピトープに対して結合特異性を有する半抗体又はその断片とを含む。ある実施形態において、二重特異性抗体分子は、第１のエピトープに対して結合特異性を有するｓｃＦｖ又はその断片と、第２のエピトープに対して結合特異性を有するｓｃＦｖ又はその断片とを含む。ある実施形態において、第１のエピトープは、ＴＩＭ－３上に位置し、且つ第２のエピトープは、ＰＤ－１、ＬＡＧ－３、ＣＥＡＣＡＭ（例えば、ＣＥＡＣＡＭ－１及び／又はＣＥＡＣＡＭ－５）、ＰＤ－Ｌ１又はＰＤ－Ｌ２上に位置する。

多重特異性（例えば、二重特異性又は三重特異性）又はヘテロ二量体抗体分子を作製するためのプロトコルは、当技術分野で公知であり、以下のものを含むが、限定されない；例えば米国特許第５７３１，１６８号明細書に記載の「ノブインアホール（ｋｎｏｂ ｉｎ ａ ｈｏｌｅ）」アプローチ；例えば国際公開第０９／０８９００４号パンフレット、同第０６／１０６９０５号パンフレット及び同第２０１０／１２９３０４号パンフレットに記載のような静電気ステアリング（ｅｌｅｃｔｒｏｓｔａｔｉｃ ｓｔｅｅｒｉｎｇ）Ｆｃ対形成；例えば国際公開第０７／１１０２０５号パンフレットに記載のようなＳｔｒａｎｄ Ｅｘｃｈａｎｇｅ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ Ｄｏｍａｉｎｓ（ＳＥＥＤ）ヘテロ二量体形成；例えば国際公開第０８／１１９３５３号パンフレット、同第２０１１／１３１７４６号パンフレット及び同第２０１３／０６０８６７号パンフレットに記載のようなＦａｂアーム交換；例えば米国特許第４，４３３，０５９号明細書に記載のようなアミン反応基及びスルフィドリル反応基を有するヘテロ二官能性試薬を使用した二重特異的な構造を作製するための抗体架橋による二重抗体複合物；例えば米国特許第４，４４４，８７８号明細書に記載のような、２本の重鎖間のジスルフィド結合の還元及び酸化のサイクルを通して異なる抗体からの半分の抗体（重－軽鎖対又はＦａｂ）を組み換えることにより作製される二重特異性抗体決定基；三官能性抗体、例えば、例えば米国特許第５，２７３，７４３号明細書に記載のようなスルフィドリル反応基を通して架橋される３つのＦａｂ’断片；例えば米国特許第５，５３４，２５４号明細書に記載のような、生合成結合タンパク質、例えばＣ末端尾部を通して、好ましくはジスルフィド又はアミン反応化学架橋を通して架橋されるｓｃＦｖの対；例えば米国特許第５，５８２，９９６号明細書に記載のような、二官能性抗体、例えば定常ドメインを置換されているロイシンジッパーを通して二量体化される異なる結合特性のＦａｂ断片（例えば、ｃ－ｆｏｓ及びｃ－ｊｕｎ）；例えば米国特許第５，５９１，８２８号明細書に記載のような、二重特異性及びオリゴ特異的なモノ及びオリゴ価受容体、例えば一般的には関連する軽鎖と、１つの抗体のＣＨ１領域と他の抗体のＶＨ領域との間のポリペプチドスペーサーを通して連結される２つの抗体（２つのＦａｂ断片）のＶＨ－ＣＨ１領域；ＤＮＡ抗体複合物、例えば米国特許第５，６３５，６０２号明細書に記載のようなＤＮＡの２本鎖片を通した抗体又はＦａｂ断片の架橋；二重特異性ＤＮＡ－抗体複合物、例えばＤＮＡの２本鎖片を通した抗体又はＦａｂ断片の架橋；例えば米国特許第５，６３７，４８１号明細書に記載のような、二重特異性融合タンパク質、例えば２つのｓｃＦｖ間の親水性ヘリックスペプチドリンカーとともに２つのｓｃＦｖ及び完全な定常領域を含有する発現コンストラクト；例えば米国特許第５，８３７，２４２号明細書に記載のような、多価及び多特異性結合タンパク質、例えば一般にダイアボディと呼ばれる、Ｉｇ重鎖可変領域の結合領域がある第１のドメイン及びＩｇ軽鎖可変領域の結合領域を有する第２のドメインを有するポリペプチドの二量体（二重特異性、三重特異性又は四重特異性分子を生成させるより高い次元の構造も開示される；例えば米国特許第５，８３７，８２１号明細書に記載のような、二重特異性／多価分子を形成するために二量体化され得る、抗体ヒンジ領域及びＣＨ３領域とペプチドスペーサーでさらに連結される連結ＶＬ及びＶＨ鎖があるミニボディーコンストラクト；二量体を形成して二重特異性ダイアボディを形成し得る何れかの方向の短いペプチドリンカー（例えば、５又は１０アミノ酸）によるか又はリンカー全くなしで連結されるＶＨ及びＶＬドメイン；例えば米国特許第５，８４４，０９４号明細書に記載のような三量体及び四量体；例えば米国特許第５，８６４，０１９号明細書に記載のような一連のＦＶ（又はｓｃＦｖ）を形成させるためにＶＬドメインとさらに結合されるＣ末端で架橋可能な基とともにペプチド連結により連結される一連のＶＨドメイン（又はファミリーメンバー中のＶＬドメイン）；及び例えば米国特許第５，８６９，６２０号明細書に記載のような、例えばｓｃＦＶ又はダイアボディータイプの方式の両方を使用してホモ二価、ヘテロ二価、三価及び四価構造を形成させるために非共有又は化学的架橋を通して多価構造になるように組み合わされる、ペプチドリンカーを通して連結されるＶＨ及びＶＬドメインの両方を有する１本鎖結合ポリペプチド。上に記載のものを作製するさらなる代表的な多重特異性及び二重特異性分子及び方法は、例えば、米国特許第５，９１０，５７３号明細書、同第５，９３２，４４８号明細書、同第５，９５９，０８３号明細書、同第５，９８９，８３０号明細書、同第６，００５，０７９号明細書、同第６，２３９，２５９号明細書、同第６，２９４，３５３号明細書、同第６，３３３，３９６号明細書、同第６，４７６，１９８号明細書、同第６，５１１，６６３号明細書、同第６，６７０，４５３号明細書、同第６，７４３，８９６号明細書、同第６，８０９，１８５号明細書、同第６，８３３，４４１号明細書、同第７，１２９，３３０号明細書、同第７，１８３，０７６号明細書、同第７，５２１，０５６号明細書、同第７，５２７，７８７号明細書、同第７，５３４，８６６号明細書、同第７，６１２，１８１号明細書、米国特許出願公開第２００２／００４５８７Ａ１号明細書、同第２００２／０７６４０６Ａ１号明細書、同第２００２／１０３３４５Ａ１号明細書、同第２００３／２０７３４６Ａ１号明細書、同第２００３／２１１０７８Ａ１号明細書、同第２００４／２１９６４３Ａ１号明細書、同第２００４／２２０３８８Ａ１号明細書、同第２００４／２４２８４７Ａ１号明細書、同第２００５／００３４０３Ａ１号明細書、同第２００５／００４３５２Ａ１号明細書、同第２００５／０６９５５２Ａ１号明細書、同第２００５／０７９１７０Ａ１号明細書、同第２００５／１００５４３Ａ１号明細書、同第２００５／１３６０４９Ａ１号明細書、同第２００５／１３６０５１Ａ１号明細書、同第２００５／１６３７８２Ａ１号明細書、同第２００５／２６６４２５Ａ１号明細書、同第２００６／０８３７４７Ａ１号明細書、同第２００６／１２０９６０Ａ１号明細書、同第２００６／２０４４９３Ａ１号明細書、同第２００６／２６３３６７Ａ１号明細書、同第２００７／００４９０９Ａ１号明細書、同第２００７／０８７３８１Ａ１号明細書、同第２００７／１２８１５０Ａ１号明細書、同第２００７／１４１０４９Ａ１号明細書、同第２００７／１５４９０１Ａ１号明細書、同第２００７／２７４９８５Ａ１号明細書、同第２００８／０５０３７０Ａ１号明細書、同第２００８／０６９８２０Ａ１号明細書、同第２００８／１５２６４５Ａ１号明細書、同第２００８／１７１８５５Ａ１号明細書、同第２００８／２４１８８４Ａ１号明細書、同第２００８／２５４５１２Ａ１号明細書、同第２００８／２６０７３８Ａ１号明細書、同第２００９／１３０１０６Ａ１号明細書、同第２００９／１４８９０５Ａ１号明細書、同第２００９／１５５２７５Ａ１号明細書、同第２００９／１６２３５９Ａ１号明細書、同第２００９／１６２３６０Ａ１号明細書、同第２００９／１７５８５１Ａ１号明細書、同第２００９／１７５８６７Ａ１号明細書、同第２００９／２３２８１１Ａ１号明細書、同第２００９／２３４１０５Ａ１号明細書、同第２００９／２６３３９２Ａ１号明細書、同第２００９／２７４６４９Ａ１号明細書、欧州特許第３４６０８７Ａ２号明細書、国際公開第００／０６６０５Ａ２号パンフレット、同第０２／０７２６３５Ａ２号パンフレット、同第０４／０８１０５１Ａ１号パンフレット、同第０６／０２０２５８Ａ２号パンフレット、同第２００７／０４４８８７Ａ２号パンフレット、同第２００７／０９５３３８Ａ２号パンフレット、同第２００７／１３７７６０Ａ２号パンフレット、同第２００８／１１９３５３Ａ１号パンフレット、同第２００９／０２１７５４Ａ２号パンフレット、同第２００９／０６８６３０Ａ１号パンフレット、同第９１／０３４９３Ａ１号パンフレット、同第９３／２３５３７Ａ１号パンフレット、同第９４／０９１３１Ａ１号パンフレット、同第９４／１２６２５Ａ２号パンフレット、同第９５／０９９１７Ａ１号パンフレット、同第９６／３７６２１Ａ２号パンフレット、同第９９／６４４６０Ａ１号パンフレットで見出され得る。上で参照される出願の内容は、それらの全体において参照により本明細書中に組み込まれる。

他の実施形態では、抗ＴＩＭ－３抗体分子（例えば、単一特異性、二重特異性又は多重特異性抗体分子）は、共有結合され、例えば融合分子、例えば融合タンパク質として例えば別のパートナー、例えばタンパク質、例えば１、２つ又はそれ超えるサイトカインに融合される。他の実施形態では、融合分子は、１つ以上のタンパク質、例えば１、２つ又はそれを超えるサイトカインを含む。一実施形態では、サイトカインは、ＩＬ－１、ＩＬ－２、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５又はＩＬ－２１の１、２、３つ又はそれを超えるものから選択されるインターロイキン（ＩＬ）である。一実施形態では、二重特異性抗体分子は、第１の標的に対する（例えば、ＰＤ－１に対する）第１の結合特異性、第２の標的（例えば、ＬＡＧ－３又はＴＩＭ－３）に対する第２の結合特異性であり、任意選択的にインターロイキン（例えば、ＩＬ－１２）ドメイン、例えば全長ＩＬ－１２又はその一部に連結される。

「融合タンパク質」及び「融合ポリペプチド」は、一緒に共有結合される少なくとも２つの部分を有するポリペプチドを指し、この部分のそれぞれは、異なる特性を有するポリペプチドである。この特性は、生物学的特性、例えばインビトロ又はインビボでの活性であり得る。この特性は、単純な化学又は物理学的特性、例えば標的分子への結合、反応の触媒などでもあり得る。この２つの部分は、単一のペプチド結合により直接又はペプチドリンカーを通して連結され得るが、互いに読み枠内である。

ある実施形態において、抗体分子には、ダイアボディ及び単鎖分子並びに抗体の抗原結合断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ’）_２及びＦｖ）が含まれる。例えば、抗体分子は、重（Ｈ）鎖可変ドメイン配列（本明細書ではＶＨと省略する）と、軽（Ｌ）鎖可変ドメイン配列（本明細書ではＶＬと省略する）とを含み得る。ある実施形態において、抗体分子は、重鎖と軽鎖とを含むか又はそれからなる（本明細書において半抗体と称される）。別の例において、抗体分子は、２つの重（Ｈ）鎖可変ドメイン配列と、２つの軽（Ｌ）鎖可変ドメイン配列とを含み、それにより２つの抗原結合部位、例えばＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２、Ｆｃ、Ｆｄ、Ｆｄ’、Ｆｖ、一本鎖抗体（例えばｓｃＦｖ）、シングル可変ドメイン抗体、ダイアボディ（Ｄａｂ）（二価及び二重特異性）及びキメラ（例えば、ヒト化）抗体などを形成し、これらは、全抗体の修飾によって作製され得るか、又は組換えＤＮＡ技術を用いてデノボ合成されたものであり得る。これらの機能性抗体断片は、そのそれぞれの抗原又は受容体と選択的に結合する能力を保持している。抗体及び抗体断片は、限定はされないが、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭ、ＩｇＤ及びＩｇＥを含め、任意の抗体クラス及び抗体の任意のサブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４）であり得る。抗体分子の製剤は、モノクローナル又はポリクローナルであり得る。抗体分子は、ヒト、ヒト化、ＣＤＲグラフト又はインビトロ生成抗体でもあり得る。抗体は、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４から選択される重鎖定常領域を有し得る。抗体は、例えば、κ又はλから選択される軽鎖も有し得る。用語「免疫グロブリン」（Ｉｇ）は、本明細書では用語「抗体」と同義的に使用される。

