JP2019506869A - 二重特異性シグナル伝達物質およびその使用 - Google Patents

Abstract

本発明は、一部として、例えば、二重免疫細胞動員および免疫シグナル送達機能を含む、様々な特性に基づく様々な免疫療法に用途を見出す二重特異性キメラタンパク質に関する。【選択図】図１８

Description

関連出願の相互参照
本出願は、２０１６年２月５日出願の米国特許仮出願第６２／２９１，７６９号；２０１６年５月１３日出願の同第６２／３３５，８８０号；２０１６年１０月２４日出願の同第６２／４１１，８０５号；２０１６年２月５日出願の同第６２／２９１，７７２号；２０１６年２月５日出願の同第６２／２９１，７７４号；２０１６年５月１３日出願の同第６２／３３５，９６５号；２０１６年２月５日出願の同第６２／２９１，７７６号；２０１６年５月１３日出願の同第６２／３３５，９６８号；２０１６年５月１３日出願の同第６２／３３５，９７９号；２０１６年５月１３日出願の同第６２／３３６，０３０号；２０１６年６月２３日出願の同第６２／３５３，６０７号；および２０１６年２月５日出願の同第６２／２９１，７７９号の利益を主張するものであり、それら全出願の内容全体は、参照により本明細書に組み入れられる。

分野
本発明は、一部として、有益な効果を提供するために、エフェクター細胞を動員してシグナル伝達を送達することが可能なキメラタンパク質に関する。

電子メールで提出されたテキストファイルの記載
本明細書と共に電子メールで提出されたテキストファイルの内容は、全体として参照により本明細書に組み入れられる：「配列表のコンピュータ解読可能なフォーマットのコピー（Ａ ｃｏｍｐｕｔｅｒ ｒｅａｄａｂｌｅ ｆｏｒｍａｔ ｃｏｐｙ ｏｆ ｔｈｅ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ｌｉｓｔｉｎｇ）」（ファイル名：ＯＲＮ−００９ＰＣ＿Ｓｅｑｕｅｎｃｅ＿ｌｉｓｔｉｎｇ；記録日：２０１７年２月３日；ファイルサイズ：３８６ＫＢ）。

背景
癌は、世界全体で１年あたりほぼ７００万名の死亡原因とされ、今日までに、医学の大規模な発展にもかかわらず大部分が処置不能であることが立証されている、地球全体の健康問題である。悔しいことに癌は、免疫検出および破壊を逃れ、それにより疾患に対する身体の主な防御をかわす戦略を開発するようである。

近年の免疫療法の多くは、身体の免疫系を癌に再度方向づけるよう開発されている。免疫療法は、化学療法および放射線療法などの他の処置モダリティーに欠如する細胞特異性の利点を提供する。そのため、免疫に基づく治療の有効性を増強するための方法は、臨床的に有益であり得る。例えば、共刺激および共阻害分子は、Ｔ細胞免疫応答の調節において中心的役割を担う。しかし、例えばＹＥＲＶＯＹ、ＫＥＹＴＲＵＤＡおよびＯＰＤＩＶＯの認可を導いた臨床試験を含む、これらの共刺激および共阻害分子を標的とする薬剤への印象的な患者の応答にもかかわらず、チェックポイント阻害療法は、依然として患者の圧倒的多数で不能である。

さらに、免疫療法を含むほとんどの癌処置は、様々な薬剤の複雑なレジメンを必要とし、薬剤のそれぞれは典型的に、複雑なパターンの副作用をもたらし、それが処置のための患者の治療濃度域を狭め、かつ患者を他の疾患により罹り易くする。

それゆえ、免疫系を多機能的様式で効果的にモジュレートし得るものを含む、改善された免疫療法剤が、依然として求められている。

概要
幾つかの態様において、本発明は、様々な標的細胞法に用途を見出すキメラタンパク質に関する。幾つかの態様において、本発明は、目的の標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合する認識ドメイン（例えば、非限定的に、単一ドメイン抗体を含む、様々な抗体形式などの抗原認識ドメイン）を有する２つ以上の標的部分を有するキメラタンパク質に関する。キメラタンパク質は、修飾された（例えば、変異した）シグナル伝達物質（例えば、免疫調整剤）をさらに含み、修飾された（例えば、変異した）シグナル伝達物質は、非修飾の（例えば、野生型の）シグナル伝達物質に比較して、改善された安全性を提供する１つまたは複数の修飾（例えば、突然変異）を有する。標的部分および修飾された（例えば、変異した）シグナル伝達物質は、場合により１つまたは複数のリンカーによって連結される。

様々な実施形態において、標的部分は、１つまたは複数の免疫細胞上で見出されるものを含む、目的の標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合する認識ドメインを有し、免疫細胞としては、Ｔ細胞、細胞障害性Ｔリンパ球、Ｔヘルパー細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、ナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞、抗腫瘍マクロファージ（例えば、Ｍ１マクロファージ）、好中球、Ｂ細胞、および樹状細胞を挙げることができるが、これらに限定されない。幾つかの実施形態において、認識ドメインは、目的の標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合し、より多くの免疫細胞の１つを効果的に動員する。幾つかの実施形態において、目的の標的（例えば、抗原、受容体）は、１つまたは複数の腫瘍細胞上で見出され得る。これらの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、免疫細胞、例えば腫瘍細胞を殺傷および／または抑制し得る免疫細胞を、作用の部位（非限定的例として、腫瘍微細環境など）に動員し得る。

さらに、本発明のキメラタンパク質は、有益な効果、例えば抗腫瘍効果、の可能性を高める細胞を直接的または間接的に動員し得るだけでなく、シグナル伝達物質を介して（例えば、インターフェロン、インターロイキン、ＴＮＦ、ＥＰＯなどの１つまたは複数を介して）細胞に重要なシグナル伝達を送達し得る。さらに、そのようなシグナル伝達物質は、シグナル伝達が制御され改善された安全性を提供するように（例えば、全身毒性を代償としないように）、変異され得る。さらに、様々な実施形態において、本発明は、シグナル伝達物質への様々な突然変異を提供し、例えば治療作用の部位（例えば、治療受容体）で活性を加減し、非治療受容体ではオフターゲット結合を減少または排除することもできる。即ち、幾つかの実施形態において、シグナル伝達物質は、低減された受容体無差別性（ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｐｒｏｍｉｓｃｕｉｔｙ）および制御されたオンターゲット作用を有する。

様々な実施形態において、シグナル伝達物質は、標的部分により標的にされる１つまたは複数の細胞（例えば、疾患細胞および／またはエフェクター細胞などの、動員される細胞）をモジュレートし得る。例えば、シグナル伝達物質は、標的細胞がシグナル伝達物質に対する受容体を発現するか否かに応じて、標的細胞の１つまたは両方をモジュレートし得る（かつ標的細胞は、エフェクター細胞および／または疾患細胞であり得る）。

様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、癌、感染、免疫障害、貧血、自己免疫性疾患、心臓血管疾患、創傷治癒、虚血関連疾患、神経変性疾患、代謝性疾患ならびに他の多くの疾患および障害などの、様々な疾患または障害の処置に用途を見出し、本発明は、様々な処置方法を包含する。

パネルＡでは、Ｃ５７ＢＬ／６マウスに、Ｂ１６ｍＣＤ２０ｃｌ１黒色腫細胞６×１０^５個（５０μｌ）を皮下接種したことを示す。カリパスによる測定で腫瘍が±１０ｍｍ^２のサイズに達したら、抗ＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ（１２０μｌ）、またはヒトＩＦＮアルファ，Ｑ１２４Ｒ突然変異体への抗ＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨの融合体１２０μｇによる病変周囲の処置を開始した。曲線は、処置タイプを同定した図の説明と同じ順序（上から下へ）である（例えば、ＰＢＳは、上の曲線であり、抗ＰＤ−Ｌ１は、中央の曲線であり、下の曲線は、ヒトＩＦＮアルファ，Ｑ１２４Ｒ突然変異体への抗ＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨの融合体である）。パネルＢ：Ｃ５７ＢＬ／６同腹仔に、Ｂ１６ｍＣＤ２０ｃｌ１黒色腫細胞６×１０^５個（５０μｌ）を皮下接種した。カリパスによる測定で腫瘍が±１０ｍｍ^２のサイズに達したら、示された構築物（１００μｌ）３０μｇでの病変周囲の処置を開始した。黒い矢印は、処置計画を示す。曲線は、処置タイプを同定した図の説明と同じ順序（上から下へ）である（例えば、上の曲線は、ＰＢＳであり、中央の曲線は、ヒトＩＦＮアルファ，Ｑ１２４Ｒ突然変異体への抗ＣＤ２０ ＶＨＨの融合体であり、下の曲線は、二重特異性構築物：抗ＣＤ２０ ＶＨＨ−ヒトＩＦＮアルファ，Ｑ１２４Ｒ突然変異体−抗ＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨである）。 Ｃ５７ＢＬ／６マウスに、Ｂ１６ｍＣＤ２０ｃｌ１黒色腫細胞６×１０^５個（５０μｌ）を皮下接種した実験を示す。カリパスによる測定で腫瘍が±１０ｍｍ^２のサイズに達したら、指示されたキメラ（１００μｌ）３０μｇでの病変周辺の処置を開始した。上の矢印は、処置計画を示す。下の矢印は、抗ＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ（１２０μｌ）１２０μｇの病変周囲の注射を示す。曲線は、処置タイプを同定した図の説明と同じ順序（上から下へ）である。「ＰＤ−Ｌ１ Ｑ１２４Ｒ」は、ヒトＩＦＮアルファ，Ｑ１２４Ｒ突然変異体への抗ＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨの融合体であり；「Ｃｌｅｃ９Ａ−Ｑ１２４Ｒ」は、ヒトＩＦＮアルファ，Ｑ１２４Ｒ突然変異体への抗Ｃｌｅｃ９Ａ ＶＨＨの融合体であり、「Ｃｌｅｃ９Ａ−Ｑ１２４Ｒ−ＰＤ−Ｌ１」は、二重特異性構築物：抗Ｃｌｅｃ９Ａ ＶＨＨ−ヒトＩＦＮアルファ，Ｑ１２４Ｒ突然変異体−抗ＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨである。 二重特異性ｍＣＤ２０−Ｑ１２４Ｒ−ＰＤ−Ｌ１キメラの様々な安全性パラメータを示す。パネルＢ〜Ｇにおいて、ヒストグラムの順序は、左から右に向かって、ＰＢＳ、ヒトＩＦＮアルファ Ｑ１２４Ｒ突然変異体への抗ＣＤ２０ ＶＨＨの融合体である「ＣＤ２０−Ｑ１２４Ｒ」、および抗ＣＤ２０ ＶＨＨ−ヒトＩＦＮアルファ，Ｑ１２４Ｒ突然変異体−抗ＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨの二重特異性物質（「ＣＤ２０−Ｑ１２４Ｒ−ＰＤ−Ｌ１」）である。 二重特異性Ｃｌｅｃ９Ａ−Ｑ１２４Ｒ−ＰＤ−Ｌ１キメラの様々な安全性パラメータを示す。パネルＢ〜Ｇにおいて、ヒストグラムの順序は、左から右に向かって、ＰＢＳ、抗ＰＤ−Ｌ１、ヒトＩＦＮアルファ Ｑ１２４Ｒ突然変異体への抗Ｃｌｅｃ９Ａ ＶＨＨの融合体である「Ｃｌｅｃ９Ａ−Ｑ１２４Ｒ」、抗Ｃｌｅｃ９Ａ ＶＨＨ−ヒトＩＦＮアルファ，Ｑ１２４Ｒ突然変異体−抗ＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨの二重特異性物質（「Ｃｌｅｃ９Ａ−Ｑ１２４Ｒ−ＰＤ−Ｌ１」）、およびヒトＩＦＮアルファ Ｑ１２４Ｒ突然変異体への抗ＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨの融合体「ＰＤ−Ｌ１−Ｑ１２４Ｒ」である。 Ｃ５７ＢＬ／６マウスにＢ１６黒色腫細胞６×１０^５個（５０μｌ）を皮下接種した、マウスの腫瘍成長試験を示す。カリパスによる測定で腫瘍が±１０ｍｍ^２のサイズに達したら、指示された処置剤（１００μｌ）３０μｇでの病変周辺の処置を開始した。グラフは、指示された時間にわたる腫瘍サイズの発展を示す。 Ｃ５７ＢＬ／６マウスにＢ１６黒色腫細胞を皮下接種した、マウスの腫瘍成長試験を示す。カリパスによる測定で腫瘍が特定のサイズに達したら、指示された処置剤での病変周辺の処置を開始した。グラフは、指示された時間にわたる腫瘍サイズの発展を示す。 交差提示樹状細胞が欠如するＢａｔｆ３ノックアウトマウスにＢ１６黒色腫細胞を皮下接種した、マウスの腫瘍成長試験を示す。カリパスによる測定で腫瘍が特定のサイズに達したら、指示された処置剤での病変周辺の処置を開始した。グラフは、指示された時間にわたる腫瘍サイズの発展を示す。 パネルＡ〜Ｃは、マウスに４Ｔ１乳房腫瘍細胞を接種した、マウスの腫瘍成長試験を示す。マウスは、指示された薬剤で処置された。グラフは、指示された時間にわたる腫瘍サイズの発展を示す。 マウスにＢ１６黒色腫細胞（パネルＡ）または４Ｔ１乳房腫瘍細胞（パネルＢおよびＣ）のいずれかを接種した、マウス腫瘍成長試験を示す。マウスはその後、ドキソルビシンを伴って、または伴わずに、指示された薬剤で処置された。グラフは、指示された時間にわたる腫瘍サイズの発展を示す。 マウスに４Ｔ１乳房腫瘍細胞を接種した、マウス腫瘍成長試験を示す。図９のパネルＢの腫瘍を含まないマウスに、４Ｔ１細胞１０^５個を再チャレンジし、腫瘍の成長をモニタリングした。グラフは、指示された時間にわたる腫瘍サイズの発展を示す。 実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）モデルを用いた二重特異性キメラの有効性を示す。パネルＡは、実験計画の略図を示す。パネルＢは、１００ＩＵの指示された薬剤で処置されたマウスの臨床スコアを示す。パネルＣは、１０００ＩＵの指示された薬剤で処置されたマウスの臨床スコアを示す。パネルＤは、Ｃｌｅｃ９Ａ−ＣＤ２０−ｈＩＦＮａ２−Ｑ１２４Ｒ二重特異性キメラが安全でありリンパ球減少症を誘発しなかったことを示す。ヒストグラムのバーは、左から右に向かって、ＰＢＳ、修飾されたヒトＩＦＮアルファ Ｑ１２４Ｒへの抗Ｃｌｅｃ９Ａの一重特異性融合体、修飾されたヒトＩＦＮアルファ Ｑ１２４Ｒへの抗ｍＣＤ２０の一重特異性融合体、修飾されたヒトＩＦＮアルファ Ｑ１２４Ｒへの抗Ｂｃｌｌ１０の一重特異性融合体、野生型ＩＦＮ、修飾されたヒトＩＦＮアルファ Ｑ１２４Ｒへの抗Ｃｌｅｃ９Ａの一重特異性融合体と修飾されたヒトＩＦＮアルファ Ｑ１２４Ｒへの抗ｍＣＤ２０の一重特異性融合体との組み合わせ、Ｃｌｅｃ９Ａ−ｈＩＦＮａ２−Ｑ１２４Ｒ−ＣＤ２０二重特異性キメラ、およびＣｌｅｃ９Ａ−ＣＤ２０−ｈＩＦＮａ２−Ｑ１２４Ｒ二重特異性キメラでの処置を表す。パネルＥは、１００ＩＵおよび１０００ＩＵ投与量でＣｌｅｃ９Ａ−ｈＩＦＮａ２−Ｑ１２４Ｒ−ＣＤ２０二重特異性キメラの有効性を比較する。パネルＦは、１００ＩＵおよび１０００ＩＵ投与量でＣｌｅｃ９Ａ−ＣＤ２０−ｈＩＦＮａ２−Ｑ１２４Ｒ二重特異性キメラの有効性を比較する。 ５０００ＩＵ投与量でのＣｌｅｃ９Ａ−ＣＤ２０−ｈＩＦＮａ２−Ｑ１２４Ｒ二重特異性キメラの有効性を示す。パネルＡは、臨床スコアに及ぼす二重特異性キメラの影響を示す。パネルＢは、重量に及ぼす二重特異性キメラの影響を示す。パネルＣは、罹病率および発病に及ぼす二重特異性キメラの影響を示す。 抗腫瘍免疫の誘導における２つの主要臓器：腫瘍流入リンパ節（パネルＡおよびＢ）および脾臓（パネルＣおよびＤ）の両方における腫瘍抗原特異性ＣＤ８^＋ Ｔ細胞増殖および活性化の評価を示す。Ｂ１６−ＯＶＡ担持マウスに、ＰＢＳ、抗Ｃｌｅｃ９Ａ ＶＨＨ／抗ＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｑ１２４Ｒの二重特異性キメラ、またはドキソルビシンと組み合わせた同じ二重特異性キメラを、Ｂ１６−ＯＶＡ腫瘍細胞上に存在するモデル抗原オボアルブミン（ＯＶＡ）を認識するＣＤ８ ＴＣＲを含むＣＦＳＥ標識ＣＤ８^＋ ＯＴ−Ｉ細胞の養子移入の１日後に１回注射した。ＣＦＳＥ標識ＣＤ８^＋ ＯＴ−Ｉ細胞の増殖および活性化を、４日後にフローサイトメトリーにより評価し、ＰＢＳの病変周囲への注射に比較して、抗Ｃｌｅｃ９Ａ ＶＨＨ／抗ＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｑ１２４Ｒの二重特異性キメラ、またはドキソルビシンと組み合わせた同じ二重特異性キメラを受けたマウスでの、増殖した細胞の増殖および活性化状態の増進を示す（パネルＡおよびＣ）。データは、少なくとも１回の分裂を受けたＯＴ−Ｉ ＣＤ８^＋細胞の割合％を示す。１つの代表的なフローサイトメトリープロファイルが含まれる。加えて、パネルＢおよびＤに示される通り、ＣＤ４４およびＣＤ６２Ｌ発現のフローサイトメトリー分析をＣＤ８^＋ ＣＦＳＥ^＋ Ｔ細胞で実施し、単独でまたはドキソルビシンとの組み合わせのいずれかで抗Ｃｌｅｃ９Ａ ＶＨＨ／抗ＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｑ１２４Ｒの二重特異性キメラの送達による活性化されたメモリーＴ細胞表現型を示す。ダネット多重比較検定を含む一元配置分散分析によるＰＢＳ処置動物との比較で^＊Ｐ＜０．０５、^＊＊Ｐ＜０．０１、^＊＊＊Ｐ＜０．００１および^＊＊＊＊Ｐ＜０．０００１。 １００ｎｇ／ｍｌキメラで刺激し（または刺激しないまま）、ｐｈｏｓｐｈｏ ＳＴＡＴ１について染色されたＢ１６細胞を示す。データを平均蛍光強度としてプロットする。分析されたキメラは、抗Ｓｉｒｐ１α ＶＨＨ／抗ＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｑ１２４Ｒ、抗ＤＮＡＭ ＶＨＨ／抗ＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｑ１２４Ｒ、および修飾されたヒトＩＦＮアルファＱ１２４Ｒへの抗Ｂｃｌｌ１０ ＶＨＨの一重特異性融合体（非特異的対照）である。 パネルＡ、ＢおよびＣにおいて、一重特異性キメラ（抗ヒトＣＤ８ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｒ１４９Ａ）のヒトＣＤ８標的化を示す。刺激されたＰＢＭＣのｐＳＴＡＴ１染色に対比させたＣＤ８のシマウマ状のプロットを、パネルＡに示す。パネルＢおよびＣ：ＣＤ８陽性（パネルＢ）またはＣＤ８陰性（パネルＣ）細胞のｐＳＴＡＴ１染色の平均蛍光強度（ＭＦＩ）をプロットする。図１５は、パネルＤ、ＥおよびＦにおいて、二重キメラ（抗ヒトＣＤ８ ＶＨＨ／抗ヒトＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｒ１４９Ａ）のヒトＣＤ８標的化を示す。 ＭＤＡ−ＭＢ−３２１細胞をキメラの系列希釈で刺激して、ｐｈｏｓｐｈｏ ＳＴＡＴ１について染色した実験を示す。データは、平均蛍光強度（ＭＦＩ）としてプロットされる。試験されたキメラは、抗ヒトＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｒ１４９Ａ；抗ヒトＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｒ３３Ａ／Ｅ１２０Ｒ；抗ヒトＣｌｅｃ９Ａ ＶＨＨ／抗ヒトＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｒ１４９Ａ；抗ヒトＣｌｅｃ９Ａ ＶＨＨ／抗ヒトＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｒ３３Ａ／Ｅ１２０Ｒ；および抗ヒトＢｃｌ１０ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｒ１４９Ａであった。参考までに、これは、Ｘ軸上の４ｎｇ／ｍｌポイントで観察する場合の、上から下へ、図１６での構築物の順である。 Ｄａｕｄｉ、ＪｕｒｋａｔおよびＷｉｓｈ細胞を、系列希釈されたｓｃＦｖキメラで刺激して、ｐｈｏｓｐｈｏ ＳＴＡＴ１について染色した。データを、平均蛍光強度（ＭＦＩ）としてプロットする。試験されたキメラは、抗ヒトＣＤ２０ ｓｃＦｖ／抗ヒトＣＤ３ ｓｃＦｖ／ＩＦＮ Ｒ１４９Ａであった。Ｘ軸上の１０００ポイントでグラフを観察する場合、曲線の順序は、Ｊｕｒｋａｔ、Ｄａｕｄｉ、およびＷｉｓｈ細胞である。 ヒト化マウス中で成長したヒト腫瘍（ＲＬ）に対する抗ヒトＣｌｅｃ９ａ ＶＨＨ／抗ヒトＰＤＬ１ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ−Ｒ１４９Ａ二重特異性キメラの抗腫瘍効果を示す。Ｘ軸上の１８日目を参照すると、試験された構築物は、上から下に向かって、ＰＢＳ（対照）；抗ヒトＣｌｅｃ９Ａ ＶＨＨ／抗ヒトＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｒ１４９Ａ二重特異性キメラ；および抗ヒトＣｌｅｃ９Ａ ＶＨＨ／抗ヒトＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｒ１４９Ａ二重特異性キメラ＋ＦＭＳ様チロシンキナーゼ３リガンド（ＦＬＴ３Ｌ）であった。 ヒト樹状細胞ｐＳＴＡＴ１シグナル伝達アッセイを示す。試験されたキメラは、抗ヒトＣｌｅｃ９Ａ ＶＨＨ／抗ヒトＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｒ１４９Ａおよび抗ヒトＣｌｅｃ９Ａ ＶＨＨ／抗ヒトＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｒ３３Ａ／Ｅ１２０Ｒであった。２つの用量：１００ｎｇ／ｍｌおよび５００ｎｇ／ｍｌの薬剤を試験した。ＰＢＳは対照であり、データをｐＳＴＡＴ１^＋樹状細胞の割合％の倍率変化として表す（データは、３データからなるデータセットの平均である）。

詳細な記載
本発明は、一部として、治療的に有益な突然変異を担持するシグナル伝達物質を有する二重特異性キメラタンパク質が有益な治療特性および低減された副作用を提供する、という驚くべき発見に基づく。様々な実施形態において、これらのキメラタンパク質は、二重標的部分を介して適当な細胞（例えば、免疫細胞）を治療作用が必要な部位（例えば、腫瘍細胞）に動員することができ、加えて、治療性シグナルを実行する１つまたは複数の重要なシグナルを送達できる（例えば、１つまたは複数の修飾されたシグナル伝達物質を介して）。本発明は、キメラタンパク質を含む医薬組成物、および様々な疾患の処置におけるそれらの使用を提供する。本発明のキメラタンパク質および医薬組成物の投与は、野生型可溶性物質に比較して有意に低減された副作用を実現する。

キメラタンパク質
様々な実施形態において、本発明は、目的の標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合する認識ドメインを有し、場合により関連の細胞を直接的または間接的に動員し、そして／または動員された細胞の機能をモジュレートする２つ以上の標的部分と、最小限の副作用（例えば、特に、最小限のサイトカインストーム様の影響、インフルエンザ様症状、自殺念慮、オフターゲット副作用）を有し医薬的使用に適したシグナル伝達物質にする１つまたは複数の突然変異を担持する修飾されたシグナル伝達物質と、を有する二重特異性または多機能性キメラタンパク質に関する。

様々な実施形態において、キメラタンパク質は、特徴のうち特に、例えば標的部分を介して、１種または複数のエフェクター細胞を疾患細胞に直接的または間接的に動員し、さらにシグナルをエフェクター細胞に送達して、疾患細胞を治療に関連する様式でモジュレートする。様々な実施形態において、キメラタンパク質は、特徴のうち特に、例えば標的部分を介して、１種または複数のエフェクター細胞を疾患細胞に直接的または間接的に動員し、さらにシグナルを疾患細胞に送達して、エフェクター細胞を治療に関連する様式でモジュレートする。様々な実施形態において、キメラタンパク質は、特徴のうち特に、例えば標的部分を介して、１種または複数のエフェクター細胞を疾患細胞に直接的または間接的に動員し、さらにシグナルをエフェクター細胞に送達して、エフェクター細胞を治療に関連する様式でモジュレートする。様々な実施形態において、キメラタンパク質は、特徴のうち特に、例えば標的部分を介して、１種または複数のエフェクター細胞を疾患細胞に直接的または間接的に動員し、さらにシグナルを疾患細胞に送達して、疾患細胞を治療に関連する様式でモジュレートする。幾つかの実施形態において、シグナル伝達物質は、エフェクター細胞および／または疾患細胞に影響を及ぼす。

様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、医学的に使用される時に、少なくとも２つの治療上の利益を提供する。例えば、本発明のキメラタンパク質は、適当な細胞を、必要とされる治療の部位に（非限定的例として、免疫エフェクター細胞を腫瘍、例えば腫瘍微細環境に）効果的に動員し、１つまたは複数のシグナルを細胞、例えば免疫エフェクター細胞および／または腫瘍細胞、に送達して、癌の減少または排除効果を促進する（例えば、シグナル伝達物質からの免疫細胞刺激を提供する、標的ドメインを介する免疫共刺激シグナルを提供する、標的ドメインを介する免疫共刺激シグナルの減少もしくはサイレンシングを提供するなど）。したがって本明細書に記載される通り、本発明のキメラタンパク質は、非限定的に癌の処置を含む、免疫系を介する疾患の効果的処置のための治療的に関連する選択の基盤を提供する。

さらに、本発明のキメラタンパク質は、様々な実施形態において、薬力学的および薬物動態的性質を有し、それにより治療における使用に特に適する。例えば、より小さな抗体に基づく形式が標的化に用いられる実施形態（本明細書の他の箇所に記載）を含む、様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、腎臓排出の回避を可能にする分子量を有し、低用量での治療効果を可能にする（例えば、腎臓を介する治療薬の損失なしに）。例えば、本発明のキメラタンパク質は、様々な実施形態において、約５０ｋＤａ、または約６０ｋＤａ、または約７０ｋＤａ、または約８０ｋＤａ、または約９０ｋＤａ、または約１００ｋＤａの分子量を有するように操作される。様々な実施形態において、本発明の構築物は、外部からの半減期延長方法を必要としないように腎臓濾過を逃れる。

様々な実施形態において、各キメラタンパク質のそれぞれは別の薬剤とコンジュゲートおよび／または融合されて、半減期を延長させ得る、または他の方法で薬力学的および薬物動態的性質を改善し得る。幾つかの実施形態において、キメラタンパク質は、ＰＥＧ、ＸＴＥＮ（例えば、ｒＰＥＧとして）、ポリシアル酸（ＰＯＬＹＸＥＮ）、アルブミン（例えば、ヒト血清アルブミンまたはＨＡＳ）、エラスチン様タンパク質（ＥＬＰ）、ＰＡＳ、ＨＡＰ、ＧＬＫ、ＣＴＰ、トランスフェリンなどの１つまたは複数と融合またはコンジュゲートされ得る。幾つかの実施形態において、キメラタンパク質は、抗体またはＦｃフラグメントなどの抗体フラグメントと融合またはコンジュゲートされ得る。例えば、キメラタンパク質は、ヒト免疫グロブリン（Ｉｇ）ＧのＦｃドメインのＮ−末端またはＣ−末端のいずれかに融合され得る。様々な実施形態において、各キメラタンパク質のそれぞれは、内容全体が参照により本明細書に組み入れられるＢｉｏＤｒｕｇｓ（２０１５）２９：２１５−２３９に記載される物質の１つまたは複数に融合される。

本明細書に記載される通り、本発明のキメラタンパク質は、複数の修飾、例えば突然変異の１つにより、改善された安全性を有し得る。様々な実施形態において、改善された安全性は、本発明のキメラタンパク質がより低い毒性（例えば、全身毒性および／または組織／臓器関連毒性）；および／または低下もしくは実質的に排除された副作用；および／または高い耐容性、低下もしくは実質的に排除された有害作用；および／または低減もしくは実質的に排除されたオフターゲット効果；および／または上昇された治療濃度域を提供することを意味する。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、タンパク質の一般的毒性を低減すること、および標的細胞または組織に及ぼすタンパク質の選択的影響を維持するまたは増加させることにより、任意のタンパク質治療薬（例えば、天然由来または操作されたタンパク質またはそれらのフラグメントに基づく）の治療指数を上昇させる（例えば、約２倍、約５倍、約１０倍、約２５倍、約５０倍、約１００倍、約２００倍、またはより大きく）。例えば、治療指数のこの上昇（例えば、約２倍、約５倍、約１０倍、約２５倍、約５０倍、約１００倍、約２００倍、またはより大きい）は、修飾されたシグナル伝達物質のものであり得る（例えば、野生型シグナル伝達物質に対して、またはシグナル標的部分を有する融合タンパク質という状況で野生型シグナル伝達物質に対して、または１つより多くの標的部分を有する融合タンパク質という状況で野生型シグナル伝達物質に対して）。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、それらの受容体への、標的部分およびシグナル伝達物質の効率的な結合を可能にする。例えば、幾つかの実施形態において、キメラタンパク質は、同じ細胞上の受容体（例えば、異なる受容体）への、標的部分およびシグナル伝達物質の一方の効率的な結合、ならびに別の細胞への他の標的部分の効率的な結合を可能にする。本明細書の他の箇所に記載される通り、様々な実施形態において、シグナル伝達物質は弱化された活性を提供するように突然変異されており、同じ細胞上の受容体への標的部分およびシグナル伝達物質の効率的な結合が連続であり、例えば標的部分／受容体の結合がシグナル伝達物質／受容体の結合に先行する。例えば、幾つかの実施形態において、シグナル伝達物質それ自体は、その突然変異形態で顕著に活性がより低く（例えば、野生型に対して）、なぜならそれはその受容体（複数可）に効率的に結合できないからである。したがって本発明のキメラタンパク質は、非標的細胞上の天然の受容体へのシグナル伝達物質の結合により引き起こされる望まない副作用を回避するのに有用である。しかし、標的部分（複数可）が実質的な活性化に必要とされる不足するまたは不充分な結合（例えば、限定なしにおよび／または結合活性）を補填するため、シグナル伝達物質は、標的細胞上で活性である。様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、シグナル伝達物質が、身体を通る治療活性の部位への途中では不活性であり、かつ望ましくない副作用を大きく低減する特異的に標的にされる細胞型上で実質的に効果を有するようにする、修飾された（例えば、突然変異体の）シグナル伝達物質を有する。

様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、標的細胞（例えば、腫瘍細胞）に向けられるが、標的にされない細胞（例えば、正常細胞、非腫瘍細胞）には向けられない選択的生物活性、例えば治療関連の生物活性を有する。

様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、相乗的な活性および／または治療効果を提供する。そのような実施形態において、キメラタンパク質の活性および／または治療効果は、単独で、または共投与により組み合わせて投与される個々の成分（即ち、標的部分およびシグナル伝達物質）の治療効果よりも、改善された治療効果、例えば相乗的に大きな治療効果を有する。

様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、異なる構成を介して互いに結合される２つ以上の標的部分およびシグナル伝達物質を有する。一実施形態において、標的部分の１つは、シグナル伝達物質のアミノ末端に連結され、別の標的部分は、シグナル伝達物質のカルボキシ末端に連結される。別の実施形態において、両方の標的部分は、シグナル伝達物質のアミノ末端に連結される。例えば、シグナル伝達物質のアミノ末端は、標的部分の１つのカルボキシ末端に連結され得、標的部分が、順次、他の標的部分に連結される（例えば、アミノ末端を介して）。さらなる実施形態において、両方の標的部分は、シグナル伝達物質のカルボキシ末端に連結される。例えば、シグナル伝達物質のカルボキシ末端は、標的部分の１つのアミノ末端に連結され得、標的部分が、順次、他の標的部分に連結される（例えば、カルボキシ末端を介して）。

様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、本明細書に記載される成分を有する融合タンパク質の形態である。

様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、異なる抗原または受容体を標的とする２つ以上の標的部分を有し、１つの標的部分は、その抗原または受容体に対して弱化され得、例えば標的部分は、低い親和性または結合活性で抗原または受容体を結合する（例えば、他の標的部分がその抗原または受容体に向ける親和性または結合活性よりも低い親和性または結合活性でなど、例えば結合親和性の差は、約１０倍、または約２５倍、または約５０倍、または約１００倍、または約３００倍、または約５００倍、または約１０００倍、または約５０００倍であり得；例えばより低い親和性または結合活性の標的部分は、中〜高ｎＭまたは低〜中μＭの範囲のＫ_Ｄでその抗原または受容体を結合し得るが、より高い親和性または結合活性の標的部分は、中〜高ｐＭまたは低〜中ｎＭの範囲のＫ_Ｄで抗原または受容体を結合し得る）。例えば、幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、無差別な抗原または受容体に対する弱化された標的部分を含み、これは目的の細胞への標的を改善し得（例えば、他の標的部分を介して）、かつ治療のための標的にされないものを含む、複数の細胞型にわたる影響を予防し得る（例えば、これらの実施形態で提供されるものより高い親和性で無差別な抗原または受容体に結合することにより）。

様々な実施形態において、本発明は、本明細書に記載されるキメラタンパク質をコードする単離された核酸を提供する。

標的部分の細胞動員
様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、目的の標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合する認識ドメインを有する標的部分を有する。様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、異なる細胞（例えば、シナプスを生成するため）または同じ細胞（例えば、より集中したシグナル伝達物質または治療効果を得るため）を標的とする１つまたは複数の標的部分を有する。目的の標的（例えば、抗原、受容体）は、非限定的にＴ細胞、細胞障害性Ｔリンパ球、Ｔヘルパー細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、ナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞、抗腫瘍マクロファージ（例えば、Ｍ１マクロファージ）、Ｂ細胞、樹状細胞、またはそのサブセットを包含し得る、１つまたは複数の免疫細胞上で見出され得る。幾つかの実施形態において、認識ドメインは、目的の標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合し、直接的または間接的により多くの免疫細胞の１つを効果的に動員する。幾つかの実施形態において、目的の標的（例えば、抗原、受容体）は、１つまたは複数の腫瘍細胞上で見出され得る。これらの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、免疫細胞を、例えば幾つかの実施形態において、治療部位（例えば、１つまたは複数の疾患細胞または治療効果のためにモジュレートされる細胞を有する位置）へ、直接的または間接的に動員し得る。幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、免疫細胞、例えば腫瘍細胞を殺傷および／または抑制し得る免疫細胞を、作用の部位（非限定的例として、腫瘍微細環境など）へ直接的または間接的に動員し得る。

様々な実施形態において、キメラタンパク質は、非細胞構造の一部である標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合する認識ドメインを有する標的部分を有する。幾つかの実施形態において、抗原または受容体は、インタクト細胞または細胞構造の不可欠な成分ではない。幾つかの実施形態において、抗原または受容体は、細胞外抗原または受容体である。幾つかの実施形態において、標的は、非限定的に、ＤＮＡまたはＲＮＡを含む核酸、例えば壊死性腫瘍細胞から放出されたＤＮＡ、またはコレステロールなどの細胞外堆積物を含む、非タンパク質性の非細胞性マーカーである。

幾つかの実施形態において、目的の標的（例えば、抗原、受容体）は、間質または細胞外マトリックス（ＥＣＭ）の非細胞成分の一部、またはそれらに関連するマーカーである。本明細書で用いられる間質は、組織または臓器の結合および支持的フレームワークを指す。間質は、線維芽細胞／筋線維芽細胞、膠細胞、上皮細胞、脂肪細胞、免疫細胞、血管細胞、平滑筋細胞、および免疫細胞などの細胞と、細胞外マトリックス（ＥＣＭ）および細胞外分子の編集物を包含し得る。様々な実施形態において、目的の標的（例えば、抗原、受容体）は、細胞外マトリックスおよび細胞外分子などの間質の非細胞成分の一部である。本明細書で用いられるＥＣＭは、全ての組織および臓器の中に存在する非細胞成分を指す。ＥＣＭは、非限定的にタンパク質、糖タンパク質、プロテオグリカンおよび多糖類を含む生化学的に異なる成分の大きな集合体で構成される。ＥＣＭのこれらの成分は通常、隣接する細胞により産生され、エキソサイトーシスを介してＥＣＭに分泌される。ＥＣＭ成分は多くの場合、分泌されると凝集して、巨大分子の複雑なネットワークを形成する。様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、ＥＣＭの任意の成分上に存在する標的（例えば、抗原または受容体または非タンパク質性分子）を認識する標的部分を含む。ＥＣＭの例示的な成分としては、プロテオグリカン、非プロテオグリカンの多糖類、線維、および他のＥＣＭタンパク質またはＥＣＭ非タンパク質、例えば多糖類および／もしくは脂質、またはＥＣＭ関連分子（例えば、タンパク質または非タンパク質、例えば多糖類、核酸および／または脂質）が挙げられるが、これらに限定されない。

幾つかの実施形態において、標的部分は、ＥＣＭプロテオグリカン上の標的（例えば、抗原、受容体）を認識する。プロテオグリカンは、グリコシル化タンパク質である。基本のプロテオグリカン単位は、１つまたは複数の共有結合で付着されるグリコサミノグリカン（ＧＡＧ）鎖を有するコアタンパク質を含む。プロテオグリカンは、正電荷ナトリウムイオン（Ｎａ＋）を引き寄せる正味の負電荷を有し、これは浸透圧により水分子を引き寄せて、ＥＣＭおよび常在細胞を水和状態に保つ。プロテオグリカンはまた、ＥＣＭ内の成長因子の捕捉および貯蔵を支援し得る。本発明のキメラタンパク質により標的にされ得る例示的なプロテオグリカンとしては、ヘパラン硫酸塩、コンドロイチン硫酸塩、およびケラタン硫酸塩が挙げられるが、これらに限定されない。一実施形態において、標的部分は、ヒアルロン酸などの非プロテオグリカン多糖類上の標的（例えば、抗原、受容体）を認識する。

幾つかの実施形態において、標的部分は、ＥＣＭ線維上の標的（例えば、抗原、受容体）を認識する。ＥＣＭ線維は、コラーゲン線維およびエラスチン線維を含む。幾つかの実施形態において、標的部分は、コラーゲンまたはコラーゲン線維上の１つまたは複数のエピトープを認識する。コラーゲンは、ＥＣＭ中で最も豊富なタンパク質である。コラーゲンは、原線維タンパク質としてＥＣＭ中に存在し、常在細胞に構造的支持を提供する。１つまたは複数の実施形態において、標的部分は、非限定的に原線維コラーゲン（Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、Ｖ、ＸＩ型）、ＦＡＣＩＴコラーゲン（ＩＸ、ＸＩＩ、ＸＩＶ型）、単鎖コラーゲン（ＶＩＩＩ、Ｘ型）、基底膜コラーゲン（ＩＶ型）、および／またはＶＩ、ＶＩＩ、もしくはＸＩＩＩ型コラーゲンを含む、ＥＣＭ内に存在する様々な型のコラーゲンを認識し、それに結合する。エラスチン線維は、組織に弾性を提供し、必要に応じてそれらを緊張させ、その後、本来の状態に戻す。幾つかの実施形態において、標的部分は、エラスチンまたはエラスチン線維上の１つまたは複数のエピトープを認識する。

幾つかの実施形態において、標的部分は、非限定的にテネイシン、フィブロネクチン、フィブリン、ラミニン、またはニドゲン／エンタクチンを含む、１種または複数のＥＣＭタンパク質を認識する。

一実施形態において、標的部分は、テネイシンを認識し、それに結合する。糖タンパク質のテネイシン（ＴＮ）ファミリーは、少なくとも４種のメンバー：テネイシン−Ｃ、テネイシン−Ｒ、テネイシン−Ｘ、およびテネイシンＷを含む。テネイシンタンパク質の一次構造は、同じ連続配列で並べられる複数の共通モチーフ：アミノ末端ヘプタドリピート、上皮成長因子（ＥＧＦ）様リピート、フィブロネクチンＩＩＩ型ドメインリピート、およびカルボキシル末端フィブリノーゲン様球状ドメインを含む。各タンパク質メンバーは、ＥＧＦ様およびフィブロネクチンＩＩＩ型リピートの数および性質における典型的な変動と関連する。アイソフォームバリアントもまた、特にテネイシン−Ｃに関連して存在する。テネイシン−Ｃの２７を超えるスプライスバリアントおよび／またはアイソフォームが、公知である。特別な実施形態において、標的部分は、テネイシン−ＣＡ１を認識し、それに結合する。同様に、テネイシン−Ｒもまた、様々なスプライスバリアントおよびアイソフォームを有する。テネイシン−Ｒは通常、二量体または三量体として存在する。テネイシン−Ｘは、テネイシンファミリーの最大のメンバーであり、三量体として存在することが知られている。テネイシン−Ｗは、三量体として存在する。幾つかの実施形態において、標的部分は、テネイシンタンパク質上の１つまたは複数のエピトープを認識する。幾つかの実施形態において、標的部分は、テネイシンタンパク質の単量体および／または二量体および／または三量体および／または六量体形態を認識する。

一実施形態において、標的部分は、フィブロネクチンを認識し、それに結合する。フィブロネクチンは、ＥＣＭ中で細胞をコラーゲン線維と連結させて、ＥＣＭを通して細胞を移動させる糖タンパク質である。インテグリンへの結合により、フィブロネクチンは、フォールディングを解いて機能的二量体を形成する。幾つかの実施形態において、標的部分は、フィブロネクチンの単量体および／または二量体形態を認識する。幾つかの実施形態において、標的部分は、フィブロネクチン上の１つまたは複数のエピトープを認識する。例示的実施形態において、標的部分は、フィブロネクチン細胞外ドメインＡ（ＥＤＡ）またはフィブロネクチン細胞外ドメインＢ（ＥＤＢ）を認識する。高レベルのＥＤＡは、乾癬、関節リウマチ、糖尿病、および癌を含む様々な疾患および障害に関連する。幾つかの実施形態において、標的部分は、ＥＤＡアイソフォームを含むフィブロネクチンを認識し、キメラタンパク質に、癌細胞を含む疾患細胞を標的化させるために用いられ得る。幾つかの実施形態において、標的部分は、ＥＤＢアイソフォームを含むフィブロネクチンを認識する。様々な実施形態において、そのような標的部分は、キメラタンパク質に、腫瘍新生血管構造を含む腫瘍細胞を標的化させるために用いられ得る。

一実施形態において、標的部分は、フィブリンを認識し、それに結合する。フィブリンは、ＥＣＭのマトリックス網の中で見出されることの多い別のタンパク質物質である。フィブリンは、フィブリンを重合させるフィブリノーゲンに対するプロテアーゼトロンビンの作用により形成される。幾つかの実施形態において、標的部分は、フィブリン上の１つまたは複数のエピトープを認識する。幾つかの実施形態において、標的部分は、フィブリンの単量体形態および重合形態を認識する。

一実施形態において、標的部分は、ラミニンを認識し、それに結合する。ラミニンは、細胞および臓器のタンパク質網の基礎である基底板の主成分である。ラミニンは、α鎖、β鎖、およびγ鎖を含むヘテロ三量体タンパク質である。幾つかの実施形態において、標的部分は、ラミニン上の１つまたは複数のエピトープを認識する。幾つかの実施形態において、標的部分は、ラミニンの単量体、二量体および三量体形態を認識する。

一実施形態において、標的部分は、ニドゲンまたはエンタクチンを認識し、それに結合する。ニドゲン／エンタクチンは、高度に保存された硫酸化糖タンパク質のファミリーである。それらは、基底膜の主な構造成分を構成し、基底膜中のラミニンおよびコラーゲンＩＶ型ネットワークを結び付けるよう機能する。このファミリーのメンバーとしては、ニドゲン−１およびニドゲン−２が挙げられる。様々な実施形態において、標的部分は、ニドゲン−１および／またはニドゲン−２上のエピトープを認識する。

様々な実施形態において、標的部分は、本明細書に記載される標的（例えば、ＥＣＭタンパク質）のいずれかに存在するエピトープを認識する抗原認識ドメインを含む。一実施形態において、抗原認識ドメインは、タンパク質上に存在する１つまたは複数の線形エピトープを認識する。本明細書で用いられる線形エピトープは、タンパク質上に存在するアミノ酸の任意の連続配列を指す。別の実施形態において、抗原認識ドメインは、タンパク質上に存在する１つまたは複数の立体構造エピトープを認識する。本明細書で用いられる立体構造エピトープは、抗原認識ドメインにより認識され得る特徴および／または形状および／または三次構造を有する三次元表面を形成するアミノ酸の１つまたは複数の区分（それは不連続であり得る）を指す。

様々な実施形態において、標的部分は、本明細書に記載される標的（例えば、ＥＣＭタンパク質）のいずれかの完全長および／または成熟形態および／またはアイソフォームおよび／またはスプライスバリアントおよび／またはフラグメントおよび／または任意の他の天然由来もしくは合成類似体、バリアント、もしくは突然変異体に結合し得る。様々な実施形態において、標的部分は、単量体、二量体、三量体、四量体、ヘテロ二量体、多量体および関連の形態を含む、本明細書に記載されるタンパク質の任意の形態に結合し得る。様々な実施形態において、標的部分は、グリコシル化および／またはリン酸化形態などの、本明細書に記載されるタンパク質の任意の翻訳後修飾形態に結合し得る。

様々な実施形態において、標的部分は、ＤＮＡなどの細胞外分子を認識する抗原認識ドメインを含む。幾つかの実施形態において、標的部分は、ＤＮＡを認識する抗原認識ドメインを含む。一実施形態において、ＤＮＡは、壊死性またはアポトーシス性腫瘍細胞または他の疾患細胞から細胞外空間に放出される。

様々な実施形態において、標的部分は、アテローム斑に関連する１つまたは複数の非細胞構造を認識する抗原認識ドメインを含む。２つの型のアテローム斑が、公知である。線維・脂質（線維・脂肪）斑は、動脈の内膜の直下の脂質沈着細胞の蓄積を特徴とする。内皮の直下に、プラークのアテローム性の核を覆う線維性被膜が存在する。この核は、多量の組織コレステロールおよびコレステロールエステル、フィブリン、プロテオグリカン、コラーゲン、エラスチン、ならびに細胞破片を有する脂質沈着細胞（マクロファージおよび平滑筋細胞）を含む。進行したプラークでは、プラークの中心核は通常、細胞外コレステロール沈着（死亡細胞から放出）を含み、それが空洞の針状裂隙のあるコレステロール結晶のエリアを形成する。プラークの周辺には、より若い泡沫細胞および毛細血管がある。線維斑もまた、動脈壁内の内膜下に存在し、壁の肥厚および拡大を生じ、時には、筋肉層のいくらかの萎縮を有する管腔のまだらな局所的狭窄を生じる。線維斑は、コラーゲン線維（好酸球性）、カルシウムの沈降物（好ヘマトキシリン性）および脂質沈着細胞を含有する。幾つかの実施形態において、標的部分は、フィブリン、プロテオグリカン、コラーゲン、エラスチン、細胞破片、およびカルシウムまたは他の鉱物性沈着物もしくは沈降物などの、これらのプラークの非細胞成分の１種または複数を認識し、それに結合する。幾つかの実施形態において、細胞破片は、死細胞から放出される核酸、例えばＤＮＡまたはＲＮＡである。

様々な実施形態において、標的部分は、神経変性疾患に関連する脳のプラーク中で見出される１種または複数の非細胞構造を認識する抗原認識ドメインを含む。幾つかの実施形態において、標的部分は、アルツハイマー病患者の脳中に見出されるアミロイド斑の中に存在する１種または複数の非細胞構造を認識し、それに結合する。例えば、標的部分は、アミロイド斑の主成分であるペプチドアミロイドベータを認識してそれに結合できる。幾つかの実施形態において、標的部分は、ハンチントン病患者に見出される脳のプラーク中に存在する１種または複数の非細胞構造を認識し、それに結合する。様々な実施形態において、標的部分は、レビー小体型認知症および封入体筋炎などの他の神経変性または筋骨格疾患に関連するプラーク中に見出される１種または複数の非細胞構造を認識し、それに結合する。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、非細胞構造に結合する２つ以上の標的部分を有し得る。幾つかの実施形態において、２つの標的部分が存在し、一方は細胞を標的とし、他方は非細胞構造を標的とする。様々な実施形態において、標的部分は、疾患細胞および／またはエフェクター細胞などの細胞を直接的または間接的に動員し得る。様々な実施形態において、シグナル伝達物質は、標的部分により標的とされる１つまたは複数の細胞（例えば、疾患細胞および／またはエフェクター細胞などの、動員される細胞）をモジュレートし得る。例えば、シグナル伝達物質は、標的細胞がシグナル伝達物質の受容体を発現するか否かに応じて、標的細胞の一方または両方をモジュレートし得る（および標的細胞は、エフェクターおよび／または疾患細胞であり得る）。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、免疫細胞のバランスを腫瘍の免疫攻撃に偏るようにシフトでき、またはシフトすることを含む方法で用途を見出す。例えば、本発明のキメラタンパク質は、腫瘍を殺傷および／または抑制し得る細胞（例えば、Ｔ細胞、細胞障害性Ｔリンパ球、Ｔヘルパー細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、ナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞、抗腫瘍マクロファージ（例えば、Ｍ１マクロファージ）、Ｂ細胞、樹状細胞、またはそれらのサブセット）に偏るように、かつ腫瘍を保護する細胞（例えば、骨髄由来免疫サプレッサ細胞（ＭＤＳＣ）、調節性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ）、腫瘍関連好中球（ＴＡＮ）、Ｍ２マクロファージ、腫瘍関連マクロファージ（ＴＡＭ）、またはそれらのサブセット）に対抗するように、臨床的に重要な部位で免疫細胞の比率をシフトし得る。幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、調節性Ｔ細胞に対するエフェクターＴ細胞の比率を上昇させることが可能である。

例えば幾つかの実施形態において、標的部分は、Ｔ細胞に関連する標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合する認識ドメインを含む。幾つかの実施形態において、標的部分は、Ｔ細胞を直接的または間接的に動員する抗原認識ドメインを含む。一実施形態において、標的部分は、エフェクターＴ細胞に特異的に結合する抗原認識ドメインを含む。幾つかの実施形態において、標的部分は、エフェクターＴ細胞を、例えば幾つかの実施形態において、治療部位（例えば、１つもしくは複数の疾患細胞、または治療効果のためにモジュレートされる細胞を有する位置）に、直接的または間接的に動員する抗原認識ドメインを含む。例示的なエフェクターＴ細胞としては、細胞障害性Ｔ細胞（例えば、αβＴＣＲ、ＣＤ３^＋、ＣＤ８^＋、ＣＤ４５ＲＯ^＋）；ＣＤ４^＋エフェクターＴ細胞（例えば、αβＴＣＲ、ＣＤ３^＋、ＣＤ４^＋、ＣＣＲ７^＋、ＣＤ６２Ｌｈｉ、ＩＬ−７Ｒ／ＣＤ１２７^＋）；ＣＤ８^＋エフェクターＴ細胞（例えば、αβＴＣＲ、ＣＤ３^＋、ＣＤ８^＋、ＣＣＲ７^＋、ＣＤ６２Ｌｈｉ、ＩＬ−７Ｒ／ＣＤ１２７^＋）；エフェクターメモリーＴ細胞（例えば、ＣＤ６２Ｌｌｏｗ、ＣＤ４４^＋、ＴＣＲ、ＣＤ３^＋、ＩＬ−７Ｒ／ＣＤ１２７^＋、ＩＬ−１５Ｒ^＋、ＣＣＲ７ｌｏｗ）；セントラルメモリーＴ細胞（例えば、ＣＣＲ７^＋、ＣＤ６２Ｌ^＋、ＣＤ２７^＋；またはＣＣＲ７ｈｉ、ＣＤ４４^＋、ＣＤ６２Ｌｈｉ、ＴＣＲ、ＣＤ３^＋、ＩＬ−７Ｒ／ＣＤ１２７^＋、ＩＬ−１５Ｒ^＋）；ＣＤ６２Ｌ^＋エフェクターＴ細胞；初期エフェクターメモリーＴ細胞（ＣＤ２７^＋ＣＤ６２Ｌ⁻）および後期エフェクターメモリーＴ細胞（ＣＤ２７⁻ＣＤ６２Ｌ⁻）（それぞれＴｅｍＥおよびＴｅｍＬ）を含むＣＤ８^＋エフェクターメモリーＴ細胞（ＴＥＭ）；ＣＤ１２７（^＋）ＣＤ２５（ｌｏｗ／−）エフェクターＴ細胞；ＣＤ１２７（⁻）ＣＤ２５（⁻）エフェクターＴ細胞；ＣＤ８^＋幹細胞メモリーエフェクター細胞（ＴＳＣＭ）（例えば、ＣＤ４４（ｌｏｗ）ＣＤ６２Ｌ（ｈｉｇｈ）ＣＤ１２２（ｈｉｇｈ）ｓｃａ（^＋））；ＴＨ１エフェクターＴ細胞（例えば、ＣＸＣＲ３^＋、ＣＸＣＲ６^＋およびＣＣＲ５^＋；またはαβＴＣＲ、ＣＤ３^＋、ＣＤ４^＋、ＩＬ−１２Ｒ^＋、ＩＦＮγＲ^＋、ＣＸＣＲ３^＋）、ＴＨ２エフェクターＴ細胞（例えば、ＣＣＲ３^＋、ＣＣＲ４^＋およびＣＣＲ８^＋；またはαβＴＣＲ、ＣＤ３^＋、ＣＤ４^＋、ＩＬ−４Ｒ^＋、ＩＬ−３３Ｒ^＋、ＣＣＲ４^＋、ＩＬ−１７ＲＢ^＋、ＣＲＴＨ２^＋）；ＴＨ９エフェクターＴ細胞（例えば、αβＴＣＲ、ＣＤ３^＋、ＣＤ４^＋）；ＴＨ１７エフェクターＴ細胞（例えば、αβＴＣＲ、ＣＤ３^＋、ＣＤ４^＋、ＩＬ−２３Ｒ^＋、ＣＣＲ６^＋、ＩＬ−１Ｒ^＋）；ＣＤ４^＋ＣＤ４５ＲＯ^＋ＣＣＲ７^＋エフェクターＴ細胞、ＩＣＯＳ^＋エフェクターＴ細胞；ＣＤ４^＋ＣＤ４５ＲＯ^＋ＣＣＲ７（⁻）エフェクターＴ細胞；ならびにＩＬ−２、ＩＬ−４および／またはＩＦＮ−γを分泌するエフェクターＴ細胞が挙げられる。

例示的な目的のＴ細胞抗原としては、例えばＣＤ８、ＣＤ３、ＳＬＡＭＦ４、ＩＬ−２Ｒα、４−１ＢＢ／ＴＮＦＲＳＦ９、ＩＬ−２ Ｒβ、ＡＬＣＡＭ、Ｂ７−１、ＩＬ−４ Ｒ、Ｂ７−Ｈ３、ＢＬＡＭＥ／ＳＬＡＭＦＳ、ＣＥＡＣＡＭ１、ＩＬ−６ Ｒ、ＣＣＲ３、ＩＬ−７ Ｒα、ＣＣＲ４、ＣＸＣＲｌ／ＩＬ−Ｓ ＲＡ、ＣＣＲ５、ＣＣＲ６、ＩＬ−１０ Ｒα、ＣＣＲ ７、ＩＬ−１０ Ｒβ、ＣＣＲＳ、ＩＬ−１２ Ｒβ１、ＣＣＲ９、ＩＬ−１２ Ｒβ２、ＣＤ２、ＩＬ−１３ Ｒα１、ＩＬ−１３、ＣＤ３、ＣＤ４、ＩＬＴ２／ＣＤＳ５ｊ、ＩＬＴ３／ＣＤＳ５ｋ、ＩＬＴ４／ＣＤＳ５ｄ、ＩＬＴ５／ＣＤＳ５ａ、インテグリン（Ｉｕｔｅｇｒｉｎ）α ４／ＣＤ４９ｄ、ＣＤＳ、インテグリンα Ｅ／ＣＤ１０３、ＣＤ６、インテグリンα Ｍ／ＣＤ １１ｂ、ＣＤＳ、インテグリンα Ｘ／ＣＤ１１ｃ、インテグリンβ ２／ＣＤ１Ｓ、ＫＩＲ／ＣＤ１５Ｓ、ＣＤ２７／ＴＮＦＲＳＦ７、ＫＩＲ２ＤＬ１、ＣＤ２Ｓ、ＫＩＲ２ＤＬ３、ＣＤ３０／ＴＮＦＲＳＦＳ、ＫＩＲ２ＤＬ４／ＣＤ１５Ｓｄ、ＣＤ３１／ＰＥＣＡＭ−１、ＫＩＲ２ＤＳ４、ＣＤ４０リガンド／ＴＮＦＳＦ５、ＬＡＧ−３、ＣＤ４３、ＬＡＩＲ１、ＣＤ４５、ＬＡＩＲ２、ＣＤＳ３、ロイコトリエンＢ４−Ｒ１、ＣＤＳ４／ＳＬＡＭＦ５、ＮＣＡＭ−Ｌ１、ＣＤ９４、ＮＫＧ２Ａ、ＣＤ９７、ＮＫＧ２Ｃ、ＣＤ２２９／ＳＬＡＭＦ３、ＮＫＧ２Ｄ、ＣＤ２Ｆ−１０／ＳＬＡＭＦ９、ＮＴ−４、ＣＤ６９、ＮＴＢ−Ａ／ＳＬＡＭＦ６、共通γ鎖／ＩＬ−２ Ｒγ、オステオポンチン、ＣＲＡＣＣ／ＳＬＡＭＦ７、ＳＬＡＭＦ７（ＣＳ１）、ＰＤ−１、ＣＲＴＡＭ、ＰＳＧＬ−１、ＣＴＬＡ−４、ＲＡＮＫ／ＴＮＦＲＳＦ１１Ａ、ＣＸ３ＣＲ１、ＣＸ３ＣＬ１、Ｌ−セレクチン、ＣＸＣＲ３、ＳＩＲＰ β１、ＣＸＣＲ４、ＳＬＡＭ、ＣＸＣＲ６、ＴＣＣＲ／ＷＳＸ−１、ＤＮＡＭ−１、チモポエチン、ＥＭＭＰＲＩＮ／ＣＤ１４７、ＴＩＭ−１、ＥｐｈＢ６、ＴＩＭ−２、Ｆａｓ／ＴＮＦＲＳＦ６、ＴＩＭ−３、Ｆａｓリガンド／ＴＮＦＳＦ６、ＴＩＭ−４、Ｆｃγ ＲＩＩＩ／ＣＤ１６、ＴＩＭ−６、ＴＮＦＲ１／ＴＮＦＲＳＦ１Ａ、グラニュライシン、ＴＮＦ ＲＩＩＩ／ＴＮＦＲＳＦ１Ｂ、ＴＲＡＩＬ ＲＬ／ＴＮＦＲＳＦＬＯＡ、ＩＣＡＭ−１／ＣＤ５４、ＴＲＡＩＬ Ｒ２／ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ、ＩＣＡＭ−２／ＣＤ１０２、ＴＲＡＩＬＲ３／ＴＮＦＲＳＦ１０Ｃ、ＩＦＮ−γＲ１、ＴＲＡＩＬＲ４／ＴＮＦＲＳＦ１０Ｄ、ＩＦＮ−γ Ｒ２、ＴＳＬＰ、ＩＬ−１ Ｒ１ およびＴＳＬＰ Ｒ（および適宜、細胞外ドメインを含む）が挙げられる。様々な実施形態において、キメラタンパク質の標的部分は、これらの例示的Ｔ細胞抗原の１つまたは複数を結合する。

模範的な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、ＣＤ８に対する標的部分を含む。様々な実施形態において、ＣＤ８に対する標的部分は、ＣＤ８の機能的モジュレーション（例えば、部分的または完全な中和）を行わずにＣＤ８に特異的に結合可能なタンパク質系物質である。ＣＤ８はヘテロ二量体Ｉ型膜貫通糖タンパク質であり、そのαおよびβ鎖が両者とも、延長したＯ−グリコシル化ストークによって一回膜貫通ドメインおよび短い細胞質テールに連結される免疫グロブリン（Ｉｇ）様細胞外ドメインで構成される（Ｌｉ ｅｔ ａｌ．，２０１３）。α鎖の細胞質領域は、ｓｒｃチロシンキナーゼｐ５６ｌｃｋ（Ｌｃｋ）のためのドッキング部位として働く２つのシステインモチーフを含む。対照的に、このＬｃｋ結合ドメインはβ鎖から欠如しているようであり、ＣＤ８ β鎖が下流のシグナル伝達に関与しないことを示唆する（Ａｒｔｙｏｍｏｖ ｅｔ ａｌ．，２０１０）。ＣＤ８は、Ｔ細胞受容体のための共受容体として機能し、その根本的役割は、ＭＨＣへの共受容体に続くＴＣＲ−ｐＭＨＣ複合体へのＬｃｋの動員である（Ｔｕｒｎｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９９０、Ｖｅｉｌｌｅｔｔｅ ｅｔ ａｌ．，１９８８）。このキナーゼの局所濃度の上昇がシグナル伝達カスケードを活性化し、それがζ鎖関連プロテインキナーゼ７０（ＺＡＰ−７０）を動員および活性化し、続いてＴ細胞活性化シグナルの増幅または増進を導く（Ｐｕｒｂｈｏｏ ｅｔ ａｌ．，２００１、Ｌａｕｇｅｌ ｅｔ ａｌ．，２００７ａ）。

様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、ＣＤ８ αおよび／またはβ鎖上に存在するエピトープを認識する抗原認識ドメインを有する標的部分を含む。一実施形態において、抗原認識ドメインは、ＣＤ８ αおよび／またはβ鎖上の１つまたは複数の線形エピトープを認識する。本明細書で用いられる線形エピトープは、ＣＤ８ αおよび／またはβ鎖上に存在するアミノ酸の任意の連続配列を指す。別の実施形態において、抗原認識ドメインは、ＣＤ８ αおよび／またはβ鎖上に存在する１つまたは複数の立体構造エピトープを認識する。本明細書で用いられる立体構造エピトープは、抗原認識ドメインにより認識され得る特徴および／または形状および／または三次構造を有する三次元表面を形成するアミノ酸の１つまたは複数の区分（それは不連続であり得る）を指す。

様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、ヒトＣＤ８ αおよび／またはβ鎖の完全長および／または成熟形態および／またはアイソフォームおよび／またはスプライスバリアントおよび／またはフラグメントおよび／または任意の他の天然由来のもしくは合成の類似体、バリアントもしくは突然変異体に結合し得る標的部分を含み得る。様々な実施形態において、ＣＤ８に対する標的部分は、単量体、二量体、ヘテロ二量体、多量体および関連の形態を含む、ヒトＣＤ８ αおよび／またはβ鎖の任意の形態に結合し得る。一実施形態において、ＣＤ８に対する標的部分は、ＣＤ８ α鎖またはＣＤ８ β鎖の一量体形態に結合し得る。別の実施形態において、ＣＤ８に対する標的部分は、２つのＣＤ８ α鎖または２つのＣＤ８ β鎖で構成されるホモ二量体形態に結合し得る。別の実施形態において、ＣＤ８に対する標的部分は、１つのＣＤ８ α鎖および１つのＣＤ８ β鎖で構成されるヘテロ二量体形態に結合し得る。

一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、ヒトＣＤ８ α鎖上に存在する１つまたは複数のエピトープを認識する抗原認識ドメインを有する標的部分を含む。一実施形態において、ヒトＣＤ８ α鎖は、
アイソフォーム１（配列番号１）
ＭＡＬＰＶＴＡＬＬＬＰＬＡＬＬＬＨＡＡＲＰＳＱＦＲＶＳＰＬＤＲＴＷＮＬＧＥＴＶＥＬＫＣＱＶＬＬＳＮＰＴＳＧＣＳＷＬＦＱＰＲＧＡＡＡＳＰＴＦＬＬＹＬＳＱＮＫＰＫＡＡＥＧＬＤＴＱＲＦＳＧＫＲＬＧＤＴＦＶＬＴＬＳＤＦＲＲＥＮＥＧＹＹＦＣＳＡＬＳＮＳＩＭＹＦＳＨＦＶＰＶＦＬＰＡＫＰＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣＮＨＲＮＲＲＲＶＣＫＣＰＲＰＶＶＫＳＧＤＫＰＳＬＳＡＲＹＶ
のアミノ酸配列を含む。

一実施形態において、ヒトＣＤ８ α鎖は、
アイソフォーム２（配列番号２）
ＭＡＬＰＶＴＡＬＬＬＰＬＡＬＬＬＨＡＡＲＰＳＱＦＲＶＳＰＬＤＲＴＷＮＬＧＥＴＶＥＬＫＣＱＶＬＬＳＮＰＴＳＧＣＳＷＬＦＱＰＲＧＡＡＡＳＰＴＦＬＬＹＬＳＱＮＫＰＫＡＡＥＧＬＤＴＱＲＦＳＧＫＲＬＧＤＴＦＶＬＴＬＳＤＦＲＲＥＮＥＧＹＹＦＣＳＡＬＳＮＳＩＭＹＦＳＨＦＶＰＶＦＬＰＡＫＰＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＧＮＲＲＲＶＣＫＣＰＲＰＶＶＫＳＧＤＫＰＳＬＳＡＲＹＶ
のアミノ酸配列を含む。

一実施形態において、ヒトＣＤ８ α鎖は、
アイソフォーム３（配列番号３）
ＭＲＮＱＡＰＧＲＰＫＧＡＴＦＰＰＲＲＰＴＧＳＲＡＰＰＬＡＰＥＬＲＡＫＱＲＰＧＥＲＶＭＡＬＰＶＴＡＬＬＬＰＬＡＬＬＬＨＡＡＲＰＳＱＦＲＶＳＰＬＤＲＴＷＮＬＧＥＴＶＥＬＫＣＱＶＬＬＳＮＰＴＳＧＣＳＷＬＦＱＰＲＧＡＡＡＳＰＴＦＬＬＹＬＳＱＮＫＰＫＡＡＥＧＬＤＴＱＲＦＳＧＫＲＬＧＤＴＦＶＬＴＬＳＤＦＲＲＥＮＥＧＹＹＦＣＳＡＬＳＮＳＩＭＹＦＳＨＦＶＰＶＦＬＰＡＫＰＴＴＴＰＡＰＲＰＰＴＰＡＰＴＩＡＳＱＰＬＳＬＲＰＥＡＣＲＰＡＡＧＧＡＶＨＴＲＧＬＤＦＡＣＤＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣＮＨＲＮＲＲＲＶＣＫＣＰＲＰＶＶＫＳＧＤＫＰＳＬＳＡＲＹＶ
のアミノ酸配列を含む。

一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、ヒトＣＤ８ β鎖上に存在する１つまたは複数のエピトープを認識する抗原認識ドメインを有する標的部分を含む。一実施形態において、ヒトＣＤ８ β鎖は、
アイソフォーム１（配列番号４）
ＭＲＰＲＬＷＬＬＬＡＡＱＬＴＶＬＨＧＮＳＶＬＱＱＴＰＡＹＩＫＶＱＴＮＫＭＶＭＬＳＣＥＡＫＩＳＬＳＮＭＲＩＹＷＬＲＱＲＱＡＰＳＳＤＳＨＨＥＦＬＡＬＷＤＳＡＫＧＴＩＨＧＥＥＶＥＱＥＫＩＡＶＦＲＤＡＳＲＦＩＬＮＬＴＳＶＫＰＥＤＳＧＩＹＦＣＭＩＶＧＳＰＥＬＴＦＧＫＧＴＱＬＳＶＶＤＦＬＰＴＴＡＱＰＴＫＫＳＴＬＫＫＲＶＣＲＬＰＲＰＥＴＱＫＧＰＬＣＳＰＩＴＬＧＬＬＶＡＧＶＬＶＬＬＶＳＬＧＶＡＩＨＬＣＣＲＲＲＲＡＲＬＲＦＭＫＱＦＹＫ
のアミノ酸配列を含む。

一実施形態において、ヒトＣＤ８ β鎖は、
アイソフォーム２（配列番号５）
ＭＲＰＲＬＷＬＬＬＡＡＱＬＴＶＬＨＧＮＳＶＬＱＱＴＰＡＹＩＫＶＱＴＮＫＭＶＭＬＳＣＥＡＫＩＳＬＳＮＭＲＩＹＷＬＲＱＲＱＡＰＳＳＤＳＨＨＥＦＬＡＬＷＤＳＡＫＧＴＩＨＧＥＥＶＥＱＥＫＩＡＶＦＲＤＡＳＲＦＩＬＮＬＴＳＶＫＰＥＤＳＧＩＹＦＣＭＩＶＧＳＰＥＬＴＦＧＫＧＴＱＬＳＶＶＤＦＬＰＴＴＡＱＰＴＫＫＳＴＬＫＫＲＶＣＲＬＰＲＰＥＴＱＫＧＰＬＣＳＰＩＴＬＧＬＬＶＡＧＶＬＶＬＬＶＳＬＧＶＡＩＨＬＣＣＲＲＲＲＡＲＬＲＦＭＫＱＬＲＬＨＰＬＥＫＣＳＲＭＤＹ
のアミノ酸配列を含む。

一実施形態において、ヒトＣＤ８ β鎖は、
アイソフォーム３（配列番号６）
ＭＲＰＲＬＷＬＬＬＡＡＱＬＴＶＬＨＧＮＳＶＬＱＱＴＰＡＹＩＫＶＱＴＮＫＭＶＭＬＳＣＥＡＫＩＳＬＳＮＭＲＩＹＷＬＲＱＲＱＡＰＳＳＤＳＨＨＥＦＬＡＬＷＤＳＡＫＧＴＩＨＧＥＥＶＥＱＥＫＩＡＶＦＲＤＡＳＲＦＩＬＮＬＴＳＶＫＰＥＤＳＧＩＹＦＣＭＩＶＧＳＰＥＬＴＦＧＫＧＴＱＬＳＶＶＤＦＬＰＴＴＡＱＰＴＫＫＳＴＬＫＫＲＶＣＲＬＰＲＰＥＴＱＫＧＲＲＲＲＡＲＬＲＦＭＫＱＰＱＧＥＧＩＳＧＴＦＶＰＱＣＬＨＧＹＹＳＮＴＴＴＳＱＫＬＬＮＰＷＩＬＫＴ
のアミノ酸配列を含む。

一実施形態において、ヒトＣＤ８ β鎖は、
アイソフォーム４（配列番号７）
ＭＲＰＲＬＷＬＬＬＡＡＱＬＴＶＬＨＧＮＳＶＬＱＱＴＰＡＹＩＫＶＱＴＮＫＭＶＭＬＳＣＥＡＫＩＳＬＳＮＭＲＩＹＷＬＲＱＲＱＡＰＳＳＤＳＨＨＥＦＬＡＬＷＤＳＡＫＧＴＩＨＧＥＥＶＥＱＥＫＩＡＶＦＲＤＡＳＲＦＩＬＮＬＴＳＶＫＰＥＤＳＧＩＹＦＣＭＩＶＧＳＰＥＬＴＦＧＫＧＴＱＬＳＶＶＤＦＬＰＴＴＡＱＰＴＫＫＳＴＬＫＫＲＶＣＲＬＰＲＰＥＴＱＫＧＰＬＣＳＰＩＴＬＧＬＬＶＡＧＶＬＶＬＬＶＳＬＧＶＡＩＨＬＣＣＲＲＲＲＡＲＬＲＦＭＫＱＫＦＮＩＶＣＬＫＩＳＧＦＴＴＣＣＣＦＱＩＬＱＩＳＲＥＹＧＦＧＶＬＬＱＫＤＩＧＱ
のアミノ酸配列を含む。

一実施形態において、ヒトＣＤ８ β鎖は、
アイソフォーム５（配列番号８）
ＭＲＰＲＬＷＬＬＬＡＡＱＬＴＶＬＨＧＮＳＶＬＱＱＴＰＡＹＩＫＶＱＴＮＫＭＶＭＬＳＣＥＡＫＩＳＬＳＮＭＲＩＹＷＬＲＱＲＱＡＰＳＳＤＳＨＨＥＦＬＡＬＷＤＳＡＫＧＴＩＨＧＥＥＶＥＱＥＫＩＡＶＦＲＤＡＳＲＦＩＬＮＬＴＳＶＫＰＥＤＳＧＩＹＦＣＭＩＶＧＳＰＥＬＴＦＧＫＧＴＱＬＳＶＶＤＦＬＰＴＴＡＱＰＴＫＫＳＴＬＫＫＲＶＣＲＬＰＲＰＥＴＱＫＧＰＬＣＳＰＩＴＬＧＬＬＶＡＧＶＬＶＬＬＶＳＬＧＶＡＩＨＬＣＣＲＲＲＲＡＲＬＲＦＭＫＱＰＱＧＥＧＩＳＧＴＦＶＰＱＣＬＨＧＹＹＳＮＴＴＴＳＱＫＬＬＮＰＷＩＬＫＴ
のアミノ酸配列を含む。

一実施形態において、ヒトＣＤ８ β鎖は、
アイソフォーム６（配列番号９）
ＭＲＰＲＬＷＬＬＬＡＡＱＬＴＶＬＨＧＮＳＶＬＱＱＴＰＡＹＩＫＶＱＴＮＫＭＶＭＬＳＣＥＡＫＩＳＬＳＮＭＲＩＹＷＬＲＱＲＱＡＰＳＳＤＳＨＨＥＦＬＡＬＷＤＳＡＫＧＴＩＨＧＥＥＶＥＱＥＫＩＡＶＦＲＤＡＳＲＦＩＬＮＬＴＳＶＫＰＥＤＳＧＩＹＦＣＭＩＶＧＳＰＥＬＴＦＧＫＧＴＱＬＳＶＶＤＦＬＰＴＴＡＱＰＴＫＫＳＴＬＫＫＲＶＣＲＬＰＲＰＥＴＱＫＧＲＲＲＲＡＲＬＲＦＭＫＱＦＹＫ
のアミノ酸配列を含む。

一実施形態において、ヒトＣＤ８ β鎖は、
アイソフォーム７（配列番号１０）
ＭＲＰＲＬＷＬＬＬＡＡＱＬＴＶＬＨＧＮＳＶＬＱＱＴＰＡＹＩＫＶＱＴＮＫＭＶＭＬＳＣＥＡＫＩＳＬＳＮＭＲＩＹＷＬＲＱＲＱＡＰＳＳＤＳＨＨＥＦＬＡＬＷＤＳＡＫＧＴＩＨＧＥＥＶＥＱＥＫＩＡＶＦＲＤＡＳＲＦＩＬＮＬＴＳＶＫＰＥＤＳＧＩＹＦＣＭＩＶＧＳＰＥＬＴＦＧＫＧＴＱＬＳＶＶＤＦＬＰＴＴＡＱＰＴＫＫＳＴＬＫＫＲＶＣＲＬＰＲＰＥＴＱＫＤＦＴＮＫＱＲＩＧＦＷＣＰＡＴＫＲＨＲＳＶＭＳＴＭＷＫＮＥＲＲＤＴＦＮＰＧＥＦＮＧＣ
のアミノ酸配列を含む。

一実施形態において、ヒトＣＤ８ β鎖は、
アイソフォーム８（配列番号１１）
ＭＲＰＲＬＷＬＬＬＡＡＱＬＴＶＬＨＧＮＳＶＬＱＱＴＰＡＹＩＫＶＱＴＮＫＭＶＭＬＳＣＥＡＫＩＳＬＳＮＭＲＩＹＷＬＲＱＲＱＡＰＳＳＤＳＨＨＥＦＬＡＬＷＤＳＡＫＧＴＩＨＧＥＥＶＥＱＥＫＩＡＶＦＲＤＡＳＲＦＩＬＮＬＴＳＶＫＰＥＤＳＧＩＹＦＣＭＩＶＧＳＰＥＬＴＦＧＫＧＴＱＬＳＶＶＤＦＬＰＴＴＡＱＰＴＫＫＳＴＬＫＫＲＶＣＲＬＰＲＰＥＴＱＫＧＬＫＧＫＶＹＱＥＰＬＳＰＮＡＣＭＤＴＴＡＩＬＱＰＨＲＳＣＬＴＨＧＳ
のアミノ酸配列を含む。

様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、特異的な結合ができる標的部分を含む。様々な実施形態において、キメラタンパク質は、抗体またはその誘導体などの抗原認識ドメインを有する標的部分を含む。一実施形態において、ＣＤ８結合剤は、抗体である標的部分を含む。様々な実施形態において、抗体は、本明細書の他の箇所に記載される通り１つの重鎖および２つの軽鎖を含む完全長の多量体タンパク質である。幾つかの実施形態において、抗体は、キメラ抗体である。幾つかの実施形態において、抗体は、ヒト化抗体である。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、ＶＨＨなどの、単一ドメイン抗体であるＣＤ８に対する標的部分を含む。ＶＨＨは、例えばラクダ、サメなどのＶＨＨ抗体を生成する生物体に由来してよく、またはＶＨＨは、設計されたＶＨＨであり得る。ＶＨＨは、天然由来重鎖抗体の特有の構造的および機能的特性を含む抗体由来の治療性タンパク質である。ＶＨＨ技術は、軽鎖が欠如するラクダ由来の完全に機能的な抗体に基づく。これらの重鎖抗体は、単一可変ドメイン（Ｖ_ＨＨ）および２つの定常ドメイン（ＣＨ２およびＣＨ３）を含む。ＶＨＨは、商標：ＮＡＮＯＢＯＤＹまたはＮＡＮＯＢＯＤＩＥＳとして市販される。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、ＶＨＨを含む。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、４つの「フレームワーク領域」またはＦＲと、３つの「相補性決定領域」またはＣＤＲと、を有する単一アミノ酸鎖を含むＶＨＨであるＣＤ８に対する標的部分を含む。本明細書で用いられる「フレームワーク領域」または「ＦＲ」は、ＣＤＲの間に位置する可変ドメイン中の一領域を指す。本明細書で用いられる「相補性決定領域」または「ＣＤＲ」は、抗原性標的に特異的に結合可能なアミノ酸配列を含むＶＨＨ中の可変領域を指す。

様々な実施形態において、ＣＤ８に対する標的部分は、少なくとも１つのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、および／またはＣＤＲ３配列を含む可変ドメインを有するＶＨＨを含む。

幾つかの実施形態において、ＣＤＲ１配列は、
ＧＦＴＦＤＤＹＡＭＳ（配列番号１２）または
ＧＦＴＦＤＤＹＡＩＧ（配列番号１３）
から選択される。

幾つかの実施形態において、ＣＤＲ２配列は、
ＴＩＮＷＮＧＧＳＡＥＹＡＥＰＶＫＧ（配列番号１４）または
ＣＩＲＶＳＤＧＳＴＹＹＡＤＰＶＫＧ（配列番号１５）
から選択される。

幾つかの実施形態において、ＣＤＲ３配列は、
ＫＤＡＤＬＶＷＹＮＬＳ（配列番号１６）または
ＫＤＡＤＬＶＷＹＮＬＲ（配列番号１７）または
ＡＧＳＬＹＴＣＶＱＳＩＶＶＶＰＡＲＰＹＹＤＭＤＹ（配列番号１８）
から選択される。

様々な実施形態において、ＣＤ８標的部分は、配列番号１２、配列番号１４、および配列番号１６を含む。様々な実施形態において、ＣＤ８標的部分は、配列番号１２、配列番号１４、および配列番号１７を含む。様々な実施形態において、ＣＤ８標的部分は、配列番号１２、配列番号１４、および配列番号１８を含む。

様々な実施形態において、ＣＤ８標的部分は、配列番号１２、配列番号１５、および配列番号１６を含む。様々な実施形態において、ＣＤ８標的部分は、配列番号１２、配列番号１５、および配列番号１７を含む。様々な実施形態において、ＣＤ８標的部分は、配列番号１２、配列番号１５、および配列番号１８を含む。

