JP2018529738A5

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Publication number: JP2018529738A5
Application number: JP2018517329A
Authority: JP
Filing date: 2016-10-05
Publication date: 2019-11-14
Anticipated expiration: 2036-10-05

Description

本開示の多様な実施形態についての詳細を、下記の記載に明示する。本開示の他の特色、目的、および利点は、記載および図面、ならびに特許請求の範囲から明らかであろう。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
（項目１）
被験体における抗薬物抗体応答を低減または阻害する方法であって、前記被験体へと、目的のポリペプチドをコードする修飾メッセンジャーＲＮＡ（ｍｍＲＮＡ）を投与するステップを含み、前記被験体における、前記目的のポリペプチドに対する抗薬物抗体応答を低減または阻害するように、前記ｍｍＲＮＡが、（ｉ）少なくとも１つのｍｉＲ−１４２−３ｐマイクロＲＮＡ結合部位；（ｉｉ）少なくとも１つのｍｉＲ−１２６結合部位；または（ｉｉｉ）少なくとも１つのｍｉＲ−１４２−３ｐマイクロＲＮＡ結合部位および少なくとも１つのｍｉＲ−１２６結合部位を含み、前記ｍｍＲＮＡが、１または複数の修飾ヌクレオ塩基を含む、方法。
（項目２）
前記ｍｍＲＮＡを、脂質ナノ粒子内に封入して、静脈内投与する、項目１に記載の方法。
（項目３）
前記ｍｍＲＮＡを、毎週１回の注入により投与する、項目２に記載の方法。
（項目４）
前記ｍｍＲＮＡが、５’ＵＴＲ、前記目的のポリペプチドをコードする、コドン最適化オープンリーディングフレーム、（ｉ）前記少なくとも１つのｍｉＲ−１４２−３ｐマイクロＲＮＡ結合部位；（ｉｉ）前記少なくとも１つのｍｉＲ−１２６結合部位；または（ｉｉｉ）前記少なくとも１つのｍｉＲ−１４２−３ｐマイクロＲＮＡ結合部位および少なくとも１つのｍｉＲ−１２６結合部位を含む３’ＵＴＲ、ならびに連結されるヌクレオシドの３’テーリング領域を含む、先行する項目のいずれかに記載の方法。
（項目５）
前記ｍｍＲＮＡが、コード領域に対して異種性である、５’ＵＴＲおよび３’ＵＴＲを含む、先行する項目のいずれかに記載の方法。
（項目６）
前記ｍｍＲＮＡを、全修飾する、先行する項目のいずれかに記載の方法。
（項目７）
前記ｍｍＲＮＡが、シュードウリジン（ψ）、シュードウリジン（ψ）および５−メチルシチジン（ｍ５Ｃ）、１−メチルシュードウリジン（ｍ ^１ ψ）、１−メチルシュードウリジン（ｍ ^１ ψ）および５−メチルシチジン（ｍ ^５Ｃ）、２−チオウリジン（ｓ ^２Ｕ）、２−チオウリジンおよび５−メチルシチジン（ｍ ^５Ｃ）、５−メトキシウリジン（ｍｏ ^５Ｕ）、５−メトキシウリジン（ｍｏ ^５Ｕ）および５−メチルシチジン（ｍ ^５Ｃ）、２’−Ｏ−メチルウリジン、２’−Ｏ−メチルウリジンおよび５−メチルシチジン（ｍ ^５Ｃ）、Ｎ６−メチルアデノシン（ｍ ^６Ａ）、またはＮ６−メチルアデノシン（ｍ ^６Ａ）および５−メチルシチジン（ｍ ^５Ｃ）を含む、先行する項目のいずれかに記載の方法。
（項目８）
前記ｍｍＲＮＡが、シュードウリジン（ψ）、Ｎ１−メチルシュードウリジン（ｍ ^１ ψ）、２−チオウリジン、４’−チオウリジン、５−メチルシトシン、２−チオ−１−メチル−１−デアザシュードウリジン、２−チオ−１−メチルシュードウリジン、２−チオ−５−アザウリジン、２−チオジヒドロシュードウリジン、２−チオジヒドロウリジン、２−チオシュードウリジン、４−メトキシ−２−チオシュードウリジン、４−メトキシシュードウリジン、４−チオ−１−メチルシュードウリジン、４−チオシュードウリジン、５−アザウリジン、ジヒドロシュードウリジン、５−メトキシウリジン、もしくは２’−Ｏ−メチルウリジン、またはこれらの組合せを含む、先行する項目のいずれかに記載の方法。
（項目９）
前記ｍｍＲＮＡが、１−メチルシュードウリジン（ｍ ^１ ψ）、５−メトキシウリジン（ｍｏ ^５Ｕ）、５−メチルシチジン（ｍ ^５Ｃ）、シュードウリジン（ψ）、α−チオグアノシン、もしくはα−チオアデノシン、またはこれらの組合せを含む、先行する項目のいずれかに記載の方法。
（項目１０）
前記目的のポリペプチドが、治療用タンパク質、サイトカイン、増殖因子、抗体、または融合タンパク質である、先行する項目のいずれかに記載の方法。
（項目１１）
脂質ナノ粒子が、リポソームである、先行する項目のいずれかに記載の方法。
（項目１２）
脂質ナノ粒子が、カチオン性脂質および／またはイオン化脂質を含む、先行する項目のいずれかに記載の方法。
（項目１３）
前記カチオン性脂質および／またはイオン化脂質が、ＤＬｉｎ−ＫＣ２−ＤＭＡまたはＤＬｉｎ−ＭＣ３−ＤＭＡである、項目１２に記載の方法。
（項目１４）
前記ｍｍＲＮＡが、配列番号３に示される配列を含む、少なくとも１つのｍｉＲ−１４２−３ｐマイクロＲＮＡ結合部位を含む、項目１から１３のいずれか一項に記載の方法。
（項目１５）
前記ｍｍＲＮＡが、少なくとも２つのマイクロＲＮＡ結合部位を含み、前記マイクロＲＮＡ結合部位のうちの少なくとも１つが、ｍｉＲ−１４２−３ｐマイクロＲＮＡ結合部位である、項目１から１３のいずれか一項に記載の方法。
（項目１６）
前記ｍｍＲＮＡが、ｍｉＲ−１４２−３ｐ結合部位と、ｍｉＲ−１４２−５ｐ、ｍｉＲ−１４６−３ｐ、ｍｉＲ−１４６−５ｐ、ｍｉＲ−１５５、ｍｉＲ−１２６、ｍｉＲ−１６、ｍｉＲ−２１、ｍｉＲ−２２３、ｍｉＲ−２４、およびｍｉＲ−２７からなる群から選択される、ｍｉＲに対する第２のマイクロＲＮＡ結合部位とを含む、項目１５に記載の方法。
（項目１７）
前記ｍｍＲＮＡが、配列番号２６に示される配列を含む、少なくとも１つのｍｉＲ−１２６マイクロＲＮＡ結合部位を含む、項目１から１３のいずれか一項に記載の方法。
（項目１８）
前記ｍｍＲＮＡが、少なくとも２つのマイクロＲＮＡ結合部位を含み、前記マイクロＲＮＡ結合部位のうちの少なくとも１つが、ｍｉＲ−１２６マイクロＲＮＡ結合部位である、項目１から１３のいずれか一項に記載の方法。
（項目１９）
前記ｍｍＲＮＡが、ｍｉＲ−１２６結合部位と、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−１４２−５ｐ、ｍｉＲ−１４６−３ｐ、ｍｉＲ−１４６−５ｐ、ｍｉＲ−１５５、ｍｉＲ−１６、ｍｉＲ−２１、ｍｉＲ−２２３、ｍｉＲ−２４、およびｍｉＲ−２７からなる群から選択される、ｍｉＲに対する第２のマイクロＲＮＡ結合部位とを含む、項目１８に記載の方法。
（項目２０）
ｍｍＲＮＡ構築物が、ｍｉＲ−１２６結合部位およびｍｉＲ−１４２−３ｐ結合部位を含む、項目１から１３のいずれか一項に記載の方法。
（項目２１）
ｍｍＲＮＡ構築物が、３つのｍｉＲ−１４２−３ｐ結合部位を含む、項目１から１３のいずれか一項に記載の方法。
（項目２２）
ｍｍＲＮＡ構築物が、３つのｍｉＲ−１２６結合部位を含む、項目１から１３のいずれか一項に記載の方法。
（項目２３）
前記目的のポリペプチドをコードする、前記コドン最適化オープンリーディングフレームが、終止コドンを含み、前記（ｉ）少なくとも１つのｍｉＲ−１４２−３ｐマイクロＲＮＡ結合部位；（ｉｉ）少なくとも１つのｍｉＲ−１２６結合部位；または（ｉｉｉ）少なくとも１つのｍｉＲ−１４２−３ｐマイクロＲＮＡ結合部位および少なくとも１つのｍｉＲ−１２６結合部位を、前記終止コドンの後の、３’ＵＴＲの３０〜５０ヌクレオチドの中に配置する、項目１から１３のいずれか一項に記載の方法。