抗体分子の抗原結合断片の例としては、（ｉ）ＶＬ、ＶＨ、ＣＬ及びＣＨ１ドメインからなる一価断片であるＦａｂ断片；（ｉｉ）ヒンジ領域でジスルフィド架橋によって連結された２つのＦａｂ断片を含む二価断片であるＦ（ａｂ’）２断片；（ｉｉｉ）ＶＨ及びＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片；（ｉｖ）抗体の単一アームのＶＬ及びＶＨドメインからなるＦｖ断片、（ｖ）ＶＨドメインからなるダイアボディ（ｄＡｂ）断片；（ｖｉ）ラクダ科動物又はラクダ科動物化可変ドメイン；（ｖｉｉ）単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、例えばＢｉｒｄ ｅｔ ａｌ．（１９８８）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４２：４２３－４２６；及びＨｕｓｔｏｎ ｅｔ ａｌ．（１９８８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８５：５８７９－５８８３を参照されたい）；（ｖｉｉｉ）シングルドメイン抗体が挙げられる。これらの抗体断片は、当業者に公知の従来技術を用いて入手され、及び断片は、有用性に関してインタクトな抗体と同じようにスクリーニングされる。

用語「抗体」には、インタクトな分子及びその機能性断片が含まれる。抗体の定常領域は、抗体の特性が修飾されるように（例えば、Ｆｃ受容体結合、抗体グリコシル化、システイン残基の数、エフェクター細胞機能又は補体機能の１つ以上が増加又は減少するように）変化させる、例えば突然変異させることができる。

抗体分子は、単一ドメイン抗体でもあり得る。単一ドメイン抗体は、相補性決定領域が単一ドメインポリペプチドの一部である抗体を含み得る。例としては、重鎖抗体、軽鎖を天然に欠く抗体、従来の４本鎖抗体由来の単一ドメイン抗体、改変抗体及び抗体由来のもの以外の単一ドメイン足場が挙げられるが、限定されない。単一ドメイン抗体は、当技術分野の何れか又は任意の将来的な単一ドメイン抗体であり得る。単一ドメイン抗体は、マウス、ヒト、ラクダ、ラマ、魚、サメ、ヤギ、ウサギ及びウシを含むが、限定されない任意の種由来であり得る。本発明の別の態様によれば、単一ドメイン抗体は、軽鎖を欠く重鎖抗体として知られる天然の単一ドメイン抗体である。このような単一ドメイン抗体は、例えば、国際公開第９４／０４６７８号パンフレットで開示されている。明確にするために、天然に軽鎖を欠く重鎖抗体由来のこの可変ドメインは、本明細書中で４本鎖免疫グロブリンの通常のＶＨからそれを区別するために、ＶＨＨ又はナノボディーとして知られる。このようなＶＨＨ分子は、ラクダ科（Ｃａｍｅｌｉｄａｅ ｓｐｅｃｉｅｓ）において、例えばラクダ、ラマ、ヒトコブラクダ、アルパカ及びグアナコにおいて産生される抗体由来であり得る。ラクダ科（Ｃａｍｅｌｉｄａｅ）以外の他の種は、天然に軽鎖を欠く重鎖抗体を産生し得；このようなＶＨＨは、本発明の範囲内である。

ＶＨ及びＶＬ領域は、「フレームワーク領域」（ＦＲ又はＦＷ）と呼ばれるより保存されている領域が間に散在する「相補性決定領域」（ＣＤＲ）と呼ばれる超可変性領域にさらに分けることができる。

フレームワーク領域及びＣＤＲの範囲は、幾つもの方法によって正確に定義されている（Ｋａｂａｔ，Ｅ．Ａ．，ｅｔ ａｌ．（１９９１）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，ＮＩＨ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ Ｎｏ．９１－３２４２；Ｃｈｏｔｈｉａ，Ｃ．ｅｔ ａｌ．（１９８７）Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１－９１７；及びＯｘｆｏｒｄ ＭｏｌｅｃｕｌａｒのＡｂＭ抗体モデル化ソフトウェアによって使用されるＡｂＭ定義を参照されたい。概略的には、例えば、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎｄ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｖａｒｉａｂｌｅ Ｄｏｍａｉｎｓ．Ｉｎ：Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｌａｂ Ｍａｎｕａｌ（Ｅｄ．：Ｄｕｅｂｅｌ，Ｓ．ａｎｄ Ｋｏｎｔｅｒｍａｎｎ，Ｒ．，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ，Ｈｅｉｄｅｌｂｅｒｇ）を参照されたい。

用語「相補性決定領域」及び「ＣＤＲ」は、本明細書で使用されるとき、抗原特異性及び結合親和性を付与する抗体可変領域内にあるアミノ酸配列を指す。一般に、各重鎖可変領域に３つのＣＤＲ（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３）及び各軽鎖可変領域に３つのＣＤＲ（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３）がある。

所与のＣＤＲの正確なアミノ酸配列境界は、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．（１９９１），“Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，”５ｔｈ Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ（「Ｋａｂａｔ」付番スキーム）、Ａｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉ ｅｔ ａｌ．，（１９９７）ＪＭＢ ２７３，９２７－９４８（「Ｃｈｏｔｈｉａ」付番スキーム）によって記載されるものを含め、幾つもの周知のスキームの何れかを用いて決定することができる。本明細書で使用されるとき、「Ｃｈｏｔｈｉａ」番号スキームにより定義されるＣＤＲは、ときに「超可変ループ」と称されることもある。

例えば、Ｋａｂａｔに基づけば、重鎖可変ドメイン（ＶＨ）のＣＤＲアミノ酸残基は、３１～３５（ＨＣＤＲ１）、５０～６５（ＨＣＤＲ２）及び９５～１０２（ＨＣＤＲ３）と付番され；及び軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）のＣＤＲアミノ酸残基は、２４～３４（ＬＣＤＲ１）、５０～５６（ＬＣＤＲ２）及び８９～９７（ＬＣＤＲ３）と付番される。Ｃｈｏｔｈｉａに基づけば、ＶＨのＣＤＲアミノ酸は、２６～３２（ＨＣＤＲ１）、５２～５６（ＨＣＤＲ２）及び９５～１０２（ＨＣＤＲ３）と付番され；及びＶＬのアミノ酸残基は、２６～３２（ＬＣＤＲ１）、５０～５２（ＬＣＤＲ２）及び９１～９６（ＬＣＤＲ３）と付番される。Ｋａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａの両方のＣＤＲ定義を組み合わせることにより、ＣＤＲは、ヒトＶＨのアミノ酸残基２６～３５（ＨＣＤＲ１）、５０～６５（ＨＣＤＲ２）及び９５～１０２（ＨＣＤＲ３）並びにヒトＶＬのアミノ酸残基２４～３４（ＬＣＤＲ１）、５０～５６（ＬＣＤＲ２）及び８９～９７（ＬＣＤＲ３）からなる。

概して、具体的に指示されない限り、抗ＰＤ－１抗体分子は、例えば、表１に記載される、１つ以上のＫａｂａｔ ＣＤＲ及び／又はＣｈｏｔｈｉａ超可変ループの任意の組み合わせを含み得る。一実施形態において、表１に記載される抗ＰＤ－１抗体分子には、以下の定義：Ｋａｂａｔ及びＣｈｏｔｈｉａの両方を組み合わせたＣＤＲ定義によるＨＣＤＲ１並びにＫａｂａｔのＣＤＲ定義によるＨＣＣＤＲ２～３及びＬＣＣＤＲ１～３が用いられる。何れの定義においても、各ＶＨ及びＶＬは、典型的には、アミノ末端からカルボキシ末端に向かって以下の順番：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４に並んだ３つのＣＤＲ及び４つのＦＲを含む。

本明細書で使用されるとき、「免疫グロブリン可変ドメイン配列」は、免疫グロブリン可変ドメインの構造を形成し得るアミノ酸配列を指す。例えば、この配列は、天然に存在する可変ドメインのアミノ酸配列の全て又は一部を含み得る。例えば、この配列は、１つ、２つ若しくはそれを超えるＮ末端若しくはＣ末端アミノ酸を含むことも若しくは含まないこともあるか、又はタンパク質構造の形成と適合性のある他の変化を含み得る。

用語「抗原結合部位」は、ＰＤ－１ポリペプチド又はそのエピトープに結合する接合部分を形成する決定基を含む抗体分子の一部を指す。タンパク質（又はタンパク質模倣体）に関して、抗原結合部位は、典型的には、ＰＤ－１ポリペプチドに結合する接合部分を形成する（少なくとも４つのアミノ酸又はアミノ酸模倣体の）１つ以上のループを含む。典型的には、抗体分子の抗原結合部位は、少なくとも１つ若しくは２つのＣＤＲ及び／若しくは超可変ループ又はより典型的には少なくとも３、４、５若しくは６つのＣＤＲ及び／若しくは超可変ループを含む。

「競合する」又は「交差競合する」という用語は、抗ＴＩＭ－３抗体分子、例えば本明細書中で提供される抗ＴＩＭ－３抗体分子の、標的、例えばヒトＴＩＭ－３への結合を阻止する抗体分子の能力を指すために本明細書中で交換可能に使用される。結合の妨害は、（例えば、抗体分子又は標的のアロステリック調整を通して）直接的又は間接的であり得る。抗体分子が別の抗体分子の標的への結合を妨害可能である程度及び従ってそれが競合すると言い得るか否かは、競合結合アッセイ、例えばＦＡＣＳアッセイ、ＥＬＩＳＡ又はＢＩＡＣＯＲＥアッセイを使用して決定され得る。いくつかの実施形態では、競合結合アッセイは、定量的競合アッセイである。いくつかの実施形態では、第１の抗ＴＩＭ－３抗体分子は、第１の抗体分子の標的への結合が競合結合アッセイ（例えば、本明細書中に記載の競合アッセイ）において１０％以上、例えば２０％以上、３０％以上、４０％以上、５０％以上、５５％以上、６０％以上、６５％以上、７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９８％以上、９９％以上低下する場合、第２の抗ＴＩＭ－３抗体分子と、標的への結合に対して競合すると言われる。

用語「モノクローナル抗体」又は「モノクローナル抗体組成物」は、本明細書で使用されるとき、単一分子組成の抗体分子の製剤を指す。モノクローナル抗体組成物は、特定のエピトープに対する単一の結合特異性及び親和性を示す。モノクローナル抗体は、ハイブリドーマ技術によるか、又はハイブリドーマ技術を使用しない方法（例えば、組換え方法）によって作製することができる。

「有効にヒト」タンパク質は、中和抗体応答、例えばヒト抗マウス抗体（ＨＡＭＡ）応答を誘発しないタンパク質である。ＨＡＭＡは、多くの状況において、例えば抗体分子が繰り返し投与される場合、例えば慢性又は再発性疾患状態の処置において問題となり得る。ＨＡＭＡ応答は、血清からの抗体クリアランス上昇のために（例えば、Ｓａｌｅｈ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．３２：１８０－１９０（１９９０）を参照されたい）、またアレルギー性反応の可能性のために（例えば、ＬｏＢｕｇｌｉｏ ｅｔ ａｌ．，Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ，５：５１１７－５１２３（１９８６）を参照されたい）、反復抗体投与を無効にし得る可能性がある。

抗体分子は、ポリクローナル又はモノクローナル抗体であり得る。他の実施形態では、本抗体は、組み換え作製され得、例えばファージディスプレイ又はコンビナトリアル法により作製され得る。

抗体を作製するためのファージディスプレイ及びコンビナトリアル法は、当技術分野で公知である（例えば、それらの全ての内容が本明細書中で参照により組み込まれるＬａｄｎｅｒ ｅｔ ａｌ．、米国特許第５，２２３，４０９号明細書；Ｋａｎｇ ｅｔ ａｌ．、国際公開第９２／１８６１９号パンフレット；Ｄｏｗｅｒ ｅｔ ａｌ．、同第９１／１７２７１号パンフレット；Ｗｉｎｔｅｒ ｅｔ ａｌ．、同第９２／２０７９１号パンフレット；Ｍａｒｋｌａｎｄ ｅｔ ａｌ．、同第９２／１５６７９号パンフレット；Ｂｒｅｉｔｌｉｎｇ ｅｔ ａｌ．、同第９３／０１２８８号パンフレット；ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ ｅｔ ａｌ．、同第９２／０１０４７号パンフレット；Ｇａｒｒａｒｄ ｅｔ ａｌ．、同第９２／０９６９０号パンフレット；Ｌａｄｎｅｒ ｅｔ ａｌ．、同第９０／０２８０９号パンフレット；Ｆｕｃｈｓ ｅｔ ａｌ．（１９９１）Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ９：１３７０－１３７２；Ｈａｙ ｅｔ ａｌ．（１９９２）Ｈｕｍ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ ３：８１－８５；Ｈｕｓｅ ｅｔ ａｌ．（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４６：１２７５－１２８１；Ｇｒｉｆｆｔｈｓ ｅｔ ａｌ．（１９９３）ＥＭＢＯ Ｊ １２：７２５－７３４；Ｈａｗｋｉｎｓ ｅｔ ａｌ．（１９９２）Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ２２６：８８９－８９６；Ｃｌａｃｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，（１９９１）Ｎａｔｕｒｅ ３５２：６２４－６２８；Ｇｒａｍ ｅｔ ａｌ．（１９９２）ＰＮＡＳ ８９：３５７６－３５８０；Ｇａｒｒａｄ ｅｔ ａｌ．（１９９１）Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ９：１３７３－１３７７；Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ｅｔ ａｌ．（１９９１）Ｎｕｃ Ａｃｉｄ Ｒｅｓ １９：４１３３－４１３７；及びＢａｒｂａｓ ｅｔ ａｌ．（１９９１）ＰＮＡＳ ８８：７９７８－７９８２に記載のとおり）。

