JP2022160674A - ｍＲＮＡ媒介性の免疫化方法 - Google Patents

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Abstract

【課題】カチオン性脂質、およびポリリボヌクレオチド分子、例えば、免疫原（例えば、標的タンパク質またはその断片）をコードするｍＲＮＡなどのポリヌクレオチド分子を含む組成物を使用する免疫化の方法および抗体作製の方法に関する。【解決手段】少なくとも１つのカチオン性脂質を、標的タンパク質またはその断片をコードするメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）などのポリリボヌクレオチドと混合し、それにより、カチオン性脂質－ポリリボヌクレオチド複合体を形成するステップと、前記脂質－ポリリボヌクレオチド複合体を非ヒト動物に投与するステップと、前記標的タンパク質に特異的に結合する抗体を前記動物から得るステップとを含む、標的タンパク質に対するモノクローナル抗体を作製するための方法である。【選択図】なし

Description

本出願は、２０１６年８月７日出願の米国仮出願第６２／３７１，８３４号、２０１６
年９月２６日出願の米国仮出願第６２／３９９，５４４号の利益を主張するものであり、
各々は、参照によりその全体が本明細書中に組み込まれる。
配列表
本出願は、ＡＳＣＩＩ形式で電子的手段により提出された配列表を含み、参照によりそ
の全体が本明細書に組み込まれる。２０１７年８月３日に作成された前記配列表のＡＳＣ
ＩＩ複製は、ＰＡＴ０５７１６９－ＷＯ－ＰＣＴ＿ＳＬ．ｔｘｔと命名され、サイズは１
４６，９９２バイトである。
本開示は、免疫学の分野である。具体的には、本開示は、カチオン性脂質、およびポリ
リボヌクレオチド分子、例えば、免疫原（例えば、標的タンパク質またはその断片）をコ
ードするｍＲＮＡなどのポリヌクレオチド分子を含む組成物を使用する免疫化の方法に関
する。本開示はまた、治療用抗体の作製の目的で免疫化された動物（例えば、非ヒト動物
）から抗体（例えば、モノクローナル抗体）を作製する方法、および抗体それら自体に関
する。
インビボにおける治療用モノクローナル抗体の開発は、多くの場合、免疫化のために使
用することができる高品質な抗原を作製する能力に制限される。理想的には、抗原は、完
全な構造上のコンフォメーションを有して高度に精製されたタンパク質であるべきであり
、かつ免疫寛容を破り、ロバストな体液性応答を誘導するために動物宿主株と十分な配列
の差異を有するべきである。しかし、抗原としての使用が意図される多くの標的タンパク
質については、これらの要求を満たすことは、過剰発現／精製をさせないタンパク質の本
質的に不十分な生物物理学的特性、宿主産生細胞における細胞毒性、および標的タンパク
質のアミノ酸配列の不十分な免疫原性などの問題のために、不可能である。
従来の動物免疫化の方法では、抗体の産生について２つの一般的な戦略を採用してきた
。第１の戦略は、免疫応答を増強するための、アジュバントの存在下で精製された形態に
おける全長タンパク質抗原の反復的な注射を含む。小さなサイズから中程度のサイズの可
溶性タンパク質については、この処置は、その天然のコンフォメーションの抗原に対する
モノクローナル抗体の産生に関して、奏功する方法となる場合がある。極めて大きいタン
パク質、膜貫通タンパク質、特有な翻訳後修飾を有するタンパク質、または溶解性の低い
タンパク質については、この方法は実用性に非常に制約があり、とゆうのも、免疫化のた
めに必要な量の純粋な天然の全長タンパク質を得ることが難しいためである。第２の戦略
は、目的の抗原をコードするＤＮＡコンストラクトを有する動物の免疫化を必要とする。
この戦略により、天然状態において精製の困難なタンパク質を、その場で発現させること
が可能になる。しかし、抗体力価の産生が相対的に低いことを欠点として持ち、これが結
局のところモノクローナルハイブリドーマによる産生の産生量の低さと相関する（Ｈｏｗ
ａｒｄ ｅｔ ａｌ．Ｍａｋｉｎｇ ａｎｄ ｕｓｉｎｇ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ
Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ｈａｎｄｂｏｏｋ，２ｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ
，２０１３）。
本開示は、動物（例えば、非ヒト動物）において免疫応答を誘発するための方法であっ
て：（ａ）少なくとも１つのカチオン性脂質を、抗原決定基をコードするポリリボヌクレ
オチド（例えば、ｍＲＮＡ）などのポリヌクレオチドと混合し、それによりカチオン性脂
質－ポリヌクレオチド複合体を形成するステップと；（ｂ）その脂質－ポリヌクレオチド
複合体を動物に投与するステップとを含む、方法に関する。本発明はさらに、遺伝的免疫
化方法であって、ポリヌクレオチドが、免疫原（例えば、標的タンパク質またはその断片
）をコードするｍＲＮＡ分子などのポリリボヌクレオチド分子である方法に関する。本発
明はさらに、本明細書に記載の遺伝的免疫化方法の使用と、免疫化された動物から抗体を
単離するステップとをさらに含む、抗体（例えば、ポリクローナルまたはモノクローナル
抗体）を作製するための方法に関する。
本発明はまた、モノクローナル抗体を作製するための方法であって、（ａ）少なくとも
１つのカチオン性脂質を、ポリリボヌクレオチドと混合し、それにより脂質－ポリヌクレ
オチド複合体を形成するステップであって、ポリヌクレオチドが免疫原をコードするｍＲ
ＮＡ配列を含むステップと；（ｂ）脂質－ポリヌクレオチド複合体を少なくとも１匹のマ
ウスに投与するステップと；（ｃ）リンパ球（例えば、Ｂリンパ球）または脾細胞などの
抗体産生細胞を免疫化されたマウスから取り出すステップと；（ｄ）免疫化されたマウス
由来のＢリンパ球を骨髄腫細胞と融合して、それによりハイブリドーマを作製するステッ
プと；（ｅ）ハイブリドーマをクローニングするステップと；（ｆ）抗免疫原抗体を産生
する陽性クローンを選択するステップと；（ｇ）抗免疫原抗体産生クローンを培養するス
テップと；（ｈ）抗免疫原抗体を培養液から単離するステップとを含む方法に関する。あ
る種の態様では、抗体を作製するために本明細書で提供される方法はさらに、そのような
抗体の重鎖可変領域および軽鎖可変領域のアミノ酸配列、ならびに対応するコード化核酸
配列を決定するステップを含む。特定の態様では、抗体を作製するために本明細書で提供
される方法はさらに、その抗免疫原抗体のキメラ抗体またはヒト化抗体を作製するステッ
プを含む。
本開示はまた、免疫組織を、カチオン性脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）を含有するｍＲＮＡで
免疫化された動物から回収し、Ｂ細胞を選択的に単離する方法に関する。Ｂ細胞は、所望
の特性を有する抗体の産生のために直接的にスクリーニングされ、抗体は、組換えによっ
て直接的にクローン化され、かつ発現されて、ハイブリドーマの作製の必要を回避する。
本開示のｍＲＮＡ被包性ＬＮＰはまた、免疫化された宿主動物（例えば、齧歯動物（例
えば、マウスおよびラット）、ウサギ、ニワトリ、雌ウシ、ラクダ科動物、ブタ、ヒツジ
、ヤギ、サメ、および非ヒト霊長類など）の免疫組織から組換え体抗体ライブラリを作製
する目的のために使用してもよい。続いて、このライブラリを、ファージまたは酵母ディ
スプレイなどの異種宿主系において、所望の特性についてスクリーニングすることができ
る。
ポリヌクレオチドに基づく、例えばｍＲＮＡに基づく、本開示の免疫化の方法は、抗原
の作製および／または抗体産生に固有の上述の障害と関連する問題の多くに対処した。と
りわけ、前記方法は、標的タンパク質抗原を直接発現し精製する必要性を不要にする。動
物宿主自体の細胞機構を使用して、標的タンパク質を作り出し、それを免疫系に提示する
。真核生物の標的タンパク質に関して、このことは、真核生物特異的な翻訳後修飾および
タンパク質プロセシングの追加を許容する付加的な利点を有する。特に、免疫化に使用さ
れる精製されていないｍＲＮＡは、調製物中の二重鎖ＲＮＡ要素の存在に一部起因して、
高い炎症性の性質を有する。二重鎖ＲＮＡは、トール様受容体をはじめとした自然免疫系
を含む受容体により認識される病原体関連分子パターンを提示することができる。いずれ
かの特定の理論に束縛されるわけではないが、このことが標的タンパク質に対する体液性
応答をブーストするためのアジュバントとして機能し、高い力価の抗体産生をもたらすと
考えられている。
免疫原、例えば、標的タンパク質またはその断片に対するモノクローナル抗体の発生は
、特に、前記標的タンパク質またはその断片をコードするｍＲＮＡによる動物の免疫化を
介して促進され得る。この方法は、標的タンパク質を異種で生成し、かつ精製する必要が
ないため、膜貫通タンパク質（例えば、複数回膜貫通タンパク質）、例えば、Ｇタンパク
質共役型受容体（ＧＰＣＲ）などの、特異的な抗体を開発するために技術的な課題を歴史
的に有してきたタンパク質に対して多大な利点を提供する。いずれかの特定の理論に束縛
されるわけではないが、ｍＲＮＡのアジュバント様特性により誘発される宿主防御機構は
、血清力価の迅速な発達をもたらし、かつＤＮＡ免疫化または他の従来の免疫化の方法（
例えば、組換え体タンパク質による免疫化）よりも優れた選択になると考えられている。
本開示の非限定的実施形態は、以下の態様において説明される。
態様１．標的タンパク質に対する抗体（例えば、モノクローナル抗体）を作製するため
の方法であって、（ａ）少なくとも１つのカチオン性脂質を、標的タンパク質またはその
断片をコードするメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）などのポリリボヌクレオチドと混合
し、それにより、カチオン性脂質－ポリリボヌクレオチド複合体（例えば、ｍＲＮＡ－Ｌ
ＮＰ複合体）を形成するステップと；（ｂ）脂質－ポリリボヌクレオチド複合体を非ヒト
動物に投与するステップと；（ｃ）標的タンパク質に特異的に結合する抗体を動物から得
るステップとを含む、方法。
態様２．標的タンパク質に対する抗体（例えば、モノクローナル抗体）を作製するため
の方法であって、（ａ）脂質－ポリリボヌクレオチド複合体（例えば、ｍＲＮＡ－ＬＮＰ
複合体）を非ヒト動物に投与し、それにより、標的タンパク質に対する免疫応答を誘導す
るステップであって、複合体が、標的タンパク質またはその断片をコードするｍＲＮＡな
どのポリリボヌクレオチドを有する少なくとも１つのカチオン性脂質を含むステップと；
（ｂ）動物によって産生される標的タンパク質に特異的に結合する抗体を得るステップと
を含む、方法。
態様３．標的タンパク質が膜貫通タンパク質である、態様１または２の方法。
態様４．膜貫通タンパク質が、次の：
（ｉ）Ｇタンパク質共役型受容体（ＧＰＣＲ）；
（ｉｉ）１回膜貫通型タンパク質受容体；
（ｉｉｉ）腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）メンバー；
（ｉｖ）インターロイキン（ＩＬ）受容体；
（ｖ）イオンチャネル；
（ｖｉ）溶質輸送体；
（ｖｉｉ）免疫受容体；および
（ｖｉｉｉ）複数回膜貫通タンパク質
から選択される、態様３の方法。
態様５．膜貫通タンパク質が、Ｇタンパク質共役型受容体（ＧＰＣＲ）などの複数回膜
貫通タンパク質である、態様３または４の方法。
態様６．ＧＰＣＲが、ＲＸＦＰ１、ＴＳＨＲ、ＡＰＪ、ＧＰＲ４０、ＧＰＲ６４、ＧＰ
Ｒ４、またはＧＰＲ１５である、態様５の方法。
態様７．膜貫通タンパク質が、ＧＰ１３０などの１回膜貫通型タンパク質受容体タンパ
ク質受容体、またはＳＬＣ５２Ａ２などの複数回膜貫通タンパク質である、態様３または
４の方法。
態様８．膜貫通タンパク質が、ＩＬ－１受容体、ＩＬ－２受容体、ＩＬ－３受容体、Ｉ
Ｌ－４受容体、ＩＬ－５受容体、ＩＬ－６受容体、ＩＬ－７受容体、ＩＬ－８受容体、Ｉ
Ｌ－９受容体、ＩＬ－１０受容体、ＩＬ－１１受容体、ＩＬ－１２受容体、ＩＬ－１３受
容体、ＩＬ－１４受容体、ＩＬ－１５受容体、ＩＬ－１６受容体、ＩＬ－１７受容体、Ｉ
Ｌ－１８受容体、ＩＬ－１９受容体、ＩＬ－２０受容体、ＩＬ－２１受容体、ＩＬ－２２
受容体、ＩＬ－２３受容体、ＩＬ－２４受容体、ＩＬ－２５受容体、ＩＬ－２６受容体、
ＩＬ－２７受容体、ＩＬ－２８受容体、ＩＬ－２９受容体、ＩＬ－３０受容体、ＩＬ－３
１受容体、ＩＬ－３２受容体、ＩＬ－３３受容体、ＩＬ－３５受容体、またはＩＬ－３６
受容体などのインターロイキン（ＩＬ）受容体である、態様３または４の方法。
態様９．膜貫通タンパク質が、次の：ＴＮＦＲＳＦ１Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１Ｂ、ＴＮＦＲ
ＳＦ３、ＴＮＦＲＳＦ４、ＴＮＦＲＳＦ５、ＴＮＦＲＳＦ６、ＴＮＦＲＳＦ６Ｂ、ＴＮＦ
ＲＳＦ７、ＴＮＦＲＳＦ８、ＴＮＦＲＳＦ９、ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ
、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｃ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｄ、ＴＮＦＲＳＦ１１Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１１Ｂ
、ＴＮＦＲＳＦ１２Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１３Ｂ、ＴＮＦＲＳＦ１３Ｃ、ＴＮＦＲＳＦ１４、
ＴＮＦＲＳＦ１６、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＴＮＦＲＳＦ１８、ＴＮＦＲＳＦ１９、ＴＮＦＲ
ＳＦ２１、ＴＮＦＲＳＦ２５、およびＴＮＦＲＳＦ２７からなる群から選択される腫瘍壊
死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）メンバーである、態様３または４の方
法。
態様１０．膜貫通タンパク質が、ＴＭＥＭ１６Ａなどのイオンチャネルである、態様３
または４の方法。
態様１１．膜貫通タンパク質が、溶質輸送体である、態様３または４の方法。
態様１２．標的タンパク質が、次の：ＡＣＫＲ１、ＡＣＫＲ２、ＡＣＫＲ３、ＡＣＫＲ
４、ＡＤＣＹＡＰ１Ｒ１、ＡＤＧＲＡ１、ＡＤＧＲＡ２、ＡＤＧＲＡ３、ＡＤＧＲＢ１、
ＡＤＧＲＢ２、ＡＤＧＲＢ３、ＡＤＧＲＤ１、ＡＤＧＲＤ２、ＡＤＧＲＥ１、ＡＤＧＲＥ
２、ＡＤＧＲＥ３、ＡＤＧＲＥ４Ｐ、ＡＤＧＲＥ５、ＡＤＧＲＦ１、ＡＤＧＲＦ２、ＡＤ
ＧＲＦ３、ＡＤＧＲＦ４、ＡＤＧＲＦ５、ＡＤＧＲＧ１、ＡＤＧＲＧ２、ＡＤＧＲＧ３、
ＡＤＧＲＧ４、ＡＤＧＲＧ５、ＡＤＧＲＧ６、ＡＤＧＲＧ７、ＡＤＧＲＬ１、ＡＤＧＲＬ
２、ＡＤＧＲＬ３、ＡＤＧＲＬ４、ＡＤＧＲＶ１、ＡＤＯＲＡ１、ＡＤＯＲＡ２Ａ、ＡＤ
ＯＲＡ２Ｂ、ＡＤＯＲＡ３、ＡＤＲＡ１Ａ、ＡＤＲＡ１Ｂ、ＡＤＲＡ１Ｄ、ＡＤＲＡ２Ａ
、ＡＤＲＡ２Ｂ、ＡＤＲＡ２Ｃ、ＡＤＲＢ１、ＡＤＲＢ２、ＡＤＲＢ３、ＡＧＴＲ１、Ａ
ＧＴＲ２、ＡＰＬＮＲ／ＡＰＪ、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＡＶＰＲ１Ａ、ＡＶＰＲ１Ｂ
、ＡＶＰＲ２、ＢＤＫＲＢ１、ＢＤＫＲＢ２、ＢＲＳ３、ＢＲＳ３、Ｃ３ＡＲ１、Ｃ５Ａ
Ｒ１、Ｃ５ＡＲ２、ＣＡＬＣＲ、ＣＡＬＣＲＬ、ＣＡＳＲ、ＣＣＫＡＲ、ＣＣＫＢＲ、Ｃ
ＣＲ１、ＣＣＲ１０、ＣＣＲ２、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、
ＣＣＲ８、ＣＣＲ９、ＣＣＲＬ２、ＣＥＬＳＲ１、ＣＥＬＳＲ２、ＣＥＬＳＲ３、ＣＨＲ
Ｍ１、ＣＨＲＭ２、ＣＨＲＭ３、ＣＨＲＭ４、ＣＨＲＭ５、ＣＭＫＬＲ１、ＣＮＲ１、Ｃ
ＮＲ２、ＣＲＨＲ１、ＣＲＨＲ２、ＣＸ３ＣＲ１、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ３
、ＣＸＣＲ４、ＣＸＣＲ５、ＣＸＣＲ６、ＣＹＳＬＴＲ１、ＣＹＳＬＴＲ２、ＤＲＤ１、
ＤＲＤ２、ＤＲＤ３、ＤＲＤ４、ＤＲＤ５、ＥＤＮＲＡ、ＥＤＮＲＢ、Ｆ２Ｒ、Ｆ２ＲＬ
１、Ｆ２ＲＬ２、Ｆ２ＲＬ３、ＦＦＡＲ１、ＦＦＡＲ２、ＦＦＡＲ３、ＦＦＡＲ４、ＦＰ
Ｒ１、ＦＰＲ２、ＦＰＲ２、ＦＰＲ３、ＦＳＨＲ、ＦＺＤ１、ＦＺＤ１０、ＦＺＤ２、Ｆ
ＺＤ３、ＦＺＤ４、ＦＺＤ５、ＦＺＤ６、ＦＺＤ７、ＦＺＤ８、ＦＺＤ９、ＧＡＢＢＲ１
、ＧＡＢＢＲ２、ＧＡＬＲ１、ＧＡＬＲ２、ＧＡＬＲ３、ＧＣＧＲ、ＧＨＲＨＲ、ＧＨＳ
Ｒ、ＧＩＰＲ、ＧＬＰ１Ｒ、ＧＬＰ２Ｒ、ＧＮＲＨＲ、ＧＮＲＨＲ２、ＧＰＢＡＲ１、Ｇ
ＰＥＲ１、ＧＰＲ１、ＧＰＲ４、ＧＰＲ１２、ＧＰＲ１５、ＧＰＲ１７、ＧＰＲ１８、Ｇ
ＰＲ１９、ＧＰＲ２０、ＧＰＲ２１、ＧＰＲ２２、ＧＰＲ２５、ＧＰＲ２６、ＧＰＲ２７
、ＧＰＲ３、ＧＰＲ３１、ＧＰＲ３２、ＧＰＲ３３、ＧＰＲ３４、ＧＰＲ３５、ＧＰＲ３
７、ＧＰＲ３７Ｌ１、ＧＰＲ３９、ＧＰＲ４０、ＧＰＲ４２、ＧＰＲ４２、ＧＰＲ４５、
ＧＰＲ５０、ＧＰＲ５２、ＧＰＲ５５、ＧＰＲ６、ＧＰＲ６１、ＧＰＲ６２、ＧＰＲ６３
、ＧＰＲ６５、ＧＰＲ６８、ＧＰＲ７５、ＧＰＲ７８、ＧＰＲ７９、ＧＰＲ８２、ＧＰＲ
８３、ＧＰＲ８４、ＧＰＲ８５、ＧＰＲ８７、ＧＰＲ８８、ＧＰＲ１０１、ＧＰＲ１０７
、ＧＰＲ１３２、ＧＰＲ１３５、ＧＰＲ１３７、ＧＰＲ１３９、ＧＰＲ１４１、ＧＰＲ１
４２、ＧＰＲ１４３、ＧＰＲ１４６、ＧＰＲ１４８、ＧＰＲ１４９、ＧＰＲ１５、ＧＰＲ
１５０、ＧＰＲ１５１、ＧＰＲ１５２、ＧＰＲ１５３、ＧＰＲ１５６、ＧＰＲ１５７、Ｇ
ＰＲ１５８、ＧＰＲ１６０、ＧＰＲ１６１、ＧＰＲ１６２、ＧＰＲ１７１、ＧＰＲ１７３
、ＧＰＲ１７４、ＧＰＲ１７６、ＧＰＲ１７９、ＧＰＲ１８２、ＧＰＲ１８３、ＧＰＲＣ
５Ａ、ＧＰＲＣ５Ｂ、ＧＰＲＣ５Ｃ、ＧＰＲＣ５Ｄ、ＧＰＲＣ６Ａ、ＧＲＭ１、ＧＲＭ２
、ＧＲＭ３、ＧＲＭ４、ＧＲＭ５、ＧＲＭ６、ＧＲＭ７、ＧＲＭ８、ＧＲＰＲ、ＨＣＡＲ
１、ＨＣＡＲ２、ＨＣＡＲ３、ＨＣＲＴＲ１、ＨＣＲＴＲ２、ＨＲＨ１、ＨＲＨ２、ＨＲ
Ｈ３、ＨＲＨ４、ＨＴＲ１Ａ、ＨＴＲ１Ｂ、ＨＴＲ１Ｄ、ＨＴＲ１Ｅ、ＨＴＲ１Ｆ、ＨＴ
Ｒ２Ａ、ＨＴＲ２Ｂ、ＨＴＲ２Ｃ、ＨＴＲ４、ＨＴＲ５Ａ、ＨＴＲ５ＢＰ、ＨＴＲ６、Ｈ
ＴＲ７、ＫＩＳＳ１Ｒ、ＬＧＲ３、ＬＧＲ４、ＬＧＲ５、ＬＧＲ６、ＬＨＣＧＲ、ＬＰＡ
Ｒ１、ＬＰＡＲ２、ＬＰＡＲ３、ＬＰＡＲ４、ＬＰＡＲ５、ＬＰＡＲ６、ＬＴＢ４Ｒ、Ｌ
ＴＢ４Ｒ２、ＭＡＳ１、ＭＡＳ１Ｌ、ＭＣ１Ｒ、ＭＣ２Ｒ、ＭＣ３Ｒ、ＭＣ４Ｒ、ＭＣ５
Ｒ、ＭＣＨＲ１、ＭＣＨＲ２、ＭＬＮＲ、ＭＲＧＰＲＤ、ＭＲＧＰＲＥ、ＭＲＧＰＲＦ、
ＭＲＧＰＲＧ、ＭＲＧＰＲＸ１、ＭＲＧＰＲＸ２、ＭＲＧＰＲＸ３、ＭＲＧＰＲＸ４、Ｍ
ＴＮＲ１Ａ、ＭＴＮＲ１Ｂ、ＮＭＢＲ、ＮＭＵＲ１、ＮＭＵＲ２、ＮＰＢＷＲ１、ＮＰＢ
ＷＲ２、ＮＰＦＦＲ１、ＮＰＦＦＲ２、ＮＰＳＲ１、ＮＰＹ１Ｒ、ＮＰＹ２Ｒ、ＮＰＹ４
Ｒ、ＮＰＹ５Ｒ、ＮＰＹ６Ｒ、ＮＴＳＲ１、ＮＴＳＲ２、ＯＰＮ３、ＯＰＮ４、ＯＰＮ５
、ＯＰＲＤ１、ＯＰＲＫ１、ＯＰＲＬ１、ＯＰＲＭ１、ＯＲ５１Ｅ１、ＯＸＥＲ１、ＯＸ
ＧＲ１、ＯＸＴＲ、Ｐ２ＲＹ１、Ｐ２ＲＹ１０、Ｐ２ＲＹ１１、Ｐ２ＲＹ１２、Ｐ２ＲＹ
１３、Ｐ２ＲＹ１４、Ｐ２ＲＹ２、Ｐ２ＲＹ４、Ｐ２ＲＹ６、Ｐ２ＲＹ８、ＰＲＬＨＲ、
ＰＲＯＫＲ１、ＰＲＯＫＲ２、ＰＴＡＦＲ、ＰＴＧＤＲ、ＰＴＧＤＲ２、ＰＴＧＥＲ１、
ＰＴＧＥＲ２、ＰＴＧＥＲ３、ＰＴＧＥＲ４、ＰＴＧＦＲ、ＰＴＧＩＲ、ＰＴＨ１Ｒ、Ｐ
ＴＨ２Ｒ、ＱＲＦＰＲ、ＲＸＦＰ１、ＲＸＦＰ２、ＲＸＦＰ３、ＲＸＦＰ４、Ｓ１ＰＲ１
、Ｓ１ＰＲ２、Ｓ１ＰＲ３、Ｓ１ＰＲ４、Ｓ１ＰＲ５、ＳＣＴＲ、ＳＭＯ、ＳＳＴＲ１、
ＳＳＴＲ２、ＳＳＴＲ３、ＳＳＴＲ４、ＳＳＴＲ５、ＳＵＣＮＲ１、ＴＡＡＲ１、ＴＡＡ
Ｒ２、ＴＡＡＲ３、ＴＡＡＲ４Ｐ、ＴＡＡＲ５、ＴＡＡＲ６、ＴＡＡＲ８、ＴＡＡＲ９、
ＴＡＣＲ１、ＴＡＣＲ２、ＴＡＣＲ３、ＴＡＳ１Ｒ１、ＴＡＳ１Ｒ２、ＴＡＳ１Ｒ３、Ｔ
ＡＳ２Ｒ１、ＴＡＳ２Ｒ１０、ＴＡＳ２Ｒ１３、ＴＡＳ２Ｒ１４、ＴＡＳ２Ｒ１６、ＴＡ
Ｓ２Ｒ１９、ＴＡＳ２Ｒ２０、ＴＡＳ２Ｒ３、ＴＡＳ２Ｒ３０、ＴＡＳ２Ｒ３１、ＴＡＳ
２Ｒ３８、ＴＡＳ２Ｒ３９、ＴＡＳ２Ｒ４、ＴＡＳ２Ｒ４０、ＴＡＳ２Ｒ４１、ＴＡＳ２
Ｒ４２、ＴＡＳ２Ｒ４３、ＴＡＳ２Ｒ４５、ＴＡＳ２Ｒ４６、ＴＡＳ２Ｒ５、ＴＡＳ２Ｒ
５０、ＴＡＳ２Ｒ６０、ＴＡＳ２Ｒ７、ＴＡＳ２Ｒ８、ＴＡＳ２Ｒ９、ＴＢＸＡ２Ｒ、Ｔ
ＰＲＡ１、ＴＲＨＲ、ＴＳＨＲ、ＵＴＳ２Ｒ、ＶＩＰＲ１、ＶＩＰＲ２、ＸＣＲ１、ＴＣ
Ｒ－α、ＴＣＲ－β、ＣＤ３、ζ－鎖アクセサリー、ＣＤ４、ＣＤ８、ＳＩＧＩＲＲ（単
一のＩｇおよびＴＩＲドメイン含有）、マンノース受容体（ＭＲ）、アシアロ糖タンパク
質受容体ファミリー（例えば、アシアロ糖タンパク質受容体マクロファージガラクトース
型レクチン（ＭＧＬ））、ＤＣ－ＳＩＧＮ（ＣＬＥＣ４Ｌ）、ランゲリン（ＣＬＥＣ４Ｋ
）、骨髄系ＤＡＰ１２会合レクチン（ＭＤＬ）－１（ＣＬＥＣ５Ａ）、デクチン１／ＣＬ
ＥＣ７Ａ、ＤＮＧＲ１／ＣＬＥＣ９Ａ、骨髄系Ｃ型レクチン様受容体（ＭＩＣＬ）（ＣＬ
ＥＣ１２Ａ）、ＣＬＥＣ２（ＣＬＥＣ１Ｂとも呼ばれる）、ＣＬＥＣ１２Ｂ、ＤＣＩＲ／
ＣＬＥＣ４Ａ、デクチン２／ＣＬＥＣ６Ａ、血液ＤＣ抗原２（ＢＤＣＡ２）（ＣＬＥＣ４
Ｃ）、マクロファージ誘導性Ｃ型レクチン（ＣＬＥＣ４Ｅ）、ＴＬＲ１、ＴＬＲ２、ＴＬ
Ｒ３、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ６、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９、ＴＬＲ１０、Ｔ
ＬＲ１１、ＴＬＲ１２、ＴＬＲ１３，ＦｃγＲＩ（ＣＤ６４）、ＦｃγＲＩＩＡ（ＣＤ３
２）、ＦｃγＲＩＩＢ１（ＣＤ３２）、ＦｃγＲＩＩＢ２（ＣＤ３２）、ＦｃγＲＩＩＩ
Ａ（ＣＤ１６ａ）、ＦｃγＲＩＩＩＢ（ＣＤ１６ｂ）、ＦｃεＲＩ、ＦｃεＲＩＩ（ＣＤ
２３）、ＦｃαＲ１（ＣＤ８９）、Ｆｃα／μＲ、ＦｃＲｎ、ＣＤ２７、ＣＤ４０、ＯＸ
４０、ＧＩＴＲ、ＣＤ１３７、ＰＤ－１、ＣＴＬＡ－４、ＰＤ－Ｌ１、ＴＩＧＩＴ、Ｔ細
胞免疫グロブリンドメインおよびムチンドメイン３（ＴＩＭ３）、Ｔ細胞活性化のＶ－ド
メインＩｇ抑制因子（ＶＩＳＴＡ）、ＣＤ２８、ＣＤ１２２、ＩＣＯＳ、Ａ２ＡＲ、Ｂ７
－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＢおよびＴリンパ球アテニュエータ（ＢＴＬＡ）、インドールアミ
ン２，３－ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）、キラー細胞免疫グロブリン様受容体（ＫＩＲ）
、リンパ球活性化遺伝子－３（ＬＡＧ３）、ＦＡＭ１５９Ｂ、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－Ｂ、
ＨＬＡ－Ｃ、ＨＬＡ－ＤＰＡ１、ＨＬＡ－ＤＰＢ１、ＨＬＡ－ＤＱＡ１、ＨＬＡ－ＤＱＢ
１、ＨＬＡ－ＤＲＡ、ＨＬＡ－ＤＲＢ１、ｇｐ１３０、ＩＬ－１受容体、ＩＬ－２受容体
、ＩＬ－３受容体、ＩＬ－４受容体、ＩＬ－５受容体、ＩＬ－６受容体、ＩＬ－７受容体
、ＩＬ－８受容体、ＩＬ－９受容体、ＩＬ－１０受容体、ＩＬ－１１受容体、ＩＬ－１２
受容体、ＩＬ－１３受容体、ＩＬ－１４受容体、ＩＬ－１５受容体、ＩＬ－１６受容体、
ＩＬ－１７受容体、ＩＬ－１８受容体、ＩＬ－１９受容体、ＩＬ－２０受容体、ＩＬ－２
１受容体、ＩＬ－２２受容体、ＩＬ－２３受容体、ＩＬ－２４受容体、ＩＬ－２５受容体
、ＩＬ－２６受容体、ＩＬ－２７受容体、ＩＬ－２８受容体、ＩＬ－２９受容体、ＩＬ－
３０受容体、ＩＬ－３１受容体、ＩＬ－３２受容体、ＩＬ－３３受容体、ＩＬ－３５受容
体、ＩＬ－３６受容体、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、ＦＧＦＲ４、ＴＮＦＲＳ
Ｆ１Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１Ｂ、ＴＮＦＲＳＦ３、ＴＮＦＲＳＦ４、ＴＮＦＲＳＦ５、ＴＮＦ
ＲＳＦ６、ＴＮＦＲＳＦ６Ｂ、ＴＮＦＲＳＦ７、ＴＮＦＲＳＦ８、ＴＮＦＲＳＦ９、ＴＮ
ＦＲＳＦ１０Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｃ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｄ、ＴＮ
ＦＲＳＦ１１Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１１Ｂ、ＴＮＦＲＳＦ１２Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１３Ｂ、ＴＮ
ＦＲＳＦ１３Ｃ、ＴＮＦＲＳＦ１４、ＴＮＦＲＳＦ１６、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＴＮＦＲＳ
Ｆ１８、ＴＮＦＲＳＦ１９、ＴＮＦＲＳＦ２１、ＴＮＦＲＳＦ２５、ＴＮＦＲＳＦ２７、
ＳＣＮ１Ａ、ＳＣＮ１Ｂ、ＳＣＮ２Ａ、ＳＣＮ２Ｂ、ＳＣＮ３Ａ、ＳＣＮ３Ｂ、ＳＣＮ４
Ａ、ＳＣＮ５Ａ、ＳＣＮ７Ａ、ＳＣＮ８Ａ、ＳＣＮ９Ａ、ＳＣＮ１０Ａ、ＳＣＮ１１Ａ、
ＣＡＣＮＡ１Ａ、ＣＡＣＮＡ１Ｂ、ＣＡＣＮＡ１Ｃ、ＣＡＣＮＡ１Ｄ、ＣＡＣＮＡ１Ｅ、
ＣＡＣＮＡ１Ｆ、ＣＡＣＮＡ１Ｇ、ＣＡＣＮＡ１Ｈ、ＣＡＣＮＡ１Ｉ、ＣＡＣＮＡ１Ｓ、
ＴＲＰＡ１、ＴＲＰＣ１、ＴＲＰＣ２、ＴＲＰＣ３、ＴＲＰＣ４、ＴＲＰＣ５、ＴＲＰＣ
６、ＴＲＰＣ７、ＴＲＰＭ１、ＴＲＰＭ２、ＴＲＰＭ３、ＴＲＰＭ４、ＴＲＰＭ５、ＴＲ
ＰＭ６、ＴＲＰＭ７、ＴＲＰＭ８、ＭＣＯＬＮ１、ＭＣＯＬＮ２、ＭＣＯＬＮ３、ＰＫＤ
１、ＰＫＤ２、ＰＫＤ２Ｌ１、ＰＫＤ２Ｌ２、ＴＲＰＶ１、ＴＲＰＶ２、ＴＲＰＶ３、Ｔ
ＲＰＶ４、ＴＲＰＶ５、ＴＲＰＶ６、ＣＡＴＳＰＥＲ１、ＣＡＴＳＰＥＲ２、ＣＡＴＳＰ
ＥＲ３、ＣＡＴＳＰＥＲ４、ＴＰＣＮ１、ＴＰＣＮ２、ＣＮＧＡ１、ＣＮＧＡ２、ＣＮＧ
Ａ３、ＣＮＧＡ４、ＣＮＧＢ１、ＣＮＧＢ３、ＨＣＮ１、ＨＣＮ２、ＨＣＮ３、ＨＣＮ４
、ＫＣＮＭＡ１、ＫＣＮＮ１、ＫＣＮＮ２、ＫＣＮＮ３、ＫＣＮＮ４、ＫＣＮＴ１、ＫＣ
ＮＴ２、ＫＣＮＵ１、ＫＣＮＡ１、ＫＣＮＡ２、ＫＣＮＡ３、ＫＣＮＡ４、ＫＣＮＡ５、
ＫＣＮＡ６、ＫＣＮＡ７、ＫＣＮＡ１０、ＫＣＮＢ１、ＫＣＮＢ２、ＫＣＮＣ１、ＫＣＮ
Ｃ２、ＫＣＮＣ３、ＫＣＮＣ４、ＫＣＮＤ１、ＫＣＮＤ２、ＫＣＮＤ３、ＫＣＮＦ１、Ｋ
ＣＮＧ１、ＫＣＮＧ２、ＫＣＮＧ３、ＫＣＮＧ４、ＫＣＮＨ１、ＫＣＮＨ２、ＫＣＮＨ３
、ＫＣＮＨ４、ＫＣＮＨ５、ＫＣＮＨ６、ＫＣＮＨ７、ＫＣＮＨ８、ＫＣＮＱ１、ＫＣＮ
Ｑ２、ＫＣＮＱ３、ＫＣＮＱ４、ＫＣＮＱ５、ＫＣＮＳ１、ＫＣＮＳ２、ＫＣＮＳ３、Ｋ
ＣＮＶ１、ＫＣＮＶ２、ＫＣＮＪ１、ＫＣＮＪ２、ＫＣＮＪ３、ＫＣＮＪ４、ＫＣＮＪ５
、ＫＣＮＪ６、ＫＣＮＪ８、ＫＣＮＪ９、ＫＣＮＪ１０、ＫＣＮＪ１１、ＫＣＮＪ１２、
ＫＣＮＪ１３、ＫＣＮＪ１４、ＫＣＮＪ１５、ＫＣＮＪ１６、ＫＣＮＪ１８、ＫＣＮＫ１
、ＫＣＮＫ２、ＫＣＮＫ３、ＫＣＮＫ４、ＫＣＮＫ５、ＫＣＮＫ６、ＫＣＮＫ７、ＫＣＮ
Ｋ９、ＫＣＮＫ１０、ＫＣＮＫ１２、ＫＣＮＫ１３、ＫＣＮＫ１５、ＫＣＮＫ１６、ＫＣ
ＮＫ１７、ＫＣＮＫ１８、ＨＶＣＮ１、ＨＴＲ３Ａ、ＨＴＲ３Ｂ、ＨＴＲ３Ｃ、ＨＴＲ３
Ｄ、ＨＴＲ３Ｅ、ＣＨＲＮＡ１、ＣＨＲＮＡ２、ＣＨＲＮＡ３、ＣＨＲＮＡ４、ＣＨＲＮ
Ａ５、ＣＨＲＮＡ６、ＣＨＲＮＡ７、ＣＨＲＮＡ９、ＣＨＲＮＡ１０、ＣＨＲＮＢ１、Ｃ
ＨＲＮＢ２、ＣＨＲＮＢ３、ＣＨＲＮＢ４、ＣＨＲＮＤ、ＣＨＲＮＥ、ＣＨＲＮＧ、ＧＡ
ＢＲＡ１、ＧＡＢＲＡ２、ＧＡＢＲＡ３、ＧＡＢＲＡ４、ＧＡＢＲＡ５、ＧＡＢＲＡ６、
Ｇ



ＡＢＲＢ１、ＧＡＢＲＢ２、ＧＡＢＲＢ３、ＧＡＢＲＤ、ＧＡＢＲＥ、ＧＡＢＲＧ１、Ｇ
ＡＢＲＧ２、ＧＡＢＲＧ３、ＧＡＢＲＰ、ＧＡＢＲＱ、ＧＡＢＲＲ１、ＧＡＢＲＲ２、Ｇ
ＡＢＲＲ３、ＧＲＩＡ１、ＧＲＩＡ２、ＧＲＩＡ３、ＧＲＩＡ４、ＧＲＩＤ１、ＧＲＩＤ
２、ＧＲＩＫ１、ＧＲＩＫ２、ＧＲＩＫ３、ＧＲＩＫ４、ＧＲＩＫ５、ＧＲＩＮ１、ＧＲ
ＩＮ２Ａ、ＧＲＩＮ２Ｂ、ＧＲＩＮ２Ｃ、ＧＲＩＮ２Ｄ、ＧＲＩＮ３Ａ、ＧＲＩＮ３Ｂ、
ＧＬＲＡ１、ＧＬＲＡ２、ＧＬＲＡ３、ＧＬＲＡ４、Ｐ２ＲＸ１、Ｐ２ＲＸ２、Ｐ２ＲＸ
３、Ｐ２ＲＸ４、Ｐ２ＲＸ５、Ｐ２ＲＸ６、Ｐ２ＲＸ７、ＺＡＣＮ、ＡＳＩＣ１、ＡＳＩ
Ｃ２、ＡＳＩＣ３、ＡＳＩＣ４、ＡＱＰ１、ＡＱＰ２、ＡＱＰ３、ＡＱＰ４、ＡＱＰ５、
ＡＱＰ６、ＡＱＰ７、ＡＱＰ８、ＡＱＰ９、ＡＱＰ１０、ＡＱＰ１１、ＡＱＰ１２Ａ、Ａ
ＱＰ１２Ｂ、ＭＩＰ、ＣＬＣＮ１、ＣＬＣＮ２、ＣＬＣＮ３、ＣＬＣＮ４、ＣＬＣＮ５、
ＣＬＣＮ６、ＣＬＣＮ７、ＣＬＣＮＫＡ、ＣＬＣＮＫＢ、嚢胞性線維症膜コンダクタンス
制御因子（ＣＦＴＲ）、ＡＮＯ１、ＡＮＯ２、ＡＮＯ３、ＡＮＯ４、ＡＮＯ５、ＡＮＯ６
、ＡＮＯ７、ＡＮＯ８、ＡＮＯ９、ＡＮＯ１０、ＢＥＳＴ１、ＢＥＳＴ２、ＢＥＳＴ３、
ＢＥＳＴ４、ＣＬＩＣ１、ＣＬＩＣ２、ＣＬＩＣ３、ＣＬＩＣ４、ＣＬＩＣ５、ＣＬＩＣ
６、ＧＪＡ１、ＧＪＡ３、ＧＪＡ４、ＧＪＡ５、ＧＪＡ６Ｐ、ＧＪＡ８、ＧＪＡ９、ＧＪ
Ａ１０、ＧＪＢ１、ＧＪＢ２、ＧＪＢ３、ＧＪＢ４、ＧＪＢ５、ＧＪＢ６、ＧＪＢ７、Ｇ
ＪＣ１、ＧＪＣ２、ＧＪＣ３、ＧＪＤ２、ＧＪＤ３、ＧＪＤ４、ＧＪＥ１、ＩＴＰＲ１、
ＩＴＰＲ２、ＩＴＰＲ３、ＰＡＮＸ１、ＰＡＮＸ２、ＰＡＮＸ３、ＲＹＲ１、ＲＹＲ２、
ＲＹＲ３、ＮＡＬＣＮ、ＳＣＮＮ１Ａ、ＳＣＮＮ１Ｂ、ＳＣＮＮ１Ｄ、ＳＣＮＮ１Ｇ、Ｔ
ＥＭ１６Ａ、ＡＤＡＭＴＳ７、ＡＮＧＰＴＬ３、ＡＮＧＰＴＬ４、ＡＮＧＰＴＬ８、ＬＰ
Ｌ、ＧＤＦ１５、ガレクチン－１、ガレクチン－２、ガレクチン－３、ガレクチン－４、
ガレクチン－７、ガレクチン－８、ガレクチン－９、ガレクチン－１０、ガレクチン－１
２、ガレクチン－１３、マトリックスｇｌａタンパク質（ＭＧＰ）、ＰＲＮＰ、ＤＧＡＴ
１、ＧＰＡＴ３、ＤＭＣ１、ＢＬＭ、ＢＲＣＡ２、ヒト内在性レトロウイルスタイプＫ（
ＨＥＲＶ－Ｋ）ファミリーのメンバー、エクトヌクレオシド三リン酸ジホスホヒドロラー
ゼ１（ＥＮＴＰＤ１）、エクトヌクレオシド三リン酸ジホスホヒドロラーゼ２（ＥＮＴＰ
Ｄ２）、ＳＬＣ１Ａ１、ＳＬＣ１Ａ２、ＳＬＣ１Ａ３、ＳＬＣ１Ａ４、ＳＬＣ１Ａ５、Ｓ
ＬＣ１Ａ６、ＳＬＣ１Ａ７、ＳＬＣ２Ａ１、ＳＬＣ２Ａ２、ＳＬＣ２Ａ３、ＳＬＣ２Ａ４
、ＳＬＣ２Ａ５、ＳＬＣ２Ａ６、ＳＬＣ２Ａ７、ＳＬＣ２Ａ８、ＳＬＣ２Ａ９、ＳＬＣ２
Ａ１０、ＳＬＣ２Ａ１１、ＳＬＣ２Ａ１２、ＳＬＣ２Ａ１３、ＳＬＣ２Ａ１４、ＳＬＣ３
Ａ１、ＳＬＣ３Ａ２、ＳＬＣ４Ａ１、ＳＬＣ４Ａ２、ＳＬＣ４Ａ３、ＳＬＣ４Ａ４、ＳＬ
Ｃ４Ａ５、ＳＬＣ４Ａ６、ＳＬＣ４Ａ７、ＳＬＣ４Ａ８、ＳＬＣ４Ａ９、ＳＬＣ４Ａ１０
、ＳＬＣ４Ａ１１、ＳＬＣ５Ａ１、ＳＬＣ５Ａ２、ＳＬＣ５Ａ３、ＳＬＣ５Ａ４、ＳＬＣ
５Ａ５、ＳＬＣ５Ａ６、ＳＬＣ５Ａ７、ＳＬＣ５Ａ８、ＳＬＣ５Ａ９、ＳＬＣ５Ａ１０、
ＳＬＣ５Ａ１１、ＳＬＣ５Ａ１２、ＳＬＣ６Ａ１、ＳＬＣ６Ａ２、ＳＬＣ６Ａ３、ＳＬＣ
６Ａ４、ＳＬＣ６Ａ５、ＳＬＣ６Ａ６、ＳＬＣ６Ａ７、ＳＬＣ６Ａ８、ＳＬＣ６Ａ９、Ｓ
ＬＣ６Ａ１０、ＳＬＣ６Ａ１１、ＳＬＣ６Ａ１２、ＳＬＣ６Ａ１３、ＳＬＣ６Ａ１４、Ｓ
ＬＣ６Ａ１５、ＳＬＣ６Ａ１６、ＳＬＣ６Ａ１７、ＳＬＣ６Ａ１８、ＳＬＣ６Ａ１９、Ｓ
ＬＣ６Ａ２０、ＳＬＣ７Ａ５、ＳＬＣ７Ａ６、ＳＬＣ７Ａ７、ＳＬＣ７Ａ８、ＳＬＣ７Ａ
９、ＳＬＣ７Ａ１０、ＳＬＣ７Ａ１１、ＳＬＣ７Ａ１３、ＳＬＣ７Ａ１４、ＳＬＣ８Ａ１
、ＳＬＣ８Ａ２、ＳＬＣ８Ａ３、ＳＬＣ９Ａ１、ＳＬＣ９Ａ２、ＳＬＣ９Ａ３、ＳＬＣ９
Ａ４、ＳＬＣ９Ａ５、ＳＬＣ９Ａ６、ＳＬＣ９Ａ７、ＳＬＣ９Ａ８、ＳＬＣ９Ａ９、ＳＬ
Ｃ９Ａ１０、ＳＬＣ９Ａ１１、ＳＬＣ９Ｂ１、ＳＬＣ９Ｂ２、ＳＬＣ１０Ａ１、ＳＬＣ１
０Ａ２、ＳＬＣ１０Ａ３、ＳＬＣ１０Ａ４、ＳＬＣ１０Ａ５、ＳＬＣ１０Ａ６、ＳＬＣ１
０Ａ７、ＳＬＣ１１Ａ１、ＳＬＣ１１Ａ２、ＳＬＣ１２Ａ１、ＳＬＣ１２Ａ２、ＳＬＣ１
２Ａ３、ＳＬＣ１２Ａ４、ＳＬＣ１２Ａ５、ＳＬＣ１２Ａ６、ＳＬＣ１２Ａ７、ＳＬＣ１
２Ａ８、ＳＬＣ１２Ａ９、ＳＬＣ１３Ａ１、ＳＬＣ１３Ａ２、ＳＬＣ１３Ａ３、ＳＬＣ１
３Ａ４、ＳＬＣ１３Ａ５、ＳＬＣ１４Ａ１、ＳＬＣ１４Ａ２、ＳＬＣ１５Ａ１、ＳＬＣ１
５Ａ２、ＳＬＣ１５Ａ３、ＳＬＣ１５Ａ４、ＳＬＣ１６Ａ１、ＳＬＣ１６Ａ２、ＳＬＣ１
６Ａ３、ＳＬＣ１６Ａ４、ＳＬＣ１６Ａ５、ＳＬＣ１６Ａ６、ＳＬＣ１６Ａ７、ＳＬＣ１
６Ａ８、ＳＬＣ１６Ａ９、ＳＬＣ１６Ａ１０、ＳＬＣ１６Ａ１１、ＳＬＣ１６Ａ１２、Ｓ
ＬＣ１６Ａ１３、ＳＬＣ１６Ａ１４、ＳＬＣ１７Ａ１、ＳＬＣ１７Ａ２、ＳＬＣ１７Ａ３
、ＳＬＣ１７Ａ４、ＳＬＣ１７Ａ５、ＳＬＣ１７Ａ６、ＳＬＣ１７Ａ７、ＳＬＣ１７Ａ８
、ＳＬＣ１７Ａ９、ＳＬＣ１８Ａ１、ＳＬＣ１８Ａ２、ＳＬＣ１８Ａ３、ＳＬＣ１９Ａ１
、ＳＬＣ１９Ａ２、ＳＬＣ１９Ａ３、ＳＬＣ２０Ａ１、ＳＬＣ２０Ａ２、ＳＬＣＯ１Ａ２
、ＳＬＣＯ１Ｂ１、ＳＬＣＯ１Ｂ３、ＳＬＣＯ１Ｃ１、ＳＬＣＯ２Ａ１、ＳＬＣＯ２Ｂ１
、ＳＬＣＯ３Ａ１、ＳＬＣＯ４Ａ１、ＳＬＣＯ４Ｃ１、ＳＬＣＯ５Ａ１、ＳＬＣＯ６Ａ１
、ＳＬＣ２２Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ２、ＳＬＣ２２Ａ３、ＳＬＣ２２Ａ４、ＳＬＣ２２Ａ５
、ＳＬＣ２２Ａ６、ＳＬＣ２２Ａ７、ＳＬＣ２２Ａ８、ＳＬＣ２２Ａ９、ＳＬＣ２２Ａ１
０、ＳＬＣ２２Ａ１１、ＳＬＣ２２Ａ１２、ＳＬＣ２２Ａ１３、ＳＬＣ２２Ａ１４、ＳＬ
Ｃ２２Ａ１５、ＳＬＣ２２Ａ１６、ＳＬＣ２２Ａ１７、ＳＬＣ２２Ａ１８、ＳＬＣ２２Ａ
１８ＡＳ，ＳＬＣ２２Ａ１９、ＳＬＣ２２Ａ２０、ＳＬＣ２２Ａ２３、ＳＬＣ２２Ａ２４
、ＳＬＣ２２Ａ２５、ＳＬＣ２２Ａ３１、ＳＬＣ２３Ａ１、ＳＬＣ２３Ａ２、ＳＬＣ２３
Ａ３、ＳＬＣ２３Ａ４、ＳＬＣ２４Ａ１、ＳＬＣ２４Ａ２、ＳＬＣ２４Ａ３、ＳＬＣ２４
Ａ４、ＳＬＣ２４Ａ５、ＳＬＣ２４Ａ６、ＳＬＣ２５Ａ１、ＳＬＣ２５Ａ２、ＳＬＣ２５
Ａ３、ＳＬＣ２５Ａ４、ＳＬＣ２５Ａ５、ＳＬＣ２５Ａ６、ＳＬＣ２５Ａ７、ＳＬＣ２５
Ａ８、ＳＬＣ２５Ａ９、ＳＬＣ２５Ａ１０、ＳＬＣ２５Ａ１１、ＳＬＣ２５Ａ１２、ＳＬ
Ｃ２５Ａ１３、ＳＬＣ２５Ａ１４、ＳＬＣ２５Ａ１５、ＳＬＣ２５Ａ１６、ＳＬＣ２５Ａ
１７、ＳＬＣ２５Ａ１８、ＳＬＣ２５Ａ１９，ＳＬＣ２５Ａ２０、ＳＬＣ２５Ａ２１、Ｓ
ＬＣ２５Ａ２２、ＳＬＣ２５Ａ２３、ＳＬＣ２５Ａ２４、ＳＬＣ２５Ａ２５、ＳＬＣ２５
Ａ２６、ＳＬＣ２５Ａ２７、ＳＬＣ２５Ａ２８、ＳＬＣ２５Ａ２９、ＳＬＣ２５Ａ３０、
ＳＬＣ２５Ａ３１、ＳＬＣ２５Ａ３２、ＳＬＣ２５Ａ３３、ＳＬＣ２５Ａ３４、ＳＬＣ２
５Ａ３５、ＳＬＣ２５Ａ３６、ＳＬＣ２５Ａ３７，ＳＬＣ２５Ａ３８、ＳＬＣ２５Ａ３９
、ＳＬＣ２５Ａ４０、ＳＬＣ２５Ａ４１、ＳＬＣ２５Ａ４２、ＳＬＣ２５Ａ４３、ＳＬＣ
２５Ａ４４、ＳＬＣ２５Ａ４５、ＳＬＣ２５Ａ４６、ＳＬＣ２６Ａ１、ＳＬＣ２６Ａ２、
ＳＬＣ２６Ａ３、ＳＬＣ２６Ａ４、ＳＬＣ２６Ａ５、ＳＬＣ２６Ａ６、ＳＬＣ２６Ａ７、
ＳＬＣ２６Ａ８、ＳＬＣ２６Ａ９、ＳＬＣ２６Ａ１０、ＳＬＣ２６Ａ１１、ＳＬＣ２７Ａ
１、ＳＬＣ２７Ａ２、ＳＬＣ２７Ａ３、ＳＬＣ２７Ａ４、ＳＬＣ２７Ａ５、ＳＬＣ２７Ａ
６、ＳＬＣ２８Ａ１、ＳＬＣ２８Ａ２、ＳＬＣ２８Ａ３、ＳＬＣ２９Ａ１、ＳＬＣ２９Ａ
２、ＳＬＣ２９Ａ３、ＳＬＣ２９Ａ４、ＳＬＣ３０Ａ１、ＳＬＣ３０Ａ２、ＳＬＣ３０Ａ
３、ＳＬＣ３０Ａ４、ＳＬＣ３０Ａ５、ＳＬＣ３０Ａ６、ＳＬＣ３０Ａ７、ＳＬＣ３０Ａ
８、ＳＬＣ３０Ａ９、ＳＬＣ３０Ａ１０、ＳＬＣ３１Ａ１、ＳＬＣ３１Ａ２、ＳＬＣ３２
Ａ１、ＳＬＣ３３Ａ１、ＳＬＣ３４Ａ１、ＳＬＣ３４Ａ２、ＳＬＣ３４Ａ３、ＳＬＣ３５
Ａ１、ＳＬＣ３５Ａ２、ＳＬＣ３５Ａ３、ＳＬＣ３５Ａ４、ＳＬＣ３５Ａ５、ＳＬＣ３５
Ｂ１、ＳＬＣ３５Ｂ２、ＳＬＣ３５Ｂ３、ＳＬＣ３５Ｂ４、ＳＬＣ３５Ｃ１、ＳＬＣ３５
Ｃ２、ＳＬＣ３５Ｄ１、ＳＬＣ３５Ｄ２、ＳＬＣ３５Ｄ３、ＳＬＣ３５Ｅ１、ＳＬＣ３５
Ｅ２、ＳＬＣ３５Ｅ３、ＳＬＣ３５Ｅ４、ＳＬＣ３５Ｆ１、ＳＬＣ３５Ｆ２、ＳＬＣ３５
Ｆ３、ＳＬＣ３５Ｆ４、ＳＬＣ３５Ｆ５、ＳＬＣ３５Ｇ１、ＳＬＣ３５Ｇ３、ＳＬＣ３５
Ｇ４、ＳＬＣ３５Ｇ５、ＳＬＣ３５Ｇ６、ＳＬＣ３６Ａ１、ＳＬＣ３６Ａ２、ＳＬＣ３６
Ａ３、ＳＬＣ３６Ａ４、ＳＬＣ３７Ａ１、ＳＬＣ３７Ａ２、ＳＬＣ３７Ａ３、ＳＬＣ３７
Ａ４、ＳＬＣ３８Ａ１、ＳＬＣ３８Ａ２、ＳＬＣ３８Ａ３、ＳＬＣ３８Ａ４、ＳＬＣ３８
Ａ５、ＳＬＣ３８Ａ６、ＳＬＣ３８Ａ７、ＳＬＣ３８Ａ８、ＳＬＣ３８Ａ９、ＳＬＣ３８
Ａ１０、ＳＬＣ３８Ａ１１、ＳＬＣ３９Ａ１、ＳＬＣ３９Ａ２、ＳＬＣ３９Ａ３、ＳＬＣ
３９Ａ４、ＳＬＣ３９Ａ５、ＳＬＣ３９Ａ６、ＳＬＣ３９Ａ７、ＳＬＣ３９Ａ８、ＳＬＣ
３９Ａ９、ＳＬＣ３９Ａ１０、ＳＬＣ３９Ａ１１、ＳＬＣ３９Ａ１２、ＳＬＣ３９Ａ１３
、ＳＬＣ３９Ａ１４、ＳＬＣ４０Ａ１、ＳＬＣ４１Ａ１、ＳＬＣ４１Ａ２、ＳＬＣ４１Ａ
３、ＲｈＡＧ、ＲｈＢＧ、ＲｈＣＧ、ＳＬＣ４３Ａ１、ＳＬＣ４３Ａ２、ＳＬＣ４３Ａ３
、ＳＬＣ４４Ａ１、ＳＬＣ４４Ａ２、ＳＬＣ４４Ａ３、ＳＬＣ４４Ａ４、ＳＬＣ４４Ａ５
、ＳＬＣ４５Ａ１、ＳＬＣ４５Ａ２、ＳＬＣ４５Ａ３、ＳＬＣ４５Ａ４、ＳＬＣ４６Ａ１
、ＳＬＣ４６Ａ２、ＳＬＣ４６Ａ３、ＳＬＣ４７Ａ１、ＳＬＣ４７Ａ２、ＨＣＰ－１、Ｍ
ＦＳＤ５、ＭＦＳＤ１０、ＳＬＣ５０Ａ１、ＯＳＴα、ＯＳＴβ、ＳＬＣ５２Ａ１、ＳＬ
Ｃ５２Ａ２、ならびにＳＬＣ５２Ａ３から選択される、態様１または２の方法。
態様１３．標的抗原が、発現させることが困難であるか、またはそれに対する抗体を産
生させることが困難である、態様１または２の方法。
態様１４．標的タンパク質の発現が、宿主産生細胞において、細胞毒性をもたらすか、
または細胞毒性の増大をもたらす、態様１３の方法。
態様１５．標的タンパク質が、組換えにより発現されかつ／または精製される場合、不
十分な収率、安定性、溶解性、および／または機能活性を示す、態様１３の方法。
態様１６．複合体の前記ポリヌクレオチドが、次の：コンセンサスコザック配列；ｍＲ
ＮＡの５’末端上の７－メチルグアノシンキャップ；ｍＲＮＡ転写物の３’終端で見られ
るポリアデノシン（ポリＡ）テール；ならびに５’－および３’－非翻訳領域（ＵＴＲ）
の１つ以上を含む、態様１～１５のいずれか１つの方法。
態様１７．前記投与が非経口である、態様１～１６のいずれか１つの方法。
態様１８．前記投与が静脈内である、態様１～１７のいずれか１つの方法。
態様１９．前記投与が筋肉内である、態様１～１８のいずれか１つの方法。
態様２０．前記投与が皮下である、態様１～１９のいずれか１つの方法。
態様２１．前記投与が鼻腔内である、態様１～２０のいずれか１つの方法。
態様２２．前記標的タンパク質がＲＸＦＰ１またはその断片である、態様１～２１のい
ずれか１つの方法。
態様２３．前記複合体が、配列番号４、または配列番号２、４および３７のいずれか１
つのヌクレオチド配列を含むポリリボヌクレオチドを含む、態様１～２２のいずれか１つ
の方法。
態様２４．前記標的タンパク質がＳＬＣ５２Ａ２またはその断片である、態様１～２３
のいずれか１つの方法。
態様２５．前記複合体が、配列番号７、または配列番号５、７および４０のいずれか１
つのヌクレオチド配列を含むポリリボヌクレオチドを含む、態様１～２４のいずれか１つ
の方法。
態様２６．前記標的タンパク質がＡＮＧＰＴＬ８またはその断片である、態様１～２５
のいずれか１つの方法。
態様２７．前記複合体が、配列番号１０、または配列番号８、１０および４３のいずれ
か１つのヌクレオチド配列を含むポリリボヌクレオチドを含む、態様１～２６のいずれか
１つの方法。
態様２８．前記標的タンパク質がＴＳＨＲまたはその断片である、態様１～２７のいず
れか１つの方法。
態様２９．前記複合体が、配列番号１６、または配列番号１４、１６および４６のいず
れか１つのヌクレオチド配列を含むポリリボヌクレオチドを含む、態様１～２８のいずれ
か１つの方法。
態様３０．前記標的タンパク質がＡＰＪまたはその断片である、態様１～２９のいずれ
か１つの方法。
態様３１．前記複合体が、配列番号１９、または配列番号１７、１９および４９のいず
れか１つのヌクレオチド配列を含むポリリボヌクレオチドを含む、態様１～３０のいずれ
か１つの方法。
態様３２．前記標的タンパク質がｇｐ１３０またはその断片である、態様１～３１のい
ずれか１つの方法。
態様３３．前記複合体が、配列番号２２、または配列番号２０、２２および５２のいず
れか１つのヌクレオチド配列を含むポリリボヌクレオチドを含む、態様１～３２のいずれ
か１つの方法。
態様３４．前記標的タンパク質がガレクチン３またはその断片である、態様１～３３の
いずれか１つの方法。
態様３５．前記複合体が、配列番号５５、または配列番号２６、５５および５６のいず
れか１つのヌクレオチド配列を含むポリリボヌクレオチドを含む、態様１～３４のいずれ
か１つの方法。
態様３６．前記複合体が、約３０～１５０ｎｍの直径を有する、態様１～３５のいずれ
か１つの方法。
態様３７．複合体がヘルパー脂質を含む、態様１～３５のいずれか１つの方法。
態様３８．複合体が、（ｉ）カチオン性脂質、（ｉｉ）ヘルパー脂質、例えば、コレス
テロール、（ｉｉｉ）中性脂質、例えば、ＤＳＰＣ、および（ｉｖ）ステルス脂質、例え
ば、Ｓ０１０、Ｓ０２４、Ｓ０２７、Ｓ０３１またはＳ０３３の任意の組み合わせを含む
、態様１～３５のいずれか１つの方法。
態様３９．動物が、５μｇ、１０μｇ、１２．５μｇ、２０μｇ、２５μｇ、３０μｇ
、４０μｇ、５０μｇ、６０μｇ、７０μｇ、８０μｇ、９０μｇ、１００μｇ、１１０
μｇ、１２０μｇ、１３０μｇ、１４０μｇ、または１５０μｇのポリリボヌクレオチド
を投与される、態様１～３８のいずれか１つの方法。
態様４０．カチオン性脂質が、Ｎ，Ｎ－ジオレイル－Ｎ，Ｎ－ジメチルアンモニウムク
ロリド（ＤＯＤＡＣ）、Ｎ，Ｎ－ジステアリル－Ｎ，Ｎ－ジメチルアンモニウムブロミド
（ＤＤＡＢ）、Ｎ－（１－（２，３－ジオレオイルオキシ）プロピル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ－ト
リメチルアンモニウムクロリド（ＤＯＴＡＰ）、１，２－ジオレオイル－３－ジメチルア
ンモニウム－プロパン（ＤＯＤＡＰ）、Ｎ－（１－（２，３－ジオレイルオキシ）プロピ
ル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ－トリメチルアンモニウムクロリド（ＤＯＴＭＡ）、１，２－ジオレオ
イルカルバミル－３－ジメチルアンモニウム－プロパン（ＤＯＣＤＡＰ）、１，２－ジリ
ネオイル－３－ジメチルアンモニウム－プロパン（ＤＬＩＮＤＡＰ）、ジラウリル（Ｃ１
２：０）トリメチルアンモニウムプロパン（ＤＬＴＡＰ）、ジオクタデシルアミドグリシ
ルスペルミン（ＤＯＧＳ）、ＤＣ－Ｃｈｏｌ、ジオレオイルオキシ－Ｎ－［２－スペルミ
ンカルボキサミド）エチル｝－Ｎ，Ｎ－ジメチル－１－プロパンアミニウムトリフルオロ
アセテート（ＤＯＳＰＡ）、１，２－ジミリスチルオキシプロピル－３－ジメチル－ヒド
ロキシエチルアンモニウムブロミド（ＤＭＲＩＥ）、３－ジメチルアミノ－２－（コレス
ト－５－エン－３－β－オキシブタン－４－オキシ）－１－（シス，シス－９，１２－オ
クタデカジエノキシ）プロパン（ＣＬｉｎＤＭＡ）、Ｎ，Ｎ－ジメチル－２，３－ジオレ
イルオキシ）プロピルアミン（ＤＯＤＭＡ）、２－［５’－（コレスト－５－エン－３β
－オキシ）－３’－オキサペントキシ）－３－ジメチル－１－（シス，シス－９’，１２
’－オクタデカジエノキシ）プロパン（ＣｐＬｉｎＤＭＡ）およびＮ，Ｎ－ジメチル－３
，４－ジオレイルオキシベンジルアミン（ＤＭＯＢＡ）、ならびに１，２－Ｎ，Ｎ’－ジ
オレイルカルバミル－３－ジメチルアミノプロパン（ＤＯｃａｒｂＤＡＰ）からなる群か
ら選択される、態様１～３９のいずれか１つの方法。
態様４１．カチオン性脂質がＤＯＴＡＰまたはＤＬＴＡＰである、態様４０の方法。
態様４２．標的タンパク質に特異的に結合する抗体を産生するハイブリドーマを作製す
るステップをさらに含む、態様１～４１のいずれか１つの方法。
態様４３．標的タンパク質に特異的に結合する抗体を精製するステップをさらに含む、
態様１～４２のいずれか１つの方法。
態様４４．標的タンパク質に特異的に結合する精製された抗体に由来するキメラまたは
ヒト化抗体を作製するステップをさらに含む、態様１～４３のいずれか１つの方法。
態様４５．前記方法が、ｃＤＮＡ、タンパク質もしくはペプチド、ウイルス粒子、また
は細胞全体による免疫化を含む方法と比較して、１回目の採血または２回目の採血由来の
血清中においてより高い抗体力価を生じる、態様１～４４のいずれか１つの方法。
態様４６．前記方法が、ｃＤＮＡ、タンパク質もしくはペプチド、ウイルス粒子、また
は細胞全体による免疫化を含む方法よりも、標的タンパク質に特異的な抗体を産生するハ
イブリドーマをより多く生じる、態様１～４４のいずれか１つの方法。
態様４７．標的タンパク質がヒト標的タンパク質であり、非ヒト動物が、マウス、ラッ
ト、ウサギ、ヒツジ、ネコ、イヌ、ラクダ科動物、サメ、サル、ブタ、またはウマである
、態様１～４６のいずれか１つの方法。
態様４８．標的タンパク質に特異的に結合する抗体を産生するハイブリドーマであって
、ハイブリドーマが態様１～４７のいずれか１つの方法によって得られる、ハイブリドー
マ。
態様４９．標的タンパク質に特異的に結合するポリクローナル抗体の混合物であって、
混合物が態様１～４７のいずれか１つの方法によって得られる、混合物。
態様５０．標的タンパク質に特異的に結合する単離されたモノクローナル抗体であって
、モノクローナル抗体が態様１～４７のいずれか１つの方法によって得られる、単離され
たモノクローナル抗体。
態様５１．非ヒト動物において標的タンパク質に対する免疫応答を誘発するための方法
であって、脂質－ポリヌクレオチド複合体をその動物に投与するステップを含み、脂質－
ポリヌクレオチド複合体がカチオン性脂質および標的タンパク質をコードするｍＲＮＡを
含み、標的タンパク質がその動物と異なる種のタンパク質である、方法。
態様５２．前記複合体が、次の：コンセンサスコザック配列；ｍＲＮＡの５’末端上の
７－メチルグアノシンキャップ；ｍＲＮＡ転写物の３’終端で見られるポリアデノシン（
ポリＡ）テール；ならびに５’－および３’－非翻訳領域（ＵＴＲ）の１つ以上を含む、
態様５１の方法。
態様５３．前記投与が非経口である、態様５１の方法。
態様５４．前記投与が静脈内である、態様５１の方法。
態様５５．前記投与が筋肉内である、態様５１の方法。
態様５６．前記投与が皮下である、態様５１の方法。
態様５７．前記投与が鼻腔内である、態様５１の方法。
態様５８．前記標的タンパク質がＲＸＦＰ１である、態様５１～５７のいずれか１つの
方法。
態様５９．前記複合体が、配列番号４、または配列番号２、４および３７のいずれか１
つのヌクレオチド配列を含むポリリボヌクレオチドを含む、態様５１～５７のいずれか１
つの方法。
態様６０．前記標的タンパク質がＳＬＣ５２Ａ２である、態様５１～５７のいずれか１
つの方法。
態様６１．前記複合体が、配列番号７、または配列番号５、７および４０のいずれか１
つのヌクレオチド配列を含むポリリボヌクレオチドを含む、態様５１～５７のいずれか１
つの方法。
態様６２．前記標的タンパク質がＡＮＧＰＴＬ８である、態様５１～５７のいずれか１
つの方法。
態様６３．前記複合体が、配列番号１０、または配列番号８、１０および４３のいずれ
か１つのヌクレオチド配列を含むポリリボヌクレオチドを含む、態様５１～５７のいずれ
か１つの方法。
態様６４．前記標的タンパク質がＴＳＨＲである、態様５１～５７のいずれか１つの方
法。
態様６５．前記複合体が、配列番号１６、または配列番号１４、１６および４６のいず
れか１つのヌクレオチド配列を含むポリリボヌクレオチドを含む、態様５１～５７のいず
れか１つの方法。
態様６６．前記標的タンパク質がＡＰＪである、態様５１～５７のいずれか１つの方法
。
態様６７．前記複合体が、配列番号１９、または配列番号１７、１９および４９のいず
れか１つのヌクレオチド配列を含むポリリボヌクレオチドを含む、態様５１～５７のいず
れか１つの方法。
態様６８．前記標的タンパク質がＧＰ１３０である、態様５１～５７のいずれか１つの
方法。
態様６９．前記複合体が、配列番号２２、または配列番号２０、２２および５２のいず
れか１つのヌクレオチド配列を含むポリリボヌクレオチドを含む、態様５１～５７のいず
れか１つの方法。
態様７０．前記標的タンパク質がガレクチン３である、態様５１の方法。
態様７１．前記複合体が、配列番号５５、または配列番号２６、５５および５６のいず
れか１つを含む、態様５１の方法。
態様７２．標的タンパク質に特異的に結合する抗体または抗体産生細胞を動物から得る
ステップをさらに含む、態様５１～７１のいずれか１つの方法。
態様７３．標的タンパク質がヒト標的タンパク質であり、非ヒト動物が、マウス、ラッ
ト、ウサギ、ヒツジ、ネコ、イヌ、ラクダ科動物、サメ、サル、ブタ、またはウマである
、態様５１～７２のいずれか１つの方法。
態様７４．複合体が、（ｉ）カチオン性脂質、（ｉｉ）ヘルパー脂質、例えば、コレス
テロール、（ｉｉｉ）中性脂質、例えば、ＤＳＰＣ、および（ｉｖ）ステルス脂質、例え
ば、Ｓ０１０、Ｓ０２４、Ｓ０２７、Ｓ０３１またはＳ０３３の任意の組み合わせを含む
、態様５１～７３のいずれか１つの方法。
態様７５．動物が、５μｇ、１０μｇ、１２．５μｇ、２０μｇ、２５μｇ、３０μｇ
、４０μｇ、５０μｇ、６０μｇ、７０μｇ、８０μｇ、９０μｇ、１００μｇ、１１０
μｇ、１２０μｇ、１３０μｇ、１４０μｇ、または１５０μｇのポリリボヌクレオチド
（例えば、ｍＲＮＡ）を投与される、態様５１～７４のいずれか１つの方法。
態様７６．カチオン性脂質が、Ｎ，Ｎ－ジオレイル－Ｎ，Ｎ－ジメチルアンモニウムク
ロリド（ＤＯＤＡＣ）、Ｎ，Ｎ－ジステアリル－Ｎ，Ｎ－ジメチルアンモニウムブロミド
（ＤＤＡＢ）、Ｎ－（１－（２，３－ジオレオイルオキシ）プロピル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ－ト
リメチルアンモニウムクロリド（ＤＯＴＡＰ）、１，２－ジオレオイル－３－ジメチルア
ンモニウム－プロパン（ＤＯＤＡＰ）、Ｎ－（１－（２，３－ジオレイルオキシ）プロピ
ル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ－トリメチルアンモニウムクロリド（ＤＯＴＭＡ）、１，２－ジオレオ
イルカルバミル－３－ジメチルアンモニウム－プロパン（ＤＯＣＤＡＰ）、１，２－ジリ
ネオイル－３－ジメチルアンモニウム－プロパン（ＤＬＩＮＤＡＰ）、ジラウリル（Ｃ１
２：０）トリメチルアンモニウムプロパン（ＤＬＴＡＰ）、ジオクタデシルアミドグリシ
ルスペルミン（ＤＯＧＳ）、ＤＣ－Ｃｈｏｌ、ジオレオイルオキシ－Ｎ－［２－スペルミ
ンカルボキサミド）エチル｝－Ｎ，Ｎ－ジメチル－１－プロパンアミニウムトリフルオロ
アセテート（ＤＯＳＰＡ）、１，２－ジミリスチルオキシプロピル－３－ジメチル－ヒド
ロキシエチルアンモニウムブロミド（ＤＭＲＩＥ）、３－ジメチルアミノ－２－（コレス
ト－５－エン－３－β－オキシブタン－４－オキシ）－１－（シス，シス－９，１２－オ
クタデカジエノキシ）プロパン（ＣＬｉｎＤＭＡ）、Ｎ，Ｎ－ジメチル－２，３－ジオレ
イルオキシ）プロピルアミン（ＤＯＤＭＡ）、２－［５’－（コレスト－５－エン－３β
－オキシ）－３’－オキサペントキシ）－３－ジメチル－１－（シス，シス－９’，１２
’－オクタデカジエノキシ）プロパン（ＣｐＬｉｎＤＭＡ）およびＮ，Ｎ－ジメチル－３
，４－ジオレイルオキシベンジルアミン（ＤＭＯＢＡ）、ならびに１，２－Ｎ，Ｎ’－ジ
オレイルカルバミル－３－ジメチルアミノプロパン（ＤＯｃａｒｂＤＡＰ）からなる群か
ら選択される、態様５１～７５のいずれか１つの方法。
態様７７．カチオン性脂質がＤＯＴＡＰまたはＤＬＴＡＰである、態様７６の方法。
態様７８．標的タンパク質が、次の：ＡＣＫＲ１、ＡＣＫＲ２、ＡＣＫＲ３、ＡＣＫＲ
４、ＡＤＣＹＡＰ１Ｒ１、ＡＤＧＲＡ１、ＡＤＧＲＡ２、ＡＤＧＲＡ３、ＡＤＧＲＢ１、
ＡＤＧＲＢ２、ＡＤＧＲＢ３、ＡＤＧＲＤ１、ＡＤＧＲＤ２、ＡＤＧＲＥ１、ＡＤＧＲＥ
２、ＡＤＧＲＥ３、ＡＤＧＲＥ４Ｐ、ＡＤＧＲＥ５、ＡＤＧＲＦ１、ＡＤＧＲＦ２、ＡＤ
ＧＲＦ３、ＡＤＧＲＦ４、ＡＤＧＲＦ５、ＡＤＧＲＧ１、ＡＤＧＲＧ２、ＡＤＧＲＧ３、
ＡＤＧＲＧ４、ＡＤＧＲＧ５、ＡＤＧＲＧ６、ＡＤＧＲＧ７、ＡＤＧＲＬ１、ＡＤＧＲＬ
２、ＡＤＧＲＬ３、ＡＤＧＲＬ４、ＡＤＧＲＶ１、ＡＤＯＲＡ１、ＡＤＯＲＡ２Ａ、ＡＤ
ＯＲＡ２Ｂ、ＡＤＯＲＡ３、ＡＤＲＡ１Ａ、ＡＤＲＡ１Ｂ、ＡＤＲＡ１Ｄ、ＡＤＲＡ２Ａ
、ＡＤＲＡ２Ｂ、ＡＤＲＡ２Ｃ、ＡＤＲＢ１、ＡＤＲＢ２、ＡＤＲＢ３、ＡＧＴＲ１、Ａ
ＧＴＲ２、ＡＰＬＮＲ／ＡＰＪ、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＡＶＰＲ１Ａ、ＡＶＰＲ１Ｂ
、ＡＶＰＲ２、ＢＤＫＲＢ１、ＢＤＫＲＢ２、ＢＲＳ３、ＢＲＳ３、Ｃ３ＡＲ１、Ｃ５Ａ
Ｒ１、Ｃ５ＡＲ２、ＣＡＬＣＲ、ＣＡＬＣＲＬ、ＣＡＳＲ、ＣＣＫＡＲ、ＣＣＫＢＲ、Ｃ
ＣＲ１、ＣＣＲ１０、ＣＣＲ２、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、
ＣＣＲ８、ＣＣＲ９、ＣＣＲＬ２、ＣＥＬＳＲ１、ＣＥＬＳＲ２、ＣＥＬＳＲ３、ＣＨＲ
Ｍ１、ＣＨＲＭ２、ＣＨＲＭ３、ＣＨＲＭ４、ＣＨＲＭ５、ＣＭＫＬＲ１、ＣＮＲ１、Ｃ
ＮＲ２、ＣＲＨＲ１、ＣＲＨＲ２、ＣＸ３ＣＲ１、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ３
、ＣＸＣＲ４、ＣＸＣＲ５、ＣＸＣＲ６、ＣＹＳＬＴＲ１、ＣＹＳＬＴＲ２、ＤＲＤ１、
