JP2018520127A5 - - Google Patents
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Description
データを定量化し、その後、ペプチドマップ及び強度マップ、並びに濃度1μg/ml及び10μg/mlのマウスモノクローナル抗体4B4によるアッセイについての強度プロットを作成した。後者の強度プロットは、より明確なデータ概要をもたらすように均一化した。抗体濃度10μg/mlでは、エピトープ様のスポットパターンの未加工の強度は同様であったが、バックグラウンド相互作用がわずかに増加したことから、正規化されたシグナル強度の低下につながった。シグナルは、マイクロアレイスキャンで観察され、コンセンサスモチーフDDRVAIH及びWDETKGEを有するペプチドに起因するエピトープ様のスポットパターンに基づくものであった。
以下、本発明の実施形態を示す。
(1)Mcm5に特異的に結合する抗体であって、
(i)配列番号2又は1のアミノ酸配列を有するポリペプチドに結合し、
(ii)
a.配列番号21の配列、又は1アミノ酸置換により配列番号21と異なる配列を有する4B4 CDRH1、
b.配列番号23の配列、又は1アミノ酸置換により配列番号23と異なる配列を有する4B4 CDRH2、
c.配列番号25の配列、又は1アミノ酸置換により配列番号25と異なる配列を有する4B4 CDRH3、
d.配列番号15の配列、又は1アミノ酸置換により配列番号15と異なる配列を有する4B4 CDRL1、
e.配列番号17の配列、又は1アミノ酸置換により配列番号17と異なる配列を有する4B4 CDRL2、
f.配列番号19の配列、又は1アミノ酸置換により配列番号19と異なる配列を有する4B4 CDRL3、
g.配列番号9の配列、又は1アミノ酸置換により配列番号9と異なる配列を有する12A7 CDRH1、
h.配列番号11の配列、又は1アミノ酸置換により配列番号11と異なる配列を有する12A7 CDRH2、
i.配列番号13の配列、又は1アミノ酸置換により配列番号13と異なる配列を有する12A7 CDRH3、
j.配列番号3の配列、又は1アミノ酸置換により配列番号3と異なる配列を有する12A7 CDRL1、
k.配列番号5の配列、又は1アミノ酸置換により配列番号5と異なる配列を有する12A7 CDRL2、及び
l.配列番号7の配列、又は1アミノ酸置換により配列番号7と異なる配列を有する12A7 CDRL3
から成る群から選択される少なくとも1つの相補性決定領域(CDR)を含み、
(iii)配列番号33又は29に対し少なくとも85%、90%、95%、98%、99%又は100%同一である配列を有する重鎖可変領域を含み、
(iv)配列番号31又は27に対し少なくとも85%、90%、95%、98%、99%又は100%同一である配列を有する軽鎖可変領域配列を含み、又は
(v)(i)、(ii)、(iii)又は(iv)の抗体と競合する、前記抗体。
(2)1〜10nMの範囲のMcm5に対する親和性を有する、(1)記載の抗体。
(3)Fab' 2 、F'(ab) 2 、Fv、一本鎖抗体又はダイアボディである、(1)又は(2)記載の抗体。
(4)配列番号1のアミノ酸配列を有するポリペプチドに結合する、(1)〜(3)のいずれか1記載の抗体。
(5)配列番号2のアミノ酸配列を有するポリペプチドに結合する、(1)〜(3)のいずれか1記載の抗体。
(6)12A7 CDRH1、12A7 CDRH2、12A7 CDRH3、12A7 CDRL1、12A7 CDRL2、及び12A7 CDRL3から成る群から選択される、2つ以上、3つ以上、4つ以上、又は5つ以上のCDRを含む、(1)〜(4)のいずれか1記載の抗体。
(7)12A7 CDRH1、12A7 CDRH2、及び12A7 CDRH3を含む、(6)記載の抗体。
(8)12A7 CDRL1、12A7 CDRL2及び12A7 CDRL3を含む、(6)又は(7)記載の抗体。
(9)配列番号9の配列を有する12A7 CDRH1、配列番号11の配列を有する12A7 CDRH2、及び配列番号13の配列を有する12A7 CDRH3を含む、(6)〜(8)のいずれか1記載の抗体。