一実施形態では、本抗体は、完全ヒト抗体（例えば、ヒト免疫グロブリン配列から抗体を作製するように遺伝子改変されているマウスで作製される抗体）又は非ヒト抗体、例えばげっ歯類（マウス又はラット）、ヤギ、霊長類（例えば、サル）、ラクダ抗体である。好ましくは、非ヒト抗体は、げっ歯類（マウス又はラット抗体）である。げっ歯類抗体を作製する方法は、当技術分野で公知である。

ヒトモノクローナル抗体は、マウス系ではなく、ヒト免疫グロブリン遺伝子を保有するトランスジェニックマウスを使用して作製され得る。関心のある抗原で免疫付与されたこれらのトランスジェニックマウスからの脾臓細胞を使用して、ヒトタンパク質からのエピトープに対して特異的な親和性を有するヒトｍＡｂを分泌するハイブリドーマを作製する（例えば、Ｗｏｏｄ ｅｔ ａｌ．、国際公開第９１／００９０６号パンフレット、Ｋｕｃｈｅｒｌａｐａｔｉ ｅｔ ａｌ．、同第９１／１０７４１号パンフレット；Ｌｏｎｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．、同第９２／０３９１８号パンフレット；Ｋａｙ ｅｔ ａｌ．、同第９２／０３９１７号パンフレット；Ｌｏｎｂｅｒｇ，Ｎ．ｅｔ ａｌ．，１９９４ Ｎａｔｕｒｅ ３６８：８５６－８５９；Ｇｒｅｅｎ，Ｌ．Ｌ．ｅｔ ａｌ．，１９９４ Ｎａｔｕｒｅ Ｇｅｎｅｔ．７：１３－２１；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｓ．Ｌ．ｅｔ ａｌ．，１９９４ Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８１：６８５１－６８５５；Ｂｒｕｇｇｅｍａｎ ｅｔ ａｌ．，１９９３ Ｙｅａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ ７：３３－４０；Ｔｕａｉｌｌｏｎ ｅｔ ａｌ．，１９９３ ＰＮＡＳ ９０：３７２０－３７２４；Ｂｒｕｇｇｅｍａｎ ｅｔ ａｌ．，１９９１ Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２１：１３２３－１３２６を参照されたい）。

抗体は、可変領域又はその一部、例えばＣＤＲが非ヒト生物、例えばラット又はマウスで作製されるものであり得る。キメラ、ＣＤＲ移植及びヒト化抗体は、本発明の範囲内である。非ヒト生物、例えばラット又はマウスで作製され、次いでヒトでの抗原性を低下させるために例えば可変フレームワーク又は定常領域で修飾される抗体は、本発明の範囲内である。

キメラ抗体は、当技術分野で公知の組み換えＤＮＡ技術により作製され得る。（Ｒｏｂｉｎｓｏｎ ｅｔ ａｌ．、国際公開第８６／０２２６９号パンフレット；Ａｋｉｒａ ｅｔ ａｌ．、欧州特許出願公開第１８４，１８７号明細書；Ｔａｎｉｇｕｃｈｉ，Ｍ．，同第１７１，４９６号明細書；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ ｅｔ ａｌ．、同第１７３，４９４号明細書；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ ｅｔ ａｌ．、国際公開第８６／０１５３３号パンフレット；Ｃａｂｉｌｌｙ ｅｔ ａｌ．、米国特許第４，８１６，５６７号明細書；Ｃａｂｉｌｌｙ ｅｔ ａｌ．、欧州特許出願公開第１２５，０２３号明細書；Ｂｅｔｔｅｒ ｅｔ ａｌ．（１９８８ Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４０：１０４１－１０４３）；Ｌｉｕ ｅｔ ａｌ．（１９８７）ＰＮＡＳ ８４：３４３９－３４４３；Ｌｉｕ ｅｔ ａｌ．，１９８７，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３９：３５２１－３５２６；Ｓｕｎ ｅｔ ａｌ．（１９８７）ＰＮＡＳ ８４：２１４－２１８；Ｎｉｓｈｉｍｕｒａ ｅｔ ａｌ．，１９８７，Ｃａｎｃ．Ｒｅｓ．４７：９９９－１００５；Ｗｏｏｄ ｅｔ ａｌ．（１９８５）Ｎａｔｕｒｅ ３１４：４４６－４４９；及びＳｈａｗ ｅｔ ａｌ．，１９８８，Ｊ．Ｎａｔｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ．８０：１５５３－１５５９を参照されたい）。

ヒト化又はＣＤＲグラフト抗体は、少なくとも１つ又は２つ、しかし概して３つ全てのレシピエントＣＤＲ（重鎖及び／又は軽鎖免疫グロブリン鎖の）がドナーＣＤＲによって置き換えられたものを有することになる。抗体は、非ヒトＣＤＲの少なくとも一部分によって置き換えられ得るか、又はＣＤＲの一部のみが非ヒトＣＤＲによって置き換えられ得る。ヒト化抗体がＰＤ－１に結合するのに必要な数のＣＤＲを置き換えるのみでよい。好ましくは、ドナーがげっ歯類抗体、例えばラット又はマウス抗体となり、レシピエントがヒトフレームワーク又はヒトコンセンサスフレームワークとなるであろう。典型的には、ＣＤＲを提供する免疫グロブリンが「ドナー」と呼ばれ、フレームワークを提供する免疫グロブリンが「アクセプター」と呼ばれる。一実施形態において、ドナー免疫グロブリンは、非ヒト（例えば、げっ歯類）である。アクセプターフレームワークは、天然に存在する（例えば、ヒト）フレームワーク若しくはンセンサスフレームワーク又はそれと約８５％以上、好ましくは９０％、９５％、９９％以上同一の配列である。

本明細書中で使用される場合、「コンセンサス配列」という用語は、関連配列のファミリーで最も頻繁に生じるアミノ酸（又はヌクレオチド）から形成される配列を指す（例えば、Ｗｉｎｎａｋｅｒ，Ｆｒｏｍ Ｇｅｎｅ ｔｏ Ｃｌｏｎｅｓ（Ｖｅｒｌａｇｓｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ，Ｗｅｉｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ １９８７を参照されたい）。タンパク質のファミリーにおいて、コンセンサス配列中の各位置は、そのファミリーでその位置で最も頻繁に生じるアミノ酸により占有される。２つのアミノ酸が等しい頻度で生じる場合、何れかがコンセンサス配列に含まれ得る。「コンセンサスフレームワーク」は、コンセンサス免疫グロブリン配列におけるフレームワーク領域を指す。

抗体は、当技術分野で公知の方法（例えば、それらの全ての内容が参照により本明細書に組み込まれるＭｏｒｒｉｓｏｎ，Ｓ．Ｌ．，１９８５，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２２９：１２０２－１２０７，Ｏｉ ｅｔ ａｌ．による１９８６，ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ４：２１４及びＱｕｅｅｎ ｅｔ ａｌ．による米国特許第５，５８５，０８９号明細書、同第５，６９３，７６１号明細書及び同第５，６９３，７６２号明細書を参照されたい）によりヒト化され得る。

ヒト化又はＣＤＲ移植抗体は、ＣＤＲ移植又はＣＤＲ置換により作製され得、免疫グロブリン鎖の１、２つ又は全てのＣＤＲが置換され得る。例えば、それらの全ての内容が参照により本明細書に明らかに組み込まれる米国特許第５，２２５，５３９号明細書；Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．，１９８６ Ｎａｔｕｒｅ ３２１：５５２－５２５；Ｖｅｒｈｏｅｙａｎ ｅｔ ａｌ．，１９８８ Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３９：１５３４；Ｂｅｉｄｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９８８ Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４１：４０５３－４０６０；Ｗｉｎｔｅｒ 米国特許第５，２２５，５３９号明細書を参照されたい。Ｗｉｎｔｅｒは、本発明のヒト化抗体を調製するために使用され得るＣＤＲ移植方法を記載している（１９８７年３月２６日提出の英国特許出願公開第ＧＢ２１８８６３８Ａ号明細書；Ｗｉｎｔｅｒ 米国特許第５，２２５，５３９号明細書）、この内容は、参照により明らかに組み込まれる。

特異的なアミノ酸が置換、欠失又は付加されているヒト化抗体も本発明の範囲内である。ドナーからアミノ酸を選択するための基準は、それらの内容が参照により本明細書に組み込まれる米国特許第５，５８５，０８９号明細書、例えば米国特許第５，５８５，０８９号明細書の１２～１６行目、例えば米国特許第５，５８５，０８９号明細書の１２～１６行目に記載されている。抗体をヒト化するための他の技術は、１９９２年１２月２３日公開のＰａｄｌａｎ ｅｔ ａｌ．、欧州特許出願公開第５１９５９６Ａ１号明細書に記載されている。

本抗体分子は、１本鎖抗体であり得る。１本鎖抗体（ｓｃＦＶ）は、改変され得る（例えば、Ｃｏｌｃｈｅｒ，Ｄ．ｅｔ ａｌ．（１９９９）Ａｎｎ Ｎ Ｙ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ８８０：２６３－８０；及びＲｅｉｔｅｒ，Ｙ．（１９９６）Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２：２４５－５２を参照されたい）。同じ標的のタンパク質の異なるエピトープに対する特性を有する多価抗体を作製するために、１本鎖抗体を二量体化するか又は多量体化し得る。

また他の実施形態では、本抗体分子は、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＭ、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２、ＩｇＤ及びＩｇＥの重鎖定常領域から選択され；特に例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４の（例えば、ヒト）重鎖定常領域から選択される重鎖定常領域を有する。別の実施形態では、本抗体分子は、例えば、（例えば、ヒト）カッパ又はラムダの軽鎖定常領域から選択される軽鎖定常領域を有する。定常領域は、抗体の特性を修正するために（例えば、Ｆｃ受容体結合、抗体グリコシル化、システイン残基数、エフェクター細胞機能及び／又は補体機能の１つ以上を上昇又は低下させるために）、変更され得る、例えば突然変異され得る。一実施形態では、本抗体は、エフェクター機能を有し；補体を固定し得る。他の実施形態では、本抗体は、エフェクター細胞を動員しないか；又は補体を固定しない。別の実施形態では、本抗体は、Ｆｃ受容体との結合能が低いか又はない。例えば、それは、アイソタイプ又はサブタイプ、断片又は他の突然変異体であり、これは、Ｆｃ受容体への結合を支持せず、例えばＦｃ受容体結合領域が突然変異誘発されているか又は欠失している。

抗体定常領域を変更するための方法は、当技術分野で公知である。機能が変化した、例えば細胞上のＦｃＲなどのエフェクターリガンドへの親和性が変化した抗体又は補体のＣ１構成成分は、異なる残基での本抗体の定常部分中の少なくとも１つのアミノ酸残基の置換により作製され得る（例えば、その全ての内容が参照により本明細書に組み込まれる欧州特許出願公開第３８８，１５１Ａ１号明細書、米国特許第５，６２４，８２１号明細書及び同第５，６４８，２６０号明細書を参照されたい）。同様のタイプの変更は、マウス又は他の種の免疫グロブリンに適用される場合にこれらの機能を低下させるか又は排除することが記載され得る。

抗体分子は、誘導体化され得るか又は別の機能分子（例えば、別のペプチド又はタンパク質）に連結され得る。本明細書中で使用される場合、「誘導体化される」抗体分子は、修飾されているものである。誘導体化の方法としては、蛍光部分、放射性ヌクレオチド、毒素、酵素又は親和性リガンド、例えばビオチンなどの付加が挙げられるが、限定されない。従って、本発明の抗体分子は、免疫接着分子を含め、本明細書中に記載の誘導体化されるか及びそうでなければ修飾される抗体の形態を含むものとする。例えば、抗体分子は、（化学的カップリング、遺伝子融合、非共有会合又はその他により）別の分子（ストレプトアビジンコア領域又はポリヒスチジンタグなど）との抗体又は抗体部分の会合を媒介し得る１つ以上の他の分子部分、例えば別の抗体（例えば、二重特異性抗体又はダイアボディ）、検出可能な薬剤、細胞毒性剤、医薬品及び／又はタンパク質又はペプチドに機能的に連結し得る。

あるタイプの誘導体化された抗体分子は、２つ以上の抗体（同じタイプのもの又は異なるタイプのもの、例えば二重特異性抗体を作製するため）を架橋することにより作製される。適切な架橋剤としては、適切なスペーサー（例えば、ｍ－マレイミドベンゾイル－Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステル）又はホモ二官能性（例えば、ジスクシンイミジルスベラート）により分離される２つの別個に反応性の基を有するヘテロ二官能性であるものが挙げられる。このようなリンカーは、Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，Ｉｌｌから入手可能である。

本発明の抗体分子が誘導体化（又は標識）され得る有用な検出可能剤は、蛍光化合物、様々な酵素、補欠分子族、発光物質、生物発光物質、蛍光発光金属原子、例えばユーロピウム（Ｅｕ）及び他のアンタニド（ａｎｔｈａｎｉｄｅ）及び放射活性物質（下記）を含む。代表的な蛍光検出可能剤としては、フルオレセイン、フルオレセインイソチイオシアネート、ローダミン、５ジメチルアミン－１－ナフタレンスルホニルクロリド、フィコエリスリンなどが挙げられる。抗体は、検出可能酵素、例えばアルカリホスファターゼ、ホースラディッシュペルオキシダーゼ、β－ガラクトシダーゼ、アセチルコリンエステラーゼ、グルコースオキシダーゼなどでも誘導体化され得る。抗体が検出可能酵素で誘導体化される場合、これは、検出可能反応生成物を生成させるために酵素が使用するさらなる試薬を添加することにより検出され得る。例えば、検出可能剤ホースラディッシュペルオキシダーゼが存在する場合、過酸化水素及びジアミノベンジジンの添加は、検出可能である色付きの反応生成物につながる。抗体分子は、補欠分子族（例えば、ストレプトアビジン／ビオチン及びアビジン／ビオチン）でも誘導体化され得る。例えば、抗体は、ビオチンで誘導体化され、アビジン又はストレプトアビジン結合の間接的測定を通して検出され得る。適切な蛍光物質の例としては、ウンベリフェロン、フルオレセイン、フルオレセインイソチイオシアネート、ローダミン、ジクロロトリアジニルアミンフルオレセイン、塩化ダンシル又はフィコエリスリンが挙げられ；発光物質の例としては、ルミノールが挙げられ；生物発光物質の例としては、ルシフェラーゼ、ルシフェリン及びエクオリンが挙げられる。

