JP2018510615A - 遺伝子治療用ポイントオブケア及び/又はポータブルプラットフォーム - Google Patents
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Abstract
Description
1.USP<71>による最終放出無菌試験(細菌、真菌及び酵母)。試験の準備は制御下のクリーンルームで行い、14日間のインキュベーションと、直接接種法、メンブレンフィルター法及びスワブ法による薬局方無菌検査を含む。
2.最終産物生存率試験は制御下のクリーンルームでトリパンブルー色素排除法とフローサイトメトリーによる7AAD染色法により行う。
3.細胞計数は制御下の実験室で手動血球計算盤計測及び/又は自動血球計算盤計測及び/又は自動血球計数器により行う。
4.マイコプラズマ試験は培養法及び/又は高速PCR試験及び/又は非高速PCR試験により行う。
5.エンドトキシン試験はLAL(limulus amebocyte lysate)アッセイにより行う。
1.対象試料から得た標的細胞を単離・遺伝子改変・製剤化する方法であって、前記方法が、
(i)試料投入口、緩衝液投入口及び処理チャンバーを備える前記対象試料のプロセシング用回路と;
前記回路の1個以上の流路を選択的に閉じるための複数の弁と;
前記対象試料の前記標的細胞を前記対象試料の非標的細胞から分離するための1個以上の標的細胞セレクターと;
前記回路の少なくとも一部を通して前記対象試料を灌流させるための少なくとも1個のポンプと;
前記処理チャンバー、前記複数の弁、前記標的細胞セレクター及び前記ポンプの動作を制御するために1個以上のプロセッサにより実行可能なメモリ格納命令
を含むポイントオブケア及び/又はポータブルデバイスに前記対象試料を仕込む工程と;
(ii)前記1個以上のプロセッサによる前記命令の実行を開始し、
前記対象試料を前記処理チャンバーから前記標的細胞セレクターへと移送する作業と;
2個以上のセレクターを使用する場合には、前記標的細胞セレクターの動作により前記標的細胞を前記非標的細胞から同時又はタンデムに分離する作業と;
前記標的細胞を前記処理チャンバーに戻す作業と;
前記処理チャンバー及び/又は前記標的細胞セレクター内の前記標的細胞に遺伝子モディファイヤーを導入し、遺伝子改変された標的細胞を作製する作業と;
前記遺伝子改変された標的細胞を対象への投与用製剤として製剤化する作業を
前記複数の弁、前記1個以上の標的細胞セレクター、又は前記少なくとも1個のポンプのうちの少なくとも1種に実施させる工程を含む前記方法。
2.前記実行を開始する工程がSW1、SW2、SW3、SW4、SW6、SW7、SW8及び/又はSW9の1種以上の実行を開始する工程を含む実施形態1に記載の方法。
3.前記実行を開始する工程がSW1、記述1、2、3もしくは4;SW2、記述1、2、3もしくは4;SW3、記述1、2、3もしくは4;SW4、記述1、2、3、4もしくは5;SW6、記述1、2、3、4もしくは5;SW7、記述1、2、3、4もしくは5;SW8、記述1、2、3、4もしくは5;及び/又はSW9、記述1、2、3、4もしくは5の1種以上の実行を開始する工程を含む実施形態1に記載の方法。
4.前記実行を開始する工程がJ1、J2、J3、J4、J6、J7、J8及び/又はJ9の1種以上の実行を開始する工程を含む実施形態1に記載の方法。
5.更に前記対象試料の初期体積を測定する工程を含む実施形態1から4のいずれかに記載の方法。
6.更に前記仕込み工程の前に前記対象試料のヘマトクリット値を測定する工程を含む実施形態1から5のいずれかに記載の方法。
7.更に一定体積の緩衝液を前記対象試料に添加し、前記ヘマトクリット値を少なくとも25%まで低下させる工程を含む実施形態1から6のいずれかに記載の方法。
8.前記対象試料に添加する緩衝液の体積が下式:
9.更に前記緩衝液の添加後に前記対象試料のヘマトクリット値を測定する工程を含む実施形態7又は8に記載の方法。
10.更に前記希釈後の対象試料の体積を測定する工程を含む実施形態7から9のいずれかに記載の方法。
11.更に25%のヘマトクリット値を前記デバイスのユーザーインターフェースに入力する工程を含む実施形態1から10のいずれかに記載の方法。
12.現行の適正製造規範(Current Good Manufacturing Practices)の適合を確認するための放出試験を実施する工程を含む実施形態1から11のいずれかに記載の方法。
13.前記放出試験が以下の試験を含む実施形態12に記載の方法。
15.前記免疫介在性疾患がグレーブス病、関節リウマチ、悪性貧血、多発性硬化症(MS)、炎症性腸疾患、全身性エリテマトーデス(SLE)、重症複合免疫不全症(SCID)、アデノシン・デアミナーゼ欠損SCID(ADA−SCID)又はウィスコット・アルドリッチ症候群(WAS)である実施形態14に記載の方法。
