JP2020535803A5 - - Google Patents

Claims (21)

1. 第１の鎖および第２の鎖を含むＲＮＡｉであって、
   ａ）該第１の鎖および該第２の鎖は、二重鎖を形成し；
   ｂ）該第１の鎖は、ガイド領域を含み、該ガイド領域は、核酸配列５’−ＵＧＧＣＣＧＵＣＣＡＵＣＵＵＧＧＡＣＣＣＧ−３’（配列番号１）、もしくは配列番号１に対して約９０％の同一性を有する核酸配列；または核酸配列５’−ＡＧＵＣＧＧＵＧＵＧＧＵＵＧＡＣＡＡＧＣＡ−３’（配列番号７）、もしくは配列番号７に対して約９０％の同一性を有する核酸配列を含み；および
   ｃ）該第２の鎖は、非ガイド領域を含む、
   前記ＲＮＡｉ。
2. （ｉ）ガイド領域の核酸は、核酸配列５’−ＵＧＧＣＣＧＵＣＣＡＵＣＵＵＧＧＡＣＣＣＧ−３’（配列番号１）、もしくは配列番号１に対して約９０％の同一性を有する核酸配列を含み；非ガイド領域は、配列５’−ＣＧＧＧＵＣＣＡＡＧＡＵＧＧＡＣＧＧＣＣＡ−３’（配列番号２）、もしくは配列番号２に対して約９０％の同一性を有する核酸配列を含む；または
   （ｉｉ）ガイド領域の核酸は、核酸配列５’−ＡＧＵＣＧＧＵＧＵＧＧＵＵＧＡＣＡＡＧＣＡ−３’（配列番号７）、もしくは配列番号７に対して約９０％の同一性を有する核酸配列を含み；非ガイド領域は、配列５’−ＵＧＣＵＵＧＵＣＡＡＣＣＡＣＡＣＣＧＡＣＵ−３’（配列番号８）、もしくは配列番号８に対して約９０％の同一性を有する核酸配列を含む、
   請求項１に記載のＲＮＡｉ。
3. 第１の鎖および第２の鎖は、ループ構造を形成することが可能なＲＮＡリンカーによって連結されており、場合により、ここで：
   （ｉ）該ＲＮＡリンカーは、４〜５０ヌクレオチドを含む；および／または
   （ｉｉ）該ループ構造は、４〜２０ヌクレオチドを含む；および／または
   （ｉｉｉ）５’から３’へ、該第２の鎖、該ＲＮＡリンカー、および該第１の鎖を含む；または
   （ｉｖ）５’から３’へ、該第１の鎖、該ＲＮＡリンカー、および該第２の鎖を含む、
   請求項１または２に記載のＲＮＡｉ。
4. ＲＮＡｉは、５’から３’へ、第１の鎖、ＲＮＡリンカー、および第２の鎖を含み、該ＲＮＡｉは、配列番号４もしくは配列番号１０の核酸配列、または配列番号４もしくは配列番号１０のヌクレオチド配列と約９０％同一なヌクレオチド配列を含む、請求項３に記載のＲＮＡｉ。
5. 低分子阻害性ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、または小ヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）である、請求項１〜４のいずれか１項に記載のＲＮＡｉ。
6. ハンチントン病に関連するポリペプチドをコードするＲＮＡを標的化し、場合により、該ポリペプチドは、ハンチンチンであり、そして場合により、該ハンチンチンは、ハンチントン病に関連する突然変異を含む、請求項１〜５のいずれか１項に記載のＲＮＡｉ。
7. 請求項１〜６のいずれか１項に記載のＲＮＡｉをコードする核酸を含む発現コンストラクト。
8. 請求項７に記載の発現コンストラクトであって、以下の：
   （ｉ）ＲＮＡｉをコードする核酸は、ｍｉＲＮＡ足場を含む；および／または
   （ｉｉ）ＲＮＡｉをコードする核酸は、プロモーターに機能するように連結されており、場合により、該プロモーターは、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）前初期プロモーター、ＲＳＶ ＬＴＲ、ＭｏＭＬＶ ＬＴＲ、ホスホグリセリン酸キナーゼ−１（ＰＧＫ）プロモーター、シミアンウイルス４０（ＳＶ４０）プロモーター、ＣＫ６プロモーター、トランスチレチンプロモーター（ＴＴＲ）、ＴＫプロモーター、テトラサイクリン応答プロモーター（ＴＲＥ）、ＨＢＶプロモーター、ｈＡＡＴプロモーター、ＬＳＰプロモーター、キメラ肝臓特異的プロモーター（ＬＳＰ）、Ｅ２Ｆプロモーター、テロメラーゼ（ｈＴＥＲＴ）プロモーター；サイトメガロウイルスエンハンサー／ニワトリベータ−アクチン／ウサギβ−グロビンプロモーター（ＣＡＧ）プロモーター、延長因子１−アルファプロモーター（ＥＦ１−アルファ）プロモーター、ヒトβ−グルクロニダーゼプロモーター、ニワトリβ−アクチン（ＣＢＡ）プロモーター、レトロウイルス性のラウス肉腫ウイルス（ＲＳＶ）ＬＴＲプロモーター、ジヒドロ葉酸レダクターゼプロモーター、および１３−アクチンプロモーターから選択される；および／または