標識される抗体分子は、（ｉ）アフィニティークロマトグラフィー又は免疫沈降などの標準的技術により予め決定された抗原を単離すること；（ｉｉ）タンパク質発現の存在量及びパターンを評価するために（例えば、細胞溶解液又は細胞上清中で）予め決定された抗原を検出すること；（ｉｉｉ）臨床試験手順の一部として組織中でタンパク質レベルを監視するため、例えばある種の処置レジメンの有効性を判定することを含め、多くの状況において、例えば診断的及び／又は実験的に使用され得る。

抗体分子は、別の分子実体、一般的には標識又は治療（例えば、細胞傷害性又は細胞分裂阻害）剤又は部分と複合化され得る。診断又は治療適用において放射活性アイソトープを使用し得る。

本発明は、放射性標識抗体分子及びその標識方法を提供する。一実施形態では、抗体分子を標識する方法が開示される。本方法は、抗体分子をキレート剤と接触させて、それにより複合化抗体を作製することを含む。

上で論じられるように、本抗体分子は、治療剤と複合化され得る。治療活性のある放射性同位体は、既に言及されている。他の治療剤の例としては、タキソール、サイトカラシンＢ、グラミシジンＤ、臭化エチジウム、エメチン、マイトマイシン、エトポシド、テノポシド、ビンクリスチン、ビンブラスチン、コルヒチン、ドキソルビシン、ダウノルビシン、ジヒドロキシアントラシンジオン、ミトキサントロン、ミスラマイシン、アクチノマイシンＤ、１－デヒドロテストステロン、グルココルチコイド、プロカイン、テトラカイン、リドカイン、プロプラノロール、ピューロマイシン、マイタンシノイド、例えばマイタンシノール（例えば、米国特許第５，２０８，０２０号明細書を参照されたい）、ＣＣ－１０６５（例えば、米国特許第５，４７５，０９２号明細書、同第５，５８５，４９９号明細書、同第５，８４６、５４５号明細書を参照されたい）及びその類似体又はホモローグが挙げられる。治療剤としては、代謝拮抗剤（例えば、メトトレキサート、６－メルカプトプリン、６－チオグアニン、シタラビン、５－フルオロウラシルデカルバジン）、アルキル化剤（例えば、メクロレタミン、チオエパ（ｔｈｉｏｅｐａ）クロランブシル、ＣＣ－１０６５、メルファラン、カルムスチン（ＢＳＮＵ）及びロムスチン（ＣＣＮＵ）、シクロトスファミド（ｃｙｃｌｏｔｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、ブスルファン、ジブロモマンニトール、ストレプトゾトシン、マイトマイシンＣ及びｃｉｓ－ジクロロジアミン白金（ＩＩ）（ＤＤＰ）シスプラチン）、アントラサイクリニーズ（ａｎｔｈｒａｃｙｃｌｉｎｉｅｓ）（例えば、ダウノルビシン（以前のダウノマイシン）及びドキソルビシン）、抗生物質（例えば、ダクチノマイシン（以前のアクチノマイシン）、ブレオマイシン、ミスラマイシン及びアントラマイシン（ＡＭＣ））及び抗有糸分裂剤（例えば、ビンクリスチン、ビンブラスチン、タキソール及びマイタンシノイド）が挙げられるが、限定されない。

一態様では、本開示は、本明細書中で開示される標的、例えばＴＩＭ－３に特異的に結合する標的結合分子を提供する方法を提供する。例えば、標的結合分子は、抗体分子である。本方法は、ヒト標的タンパク質の対応する部分に対して相同である（少なくとも７０、７５、８０、８５、８７、９０、９２、９４、９５、９６、９７、９８％同一である）が、少なくとも１つのアミノ酸（例えば、少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８又は９つのアミノ酸）が異なる非ヒトタンパク質の少なくとも一部分を含む標的タンパク質を提供すること；抗原に特異的に結合する抗体分子を得ること；及び標的タンパク質の活性調整において結合剤の有効性を評価することを含む。本方法は、結合剤（例えば、抗体分子）又は誘導体（例えば、ヒト化抗体分子）をヒト対象に投与することをさらに含み得る。

本開示は、上の抗体分子、ベクター及びその宿主細胞をコードする単離核酸分子を提供する。核酸分子としては、ＲＮＡ、ゲノムＤＮＡ及びｃＤＮＡが挙げられるが、限定されない。

１．代表的な抗ＴＩＭ－３抗体分子
一実施形態では、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、その全体において参照により組み込まれる、「Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓ ｔｏ ＴＩＭ－３ ａｎｄ Ｕｓｅｓ Ｔｈｅｒｅｏｆ」という名称の２０１５年８月６日に公開された米国特許出願公開第２０１５／０２１８２７４号明細書で開示されている。

一実施形態では、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、表７で示されるアミノ酸配列を含む（例えば、表７で開示されるＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ１１又はＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ０３の重及び軽鎖可変領域配列から）か、又は表７で示されるヌクレオチド配列によりコードされる重及び軽鎖可変領域から少なくとも１、２、３、４、５又は６つの相補性決定領域（ＣＤＲ）（又はＣＤＲ全てをまとめて）を含む。いくつかの実施形態では、（例えば、表７で設定されるとおり）ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ定義に従う。いくつかの実施形態では、（例えば、表７で設定されるとおり）ＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａ定義に従う。一実施形態では、表７で示されるか又は表７で示されるヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列と比較して、１つ以上のＣＤＲ（又はＣＤＲ全てをまとめて）は、１、２、３、４、５、６つ又はそれを超える変化、例えばアミノ酸置換（例えば、保存的アミノ酸置換）又は欠失を有する。

一実施形態では、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、それぞれ表７で開示される、配列番号８０１のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号８０２のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列及び配列番号８０３のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）と；配列番号８１０のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号８１１のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列及び配列番号８１２のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）とを含む。一実施形態では、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、それぞれ表７で開示される、配列番号８０１のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号８２０のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列及び配列番号８０３のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）と；配列番号８１０のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号８１１のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列及び配列番号８１２のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）とを含む。

一実施形態では、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、配列番号８０６のアミノ酸配列又は配列番号８０６と少なくとも８５％、９０％、９５％若しくは９９％以上同一のアミノ酸配列を含むＶＨを含む。一実施形態では、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、配列番号８１６のアミノ酸配列又は配列番号８１６と少なくとも８５％、９０％、９５％若しくは９９％以上同一のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一実施形態では、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、配列番号８２２のアミノ酸配列又は配列番号８２２と少なくとも８５％、９０％、９５％若しくは９９％以上同一のアミノ酸配列を含むＶＨを含む。一実施形態では、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、配列番号８２６のアミノ酸配列又は配列番号８２６と少なくとも８５％、９０％、９５％若しくは９９％以上同一のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。一実施形態では、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、配列番号８０６のアミノ酸配列を含むＶＨと、配列番号８１６のアミノ酸配列を含むＶＬとを含む。一実施形態では、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、配列番号８２２のアミノ酸配列を含むＶＨと、配列番号８２６のアミノ酸配列を含むＶＬとを含む。

一実施形態では、本抗体分子は、配列番号８０７のヌクレオチド配列又は配列番号８０７と少なくとも８５％、９０％、９５％若しくは９９％以上同一のヌクレオチド配列によりコードされるＶＨを含む。一実施形態では、本抗体分子は、配列番号８１７のヌクレオチド配列又は配列番号８１７と少なくとも８５％、９０％、９５％若しくは９９％以上同一のヌクレオチド配列によりコードされるＶＬを含む。一実施形態では、本抗体分子は、配列番号８２３のヌクレオチド配列又は配列番号８２３と少なくとも８５％、９０％、９５％若しくは９９％以上同一のヌクレオチド配列によりコードされるＶＨを含む。一実施形態では、本抗体分子は、配列番号８２７のヌクレオチド配列又は配列番号８２７と少なくとも８５％、９０％、９５％若しくは９９％以上同一のヌクレオチド配列によりコードされるＶＬを含む。一実施形態では、本抗体分子は、配列番号８０７のヌクレオチド配列によりコードされるＶＨと、配列番号８１７のヌクレオチド配列によりコードされるＶＬとを含む。一実施形態では、本抗体分子は、配列番号８２３のヌクレオチド配列によりコードされるＶＨと、配列番号８２７のヌクレオチド配列によりコードされるＶＬとを含む。

一実施形態では、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、配列番号８０８のアミノ酸配列又は配列番号８０８と少なくとも８５％、９０％、９５％若しくは９９％以上同一のアミノ酸配列を含む重鎖を含む。一実施形態では、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、配列番号８１８のアミノ酸配列又は配列番号８１８と少なくとも８５％、９０％、９５％若しくは９９％以上同一のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。一実施形態では、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、配列番号８２４のアミノ酸配列又は配列番号８２４と少なくとも８５％、９０％、９５％若しくは９９％以上同一のアミノ酸配列を含む重鎖を含む。一実施形態では、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、配列番号８２８のアミノ酸配列又は配列番号８２８と少なくとも８５％、９０％、９５％若しくは９９％以上同一のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。一実施形態では、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、配列番号８０８のアミノ酸配列を含む重鎖と、配列番号８１８のアミノ酸配列を含む軽鎖とを含む。一実施形態では、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、配列番号８２４のアミノ酸配列を含む重鎖と、配列番号８２８のアミノ酸配列を含む軽鎖とを含む。

一実施形態では、本抗体分子は、配列番号８０９のヌクレオチド配列又は配列番号８０９と少なくとも８５％、９０％、９５％若しくは９９％以上同一のヌクレオチド配列によりコードされる重鎖を含む。一実施形態では、本抗体分子は、配列番号８１９のヌクレオチド配列又は配列番号８１９と少なくとも８５％、９０％、９５％若しくは９９％以上同一のヌクレオチド配列によりコードされる軽鎖を含む。一実施形態では、本抗体分子は、配列番号８２５のヌクレオチド配列又は配列番号８２５と少なくとも８５％、９０％、９５％若しくは９９％以上同一のヌクレオチド配列によりコードされる重鎖を含む。一実施形態では、本抗体分子は、配列番号８２９のヌクレオチド配列又は配列番号８２９と少なくとも８５％、９０％、９５％若しくは９９％以上のヌクレオチド配列によりコードされる軽鎖を含む。一実施形態では、本抗体分子は、配列番号８０９のヌクレオチド配列によりコードされる重鎖と、配列番号８１９のヌクレオチド配列によりコードされる軽鎖とを含む。一実施形態では、本抗体分子は、配列番号８２５のヌクレオチド配列によりコードされる重鎖と、配列番号８２９のヌクレオチド配列によりコードされる軽鎖とを含む。

本明細書中に記載の抗体分子は、その全体において参照により組み込まれる米国特許出願公開第２０１５／０２１８２７４号明細書により記載されるベクター、宿主細胞及び方法により作製され得る。

一実施形態では、本抗ＴＩＭ－３抗体分子は、ＬＹ３３２１３６７（Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ）である。一実施形態では、本抗ＴＩＭ－３抗体分子は、ＬＹ３３２１３６７の、ＣＤＲ配列（又はＣＤＲ配列全てをまとめて）、重鎖可変領域配列及び／若しくは軽鎖可変領域配列又は重鎖配列及び／若しくは軽鎖配列の１つ以上を含む。

一実施形態では、本抗ＴＩＭ－３抗体分子は、Ｓｙｍ０２３（Ｓｙｍｐｈｏｇｅｎ）である。一実施形態では、本抗ＴＩＭ－３抗体分子は、Ｓｙｍ０２３の、ＣＤＲ配列（又はＣＤＲ配列全てをまとめて）、重鎖可変領域配列及び／若しくは軽鎖可変領域配列又は重鎖配列及び／若しくは軽鎖配列の１つ以上を含む。

一実施形態では、本抗ＴＩＭ－３抗体分子は、ＢＧＢ－Ａ４２５（Ｂｅｉｇｅｎｅ）である。一実施形態では、本抗ＴＩＭ－３抗体分子は、ＢＧＢ－Ａ４２５の、ＣＤＲ配列（又はＣＤＲ配列全てをまとめて）、重鎖可変領域配列及び／若しくは軽鎖可変領域配列又は重鎖配列及び／若しくは軽鎖配列の１つ以上を含む。

一実施形態では、本抗ＴＩＭ－３抗体分子は、ＩＮＣＡＧＮ－２３９０（Ａｇｅｎｕｓ／Ｉｎｃｙｔｅ）である。一実施形態では、本抗ＴＩＭ－３抗体分子は、ＩＮＣＡＧＮ－２３９０の、ＣＤＲ配列（又はＣＤＲ配列全てをまとめて）、重鎖可変領域配列及び／若しくは軽鎖可変領域配列又は重鎖若しくは軽鎖配列の１つ以上を含む。

一実施形態では、本抗ＴＩＭ－３抗体分子は、ＭＢＳ－９８６２５８（ＢＭＳ／Ｆｉｖｅ Ｐｒｉｍｅ）である。一実施形態では、本抗ＴＩＭ－３抗体分子は、ＭＢＳ－９８６２５８の、ＣＤＲ配列（又はＣＤＲ配列全てをまとめて）、重鎖可変領域配列及び／若しくは軽鎖可変領域配列又は重鎖配列及び／若しくは軽鎖配列の１つ以上を含む。