16.前記遺伝性遺伝子疾患が慢性肉芽腫症(CGD)、ファンコーニ貧血(FA)、シュワッハマン・ダイアモンド・ブラックファン貧血(DBA)、先天性角化不全症(DKC)、ピルビン酸キナーゼ欠損症(PKD)、嚢胞性線維症(CF)、肺胞蛋白症(PAP)、バッテン病、副腎白質ジストロフィー(ALD)、異染性白質ジストロフィー(MLD)、筋ジストロフィー(MD)、パーキンソン病、アルツハイマー病又は筋萎縮性側索硬化症(ALS;ルー・ゲーリッグ病)である実施形態14に記載の方法。
17.前記血液障害がサラセミアや鎌状赤血球貧血症等の異常ヘモグロビン症である実施形態14に記載の方法。
18.前記リソソーム蓄積症がムコ多糖症(MPS)I型、MPS II型、MPS III型、MPS IV型、MPS V型、MPS VI型、MPS VII型、α−マンノース症、β−マンノース症、テイ=サックス病、ポンペ病、ゴーシェ病又はファブリー病である実施形態14に記載の方法。
19.前記過剰増殖性疾患が癌である実施形態14に記載の方法。
20.前記感染症がHIV、麻疹ウイルス、コロナウイルス、アミノペプチダーゼ−N、LCMV/ラッサ熱ウイルス、細菌及び/又は寄生虫による感染に起因する実施形態14に記載の方法。
21.前記単離・遺伝子改変・製剤化された細胞が造血幹細胞(HSC)、造血前駆細胞(HPC)、造血幹・前駆細胞(HSPC)、T細胞、ナチュラルキラー細胞、B細胞、マクロファージ、単球、間葉系幹細胞(MSC)、白血球(WBC)、単核細胞(MNC)、内皮細胞(EC)、間質細胞及び/又は骨髄線維芽細胞である実施形態1から20のいずれかに記載の方法。
22.前記単離・遺伝子改変・製剤化された細胞がCD34+HSPCである実施形態1から21のいずれかに記載の方法。
23.前記遺伝子がABCD1、ABCA3、ABL1、ADA、AKT1、APC、APP、ARSA、ARSB、BCL11A、BLC1、BLC6、BRCA1、BRCA2、BRIP1、C9ORF72、C46又は他のCペプチド、CAR、CAS9、C−CAM、CBFA1、CBL、CCR5、CD4、CD19、CD40、CDA、CFTR、CLN3、C−MYC、CRE、CSCR4、CSFIR、CTLA、CTS−1、CYB5R3、DCC、DHFR、DKC1、DLL1、DMD、EGFR、ERBA、ERBB、EBRB2、ETS1、ETS2、ETV6、F8、F9、FANCA、FANCB、FANCC、FANCD2、FANCE、FANCF、FANCG、FANCI、FANCL、FANCM、FasL、FCC、FGR、FOX、FUS、FUS1、FYN、GALNS、GATA1、GLB1、GNS、GUSB、HBB、HBD、HBE1、HBG1、HBG2、HCR、HGSNAT、HOXB4、HRAS、HYAL1、ICAM−1、iカスパーゼ、IDUA、IDS、JUN、KLF4、KRAS、LCK、LRRK2、LYN、MCC、MDM2、MGMT、MLL、MMAC1、MYB、MEN−I、MEN−II、MYC、NAGLU、NANOG、NF−1、NF−2、NKX2.1、NOTCH、OCT4、p16、p21、p27、p53、p57、p73、PALB2、PARK2、PARK7、phox、PINK1、PK、PSEN1、PSEN2、PTPN22、RAD51C、ras、RPL3〜RPL40、RPLP0、RPLP1、RPLP2、RPS2〜RPS30、RPSA、SFTPB、SFTPC、SGSH、SLX4、SNCA、SOD1、SOX2、TERC、TERT、TDP43、TINF2、TK、ユビキリン2、VHL、WAS及びWT−1の1種以上である実施形態14から22のいずれかに記載の方法。
24.更に投与を必要とする対象に前記単離・遺伝子改変・製剤化された細胞を治療有効量で投与する工程を含む実施形態1から23のいずれかに記載の方法。
25.前記単離・遺伝子改変・製剤化された細胞の前記治療有効量が対象体重1kg当たり≧2.5E+05である実施形態24に記載の方法。
26.前記単離・遺伝子改変・製剤化された細胞の前記治療有効量が対象体重1kg当たり細胞2×106個である実施形態24に記載の方法。
27.前記遺伝子モディファイヤーが非組込み型ベクターを含む実施形態14に記載の方法。
28.前記遺伝子モディファイヤーがウイルスベクターを含む実施形態14又は27に記載の方法。
29.前記遺伝子モディファイヤーがレンチウイルスベクターを含む実施形態14、27又は28に記載の方法。
30.前記レンチウイルスベクターがシュードタイプエンベロープ糖タンパク質とレンチウイルスRNA分子を含む実施形態29に記載の方法。
