JPWO2021067448A5

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Publication number: JPWO2021067448A5
Application number: JP2022520059A
Authority: JP
Publication date: 2023-10-10

Claims

ギャップ・ジャンクションタンパク質ベータ２（ＧＪＢ２）をコードする核酸配列を含む単離ポリヌクレオチドであって、前記核酸配列が、哺乳動物における発現についてコドン最適化されている、単離ポリヌクレオチド。
前記核酸配列が、ヒト、マウス、またはラットのＧＪＢ２をコードする、請求項１に記載の単離ポリヌクレオチド。
前記核酸配列が、配列番号１８と少なくとも８５％同一である配列、配列番号１１と少なくとも８５％同一である配列、配列番号１２と少なくとも８５％同一である配列、または配列番号１３と少なくとも８５％同一である配列を含む、請求項１に記載の単離ポリヌクレオチド。
前記核酸配列が、ｃＤＮＡ配列である、請求項１から３のいずれか一項に記載の単離ポリヌクレオチド。
前記核酸配列が、プロモーターに作動可能に連結されている、請求項１から４のいずれか一項に記載の単離ポリヌクレオチド。
前記プロモーターが、遍在活性ＣＢＡプロモーター、小型ＣＢＡ（ｓｍＣＢＡ）プロモーター、ＥＦ１ａプロモーター、ＣＡＳＩプロモーター、蝸牛支持細胞プロモーター、ＧＪＢ２発現特異的ＧＦＡＰプロモーター、小型ＧＪＢ２プロモーター、中型ＧＪＢ２プロモーター、大型ＧＪＢ２プロモーター、または２つ～３つの個別のＧＪＢ２発現特異的プロモーターの配列組合せである、請求項５に記載の単離ポリヌクレオチド。
前記プロモーターが、高度のＧＪＢ２発現を駆動するように最適化されている、請求項５または６に記載の単離ポリヌクレオチド。
前記核酸配列が、
ＷＰＲＥ（ＷｏｏｄｃｈｕｃｋＨｅｐａｔｉｔｉｓＶｉｒｕｓＰｏｓｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌＲｅｇｕｌａｔｏｒｙＥｌｅｍｅｎｔ）を含む３’ＵＴＲ調節的領域、
ポリアデニル化シグナル（ｐＡ）、および／または
ヘマグルチニンＣ末端タグ
をさらに含む、請求項１から７のいずれか一項に記載の単離ポリヌクレオチド。
前記ポリアデニル化シグナルが、ヒト成長ホルモン（ｈＧＨ）ポリアデニル化シグナルである、請求項８に記載の単離ポリヌクレオチド。
以下の順序：ＣＢＡ－ＧＪＢ２（Ｘ）－ＨＡ－ＷＰＲＥ－ｐＡの配列［配列中、Ｘは、配列番号１８と少なくとも８５％同一である核酸配列を含む］を含むポリヌクレオチド。
請求項１から１０のいずれか一項に記載のポリヌクレオチドを含む宿主細胞。
哺乳動物細胞である、請求項１１に記載の宿主細胞。
ＨＥＫ－２９３（２９３）細胞、Ｖｅｒｏ細胞、Ｒｈａｂｄｏｍｙｏｓａｒｃｏｍａ（ＲＤ）細胞、ＢＨＫ細胞、ＨＴ－１０８０細胞、Ａ５４９細胞、Ｃｏｓ－７細胞、ＡＲＰＥ－１９細胞、およびＭＲＣ－５細胞である、請求項１１または１２に記載の宿主細胞。
ＢＨＫ－２１細胞である、請求項１３に記載の宿主細胞。
請求項１から１０のいずれか一項に記載のポリヌクレオチドを含む組換え単純ヘルペス・ウイルス（ｒＨＳＶ）。
（ａ）請求項１から１０のいずれか一項に記載のポリヌクレオチド、および
（ｂ）最小調節エレメント
を含むトランス遺伝子発現カセット。
請求項１６に記載のトランス遺伝子発現カセットを含む核酸ベクター。
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）ベクターである、請求項１７に記載の核酸ベクター。
請求項１６に記載のトランス遺伝子発現カセットを含む宿主細胞。
請求項１７に記載の核酸ベクターと、使用のための指示書とを含むキット。
前記ＡＡＶベクターの、カプシド配列の血清型およびＩＴＲの血清型が、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ｒｈＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、およびＡＡＶ１２からなる群から選択される血清型に独立して由来する、請求項１８に記載のベクター。
蝸牛内送達に最適である、タンパク質カプシド変異体をさらに含む、請求項１８または２１のいずれか一項に記載のベクター。
対象の遺伝性難聴を処置する方法における使用のための、請求項１７、１８、２１、または２２のいずれか一項に記載のベクターを含む医薬組成物。
対象の遺伝性難聴を防止する方法における使用のための、請求項１７、１８、２１、または２２のいずれか一項に記載のベクターを含む医薬組成物。
前記遺伝性難聴が、ＤＦＮＢ１型難聴である、請求項２３から２４のいずれか一項に記載の医薬組成物。
前記遺伝性難聴が、ＧＪＢ２内の１つ以上の突然変異により引き起こされる、請求項２４に記載の医薬組成物。
前記遺伝性難聴が、常染色体劣性ＧＪＢ２突然変異（ＤＦＮＢ１）により引き起こされる、請求項２４または２５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
前記遺伝性難聴が、常染色体優性ＧＪＢ２突然変異（ＤＦＮＡ３Ａ）により引き起こされる、請求項２４または２５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
蝸牛へと投与される、請求項２４、または２５から２８のいずれか一項に記載の医薬組成物。
静脈内経路、脳室内経路、蝸牛内経路、もしくは髄腔内経路、またはこれらの組合せにより投与される、請求項２４、または２５から２９のいずれか一項に記載の医薬組成物。