一実施形態では、本抗ＴＩＭ－３抗体分子は、ＲＯ－７１２１６６１（Ｒｏｃｈｅ）である。一実施形態では、本抗ＴＩＭ－３抗体分子は、ＲＯ－７１２１６６１の、ＣＤＲ配列（又はＣＤＲ配列全てをまとめて）、重鎖可変領域配列及び／若しくは軽鎖可変領域配列又は重鎖配列及び／若しくは軽鎖配列の１つ以上を含む。

一実施形態では、本抗ＴＩＭ－３抗体分子は、ＬＹ－３４１５２４４（Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ）である。一実施形態では、本抗ＴＩＭ－３抗体分子は、ＬＹ－３４１５２４４の、ＣＤＲ配列（又はＣＤＲ配列全てをまとめて）、重鎖可変領域配列及び／若しくは軽鎖可変領域配列又は重鎖配列及び／若しくは軽鎖配列の１つ以上を含む。

さらなる既知の抗ＴＩＭ－３抗体としては、例えば、それらの全体において参照により組み込まれる国際公開第２０１６／１１１９４７号パンフレット、同第２０１６／０７１４４８号パンフレット、同第２０１６／１４４８０３号パンフレット、米国特許第８，５５２，１５６号明細書、同第８，８４１，４１８号明細書及び同第９，１６３，０８７号明細書に記載のものが挙げられる。

一実施形態では、本抗ＴＩＭ－３抗体は、本明細書中に記載の抗ＴＩＭ－３抗体の１つとして、ＴＩＭ－３上の同じエピトープとの結合に対して競合し、且つ／又は同じエピトープに結合する抗体である。

一実施形態では、本抗ＴＩＭ－３抗体分子は、ＡＢＴＩＭ３、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ０１、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ０２、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ０３、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ０４、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ０５、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ０６、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ０７、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ０８、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ０９、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ１０、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ１１、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ１２、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ１３、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ１４、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ１５、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ１６、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ１７、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ１８、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ１９、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ２０、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ２１、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ２２、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ２３のアミノ酸配列を含め、少なくとも１つ若しくは２つの重鎖可変ドメイン（任意選択的に定常領域を含む）、少なくとも１つ若しくは２つの軽鎖可変ドメイン（任意選択的に定常領域を含む）又は両方を含むか；又は米国特許出願公開第２０１５／０２１８２７４号明細書の表１～４に記載のような；又は表１～４のヌクレオチド配列によりコードされる；又は上述の配列の何れかと実質的に同一である（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％又それを超えて同一である）配列を含む。本抗ＴＩＭ－３抗体分子は、任意選択的に、米国特許出願公開第２０１５／０２１８２７４号明細書で示されるような重鎖、軽鎖又は両方からのリーダー配列；又はそれと実質的に同一である配列を含む。

また別の実施形態では、本抗ＴＩＭ－３抗体分子は、本明細書中に記載の抗体、例えばＡＢＴＩＭ３、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ０１、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ０２、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ０３、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ０４、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ０５、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ０６、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ０７、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ０８、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ０９、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ１０、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ１１、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ１２、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ１３、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ１４、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ１５、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ１６、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ１７、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ１８、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ１９、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ２０、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ２１、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ２２、ＡＢＴＩＭ３－ｈｕｍ２３の何れかから選択される抗体の又は米国特許出願公開第２０１５／０２１８２７４号明細書の表１～４に記載のような；又は表１～４のヌクレオチド配列によりコードされる、重鎖可変領域及び／又は軽鎖可変領域；又は上述の配列の何れかと実質的に同一である（例えば、少なくとも８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、９９％又それを超えて同一である）配列からの少なくとも１、２又は３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。

また別の実施形態では、抗ＴＩＭ－３抗体分子は、米国特許出願公開第２０１５／０２１８２７４号明細書の表１～４で示されるか又は表１～４で示されるヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列を含む重鎖可変領域からの少なくとも１、２又は３つのＣＤＲ（又はＣＤＲ全てをまとめて）を含む。一実施形態では、ＣＤＲ（又はＣＤＲ全てをまとめて）の１つ以上は、表１～４で示されるか又は表１～４で示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列と比較して、１、２、３、４、５、６つ又はそれを超える変化、例えばアミノ酸置換又は欠失を有する。

また別の実施形態では、本抗ＴＩＭ－３抗体分子は、米国特許出願公開第２０１５／０２１８２７４号明細書の表１～４で示されるか又は表１～４で示されるヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域からの少なくとも１、２又は３つのＣＤＲ（又はＣＤＲ全てをまとめて）を含む。一実施形態では、ＣＤＲの１つ以上（又はＣＤＲ全てをまとめて）は、表１～４で示されるか又は表１～４で示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列と比較して、１、２、３、４、５、６つ又はそれを超える変化、例えばアミノ酸置換又は欠失を有する。特定の実施形態では、本抗ＴＩＭ－３抗体分子は、軽鎖ＣＤＲにおける置換、例えば軽鎖のＣＤＲ１、ＣＤＲ２及び／又はＣＤＲ３において１つ以上の置換を含む。

別の実施形態では、本抗ＴＩＭ－３抗体分子は、米国特許出願公開第２０１５／０２１８２７４号明細書の表１～４で示されるか又は表１～４で示されるヌクレオチド配列によりコードされるアミノ酸配列を含む重及び軽鎖可変領域からの少なくとも１、２、３、４、５又は６つのＣＤＲ（又はＣＤＲ全てをまとめて）を含む。一実施形態では、ＣＤＲ（又はＣＤＲ全てをまとめて）の１つ以上は、表１～４で示されるか又は表１～４で示されるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸配列と比較して、１、２、３、４、５、６つ又はそれを超える変化、例えばアミノ酸置換又は欠失を有する。

ＭＢＧ４５３は、ホスファチジルセリン（ＰｔｄＳｅｒ）に対するＴＩＭ－３の結合を阻止する高親和性、ヒト化抗ＴＩＭ－３ ＩｇＧ４モノクローナル抗体である。

２．他の代表的な抗ＴＩＭ－３抗体分子
一実施形態では、本抗ＴＩＭ－３抗体分子は、ＴＳＲ－０２２（ＡｎａｐｔｙｓＢｉｏ／Ｔｅｓａｒｏ）である。一実施形態では、本抗ＴＩＭ－３抗体分子は、ＴＳＲ－０２２の、ＣＤＲ配列（又はＣＤＲ配列全てをまとめて）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列又は重鎖若しくは軽鎖配列の１つ以上を含む。一実施形態では、本抗ＴＩＭ－３抗体分子は、例えば、表８で開示されるような、ＡＰＥ５１３７又はＡＰＥ５１２１の、ＣＤＲ配列（又はＣＤＲ配列全てをまとめて）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列又は重鎖若しくは軽鎖配列の１つ以上を含む。ＡＰＥ５１３７、ＡＰＥ５１２１及び他の抗ＴＩＭ－３抗体は、その全体において参照により組み込まれる国際公開第２０１６／１６１２７０号パンフレットで開示されている。

一実施形態では、本抗ＴＩＭ－３抗体分子は、抗体クローンＦ３８－２Ｅ２である。一実施形態では、本抗ＴＩＭ－３抗体分子は、Ｆ３８－２Ｅ２の、ＣＤＲ配列（又はＣＤＲ配列全てをまとめて）、重鎖若しくは軽鎖可変領域配列又は重鎖若しくは軽鎖配列の１つ以上を含む。

さらなる既知の抗ＴＩＭ－３抗体としては、例えば、それらの全体において参照により組み込まれる国際公開第２０１６／１１１９４７号パンフレット、同第２０１６／０７１４４８号パンフレット、同第２０１６／１４４８０３号パンフレット、米国特許第８，５５２，１５６号明細書、同第８，８４１，４１８号明細書及び同第９，１６３，０８７号明細書に記載のものが挙げられる。

一実施形態では、本抗ＴＩＭ－３抗体は、本明細書中に記載の抗ＴＩＭ－３抗体の１つと同じＴＩＭ－３上のエピトープとの結合に対して競合し、且つ／又はそれと結合する抗体である。

「ＨＤＭ２－ｐ５３相互作用阻害剤」又は略して「ＨＤＭ２阻害剤」という用語は、「ＨＤＭ２ｉ」、「Ｈｄｍ２ｉ」、「ＭＤＭ２阻害剤」、「ＭＤＭ２ｉ」、「Ｍｄｍ２ｉ」とも呼ばれ、本明細書中では、時間分解蛍光エネルギー移動（ＴＲ－ＦＲＥＴ）アッセイにより測定して、１０μＭ未満、好ましくは１μＭ未満、好ましくはｎＭの範囲のＩＣ_５０でＨＤＭ－２／ｐ５３又はＨＤＭ－４／ｐ５３相互作用を阻害するあらゆる化合物を指す。ｐ５３－Ｈｄｍ２及びｐ５３－Ｈｄｍ４相互作用の阻害は、時間分解蛍光エネルギー移動（ＴＲ－ＦＲＥＴ）により測定される。蛍光エネルギー移動（又はＦｏｅｒｓｔｅｒ共鳴エネルギー移動）は、ドナーとアクセプターの５つの蛍光分子との間のエネルギー移動を説明する。このアッセイに対して、Ｃ末端ビオチン部分をタグ付加されたＭＤＭ２タンパク質（アミノ酸２～１８８）及びＭＤＭ４タンパク質（アミノ酸２～１８５）を、ドナーフルオロフォアとしての役割を果たすユーロピウム標識されるストレプトアビジン（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ，ＵＳＡ）と組み合わせて使用する。ｐ５３由来のＣｙ５標識ペプチドＣｙ５－ＴＦＳＤＬＷＫＬＬ（配列番号１００７）（ｐ５３ ａａ１８～２６）は、エネルギーアクセプターである。３４０ｎｍでのドナー１０分子の励起時、ＭＤＭ２又はＭＤＭ４とｐ５３ペプチドとの間の結合相互作用は、エネルギー移動及び６６５ｎｍのアクセプター発光波長での反応促進を誘導する。ＭＤＭ２又はＭＤＭ４のｐ５３結合部位に対する阻害剤分子結合によるｐ５３－ＭＤＭ２又はｐ５３－ＭＤＭ４錯体の形成の破壊の結果、６１５ｎｍでのドナー発光が増加する。比率計測ＦＲＥＴアッセイ読み取りは、時間分解モードで測定した２つの別個の蛍光シグナルの１５個の生データから計算される（カウント値６６５ｎｍ／カウント値６１５ｎｍ×１０００）。このアッセイは、以下の手順に従って行われ得る：試験は、反応緩衝液（ＰＢＳ、１２５ｍＭ ＮａＣｌ、０．００１％Ｎｏｖｅｘｉｎ（タンパク質の溶解度及び安定性を向上させるために設計された炭水化物ポリマー（Ｎｏｖｅｘｉｎポリマー）からなり；Ｎｏｖｅｘｉｎ Ｌｔｄ．，ａｍｂｒｉｄｇｅｓｈｉｒｅ，Ｕｎｉｔｅｄ Ｋｉｎｇｄｏｍ）、ゼラチン０．０１％、０．２％Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（エチルエノキシド及びプロピレンオキシドからのブロックコポリマー、ＢＡＳＦ，Ｌｕｄｗｉｇｓｈａｆｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）、１ｍＭ ＤＴＴ）中の２μＬユーロピウム２０標識ストレプトアビジン（最終濃度２．５ｎＭ）と９０％ＤＭＳＯ／１０％Ｈ２Ｏ中で希釈される１００ｎＬの化合物（３．２％最終ＤＭＳＯ濃度）を組み合わせ、続いてアッセイ緩衝液中で希釈した０．５μＬ ＭＤＭ２－Ｂｉｏ又はＭＤＭ４－Ｂｉｏ（最終濃度１０ｎＭ）を添加することにより、３．１μＬの総体積で白色１５３６ｗマイクロタイタープレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ Ｂｉｏ－Ｏｎｅ ＧｍｂＨ，Ｆｒｉｃｋｅｎｈａｕｓｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）で行う。この溶液を室温で１５分間予め温置し、続いてアッセイ緩衝液中の０．５μＬ Ｃｙ５－ｐ５３ペプチドを添加する（最終濃度２０ｎＭ）。プレートの読み取りを行う前に室温で１０分間温置する。試料の測定に対して、以下の設定３０でＡｎａｌｙｓｔ ＧＴマルチモードマイクロプレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）を使用する：ダイクロイックミラー３８０ｎｍ、励起３３０ｎｍ、発光ドナー６１５ｎｍ及び発光アクセプター６６５ｎｍ。ＸＬｆｉｔを用いて曲線フィッティングを行うことによりＩＣ５０値を計算する。指定されない場合、試薬は、Ｓｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ，ＵＳＡから購入する。

本発明によるＨＤＭ２阻害剤は、ＨＤＭ２０１、即ち（Ｓ）－５－（５－クロロ－１－メチル－２－オキソ－１，２－ジヒドロ－ピリジン－３－イル）－６－（４－クロロ－フェニル）－２－（２，４－ジメトキシ－ピリミジン－５－イル）－１－イソプロピル－５，６－ジヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，４－ｄ］イミダゾール－４－オンである。

ＨＤＭ２０１は、遊離分子として又は塩、溶媒和物、水和物、錯体、共結晶若しくはそれらの混合物を含む何らかの他の非共有結合誘導体で存在し得る。ＨＤＭ２０１は、酸誘導体として存在し得る。酸誘導体は、酸とともにＨＤＭ２０１から形成される塩若しくはＨＤＭ２０１酸錯体であり得るか又はＨＤＭ２０１酸共結晶としてのものであり得る。好ましくは、ＨＤＭ２０１は、共結晶として存在する。好ましくは、酸は、コハク酸である。最も好ましくは、ＨＤＭ２０１は、コハク酸共結晶として存在する。ＨＤＭ２０１の非共有結合誘導体は、国際公開第２０１３／１１１１０５号パンフレットに記載されている。