(10)配列番号3の配列を有する12A7 CDRL1、配列番号5の配列を有する12A7 CDRL2、及び配列番号7の配列を有する12A7 CDRL3を含む、(6)〜(9)のいずれか1記載の抗体。
(11)4B4 CDRH1、4B4 CDRH2、4B4 CDRH3、4B4 CDRL1、4B4 CDRL2、及び4B4 CDRL3から成る群から選択される、2つ以上、3つ以上、4つ以上、又は5つ以上のCDRを含む、(1)〜(3)のいずれか1記載の抗体。
(12)4B4 CDRH1、4B4 CDRH2、及び4B4 CDRH3を含む、(11)記載の抗体。
(13)4B4 CDRL1、4B4 CDRL2及び4B4 CDRL3を含む、(11)又は(12)記載の抗体。
(14)配列番号21の配列を有する4B4 CDRH1、配列番号23の配列を有する4B4 CDRH2、及び配列番号25の配列を有する4B4 CDRH3を含む、(11)〜(13)のいずれか1記載の抗体。
(15)配列番号15の配列を有する4B4 CDRL1、配列番号17の配列を有する4B4 CDRL2、及び配列番号19の配列を有する4B4 CDRL3を含む、(11)〜(14)のいずれか1記載の抗体。
(16)配列番号29に対し少なくとも95%同一である配列を有する重鎖可変領域を含む、(1)、(2)、(3)、(4)又は(6)〜(10)のいずれか1記載の抗体。
(17)配列番号29に対し少なくとも98%同一である配列を有する重鎖可変領域を含む、(1)、(2)、(3)、(4)、(6)〜(10)又は(16)のいずれか1記載の抗体。
(18)配列番号27に対し少なくとも95%同一である配列を有する軽鎖可変領域を含む、(1)、(2)、(3)、(4)、(6)〜(10)又は(16)〜(17)のいずれか1記載の抗体。
(19)配列番号27に対し少なくとも98%同一である配列を有する軽鎖可変領域を含む、(1)、(2)、(3)、(4)、(6)〜(10)又は(16)〜(18)のいずれか1記載の抗体。
(20)配列番号33に対し少なくとも95%同一である配列を有する重鎖可変領域を含む、(1)、(2)、(3)、(5)又は(11)〜(15)のいずれか1記載の抗体。
(21)配列番号33に対し少なくとも98%同一である配列を有する重鎖可変領域を含む、(1)、(2)、(3)、(5)、(11)〜(15)又は(20)のいずれか1記載の抗体。
(22)配列番号31に対し少なくとも95%同一である配列を有する軽鎖可変領域を含む、(1)、(2)、(3)、(5)、(11)〜(15)又は(20)〜(21)のいずれか1記載の抗体。
(23)配列番号31に対し少なくとも98%同一である配列を有する軽鎖可変領域を含む、(1)、(2)、(3)、(5)、(11)〜(15)又は(20)〜(22)のいずれか1記載の抗体。
(24)(1)〜(23)のいずれか1記載の抗体を含む組成物。
(25)(1)〜(23)のいずれか1記載の抗体を産生することができるハイブリドーマ細胞株。
(26)抗体がモノクローナル抗体である、(1)〜(25)のいずれか1記載の抗体、組成物又はハイブリドーマ。
(27)抗体が放射標識で標識されている、(1)〜(26)のいずれか1記載の抗体、組成物又はハイブリドーマ。
(28)放射標識がユーロピウムである、(27)記載の抗体、組成物、又はハイブリドーマ。
(29)(1)〜(23)又は(26)のいずれか1記載の抗体の重鎖を含むポリペプチドをコードする核酸配列を含むポリヌクレオチド。
(30)(1)〜(23)又は(26)のいずれか1記載の抗体の軽鎖を含むポリペプチドをコードする核酸配列を含むポリヌクレオチド。
(31)配列番号4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32又は34に対し少なくとも85%、90%、95%、98%、99%、又は100%同一である核酸配列を含むポリヌクレオチド。
(32)配列番号4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32又は34の核酸配列を含むポリヌクレオチド。
(33)(29)〜(32)のいずれか1記載の核酸を含むベクター。
(34)(29)〜(32)のいずれか1記載の核酸又は(33)記載のベクターを含む宿主細胞。