（項目２４）
前記目的のポリペプチドをコードする、前記コドン最適化オープンリーディングフレームが、終止コドンを含み、前記（ｉ）少なくとも１つのｍｉＲ−１４２−３ｐマイクロＲＮＡ結合部位；（ｉｉ）少なくとも１つのｍｉＲ−１２６結合部位；または（ｉｉｉ）少なくとも１つのｍｉＲ−１４２−３ｐマイクロＲＮＡ結合部位および少なくとも１つのｍｉＲ−１２６結合部位を、前記終止コドンの後の、３’ＵＴＲの少なくとも５０ヌクレオチドの中に配置する、項目１から１３のいずれか一項に記載の方法。
（項目２５）
前記（ｉ）少なくとも１つのｍｉＲ−１４２−３ｐマイクロＲＮＡ結合部位；（ｉｉ）少なくとも１つのｍｉＲ−１２６結合部位；または（ｉｉｉ）少なくとも１つのｍｉＲ−１４２−３ｐマイクロＲＮＡ結合部位および少なくとも１つのｍｉＲ−１２６結合部位を、前記ｍｍＲＮＡ構築物の５’ＵＴＲ内に配置する、項目１から１３のいずれか一項に記載の方法。
（項目２６）
目的のポリペプチドの、被験体への反復投与後における、抗薬物抗体応答を低減または阻害する方法であって、前記被験体へと、ＬＮＰ内に封入された、目的のポリペプチドをコードする修飾ｍＲＮＡ（ｍｍＲＮＡ）の第１の用量を静脈内投与するステップであり、前記ｍｍＲＮＡが、（ｉ）少なくとも１つのｍｉＲ−１４２−３ｐマイクロＲＮＡ結合部位；（ｉｉ）少なくとも１つのｍｉＲ−１２６結合部位；または（ｉｉｉ）少なくとも１つのｍｉＲ−１４２−３ｐマイクロＲＮＡ結合部位および少なくとも１つのｍｉＲ−１２６結合部位を含み、前記ｍｍＲＮＡが、１または複数の修飾ヌクレオ塩基を含むステップと；
前記被験体における、前記目的のポリペプチドに対する抗薬物抗体応答を低減または阻害するように、前記被験体へと、ＬＮＰ内に封入された前記ｍｍＲＮＡの第２の用量を、静脈内投与するステップと
を含む方法。
（項目２７）
目的のポリペプチドの、被験体への反復投与後における、抗薬物抗体応答を低減または阻害する方法であって、
（ｉ）前記被験体へと、ＬＮＰ内に封入された、目的のポリペプチドをコードする修飾ｍＲＮＡ（ｍｍＲＮＡ）の第１の用量を静脈内投与するステップであって、前記ｍｍＲＮＡが、（ｉ）少なくとも１つのｍｉＲ−１４２−３ｐマイクロＲＮＡ結合部位；（ｉｉ）少なくとも１つのｍｉＲ−１２６結合部位；または（ｉｉｉ）少なくとも１つのｍｉＲ−１４２−３ｐマイクロＲＮＡ結合部位および少なくとも１つのｍｉＲ−１２６結合部位を含み、前記ｍｍＲＮＡが、１または複数の修飾ヌクレオ塩基を含むステップと；
（ｉｉ）前記被験体に由来する試料中の抗薬物抗体のレベルを検出するステップと；
（ｉｉｉ）前記試料中の抗薬物抗体の前記レベルが低下したら、前記被験体における、前記目的のポリペプチドに対する抗薬物抗体応答を低減または阻害するように、前記被験体へと、ＬＮＰ内に封入された前記ｍｍＲＮＡの第２の用量を、静脈内投与するステップと
を含む方法。
（項目２８）
被験体における薬物関連毒性を低減または阻害する方法であって、前記被験体へと、目的のポリペプチドをコードする修飾メッセンジャーＲＮＡ（ｍｍＲＮＡ）を投与するステップを含み、前記被験体における、前記目的のポリペプチドに対する薬物関連毒性を低減または阻害するように、前記ｍｍＲＮＡが、（ｉ）少なくとも１つのｍｉＲ−１４２−３ｐマイクロＲＮＡ結合部位；（ｉｉ）少なくとも１つのｍｉＲ−１２６結合部位；または（ｉｉｉ）少なくとも１つのｍｉＲ−１４２−３ｐマイクロＲＮＡ結合部位および少なくとも１つのｍｉＲ−１２６結合部位を含み、前記ｍｍＲＮＡが、１または複数の修飾ヌクレオ塩基を含む、方法。
（項目２９）
目的のポリペプチドをコードするメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）を投与された被験体における、望ましくない免疫細胞の活性化を低減または阻害する方法であって、前記被験体へと、前記目的のポリペプチドをコードする化学修飾ｍＲＮＡを投与するステップを含み、前記被験体における、望ましくない免疫細胞の活性化を低減または阻害するように、前記化学修飾ｍＲＮＡが、免疫細胞内で発現するマイクロＲＮＡに対する、少なくとも１つのマイクロＲＮＡ結合部位を含み、前記化学修飾ｍＲＮＡが、１または複数の修飾ヌクレオ塩基を含む、方法。
（項目３０）
望ましくない免疫細胞の活性化の低減または阻害を、前記少なくとも１つのマイクロＲＮＡ結合部位を欠く化学修飾ｍＲＮＡの対照投与と比較して決定する、項目２９に記載の方法。
（項目３１）
前記望ましくない免疫細胞の活性化の低減または阻害が、リンパ球の活性化の低減または阻害である、項目２９に記載の方法。
（項目３２）
前記リンパ球の活性化の低減または阻害が、Ｂ細胞の活性化の低減または阻害である、項目３１に記載の方法。
（項目３３）
Ｂ細胞の活性化の低減または阻害を、ＣＤ１９ ^＋ＣＤ８６ ^＋ＣＤ６９ ^＋Ｂ細胞の頻度により決定する、項目３２に記載の方法。
（項目３４）
前記望ましくない免疫細胞の活性化の低減または阻害が、サイトカイン産生の低減または阻害を引き起こす、項目２９から３３のいずれか一項に記載の方法。
（項目３５）
免疫細胞の活性化を、前記化学修飾ｍＲＮＡによりコードされる、前記目的のポリペプチドの発現の、対応する減少を伴わずに減少させる、項目２９から３４のいずれか一項に記載の方法。
（項目３６）
目的のポリペプチドをコードするメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）を投与された被験体における、望ましくないサイトカインの産生を低減または阻害する方法であって、前記被験体へと、前記目的のポリペプチドをコードする化学修飾ｍＲＮＡを投与するステップを含み、前記被験体における、望ましくないサイトカインの産生を低減または阻害するように、前記化学修飾ｍＲＮＡが、免疫細胞内で発現するマイクロＲＮＡに対する、少なくとも１つのマイクロＲＮＡ結合部位を含み、前記化学修飾ｍＲＮＡが、１または複数の修飾ヌクレオ塩基を含む、方法。
（項目３７）
望ましくないサイトカインの産生の低減または阻害を、免疫細胞内で発現するマイクロＲＮＡに対する、前記少なくとも１つのマイクロＲＮＡ結合部位を欠く化学修飾ｍＲＮＡの対照投与と比較して決定する、項目３６に記載の方法。
（項目３８）
前記サイトカインの産生の低減または阻害が、インターロイキン６（ＩＬ−６）、腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ−α）、またはインターフェロンγ（ＩＦＮ−γ）の産生の低減または阻害である、項目３６に記載の方法。
（項目３９）
前記サイトカインの産生の低減または阻害が、インターロイキン６（ＩＬ−６）の産生の低減または阻害である、項目３６に記載の方法。
（項目４０）
サイトカインの産生を、前記化学修飾ｍＲＮＡによりコードされる、前記目的のポリペプチドの発現の、対応する減少を伴わずに減少させる、項目３６から３９のいずれか一項に記載の方法。
（項目４１）
前記化学修飾ｍＲＮＡを、脂質ナノ粒子内に封入して、静脈内投与する、項目２９から４０のいずれか一項に記載の方法。
（項目４２）
前記化学修飾ｍＲＮＡを、毎週１回の注入により投与する、項目４１に記載の方法。
（項目４３）
前記化学修飾ｍＲＮＡが、５’ＵＴＲ、前記目的のポリペプチドをコードする、コドン最適化オープンリーディングフレーム、前記少なくとも１つのマイクロＲＮＡ結合部位を含む３’ＵＴＲ、および連結されるヌクレオシドの３’テーリング領域を含む、項目２９から４２のいずれか一項に記載の方法。
（項目４４）