好ましい実施形態では、ＨＤＭ２０１は、コハク酸－（６Ｓ）－５－（５－クロロ－１－メチル－２－オキソ－１，２－ジヒドロピリジン－３－イル）－６－（４－クロロフェニル）－２－（２，４ジメトキシピリミジン－５－イル）－１－イソプロピル－５，６－ジヒドロピロロ［３，４－ｄ］イミダゾール－４（１Ｈ）－オン（１：１）と呼ばれる。

例えば、本明細書中でＨＤＭ２０１の投与量にｍｇ（ミリグラム）で言及する場合、これは、塩、溶媒和物、錯体又は共結晶と異なり、遊離塩基としてのＨＤＭ２０１の量であることを意味する。

「血液腫瘍」という用語は、本明細書中で血液形成組織、例えば骨髄など、又は免疫系の細胞で始まる癌を指す。血液腫瘍の例は、白血病、リンパ腫及び多発性骨髄腫である。これらは、血液癌と呼ばれることも多い。

本発明の好ましい血液腫瘍は、白血病である。より好ましくは、血液腫瘍は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）及び急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）から選択される。さらにより好ましくは、血液腫瘍は、ＡＭＬ及び／又はＭＤＳである。

本発明の特に好ましい血液腫瘍は、ＴＰ５３野生型血液腫瘍である。より好ましくは、本発明のＴＰ５３野生型血液腫瘍は、ＴＰ５３野生型白血病である。さらにより好ましくは、ＴＰ５３野生型血液腫瘍は、ＴＰ５３野生型急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、ＴＰ５３野生型骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）及びＴＰ５３野生型急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）から選択される。さらにより好ましくは、ＴＰ５３野生型血液腫瘍は、ＴＰ５３野生型ＡＭＬ及び／又はＭＤＳである。

本発明によれば、薬物ＨＤＭ２０１は、２８日（４週間）処置サイクルの最初の３～７日のそれぞれに投与され、好ましくは、本薬物は、２８日処置サイクルの最初の４～６日のそれぞれ、より好ましくは２８日処置サイクルの最初の５日に投与される。

「２８日処置サイクルの最初の５日のそれぞれに」は、第１日（ｄ１）、ｄ２、ｄ３、ｄ４及びｄ５にＨＤＭ２０１が患者に投与され、その後、第６日～第２８日まで薬物投与を行わない期間（休薬期間又は休息期間とも呼ばれる）を置くことを意味する。第２９日に次の処置サイクルを開始し、その日が次のこの処置サイクルのｄ１となる。

好ましくは、本薬物は、各投与日（即ち２８日サイクルのｄ１～ｄ５）におよそ同じ時間に投与される。好ましくは、本薬物は、各投与日に１日１回（ｑｄ）投与される。より好ましくは、本薬物は、午前中に投与される。

好ましくは、本薬物は、絶食状態、即ち少なくとも食事の１時間前以前又は食事の２時間後以降に投与される。

好ましくは、本薬物は、コップ１杯の水とともに且つカプセル又は錠剤を噛まずに摂取される。

患者が複数のカプセル／錠剤を摂取すべき用量レベルに割り当てられる場合、カプセル／錠剤は、できる限り短時間内、例えば５分以内に連続的に摂取すべきである。

好ましくは、薬物投与は、経口送達、即ち経口投与により、経口（ｐ．ｏ．）で行う。

好ましくは、本薬物は、経口剤形の形態、より好ましくは固体経口剤形、例えばカプセル又は錠剤の形態で提供される。

用量範囲が本明細書中で与えられる場合、例えば「１日薬物用量が５０ｍｇ～１００ｍｇである」場合、エンドポイント及びこれらのエンドポイント間のあらゆる全部のｍｇ数、例えば５０ｍｇ、５１ｍｇ、５２ｍｇ、５３ｍｇ、５４ｍｇ、５５ｍｇ、５６ｍｇ、５７ｍｇ、．．．９８ｍｇ、９９ｍｇ、１００ｍｇが本明細書により開示されるものとする。

本発明のさらなる態様が提供される場合：
本明細書中に記載のような実施形態の何れか１つによるＨＤＭ２０１と抗ＴＩＭ－３抗体分子との組み合わせであって、１つ以上の他の／さらなる抗癌剤と組み合わされ、好ましくは、前記抗癌剤は、癌免疫薬（例えば、ＰＤ－１［例えば、ＰＤＲ００１（Ｎｏｖａｒｔｉｓ，ＩＮＮ スパルタリズマブ）］、ＰＤ－Ｌ１、ＬＡＧ－３、ＧＴＩＲ、ＴＧＦ－ベータ、ＩＬ１５阻害剤）、ＦＬＴ３阻害剤（例えば、ギルテリニブ、キザルチニブ、ミドスタウリン）、ＢＣＬ２阻害剤（例えば、ナビトクラックス、ベネトクラックス）、他のＨＤＭ２阻害剤（例えば、イダサヌトリン、ＡＭＧ２３２、ＤＳ－３０３２Ｂ、ＡＬＲＮ６９２４／ＡＴＳＰ７０４１）、低メチル化剤（ＨＭＡ）（例えば、Ｖｉｄａｚａ［アザシチジン、５－アザシチジン］、Ｄａｃｏｇｅｎ［デシタビン］、グアデシタビン）、アントラサイクリン（例えば、イダルビシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、ルビドマイシン）；抗ＣＤ３３抗体（例えば、マイロターグ［ゲムツズマブ］、バダスツキシマブ）及び他の薬剤（例えば、ＡｒａＣ［シタラビン、アラシチン］）から選択される。

好ましくは、ＨＤＭ２０１と抗ＴＩＭ－３抗体分子との組み合わせは、シタラビン（Ａｒａ－Ｃ）、アントラサイクリン、ダウノルビシン、イダルビシン、ルビドマイシン、イダマイシン、ミドスタウリン及びアザシチジンから選択される１つ以上の治療活性剤と組み合わされる。

他の特定の好ましい実施形態では、ＨＤＭ２０１と抗ＴＩＭ－３抗体分子との組み合わせは、ＢＣＬ２阻害剤、好ましくはベネトクラックスと組み合わされる。

他の／さらなる活性剤は、ＨＤＭ２０１と同じ日又はＨＤＭ２０１用量が投与されない日に投与され得る。

本発明の実施形態に記載のような第２の医学的使用は、以下の様々な代替的な方式で述べられ得る。

癌の処置での使用のためのＨＤＭ２０１と抗ＴＩＭ－３抗体分子との組み合わせ。

有効量の、ＨＤＭ２０１と抗ＴＩＭ－３抗体分子との組み合わせを投与することを含む、癌の処置を必要とするヒト患者における癌の処置のための方法。

癌の処置のための薬剤の製造／調製のための、ＨＤＭ２０１と抗ＴＩＭ－３抗体分子との組み合わせの使用。

ＨＤＭ２０１と抗ＴＩＭ－３抗体分子との組み合わせを含む、癌の処置のための薬剤。

実施例１：ＨＤＭ２０１投与レジメンモデリング
血小板モデル
臨床試験ＣＨＤＭ２０１Ｘ２１０１の集団ＰＫ／ＰＤデータに基づき、疾患が血小板産生の制御に影響を与えることを認識するＡＭＬ患者血小板モデルを開発した。以下の図画は、このモデルを明らかにする。

骨髄芽球モデル
晩発性の効果、抵抗性成分により再現される時間での効果喪失を認識し、集中的な投与により抵抗性の影響が低下する、骨髄芽球ＰＫＰＤモデルを開発した。以下の図画は、このモデルを明らかにする。

模擬血小板及び芽球プロファイルからの重要な指標の誘導
実施例１及び２の集団ＰＫ／ＰＤモデルを使用して、個体間の変動性とともに経時的にＰＫ、血小板及び芽球プロファイルのシミュレーションを行った。

これらのプロファイルにおける投与レジメンの変更の影響を試験した。

考慮されたシミュレーション設計：サイクルの持続時間、用量レベル、投与回数、処置の持続時間、誘導／地固め期間。
重要な指標は、以下のとおりであった：経時的な血小板数がある一定の閾値を下回る／上回る患者の割合、ＰＫ閾値を上回る患者の割合、芽球値がベースラインを下回る日数。

Ｓｈｉｎｙ ｐａｃｋａｇｅとともにＲ（統計学ソフトウェア）を用いてシミュレーションを行った。

モデル確立のために、ＣＨＤＭ２０１Ｘ２１０１のＰＫ／ＰＤデータセットを使用し、ＮＬＭＥ推定（Ｍｏｎｏｌｉｘ ４．３．２）を行った。モデル構造及びパラメーター推定を以下で与える。これは、Ｒ／ｓｈｉｎｙに対するインプットを与えた。ＭＬＸＴＲＡＮモデルからの長期的データのシミュレーションのためにｍｌｘＲパッケージを使用した。

モデル構造

パラメーター推定

ＰＫＰＤシミュレーションからの重要な知見として、以下の事項を見出した：
・長期血小板枯渇、及び
・長期処置（＞６カ月）は、用量減量又は中断なく持続可能ではない：
－ 処置サイクル増加に伴う血小板数の漸減
－ サイクル３又は４を超えた際の芽球における薬物効果を制限する疾患抵抗性。

このシミュレーションは、ＡＭＬにおける第２相試験に対する用量及びレジメン選択を裏付ける。

臨床試験ＣＨＤＭ２０１Ｘ２１０１からの知識として、ＡＭＬにおけるＨＤＭ２１０の投与での課題は、以下のとおりである。
・累積的な血小板毒性
・地固めでの投与を妨げる造血回復の遅れがこの適応症に対するリスクをもたらす。

本シミュレーションにより、これらの課題が良好に制御される：
誘導の１又は２、好ましくは２サイクル後の用量減量。

臨床試験ＨＤＭ２０１Ａ２１０１での用量漸増ストラテジーを支援するために、本シミュレーションを使用した：レジメンＤ１～Ｄ７（４ｗｋサイクル）の代わりの新しいＤ１～Ｄ５（４ｗｋサイクル）レジメンを特定した。以下の表は、新しい用量漸増及び新しい投与レジメンの詳細を提供する。

実施例２：前臨床試験
ＨＤＭ２０１と抗ＴＩＭ３との組み合わせのインビボ薬理学
Ｃｏｌｏｎ２６結直腸癌（ＣＲＣ）同一遺伝子マウスモデルにおいて、ＨＤＭ２０１の抗腫瘍効果を単剤療法として又は抗ＴＩＭ３抗体との組み合わせで評価した。４０ｍｇ／ｋｇのＨＤＭ２０１は、腫瘍成長を阻害する一方、抗ＴＩＭ３抗体の添加の結果、相乗的な活性が生じ、持続性の腫瘍退縮が起こった。何れかの処置単独と比較した場合、組み合わせ群において完全腫瘍退縮（ＣＲ）の比率が上昇した（組み合わせで５例のＣＲ、ＨＤＭ２０１単独で１例のＣＲ及び抗ＴＩＭ３単独群で０回のＣＲ）。最終的に、ＨＤＭ２０１の抗ＴＩＭ３抗体との組み合わせは、図８でカプランマイヤー生存曲線により示されるように、長期生存のマウス数を顕著に増加させた。組み合わせアームにおけるこのロバストな抗腫瘍活性は、ＨＤＭ２０１による免疫調整と一致し、それにより、ＣＲを達成したマウスもＣｏｌｏｎ２６細胞に対して長期の特異的記憶を発現した。体重減少により測定される場合、同様の忍容性パターンは、ＨＤＭ２０１において単剤として及び抗ＴＩＭ３抗体との組み合わせで観察された。これらのデータをまとめると、ＨＤＭ２０１の抗ＴＩＭ３抗体との組み合わせにより、抗腫瘍反応が顕著に改善され、臨床でのこの組み合わせの探索が裏付けられることが明らかになる。

これらの前臨床データから、免疫競合的な同一遺伝子マウスモデルでのＭＤＭ２及びＴＩＭ３の同時遮断は、ロバストな抗腫瘍活性を誘導することが示される。ＨＤＭ２０１での処置後に長期生存した動物は抗腫瘍免疫を発現し、同じ腫瘍細胞での再チャレンジに対して耐性がある。

まとめると、これらのデータは、ＭＢＧ４５３と組み合わせたＨＤＭ２０１の臨床研究を裏付ける。

実施例３：臨床試験
ＭＢＧ４５３と組み合わせたＨＤＭ２０１の用量／レジメン及び処置の持続時間に対する根拠及び設計
これは、ＡＭＬ又は高リスクＭＤＳの対象でのＭＢＧ４５３と組み合わせたＨＤＭ２０１の第１ｂ相試験、多群非盲検試験である。

全対象について、ＴＰ５３ｗｔの状況は、少なくともエクソン５、６、７及び８で記載される突然変異がないことを特徴としなければならない。

対象は、ＭＢＧ４５３と組み合わせてＨＤＭ２０１を投与される。

ＨＤＭ２０１用量を漸増させ得る（試験しようとする暫定的な用量レベルについては、表実施例３－１を参照されたい）。反復投与による累積的なＨＤＭ２０１が関連する安全性の影響についての可能性に基づき、対象は、サイクル３以降から、１日４０ｍｇ（＞２００ｍｇ／サイクル）の計画された最大用量を超えるＨＤＭ２０１用量を投与されない。

漸増パートの完了時、ＡＭＬ及び高リスクＭＤＳ対象においてＭＢＧ４５３と組み合わせたＨＤＭ２０１のＭＴＤ及び／又はＲＤを決定する。

試験処置は、２８日投与サイクルで行う。

各処置群は、将来的な使用に対するＭＴＤ及び／又はＲＤ及びレジメンが特定されるまでＨＤＭ２０１＋ＭＢＧ４５３で処置される３～６名の対象のコホートを登録する。

試験処置の安全性、忍容性、ＰＫ及び予備的な活性をより詳細に理解するために、一方又は両方の適応症において、予め試験し、公表される安全用量レベルで１～１０名の対象のさらなるコホートを登録させ得る。