(35)CHO細胞又は大腸菌細胞である、(34)記載の宿主細胞。
(36)(i)(25)記載のハイブリドーマ細胞株又は(34)若しくは(35)記載の宿主細胞を増殖させるステップ、及び
(ii)ハイブリドーマ細胞株又は宿主細胞から抗体を単離するステップ
を含む、抗体を作製する方法。
(37)抗体を放射標識にコンジュゲートさせることにより抗体を標識するステップをさらに含む、(36)記載の方法。
(38)抗体を固体支持体に固定化するステップをさらに含む、(36)記載の方法。
(39)(i)(1)〜(23)のいずれか1記載の第1の抗体を含む組成物、及び
(ii)Mcm5に結合する第2の抗体を含む組成物
を含むキット。
(40)(i)(4)、(6)〜(10)又は(16)〜(19)のいずれか1記載の第1の抗体を含む組成物、及び
(ii)(5)、(11)〜(15)又は(20)〜(23)のいずれか1記載の第2の抗体を含む組成物
を含むキット。
(41)試料中のMcm5の濃度又は量を決定する方法であって、
(i)固体支持体に固定化された、(1)〜(23)又は(26)のいずれか1記載の抗体である、固定化された第1の抗体を用意するステップ、
(ii)固定化された第1の抗体に試料中のMcm5が結合できるように、固定化された第1の抗体に試料を曝露して、固定化されたMcm5を用意するステップ、
(iii)標識にコンジュゲートさせた、(1)〜(23)又は(26)〜(28)のいずれか1記載の抗体である、標識された第2の抗体を用意するステップ、
(iv)標識された第2の抗体がMcm5に結合できるように、標識された第2の抗体に固定化されたMcm5を曝露するステップ、及び
(v)標識された第2の抗体の濃度を検出するステップ
を含む、前記方法。
(42)第1の抗体及び第2の抗体がともにMcm5に結合するが、第1の抗体及び第2の抗体がMcm5の異なるエピトープに結合する、(39)若しくは(40)記載のキット又は(41)記載の方法。
(43)第1の抗体が配列番号1に結合する、(39)又は(41)〜(42)のいずれか1記載のキット又は方法。
(44)第1の抗体が配列番号2に結合する、(39)又は(41)〜(42)のいずれか1記載のキット又は方法。
(45)第2の抗体が配列番号1に結合する、(39)、(41)〜(42)又は(44)のいずれか1記載のキット又は方法。
(46)第2の抗体が配列番号2に結合する、(39)又は(41)〜(44)のいずれか1記載のキット又は方法。
(47)第1の抗体がELISAプレートに固定化されている、(39)〜(46)のいずれか1記載のキット又は方法。
(48)第2の抗体がELISAプレートに固定化されている、(39)〜(40)又は(42)〜(46)のいずれか1記載のキット。
(49)第2の抗体が放射性標識にコンジュゲートしている、(39)〜(47)のいずれか1記載のキット又は方法。
(50)第1の抗体が放射性標識にコンジュゲートしている、(39)〜(40)、(42)〜(46)又は(48)のいずれか1記載のキット。
(51)放射性標識がユーロピウム 3+ である、(49)又は(50)記載のキット又は方法。
(52)標識された第2の抗体の濃度を検出するステップが、Eu 3+ の免疫蛍光検出を含む、(41)〜(51)のいずれか1記載の方法。
(53)(41)〜(47)又は(49)のいずれか1記載の方法の実施における、(39)〜(40)若しくは(42)〜(51)のいずれか1記載のキット又は(1)〜(23)若しくは(26)のいずれか1記載の抗体の使用。
以下、本発明の実施形態を示す。
(1)Mcm5に特異的に結合する抗体であって、
(i)配列番号2又は1のアミノ酸配列を有するポリペプチドに結合し、
(ii)
a.配列番号21の配列、又は1アミノ酸置換により配列番号21と異なる配列を有する4B4 CDRH1、
b.配列番号23の配列、又は1アミノ酸置換により配列番号23と異なる配列を有する4B4 CDRH2、
c.配列番号25の配列、又は1アミノ酸置換により配列番号25と異なる配列を有する4B4 CDRH3、
d.配列番号15の配列、又は1アミノ酸置換により配列番号15と異なる配列を有する4B4 CDRL1、