前記化学修飾ｍＲＮＡが、前記オープンリーディングフレームに対して異種性である、５’ＵＴＲおよび３’ＵＴＲを含む、項目４３に記載の方法。
（項目４５）
前記ｍＲＮＡを、全修飾する、項目２９から４４のいずれか一項に記載の方法。
（項目４６）
前記ｍＲＮＡが、シュードウリジン（ψ）、シュードウリジン（ψ）および５−メチルシチジン（ｍ５Ｃ）、１−メチルシュードウリジン（ｍ ^１ ψ）、１−メチルシュードウリジン（ｍ ^１ ψ）および５−メチルシチジン（ｍ ^５Ｃ）、２−チオウリジン（ｓ ^２Ｕ）、２−チオウリジンおよび５−メチルシチジン（ｍ ^５Ｃ）、５−メトキシウリジン（ｍｏ ^５Ｕ）、５−メトキシウリジン（ｍｏ ^５Ｕ）および５−メチルシチジン（ｍ ^５Ｃ）、２’−Ｏ−メチルウリジン、２’−Ｏ−メチルウリジンおよび５−メチルシチジン（ｍ ^５Ｃ）、Ｎ６−メチルアデノシン（ｍ ^６Ａ）、またはＮ６−メチルアデノシン（ｍ ^６Ａ）および５−メチルシチジン（ｍ ^５Ｃ）を含む、項目２９から４５のいずれかに記載の方法。
（項目４７）
前記ｍＲＮＡが、シュードウリジン（ψ）、Ｎ１−メチルシュードウリジン（ｍ ^１ ψ）、２−チオウリジン、４’−チオウリジン、５−メチルシトシン、２−チオ−１−メチル−１−デアザシュードウリジン、２−チオ−１−メチルシュードウリジン、２−チオ−５−アザウリジン、２−チオジヒドロシュードウリジン、２−チオジヒドロウリジン、２−チオシュードウリジン、４−メトキシ−２−チオシュードウリジン、４−メトキシシュードウリジン、４−チオ−１−メチルシュードウリジン、４−チオシュードウリジン、５−アザウリジン、ジヒドロシュードウリジン、５−メトキシウリジン、もしくは２’−Ｏ−メチルウリジン、またはこれらの組合せを含む、項目２９から４６のいずれか一項に記載の方法。
（項目４８）
前記ｍＲＮＡが、１−メチルシュードウリジン（ｍ ^１ ψ）、５−メトキシウリジン（ｍｏ ^５Ｕ）、５−メチルシチジン（ｍ ^５Ｃ）、シュードウリジン（ψ）、α−チオグアノシン、もしくはα−チオアデノシン、またはこれらの組合せを含む、項目２９から４７のいずれか一項に記載の方法。
（項目４９）
前記マイクロＲＮＡ結合部位が、骨髄系細胞内で発現するマイクロＲＮＡに結合する、項目２９から４８のいずれか一項に記載の方法。
（項目５０）
前記マイクロＲＮＡ結合部位が、形質細胞様樹状細胞内で発現するマイクロＲＮＡに結合する、項目２９から４８のいずれか一項に記載の方法。
（項目５１）
前記マイクロＲＮＡ結合部位が、マクロファージ内で発現するマイクロＲＮＡに結合する、項目２９から４８のいずれか一項に記載の方法。
（項目５２）
前記マイクロＲＮＡ結合部位が、ｍｉＲ−１２６マイクロＲＮＡ結合部位である、項目２９から４８のいずれか一項に記載の方法。
（項目５３）
前記ｍｉＲ−１２６マイクロＲＮＡ結合部位が、配列番号２６に示される配列を含む、項目５２に記載の方法。
（項目５４）
前記マイクロＲＮＡ結合部位が、ｍｉＲ−１４２マイクロＲＮＡ結合部位である、項目２９から４８のいずれか一項に記載の方法。
（項目５５）
前記ｍｉＲ−１４２マイクロＲＮＡ結合部位が、配列番号３に示される配列を含む、項目５４に記載の方法。
（項目５６）
前記マイクロＲＮＡ結合部位が、ｍｉＲ−１５５マイクロＲＮＡ結合部位である、項目２９から４８のいずれか一項に記載の方法。
（項目５７）
前記ｍｉＲ−１５５マイクロＲＮＡ結合部位が、配列番号３５に示される配列を含む、項目５６に記載の方法。
（項目５８）
前記目的のポリペプチドが、治療用タンパク質、サイトカイン、増殖因子、抗体、または融合タンパク質である、項目２９から５７のいずれか一項に記載の方法。
（項目５９）
前記化学修飾ｍＲＮＡが、少なくとも２つのマイクロＲＮＡ結合部位を含む、項目２９から５８のいずれか一項に記載の方法。
（項目６０）
前記マイクロＲＮＡ結合部位のうちの少なくとも１つが、ｍｉＲ−１２６マイクロＲＮＡ結合部位である、項目５９に記載の方法。
（項目６１）
前記化学修飾ｍＲＮＡが、ｍｉＲ−１２６結合部位と、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−１４２−５ｐ、ｍｉＲ−１４６−３ｐ、ｍｉＲ−１４６−５ｐ、ｍｉＲ−１５５、ｍｉＲ−１６、ｍｉＲ−２１、ｍｉＲ−２２３、ｍｉＲ−２４、およびｍｉＲ−２７からなる群から選択される、ｍｉＲに対する第２のマイクロＲＮＡ結合部位とを含む、項目６０に記載の方法。
（項目６２）
前記化学修飾ｍＲＮＡが、ｍｉＲ−１２６結合部位およびｍｉＲ−１４２結合部位を含む、項目６０に記載の方法。
（項目６３）
前記脂質ナノ粒子が、リポソームである、項目４１に記載の方法。
（項目６４）
前記脂質ナノ粒子が、カチオン性脂質および／またはイオン化脂質を含む、項目４１に記載の方法。
（項目６５）
前記カチオン性脂質および／またはイオン化脂質が、ＤＬｉｎ−ＫＣ２−ＤＭＡまたはＤＬｉｎ−ＭＣ３−ＤＭＡである、項目６４に記載の方法。
（項目６６）
目的のポリペプチドをコードするメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）を投与された被験体における、望ましくない免疫細胞の活性化を低減または阻害する方法であって、前記被験体へと、脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）内に封入された化学修飾ｍＲＮＡの第１の用量を、静脈内投与するステップであり、前記化学修飾ｍＲＮＡが、免疫細胞内で発現するマイクロＲＮＡに対する、少なくとも１つのマイクロＲＮＡ結合部位を含み、前記化学修飾ｍＲＮＡが、１または複数の修飾ヌクレオ塩基を含むステップと；
前記被験体における、望ましくない免疫細胞の活性化を低減または阻害するように、前記被験体へと、ＬＮＰ内に封入された前記化学修飾ｍＲＮＡの第２の用量を、静脈内投与するステップと
を含む方法。
（項目６７）
目的のポリペプチドをコードするメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）の、被験体への反復投与後の前記被験体における、望ましくない免疫細胞の活性化を低減または阻害する方法であって、
（ｉ）前記被験体へと、脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）内に封入された化学修飾ｍＲＮＡの第１の用量を、静脈内投与するステップであり、前記化学修飾ｍＲＮＡが、免疫細胞内で発現するマイクロＲＮＡに対する、少なくとも１つのマイクロＲＮＡ結合部位を含み、
前記化学修飾ｍＲＮＡが、１または複数の修飾ヌクレオ塩基を含むステップと；
（ｉｉ）前記被験体に由来する試料中の免疫細胞の活性化のレベルを検出するステップと；
（ｉｉｉ）前記試料中の免疫細胞の活性化の前記レベルが低下したら、前記被験体における、望ましくない免疫細胞の活性化を低減または阻害するように、前記被験体へと、ＬＮＰ内に封入された前記化学修飾ｍＲＮＡの第２の用量を、静脈内投与するステップと
を含む方法。
（項目６８）
前記望ましくない免疫細胞の活性化の低減または阻害が、Ｂ細胞の活性化の低減または阻害である、項目６６または６７に記載の方法。
（項目６９）
前記望ましくない免疫細胞の活性化の低減または阻害が、サイトカインの産生の低減または阻害を引き起こす、項目６６または６７に記載の方法。
（項目７０）
脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）内に封入された、目的のポリペプチドをコードするメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）を反復投与された被験体における、血中クリアランスの加速化を低減または阻害する方法であって、前記被験体へと、脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）内に封入された、前記目的のポリペプチドをコードする化学修飾ｍＲＮＡを投与するステップを含み、反復投与後の前記被験体における血中クリアランスの加速化を低減または阻害するように、前記化学修飾ｍＲＮＡが、免疫細胞内で発現するマイクロＲＮＡに対する、少なくとも１つのマイクロＲＮＡ結合部位を含み、前記化学修飾ｍＲＮＡが、１または複数の修飾ヌクレオ塩基を含む、方法。
（項目７１）
脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）内に封入された、目的のポリペプチドをコードするメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）を投与された被験体における、血中クリアランスの加速化を低減または阻害する方法であって、前記被験体へと、脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）内に封入された化学修飾ｍＲＮＡの第１の用量を、静脈内投与するステップであり、前記化学修飾ｍＲＮＡが、免疫細胞内で発現するマイクロＲＮＡに対する、少なくとも１つのマイクロＲＮＡ結合部位を含み、前記化学修飾ｍＲＮＡが、１または複数の修飾ヌクレオ塩基を含む、ステップと；
前記被験体における血中クリアランスの加速化を低減または阻害するように、前記被験体へと、ＬＮＰ内に封入された前記化学修飾ｍＲＮＡの第２の用量を、静脈内投与するステップと
を含む方法。
（項目７２）
脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）内に封入された、前記目的のポリペプチドをコードするｍＲＮＡが、Ｂ細胞を活性化させず、かつ／または前記ＬＮＰに結合することが可能なＩｇＭ分子の産生を誘導しない、項目７０から７１のいずれか一項に記載の方法。
（項目７３）
血中クリアランスの加速化の低減または阻害を、脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）内に封入された、前記少なくとも１つのマイクロＲＮＡ結合部位を欠く化学修飾ｍＲＮＡの対照投与と比較して決定する、項目７０から７２のいずれか一項に記載の方法。
（項目７４）
血中クリアランスの加速化を、前記化学修飾ｍＲＮＡによりコードされる、前記目的のポリペプチドの発現の、対応する低下または阻害を伴わずに低減または阻害する、項目７０から７３のいずれか一項に記載の方法。
（項目７５）
２回にわたる連続投与の間の間隔が、２週間未満である、項目７０から７４のいずれか一項に記載の方法。
（項目７６）
２回にわたる連続投与の間の間隔が、１週間未満である、項目７５に記載の方法。
（項目７７）
脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）内に封入された、目的のポリペプチドをコードするメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）を反復投与された被験体における、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を認識するＩｇＭ分子の産生を低減または阻害する方法であって、前記被験体へと、脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）内に封入された、前記目的のポリペプチドをコードする化学修飾ｍＲＮＡを投与するステップを含み、反復投与後の前記被験体における、ＰＥＧを認識するＩｇＭ分子の産生を低減または阻害するように、前記化学修飾ｍＲＮＡが、免疫細胞内で発現するマイクロＲＮＡに対する、少なくとも１つのマイクロＲＮＡ結合部位を含み、前記化学修飾ｍＲＮＡが、１または複数の修飾ヌクレオ塩基を含む、方法。
（項目７８）
脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）内に封入された、目的のポリペプチドをコードするメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）を投与された被験体における、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を認識するＩｇＭ分子の産生を低減または阻害する方法であって、前記被験体へと、脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）内に封入された化学修飾ｍＲＮＡの第１の用量を、静脈内投与するステップであり、前記化学修飾ｍＲＮＡが、免疫細胞内で発現するマイクロＲＮＡに対する、少なくとも１つのマイクロＲＮＡ結合部位を含み、前記化学修飾ｍＲＮＡが、１または複数の修飾ヌクレオ塩基を含むステップと；
前記被験体における、ＰＥＧを認識するＩｇＭ分子の産生を低減または阻害するように、前記被験体へと、ＬＮＰ内に封入された前記化学修飾ｍＲＮＡの第２の用量を、静脈内投与するステップと
を含む方法。
（項目７９）
前記化学修飾ｍＲＮＡが、５’ＵＴＲ、前記目的のポリペプチドをコードする、コドン最適化オープンリーディングフレーム、前記少なくとも１つのマイクロＲＮＡ結合部位を含む３’ＵＴＲ、および連結されるヌクレオシドの３’テーリング領域を含む、項目７０から７８のいずれか一項に記載の方法。
（項目８０）
前記化学修飾ｍＲＮＡが、前記オープンリーディングフレームに対して異種性である、５’ＵＴＲおよび３’ＵＴＲを含む、項目７９に記載の方法。
（項目８１）
前記ｍＲＮＡを、全修飾する、項目７０から８０のいずれか一項に記載の方法。
（項目８２）
前記ｍＲＮＡが、シュードウリジン（ψ）、シュードウリジン（ψ）および５−メチルシチジン（ｍ５Ｃ）、１−メチルシュードウリジン（ｍ ^１ ψ）、１−メチルシュードウリジン（ｍ ^１ ψ）および５−メチルシチジン（ｍ ^５Ｃ）、２−チオウリジン（ｓ ^２Ｕ）、２−チオウリジンおよび５−メチルシチジン（ｍ ^５Ｃ）、５−メトキシウリジン（ｍｏ ^５Ｕ）、５−メトキシウリジン（ｍｏ ^５Ｕ）および５−メチルシチジン（ｍ ^５Ｃ）、２’−Ｏ−メチルウリジン、２’−Ｏ−メチルウリジンおよび５−メチルシチジン（ｍ ^５Ｃ）、Ｎ６−メチルアデノシン（ｍ ^６Ａ）、またはＮ６−メチルアデノシン（ｍ ^６Ａ）および５−メチルシチジン（ｍ ^５Ｃ）を含む、項目７０から８１のいずれか一項に記載の方法。
（項目８３）
前記ｍＲＮＡが、シュードウリジン（ψ）、Ｎ１−メチルシュードウリジン（ｍ ^１ ψ）、２−チオウリジン、４’−チオウリジン、５−メチルシトシン、２−チオ−１−メチル−１−デアザシュードウリジン、２−チオ−１−メチルシュードウリジン、２−チオ−５−アザウリジン、２−チオジヒドロシュードウリジン、２−チオジヒドロウリジン、２−チオシュードウリジン、４−メトキシ−２−チオシュードウリジン、４−メトキシシュードウリジン、４−チオ−１−メチルシュードウリジン、４−チオシュードウリジン、５−アザウリジン、ジヒドロシュードウリジン、５−メトキシウリジン、もしくは２’−Ｏ−メチルウリジン、またはこれらの組合せを含む、項目７０から８２のいずれか一項に記載の方法。
（項目８４）