31.前記シュードタイプエンベロープ糖タンパク質が水泡性口内炎ウイルス糖タンパク質(VSVG)、Cocalウイルス糖タンパク質(cocal)、ネコ内在性ウイルス糖タンパク質(RD114)又は改変型フォーミーウイルス糖タンパク質(mFoamy)を含む実施形態30に記載の方法。
32.前記レンチウイルスRNA分子がHIV−1由来自己不活性化型レンチウイルスバックボーンを含む実施形態30又は31に記載の方法。
33.前記レンチウイルスRNA分子が組込み欠損型のHIV−1由来自己不活性化型レンチウイルスバックボーンを含む実施形態30又は31に記載の方法。
34.前記遺伝子モディファイヤーがガンマレトロウイルスベクターを含む実施形態14、27又は28に記載の方法。
35.前記ガンマレトロウイルスベクターがシュードタイプエンベロープ糖タンパク質とガンマレトロウイルスRNA分子を含む実施形態34に記載の方法。
36.前記シュードタイプエンベロープ糖タンパク質がテナガザル白血病ウイルス糖タンパク質(GALV)又はネコ内在性ウイルスエンベロープ(RD114)を含む実施形態35に記載の方法。
37.前記ガンマレトロウイルスRNA分子が自己不活性化型ガンマレトロウイルスバックボーンを含む実施形態35又は36に記載の方法。
38.前記ガンマレトロウイルスRNA分子が組込み欠損型の自己不活性化型ガンマレトロウイルスバックボーンを含む実施形態35又は36に記載の方法。
39.前記遺伝子モディファイヤーがフォーミーウイルスベクターを含む実施形態14、27又は28に記載の方法。
40.前記フォーミーウイルスベクターがシュードタイプエンベロープ糖タンパク質とフォーミーウイルスRNA分子を含む実施形態39に記載の方法。
41.前記シュードタイプエンベロープ糖タンパク質がフォーミーウイルスエンベロープタンパク質(Foamy)又は改変型フォーミーウイルスエンベロープタンパク質(mFoamy)を含む実施形態40に記載の方法。
42.前記フォーミーウイルスRNA分子が自己不活性化型フォーミーウイルスバックボーンを含む実施形態40又は41に記載の方法。
43.前記フォーミーウイルスRNA分子が組込み欠損型の自己不活性化型フォーミーウイルスバックボーンを含む実施形態40又は41に記載の方法。
44.前記遺伝子モディファイヤーがアルファレトロウイルスベクターを含む実施形態14、27又は28に記載の方法。
45.前記アルファレトロウイルスベクターがシュードタイプエンベロープ糖タンパク質とアルファレトロウイルスRNA分子を含む実施形態44に記載の方法。
46.前記シュードタイプエンベロープ糖タンパク質が水泡性口内炎ウイルス糖タンパク質(VSVG)、Cocalウイルス糖タンパク質(cocal)、ネコ内在性ウイルス糖タンパク質(RD114)又は改変型フォーミーウイルス糖タンパク質(mFoamy)を含む実施形態45に記載の方法。
47.前記アルファレトロウイルスRNA分子が自己不活性化型アルファレトロウイルスバックボーンを含む実施形態45又は46に記載の方法。
48.前記遺伝子モディファイヤーが1種以上のプロモーターエレメント、選択カセット、エンハンサーエレメント、インシュレーターエレメント、調節エレメント及び転写/翻訳エンハンサーエレメントを更に含むレンチウイルス、ガンマレトロウイルス、フォーミーウイルス又はアルファレトロウイルスベクターを含む実施形態14から47のいずれかに記載の方法。
49.前記転写/翻訳エンハンサーエレメントがウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメントの一部、2Aウイルス融合エレメント又は配列内リボソーム進入部位(IRES)配列を含む実施形態48に記載の方法。
50.前記遺伝子モディファイヤーが裸のDNA、裸のmRNA、アデノウイルスベクターもしくはアデノ随伴ウイルスベクター、ガイドRNA、ジンクフィンガー、メガヌクレアーゼ、TALEN、メガヌクレアーゼ−TALEN融合体(megaTAL)及び/又は相同領域に挟まれた遺伝子を含む実施形態14に記載の方法。
51.前記デバイスに連結したチューブセットに1個以上の漏斗形クライオバッグを無菌溶接する工程を含む実施形態1から50のいずれかに記載の方法。
52.予想沈降体積に適したバッグ容積を選択する工程を含む実施形態1から51のいずれかに記載の方法。
53.前記対象試料を沈降させるために前記チューブセットに仕込むために必要な段階数を入力する工程を含み、前記必要な段階数が前記希釈後の試料体積(mL)を段階毎に300mLで割り、次の整数に切り上げることにより得られる実施形態1から52のいずれかに記載の方法。
54.沈降が完了し、RBC除去を開始してもよいことを前記デバイスに通知する工程を含む実施形態1から53のいずれかに記載の方法。
55.RBC沈降層から除去する初期体積(mL)を入力する工程を含む実施形態1から54のいずれかに記載の方法。