e.配列番号17の配列、又は1アミノ酸置換により配列番号17と異なる配列を有する4B4 CDRL2、
f.配列番号19の配列、又は1アミノ酸置換により配列番号19と異なる配列を有する4B4 CDRL3、
g.配列番号9の配列、又は1アミノ酸置換により配列番号9と異なる配列を有する12A7 CDRH1、
h.配列番号11の配列、又は1アミノ酸置換により配列番号11と異なる配列を有する12A7 CDRH2、
i.配列番号13の配列、又は1アミノ酸置換により配列番号13と異なる配列を有する12A7 CDRH3、
j.配列番号3の配列、又は1アミノ酸置換により配列番号3と異なる配列を有する12A7 CDRL1、
k.配列番号5の配列、又は1アミノ酸置換により配列番号5と異なる配列を有する12A7 CDRL2、及び
l.配列番号7の配列、又は1アミノ酸置換により配列番号7と異なる配列を有する12A7 CDRL3
から成る群から選択される少なくとも1つの相補性決定領域(CDR)を含み、
(iii)配列番号33又は29に対し少なくとも85%、90%、95%、98%、99%又は100%同一である配列を有する重鎖可変領域を含み、
(iv)配列番号31又は27に対し少なくとも85%、90%、95%、98%、99%又は100%同一である配列を有する軽鎖可変領域配列を含み、又は
(v)(i)、(ii)、(iii)又は(iv)の抗体と競合する、前記抗体。
(2)1〜10nMの範囲のMcm5に対する親和性を有する、(1)記載の抗体。
(3)Fab' 2 、F'(ab) 2 、Fv、一本鎖抗体又はダイアボディである、(1)又は(2)記載の抗体。
(4)配列番号1のアミノ酸配列を有するポリペプチドに結合する、(1)〜(3)のいずれか1記載の抗体。
(5)配列番号2のアミノ酸配列を有するポリペプチドに結合する、(1)〜(3)のいずれか1記載の抗体。
(6)12A7 CDRH1、12A7 CDRH2、12A7 CDRH3、12A7 CDRL1、12A7 CDRL2、及び12A7 CDRL3から成る群から選択される、2つ以上、3つ以上、4つ以上、又は5つ以上のCDRを含む、(1)〜(4)のいずれか1記載の抗体。
(7)12A7 CDRH1、12A7 CDRH2、及び12A7 CDRH3を含む、(6)記載の抗体。
(8)12A7 CDRL1、12A7 CDRL2及び12A7 CDRL3を含む、(6)又は(7)記載の抗体。
(9)配列番号9の配列を有する12A7 CDRH1、配列番号11の配列を有する12A7 CDRH2、及び配列番号13の配列を有する12A7 CDRH3を含む、(6)〜(8)のいずれか1記載の抗体。
(10)配列番号3の配列を有する12A7 CDRL1、配列番号5の配列を有する12A7 CDRL2、及び配列番号7の配列を有する12A7 CDRL3を含む、(6)〜(9)のいずれか1記載の抗体。
(11)4B4 CDRH1、4B4 CDRH2、4B4 CDRH3、4B4 CDRL1、4B4 CDRL2、及び4B4 CDRL3から成る群から選択される、2つ以上、3つ以上、4つ以上、又は5つ以上のCDRを含む、(1)〜(3)のいずれか1記載の抗体。
(12)4B4 CDRH1、4B4 CDRH2、及び4B4 CDRH3を含む、(11)記載の抗体。
(13)4B4 CDRL1、4B4 CDRL2及び4B4 CDRL3を含む、(11)又は(12)記載の抗体。
(14)配列番号21の配列を有する4B4 CDRH1、配列番号23の配列を有する4B4 CDRH2、及び配列番号25の配列を有する4B4 CDRH3を含む、(11)〜(13)のいずれか1記載の抗体。
(15)配列番号15の配列を有する4B4 CDRL1、配列番号17の配列を有する4B4 CDRL2、及び配列番号19の配列を有する4B4 CDRL3を含む、(11)〜(14)のいずれか1記載の抗体。
(16)配列番号29に対し少なくとも95%同一である配列を有する重鎖可変領域を含む、(1)、(2)、(3)、(4)又は(6)〜(10)のいずれか1記載の抗体。
(17)配列番号29に対し少なくとも98%同一である配列を有する重鎖可変領域を含む、(1)、(2)、(3)、(4)、(6)〜(10)又は(16)のいずれか1記載の抗体。