前記ｍＲＮＡが、１−メチルシュードウリジン（ｍ ^１ ψ）、５−メトキシウリジン（ｍｏ ^５Ｕ）、５−メチルシチジン（ｍ ^５Ｃ）、シュードウリジン（ψ）、α−チオグアノシン、もしくはα−チオアデノシン、またはこれらの組合せを含む、項目７０から８３のいずれか一項に記載の方法。
（項目８５）
前記マイクロＲＮＡ結合部位が、骨髄系細胞内で発現するマイクロＲＮＡに結合する、項目７０から８４のいずれか一項に記載の方法。
（項目８６）
前記マイクロＲＮＡ結合部位が、ｍｉＲ−１４２マイクロＲＮＡ結合部位である、項目７０から８４のいずれか一項に記載の方法。
（項目８７）
前記ｍｉＲ−１４２マイクロＲＮＡ結合部位が、配列番号３に示される配列を含む、項目８６に記載の方法。
（項目８８）
前記マイクロＲＮＡ結合部位が、形質細胞様樹状細胞内で発現するマイクロＲＮＡに結合する、項目７０から８４のいずれか一項に記載の方法。
（項目８９）
前記マイクロＲＮＡ結合部位が、ｍｉＲ−１２６マイクロＲＮＡ結合部位である、項目７０から８４のいずれか一項に記載の方法。
（項目９０）
前記ｍｉＲ−１２６マイクロＲＮＡ結合部位が、配列番号２６に示される配列を含む、項目８９に記載の方法。
（項目９１）
前記マイクロＲＮＡ結合部位が、マクロファージ内で発現するマイクロＲＮＡに結合する、項目７０から８４のいずれか一項に記載の方法。
（項目９２）
前記マイクロＲＮＡ結合部位が、ｍｉＲ−１５５マイクロＲＮＡ結合部位である、項目７０から８４のいずれか一項に記載の方法。
（項目９３）
前記ｍｉＲ−１５５マイクロＲＮＡ結合部位が、配列番号３５に示される配列を含む、項目９２に記載の方法。
（項目９４）
前記目的のポリペプチドが、治療用タンパク質、サイトカイン、増殖因子、抗体、または融合タンパク質である、項目７０から９３のいずれか一項に記載の方法。
（項目９５）
前記化学修飾ｍＲＮＡが、少なくとも２つのマイクロＲＮＡ結合部位を含む、項目７０から９４のいずれか一項に記載の方法。
（項目９６）
前記マイクロＲＮＡ結合部位のうちの少なくとも１つが、ｍｉＲ−１２６マイクロＲＮＡ結合部位である、項目９５に記載の方法。
（項目９７）
前記化学修飾ｍＲＮＡが、ｍｉＲ−１２６結合部位と、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−１４２−５ｐ、ｍｉＲ−１４６−３ｐ、ｍｉＲ−１４６−５ｐ、ｍｉＲ−１５５、ｍｉＲ−１６、ｍｉＲ−２１、ｍｉＲ−２２３、ｍｉＲ−２４、およびｍｉＲ−２７からなる群から選択される、ｍｉＲに対する第２のマイクロＲＮＡ結合部位とを含む、項目９６に記載の方法。
（項目９８）
前記化学修飾ｍＲＮＡが、ｍｉＲ−１２６結合部位およびｍｉＲ−１４２結合部位を含む、項目９６に記載の方法。
（項目９９）
前記脂質ナノ粒子が、リポソームである、項目７０から９８のいずれか一項に記載の方法。
（項目１００）
前記脂質ナノ粒子が、カチオン性脂質および／またはイオン化脂質を含む、項目７０から９８のいずれか一項に記載の方法。
（項目１０１）
前記カチオン性脂質および／またはイオン化脂質が、ＤＬｉｎ−ＫＣ２−ＤＭＡまたはＤＬｉｎ−ＭＣ３−ＤＭＡである、項目１００に記載の方法。
（項目１０２）
目的のポリペプチドをコードする修飾メッセンジャーＲＮＡ（ｍｍＲＮＡ）であって、前記ｍｍＲＮＡが、少なくとも２つの異なるマイクロＲＮＡ（ｍｉＲ）結合部位を含み、前記マイクロＲＮＡが、造血系免疫細胞内で、またはＴＬＲ７および／もしくはＴＬＲ８を発現し、炎症促進性のサイトカインおよび／もしくはケモカインを分泌する細胞内で発現され、前記ｍｍＲＮＡが、１または複数の修飾ヌクレオ塩基を含む、ｍｍＲＮＡ。
（項目１０３）
前記造血系免疫細胞が、Ｔ細胞、Ｂ細胞、またはＮＫ細胞などのリンパ系細胞である、項目１０２に記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１０４）
前記造血系免疫細胞が、単球、マクロファージ、好中球、好塩基球、好酸球、赤血球、樹状細胞、巨核球、または血小板などの骨髄系細胞である、項目１０２に記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１０５）
前記造血系免疫細胞が、造血前駆細胞である、項目１０２に記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１０６）
前記ＴＬＲ７および／もしくはＴＬＲ８を発現し、炎症促進性のサイトカインおよび／もしくはケモカインを分泌する細胞が、内皮細胞である、項目１０２に記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１０７）
前記マイクロＲＮＡが、同じ目的の細胞型内または異なる目的の細胞型内で夥多である、項目１０２から１０６のいずれか一項に記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１０８）
前記マイクロＲＮＡが、複数の目的の細胞型内で夥多である、項目１０２から１０６のいずれか一項に記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１０９）
前記ｍｍＲＮＡが、造血系免疫細胞内で夥多なマイクロＲＮＡの少なくとも１つの第１のマイクロＲＮＡ結合部位および、内皮細胞内で夥多なマイクロＲＮＡの少なくとも１つの第２のマイクロＲＮＡ結合部位を含む、項目１０２に記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１１０）
前記ｍｍＲＮＡが、Ｂ細胞内で夥多なマイクロＲＮＡの少なくとも１つの第１のマイクロＲＮＡ結合部位と、内皮細胞内で夥多なマイクロＲＮＡの、少なくとも１つの第２のマイクロＲＮＡ結合部位とを含む、項目１０２に記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１１１）
前記ｍｍＲＮＡが、形質細胞様樹状細胞内で夥多なマイクロＲＮＡの、少なくとも１つの第１のマイクロＲＮＡ結合部位と、内皮細胞内で夥多なマイクロＲＮＡの、少なくとも１つの第２のマイクロＲＮＡ結合部位とを含む、項目１０２に記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１１２）
第１のマイクロＲＮＡ結合部位の複数のコピーと、第２のマイクロＲＮＡ結合部位の少なくとも１つのコピーとを含む、項目１０２から１１１のいずれか一項に記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１１３）
前記第１のマイクロＲＮＡ結合部位の２つのコピーを含む、項目１１２に記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１１４）
同じマイクロＲＮＡの第１のマイクロＲＮＡ結合部位および第２のマイクロＲＮＡ結合部位を含む、項目１０２から１１１のいずれか一項に記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１１５）
前記マイクロＲＮＡ結合部位が、同じマイクロＲＮＡの３ｐアームおよび５ｐアームのものである、項目１１４に記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１１６）
前記マイクロＲＮＡが、ｍｉＲ−１２６、ｍｉＲ−１４２、ｍｉＲ−１４４、ｍｉＲ−１４６、ｍｉＲ−１５０、ｍｉＲ−１５５、ｍｉＲ−１６、ｍｉＲ−２１、ｍｉＲ−２２３、ｍｉＲ−２４、ｍｉＲ−２７、およびｍｉＲ−２６ａからなる群から選択される、項目１０２に記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１１７）