56.CD3、CD4、CD8、CD13、CD14、CD15、CD16、CD19、CD20、CD34、CD45、CD45RA、CD45RO、CD49f、CD50、CD56、CD71、CD90又はCD133と選択的に結合するビーズ又は抗体を前記デバイスに仕込む工程を含む実施形態1から55のいずれかに記載の方法。
57.マイクロビーズとIVIgを前記デバイスに仕込む工程を含む実施形態1から56のいずれかに記載の方法。
58.標的細胞を収容した標的細胞バッグのルアー接続部の上部にチューブセットをシールする工程を含む実施形態1から57のいずれかに記載の方法。
59.形質導入培地を前記デバイスに仕込む工程を含む実施形態1から58のいずれかに記載の方法。
60.前記形質導入培地が基礎培地と、サイトカイン及び/又はケモカインと、細胞生存と遺伝子導入を助長するための添加物を含む実施形態59に記載の方法。
61.前記サイトカイン/ケモカインが組換えヒト顆粒球コロニー刺激因子(G−CSF)、幹細胞因子(SCF)、トロンボポエチン(TPO)、flightless 3リガンド(flt3又はflt3L)及びインターロイキンを含む実施形態60に記載の方法。
62.前記インターロイキンがインターロイキン3(IL−3)及び/又はインターロイキン6(IL−6)を含む実施形態61に記載の方法。
63.前記添加物が芳香族炭化水素受容体拮抗薬、ピリミドインドール誘導体、グルココルチコイド受容体拮抗薬、プロタミン硫酸塩、ラパマイシン、ポリブレン、フィブロネクチンフラグメント、プロスタグランジン、抗酸化剤及び/又は非ステロイド性抗炎症薬を含む実施形態60から62のいずれかに記載の方法。
64.前記芳香族炭化水素受容体拮抗薬がStemRegenin1、GNF351及び/又はCH223191を含む実施形態60から63のいずれかに記載の方法。
65.前記ピリミドインドール誘導体がUM171及び/又はUM118428を含む実施形態60から64のいずれかに記載の方法。
66.前記グルココルチコイド受容体拮抗薬がミフェプリストン、RU−43044、ミコナゾール、11−オキサコルチゾール、11−オキサプレドニゾロン及び/又はデキサメタゾンメシラートを含む実施形態60から65のいずれかに記載の方法。
67.プロスタグランジンがプロスタグランジンE2を含む実施形態60から66のいずれかに記載の方法。
68.前記非ステロイド性抗炎症薬がセレコキシブ、ジクロフェナク、ジフルニサル、エトドラク、イブプロフェン、インドメタシン、ケトプロフェン、ナブメトン、ナプロキセン、オキサプロジン、ピロキシカム、サルサレート、スリンダク及び/又はトルメチンを含む実施形態60から67のいずれかに記載の方法。
69.一定体積の濃縮レンチウイルス、ガンマレトロウイルス、フォーミーウイルス又はアルファレトロウイルスを適当な寸法のシリンジ内に吸引する工程と、前記シリンジをルアーフィッティングに接続する工程を含む実施形態1から68のいずれかに記載の方法。
70.第2の体積の濃縮レンチウイルス、ガンマレトロウイルス、フォーミーウイルス又はアルファレトロウイルスを適当な寸法のシリンジ内に吸引する工程と、前記シリンジをルアーフィッティングに接続する工程を含む実施形態1から69のいずれかに記載の方法。
71.無針スパイクアダプターを製剤化用緩衝液のバッグに差し込む工程を含む実施形態1から70のいずれかに記載の方法。
72.標的細胞バッグを製剤化用緩衝液のバッグに交換する工程を含む実施形態1から71のいずれかに記載の方法。
73.クライオバッグから廃棄物バッグへの弁経路を手動で開き、チューブセットを通して製剤化用緩衝液を排出させる工程を含む実施形態1から72のいずれかに記載の方法。
74.対象から得た標的細胞を単離・遺伝子改変・製剤化するためのキットであって、前記キットが遺伝子モディファイヤーと、試料プロセシング、ソフトウェアプログラム使用、並びに/又はポイントオブケア及び/もしくはポータブルデバイスで使用するためのユーザーインターフェースガイドラインに関する説明書を含む前記キット。
75.SW1、記述1、2、3もしくは4;SW2、記述1、2、3もしくは4;SW3、記述1、2、3もしくは4;SW4、記述1、2、3、4もしくは5;SW6、記述1、2、3、4もしくは5;SW7、記述1、2、3、4もしくは5;SW8、記述1、2、3、4もしくは5;及び/又はSW9、記述1、2、3、4もしくは5の1種以上の使用説明書を含む実施形態74に記載のキット。
76.J1、J2、J3、J4、J6、J7、J8又はJ9の1種以上の使用説明書を含む実施形態74に記載のキット。
77.前記説明書が前記対象試料の出発時の体積を測定するように指示する実施形態74から76のいずれかに記載のキット。