ＤＲＤ２、ＤＲＤ３、ＤＲＤ４、ＤＲＤ５、ＥＤＮＲＡ、ＥＤＮＲＢ、Ｆ２Ｒ、Ｆ２ＲＬ
１、Ｆ２ＲＬ２、Ｆ２ＲＬ３、ＦＦＡＲ１、ＦＦＡＲ２、ＦＦＡＲ３、ＦＦＡＲ４、ＦＰ
Ｒ１、ＦＰＲ２、ＦＰＲ２、ＦＰＲ３、ＦＳＨＲ、ＦＺＤ１、ＦＺＤ１０、ＦＺＤ２、Ｆ
ＺＤ３、ＦＺＤ４、ＦＺＤ５、ＦＺＤ６、ＦＺＤ７、ＦＺＤ８、ＦＺＤ９、ＧＡＢＢＲ１
、ＧＡＢＢＲ２、ＧＡＬＲ１、ＧＡＬＲ２、ＧＡＬＲ３、ＧＣＧＲ、ＧＨＲＨＲ、ＧＨＳ
Ｒ、ＧＩＰＲ、ＧＬＰ１Ｒ、ＧＬＰ２Ｒ、ＧＮＲＨＲ、ＧＮＲＨＲ２、ＧＰＢＡＲ１、Ｇ
ＰＥＲ１、ＧＰＲ１、ＧＰＲ４、ＧＰＲ１２、ＧＰＲ１５、ＧＰＲ１７、ＧＰＲ１８、Ｇ
ＰＲ１９、ＧＰＲ２０、ＧＰＲ２１、ＧＰＲ２２、ＧＰＲ２５、ＧＰＲ２６、ＧＰＲ２７
、ＧＰＲ３、ＧＰＲ３１、ＧＰＲ３２、ＧＰＲ３３、ＧＰＲ３４、ＧＰＲ３５、ＧＰＲ３
７、ＧＰＲ３７Ｌ１、ＧＰＲ３９、ＧＰＲ４０、ＧＰＲ４２、ＧＰＲ４２、ＧＰＲ４５、
ＧＰＲ５０、ＧＰＲ５２、ＧＰＲ５５、ＧＰＲ６、ＧＰＲ６１、ＧＰＲ６２、ＧＰＲ６３
、ＧＰＲ６５、ＧＰＲ６８、ＧＰＲ７５、ＧＰＲ７８、ＧＰＲ７９、ＧＰＲ８２、ＧＰＲ
８３、ＧＰＲ８４、ＧＰＲ８５、ＧＰＲ８７、ＧＰＲ８８、ＧＰＲ１０１、ＧＰＲ１０７
、ＧＰＲ１３２、ＧＰＲ１３５、ＧＰＲ１３７、ＧＰＲ１３９、ＧＰＲ１４１、ＧＰＲ１
４２、ＧＰＲ１４３、ＧＰＲ１４６、ＧＰＲ１４８、ＧＰＲ１４９、ＧＰＲ１５、ＧＰＲ
１５０、ＧＰＲ１５１、ＧＰＲ１５２、ＧＰＲ１５３、ＧＰＲ１５６、ＧＰＲ１５７、Ｇ
ＰＲ１５８、ＧＰＲ１６０、ＧＰＲ１６１、ＧＰＲ１６２、ＧＰＲ１７１、ＧＰＲ１７３
、ＧＰＲ１７４、ＧＰＲ１７６、ＧＰＲ１７９、ＧＰＲ１８２、ＧＰＲ１８３、ＧＰＲＣ
５Ａ、ＧＰＲＣ５Ｂ、ＧＰＲＣ５Ｃ、ＧＰＲＣ５Ｄ、ＧＰＲＣ６Ａ、ＧＲＭ１、ＧＲＭ２
、ＧＲＭ３、ＧＲＭ４、ＧＲＭ５、ＧＲＭ６、ＧＲＭ７、ＧＲＭ８、ＧＲＰＲ、ＨＣＡＲ
１、ＨＣＡＲ２、ＨＣＡＲ３、ＨＣＲＴＲ１、ＨＣＲＴＲ２、ＨＲＨ１、ＨＲＨ２、ＨＲ
Ｈ３、ＨＲＨ４、ＨＴＲ１Ａ、ＨＴＲ１Ｂ、ＨＴＲ１Ｄ、ＨＴＲ１Ｅ、ＨＴＲ１Ｆ、ＨＴ
Ｒ２Ａ、ＨＴＲ２Ｂ、ＨＴＲ２Ｃ、ＨＴＲ４、ＨＴＲ５Ａ、ＨＴＲ５ＢＰ、ＨＴＲ６、Ｈ
ＴＲ７、ＫＩＳＳ１Ｒ、ＬＧＲ３、ＬＧＲ４、ＬＧＲ５、ＬＧＲ６、ＬＨＣＧＲ、ＬＰＡ
Ｒ１、ＬＰＡＲ２、ＬＰＡＲ３、ＬＰＡＲ４、ＬＰＡＲ５、ＬＰＡＲ６、ＬＴＢ４Ｒ、Ｌ
ＴＢ４Ｒ２、ＭＡＳ１、ＭＡＳ１Ｌ、ＭＣ１Ｒ、ＭＣ２Ｒ、ＭＣ３Ｒ、ＭＣ４Ｒ、ＭＣ５
Ｒ、ＭＣＨＲ１、ＭＣＨＲ２、ＭＬＮＲ、ＭＲＧＰＲＤ、ＭＲＧＰＲＥ、ＭＲＧＰＲＦ、
ＭＲＧＰＲＧ、ＭＲＧＰＲＸ１、ＭＲＧＰＲＸ２、ＭＲＧＰＲＸ３、ＭＲＧＰＲＸ４、Ｍ
ＴＮＲ１Ａ、ＭＴＮＲ１Ｂ、ＮＭＢＲ、ＮＭＵＲ１、ＮＭＵＲ２、ＮＰＢＷＲ１、ＮＰＢ
ＷＲ２、ＮＰＦＦＲ１、ＮＰＦＦＲ２、ＮＰＳＲ１、ＮＰＹ１Ｒ、ＮＰＹ２Ｒ、ＮＰＹ４
Ｒ、ＮＰＹ５Ｒ、ＮＰＹ６Ｒ、ＮＴＳＲ１、ＮＴＳＲ２、ＯＰＮ３、ＯＰＮ４、ＯＰＮ５
、ＯＰＲＤ１、ＯＰＲＫ１、ＯＰＲＬ１、ＯＰＲＭ１、ＯＲ５１Ｅ１、ＯＸＥＲ１、ＯＸ
ＧＲ１、ＯＸＴＲ、Ｐ２ＲＹ１、Ｐ２ＲＹ１０、Ｐ２ＲＹ１１、Ｐ２ＲＹ１２、Ｐ２ＲＹ
１３、Ｐ２ＲＹ１４、Ｐ２ＲＹ２、Ｐ２ＲＹ４、Ｐ２ＲＹ６、Ｐ２ＲＹ８、ＰＲＬＨＲ、
ＰＲＯＫＲ１、ＰＲＯＫＲ２、ＰＴＡＦＲ、ＰＴＧＤＲ、ＰＴＧＤＲ２、ＰＴＧＥＲ１、
ＰＴＧＥＲ２、ＰＴＧＥＲ３、ＰＴＧＥＲ４、ＰＴＧＦＲ、ＰＴＧＩＲ、ＰＴＨ１Ｒ、Ｐ
ＴＨ２Ｒ、ＱＲＦＰＲ、ＲＸＦＰ１、ＲＸＦＰ２、ＲＸＦＰ３、ＲＸＦＰ４、Ｓ１ＰＲ１
、Ｓ１ＰＲ２、Ｓ１ＰＲ３、Ｓ１ＰＲ４、Ｓ１ＰＲ５、ＳＣＴＲ、ＳＭＯ、ＳＳＴＲ１、
ＳＳＴＲ２、ＳＳＴＲ３、ＳＳＴＲ４、ＳＳＴＲ５、ＳＵＣＮＲ１、ＴＡＡＲ１、ＴＡＡ
Ｒ２、ＴＡＡＲ３、ＴＡＡＲ４Ｐ、ＴＡＡＲ５、ＴＡＡＲ６、ＴＡＡＲ８、ＴＡＡＲ９、
ＴＡＣＲ１、ＴＡＣＲ２、ＴＡＣＲ３、ＴＡＳ１Ｒ１、ＴＡＳ１Ｒ２、ＴＡＳ１Ｒ３、Ｔ
ＡＳ２Ｒ１、ＴＡＳ２Ｒ１０、ＴＡＳ２Ｒ１３、ＴＡＳ２Ｒ１４、ＴＡＳ２Ｒ１６、ＴＡ
Ｓ２Ｒ１９、ＴＡＳ２Ｒ２０、ＴＡＳ２Ｒ３、ＴＡＳ２Ｒ３０、ＴＡＳ２Ｒ３１、ＴＡＳ
２Ｒ３８、ＴＡＳ２Ｒ３９、ＴＡＳ２Ｒ４、ＴＡＳ２Ｒ４０、ＴＡＳ２Ｒ４１、ＴＡＳ２
Ｒ４２、ＴＡＳ２Ｒ４３、ＴＡＳ２Ｒ４５、ＴＡＳ２Ｒ４６、ＴＡＳ２Ｒ５、ＴＡＳ２Ｒ
５０、ＴＡＳ２Ｒ６０、ＴＡＳ２Ｒ７、ＴＡＳ２Ｒ８、ＴＡＳ２Ｒ９、ＴＢＸＡ２Ｒ、Ｔ
ＰＲＡ１、ＴＲＨＲ、ＴＳＨＲ、ＵＴＳ２Ｒ、ＶＩＰＲ１、ＶＩＰＲ２、ＸＣＲ１、ＴＣ
Ｒ－α、ＴＣＲ－β、ＣＤ３、ζ－鎖アクセサリー、ＣＤ４、ＣＤ８、ＳＩＧＩＲＲ（単
一のＩｇおよびＴＩＲドメイン含有）、マンノース受容体（ＭＲ）、アシアロ糖タンパク
質受容体ファミリー（例えば、アシアロ糖タンパク質受容体マクロファージガラクトース
型レクチン（ＭＧＬ））、ＤＣ－ＳＩＧＮ（ＣＬＥＣ４Ｌ）、ランゲリン（ＣＬＥＣ４Ｋ
）、骨髄系ＤＡＰ１２会合レクチン（ＭＤＬ）－１（ＣＬＥＣ５Ａ）、デクチン１／ＣＬ
ＥＣ７Ａ、ＤＮＧＲ１／ＣＬＥＣ９Ａ、骨髄系Ｃ型レクチン様受容体（ＭＩＣＬ）（ＣＬ
ＥＣ１２Ａ）、ＣＬＥＣ２（ＣＬＥＣ１Ｂとも呼ばれる）、ＣＬＥＣ１２Ｂ、ＤＣＩＲ／
ＣＬＥＣ４Ａ、デクチン２／ＣＬＥＣ６Ａ、血液ＤＣ抗原２（ＢＤＣＡ２）（ＣＬＥＣ４
Ｃ）、マクロファージ誘導性Ｃ型レクチン（ＣＬＥＣ４Ｅ）、ＴＬＲ１、ＴＬＲ２、ＴＬ
Ｒ３、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ６、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９、ＴＬＲ１０、Ｔ
ＬＲ１１、ＴＬＲ１２、ＴＬＲ１３，ＦｃγＲＩ（ＣＤ６４）、ＦｃγＲＩＩＡ（ＣＤ３
２）、ＦｃγＲＩＩＢ１（ＣＤ３２）、ＦｃγＲＩＩＢ２（ＣＤ３２）、ＦｃγＲＩＩＩ
Ａ（ＣＤ１６ａ）、ＦｃγＲＩＩＩＢ（ＣＤ１６ｂ）、ＦｃεＲＩ、ＦｃεＲＩＩ（ＣＤ
２３）、ＦｃαＲ１（ＣＤ８９）、Ｆｃα／μＲ、ＦｃＲｎ、ＣＤ２７、ＣＤ４０、ＯＸ
４０、ＧＩＴＲ、ＣＤ１３７、ＰＤ－１、ＣＴＬＡ－４、ＰＤ－Ｌ１、ＴＩＧＩＴ、Ｔ細
胞免疫グロブリンドメインおよびムチンドメイン３（ＴＩＭ３）、Ｔ細胞活性化のＶ－ド
メインＩｇ抑制因子（ＶＩＳＴＡ）、ＣＤ２８、ＣＤ１２２、ＩＣＯＳ、Ａ２ＡＲ、Ｂ７
－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＢおよびＴリンパ球アテニュエータ（ＢＴＬＡ）、インドールアミ
ン２，３－ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）、キラー細胞免疫グロブリン様受容体（ＫＩＲ）
、リンパ球活性化遺伝子－３（ＬＡＧ３）、ＦＡＭ１５９Ｂ、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－Ｂ、
ＨＬＡ－Ｃ、ＨＬＡ－ＤＰＡ１、ＨＬＡ－ＤＰＢ１、ＨＬＡ－ＤＱＡ１、ＨＬＡ－ＤＱＢ
１、ＨＬＡ－ＤＲＡ、ＨＬＡ－ＤＲＢ１、ｇｐ１３０、ＩＬ－１受容体、ＩＬ－２受容体
、ＩＬ－３受容体、ＩＬ－４受容体、ＩＬ－５受容体、ＩＬ－６受容体、ＩＬ－７受容体
、ＩＬ－８受容体、ＩＬ－９受容体、ＩＬ－１０受容体、ＩＬ－１１受容体、ＩＬ－１２
受容体、ＩＬ－１３受容体、ＩＬ－１４受容体、ＩＬ－１５受容体、ＩＬ－１６受容体、
ＩＬ－１７受容体、ＩＬ－１８受容体、ＩＬ－１９受容体、ＩＬ－２０受容体、ＩＬ－２
１受容体、ＩＬ－２２受容体、ＩＬ－２３受容体、ＩＬ－２４受容体、ＩＬ－２５受容体
、ＩＬ－２６受容体、ＩＬ－２７受容体、ＩＬ－２８受容体、ＩＬ－２９受容体、ＩＬ－
３０受容体、ＩＬ－３１受容体、ＩＬ－３２受容体、ＩＬ－３３受容体、ＩＬ－３５受容
体、ＩＬ－３６受容体、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、ＦＧＦＲ４、ＴＮＦＲＳ
Ｆ１Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１Ｂ、ＴＮＦＲＳＦ３、ＴＮＦＲＳＦ４、ＴＮＦＲＳＦ５、ＴＮＦ
ＲＳＦ６、ＴＮＦＲＳＦ６Ｂ、ＴＮＦＲＳＦ７、ＴＮＦＲＳＦ８、ＴＮＦＲＳＦ９、ＴＮ
ＦＲＳＦ１０Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｃ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｄ、ＴＮ
ＦＲＳＦ１１Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１１Ｂ、ＴＮＦＲＳＦ１２Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１３Ｂ、ＴＮ
ＦＲＳＦ１３Ｃ、ＴＮＦＲＳＦ１４、ＴＮＦＲＳＦ１６、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＴＮＦＲＳ
Ｆ１８、ＴＮＦＲＳＦ１９、ＴＮＦＲＳＦ２１、ＴＮＦＲＳＦ２５、ＴＮＦＲＳＦ２７、
ＳＣＮ１Ａ、ＳＣＮ１Ｂ、ＳＣＮ２Ａ、ＳＣＮ２Ｂ、ＳＣＮ３Ａ、ＳＣＮ３Ｂ、ＳＣＮ４
Ａ、ＳＣＮ５Ａ、ＳＣＮ７Ａ、ＳＣＮ８Ａ、ＳＣＮ９Ａ、ＳＣＮ１０Ａ、ＳＣＮ１１Ａ、
ＣＡＣＮＡ１Ａ、ＣＡＣＮＡ１Ｂ、ＣＡＣＮＡ１Ｃ、ＣＡＣＮＡ１Ｄ、ＣＡＣＮＡ１Ｅ、
ＣＡＣＮＡ１Ｆ、ＣＡＣＮＡ１Ｇ、ＣＡＣＮＡ１Ｈ、ＣＡＣＮＡ１Ｉ、ＣＡＣＮＡ１Ｓ、
ＴＲＰＡ１、ＴＲＰＣ１、ＴＲＰＣ２、ＴＲＰＣ３、ＴＲＰＣ４、ＴＲＰＣ５、ＴＲＰＣ
６、ＴＲＰＣ７、ＴＲＰＭ１、ＴＲＰＭ２、ＴＲＰＭ３、ＴＲＰＭ４、ＴＲＰＭ５、ＴＲ
ＰＭ６、ＴＲＰＭ７、ＴＲＰＭ８、ＭＣＯＬＮ１、ＭＣＯＬＮ２、ＭＣＯＬＮ３、ＰＫＤ
１、ＰＫＤ２、ＰＫＤ２Ｌ１、ＰＫＤ２Ｌ２、ＴＲＰＶ１、ＴＲＰＶ２、ＴＲＰＶ３、Ｔ
ＲＰＶ４、ＴＲＰＶ５、ＴＲＰＶ６、ＣＡＴＳＰＥＲ１、ＣＡＴＳＰＥＲ２、ＣＡＴＳＰ
ＥＲ３、ＣＡＴＳＰＥＲ４、ＴＰＣＮ１、ＴＰＣＮ２、ＣＮＧＡ１、ＣＮＧＡ２、ＣＮＧ
Ａ３、ＣＮＧＡ４、ＣＮＧＢ１、ＣＮＧＢ３、ＨＣＮ１、ＨＣＮ２、ＨＣＮ３、ＨＣＮ４
、ＫＣＮＭＡ１、ＫＣＮＮ１、ＫＣＮＮ２、ＫＣＮＮ３、ＫＣＮＮ４、ＫＣＮＴ１、ＫＣ
ＮＴ２、ＫＣＮＵ１、ＫＣＮＡ１、ＫＣＮＡ２、ＫＣＮＡ３、ＫＣＮＡ４、ＫＣＮＡ５、
ＫＣＮＡ６、ＫＣＮＡ７、ＫＣＮＡ１０、ＫＣＮＢ１、ＫＣＮＢ２、ＫＣＮＣ１、ＫＣＮ
Ｃ２、ＫＣＮＣ３、ＫＣＮＣ４、ＫＣＮＤ１、ＫＣＮＤ２、ＫＣＮＤ３、ＫＣＮＦ１、Ｋ
ＣＮＧ１、ＫＣＮＧ２、ＫＣＮＧ３、ＫＣＮＧ４、ＫＣＮＨ１、ＫＣＮＨ２、ＫＣＮＨ３
、ＫＣＮＨ４、ＫＣＮＨ５、ＫＣＮＨ６、ＫＣＮＨ７、ＫＣＮＨ８、ＫＣＮＱ１、ＫＣＮ
Ｑ２、ＫＣＮＱ３、ＫＣＮＱ４、ＫＣＮＱ５、ＫＣＮＳ１、ＫＣＮＳ２、ＫＣＮＳ３、Ｋ
ＣＮＶ１、ＫＣＮＶ２、ＫＣＮＪ１、ＫＣＮＪ２、ＫＣＮＪ３、ＫＣＮＪ４、ＫＣＮＪ５
、ＫＣＮＪ６、ＫＣＮＪ８、ＫＣＮＪ９、ＫＣＮＪ１０、ＫＣＮＪ１１、ＫＣＮＪ１２、
ＫＣＮＪ１３、ＫＣＮＪ１４、ＫＣＮＪ１５、ＫＣＮＪ１６、ＫＣＮＪ１８、ＫＣＮＫ１
、ＫＣＮＫ２、ＫＣＮＫ３、ＫＣＮＫ４、ＫＣＮＫ５、ＫＣＮＫ６、ＫＣＮＫ７、ＫＣＮ
Ｋ９、ＫＣＮＫ１０、ＫＣＮＫ１２、ＫＣＮＫ１３、ＫＣＮＫ１５、ＫＣＮＫ１６、ＫＣ
ＮＫ１７、ＫＣＮＫ１８、ＨＶＣＮ１、ＨＴＲ３Ａ、ＨＴＲ３Ｂ、ＨＴＲ３Ｃ、ＨＴＲ３
Ｄ、ＨＴＲ３Ｅ、ＣＨＲＮＡ１、ＣＨＲＮＡ２、ＣＨＲＮＡ３、ＣＨＲＮＡ４、ＣＨＲＮ
Ａ５、ＣＨＲＮＡ６、ＣＨＲＮＡ７、ＣＨＲＮＡ９、ＣＨＲＮＡ１０、ＣＨＲＮＢ１、Ｃ
ＨＲＮＢ２、ＣＨＲＮＢ３、ＣＨＲＮＢ４、ＣＨＲＮＤ、ＣＨＲＮＥ、ＣＨＲＮＧ、ＧＡ
ＢＲＡ１、ＧＡＢＲＡ２、ＧＡＢＲＡ３、ＧＡＢＲＡ４、ＧＡＢＲＡ５、ＧＡＢＲＡ６、
Ｇ



ＡＢＲＢ１、ＧＡＢＲＢ２、ＧＡＢＲＢ３、ＧＡＢＲＤ、ＧＡＢＲＥ、ＧＡＢＲＧ１、Ｇ
ＡＢＲＧ２、ＧＡＢＲＧ３、ＧＡＢＲＰ、ＧＡＢＲＱ、ＧＡＢＲＲ１、ＧＡＢＲＲ２、Ｇ
ＡＢＲＲ３、ＧＲＩＡ１、ＧＲＩＡ２、ＧＲＩＡ３、ＧＲＩＡ４、ＧＲＩＤ１、ＧＲＩＤ
２、ＧＲＩＫ１、ＧＲＩＫ２、ＧＲＩＫ３、ＧＲＩＫ４、ＧＲＩＫ５、ＧＲＩＮ１、ＧＲ
ＩＮ２Ａ、ＧＲＩＮ２Ｂ、ＧＲＩＮ２Ｃ、ＧＲＩＮ２Ｄ、ＧＲＩＮ３Ａ、ＧＲＩＮ３Ｂ、
ＧＬＲＡ１、ＧＬＲＡ２、ＧＬＲＡ３、ＧＬＲＡ４、Ｐ２ＲＸ１、Ｐ２ＲＸ２、Ｐ２ＲＸ
３、Ｐ２ＲＸ４、Ｐ２ＲＸ５、Ｐ２ＲＸ６、Ｐ２ＲＸ７、ＺＡＣＮ、ＡＳＩＣ１、ＡＳＩ
Ｃ２、ＡＳＩＣ３、ＡＳＩＣ４、ＡＱＰ１、ＡＱＰ２、ＡＱＰ３、ＡＱＰ４、ＡＱＰ５、
ＡＱＰ６、ＡＱＰ７、ＡＱＰ８、ＡＱＰ９、ＡＱＰ１０、ＡＱＰ１１、ＡＱＰ１２Ａ、Ａ
ＱＰ１２Ｂ、ＭＩＰ、ＣＬＣＮ１、ＣＬＣＮ２、ＣＬＣＮ３、ＣＬＣＮ４、ＣＬＣＮ５、
ＣＬＣＮ６、ＣＬＣＮ７、ＣＬＣＮＫＡ、ＣＬＣＮＫＢ、嚢胞性線維症膜コンダクタンス
制御因子（ＣＦＴＲ）、ＡＮＯ１、ＡＮＯ２、ＡＮＯ３、ＡＮＯ４、ＡＮＯ５、ＡＮＯ６
、ＡＮＯ７、ＡＮＯ８、ＡＮＯ９、ＡＮＯ１０、ＢＥＳＴ１、ＢＥＳＴ２、ＢＥＳＴ３、
ＢＥＳＴ４、ＣＬＩＣ１、ＣＬＩＣ２、ＣＬＩＣ３、ＣＬＩＣ４、ＣＬＩＣ５、ＣＬＩＣ
６、ＧＪＡ１、ＧＪＡ３、ＧＪＡ４、ＧＪＡ５、ＧＪＡ６Ｐ、ＧＪＡ８、ＧＪＡ９、ＧＪ
Ａ１０、ＧＪＢ１、ＧＪＢ２、ＧＪＢ３、ＧＪＢ４、ＧＪＢ５、ＧＪＢ６、ＧＪＢ７、Ｇ
ＪＣ１、ＧＪＣ２、ＧＪＣ３、ＧＪＤ２、ＧＪＤ３、ＧＪＤ４、ＧＪＥ１、ＩＴＰＲ１、
ＩＴＰＲ２、ＩＴＰＲ３、ＰＡＮＸ１、ＰＡＮＸ２、ＰＡＮＸ３、ＲＹＲ１、ＲＹＲ２、
ＲＹＲ３、ＮＡＬＣＮ、ＳＣＮＮ１Ａ、ＳＣＮＮ１Ｂ、ＳＣＮＮ１Ｄ、ＳＣＮＮ１Ｇ、Ｔ
ＥＭ１６Ａ、ＡＤＡＭＴＳ７、ＡＮＧＰＴＬ３、ＡＮＧＰＴＬ４、ＡＮＧＰＴＬ８、ＬＰ
Ｌ、ＧＤＦ１５、ガレクチン－１、ガレクチン－２、ガレクチン－３、ガレクチン－４、
ガレクチン－７、ガレクチン－８、ガレクチン－９、ガレクチン－１０、ガレクチン－１
２、ガレクチン－１３、マトリックスｇｌａタンパク質（ＭＧＰ）、ＰＲＮＰ、ＤＧＡＴ
１、ＧＰＡＴ３、ＤＭＣ１、ＢＬＭ、ＢＲＣＡ２、ヒト内在性レトロウイルスタイプＫ（
ＨＥＲＶ－Ｋ）ファミリーのメンバー、エクトヌクレオシド三リン酸ジホスホヒドロラー
ゼ１（ＥＮＴＰＤ１）、エクトヌクレオシド三リン酸ジホスホヒドロラーゼ２（ＥＮＴＰ
Ｄ２）、ＳＬＣ１Ａ１、ＳＬＣ１Ａ２、ＳＬＣ１Ａ３、ＳＬＣ１Ａ４、ＳＬＣ１Ａ５、Ｓ
ＬＣ１Ａ６、ＳＬＣ１Ａ７、ＳＬＣ２Ａ１、ＳＬＣ２Ａ２、ＳＬＣ２Ａ３、ＳＬＣ２Ａ４
、ＳＬＣ２Ａ５、ＳＬＣ２Ａ６、ＳＬＣ２Ａ７、ＳＬＣ２Ａ８、ＳＬＣ２Ａ９、ＳＬＣ２
Ａ１０、ＳＬＣ２Ａ１１、ＳＬＣ２Ａ１２、ＳＬＣ２Ａ１３、ＳＬＣ２Ａ１４、ＳＬＣ３
Ａ１、ＳＬＣ３Ａ２、ＳＬＣ４Ａ１、ＳＬＣ４Ａ２、ＳＬＣ４Ａ３、ＳＬＣ４Ａ４、ＳＬ
Ｃ４Ａ５、ＳＬＣ４Ａ６、ＳＬＣ４Ａ７、ＳＬＣ４Ａ８、ＳＬＣ４Ａ９、ＳＬＣ４Ａ１０
、ＳＬＣ４Ａ１１、ＳＬＣ５Ａ１、ＳＬＣ５Ａ２、ＳＬＣ５Ａ３、ＳＬＣ５Ａ４、ＳＬＣ
５Ａ５、ＳＬＣ５Ａ６、ＳＬＣ５Ａ７、ＳＬＣ５Ａ８、ＳＬＣ５Ａ９、ＳＬＣ５Ａ１０、
ＳＬＣ５Ａ１１、ＳＬＣ５Ａ１２、ＳＬＣ６Ａ１、ＳＬＣ６Ａ２、ＳＬＣ６Ａ３、ＳＬＣ
６Ａ４、ＳＬＣ６Ａ５、ＳＬＣ６Ａ６、ＳＬＣ６Ａ７、ＳＬＣ６Ａ８、ＳＬＣ６Ａ９、Ｓ
ＬＣ６Ａ１０、ＳＬＣ６Ａ１１、ＳＬＣ６Ａ１２、ＳＬＣ６Ａ１３、ＳＬＣ６Ａ１４、Ｓ
ＬＣ６Ａ１５、ＳＬＣ６Ａ１６、ＳＬＣ６Ａ１７、ＳＬＣ６Ａ１８、ＳＬＣ６Ａ１９、Ｓ
ＬＣ６Ａ２０、ＳＬＣ７Ａ５、ＳＬＣ７Ａ６、ＳＬＣ７Ａ７、ＳＬＣ７Ａ８、ＳＬＣ７Ａ
９、ＳＬＣ７Ａ１０、ＳＬＣ７Ａ１１、ＳＬＣ７Ａ１３、ＳＬＣ７Ａ１４、ＳＬＣ８Ａ１
、ＳＬＣ８Ａ２、ＳＬＣ８Ａ３、ＳＬＣ９Ａ１、ＳＬＣ９Ａ２、ＳＬＣ９Ａ３、ＳＬＣ９
Ａ４、ＳＬＣ９Ａ５、ＳＬＣ９Ａ６、ＳＬＣ９Ａ７、ＳＬＣ９Ａ８、ＳＬＣ９Ａ９、ＳＬ
Ｃ９Ａ１０、ＳＬＣ９Ａ１１、ＳＬＣ９Ｂ１、ＳＬＣ９Ｂ２、ＳＬＣ１０Ａ１、ＳＬＣ１
０Ａ２、ＳＬＣ１０Ａ３、ＳＬＣ１０Ａ４、ＳＬＣ１０Ａ５、ＳＬＣ１０Ａ６、ＳＬＣ１
０Ａ７、ＳＬＣ１１Ａ１、ＳＬＣ１１Ａ２、ＳＬＣ１２Ａ１、ＳＬＣ１２Ａ２、ＳＬＣ１
２Ａ３、ＳＬＣ１２Ａ４、ＳＬＣ１２Ａ５、ＳＬＣ１２Ａ６、ＳＬＣ１２Ａ７、ＳＬＣ１
２Ａ８、ＳＬＣ１２Ａ９、ＳＬＣ１３Ａ１、ＳＬＣ１３Ａ２、ＳＬＣ１３Ａ３、ＳＬＣ１
３Ａ４、ＳＬＣ１３Ａ５、ＳＬＣ１４Ａ１、ＳＬＣ１４Ａ２、ＳＬＣ１５Ａ１、ＳＬＣ１
５Ａ２、ＳＬＣ１５Ａ３、ＳＬＣ１５Ａ４、ＳＬＣ１６Ａ１、ＳＬＣ１６Ａ２、ＳＬＣ１
６Ａ３、ＳＬＣ１６Ａ４、ＳＬＣ１６Ａ５、ＳＬＣ１６Ａ６、ＳＬＣ１６Ａ７、ＳＬＣ１
６Ａ８、ＳＬＣ１６Ａ９、ＳＬＣ１６Ａ１０、ＳＬＣ１６Ａ１１、ＳＬＣ１６Ａ１２、Ｓ
ＬＣ１６Ａ１３、ＳＬＣ１６Ａ１４、ＳＬＣ１７Ａ１、ＳＬＣ１７Ａ２、ＳＬＣ１７Ａ３
、ＳＬＣ１７Ａ４、ＳＬＣ１７Ａ５、ＳＬＣ１７Ａ６、ＳＬＣ１７Ａ７、ＳＬＣ１７Ａ８
、ＳＬＣ１７Ａ９、ＳＬＣ１８Ａ１、ＳＬＣ１８Ａ２、ＳＬＣ１８Ａ３、ＳＬＣ１９Ａ１
、ＳＬＣ１９Ａ２、ＳＬＣ１９Ａ３、ＳＬＣ２０Ａ１、ＳＬＣ２０Ａ２、ＳＬＣＯ１Ａ２
、ＳＬＣＯ１Ｂ１、ＳＬＣＯ１Ｂ３、ＳＬＣＯ１Ｃ１、ＳＬＣＯ２Ａ１、ＳＬＣＯ２Ｂ１
、ＳＬＣＯ３Ａ１、ＳＬＣＯ４Ａ１、ＳＬＣＯ４Ｃ１、ＳＬＣＯ５Ａ１、ＳＬＣＯ６Ａ１
、ＳＬＣ２２Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ２、ＳＬＣ２２Ａ３、ＳＬＣ２２Ａ４、ＳＬＣ２２Ａ５
、ＳＬＣ２２Ａ６、ＳＬＣ２２Ａ７、ＳＬＣ２２Ａ８、ＳＬＣ２２Ａ９、ＳＬＣ２２Ａ１
０、ＳＬＣ２２Ａ１１、ＳＬＣ２２Ａ１２、ＳＬＣ２２Ａ１３、ＳＬＣ２２Ａ１４、ＳＬ
Ｃ２２Ａ１５、ＳＬＣ２２Ａ１６、ＳＬＣ２２Ａ１７、ＳＬＣ２２Ａ１８、ＳＬＣ２２Ａ
１８ＡＳ，ＳＬＣ２２Ａ１９、ＳＬＣ２２Ａ２０、ＳＬＣ２２Ａ２３、ＳＬＣ２２Ａ２４
、ＳＬＣ２２Ａ２５、ＳＬＣ２２Ａ３１、ＳＬＣ２３Ａ１、ＳＬＣ２３Ａ２、ＳＬＣ２３
Ａ３、ＳＬＣ２３Ａ４、ＳＬＣ２４Ａ１、ＳＬＣ２４Ａ２、ＳＬＣ２４Ａ３、ＳＬＣ２４
Ａ４、ＳＬＣ２４Ａ５、ＳＬＣ２４Ａ６、ＳＬＣ２５Ａ１、ＳＬＣ２５Ａ２、ＳＬＣ２５
Ａ３、ＳＬＣ２５Ａ４、ＳＬＣ２５Ａ５、ＳＬＣ２５Ａ６、ＳＬＣ２５Ａ７、ＳＬＣ２５
Ａ８、ＳＬＣ２５Ａ９、ＳＬＣ２５Ａ１０、ＳＬＣ２５Ａ１１、ＳＬＣ２５Ａ１２、ＳＬ
Ｃ２５Ａ１３、ＳＬＣ２５Ａ１４、ＳＬＣ２５Ａ１５、ＳＬＣ２５Ａ１６、ＳＬＣ２５Ａ
１７、ＳＬＣ２５Ａ１８、ＳＬＣ２５Ａ１９，ＳＬＣ２５Ａ２０、ＳＬＣ２５Ａ２１、Ｓ
ＬＣ２５Ａ２２、ＳＬＣ２５Ａ２３、ＳＬＣ２５Ａ２４、ＳＬＣ２５Ａ２５、ＳＬＣ２５
Ａ２６、ＳＬＣ２５Ａ２７、ＳＬＣ２５Ａ２８、ＳＬＣ２５Ａ２９、ＳＬＣ２５Ａ３０、
ＳＬＣ２５Ａ３１、ＳＬＣ２５Ａ３２、ＳＬＣ２５Ａ３３、ＳＬＣ２５Ａ３４、ＳＬＣ２
５Ａ３５、ＳＬＣ２５Ａ３６、ＳＬＣ２５Ａ３７，ＳＬＣ２５Ａ３８、ＳＬＣ２５Ａ３９
、ＳＬＣ２５Ａ４０、ＳＬＣ２５Ａ４１、ＳＬＣ２５Ａ４２、ＳＬＣ２５Ａ４３、ＳＬＣ
２５Ａ４４、ＳＬＣ２５Ａ４５、ＳＬＣ２５Ａ４６、ＳＬＣ２６Ａ１、ＳＬＣ２６Ａ２、
ＳＬＣ２６Ａ３、ＳＬＣ２６Ａ４、ＳＬＣ２６Ａ５、ＳＬＣ２６Ａ６、ＳＬＣ２６Ａ７、
ＳＬＣ２６Ａ８、ＳＬＣ２６Ａ９、ＳＬＣ２６Ａ１０、ＳＬＣ２６Ａ１１、ＳＬＣ２７Ａ
１、ＳＬＣ２７Ａ２、ＳＬＣ２７Ａ３、ＳＬＣ２７Ａ４、ＳＬＣ２７Ａ５、ＳＬＣ２７Ａ
６、ＳＬＣ２８Ａ１、ＳＬＣ２８Ａ２、ＳＬＣ２８Ａ３、ＳＬＣ２９Ａ１、ＳＬＣ２９Ａ
２、ＳＬＣ２９Ａ３、ＳＬＣ２９Ａ４、ＳＬＣ３０Ａ１、ＳＬＣ３０Ａ２、ＳＬＣ３０Ａ
３、ＳＬＣ３０Ａ４、ＳＬＣ３０Ａ５、ＳＬＣ３０Ａ６、ＳＬＣ３０Ａ７、ＳＬＣ３０Ａ
８、ＳＬＣ３０Ａ９、ＳＬＣ３０Ａ１０、ＳＬＣ３１Ａ１、ＳＬＣ３１Ａ２、ＳＬＣ３２
Ａ１、ＳＬＣ３３Ａ１、ＳＬＣ３４Ａ１、ＳＬＣ３４Ａ２、ＳＬＣ３４Ａ３、ＳＬＣ３５
Ａ１、ＳＬＣ３５Ａ２、ＳＬＣ３５Ａ３、ＳＬＣ３５Ａ４、ＳＬＣ３５Ａ５、ＳＬＣ３５
Ｂ１、ＳＬＣ３５Ｂ２、ＳＬＣ３５Ｂ３、ＳＬＣ３５Ｂ４、ＳＬＣ３５Ｃ１、ＳＬＣ３５
Ｃ２、ＳＬＣ３５Ｄ１、ＳＬＣ３５Ｄ２、ＳＬＣ３５Ｄ３、ＳＬＣ３５Ｅ１、ＳＬＣ３５
Ｅ２、ＳＬＣ３５Ｅ３、ＳＬＣ３５Ｅ４、ＳＬＣ３５Ｆ１、ＳＬＣ３５Ｆ２、ＳＬＣ３５
Ｆ３、ＳＬＣ３５Ｆ４、ＳＬＣ３５Ｆ５、ＳＬＣ３５Ｇ１、ＳＬＣ３５Ｇ３、ＳＬＣ３５
Ｇ４、ＳＬＣ３５Ｇ５、ＳＬＣ３５Ｇ６、ＳＬＣ３６Ａ１、ＳＬＣ３６Ａ２、ＳＬＣ３６
Ａ３、ＳＬＣ３６Ａ４、ＳＬＣ３７Ａ１、ＳＬＣ３７Ａ２、ＳＬＣ３７Ａ３、ＳＬＣ３７
Ａ４、ＳＬＣ３８Ａ１、ＳＬＣ３８Ａ２、ＳＬＣ３８Ａ３、ＳＬＣ３８Ａ４、ＳＬＣ３８
Ａ５、ＳＬＣ３８Ａ６、ＳＬＣ３８Ａ７、ＳＬＣ３８Ａ８、ＳＬＣ３８Ａ９、ＳＬＣ３８
Ａ１０、ＳＬＣ３８Ａ１１、ＳＬＣ３９Ａ１、ＳＬＣ３９Ａ２、ＳＬＣ３９Ａ３、ＳＬＣ
３９Ａ４、ＳＬＣ３９Ａ５、ＳＬＣ３９Ａ６、ＳＬＣ３９Ａ７、ＳＬＣ３９Ａ８、ＳＬＣ
３９Ａ９、ＳＬＣ３９Ａ１０、ＳＬＣ３９Ａ１１、ＳＬＣ３９Ａ１２、ＳＬＣ３９Ａ１３
、ＳＬＣ３９Ａ１４、ＳＬＣ４０Ａ１、ＳＬＣ４１Ａ１、ＳＬＣ４１Ａ２、ＳＬＣ４１Ａ
３、ＲｈＡＧ、ＲｈＢＧ、ＲｈＣＧ、ＳＬＣ４３Ａ１、ＳＬＣ４３Ａ２、ＳＬＣ４３Ａ３
、ＳＬＣ４４Ａ１、ＳＬＣ４４Ａ２、ＳＬＣ４４Ａ３、ＳＬＣ４４Ａ４、ＳＬＣ４４Ａ５
、ＳＬＣ４５Ａ１、ＳＬＣ４５Ａ２、ＳＬＣ４５Ａ３、ＳＬＣ４５Ａ４、ＳＬＣ４６Ａ１
、ＳＬＣ４６Ａ２、ＳＬＣ４６Ａ３、ＳＬＣ４７Ａ１、ＳＬＣ４７Ａ２、ＨＣＰ－１、Ｍ
ＦＳＤ５、ＭＦＳＤ１０、ＳＬＣ５０Ａ１、ＯＳＴα、ＯＳＴβ、ＳＬＣ５２Ａ１、ＳＬ
Ｃ５２Ａ２、ならびにＳＬＣ５２Ａ３から選択される、態様５１～７７のいずれか１つの
方法。
態様７９．標的タンパク質に特異的に結合する抗体を得るステップが、動物から抗体産
生細胞を得るステップと、抗体産生細胞を有するハイブリドーマを作製するステップと、
標的タンパク質に特異的に結合する抗体を産生するハイブリドーマを選択するステップと
、ハイブリドーマによって産生される抗体を単離するステップとを含む、態様１～７８の
いずれか１つの方法。
態様８０．標的タンパク質に特異的に結合する抗体をコードする核酸配列を決定するス
テップをさらに含む、態様７９の方法。
態様８１．抗体産生細胞が、リンパ球、脾細胞、または末梢血単核球（ＰＢＭＣ）であ
る、態様７２、７９、または８０の方法。
態様８２．標的タンパク質に特異的に結合する抗体に基づくキメラ抗体またはヒト化抗
体を作製するステップであって、キメラ抗体またはヒト化抗体が同等の親和性で標的タン
パク質と結合することができる、ステップをさらに含む、態様１～８１のいずれか１つの
方法。
態様８３．動物が、ヒト抗体を産生するように遺伝的に改変された、態様１～８２のい
ずれか１つの方法。
態様８４．複合体のポリリボヌクレオチドがプソイドウリジンである、態様１～８３の
いずれか１つの方法。
態様８５．複合体のポリリボヌクレオチドが、
（ａ）次のシチジンについての修飾ヌクレオチド：５－ホルミルシチジン、５－メチルシ
チジン、５－メトキシシチジン、５－ヒドロキシシチジン、および５－ヒドロキシメチル
シチジンの１つ以上；
（ｂ）次のウリジンについての修飾ヌクレオチド：５－ホルミルウリジン、５－メチルウ
リジン、５－メトキシウリジン、５－カルボキシメチルエステルウリジン、プソイドウリ
ジン、およびＮ１－メチルプソイドウリジンの１つ以上；
（ｃ）アデノシンについての修飾ヌクレオチドとしてＮ６－メチルアデノシン：および／
または
（ｄ）グアノシンについての修飾ヌクレオチドとしてチエノグアノシンを含む、態様１～
８４のいずれか１つの方法。
態様８６．複合体が、互いに結合することができる２つ以上の異なる標的タンパク質を
コードするｍＲＮＡなどの２つ以上の異なるポリリボヌクレオチドを含む、態様１～８５
のいずれか１つの方法。
態様８７．前記複合体が、表１～７の配列、例えば、配列番号、２、４、３７、５、７
、４０、８、１０、４３、１４、１６、４６、１７、１９、４９、２０、２２、５２、２
６、５５、または５６のいずれか１つと、少なくとも８０％、８５％、９０％、９１％、
９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一である配
列を含むポリリボヌクレオチドを含む、態様１～８６のいずれか１つの方法。
図１：図１Ａ～１Ｄは、例示的なＲＸＦＰ１による免疫化戦略および結果として得られたＦＡＣＳに基づく血清応答を示す。図１ＡはヒトＲＸＦＰ１についての例示的な免疫化戦略の模式図である。図１Ｂはプライミング免疫化の１０日後の動物由来のＦＡＣＳに基づく血清応答を示し、より従来型の免疫化形態である細胞全体での過剰発現ヒトＲＸＦＰ１（ＢａＦ／３）またはウイルス様粒子による過剰発現ヒトＲＸＦＰ１（ＶＬＰ－３００．１９）と比較して、ｍＲＮＡ免疫化による標的特異的な力価の迅速な誘導を説明している。図１Ｃは最終ブーストおよびハイブリドーマ融合の開始前の免疫化されたマウスの最終血清応答を示す。８匹のマウスが融合のために選択され、１００μｇの示された免疫原でブーストした。図１Ｄは集団免疫化から得られた３つの抗ヒトＲＸＦＰ１ハイブリドーマクローンのサンプルとなるＦＡＣＳプロファイルを示す。全体で２０７個のＲＸＦＰ１特異的クローンを得た。 （上記の通り。） （上記の通り。） （上記の通り。） 例示的なＳＬＣ５２Ａ２による免疫化戦略および結果として得られたＦＡＣＳに基づく血清応答を示す。抗ＳＬＣ５２Ａ抗体および対応する血清力価の産生のために採用された免疫化戦略を示す。過剰発現細胞、ウイルス様粒子および細胞外ループ（ＥＣ２）をコードするペプチドなどの従来の免疫原は、有意な標的特異的な力価を誘発できなかった。ＳＬＣ５２Ａ２に特異的な抗体を産生することができる合計２２８個のハイブリドーマを８匹の融合マウスから作製した。 例示的なガレクチン－３による免疫化戦略および結果として得られたＥＬＩＳＡの血清応答を示す。 精製されたヒトＲＸＦＰ１のｍＲＮＡに対するｂｉｏａｎａｌｙｚｅｒトレースを示す。ウェル毎にロードされたｍＲＮＡの総量を示す。プソイドウリジンを用いて合成された試料は、ウリジンで合成された転写物よりも予測されたサイズ（２６８７塩基）に近い分子量を示す。 ヒトＲＸＦＰ１のｍＲＮＡの濃度を増加させながら一過的にトランスフェクトしたＨＥＫ２９３細胞から調製された細胞膜画分のウエスタンブロッティングを示す。対照試料として、トランスフェクトしていない細胞およびヒトＲＸＦＰ１をコードするＤＮＡプラスミドをトランスフェクトした細胞もロードした。トランスフェクトした６個のウェル毎に使用された核酸の量を示す。
本開示は、カチオン性脂質、およびポリリボヌクレオチド分子、例えば、免疫原（例え
ば、標的タンパク質またはその断片）をコードするｍＲＮＡなどのポリヌクレオチド分子
を含む組成物を使用する免疫化の方法に関する。本開示はまた、遺伝的に免疫化された動
物からポリクローナル抗体およびモノクローナル抗体を作製するための方法、ならびにそ
のような抗体のキメラ変異体およびヒト化変異体を含む、本明細書で提供される免疫化方
法によって作製される抗体に関する。本開示はまた、本明細書で提供される免疫化方法（
例えば、ｍＲＮＡ－ＬＮＰによる免疫化方法）によって得られるハイブリドーマに関する
。
本開示は、動物（例えば、マウス、ラット、またはウサギなどの非ヒト動物）において
免疫応答を誘発するための方法であって：（ａ）少なくとも１つのカチオン性脂質を、抗
原決定基をコードするポリヌクレオチドと混合し、それによりカチオン性脂質－ポリヌク
レオチド複合体（例えば、ｍＲＮＡ－ＬＮＰ複合体）を形成するステップと；（ｂ）脂質
－ポリヌクレオチド複合体を動物に投与するステップとを含む方法に関する。本開示はさ
らに、ポリヌクレオチドがＧＰＣＲなどの免疫原（例えば、膜貫通タンパク質（例えば、
複数回膜貫通タンパク質）をコードするｍＲＮＡ分子である、遺伝的免疫化方法に関する
。ｍＲＮＡは、チャレンジおよび複合体タンパク質標的（例えば、ＧＰＣＲなどの複数回
膜貫通タンパク質）に対して抗体を迅速に産生させるための優れたポリヌクレオチドであ
ることが見出されている。
本開示はさらに、上述の遺伝的免疫化方法の使用と、免疫化された動物からポリクロー
ナル抗体を単離するステップとをさらに含む、ポリクローナル抗体を作製するための方法
に関する。
本開示はまた、モノクローナル抗体を作製するための方法であって、（ａ）非ヒト動物
（例えば、マウス）に、少なくとも１つのカチオン性脂質およびポリヌクレオチド（例え
ば、ポリリボヌクレオチド）を含む組成物を投与するステップであって、ポリヌクレオチ
ドが免疫原をコードするｍＲＮＡ配列を含むステップと；（ｂ）免疫原に特異的に結合す
る抗体を得るステップとを含む方法に関する。特定の態様では、免疫原に特異的に結合す
る抗体を得るステップは、次のステップ：（ａ）リンパ球（例えば、Ｂリンパ球）または
脾細胞などの抗体産生細胞を免疫化された動物から得るステップと；（ｂ）骨髄腫細胞を
有する免疫化された動物由来の抗体産生細胞を融合し、それによりハイブリドーマを作製
するステップと；（ｃ）ハイブリドーマをクローニングするステップと；（ｄ）抗免疫原
抗体（すなわち、免疫原に特異的に結合する抗体）を産生する陽性クローンを選択するス
テップと；（ｅ）抗免疫原抗体産生クローンを培養するステップと；（ｆ）抗免疫原抗体
を培養液から単離するステップの１つ以上を含む。
本開示はまた、モノクローナル抗体を作製するための方法であって、（ａ）少なくとも
１つのカチオン性脂質を、ポリリボヌクレオチド（例えば、ポリリボヌクレオチド）と混
合し、それにより脂質－ポリヌクレオチド複合体を形成するステップであって、ポリヌク
レオチドが免疫原をコードするｍＲＮＡ配列を含むステップと；（ｂ）脂質－ポリヌクレ
オチド複合体を少なくとも１匹のマウスに投与するステップと；（ｃ）リンパ球（例えば
、Ｂリンパ球）または脾細胞などの抗体産生細胞を免疫化されたマウスから取り出すステ
ップと；（ｄ）免疫化されたマウス由来のＢリンパ球を骨髄腫細胞と使用して、それによ
りハイブリドーマを作製するステップと；（ｅ）ハイブリドーマをクローニングするステ
ップと；（ｆ）抗免疫原抗体を産生する陽性クローンを選択するステップと；（ｇ）抗免
疫原抗体産生クローンを培養するステップと；（ｈ）抗免疫原抗体を培養液から単離する
ステップとを含む方法に関する。
カチオン性脂質の種々の製剤が、インビトロで細胞にトランスフェクトするために使用
されてきた（例えば、国際公開第９１／１７４２４号パンフレット；国際公開第９１／１
６０２４号パンフレット；米国特許第４，８９７，３５５号明細書；米国特許第４，９４
６，７８７号明細書；米国特許第５，０４９，３８６号明細書；および米国特許第５，２
０８，０３６号明細書）。カチオン性脂質はまた、インビボでカエルおよびラット細胞に
外来性のポリヌクレオチドを導入するために使用されてきた（例えば、Ｈｏｌｔ ｅｔ
ａｌ．，Ｎｅｕｒｏｎ ４：２０３－２１４（１９９０）；Ｈａｚｉｎｓｋｉ ｅｔ ａ
ｌ．，Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｒ．Ｃｅｌｌ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４：２０６－２０９（１９
９１）を参照のこと）。本明細書で提供される特定の実施形態では、カチオン性脂質は、
一般に、生物学的に活性な物質を送達するか、または導入するために使用される（例えば
、国際公開第９１／１７４２４号パンフレット；国際公開第９１／１６０２４号パンフレ
ット；および国際公開第９３／０３７０９号パンフレットを参照のこと）。本明細書で記
載される特定の態様では、カチオン性リポソームは、ポリリボヌクレオチド（例えば、ｍ
ＲＮＡ）などの外来性のポリヌクレオチドを、遺伝的免疫化のために宿主細胞に導入する
ための効率的な担体を提供することができる。
従来技術でよく知られている種々のカチオン性脂質を、本明細書で提供される組成物お
よび方法において使用することができる。よく知られているカチオン性脂質の１つは、Ｎ
－［１－（２，３－ジオレオイルオキシ）プロピル］－Ｎ，Ｎ，Ｎ－トリメチルアンモニ
ウムクロリド（ＤＯＴＭＡ）である。ＤＯＴＭＡ単独で、またはジオレオイルホスファチ
ジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）との１：１の配合において、標準的な手法を用いてリ
ポソームに製剤化することができる。全体が参照により本明細書中に組み込まれるＦｅｌ
ｇｎｅｒ ｅｔ ａｌ．（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８４：
７４１３－７４１７（１９８７））は、このようなリポソームが、核酸の培養細胞への効
率的な送達をもたらすことを示した。ＤＯＴＭＡ：ＤＯＰＥ（１：１）製剤は、ＬＩＰＯ
ＦＥＣＴＩＮ（商標）（ＧＩＢＣＯ／ＢＲＬ：Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｉ
ｎｃ．，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，Ｍｄ．）の名称で販売されている。別の市販されて
いるカチオン性脂質は、１，２－ビス（オレオイルオキシ）－３－３－（トリメチルアン
モニア）プロパン（ＤＯＴＡＰ）であり、これは、オレオイル部分がプロピルアミンにエ
ーテル結合ではなくエステル結合を介して結合しているという点でＤＯＴＭＡとは異なる
。ＤＯＴＡＰは、標的細胞によって、より容易に分解されると考えられている。
既知化合物の関連する基は、トリメチルアンモニウム基のメチル基の１つがヒドロキシ
エチル基によって置換されているという点でＤＯＴＭＡおよびＤＯＴＡＰと異なる。この
種の化合物は、ホスホリパーゼＡのＲｏｓｅｎｔｈａｌ阻害剤（Ｒｏｓｅｎｔｈａｌ ｅ
ｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ． ２３５：２２０２－２２０６（１９６０）に類
似しており、これは、プロピルアミンコアに結合したステアロイルエステルを有する。Ｒ
ｏｓｅｎｔｈａｌ阻害剤（ＲＩ）のジオレオイル類似体は、脂肪酸部分のプロピルアミン
コアへの結合に依存して、ＤＯＲＩエーテルおよびＤＯＲＩエステルと、一般に略記され
る。ヒドロキシ基が、さらなる官能基化のための部位として、例えば、カルボキシスペル
ミンへのエステル化によって、使用され得る。
既知化合物の別のクラスは、Ｂｅｈｒら（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ
ＳＡ ８６：６９８２－６９８６（１９８９）；ＥＰＯ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ ０
３９４ １１１）によって記載されており、この中で、カルボキシスペルミンは２種の脂
質に結合されており、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン５－カルボキシス
ペルミルアミド（ＤＤＰＥＳ）をもたらす。
ＤＯＧＳとＤＰＰＥＳの両方を使用してプラスミドを覆って、効率的なトランスフェク
ションをもたらす脂質凝集体複合体を形成する。これらの化合物は、ある種の細胞株のト
ランスフェクションに関してＤＯＴＭＡよりもより効率的であり、かつより低い毒性であ
ると主張される。ＤＯＧＳは、ＴＲＡＮＳＦＥＣＴＡＭ（商標）（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｍａ
ｄｉｓｏｎ，Ｗｉｓ．）として商業的に利用可能である。
カチオン性コレステロール誘導体（ＤＣ－Ｃｈｏｌ）が合成されており、ＤＯＰＥと組
み合わせてリポソームに製剤化されている（Ｇａｏ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂ
ｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．１７９：２８０－２８５（１９９１））。ＤＣ－Ｃｈ
ｏｌにより製剤化されたリポソームは、ある種の細胞株に関して、ＤＯＴＭＡ含有リポソ
ームよりもより効率的なトランスフェクションおよびより低い毒性を提供する。
リポポリリジンは、ポリリジンをＤＯＰＥに結合することによって形成される。この化
合物は、血清存在下でのトランスフェクションに関して特に効率的であると報告されてい
る（Ｚｈｏｕ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．１
６５：８－１４（１９９１））。したがって、リポポリリジンは免疫化のための効率的な
担体であり得る。
本明細書で提供される方法および組成物において使用することができる脂質（例えば、
カチオン性脂質、ヘルパー脂質、およびステルス脂質）の他の非限定的な例としては、国
際公開第２０１５／０９５３４６号パンフレット、国際公開第２０１５／０９５３４０号
パンフレット、国際公開第２０１６／０３７０５３号パンフレット、国際公開第２０１４
／１３６０８６号パンフレット、および国際公開第２０１１／０７６８０７号パンフレッ
トに記載のものを含み、各々は、参照によりその全体が本明細書中に組み込まれる。
ある種の態様では、本明細書に記載の組成物および方法のためのカチオン性脂質として
は、Ｎ，Ｎ－ジオレイル－Ｎ，Ｎ－ジメチルアンモニウムクロリド（ＤＯＤＡＣ）、Ｎ，
Ｎ－ジステアリル－Ｎ，Ｎ－ジメチルアンモニウムブロミド（ＤＤＡＢ）、Ｎ－（１－（
２，３－ジオレオイルオキシ）プロピル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ－トリメチルアンモニウムクロリ
ド（ＤＯＴＡＰ）、１，２－ジオレオイル－３－ジメチルアンモニウム－プロパン（ＤＯ
ＤＡＰ）、Ｎ－（１－（２，３－ジオレイルオキシ）プロピル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ－トリメチ
ルアンモニウムクロリド（ＤＯＴＭＡ）、１，２－ジオレオイルカルバミル－３－ジメチ
ルアンモニウム－プロパン（ＤＯＣＤＡＰ）、１，２－ジリネオイル－３－ジメチルアン
モニウム－プロパン（ＤＬＩＮＤＡＰ）、ジラウリル（Ｃ１２：０）トリメチルアンモニ
ウムプロパン（ＤＬＴＡＰ）、ジオクタデシルアミドグリシルスペルミン（ＤＯＧＳ）、
ＤＣ－Ｃｈｏｌ、ジオレオイルオキシ－Ｎ－［２－スペルミンカルボキサミド）エチル｝
－Ｎ，Ｎ－ジメチル－１－プロパンアミニウムトリフルオロアセテート（ＤＯＳＰＡ）、
１，２－ジミリスチルオキシプロピル－３－ジメチル－ヒドロキシエチルアンモニウムブ
ロミド（ＤＭＲＩＥ）、３－ジメチルアミノ－２－（コレスト－５－エン－３－β－オキ
シブタン－４－オキシ）－１－（シス，シス－９，１２－オクタデカジエノキシ）プロパ
ン（ＣＬｉｎＤＭＡ）、Ｎ，Ｎ－ジメチル－２，３－ジオレイルオキシ）プロピルアミン
（ＤＯＤＭＡ）、２－［５’－（コレスト－５－エン－３β－オキシ）－３’－オキサペ
ントキシ）－３－ジメチル－１－（シス，シス－９’，１２’－オクタデカジエノキシ）
プロパン（ＣｐＬｉｎＤＭＡ）およびＮ，Ｎ－ジメチル－３，４－ジオレイルオキシベン
ジルアミン（ＤＭＯＢＡ）、ならびに１，２－Ｎ，Ｎ’－ジオレイルカルバミル－３－ジ
メチルアミノプロパン（ＤＯｃａｒｂＤＡＰ）が挙げられるが、これらに限定されない。
一実施形態では、本明細書で提供される組成物および方法のためのカチオン性脂質は、Ｄ
ＯＴＡＰまたはＤＬＴＡＰである。これらの化合物は、単独で、または他の脂質凝集体形
成成分（ＤＯＰＥまたはコレステロールなど）との組み合わせのいずれかにおいて、リポ
ソームまたは他の脂質凝集体への製剤化のために有用である。このような凝集体はカチオ
ン性であり、ＤＮＡまたはＲＮＡなどのアニオン性高分子と複合体を形成することができ
る。
本明細書で提供されるｍＲＮＡに基づく免疫化の方法は、抗原の作製および／または抗
体産生に固有の上述の障害と関連する問題の多くに対処した。とりわけ、前記方法は、標
的タンパク質抗原を直接発現し精製する必要性を不要にする。動物宿主自体の細胞機構を
使用して、標的タンパク質を作り出し、それを免疫系に提示する。真核生物の標的タンパ
ク質に関して、このことは、真核生物特異的な翻訳後修飾およびタンパク質プロセシング
の追加を許容する付加的な利点を有する。いずれかの特定の理論に束縛されるわけではな
いが、免疫化に使用される精製されていないｍＲＮＡは、調製物中の二重鎖ＲＮＡ要素の
存在に一部起因して、高い炎症性の性質を有する。特定の態様では、これは、アジュバン
トとして機能して、標的タンパク質に対する体液性応答をブーストする。
本明細書で提供される特定の態様では、標的タンパク質のためのモノクローナル抗体の
開発を、前記標的タンパク質をコードするｍＲＮＡによる動物の免疫化を介して促進する
ことができる。この方法は、標的タンパク質を異種で生成し、かつ精製する必要がないた
め、Ｇタンパク質共役型受容体などの、特異的な抗体を開発するために技術的な課題を歴
史的に有してきたタンパク質に対して多大な利点を提供する。ｍＲＮＡのアジュバント様
特性によって誘発される宿主防御機構は、血清力価の迅速な発達をもたらす。
ある種の態様では、本明細書で提供される被包性ｍＲＮＡに基づく免疫化方法により免
疫化された動物から得られる抗体産生細胞を使用したハイブリドーマ融合物は、高度に増
殖性である。被包性ｍＲＮＡは強力かつ高度に免疫原性であり、これにより、免疫化の日
程を短縮することができ、より少ない動物を必要とすることができる。本方法により、全
ての様式のタンパク質を、例えば、溶解性、膜結合性、複合型／ヘテロマー型など、複雑
度に関係なく、抗原として産生することができる。発現により、抗原の天然のコンフォメ
ーションになるはずである。
本明細書で提供される本方法はまた、複合型タンパク質（例えば、ＩｇＧ、受容体複合
体）のために複数鎖の共発現をもたらすことができる。本明細書で提供されるｍＲＮＡに
基づく免疫化方法の特定の態様では、発現した抗原は、それらが合成物質であるため、免
疫原性的に汚染されておらず、すなわち、体液性応答または感染性病原体の特異性を変化
させ得る夾雑物を有しない。
特定の態様では、本方法は、抗原産生および試薬保管の安定的な方法を説明し、という
のも、本発明の脂質被包性ｍＲＮＡは、４℃で数ヶ月間安定であり続けることができるた
めである。さらに、ｍＲＮＡが全て合成物であるため、必要とされるＩＭＰＡＣＴ（感染
性微生物ＰＣＲ増幅試験）病原体試験がない。
用語
「クローニングベクター」は、プラスミドもしくはファージＤＮＡまたはその他のＤＮ
Ａ配列を意味し、これは、宿主細胞において自律的に複製が可能であり、かつ１つまたは
少数の制限エンドヌクレアーゼ認識部位により特徴づけられ、そこでは、そのようなＤＮ
Ａ配列をベクターの必須の生物学的機能を失うことなく確定的に切断し得、その複製およ
びクローニングをもたらすためにそこにＤＮＡがスプライスされ得る。クローニングベク
ターはさらに、クローニングベクターによりトランスフェクトされた細胞の同定における
使用に適したマーカーを含有してもよい。マーカーは、例えば、テトラサイクリン抵抗性
またはアンピシリン抵抗性をもたらす。
「発現ベクター」は、クローニングベクターに類似したベクターであるが、宿主への形
質転換後に、発現ベクターにクローン化された遺伝子の発現を亢進する能力がある。クロ
ーン化された遺伝子は通常、プロモーター配列などの一定の制御配列の制御下に置かれる
（すなわち、操作可能に連結される）。プロモーター配列は構成的または誘導性のいずれ
かであり得る。
「発現」は、ポリペプチドが構造遺伝子から生成される細胞プロセスである。このプロ
セスは、遺伝子のメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）への転写およびそのようなｍＲＮＡ
のポリペプチドへの翻訳を含む。「発現」はまた、該当する場合、例えば、転写、翻訳、
フォールディング、修飾、およびプロセシングを含むことができるが、これらに限定され
ない。「発現産物」は、遺伝子から転写されたＲＮＡ、および遺伝子から転写されたｍＲ
ＮＡの翻訳により得られるポリペプチドを含む。特定の態様では、核酸配列の「発現」は
、次の事象：（１）ＤＮＡ配列からのＲＮＡ鋳型の生成（例えば、転写による）；（２）
ＲＮＡ転写物のプロセシング（例えば、スプライシング、編集、５’キャップ形成、およ
び／または３’末端プロセシングによる）；（３）ＲＮＡのポリペプチドまたはタンパク
質への翻訳；ならびに（４）ポリペプチドまたはタンパク質の翻訳後修飾の１つ以上を指
す。
「外因性」核酸は、細胞または生物体などの生物システムに人為的介入を伴うプロセス
によって導入された、その中に通常見出されないか、またはより少量見出される核酸（例
えば、本明細書に記載の修飾合成ｍＲＮＡ）である。因子（例えば、本明細書に記載の修
飾合成ｍＲＮＡ）は、その物質を継承する直属の前駆細胞または子孫細胞にそれが導入さ
れる場合、外因性である。対照的に、「内因性」は、生物システムまたは細胞にとって天
然である因子または発現産物である（例えば、遺伝子の内因性発現）。
「単離された」は、核酸またはポリペプチドの場合、その天然の供給源において見られ
るように核酸もしくはポリペプチドとともに存在する、および／または細胞で発現させた
場合には核酸もしくはポリペプチドとともに存在すると考えられる、または分泌ポリペプ
チドの場合には分泌される、少なくとも１種の他の成分（例えば、核酸またはポリペプチ
ド）から分離された、核酸またはポリペプチドを意味する。化学合成された核酸もしくは
ポリペプチドまたはインビトロ転写／翻訳を用いて合成されたものは、「単離された」と
考えられる。
「単離された細胞」は、それが本来見出される生物体から取り出された細胞またはその
ような細胞の子孫である。任意選択により、細胞は、インビトロで、例えば他の細胞の存
在下で、培養されている。任意選択により、細胞は後に第２の生物体に導入されるか、ま
たはそれ（またはそれが由来する細胞または細胞の集団）が単離された生物体に再導入さ
れる。
「修飾された」は、本明細書に記載の分子の変化した状態または構造を意味する。分子
は、化学的、構造的、および機能的な方法を含む様々な方法で修飾されてもよい。一実施
形態では、本明細書に記載のｍＲＮＡは、天然および非天然のヌクレオシドおよび／また
はヌクレオチドの導入によって修飾される。修飾はまた、野生型と異なる任意の変化を意
味する。「修飾された」ＲＮＡは、インビトロで作製されたＲＮＡ分子であり、少なくと
も１つの修飾されたヌクレオシドを含む。
「修飾されたヌクレオシド」は、標準のグアニン（Ｇ）、アデニン（Ａ）、シチジン（
Ｃ）およびウリジン（Ｕ）ヌクレオシドに対する修飾を包含するリボヌクレオシドである
。このような修飾としては、当業者に知られているように、例えば、通常転写後に哺乳動
物細胞のｍＲＮＡに導入される修飾、および人工的な化学的修飾を挙げることができる。
一態様では、以下が、修飾されたヌクレオチドの非限定的な例である：５－ホルミルシチ
ジン、５－メチルシチジン、５－メトキシシチジン、５－ヒドロキシシチジン、５－ヒド
ロキシメチルシチジン、５－ホルミルウリジン、５－メチルウリジン、５－メトキシウリ
ジン、５－カルボキシメチルエステルウリジン、プソイドウリジン、Ｎ１－メチルプソイ
ドウリジン、Ｎ６－メチルアデノシン、およびチエノグアノシン。
「転写と共役して付加された」は、ＲＮＡ分子の転写中の、本発明の修飾合成ｍＲＮＡ
への特徴、例えば５’メチルグアノシンキャップまたは他の修飾されたヌクレオシドの付
加を意味する（すなわち、修飾ＲＮＡは５’キャップの付加の前に完全には転写されてい
ない）。
細胞を「接触させる」とは、因子（例えば、本明細書に記載の修飾合成ｍＲＮＡ）と接
触させることを意味し、任意選択により、細胞をトランスフェクション系に晒すことを含
む。そのような細胞がインビボにある場合、細胞を本明細書に記載の修飾合成ｍＲＮＡと
接触させることは、化合物がインビボで細胞と接触するように、医薬組成物などの製剤中
の本明細書に記載の修飾合成ｍＲＮＡを適切な投与経路によって対象に投与することを含
む。
一般に、「組換え体宿主」は、発現ベクターまたはクローニングベクター中に所望のク
ローン化された遺伝子を含有する任意の原核もしくは真核の微生物または細胞であり得る
。この用語はまた、染色体または生物体のゲノム中に所望の遺伝子を含有するために遺伝
子操作されたそれらの微生物を含むことを意味する。
「組換え体ベクター」は、所望のクローン化された遺伝子を含有する任意のクローニン
グベクターまたは発現ベクターである。
「宿主」は、複製可能な発現ベクターまたはクローニングベクターのレシピエントであ
る、任意の原核もしくは真核の微生物または細胞を意味する。宿主はまた、その染色体ま
たはゲノム上に所望の遺伝子を含有するためによく知られた手法によって遺伝子操作する
ことができる、原核もしくは真核の微生物または細胞を含む。そのような宿主の例として
は、Ｍａｎｉａｔｉｓ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａ
ｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ， Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏ
ｒａｔｏｒｙ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．（１９８２）を参照さ
れたい。
「プロモーター」は、開始コドンに隣接して位置する、遺伝子の５’領域として一般に
説明されるＤＮＡ配列である。隣接遺伝子の転写は、プロモーター領域から開始される。
プロモーターが誘導性プロモーターである場合、転写速度は、誘導剤に対応して増大する
。対照的に、プロモーターが構成的プロモーターである場合、転写速度は、誘導剤によっ
て調節されない。
「遺伝子」は、ポリペプチドまたはタンパク質を発現するために必要な情報を含有する
ＤＮＡ配列である。
「構造遺伝子」は、ヌクレオチド、例えば、後に特定のポリペプチドに特有のアミノ酸
配列に翻訳されるメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）へと転写されるＤＮＡ配列である。
「トランスフェクション」は、ポリヌクレオチド、例えば、ＤＮＡまたはＲＮＡによる
宿主細胞の形質転換を指す。組換え体宿主細胞は、トランスフェクトされたポリヌクレオ
チド、例えば、ＤＮＡまたはＲＮＡによってコードされるタンパク質を発現する。特定の
態様では、「トランスフェクション」は、本明細書に記載の修飾合成ｍＲＮＡなどの外因
性核酸を、真核細胞などの宿主細胞に導入する化学的方法などの方法の使用を意味する。
本明細書で用いる場合、用語「トランスフェクション」は、外因性核酸を細胞に導入する
、ウイルスに基づく方法を包含しない。トランスフェクションの非限定的な方法は、物理
的処理（例えば、エレクトロポレーション、ナノ粒子、マグネトフェクション）、および
化学物質に基づくトランスフェクションの方法を含む。化学物質に基づくトランスフェク
ションの方法としては、シクロデキストリン、ポリマー、リポソーム、およびナノ粒子が
挙げられるが、これらに限定されない。
「エピトープ」は、抗体の可変領域が結合する非免疫グロブリン抗原の部分である。「
抗原決定基」は、１つ以上のエピトープを含有するタンパク質またはペプチドである。「
免疫原」は、１つ以上のエピトープの存在のために免疫応答を誘発することができるタン
パク質またはペプチドである。用語「抗原」、「抗原決定基」、および「免疫原」は、本
明細書では同義として用いる。特定の態様では、エピトープは通常、アミノ酸または糖側
鎖などの、分子の化学的に活性な表面群からなり、かつ特定の三次元構造特性および特定
の電荷特性を有し得る。特定の態様では、立体構造的なエピトープおよび非立体構造的な
エピトープは、後者ではなく前者への結合が変性溶媒の存在下において失われるという点
で区別される。ある種の態様では、エピトープは、抗原の断片または部分の連続的なアミ
ノ酸配列を含む直鎖状のエピトープであってもよい。ある種の態様では、エピトープは、
抗原の非連続的なアミノ酸配列を含む立体構造的なエピトープであってもよい。
「トランスフェクション試薬」は、ＤＮＡまたはＲＮＡなどのポリヌクレオチドの宿主
細胞への取り込みを誘導する試薬である。特定の態様では、そのような試薬の不存在下で
処理された本明細書に記載の修飾合成ｍＲＮＡと比べて、例えば、少なくとも５０～９０
％、取り込みを亢進させる試薬も包含される。一実施形態では、医薬組成物の調製、もし
くは本明細書に記載の修飾合成ｍＲＮＡの同時投与に有用なカチオン性または非カチオン
性脂質分子が、トランスフェクション試薬として使用される。他の実施形態では、本明細
書に記載の修飾合成ｍＲＮＡは、例えば、リガンド、ペプチド基、親油性基、標的部分な
どに結合する化学的結合を含む。他の実施形態では、トランスフェクション試薬は、当技
術分野で知られているかまたは本明細書に記載の荷電脂質、エマルション、リポソーム、
カチオン性もしくは非カチオン性脂質、アニオン性脂質、または浸透促進剤を含む。
「自然免疫応答」または「インターフェロン応答」は、外来生物体、例えばウイルスも
しくは細菌、またはそのような生物体の生成物、例えば対象細胞で生成されるＲＮＡに特
徴的な修飾を欠くＲＮＡによる感染の認識に応答した細胞によって惹起される、細胞防御
応答を意味する。自然免疫応答は、外因性核酸を検出する細胞の死を誘導することによっ
て、ウイルスおよび細菌感染から保護する。
「治療有効量」または「有効量」は、研究者、獣医、医師または他の臨床医によって求
められている組織、系、動物もしくはヒトの生物学的または医学的応答を誘発することに
なる対象化合物または配合の量である。
「プライマー」はまた、核酸配列である。ＰＣＲプライマーは通常、ポリメラーゼ連鎖
反応において使用される、かなり短い長さ（例えば、８～３０ヌクレオチド）のオリゴヌ