前記マイクロＲＮＡが、ｍｉＲ１２６−３ｐ、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−１４２−５ｐ、およびｍｉＲ−１５５からなる群から選択される、項目１０２に記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１１８）
少なくとも１つのマイクロＲＮＡ結合部位が、ｍｉＲ−１２６結合部位である、項目１０２に記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１１９）
少なくとも１つのマイクロＲＮＡ結合部位が、ｍｉＲ−１４２結合部位である、項目１０２に記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１２０）
１つのマイクロＲＮＡ結合部位が、ｍｉＲ−１２６結合部位であり、前記第２のマイクロＲＮＡ結合部位が、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−１４２−５ｐ、ｍｉＲ−１４６−３ｐ、ｍｉＲ−１４６−５ｐ、ｍｉＲ−１５５、ｍｉＲ−１６、ｍｉＲ−２１、ｍｉＲ−２２３、ｍｉＲ−２４、およびｍｉＲ−２７からなる群から選択されるマイクロＲＮＡに対するものである、項目１０２に記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１２１）
少なくとも１つのｍｉＲ−１２６−３ｐ結合部位と、少なくとも１つのｍｉＲ−１４２−３ｐ結合部位とを含む、項目１０２に記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１２２）
少なくとも１つのｍｉＲ−１４２−３ｐ結合部位と、少なくとも１つのｍｉＲ−１４２−５ｐ結合部位とを含む、項目１０２に記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１２３）
少なくとも３つの異なるマイクロＲＮＡ結合部位を含み、前記マイクロＲＮＡ結合部位のうちの少なくとも１つが、ｍｉＲ−１２６結合部位である、項目１０２に記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１２４）
少なくとも３つの異なるマイクロＲＮＡ結合部位を含み、前記マイクロＲＮＡ結合部位のうちの少なくとも１つが、ｍｉＲ−１４２結合部位である、項目１０２に記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１２５）
少なくとも１つのｍｉＲ−１２６−３ｐ結合部位と、少なくとも１つのｍｉＲ−１４２−３ｐと、ｍｉＲ−１４６−３ｐ、ｍｉＲ−１４６−５ｐ、ｍｉＲ−１５５、ｍｉＲ−１６、ｍｉＲ−２１、ｍｉＲ−２２３、ｍｉＲ−２４、およびｍｉＲ−２７からなる群から選択されるマイクロＲＮＡに対する第３のマイクロＲＮＡ結合部位とを含む、項目１０２に記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１２６）
少なくとも１つのｍｉＲ−１２６−３ｐ結合部位と、少なくとも１つのｍｉＲ−１４２−３ｐ結合部位と、少なくとも１つのｍｉＲ−１５５結合部位とを含む、項目１０２に記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１２７）
少なくとも１つのｍｉＲ−１２６−３ｐ結合部位と、少なくとも１つのｍｉＲ−１４２−３ｐ結合部位と、少なくとも１つのｍｉＲ−１４２−５ｐ結合部位と、少なくとも１つのｍｉＲ−１５５結合部位とを含む、項目１０２に記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１２８）
前記マイクロＲＮＡ結合部位を、前記ｍｍＲＮＡの前記５’ＵＴＲ内、３’ＵＴＲ内、または前記５’ＵＴＲ内および３’ＵＴＲ内の両方に配置した、先行する項目のいずれかに記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１２９）
前記マイクロＲＮＡ結合部位を、前記ｍｍＲＮＡの前記３’ＵＴＲ内に配置する、項目１２８に記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１３０）
前記マイクロＲＮＡ結合部位を、前記ｍｍＲＮＡの前記５’ＵＴＲ内に配置する、項目１２８に記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１３１）
前記マイクロＲＮＡ結合部位を、前記ｍｍＲＮＡの前記５’ＵＴＲ内および３’ＵＴＲ内の両方に配置する、項目１２８に記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１３２）
少なくとも１つのマイクロＲＮＡ結合部位を、前記ｍｍＲＮＡのコード領域の終止コドンと直に隣接する前記３’ＵＴＲ内に配置する、項目１２８に記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１３３）
少なくとも１つのマイクロＲＮＡ結合部位を、前記ｍｍＲＮＡのコード領域の終止コドンの７０〜８０塩基下流の前記３’ＵＴＲ内に配置する、項目１２８に記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１３４）
少なくとも１つのマイクロＲＮＡ結合部位を、前記ｍｍＲＮＡのコード領域の開始コドンに直に先行する前記５’ＵＴＲ内に配置する、項目１２８に記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１３５）
少なくとも１つのマイクロＲＮＡ結合部位を、前記ｍｍＲＮＡのコード領域の開始コドンに１５〜２０ヌクレオチド先行する前記５’ＵＴＲ内に配置する、項目１２８に記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１３６）
少なくとも１つのマイクロＲＮＡ結合部位を、前記ｍｍＲＮＡのコード領域の開始コドンに７０〜８０ヌクレオチド先行する前記５’ＵＴＲ内に配置する、項目１２８に記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１３７）
互いと直に隣接するか、または５ヌクレオチド未満、５〜１０、１０〜１５、もしくは１５〜２０ヌクレオチドのスペーサーを伴って位置する、同じマイクロＲＮＡ結合部位の複数のコピーを含む、項目１２８に記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１３８）
前記３’ＵＴＲ内に配置された、同じマイクロＲＮＡ結合部位の複数のコピーを含み、前記第１のマイクロＲＮＡ結合部位が、終止コドンと直に隣接して位置し、前記第２のマイクロＲＮＡ結合部位および第３のマイクロＲＮＡ結合部位が、前記第１のマイクロＲＮＡ結合部位の３０〜４０塩基下流に位置する、項目１２８に記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１３９）
前記３’ＵＴＲ内に配置された、第１のマイクロＲＮＡ結合部位の２つのコピーと、第２のマイクロＲＮＡ結合部位の１つのコピーとを含み、前記第１のマイクロＲＮＡ結合部位の前記第１のコピーが、終止コドンと直に隣接して位置し、前記第２のマイクロＲＮＡ結合部位が、前記第１のマイクロＲＮＡ結合部位の前記第１のコピーの３０〜４０塩基下流に位置し、前記第１のマイクロＲＮＡ結合部位の前記第２のコピーが、前記第２のマイクロＲＮＡ結合部位の３０〜４０塩基下流に位置する、項目１２８に記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１４０）