78.前記説明書が前記仕込み工程の前に前記対象試料のヘマトクリット値を測定するように指示する実施形態74から77のいずれかに記載のキット。
79.前記説明書が一定体積の緩衝液を前記対象試料に添加し、前記ヘマトクリット値を25%まで低下させるように指示する実施形態74から78のいずれかに記載のキット。
80.前記説明書が前記対象試料に添加する緩衝液の体積を下式:
81.前記説明書が前記緩衝液の添加後に前記対象試料のヘマトクリット値を測定するように指示する実施形態74から80のいずれかに記載のキット。
82.前記説明書が希釈後の試料の体積を測定するように指示する実施形態74から81のいずれかに記載のキット。
83.前記説明書が25%のヘマトクリット値を前記デバイスのユーザーインターフェースに入力するように指示する実施形態74から82のいずれかに記載のキット。
84.前記説明書が前記デバイスに連結したチューブセットに1個以上の漏斗形クライオバッグを無菌溶接するように指示する実施形態74から83のいずれかに記載のキット。
85.前記説明書が予想沈降体積に適したバッグ容積を選択するように指示する実施形態74から84のいずれかに記載のキット。
86.前記説明書が前記対象試料を沈降させるために前記チューブセットに仕込むために必要な段階数を入力することを指示し、前記必要な段階数が前記希釈後の試料体積(mL)を段階毎に300mLで割り、次の整数に切り上げることにより得られる実施形態74から85のいずれかに記載のキット。
87.沈降が完了し、RBC除去を開始してもよいことを前記デバイスに通知するように前記説明書が指示する実施形態74から87のいずれかに記載のキット。
88.前記説明書がRBC沈降層から除去する初期体積(mL)を入力するように指示する実施形態74から87のいずれかに記載のキット。
89.前記説明書が造血幹細胞(HSC)、造血前駆細胞(HPC)、造血幹・前駆細胞(HSPC)、T細胞、ナチュラルキラー細胞、B細胞、マクロファージ、単球、間葉系幹細胞(MSC)、白血球(WBC)、単核細胞(MNC)、内皮細胞(EC)、間質細胞及び/又は骨髄線維芽細胞から選択される細胞の単離・遺伝子改変・製剤化を指示する実施形態74から88のいずれかに記載のキット。
90.前記説明書がCD34+HSPCの単離・遺伝子改変・製剤化を指示する実施形態74から89のいずれかに記載のキット。
91.前記説明書がCD3、CD4、CD8、CD13、CD14、CD15、CD16、CD19、CD20、CD34、CD45、CD45RA、CD45RO、CD49f、CD50、CD56、CD71、CD90又はCD133と選択的に結合するビーズ又は抗体を前記デバイスに仕込むように指示する実施形態74から90のいずれかに記載のキット。
92.前記説明書がマイクロビーズとIVIgを前記デバイスに仕込むように指示する実施形態74から91のいずれかに記載のキット。
93.前記説明書が標的細胞を収容した標的細胞バッグのルアー接続部の上部にチューブセットをシールするように指示する実施形態74から92のいずれかに記載のキット。
94.前記説明書が形質導入培地を前記デバイスに仕込むように指示する実施形態74から93のいずれかに記載のキット。
95.前記説明書が一定体積の濃縮レンチウイルス、ガンマレトロウイルス、フォーミーウイルス又はアルファレトロウイルスを適当な寸法のシリンジ内に吸引し、前記シリンジをルアーフィッティングに接続するように指示する実施形態74から94のいずれかに記載のキット。
96.前記説明書が第2の体積の濃縮レンチウイルス、ガンマレトロウイルス、フォーミーウイルス又はアルファレトロウイルスを適当な寸法のシリンジ内に吸引し、前記シリンジをルアーフィッティングに接続するように指示する実施形態74から95のいずれかに記載のキット。
97.前記説明書が無針スパイクアダプターを製剤化用緩衝液のバッグに差し込むように指示する実施形態74から96のいずれかに記載のキット。
98.前記説明書が標的細胞バッグを製剤化用緩衝液のバッグに交換するように指示する実施形態74から97のいずれかに記載のキット。
99.前記説明書がクライオバッグから廃棄物バッグへの弁経路を手動で開き、チューブセットを通して製剤化用緩衝液を排出させるように指示する実施形態74から98のいずれかに記載のキット。
100.前記説明書が現行の適正製造規範の適合を確認するために放出試験を実施するように指示する実施形態74から99のいずれかに記載のキット。
101.前記放出試験が以下の試験を含む実施形態100に記載のキット。
103.前記単離・遺伝子改変・製剤化された細胞の前記治療有効量が対象体重1kg当たり≧2.5E+05である実施形態102に記載のキット。
104.前記単離・遺伝子改変・製剤化された細胞の前記治療有効量が対象体重1kg当たり細胞2×106個である実施形態102に記載のキット。