(18)配列番号27に対し少なくとも95%同一である配列を有する軽鎖可変領域を含む、(1)、(2)、(3)、(4)、(6)〜(10)又は(16)〜(17)のいずれか1記載の抗体。
(19)配列番号27に対し少なくとも98%同一である配列を有する軽鎖可変領域を含む、(1)、(2)、(3)、(4)、(6)〜(10)又は(16)〜(18)のいずれか1記載の抗体。
(20)配列番号33に対し少なくとも95%同一である配列を有する重鎖可変領域を含む、(1)、(2)、(3)、(5)又は(11)〜(15)のいずれか1記載の抗体。
(21)配列番号33に対し少なくとも98%同一である配列を有する重鎖可変領域を含む、(1)、(2)、(3)、(5)、(11)〜(15)又は(20)のいずれか1記載の抗体。
(22)配列番号31に対し少なくとも95%同一である配列を有する軽鎖可変領域を含む、(1)、(2)、(3)、(5)、(11)〜(15)又は(20)〜(21)のいずれか1記載の抗体。
(23)配列番号31に対し少なくとも98%同一である配列を有する軽鎖可変領域を含む、(1)、(2)、(3)、(5)、(11)〜(15)又は(20)〜(22)のいずれか1記載の抗体。
(24)(1)〜(23)のいずれか1記載の抗体を含む組成物。
(25)(1)〜(23)のいずれか1記載の抗体を産生することができるハイブリドーマ細胞株。
(26)抗体がモノクローナル抗体である、(1)〜(25)のいずれか1記載の抗体、組成物又はハイブリドーマ。
(27)抗体が放射標識で標識されている、(1)〜(26)のいずれか1記載の抗体、組成物又はハイブリドーマ。
(28)放射標識がユーロピウムである、(27)記載の抗体、組成物、又はハイブリドーマ。
(29)(1)〜(23)又は(26)のいずれか1記載の抗体の重鎖を含むポリペプチドをコードする核酸配列を含むポリヌクレオチド。
(30)(1)〜(23)又は(26)のいずれか1記載の抗体の軽鎖を含むポリペプチドをコードする核酸配列を含むポリヌクレオチド。
(31)配列番号4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32又は34に対し少なくとも85%、90%、95%、98%、99%、又は100%同一である核酸配列を含むポリヌクレオチド。
(32)配列番号4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、30、32又は34の核酸配列を含むポリヌクレオチド。
(33)(29)〜(32)のいずれか1記載の核酸を含むベクター。
(34)(29)〜(32)のいずれか1記載の核酸又は(33)記載のベクターを含む宿主細胞。
(35)CHO細胞又は大腸菌細胞である、(34)記載の宿主細胞。
(36)(i)(25)記載のハイブリドーマ細胞株又は(34)若しくは(35)記載の宿主細胞を増殖させるステップ、及び
(ii)ハイブリドーマ細胞株又は宿主細胞から抗体を単離するステップ
を含む、抗体を作製する方法。
(37)抗体を放射標識にコンジュゲートさせることにより抗体を標識するステップをさらに含む、(36)記載の方法。
(38)抗体を固体支持体に固定化するステップをさらに含む、(36)記載の方法。
(39)(i)(1)〜(23)のいずれか1記載の第1の抗体を含む組成物、及び
(ii)Mcm5に結合する第2の抗体を含む組成物
を含むキット。
(40)(i)(4)、(6)〜(10)又は(16)〜(19)のいずれか1記載の第1の抗体を含む組成物、及び
(ii)(5)、(11)〜(15)又は(20)〜(23)のいずれか1記載の第2の抗体を含む組成物
を含むキット。
(41)試料中のMcm5の濃度又は量を決定する方法であって、
(i)固体支持体に固定化された、(1)〜(23)又は(26)のいずれか1記載の抗体である、固定化された第1の抗体を用意するステップ、
(ii)固定化された第1の抗体に試料中のMcm5が結合できるように、固定化された第1の抗体に試料を曝露して、固定化されたMcm5を用意するステップ、
(iii)標識にコンジュゲートさせた、(1)〜(23)又は(26)〜(28)のいずれか1記載の抗体である、標識された第2の抗体を用意するステップ、
(iv)標識された第2の抗体がMcm5に結合できるように、標識された第2の抗体に固定化されたMcm5を曝露するステップ、及び