様々な実施形態において、ＣＤ８標的部分は、配列番号１３、配列番号１４、および配列番号１６を含む。様々な実施形態において、ＣＤ８標的部分は、配列番号１３、配列番号１４、および配列番号１７を含む。様々な実施形態において、ＣＤ８標的部分は、配列番号１３、配列番号１４、および配列番号１８を含む。

様々な実施形態において、ＣＤ８標的部分は、配列番号１３、配列番号１５、および配列番号１６を含む。様々な実施形態において、ＣＤ８標的部分は、配列番号１３、配列番号１５、および配列番号１７を含む。様々な実施形態において、ＣＤ８標的部分は、配列番号１３、配列番号１５、および配列番号１８を含む。

様々な実施形態において、ＣＤ８標的部分は、以下の配列：
Ｒ３ＨＣＤ２７（配列番号１９）
ＱＶＱＬＱＥＳＧＧＧＳＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＤＤＹＡＭＳＷＶＲＱＶＰＧＫＧＬＥＷＶＳＴＩＮＷＮＧＧＳＡＥＹＡＥＰＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＶＹＬＱＭＮＳＬＫＬＥＤＴＡＶＹＹＣＡＫＤＡＤＬＶＷＹＮＬＳＴＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳＡＡＡＹＰＹＤＶＰＤＹＧＳ
または
Ｒ３ＨＣＤ１２９（配列番号２０）
ＱＶＱＬＱＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＤＤＹＡＭＳＷＶＲＱＶＰＧＫＧＬＥＷＶＳＴＩＮＷＮＧＧＳＡＥＹＡＥＰＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＶＹＬＱＭＮＳＬＫＬＥＤＴＡＶＹＹＣＡＫＤＡＤＬＶＷＹＮＬＲＴＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳＡＡＡＹＰＹＤＶＰＤＹＧＳ
または
Ｒ２ＨＣＤ２６（配列番号２１）
ＱＶＱＬＱＥＳＧＧＧＬＶＱＡＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＤＤＹＡＩＧＷＦＲＱＡＰＧＫＥＲＥＧＶＳＣＩＲＶＳＤＧＳＴＹＹＡＤＰＶＫＧＲＦＴＩＳＳＤＮＡＫＮＴＶＹＬＱＭＮＳＬＫＰＥＤＡＡＶＹＹＣＡＡＧＳＬＹＴＣＶＱＳＩＶＶＶＰＡＲＰＹＹＤＭＤＹＷＧＫＧＴＱＶＴＶＳＳＡＡＡＹＰＹＤＶＰＤＹＧＳ
から選択されるアミノ酸配列を含む。

様々な実施形態において、標的部分は、内容全体が参照により組み入れられる米国特許出願公開第２０１４／０２７１４６２号に記載されるアミノ酸配列を含む。様々な実施形態において、ＣＤ８標的部分は、内容全体が参照により組み入れられる米国特許出願公開第２０１４／０２７１４６２号の表０．１、表０．２、表０．３、および／または図１Ａ〜１２Ｉに記載されるアミノ酸配列を含む。様々な実施形態において、ＣＤ８標的部分は、以下に提供される通り、配列番号２２もしくは２３のＨＣＤＲ１であるＨＣＤＲ１、および／または配列番号２２もしくは２３のＨＣＤＲ１であるＨＣＤＲ２、および／または配列番号２２もしくは２３のＨＣＤＲ１であるＨＣＤＲ３、および／または配列番号２４のＬＣＤＲ１であるＬＣＤＲ１、および／または配列番号２４のＬＣＤＲ１であるＬＣＤＲ２、および／または配列番号２４のＬＣＤＲ１であるＬＣＤＲ３を含む。
配列番号２２：
Ｇｌｕ Ｖａｌ Ｇｌｎ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ｇｌｕ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ｇｌｎ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ｌｅｕ Ａｒｇ Ｌｅｕ Ｓｅｒ Ｃｙｓ Ａｌａ Ａｌａ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ｐｈｅ Ａｓｎ Ｉｌｅ Ｌｙｓ Ａｓｐ Ｔｈｒ Ｔｙｒ Ｉｌｅ Ｈｉｓ Ｔｒｐ Ｖａｌ Ａｒｇ Ｇｌｎ Ａｌａ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ｌｙｓ Ｇｌｙ Ｌｅｕ Ｇｌｕ Ｔｒｐ Ｖａｌ Ａｌａ Ａｒｇ Ｉｌｅ Ａｓｐ Ｐｒｏ Ａｌａ Ａｓｎ Ａｓｐ Ａｓｎ Ｔｈｒ Ｌｅｕ Ｔｙｒ Ａｌａ Ｓｅｒ Ｌｙｓ Ｐｈｅ Ｇｌｎ Ｇｌｙ Ａｒｇ Ａｌａ Ｔｈｒ Ｉｌｅ Ｓｅｒ Ａｌａ Ａｓｐ Ｔｈｒ Ｓｅｒ Ｌｙｓ Ａｓｎ Ｔｈｒ Ａｌａ Ｔｙｒ Ｌｅｕ Ｇｌｎ Ｍｅｔ Ａｓｎ Ｓｅｒ Ｌｅｕ Ａｒｇ Ａｌａ Ｇｌｕ Ａｓｐ Ｔｈｒ Ａｌａ Ｖａｌ Ｔｙｒ Ｔｙｒ Ｃｙｓ Ｇｌｙ Ａｒｇ Ｇｌｙ Ｔｙｒ Ｇｌｙ Ｔｙｒ Ｔｙｒ Ｖａｌ Ｐｈｅ Ａｓｐ Ｈｉｓ Ｔｒｐ Ｇｌｙ Ｇｌｎ Ｇｌｙ Ｔｈｒ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ｔｈｒ Ｖａｌ Ｓｅｒ Ｓｅｒ。
配列番号２３：
Ｇｌｎ Ｖａｌ Ｇｌｎ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ｇｌｎ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｇｌｕ Ｖａｌ Ｌｙｓ Ｌｙｓ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｔｈｒ Ｖａｌ Ｌｙｓ Ｉｌｅ Ｓｅｒ Ｃｙｓ Ｌｙｓ Ｖａｌ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ｐｈｅ Ａｓｎ Ｉｌｅ Ｌｙｓ Ａｓｐ Ｔｈｒ Ｔｙｒ Ｉｌｅ Ｈｉｓ Ｔｒｐ Ｖａｌ Ｇｌｎ Ｇｌｎ Ａｌａ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ｌｙｓ Ｇｌｙ Ｌｅｕ Ｇｌｕ Ｔｒｐ Ｍｅｔ Ｇｌｙ Ａｒｇ Ｉｌｅ Ａｓｐ Ｐｒｏ Ａｌａ Ａｓｎ Ａｓｐ Ａｓｎ Ｔｈｒ Ｌｅｕ Ｔｙｒ Ａｌａ Ｓｅｒ Ｌｙｓ Ｐｈｅ Ｇｌｎ Ｇｌｙ Ａｒｇ Ｖａｌ Ｔｈｒ Ｉｌｅ Ｔｈｒ Ａｌａ Ａｓｐ Ｔｈｒ Ｓｅｒ Ｔｈｒ Ａｓｐ Ｔｈｒ Ａｌａ Ｔｙｒ Ｍｅｔ Ｇｌｕ Ｌｅｕ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｌｅｕ Ａｒｇ Ｓｅｒ Ｇｌｕ Ａｓｐ Ｔｈｒ Ａｌａ Ｖａｌ Ｔｙｒ Ｔｙｒ Ｃｙｓ Ａｌａ Ａｒｇ Ｇｌｙ Ｔｙｒ Ｇｌｙ Ｔｙｒ Ｔｙｒ Ｖａｌ Ｐｈｅ Ａｓｐ Ｈｉｓ Ｔｒｐ Ｇｌｙ Ｇｌｎ Ｇｌｙ Ｔｈｒ Ｌｅｕ Ｖａｌ Ｔｈｒ Ｖａｌ Ｓｅｒ Ｓｅｒ。
配列番号２４：
Ａｓｐ Ｖａｌ Ｇｌｎ Ｉｌｅ Ｔｈｒ Ｇｌｎ Ｓｅｒ Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｌｅｕ Ｓｅｒ Ａｌａ Ｓｅｒ Ｖａｌ Ｇｌｙ Ａｓｐ Ａｒｇ Ｖａｌ Ｔｈｒ Ｉｌｅ Ｔｈｒ Ｃｙｓ Ａｒｇ Ｔｈｒ Ｓｅｒ Ａｒｇ Ｓｅｒ Ｉｌｅ Ｓｅｒ Ｇｌｎ Ｔｙｒ Ｌｅｕ Ａｌａ Ｔｒｐ Ｔｙｒ Ｇｌｎ Ｇｌｎ Ｌｙｓ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ｌｙｓ Ｖａｌ Ｐｒｏ Ｌｙｓ Ｌｅｕ Ｌｅｕ Ｉｌｅ Ｔｙｒ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ｔｈｒ Ｌｅｕ Ｇｌｎ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ｖａｌ Ｐｒｏ Ｓｅｒ Ａｒｇ Ｐｈｅ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ｇｌｙ Ｔｈｒ Ａｓｐ Ｐｈｅ Ｔｈｒ Ｌｅｕ Ｔｈｒ Ｉｌｅ Ｓｅｒ Ｓｅｒ Ｌｅｕ Ｇｌｎ Ｐｒｏ Ｇｌｕ Ａｓｐ Ｖａｌ Ａｌａ Ｔｈｒ Ｔｙｒ Ｔｙｒ Ｃｙｓ Ｇｌｎ Ｇｌｎ Ｈｉｓ Ａｓｎ Ｇｌｕ Ａｓｎ Ｐｒｏ Ｌｅｕ Ｔｈｒ Ｐｈｅ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｔｈｒ Ｌｙｓ Ｖａｌ Ｇｌｕ Ｉｌｅ Ｌｙｓ。

様々な実施形態において、本発明は、本明細書に記載される通り、ＣＤ８に対する標的部分の任意の天然または合成の類似体、突然変異体、バリアント、対立遺伝子、相同体および相同分子種（本明細書では集合的に「類似体」と称する）の使用を企図する。様々な実施形態において、ＣＤ８を標的とする標的部分のアミノ酸配列は、アミノ酸類似体、アミノ酸誘導体、または他の非古典的アミノ酸をさらに含む。

様々な実施形態において、本発明の標的部分は、本明細書に開示される配列の任意の１つと少なくとも約６０％、少なくとも約６１％、少なくとも約６２％、少なくとも約６３％、少なくとも約６４％、少なくとも約６５％、少なくとも約６６％、少なくとも約６７％、少なくとも約６８％、少なくとも約６９％、少なくとも約７０％、少なくとも約７１％、少なくとも約７２％、少なくとも約７３％、少なくとも約７４％、少なくとも約７５％、少なくとも約７６％、少なくとも約７７％、少なくとも約７８％、少なくとも約７９％、少なくとも約８０％、少なくとも約８１％、少なくとも約８２％、少なくとも約８３％、少なくとも約８４％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または１００％同一である（例えば、本明細書に開示される配列の任意の１つと約６０％、または約６１％、または約６２％、または約６３％、または約６４％、または約６５％、または約６６％、または約６７％、または約６８％、または約６９％、または約７０％、または約７１％、または約７２％、または約７３％、または約７４％、または約７５％、または約７６％、または約７７％、または約７８％、または約７９％、または約８０％、または約８１％、または約８２％、または約８３％、または約８４％、または約８５％、または約８６％、または約８７％、または約８８％、または約８９％、または約９０％、または約９１％、または約９２％、または約９３％、または約９４％、または約９５％、または約９６％、または約９７％、または約９８％、約９９％、または約１００％の配列同一性）、ＣＤ８を標的とするアミノ酸配列を含み得る。

様々な実施形態において、本発明の標的部分は、ＣＤ８に特異的に結合する本発明のＣＤ８標的部分の能力を実質的に低減しない１つまたは複数の突然変異を含む。様々な実施形態において、突然変異は、ＣＤ８を機能的にモジュレートせずに、ＣＤ８に特異的に結合する標的部分の能力を実質的に低減しない。

様々な実施形態において、ヒトＣＤ８ αおよび／またはβ鎖の完全長および／または成熟形態および／またはアイソフォームおよび／またはスプライスバリアントおよび／またはフラグメントおよび／または任意の他の天然由来のもしくは合成の類似体、バリアントもしくは突然変異体（単量体、二量体、ヘテロ二量体、多量体および／または関連の形態を含む）に対するＣＤ８標的部分の結合親和性は、平衡解離定数（Ｋ_Ｄ）により記載され得る。様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、約１ｕＭ、約９００ｎＭ、約８００ｎＭ、約７００ｎＭ、約６００ｎＭ、約５００ｎＭ、約４００ｎＭ、約３００ｎＭ、約２００ｎＭ、約１００ｎＭ、約９０ｎＭ、約８０ｎＭ、約７０ｎＭ、約６０ｎＭ、約５０ｎＭ、約４０ｎＭ、約３０ｎＭ、約２０ｎＭ、約１０ｎＭ、または約５ｎＭ、または約１ｎＭ未満のＫ_Ｄで、ヒトＣＤ８ αおよび／またはβ鎖の完全長および／または成熟形態および／またはアイソフォームおよび／またはスプライスバリアントおよび／またはフラグメントおよび／または任意の他の天然由来のもしくは合成の類似体、バリアントもしくは突然変異体（単量体、二量体、ヘテロ二量体、多量体および／または関連の形態を含む）に結合する標的部分を含む。

様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、目的の抗原、即ちＣＤ８を結合するが機能的にモジュレートしない標的部分を含む。例えば、様々な実施形態において、標的部分は、抗原を単に標的にするが、抗原を実質的に機能的にモジュレートせず、例えばそれは、抗原が有する生物学的効果を実質的に阻害、低減または中和しない。様々な実施形態において、標的部分の物質は、その生物活性に重要である抗原部位（例えば、抗原活性部位）から物理的に離れたエピトープを結合する。

結合をそのように非機能的にモジュレートすること（例えば、非中和）は、本発明のキメラタンパク質がエフェクター抗原を介して必要な部位に活性免疫細胞を直接的または間接的に動員するために用いられる方法を含む、本発明の様々な実施形態で用途を見出す。例えば、様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、腫瘍を低減または排除する方法において、腫瘍細胞にＣＤ８を介して細胞障害性Ｔ細胞を直接的または間接的に動員するために用いられ得る（例えば、キメラタンパク質は、抗ＣＤ８抗原認識ドメインを有する標的部分と、腫瘍抗原または受容体に対する認識ドメイン（例えば、抗原認識ドメイン）を有する標的部分と、を含み得る）。そのような実施形態において、ＣＤ８を発現する細胞障害性Ｔ細胞を直接的または間接的に動員するが、ＣＤ８活性を中和しないことが、望ましい。これらの実施形態において、ＣＤ８シグナル伝達は、腫瘍の低減または排除効果の重要な部分である。

非限定的例として、様々な実施形態において、本発明は、Ｔ細胞上で発現されるチェックポインマーカー、例えばＰＤ−１、ＣＤ２８、ＣＴＬＡ４、ＩＣＯＳ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ３、ＣＤ１３７、ＯＸ４０、ＣＤ２７、ＣＤ４０Ｌ、ＴＩＭ３、およびＡ２ａＲの１つまたは複数に対する標的部分を有する。

例えば幾つかの実施形態において、標的部分は、Ｂ細胞に関連する標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合する抗原認識ドメインを含む。幾つかの実施形態において、認識ドメインは、Ｂ細胞を、例えば、幾つかの実施形態において、治療部位（例えば、１つまたは複数の疾患細胞、または治療効果のためにモジュレートされる細胞を有する位置）に、直接的または間接的に動員する。例示的な目的のＢ細胞抗原としては、例えばＣＤ１０、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２１、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＣＤ２４、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ３９、ＣＤ４０、ＣＤ７０、ＣＤ７２、ＣＤ７３、ＣＤ７４、ＣＤｗ７５、ＣＤｗ７６、ＣＤ７７、ＣＤ７８、ＣＤ７９ａ／ｂ、ＣＤ８０、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ８３、ＣＤ８４、ＣＤ８５、ＣＤ８６、ＣＤ８９、ＣＤ９８、ＣＤ１２６、ＣＤ１２７、ＣＤｗ１３０、ＣＤ１３８、ＣＤｗ１５０、およびＢ細胞突然変異抗原（ＢＣＭＡ）が挙げられる。様々な実施形態において、キメラタンパク質の標的部分は、これらの例示的なＢ細胞抗原の１つまたは複数を結合する。

さらなる例として、幾つかの実施形態において、標的部分は、ナチュラルキラー細胞に関連する標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合する抗原認識ドメインを含む。幾つかの実施形態において、認識ドメインは、ナチュラルキラー細胞を、例えば、幾つかの実施形態において、治療部位（例えば、１つまたは複数の疾患細胞、または治療効果のためにモジュレートされる細胞を有する位置）に、直接的または間接的に動員する。例示的な目的のナチュラルキラー細胞抗原としては、例えばＴＩＧＩＴ、２Ｂ４／ＳＬＡＭＦ４、ＫＩＲ２ＤＳ４、ＣＤ１５５／ＰＶＲ、ＫＩＲ３ＤＬ１、ＣＤ９４、ＬＭＩＲ１／ＣＤ３００Ａ、ＣＤ６９、ＬＭＩＲ２／ＣＤ３００ｃ、ＣＲＡＣＣ／ＳＬＡＭＦ７、ＬＭＩＲ３／ＣＤ３００ＬＦ、Ｋｉｒ１アルファ、ＤＮＡＭ−１、ＬＭＩＲ５／ＣＤ３００ＬＢ、Ｆｃ−イプシロン ＲＩＩ、ＬＭＩＲ６／ＣＤ３００ＬＥ、Ｆｃ−γ Ｒｌ／ＣＤ６４、ＭＩＣＡ、Ｆｃ−γ ＲＩＩＢ／ＣＤ３２ｂ、ＭＩＣＢ、Ｆｃ−γ ＲＩＩＣ／ＣＤ３２ｃ、ＭＵＬＴ−１、Ｆｃ−γ ＲＩＩＡ／ＣＤ３２ａ、ネクチン−２／ＣＤ１１２、ＦＣ−γ ＲＩＩＩ／ＣＤ１６、ＮＫＧ２Ａ、ＦｃＲＨ１／ＩＲＴＡ５、ＮＫＧ２Ｃ、ＦｃＲＨ２／ＩＲＴＡ４、ＮＫＧ２Ｄ、ＦｃＲＨ４／ＩＲＴＡ１、ＮＫｐ３０、ＦｃＲＨ５／ＩＲＴＡ２、ＮＫｐ４４、Ｆｃ受容体様３／ＣＤ１６−２、ＮＫｐ４６／ＮＣＲ１、ＮＫｐ８０／ＫＬＲＦ１、ＮＴＢ−Ａ／ＳＬＡＭＦ６、Ｒａｅ−１、Ｒａｅ−１ α、Ｒａｅ−１ β、Ｒａｅ−１ デルタ、Ｈ６０、Ｒａｅ−１ イプシロン、ＩＬＴ２／ＣＤ８５ｊ、Ｒａｅ−１ γ、ＩＬＴ３／ＣＤ８５ｋ、ＴＲＥＭ−１、ＩＬＴ４／ＣＤ８５ｄ、ＴＲＥＭ−２、ＩＬＴ５／ＣＤ８５ａ、ＴＲＥＭ−３、ＫＩＲ／ＣＤ１５８、ＴＲＥＭＬ１／ＴＬＴ−１、ＫＩＲ２ＤＬ１、ＵＬＢＰ−１、ＫＩＲ２ＤＬ３、ＵＬＢＰ−２、ＫＩＲ２ＤＬ４／ＣＤ１５８ｄおよびＵＬＢＰ−３が挙げられる。様々な実施形態において、キメラタンパク質の標的部分は、これらの例示的なＮＫ細胞抗原の１つまたは複数を結合する。

同じく幾つかの実施形態において、標的部分は、マクロファージ／単球に関連する標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合する抗原認識ドメインを含む。幾つかの実施形態において、認識ドメインは、マクロファージ／単球を、例えば、幾つかの実施形態において治療部位（例えば、１つまたは複数の疾患細胞、または治療効果のためにモジュレートされる細胞を有する位置）に、直接的または間接的に動員する。例示的な目的のマクロファージ／単球抗原としては、例えばＳＩＲＰ１ａ、Ｂ７−１／ＣＤ８０、ＩＬＴ４／ＣＤ８５ｄ、Ｂ７−Ｈ１、ＩＬＴ５／ＣＤ８５ａ、共通β鎖、インテグリンα ４／ＣＤ４９ｄ、ＢＬＡＭＥ／ＳＬＡＭＦ８、インテグリンα Ｘ／ＣＤ１１ｃ、ＣＣＬ６／Ｃ１０、インテグリンβ ２／ＣＤ１８、ＣＤ１５５／ＰＶＲ、インテグリンβ ３／ＣＤ６１、ＣＤ３１／ＰＥＣＡＭ−１、ラテキシン（Ｌａｔｅｘｉｎ）、ＣＤ３６／ＳＲ−Ｂ３、ロイコトリエン Ｂ４ Ｒ１、ＣＤ４０／ＴＮＦＲＳＦ５、ＬＩＭＰＩＩＩＳＲ−Ｂ２、ＣＤ４３、ＬＭＩＲ１／ＣＤ３００Ａ、ＣＤ４５、ＬＭＩＲ２／ＣＤ３００ｃ、ＣＤ６８、ＬＭＩＲ３／ＣＤ３００ＬＦ、ＣＤ８４／ＳＬＡＭＦ５、ＬＭＩＲ５／ＣＤ３００ＬＢ、ＣＤ９７、ＬＭＩＲ６／ＣＤ３００ＬＥ、ＣＤ１６３、ＬＲＰ−１、ＣＤ２Ｆ−１０／ＳＬＡＭＦ９、ＭＡＲＣＯ、ＣＲＡＣＣ／ＳＬＡＭＦ７、ＭＤ−１、ＥＣＦ−Ｌ、ＭＤ−２、ＥＭＭＰＲＩＮ／ＣＤ１４７、ＭＧＬ２、エンドグリン／ＣＤ１０５、オステオアクチビン／ＧＰＮＭＢ、Ｆｃ−γ ＲＩ／ＣＤ６４、オステオポンチン、Ｆｃ−γ ＲＩＩＢ／ＣＤ３２ｂ、ＰＤ−Ｌ２、Ｆｃ−γ ＲＩＩＣ／ＣＤ３２ｃ、シグレック−３／ＣＤ３３、Ｆｃ−γ ＲＩＩＡ／ＣＤ３２ａ、ＳＩＧＮＲ１／ＣＤ２０９、Ｆｃ−γ ＲＩＩＩ／ＣＤ１６、ＳＬＡＭ、ＧＭ−ＣＳＦ Ｒα、ＴＣＣＲ／ＷＳＸ−１、ＩＣＡＭ−２／ＣＤ１０２、ＴＬＲ３、ＩＦＮ−γ ＲＩ、ＴＬＲ４、ＩＦＮ−ガンマ Ｒ２、ＴＲＥＭ−ｌ、ＩＬ−ｌ ＲＩＩ、ＴＲＥＭ−２、ＩＬＴ２／ＣＤ８５ｊ、ＴＲＥＭ−３、ＩＬＴ３／ＣＤ８５ｋ、ＴＲＥＭＬ１／ＴＬＴ−１、２Ｂ４／ＳＬＡＭＦ ４、ＩＬ−１０ Ｒα、ＡＬＣＡＭ、ＩＬ−１０ Ｒβ、アミノペプチダーゼＮ／ＡＮＰＥＰ、ＩＬＴ２／ＣＤ８５ｊ、共通β鎖、ＩＬＴ３／ＣＤ８５ｋ、Ｃｌｑ Ｒ１／ＣＤ９３、ＩＬＴ４／ＣＤ８５ｄ、ＣＣＲ１、ＩＬＴ５／ＣＤ８５ａ、ＣＣＲ２、インテグリンα ４／ＣＤ４９ｄ、ＣＣＲ５、インテグリンα Ｍ／ＣＤｌｌ ｂ、ＣＣＲ８、インテグリンα Ｘ／ＣＤｌｌｃ、ＣＤ１５５／ＰＶＲ、インテグリンβ ２／ＣＤ１８、ＣＤ１４、インテグリンβ ３／ＣＤ６１、ＣＤ３６／ＳＲ−Ｂ３、ＬＡＩＲ１、ＣＤ４３、ＬＡＩＲ２、ＣＤ４５、ロイコトリエン Ｂ４−Ｒ１、ＣＤ６８、ＬＩＭＰＩＩＩＳＲ−Ｂ２、ＣＤ８４／ＳＬＡＭＦ５、ＬＭＩＲ１／ＣＤ３００Ａ、ＣＤ９７、ＬＭＩＲ２／ＣＤ３００ｃ、ＣＤ１６３、ＬＭＩＲ３／ＣＤ３００ＬＦ、凝固因子ＩＩＩ／組織因子、ＬＭＩＲ５／ＣＤ３００ＬＢ、ＣＸ３ＣＲ１、ＣＸ３ＣＬ１、ＬＭＩＲ６／ＣＤ３００ＬＥ、ＣＸＣＲ４、ＬＲＰ−１、ＣＸＣＲ６、Ｍ−ＣＳＦ Ｒ、ＤＥＰ−１／ＣＤ１４８、ＭＤ−１、ＤＮＡＭ−１、ＭＤ−２、ＥＭＭＰＲＩＮ／ＣＤ１４７、ＭＭＲ、エンドグリン／ＣＤ１０５、ＮＣＡＭ−Ｌ１、Ｆｃ−γ ＲＩ／ＣＤ６４、ＰＳＧＬ−１、Ｆｃ−γ ＲＩＩＩＩＣＤ１６、ＲＰ１０５、Ｇ−ＣＳＦ Ｒ、Ｌ−セレクチン、ＧＭ−ＣＳＦ Ｒα、シグレック−３／ＣＤ３３、ＨＶＥＭ／ＴＮＦＲＳＦ１４、ＳＬＡＭ、ＩＣＡＭ−１／ＣＤ５４、ＴＣＣＲ／ＷＳＸ−１、ＩＣＡＭ−２／ＣＤ１０２、ＴＲＥＭ−ｌ、ＩＬ−６ Ｒ、ＴＲＥＭ−２、ＣＸＣＲｌ／ＩＬ−８ ＲＡ、ＴＲＥＭ−３およびＴＲＥＭＬ１／ＴＬＴ−１が挙げられる。様々な実施形態において、キメラタンパク質の標的部分は、これらの例示的なマクロファージ／単球の１つまたは複数を結合する。

同じく幾つかの実施形態において、標的部分は、樹状細胞に関連する標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合する抗原認識ドメインを含む。幾つかの実施形態において、認識ドメインは、樹状細胞を、例えば、幾つかの実施形態において、治療部位（例えば、１つまたは複数の疾患細胞、または治療効果のためにモジュレートされる細胞を有する位置）に、直接的または間接的に動員する。例示的な目的の樹状細胞抗原としては、例えばＣＬＥＣ９Ａ、ＸＣＲ１、ＲＡＮＫ、ＣＤ３６／ＳＲＢ３、ＬＯＸ−１／ＳＲ−Ｅ１、ＣＤ６８、ＭＡＲＣＯ、ＣＤ１６３、ＳＲ−Ａ１／ＭＳＲ、ＣＤ５Ｌ、ＳＲＥＣ−１、ＣＬ−Ｐｌ／ＣＯＬＥＣ１２、ＳＲＥＣ−ＩＩ、ＬＩＭＰＩＩＩＳＲＢ２、ＲＰ１０５、ＴＬＲ４、ＴＬＲ１、ＴＬＲ５、ＴＬＲ２、ＴＬＲ６、ＴＬＲ３、ＴＬＲ９、４−ＩＢＢリガンド／ＴＮＦＳＦ９、ＩＬ−１２／ＩＬ−２３ ｐ４０、４−アミノ−１，８−ナフタルイミド、ＩＬＴ２／ＣＤ８５ｊ、ＣＣＬ２１／６Ｃｋｉｎｅ、ＩＬＴ３／ＣＤ８５ｋ、８−オキソ−ｄＧ、ＩＬＴ４／ＣＤ８５ｄ、８Ｄ６Ａ、ＩＬＴ５／ＣＤ８５ａ、Ａ２Ｂ５、インテグリンα ４／ＣＤ４９ｄ、Ａａｇ、インテグリンβ ２／ＣＤ１８、ＡＭＩＣＡ、ランゲリン、Ｂ７−２／ＣＤ８６、ロイコトリエン Ｂ４ Ｒｌ、Ｂ７−Ｈ３、ＬＭＩＲｌ／ＣＤ３００Ａ、ＢＬＡＭＥ／ＳＬＡＭＦ８、ＬＭＩＲ２／ＣＤ３００ｃ、Ｃｌｑ Ｒ１／ＣＤ９３、ＬＭＩＲ３／ＣＤ３００ＬＦ、ＣＣＲ６、ＬＭＩＲ５／ＣＤ３００ＬＢ ＣＣＲ７、ＬＭＩＲ６／ＣＤ３００ＬＥ、ＣＤ４０／ＴＮＦＲＳＦ５、ＭＡＧ／シグレック−４−ａ、ＣＤ４３、ＭＣＡＭ、ＣＤ４５、ＭＤ−１、ＣＤ６８、ＭＤ−２、ＣＤ８３、ＭＤＬ−１／ＣＬＥＣ５Ａ、ＣＤ８４／ＳＬＡＭＦ５、ＭＭＲ、ＣＤ９７、ＮＣＡＭＬｌ、ＣＤ２Ｆ−１０／ＳＬＡＭＦ９、オステオアクチビン ＧＰＮＭＢ、Ｃｈｅｒｎ２３、ＰＤ−Ｌ２、ＣＬＥＣ−１、ＲＰ１０５、ＣＬＥＣ−２、ＣＬＥＣ−８、シグレック−２／ＣＤ２２、ＣＲＡＣＣ／ＳＬＡＭＦ７、シグレック−３／ＣＤ３３、ＤＣ−ＳＩＧＮ、シグレック−５、ＤＣ−ＳＩＧＮＲ／ＣＤ２９９、シグレック−６、ＤＣＡＲ、シグレック−７、ＤＣＩＲ／ＣＬＥＣ４Ａ、シグレック−９、ＤＥＣ−２０５、シグレック−１０、デクチン−１／ＣＬＥＣ７Ａ、シグレック−Ｆ、デクチン−２／ＣＬＥＣ６Ａ、ＳＩＧＮＲ１／ＣＤ２０９、ＤＥＰ−１／ＣＤ１４８、ＳＩＧＮＲ４、ＤＬＥＣ、ＳＬＡＭ、ＥＭＭＰＲＩＮ／ＣＤ１４７、ＴＣＣＲ／ＷＳＸ−１、Ｆｃ−γ Ｒ１／ＣＤ６４、ＴＬＲ３、Ｆｃ−γ ＲＩＩＢ／ＣＤ３２ｂ、ＴＲＥＭ−１、Ｆｃ−γ ＲＩＩＣ／ＣＤ３２ｃ、ＴＲＥＭ−２、Ｆｃ−γ ＲＩＩＡ／ＣＤ３２ａ、ＴＲＥＭ−３、Ｆｃ−γ ＲＩＩＩ／ＣＤ１６、ＴＲＥＭＬ１／ＴＬＴ−１、ＩＣＡＭ−２／ＣＤ１０２、ＤＥＣ２０５、およびバニロイド Ｒ１が挙げられる。様々な実施形態において、キメラタンパク質の標的部分は、これらの例示的なＤＣ抗原の１つまたは複数を結合する。

模範的な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、Ｃｌｅｃ９Ａに対する標的部分を含む。様々な実施形態において、Ｃｌｅｃ９Ａに対する標的部分は、Ｃｌｅｃ９Ａに特異的に結合可能なタンパク質系物質である。様々な実施形態において、標的部分は、Ｃｌｅｃ９Ａの中和なしにＣｌｅｃ９Ａに特異的に結合可能なタンパク質系物質である。Ｃｌｅｃ９Ａは、死細胞からの物質の取り込みおよび処理に特化された樹状細胞のサブセット（即ち、ＢＤＣＡ_３＋樹状細胞）の表面で発現されるＶ群のＣ型レクチン様受容体（ＣＴＬＲ）である。Ｃｌｅｃ９Ａは、細胞膜が損傷されると露出される核化および非核化細胞内の保存された成分を認識する。ＣＬＥＣ９Ａは、細胞表面でグリコシル化二量体として発現され、ファゴサイトーシスではなくエンドサイトーシスを媒介し得る。ＣＬＥＣ９Ａは、Ｓｙｋキナーゼを動員し炎症促進性サイトカインの産生を誘導できる細胞質免疫受容体活性化チロシンモチーフを有する（Ｈｕｙｓａｍｅｎ ｅｔ ａｌ．（２００８），ＪＢＣ，２８３：１６６９３−７０１参照）。

様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、Ｃｌｅｃ９Ａ上に存在するエピトープを認識する抗原認識ドメインを有する標的部分を含む。一実施形態において、抗原認識ドメインは、Ｃｌｅｃ９Ａ上に存在する１つまたは複数の線形エピトープを認識する。本明細書で用いられる線形エピトープは、Ｃｌｅｃ９Ａ上に存在するアミノ酸の任意の連続配列を指す。別の実施形態において、抗原認識ドメインは、Ｃｌｅｃ９Ａ上の１つまたは複数の立体構造エピトープを認識する。本明細書で用いられる立体構造エピトープは、抗原認識ドメインにより認識され得る特徴および／または形状および／または三次構造を有する三次元表面を形成するアミノ酸の１つまたは複数の区分（それは不連続であり得る）を指す。

様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、ヒトＣｌｅｃ９Ａの完全長および／または成熟形態および／またはアイソフォームおよび／またはスプライスバリアントおよび／またはフラグメントおよび／または任意の他の天然由来のもしくは合成の類似体、バリアントもしくは突然変異体に結合し得る標的部分を含む。様々な実施形態において、標的部分は、単量体、二量体、ヘテロ二量体、多量体および関連の形態を含む、ヒトＣｌｅｃ９Ａの任意の形態に結合し得る。一実施形態において、標的部分は、Ｃｌｅｃ９Ａの単量体形態に結合する。別の実施形態において、標的部分は、Ｃｌｅｃ９Ａの二量体形態に結合する。さらなる実施形態において、標的部分は、単量体または二量体のいずれかであり得る、Ｃｌｅｃ９Ａのグリコシル化形態に結合する。

一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、ヒトＣｌｅｃ９Ａ上に存在する１つまたは複数のエピトープを認識する抗原認識ドメインを有する標的部分を含む。一実施形態において、ヒトＣｌｅｃ９Ａは、
ＭＨＥＥＥＩＹＴＳＬＱＷＤＳＰＡＰＤＴＹＱＫＣＬＳＳＮＫＣＳＧＡＣＣＬＶＭＶＩＳＣＶＦＣＭＧＬＬＴＡＳＩＦＬＧＶＫＬＬＱＶＳＴＩＡＭＱＱＱＥＫＬＩＱＱＥＲＡＬＬＮＦＴＥＷＫＲＳＣＡＬＱＭＫＹＣＱＡＦＭＱＮＳＬＳＳＡＨＮＳＳＰＣＰＮＮＷＩＱＮＲＥＳＣＹＹＶＳＥＩＷＳＩＷＨＴＳＱＥＮＣＬＫＥＧＳＴＬＬＱＩＥＳＫＥＥＭＤＦＩＴＧＳＬＲＫＩＫＧＳＹＤＹＷＶＧＬＳＱＤＧＨＳＧＲＷＬＷＱＤＧＳＳＰＳＰＧＬＬＰＡＥＲＳＱＳＡＮＱＶＣＧＹＶＫＳＮＳＬＬＳＳＮＣＳＴＷＫＹＦＩＣＥＫＹＡＬＲＳＳＶ（配列番号２５）
のアミノ酸配列を含む。

様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、特異的結合が可能な標的部分を含む。様々な実施形態において、キメラタンパク質は、抗体またはその誘導体などの抗原認識ドメインを有する標的部分を含む。一実施形態において、キメラタンパク質は、抗体である標的部分を含む。様々な実施形態において、抗体は、本明細書の他の箇所に記載される通り、２つの重鎖および２つの軽鎖を含む完全長の多量体タンパク質である。幾つかの実施形態において、抗体は、キメラ抗体である。幾つかの実施形態において、抗体は、ヒト化抗体である。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、他の箇所に記載される通り、ＶＨＨ（商標：ＮＡＮＯＢＯＤＩＥＳとして市販）などの、単一ドメイン抗体である標的部分を含む。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、ＶＨＨを含む。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、４つの「フレームワーク領域」またはＦＲと、３つの「相補性決定領域」またはＣＤＲと、を有する単一アミノ酸鎖を含むＶＨＨである標的部分を含む。本明細書で用いられる「フレームワーク領域」または「ＦＲ」は、ＣＤＲの間に位置する可変ドメインの中の一領域を指す。本明細書で用いられる「相補性決定領域」または「ＣＤＲ」は、抗原性標的に特異的に結合可能なアミノ酸配列を含むＶＨＨ中の可変領域を指す。

様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、少なくとも１つのＣＤＲ１、ＣＤＲ２、および／またはＣＤＲ３配列を含む可変ドメインを有するＶＨＨを含む。

幾つかの実施形態において、ＣＤＲ１配列は、
ＧＳＩＳＳＩＮＶＭＧ（配列番号２６）；
ＧＳＦＳＳＩＮＶＭＧ（配列番号２７）；
ＧＳＩＳＳＩＮＩＭＧ（配列番号２８）；
ＧＳＩＳＳＩＮＩＭＧ（配列番号２９）；
ＶＳＩＦＳＩＮＡＭＧ（配列番号３０）；
ＧＳＩＦＳＬＮＡＭＧ（配列番号３１）；
ＧＲＴＩＳＮＹＤＭＡ（配列番号３２）；
ＧＲＴＦＴＴＳＬＭＱ（配列番号３３）；
ＥＲＮＬＲＩＹＤＭＡ（配列番号３４）；
ＥＲＮＬＲＳＹＤＭＡ（配列番号３５）；
ＧＬＴＦＳＮＹＨＭＧ（配列番号３６）；
ＧＬＴＦＳＳＹＨＭＧ（配列番号３７）；
ＧＬＴＦＳＲＹＨＭＧ（配列番号３８）；
ＧＬＴＬＳＳＹＹＩＡ（配列番号３９）；
ＧＬＴＦＳＳＹＹＴＧ（配列番号４０）；
ＧＬＴＬＳＳＹＨＭＧ（配列番号４１）；
ＧＲＴＳＳＰＹＶＴＧ（配列番号４２）；
ＧＦＴＦＳＧＹＶＭＳ（配列番号４３）；
ＧＦＴＦＳＧＹＶＭＴ（配列番号４４）；または
ＧＦＴＦＳＧＹＬＭＳ（配列番号４５）
から選択される。

幾つかの実施形態において、ＣＤＲ２配列は、
ＲＩＴＮＬＧＬＰＮＹＡＤＷＬＫＤ（配列番号４６）；
ＲＩＴＮＬＧＬＰＮＹＡＤＳＶＴＧ（配列番号４７）；
ＲＩＴＮＩＧＬＰＮＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号４８）；
ＲＩＴＮＬＧＬＰＮＹＡＤＳＶＥＧ（配列番号４９）；
ＡＩＴＳＧＧＲＶＶＹＳＤＳＶＫＧ（配列番号５０）；
ＡＩＴＳＧＧＲＴＡＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号５１）；
ＨＩＴＳＤＧＲＩＶＹＡＤＰＶＫＧ（配列番号５２）；
ＲＩＳＧＳＧＤＲＴＤＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号５３）；
ＳＩＴＷＳＴＧＮＴＨＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号５４）；
ＶＩＳＳＳＧＤＳＴＨＹＳＤＦＶＫＧ（配列番号５５）；
ＶＩＴＳＳＧＤＳＴＨＹＳＤＦＶＫＧ（配列番号５６）；
ＱＩＴＷＳＤＡＳＩＹＹＡＧＳＶＫＧ（配列番号５７）；
ＱＩＴＷＳＤＴＳＩＹＹＡＧＳＶＫＧ（配列番号５８）；
ＱＩＴＷＳＤＧＴＴＹＹＰＧＳＶＫＧ（配列番号５９）；
ＱＩＲＷＳＤＤＳＴＹＹＰＧＳＶＫＧ（配列番号６０）；
ＱＩＳＷＳＤＤＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号６１）；
ＴＶＳＷＧＧＶＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号６２）；
ＳＩＧＳＧＧＧＹＰＳＹＴＤＳＶＥＧ（配列番号６３）；
ＳＩＧＳＧＧＧＹＰＳＹＴＧＳＶＥＧ（配列番号６４）；
ＨＩＧＳＧＧＧＹＰＳＹＴＤＳＶＱＧ（配列番号６５）；
ＨＩＧＳＧＧＧＨＡＴＹＴＤＳＶＥＧ（配列番号６６）；または
ＴＩＧＳＧＧＧＩＴＳＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号６７）
から選択される。

幾つかの実施形態において、ＣＤＲ３配列は、
ＶＡＬＳＡＥＹ（配列番号６８）；
ＶＡＬＫＡＥＹ（配列番号６９）；
ＶＧＬＫＡＥＹ（配列番号７０）；
ＫＴＫＳＡＶＬＦＧＧＭＤＹ（配列番号７１）；
ＹＩＲＧＥＤＹ（配列番号７２）；
ＫＨＹＡＳＮＹ（配列番号７３）；
ＱＤＦＧＳＰＳＦ（配列番号７４）；
ＱＤＦＲＳＰＤＦ（配列番号７５）；
ＱＩＦＧＳＰＮＦ（配列番号７６）；
ＬＡＩＨＧＤＹ（配列番号７７）；
ＮＱＩＲＱＷＰ（配列番号７８）；
ＮＳＩＲＱＷＰ（配列番号７９）；
ＮＡＩＲＱＷＰ（配列番号８０）；
ＲＫＶＧＧＰＤＹ（配列番号８１）；
ＮＴＦＧＮＶＹ（配列番号８２）；
ＬＧＲ；または
ＶＩＫ
から選択される。

幾つかの実施形態において、Ｃｌｅｃ９Ａ標的部分は、配列番号２６、配列番号４６、および配列番号６８を含む。

幾つかの実施形態において、Ｃｌｅｃ９Ａ標的部分は、配列番号２７、配列番号４７、および配列番号６９を含む。

幾つかの実施形態において、Ｃｌｅｃ９Ａ標的部分は、配列番号２８、配列番号４８、および配列番号６９を含む。

幾つかの実施形態において、Ｃｌｅｃ９Ａ標的部分は、配列番号２６、配列番号４９、および配列番号７０を含む。

幾つかの実施形態において、Ｃｌｅｃ９Ａ標的部分は、配列番号２９、配列番号５０、および配列番号７１を含む。

幾つかの実施形態において、Ｃｌｅｃ９Ａ標的部分は、配列番号３０、配列番号５１、および配列番号７２を含む。

幾つかの実施形態において、Ｃｌｅｃ９Ａ標的部分は、配列番号３１、配列番号５２、および配列番号７３を含む。

幾つかの実施形態において、Ｃｌｅｃ９Ａ標的部分は、配列番号３２、配列番号５３、および配列番号７４を含む。

幾つかの実施形態において、Ｃｌｅｃ９Ａ標的部分は、配列番号３２、配列番号５３、および配列番号７５を含む。

幾つかの実施形態において、Ｃｌｅｃ９Ａ標的部分は、配列番号３２、配列番号５３、および配列番号７６を含む。

幾つかの実施形態において、Ｃｌｅｃ９Ａ標的部分は、配列番号３３、配列番号５４、および配列番号７７を含む。

幾つかの実施形態において、Ｃｌｅｃ９Ａ標的部分は、配列番号３４、配列番号５５、および配列番号７８を含む。

幾つかの実施形態において、Ｃｌｅｃ９Ａ標的部分は、配列番号３４、配列番号５５、および配列番号７９を含む。

幾つかの実施形態において、Ｃｌｅｃ９Ａ標的部分は、配列番号３５、配列番号５６、および配列番号８０を含む。

幾つかの実施形態において、Ｃｌｅｃ９Ａ標的部分は、配列番号３６、配列番号５７、および配列番号８１を含む。

幾つかの実施形態において、Ｃｌｅｃ９Ａ標的部分は、配列番号３７、配列番号５８、および配列番号８１を含む。

幾つかの実施形態において、Ｃｌｅｃ９Ａ標的部分は、配列番号３８、配列番号５９、および配列番号８１を含む。

幾つかの実施形態において、Ｃｌｅｃ９Ａ標的部分は、配列番号３９、配列番号６０、および配列番号８１を含む。

幾つかの実施形態において、Ｃｌｅｃ９Ａ標的部分は、配列番号４０、配列番号６１、および配列番号８１を含む。

幾つかの実施形態において、Ｃｌｅｃ９Ａ標的部分は、配列番号４１、配列番号６１、および配列番号８１を含む。

幾つかの実施形態において、Ｃｌｅｃ９Ａ標的部分は、配列番号４２、配列番号６２、および配列番号８２を含む。

幾つかの実施形態において、Ｃｌｅｃ９Ａ標的部分は、配列番号４３、配列番号６３、およびＬＧＲを含む。

幾つかの実施形態において、Ｃｌｅｃ９Ａ標的部分は、配列番号４３、配列番号６４、およびＬＧＲを含む。

幾つかの実施形態において、Ｃｌｅｃ９Ａ標的部分は、配列番号４３、配列番号６５、およびＬＧＲを含む。

幾つかの実施形態において、Ｃｌｅｃ９Ａ標的部分は、配列番号４４、配列番号６６、およびＬＧＲを含む。

幾つかの実施形態において、Ｃｌｅｃ９Ａ標的部分は、配列番号４５、配列番号６７、およびＶＩＫを含む。

様々な実施形態において、Ｃｌｅｃ９Ａ標的部分は、以下の配列から選択されるアミノ酸配列を含む：
Ｒ２ＣＨＣＬ８（配列番号８３）
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＨＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＳＩＳＳＩＮＶＭＧＷＹＲＱＡＰＧＫＥＲＥＬＶＡＲＩＴＮＬＧＬＰＮＹＡＤＷＬＫＤＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＶＹＬＱＭＮＳＬＫＰＥＤＴＡＶＹＹＣＹＬＶＡＬＳＡＥＹＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ；
Ｒ１ＣＨＣＬ５０（配列番号８４）
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＨＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＳＦＳＳＩＮＶＭＧＷＹＲＱＡＰＧＫＥＲＥＬＶＡＲＩＴＮＬＧＬＰＮＹＡＤＳＶＴＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＶＹＬＱＭＮＳＬＫＰＥＤＴＡＶＹＹＣＹＬＶＡＬＫＡＥＹＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ；
Ｒ１ＣＨＣＬ２１（配列番号８５）
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＨＲＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＳＩＳＳＩＮＩＭＧＷＹＲＱＡＰＧＫＥＲＥＬＶＡＲＩＴＮＩＧＬＰＮＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＳＴＶＹＬＱＭＮＳＬＮＡＥＤＴＡＶＹＹＣＹＬＶＡＬＫＡＥＹＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ；
Ｒ２ＣＨＣＬ８７（配列番号８６）
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＳＩＳＳＩＮＶＭＧＷＹＲＱＡＰＧＫＥＲＥＬＶＡＲＩＴＮＬＧＬＰＮＹＡＤＳＶＥＧＲＦＴＩＳＲＤＫＤＥＮＴＶＹＬＥＭＮＴＬＫＰＥＤＴＡＶＹＹＣＹＬＶＧＬＫＡＥＹＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ；
Ｒ２ＣＨＣＬ２４（配列番号８７）
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＳＳＤＳＩＮＡＭＧＷＹＲＱＡＰＧＫＥＲＥＬＶＡＡＩＴＳＧＧＲＶＶＹＳＤＳＶＫＧＲＧＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＶＹＬＱＩＡＳＬＫＰＥＤＴＡＶＹＹＣＮＶＫＴＫＳＡＶＬＦＧＧＭＤＹＷＧＫＧＴＱＶＴＶＳＳ；
Ｒ２ＣＨＣＬ３８（配列番号８８）
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＶＳＩＦＳＩＮＡＭＧＷＹＲＱＡＰＧＫＥＲＥＬＶＡＡＩＴＳＧＧＲＴＡＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＶＹＬＱＭＤＳＬＫＰＥＤＴＤＶＹＹＣＫＡＹＩＲＧＥＤＹＷＧＫＧＴＱＶＴＶＳＳ；
Ｒ１ＣＨＣＬ１６（配列番号８９）
ＤＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＳＩＦＳＬＮＡＭＧＷＹＲＱＡＰＧＫＥＲＥＬＶＡＨＩＴＳＤＧＲＩＶＹＡＤＰＶＫＧＲＦＴＩＳＲＶＤＧＫＮＭＶＴＬＱＭＮＳＬＫＰＥＤＴＡＶＹＹＣＮＡＫＨＹＡＳＮＹＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ；
Ｒ２ＣＨＣＬ１０（配列番号９０）
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＳＶＱＡＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＲＴＩＳＮＹＤＭＡＷＳＲＱＡＰＧＫＥＲＥＦＶＡＲＩＳＧＳＧＤＲＴＤＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＶＹＬＱＭＮＳＬＫＰＥＤＴＡＩＹＹＣＱＩＱＤＦＧＳＰＳＦＳＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ；
Ｒ１ＣＨＣＬ３４（配列番号９１）
ＤＶＱＬＶＥＳＧＧＧＳＶＱＡＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＲＴＩＳＮＹＤＭＡＷＳＲＱＡＰＧＫＥＲＥＦＶＡＲＩＳＧＳＧＤＲＴＤＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＶＹＬＱＭＮＳＬＫＰＥＤＴＡＩＹＹＣＱＩＱＤＦＲＳＰＤＦＷＳＱＧＴＱＶＴＶＳＳ；
Ｒ１ＣＨＣＬ８２（配列番号９２）
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＥＳＶＱＡＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＲＴＩＳＮＹＤＭＡＷＳＲＱＡＰＧＫＥＲＥＦＶＡＲＩＳＧＳＧＤＲＴＤＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＶＹＬＱＭＮＳＬＫＰＥＤＴＡＩＹＮＣＱＴＱＩＦＧＳＰＮＦＳＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ；
Ｒ２ＣＨＣＬ３（配列番号９３）
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＡＧＤＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＲＴＦＴＴＳＬＭＱＷＨＲＱＡＰＧＫＥＲＥＦＶＡＳＩＴＷＳＴＧＮＴＨＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＲＮＴＶＹＬＱＭＮＳＬＫＰＥＤＴＡＩＹＴＣＲＶＬＡＩＨＧＤＹＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ；
Ｒ２ＣＨＣＬ６９ （配列番号 ９４）
ＤＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＡＧＤＳＬＲＬＳＣＡＡＳＥＲＮＬＲＩＹＤＭＡＷＹＲＱＡＰＧＫＥＲＥＹＶＡＶＩＳＳＳＧＤＳＴＨＹＳＤＦＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＶＳＬＱＭＤＳＬＫＰＥＤＴＡＦＹＹＣＮＶＮＱＩＲＱＷＰＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ；
Ｒ１ＣＨＣＬ５６（配列番号９５）
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＡＧＤＳＬＲＬＳＣＡＡＳＥＲＮＬＲＩＹＤＭＡＷＹＲＱＡＰＧＫＥＲＥＹＶＡＶＩＳＳＳＧＤＳＴＨＹＳＤＦＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＶＳＬＱＭＤＳＬＫＰＥＤＴＡＦＹＹＣＮＶＮＳＩＲＱＷＰＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ；
Ｒ２ＣＨＣＬ３２（配列番号９６）
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＡＧＤＳＬＲＬＳＣＴＡＳＥＲＮＬＲＳＹＤＭＡＷＷＲＱＡＰＧＫＥＲＥＹＶＡＶＩＴＳＳＧＤＳＴＨＹＳＤＦＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＶＳＬＱＭＤＳＬＫＰＥＤＴＡＳＹＹＣＮＶＮＡＩＲＱＷＰＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ；
Ｒ２ＣＨＣＬ４９（配列番号９７）
ＤＶＱＬＶＥＳＧＧＧＳＶＱＡＧＧＳＬＲＬＳＣＡＩＳＧＬＴＦＳＮＹＨＭＧＷＹＲＱＡＰＧＲＥＲＥＦＶＡＱＩＴＷＳＤＡＳＩＹＹＡＧＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＶＫＮＩＶＹＬＱＩＤＮＬＫＰＥＤＴＡＩＹＹＣＤＡＲＫＶＧＧＰＤＹＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ；
Ｒ２ＣＨＣＬ５３（配列番号９８）
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＡＧＧＳＬＴＬＳＣＡＩＳＧＬＴＦＳＳＹＨＭＧＷＹＲＱＡＰＧＲＥＲＥＦＶＡＱＩＴＷＳＤＴＳＩＹＹＡＧＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＶＫＮＩＶＹＬＱＩＤＮＬＫＰＥＤＴＡＩＹＹＣＤＡＲＫＶＧＧＰＤＹＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ；
Ｒ２ＣＨＣＬ２２（配列番号９９）
ＤＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＡＧＧＳＬＲＬＳＣＡＩＳＧＬＴＦＳＲＹＨＭＧＷＹＲＱＡＰＧＲＥＲＥＦＶＡＱＩＴＷＳＤＧＴＴＹＹＰＧＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＲＮＴＶＹＬＱＩＤＮＬＫＰＥＤＴＡＩＹＹＣＤＡＲＫＶＧＧＰＤＹＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ；
Ｒ２ＣＨＣＬ２５（配列番号１００）
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＡＧＧＳＬＲＬＳＣＡＴＳＧＬＴＬＳＳＹＹＩＡＷＹＲＱＡＰＧＲＥＲＥＦＶＡＱＩＲＷＳＤＤＳＴＹＹＰＧＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＲＮＴＶＹＬＲＭＤＮＬＫＰＥＤＴＡＲＹＹＣＤＡＲＫＶＧＧＰＤＹＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ；
Ｒ２ＣＨＣＬ１８（配列番号１０１）
ＤＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＡＧＧＳＬＲＬＳＣＡＴＳＧＬＴＦＳＳＹＹＴＧＷＹＲＱＡＰＧＲＥＲＥＦＶＡＱＩＳＷＳＤＤＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＲＮＴＶＹＬＱＭＮＮＬＫＰＧＤＴＡＩＹＹＣＤＡＲＫＶＧＧＰＤＹＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ；
Ｒ１ＣＨＣＬ２３（配列番号１０２）
ＤＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＡＧＧＳＬＲＬＳＣＡＴＳＧＬＴＬＳＳＹＨＭＧＷＹＲＱＡＰＧＲＥＲＥＦＶＡＱＩＳＷＳＤＤＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＲＮＴＶＹＬＱＭＮＮＬＫＰＥＤＴＡＩＹＹＣＤＡＲＫＶＧＧＰＤＹＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ；
Ｒ１ＣＨＣＬ２７（配列番号１０３）
ＤＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＡＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＲＴＳＳＰＹＶＴＧＷＹＲＱＴＰＧＫＥＲＥＰＶＡＴＶＳＷＧＧＶＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＶＹＬＱＭＮＡＬＫＰＥＤＴＡＩＹＹＣＮＶＮＴＦＧＮＶＹＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ；
Ｒ２ＣＨＣＬ１３（配列番号１０４）
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＧＹＶＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＳＩＧＳＧＧＧＹＰＳＹＴＤＳＶＥＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＬＹＬＬＭＤＮＬＫＰＤＤＴＡＶＹＹＣＥＭＬＧＲＲＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ；
Ｒ２ＣＨＣＬ１４（配列番号：１０５）
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＧＹＶＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＳＩＧＳＧＧＧＹＰＳＹＴＤＳＶＥＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＬＹＬＱＭＮＮＬＫＰＤＤＴＡＶＹＹＣＥＭＬＧＲＲＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ；
Ｒ２ＣＨＣＬ４２（配列番号：１０６）
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＧＹＶＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＳＩＧＳＧＧＧＹＰＳＹＴＧＳＶＥＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＬＹＬＬＭＮＮＬＫＰＤＤＴＡＶＹＹＣＥＭＬＧＲＲＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ；
Ｒ２ＣＨＣＬ４１（配列番号：１０７）
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＧＹＶＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＨＩＧＳＧＧＧＹＰＳＹＴＤＳＶＱＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＬＹＬＱＭＮＮＬＫＰＥＤＴＡＶＹＹＣＥＭＬＧＲＲＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ；
Ｒ２ＣＨＣＬ９４（配列番号１０８）
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＧＹＶＭＴＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＨＩＧＳＧＧＧＨＡＴＹＴＤＳＶＥＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＬＹＬＱＭＮＮＬＫＡＥＤＴＡＶＹＹＣＥＦＬＧＲＲＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ；または
Ｒ２ＣＨＣＬ２７（配列番号１０９）
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＧＹＬＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＴＩＧＳＧＧＧＩＴＳＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＬＹＬＱＭＮＮＬＫＨＥＤＴＡＶＹＹＣＥＴＶＩＫＲＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ。

様々な実施形態において、本発明は、本明細書に記載される通り、Ｃｌｅｃ９Ａに対する標的部分の任意の天然または合成の類似体、突然変異体、対立遺伝子、相同体および相同分子種（本明細書では集合的に「類似体」と称する）の使用を企図する。様々な実施形態において、Ｃｌｅｃ９Ａに対する標的部分のアミノ酸配列は、アミノ酸類似体、アミノ酸誘導体、または他の非古典的アミノ酸をさらに含む。

様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、本明細書に開示される配列の任意の１つと少なくとも約６０％同一であるアミノ酸配列を含む標的部分を含む。例えばキメラタンパク質は、本明細書に開示される配列の任意の１つと少なくとも約６０％、少なくとも約６１％、少なくとも約６２％、少なくとも約６３％、少なくとも約６４％、少なくとも約６５％、少なくとも約６６％、少なくとも約６７％、少なくとも約６８％、少なくとも約６９％、少なくとも約７０％、少なくとも約７１％、少なくとも約７２％、少なくとも約７３％、少なくとも約７４％、少なくとも約７５％、少なくとも約７６％、少なくとも約７７％、少なくとも約７８％、少なくとも約７９％、少なくとも約８０％、少なくとも約８１％、少なくとも約８２％、少なくとも約８３％、少なくとも約８４％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または１００％同一である（例えば、本明細書に開示された配列の任意の１つと約６０％、または約６１％、または約６２％、または約６３％、または約６４％、または約６５％、または約６６％、または約６７％、または約６８％、または約６９％、または約７０％、または約７１％、または約７２％、または約７３％、または約７４％、または約７５％、または約７６％、または約７７％、または約７８％、または約７９％、または約８０％、または約８１％、または約８２％、または約８３％、または約８４％、または約８５％、または約８６％、または約８７％、または約８８％、または約８９％、または約９０％、または約９１％、または約９２％、または約９３％、または約９４％、または約９５％、または約９６％、または約９７％、または約９８％、約９９％、または約１００％の配列同一性）、アミノ酸配列を含む標的部分を含み得る。

様々な実施形態において、本発明の標的部分は、Ｃｌｅｃ９Ａに特異的に結合する本発明のＣｌｅｃ９Ａ標的部分の能力を実質的に低減しない１つまたは複数の突然変異を含む。様々な実施形態において、突然変異は、Ｃｌｅｃ９Ａを中和せずにＣｌｅｃ９Ａに特異的に結合する標的部分の能力を実質的に低減しない。

様々な実施形態において、ヒトＣｌｅｃ９Ａの完全長および／または成熟形態および／またはアイソフォームおよび／またはスプライスバリアントおよび／またはフラグメントおよび／または単量体形態および／または二量体形態および／または任意の他の天然由来もしくは合成の類似体、バリアントもしくは突然変異体（単量体および／または二量体形態を含む）に対するＣｌｅｃ９Ａ標的部分の結合親和性は、平衡解離定数（Ｋ_Ｄ）により記載され得る。様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、約１ｕＭ、約９００ｎＭ、約８００ｎＭ、約７００ｎＭ、約６００ｎＭ、約５００ｎＭ、約４００ｎＭ、約３００ｎＭ、約２００ｎＭ、約１００ｎＭ、約９０ｎＭ、約８０ｎＭ、約７０ｎＭ、約６０ｎＭ、約５０ｎＭ、約４０ｎＭ、約３０ｎＭ、約２０ｎＭ、約１０ｎＭ、または約５ｎＭ、または約１ｎＭ未満のＫ_Ｄで、ヒトＣｌｅｃ９Ａの完全長および／または成熟形態および／またはアイソフォームおよび／またはスプライスバリアントおよび／またはフラグメントおよび／または任意の他の天然由来もしくは合成の類似体、バリアントもしくは突然変異体（単量体および／または二量体形態を含む）に結合する標的部分を含む。

様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、目的の抗原、例えばＣｌｅｃ９Ａを結合するが機能的にモジュレートしない標的部分を含む。例えば様々な実施形態において、Ｃｌｅｃ９Ａ標的部分は、抗原を単に標的にするが、抗原が有する生物学的効果を実質的に機能的にモジュレートしない（例えば、実質的に阻害、低減または中和しない）。様々な実施形態において、Ｃｌｅｃ９Ａ標的部分は、生物活性に重要である抗原部位（例えば、抗原活性部位）から物理的に離れたエピトープを結合する。

有意な機能的モジュレーションを有さないそのような結合は、本発明のキメラタンパク質がエフェクター抗原を介して必要な部位に活性免疫細胞を直接的または間接的に動員するために用いられる方法を含む、本発明の様々な実施形態で用途を見出す。例えば、様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、腫瘍を低減または排除する方法において、腫瘍細胞にＣｌｅｃ９Ａを介して樹状細胞を直接的または間接的に動員するために用いられ得る（例えば、キメラタンパク質は、抗Ｃｌｅｃ９Ａ抗原認識ドメインを有する標的部分と、腫瘍抗原または受容体に対する認識ドメイン（例えば、抗原認識ドメイン）を有する標的部分と、を含み得る）。そのような実施形態において、樹状細胞を直接的または間接的に動員するがＣｌｅｃ９Ａ活性を機能的にモジュレートしないことが、望ましい。これらの実施形態において、Ｃｌｅｃ９Ａシグナル伝達は、腫瘍の低減または排除効果の重要な部分である。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、樹状細胞による抗原提示を増強する。例えば、様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、腫瘍細胞にＣｌｅｃ９Ａを介して樹状細胞を直接的または間接的に動員し、腫瘍抗原が続いてエンドサイトーシスされ、強力な液性および細胞障害性Ｔ細胞応答の誘導のために樹状細胞上に提示される。

幾つかの実施形態において、標的部分は、非限定的に巨核球、血小板、赤血球、肥満細胞、好塩基球、好中球、好酸球、またはそれらのサブセットから選択される免疫細胞上の標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合する抗原認識ドメインを含む。幾つかの実施形態において、認識ドメインは、巨核球、血小板、赤血球、肥満細胞、好塩基球、好中球、好酸球、またはそれらのサブセットを、例えば、幾つかの実施形態において、治療部位（例えば、１つまたは複数の疾患細胞、または治療効果のためにモジュレートされる細胞を有する位置）に、直接的または間接的に動員する。

幾つかの実施形態において、標的部分は、巨核球および／または血小板に関連する標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合する抗原認識ドメインを含む。例示的な目的の巨核球および／または血小板抗原としては、例えばＧＰ ＩＩｂ／ＩＩＩａ、ＧＰＩｂ、ｖＷＦ、ＰＦ４、およびＴＳＰが挙げられる。様々な実施形態において、キメラタンパク質の標的部分は、これらの例示的な巨核球および／または血小板抗原の１つまたは複数を結合する。

幾つかの実施形態において、標的部分は、赤血球に関連する標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合する抗原認識ドメインを含む。例示的な目的の赤血球抗原としては、例えばＣＤ３４、ＣＤ３６、ＣＤ３８、ＣＤ４１ａ（血小板糖タンパク質ＩＩｂ／ＩＩＩａ）、ＣＤ４１ｂ（ＧＰＩＩｂ）、ＣＤ７１（トランスフェリン受容体）、ＣＤ１０５、グリコフォリンＡ、グリコフォリンＣ、ｃ−ｋｉｔ、ＨＬＡ−ＤＲ、Ｈ２（ＭＨＣ−ＩＩ）、およびアカゲザル抗原が挙げられる。様々な実施形態において、キメラタンパク質の標的部分は、これらの例示的な赤血球抗原の１つまたは複数を結合する。

幾つかの実施形態において、標的部分は、肥満細胞に関連する標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合する抗原認識ドメインを含む。例示的な目的の肥満細胞抗原としては、例えばＳＣＦＲ／ＣＤ１１７、Ｆｃ_εＲＩ、ＣＤ２、ＣＤ２５、ＣＤ３５、ＣＤ８８、ＣＤ２０３ｃ、Ｃ５Ｒ１、ＣＭＡｌ、ＦＣＥＲｌＡ、ＦＣＥＲ２、ＴＰＳＡＢｌが挙げられる。様々な実施形態において、キメラタンパク質の標的部分は、これらの肥満細胞抗原の１つまたは複数を結合する。

幾つかの実施形態において、標的部分は、好塩基球に関連する標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合する抗原認識ドメインを含む。例示的な目的の好塩基球抗原としては、例えばＦｃ_εＲＩ、ＣＤ２０３ｃ、ＣＤ１２３、ＣＤ１３、ＣＤ１０７ａ、ＣＤ１０７ｂ、およびＣＤ１６４が挙げられる。様々な実施形態において、キメラタンパク質の標的部分は、これらの好塩基球抗原の１つまたは複数を結合する。

幾つかの実施形態において、標的部分は、好中球に関連する標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合する抗原認識ドメインを含む。例示的な目的の好中球抗原としては、例えば７Ｄ５、ＣＤ１０／ＣＡＬＬＡ、ＣＤ１３、ＣＤ１６（ＦｃＲＩＩＩ）、ＣＤ１８タンパク質（ＬＦＡ−１、ＣＲ３、およびｐ１５０、９５）、ＣＤ４５、ＣＤ６７、およびＣＤ１７７が挙げられる。様々な実施形態において、キメラタンパク質の標的部分は、これらの好中球抗原の１つまたは複数を結合する。

幾つかの実施形態において、標的部分は、好酸球に関連する標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合する抗原認識ドメインを含む。例示的な目的の好酸球抗原としては、例えばＣＤ３５、ＣＤ４４およびＣＤ６９が挙げられる。様々な実施形態において、キメラタンパク質の標的部分は、これらの好酸球抗原の１つまたは複数を結合する。

様々な実施形態において、標的部分は、当業者に公知の任意の適当な標的、抗原、受容体、または細胞表面マーカーに結合し得る抗原認識ドメインを含み得る。幾つかの実施形態において、抗原または細胞表面マーカーは、組織特異的マーカーである。例示的な組織特異的マーカーとしては、ＡＣＥ、ＣＤ１４、ＣＤ３４、ＣＤＨ５、ＥＮＧ、ＩＣＡＭ２、ＭＣＡＭ、ＮＯＳ３、ＰＥＣＡＭｌ、ＰＲＯＣＲ、ＳＥＬＥ、ＳＥＬＰ、ＴＥＫ、ＴＨＢＤ、ＶＣＡＭｌ、ＶＷＦなどの内皮細胞表面マーカー；ＡＣＴＡ２、ＭＹＨｌＯ、ＭＹＨｌ １、ＭＹＨ９、ＭＹＯＣＤなどの平滑筋細胞表面マーカー；ＡＬＣＡＭ、ＣＤ３４、ＣＯＬｌＡｌ、ＣＯＬ１Ａ２、ＣＯＬ３Ａ１、ＦＡＰ、ＰＨ−４などの線維芽細胞（間質）細胞表面マーカー；ＣＤＩＤ、Ｋ６ＩＲＳ２、ＫＲＴｌＯ、ＫＲＴ１３、ＫＲＴ１７、ＫＲＴ１８、ＫＲＴ１９、ＫＲＴ４、ＫＲＴ５、ＫＲＴ８、ＭＵＣｌ、ＴＡＣＳＴＤｌなどの上皮細胞表面マーカー；ＣＤ１３、ＴＦＮＡ、アルファ−ｖ ベータ−３（α_Ｖβ_３）、Ｅ−セレクチンなどの新生血管構造マーカー；ならびにＡＤＩＰＯＱ、ＦＡＢＰ４、およびＲＥＴＮなどの脂肪細胞表面マーカーが挙げられるが、これらに限定されない。様々な実施形態において、キメラタンパク質の標的部分は、これらの抗原の１つまたは複数を結合する。様々な実施形態において、キメラタンパク質の標的部分は、これらの抗原を有する細胞の１つまたは複数を結合する。

幾つかの実施形態において、認識ドメインは、腫瘍細胞に関連する標的（例えば、抗原、受容体）に特異的に結合する。幾つかの実施形態において、認識ドメインは、腫瘍細胞を直接的または間接的に動員する。例えば、幾つかの実施形態において、腫瘍細胞の直接的または間接的な動員は、腫瘍細胞を殺傷および／または抑制し得る１つまたは複数のエフェクター細胞（例えば、本明細書に記載される免疫細胞）へである。

腫瘍細胞または癌細胞は、身体の臓器および系の正常な機能を妨害する、細胞もしくは組織の非制御的成長および／または細胞生存の異常な増進および／またはアポトーシスの阻害を指す。例えば腫瘍細胞は、良性および悪性の癌、ポリープ、過形成、および休眠状態の腫瘍または微小転移を包含する。例示的な腫瘍細胞としては、基底細胞癌、胆道癌、膀胱癌、骨癌、脳および中枢神経系癌、乳癌、腹膜の癌、子宮頸癌、絨毛癌、大腸癌、結合組織癌、消化器系の癌、子宮内膜癌、食道癌、眼癌、頭頸部癌、胃癌（ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ）（胃腸癌を含む）、神経膠芽腫、肝細胞癌、ヘパトーマ、上皮内腫瘍、腎臓癌、喉頭癌、白血病、肝臓癌、肺癌（例えば、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺腺癌、および肺の扁平上皮癌）、黒色腫、骨髄腫、神経芽細胞腫、口腔癌（唇、舌、口および咽頭）、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、直腸癌、呼吸器系の癌、唾液腺癌、肉腫、皮膚癌、扁平上皮癌、胃癌（ｓｔｏｍａｃｈ ｃａｎｃｅｒ）、精巣癌、甲状腺癌、子宮または子宮内膜癌、泌尿器系の癌、外陰部癌、ホジキンおよび非ホジキンリンパ腫に加え、Ｂ細胞リンパ腫（低悪性度／濾胞性非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）、小リンパ球性（ＳＬ）ＮＨＬ、中悪性度／濾胞性ＮＨＬ、中悪性度びまん性ＮＨＬ、高悪性度免疫芽細胞性ＮＨＬ、高悪性度リンパ芽球性ＮＨＬ、高悪性度小型非切れ込み核細胞ＮＨＬ、巨大腫瘤病変ＮＨＬ、マントル細胞リンパ腫、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、およびワルデンストレームマクログロブリン血症を含むリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、ヘアリー細胞白血病、慢性骨髄芽球性白血病、および他の癌腫および肉腫、ならびに移植後リンパ増殖性疾患（ＰＴＬＤ）、ならびに母斑症、浮腫（例えば、脳腫瘍に関連するもの）、およびメイグス症候群に関連する異常な血管増殖の細胞が挙げられるが、これらに限定されない。

腫瘍細胞または癌細胞としては、癌腫（例えば、腺癌、基底細胞癌、扁平上皮癌、および移行細胞癌を含む様々なサブタイプ）、肉腫（例えば、骨および軟組織など）、白血病（例えば、急性骨髄性、急性リンパ芽球性、慢性骨髄性、慢性リンパ球性およびヘアリー細胞）、リンパ腫および骨髄腫（例えば、ホジキンおよび非ホジキンリンパ腫、軽鎖型、非分泌型、ＭＧＵＳ、および形質細胞腫）、ならびに中枢神経系癌（例えば、脳（例えば、神経膠腫（例えば、星細胞腫、乏突起神経膠腫、および上皮腫）、髄膜腫、脳下垂体腺癌、および神経腫、脊髄腫瘍（例えば、髄膜腫および神経線維腫））も挙げられるが、これらに限定されない。

例示的な腫瘍抗原としては、ＭＡＲＴ−１／Ｍｅｌａｎ−Ａ、ｇｐ１００、ジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰＩＶ）、アデノシンデアミナーゼ結合タンパク質（ＡＤＡｂｐ）、シクロフィリンｂ、大腸癌関連抗原（Ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ａｎｔｉｇｅｎ）（ＣＲＣ）−００１７−１Ａ／ＧＡ７３３、癌胎児性抗原（ＣＥＡ）およびその免疫原性エピトープＣＡＰ−１およびＣＡＰ−２、ｅｔｖ６、ａｍｌ１、前立腺特異性抗原（ＰＳＡ）およびその免疫原性エピトープＰＳＡ−１、ＰＳＡ−２、およびＰＳＡ−３、前立腺特異性膜抗原（ＰＳＭＡ）、Ｔ細胞受容体／ＣＤ３−ゼータ鎖、腫瘍抗原のＭＡＧＥファミリー（例えば、ＭＡＧＥ−Ａ１、ＭＡＧＥ−Ａ２、ＭＡＧＥ−Ａ３、ＭＡＧＥ−Ａ４、ＭＡＧＥ−Ａ５、ＭＡＧＥ−Ａ６、ＭＡＧＥ−Ａ７、ＭＡＧＥ−Ａ８、ＭＡＧＥ−Ａ９、ＭＡＧＥ−Ａ１０、ＭＡＧＥ−Ａ１１、ＭＡＧＥ−Ａ１２、ＭＡＧＥ−Ｘｐ２（ＭＡＧＥ−Ｂ２）、ＭＡＧＥ−Ｘｐ３（ＭＡＧＥ−Ｂ３）、ＭＡＧＥ−Ｘｐ４（ＭＡＧＥ−Ｂ４）、ＭＡＧＥ−Ｃ１、ＭＡＧＥ−Ｃ２、ＭＡＧＥ−Ｃ３、ＭＡＧＥ−Ｃ４、ＭＡＧＥ−Ｃ５）、腫瘍抗原のＧＡＧＥファミリー（例えば、ＧＡＧＥ−１、ＧＡＧＥ−２、ＧＡＧＥ−３、ＧＡＧＥ−４、ＧＡＧＥ−５、ＧＡＧＥ−６、ＧＡＧＥ−７、ＧＡＧＥ−８、ＧＡＧＥ−９）、ＢＡＧＥ、ＲＡＧＥ、ＬＡＧＥ−１、ＮＡＧ、ＧｎＴ−Ｖ、ＭＵＭ−１、ＣＤＫ４、チロシナーゼ、ｐ５３、ＭＵＣファミリー、ＨＥＲ２／ｎｅｕ、ｐ２１ｒａｓ、ＲＣＡＳ１、α−フェトタンパク質、Ｅ−カドヘリン、α−カテニン、β−およびγ−カテニン、ｐ１２０ｃｔｎ、ｇｐ１００ Ｐｍｅｌ１１７、ＰＲＡＭＥ、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ｃｄｃ２７、大腸腺腫症タンパク質（ＡＰＣ）、フォドリン、コネクチン３７、Ｉｇイディオタイプ、ｐ１５、ｇｐ７５、ＧＭ２およびＧＤ２ガングリオシド、ヒトパピローマウイルス産物などのウイルス産物、腫瘍抗原のＳｍａｄファミリー、Ｉｍｐ−１、ＮＡ、ＥＢＶコード化核抗原（ＥＢＮＡ）−１、脳グリコーゲンホスホリラーゼ、ＳＳＸ−１、ＳＳＸ−２（ＨＯＭ−ＭＥＬ−４０）、ＳＳＸ−１、ＳＳＸ−４、ＳＳＸ−５、ＳＣＰ−１ ＣＴ−７、ｃ−ｅｒｂＢ−２、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ５６、ＣＤ７０、ＣＤ７４、ＣＤ１３８、ＡＧＳ１６、ＭＵＣ１、ＧＰＮＭＢ、Ｅｐ−ＣＡＭ、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、ＰＭＳＡ、およびＢＣＭＡ（ＴＮＦＲＳＦ１７）が挙げられるが、これらに限定されない。様々な実施形態において、キメラタンパク質の標的部分は、これらの腫瘍抗原の１つまたは複数を結合する。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、本明細書に記載される修飾された（例えば、変異した）シグナル伝達物質のいずれかと共に、（ｉ）Ｔ細胞、Ｂ細胞、樹状細胞、マクロファージ、ＮＫ細胞、またはそれらのサブセットから選択される免疫細胞に対する標的部分の１つまたは複数と（ｉｉ）腫瘍細胞に対する標的部分の１つまたは複数を有する。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、本明細書に記載される修飾された（例えば、変異した）シグナル伝達物質のいずれかと共に、（ｉ）Ｔ細胞（非限定的にエフェクターＴ細胞を含む）に対する標的部分と（ｉｉ）腫瘍細胞に対する標的部分を有する。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、本明細書に記載される修飾された（例えば、変異した）シグナル伝達物質のいずれかと共に、（ｉ）Ｂ細胞に対する標的部分と（ｉｉ）腫瘍細胞に対する標的部分を有する。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、本明細書に記載される修飾された（例えば、変異した）シグナル伝達物質のいずれかと共に、（ｉ）樹状細胞に対する標的部分と（ｉｉ）腫瘍細胞に対する標的部分を有する。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、本明細書に記載される修飾された（例えば、変異した）シグナル伝達物質のいずれかと共に、（ｉ）マクロファージに対する標的部分と（ｉｉ）腫瘍細胞に対する標的部分を有する。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、本明細書に記載される修飾された（例えば、変異した）シグナル伝達物質のいずれかと共に、（ｉ）ＮＫ細胞に対する標的部分と（ｉｉ）腫瘍細胞に対する標的部分を有する。

非限定的例として、様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、本明細書に記載される修飾された（例えば、変異した）シグナル伝達物質のいずれかと共に、（ｉ）例えば、ＣＤ８、ＳＬＡＭＦ４、ＩＬ−２ Ｒα、４−１ＢＢ／ＴＮＦＲＳＦ９、ＩＬ−２ Ｒβ、ＡＬＣＡＭ、Ｂ７−１、ＩＬ−４ Ｒ、Ｂ７−Ｈ３、ＢＬＡＭＥ／ＳＬＡＭＦＳ、ＣＥＡＣＡＭ１、ＩＬ−６ Ｒ、ＣＣＲ３、ＩＬ−７ Ｒα、ＣＣＲ４、ＣＸＣＲｌ／ＩＬ−Ｓ ＲＡ、ＣＣＲ５、ＣＣＲ６、ＩＬ−１０ Ｒα、ＣＣＲ７、ＩＬ−ｌ０ Ｒβ、ＣＣＲＳ、ＩＬ−１２ Ｒβ１、ＣＣＲ９、ＩＬ−１２ Ｒβ２、ＣＤ２、ＩＬ−１３ Ｒα１、ＩＬ−１３、ＣＤ３、ＣＤ４、ＩＬＴ２／ＣＤＳ５ｊ、ＩＬＴ３／ＣＤＳ５ｋ、ＩＬＴ４／ＣＤＳ５ｄ、ＩＬＴ５／ＣＤＳ５ａ、インテグリンα ４／ＣＤ４９ｄ、ＣＤＳ、インテグリンα Ｅ／ＣＤ１０３、ＣＤ６、インテグリンα Ｍ／ＣＤ１１ｂ、ＣＤＳ、インテグリンα Ｘ／ＣＤ１１ｃ、インテグリンβ ２／ＣＤｌＳ、ＫＩＲ／ＣＤ１５Ｓ、ＣＤ２７／ＴＮＦＲＳＦ７、ＫＩＲ２ＤＬ１、ＣＤ２Ｓ、ＫＩＲ２ＤＬ３、ＣＤ３０／ＴＮＦＲＳＦＳ、ＫＩＲ２ＤＬ４／ＣＤ１５Ｓｄ、ＣＤ３１／ＰＥＣＡＭ−１、ＫＩＲ２ＤＳ４、ＣＤ４０リガンド／ＴＮＦＳＦ５、ＬＡＧ−３、ＣＤ４３、ＬＡＩＲ１、ＣＤ４５、ＬＡＩＲ２、ＣＤＳ３、ロイコトリエンＢ４−Ｒ１、ＣＤＳ４／ＳＬＡＭＦ５、ＮＣＡＭ−Ｌ１、ＣＤ９４、ＮＫＧ２Ａ、ＣＤ９７、ＮＫＧ２Ｃ、ＣＤ２２９／ＳＬＡＭＦ３、ＮＫＧ２Ｄ、ＣＤ２Ｆ−１０／ＳＬＡＭＦ９、ＮＴ−４、ＣＤ６９、ＮＴＢ−Ａ／ＳＬＡＭＦ６、共通γ鎖／ＩＬ−２ Ｒγ、オステオポンチン、ＣＲＡＣＣ／ＳＬＡＭＦ７、ＰＤ−１、ＣＲＴＡＭ、ＰＳＧＬ−１、ＣＴＬＡ−４、ＲＡＮＫ／ＴＮＦＲＳＦ１１Ａ、ＣＸ３ＣＲ１、ＣＸ３ＣＬ１、Ｌ−セレクチン、ＣＸＣＲ３、ＳＩＲＰ β１、ＣＸＣＲ４、ＳＬＡＭ、ＣＸＣＲ６、ＴＣＣＲ／ＷＳＸ−１、ＤＮＡＭ−１、チモポエチン、ＥＭＭＰＲＩＮ／ＣＤ１４７、ＴＩＭ−１、ＥｐｈＢ６、ＴＩＭ−２、Ｆａｓ／ＴＮＦＲＳＦ６、ＴＩＭ−３、Ｆａｓリガンド／ＴＮＦＳＦ６、ＴＩＭ−４、Ｆｃγ ＲＩＩＩ／ＣＤ１６、ＴＩＭ−６、ＴＮＦＲ１／ＴＮＦＲＳＦ１Ａ、グラニュライシン、ＴＮＦ ＲＩＩＩ／ＴＮＦＲＳＦ１Ｂ、ＴＲＡＩＬ Ｒｌ／ＴＮＦＲＳＦｌＯＡ、ＩＣＡＭ−１／ＣＤ５４、ＴＲＡＩＬ Ｒ２／ＴＮＦＲＳＦ１０Ｂ、ＩＣＡＭ−２／ＣＤ１０２、ＴＲＡＩＬＲ３／ＴＮＦＲＳＦ１０Ｃ、ＩＦＮ−γＲ１、ＴＲＡＩＬＲ４／ＴＮＦＲＳＦ１０Ｄ、ＩＦＮ−γ Ｒ２、ＴＳＬＰ、ＩＬ−１ Ｒ１、またはＴＳＬＰ Ｒへの標的化により媒介される、Ｔ細胞に対する標的部分と；（ｉｉ）腫瘍細胞に対する標的部分を有する。