前記ｍｍＲＮＡが全修飾された、先行する項目のいずれかに記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１４１）
シュードウリジン（ψ）、シュードウリジン（ψ）および５−メチルシチジン（ｍ５Ｃ）、１−メチルシュードウリジン（ｍ ^１ ψ）、１−メチルシュードウリジン（ｍ ^１ ψ）および５−メチルシチジン（ｍ ^５Ｃ）、２−チオウリジン（ｓ ^２Ｕ）、２−チオウリジンおよび５−メチルシチジン（ｍ ^５Ｃ）、５−メトキシウリジン（ｍｏ ^５Ｕ）、５−メトキシウリジン（ｍｏ ^５Ｕ）および５−メチルシチジン（ｍ ^５Ｃ）、２’−Ｏ−メチルウリジン、２’−Ｏ−メチルウリジンおよび５−メチルシチジン（ｍ ^５Ｃ）、Ｎ６−メチルアデノシン（ｍ ^６Ａ）、またはＮ６−メチルアデノシン（ｍ ^６Ａ）および５−メチルシチジン（ｍ ^５Ｃ）を含む、先行する項目のいずれかに記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１４２）
シュードウリジン（ψ）、Ｎ１−メチルシュードウリジン（ｍ ^１ ψ）、２−チオウリジン、４’−チオウリジン、５−メチルシトシン、２−チオ−１−メチル−１−デアザシュードウリジン、２−チオ−１−メチルシュードウリジン、２−チオ−５−アザウリジン、２−チオジヒドロシュードウリジン、２−チオジヒドロウリジン、２−チオシュードウリジン、４−メトキシ−２−チオシュードウリジン、４−メトキシシュードウリジン、４−チオ−１−メチルシュードウリジン、４−チオシュードウリジン、５−アザウリジン、ジヒドロシュードウリジン、５−メトキシウリジン、もしくは２’−Ｏ−メチルウリジン、またはこれらの組合せを含む、先行する項目のいずれかに記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１４３）
１−メチルシュードウリジン（ｍ ^１ ψ）、５−メトキシウリジン（ｍｏ ^５Ｕ）、５−メチルシチジン（ｍ ^５Ｃ）、シュードウリジン（ψ）、α−チオグアノシン、もしくはα−チオアデノシン、またはこれらの組合せを含む、先行する項目のいずれかに記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１４４）
前記目的のポリペプチドが、治療用タンパク質、サイトカイン、増殖因子、抗体、または融合タンパク質である、先行する項目のいずれかに記載のｍｍＲＮＡ。
（項目１４５）
先行する項目のいずれかに記載のｍｍＲＮＡを含む、脂質ナノ粒子。
（項目１４６）
リポソームを含む、項目１４５に記載の脂質ナノ粒子。
（項目１４７）
カチオン性脂質および／またはイオン化脂質を含む、項目１４５に記載の脂質ナノ粒子。
（項目１４８）
前記カチオン性脂質および／またはイオン化脂質が、ＤＬｉｎ−ＫＣ２−ＤＭＡまたはＤＬｉｎ−ＭＣ３−ＤＭＡである、項目１４７に記載の脂質ナノ粒子。
（項目１４９）
項目１０２から１４４のいずれか一項に記載のｍｍＲＮＡ、または項目１４５から１４８のいずれか一項に記載の脂質ナノ粒子と、薬学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤とを含む医薬組成物。
（項目１５０）
抗薬物抗体応答の低減もしくは阻害、または薬物関連毒性の阻害を必要とする被験体における、抗薬物抗体応答の低減もしくは阻害、または薬物関連毒性の阻害における使用のための、項目１０２から１４４のいずれか一項に記載のｍｍＲＮＡ、項目１４５から１４８のいずれか一項に記載の脂質ナノ粒子、または項目１４９に記載の医薬組成物。
（項目１５１）
望ましくない免疫細胞の活性化の低減もしくは阻害、または望ましくないサイトカインの産生の低減もしくは阻害を必要とする被験体における、望ましくない免疫細胞の活性化の低減もしくは阻害、または望ましくないサイトカインの産生の低減もしくは阻害における使用のための、項目１０２から１４４のいずれか一項に記載のｍｍＲＮＡ、項目１４５から１４８のいずれか一項に記載の脂質ナノ粒子、または項目１４９に記載の医薬組成物。
（項目１５２）
血中クリアランスの加速化の低減または阻害を必要とする被験体における、血中クリアランスの加速化の低減または阻害における使用のための、項目１０２から１４４のいずれか一項に記載のｍｍＲＮＡ、項目１４５から１４８のいずれか一項に記載の脂質ナノ粒子、または項目１４９に記載の医薬組成物。
（項目１５３）
ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を認識するＩｇＭ分子の産生の低減または阻害を必要とする被験体における、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を認識するＩｇＭ分子の産生の低減または阻害における使用のための、項目１０２から１４４のいずれか一項に記載のｍｍＲＮＡ、項目１４５から１４８のいずれか一項に記載の脂質ナノ粒子、または項目１４９に記載の医薬組成物。

Claims

被験体における抗薬物抗体応答を低減または阻害するための組成物であって、治療用ポリペプチドをコードする修飾メッセンジャーＲＮＡ（ｍｍＲＮＡ）を含み、前記被験体における、前記治療用ポリペプチドに対する抗薬物抗体応答を低減または阻害するように、前記ｍｍＲＮＡが、（ｉ）少なくとも１つのｍｉＲ−１４２−３ｐマイクロＲＮＡ結合部位；（ｉｉ）少なくとも１つのｍｉＲ−１２６結合部位；または（ｉｉｉ）少なくとも１つのｍｉＲ−１４２−３ｐマイクロＲＮＡ結合部位および少なくとも１つのｍｉＲ−１２６結合部位を含み、前記ｍｍＲＮＡが、１または複数の修飾ヌクレオ塩基を含み、前記ｍｍＲＮＡが脂質ナノ粒子内に封入されて静脈内投与されることを特徴とする、組成物。
前記ｍｍＲＮＡが、５’ＵＴＲ、前記治療用ポリペプチドをコードする、コドン最適化オープンリーディングフレーム、（ｉ）前記少なくとも１つのｍｉＲ−１４２−３ｐマイクロＲＮＡ結合部位；（ｉｉ）前記少なくとも１つのｍｉＲ−１２６結合部位；または（ｉｉｉ）前記少なくとも１つのｍｉＲ−１４２−３ｐマイクロＲＮＡ結合部位および少なくとも１つのｍｉＲ−１２６結合部位を含む３’ＵＴＲ、ならびに連結されるヌクレオシドの３’テーリング領域を含む、請求項１に記載の組成物。
前記ｍｍＲＮＡが、全修飾されている、請求項１から２のいずれかに記載の組成物。
前記ｍｍＲＮＡが、１−メチルシュードウリジン（ｍ^１ψ）、５−メトキシウリジン（ｍｏ^５Ｕ）、５−メチルシチジン（ｍ^５Ｃ）、シュードウリジン（ψ）、α−チオグアノシン、もしくはα−チオアデノシン、またはこれらの組合せを含む、請求項１から３のいずれかに記載の組成物。
脂質ナノ粒子が、カチオン性脂質および／またはイオン化脂質を含む、請求項１から４のいずれかに記載の組成物。
前記ｍｍＲＮＡが、配列番号３に示される配列を含む、少なくとも１つのｍｉＲ−１４２−３ｐマイクロＲＮＡ結合部位を含む、請求項１から５のいずれか一項に記載の組成物。
前記ｍｍＲＮＡが、少なくとも２つのマイクロＲＮＡ結合部位を含み、前記マイクロＲＮＡ結合部位のうちの少なくとも１つが、ｍｉＲ−１４２−３ｐマイクロＲＮＡ結合部位である、請求項１から５のいずれか一項に記載の組成物。
前記ｍｍＲＮＡが、ｍｉＲ−１４２−３ｐ結合部位と、ｍｉＲ−１４２−５ｐ、ｍｉＲ−１４６−３ｐ、ｍｉＲ−１４６−５ｐ、ｍｉＲ−１５５、ｍｉＲ−１２６、ｍｉＲ−１６、ｍｉＲ−２１、ｍｉＲ−２２３、ｍｉＲ−２４、およびｍｉＲ−２７からなる群から選択される、ｍｉＲに対する第２のマイクロＲＮＡ結合部位とを含む、請求項７に記載の組成物。