(v)標識された第2の抗体の濃度を検出するステップ
を含む、前記方法。
(42)第1の抗体及び第2の抗体がともにMcm5に結合するが、第1の抗体及び第2の抗体がMcm5の異なるエピトープに結合する、(39)若しくは(40)記載のキット又は(41)記載の方法。
(43)第1の抗体が配列番号1に結合する、(39)又は(41)〜(42)のいずれか1記載のキット又は方法。
(44)第1の抗体が配列番号2に結合する、(39)又は(41)〜(42)のいずれか1記載のキット又は方法。
(45)第2の抗体が配列番号1に結合する、(39)、(41)〜(42)又は(44)のいずれか1記載のキット又は方法。
(46)第2の抗体が配列番号2に結合する、(39)又は(41)〜(44)のいずれか1記載のキット又は方法。
(47)第1の抗体がELISAプレートに固定化されている、(39)〜(46)のいずれか1記載のキット又は方法。
(48)第2の抗体がELISAプレートに固定化されている、(39)〜(40)又は(42)〜(46)のいずれか1記載のキット。
(49)第2の抗体が放射性標識にコンジュゲートしている、(39)〜(47)のいずれか1記載のキット又は方法。
(50)第1の抗体が放射性標識にコンジュゲートしている、(39)〜(40)、(42)〜(46)又は(48)のいずれか1記載のキット。
(51)放射性標識がユーロピウム 3+ である、(49)又は(50)記載のキット又は方法。
(52)標識された第2の抗体の濃度を検出するステップが、Eu 3+ の免疫蛍光検出を含む、(41)〜(51)のいずれか1記載の方法。
(53)(41)〜(47)又は(49)のいずれか1記載の方法の実施における、(39)〜(40)若しくは(42)〜(51)のいずれか1記載のキット又は(1)〜(23)若しくは(26)のいずれか1記載の抗体の使用。
Claims (20)
- 配列番号2のアミノ酸配列を有するエピトープに結合する、Mcm5に特異的に結合するモノクローナル抗体。
- 配列番号1のアミノ酸配列を有するエピトープに結合する、Mcm5に特異的に結合するモノクローナル抗体。
- 配列番号21の配列を有する4B4 CDRH1、配列番号23の配列を有する4B4 CDRH2、配列番号25の配列を有する4B4 CDRH3、配列番号15の配列を有する4B4 CDRL1、配列番号17の配列を有する4B4 CDRL2、及び配列番号19の配列を有する4B4 CDRL3を含む、Mcm5に特異的に結合するモノクローナル抗体。
- 配列番号9の配列を有する12A7 CDRH1、配列番号11の配列を有する12A7 CDRH2、配列番号13の配列を有する12A7 CDRH3、配列番号3の配列を有する12A7 CDRL1、配列番号5の配列を有する12A7 CDRL2、及び配列番号7の配列を有する12A7 CDRL3を含む、Mcm5に特異的に結合するモノクローナル抗体。
- 1〜10nMの範囲のMcm5に対する親和性を有する、請求項1〜4のいずれか1項記載の抗体。
- 配列番号29の配列に対して少なくとも98%同一である配列を有する重鎖可変領域と、配列番号27の配列に対して少なくとも98%同一である配列を有する軽鎖可変領域とを含む、請求項2又は4記載の抗体。
- 配列番号33の配列に対して少なくとも98%同一である配列を有する重鎖可変領域と、配列番号31の配列に対して少なくとも98%同一である配列を有する軽鎖可変領域とを含む、請求項1又は3記載の抗体。
- 請求項1〜7のいずれか1項記載の抗体を含む組成物。
- (i) 配列番号28の核酸配列に対して少なくとも98%、99%若しくは100%同一である核酸配列を有する核酸、及び配列番号30の核酸配列に対して少なくとも98%、99%若しくは100%同一である核酸配列を有する核酸、又は、
(ii) 配列番号32の核酸配列に対して少なくとも98%、99%若しくは100%同一である核酸配列を有する核酸、及び配列番号34の核酸配列に対して少なくとも98%、99%若しくは100%同一である核酸配列を有する核酸、又は、
(iii) 配列番号28の核酸配列を有する核酸、及び配列番号30の核酸配列を有する核酸、又は、