クレオチドである。ＰＣＲプライマーおよびハイブリダイゼーションプローブは、標的配
列からの配列情報を用いて、当業者によって容易に開発され、かつ作製され得る。Ｓａｍ
ｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．（１９８９）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａ
ｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｓ
Ｐｒｅｓｓ）を参照されたい。
「選択的に結合する」または「特異的に結合する」は、一方のタンパク質のもう一方の
タンパク質（例えば、標的タンパク質に対する抗体、その断片、または結合パートナー）
への特異的な結合を意味し、結合のレベルは、任意の標準アッセイ（例えば、イムノアッ
セイ）によって測定した際に、アッセイに対するバックグラウンド対照よりも統計的に有
意に高い。
「保存された」ヌクレオチドまたはアミノ酸は、比較される２つ以上の配列の同じ位置
に変動なく出現する、それぞれポリヌクレオチド配列またはポリペプチド配列の残基であ
る。比較的保存されているヌクレオチドまたはアミノ酸は、配列の他の箇所に出現するヌ
クレオチドまたはアミノ酸よりも関係のある配列の間で保存されているものである。それ
らが相互に１００％同一である場合、２つ以上の配列は「完全に保存されている」。いく
つかの実施形態では、それらが相互に少なくとも９０％同一である場合、２つ以上の配列
は「高度に保存されている」。いくつかの実施形態では、それらが相互に同一である場合
、２つ以上の配列は「保存されている」。配列の保存は、オリゴヌクレオチドもしくはポ
リペプチドの全長に適用してもよく、またはその部分、領域もしくは特徴に適用してもよ
い。ポリペプチドに関しては、次の８つの群が、互いに保存的置換となるアミノ酸を含有
する：１）アラニン（Ａ）、グリシン（Ｇ）；２）アスパラギン酸（Ｄ）、グルタミン酸
（Ｅ）；３）アスパラギン（Ｎ）、グルタミン（Ｑ）；４）アルギニン（Ｒ）、リジン（
Ｋ）；５）イソロイシン（Ｉ）、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、バリン（Ｖ）；６
）フェニルアラニン（Ｆ）、チロシン（Ｙ）、トリプトファン（Ｗ）；７）セリン（Ｓ）
、トレオニン（Ｔ）；および８）システイン（Ｃ）、メチオニン（Ｍ）（例えば、Ｃｒｅ
ｉｇｈｔｏｎ，Ｐｒｏｔｅｉｎｓ（１９８４）を参照のこと）。
「送達」は、化合物、物質、実体、部分、カーゴまたはペイロードを送達する作用また
は様式を意味する。
「送達剤」は、標的細胞への核酸分子のインビボ送達を少なくとも一部促進する任意の
物質である。
「製剤」は、少なくとも修飾された核酸分子および送達剤を含む。
「相同性」は、ポリマー分子の間、例えば、核酸分子（例えば、ＤＮＡ分子および／も
しくはＲＮＡ分子）の間ならびに／またはポリペプチド分子の間の全体的な関連性を意味
する。いくつかの実施形態では、ポリマー分子は、それらの配列が少なくとも２５％同一
である場合、相互に「相同」であるとみなされる。用語「相同」は必ず、少なくとも２つ
の配列（ポリヌクレオチドまたはポリペプチド配列）間の比較に関連する。２つのポリヌ
クレオチド配列は、それらがコードするポリペプチドが少なくとも約２０アミノ酸の少な
くとも１つの連続配列について少なくとも約５０％同一である場合、相同であるとみなさ
れる。いくつかの実施形態では、相同なポリヌクレオチド配列は、少なくとも４～５個の
一意に特定されるアミノ酸の連続配列をコードする能力によって特徴づけられる。６０ヌ
クレオチド長未満のポリヌクレオチド配列については、相同性は、少なくとも４～５個の
一意に特定されるアミノ酸の連続配列をコードする能力によって決定される。本発明に基
づくと、２つのタンパク質配列は、それらのタンパク質が少なくとも約２０アミノ酸の少
なくとも１つの連続配列について少なくとも約５０％同一、少なくとも約６０％同一であ
る場合、相同であるとみなされる。
「同一性」は、ポリマー分子の間、例えば、オリゴヌクレオチド分子（例えば、ＤＮＡ
分子および／もしくはＲＮＡ分子）の間またはポリペプチド分子の間の全体的な関連性を
意味する。例えば２つのポリヌクレオチド配列の同一性パーセントの計算は、最適な比較
目的のために２つの配列を整列させることによって実施することができる（例えば、最適
なアラインメントのために第１および第２の核酸配列の一方または両方にギャップを導入
することができ、非同一配列は比較目的のために無視することができる）。続いて、対応
するヌクレオチド位置のヌクレオチドが比較される。第１の配列中の位置が第２の配列中
の対応する位置と同じヌクレオチドによって占められる場合、これらの分子はその位置で
同一である。２つの配列間の同一性パーセントは、２つの配列の最適なアラインメントの
ために導入される必要があるギャップの数および各ギャップの長さを考慮する、これらの
配列によって共有される同一位置の数の関数である。配列の比較および２つの配列間の同
一性パーセントの判定は、数学的アルゴリズムを用いて達成することができる。パーセン
ト配列同一性および配列類似性を判定するのに適したアルゴリズムの２つの非限定的な例
は、ＢＬＡＳＴおよびＢＬＡＳＴ２．０アルゴリズムであり、これらは、それぞれ、Ａｌ
ｔｓｃｈｕｌ ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｃ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．２５：３３８９－３４０２
，１９７７；およびＡｌｔｓｃｈｕｌ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：
４０３－４１０，１９９０において記載されている。ＢＬＡＳＴ分析を実施するためのソ
フトウェアは、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ
Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎを通して公的に入手可能である。
用語「カチオン性リポソーム」または「カチオン性脂質」は、正に荷電した脂質から作
られる構築物であり、負に荷電したＤＮＡおよび細胞膜と相互作用することができる。
用語「脂質ナノ粒子」または「ＬＮＰ」は、分子間力によって互いに物理的に会合した
複数の（すなわち、１つより多い）脂質分子を含む粒子を指す。脂質ナノ粒子は、例えば
、ミクロスフィア（単層および多層の小胞、例えば、リポソームを含む）、エマルション
中で分散した相、ミセル、または懸濁液中の内相であってもよい。
本明細書では、用語「核酸」が、用語「ポリヌクレオチド」と互換的に使用され、デオ
キシリボヌクレオチド（ＤＮＡ）もしくはリボヌクレオチド（ＲＮＡ）、またはメッセン
ジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）を含むポリリボヌクレオチド、および単鎖もしくは二重鎖形態
のいずれかのそのポリマーを指す。この用語は、既知のヌクレオチド類似体または修飾さ
れた主鎖残基もしくは結合を含有する核酸であって、合成の核酸、天然に存在する核酸、
および天然に存在しない核酸であり、基準の核酸と同様の特性を有し、基準のヌクレオチ
ドと同様の様式で代謝される核酸を包含する。このような類似体の例は、ホスホロチオエ
ート、ホスホルアミデート、メチルホスホネート、キラル－メチルホスホネート、２－Ｏ
－メチルリボヌクレオチド、ペプチド核酸（ＰＮＡ）を含むが、これらに限定されない。
別段の指示がない限り、特定の核酸配列はまた、明示的に示される配列だけでなく、保
存的に改変されたその変異体（例えば、縮重コドン置換）および相補的配列も暗示的に包
含する。とりわけ、下記で詳述される通り、縮重コドン置換は、１つ以上の選択された（
または全ての）コドンの第３位が、混合塩基および／またはデオキシイノシン残基で置換
された配列を作製することにより達成してもよい（Ｂａｔｚｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｃ
ｌｅｉｃ Ａｃｉｄ Ｒｅｓ．１９：５０８１，１９９１；Ｏｈｔｓｕｋａ ｅｔ ａｌ
．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６０：２６０５－２６０８，１９８５；およびＲｏｓｓ
ｏｌｉｎｉ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｐｒｏｂｅｓ ８：９１－９８，１９９
４）。
語句「薬学的に許容される」は、本明細書において、健全な医学的判断の範囲内で、過
剰な毒性、刺激、アレルギー応答または他の問題もしくは合併症なしでヒトおよび動物の
組織と接触させて用いるのに適し、合理的な利益／危険比で釣り合った、化合物、材料、
組成物、および／または剤形を指すために採用される。
「試料」は、その組織、細胞または成分部分（例えば、体液）のサブセットである。試
料は、全生物体またはその組織、細胞もしくは成分部分のサブセット、またはその画分も
しくは部分、例えば、限定するものではないが、血漿、血清、脊髄液、リンパ液、皮膚の
外部、呼吸、腸および尿生殖器の管、涙、唾液、乳、血球細胞、腫瘍、器官、から調製さ
れるホモジネート、溶解物または抽出物をさらに含んでもよい。試料はさらに、タンパク
質または核酸分子などの細胞成分を含有し得る、栄養ブロスまたはゲルなどの培地を指す
。
「合成」は、人為的介入によって生成、調製および／または製造されることを意味する
。本明細書に記載のポリヌクレオチドもしくはポリペプチドまたは他の分子の合成は、化
学的であるか、または酵素的であってもよい。
本明細書で使用する場合、「プソイドウリジン」は、ヌクレオシドであるウリジンのＣ
－グリコシド異性体を指す。
本明細書で使用する場合、「精製する」、「精製された」、「精製」は、実質的に純粋
にするか、または不要な成分、材料汚染、混合物もしくは不純物を取り除くことを意味す
る。
本明細書で使用する場合、用語「抗体」は、全長抗体および任意の抗原結合断片（すな
わち、「抗原結合部分」）またはその単鎖を意味する。全長抗体は、ジスルフィド結合に
より相互連結された少なくとも２つの重（Ｈ）鎖および２つの軽（Ｌ）鎖を含む糖タンパ
ク質である。各重鎖は重鎖可変領域（本明細書中でＶＨと略記される）および重鎖定常領
域で構成されている。重鎖定常領域は、ＣＨ１、ＣＨ２およびＣＨ３という３つのドメイ
ンで構成されている。各軽鎖は軽鎖可変領域（本明細書中でＶＬと略記される）および軽
鎖定常領域で構成されている。軽鎖定常領域はＣＬという１つのドメインで構成されてい
る。ＶＨおよびＶＬ領域は、フレームワーク領域（ＦＲ）と称される、より保存されてい
る領域が挿入された相補性決定領域（ＣＤＲ）と称される、超可変領域にさらに細分する
ことができる。ＶＨおよびＶＬはそれぞれ、次の順でアミノ末端からカルボキシ末端に整
列した、３つのＣＤＲおよび４つのＦＲから構成される：ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、Ｃ
ＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４。重鎖および軽鎖の可変領域は抗原と相互作用する結
合ドメインを含有する。抗体の定常領域は、免疫系の様々な細胞（例えば、エフェクター
細胞）および古典的補体系の第１成分（Ｃｌｑ）を含む宿主組織または宿主因子への免疫
グロブリンの結合を媒介し得る。
本明細書で使用する場合、抗体の「抗原結合部分」または「抗原結合断片」という用語
は、所与の抗原に特異的に結合するための能力を保持する、完全抗体の１つ以上の断片を
指す。抗体の抗原結合機能は、完全抗体の断片により果たされ得る。抗体の抗原結合部分
または抗原結合断片という用語内に包含される結合断片の例は、Ｆａｂ断片、ＶＬドメイ
ン、ＶＨドメイン、ＣＬドメイン、およびＣＨ１ドメインからなる一価断片；ヒンジ領域
においてジスルフィド架橋により連結された２つのＦａｂ断片を含む二価断片であるＦ（
ａｂ）２断片；ＶＨドメインおよびＣＨ１ドメインからなるＦｄ断片；抗体の単一のアー
ムのＶＬドメインおよびＶＨドメインからなるＦｖ断片；ＶＨドメインまたはＶＬドメイ
ンからなる単一ドメイン抗体（ｄＡｂ）断片（Ｗａｒｄ ｅｔ ａｌ．，１９８９ Ｎａ
ｔｕｒｅ ３４１：５４４－５４６）；ならびに単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）を
含む。ある種の態様では、抗体のＣＤＲは、（ｉ）Ｋａｂａｔナンバリングシステム（Ｋ
ａｂａｔ ｅｔ ａｌ．（１９７１）Ａｎｎ．ＮＹ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．１９０：３８２
－３９１およびＫａｂａｔ ｅｔ ａｌ．（１９９１）Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒ
ｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ Ｆｉｆｔｈ Ｅ
ｄｉｔｉｏｎ，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａ
ｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，ＮＩＨ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ Ｎｏ．９１－３２４２）；ま
たは（ｉｉ）Ｃｈｏｔｈｉａナンバリングスキーム（例えば、ＣｈｏｔｈｉａおよびＬｅ
ｓｋ，１９８７，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９６：９０１－９１７；Ａｌ－Ｌａｚｉｋ
ａｎｉ ｅｔ ａｌ，１９９７，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２７３：９２７－９４８；Ｃ
ｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．，１９９２，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２７：７９９－８
１７；Ｔｒａｍｏｎｔａｎｏ Ａ ｅｔ ａｌ．，１９９０，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２
１５（１）：１７５－８２；および米国特許第７，７０９，２２６号明細書を参照のこと
）；または（ｉｉｉ）例えば、Ｌｅｆｒａｎｃ，Ｍ．－Ｐ．，１９９９，Ｔｈｅ Ｉｍｍ
ｕｎｏｌｏｇｉｓｔ，７：１３２－１３６およびＬｅｆｒａｎｃ，Ｍ．－Ｐ． ｅｔ ａ
ｌ，１９９９，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．，２７：２０９－２１２（“ＩＭ
ＧＴ ＣＤＲｓ”）に記載のＩｍＭｕｎｏＧｅｎｅＴｉｃｓ（ＩＭＧＴ）ナンバリングシ
ステム；または（ｉｖ）ＭａｃＣａｌｌｕｍ ｅｔ ａｌ，１９９６，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉ
ｏｌ．，２６２：７３２－７４５に従って決定することができる。また、例えば、Ｍａｒ
ｔｉｎ，Ａ．，“Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎｄ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ Ａ
ｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｖａｒｉａｂｌｅ Ｄｏｍａｉｎｓ，”ｉｎ
Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ＫｏｎｔｅｒｍａｎｎおよびＤｉｉｂｅ
ｌ，ｅｄｓ．，Ｃｈａｐｔｅｒ ３１，ｐｐ．４２２－４３９，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅ
ｒｌａｇ，Ｂｅｒｌｉｎ（２００１）を参照されたい。
さらに、Ｆｖ断片の２つのドメイン、ＶＬおよびＶＨは、別個の遺伝子によってコード
されるが、それらは、それらをＶＬおよびＶＨ領域が対になって一価分子を形成する単一
のタンパク質鎖として作製することを可能にする人工ペプチドリンカーによって、組換え
法を使用して連結させることができる（単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として知られている；例え
ば、Ｂｉｒｄ ｅｔ ａｌ．，１９８８ Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４２：４２３－４２６；お
よびＨｕｓｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，１９８８ Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．
８５：５８７９－５８８３を参照のこと）。そのような単鎖抗体は、１つ以上の抗原結合
部分または抗体の断片を含む。これらの抗体断片は、当業者に知られている従来の技術を
使用して得られ、断片は、完全抗体と同じ方法で有用性についてスクリーニングされる。
抗原結合断片はまた、単一ドメイン抗体、マキシボディ、ミニボディ、イントラボディ
、ダイアボディ、トリアボディ、テトラボディ、ｖ－ＮＡＲ、およびビス－ｓｃＦｖに組
み込むことができる（例えば、ＨｏｌｌｉｎｇｅｒおよびＨｕｄｓｏｎ，２００５，Ｎａ
ｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２３，９，１１２６－１１３６を参照のこと）
。抗体の抗原結合部分は、ＩＩＩ型フィブロネクチン（Ｆｎ３）などのポリペプチドに基
づく足場に移植することができる（フィブロネクチンポリペプチドモノボディについて記
載する米国特許第６，７０３，１９９号明細書を参照のこと）。
抗原結合断片は、相補的な軽鎖ポリペプチドとともに抗原結合領域の対を形成する、タ
ンデムＦｖセグメント（ＶＨ－ＣＨ１－ＶＨ－ＣＨ１）の対を含む単鎖分子に組み込むこ
とができる（Ｚａｐａｔａ ｅｔ ａｌ．（１９９５）Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ．８（１
０）：１０５７－１０６２；および米国特許第５，６４１，８７０号明細書）。
本明細書で使用する場合、用語「親和性」は、単一の抗原性部位における抗体と抗原と
の間の相互作用の強度を指す。各抗原性部位内では、抗体「アーム」の可変領域は、多数
の部位において、弱い非共有結合性の力を介して抗原と相互作用し、相互作用が大きいほ
ど、親和性は強くなる。本明細書で使用する場合、抗体またはその抗原結合断片（例えば
、Ｆａｂ断片）についての用語「高親和性」は通常、ＫＤが１０－９Ｍ以下の抗体または
抗原結合断片を指す。
本明細書で使用する場合、用語「ヒト抗体」は、フレームワーク領域およびＣＤＲ領域
の両方がヒト起源の配列に由来する可変領域を有する抗体を含むことを意図する。さらに
、抗体が定常領域を含有する場合、定常領域もまた、このようなヒト配列、例えば、ヒト
生殖細胞系列配列またはヒト生殖細胞系列配列の変異した型に由来する。ある種の態様で
は、ヒトモノクローナル抗体などのヒト抗体は、ヒト重鎖導入遺伝子および軽鎖導入遺伝
子を含むゲノムを有するトランスジェニックの非ヒト動物、例えば、トランスジェニック
マウスから得られるＢ細胞に融合した不死化細胞を含むハイブリドーマによって作製され
てもよい。
「ヒト化」抗体は、ヒトにおける免疫原性は小さいが、非ヒト抗体の反応性を保持する
抗体である。これは、例えば、非ヒトＣＤＲ領域を保持し、抗体の残りの部分を、それら
のヒト対応物（すなわち、定常領域および可変領域のフレームワーク部分）で置換するこ
とにより達成することができる。例えば、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．
Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１－６８５５，１９８４；Ｍｏｒｒ
ｉｓｏｎおよびＯｉ，Ａｄｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，４４：６５－９２，１９８８；Ｖｅｒ
ｈｏｅｙｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２３９：１５３４－１５３６，１９８８
；Ｐａｄｌａｎ，Ｍｏｌｅｃ．Ｉｍｍｕｎ．，２８：４８９－４９８，１９９１；ならび
にＰａｄｌａｎ，Ｍｏｌｅｃ．Ｉｍｍｕｎ．，３１：１６９－２１７，１９９４を参照さ
れたい。ヒト操作技術の他の例は、米国特許第５，７６６，８８６号明細書において開示
されているＸＯＭＡ技術を含むが、これに限定されない。
用語「ハイブリドーマ」は、Ｂリンパ芽球などの抗体産生細胞の、骨髄腫細胞などの融
合パートナーとの融合に由来する不死化細胞を指す。特定の態様では、ハイブリドーマを
作製するために使用される抗体産生細胞は、抗原によって免疫化された、例えば、本明細
書に記載のｍＲＮＡに基づく免疫化方法に従って免疫化された動物から得られる。
用語「単離抗体」は、異なる抗原特異性および／または異なるアミノ酸配列を有する他
の抗体を実質的に含まない抗体を指す。特定の態様では、しかしながら、抗原に特異的に
結合する単離抗体は、他の抗原に対する交差反応性を有し得る。特定の態様では、単離抗
体は、他の細胞物質および／または化学物質を実質的に含まない場合がある。
用語「アイソタイプ」は、重鎖定常領域遺伝子によって提供される抗体クラス（例えば
、ＩｇＭ、ＩｇＥ、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２またはＩｇＧ４などのＩｇＧ）を指す。アイソタ
イプはまた、これらのクラスのうちの１つの改変された型を含み、改変により、例えば、
エフェクター機能またはＦｃ受容体への結合を亢進するか、または低減させるといったＦ
ｃ機能が変化させられてきた。用語「モノクローナル抗体」は、特定のエピトープについ
て結合特異性および親和性を示す均質または実質的に均質な抗体の集団から得られる抗体
を指す、よく知られている技術用語である。用語「モノクローナル」は、抗体を作製する
ための任意の特定の方法に限定されない。一般に、モノクローナル抗体の集団を、細胞、
細胞の集団、または細胞株によって作製することができる。特定の態様では、モノクロー
ナル抗体は、キメラ抗体またはヒト化抗体であり得る。特定の態様では、モノクローナル
抗体は、一価抗体または多価（例えば、二価）抗体である。
本明細書で使用する場合、用語「ポリクローナル抗体」は、特定の抗原に対して反応す
る種々の異なる抗体を含む異種抗体の集団を指すが、異なる抗体は抗原中の異なるエピト
ープを認識する。
本明細書で使用する場合、用語「組換えヒト抗体」は、ヒト免疫グロブリン遺伝子につ
いてのトランスジェニックもしくは染色体を導入した動物（例えば、マウス）から単離さ
れる抗体またはそれから作製されるハイブリドーマから単離される抗体、ヒト抗体を発現
するように形質転換された宿主細胞から、例えばトランスフェクトーマから単離される抗
体、組換えコンビナトリアルヒト抗体ライブラリから単離される抗体、およびヒト免疫グ
ロブリン遺伝子の全てまたは一部の配列を他のＤＮＡ配列にスプライスすることを含む任
意の他の手段によって作製されるか、発現されるか、作り出されるか、または単離される
抗体など、組換え手段によって作製されるか、発現されるか、作り出されるか、または単
離されるヒト抗体を全て含む。そのような組換えヒト抗体は、フレームワーク領域および
ＣＤＲ領域がヒト生殖細胞系列の免疫グロブリン配列に由来する可変領域を有する。しか
しながら、ある種の実施形態では、そのような組換えヒト抗体は、インビトロ変異誘発（
またはヒトＩｇ配列についてトランスジェニックな動物が使用される場合、インビボ体細
胞変異誘発）にかけることができ、したがって、組換え抗体のＶＨ領域およびＶＬ領域の
アミノ酸配列は、ヒト生殖系列ＶＨ配列およびＶＬ配列に由来し、それらと関係するが、
インビボにおいてヒト抗体生殖系列レパートリー内に天然に存在し得ない配列である。
本明細書で使用する場合、用語「最適化された」は、ヌクレオチド配列が、産生細胞ま
たは生物体、通常真核細胞において好ましいコドンを使用するアミノ酸配列をコードする
ように改変されていることを意味する。ある種の態様では、最適化されたヌクレオチド配
列は、「親」配列としても知られている出発ヌクレオチド配列によって元来コードされる
アミノ酸配列を完全に、またはできるだけ多く保持するように操作される。特定の態様で
は、本明細書に記載の最適化された配列は、マウス細胞などの哺乳動物細胞において好ま
しいコドンを有するように操作されている。他の態様では、他の真核細胞または原核細胞
における配列の最適化された発現もまた、本明細書において想定される。
Ｉ．標的タンパク質／抗原決定基
本明細書で提供されるのは、動物（例えば、非ヒト動物）における標的タンパク質（例
えば、ヒト膜貫通タンパク質、例えば、ヒトＧＰＣＲなどのヒトタンパク質）またはその
断片に対する免疫応答を誘導するための方法であって、その動物に、脂質および標的タン
パク質またはその断片をコードするポリリボヌクレオチド（例えば、ｍＲＮＡ）などのポ
リヌクレオチドを含む複合体を含む組成物を投与する方法と、そのような標的タンパク質
に対する抗体を作製する関連した方法である。本明細書で提供される方法は、目的の任意
の標的タンパク質（例えば、膜貫通タンパク質）に対する抗体（例えば、モノクローナル
抗体）を作製するか、またはそれに対する免疫応答を誘導するために有用である。特定の
態様では、標的タンパク質は、ヒト標的タンパク質であり、本明細書に記載の方法におい
て使用される免疫化された動物は、非ヒト動物である。
特定の態様では、本明細書で提供されるのは、動物（例えば、非ヒト動物）における標
的タンパク質（例えば、ヒト膜貫通タンパク質、例えば、ヒトＧＰＣＲなどのヒトタンパ
ク質）またはその断片に対する抗体を、脂質および標的タンパク質またはその断片をコー
ドするｍＲＮＡなどのポリリボヌクレオチドを含む複合体を含む組成物を使用して作製す
るための方法であって、標的タンパク質は、（ｉ）Ｇタンパク質共役型受容体（ＧＰＣＲ
）；（ｉｉ）１回膜貫通型タンパク質受容体；（ｉｉｉ）腫瘍壊死因子受容体スーパーフ
ァミリー（ＴＮＦＲＳＦ）メンバー；（ｉｖ）インターロイキン（ＩＬ）受容体；（ｖ）
イオンチャネル；（ｖｉ）溶質輸送体；（ｖｉｉ）免疫受容体；または（ｖｉｉｉ）複数
回膜貫通タンパク質である。
特定の態様では、本明細書で提供されるのは、動物（例えば、非ヒト動物）における標
的タンパク質（例えば、ヒト膜貫通タンパク質、例えば、ヒトＧＰＣＲなどのヒトタンパ
ク質）またはその断片に対する抗体を、脂質および標的タンパク質またはその断片をコー
ドするｍＲＮＡなどのポリリボヌクレオチドを含む複合体を含む組成物を使用して作製す
るための方法であって、標的タンパク質は、次の：ＡＣＫＲ１、ＡＣＫＲ２、ＡＣＫＲ３
、ＡＣＫＲ４、ＡＤＣＹＡＰ１Ｒ１、ＡＤＧＲＡ１、ＡＤＧＲＡ２、ＡＤＧＲＡ３、ＡＤ
ＧＲＢ１、ＡＤＧＲＢ２、ＡＤＧＲＢ３、ＡＤＧＲＤ１、ＡＤＧＲＤ２、ＡＤＧＲＥ１、
ＡＤＧＲＥ２、ＡＤＧＲＥ３、ＡＤＧＲＥ４Ｐ、ＡＤＧＲＥ５、ＡＤＧＲＦ１、ＡＤＧＲ
Ｆ２、ＡＤＧＲＦ３、ＡＤＧＲＦ４、ＡＤＧＲＦ５、ＡＤＧＲＧ１、ＡＤＧＲＧ２、ＡＤ
ＧＲＧ３、ＡＤＧＲＧ４、ＡＤＧＲＧ５、ＡＤＧＲＧ６、ＡＤＧＲＧ７、ＡＤＧＲＬ１、
ＡＤＧＲＬ２、ＡＤＧＲＬ３、ＡＤＧＲＬ４、ＡＤＧＲＶ１、ＡＤＯＲＡ１、ＡＤＯＲＡ
２Ａ、ＡＤＯＲＡ２Ｂ、ＡＤＯＲＡ３、ＡＤＲＡ１Ａ、ＡＤＲＡ１Ｂ、ＡＤＲＡ１Ｄ、Ａ
ＤＲＡ２Ａ、ＡＤＲＡ２Ｂ、ＡＤＲＡ２Ｃ、ＡＤＲＢ１、ＡＤＲＢ２、ＡＤＲＢ３、ＡＧ
ＴＲ１、ＡＧＴＲ２、ＡＰＬＮＲ／ＡＰＪ、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＡＶＰＲ１Ａ、Ａ
ＶＰＲ１Ｂ、ＡＶＰＲ２、ＢＤＫＲＢ１、ＢＤＫＲＢ２、ＢＲＳ３、ＢＲＳ３、Ｃ３ＡＲ
１、Ｃ５ＡＲ１、Ｃ５ＡＲ２、ＣＡＬＣＲ、ＣＡＬＣＲＬ、ＣＡＳＲ、ＣＣＫＡＲ、ＣＣ
ＫＢＲ、ＣＣＲ１、ＣＣＲ１０、ＣＣＲ２、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ６、
ＣＣＲ７、ＣＣＲ８、ＣＣＲ９、ＣＣＲＬ２、ＣＥＬＳＲ１、ＣＥＬＳＲ２、ＣＥＬＳＲ
３、ＣＨＲＭ１、ＣＨＲＭ２、ＣＨＲＭ３、ＣＨＲＭ４、ＣＨＲＭ５、ＣＭＫＬＲ１、Ｃ
ＮＲ１、ＣＮＲ２、ＣＲＨＲ１、ＣＲＨＲ２、ＣＸ３ＣＲ１、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、
ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ４、ＣＸＣＲ５、ＣＸＣＲ６、ＣＹＳＬＴＲ１、ＣＹＳＬＴＲ２、
ＤＲＤ１、ＤＲＤ２、ＤＲＤ３、ＤＲＤ４、ＤＲＤ５、ＥＤＮＲＡ、ＥＤＮＲＢ、Ｆ２Ｒ
、Ｆ２ＲＬ１、Ｆ２ＲＬ２、Ｆ２ＲＬ３、ＦＦＡＲ１、ＦＦＡＲ２、ＦＦＡＲ３、ＦＦＡ
Ｒ４、ＦＰＲ１、ＦＰＲ２、ＦＰＲ２、ＦＰＲ３、ＦＳＨＲ、ＦＺＤ１、ＦＺＤ１０、Ｆ
ＺＤ２、ＦＺＤ３、ＦＺＤ４、ＦＺＤ５、ＦＺＤ６、ＦＺＤ７、ＦＺＤ８、ＦＺＤ９、Ｇ
ＡＢＢＲ１、ＧＡＢＢＲ２、ＧＡＬＲ１、ＧＡＬＲ２、ＧＡＬＲ３、ＧＣＧＲ、ＧＨＲＨ
Ｒ、ＧＨＳＲ、ＧＩＰＲ、ＧＬＰ１Ｒ、ＧＬＰ２Ｒ、ＧＮＲＨＲ、ＧＮＲＨＲ２、ＧＰＢ
ＡＲ１、ＧＰＥＲ１、ＧＰＲ１、ＧＰＲ４、ＧＰＲ１２、ＧＰＲ１５、ＧＰＲ１７、ＧＰ
Ｒ１８、ＧＰＲ１９、ＧＰＲ２０、ＧＰＲ２１、ＧＰＲ２２、ＧＰＲ２５、ＧＰＲ２６、
ＧＰＲ２７、ＧＰＲ３、ＧＰＲ３１、ＧＰＲ３２、ＧＰＲ３３、ＧＰＲ３４、ＧＰＲ３５
、ＧＰＲ３７、ＧＰＲ３７Ｌ１、ＧＰＲ３９、ＧＰＲ４０、ＧＰＲ４２、ＧＰＲ４２、Ｇ
ＰＲ４５、ＧＰＲ５０、ＧＰＲ５２、ＧＰＲ５５、ＧＰＲ５５、ＧＰＲ６、ＧＰＲ６１、
ＧＰＲ６２、ＧＰＲ６３、ＧＰＲ６５、ＧＰＲ６８、ＧＰＲ７５、ＧＰＲ７８、ＧＰＲ７
９、ＧＰＲ８２、ＧＰＲ８３、ＧＰＲ８４、ＧＰＲ８５、ＧＰＲ８７、ＧＰＲ８８、ＧＰ
Ｒ１０１、ＧＰＲ１０７、ＧＰＲ１３２、ＧＰＲ１３５、ＧＰＲ１３７、ＧＰＲ１３９、
ＧＰＲ１４１、ＧＰＲ１４２、ＧＰＲ１４３、ＧＰＲ１４６、ＧＰＲ１４８、ＧＰＲ１４
９、ＧＰＲ１５、ＧＰＲ１５０、ＧＰＲ１５１、ＧＰＲ１５２、ＧＰＲ１５３、ＧＰＲ１
５６、ＧＰＲ１５７、ＧＰＲ１５８、ＧＰＲ１６０、ＧＰＲ１６１、ＧＰＲ１６２、ＧＰ
Ｒ１７１、ＧＰＲ１７３、ＧＰＲ１７４、ＧＰＲ１７６、ＧＰＲ１７９、ＧＰＲ１８２、
ＧＰＲ１８３、ＧＰＲＣ５Ａ、ＧＰＲＣ５Ｂ、ＧＰＲＣ５Ｃ、ＧＰＲＣ５Ｄ、ＧＰＲＣ６
Ａ、ＧＲＭ１、ＧＲＭ２、ＧＲＭ３、ＧＲＭ４、ＧＲＭ５、ＧＲＭ６、ＧＲＭ７、ＧＲＭ
８、ＧＲＰＲ、ＨＣＡＲ１、ＨＣＡＲ２、ＨＣＡＲ３、ＨＣＲＴＲ１、ＨＣＲＴＲ２、Ｈ
ＲＨ１、ＨＲＨ２、ＨＲＨ３、ＨＲＨ４、ＨＴＲ１Ａ、ＨＴＲ１Ｂ、ＨＴＲ１Ｄ、ＨＴＲ
１Ｅ、ＨＴＲ１Ｆ、ＨＴＲ２Ａ、ＨＴＲ２Ｂ、ＨＴＲ２Ｃ、ＨＴＲ４、ＨＴＲ５Ａ、ＨＴ
Ｒ５ＢＰ、ＨＴＲ６、ＨＴＲ７、ＫＩＳＳ１Ｒ、ＬＧＲ３、ＬＧＲ４、ＬＧＲ５、ＬＧＲ
６、ＬＨＣＧＲ、ＬＰＡＲ１、ＬＰＡＲ２、ＬＰＡＲ３、ＬＰＡＲ４、ＬＰＡＲ５、ＬＰ
ＡＲ６、ＬＴＢ４Ｒ、ＬＴＢ４Ｒ２、ＭＡＳ１、ＭＡＳ１Ｌ、ＭＣ１Ｒ、ＭＣ２Ｒ、ＭＣ
３Ｒ、ＭＣ４Ｒ、ＭＣ５Ｒ、ＭＣＨＲ１、ＭＣＨＲ２、ＭＬＮＲ、ＭＲＧＰＲＤ、ＭＲＧ
ＰＲＥ、ＭＲＧＰＲＦ、ＭＲＧＰＲＧ、ＭＲＧＰＲＸ１、ＭＲＧＰＲＸ２、ＭＲＧＰＲＸ
３、ＭＲＧＰＲＸ４、ＭＴＮＲ１Ａ、ＭＴＮＲ１Ｂ、ＮＭＢＲ、ＮＭＵＲ１、ＮＭＵＲ２
、ＮＰＢＷＲ１、ＮＰＢＷＲ２、ＮＰＦＦＲ１、ＮＰＦＦＲ２、ＮＰＳＲ１、ＮＰＹ１Ｒ
、ＮＰＹ２Ｒ、ＮＰＹ４Ｒ、ＮＰＹ５Ｒ、ＮＰＹ６Ｒ、ＮＴＳＲ１、ＮＴＳＲ２、ＯＰＮ
３、ＯＰＮ４、ＯＰＮ５、ＯＰＲＤ１、ＯＰＲＫ１、ＯＰＲＬ１、ＯＰＲＭ１、ＯＲ５１
Ｅ１、ＯＸＥＲ１、ＯＸＧＲ１、ＯＸＴＲ、Ｐ２ＲＹ１、Ｐ２ＲＹ１０、Ｐ２ＲＹ１１、
Ｐ２ＲＹ１２、Ｐ２ＲＹ１３、Ｐ２ＲＹ１４、Ｐ２ＲＹ２、Ｐ２ＲＹ４、Ｐ２ＲＹ６、Ｐ
２ＲＹ８、ＰＲＬＨＲ、ＰＲＯＫＲ１、ＰＲＯＫＲ２、ＰＴＡＦＲ、ＰＴＧＤＲ、ＰＴＧ
ＤＲ２、ＰＴＧＥＲ１、ＰＴＧＥＲ２、ＰＴＧＥＲ３、ＰＴＧＥＲ４、ＰＴＧＦＲ、ＰＴ
ＧＩＲ、ＰＴＨ１Ｒ、ＰＴＨ２Ｒ、ＱＲＦＰＲ、ＲＸＦＰ１、ＲＸＦＰ２、ＲＸＦＰ３、
ＲＸＦＰ４、Ｓ１ＰＲ１、Ｓ１ＰＲ２、Ｓ１ＰＲ３、Ｓ１ＰＲ４、Ｓ１ＰＲ５、ＳＣＴＲ
、ＳＭＯ、ＳＳＴＲ１、ＳＳＴＲ２、ＳＳＴＲ３、ＳＳＴＲ４、ＳＳＴＲ５、ＳＵＣＮＲ
１、ＴＡＡＲ１、ＴＡＡＲ２、ＴＡＡＲ３、ＴＡＡＲ４Ｐ、ＴＡＡＲ５、ＴＡＡＲ６、Ｔ
ＡＡＲ８、ＴＡＡＲ９、ＴＡＣＲ１、ＴＡＣＲ２、ＴＡＣＲ３、ＴＡＳ１Ｒ１、ＴＡＳ１
Ｒ２、ＴＡＳ１Ｒ３、ＴＡＳ２Ｒ１、ＴＡＳ２Ｒ１０、ＴＡＳ２Ｒ１３、ＴＡＳ２Ｒ１４
、ＴＡＳ２Ｒ１６、ＴＡＳ２Ｒ１９、ＴＡＳ２Ｒ２０、ＴＡＳ２Ｒ３、ＴＡＳ２Ｒ３０、
ＴＡＳ２Ｒ３１、ＴＡＳ２Ｒ３８、ＴＡＳ２Ｒ３９、ＴＡＳ２Ｒ４、ＴＡＳ２Ｒ４０、Ｔ
ＡＳ２Ｒ４１、ＴＡＳ２Ｒ４２、ＴＡＳ２Ｒ４３、ＴＡＳ２Ｒ４５、ＴＡＳ２Ｒ４６、Ｔ
ＡＳ２Ｒ５、ＴＡＳ２Ｒ５０、ＴＡＳ２Ｒ６０、ＴＡＳ２Ｒ７、ＴＡＳ２Ｒ８、ＴＡＳ２
Ｒ９、ＴＢＸＡ２Ｒ、ＴＰＲＡ１、ＴＲＨＲ、ＴＳＨＲ、ＵＴＳ２Ｒ、ＶＩＰＲ１、ＶＩ
ＰＲ２、ＸＣＲ１、ＴＣＲ－α、ＴＣＲ－β、ＣＤ３、ζ－鎖アクセサリー、ＣＤ４およ
びＣＤ８、マンノース受容体（ＭＲ）、アシアロ糖タンパク質受容体ファミリー（例えば
、アシアロ糖タンパク質受容体マクロファージガラクトース型レクチン（ＭＧＬ））、Ｄ
Ｃ－ＳＩＧＮ（ＣＬＥＣ４Ｌ）、ランゲリン（ＣＬＥＣ４Ｋ）、骨髄系ＤＡＰ１２会合レ
クチン（ＭＤＬ）－１（ＣＬＥＣ５Ａ）、デクチン１／ＣＬＥＣ７Ａ、ＤＮＧＲ１／ＣＬ
ＥＣ９Ａ、骨髄系Ｃ型レクチン様受容体（ＭＩＣＬ）（ＣＬＥＣ１２Ａ）、ＣＬＥＣ２（
ＣＬＥＣ１Ｂとも呼ばれる）、ＣＬＥＣ１２Ｂ、ＤＣＩＲ／ＣＬＥＣ４Ａ、デクチン２／
ＣＬＥＣ６Ａ、血液ＤＣ抗原２（ＢＤＣＡ２）（ＣＬＥＣ４Ｃ）、マクロファージ誘導性
Ｃ型レクチン（ＣＬＥＣ４Ｅ）、ＴＬＲ１、ＴＬＲ２、ＴＬＲ３、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、
ＴＬＲ６、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９、ＴＬＲ１０、ＴＬＲ１１、ＴＬＲ１２、ＴＬ
Ｒ１３，ＦｃγＲＩ（ＣＤ６４）、ＦｃγＲＩＩＡ（ＣＤ３２）、ＦｃγＲＩＩＢ１（Ｃ
Ｄ３２）、ＦｃγＲＩＩＢ２（ＣＤ３２）、ＦｃγＲＩＩＩＡ（ＣＤ１６ａ）、ＦｃγＲ
ＩＩＩＢ（ＣＤ１６ｂ）、ＦｃεＲＩ、ＦｃεＲＩＩ（ＣＤ２３）、ＦｃαＲ１（ＣＤ８
９）、Ｆｃα／μＲ、ＦｃＲｎ、ＣＤ２７、ＣＤ４０、ＯＸ４０、ＧＩＴＲ、ＣＤ１３７
、ＰＤ－１、ＣＴＬＡ－４、ＰＤ－Ｌ１、ＴＩＧＩＴ、Ｔ細胞免疫グロブリンドメインお
よびムチンドメイン３（ＴＩＭ３）、Ｔ細胞活性化のＶ－ドメインＩｇ抑制因子（ＶＩＳ
ＴＡ）、ＣＤ２８、ＣＤ１２２、ＩＣＯＳ、Ａ２ＡＲ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、Ｂおよ
びＴリンパ球アテニュエータ（ＢＴＬＡ）、インドールアミン２，３－ジオキシゲナーゼ
（ＩＤＯ）、キラー細胞免疫グロブリン様受容体（ＫＩＲ）、リンパ球活性化遺伝子－３
（ＬＡＧ３）、ＦＡＭ１５９Ｂ、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－Ｂ、ＨＬＡ－Ｃ、ＨＬＡ－ＤＰＡ
１、ＨＬＡ－ＤＰＢ１、ＨＬＡ－ＤＱＡ１、ＨＬＡ－ＤＱＢ１、ＨＬＡ－ＤＲＡ、ＨＬＡ
－ＤＲＢ１、ｇｐ１３０、ＩＬ－１受容体、ＩＬ－２受容体、ＩＬ－３受容体、ＩＬ－４
受容体、ＩＬ－５受容体、ＩＬ－６受容体、ＩＬ－７受容体、ＩＬ－８受容体、ＩＬ－９
受容体、ＩＬ－１０受容体、ＩＬ－１１受容体、ＩＬ－１２受容体、ＩＬ－１３受容体、
ＩＬ－１４受容体、ＩＬ－１５受容体、ＩＬ－１６受容体、ＩＬ－１７受容体、ＩＬ－１
８受容体、ＩＬ－１９受容体、ＩＬ－２０受容体、ＩＬ－２１受容体、ＩＬ－２２受容体
、ＩＬ－２３受容体、ＩＬ－２４受容体、ＩＬ－２５受容体、ＩＬ－２６受容体、ＩＬ－
２７受容体、ＩＬ－２８受容体、ＩＬ－２９受容体、ＩＬ－３０受容体、ＩＬ－３１受容
体、ＩＬ－３２受容体、ＩＬ－３３受容体、ＩＬ－３５受容体、ＩＬ－３６受容体、ＦＧ
ＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、ＦＧＦＲ４、ＴＮＦＲＳＦ１Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１Ｂ、
ＴＮＦＲＳＦ３、ＴＮＦＲＳＦ４、ＴＮＦＲＳＦ５、ＴＮＦＲＳＦ６、ＴＮＦＲＳＦ６Ｂ
、ＴＮＦＲＳＦ７、ＴＮＦＲＳＦ８、ＴＮＦＲＳＦ９、ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ、ＴＮＦＲＳ
Ｆ１０Ｂ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｃ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｄ、ＴＮＦＲＳＦ１１Ａ、ＴＮＦＲＳ
Ｆ１１Ｂ、ＴＮＦＲＳＦ１２Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１３Ｂ、ＴＮＦＲＳＦ１３Ｃ、ＴＮＦＲＳ
Ｆ１４、ＴＮＦＲＳＦ１６、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＴＮＦＲＳＦ１８、ＴＮＦＲＳＦ１９、
ＴＮＦＲＳＦ２１、ＴＮＦＲＳＦ２５、ＴＮＦＲＳＦ２７、ＳＣＮ１Ａ、ＳＣＮ１Ｂ、Ｓ
ＣＮ２Ａ、ＳＣＮ２Ｂ、ＳＣＮ３Ａ、ＳＣＮ３Ｂ、ＳＣＮ４Ａ、ＳＣＮ５Ａ、ＳＣＮ７Ａ
、ＳＣＮ８Ａ、ＳＣＮ９Ａ、ＳＣＮ１０Ａ、ＳＣＮ１１Ａ、ＣＡＣＮＡ１Ａ、ＣＡＣＮＡ
１Ｂ、ＣＡＣＮＡ１Ｃ、ＣＡＣＮＡ１Ｄ、ＣＡＣＮＡ１Ｅ、ＣＡＣＮＡ１Ｆ、ＣＡＣＮＡ
１Ｇ、ＣＡＣＮＡ１Ｈ、ＣＡＣＮＡ１Ｉ、ＣＡＣＮＡ１Ｓ、ＴＲＰＡ１、ＴＲＰＣ１、Ｔ
ＲＰＣ２、ＴＲＰＣ３、ＴＲＰＣ４、ＴＲＰＣ５、ＴＲＰＣ６、ＴＲＰＣ７、ＴＲＰＭ１
、ＴＲＰＭ２、ＴＲＰＭ３、ＴＲＰＭ４、ＴＲＰＭ５、ＴＲＰＭ６、ＴＲＰＭ７、ＴＲＰ
Ｍ８、ＭＣＯＬＮ１、ＭＣＯＬＮ２、ＭＣＯＬＮ３、ＰＫＤ１、ＰＫＤ２、ＰＫＤ２Ｌ１
、ＰＫＤ２Ｌ２、ＴＲＰＶ１、ＴＲＰＶ２、ＴＲＰＶ３、ＴＲＰＶ４、ＴＲＰＶ５、ＴＲ
ＰＶ６、ＣＡＴＳＰＥＲ１、ＣＡＴＳＰＥＲ２、ＣＡＴＳＰＥＲ３、ＣＡＴＳＰＥＲ４、
ＴＰＣＮ１、ＴＰＣＮ２、ＣＮＧＡ１、ＣＮＧＡ２、ＣＮＧＡ３、ＣＮＧＡ４、ＣＮＧＢ
１、ＣＮＧＢ３、ＨＣＮ１、ＨＣＮ２、ＨＣＮ３、ＨＣＮ４、ＫＣＮＭＡ１、ＫＣＮＮ１
、ＫＣＮＮ２、ＫＣＮＮ３、ＫＣＮＮ４、ＫＣＮＴ１、ＫＣＮＴ２、ＫＣＮＵ１、ＫＣＮ
Ａ１、ＫＣＮＡ２、ＫＣＮＡ３、ＫＣＮＡ４、ＫＣＮＡ５、ＫＣＮＡ６、ＫＣＮＡ７、Ｋ
ＣＮＡ１０、ＫＣＮＢ１、ＫＣＮＢ２、ＫＣＮＣ１、ＫＣＮＣ２、ＫＣＮＣ３、ＫＣＮＣ
４、ＫＣＮＤ１、ＫＣＮＤ２、ＫＣＮＤ３、ＫＣＮＦ１、ＫＣＮＧ１、ＫＣＮＧ２、ＫＣ
ＮＧ３、ＫＣＮＧ４、ＫＣＮＨ１、ＫＣＮＨ２、ＫＣＮＨ３、ＫＣＮＨ４、ＫＣＮＨ５、
ＫＣＮＨ６、ＫＣＮＨ７、ＫＣＮＨ８、ＫＣＮＱ１、ＫＣＮＱ２、ＫＣＮＱ３、ＫＣＮＱ
４、ＫＣＮＱ５、ＫＣＮＳ１、ＫＣＮＳ２、ＫＣＮＳ３、ＫＣＮＶ１、ＫＣＮＶ２、ＫＣ
ＮＪ１、ＫＣＮＪ２、ＫＣＮＪ３、ＫＣＮＪ４、ＫＣＮＪ５、ＫＣＮＪ６、ＫＣＮＪ８、
ＫＣＮＪ９、ＫＣＮＪ１０、ＫＣＮＪ１１、ＫＣＮＪ１２、ＫＣＮＪ１３、ＫＣＮＪ１４
、ＫＣＮＪ１５、ＫＣＮＪ１６、ＫＣＮＪ１８、ＫＣＮＫ１、ＫＣＮＫ２、ＫＣＮＫ３、
ＫＣＮＫ４、ＫＣＮＫ５、ＫＣＮＫ６、ＫＣＮＫ７、ＫＣＮＫ９、ＫＣＮＫ１０、ＫＣＮ
Ｋ１２、ＫＣＮＫ１３、ＫＣＮＫ１５、ＫＣＮＫ１６、ＫＣＮＫ１７、ＫＣＮＫ１８、Ｈ
ＶＣＮ１、ＨＴＲ３Ａ、ＨＴＲ３Ｂ、ＨＴＲ３Ｃ、ＨＴＲ３Ｄ、ＨＴＲ３Ｅ、ＣＨＲＮＡ
１



、ＣＨＲＮＡ２、ＣＨＲＮＡ３、ＣＨＲＮＡ４、ＣＨＲＮＡ５、ＣＨＲＮＡ６、ＣＨＲＮ
Ａ７、ＣＨＲＮＡ９、ＣＨＲＮＡ１０、ＣＨＲＮＢ１、ＣＨＲＮＢ２、ＣＨＲＮＢ３、Ｃ
ＨＲＮＢ４、ＣＨＲＮＤ、ＣＨＲＮＥ、ＣＨＲＮＧ、ＧＡＢＲＡ１、ＧＡＢＲＡ２、ＧＡ
ＢＲＡ３、ＧＡＢＲＡ４、ＧＡＢＲＡ５、ＧＡＢＲＡ６、ＧＡＢＲＢ１、ＧＡＢＲＢ２、
ＧＡＢＲＢ３、ＧＡＢＲＤ、ＧＡＢＲＥ、ＧＡＢＲＧ１、ＧＡＢＲＧ２、ＧＡＢＲＧ３、
ＧＡＢＲＰ、ＧＡＢＲＱ、ＧＡＢＲＲ１、ＧＡＢＲＲ２、ＧＡＢＲＲ３、ＧＲＩＡ１、Ｇ
ＲＩＡ２、ＧＲＩＡ３、ＧＲＩＡ４、ＧＲＩＤ１、ＧＲＩＤ２、ＧＲＩＫ１、ＧＲＩＫ２
、ＧＲＩＫ３、ＧＲＩＫ４、ＧＲＩＫ５、ＧＲＩＮ１、ＧＲＩＮ２Ａ、ＧＲＩＮ２Ｂ、Ｇ
ＲＩＮ２Ｃ、ＧＲＩＮ２Ｄ、ＧＲＩＮ３Ａ、ＧＲＩＮ３Ｂ、ＧＬＲＡ１、ＧＬＲＡ２、Ｇ
ＬＲＡ３、ＧＬＲＡ４、Ｐ２ＲＸ１、Ｐ２ＲＸ２、Ｐ２ＲＸ３、Ｐ２ＲＸ４、Ｐ２ＲＸ５
、Ｐ２ＲＸ６、Ｐ２ＲＸ７、ＺＡＣＮ、ＡＳＩＣ１、ＡＳＩＣ２、ＡＳＩＣ３、ＡＳＩＣ
４、ＡＱＰ１、ＡＱＰ２、ＡＱＰ３、ＡＱＰ４、ＡＱＰ５、ＡＱＰ６、ＡＱＰ７、ＡＱＰ
８、ＡＱＰ９、ＡＱＰ１０、ＡＱＰ１１、ＡＱＰ１２Ａ、ＡＱＰ１２Ｂ、ＭＩＰ、ＣＬＣ
Ｎ１、ＣＬＣＮ２、ＣＬＣＮ３、ＣＬＣＮ４、ＣＬＣＮ５、ＣＬＣＮ６、ＣＬＣＮ７、Ｃ
ＬＣＮＫＡ、ＣＬＣＮＫＢ、嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）、ＡＮ
Ｏ１／ＴＭＥＭ１６ａ、ＡＮＯ２、ＡＮＯ３、ＡＮＯ４、ＡＮＯ５、ＡＮＯ６、ＡＮＯ７
、ＡＮＯ８、ＡＮＯ９、ＡＮＯ１０、ＢＥＳＴ１、ＢＥＳＴ２、ＢＥＳＴ３、ＢＥＳＴ４
、ＣＬＩＣ１、ＣＬＩＣ２、ＣＬＩＣ３、ＣＬＩＣ４、ＣＬＩＣ５、ＣＬＩＣ６、ＧＪＡ
１、ＧＪＡ３、ＧＪＡ４、ＧＪＡ５、ＧＪＡ６Ｐ、ＧＪＡ８、ＧＪＡ９、ＧＪＡ１０、Ｇ
ＪＢ１、ＧＪＢ２、ＧＪＢ３、ＧＪＢ４、ＧＪＢ５、ＧＪＢ６、ＧＪＢ７、ＧＪＣ１、Ｇ
ＪＣ２、ＧＪＣ３、ＧＪＤ２、ＧＪＤ３、ＧＪＤ４、ＧＪＥ１、ＩＴＰＲ１、ＩＴＰＲ２
、ＩＴＰＲ３、ＰＡＮＸ１、ＰＡＮＸ２、ＰＡＮＸ３、ＲＹＲ１、ＲＹＲ２、ＲＹＲ３、
ＮＡＬＣＮ、ＳＣＮＮ１Ａ、ＳＣＮＮ１Ｂ、ＳＣＮＮ１Ｄ、ＳＣＮＮ１Ｇ、ＡＤＡＭＴＳ
７、ＡＮＧＰＴＬ３、ＡＮＧＰＴＬ４、ＡＮＧＰＴＬ８、ＬＰＬ、ＧＤＦ１５、ガレクチ
ン－１、ガレクチン－２、ガレクチン－３、ガレクチン－４、ガレクチン－７、ガレクチ
ン－８、ガレクチン－９、ガレクチン－１０、ガレクチン－１２、ガレクチン－１３、マ
トリックスｇｌａタンパク質（ＭＧＰ）、ＰＲＮＰ、ＤＧＡＴ１、ＧＰＡＴ３、ＤＭＣ１
、ＢＬＭ、ＢＲＣＡ２、ヒト内在性レトロウイルスタイプＫ（ＨＥＲＶ－Ｋ）ファミリー
のメンバー、エクトヌクレオシド三リン酸ジホスホヒドロラーゼ１（ＥＮＴＰＤ１）、エ
クトヌクレオシド三リン酸ジホスホヒドロラーゼ２（ＥＮＴＰＤ２）、ＳＬＣ１Ａ１、Ｓ
ＬＣ１Ａ２、ＳＬＣ１Ａ３、ＳＬＣ１Ａ４、ＳＬＣ１Ａ５、ＳＬＣ１Ａ６、ＳＬＣ１Ａ７
、ＳＬＣ２Ａ１、ＳＬＣ２Ａ２、ＳＬＣ２Ａ３、ＳＬＣ２Ａ４、ＳＬＣ２Ａ５、ＳＬＣ２
Ａ６、ＳＬＣ２Ａ７、ＳＬＣ２Ａ８、ＳＬＣ２Ａ９、ＳＬＣ２Ａ１０、ＳＬＣ２Ａ１１、
ＳＬＣ２Ａ１２、ＳＬＣ２Ａ１３、ＳＬＣ２Ａ１４、ＳＬＣ３Ａ１、ＳＬＣ３Ａ２、ＳＬ
Ｃ４Ａ１、ＳＬＣ４Ａ２、ＳＬＣ４Ａ３、ＳＬＣ４Ａ４、ＳＬＣ４Ａ５、ＳＬＣ４Ａ６、
ＳＬＣ４Ａ７、ＳＬＣ４Ａ８、ＳＬＣ４Ａ９、ＳＬＣ４Ａ１０、ＳＬＣ４Ａ１１、ＳＬＣ
５Ａ１、ＳＬＣ５Ａ２、ＳＬＣ５Ａ３、ＳＬＣ５Ａ４、ＳＬＣ５Ａ５、ＳＬＣ５Ａ６、Ｓ
ＬＣ５Ａ７、ＳＬＣ５Ａ８、ＳＬＣ５Ａ９、ＳＬＣ５Ａ１０、ＳＬＣ５Ａ１１、ＳＬＣ５
Ａ１２、ＳＬＣ６Ａ１、ＳＬＣ６Ａ２、ＳＬＣ６Ａ３、ＳＬＣ６Ａ４、ＳＬＣ６Ａ５、Ｓ
ＬＣ６Ａ６、ＳＬＣ６Ａ７、ＳＬＣ６Ａ８、ＳＬＣ６Ａ９、ＳＬＣ６Ａ１０、ＳＬＣ６Ａ
１１、ＳＬＣ６Ａ１２、ＳＬＣ６Ａ１３、ＳＬＣ６Ａ１４、ＳＬＣ６Ａ１５、ＳＬＣ６Ａ
１６、ＳＬＣ６Ａ１７、ＳＬＣ６Ａ１８、ＳＬＣ６Ａ１９、ＳＬＣ６Ａ２０、ＳＬＣ７Ａ
５、ＳＬＣ７Ａ６、ＳＬＣ７Ａ７、ＳＬＣ７Ａ８、ＳＬＣ７Ａ９、ＳＬＣ７Ａ１０、ＳＬ
Ｃ７Ａ１１、ＳＬＣ７Ａ１３、ＳＬＣ７Ａ１４、ＳＬＣ８Ａ１、ＳＬＣ８Ａ２、ＳＬＣ８
Ａ３、ＳＬＣ９Ａ１、ＳＬＣ９Ａ２、ＳＬＣ９Ａ３、ＳＬＣ９Ａ４、ＳＬＣ９Ａ５、ＳＬ
Ｃ９Ａ６、ＳＬＣ９Ａ７、ＳＬＣ９Ａ８、ＳＬＣ９Ａ９、ＳＬＣ９Ａ１０、ＳＬＣ９Ａ１
１、ＳＬＣ９Ｂ１、ＳＬＣ９Ｂ２、ＳＬＣ１０Ａ１、ＳＬＣ１０Ａ２、ＳＬＣ１０Ａ３、
ＳＬＣ１０Ａ４、ＳＬＣ１０Ａ５、ＳＬＣ１０Ａ６、ＳＬＣ１０Ａ７、ＳＬＣ１１Ａ１、
ＳＬＣ１１Ａ２、ＳＬＣ１２Ａ１、ＳＬＣ１２Ａ２、ＳＬＣ１２Ａ３、ＳＬＣ１２Ａ４、
ＳＬＣ１２Ａ５、ＳＬＣ１２Ａ６、ＳＬＣ１２Ａ７、ＳＬＣ１２Ａ８、ＳＬＣ１２Ａ９、
ＳＬＣ１３Ａ１、ＳＬＣ１３Ａ２、ＳＬＣ１３Ａ３、ＳＬＣ１３Ａ４、ＳＬＣ１３Ａ５、
ＳＬＣ１４Ａ１、ＳＬＣ１４Ａ２、ＳＬＣ１５Ａ１、ＳＬＣ１５Ａ２、ＳＬＣ１５Ａ３、
ＳＬＣ１５Ａ４、ＳＬＣ１６Ａ１、ＳＬＣ１６Ａ２、ＳＬＣ１６Ａ３、ＳＬＣ１６Ａ４、
ＳＬＣ１６Ａ５、ＳＬＣ１６Ａ６、ＳＬＣ１６Ａ７、ＳＬＣ１６Ａ８、ＳＬＣ１６Ａ９、
ＳＬＣ１６Ａ１０、ＳＬＣ１６Ａ１１、ＳＬＣ１６Ａ１２、ＳＬＣ１６Ａ１３、ＳＬＣ１
６Ａ１４、ＳＬＣ１７Ａ１、ＳＬＣ１７Ａ２、ＳＬＣ１７Ａ３、ＳＬＣ１７Ａ４、ＳＬＣ
１７Ａ５、ＳＬＣ１７Ａ６、ＳＬＣ１７Ａ７、ＳＬＣ１７Ａ８、ＳＬＣ１７Ａ９、ＳＬＣ
１８Ａ１、ＳＬＣ１８Ａ２、ＳＬＣ１８Ａ３、ＳＬＣ１９Ａ１、ＳＬＣ１９Ａ２、ＳＬＣ
１９Ａ３、ＳＬＣ２０Ａ１、ＳＬＣ２０Ａ２、ＳＬＣＯ１Ａ２、ＳＬＣＯ１Ｂ１、ＳＬＣ
Ｏ１Ｂ３、ＳＬＣＯ１Ｃ１、ＳＬＣＯ２Ａ１、ＳＬＣＯ２Ｂ１、ＳＬＣＯ３Ａ１、ＳＬＣ
Ｏ４Ａ１、ＳＬＣＯ４Ｃ１、ＳＬＣＯ５Ａ１、ＳＬＣＯ６Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ１、ＳＬＣ
２２Ａ２、ＳＬＣ２２Ａ３、ＳＬＣ２２Ａ４、ＳＬＣ２２Ａ５、ＳＬＣ２２Ａ６、ＳＬＣ
２２Ａ７、ＳＬＣ２２Ａ８、ＳＬＣ２２Ａ９、ＳＬＣ２２Ａ１０、ＳＬＣ２２Ａ１１、Ｓ
ＬＣ２２Ａ１２、ＳＬＣ２２Ａ１３、ＳＬＣ２２Ａ１４、ＳＬＣ２２Ａ１５、ＳＬＣ２２
Ａ１６、ＳＬＣ２２Ａ１７、ＳＬＣ２２Ａ１８、ＳＬＣ２２Ａ１８ＡＳ，ＳＬＣ２２Ａ１
９、ＳＬＣ２２Ａ２０、ＳＬＣ２２Ａ２３、ＳＬＣ２２Ａ２４、ＳＬＣ２２Ａ２５、ＳＬ
Ｃ２２Ａ３１、ＳＬＣ２３Ａ１、ＳＬＣ２３Ａ２、ＳＬＣ２３Ａ３、ＳＬＣ２３Ａ４、Ｓ
ＬＣ２４Ａ１、ＳＬＣ２４Ａ２、ＳＬＣ２４Ａ３、ＳＬＣ２４Ａ４、ＳＬＣ２４Ａ５、Ｓ
ＬＣ２４Ａ６、ＳＬＣ２５Ａ１、ＳＬＣ２５Ａ２、ＳＬＣ２５Ａ３、ＳＬＣ２５Ａ４、Ｓ
ＬＣ２５Ａ５、ＳＬＣ２５Ａ６、ＳＬＣ２５Ａ７、ＳＬＣ２５Ａ８、ＳＬＣ２５Ａ９、Ｓ
ＬＣ２５Ａ１０、ＳＬＣ２５Ａ１１、ＳＬＣ２５Ａ１２、ＳＬＣ２５Ａ１３、ＳＬＣ２５
Ａ１４、ＳＬＣ２５Ａ１５、ＳＬＣ２５Ａ１６、ＳＬＣ２５Ａ１７、ＳＬＣ２５Ａ１８、
ＳＬＣ２５Ａ１９，ＳＬＣ２５Ａ２０、ＳＬＣ２５Ａ２１、ＳＬＣ２５Ａ２２、ＳＬＣ２
５Ａ２３、ＳＬＣ２５Ａ２４、ＳＬＣ２５Ａ２５、ＳＬＣ２５Ａ２６、ＳＬＣ２５Ａ２７
、ＳＬＣ２５Ａ２８、ＳＬＣ２５Ａ２９、ＳＬＣ２５Ａ３０、ＳＬＣ２５Ａ３１、ＳＬＣ
２５Ａ３２、ＳＬＣ２５Ａ３３、ＳＬＣ２５Ａ３４、ＳＬＣ２５Ａ３５、ＳＬＣ２５Ａ３
６、ＳＬＣ２５Ａ３７，ＳＬＣ２５Ａ３８、ＳＬＣ２５Ａ３９、ＳＬＣ２５Ａ４０、ＳＬ
Ｃ２５Ａ４１、ＳＬＣ２５Ａ４２、ＳＬＣ２５Ａ４３、ＳＬＣ２５Ａ４４、ＳＬＣ２５Ａ
４５、ＳＬＣ２５Ａ４６、ＳＬＣ２６Ａ１、ＳＬＣ２６Ａ２、ＳＬＣ２６Ａ３、ＳＬＣ２
６Ａ４、ＳＬＣ２６Ａ５、ＳＬＣ２６Ａ６、ＳＬＣ２６Ａ７、ＳＬＣ２６Ａ８、ＳＬＣ２
６Ａ９、ＳＬＣ２６Ａ１０、ＳＬＣ２６Ａ１１、ＳＬＣ２７Ａ１、ＳＬＣ２７Ａ２、ＳＬ
Ｃ２７Ａ３、ＳＬＣ２７Ａ４、ＳＬＣ２７Ａ５、ＳＬＣ２７Ａ６、ＳＬＣ２８Ａ１、ＳＬ
Ｃ２８Ａ２、ＳＬＣ２８Ａ３、ＳＬＣ２９Ａ１、ＳＬＣ２９Ａ２、ＳＬＣ２９Ａ３、ＳＬ
Ｃ２９Ａ４、ＳＬＣ３０Ａ１、ＳＬＣ３０Ａ２、ＳＬＣ３０Ａ３、ＳＬＣ３０Ａ４、ＳＬ
Ｃ３０Ａ５、ＳＬＣ３０Ａ６、ＳＬＣ３０Ａ７、ＳＬＣ３０Ａ８、ＳＬＣ３０Ａ９、ＳＬ
Ｃ３０Ａ１０、ＳＬＣ３１Ａ１、ＳＬＣ３１Ａ２、ＳＬＣ３２Ａ１、ＳＬＣ３３Ａ１、Ｓ
ＬＣ３４Ａ１、ＳＬＣ３４Ａ２、ＳＬＣ３４Ａ３、ＳＬＣ３５Ａ１、ＳＬＣ３５Ａ２、Ｓ
ＬＣ３５Ａ３、ＳＬＣ３５Ａ４、ＳＬＣ３５Ａ５、ＳＬＣ３５Ｂ１、ＳＬＣ３５Ｂ２、Ｓ
ＬＣ３５Ｂ３、ＳＬＣ３５Ｂ４、ＳＬＣ３５Ｃ１、ＳＬＣ３５Ｃ２、ＳＬＣ３５Ｄ１、Ｓ
ＬＣ３５Ｄ２、ＳＬＣ３５Ｄ３、ＳＬＣ３５Ｅ１、ＳＬＣ３５Ｅ２、ＳＬＣ３５Ｅ３、Ｓ
ＬＣ３５Ｅ４、ＳＬＣ３５Ｆ１、ＳＬＣ３５Ｆ２、ＳＬＣ３５Ｆ３、ＳＬＣ３５Ｆ４、Ｓ
ＬＣ３５Ｆ５、ＳＬＣ３５Ｇ１、ＳＬＣ３５Ｇ３、ＳＬＣ３５Ｇ４、ＳＬＣ３５Ｇ５、Ｓ
ＬＣ３５Ｇ６、ＳＬＣ３６Ａ１、ＳＬＣ３６Ａ２、ＳＬＣ３６Ａ３、ＳＬＣ３６Ａ４、Ｓ
ＬＣ３７Ａ１、ＳＬＣ３７Ａ２、ＳＬＣ３７Ａ３、ＳＬＣ３７Ａ４、ＳＬＣ３８Ａ１、Ｓ
ＬＣ３８Ａ２、ＳＬＣ３８Ａ３、ＳＬＣ３８Ａ４、ＳＬＣ３８Ａ５、ＳＬＣ３８Ａ６、Ｓ
ＬＣ３８Ａ７、ＳＬＣ３８Ａ８、ＳＬＣ３８Ａ９、ＳＬＣ３８Ａ１０、ＳＬＣ３８Ａ１１
、ＳＬＣ３９Ａ１、ＳＬＣ３９Ａ２、ＳＬＣ３９Ａ３、ＳＬＣ３９Ａ４、ＳＬＣ３９Ａ５
、ＳＬＣ３９Ａ６、ＳＬＣ３９Ａ７、ＳＬＣ３９Ａ８、ＳＬＣ３９Ａ９、ＳＬＣ３９Ａ１
０、ＳＬＣ３９Ａ１１、ＳＬＣ３９Ａ１２、ＳＬＣ３９Ａ１３、ＳＬＣ３９Ａ１４、ＳＬ
Ｃ４０Ａ１、ＳＬＣ４１Ａ１、ＳＬＣ４１Ａ２、ＳＬＣ４１Ａ３、ＲｈＡＧ、ＲｈＢＧ、
ＲｈＣＧ、ＳＬＣ４３Ａ１、ＳＬＣ４３Ａ２、ＳＬＣ４３Ａ３、ＳＬＣ４４Ａ１、ＳＬＣ
４４Ａ２、ＳＬＣ４４Ａ３、ＳＬＣ４４Ａ４、ＳＬＣ４４Ａ５、ＳＬＣ４５Ａ１、ＳＬＣ
４５Ａ２、ＳＬＣ４５Ａ３、ＳＬＣ４５Ａ４、ＳＬＣ４６Ａ１、ＳＬＣ４６Ａ２、ＳＬＣ
４６Ａ３、ＳＬＣ４７Ａ１、ＳＬＣ４７Ａ２、ＨＣＰ－１、ＭＦＳＤ５、ＭＦＳＤ１０、
ＳＬＣ５０Ａ１、ＯＳＴα、ＯＳＴβ、ＳＬＣ５２Ａ１、ＳＬＣ５２Ａ２、ならびにＳＬ
Ｃ５２Ａ３から選択される。
特定の態様では、本明細書で提供される方法は、膜貫通受容体などの膜貫通タンパク質
である標的タンパク質、ならびに抗体を産生させにくい標的タンパク質または発現しにく
い標的タンパク質、例えば、細胞毒性、収率、溶解性、凝集、および／もしくは安定性の
問題のために難しい標的タンパク質に対する抗体の作製に有効である。
ある種の態様では、本明細書に記載の標的タンパク質（例えば、ヒト標的タンパク質）
は、Ｉ型、ＩＩ型、ＩＩ型単一アンカー、Ｃ末端アンカー、およびポリトピック型（例え
ば、ＯｔｔおよびＬｉｎｇａｐｐａ，２００２，Ｊ． Ｃｅｌｌ Ｓｃｉ．，１１５（Ｐ
ｔ１０）：２００３－２００９を参照のこと）として分類される膜内在性タンパク質（Ｉ
ＭＰ）を含む。特定の態様では、本明細書に記載の標的タンパク質（例えば、ヒト標的タ
ンパク質）は、１回膜貫通型タンパク質である。特定の態様では、本明細書に記載の標的
タンパク質（例えば、ヒト標的タンパク質）は、複数回膜貫通タンパク質である。
Ｇタンパク質共役型受容体（ＧＰＣＲ）
特定の態様では、本明細書で提供される方法における使用のための複合体は、脂質およ
び標的タンパク質をコードするポリヌクレオチド（例えば、ｍＲＮＡ）を含み、標的タン
パク質（例えば、ヒト標的タンパク質）は、ＧＰＣＲ（例えば、ヒトＧＰＣＲ）である。
７回膜貫通（７ＴＭ）ドメイン受容体およびＧタンパク質結合受容体（ＧＰＬＲ）として
も知られるＧＰＣＲ。ＧＰＣＲに関係する２つの主要なシグナル伝達経路は、ｃＡＭＰシ
グナル経路およびホスファチジルイノシトールシグナル経路である。
ＧＰＣＲのクラスとしては、クラスＡ（ロドプシン様）、クラスＢ（セクレチン受容体
ファミリー）、クラスＣ（代謝型グルタミン酸／フェロモン）、クラスＤ（真菌の接合フ
ェロモン受容体）、クラスＥ（サイクリックＡＭＰ受容体）、およびクラスＦ（Ｆｒｉｚ
ｚｌｅｄ／Ｓｍｏｏｔｈｅｎｅｄ）が含まれる。
ＧＰＣＲ（クラスＡ、Ｂ、Ｃ、クラスＦｒｉｚｚｌｅｄ、および他の７回膜貫通タンパ
ク質）である標的タンパク質の非限定的な例は、ＡＣＫＲ１、ＡＣＫＲ２、ＡＣＫＲ３、
ＡＣＫＲ４、ＡＤＣＹＡＰ１Ｒ１、ＡＤＧＲＡ１、ＡＤＧＲＡ２、ＡＤＧＲＡ３、ＡＤＧ
ＲＢ１、ＡＤＧＲＢ２、ＡＤＧＲＢ３、ＡＤＧＲＤ１、ＡＤＧＲＤ２、ＡＤＧＲＥ１、Ａ
ＤＧＲＥ２、ＡＤＧＲＥ３、ＡＤＧＲＥ４Ｐ、ＡＤＧＲＥ５、ＡＤＧＲＦ１、ＡＤＧＲＦ
２、ＡＤＧＲＦ３、ＡＤＧＲＦ４、ＡＤＧＲＦ５、ＡＤＧＲＧ１、ＡＤＧＲＧ２、ＡＤＧ
ＲＧ３、ＡＤＧＲＧ４、ＡＤＧＲＧ５、ＡＤＧＲＧ６、ＡＤＧＲＧ７、ＡＤＧＲＬ１、Ａ
ＤＧＲＬ２、ＡＤＧＲＬ３、ＡＤＧＲＬ４、ＡＤＧＲＶ１、ＡＤＯＲＡ１、ＡＤＯＲＡ２
Ａ、ＡＤＯＲＡ２Ｂ、ＡＤＯＲＡ３、ＡＤＲＡ１Ａ、ＡＤＲＡ１Ｂ、ＡＤＲＡ１Ｄ、ＡＤ
ＲＡ２Ａ、ＡＤＲＡ２Ｂ、ＡＤＲＡ２Ｃ、ＡＤＲＢ１、ＡＤＲＢ２、ＡＤＲＢ３、ＡＧＴ
Ｒ１、ＡＧＴＲ２、ＡＰＬＮＲ／ＡＰＪ、ＡＶＰＲ１Ａ、ＡＶＰＲ１Ｂ、ＡＶＰＲ２、Ｂ
ＤＫＲＢ１、ＢＤＫＲＢ２、ＢＲＳ３、ＢＲＳ３、Ｃ３ＡＲ１、Ｃ５ＡＲ１、Ｃ５ＡＲ２
、ＣＡＬＣＲ、ＣＡＬＣＲＬ、ＣＡＳＲ、ＣＣＫＡＲ、ＣＣＫＢＲ、ＣＣＲ１、ＣＣＲ１
０、ＣＣＲ２、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＣＲ８、ＣＣＲ