この試験では、用量及びレジメンの選択は、ＨＤＭ２０１に対するヒト初回臨床試験ＣＨＤＭ２０１Ｘ２１０１からの現在利用可能な前臨床及び臨床安全性、有効性、ＰＫ及びＰＫ／ＰＤモデリング情報及びＭＢＧ４５３に対するＣＭＢＧ４５３Ｘ２１０１及びＣＰＤＲ００１Ｘ２１０５治験からの臨床データに基づく。

ＡＭＬ対象におけるＦＩＨ治験からの安全性及び有効性データから、２８日サイクルの第１日～第７日のＨＤＭ２０１の１日１回投与は、組み合わせを追跡するために興味深いことが示唆される。

このレジメンでは、ＲＤは、ＣＨＤＭ２０１Ｘ２１０１試験において血液腫瘍では４５ｍｇ ＨＤＭ２０１として決定されている。さらに、ラット異種移植データの前臨床ＰＫＰＤ腫瘍成長阻害モデリング並びに腫瘍成長の臨床ＰＫＰＤモデリング及び固形及び血液腫瘍からの骨髄芽球データから、ＨＤＭ２０１有効性は、１サイクルあたりの累積曝露により主に発揮されると思われるため、この元のレジメンから５連続日までＨＤＭ２０１投与を短縮することは、依然として適切な抗腫瘍活性につながることが示された（Ｍｅｉｌｌｅ Ｃ，Ｇｕｅｒｒｅｉｒｏ Ｎ，Ｊｕｌｌｉｏｎ Ａ ｅｔ ａｌ（２０１７）Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｄｏｓｅ ａｎｄ ｓｃｈｅｄｕｌｅ ｏｆ ａｎ ＨＤＭ２ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ＮＶＰ－ＨＤＭ２０１ ｉｎ ａ ｆｉｒｓｔ－ｉｎ－ｈｕｍａｎ Ｐｈａｓｅ Ｉ ｓｔｕｄｙ ｕｓｉｎｇ ａ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ－ｂａｓｅｄ ＰＫ／ＰＤ ｍｏｄｅｌ．Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｆｏｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ａｎｎｕａｌ Ｍｅｅｔｉｎｇ ２０１７；２０１７ Ａｐｒ１－５；Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，ＤＣ．Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ（ＰＡ）：ＡＡＣＲ；Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２０１７；７７（１３ Ｓｕｐｐｌ）：Ａｂｓｔｒａｃｔ ｎｒ ＣＴ１５４．ｄｏｉ：１０．１１５８／１５３８－７４４５．ＡＭ２０１７－ＣＴ１５４）。

ＭＢＧ４５３と組み合わせたＨＤＭ２０１の適切な用量を決定するために用量漸増アプローチを行う。ＭＢＧ４５３と組み合わせて試験したＨＤＭ２０１の出発用量は、２０ｍｇである。ＨＤＭ２０１は、２８日サイクルの第１日～第５日に１日１回経口投与される。サイクルごとの総ＨＤＭ２０１用量は、ＣＨＤＭ２０１Ｘ２１０１試験における元の７日レジメンで定められるＲＤを使用した総用量／サイクルよりも３．１５倍低い。従って、２８日サイクルの第１日～第５日の２０ｍｇの出発用量でのＨＤＭ２０１は、忍容性があると予想される。

血小板減少症のＰＫＰＤ安全性モデルは、≧２００ｍｇ／サイクルを投与される対象に対するサイクル２以降からの潜在的な累積ＨＤＭ２０１関連の安全性の影響（即ち血小板減少症）を示唆するため、この試験は、１サイクルあたり最大２００ｍｇの続くサイクルに対してその用量を維持する（即ち第１日～第５日に１日４０ｍｇ）一方、最初の２サイクルの用量をサイクルごとに２００ｍｇを上回って増量させ得る（即ち第１日～第５日に１日＞４０ｍｇ）ことを示唆する。ＨＤＭ２０１暫定用量レベルについては、表実施例３－１を参照されたい。

ＭＢＧ４５３単剤ＲＤは、標的（ＴＩＭ－３）占有のＰＫ及びＰＫＰＤモデリングに主に基づいて、固形腫瘍対象において８００ｍｇ Ｑ４Ｗと決定された。８００ｍｇ Ｑ４Ｗの用量レベルのＭＢＧ４５３は、対象の＞９０％の腫瘍において９０％の持続的な標的占有をもたらすと予想された。ＣＭＢＧ４５３Ｘ２１０１試験において１２００ｍｇ Ｑ２Ｗ又はＱ４ＷまでのＭＢＧ４５３の何れの用量でも顕著な安全性シグナルが検出されなかった。Ｑ４Ｗ及びＱ２ＷレジメンによるＣＰＤＲ００１Ｘ２１０５試験においてＡＭＬ／ＭＤＳ対象でＭＢＧ４５３単剤も評価している。

ＡＭＬ／ＭＤＳにおけるＲＤは、依然として決定されていないが、予備的ＰＫ及び安全性データに基づくと、固形腫瘍と異なるとは予想されない。４００ｍｇ Ｑ２Ｗ及び８００ｍｇ Ｑ４Ｗの用量レベルのＭＢＧ４５３は、ＡＭＬ／ＭＤＳにおいて忍容性に優れており、両方とも有効性に対する標的要件としてのＴＩＭ－３の持続性の＞９０％枯渇を達成すると同様に予想される。

群１でのＭＢＧ４５３に対する提案される出発用量及びレジメンは、４００ｍｇ Ｑ２Ｗであろう。しかし、進行中のＣＰＤＲ００１Ｘ２１０５試験からの新しいデータから代替レジメンが示唆される場合、固形腫瘍で決定されたＲＤである８００ｍｇ Ｑ４Ｗへの変更が考慮され得る。ＭＢＧ４５３が４００ｍｇ Ｑ２Ｗの固定用量で投与される一方、ＨＤＭ２０１のみが用量を増量される。ＣＰＤＲ００１Ｘ２１０５試験の最終結果に依存して、固形腫瘍対象で決定された８００ｍｇ ＭＢＧ４５３ Ｑ４ＷのＲＤも探索され得る。

これらの事前安全性データ及びＤＤＩに対する前提に基づき、本組み合わせに対する出発用量は、ＢＨＬＲＭ内のＥＷＯＣ基準を満たす。

組み合わせ薬物の選択のための根拠
ＨＤＭ２０１及びＭＢＧ４５３を組み合わせるための根拠は、以下の証拠に基づく：
一次白血病性芽球は、ＴＩＭ－３を過剰発現し、ＴＩＭ－３は、ＭＤＭ２阻害剤で処置したエクスビボヒトＰＢＭＣ及び対象試料の両方でＭＤＭ２阻害時に調整される。

前臨床の証拠から、同一遺伝子のマウスモデルでのＭＤＭ２及びＴＩＭ－３の同時発生的な遮断が抗腫瘍反応を促進することが示される（実施例２）。

集団
本試験は、以下のＴＰ５３ｗｔ成人患者において行う：
以前のレジメンが≧１回、奏効しなかったＲ／Ｒ ＡＭＬ、又は
標準的誘導化学療法に不適切な初回ＡＭＬ、又は
低メチル化剤療法が奏効しなかった高リスクＭＤＳ。

以下の組み入れ基準全てに合致し、排除基準の何れにも合致しない患者のみを本試験で処置する。Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ＣＴＣＡＥバージョン５．０を全類別に使用する。

組み入れ基準
この試験の対象となる組み入れ患者は、以下の基準全てに合致しなければならない：
１．以下の１つを呈する、インフォームドコンセント用紙への署名日に≧１８歳の男性又は女性患者：
ａ．ＡＭＬ患者に対するシタラビン又は他の確立された化学療法レジメンでの再誘導を含む、難治性疾患を再発したか又はそれを呈しており（一次無効）、標準的治療に対する候補ではないと治験責任者によりみなされる、≧１回の以前の治療（しかし、≦３回の以前の治療）後の再発／難治性ＡＭＬ（標準的な再誘導化学療法又は造血幹細胞移植に適切であり、それを受ける意思がある患者は、排除される）。一実施形態では、ＡＭＬは、難治性疾患を再発したか又はそれを呈した（一次無効）患者における、１回以上の以前の治療後の再発／難治性ＡＭＬである。ｂ．標準的な誘導化学療法に不適切である初回ＡＭＬ患者（新規及び二次性ＡＭＬの両方を含む）。別の実施形態では、ＡＭＬは、特に標準的な誘導化学療法に不適切な患者における、初回ＡＭＬである（ここで、ＡＭＬは、新規及び二次性ＡＭＬの両方を含む）。
ｃ．低メチル化剤療法が奏効しなかった高リスクＭＤＳ患者（ｒＩＰＳＳによる高リスク及び超高リスク群）。別の実施形態では、ＭＤＳは、高リスクＭＤＳ患者（ｒＩＰＳＳによる高リスク及び超高リスク群）、特に低メチル化剤療法が奏効しなかった患者である。
２．Ｅａｓｔｅｒｎ Ｃｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ Ｇｒｏｕｐ（ＥＣＯＧ）パフォーマンスステータスが≦１。
３．患者の腫瘍がＴＰ５３ｗｔである。ＴＰ５３遺伝子の少なくともエクソン５、６、７及び８が配列決定され、突然変異を含有しないと判定されなければならない。ＴＰ５３の状態は、主要なＩＣＦに署名する前３カ月以内に骨髄試料から得られ、回収されなければならない。
４．患者は、本研究所の指針に従う連続的な骨髄穿刺及び／又は生検に対する候補であり、スクリーニング時、本研究の治療中、治療終了時に骨髄穿刺及び／又は生検を行う。

原則除外基準：
この試験に適格な患者は、以下の基準の何れにも該当してはならない：
・同じ作用方式を有する化合物での以前の組み合わせ処置：
－ ＴＩＭ－３阻害剤と組み合わせたｍｄｍ２又はｍｄｍ４阻害剤
・試験薬物及び他のモノクローナル抗体（ｍＡｂ）及び／又はそれらの賦形剤のあらゆる成分に対する重篤な過敏反応の病歴
・ＰＭＬ－ＲＡＲＡを伴う急性前骨髄球性白血病の患者。
・過去６カ月以内の同種幹細胞移植（ＨＳＣＴ）及び／又は全身免疫抑制療法を必要とする活動性ＧｖＨＤ。
・経口ＨＤＭ２０１の吸収に影響を及ぼすＧＩ障害。
・活動性出血又は出血素因又は重度の凝固障害（家族性を含む）のエビデンス。
・活動性の、既知の自己免疫疾患又は自己免疫疾患が疑われる患者。

処置及び試験薬物
この試験に対して、「治験薬」又は「試験薬物」という用語は、ＨＤＭ２０１又はＭＢＧ４５３を指す。「処置群」又は「試験処置」は、具体的な組み合わせ処置、即ちＨＤＭ２０１＋ＭＢＧ４５３を指す。この試験で使用される治験薬は、以下のとおりである：
ＨＤＭ２０１：１０ｍｇ、２０ｍｇ、４０ｍｇ、経口使用のためのカプセル、２０ｍｇ（出発用量）、第１日～第５日（２８日サイクル）、オープンラベル患者固有；ボトル。
ＭＢＧ４５３：１００ｍｇ／ｍＬ ＬＩＶＩ、（バイアル中の液体）、点滴のための溶液に対する濃度；静脈内使用、２週間ごとに１回４００ｍｇ（２８日サイクルの第１、１５日）又は８００ｍｇ、４週間ごとに１回（２８日サイクルの第１日）；オープンラベルバルク、供給；バイアル。

この試験では、無作為化は、行われない。

絶食状態、少なくとも食事の１時間前以前又は食事の２時間後以降にＨＤＭ２０１カプセルを経口投与する（ｐ．ｏ．）。対象は、各投与日に午前中、ほぼ同じ時刻にコップ１杯の水とともに、カプセルを噛まずにカプセルを摂取すべきである。患者が、複数カプセルを摂取する用量レベルに割り当てられる場合、カプセルは、可能な限り短時間内に連続的に摂取すべきである。対象がその者の１日用量を摂取し忘れた場合、その対象は、飲み忘れた用量に対する埋め合わせを行わずにスケジュール化された次の投与日に投与を再開すべきである。ＨＤＭ２０１は、最初に投与されるものとする。

ＭＢＧ４５３は、投与する場合、ＨＤＭ２０１投与後およそ１時間以内に開始して、薬局マニュアルに記載のように、ｉ．ｖ．点滴を介して３０分間（臨床的に指示される場合には最長２時間）にわたり投与される。

対象は、対象が許容できない毒性、疾患進行を経験するまで試験処置を継続し得る（Ｃｈｅｓｏｎ ＢＤ，Ｂｅｎｎｅｔｔ ＪＭ，Ｋｏｐｅｃｋｙ Ｋ，ｅｔ ａｌ．（２００３）Ｒｅｖｉｓｅｄ ｒｅｃｏｍｍｅｎｄａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｗｏｒｋｉｎｇ Ｇｒｏｕｐ（ＩＷＧ）ｆｏｒ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ，ｓｔａｎｄａｒｄｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｃｒｉｔｅｒｉａ，ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｕｔｃｏｍｅｓ ａｎｄ ｒｅ ｏｒｔｉｎｇ ｓｔａｎｄａｒｄｓ ｆｏｒ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｔｒｉａｌｓ ｉｎ ａｃｕｔｅ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ；２１（２４）：４６４２－９及びＣｈｅｓｏｎ ＢＤ，Ｇｒｅｅｎｂｅｒｇ Ｐ，Ｂｅｎｎｅｔｔ Ｊ，ｅｔ ａｌ．（２００６）Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｒｏｐｏｓａｌ ｆｏｒ ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｗｏｒｋｉｎｇ Ｇｒｏｕｐ（ＯＷＧ）ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｃｒｉｔｅｒｉａ ｉｎ ｍｙｅｌｏｄｙｓｐｌａｓｉａ．Ｂｌｏｏｄ；１０８：４１９－４２５）。薬物関連毒性のためにＨＤＭ２０１＋ＭＢＧ４５３の２回を超える連続サイクルを省略しなければならない場合、本薬物の組み合わせを永久的に中断すべきである。