(iv) 配列番号32の核酸配列を有する核酸、及び配列番号34の核酸配列を有する核酸、
を含む組成物。 - (i) 配列番号28の核酸配列に対して少なくとも98%、99%若しくは100%同一である核酸配列を有する核酸、及び配列番号30の核酸配列に対して少なくとも98%、99%若しくは100%同一である核酸配列を有する核酸、又は、
(ii) 配列番号32の核酸配列に対して少なくとも98%、99%若しくは100%同一である核酸配列を有する核酸、及び配列番号34の核酸配列に対して少なくとも98%、99%若しくは100%同一である核酸配列を有する核酸、又は、
(iii) 配列番号28の核酸配列を有する核酸、及び配列番号30の核酸配列を有する核酸、又は、
(iv) 配列番号32の核酸配列を有する核酸、及び配列番号34の核酸配列を有する核酸、
を含む宿主細胞。 - CHO細胞又は大腸菌細胞である、請求項10記載の宿主細胞。
- (i) 請求項10又は11記載の宿主細胞を増殖させるステップ、及び、
(ii) 前記宿主細胞から抗体を単離するステップ
を含む、抗体を作製する方法。 - (i) 前記抗体を放射標識にコンジュゲートさせることにより該抗体を標識するステップをさらに含むか、又は、
(ii) 前記抗体を固体支持体に固定化するステップをさらに含む、
請求項12記載の方法。 - (i) 請求項1、3及び7のいずれか1項記載の第1の抗体を含む組成物と、
(ii) 請求項2、4及び6のいずれか1項記載の第2の抗体を含む組成物と、
を含むキット。 - 試料中のMcm5の濃度又は量を決定する方法であって、
(i) 固体支持体に固定化された、請求項1〜7のいずれか1項記載の抗体である、固定化された第1の抗体を用意するステップ、
(ii) 前記固定化された第1の抗体に前記試料中のMcm5が結合できるように、該固定化された第1の抗体に該試料を曝露して、固定化されたMcm5を用意するステップ、
(iii) 標識にコンジュゲートさせた、請求項1〜7のいずれか1項記載の抗体である、標識された第2の抗体を用意するステップ、
(iv) 前記標識された第2の抗体がMcm5に結合できるように、該標識された第2の抗体に前記固定化されたMcm5を曝露するステップ、及び
(v) 前記標識された第2の抗体の濃度を検出するステップ
を含み、
第1の抗体及び第2の抗体がともにMcm5に結合するが、第1の抗体及び第2の抗体がMcm5の異なるエピトープに結合する、
前記方法。 - 第1の抗体及び第2の抗体がともにMcm5に結合するが、第1の抗体及び第2の抗体がMcm5の異なるエピトープに結合し、且つ、
(a) 第1の抗体がELISAプレートに固定化されている、及び/又は、
(b) 第2の抗体がELISAプレートに固定化されている、及び/又は、
(c) 第2の抗体が放射性標識にコンジュゲートしている、及び/又は、
(d) 第1の抗体が放射性標識にコンジュゲートしている、
請求項14記載のキット。 - 前記放射性標識がユーロピウム3+である、請求項16記載のキット。
- 第1の抗体及び第2の抗体がともにMcm5に結合するが、第1の抗体及び第2の抗体がMcm5の異なるエピトープに結合し、且つ、
(a) (i) 第1の抗体が、配列番号1のアミノ酸配列を有するエピトープに結合し、且つ、第2の抗体が、配列番号2のアミノ酸配列を有するエピトープに結合するか、若しくは、
(ii) 第1の抗体が、配列番号2のアミノ酸配列を有するエピトープに結合し、且つ、第2の抗体が、配列番号1のアミノ酸配列を有するエピトープに結合する、及び/又は、
(b) 第1の抗体がELISAプレートに固定化されている、及び/又は、
(c) 第2の抗体がELISAプレートに固定化されている、及び/又は、
(d) 第2の抗体が放射性標識にコンジュゲートしている、及び/又は、
(e) 第1の抗体が放射性標識にコンジュゲートしている、
請求項15記載の方法。 - 前記放射性標識がユーロピウム3+である、請求項18記載の方法。
- 前記標識された第2の抗体の濃度を検出するステップが、Eu3+の免疫蛍光検出を含む、請求項15、18及び19のいずれか1項記載の方法。
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