９、ＣＣＲＬ２、ＣＥＬＳＲ１、ＣＥＬＳＲ２、ＣＥＬＳＲ３、ＣＨＲＭ１、ＣＨＲＭ２
、ＣＨＲＭ３、ＣＨＲＭ４、ＣＨＲＭ５、ＣＭＫＬＲ１、ＣＮＲ１、ＣＮＲ２、ＣＲＨＲ
１、ＣＲＨＲ２、ＣＸ３ＣＲ１、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ４、Ｃ
ＸＣＲ５、ＣＸＣＲ６、ＣＹＳＬＴＲ１、ＣＹＳＬＴＲ２、ＤＲＤ１、ＤＲＤ２、ＤＲＤ
３、ＤＲＤ４、ＤＲＤ５、ＥＤＮＲＡ、ＥＤＮＲＢ、Ｆ２Ｒ、Ｆ２ＲＬ１、Ｆ２ＲＬ２、
Ｆ２ＲＬ３、ＦＦＡＲ１、ＦＦＡＲ２、ＦＦＡＲ３、ＦＦＡＲ４、ＦＰＲ１、ＦＰＲ２、
ＦＰＲ２、ＦＰＲ３、ＦＳＨＲ、ＦＺＤ１、ＦＺＤ１０、ＦＺＤ２、ＦＺＤ３、ＦＺＤ４
、ＦＺＤ５、ＦＺＤ６、ＦＺＤ７、ＦＺＤ８、ＦＺＤ９、ＧＡＢＢＲ１、ＧＡＢＢＲ２、
ＧＡＬＲ１、ＧＡＬＲ２、ＧＡＬＲ３、ＧＣＧＲ、ＧＨＲＨＲ、ＧＨＳＲ、ＧＩＰＲ、Ｇ
ＬＰ１Ｒ、ＧＬＰ２Ｒ、ＧＮＲＨＲ、ＧＮＲＨＲ２、ＧＰＢＡＲ１、ＧＰＥＲ１、ＧＰＲ
１、ＧＰＲ４、ＧＰＲ１２、ＧＰＲ１５、ＧＰＲ１７、ＧＰＲ１８、ＧＰＲ１９、ＧＰＲ
２０、ＧＰＲ２１、ＧＰＲ２２、ＧＰＲ２５、ＧＰＲ２６、ＧＰＲ２７、ＧＰＲ３、ＧＰ
Ｒ３１、ＧＰＲ３２、ＧＰＲ３３、ＧＰＲ３４、ＧＰＲ３５、ＧＰＲ３７、ＧＰＲ３７Ｌ
１、ＧＰＲ３９、ＧＰＲ４０、ＧＰＲ４２、ＧＰＲ４２、ＧＰＲ４５、ＧＰＲ５０、ＧＰ
Ｒ５２、ＧＰＲ５５、ＧＰＲ６、ＧＰＲ６１、ＧＰＲ６２、ＧＰＲ６３、ＧＰＲ６５、Ｇ
ＰＲ６８、ＧＰＲ７５、ＧＰＲ７８、ＧＰＲ７９、ＧＰＲ８２、ＧＰＲ８３、ＧＰＲ８４
、ＧＰＲ８５、ＧＰＲ８７、ＧＰＲ８８、ＧＰＲ１０１、ＧＰＲ１０７、ＧＰＲ１３２、
ＧＰＲ１３５、ＧＰＲ１３７、ＧＰＲ１３９、ＧＰＲ１４１、ＧＰＲ１４２、ＧＰＲ１４
３、ＧＰＲ１４６、ＧＰＲ１４８、ＧＰＲ１４９、ＧＰＲ１５、ＧＰＲ１５０、ＧＰＲ１
５１、ＧＰＲ１５２、ＧＰＲ１５３、ＧＰＲ１５６、ＧＰＲ１５７、ＧＰＲ１５８、ＧＰ
Ｒ１６０、ＧＰＲ１６１、ＧＰＲ１６２、ＧＰＲ１７１、ＧＰＲ１７３、ＧＰＲ１７４、
ＧＰＲ１７６、ＧＰＲ１７９、ＧＰＲ１８２、ＧＰＲ１８３、ＧＰＲＣ５Ａ、ＧＰＲＣ５
Ｂ、ＧＰＲＣ５Ｃ、ＧＰＲＣ５Ｄ、ＧＰＲＣ６Ａ、ＧＲＭ１、ＧＲＭ２、ＧＲＭ３、ＧＲ
Ｍ４、ＧＲＭ５、ＧＲＭ６、ＧＲＭ７、ＧＲＭ８、ＧＲＰＲ、ＨＣＡＲ１、ＨＣＡＲ２、
ＨＣＡＲ３、ＨＣＲＴＲ１、ＨＣＲＴＲ２、ＨＲＨ１、ＨＲＨ２、ＨＲＨ３、ＨＲＨ４、
ＨＴＲ１Ａ、ＨＴＲ１Ｂ、ＨＴＲ１Ｄ、ＨＴＲ１Ｅ、ＨＴＲ１Ｆ、ＨＴＲ２Ａ、ＨＴＲ２
Ｂ、ＨＴＲ２Ｃ、ＨＴＲ４、ＨＴＲ５Ａ、ＨＴＲ５ＢＰ、ＨＴＲ６、ＨＴＲ７、ＫＩＳＳ
１Ｒ、ＬＧＲ４、ＬＧＲ５、ＬＧＲ６、ＬＨＣＧＲ、ＬＰＡＲ１、ＬＰＡＲ２、ＬＰＡＲ
３、ＬＰＡＲ４、ＬＰＡＲ５、ＬＰＡＲ６、ＬＴＢ４Ｒ、ＬＴＢ４Ｒ２、ＭＡＳ１、ＭＡ
Ｓ１Ｌ、ＭＣ１Ｒ、ＭＣ２Ｒ、ＭＣ３Ｒ、ＭＣ４Ｒ、ＭＣ５Ｒ、ＭＣＨＲ１、ＭＣＨＲ２
、ＭＬＮＲ、ＭＲＧＰＲＤ、ＭＲＧＰＲＥ、ＭＲＧＰＲＦ、ＭＲＧＰＲＧ、ＭＲＧＰＲＸ
１、ＭＲＧＰＲＸ２、ＭＲＧＰＲＸ３、ＭＲＧＰＲＸ４、ＭＴＮＲ１Ａ、ＭＴＮＲ１Ｂ、
ＮＭＢＲ、ＮＭＵＲ１、ＮＭＵＲ２、ＮＰＢＷＲ１、ＮＰＢＷＲ２、ＮＰＦＦＲ１、ＮＰ
ＦＦＲ２、ＮＰＳＲ１、ＮＰＹ１Ｒ、ＮＰＹ２Ｒ、ＮＰＹ４Ｒ、ＮＰＹ５Ｒ、ＮＰＹ６Ｒ
、ＮＴＳＲ１、ＮＴＳＲ２、ＯＰＮ３、ＯＰＮ４、ＯＰＮ５、ＯＰＲＤ１、ＯＰＲＫ１、
ＯＰＲＬ１、ＯＰＲＭ１、ＯＲ５１Ｅ１、ＯＸＥＲ１、ＯＸＧＲ１、ＯＸＴＲ、Ｐ２ＲＹ
１、Ｐ２ＲＹ１０、Ｐ２ＲＹ１１、Ｐ２ＲＹ１２、Ｐ２ＲＹ１３、Ｐ２ＲＹ１４、Ｐ２Ｒ
Ｙ２、Ｐ２ＲＹ４、Ｐ２ＲＹ６、Ｐ２ＲＹ８、ＰＲＬＨＲ、ＰＲＯＫＲ１、ＰＲＯＫＲ２
、ＰＴＡＦＲ、ＰＴＧＤＲ、ＰＴＧＤＲ２、ＰＴＧＥＲ１、ＰＴＧＥＲ２、ＰＴＧＥＲ３
、ＰＴＧＥＲ４、ＰＴＧＦＲ、ＰＴＧＩＲ、ＰＴＨ１Ｒ、ＰＴＨ２Ｒ、ＱＲＦＰＲ、ＲＸ
ＦＰ１、ＲＸＦＰ２、ＲＸＦＰ３、ＲＸＦＰ４、Ｓ１ＰＲ１、Ｓ１ＰＲ２、Ｓ１ＰＲ３、
Ｓ１ＰＲ４、Ｓ１ＰＲ５、ＳＣＴＲ、ＳＭＯ、ＳＳＴＲ１、ＳＳＴＲ２、ＳＳＴＲ３、Ｓ
ＳＴＲ４、ＳＳＴＲ５、ＳＵＣＮＲ１、ＴＡＡＲ１、ＴＡＡＲ２、ＴＡＡＲ３、ＴＡＡＲ
４Ｐ、ＴＡＡＲ５、ＴＡＡＲ６、ＴＡＡＲ８、ＴＡＡＲ９、ＴＡＣＲ１、ＴＡＣＲ２、Ｔ
ＡＣＲ３、ＴＡＳ１Ｒ１、ＴＡＳ１Ｒ２、ＴＡＳ１Ｒ３、ＴＡＳ２Ｒ１、ＴＡＳ２Ｒ１０
、ＴＡＳ２Ｒ１３、ＴＡＳ２Ｒ１４、ＴＡＳ２Ｒ１６、ＴＡＳ２Ｒ１９、ＴＡＳ２Ｒ２０
、ＴＡＳ２Ｒ３、ＴＡＳ２Ｒ３０、ＴＡＳ２Ｒ３１、ＴＡＳ２Ｒ３８、ＴＡＳ２Ｒ３９、
ＴＡＳ２Ｒ４、ＴＡＳ２Ｒ４０、ＴＡＳ２Ｒ４１、ＴＡＳ２Ｒ４２、ＴＡＳ２Ｒ４３、Ｔ
ＡＳ２Ｒ４５、ＴＡＳ２Ｒ４６、ＴＡＳ２Ｒ５、ＴＡＳ２Ｒ５０、ＴＡＳ２Ｒ６０、ＴＡ
Ｓ２Ｒ７、ＴＡＳ２Ｒ８、ＴＡＳ２Ｒ９、ＴＢＸＡ２Ｒ、ＴＰＲＡ１、ＴＲＨＲ、ＴＳＨ
Ｒ、ＵＴＳ２Ｒ、ＶＩＰＲ１、ＶＩＰＲ２、およびＸＣＲ１を含む。
膜貫通および膜結合性の免疫受容体：
特定の態様では、本明細書で提供される方法における使用のための複合体は、脂質およ
び標的タンパク質をコードするポリヌクレオチド（例えば、ｍＲＮＡ）を含み、標的タン
パク質は、パターン認識受容体（ＰＲＲ）、トール様受容体（ＴＬＲ）、キラー活性化お
よびキラー抑制受容体（ＫＡＲおよびＫＩＲ）、補体受容体、Ｆｃ受容体、Ｂ細胞受容体
、およびＴ細胞受容体（例えば、ＴＣＲ－α、ＴＣＲ－β、ＣＤ３、ζ－鎖アクセサリー
、ＣＤ４、およびＣＤ８）ならびに主要組織適合複合体を含む。
パターン認識受容体（ＰＲＲ）の非限定的な例は、マンノース受容体（ＭＲ）、アシア
ロ糖タンパク質受容体ファミリー（例えば、アシアロ糖タンパク質受容体マクロファージ
ガラクトース型レクチン（ＭＧＬ））、ＤＣ－ＳＩＧＮ（ＣＬＥＣ４Ｌ）、ランゲリン（
ＣＬＥＣ４Ｋ）、骨髄系ＤＡＰ１２会合レクチン（ＭＤＬ）－１（ＣＬＥＣ５Ａ）、デク
チン１／ＣＬＥＣ７Ａ、ＤＮＧＲ１／ＣＬＥＣ９Ａ、骨髄系Ｃ型レクチン様受容体（ＭＩ
ＣＬ）（ＣＬＥＣ１２Ａ）、ＣＬＥＣ２（ＣＬＥＣ１Ｂとも称される）、ＣＬＥＣ１２Ｂ
、およびＤＣ免疫受容体（ＤＣＩＲ）サブファミリー（例えば、ＤＣＩＲ／ＣＬＥＣ４Ａ
、デクチン２／ＣＬＥＣ６Ａ、血液ＤＣ抗原２（ＢＤＣＡ２）（ＣＬＥＣ４Ｃ）、および
マクロファージ誘導性Ｃ型レクチン（ＣＬＥＣ４Ｅ））を含む。
特定の態様では、本明細書で提供される方法における使用のための複合体は、脂質およ
び標的タンパク質をコードするポリヌクレオチド（例えば、ｍＲＮＡ）を含み、標的タン
パク質は、トール様受容体（ＴＬＲ）である。ＴＬＲは、自然免疫系において重要な役割
を果たすタンパク質のクラスである。それらは、微生物由来の保存された分子を構造的に
認識し、免疫応答を活性化するマクロファージおよび樹状細胞などの細胞において通常発
現される、１回膜貫通非触媒性受容体である。ＴＬＲの非限定的な例は、ＴＬＲ１、ＴＬ
Ｒ２、ＴＬＲ３、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ６、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９、ＴＬ
Ｒ１０、ＴＬＲ１１、ＴＬＲ１２、およびＴＬＲ１３を含む。
Ｆｃ受容体（例えば、Ｆｃγ受容体、Ｆｃα受容体、およびＦｃε受容体）の非限定的
な例は、多量体免疫グロブリン受容体（ｐｌｇＲ）、ＦｃγＲＩ（ＣＤ６４）、ＦｃγＲ
ＩＩＡ（ＣＤ３２）、ＦｃγＲＩＩＢ１（ＣＤ３２）、ＦｃγＲＩＩＢ２（ＣＤ３２）、
ＦｃγＲＩＩＩＡ（ＣＤ１６ａ）、ＦｃγＲＩＩＩＢ（ＣＤ１６ｂ）、ＦｃεＲＩ、Ｆｃ
εＲＩＩ（ＣＤ２３）、ＦｃαＲ１（ＣＤ８９）、Ｆｃα／μＲ、およびＦｃＲｎを含む
。
特定の態様では、本明細書で提供される方法における使用のための複合体は、脂質およ
び標的タンパク質をコードするポリヌクレオチド（例えば、ｍＲＮＡ）を含み、標的タン
パク質は、次の：ＣＤ２７、ＣＤ４０、ＯＸ４０、ＧＩＴＲ、ＣＤ１３７、ＰＤ－１、Ｃ
ＴＬＡ－４、ＰＤ－Ｌ１、ＴＩＧＩＴ、Ｔ細胞免疫グロブリンドメインおよびムチンドメ
イン３（ＴＩＭ３）、Ｔ細胞活性化のＶ－ドメインＩｇ抑制因子（ＶＩＳＴＡ）、ＣＤ２
８、ＣＤ１２２、ＩＣＯＳ、Ａ２ＡＲ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＢおよびＴリンパ球ア
テニュエータ（ＢＴＬＡ）、インドールアミン２，３－ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）、キ
ラー細胞免疫グロブリン様受容体（ＫＩＲ）、リンパ球活性化遺伝子－３（ＬＡＧ３）か
ら選択される免疫受容体である。
特定の態様では、本明細書で提供される方法における使用のための複合体は、脂質およ
び標的タンパク質をコードするポリヌクレオチド（例えば、ｍＲＮＡ）を含み、標的タン
パク質は、主要組織適合複合体ＩもしくはＩＩ（ＭＨＣ ＩもしくはＭＨＣ ＩＩ）、ま
たはペプチド断片を有する複合体中のＭＨＣの一部である。ＭＨＣタンパク質は獲得免疫
系の一部であり、加工されたペプチド断片のＴ細胞への提示および体液性免疫系活性化の
誘発において重要な役割を果たす。ＭＨＣタンパク質の非限定的な例は、ＨＬＡ－Ａ、Ｈ
ＬＡ－Ｂ、ＨＬＡ－Ｃ、ＨＬＡ－ＤＰＡ１、ＨＬＡ－ＤＰＢ１、ＨＬＡ－ＤＱＡ１、ＨＬ
Ａ－ＤＱＢ１、ＨＬＡ－ＤＲＡ、およびＨＬＡ－ＤＲＢ１を含む。
サイトカイン受容体：
特定の態様では、本明細書で提供される方法における使用のための複合体は、脂質およ
び標的タンパク質をコードするポリヌクレオチド（例えば、ｍＲＮＡ）を含み、標的タン
パク質は、サイトカイン受容体（例えば、インターロイキン（ＩＬ）受容体または線維芽
細胞増殖因子（ＦＧＦ）受容体）である。サイトカイン受容体の非限定的な例は、神経成
長因子（ＮＧＦ）、ミオスタチン（ＧＤＦ－８）、増殖分化因子（ＧＤＦ）、顆粒球マク
ロファージコロニー刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）、顆粒球コロニー刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）
、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、エリスロポエチン（ＥＰＯ）、トロンボポチエン（
ＴＰＯ）、上皮増殖因子（ＥＧＦ）、線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）、血管内皮増殖因子
（ＶＥＧＦ）、組織メタロプロテアーゼ阻害物質（ＴＩＭＰ）、マトリックスメタロプロ
テアーゼ（ＭＭＰ）、マクロファージ刺激因子（ＭＳＦ）、毛様体神経栄養因子（ＣＮＴ
Ｆ）、カルジオトロフィン、オンコスタチンＭ、白血病抑制因子（ＬＩＦ）、形質転換増
殖因子（ＴＧＦ）－αおよび－β、インターフェロン（ＩＦＮ）－βおよび－γ、ならび
に腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）αに対する受容体を含む。ある特定の実施形態では、本明細書
で提供される方法における使用のための複合体は、脂質および標的タンパク質をコードす
るポリヌクレオチド（例えば、ｍＲＮＡ）を含み、標的タンパク質はｇｐ１３０であり、
これは、ＩＬ－６、ＩＬ－１１、ＩＬ－２７、白血病抑制因子（ＬＩＦ）、オンコスタチ
ンＭ（ＯＳＭ）、毛様体神経栄養因子（ＣＮＴＦ）、カルジオトロフィン１（ＣＴ－１）
、およびカルジオトロフィン様サイトカイン（ＣＬＣ）を含むいくつかの関連するサイト
カインによって利用される共有のレセプターである。
特定の態様では、本明細書で提供される方法における使用のための複合体は、脂質およ
び標的タンパク質をコードするポリヌクレオチド（例えば、ｍＲＮＡ）を含み、標的タン
パク質は、インターロイキン（ＩＬ）受容体である。ＩＬ受容体の非限定的な例は、ＩＬ
－１受容体、ＩＬ－２受容体、ＩＬ－３受容体、ＩＬ－４受容体、ＩＬ－５受容体、ＩＬ
－６受容体、ＩＬ－７受容体、ＩＬ－８受容体、ＩＬ－９受容体、ＩＬ－１０受容体、Ｉ
Ｌ－１１受容体、ＩＬ－１２受容体、ＩＬ－１３受容体、ＩＬ－１４受容体、ＩＬ－１５
受容体、ＩＬ－１６受容体、ＩＬ－１７受容体、ＩＬ－１８受容体、ＩＬ－１９受容体、
ＩＬ－２０受容体、ＩＬ－２１受容体、ＩＬ－２２受容体、ＩＬ－２３受容体、ＩＬ－２
４受容体、ＩＬ－２５受容体、ＩＬ－２６受容体，ＩＬ－２７受容体、ＩＬ－２８受容体
、ＩＬ－２９受容体、ＩＬ－３０受容体、ＩＬ－３１受容体、ＩＬ－３２受容体、ＩＬ－
３３受容体、ＩＬ－３５受容体、およびＩＬ－３６受容体を含む。
特定の態様では、本明細書で提供される方法における使用のための複合体は、脂質およ
び標的タンパク質をコードするポリヌクレオチド（例えば、ｍＲＮＡ）を含み、標的タン
パク質は、線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）受容体（ＦＧＦＲ）である。ＦＧＦ受容体の非
限定的な例は、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、およびＦＧＦＲ４を含む。
特定の態様では、本明細書で提供される方法における使用のための複合体は、脂質およ
び標的タンパク質をコードするポリヌクレオチド（例えば、ｍＲＮＡ）を含み、標的タン
パク質は、腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）メンバーである。Ｔ
ＮＦＲＳＦメンバーの非限定的な例は、ＴＮＦＲＳＦ１Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１Ｂ、ＴＮＦＲ
ＳＦ３、ＴＮＦＲＳＦ４、ＴＮＦＲＳＦ５、ＴＮＦＲＳＦ６、ＴＮＦＲＳＦ６Ｂ、ＴＮＦ
ＲＳＦ７、ＴＮＦＲＳＦ８、ＴＮＦＲＳＦ９、ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ
、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｃ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｄ、ＴＮＦＲＳＦ１１Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１１Ｂ
、ＴＮＦＲＳＦ１２Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１３Ｂ、ＴＮＦＲＳＦ１３Ｃ、ＴＮＦＲＳＦ１４、
ＴＮＦＲＳＦ１６、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＴＮＦＲＳＦ１８、ＴＮＦＲＳＦ１９、ＴＮＦＲ
ＳＦ２１、ＴＮＦＲＳＦ２５、およびＴＮＦＲＳＦ２７を含む。
イオンチャネル；
特定の態様では、本明細書で提供される方法における使用のための複合体は、脂質およ
び標的タンパク質をコードするポリヌクレオチド（例えば、ｍＲＮＡ）を含み、標的タン
パク質は、イオンチャネルである。
イオンチャネルには３００種を超える型があり、それらは、ゲーティングの性質、それ
らのゲートを通過するイオン種、ゲート（孔）の数、およびタンパク質の局在によって分
類することができる。例えば、電位依存性イオンチャネルは、電位依存性ナトリウムチャ
ネル、電位依存性カルシウムチャネル、電位依存性カリウムチャネル（Ｋｖ）、過分極活
性化環状ヌクレオチド依存性チャネル、電位依存性プロトンチャネルを含むが、これらに
限定されない。リガンド依存性イオンチャネルは、カチオン透過性「ニコチン性」アセチ
ルコリン受容体、イオンチャネル型グルタミン酸依存性受容体およびＡＴＰ依存性Ｐ２Ｘ
受容体、ならびにアニオン透過性γ－アミノ酪酸依存性ＧＡＢＡ受容体を含むが、これら
に限定されない。イオン種によるイオンチャネルの分類は、クロライドチャネル、カリウ
ムチャネル（例えば、ＡＴＰ感受性カリウムイオンチャネル）、ナトリウムチャネル（例
えば、ＮａＶｓ、ＥＮａＣｓ、ＣａＶｓ）、カルシウムチャネル、プロトンチャネル、お
よび非選択的カチオンチャネルを含むが、これらに限定されない。
電位依存性ナトリウムチャネルの非限定的な例は、ＳＣＮ１Ａ、ＳＣＮ１Ｂ、ＳＣＮ２
Ａ、ＳＣＮ２Ｂ、ＳＣＮ３Ａ、ＳＣＮ３Ｂ、ＳＣＮ４Ａ、ＳＣＮ５Ａ、ＳＣＮ７Ａ、ＳＣ
Ｎ８Ａ、ＳＣＮ９Ａ、ＳＣＮ１０Ａ、およびＳＣＮ１１Ａを含む。
電位依存性カルシウムチャネルの非限定的な例は、ＣＡＣＮＡ１Ａ、ＣＡＣＮＡ１Ｂ、
ＣＡＣＮＡ１Ｃ、ＣＡＣＮＡ１Ｄ、ＣＡＣＮＡ１Ｅ、ＣＡＣＮＡ１Ｆ、ＣＡＣＮＡ１Ｇ、
ＣＡＣＮＡ１Ｈ、ＣＡＣＮＡ１Ｉ、およびＣＡＣＮＡ１Ｓを含む。
一過性受容器電位カチオンチャネルの非限定的な例は、ＴＲＰＡ１、ＴＲＰＣ１、ＴＲ
ＰＣ２、ＴＲＰＣ３、ＴＲＰＣ４、ＴＲＰＣ５、ＴＲＰＣ６、ＴＲＰＣ７、ＴＲＰＭ１、
ＴＲＰＭ２、ＴＲＰＭ３、ＴＲＰＭ４、ＴＲＰＭ５、ＴＲＰＭ６、ＴＲＰＭ７、ＴＲＰＭ
８、ＭＣＯＬＮ１、ＭＣＯＬＮ２、ＭＣＯＬＮ３、ＰＫＤ１、ＰＫＤ２、ＰＫＤ２Ｌ１、
ＰＫＤ２Ｌ２、ＴＲＰＶ１、ＴＲＰＶ２、ＴＲＰＶ３、ＴＲＰＶ４、ＴＲＰＶ５、および
ＴＲＰＶ６を含む。
ＣａｔＳｐｅｒチャネルの非限定的な例は、ＣＡＴＳＰＥＲ１、ＣＡＴＳＰＥＲ２、Ｃ
ＡＴＳＰＥＲ３、およびＣＡＴＳＰＥＲ４を含む。
二孔チャネルの非限定的な例は、ＴＰＣＮ１およびＴＰＣＮ２を含む。
環状ヌクレオチド依存性チャネルの非限定的な例は、ＣＮＧＡ１、ＣＮＧＡ２、ＣＮＧ
Ａ３、ＣＮＧＡ４、ＣＮＧＢ１、ＣＮＧＢ３、ＨＣＮ１、ＨＣＮ２、ＨＣＮ３、およびＨ
ＣＮ４を含む。
カルシウム活性化カリウムチャネルの非限定的な例は、ＫＣＮＭＡ１、ＫＣＮＮ１、Ｋ
ＣＮＮ２、ＫＣＮＮ３、ＫＣＮＮ４、ＫＣＮＴ１、ＫＣＮＴ２、およびＫＣＮＵ１を含む
。
電位依存性カリウムチャネルの非限定的な例は、ＫＣＮＡ１、ＫＣＮＡ２、ＫＣＮＡ３
、ＫＣＮＡ４、ＫＣＮＡ５、ＫＣＮＡ６、ＫＣＮＡ７、ＫＣＮＡ１０、ＫＣＮＢ１、ＫＣ
ＮＢ２、ＫＣＮＣ１、ＫＣＮＣ２、ＫＣＮＣ３、ＫＣＮＣ４、ＫＣＮＤ１、ＫＣＮＤ２、
ＫＣＮＤ３、ＫＣＮＦ１、ＫＣＮＧ１、ＫＣＮＧ２、ＫＣＮＧ３、ＫＣＮＧ４、ＫＣＮＨ
１、ＫＣＮＨ２、ＫＣＮＨ３、ＫＣＮＨ４、ＫＣＮＨ５、ＫＣＮＨ６、ＫＣＮＨ７、ＫＣ
ＮＨ８、ＫＣＮＱ１、ＫＣＮＱ２、ＫＣＮＱ３、ＫＣＮＱ４、ＫＣＮＱ５、ＫＣＮＳ１、
ＫＣＮＳ２、ＫＣＮＳ３、ＫＣＮＶ１、およびＫＣＮＶ２を含む。
内向き整流性カリウムチャネルの非限定的な例は、ＫＣＮＪ１、ＫＣＮＪ２、ＫＣＮＪ
３、ＫＣＮＪ４、ＫＣＮＪ５、ＫＣＮＪ６、ＫＣＮＪ８、ＫＣＮＪ９、ＫＣＮＪ１０、Ｋ
ＣＮＪ１１、ＫＣＮＪ１２、ＫＣＮＪ１３、ＫＣＮＪ１４、ＫＣＮＪ１５、ＫＣＮＪ１６
、およびＫＣＮＪ１８を含む。
２Ｐカリウムチャネルの非限定的な例は、ＫＣＮＫ１、ＫＣＮＫ２、ＫＣＮＫ３、ＫＣ
ＮＫ４、ＫＣＮＫ５、ＫＣＮＫ６、ＫＣＮＫ７、ＫＣＮＫ９、ＫＣＮＫ１０、ＫＣＮＫ１
２、ＫＣＮＫ１３、ＫＣＮＫ１５、ＫＣＮＫ１６、ＫＣＮＫ１７、およびＫＣＮＫ１８を
含む。
水素電位依存性イオンチャネルの非限定的な例は、ＨＶＣＮ１を含む。
イオンチャネル型５－ＨＴ（セロトニン）受容体の非限定的な例は、ＨＴＲ３Ａ、ＨＴ
Ｒ３Ｂ、ＨＴＲ３Ｃ、ＨＴＲ３Ｄ、およびＨＴＲ３Ｅを含む。
ニコチン性アセチルコリン受容体の非限定的な例は、ＣＨＲＮＡ１、ＣＨＲＮＡ２、Ｃ
ＨＲＮＡ３、ＣＨＲＮＡ４、ＣＨＲＮＡ５、ＣＨＲＮＡ６、ＣＨＲＮＡ７、ＣＨＲＮＡ９
、ＣＨＲＮＡ１０、ＣＨＲＮＢ１、ＣＨＲＮＢ２、ＣＨＲＮＢ３、ＣＨＲＮＢ４、ＣＨＲ
ＮＤ、ＣＨＲＮＥ、およびＣＨＲＮＧを含む。
ＧＡＢＡ（Ａ）受容体の非限定的な例は、ＧＡＢＲＡ１、ＧＡＢＲＡ２、ＧＡＢＲＡ３
、ＧＡＢＲＡ４、ＧＡＢＲＡ５、ＧＡＢＲＡ６、ＧＡＢＲＢ１、ＧＡＢＲＢ２、ＧＡＢＲ
Ｂ３、ＧＡＢＲＤ、ＧＡＢＲＥ、ＧＡＢＲＧ１、ＧＡＢＲＧ２、ＧＡＢＲＧ３、ＧＡＢＲ
Ｐ、ＧＡＢＲＱ、ＧＡＢＲＲ１、ＧＡＢＲＲ２、およびＧＡＢＲＲ３を含む。
イオンチャネル型グルタミン酸受容体の非限定的な例は、ＧＲＩＡ１、ＧＲＩＡ２、Ｇ
ＲＩＡ３、ＧＲＩＡ４、ＧＲＩＤ１、ＧＲＩＤ２、ＧＲＩＫ１、ＧＲＩＫ２、ＧＲＩＫ３
、ＧＲＩＫ４、ＧＲＩＫ５、ＧＲＩＮ１、ＧＲＩＮ２Ａ、ＧＲＩＮ２Ｂ、ＧＲＩＮ２Ｃ、
ＧＲＩＮ２Ｄ、ＧＲＩＮ３Ａ、およびＧＲＩＮ３Ｂを含む。
グリシン受容体の非限定的な例は、ＧＬＲＡ１、ＧＬＲＡ２、ＧＬＲＡ３、およびＧＬ
ＲＡ４を含む。
イオンチャネル型プリン受容体の非限定的な例は、Ｐ２ＲＸ１、Ｐ２ＲＸ２、Ｐ２ＲＸ
３、Ｐ２ＲＸ４、Ｐ２ＲＸ５、Ｐ２ＲＸ６、およびＰ２ＲＸ７を含む。
亜鉛活性化チャネルの非限定的な例は、ＺＡＣＮを含む。
酸感受性（プロトン依存性）イオンチャネルの非限定的な例は、ＡＳＩＣ１、ＡＳＩＣ
２、ＡＳＩＣ３、ＡＳＩＣ４を含む。
アクアポリンの非限定的な例は、ＡＱＰ１、ＡＱＰ２、ＡＱＰ３、ＡＱＰ４、ＡＱＰ５
、ＡＱＰ６、ＡＱＰ７、ＡＱＰ８、ＡＱＰ９、ＡＱＰ１０、ＡＱＰ１１、ＡＱＰ１２Ａ、
ＡＱＰ１２Ｂ、およびＭＩＰを含む。
電位感受性クロライドチャネルの非限定的な例は、ＣＬＣＮ１、ＣＬＣＮ２、ＣＬＣＮ
３、ＣＬＣＮ４、ＣＬＣＮ５、ＣＬＣＮ６、ＣＬＣＮ７、ＣＬＣＮＫＡ、およびＣＬＣＮ
ＫＢを含む。
嚢胞性線維症膜貫通型コンダクタンス制御因子の非限定的な例は、ＣＦＴＲを含む。
カルシウム活性化クロライドチャネル（ＣａＣＣ）の非限定的な例は、ＡＮＯ１、ＡＮ
Ｏ２、ＡＮＯ３、ＡＮＯ４、ＡＮＯ５、ＡＮＯ６、ＡＮＯ７、ＡＮＯ８、ＡＮＯ９、ＡＮ
Ｏ１０、ＢＥＳＴ１、ＢＥＳＴ２、ＢＥＳＴ３、およびＢＥＳＴ４を含む。
クロライド細胞内チャネルの非限定的な例は、ＣＬＩＣ１、ＣＬＩＣ２、ＣＬＩＣ３、
ＣＬＩＣ４、ＣＬＩＣ５、およびＣＬＩＣ６を含む。
ギャップ結合タンパク質（コネキシン）の非限定的な例は、ＧＪＡ１、ＧＪＡ３、ＧＪ
Ａ４、ＧＪＡ５、ＧＪＡ６Ｐ、ＧＪＡ８、ＧＪＡ９、ＧＪＡ１０、ＧＪＢ１、ＧＪＢ２、
ＧＪＢ３、ＧＪＢ４、ＧＪＢ５、ＧＪＢ６、ＧＪＢ７、ＧＪＣ１、ＧＪＣ２、ＧＪＣ３、
ＧＪＤ２、ＧＪＤ３、ＧＪＤ４、およびＧＪＥ１を含む。
ＩＰ３受容体の非限定的な例は、ＩＴＰＲ１、ＩＴＰＲ２、およびＩＴＰＲ３を含む。
パネキシンの非限定的な例は、ＰＡＮＸ１、ＰＡＮＸ２、およびＰＡＮＸ３を含む。
リアノジン受容体の非限定的な例は、ＲＹＲ１、ＲＹＲ２、およびＲＹＲ３を含む。
非選択的ナトリウム漏洩チャネルの非限定的な例は、ＮＡＬＣＮを含む。
非電位依存性ナトリウムチャネルの非限定的な例は、ＳＣＮＮ１Ａ、ＳＣＮＮ１Ｂ、Ｓ
ＣＮＮ１Ｄ、およびＳＣＮＮ１Ｇを含む。
溶質輸送体タンパク質：
特定の態様では、本明細書で提供される方法における使用のための複合体は、脂質およ
び標的タンパク質をコードするポリヌクレオチド（例えば、ｍＲＮＡ）を含み、標的タン
パク質は、溶質輸送体である。溶質輸送体タンパク質は、脂質膜の一方から他方に溶質を
輸送する能力によって特徴づけられる膜内在性タンパク質である。このタンパク質の群は
、溶質を電気化学的勾配に逆らって移動させる二次性能動輸送体、および溶質をそれらの
電気化学的勾配の方向に移動させる促進性輸送体を含む。溶質輸送体は、３００種を超え
るタンパク質を包含する５２種のファミリーにまとめられる。５２種のファミリーおよび
その非限定的な例となるメンバーを以下に示す：
（１）高親和性グルタミン酸および中性アミノ酸輸送体ファミリーであって、非限定的な
例は、ＳＬＣ１Ａ１、ＳＬＣ１Ａ２、ＳＬＣ１Ａ３、ＳＬＣ１Ａ４、ＳＬＣ１Ａ５、ＳＬ
Ｃ１Ａ６、およびＳＬＣ１Ａ７を含み；
（２）促進性グルコース（ＧＬＵＴ）輸送体ファミリーであって、非限定的な例は、ＳＬ
Ｃ２Ａ１、ＳＬＣ２Ａ２、ＳＬＣ２Ａ３、ＳＬＣ２Ａ４、ＳＬＣ２Ａ５、ＳＬＣ２Ａ６、
ＳＬＣ２Ａ７、ＳＬＣ２Ａ８、ＳＬＣ２Ａ９、ＳＬＣ２Ａ１０、ＳＬＣ２Ａ１１、ＳＬＣ
２Ａ１２、ＳＬＣ２Ａ１３、およびＳＬＣ２Ａ１４を含み；
（３）ヘテロ二量体アミノ酸ファミリーの大サブユニットであって、非限定的な例は、Ｓ
ＬＣ３Ａ１およびＳＬＣ３Ａ２を含み；
（４）重炭酸塩ファミリーであって、例は、ＳＬＣ４Ａ１、ＳＬＣ４Ａ２、ＳＬＣ４Ａ３
、ＳＬＣ４Ａ４、ＳＬＣ４Ａ５、ＳＬＣ４Ａ６、ＳＬＣ４Ａ７、ＳＬＣ４Ａ８、ＳＬＣ４
Ａ９、ＳＬＣ４Ａ１０、およびＳＬＣ４Ａ１１を含み；
（５）ナトリウム・グルコース共輸送体ファミリーであって、例は、ＳＬＣ５Ａ１、ＳＬ
Ｃ５Ａ２、ＳＬＣ５Ａ３、ＳＬＣ５Ａ４、ＳＬＣ５Ａ５、ＳＬＣ５Ａ６、ＳＬＣ５Ａ７、
ＳＬＣ５Ａ８、ＳＬＣ５Ａ９、ＳＬＣ５Ａ１０、ＳＬＣ５Ａ１１、およびＳＬＣ５Ａ１２
を含み；
（６）ナトリウムおよびクロライド依存性ナトリウム：神経伝達物質共輸送体ファミリー
であって、例は、ＳＬＣ６Ａ１、ＳＬＣ６Ａ２、ＳＬＣ６Ａ３、ＳＬＣ６Ａ４、ＳＬＣ６
Ａ５、ＳＬＣ６Ａ６、ＳＬＣ６Ａ７、ＳＬＣ６Ａ８、ＳＬＣ６Ａ９、ＳＬＣ６Ａ１０、Ｓ
ＬＣ６Ａ１１、ＳＬＣ６Ａ１２、ＳＬＣ６Ａ１３、ＳＬＣ６Ａ１４、ＳＬＣ６Ａ１５、Ｓ
ＬＣ６Ａ１６、ＳＬＣ６Ａ１７、ＳＬＣ６Ａ１８、ＳＬＣ６Ａ１９、およびＳＬＣ６Ａ２
０を含み；
（７）カチオン性アミノ酸輸送体／糖タンパク質関連ファミリーであって、非限定的な例
は、（ｉ）カチオン性アミノ酸輸送体（ＳＬＣ７Ａ１、ＳＬＣ７Ａ２、ＳＬＣ７Ａ３、Ｓ
ＬＣ７Ａ４）および（ｉｉ）ヘテロ二量体アミノ酸輸送体の糖タンパク質関連／小または
触媒サブユニット（ＳＬＣ７Ａ５、ＳＬＣ７Ａ６、ＳＬＣ７Ａ７、ＳＬＣ７Ａ８、ＳＬＣ
７Ａ９、ＳＬＣ７Ａ１０、ＳＬＣ７Ａ１１、ＳＬＣ７Ａ１３、ＳＬＣ７Ａ１４）を含み；
（８）Ｎａ＋／Ｃａ２＋交換輸送体ファミリーであって、非限定的な例は、ＳＬＣ８Ａ１
、ＳＬＣ８Ａ２、およびＳＬＣ８Ａ３を含み；
（９）Ｎａ＋／Ｈ＋交換輸送体ファミリーであって、非限定的な例は、ＳＬＣ９Ａ１、Ｓ
ＬＣ９Ａ２、ＳＬＣ９Ａ３、ＳＬＣ９Ａ４、ＳＬＣ９Ａ５、ＳＬＣ９Ａ６、ＳＬＣ９Ａ７
、ＳＬＣ９Ａ８、ＳＬＣ９Ａ９、ＳＬＣ９Ａ１０、ＳＬＣ９Ａ１１、ＳＬＣ９Ｂ１、およ
びＳＬＣ９Ｂ２を含み；
（１０）ナトリウム胆汁酸塩共輸送ファミリーであって、非限定的な例は、ＳＬＣ１０Ａ
１、ＳＬＣ１０Ａ２、ＳＬＣ１０Ａ３、ＳＬＣ１０Ａ４、ＳＬＣ１０Ａ５、ＳＬＣ１０Ａ
６、およびＳＬＣ１０Ａ７を含み；
（１１）プロトン共役型金属イオン輸送体ファミリーであって、非限定的な例は、ＳＬＣ
１１Ａ１およびＳＬＣ１１Ａ２を含み；
（１２）電気的中性カチオン－Ｃｌ共輸送体ファミリーであって、非限定的な例は、ＳＬ
Ｃ１２Ａ１、ＳＬＣ１２Ａ１、ＳＬＣ１２Ａ２、ＳＬＣ１２Ａ３、ＳＬＣ１２Ａ４、ＳＬ
Ｃ１２Ａ５、ＳＬＣ１２Ａ６、ＳＬＣ１２Ａ７、ＳＬＣ１２Ａ８、およびＳＬＣ１２Ａ９
を含み；
（１３）Ｎａ＋－ＳＯ４２－／カルボン酸共輸送体ファミリーであって、非限定的な例は
、ＳＬＣ１３Ａ１、ＳＬＣ１３Ａ２、ＳＬＣ１３Ａ３、ＳＬＣ１３Ａ４、およびＳＬＣ１
３Ａ５を含み；
（１４）尿素輸送体ファミリーであって、非限定的な例は、ＳＬＣ１４Ａ１およびＳＬＣ
１４Ａ２を含み；
（１５）プロトンオリゴペプチド共輸送体ファミリーであって、非限定的な例は、ＳＬＣ
１５Ａ１、ＳＬＣ１５Ａ２、ＳＬＣ１５Ａ３、およびＳＬＣ１５Ａ４を含み；
（１６）モノカルボン酸輸送体ファミリーであって、非限定的な例は、ＳＬＣ１６Ａ１、
ＳＬＣ１６Ａ２、ＳＬＣ１６Ａ３、ＳＬＣ１６Ａ４、ＳＬＣ１６Ａ５、ＳＬＣ１６Ａ６、
ＳＬＣ１６Ａ７、ＳＬＣ１６Ａ８、ＳＬＣ１６Ａ９、ＳＬＣ１６Ａ１０、ＳＬＣ１６Ａ１
１、ＳＬＣ１６Ａ１２、ＳＬＣ１６Ａ１３、およびＳＬＣ１６Ａ１４を含み；
（１７）小胞グルタミン酸輸送体ファミリーであって、非限定的な例は、ＳＬＣ１７Ａ１
、ＳＬＣ１７Ａ２、ＳＬＣ１７Ａ３、ＳＬＣ１７Ａ４、ＳＬＣ１７Ａ５、ＳＬＣ１７Ａ６
、ＳＬＣ１７Ａ７、ＳＬＣ１７Ａ８、およびＳＬＣ１７Ａ９を含み；
（１８）小胞アミン輸送体ファミリーであって、非限定的な例は、ＳＬＣ１８Ａ１、ＳＬ
Ｃ１８Ａ２、およびＳＬＣ１８Ａ３を含み；
（１９）葉酸／チアミン輸送体ファミリーであって、非限定的な例は、ＳＬＣ１９Ａ１、
ＳＬＣ１９Ａ２、およびＳＬＣ１９Ａ３を含み；
（２０）ＩＩＩ型Ｎａ＋－リン酸共輸送体ファミリーであって、非限定的な例は、ＳＬＣ
２０Ａ１およびＳＬＣ２０Ａ２を含み；
（２１）有機アニオン輸送体ファミリーであって、非限定的な例は、（ｉ）サブファミリ
ー１ ＳＬＣＯ１Ａ２、ＳＬＣＯ１Ｂ１、ＳＬＣＯ１Ｂ３、およびＳＬＣＯ１Ｃ１；（ｉ
ｉ）サブファミリー２、ＳＬＣＯ２Ａ１およびＳＬＣＯ２Ｂ１を含み；（ｉｉｉ）サブフ
ァミリー３、ＳＬＣＯ３Ａ１；（ｉｖ）サブファミリー４、ＳＬＣＯ４Ａ１、ＳＬＣＯ４
Ｃ１；（ｖ）サブファミリー５、ＳＬＣＯ５Ａ１；ならびに（ｖｉ）サブファミリー６、
ＳＬＣＯ６Ａ１を含み；
（２２）有機カチオン／アニオン／双性イオン輸送体ファミリーであって、非限定的な例
は、ＳＬＣ２２Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ２、ＳＬＣ２２Ａ３、ＳＬＣ２２Ａ４、ＳＬＣ２２Ａ
５、ＳＬＣ２２Ａ６、ＳＬＣ２２Ａ７、ＳＬＣ２２Ａ８、ＳＬＣ２２Ａ９、ＳＬＣ２２Ａ
１０、ＳＬＣ２２Ａ１１、ＳＬＣ２２Ａ１２、ＳＬＣ２２Ａ１３、ＳＬＣ２２Ａ１４、Ｓ
ＬＣ２２Ａ１５、ＳＬＣ２２Ａ１６、ＳＬＣ２２Ａ１７、ＳＬＣ２２Ａ１８、ＳＬＣ２２
Ａ１８ＡＳ，ＳＬＣ２２Ａ１９、ＳＬＣ２２Ａ２０、ＳＬＣ２２Ａ２３、ＳＬＣ２２Ａ２
４、ＳＬＣ２２Ａ２５、およびＳＬＣ２２Ａ３１を含み；
（２３）Ｎａ＋依存性アスコルビン酸輸送体ファミリーであって、非限定的な例は、ＳＬ
Ｃ２３Ａ１、ＳＬＣ２３Ａ２、ＳＬＣ２３Ａ３、およびＳＬＣ２３Ａ４を含み；
（２４）Ｎａ＋／（Ｃａ２＋－Ｋ＋）交換輸送体ファミリーであって、非限定的な例は、
ＳＬＣ２４Ａ１、ＳＬＣ２４Ａ２、ＳＬＣ２４Ａ３、ＳＬＣ２４Ａ４、ＳＬＣ２４Ａ５、
およびＳＬＣ２４Ａ６を含み；
（２５）ミトコンドリアキャリアファミリーであって、非限定的な例は、ＳＬＣ２５Ａ１
、ＳＬＣ２５Ａ２、ＳＬＣ２５Ａ３、ＳＬＣ２５Ａ４、ＳＬＣ２５Ａ５、ＳＬＣ２５Ａ６
、ＳＬＣ２５Ａ７、ＳＬＣ２５Ａ８、ＳＬＣ２５Ａ９、ＳＬＣ２５Ａ１０、ＳＬＣ２５Ａ
１１、ＳＬＣ２５Ａ１２、ＳＬＣ２５Ａ１３、ＳＬＣ２５Ａ１４、ＳＬＣ２５Ａ１５、Ｓ
ＬＣ２５Ａ１６、ＳＬＣ２５Ａ１７、ＳＬＣ２５Ａ１８、ＳＬＣ２５Ａ１９，ＳＬＣ２５
Ａ２０、ＳＬＣ２５Ａ２１、ＳＬＣ２５Ａ２２、ＳＬＣ２５Ａ２３、ＳＬＣ２５Ａ２４、
ＳＬＣ２５Ａ２５、ＳＬＣ２５Ａ２６、ＳＬＣ２５Ａ２７、ＳＬＣ２５Ａ２８、ＳＬＣ２
５Ａ２９、ＳＬＣ２５Ａ３０、ＳＬＣ２５Ａ３１、ＳＬＣ２５Ａ３２、ＳＬＣ２５Ａ３３
、ＳＬＣ２５Ａ３４、ＳＬＣ２５Ａ３５、ＳＬＣ２５Ａ３６、ＳＬＣ２５Ａ３７，ＳＬＣ
２５Ａ３８、ＳＬＣ２５Ａ３９、ＳＬＣ２５Ａ４０、ＳＬＣ２５Ａ４１、ＳＬＣ２５Ａ４
２、ＳＬＣ２５Ａ４３、ＳＬＣ２５Ａ４４、ＳＬＣ２５Ａ４５、およびＳＬＣ２５Ａ４６
を含み；
（２６）多機能性アニオン交換輸送体ファミリーであって、非限定的な例は、ＳＬＣ２６
Ａ１、ＳＬＣ２６Ａ２、ＳＬＣ２６Ａ３、ＳＬＣ２６Ａ４、ＳＬＣ２６Ａ５、ＳＬＣ２６
Ａ６、ＳＬＣ２６Ａ７、ＳＬＣ２６Ａ８、ＳＬＣ２６Ａ９、ＳＬＣ２６Ａ１０、およびＳ
ＬＣ２６Ａ１１を含み；
（２７）脂肪酸輸送タンパク質ファミリーであって、非限定的な例は、ＳＬＣ２７Ａ１、
ＳＬＣ２７Ａ２、ＳＬＣ２７Ａ３、ＳＬＣ２７Ａ４、ＳＬＣ２７Ａ５、およびＳＬＣ２７
Ａ６を含み；
（２８）Ｎａ＋共役型ヌクレオシド輸送ファミリーであって、非限定的な例は、ＳＬＣ２
８Ａ１、ＳＬＣ２８Ａ２、およびＳＬＣ２８Ａ３を含み；
（２９）促進性ヌクレオシド輸送体ファミリーであって、非限定的な例は、ＳＬＣ２９Ａ
１、ＳＬＣ２９Ａ２、ＳＬＣ２９Ａ３、およびＳＬＣ２９Ａ４を含み；
（３０）亜鉛排出ファミリーであって、非限定的な例は、ＳＬＣ３０Ａ１、ＳＬＣ３０Ａ
２、ＳＬＣ３０Ａ３、ＳＬＣ３０Ａ４、ＳＬＣ３０Ａ５、ＳＬＣ３０Ａ６、ＳＬＣ３０Ａ
７、ＳＬＣ３０Ａ８、ＳＬＣ３０Ａ９、およびＳＬＣ３０Ａ１０を含み；
（３１）銅輸送体ファミリーであって、非限定的な例は、ＳＬＣ３１Ａ１およびＳＬＣ３
１Ａ２を含み；
（３２）小胞抑制性アミノ酸輸送体ファミリーであって、非限定的な例は、ＳＬＣ３２Ａ
１を含み；
（３３）アセチル－ＣｏＡ輸送体ファミリーであって、非限定的な例は、ＳＬＣ３３Ａ１
を含み；
（３４）ＩＩ型Ｎａ＋－リン酸共輸送体ファミリーであって、非限定的な例は、ＳＬＣ３
４Ａ１、ＳＬＣ３４Ａ２、およびＳＬＣ３４Ａ３を含み；
（３５）ヌクレオシド－糖輸送体ファミリーであって、非限定的な例は、（ｉ）サブファ
ミリーＡ、ＳＬＣ３５Ａ１、ＳＬＣ３５Ａ２、ＳＬＣ３５Ａ３、ＳＬＣ３５Ａ４、ＳＬＣ
３５Ａ５；（ｉｉ）サブファミリーＢ、ＳＬＣ３５Ｂ１、ＳＬＣ３５Ｂ２、ＳＬＣ３５Ｂ
３、ＳＬＣ３５Ｂ４；（ｉｉｉ）サブファミリーＣ、ＳＬＣ３５Ｃ１、ＳＬＣ３５Ｃ２；
（ｉｖ）サブファミリーＤ、ＳＬＣ３５Ｄ１、ＳＬＣ３５Ｄ２、ＳＬＣ３５Ｄ３；（ｖ）
サブファミリーＥ、ＳＬＣ３５Ｅ１、ＳＬＣ３５Ｅ２、ＳＬＣ３５Ｅ３、ＳＬＣ３５Ｅ４
；（ｖｉ）サブファミリーＦ、ＳＬＣ３５Ｆ１、ＳＬＣ３５Ｆ２、ＳＬＣ３５Ｆ３、ＳＬ
Ｃ３５Ｆ４、ＳＬＣ３５Ｆ５；（ｖｉｉ）サブファミリーＧ、ＳＬＣ３５Ｇ１、ＳＬＣ３
５Ｇ３、ＳＬＣ３５Ｇ４、ＳＬＣ３５Ｇ５、ＳＬＣ３５Ｇ６を含み；
（３６）プロトン共役型アミノ酸輸送体ファミリーであって、非限定的な例は、ＳＬＣ３
６Ａ１、ＳＬＣ３６Ａ２、ＳＬＣ３６Ａ３、およびＳＬＣ３６Ａ４を含み；
（３７）糖－リン酸／リン酸交換輸送体ファミリーであって、非限定的な例は、ＳＬＣ３
７Ａ１、ＳＬＣ３７Ａ２、ＳＬＣ３７Ａ３、およびＳＬＣ３７Ａ４を含み；
（３８）システムＡおよびＮナトリウム共役型中性アミノ酸輸送体ファミリーであって、
非限定的な例は、ＳＬＣ３８Ａ１、ＳＬＣ３８Ａ２、ＳＬＣ３８Ａ３、ＳＬＣ３８Ａ４、
ＳＬＣ３８Ａ５、ＳＬＣ３８Ａ６、ＳＬＣ３８Ａ７、ＳＬＣ３８Ａ８、ＳＬＣ３８Ａ９、
ＳＬＣ３８Ａ１０、およびＳＬＣ３８Ａ１１を含み；
（３９）金属イオン輸送体ファミリーであって、非限定的な例は、ＳＬＣ３９Ａ１、ＳＬ
Ｃ３９Ａ２、ＳＬＣ３９Ａ３、ＳＬＣ３９Ａ４、ＳＬＣ３９Ａ５、ＳＬＣ３９Ａ６、ＳＬ
Ｃ３９Ａ７、ＳＬＣ３９Ａ８、ＳＬＣ３９Ａ９、ＳＬＣ３９Ａ１０、ＳＬＣ３９Ａ１１、
ＳＬＣ３９Ａ１２、ＳＬＣ３９Ａ１３、およびＳＬＣ３９Ａ１４を含み；
（４０）側底側鉄輸送体ファミリーであって、非限定的な例は、ＳＬＣ４０Ａ１を含み；
（４１）ＭｇｔＥ様マグネシウム輸送体ファミリーであって、非限定的な例は、ＳＬＣ４
１Ａ１、ＳＬＣ４１Ａ２、およびＳＬＣ４１Ａ３を含み；
（４２）アンモニア輸送体ファミリーであって、非限定的な例は、ＲｈＡＧ、ＲｈＢＧお
よびＲｈＣＧを含み；
（４３）Ｎａ＋依存性システムＬ様アミノ酸輸送体ファミリーであって、非限定的な例は
、ＳＬＣ４３Ａ１、ＳＬＣ４３Ａ２、およびＳＬＣ４３Ａ３を含み；
（４４）コリン様輸送体ファミリーであって、非限定的な例は、ＳＬＣ４４Ａ１、ＳＬＣ
４４Ａ２、ＳＬＣ４４Ａ３、ＳＬＣ４４Ａ４、およびＳＬＣ４４Ａ５を含み；
（４５）推定上の糖輸送体ファミリーであって、非限定的な例は、ＳＬＣ４５Ａ１、ＳＬ
Ｃ４５Ａ２、ＳＬＣ４５Ａ３、およびＳＬＣ４５Ａ４を含み；
（４６）葉酸輸送体ファミリーであって、非限定的な例は、ＳＬＣ４６Ａ１、ＳＬＣ４６
Ａ２、およびＳＬＣ４６Ａ３を含み；
（４７）多剤および毒素排出ファミリーであって、非限定的な例は、ＳＬＣ４７Ａ１およ
びＳＬＣ４７Ａ２を含み；
（４８）ヘム輸送体ファミリーであって、非限定的な例は、ＨＣＰ－１を含み；
（４９）主要促進因子の輸送体スーパーファミリーであって、非限定的な例は、ＭＦＳＤ
５およびＭＦＳＤ１０を含み；
（５０）糖排出輸送体のＳＷＥＥＴファミリーであって、非限定的な例は、ＳＬＣ５０Ａ
１を含み；
（５１）ステロイド由来の分子の輸送体であって、非限定的な例は、ＯＳＴαおよびＯＳ
Ｔβを含み；
（５２）リボフラビン輸送体ファミリーＲＦＶＴ／ＳＬＣ５２であって、非限定的な例は
、ＳＬＣ５２Ａ１、ＳＬＣ５２Ａ２、およびＳＬＣ５２Ａ３を含む。
発現が困難な標的タンパク質：
特定の態様では、抗体を作製するための従来の方法、例えば、精製された組換え体タン
パク質により動物を免疫化することは、発現が困難な標的タンパク質について効果的では
ない場合がある。多くの要因が、過剰発現／精製をさせないタンパク質の宿主産生細胞に
おける細胞毒性、本質的に不十分な生物物理学的特性（例えば、サイズ、溶解性、コンフ
ォメーション、翻訳後修飾（糖鎖付加など）などの、発現の問題に寄与し得る。発現が困
難なタンパク質の特徴の非限定的な例は、大きなタンパク質（例えば、分子量≧１５０ｋ
Ｄａを有するタンパク質）、膜貫通タンパク質、特有な翻訳後修飾を有するタンパク質ま
たは溶解性の低いタンパク質、不安定なタンパク質、シグナルペプチドを含有しない分泌
タンパク質、膜結合タンパク質、天然変性タンパク質、および半減期の短いタンパク質を
含むが、これらに限定されない。
本明細書で提供される方法における使用のための、発現が困難な場合のある、可溶性標
的タンパク質などの標的タンパク質の非限定的な例は、ＡＤＡＭＴＳ７、ＡＮＧＰＴＬ３
、ＡＮＧＰＴＬ４、ＡＮＧＰＴＬ８、ＬＰＬ、ＧＤＦ１５、ガレクチン－１、ガレクチン
－２、ガレクチン－３、マトリックスｇｌａタンパク質（ＭＧＰ）、ＰＲＮＰ、ＤＧＡＴ
１、ＧＰＡＴ３、ＤＭＣ１、ＢＬＭ、およびＢＲＣＡ２を含む。
発現が困難なタンパク質の特徴は、当技術分野で記述されている方法、例えば、溶解性
評価法（例えば、動的光散乱法、液体クロマトグラフィー質量分析法）、安定性評価法（
例えば、示差走査蛍光定量法、示差走査熱量測定法、円偏光二色性）、ＮＭＲ、およびク
ロマトグラフィーを用いて評価することができる。ある種の態様では、発現が困難なタン
パク質は、例えば、室温または４℃の溶液において１週間超、数週間超、１ヶ月超、数ヶ
月超（例えば、３ヶ月、４ヶ月もしくは５ヶ月）、もしくは６ヶ月超または１年の期間保
存される場合に、より凝集（例えば、少なくとも５％の凝集、少なくとも１０％の凝集、
少なくとも２０％の凝集、少なくとも３０％の凝集、少なくとも４０％の凝集、少なくと
も５０％の凝集、または少なくとも６０％の凝集）しやすくなり得る。
特定の態様では、発現が困難なタンパク質は正電荷を有する。ある種の態様では、発現
が困難なタンパク質は負電荷を有する。ある種の態様では、発現が困難なタンパク質は疎
水性である。
ある種の態様では、発現が困難なタンパク質は、短い半減期、例えば、２４時間未満、
２０時間未満、１５時間未満、１２時間未満、１０時間未満、８時間未満、６時間未満、
４時間未満、２時間未満、または１時間未満の半減期を有する。
ある種の実施形態では、本明細書に記載の標的タンパク質は、正に荷電したタンパク質
、負に荷電したタンパク質、疎水性タンパク質、および糖タンパク質を含む。
ある種の実施形態では、本明細書に記載の標的タンパク質は、分泌性酵素および膜結合
酵素などの酵素を含む。
ＩＩ．カチオン性リポソーム
従来技術において知られるカチオン性脂質のいずれかを、特許請求された発明の実施に
際して採用してもよい。例えば、Ｆｅｌｇｎｅｒ ｅｔ ａｌ．（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．
Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ．Ｓ．Ａ．８４：７４１３－７４１７（１９８７））；Ｆｅｌｇｎ
ｅｒ ｅｔ ａｌ．（Ｆｏｃｕｓ １１：２１－２５（１９８９））；Ｆｅｌｇｎｅｒ（
“Ｃａｔｉｏｎｉｃ Ｌｉｐｏｓｏｍｅ－Ｍｅｄｉａｔｅｄ Ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ
ｗｉｔｈ Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ（商標） Ｒｅａｇｅｎｔ，”ｉｎ Ｇｅｎｅ Ｔｒ
ａｎｓｆｅｒ ａｎｄ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ Ｖｏｌ．７，Ｍｕ
ｒｒａｙ，Ｅ．Ｊ．，Ｅｄ．，Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｊｅｒｓｅｙ，ｐｐ
．８１－８９（１９９１））；国際公開第９１／１７４２４号パンフレット；国際公開第
９１／１６０２４号パンフレット；米国特許第４，８９７，３５５号明細書；米国特許第
４，９４６，７８７号明細書；米国特許第５，０４９，３８６号明細書；米国特許第５，
２０８，０３６号明細書；Ｂｅｈｒ ｅｔ ａｌ．（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓ
ｃｉ．ＵＳＡ ８６：６９８２－６９８６（１９８９）；ＥＰＯ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏ
ｎ ０ ３９４ １１１）；Ｇａｏ ｅｔ ａｌ．（Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．
Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．１７９：２８０－２８５（１９９１））；Ｚｈｏｕ ｅｔ ａｌ．，
（Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ．１６５：８－１４（１９９１）
）；およびＧｅｂｅｙｃｈｕ ｅｔ ａｌ．（共有の米国特許出願第０７／９３７，５０
８号明細書；１９９２年８月２８日出願）を参照されたい。これらの内容は参照により全
面的に組み込まれる。
本明細書で提供される方法および組成物において使用することができる脂質（例えば、
カチオン性脂質、中性脂質、ヘルパー脂質、およびステルス脂質）の非限定的な例として
は、国際公開第２０１６／０３７０５３号パンフレット、国際公開第２０１６／０１０８
４０号パンフレット、国際公開第２０１５／０９５３４６号パンフレット、国際公開第２
０１５／０９５３４０号パンフレット、国際公開第２０１６／０３７０５３号パンフレッ
ト、国際公開第２０１４／１３６０８６号パンフレット、および国際公開第２０１１／０
７６８０７号パンフレットに記載のものを含み、各々は、参照によりその全体が本明細書
中に組み込まれる。ある特定の態様では、本明細書に記載の方法に適したカチオン性脂質
は、以下の化学構造を有するリピドＡ、リピドＢおよびリピドＣを含む（これらは、国際
公開第２０１５／０９５３４６号パンフレットおよび国際公開第２０１５／０９５３４０
号パンフレットにおいてさらに詳細に記載されている）。
Figure 2022160674000001
ある種の態様では、本明細書に記載の組成物および方法のためのカチオン性脂質として
は、Ｎ，Ｎ－ジオレイル－Ｎ，Ｎ－ジメチルアンモニウムクロリド（ＤＯＤＡＣ）、Ｎ，
Ｎ－ジステアリル－Ｎ，Ｎ－ジメチルアンモニウムブロミド（ＤＤＡＢ）、Ｎ－（１－（
２，３－ジオレオイルオキシ）プロピル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ－トリメチルアンモニウムクロリ
ド（ＤＯＴＡＰ）、１，２－ジオレオイル－３－ジメチルアンモニウム－プロパン（ＤＯ
ＤＡＰ）、Ｎ－（１－（２，３－ジオレイルオキシ）プロピル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ－トリメチ
ルアンモニウムクロリド（ＤＯＴＭＡ）、１，２－ジオレオイルカルバミル－３－ジメチ
ルアンモニウム－プロパン（ＤＯＣＤＡＰ）、１，２－ジリネオイル－３－ジメチルアン
モニウム－プロパン（ＤＬＩＮＤＡＰ）、ジラウリル（Ｃ１２：０）トリメチルアンモニ
ウムプロパン（ＤＬＴＡＰ）、ジオクタデシルアミドグリシルスペルミン（ＤＯＧＳ）、
ＤＣ－Ｃｈｏｌ、ジオレオイルオキシ－Ｎ－［２－スペルミンカルボキサミド）エチル｝
－Ｎ，Ｎ－ジメチル－１－プロパンアミニウムトリフルオロアセテート（ＤＯＳＰＡ）、
１，２－ジミリスチルオキシプロピル－３－ジメチル－ヒドロキシエチルアンモニウムブ
ロミド（ＤＭＲＩＥ）、３－ジメチルアミノ－２－（コレスト－５－エン－３－β－オキ
シブタン－４－オキシ）－１－（シス，シス－９，１２－オクタデカジエノキシ）プロパ
ン（ＣＬｉｎＤＭＡ）、Ｎ，Ｎ－ジメチル－２，３－ジオレイルオキシ）プロピルアミン
（ＤＯＤＭＡ）、２－［５’－（コレスト－５－エン－３［β］－オキシ）－３’－オキ
サペントキシ）－３－ジメチル－１－（シス，シス－９’，１２’－オクタデカジエノキ
シ）プロパン（ＣｐＬｉｎＤＭＡ）およびＮ，Ｎ－ジメチル－３，４－ジオレイルオキシ
ベンジルアミン（ＤＭＯＢＡ）、ならびに１，２－Ｎ，Ｎ’－ジオレイルカルバミル－３
－ジメチルアミノプロパン（ＤＯｃａｒｂＤＡＰ）が挙げられるが、これらに限定されな
い。一実施形態では、本明細書で提供される組成物および方法のためのカチオン性脂質は
、ＤＯＴＡＰまたはＤＬＴＡＰである。
特定の実施形態では、本明細書に記載の組成物および方法のためのカチオン性脂質は、
Ｎ－［１－（２，３－ジオレオイルオキシ）プロピル］－Ｎ，Ｎ，Ｎ－トリメチルアンモ
ニウムクロリド（ＤＯＴＭＡ）を含む。ＤＯＴＭＡ単独で、またはジオレオイルホスファ
チジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）との１：１の配合において、標準的な手法を用いて
リポソームに製剤化することができる。ＤＯＴＭＡ：ＤＯＰＥ（１：１）製剤は、ＬＩＰ
ＯＦＥＣＴＩＮ（商標）（ＧＩＢＣＯ／ＢＲＬ：Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，
Ｉｎｃ．，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，Ｍｄ．）の名称で販売されている。特定の実施形
態では、市販されているカチオン性脂質は、１，２－ビス（オレオイルオキシ）－３－３
－（トリメチルアンモニア）プロパン（ＤＯＴＡＰ）であり、これは、オレオイル部分が
プロピルアミンにエーテル結合ではなくエステル結合を介して結合しているという点でＤ
ＯＴＭＡとは異なる。
特定の実施形態では、本明細書に記載の組成物および方法のためのカチオン性脂質の関
連する基は、トリメチルアンモニウム基のメチル基の１つがヒドロキシエチル基によって
置換されているという点でＤＯＴＭＡおよびＤＯＴＡＰと異なる。この種の化合物は、ホ
スホリパーゼＡのＲｏｓｅｎｔｈａｌ阻害剤（Ｒｏｓｅｎｔｈａｌ ｅｔ ａｌ．上記）
に類似しており、これは、プロピルアミンコアに結合したステアロイルエステルを有する
。Ｒｏｓｅｎｔｈａｌ阻害剤（ＲＩ）のジオレオイル類似体は、脂肪酸部分のプロピルア
ミンコアへの結合に依存して、ＤＯＲＩエーテルおよびＤＯＲＩエステルと、一般に略記
される。ヒドロキシ基が、さらなる官能基化のための部位として、例えば、カルボキシス
ペルミンへのエステル化によって、使用され得る。
ある種の実施形態では、本明細書に記載の組成物および方法のためのカチオン性脂質の
別のクラスは、２種の脂質に結合したカルボキシスペルミンを含み、５－カルボキシルス
ペルミルグリシンオクタデシルアミド（ＤＯＧＳ）をもたらす。ＤＯＧＳは、ＴＲＡＮＳ
ＦＥＣＴＡＭ（商標）（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｍａｄｉｓｏｎ，Ｗｉｓ．）として商業的に利
用可能である。
既知化合物の別のクラスは、Ｂｅｈｒら（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｕ
ＳＡ ８６：６９８２－６９８６（１９８９）；ＥＰＯ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ ０
３９４ １１１）によって記載されており、この中で、カルボキシスペルミンは２種の脂
質に結合されており、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン５－カルボキシス
ペルミルアミド（ＤＤＰＥＳ）をもたらす。
特定の態様では、本明細書に記載の組成物および方法のための別のカチオン性脂質は、
ＤＯＰＥと組み合わされて合成され、リポソームに製剤化されたコレステロール誘導体（
ＤＣ－Ｃｈｏｌ）である。別の特定の実施形態では、本明細書に記載の組成物および方法
のためのカチオン性脂質は、リポポリリジンであり、これはポリリジンをＤＯＰＥに結合
することにより形成される。
本明細書で提供される組成物および方法のためのカチオン性脂質のさらなる非限定的な
例は、以下および国際公開第２０１５／０９５３４６号パンフレットに記載のものを含む
：
２－（１０－ドデシル－３－エチル－８，１４－ジオキソ－７，９，１３－トリオキサ－
３－アザオクタデカン－１８－イル）プロパン－１，３－ジイルジオクタノアート；
２－（９－ドデシル－２－メチル－７，１３－ジオキソ－６，８，１２－トリオキサ－２
－アザヘプタデカン－１７－イル）プロパン－１，３－ジイルジオクタノアート；
２－（９－ドデシル－２－メチル－７，１３－ジオキソ－６，８，１２－トリオキサ－２
－アザペンタデカン－１５－イル）プロパン－１，３－ジイルジオクタノアート；
２－（１０－ドデシル－３－エチル－８，１４－ジオキソ－７，９，１３－トリオキサ－
３－アザヘキサデカン－１６－イル）プロパン－１，３－ジイルジオクタノアート；
２－（８－ドデシル－２－メチル－６，１２－ジオキソ－５，７，１１－トリオキサ－２
－アザヘプタデカン－１７－イル）プロパン－１，３－ジイルジオクタノアート；
２－（１０－ドデシル－３－エチル－８，１４－ジオキソ－７，９，１３－トリオキサ－
３－アザノナデカン－１９－イル）プロパン－１，３－ジイルジオクタノアート；
２－（９－ドデシル－２－メチル－７，１３－ジオキソ－６，８，１２－トリオキサ－２
－アザオクタデカン－１８－イル）プロパン－１，３－ジイルジオクタノアート；
２－（８－ドデシル－２－メチル－６，１２－ジオキソ－５，７，１１－トリオキサ－２
－アザオクタデカン－１８－イル）プロパン－１，３－ジイルジオクタノアート；
２－（１０－ドデシル－３－エチル－８，１４－ジオキソ－７，９，１３－トリオキサ－
３－アザイコサン－２０－イル）プロパン－１，３－ジイルジオクタノアート；
２－（９－ドデシル－２－メチル－７，１３－ジオキソ－６，８，１２－トリオキサ－２
－アザノナデカン－１９－イル）プロパン－１，３－ジイルジオクタノアート；
３－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデシル４，
４－ビス（オクチルオキシ）ブタノアート；
３－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデシル４，
４－ビス（（２－エチルヘキシル）オキシ）ブタノアート；
３－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデシル４，
４－ビス（（２－プロピルペンチル）オキシ）ブタノアート；
３－（（（３－（エチル（メチル）アミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデ
シル４，４－ビス（（２－プロピルペンチル）オキシ）ブタノアート；
３－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデシル４，
４－ビス（（２－プロピルペンチル）オキシ）ブタノアート；
３－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデシル６，
６－ビス（オクチルオキシ）ヘキサノアート；
３－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデシル６，
６－ビス（ヘキシルオキシ）ヘキサノアート；
３－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデシル６，
６－ビス（（２－エチルヘキシル）オキシ）ヘキサノアート；
３－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデシル８，
８－ビス（ヘキシルオキシ）オクタノアート；
３－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデシル８，
８－ジブトキシオクタノアート；
３－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデシル８，
８－ビス（（２－プロピルペンチル）オキシ）オクタノアート；
３－（（（３－（エチル（メチル）アミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデ
シル８，８－ビス（（２－プロピルペンチル）オキシ）オクタノアート；
３－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデシル８，
８－ビス（（２－プロピルペンチル）オキシ）オクタノアート；
３－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデシル３－
オクチルウンデカノアート；
３－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデシル３－
オクチルウンデカ－２－エノアート；
３－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデシル７－
ヘキシルトリデカ－６－エノアート；
３－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデシル９－
ペンチルテトラデカノアート；
３－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデシル９－
ペンチルテトラデカ－８－エノアート；