非限定的例として、様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、本明細書に記載される修飾された（例えば、変異した）シグナル伝達物質のいずれかと共に、（ｉ）Ｔ細胞上で発現されるチェックポイントマーカー、例えばＰＤ−１、ＣＤ２８、ＣＴＬＡ４、ＩＣＯＳ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ３、ＣＤ１３７、ＯＸ４０、ＣＤ２７、ＣＤ４０Ｌ、ＴＩＭ３、およびＡ２ａＲの１つまたは複数と（ｉｉ）腫瘍細胞に対する標的部分を有する。

様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、ＰＤ−１に対する１つまたは複数の標的部分を有する。幾つかの実施形態において、キメラタンパク質は、ＰＤ−１ポリペプチドを選択的に結合する１つまたは複数の標的部分を有する。幾つかの実施形態において、キメラタンパク質は、ＰＤ−１ポリペプチドを選択的に結合する１つまたは複数の抗体、抗体誘導体もしくはフォーマット、ペプチドもしくはポリペプチド、または融合タンパク質を含む。

一実施形態において、標的部分は、抗ＰＤ−１抗体ペムブロリズマブ（ＭＫ−３４７５、ＫＥＹＴＲＵＤＡとしても公知）、またはそのフラグメントを含む。ペムブロリズマブおよび他のヒト化抗ＰＤ−１抗体は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられる、Ｈａｍｉｄ，ｅｔ ａｌ．（２０１３） Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ３６９（２）：１３４−４４、ＵＳ８，３５４，５０９およびＷＯ２００９／１１４３３５に開示される。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法での使用のためのペムブロリズマブまたはその抗原結合フラグメントは、
ＱＶＱＬＶＱＳＧＶＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＮＹＹＭＹＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＧＩＮＰＳＮＧＧＴＮＦ ＮＥＫＦＫＮＲＶＴＬＴＴＤＳＳＴＴＴＡＹＭＥＬＫＳＬＱＦＤＤＴＡＶＹＹＣＡＲＲＤＹＲＦＤＭＧＦＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳ ＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＬＧＧＰＳＶ ＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹ ＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫ ＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧ ＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ（配列番号１１０）、
のアミノ酸配列を含む重鎖、および／または
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＫＧＶＳＴＳＧＹＳＹＬＨＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＬＡＳＹＬＥＳ ＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＨＳＲＤＬＰＬＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦ ＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳ ＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号１１１）
のアミノ酸配列を含む軽鎖、
を含む。

一実施形態において、標的部分は、抗ＰＤ−１抗体ニボルマブ（ＢＭＳ−９３６５５８、ＭＤＸ−１１０６、ＯＮＯ−４５３８、ＯＰＤＩＶＯとしても公知）、またはそのフラグメントを含む。ニボルマブ（クローン５Ｃ４）およびＰＤ−１に特異的に結合する他のヒトモノクローナル抗体は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられる、ＵＳ８，００８，４４９およびＷＯ２００６／１２１１６８に開示される。例示的な実施形態において、ニボルマブまたはその抗原結合フラグメントは、
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧ ＶＶＱＰＧＲＳＬＲＬ ＤＣＫＡＳＧＩＴＦＳ ＮＳＧＭＨＷＶＲＱＡ ＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶ ＩＷＹＤＧＳＫＲＹＹ
ＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩ ＳＲＤＮＳＫＮＴＬＦ ＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤ ＴＡＶＹＹＣＡＴＮＤ ＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴ ＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳ
ＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳ ＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣ ＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶ ＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴ ＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬ ＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳ
ＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧ ＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨ ＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲ ＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰ ＰＣＰＡＰＥＦＬＧＧ ＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰ
ＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰ ＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳ ＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷ ＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡ ＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮ ＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴ
ＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫ ＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧ ＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳ ＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱ ＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥ ＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣ
ＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩ ＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰ ＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶ ＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹ ＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷ ＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶ
ＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴ ＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ（配列番号１１２）
のアミノ酸配列を含む重鎖、および／または
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴ ＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴ ＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳ ＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰ ＧＱＡＰＲＬＬＩＹＤ ＡＳＮＲＡＴＧＩＰＡ
ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤ ＦＴＬＴＩＳＳＬＥＰ ＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱ ＳＳＮＷＰＲＴＦＧＱ ＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶ ＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰ
ＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡ ＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹ ＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶ ＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱ ＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤ ＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴ
ＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫ ＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧ ＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮ ＲＧＥＣ（配列番号１１３）
のアミノ酸配列を含む軽鎖、
を含む。

一実施形態において、標的部分は、抗ＰＤ−１抗体ピジリズマブ（ＣＴ−０１１、ｈＢＡＴまたはｈＢＡＴ−１としても公知）、またはそのフラグメントを含む。ピジリズマブおよび他のヒト化抗ＰＤ−Ｉモノクローナル抗体は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられる、ＵＳ２００８／００２５９８０およびＷＯ２００９／１０１６１１に開示される。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法での使用のための抗ＰＤ−１抗体またはその抗原結合フラグメントは、
ＵＳ２００８／００２５９８０の配列番号１５〜１８：
ＵＳ２００８／００２５９８０の配列番号１５（配列番号１１４）：
ＥＩＶＬＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＳＡＲＳＳＶＳＹＭＨＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＲＴＳＮＬＡＳＧＶＰＳＲ
ＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＮＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＲＳＳＦＰＬＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ；
ＵＳ２００８／００２５９８０の配列番号１６（配列番号１１５）：
ＥＩＶＬＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＳＡＲＳＳＶＳＹＭＨＷＦＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＷＩＹＲＴＳＮＬＡＳＧＶＰＳＲ
ＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＮＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＲＳＳＦＰＬＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ；
ＵＳ２００８／００２５９８０の配列番号１７（配列番号１１６）：
ＥＩＶＬＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＳＡＲＳＳＶＳＹＭＨＷＦＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＷＩＹＲＴＳＮＬＡＳＧＶＰＳＲ
ＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＣＬＴＩＮＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＲＳＳＦＰＬＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ；
ＵＳ２００８／００２５９８０の配列番号１８（配列番号１１７）：
ＥＩＶＬＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＳＡＲＳＳＶＳＹＭＨＷＦＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＷＩＹＲＴＳＮＬＡＳＧＶＰＳＲ
ＦＳＧＳＧＳＧＴＳＹＣＬＴＩＮＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＲＳＳＦＰＬＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ；
から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、および／または
ＵＳ２００８／００２５９８０の配列番号２０〜２４：
ＵＳ２００８／００２５９８０の配列番号２０（配列番号１１８）：
ＱＶＱＬＶＱＳＧＳＥＬＫＫＰＧＡＳＶＫＩＳＣＫＡＳＧＹＳＦＳＮＹＧＭＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＱＷＭＧＷＩＮＴＤＳＧＥＳＴＹ
ＡＥＥＦＫＧＲＦＶＦＳＬＤＴＳＶＳＴＡＹＬＱＩＴＳＬＴＡＥＤＴＧＭＹＦＣＡＫＶＧＹＤＡＬＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ；
ＵＳ２００８／００２５９８０の配列番号２１（配列番号１１９）：
ＱＶＱＬＶＱＳＧＳＥＬＫＫＰＧＡＳＶＫＩＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＮＹＧＭＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＱＷＭＧＷＩＮＴＤＳＧＥＳＴＹ
ＡＥＥＦＫＧＲＦＶＦＳＬＤＴＳＶＳＴＡＹＬＱＩＴＳＬＴＡＥＤＴＧＭＹＦＣＡＫＶＧＹＤＡＬＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ；
ＵＳ２００８／００２５９８０の配列番号２２（配列番号１２０）：
ＱＶＱＬＶＱＳＧＳＥＬＫＫＰＧＡＳＶＫＩＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＮＹＧＭＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＱＷＭＧＷＩＮＴＤＳＧＥＳＴＹ
ＡＥＥＦＫＧＲＦＶＦＳＬＤＴＳＶＮＴＡＹＬＱＩＴＳＬＴＡＥＤＴＧＭＹＦＣＶＲＶＧＹＤＡＬＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ；
ＵＳ２００８／００２５９８０の配列番号２３（配列番号１２１）：
ＱＩＱＬＶＱＳＧＳＥＬＫＫＰＧＡＳＶＫＩＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＮＹＧＭＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＱＷＭＧＷＩＮＴＤＳＧＥＳＴＹ
ＡＥＥＦＫＧＲＦＶＦＳＬＤＴＳＶＮＴＡＹＬＱＩＴＳＬＴＡＥＤＴＧＭＹＦＣＶＲＶＧＹＤＡＬＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ；
ＵＳ２００８／００２５９８０の配列番号２４（配列番号１２２）：
ＱＩＱＬＶＱＳＧＳＥＬＫＫＰＧＡＳＶＫＩＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＮＹＧＭＮＷＶＫＱＡＰＧＱＧＬＫＷＭＧＷＩＮＴＤＳＧＥＳＴＹ
ＡＥＥＦＫＧＲＦＡＦＳＬＤＴＳＶＮＴＡＹＬＱＩＴＳＬＮＡＥＤＴＧＭＹＦＣＶＲＶＧＹＤＡＬＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖、
を含む。

一実施形態において、標的部分は、ＵＳ２００８／００２５９８０の配列番号１８を含む軽鎖とＵＳ２００８／００２５９８０の配列番号２２を含む重鎖とを含む。

一実施形態において、標的部分は、ＡＭＰ−５１４（ＭＥＤＩ−０６８０としても公知）を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２０１０／０２７８２７およびＷＯ２０１１／０６６３４２に開示されるＰＤ−Ｌ２−Ｆｃ融合タンパク質ＡＭＰ−２２４を含む。そのような実施形態において、標的部分は、ＷＯ２０１０／０２７８２７の配列番号４（配列番号１２３）：
ＬＦＴＶＴＶＰＫＥＬＹＩＩＥＨＧＳＮＶＴＬＥＣＮＦＤＴＧＳＨＶＮＬＧＡＩＴＡＳＬＱＫＶＥＮＤＴＳＰＨＲＥＲＡＴＬＬＥＥＱ
ＬＰＬＧＫＡＳＦＨＩＰＱＶＱＶＲＤＥＧＱＹＱＣＩＩＩＹＧＶＡＷＤＹＫＹＬＴＬＫＶＫＡＳＹＲＫＩＮＴＨＩＬＫＶＰＥＴＤＥＶ
ＥＬＴＣＱＡＴＧＹＰＬＡＥＶＳＷＰＮＶＳＶＰＡＮＴＳＨＳＲＴＰＥＧＬＹＱＶＴＳＶＬＲＬＫＰＰＰＧＲＮＦＳＣＶＦＷＮＴＨＶ
ＲＥＬＴＬＡＳＩＤＬＱＳＱＭＥＰＲＴＨＰＴＷＬＬＨＩＦＩＰＦＣＩＩＡＦＩＦＩＡＴＶＩＡＬＲＫＱＬＣＱＫＬＹＳＳＫＤＴＴＫ
ＲＰＶＴＴＴＫＲＥＶＮＳＡＩ
を含む標的化ドメイン、および／または
ＷＯ２０１０／０２７８２７の配列番号８３（配列番号１２４）：
ＭＩＦＬＬＬＭＬＳＬＥＬＱＬＨＱＩＡＡＬＦＴＶＴＶＰＫＥＬＹＩＩＥＨＧＳＮＶＴＬＥＣＮＦＤＴＧＳＨＶＮＬＧＡＩＴＡＳＬＱ
ＫＶＥＮＤＴＳＰＨＲＥＲＡＴＬＬＥＥＱＬＰＬＧＫＡＳＦＨＩＰＱＶＱＶＲＤＥＧＱＹＱＣＩＩＩＹＧＶＡＷＤＹＫＹＬＴＬＫＶＫ
ＡＳＹＲＫＩＮＴＨＩＬＫＶＰＥＴＤＥＶＥＬＴＣＱＡＴＧＹＰＬＡＥＶＳＷＰＮＶＳＶＰＡＮＴＳＨＳＲＴＰＥＧＬＹＱＶＴＳＶＬ
ＲＬＫＰＰＰＧＲＮＦＳＣＶＦＷＮＴＨＶＲＥＬＴＬＡＳＩＤＬＱＳＱＭＥＰＲＴＨＰＴＷＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬ
ＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥ
ＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳ
ＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫ
ＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
を含むＢ７−ＤＣ融合タンパク質
を含み得る。

一実施形態において、標的部分は、ペプチドＡＵＮＰ１２またはＵＳ２０１１／０３１８３７３もしくは同８，９０７，０５３に開示される他のペプチドのいずれかを含む。例えば、標的部分は、配列番号１２５：
ＳＮＴＳＥＳＦＫ （ＳＮＴＳＥＳＦ）ＦＲＶＴＱＬＡＰＫＡＱＩＫＥ−ＮＨ２

の配列を有するＡＵＮＰ１２（即ち、ＵＳ２０１１／０３１８３７３の化合物８または配列番号４９）を含み得る。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＵＳ２０１４／００４４７３８に開示される抗ＰＤ−１抗体１Ｅ３またはそのフラグメントを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法における使用のための１Ｅ３またはその抗原結合フラグメントは、
ＥＶＱＬＱＱＳＧＰＶ ＬＶＫＰＧＡＳＶＫＭ ＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴ ＤＹＹＭＮＷＶＫＱＳ ＨＧＫＳＬＥＷＩＧＮ
ＩＮＰＹＮＧＧＴＴＹ ＮＱＫＦＫＧＫＡＴＬ ＴＶＤＫＳＳＲＴＡＹ ＭＥＩＮＳＬＴＳＥＤ ＳＡＶＹＹＣＡＲＧＲ
ＩＹＤＧＳＬＤＹＷＧ ＱＧＴＡＬＴＶＳＳ（配列番号１２６）
のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または
ＤＩＱＭＴＱＦＰＳＳ ＬＣＡＳＱＧＧＫＶＴ ＶＴＣＫＡＳＱＤＩＮ ＮＹＭＡＷＹＱＨＫＰ ＧＫＧＰＲＬＬＩＨＹ
ＴＳＴＬＬＳＧＩＰＳ ＲＦＳＧＳＧＳＧＲＤ ＹＳＦＳＩＳＮＬＥＰ ＥＤＩＡＴＹＹＣＬＱ ＹＤＮＬＷＴＦＧＧＧ
ＴＫＬＥＩＫ（配列番号１２７）
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＵＳ２０１４／００４４７３８に開示される抗ＰＤ−１抗体１Ｅ８またはそのフラグメントを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法における使用のための１Ｅ８またはその抗原結合フラグメントは、
ＱＶＱＬＱＱＳＧＡＥ ＬＡＫＰＧＡＳＶＲＬ ＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴ ＮＹＷＭＨＷＶＫＱＲ ＰＧＱＧＬＥＷＩＧＨ
ＩＮＰＳＳＧＦＴＴＹ ＮＱＮＦＫＤＫＡＴＬ ＴＡＤＫＳＳＮＴＡＹ ＭＱＬＳＳＬＴＹＥＤ ＳＡＶＹＦＣＡＲＥＤ
ＹＤＶＤＹＷＧＱＧＴ ＴＬＴＶＳＳ（配列番号１２８）；
のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または
ＤＩＶＭＴＱＳＱＫＦ ＭＳＴＳＶＧＤＲＶＳ ＶＴＣＫＡＳＱＳＶＤ ＴＮＶＡＷＹＱＱＫＰ ＧＱＳＰＫＡＬＩＦＳ
ＡＳＹＲＹＳＧＶＰＤ ＲＦＴＧＳＧＳＧＴＤ ＦＴＬＴＩＮＳＶＱＳ ＥＤＬＡＥＹＦＣＱＱ ＹＮＳＹＰＹＴＦＧＳ
ＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号１２９）
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＵＳ２０１４／００４４７３８に開示される抗ＰＤ−１抗体１Ｈ３、またはそのフラグメントを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法における使用のための１Ｈ３またはその抗原結合フラグメントは、
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧ ＬＶＫＰＧＧＳＬＫＬ ＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳ ＤＹＧＭＨＷＶＲＱＡ ＰＥＫＧＬＥＷＶＡＹ
ＩＳＳＧＳＹＴＩＹＹ ＴＤＴＶＫＧＲＦＴＩ ＳＲＤＮＡＫＮＴＬＦ ＬＱＭＴＳＬＲＳＥＤ ＴＡＭＹＹＣＡＲＲＧ
ＹＧＳＦＹＥＹＹＦＤ ＹＷＧＱＧＴＴＬＴＶ ＳＳ（配列番号１３０）；
のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または
ＱＩＶＬＴＱＳＰＡＬ ＭＳＡＳＰＧＥＫＶＴ ＭＴＣＳＡＳＳＳＶＳ ＹＭＹＷＹＱＱＫＰＲ ＳＳＰＫＰＷＩＹＬＴ
ＳＮＬＡＳＧＶＰＡＲ ＦＳＧＳＧＳＧＴＳＹ ＳＬＴＩＳＳＭＥＡＥ ＤＡＡＴＹＹＣＱＱＷ ＳＳＮＰＦＴＦＧＳＧ
ＴＫＬＥＩＫ（配列番号１３１）
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域
を含む。

一実施形態において、標的部分は、例えば開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＵＳ８，９０７，０６５およびＷＯ２００８／０７１４４７、に開示されるＰＤ−１に対するＶＨＨを含む。例示的な実施形態において、ＰＤ−１に対するＶＨＨは、
ＵＳ８，９０７，０６５の配列番号３４７〜３５１：
ＵＳ８，９０７，０６５の配列番号３４７（配列番号１３２）：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＡＧＫＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＳＩＦＳＩＨＡＭＧＷＦＲＱＡＰＧＫＥＲＥＦＶＡＡ
ＩＴＷＳＧＧＩＴＹＹＥＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＶＹＬＱＭＮＳＬＫＰＥＤＴＡＩＹＹＣＡＡＤＲ
ＡＥＳＳＷＹＤＹＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ；
ＵＳ８，９０７，０６５の配列番号３４８（配列番号１３３）：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＡＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＳＩＡＳＩＨＡＭＧＷＦＲＱＡＰＧＫＥＲＥＦＶＡＶ
ＩＴＷＳＧＧＩＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＶＹＬＱＭＮＳＬＫＰＥＤＴＡＩＹＹＣＡＧＤＫ
ＨＱＳＳＷＹＤＹＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ；
ＵＳ８，９０７，０６５の配列番号３４９（配列番号１３４）：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＡＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＳＩＳＳＩＨＡＭＧＷＦＲＱＡＰＧＫＥＲＥＦＶＡＡ
ＩＴＷＳＧＧＩＴＹＹＡＤＳＬＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＧＹＬＱＭＮＳＬＫＰＥＤＴＡＩＹＹＣＡＡＤＲ
ＡＱＳＳＷＹＤＹＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ；
ＵＳ８，９０７，０６５の配列番号３５０（配列番号１３５）：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＡＧＧＳＬＧＬＳＣＡＡＳＧＳＩＦＳＩＮＡＭＡＷＦＲＱＡＰＧＫＥＲＥＦＶＡＬ
ＩＳＷＳＧＧＳＴＹＹＥＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＶＹＬＱＭＮＳＬＫＰＥＤＴＡＩＹＹＣＡＡＤＲ
ＶＤＳＮＷＹＤＹＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ；
ＵＳ８，９０７，０６５の配列番号３５１（配列番号１３６）：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＡＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＲＡＦＳＳＧＴＭＧＷＦＲＲＡＰＧＫＥＲＥＦＶＡ
ＳＩＰＷＳＧＧＲＩＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＱＮＴＶＹＬＱＭＮＳＬＫＰＥＤＴＡＶＹＹＣＡＶＫ
ＥＲＳＴＧＷＤＦＡＳＷＧＱＣＴＱＶＴＶＳＳ
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＵＳ２０１１／０２７１３５８およびＷＯ２０１０／０３６９５９に開示される抗ＰＤ−１抗体、またはそのフラグメントの任意の１つを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法における使用のための抗体またはその抗原結合フラグメントは、
ＵＳ２０１１／０２７１３５８の配列番号２５〜２９：
ＵＳ２０１１／０２７１３５８の配列番号２５（配列番号１３７）：
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＬＫＱＰＧＡＳＶＫＭＳＣＫＡＳＧＹＳＦＴＳＳＷＩＨＷＶＫＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＹＩＹＰＳＴＧＦＴＥＹ
ＮＱＫＦＫＤＲＡＴＬＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＳＡＶＹＹＣＡＲＷＲＤＳＳＧＹＨＡＭＤＹＷＧＱＧＴＳＶＴＶＳ
Ｓ；
ＵＳ２０１１／０２７１３５８の配列番号２６（配列番号１３８）：
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＱＰＧＡＳＶＫＭＳＣＫＡＳＧＹＳＦＴＳＳＷＩＨＷＶＫＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＹＩＹＰＳＴＧＦＴＥＹ
ＮＱＫＦＫＤＲＡＴＬＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹ３／ｄ１０ＣＡＲＷＲＤＳＳＧＹＨＡＭＤＹＷＧＱＧＴＳＶＴＶＳ
Ｓ；
ＵＳ２０１１／０２７１３５８の配列番号２７（配列番号１３９）：
ＱＶＱＬＶＱＳＧＨＥＶＫＱＰＧＡＳＶＫＭＳＣＫＡＳＧＹＳＦＴＳＳＷＩＨＷＶＫＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＹＩＹＰＳＴＧＦＴＥＹ
ＮＱＫＦＫＤＲＡＴＬＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＷＲＤＳＳＧＹＨＡＭＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳ
Ｓ；
ＵＳ２０１１／０２７１３５８の配列番号２８（配列番号１４０）：
ＱＶＱＬＶＱＳＧＨＥＶＫＱＰＧＡＳＶＫＭＳＣＫＡＳＧＹＳＦＴＳＳＷＩＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＹＩＹＰＳＴＧＦＴＥＹ
ＮＱＫＦＫＤＲＡＴＬＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＷＲＤＳＳＧＹＨＡＭＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳ
Ｓ；
ＵＳ２０１１／０２７１３５８の配列番号２９（配列番号１４１）：
ＱＶＱＬＶＱＳＧＨＥＶＫＱＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＳＦＴＳＳＷＩＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＹＩＹＰＳＴＧＦＴＥＹ
ＮＱＫＦＫＤＲＡＴＩＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＷＲＤＳＳＧＹＨＡＭＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳ
Ｓ
から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖、および／または
ＵＳ２０１１／０２７１３５８の配列番号３０〜３３：
ＵＳ２０１１／０２７１３５８の配列番号３０（配列番号１４２）：
ＤＩＶＬＴＱＳＰＡＳＬＴＬＳＰＧＱＲＬＴＩＳＣＲＡＳＱＳＶＳＴＳＧＹＳＹＭＨＷＹＱＱＫＰＤＱＳＰＫＬＬＩＫＦＧＳＮＬＥＳ
ＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＥＥＥＤＦＡＴＹＹＣＱＨＳＷＥＩＰＹＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ；
ＵＳ２０１１／０２７１３５８の配列番号３１（配列番号１４３）：
ＤＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＱＲＬＴＩＳＣＲＡＳＱＳＶＳＴＳＧＹＳＹＭＨＷＹＱＱＫＰＤＱＳＰＫＬＬＩＫＦＧＳＮＬＥＳ
ＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＨＳＷＥＩＰＹＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ；
ＵＳ２０１１／０２７１３５８の配列番号３２（配列番号１４４）：
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＱＲＬＴＩＳＣＲＡＳＱＳＶＳＴＳＧＹＳＹＭＨＷＹＱＱＫＰＤＱＳＰＫＬＬＩＫＦＧＳＮＬＥＳ
ＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＨＳＷＥＩＰＹＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ；
ＵＳ２０１１／０２７１３５８の配列番号３３（配列番号１４５）：
ＤＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＱＲＬＴＩＳＣＲＡＳＱＳＶＳＴＳＧＹＳＹＭＨＷＹＱＱＫＰＤＱＳＰＫＬＬＩＫＦＧＳＮＬＥＳ
ＧＩＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＨＳＷＥＩＰＹＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ．
から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖
を含む。

様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、ＴＳＲ−０４２（Ｔｅｓａｒｏ，Ｉｎｃ．）、ＲＥＧＮ２８１０（Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．）、ＰＤＲ００１（Ｎｏｖａｒｔｉｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、およびＢＧＢ−Ａ３１７（ＢｅｉＧｅｎｅ Ｌｔｄ．）から選択されるＰＤ−１に対する１つまたは複数の抗体、またはその抗体断片を含む。

様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、ＰＤ−Ｌ１に対する１つまたは複数の標的部分を有する。幾つかの実施形態において、キメラタンパク質は、ＰＤ−Ｌ１ポリペプチドを選択的に結合する１つまたは複数の標的部分を有する。幾つかの実施形態において、キメラタンパク質は、ＰＤ−Ｌ１ポリペプチドを選択的に結合する１つまたは複数の抗体、抗体誘導体もしくはフォーマット、ペプチドもしくはポリペプチド、または融合タンパク質を含む。

一実施形態において、標的部分は、抗ＰＤ−１抗体ＭＥＤＩ４７３６（デュルバルマブとしても公知）、またはそのフラグメントを含む。ＭＥＤＩ４７３６は、ＰＤ−Ｌ１に選択的であり、ＰＤ−１およびＣＤ８０受容体へのＰＤ−Ｌ１の結合を遮断する。本明細書で提供される方法における使用のためのＭＥＤＩ４７３６および抗原結合フラグメントは、重鎖と軽鎖、または重鎖可変領域と軽鎖可変領域を含む。ＭＥＤＩ４７３６の配列は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＷＯ／２０１６／０６２７２に開示される。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法での使用のためのＭＥＤＩ４７３６またはその抗原結合フラグメントは、
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧ ＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬ ＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳ ＲＹＷＭＳＷＶＲＱＡ ＰＧＫＧＬＥＷＶＡＮ
ＩＫＱＤＧＳＥＫＹＹ ＶＤＳＶＫＧＲＦＴＩ ＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹ ＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤ ＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧ
ＧＷＦＧＥＬＡＦＤＹ ＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳ ＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦ ＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳ ＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶ
ＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶ ＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧ ＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳ ＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶ ＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱ
ＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰ ＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥ ＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣ ＰＰＣＰＡＰＥＦＥＧ ＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫ
ＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴ ＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶ ＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮ ＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮ ＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹ
ＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬ ＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧ ＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫ ＡＬＰＡＳＩＥＫＴＩ ＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰ
ＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥ ＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴ ＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤ ＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱ ＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰ
ＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬ ＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲ ＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳ ＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹ ＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧ
Ｋ（配列番号１４６）；
のアミノ酸配列を含む重鎖、および／または
ＥＩＶＬＴＱＳＰＧＴ ＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴ ＬＳＣＲＡＳＱＲＶＳ ＳＳＹＬＡＷＹＱＱＫ ＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹ
ＤＡＳＳＲＡＴＧＩＰ ＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴ ＤＦＴＬＴＩＳＲＬＥ ＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱ ＱＹＧＳＬＰＷＴＦＧ
ＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴ ＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰ ＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴ ＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦ ＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫ
ＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳ ＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫ ＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬ ＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨ ＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱ
ＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦ ＮＲＧＥＣ（配列番号１４７）
のアミノ酸配列を含む軽鎖
を含む。

例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法での使用のためのＭＥＤＩ４７３６またはその抗原結合フラグメントは、
ＷＯ／２０１６／０６２７２の配列番号４（配列番号１４８）：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＲＹＷＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＮＩＫＱＤＧＳＥＫＹＹ
ＶＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＧＷＦＧＥＬＡＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳ
Ｓ；
のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または
ＷＯ／２０１６／０６２７２の配列番号３（配列番号１４９）：
ＥＩＶＬＴＱＳＰＧＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＲＶＳＳＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＤＡＳＳＲＡＴＧＩＰ
ＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＲＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＹＧＳＬＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域
を含む。

一実施形態において、標的部分は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体アテゾリズマブ（ＭＰＤＬ３２８０Ａ、ＲＧ７４４６としても公知）、またはそのフラグメントを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法での使用のためのアテゾリズマブまたはその抗原結合フラグメントは、
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＤＳＷＩＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＷＩＳＰＹＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＡＤＴＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＲＨＷＰＧＧＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＡＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号１５０）；
のアミノ酸配列を含む重鎖、および／または
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＶＳＴＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＳＡＳＦＬＹＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＬＹＨＰＡＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号１５１）
のアミノ酸配列を含む軽鎖、
を含む。

一実施形態において、標的部分は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体アベルマブ（ＭＳＢ００１０７１８Ｃとしても公知）、またはそのフラグメントを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法での使用のためのアベルマブまたはその抗原結合フラグメントは、
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧ ＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬ ＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳ ＳＹＩＭＭＷＶＲＱＡ ＰＧＫＧＬＥＷＶＳＳ
ＩＹＰＳＧＧＩＴＦＹ ＡＤＴＶＫＧＲＦＴＩ ＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹ ＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤ ＴＡＶＹＹＣＡＲＩＫ
ＬＧＴＶＴＴＶＤＹＷ ＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰ ＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧ ＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫ
ＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳ ＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶ ＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳ ＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴ ＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴ
ＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳ ＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰ ＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰ ＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧ ＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰ
ＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰ ＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳ ＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷ ＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡ ＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮ
ＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴ ＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫ ＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡ ＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳ ＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱ
ＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥ ＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣ ＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩ ＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰ ＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶ
ＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹ ＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷ ＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶ ＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴ ＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号１５２）；
のアミノ酸配列を含む重鎖、および／または
ＱＳＡＬＴＱＰＡＳＶ ＳＧＳＰＧＱＳＩＴＩ ＳＣＴＧＴＳＳＤＶＧ ＧＹＮＹＶＳＷＹＱＱ ＨＰＧＫＡＰＫＬＭＩ
ＹＤＶＳＮＲＰＳＧＶ ＳＮＲＦＳＧＳＫＳＧ ＮＴＡＳＬＴＩＳＧＬ ＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣ ＳＳＹＴＳＳＳＴＲＶ
ＦＧＴＧＴＫＶＴＶＬ ＧＱＰＫＡＮＰＴＶＴ ＬＦＰＰＳＳＥＥＬＱ ＡＮＫＡＴＬＶＣＬＩ ＳＤＦＹＰＧＡＶＴＶ
ＡＷＫＡＤＧＳＰＶＫ ＡＧＶＥＴＴＫＰＳＫ ＱＳＮＮＫＹＡＡＳＳ ＹＬＳＬＴＰＥＱＷＫ ＳＨＲＳＹＳＣＱＶＴ
ＨＥＧＳＴＶＥＫＴＶ ＡＰＴＥＣＳ（配列番号１５３）
のアミノ酸配列を含む軽鎖、
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＵＳ２０１３／０３０９２５０およびＷＯ２００７／００５８７４に開示される抗ＰＤ−Ｌ１抗体ＢＭＳ−９３６５５９（１２Ａ４、ＭＤＸ−１１０５としても公知）、またはそのフラグメントを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法での使用のためのＢＭＳ−９３６５５９またはその抗原結合フラグメントは、
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＴＳＧＤＴＦＳＴＹＡＩＳＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＧＩＩＰＩＦＧＫＡＨＹ
ＡＱＫＦＱＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＦＣＡＲＫＦＨＦＶＳＧＳＰＦＧＭＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴ
ＶＳＳ（配列番号１５４）；
のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＤＡＳＮＲＡＴＧＩＰＡ
ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＲＳＮＷＰＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号１５５）
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＵＳ２０１３／０３０９２５０およびＷＯ２００７／００５８７４に開示される抗ＰＤ−Ｌ１抗体３Ｇ１０、またはそのフラグメントを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法での使用のための３Ｇ１０またはその抗原結合フラグメントは、
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＤＹＧＦＳＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＷＩＴＡＹＮＧＮＴＮＹ
ＡＱＫＬＱＧＲＶＴＭＴＴＤＴＳＴＳＴＶＹＭＥＬＲＳＬＲＳＤＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＹＦＹＧＭＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号１５６）
のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＹＬＶＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＤＡＳＮＲＡＴＧＩＰＡ
ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＲＳＮＷＰＲＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号１５７）
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＵＳ２０１３／０３０９２５０およびＷＯ２００７／００５８７４に開示される抗ＰＤ−Ｌ１抗体１０Ａ５、またはそのフラグメントを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法での使用のための１０Ａ５またはその抗原結合フラグメントは、
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＳＹＤＶＨＷＶＲＱＡＰＧＱＲＬＥＷＭＧＷＬＨＡＤＴＧＩＴＫＦ
ＳＱＫＦＱＧＲＶＴＩＴＲＤＴＳＡＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＲＩＱＬＷＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号１５８）；
のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＧＩＳＳＷＬＡＷＹＱＱＫＰＥＫＡＰＫＳＬＩＹＡＡＳＳＬＱＳＧＶＰＳ
ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＮＳＹＰＹＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号１５９）
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＵＳ２０１３／０３０９２５０およびＷＯ２００７／００５８７４に開示される抗ＰＤ−Ｌ１抗体５Ｆ８、またはそのフラグメントを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法での使用のための５Ｆ８またはその抗原結合フラグメントは、
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＶＳＧＧＩＦＳＴＹＡＩＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＧＩＩＰＩＦＧＴＡＮＨ
ＡＱＫＦＱＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＱＧＩＡＡＡＬＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号１６０）；
のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または
ＥＩＶＬＴＱＳＰＧＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＧＡＳＳＲＡＴＧＩＰ
ＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＲＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＹＧＳＳＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号１６１）
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＵＳ２０１３／０３０９２５０およびＷＯ２００７／００５８７４に開示される抗ＰＤ−Ｌ１抗体１０Ｈ１０、またはそのフラグメントを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法での使用のための１０Ｈ１０またはその抗原結合フラグメントは、
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＶＳＧＦＴＦＤＤＹＶＶＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＳＧＮＳＧＮＩＧＹ
ＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＬＹＹＣＡＶＰＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号１６２）；
のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＧＩＳＳＷＬＡＷＹＱＱＫＰＥＫＡＰＫＳＬＩＹＡＡＳＳＬＱＳＧＶＰＳ
ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＮＳＹＰＹＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号１６３）
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＵＳ２０１３／０３０９２５０およびＷＯ２００７／００５８７４に開示される抗ＰＤ−Ｌ１抗体１Ｂ１２、またはそのフラグメントを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法での使用のための１Ｂ１２またはその抗原結合フラグメントは、
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＴＳＧＤＴＦＳＳＹＡＩＳＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＧＩＩＰＩＦＧＲＡＨＹ
ＡＱＫＦＱＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＦＣＡＲＫＦＨＦＶＳＧＳＰＦＧＭＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴ
ＶＳＳ（配列番号１６４）；
のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＤＡＳＮＲＡＴＧＩＰＡ
ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＲＳＮＷＰＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号１６５）
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＵＳ２０１３／０３０９２５０およびＷＯ２００７／００５８７４に開示される抗ＰＤ−Ｌ１抗体７Ｈ１、またはそのフラグメントを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法での使用のための７Ｈ１またはその抗原結合フラグメントは、
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＴＳＧＧＴＦＳＳＹＡＩＳＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＧＩＩＰＩＦＧＫＡＨＹ
ＡＱＫＦＱＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＴＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＫＹＤＹＶＳＧＳＰＦＧＭＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴ
ＶＳＳ（配列番号１６６）；
のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＤＡＳＮＲＡＴＧＩＰＡ
ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＲＳＮＷＰＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号１６７）
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＵＳ２０１３／０３０９２５０およびＷＯ２００７／００５８７４に開示される抗ＰＤ−Ｌ１抗体１１Ｅ６、またはそのフラグメントを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法での使用のための１１Ｅ６またはその抗原結合フラグメントは、
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＧＴＦＳＳＹＡＩＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＧＩＩＰＩＦＧＳＡＮＹ
ＡＱＫＦＱＤＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＡＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＳＳＧＷＳＲＹＹＭＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳ
Ｓ（配列番号１６８）；
のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または
ＥＩＶＬＴＱＳＰＧＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＧＡＳＳＲＡＴＧＩＰ
ＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＲＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＹＧＳＳＰＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号：１６９）
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＵＳ２０１３／０３０９２５０およびＷＯ２００７／００５８７４に開示される抗ＰＤ−Ｌ１抗体１２Ｂ７、またはそのフラグメントを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法での使用のための１２Ｂ７またはその抗原結合フラグメントは、
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＥＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＧＴＦＮＳＹＡＩＳＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＧＩＩＰＬＦＧＩＡＨＹ
ＡＱＫＦＱＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＮＴＡＹＭＤＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＫＹＳＹＶＳＧＳＰＦＧＭＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴ
ＶＳＳ（配列番号１７０）；
のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＤＡＳＮＲＡＴＧＩＰＡ
ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＲＳＮＷＰＴＦＧＱＧＴＲＬＥＩＫ（配列番号１７１）
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＵＳ２０１３／０３０９２５０およびＷＯ２００７／００５８７４に開示される抗ＰＤ−Ｌ１抗体１３Ｇ４、またはそのフラグメントを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法での使用のための１３Ｇ４またはその抗原結合フラグメントは、
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＩＴＦＤＤＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＧＩＳＷＮＲＧＲＩＥＹ
ＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＬＹＹＣＡＫＧＲＦＲＹＦＤＷＦＬＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳ
Ｓ（配列番号１７２）；
のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または
ＡＩＱＬＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＧＩＳＳＡＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＤＡＳＳＬＥＳＧＶＰＳ
ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＦＮＳＹＰＦＴＦＧＰＧＴＫＶＤＩＫ（配列番号１７３）
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＵＳ２０１４／００４４７３８に開示される抗ＰＤ−Ｌ１抗体１Ｅ１２、またはそのフラグメントを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法での使用のための１Ｅ１２またはその抗原結合フラグメントは、
ＥＶＫＬＱＥＳＧＰＳ ＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬ ＴＣＳＶＴＧＹＳＩＴ ＳＤＹＷＮＷＩＲＫＦ ＰＧＮＫＬＥＹＶＧＹ
ＩＳＹＴＧＳＴＹＹＮ ＰＳＬＫＳＲＩＳＩＴ ＲＤＴＳＫＮＱＹＹＬ ＱＬＮＳＶＴＳＥＤＴ ＡＴＹＹＣＡＲＹＧＧ
ＷＬＳＰＦＤＹＷＧＱ ＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１７４）；
のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または
ＤＩＶＭＴＱＳＨＫＬ ＭＳＴＳＶＧＤＲＶＳ ＩＴＣＫＡＳＱＤＶＧ ＴＡＶＡＷＹＱＱＫＰ ＧＱＳＰＫＬＬＩＹＷ
ＡＳＴＲＨＴＧＶＰＤ ＲＦＴＧＳＧＳＧＴＤ ＦＴＬＴＩＳＮＶＱＳ ＥＤＬＡＤＹＦＣＱＱ ＤＳＳＹＰＬＴＦＧＡ
ＧＴＫＶＥＬＫ（配列番号１７５）
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＵＳ２０１４／００４４７３８に開示される抗ＰＤ−Ｌ１抗体１Ｆ４、またはそのフラグメントを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法での使用のための１Ｆ４またはその抗原結合フラグメントは、
ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＧ ＬＶＡＰＳＱＳＬＳＩ ＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴ ＴＹＳＩＮＷＩＲＱＰ ＰＧＫＧＬＥＷＬＧＶ
ＭＷＡＧＧＧＴＮＳＮ ＳＶＬＫＳＲＬＩＩＳ ＫＤＮＳＫＳＱＶＦＬ ＫＭＮＳＬＱＴＤＤＴ ＡＲＹＹＣＡＲＹＹＧ
ＮＳＰＹＹＡＩＤＹＷ ＧＱＧＴＳＶＴＶＳＳ（配列番号１７６）；
のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または
ＤＩＶＴＴＱＳＨＫＬ ＭＳＴＳＶＧＤＲＶＳ ＩＴＣＫＡＳＱＤＶＧ ＴＡＶＡＷＹＱＱＫＰ ＧＱＳＰＫＬＬＩＹＷ
ＡＳＴＲＨＴＧＶＰＤ ＲＦＴＧＳＧＳＧＴＤ ＦＴＬＴＩＳＮＶＱＳ ＥＤＬＡＤＹＦＣＱＱ ＤＳＳＹＰＬＴＦＧＡ
ＧＴＫＶＥＬＫ（配列番号１７７）
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＵＳ２０１４／００４４７３８に開示される抗ＰＤ−Ｌ１抗体２Ｇ１１、またはそのフラグメントを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法での使用のための２Ｇ１１またはその抗原結合フラグメントは、
ＥＶＫＬＱＥＳＧＰＳ ＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬ ＴＣＳＶＴＧＹＳＩＩ ＳＤＹＷＮＷＩＲＫＦ ＰＧＮＫＬＥＹＬＧＹ
ＩＳＹＴＧＳＴＹＹＮ ＰＳＬＫＳＲＩＳＩＴ ＲＤＴＳＫＮＱＹＹＬ ＱＬＮＳＶＴＴＥＤＴ ＡＴＹＹＣＡＲＲＧＧ
ＷＬＬＰＦＤＹＷＧＱ ＧＴＴＬＴＶＳＳ（配列番号１７８）；
のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または
ＤＩＶＭＴＱＳＰＳＳ ＬＡＶＳＶＧＥＫＶＳ ＭＧＣＫＳＳＱＳＬＬ ＹＳＳＮＱＫＮＳＬＡ ＷＹＱＱＫＰＧＱＳＰ
ＫＬＬＩＤＷＡＳＴＲ ＥＳＧＶＰＤＲＦＴＧ ＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴ ＩＳＳＶＫＡＥＤＬＡ ＶＹＹＣＱＱＹＹＧＹ
ＰＬＴＦＧＡＧＴＫＬ ＥＬＫ（配列番号１７９）
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＵＳ２０１４／００４４７３８に開示される抗ＰＤ−Ｌ１抗体３Ｂ６、またはそのフラグメントを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法での使用のための３Ｂ６またはその抗原結合フラグメントは、
ＥＶＫＬＱＥＳＧＰＳ ＬＶＫＰＧＡＳＶＫＬ ＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴ ＳＹＤＩＮＷＶＫＱＲ ＰＧＱＧＬＥＷＩＧＷ
ＩＦＰＲＤＮＮＴＫＹ ＮＥＮＦＫＧＫＡＴＬ ＴＶＤＴＳＳＴＴＡＹ ＭＥＬＨＳＬＴＳＥＤ ＳＡＶＹＦＣＴＫＥＮ
ＷＶＧＤＦＤＹＷＧＱ ＧＴＴＬＴＬＳＳ（配列番号１８０）；
のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または
ＤＩＶＭＴＱＳＰＡＩ ＭＳＡＳＰＧＥＫＶＴ ＭＴＣＳＡＳＳＳＩＲ ＹＭＨＷＹＱＱＫＰＧ ＴＳＰＫＲＷＩＳＤＴ
ＳＫＬＴＳＧＶＰＡＲ ＦＳＧＳＧＳＧＴＳＹ ＡＬＴＩＳＳＭＥＡＥ ＤＡＡＴＹＹＣＨＱＲ ＳＳＹＰＷＴＦＧＧＧ
ＴＫＬＥＩＫ（配列番号１８１）
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＵＳ２０１４／００４４７３８およびＷＯ２０１２／１４５４９３に開示される抗ＰＤ−Ｌ１抗体３Ｄ１０、またはそのフラグメントを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法での使用のための３Ｄ１０またはその抗原結合フラグメントは、
ＥＶＱＬＱＱＳＧＰＤ ＬＶＴＰＧＡＳＶＲＩ ＳＣＱＡＳＧＹＴＦＰ ＤＹＹＭＮＷＶＫＱＳ ＨＧＫＳＬＥＷＩＧＤ
ＩＤＰＮＹＧＧＴＴＹ ＮＱＫＦＫＧＫＡＩＬ ＴＶＤＲＳＳＳＴＡＹ ＭＥＬＲＳＬＴＳＥＤ ＳＡＶＹＹＣＡＲＧＡ
ＬＴＤＷＧＱＧＴＳＬ ＴＶＳＳ（配列番号１８２）；
のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または
ＱＩＶＬＳＱＳＰＡＩ ＬＳＡＳＰＧＥＫＶＴ ＭＴＣＲＡＳＳＳＶＳ ＹＩＹＷＦＱＱＫＰＧ ＳＳＰＫＰＷＩＹＡＴ
ＦＮＬＡＳＧＶＰＡＲ ＦＳＧＳＧＳＧＴＳＹ ＳＬＴＩＳＲＶＥＴＥ ＤＡＡＴＹＹＣＱＱＷ ＳＮＮＰＬＴＦＧＡＧ
ＴＫＬＥＬＫ（配列番号１８３）
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＵＳ２０１１／０２７１３５８およびＷＯ２０１０／０３６９５９に開示される抗ＰＤ−Ｌ１抗体の任意の１つを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法での使用のための抗体またはその抗原結合フラグメントは、
ＵＳ２０１１／０２７１３５８の配列番号３４〜３８：
ＵＳ２０１１／０２７１３５８の配列番号３４（配列番号１８４）：
ＥＶＱＬＶＱＳＧＰＥＬＫＫＰＧＡＳＶＫＭＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＳＹＶＭＨＷＶＫＱＡＰＧＱＲＬＥＷＩＧＹＶＮＰＦＮＤＧＴＫＹ
ＮＥＭＦＫＧＲＡＴＬＴＳＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＳＡＶＹＹＣＡＲＱＡＷＧＹＰＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ；
ＵＳ２０１１／０２７１３５８の配列番号３５（配列番号１８５）：
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＭＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＳＹＶＭＨＷＶＫＱＡＰＧＱＲＬＥＷＩＧＹＶＮＰＦＮＤＧＴＫＹ
ＮＥＭＦＫＧＲＡＴＬＴＳＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＱＡＷＧＹＰＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ；
ＵＳ２０１１／０２７１３５８の配列番号３６（配列番号１８６）：
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＭＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＳＹＶＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＲＬＥＷＩＧＹＶＮＰＦＮＤＧＴＫＹ
ＮＥＭＦＫＧＲＡＴＬＴＳＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＱＡＷＧＹＰＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ；
ＵＳ２０１１／０２７１３５８の配列番号３７（配列番号１８７）：
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＳＹＶＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＲＬＥＷＩＧＹＶＮＰＦＮＤＧＴＫＹ
ＮＥＭＦＫＧＲＡＴＬＴＳＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＱＡＷＧＹＰＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ；
ＵＳ２０１１／０２７１３５８の配列番号３８（配列番号１８８）：
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＳＹＶＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＲＬＥＷＩＧＹＶＮＰＦＮＤＧＴＫＹ
ＮＥＭＦＫＧＲＡＴＩＴＳＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＱＡＷＧＹＰＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ；
から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖、および／または
ＵＳ２０１１／０２７１３５８の配列番号３９〜４２：
ＵＳ２０１１／０２７１３５８の配列番号３９（配列番号１８９）：
ＤＩＶＬＴＱＳＰＡＳＬＡＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＴＥＳＶＥＹＹＧＴＳＬＶＱＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＡＡＳＳＶＤＳ
ＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＮＳＬＥＥＥＤＡＡＭＹＦＣＱＱＳＲＲＶＰＹＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ；
ＵＳ２０１１／０２７１３５８の配列番号４０（配列番号１９０）：
ＤＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＴＥＳＶＥＹＹＧＴＳＬＶＱＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＡＡＳＳＶＤＳ
ＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＮＳＬＥＡＥＤＡＡＭＹＦＣＱＱＳＲＲＶＰＹＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ；
ＵＳ２０１１／０２７１３５８の配列番号４１（配列番号１９１）：
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＴＥＳＶＥＹＹＧＴＳＬＶＱＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＡＡＳＳＶＤＳ
ＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＮＳＬＥＡＥＤＡＡＭＹＦＣＱＱＳＲＲＶＰＹＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ；
ＵＳ２０１１／０２７１３５８の配列番号４２（配列番号１９２）：
ＤＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＴＥＳＶＥＹＹＧＴＳＬＶＱＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＡＡＳＳＶＤＳ
ＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＮＳＬＥＡＥＤＡＡＴＹＦＣＱＱＳＲＲＶＰＹＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ
から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２０１１／０６６３８９、ＵＳ８，７７９，１０８、およびＵＳ２０１４／０３５６３５３に開示される抗ＰＤ−Ｌ１抗体２．７Ａ４、またはそのフラグメントを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法での使用のための２．７Ａ４またはその抗原結合フラグメントは、
ＷＯ２０１１／０６６３８９の配列番号２（配列番号１９３）：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＴＹＳＭＮＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＳＩＳＳＳＧＤＹＩＹＹ
ＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＦＬＱＭＮＳＬＫＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＬＶＴＳＭＶＡＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ；
のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または
ＷＯ２０１１／０６６３８９の配列番号７（配列番号１９４）：
ＳＹＥＬＴＱＰＰＳＶＳＶＳＰＧＱＡＡＲＩＴＣＳＧＤＡＬＰＱＫＹＶＦＷＹＱＱＫＳＧＱＡＰＶＬＶＩＹＥＤＳＫＲＰＳＧＩＰＥＲ
ＦＳＧＳＳＳＧＴＭＡＴＬＴＩＳＧＡＱＶＥＤＥＡＤＹＹＣＹＳＴＤＲＳＧＮＨＲＶＦＧＧＧＴＲＬＴＶＬ
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２０１１／０６６３８９、ＵＳ８，７７９，１０８、およびＵＳ２０１４／０３５６３５３に開示される抗ＰＤ−Ｌ１抗体２．９Ｄ１０、またはそのフラグメントを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法での使用のための２．９Ｄ１０またはその抗原結合フラグメントは、
ＷＯ２０１１／０６６３８９の配列番号１２（配列番号１９５）：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＷＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＮＩＫＱＤＧＧＥＱＹＹ
ＶＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＷＮＹＧＹＹＤＭＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ；
のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または
ＷＯ２０１１／０６６３８９の配列番号１７（配列番号１９６）：
ＥＩＶＬＴＱＳＰＧＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＮＹＬＡＷＦＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＦＧＴＳＳＲＡＴＧＩＰ
ＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＲＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＹＧＳＳＩＦＴＦＧＰＧＴＫＶＤＩＫ
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２０１１／０６６３８９、ＵＳ８，７７９，１０８、およびＵＳ２０１４／０３５６３５３に開示される抗ＰＤ−Ｌ１抗体２．１４Ｈ９、またはそのフラグメントを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法での使用のための２．１４Ｈ９またはその抗原結合フラグメントは、
ＷＯ２０１１／０６６３８９の配列番号２２（配列番号１９７）：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＲＹＷＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＮＩＫＱＤＧＳＥＫＹＹ
ＶＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＧＷＦＧＥＬＡＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳ
Ｓ；
のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または
ＷＯ２０１１／０６６３８９の配列番号２７（配列番号１９８）：
ＥＩＶＬＴＱＳＰＧＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＲＶＳＳＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＤＡＳＳＲＡＴＧＩＰ
ＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＲＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＹＧＳＬＰＷＴＦＧＱＧＴＥＶＥＩＫ
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２０１１／０６６３８９、ＵＳ８，７７９，１０８、およびＵＳ２０１４／０３５６３５３に開示される抗ＰＤ−Ｌ１抗体２．２０Ａ８、またはそのフラグメントを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法での使用のための２．２０Ａ８またはその抗原結合フラグメントは、
ＷＯ２０１１／０６６３８９の配列番号３２（配列番号１９９）：
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＮＹＡＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＲＧＳＧＧＳＴＹＹ
ＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＫＤＬＨＹＤＳＳＧＹＬＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳ
Ｓ；
のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または
ＷＯ２０１１／０６６３８９の配列番号３７（配列番号２００）：
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＶＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＧＩＲＳＷＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＡＩＳＲＬＱＳＧＶＰＳ
ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＡＮＳＦＰＬＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫ
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２０１１／０６６３８９、ＵＳ８，７７９，１０８、およびＵＳ２０１４／０３５６３５３に開示される抗ＰＤ−Ｌ１抗体３．１５Ｇ８、またはそのフラグメントを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法での使用のための３．１５Ｇ８またはその抗原結合フラグメントは、
ＷＯ２０１１／０６６３８９の配列番号４２（配列番号２０１）：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＷＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＮＩＫＱＤＧＧＥＫＹＹ
ＶＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＦＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＶＱＬＹＳＤＹＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ；
のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または
ＷＯ２０１１／０６６３８９の配列番号４７（配列番号２０２）：
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＶＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＧＩＳＳＷＬＡＷＹＱＱＫＳＧＫＡＰＫＬＬＩＹＡＡＳＧＬＱＳＧＶＰＳ
ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＬＡＴＹＹＣＱＱＳＨＳＬＰＰＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２０１１／０６６３８９、ＵＳ８，７７９，１０８、およびＵＳ２０１４／０３５６３５３に開示される抗ＰＤ−Ｌ１抗体３．１８Ｇ１、またはそのフラグメントを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法での使用のための３．１８Ｇ１またはその抗原結合フラグメントは、
ＷＯ２０１１／０６６３８９の配列番号５２（配列番号２０３）：
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＤＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＮＳＹＡＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＴＩＳＧＳＧＧＦＴＦＳ
ＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＦＬＱＭＮＳＬＲＶＥＤＳＡＶＹＳＣＡＫＶＬＶＧＦＮＮＧＣＷＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳ
Ｓ；
のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または
ＷＯ２０１１／０６６３８９の配列番号５７（配列番号２０４）：
ＳＹＶＬＴＱＰＰＳＶＳＶＡＰＧＱＴＡＲＩＴＣＧＧＮＮＩＧＳＫＳＶＨＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＶＬＶＶＹＤＤＳＤＲＰＳＧＩＰＥＲ
ＦＳＧＳＮＳＧＮＴＡＴＬＴＩＳＲＶＥＡＧＤＥＡＤＹＹＣＱＶＷＤＳＳＮＤＨＶＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬ
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２０１１／０６６３８９、ＵＳ８，７７９，１０８、およびＵＳ２０１４／０３５６３５３、およびＵＳ２０１４／０３５６３５３に開示される抗ＰＤ−Ｌ１抗体２．７Ａ４ＯＰＴ、またはそのフラグメントを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法での使用のための２．７Ａ４ＯＰＴまたはその抗原結合フラグメントは、
ＷＯ２０１１／０６６３８９の配列番号６２（配列番号２０５）：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＴＹＳＭＮＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＳＩＳＳＳＧＤＹＩＹＹ
ＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＬＶＴＳＭＶＡＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ；
のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または
ＷＯ２０１１／０６６３８９の配列番号６７（配列番号２０６）：
ＳＹＥＬＴＱＰＰＳＶＳＶＳＰＧＱＴＡＲＩＴＣＳＧＤＡＬＰＱＫＹＶＦＷＹＱＱＫＳＧＱＡＰＶＬＶＩＹＥＤＳＫＲＰＳＧＩＰＥＲ
ＦＳＧＳＳＳＧＴＭＡＴＬＴＩＳＧＡＱＶＥＤＥＡＤＹＹＣＹＳＴＤＲＳＧＮＨＲＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬ
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２０１１／０６６３８９、ＵＳ８，７７９，１０８、およびＵＳ２０１４／０３５６３５３に開示される抗ＰＤ−Ｌ１抗体２．１４Ｈ９ＯＰＴ、またはそのフラグメントを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法での使用のための２．１４Ｈ９ＯＰＴまたはその抗原結合フラグメントは、
ＷＯ２０１１／０６６３８９の配列番号７２（配列番号２０７）：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＲＹＷＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＮＩＫＱＤＧＳＥＫＹＹ
ＶＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＧＷＦＧＥＬＡＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳ
Ｓ；
のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または
ＷＯ２０１１／０６６３８９の配列番号７７（配列番号２０８）：
ＥＩＶＬＴＱＳＰＧＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＲＶＳＳＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＤＡＳＳＲＡＴＧＩＰ
ＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＲＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＹＧＳＬＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２０１６／０６１１４２に開示される抗ＰＤ−Ｌ１抗体の任意の１つを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法での使用のための抗体またはその抗原結合フラグメントは、
ＷＯ２０１６／０６１１４２の配列番号１８、３０、３８、４６、５０、５４、６２、７０、および７８：
ＷＯ２０１６／０６１１４２の配列番号１８（配列番号２０９）：
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＳＹＷＭＹＷＶＲＱＡＴＧＱＧＬＥＷＭＧＲＩＤＰＮＳＧＳＴＫＹ
ＮＥＫＦＫＮＲＦＴＩＳＲＤＤＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＫＴＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＹＲＫＧＬＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ；
ＷＯ２０１６／０６１１４２の配列番号３０（配列番号２１０）：
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＴＶＫＩＳＣＫＶＳＧＹＴＦＴＳＹＷＭＹＷＶＲＱＡＴＧＱＧＬＥＷＭＧＲＩＤＰＮＳＧＳＴＫＹ
ＮＥＫＦＫＮＲＶＴＩＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＹＲＫＧＬＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ；
ＷＯ２０１６／０６１１４２の配列番号３８（配列番号２１１）：
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＥＳＬＲＩＳＣＫＧＳＧＹＴＦＴＳＹＷＭＹＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＲＩＤＰＮＳＧＳＴＫＹ
ＮＥＫＦＫＮＲＶＴＩＳＶＤＴＳＫＮＱＦＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＹＲＫＧＬＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ；
ＷＯ２０１６／０６１１４２の配列番号４６（配列番号２１２）：
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＴＶＫＩＳＣＫＶＳＧＹＴＦＴＳＹＷＭＹＷＩＲＱＳＰＳＲＧＬＥＷＬＧＲＩＤＰＮＳＧＳＴＫＹ
ＮＥＫＦＫＮＲＬＴＩＳＫＤＴＳＫＮＱＶＶＬＴＭＴＮＭＤＰＶＤＴＡＴＹＹＣＡＲＤＹＲＫＧＬＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ；
ＷＯ２０１６／０６１１４２の配列番号５０（配列番号２１３）：
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＥＳＬＲＩＳＣＫＧＳＧＹＴＦＴＳＹＷＭＹＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＲＩＤＰＮＳＧＳＴＫＹ
ＮＥＫＦＫＮＲＶＴＩＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＹＲＫＧＬＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ；
ＷＯ２０１６／０６１１４２の配列番号５４（配列番号２１４）：
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＳＹＷＭＹＷＩＲＱＳＰＳＲＧＬＥＷＬＧＲＩＤＰＮＳＧＳＴＫＹ
ＮＥＫＦＫＮＲＦＴＩＳＲＤＤＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＫＴＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＹＲＫＧＬＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ；
ＷＯ２０１６／０６１１４２の配列番号６２（配列番号２１５）
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＥＳＬＲＩＳＣＫＧＳＧＹＴＦＴＳＹＷＭＹＷＶＲＱＡＲＧＱＲＬＥＷＩＧＲＩＤＰＮＳＧＳＴＫＹ
ＮＥＫＦＫＮＲＬＴＩＳＫＤＴＳＫＮＱＶＶＬＴＭＴＮＭＤＰＶＤＴＡＴＹＹＣＡＲＤＹＲＫＧＬＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ；
ＷＯ２０１６／０６１１４２の配列番号７０（配列番号２１６）：
ＱＩＴＬＫＥＳＧＰＴＬＶＫＰＴＱＴＬＴＬＴＣＴＦＳＧＹＴＦＴＳＹＷＭＹＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＲＩＤＰＮＳＧＳＴＫＹ
ＮＥＫＦＫＮＲＶＴＩＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＹＲＫＧＬＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ；
ＷＯ２０１６／０６１１４２の配列番号７８（配列番号２１７）：
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＴＶＫＩＳＣＫＶＳＧＹＴＦＴＳＹＷＭＹＷＶＲＱＡＲＧＱＲＬＥＷＩＧＲＩＤＰＮＳＧＳＴＫＹ
ＮＥＫＦＫＮＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＹＲＫＧＬＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ；
から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖、および／または
ＷＯ２０１６／０６１１４２の配列番号２２、２６、３４、４２、５８、６６、７４、８２、および８６：
ＷＯ２０１６／０６１１４２の配列番号２２（配列番号２１８）：
ＤＩＶＭＴＱＴＰＬＳＬＰＶＴＰＧＥＰＡＳＩＳＣＫＡＳＱＤＶＧＴＡＶＡＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＱＬＬＩＹＷＡＳＴＲＨＴＧＩＰＡ
ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＳＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＹＮＳＹＰＬＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ；
ＷＯ２０１６／０６１１４２の配列番号２６（配列番号２１９）：
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＡＳＱＤＶＧＴＡＶＡＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＱＬＬＩＹＷＡＳＴＲＨＴＧＶＰＳ
ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＮＳＹＰＬＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ；
ＷＯ２０１６／０６１１４２の配列番号３４（配列番号２２０）：
ＥＩＶＬＴＱＳＰＤＦＱＳＶＴＰＫＥＫＶＴＩＴＣＫＡＳＱＤＶＧＴＡＶＡＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＱＬＬＩＹＷＡＳＴＲＨＴＧＶＰＤ
ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＱＱＹＮＳＹＰＬＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ；
ＷＯ２０１６／０６１１４２の配列番号４２（配列番号２２１）：
ＥＩＶＬＴＱＳＰＤＦＱＳＶＴＰＫＥＫＶＴＩＴＣＫＡＳＱＤＶＧＴＡＶＡＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＱＬＬＩＹＷＡＳＴＲＨＴＧＶＰＳ
ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＦＴＩＳＳＬＱＰＥＤＩＡＴＹＹＣＱＱＹＮＳＹＰＬＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ
ＷＯ２０１６／０６１１４２の配列番号５８（配列番号２２２）：
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＫＡＳＱＤＶＧＴＡＶＡＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＱＬＬＩＹＷＡＳＴＲＨＴＧＩＰＰ
ＲＦＳＧＳＧＹＧＴＤＦＴＬＴＩＮＮＩＥＳＥＤＡＡＹＹＦＣＱＱＹＮＳＹＰＬＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ；
ＷＯ２０１６／０６１１４２の配列番号６６（配列番号２２３）：
ＤＶＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＱＰＡＳＩＳＣＫＡＳＱＤＶＧＴＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＷＡＳＴＲＨＴＧＶＰＳ
ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＤＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＮＳＹＰＬＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ；
ＷＯ２０１６／０６１１４２の配列番号７４（配列番号２２４）：
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＡＳＱＤＶＧＴＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＷＡＳＴＲＨＴＧＶＰＳ
ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＦＴＩＳＳＬＱＰＥＤＩＡＴＹＹＣＱＱＹＮＳＹＰＬＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ；
ＷＯ２０１６／０６１１４２の配列番号８２（配列番号２２５）：
ＡＩＱＬＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＡＳＱＤＶＧＴＡＶＡＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＱＬＬＩＹＷＡＳＴＲＨＴＧＶＰＳ
ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＦＴＩＳＳＬＥＡＥＤＡＡＴＹＹＣＱＱＹＮＳＹＰＬＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ；
ＷＯ２０１６／０６１１４２の配列番号８６（配列番号２２６）：
ＥＩＶＬＴＱＳＰＤＦＱＳＶＴＰＫＥＫＶＴＩＴＣＫＡＳＱＤＶＧＴＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＷＡＳＴＲＨＴＧＶＰＳ
ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＤＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＮＳＹＰＬＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ
から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２０１６／０２２６３０に開示される抗ＰＤ−Ｌ１抗体の任意の１つを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法での使用のための抗体またはその抗原結合フラグメントは、
ＷＯ２０１６／０２２６３０の配列番号２、６、１０、１４、１８、２２、２６、３０、３４、３８、４２、および４６：
ＷＯ２０１６／０２２６３０の配列番号２（配列番号２２７）：
ＥＶＫＬＶＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＳＬＫＬＳＣＡＡＳＧＦＩＦＲＳＹＧＭＳＷＶＲＱＴＰＥＫＲＬＥＷＶＡＳＩＳＳＧＧＳＴＹＹＰ
ＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＲＮＩＬＹＬＱＭＳＳＬＲＳＥＤＴＡＭＹＤＣＡＲＧＹＤＳＧＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＥ；
ＷＯ２０１６／０２２６３０の配列番号６（配列番号２２８）：
ＥＶＫＬＶＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＳＬＫＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＲＳＹＧＭＳＷＶＲＱＴＰＥＫＲＬＥＷＶＡＳＩＳＳＧＧＴＴＹＹＰ
ＤＳＶＫＧＲＦＩＩＳＲＤＮＡＲＮＩＬＹＬＱＭＳＳＬＲＳＥＤＴＡＭＹＹＣＡＫＧＹＤＳＧＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＩＶＳＡ；
ＷＯ２０１６／０２２６３０の配列番号１０（配列番号２２９）：
ＱＶＱＬＫＱＳＧＰＧＬＶＱＰＳＱＳＬＳＩＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＴＹＧＶＨＷＶＲＱＳＰＧＫＧＬＥＷＬＧＶＩＷＲＧＶＴＴＤＹＮ
ＡＡＦＭＳＲＬＴＩＴＫＤＮＳＫＳＱＶＦＦＫＭＮＳＬＱＡＮＤＴＡＩＹＹＣＡＲＬＧＦＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＳＶＴＶＳＳ；
ＷＯ２０１６／０２２６３０の配列番号１４（配列番号２３０）：
ＱＶＱＬＫＱＳＧＰＧＬＶＱＰＳＱＳＬＳＩＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＳＹＧＶＨＷＶＲＱＳＰＧＫＧＬＥＷＬＧＶＩＷＳＧＧＶＴＤＹＮ
ＡＡＦＩＳＲＬＳＩＳＫＤＮＳＫＳＱＶＦＦＫＭＮＳＬＱＡＮＤＴＡＩＹＹＣＡＲＬＧＦＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＳＶＴＶＳＳ；
ＷＯ２０１６／０２２６３０の配列番号１８（配列番号２３１）：
ＥＶＫＬＦＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＫＬＳＣＶＡＳＧＦＤＦＳＴＹＷＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＱＩＮＰＤＳＴＴＩＮＹ
ＡＰＳＬＫＤＲＦＩＩＳＲＤＮＡＫＮＴＬＦＬＱＭＳＫＶＲＳＥＤＴＡＬＹＹＣＡＫＰＧＤＹＧＹＤＦＤＣＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳ；
ＷＯ２０１６／０２２６３０の配列番号２２（配列番号２３２）：
ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＳＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＳＶＴＧＤＳＩＴＳＧＹＷＮＷＩＲＫＦＰＧＮＫＬＥＹＭＧＹＩＳＹＳＧＳＴＹＹＮ
ＰＳＬＫＳＲＩＳＩＴＲＤＴＳＫＮＱＹＹＬＱＬＮＳＶＴＴＥＤＴＡＴＹＹＣＡＲＳＬＬＷＦＳＴＧＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＡ；
ＷＯ２０１６／０２２６３０の配列番号２６（配列番号２３３）：
ＱＶＱＬＫＱＳＧＰＧＬＶＱＰＳＱＳＬＳＩＴＣＴＶＳＧＦＳＬＴＳＹＧＶＨＷＶＲＱＳＰＧＫＧＬＥＷＬＧＶＩＷＳＧＧＩＴＤＹＮ
ＡＡＦＫＳＲＬＳＩＳＫＤＮＳＫＳＱＶＦＦＫＭＮＳＬＱＡＮＤＴＡＩＹＦＣＡＲＬＧＦＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＳＶＴＶＳＳ；
ＷＯ２０１６／０２２６３０の配列番号３０（配列番号２３４）：
ＥＶＫＬＶＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＳＬＫＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＲＳＹＧＭＳＷＡＲＱＩＰＥＫＲＬＥＷＶＡＳＩＳＳＧＧＴＴＹＹＬ
ＧＳＶＱＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＲＮＩＬＹＬＱＭＳＳＬＲＳＥＤＴＡＭＹＹＣＡＲＧＹＤＡＧＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＳＶＳＥ；
ＷＯ２０１６／０２２６３０の配列番号３４（配列番号２３５）：
ＥＶＱＬＱＥＳＧＰＳＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＳＶＴＧＤＳＩＴＳＧＹＷＴＷＩＲＫＦＰＧＮＫＬＥＹＭＧＹＩＳＹＴＧＳＴＹＹＮ
ＰＳＬＫＳＲＩＳＩＳＲＤＴＳＫＳＱＹＹＬＱＬＮＳＶＴＴＥＤＴＡＴＹＹＣＡＲＱＲＤＷＬＧＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＡ；
ＷＯ２０１６／０２２６３０の配列番号３８（配列番号２３６）：
ＥＥＫＬＶＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＳＬＫＬＳＣＡＡＳＧＦＳＦＳＳＹＧＭＳＷＶＲＱＴＰＥＫＲＬＥＷＶＡＳＩＳＳＧＧＳＩＹＹＰ
ＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＲＮＩＬＹＬＱＭＳＳＬＲＳＥＤＴＡＭＹＹＣＡＲＧＹＤＡＧＦＡＦＷＧＱＧＴＬＶＴＡＳＡ；
ＷＯ２０１６／０２２６３０の配列番号４２（配列番号２３７）：
ＱＩＴＬＫＥＳＧＰＴＬＶＫＰＴＱＴＬＴＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＳＴＹＧＶＨＷＩＲＱＰＰＧＫＡＬＥＷＬＧＶＩＷＲＧＶＴＴＤＹＮ
ＡＡＦＭＳＲＬＴＩＴＫＤＮＳＫＮＱＶＶＬＴＭＮＮＭＤＰＶＤＴＡＴＹＹＣＡＲＬＧＦＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ；
ＷＯ２０１６／０２２６３０の配列番号４６（配列番号２３８）：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＩＦＲＳＹＧＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＳＩＳＳＧＧＳＴＹＹＰ
ＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＤＣＡＲＧＹＤＳＧＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ；
から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖、および／または
ＷＯ２０１６／０２２６３０の配列番号４、８、１２、１６、２０、２４、２８、３２、３６、４０、４４、および４８：
ＷＯ２０１６／０２２６３０の配列番号４（配列番号２３９）：
ＤＩＶＬＴＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＱＲＡＴＩＳＣＲＡＳＱＳＶＳＴＳＳＳＳＦＭＨＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＫＹＡＳＮＬＥＳ
ＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＮＩＨＰＶＥＥＥＤＴＡＴＹＹＣＱＨＳＷＥＩＰＹＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲ；
ＷＯ２０１６／０２２６３０の配列番号８（配列番号２４０）：
ＤＩＶＬＴＱＳＰＰＳＬＡＶＳＬＧＱＲＡＴＩＳＣＲＡＳＱＳＶＳＴＳＳＳＳＹＭＨＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＫＹＡＳＮＬＥＳ
ＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＮＩＨＰＶＥＥＥＤＴＡＴＹＹＣＱＨＳＷＥＩＰＹＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ；
ＷＯ２０１６／０２２６３０の配列番号１２（配列番号２４１）：
ＳＩＶＭＴＱＴＰＫＦＬＬＶＳＡＧＤＲＶＴＩＴＣＫＡＳＱＳＶＳＮＤＶＡＷＹＱＱＫＰＧＱＳＰＫＬＬＩＹＹＡＡＮＲＹＴＧＶＰＤ
ＲＦＴＧＳＧＹＧＴＤＦＴＦＴＩＳＩＶＱＡＥＤＬＡＶＹＦＣＱＱＤＹＴＳＰＹＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ；
ＷＯ２０１６／０２２６３０の配列番号１６（配列番号２４２）：
ＳＩＶＭＴＱＴＰＫＦＬＬＶＳＡＧＤＲＶＴＩＴＣＫＡＳＱＳＶＳＮＤＶＧＷＹＱＱＫＰＧＱＳＰＫＬＬＩＹＹＡＳＮＲＹＳＧＶＰＤ
ＲＦＴＧＳＧＹＧＴＤＦＴＦＴＩＳＴＶＱＡＥＤＬＡＶＹＦＣＱＱＤＹＴＳＰＹＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ；
ＷＯ２０１６／０２２６３０の配列番号２０（配列番号２４３）：
ＤＶＬＭＴＱＴＰＬＹＬＰＶＳＬＧＤＱＡＳＩＳＣＲＳＳＱＩＩＶＨＳＮＡＮＴＹＬＥＷＦＬＱＫＰＧＱＳＰＫＬＬＩＹＫＶＳＮＲＦ
ＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＬＧＶＹＹＣＦＱＧＳＨＶＰＹＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ；
ＷＯ２０１６／０２２６３０の配列番号２４（配列番号２４４）：
ＱＩＶＬＴＱＳＰＡＩＭＳＡＳＰＧＥＫＶＴＬＴＣＳＡＳＳＳＶＳＳＳＹＬＹＷＮＱＱＫＰＧＳＳＰＫＶＷＩＹＮＴＳＮＬＡＳＧＶＰ
ＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＳＹＳＬＴＩＳＳＭＥＡＥＤＡＡＳＹＦＣＨＱＷＲＳＹＰＰＴＬＧＡＧＴＫＬＥＬＫ；
ＷＯ２０１６／０２２６３０の配列番号２８（配列番号２４５）：
ＱＩＶＬＴＱＳＰＡＩＭＳＡＳＰＧＥＫＶＴＭＴＣＳＡＮＳＳＶＳＹＭＨＷＹＱＱＫＳＧＴＳＰＫＲＷＩＹＤＴＳＫＬＡＳＧＶＰＡＲ
ＦＳＧＳＧＳＧＴＳＹＳＬＴＩＳＳＭＧＡＥＤＡＡＴＹＹＣＱＱＷＳＳＮＰＷＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ；
ＷＯ２０１６／０２２６３０の配列番号３２（配列番号２４６）：
ＤＩＶＬＴＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＱＲＡＴＩＳＣＲＡＳＱＳＶＳＴＳＳＹＳＹＭＨＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＫＹＡＳＮＬＥＳ
ＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＮＩＨＰＶＥＥＥＤＴＡＴＹＹＣＱＮＳＷＥＩＰＹＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ；
ＷＯ２０１６／０２２６３０の配列番号３６（配列番号２４７）：
ＤＩＶＭＴＱＴＰＳＳＬＡＶＳＬＧＥＫＶＴＭＳＣＫＳＳＱＳＬＬＹＳＳＮＱＫＮＳＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＳＰＫＬＬＩＹＷＡＳＮＲ
ＥＳＧＶＰＤＲＦＴＧＳＳＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＶＫＡＥＤＬＡＶＹＹＣＱＱＹＹＳＹＰＬＴＦＧＡＧＴＫＬＥＬＫ；
ＷＯ２０１６／０２２６３０の配列番号４０（配列番号２４８）：
ＤＩＶＬＴＱＳＰＡＳＬＡＶＳＬＧＱＲＡＴＩＳＣＲＡＳＱＳＶＳＴＳＳＹＳＹＶＨＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＫＹＡＳＮＬＥＳ
ＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＮＩＨＰＶＥＥＥＤＴＡＴＹＹＣＱＨＳＷＥＩＰＹＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫ；
ＷＯ２０１６／０２２６３０の配列番号４４（配列番号２４９）：
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＡＳＱＳＶＳＮＤＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＹＡＡＮＲＹＴＧＶＰＤ
ＲＦＳＧＳＧＹＧＴＤＦＴＦＴＩＳＳＬＱＰＥＤＩＡＴＹＦＣＱＱＤＹＴＳＰＹＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ；
ＷＯ２０１６／０２２６３０の配列番号４８（配列番号２５０）：
ＤＩＶＬＴＱＳＰＡＳＬＡＶＳＰＧＱＲＡＴＩＴＣＲＡＳＱＳＶＳＴＳＳＳＳＦＭＨＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＫＹＡＳＮＬＥＳ
ＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＮＰＶＥＡＮＤＴＡＮＹＹＣＱＨＳＷＥＩＰＹＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ
から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２０１５／１１２９００に開示される抗ＰＤ−Ｌ１抗体の任意の１つを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法での使用のための抗体またはその抗原結合フラグメントは、
ＷＯ２０１５／１１２９００の配列番号３８、５０、８２、および８６：
ＷＯ２０１５／１１２９００の配列番号３８（配列番号２５１）：
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＥＳＬＲＩＳＣＫＧＳＧＹＴＦＴＴＹＷＭＨＷＶＲＱＡＴＧＱＧＬＥＷＭＧＮＩＹＰＧＴＧＧＳＮＦ
ＤＥＫＦＫＮＲＶＴＩＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＴＲＷＴＴＧＴＧＡＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ；
ＷＯ２０１５／１１２９００の配列番号５０（配列番号２５２）：
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＥＳＬＲＩＳＣＫＧＳＧＹＴＦＴＴＹＷＭＨＷＩＲＱＳＰＳＲＧＬＥＷＬＧＮＩＹＰＧＴＧＧＳＮＦ
ＤＥＫＦＫＮＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＴＲＷＴＴＧＴＧＡＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ；
ＷＯ２０１５／１１２９００の配列番号８２（配列番号２５３）：
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＴＹＷＭＨＷＩＲＱＳＰＳＲＧＬＥＷＬＧＮＩＹＰＧＴＧＧＳＮＦ
ＤＥＫＦＫＮＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＴＲＷＴＴＧＴＧＡＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ；
ＷＯ２０１５／１１２９００の配列番号８６（配列番号２５４）：
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＥＳＬＲＩＳＣＫＧＳＧＹＴＦＴＴＹＷＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＮＩＹＰＧＴＧＧＳＮＦ
ＤＥＫＦＫＮＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＴＲＷＴＴＧＴＧＡＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ；
から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖、および／または
ＷＯ２０１５／１１２９００の配列番号４２、４６、５４、５８、６２、６６、７０、７４、および７８：
ＷＯ２０１５／１１２９００の配列番号４２（配列番号２５５）：
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＫＳＳＱＳＬＬＤＳＧＮＱＫＮＦＬＴＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＷＡＳＴＲ
ＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＤＤＦＡＴＹＹＣＱＮＤＹＳＹＰＹＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ；
ＷＯ２０１５／１１２９００の配列番号４６（配列番号２５６）：
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＳＳＱＳＬＬＤＳＧＮＱＫＮＦＬＴＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＷＡＳＴＲ
ＥＳＧＩＰＰＲＦＳＧＳＧＹＧＴＤＦＴＬＴＩＮＮＩＥＳＥＤＡＡＹＹＦＣＱＮＤＹＳＹＰＹＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ；
ＷＯ２０１５／１１２９００の配列番号５４（配列番号２５７）：
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＫＳＳＱＳＬＬＤＳＧＮＱＫＮＦＬＴＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲ
ＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＦＴＩＳＳＬＱＰＥＤＩＡＴＹＹＣＱＮＤＹＳＹＰＹＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ；
ＷＯ２０１５／１１２９００の配列番号５８（配列番号２５８）：
ＤＩＶＭＴＱＴＰＬＳＬＰＶＴＰＧＥＰＡＳＩＳＣＫＳＳＱＳＬＬＤＳＧＮＱＫＮＦＬＴＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＷＡＳＴＲ
ＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＦＴＩＳＳＬＥＡＥＤＡＡＴＹＹＣＱＮＤＹＳＹＰＹＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ；
ＷＯ２０１５／１１２９００の配列番号６２（配列番号２５９）：
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＫＳＳＱＳＬＬＤＳＧＮＱＫＮＦＬＴＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲ
ＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＦＴＩＳＳＬＥＡＥＤＡＡＴＹＹＣＱＮＤＹＳＹＰＹＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ；
ＷＯ２０１５／１１２９００の配列番号６６（配列番号２６０）：
ＥＩＶＬＴＱＳＰＤＦＱＳＶＴＰＫＥＫＶＴＩＴＣＫＳＳＱＳＬＬＤＳＧＮＱＫＮＦＬＴＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＷＡＳＴＲ
ＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＦＴＩＳＳＬＥＡＥＤＡＡＴＹＹＣＱＮＤＹＳＹＰＹＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ；
ＷＯ２０１５／１１２９００の配列番号７０（配列番号２６１）：
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＫＳＳＱＳＬＬＤＳＧＮＱＫＮＦＬＴＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＷＡＳＴＲ
ＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＦＴＩＳＳＬＥＡＥＤＡＡＴＹＹＣＱＮＤＹＳＹＰＹＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ；
ＷＯ２０１５／１１２９００の配列番号７４（配列番号２６２）：
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＳＳＱＳＬＬＤＳＧＮＱＫＮＦＬＴＷＹＬＱＫＰＧＱＳＰＱＬＬＩＹＷＡＳＴＲ
ＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＦＴＩＳＳＬＥＡＥＤＡＡＴＹＹＣＱＮＤＹＳＹＰＹＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ；
ＷＯ２０１５／１１２９００の配列番号７８（配列番号２６３）：
ＤＶＶＭＴＱＳＰＬＳＬＰＶＴＬＧＱＰＡＳＩＳＣＫＳＳＱＳＬＬＤＳＧＮＱＫＮＦＬＴＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲ
ＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＦＴＩＳＳＬＥＡＥＤＡＡＴＹＹＣＱＮＤＹＳＹＰＹＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ
から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２０１０／０７７６３４およびＵＳ８，２１７，１４９に開示される抗ＰＤ−Ｌ１抗体の任意の１つを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法での使用のための抗ＰＤ−Ｌ１抗体またはその抗原結合フラグメントは、
ＷＯ２０１０／０７７６３４の配列番号２０（配列番号２６４）：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＤＳＷＩＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＷＩＳＰＹＧＧＳＴＹＹ
ＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＡＤＴＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＲＨＷＰＧＧＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＡ；
のアミノ酸配列を含む重鎖領域、および／または
ＷＯ２０１０／０７７６３４の配列番号２１（配列番号２６５）：
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＶＳＴＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＳＡＳＦＬＹＳＧＶＰＳ
ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＹＬＹＨＰＡＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲ
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＵＳ２０１２００３９９０６に開示されるＣＮＣＭ寄託番号ＣＮＣＭ Ｉ−４１２２、ＣＮＣＭ Ｉ−４０８０およびＣＮＣＭ Ｉ−４０８１の下でアクセス可能なハイブリドーマから得られる抗ＰＤ−Ｌ１抗体の任意の１つを含む。