   （ｉｉｉ）該発現コンストラクトは、イントロンをさらに含み、場合により、該イントロンは、キメライントロンであり、そして場合により、発現ベクターは、自己相補的なベクターであり、該イントロンは、デルタキメライントロンである；および／または
   （ｉｖ）発現コンストラクトは、ポリアデニル化シグナルをさらに含み、場合により、該ポリアデニル化シグナルは、ウシ成長ホルモンのポリアデニル化シグナル、ＳＶ４０のポリアデニル化シグナル、またはＨＳＶ ＴＫ ｐＡである、
   上記発現コンストラクト。
9. 請求項７または８に記載の発現コンストラクトを含むベクター。
10. 請求項９に記載のベクターであって、以下の：
    （ｉ）該ベクターは、組換えアデノウイルスベクターであり、場合により、該組換えアデノウイルスベクターは、アデノウイルス血清型２、１、５、６、１９、３、１１、７、１４、１６、２１、１２、１８、３１、８、９、１０、１３、１５、１７、１９、２０、２２、２３、２４〜３０、３７、４０、４１、ＡｄＨｕ２、ＡｄＨｕ３、ＡｄＨｕ４、ＡｄＨｕ２４、ＡｄＨｕ２６、ＡｄＨｕ３４、ＡｄＨｕ３５、ＡｄＨｕ３６、ＡｄＨｕ３７、ＡｄＨｕ４１、ＡｄＨｕ４８、ＡｄＨｕ４９、ＡｄＨｕ５０、ＡｄＣ６、ＡｄＣ７、ＡｄＣ６９、ウシＡｄ３型、イヌＡｄ２型、ヒツジＡｄ、またはブタＡｄ３型から誘導され
    る；または
    （ｉｉ）該ベクターは、組換えレンチウイルスベクターであり、場合により、該組換えレンチウイルスベクターは、水疱性口内炎ウイルス（ＶＳＶ）、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス（ＬＣＭＶ）、ロスリバーウイルス（ＲＲＶ）、エボラウイルス、マールブルグウイルス、モコラウイルス、狂犬病ウイルス、ＲＤ１１４またはそれらのバリアントで偽型化したレンチウイルスから誘導される；または
    （ｉｉｉ）該ベクターは、組換え単純疱疹ウイルス（ｒＨＳＶ）ベクターであり、場合により、該ｒＨＳＶベクターは、ｒＨＳＶ−１またはｒＨＳＶ−２から誘導される、
    上記ベクター。
11. ｒＡＡＶベクターである、請求項９に記載のベクター。
12. 発現コンストラクトに、１つまたはそれ以上のＡＡＶの逆方向末端反復（ＩＴＲ）配列が隣接し、場合により、ここで：
    （ｉ）該発現コンストラクトに、２つのＡＡＶのＩＴＲが隣接する；および／または
    （ｉｉ）該ＡＡＶのＩＴＲは、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶｒｈ８、ＡＡＶｒｈ８Ｒ、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶｒｈ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶ２Ｒ４７１Ａ、ＡＡＶ ＤＪ、ヤギＡＡＶ、ウシＡＡＶ、またはマウスＡＡＶ血清型のＩＴＲであり、場合により、該ＡＡＶのＩＴＲは、ＡＡＶ２のＩＴＲである、
    請求項１１に記載のｒＡＡＶベクター。
13. スタッファー核酸をさらに含み、場合により、該スタッファー核酸が、ＲＮＡｉをコードする核酸の上流または下流に配置されている、請求項１１または１２に記載のｒＡＡＶベクター。
14. ベクターは、自己相補的なｒＡＡＶベクターであり、場合により、該ベクターは、ＲＮＡｉをコードする第１の核酸配列およびＲＮＡｉの相補物をコードする第２の核酸配列を含み、該第１の核酸配列は、その長さのほとんどまたは全てにわたり、該第２の核酸配列と鎖内の塩基対を形成することができ、かつ場合により、該第１の核酸配列および該第２の核酸配列は、突然変異したＡＡＶのＩＴＲによって連結されており、該突然変異したＡＡＶのＩＴＲは、Ｄ領域の欠失を含み、そして末端分解配列の突然変異を含む、請求項１１〜１３のいずれか１項に記載のｒＡＡＶベクター。