３－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデシル５－
ヘプチルドデカノアート；
３－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）トリデシル５－ヘ
プチルドデカノアート；
３－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ウンデシル５－ヘ
プチルドデカノアート；
１，３－ビス（オクタノイルオキシ）プロパン－２－イル（３－（（（２－（ジメチルア
ミノ）エトキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデシル）サクシナート；
１，３－ビス（オクタノイルオキシ）プロパン－２－イル（３－（（（３－（ジメチルア
ミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデシル）サクシナート；
１－（３－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデシ
ル）１０－オクチルデカンジオアート；
１－（３－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデシ
ル）１０－オクチルデカンジオアート；
１－（３－（（（３－（エチル（メチル）アミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ペ
ンタデシル）１０－オクチルデカンジオアート；
１－（３－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデシ
ル）１０－（２－エチルヘキシル）デカンジオアート；
１－（３－（（（３－（エチル（メチル）アミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ペ
ンタデシル）１０－（２－エチルヘキシル）デカンジオアート；
３－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデシル１０
－（オクタノイルオキシ）デカノアート；
８－ドデシル－２－メチル－６，１２－ジオキソ－５，７，１１－トリオキサ－２－アザ
ノナデカン－１９－イルデカノアート；
３－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデシル１０
－（オクタノイルオキシ）デカノアート；
３－（（（３－（エチル（メチル）アミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデ
シル１０－（オクタノイルオキシ）デカノアート；
（９Ｚ，１２Ｚ）－３－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ
）ペンタデシルオクタデカ－９，１２－ジエノアート；
（９Ｚ，１２Ｚ）－３－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ
）ペンタデシルオクタデカ－９，１２－ジエノアート；
（９Ｚ，１２Ｚ）－３－（（（３－（エチル（メチル）アミノ）プロポキシ）カルボニル
）オキシ）ペンタデシルオクタデカ－９，１２－ジエノアート；
（９Ｚ，１２Ｚ）－３－（（（２－（ジメチルアミノ）エトキシ）カルボニル）オキシ）
ペンタデシルオクタデカ－９，１２－ジエノアート；
１－（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエノイルオキシ）ペンタデカン－３
－イル１，４－ジメチルピペリジン－４－カルボキシラート；
２－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）テトラデシル４，
４－ビス（（２－エチルヘキシル）オキシ）ブタノアート；
（９Ｚ，１２Ｚ）－（１２Ｚ，１５Ｚ）－３－（（３－（ジメチルアミノ）プロパノイル
）オキシ）ヘンイコサ－１２，１５－ジエン－１－イルオクタデカ－９，１２－ジエノア
ート；
（１２Ｚ，１５Ｚ）－３－（（４－（ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）ヘンイコサ
－１２，１５－ジエン－１－イル３－オクチルウンデカノアート；
（１２Ｚ，１５Ｚ）－３－（（４－（ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）ヘンイコサ
－１２，１５－ジエン－１－イル５－ヘプチルドデカノアート；
（１２Ｚ，１５Ｚ）－３－（（４－（ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）ヘンイコサ
－１２，１５－ジエン－１－イル７－ヘキシルトリデカノアート；
（１２Ｚ，１５Ｚ）－３－（（４－（ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）ヘンイコサ
－１２，１５－ジエン－１－イル９－ペンチルテトラデカノアート；
（１２Ｚ，１５Ｚ）－１－（（（（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエン－１
－イルオキシ）カルボニル）オキシ）ヘンイコサ－１２，１５－ジエン－３－イル３－（
ジメチルアミノ）プロパノアート；
（１３Ｚ，１６Ｚ）－４－（（（２－（ジメチルアミノ）エトキシ）カルボニル）オキシ
）ドコサ－１３，１６－ジエン－１－イル２，２－ビス（ヘプチルオキシ）アセタート；
（１３Ｚ，１６Ｚ）－４－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキ
シ）ドコサ－１３，１６－ジエン－１－イル２，２－ビス（ヘプチルオキシ）アセタート
；
２，２－ビス（ヘプチルオキシ）エチル３－（（３－エチル－１０－（（９Ｚ，１２Ｚ）
－オクタデカ－９，１２－ジエン－１－イル）－８，１５－ジオキソ－７，９，１４－ト
リオキサ－３－アザヘプタデカン－１７－イル）ジスルファニル）プロパノアート；
（１３Ｚ，１６Ｚ）－４－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキ
シ）ドコサ－１３，１６－ジエン－１－イルヘプタデカン－９－イルサクシナート；
（９Ｚ，１２Ｚ）－２－（（（１１Ｚ，１４Ｚ）－２－（（３－（ジメチルアミノ）プロ
パノイル）オキシ）イコサ－１１，１４－ジエン－１－イル）オキシ）エチルオクタデカ
－９，１２－ジエノアート；
（９Ｚ，１２Ｚ）－３－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ
）－１３－（オクタノイルオキシ）トリデシルオクタデカ－９，１２－ジエノアート；
３－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）－１３－（オクタ
ノイルオキシ）トリデシル３－オクチルウンデカノアート；
３－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）－１３－ヒドロキ
シトリデシル５－ヘプチルドデカノアート；
３－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）－１３－（オクタ
ノイルオキシ）トリデシル５－ヘプチルドデカノアート；
３－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）－１３－（オクタ
ノイルオキシ）トリデシル７－ヘキシルトリデカノアート；
３－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）－１３－ヒドロキ
シトリデシル９－ペンチルテトラデカノアート；
３－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）－１３－（オクタ
ノイルオキシ）トリデシル９－ペンチルテトラデカノアート；
１－（３－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）－１３－（
オクタノイルオキシ）トリデシル）１０－オクチルデカンジオアート；
３－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）－１３－（オクタ
ノイルオキシ）トリデシル１０－（オクタノイルオキシ）デカノアート；
（９Ｚ，１２Ｚ）－３－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ
）－５－オクチルトリデシルオクタデカ－９，１２－ジエノアート；
３－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）－５－オクチルト
リデシルデカノアート；
５－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）－７－オクチルペ
ンタデシルオクタノアート；
（９Ｚ，１２Ｚ）－５－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ
）－７－オクチルペンタデシルオクタデカ－９，１２－ジエノアート；
９－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）－１１－オクチル
ノナデシルオクタノアート；
９－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）－１１－オクチル
ノナデシルデカノアート；
（９Ｚ，１２Ｚ）－９－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ
）ノナデシルオクタデカ－９，１２－ジエノアート；９－（（（３－（ジメチルアミノ）
プロポキシ）カルボニル）オキシ）ノナデシルヘキサノアート；
９－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ノナデシル３－オ
クチルウンデカノアート；
９－（（４－（ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）ノナデシルヘキサノアート；
９－（（４－（ジメチルアミノ）ブタノイル）オキシ）ノナデシル３－オクチルウンデカ
ノアート；
（９Ｚ，９’Ｚ，１２Ｚ，１２’Ｚ）－２－（（４－（（（３－（ジメチルアミノ）プロ
ポキシ）カルボニル）オキシ）ヘキサデカノイル）オキシ）プロパン－１，３－ジイルビ
ス（オクタデカ－９，１２－ジエノアート）；
（９Ｚ，９’Ｚ，１２Ｚ，１２’Ｚ）－２－（（４－（（（３－（ジエチルアミノ）プロ
ポキシ）カルボニル）オキシ）ヘキサデカノイル）オキシ）プロパン－１，３－ジイルビ
ス（オクタデカ－９，１２－ジエノアート）；
（９Ｚ，９’Ｚ，１２Ｚ，１２’Ｚ，１５Ｚ，１５’Ｚ）－２－（（４－（（（３－（ジ
メチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ヘキサデカノイル）オキシ）プロパン
－１，３－ジイルビス（オクタデカ－９，１２，１５－トリエノアート）；
（Ｚ）－２－（（４－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）
ヘキサデカノイル）オキシ）プロパン－１，３－ジイルジオレアート；
２－（（４－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ヘキサデ
カノイル）オキシ）プロパン－１，３－ジイルジテトラデカノアート；
２－（（４－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ヘキサデ
カノイル）オキシ）プロパン－１，３－ジイルジテトラデカノアート；
２－（（４－（（（３－（エチル（メチル）アミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）
ヘキサデカノイル）オキシ）プロパン－１，３－ジイルジテトラデカノアート；
２－（（４－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ヘキサデ
カノイル）オキシ）プロパン－１，３－ジイルジドデカノアート；
２－（（４－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ヘキサデ
カノイル）オキシ）プロパン－１，３－ジイルジドデカノアート；
２－（（４－（（（３－（エチル（メチル）アミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）
ヘキサデカノイル）オキシ）プロパン－１，３－ジイルジドデカノアート；
２－（（４－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ヘキサデ
カノイル）オキシ）プロパン－１，３－ジイルビス（デカノアート）；
２－（（４－（（（３－（エチル（メチル）アミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）
ヘキサデカノイル）オキシ）プロパン－１，３－ジイルビス（デカノアート）；
２－（（４－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ヘキサデ
カノイル）オキシ）プロパン－１，３－ジイルジオクタノアート；
２－（（４－（（（３－（エチル（メチル）アミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）
ヘキサデカノイル）オキシ）プロパン－１，３－ジイルジオクタノアート；
２－（（（１３Ｚ，１６Ｚ）－４－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニ
ル）オキシ）ドコサ－１３，１６－ジエノイル）オキシ）プロパン－１，３－ジイルジオ
クタノアート；
２－（（（１３Ｚ，１６Ｚ）－４－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニ
ル）オキシ）ドコサ－１３，１６－ジエノイル）オキシ）プロパン－１，３－ジイルジオ
クタノアート；
（９Ｚ，９’Ｚ，１２Ｚ，１２’Ｚ）－２－（（２－（（（３－（ジエチルアミノ）プロ
ポキシ）カルボニル）オキシ）テトラデカノイル）オキシ）プロパン－１，３－ジイルビ
ス（オクタデカ－９，１２－ジエノアート）；
（９Ｚ，９’Ｚ，１２Ｚ，１２’Ｚ）－２－（（２－（（（３－（ジメチルアミノ）プロ
ポキシ）カルボニル）オキシ）ドデカノイル）オキシ）プロパン－１，３－ジイルビス（
オクタデカ－９，１２－ジエノアート）；
（９Ｚ，９’Ｚ，１２Ｚ，１２’Ｚ）－２－（（２－（（（３－（ジメチルアミノ）プロ
ポキシ）カルボニル）オキシ）テトラデカノイル）オキシ）プロパン－１，３－ジイルビ
ス（オクタデカ－９，１２－ジエノアート）；
（９Ｚ，９’Ｚ，１２Ｚ，１２’Ｚ）－２－（（２－（（（３－（ジエチルアミノ）プロ
ポキシ）カルボニル）オキシ）ドデカノイル）オキシ）プロパン－１，３－ジイルビス（
オクタデカ－９，１２－ジエノアート）；
２－（（２－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）テトラデ
カノイル）オキシ）プロパン－１，３－ジイルジオクタノアート；
４．４－ビス（オクチルオキシ）ブチル４－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）
カルボニル）オキシ）ヘキサデカノアート；
４，４－ビス（オクチルオキシ）ブチル２－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）
カルボニル）オキシ）ドデカノアート；
（９Ｚ，１２Ｚ）－１０－ドデシル－３－エチル－１４－（２－（（９Ｚ，１２Ｚ）－オ
クタデカ－９，１２－ジエノイルオキシ）エチル）－８，１３－ジオキソ－７，９－ジオ
キサ－３，１４－ジアザヘキサデカン－１６－イルオクタデカ－９，１２－ジエノアート
；
２－（（４－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）－１１－
（オクタノイルオキシ）ウンデカノイル）オキシ）プロパン－１，３－ジイルジオクタノ
アート；
（９Ｚ，９’Ｚ，１２Ｚ，１２’Ｚ）－２－（９－ドデシル－２－メチル－７，１２－ジ
オキソ－６，８，１３－トリオキサ－２－アザテトラデカン－１４－イル）プロパン－１
，３－ジイルビス（オクタデカ－９，１２－ジエノアート）；
３－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデシル４，
４－ビス（オクチルオキシ）ブタノアート；
３－（（（３－（ピペリジン－１－イル）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデシ
ル６，６－ビス（オクチルオキシ）ヘキサノアート；
３－（（（３－（ピペラジン－１－イル）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデシ
ル６，６－ビス（オクチルオキシ）ヘキサノアート；
３－（（（４－（ジエチルアミノ）ブトキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデシル６，６
－ビス（オクチルオキシ）ヘキサノアート；
３－（（（３－（４－メチルピペラジン－１－イル）プロポキシ）カルボニル）オキシ）
ペンタデシル６，６－ビス（オクチルオキシ）ヘキサノアート；
３－（（（（１－メチルピペリジン－４－イル）メトキシ）カルボニル）オキシ）ペンタ
デシル６，６－ビス（オクチルオキシ）ヘキサノアート；
３－（（（３－モルホリノポロポキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデシル６，６－ビス
（オクチルオキシ）ヘキサノアート；
３－（（（２－（ジエチルアミノ）エトキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデシル６，６
－ビス（オクチルオキシ）ヘキサノアート；
３－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデシル６，
６－ビス（オクチルオキシ）ヘキサノアート；
３－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデシル６，
６－ビス（（２－プロピルペンチル）オキシ）ヘキサノアート；
３－（（（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデシル６，
６－ビス（（２－プロピルペンチル）オキシ）ヘキサノアート ＬＸＲ４２０：３－（（
（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデシル６，６－ビス
（（３－エチルペンチル）オキシ）ヘキサノアート；
（２Ｒ）－１－（（６，６－ビス（オクチルオキシ）ヘキサノイル）オキシ）ペンタデカ
ン－３－イル１－メチルピロリジン－２－カルボキシラート；
（２Ｓ）－１－（（６，６－ビス（オクチルオキシ）ヘキサノイル）オキシ）ペンタデカ
ン－３－イル１－メチルピロリジン－２－カルボキシラート；
（２Ｒ）－１－（（６，６－ビス（オクチルオキシ）ヘキサノイル）オキシ）ペンタデカ
ン－３－イルピロリジン－２－カルボキシラート；
１－（（６，６－ビス（オクチルオキシ）ヘキサノイル）オキシ）ペンタデカン－３－イ
ル１，３－ジメチルピロリジン－３－カルボキシラート；
３－（（３－（１－メチルピペリジン－４－イル）プロパノイル）オキシ）ペンタデシル
６，６－ビス（オクチルオキシ）ヘキサノアート；
１－（（６，６－ビス（オクチルオキシ）ヘキサノイル）オキシ）ペンタデカン－３－イ
ル１，４－ジメチルピペリジン－４－カルボキシラート；
３－（（５－（ジエチルアミノ）ペンタノイル）オキシ）ペンタデシル６，６－ビス（オ
クチルオキシ）ヘキサノアート；
３－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ペンタデシル５－
（４，６－ジヘプチル－１，３－ジオキサン－２－イル）ペンタノアート；
３－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ウンデシル６，６
－ビス（オクチルオキシ）ヘキサノアート；
３－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）トリデシル６，６
－ビス（オクチルオキシ）ヘキサノアート；
（１２Ｚ，１５Ｚ）－３－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキ
シ）ヘンイコサ－１２，１５－ジエン－１－イル６，６－ビス（オクチルオキシ）ヘキサ
ノアート；
６－（（６，６－ビス（オクチルオキシ）ヘキサノイル）オキシ）－４－（（（３－（ジ
エチルアミノ）プロポキシ）カルボニル）オキシ）ヘキシルオクタノアート；
４，４－ビス（オクチルオキシ）ブチル５－（（（３－（ジエチルアミノ）プロポキシ）
カルボニル）オキシ）ヘプタデカノアート；
４，４－ビス（オクチルオキシ）ブチル（３－（ジエチルアミノ）プロピル）ペンタデカ
ン－１，３－ジイルジカルボナート；
２－（５－（（４－（（１，４－ジメチルピペリジン－４－カルボニル）オキシ）ヘキサ
デシル）オキシ）－５－オキソペンチル）プロパン－１，３－ジイルジオクタノアート；
２－（５－（（４－（（１，３－ジメチルピロリジン－３－カルボニル）オキシ）ヘキサ
デシル）オキシ）－５－オキソペンチル）プロパン－１，３－ジイルジオクタノアート；
２－（５－オキソ－５－（（４－（（（Ｓ）－ピロリジン－２－カルボニル）オキシ）ヘ
キサデシル）オキシ）ペンチル）プロパン－１，３－ジイルジオクタノアート；
２－（５－（（４－（（（（（Ｓ）－１－メチルピロリジン－３－イル）オキシ）カルボ
ニル）オキシ）ヘキサデシル）オキシ）－５－オキソペンチル）プロパン－１，３－ジイ
ルジオクタノアート；
２－（５－（（４－（（（（（Ｒ）－１－メチルピロリジン－３－イル）オキシ）カルボ
ニル）オキシ）ヘキサデシル）オキシ）－５－オキソペンチル）プロパン－１，３－ジイ
ルジオクタノアート；
２－（５－（（４－（（（（１－エチルピペリジン－３－イル）メトキシ）カルボニル）
オキシ）ヘキサデシル）オキシ）－５－オキソペンチル）プロパン－１，３－ジイルジオ
クタノアート；
２－（５－（（４－（（（（１－メチルピペリジン－４－イル）オキシ）カルボニル）オ
キシ）ヘキサデシル）オキシ）－５－オキソペンチル）プロパン－１，３－ジイルジオク
タノアート；
２－（１０－ドデシル－３－エチル－８，１５－ジオキソ－７，９，１４－トリオキサ－
３－アザノナデカン－１９－イル）プロパン－１，３－ジイルジオクタノアート；
２－（１１－ドデシル－３－エチル－９，１５－ジオキソ－８，１０，１４－トリオキサ
－３－アザノナデカン－１９－イル）プロパン－１，３－ジイルジオクタノアート；
２－（５－（（３－（（（３－（１Ｈ－イミダゾール－イル）プロポキシ）カルボニル）
オキシ）ペンタデシル）オキシ）－５－オキソペンチル）プロパン－１，３－ジイルジオ
クタノアート；
２－（５－オキソ－５－（（３－（（（３－（ピペリジン－１－イル）プロポキシ）カル
ボニル）オキシ）ペンタデシル）オキシ）ペンチル）プロパン－１，３－ジイルジオクタ
ノアート；および２－（１２－ドデシル－３－エチル－８，１４－ジオキソ－７，９，１
３－トリオキサ－３－アザオクタデカン－１８－イル）プロパン－１，３－ジイルジオク
タノアート。
特定の態様では、これらのカチオン性脂質化合物は、単独で、または他の脂質凝集体形
成成分（ＤＯＰＥまたはコレステロールなど）との組み合わせのいずれかにおいて、リポ
ソームまたは他の脂質凝集体への製剤化のために有用である。このような凝集体はカチオ
ン性であり、ＤＮＡまたはＲＮＡなどのアニオン性高分子と複合体を形成することができ
る。
本明細書に記載の脂質組成物および方法における使用に適した「中性脂質」は、例えば
、種々の中性脂質、無電荷の脂質または双性イオン脂質を含む。本発明における使用に適
した中性リン脂質の例は、５－ヘプタデシルベンゼン－１，３－ジオール（レゾルシノー
ル）、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、ジステアロイルホスファチジ
ルコリン（ＤＳＰＣ）、ホスホコリン（ＤＯＰＣ）、ジミリストイルホスファチジルコリ
ン（ＤＭＰＣ）、ホスファチジルコリン（ＰＬＰＣ）、１，２－ジステアロイル－ｓｎ－
グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＡＰＣ）、ホスファチジルエタノールアミン（ＰＥ）、
卵ホスファチジルコリン（ＥＰＣ）、ジラウロイルホスファチジルコリン（ＤＬＰＣ）、
ジミリストイルホスファチジルコリン（ＤＭＰＣ）、１－ミリストイル－２－パルミトイ
ルホスファチジルコリン（ＭＰＰＣ）、１－パルミトイル－２－ミリストイルホスファチ
ジルコリン（ＰＭＰＣ）、１－パルミトイル－２－ステアロイルホスファチジルコリン（
ＰＳＰＣ）、１，２－ジアラキドイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＢＰＣ）
、１－ステアロイル－２－パルミトイルホスファチジルコリン（ＳＰＰＣ）、１，２－ジ
エイコセノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＥＰＣ）、パルミトイルオレオ
イルホスファチジルコリン（ＰＯＰＣ）、リゾホスファチジルコリン、ジオレオイルホス
ファチジルエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、ジリノレオイルホスファチジルコリン、ジス
テアロイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＳＰＥ）、ジミリストイルホスファチジ
ルエタノールアミン（ＤＭＰＥ）、ジパルミトイルホスファチジルエタノールアミン（Ｄ
ＰＰＥ）、パルミトイルオレオイルホスファチジルエタノールアミン（ＰＯＰＥ）、リゾ
ホスファチジルエタノールアミン、およびその組み合わせを含むが、これらに限定されな
い。一実施形態では、中性リン脂質は、ジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ
）およびジミリストイルホスファチジルエタノールアミン（ＤＭＰＥ）からなる群から選
択される。
「ヘルパー脂質」は、ある程度トランスフェクション（例えば、生物学的に活性な薬剤
を含むナノ粒子のトランスフェクション）を亢進する脂質である。ヘルパー脂質がトラン
スフェクションを亢進する機構は、例えば、粒子安定性を高めることおよび／または膜融
合性を高めることを含み得る。ヘルパー脂質は、ステロイドおよびアルキルレゾルシノー
ルを含む。本明細書に記載の組成物および方法に適したヘルパー脂質は、コレステロール
、５－ヘプタデシルレゾルシノール、およびコレステロールヘミコハク酸を含むが、これ
らに限定されない。本明細書に記載の組成物および方法のためのヘルパー脂質の非限定的
な例としては、国際公開第２０１５／０９５３４６号パンフレット、国際公開第２０１５
／０９５３４０号パンフレット、国際公開第２０１６／０３７０５３号パンフレット、国
際公開第２０１４／１３６０８６号パンフレット、および国際公開第２０１１／０７６８
０７号パンフレットに記載のものを含み、各々は、参照によりその全体が本明細書中に組
み込まれる。
ステルス脂質は、ナノ粒子がインビボ（例えば、血液中）に存在することができる時間
を増大させる脂質である。本明細書に記載の組成物および方法に適したステルス脂質は、
脂質部分に連結される疎水性頭部を有するステルス脂質を含むが、これらに限定されない
。本明細書に記載の組成物および方法のためのステルス脂質の非限定的な例としては、国
際公開第２０１５／０９５３４６号パンフレット、国際公開第２０１５／０９５３４０号
パンフレット、国際公開第２０１６／０３７０５３号パンフレット、国際公開第２０１４
／１３６０８６号パンフレット、および国際公開第２０１１／０７６８０７号パンフレッ
トに記載のものを含み、各々は、参照によりその全体が本明細書中に組み込まれる。ある
種の態様では、ステルス脂質の例は、国際公開第２０１１／０７６８０７号パンフレット
に記載の式（ＸＩ）化合物、および国際公開第２０１６／０１０８４０号パンフレットの
表１に列記される化合物を含む。特定の態様では、本明細書に記載の脂質組成物における
使用に適した他のステルス脂質、およびそのような脂質の生化学についての情報は、Ｒｏ
ｍｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｖｏｌ
．２５，Ｎｏ．１，２００８，ｐ．５５－７１およびＨｏｅｋｓｔｒａ ｅｔ ａｌ．，
Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ ｅｔ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ Ａｃｔａ １６６０（２００４）
４１－５２において見出すことができる。
一態様では、好適なステルス脂質は、ＰＥＧ（ポリ（エチレンオキシド）と称される場
合もある）、ならびにポリ（オキサゾリン）、ポリ（ビニルアルコール）、ポリ（グリセ
ロール）、ポリ（Ｎ－ビニルピロリドン）、ポリアミノ酸およびポリ［Ｎ－（２－ヒドロ
キシプロピル）メタクリルアミド］に基づくポリマー、ならびに、例えば、国際公開第２
００６／００７７１２号パンフレットに開示されるさらなる好適なＰＥＧ脂質から選択さ
れる群を含む。
特定の態様では、好適なステルス脂質の非限定的な例は、約Ｃ４～約Ｃ４０飽和もしく
は不飽和炭素原子を含むアルキル鎖長を独立して有するジアルキルグリセロールまたはジ
アルキルグリカミド基を含むものを含む、ポリエチレングリコール－ジアシルグリセロー
ルまたはポリエチレングリコール－ジアシルグリカミド（ＰＥＧ－ＤＡＧ）コンジュゲー
トを含む。さらなる態様では、ジアルキルグリセロールまたはジアルキルグリカミド基は
さらに、１つ以上の置換アルキル基を含むことができる。本明細書に記載のさらなる態様
では、ＰＥＧコンジュゲートは、ＰＥＧ－ジラウリルグリセロール、ＰＥＧ－ジミリスチ
ルグリセロール（ＰＥＧ－ＤＭＧ）（ＮＯＦのカタログ番号ＧＭ－０２０、東京、日本）
、ＰＥＧ－ジパルミトイルグリセロール、ＰＥＧ－ジステアリルグリセロール、ＰＥＧ－
ジラウリルグリカミド、ＰＥＧ－ジミリスチルグリカミド、ＰＥＧ－ジパルミトイルグリ
カミド、およびＰＥＧ－ジステリルグリカミド、ＰＥＧ－コレステロール（１－［８’－
（コレスト－５－エン－３［β］－オキシ）カルボキサミド－３’，６’－ジオキサオク
タニル］カルバモイル－［ω］－メチル－ポリ（エチレングリコール）、ＰＥＧ－ＤＭＢ
（３，４－ジテトラデコキシルベンジル－［ω］－メチル－ポリ（エチレングリコール）
エーテル）、１，２－ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン－
Ｎ－［メトキシ（ポリエチレングリコール）－２０００］（Ａｖａｎｔｉ Ｐｏｌａｒ
Ｌｉｐｉｄｓのカタログ番号８８０１５０Ｐ、Ａｌａｂａｓｔｅｒ、Ａｌａｂａｍａ、Ｕ
ＳＡ）から選択することができる。一態様では、ステルス脂質は、Ｓ０１０、Ｓ０２４、
Ｓ０２７、Ｓ０３１、またはＳ０３３（国際公開第２０１６／０３７０５３号パンフレッ
ト、例えば、表１に記載）である。別の態様では、ステルス脂質は、Ｓ０２４（国際公開
第２０１６／０３７０５３号パンフレット、例えば、表１に記載）である。
ＩＩＩ．ｍＲＮＡ分子の組成物
ある特定の実施形態では、本発明の免疫化方法のために使用されるポリヌクレオチドは
、ポリリボヌクレオチドをベースにした、例えば、ｍＲＮＡをベースにしたものである。
このｍＲＮＡ分子は、抗体応答が望まれる標的タンパク質の翻訳を直接にコードし、かつ
促進することができなければならない。そのため、その分子はいくつかの成分を含有しな
ければならない。特定の態様では、第１の成分は、タンパク質、例えば、ヒト標的タンパ
ク質またはその断片のアミノ酸配列に対応するオープンリーディングフレームである。天
然のコドン配列を使用してもよく、あるいは、翻訳効率および根本的に標的のタンパク質
発現レベルを上昇させるために、宿主種（マウスまたはウサギなど）に関してコドン最適
化を実施してもよい。さらなる改変をオープンリーディングフレームに対して行い、タン
パク質発現／輸送を亢進してもよい。分泌タンパク質または膜タンパク質については、こ
のことは、インターロイキン２（ＩＬ－２）からの分泌シグナルなどの異種のシグナルペ
プチドの使用を含み得る。分泌タンパク質についての特定の例では、ｍＲＮＡ分子は、ヒ
トＩＬ－２またはＩｇＧカッパのシグナルペプチドなどの異種のシグナルペプチドを含ん
でもよい。
特定の態様では、第２の成分は、コンセンサスコザック配列である。例示的なコザック
ＤＮＡ配列としては、ＧＣＣＡＣＣＡＴＧ（配列番号１）が提供され、ヌクレオチドＡＴ
Ｇは開始メチオニンを表す。例示的なコザックＲＮＡ配列としては、ＧＣＣＡＣＣＡＵＧ
（配列番号１１）が提供され、ヌクレオチドＡＵＧは開始メチオニンを表す。コザック配
列の他の非限定的な例は、ＲＮＡまたはＤＮＡのいずれかによってコードされるような：
（ＧＣＣ）ＧＣＣＲＣＣＡＵＧＧ（配列番号１２）、ＡＧＮＮＡＵＧＮ（配列番号１３）
、ＡＮＮＡＵＧＧ（配列番号２３）、ＡＣＣＡＵＧＧ（配列番号２４）、ＧＡＣＡＣＣＡ
ＵＧＧ（配列番号２５）、ＧＣＣＲＣＣＡＴＧＧ（配列番号５７）、ＣＡＡＡＣＡＴＧ（
配列番号５８）、ＡＡＡＡＡＡＴＧＴＣＴ（配列番号２８）、ＡＡＡＡＡＡＡＴＧＲＮＡ
（配列番号２９）、ＮＴＡＡＡＡＡＴＧＲＣＴ（配列番号３０）、ＴＡＡＡＡＡＡＴＧＡ
ＡＮ（配列番号３１）、ＧＮＣＡＡＡＡＴＧＧ（配列番号３２）、ＮＮＮＡＮＮＡＴＧＮ
Ｃ（配列番号３３）、およびＡＡＣＡＡＴＧＧＣ（配列番号３４）を含み、ここで、「Ｎ
」は、任意のヌクレオチド（例えば、ＤＮＡとの関係においてはＡ、Ｇ、ＣまたはＴ、お
よびＲＮＡとの関係においてはＡ、Ｇ、ＣまたはＵ）を意味し、「Ｒ」は、ＡまたはＧを
意味する。オープンリーディングフレームのコザック配列５’を含めることにより、真核
生物宿主における翻訳が亢進されることが広く知られている。
特定の態様では、第３の成分は、ｍＲＮＡの５’末端上の７－メチルグアノシンキャッ
プである。このキャップは、真核生物の開始因子ｅｌＦ４Ｅの動員および成熟リボソーム
の会合に必須である。ｍＲＮＡ転写物の生成に続いて、酵素的にまたは化学的にメチルグ
アノシンキャップを付加することができる。
特定の態様では、第４の成分は、ｍＲＮＡ転写物の３’終端上で見られるポリアデノシ
ン（ポリＡ）テールである。ポリＡトラクトは、細胞内におけるｍＲＮＡの半減期を延ば
し、効率的なリボソームの会合およびタンパク質翻訳を促進することが知られている。あ
る特定の実施形態では、本明細書に記載の組成物および方法のためのｍＲＮＡは、１２０
ヌクレオチド（配列番号５９）のポリＡテールを含む。ある種の実施形態では、本明細書
に記載の組成物および方法のためのｍＲＮＡは、６０～１２０ヌクレオチドを有するポリ
Ａテールを含む。特定の実施形態では、本明細書に記載の組成物および方法のためのｍＲ
ＮＡは、６０ヌクレオチド、７０ヌクレオチド、８０ヌクレオチド、９０ヌクレオチド、
１００ヌクレオチド、１１０ヌクレオチド、または１２０ヌクレオチドのポリＡテールを
含む。ポリＡトラクトの包含は、インビトロ転写を介して、またはポリ（Ａ）ポリメラー
ゼを用いた酵素的ポリアデニル化によってなされ得る。
特定の態様では、ｍＲＮＡ分子の第５の成分は、５’－および３’－非翻訳領域（ＵＴ
Ｒ）の包含である。特定の実施形態では、５’ＵＴＲはタバコエッチ病ウイルス（Ｔｏｂ
ａｃｃｏ ｅｔｃｈ ｖｉｒｕｓ）に由来し、３’ＵＴＲはヒトβ－グロビンで見られる
３’ＵＴＲのタンデムリピートである。ＵＴＲの存在により、ｍＲＮＡの翻訳を亢進し、
かつ細胞内でその半減期を増大させることができることは広く受け入れられている（例え
ば、Ｒ．Ｌ．ＴａｎｇｕａｙおよびＤ．Ｒ． Ｇａｌｌｉｅ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ａｎ
ｄ Ｃｅｌｌｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ １９９６ ｖｏｌ １６ ｎｏ１ ｐｐ １４
６－１５６を参照のこと）。
十分な量のそのようなＲＮＡ分子は、インビトロ転写と、それに続くＲＮＡの精製によ
り得てもよい。ＤＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼを用いてクローン化されたＤＮＡ配列を
インビトロで転写する手法は、当技術分野でよく知られている（例えば、Ｓａｍｂｒｏｏ
ｋ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ
Ｍａｎｕａｌ，２ｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ， Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌ
ａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，１９８９を参照のこと）。ウラシル、グアニン、シト
シン、アデニン、プソイドウラシルなどの天然に存在するリボヌクレオチド、または修飾
されたリボヌクレオチドのいずれも、それらがなおも適切なコドン認識およびタンパク質
翻訳に対応する限り、ｍＲＮＡ合成に使用してもよい。本発明では、ｍＲＮＡ合成のため
にグアニン、シトシン、アデニン、およびプソイドウラシルを使用した。特定の態様では
、ウラシルの代わりにプソイドウラシルを使用することにより、ＢｉｏＡｎａｌｙｚｅｒ
（後述される）上での品質管理評価中にｍＲＮＡサイズのより正確な見積もりが可能にな
る。
ＩＶ．脂質／ポリヌクレオチド複合体の使用
本開示によれば、特定の態様では、脂質／ポリヌクレオチド複合体を使用して、インビ
ボトランスフェクションを行う。トランスフェクトされた細胞は、ポリヌクレオチド（例
えば、ｍＲＮＡなどのポリリボヌクレオチド）によってコードされたタンパク質を発現し
、外来タンパク質を、例えば、細胞表面上に発現または提示し得る。その結果、宿主動物
（例えば、非ヒト宿主動物）は、外来タンパク質、すなわち免疫原に対する免疫応答を開
始する。
合成ｍＲＮＡは、プラスミドＤＮＡ鋳型、ｒＮＴＰおよびＴ７ ＲＮＡポリメラーゼを
用いてインビトロで転写される。７－メチルグアノシンキャップ構造（Ｃａｐ１）がｍＲ
ＮＡの５’末端に酵素的に付加されて、効率的な翻訳を促進する。キャップされたｍＲＮ
Ａは、カチオン性脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）に製剤化されて、分解からｍＲＮＡを保護し、
細胞質送達を亢進する。ｍＲＮＡ ＬＮＰは、４℃で３～４ヶ月安定であり、免疫化のた
めの使用に対して準備が整っている。特定の態様では、カチオン性脂質－ポリヌクレオチ
ド複合体は、カチオン性脂質溶液を同量のポリヌクレオチド溶液と混合することによって
形成される。カチオン性脂質およびポリヌクレオチドは、無菌の生理学的に適合性のある
任意の水性担体中に溶解することができる。特定の実施形態では、カチオン性脂質および
ポリヌクレオチドは、無菌の生理食塩水（１５０ｍＭ ＮａＣｌ）中に溶解される。溶液
は、周囲温度で混合される。ある種の実施形態では、溶液は２５℃で混合される。混合後
、カチオン性脂質－ポリヌクレオチド複合体は、例えば、１５～４５分間、室温でインキ
ュベートされる。
本明細書記載の方法の脂質／ポリヌクレオチド複合体の投与は、非経口、静脈内、筋肉
内、皮下、鼻腔内、または任意の他の好適な手段によるものであり得る。マウスでは、ｍ
ＲＮＡ ＬＮＰの静脈内投与は、皮下送達よりも優位であることが判明した（図１Ｂを参
照のこと）。投与される具体的な用量は、年齢、体重、もしあれば、目下の治療の種類、
および発現されることになる免疫原の性質に依存し得る。初回用量は、ブースター用量を
後に伴って、免疫原性応答を亢進し得る。ｍＲＮＡ ＬＮＰによる免疫化はまた、他の免
疫原形態により交替され得る（図１Ｃを参照のこと）。
免疫化は、宿主において免疫原特異的な抗体の産生を引き起こすため、本開示はまた、
免疫原特異的な抗体を作製する方法に関する。ポリクローナル抗体は、当技術分野におい
てよく知られた方法を用いて宿主動物から単離され、かつ精製され得る（例えば、Ｈａｒ
ｌｏｗ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａ
ｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，１９
８８を参照のこと）。
本開示はまた、モノクローナル抗体を作製するためのｍＲＮＡ ＬＮＰに基づく免疫化
の使用に関する。本方法によれば、非ヒト動物（例えば、マウス）が脂質／ｍＲＮＡ複合
体を注射され、抗体産生細胞（例えば、Ｂリンパ球または脾細胞）が、免疫化した動物（
例えば、マウス）から単離される。モノクローナル抗体は、当技術分野で知られている任
意の方法、例えば、ＫｏｈｌｅｒおよびＭｉｌｓｔｅｉｎ（Ｎａｔｕｒｅ ２５６：４９
５－４９７（１９７５）（例えば、Ｈａｒｌｏｗ ｅｔ ａｌ．，上記）を参照のこと）
の方法に従って作製される。要約すると、モノクローナル抗体は、動物（例えば、マウス
）をカチオン性脂質－ｍＲＮＡ複合体で免疫化し、血清試料を取り出すことによって抗体
産生の存在を確認し、脾臓を取り出してＢリンパ球を入手し、Ｂリンパ球を骨髄腫細胞と
融合してハイブリドーマを作製し、ハイブリドーマをクローニングし、抗免疫原抗体を産
生する陽性クローンを選択し、抗免疫原抗体産生クローンを培養し、そして、抗免疫原抗
体をハイブリドーマ培養液から単離することによって作製することができる。
Ｖ．ＲＮＡの修飾
本明細書に記載の組成物および方法のためのｍＲＮＡなどのポリリボヌクレオチドは、
エンドヌクレアーゼおよびエキソヌクレアーゼによる迅速な分解を予防し、かつＲＮＡに
対する細胞の自然免疫またはインターフェロン応答を回避または低減するための修飾を含
むことができる。修飾には、例えば、（ａ）末端の修飾、例えば、５’末端修飾（リン酸
化、脱リン酸化、コンジュゲーション、逆方向結合など）、３’末端修飾（コンジュゲー
ション、ＤＮＡヌクレオチド、逆方向結合など）、（ｂ）塩基修飾、例えば、修飾された
塩基、安定化塩基、不安定化塩基、もしくはパートナーの広範なレパートリーと塩基対合
する塩基による置換、またはコンジュゲートされた塩基、（ｃ）糖の修飾（例えば、２’
位もしくは４’位での）または糖の置換、および（ｄ）ホスホジエステル結合の修飾また
は置換を含むヌクレオシド間の結合の修飾を含むが、これらに限定されない。
特定の態様では、本明細書に記載のｍＲＮＡなどのポリリボヌクレオチドはさらに、５
’キャップを含むことができる。本明細書に記載の態様のいくつかの実施形態では、修飾
合成ｍＲＮＡは、５’－５’三リン酸結合を用いてＲＮＡ分子の５’末端に結合される修
飾されたグアニンヌクレオチドを含む５’キャップを含む。用語「５’キャップ」はまた
、例えば、５’ジグアノシンキャップ、メチレン－ビス（ホスホナート）部分を有する四
リン酸キャップアナログ（例えば、Ｒｙｄｚｉｋ，ＡＭ ｅｔ ａｌ．（２００９） Ｏ
ｒｇ Ｂｉｏｍｏｌ Ｃｈｅｍ ７（２２）：４７６３－７６を参照のこと）、ホスホロ
チオアート修飾を有するジヌクレオチドキャップアナログ（例えば、Ｋｏｗａｌｓｋａ，
Ｊ．ｅｔ ａｌ．（２００８）ＲＮＡ １４（６）：１１１９－１１３１を参照のこと）
、非架橋酸素についての硫黄置換を有するキャップアナログ（例えば、Ｇｒｕｄｚｉｅｎ
－Ｎｏｇａｌｓｋａ，Ｅ．ｅｔ ａｌ．，（２００７）ＲＮＡ １３（１０）：１７４５
－１７５５を参照のこと）、Ｎ７－ベンジル化ジヌクレシド四リン酸アナログ（例えば、
Ｇｒｕｄｚｉｅｎ，Ｅ．ｅｔ ａｌ．（２００４）ＲＮＡ １０（９）：１４７９－１４
８７を参照のこと）、またはアンチリバースキャップアナログ（例えば、Ｊｅｍｉｅｌｉ
ｔｙ，Ｊ．ｅｔ ａｌ．，（２００３）ＲＮＡ ９（９）：１１０８－１１２２およびＳ
ｔｅｐｉｎｓｋｉ，Ｊ．ｅｔ ａｌ．（２００１）ＲＮＡ ７（１０）：１４８６－１４
９５を参照のこと）を含む他の５’キャップアナログを包含することが意図される。１つ
のそのような実施形態では、５’キャップアナログは、５’ジグアノシンキャップである
。いくつかの実施形態では、本発明の修飾合成ｍＲＮＡは、５’三リン酸を含まない。
５’キャップは、翻訳を開始するためのｍＲＮＡのリボソームへの認識および結合に重
要である。５’キャップはまた、本明細書に記載の修飾合成ｍＲＮＡを５’エキソヌクレ
アーゼ媒介性の分解から保護する。
本明細書に記載のｍＲＮＡなどのポリリボヌクレオチドはさらに、５’および／または
３’非翻訳領域（ＵＴＲ）を含むことができる。非翻訳領域は、開始コドン（５’）の上
流、および終止コドン（３’）の下流にあるＲＮＡの領域であり、したがって、翻訳装置
によって翻訳されない。非翻訳領域は、リボヌクレアーゼおよびＲＮＡ分解に関与する他
のタンパク質を妨害することができるため、１つ以上の非翻訳領域によるＲＮＡ分子の修
飾により、ｍＲＮＡの安定性を向上させることができる。加えて、５’および／または３
’非翻訳領域によるＲＮＡの修飾は、ｍＲＮＡに対するリボソームの結合を変化させる結
合タンパク質による翻訳効率を亢進させることができる。３’ＵＴＲによるＲＮＡの修飾
を用いて、ＲＮＡの細胞質局在を維持することができ、それにより、細胞の細胞質におい
て翻訳が生じることを可能にする。一実施形態では、本発明の修飾合成ｍＲＮＡは、５’
または３’ＵＴＲを含まない。別の実施形態では、本発明の修飾合成ｍＲＮＡは、５’ま
たは３’ＵＴＲのいずれかを含む。別の実施形態では、本発明の修飾合成ｍＲＮＡは、５
’および３’ＵＴＲの両方を含む。一実施形態では、５’および／または３’ＵＴＲは、
細胞において高い安定性を有すると知られているｍＲＮＡ（例えば、マウスのα－グロビ
ンの３’ＵＴＲ）から選択される。いくつかの実施形態では、５’ＵＴＲ、３’ＵＴＲ、
または両方は、１つ以上の修飾されたヌクレオシドを含む。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｍＲＮＡなどのポリリボヌクレオチドはさ
らに、コザック配列を含む。「コザック配列」は、コンセンサス（ｇｃｃ）ｇｃｃＲｃｃ
ＡＵＧＧ（配列番号１２）を有する真核生物のｍＲＮＡ上の配列を指し、ここで、Ｒは、
開始コドン（ＡＵＧ）の３塩基上流のプリン（アデニンまたはグアニン）であり、開始コ
ドンにさらなる「Ｇ」が続く。コザックコンセンサス配列がリボソームによって認識され
て、ポリペプチドの翻訳が開始される。通常、開始は、転写物の５’末端の近位にある翻
訳装置が直面する最初のＡＵＧコドンにおいて起こる。しかし、場合によって、このＡＵ
Ｇコドンは、リーキースキャニングと称されるプロセスにおいて迂回される場合がある。
ＡＵＧコドンの近傍のコザック配列の存在は、翻訳の開始部位としてそのコドンを増強す
ることになり、その結果、適切なポリペプチドの翻訳が起こる。さらに、開始コドンに関
して曖昧さがない場合でさえ、本明細書に記載の修飾合成ｍＲＮＡへのコザック配列の付
加により、より効率的な翻訳を促進することができる。したがって、いくつかの実施形態
では、本明細書に記載の修飾合成ＲＮＡはさらに、適切な長さのポリペプチドを産生する
翻訳の開始のために、所望の部位においてコザックコンセンサス配列を含む。いくつかの
このような実施形態では、コザック配列は、１つ以上の修飾されたヌクレオシドを含む。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の修飾合成ｍＲＮＡはさらに「ポリ（Ａ）テ
ール」を含み、これは、アデニンヌクレオチドの３’ホモポリマーテールを指し、長さは
変動する場合があり（例えば、少なくとも５個のアデニンヌクレオチド）、数百個のアデ
ニンヌクレオチドに達する場合がある）。３’ポリ（Ａ）テールを含むことにより、本発
明の修飾合成ｍＲＮＡを細胞中での分解から保護することができ、核外局在も促進して、
翻訳効率を亢進する。いくつかの実施形態では、ポリ（Ａ）テールは、１～５００個のア
デニンヌクレオチドを含み（配列番号６０）；他の実施形態では、ポリ（Ａ）テールは、
少なくとも５個以上のアデニンヌクレオチドを含む。一実施形態では、ポリ（Ａ）テール
は、１～１５０個のアデニンヌクレオチドを含む。一実施形態では、ポリ（Ａ）テールは
、６０～１２０個のアデニンヌクレオチドを含む。別の実施形態では、ポリ（Ａ）テール
は、９０～１２０個のアデニンヌクレオチドを含む。いくつかのこのような実施形態では
、ポリ（Ａ）テールは、１つ以上の修飾されたヌクレオシドを含む。
以下は、本明細書で提供されるｍＲＮＡによる免疫化方法に従う産生および発現に適用
できる標的タンパク質抗原の代表的な例である。ｍＲＮＡの生成およびこれによる宿主動
物の免疫化は、本明細書に記載のように前記方法の概念実証を示す。
Ｉ．ＲＸＦＰ１
ＲＸＦＰ１、すなわちリラキシン／インスリン様ファミリーペプチド受容体１は、ロイ
シンリッチ反復Ｎ末端細胞外ドメインを含有する７５７アミノ酸のクラスＡ Ｇタンパク
質共役型受容体（ＧＰＣＲ）である。系統学的に、卵胞刺激ホルモン受容体、黄体形成ホ
ルモン受容体、および甲状腺刺激ホルモン受容体を含む同一の受容体サブファミリーの一
部である。ＲＸＦＰ１の内因性のリガンドは、タンパク質ホルモンのリラキシンである。
ＲＸＦＰ１およびそのリガンドは、月経ならびに妊娠および分娩と関係した生理学的応答
の一部の制御において意味づけられてきた。急性非代償性心不全に罹患した患者において
、第ＩＩＩ相臨床試験（ＲＥＬＡＸ－ＡＨＦ）は、入院期間中の４８時間の組換え体リラ
キシン注射により６ヶ月後の死亡率を有意に低減したことを示している。
高レベルのＲＸＦＰ１発現を有する細胞株の確立は、細胞毒性のために困難である。多
くのＧＰＣＲのように、精製された全長の組換え体タンパク質の発現もまた、技術的に手
が出せない。
ヒトＲＸＦＰ１のｍＲＮＡの生成のために、ＲＸＦＰ１のオープンリーディングフレー
ムに関する天然のヒトヌクレオチド配列（例えば、アクセッション番号ＮＭ＿０２１６３
４．３／ＮＰ＿０６７６４７．２）は、ＧｅｎｅＡｒｔ（登録商標）のマウス用コドン最
適化アルゴリズムを用いてコドン最適化が施された（表１を参照のこと）。マウスの片寄
りを基準にしたコドン配列の変更に加えて、配列は、これらが後に続くサブクローニング
およびｍＲＮＡの合成のために用いられるであろうことから、ＢａｍＨＩ、ＲｓｒＩＩお
よびＢｓｐＱＩ制限酵素部位を除去するために変更された。
Figure 2022160674000002
Figure 2022160674000003
Figure 2022160674000004
Figure 2022160674000005
Figure 2022160674000006
Figure 2022160674000007
Figure 2022160674000008
Figure 2022160674000009
ＩＩ．ＳＬＣ５２Ａ２
ＳＬＣ５２Ａ２（ＧＰＲ１７２Ａ）は、１０個または１１個の推定上の膜貫通ヘリック
スを有すると予測される４４５アミノ酸の複数回膜貫通タンパク質である。それは、リボ
フラビンの細胞内取り込みを媒介することが示されており、ブタ内在性レトロウイルスサ
ブグループＡに対する受容体であることが報告されている。ＳＬＣ５２Ａ２のある種の遺
伝的変異体は、運動、感覚、および頭部ニューロン症と関連がある。
ヒトＳＬＣ５２Ａ２のｍＲＮＡの生成のために、このタンパク質のオープンリーディン
グフレームに関する天然のヒトヌクレオチド配列（例えば、アクセッション番号ＮＭ＿０
０１２５３８１６．１／ＮＰ＿００１２４０７４５）は、ＧｅｎｅＡｒｔ（登録商標）の
マウス用コドン最適化アルゴリズムを用いてコドン最適化が施された（表２を参照のこと
）。マウスの片寄りを基準にしたコドン配列の変更に加えて、配列は、これらが後に続く
サブクローニングおよびｍＲＮＡの合成のために用いられるであろうことから、ＢａｍＨ
Ｉ、ＲｓｒＩＩおよびＢｓｐＱＩ制限酵素部位を除去するために変更された。
Figure 2022160674000010
Figure 2022160674000011
Figure 2022160674000012
Figure 2022160674000013
Figure 2022160674000014
ＩＩＩ．ＡＮＧＰＴＬ８
ＡＮＧＰＴＬ８は、脂質代謝に関与する分泌タンパク質であり、ヒト血漿においてｎｇ
／ｍｌの低い濃度で見出すことができる。しかし、このタンパク質は、異種系統において
、その天然の可溶性形態での発現は困難である。さらに、このタンパク質の生化学的機能
は記述されておらず、したがって、組換え技術によって生成されたタンパク質の活性を測