一実施形態において、標的部分は、例えば開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＵＳ８，９０７，０６５およびＷＯ２００８／０７１４４７に開示されるＰＤ−Ｌ１に対するＶＨＨを含む。例示的な実施形態において、ＰＤ−Ｌ１に対するＶＨＨは、
ＵＳ８，９０７，０６５の配列番号３９４〜３９９：
ＵＳ８，９０７，０６５の配列番号３９４（配列番号２６６）：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＬＤＹＹＡＩＧＷＦＲＱＡＰＧＫＥＲＥＷＡＳＳ
ＩＳＳＳＤＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＶＦＬＱＭＮＳＬＫＰＥＤＴＡＶＹＳＣＡＡＳＱ
ＡＰＩＴＩＡＴＭＭＫＰＦＹＤＹＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ；
ＵＳ８，９０７，０６５の配列番号３９５（配列番号２６７）：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＬＤＹＹＡＫＣＷＦＲＱＡＰＧＫＥＲＥＷＶＳＣ
ＩＳＳＳＤＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＶＹＬＱＭＮＳＬＫＰＥＤＴＡＶＹＦＣＡＡＲＨ
ＧＧＰＬＴＶＥＹＦＦＤＹＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ：
ＵＳ８，９０７，０６５の配列番号３９６（配列番号２６８）：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＤＹＹＡＩＧＷＦＲＱＡＰＧＫＡＲＥＧＶＳＣ
ＩＳＧＧＤＮＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＶＹＬＱＭＮＳＬＫＰＥＤＴＡＶＹＹＣＡＴＧＧ
ＷＫＹＣＳＧＹＤＰＥＹＩＹＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ；
ＵＳ８，９０７，０６５の配列番号３９７（配列番号２６９）：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＡＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＳＴＦＳＱＹＤＶＧＷＹＲＱＡＰＧＫＱＲＥＬＶＡ
ＦＳＳＳＧＧＲＴＩＹＰＤＳＶＫＧＲＦＴＦＳＲＤＮＴＫＮＴＶＹＬＱＭＴＳＬＫＰＥＤＴＡＶＹＹＣＫＩＤＷ
ＹＬＮＳＹＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ；
ＵＳ８，９０７，０６５の配列番号３９８（配列番号２７０）：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＡＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＶＤＡＳＮＳＡＭＧＷＹＲＱＡＰＧＫＱＲＥＷＶＡＲ
ＩＴＧＧＧＬＩＡＹＴＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＳＴＶＹＬＱＭＮＳＬＥＰＥＤＴＡＶＹＹＣＮＴＩＮＳ
ＲＤＧＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ；
ＵＳ８，９０７，０６５の配列番号３９９（配列番号２７１）：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＡＧＧＳＬＴＩＳＣＡＡＳＧＩＴＦＳＤＳＩＶＳＷＹＲＲＡＲＧＫＱＲＥＷＶＡＧ
ＩＳＮＧＧＴＴＫＹＡＥＳＶＬＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＮＶＹＬＱＭＮＧＬＮＰＥＤＴＡＶＹＬＣＫＶＲＱＹ
ＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ
を含む。

様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、ＰＤ−Ｌ２に対する１つまたは複数の標的部分を有する。幾つかの実施形態において、キメラタンパク質は、ＰＤ−Ｌ２ポリペプチドを選択的に結合する１つまたは複数の抗体、抗体誘導体もしくはフォーマット、ペプチドもしくはポリペプチド、または融合タンパク質を含む。

一実施形態において、標的部分は、例えば開示全体が参照により本明細書に組み入れられる、ＵＳ８，９０７，０６５およびＷＯ２００８／０７１４４７に開示されるＰＤ−Ｌ２に対するＶＨＨを含む。例示的な実施形態において、ＰＤ−１に対するＶＨＨは、
ＵＳ８，９０７，０６５の配列番号４４９〜４５５：
ＵＳ８，９０７，０６５の配列番号４４９（配列番号２７２）：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＡＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＥＳＴＶＬＩＮＡＭＧＷＹＲＱＡＰＧＫＱＲＥＬＶＡＳ
ＩＳＳＧＧＳＴＮＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＶＹＬＱＭＮＳＬＫＰＥＤＴＡＶＹＹＣＮＡＤＶＹ
ＰＱＤＹＧＬＧＹＶＥＧＫＶＹＹＧＨＤＹＷＧＴＧＴＬＶＴＶＳＳ；
ＵＳ８，９０７，０６５の配列番号４５０（配列番号２７３）：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＡＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＳＴＦＳＮＹＶＳＮＹＡＭＧＷＧＲＱＡＰＧＴＱ
ＲＥＬＶＡＳＩＳＮＧＤＴＴＮＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＶＹＬＱＭＮＳＬＫＰＥＤＴＡＶＹＹ
ＣＦＥＨＱＶＡＧＬＴＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ；
ＵＳ８，９０７，０６５の配列番号４５１（配列番号２７４）：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＡＧＧＳＬＲＬＳＣＶＡＳＧＸＡＬＫＩＸＶＭＧＷＹＲＱＡＰＧＫＱＲＥＬＶ
ＡＡＩＴＳＧＧＲＴＮＹＳＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＧＤＮＡＸＮＴＶＹＬＱＭＮＳＬＫＳＥＤＴＡＶＹＹＣＲＥ
ＷＮＳＧＹＰＰＶＤＹＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ；
ＵＳ８，９０７，０６５の配列番号４５２（配列番号２７５）：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＡＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＲＴＦＳＳＧＴＭＧＷＦＲＲＡＰＧＫＥＲＥＦＶ
ＡＳＩＰＷＳＧＧＲＴＹＹＡＤＳＶＫＤＲＦＴＩＳＲＤＮＡＱＮＴＶＦＬＱＭＮＳＬＫＰＥＤＴＡＶＹＹＣＡＦ
ＫＥＲＳＴＧＷＤＦＡＳＷＧＱＧＩＱＶＴＶＳＳ；
ＵＳ８，９０７，０６５の配列番号４５３（配列番号２７６）：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＴＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＬＤＹＹＧＩＧＷＦＲＱＡＰＧＫＥＲＥＧＶＳ
ＦＩＳＧＳＤＧＳＴＹＹＡＥＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＫＡＫＮＴＶＹＬＱＭＮＳＬＫＰＥＤＴＡＶＹＹＣＡＡＤ
ＰＷＧＰＰＳＩＡＴＭＴＳＹＥＹＫＨＷＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ；
ＵＳ８，９０７，０６５の配列番号４５４（配列番号２７７）：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＴＹＴＭＩＷＬＲＲＡＰＧＫＧＦＥＷＶ
ＳＴＩＤＫＤＧＮＴＮＹＶＤＳＶＫＧＲＦＡＶＳＲＤＮＴＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＫＰＥＤＴＡＭＹＹＣＴＫ
ＨＧＳＳＡＲＧＱＧＴＲＶＴＶＳＳ；
ＵＳ８，９０７，０６５の配列番号４５５（配列番号２７８）：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＥＰＧＧＳＬＲＬＳＣＶＡＳＧＦＴＦＳＳＹＤＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥ
ＷＶＳＴＩＮＳＧＧＧＩＴＹＲＧＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＫＰＥＤＴＡＶＹＹ
ＣＥＮＧＧＳＳＹＲＲＧＱＧＴＱＶＴＶＳＳ
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＵＳ２０１１／０２７１３５８およびＷＯ２０１０／０３６９５９に開示される抗ＰＤ−Ｌ２抗体のいずれか１つを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法での使用のための抗体またはその抗原結合フラグメントは、
ＵＳ２０１１／０２７１３５８の配列番号４３〜４７：
ＵＳ２０１１／０２７１３５８の配列番号４３（配列番号２７９）：
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＬＫＫＰＧＡＳＶＫＭＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＧＹＴＭＨＷＶＫＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＹＩＮＰＲＳＧＹＴＥＹ
ＮＱＫＦＫＤＲＴＴＬＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＳＡＶＹＹＣＡＲＰＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ；
ＵＳ２０１１／０２７１３５８の配列番号４４（配列番号２８０）：
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＭＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＧＹＴＭＨＷＶＫＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＹＩＮＰＲＳＧＹＴＥＹ
ＮＱＫＦＫＤＲＴＴＬＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＰＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ；
ＵＳ２０１１／０２７１３５８の配列番号４５（配列番号２８１）：
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＭＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＧＹＴＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＹＩＮＰＲＳＧＹＴＥＹ
ＮＱＫＦＫＤＲＴＴＬＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＰＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ；
ＵＳ２０１１／０２７１３５８の配列番号４６（配列番号２８２）：
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＧＹＴＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＹＩＮＰＲＳＧＹＴＥＹ
ＮＱＫＦＫＤＲＴＴＬＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＰＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ；
ＵＳ２０１１／０２７１３５８の配列番号４７（配列番号２８３）：
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＧＹＴＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＩＧＹＩＮＰＲＳＧＹＴＥＹ
ＮＱＫＦＫＤＲＴＴＩＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＰＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ；
から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖、および／または
ＵＳ２０１１／０２７１３５８の配列番号４８〜５１：
ＵＳ２０１１／０２７１３５８の配列番号４８（配列番号２８４）：
ＤＩＶＭＴＱＳＰＡＳＬＴＶＴＰＧＥＫＶＴＩＴＣＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲ
ＥＳＧＶＰＤＲＦＴＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＡＥＤＶＡＶＹＹＣＱＮＤＹＳＹＰＬＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ；
ＵＳ２０１１／０２７１３５８の配列番号４９（配列番号２８５）：
ＤＩＶＭＴＱＳＰＡＳＬＳＶＴＰＧＥＫＶＴＩＴＣＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲ
ＥＳＧＶＰＤＲＦＴＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＡＥＤＶＡＶＹＹＣＱＮＤＹＳＹＰＬＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ；
ＵＳ２０１１／０２７１３５８の配列番号５０（配列番号２８６）：
ＤＩＶＭＴＱＳＰＡＦＬＳＶＴＰＧＥＫＶＴＩＴＣＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲ
ＥＳＧＶＰＤＲＦＴＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＡＥＤＶＡＶＹＹＣＱＮＤＹＳＹＰＬＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ；
ＵＳ２０１１／０２７１３５８の配列番号５１（配列番号２８７）：
ＤＩＶＭＴＱＳＰＡＦＬＳＶＴＰＧＥＫＶＴＩＴＣＫＳＳＱＳＬＬＮＳＧＮＱＫＮＹＬＴＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲ
ＥＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＡＥＤＶＡＶＹＹＣＱＮＤＹＳＹＰＬＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ
から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖
を含む。

様々な実施形態において、本発明の標的部分は、本明細書に開示される配列の任意の１つに少なくとも約６０％、少なくとも約６１％、少なくとも約６２％、少なくとも約６３％、少なくとも約６４％、少なくとも約６５％、少なくとも約６６％、少なくとも約６７％、少なくとも約６８％、少なくとも約６９％、少なくとも約７０％、少なくとも約７１％、少なくとも約７２％、少なくとも約７３％、少なくとも約７４％、少なくとも約７５％、少なくとも約７６％、少なくとも約７７％、少なくとも約７８％、少なくとも約７９％、少なくとも約８０％、少なくとも約８１％、少なくとも約８２％、少なくとも約８３％、少なくとも約８４％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または１００％同一である（例えば、本明細書に開示される配列の任意の１つと約６０％、または約６１％、または約６２％、または約６３％、または約６４％、または約６５％、または約６６％、または約６７％、または約６８％、または約６９％、または約７０％、または約７１％、または約７２％、または約７３％、または約７４％、または約７５％、または約７６％、または約７７％、または約７８％、または約７９％、または約８０％、または約８１％、または約８２％、または約８３％、または約８４％、または約８５％、または約８６％、または約８７％、または約８８％、または約８９％、または約９０％、または約９１％、または約９２％、または約９３％、または約９４％、または約９５％、または約９６％、または約９７％、または約９８％、約９９％または約１００％の配列同一性）、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、および／またはＰＤ−Ｌ２を標的とする配列を含み得る。

様々な実施形態において、本発明の標的部分は、本明細書に開示される通り、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、および／またはＰＤ−Ｌ２を標的にする重鎖、軽鎖、重鎖可変領域、軽鎖可変領域、相補性決定領域（ＣＤＲ）、およびフレームワーク領域配列の任意の組み合わせを含み得る。

ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、および／またはＰＤ−Ｌ２を選択的に結合する、または標的にするさらなる抗体、抗体誘導体もしくはフォーマット、ペプチドもしくはポリペプチド、または融合タンパク質は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられる、ＷＯ２０１１／０６６３８９、ＵＳ２００８／００２５９８０、ＵＳ２０１３／００３４５５９、ＵＳ８，７７９，１０８、ＵＳ２０１４／０３５６３５３、ＵＳ８，６０９，０８９、ＵＳ２０１０／０２８３３０、ＵＳ２０１２／０１１４６４９、ＷＯ２０１０／０２７８２７、ＷＯ２０１１／０６６３４２、ＵＳ８，９０７，０６５、ＷＯ２０１６／０６２７２２、ＷＯ２００９／１０１６１１、ＷＯ２０１０／０２７８２７、ＷＯ２０１１／０６６３４２、ＷＯ２００７／００５８７４、ＷＯ２００１／０１４５５６、ＵＳ２０１１／０２７１３５８、ＷＯ２０１０／０３６９５９、ＷＯ２０１０／０７７６３４、ＵＳ８，２１７，１４９、ＵＳ２０１２／００３９９０６、ＷＯ２０１２／１４５４９３、ＵＳ２０１１／０３１８３７３、米国特許第８，７７９，１０８号、ＵＳ２０１４００４４７３８、ＷＯ２００９／０８９１４９、ＷＯ２００７／００５８７、ＷＯ２０１６０６１１４２、ＷＯ２０１６，０２２６３、ＷＯ２０１０／０７７６３４、およびＷＯ２０１５／１１２９００に開示される。

一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、本明細書に記載される修飾された（例えば、変異された）シグナル伝達物質のいずれかと共に、（ｉ）例えばＣＤ８への標的化により媒介される、Ｔ細胞に対する標的部分と（ｉｉ）腫瘍細胞に対する標的部分を有する。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、Ｔ細胞上のＣＤ８に対する標的部分と、腫瘍細胞上のＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２に対する第二の標的部分と、を有する。

一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、本明細書に記載される修飾された（例えば、変異された）シグナル伝達物質のいずれかと共に、（ｉ）例えばＣＤ４への標的化により媒介される、Ｔ細胞に対する標的部分と（ｉｉ）腫瘍細胞に対する標的部分を有する。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、Ｔ細胞上のＣＤ４に対する標的部分と、腫瘍細胞上のＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２に対する第二の標的部分と、を有する。

一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、本明細書に記載される修飾された（例えば、変異された）シグナル伝達物質のいずれかと共に、（ｉ）例えばＣＤ３、ＣＸＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ９、ＣＤ７０、ＣＤ１０３または１つもしくは複数の免疫チェックポイントマーカーへの標的化により媒介される、Ｔ細胞に対する標的部分と（ｉｉ）腫瘍細胞に対する標的部分を有する。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、Ｔ細胞上のＣＤ３に対する標的部分と、腫瘍細胞上のＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２に対する第二の標的部分と、を有する。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、Ｔ細胞上で発現されるＣＤ３に対する１つまたは複数の標的部分を有する。幾つかの実施形態において、キメラタンパク質は、ＣＤ３ポリペプチドを選択的に結合する１つまたは複数の標的部分を有する。幾つかの実施形態において、キメラタンパク質は、ＣＤ３ポリペプチドを選択的に結合する１つまたは複数の抗体、抗体誘導体もしくはフォーマット、ペプチドもしくはポリペプチド、または融合タンパク質を含む。

一実施形態において、標的部分は、抗ＣＤ３抗体ムロモナブ−ＣＤ３（Ｏｒｔｈｏｃｌｏｎｅ ＯＫＴ３としても公知）、またはそのフラグメントを含む。ムロモナブ−ＣＤ３は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられる、米国特許第４，３６１，５４９号およびＷｉｌｄｅ ｅｔ ａｌ．（１９９６）５１：８６５−８９４に開示される。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法における使用のためのムロモナブ−ＣＤ３またはその抗原結合フラグメントは、
ＱＶＱＬＱＱＳＧＡＥＬＡＲＰＧＡＳＶＫＭＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＲＹＴＭＨＷＶＫＱＲＰＧＱＧＬＥＷＩＧＹＩＮＰＳＲＧＹＴＮＹ
ＮＱＫＦＫＤＫＡＴＬＴＴＤＫＳＳＳＴＡＹＭＱＬＳＳＬＴＳＥＤＳＡＶＹＹＣＡＲＹＹＤＤＨＹＣＬＤＹＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳＡ
ＫＴＴＡＰＳＶＹＰＬＡＰＶＣＧＧＴＴＧＳＳＶＴＬＧＣＬＶＫＧＹＦＰＥＰＶＴＬＴＷＮＳＧＳＬＳＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＤＬ
ＹＴＬＳＳＳＶＴＶＴＳＳＴＷＰＳＱＳＩＴＣＮＶＡＨＰＡＳＳＴＫＶＤＫＫＩＥＰＲＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧ
ＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮ
ＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥ
ＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷ
ＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号２８８）；
のアミノ酸配列を含む重鎖、および／または
ＱＩＶＬＴＱＳＰＡＩＭＳＡＳＰＧＥＫＶＴＭＴＣＳＡＳＳＳＶＳＹＭＮＷＹＱＱＫＳＧＴＳＰＫＲＷＩＹＤＴＳＫＬＡＳＧＶＰＡＨ
ＦＲＧＳＧＳＧＴＳＹＳＬＴＩＳＧＭＥＡＥＤＡＡＴＹＹＣＱＱＷＳＳＮＰＦＴＦＧＳＧＴＫＬＥＩＮＲＡＤＴＡＰＴＶＳＩＦＰＰＳ
ＳＥＱＬＴＳＧＧＡＳＶＶＣＦＬＮＮＦＹＰＫＤＩＮＶＫＷＫＩＤＧＳＥＲＱＮＧＶＬＮＳＷＴＤＱＤＳＫＤＳＴＹＳＭＳＳＴＬＴＬ
ＴＫＤＥＹＥＲＨＮＳＹＴＣＥＡＴＨＫＴＳＴＳＰＩＶＫＳＦＮＲＮＥＣ（配列番号２８９）
のアミノ酸配列を含む軽鎖、
を含む。

一実施形態において、標的部分は、抗ＣＤ３抗体オテリキシズマブ、またはそのフラグメントを含む。オテリキシズマブは、開示全体が参照により本明細書に組み入れられる、米国特許出願公開第２０１６００００９１６号およびＣｈａｔｅｎｏｕｄ ｅｔ ａｌ．（２０１２）９：３７２−３８１に開示される。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法における使用のためのオテリキシズマブまたはその抗原結合フラグメントは、
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＦＰＭＡＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＴＩＳＴＳＧＧＲＴＹＹＲＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＫＦＲＱＹＳＧＧＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＡＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号２９０）；
のアミノ酸配列を含む重鎖、および／または
ＤＩＱＬＴＱＰＮＳＶＳＴＳＬＧＳＴＶＫＬＳＣＴＬＳＳＧＮＩＥＮＮＹＶＨＷＹＱＬＹＥＧＲＳＰＴＴＭＩＹＤＤＤＫＲＰＤＧＶＰＤＲＦＳＧＳＩＤＲＳＳＮＳＡＦＬＴＩＨＮＶＡＩＥＤＥＡＩＹＦＣＨＳＹＶＳＳＦＮＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＲＱＰＫＡＡＰＳＶＴＬＦＰＰＳＳＥＥＬＱＡＮＫＡＴＬＶＣＬＩＳＤＦＹＰＧＡＶＴＶＡＷＫＡＤＳＳＰＶＫＡＧＶＥＴＴＴＰＳＫＱＳＮＮＫＹＡＡＳＳＹＬＳＬＴＰＥＱＷＫＳＨＲＳＹＳＣＱＶＴＨＥＧＳＴＶＥＫＴＶＡＰＴＥＣＳ（配列番号２９１）
のアミノ酸配列を含む軽鎖、
を含む。

一実施形態において、標的部分は、抗ＣＤ３抗体テプリズマブ（ＭＧＡ０３１およびｈＯＫＴ３γ１（Ａｌａ−Ａｌａ）としても公知）、またはそのフラグメントを含む。テプリズマブは、開示全体が参照により本明細書に組み入れられる、Ｃｈａｔｅｎｏｕｄ ｅｔ ａｌ．（２０１２）９：３７２−３８１に開示される。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法における使用のためのテプリズマブまたはその抗原結合フラグメントは、
ＱＶＱＬＶＱＳＧＧＧＶＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＲＹＴＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＩＧＹＩＮＰＳＲＧＹＴＮＹＮＱＫＶＫＤＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＡＦＬＱＭＤＳＬＲＰＥＤＴＧＶＹＦＣＡＲＹＹＤＤＨＹＣＬＤＹＷＧＱＧＴＰＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＡＡＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ（配列番号２９２）；
のアミノ酸配列を含む重鎖、および／または
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＳＡＳＳＳＶＳＹＭＮＷＹＱＱＴＰＧＫＡＰＫＲＷＩＹＤＴＳＫＬＡＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＦＴＩＳＳＬＱＰＥＤＩＡＴＹＹＣＱＱＷＳＳＮＰＦＴＦＧＱＧＴＫＬＱＩＴＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号２９３）
のアミノ酸配列を含む軽鎖、
を含む。

一実施形態において、標的部分は、抗ＣＤ３抗体ビシリズマブ（Ｎｕｖｉｏｎ（登録商標）；ＨｕＭ２９１としても公知）、またはそのフラグメントを含む。ビシリズマブは、開示全体が参照により本明細書に組み入れられる、Ｕ．Ｓ．５，８３４，５９７およびＷＯ２００４０５２３９７、ならびにＣｏｌｅ ｅｔ ａｌ．，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ（１９９９）６８：５６３−５７１に開示される。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法における使用のためのビシリズマブまたはその抗原結合フラグメントは、
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＩＳＹＴＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＹＩＮＰＲＳＧＹＴＨＹＮＱＫＬＫＤＫＡＴＬＴＡＤＫＳＡＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＳＡＹＹＤＹＤＧＦＡＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号２９４）；
のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および／または
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＳＡＳＳＳＶＳＹＭＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＲＬＩＹＤＴＳＫＬＡＳＧＶＰＳＲ
ＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＷＳＳＮＰＰＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号２９５）
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、
を含む。

一実施形態において、標的部分は、抗ＣＤ３抗体フォラルマブ（ＮＩ−０４０１としても公知）、またはそのフラグメントを含む。様々な実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられる、ＵＳ２０１４０１９３３９９、ＵＳ７，７２８，１１４、ＵＳ２０１００１８３５５４、およびＵＳ８，５５１，４７８に開示される抗ＣＤ３抗体の任意の１つを含む。

例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法における使用のための抗ＣＤ３抗体またはその抗原結合フラグメントは、
ＵＳ７，７２８，１１４の配列番号２および６：
ＵＳ７，７２８，１１４の配列番号２（配列番号２９６）：
ＱＶＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＫＦＳＧＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＷＹＤＧＳＫＫＹＹ
ＶＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＱＭＧＹＷＨＦＤＬＷＧＲＧＴＬＶＴＶＳＳ；
ＵＳ７，７２８，１１４の配列番号６（配列番号２９７）：
ＱＶＱＬＶＱＳＧＧＧＶＶＱＳＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＫＦＳＧＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＷＹＤＧＳＫＫＹＹ
ＶＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＧＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＱＭＧＹＷＨＦＤＬＷＧＲＧＴＬＶＴＶＳＳ；
のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、ならびに／または
ＵＳ７，７２８，１１４の配列番号４および８：
ＵＳ７，７２８，１１４の配列番号４（配列番号２９８）：
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＤＡＳＮＲＡＴＧＩＰＡ
ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＲＳＮＷＰＰＬＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫ；
ＵＳ７，７２８，１１４の配列番号８（配列番号２９９）：
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＤＡＳＮＲＡＴＧＩＰＡ
ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＲＳＮＷＰＰＬＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫ
のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域
を含む。

一実施形態において、標的部分は、ＵＳ７，７２８，１１４の配列番号２のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域と、ＵＳ７，７２８，１１４の配列番号４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域と、を含む。一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＵＳ２０１６／０１６８２４７に開示される抗ＣＤ３抗体の任意の１つを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法における使用のための抗体またはその抗原結合フラグメントは、
ＵＳ２０１６／０１６８２４７の配列番号６〜９：
ＵＳ２０１６／０１６８２４７の配列番号６（配列番号３００）：
ＥＶＫＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＮＴＹＡＭＮＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＲＩＲＳＫＹＮＮＹＡＴ
ＹＹＡＤＳＶＫＤＲＦＴＩＳＲＤＤＳＫＳＳＬＹＬＱＭＮＮＬＫＴＥＤＴＡＭＹＹＣＶＲＨＧＮＦＧＮＳＹＶＳＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬ
ＶＴＶＳＳ；
ＵＳ２０１６／０１６８２４７の配列番号７（配列番号３０１）：
ＥＶＫＬＶＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＮＴＹＡＭＮＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＲＩＲＳＫＹＮＮＹＡＴ
ＹＹＡＤＳＶＫＤＲＦＴＩＳＲＤＤＳＫＳＩＬＹＬＱＭＮＮＬＫＴＥＤＴＡＭＹＹＣＶＲＨＧＮＦＧＮＳＹＶＳＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬ
ＶＴＶＳＳ；
ＵＳ２０１６／０１６８２４７の配列番号８（配列番号３０２）：
ＥＶＫＬＶＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＮＴＹＡＭＮＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＲＩＲＳＫＹＮＮＹＡＴ
ＹＹＡＤＳＶＫＤＲＦＴＩＳＲＤＤＳＫＳＩＬＹＬＱＭＮＳＬＫＴＥＤＴＡＭＹＹＣＶＲＨＧＮＦＧＮＳＹＶＳＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬ
ＶＴＶＳＳ；
ＵＳ２０１６／０１６８２４７の配列番号９（配列番号３０３）：
ＥＶＫＬＶＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＮＴＹＡＭＮＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＲＩＲＳＫＹＮＮＹＡＴ
ＹＹＡＤＳＶＫＤＲＦＴＩＳＲＤＤＳＫＳＩＬＹＬＱＭＮＳＬＫＴＥＤＴＡＭＹＹＣＶＲＨＧＮＦＧＮＳＹＶＳＷＦＡＹＷＧＱＧＴＭ
ＶＴＶＳＳ；
から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖、および／または
ＵＳ２０１６／０１６８２４７の配列番号１０〜１２：
ＵＳ２０１６／０１６８２４７の配列番号１０（配列番号３０４）：
ＱＡＶＶＴＱＥＰＳＦＳＶＳＰＧＧＴＶＴＬＴＣＲＳＳＴＧＡＶＴＴＳＮＹＡＮＷＶＱＱＴＰＧＱＡＦＲＧＬＩＧＧＴＮＫＲＡＰＧＶ
ＰＡＲＦＳＧＳＬＩＧＤＫＡＡＬＴＩＴＧＡＱＡＤＤＥＳＩＹＦＣＡＬＷＹＳＮＬＷＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬ；
ＵＳ２０１６／０１６８２４７の配列番号１１（配列番号３０５）：
ＱＡＶＶＴＱＥＰＳＦＳＶＳＰＧＧＴＶＴＬＴＣＲＳＳＴＧＡＶＴＴＳＮＹＡＮＷＶＱＱＴＰＧＱＡＦＲＧＬＩＧＧＴＮＫＲＡＰＧＶ
ＰＡＲＦＳＧＳＩＬＧＮＫＡＡＬＴＩＴＧＡＱＡＤＤＥＳＩＹＦＣＡＬＷＹＳＮＬＷＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬ；
ＵＳ２０１６／０１６８２４７の配列番号１２（配列番号３０６）：
ＱＡＶＶＴＱＥＰＳＦＳＶＳＰＧＧＴＶＴＬＴＣＲＳＳＴＧＡＶＴＴＳＮＹＡＮＷＶＱＱＴＰＧＱＡＦＲＧＬＩＧＧＴＮＫＲＡＰＧＶ
ＰＡＲＦＳＧＳＩＬＧＮＫＡＡＬＴＩＴＧＡＱＡＤＤＥＳＤＹＹＣＡＬＷＹＳＮＬＷＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬ
から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖、
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＵＳ２０１５／０１７５６９９に開示される抗ＣＤ３抗体の任意の１つを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法における使用のための抗体またはその抗原結合フラグメントは、
ＵＳ２０１５／０１７５６９９の配列番号９：
ＵＳ２０１５／０１７５６９９の配列番号９（配列番号３０７）：
ＱＶＱＬＶＱＳＧＳＥＬＫＫＰＧＡＳＶＫＭＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＲＹＴＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＩＧＹＩＮＰＳＲＧＹＴＮＹ
ＮＱＫＦＫＤＲＡＴＬＴＴＤＫＳＴＳＴＡＹＭＱＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＹＹＤＤＨＹＳＬＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ；
から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖、および／または
ＵＳ２０１５／０１７５６９９の配列番号１０：
ＵＳ２０１５／０１７５６９９の配列番号１０（配列番号３０８）：
ＱＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＭＳＣＳＡＳＳＳＶＳＹＭＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＲＷＩＹＤＴＳＫＬＡＳＧＶＰＳＲ
ＦＲＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＷＳＳＮＰＦＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫ
から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖、
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＵＳ８，７８４，８２１に開示される抗ＣＤ３抗体の任意の１つを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法における使用のための抗体またはその抗原結合フラグメントは、
ＵＳ８，７８４，８２１の配列番号２、１８、３４、５０、６６、８２、９８および１１４：
ＵＳ８，７８４，８２１の配列番号２（配列番号３０９）：
ＥＬＱＬＶＥＳＧＧＧＶＶＱＰＧＲＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＧＭＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＶＩＳＹＤＧＳＮＫＹＹ
ＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＬＳＰＹＣＴＮＧＶＣＷＤＡＦＤＩＷＧＱＧＴＭ
ＶＴＶＳＳ；
ＵＳ８，７８４，８２１の配列番号１８（配列番号３１０）：
ＥＬＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＲＳＬＲＬＳＣＴＡＳＧＦＴＦＧＤＹＡＭＳＷＦＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＧＦＩＲＳＫＡＹＧＧＴＴ
ＥＹＡＡＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＤＳＫＳＩＡＹＬＱＭＮＳＬＫＴＥＤＴＡＶＹＹＣＴＰＱＬＷＬＬＱＤＡＦＤＩＷＧＱＧＴＭＶＴＶ
ＳＳ；
ＵＳ８，７８４，８２１の配列番号３４（配列番号３１１）：
ＥＬＱＬＶＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＧＴＬＳＬＴＣＡＶＳＧＧＳＩＳＳＲＮＷＷＳＷＶＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＤＩＹＨＳＧＳＴＮＹ
ＮＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＶＤＫＳＫＮＱＦＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＳＧＹＴＳＣＲＤＡＦＤＩＷＧＱＧＴＭＶＴＶＳＳ；
ＵＳ８，７８４，８２１の配列番号５０（配列番号３１２）：
ＥＬＱＬＶＥＷＧＡＧＬＬＫＰＳＥＴＬＳＬＴＣＡＶＹＧＧＳＦＳＧＹＹＷＳＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＥＩＮＨＳＧＳＴＮＹＮ
ＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＶＤＴＳＫＮＱＦＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＲＧＲＦＬＧＷＬＬＧＧＳＮＷＦＤＰＷＧＱＧＴ
ＬＶＴＶＳＳ；
ＵＳ８，７８４，８２１の配列番号６６（配列番号３１３）：
ＥＬＱＬＶＥＷＧＡＧＬＬＫＰＳＥＴＬＳＬＴＣＡＶＹＧＧＳＦＳＧＹＹＷＳＷＩＲＱＰＰＧＫＧＬＥＷＩＧＥＩＮＨＳＧＳＴＮＹＮ
ＰＳＬＫＳＲＶＴＩＳＶＤＴＳＫＮＱＦＳＬＫＬＳＳＶＴＡＡＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＰＤＲＭＧＨＧＦＤＩＷＧＱＧＴＭＶＴＶＳＳ；
ＵＳ８，７８４，８２１の配列番号８２（配列番号３１４）：
ＥＬＱＬＶＥＳＧＰＧＬＶＫＰＳＱＴＬＳＬＴＣＡＩＳＧＤＳＶＳＳＮＳＡＡＷＮＷＩＲＱＳＰＳＲＧＬＥＷＬＧＲＴＹＹＲＳＫＷＹ
ＮＤＹＡＶＳＶＫＳＲＩＴＩＮＰＤＴＳＫＮＱＦＳＬＱＬＮＳＶＴＰＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＲＲＲＩＡＡＲＱＹＹＧＭＤＶＷＧＱＧ
ＴＴＶＴＶＳＳ；
ＵＳ８，７８４，８２１の配列番号９８（配列番号３１５）：
ＥＬＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＡＭＧＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＶＳＧＳＧＧＳＴＹＹ
ＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＫＡＫＦＬＧＨＹＹＧＭＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳ
Ｓ；
ＵＳ８，７８４，８２１の配列番号１１４（配列番号３１６）：
ＥＬＱＬＶＥＳＧＰＶＬＶＫＰＴＤＴＬＴＬＴＣＴＶＳＧＦＳＬＮＮＰＲＭＧＶＳＷＩＲＱＰＰＧＫＴＬＥＷＬＡＨＩＦＰＳＤＡＫＡ
ＨＳＡＳＬＫＳＲＬＴＩＳＫＤＴＳＫＳＱＶＶＰＴＭＴＮＭＤＰＶＤＴＡＴＹＹＣＡＲＩＬＧＥＹＹＰＰＡＷＦＤＰＷＧＱＧＴＬＶＴ
ＶＳＳ；
から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖、ならびに／または
ＵＳ８，７８４，８２１の配列番号１０、２６、４２、５８、７４、９０、１０６および１２２：
ＵＳ８，７８４，８２１の配列番号１０（配列番号３１７）：
ＥＬＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＳＩＴＣＲＡＳＱＴＩＳＮＹＬＮＷＹＱＬＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＡＡＳＴＬＱＳＥＶＰＴ
ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＧＬＨＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＦＮＳＹＰＲＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ；
ＵＳ８，７８４，８２１の配列番号２６（配列番号３１８）：
ＥＬＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＧＩＳＮＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＶＰＫＬＬＩＹＡＡＳＴＬＱＳＧＶＰＳ
ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＳＹＳＴＰＰＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ；
ＵＳ８，７８４，８２１の配列番号４２（配列番号３１９）：
ＥＬＶＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＧＩＧＮＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＭＬＩＹＷＡＳＩＲＥＳＧＶＰＤ
ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＡＥＤＶＡＶＹＹＣＱＱＹＹＳＮＰＱＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ；
ＵＳ８，７８４，８２１の配列番号５８（配列番号３２０）：
ＥＬＶＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＧＩＳＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＤＡＳＮＬＥＴＧＶＰＳ
ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＳＹＳＴＰＹＴＦＧＱＧＴＫＶＤＩＫ；
ＵＳ８，７８４，８２１の配列番号７４（配列番号３２１）：
ＥＬＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＳＩＳＳＹＬＮＷＹＱＱＫＳＧＫＡＰＫＬＬＩＹＡＡＳＳＬＱＳＧＶＰＳ
ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＳＹＳＳＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ；
ＵＳ８，７８４，８２１の配列番号９０（配列番号３２２）：
ＥＬＶＬＴＱＳＰＧＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＲＡＳＱＳＶＳＳＮＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＧＡＳＳＲＡＴＧＩＰ
ＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＶＡＴＹＹＣＱＫＹＮＳＡＰＬＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫ；
ＵＳ８，７８４，８２１の配列番号１０６（配列番号３２３）：
ＥＬＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＳＩＳＳＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＡＡＳＳＬＱＳＧＶＰＳ
ＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＬＱＨＮＡＹＰＹＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ；
ＵＳ８，７８４，８２１の配列番号１２２（配列番号３２４）：
ＥＬＶＭＴＱＳＰＤＳＬＡＶＳＬＧＥＲＡＴＩＮＣＫＳＳＱＳＶＬＹＳＳＮＮＫＮＹＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲ
ＥＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＡＥＤＶＡＶＹＹＣＱＱＹＬＫＩＰＹＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ
から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖、
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＵＳ２０１５０１１８２５２に開示される抗ＣＤ３抗体の任意の１つを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法における使用のための抗体またはその抗原結合フラグメントは、
ＵＳ２０１５０１１８２５２の配列番号６および８６：
ＵＳ２０１５０１１８２５２の配列番号６（配列番号３２５）：
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＲＹＴＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＹＩＮＰＳＲＧＹＴＮＹ
ＮＱＫＦＫＤＲＶＴＭＴＴＤＴＳＩＳＴＡＹＭＥＬＳＲＬＲＳＤＤＴＡＶＹＹＣＡＲＹＹＤＤＨＹＣＬＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ；
ＵＳ２０１５０１１８２５２の配列番号８６（配列番号３２６）：
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＲＹＴＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＹＩＮＰＳＲＧＹＴＮＹ
ＮＱＫＦＫＤＲＶＴＭＴＴＤＴＳＩＳＴＡＹＭＥＬＳＲＬＲＳＤＤＴＡＶＹＹＣＡＲＹＹＤＤＨＹＳＬＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ；
から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖、ならびに／または
ＵＳ２０１５／０１７５６９９の配列番号３：
ＵＳ２０１５０１１８２５２の配列番号３（配列番号３２７）：
ＥＩＶＬＴＱＳＰＡＴＬＳＬＳＰＧＥＲＡＴＬＳＣＳＡＳＳＳＶＳＹＭＮＷＹＱＱＫＰＧＱＡＰＲＬＬＩＹＤＴＳＫＬＡＳＧＶＰＡＨ
ＦＲＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＥＰＥＤＦＡＶＹＹＣＱＱＷＳＳＮＰＦＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ
から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖、
を含む。

一実施形態において、標的部分は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＵＳ２０１６／００３９９３４に開示される抗ＣＤ３抗体の任意の１つを含む。例示的な実施形態において、本明細書で提供される方法における使用のための抗体またはその抗原結合フラグメントは、
ＵＳ２０１６／００３９９３４の配列番号６〜９：
ＵＳ２０１６／００３９９３４の配列番号６（配列番号３２８）：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＴＹＡＭＮＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＧＲＩＲＳＫＹＮＮＹＡＴ
ＹＹＡＤＳＶＫＤＲＦＴＩＳＲＤＤＳＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＫＴＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＨＧＮＦＧＮＳＹＶＳＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬ
ＶＴＶＳＳ；
ＵＳ２０１６／００３９９３４の配列番号７（配列番号３２９）：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＴＹＡＭＮＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＧＲＩＲＳＫＹＮＮＹＡＴ
ＹＹＡＤＳＶＫＤＲＦＴＩＳＲＤＤＳＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＫＴＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＨＧＮＦＧＮＳＹＶＳＷＦＡＹＷＧＱＧＴＬ
ＶＴＶＳＳ；
ＵＳ２０１６／００３９９３４の配列番号８（配列番号３３０）：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＴＹＡＭＮＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＧＲＩＲＳＫＹＮＮＹＡＴ
ＹＹＡＤＳＶＫＤＲＦＴＩＳＲＤＤＳＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＫＴＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＨＧＮＦＧＮＳＹＶＳＹＦＡＹＷＧＱＧＴＬ
ＶＴＶＳＳ；
ＵＳ２０１６／００３９９３４の配列番号９（配列番号３３１）：
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＴＹＡＭＮＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＧＲＩＲＳＫＹＮＮＹＡＴ
ＹＹＡＤＳＶＫＤＲＦＴＩＳＲＤＤＳＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＫＴＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＨＧＮＦＧＮＳＹＶＳＨＦＡＹＷＧＱＧＴＬ
ＶＴＶＳＳ；
から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖、および／または
ＵＳ２０１６／００３９９３４の配列番号１〜４：
ＵＳ２０１６／００３９９３４の配列番号１（配列番号３３２）：
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＳＳＴＧＡＶＴＴＳＮＹＡＮＷＶＱＱＫＰＧＫＡＰＫＧＬＩＧＧＴＮＫＲＡＰＧ
ＶＰＳＲＦＳＧＳＬＩＧＤＫＡＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＡＬＷＹＳＮＬＷＶＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ；
ＵＳ２０１６／００３９９３４の配列番号２（配列番号３３３）：
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＳＳＴＧＡＶＴＴＳＮＹＡＮＷＶＱＱＫＰＧＫＡＰＫＧＬＩＧＧＴＮＫＲＡＰＧ
ＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＡＬＷＹＳＮＬＷＶＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ；
ＵＳ２０１６／００３９９３４の配列番号３（配列番号３３４）：
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＳＳＴＧＡＶＴＴＳＮＹＡＮＷＶＱＱＫＰＧＫＡＰＫＡＬＩＧＧＴＮＫＲＡＰＧ
ＶＰＳＲＦＳＧＳＬＩＧＤＫＡＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＡＬＷＹＳＮＬＷＶＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ；
ＵＳ２０１６／００３９９３４の配列番号４（配列番号３３５）：
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＳＳＴＧＡＶＴＴＳＮＹＡＮＷＶＱＱＫＰＧＫＡＰＫＧＬＩＧＧＴＮＫＲＡＰＧ
ＶＰＳＲＦＳＧＳＬＩＧＤＫＡＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＡＬＷＹＳＮＬＷＶＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ；
から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖、
を含む。

様々な実施形態において、本発明の標的部分は、本明細書に開示される配列のいずれかに少なくとも約６０％、少なくとも約６１％、少なくとも約６２％、少なくとも約６３％、少なくとも約６４％、少なくとも約６５％、少なくとも約６６％、少なくとも約６７％、少なくとも約６８％、少なくとも約６９％、少なくとも約７０％、少なくとも約７１％、少なくとも約７２％、少なくとも約７３％、少なくとも約７４％、少なくとも約７５％、少なくとも約７６％、少なくとも約７７％、少なくとも約７８％、少なくとも約７９％、少なくとも約８０％、少なくとも約８１％、少なくとも約８２％、少なくとも約８３％、少なくとも約８４％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または１００％同一である（例えば、本明細書に開示される配列の任意の１つと約６０％、または約６１％、または約６２％、または約６３％、または約６４％、または約６５％、または約６６％、または約６７％、または約６８％、または約６９％、または約７０％、または約７１％、または約７２％、または約７３％、または約７４％、または約７５％、または約７６％、または約７７％、または約７８％、または約７９％、または約８０％、または約８１％、または約８２％、または約８３％、または約８４％、または約８５％、または約８６％、または約８７％、または約８８％、または約８９％、または約９０％、または約９１％、または約９２％、または約９３％、または約９４％、または約９５％、または約９６％、または約９７％、または約９８％、約９９％または約１００％の配列同一性）、ＣＤ３を標的とする配列を含み得る。

様々な実施形態において、本発明の標的部分は、本明細書に開示される通り、ＣＤ３を標的にする重鎖、軽鎖、重鎖可変領域、軽鎖可変領域、相補性決定領域（ＣＤＲ）、およびフレームワーク領域配列の任意の組み合わせを含み得る。様々な実施形態において、本発明の標的部分は、非限定的にＸ３５−３、ＶＩＴ３、ＢＭＡ０３０（ＢＷ２６４／５６）、ＣＬＢ−Ｔ３／３、ＣＲＩＳ７、ＹＴＨ１２．５、Ｆｌ １１−４０９、ＣＬＢ−Ｔ３．４．２、ＴＲ−６６、ＷＴ３２、ＳＰｖ−Ｔ３ｂ、１１Ｄ８、ＸＩＩＩ−１４１、ＸＩＩＩ−４６、ＸＩＩＩ−８７、１２Ｆ６、Ｔ３／ＲＷ２−８Ｃ８、Ｔ３／ＲＷ２−４Ｂ６、ＯＫＴ３Ｄ、Ｍ−Ｔ３０１、ＳＭＣ２、ＷＴ３１およびＦ１０１．０１を含むＣＤ３特異性抗体の任意の重鎖、軽鎖、重鎖可変領域、軽鎖可変領域、相補性決定領域（ＣＤＲ）、およびフレームワーク領域配列を含み得る。これらのＣＤ３特異性抗体は、当技術分野で周知であり、特に、開示全体が参照により本明細書に組み入れられるＴｕｎｎａｃｌｉｆｆｅ（１９８９），Ｉｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１，５４６−５５０に記載されている。

ＣＤ３を選択的に結合する、または標的にするさらなる抗体、抗体誘導体もしくはフォーマット、ペプチドもしくはポリペプチド、または融合タンパク質は、開示全体が参照により本明細書に組み入れられる、米国特許出願公開第２０１６／００００９１６号、米国特許第４，３６１，５４９号、同第５，８３４，５９７号、同第６，４９１，９１６号、同第６，４０６，６９６号、同第６，１４３，２９７号、同第６，７５０，３２５号および国際出願公開ＷＯ２００４／０５２３９７に開示される。

幾つかの実施形態において、ＣＤ３標的部分は、ｓｃＦｖである。幾つかの実施形態において、ＣＤ３標的部分は、
ＱＶＱＬＱＱＳＧＡＥＬＡＲＰＧＡＳＶＫＭＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＲＹＴＭＨＷＶＫＱＲＰＧＱＧＬＥＷＩＧＹＩＮＰＳＲＧＹＴＮＹＮＱＫＦＫＤＫＡＴＬＴＴＤＫＳＳＳＴＡＹＭＱＬＳＳＬＴＳＥＤＳＡＶＹＹＣＡＲＹＹＤＤＨＹＳＬＤＹＷＧＱＧＴＴＬＴＶＳＳＧＳＴＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＤＩＶＬＴＱＳＰＡＩＭＳＡＳＰＧＥＫＶＴＭＴＣＳＡＳＳＳＶＳＹＭＮＷＹＱＱＫＳＧＴＳＰＫＲＷＩＹＤＴＳＫＬＡＳＧＶＰＡＨＦＲＧＳＧＳＧＴＳＹＳＬＴＩＳＧＭＥＡＥＤＡＡＴＹＹＣＱＱＷＳＳＮＰＦＴＦＧＳＧＴＫＬＥＩＮＲ（配列番号３６５）
である。

一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、本明細書に記載される修飾された（例えば、変異された）シグナル伝達物質のいずれかと共に、（ｉ）例えばＰＤ−１への標的化により媒介される、Ｔ細胞に対する標的部分と（ｉｉ）腫瘍細胞に対する標的部分を有する。

非限定的な例として、様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、本明細書に記載される修飾された（例えば、変異された）シグナル伝達物質のいずれかと共に、（ｉ）例えばＣＤ１０、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２１、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＣＤ２４、ＣＤ３７、ＣＤ３８、ＣＤ３９、ＣＤ４０、ＣＤ７０、ＣＤ７２、ＣＤ７３、ＣＤ７４、ＣＤｗ７５、ＣＤｗ７６、ＣＤ７７、ＣＤ７８、ＣＤ７９ａ／ｂ、ＣＤ８０、ＣＤ８１、ＣＤ８２、ＣＤ８３、ＣＤ８４、ＣＤ８５、ＣＤ８６、ＣＤ８９、ＣＤ９８、ＣＤ１２６、ＣＤ１２７、ＣＤｗ１３０、ＣＤ１３８、またはＣＤｗ１５０への標的化により媒介される、Ｂ細胞に対する標的部分と（ｉｉ）腫瘍細胞に対する標的部分を有する。

一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、本明細書に記載される修飾された（例えば、変異された）シグナル伝達物質のいずれかと共に、（ｉ）例えばＣＤ１９、ＣＤ２０またはＣＤ７０への標的化により媒介される、Ｂ細胞に対する標的部分と（ｉｉ）腫瘍細胞に対する標的部分を有する。

一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、本明細書に記載される修飾された（例えば、変異された）シグナル伝達物質のいずれかと共に、（ｉ）例えばＣＤ２０への標的化により媒介される、Ｂ細胞に対する標的部分と（ｉｉ）腫瘍細胞に対する標的部分を有する。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、Ｂ細胞上のＣＤ２０に対する標的部分と、腫瘍細胞上のＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２に対する第二の標的部分と、を有する。

幾つかの実施形態において、ＣＤ２０標的部分は、ｓｃＦｖである。幾つかの実施形態において、ＣＤ２０標的部分は、
ＱＩＶＬＳＱＳＰＡＩＬＳＡＳＰＧＥＫＶＴＭＴＣＲＡＳＳＳＶＳＹＩＨＷＦＱＱＫＰＧＳＳＰＫＰＷＩＹＡＴＳＮＬＡＳＧＶＰＶＲＦＳＧＳＧＳＧＴＳＹＳＬＴＩＳＲＶＥＡＥＤＡＡＴＹＹＣＱＱＷＴＳＮＰＰＴＦＧＧＧＴＫＬＥＩＫＲＧＳＴＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＱＶＱＬＱＱＰＧＡＥＬＶＫＰＧＡＳＶＫＭＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＳＹＮＭＨＷＶＫＱＴＰＧＲＧＬＥＷＩＧＡＩＹＰＧＮＧＤＴＳＹＮＱＫＦＫＧＫＡＴＬＴＡＤＫＳＳＳＴＡＹＭＱＬＳＳＬＴＳＥＤＳＡＶＹＹＣＡＲＳＴＹＹＧＧＤＷＹＦＮＶＷＧＡＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号３６６）
である。

非限定的な例として、様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、本明細書に記載される修飾された（例えば、変異された）シグナル伝達物質のいずれかと共に、（ｉ）例えば２Ｂ４／ＳＬＡＭＦ４、ＫＩＲ２ＤＳ４、ＣＤ１５５／ＰＶＲ、ＫＩＲ３ＤＬ１、ＣＤ９４、ＬＭＩＲ１／ＣＤ３００Ａ、ＣＤ６９、ＬＭＩＲ２／ＣＤ３００ｃ、ＣＲＡＣＣ／ＳＬＡＭＦ７、ＬＭＩＲ３／ＣＤ３００ＬＦ、ＤＮＡＭ−１、ＬＭＩＲ５／ＣＤ３００ＬＢ、Ｆｃ−イプシロン ＲＩＩ、ＬＭＩＲ６／ＣＤ３００ＬＥ、Ｆｃ−γ Ｒｌ／ＣＤ６４、ＭＩＣＡ、Ｆｃ−γ ＲＩＩＢ／ＣＤ３２ｂ、ＭＩＣＢ、Ｆｃ−γ ＲＩＩＣ／ＣＤ３２ｃ、ＭＵＬＴ−１、Ｆｃ−γ ＲＩＩＡ／ＣＤ３２ａ、ネクチン−２／ＣＤ１１２、Ｆｃ−γ ＲＩＩＩ／ＣＤ１６、ＮＫＧ２Ａ、ＦｃＲＨ１／ＩＲＴＡ５、ＮＫＧ２Ｃ、ＦｃＲＨ２／ＩＲＴＡ４、ＮＫＧ２Ｄ、ＦｃＲＨ４／ＩＲＴＡ１、ＮＫｐ３０、ＦｃＲＨ５／ＩＲＴＡ２、ＮＫｐ４４、Ｆｃ受容体様３／ＣＤ１６−２、ＮＫｐ４６／ＮＣＲ１、ＮＫｐ８０／ＫＬＲＦ１、ＮＴＢ−Ａ／ＳＬＡＭＦ６、Ｒａｅ−１、Ｒａｅ−１ α、Ｒａｅ−１ β、Ｒａｅ−１ デルタ、Ｈ６０、Ｒａｅ−１ イプシロン、ＩＬＴ２／ＣＤ８５ｊ、Ｒａｅ−１ γ、ＩＬＴ３／ＣＤ８５ｋ、ＴＲＥＭ−１、ＩＬＴ４／ＣＤ８５ｄ、ＴＲＥＭ−２、ＩＬＴ５／ＣＤ８５ａ、ＴＲＥＭ−３、ＫＩＲ／ＣＤ１５８、ＴＲＥＭＬ１／ＴＬＴ−１、ＫＩＲ２ＤＬ１、ＵＬＢＰ−１、ＫＩＲ２ＤＬ３、ＵＬＢＰ−２、ＫＩＲ２ＤＬ４／ＣＤ１５８ｄ、またはＵＬＢＰ−３への標的化により媒介される、ＮＫ細胞に対する標的部分と（ｉｉ）腫瘍細胞に対する標的部分を有する。

一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、本明細書に記載される修飾された（例えば、変異された）シグナル伝達物質のいずれかと共に、（ｉ）例えばＫｉｒ１アルファ、ＤＮＡＭ−１またはＣＤ６４への標的化により媒介される、ＮＫ細胞に対する標的部分と（ｉｉ）腫瘍細胞に対する標的部分を有する。

一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、本明細書に記載される修飾された（例えば、変異された）シグナル伝達物質のいずれかと共に、（ｉ）例えばＫＩＲ１への標的化により媒介される、ＮＫ細胞に対する標的部分と（ｉｉ）腫瘍細胞に対する標的部分を有する。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、ＮＫ細胞上のＫＩＲ１に対する標的部分と、腫瘍細胞上のＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２に対する第二の標的部分と、を有する。

一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、本明細書に記載される修飾された（例えば、変異された）シグナル伝達物質のいずれかと共に、（ｉ）例えばＴＩＧＩＴまたはＫＩＲ１への標的化により媒介される、ＮＫ細胞に対する標的部分と（ｉｉ）腫瘍細胞に対する標的部分を有する。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、ＮＫ細胞上のＴＩＧＩＴに対する標的部分と、腫瘍細胞上のＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２に対する第二の標的部分と、を有する。

非限定的な例として、様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、本明細書に記載される修飾された（例えば、変異された）シグナル伝達物質のいずれかと共に、（ｉ）例えばＣＬＥＣ−９Ａ、ＸＣＲ１、ＲＡＮＫ、ＣＤ３６／ＳＲＢ３、ＬＯＸ−１／ＳＲ−Ｅ１、ＣＤ６８、ＭＡＲＣＯ、ＣＤ１６３、ＳＲ−Ａ１／ＭＳＲ、ＣＤ５Ｌ、ＳＲＥＣ−１、ＣＬ−Ｐｌ／ＣＯＬＥＣ１２、ＳＲＥＣ−ＩＩ、ＬＩＭＰＩＩＩＳＲＢ２、ＲＰ１０５、ＴＬＲ４、ＴＬＲ１、ＴＬＲ５、ＴＬＲ２、ＴＬＲ６、ＴＬＲ３、ＴＬＲ９、４−ＩＢＢリガンド／ＴＮＦＳＦ９、ＩＬ−１２／ＩＬ−２３ ｐ４０、４−アミノ−１，８−ナフタルイミド、ＩＬＴ２／ＣＤ８５ｊ、ＣＣＬ２１／６Ｃｋｉｎｅ、ＩＬＴ３／ＣＤ８５ｋ、８−オキソ−ｄＧ、ＩＬＴ４／ＣＤ８５ｄ、８Ｄ６Ａ、ＩＬＴ５／ＣＤ８５ａ、Ａ２Ｂ５、インテグリンα ４／ＣＤ４９ｄ、Ａａｇ、インテグリンβ ２／ＣＤ１８、ＡＭＩＣＡ、ランゲリン、Ｂ７−２／ＣＤ８６、ロイコトリエン Ｂ４ Ｒｌ、Ｂ７−Ｈ３、ＬＭＩＲ１／ＣＤ３００Ａ、ＢＬＡＭＥ／ＳＬＡＭＦ８、ＬＭＩＲ２／ＣＤ３００ｃ、Ｃｌｑ Ｒ１／ＣＤ９３、ＬＭＩＲ３／ＣＤ３００ＬＦ、ＣＣＲ６、ＬＭＩＲ５／ＣＤ３００ＬＢ ＣＣＲ７、ＬＭＩＲ６／ＣＤ３００ＬＥ、ＣＤ４０／ＴＮＦＲＳＦ５、ＭＡＧ／シグレック−４−ａ、ＣＤ４３、ＭＣＡＭ、ＣＤ４５、ＭＤ−１、ＣＤ６８、ＭＤ−２、ＣＤ８３、ＭＤＬ−１／ＣＬＥＣ５Ａ、ＣＤ８４／ＳＬＡＭＦ５、ＭＭＲ、ＣＤ９７、ＮＣＡＭＬｌ、ＣＤ２Ｆ−１０／ＳＬＡＭＦ９、オステオアクチビンＧＰＮＭＢ、Ｃｈｅｒｎ２３、ＰＤ−Ｌ２、ＣＬＥＣ−１、ＲＰ１０５、ＣＬＥＣ−２、シグレック−２／ＣＤ２２、ＣＲＡＣＣ／ＳＬＡＭＦ７、シグレック−３／ＣＤ３３、ＤＣ−ＳＩＧＮ、シグレック−５、ＤＣ−ＳＩＧＮＲ／ＣＤ２９９、シグレック−６、ＤＣＡＲ、シグレック−７、ＤＣＩＲ／ＣＬＥＣ４Ａ、シグレック−９、ＤＥＣ−２０５、シグレック−１０、デクチン−１／ＣＬＥＣ７Ａ、シグレック−Ｆ、デクチン−２／ＣＬＥＣ６Ａ、ＳＩＧＮＲ１／ＣＤ２０９、ＤＥＰ−１／ＣＤ１４８、ＳＩＧＮＲ４、ＤＬＥＣ、ＳＬＡＭ、ＥＭＭＰＲＩＮ／ＣＤ１４７、ＴＣＣＲ／ＷＳＸ−１、Ｆｃ−γ Ｒ１／ＣＤ６４、ＴＬＲ３、Ｆｃ−γ ＲＩＩＢ／ＣＤ３２ｂ、ＴＲＥＭ−１、Ｆｃ−γ ＲＩＩＣ／ＣＤ３２ｃ、ＴＲＥＭ−２、Ｆｃ−γ ＲＩＩＡ／ＣＤ３２ａ、ＴＲＥＭ−３、Ｆｃ−γ ＲＩＩＩ／ＣＤ１６、ＴＲＥＭＬ１／ＴＬＴ−１、ＩＣＡＭ−２／ＣＤ１０２、またはバニロイド Ｒ１への標的化により媒介される、樹状細胞に対する標的部分と（ｉｉ）腫瘍細胞に対する標的部分を有する。

一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、本明細書に記載される修飾された（例えば、変異された）シグナル伝達物質のいずれかと共に、（ｉ）例えばＣＬＥＣ−９Ａ、ＤＣ−ＳＩＧＮ、ＣＤ６４、ＣＬＥＣ４Ａ、またはＤＥＣ２０５への標的化により媒介される、樹状細胞に対する標的部分と（ｉｉ）腫瘍細胞に対する標的部分を有する。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、樹状細胞上のＣＬＥＣ９Ａに対する標的部分と、腫瘍細胞上のＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２に対する第二の標的部分と、を有する。

一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、本明細書に記載される修飾された（例えば、変異された）シグナル伝達物質のいずれかと共に、（ｉ）例えばＣＬＥＣ９Ａへの標的化により媒介される、樹状細胞に対する標的部分と（ｉｉ）腫瘍細胞に対する標的部分を有する。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、樹状細胞上のＣＬＥＣ９Ａに対する標的部分と、腫瘍細胞上のＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２に対する第二の標的部分と、を有する。

一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、本明細書に記載される修飾された（例えば、変異された）シグナル伝達物質のいずれかと共に、（ｉ）例えばＸＣＲ１への標的化により媒介される、樹状細胞に対する標的部分と（ｉｉ）腫瘍細胞に対する標的部分を有する。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、樹状細胞上のＸＣＲ１に対する標的部分と、腫瘍細胞上のＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２に対する第二の標的部分と、を有する。

一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、本明細書に記載される修飾された（例えば、変異された）シグナル伝達物質のいずれかと共に、（ｉ）例えばＲＡＮＫへの標的化により媒介される、樹状細胞に対する標的部分と（ｉｉ）腫瘍細胞に対する標的部分を有する。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、樹状細胞上のＲＡＮＫに対する標的部分と、腫瘍細胞上のＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２に対する第二の標的部分と、を有する。

非限定的な例として、様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、本明細書に記載される修飾された（例えば、変異された）シグナル伝達物質のいずれかと共に、（ｉ）例えばＳＩＲＰ１ａ、Ｂ７−１／ＣＤ８０、ＩＬＴ４／ＣＤ８５ｄ、Ｂ７−Ｈ１、ＩＬＴ５／ＣＤ８５ａ、共通β鎖、インテグリンα ４／ＣＤ４９ｄ、ＢＬＡＭＥ／ＳＬＡＭＦ８、インテグリンα Ｘ／ＣＤＩＩｃ、ＣＣＬ６／Ｃ１０、インテグリンβ ２／ＣＤ１８、ＣＤ１５５／ＰＶＲ、インテグリンβ ３／ＣＤ６１、ＣＤ３１／ＰＥＣＡＭ−１、ラテキシン、ＣＤ３６／ＳＲ−Ｂ３、ロイコトリエン Ｂ４ Ｒ１、ＣＤ４０／ＴＮＦＲＳＦ５、ＬＩＭＰＩＩＩＳＲ−Ｂ２、ＣＤ４３、ＬＭＩＲ１／ＣＤ３００Ａ、ＣＤ４５、ＬＭＩＲ２／ＣＤ３００ｃ、ＣＤ６８、ＬＭＩＲ３／ＣＤ３００ＬＦ、ＣＤ８４／ＳＬＡＭＦ５、ＬＭＩＲ５／ＣＤ３００ＬＢ、ＣＤ９７、ＬＭＩＲ６／ＣＤ３００ＬＥ、ＣＤ１６３、ＬＲＰ−１、ＣＤ２Ｆ−１０／ＳＬＡＭＦ９、ＭＡＲＣＯ、ＣＲＡＣＣ／ＳＬＡＭＦ７、ＭＤ−１、ＥＣＦ−Ｌ、ＭＤ−２、ＥＭＭＰＲＩＮ／ＣＤ１４７、ＭＧＬ２、エンドグリン／ＣＤ１０５、オステオアクチビン／ＧＰＮＭＢ、Ｆｃ−γ ＲＩ／ＣＤ６４、オステオポンチン、Ｆｃ−γ ＲＩＩＢ／ＣＤ３２ｂ、ＰＤ−Ｌ２、Ｆｃ−γ ＲＩＩＣ／ＣＤ３２ｃ、シグレック−３／ＣＤ３３、Ｆｃ−γ ＲＩＩＡ／ＣＤ３２ａ、ＳＩＧＮＲ１／ＣＤ２０９、Ｆｃ−γ ＲＩＩＩ／ＣＤ１６、ＳＬＡＭ、ＧＭ−ＣＳＦ Ｒα、ＴＣＣＲ／ＷＳＸ−１、ＩＣＡＭ−２／ＣＤ１０２、ＴＬＲ３、ＩＦＮ−γ Ｒｌ、ＴＬＲ４、ＩＦＮ−ガンマ Ｒ２、ＴＲＥＭ−ｌ、ＩＬ−ｌ ＲＩＩ、ＴＲＥＭ−２、ＩＬＴ２／ＣＤ８５ｊ、ＴＲＥＭ−３、ＩＬＴ３／ＣＤ８５ｋ、ＴＲＥＭＬ１／ＴＬＴ−１、２Ｂ４／ＳＬＡＭＦ ４、ＩＬ−１０ Ｒα、ＡＬＣＡＭ、ＩＬ−１０ Ｒβ、アミノペプチダーゼＮ／ＡＮＰＥＰ、ＩＬＴ２／ＣＤ８５ｊ、共通β鎖、ＩＬＴ３／ＣＤ８５ｋ、Ｃｌｑ Ｒ１／ＣＤ９３、ＩＬＴ４／ＣＤ８５ｄ、ＣＣＲ１、ＩＬＴ５／ＣＤ８５ａ、ＣＣＲ２、ＣＤ２０６、インテグリンα ４／ＣＤ４９ｄ、ＣＣＲ５、インテグリンα Ｍ／ＣＤｌｌ ｂ、ＣＣＲ８、インテグリンα Ｘ／ＣＤｌｌｃ、ＣＤ１５５／ＰＶＲ、インテグリンβ ２／ＣＤ１８、ＣＤ１４、インテグリンβ ３／ＣＤ６１、ＣＤ３６／ＳＲ−Ｂ３、ＬＡＩＲ１、ＣＤ４３、ＬＡＩＲ２、ＣＤ４５、ロイコトリエン Ｂ４−Ｒ１、ＣＤ６８、ＬＩＭＰＩＩＩＳＲ−Ｂ２、ＣＤ８４／ＳＬＡＭＦ５、ＬＭＩＲ１／ＣＤ３００Ａ、ＣＤ９７、ＬＭＩＲ２／ＣＤ３００ｃ、ＣＤ１６３、ＬＭＩＲ３／ＣＤ３００ＬＦ、凝固因子ＩＩＩ／組織因子、ＬＭＩＲ５／ＣＤ３００ＬＢ、ＣＸ３ＣＲ１、ＣＸ３ＣＬ１、ＬＭＩＲ６／ＣＤ３００ＬＥ、ＣＸＣＲ４、ＬＲＰ−１、ＣＸＣＲ６、Ｍ−ＣＳＦ Ｒ、ＤＥＰ−１／ＣＤ１４８、ＭＤ−１、ＤＮＡＭ−１、ＭＤ−２、ＥＭＭＰＲＩＮ／ＣＤ１４７、ＭＭＲ、エンドグリン／ＣＤ１０５、ＮＣＡＭ−Ｌ１、Ｆｃ−γ ＲＩ／ＣＤ６４、ＰＳＧＬ−１、Ｆｃ−γ ＲＩＩＩＩＣＤ１６、ＲＰ１０５、Ｇ−ＣＳＦ Ｒ、Ｌ−セレクチン、ＧＭ−ＣＳＦ Ｒα、シグレック−３／ＣＤ３３、ＨＶＥＭ／ＴＮＦＲＳＦ１４、ＳＬＡＭ、ＩＣＡＭ−１／ＣＤ５４、ＴＣＣＲ／ＷＳＸ−１、ＩＣＡＭ−２／ＣＤ１０２、ＴＲＥＭ−ｌ、ＩＬ−６ Ｒ、ＴＲＥＭ−２、ＣＸＣＲｌ／ＩＬ−８ ＲＡ、ＴＲＥＭ−３、またはＴＲＥＭＬｌ／ＴＬＴ−１への標的化により媒介される、単球／マクロファージに対する標的部分と（ｉｉ）腫瘍細胞に対する標的部分を有する。

一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、本明細書に記載される修飾された（例えば、変異された）シグナル伝達物質のいずれかと共に、（ｉ）例えばＢ７−Ｈ１、ＣＤ３１／ＰＥＣＡＭ−１、ＣＤ１６３、ＣＣＲ２、またはマクロファージマンノース受容体ＣＤ２０６への標的化により媒介される、単球／マクロファージに対する標的部分と（ｉｉ）腫瘍細胞に対する標的部分を有する。

一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、本明細書に記載される修飾された（例えば、変異された）シグナル伝達物質のいずれかと共に、（ｉ）例えばＳＩＲＰ１ａへの標的化により媒介される、単球／マクロファージに対する標的部分と（ｉｉ）腫瘍細胞に対する標的部分を有する。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、マクロファージ細胞上のＳＩＲＰ１ａに対する標的部分と、腫瘍細胞上のＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２に対する第二の標的部分と、を有する。

様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、チェックポイントマーカー、例えばＰＤ−１／ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２、ＣＤ２８／ＣＤ８０またはＣＤ８６、ＣＴＬＡ４／ＣＤ８０またはＣＤ８６、ＩＣＯＳ／ＩＣＯＳＬまたはＢ７ＲＰ１、ＢＴＬＡ／ＨＶＥＭ、ＫＩＲ、ＬＡＧ３、ＣＤ１３７／ＣＤ１３７Ｌ、ＯＸ４０／ＯＸ４０Ｌ、ＣＤ２７、ＣＤ４０Ｌ、ＴＩＭ３／Ｇａｌ９、およびＡ２ａＲの１つまたは複数に対する１つまたは複数の標的部分を有する。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、本明細書に記載される修飾された（例えば、変異された）シグナル伝達物質のいずれかと共に、（ｉ）Ｔ細胞上のチェックポイントマーカー、例えばＰＤ−１に対する標的部分と（ｉｉ）腫瘍細胞に対する標的部分、例えばＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２を有する。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、Ｔ細胞上のＰＤ−１に対する標的部分と、腫瘍細胞上のＰＤ−Ｌ１に対する第二の標的部分と、を有する。別の実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、Ｔ細胞上のＰＤ−１に対する標的部分と、腫瘍細胞上のＰＤ−Ｌ２に対する第二の標的部分と、を有する。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、同一または異なる免疫細胞に対する２つ以上の標的部分を含む。幾つか実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、本明細書に記載される修飾された（例えば、変異された）シグナル伝達物質のいずれか（例えば、修飾ＩＦＮ−β）と共に、（ｉ）Ｔ細胞、Ｂ細胞、樹状細胞、マクロファージ、ＮＫ細胞、またはそれらのサブセットから選択される免疫細胞に対する１つまたは複数の標的部分と（ｉｉ）Ｔ細胞、Ｂ細胞、樹状細胞、マクロファージ、ＮＫ細胞、またはそれらのサブセットから選択される同一のまたは別の免疫細胞に対する１つまたは複数の標的部分を有する。

一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、Ｔ細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、同一のまたは別のＴ細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、を含む。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、Ｔ細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、Ｂ細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、を含む。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、Ｔ細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、樹状細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、を含む。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、Ｔ細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、マクロファージに対する１つまたは複数の標的部分と、を含む。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、Ｔ細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、ＮＫ細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、を含む。例えば、例示的な実施形態において、キメラタンパク質は、ＣＤ８に対する標的部分と、ＣＬｅｃ９Ａに対する標的部分と、を含み得る。別の例示的な実施形態において、キメラタンパク質は、ＣＤ８に対する標的部分と、ＣＤ３に対する標的部分と、を含み得る。別の例示的な実施形態において、キメラタンパク質は、ＣＤ８に対する標的部分と、ＰＤ−１に対する標的部分と、を含み得る。

一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、Ｂ細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、同一のまたは別のＢ細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、を含む。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、Ｂ細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、Ｔ細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、を含む。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、Ｂ細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、樹状細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、を含む。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、Ｂ細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、マクロファージに対する１つまたは複数の標的部分と、を含む。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、Ｂ細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、ＮＫ細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、を含む。

一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、樹状細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、同一のまたは別の樹状細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、を含む。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、樹状細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、Ｔ細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、を含む。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、樹状細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、Ｂ細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、を含む。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、樹状細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、マクロファージに対する１つまたは複数の標的部分と、を含む。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、樹状細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、ＮＫ細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、を含む。

一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、マクロファージに対する１つまたは複数の標的部分と、同一のまたは別のマクロファージに対する１つまたは複数の標的部分と、を含む。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、マクロファージに対する１つまたは複数の標的部分と、Ｔ細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、を含む。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、マクロファージに対する１つまたは複数の標的部分と、Ｂ細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、を含む。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、マクロファージに対する１つまたは複数の標的部分と、樹状細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、を含む。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、マクロファージに対する１つまたは複数の標的部分と、ＮＫ細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、を含む。

一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、ＮＫ細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、同一のまたは別のＮＫ細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、を含む。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、ＮＫ細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、Ｔ細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、を含む。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、ＮＫ細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、Ｂ細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、を含む。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、ＮＫ細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、マクロファージに対する１つまたは複数の標的部分と、を含む。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、ＮＫ細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、樹状細胞に対する１つまたは複数の標的部分と、を含む。

一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、腫瘍細胞に対する標的部分と、同一のまたは異なる腫瘍細胞に対する第二の標的部分と、を含む。そのような実施形態において、標的部分は、本明細書に記載される腫瘍抗原のいずれかに結合し得る。

様々な実施形態において、本発明の標的部分は、本明細書に開示される配列の任意の１つに関して１つまたは複数のアミノ酸突然変異を有する配列を含み得る。様々な実施形態において、標的部分は、本明細書に開示される標的部分のアミノ酸配列の任意の１つに関して約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、もしくは１００またはより多くのアミノ酸突然変異を有する配列を含む。幾つかの実施形態において、１つまたは複数のアミノ酸突然変異は、独立して置換、挿入、欠失、およびトランケーションから選択され得る。

幾つかの実施形態において、アミノ酸突然変異は、アミノ酸置換であり、保存的置換および／または非保存的置換を包含し得る。

「保存的置換」は、例えば、含まれるアミノ酸残基の極性、電荷、サイズ、溶解度、疎水性、親水性、および／または両親媒性における類似性に基づいて、行われ得る。２０の天然由来アミノ酸は、以下の６つの標準的アミノ酸群に群分けされ得る：（１）疎水性：Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；（２）中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ；Ａｓｎ、Ｇｌｎ；（３）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；（４）塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；（５）鎖配向に影響を及ぼす残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；および（６）芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ。

本明細書で用いられる「保存的置換」は、先に示された６つの標準的アミノ酸群の同じ群内に列挙される別のアミノ酸による、あるアミノ酸の交換として定義される。例えばＧｌｕによるＡｓｐの交換は、そのように修飾されたポリペプチド中で１つの負電荷を保持する。加えて、グリシンおよびプロリンは、αヘリックスを破壊するそれらの能力に基づいて互いに置換され得る。

本明細書で用いられる「非保存的置換」は、先に示された６つの標準的アミノ酸群（１）〜（６）の異なる群内に列挙される別のアミノ酸による、あるアミノ酸の交換として定義される。

様々な実施形態において、置換はまた、非古典的アミノ酸（例えば、セレノシステイン、ピロリジン、Ｎ−ホルミルメチオニン、β−アラニン、ＧＡＢＡおよびδ−アミノレブリン酸、４−アミノ安息香酸（ＰＡＢＡ）、共通アミノ酸のＤ−異性体、２，４−ジアミノ酪酸、α−アミノイソ酪酸、４−アミノ酪酸、Ａｂｕ、２−アミノ酪酸、γ−Ａｂｕ、ε−Ａｈｘ、６−アミノヘキサン酸、Ａｉｂ、２−アミノイソ酪酸、３−アミノプロピオン酸、オルニチン、ノルロイシン、ノルバリン、ヒドロキシプロリン、サルコソーム（ｓａｒｃｏｓｍｅ）、シトルリン、ホモシトルリン、システイン酸、ｔ−ブチルグリシン、ｔ−ブチルアラニン、フェニルグリシン、シクロヘキシルアラニン、β−アラニン、フルオロアミノ酸、デザイナーアミノ酸、例えばβメチルアミノ酸、Ｃα−メチルアミノ酸、Ｎα−メチルアミノ酸、および一般のアミノ酸類似体）を包含し得る。

様々な実施形態において、アミノ酸突然変異は、標的部分のＣＤＲ（例えば、ＣＤＲ１、ＣＤＲ２またはＣＤＲ３領域）中であり得る。別の実施形態において、アミノ酸改変は、標的部分のフレームワーク領域（ＦＲ）（例えば、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、またはＦＲ４領域）中であり得る。

アミノ酸配列の修飾は、当該技術分野の任意の公知技術、例えば部位特異的突然変異誘発またはＰＣＲに基づく突然変異誘発を利用して実現され得る。そのような技術は、例えばＳａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｐｒｅｓｓ，Ｐｌａｉｎｖｉｅｗ，Ｎ．Ｙ．，１９８９、およびＡｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．，１９８９に記載される。

標的部分のフォーマット
様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質の標的部分は、特異的結合が可能なタンパク質系物質、例えば抗体またはその誘導体である。一実施形態において、標的部分は、抗体を含む。様々な実施形態において、抗体は、２つの重鎖および２つの軽鎖を含む完全長多量体タンパク質である。各重鎖は１つの可変領域（例えば、Ｖ_Ｈ）および少なくとも３つの定常領域（例えば、ＣＨ_１、ＣＨ_２およびＣＨ_３）を含み、各軽鎖は１つの可変領域（Ｖ_Ｌ）および１つの定常領域（Ｃ_Ｌ）を含む。可変領域は、抗体の特異性を決定する。各可変領域は、４つの相対的に保存されたフレームワーク領域（ＦＲ）に隣接される相補性決定領域（ＣＤＲ）としても知られる３つの超可変領域を含む。ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３と称される３つのＣＤＲは、抗体結合特異性に寄与する。幾つかの実施形態において、抗体は、キメラ抗体である。幾つかの実施形態において、抗体は、ヒト化抗体である。