用量漸増及び用量調整
出発用量
用量漸増におけるＨＤＭ２０１に対する出発用量及びレジメン選択は、ＡＭＬ／ＭＤＳの対象における単剤としてのＨＤＭ２０１の以前の第Ｉ相用量漸増及び拡大試験（ＣＨＤＭ２０１Ｘ２１０１）に基づき、その試験では、４５ｍｇ／日の用量（第１～７日／２８日サイクル）がＲＤであることが決定された。この試験において、用量漸増に対する２０ｍｇ／日ＨＤＭ２０１の出発用量及びレジメン（第１～５日／２８日サイクル）を選択した。用量及びレジメンの選択は、腫瘍保有ラットの単剤トランスレーショナル前臨床モデリング及び血小板減少症の集団ＰＫ／ＰＤモデリング及びＡＭＬ／ＭＤＳ対象におけるＣＨＤＭ２０１Ｘ２１０１試験からの骨髄芽球データにより裏付けられた。この出発用量は、ＨＤＭ２０１単剤ＲＤ（４５ｍｇ／日（第１～７日／２８日サイクル）又は３１５ｍｇ／サイクルでＣＨＤＭ２０１Ｘ２１０１において評価される場合）の累積用量を約３１５％下回る量に相当する。この用量レベルで、対象の～１５％が、いくつかの見込まれる臨床活性（骨髄芽球減少）及び標的骨髄抑制の制限とともに、１サイクルあたりのＨＤＭ２０１の前臨床由来の平均標的有効濃度を達成すると予想される。

ＨＤＭ２０１＋ＭＢＧ４５３処置群１において、ＨＤＭ２０１及びＭＢＧ４５３に対する出発用量は、それぞれ２０ｍｇ／日（第１～５日／２８日サイクル）及び４００ｍｇ（Ｑ２Ｗ、２８日サイクル）である。

進行中のＣＰＤＲ００１Ｘ２１０５試験の結果に依存して、８００ｍｇ Ｑ４ＷのＭＢＧ４５３も探索され得る。ＨＤＭ２０１のみが増量される一方、ＭＢＧ４５３は、固定用量で、ある一定のレジメン、即ち４００ｍｇ Ｑ２Ｗ又は８００ｍｇ Ｑ４Ｗの何れかで投与される。代替的なレジメンが探索されるか又は付加されるべきであり（例えば、ＭＢＧ４５３ Ｑ４Ｗ）、ＢＨＬＲＭを使用した新しいレジメンの出発用量を導き出すために進行中のレジメン（例えば、ＭＢＧ４５３ Ｑ２Ｗ）から入手可能な用量－ＤＬＴデータが含まれ、ＥＷＯＣが満たされるべきである。

暫定的な用量レベル
以下の表実施例３－１は、ＨＤＭ２０１＋ＭＢＧ４５３の組み合わせ（１サイクル＝２８日）中に評価され得るＨＤＭ２０１の出発用量及び投与レジメンを記載する。

以下の表は、２８日サイクルにわたるＱ２Ｗ及びＱ４ＷレジメンのためのＨＤＭ２０１＋ＭＢＧ４５３の組み合わせ（処置群１）中に評価され得るＭＢＧ４５３の出発用量及び投与レジメンを記載する。

目的及びエンドポイント

略語リスト：
ＡＥ 有害事象
ＳＡＥ 重篤な有害事象
ＡＵＣ 曲線下面積
ＡＭＬ 急性骨髄性白血病
Ｒ／Ｒ 再発／難治性
ＢＨＬＲＭ ベイズ階級ロジスティック回帰モデル
ＢＭ 骨髄
ＣＲ 完全寛解
ＣＴＣＡＥ 有害事象共通用語規準
ＭＤＳ 骨髄異形成症候群
ＭＴＤ 最大耐量
ＲＤ 推奨用量
ＦＩＨ ヒトで最初
ＥＷＯＣ 過大用量制御を伴う増量
Ｑ４Ｗ ４週間ごと
Ｑ２Ｗ ２週間ごと
ＴＰ５３ 腫瘍タンパク質５３
Ｗｔ 野生型
ＰＭＬ－ＲＡＲＡ 前骨髄球性白血病／レチノイン酸受容体アルファ
ＧｖＨＤ 移植片対宿主病
ＧＩ 胃腸
ＥＣＧ 心電図
ＤＬＴ 用量制限毒性
ＯＲＲ 奏効率
ＢＯＲ 最良総合効果
ＰＦＳ 無増悪生存期間
ＴＴＲ 奏効までの期間
ＤＯＲ 奏効持続期間
ｒＩＰＳＳ 改定国際予後判定システム

Claims (20)

1. ＨＤＭ２－ｐ５３相互作用阻害薬（Ｓ）－５－（５－クロロ－１－メチル－２－オキソ－１，２－ジヒドロ－ピリジン－３－イル）－６－（４－クロロ－フェニル）－２－（２，４－ジメトキシ－ピリミジン－５－イル）－１－イソプロピル－５，６－ジヒドロ－１Ｈ－ピロロ［３，４－ｄ］イミダゾール－４－オン［ＨＤＭ２０１］又はその薬学的に許容可能な非共有結合誘導体（塩、溶媒和物、水和物、錯体、共結晶を含む）と、抗ＴＩＭ－３抗体分子との組み合わせ。
2. 前記抗ＴＩＭ－３抗体分子は、配列番号８０１のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号８０２又は８２０のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列及び配列番号８０３のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含む重鎖可変領域（ＶＨ）と；配列番号８１０のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号８１１のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列及び配列番号８１２のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）とを含む、請求項１に記載の組み合わせ。
3. 前記抗ＴＩＭ－３抗体分子は、配列番号８０１のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号８０２のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列及び配列番号８０３のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＨと；配列番号８１０のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号８１１のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列及び配列番号８１２のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬとを含む、請求項１に記載の組み合わせ。
4. 前記抗ＴＩＭ－３抗体分子は、配列番号８０６のアミノ酸配列を含むＶＨと、配列番号８１６のアミノ酸配列を含むＶＬとを含む、請求項２又は３に記載の組み合わせ。
5. 前記抗体分子は、配列番号８０８のアミノ酸配列を含む重鎖と、配列番号８１８のアミノ酸配列を含む軽鎖とを含む、請求項２～４の何れか一項に記載の組み合わせ。
6. 前記抗体分子は、配列番号８０１のＶＨＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号８２０のＶＨＣＤＲ２アミノ酸配列及び配列番号８０３のＶＨＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＨと；配列番号８１０のＶＬＣＤＲ１アミノ酸配列、配列番号８１１のＶＬＣＤＲ２アミノ酸配列及び配列番号８１２のＶＬＣＤＲ３アミノ酸配列を含むＶＬとを含む、請求項１～３の何れか一項に記載の組み合わせ。
7. 前記抗体分子は、配列番号８２２のアミノ酸配列を含むＶＨと、配列番号８２６のアミノ酸配列を含むＶＬとを含む、請求項１～３又は６の何れか一項に記載の組み合わせ。
8. 前記抗体分子は、配列番号８２４のアミノ酸配列を含む重鎖と、配列番号８２８のアミノ酸配列を含む軽鎖とを含む、請求項１～３又は６若しくは７の何れか一項に記載の組み合わせ。
9. 癌の処置での使用のための、請求項１～８の何れか一項に記載の組み合わせ。
10. 前記癌は、血液腫瘍である、請求項９に記載の癌の処置での使用のための組み合わせ。
11. 前記血液腫瘍は、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、好ましくは再発／難治性ＡＭＬ又は初回（１Ｌ）ＡＭＬ（新規及び二次ＡＭＬの両方を含む）である、請求項１０に記載の癌の処置での使用のための組み合わせ。
12. 前記血液腫瘍は、骨髄異形成症候群（ＭＤＳ）、好ましくは高リスクＭＤＳ（ｒＩＰＳＳ（改定国際予後判定システム）による高及び超高リスクのＭＤＳを含む）である、請求項１１に記載の癌の処置での使用のための組み合わせ。
13. 前記癌は、ＴＰ５３野生型腫瘍である、請求項９～１２の何れか一項に記載の癌の処置での使用のための組み合わせ。
14. ＨＤＭ２０１は、２８日処置サイクルの最初の３～７日のそれぞれ、好ましくは最初の４～６日のそれぞれ、より好ましくは最初の５日のそれぞれに投与され；
    ＨＤＭ２０１処置は、少なくとも３回の２８日処置サイクルから構成され、
    １回目及び２回目の処置サイクル（即ち誘導サイクル）のためのＨＤＭ２０１の１日薬物用量は、５０ｍｇ～１００ｍｇ、好ましくは５０ｍｇ～８０ｍｇ、より好ましくは６０ｍｇ～８０ｍｇ、さらにより好ましくは６０ｍｇであり、且つ３回目及び任意のそれ以降の処置サイクル（即ち地固めサイクル）のための１日のＨＤＭ２０１用量は、１０ｍｇ～４５ｍｇ、好ましくは２０ｍｇ～４０ｍｇ、より好ましくは３０ｍｇ～４０ｍｇ、さらにより好ましくは４０ｍｇである、請求項１０～１３の何れか一項に記載の癌の処置での使用のための組み合わせ。
15. ＨＤＭ２０１は、２８日処置サイクルの最初の５日のそれぞれに投与され、
    ＨＤＭ２０１処置は、少なくとも３回の２８日処置サイクルから構成され、
    誘導サイクル（サイクル１及び２）の１日のＨＤＭ２０１用量は、６０ｍｇ～８０ｍｇであり、地固めサイクル（サイクル３及びそれ以降）の１日のＨＤＭ２０１用量は、４０ｍｇである、請求項１０～１３の何れか一項に記載の癌の処置での使用のための組み合わせ。
16. 前記抗ＴＩＭ－３抗体分子は、４週間ごとに１回４００ｍｇ、２週間ごとに１回４００ｍｇ又は４週間ごとに１回８００ｍｇ、好ましくは２週間ごとに１回４００ｍｇ又は４週間ごとに１回８００ｍｇの用量で投与される、請求項９～１５の何れか一項に記載の癌の処置での使用のための組み合わせ。
17. ＨＤＭ２０１は、２８日処置サイクルの最初の５日のそれぞれに投与され、ＨＤＭ２０１処置は、少なくとも３回の２８日処置サイクルから構成され、誘導サイクル（サイクル１及び２）の１日のＨＤＭ２０１用量は、６０ｍｇ～８０ｍｇであり、地固めサイクル（サイクル３及びそれ以降）の１日のＨＤＭ２０１用量は、４０ｍｇであり、
    前記抗ＴＩＭ－３抗体分子は、２週間ごとに１回４００ｍｇ又は４週間ごとに１回８００ｍｇの用量で投与される、請求項９～１３の何れか一項に記載の癌の処置での使用のための組み合わせ。
18. ＨＤＭ２０１は、非共有結合誘導体として存在し、好ましくは、前記非共有結合誘導体は、塩、溶媒和物、水和物、錯体及び共結晶からなる群から選択され、より好ましくは、前記非共有結合誘導体は、共結晶であり、さらにより好ましくはコハク酸共結晶として、さらにより好ましくは１：１（モル比）コハク酸：ＨＤＭ２０１共結晶として存在する、請求項１～１７の何れか一項に記載の組み合わせ又は癌の処置での使用のための組み合わせ。
19. １つ以上の他の抗癌剤をさらに含み、好ましくは、前記抗癌剤は、癌免疫薬（例えば、ＰＤ－１［例えば、ＰＤＲ００１（Ｎｏｖａｒｔｉｓ，ＩＮＮ スパルタリズマブ）］、ＰＤ－Ｌ１、ＬＡＧ－３、ＧＴＩＲ、ＴＧＦ－ベータ、ＩＬ１５阻害剤）、ＦＬＴ３阻害剤（例えば、ギルテリニブ、キザルチニブ、ミドスタウリン）、ＢＣＬ２阻害剤（例えば、ナビトクラックス、ベネトクラックス）、他のＨＤＭ２阻害剤（例えば、イダサヌトリン、ＡＭＧ２３２、ＤＳ－３０３２Ｂ、ＡＬＲＮ６９２４／ＡＴＳＰ７０４１）、低メチル化剤（ＨＭＡ）（例えば、Ｖｉｄａｚａ［アザシチジン、５－アザシチジン］、Ｄａｃｏｇｅｎ［デシタビン］、グアデシタビン）、アントラサイクリン（例えば、イダルビシン、ダウノルビシン、ドキソルビシン、エピルビシン、ルビドマイシン）；抗ＣＤ３３抗体（例えば、マイロターグ［ゲムツズマブ］、バダスツキシマブ）及び他の薬剤（例えば、ＡｒａＣ［シタラビン、アラシチン］）から選択される、請求項１～１８の何れか一項に記載の組み合わせ又は癌の処置での使用のための組み合わせ。
20. １つ以上の他の抗癌剤をさらに含み、好ましくは、前記抗癌剤は、シタラビン（Ａｒａ－Ｃ）、アントラサイクリン、ダウノルビシン、イダルビシン、ルビドマイシン、イダマイシン、ミドスタウリン及びアザシチジンから選択される、請求項１～１９の何れか一項に記載の組み合わせ又は癌の処置での使用のための組み合わせ。

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