定するために使用され得るインビトロ機能アッセイがない。作製の難しさ、および抗原と
して使用するための組換え体ＡＮＧＰＴＬ８の品質を検証する難しさを考慮すると、この
タンパク質は、モノクローナル抗体を作製するｍＲＮＡ媒介性の免疫化のための良好な候
補であった。
ヒトＡＮＧＰＴＬ８の全長コード配列（例えば、アクセッション番号ＮＰ＿０６１１５
７）を、ヒト細胞での発現のためにコドン最適化し、ならびにＴ７ポリメラーゼによるｍ
ＲＮＡ転写を維持することができ、かつｍＲＮＡの安定性および翻訳可能性を助ける３お
よび５’非翻訳領域の両方を含有するベクターにクローン化した（配列については表３を
参照のこと）。ｍＲＮＡを、上述のようにインビトロで転写し、脂質ナノ粒子に被包した
。
Figure 2022160674000015
Figure 2022160674000016
Figure 2022160674000017
Figure 2022160674000018
ＩＶ．ＴＳＨＲ
甲状腺刺激ホルモン受容体（ＴＳＨＲ）は、甲状腺の発育および甲状腺ホルモン産生に
必須のＧタンパク質共役型受容体である。それはまた、グレーブス病における自己抗原で
もある。ＴＳＨＲに特異的な抗体によるＴＳＨＲの遷延性の活性化は、グレーブス病の根
底にある主要な原因の１つである（Ｄａｖｉｅｓ ＴＦ（２０１５）Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐ
ｉｎ Ｔｈｅｒ Ｔａｒｇｅｔｓ；１９：８３５－４７）。
ＴＳＨＲは、大きな細胞外ドメイン（ＥＣＤ）および膜貫通ドメイン（ＴＭＤ）を有す
る。ＥＣＤは、ＴＳＨおよび多くの自己抗体の結合部位を含有する１１個のロイシンリッ
チ反復ドメイン（ＬＲＤ）を有する。ＴＳＨＲは、広範な翻訳後修飾を経て、ホモ二量体
および多量体を形成することができる。ＴＳＨＲは、低いベースラインの構成的活性を有
する。そのシグナル伝達は、Ｇｓ、Ｇｉ／ｏ、Ｇｑ／１１またはＧ１２／１３によって媒
介され、乱雑である。ＴＳＨＲは、黄体形成ホルモンおよび絨毛性ゴナドトロピン受容体
（ＬＨＣＧＲ）と５１％同一であり、卵胞刺激ホルモン受容体（ＦＳＨＲ）と４８％同一
である。
正常な甲状腺では、ＴＳＨはＴＳＨＲを活性化し、甲状腺細胞の増殖および甲状腺ホル
モンの放出を調節している。グレーブス病では、患者においてアゴニストの自己抗体が産
生される。それらがＴＳＨに取って代わり、調節されていない様式で受容体を過剰に活性
化する。すなわち、甲状腺が肥大し、Ｔ３およびＴ４のレベルが上昇する。
ヒトＴＳＨＲの全長コード配列（例えば、タンパク質アクセッション番号ＮＰ＿０００
３６０．２）を、ヒト細胞での発現のためにコドン最適化し、ならびにＴ７ポリメラーゼ
によるｍＲＮＡ転写を維持することができ、かつｍＲＮＡの安定性および翻訳可能性を助
ける３および５’非翻訳領域の両方を含有するベクターにクローン化した（配列について
は表４を参照のこと）。ｍＲＮＡを、上述のようにインビトロで転写し、脂質ナノ粒子に
被包した。
Figure 2022160674000019
Figure 2022160674000020
Figure 2022160674000021
Figure 2022160674000022
Figure 2022160674000023
Figure 2022160674000024
Figure 2022160674000025
Ｖ．ＡＰＪ
ＡＰＪ、アンジオテンシン様１受容体、アンジオテンシンＩＩ様１受容体などとも称さ
れるアペリン受容体は、内因性リガンドのアペリンに対して同族である以前はオーファン
であったＧタンパク質共役型受容体（ＧＰＣＲ）である。アペリン／ＡＰＪ経路は、心血
管系において広範にわたって発現され、アペリンは、前臨床モデルにおいて、有益な主要
な心血管効果を示している。ヒトにおける急性アペリン投与は、末梢および冠動脈の血管
拡張を引き起こし、心拍出量を増加させる（Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ．２０１０；１２１
：１８１８－１８２７）。その結果、ＡＰＪのアゴニズムは、心不全患者にとっての重要
な治療標的として台頭している。アペリン受容体ＡＰＪの活性化は、現行の療法の傾向を
伴わずに、心収縮性を増大させ、心臓保護をもたらすと考えられている。
ＡＰＪは、心臓だけでなく血管、腎臓、肝臓、脂肪組織および脳を含む他の臓器ならび
に組織において広範に分布している。
ヒトＡＰＪの全長コード配列（例えば、タンパク質アクセッション番号ＮＰ＿００５１
５２．１）を、ヒト細胞での発現のためにコドン最適化し、ならびにＴ７ポリメラーゼに
よるｍＲＮＡ転写を維持することができ、かつｍＲＮＡの安定性および翻訳可能性を助け
る３および５’非翻訳領域の両方を含有するベクターにクローン化した（配列については
表５を参照のこと）。ｍＲＮＡを、上述のようにインビトロで転写し、脂質ナノ粒子に被
包した。
Figure 2022160674000026
Figure 2022160674000027
Figure 2022160674000028
Figure 2022160674000029
Figure 2022160674000030
Figure 2022160674000031
ＶＩ．ＧＰ１３０
糖タンパク質１３０（ＧＰ１３０）は、９１８アミノ酸を含有するタンパク質であり、
Ｉ型１回膜貫通型タンパク質受容体ファミリーのメンバーである。それは、インターロイ
キン６、インターロイキン１１、毛様体神経栄養因子、白血病抑制因子、およびオンコス
タチンＭを含む多くのサイトカインによって用いられるシグナル伝達複合体の中心的な成
分である。インターロイキン６（ＩＬ６）の場合、ＧＰ１３０はＩＬ６／ＩＬ６Ｒ（α鎖
）複合体に結合して、高親和性ＩＬ６結合部位の形成およびシグナル伝達の開始を引き起
こす。ＧＰ１３０は、５つのＩＩＩ型フィブロネクチンドメインおよび１つのＩｇ様Ｃ２
タイプドメインを含有する。
ヒトＧＰ１３０の全長コード配列（例えば、タンパク質アクセッション番号ＮＰ＿００
２１７５．２またはＡＡＩ１７４０５）を、ヒト細胞での発現のためにコドン最適化し、
ならびにＴ７ポリメラーゼによるｍＲＮＡ転写を維持することができ、かつｍＲＮＡの安
定性および翻訳可能性を助ける３および５’非翻訳領域の両方を含有するベクターにクロ
ーン化した（配列については表６を参照のこと）。ｍＲＮＡを、上述のようにインビトロ
で転写し、脂質ナノ粒子に被包した。
Figure 2022160674000032
Figure 2022160674000033
Figure 2022160674000034
Figure 2022160674000035
Figure 2022160674000036
Figure 2022160674000037
Figure 2022160674000038
Figure 2022160674000039
ＶＩＩ．ガレクチン－３
ガレクチン－３は、２６ｋＤａのタンパク質であり、β－ガラクトシド－結合レクチン
ファミリーのメンバーである。それは、コラーゲン様Ｎ末端ドメイン、およびガレクチン
－３の糖を結びつける能力を与えるＣ末端糖認識ドメインを含有する。そのＮ末端ドメイ
ンを介して、ガレクチン－３はより高次のオリゴマーを形成することができる。ガレクチ
ン－３は、細胞接着、分化、転移、胚形成、炎症、および線維形成において役割を果たす
ことが示唆されている。
ヒトガレクチン－３の全長コード配列（例えば、タンパク質アクセッション番号ＮＰ＿
００２２９７）を、ヒト細胞での発現のためにコドン最適化し、ならびにＴ７ポリメラー
ゼによるｍＲＮＡ転写を維持することができ、かつｍＲＮＡの安定性および翻訳可能性を
助ける３および５’非翻訳領域の両方を含有するベクターにクローン化した（配列につい
ては表７を参照のこと）。ｍＲＮＡを、上述のようにインビトロで転写し、脂質ナノ粒子
に被包した。
Figure 2022160674000040
Figure 2022160674000041
Figure 2022160674000042
Figure 2022160674000043
Ｖ．被包性核酸ナノ粒子
用語「脂質ナノ粒子」または「ＬＮＰ」もしくは「ＬＮＰｓ」は、分子間力によって互
いに物理的に会合（例えば、共有結合的にまたは非共有結合的に）した複数の（すなわち
、２つ以上の）脂質分子を含む粒子を指す。脂質ナノ粒子は、例えば、ミクロスフィア（
単層および多層の小胞を含む、例えば、リポソーム）、エマルション中で分散した相、ミ
セル、または懸濁液中の内相であってもよい。
用語「脂質ナノ粒子ホスト」は、分子間力／静電相互作用によって互いに物理的に会合
して、ｍＲＮＡなどの１つ以上の核酸分子を被包する複数の脂質分子を指す。
ある種の実施形態は、薬学的に許容される担体および被包性核酸ナノ粒子を含む、被包
性核酸ナノ粒子組成物を提供する。被包性核酸ナノ粒子は、脂質ナノ粒子ホスト、および
核酸、例えば、脂質ナノ粒子ホスト内に被包されるｍＲＮＡなどのポリリボヌクレオチド
を含む。
用語「薬学的に許容される担体」は、本明細書で使用する場合、非毒性の不活性希釈剤
を意味する。薬学的に許容される担体として機能することができる材料は、パイロジェン
フリー水、脱イオン水、等張生理食塩水、リンガー液、リン酸緩衝液を含むが、これらに
限定されない。好ましい実施態様では、被包性核酸ナノ粒子は、約４０～約７０ｎｍの平
均サイズ、および動的光散乱法、例えば、Ｍａｌｖｅｒｎ Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ Ｎａｎ
ｏ ＺＳを使用して決定される約０．１未満の多分散指数を有する。脂質ナノ粒子ホスト
は、本明細書の他の箇所に記載の分解性のカチオン性脂質、脂質付加されたポリエチレン
グリコール、コレステロール、および１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホ
スホコリン成分を含む。
本明細書で提供されるのは、カチオン性脂質および別の脂質成分を含む、被包性核酸ナ
ノ粒子組成物を作製する方法である。別の実施形態は、カチオン性脂質およびヘルパー脂
質、例えば、コレステロールを用いる方法を提供する。別の実施形態は、カチオン性脂質
、ヘルパー脂質、例えば、コレステロール、および中性脂質、例えば、ＤＳＰＣを用いる
方法を提供する。本発明の別の実施形態は、カチオン性脂質、ヘルパー脂質、例えば、コ
レステロール、中性脂質、例えば、ＤＳＰＣ、およびステルス脂質、例えば、Ｓ０１０、
Ｓ０２４、Ｓ０２７、Ｓ０３１またはＳ０３３を用いる方法を提供する。本発明の別の実
施形態は、脂質ナノ粒子ホスト中に核酸を被包する方法を提供し、ナノ粒子は、カチオン
性脂質、ヘルパー脂質、例えば、コレステロール、中性脂質、例えば、ＤＳＰＣ、ステル
ス脂質、例えば、Ｓ０１０、Ｓ０２４、Ｓ０２７、Ｓ０３１またはＳ０３３を含み、核酸
は、例えば、ＲＮＡまたはＤＮＡである。本発明の別の実施形態は、カチオン性脂質、ヘ
ルパー脂質、例えば、コレステロール、中性脂質、例えば、ＤＳＰＣ、およびステルス脂
質、例えば、Ｓ０１０、Ｓ０２４、Ｓ０２７、Ｓ０３１またはＳ０３３を用いる方法を提
供し、核酸は、例えば、ｍＲＮＡ、ｍＲＮＡまたはＤＮＡである。
いくつかの実施形態では、脂質溶液／流は、カチオン性脂質化合物、ヘルパー脂質（コ
レステロール）、任意選択の中性脂質（ＤＳＰＣ）、およびステルス脂質（例えば、Ｓ０
１０、Ｓ０２４、Ｓ０２７、またはＳ０３１）を含有する。製剤が４種の脂質成分を含有
する場合、脂質のモル比は、カチオン性脂質について４０～６０を目標にして２０～７０
モルパーセントの範囲であってもよく、ヘルパー脂質のモルパーセントは３０～５０を目
標にして２０～７０の範囲にわたり、中性脂質のモルパーセントは１０～３０の範囲にわ
たり、ＰＥＧ脂質のモルパーセントは２～５を目標にして１～６の範囲を有する。
いくつかの実施形態では、脂質溶液／流は、３０～６０％の式（ＩＩＩ）の化合物、３
０～６０％のコレステロール／５～１０％のＤＳＰＣ、および１～５％のＰＥＧ－ＤＭＧ
、Ｓ０１０、Ｓ０１１またはＳ０２４を含有する。
本開示の別の実施形態は、約４０～５５のカチオン性脂質／約４０～５５のヘルパー脂
質の脂質モル比において、カチオン性脂質およびヘルパー脂質、例えば、コレステロール
を用いて、脂質ナノ粒子ホスト中に核酸を被包する方法を提供する。別の実施形態は、約
４０～５５のカチオン性脂質／約４０～５５のヘルパー脂質／約５～１５の中性脂質の脂
質モル比において、カチオン性脂質、ヘルパー脂質、例えば、コレステロール、および中
性脂質、例えば、ＤＳＰＣを使用する方法を提供する。別の実施形態は、約４０～５５の
カチオン性脂質／約４０～５５のヘルパー脂質／約５～１５の中性脂質／約１～１０のス
テルス脂質の脂質モル比において、カチオン性脂質、ヘルパー脂質、例えば、コレステロ
ール、中性脂質、例えば、ＤＳＰＣ、およびステルス脂質、例えば、Ｓ０１０、Ｓ０２４
、Ｓ０２７、Ｓ０３１またはＳ０３３を使用する方法を提供する。
本開示の別の実施形態は、約４０～５０のカチオン性脂質／約４０～５０のヘルパー脂
質の脂質モル比において、カチオン性脂質およびヘルパー脂質、例えば、コレステロール
を用いて、脂質ナノ粒子ホスト中に核酸を被包する方法を提供する。別の実施形態は、約
４０～５０のカチオン性脂質／約４０～５０のヘルパー脂質／約５～１５の中性脂質の脂
質モル比において、カチオン性脂質、ヘルパー脂質、例えば、コレステロール、および中
性脂質、例えば、ＤＳＰＣを使用する方法を提供する。別の実施形態は、約４０～５０の
カチオン性脂質／約４０～５０のヘルパー脂質／約５～１５の中性脂質／約１～５のステ
ルス脂質の脂質モル比において、カチオン性脂質、ヘルパー脂質、例えば、コレステロー
ル、中性脂質、例えば、ＤＳＰＣ、およびステルス脂質、例えば、Ｓ０１０、Ｓ０２４、
Ｓ０２７、Ｓ０３１またはＳ０３３を使用する方法を提供する。
本開示の別の実施形態は、約４３～４７のカチオン性脂質／約４３～４７のヘルパー脂
質の脂質モル比において、カチオン性脂質およびヘルパー脂質、例えば、コレステロール
を用いて、脂質ナノ粒子ホスト中に核酸を被包する方法を提供する。別の実施形態は、約
４３～４７のカチオン性脂質／約４３～４７のヘルパー脂質／約７～１２の中性脂質の脂
質モル比において、カチオン性脂質、ヘルパー脂質、例えば、コレステロール、および中
性脂質、例えば、ＤＳＰＣを使用する方法を提供する。別の実施形態は、約４３～４７の
カチオン性脂質／約４３～４７のヘルパー脂質／約７～１２の中性脂質／約１～４のステ
ルス脂質の脂質モル比において、カチオン性脂質、ヘルパー脂質、例えば、コレステロー
ル、中性脂質、例えば、ＤＳＰＣ、およびステルス脂質、例えば、Ｓ０１０、Ｓ０２４、
Ｓ０２７、Ｓ０３１またはＳ０３３を使用する方法を提供する。
本開示の別の実施形態は、約４５％のカチオン性脂質および約４４％のヘルパー脂質の
脂質モル比において、カチオン性脂質およびヘルパー脂質、例えば、コレステロールを用
いて、脂質ナノ粒子ホスト中に核酸を被包する方法を提供する。別の実施形態は、約４５
％のカチオン性脂質、約４４％のヘルパー脂質、および約９％の中性脂質の脂質モル比に
おいて、カチオン性脂質、ヘルパー脂質、例えば、コレステロール、および中性脂質、例
えば、ＤＳＰＣを使用する方法を提供する。別の実施形態は、約４５％のカチオン性脂質
、約４４％のヘルパー脂質、約９％の中性脂質、および約２％のステルス脂質の脂質モル
比において、カチオン性脂質、ヘルパー脂質、例えば、コレステロール、中性脂質、例え
ば、ＤＳＰＣ、およびステルス脂質、例えば、Ｓ０１０、Ｓ０２４、Ｓ０２７、Ｓ０３１
またはＳ０３３を使用する方法を提供する。
本開示の一実施形態は、カチオン性脂質および別の脂質成分を含む、被包性核酸ナノ粒
子組成物を作製する方法を提供する。別の実施形態は、式（Ｉ）の化合物およびヘルパー
脂質、例えば、コレステロールを用いる方法を提供する。別の実施形態は、カチオン性脂
質、ヘルパー脂質、例えば、コレステロール、および中性脂質、例えば、ＤＳＰＣを用い
る方法を提供する。本開示の別の実施形態は、カチオン性脂質、ヘルパー脂質、例えば、
コレステロール、中性脂質、例えば、ＤＳＰＣ、およびステルス脂質、例えば、Ｓ０１０
、Ｓ０２４、Ｓ０２７、Ｓ０３１またはＳ０３３を用いる方法を提供する。本開示の別の
実施形態は、脂質ナノ粒子ホスト中に核酸を被包する方法を提供し、ナノ粒子は、カチオ
ン性脂質、ヘルパー脂質、例えば、コレステロール、中性脂質、例えば、ＤＳＰＣ、ステ
ルス脂質、例えば、Ｓ０１０、Ｓ０２４、Ｓ０２７、Ｓ０３１またはＳ０３３を含み、核
酸は、例えば、ＲＮＡまたはＤＮＡである。本開示の別の実施形態は、カチオン性脂質、
ヘルパー脂質、例えば、コレステロール、中性脂質、例えば、ＤＳＰＣ、およびステルス
脂質、例えば、Ｓ０１０、Ｓ０２４、Ｓ０２７、Ｓ０３１またはＳ０３３を用いる方法を
提供し、核酸は、例えば、ｍＲＮＡ、ｍＲＮＡまたはＤＮＡである。
本開示の別の実施形態は、約４０～５５の式（Ｉ）の化合物／約４０～５５のヘルパー
脂質の脂質モル比において、カチオン性脂質およびヘルパー脂質、例えば、コレステロー
ルを用いて、脂質ナノ粒子ホスト中に核酸を被包する方法を提供する。別の実施形態は、
約４０～５５のカチオン性脂質／約４０～５５のヘルパー脂質／約５～１５の中性脂質の
脂質モル比において、カチオン性脂質、ヘルパー脂質、例えば、コレステロール、および
中性脂質、例えば、ＤＳＰＣを使用する方法を提供する。別の実施形態は、約４０～５５
の式（Ｉ）の化合物／約４０～５５のヘルパー脂質／約５～１５の中性脂質／約１～１０
のステルス脂質の脂質モル比において、カチオン性脂質、ヘルパー脂質、例えば、コレス
テロール、中性脂質、例えば、ＤＳＰＣ、およびステルス脂質、例えば、Ｓ０１０、Ｓ０
２４、Ｓ０２７、Ｓ０３１またはＳ０３３を使用する方法を提供する。
本開示の別の実施形態は、約４０～５０のカチオン性脂質／約４０～５０のヘルパー脂
質の脂質モル比において、カチオン性脂質およびヘルパー脂質、例えば、コレステロール
を用いて、脂質ナノ粒子ホスト中に核酸を被包する方法を提供する。別の実施形態は、約
４０～５０のカチオン性脂質／約４０～５０のヘルパー脂質／約５～１５の中性脂質の脂
質モル比において、カチオン性脂質、ヘルパー脂質、例えば、コレステロール、および中
性脂質、例えば、ＤＳＰＣを使用する方法を提供する。別の実施形態は、約４０～５０の
カチオン性脂質／約４０～５０のヘルパー脂質／約５～１５の中性脂質／約１～５のステ
ルス脂質の脂質モル比において、カチオン性脂質、ヘルパー脂質、例えば、コレステロー
ル、中性脂質、例えば、ＤＳＰＣ、およびステルス脂質、例えば、Ｓ０１０、Ｓ０２４、
Ｓ０２７、Ｓ０３１またはＳ０３３を使用する方法を提供する。
本開示の別の実施形態は、約４３～４７のカチオン性脂質／約４３～４７のヘルパー脂
質の脂質モル比において、カチオン性脂質およびヘルパー脂質、例えば、コレステロール
を用いて、脂質ナノ粒子ホスト中に核酸を被包する方法を提供する。別の実施形態は、約
４３～４７のカチオン性脂質／約４３～４７のヘルパー脂質／約７～１２の中性脂質の脂
質モル比において、カチオン性脂質、ヘルパー脂質、例えば、コレステロール、および中
性脂質、例えば、ＤＳＰＣを使用する方法を提供する。別の実施形態は、約４３～４７の
カチオン性脂質／約４３～４７のヘルパー脂質／約７～１２の中性脂質／約１～４のステ
ルス脂質の脂質モル比において、カチオン性脂質、ヘルパー脂質、例えば、コレステロー
ル、中性脂質、例えば、ＤＳＰＣ、およびステルス脂質、例えば、Ｓ０１０、Ｓ０２４、
Ｓ０２７、Ｓ０３１またはＳ０３３を使用する方法を提供する。
本開示の別の実施形態は、約４５％のカチオン性脂質および約４４％のヘルパー脂質の
脂質モル比において、カチオン性脂質およびヘルパー脂質、例えば、コレステロールを用
いて、脂質ナノ粒子ホスト中に核酸を被包する方法を提供する。別の実施形態は、約４５
％のカチオン性脂質、約４４％のヘルパー脂質、および約９％の中性脂質の脂質モル比に
おいて、カチオン性脂質、ヘルパー脂質、例えば、コレステロール、および中性脂質、例
えば、ＤＳＰＣを使用する方法を提供する。別の実施形態は、約４５％のカチオン性脂質
、約４４％のヘルパー脂質、約９％の中性脂質、および約２％のステルス脂質の脂質モル
比において、カチオン性脂質、ヘルパー脂質、例えば、コレステロール、中性脂質、例え
ば、ＤＳＰＣ、およびステルス脂質、例えば、Ｓ０１０、Ｓ０２４、Ｓ０２７、Ｓ０３１
またはＳ０３３を使用する方法を提供する。
本開示のプロセスにおける脂質：核酸（例えば、ｍＲＮＡなどのポリリボヌクレオチド
）の比は、約１５～２０：１（ｗｔ／ｗｔ）であってもよい。ある種の実施形態では、脂
質：核酸の比は、約１７～１９：１である。他の実施形態では、脂質：核酸の比は、約１
８．５：１である。他の実施形態では、脂質：核酸の比は、少なくとも約３０：１、２５
：１、２４：１、２３：１、２２：１、２１：１、２０：１、１９：１、１８：１、１７
：１、１６：１、１５：１、１４：１、１３：１、１２：１、１１：１、または１０：１
（ｗｔ／ｗｔ）である。
ある種の態様では、本開示のプロセスによって作製されるナノ粒子は、平均（ａｖｅｒ
ａｇｅ／ｍｅａｎ）直径および平均値付近のサイズ分布を有する。より狭い範囲の粒径が
、より一様な分布の粒径に対応する。粒径は、インキュベーション時間の後、またはナノ
粒子製剤を十分に処理（例えば、希釈、濾過、透析など）した後、ナノ粒子の回収時に測
定され得る。例えば、粒径測定は通常、６０分間のインキュベーション期間後および／ま
たは十分な試料処理後になされる。平均粒径は、Ｚ平均または数平均のいずれかとして報
告される。Ｚ平均は、Ｍａｌｖｅｒｎ Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ上での動的光散乱法により測
定される。ナノ粒子試料は、計数速度が約２００～４００ｋｃｔｓとなるようリン酸緩衝
生理食塩水（ＰＢＳ）で希釈される。データは、強度測度の加重平均として示される。動
的光散乱法はまた、粒径分布の幅を数量化する多分散指数（ＰＤＩ）を提供する。ＰＤＩ
の増大は、粒径分布の増大と相関し、逆の場合も同様である。他方では、数平均は、顕微
鏡下での測定によって決定することができる。
いくつかの実施形態では、本開示のプロセスによって作製される被包性核酸ナノ粒子は
、約３０～約１５０ｎｍの平均粒径を有する。他の実施形態では、粒子は、約３０～約４
０ｎｍの平均粒径を有する。他の実施形態では、粒子は、約４０～約７０ｎｍの平均粒径
を有する。他の実施形態では、粒子は、約６５～約８０ｎｍの平均粒径を有する。他の実
施形態では、粒子は、約５０～約８０ｎｍのＺ平均、および／または約４０～約８０ｎｍ
の数平均を有する。さらに他の実施形態では、粒子は、約５０～約７０ｎｍのＺ平均、お
よび／または約４０～約６５ｎｍの数平均を有する。さらに他の実施形態では、粒子は、
約７０～約８０ｎｍのＺ平均、および／または約６０～約８０ｎｍの数平均を有する。得
られる粒子の粒径は、核酸および脂質流の線速度、任意選択の希釈ステップの使用、およ
び使用される特定の核酸または脂質に依存し得る。線速度の増大および第１の出口溶液の
有機溶媒濃度を３３％未満に維持することにより、より小さな粒径を生成しやすくなる。
いくつかの実施形態では、本開示のプロセスによって作製される被包性ｍＲＮＡナノ粒
子は、約３０～約１５０ｎｍの平均粒径を有する。他の実施形態では、粒子は、約３０～
約４０ｎｍの平均粒径を有する。他の実施形態では、粒子は、約４０～約７０ｎｍの平均
粒径を有する。他の実施形態では、粒子は、約６５～約８０ｎｍの平均粒径を有する。他
の実施形態では、粒子は、約５０～約８０ｎｍのＺ平均、および／または約４０～約８０
ｎｍの数平均を有する。さらに他の実施形態では、粒子は、約５０～約７０ｎｍのＺ平均
、および／または約４０～約６５ｎｍの数平均を有する。さらに他の実施形態では、粒子
は、約７０～約８０ｎｍのＺ平均、および／または約６０～約８０ｎｍの数平均を有する
。さらに他の実施形態では、本開示のプロセスによって作製される被包性ｍＲＮＡナノ粒
子は、約３０ｎｍ、約３５ｎｍ、約４０ｎｍ、約４５ｎｍ、約５０ｎｍ、約５５ｎｍ、約
６０ｎｍ、約６５ｎｍ、約７０ｎｍ、約７５ｎｍ、または約８０ｎｍの平均粒径を有し得
る。さらに他の実施形態では、本開示のプロセスによって作製される被包性ｍＲＮＡナノ
粒子は、少なくとも約３０ｎｍ、約３５ｎｍ、約４０ｎｍ、約４５ｎｍ、約５０ｎｍ、約
５５ｎｍ、約６０ｎｍ、約６５ｎｍ、約７０ｎｍ、約７５ｎｍ、または約８０ｎｍの平均
粒径を有し得る。さらに他の実施形態では、本開示のプロセスによって作製される被包性
ｍＲＮＡナノ粒子は、約３０ｎｍ未満、約３５ｎｍ、約４０ｎｍ、約４５ｎｍ、約５０ｎ
ｍ、約５５ｎｍ、約６０ｎｍ、約６５ｎｍ、約７０ｎｍ、約７５ｎｍ、または約８０ｎｍ
の平均粒径を有し得る。
動的光散乱法（例えば、Ｍａｌｖｅｒｎ Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ ＮａｎｏＺＳ）を使用
して、多分散指数（ＰＤＩ）は、０～１．０の範囲であり得る。ある種の実施形態では、
ＰＤＩは約０．２未満である。他の実施形態では、ＰＤＩは約０．１未満である。いくつ
かの実施形態では、ＰＤＩは、１．５未満、１．４未満、１．３未満、１．２未満、１．
１未満、１．０未満、０．９未満、０．８未満、０．７未満、０．６未満、０．５未満、
０．４未満、０．３未満、０．２未満、または０．１未満である。
本開示のプロセスは、カチオン性脂質を、所望のｐＫａ範囲、ステルス脂質、ヘルパー
脂質、および中性脂質と組み合わせて、インビボでの特定の細胞および組織への送達のた
めに、例えば、リポソーム製剤、脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）製剤などを含む製剤へと当業者
によってさらに最適化されてもよい。一実施形態では、さらなる最適化は、これらの様々
な種類の脂質間の脂質モル比を調節することにより得られる。一実施形態では、さらなる
最適化は、所望の粒径、Ｎ／Ｐ比、および／またはプロセスパラメーターの１つ以上を調
節することにより得られる。上記で列挙する実施形態に関する当業者に知られる様々な最
適化手法は、本発明の一部とみなされる。
脂質ナノ粒子ホスト中に核酸を被包するプロセス
下記方法を使用して、本明細書で提供される脂質ナノ粒子を作製することができる。脂
質ナノ粒子を作製する非限定的な例が記載されており、例えば、ＰＣＴ国際特許出願公開
番号の国際公開第２０１６／０１０８４０号パンフレット、国際公開第２０１６／０３７
０５３号パンフレット、国際公開第２０１５／０９５３４６号パンフレット、国際公開第
２０１５／０９５３４０号パンフレット、国際公開第２０１４／１３６０８６号パンフレ
ット、および国際公開第２０１１／０７６８０７号パンフレットを参照されたく、各々は
、参照によりその全体が本明細書中に組み込まれる。粒子のサイズ縮小を達成するために
、および／または粒子のサイズの一様性を増大させるために、当業者は、以下に提示する
方法ステップを使用して、様々な組み合わせを実験してもよい。加えて、当業者は、リポ
ソーム製剤で使用される超音波処理、濾過または他のサイジング手法を採用することがで
きる。
本明細書で提供される組成物を作製するプロセスは通常、第１のリザーバー中に核酸を
含む、クエン酸緩衝液などの水溶液を用意することと、有機アルコール、例えばエタノー
ルなどの脂質の有機溶液を含む第２のリザーバーを用意することと、続いて水溶液を有機
脂質溶液と混合することとを含む。第１のリザーバーは、任意選択により、第２のリザー
バーと流体連通している。混合ステップに続いて、任意選択で、インキュベーションステ
ップ、濾過または透析ステップ、ならびに希釈および／または濃縮ステップが行われる。
インキュベーションステップは、混合ステップからの溶液を、ほぼ室温にて約０～約２４
時間（好ましくは、約１時間）容器中で、および任意選択で光から保護して静置させるこ
とを含む。一実施形態では、希釈ステップがインキュベーションステップに続いて行われ
る。希釈ステップは、例えば、ポンピング装置（例えば、蠕動ポンプ）を使用した、水性
緩衝液（例えば、クエン酸緩衝液または純水）による希釈を含み得る。濾過ステップは、
限外濾過または透析であってもよい。限外濾過は、好適な限外濾過膜（例えば、ＧＥのＨ
ｏｌｌｏｗ ｆｉｂｅｒ ｃａｒｔｒｉｄｇｅまたは均等物）とともに好適なポンピング
システム（例えば、蠕動ポンプなどのポンピング装置またはその均等物）を使用した、希
釈した溶液の濃縮、続くダイアフィルトレーションを含む。透析は、好適な膜（例えば、
１０，０００ｍｗｃ ｓｎａｋｅｓｋｉｎ膜）に通した溶媒（緩衝液）交換を含む。
一実施形態では、混合ステップは、透明な単相をもたらす。一実施形態では、混合ステ
ップの後、有機溶媒を除去して、粒子の懸濁液をもたらし、核酸は脂質により被包される
。
有機溶媒の選択には、通常、溶媒の極性および粒子形成の後の段階で溶媒を除去するこ
とができる容易さを考慮することが必要になる。可溶化剤としても用いられる有機溶媒は
、好ましくは核酸および脂質の透明な単相混合物を得るのに十分な量である。好適な有機
溶媒として、注射用製剤のための共溶媒としての使用に関して、Ｓｔｒｉｃｋｌｅｙ，Ｐ
ｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｒｅｓ．（２００４），２１，２０１－２３０により記載
されるものを含む。例えば、有機溶媒は、エタノール、プロピレングリコール、ポリエチ
レングリコール３００、ポリエチレングリコール４００、グリセリン、ジメチルアセトア
ミド（ＤＭＡ）、Ｎ－メチル－２－ピロリドン（ＮＭＰ）、およびジメチルスルホキシド
（ＤＭＳＯ）のうちの１つ以上（例えば、２つ）から選択され得る。一実施形態では、有
機溶媒はエタノールである。
本開示の組成物を作製するための装置が、本明細書中に開示される。装置は通常、核酸
を含む水溶液を保持するための少なくとも１つのリザーバー、および有機脂質溶液を保持
するための別の１つ以上のリザーバーを含む。装置はまた通常、水性および有機脂質溶液
を混合領域または混合チャンバー内に汲み出すように構成されたポンプ機構を含む。いく
つかの実施形態では、混合領域または混合チャンバーは、水性および有機液体流が十字型
コネクターへの流入物として混合することを可能にし、得られた混合水性および有機溶液
が十字型コネクターから出て、回収リザーバーまたはその均等物に流入することを可能に
する、十字型継手またはその均等物を含む。他の実施形態では、混合領域または混合チャ
ンバーは、水性および有機液体流がＴ字型コネクターへの流入物として混合することを可
能にし、得られた混合水性および有機溶液がＴ字型コネクターから出て、回収リザーバー
またはその均等物に流入することを可能にする、Ｔ字型継手またはその均等物を含む。
ある種の実施形態では、１つ以上の核酸流中の核酸の濃度は、約０．１～約１．５ｍｇ
／ｍＬであり、１つ以上の脂質流中の脂質の濃度は、約１０～約２５ｍｇ／ｍＬである。
他の実施形態では、１つ以上の核酸流中の核酸の濃度は、約０．２～約０．９ｍｇ／ｍＬ
であり、１つ以上の脂質流中の脂質の濃度は、約１５～約２０ｍｇ／ｍＬである。他の実
施形態では、１つ以上の核酸流中の核酸の濃度は、約０．２２５、０．３、０．３３、ま
たは０．４５～約０．６７５ｍｇ／ｍＬであり、１つ以上の脂質流中の脂質の濃度は、約
１６～１８ｍｇ／ｍＬである。他の実施形態では、１つ以上の核酸流中の核酸の濃度は、
約０．２２５、０．３、０．３３、０．４５、または０．６７５ｍｇ／ｍＬであり、１つ
以上の脂質流中の脂質の濃度は、約１６．７ｍｇ／ｍＬである。
脂質流は、有機溶媒中に１つ以上の脂質の混合物を含む。１つ以上の脂質は、カチオン
性脂質、中性脂質、ヘルパー脂質、およびステルス脂質の混合物であってもよく、それら
の各々は、最終的な被包性核酸ナノ粒子に関して本明細書の上記の他の箇所で記載される
ものとほぼ同じ相対量で存在し得る。脂質流に使用される有機溶媒は、脂質を可溶化させ
ることが可能であり、かつ水性媒体と混和性でもあるものである。好適な有機溶媒は、エ
タノール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール３００、ポリエチレングリコ
ール４００、グリセリン、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）、Ｎ－メチル－２－ピロリド
ン（ＮＭＰ）、およびジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）を含む。一態様では、有機溶媒
は、約８０％以上のエタノールを含む。ある特定の態様では、有機溶媒は、約９０％以上
のエタノールを含む。ある特定の態様では、有機溶媒はエタノールである。ある種の実施
形態では、脂質流は、クエン酸ナトリウムの緩衝溶液（例えば、２５ｍＭ）などの任意選
択の緩衝溶液を含む。
核酸流は、第１の水溶液中に好適な核酸の混合物を含む。第１の水溶液は、塩を含まな
くてもよく、または少なくとも１つの塩を含んでもよい。例えば、第１の水溶液は、添加
塩を伴わずに、脱イオン水または蒸留水中に好適な核酸を含んでもよい。ある種の実施形
態では、第１の水溶液は、例えば、塩化ナトリウムおよび／またはクエン酸ナトリウムな
どの少なくとも１つの塩を含む第１の緩衝溶液である。第１の水溶液において、塩化ナト
リウムは、約０～約３００ｍＭの範囲の濃度で存在し得る。ある種の実施形態では、塩化
ナトリウムの濃度は、約５０、６６、７５、１００、または１５０ｍＭである。第１の水
溶液は、約０ｍＭ～約１００ｍＭの濃度でクエン酸ナトリウムを含み得る。第１の緩衝溶
液は、好ましくは、ｐＨ約４～約６．５、より好ましくは、約４．５～５．５を有する。
いくつかの実施形態では、第１の緩衝溶液のｐＨは、約５であり、クエン酸ナトリウム濃
度は、約２５ｍＭである。他の実施形態では、第１の緩衝溶液のｐＨは、約６であり、ク
エン酸ナトリウムの濃度は、約１００ｍＭである。特定の実施形態では、第１の緩衝溶液
は、カチオン性脂質のｐＫａ未満のｐＨを有する。水溶液中に塩を含まない本開示の実施
形態に関して、脂質流は、任意選択の緩衝溶液を含む。核酸流または脂質流のいずれかに
おける塩（例えば、クエン酸ナトリウム）の不存在下では、被包は生じない。
他の可能な緩衝液として、酢酸ナトリウム／酢酸、Ｎａ２ＨＰＯ４／クエン酸、フタル
酸水素カリウム／水酸化ナトリウム、フタル酸水素二ナトリウム／オルトリン酸二水素ナ
トリウム、フタル酸水素二カリウム／オルトリン酸二水素カリウム、オルトリン酸二水素
カリウム／水酸化ナトリウムを含むが、これらに限定されない。
ある種の実施形態では、有機溶媒はエタノールを含み、第１の出口溶液は、約２０～２
５％のエタノール、約０．１５～０．２５ｍｇ／ｍＬの核酸、および約３～４．５ｍｇ／
ｍＬの脂質を含む。他の実施形態では、有機溶媒はエタノールを含み、第１の出口溶液は
、約２０％のエタノール、約０．１５～０．２ｍｇ／ｍＬの核酸、および約３～３．５ｍ
ｇ／ｍＬの脂質を含む。さらに他の実施形態では、有機溶媒はエタノールを含み、第１の
出口溶液は、約２０％のエタノール、約０．１８ｍｇ／ｍＬの核酸、および約３．３ｍｇ
／ｍＬの脂質を含む。他の実施形態では、有機溶媒はエタノールを含み、第１の出口溶液
は、約２５％のエタノール、約０．２～０．２５ｍｇ／ｍＬの核酸、および約４～４．５
ｍｇ／ｍＬの脂質を含む。さらに他の実施形態では、有機溶媒はエタノールを含み、第１
の出口溶液は、約２５％のエタノール、約０．２３ｍｇ／ｍＬの核酸、および約４．２ｍ
ｇ／ｍＬの脂質を含む。
本開示のいくつかの実施形態では、核酸および脂質の濃度は、両方ともに低下または上
昇され得る。例えば、より効率的なプロセスのために可能な限り高い濃度を保持すること
が一般的に望ましいが、核酸の濃度を約０．０４５ｍｇ／ｍＬに、および脂質の濃度を約
１．６７ｍｇ／ｍＬに低下させることが可能である。しかしながら、さらに低い濃度では
、粒子凝集が増加する傾向にある。
ある種の実施形態では、１つ以上の核酸流中の核酸の濃度は、約０．１～約１．５ｍｇ
／ｍＬであり、１つ以上の脂質流中の脂質の濃度は、約１０～約２５ｍｇ／ｍＬである。
他の実施形態では、１つ以上の核酸流中の核酸の濃度は、約０．２～約０．９ｍｇ／ｍＬ
であり、１つ以上の脂質流中の脂質の濃度は、約１５～約２０ｍｇ／ｍＬである。他の実
施形態では、１つ以上の核酸流中の核酸の濃度は、約０．２２５、０．３、０．３３、ま
たは０．４５～約０．６７５ｍｇ／ｍＬであり、１つ以上の脂質流中の脂質の濃度は、約
１６～１８ｍｇ／ｍＬである。他の実施形態では、１つ以上の核酸流中の核酸の濃度は、
約０．２２５、０．３、０．３３、０．４５、または０．６７５ｍｇ／ｍＬであり、１つ
以上の脂質流中の脂質の濃度は、約１６．７ｍｇ／ｍＬである。一般に、より高い核酸濃
度は、好ましい範囲（例えば、約０．１５～０．２５ｍｇ／ｍＬ）で第１の出口流６０中
の核酸濃度を維持するために、それに対応して希釈流５０からの希釈のレベルを増大させ
ることが必要になる。
特定の実施形態では、脂質：核酸の質量比は、約１５～２０：１または約１７～１９：
１であり、出口溶液中の有機溶媒の濃度は、約２０～２５％である。他の特定の実施形態
では、脂質：核酸の質量比は、約１８．５：１であり、出口溶液中の有機溶媒の濃度は、
約２５％である。
特定の実施形態では、脂質：核酸の質量比は、約１７～１９：１である。他の特定の実
施形態では、脂質：核酸の質量比は、約１８．５：１である。
特定の実施形態では、脂質：核酸の質量比は、約１５～２０：１または約１７～１９：
１であり、出口溶液中の有機溶媒の濃度は、約２０～２５％である。他の特定の実施形態
では、脂質：核酸の質量比は、約１８．５：１であり、出口溶液中の有機溶媒の濃度は、
約２０％または２５％である。
特定の実施形態では、脂質：核酸の質量比は、約１７～１９：１である。他の特定の実
施形態では、脂質：核酸の質量比は、約１８．５：１である。特定の実施形態では、脂質
：核酸の質量比は、約１５～２０：１または約１７～１９：１であり、出口溶液中の有機
溶媒の濃度は、約２０～２５％である。他の特定の実施形態では、脂質：核酸の質量比は
、約１８．５：１であり、出口溶液中の有機溶媒の濃度は、約２０％である。
特定の実施形態では、脂質：核酸の質量比は、約１７～１９：１である。他の特定の実
施形態では、脂質：核酸の質量比は、約１８．５：１である。
ある種の態様では、被包率は６０％を超える。ある種の態様では、被包率は６５％を超
える。ある種の態様では、被包率は７０％を超える。本開示のいくつかの実施形態では、
７５％以上の核酸が被包される。他の実施形態では、８０％または８５％の核酸が被包さ
れる。さらに他の実施形態では、９０％以上の核酸が被包される。他の実施形態では、約
９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約
９９％、または約１００％の核酸が被包される。
ある種の態様では、本明細書に記載の被包性核酸ナノ粒子の形成後に、第１の出口溶液
は、室温で約６０分間インキュベートされ得る。インキュベーション後、溶液を第２の希
釈溶媒と混合して、第１の出口溶液を約２倍希釈して、第２の出口溶液を用意してもよい
。第２の希釈溶媒は、第３の緩衝溶液または水であり得る。希釈ステップは、例えば、Ｔ
字型コネクター中で、インキュベートした第１の出口溶液を第２の希釈溶媒（水）と混合
することにより実施され得る。インキュベートした第１の出口溶液および第２の希釈溶媒
は、例えば、約０．５～１メートル／秒などの任意の好適な流速または速度で、Ｔ字型コ
ネクターに供給され得る。希釈ステップ後に、第２の出口溶液中の有機溶媒の濃度は、第
１の出口溶液に対して、半減する。したがって、いくつかの実施形態では、第２の出口溶
液中の有機溶媒（例えば、エタノール）の濃度は、１６．５％未満である。他の実施形態
では、第２の出口溶液中の有機溶媒（例えば、エタノール）の濃度は、約１０～１５％、
約１０～１２．５％、約１２．５％、または約１０％である。第２の出口溶液を、タンジ
ェンシャルフロー濾過により濃縮し、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を用いた１５Ｘダ
イアフィルトレーションに付して、出発緩衝液およびエタノールを除去してもよく、出発
緩衝液およびエタノールは、ＰＢＳで置き換えられる。タンジェンシャルフロー濾過後、
ＰＢＳ中の濃縮された被包性核酸ナノ粒子のプールを回収して、滅菌濾過してもよい。上
述のさらなるプロセスステップにより作製される製剤中に存在する被包性核酸ナノ粒子は
、４℃で６カ月を超過して安定に保存され得る。
本明細書に開示される実施形態の各々によれば、核酸がｍＲＮＡなどのポリリボヌクレ
オチドであるさらなる実施形態が存在する。例えば、本明細書に記載の実施形態によれば
、核酸流が、緩衝溶液中に１つ以上のｍＲＮＡ分子の混合物を含み、かつ本明細書に開示
される線速度を有するｍＲＮＡ流であるさらなる実施形態が存在する。
ＶＩ．動物の免疫化
免疫化に使用される宿主動物は、体液性（抗体）媒介性免疫応答を起こすことができる
任意の種を包含する。免疫化に使用される非ヒト動物などの宿主動物の非限定的な例は、
マウス、ラット、ウサギ、ヤギ、ヒツジ、ラクダ科動物、ウマ、ニワトリ、イヌ、ネコ、
ブタ、ロバ、雌ウシ、サル、およびサメを含む。
標的タンパク質に対するヒト抗体を作製するための本開示の特定の態様では、マウスの
免疫系ではなく、ヒト免疫系の一部を保有する、トランスジェニックマウスまたはトラン
スクロモソミックマウスを、本明細書に記載のｍＲＮＡ－ＬＮＰ複合体により免疫化され
る宿主動物として使用してもよい。これらのトランスジェニックマウスおよび／またはト
ランスクロモソミックマウスの非限定的な例は、本明細書中でそれぞれＨｕＭＡｂマウス
およびＫＭマウスと称されるマウスを含み、本明細書中では「ヒトＩｇマウス」と総称さ
れる。
ＨｕＭＡｂマウス（登録商標）（Ｍｅｄａｒｅｘ，Ｉｎｃ．）は、内在性μおよびκ鎖
遺伝子座を不活性化する標的化された変異とともに、再編成されていないヒト重鎖（μお
よびγ）ならびにκ軽鎖免疫グロブリン配列をコードするヒト免疫グロブリンの小さな遺
伝子座を含む（例えば、Ｌｏｎｂｅｒｇ，ｅｔ ａｌ．，１９９４ Ｎａｔｕｒｅ ３６
８（６４７４）：８５６－８５９を参照のこと）。したがって、マウスは、マウスＩｇＭ
またはκの発現の低下を示し、免疫に応答して、導入されたヒト重鎖および軽鎖導入遺伝
子がクラススイッチおよび体細胞変異を経て、高親和性のヒトＩｇＧκモノクローナルを
産生する（Ｌｏｎｂｅｒｇ，Ｎ．ｅｔ ａｌ．，１９９４上記；Ｌｏｎｂｅｒｇ，Ｎ．，
１９９４ Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏ
ｇｙ １１３：４９－１０１において概説される；Ｌｏｎｂｅｒｇ，Ｎ．およびＨｕｓｚ
ａｒ，Ｄ．，１９９５ Ｉｎｔｅｒｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３：６５－９３、な
らびにＨａｒｄｉｎｇ，Ｆ．およびＬｏｎｂｅｒｇ，Ｎ．，１９９５ Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．
Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．７６４：５３６－５４６）。ＨｕＭＡｂマウスの作製および使用なら
びにこのようなマウスにより保有されるゲノム改変は、Ｔａｙｌｏｒ，Ｌ．ｅｔ ａｌ．
，１９９２ Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ２０：６２８７－６２９
５；Ｃｈｅｎ，Ｊ．ｅｔ ａｔ．，１９９３ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｍｍｕｎ
ｏｌｏｇｙ ５：６４７－６５６；Ｔｕａｉｌｌｏｎ ｅｔ ａｌ．，１９９３ Ｐｒｏ
ｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９４：３７２０－３７２４；Ｃｈｏｉ ｅｔ
ａｌ．，１９９３ Ｎａｔｕｒｅ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ４：１１７－１２３；Ｃｈｅｎ
，Ｊ．ｅｔ ａｌ．，１９９３ ＥＭＢＯ Ｊ．１２：８２１－８３０；Ｔｕａｉｌｌｏ
ｎ ｅｔ ａｌ．，１９９４ Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５２：２９１２－２９２０；Ｔａ
ｙｌｏｒ，Ｌ．ｅｔ ａｌ．，１９９４ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ
ｏｇｙ ５７９－５９１；およびＦｉｓｈｗｉｌｄ，Ｄ．ｅｔ ａｌ．，１９９６ Ｎａ
ｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １４：８４５－８５１においてさらに記載され
ており、それらの全ての内容が、参照によりそれらの全体において本明細書に具体的に組
み込まれる。さらに、全てがＬｏｎｂｅｒｇおよびＫａｙによる、米国特許第５，５４５
，８０６号明細書；同第５，５６９，８２５号明細書；同第５，６２５，１２６号明細書
；同第５，６３３，４２５号明細書；同第５，７８９，６５０号明細書；同第５，８７７
，３９７号明細書；同第５，６６１，０１６号明細書；同第５，８１４，３１８号明細書
；同第５，８７４，２９９号明細書；および同第５，７７０，４２９号明細書、Ｓｕｒａ
ｎｉらによる、米国特許第５，５４５，８０７号明細書；全てがＬｏｎｂｅｒｇおよびＫ
ａｙによる、ＰＣＴ公開番号国際公開第９２１０３９１８号パンフレット、同第９３／１
２２２７号パンフレット、同第９４／２５５８５号パンフレット、同第９７１１３８５２
号パンフレット、同第９８／２４８８４号パンフレット、および同第９９／４５９６２号
パンフレット；ならびにＫｏｒｍａｎらによるＰＣＴ公開番号国際公開第０１／１４４２
４号パンフレットも参照されたい。
別の実施形態では、ヒト抗体は、ヒト重鎖導入遺伝子およびヒト軽鎖トランスクロモソ
ームを保有するマウスなどの、導入遺伝子およびトランスクロモソーム上にヒト免疫グロ
ブリン配列を保有するマウスを用いて、本明細書で提供されるｍＲＮＡ－免疫化方法によ
って産生させることができる。本明細書中で「ＫＭマウス」と称されるこのようなマウス
は、石田らによるＰＣＴ公開国際公開第０２／４３４７８号パンフレットに詳述されてい
る。さらに、ヒト免疫グロブリン遺伝子を発現する代替のトランスジェニック動物系は、
当技術分野で利用可能であり、本明細書で提供されるｍＲＮＡ－免疫化方法のための宿主
動物として使用することができる。例えば、Ｘｅｎｏｍｏｕｓｅ（Ａｂｇｅｎｉｘ，Ｉｎ
ｃ．）と呼ばれる代替のトランスジェニック系を使用することができる。このようなマウ
スは、例えば、Ｋｕｃｈｅｒｌａｐａｔｉらによる、米国特許第５，９３９，５９８号明
細書；同第６，０７５，１８１号明細書；同第６，１１４，５９８号明細書；同第６，１
５０，５８４号明細書、および同第６，１６２，９６３号明細書に記載されている。
さらに、ヒト免疫グロブリン遺伝子を発現する代替のトランスクロモソミック動物系は
、当技術分野で利用可能であり、本明細書で提供されるｍＲＮＡ－免疫化方法のための宿
主動物として使用することができる。例えば、「ＴＣマウス」と呼ばれる、ヒト重鎖トラ
ンスクロモソームおよびヒト軽鎖トランスクロモソームの両方を保有するマウスを使用す
ることができ、このようなマウスは、Ｔｏｍｉｚｕｋａ ｅｔ ａｌ．，２０００ Ｐｒ
ｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ． ＵＳＡ ９７：７２２－７２７に記載されている
。さらに、当技術分野では、ヒト重鎖および軽鎖トランスクロモソームを保有する雌ウシ
も記載されており（Ｋｕｒｏｉｗａ ｅｔ ａｌ．，２００２ Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔ
ｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ２０：８８９－８９４）、本明細書で提供されるｍＲＮＡ－免疫化
方法のための宿主動物として使用することができる。
被包性ｍＲＮＡ媒介性の免疫化の後、宿主動物由来の抗体分泌細胞（例えば、リンパ球
、骨髄細胞、形質細胞、または脾細胞など）を回収し、所望の特性を含有するタンパク質
標的に対して産生された抗体についてスクリーニングしてもよい。これは、ハイブリドー
マに基づく手法の使用、抗体産生Ｂ細胞の直接的なスクリーニング、その後のクローニン
グおよび組換え体抗体産生、またはＢ細胞からの組換え体抗体ライブラリの生成、その後
の発現およびファージディスプレイもしくは酵母ディスプレイなどの異種発現系における
スクリーニングを介してなされてもよい。
ある特定の態様では、宿主動物由来の抗体分泌細胞（例えば、リンパ球、骨髄細胞、形
質細胞、または脾細胞など）を、Ｆ０細胞（ＡＴＣＣ（登録商標）、ＣＲＬ－１６４６）
およびＳＰ２／０骨髄腫細胞（ＡＴＣＣ（登録商標）、ＣＲＬ－１５８１）などの融合パ
ートナー細胞（例えば、不死化Ｂ細胞癌細胞、例えば、不死化骨髄腫細胞）と融合する。
細胞融合は、電気融合または例えば、ポリエチレングリコールを使用する化学的プロトコ
ルなどの様々な方法によって実施することができる。
マウスが宿主動物である免疫化の場合、ハイブリドーマに基づく抗体産生に続くＦＡＣ
ＳまたはＥＬＩＳＡに基づくスクリーニングが、効率的な抗体発現およびスクリーニング
プラットフォームを提供する。標的特異的抗体の循環レベル（すなわち、血清力価）を、
ハイブリドーマに基づく集団免疫化にわたってモニターして、体液性応答の有効性を評価
することができる。ｍＲＮＡに基づく免疫化と関連する標的特異性の程度が高いことを考
慮すると、内在性または膜タンパク質に関する血清力価を、標的タンパク質を過剰発現す
る細胞を用いるＦＡＣＳによって効率的にモニターすることができる。可溶性タンパク質
に関する力価はまた、ＥＬＩＳＡによって評価され得る。血清力価に応じて、投与を調整
して、Ｂ細胞単離および骨髄腫融合の開始に好適であると見なされるレベルに達すること
ができる。ｍＲＮＡ投与の経路（例えば、静脈内、皮下、筋肉内など）を変更して、免疫
応答の程度およびおそらくは多様性を変えることもできる。被包性ｍＲＮＡの静脈内投与
は、迅速な標的特異的力価を発生させるための特に効果的な経路であることが判明した。
１つの一般化できる免疫化のスケジュールを、一例として下に概説する：
０日目：免疫学的に無感作のマウスにおいてベースライン力価を規定するために採血する
。
１日目（１回目の免疫化）：５～１００μｇ、例えば、２５～５０μｇの被包性ｍＲＮＡ
を、４匹のマウスの皮下および４匹のマウスの静脈内に注射する。
１０日目：血清力価をモニターするために採血する。
２１日目（２回目の免疫化）：５～１００μｇ、例えば、２５～５０μｇの被包性ｍＲＮ
Ａを、４匹のマウスの皮下および４匹のマウスの静脈内に注射する。
３１日目：血清力価をモニターするために採血する。
４２日目（最後の免疫化）：５～１００μｇ、例えば、２５～５０μｇの被包性ｍＲＮＡ
を、マウスの静脈内に注射する。
４５日目：脾細胞の単離およびハイブリドーマ融合のために脾臓を回収する。
ある種の態様では、一般化できる免疫化のスケジュールは、被包性ｍＲＮＡによる免疫
化と、組換え体タンパク質による免疫化または細胞全体／細胞全体の抽出物による免疫化
などの従来の免疫化方法との併用を含んでもよい。例えば、１回目の免疫化は、被包性ｍ
ＲＮＡによる免疫化を含み、続いて、組換え体タンパク質による免疫化または細胞全体／
細胞全体の抽出物による免疫化などの従来の免疫化方法による２回目の免疫化が行われる
。特定の態様では、免疫化、血清力価をモニターするための採血、および後に続く免疫化
のラウンドの間の日数は、１日、２日、３日、４日、５日、６日、または７日で変動して
もよい。
ＶＩＩＩ．抗体の作製
モノクローナル抗体の生成
モノクローナル抗体（ｍＡｂ）は、従来のモノクローナル抗体の方法論、例えば、Ｋｏ
ｈｌｅｒおよびＭｉｌｓｔｅｉｎ，１９７５ Ｎａｔｕｒｅ ２５６：４９５の標準的な
体細胞ハイブリダイゼーション技術を含む種々の手法により作製可能である。例えば、Ｂ
リンパ球のウイルス性形質転換または癌発生の形質転換など、モノクローナル抗体を作製
するための多くの手法を採用することができる。
ハイブリドーマを作製するための動物系は、マウス系、ラット系、およびウサギ系を含
む。マウスにおけるハイブリドーマ作製は、十分に確立された方法である。免疫化プロト
コルは本明細書で記載されており、融合のために免疫化された脾臓細胞を単離するための
手法は、当技術分野において知られている。融合パートナー（例えば、マウス骨髄腫細胞
）および融合手順もまた知られており、記載されている。
本開示のキメラまたはヒト化抗体は、本明細書で記載のように作製される、非ヒト、例
えば、マウスモノクローナル抗体の配列に基づいて作製することができる。重鎖および軽
鎖免疫グロブリンをコードするＤＮＡは、目的のハイブリドーマから入手することができ