15. 請求項９もしくは１０に記載のベクター、または請求項１１〜１４のいずれか１項に記載のｒＡＡＶベクター、を含む細胞。
16. 請求項９に記載のベクターを含むウイルス粒子であって、ここで：
    （ｉ）該ウイルス粒子は、ｒＡＡＶベクターをキャプシド化するＡＡＶ粒子であり、場合により、アデノウイルス粒子は、アデノウイルス血清型２、１、５、６、１９、３、１１、７、１４、１６、２１、１２、１８、３１、８、９、１０、１３、１５、１７、１９、２０、２２、２３、２４〜３０、３７、４０、４１、ＡｄＨｕ２、ＡｄＨｕ３、ＡｄＨｕ４、ＡｄＨｕ２４、ＡｄＨｕ２６、ＡｄＨｕ３４、ＡｄＨｕ３５、ＡｄＨｕ３６、ＡｄＨｕ３７、ＡｄＨｕ４１、ＡｄＨｕ４８、ＡｄＨｕ４９、ＡｄＨｕ５０、ＡｄＣ６、ＡｄＣ７、ＡｄＣ６９、ウシＡｄ３型、イヌＡｄ２型、ヒツジＡｄ、もしくはブタＡｄ３型由来のキャプシドを含む；または
    （ｉｉ）該ウイルス粒子は、組換えアデノウイルスベクターをキャプシド化するアデノウイルス粒子であり、場合により、該アデノウイルス粒子は、アデノウイルス血清型２のキャプシドもしくはアデノウイルス血清型５のキャプシドを含む；または
    （ｉｉｉ）該ウイルス粒子は、組換えレンチウイルスベクターをキャプシド化するレン
    チウイルス粒子であり、場合により、該レンチウイルス粒子は、水疱性口内炎ウイルス（ＶＳＶ）、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス（ＬＣＭＶ）、ロスリバーウイルス（ＲＲＶ）、エボラウイルス、マールブルグウイルス、モコラウイルス、狂犬病ウイルス、ＲＤ１１４もしくはそれらのバリアントで偽型化したキャプシドを含む；または
    （ｉｖ）該ウイルス粒子は、組換えＨＳＶベクターをキャプシド化するＨＳＶ粒子であり、場合により、該ＨＳＶ粒子は、ｒＨＳＶ−１粒子またはｒＨＳＶ−２粒子である、
    上記ウイルス粒子。
17. 請求項１１〜１４のいずれか１項に記載のｒＡＡＶベクターを含む組換えＡＡＶ粒子であって、場合により、ここで：
    （ｉ）ＡＡＶウイルス粒子は、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶｒｈ８、ＡＡＶｒｈ８Ｒ、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶｒｈ１０、ＡＡＶ１１、ＡＡＶ１２、ＡＡＶ２Ｒ４７１Ａ、ＡＡＶ２／２−７ｍ８、ＡＡＶ ＤＪ、ＡＡＶ２ Ｎ５８７Ａ、ＡＡＶ２ Ｅ５４８Ａ、ＡＡＶ２ Ｎ７０８Ａ、ＡＡＶ Ｖ７０８Ｋ、ＡＡＶ２−ＨＢＫＯ、ＡＡＶＤＪ８、ＡＡＶＰＨＰ．Ｂ、ＡＡＶＰＨＰ．ｅＢ、ＡＡＶＢＲ１、ＡＡＶＨＳＣ１５、ＡＡＶＨＳＣ１７、ヤギＡＡＶ、ＡＡＶ１／ＡＡＶ２キメラ、ウシＡＡＶ、またはマウスＡＡＶキャプシド ｒＡＡＶ２／ＨＢｏＶ１血清型キャプシドを含む；および／または
    （ｉｉ）ＩＴＲおよびｒＡＡＶウイルス粒子のキャプシドは、同じＡＡＶ血清型から誘導される；または
    （ｉｉｉ）ＩＴＲおよびｒＡＡＶウイルス粒子のキャプシドは、異なるＡＡＶ血清型から誘導され、場合により、該ＩＴＲは、ＡＡＶ２から誘導され、該ｒＡＡＶ粒子のキャプシドは、ＡＡＶ１から誘導される、
    上記組換えＡＡＶ粒子。
18. 請求項１６に記載のウイルス粒子または請求項１７に記載のｒＡＡＶ粒子を含む組成物であって、場合により、該組成物は、医薬的に許容される担体をさらに含む、上記組成物。
19. 請求項１〜６のいずれか１項に記載のＲＮＡｉ、請求項１６に記載のウイルス粒子、請求項１７に記載のｒＡＡＶ粒子、または請求項１８に記載の組成物を含むキットであって、場合により、使用説明書をさらに含む、上記キット。
20. 哺乳動物におけるハンチントン病を処置するための、請求項２〜６のいずれか１項に記載のＲＮＡｉ、請求項１６に記載のウイルス粒子、請求項１７に記載のｒＡＡＶ粒子、または請求項１８に記載の組成物。
21. ハンチントン病を有する哺乳動物における、ｈｔｔの発現を阻害するための、またはｈｔｔの細胞における蓄積を阻害するための、請求項２〜６のいずれか１項に記載のＲＮＡｉ、請求項１６に記載のウイルス粒子、請求項１７に記載のｒＡＡＶ粒子、または請求項１８に記載の組成物。