前記ｍｍＲＮＡが、配列番号２６に示される配列を含む、少なくとも１つのｍｉＲ−１２６マイクロＲＮＡ結合部位を含む、請求項１から８のいずれか一項に記載の組成物。
前記ｍｍＲＮＡが、少なくとも２つのマイクロＲＮＡ結合部位を含み、前記マイクロＲＮＡ結合部位のうちの少なくとも１つが、ｍｉＲ−１２６マイクロＲＮＡ結合部位である、請求項１から８のいずれか一項に記載の組成物。
前記ｍｍＲＮＡが、ｍｉＲ−１２６結合部位と、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−１４２−５ｐ、ｍｉＲ−１４６−３ｐ、ｍｉＲ−１４６−５ｐ、ｍｉＲ−１５５、ｍｉＲ−１６、ｍｉＲ−２１、ｍｉＲ−２２３、ｍｉＲ−２４、およびｍｉＲ−２７からなる群から選択される、ｍｉＲに対する第２のマイクロＲＮＡ結合部位とを含む、請求項１０に記載の組成物。
ｍｍＲＮＡ構築物が、ｍｉＲ−１２６結合部位およびｍｉＲ−１４２−３ｐ結合部位を含む、請求項１から１１のいずれか一項に記載の組成物。
ｍｍＲＮＡ構築物が、３つのｍｉＲ−１４２−３ｐ結合部位を含む、請求項１から５のいずれか一項に記載の組成物。
ｍｍＲＮＡ構築物が、３つのｍｉＲ−１２６結合部位を含む、請求項１から５のいずれか一項に記載の組成物。
治療用ポリペプチドの、被験体への反復投与後における、抗薬物抗体応答を低減または阻害するための組成物であって、ＬＮＰ内に封入された、治療用ポリペプチドをコードする修飾ｍＲＮＡ（ｍｍＲＮＡ）を含み、前記ｍｍＲＮＡが、（ｉ）少なくとも１つのｍｉＲ−１４２−３ｐマイクロＲＮＡ結合部位；（ｉｉ）少なくとも１つのｍｉＲ−１２６結合部位；または（ｉｉｉ）少なくとも１つのｍｉＲ−１４２−３ｐマイクロＲＮＡ結合部位および少なくとも１つのｍｉＲ−１２６結合部位を含み、前記ｍｍＲＮＡが、１または複数の修飾ヌクレオ塩基を含み；
前記被験体における、前記治療用ポリペプチドに対する抗薬物抗体応答を低減または阻害するように、前記組成物が、前記被験体へと、第１の用量で静脈内投与され、前記組成物が、前記被験体へと、第２の用量で静脈内投与されることを特徴とする、
組成物。
治療用ポリペプチドの、被験体への反復投与後における、抗薬物抗体応答を低減または阻害するための組成物であって、
ＬＮＰ内に封入された、治療用ポリペプチドをコードする修飾ｍＲＮＡ（ｍｍＲＮＡ）を含み、前記ｍｍＲＮＡが、（ｉ）少なくとも１つのｍｉＲ−１４２−３ｐマイクロＲＮＡ結合部位；（ｉｉ）少なくとも１つのｍｉＲ−１２６結合部位；または（ｉｉｉ）少なくとも１つのｍｉＲ−１４２−３ｐマイクロＲＮＡ結合部位および少なくとも１つのｍｉＲ−１２６結合部位を含み、前記ｍｍＲＮＡが、１または複数の修飾ヌクレオ塩基を含み；前記組成物が、前記被験体へと、第１の用量で静脈内投与されることを特徴とし、
前記被験体に由来する試料中の抗薬物抗体のレベルが検出され；
前記試料中の抗薬物抗体の前記レベルが低下したら、前記被験体における、前記治療用ポリペプチドに対する抗薬物抗体応答を低減または阻害するように、前記組成物が、前記被験体へと、第２の用量で静脈内投与されることを特徴とする、
組成物。
被験体における薬物関連毒性を低減または阻害するための組成物であって、治療用ポリペプチドをコードする修飾メッセンジャーＲＮＡ（ｍｍＲＮＡ）を含み、前記被験体における、前記治療用ポリペプチドに対する薬物関連毒性を低減または阻害するように、前記ｍｍＲＮＡが、（ｉ）少なくとも１つのｍｉＲ−１４２−３ｐマイクロＲＮＡ結合部位；（ｉｉ）少なくとも１つのｍｉＲ−１２６結合部位；または（ｉｉｉ）少なくとも１つのｍｉＲ−１４２−３ｐマイクロＲＮＡ結合部位および少なくとも１つのｍｉＲ−１２６結合部位を含み、前記ｍｍＲＮＡが、１または複数の修飾ヌクレオ塩基を含む、組成物。
治療用ポリペプチドをコードするメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）を投与された被験体における、望ましくない免疫細胞の活性化を低減または阻害するための組成物であって、前記治療用ポリペプチドをコードする化学修飾ｍＲＮＡを含み、前記被験体における、望ましくない免疫細胞の活性化を低減または阻害するように、前記化学修飾ｍＲＮＡが、免疫細胞内で発現するマイクロＲＮＡに対する、少なくとも１つのマイクロＲＮＡ結合部位を含み、前記化学修飾ｍＲＮＡが、１または複数の修飾ヌクレオ塩基を含む、組成物。
免疫細胞の活性化を、前記化学修飾ｍＲＮＡによりコードされる、前記治療用ポリペプチドの発現の、対応する減少を伴わずに減少させる、請求項１８に記載の組成物。
前記化学修飾ｍＲＮＡが、５’ＵＴＲ、前記治療用ポリペプチドをコードする、コドン最適化オープンリーディングフレーム、前記少なくとも１つのマイクロＲＮＡ結合部位を含む３’ＵＴＲ、および連結されるヌクレオシドの３’テーリング領域を含む、請求項１８に記載の組成物。
前記ｍＲＮＡが、全修飾されている、請求項１８から１９のいずれか一項に記載の組成物。
前記ｍＲＮＡが、１−メチルシュードウリジン（ｍ^１ψ）、５−メトキシウリジン（ｍｏ^５Ｕ）、５−メチルシチジン（ｍ^５Ｃ）、シュードウリジン（ψ）、α−チオグアノシン、もしくはα−チオアデノシン、またはこれらの組合せを含む、請求項１８または１９のいずれか一項に記載の組成物。
前記化学修飾ｍＲＮＡが、少なくとも２つのマイクロＲＮＡ結合部位を含む、請求項１８から１９のいずれか一項に記載の組成物。
前記マイクロＲＮＡ結合部位のうちの少なくとも１つが、ｍｉＲ−１２６マイクロＲＮＡ結合部位である、請求項２３に記載の組成物。
前記化学修飾ｍＲＮＡが、ｍｉＲ−１２６結合部位と、ｍｉＲ−１４２−３ｐ、ｍｉＲ−１４２−５ｐ、ｍｉＲ−１４６−３ｐ、ｍｉＲ−１４６−５ｐ、ｍｉＲ−１５５、ｍｉＲ−１６、ｍｉＲ−２１、ｍｉＲ−２２３、ｍｉＲ−２４、およびｍｉＲ−２７からなる群から選択される、ｍｉＲに対する第２のマイクロＲＮＡ結合部位とを含む、請求項１８から１９に記載の組成物。
前記化学修飾ｍＲＮＡが、ｍｉＲ−１２６結合部位およびｍｉＲ−１４２結合部位を含む、請求項２５に記載の組成物。
治療用ポリペプチドをコードするメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）を投与された被験体における、望ましくない免疫細胞の活性化を低減または阻害するための組成物であって、脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）内に封入された化学修飾ｍＲＮＡを含み、前記化学修飾ｍＲＮＡが、免疫細胞内で発現するマイクロＲＮＡに対する、少なくとも１つのマイクロＲＮＡ結合部位を含み、前記化学修飾ｍＲＮＡが、１または複数の修飾ヌクレオ塩基を含み；
前記被験体における、望ましくない免疫細胞の活性化を低減または阻害するように、前記組成物が、前記被験体へと、第１の用量で静脈内注射され；前記組成物が、前記被験体へと、第２の用量で静脈内投与されることを特徴とする、
組成物。
脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）内に封入された、前記治療用ポリペプチドをコードするｍＲＮＡが、Ｂ細胞を活性化させず、かつ／または前記ＬＮＰに結合することが可能なＩｇＭ分子の産生を誘導しない、請求項２７に記載の組成物。
２回にわたる連続投与の間の間隔が、２週間未満である、請求項２７に記載の組成物。
２回にわたる連続投与の間の間隔が、１週間未満である、請求項２９に記載の組成物。