105.免疫介在性疾患、遺伝性遺伝子疾患、血液障害、リソソーム蓄積症、過剰増殖性疾患又は感染症を治療するために遺伝子を導入又は改変するための遺伝子モディファイヤーを含む実施形態74から104のいずれかに記載のキット。
106.前記免疫介在性疾患がグレーブス病、関節リウマチ、悪性貧血、多発性硬化症(MS)、炎症性腸疾患、全身性エリテマトーデス(SLE)、重症複合免疫不全症(SCID)、アデノシン・デアミナーゼ欠損SCID(ADA−SCID)又はウィスコット・アルドリッチ症候群(WAS)である実施形態105に記載のキット。
107.前記遺伝性遺伝子疾患が慢性肉芽腫症(CGD)、ファンコーニ貧血(FA)、シュワッハマン・ダイアモンド・ブラックファン貧血(DBA)、先天性角化不全症(DKC)、ピルビン酸キナーゼ欠損症(PKD)、嚢胞性線維症(CF)、肺胞蛋白症(PAP)、バッテン病、副腎白質ジストロフィー(ALD)、異染性白質ジストロフィー(MLD)、筋ジストロフィー(MD)、パーキンソン病、アルツハイマー病又は筋萎縮性側索硬化症(ALS;ルー・ゲーリッグ病)である実施形態105に記載のキット。
108.前記血液障害がサラセミアや鎌状赤血球貧血症等の異常ヘモグロビン症である実施形態105に記載のキット。
109.前記リソソーム蓄積症がムコ多糖症(MPS)I型、MPS II型、MPS III型、MPS IV型、MPS V型、MPS VI型、MPS VII型、α−マンノース症、β−マンノース症、テイ=サックス病、ポンペ病、ゴーシェ病又はファブリー病である実施形態105に記載のキット。
110.前記過剰増殖性疾患が癌である実施形態105に記載のキット。
111.前記感染症がHIV、麻疹ウイルス、コロナウイルス、アミノペプチダーゼ−N、LCMV/ラッサ熱ウイルス、細菌及び/又は寄生虫による感染に起因する実施形態105に記載のキット。
112.前記遺伝子がABCD1、ABCA3、ABL1、ADA、AKT1、APC、APP、ARSA、ARSB、BCL11A、BLC1、BLC6、BRCA1、BRCA2、BRIP1、C9ORF72、C46又は他のCペプチド、CAR、CAS9、C−CAM、CBFA1、CBL、CCR5、CD4、CD19、CD40、CDA、CFTR、CLN3、C−MYC、CRE、CSCR4、CSFIR、CTLA、CTS−1、CYB5R3、DCC、DHFR、DKC1、DLL1、DMD、EGFR、ERBA、ERBB、EBRB2、ETS1、ETS2、ETV6、F8、F9、FANCA、FANCB、FANCC、FANCD2、FANCE、FANCF、FANCG、FANCI、FANCL、FANCM、FasL、FCC、FGR、FOX、FUS、FUS1、FYN、GALNS、GATA1、GLB1、GNS、GUSB、HBB、HBD、HBE1、HBG1、HBG2、HCR、HGSNAT、HOXB4、HRAS、HYAL1、ICAM−1、iカスパーゼ、IDUA、IDS、JUN、KLF4、KRAS、LCK、LRRK2、LYN、MCC、MDM2、MGMT、MLL、MMAC1、MYB、MEN−I、MEN−II、MYC、NAGLU、NANOG、NF−1、NF−2、NKX2.1、NOTCH、OCT4、p16、p21、p27、p53、p57、p73、PALB2、PARK2、PARK7、phox、PINK1、PK、PSEN1、PSEN2、PTPN22、RAD51C、ras、RPL3〜RPL40、RPLP0、RPLP1、RPLP2、RPS2〜RPS30、RPSA、SFTPB、SFTPC、SGSH、SLX4、SNCA、SOD1、SOX2、TERC、TERT、TDP43、TINF2、TK、ユビキリン2、VHL、WAS及びWT−1の1種以上である実施形態105から111のいずれかに記載のキット。
113.前記遺伝子モディファイヤーがウイルスベクターを含む実施形態105から112のいずれかに記載のキット。
114.前記遺伝子モディファイヤーが非組込み型ベクターを含む実施形態105から113のいずれかに記載のキット。
115.前記遺伝子モディファイヤーがレンチウイルスベクターを含む実施形態104から114のいずれかに記載のキット。
116.前記レンチウイルスベクターがシュードタイプエンベロープ糖タンパク質とレンチウイルスRNA分子を含む実施形態115に記載のキット。
117.前記シュードタイプエンベロープ糖タンパク質が水泡性口内炎ウイルス糖タンパク質(VSVG)、Cocalウイルス糖タンパク質(cocal)、ネコ内在性ウイルス糖タンパク質(RD114)又は改変型フォーミーウイルス糖タンパク質(mFoamy)を含む実施形態116に記載のキット。
118.前記レンチウイルスRNA分子がHIV−1由来自己不活性化型レンチウイルスバックボーンを含む実施形態116又は117に記載のキット。