、標準的な分子生物学的手法を用いて非マウス（例えばヒト）免疫グロブリン配列を含有
するように操作することができる。例えば、キメラ抗体を創出するために、当技術分野で
知られる方法を用いてマウス可変領域をヒト定常領域に連結することができる（例えば、
Ｃａｂｉｌｌｙらの米国特許第４，８１６，５６７号明細書を参照のこと）。ヒト化抗体
を創出するために、当技術分野で知られる方法を使用して、マウスＣＤＲ領域を、ヒトフ
レームワークへと挿入することができる。例えば、Ｗｉｎｔｅｒによる米国特許第５２２
５５３９号明細書；ならびにＱｕｅｅｎらによる米国特許第５５３０１０１号明細書；同
第５５８５０８９号明細書；同第５６９３７６２号明細書；および同第６１８０３７０号
明細書を参照されたい。
キメラ抗体は、抗体の様々な部分が異なる免疫グロブリン分子に由来する分子である。
例えば、キメラ抗体は、ヒト抗体の定常領域と融合したマウスまたはラットモノクローナ
ル抗体の可変領域を含有することができる。キメラ抗体を作製する方法は、当技術分野に
おいて知られている。例えば、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，１９８５，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２２９：
１２０２；Ｏｉ ｅｔ ａｌ．，１９８６，ＢｉｏＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ４：２１４；
Ｇｉｌｌｉｅｓ ｅｔ ａｌ．，１９８９，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌを参照されたい。
ある種の態様では、本開示の抗体はヒトモノクローナル抗体である。このようなヒトモ
ノクローナル抗体は、マウス系ではなくヒト免疫系の一部を保有するトランスジェニック
マウスまたはトランスクロモソミックマウスを用いて作製することができる。これらのト
ランスジェニックマウスおよび／またはトランスクロモソミックマウスは、本明細書中で
それぞれＨｕＭＡｂマウスおよびＫＭマウスと称されるマウスを含み、本明細書中では「
ヒトＩｇマウス」と総称される。
Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ５７９－５９１；およびＦｉｓｈｗｉｌｄ，Ｄ．ｅｔ ａｌ．
，１９９６ Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １４：８４５－８５１は、そ
れらの全ての内容が、参照によりそれらの全体において本明細書に具体的に組み込まれる
。さらに、全てがＬｏｎｂｅｒｇおよびＫａｙによる、米国特許第５，５４５，８０６号
明細書；同第５，５６９，８２５号明細書；同第５，６２５，１２６号明細書；同第５，
６３３，４２５号明細書；同第５，７８９，６５０号明細書；同第５，８７７，３９７号
明細書；同第５，６６１，０１６号明細書；同第５，８１４，３１８号明細書；同第５，
８７４，２９９号明細書；および同第５，７７０，４２９号明細書、Ｓｕｒａｎｉらによ
る、米国特許第５，５４５，８０７号明細書；全てがＬｏｎｂｅｒｇおよびＫａｙによる
、ＰＣＴ公開番号国際公開第９２１０３９１８号パンフレット、同第９３／１２２２７号
パンフレット、同第９４／２５５８５号パンフレット、同第９７１１３８５２号パンフレ
ット、同第９８／２４８８４号パンフレット、および同第９９／４５９６２号パンフレッ
ト；ならびにＫｏｒｍａｎらによるＰＣＴ公開番号国際公開第０１／１４４２４号パンフ
レットも参照されたい。
本明細書に記載のものなどの手法を使用して作製される抗体または抗原結合断片は、標
準的なよく知られた手法を使用して単離することができる。例えば、抗体または抗原結合
断片は、例えば、培養液、腹水、血清、細胞可溶化物、合成反応材料などから、例えば、
プロテインＡ－セファロース、ハイドロキシアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳
動、透析、または親和性クロマトグラフィーなどの従来の免疫グロブリン精製方法によっ
て、好適に単離され得る。
以下の実施例は例示として提供されるものであり、特に明記されない限り、本発明の限
定を意図しない。
実施例１
被包性ｍＲＮＡ作製のワークフロー
ステップ１：ｃＤＮＡの設計およびインビトロ転写ベクターへのクローニング
ｃＤＮＡコンストラクトの設計
天然のｃＤＮＡ配列は、それが、サブクローニング計画において、または転写前の最終
コンストラクトの線状化において使用される制限酵素のための任意のコンセンサス部位を
含有しない場合に、サブクローニングの目的で使用され得る。この特定の例では、サブク
ローニングに使用される制限酵素はＢａｍＨＩおよびＲｓｒＩＩであり、線状化に使用さ
れる制限酵素はＢｓｐＱＩである。しかし、任意の好適な制限酵素および対応する制限酵
素部位を使用することができる。例えば、目的の標的タンパク質をコードする特定のｃＤ
ＮＡ中に存在しないある種の制限酵素部位を、サブクローニング計画および線状化のため
に選択することができる。
天然のｃＤＮＡ配列はまた、マウスまたはウサギなどの非ヒト動物における発現のため
に、例えば、ＧｅｎｅＯｐｔｉｍｉｚｅｒ（登録商標）ソフトウェア（ＴｈｅｒｍｏＦｉ
ｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｉｎｃ．）を使用する従来の方法を用いてコドン最適
化され得る。コドン最適化のプロセスは、以下：（ｉ）ＲＮＡの安定性を増大させるため
の、潜在性のスプライス部位およびＲＮＡ不安定化配列エレメントの除去；（ｉｉ）ＲＮ
Ａ安定化配列エレメントの付加；（ｉｉｉ）特定の発現系のためのコドン最適化およびＧ
／Ｃ含量調節；（ｉｖ）イントロン除去；ならびに（ｖ）安定的なＲＮＡ２次構造の回避
の１つ以上を含む。ＧｅｎｅＯｐｔｉｍｉｚｅｒ（登録商標）ソフトウェアを使用する特
定の態様では、コドン最適化の設定は、５’／３’の制限を保護し、分子の残部からそれ
らを排除するように調節された。ＢｓｐＱ１コンセンサス配列（フォワード［ＧＣＴＣＴ
ＴＣ］およびリバース［ＧＡＡＧＡＧＣ］の両方、ＢｓｐＱ１は回文構造の配列の制限酵
素ではないため）もまた、排除されなければならない。
Figure 2022160674000044
ベクターの説明
標的タンパク質をコードするｃＤＮＡ（例えば、表１～７を参照のこと）を、Ｔ７ Ｒ
ＮＡポリメラーゼプロモーターからのＲＮＡポリメラーゼ媒介性の転写を駆動するように
設計されたベクターにクローン化した。Ｔ７プロモーターのすぐ下流は、タバコエッチ病
ウイルス（Ｔｏｂａｃｃｏ ｅｔｃｈ ｖｉｒｕｓ）（ＴＥＶ）の５’非翻訳領域（ＵＴ
Ｒ）をコードする配列である。このＵＴＲは、真核細胞における翻訳効率を向上させるこ
とが示されている。ＴＥＶのＵＴＲの下流に、標的タンパク質のｃＤＮＡが配置される。
コザックコンセンサス配列（ｃｃｇｃｃａｃｃ）を、翻訳を亢進するためにイニシエータ
メチオニン／開始コドンの上流に挿入した。２つの終止コドンを、ＲｓｒＩＩ制限酵素部
位を後に伴うｃＤＮＡの末端に配置した。２つの直列のヒトβグロビン３’ＵＴＲが、そ
のｃＤＮＡ配列に続く。このエレメントは、細胞内でのｍＲＮＡの安定性を高めることが
示されている。ベクターの転写に関連する成分のＣ末端エレメントは、ポリＡテールであ
る。特定の実施形態では、標的タンパク質またはその断片をコードするｍＲＮＡのポリＡ
テールは、約５０ｂｐｓ～１２０ｂｐｓまたは６０ｂｐｓ～１２０ｂｐｓである。特定の
実施形態では、標的タンパク質またはその断片をコードするｍＲＮＡのポリＡテールは、
約６０ｂｐｓまたは１２０ｂｐｓである。ある種の実施形態では、標的タンパク質または
その断片をコードするｍＲＮＡのポリＡテールは、約７０ｂｐｓ、８０ｂｐｓ、９０ｂｐ
ｓ、１００ｂｐｓ、または１１０ｂｐｓである。
ｃＤＮＡのインビトロ転写ベクターへのクローニング
制限酵素ＢａｍＨＩ／ＲｓｒＩＩによりベクターとともにｃＤＮＡコンストラクトを消
化することにより、アガロースゲル電気泳動によって精製された適合性の断片を生成し、
続いて、精製されたｃＤＮＡを消化されたベクターに連結して、所望の転写ベクターコン
ストラクトを得た。
ライゲーション混合物を、ｓｔｂｌ３コンピテント細菌細胞に形質転換し、アンピシリ
ンプレートに蒔いた。プレートを３７℃で一晩インキュベートした。シークエンシングの
前に、サブクローニング制限酵素を用いて消化することによりコロニーを選別して、適切
にサイズ分類された挿入断片およびバックボーンを検証した。コロニーはまた、並行して
ＲｓｒＩＩおよびＳａｐＩ（３７℃で効率的に切断するＢｓｐＱ１のアイソシゾマー）を
用いて消化されて、ポリＡテールの完全性を確立した。配列を検証したクローン由来のプ
ラスミドを増やし、ｍＲＮＡ生成のために使用した。
ステップ２：転写物線状化、インビトロ転写およびキャッピング
環状プラスミドＤＮＡを、従来の方法に従って調製した。精製されたプラスミドＤＮＡ
を、ＢｓｐＱＩ制限エンドヌクレアーゼにより消化した。プラスミドＤＮＡを、適切な反
応緩衝液（緩衝液４、Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｂｉｏｌａｂｓ、１０×原液）およびＢ
ｓｐＱＩ酵素（ＤＮＡ１ｍｇあたり１，２５０Ｕ）と混ぜ合わせた。反応を５０℃で２時
間インキュベートし、続いて氷上または４℃に置いた。少量の反応試料を、標準的なアガ
ロース電気泳動上に流して、環状プラスミドＤＮＡの完全な線状化を確認した。線状化Ｄ
ＮＡ鋳型をエタノール沈殿により精製した。エタノール沈殿ステップのＤＮＡペレットを
、ヌクレアーゼフリー水を用いて溶解して、０．５ｍｇ／ｍｌを超える濃度にした。
修飾合成ｍＲＮＡのインビトロ転写およびキャッピング
本実施例の修飾合成ｍＲＮＡは、インビトロ転写（ＩＶＴ）により作製され、塩化リチ
ウム（ＬｉＣｌ）精製により精製され、Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｂｉｏｌａｂｓ（登録
商標）（Ｂｅｖｅｒｌｙ、ＭＡ ＵＳＡ）の市販のキットを使用してキャップされた。材
料および試薬を表９に示す。
Figure 2022160674000045
転写反応を、例えば、表１０に列記されるように構築し、ＲＮＡ分解酵素フリーのチュ
ーブ、チップおよび実施の使用に注意を払った。
Figure 2022160674000046
修飾合成ｍＲＮＡを作製するための本実施例における手順は以下のように実施された：
１．上記の材料を３０℃で２時間、温度をモニタリングしながらインキュベートした。Ｄ
ＮＡ鋳型を、０．０４Ｕ／μＬのＤＮＡ分解酵素の添加により消化し、この反応混合物を
３７℃で３０分間インキュベートした。
２．ＬｉＣｌを最終濃度２．８１Ｍとなるように添加し、反応混合物を十分に混合し、－
２０℃で１時間を超えてインキュベートした。次に、混合物を４℃で１５分間、約２０，
０００×ｇ（最大速度）の最大速度で遠心分離した。上清を除去し、ペレットを１ｍＬの
７０％エタノールで洗浄した。調製物を、すぐ上に記載したように１０分間遠心分離した
。次に、上清を除去し、残留ペレットを上記のように１分未満の間再び遠心分離した。
３．残留エタノールを除去し、ペレットをヌクレアーゼフリー水中に再懸濁した。濃度を
測定し、約１μｇ／μＬに調整した。
４．調製物に、１０％容量のｐＨ５．５の３Ｍ酢酸ナトリウムを添加し、調製物を十分に
混合した。次に、１容量の室温イソプロパノールを調製物に加え、よく混合した。調製物
を－２０℃で一晩インキュベートした。その後、調製物を４℃で１５分間、約２０，００
０×ｇ（最大速度）の最大速度で遠心分離し、上清を除去し、残留ペレットを１ｍＬの７
０％エタノールで洗浄した。再度、調製物をすぐ上に記載したように１０分間遠心分離し
、続いて上清を除去し、遠心分離ステップを、上記のように１分未満の間再び実施した。
５．残留エタノールを除去し、ペレットをヌクレアーゼフリー水中に再懸濁した。調製物
の濃度を測定し、約４μｇ／μＬに調整した。
修飾合成ｍＲＮＡは、その後キャッピングまで－８０℃で保存することができ、解凍時
に濃度を再び測定する。
キャッピングについては、使用した手順は、Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ ＢｉｏＬａｂｓ
のものであった。合成ｍＲＮＡおよび水の混合物を６５℃で１０分間熱変性させ、次に冷
たいブロックに移して５分間クエンチした。使用直前にＳ－アデノシルメチオニン（ＳＡ
Ｍ）（３２ｍＭ）の原液を水で１：８に希釈して４ｍＭにし、次に残りの反応成分を表１
１に指定の順序で加えた。
Figure 2022160674000047
次に、混合物を３７℃で１時間インキュベートした。試料を上記のようにＬｉＣｌ沈殿
によって精製し、次に－８０℃で保存した。
ステップ３：ｍＲＮＡの品質および機能性の決定
最初のインビトロ転写反応の後および／またはキャッピング反応の後、Ａｇｉｌｅｎｔ
２１００ Ｂｉｏａｎａｌｙｚｅｒを使用して、合成ｍＲＮＡを、品質および完全性に
ついて分析した。Ａｇｉｌｅｎｔ ２１００ ＢｉｏＡｎａｌｙｚｅｒは、ＤＮＡ、ＲＮ
Ａまたはタンパク質の少量試料のサイズ分画および定量を実施するナノ流体デバイスであ
る。Ａｇｉｌｅｎｔ ＲＮＡ ６０００ Ｎａｎｏ Ｋｉｔ（カタログ番号５０６７－１
５１１）を使用して、分析を実施した。
キット試薬の全てを、使用前に３０分間室温に平衡化した。合成ｍＲＮＡ試料およびキ
ットのラダーを氷上で保存した。
ゲル、ゲル／色素混合物、および試料の調製
ゲルマトリクス（５５０μＬ）をスピンフィルターにピペットで移し、室温にて１０分
間、１，５００ｇで遠心分離し、続いて４℃で保存した（１ヶ月以内の使用用）。色素原
液（１μｌ）を、濾過したゲルマトリクスの６５μｌアリコートに添加した。色素および
ゲルマトリクスの混合物をボルテックスし、続いて室温にて１０分間、１３，０００ｇで
遠心分離した（１日以内の使用用）。ｍＲＮＡ試料ならびにラダーおよびキット標準を７
０℃で３～５分間加熱変性させて、あらゆる高次構造を壊し、続いて分析前に氷上でクエ
ンチした。
Ｂｉｏａｎａｌｙｚｅｒの電極の浄化
Ｂｉｏａｎａｌｙｚｅｒの電極を、３５０μｌのＲＮａｓｅＺａｐ電極洗浄剤およびヌ
クレアーゼフリー水で浄化した。
ゲル／色素混合物のチップへのロード
新しいチップをＢｉｏａｎａｌｙｚｅｒのプライミングステーション（ポジションＣで
のプラットフォーム、トップポジションでのクリップ）に配置し、９μｌのゲル／色素混
合物をウェルに添加した。
試料のチップへのロード
５μｌ容量のマーカーをラダーウェルおよび試料ウェルに添加し、１μｌ容量のｍＲＮ
Ａ試料（＜１μｇ）を試料ウェルに添加した。ＩＫＡ Ｖｏｒｔｅｘｅｒを使用して、２
４００ｒｐｍで１分間ボルテックスした。次に、試料を、ｍＲＮＡアッセイ法を用いてＡ
ｇｉｌｅｎｔ ２１００ Ｂｉｏａｎａｌｙｚｅｒ上で測定した。アデニン、グアニン、
シチジン、およびウリジンまたはプソイドウリジンのいずれかを用いて合成されたヒトＲ
ＸＦＰ１（コドン最適化およびコドン非最適化の両方）について調製されたｍＲＮＡの試
料Ｂｉｏａｎａｌｙｚｅｒトレースについては、図４を参照されたい。
ｍＲＮＡの培養哺乳動物細胞へのトランスフェクションおよびコード化タンパク質の発現
を確認するためのウェスタンブロット
Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ ＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃのＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ（
登録商標）２０００試薬を使用したｍＲＮＡの培養哺乳動物細胞へのインビトロトランス
フェクションによって、翻訳可能性を評価した。次に、トランスフェクトされた細胞を２
４～４８時間後に溶解し、溶解物中のタンパク質を、ポリアクリルアミドゲル電気泳動を
用いて分離し、続いてｍＲＮＡによってコードされるタンパク質に特異的な抗体による免
疫ブロットを行った（ｍＲＮＡ由来のヒトＲＸＦＰ１発現の確証を示す試料のウェスタン
ブロットについては図５を参照のこと）。
ステップ４．送達ビヒクルへの修飾合成ｍＲＮＡのパッケージング
本実施例で用いた材料は、以下の通りであった：
Figure 2022160674000048
Figure 2022160674000049
 １．カチオン性脂質アミン基対ｍＲＮＡリン酸基（Ｎ：Ｐ）モル比が４：１で標的タンパ
ク質をコードする修飾合成ｍＲＮＡ（例えば、表１～７を参照のこと）を脂質ナノ粒子に
パッケージし、透析し、濃縮した。一例として、０．４ｍｇ／ｍＬを超える濃度のｍＲＮ
Ａの約２ｍｇのパッケージ化された修飾合成ｍＲＮＡを生じるプロトコルについての量を
示す。
２．ＲＮＡ分解酵素フリーの試薬、チューブ、チップおよび実施を用いて、表１３に記載
のように脂質ナノ粒子混合物試薬を計量し、バイアル中に混合した。
Figure 2022160674000050
３．処理を容易にするために、エタノールを脂質に添加して、必要量の１．１×比とな
った。混合物を短時間超音波処理して、３７℃で５分間緩やかに撹拌した。その後、使用
の準備ができるまで、混合物を撹拌せずに３７℃でインキュベートした。
４．Ａｍｉｃｏｎ Ｕｌｔｒａ－１５遠心分離デバイスにｍＲＮＡ溶液を充填し、４℃に
て４，０００ｒｐｍで１５分間遠心分離することによって、修飾合成ｍＲＮＡを水からｐ
Ｈ６．０緩衝液に交換した。濃縮したｍＲＮＡをｐＨ６．０クエン酸緩衝液に再懸濁し、
ｍＲＮＡ濃度を測定した。
５．ｐＨ６．０のクエン酸緩衝液中における修飾合成ｍＲＮＡの０．５ｍｇ／ｍＬの最終
濃度を、すすがれたシンチレーションバイアルにおいて調製し（８ｍＬに４ｍｇのｍＲＮ
Ａ）、ｍＲＮＡ溶液の最終濃度を測定した。使用の準備ができるまで、ｍＲＮＡ希釈溶液
を３７℃でインキュベートした。
６．（ａ）脂質混合物；（ｂ）ｍＲＮＡ溶液；（ｃ）クエン酸緩衝液の各８ｍＬにより、
３つの１０ｍｌシリンジを調製した。シリンジ（ａ）および（ｂ）を、Ｔ字型接合部のル
アー嵌合部に取り付けた。要約すると、０．５ｍｍ内径のＰ７２７ Ｔ－混合機が、Ｐ６
５２アダプタ（ＩＤＥＸ、Ｏａｋ Ｈａｒｂｏｒ ＷＡ ＵＳＡ）に取り付けられた。シ
リンジ（ａ）および（ｂ）は、Ｐ６５８ルアー嵌合部（ＩＤＥＸ）に取り付けた。シリン
ジ（ａ）および（ｂ）を、Ｐ９３８ｘナットおよびフェルール（ＩＤＥＸ）を用いて、Ｐ
ＴＦＥ０．８ｍｍ内径チューブ（＃３２０００６８、Ｄｏｌｏｍｉｔｅ、Ｒｏｙｓｔｏｎ
、ＵＫ）によって、Ｔ－混合機に接続した。シリンジ（ｃ）は、Ｐ９３８ｘナットおよび
フェルールによって最終の単一チューブに接続されたルアー嵌合部に取り付けた。チュー
ブの末端は、撹拌棒入りの事前にすすいだビーカーの上に合わせて固定し、緩やかに撹拌
した。
７．シリンジポンプ設定を、適切なシリンジ製造業者およびサイズにセットし、容量（８
ｍＬ）および１．０ｍＬ／分の流速が入力された。ポンプを起動し、得られた材料を撹拌
棒入りのＲＮＡ分解酵素フリーの５０ｍＬプラスチックビーカーに回収した。ｍＲＮＡを
含有する脂質ナノ粒子の懸濁液を、１バッグにつき２～３ｍＬで透析チューブに移し、４
℃で一晩、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中に透析した。
８．分割した材料を、１本の１５ｍＬコニカルチューブにプールした。タンジェンシャル
フロー濾過（ＴＦＦ）を用いて、脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）懸濁液を濃縮した。新しいチュ
ーブを使用して新しい５００Ｋの分子量カットオフカプセルをＭｉｎｉｍａｔｅシステム
に接続して、１５０ｒｐｍの流速により５００ｍＬのＲＮＡフリー水ですすぐことによっ
てＴＦＦシステムを準備した。
９．脂質ナノ粒子／修飾合成ｍＲＮＡ懸濁液をＴＦＦユニットリザーバーに充填し、７５
ｍＬ／分の流速で２～３ｍｌの最終容量に濃縮した。
１０．修飾合成ｍＲＮＡの被包パーセントは、Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｇ
ｒａｎｄ Ｉｓｌａｎｄ ＮＹ ＵＳＡ）のＱｕａｎｔ－ｉＴ Ｒｉｂｏｇｒｅｅｎ Ｒ
ＮＡアッセイキットを用いて決定した。脂質ナノ粒子／修飾合成ｍＲＮＡ懸濁液を、緩衝
液（粒子外のｍＲＮＡ）および界面活性剤を加えた緩衝液（全ｍＲＮＡ）での蛍光測定に
よって分析した。提供されたリボソームＲＮＡから１０００ｎｇ／ｍＬ原液を調製し、こ
れを使用してＲｉｂｏｇｒｅｅｎアッセイのための標準曲線を作成した。アッセイのため
に、ＴＥ緩衝液またはＴｒｉｔｏｎを加えたＴＥ中に試料を調製し、蛍光試薬を各々に添
加する。計算される差は、粒子内部のｍＲＮＡである。
Figure 2022160674000051
１１．測定値が標準曲線内（４００～６００倍）にあるように、試料をＴＥ緩衝液およ
びＴＥ緩衝液＋０．７５％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００により適切な希釈で調製した。９６
ウェルプレートの各ウェルに１００μＬの標準／試料を添加した。Ｒｉｂｏｇｒｅｅｎ試
薬をＴＥ緩衝液中に１：２００で希釈し、１００μＬを各ウェルに添加した。
１２．試料蛍光を、蛍光マイクロプレートリーダーを用いて、４８０ｎｍの励起、５２０
ｎｍの発光で測定した。各ＲＮＡ試料の蛍光値から試薬ブランクの蛍光値を差し引いて、
蛍光対ＲＮＡ濃度の標準曲線を作成した。各試料の蛍光値から試薬ブランクの蛍光値を差
し引き、標準曲線から試料のＲＮＡ濃度を決定した。試料の被包パーセントは、Ｔｒｉｔ
ｏｎを加えた試料と試料だけの間の濃度の差を、Ｔｒｉｔｏｎを加えた試料の濃度によっ
て割り算することによって決定した。脂質ナノ粒子／修飾合成懸濁液の６倍希釈溶液を作
製し、Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ Ｎａｎｏ ＺＳ機器（Ｍａｌｖｅｒｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎ
ｔｓ，Ｌｔｄ、Ｗｏｒｃｅｓｔｅｒｓｈｉｒｅ、ＵＫ）を用いて直径および多分散指数を
決定した。
Figure 2022160674000052
実施例２－ＲＸＦＰ１に対する免疫化戦略
ヒトＲＸＦＰ１などのＧＰＣＲ標的タンパク質に対する免疫化戦略の概観を表１６に示
す。
Figure 2022160674000053
雌ＢＡＬＢ／ｃマウスを、皮下（ｓ．ｃ．）または静脈内（ｉ．ｖ．）経路を介して、
１００μｇのパッケージ化されたヒトＲＸＦＰ１のｍＲＮＡ（例えば、表１を参照のこと
）、１０６細胞／ｍｌのｈＲＸＦＰ１を過剰発現するＢａ／Ｆ３細胞、または３００．１
９もしくはＨＥＫ２９３細胞のいずれかに由来するヒトＲＸＦＰ１を過剰発現する５０μ
ｇのウイルス様粒子（ＶＬＰ）のいずれかを用いて、免疫化した。力価をプライミング免
疫化の１０日後に確認した（図１Ａで見られるように）。ブースティング免疫化を、前回
の免疫化の２１日後に行った。
ＲＸＦＰ１に特異的な抗体を産生する合計２０７個のハイブリドーマが得られ、さらに
スクリーニングして、ｐＭおよびｎＭの範囲にあった高親和性を有する１０個の抗ＲＸＦ
Ｐ１モノクローナル抗体を同定した。
図１Ｂは、免疫化後１０日目において、ウイルス様粒子またはＲＸＦＰ１（例示的な標
的タンパク質免疫原）を過剰発現する細胞による免疫化が、有意な抗体力価を誘発できな
かったことを示す。対照的に、ｍＲＮＡ－ＬＮＰによる免疫化は、バックグラウンドより
２～１２倍高い力価をもたらした。このデータは、ｍＲＮＡ－ＬＮＰによる免疫化が、ウ
イルス様粒子または標的遺伝子の免疫原を過剰発現する細胞を用いるなどの従来の方法よ
りも、標的タンパク質免疫原に対してよりロバストな免疫応答（例えば、血清中でより高
い抗体力価）を与えることを示唆している。
図１Ｃは、ブースティング免疫化ステップ（例えば、免疫原の２回目の投与）後の動物
（図１Ｂ）の抗体力価を示す。１回目および２回目の両方の免疫化に関してｍＲＮＡで免
疫化（ｓ．ｃ．）されたマウスは、２回の免疫化（プライミング免疫化およびブースティ
ング免疫化）のうち１回のみに関してｍＲＮＡで免疫化（ｓ．ｃ．）されたマウス、なら
びに残りの免疫化のうち１回に関してＶＬＰまたはＲＸＦＰ１を過剰発現する細胞で免疫
化（ｓ．ｃ．）されたマウスよりも、高い抗体力価を示した。ｉ．ｖ．投与を介した免疫
化については、プライミングおよびブースティング免疫化の両方に関してｍＲＮＡを用い
る免疫化戦略と、２回の免疫化のうち１回のみに関してｍＲＮＡを用いる免疫化戦略につ
いて、抗体力価の差はより少なかった。全てのｉ．ｖ．免疫化の力価の平均は、ｓ．ｃ．
免疫化よりも高かった。
図１Ｄは、ｍＲＮＡに基づく免疫化から得られるＲＸＦＰ１に特異的な３つのモノクロ
ーナルハイブリドーマ培養液試料のＦＡＣＳプロットを示す。クローンは、非ＲＸＦＰ１
発現細胞（３００．１９親）に対して最小の交差反応性を示し、ヒトＲＸＦＰ１を過剰発
現する細胞（３００．１９ｈＲＸＦＰ１およびＢａ／Ｆ３ｈＲＸＦＰ１）に対して有意な
結合を示す。
図２は、複数回膜貫通タンパク質のＳＬＣ５２Ａ２に対する免疫化戦略、および得られ
たＦＡＣＳに基づく血清応答を示す。ＳＬＣ５２Ａ２（例えば、表２）をコードするｍＲ
ＮＡでの２回のラウンドのみの免疫化が、標的特異的な抗体力価を誘発することができる
唯一の抗原であり；過剰発現細胞、ＶＬＰおよび細胞外ループ（ＥＣ２）をコードするペ
プチドなどの従来の抗原による２回～４回のラウンドの様々な組み合わせでの免疫化は、
標的特異的な力価を誘発できなかった。これらの免疫原形態で免疫化されたマウス由来の
血清において、標的特異的なＩｇＧが検出されなかったため、ハイブリドーマ融合を開始
しなかった。これらの従来型の抗原で免疫化された動物由来の血漿において標的特異的な
ＩｇＧを検出できないことは、ＳＬＣ５２Ａ２が不十分な免疫原性タンパク質であること
を示唆している。しかしながら、ｍＲＮＡ－ＬＮＰで免疫化されたマウスでは、ハイブリ
ドーマ融合を開始した。ＳＬＣ５２Ａ２特異的な抗体を産生することができる合計２２８
個のハイブリドーマを、１２，８８０個のハイブリドーマウェルのプールから同定したが
、一般に、これらのウェルの約３分の１（１／３）のウェルがハイブリドーマを含有する
（約４，２９０個を超えるハイブリドーマ）。したがって、図２で示されるデータは、本
明細書に記載のｍＲＮＡによる免疫化方法が、例えば、複数回膜貫通タンパク質、例えば
、ＳＬＣ５２Ａ２などの膜貫通タンパク質のための従来の抗原形態よりも驚くほど優れて
いることを示唆しており、それは、標的特異的な血清力価をもたらすことができた唯一の
手段であったためである。
実施例３－ＡＮＧＰＴＬ８に対する免疫化戦略
ヒトＡＮＧＰＴＬ８などの発現が困難な標的タンパク質に対する免疫化戦略の概観を表
１７に示す。特異的な抗体を産生させるためのＡＮＧＰＴＬ８の組換え体発現に関連する
問題の例としては、低収率、不十分な分泌、および凝集が挙げられる。例えば、標準的な
発現プロトコルを使用すると、得られるタンパク質は、９０％超が凝集しているように見
えた。
Figure 2022160674000054
雌ＢＡＬＢ／ｃマウスを、５０μｇのパッケージ化されたヒトＡＮＧＰＴＬ８ ｍＲＮ
Ａ（例えば、表３を参照のこと）または５０μｇのＨＳＡ－ＡＮＧＰＴＬ８融合タンパク
質のいずれかで免疫化した。力価をプライミング免疫化の１０日後および１回目のブース
ト後に確認した。１回目のブースティング免疫化をプライミング免疫化の２１日後に与え
、最終ブーストを１回目のブーストの２５日後に与えた。ヒトＡＮＧＰＴＬ８をコードす
るｍＲＮＡまたは精製された組換え体ヒトＡＮＧＰＴＬ８タンパク質を投与したマウスは
、マウスにおいて、ヒトＡＮＧＰＴＬ８に対しておおむね同等に強い免疫応答をもたらし
た。ＡＮＧＰＴＬ８特異的な抗体を産生するハイブリドーマが作製され、さらなる選別か
ら高親和性ＡＮＧＰＴＬ８抗体が得られた。これらの結果は、本明細書で提供されるｍＲ
ＮＡ－ＬＮＰによる免疫化方法が、ヒトＡＮＧＰＴＬ８などの発現が困難な標的タンパク
質に対する抗体を作製するのに効果的な戦略であることを裏付けている。
実施例４－ガレクチン－３に対する免疫化戦略
ガレクチン－３などのレクチン結合タンパク質に対する免疫化戦略の概観を表１８に示
す。
ＢＡＬＢ／ｃマウスを、表１８に記載のように、ＬＮＰと組み合わされた２ｍｇ／ｋｇ
のｍＲＮＡ、または２０μｇの組換え体タンパク質で免疫化した。血漿の抗ガレクチン－
３ＩｇＧ力価を、５５日目に与えられた最終ブーストの７日後に評価した。
図３は、最終ブースティング剤としてのガレクチン－３ｍＲＮＡの使用が、精製された
組換え体タンパク質（従来の免疫原）を使用した際よりも、有意に高い標的特異的なＩｇ
Ｇ力価をもたらしたことを示す。この作用は、抗原が皮下または静脈内に与えられるかど
うかにかかわらず観測された。
ガレクチン－３特異的な抗体を産生するハイブリドーマが作製され、さらなる選別から
高親和性のモノクローナル抗ガレクチン－３抗体が得られた。
Figure 2022160674000055
ｍＲＮＡ媒介性の免疫化によって達成可能な適合率の概要
表１９は、選別された合計のハイブリドーマウェル（一般にこれらのウェルのうち約３
分の１（１／３）がハイブリドーマを含有する）の標的タンパク質ごとの概要、および免
疫原としての脂質に被包されたｍＲＮＡの使用後にそれらのハイブリドーマウェルから得
られる確認された標的特異的な抗体の数を提供する。
表２０は、ｍＲＮＡ－ＬＮＰによる免疫化方法と他の従来の免疫化方法の、標的特異的
な抗体を産生するハイブリドーマの数による比較を提供する。概して、これらのデータは
、ｍＲＮＡ－ＬＮＰによる免疫化が、標的タンパク質抗原に対して免疫応答を誘導し、か
つ標的タンパク質に特異的な抗体をより多い数／率で得るための効果的な方法であること
を示唆している。特に、これらの結果は、ｍＲＮＡ－ＬＮＰによる免疫化が、抗体を産生
させることが困難な、膜貫通タンパク質、例えば、ＧＰＣＲなどの複数回膜貫通タンパク
質、および不十分な免疫原性タンパク質（例えば、従来の抗原で免疫化された動物の血漿
中において標的特異的なＩｇＧを少量もたらすか、またはまったく検出されないタンパク
質）に対して特異的な抗体を得ることに関して、従来の免疫化方法よりも驚くほど効果的
であることを裏付けている。
Figure 2022160674000056
Figure 2022160674000057
概して、抗原特異的な抗体を産生するハイブリドーマの順調な生成は、本明細書に例示
するように、ｍＲＮＡ－ＬＮＰによる免疫化方法を利用する少なくとも１５種の異なる標
的に対して達成された。これらの結果は、本明細書に記載のｍＲＮＡによる免疫化方法が
、宿主動物において様々な抗原（例えば、膜貫通タンパク質、例えば、ＧＰＣＲなどの複
数回膜貫通タンパク質）に対する免疫応答を誘発することができ、かつキメラ変異体、ヒ
ト化変異体、および親和性成熟変異体の生成のための親として機能できる、高親和性のモ
ノクローナル抗体を作製するための効果的な方法であることを示す。
参照による組み込み
特許、特許出願、論文、教科書などを含む、本明細書に引用される全ての参考文献およ
びそれらに引用される参考文献は、それらが既に引用されていない限り、本明細書に参照
によりその全体が組み込まれる。
均等物
上述した明細書で、当業者は本発明を十分に実施可能であると考えられる。上述の説明
および実施例は、本発明のある種の実施形態を詳述している。しかし、上述の説明がどん
なに詳細に本文中に記載されているとしても、本発明は様々な様式で実施することができ
、本発明は添付の特許請求の範囲およびその任意の均等物に従い解釈されるべきであると
理解されよう。
均等物
上述した明細書で、当業者は本発明を十分に実施可能であると考えられる。上述の説明
および実施例は、本発明のある種の実施形態を詳述している。しかし、上述の説明がどん
なに詳細に本文中に記載されているとしても、本発明は様々な様式で実施することができ
、本発明は添付の特許請求の範囲およびその任意の均等物に従い解釈されるべきであると
理解されよう。
本願発明は以下の態様も含む。
（１） 標的タンパク質に対するモノクローナル抗体を作製するための方法であって、（ａ）少なくとも１つのカチオン性脂質を、前記標的タンパク質またはその断片をコードするメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）などのポリリボヌクレオチドと混合し、それにより、カチオン性脂質－ポリリボヌクレオチド複合体を形成するステップと；（ｂ）前記脂質－ポリリボヌクレオチド複合体を非ヒト動物に投与するステップと；（ｃ）前記標的タンパク質に特異的に結合する抗体を前記動物から得るステップとを含む、方法。
（２） 標的タンパク質に対するモノクローナル抗体を作製するための方法であって、（ａ）脂質－ポリリボヌクレオチド複合体を非ヒト動物に投与し、それにより、前記標的タンパク質に対する免疫応答を誘導するステップであって、前記複合体が、前記標的タンパク質またはその断片をコードするｍＲＮＡなどのポリリボヌクレオチドを有する少なくとも１つのカチオン性脂質を含むステップと；（ｂ）前記標的タンパク質に特異的に結合する抗体を前記動物から得るステップとを含む、方法。
（３） 非ヒト動物において標的タンパク質に対する免疫応答を誘発するための方法であって、脂質－ポリヌクレオチド複合体を前記動物に投与するステップを含み、前記脂質－ポリヌクレオチド複合体がカチオン性脂質および標的タンパク質をコードするｍＲＮＡを含み、前記標的タンパク質が前記動物と異なる種のタンパク質である、方法。
（４） 前記標的タンパク質が膜貫通タンパク質である、前記（１）、（２）または（３）に記載の方法。
（５） 前記膜貫通タンパク質が、次の：
（ｉ）Ｇタンパク質共役型受容体（ＧＰＣＲ）；
（ｉｉ）１回膜貫通型タンパク質受容体；
（ｉｉｉ）腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）メンバー；
（ｉｖ）インターロイキン（ＩＬ）受容体；
（ｖ）イオンチャネル；
（ｖｉ）溶質輸送体；
（ｖｉｉ）免疫受容体；および
（ｖｉｉｉ）複数回膜貫通タンパク質
から選択される、前記（４）に記載の方法。
（６） 前記膜貫通タンパク質が、Ｇタンパク質共役型受容体（ＧＰＣＲ）である、前記（４）または５に記載の方法。
（７） 前記ＧＰＣＲが、ＲＸＦＰ１、ＴＳＨＲ、ＡＰＪ、ＧＰＲ４０、ＧＰＲ６４、ＧＰＲ４、またはＧＰＲ１５である、前記（６）に記載の方法。
（８） 前記膜貫通タンパク質が、ＧＰ１３０などの１回膜貫通型タンパク質受容体である、前記（４）または（５）に記載の方法。
（９） 前記膜貫通タンパク質が、ＳＬＣ５２Ａ２などの複数回膜貫通タンパク質である、前記（４）または（５）に記載の方法。
（１０） 前記膜貫通タンパク質が、ＩＬ－１受容体、ＩＬ－２受容体、ＩＬ－３受容体、ＩＬ－４受容体、ＩＬ－５受容体、ＩＬ－６受容体、ＩＬ－７受容体、ＩＬ－８受容体、ＩＬ－９受容体、ＩＬ－１０受容体、ＩＬ－１１受容体、ＩＬ－１２受容体、ＩＬ－１３受容体、ＩＬ－１４受容体、ＩＬ－１５受容体、ＩＬ－１６受容体、ＩＬ－１７受容体、ＩＬ－１８受容体、ＩＬ－１９受容体、ＩＬ－２０受容体、ＩＬ－２１受容体、ＩＬ－２２受容体、ＩＬ－２３受容体、ＩＬ－２４受容体、ＩＬ－２５受容体、ＩＬ－２６受容体、ＩＬ－２７受容体、ＩＬ－２８受容体、ＩＬ－２９受容体、ＩＬ－３０受容体、ＩＬ－３１受容体、ＩＬ－３２受容体、ＩＬ－３３受容体、ＩＬ－３５受容体、またはＩＬ－３６受容体などのインターロイキン（ＩＬ）受容体である、前記（４）または（５）に記載の方法。
（１１） 前記膜貫通タンパク質が、次の：ＴＮＦＲＳＦ１Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１Ｂ、ＴＮＦＲＳＦ３、ＴＮＦＲＳＦ４、ＴＮＦＲＳＦ５、ＴＮＦＲＳＦ６、ＴＮＦＲＳＦ６Ｂ、ＴＮＦＲＳＦ７、ＴＮＦＲＳＦ８、ＴＮＦＲＳＦ９、ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｃ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｄ、ＴＮＦＲＳＦ１１Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１１Ｂ、ＴＮＦＲＳＦ１２Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１３Ｂ、ＴＮＦＲＳＦ１３Ｃ、ＴＮＦＲＳＦ１４、ＴＮＦＲＳＦ１６、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＴＮＦＲＳＦ１８、ＴＮＦＲＳＦ１９、ＴＮＦＲＳＦ２１、ＴＮＦＲＳＦ２５、およびＴＮＦＲＳＦ２７からなる群から選択される腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）メンバーである、前記（４）または（５）に記載の方法。
（１２） 前記膜貫通タンパク質が、ＴＭＥＭ１６Ａなどのイオンチャネルである、前記（４）または５に記載の方法。
（１３） 前記膜貫通タンパク質が、溶質輸送体である、前記（４）または（５）に記載の方法。
（１４） 前記標的タンパク質が、次の：ＡＣＫＲ１、ＡＣＫＲ２、ＡＣＫＲ３、ＡＣＫＲ４、ＡＤＣＹＡＰ１Ｒ１、ＡＤＧＲＡ１、ＡＤＧＲＡ２、ＡＤＧＲＡ３、ＡＤＧＲＢ１、ＡＤＧＲＢ２、ＡＤＧＲＢ３、ＡＤＧＲＤ１、ＡＤＧＲＤ２、ＡＤＧＲＥ１、ＡＤＧＲＥ２、ＡＤＧＲＥ３、ＡＤＧＲＥ４Ｐ、ＡＤＧＲＥ５、ＡＤＧＲＦ１、ＡＤＧＲＦ２、ＡＤＧＲＦ３、ＡＤＧＲＦ４、ＡＤＧＲＦ５、ＡＤＧＲＧ１、ＡＤＧＲＧ２、ＡＤＧＲＧ３、ＡＤＧＲＧ４、ＡＤＧＲＧ５、ＡＤＧＲＧ６、ＡＤＧＲＧ７、ＡＤＧＲＬ１、ＡＤＧＲＬ２、ＡＤＧＲＬ３、ＡＤＧＲＬ４、ＡＤＧＲＶ１、ＡＤＯＲＡ１、ＡＤＯＲＡ２Ａ、ＡＤＯＲＡ２Ｂ、ＡＤＯＲＡ３、ＡＤＲＡ１Ａ、ＡＤＲＡ１Ｂ、ＡＤＲＡ１Ｄ、ＡＤＲＡ２Ａ、ＡＤＲＡ２Ｂ、ＡＤＲＡ２Ｃ、ＡＤＲＢ１、ＡＤＲＢ２、ＡＤＲＢ３、ＡＧＴＲ１、ＡＧＴＲ２、ＡＰＬＮＲ／ＡＰＪ、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＡＶＰＲ１Ａ、ＡＶＰＲ１Ｂ、ＡＶＰＲ２、ＢＤＫＲＢ１、ＢＤＫＲＢ２、ＢＲＳ３、ＢＲＳ３、Ｃ３ＡＲ１、Ｃ５ＡＲ１、Ｃ５ＡＲ２、ＣＡＬＣＲ、ＣＡＬＣＲＬ、ＣＡＳＲ、ＣＣＫＡＲ、ＣＣＫＢＲ、ＣＣＲ１、ＣＣＲ１０、ＣＣＲ２、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＣＲ８、ＣＣＲ９、ＣＣＲＬ２、ＣＥＬＳＲ１、ＣＥＬＳＲ２、ＣＥＬＳＲ３、ＣＨＲＭ１、ＣＨＲＭ２、ＣＨＲＭ３、ＣＨＲＭ４、ＣＨＲＭ５、ＣＭＫＬＲ１、ＣＮＲ１、ＣＮＲ２、ＣＲＨＲ１、ＣＲＨＲ２、ＣＸ３ＣＲ１、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ４、ＣＸＣＲ５、ＣＸＣＲ６、ＣＹＳＬＴＲ１、ＣＹＳＬＴＲ２、ＤＲＤ１、ＤＲＤ２、ＤＲＤ３、ＤＲＤ４、ＤＲＤ５、ＥＤＮＲＡ、ＥＤＮＲＢ、Ｆ２Ｒ、Ｆ２ＲＬ１、Ｆ２ＲＬ２、Ｆ２ＲＬ３、ＦＦＡＲ１、ＦＦＡＲ２、ＦＦＡＲ３、ＦＦＡＲ４、ＦＰＲ１、ＦＰＲ２、ＦＰＲ２、ＦＰＲ３、ＦＳＨＲ、ＦＺＤ１、ＦＺＤ１０、ＦＺＤ２、ＦＺＤ３、ＦＺＤ４、ＦＺＤ５、ＦＺＤ６、ＦＺＤ７、ＦＺＤ８、ＦＺＤ９、ＧＡＢＢＲ１、ＧＡＢＢＲ２、ＧＡＬＲ１、ＧＡＬＲ２、ＧＡＬＲ３、ＧＣＧＲ、ＧＨＲＨＲ、ＧＨＳＲ、ＧＩＰＲ、ＧＬＰ１Ｒ、ＧＬＰ２Ｒ、ＧＮＲＨＲ、ＧＮＲＨＲ２、ＧＰＢＡＲ１、ＧＰＥＲ１、ＧＰＲ１、ＧＰＲ４、ＧＰＲ１２、ＧＰＲ１５、ＧＰＲ１７、ＧＰＲ１８、ＧＰＲ１９、ＧＰＲ２０、ＧＰＲ２１、ＧＰＲ２２、ＧＰＲ２５、ＧＰＲ２６、ＧＰＲ２７、ＧＰＲ３、ＧＰＲ３１、ＧＰＲ３２、ＧＰＲ３３、ＧＰＲ３４、ＧＰＲ３５、ＧＰＲ３７、ＧＰＲ３７Ｌ１、ＧＰＲ３９、ＧＰＲ４０、ＧＰＲ４２、ＧＰＲ４２、ＧＰＲ４５、ＧＰＲ５０、ＧＰＲ５２、ＧＰＲ５５、ＧＰＲ６、ＧＰＲ６１、ＧＰＲ６２、ＧＰＲ６３、ＧＰＲ６５、ＧＰＲ６８、ＧＰＲ７５、ＧＰＲ７８、ＧＰＲ７９、ＧＰＲ８２、ＧＰＲ８３、ＧＰＲ８４、ＧＰＲ８５、ＧＰＲ８７、ＧＰＲ８８、ＧＰＲ１０１、ＧＰＲ１０７、ＧＰＲ１３２、ＧＰＲ１３５、ＧＰＲ１３７、ＧＰＲ１３９、ＧＰＲ１４１、ＧＰＲ１４２、ＧＰＲ１４３、ＧＰＲ１４６、ＧＰＲ１４８、ＧＰＲ１４９、ＧＰＲ１５、ＧＰＲ１５０、ＧＰＲ１５１、ＧＰＲ１５２、ＧＰＲ１５３、ＧＰＲ１５６、ＧＰＲ１５７、ＧＰＲ１５８、ＧＰＲ１６０、ＧＰＲ１６１、ＧＰＲ１６２、ＧＰＲ１７１、ＧＰＲ１７３、ＧＰＲ１７４、ＧＰＲ１７６、ＧＰＲ１７９、ＧＰＲ１８２、ＧＰＲ１８３、ＧＰＲＣ５Ａ、ＧＰＲＣ５Ｂ、ＧＰＲＣ５Ｃ、ＧＰＲＣ５Ｄ、ＧＰＲＣ６Ａ、ＧＲＭ１、ＧＲＭ２、ＧＲＭ３、ＧＲＭ４、ＧＲＭ５、ＧＲＭ６、ＧＲＭ７、ＧＲＭ８、ＧＲＰＲ、ＨＣＡＲ１、ＨＣＡＲ２、ＨＣＡＲ３、ＨＣＲＴＲ１、ＨＣＲＴＲ２、ＨＲＨ１、ＨＲＨ２、ＨＲＨ３、ＨＲＨ４、ＨＴＲ１Ａ、ＨＴＲ１Ｂ、ＨＴＲ１Ｄ、ＨＴＲ１Ｅ、ＨＴＲ１Ｆ、ＨＴＲ２Ａ、ＨＴＲ２Ｂ、ＨＴＲ２Ｃ、ＨＴＲ４、ＨＴＲ５Ａ、ＨＴＲ５ＢＰ、ＨＴＲ６、ＨＴＲ７、ＫＩＳＳ１Ｒ、ＬＧＲ３、ＬＧＲ４、ＬＧＲ５、ＬＧＲ６、ＬＨＣＧＲ、ＬＰＡＲ１、ＬＰＡＲ２、ＬＰＡＲ３、ＬＰＡＲ４、ＬＰＡＲ５、ＬＰＡＲ６、ＬＴＢ４Ｒ、ＬＴＢ４Ｒ２、ＭＡＳ１、ＭＡＳ１Ｌ、ＭＣ１Ｒ、ＭＣ２Ｒ、ＭＣ３Ｒ、ＭＣ４Ｒ、ＭＣ５Ｒ、ＭＣＨＲ１、ＭＣＨＲ２、ＭＬＮＲ、ＭＲＧＰＲＤ、ＭＲＧＰＲＥ、ＭＲＧＰＲＦ、ＭＲＧＰＲＧ、ＭＲＧＰＲＸ１、ＭＲＧＰＲＸ２、ＭＲＧＰＲＸ３、ＭＲＧＰＲＸ４、ＭＴＮＲ１Ａ、ＭＴＮＲ１Ｂ、ＮＭＢＲ、ＮＭＵＲ１、ＮＭＵＲ２、ＮＰＢＷＲ１、ＮＰＢＷＲ２、ＮＰＦＦＲ１、ＮＰＦＦＲ２、ＮＰＳＲ１、ＮＰＹ１Ｒ、ＮＰＹ２Ｒ、ＮＰＹ４Ｒ、ＮＰＹ５Ｒ、ＮＰＹ６Ｒ、ＮＴＳＲ１、ＮＴＳＲ２、ＯＰＮ３、ＯＰＮ４、ＯＰＮ５、ＯＰＲＤ１、ＯＰＲＫ１、ＯＰＲＬ１、ＯＰＲＭ１、ＯＲ５１Ｅ１、ＯＸＥＲ１、ＯＸＧＲ１、ＯＸＴＲ、Ｐ２ＲＹ１、Ｐ２ＲＹ１０、Ｐ２ＲＹ１１、Ｐ２ＲＹ１２、Ｐ２ＲＹ１３、Ｐ２ＲＹ１４、Ｐ２ＲＹ２、Ｐ２ＲＹ４、Ｐ２ＲＹ６、Ｐ２ＲＹ８、ＰＲＬＨＲ、ＰＲＯＫＲ１、ＰＲＯＫＲ２、ＰＴＡＦＲ、ＰＴＧＤＲ、ＰＴＧＤＲ２、ＰＴＧＥＲ１、ＰＴＧＥＲ２、ＰＴＧＥＲ３、ＰＴＧＥＲ４、ＰＴＧＦＲ、ＰＴＧＩＲ、ＰＴＨ１Ｒ、ＰＴＨ２Ｒ、ＱＲＦＰＲ、ＲＸＦＰ１、ＲＸＦＰ２、ＲＸＦＰ３、ＲＸＦＰ４、Ｓ１ＰＲ１、Ｓ１ＰＲ２、Ｓ１ＰＲ３、Ｓ１ＰＲ４、Ｓ１ＰＲ５、ＳＣＴＲ、ＳＭＯ、ＳＳＴＲ１、ＳＳＴＲ２、ＳＳＴＲ３、ＳＳＴＲ４、ＳＳＴＲ５、ＳＵＣＮＲ１、ＴＡＡＲ１、ＴＡＡＲ２、ＴＡＡＲ３、ＴＡＡＲ４Ｐ、ＴＡＡＲ５、ＴＡＡＲ６、ＴＡＡＲ８、ＴＡＡＲ９、ＴＡＣＲ１、ＴＡＣＲ２、ＴＡＣＲ３、ＴＡＳ１Ｒ１、ＴＡＳ１Ｒ２、ＴＡＳ１Ｒ３、ＴＡＳ２Ｒ１、ＴＡＳ２Ｒ１０、ＴＡＳ２Ｒ１３、ＴＡＳ２Ｒ１４、ＴＡＳ２Ｒ１６、ＴＡＳ２Ｒ１９、ＴＡＳ２Ｒ２０、ＴＡＳ２Ｒ３、ＴＡＳ２Ｒ３０、ＴＡＳ２Ｒ３１、ＴＡＳ２Ｒ３８、ＴＡＳ２Ｒ３９、ＴＡＳ２Ｒ４、ＴＡＳ２Ｒ４０、ＴＡＳ２Ｒ４１、ＴＡＳ２Ｒ４２、ＴＡＳ２Ｒ４３、ＴＡＳ２Ｒ４５、ＴＡＳ２Ｒ４６、ＴＡＳ２Ｒ５、ＴＡＳ２Ｒ５０、ＴＡＳ２Ｒ６０、ＴＡＳ２Ｒ７、ＴＡＳ２Ｒ８、ＴＡＳ２Ｒ９、ＴＢＸＡ２Ｒ、ＴＰＲＡ１、ＴＲＨＲ、ＴＳＨＲ、ＵＴＳ２Ｒ、ＶＩＰＲ１、ＶＩＰＲ２、ＸＣＲ１、ＴＣＲ－α、ＴＣＲ－β、ＣＤ３、ζ－鎖アクセサリー、ＣＤ４、ＣＤ８、ＳＩＧＩＲＲ、マンノース受容体（ＭＲ）、アシアロ糖タンパク質受容体ファミリー（例えば、アシアロ糖タンパク質受容体マクロファージガラクトース型レクチン（ＭＧＬ））、ＤＣ－ＳＩＧＮ（ＣＬＥＣ４Ｌ）、ランゲリン（ＣＬＥＣ４Ｋ）、骨髄系ＤＡＰ１２会合レクチン（ＭＤＬ）－１（ＣＬＥＣ５Ａ）、デクチン１／ＣＬＥＣ７Ａ、ＤＮＧＲ１／ＣＬＥＣ９Ａ、骨髄系Ｃ型レクチン様受容体（ＭＩＣＬ）（ＣＬＥＣ１２Ａ）、ＣＬＥＣ２（ＣＬＥＣ１Ｂとも呼ばれる）、ＣＬＥＣ１２Ｂ、ＤＣＩＲ／ＣＬＥＣ４Ａ、デクチン２／ＣＬＥＣ６Ａ、血液ＤＣ抗原２（ＢＤＣＡ２）（ＣＬＥＣ４Ｃ）、マクロファージ誘導性Ｃ型レクチン（ＣＬＥＣ４Ｅ）、ＴＬＲ１、ＴＬＲ２、ＴＬＲ３、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ６、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９、ＴＬＲ１０、ＴＬＲ１１、ＴＬＲ１２、ＴＬＲ１３，ＦｃγＲＩ（ＣＤ６４）、ＦｃγＲＩＩＡ（ＣＤ３２）、ＦｃγＲＩＩＢ１（ＣＤ３２）、ＦｃγＲＩＩＢ２（ＣＤ３２）、ＦｃγＲＩＩＩＡ（ＣＤ１６ａ）、ＦｃγＲＩＩＩＢ（ＣＤ１６ｂ）、ＦｃεＲＩ、ＦｃεＲＩＩ（ＣＤ２３）、ＦｃαＲ１（ＣＤ８９）、Ｆｃα／μＲ、ＦｃＲｎ、ＣＤ２７、ＣＤ４０、ＯＸ４０、ＧＩＴＲ、ＣＤ１３７、ＰＤ－１、ＣＴＬＡ－４、ＰＤ－Ｌ１、ＴＩＧＩＴ、Ｔ細胞免疫グロブリンドメインおよびムチンドメイン３（ＴＩＭ３）、Ｔ細胞活性化のＶ－ドメインＩｇ抑制因子（ＶＩＳＴＡ）、ＣＤ２８、ＣＤ１２２、ＩＣＯＳ、Ａ２ＡＲ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＢおよびＴリンパ球アテニュエータ（ＢＴＬＡ）、インドールアミン２，３－ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）、キラー細胞免疫グロブリン様受容体（ＫＩＲ）、リンパ球活性化遺伝子－３（ＬＡＧ３）、ＦＡＭ１５９Ｂ、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－Ｂ、ＨＬＡ－Ｃ、ＨＬＡ－ＤＰＡ１、ＨＬＡ－ＤＰＢ１、ＨＬＡ－ＤＱＡ１、ＨＬＡ－ＤＱＢ１、ＨＬＡ－ＤＲＡ、ＨＬＡ－ＤＲＢ１、ｇｐ１３０、ＩＬ－１受容体、ＩＬ－２受容体、ＩＬ－３受容体、ＩＬ－４受容体、ＩＬ－５受容体、ＩＬ－６受容体、ＩＬ－７受容体、ＩＬ－８受容体、ＩＬ－９受容体、ＩＬ－１０受容体、ＩＬ－１１受容体、ＩＬ－１２受容体、ＩＬ－１３受容体、ＩＬ－１４受容体、ＩＬ－１５受容体、ＩＬ－１６受容体、ＩＬ－１７受容体、ＩＬ－１８受容体、ＩＬ－１９受容体、ＩＬ－２０受容体、ＩＬ－２１受容体、ＩＬ－２２受容体、ＩＬ－２３受容体、ＩＬ－２４受容体、ＩＬ－２５受容体、ＩＬ－２６受容体、ＩＬ－２７受容体、ＩＬ－２８受容体、ＩＬ－２９受容体、ＩＬ－３０受容体、ＩＬ－３１受容体、ＩＬ－３２受容体、ＩＬ－３３受容体、ＩＬ－３５受容体、ＩＬ－３６受容体、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、ＦＧＦＲ４、ＴＮＦＲＳＦ１Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１Ｂ、ＴＮＦＲＳＦ３、ＴＮＦＲＳＦ４、ＴＮＦＲＳＦ５、ＴＮＦＲＳＦ６、ＴＮＦＲＳＦ６Ｂ、ＴＮＦＲＳＦ７、ＴＮＦＲＳＦ８、ＴＮＦＲＳＦ９、ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｃ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｄ、ＴＮＦＲＳＦ１１Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１１Ｂ、ＴＮＦＲＳＦ１２Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１３Ｂ、ＴＮＦＲＳＦ１３Ｃ、ＴＮＦＲＳＦ１４、ＴＮＦＲＳＦ１６、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＴＮＦＲＳＦ１８、ＴＮＦＲＳＦ１９、ＴＮＦＲＳＦ２１、ＴＮＦＲＳＦ２５、ＴＮＦＲＳＦ２７、ＳＣＮ１Ａ、ＳＣＮ１Ｂ、ＳＣＮ２Ａ、ＳＣＮ２Ｂ、ＳＣＮ３Ａ、ＳＣＮ３Ｂ、ＳＣＮ４Ａ、ＳＣＮ５Ａ、ＳＣＮ７Ａ、ＳＣＮ８Ａ、ＳＣＮ９Ａ、ＳＣＮ１０Ａ、ＳＣＮ１１Ａ、ＣＡＣＮＡ１Ａ、ＣＡＣＮＡ１Ｂ、ＣＡＣＮＡ１Ｃ、ＣＡＣＮＡ１Ｄ、ＣＡＣＮＡ１Ｅ、ＣＡＣＮＡ１Ｆ、ＣＡＣＮＡ１Ｇ、ＣＡＣＮＡ１Ｈ、ＣＡＣＮＡ１Ｉ、ＣＡＣＮＡ１Ｓ、ＴＲＰＡ１、ＴＲＰＣ１、ＴＲＰＣ２、ＴＲＰＣ３、ＴＲＰＣ４、ＴＲＰＣ５、ＴＲＰＣ６、ＴＲＰＣ７、ＴＲＰＭ１、ＴＲＰＭ２、ＴＲＰＭ３、ＴＲＰＭ４、ＴＲＰＭ５、ＴＲＰＭ６、ＴＲＰＭ７、ＴＲＰＭ８、ＭＣＯＬＮ１、ＭＣＯＬＮ２、ＭＣＯＬＮ３、ＰＫＤ１、ＰＫＤ２、ＰＫＤ２Ｌ１、ＰＫＤ２Ｌ２、ＴＲＰＶ１、ＴＲＰＶ２、ＴＲＰＶ３、ＴＲＰＶ４、ＴＲＰＶ５、ＴＲＰＶ６、ＣＡＴＳＰＥＲ１、ＣＡＴＳＰＥＲ２、ＣＡＴＳＰＥＲ３、ＣＡＴＳＰＥＲ４、ＴＰＣＮ１、ＴＰＣＮ２、ＣＮＧＡ１、ＣＮＧＡ２、ＣＮＧＡ３、ＣＮＧＡ４、ＣＮＧＢ１、ＣＮＧＢ３、ＨＣＮ１、ＨＣＮ２、ＨＣＮ３、ＨＣＮ４、ＫＣＮＭＡ１、ＫＣＮＮ１、ＫＣＮＮ２、ＫＣＮＮ３、ＫＣＮＮ４、ＫＣＮＴ１、ＫＣＮＴ２、ＫＣＮＵ１、ＫＣＮＡ１、ＫＣＮＡ２、ＫＣＮＡ３、ＫＣＮＡ４、ＫＣＮＡ５、ＫＣＮＡ６、ＫＣＮＡ７、ＫＣＮＡ１０、ＫＣＮＢ１、ＫＣＮＢ２、ＫＣＮＣ１、ＫＣＮＣ２、ＫＣＮＣ３、ＫＣＮＣ４、ＫＣＮＤ１、ＫＣＮＤ２、ＫＣＮＤ３、ＫＣＮＦ１、ＫＣＮＧ１、ＫＣＮＧ２、ＫＣＮＧ３、ＫＣＮＧ４、ＫＣＮＨ１、ＫＣＮＨ２、ＫＣＮＨ３、ＫＣＮＨ４、ＫＣＮＨ５、ＫＣＮＨ６、ＫＣＮＨ７、ＫＣＮＨ８、ＫＣＮＱ１、ＫＣＮＱ２、ＫＣＮＱ３、ＫＣＮＱ４、ＫＣＮＱ５、ＫＣＮＳ１、ＫＣＮＳ２、ＫＣＮＳ３、ＫＣＮＶ１、ＫＣＮＶ２、ＫＣＮＪ１、ＫＣＮＪ２、ＫＣＮＪ３、ＫＣＮＪ４、ＫＣＮＪ５、ＫＣＮＪ６、ＫＣＮＪ８、ＫＣＮＪ９、ＫＣＮＪ１０、ＫＣＮＪ１１、ＫＣＮＪ１２、ＫＣＮＪ１３、ＫＣＮＪ１４、ＫＣＮＪ１５、ＫＣＮＪ１６、ＫＣＮＪ１８、ＫＣＮＫ１、ＫＣＮＫ２、ＫＣＮＫ３、ＫＣＮＫ４、ＫＣＮＫ５、ＫＣＮＫ６、ＫＣＮＫ７、ＫＣＮＫ９、ＫＣＮＫ１０、ＫＣＮＫ１２、ＫＣＮＫ１３、ＫＣＮＫ１５、ＫＣＮＫ１６、ＫＣＮＫ１７、ＫＣＮＫ１８、ＨＶＣＮ１、ＨＴＲ３Ａ、ＨＴＲ３Ｂ、ＨＴＲ３Ｃ、ＨＴＲ３Ｄ、ＨＴＲ３Ｅ、ＣＨＲＮＡ１、ＣＨＲＮＡ２、ＣＨＲＮＡ３、ＣＨＲＮＡ４、ＣＨＲＮＡ５、ＣＨＲＮＡ６、ＣＨＲＮＡ７、ＣＨＲＮＡ９、ＣＨＲＮＡ１０、ＣＨＲＮＢ１、ＣＨＲＮＢ２、ＣＨＲＮＢ３、ＣＨＲＮＢ４、ＣＨＲＮＤ、ＣＨＲＮＥ、ＣＨＲＮＧ、ＧＡＢＲＡ１、ＧＡＢＲＡ２、ＧＡＢＲＡ３、ＧＡＢＲＡ４、ＧＡＢＲＡ５、ＧＡＢＲＡ６、ＧＡＢＲＢ１、ＧＡＢＲＢ２、ＧＡＢ