幾つかの実施形態において、標的部分は、抗体誘導体またはフォーマットを含む。幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質の標的部分は、内容が全体として参照により本明細書に組み入れられる、米国特許または米国特許出願のＵＳ７，４１７，１３０、ＵＳ２００４／１３２０９４、ＵＳ５，８３１，０１２、ＵＳ２００４／０２３３３４、ＵＳ７，２５０，２９７、ＵＳ６，８１８，４１８、ＵＳ２００４／２０９２４３、ＵＳ７，８３８，６２９、ＵＳ７，１８６，５２４、ＵＳ６，００４，７４６、ＵＳ５，４７５，０９６、ＵＳ２００４／１４６９３８、ＵＳ２００４／１５７２０９、ＵＳ６，９９４，９８２、ＵＳ６，７９４，１４４、ＵＳ２０１０／２３９６３３、ＵＳ７，８０３，９０７、ＵＳ２０１０／１１９４４６、および／またはＵＳ７，１６６，６９７に記載される、単一ドメイン抗体、組換えの重鎖のみの抗体（ＶＨＨ）、一本鎖抗体（ｓｃＦｖ）、シャーク重鎖のみの抗体（ＶＮＡＲ）、マイクロタンパク質（システインノットタンパク質、ノッティン）、ＤＡＲＰｉｎ；テトラネクチン；Ａｆｆｉｂｏｄｙ；Ｔｒａｎｓｂｏｄｙ；Ａｎｔｉｃａｌｉｎ；ＡｄＮｅｃｔｉｎ；Ａｆｆｉｌｉｎ；Ｍｉｃｒｏｂｏｄｙ；ペプチドアプタマー；アルテラーゼ；プラスチック抗体；Ｐｈｙｌｏｍｅｒ；Ｓｔｒａｄｏｂｏｄｙ；マキシボディ（ｍａｘｉｂｏｄｙ）；Ｅｖｉｂｏｄｙ；Ｆｙｎｏｍｅｒ、アルマジロリピートタンパク質、クニッツドメイン、アビマー、アトリマー、Ｐｒｏｂｏｄｙ、Ｉｍｍｕｎｏｂｏｄｙ、Ｔｒｉｏｍａｂ、トロイボディ（ｔｒｏｙｂｏｄｙ）；ペプボディ（ｐｅｐｂｏｄｙ）；Ｖａｃｃｉｂｏｄｙ、ＵｎｉＢｏｄｙ；Ａｆｆｉｍｅｒ、ＤｕｏＢｏｄｙ、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２、ペプチド模倣分子、または合成分子である。Ｓｔｏｒｚ ＭＡｂｓ．２０１１ Ｍａｙ−Ｊｕｎ；３（３）：３１０−３１７も参照されたい。

一実施形態において、標的部分は、例えばラクダ、サメなどのＶＨＨ抗体を生成する生物体に由来のＶＨＨ、または設計されたＶＨＨなどの、単一ドメイン抗体を含む。ＶＨＨは、天然由来重鎖抗体の特有の構造的および機能的特性を含む抗体由来治療性タンパク質である。ＶＨＨ技術は、軽鎖が欠如するラクダからの完全に機能的な抗体に基づく。これらの重鎖抗体は、１つの可変ドメイン（ＶＨＨ）および２つの定常ドメイン（ＣＨ２およびＣＨ３）を含む。ＶＨＨは、商標：ＮＡＮＯＢＯＤＩＥＳとして市販される。

幾つかの実施形態において、ＶＨＨは、ヒト化ＶＨＨまたはラクダ化ＶＨＨである。

様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質の標的部分は、細胞受容体に対する天然リガンドなど、細胞受容体への特異的結合が可能なタンパク質系物質である。様々な実施形態において、細胞受容体は、非限定的にＴ細胞、細胞障害性Ｔリンパ球、Ｔヘルパー細胞、ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞、ナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞、抗腫瘍マクロファージ（例えば、Ｍ１マクロファージ）、Ｂ細胞、樹状細胞、またはそれらのサブセットを含む、１つまたは複数の免疫細胞上で見出される。幾つかの実施形態において、細胞受容体は、巨核球、血小板、赤血球、肥満細胞、好塩基球、好中球、好酸球、またはそれらのサブセット上で見出される。

幾つかの実施形態において、標的部分は、ケモカインなどの天然リガンドである。本発明のキメラタンパク質中に含まれ得る模範的なケモカインとしては、ＣＣＬ１、ＣＣＬ２、ＣＣＬ４、ＣＣＬ５、ＣＣＬ６、ＣＣＬ７、ＣＣＬ８、ＣＣＬ９、ＣＣＬ１０、ＣＣＬ１１、ＣＣＬ１２、ＣＣＬ１３、ＣＣＬ１４、ＣＣＬ１５、ＣＣＬ１６、ＣＬ１７、ＣＣＬ１８、ＣＣＬ１９、ＣＣＬ２０、ＣＣＬ２１、ＣＣＬ２２、ＣＣＬ２３、ＣＣＬ２４、ＣＬＬ２５、ＣＣＬ２６、ＣＣＬ２７、ＣＸＣＬ１、ＣＸＣＬ２、ＣＸＣＬ３、ＣＸＣＬ４、ＣＸＣＬ５、ＣＸＣＬ６、ＣＸＣＬ７、ＣＸＣＬ８、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１２、ＣＸＣＬ１３、ＣＸＣＬ１４、ＣＸＣＬ１５、ＣＸＣＬ１６、ＣＸＣＬ１７、ＸＣＬ１、ＸＣＬ２、ＣＸ３ＣＬ１、ＨＣＣ−４、およびＬＤＧＦ−ＰＢＰが挙げられるが、これらに限定されない。例示的な実施形態において、標的部分は、樹状細胞受容体ＸＣＲ１を認識しそれに結合するケモカインであるＸＣＬ１であり得る。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＣＲ８を認識しそれに結合するケモカインであるＣＣＬ１である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＣＲ２またはＣＣＲ９を認識しそれに結合するケモカインであるＣＣＬ２である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＣＲ１、ＣＣＲ５、またはＣＣＲ９を認識しそれに結合するケモカインであるＣＣＬ３である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＣＲ１、ＣＣＲ５またはＣＣＲ９を認識しそれに結合するケモカインであるＣＣＬ４である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＣＲ１またはＣＣＲ３またはＣＣＲ４またはＣＣＲ５を認識しそれに結合するケモカインであるＣＣＬ５である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＣＲ１を認識しそれに結合するケモカインであるＣＣＬ６である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＣＲ２またはＣＣＲ９を認識しそれに結合するケモカインであるＣＣＬ７である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＣＲ１またはＣＣＲ２またはＣＣＲ３またはＣＣＲ５またはＣＣＲ９を認識しそれに結合するケモカインであるＣＣＬ８である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＣＲ１を認識しそれに結合するケモカインであるＣＣＬ９である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＣＲ１を認識しそれに結合するケモカインであるＣＣＬ１０である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＣＲ２またはＣＣＲ３またはＣＣＲ５またはＣＣＲ９を認識しそれに結合するケモカインであるＣＣＬ１１である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＣＲ２またはＣＣＲ３またはＣＣＲ５またはＣＣＲ９を認識してそれに結合するケモカインであるＣＣＬ１３である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＣＲ１またはＣＣＲ９を認識しそれに結合するケモカインであるＣＣＬ１４である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＣＲ１またはＣＣＲ３を認識しそれに結合するケモカインであるＣＣＬ１５である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ５、またはＣＣＲ８を認識しそれに結合するケモカインであるＣＣＬ１６である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＣＲ４を認識しそれに結合するケモカインであるＣＣＬ１７である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＣＲ７を認識しそれに結合するケモカインであるＣＣＬ１９である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＣＲ６を認識しそれに結合するケモカインであるＣＣＬ２０である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＣＲ７を認識しそれに結合するケモカインであるＣＣＬ２１である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＣＲ４を認識しそれに結合するケモカインであるＣＣＬ２２である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＣＲ１を認識しそれに結合するケモカインであるＣＣＬ２３である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＣＲ３を認識しそれに結合するケモカインであるＣＣＬ２４である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＣＲ９を認識しそれに結合するケモカインであるＣＣＬ２５である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＣＲ３を認識しそれに結合するケモカインであるＣＣＬ２６である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＣＲ１０を認識しそれに結合するケモカインであるＣＣＬ２７である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＣＲ３またはＣＣＲ１０を認識しそれに結合するケモカインであるＣＣＬ２８である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＸＣＲ１またはＣＸＣＲ２を認識しそれに結合するケモカインであるＣＸＣＬ１である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＸＣＲ２を認識しそれに結合するケモカインであるＣＸＣＬ２である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＸＣＲ２を認識しそれに結合するケモカインであるＣＸＣＬ３である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＸＣＲ３Ｂを認識しそれに結合するケモカインであるＣＸＣＬ４である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＸＣＲ２を認識しそれに結合するケモカインであるＣＸＣＬ５である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＸＣＲ１またはＣＸＣＲ２を認識しそれに結合するケモカインであるＣＸＣＬ６である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＸＣＲ１またはＣＸＣＲ２を認識しそれに結合するケモカインであるＣＸＣＬ８である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＸＣＲ３を認識しそれに結合するケモカインであるＣＸＣＬ９である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＸＣＲ３を認識しそれに結合するケモカインであるＣＸＣＬ１０である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＸＣＲ３またはＣＸＣＲ７を認識しそれに結合するケモカインであるＣＸＣＬ１１である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＸＣＲ４またはＣＸＣＲ７を認識しそれに結合するケモカインであるＣＸＣＬ１２である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＸＣＲ５を認識しそれに結合するケモカインであるＣＸＣＬ１３である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＸＣＲ６を認識しそれに結合するケモカインであるＣＸＣＬ１６である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＸＣＲ２を認識しそれに結合するケモカインであるＬＤＧＦ−ＰＢＰである。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＸＣＲ１を認識しそれに結合するケモカインであるＸＣＬ２である。別の例示的な実施形態において、標的部分は、ＣＸ３ＣＲ１を認識しそれに結合するケモカインであるＣＸ３ＣＬ１である。

様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、様々な組み合わせで標的部分を含む。例示的な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、２つの標的部分を含み得、両者の標的部分は抗体またはその誘導体である。別の例示的な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、２つの標的部分を含み得、両者の標的部分は細胞受容体に対する天然リガンドである。さらなる例示的な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、２つの標的部分を含み得、それらの標的部分の一方は抗体またはその誘導体であり、他方の標的部分は細胞受容体に対する天然リガンドである。

様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質の認識ドメインは、目的の標的（例えば、抗原、受容体）を機能的にモジュレートし（非限定的に、部分的または完全に中和する）、例えば抗原が有する生物学的効果を実質的に阻害、低減、または中和する。例えば、様々な認識ドメインが、例えば患者が担持する腫瘍の、免疫系を能動的に抑制している、または抑制する能力を有する、１つまたは複数の腫瘍抗原を対象とし得る。例えば、幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、免疫阻害シグナル（例えば、チェックポイント阻害剤）、例えばＴＩＭ−３、ＢＴＬＡ、ＰＤ−１、ＣＴＬＡ−４、Ｂ７−Ｈ４、ＧＩＴＲ、ガレクチン−９、ＨＶＥＭ、ＰＤ−Ｌ１、ＰＤ−Ｌ２、Ｂ７−Ｈ３、ＣＤ２４４、ＣＤ１６０、ＴＩＧＩＴ、ＳＩＲＰα、ＩＣＯＳ、ＣＤ１７２ａ、およびＴＭＩＧＤ２の１つまたは複数を機能的にモジュレートする。例えば、幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、免疫阻害シグナルの伝達、非限定的例としてＰＤ−１とＰＤ−Ｌ１もしくはＰＤ−Ｌ２の結合ならびに／またはＣＴＬＡ−４とＡＰ２Ｍ１、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＳＨＰ−２、およびＰＰＰ２Ｒ５Ａの１つもしくは複数との結合、を破壊、遮断、低減、および／または阻害するように操作される。

様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質の認識ドメインは、目的の標的（例えば、抗原、受容体）を結合するが機能的にモジュレートせず、例えば認識ドメインは、結合抗体である、またはそれに類似している。例えば、様々な実施形態において、認識ドメインは、抗原または受容体を単に標的とするが、抗原または受容体が有する生物学的効果を実質的に阻害、低減、または機能的にモジュレートしない。例えば、先に定義されたより小さな抗体の幾つか（例えば、例として完全な抗体、に比較して）は、接近するのが困難なエピトープを標的とする能力を有し、より広範囲の特異的結合場所を提供する。様々な実施形態において、認識ドメインは、その生物活性にとって重要である抗原または受容体部位（例えば、抗原活性部位）から物理的に離れているエピトープを結合する。

そのような非中和の結合は、本発明のキメラタンパク質が、本明細書に記載されるもののいずれかなどのエフェクター抗原を介して必要な部位に活性免疫細胞を直接的または間接的に動員するために用いられる方法を含む、本発明の様々な実施形態で用途を見出す。例えば、様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、腫瘍を低減または排除する方法において、ＣＤ８を介して腫瘍細胞へ細胞障害性Ｔ細胞を直接的または間接的に動員するために用いられ得る（例えば、キメラタンパク質は、抗ＣＤ８抗原認識ドメインと、腫瘍抗原に対する認識ドメインと、を含み得る）。そのような実施形態において、ＣＤ８を発現する細胞障害性Ｔ細胞を直接的または間接的に動員するがＣＤ８活性を機能的にモジュレートしないことが、望ましい。反対に、これらの実施形態において、ＣＤ８シグナル伝達は、腫瘍の低減または排除効果の重要な部分である。さらなる例として、腫瘍を低減または排除する様々な方法において、本発明のキメラタンパク質は、ＣＬＥＣ９Ａを介して樹状細胞（ＤＣ）を直接的または間接的に動員するために用いられ得る（例えば、キメラタンパク質は、抗ＣＬＥＣ９Ａ認識ドメインと、腫瘍抗原に対する認識ドメインと、を含み得る）。そのような実施形態において、ＣＬＥＣ９Ａを発現するＤＣを直接的または間接的に動員するがＣＬＥＣ９Ａ活性を機能的にモジュレートしないことが、望ましい。反対に、これらの実施形態において、ＣＬＥＣ９Ａシグナル伝達は、腫瘍の低減または排除効果の重要な部分である。

様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質の認識ドメインは、例えば樹状細胞上の、ＸＣＲ１に結合する。例えば、認識ドメインは、幾つかの実施形態において、ＸＣＬ１または非中和抗ＸＣＲ１物質の全てまたは一部を含む。

様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質の認識ドメインは、免疫調整抗原（例えば、免疫刺激性または免疫阻害性）に結合する。様々な実施形態において、免疫調整抗原は、４−１ＢＢ、ＯＸ−４０、ＨＶＥＭ、ＧＩＴＲ、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＩＣＯＳリガンド；ＯＸ−４０リガンド、ＬＩＧＨＴ（ＣＤ２５８）、ＧＩＴＲリガンド、ＣＤ７０、Ｂ７−１、Ｂ７−２、ＣＤ３０リガンド、ＣＤ４０リガンド、ＩＣＯＳ、ＩＣＯＳリガンド、ＣＤ１３７リガンドおよびＴＬ１Ａの１つまたは複数である。様々な実施形態において、そのような免疫刺激性抗原は、腫瘍細胞上で発現される。様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質の認識ドメインは、そのような免疫刺激性抗原を結合するが機能的にモジュレートせずそれゆえ、それらの潜在的な腫瘍低減または排除能力の減少または喪失なしに、これらの物質を発現する細胞の動員を可能にする。

様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質の認識ドメインは、中和活性を有する２つの認識ドメインを含むか、または非中和（例えば、結合）活性を有する２つの認識ドメインを含むか、または中和活性を有する１つの認識ドメインと非中和（例えば、結合）活性を有する１つの認識ドメインとを含む、キメラタンパク質の状況下にあり得る。

シグナル伝達物質
一態様において、本発明は、シグナル伝達物質（例えば、免疫調整物質）を含むキメラタンパク質を提供する。様々な実施形態において、シグナル伝達物質は、受容体の１つまたは複数に対して低い親和性または活性を有するように修飾され、これは活性の弱化（作動性または拮抗性を含む）を可能にし、かつ／またはキメラタンパク質の非特異的シグナル伝達もしくは望まない封鎖を予防する。

様々な実施形態において、シグナル伝達物質は、その野生型形態で拮抗性であり、その拮抗活性を弱化する１つまたは複数の突然変異を担持する。様々な実施形態において、シグナル伝達物質は、１つまたは複数の突然変異により拮抗性であり、例えば作動性シグナル伝達物質が拮抗性シグナル伝達物質に変換され、そのように変換されたシグナル伝達物質は、場合により、その拮抗活性を弱化する１つまたは複数の突然変異も担持する（例えば、内容全体が参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２０１５／００７５２０に記載される通り）。

様々な実施形態において、シグナル伝達物質は、サイトカイン、成長因子、およびホルモンの修飾型から選択される。そのようなサイトカイン、成長因子、およびホルモンの例示としては、リンホカイン、モノカイン、伝統的なポリペプチドホルモン、例えばヒト成長ホルモン、Ｎ−メチオニルヒト成長ホルモン、およびウシ成長ホルモン；副甲状腺ホルモン；チロキシン；インスリン；プロインスリン；レラキシン；プロレラキシン；糖タンパク質ホルモン、例えば濾胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）、甲状腺刺激ホルモン（ＴＳＨ）、および黄体形成ホルモン（ＬＨ）；肝臓成長因子；線維芽成長因子；プロラクチン；胎盤ラクトゲン；腫瘍壊死因子−αおよび腫瘍壊死因子−β；ミューラー阻害物質；マウスゴナドトロピン関連ペプチド；インヒビン；アクチビン；血管内皮成長因子；インテグリン；トロンボポエチン（ＴＰＯ）；ＮＧＦ−αなどの神経成長因子；血小板増殖因子；ＴＧＦ−αおよびＴＧＦ−βなどのトランスフォーミング成長因子（ＴＧＦ）；インスリン様成長因子−ＩおよびＩＩ；骨誘発因子；インターフェロン、例えばインターフェロン−α、インターフェロン−β、およびインターフェロン−γ（およびインターフェロンＩ型、ＩＩ型およびＩＩＩ型）など；コロニー刺激因子（ＣＳＦ）、例えばマクロファージ−ＣＳＦ（Ｍ−ＣＳＦ）；顆粒球−マクロファージ−ＣＳＦ（ＧＭ−ＣＳＦ）；顆粒球−ＣＳＦ（Ｇ−ＣＳＦ）；インターロイキン（ＩＬ）、例えばＩＬ−１、ＩＬ−１α、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３およびＩＬ−１８など；腫瘍壊死因子、例えばＴＮＦ−αおよびＴＮＦ−β；ならびに他のポリペプチド因子、例えばＬＩＦおよびｋｉｔリガンド（ＫＬ）が挙げられるが、これらに限定されない。本明細書で用いられるサイトカイン、成長因子、およびホルモンとしては、天然供給源から得られる、またはネイティブ配列サイトカインの組換え細菌、真核細胞もしくは哺乳動物細胞培養系から産生されるタンパク質、および生物学的活性均等物が挙げられる。

幾つかの実施形態において、シグナル伝達物質は、非限定的にＴＧＦ−αおよびＴＧＦ−βなどのトランスフォーミング成長因子（ＴＧＦ）、上皮成長因子（ＥＧＦ）、インスリン様成長因子−ＩおよびＩＩなどのインスリン様成長因子、線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）、ヘレグリン、血小板由来因子（ＰＤＧＦ）、血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）から選択される成長因子の修飾型である。

一実施形態において、成長因子は、線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）の修飾型である。例示的なＦＧＦとしては、ＦＧＦ１、ＦＧＦ２、ＦＧＦ３、ＦＧＦ４、ＦＧＦ５、ＦＧＦ６、ＦＧＦ７、ＦＧＦ８、ＦＧＦ９、ＦＧＦ１０、ＦＧＦ１１、ＦＧＦ１２、ＦＧＦ１３、ＦＧＦ１４、ネズミＦＧＦ１５、ＦＧＦ１６、ＦＧＦ１７、ＦＧＦ１８、ＦＧＦ１９、ＦＧＦ２０、ＦＧＦ２１、ＦＧＦ２２、およびＦＧＦ２３が挙げられるが、これらに限定されない。

一実施形態において、成長因子は、血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）の修飾型である。例示的なＶＥＧＦとしては、ＶＥＧＦ−Ａ、ＶＥＧＦ−Ｂ、ＶＥＧＦ−Ｃ、ＶＥＧＦ−Ｄ、およびＰＧＦ、ならびにそれらのアイソフォーム、例えばＶＥＧＦ_１２１、ＶＥＧＦ_１２１ｂ、ＶＥＧＦ_１４５、ＶＥＧＦ_１６５、ＶＥＧＦ_１６５ｂ、ＶＥＧＦ_１８９、およびＶＥＧＦ_２０６を含むＶＥＧＦ−Ａの様々なアイソフォームが挙げられるが、これらに限定されない。

一実施形態において、成長因子は、トランスフォーミング成長因子（ＴＧＦ）の修飾型である。例示的なＴＧＦとしては、ＴＧＦ−αおよびＴＧＦ−β、ならびにそれらのサブタイプ、例えばＴＧＦβ１、ＴＧＦβ２、およびＴＧＦβ３を含むＴＧＦ−βの様々なサブタイプが挙げられるが、これらに限定されない。

幾つかの実施形態において、シグナル伝達物質は、非限定的にヒト絨毛膜ゴナドトロピン、ゴナドトロピン放出ホルモン、アンドロゲン、エストロゲン、甲状腺刺激ホルモン、卵胞刺激ホルモン、黄体形成ホルモン、プロラクチン、成長ホルモン、副腎皮質刺激ホルモン、抗利尿ホルモン、オキシトシン、サイロトロピン放出ホルモン、成長ホルモン放出ホルモン、コルチコトロピン放出ホルモン、ソマトスタチン、ドーパミン、メラトニン、チロキシン、カルシトニン、副甲状腺ホルモン、グルココルチコイド、ミネラルコルチコイド、アドレナリン、ノルアドレナリン、プロゲステロン、インスリン、グルカゴン、アミリン、カルシトリオール、カルシフェロール、心房性ナトリウム利尿性ペプチド、ガストリン、セクレチン、コレシストキニン、神経ペプチドＹ、グレリン、ＰＹＹ３−３６、インスリン様成長因子（ＩＧＦ）、レプチン、トロンボポエチン、エリスロポエチン（ＥＰＯ）、およびアンギオテンシノーゲンから選択されるホルモンの修飾型である。幾つかの実施形態において、シグナル伝達物質は、ＥＰＯである。

幾つかの実施形態において、シグナル伝達物質は、免疫調整剤、例えばインターロイキン、インターフェロン、および腫瘍壊死因子の１つまたは複数である。

幾つかの実施形態において、シグナル伝達物質は、例えばＩＬ−１；ＩＬ−２；ＩＬ−３；ＩＬ−４；ＩＬ−５；ＩＬ−６；ＩＬ−７；ＩＬ−８；ＩＬ−９；ＩＬ−１０；ＩＬ−１１；ＩＬ−１２；ＩＬ−１３；ＩＬ−１４；ＩＬ−１５；ＩＬ−１６；ＩＬ−１７；ＩＬ−１８；ＩＬ−１９；ＩＬ−２０；ＩＬ−２１；ＩＬ−２２；ＩＬ−２３；ＩＬ−２４；ＩＬ−２５；ＩＬ−２６；ＩＬ−２７；ＩＬ−２８；ＩＬ−２９；ＩＬ−３０；ＩＬ−３１；ＩＬ−３２；ＩＬ−３３；ＩＬ−３５；ＩＬ−３６、またはそのフラグメント、バリアント、類似体、もしくはファミリーメンバーを含む、インターロイキンまたは修飾されたインターロイキンである。インターロイキンは、リンパ球、単球、およびマクロファージにより合成される多機能サイトカインの一群である。公知の機能としては、免疫細胞（例えば、Ｔヘルパー細胞、Ｂ細胞、好酸球およびリンパ球）の増殖刺激、好中球およびＴリンパ球のケモタクシス、ならびに／またはインターフェロンの阻害が挙げられる。インターロイキン活性は、当該技術分野で公知のアッセイを利用して計測され得る：ＭａｔｔｈｅｗｓらのＬｙｍｐｈｏｋｉｎｅｓ ａｎｄ Ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｓ：Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈ，Ｃｌｅｍｅｎｓ ｅｔ ａｌ．，ｅｄｓ，ＩＲＬ Ｐｒｅｓｓ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ，Ｄ．Ｃ．１９８７，ｐｐ．２２１−２２５；およびＯｒｅｎｃｏｌｅ ＆ Ｄｉｎａｒｅｌｌｏ（１９８９） Ｃｙｔｏｋｉｎｅ １，１４−２０。

幾つかの実施形態において、シグナル伝達物質は、インターフェロンＩ、ＩＩ、およびＩＩＩ型などのインターフェロン、またはインターフェロンの修飾型である。例示的なインターフェロンとしては、例えばインターフェロン−α−１、２、４、５、６、７、８、１０、１３、１４、１６、１７、および２１、インターフェロン−β、インターフェロン−γ、インターフェロン−κ、インターフェロン−ε、インターフェロン−τ、ならびにインターフェロン−ωが挙げられる。

幾つかの実施形態において、シグナル伝達物質は、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）または腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）の修飾型、またはＴＮＦファミリー中のタンパク質であり、例えば非限定的にＴＮＦ−α、ＴＮＦ−β、ＬＴ−β、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ２７Ｌ、ＣＤ３０Ｌ、ＦＡＳＬ、４−１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、およびＴＲＡＩＬを含む。

様々な実施形態において、シグナル伝達物質は、１つまたは複数の突然変異を有するシグナル伝達物質の修飾（例えば、突然変異）形態である。様々な実施形態において、突然変異は、修飾されたシグナル伝達物質が、シグナル伝達物質の非修飾または非突然変異形態、即ち野生型形態に対して（例えば、同じシグナル伝達物質を野生型形態対修飾（例えば、突然変異）形態で比較して）、結合親和性の低減、内因活性の低減、および特異的生物活性の低減の１つまたは複数などの弱化された活性の１つまたは複数を有することを可能にする。幾つかの実施形態において、結合または親和性を弱化または低減する突然変異は、結合または活性を実質的に弱化または除去するそのような突然変異を含む。幾つかの実施形態において、結合または親和性を弱化または低減する突然変異は、結合または活性を実質的に弱化または除去するそのような突然変異と異なる。結論として、様々な実施形態において、突然変異は、シグナル伝達物質が、改善された安全性を有する、例えば非変異の、即ち野生型の、シグナル伝達物質に対して（例えば、同じシグナル伝達物質を野生型形態対修飾（例えば、突然変異）形態で比較して）低減された全身毒性、低減された副作用、および低減されたオフターゲット効果を有することを可能にする。

様々な実施形態において、シグナル伝達物質は、その受容体の１つまたは複数に対する結合親和性または活性を低減する１つまたは複数の突然変異を有するように修飾される。幾つかの実施形態において、シグナル伝達物質は、受容体に対する結合親和性または活性を実質的に低減または除去する１つまたは複数の突然変異を有するように修飾される。幾つかの実施形態において、野生型シグナル伝達物質により提供される活性は、受容体で作動性である（例えば、治療の部位での細胞効果の活性化）。例えば、野生型シグナル伝達物質は、受容体を活性化し得る。そのような実施形態において、突然変異は、受容体で低減または除去された活性化活性を有するように修飾されたシグナル伝達物質をもたらす。例えば突然変異は、標的細胞に低減された活性化シグナルを送達するように修飾されたシグナル伝達物質をもたらし得るか、または活性化シグナルが、除去され得る。幾つかの実施形態において、野生型シグナル伝達物質により提供される活性は、受容体で拮抗性である（例えば、治療の部位での細胞効果の遮断または減衰）。例えば、野生型シグナル伝達物質は、受容体を拮抗または阻害し得る。これらの実施形態において、突然変異は、受容体で低減または除去された拮抗活性を有するように修飾されたシグナル伝達物質をもたらす。例えば突然変異は、標的細胞に低減された阻害性シグナルを送達するように修飾されたシグナル伝達物質をもたらし得るか、または阻害性シグナルが、除去され得る。様々な実施形態において、シグナル伝達物質は、１つまたは複数の突然変異により拮抗性であり、例えば作動性シグナル伝達物質が、拮抗性シグナル伝達物質に変換され（例えば、内容全体が参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２０１５／００７５２０に記載される通り）、そのような変換されたシグナル伝達物質は、場合によりその受容体の１つまたは複数に対する結合親和性もしくは活性を低減する、またはその受容体の１つまたは複数に対する結合親和性を実質的に低減もしくは除去する、１つまたは複数の突然変異も担持する。

幾つかの実施形態において、受容体で低減された親和性または活性は、標的部分の１つまたは複数の付着により回復可能である。他の実施形態において、受容体で低減された親和性または活性は、標的部分の１つまたは複数の活性により実質的に回復可能でない。

様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、それらのシグナル伝達物質が受容体で結合親和性または活性を減弱または除去する突然変異を有するため、オフターゲット効果を低減する。様々な実施形態において、副作用のこの低減は、例えば野生型シグナル伝達物質に相対的に、観察される。様々な実施形態において、標的部分（複数可）が、実質的な活性化に必要とされる消失した／不充分な結合（例えば、限定なしにおよび／または親和性）を補填するため、シグナル伝達物質は、標的細胞上で活性である。様々な実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、治療活性部位への途中では実質的に不活性であり、特異的に標的にされる細胞型上では実質的に効果を有し、これは望ましくない副作用を大きく低減する。

幾つかの実施形態において、シグナル伝達物質は、１つの受容体（即ち、治療性受容体）への結合および親和性を弱化または低減する１つまたは複数の突然変異と、第二の受容体で結合または活性を実質的に低減または除去する１つまたは複数の突然変異と、を含み得る。そのような実施形態において、これらの突然変異は、同一のまたは異なる位置（即ち、同一の突然変異または複数の突然変異）であり得る。幾つかの実施形態において、１つの受容体での結合および／または活性を低減する突然変異（複数可）は、別の受容体で実質的に低減または除去する突然変異（複数可）と異なる。幾つかの実施形態において、１つの受容体での結合および／または活性を低減する突然変異（複数可）は、別の受容体で実質的に低減または除去する突然変異（複数可）と同一である。幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、治療性受容体で結合および／または活性を弱化し、それゆえより制御されたオンターゲット治療効果（例えば、相対的な野生型シグナル伝達物質）を可能にする突然変異と、別の受容体で結合および／または活性を実質的に低減または除去し、それゆえ副作用を低減する（例えば、野生型シグナル伝達物質に対して）突然変異と、の両方を有する修飾されたシグナル伝達物質を有する。

幾つかの実施形態において、結合または活性の実質的な低減または除去は、標的部分で実質的に回復可能でない。幾つかの実施形態において、結合または活性の実質的な低減または除去は、標的部分で回復可能である。様々な実施形態において、第二の受容体で結合または活性を実質的に低減または除去することは、他の受容体により媒介される有害作用も予防し得る。代わりまたは追加として、別の受容体で結合または活性を実質的に低減または除去することは、治療作用部位から離れた治療性キメラタンパク質の低減または排除される封鎖があるため、治療効果を改善させる。例えば、幾つかの実施形態において、これは、他の受容体での損失を補填する本発明のキメラタンパク質の高用量の要件を不要にする。用量を低減するそのような能力がさらに、副作用のより低い可能性をもたらす。

様々な実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、シグナル伝達物質が受容体の１つまたは複数について、低減れた、実質的に低減された、または除去された親和性、例えば結合（例えば、Ｋ_Ｄ）および／または活性化（例えば、修飾されたシグナル伝達物質が、その受容体のアゴニストであれば、例えばＫ_Ａおよび／またはＥＣ_５０として測定できる）および／または阻害（例えば、修飾されたシグナル伝達物質が、その受容体のアンタゴニストであれば、例えばＫ_Ｉおよび／またはＩＣ_５０として測定できる）を有するようにさせる１つまたは複数の突然変異を含む。様々な実施形態において、免疫調整剤の受容体で低減された親和性は、活性（作動または拮抗を含む）の弱化を可能にする。そのような実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、野生型シグナル伝達物質に対して、受容体への約１％、または約３％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、または約１０％〜２０％、約２０％〜４０％、約５０％、約４０％〜６０％、約６０％〜８０％、約８０％〜１００％の親和性を有する。幾つかの実施形態において、結合親和性は、野生型シグナル伝達物質に対して、少なくとも約２倍低い、約３倍低い、約４倍低い、約５倍低い、約６倍低い、約７倍低い、約８倍低い、約９倍低い、少なくとも約１０倍低い、少なくとも約１５倍低い、少なくとも約２０倍低い、少なくとも約２５倍低い、少なくとも約３０倍低い、少なくとも約３５倍低い、少なくとも約４０倍低い、少なくとも約４５倍低い、少なくとも約５０倍低い、少なくとも約１００倍低い、少なくとも約１５０倍低い、または約１０〜５０倍低い、約５０〜１００倍低い、約１００〜１５０倍低い、約１５０〜２００倍低い、または２００倍よりもさらに低い。

キメラタンパク質が、１つの受容体で結合を低下させ、かつ第二の受容体で結合を実質的に低下または弱化させる突然変異を有する実施形態において、１つの受容体に対する修飾されたシグナル伝達物質の結合親和性の弱化または低減は、他の受容体に対する親和性の実質的な弱化または除去よりも低い。幾つかの実施形態において、１つの受容体に対する修飾されたシグナル伝達物質の結合親和性における弱化または低減は、他の受容体に対する親和性の実質的な弱化または除去よりも約１％、または約３％、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、または約９５％低い。様々な実施形態において、実質的な低減または除去は、弱化または低減よりも大きな、結合親和性および／または活性の低減を指す。

様々な実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、シグナル伝達物質の内因性活性を、例えば、野生型シグナル伝達物質に対して、約７５％、または約７０％、または約６０％、または約５０％、または約４０％、または約３０％、または約２５％、または約２０％、または約１０％、または約５％、または約３％、または約１％に低減する１つまたは複数の突然変異を含む。

様々な実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、シグナル伝達物質が、本明細書に記載されるサイトカイン、成長因子、およびホルモンの任意の１つの受容体に対する低減された親和性および／または活性を有するようにさせる、１つまたは複数の突然変異を含む。

幾つかの実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、シグナル伝達物質が、その受容体（複数可）に対する標的部分（複数可）の結合親和性よりも低い、その受容体に対する低減された親和性を有するようにさせる、１つまたは複数の突然変異を含む。幾つかの実施形態において、この結合親和性の差異は、同じ細胞上でのシグナル伝達物質／受容体と標的部分／受容体の間にある。幾つかの実施形態において、この結合親和性の差異は、シグナル伝達物質、例えば突然変異されたシグナル伝達物質が、局在化されたオンターゲット効果を有し、および野生型シグナル伝達物質で観察される副作用の根底にあるオフターゲット効果を最小限にすることを可能にする。幾つかの実施形態において、この結合親和性は、少なくとも約２倍、または少なくとも約５倍、または少なくとも約１０倍、または少なくとも約１５倍低い、または少なくとも約２５倍、または少なくとも約５０倍低い、または少なくとも約１００倍、または少なくとも約１５０倍である。

受容体結合活性は、当該技術分野で公知の方法を利用して測定され得る。例えば親和性および／または結合活性は、結合データのスキャッチャードプロット分析とコンピュータフィッティング（例えば、Ｓｃａｔｃｈａｒｄ，１９４９）により、またはＢｒｅｃｈｔ ら（１９９３）により記載される通りフロースルー条件下での反射干渉分光法により、評定され得る（それらの全ての全体的内容は、参照により本明細書に組み入れられる）。

本明細書に記載される野生型シグナル伝達物質は、当該技術分野で周知である。したがって様々な実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、本明細書に記載されるシグナル伝達物質の公知の野生型アミノ酸配列と少なくとも約６０％、少なくとも約６１％、少なくとも約６２％、少なくとも約６３％、少なくとも約６４％、少なくとも約６５％、少なくとも約６６％、少なくとも約６７％、少なくとも約６８％、少なくとも約６９％、少なくとも約７０％、少なくとも約７１％、少なくとも約７２％、少なくとも約７３％、少なくとも約７４％、少なくとも約７５％、少なくとも約７６％、少なくとも約７７％、少なくとも約７８％、少なくとも約７９％、少なくとも約８０％、少なくとも約８１％、少なくとも約８２％、少なくとも約８３％、少なくとも約８４％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％の配列同一性（例えば、本明細書に開示される配列の任意の１つと約６０％、または約６１％、または約６２％、または約６３％、または約６４％、または約６５％、または約６６％、または約６７％、または約６８％、または約６９％、または約７０％、または約７１％、または約７２％、または約７３％、または約７４％、または約７５％、または約７６％、または約７７％、または約７８％、または約７９％、または約８０％、または約８１％、または約８２％、または約８３％、または約８４％、または約８５％、または約８６％、または約８７％、または約８８％、または約８９％、または約９０％、または約９１％、または約９２％、または約９３％、または約９４％、または約９５％、または約９６％、または約９７％、または約９８％、または約９９％の配列同一性）を有するアミノ酸配列を含む。

様々な実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、本明細書に開示されるシグナル伝達物質のアミノ酸配列のいずれかと少なくとも約６０％、少なくとも約６１％、少なくとも約６２％、少なくとも約６３％、少なくとも約６４％、少なくとも約６５％、少なくとも約６６％、少なくとも約６７％、少なくとも約６８％、少なくとも約６９％、少なくとも約７０％、少なくとも約７１％、少なくとも約７２％、少なくとも約７３％、少なくとも約７４％、少なくとも約７５％、少なくとも約７６％、少なくとも約７７％、少なくとも約７８％、少なくとも約７９％、少なくとも約８０％、少なくとも約８１％、少なくとも約８２％、少なくとも約８３％、少なくとも約８４％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％の配列同一性（例えば、本明細書に開示される配列の任意の１つと約６０％、または約６１％、または約６２％、または約６３％、または約６４％、または約６５％、または約６６％、または約６７％、または約６８％、または約６９％、または約７０％、または約７１％、または約７２％、または約７３％、または約７４％、または約７５％、または約７６％、または約７７％、または約７８％、または約７９％、または約８０％、または約８１％、または約８２％、または約８３％、または約８４％、または約８５％、または約８６％、または約８７％、または約８８％、または約８９％、または約９０％、または約９１％、または約９２％、または約９３％、または約９４％、または約９５％、または約９６％、または約９７％、または約９８％、または約９９％の配列同一性）を有するアミノ酸配列を含む。

様々な実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、１つまたは複数のアミノ酸突然変異を有するアミノ酸配列を含む。幾つかの実施形態において、１つまたは複数のアミノ酸突然変異は、独立して、置換、挿入、欠失、およびトランケーションから選択され得る。

幾つかの実施形態において、アミノ酸突然変異は、アミノ酸置換であり、本明細書の他の箇所に記載される通り、保存的置換および／または非保存的置換を包含し得る。

本明細書に記載される通り、修飾されたシグナル伝達物質は、１つまたは複数の受容体で親和性および／または活性に影響を及ぼす突然変異を担持する。様々な実施形態において、治療性受容体、例えばそれを介して所望の治療効果が媒介される（例えば、作動または拮抗）受容体で親和性および／または活性が低減される。様々な実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、受容体、例えばそれを介して所望の治療効果が媒介されない（例えば、結合の無差別性の結果として）受容体で親和性および／または活性を実質的に低減または除去する突然変異を担持する。本明細書に記載される通り、任意の修飾されたシグナル伝達物質、例えばサイトカイン、成長因子、およびホルモンの１つ、の受容体は、当該技術分野で公知である。

受容体で低減された親和性および／または活性（例えば、作動性）を提供する例示的な突然変異は、それぞれの内容全体が参照により本明細書に組み入れられる、ＷＯ２０１３／１０７７９１（例えば、インターフェロンに関する）ＷＯ２０１５／００７５４２（例えば、インターロイキンに関する）、およびＷＯ２０１５／００７９０３（例えば、ＴＮＦに関する）に見出される。治療性受容体で低減された親和性および／または活性（例えば、拮抗性）を提供する例示的な突然変異は、内容全体が参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２０１５／００７５２０に見出される。

幾つかの実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、シグナル伝達物質が、Ｉ型サイトカイン受容体、ＩＩ型サイトカイン受容体、ケモカイン受容体、腫瘍壊死因子受容体（ＴＮＦＲ）スーパーファミリーにおける受容体、ＴＧＦ−β受容体、免疫グロブリン（Ｉｇ）スーパーファミリーにおける受容体、および／またはチロシンキナーゼスーパーファミリーにおける受容体に対する低減された親和性および／または活性を有するようにさせる、１つまたは複数の突然変異を含む。

様々な実施形態において、シグナル伝達物質の受容体は、Ｉ型サイトカイン受容体である。Ｉ型サイトカイン受容体は、当該技術分野で公知であり、ＩＬ２（ベータサブユニット）、ＩＬ３、ＩＬ４、ＩＬ５、ＩＬ６、ＩＬ７、ＩＬ９、ＩＬ１１、ＩＬ１２、ＧＭ−ＣＳＦ、Ｇ−ＣＳＦ、ＬＩＦ、ＣＮＴＦに対する受容体、ならびにトロンボポエチン（ＴＰＯ）、プロラクチン、および成長ホルモンに対する受容体も挙げられるが、これらに限定されない。例示的なＩ型サイトカイン受容体としては、ＧＭ−ＣＳＦ受容体、Ｇ−ＣＳＦ受容体、ＬＩＦ受容体、ＣＮＴＦ受容体、ＴＰＯ受容体、およびＩ型ＩＬ受容体が挙げられるが、これらに限定されない。

様々な実施形態において、シグナル伝達物質の受容体は、ＩＩ型サイトカイン受容体である。ＩＩ型サイトカイン受容体は、異種性サブユニット（ｈｅｔｅｒｏｌｏｇｏｕｓ ｓｕｂｕｎｉｔｓ）で構成される多量体受容体であり、主にインターフェロンのための受容体である。この受容体ファミリーとしては、インターフェロン−α、インターフェロン−β、およびインターフェロン−γ、ＩＬ１０、ＩＬ２２、および組織因子に対する受容体が挙げられるが、これらに限定されない。例示的なＩＩ型サイトカイン受容体としては、ＩＦＮ−α受容体（例えば、ＩＦＮＡＲ１およびＩＦＮＡＲ２）、ＩＦＮ−β受容体、およびＩＦＮ−γ受容体（例えば、ＩＦＮＧＲ１およびＩＦＮＧＲ２）、およびＩＩ型ＩＬ受容体が挙げられるが、これらに限定されない。

様々な実施形態において、シグナル伝達物質の受容体は、Ｇタンパク質共役受容体である。ケモカイン受容体は、７つの膜貫通構造を有しシグナル伝達のためにＧタンパク質に共役される、Ｇタンパク質共役受容体である。ケモカイン受容体としては、ＣＣケモカイン受容体、ＣＸＣケモカイン受容体、ＣＸ３Ｃケモカイン受容体、およびＸＣケモカイン受容体（ＸＣＲ１）が挙げられるが、これらに限定されない。例示的なケモカイン受容体としては、ＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＣＲ８、ＣＣＲ９、ＣＣＲ１０、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ３ｂ、ＣＸＣＲ４、ＣＸＣＲ５、ＣＳＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ＸＣＲ１、およびＣＸ３ＣＲ１が挙げられるが、これらに限定されない。

様々な実施形態において、シグナル伝達物質の受容体は、ＴＮＦＲファミリーメンバーである。腫瘍壊死因子（ＴＮＦＲ）ファミリーメンバーは、細長い分子を生成するＣＸＸＣＸＸＣのコアモチーフを取り囲む３つのジスルフィド結合で形成されるシステインリッチドメイン（ＣＲＤ）を共有する。例示的な腫瘍壊死因子受容体ファミリーとしては、ＣＤＩ ２０ａ（ＴＮＦＲＳＦＩＡ）、ＣＤ １２０ｂ（ＴＮＦＲＳＦＩＢ）、リンホカインベータ受容体（ＬＴＢＲ、ＴＮＦＲＳＦ３）、ＣＤ１３４（ＴＮＦＲＳＦ４）、ＣＤ４０（ＣＤ４０、ＴＮＦＲＳＦ５）、ＦＡＳ（ＦＡＳ、ＴＮＦＲＳＦ６）、ＴＮＦＲＳＦ６Ｂ（ＴＮＦＲＳＦ６Ｂ）、ＣＤ２７（ＣＤ２７、ＴＮＦＲＳＦ７）、ＣＤ３０（ＴＮＦＲＳＦ８）、ＣＤ１３７（ＴＮＦＲＳＦ９）、ＴＮＦＲＳＦＩＯＡ（ＴＮＦＲＳＦＩＯＡ）、ＴＮＦＲＳＦＩＯＢ、（ＴＮＦＲＳＦＩＯＢ）、ＴＮＦＲＳＦＩＯＣ（ＴＮＦＲＳＦＩＯＣ）、ＴＮＦＲＳＦＩＯＤ（ＴＮＦＲＳＦＩＯＤ）、ＲＡＮＫ（ＴＮＦＲＳＦＩ lＡ）、オステオプロテゲリン（ＴＮＦＲＳＦＩ ＩＢ）、ＴＮＦＲＳＦ１２Ａ（ＴＮＦＲＳＦ１２Ａ）、ＴＮＦＲＳＦ１３Ｂ（ＴＮＦＲＳＦ１３Ｂ）、ＴＮＦＲＳＦ１３Ｃ（ＴＮＦＲＳＦ１３Ｃ）、ＴＮＦＲＳＦ１４（ＴＮＦＲＳＦ１４）、神経成長因子受容体（ＮＧＦＲ、ＴＮＦＲＳＦ１６）、ＴＮＦＲＳＦ１７（ＴＮＦＲＳＦ１７）、ＴＮＦＲＳＦ１８（ＴＮＦＲＳＦ１８）、ＴＮＦＲＳＦ１９（ＴＮＦＲＳＦ１９）、ＴＮＦＲＳＦ２１（ＴＮＦＲＳＦ２１）、およびＴＮＦＲＳＦ２５（ＴＮＦＲＳＦ２５）が挙げられる。

様々な実施形態において、シグナル伝達物質の受容体は、ＴＧＦ−ベータ受容体である。ＴＧＦ−ベータ受容体は、シングルパスセリン／トレオニンキナーゼ受容体である。ＴＧＦ−ベータ受容体としては、ＴＧＦＢＲ１、ＴＧＦＢＲ２、およびＴＧＦＢＲ３が挙げられるが、これらに限定されない。

様々な実施形態において、シグナル伝達物質の受容体は、Ｉｇスーパーファミリー受容体である、免疫グロブリン（Ｉｇ）スーパーファミリーにおける受容体は、免疫グロブリンと構造的相同性を共有する。Ｉｇスーパーファミリーにおける受容体としては、インターロイキン−１受容体、ＣＳＦ−１Ｒ、ＰＤＧＦＲ（例えば、ＰＤＧＦＲＡおよびＰＤＧＦＲＢ）、およびＳＣＦＲが挙げられるが、これらに限定されない。

様々な実施形態において、シグナル伝達物質の受容体は、チロシンキナーゼスーパーファミリー受容体である。チロシンキナーゼスーパーファミリーにおける受容体は、当該技術分野で周知である。約５８の公知の受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）が存在し、それらは２０のサブファミリーに群分けされる。チロシンキナーゼスーパーファミリーにおける受容体としては、ＦＧＦ受容体、ならびにそれらの様々なアイソフォーム、例えばＦＧＦＲ１、ＦＧＦＲ２、ＦＧＦＲ３、ＦＧＦＲ４、およびＦＧＦＲ５が挙げられるが、これらに限定されない。

一実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、インターフェロンαである。そのような実施形態において、修飾されたＩＦＮ−α剤は、ＩＦＮα／β受容体（ＩＦＮＡＲ）、即ちＩＦＮＡＲ１および／またはＩＦＮＲ２鎖に対し低減された親和性および／または活性を有する。幾つかの実施形態において、修飾されたＩＦＮ−α剤は、ＩＦＮα／β受容体（ＩＦＮＡＲ）、即ちＩＦＮＡＲ１および／またはＩＦＮＲ２鎖に対し実質的に低減または除去された親和性および／または活性を有する。

インターフェロンαの突然変異形態は、当業者に公知である。例示的な実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、
ＩＦＮ−α２ａ（配列番号３３６）：
ＣＤＬＰＱＴＨＳＬＧＳＲＲＴＬＭＬＬＡＱＭＲＫＩＳＬＦＳＣＬＫＤＲＨＤＦＧＦＰＱＥＥＦＧＮＱＦＱＫＡＥＴＩＰＶＬＨＥＭＩＱＱＩＦＮＬＦＳＴＫＤＳＳＡＡＷＤＥＴＬＬＤＫＦＹＴＥＬＹＱＱＬＮＤＬＥＡＣＶＩＱＧＶＧＶＴＥＴＰＬＭＫＥＤＳＩＬＡＶＲＫＹＦＱＲＩＴＬＹＬＫＥＫＫＹＳＰＣＡＷＥＶＶＲＡＥＩＭＲＳＦＳＬＳＴＮＬＱＥＳＬＲＳＫＥ
のアミノ酸配列を有する対立遺伝子形態ＩＦＮ−α２ａである。

例示的な実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、
ＩＦＮ−α２ｂ（配列番号３３７）：
ＣＤＬＰＱＴＨＳＬＧＳＲＲＴＬＭＬＬＡＱＭＲＲＩＳＬＦＳＣＬＫＤＲＨＤＦＧＦＰＱＥＥＦＧＮＱＦＱＫＡＥＴＩＰＶＬＨＥＭＩＱＱＩＦＮＬＦＳＴＫＤＳＳＡＡＷＤＥＴＬＬＤＫＦＹＴＥＬＹＱＱＬＮＤＬＥＡＣＶＩＱＧＶＧＶＴＥＴＰＬＭＫＥＤＳＩＬＡＶＲＫＹＦＱＲＩＴＬＹＬＫＥＫＫＹＳＰＣＡＷＥＶＶＲＡＥＩＭＲＳＦＳＬＳＴＮＬＱＥＳＬＲＳＫＥ
（これはアミノ酸位置２３でＩＦＮ−α２ａと異なる）のアミノ酸配列を有する対立遺伝子形態ＩＦＮ−α２ｂである。

幾つかの実施形態において、上記ＩＦＮ−α２突然変異体（ＩＦＮ−α２ａまたはＩＦＮ−α２ｂ）は、アミノ酸位置１４８、１４９および／または１５３などの、１４４〜１５４位置の１つまたは複数のアミノ酸で突然変異されている。幾つかの実施形態において、ＩＦＮ−α２突然変異体は、Ｌ１５３Ａ、Ｒ１４９Ａ、およびＭ１４８Ａから選択される１つまたは複数の突然変異を含む。そのような突然変異体は、例えば全ての内容全体が参照により本明細書に組み入れられる、ＷＯ２０１３／１０７７９１およびＰｉｅｈｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，（２０００）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ，２７５：４０４２５−３３に記載される。

幾つかの実施形態において、ＩＦＮ−α２突然変異体は、ＩＦＮＡＲ１に対し低減された親和性および／または活性を有する。幾つかの実施形態において、ＩＦＮ−α２突然変異体は、内容全体が参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２０１０／０３０６７１に記載される、Ｆ６４Ａ、Ｎ６５Ａ、Ｔ６９Ａ、Ｌ８０Ａ、Ｙ８５Ａ、およびＹ８９Ａから選択される１つまたは複数の突然変異を含む。

幾つかの実施形態において、ＩＦＮ−α２突然変異体は、内容全体が参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２００８／１２４０８６に記載されるＫ１３３Ａ、Ｒ１４４Ａ、Ｒ１４９Ａ、およびＬ１５３Ａから選択される１つまたは複数の突然変異を含む。

幾つかの実施形態において、ＩＦＮ−α２突然変異体は、内容全体が参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２０１５／００７５２０およびＷＯ２０１０／０３０６７１に記載される、Ｒ１２０ＥおよびＲ１２０Ｅ／Ｋ１２１Ｅから選択される１つまたは複数の突然変異を含む。そのような実施形態において、上記ＩＦＮ−α２突然変異体は、野生型ＩＦＮ−α２活性と拮抗する。そのような実施形態において、上記突然変異体ＩＦＮ−α２は、ＩＦＮＡＲ１に対し低減された親和性および／または活性を有するが、ＩＦＮＲ２の親和性および／または活性は、保持される。

幾つかの実施形態において、ヒトＩＦＮ−α２突然変異体は、（１）理論に結びつけるのを望むものではないが、拮抗効果を生じる、Ｒ１２０ＥおよびＲ１２０Ｅ／Ｋ１２１Ｅから選択される１つまたは複数の突然変異と、（２）理論に結びつけるのを望むものではないが、例えばＩＦＮＲ２で、弱化された効果を可能にする、Ｋ１３３Ａ、Ｒ１４４Ａ、Ｒ１４９Ａ、およびＬ１５３Ａから選択される１つまたは複数の突然変異と、を含む。一実施形態において、ヒトＩＦＮ−α２突然変異体は、Ｒ１２０ＥおよびＬ１５３Ａを含む。

幾つかの実施形態において、ヒトＩＦＮ−α２突然変異体は、内容全体が参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２０１３／０５９８８５に開示されるＬ１５Ａ、Ａ１９Ｗ、Ｒ２２Ａ、Ｒ２３Ａ、Ｌ２６Ａ、Ｆ２７Ａ、Ｌ３０Ａ、Ｌ３０Ｖ、Ｋ３１Ａ、Ｄ３２Ａ、Ｒ３３Ｋ、Ｒ３３Ａ、Ｒ３３Ｑ、Ｈ３４Ａ、Ｄ３５Ａ、Ｑ４０Ａ、Ｄ１１４Ｒ、Ｌ１１７Ａ、Ｒ１２０Ａ、Ｒ１２５Ａ、Ｋ１３４Ａ、Ｒ１４４Ａ、Ａ１４５Ｇ、Ａ１４５Ｍ、Ｍ１４８Ａ、Ｒ１４９Ａ、Ｓ１５２Ａ、Ｌ１５３Ａ、およびＮ１５６Ａから選択される１つまたは複数の突然変異を含む。幾つかの実施形態において、ヒトＩＦＮ−α２突然変異体は、ＷＯ２０１３／０５９８８５に開示される突然変異Ｈ５７Ｙ、Ｅ５８Ｎ、Ｑ６１Ｓ、および／またはＬ３０Ａを含む。幾つかの実施形態において、ヒトＩＦＮ−α２突然変異体は、ＷＯ２０１３／０５９８８５に開示される突然変異Ｈ５７Ｙ、Ｅ５８Ｎ、Ｑ６１Ｓ、および／またはＲ３３Ａを含む。幾つかの実施形態において、ヒトＩＦＮ−α２突然変異体は、ＷＯ２０１３／０５９８８５に開示される突然変異Ｈ５７Ｙ、Ｅ５８Ｎ、Ｑ６１Ｓ、および／またはＭ１４８Ａを含む。幾つかの実施形態において、ヒトＩＦＮ−α２突然変異体は、ＷＯ２０１３／０５９８８５に開示される突然変異Ｈ５７Ｙ、Ｅ５８Ｎ、Ｑ６１Ｓ、および／またはＬ１５３Ａを含む。幾つかの実施形態において、ヒトＩＦＮ−α２突然変異体は、ＷＯ２０１３／０５９８８５に開示される突然変異Ｎ６５Ａ、Ｌ８０Ａ、Ｙ８５Ａ、および／またはＹ８９Ａを含む。幾つかの実施形態において、ヒトＩＦＮ−α２突然変異体は、ＷＯ２０１３／０５９８８５に開示される突然変異Ｎ６５Ａ、Ｌ８０Ａ、Ｙ８５Ａ、Ｙ８９Ａ、および／またはＤ１１４Ａを含む。

一実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、インターフェロンβである。そのような実施形態において、修飾されたインターフェロンβ剤は、ＩＦＮ−α／β受容体（ＩＦＮＡＲ）、即ち、ＩＦＮＡＲ１および／またはＩＦＮＡＲ２鎖に対する低減された親和性および／または活性を有する。幾つかの実施形態において、修飾されたインターフェロンβ剤は、ＩＦＮ−α／β受容体（ＩＦＮＡＲ）、即ち、ＩＦＮＡＲ１および／またはＩＦＮＡＲ２鎖に対する実質的に低減または除去された親和性および／または活性を有する。

一実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、インターフェロンγである。そのような実施形態において、修飾されたインターフェロンγ剤は、ＩＦＮ−ガンマ受容体（ＩＦＮＧＲ）、即ち、ＩＦＮＧＲ１およびＩＦＮＧＲ２鎖に対する低減された親和性および／または活性を有する。幾つかの実施形態において、修飾されたインターフェロンγ剤は、ＩＦＮ−ガンマ受容体（ＩＦＮＧＲ）、即ち、ＩＦＮＧＲ１および／またはＩＦＮＧＲ２鎖に対する実質的に低減または除去された親和性および／または活性を有する。

幾つかの実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）である。ＶＥＧＦは、生理学的だけでなく病理学的な血管新生において主要な役割を担い、血管透過性を調節し、かつＶＥＧＦ受容体を発現する細胞上で成長因子として作用し得る強力な成長因子である。さらなる機能としては、特に、マクロファージ系列および内皮細胞における細胞遊走の刺激が挙げられる。成長因子のＶＥＧＦファミリーの複数のメンバー、ならびに少なくとも３種の受容体（ＶＥＧＦＲ−１、ＶＥＧＦＲ−２、およびＶＥＧＦＲ−３）が、存在する。ＶＥＧＦファミリーのメンバーは、１つよりも多くのＶＥＧＦＲタイプを結合し活性化できる。例えば、ＶＥＧＦ−Ａは、ＶＥＧＦＲ−１および−２を結合し、一方でＶＥＧＦ−Ｃは、ＶＥＧＦＲ−２および−３を結合し得る。ＶＥＧＦＲ−１および−２の活性化は、血管新生を調節し、一方でＶＥＧＦＲ−３活性化は、リンパ管新生と関連する。主要な血管新生促進シグナルは、ＶＥＧＦＲ−２の活性化から発生する。ＶＥＧＦＲ−１の活性化は、血管新生における負の役割とおそらく関連することが報告されている。ＶＥＧＦＲ−１シグナル伝達は、骨髄由来ＶＥＧＦＲ−１陽性細胞を介するインビボでの腫瘍の進行に重要である（骨における前転移ニッチの形成に寄与する）ことも報告されている。ＶＥＧＦ−Ａに向けられる／中和する治療抗体に基づく複数の治療が、主に、血管新生に依存する様々なヒト腫瘍の処置における使用のために、開発されている。これらはしかし、副作用なしではない。これは、これらが一般的な非細胞／組織特異的ＶＥＧＦ／ＶＥＧＦＲ相互作用阻害剤として動作することを思えば、驚くことではなかろう。こうして、ＶＥＧＦ（例えば、ＶＥＧＦ−Ａ）／ＶＥＧＦＲ−２阻害を特異的な標的細胞（例えば、腫瘍血管構造の内皮細胞）に制限することが望ましいであろう。

幾つかの実施形態において、ＶＥＧＦは、ＶＥＧＦ−Ａ、ＶＥＧＦ−Ｂ、ＶＥＦＧ−Ｃ、ＶＥＧＦ−Ｄ、またはＶＥＧＦ−Ｅおよびそれらのアイソフォームであり、ＶＥＧＦ_１２１、ＶＥＧＦ_１２１ｂ、ＶＥＧＦ_１４５、ＶＥＧＦ_１６５、ＶＥＧＦ_１６５ｂ、ＶＥＧＦ_１８９、およびＶＥＧＦ_２０６などのＶＥＧＦ−Ａの様々なアイソフォームを含む。幾つかの実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＶＥＧＦＲ−１（Ｆｌｔ−１）および／またはＶＥＧＦＲ−２（ＫＤＲ／Ｆｌｋ−１）に対する低減された親和性および／または活性を有する。幾つかの実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＶＥＧＦＲ−１（Ｆｌｔ−１）および／またはＶＥＧＦＲ−２（ＫＤＲ／Ｆｌｋ−１）に対する実質的に低減または除去された親和性および／または活性を有する。一実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＶＥＧＦＲ−２（ＫＤＲ／Ｆｌｔ−１）に対する低減された親和性および／もしくは活性、ならびに／またはＶＥＧＦＲ−１（Ｆｌｔ−１）に対する実質的に低減もしくは除去された親和性および／もしくは活性を有する。そのような実施形態は、例えば、創傷治癒法または虚血関連疾患の処置（理論に結びつけるのを望むものではないが、内皮細胞の機能および血管新生に及ぼすＶＥＧＦＲ−２の影響により媒介される）において、用途を見出す。様々な実施形態において、癌および炎症促進活性に結び付けられる、ＶＥＧＦＲ−１（Ｆｌｔ−１）への結合が、回避される。様々な実施形態において、ＶＥＧＦＲ−１（Ｆｌｔ−１）は、デコイ受容体として作用し、それゆえこの受容体での親和性を実質的に低減または除去し、治療薬の封鎖を回避する。一実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＶＥＧＦＲ−１（Ｆｌｔ−１）に対する実質的に低減もしくは除去された親和性および／もしくは活性、ならびに／またはＶＥＧＦＲ−２（ＫＤＲ／Ｆｌｔ−１）に対する実質的に低減もしくは除去された親和性および／もしくは活性を有する。幾つかの実施形態において、ＶＥＧＦは、ＶＥＧＦ−ＣまたはＶＥＧＦ−Ｄである。そのような実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＶＥＧＦＲ−３に対する低減された親和性および／または活性を有する。あるいは修飾されたシグナル伝達物質は、ＶＥＧＦＲ−３に対する実質的に低減または除去された親和性および／または活性を有する。

血管新生促進療法もまた、様々な疾患（例えば、虚血性心疾患、出血など）において重要であり、ＶＥＧＦに基づく治療を包含する。ＶＥＧＦＲ−２の活性化は、血管新生促進性である（内皮細胞上で作用する）。ＶＥＧＦＲ−１の活性化は、炎症細胞（例えば、マクロファージなど）の遊走の刺激を誘起し、炎症関連の高度血管透過性（ｈｙｐｅｒｖａｓｃｕｌａｒ ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｔｙ）をもたらし得る。ＶＥＧＦＲ−１の活性化は、骨髄関連腫瘍ニッチ形成も促進できる。したがって、ＶＥＧＦＲ−２に選択的なＶＥＧＦに基づく治療が、この場合に望ましいであろう。加えて、例えば内皮細胞への、細胞特異的標的化が、望ましいであろう。

幾つかの実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＶＥＧＦＲ−２に対する低減された親和性および／もしくは活性（例えば、拮抗性）を有し、および／またはＶＥＧＦＲ−１に対する実質的に低減もしくは除去された親和性および／もしくは活性を有する。そのような構築物は、腫瘍内皮細胞マーカー（例えば、ＰＳＭＡその他）に結合する標的部分を介して腫瘍血管構造の内皮細胞に標的されると、そのようなマーカー陽性細胞上でＶＥＧＦＲ−２活性化を特異的に阻害するが、標的細胞への途中および標的細胞上ではＶＥＧＦＲ−１を活性化せず（活性が除去されるとしても）、したがって例えば、炎症応答の誘発を排除する。これは、ＶＥＧＦ−Ａ中和療法に比較して、多くの腫瘍タイプに対しより選択的でかつ安全な血管新生抑制療法を提供するであろう。

幾つかの実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＶＥＧＦＲ−２に対する低減された親和性および／もしくは活性（例えば、作動性）を有し、および／またはＶＥＧＦＲ−１に対する実質的に低減もしくは除去された親和性および／もしくは活性を有する。そのような構築物は、血管内皮細胞への標的化を通して、幾つかの実施形態において、ＶＥＧＦＲ−１関連の炎症応答の誘発を引き起こすことなく、血管新生を促進する。つまり、そのような構築物は、標的化された血管新生促進作用を有し、ＶＥＧＦＲ−２およびＶＥＧＲ−１の全身活性化により誘発される副作用のリスクを実質的に低減するであろう。

例示的な実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＶＥＧＦ_１６５であり、それはアミノ酸配列：
ＶＥＧＦ １６５（野生型）（配列番号３３８）
ＡＰＭＡＥＧＧＧＱＮＨＨＥＶＶＫＦＭＤＶＹＱＲＳＹＣＨＰＩＥＴＬＶＤＩＦＱＥＹＰＤＥＩＥＹＩＦＫＰＳＣＶＰＬＭＲＣＧＧＣＣＮＤＥＧＬＥＣＶＰＴＥＥＳＮＩＴＭＱＩＭＲＩＫＰＨＱＧＱＨＩＧＥＭＳＦＬＱＨＮＫＣＥＣＲＰＫＫＤＲＡＲＱＥＮＰＣＧＰＣＳＥＲＲＫＨＬＦＶＱＤＰＱＴＣＫＣＳＣＫＮＴＤＳＲＣＫＡＲＱＬＥＬＮＥＲＴＣＲＣＤＫＰＲＲ
を有する。

例示的な実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＶＥＧＦ_１６５ｂであり、それはアミノ酸配列：
ＶＥＧＦ １６５ｂ（野生型）（配列番号３３９）
ＡＰＭＡＥＧＧＧＱＮＨＨＥＶＶＫＦＭＤＶＹＱＲＳＹＣＨＰＩＥＴＬＶＤＩＦＱＥＹＰＤＥＩＥＹＩＦＫＰＳＣＶＰＬＭＲＣＧＧＣＣＮＤＥＧＬＥＣＶＰＴＥＥＳＮＩＴＭＱＩＭＲＩＫＰＨＱＧＱＨＩＧＥＭＳＦＬＱＨＮＫＣＥＣＲＰＫＫＤＲＡＲＱＥＮＰＣＧＰＣＳＥＲＲＫＨＬＦＶＱＤＰＱＴＣＫＣＳＣＫＮＴＤＳＲＣＫＡＲＱＬＥＬＮＥＲＴＣＲＳＬＴＲＫＤ
を有する。

これらの実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、アミノ酸Ｉ８３で突然変異（例えば、Ｉ８３での置換突然変異、例えばＩ８３Ｋ、Ｉ８３Ｒ、またはＩ８３Ｈ）を有する。理論に結びつけるのを望むものではないが、そのような突然変異は、低減された受容体結合親和性をもたらし得ると考えられる。例えば、内容全体が参照により本明細書に組み入れられる、米国特許第９，０７８，８６０号を参照されたい。

一実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＴＮＦ−αである。ＴＮＦは、細胞増殖、分化、アポトーシス、腫瘍化、ウイルス複製、自己免疫性、免疫細胞の機能および輸送の調節、炎症、ならびに敗血症性ショックを含む、多くの多様な機能を有する多面発現性サイトカインである。それは、標的細胞上の２つの異なる膜受容体ＴＮＦＲ１（ｐ５５）およびＴＮＦＲ２（ｐ７５）に結合する。ＴＮＦＲ１は、非常に広い発現パターンを示すが、ＴＮＦＲ２は、主にリンパ球、Ｔｒｅｇ、内皮細胞、特定の神経細胞、ミクログリア、心筋細胞および間葉系幹細胞の表面で、発現される。非常に異なる生物学的経路が、受容体活性化に応答して活性化されるが、幾つかのオーバーラップも存在する。概して言うと、理論に結びつけるのを望むものではないが、ＴＮＦＲ１シグナル伝達は、アポトーシス（細胞死）の誘導と関連し、ＴＮＦＲ２シグナル伝達は、細胞生存シグナルの活性化（例えば、ＮＦｋＢ経路の活性化）と関連する。ＴＮＦの投与は、全身毒性であり、これは、ＴＮＦＲ１エンゲージメントによるものが大きい。しかし、ＴＮＦＲ２の活性化も広範囲の活性と関連し、ＴＮＦＲ１と同様に、ＴＮＦに基づく治療を開発する際に、ＴＮＦ標的化および活性に対する制御が重要であることを、留意すべきである。

幾つかの実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＴＮＦＲ１および／またはＴＮＦＲ２に対する低減された親和性および／または活性を有する。幾つかの実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＴＮＦＲ１および／またはＴＮＦＲ２に対する実質的に低減または除去された親和性および／または活性を有する。ＴＮＦＲ１は、ほとんどの組織中で発現され、細胞死シグナル伝達に関与するが、対照的にＴＮＦＲ２は、細胞生存シグナル伝達に関与する。したがって、癌を処置する方法に向けられる実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＴＮＦＲ１に対する低減された親和性および／もしくは活性、ならびに／またはＴＮＦＲ２に対する実質的に低減もしくは除去された親和性および／もしくは活性を有する。これらの実施形態において、キメラタンパク質は、アポトーシスが望ましい細胞、例えば腫瘍細胞または腫瘍血管構造の内皮細胞へ標的され得る。細胞生存を促進する方法に向けられる実施形態において、例えば神経変性障害の処置のための神経形成において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＴＮＦＲ２に対する低減された親和性および／もしくは活性、ならびに／またはＴＮＦＲ１に対する実質的に低減もしくは除去された親和性および／もしくは活性を有する。別の言い方では、本発明のキメラタンパク質は、幾つかの実施形態において、死亡または生存のいずれかのシグナルを優先させる修飾されたＴＮＦ−α剤を含む。

幾つかの実施形態において、キメラタンパク質は、ＴＮＦＲ１に対する低減された親和性および／もしくは活性、ならびに／またはＴＮＦＲ２に対する実質的に低減もしくは除去された親和性および／もしくは活性を有する修飾されたＴＮＦを有する。そのようなキメラは、幾つかの実施形態において、野生型ＴＮＦ、および／またはＴＮＦＲ１に対する親和性および／または活性を低減させる突然変異（複数可）のみを担持するキメラに比較して、強力なアポトーシス誘導物質である。そのようなキメラは、幾つかの実施形態において、腫瘍細胞死または腫瘍血管構造の内皮細胞死を誘導すること（例えば、癌の処置において）に用途を見出す。同じく幾つかの実施形態において、これらのキメラは、例えばＴＮＦＲ２を介してＴ_ｒｅｇ細胞の活性化を回避または低減し、したがってインビボでＴＮＦＲ１を介する抗腫瘍活性を支援する。

幾つかの実施形態において、キメラタンパク質は、ＴＮＦＲ２に対する低減された親和性および／もしくは活性、ならびに／またはＴＮＦＲ１に対する実質的に低減もしくは除去された親和性および／もしくは活性を有する修飾されたＴＮＦを有する。そのようなキメラは、幾つかの実施形態において、幾つかの細胞型における細胞生存のより強力な活性化物質であり、それは、非限定的に神経形成の刺激を含む、様々な疾患状況における特定の治療目的であり得る。加えて、そのようなＴＮＦＲ２に好都合なキメラはまた、自己免疫性疾患（例えば、クローン病、糖尿病、ＭＳ、大腸炎など、および本明細書に記載される多くの他のもの）の処置に有用である。幾つかの実施形態において、キメラは、自己反応性Ｔ細胞に標的される。幾つかの実施形態において、キメラは、Ｔ_ｒｅｇ細胞活性化および細胞障害性Ｔ細胞の間接的抑制を促進する。

幾つかの実施形態において、キメラは、例えばＴＮＦＲ２の活性化および／またはＴＮＦＲ１の回避により（例えば、ＴＮＦＲ２に対する低減された親和性および／もしくは活性、ならびに／またはＴＮＦＲ１に対する実質的に低減もしくは除去された親和性および／もしくは活性を有する修飾されたＴＮＦ）、自己反応性Ｔ細胞の死を引き起こす。理論に結びつけるのを望むものではないが、これらの自己反応性Ｔ細胞は、例えばＮＦｋＢ経路の活性／シグナル伝達の改変により、改変されたそれらのアポトーシス／生存シグナルを有する。幾つかの実施形態において、キメラは、それらの細胞死（アポトーシス）／生存シグナル伝達特性の不均衡および、場合により特定の死亡誘導シグナル（例えば、ＴＮＦＲ２活性化）への改変された感受性の根底にある、ＮＦｋＢ経路における病変または修飾を有する自己反応性Ｔ細胞の死を引き起こす。

幾つかの実施形態において、ＴＮＦＲ２に基づくキメラは、とりわけ、様々な自己免疫性疾患、心疾患、脱髄および神経変性障害、ならびに感染性疾患を含む、疾患におけるさらなる治療適用を有する。

一実施形態において、野生型ＴＮＦ−αは、
ＴＮＦ−α（配列番号３４０）
ＶＲＳＳＳＲＴＰＳＤＫＰＶＡＨＶＶＡＮＰＱＡＥＧＱＬＱＷＬＮＲＲＡＮＡＬＬＡＮＧＶＥＬＲＤＮＱＬＶＶＰＳＥＧＬＹＬＩＹＳＱＶＬＦＫＧＱＧＣＰＳＴＨＶＬＬＴＨＴＩＳＲＩＡＶＳＹＱＴＫＶＮＬＬＳＡＩＫＳＰＣＱＲＥＴＰＥＧＡＥＡＫＰＷＹＥＰＩＹＬＧＧＶＦＱＬＥＫＧＤＲＬＳＡＥＩＮＲＰＤＹＬＤＦＡＥＳＧＱＶＹＦＧＩＩＡＬ
のアミノ酸配列を有する。

そのような実施形態において、修飾されたＴＮＦ−α剤は、低減された受容体結合親和性を有する修飾されたＴＮＦ−αを生成する１つまたは複数のアミノ酸位置２９、３１、３２、８４、８５、８６、８７、８８、８９、１４５、１４６および１４７で突然変異を有する。例えば、内容全体が参照により本明細書に組み入れられる、米国特許第７，９９３，６３６号を参照されたい。

幾つかの実施形態において、修飾されたＴＮＦ−α部分は、例えば内容全体が参照により本明細書に組み入れられるＷＯ／２０１５／００７９０３に記載される通り、１つまたは複数のアミノ酸位置Ｒ３２、Ｎ３４、Ｑ６７、Ｈ７３、Ｌ７５、Ｔ７７、Ｓ８６、Ｙ８７、Ｖ９１、Ｉ９７、Ｔ１０５、Ｐ１０６、Ａ１０９、Ｐ１１３、Ｙ１１５、Ｅ１２７、Ｎ１３７、Ｄ１４３、およびＡ１４５（ヒトＴＮＦ配列Ｇｅｎｂａｎｋアクセション番号ＢＡＧ７０３０６、バージョンＢＡＧ７０３０６．１ Ｇｌ：１９７６９２６８５に従ってナンバリング）で突然変異を有する。幾つかの実施形態において、修飾されたＴＮＦ−α部分は、Ｒ３２Ｇ、Ｎ３４Ｇ、Ｑ６７Ｇ、Ｈ７３Ｇ、Ｌ７５Ｇ、Ｌ７５Ａ、Ｌ７５Ｓ、Ｔ７７Ａ、Ｓ８６Ｇ、Ｙ８７Ｑ、Ｙ８７Ｌ、Ｙ８７Ａ、Ｙ８７Ｆ、Ｖ９１Ｇ、Ｖ９１Ａ、Ｉ９７Ａ、Ｉ９７Ｑ、Ｉ９７Ｓ、Ｔ１０５Ｇ、Ｐ１０６Ｇ、Ａ１０９Ｙ、Ｐ１１３Ｇ、Ｙ１１５Ｇ、Ｙ１１５Ａ、Ｅ１２７Ｇ、Ｎ１３７Ｇ、Ｄ１４３Ｎ、Ａ１４５ＧおよびＡ１４５Ｔから選択される置換変異を有する。一実施形態において、ヒトＴＮＦ−α部分は、Ｙ８７Ｑ、Ｙ８７Ｌ、Ｙ８７Ａ、およびＹ８７Ｆから選択される突然変異を有する。別の実施形態において、ヒトＴＮＦ−α部分は、Ｉ９７Ａ、Ｉ９７Ｑ、およびＩ９７Ｓから選択される突然変異を有する。さらなる実施形態において、ヒトＴＮＦ−α部分は、Ｙ１１５ＡおよびＹ１１５Ｇから選択される突然変異を有する。

幾つかの実施形態において、修飾されたＴＮＦ−α部分は、内容全体が参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２００８／１２４０８６に記載される通り、Ｎ３９Ｙ、Ｓ１４７Ｙ、およびＹ８７Ｈから選択される１つまたは複数の突然変異を有する。

幾つかの実施形態において、修飾されたヒトＴＮＦ−α部分は、内容全体が参照により本明細書に組み入れられるＰＣＴ／ＩＢ２０１６／００１６６８に記載される通り、受容体選択性を提供する突然変異を有する。幾つかの実施形態において、ＴＮＦへの突然変異は、ＴＮＦ−Ｒ１選択的である。幾つかの実施形態において、ＴＮＦ−Ｒ１選択的であるＴＮＦへの突然変異は、位置Ｒ３２、Ｓ８６、およびＥ１４６の１つまたは複数においてである。幾つかの実施形態において、ＴＮＦ−Ｒ１選択的であるＴＮＦへの突然変異は、Ｒ３２Ｗ、Ｓ８６Ｔ、およびＥ１４６Ｋの１つまたは複数である。幾つかの実施形態において、ＴＮＦ−Ｒ１選択的であるＴＮＦへの突然変異は、Ｒ３２Ｗ、Ｒ３２Ｗ／Ｓ８６Ｔ、Ｒ３２Ｗ／Ｅ１４６ＫおよびＥ１４６Ｋの１つまたは複数である。幾つかの実施形態において、ＴＮＦへの突然変異は、ＴＮＦ−Ｒ２選択的である。幾つかの実施形態において、ＴＮＦ−Ｒ２選択的であるＴＮＦへの突然変異は、位置Ａ１４５、Ｅ１４６、およびＳ１４７の１つまたは複数においてである。幾つかの実施形態において、ＴＮＦ−Ｒ２選択的であるＴＮＦへの突然変異は、Ａ１４５Ｔ、Ａ１４５Ｒ、Ｅ１４６Ｄ、およびＳ１４７Ｄの１つまたは複数である。幾つかの実施形態において、ＴＮＦ−Ｒ２選択的であるＴＮＦへの突然変異は、Ａ１４５Ｒ、Ａ１４５Ｔ／Ｓ１４７Ｄ、およびＡ１４５Ｔ／Ｅ１４６Ｄ／Ｓ１４７Ｄの１つまたは複数である。

一実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＴＮＦ−βである。ＴＮＦ−βは、ホモ三量体またはＬＴ−β（ＬＴ−α１β２）とヘテロ三量体を形成し得る。幾つかの実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＴＮＦＲ１および／またはＴＮＦＲ２および／またはヘルペスウイルスエントリーメディエータ（ＨＥＶＭ）および／またはＬＴ−βＲに対する実質的に低減または除去された親和性および／または活性を有する。

一実施形態において、野生型ＴＮＦ−βは、
ＴＮＦ−β（配列番号３４１）
ＬＰＧＶＧＬＴＰＳＡＡＱＴＡＲＱＨＰＫＭＨＬＡＨＳＮＬＫＰＡＡＨＬＩＧＤＰＳＫＱＮＳＬＬＷＲＡＮＴＤＲＡＦＬＱＤＧＦＳＬＳＮＮＳＬＬＶＰＴＳＧＩＹＦＶＹＳＱＶＶＦＳＧＫＡＹＳＰＫＡＴＳＳＰＬＹＬＡＨＥＶＱＬＦＳＳＱＹＰＦＨＶＰＬＬＳＳＱＫＭＶＹＰＧＬＱＥＰＷＬＨＳＭＹＨＧＡＡＦＱＬＴＱＧＤＱＬＳＴＨＴＤＧＩＰＨＬＶＬＳＰＳＴＶＦＦＧＡＦＡＬ
のアミノ酸配列を有する。

そのような実施形態において、修飾されたＴＮＦ−β剤は、ＴＮＦＲ２への低減された受容体結合親和性を有する修飾されたＴＮＦ−βを生成する、１つまたは複数のアミノ酸位置１０６〜１１３で突然変異を有する。一実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、アミノ酸位置１０６〜１１３に１つまたは複数の置換突然変異を有する。例示的な実施形態において、置換突然変異は、Ｑ１０７Ｅ、Ｑ１０７Ｄ、Ｓ１０６Ｅ、Ｓ１０６Ｄ、Ｑ１０７Ｒ、Ｑ１０７Ｎ、Ｑ１０７Ｅ／Ｓ１０６Ｅ、Ｑ１０７Ｅ／Ｓ１０６Ｄ、Ｑ１０７Ｄ／Ｓ１０６Ｅ、およびＱ１０７Ｄ／Ｓ１０６Ｄから選択される。別の実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、位置１０６〜１１３で約１〜約３のアミノ酸の挿入を有する。