119.前記レンチウイルスRNA分子が組込み欠損型のHIV−1由来自己不活性化型レンチウイルスバックボーンを含む実施形態116又は117に記載のキット。
120.前記遺伝子モディファイヤーがガンマレトロウイルスベクターを含む実施形態105から114のいずれかに記載のキット。
121.前記ガンマレトロウイルスベクターがシュードタイプエンベロープ糖タンパク質とガンマレトロウイルスRNA分子を含む実施形態120に記載のキット。
122.前記シュードタイプエンベロープ糖タンパク質がテナガザル白血病ウイルス糖タンパク質(GALV)又はネコ内在性ウイルスエンベロープ(RD114)を含む実施形態121に記載のキット。
123.前記ガンマレトロウイルスRNA分子が自己不活性化型ガンマレトロウイルスバックボーンを含む実施形態121又は122に記載のキット。
124.前記ガンマレトロウイルスRNA分子が組込み欠損型の自己不活性化型ガンマレトロウイルスバックボーンを含む実施形態121又は122に記載のキット。
125.前記遺伝子モディファイヤーがフォーミーウイルスベクターを含む実施形態105から114のいずれかに記載のキット。
126.前記フォーミーウイルスベクターがシュードタイプエンベロープ糖タンパク質とフォーミーウイルスRNA分子を含む実施形態125に記載のキット。
127.前記シュードタイプエンベロープ糖タンパク質がフォーミーウイルスエンベロープタンパク質(Foamy)又は改変型フォーミーウイルスエンベロープタンパク質(mFoamy)を含む実施形態126に記載のキット。
128.前記フォーミーウイルスRNA分子が自己不活性化型フォーミーウイルスバックボーンを含む実施形態126又は127に記載のキット。
129.前記フォーミーウイルスRNA分子が組込み欠損型の自己不活性化型フォーミーウイルスバックボーンを含む実施形態126又は127に記載のキット。
130.前記遺伝子モディファイヤーがアルファレトロウイルスベクターを含む実施形態105から114のいずれかに記載のキット。
131.前記アルファレトロウイルスベクターがシュードタイプエンベロープ糖タンパク質とアルファレトロウイルスRNA分子を含む実施形態130に記載のキット。
132.前記シュードタイプエンベロープ糖タンパク質が水泡性口内炎ウイルス糖タンパク質(VSVG)、Cocalウイルス糖タンパク質(cocal)、ネコ内在性ウイルス糖タンパク質(RD114)又は改変型フォーミーウイルス糖タンパク質(mFoamy)を含む実施形態131に記載のキット。
133.前記アルファレトロウイルスRNA分子が自己不活性化型アルファレトロウイルスバックボーンを含む実施形態131又は132に記載のキット。
134.前記遺伝子モディファイヤーが1種以上のプロモーターエレメント、選択カセット、エンハンサーエレメント、インシュレーターエレメント、調節エレメント及び転写/翻訳エンハンサーエレメントを更に含むレンチウイルス、ガンマレトロウイルス、フォーミーウイルス又はアルファレトロウイルスベクターを含む実施形態105から133のいずれかに記載のキット。
135.前記転写/翻訳エンハンサーエレメントがウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメントの一部、2Aウイルス融合エレメント又は配列内リボソーム進入部位(IRES)配列を含む実施形態134に記載のキット。
136.前記遺伝子モディファイヤーが裸のDNA、裸のmRNA、アデノウイルスベクターもしくはアデノ随伴ウイルスベクター、ガイドRNA、ジンクフィンガー、メガヌクレアーゼ、TALEN、メガヌクレアーゼ−TALEN融合体(megaTAL)及び/又は相同領域に挟まれた遺伝子を含む実施形態105に記載のキット。
137.更に形質導入培地を含む実施形態74から136のいずれかに記載のキット。
138.前記形質導入培地が基礎培地と、サイトカイン及び/又はケモカインと、細胞生存と遺伝子導入を助長するための添加物を含む実施形態137に記載のキット。
139.前記サイトカイン/ケモカインが組換えヒト顆粒球コロニー刺激因子(G−CSF)、幹細胞因子(SCF)、トロンボポエチン(TPO)、flightless 3リガンド(flt3又はflt3L)及びインターロイキンを含む実施形態138に記載のキット。
140.前記インターロイキンがインターロイキン3(IL−3)及び/又はインターロイキン6(IL−6)を含む実施形態139に記載のキット。
141.前記添加物が芳香族炭化水素受容体拮抗薬、ピリミドインドール誘導体、グルココルチコイド受容体拮抗薬、プロタミン硫酸塩、ラパマイシン、ポリブレン、フィブロネクチンフラグメント、プロスタグランジン、抗酸化剤又は非ステロイド性抗炎症薬を含む実施形態138から140のいずれかに記載のキット。