ＲＢ３、ＧＡＢＲＤ、ＧＡＢＲＥ、ＧＡＢＲＧ１、ＧＡＢＲＧ２、ＧＡＢＲＧ３、ＧＡＢＲＰ、ＧＡＢＲＱ、ＧＡＢＲＲ１、ＧＡＢＲＲ２、ＧＡＢＲＲ３、ＧＲＩＡ１、ＧＲＩＡ２、ＧＲＩＡ３、ＧＲＩＡ４、ＧＲＩＤ１、ＧＲＩＤ２、ＧＲＩＫ１、ＧＲＩＫ２、ＧＲＩＫ３、ＧＲＩＫ４、ＧＲＩＫ５、ＧＲＩＮ１、ＧＲＩＮ２Ａ、ＧＲＩＮ２Ｂ、ＧＲＩＮ２Ｃ、ＧＲＩＮ２Ｄ、ＧＲＩＮ３Ａ、ＧＲＩＮ３Ｂ、ＧＬＲＡ１、ＧＬＲＡ２、ＧＬＲＡ３、ＧＬＲＡ４、Ｐ２ＲＸ１、Ｐ２ＲＸ２、Ｐ２ＲＸ３、Ｐ２ＲＸ４、Ｐ２ＲＸ５、Ｐ２ＲＸ６、Ｐ２ＲＸ７、ＺＡＣＮ、ＡＳＩＣ１、ＡＳＩＣ２、ＡＳＩＣ３、ＡＳＩＣ４、ＡＱＰ１、ＡＱＰ２、ＡＱＰ３、ＡＱＰ４、ＡＱＰ５、ＡＱＰ６、ＡＱＰ７、ＡＱＰ８、ＡＱＰ９、ＡＱＰ１０、ＡＱＰ１１、ＡＱＰ１２Ａ、ＡＱＰ１２Ｂ、ＭＩＰ、ＣＬＣＮ１、ＣＬＣＮ２、ＣＬＣＮ３、ＣＬＣＮ４、ＣＬＣＮ５、ＣＬＣＮ６、ＣＬＣＮ７、ＣＬＣＮＫＡ、ＣＬＣＮＫＢ、嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）、ＡＮＯ１、ＡＮＯ２、ＡＮＯ３、ＡＮＯ４、ＡＮＯ５、ＡＮＯ６、ＡＮＯ７、ＡＮＯ８、ＡＮＯ９、ＡＮＯ１０、ＢＥＳＴ１、ＢＥＳＴ２、ＢＥＳＴ３、ＢＥＳＴ４、ＣＬＩＣ１、ＣＬＩＣ２、ＣＬＩＣ３、ＣＬＩＣ４、ＣＬＩＣ５、ＣＬＩＣ６、ＧＪＡ１、ＧＪＡ３、ＧＪＡ４、ＧＪＡ５、ＧＪＡ６Ｐ、ＧＪＡ８、ＧＪＡ９、ＧＪＡ１０、ＧＪＢ１、ＧＪＢ２、ＧＪＢ３、ＧＪＢ４、ＧＪＢ５、ＧＪＢ６、ＧＪＢ７、ＧＪＣ１、ＧＪＣ２、ＧＪＣ３、ＧＪＤ２、ＧＪＤ３、ＧＪＤ４、ＧＪＥ１、ＩＴＰＲ１、ＩＴＰＲ２、ＩＴＰＲ３、ＰＡＮＸ１、ＰＡＮＸ２、ＰＡＮＸ３、ＲＹＲ１、ＲＹＲ２、ＲＹＲ３、ＮＡＬＣＮ、ＳＣＮＮ１Ａ、ＳＣＮＮ１Ｂ、ＳＣＮＮ１Ｄ、ＳＣＮＮ１Ｇ、ＴＥＭ１６Ａ、ＡＤＡＭＴＳ７、ＡＮＧＰＴＬ３、ＡＮＧＰＴＬ４、ＡＮＧＰＴＬ８、ＬＰＬ、ＧＤＦ１５、ガレクチン－１、ガレクチン－２、ガレクチン－３、ガレクチン－４、ガレクチン－７、ガレクチン－８、ガレクチン－９、ガレクチン－１０、ガレクチン－１２、ガレクチン－１３、マトリックスｇｌａタンパク質（ＭＧＰ）、ＰＲＮＰ、ＤＧＡＴ１、ＧＰＡＴ３、ＤＭＣ１、ＢＬＭ、ＢＲＣＡ２、ヒト内在性レトロウイルスタイプＫ（ＨＥＲＶ－Ｋ）ファミリーのメンバー、エクトヌクレオシド三リン酸ジホスホヒドロラーゼ１（ＥＮＴＰＤ１）、エクトヌクレオシド三リン酸ジホスホヒドロラーゼ２（ＥＮＴＰＤ２）、ＳＬＣ１Ａ１、ＳＬＣ１Ａ２、ＳＬＣ１Ａ３、ＳＬＣ１Ａ４、ＳＬＣ１Ａ５、ＳＬＣ１Ａ６、ＳＬＣ１Ａ７、ＳＬＣ２Ａ１、ＳＬＣ２Ａ２、ＳＬＣ２Ａ３、ＳＬＣ２Ａ４、ＳＬＣ２Ａ５、ＳＬＣ２Ａ６、ＳＬＣ２Ａ７、ＳＬＣ２Ａ８、ＳＬＣ２Ａ９、ＳＬＣ２Ａ１０、ＳＬＣ２Ａ１１、ＳＬＣ２Ａ１２、ＳＬＣ２Ａ１３、ＳＬＣ２Ａ１４、ＳＬＣ３Ａ１、ＳＬＣ３Ａ２、ＳＬＣ４Ａ１、ＳＬＣ４Ａ２、ＳＬＣ４Ａ３、ＳＬＣ４Ａ４、ＳＬＣ４Ａ５、ＳＬＣ４Ａ６、ＳＬＣ４Ａ７、ＳＬＣ４Ａ８、ＳＬＣ４Ａ９、ＳＬＣ４Ａ１０、ＳＬＣ４Ａ１１、ＳＬＣ５Ａ１、ＳＬＣ５Ａ２、ＳＬＣ５Ａ３、ＳＬＣ５Ａ４、ＳＬＣ５Ａ５、ＳＬＣ５Ａ６、ＳＬＣ５Ａ７、ＳＬＣ５Ａ８、ＳＬＣ５Ａ９、ＳＬＣ５Ａ１０、ＳＬＣ５Ａ１１、ＳＬＣ５Ａ１２、ＳＬＣ６Ａ１、ＳＬＣ６Ａ２、ＳＬＣ６Ａ３、ＳＬＣ６Ａ４、ＳＬＣ６Ａ５、ＳＬＣ６Ａ６、ＳＬＣ６Ａ７、ＳＬＣ６Ａ８、ＳＬＣ６Ａ９、ＳＬＣ６Ａ１０、ＳＬＣ６Ａ１１、ＳＬＣ６Ａ１２、ＳＬＣ６Ａ１３、ＳＬＣ６Ａ１４、ＳＬＣ６Ａ１５、ＳＬＣ６Ａ１６、ＳＬＣ６Ａ１７、ＳＬＣ６Ａ１８、ＳＬＣ６Ａ１９、ＳＬＣ６Ａ２０、ＳＬＣ７Ａ５、ＳＬＣ７Ａ６、ＳＬＣ７Ａ７、ＳＬＣ７Ａ８、ＳＬＣ７Ａ９、ＳＬＣ７Ａ１０、ＳＬＣ７Ａ１１、ＳＬＣ７Ａ１３、ＳＬＣ７Ａ１４、ＳＬＣ８Ａ１、ＳＬＣ８Ａ２、ＳＬＣ８Ａ３、ＳＬＣ９Ａ１、ＳＬＣ９Ａ２、ＳＬＣ９Ａ３、ＳＬＣ９Ａ４、ＳＬＣ９Ａ５、ＳＬＣ９Ａ６、ＳＬＣ９Ａ７、ＳＬＣ９Ａ８、ＳＬＣ９Ａ９、ＳＬＣ９Ａ１０、ＳＬＣ９Ａ１１、ＳＬＣ９Ｂ１、ＳＬＣ９Ｂ２、ＳＬＣ１０Ａ１、ＳＬＣ１０Ａ２、ＳＬＣ１０Ａ３、ＳＬＣ１０Ａ４、ＳＬＣ１０Ａ５、ＳＬＣ１０Ａ６、ＳＬＣ１０Ａ７、ＳＬＣ１１Ａ１、ＳＬＣ１１Ａ２、ＳＬＣ１２Ａ１、ＳＬＣ１２Ａ２、ＳＬＣ１２Ａ３、ＳＬＣ１２Ａ４、ＳＬＣ１２Ａ５、ＳＬＣ１２Ａ６、ＳＬＣ１２Ａ７、ＳＬＣ１２Ａ８、ＳＬＣ１２Ａ９、ＳＬＣ１３Ａ１、ＳＬＣ１３Ａ２、ＳＬＣ１３Ａ３、ＳＬＣ１３Ａ４、ＳＬＣ１３Ａ５、ＳＬＣ１４Ａ１、ＳＬＣ１４Ａ２、ＳＬＣ１５Ａ１、ＳＬＣ１５Ａ２、ＳＬＣ１５Ａ３、ＳＬＣ１５Ａ４、ＳＬＣ１６Ａ１、ＳＬＣ１６Ａ２、ＳＬＣ１６Ａ３、ＳＬＣ１６Ａ４、ＳＬＣ１６Ａ５、ＳＬＣ１６Ａ６、ＳＬＣ１６Ａ７、ＳＬＣ１６Ａ８、ＳＬＣ１６Ａ９、ＳＬＣ１６Ａ１０、ＳＬＣ１６Ａ１１、ＳＬＣ１６Ａ１２、ＳＬＣ１６Ａ１３、ＳＬＣ１６Ａ１４、ＳＬＣ１７Ａ１、ＳＬＣ１７Ａ２、ＳＬＣ１７Ａ３、ＳＬＣ１７Ａ４、ＳＬＣ１７Ａ５、ＳＬＣ１７Ａ６、ＳＬＣ１７Ａ７、ＳＬＣ１７Ａ８、ＳＬＣ１７Ａ９、ＳＬＣ１８Ａ１、ＳＬＣ１８Ａ２、ＳＬＣ１８Ａ３、ＳＬＣ１９Ａ１、ＳＬＣ１９Ａ２、ＳＬＣ１９Ａ３、ＳＬＣ２０Ａ１、ＳＬＣ２０Ａ２、ＳＬＣＯ１Ａ２、ＳＬＣＯ１Ｂ１、ＳＬＣＯ１Ｂ３、ＳＬＣＯ１Ｃ１、ＳＬＣＯ２Ａ１、ＳＬＣＯ２Ｂ１、ＳＬＣＯ３Ａ１、ＳＬＣＯ４Ａ１、ＳＬＣＯ４Ｃ１、ＳＬＣＯ５Ａ１、ＳＬＣＯ６Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ２、ＳＬＣ２２Ａ３、ＳＬＣ２２Ａ４、ＳＬＣ２２Ａ５、ＳＬＣ２２Ａ６、ＳＬＣ２２Ａ７、ＳＬＣ２２Ａ８、ＳＬＣ２２Ａ９、ＳＬＣ２２Ａ１０、ＳＬＣ２２Ａ１１、ＳＬＣ２２Ａ１２、ＳＬＣ２２Ａ１３、ＳＬＣ２２Ａ１４、ＳＬＣ２２Ａ１５、ＳＬＣ２２Ａ１６、ＳＬＣ２２Ａ１７、ＳＬＣ２２Ａ１８、ＳＬＣ２２Ａ１８ＡＳ，ＳＬＣ２２Ａ１９、ＳＬＣ２２Ａ２０、ＳＬＣ２２Ａ２３、ＳＬＣ２２Ａ２４、ＳＬＣ２２Ａ２５、ＳＬＣ２２Ａ３１、ＳＬＣ２３Ａ１、ＳＬＣ２３Ａ２、ＳＬＣ２３Ａ３、ＳＬＣ２３Ａ４、ＳＬＣ２４Ａ１、ＳＬＣ２４Ａ２、ＳＬＣ２４Ａ３、ＳＬＣ２４Ａ４、ＳＬＣ２４Ａ５、ＳＬＣ２４Ａ６、ＳＬＣ２５Ａ１、ＳＬＣ２５Ａ２、ＳＬＣ２５Ａ３、ＳＬＣ２５Ａ４、ＳＬＣ２５Ａ５、ＳＬＣ２５Ａ６、ＳＬＣ２５Ａ７、ＳＬＣ２５Ａ８、ＳＬＣ２５Ａ９、ＳＬＣ２５Ａ１０、ＳＬＣ２５Ａ１１、ＳＬＣ２５Ａ１２、ＳＬＣ２５Ａ１３、ＳＬＣ２５Ａ１４、ＳＬＣ２５Ａ１５、ＳＬＣ２５Ａ１６、ＳＬＣ２５Ａ１７、ＳＬＣ２５Ａ１８、ＳＬＣ２５Ａ１９，ＳＬＣ２５Ａ２０、ＳＬＣ２５Ａ２１、ＳＬＣ２５Ａ２２、ＳＬＣ２５Ａ２３、ＳＬＣ２５Ａ２４、ＳＬＣ２５Ａ２５、ＳＬＣ２５Ａ２６、ＳＬＣ２５Ａ２７、ＳＬＣ２５Ａ２８、ＳＬＣ２５Ａ２９、ＳＬＣ２５Ａ３０、ＳＬＣ２５Ａ３１、ＳＬＣ２５Ａ３２、ＳＬＣ２５Ａ３３、ＳＬＣ２５Ａ３４、ＳＬＣ２５Ａ３５、ＳＬＣ２５Ａ３６、ＳＬＣ２５Ａ３７，ＳＬＣ２５Ａ３８、ＳＬＣ２５Ａ３９、ＳＬＣ２５Ａ４０、ＳＬＣ２５Ａ４１、ＳＬＣ２５Ａ４２、ＳＬＣ２５Ａ４３、ＳＬＣ２５Ａ４４、ＳＬＣ２５Ａ４５、ＳＬＣ２５Ａ４６、ＳＬＣ２６Ａ１、ＳＬＣ２６Ａ２、ＳＬＣ２６Ａ３、ＳＬＣ２６Ａ４、ＳＬＣ２６Ａ５、ＳＬＣ２６Ａ６、ＳＬＣ２６Ａ７、ＳＬＣ２６Ａ８、ＳＬＣ２６Ａ９、ＳＬＣ２６Ａ１０、ＳＬＣ２６Ａ１１、ＳＬＣ２７Ａ１、ＳＬＣ２７Ａ２、ＳＬＣ２７Ａ３、ＳＬＣ２７Ａ４、ＳＬＣ２７Ａ５、ＳＬＣ２７Ａ６、ＳＬＣ２８Ａ１、ＳＬＣ２８Ａ２、ＳＬＣ２８Ａ３、ＳＬＣ２９Ａ１、ＳＬＣ２９Ａ２、ＳＬＣ２９Ａ３、ＳＬＣ２９Ａ４、ＳＬＣ３０Ａ１、ＳＬＣ３０Ａ２、ＳＬＣ３０Ａ３、ＳＬＣ３０Ａ４、ＳＬＣ３０Ａ５、ＳＬＣ３０Ａ６、ＳＬＣ３０Ａ７、ＳＬＣ３０Ａ８、ＳＬＣ３０Ａ９、ＳＬＣ３０Ａ１０、ＳＬＣ３１Ａ１、ＳＬＣ３１Ａ２、ＳＬＣ３２Ａ１、ＳＬＣ３３Ａ１、ＳＬＣ３４Ａ１、ＳＬＣ３４Ａ２、ＳＬＣ３４Ａ３、ＳＬＣ３５Ａ１、ＳＬＣ３５Ａ２、ＳＬＣ３５Ａ３、ＳＬＣ３５Ａ４、ＳＬＣ３５Ａ５、ＳＬＣ３５Ｂ１、ＳＬＣ３５Ｂ２、ＳＬＣ３５Ｂ３、ＳＬＣ３５Ｂ４、ＳＬＣ３５Ｃ１、ＳＬＣ３５Ｃ２、ＳＬＣ３５Ｄ１、ＳＬＣ３５Ｄ２、ＳＬＣ３５Ｄ３、ＳＬＣ３５Ｅ１、ＳＬＣ３５Ｅ２、ＳＬＣ３５Ｅ３、ＳＬＣ３５Ｅ４、ＳＬＣ３５Ｆ１、ＳＬＣ３５Ｆ２、ＳＬＣ３５Ｆ３、ＳＬＣ３５Ｆ４、ＳＬＣ３５Ｆ５、ＳＬＣ３５Ｇ１、ＳＬＣ３５Ｇ３、ＳＬＣ３５Ｇ４、ＳＬＣ３５Ｇ５、ＳＬＣ３５Ｇ６、ＳＬＣ３６Ａ１、ＳＬＣ３６Ａ２、ＳＬＣ３６Ａ３、ＳＬＣ３６Ａ４、ＳＬＣ３７Ａ１、ＳＬＣ３７Ａ２、ＳＬＣ３７Ａ３、ＳＬＣ３７Ａ４、ＳＬＣ３８Ａ１、ＳＬＣ３８Ａ２、ＳＬＣ３８Ａ３、ＳＬＣ３８Ａ４、ＳＬＣ３８Ａ５、ＳＬＣ３８Ａ６、ＳＬＣ３８Ａ７、ＳＬＣ３８Ａ８、ＳＬＣ３８Ａ９、ＳＬＣ３８Ａ１０、ＳＬＣ３８Ａ１１、ＳＬＣ３９Ａ１、ＳＬＣ３９Ａ２、ＳＬＣ３９Ａ３、ＳＬＣ３９Ａ４、ＳＬＣ３９Ａ５、ＳＬＣ３９Ａ６、ＳＬＣ３９Ａ７、ＳＬＣ３９Ａ８、ＳＬＣ３９Ａ９、ＳＬＣ３９Ａ１０、ＳＬＣ３９Ａ１１、ＳＬＣ３９Ａ１２、ＳＬＣ３９Ａ１３、ＳＬＣ３９Ａ１４、ＳＬＣ４０Ａ１、ＳＬＣ４１Ａ１、ＳＬＣ４１Ａ２、ＳＬＣ４１Ａ３、ＲｈＡＧ、ＲｈＢＧ、ＲｈＣＧ、ＳＬＣ４３Ａ１、ＳＬＣ４３Ａ２、ＳＬＣ４３Ａ３、ＳＬＣ４４Ａ１、ＳＬＣ４４Ａ２、ＳＬＣ４４Ａ３、ＳＬＣ４４Ａ４、ＳＬＣ４４Ａ５、ＳＬＣ４５Ａ１、ＳＬＣ４５Ａ２、ＳＬＣ４５Ａ３、ＳＬＣ４５Ａ４、ＳＬＣ４６Ａ１、ＳＬＣ４６Ａ２、ＳＬＣ４６Ａ３、ＳＬＣ４７Ａ１、ＳＬＣ４７Ａ２、ＨＣＰ－１、ＭＦＳＤ５、ＭＦＳＤ１０、ＳＬＣ５０Ａ１、ＯＳＴα、ＯＳＴβ、ＳＬＣ５２Ａ１、ＳＬＣ５２Ａ２、ならびにＳＬＣ５２Ａ３から選択される、前記（１）、（２）または（３）に記載の方法。
（１５） 前記標的抗原が、発現させることが困難であるか、またはそれに対する抗体を産生させることが困難である、前記（１～１４）のいずれかに記載の方法。
（１６） 前記標的タンパク質の発現が、宿主産生細胞において細胞毒性をもたらす、前記（１～１５）のいずれかに記載の方法。
（１７） 前記標的タンパク質が、組換えにより発現されかつ／または精製される場合、不十分な収率、安定性、溶解性、および／または機能活性を示す、前記（１～１６）のいずれかに記載の方法。
（１８） 前記複合体の前記ポリヌクレオチドまたはｍＲＮＡが、次の：コンセンサスコザック配列；前記ｍＲＮＡの５’末端上の７－メチルグアノシンキャップ；前記ｍＲＮＡ転写物の３’終端で見られるポリアデノシン（ポリＡ）テール；ならびに５’－および３’－非翻訳領域（ＵＴＲ）の１つ以上を含む、前記（１～１７）のいずれかに記載の方法。
（１９） 前記投与が、非経口、静脈内、筋肉内、鼻腔内、または皮下である、前記（１）～（１８）のいずれかに記載の方法。
（２０） 前記標的タンパク質がＲＸＦＰ１である、前記（１）～（１９）のいずれかに記載の方法。
（２１） 前記複合体が、配列番号４、または配列番号２、４および３７のいずれか１つの核酸配列を含むポリリボヌクレオチドまたはｍＲＮＡを含む、前記（１）～（２０）のいずれかに記載の方法。
（２２） 前記標的タンパク質がＳＬＣ５２Ａ２である、前記（１）～（２１）のいずれかに記載の方法。
（２３） 前記複合体が、配列番号７、または配列番号５、７および４０のいずれか１つの核酸配列を含むポリリボヌクレオチドまたはｍＲＮＡを含む、前記（１）～（２２）のいずれか一項に
記載の方法。
（２４） 前記標的タンパク質がＡＮＧＰＴＬ８である、前記（１）～（２３）のいずれかに記載の
方法。
（２５） 前記複合体が、配列番号１０、または配列番号８、１０および４３のいずれか１つの核酸配列を含むポリリボヌクレオチドまたはｍＲＮＡを含む、前記（１）～（２４）のいずれかに記載の方法。
（２６） 前記標的タンパク質がＴＳＨＲである、前記（１）～（２５）のいずれかに記載の方法。
（２７） 前記複合体が、配列番号１６、または配列番号１４、１６および４６のいずれか１つの核酸配列を含むポリリボヌクレオチドまたはｍＲＮＡを含む、前記（１）～（２６）のいずれかに記載の方法。
（２８） 前記標的タンパク質がＡＰＪである、前記（１）～（２７）のいずれかに記載の方法。
（２９） 前記複合体が、配列番号１９、または配列番号１７、１９および４９のいずれか１つの核酸配列を含むポリリボヌクレオチドまたはｍＲＮＡを含む、前記（１）～（２８）のいずれかに記載の方法。
（３０） 前記標的タンパク質がｇｐ１３０である、前記（１）～（２９）のいずれかに記載の方法。
（３１） 前記複合体が、配列番号２２、または配列番号２０、２２および５２のいずれか１つの核酸配列を含むポリリボヌクレオチドまたはｍＲＮＡを含む、前記（１）～（３０）のいずれかに記載の方法。
（３２） 前記標的タンパク質がガレクチン３である、前記（１）～（３１）のいずれかに記載の方法。
（３３） 前記複合体が、配列番号５５、または配列番号２６、５５および５６のいずれか１つの核酸配列を含むポリリボヌクレオチドまたはｍＲＮＡを含む、前記（１）～（３２）のいずれかに記載の方法。
（３４） 前記複合体が、約３０～１５０ｎｍの直径を有する、前記（１）～（３３）のいずれかに記載の方法。
（３５） 前記複合体がヘルパー脂質を含む、前記（１）～（３４）のいずれかに記載の方法。
（３６） 前記複合体が、（ｉ）カチオン性脂質、（ｉｉ）ヘルパー脂質、例えば、コレステロール、（ｉｉｉ）中性脂質、例えば、ＤＳＰＣ、および（ｉｖ）ステルス脂質、例えば、Ｓ０１０、Ｓ０２４、Ｓ０２７、Ｓ０３１またはＳ０３３の任意の組み合わせを含む、前記（１）～（３５）のいずれかに記載の方法。
（３７） 前記動物が、１０μｇ、１２．５μｇ、２０μｇ、２５μｇ、３０μｇ、４０μｇ、５０μｇ、６０μｇ、７０μｇ、８０μｇ、９０μｇ、１００μｇ、１１０μｇ、１２０μｇ、１３０μｇ、１４０μｇ、または１５０μｇのポリリボヌクレオチドを投与される、前記（１）～（３６）のいずれかに記載の方法。
（３８） 前記カチオン性脂質が、Ｎ，Ｎ－ジオレイル－Ｎ，Ｎ－ジメチルアンモニウムクロリド（ＤＯＤＡＣ）、Ｎ，Ｎ－ジステアリル－Ｎ，Ｎ－ジメチルアンモニウムブロミド（ＤＤＡＢ）、Ｎ－（１－（２，３－ジオレオイルオキシ）プロピル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ－トリメチルアンモニウムクロリド（ＤＯＴＡＰ）、１，２－ジオレオイル－３－ジメチルアンモニウム－プロパン（ＤＯＤＡＰ）、Ｎ－（１－（２，３－ジオレイルオキシ）プロピル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ－トリメチルアンモニウムクロリド（ＤＯＴＭＡ）、１，２－ジオレオイルカルバミル－３－ジメチルアンモニウム－プロパン（ＤＯＣＤＡＰ）、１，２－ジリネオイル－３－ジメチルアンモニウム－プロパン（ＤＬＩＮＤＡＰ）、ジラウリル（Ｃ １２：０ ）トリメチルアンモニウムプロパン（ＤＬＴＡＰ）、ジオクタデシルアミドグリシルスペルミン（ＤＯＧＳ）、ＤＣ－Ｃｈｏｌ、ジオレオイルオキシ－Ｎ－［２－スペルミンカルボキサミド）エチル｝－Ｎ，Ｎ－ジメチル－１－プロパンアミニウムトリフルオロアセテート（ＤＯＳＰＡ）、１，２－ジミリスチルオキシプロピル－３－ジメチル－ヒドロキシエチルアンモニウムブロミド（ＤＭＲＩＥ）、３－ジメチルアミノ－２－（コレスト－５－エン－３－β－オキシブタン－４－オキシ）－１－（シス，シス－９，１２－オクタデカジエノキシ）プロパン（ＣＬｉｎＤＭＡ）、Ｎ，Ｎ－ジメチル－２，３－ジオレイルオキシ）プロピルアミン（ＤＯＤＭＡ）、２－［５’－（コレスト－５－エン－３β－オキシ）－３’－オキサペントキシ）－３－ジメチル－１－（シス，シス－９’，１２’－オクタデカジエノキシ）プロパン（ＣｐＬｉｎＤＭＡ）およびＮ，Ｎ－ジメチル－３，４－ジオレイルオキシベンジルアミン（ＤＭＯＢＡ）、ならびに１，２－Ｎ，Ｎ’－ジオレイルカルバミル－３－ジメチルアミノプロパン（ＤＯｃａｒｂＤＡＰ）からなる群から選択される、前記（１）～（３７）のいずれかに記載の方法。
（３９） 前記カチオン性脂質がＤＯＴＡＰまたはＤＬＴＡＰである、前記（３８）に記載の方法。
（４０） 前記標的タンパク質に特異的に結合する抗体を産生するハイブリドーマを作製するステップをさらに含む、前記（１）～（３９）のいずれかに記載の方法。
（４１） 前記標的タンパク質に特異的に結合する抗体を精製するステップをさらに含む、前記（１）～（４０）のいずれかに記載の方法。
（４２） 前記標的タンパク質に特異的に結合する精製された抗体に由来するキメラまたはヒト化抗体を作製するステップをさらに含む、前記（１）～（４１）のいずれかに記載の方法。
（４３） 前記方法が、ｃＤＮＡ、タンパク質もしくはペプチド、ウイルス粒子、または細胞全体による免疫化を含む方法と比較して、１回目の採血または２回目の採血由来の血清中においてより高い抗体力価を生じる、前記（１）～（４２）のいずれかに記載の方法。
（４４） 前記方法が、ｃＤＮＡ、タンパク質もしくはペプチド、ウイルス粒子、または細胞全体による免疫化を含む方法よりも、標的タンパク質に特異的な抗体を産生するハイブリドーマをより多く生じる、前記（１）～（４３）のいずれかに記載の方法。
（４５） 前記標的タンパク質がヒト標的タンパク質であり、非ヒト動物が、マウス、ラット、ウサギ、ヒツジ、ネコ、イヌ、ラクダ科動物、サメ、サル、ブタ、またはウマである、前記（１）～（４４）のいずれかに記載の方法。
（４６） 前記標的タンパク質に特異的に結合する抗体を産生するハイブリドーマであって、前記ハイブリドーマが前記（１）～（４５）のいずれか１つの方法によって得られた、ハイブリドーマ。
（４７） 前記標的タンパク質に特異的に結合するポリクローナル抗体の混合物であって、前記混合物が前記（１）～（４５）のいずれか１つの方法によって得られた、混合物。
（４８） 前記標的タンパク質に特異的に結合する単離されたモノクローナル抗体であって、前記モノクローナル抗体が前記（１）～（４５）のいずれか１つの方法によって得られた、単離されたモノクローナル抗体。

Claims (48)

  1. 標的タンパク質に対するモノクローナル抗体を作製するための方法であって、（ａ）少
    なくとも１つのカチオン性脂質を、前記標的タンパク質またはその断片をコードするメッ
    センジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）などのポリリボヌクレオチドと混合し、それにより、カチ
    オン性脂質－ポリリボヌクレオチド複合体を形成するステップと；（ｂ）前記脂質－ポリ
    リボヌクレオチド複合体を非ヒト動物に投与するステップと；（ｃ）前記標的タンパク質
    に特異的に結合する抗体を前記動物から得るステップとを含む、方法。
  2. 標的タンパク質に対するモノクローナル抗体を作製するための方法であって、（ａ）脂
    質－ポリリボヌクレオチド複合体を非ヒト動物に投与し、それにより、前記標的タンパク
    質に対する免疫応答を誘導するステップであって、前記複合体が、前記標的タンパク質ま
    たはその断片をコードするｍＲＮＡなどのポリリボヌクレオチドを有する少なくとも１つ
    のカチオン性脂質を含むステップと；（ｂ）前記標的タンパク質に特異的に結合する抗体
    を前記動物から得るステップとを含む、方法。
  3. 非ヒト動物において標的タンパク質に対する免疫応答を誘発するための方法であって、
    脂質－ポリヌクレオチド複合体を前記動物に投与するステップを含み、前記脂質－ポリヌ
    クレオチド複合体がカチオン性脂質および標的タンパク質をコードするｍＲＮＡを含み、
    前記標的タンパク質が前記動物と異なる種のタンパク質である、方法。
  4. 前記標的タンパク質が膜貫通タンパク質である、請求項１、２または３に記載の方法。
  5. 前記膜貫通タンパク質が、次の：
    （ｉ）Ｇタンパク質共役型受容体（ＧＰＣＲ）；
    （ｉｉ）１回膜貫通型タンパク質受容体；
    （ｉｉｉ）腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）メンバー；
    （ｉｖ）インターロイキン（ＩＬ）受容体；
    （ｖ）イオンチャネル；
    （ｖｉ）溶質輸送体；
    （ｖｉｉ）免疫受容体；および
    （ｖｉｉｉ）複数回膜貫通タンパク質
    から選択される、請求項４に記載の方法。
  6. 前記膜貫通タンパク質が、Ｇタンパク質共役型受容体（ＧＰＣＲ）である、請求項４ま
    たは５に記載の方法。
  7. 前記ＧＰＣＲが、ＲＸＦＰ１、ＴＳＨＲ、ＡＰＪ、ＧＰＲ４０、ＧＰＲ６４、ＧＰＲ４
    、またはＧＰＲ１５である、請求項６に記載の方法。
  8. 前記膜貫通タンパク質が、ＧＰ１３０などの１回膜貫通型タンパク質受容体である、請
    求項４または５に記載の方法。
  9. 前記膜貫通タンパク質が、ＳＬＣ５２Ａ２などの複数回膜貫通タンパク質である、請求
    項４または５に記載の方法。
  10. 前記膜貫通タンパク質が、ＩＬ－１受容体、ＩＬ－２受容体、ＩＬ－３受容体、ＩＬ－
    ４受容体、ＩＬ－５受容体、ＩＬ－６受容体、ＩＬ－７受容体、ＩＬ－８受容体、ＩＬ－
    ９受容体、ＩＬ－１０受容体、ＩＬ－１１受容体、ＩＬ－１２受容体、ＩＬ－１３受容体
    、ＩＬ－１４受容体、ＩＬ－１５受容体、ＩＬ－１６受容体、ＩＬ－１７受容体、ＩＬ－
    １８受容体、ＩＬ－１９受容体、ＩＬ－２０受容体、ＩＬ－２１受容体、ＩＬ－２２受容
    体、ＩＬ－２３受容体、ＩＬ－２４受容体、ＩＬ－２５受容体、ＩＬ－２６受容体、ＩＬ
    －２７受容体、ＩＬ－２８受容体、ＩＬ－２９受容体、ＩＬ－３０受容体、ＩＬ－３１受
    容体、ＩＬ－３２受容体、ＩＬ－３３受容体、ＩＬ－３５受容体、またはＩＬ－３６受容
    体などのインターロイキン（ＩＬ）受容体である、請求項４または５に記載の方法。
  11. 前記膜貫通タンパク質が、次の：ＴＮＦＲＳＦ１Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１Ｂ、ＴＮＦＲＳＦ
    ３、ＴＮＦＲＳＦ４、ＴＮＦＲＳＦ５、ＴＮＦＲＳＦ６、ＴＮＦＲＳＦ６Ｂ、ＴＮＦＲＳ
    Ｆ７、ＴＮＦＲＳＦ８、ＴＮＦＲＳＦ９、ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ、Ｔ
    ＮＦＲＳＦ１０Ｃ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｄ、ＴＮＦＲＳＦ１１Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１１Ｂ、Ｔ
    ＮＦＲＳＦ１２Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１３Ｂ、ＴＮＦＲＳＦ１３Ｃ、ＴＮＦＲＳＦ１４、ＴＮ
    ＦＲＳＦ１６、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＴＮＦＲＳＦ１８、ＴＮＦＲＳＦ１９、ＴＮＦＲＳＦ
    ２１、ＴＮＦＲＳＦ２５、およびＴＮＦＲＳＦ２７からなる群から選択される腫瘍壊死因
    子受容体スーパーファミリー（ＴＮＦＲＳＦ）メンバーである、請求項４または５に記載
    の方法。
  12. 前記膜貫通タンパク質が、ＴＭＥＭ１６Ａなどのイオンチャネルである、請求項４また
    は５に記載の方法。
  13. 前記膜貫通タンパク質が、溶質輸送体である、請求項４または５に記載の方法。
  14. 前記標的タンパク質が、次の：ＡＣＫＲ１、ＡＣＫＲ２、ＡＣＫＲ３、ＡＣＫＲ４、Ａ
    ＤＣＹＡＰ１Ｒ１、ＡＤＧＲＡ１、ＡＤＧＲＡ２、ＡＤＧＲＡ３、ＡＤＧＲＢ１、ＡＤＧ
    ＲＢ２、ＡＤＧＲＢ３、ＡＤＧＲＤ１、ＡＤＧＲＤ２、ＡＤＧＲＥ１、ＡＤＧＲＥ２、Ａ
    ＤＧＲＥ３、ＡＤＧＲＥ４Ｐ、ＡＤＧＲＥ５、ＡＤＧＲＦ１、ＡＤＧＲＦ２、ＡＤＧＲＦ
    ３、ＡＤＧＲＦ４、ＡＤＧＲＦ５、ＡＤＧＲＧ１、ＡＤＧＲＧ２、ＡＤＧＲＧ３、ＡＤＧ
    ＲＧ４、ＡＤＧＲＧ５、ＡＤＧＲＧ６、ＡＤＧＲＧ７、ＡＤＧＲＬ１、ＡＤＧＲＬ２、Ａ
    ＤＧＲＬ３、ＡＤＧＲＬ４、ＡＤＧＲＶ１、ＡＤＯＲＡ１、ＡＤＯＲＡ２Ａ、ＡＤＯＲＡ
    ２Ｂ、ＡＤＯＲＡ３、ＡＤＲＡ１Ａ、ＡＤＲＡ１Ｂ、ＡＤＲＡ１Ｄ、ＡＤＲＡ２Ａ、ＡＤ
    ＲＡ２Ｂ、ＡＤＲＡ２Ｃ、ＡＤＲＢ１、ＡＤＲＢ２、ＡＤＲＢ３、ＡＧＴＲ１、ＡＧＴＲ
    ２、ＡＰＬＮＲ／ＡＰＪ、ＡＳＧＲ１、ＡＳＧＲ２、ＡＶＰＲ１Ａ、ＡＶＰＲ１Ｂ、ＡＶ
    ＰＲ２、ＢＤＫＲＢ１、ＢＤＫＲＢ２、ＢＲＳ３、ＢＲＳ３、Ｃ３ＡＲ１、Ｃ５ＡＲ１、
    Ｃ５ＡＲ２、ＣＡＬＣＲ、ＣＡＬＣＲＬ、ＣＡＳＲ、ＣＣＫＡＲ、ＣＣＫＢＲ、ＣＣＲ１
    、ＣＣＲ１０、ＣＣＲ２、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＣＲ
    ８、ＣＣＲ９、ＣＣＲＬ２、ＣＥＬＳＲ１、ＣＥＬＳＲ２、ＣＥＬＳＲ３、ＣＨＲＭ１、
    ＣＨＲＭ２、ＣＨＲＭ３、ＣＨＲＭ４、ＣＨＲＭ５、ＣＭＫＬＲ１、ＣＮＲ１、ＣＮＲ２
    、ＣＲＨＲ１、ＣＲＨＲ２、ＣＸ３ＣＲ１、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ３、ＣＸ
    ＣＲ４、ＣＸＣＲ５、ＣＸＣＲ６、ＣＹＳＬＴＲ１、ＣＹＳＬＴＲ２、ＤＲＤ１、ＤＲＤ
    ２、ＤＲＤ３、ＤＲＤ４、ＤＲＤ５、ＥＤＮＲＡ、ＥＤＮＲＢ、Ｆ２Ｒ、Ｆ２ＲＬ１、Ｆ
    ２ＲＬ２、Ｆ２ＲＬ３、ＦＦＡＲ１、ＦＦＡＲ２、ＦＦＡＲ３、ＦＦＡＲ４、ＦＰＲ１、
    ＦＰＲ２、ＦＰＲ２、ＦＰＲ３、ＦＳＨＲ、ＦＺＤ１、ＦＺＤ１０、ＦＺＤ２、ＦＺＤ３
    、ＦＺＤ４、ＦＺＤ５、ＦＺＤ６、ＦＺＤ７、ＦＺＤ８、ＦＺＤ９、ＧＡＢＢＲ１、ＧＡ
    ＢＢＲ２、ＧＡＬＲ１、ＧＡＬＲ２、ＧＡＬＲ３、ＧＣＧＲ、ＧＨＲＨＲ、ＧＨＳＲ、Ｇ
    ＩＰＲ、ＧＬＰ１Ｒ、ＧＬＰ２Ｒ、ＧＮＲＨＲ、ＧＮＲＨＲ２、ＧＰＢＡＲ１、ＧＰＥＲ
    １、ＧＰＲ１、ＧＰＲ４、ＧＰＲ１２、ＧＰＲ１５、ＧＰＲ１７、ＧＰＲ１８、ＧＰＲ１
    ９、ＧＰＲ２０、ＧＰＲ２１、ＧＰＲ２２、ＧＰＲ２５、ＧＰＲ２６、ＧＰＲ２７、ＧＰ
    Ｒ３、ＧＰＲ３１、ＧＰＲ３２、ＧＰＲ３３、ＧＰＲ３４、ＧＰＲ３５、ＧＰＲ３７、Ｇ
    ＰＲ３７Ｌ１、ＧＰＲ３９、ＧＰＲ４０、ＧＰＲ４２、ＧＰＲ４２、ＧＰＲ４５、ＧＰＲ
    ５０、ＧＰＲ５２、ＧＰＲ５５、ＧＰＲ６、ＧＰＲ６１、ＧＰＲ６２、ＧＰＲ６３、ＧＰ
    Ｒ６５、ＧＰＲ６８、ＧＰＲ７５、ＧＰＲ７８、ＧＰＲ７９、ＧＰＲ８２、ＧＰＲ８３、
    ＧＰＲ８４、ＧＰＲ８５、ＧＰＲ８７、ＧＰＲ８８、ＧＰＲ１０１、ＧＰＲ１０７、ＧＰ
    Ｒ１３２、ＧＰＲ１３５、ＧＰＲ１３７、ＧＰＲ１３９、ＧＰＲ１４１、ＧＰＲ１４２、
    ＧＰＲ１４３、ＧＰＲ１４６、ＧＰＲ１４８、ＧＰＲ１４９、ＧＰＲ１５、ＧＰＲ１５０
    、ＧＰＲ１５１、ＧＰＲ１５２、ＧＰＲ１５３、ＧＰＲ１５６、ＧＰＲ１５７、ＧＰＲ１
    ５８、ＧＰＲ１６０、ＧＰＲ１６１、ＧＰＲ１６２、ＧＰＲ１７１、ＧＰＲ１７３、ＧＰ
    Ｒ１７４、ＧＰＲ１７６、ＧＰＲ１７９、ＧＰＲ１８２、ＧＰＲ１８３、ＧＰＲＣ５Ａ、
    ＧＰＲＣ５Ｂ、ＧＰＲＣ５Ｃ、ＧＰＲＣ５Ｄ、ＧＰＲＣ６Ａ、ＧＲＭ１、ＧＲＭ２、ＧＲ
    Ｍ３、ＧＲＭ４、ＧＲＭ５、ＧＲＭ６、ＧＲＭ７、ＧＲＭ８、ＧＲＰＲ、ＨＣＡＲ１、Ｈ
    ＣＡＲ２、ＨＣＡＲ３、ＨＣＲＴＲ１、ＨＣＲＴＲ２、ＨＲＨ１、ＨＲＨ２、ＨＲＨ３、
    ＨＲＨ４、ＨＴＲ１Ａ、ＨＴＲ１Ｂ、ＨＴＲ１Ｄ、ＨＴＲ１Ｅ、ＨＴＲ１Ｆ、ＨＴＲ２Ａ
    、ＨＴＲ２Ｂ、ＨＴＲ２Ｃ、ＨＴＲ４、ＨＴＲ５Ａ、ＨＴＲ５ＢＰ、ＨＴＲ６、ＨＴＲ７
    、ＫＩＳＳ１Ｒ、ＬＧＲ３、ＬＧＲ４、ＬＧＲ５、ＬＧＲ６、ＬＨＣＧＲ、ＬＰＡＲ１、
    ＬＰＡＲ２、ＬＰＡＲ３、ＬＰＡＲ４、ＬＰＡＲ５、ＬＰＡＲ６、ＬＴＢ４Ｒ、ＬＴＢ４
    Ｒ２、ＭＡＳ１、ＭＡＳ１Ｌ、ＭＣ１Ｒ、ＭＣ２Ｒ、ＭＣ３Ｒ、ＭＣ４Ｒ、ＭＣ５Ｒ、Ｍ
    ＣＨＲ１、ＭＣＨＲ２、ＭＬＮＲ、ＭＲＧＰＲＤ、ＭＲＧＰＲＥ、ＭＲＧＰＲＦ、ＭＲＧ
    ＰＲＧ、ＭＲＧＰＲＸ１、ＭＲＧＰＲＸ２、ＭＲＧＰＲＸ３、ＭＲＧＰＲＸ４、ＭＴＮＲ
    １Ａ、ＭＴＮＲ１Ｂ、ＮＭＢＲ、ＮＭＵＲ１、ＮＭＵＲ２、ＮＰＢＷＲ１、ＮＰＢＷＲ２
    、ＮＰＦＦＲ１、ＮＰＦＦＲ２、ＮＰＳＲ１、ＮＰＹ１Ｒ、ＮＰＹ２Ｒ、ＮＰＹ４Ｒ、Ｎ
    ＰＹ５Ｒ、ＮＰＹ６Ｒ、ＮＴＳＲ１、ＮＴＳＲ２、ＯＰＮ３、ＯＰＮ４、ＯＰＮ５、ＯＰ
    ＲＤ１、ＯＰＲＫ１、ＯＰＲＬ１、ＯＰＲＭ１、ＯＲ５１Ｅ１、ＯＸＥＲ１、ＯＸＧＲ１
    、ＯＸＴＲ、Ｐ２ＲＹ１、Ｐ２ＲＹ１０、Ｐ２ＲＹ１１、Ｐ２ＲＹ１２、Ｐ２ＲＹ１３、
    Ｐ２ＲＹ１４、Ｐ２ＲＹ２、Ｐ２ＲＹ４、Ｐ２ＲＹ６、Ｐ２ＲＹ８、ＰＲＬＨＲ、ＰＲＯ
    ＫＲ１、ＰＲＯＫＲ２、ＰＴＡＦＲ、ＰＴＧＤＲ、ＰＴＧＤＲ２、ＰＴＧＥＲ１、ＰＴＧ
    ＥＲ２、ＰＴＧＥＲ３、ＰＴＧＥＲ４、ＰＴＧＦＲ、ＰＴＧＩＲ、ＰＴＨ１Ｒ、ＰＴＨ２
    Ｒ、ＱＲＦＰＲ、ＲＸＦＰ１、ＲＸＦＰ２、ＲＸＦＰ３、ＲＸＦＰ４、Ｓ１ＰＲ１、Ｓ１
    ＰＲ２、Ｓ１ＰＲ３、Ｓ１ＰＲ４、Ｓ１ＰＲ５、ＳＣＴＲ、ＳＭＯ、ＳＳＴＲ１、ＳＳＴ
    Ｒ２、ＳＳＴＲ３、ＳＳＴＲ４、ＳＳＴＲ５、ＳＵＣＮＲ１、ＴＡＡＲ１、ＴＡＡＲ２、
    ＴＡＡＲ３、ＴＡＡＲ４Ｐ、ＴＡＡＲ５、ＴＡＡＲ６、ＴＡＡＲ８、ＴＡＡＲ９、ＴＡＣ
    Ｒ１、ＴＡＣＲ２、ＴＡＣＲ３、ＴＡＳ１Ｒ１、ＴＡＳ１Ｒ２、ＴＡＳ１Ｒ３、ＴＡＳ２
    Ｒ１、ＴＡＳ２Ｒ１０、ＴＡＳ２Ｒ１３、ＴＡＳ２Ｒ１４、ＴＡＳ２Ｒ１６、ＴＡＳ２Ｒ
    １９、ＴＡＳ２Ｒ２０、ＴＡＳ２Ｒ３、ＴＡＳ２Ｒ３０、ＴＡＳ２Ｒ３１、ＴＡＳ２Ｒ３
    ８、ＴＡＳ２Ｒ３９、ＴＡＳ２Ｒ４、ＴＡＳ２Ｒ４０、ＴＡＳ２Ｒ４１、ＴＡＳ２Ｒ４２
    、ＴＡＳ２Ｒ４３、ＴＡＳ２Ｒ４５、ＴＡＳ２Ｒ４６、ＴＡＳ２Ｒ５、ＴＡＳ２Ｒ５０、
    ＴＡＳ２Ｒ６０、ＴＡＳ２Ｒ７、ＴＡＳ２Ｒ８、ＴＡＳ２Ｒ９、ＴＢＸＡ２Ｒ、ＴＰＲＡ
    １、ＴＲＨＲ、ＴＳＨＲ、ＵＴＳ２Ｒ、ＶＩＰＲ１、ＶＩＰＲ２、ＸＣＲ１、ＴＣＲ－α
    、ＴＣＲ－β、ＣＤ３、ζ－鎖アクセサリー、ＣＤ４、ＣＤ８、ＳＩＧＩＲＲ、マンノー
    ス受容体（ＭＲ）、アシアロ糖タンパク質受容体ファミリー（例えば、アシアロ糖タンパ
    ク質受容体マクロファージガラクトース型レクチン（ＭＧＬ））、ＤＣ－ＳＩＧＮ（ＣＬ
    ＥＣ４Ｌ）、ランゲリン（ＣＬＥＣ４Ｋ）、骨髄系ＤＡＰ１２会合レクチン（ＭＤＬ）－
    １（ＣＬＥＣ５Ａ）、デクチン１／ＣＬＥＣ７Ａ、ＤＮＧＲ１／ＣＬＥＣ９Ａ、骨髄系Ｃ
    型レクチン様受容体（ＭＩＣＬ）（ＣＬＥＣ１２Ａ）、ＣＬＥＣ２（ＣＬＥＣ１Ｂとも呼
    ばれる）、ＣＬＥＣ１２Ｂ、ＤＣＩＲ／ＣＬＥＣ４Ａ、デクチン２／ＣＬＥＣ６Ａ、血液
    ＤＣ抗原２（ＢＤＣＡ２）（ＣＬＥＣ４Ｃ）、マクロファージ誘導性Ｃ型レクチン（ＣＬ
    ＥＣ４Ｅ）、ＴＬＲ１、ＴＬＲ２、ＴＬＲ３、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ６、ＴＬＲ７
    、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９、ＴＬＲ１０、ＴＬＲ１１、ＴＬＲ１２、ＴＬＲ１３，ＦｃγＲＩ
    （ＣＤ６４）、ＦｃγＲＩＩＡ（ＣＤ３２）、ＦｃγＲＩＩＢ１（ＣＤ３２）、ＦｃγＲ
    ＩＩＢ２（ＣＤ３２）、ＦｃγＲＩＩＩＡ（ＣＤ１６ａ）、ＦｃγＲＩＩＩＢ（ＣＤ１６
    ｂ）、ＦｃεＲＩ、ＦｃεＲＩＩ（ＣＤ２３）、ＦｃαＲ１（ＣＤ８９）、Ｆｃα／μＲ
    、ＦｃＲｎ、ＣＤ２７、ＣＤ４０、ＯＸ４０、ＧＩＴＲ、ＣＤ１３７、ＰＤ－１、ＣＴＬ
    Ａ－４、ＰＤ－Ｌ１、ＴＩＧＩＴ、Ｔ細胞免疫グロブリンドメインおよびムチンドメイン
    ３（ＴＩＭ３）、Ｔ細胞活性化のＶ－ドメインＩｇ抑制因子（ＶＩＳＴＡ）、ＣＤ２８、
    ＣＤ１２２、ＩＣＯＳ、Ａ２ＡＲ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＢおよびＴリンパ球アテニ
    ュエータ（ＢＴＬＡ）、インドールアミン２，３－ジオキシゲナーゼ（ＩＤＯ）、キラー
    細胞免疫グロブリン様受容体（ＫＩＲ）、リンパ球活性化遺伝子－３（ＬＡＧ３）、ＦＡ
    Ｍ１５９Ｂ、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－Ｂ、ＨＬＡ－Ｃ、ＨＬＡ－ＤＰＡ１、ＨＬＡ－ＤＰＢ
    １、ＨＬＡ－ＤＱＡ１、ＨＬＡ－ＤＱＢ１、ＨＬＡ－ＤＲＡ、ＨＬＡ－ＤＲＢ１、ｇｐ１
    ３０、ＩＬ－１受容体、ＩＬ－２受容体、ＩＬ－３受容体、ＩＬ－４受容体、ＩＬ－５受
    容体、ＩＬ－６受容体、ＩＬ－７受容体、ＩＬ－８受容体、ＩＬ－９受容体、ＩＬ－１０
    受容体、ＩＬ－１１受容体、ＩＬ－１２受容体、ＩＬ－１３受容体、ＩＬ－１４受容体、
    ＩＬ－１５受容体、ＩＬ－１６受容体、ＩＬ－１７受容体、ＩＬ－１８受容体、ＩＬ－１
    ９受容体、ＩＬ－２０受容体、ＩＬ－２１受容体、ＩＬ－２２受容体、ＩＬ－２３受容体
    、ＩＬ－２４受容体、ＩＬ－２５受容体、ＩＬ－２６受容体、ＩＬ－２７受容体、ＩＬ－
    ２８受容体、ＩＬ－２９受容体、ＩＬ－３０受容体、ＩＬ－３１受容体、ＩＬ－３２受容
    体、ＩＬ－３３受容体、ＩＬ－３５受容体、ＩＬ－３６受容体、ＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２
    、ＦＧＦＲ３、ＦＧＦＲ４、ＴＮＦＲＳＦ１Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１Ｂ、ＴＮＦＲＳＦ３、Ｔ
    ＮＦＲＳＦ４、ＴＮＦＲＳＦ５、ＴＮＦＲＳＦ６、ＴＮＦＲＳＦ６Ｂ、ＴＮＦＲＳＦ７、
    ＴＮＦＲＳＦ８、ＴＮＦＲＳＦ９、ＴＮＦＲＳＦ１０Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ、ＴＮＦＲ
    ＳＦ１０Ｃ、ＴＮＦＲＳＦ１０Ｄ、ＴＮＦＲＳＦ１１Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１１Ｂ、ＴＮＦＲ
    ＳＦ１２Ａ、ＴＮＦＲＳＦ１３Ｂ、ＴＮＦＲＳＦ１３Ｃ、ＴＮＦＲＳＦ１４、ＴＮＦＲＳ
    Ｆ１６、ＴＮＦＲＳＦ１７、ＴＮＦＲＳＦ１８、ＴＮＦＲＳＦ１９、ＴＮＦＲＳＦ２１、
    ＴＮＦＲＳＦ２５、ＴＮＦＲＳＦ２７、ＳＣＮ１Ａ、ＳＣＮ１Ｂ、ＳＣＮ２Ａ、ＳＣＮ２
    Ｂ、ＳＣＮ３Ａ、ＳＣＮ３Ｂ、ＳＣＮ４Ａ、ＳＣＮ５Ａ、ＳＣＮ７Ａ、ＳＣＮ８Ａ、ＳＣ
    Ｎ９Ａ、ＳＣＮ１０Ａ、ＳＣＮ１１Ａ、ＣＡＣＮＡ１Ａ、ＣＡＣＮＡ１Ｂ、ＣＡＣＮＡ１
    Ｃ、ＣＡＣＮＡ１Ｄ、ＣＡＣＮＡ１Ｅ、ＣＡＣＮＡ１Ｆ、ＣＡＣＮＡ１Ｇ、ＣＡＣＮＡ１
    Ｈ、ＣＡＣＮＡ１Ｉ、ＣＡＣＮＡ１Ｓ、ＴＲＰＡ１、ＴＲＰＣ１、ＴＲＰＣ２、ＴＲＰＣ
    ３、ＴＲＰＣ４、ＴＲＰＣ５、ＴＲＰＣ６、ＴＲＰＣ７、ＴＲＰＭ１、ＴＲＰＭ２、ＴＲ
    ＰＭ３、ＴＲＰＭ４、ＴＲＰＭ５、ＴＲＰＭ６、ＴＲＰＭ７、ＴＲＰＭ８、ＭＣＯＬＮ１
    、ＭＣＯＬＮ２、ＭＣＯＬＮ３、ＰＫＤ１、ＰＫＤ２、ＰＫＤ２Ｌ１、ＰＫＤ２Ｌ２、Ｔ
    ＲＰＶ１、ＴＲＰＶ２、ＴＲＰＶ３、ＴＲＰＶ４、ＴＲＰＶ５、ＴＲＰＶ６、ＣＡＴＳＰ
    ＥＲ１、ＣＡＴＳＰＥＲ２、ＣＡＴＳＰＥＲ３、ＣＡＴＳＰＥＲ４、ＴＰＣＮ１、ＴＰＣ
    Ｎ２、ＣＮＧＡ１、ＣＮＧＡ２、ＣＮＧＡ３、ＣＮＧＡ４、ＣＮＧＢ１、ＣＮＧＢ３、Ｈ
    ＣＮ１、ＨＣＮ２、ＨＣＮ３、ＨＣＮ４、ＫＣＮＭＡ１、ＫＣＮＮ１、ＫＣＮＮ２、ＫＣ
    ＮＮ３、ＫＣＮＮ４、ＫＣＮＴ１、ＫＣＮＴ２、ＫＣＮＵ１、ＫＣＮＡ１、ＫＣＮＡ２、
    ＫＣＮＡ３、ＫＣＮＡ４、ＫＣＮＡ５、ＫＣＮＡ６、ＫＣＮＡ７、ＫＣＮＡ１０、ＫＣＮ
    Ｂ１、ＫＣＮＢ２、ＫＣＮＣ１、ＫＣＮＣ２、ＫＣＮＣ３、ＫＣＮＣ４、ＫＣＮＤ１、Ｋ
    ＣＮＤ２、ＫＣＮＤ３、ＫＣＮＦ１、ＫＣＮＧ１、ＫＣＮＧ２、ＫＣＮＧ３、ＫＣＮＧ４
    、ＫＣＮＨ１、ＫＣＮＨ２、ＫＣＮＨ３、ＫＣＮＨ４、ＫＣＮＨ５、ＫＣＮＨ６、ＫＣＮ
    Ｈ７、ＫＣＮＨ８、ＫＣＮＱ１、ＫＣＮＱ２、ＫＣＮＱ３、ＫＣＮＱ４、ＫＣＮＱ５、Ｋ
    ＣＮＳ１、ＫＣＮＳ２、ＫＣＮＳ３、ＫＣＮＶ１、ＫＣＮＶ２、ＫＣＮＪ１、ＫＣＮＪ２
    、ＫＣＮＪ３、ＫＣＮＪ４、ＫＣＮＪ５、ＫＣＮＪ６、ＫＣＮＪ８、ＫＣＮＪ９、ＫＣＮ
    Ｊ１０、ＫＣＮＪ１１、ＫＣＮＪ１２、ＫＣＮＪ１３、ＫＣＮＪ１４、ＫＣＮＪ１５、Ｋ
    ＣＮＪ１６、ＫＣＮＪ１８、ＫＣＮＫ１、ＫＣＮＫ２、ＫＣＮＫ３、ＫＣＮＫ４、ＫＣＮ
    Ｋ５、ＫＣＮＫ６、ＫＣＮＫ７、ＫＣＮＫ９、ＫＣＮＫ１０、ＫＣＮＫ１２、ＫＣＮＫ１
    ３、ＫＣＮＫ１５、ＫＣＮＫ１６、ＫＣＮＫ１７、ＫＣＮＫ１８、ＨＶＣＮ１、ＨＴＲ３
    Ａ、ＨＴＲ３Ｂ、ＨＴＲ３Ｃ、ＨＴＲ３Ｄ、ＨＴＲ３Ｅ、ＣＨＲＮＡ１、ＣＨＲＮＡ２、
    ＣＨＲＮＡ３、ＣＨＲＮＡ４、ＣＨＲＮＡ５、ＣＨＲＮＡ６、ＣＨＲＮＡ７、ＣＨＲＮＡ
    ９、ＣＨＲＮＡ１０、ＣＨＲＮＢ１、ＣＨＲＮＢ２、ＣＨＲＮＢ３、ＣＨＲＮＢ４、ＣＨ
    ＲＮＤ、ＣＨＲＮＥ、ＣＨＲＮＧ、ＧＡＢＲＡ１、ＧＡＢＲＡ２、ＧＡＢＲＡ３、ＧＡＢ
    ＲＡ４、ＧＡＢＲＡ５、ＧＡＢＲＡ６、ＧＡＢＲＢ１、ＧＡＢＲＢ２、ＧＡＢＲＢ３、Ｇ
    Ａ



    ＢＲＤ、ＧＡＢＲＥ、ＧＡＢＲＧ１、ＧＡＢＲＧ２、ＧＡＢＲＧ３、ＧＡＢＲＰ、ＧＡＢ
    ＲＱ、ＧＡＢＲＲ１、ＧＡＢＲＲ２、ＧＡＢＲＲ３、ＧＲＩＡ１、ＧＲＩＡ２、ＧＲＩＡ
    ３、ＧＲＩＡ４、ＧＲＩＤ１、ＧＲＩＤ２、ＧＲＩＫ１、ＧＲＩＫ２、ＧＲＩＫ３、ＧＲ
    ＩＫ４、ＧＲＩＫ５、ＧＲＩＮ１、ＧＲＩＮ２Ａ、ＧＲＩＮ２Ｂ、ＧＲＩＮ２Ｃ、ＧＲＩ
    Ｎ２Ｄ、ＧＲＩＮ３Ａ、ＧＲＩＮ３Ｂ、ＧＬＲＡ１、ＧＬＲＡ２、ＧＬＲＡ３、ＧＬＲＡ
    ４、Ｐ２ＲＸ１、Ｐ２ＲＸ２、Ｐ２ＲＸ３、Ｐ２ＲＸ４、Ｐ２ＲＸ５、Ｐ２ＲＸ６、Ｐ２
    ＲＸ７、ＺＡＣＮ、ＡＳＩＣ１、ＡＳＩＣ２、ＡＳＩＣ３、ＡＳＩＣ４、ＡＱＰ１、ＡＱ
    Ｐ２、ＡＱＰ３、ＡＱＰ４、ＡＱＰ５、ＡＱＰ６、ＡＱＰ７、ＡＱＰ８、ＡＱＰ９、ＡＱ
    Ｐ１０、ＡＱＰ１１、ＡＱＰ１２Ａ、ＡＱＰ１２Ｂ、ＭＩＰ、ＣＬＣＮ１、ＣＬＣＮ２、
    ＣＬＣＮ３、ＣＬＣＮ４、ＣＬＣＮ５、ＣＬＣＮ６、ＣＬＣＮ７、ＣＬＣＮＫＡ、ＣＬＣ
    ＮＫＢ、嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）、ＡＮＯ１、ＡＮＯ２、Ａ
    ＮＯ３、ＡＮＯ４、ＡＮＯ５、ＡＮＯ６、ＡＮＯ７、ＡＮＯ８、ＡＮＯ９、ＡＮＯ１０、
    ＢＥＳＴ１、ＢＥＳＴ２、ＢＥＳＴ３、ＢＥＳＴ４、ＣＬＩＣ１、ＣＬＩＣ２、ＣＬＩＣ
    ３、ＣＬＩＣ４、ＣＬＩＣ５、ＣＬＩＣ６、ＧＪＡ１、ＧＪＡ３、ＧＪＡ４、ＧＪＡ５、
    ＧＪＡ６Ｐ、ＧＪＡ８、ＧＪＡ９、ＧＪＡ１０、ＧＪＢ１、ＧＪＢ２、ＧＪＢ３、ＧＪＢ
    ４、ＧＪＢ５、ＧＪＢ６、ＧＪＢ７、ＧＪＣ１、ＧＪＣ２、ＧＪＣ３、ＧＪＤ２、ＧＪＤ
    ３、ＧＪＤ４、ＧＪＥ１、ＩＴＰＲ１、ＩＴＰＲ２、ＩＴＰＲ３、ＰＡＮＸ１、ＰＡＮＸ
    ２、ＰＡＮＸ３、ＲＹＲ１、ＲＹＲ２、ＲＹＲ３、ＮＡＬＣＮ、ＳＣＮＮ１Ａ、ＳＣＮＮ
    １Ｂ、ＳＣＮＮ１Ｄ、ＳＣＮＮ１Ｇ、ＴＥＭ１６Ａ、ＡＤＡＭＴＳ７、ＡＮＧＰＴＬ３、
    ＡＮＧＰＴＬ４、ＡＮＧＰＴＬ８、ＬＰＬ、ＧＤＦ１５、ガレクチン－１、ガレクチン－
    ２、ガレクチン－３、ガレクチン－４、ガレクチン－７、ガレクチン－８、ガレクチン－
    ９、ガレクチン－１０、ガレクチン－１２、ガレクチン－１３、マトリックスｇｌａタン
    パク質（ＭＧＰ）、ＰＲＮＰ、ＤＧＡＴ１、ＧＰＡＴ３、ＤＭＣ１、ＢＬＭ、ＢＲＣＡ２
    、ヒト内在性レトロウイルスタイプＫ（ＨＥＲＶ－Ｋ）ファミリーのメンバー、エクトヌ
    クレオシド三リン酸ジホスホヒドロラーゼ１（ＥＮＴＰＤ１）、エクトヌクレオシド三リ
    ン酸ジホスホヒドロラーゼ２（ＥＮＴＰＤ２）、ＳＬＣ１Ａ１、ＳＬＣ１Ａ２、ＳＬＣ１
    Ａ３、ＳＬＣ１Ａ４、ＳＬＣ１Ａ５、ＳＬＣ１Ａ６、ＳＬＣ１Ａ７、ＳＬＣ２Ａ１、ＳＬ
    Ｃ２Ａ２、ＳＬＣ２Ａ３、ＳＬＣ２Ａ４、ＳＬＣ２Ａ５、ＳＬＣ２Ａ６、ＳＬＣ２Ａ７、
    ＳＬＣ２Ａ８、ＳＬＣ２Ａ９、ＳＬＣ２Ａ１０、ＳＬＣ２Ａ１１、ＳＬＣ２Ａ１２、ＳＬ
    Ｃ２Ａ１３、ＳＬＣ２Ａ１４、ＳＬＣ３Ａ１、ＳＬＣ３Ａ２、ＳＬＣ４Ａ１、ＳＬＣ４Ａ
    ２、ＳＬＣ４Ａ３、ＳＬＣ４Ａ４、ＳＬＣ４Ａ５、ＳＬＣ４Ａ６、ＳＬＣ４Ａ７、ＳＬＣ
    ４Ａ８、ＳＬＣ４Ａ９、ＳＬＣ４Ａ１０、ＳＬＣ４Ａ１１、ＳＬＣ５Ａ１、ＳＬＣ５Ａ２
    、ＳＬＣ５Ａ３、ＳＬＣ５Ａ４、ＳＬＣ５Ａ５、ＳＬＣ５Ａ６、ＳＬＣ５Ａ７、ＳＬＣ５
    Ａ８、ＳＬＣ５Ａ９、ＳＬＣ５Ａ１０、ＳＬＣ５Ａ１１、ＳＬＣ５Ａ１２、ＳＬＣ６Ａ１
    、ＳＬＣ６Ａ２、ＳＬＣ６Ａ３、ＳＬＣ６Ａ４、ＳＬＣ６Ａ５、ＳＬＣ６Ａ６、ＳＬＣ６
    Ａ７、ＳＬＣ６Ａ８、ＳＬＣ６Ａ９、ＳＬＣ６Ａ１０、ＳＬＣ６Ａ１１、ＳＬＣ６Ａ１２
    、ＳＬＣ６Ａ１３、ＳＬＣ６Ａ１４、ＳＬＣ６Ａ１５、ＳＬＣ６Ａ１６、ＳＬＣ６Ａ１７
    、ＳＬＣ６Ａ１８、ＳＬＣ６Ａ１９、ＳＬＣ６Ａ２０、ＳＬＣ７Ａ５、ＳＬＣ７Ａ６、Ｓ
    ＬＣ７Ａ７、ＳＬＣ７Ａ８、ＳＬＣ７Ａ９、ＳＬＣ７Ａ１０、ＳＬＣ７Ａ１１、ＳＬＣ７
    Ａ１３、ＳＬＣ７Ａ１４、ＳＬＣ８Ａ１、ＳＬＣ８Ａ２、ＳＬＣ８Ａ３、ＳＬＣ９Ａ１、
    ＳＬＣ９Ａ２、ＳＬＣ９Ａ３、ＳＬＣ９Ａ４、ＳＬＣ９Ａ５、ＳＬＣ９Ａ６、ＳＬＣ９Ａ
    ７、ＳＬＣ９Ａ８、ＳＬＣ９Ａ９、ＳＬＣ９Ａ１０、ＳＬＣ９Ａ１１、ＳＬＣ９Ｂ１、Ｓ
    ＬＣ９Ｂ２、ＳＬＣ１０Ａ１、ＳＬＣ１０Ａ２、ＳＬＣ１０Ａ３、ＳＬＣ１０Ａ４、ＳＬ
    Ｃ１０Ａ５、ＳＬＣ１０Ａ６、ＳＬＣ１０Ａ７、ＳＬＣ１１Ａ１、ＳＬＣ１１Ａ２、ＳＬ
    Ｃ１２Ａ１、ＳＬＣ１２Ａ２、ＳＬＣ１２Ａ３、ＳＬＣ１２Ａ４、ＳＬＣ１２Ａ５、ＳＬ
    Ｃ１２Ａ６、ＳＬＣ１２Ａ７、ＳＬＣ１２Ａ８、ＳＬＣ１２Ａ９、ＳＬＣ１３Ａ１、ＳＬ
    Ｃ１３Ａ２、ＳＬＣ１３Ａ３、ＳＬＣ１３Ａ４、ＳＬＣ１３Ａ５、ＳＬＣ１４Ａ１、ＳＬ
    Ｃ１４Ａ２、ＳＬＣ１５Ａ１、ＳＬＣ１５Ａ２、ＳＬＣ１５Ａ３、ＳＬＣ１５Ａ４、ＳＬ
    Ｃ１６Ａ１、ＳＬＣ１６Ａ２、ＳＬＣ１６Ａ３、ＳＬＣ１６Ａ４、ＳＬＣ１６Ａ５、ＳＬ
    Ｃ１６Ａ６、ＳＬＣ１６Ａ７、ＳＬＣ１６Ａ８、ＳＬＣ１６Ａ９、ＳＬＣ１６Ａ１０、Ｓ
    ＬＣ１６Ａ１１、ＳＬＣ１６Ａ１２、ＳＬＣ１６Ａ１３、ＳＬＣ１６Ａ１４、ＳＬＣ１７
    Ａ１、ＳＬＣ１７Ａ２、ＳＬＣ１７Ａ３、ＳＬＣ１７Ａ４、ＳＬＣ１７Ａ５、ＳＬＣ１７
    Ａ６、ＳＬＣ１７Ａ７、ＳＬＣ１７Ａ８、ＳＬＣ１７Ａ９、ＳＬＣ１８Ａ１、ＳＬＣ１８
    Ａ２、ＳＬＣ１８Ａ３、ＳＬＣ１９Ａ１、ＳＬＣ１９Ａ２、ＳＬＣ１９Ａ３、ＳＬＣ２０
    Ａ１、ＳＬＣ２０Ａ２、ＳＬＣＯ１Ａ２、ＳＬＣＯ１Ｂ１、ＳＬＣＯ１Ｂ３、ＳＬＣＯ１
    Ｃ１、ＳＬＣＯ２Ａ１、ＳＬＣＯ２Ｂ１、ＳＬＣＯ３Ａ１、ＳＬＣＯ４Ａ１、ＳＬＣＯ４
    Ｃ１、ＳＬＣＯ５Ａ１、ＳＬＣＯ６Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ１、ＳＬＣ２２Ａ２、ＳＬＣ２２
    Ａ３、ＳＬＣ２２Ａ４、ＳＬＣ２２Ａ５、ＳＬＣ２２Ａ６、ＳＬＣ２２Ａ７、ＳＬＣ２２
    Ａ８、ＳＬＣ２２Ａ９、ＳＬＣ２２Ａ１０、ＳＬＣ２２Ａ１１、ＳＬＣ２２Ａ１２、ＳＬ
    Ｃ２２Ａ１３、ＳＬＣ２２Ａ１４、ＳＬＣ２２Ａ１５、ＳＬＣ２２Ａ１６、ＳＬＣ２２Ａ
    １７、ＳＬＣ２２Ａ１８、ＳＬＣ２２Ａ１８ＡＳ，ＳＬＣ２２Ａ１９、ＳＬＣ２２Ａ２０
    、ＳＬＣ２２Ａ２３、ＳＬＣ２２Ａ２４、ＳＬＣ２２Ａ２５、ＳＬＣ２２Ａ３１、ＳＬＣ
    ２３Ａ１、ＳＬＣ２３Ａ２、ＳＬＣ２３Ａ３、ＳＬＣ２３Ａ４、ＳＬＣ２４Ａ１、ＳＬＣ
    ２４Ａ２、ＳＬＣ２４Ａ３、ＳＬＣ２４Ａ４、ＳＬＣ２４Ａ５、ＳＬＣ２４Ａ６、ＳＬＣ
    ２５Ａ１、ＳＬＣ２５Ａ２、ＳＬＣ２５Ａ３、ＳＬＣ２５Ａ４、ＳＬＣ２５Ａ５、ＳＬＣ
    ２５Ａ６、ＳＬＣ２５Ａ７、ＳＬＣ２５Ａ８、ＳＬＣ２５Ａ９、ＳＬＣ２５Ａ１０、ＳＬ
    Ｃ２５Ａ１１、ＳＬＣ２５Ａ１２、ＳＬＣ２５Ａ１３、ＳＬＣ２５Ａ１４、ＳＬＣ２５Ａ
    １５、ＳＬＣ２５Ａ１６、ＳＬＣ２５Ａ１７、ＳＬＣ２５Ａ１８、ＳＬＣ２５Ａ１９，Ｓ
    ＬＣ２５Ａ２０、ＳＬＣ２５Ａ２１、ＳＬＣ２５Ａ２２、ＳＬＣ２５Ａ２３、ＳＬＣ２５
    Ａ２４、ＳＬＣ２５Ａ２５、ＳＬＣ２５Ａ２６、ＳＬＣ２５Ａ２７、ＳＬＣ２５Ａ２８、
    ＳＬＣ２５Ａ２９、ＳＬＣ２５Ａ３０、ＳＬＣ２５Ａ３１、ＳＬＣ２５Ａ３２、ＳＬＣ２
    ５Ａ３３、ＳＬＣ２５Ａ３４、ＳＬＣ２５Ａ３５、ＳＬＣ２５Ａ３６、ＳＬＣ２５Ａ３７
    ，ＳＬＣ２５Ａ３８、ＳＬＣ２５Ａ３９、ＳＬＣ２５Ａ４０、ＳＬＣ２５Ａ４１、ＳＬＣ
    ２５Ａ４２、ＳＬＣ２５Ａ４３、ＳＬＣ２５Ａ４４、ＳＬＣ２５Ａ４５、ＳＬＣ２５Ａ４
    ６、ＳＬＣ２６Ａ１、ＳＬＣ２６Ａ２、ＳＬＣ２６Ａ３、ＳＬＣ２６Ａ４、ＳＬＣ２６Ａ
    ５、ＳＬＣ２６Ａ６、ＳＬＣ２６Ａ７、ＳＬＣ２６Ａ８、ＳＬＣ２６Ａ９、ＳＬＣ２６Ａ
    １０、ＳＬＣ２６Ａ１１、ＳＬＣ２７Ａ１、ＳＬＣ２７Ａ２、ＳＬＣ２７Ａ３、ＳＬＣ２
    ７Ａ４、ＳＬＣ２７Ａ５、ＳＬＣ２７Ａ６、ＳＬＣ２８Ａ１、ＳＬＣ２８Ａ２、ＳＬＣ２
    ８Ａ３、ＳＬＣ２９Ａ１、ＳＬＣ２９Ａ２、ＳＬＣ２９Ａ３、ＳＬＣ２９Ａ４、ＳＬＣ３
    ０Ａ１、ＳＬＣ３０Ａ２、ＳＬＣ３０Ａ３、ＳＬＣ３０Ａ４、ＳＬＣ３０Ａ５、ＳＬＣ３
    ０Ａ６、ＳＬＣ３０Ａ７、ＳＬＣ３０Ａ８、ＳＬＣ３０Ａ９、ＳＬＣ３０Ａ１０、ＳＬＣ
    ３１Ａ１、ＳＬＣ３１Ａ２、ＳＬＣ３２Ａ１、ＳＬＣ３３Ａ１、ＳＬＣ３４Ａ１、ＳＬＣ
    ３４Ａ２、ＳＬＣ３４Ａ３、ＳＬＣ３５Ａ１、ＳＬＣ３５Ａ２、ＳＬＣ３５Ａ３、ＳＬＣ
    ３５Ａ４、ＳＬＣ３５Ａ５、ＳＬＣ３５Ｂ１、ＳＬＣ３５Ｂ２、ＳＬＣ３５Ｂ３、ＳＬＣ
    ３５Ｂ４、ＳＬＣ３５Ｃ１、ＳＬＣ３５Ｃ２、ＳＬＣ３５Ｄ１、ＳＬＣ３５Ｄ２、ＳＬＣ
    ３５Ｄ３、ＳＬＣ３５Ｅ１、ＳＬＣ３５Ｅ２、ＳＬＣ３５Ｅ３、ＳＬＣ３５Ｅ４、ＳＬＣ
    ３５Ｆ１、ＳＬＣ３５Ｆ２、ＳＬＣ３５Ｆ３、ＳＬＣ３５Ｆ４、ＳＬＣ３５Ｆ５、ＳＬＣ
    ３５Ｇ１、ＳＬＣ３５Ｇ３、ＳＬＣ３５Ｇ４、ＳＬＣ３５Ｇ５、ＳＬＣ３５Ｇ６、ＳＬＣ
    ３６Ａ１、ＳＬＣ３６Ａ２、ＳＬＣ３６Ａ３、ＳＬＣ３６Ａ４、ＳＬＣ３７Ａ１、ＳＬＣ
    ３７Ａ２、ＳＬＣ３７Ａ３、ＳＬＣ３７Ａ４、ＳＬＣ３８Ａ１、ＳＬＣ３８Ａ２、ＳＬＣ
    ３８Ａ３、ＳＬＣ３８Ａ４、ＳＬＣ３８Ａ５、ＳＬＣ３８Ａ６、ＳＬＣ３８Ａ７、ＳＬＣ
    ３８Ａ８、ＳＬＣ３８Ａ９、ＳＬＣ３８Ａ１０、ＳＬＣ３８Ａ１１、ＳＬＣ３９Ａ１、Ｓ
    ＬＣ３９Ａ２、ＳＬＣ３９Ａ３、ＳＬＣ３９Ａ４、ＳＬＣ３９Ａ５、ＳＬＣ３９Ａ６、Ｓ
    ＬＣ３９Ａ７、ＳＬＣ３９Ａ８、ＳＬＣ３９Ａ９、ＳＬＣ３９Ａ１０、ＳＬＣ３９Ａ１１
    、ＳＬＣ３９Ａ１２、ＳＬＣ３９Ａ１３、ＳＬＣ３９Ａ１４、ＳＬＣ４０Ａ１、ＳＬＣ４
    １Ａ１、ＳＬＣ４１Ａ２、ＳＬＣ４１Ａ３、ＲｈＡＧ、ＲｈＢＧ、ＲｈＣＧ、ＳＬＣ４３
    Ａ１、ＳＬＣ４３Ａ２、ＳＬＣ４３Ａ３、ＳＬＣ４４Ａ１、ＳＬＣ４４Ａ２、ＳＬＣ４４
    Ａ３、ＳＬＣ４４Ａ４、ＳＬＣ４４Ａ５、ＳＬＣ４５Ａ１、ＳＬＣ４５Ａ２、ＳＬＣ４５
    Ａ３、ＳＬＣ４５Ａ４、ＳＬＣ４６Ａ１、ＳＬＣ４６Ａ２、ＳＬＣ４６Ａ３、ＳＬＣ４７
    Ａ１、ＳＬＣ４７Ａ２、ＨＣＰ－１、ＭＦＳＤ５、ＭＦＳＤ１０、ＳＬＣ５０Ａ１、ＯＳ
    Ｔα、ＯＳＴβ、ＳＬＣ５２Ａ１、ＳＬＣ５２Ａ２、ならびにＳＬＣ５２Ａ３から選択さ
    れる、請求項１、２または３に記載の方法。
  15. 前記標的抗原が、発現させることが困難であるか、またはそれに対する抗体を産生させ
    ることが困難である、請求項１～１４のいずれか一項に記載の方法。
  16. 前記標的タンパク質の発現が、宿主産生細胞において細胞毒性をもたらす、請求項１～
    １５のいずれか一項に記載の方法。
  17. 前記標的タンパク質が、組換えにより発現されかつ／または精製される場合、不十分な
    収率、安定性、溶解性、および／または機能活性を示す、請求項１～１６のいずれか一項
    に記載の方法。
  18. 前記複合体の前記ポリヌクレオチドまたはｍＲＮＡが、次の：コンセンサスコザック配
    列；前記ｍＲＮＡの５’末端上の７－メチルグアノシンキャップ；前記ｍＲＮＡ転写物の
    ３’終端で見られるポリアデノシン（ポリＡ）テール；ならびに５’－および３’－非翻
    訳領域（ＵＴＲ）の１つ以上を含む、請求項１～１７のいずれか一項に記載の方法。
  19. 前記投与が、非経口、静脈内、筋肉内、鼻腔内、または皮下である、請求項１～１８の
    いずれか一項に記載の方法。
  20. 前記標的タンパク質がＲＸＦＰ１である、請求項１～１９のいずれか一項に記載の方法
    。
  21. 前記複合体が、配列番号４、または配列番号２、４および３７のいずれか１つの核酸配
    列を含むポリリボヌクレオチドまたはｍＲＮＡを含む、請求項１～２０のいずれか一項に
    記載の方法。
  22. 前記標的タンパク質がＳＬＣ５２Ａ２である、請求項１～２１のいずれか一項に記載の
    方法。
  23. 前記複合体が、配列番号７、または配列番号５、７および４０のいずれか１つの核酸配
    列を含むポリリボヌクレオチドまたはｍＲＮＡを含む、請求項１～２２のいずれか一項に
    記載の方法。
  24. 前記標的タンパク質がＡＮＧＰＴＬ８である、請求項１～２３のいずれか一項に記載の
    方法。
  25. 前記複合体が、配列番号１０、または配列番号８、１０および４３のいずれか１つの核
    酸配列を含むポリリボヌクレオチドまたはｍＲＮＡを含む、請求項１～２４のいずれか一
    項に記載の方法。
  26. 前記標的タンパク質がＴＳＨＲである、請求項１～２５のいずれか一項に記載の方法。
  27. 前記複合体が、配列番号１６、または配列番号１４、１６および４６のいずれか１つの
    核酸配列を含むポリリボヌクレオチドまたはｍＲＮＡを含む、請求項１～２６のいずれか
    一項に記載の方法。
  28. 前記標的タンパク質がＡＰＪである、請求項１～２７のいずれか一項に記載の方法。
  29. 前記複合体が、配列番号１９、または配列番号１７、１９および４９のいずれか１つの
    核酸配列を含むポリリボヌクレオチドまたはｍＲＮＡを含む、請求項１～２８のいずれか
    一項に記載の方法。
  30. 前記標的タンパク質がｇｐ１３０である、請求項１～２９のいずれか一項に記載の方法
    。
  31. 前記複合体が、配列番号２２、または配列番号２０、２２および５２のいずれか１つの
    核酸配列を含むポリリボヌクレオチドまたはｍＲＮＡを含む、請求項１～３０のいずれか
    一項に記載の方法。
  32. 前記標的タンパク質がガレクチン３である、請求項１～３１のいずれか一項に記載の方
    法。
  33. 前記複合体が、配列番号５５、または配列番号２６、５５および５６のいずれか１つの
    核酸配列を含むポリリボヌクレオチドまたはｍＲＮＡを含む、請求項１～３２のいずれか
    一項に記載の方法。
  34. 前記複合体が、約３０～１５０ｎｍの直径を有する、請求項１～３３のいずれか一項に
    記載の方法。
  35. 前記複合体がヘルパー脂質を含む、請求項１～３４のいずれか一項に記載の方法。
  36. 前記複合体が、（ｉ）カチオン性脂質、（ｉｉ）ヘルパー脂質、例えば、コレステロー
    ル、（ｉｉｉ）中性脂質、例えば、ＤＳＰＣ、および（ｉｖ）ステルス脂質、例えば、Ｓ
    ０１０、Ｓ０２４、Ｓ０２７、Ｓ０３１またはＳ０３３の任意の組み合わせを含む、請求
    項１～３５のいずれか一項に記載の方法。
  37. 前記動物が、１０μｇ、１２．５μｇ、２０μｇ、２５μｇ、３０μｇ、４０μｇ、５
    ０μｇ、６０μｇ、７０μｇ、８０μｇ、９０μｇ、１００μｇ、１１０μｇ、１２０μ
    ｇ、１３０μｇ、１４０μｇ、または１５０μｇのポリリボヌクレオチドを投与される、
    請求項１～３６のいずれか一項に記載の方法。
  38. 前記カチオン性脂質が、Ｎ，Ｎ－ジオレイル－Ｎ，Ｎ－ジメチルアンモニウムクロリド
    （ＤＯＤＡＣ）、Ｎ，Ｎ－ジステアリル－Ｎ，Ｎ－ジメチルアンモニウムブロミド（ＤＤ
    ＡＢ）、Ｎ－（１－（２，３－ジオレオイルオキシ）プロピル）－Ｎ，Ｎ，Ｎ－トリメチ
    ルアンモニウムクロリド（ＤＯＴＡＰ）、１，２－ジオレオイル－３－ジメチルアンモニ
    ウム－プロパン（ＤＯＤＡＰ）、Ｎ－（１－（２，３－ジオレイルオキシ）プロピル）－
    Ｎ，Ｎ，Ｎ－トリメチルアンモニウムクロリド（ＤＯＴＭＡ）、１，２－ジオレオイルカ
    ルバミル－３－ジメチルアンモニウム－プロパン（ＤＯＣＤＡＰ）、１，２－ジリネオイ
    ル－３－ジメチルアンモニウム－プロパン（ＤＬＩＮＤＡＰ）、ジラウリル（Ｃ１２：０
    ）トリメチルアンモニウムプロパン（ＤＬＴＡＰ）、ジオクタデシルアミドグリシルスペ
    ルミン（ＤＯＧＳ）、ＤＣ－Ｃｈｏｌ、ジオレオイルオキシ－Ｎ－［２－スペルミンカル
    ボキサミド）エチル｝－Ｎ，Ｎ－ジメチル－１－プロパンアミニウムトリフルオロアセテ
    ート（ＤＯＳＰＡ）、１，２－ジミリスチルオキシプロピル－３－ジメチル－ヒドロキシ
    エチルアンモニウムブロミド（ＤＭＲＩＥ）、３－ジメチルアミノ－２－（コレスト－５
    －エン－３－β－オキシブタン－４－オキシ）－１－（シス，シス－９，１２－オクタデ
    カジエノキシ）プロパン（ＣＬｉｎＤＭＡ）、Ｎ，Ｎ－ジメチル－２，３－ジオレイルオ
    キシ）プロピルアミン（ＤＯＤＭＡ）、２－［５’－（コレスト－５－エン－３β－オキ
    シ）－３’－オキサペントキシ）－３－ジメチル－１－（シス，シス－９’，１２’－オ
    クタデカジエノキシ）プロパン（ＣｐＬｉｎＤＭＡ）およびＮ，Ｎ－ジメチル－３，４－
    ジオレイルオキシベンジルアミン（ＤＭＯＢＡ）、ならびに１，２－Ｎ，Ｎ’－ジオレイ
    ルカルバミル－３－ジメチルアミノプロパン（ＤＯｃａｒｂＤＡＰ）からなる群から選択
    される、請求項１～３７のいずれか一項に記載の方法。
  39. 前記カチオン性脂質がＤＯＴＡＰまたはＤＬＴＡＰである、請求項３８に記載の方法。
  40. 前記標的タンパク質に特異的に結合する抗体を産生するハイブリドーマを作製するステ
    ップをさらに含む、請求項１～３９のいずれか一項に記載の方法。
  41. 前記標的タンパク質に特異的に結合する抗体を精製するステップをさらに含む、請求項
    １～４０のいずれか一項に記載の方法。
  42. 前記標的タンパク質に特異的に結合する精製された抗体に由来するキメラまたはヒト化
    抗体を作製するステップをさらに含む、請求項１～４１のいずれか一項に記載の方法。
  43. 前記方法が、ｃＤＮＡ、タンパク質もしくはペプチド、ウイルス粒子、または細胞全体
    による免疫化を含む方法と比較して、１回目の採血または２回目の採血由来の血清中にお
    いてより高い抗体力価を生じる、請求項１～４２のいずれか一項に記載の方法。
  44. 前記方法が、ｃＤＮＡ、タンパク質もしくはペプチド、ウイルス粒子、または細胞全体
    による免疫化を含む方法よりも、標的タンパク質に特異的な抗体を産生するハイブリドー
    マをより多く生じる、請求項１～４３のいずれか一項に記載の方法。
  45. 前記標的タンパク質がヒト標的タンパク質であり、非ヒト動物が、マウス、ラット、ウ
    サギ、ヒツジ、ネコ、イヌ、ラクダ科動物、サメ、サル、ブタ、またはウマである、請求
    項１～４４のいずれか一項に記載の方法。
  46. 前記標的タンパク質に特異的に結合する抗体を産生するハイブリドーマであって、前記
    ハイブリドーマが請求項１～４５のいずれか１つの方法によって得られた、ハイブリドー
    マ。
  47. 前記標的タンパク質に特異的に結合するポリクローナル抗体の混合物であって、前記混
    合物が請求項１～４５のいずれか１つの方法によって得られた、混合物。
  48. 前記標的タンパク質に特異的に結合する単離されたモノクローナル抗体であって、前記
    モノクローナル抗体が請求項１～４５のいずれか１つの方法によって得られた、単離され
    たモノクローナル抗体。
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