幾つかの実施形態において、修飾された物質は、内容全体が参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２０１５／００７９０３に記載される通り一本鎖三量体型であり得るＴＮＦファミリーメンバー（例えば、ＴＮＦ−アルファ、ＴＮＦ−ベータ）である。

幾つかの実施形態において、修飾された物質は、ＴＮＦＲ１で低減された親和性および／または活性、即ち拮抗活性（例えば、天然の拮抗活性、または１つもしくは複数の突然変異の結果である拮抗活性、例えば、内容全体が参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２０１５／００７５２０参照）を有するＴＮＦファミリーメンバー（例えば、ＴＮＦ−アルファ、ＴＮＦ−ベータ）である。これらの実施形態において、修飾された物質は、場合によりＴＮＦＲ２に対する実質的に低減または除去された親和性および／または活性も有する、ＴＮＦファミリーメンバー（例えば、ＴＮＦ−アルファ、ＴＮＦ−ベータ）である。幾つかの実施形態において、修飾された物質は、ＴＮＦＲ２で低減された親和性および／または活性、即ち拮抗活性（例えば、天然の拮抗活性、または１つもしくは複数の突然変異の結果である拮抗活性、例えば、内容全体が参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２０１５／００７５２０参照）を有するＴＮＦファミリーメンバー（例えば、ＴＮＦ−アルファ、ＴＮＦ−ベータ）である。これらの実施形態において、修飾された物質は、場合によりＴＮＦＲ１に対する実質的に低減または除去された親和性および／または活性も有する、ＴＮＦファミリーメンバー（例えば、ＴＮＦ−アルファ、ＴＮＦ−ベータ）である。そのような実施形態の構築物は、例えば細胞特異的な様式でＴＮＦ応答を減衰させる方法で、用途を見出す。幾つかの実施形態において、拮抗性ＴＮＦファミリーメンバー（例えば、ＴＮＦ−アルファ、ＴＮＦ−ベータ）は、ＷＯ２０１５／００７９０３に記載される通り一本鎖三量体型である。

一実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＴＲＡＩＬである。幾つかの実施形態において、修飾されたＴＲＡＩＬ剤は、ＤＲ４（ＴＲＡＩＬ−ＲＩ）および／またはＤＲ５（ＴＲＡＩＬ−ＲＩＩ）および／またはＤｃＲ１および／またはＤｃＲ２に対する低減された親和性および／または活性を有する。幾つかの実施形態において、修飾されたＴＲＡＩＬ剤は、ＤＲ４（ＴＲＡＩＬ−ＲＩ）および／またはＤＲ５（ＴＲＡＩＬ−ＲＩＩ）および／またはＤｃＲ１および／またはＤｃＲ２に対する実質的に低減または除去された親和性および／または活性を有する。

一実施形態において、野生型ＴＲＡＩＬは、
ＴＲＡＩＬ（配列番号３４２）
ＭＡＭＭＥＶＱＧＧＰＳＬＧＱＴＣＶＬＩＶＩＦＴＶＬＬＱＳＬＣＶＡＶＴＹＶＹＦＴＮＥＬＫＱＭＱＤＫＹＳＫＳＧＩＡＣＦＬＫＥＤＤＳＹＷＤＰＮＤＥＥＳＭＮＳＰＣＷＱＶＫＷＱＬＲＱＬＶＲＫＭＩＬＲＴＳＥＥＴＩＳＴＶＱＥＫＱＱＮＩＳＰＬＶＲＥＲＧＰＱＲＶＡＡＨＩＴＧＴＲＧＲＳＮＴＬＳＳＰＮＳＫＮＥＫＡＬＧＲＫＩＮＳＷＥＳＳＲＳＧＨＳＦＬＳＮＬＨＬＲＮＧＥＬＶＩＨＥＫＧＦＹＹＩＹＳＱＴＹＦＲＦＱＥＥＩＫＥＮＴＫＮＤＫＱＭＶＱＹＩＹＫＹＴＳＹＰＤＰＩＬＬＭＫＳＡＲＮＳＣＷＳＫＤＡＥＹＧＬＹＳＩＹＱＧＧＩＦＥＬＫＥＮＤＲＩＦＶＳＶＴＮＥＨＬＩＤＭＤＨＥＡＳＦＦＧＡＦＬＶＧ
のアミノ酸配列を有する。

そのような実施形態において、修飾されたＴＲＡＩＬ剤は、アミノ酸位置Ｔ１２７−Ｒ１３２、Ｅ１４４−Ｒ１４９、Ｅ１５５−Ｈ１６１、Ｙ１８９−Ｙ２０９、Ｔ２１４−１２２０、Ｋ２２４−Ａ２２６、Ｗ２３１、Ｅ２３６−Ｌ２３９、Ｅ２４９−Ｋ２５１、Ｔ２６１−Ｈ２６４およびＨ２７０−Ｅ２７１（ヒト配列Ｇｅｎｂａｎｋアクセション番号ＮＰ＿００３８０１、バージョン１０ＮＰ＿００３０１．１、Ｇｌ：４５０７５９３に基づいてナンバリング；上記参照）で突然変異を含み得る。

一実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＴＧＦαである。そのような実施形態において、修飾されたＴＧＦα剤は、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）に対する低減された親和性および／または活性を有する。幾つかの実施形態において、修飾されたＴＧＦα剤は、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）に対する実質的に低減または除去された親和性および／または活性を有する。

一実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＴＧＦβである。そのような実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＴＧＦＢＲ１および／またはＴＧＦＢＲ２に対する低減された親和性および／または活性を有する。幾つかの実施形態において、修飾されたＴＧＦα剤は、ＴＧＦＢＲ１および／またはＴＧＦＢＲ２に対する実質的に低減または除去された親和性および／または活性を有する。幾つかの実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、理論に結びつけるのを望むものではないが、ＴＧＦ−β受容体に対するリガンドのリザーバーとして作用し得るＴＧＦＢＲ３に対する低減された、または実質的に低減もしくは除去された親和性および／または活性を有する。幾つかの実施形態において、ＴＧＦβは、ＴＧＦＢＲ２よりもＴＧＦＢＲ１が、またはＴＧＦＢＲ１よりもＴＧＦＢＲ２が好適であり得る。同様にＬＡＰは、理論に結びつけるのを望むものではないが、ＴＧＦ−ベータ受容体に対するリガンドのリザーバーとして作用し得る。幾つかの実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＴＧＦＢＲ１および／もしくはＴＧＦＢＲ２に対する低減された親和性および／もしくは活性、ならびに／または潜在関連ペプチド（ＬＡＰ）２に対する実質的に低減もしくは除去された親和性および／もしくは活性を有する。幾つかの実施形態において、そのようなキメラは、カムラチ・エンゲルマン病、または不適切なＴＧＦβシグナル伝達に関連する他の疾患で用途を見出す。

幾つかの実施形態において、修飾された物質は、ＴＧＦＢＲ１、ＴＧＦＢＲ２、ＴＧＦＢＲ３の１つまたは複数で、低減された親和性および／または活性、即ち拮抗活性（例えば、天然の拮抗活性、または１つもしくは複数の突然変異の結果である拮抗活性、例えば、内容全体が参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２０１５／００７５２０参照）を有するＴＧＦファミリーメンバー（例えば、ＴＧＦα、ＴＧＦβ）である。これらの実施形態において、修飾された物質は、場合によりＴＧＦＢＲ１、ＴＧＦＢＲ２、ＴＧＦＢＲ３の１つまたは複数で実質的に低減または除去された親和性および／または活性も有する、ＴＧＦファミリーメンバー（例えば、ＴＧＦα、ＴＧＦβ）である。

幾つかの実施形態において、修飾された物質は、ＴＧＦＢＲ１および／またはＴＧＦＢＲ２で、低減された親和性および／または活性、即ち拮抗活性（例えば、天然の拮抗活性、または１つもしくは複数の突然変異の結果である拮抗活性、例えば、内容全体が参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２０１５／００７５２０参照）を有するＴＧＦファミリーメンバー（例えば、ＴＧＦα、ＴＧＦβ）である。これらの実施形態において、修飾された物質は、場合によりＴＧＦＢＲ３で実質的に低減または除去された親和性および／または活性も有する、ＴＧＦファミリーメンバー（例えば、ＴＧＦα、ＴＧＦβ）である。

一実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、インターロイキンである。一実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＬ−１である。一実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＬ−１αまたはＩＬ−１βである。幾つかの実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＬ−１Ｒ１および／またはＩＬ−１ＲＡｃＰに対する低減された親和性および／または活性を有する。幾つかの実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＬ−１Ｒ１および／またはＩＬ−１ＲＡｃＰに対する実質的に低減または除去された親和性および／または活性を有する。幾つかの実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＬ−１Ｒ２に対する低減された親和性および／または活性を有する。幾つかの実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＬ−１Ｒ２に対する実質的に低減または除去された親和性および／または活性を有する。例えば、幾つかの実施形態において、本発明の修飾されたＩＬ−１剤は、ＩＬ−１Ｒ２での相互作用を回避し、それゆえ治療薬のためのデコイおよび／またはシンクとしてのその機能を実質的に低減する。

一実施形態において、野生型ＩＬ−１βは、
ＩＬ−１ベータ（成熟形態、野生型）（配列番号３４３）
ＡＰＶＲＳＬＮＣＴＬＲＤＳＱＱＫＳＬＶＭＳＧＰＹＥＬＫＡＬＨＬＱＧＱＤＭＥＱＱＶＶＦＳＭＳＦＶＱＧＥＥＳＮＤＫＩＰＶＡＬＧＬＫＥＫＮＬＹＬＳＣＶＬＫＤＤＫＰＴＬＱＬＥＳＶＤＰＫＮＹＰＫＫＫＭＥＫＲＦＶＦＮＫＩＥＩＮＮＫＬＥＦＥＳＡＱＦＰＮＷＹＩＳＴＳＱＡＥＮＭＰＶＦＬＧＧＴＫＧＧＱＤＩＴＤＦＴＭＱＦＶＳＳ
のアミノ酸配列を有する。

ＩＬ１は、炎症促進性サイトカインであり、重要な免疫系調節物質である。それは、ＣＤ４ Ｔ細胞応答の強力な活性化因子であり、Ｔｈ１７細胞の割合、ならびにＩＦＮγおよびＩＬ−４産生細胞の増大を増加させる。ＩＬ−１は、ＣＤ８^＋ Ｔ細胞の強力な調節物質でもあり、抗原特異性ＣＤ８^＋ Ｔ細胞増大、分化、末梢への遊走、およびメモリーを増進する。ＩＬ−１受容体は、ＩＬ−１Ｒ１およびＩＬ−１Ｒ２を含む。ＩＬ−１Ｒ１への結合、およびそれを介するシグナル伝達は、それによりＩＬ−１がその生物学的（および病理学的）活性の多くを媒介するメカニズムを構成する。ＩＬ１−Ｒ２は、デコイ受容体として機能し、それによりＩＬ−１Ｒ１を介する相互作用およびシグナル伝達に関するＩＬ−１利用可能性を低減できる。

幾つかの実施形態において、修飾されたＩＬ−１は、ＩＬ−１Ｒ１に対する低減された親和性および／または活性（例えば、作動性活性）を有する。幾つかの実施形態において、修飾されたＩＬ−１は、ＩＬ−１Ｒ２に対する実質的に低減または除去された親和性および／または活性を有する。そのような実施形態において、回復可能なＩＬ−１／ＩＬ−１Ｒ１シグナル伝達、およびＩＬ−Ｒ２での治療性キメラの損失の予防かつ、それによる必要とされるＩＬ−１用量の低下（例えば、野生型、またはＩＬ−Ｒ１について弱化突然変異のみを担持するキメラに対して）がある。そのような構築物は、例えば、免疫系を刺激して抗癌応答を開始することを含む、例えば癌を処置する方法で、用途を見出す。

幾つかの実施形態において、修飾されたＩＬ−１は、ＩＬ−１Ｒ１に対する低減された親和性および／または活性（例えば、拮抗活性、例えば天然の拮抗活性、または１つもしくは複数の突然変異の結果である拮抗活性、例えば、内容全体が参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２０１５／００７５２０参照）を有する。幾つかの実施形態において、修飾されたＩＬ−１は、ＩＬ−１Ｒ２に対する実質的に低減または除去された親和性および／または活性を有する。そのような実施形態において、ＩＬ−１／ＩＬ−１Ｒ１シグナル伝達は回復可能でなく、ＩＬ−Ｒ２での治療性キメラの損失の予防かつ、それによる必要とされるＩＬ−１用量の低下（例えば、野生型、またはＩＬ−Ｒ１に対する弱化突然変異（ａｔｔｅｎｕａｔｉｏｎ ｍｕｔａｔｉｏｎ）のみを担持するキメラに対して）が存在する。そのような構築物は、例えば、免疫系を抑制することを含む、例えば自己免疫性疾患を処置する方法で、用途を見出す。

そのような実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、Ｉ型ＩＬ−１Ｒに対する低減された結合親和性および低減された生物活性を有する修飾されたヒトＩＬ−１βを生成する、アミノ酸５２〜５４の欠失を有する。例えば内容全体が参照により本明細書に組み入れられるＷＯ１９９４／０００４９１を参照されたい。幾つかの実施形態において、修飾されたヒトＩＬ−１βは、例えば内容全体が参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２０１５／００７５４２およびＷＯ／２０１５／００７５３６に記載される通り、ＩＬ−１Ｒへの低減された結合を示す、Ａ１１７Ｇ／Ｐ１１８Ｇ、Ｒ１２０Ｘ、Ｌ１２２Ａ、Ｔ１２５Ｇ／Ｌ１２６Ｇ、Ｒ１２７Ｇ、Ｑ１３０Ｘ、Ｑ１３１Ｇ、Ｋ１３２Ａ、Ｓ１３７Ｇ／Ｑ１３８Ｙ、Ｌ１４５Ｇ、Ｈ１４６Ｘ、Ｌ１４５Ａ／Ｌ１４７Ａ、Ｑ１４８Ｘ、Ｑ１４８Ｇ／Ｑ１５０Ｇ、Ｑ１５０Ｇ／Ｄ１５１Ａ、Ｍ１５２Ｇ、Ｆ１６２Ａ、Ｆ１６２Ａ／Ｑ１６４Ｅ、Ｆ１６６Ａ、Ｑ１６４Ｅ／Ｅ１６７Ｋ、Ｎ１６９Ｇ／Ｄ１７０Ｇ、Ｉ１７２Ａ、Ｖ１７４Ａ、Ｋ２０８Ｅ、Ｋ２０９Ｘ、Ｋ２０９Ａ／Ｋ２１０Ａ、Ｋ２１９Ｘ、Ｅ２２１Ｘ、Ｅ２２１ Ｓ／Ｎ２２４Ａ、Ｎ２２４Ｓ／Ｋ２２５Ｓ、Ｅ２４４Ｋ、Ｎ２４５Ｑ（ここで、Ｘは、アミノ酸中の任意の変化、例えば非保存的変化であり得る）（ヒト配列ＩＬ−１β配列、Ｇｅｎｂａｎｋアクセション番号ＮＰ＿０００５６７、バージョンＮＰ＿０００５６７．１、Ｇｌ：１０８３５１４５を基にしてナンバリング）から選択される１つまたは複数の置換突然変異を有する。幾つかの実施形態において、修飾されたヒトＩＬ−１βは、Ｒ１２０Ａ、Ｒ１２０Ｇ、Ｑ１３０Ａ、Ｑ１３０Ｗ、Ｈ１４６Ａ、Ｈ１４６Ｇ、Ｈ１４６Ｅ、Ｈ１４６Ｎ、Ｈ１４６Ｒ、Ｑ１４８Ｅ、Ｑ１４８Ｇ、Ｑ１４８Ｌ、Ｋ２０９Ａ、Ｋ２０９Ｄ、Ｋ２１９Ｓ、Ｋ２１９Ｑ、Ｅ２２１ＳおよびＥ２２１Ｋから選択される１つまたは複数の突然変異を有し得る。一実施形態において、修飾されたヒトＩＬ−１βは、突然変異Ｑ１３１ＧおよびＱ１４８Ｇを含む。一実施形態において、修飾されたヒトＩＬ−１βは、突然変異Ｑ１４８ＧおよびＫ２０８Ｅを含む。一実施形態において、修飾されたヒトＩＬ−１βは、突然変異Ｒ１２０ＧおよびＱ１３１Ｇを含む。一実施形態において、修飾されたヒトＩＬ−１βは、突然変異Ｒ１２０ＧおよびＨ１４６Ａを含む。一実施形態において、修飾されたヒトＩＬ−１βは、突然変異Ｒ１２０ＧおよびＨ１４６Ｎを含む。一実施形態において、修飾されたヒトＩＬ−１βは、突然変異Ｒ１２０ＧおよびＨ１４６Ｒを含む。一実施形態において、修飾されたヒトＩＬ−１βは、突然変異Ｒ１２０ＧおよびＨ１４６Ｅを含む。一実施形態において、修飾されたヒトＩＬ−１βは、突然変異Ｒ１２０ＧおよびＨ１４６Ｇを含む。一実施形態において、修飾されたヒトＩＬ−１βは、突然変異Ｒ１２０ＧおよびＫ２０８Ｅを含む。一実施形態において、修飾されたヒトＩＬ−１βは、突然変異Ｒ１２０Ｇ、Ｆ１６２Ａ、およびＱ１６４Ｅを含む。

一実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＬ−２である。そのような実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＬ−２Ｒαおよび／またはＩＬ−２Ｒβおよび／またはＩＬ−２Ｒγに対する低減された親和性および／または活性を有する。幾つかの実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＬ−２Ｒβおよび／またはＩＬ−２Ｒγに対する低減された親和性および／または活性を有する。幾つかの実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＬ−２Ｒαに対する実質的に低減または除去された親和性および／または活性を有する。例えば修飾されたＩＬ−２がＩＬ−２Ｒβおよび／またはＩＬ−２Ｒγで作動性である場合には、そのような実施形態は、癌の処置に関連し得る。例えば、本発明の構築物は、ＩＬ２受容体βおよびγを有するＣＤ８^＋Ｔ細胞（これは抗腫瘍効果を提供し得る）の弱化された活性化に好適であり、ＩＬ２受容体α、β、およびγを有するＴ_ｒｅｇ（これは免疫抑制性腫瘍促進効果を提供し得る）に非好適であり得る。さらに、幾つかの実施形態において、ＩＬ−２ＲαよりもＩＬ−２Ｒβおよび／またはＩＬ−２Ｒγに対する優先性は、肺浮腫などのＩＬ−２の副作用を回避する。また、例えば修飾されたＩＬ−２がＩＬ−２Ｒβおよび／またはＩＬ−２Ｒγで拮抗性（例えば、天然の拮抗活性、または１つもしくは複数の突然変異の結果である拮抗活性、例えば、内容全体が参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２０１５／００７５２０参照）である場合には、ＩＬ−２に基づくキメラは、自己免疫性疾患の処置に有用である。例えば、本発明の構築物は、ＩＬ２受容体βを有するＣＤ８^＋Ｔ細胞の弱化された抑制（そしてそれゆえ免疫応答を減衰する）に好適であり、ＩＬ−２受容体α、β、およびγを有するＴ_ｒｅｇに非好適であり得る。あるいは、幾つかの実施形態において、ＩＬ−２を担持するキメラは、Ｔ_ｒｅｇの活性化、およびそれゆえ免疫抑制、かつＣＤ８^＋Ｔ細胞の非好適性の活性化に好適である。例えば、これらの構築物は、疾患、または免疫抑制から利益を享受する疾患、例えば自己免疫障害の処置で用途を見出す。

幾つかの実施形態において、キメラタンパク質は、ＣＤ８^＋Ｔ細胞に向けられる本明細書に記載される標的部分ならびに、ＩＬ−２Ｒβおよび／もしくはＩＬ−２Ｒγに対する低減された親和性および／もしくは活性ならびに／またはＩＬ−２Ｒαに対する実質的に低減もしくは除去された親和性および／もしくは活性を有する修飾されたＩＬ−２剤を有する。幾つかの実施形態において、これらの構築物は、標的化されたＣＤ８^＋Ｔ細胞活性を提供し、Ｔ_ｒｅｇ細胞に対して一般に不活性である（または実質的に低減された活性を有する）。幾つかの実施形態において、そのような構築物は、野生型ＩＬ−２に比較して増強された免疫刺激効果を有する（例えば、理論に結びつけるのを望むものではないが、Ｔｒｅｇを刺激しないことにより）が、ＩＬ−２と関連する全身毒性を排除または低減する。

一実施形態において、野生型ＩＬ−２は、
ＩＬ−２（成熟形態、野生型）（配列番号３４４）
ＡＰＴＳＳＳＴＫＫＴＱＬＱＬＥＨＬＬＬＤＬＱＭＩＬＮＧＩＮＮＹＫＮＰＫＬＴＲＭＬＴＦＫＦＹＭＰＫＫＡＴＥＬＫＨＬＱＣＬＥＥＥＬＫＰＬＥＥＶＬＮＬＡＱＳＫＮＦＨＬＲＰＲＤＬＩＳＮＩＮＶＩＶＬＥＬＫＧＳＥＴＴＦＭＣＥＹＡＤＥＴＡＴＩＶＥＦＬＮＲＷＩＴＦＣＱＳＩＩＳＴＬＴ
のアミノ酸配列を有する。

そのような実施形態において、修飾されたＩＬ−２剤は、アミノ酸Ｌ７２（Ｌ７２Ｇ、Ｌ７２Ａ、Ｌ７２Ｓ、Ｌ７２Ｔ、Ｌ７２Ｑ、Ｌ７２Ｅ、Ｌ７２Ｎ、Ｌ７２Ｄ、Ｌ７２Ｒ、またはＬ７２Ｋ）、Ｆ４２（Ｆ４２Ａ、Ｆ４２Ｇ、Ｆ４２Ｓ、Ｆ４２Ｔ、Ｆ４２Ｑ、Ｆ４２Ｅ、Ｆ４２Ｎ、Ｆ４２Ｄ、Ｆ４２Ｒ、またはＦ４２Ｋ）およびＹ４５（Ｙ４５Ａ、Ｙ４５Ｇ、Ｙ４５Ｓ、Ｙ４５Ｔ、Ｙ４５Ｑ、Ｙ４５Ｅ、Ｙ４５Ｎ、Ｙ４５Ｄ、Ｙ４５ＲまたはＹ４５Ｋ）で１つまたは複数の突然変異を有する。理論に結びつけるのを望むものではないが、これらの修飾されたＩＬ−２剤は、野生型ＩＬ−２に比較して、高親和性ＩＬ−２受容体に対する低減された親和性を有し、中等度の親和性のＩＬ−２受容体への親和性を保持すると考えられる。例えば、内容全体が参照により本明細書に組み入れられる米国特許出願公開第２０１２／０２４４１１２号を参照されたい。

一実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＬ−３である。幾つかの実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＬ−３受容体に対する低減された親和性および／または活性を有し、これは共通のベータ（ベータｃまたはＣＤ１３１）サブユニットと対合される特有のアルファ鎖を有するヘテロ二量体である。幾つかの実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＬ−３受容体に対する実質的に低減または除去された親和性および／または活性を有し、これは共通のベータ（ベータｃまたはＣＤ１３１）サブユニットと対合される特有のアルファ鎖のヘテロ二量体である。

一実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＬ−４である。そのような実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、１型および／または２型ＩＬ−４受容体に対する低減された親和性および／または活性を有する。そのような実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、１型および／または２型ＩＬ−４受容体に対する実質的に低減または除去された親和性および／または活性を有する。１型ＩＬ−４受容体は、ＩＬ−４Ｒαサブユニットと共通γ鎖で構成され、ＩＬ−４を特異的に結合する。２型ＩＬ−４受容体は、ＩＬ−１３Ｒα１として公知の異なるサブユニットに結合されるＩＬ−４Ｒαを包含する。幾つかの実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、２型ＩＬ−４受容体に対する実質的に低減または除去された親和性および／または活性を有する。

一実施形態において、野生型ＩＬ−４は、
ＩＬ−４（成熟形態、野生型）（配列番号３４５）
ＨＫＣＤＩＴＬＱＥＩＩＫＴＬＮＳＬＴＥＱＫＴＬＣＴＥＬＴＶＴＤＩＦＡＡＳＫＮＴＴＥＫＥＴＦＣＲＡＡＴＶＬＲＱＦＹＳＨＨＥＫＤＴＲＣＬＧＡＴＡＱＱＦＨＲＨＫＱＬＩＲＦＬＫＲＬＤＲＮＬＷＧＬＡＧＬＮＳＣＰＶＫＥＡＮＱＳＴＬＥＮＦＬＥＲＬＫＴＩＭＲＥＫＹＳＫＣＳＳ
のアミノ酸配列を有する。

そのような実施形態において、修飾されたＩＬ−４剤は、アミノ酸Ｒ１２１（Ｒ１２１Ａ、Ｒ１２１Ｄ、Ｒ１２１Ｅ、Ｒ１２１Ｆ、Ｒ１２１Ｈ、Ｒ１２１Ｉ、Ｒ１２１Ｋ、Ｒ１２１Ｎ、Ｒ１２１Ｐ、Ｒ１２１Ｔ、Ｒ１２１Ｗ）、Ｅ１２２（Ｅ１２２Ｆ）、Ｙ１２４（Ｙ１２４Ａ、Ｙ１２４Ｑ、Ｙ１２４Ｒ、Ｙ１２４Ｓ、Ｙ１２４Ｔ）およびＳ１２５（Ｓ１２５Ａ）で１つまたは複数の突然変異を有する。理論に結びつけるのを望むものではないが、これらの修飾されたＩＬ−４剤はＩ型受容体により媒介される活性を維持するが、他の受容体により媒介される生物活性を有意に低減すると考えられる。例えば、内容全体が参照により本明細書に組み入れられる米国特許第６，４３３，１５７号を参照されたい。

一実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＬ−６である。ＩＬ−６は、リガンド結合ＩＬ−６Ｒ鎖（ＣＤ１２６）およびシグナル伝達成分ｇｐ１３０を含む細胞表面Ｉ型サイトカイン受容体複合体を通してシグナル伝達する。ＩＬ−６はまた、ＩＬ−６Ｒの細胞外部分であるＩＬ−６Ｒの可溶性形態（ｓＩＬ−６Ｒ）に結合し得る。ｓＩＬ−６Ｒ／ＩＬ−６複合体は、神経突起伸展および神経細胞の生存に関与し得、したがって再ミエリン化を介する神経再生において重要であり得る。したがって、幾つかの実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＬ−６Ｒ／ｇｐ１３０および／またはｓＩＬ−６Ｒに対する低減された親和性および／または活性を有する。幾つかの実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＬ−６Ｒ／ｇｐ１３０および／またはｓＩＬ−６Ｒに対する実質的に低減または除去された親和性および／または活性を有する。

一実施形態において、野生型ＩＬ−６は、ＩＬ−６（成熟形態、野生型）（配列番号３４６）：
ＡＰＶＰＰＧＥＤＳＫＤＶＡＡＰＨＲＱＰＬＴＳＳＥＲＩＤＫＱＩＲＹＩＬＤＧＩＳＡＬＲＫＥＴＣＮＫＳＮＭＣＥＳＳＫＥＡＬＡＥＮＮＬＮＬＰＫＭＡＥＫＤＧＣＦＱＳＧＦＮＥＥＴＣＬＶＫＩＩＴＧＬＬＥＦＥＶＹＬＥＹＬＱＮＲＦＥＳＳＥＥＱＡＲＡＶＱＭＳＴＫＶＬＩＱＦＬＱＫＫＡＫＮＬＤＡＩＴＴＰＤＰＴＴＮＡＳＬＴＴＫＬＱＡＱＮＱＷＬＱＤＭＴＴＨＬＩＬＲＳＦＫＥＦＬＱＳＳＬＲＡＬＲＱＭ
のアミノ酸配列を有する。

そのような実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、アミノ酸配列５８、１６０、１６３、１７１または１７７で１つまたは複数の突然変異を有する。理論に結びつけるのを望むものではないが、これらの修飾されたＩＬ−６剤はＩＬ−６Ｒアルファへの低減された結合親和性および低減された生物活性を示すと考えられる。例えば、内容全体が参照により本明細書に組み入れられるＷＯ９７／１０３３８を参照されたい。

一実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＬ−１０である。そのような実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＬ−１０受容体−１およびＩＬ−１０受容体−２に対する低減された親和性および／または活性を有する。幾つかの実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＬ−１０受容体−１およびＩＬ−１０受容体−２に対する実質的に低減または除去された親和性および／または活性を有する。

一実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＬ−１１である。そのような実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＬ−１１Ｒαおよび／またはＩＬ−１１Ｒβおよび／またはｇｐ１３０に対する低減された親和性および／または活性を有する。そのような実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＬ−１１Ｒαおよび／またはＩＬ−１１Ｒβおよび／またはｇｐ１３０に対する実質的に低減または除去された親和性および／または活性を有する。

一実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＬ−１２である。そのような実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＬ−１２Ｒβ１および／またはＩＬ−１２Ｒβ２に対する低減された親和性および／または活性を有する。そのような実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＬ−１２Ｒβ１および／またはＩＬ−１２Ｒβ２に対する実質的に低減または除去された親和性および／または活性を有する。

一実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＬ−１３である。そのような実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＬ−４受容体（ＩＬ−４Ｒα）およびＩＬ−１３Ｒα１に対する低減された親和性および／または活性を有する。幾つかの実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＬ−４受容体（ＩＬ−４Ｒα）またはＩＬ−１３Ｒα１に対する実質的に低減または除去された親和性および／または活性を有する。

一実施形態において、野生型ＩＬ−１３は、ＩＬ−１３（成熟形態、野生型）（配列番号３４７）：
ＳＰＧＰＶＰＰＳＴＡＬＲＥＬＩＥＥＬＶＮＩＴＱＮＱＫＡＰＬＣＮＧＳＭＶＷＳＩＮＬＴＡＧＭＹＣＡＡＬＥＳＬＩＮＶＳＧＣＳＡＩＥＫＴＱＲＭＬＳＧＦＣＰＨＫＶＳＡＧＱＦＳＳＬＨＶＲＤＴＫＩＥＶＡＱＦＶＫＤＬＬＬＨＬＫＫＬＦＲＥＧＲＦＮ
のアミノ酸配列を有する。

そのような実施形態において、修飾されたＩＬ−１３剤は、アミノ酸１３、１６、１７、６６、６９、９９、１０２、１０４、１０５、１０６、１０７、１０８、１０９、１１２、１１３および１１４で１つまたは複数の突然変異を有する。理論に結びつけるのを望むものではないが、これらの修飾されたＩＬ−１３剤は、低減された生物活性を有すると考えられる。例えば、内容全体が参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２００２／０１８４２２を参照されたい。

一実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＬ−１８である。幾つかの実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＬ−１８Ｒαおよび／またはＩＬ−１８Ｒβに対する低減された親和性および／または活性を有する。幾つかの実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＬ−１８Ｒαおよび／またはＩＬ−１８Ｒβに対する実質的に低減または除去された親和性および／または活性を有する。幾つかの実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、シグナル伝達に必要とされるＴＩＲドメインが欠如したＩＬ−１８ＲαのアイソフォームであるＩＬ−１８Ｒα ＩＩ型に対する実質的に低減または除去された親和性および／または活性を有する。

一実施形態において、野生型ＩＬ−１８は、ＩＬ−１８（野生型）（配列番号３４８）：
ＭＡＡＥＰＶＥＤＮＣＩＮＦＶＡＭＫＦＩＤＮＴＬＹＦＩＡＥＤＤＥＮＬＥＳＤＹＦＧＫＬＥＳＫＬＳＶＩＲＮＬＮＤＱＶＬＦＩＤＱＧＮＲＰＬＦＥＤＭＴＤＳＤＣＲＤＮＡＰＲＴＩＦＩＩＳＭＹＫＤＳＱＰＲＧＭＡＶＴＩＳＶＫＣＥＫＩＳＴＬＳＣＥＮＫＩＩＳＦＫＥＭＮＰＰＤＮＩＫＤＴＫＳＤＩＩＦＦＱＲＳＶＰＧＨＤＮＫＭＱＦＥＳＳＳＹＥＧＹＦＬＡＣＥＫＥＲＤＬＦＫＬＩＬＫＫＥＤＥＬＧＤＲＳＩＭＦＴＶＱＮＥＤＬ
のアミノ酸配列を有する。

そのような実施形態において、修飾されたＩＬ−１８剤は、内容全体が参照により本明細書に組み入れられるＷＯ２０１５／００７５４２に記載される通り、Ｙ３７−Ｋ４４、Ｒ４９−Ｑ５４、Ｄ５９−Ｒ６３、Ｅ６７−Ｃ７４、Ｒ８０、Ｍ８７−Ａ９７、Ｎ１２７−Ｋ１２９、Ｑ１３９−Ｍ１４９、Ｋ１６５−Ｋ１７１、Ｒ１８３およびＱ１９０−Ｎ１９１から選択されるアミノ酸またはアミノ酸領域に１つまたは複数の突然変異を含み得る（ヒトＩＬ−１８配列Ｇｅｎｂａｎｋアクセション番号ＡＡＶ３８６９７、バージョンＡＡＶ３８６９７．１、Ｇｌ：５４６９６６５０に基づいてナンバリング）。

一実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＬ−３３である。そのような実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＳＴ−２受容体およびＩＬ−１ＲＡｃＰに対する低減された親和性および／または活性を有する。幾つかの実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＳＴ−２受容体およびＩＬ−１ＲＡｃＰに対する実質的に低減または除去された親和性および／または活性を有する。

一実施形態において、野生型ＩＬ−３３は、
ＭＫＰＫＭＫＹＳＴＮＫＩＳＴＡＫＷＫＮＴＡＳＫＡＬＣＦＫＬＧＫＳＱＱＫＡＫＥＶＣＰＭＹＦＭＫＬＲＳＧＬＭＩＫＫＥＡＣＹＦＲＲＥＴＴＫＲＰＳＬＫＴＧＲＫＨＫＲＨＬＶＬＡＡＣＱＱＱＳＴＶＥＣＦＡＦＧＩＳＧＶＱＫＹＴＲＡＬＨＤＳＳＩＴＧＩＳＰＩＴＥＹＬＡＳＬＳＴＹＮＤＱＳＩＴＦＡＬＥＤＥＳＹＥＩＹＶＥＤＬＫＫＤＥＫＫＤＫＶＬＬＳＹＹＥＳＱＨＰＳＮＥＳＧＤＧＶＤＧＫＭＬＭＶＴＬＳＰＴＫＤＦＷＬＨＡＮＮＫＥＨＳＶＥＬＨＫＣＥＫＰＬＰＤＱＡＦＦＶＬＨＮＭＨＳＮＣＶＳＦＥＣＫＴＤＰＧＶＦＩＧＶＫＤＮＨＬＡＬＩＫＶＤＳＳＥＮＬＣＴＥＮＩＬＦＫＬＳＥＴ（配列番号３４９）
のアミノ酸配列を有する。

そのような実施形態において、修飾されたＩＬ−３３剤は、内容全体が参照により本明細書に組み入れられるＷＯ／２０１５／００７５４２に記載される通り、Ｉ１１３−Ｙ１２２、Ｓ１２７−Ｅ１３９、Ｅ１４４−Ｄ１５７、Ｙ１６３−Ｍ１８３、Ｅ２００、Ｑ２１５、Ｌ２２０−Ｃ２２７およびＴ２６０−Ｅ２６９から選択されるアミノ酸またはアミノ酸領域に１つまたは複数の突然変異を含み得る（ヒト配列Ｇｅｎｂａｎｋアクセション番号ＮＰ＿２５４２７４、バージョンＮＰ＿２５４２７４．１、Ｇｌ：１５５５９２０９に基づいてナンバリング）。

一実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、上皮成長因子（ＥＧＦ）である。ＥＧＦは、強力な成長因子のファミリーのメンバーである。メンバーとしては、ＥＧＦ、ＨＢ−ＥＧＦ、および他のもの、例えばＴＧＦアルファ、アンフィレグリン、ニューレグリン、エピレグリン、ベータセルリンが挙げられる。ＥＧＦファミリー受容体としては、ＥＧＦＲ（ＥｒｂＢ１）、ＥｒｂＢ２、ＥｒｂＢ３およびＥｒｂＢ４が挙げられる。これらは、ホモ二量体および／またはヘテロ二量体受容体サブタイプとして機能し得る。異なるＥＧＦファミリーメンバーは、様々な受容体サブタイプに対して差示的な選択性を示す。例えば、ＥＧＦは、ＥｒｂＢ１／ＥｒｂＢ１、ＥｒｂＢ１／ＥｒｂＢ２、ＥｒｂＢ４／ＥｒｂＢ２および他のヘテロ二量体サブタイプと関連する。ＨＢ−ＥＧＦは、類似のパターンを有するが、ＥｒｂＢ４／４にも関連する。ＥＧＦ（ＥＧＦ様）成長因子シグナル伝達の正または負のモジュレーションは、大きな治療的関心である。例えば、ＥＧＦＲシグナル伝達の阻害は、ＥＧＦＲシグナル伝達が主な成長促進シグナルを構成する様々な癌の処置で関心が持たれる。あるいはＥＧＦＲシグナル伝達の刺激は、例えば、創傷治癒の促進（急性および慢性）、口腔粘膜炎（非限定的に放射線療法を含む、様々な癌治療の主な副作用）において、治療的関心である。

幾つかの実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＥｒｂＢ１、ＥｒｂＢ２、ＥｒｂＢ３、および／またはＥｒｂＢ４に対する低減された親和性および／または活性を有する。そのような実施形態は、例えば創傷を処置する方法で、用途を見出す。幾つかの実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、１つまたは複数のＥｒｂＢ１、ＥｒｂＢ２、ＥｒｂＢ３、およびＥｒｂＢ４に結合し、受容体の活性と拮抗する。そのような実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＥｒｂＢ１、ＥｒｂＢ２、ＥｒｂＢ３、および／またはＥｒｂＢ４に対する低減された親和性および／または活性を有し、これは受容体の活性が弱化される方式で拮抗されるようにする。そのような実施形態は、例えば癌の処置で用途を見出す。一実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＥｒｂＢ１に対する低減された親和性および／または活性を有する。ＥｒｂＢ１はキナーゼ阻害剤の治療ターゲットであり、キナーゼ阻害剤は、それらがあまり選択的でないため、ほとんどが副作用を有する（例えば、ゲフィチニブ、エルロチニブ、アファチニブ、ブリガチニブおよびイコチニブ）。幾つかの実施形態において、弱化された拮抗性ＥｒｂＢ１シグナル伝達は、よりオンターゲットであり、ＥＧＦに対する受容体を標的とする他の薬剤よりも少ない副作用を有する。

幾つかの実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＥｒｂＢ１に対する低減された親和性および／もしくは活性（例えば、拮抗性、例えば天然の拮抗活性、または１つもしくは複数の突然変異の結果である拮抗活性、例えば内容全体が参照により本明細書に組み入れられる、ＷＯ２０１５／００７５２０参照）、ならびに／またはＥｒｂＢ４もしくはそれが相互作用し得る他のサブタイプに対する、実質的に低減もしくは除去された親和性および／もしくは活性を有する。標的部分を介する特異的標的化により、ＥｒｂＢ１／ＥｒｂＢ１受容体活性化の細胞選択性の抑制（拮抗性、例えば天然の拮抗活性、または１つもしくは複数の突然変異の結果である拮抗活性、例えば内容全体が参照により本明細書に組み入れられる、ＷＯ２０１５／００７５２０参照）が実現される（阻害関連の副作用と潜在的に関連する他の受容体サブタイプを関わらせずに）。したがってそのような構築物は、体内の全ての細胞型でＥＧＦＲ活性を阻害するＥＧＦＲキナーゼ阻害剤とは対照的に、細胞選択的な（例えば、受容体の増幅、過剰発現などによりＥＧＦＲシグナル伝達が活性化された腫瘍細胞）抗ＥＧＦＲ（ＥｒｂＢ１）薬物効果を低減された副作用で提供する。

幾つかの実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＥｒｂＢ４および／またはそれが相互作用し得る他のサブタイプに対する低減された親和性および／または活性（例えば、拮抗性）を有する。標的部分を介する特異的標的細胞への標的により、ＥｒｂＢ１シグナル伝達の選択的活性化が実現される（例えば、上皮細胞）。そのような構築物は、幾つかの実施形態において、特に慢性状態での処置および治療薬の外用以外の適用（例えば、全身創傷治癒）のために、副作用が低減された創傷の処置（創傷治癒を促進する）で用途を見出す。

一実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、インスリンまたはインスリン類似体である。幾つかの実施形態において、修飾されたインスリンまたはインスリン類似体は、インスリン受容体および／またはＩＧＦ１もしくはＩＧＦ２受容体に対する低減された親和性および／または活性を有する。幾つかの実施形態において、修飾されたインスリンまたはインスリン類似体は、インスリン受容体および／またはＩＧＦ１もしくはＩＧＦ２受容体に対する実質的に低減または除去された親和性および／または活性を有する。インスリン受容体での弱化された応答は、糖尿病、肥満、代謝障害などのコントロールを可能にしながら、ＩＧＦ１またはＩＧＦ２受容体から離れる方向づけが癌促進作用（ｐｒｏｃａｎｃｅｒ ｅｆｆｅｃｔｓ）を回避する。

一実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、インスリン様成長因子Ｉまたはインスリン様成長因子ＩＩ（ＩＧＦ−１またはＩＧＦ−２）である。一実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＧＦ−１である。そのような実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、インスリン受容体および／またはＩＧＦ１受容体に対する低減された親和性および／または活性を有する。一実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＧＦ１受容体に結合し、受容体の活性に拮抗し得る。そのような実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＧＦ１受容体に対する低減された親和性および／または活性を有し、これは受容体の活性が弱化される方式で拮抗されるようにする。幾つかの実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、インスリン受容体および／またはＩＧＦ１受容体に対する実質的に低減または除去された親和性および／または活性を有する。幾つかの実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＩＧＦ２受容体に対する低減された親和性および／または活性を有し、これは受容体の活性が弱化される方式で拮抗されるようにする。一実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、インスリン受容体に対する実質的に低減または除去された親和性および／または活性を有し、したがってインスリンシグナル伝達を妨害しない。様々な実施形態において、これは、癌処置に適用される。様々な実施形態において、本発明の薬剤は、ＩＲアイソフォームＡが癌処置への抵抗性を誘発するのを予防し得る。

一実施形態において、修飾されたシグナル伝達物質は、ＥＰＯである。様々な実施形態において、修飾されたＥＰＯ剤は、野生型ＥＰＯまたは本明細書に記載される他のＥＰＯに基づく物質に比較して、ＥＰＯ受容体（ＥＰＯＲ）および／またはエフリン受容体（ＥｐｈＲ）に対する低減された親和性および／または活性を有する。幾つかの実施形態において、修飾されたＥＰＯ剤は、ＥＰＯ受容体（ＥＰＯＲ）および／またはＥｐｈ受容体（ＥｐｈＲ）に対する実質的に低減または除去された親和性および／または活性を有する。例示的なＥＰＯ受容体としては、ＥＰＯＲホモ二量体またはＥＰＯＲ／ＣＤ１３１ヘテロ二量体が挙げられるが、これらに限定されない。またＥＰＯ受容体として挙げられるのは、ベータ共通受容体（βｃＲ）である。例示的なＥｐｈ受容体としては、ＥＰＨＡ１、ＥＰＨＡ２、ＥＰＨＡ３、ＥＰＨＡ４、ＥＰＨＡ５、ＥＰＨＡ６、ＥＰＨＡ７、ＥＰＨＡ８、ＥＰＨＡ９、ＥＰＨＡ１０、ＥＰＨＢ１、ＥＰＨＢ２、ＥＰＨＢ３、ＥＰＨＢ４、ＥＰＨＢ５、およびＥＰＨＢ６が挙げられるが、これらに限定されない。幾つかの実施形態において、修飾されたＥＰＯタンパク質は、１つまたは複数の異なるＥＰＯ受容体またはＥｐｈ受容体（例えば、非限定的にＥＰＯＲ−ＥＰＨＢ４、ＥＰＯＲ−βｃＲ−ＥＰＯＲを含む、ヘテロ二量体、ヘテロ三量体など）を含む受容体についてＥＰＯタンパク質が低減された親和性を持つようにさせる１つまたは複数の突然変異を含む。また提供されるのは、非限定的にＮＥＰＯＲを含む、内容全体が本明細書に組み入れられる欧州特許出願第２４９２３５５号の受容体である。

一実施形態において、ヒトＥＰＯは、

一実施形態において、ヒトＥＰＯタンパク質は、
ＡＰＰＲＬＩＣＤＳＲＶＬＥＲＹＬＬＥＡＫＥＡＥＮＩＴＴＧＣＡＥＨＣＳＬＮＥＮＩＴＶＰＤＴＫＶＮＦＹＡＷＫＲＭＥＶＧＱＱＡＶＥＶＷＱＧＬＡＬＬＳＥＡＶＬＲＧＱＡＬＬＶＮＳＳＱＰＷＥＰＬＱＬＨＶＤＫＡＶＳＧＬＲＳＬＴＴＬＬＲＡＬＧＡＱＫＥＡＩＳＰＰＤＡＡＳＡＡＰＬＲＴＩＴＡＤＴＦＲＫＬＦＲＶＹＳＮＦＬＲＧＫＬＫＬＹＴＧＥＡＣＲＴＧＤＲ（配列番号３５１）
の配列を有する１６６アミノ酸残基の糖タンパク質であるＥＰＯ（シグナルペプチドが切除された）の成熟形態である。

ヒトＥＰＯタンパク質の構造は、ヘリックスＡ、Ｂ、Ｃ、およびＤを含む４ヘリックスバンドルを含むと予測される。様々な実施形態において、修飾されたＥＰＯタンパク質は、生物活性にとって重要であるＥＰＯタンパク質の４つの領域：即ちアミノ酸残基１０−２０、４４−５１、９６−１０８、および１４２−１５６に位置する１つまたは複数の突然変異を含む。幾つかの実施形態において、１つまたは複数の突然変異は、残基１１−１５、４４−５１、１００−１０８、および１４７−１５１に位置する。これらの残基は、ヘリックスＡ（Ｖａｌ１１、Ａｒｇ１４、およびＴｙｒ１５）、ヘリックスＣ（Ｓｅｒ１００、Ａｒｇ１０３、Ｓｅｒ１０４、およびＬｅｕ１０８）、ヘリックスＤ（Ａｓｎ１４７、Ａｒｇ１５０、Ｇｌｙ１５１、およびＬｅｕ１５５）、およびＡ／Ｂ連結ループ（残基４２−５１）に位置する。幾つかの実施形態において、修飾されたＥＰＯタンパク質は、アミノ酸４１−５２とアミノ酸１４７、１５０、１５１、および１５５の間の残基に突然変異を含む。理論に結びつけるのを望むものではないが、これらの残基の突然変異は、受容体結合とインビトロ生物活性の両方に実質的な影響を有すると考えられる。幾つかの実施形態において、修飾されたＥＰＯタンパク質は、残基１１、１４、１５、１００、１０３、１０４、および１０８で突然変異を含む。理論に結びつけるのを望むものではないが、これらの残基の突然変異は、受容体結合活性への軽度の影響と、インビトロ生物活性へのかなり大きな影響を有すると考えられる。例示的な置換としては、Ｖａｌ１１Ｓｅｒ、Ａｒｇ１４Ａｌａ、Ａｒｇ１４Ｇｌｎ、Ｔｙｒ１５ｌｌｅ、Ｐｒｏ４２Ａｓｎ、Ｔｈｒ４４ｌｌｅ、Ｌｙｓ４５Ａｓｐ、Ｖａｌ４６Ａｌａ、Ｔｙｒ５１Ｐｈｅ、Ｓｅｒ１００Ｇｌｕ、Ｓｅｒ１００Ｔｈｒ、Ａｒｇ１０３Ａｌａ、Ｓｅｒ１０４ｌｌｅ、Ｓｅｒ１０４Ａｌａ、Ｌｅｕ１０８Ｌｙｓ、Ａｓｎ１４７Ｌｙｓ、Ａｒｇ１５０Ａｌａ、Ｇｌｙ１５１Ａｌａ、およびＬｅｕ１５５Ａｌａが挙げられるが、これらに限定されない。

幾つかの実施形態において、修飾されたＥＰＯタンパク質は、例えば、内容全体が参照により本明細書に組み入れられるＥｌｉｏｔ，ｅｔ ａｌ．Ｍａｐｐｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ Ａｃｔｉｖｅ Ｓｉｔｅ ｏｆ Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ Ｈｕｍａｎ Ｅｒｙｔｈｒｏｐｏｉｅｔｉｎ Ｊａｎｕａｒｙ １５，１９９７；Ｂｌｏｏｄ：８９（２）に列挙されたものなど、生物活性に影響を及ぼし結合に影響を及ぼさない突然変異を含む。

幾つかの実施形態において、修飾されたＥＰＯタンパク質は、受容体の接触に関与するＥＰＯタンパク質の表面残基を含む１つまたは複数の突然変異を含む。理論に結びつけるのを望むものではないが、これらの表面残基の突然変異は、タンパク質フォールディングに影響を及ぼす可能性は低くしたがっていくらかの生物活性を保持すると考えられる。変異され得る例示的な表面残基としては、残基１４７および１５０が挙げられるが、これらに限定されない。例示的な実施形態において、突然変異は、Ｎ１４７Ａ、Ｎ１４７Ｋ、Ｒ１５０ＡおよびＲ１５０Ｅの１つまたは複数を含む置換である。

幾つかの実施形態において、修飾されたＥＰＯタンパク質は、残基Ｎ５９、Ｅ６２、Ｌ６７、およびＬ７０での１つまたは複数の突然変異と、ジスルフィド結合に影響を及ぼす１つまたは複数の突然変異と、を含む。理論に結びつけるのを望むものではないが、これらの突然変異は、フォールディングに影響を及ぼし、かつ／または埋もれた位置にあると予測され、したがって生物活性に間接的に影響を及ぼすと考えられる。

一実施形態において、修飾されたＥＰＯタンパク質は、受容体結合を有意に低減するＫ２０Ｅ置換を含む。内容全体が参照により本明細書に組み入れられるＥｌｌｉｏｔｔ，ｅｔ ａｌ．，（１９９７）Ｂｌｏｏｄ，８９：４９３−５０２を参照されたい。

本発明のキメラＥＰＯタンパク質に組み込まれ得る追加のＥＰＯ突然変異は、例えば内容全体が参照により本明細書に組み入れられるＥｌｌｉｏｔｔ，ｅｔ ａｌ．，（１９９７）Ｂｌｏｏｄ，８９：４９３−５０２および内容全体が参照により本明細書に組み入れられるＴａｙｌｏｒ ｅｔ ａｌ．，（２０１０）ＰＥＤＳ，２３（４）：２５１−２６０に開示される。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、シグナル伝達物質として修飾されたＩＬ−１（例えば、ＩＬ−１αおよび／またはＩＬ−１β）を含む。そのような実施形態において、キメラタンパク質は、Ｔヘルパー細胞（例えば、共刺激および活性化のため）などのＴ細胞、および／またはＢ細胞（例えば、成熟、増殖のため）、および／またはＮＫ細胞（例えば、活性化のため）、および／またはマクロファージ（例えば、活性化のため）に対する影響を有する（および１つの標的部分がそれを標的にする）。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、シグナル伝達物質として修飾されたＩＬ−２を含む。そのような実施形態において、キメラタンパク質は、Ｔ細胞（例えば、成長および分化のため）、および／またはＢ細胞（例えば、成長のため）、および／またはＮＫ細胞（例えば、成長のため）、および／またはマクロファージに対する影響を有する（および１つの標的部分がそれを標的にする）。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、シグナル伝達物質として修飾されたＩＬ−３を含む。そのような実施形態において、キメラタンパク質は、造血幹細胞（例えば、成長、分化および増殖のため）、および／または骨髄前駆細胞（例えば、分化および増殖のため）、および／または肥満細胞（例えば、成長のため）に対する影響を有する（および１つの標的部分がそれを標的にする）。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、シグナル伝達物質として修飾されたＩＬ−４を含む。そのような実施形態において、キメラタンパク質は、Ｔ細胞（例えば、成長、増殖および生存のため）、および／またはＢ細胞（例えば、活性化、成長、分化、および増殖のため）、および／または肥満細胞（例えば、成長のため）、および／またはマクロファージ（例えば、活性化の阻害のため）に対する影響を有する（および１つの標的部分がそれを標的にする）。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、シグナル伝達物質として修飾されたＩＬ−５を含む。そのような実施形態において、キメラタンパク質は、好酸球（例えば、成長および分化のため）、および／またはＢ細胞（例えば、分化および生成のため）に対する影響を有する（および１つの標的部分がそれを標的にする）。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、シグナル伝達物質として修飾されたＩＬ−６を含む。そのような実施形態において、キメラタンパク質は、Ｂ細胞（例えば、成長および分化のため）、および／または形質細胞（例えば、抗体分泌のため）、および／または造血幹細胞（例えば、分化のため）、および／またはＴ細胞（例えば、成長および分化のため）に対する影響を有する（および１つの標的部分がそれを標的にする）。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、シグナル伝達物質として修飾されたＩＬ−７を含む。そのような実施形態において、キメラタンパク質は、Ｔ細胞（例えば、成長および分化および生存のため）、および／またはＢ細胞（例えば、成長および分化および生存のため）、および／またはＮＫ細胞（例えば、成長および分化および生存のため）に対する影響を有する（および１つの標的部分がそれを標的にする）。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、シグナル伝達物質として修飾されたＩＬ−８を含む。そのような実施形態において、キメラタンパク質は、好中球および／または好塩基球および／またはＢ細胞および／またはＴ細胞および／またはＮＫ細胞に対する影響を有する（および１つの標的部分がそれを標的にする）。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、シグナル伝達物質として修飾されたＩＬ−９を含む。そのような実施形態において、キメラタンパク質は、Ｔ細胞および／またはＢ細胞（例えば、活性化のため）、および／または肥満細胞（例えば、刺激のため）に対する影響を有する（および１つの標的部分がそれを標的にする）。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、シグナル伝達物質として修飾されたＩＬ−１０を含む。そのような実施形態において、キメラタンパク質は、マクロファージ（例えば、阻害のため）、および／またはＢ細胞（例えば、活性化のため）、および／または肥満細胞（例えば、成長の共刺激ため）、および／またはＴｈ_１細胞（例えば、阻害のため）および／またはＴｈ_２細胞（例えば、刺激のため）に対する影響を有する（および１つの標的部分がそれを標的にする）。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、シグナル伝達物質として修飾されたＩＬ−１２を含む。そのような実施形態において、キメラタンパク質は、Ｔ細胞（例えば、分化のため）、および／またはＮＫ細胞（例えば、活性化のため）に対する影響を有する（および１つの標的部分がそれを標的にする）。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、シグナル伝達物質として修飾されたＩＬ−１３を含む。そのような実施形態において、キメラタンパク質は、Ｔ細胞（例えば、Ｔｈ_１およびＴｈ_２細胞、例えばＴｈ_１細胞の阻害のため）、および／またはＢ細胞（例えば、成長および分化のため）、および／またはマクロファージ（例えば、阻害のため）に対する影響を有する（および１つの標的部分がそれを標的にする）。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、シグナル伝達物質として修飾されたＩＬ−１４を含む。そのような実施形態において、キメラタンパク質は、Ｂ細胞（例えば、成長および増殖のため）に対する影響を有する（および１つの標的部分がそれを標的にする）。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、シグナル伝達物質として修飾されたＩＬ−１５を含む。そのような実施形態において、キメラタンパク質は、Ｔ細胞（例えば、成長ため）、および／またはＢ細胞および／またはＮＫ細胞（例えば、成長のため）に対する影響を有する（および１つの標的部分がそれを標的にする）。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、シグナル伝達物質として修飾されたＩＬ−１６を含む。そのような実施形態において、キメラタンパク質は、Ｔ細胞（例えば、ＣＤ４＋Ｔ細胞；例えば、生存のため）に対する影響を有する（および１つの標的部分がそれを標的にする）。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、シグナル伝達物質として修飾されたＩＬ−１８を含む。そのような実施形態において、キメラタンパク質は、Ｔｈ_１細胞（例えば、導入のため）、および／またはＮＫ細胞（例えば、ＩＦＮγ生成の導入のため）に対する影響を有する（および１つの標的部分がそれを標的にする）。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、シグナル伝達物質として修飾されたＩＬ−２１を含む。そのような実施形態において、キメラタンパク質は、Ｔ細胞（例えば、活性化および増殖および／または分化のため）、および／またはＢ細胞（例えば、増殖および分化のため）、および／またはＮＫ細胞、および／または樹状細胞に対する影響を有する（および１つの標的部分がそれを標的にする）。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、シグナル伝達物質として修飾されたＩＬ−２７を含む。そのような実施形態において、キメラタンパク質は、Ｔ細胞および／またはＢ細胞に対する影響を有する（および１つの標的部分がそれを標的にする）。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、シグナル伝達物質として修飾されたＩＬ−３２を含む。そのような実施形態において、キメラタンパク質は、単球および／またはマクロファージに対する影響を有する（および１つの標的部分がそれを標的にする）。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、シグナル伝達物質として修飾されたＩＬ−３３を含む。そのような実施形態において、キメラタンパク質は、Ｔ細胞（例えば、Ｔヘルパー細胞）に対する影響を有する（および１つの標的部分がそれを標的にする）。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、シグナル伝達物質として修飾されたＩＬ−３５を含む。そのような実施形態において、キメラタンパク質は、Ｔ細胞（例えば、Ｔヘルパー細胞）に対する影響を有する（および１つの標的部分がそれを標的にする）。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、シグナル伝達物質として修飾されたＩＬ−３６を含む。そのような実施形態において、キメラタンパク質は、Ｔ細胞および／または樹状細胞に対する影響を有する（および１つの標的部分がそれを標的にする）。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、シグナル伝達物質として修飾されたＴＮＦ−αを含む。そのような実施形態において、キメラタンパク質は、マクロファージ（例えば、活性化のため）に対する影響を有する（および１つの標的部分がそれを標的にする）。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、シグナル伝達物質として修飾されたＴＮＦ−βを含む。そのような実施形態において、キメラタンパク質は、Ｔ細胞（例えば、殺傷のため）および／またはＢ細胞（例えば、阻害のため）および／またはマクロファージ（例えば、活性化のため）および／または好中球（例えば、活性化のため）に対する影響を有する（および１つの標的部分がそれを標的にする）。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、シグナル伝達物質として修飾されたＣＤ４０Ｌを含む。そのような実施形態において、キメラタンパク質は、Ｂ細胞（例えば、活性化のため）に対する影響を有する（および１つの標的部分がそれを標的にする）。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、シグナル伝達物質として修飾されたＣＤ２７Ｌを含む。そのような実施形態において、キメラタンパク質は、Ｔ細胞（例えば、増殖のため）に対する影響を有する（および１つの標的部分がそれを標的にする）。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、シグナル伝達物質として修飾されたＣＤ３０Ｌを含む。そのような実施形態において、キメラタンパク質は、Ｔ細胞（例えば、増殖のため）および／またはＢ細胞（例えば、増殖のため）に対する影響を有する（および１つの標的部分がそれを標的にする）。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、シグナル伝達物質として修飾された４−１ＢＢＬを含む。そのような実施形態において、キメラタンパク質は、Ｔ細胞（例えば、共刺激のため）および／またはＢ細胞（例えば、共刺激のため）に対する影響を有する（および１つの標的部分がそれを標的にする）。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、シグナル伝達物質として修飾されたＴＧＦ−βを含む。そのような実施形態において、キメラタンパク質は、Ｂ細胞（例えば、成長の阻害のため）および／またはマクロファージ（例えば、活性化の阻害のため）および／または好中球（例えば、活性化のため）に対する影響を有する（および１つの標的部分がそれを標的にする）。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、シグナル伝達物質として修飾されたＩＦＮ−γを含む。そのような実施形態において、キメラタンパク質は、Ｔ細胞（例えば、Ｔｈ_２成長の阻害のため）および／またはＢ細胞（例えば、分化のため）および／またはＮＫ細胞（例えば、活性化のため）および／またはマクロファージ（例えば、活性化のため）に対する影響を有する（および１つの標的部分がそれを標的にする）。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、シグナル伝達物質として修飾されたＧＭ−ＣＳＦを含む。そのような実施形態において、キメラタンパク質は、Ｔ細胞（例えば、成長の阻害のため）および／またはＢ細胞（例えば、分化のため）および／またはマクロファージ（例えば、活性化および分化のため）および／または造血幹細胞（例えば、分化のため）および／または骨髄前駆細胞（例えば、成長および分化のため）に対する影響を有する（および１つの標的部分がそれを標的にする）。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、シグナル伝達物質として修飾されたＧ−ＣＳＦを含む。そのような実施形態において、キメラタンパク質は、好中球（例えば、発生および分化のため）に対する影響を有する（および１つの標的部分がそれを標的にする）。

幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、シグナル伝達物質として修飾されたＥＰＯを含む。そのような実施形態において、キメラタンパク質は、造血前駆体および／もしくは前駆細胞、ならびに／または赤血球前駆体および／もしくは前駆細胞（例えば、ＢＦＵ−Ｅ（赤血球バースト形成細胞）および／またはＣＦＵ−Ｅ（赤血球コロニー形成単位））に対する影響を有する（および１つの標的部分がそれを標的にする）。

非限定的例として、一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、（ｉ）例えばＣＤ８、ＣＤ４、およびＣＤ３の１つへの標的化により媒介される、Ｔ細胞に対する標的部分と（ｉｉ）腫瘍細胞に対する標的部分（例えば、非限定的にチェックポイント阻害剤、例えば非限定的にＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２、へ標的することにより媒介される）を、本明細書に記載される修飾された（例えば、変異体の）シグナル伝達物質のいずれか、例えばＴ細胞の活性を改変し得る修飾された（例えば、変異体の）シグナル伝達物質、例えば非限定的に以下の突然変異Ｆ６４Ａ、Ｎ６５Ａ、Ｔ６９Ａ、Ｌ８０Ａ、Ｙ８５Ａ、Ｙ８９Ａ、Ｒ１２０Ｅ、Ｒ１２０Ｅ／Ｋ１２１Ｅ、Ｋ１３３Ａ、Ｒ１４４Ａ、Ｍ１４８Ａ、Ｒ１４９Ａ、およびＬ１５３Ａの１つまたは複数を含む、インターフェロンアルファ、と共に有する。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、Ｔ細胞上のＣＤ８に対する標的部分と、腫瘍細胞上のチェックポイント阻害剤、例えば非限定的にＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２、に対する第二の標的部分と、本明細書に記載される修飾された（例えば、変異体の）インターフェロン剤とを有する。

非限定的例として、一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、（ｉ）例えばＣＤ２０への標的化により媒介される、Ｂ細胞に対する標的部分と（ｉｉ）腫瘍細胞に対する標的部分（例えば、非限定的にチェックポイント阻害剤、例えば非限定的にＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２、へ標的することにより媒介される）を、本明細書に記載される修飾された（例えば、変異体の）シグナル伝達物質のいずれか、例えばＢ細胞の活性を改変し得る修飾された（例えば、変異体の）シグナル伝達物質、例えば非限定的に以下の突然変異Ｆ６４Ａ、Ｎ６５Ａ、Ｔ６９Ａ、Ｌ８０Ａ、Ｙ８５Ａ、Ｙ８９Ａ、Ｒ１２０Ｅ、Ｒ１２０Ｅ／Ｋ１２１Ｅ、Ｋ１３３Ａ、Ｒ１４４Ａ、Ｍ１４８Ａ、Ｒ１４９Ａ、およびＬ１５３Ａの１つまたは複数を含む、インターフェロンアルファ、と共に有する。

非限定的例として、一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、（ｉ）例えばＣＬＥＣ９Ａ、ＸＣＲ１、およびＲＡＮＫの１つへの標的化により媒介される、樹状細胞に対する標的部分と（ｉｉ）腫瘍細胞に対する標的部分（例えば、非限定的にチェックポイント阻害剤、例えば非限定的にＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２、へ標的することにより媒介される）を、本明細書に記載される修飾された（例えば、変異体の）シグナル伝達物質のいずれか、例えば樹状細胞の活性を改変し得る修飾された（例えば、変異体の）シグナル伝達物質、例えば非限定的に以下の突然変異Ｆ６４Ａ、Ｎ６５Ａ、Ｔ６９Ａ、Ｌ８０Ａ、Ｙ８５Ａ、Ｙ８９Ａ、Ｒ１２０Ｅ、Ｒ１２０Ｅ／Ｋ１２１Ｅ、Ｋ１３３Ａ、Ｒ１４４Ａ、Ｍ１４８Ａ、Ｒ１４９Ａ、およびＬ１５３Ａの１つまたは複数を含む、インターフェロンアルファ、と共に有する。一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、樹状細胞上のＣＬＥＣ９Ａに対する標的部分と、チェックポイント阻害剤、例えば非限定的に腫瘍細胞上のＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２、に対する第二の標的部分と、本明細書に記載される修飾された（例えば、変異体の）インターフェロン剤とを有する。

非限定的例として、一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、（ｉ）例えばＳＩＲＰ１ａへの標的化により媒介される、マクロファージに対する標的部分と（ｉｉ）腫瘍細胞に対する標的部分（例えば、非限定的にチェックポイント阻害剤、例えば非限定的にＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２、へ標的することにより媒介される）を、本明細書に記載される修飾された（例えば、変異体の）シグナル伝達物質のいずれか、例えばマクロファージの活性を改変し得る修飾された（例えば、変異体の）シグナル伝達物質、例えば非限定的に以下の突然変異Ｆ６４Ａ、Ｎ６５Ａ、Ｔ６９Ａ、Ｌ８０Ａ、Ｙ８５Ａ、Ｙ８９Ａ、Ｒ１２０Ｅ、Ｒ１２０Ｅ／Ｋ１２１Ｅ、Ｋ１３３Ａ、Ｒ１４４Ａ、Ｍ１４８Ａ、Ｒ１４９Ａ、およびＬ１５３Ａの１つまたは複数を含む、インターフェロンアルファ、と共に有する。

非限定的例として、一実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、（ｉ）例えばＴＩＧＩＴまたはＫＩＲ１への標的化により媒介される、ＮＫ細胞に対する標的部分と（ｉｉ）腫瘍細胞に対する標的部分（例えば、非限定的にチェックポイント阻害剤、例えば非限定的にＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２、へ標的することにより媒介される）を、本明細書に記載される修飾された（例えば、変異体の）シグナル伝達物質のいずれか、例えばＮＫ細胞の活性を改変し得る修飾された（例えば、変異体の）シグナル伝達物質、例えば非限定的に以下の突然変異Ｆ６４Ａ、Ｎ６５Ａ、Ｔ６９Ａ、Ｌ８０Ａ、Ｙ８５Ａ、Ｙ８９Ａ、Ｒ１２０Ｅ、Ｒ１２０Ｅ／Ｋ１２１Ｅ、Ｋ１３３Ａ、Ｒ１４４Ａ、Ｍ１４８Ａ、Ｒ１４９Ａ、およびＬ１５３Ａの１つまたは複数を含む、インターフェロンアルファ、と共に有する。

様々な実施形態において、シグナル伝達物質は、毒素または毒性酵素である。幾つかの実施形態において、毒素または毒性酵素は、植物および細菌に由来する。例示的な毒素または毒性酵素としては、ジフテリア毒素、緑膿菌毒素、炭疽毒素、リボソーム不活性化タンパク質（ＲＩＰ）、例えばリシンおよびサポリン、モデクシン、アブリン、ゲロニン、およびポークウィード抗ウイルス性タンパク質が挙げられるが、これらに限定されない。さらなる毒素としては、内容全体が参照により本明細書に組み入れられるＭａｔｈｅｗ ｅｔ ａｌ．，（２００９） Ｃａｎｃｅｒ Ｓｃｉ １００（８）：１３５９−６５に開示されるものが挙げられる。そのような実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、細胞死を細胞型特異的な様式で誘導するために用いられ得る。そのような実施形態において、毒素は、例えば本明細書の他のシグナル伝達物質に記載される通り、弱化された効果のために毒素の親和性および／または活性を低減するように修飾、例えば変異され得る。

リンカー
幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は場合により、１種または複数のリンカーを含む。幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、標的部分およびシグナル伝達物質を連結するリンカーを含む。幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、シグナル伝達物質内にリンカーを含む（例えば、一本鎖ＴＮＦの場合、それは三量体を生成するように２つのリンカーを含み得る）。

幾つかの実施形態において、本明細書に記載されるリンカーのいずれかに単一ヌクレオチド配列として連結される本発明のキメラタンパク質をコードするベクターが提供され、そのようなキメラタンパク質を調製するために用いられ得る。

幾つかの実施形態において、リンカーの長さは、標的部分およびシグナル伝達物質の、それらの受容体への効率的な結合を可能にする。例えば、幾つかの実施形態において、リンカーの長さは、標的部分の１つおよびシグナル伝達物質の、同じ細胞上のそれらの受容体への効率的な結合、ならびに他の標的部分の、別の細胞への効率的な結合を可能にする。例示的な細胞の対が、本明細書の他の箇所に提供される。

幾つかの実施形態において、リンカーの長さは、標的部分の１つおよびシグナル伝達物質の同じ細胞上の受容体への結合部位間の最小距離に少なくとも等しい。幾つかの実施形態において、リンカーの長さは、標的部分の１つおよびシグナル伝達物質の同じ細胞上の受容体への結合部位間の最小距離の少なくとも２倍、または３倍、または４倍、または５倍、または１０倍、または２０倍、または２５倍、または５０倍、または１００倍である、またはより大きい。

本明細書に記載される通り、リンカーの長さは、標的部分の１つおよびシグナル伝達物質の同じ細胞上の受容体への効率的な結合を可能にし、結合は連続的であり、例えば標的部分／受容体結合がシグナル伝達物質／受容体結合に先行する。

幾つかの実施形態において、単一キメラ中に２つのリンカーが存在し、それぞれがシグナル伝達物質を標的部分に連結する。様々な実施形態において、リンカーは、疾患細胞およびエフェクター細胞を有する部位の形成を、いずれかの細胞のモジュレーションを妨害する立体障害を含まずに可能にする長さを有する。

本発明は、多様なリンカー配列の使用を企図する。様々な実施形態において、リンカーは、天然由来のマルチドメインタンパク質に由来し得るか、または例えば、内容全体が参照により本明細書に組み入れられるＣｈｉｃｈｉｌｉ ｅｔ ａｌ．，（２０１３），Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉ．２２（２）：１５３−１６７、Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ．，（２０１３），Ａｄｖ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ Ｒｅｖ．６５（１０）：１３５７−１３６９に記載される通り経験的なリンカーである。幾つかの実施形態において、リンカーは、内容全体が参照により本明細書に組み入れられるＣｈｅｎ ｅｔ ａｌ．，（２０１３），Ａｄｖ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖ Ｒｅｖ．６５（１０）：１３５７−１３６９、およびＣｒａｓｔｏ ｅｔ ａｌ．，（２０００），Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ．１３（５）：３０９−３１２に記載されるものなどのリンカー設計データベースおよびコンピュータプログラムを利用して設計され得る。様々な実施形態において、リンカーは、機能的であり得る。例えば、非限定的に、リンカーは、本発明のキメラタンパク質のフォールディングおよび／もしくは安定性を改善するように、発現を改善するように、薬物動態を改善するように、および／または生物活性を改善するように機能し得る。

幾つかの実施形態において、リンカーは、ポリペプチドである。幾つかの実施形態において、リンカーは、約１００アミノ酸長未満である。例えば、リンカーは、約１００、約９５、約９０、約８５、約８０、約７５、約７０、約６５、約６０、約５５、約５０、約４５、約４０、約３５、約３０、約２５、約２０、約１９、約１８、約１７、約１６、約１５、約１４、約１３、約１２、約１１、約１０、約９、約８、約７、約６、約５、約４、約３、または約２アミノ酸長未満であり得る。幾つかの実施形態において、リンカーは、ポリペプチドである。幾つかの実施形態において、リンカーは、約１００アミノ酸長を超える。例えば、リンカーは、約１００、約９５、約９０、約８５、約８０、約７５、約７０、約６５、約６０、約５５、約５０、約４５、約４０、約３５、約３０、約２５、約２０、約１９、約１８、約１７、約１６、約１５、約１４、約１３、約１２、約１１、約１０、約９、約８、約７、約６、約５、約４、約３、または約２アミノ酸長を超え得る。幾つかの実施形態において、リンカーは、柔軟である。別の実施形態において、リンカーは、剛性である。

幾つかの実施形態において、１つのリンカーは、２つの標的部分を互いに連結し、このリンカーは、短い長さを有し、１つのリンカーは、標的部分およびシグナル伝達物質を連結し、このリンカーは、２つの標的部分を連結するリンカーよりも長い。例えば、２つの標的部分を連結するリンカーと、標的部分とシグナル伝達物質を連結するリンカーとの間でアミノ酸長の差異は、約１００、約９５、約９０、約８５、約８０、約７５、約７０、約６５、約６０、約５５、約５０、約４５、約４０、約３５、約３０、約２５、約２０、約１９、約１８、約１７、約１６、約１５、約１４、約１３、約１２、約１１、約１０、約９、約８、約７、約６、約５、約４、約３、または約２アミノ酸長であり得る。

様々な実施形態において、リンカーは、実質的にグリシンおよびセリン残基で構成される（例えば、約３０％、または約４０％、または約５０％、または約６０％、または約７０％、または約８０％、または約９０％、または約９５％、または約９７％のグリシンおよびセリン）。例えば、幾つかの実施形態において、リンカーは、（Ｇｌｙ_４Ｓｅｒ）_ｎであり、ここで、ｎは、約１〜約８、例えば１、２、３、４、５、６、７、または８である。一実施形態において、リンカー配列は、ＧＧＳＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号３５２）である。さらなる例示的なリンカーとしては、配列ＬＥ、ＧＧＧＧＳ（配列番号３５３）、（ＧＧＧＧＳ）_ｎ（ｎ＝１〜４）（配列番号３５４）、（Ｇｌｙ）_８（配列番号３５５）、（Ｇｌｙ）_６（配列番号３５６）、（ＥＡＡＡＫ）_ｎ（ｎ＝１〜３）（配列番号３５７）、Ａ（ＥＡＡＡＫ）_ｎＡ（ｎ＝２〜５）（配列番号３５８）、ＡＥＡＡＡＫＥＡＡＡＫＡ（配列番号３５９）、Ａ（ＥＡＡＡＫ）_４ＡＬＥＡ（ＥＡＡＡＫ）_４Ａ（配列番号３６０）、ＰＡＰＡＰ（配列番号３６１）、ＫＥＳＧＳＶＳＳＥＱＬＡＱＦＲＳＬＤ（配列番号３６２）、ＥＧＫＳＳＧＳＧＳＥＳＫＳＴ（配列番号３６３）、ＧＳＡＧＳＡＡＧＳＧＥＦ（配列番号３６４）、および（ＸＰ）_ｎ（ここで、Ｘは、任意のアミノ酸、例えばＡｌａ、ＬｙｓまたはＧｌｕを表す）を有するリンカーが挙げられるが、これらに限定されない。様々な実施形態において、リンカーは、ＧＧＳである。

幾つかの実施形態において、リンカーは、抗体の（例えば、サブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４、ならびにＩｇＡ１およびＩｇＡ２）を含むＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、およびＩｇＥの）ヒンジ領域である。様々な実施形態において、リンカーは、抗体の（例えば、サブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４、ならびにＩｇＡ１およびＩｇＡ２）を含むＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、およびＩｇＥの）ヒンジ領域である。ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、およびＩｇＥクラスの抗体に見出されるヒンジ領域は、柔軟なスペーサとして作用し、Ｆａｂ部分を空間中で自由に移動させる。定常領域とは対照的に、ヒンジドメインは構造的に多様であり、免疫グロブリンクラスおよびサブクラスの間で配列および長さの両方が変動する。例えば、ヒンジ領域の長さおよび柔軟性は、ＩｇＧサブクラスの間で変動する。ＩｇＧ１のヒンジ領域はアミノ酸２１６−２３１を含み、それが自由に柔軟であるために、Ｆａｂフラｇメントは、それらの対称軸の周りを回転でき、２つの重鎖間ジスルフィド架橋の第一を中心として１つの球内で運動できる。ＩｇＧ２はＩｇＧ１よりも短いヒンジを有し、１２のアミノ酸残基および４つのジスルフィド架橋を有する。ＩｇＧ２のヒンジ領域はグリシン残基が欠如し、比較的短く、剛性のポリ−プロリン二重らせんを含み、余分の重鎖間ジスルフィド架橋により安定化される。これらの特性が、ＩｇＧ２分子の柔軟性を制限する。ＩｇＧ３は、その特有の伸長したヒンジ領域（ＩｇＧ１ヒンジの約４倍もの長さ）により他のサブクラスと異なり、６２アミノ酸を含み（２１プロリンおよび１１システインを含む）、柔軟でないポリ−プロリン二重らせんを形成する。ＩｇＧ３では、ＦａｂフラグメントはＦｃフラグメントから比較的遠く離れており、分子により大きな柔軟性を与える。ＩｇＧ３中の延長されたヒンジはまた、他のサブクラスに比較して、より高いその分子量の原因である。ＩｇＧ４のヒンジ領域は、ＩｇＧ１のものよりも短く、その柔軟性は、ＩｇＧ１とＩｇＧ２のものの中間である。ヒンジ領域の柔軟性は、報告ではＩｇＧ３＞ＩｇＧ１＞ＩｇＧ４＞ＩｇＧ２の順に低下する。

結晶学的研究によれば、免疫グロブリンのヒンジ領域はさらに、３つの領域：つまり上部ヒンジ領域、コア領域、および下部ヒンジ領域に機能的に分別され得る。Ｓｈｉｎ ｅｔ ａｌ．，１９９２ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ １３０：８７を参照されたい。上部ヒンジ領域は、Ｃ_Ｈ１のカルボキシル末端〜運動を制限するヒンジ中の第一の残基、一般には２つの重鎖の間で鎖間ジスルフィド結合を形成する第一のシステイン残基、のアミノ酸を含む。上部ヒンジ領域の長さは、抗体の区分的な柔軟性と相関する。コアヒンジ領域は重鎖間ジスルフィド架橋を含み、下部ヒンジ領域はＣ_Ｈ２ドメインのアミノ末端に接続し、Ｃ_Ｈ２中の残基を含む（同著者）。野生型ヒトＩｇＧ１のコアヒンジ領域は配列Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ｐｒｏ−Ｃｙｓを含み、これは、ジスルフィド結合の形成により二量体化されると、ピボットとして作用すると考えられる環状オクタペプチドを生じ、これにより柔軟性を付与する。様々な実施形態において、本発明のリンカーは、任意の抗体（例えば、サブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４、ならびにＩｇＡ１およびＩｇＡ２）を含むＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、およびＩｇＥの）の上部ヒンジ領域、コア領域および下部ヒンジ領域の１つ、または２つ、または３つを含む。ヒンジ領域はまた、炭水化物の付着のための複数の構造的に異なるタイプの部位を含む、１つまたは複数のグリコシル化部位を含み得る。例えば、ＩｇＡ１は、ヒンジ領域の１７アミノ酸区分内に５つのグリコシル化部位を含み、分泌性免疫グロブリンにとって有利な特性と見なされる、腸内プロテアーゼに対するヒンジ領域ポリペプチドの抵抗性を付与する。様々な実施形態において、本発明のリンカーは、１つまたは複数のグリコシル化部位を含む。様々な実施形態において、リンカーは、ヒトＩｇＧ４抗体のヒンジＣＨ２−ＣＨ３ドメインである。

所望なら、本発明のキメラタンパク質は、Ｃ_Ｈ２およびＣ_Ｈ３ドメインの一方または両方、および場合によりヒンジ領域を含む、抗体Ｆｃ領域に連結され得る。例えば、Ｆｃ領域に単一ヌクレオチド配列として連結される本発明のキメラタンパク質をコードするベクターは、そのようなポリペプチドを調製するために用いられ得る。

幾つかの実施形態において、リンカーは、ＰＥＧなどの合成リンカーである。

様々な実施形態において、リンカーは、機能的であり得る。例えば非限定的に、リンカーは、本発明のキメラタンパク質のフォールディングおよび／もしくは安定性を改善するように、発現を改善するように、薬物動態を改善するように、および／または生物活性を改善するように機能し得る。別の例において、リンカーは、キメラタンパク質を特定の細胞型または位置に標的させるように機能し得る。

キメラタンパク質の生成
本発明のキメラタンパク質を生成するための方法が、本明細書に記載される。例えば、本発明のキメラタンパク質をコードするＤＮＡ配列（例えば、修飾されたシグナル伝達物質および標的部分およびリンカーをコードするＤＮＡ配列）が、当該技術分野で公知の方法を利用して化学合成され得る。合成ＤＮＡ配列を、例えば発現制御配列を含む、他の適当なヌクレオチド配列にライゲートして、所望のキメラタンパク質をコードする遺伝子発現構築物を生成できる。したがって、様々な実施形態において、本発明は、本発明のキメラタンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む単離された核酸を提供する。

本発明のキメラタンパク質をコードする核酸は、発現ベクター中に組み入れられ得（ライゲートされ得）、トランスフェクション、形質転換、または形質導入技術を介して宿主細胞中に導入され得る。例えば、本発明のキメラタンパク質をコードする核酸は、レトロウイルス形質導入により宿主細胞中に導入され得る。例示的な宿主細胞は、大腸菌細胞、チャイニーズ・ハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、ヒト胎児腎２９３（ＨＥＫ２９３）細胞、ＨｅＬａ細胞、ベビーハムスター腎（ＢＨＫ）細胞、サル腎細胞（ＣＯＳ）、ヒト肝細胞癌の細胞（例えば、Ｈｅｐ Ｇ２）、および骨髄腫細胞である。形質転換された宿主細胞は、本発明のキメラタンパク質をコードする遺伝子を宿主細胞に発現させる条件下で成長し得る。したがって様々な実施形態において、本発明は、本発明のキメラタンパク質をコードする核酸を含む発現ベクターを提供する。様々な実施形態において、本発明はさらに、そのような発現ベクターを含む宿主細胞を提供する。

特異的発現および精製条件は、用いられる発現系に応じて変動するであろう。例えば、遺伝子が大腸菌で発現される場合、それは最初、操作された遺伝子を適切な細菌プロモーター、例えば、ＴｒｐまたはＴａｃ、および原核生物シグナル配列から下流に配置することにより、発現ベクター中にクローニングされる。別の例において、操作された遺伝子が真核生物宿主細胞、例えばＣＨＯ細胞で発現される場合、それは最初、例えば、適切な真核生物プロモーター、分泌シグナル、エンハンサー、および様々なイントロンを含む発現ベクター中に挿入される。遺伝子構築物は、トランスフェクション、形質転換、または形質導入技術を利用して宿主細胞中に導入され得る。

本発明のキメラタンパク質は、キメラタンパク質をコードする発現ベクターでトランスフェクトされた宿主細胞を、タンパク質の発現を可能にする条件下で成長させることにより、生成され得る。発現に続いて、タンパク質は、当該技術分野で周知の技術、例えばグルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼ（ＧＳＴ）およびヒスチジンタグなどのアフィニティータグを利用して、またはクロマトグラフィーにより、回収および精製され得る。

したがって、様々な実施形態において、本発明は、本発明のキメラタンパク質をコードする核酸を提供する。様々な実施形態において、本発明は、本発明のキメラタンパク質をコードする核酸を含む宿主細胞を提供する。

医薬的に許容できる塩および賦形剤
本明細書に記載されたキメラタンパク質は、医薬的に許容できる塩を形成するために、無機もしくは有機酸と反応し得る充分に塩基性の官能基、または無機もしくは有機塩基と反応し得るカルボキシル基を有し得る。医薬的に許容できる酸付加塩は、当該技術分野で周知の通り、医薬的に許容できる酸から形成される。そのような塩としては、例えば全体として参照により本明細書に組み入れられるＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ，６６，２−１９（１９７７）およびＴｈｅ Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ；Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄ Ｕｓｅ．Ｐ．Ｈ．Ｓｔａｈｌ ａｎｄ Ｃ．Ｇ．Ｗｅｒｍｕｔｈ（ｅｄｓ．），Ｖｅｒｌａｇ，Ｚｕｒｉｃｈ（Ｓｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ）２００２に列挙される医薬的に許容できる塩が挙げられる。

医薬的に許容できる塩としては、硫酸塩、クエン酸塩、酢酸塩、シュウ酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、硝酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、酸性リン酸、イソニコチン酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、酸性クエン酸、酒石酸塩、オレイン酸塩、タンニン酸塩、パントテン酸塩、重酒石酸塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩、マレイン酸塩、ゲンチシン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸塩、サッカリン酸塩、ギ酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、カンファースルホン酸塩、パモ酸塩、フェニル酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、アクリル酸塩、クロロ安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安息香酸塩、メトキシ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、ｏ−アセトキシ安息香酸塩、ナフタレン−２−安息香酸塩、イソ酪酸塩、フェニル酪酸塩、α−ヒドロキシ酪酸塩、ブチン−１，４−ジカルボン酸塩、ヘキシン−１，４−ジカルボン酸塩、カプリン酸塩、カプリル酸塩、ケイ皮酸塩、グリコール酸塩、ヘプタン酸塩、馬尿酸塩、リンゴ酸塩、ヒドロキシマレイン酸塩、マロン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、ニコチン酸塩、フタル酸塩、テレフタル酸塩、プロピオル酸塩、プロピオン酸塩、フェニルプロピオン酸塩、セバシン酸塩、スベリン酸塩、ｐ−ブロモフェニルスルホン酸塩、クロロベンゼンスルホン酸塩、エチルスルホン酸塩、２−ヒドロキシエチルスルホン酸塩、メチルスルホン酸塩、ナフタレン−１−スルホン酸塩、ナフタレン−２−スルホン酸塩、ナフタレン−１，５−スルホン酸塩、キシレンスルホン酸塩、および酒石酸塩が挙げられるが、これらに限定されない。

用語「医薬的に許容できる塩」はまた、カルボン酸官能基などの酸性官能基および塩基を有する本発明の組成物の塩を指す。適切な塩基としては、ナトリウム、カリウムおよびリチウムなどのアルカリ金属の水酸化物；カルシウムおよびマグネシウムなどのアルカリ土類金属の水酸化物；アルミニウムおよび亜鉛などの他の金属の水酸化物；アンモニア、および非置換またはヒドロキシ置換のモノ−、ジ−またはトリ−アルキルアミン、ジシクロヘキシルアミンなどの有機アミン；トリブチルアミン；ピリジン；Ｎ−メチル、Ｎ−エチルアミン；ジエチルアミン；トリエチルアミン；モノ−、ビス−、またはトリス−（２−ヒドロキシエチル）アミン、２−ヒドロキシ−ｔｅｒｔ−ブチルアミン、またはトリス−（ヒドロキシメチル）メチルアミンなどのモノ−、ビス−、またはトリス−（２−ＯＨ−低級アルキルアミン）；Ｎ，Ｎ−ジメチル−Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）アミンまたはトリ−（２−ヒドロキシエチル）アミンなどのＮ，Ｎ−ジ−低級アルキル−Ｎ−（ヒドロキシル−低級アルキル）アミン；Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン；ならびにアルギニン、リジンなどのアミノ酸などが挙げられるが、これらに限定されない。

幾つかの実施形態において、本明細書に記載される組成物は、医薬的に許容できる塩の形態である。

医薬組成物および配合剤
様々な実施形態において、本発明は、本明細書に記載されるキメラタンパク質と、医薬的に許容できる担体または賦形剤と、を含む医薬組成物に関係する。本明細書に記載される任意の医薬組成物は、医薬的に許容できる担体またはビヒクルを含む組成物の成分として、対象に投与され得る。そのような組成物は場合により、適当な投与のための形態を提供するように、適切な量の医薬的に許容できる賦形剤を含み得る。

様々な実施形態において、医薬賦形剤は、ピーナッツ油、大豆油、鉱物油、ゴマ油など、石油、動物起源、植物起源、または合成起源のものを含む、水および油などの液体であり得る。医薬賦形剤は、例えば、生理食塩水、アカシアゴム、ゼラチン、デンプンペースト、タルク、ケラチン、コロイド状シリカ、尿素などであり得る。加えて、補助剤、安定化剤、増粘剤、滑沢剤、および着色剤が、用いられ得る。一実施形態において、医薬的に許容できる賦形剤は、対象に投与される時に無菌である。本明細書に記載される任意の薬剤が静脈内投与される場合、水は有用な賦形剤である。生理食塩溶液および水性デキストロースおよびグリセロール溶液もまた、特に注射可能溶液のための、液体賦形剤として用いられ得る。適切な医薬賦形剤としては、デンプン、グルコース、ラクトース、スクロース、ゼラチン、麦芽、米、小麦、白亜、シリカゲル、ステアリン酸ナトリウム、モノステアリン酸グリセロール、タルク、塩化ナトリウム、脱脂粉乳、グリセロール、プロピレン、グリコール、水、エタノールなども挙げられる。本明細書に記載される任意の薬剤はまた、所望なら、微量の湿潤もしくは乳化剤、またはｐＨ緩衝剤を含み得る。適切な医薬賦形剤の他の例は、参照により本明細書に組み入れられる、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ １４４７−１６７６（Ａｌｆｏｎｓｏ Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ ｅｄｓ．，１９ｔｈ ｅｄ．１９９５）に記載される。

本発明は、様々な配合剤中の記載される医薬組成物（および／またはさらなる治療薬）をを含む。本明細書に記載される任意の本発明の医薬組成物（および／またはさらなる治療薬）は、溶液、懸濁液、エマルジョン、点滴薬、錠剤、丸薬、ペレット、カプセル、液体含有カプセル、ゼラチンカプセル、粉末、持続放出性配合剤、坐剤、エマルジョン、エアロゾル、スプレー、懸濁液、凍結乾燥粉末、凍結懸濁液、乾燥粉末の形態、または使用に適した任意の他の形態をとり得る。一実施形態において、組成物は、カプセルの形態である。別の実施形態において、組成物は、錠剤の形態である。さらに別の実施形態において、医薬組成物は、ソフトゲルカプセルの形態で配合される。さらなる実施形態において、医薬組成物は、ゼラチンカプセルの形態で配合される。さらに別の実施形態において、医薬組成物は、液体として配合される。

必要ならば、本発明の医薬組成物（および／またはさらなる薬剤）はまた、可溶化剤を含み得る。また、薬剤は、当該技術分野で公知の通り、適切なビヒクルまたは送達デバイスで送達され得る。本明細書に概説される併用療法剤は、単一の送達ビヒクルまたは送達デバイスで同時送達され得る。

本発明の医薬組成物（および／またはさらなる薬剤）を含む配合剤は、単位投与剤形で簡便に提供され得、薬局業界で周知の方法のいずれかにより調製され得る。そのような方法は一般に、治療薬を、１種または複数の補助成分を構成する担体と会合させるステップを含む。典型的には、配合剤は、治療薬を、液体担体、微粉砕固体担体、またはその両方と均一かつ緊密に会合させ、その後、必要に応じて、生成物を所望の配合剤（例えば、当該技術分野で公知の従来法を利用する、湿式または乾式造粒、粉末ブレンドなど、その後の打錠）の投与剤形に成形することにより調製される。

様々な実施形態において、本明細書に記載される任意の医薬組成物（および／またはさらなる薬剤）は、本明細書に記載される投与方式に適合する組成物として、日常的手順に従って配合される。

投与経路としては、例えば経口、皮内、筋肉内、腹腔内、静脈内、皮下、鼻内、硬膜外、舌下、鼻内、脳内、膣内、経皮、直腸、吸入による、または外用が挙げられる。投与は、局所または全身であり得る。幾つかの実施形態において、投与は、経口で実行される。別の実施形態において、投与は、非経口注射による。投与方式は、実施者の裁量に委ねることができ、ある程度は医学的病状の部位に依存する。ほとんどの例で、投与は、本明細書に記載される任意の薬剤の血流中への放出をもたらす。

一実施形態において、本明細書に記載されるキメラタンパク質は、経口投与に適合された組成物として日常的手順に従って配合される。経口送達用の組成物は、例えば、錠剤、ロゼンジ、水性もしくは油性懸濁液、顆粒、粉末、エマルジョン、カプセル、シロップ、またはエリキシルの形態であり得る。経口投与される組成物は、医薬品として味の良い調製剤を提供するために、１種または複数の薬剤、例えばフルクトース、アスパルテーム、またはサッカリンなどの甘味剤；ペパーミント、冬緑油またはチェリーなどの香味剤；着色剤；および防腐剤を含み得る。さらに、錠剤または丸薬の形態では、組成物は、胃腸管における崩壊および吸収を遅延するようにコーティングされ、それにより長時間にわたる持続的作用を提供できる。浸透圧で能動的に移動する本明細書に記載される任意のキメラタンパク質を取り囲む選択的に透過性の膜もまた、経口投与される組成物に適する。これらの後者の状況では、カプセル周辺の環境からの液体が、移動する化合物に吸収され、化合物が膨張して、薬剤または薬剤組成物を開口部から排出する。これらの送達状況では、即時放出配合剤の急上昇性プロファイルに反して、本質的に零次の送達プロファイルを提供し得る。モノステアリン酸グリセロールまたはステアリン酸グリセロールなどの時間遅延材料もまた、有用であり得る。経口組成物は、マンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、セルロース、および炭酸マグネシウムなどの標準的賦形剤を含み得る。一実施形態において、賦形剤は、医薬品グレードのものである。懸濁液は、活性化合物に加えて、例えば、エトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールおよびソルビタンエステル、微結晶セルロース、メタ水酸化アルミニウム、ベントナイト、寒天、トラガカントなどの懸濁剤、ならびにそれらの混合物を含有し得る。

非経口投与（例えば、静脈内、筋肉内、腹腔内、皮下、および動脈内注射および輸液）に適した投与剤形としては、例えば、溶液、懸濁液、分散液、エマルジョンなどが挙げられる。それらはまた、使用の直前に滅菌注射可能媒体に溶解または懸濁され得る、滅菌固形組成物（例えば、凍結乾燥組成物）の形態で製造され得る。それらは、例えば、当該技術分野で公知の懸濁または分散剤を含有し得る。非経口投与に適した配合成分としては、注射用の水、生理食塩溶液、不揮発油、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコールまたは他の合成溶媒などの滅菌希釈剤；ベンジルアルコールまたはメチルパラベンなどの抗菌剤；アスコルビン酸または重亜硫酸ナトリウムなどの抗酸化剤；ＥＤＴＡなどのキレート剤；酢酸塩、クエン酸塩またはリン酸塩などの緩衝剤；および塩化ナトリウムまたはデキストロースなどの張度（ｔｏｎｉｃｉｔｙ）を調整するための薬剤が挙げられる。

静脈内投与の場合、適切な担体としては、生理食塩水、静菌水、Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ ＥＬＴＭ（ＢＡＳＦ、ニュージャージー州パーシッパニー所在）またはリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）が挙げられる。担体は、製造および貯蔵の条件下で安定でなければならず、かつ微生物から防御されなければならない。担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、および液体ポリエチレングリコール）、およびそれらの適切な混合物を含有する溶媒または分散媒であり得る。

単独で、または他の適切な成分と組み合わせて、本明細書で提供される組成物は、吸入を介して投与されるエアロゾル（即ち、「噴霧される」）配合剤に作製され得る。エアロゾル配合剤は、ジクロロジフルオロメタン、プロパン、窒素などの圧縮された許容できる噴射剤の中に入れることができる。

本明細書に記載される任意の本発明の医薬組成物（および／またはさらなる薬剤）は、制御放出もしくは持続放出手段により、または当業者に周知の送達デバイスにより、投与され得る。例としては、それぞれ、全体として参照により本明細書に組み入れられる米国特許第３，８４５，７７０号；同第３，９１６，８９９号；同第３，５３６，８０９号；同第３，５９８，１２３号；同第４，００８，７１９号；同第５，６７４，５３３号；同第５，０５９，５９５号；同第５，５９１，７６７号；同第５，１２０，５４８号；同第５，０７３，５４３号；同第５，６３９，４７６号；同第５，３５４，５５６；および同第５，７３３，５５６号に記載されるものが挙げられるが、これらに限定されない。そのような投与剤形は、所望の放出プロファイルを多様な割合で提供するために、例えばヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、他のポリマーマトリックス、ゲル、透過性膜、浸透圧系、多層コーティング、微粒子、リポソーム、ミクロスフェア、またはそれらの組み合わせを用いて１種または複数の有効成分の制御放出または持続放出を提供するのに有用であり得る。本明細書に記載されるものを含む、当業者に公知の適切な制御放出または持続放出配合剤は、本明細書に記載される薬剤の有効成分との使用のために即座に選択され得る。したがって本発明は、非限定的に制御放出または持続放出に適合された錠剤、カプセル、ジェルカプセル、およびカプレットなどの経口投与に適した単一の単位投与剤形を提供する。

有効成分の制御放出または持続放出は、非限定的にｐＨの変更、温度の変更、適当な光波長による刺激、酵素の濃度もしくは利用可能性、水の濃度もしくは利用可能性、または他の生理学的条件もしくは化合物を含む、様々な条件により刺激され得る。

別の実施形態において、制御放出システムは、処置される標的エリアの付近に配置され得、それによりわずかな量の全身用量のみを必要とする（例えば、Ｇｏｏｄｓｏｎ，ｉｎ Ｍｅｄｉｃａｌ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ，ｓｕｐｒａ，ｖｏｌ．２，ｐｐ．１１５−１３８（１９８４）参照）。Ｌａｎｇｅｒ，１９９０（Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４９：１５２７−１５３３）によるレビューで議論される他の制御放出システムを、用いることもできる。

医薬配合剤は、好ましくは無菌である。滅菌は、例えば、滅菌濾過膜を通す濾過により、実現され得る。組成物が凍結乾燥される場合、フィルター滅菌は、凍結乾燥および再構成の前、または後に実行され得る。

投与および投与量
本発明により投与されるキメラタンパク質の実際の用量が、詳細な投与形態および投与方式により変動することは、理解されよう。キメラタンパク質の作用を修飾し得る多くの因子（例えば、体重、性別、食事、投与時間、投与経路、排泄率、対象の状態、薬物併用、遺伝的性質、および反応の感度）が、当業者により考慮され得る。投与は、最大耐容用量内で連続して、または１回もしくは複数回の別個の投与で実施され得る。条件の所与の設定のための最適投与速度は、従来の投薬投与テストを利用して当業者により確定され得る。

幾つかの実施形態において、キメラタンパク質の適切な投与量は、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｇ／ｋｇ対象体重、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１ｇ／ｋｇ対象体重、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１００ｍｇ／ｋｇ対象体重、約０．０１ｍｇ／ｋｇ〜約１０ｍｇ／ｋｇ対象体重、例えば、約０．０１ｍｇ／ｋｇ、約０．０２ｍｇ／ｋｇ、約０．０３ｍｇ／ｋｇ、約０．０４ｍｇ／ｋｇ、約０．０５ｍｇ／ｋｇ、約０．０６ｍｇ／ｋｇ、約０．０７ｍｇ／ｋｇ、約０．０８ｍｇ／ｋｇ、約０．０９ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ、約０．２ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ、約０．４ｍｇ／ｋｇ、約０．５ｍｇ／ｋｇ、約０．６ｍｇ／ｋｇ、約０．７ｍｇ／ｋｇ、約０．８ｍｇ／ｋｇ、約０．９ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ、約１．１ｍｇ／ｋｇ、約１．２ｍｇ／ｋｇ、約１．３ｍｇ／ｋｇ、約１．４ｍｇ／ｋｇ、約１．５ｍｇ／ｋｇ、約１．６ｍｇ／ｋｇ、約１．７ｍｇ／ｋｇ、約１．８ｍｇ／ｋｇ、１．９ｍｇ／ｋｇ、約２ｍｇ／ｋｇ、約３ｍｇ／ｋｇ、約４ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇ、約６ｍｇ／ｋｇ、約７ｍｇ／ｋｇ、約８ｍｇ／ｋｇ、約９ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇ体重、約１００ｍｇ／ｋｇ体重、約１ｇ／ｋｇ体重、約１０ｇ／ｋｇ体重（それらの全ての値および範囲を含む）の範囲である。

キメラタンパク質の個々の用量は、例えば、約０．０１ｍｇ〜約１００ｇ、約０．０１ｍｇ〜約７５ｇ、約０．０１ｍｇ〜約５０ｇ、約０．０１ｍｇ〜約２５ｇ、約０．０１ｍｇ〜約１０ｇ、約０．０１ｍｇ〜約７．５ｇ、約０．０１ｍｇ〜約５ｇ、約０．０１ｍｇ〜約２．５ｇ、約０．０１ｍｇ〜約１ｇ、約０．０１ｍｇ〜約１００ｍｇ、約０．１ｍｇ〜約１００ｍｇ、約０．１ｍｇ〜約９０ｍｇ、約０．１ｍｇ〜約８０ｍｇ、約０．１ｍｇ〜約７０ｍｇ、約０．１ｍｇ〜約６０ｍｇ、約０．１ｍｇ〜約５０ｍｇ、約０．１ｍｇ〜約４０ｍｇ有効成分、約０．１ｍｇ〜約３０ｍｇ、約０．１ｍｇ〜約２０ｍｇ、約０．１ｍｇ〜約１０ｍｇ、約０．１ｍｇ〜約５ｍｇ、約０．１ｍｇ〜約３ｍｇ、約０．１ｍｇ〜約１ｍｇ／単位投与剤形、または約５ｍｇ〜約８０ｍｇ／単位投与剤形を含む単位投与剤形（例えば、錠剤またはカプセル）で投与され得る。例えば、単位投与剤形は、約０．０１ｍｇ、約０．０２ｍｇ、約０．０３ｍｇ、約０．０４ｍｇ、約０．０５ｍｇ、約０．０６ｍｇ、約０．０７ｍｇ、約０．０８ｍｇ、約０．０９ｍｇ、約０．１ｍｇ、約０．２ｍｇ、約０．３ｍｇ、約０．４ｍｇ、約０．５ｍｇ、約０．６ｍｇ、約０．７ｍｇ、約０．８ｍｇ、約０．９ｍｇ、約１ｍｇ、約２ｍｇ、約３ｍｇ、約４ｍｇ、約５ｍｇ、約６ｍｇ、約７ｍｇ、約８ｍｇ、約９ｍｇ、約１０ｍｇ、約１５ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇ、約３０ｍｇ、約３５ｍｇ、約４０ｍｇ、約４５ｍｇ、約５０ｍｇ、約５５ｍｇ、約６０ｍｇ、約６５ｍｇ、約７０ｍｇ、約７５ｍｇ、約８０ｍｇ、約８５ｍｇ、約９０ｍｇ、約９５ｍｇ、約１００ｍｇ、約２００ｍｇ、約５００ｍｇ、約１ｇ、約２．５ｇ、約５ｇ、約１０ｇ、約２５ｇ、約５０ｇ、約７５ｇ、約１００ｇ（それらの全ての値および範囲を含む）であり得る。

一実施形態において、キメラタンパク質は、約０．０１ｍｇ〜約１００ｇ／日、約０．０１ｍｇ〜約７５ｇ／日、約０．０１ｍｇ〜約５０ｇ／日、約０．０１ｍｇ〜約２５ｇ／日、約０．０１ｍｇ〜約１０ｇ／日、約０．０１ｍｇ〜約７．５ｇ／日、約０．０１ｍｇ〜約５ｇ／日、約０．０１ｍｇ〜約２．５ｇ／日、約０．０１ｍｇ〜約１ｇ／日、約０．０１ｍｇ〜約１００ｍｇ／日、約０．１ｍｇ〜約１００ｍｇ／日、約０．１ｍｇ〜約９５ｍｇ／日、約０．１ｍｇ〜約９０ｍｇ／日、約０．１ｍｇ〜約８５ｍｇ／日、約０．１ｍｇ〜約８０ｍｇ／日、約０．１ｍｇ〜約７５ｍｇ／日、約０．１ｍｇ〜約７０ｍｇ／日、約０．１ｍｇ〜約６５ｍｇ／日、約０．１ｍｇ〜約６０ｍｇ／日、約０．１ｍｇ〜約５５ｍｇ／日、約０．１ｍｇ〜約５０ｍｇ／日、約０．１ｍｇ〜約４５ｍｇ／日、約０．１ｍｇ〜約４０ｍｇ／日、約０．１ｍｇ〜約３５ｍｇ／日、約０．１ｍｇ〜約３０ｍｇ／日、約０．１ｍｇ〜約２５ｍｇ／日、約０．１ｍｇ〜約２０ｍｇ／日、約０．１ｍｇ〜約１５ｍｇ／日、約０．１ｍｇ〜約１０ｍｇ／日、約０．１ｍｇ〜約５ｍｇ／日、約０．１ｍｇ〜約３ｍｇ／日、約０．１ｍｇ〜約１ ｍｇ／日、または約５ｍｇ〜約８０ｍｇ／日の量で投与される。様々な実施形態において、キメラタンパク質は、約０．０１ｍｇ、約０．０２ｍｇ、約０．０３ｍｇ、約０．０４ｍｇ、約０．０５ｍｇ、約０．０６ｍｇ、約０．０７ｍｇ、約０．０８ｍｇ、約０．０９ｍｇ、約０．１ｍｇ、約０．２ｍｇ、約０．３ｍｇ、約０．４ｍｇ、約０．５ｍｇ、約０．６ｍｇ、約０．７ｍｇ、約０．８ｍｇ、約０．９ｍｇ、約１ｍｇ、約２ｍｇ、約３ｍｇ、約４ｍｇ、約５ｍｇ、約６ｍｇ、約７ｍｇ、約８ｍｇ、約９ｍｇ、約１０ｍｇ、約１５ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇ、約３０ｍｇ、約３５ｍｇ、約４０ｍｇ、約４５ｍｇ、約５０ｍｇ、約５５ｍｇ、約６０ｍｇ、約６５ｍｇ、約７０ｍｇ、約７５ｍｇ、約８０ｍｇ、約８５ｍｇ、約９０ｍｇ、約９５ｍｇ、約１００ｍｇ、約２００ｍｇ、約５００ｍｇ、約１ｇ、約２．５ｇ、約５ｇ、約７．５ｇ、約１０ｇ、約２５ｇ、約５０ｇ、約７５ｇ、約１００ｇ（それらの全ての値および範囲を含む）の日用量で投与される。

本発明の特定の実施形態によれば、キメラタンパク質を含む医薬組成物は、例えば、１日あたり１回よりも多く（例えば、１日に約２回、約３回、約４回、約５回、約６回、約７回、約８回、約９回、または約１０回）、約１日に１回、約１日おき、約２日おき、約１週間に１回、約２週間に１回、約１ヶ月に１回、約２ヶ月に１回、約３ヶ月に１回、約６ヶ月に１回、または約１年に１回投与され得る。

併用療法およびさらなる治療薬
様々な実施形態において、本発明の医薬組成物は、さらなる治療薬（複数可）と併せて共投与され得る。共投与は、同時または連続であり得る。

一実施形態において、さらなる治療薬および本発明のキメラタンパク質は、対象に同時に投与される。本明細書で用いられる用語「同時に」は、さらなる治療薬とキメラタンパク質が、約３０分以下、約２０分以下、約１０分以下、約５分以下、または約１分以下などの、約６０分以下の時間的分離を有して投与される。さらなる治療薬とキメラタンパク質の投与は、単一配合剤（例えば、さらなる治療薬とキメラタンパク質とを含む配合剤）の、または別個の配合剤（例えば、さらなる治療薬を含む第一の配合剤、およびキメラタンパク質を含む第二の配合剤）の同時投与により得る。

さらなる治療薬とキメラタンパク質の薬理学的活性が時間的に重なっており、それにより複合的な治療効果を発揮するような投与のタイミングであれば、共投与は、治療薬が同時に投与されることを必要としない。例えば、さらなる治療薬とキメラタンパク質は、連続で投与され得る。本明細書で用いられる用語「連続で」は、さらなる治療薬とキメラタンパク質が約６０分よりも長い時間的分離を有して投与されることを意味する。例えば、さらなる治療薬とキメラタンパク質の連続投与の間の時間は、約６０分超、約２時間超、約５時間超、約１０時間超、約１日超、約２日超、約３日超であってよく、約１週間超離れて、約２週間超離れて、または約１ヶ月超離れていてよい。より長く空けることができる。最適な投与回数は、投与されるさらなる治療薬およびキメラタンパク質の代謝、排泄の速度、および／または薬力学的活性に依存するであろう。さらなる治療薬またはキメラタンパク質細胞のいずれかが、最初に投与され得る。

共投与はまた、治療薬が同じ投与経路により対象に投与される必要はない。むしろ各治療薬は、任意の適切な経路により、例えば非経口で、または非経口でない方法で（ｎｏｎ−ｐａｒｅｎｔｅｒａｌｌｙ）、投与され得る。

幾つかの実施形態において、本明細書に記載されるキメラタンパク質は、別の治療薬と共投与されると、相乗的に作用する。そのような実施形態において、キメラタンパク質とさらなる治療薬は、薬剤が単剤療法の状況で使用される場合に用いられる用量よりも低い用量で投与され得る。

幾つかの実施形態において、本発明は、さらなる治療薬としての化学療法剤に関係する。例えば、非限定的に、本発明のキメラタンパク質と化学療法剤のそのような併用は、本明細書の他の箇所に記載される通り、癌の処置で用途を見出す。化学療法剤の例としては、チオテパおよびＣＹＴＯＸＡＮシクロホスファミドなどのアルキル化剤；ブスルファン、インプロスルファンおよびピポスルファンなどのスルホン酸アルキル；ベンゾドパ、カルボコン、メツレドパ（ｍｅｔｕｒｅｄｏｐａ）およびウレドパ（ｕｒｅｄｏｐａ）などのアジリジン類；アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンチオホスホルアミドおよびトリメチロールメラミン（ｔｒｉｍｅｔｈｙｌｏｌｏｍｅｌａｍｉｎｅ）を含むエチレンイミン類およびメチラメラミン類（ｍｅｔｈｙｌａｍｅｌａｍｉｎｅｓ）；アセトゲニン類（例えば、ブラタシンおよびブラタシノン）；カンプトテシン（合成類似体トポテカンを含む）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ−１０６５（そのアドゼレシン、カルゼレシンおよびビゼレシン合成類似体を含む）；クリプトフィシン類（例えば、クリプトフィシン１およびクリプトフィシン８）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（合成類似体、ＫＷ−２１８９およびＣＢ１−ＴＭ１を含む）；エレウテロビン（ｅｌｅｕｔｈｅｒｏｂｉｎ）；パンクラチスタチン；サルコジクチン（ｓａｒｃｏｄｉｃｔｙｉｎ）；スポンジスタチン；クロラムブシル、クロルナファジン、クロロホスファミド（ｃｈｌｏｒｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、塩酸メクロレタミンオキシド、メルファラン、ノベムビシン（ｎｏｖｅｍｂｉｃｈｉｎ）、フェネステリン（ｐｈｅｎｅｓｔｅｒｉｎｅ）、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタードなどの窒素マスタード類；カルムスチン、クロロゾトシン、ホテムスチン、ロムスチン、ニムスチンおよびラニムヌスチンなどのニトロソウレア類；エンジイン抗生物質などの抗生物質（例えば、カリケアマイシン、特にカリケアマイシンガンマ１ＩおよびカリケアマイシンオメガＩ１（例えば、Ａｎｇｅｗ Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔｌ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．，１８３−１８６（１９９４）参照）；ダイネマイシンＡを含むダイネマイシン；クロドロネートなどのビスフォスフォネート類；エスペラマイシン；ならびにネオカルチノスタチン発色団および関連する色素タンパク質エネジイン抗生物質発色団）、アクラシノマイシン類、アクチノマイシン、アントラマイシン（ａｕｔｈｒａｍｙｃｉｎ）、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン（ｃａｒａｂｉｃｉｎ）、カルミノマイシン（ｃａｍｉｎｏｍｙｃｉｎ）、カルジノフィリン、クロモマイシン類、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、アドリアマイシン／ドキソルビシン（モルホリノ−ドキソルビシン、シアノモルホリノ−ドキソルビシン、２−ピロリノ−ドキソルビシンおよびデオキシドキソルビシンを含む）、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、マイトマイシンＣなどのマイトマイシン類、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポトフィロマイシン（ｐｏｔｆｉｒｏｍｙｃｉｎ）、プロマイシン、ケラマイシン（ｑｕｅｌａｍｙｃｉｎ）、ロドルビシン（ｒｏｄｏｒｕｂｉｃｉｎ）、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン；メトトレキサートおよび５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）などの代謝拮抗物質；デノプテリン、メトトレキサート、プテロプテリン、トリメトレキセートなどの葉酸類似体；フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニンなどのプリン類似体；アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフール、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクシウリジンなどのピリミジン類似体；カルステロン、プロピオン酸ドロモスタノロン、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトンなどのアンドロゲン類；アミノグルテチミド（ｍｉｎｏｇｌｕｔｅｔｈｉｍｉｄｅ）、ミトタン、トリロスタンなどの抗副腎剤；フロリン酸（ｆｒｏｌｉｎｉｃ ａｃｉｄ）などの葉酸補給剤；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；エニルウラシル；アムサクリン；ベストラブシル；ビスアントレン；エダトラキサート（ｅｄａｔｒａｘａｔｅ）；デメコルチン；ジアジコン；エルホルニチン（ｅｌｆｏｒｎｉｔｈｉｎｅ）；酢酸エリプチニウム（ｅｌｌｉｐｔｉｎｉｕｍ ａｃｅｔａｔｅ）；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシウレア；レンチナン；ロニダイニン；メイタンシンおよびアンサマイトシンなどのメイタンシノイド類；ミトグアゾン；ミトキサントロン；モピダンモール（ｍｏｐｉｄａｎｍｏｌ）；ニトラエリン；ペントスタチン；フェナメット（ｐｈｅｎａｍｅｔ）；ピラルビシン；ロソキサントロン；ポドフィリン酸；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ多糖類複合体（ＪＨＳ Ｎａｔｕｒａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ、オレゴン州ユージーン所在）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフィラン（ｓｉｚｏｆｕｒａｎ）；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジコン；２，２’，２’’−トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン（例えば、Ｔ−２トキシン、ベラクリン（ｖｅｒｒａｃｕｒｉｎ）Ａ、ロリジンＡおよびアングイジン（ａｎｇｕｉｄｉｎｅ））；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン（ｇａｃｙｔｏｓｉｎｅ）；アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイド類、例えば、ＴＡＸＯＬパクリタキセル（Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ、ニュージャージー州プリンストン所在）、クレモホール不含、パクリタキセルのアルブミン改変ナノ粒子製剤であるＡＢＲＡＸＡＮＥ（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐａｒｔｎｅｒｓ、イリノイ州ショームバーグ所在）、およびＴＡＸＯＴＥＲＥドセタキセル（Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ Ｒｏｒｅｒ、フランス、アントニー所在）；クロラムブシル；ＧＥＭＺＡＲゲムシタビン；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキサート；シスプラチン、オキサリプラチンおよびカルボプラチンなどの白金類似体；ビンブラスチン；白金；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ＮＡＶＥＬＢＩＮＥ ビノレルビン；ノバントロン；テニポシド；エダトレキサート；ダウノマイシン；アミノプテリン；ＸＥＬＯＤＡ；イバンドロネート；イリノテカン（Ｃａｍｐｔｏｓａｒ、ＣＰＴ−１１）（イリノテカンと５−ＦＵおよびロイコボリンとの処置レジメンを含む）；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）；レチノイン酸などのレチノイド類；カペシタビン；コンブレタスタチン；ロイコボリン（ＬＶ）；オキサリプラチン処置レジメン（ＦＯＬＦＯＸ）を含むオキサリプラチン；ラパチニブ（Ｔｙｋｅｒｂ）；細胞増殖を低減するＰＫＣ−α、Ｒａｆ、Ｈ−Ｒａｓ、ＥＧＦＲ（例えば、エルロチニブ（Ｔａｒｃｅｖａ））およびＶＥＧＦ−Ａの阻害剤；ならびに上記のいずれかの薬学的に許容される塩、酸または誘導体が挙げられるが、これらに限定されない。加えて、処置の方法は、放射線の使用をさらに含み得る。加えて、処置の方法は、光線力学療法の使用をさらに含み得る。

幾つかの実施形態において、本発明の二重特異性キメラは、ＦＭＳ様チロシンキナーゼ３リガンド（ＦＬＴ３Ｌ）と組み合わされ、例えば抗ヒトＣｌｅｃ９ａ ＶＨＨ／抗ヒトＰＤＬ１ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ−Ｒ１４９Ａ二重特異性キメラが、ＦＬＴ３Ｌと組み合わされ得る。

非限定的に感染性疾患の適用を含む幾つかの実施形態において、本発明は、さらなる治療薬としての抗感染薬に関係する。幾つかの実施形態において、抗感染薬は、非限定的にアバカビル、アシクロビル、アデフォビル、アンプレナビル、アタザナビル、シドフォビル、ダルナビル、デラビルジン、ジダノシン、ドコサノール、エファビレンツ、エルビテグラビル、エムトリシタビン、エンフビルチド、エトラビリン、ファムシクロビル、およびホスカルネットを含む抗ウイルス薬である。幾つかの実施形態において、抗感染薬は、非限定的にセファロスポリン系抗生物質（セファレキシン、セフロキシム、セファドロキシル、セファゾリン、セファロチン、セファクロル、セファマンドール、セフォキシチン、セフプロジル、およびセフトビプロール）；フルオロキノロン系抗生物質（シプロ、Ｌｅｖａｑｕｉｎ、フロキシン、Ｔｅｑｕｉｎ、アベロックス、およびノルフロックス）；テトラサイクリン系抗生物質（テトラサイクリン、ミノサイクリン、オキシテトラサイクリン、およびドキシサイクリン）；ペニシリン系抗生物質（アモキシシリン、アンピシリン、ペニシリンＶ、ジクロキサシリン、カルベニシリン、バンコマイシン、およびメチシリン）；モノバクタム系抗生物質（アズトレオナム）；およびカルバペネム系抗生物質（エルタペネム、ドリペネム、イミペネム／シラスタチン、およびメロペネム）を含む抗菌剤である。幾つかの実施形態において、抗感染薬としては、抗マラリア薬（例えば、クロロキン、キニン、メフロキン、プリマキン、ドキシサイクリン、アルテメーテル／ルメファントリン、アトバコン／プログアニルおよびスルファドキシン／ピリメタミン）、メトロニダゾール、チニダゾール、イベルメクチン、パモ酸ピランテル、およびアルベンダゾールが挙げられる。

非限定的に自己免疫適用を含む幾つかの実施形態において、さらなる治療薬は、免疫抑制剤である。幾つかの実施形態において、免疫抑制剤は、ステロイド性抗炎症剤または非ステロイド性抗炎症剤（ＮＳＡＩＤ）などの抗炎症剤である。ステロイド、特に副腎皮質ステロイドおよびその合成類似体は、当該技術分野で周知である。本発明に有用な副腎皮質ステロイドの例としては、ヒドロキシトリアムシノロン、アルファメチルデキサメタゾン、ベータメチルベタメタゾン、ジプロピオン酸ベクロメタゾン、安息香酸ベタメタゾン、ジプロピオン酸ベタメタゾン、吉草酸ベタメタゾン、吉草酸クロベタゾール、デソニド、デスオキシメタゾン、デキサメタゾン、二酢酸ジフロラゾン、吉草酸ジフルコルトロン、フルアドレノロン、フルクロロロンアセトニド、ピバル酸フルメタゾン、フルオシノロンアセトニド、フルオシノニド、フルコルチン（ｆｌｕｃｏｒｔｉｎｅ）ブチルエステル、フルオコルトロン、酢酸フルプレドニデン（フルプレドニリデン）、フルランドレノロン、ハルシノニド、酢酸ヒドロコルチゾン、酪酸ヒドロコルチゾン、メチルプレドニゾロン、トリアムシノロンアセトニド、コルチゾン、コルトドキソン、フルセトニド、フルドロコルチゾン、二酢酸ジフルオロゾン、フルラドレノロン（ｆｌｕｒａｄｒｅｎｏｌｏｎｅ）アセトニド、メドリゾン、アムシナフェル、アムシナフィド、ベタメタゾンおよびそのエステルのバランス（ｂａｌａｎｃｅ）、クロロプレドニゾン、クロコルトロン（ｃｌｏｃｏｒｔｅｌｏｎｅ）、クレスシノロン（ｃｌｅｓｃｉｎｏｌｏｎｅ）、ジクロリゾン、ジフルプレドナート、フルクロロニド、フルニソリド、フルオロメタロン、フルペロロン、フルプレドニゾロン、ヒドロコルチゾン、メプレドニゾン、パラメタゾン、プレドニゾロン、プレドニゾン、ジプロピオン酸ベクロメタゾンが挙げられるが、これらに限定されない。本発明で用いられ得る（ＮＳＡＩＤＳ）としては、サリチル酸、アセチルサリチル酸、サリチル酸メチル、サリチル酸グリコール、サリチルミド（ｓａｌｉｃｙｌｍｉｄｅ）、ベンジル−２，５−ジアセトキシ安息香酸、イブプロフェン、フリンダク（ｆｕｌｉｎｄａｃ）、ナプロキセン、ケトプロフェン、エトフェナマート、フェニルブタゾン、およびインドメタシンが挙げられるが、これらに限定されない。幾つかの実施形態において、免疫抑制剤は、アルキル化剤、代謝抑制剤（例えば、アザチオプリン、メトトレキサート）、細胞障害性抗生物質、抗体（例えば、バシリキシマブ、ダクリズマブおよびムロモナブ）、抗イムノフィリン剤（例えば、シクロスポリン、タクロリムス、シロリムス）、インテフェロン、オピオイド、ＴＮＦ結合タンパク質、ミコフェノラート、および低分子生物製剤（例えば、フィンゴリモド、ミリオシン）などの細胞増殖阻害薬であり得る。さらなる抗炎症剤は、例えば内容全体が参照により本明細書に組み入れられる米国特許第４，５３７，７７６号に記載されている。

幾つかの実施形態において、本発明は、さらなる治療薬として肥満を処置するために用いられる様々な薬剤に関係する。肥満を処置するために用いられる例示的な薬剤としては、オルリスタット（例えば、ＡＬＬ１、ＸＥＮＩＣＡＬ）、ロラカセリン（例えば、ＢＥＬＶＩＱ）、フェンテルミン−トピラマート（例えば、ＱＳＹＭＩＡ）、シブトラメ（ｓｉｂｕｔｒａｍｍｅ）（例えば、ＲＥＤＵＣＴＩＬまたはＭＥＲＪＤＩＡ）、リモナバント（ＡＣＯＭＰＬＬＡ）、エキセナチド（例えば、ＢＹＥＴＴＡ）、プラムリンチド（例えば、ＳＹＭＬＩＮ）フェンテルミン、ベンズフェタミン、ジエチルプロピオン、フェンジメトラズム（ｐｈｅｎｄｉｍｅｔｒａｚｍｅ）、ブプロピオン、およびメトホルミンが挙げられるが、これらに限定されない。食物中の特異的栄養素を吸収する身体能力を妨害する薬剤、例えばオルリスタット（例えば、ＡＬＵ、ＸＥＮＩＣＡＬ）、グルコマンナン、およびグアーガムは、さらなる薬剤である。食欲を抑制する薬剤、例えばカテコールアミンおよびその誘導体（フェンテルミンおよび他のアンフェタミン系薬物など）、様々な抗うつ剤および気分安定剤（例えば、ブプロピオンおよびトピラマート）、食欲減退薬（例えば、デキセドリン、ジゴキシン）もまた、さらなる薬剤である。身体の代謝を上昇させる薬剤もまた、さらなる薬剤である。

幾つかの実施形態において、さらなる治療薬が、食欲抑制剤、神経伝達物質再取り込み阻害剤、ドーパミン作動性アゴニスト、セロトニン作動性アゴニスト、ＧＡＢＡ作動性シグナル伝達のモジュレーター、抗けいれん薬、抗うつ剤、モノアミンオキシダーゼ阻害剤、サブスタンスＰ（ＮＫ１）受容体アンタゴニスト、メラノコルチン受容体アゴニストおよびアンタゴニスト、リパーゼ阻害剤、脂肪吸収の阻害剤、エネルギー取込みまたは代謝の調節物質、カンナビノイド受容体モジュレーター、依存症を処置する薬剤、メタボリックシンドロームを処置する薬剤、ペルオキシソーム増殖剤活性化受容体（ＰＰＡＲ）モジュレーター、ジペプチジル（ｄｉｐｃｐｔｉｄｙｌ）ペプチダーゼ４（ＤＰＰ−４）アンタゴニスト、心臓血管疾患を処置するための薬剤、トリグリセリドレベル上昇を処置するための薬剤、低ＨＤＬを処置するための薬剤、高コレステロール血症を処置するための薬剤、ならびに高血圧を処置するための薬剤の中から選択され得る。心臓血管疾患のための幾つかの薬剤としては、スタチン（例えば、ロバスタチン、アトルバスタチン、フルバスタチン、ロスバスタチン、シンバスタチンおよびプラバスタチン）およびオメガ−３剤（例えば、ＬＯＶＡＺＡ、ＥＰＡＮＱＶＡ、ＶＡＳＣＥＰＡ、エステル化オメガ−３、一般には魚油、オキアミ油、藻類オイル）が挙げられる。幾つかの実施形態において、さらなる薬剤は、アンフェタミン、ベンゾジアゼピン、スルホニルウレア（ｓｕｉｆｏｎｙｌ ｕｒｅａｓ）、メグリチニド、チアゾリジンジオン、ビグアニド、ベータブロッカー、ＸＣＥ阻害剤、利尿剤、硝酸塩、カルシウムチャネルブロッカー、フェンテルミン（ｐｈｅｎｌｅｒｍｉｎｅ）、シブトラミン、ロルカセリン（ｉｏｒｃａｓｅｒｉｎ）、セチリスタット、リモナバント、タラナバント、トピラマート、ガバペンチン、バルプロ酸塩、ビガバトリン、ブプロピオン、チアガビン、セルトラリン、フルオキセチン、トラゾドン、ゾニサミド、メチルフェニデート、バレニクリン、ナルトレキソン、ジエチルプロピオン、フェンジメトラジン、レパグリニド（ｒｃｐａｇｌｉｎｉ．ｄｅ）、ナテグリニド、グリメピリド、メトホルミン、ピオグリタゾン、ロシグリタゾン、およびシタグリプチンの中から選択され得る。

幾つかの実施形態において、本発明は、さらなる治療薬として糖尿病を処置するために用いられる薬剤に関係する。例示的な抗糖尿病薬としては、スルホニルウレア（例えば、ＤＹＭＥＬＯＲ（アセトヘキサミド）、ＤＩＡＢＩＮＥＳＥ（クロルプロパミド）、ＯＲＩＮＡＳＥ（トルブタミド）、およびＴＯＬＩＮＡＳＥ（トラザミド）、ＧＬＵＣＯＴＲＯＬ（グリピジド）、ＧＬＵＣＯＴＲＯＬ ＸＬ（長期放出性）、ＤＩＡＢＥＴＡ（グリブリド）、ＭＩＣＲＯＮＡＳＥ（グリブリド）、ＧＬＹＮＡＳＥ ＰＲＥＳＴＡＢ（グリブリド）、およびＡＭＡＲＹＬ（グリメピリド））；ビアグニド（例えば、メトホルミン（ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥ、ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥ ＸＲ、ＲＩＯＭＥＴ、ＦＯＲＴＡＭＥＴ、およびＧＬＵＭＥＴＺＡ））；チアゾリジンジオン（例えば、ＡＣＴＯＳ（ピオグリタゾン）およびＡＶＡＮＤＩＡ（ロシグリタゾン）；アルファグルコシダーゼ阻害剤（例えば、ＰＲＥＣＯＳＥ（アカルボース）およびＧＬＹＳＥＴ（ミグリトール）；メグリチニド（例えば、ＰＲＡＮＤＩＮ（レパグリニド）およびＳＴＡＲＬＩＸ（ナテグリニド））；ジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰ−ＩＶ）阻害剤（例えば、ＪＡＮＵＶＩＡ（シタグリプチン）、ＮＥＳＩＮＡ（アログリプチン）、ＯＮＧＬＹＺＡ（サキサグリプチン）、およびＴＲＡＤＪＥＮＴＡ（リナグリプチン））；ナトリウム−グルコース共輸送体２（ＳＧＬＴ２）阻害剤（例えば、ＩＮＶＯＫＡＮＡ（カナグリフロジン（ｃａｎａｇｌｉｆｏｚｉｎ））；および混合丸薬（例えば、グリブリド（スルホニルウレア）とメトホルミンを組み合わせたＧＬＵＣＯＶＡＮＣＥ、グリピジド（スルホニルウレア）とメトホルミンを組み合わせたＭＥＴＡＧＬＩＰ、およびメトホルミンとロシグリタゾン（ＡＶＡＮＤＩＡ）の両方を１つの丸薬中で使用するＡＶＡＮＤＡＭＥＴ、ＫＡＺＡＮＯ（アログリプチンおよびメトホルミン）、ＯＳＥＮＩ（アログリプチン＋ピオグリタゾン）、ＭＥＴＦＯＲＭＩＮ経口薬、ＡＣＴＯＳ経口薬、ＢＹＥＴＴＡ皮下薬、ＪＡＮＵＶＩＡ経口薬、ＷＥＬＣＨＯＬ経口薬、ＪＡＮＵＭＥＴ経口薬、グリピジド経口薬、グリメピリド経口薬、ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥ経口薬、ＬＡＮＴＵＳ皮下薬、グリブリド経口薬、ＯＮＧＬＹＺＡ経口薬、ＡＭＡＲＹｌ経口薬、ＬＡＮＴＵＳ ＳＯＬＯＳＴＡＲ皮下薬、ＢＹＤＵＲＥＯＮ皮下薬、ＬＥＶＥＭＩＲ ＦＬＥＸＰＥＮ皮下薬、ＡＣＴＯＰＬＵＳ ＭＥＴ経口薬、ＧＬＵＭＥＴＺＡ経口薬、ＴＲＡＤＪＥＮＴＡ経口薬、ブロモクリプチン経口薬、ＫＯＭＢＩＧＬＹＺＥ ＸＲ経口薬、ＩＮＶＯＫＡＮＡ経口薬、ＰＲＡＮＤＩＮ経口薬、ＬＥＶＥＭＩＲ皮下薬、ＰＡＲＬＯＤＥＬ経口薬、ピオグリタゾン経口薬、ＮＯＶＯＬＯＧ皮下薬、ＮＯＶＯＬＯＧ ＦＬＥＸＰＥＮ皮下薬、ＶＩＣＴＯＺＡ ２−ＰＡＫ皮下薬、ＨＵＭＡＬＯＧ皮下薬、ＳＴＡＲＬＩＸ経口薬、ＦＯＲＴＡＭＥＴ経口薬、ＧＬＵＣＯＶＡＮＣＥ経口薬、ＧＬＵＣＯＰＨＡＧＥ ＸＲ経口薬、ＮＯＶＯＬＯＧ Ｍｉｘ ７０−３０ ＦＬＥＸＰＥＮ皮下薬、ＧＬＹＢＵＲＩＤＥ−ＭＥＴＦＯＲＭＩＮ経口薬、アカルボース経口薬、ＳＹＭＬＩＮＰＥＮ ６０皮下薬、ＧＬＵＣＯＴＲＯｌ ＸＬ経口薬、ＮＯＶＯＬＩＮ Ｒ注射薬、ＧＬＵＣＯＴＲＯＬ経口薬、ＤＵＥＴＡＣＴ経口薬、シタグリプチン経口薬、ＳＹＭＬＩＮＰＥＮ １２０皮下薬、ＨＵＭＡＬＯＧ ＫＷＩＫＰＥＮ皮下薬、ＪＡＮＵＭＥＴ ＸＲ経口薬、ＧＬＩＰＩＺＩＤＥ−ＭＥＴＦＯＲＭＩＮ経口薬、ＣＹＣＬＯＳＥＴ経口薬、ＨＵＭＡＬＯＧ ＭＩＸ ７５−２５皮下薬、ナテグリニド経口薬、ＨＵＭＡＬＯＧ Ｍｉｘ ７５−２５ ＫＷＩＫＰＥＮ皮下薬、ＨＵＭＵＬＩＮ ７０／３０皮下薬、ＰＲＥＣＯＳＥ経口薬、ＡＰＩＤＲＡ皮下薬、Ｈｕｍｕｌｉｎ Ｒ注、Ｊｅｎｔａｄｕｅｔｏ経口薬、Ｖｉｃｔｏｚａ ３−Ｐａｋ皮下薬、Ｎｏｖｏｌｉｎ ７０／３０皮下薬、ＮＯＶＯＬＩＮ Ｎ皮下薬、インスリン・デテミル皮下薬、グリブリド・マイクロナイズド経口薬、ＧＬＹＮＡＳＥ経口薬、ＨＵＭＵＬＩＮ Ｎ皮下薬、インスリン・グラルギン皮下薬、ＲＩＯＭＥＴ経口薬、ピオグリタゾン−メトホルミン経口薬、ＡＰＩＤＲＡ ＳＯＬＯＳＴＡＲ皮下薬、インスリン・リスプロ皮下薬、ＧＬＹＳＥＴ経口薬、ＨＵＭＵＬＩＮ ７０／３０ Ｐｅｎ皮下薬、コレセベラム経口薬、シタグリプチン−メトホルミン経口薬、ＤＩＡＢＥＴＡ経口薬、レギュラーヒトインスリン注、ＨＵＭＵＬＩＮ Ｎ Ｐｅｎ皮下薬、エキセナチド皮下薬、ＨＵＭＡＬＯＧ Ｍｉｘ ５０−５０ ＫＷＩＫＰＥＮ皮下薬、リラグチド皮下薬、ＫＡＺＡＮＯ経口薬、レパグリニド経口薬、クロルプロパミド経口薬、インスリン・アスパルト皮下薬、ＮＯＶＯＬＯＧ Ｍｉｘ ７０−３０皮下薬、ＨＵＭＡＬＯＧ Ｍｉｘ ５０−５０皮下薬、サキサグリプチン経口薬、ＡＣＴＯＰＬＵＳ Ｍｅｔ ＸＲ経口薬、ミグリトール経口薬、ＮＰＨ ヒト組換え体インスリン皮下薬、インスリンＮＰＨおよびレギュラーヒト皮下薬、トラザミド経口薬、ミフェプリストン経口薬、インスリン・アスパルト プロタム−インスリン・アスパルト皮下薬、レパグリニド−メトホルミン経口薬、サキサグリプチン−メトホルミン経口薬、リナグリプチン−メトホルミン経口薬、ＮＥＳＩＮＡ経口薬、ＯＳＥＮＩ経口薬、トルブタミド経口薬、インスリン・リスプロ・プロタミンおよびリスプロ皮下薬、プラムリンチド皮下薬、インスリン・グルリシン皮下薬、ピオグリタゾン−グリメピリド経口薬、ＰＲＡＮＤＩＭＥＴ経口薬、ＮＯＶＯＬＯＧ ＰｅｎＦｉｌｌ皮下薬、リナグリプチン経口薬、エキセナチド・ミクロスフェア皮下薬、ＫＯＲＬＹＭ経口薬、アログリプチン経口薬、アログリプチン−ピオグリタゾン経口薬、アログリプチン−メトホルミン経口薬、カナグリフロジン経口薬、Ｌｉｓｐｒｏ（ＨＵＭＡＬＯＧ）；アスパルト（ＮＯＶＯＬＯＧ）；グルリジン（ＡＰＩＤＲＡ）；レギュラー（ＮＯＶＯＬＩＮ ＲまたはＨＵＭＵＬＩＮ Ｒ）；ＮＰＨ（ＮＯＶＯＬＩＮ ＮまたはＨＵＭＵＬＩＮ Ｎ）；グラルギン（ＬＡＮＴＵＳ）；デテミル（ＬＥＶＥＭＩＲ）；ＨＵＭＵＬＩＮまたはＮＯＶＯＬＩＮ７０／３０；ならびにＮＯＶＯＬＯＧ Ｍｉｘ７０／３０ ＨＵＭＡＬＯＧ Ｍｉｘ７５／２５または５０／５０が挙げられるが、これらに限定されない。

幾つかの実施形態において、本発明は、輸血との併用療法に関する。例えば、本発明の組成物は、輸血を補足し得る。幾つかの実施形態において、本発明は、鉄補給剤との併用療法に関する。

幾つかの実施形態において、本発明は、１種または複数のＥＰＯ系薬剤との併用療法に関する。例えば本発明の組成物は、他のＥＰＯ系薬剤へのアジュバントとして用いられ得る。幾つかの実施形態において、本発明の組成物は、他のＥＰＯ系薬剤への維持療法として用いられる。他のＥＰＯ系薬剤としては、以下のものが挙げられる：非限定的に、ダルベポエチン（ＡＲＡＮＥＳＰ）、ＥＰＯＣＥＰＴ（ＬＵＰＩＮ ＰＨＡＲＭＡ）、ＮＡＮＯＫＩＮＥ（ＮＡＮＯＧＥＮ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ）、ＥＰＯＦＩＴ（ＩＮＴＡＳ ＰＨＡＲＭＡ）、ＥＰＯＧＥＮ（ＡＭＧＥＮ）、ＥＰＯＧＩＮ、ＥＰＲＥＸ、（ＪＡＮＳＳＥＮ−ＣＩＬＡＧ）、ＢＩＮＯＣＲＩＴ（ＳＡＮＤＯＺ）、ＰＲＯＣＲＩＴを含むエポエチンアルファ；非限定的に、ＮＥＯＲＥＣＯＲＭＯＮ（ＨＯＦＦＭＡＮＮ−ＬＡ ＲＯＣＨＥ）、ＲＥＣＯＲＭＯＮ、メトキシポリエチレングリコール−エポエチンベータ（ＭＩＲＣＥＲＡ、ＲＯＣＨＥ）を含むエポエチンベータ；非限定的に、ＤＹＮＥＰＯ（赤血球生成刺激タンパク質、ＳＨＩＲＥ ＰＬＣ）を含むエポエチンデルタ；非限定的にＥＰＯＭＡＸを含むエポエチンオメガ；非限定的に、ＳＩＬＡＰＯ（ＳＴＡＤＡ）およびＲＥＴＡＣＲＩＴ（ＨＯＳＰＩＲＡ）を含むエポエチンゼッタ、ならびに他のＥＰＯ、例えば非限定的にＥＰＯＣＥＰＴ（ＬＵＰＩＮ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬＳ）、ＥＰＯＴＲＵＳＴ（ＰＡＮＡＣＥＡ ＢＩＯＴＥＣ ＬＴＤ）、ＥＲＹＰＲＯ ＳＡＦＥ（ＢＩＯＣＯＮ ＬＴＤ．）、ＲＥＰＯＩＴＩＮ（ＳＥＲＵＭ ＩＮＳＴＩＴＵＴＥ ＯＦ ＩＮＤＩＡ ＬＩＭＩＴＥＤ）、ＶＩＮＴＯＲ（ＥＭＣＵＲＥ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬＳ）、ＥＰＯＦＩＴ（ＩＮＴＡＳ ＰＨＡＲＭＡ）、ＥＲＹＫＩＮＥ（ＩＮＴＡＳ ＢＩＯＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡ）、ＷＥＰＯＸ（ＷＯＣＫＨＡＲＤＴ ＢＩＯＴＥＣＨ）、ＥＳＰＯＧＥＮ（ＬＧ ＬＩＦＥ ＳＣＩＥＮＣＥＳ）、ＲＥＬＩＰＯＩＥＴＩＮ（ＲＥＬＩＡＮＣＥ ＬＩＦＥ ＳＣＩＥＮＣＥＳ）、ＳＨＡＮＰＯＩＥＴＩＮ（ＳＨＡＮＴＨＡ ＢＩＯＴＥＣＨＮＩＣＳ ＬＴＤ）、ＺＹＲＯＰ（ＣＡＤＩＬＡ ＨＥＡＬＴＨＣＡＲＥ ＬＴＤ．）、ＥＰＩＡＯ（ＲＨＵＥＰＯ）（ＳＨＥＮＹＡＮＧ ＳＵＮＳＨＩＮＥ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ ＣＯ． ＬＴＤ）、ＣＩＮＮＡＰＯＩＥＴＩＮ（ＣＩＮＮＡＧＥＮ）。

幾つかの実施形態において、本発明は、１つまたは複数の免疫調整剤、例えば、非限定的に、免疫チェックポイントをモジュレートする薬剤、との併用療法に関する。様々な実施形態において、免疫調整剤は、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、およびＰＤ−Ｌ２の１つまたは複数を標的とする。様々な実施形態において、免疫調整剤は、ＰＤ−１阻害剤である。様々な実施形態において、免疫調整剤は、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、およびＰＤ−Ｌ２の１つまたは複数に特異的な抗体である。例えば、幾つかの実施形態において、免疫調整剤は、非限定的に、ニボルマブ、（ＯＮＯ−４５３８／ＢＭＳ−９３６５５８、ＭＤＸ１１０６、ＯＰＤＩＶＯ、ＢＲＩＳＴＯＬ ＭＹＥＲＳ ＳＱＵＩＢＢ）、ペンブロリズマブ（ＫＥＹＴＲＵＤＡ、ＭＥＲＣＫ）、ピジリズマブ（ＣＴ−０１１、ＣＵＲＥ ＴＥＣＨ）、ＭＫ−３４７５（ＭＥＲＣＫ）、ＢＭＳ ９３６５５９（ＢＲＩＳＴＯＬ ＭＹＥＲＳ ＳＱＵＩＢＢ）、ＭＰＤＬ３２８ＯＡ（ＲＯＣＨＥ）などの抗体である。幾つかの実施形態において、免疫調整剤は、ＣＤ１３７またはＣＤ１３７Ｌの１つまたは複数を標的とする。様々な実施形態において、免疫調整剤は、ＣＤ１３７またはＣＤ１３７Ｌの１つまたは複数に特異的な抗体である。例えば、幾つかの実施形態において、免疫調整剤は、非限定的にウレルマブ（ＢＭＳ−６６３５１３および抗４−１ＢＢ抗体としても公知）などの抗体である。幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、固形腫瘍および／またはＢ細胞非ホジキンリンパ腫および／または頭頸部癌および／または多発性骨髄腫の処置のためにウレルマブと（場合によりニボルマブ、リリルマブおよびウレルマブのうちの１つまたは複数と）組み合わされる。幾つかの実施形態において、免疫調整剤は、ＣＴＬＡ−４、ＡＰ２Ｍ１、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＳＨＰ−２、およびＰＰＰ２Ｒ５Ａの１つまたは複数を標的とする薬剤である。様々な実施形態において、免疫調整剤は、ＣＴＬＡ−４、ＡＰ２Ｍ１、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＳＨＰ−２、およびＰＰＰ２Ｒ５Ａの１つまたは複数に特異的な抗体である。例えば、幾つかの実施形態において、免疫調整剤は、非限定的にイピリムマブ（ＭＤＸ−０１０、ＭＤＸ−１０１、Ｙｅｒｖｏｙ、ＢＭＳ）および／またはトレメリムマブ（Ｐｆｉｚｅｒ）などの抗体である。幾つかの実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、黒色腫、前立腺癌、および肺癌の１つまたは複数の処置のためにイピリムマブと（場合によりバビツキシマブと）組み合わされる。様々な実施形態において、免疫調整剤は、ＣＤ２０を標的とする。様々な実施形態において、免疫調整剤は、ＣＤ２０に特異的な抗体である。例えば、幾つかの実施形態において、免疫調整剤は、非限定的にオファツムマブ（ＧＥＮＭＡＢ）、オビヌツズマブ（ＧＡＺＹＶＡ）、ＡＭＥ−１３３ｖ（ＡＰＰＬＩＥＤ ＭＯＬＥＣＵＬＡＲ ＥＶＯＬＵＴＩＯＮ）、オクレリズマブ（ＧＥＮＥＮＴＥＣＨ）、ＴＲＵ−０１５（ＴＲＵＢＩＯＮ／ＥＭＥＲＧＥＮＴ）、ベルツズマブ（ＩＭＭＵ−１０６）などの抗体である。

幾つかの実施形態において、本発明は、内容全体が参照により本明細書に組み入れられる、ＷＯ２０１３／１０７７９、ＷＯ２０１５／００７５３６、ＷＯ２０１５／００７５２０、ＷＯ２０１５／００７５４２、およびＷＯ２０１５／００７９０３に記載される１種または複数のキメラ物質との併用療法に関する。

幾つかの実施形態において、本明細書に記載されるキメラタンパク質は、修飾された誘導体、即ち共有結合が組成物の活性を妨害しないような、組成物への任意のタイプの分子の共有結合による誘導体を包含する。例えば、非限定的に、誘導体は、とりわけ、グリコシル化、脂質化、アセチル化、ペグ化、リン酸化、アミド化、公知の保護／ブロッキング基による誘導体化、タンパク質分解性切断、細胞リガンドまたは他のタンパク質への連結などにより修飾されている組成物を含む。数多くの化学的修飾のいずれかが、非限定的に特異的な化学的切断、アセチル化、ホルミル化、ツニカマイシンの代謝合成などの公知の技術により実施され得る。

さらに別の実施形態において、本明細書に記載されるキメラタンパク質は、例示的実施形態において、毒素、化学療法剤、放射性同位体、およびアポトーシスまたは細胞死を誘発する薬剤を含む、細胞障害剤をさらに含む。そのような薬剤は、本明細書に記載される組成物にコンジュゲートされ得る。

したがって本明細書に記載されるキメラタンパク質は、翻訳後修飾されて、化学的リンカーなどのエフェクター部分、例えば蛍光色素、酵素、基質、生物発光材料、放射性材料、および化学発光部分などの検出可能な部分、または例えばストレプトアビジン、アビジン、ビオチン、細胞毒、細胞障害剤、および放射性材料などの機能的部分を付加し得る。

例示的な細胞障害剤としては、メトトレキサート、アミノプテリン、６−メルカプトプリン、６−チオグアニン、シタラビン、５−フルオロウラシルデカルバジン；メクロレタミン、チオエパ（ｔｈｉｏｅｐａ）・クロラムブシル、メルファラン、カルムスチン（ＢＳＮＵ）、マイトマイシンＣ、ロムスチン（ＣＣＮＵ）、１−メチルニトロソウレア、シクロホスファミド（ｃｙｃｌｏｔｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ）、メクロレタミン、ブスルファン、ジブロモマンニトール、ストレプトゾトシン、マイトマイシンＣ、シスジクロロジアミン白金（ＩＩ）（ＤＤＰ）シスプラチンおよびカルボプラチン（パラプラチン）などのアルキル化剤；ダウノルビシン（以前はダウノマイシン）、ドキソルビシン（アドリアマイシン）、デトルビシン、カルミノマイシン、イダルビシン、エピルビシン、ミトキサントロンおよびビサントレンを含むアントラサイクリン；ダクチノマイシン（アクチノマイシンＤ）、ブレオマイシン、カリケアマイシン、ミトラマイシン、およびアントラマイシン（ＡＭＣ）を含む抗生物質；ならびにビンカアルカロイド、ビンクリスチン、およびビンブラスチンなどの有糸分裂阻害剤が挙げられるが、これらに限定されない。他の細胞障害剤としては、パクリタキセル（Ｔａｘｏｌ）、リシン、緑膿菌外毒素、ゲムシタビン、サイトカラシンＢ、グラミシジンＤ、臭化エチジウム、エメチン、エトポシド、テノポシド、コルヒチン、ジヒドロキシアントラシンジオン、１−デヒドロテストステロン、グルココルチコイド、プロカイン、テトラカイン、リドカイン、プロプラノロール、ピューロマイシン、プロカルバジン、ヒドロキシウレア、アスパラギナーゼ、副腎皮質ステロイド、ミトタン（Ｏ，Ｐ’−（ＤＤＤ））、インターフェロン、およびこれらの細胞障害剤の混合物が挙げられる。

さらなる細胞障害剤としては、カルボプラチン、シスプラチン、パクリタキセル、ゲムシタビン、カリケアマイシン、ドキソルビシン、５−フルオロウラシル、マイトマイシンＣ、アクチノマイシンＤ、シクロホスファミド、ビンクリスチン、ブレオマイシン、ＶＥＧＦアンタゴニスト、ＥＧＦＲアンタゴニスト、プラチン（ｐｌａｔｉｎｓ）、Ｔａｘｏｌ、イリノテカン、５−フルオロウラシル、ゲムシタビン、ロイコボリン、ステロイド類、シクロホスファミド、メルファラン、ビンカアルカロイド（例えば、ビンブラスチン、ビンクリスチン、ビンデシンおよびビノレルビン）、ムスチン、チロシンキナーゼ阻害剤、放射線療法剤、性ホルモンアンタゴニスト、選択的アンドロゲン受容体モジュレーター、選択的エストロゲン受容体モジュレーター、ＰＤＧＦアンタゴニスト、ＴＮＦアンタゴニスト、ＩＬ−１アンタゴニスト、インターロイキン（例えば、ＩＬ−１２またはＩＬ−２）、ＩＬ−１２Ｒアンタゴニスト、毒素結合モノクローナル抗体、腫瘍抗原特異的モノクローナル抗体、Ｅｒｂｉｔｕｘ、Ａｖａｓｔｉｎ、ペルツズマブ、抗ＣＤ２０抗体、Ｒｉｔｕｘａｎ、オクレリズマブ、オファツムマブ、ＤＸＬ６２５、ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標）などの化学療法剤、またはそれらの任意の組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。リシン、ジフテリア毒素、および緑膿菌毒素などの植物および細菌からの毒性酵素を、治療薬（例えば、抗体）にコンジュゲートして、細胞型に特異的な殺傷試薬を生成できる（Ｙｏｕｌｅ，ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７７：５４８３ １９８０）；Ｇｉｌｌｉｌａｎｄ，ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７７：４５３９（１９８０）；Ｋｒｏｌｉｃｋ，ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７７：５４１９（１９８０））。

他の細胞障害剤としては、Ｇｏｌｄｅｎｂｅｒｇによる米国特許第６，６５３，１０４号に記載される細胞障害性リボヌクレアーゼが挙げられる。本発明の実施形態はまた、アルファまたはベータ粒子を放出する放射性核種が錯体形成剤の使用により、またはその使用によらず、キメラタンパク質に安定してカップリングされる、放射性イムノコンジュゲートに関する。そのような放射性核種としては、リン−３２、スカンジウム−４７、銅−６７、ガリウム−６７、イットリウム−８８、イットリウム−９０、ヨウ素−１２５、ヨウ素−１３１、サマリウム−１５３、ルテチウム−１７７、レニウム−１８６またはレニウム−１８８などのベータ放射体、およびアスタチン−２１１、鉛−２１２、ビスマス−２１２、ビスマス−２１３またはアクチニウム−２２５などのアルファ放射体が挙げられる。

例示的な検出可能部分としてはさらに、西洋ワサビペルオキシダーゼ、アセチルコリンエステラーゼ、アルカリホスファターゼ、ベータ−ガラクトシダーゼおよびルシフェラーゼが挙げられるが、これらに限定されない。さらなる例示的な蛍光材料としては、ローダミン、フルオレセイン、フルオレセインイソチオシアナート、ウンベリフェロン、ジクロロトリアジニルアミン、フィコエリスリンおよび塩化ダンシルが挙げられるが、これらに限定されない。さらなる例示的な化学発光部分としては、ルミノールが挙げられるが、これらに限定されない。さらなる例示的な生物発光材料としては、ルシフェリンおよびエクオリンが挙げられるが、これらに限定されない。さらなる例示的な放射性材料としては、ヨウ素−１２５、炭素−１４、硫黄−３５、トリチウムおよびリン−３２が挙げられるが、これらに限定されない。

処置の方法
本明細書に記載される方法および組成物は、非限定的に、癌、感染症、免疫障害、貧血、自己免疫性疾患、心臓血管疾患、創傷治癒、虚血関連疾患、神経変性疾患、代謝疾患、ならびに多くの他の疾患および障害を含む、様々な疾患および障害を処置することへの適用を有する。

さらに本発明の薬剤のいずれも、非限定的に、癌、感染症、免疫障害、炎症性疾患または状態、および自己免疫性疾患を含む、様々な疾患および障害の処置における、または処置のための薬剤の製造における、使用のためであり得る。

幾つかの実施形態において、本発明は、癌、心不全、自己免疫性疾患、鎌形赤血球病、地中海貧血、失血、輸血反応、糖尿病、ビタミンＢ１２欠乏症、膠原血管病、シュワッハマン症候群、血小板減少性紫斑病、セリアック病、甲状腺機能低下症またはアジソン病などの内分泌腺不全症、クローン病、全身性エリテマトーデス、関節リウマチまたは若年性関節リウマチ、潰瘍性大腸炎などの自己免疫性疾患、好酸球性筋膜炎、低免疫グロブリン血症、または胸腺腫／胸腺癌、移植片対宿主病などの免疫障害、前白血病、非造血系症候群（例えば、ダウン、デュボヴィッツ、セッケル）、フェルティ症候群、溶血性尿毒症症候群、骨髄異形成症候群、発作性夜間ヘモグロビン尿症、骨髄線維症、汎血球減少症、赤芽球ろう、ヘノッホ・シェーンライン紫斑病、マラリア、タンパク質欠乏、月経過多、全身性硬化症、肝硬変、低代謝状態、およびうっ血性心不全の１つまたは複数の処置、またはそれらを有する患者に関する。

幾つかの実施形態において、本発明は、癌の処置、または癌を有する患者に関する。本明細書で用いられる癌は、身体臓器および系の正常な機能を妨害し得る任意の非制御の細胞増殖を指し、原発性および転移性腫瘍の両方を包含する。発生場所および根源の重要臓器から遊走した原発性腫瘍または癌は最終的に、罹患した臓器の機能的悪化を通して対象の死亡を導く可能性がある。転移は、原発腫瘍から他の身体部分への播種により生じる、原発腫瘍の場所から離れた、癌細胞または癌細胞群である。転移は最終的に、対象の死亡をもたらし得る。例えば、癌は、良性および悪性の癌、ポリープ、過形成、ならびに休眠状態の腫瘍または微小転移を包含し得る。

処置され得る例示的な癌としては、癌腫、例えば腺癌、基底細胞癌、扁平上皮癌、および移行細胞癌、肉腫（例えば、骨および軟組織など）、白血病（例えば、急性骨髄性、急性リンパ芽球性、慢性骨髄性、慢性リンパ球性およびヘアリー細胞など）、リンパ腫および骨髄腫（例えば、ホジキンおよび非ホジキンリンパ腫、軽鎖、非分泌、ＭＧＵＳ、ならびに形質細胞腫など）、および中枢神経系癌（例えば、脳（例えば、グリオーマ（例えば、星細胞腫、乏突起神経膠腫、および上衣腫）、髄膜腫、下垂体腺腫、および神経腫）、および脊髄腫瘍（例えば、髄膜腫および神経線維腫）など）を含む、様々なサブタイプが挙げられるが、これらに限定されない。

処置され得る例示的な癌としては、基底細胞癌；胆管癌；膀胱癌；骨癌；脳および中枢神経系癌；乳癌；腹膜の癌；子宮頸癌；絨毛癌；大腸癌；結合組織癌；消化器系癌；子宮内膜癌；食道癌；眼癌；頭頸部癌；胃癌（胃腸癌を含む）；神経膠芽腫；肝癌；肝細胞癌；上皮内新生物；腎臓癌；喉頭癌；白血病；肝臓癌；肺癌（例えば、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺の腺癌、および肺の扁平上皮癌）；黒色腫；骨髄腫；神経芽細胞腫；口腔癌（唇、下、口、および咽頭）；卵巣癌；膵臓癌；前立腺癌；網膜芽細胞腫；横紋筋肉腫；直腸癌；呼吸器系癌；唾液腺癌；肉腫；皮膚癌；扁平上皮癌；胃癌；精巣癌；甲状腺癌；子宮または子宮内膜癌；泌尿器系の癌、外陰癌；ホジキンおよび非ホジキンリンパ腫、およびＢ細胞リンパ腫（低悪性度／濾胞性非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）を含む；小リンパ球性（ＳＬ）ＮＨＬ；中悪性度／濾胞性ＮＨＬ；中悪性度びまん性ＮＨＬ；高悪性度免疫芽球性ＮＨＬ；高悪性度リンパ芽球性ＮＨＬ；高悪性度非分割小細胞ＮＨＬ；巨大病変を有するＮＨＬ；マントル細胞リンパ腫；ＡＩＤＳ関連リンパ腫；およびヴァルデンストレームマクログロブリン血症を含むリンパ腫；慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）；急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）；ヘアリー細胞白血病；慢性骨髄芽球性白血病；他の癌腫および肉腫；ならびに移植後リンパ球増殖性障害（ＰＴＬＤ）、ならびに母斑症、浮腫（例えば、脳腫瘍に関連するものなど）、およびメイグス症候群と関連する異常な脈管増殖が挙げられるが、これらに限定されない。

幾つかの実施形態において、本発明は、微小生物への感染および／または慢性感染の処置、またはそれを有する患者に関する。例示的な感染としては、ＨＩＶ／ＡＩＤＳ、結核、骨髄炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、エプスタイン・バーウイルスまたはパルボウイルス、Ｔ細胞白血病ウイルス、細菌過剰症候群、真菌または寄生虫感染が挙げられるが、これらに限定されない。

様々な実施形態において、本発明の組成物は、炎症、急性炎症、慢性炎症、呼吸器疾患、アテローム性硬化症、再狭窄、喘息、アレルギー性鼻炎、アトピー性皮膚炎、敗血症性ショック、関節リウマチ、炎症性腸疾患、骨盤炎症性疾患（ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｐｅｌｖｉｃ ｄｉｓｅａｓｅ）、疼痛、炎症性眼疾患、セリアック病、リー症候群、グリセロールキナーゼ欠損症、家族性好酸球増多症（ＦＥ）、常染色体劣性遺伝性痙性失調症、喉頭の炎症性疾患、結核、慢性胆嚢炎、気管支拡張症、ケイ肺症および他の塵肺症などの、１種または複数の炎症性疾患または状態を処置または予防するために用いられる。

様々な実施形態において、本発明の組成物は、多発性硬化症、糖尿病、狼瘡、セリアック病、クローン病、潰瘍性大腸炎、ギラン・バレー症候群、強皮症、グッドパスチャー症候群、ウェゲナー肉芽腫症、自己免疫性てんかん、ラスムッセン脳炎、原発性胆汁性肝硬変、硬化性胆管炎、自己免疫性肝炎、アジソン病、橋本甲状腺炎、線維性筋痛症、メニエール症候群、移植片拒絶（例えば、同種移植片拒絶の予防）、悪性貧血、関節リウマチ、全身エリテマトーデス、皮膚筋炎、シェーグレン症候群、エリテマトーデス、多発性硬化症、重症筋無力症、ライター症候群、グレーブス病、および他の自己免疫性疾患などの、１種または複数の自己免疫性疾患または状態を処置または予防するために用いられる。

様々な実施形態において、本発明の組成物は、非限定的に、冠動脈心疾患（ＣＨＤ）、脳血管疾患（ＣＶＤ）、大動脈狭窄、末梢血管疾患、アテローム性硬化症、動脈硬化症、心筋梗塞（心臓発作）、脳血管疾患（卒中）、一過性虚血発作（ＴＩＡ）、狭心症（安定および不安定）、心房細動、不整脈、弁膜症、および／またはうっ血性心不全を含む、心臓および血管構造に影響を及ぼす疾患または状態などの、心臓血管疾患を処置、制御または予防するために用いられる。

様々な実施形態において、本発明の組成物は、１種または複数の代謝関連障害を処置または予防するために用いられる。様々な実施形態において、本発明は、１型および２型糖尿病、ならびに肥満と関連する糖尿病を含む、糖尿病の処置、制御または予防に有用である。本発明の組成物および方法は、非限定的に糖尿病成人症、高血糖、耐糖能障害、インスリン抵抗性、肥満、脂質障害、脂質異常症、高脂血症、高トリグリセリド血症、高コレステロール血症、低ＨＤＬレベル、高ＬＤＬレベル、アテローム性硬化症およびその後遺症、血管再狭窄、過敏性腸症候群、クローン病および潰瘍性大腸炎などの炎症性腸疾患、他の炎症状態、膵炎、腹部肥満、神経変性疾患、網膜症、新生物病、脂肪細胞腫瘍、脂肪肉腫などの脂肪細胞癌、前立腺癌および他の癌、例えば胃癌、乳癌、膀胱癌および結腸癌、血管新生、アルツハイマー病、乾癬、高血圧、メタボリックシンドローム（例えば、ヒトが以下の障害の３つ以上を有する：腹部肥満、高トリグリセリド血症、低ＨＤＬコレステロール、高血圧、および高い空腹時血漿グルコース値）、卵巣内アンドロゲン過剰症（多嚢胞性卵巣症候群）、および睡眠時無呼吸などの、インスリン抵抗性が要素である他の障害を含む、糖尿病関連障害の処置または予防に有用である。本発明の組成物および方法は、遺伝的または環境的な、および肥満関連の障害を含む、肥満の処置、制御、または予防に有用である。本明細書の肥満関連障害は、肥満と関連する、肥満により誘起される、または肥満から生じる。肥満関連障害の例としては、肥満、糖尿病、暴食、過食、および大食、高血圧、血漿インスリン濃度の上昇およびインスリン抵抗性、脂質異常症、高脂血症、子宮内膜癌、乳癌、前立腺癌、腎臓癌、結腸癌、骨関節炎、閉塞性睡眠時無呼吸、胆石、心臓疾患、異常な心拍リズムおよび不整脈、心筋梗塞、うっ血性心不全、冠動脈性心疾患、突然死、卒中、多嚢胞性卵巣疾患、頭蓋咽頭腫、プラダー・ウィリー症候群、フレーリッヒ症候群、ＧＨ欠損対象、正常変異型低身長、ターナー症候群、および低下した代謝活性または総除脂肪体重の割合としての安静時エネルギー消費量の減少を示す他の病的状態、例えば急性リンパ芽球性白血病の小児などが挙げられる。肥満関連障害のさらなる例は、メタボリックシンドローム、インスリン抵抗性症候群、生殖ホルモン異常、性機能および生殖機能不全、例えば受精能力の障害、不妊、男性の性腺機能低下症および女性の多毛症、母体肥満症と関連する胎児障害、肥満関連の胃食道逆流などの胃腸運動障害、肥満低換気症候群（ピックウィック症候群）などの呼吸器障害、息切れ、心臓血管障害、血管構造の全身炎症などの炎症、動脈硬化、高コレステロール血症、腰痛、胆嚢疾患、高尿酸血症、痛風、および腎臓癌、および麻酔危険度の上昇である。本発明の組成物および方法はまた、アルツハイマー病を処置するのに有用である。

様々な実施形態において、本発明の組成物は、喘息、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、気管支拡張症、アレルギー性鼻炎、副鼻腔炎、肺血管収縮、炎症、アレルギー、呼吸の阻害（ｉｍｐｅｄｅｄ ｒｅｓｐｉｒａｔｉｏｎ）、呼吸窮迫症候群、嚢胞性線維症、肺高血圧、肺血管収縮、肺気腫、ハンタウイルス肺症候群（ＨＰＳ）、レフラー症候群、グッドパスチャー症候群、胸膜炎、肺炎、肺水腫、肺線維症、サルコイドーシス、呼吸器合胞体ウイルス感染に関連する合併症、および他の呼吸器疾患などの、１種または複数の呼吸器疾患を処置または予防するために用いられる。

幾つかの実施形態において、本発明は、１種または複数の神経変性疾患を処置または予防するために用いられる。例示的な神経変性疾患としては、多発性硬化症（非限定的に、良性多発性硬化症；再発緩解型多発性硬化症（ＲＲＭＳ）；二次進行型多発性硬化症（ＳＰＭＳ）；進行再発型多発性硬化症（ＰＲＭＳ）；および原発進行型多発性硬化症（ＰＰＭＳ）など）、アルツハイマー病（非限定的に、早発性アルツハイマー病、遅発性アルツハイマー病、および家族性アルツハイマー病（ＦＡＤ）など）、パーキンソン病およびパーキンソニズム（非限定的に、特発性パーキンソン病、血管型パーキンソニズム、薬物誘発性パーキンソニズム、レビー小体型認知症、遺伝性パーキンソン病、若年性パーキンソン病など）、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ、非限定的に、孤発性ＡＬＳ、家族性ＡＬＳ、西太平洋地域のＡＬＳ、若年性ＡＬＳ、平山病（Ｈｉｒａｍａｙａ Ｄｉｓｅａｓｅ）など）が挙げられるが、これらに限定されない。

様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、創傷、例えば非治癒創傷、潰瘍、熱傷または凍傷、慢性または急性創傷、開放性または閉鎖性の創傷、内部または外部創傷（例示的な外部創傷は、透過および非透過創傷である）を処置することに用途を見出す。様々な実施形態において、本発明のキメラタンパク質は、虚血、非限定的例として急性冠動脈症候群、急性肺傷害（ＡＬＩ）、急性心筋梗塞（ＡＭＩ）、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、動脈閉塞性疾患、動脈硬化、関節軟骨欠損、無菌性全身炎症、アテローム性心臓血管疾患、自己免疫性疾患、骨折、脳浮腫、脳低灌流、バージャー病、熱傷、癌、心臓血管疾患、軟骨損傷、脳梗塞、脳虚血、脳卒中、脳血管疾患、化学療法誘発性神経障害、慢性感染、慢性腸間膜虚血、跛行、うっ血性心不全、結合組織損傷、挫傷、冠動脈疾患（ＣＡＤ）、重症下肢虚血（ＣＬＩ）、クローン病、深部静脈血栓症、深創傷、潰瘍治癒の遅滞、創傷治癒の遅滞、糖尿病（Ｉ型およびＩＩ型）、糖尿病性神経障害、糖尿病誘発性虚血、播種性血管内凝固（ＤＩＣ）、閉栓性脳虚血、凍傷、移植片対宿主病、遺伝性出血性毛細血管拡張性虚血性血管疾患（ｈｅｒｅｄｉｔａｒｙ ｈｅｍｏｒｒｈａｇｉｃ ｔｅｌｅｎｇｉｅｃｔａｓｉａｉｓｃｈｅｍｉｃ ｖａｓｃｕｌａｒ ｄｉｓｅａｓｅ）、高酸素傷害、低酸素症、炎症、炎症性腸疾患、炎症性疾患、腱損傷、間欠性跛行、腸管虚血、虚血、虚血性脳疾患、虚血性心疾患、虚血性末梢血管疾患、虚血性胎盤、虚血性腎疾患、虚血性血管疾患、虚血性再灌流傷害、裂傷、左主幹冠動脈疾患、肢虚血、下肢虚血、心筋梗塞、心筋虚血、臓器虚血、骨関節炎、骨粗鬆症、骨肉腫、パーキンソン病、末梢動脈性疾患（ＰＡＤ）、末梢動脈疾患、末梢性虚血、末梢神経障害、末梢血管疾患、前癌状態、肺浮腫、肺閉塞症、リモデリング障害、腎虚血、網膜虚血、網膜症、敗血症、皮膚潰瘍、固形臓器移植、脊髄損傷、発作、軟骨下骨嚢胞、血栓症、血栓性脳虚血、組織虚血、一過性脳虚血発作（ＴＩＡ）、外傷性脳損傷、潰瘍性大腸炎、腎臓の血管疾患、血管炎症状態、フォンヒッペル−リンドウ症候群、または組織もしくは臓器の創傷と関連する虚血、を処置することに用途を見出す。

様々な実施形態において、本発明は、慢性腎疾患（例えば、透析から）および／または抗癌剤（例えば、化学療法剤）および／またはＨＩＶ処置（例えば、ジドブジン（ＩＮＮ）またはアジドチミジン（ＡＺＴ））から生じる貧血、炎症性腸疾患（例えば、クローン病および潰瘍性大腸炎）、炎症状態に関連する貧血（例えば、関節炎、狼瘡、ＩＢＤ）、糖尿病関連の貧血、統合失調症、脳性マラリア、再生不良性貧血として、および癌の処置（例えば、化学療法および／または放射線照射）から生じる脊髄形成異常、ならびに様々な脊髄形成異常症候群疾患（例えば、鎌形赤血球性貧血、ヘモグロビンＳＣ病、ヘモグロビンＣ病、アルファ−およびベータ−地中海貧血、早産後の新生児貧血、および同等の状態）を含む、貧血の１種または複数の処置に関する。

幾つかの実施形態において、本発明は、貧血、即ち赤血球細胞の数および／もしくは赤血球細胞中に見出されるヘモグロビンの量が正常未満である状態の処置、または貧血を有する患者に関する。様々な実施形態において、貧血は、急性または慢性であり得る。例えば、本発明の貧血としては、鉄欠乏性貧血、腎性貧血、慢性疾患／炎症の貧血、大球性胃酸欠乏性貧血（ｍａｃｒｏｃｙｔｉｃ ａｃｈｙｌｉｃ ａｎｅｍｉａ）、若年性悪性貧血および先天性悪性貧血などの悪性貧血、癌関連の貧血、抗癌関連貧血（例えば、化学療法関連の貧血、放射線療法関連の貧血）、赤芽球ろう、芽球が過剰な難治性貧血、再生不良性貧血、Ｘ連鎖製鉄芽球性貧血、溶血性貧血、鎌形赤血球性貧血、ＥＳＡの産生障害による貧血、骨髄異形成症候群、低色素性貧血、小球性貧血、鉄芽球性貧血、自己免疫性溶血性貧血、クーリー貧血、地中海貧血、ダイアモンドブラックファン貧血、ファンコニ貧血および薬物誘発性免疫溶血性貧血が挙げられるが、これらに限定されない。貧血は、低酸素症、慢性疲労、集中力の欠如、肌色の不良、低血圧、めまいおよび心不全を含む、重篤な症状を引き起こし得る。

幾つかの実施形態において、本発明は、慢性腎不全から生じる貧血の処置に関する。幾つかの実施形態において、本発明は、透析、血液透析、腹膜透析、血液濾過、血液濾過透析、および腎移植を含む、１種または複数の腎臓代替療法の利用から生じる貧血に関する。

幾つかの実施形態において、本発明は、透析を受けていない慢性腎疾患の患者における貧血の処置に関する。例えば、本発明は、ステージ１ ＣＫＤ、またはステージ２ ＣＫＤ、またはステージ３ ＣＫＤ、またはステージ４ ＣＫＤ、またはステージ５ ＣＫＤの患者に関する。幾つかの実施形態において、本発明の患者は、ステージ４ ＣＫＤ、またはステージ５ ＣＫＤである。幾つかの実施形態において、本発明の患者は、腎移植を受けた。幾つかの実施形態において、本発明は、急性腎障害（ＡＫＩ）を有する患者の貧血の処置に関する。

幾つかの実施形態において、貧血は、化学療法により誘発される。例えば、化学療法は、任意の骨髄抑制化学療法であり得る。幾つかの実施形態において、化学療法は、Ｒｅｖｌｉｍｉｄ、Ｔｈａｌｏｍｉｄ、デキサメタゾン、アドリアマイシンおよびＤｏｘｉｌの１つまたは複数である。幾つかの実施形態において、化学療法は、シスプラチン（例えば、ＰＬＡＴＩＮＯＬ）およびカルボプラチン（例えば、ＰＡＲＡＰＬＡＴＩＮ）を含む１種または複数の白金系の薬物である。幾つかの実施形態において、化学療法は、本明細書に記載される化学療法剤の任意の１つである。幾つかの実施形態において、化学療法は、内容が全体として参照により本明細書に組み入れられるＧｒｏｏｐｍａｎ ｅｔ ａｌ．Ｊ Ｎａｔｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ（１９９９） ９１（１９）：１６１６−１６３４に記載される任意の薬剤である。幾つかの実施形態において、本発明の組成物および方法は、後期ステージの癌患者（例えば、ステージＩＶ、またはステージＩＩＩ、またはステージＩＩの癌）における化学療法関連の貧血の処置で用いられる。幾つかの実施形態において、本発明の組成物および方法は、ドーズデンス化学療法または他のアグレッシブな化学療法レジメンを受けている癌患者における化学療法関連の貧血の処置で用いられる。

幾つかの実施形態において、白血病、リンパ腫、および多発性骨髄腫などの、１種または複数の血液系の癌を有する患者における貧血の処置に関する。そのような癌は、骨髄に直接影響を及ぼし得る。さらに、本発明は、骨または骨髄に播種した転移癌に関する。幾つかの実施形態において、本発明は、放射線療法を受けている患者における貧血の処置に関する。そのような放射線療法は、骨髄を損傷し、赤血球細胞を生成するその能力を低下させ得る。さらなる実施形態において、本発明は、鉄、ビタミンＢ１２および葉酸の１つまたは複数の減少または欠如を有する患者における貧血の処置に関する。さらなる実施形態において、本発明は、非限定的に、手術後または、内部出血を引き起こしている腫瘍からを含む過剰な出血を有する患者における貧血の処置に関する。さらなる実施形態において、本発明は、慢性疾患の貧血を有する患者における貧血の処置に関する。

幾つかの実施形態において、本発明の方法および組成物は、赤血球細胞の生成を刺激する。幾つかの実施形態において、本発明の方法および組成物は、骨髄中のコミットされた（ｃｏｍｍｉｔｔｅｄ）赤血球前駆体の分裂および分化を刺激する。

本発明の特定の実施形態は、癌患者における化学療法誘発性貧血を処置するのに特に有用である。幾つかの実施形態において、本発明の方法および組成物は、癌患者の化学療法が終了した後のキメラタンパク質の連続投与を可能にする。幾つかの実施形態において、本発明の方法および組成物は、非癌患者に比較して用量を低減せずに癌患者の処置を可能にする。幾つかの実施形態において、本発明の方法および組成物は、化学療法を受けており治癒可能と見なされる癌患者の処置を可能にする。様々な実施形態において、癌患者は、血栓の病歴、最近の手術、長期間の安静または活動制限、および化学療法剤での処置の１つまたは複数を有する。

キット
本発明はまた、本明細書に記載される任意の薬剤の投与のためのキットを提供する（例えば、様々なさらなる治療薬を伴う、または伴わないキメラタンパク質）。キットは、本明細書に記載される本発明の医薬組成物の少なくとも１種を含む、材料または成分の集合体である。したがって幾つかの実施形態において、キットは、本明細書に記載される医薬組成物の少なくとも１種を含有する。

キットを構成する成分の厳密な性質は、その意図される目的に依存する。一実施形態において、キットは、ヒト対象を処置する目的のために構成される。

使用説明書が、キットに含まれ得る。使用説明書は典型的に、貧血を処置するなどの、所望の転帰を実行するためにキットの成分を利用することに用いられる技術を記載する有形の表示を含む。場合により、キットはまた、希釈剤、緩衝剤、医薬的に許容できる担体、シリンジ、カテーテル、アプリケーター、ピペッティングもしくは測定ツール、包帯材料、または当業者に即座に認識される他の有用な装備などの、他の有用な成分も含有する。

キット中に集められた材料および成分は、担当者に提供され、それらの操作可能性および有用性を保持する任意の簡便かつ適切な方法で貯蔵され得る。例えば、成分は、室温で、冷蔵温度で、または凍結温度で提供され得る。成分は典型的に、適切な梱包材に含まれる。様々な実施形態において、梱包材は、周知の方法により構成されて、好ましくは無菌の、汚染物不含環境を提供する。梱包材は、キットおよび／またはその成分の内容物および／または目的を示す、外部ラベルを有し得る。

定義
本明細書で用いられる「ａ」、「ａｎ」または「ｔｈｅ」は、１つまたは１つより多くを意味し得る。

さらに、参照された数字表示に関連して用いられる場合の用語「約」は、参照された数字表示の最大で±１０％の参照数字表示を意味する。例えば、言語「約５０」は、４５〜５５の範囲に及ぶ。

医学的利用に関連して用いられる場合の「有効量」は、目的の疾患の測定可能な処置、予防、または発病率低下を提供するのに有効な量である。

本明細書で用いられる場合、薬剤または刺激の存在下で、そのようなモジュレーションの非存在下に比較して、活性および／または効果の読み出しが少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、またはより多く、少なくとも最大で約１００％、およびそれを含む量でなど、有意な量だけ減少される場合に、あるものは「減少され」る。当業者に理解されるであろうが、幾つかの実施形態において、活性が減少され、およびいくらかの下流の読み出しが減少するであろうが、他のものは上昇する可能性がある。

反対に、薬剤または刺激の存在下で、そのような薬剤または刺激の非存在下に比較して、活性および／または効果の読み出しが有意な量だけ、例えば少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、またはより多く、少なくとも最大で約１００％およびそれを含みまたはより大きく、少なくとも約２倍、少なくとも約３倍、少なくとも約４倍、少なくとも約５倍、少なくとも約６倍、少なくとも約７倍、少なくとも約８倍、少なくとも約９倍、少なくとも約１０倍、少なくとも約５０倍、少なくとも約１００倍増加される場合に、あるものは「増加され」る。

本明細書で参照される全ての組成の割合％は、他に断りがなければ、全組成物重量による。本明細書で用いられる言語「包含する」およびその変形は、非限定的であることを意図するため、あるリストの項目の詳述は、この技術の組成および方法において有用になり得る他の類似項目を除外しない。同様に用語「可能性がある」または「場合がある」およびそれらの変形は、非限定的であることを意図するため、実施形態が特定の要素または特色を含む可能性がある、または含む場合があるという詳述は、それらの要素または特色を含まない本発明の技術の他の実施形態を除外しない。

包含する、含有する、または有するなどの用語の同義語としての制限のない用語「含む」が、本発明を説明および特許請求するために本明細書で用いられるが、本発明またはその実施形態は、代わりに「からなる」または「から本質的になる」などの別の用語を用いて記載される場合がある。

本明細書で用いられる言語「好ましい」および「好ましくは」は、特定の状況下で特定の利益を与える技術の実施形態を指す。しかし他の実施形態が、同じまたは別の状況下で好ましい場合もある。さらに１つまたは複数の好ましい実施形態の詳述は、他の実施形態が有用でないことを示唆しておらず、本発明の技術範囲から他の実施形態を除外することを意図するものではない。

治療効果を実現するために必要とされる本明細書に記載される組成物の量は、特定の目的のための従来の手順に従って経験的に決定され得る。一般に、治療目的で治療薬を投与するためには、治療薬は、薬理学的有効用量で与えられる。「薬理学的有効量」、「薬理学的有効用量」、「治療有効量」または「有効量」は、特に障害または疾患を処置するために、所望の生理学的効果を生じるのに充分な量、または所望の結果を実現できる量を指す。本明細書で用いられる有効量は、例えば、障害または疾患の症状の発生を遅延させるため、障害または疾患の症状の経過を改変するため（例えば、疾患の症状の進行を緩徐にするため）、障害または疾患の１つまたは複数の症状または症状発現を低減または排除するため、および障害または疾患の症状を回復させるための、充分量を包含する。治療上の利益はまた、改善が実現されるか否かにかかわらず、根底にある疾患または障害の進行を停止させる、または緩徐にすることを包含する。

有効量、毒性、および治療有効性は、例えばＬＤ５０（人口の約５０％に対する致死用量）およびＥＤ５０（人口の約５０％において治療的に有効な用量）を決定するために、細胞培養または実験動物において標準的医薬手順により決定され得る。投与量は、用いられる投与剤形、および利用される投与経路に応じて変動し得る。毒性作用と治療効果の間の用量比が、治療指数であり、ＬＤ５０／ＥＤ５０比として表現され得る。幾つかの実施形態において、大きな治療指数を示す組成物および方法が好ましい。治療有効用量は、最初に、例えば細胞培養アッセイを含む、インビトロアッセイから推定され得る。また、用量は、動物モデルで配合されて、細胞培養または適当な動物モデルで決定されたＩＣ５０を含む、循環血漿濃度範囲を実現できる。血漿中の記載される組成物のレベルは、例えば高速液体クロマトグラフィーにより、測定され得る。任意の特定の投与量の効果は、適切なバイオアッセイによりモニタリングされ得る。投与量は、医師により決定され、必要に応じて、処置の観察される効果に適合するように調整され得る。

特定の実施形態において、効果は、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約５０％、少なくとも約７０％、または少なくとも約９０％の定量可能な変化をもたらす。幾つかの実施形態において、効果は、約１０％、約２０％、約３０％、約５０％、約７０％、もしくはさらに約９０％またはより多くの定量可能な変化をもたらす。治療上の利益はまた、改善が実現されるか否かにかかわらず、根底にある疾患または障害の進行を停止させる、または緩徐にすることを包含する。

本明細書で用いられる「処置の方法」は、本明細書に記載される疾患もしくは障害を処置するための組成物の使用、ならびに／または本明細書に記載される疾患もしくは障害を処置するための薬剤の製造で使用するための組成物および／もしくは製造における使用に等しく適用可能である。本発明を、以下の非限定的実施例によりさらに例示する。

実施例
用語「ＡｃＴａｆｅｒｏｎ」が、インターフェロン系キメラを参照するために本明細書で用いられる場合がある。

以下の実施例において、断りがなければ、ＩＦＮへの突然変異は、ヒトＩＦＮ−α２ 配列番号３３６に対するものである。

Ｑ１２４Ｒ突然変異体は、ネズミモデルにおいてインビボでアッセイされ得る弱化されたヒトＩＦＮアルファ２突然変異体の代表である。詳細には、Ｑ１２４Ｒは、マウスにおける使用に適したヒトＩＦＮ突然変異である（即ちそれは、マウスで機能するヒト突然変異体ＩＦＮである）。内容全体が参照により本明細書に組み入れられるＮａｔ． Ｃｏｍｍ． ２０１４；５：３０１６． ｄｏｉ：１０．１０３８／ｎｃｏｍｍｓ４０１６を参照されたい。

Ｒ３３Ａ／Ｅ１２０Ｒ突然変異体は、非機能性の（かつ対照として用いられる）ヒトＩＦＮアルファ２突然変異体の代表である。

これらの実施例で用いられる抗ヒトＰＤ−１ ＶＨＨは、配列番号１３２である。

これらの実施例で用いられる抗ヒトＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨは、配列番号２６７である。

これらの実施例で用いられる抗ヒトＣＬＥＣ９Ａ ＶＨＨは、Ｒ２ＣＨＣＬ２４（配列番号８７）である。

これらの実施例で用いられる抗ヒトＣＤ３ ｓｃＦＶは、配列番号３６５である。

これらの実施例で用いられる抗ヒトＣＤ２０ ｓｃＦＶは、配列番号３６６である。

これらの実施例で用いられる抗ヒトＣＤ８ ＶＨＨは、Ｒ２ＨＣＤ２６（配列番号２１）である。

抗ＢｃＩＩ１０ ＶＨＨは、これらの実施例で対照として用いられる（無関係な抗原を標的にする、即ち「標的にされない」）。

実施例１：インビボＢ１６黒色腫モデルを用いる二重特異性キメラの特徴づけ
様々な二重特異性キメラ構築物は、抗マウスＰＤ−Ｌ１、抗マウスＣＤ２０、抗マウスＣｌｅｃ９Ａ、および／または抗マウスＣＤ８標的部分ならびに修飾されたインターフェロンシグナル伝達ドメインで操作された（即ち、突然変異体ヒトインターフェロン（ＩＦＮ）α２−Ｑ１２４ＲまたはＲ１４９Ａ）。キメラ構築物のリストを、以下に提供する。キメラのインビボ活性を、インビボＢ１６黒色腫モデルを利用して特徴づけた。

図１は、Ｂ１６腫瘍モデルを利用する抗ＣＤ２０ ＶＨＨ−ヒトＩＦＮアルファ（Ｑ１２４Ｒ）突然変異体−抗ＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ二重特異性構築物の抗腫瘍活性を示す。この実験では、Ｃ５７ＢＬ／６マウスにＢ１６ｍＣＤ２０ｃｌ１黒色腫細胞（マウスＣＤ２０を安定発現するマウス黒色腫細胞株）６×１０^５個を皮下接種した（５０μｌ）。カリパスによる測定で腫瘍が±１０ｍｍ^２のサイズに達したら、様々な構築物（１００μｌ）３０μｇでの病変周辺処置を開始した。テストされた構築物は、一重特異性抗ＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ、一重特異性抗ＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ−ヒトＩＦＮアルファ，Ｑ１２４Ｒ突然変異体構築物、一重特異性抗ＣＤ２０ ＶＨＨ−ヒトＩＦＮアルファ，Ｑ１２４Ｒ突然変異体構築物、および二重特異性抗ＣＤ２０ ＶＨＨ−ヒトＩＦＮアルファ，Ｑ１２４Ｒ突然変異体−抗ＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ構築物を含んだ。図１のパネルＡは、抗ＰＤ−Ｌ１はＢ１６腫瘍モデルにおいて効果を有さず、一重特異性ＰＤ−Ｌ１−Ｑ１２４Ｒ構築物は若干の抗腫瘍活性を示し、腫瘍サイズを低減したことを示す。パネルＢは、ＣＤ２０およびＰＤ−Ｌ１の両方を標的とする二重特異性キメラ（「ｍＣＤ２０−Ｑ１２４Ｒ−ＰＤ−Ｌ１」）が、抗腫瘍活性に関して、ＣＤ２０のみを標的とする一重特異性キメラ（「ｍＣＤ２０−Ｑ１２４Ｒ」）よりも優れていたことを示す（パネルＢ）。二重特異性および一重特異性の両構築物において、修飾されたインターフェロンシグナル伝達ドメインが、存在した（Ｑ１２４Ｒ）。

図２は、上記のＢ１６腫瘍モデルを用いる二重特異性キメラ（「Ｃｌｅｃ９Ａ−Ｑ１２４Ｒ−ＰＤ−Ｌ１」）の抗腫瘍活性を示す。図２に示される通り、二重特異性キメラＣｌｅｃ９Ａ−Ｑ１２４Ｒ−ＰＤ−Ｌ１は、一重特異性抗ＣＬＥＣ９Ａキメラ（「Ｃｌｅｃ９Ａ−Ｑ１２４Ｒ」）およびＰＤ−Ｌ１（「ＰＤ−Ｌ１−Ｑ１２４Ｒ」）キメラよりも優れていた。キメラは全て、修飾されたインターフェロン：Ｑ１２４Ｒに融合された。

ｍＣＤ２０−Ｑ１２４Ｒ−ＰＤ−Ｌ１およびＣｌｅｃ９Ａ−Ｑ１２４Ｒ−ＰＤ−Ｌ１の両方の二重特異性構築物は、安全であることが示された（図３および図４）。各図において、パネルＡ〜Ｇは、上記の腫瘍試験におけるマウスの体重変動（パネルＡ）、白血球細胞カウント（「ｗｂｃ」）およびリンパ球カウント（「ｌｙ」）（パネルＢ）、好中球カウント（「ｎｅ」）および単球カウント（「ｍｏ」）（パネルＣ）；赤血球細胞カウント（「ｒｂｃ」）、そして図４では、ヘモグロビン（「ｈｂ」）（パネルＤ）；ヘモクリット（ｈｅｍｏｃｒｉｔ）（「ｈｃｔ」）、平均血球体積（「ｍｃｖ」）、平均血球ヘモグロビン（「ｍｃｈ」）、平均血球ヘモグロビン濃度（「ｍｃｈｃ」）（パネルＥ）；窪みのある赤血球細胞（ｐｉｔｔｅｄ−ｒｅｄ−ｂｌｏｏｄ−ｃｅｌｌｓ）（「ｐｉｔ」）（パネルＦ）；および平均血小板体積（「ｍｐｖ」）（パネルＧ）を示す。

図５は、修飾されたヒトＩＦＮアルファ（Ｑ１２４Ｒ）への二重特異性（抗Ｃｌｅｃ９Ａおよび抗ＰＤ−Ｌ１）融合体が、修飾されたヒトＩＦＮアルファ（Ｑ１２４Ｒ）への抗Ｃｌｅｃ９Ａの融合体と修飾されたヒトＩＦＮアルファ（Ｑ１２４Ｒ）への抗ＰＤ−Ｌ１の融合体の共投与、または修飾されたヒトＩＦＮアルファ（Ｑ１２４Ｒ）への抗Ｃｌｅｃ９Ａの融合体と抗ＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨの共投与に比較して、より良好な抗腫瘍活性を提供した、Ｂ１６腫瘍モデル試験を示す。

二重特異性キメラ（「ＣＤ８−Ｑ１２４Ｒ−ＰＤ−Ｌ１」）の抗腫瘍活性もまた、Ｂ１６黒色腫モデルを利用して分析した。図６に示される通り、修飾されたヒトＩＦＮアルファ（Ｑ１２４Ｒ）への二重特異性（抗ＣＤ８および抗ＰＤ−Ｌ１）融合体は、修飾されたヒトＩＦＮアルファ（Ｑ１２４Ｒ）への抗ＣＤ８の融合体に比較して、より良好な抗腫瘍活性を提供した。

Ｂａｔｆ３ノックアウト（Ｂａｔｆ３−／−）マウスモデルを用いて、二重特異性構築物の腫瘍発生および抗腫瘍活性における交差提示樹状細胞の役割を研究した。Ｂａｔｆ３−／−Ｃ５７ＢＬ６マウスは、Ｂａｔｆ３遺伝子が欠如しており、したがってＣＤ８α＋交差提示樹状細胞をもたない。この実験では、Ｂａｔｆ３−／−マウスに、Ｂ１６ｍＣＤ２０ｃｌ１黒色腫細胞を皮下接種した。腫瘍が特定のサイズに達したら、マウスをその後、修飾されたヒトＩＦＮアルファ（Ｑ１２４Ｒ）への二重特異性（抗Ｃｌｅｃ９Ａおよび抗ＰＤ−Ｌ１）融合体で処置した。図７に示される通り、Ｂａｔｆ３−／−マウスは、野生型Ｃ５７ＢＬ６マウスよりも腫瘍形成を受け易く、かつより大きな腫瘍を形成した。修飾されたヒトＩＦＮアルファ（Ｑ１２４Ｒ）への二重特異性（抗Ｃｌｅｃ９Ａおよび抗ＰＤ−Ｌ１）融合体の投与は、Ｂａｔｆ３−／−および野生型Ｃ５７ＢＬ６マウスの両方で腫瘍サイズを低減した。さらに、理論に結びつけるのを望むものではないが、２種の遺伝的バックグランドにおいて修飾されたヒトＩＦＮアルファ（Ｑ１２４Ｒ）への二重特異性（抗Ｃｌｅｃ９Ａおよび抗ＰＤ−Ｌ１）融合体の有効性を比較することは、Ｃｌｅｃ９Ａ標的化についての樹状細胞の重要性を強調する。

実施例２：インビボ４Ｔ１乳房腫瘍モデルを用いる二重特異性キメラの特徴づけ
様々な一重特異性および二重特異性キメラ構築物の抗腫瘍活性も、４Ｔ１乳房腫瘍モデルを用いてテストした。この実験では、マウスに４Ｔ１乳房腫瘍細胞を接種した。腫瘍が特定のサイズに達したら、マウスを一重特異性抗ＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨまたは一重特異性抗ＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ−ヒトＩＦＮアルファ，Ｑ１２４Ｒ突然変異体構築物で処置した。図８のパネルＡに示される通り、抗ＰＤ−Ｌ１は、４Ｔ１乳房腫瘍モデルで効果がなかったが、一重特異性抗ＰＤ−Ｌ１−Ｑ１２４Ｒ構築物は、抗腫瘍活性を有した。

図８のパネルＢは、修飾されたヒトＩＦＮアルファ（Ｑ１２４Ｒ）への二重特異性（抗Ｃｌｅｃ９Ａおよび抗ＰＤ−Ｌ１）融合体が、修飾されたヒトＩＦＮアルファ（Ｑ１２４Ｒ）への抗Ｃｌｅｃ９Ａの融合体と修飾されたヒトＩＦＮアルファ（Ｑ１２４Ｒ）への抗ＰＤ−Ｌ１の融合体の共投与、または修飾されたヒトＩＦＮアルファ（Ｑ１２４Ｒ）への抗Ｃｌｅｃ９Ａの融合体と抗ＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨの共投与に比較して、より良好な抗腫瘍活性を提供した、４Ｔ１乳房腫瘍モデル試験を示す。

図８のパネルＣは、修飾されたヒトＩＦＮアルファ（Ｑ１２４Ｒ）への二重特異性（抗ＣＤ８および抗ＰＤ−Ｌ１）融合体が、修飾されたヒトＩＦＮアルファ（Ｑ１２４Ｒ）への抗ＣＤ８の融合体と修飾されたヒトＩＦＮアルファ（Ｑ１２４Ｒ）への抗ＰＤ−Ｌ１の融合体の共投与、または修飾されたヒトＩＦＮアルファ（Ｑ１２４Ｒ）への抗ＣＤ８融合体と抗ＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨの共投与に比較して、より良好な抗腫瘍活性を提供した、４Ｔ１乳房腫瘍モデル試験を示す。

実施例３：Ｂ１６黒色腫および４Ｔ１乳房腫瘍モデルにおける二重特異性キメラおよびドキソルビシンを用いる併用療法
ドキソルビシンおよび二重特異性構築物を用いる併用療法の抗腫瘍効果をテストした。一組の実験で、マウスにＢ１６細胞（マウスＣＤ２０を安定発現するマウス黒色腫細胞株）を移植して、腫瘍を誘導した。２組目の実験では、マウスに４Ｔ１乳房腫瘍細胞を移植した。マウスを次に、ドキソルビシンを伴って、または伴わずに、修飾されたヒトＩＦＮアルファ（Ｑ１２４Ｒ）への二重特異性（抗マウスＣｌｅｃ９Ａおよび抗ＰＤ−Ｌ１）融合体で処置した。３組目の実験では、マウスに４Ｔ１乳房腫瘍細胞を移植し、マウスを次にドキソルビシンを伴って、または伴わずに、修飾されたヒトＩＦＮアルファ（Ｑ１２４Ｒ）への二重特異性（抗ＣＤ８および抗ＰＤ−Ｌ１）融合体で処置した。図９のパネルＡ−Ｃに示される通り、３種の腫瘍モデルの全てで、二重特異性キメラをドキソルビシンと組み合わせることは、二重特異性キメラのみまたはドキソルビシンのみを用いる処置に比較して、腫瘍サイズを有意に低減した。とりわけ図９のパネルＢに示される通り、４Ｔ１乳房腫瘍モデルにおいて、修飾されたヒトＩＦＮアルファ（Ｑ１２４Ｒ）への二重特異性（抗Ｃｌｅｃ９Ａおよび抗ＰＤ−Ｌ１）融合体とドキソルビシンとの使用は、マウス６匹中５匹で治癒的効果をもたらした（即ち、それらのマウスは、腫瘍が完全に消失した）。同様に、図９のパネルＣに示される通り、４Ｔ１乳房腫瘍モデルにおいて、修飾されたヒトＩＦＮアルファ（Ｑ１２４Ｒ）への二重特異性（抗ＣＤ８および抗ＰＤ−Ｌ１）融合体とドキソルビシンとの使用もまた、マウス６匹中３匹で治癒的効果をもたらした（即ち、それらのマウスは、腫瘍が完全に消失した）。理論に結びつけるのを望むものではないが、二重特異性薬剤とドキソルビシンとの組み合わせが、個別でのそれらの薬剤の使用に比較して、相乗効果（即ち、腫瘍の完全な根絶）をもたらすと考えられた。

４Ｔ１腫瘍モデルを用いて腫瘍再チャレンジ実験を実施し、腫瘍を含まないままのマウス（即ち、図９のパネルＢで実証された腫瘍を含まないマウス５匹）にさらなる４Ｔ１腫瘍細胞を再チャレンジした。具体的には、この実験で、マウスに最初、４Ｔ１腫瘍細胞を接種し、マウスをドキソルビシンと、修飾されたヒトＩＦＮアルファ（Ｑ１２４Ｒ）への抗Ｃｌｅｃ９Ａの融合体、または前に記載された（例えば、図９）修飾されたヒトＩＦＮアルファ（Ｑ１２４Ｒ）への二重特異性（抗Ｃｌｅｃ９Ａおよび抗ＰＤ−Ｌ１）融合体との組み合わせで処置した。腫瘍を含まないままのマウスにその後、４Ｔ１腫瘍細胞１０^５個を再チャレンジし、任意のさらなる処置を行わずに腫瘍の成長をモニタリングした。

理論に結びつけるのを望むものではないが、図１０は、修飾されたヒトＩＦＮアルファ（Ｑ１２４Ｒ）への本発明の二重特異性（抗Ｃｌｅｃ９Ａおよび抗ＰＤ−Ｌ１）融合体が、抗腫瘍記憶効果を提供したことを示す。

実施例４：多発性硬化症のマウスモデルにおける二重特異性キメラの有効性
多発性硬化症を処置する際の二重特異性構築物の有効性を、確定されたマウス実験自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）モデルを用いてテストした。具体的には、死滅されたマイコバクテリウム結核菌（Ｍｔｂ）に由来する完全フロイントアジュバント（ＣＦＡ）中に懸濁されたＭＯＧ（ＭＯＧ_{３５−５５}）の免疫優性エピトープに対応するペプチドを、マウスに皮下投与した。百日咳毒素もまた、その日および２日後に腹腔内注射によりマウスに投与した。マウスをその後、１００ＩＵまたは１０００ＩＵのいずれかの、修飾されたヒトＩＦＮアルファＱ１２４Ｒへの抗マウスＣｌｅｃ９Ａの一重特異性融合体（「Ｃｌｅｃ９Ａ−Ｑ１２４Ｒ」）または修飾されたヒトＩＦＮアルファＱ１２４Ｒへの抗マウスｍＣＤ２０の一重特異性融合体（「ｍＣＤ２０−Ｑ１２４Ｒ」）キメラ、または両方の一重特異性キメラの組み合わせで７〜２５日目に処置した。あるいはマウスを、標的部分（即ち、抗Ｃｌｅｃ９Ａおよび抗ｍＣＤ２０ ＶＨＨ）およびシグナル伝達物質（即ち、ＩＦＮアルファ，Ｑ１２４Ｒ突然変異体）の構成が異なる、１００ＩＵまたは１０００ＩＵのいずれかのＣｌｅｃ９Ａ−Ｑ１２４Ｒ−ｍＣＤ２０（即ち、ｂｉ１）またはＣｌｅｃ−９Ａ−ｍＣＤ２０−Ｑ１２４Ｒ（即ち、ｂｉ２）の二重特異性キメラで処置した。マウスを、図１１のパネルＡに示される通り、表現型で１日１回スコア付けした。

図１１のパネルＢに示される通り、１００ＩＵ投与量では、Ｃｌｅｃ−９Ａ−ｍＣＤ２０−Ｑ１２４Ｒ二重特異性キメラは、一重特異性キメラまたは一重特異性キメラの組み合わせのいずれかでの処置に比較して、臨床スコアを有意に改善した。Ｃｌｅｃ−９Ａ−ｍＣＤ２０−Ｑ１２４Ｒ二重特異性キメラはまた、Ｃｌｅｃ９Ａ−Ｑ１２４Ｒ−ｍＣＤ２０二重特異性キメラに比較して、優れた活性を示した。同様に、１０００ＩＵ投与レベルでは、Ｃｌｅｃ−９Ａ−ｍＣＤ２０−Ｑ１２４Ｒ二重特異性キメラは、一重特異性キメラまたは一重特異性キメラの組み合わせのいずれかでの処置に比較して、臨床スコアを有意に改善した（図１１のパネルＣ）。この投与レベルでは、Ｃｌｅｃ９Ａ−Ｑ１２４Ｒ−ｍＣＤ２０二重特異性キメラはまた、一重特異性キメラまたは一重特異性キメラの組み合わせのいずれかでの処置に比較して優れた活性を示した（図１１のパネルＣ）。加えて、Ｃｌｅｃ−９Ａ−ｍＣＤ２０−Ｑ１２４Ｒ二重特異性キメラは、１０００ＩＵ投与レベルでの使用で安全であることが示された。図１１のパネルＤに示される通り、この投与量では、二重特異性キメラは、処置マウスにおいてリンパ球減少症を誘発しなかった。

要約すると、図１１のパネルＥにさらに示される通り、Ｃｌｅｃ９Ａ−Ｑ１２４Ｒ−ｍＣＤ２０二重特異性キメラは、１０００ＩＵの投与量でＥＡＥモデルにおける多発性硬化症に対し優れた保護を提供した。比較すると、Ｃｌｅｃ−９Ａ−ｍＣＤ２０−Ｑ１２４Ｒ二重特異性キメラは、１００ＩＵおよび１０００ＩＵ投与レベルの両方でＥＡＥモデルでの多発性硬化症に対し優れた保護を提供し、かつ処置マウスにおいてリンパ球減少症を誘発しなかった（図１１のパネルＦ）。とりわけ、１００ＩＵのＣｌｅｃ−９Ａ−ｍＣＤ２０−Ｑ１２４Ｒ二重特異性キメラ（即ち、ｂｉ２）で処置されたマウスでは、マウス５匹中１匹が、いずれの疾患症状も示さなかった。

５０００ＩＵ投与レベルでのＣｌｅｃ−９Ａ−ｍＣＤ２０−Ｑ１２４Ｒ二重特異性キメラの有効性を評価するためにまた、実験を実施した。これらの実験において、対照のＣｌｅｃ−９Ａ−ｍＣＤ２０−Ｒ１４９Ａ二重特異性キメラも、用いた。これらの実験では、二重特異性キメラを、７日目または１２日目に開始して、２５日目まで続けて投与した。

図１２のパネルＡに示される通り、Ｃｌｅｃ−９Ａ−ｍＣＤ２０−Ｑ１２４Ｒ二重特異性キメラは、５０００ＩＵの投与レベルで７日目または１２日目に投与された場合に、対照と比較して臨床スコアを有意に改善した。より具体的には、二重特異性キメラが、疾患発症前に、即ち７日目に投与されると、疾患発症は遅延されるか、または完全に停止された。重要なこととして、二重特異性キメラが、疾患発症後に、即ち１２日目に投与されると、疾患進行は緩徐化した。理論に結びつけるのを望むものではないが、二重特異性キメラの投与は、多発性硬化症の予防および処置（例えば、進行の緩徐化）の両方に用いられ得る。処置マウスは、処置の２０日目まで有意な体重減少を示さなかったため、二重特異性キメラはまた、この投与レベルで使用するのに安全であると思われた（図１２のパネルＢ）。図１２のパネルＣに示される通り、Ｃｌｅｃ−９Ａ−ｍＣＤ２０−Ｑ１２４Ｒ二重特異性キメラはまた、対照に比較して、発病および罹病率（ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ）を有意に遅延させた。

実施例５．二重特異性キメラでの腫瘍抗原特異性ＣＤ８^＋Ｔ細胞増殖および活性化
図１３は、抗腫瘍免疫の誘導における２つの主要臓器：腫瘍流入リンパ節および脾臓の両方における腫瘍抗原特異性ＣＤ８^＋Ｔ細胞増殖および活性化の評価を示す。

腫瘍抗原特異性Ｔ細胞の増殖
腫瘍抗原特異性Ｔ細胞の増殖を評価するために、Ｂ１６−オボアルブミン（ＯＶＡ）腫瘍細胞上に存在するモデル抗原ＯＶＡを特異的に認識するＴ細胞受容体トランスジェニックＣＤ８^＋Ｔ細胞（ＯＴ−Ｉ細胞）を用いた。ＣＤ８^＋Ｔ細胞を、ＣＤ８α Ｔ細胞単離キット（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃ）を用いてＣ５７ＢＬ／６ ＯＴ−Ｉマウスの脾臓から単離し、５μＭカルボキシフルオレセインスクシンイミジルエステル（ＣＦＳＥ、Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ）で標識した。ＣＦＳＥ標識ＣＤ８精製ＯＴ−Ｉ細胞１００万個を、オボアルブミンを発現するＢ１６−ＯＶＡ黒色腫細胞６×１０^５個を９日前に接種されたＣ５７ＢＬ／６マウスに、養子移入した。ＯＴ−Ｉ移入後１日目に、マウスの病変周辺をＰＢＳまたは３０μｇの抗Ｃｌｅｃ９Ａ ＶＨＨ／抗ＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｑ１２４Ｒの二重特異性キメラで処置した。一部のマウスにさらに、ドキソルビシン（３ｍｇ／ｋｇ、Ｓｉｇｍａ）を病変周辺に注射した。養子ＯＴ−Ｉ移入の５日後に、腫瘍流入リンパ節および脾臓を単離し、ＯＴ−Ｉ ＣＤ８ Ｔ細胞増殖を、フローサイトメトリーにより評定した（図１３のパネルＡおよびＣ）。試料を、Ａｔｔｕｎｅ Ｎｘｔ Ａｃｏｕｓｔｉｃ Ｆｏｃｕｓｉｎｇ Ｃｙｔｏｍｅｔｅｒ（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）で獲得して、ＦｌｏｗＪｏソフトウエアを用いて解析した。

腫瘍抗原特異性Ｔ細胞の活性化
増殖されたＯＴ−Ｉ ＣＤ８ Ｔ細胞の表現型を解析するために、腫瘍流入リンパ節および脾臓の単一細胞懸濁液を、異なるＴ細胞活性化マーカーについて染色した。したがって、Ｆｃ受容体を、ＣＤ１６／ＣＤ３２抗体（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ）を用いてブロックした後、ＣＤ８−ＡＰＣ（クローン５３−６．７、ＢＤ Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ）、ＣＤ４４−ＰｅｒｃＰ−Ｃｙ５．５（クローンＩＭＦ７、Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）およびＣＤ６２Ｌ−ＡＰＣ−Ｃｙ７（クローンＭＥＬ−１４、Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ）で染色した。ゲーティング方策を最初にＣＤ８^＋細胞で実施して、そのＣＦＳＥ希釈（増殖）Ｔ細胞を選択した。ネイティブＴ細胞は、ＣＤ４４^ｌｏｗ ＣＤ６２Ｌ^ｈｉｇｈ表現型に基づき、エフェクターＴ細胞は、ＣＤ４４^ｈｉｇｈ ＣＤ６２Ｌ^ｌｏｗ表現型に、およびメモリーＴ細胞は、ＣＤ４４^ｈｉｇｈ ＣＤ６２Ｌ^ｈｉｇｈ表現型に基づいた（図１３のパネルＢおよびＤ）。試料を、Ａｔｔｕｎｅ Ｎｘｔ Ａｃｏｕｓｔｉｃ Ｆｏｃｕｓｉｎｇ Ｃｙｔｏｍｅｔｅｒ（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）で獲得し、ＦｌｏｗＪｏソフトウエアを用いて解析した。

ＣＤ８^＋細胞障害性Ｔリンパ球が腫瘍細胞根絶において不可欠の役割を担うことは、充分に確定されている。この実施例のデータは、特に、抗Ｃｌｅｃ９Ａ ＶＨＨ／抗ＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｑ１２４Ｒの二重特異性キメラが、腫瘍流入リンパ節（図１３のパネルＡおよびＢ）および脾臓（図１３のパネルＣおよびＤ）の両方において、腫瘍抗原特異性ＣＤ８^＋Ｔ細胞の増殖および活性化を誘導したことを示す。

実施例６．Ｓｉｒｐ１αおよびＤＮＡＭ二重特異性キメラ
様々な二重特異性マウスキメラによるマウスＰＤ−Ｌ１標的化の効率を評定した。具体的には、ＦＡＣＳ解析を実施して、マウスＰＤ−Ｌ１陽性Ｂ１６細胞株中のＳＴＡＴ１リン酸化を定量した。

Ｂ１６細胞を、１０％ＦＢＳを補充したＤＭＥＭ培地中で様々な二重特異性キメラにより、３７℃で１５分間刺激した。刺激後に、細胞を、１容量のＦｉｘ Ｂｕｆｆｅｒ Ｉ（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を３７℃で１０分間添加することにより固定し、氷上で３０分間、２容量のＰｅｒｍ ＩＩＩ Ｂｕｆｆｅｒ Ｉ（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）中の再懸濁により透過させた。試料を抗ＳＴＡＴ１ ｐＹ７０１抗体（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）により４℃で２０分間染色して、ＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）およびＣｅｌｌＱｕｅｓｔ Ｐｒｏ Ｖｅｒｓｉｏｎ ４．０．２ソフトウエア（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）で解析した。

図１４に示される通り、Ｂ１６細胞を、１００ｎｇ／ｍｌの抗マウスＳｉｒｐ１α ＶＨＨ／抗マウスＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｑ１２４Ｒ二重特異性キメラ、ＢｃＩＩ１０ ＶＨＨ−ヒトＱ１２４Ｒ ＩＦＮの、抗マウスＤＮＡＭ ＶＨＨ／抗マウスＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｑ１２４Ｒ二重特異性キメラにより３７℃で１５分間刺激するか、または刺激せずに放置した。固定および透過後に、細胞をｐｈｏｓｐｈｏ ＳＴＡＴ１について染色し、ＦＡＣＳで解析した。データは、ＰＤ−Ｌ１標的化が、非標的化（ＢｃＩＩ１０ ＶＨＨ）キメラに比較して二重特異性キメラにより、ＳＴＡＴ１リン酸化を有意に増加させたことを明確に示す。

実施例７．一重特異性および二重特異性キメラのヒトＣＤ８標的化
ＦＡＣＳによるＣＤ８陽性およびＣＤ８陰性末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）中のＳＴＡＴ１リン酸化の定量により、一重特異性ヒトキメラのヒトＣＤ８標的化の効率を検査した。

抗ヒトＣＤ８ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｒ１４９Ａ（即ち、ｐｍＴＷ−ＳＩｇＫ−ｈＣＤ８＿Ｒ２ＨＣＤ２６（配列番号２１）−（ＧＧＳ）_２０−ｈＩＦＮａ２＿Ｒ１４９Ａ−ＧＧＳ−（Ｈｉｓ）_９構築物）および抗ヒトＣＤ８ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｒ３３Ａ／Ｅ１２０Ａ（即ち、ｐｍＴＷ−ＳＩｇＫ−ｈＣＤ８＿Ｒ２ＨＣＤ２６（配列番号２１）−（ＧＧＳ）_２０−ｈＩＦＮａ２＿Ｒ３３Ａ／Ｅ１２０Ａ−ＧＧＳ−（Ｈｉｓ）_９構築物）のキメラを、Ｈｅｋ２９３Ｆ細胞中で産生した。細胞を、Ｆｒｅｅｓｔｙｌｅ培地中で０．６×１０^６細胞／ｍｌの密度に成長させて、標準のプロトコルに従い２５Ｋ ＰＥＩ（ポリエチレンイミン）でトランスフェクトした。トランスフェクションの３日後に、新鮮な培地を培養物に添加し、細胞をさらに２または３日間成長させた。培地を回収し、細胞を遠心分離により除去し濾過滅菌した。組換えタンパク質を、製造業者の使用説明書に従ってＮｉ Ｅｘｃｅｌ樹脂（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を用いて精製し、イミダゾールをＰＤ１０カラム（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）で試料から除去した。

健常ドナーのバフィーコート由来のＰＢＭＣを、Ｆｉｃｏｌｌ−Ｐａｑｕｅ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）での密度勾配遠心分離を利用して単離した。細胞をＦＡＣＳ緩衝液（ＰＢＳ中の２％ＦＢＳ、１ｍＭ ＥＤＴＡ）で２回洗浄し、抗ヒトＣＤ８ ＡＰＣ（クローンＲＰＥ−Ｔ８；ＢＤ Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ）により４℃で２０分間染色した。２回洗浄した後、細胞をＣＤ８標的化キメラの系列希釈により３７℃で１５分間刺激した。固定（１０分間、３７℃、Ｆｉｘ Ｂｕｆｆｅｒ Ｉ；ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）および透過（３０分間、氷上、Ｐｅｒｍ ＩＩＩ Ｂｕｆｆｅｒ Ｉ；ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）および洗浄の後、細胞を抗ＳＴＡＴ１ ｐＹ７０１ Ａｂ（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）で染色した。試料を、ＣｅｌｌＱｕｅｓｔ Ｐｒｏ Ｖｅｒｓｉｏｎ４．０．２ソフトウエア（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を用いて、ＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）で獲得した。

単離したＰＢＭＣを、ＣＤ８標的化キメラ（抗ヒトＣＤ８ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｒ１４９Ａ、抗ヒトＣＤ８ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｒ３３Ａ／Ｅ１２０Ａ、または抗ＢｃＩＩ１０ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｒ１４９Ａ）の系列希釈で刺激し、ＣＤ８（ＡＰＣ）およびｐＳＴＡＴ１（ＰＥ）について染色した。データは、抗ヒトＣＤ８ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｒ１４９Ａおよび抗ＢｃＩＩ１０ ＶＨＨ−ヒトＩＦＮ Ｒ１４９Ａの生物活性はＣＤ８陰性細胞と同等であった（図１５のパネルＣ）が、ＣＤ８標的化が抗ヒトＣＤ８ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｒ１４９ＡによりＳＴＡＴ１リン酸化の明確かつ顕著な増加（少なくとも５００倍）をもたらしたことを明確に示した（図１５のパネルＡおよびＢ）。抗ヒトＣＤ８ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｒ３３Ａ／Ｅ１２０Ａキメラ中の組み合わされたＩＦＮ突然変異は、ＳＴＡＴ１リン酸化を完全に遮断し、ＣＤ８標的化は、生物活性を救済しなかった。これは、ＳＴＡＴ１リン酸化を維持したＩＦＮ Ｒ１４９Ａ突然変異と対照的であった。

二重特異性ヒトキメラ（抗ヒトＣＤ８ ＶＨＨ／抗ヒトＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｒ１４９Ａ）のヒトＣＤ８標的化の効率も、ＦＡＣＳでのＣＤ８陽性およびＣＤ８陰性末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）中のＳＴＡＴ１リン酸化の定量により、検査した。

抗ヒトＣＤ８ ＶＨＨ／抗ヒトＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｒ１４９Ａ二重特異性キメラ（即ち、ｐｍＴＷ−ＳＩｇＫ−ｈＣＤ８＿Ｒ２ＨＣＤ２６−（ＧＧＳ）_１０−ｈＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ−（ＧＧＳ）_２０−ｈＩＦＮａ２＿Ｒ１４９Ａ−ＧＧＳ−（Ｈｉｓ）_９構築物）および抗ヒトＣＤ８ ＶＨＨ／抗ヒトＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｒ３３Ａ／Ｅ１２０Ａ二重特異性キメラ（即ち、ｐｍＴＷ−ＳＩｇＫ−ｈＣＤ８＿Ｒ２ＨＣＤ２６−（ＧＧＳ）_１０−ｈＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ−（ＧＧＳ）_２０−ｈＩＦＮａ２＿Ｒ３３Ａ／Ｅ１２０Ａ−ＧＧＳ−（Ｈｉｓ）_９構築物）を、Ｈｅｋ２９３Ｆ細胞中で産生した。細胞を、Ｆｒｅｅｓｔｙｌｅ培地中で０．６×１０^６細胞／ｍｌの密度に成長させ、標準のプロトコルに従い２５Ｋ ＰＥＩ（ポリエチレンイミン）でトランスフェクトした。トランスフェクションの３日後に、新鮮な培地を培養物に添加し、細胞をさらに２または３日間成長させた。培地を回収し、細胞を遠心分離により除去し、濾過滅菌した。組換えタンパク質を、製造業者の使用説明書に従ってＮｉ Ｅｘｃｅｌ樹脂（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を用いて精製し、イミダゾールをＰＤ１０カラム（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）で試料から除去した。

健常ドナーのバフィーコート由来のＰＢＭＣを、Ｆｉｃｏｌｌ−Ｐａｑｕｅ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）での密度勾配遠心分離を利用して単離した。細胞をＦＡＣＳ緩衝液（ＰＢＳ中の２％ＦＢＳ、１ｍＭ ＥＤＴＡ）で２回洗浄し、抗ヒトＣＤ８ ＡＰＣ（クローンＲＰＥ−Ｔ８；ＢＤ Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ）により４℃で２０分間染色した。２回洗浄した後、細胞をＣＤ８／ＰＤ−Ｌ１二重特異性キメラの系列希釈により３７℃で１５分間刺激した。固定（１０分間、３７℃、Ｆｉｘ Ｂｕｆｆｅｒ Ｉ；ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）および透過（３０分間、氷上、Ｐｅｒｍ ＩＩＩ Ｂｕｆｆｅｒ Ｉ；ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）および洗浄の後、細胞を抗ＳＴＡＴ１ ｐＹ７０１ Ａｂ（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）で染色した。試料を、ＣｅｌｌＱｕｅｓｔ Ｐｒｏ Ｖｅｒｓｉｏｎ４．０．２ソフトウエア（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を用いて、ＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）で獲得した。

単離したＰＢＭＣを二重特異性キメラ（抗ヒトＣＤ８ ＶＨＨ／抗ヒトＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｒ１４９Ａ二重特異性キメラ、抗ヒトＣＤ８ ＶＨＨ／抗ヒトＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｒ３３Ａ／Ｅ１２０Ｅ二重特異性キメラ、または抗ヒトＢｃＩＩ１０ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｒ１４９Ａ）の系列希釈で刺激し、ＣＤ８（ＡＰＣ）およびｐＳＴＡＴ１（ＰＥ）について染色した。抗ヒトＣＤ８ ＶＨＨ／抗ヒトＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｒ１４９Ａ二重特異性キメラは、ＣＤ８陰性細胞中の抗ヒトＢｃＩＩ１０ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｒ１４９ＡよりもＳＴＡＴ１リン酸化においておよそ１００倍効果的であり（パネルＤおよびＦ）、ＰＤ−Ｌ１発現細胞に及ぼすＰＤ−Ｌ１標的化の影響を示す。ＣＤ８標的化の影響は、抗ヒトＣＤ８ ＶＨＨ／抗ヒトＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｒ１４９Ａ二重特異性キメラによる刺激の際の、ＣＤ８陽性細胞（図１５のパネルＥ）対ＣＤ８陰性細胞（図１５のパネルＦ）でのｐＳＴＡＴ１レベルの差異により明確に示された。組み合わされたヒトＩＦＮ Ｒ３３Ａ／Ｅ１２０Ａ突然変異は、ＳＴＡＴ１リン酸化を完全に遮断し、ＣＤ８および／またはＰＤ−Ｌ１標的化は、生物活性を救済しなかった。これは、ＳＴＡＴ１リン酸化を維持したＩＦＮ Ｒ１４９Ａ突然変異と対照的であった。

実施例８．一重および二重特異性キメラのヒトＰＤ−Ｌ１標的化
（二重特異性）ヒトキメラのヒトＰＤ−Ｌ１標的化の効率を、ＦＡＣＳ解析によるヒトＰＤ−Ｌ１陽性ＭＤＡ−ＭＢ−３２１細胞株中でのＳＴＡＴ１リン酸化の定量により検査した。試験されたキメラは、抗ヒトＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｒ１４９Ａ；抗ヒトＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｒ３３Ａ／Ｅ１２０Ｒ；抗ヒトＣｌｅｃ９Ａ ＶＨＨ／抗ヒトＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｒ１４９Ａ；抗ヒトＣｌｅｃ９Ａ ＶＨＨ／抗ヒトＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｒ３３Ａ／Ｅ１２０Ｒ；および抗ヒトＢｃｌ１０ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｒ１４９Ａであった。

ＭＤＡ−ＭＢ−３２１細胞を、１０％ＦＢＳを補充したＤＭＥＭ中で示されたヒトキメラにより、３７℃で１５分間刺激した。刺激後に、細胞を、１容量のＦｉｘ Ｂｕｆｆｅｒ Ｉ（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を３７℃で１０分間添加することにより固定し、氷上で３０分間、２容量のＰｅｒｍ ＩＩＩ Ｂｕｆｆｅｒ Ｉ（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）中の再懸濁により透過させた。試料を抗ＳＴＡＴ１ ｐＹ７０１抗体（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）により４℃で２０、染色し、ＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）およびＣｅｌｌＱｕｅｓｔ Ｐｒｏ Ｖｅｒｓｉｏｎ ４．０．２ソフトウエア（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）で解析した。

ＭＤＡ−ＭＢ−３２１を、一重特異性（ＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ）および二重特異性（Ｃｌｅｃ９ＡおよびＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ）キメラの系列希釈（１００ｎｇ／ｍｌ；５分の１）により３７℃で１５分間刺激した。固定および透過の後、細胞をｐｈｏｓｐｈｏ ＳＴＡＴ１について染色し、ＦＡＣＳで解析した。データは、ＰＤ−Ｌ１標的化（一重または二重特異性形式）が、ＩＦＮ Ｒ１４９Ａ突然変異を有するキメラによりＳＴＡＴ１リン酸化を強く増加させたが、ＩＦＮ Ｒ３３Ａ／Ｅ１２０Ｒ突然変異では増加させなかったことを示す。非標的化（ＢｃＩＩ１０ ＶＨＨ）キメラは、１００ｎｇ／ｍｌでもシグナル伝達できなかった。図１６参照。

実施例９ ｓｃＦｖ標的部分を有する二重特異性構築物
ＶＨＨを超える二重特異性コンセプトの拡張を実施した。以下の配列の抗ヒトＣＤ２０ｓｃＦｖ／抗ヒトＣＤ３ ｓｃＦｖ／ＩＦＮ Ｒ１４９Ａを作製した：

シグナルペプチドに下線が引かれており、ｓｃＦｖＣＤ３は太字であり、ｓｃＦｖＣＤ２０は太字で下線が引かれており、ｈＩＦＮａ２（Ｒ１４９Ａ）には陰影が付けられ、リンカーは標的部分およびシグナル伝達物質を連結する。

ヒトｓｃＦＶに基づく二重特異性キメラによる標的化の効率を、Ｄａｕｄｉ（ＣＤ２０陽性）、Ｊｕｒｋａｔ（ＣＤ３）またはＷｉｓｈ（陰性対照）細胞中でのＳＴＡＴ１リン酸化の定量により検査した。図１７参照。

細胞を、１０％ＦＢＳを補充したＤＭＥＭ中で示された二重特異性キメラにより、３７℃で１５分間刺激した。刺激後、細胞を、１容量のＦｉｘ Ｂｕｆｆｅｒ Ｉ（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を３７℃で１０分間添加することにより固定し、氷上で３０分間、２容量のＰｅｒｍ ＩＩＩ Ｂｕｆｆｅｒ Ｉ（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）中の再懸濁により透過させた。試料を抗ＳＴＡＴ１ ｐＹ７０１抗体（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）により４℃で２０分間染色し、ＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）およびＣｅｌｌＱｕｅｓｔ Ｐｒｏ Ｖｅｒｓｉｏｎ ４．０．２ソフトウエア（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）で解析した。

図１７に示される通り、Ｄａｕｄｉ、ＪｕｒｋａｔおよびＷｉｓｈ細胞を、ｓｃＦｖキメラの系列希釈（５０００ｎｇ／ｍｌ；５分の１）により３７℃で１５分間刺激した。固定および透過の後、細胞をｐｈｏｓｐｈｏ ＳＴＡＴ１について染色し、ＦＡＣＳ解析により解析した。データは、ＳＴＡＴ１リン酸化は、それぞれＣＤ３およびＣＤ２０標的化により、Ｗｉｓｈ細胞に比較してＪｕｒｋａｔ（ＣＤ３発現）およびＤａｕｄｉ（ＣＤ２０発現）細胞でより効率的であったことを明確に示した。

実施例１０．モデル化されたヒト抗腫瘍効果
ヒト臍帯血の選択
幹細胞は、実験中に用いられた腫瘍細胞によるＨＬＡ−Ａ２の発現と一致するＨＬＡ型であった。この目的のために、ＨＬＡ−Ａ２陽性臍帯血のみを選択して、ＣＤ３４幹細胞精製を進めた。細胞をＨＬＡ−Ａ２−ＦＩＴＣ（ＢＤ Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ）またはＨＬＡ−ＡＢＣ−ＰＥ（ＢＤ Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ）で染色し、後者を陽性対照とした。試料をＡｔｔｕｎｅ Ｎｘｔ Ａｃｏｕｓｔｉｃ Ｆｏｃｕｓｉｎｇ Ｃｙｔｏｍｅｔｅｒ（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）で獲得した。

ヒト臍帯血からのＣＤ３４^＋幹細胞の精製
ヒト臍帯血からの生存可能な単核細胞を、Ｆｙｃｏｌｌ（Ｌｙｍｐｈｏｐｒｅｐ、Ｓｔｅｍｃｅｌｌ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）勾配分離を利用して単離し、その後、直接ＣＤ３４^＋前駆細胞単離キット（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ）を用いてＣＤ３４^＋ ＭＡＣＳを単離した。ヒトＣＤ３−ＰＥ（ＢＤ Ｐｈａｍｒｉｎｇｅｎ）／ヒトＣＤ３４−ＡＰＣ（ＢＤ Ｐｈａｒｍｉｎｇｅｎ）を用いるフローサイトメトリー染色を利用して、単離された幹細胞の純度を評価した。試料を、Ａｔｔｕｎｅ Ｎｘｔ Ａｃｏｕｓｔｉｃ Ｆｏｃｕｓｉｎｇ Ｃｙｔｏｍｅｔｅｒ（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）で獲得した。注入された細胞の純度は、９５〜９８％に達した。

ヒト化マウスの作製
新生仔ＮＳＧマウス（１〜２日齢）に、１００ｃＧｙを致死量以下で照射した後、ＣＤ３４^＋ヒト幹細胞１０^５個を肝内送達した。ＣＤ３４移入後６週目に、末梢血を、ヒトおよびマウスの両方のＣＤ４５（両者ともＢＤ）の存在について分析して、生着の効果を分析した。試料をＬＳＲフローサイトメトリー（ＢＤ）で獲得し、ＦＡＣＳ Ｄｉｖａソフトウエア（ＢＤ）により解析した。

キメラの抗腫瘍能力を、腫瘍担持ヒト化マウスモデルで評定した。新生仔ＮＳＧマウス（１〜２日齢）に、１００ｃＧｙを致死量以下で照射した後、ＣＤ３４^＋ヒト幹細胞（ＨＬＡ−Ａ２陽性臍帯血から）１０^５個を肝内送達した。幹細胞移入後１３週目に、マウスにヒトＲＬ濾胞性リンパ腫細胞２．５×１０^６個をｓ．ｃ．接種した。マウスを、Ｆｌｔ３Ｌタンパク質３０μｌで、腫瘍接種後６日目に開始して１日１回処置した。１日１回の病変周辺キメラ送達（３０μｇ）を、触知可能な腫瘍に至った、腫瘍接種後１０日目に開始した。抗ヒトＣｌｅｃ９ａ ＶＨＨ／抗ヒトＰＤＬ１ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ−Ｒ１４９Ａ二重特異性キメラでの処置は、腫瘍成長の安定化をもたらし、それはＰＢＳの注射とは対照的に、Ｆｌｔ３Ｌ注射と組み合わせた場合により顕著であった。グラフは、腫瘍の成長を平均±ＳＥＭで示す。

重要なこととして、抗ヒトＣｌｅｃ９ａ ＶＨＨ／抗ヒトＰＤＬ１ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ−Ｒ１４９Ａ二重特異性キメラは、ヒト化マウス（再構成されたヒト免疫系を有するマウス）内で成長したヒト腫瘍（ＲＬ）に対する明確な抗腫瘍効果を示した。図１８参照。

実施例１１．抗ヒト二重特異性ＶＨＨキメラにより誘発される樹状細胞シグナル伝達
樹状細胞のｐＳＴＡＴシグナル伝達アッセイを、実施した。試験されたキメラは、抗ヒトＣｌｅｃ９Ａ ＶＨＨ／抗ヒトＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｒ１４９Ａおよび抗ヒトＣｌｅｃ９Ａ ＶＨＨ／抗ヒトＰＤ−Ｌ１ ＶＨＨ／ヒトＩＦＮ Ｒ３３Ａ／Ｅ１２０Ｒであった。物質の２用量：１００ｎｇ／ｍｌおよび５００ｎｇ／ｍｌを試験した。

手短に述べると、ヒトＰＢＭＣを、健常ドナーから得られた血液から単離した。およそ１２０ｍｌの血液を、ヘパリンコーティングチューブ（２１本）を用いて各ドナーから採取した。血液を室温で保持し、直ちに処理した。手短に述べると、血液をＤＰＢＳで１：１に希釈し、２５ｍｌをＬｙｍｐｈｏｌｙｔｅ Ｌ １５ｍｌの上に穏やかに載せた。遠心分離後、単核細胞の環を採取し、細胞をＤＰＢＳ（ＰＢＳダルベッコリン酸緩衝生理食塩水、Ｗｉｓｅｎｔ、カタログ＃３１１−４２５−ＬＬ）で３回洗浄しカウントした。樹状細胞を、製造業者の使用説明書に従って、ＰＢＳ中の系列特異性モノクローナル抗体と磁気粒子（ＳＴＥＭＣＥＬＬ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、カタログ番号１９２５１）の懸濁物との組み合わせを含む「ＤＣ濃縮キット」を用いてＰＢＭＣ集団から濃縮した。

樹状細胞（ＤＣ）を、テスト項目および対照（ＰＢＳ）の存在下または非存在下で１５分間刺激し、リン酸化ＳＴＡＴ１（ｐＳＴＡＴ１、具体的にはｐＹ７０１−ＳＴＡＴ１）のレベルを、フローサイトメトリーにより単離されたＤＣ細胞集団（Ｌｉｎ−（ＣＤ１４／ＣＤ１６／ＣＤ２０／ＣＤ５６／ＣＤ３）／ＨＬＡ−ＤＲ＋）で決定した。刺激後に、細胞を固定し（ＢＤ Ｃｙｔｏｆｉｘ固定緩衝液、ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ、カタログ＃５５４６５５）、その後Ｐｅｒｍ ｂｕｆｆｅｒ ＩＩ（ＢＤ ＰｈｏｓＦｌｏｗ Ｐｅｒｍ Ｂｕｆｆｅｒ、ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ、カタログ＃５５８０５２）で透過した。細胞をその後ｐｈｏｓｐｈｏ ＳＴＡＴ１およびＤＣ表面マーカー（Ｌｉｎ−／ＨＬＡ−ＤＲ＋）について染色した（以下の表参照）。細胞内および表面の両方の染色を、同時に実施した。フローサイトメトリーおよびデータの取得を、ＤＰＢＳでの細胞洗浄後に実施した。

図１９は、ｐＳＴＡＴ^＋樹状細胞の割合％の倍率変化として表されたデータを示す。

この試験は、細胞標的化の際にその活性が回復可能であるＩＦＮシグナル伝達物質（ＩＦＮ Ｒ１４９Ａ）を含む二重（二重特異性）ヒトＣＬＥＣ９Ａ／ＰＤ−Ｌ１抗原標的化構築物が、ヒト樹状細胞におけるＩＦＮシグナル伝達を促進することを明白に示す（ｐＳＴＡＴ１誘発により決定）。対照的に、ＩＦＮシグナル伝達活性化は、その活性化が回復可能でないＩＦＮシグナル伝達物質（ＩＦＮ Ｒ３３Ａ／Ｅ１２０Ｒ）を組み込んだ二重特異性ＣＬＥＣ９Ａ／ＰＤ−Ｌ１抗原標的化構築物では観察されない。したがって、マウスＣＬＥＣ９ＡおよびＰＤ−Ｌ１抗原を標的とする同等のＩＦＮ融合構築物で観察される通り、ヒトＣＬＥＣ９Ａ抗原に対する標的化部分を用いてＩＦＮをヒト樹状細胞に標的化させると、顕著なＩＦＮシグナル伝達の惹起が得られる。

均等物
本発明を具体的な実施形態と組み合わせて記載したが、さらなる修飾が可能であること、およびこの適用が、本発明の原理に概ね従う本発明の任意の変更、使用または適合を包含するものとし、本開示からのそのような逸脱が、本発明が属する技術分野で公知の、または慣用的実務内に含まれており、本明細書の先に示され、添付の特許請求の範囲の中の本質的特色に適用され得ることは、理解されよう。

当業者は、日常的実験を利用するだけで、本明細書に具体的に記載された具体的実施形態との数多くの均等物を認識し、または確認することが可能であろう。そのような均等物は、以下の特許請求の範囲に包含されるものとする。

参照による組み入れ
本明細書で参照される全ての特許および発行物は、全体として参照により本明細書に組み入れられる。

本明細書で議論される発行物は、単に本出願の提出日より以前のそれらの開示のために提供される。本明細書には、本発明が先行の発明のせいでそのような発行物を前の日付にする資格を与えられることの承認と解釈されるべきものはない。

本明細書で用いられる全ての表題は、単に構成のためのものであり、本開示を限定する意図はない。任意の各節の内容は、全ての節に均等に適用可能であり得る。

Claims (34)

1. （ａ）目的の抗原または受容体に特異的に結合する認識ドメインを含む、２つ以上の標的部分と；
   （ｂ）野生型シグナル伝達物質に比較して改善された安全性を付与する１つまたは複数の突然変異を有する、修飾されたシグナル伝達物質と
   を含むキメラタンパク質であって、
   前記標的化部分および修飾されたシグナル伝達物質が、１つまたは複数のリンカーで場合により連結される、キメラタンパク質。
2. 前記標的部分の１つまたは複数が、腫瘍細胞に対し向けられる、請求項１に記載のキメラタンパク質。
3. 前記標的部分の１つまたは複数が、免疫細胞に対し向けられる、請求項１に記載のキメラタンパク質。
4. 前記免疫細胞が、Ｔ細胞、Ｂ細胞、樹状細胞、マクロファージ、好中球、およびＮＫ細胞から選択される、請求項３に記載のキメラタンパク質。
5. （ｉ）前記標的部分の１つまたは複数が、Ｔ細胞、Ｂ細胞、樹状細胞、好中球、マクロファージ、およびＮＫ細胞から選択される免疫細胞に対し向けられ、かつ（ｉｉ）前記標的部分の１つまたは複数が、腫瘍細胞に対し向けられる、前記請求項のいずれかに記載のキメラタンパク質。
6. 前記認識ドメインが、完全長抗体、単一ドメイン抗体、組換えの重鎖のみの抗体（ＶＨＨ）、一本鎖抗体（ｓｃＦｖ）、シャーク重鎖のみの抗体（ＶＮＡＲ）、マイクロタンパク質（例えば、システインノットタンパク質、ノッティン）、Ｄａｒｐｉｎ；Ａｎｔｉｃａｌｉｎ；、Ａｄｎｅｃｔｉｎ、アプタマー、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２、ペプチド模倣分子、受容体に対する天然リガンド、または合成分子である、前記請求項のいずれかに記載のキメラタンパク質。
7. 前記認識ドメインが、単一ドメイン抗体（ＶＨＨ）またはｓｃＦｖである、前記請求項のいずれかに記載のキメラタンパク質。
8. 前記認識ドメインが、Ｖ_ＨＨ、ヒト化Ｖ_ＨＨまたはラクダ化Ｖ_ＨＨである、前記請求項のいずれかに記載のキメラタンパク質。
9. 前記認識ドメインが、前記目的の抗原または受容体を機能的にモジュレートする、前記請求項のいずれかに記載のキメラタンパク質。
10. 前記認識ドメインが、前記目的の抗原または受容体を結合するが機能的にモジュレートしない、前記請求項のいずれかに記載のキメラタンパク質。
11. 前記目的の抗原が、ＣＤ８、ＣＤ３、ＣＤ３３、ＳＬＡＭＦ７（ＣＳ１）、Ｓｉｒｐ１α、ＤＮＡＭ、およびＣＬＥＣ９Ａの１つまたは複数から選択される、前記請求項のいずれかに記載のキメラタンパク質。
12. 前記目的の抗体が、場合によりＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、およびＰＤ−Ｌ２から選択される、免疫チェックポイントである、前記請求項のいずれかに記載のキメラタンパク質。
13. 前記修飾されたシグナル伝達物質が、野生型シグナル伝達物質に比較して受容体に対する低減された親和性または活性を付与する１つまたは複数の突然変異を含む、請求項１に記載のキメラタンパク質。
14. 前記修飾されたシグナル伝達物質が、野生型シグナル伝達物質に比較して受容体に対する実質的に低減または除去された親和性または活性を付与する１つまたは複数の突然変異を含む、請求項１に記載のキメラタンパク質。
15. 前記修飾されたキメラタンパク質が、（ａ）野生型シグナル伝達物質に比較して受容体に対する実質的に低減または除去された親和性を付与する１つまたは複数の突然変異と（ｂ）野生型シグナル伝達物質に比較して受容体に対する低減された親和性または活性を付与する１つまたは複数の突然変異の両方を含み、かつ前記受容体が、異なっている、請求項１に記載のキメラタンパク質。
16. 前記１つまたは複数の突然変異が、活性の弱化を可能にする、請求項１３に記載のキメラタンパク質。
17. 作動または拮抗活性が、弱化される、請求項１６に記載のキメラタンパク質。
18. 前記シグナル伝達物質が、その活性を作動性から拮抗性に変換する１つまたは複数の突然変異を含む、請求項１６または１７に記載のキメラタンパク質。
19. 前記突然変異が、１つまたは複数の標的部分への付着により回復可能である低減された親和性または活性を付与する、請求項１３に記載のキメラタンパク質。
20. 前記突然変異が、１つまたは複数の標的部分への付着により実質的に回復可能でない実質的に低減または除去された親和性または活性を付与する、請求項１４に記載のキメラタンパク質。
21. 前記キメラタンパク質が、約５０ＫＤａ以上の分子量を有する、前記請求項のいずれかに記載のキメラタンパク質。
22. 前記キメラタンパク質が、腎臓による濾過を実質的に逃れる、前記請求項のいずれかに記載のキメラタンパク質。
23. 前記修飾されたシグナル伝達物質が、位置Ｌ１５３、Ｒ１４９、およびＭ１４８で１つまたは複数の突然変異を場合により有する、ＩＦＮα２ａである、前記請求項のいずれかに記載のキメラタンパク質。
24. 前記修飾されたシグナル伝達物質が、位置Ｒ１２０およびＨ１４６で１つまたは複数の突然変異を場合により有する、ＩＬ−１βである、前記請求項のいずれかに記載のキメラタンパク質。
25. 前記修飾されたシグナル伝達物質が、位置Ｙ８７およびＹ１１５で１つまたは複数の突然変異を場合により有する、ＴＮＦである、前記請求項のいずれかに記載のキメラタンパク質。
26. 前記キメラタンパク質が、癌、感染、免疫障害、自己免疫性疾患、心臓血管疾患、創傷、虚血関連疾患、神経変性疾患、および／または代謝疾患の１つまたは複数を有する患者における使用に適する、前記請求項のいずれか１項に記載のキメラタンパク質。
27. 前記請求項のいずれか１項に記載のものまたはキメラタンパク質をコードする組換え核酸組成物。
28. 請求項２７に記載の核酸を含む宿主細胞。
29. それを必要とする患者に前記請求項のいずれかに記載のキメラタンパク質の有効量を投与することを含む、癌を処置するための方法。
30. 前記癌が、基底細胞癌、胆道癌、膀胱癌、骨癌、脳および中枢神経系癌、乳癌、腹膜の癌、子宮頸癌、絨毛癌、大腸癌、結合組織癌、消化器系の癌、子宮内膜癌、食道癌、眼癌、頭頸部癌、胃癌（ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ）（胃腸癌を含む）、神経膠芽腫、肝細胞癌、ヘパトーマ、上皮内腫瘍、腎臓癌、喉頭癌、白血病、肝臓癌、肺癌（例えば、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、肺腺癌、および肺の扁平上皮癌）、黒色腫、骨髄腫、神経芽細胞腫、口腔癌（唇、舌、口および咽頭）、卵巣癌、膵臓癌、前立腺癌、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、直腸癌、呼吸器系の癌、唾液腺癌、肉腫、皮膚癌、扁平上皮癌、胃癌（ｓｔｏｍａｃｈ ｃａｎｃｅｒ）、精巣癌、甲状腺癌、子宮または子宮内膜癌、泌尿器系の癌、外陰部癌、ホジキンおよび非ホジキンリンパ腫、ならびにＢ細胞リンパ腫（低悪性度／濾胞性非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）を含む、小リンパ球性（ＳＬ）ＮＨＬ、中悪性度／濾胞性ＮＨＬ、中悪性度びまん性ＮＨＬ、高悪性度免疫芽細胞性ＮＨＬ、高悪性度リンパ芽球性ＮＨＬ、高悪性度小型非切れ込み核細胞ＮＨＬ、巨大腫瘤病変ＮＨＬ、マントル細胞リンパ腫、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、およびワルデンストレームマクログロブリン血症を含むリンパ腫、慢性リンパ球性白血病（ＣＬＬ）、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、ヘアリー細胞白血病、慢性骨髄芽球性白血病、および他の癌腫および肉腫、ならびに移植後リンパ増殖性疾患（ＰＴＬＤ）、ならびに母斑症、浮腫（例えば、脳腫瘍と関連するもの）、およびメイグス症候群と関連する異常な血管増殖の１つまたは複数から選択される、請求項２９に記載の方法。
31. それを必要とする患者に前記請求項のいずれかに記載のキメラタンパク質の有効量を投与することを含む、自己免疫性疾患または障害を処置するための方法。
32. 前記自己免疫性疾患または障害が、クローン病、全身性エリテマトーデス、関節リウマチまたは若年性関節リウマチ、潰瘍性大腸炎、免疫障害、例えば好酸球性筋膜炎、低免疫グロブリン血症、または胸腺腫／胸腺癌、移植片対宿主病、前白血病、非造血系症候群（例えば、ダウン、デュボヴィッツ、セッケル）、フェルティ症候群、溶血性尿毒症症候群、骨髄異形成症候群、発作性夜間ヘモグロビン尿症、骨髄線維症、汎血球減少症、赤芽球ろう、ヘノッホ・シェーンライン紫斑病、マラリア、タンパク質欠乏、月経過多、全身性硬化症、肝硬変、低代謝状態、およびうっ血性心不全の１つまたは複数から選択される、請求項３１に記載の方法。
33. 本明細書に記載される、癌、感染、免疫障害、自己免疫性疾患、心臓血管疾患、創傷、虚血関連疾患、神経変性疾患、および／または代謝疾患の１つまたは複数の処置における使用のための前記請求項のいずれかに記載のキメラタンパク質。
34. 本明細書に記載される、癌、感染、免疫障害、自己免疫性疾患、心臓血管疾患、創傷、虚血関連疾患、神経変性疾患、および／または代謝疾患の１つまたは複数を処置するための薬剤の製造のための前記請求項のいずれかに記載のキメラタンパク質の使用。

Images