142.前記芳香族炭化水素受容体拮抗薬がStemRegenin1、GNF351、及び/又はCH223191を含む実施形態138から141のいずれかに記載のキット。
143.前記ピリミドインドール誘導体がUM171及び/又はUM118428を含む実施形態138から142のいずれかに記載のキット。
144.前記グルココルチコイド受容体拮抗薬がミフェプリストン、RU−43044、ミコナゾール、11−オキサコルチゾール、11−オキサプレドニゾロン及び/又はデキサメタゾンメシラートを含む実施形態138から143のいずれかに記載のキット。
145.プロスタグランジンがプロスタグランジンE2を含む実施形態138から144のいずれかに記載のキット。
146.前記非ステロイド性抗炎症薬がセレコキシブ、ジクロフェナク、ジフルニサル、エトドラク、イブプロフェン、インドメタシン、ケトプロフェン、ナブメトン、ナプロキセン、オキサプロジン、ピロキシカム、サルサレート、スリンダク及び/又はトルメチンを含む実施形態138から145のいずれかに記載のキット。
147.更に滅菌済みチューブセットを含む実施形態74から146のいずれかに記載のキット。
148.更に医薬的に許容される担体を含む実施形態74から147のいずれかに記載のキット。
149.前記医薬的に許容される担体が静脈内輸液用塩類溶液を含む実施形態148に記載のキット。
150.ヒト血清アルブミンを含む実施形態74から149のいずれかに記載のキット。
151.更にヘタスターチ含有塩類溶液を含む実施形態74から150のいずれかに記載のキット。
152.更に緩衝液を含む実施形態74から151のいずれかに記載のキット。
153.前記緩衝液がPBS/EDTAである実施形態152に記載のキット。
154.更にCD3、CD4、CD8、CD13、CD14、CD15、CD16、CD19、CD20、CD34、CD45、CD45RA、CD45RO、CD49f、CD50、CD56、CD71、CD90又はCD133と選択的に結合するビーズ又は抗体を含む実施形態74から153のいずれかに記載のキット。
155.更にビオチン化抗CD34抗体を含む実施形態74から154のいずれかに記載のキット。
156.前記ビオチン化抗CD34抗体がクローン12.8である実施形態155に記載のキット。
157.更にCD34マイクロビーズを含む実施形態74から156のいずれかに記載のキット。
158.更にブロッキング剤を含む実施形態74から157のいずれかに記載のキット。
159.前記ブロッキング剤が自家血清である実施形態158に記載のキット。
160.更にストレプトアビジンで被覆したマイクロビーズを含む実施形態74から159のいずれかに記載のキット。
161.更に漏斗形クライオバッグを含む実施形態74から160のいずれかに記載のキット。
162.更に無針スパイクアダプターを含む実施形態74から161のいずれかに記載のキット。
163.更にシリンジを含む実施形態74から162のいずれかに記載のキット。
164.前記シリンジが60mL及び/又は30mLシリンジである実施形態163に記載のキット。
165.試料入口と試料出口を備えており、試料に対して不透過性であるハウジングと;
前記ハウジング内に配置された第1の電極及び第2の電極を含むフロースルーエレクトロポレーション装置であって、少なくとも1個の電極間隙を規定するように、前記第1の電極の少なくともの一部が前記第2の電極の少なくとも一部から一定の距離に配置されており、前記対象試料が前記対象試料入口から前記対象試料出口に流れるように、前記電極間隙の少なくとも一部が対象試料通路を形成する前記エレクトロポレーション装置。
166.前記第1の電極又は前記第2の電極の少なくとも一方が磁気感受性である実施形態165に記載のエレクトロポレーション装置。
167.更に前記第1の電極に対応する第1の末端と、前記第2の電極に対応する第2の末端を含み、前記第1の電極と前記第2の電極が各々前記ハウジングから突出している実施形態165又は166に記載のエレクトロポレーション装置。
168.前記少なくとも1個の電極間隙が前記第1の電極と前記第2の電極の間に配置された1個以上の絶縁体により維持されている実施形態165から167のいずれかに記載のエレクトロポレーション装置。
169.前記第1の電極が第1群の突起を含み、前記第2の電極が第2群の突起を含み、前記少なくとも1個の電極間隙が少なくとも2個の電極間隙を含むように、前記第1群の突起の少なくとも一部が前記第2群の突起の少なくとも一部の間に配置されている実施形態165から168のいずれかに記載のエレクトロポレーション装置。
170.前記対象試料通路の少なくとも一部が前記第1群の突起に対応する第1群の細孔と、前記第2群の突起に対応する第2群の細孔により形成される実施形態165から169のいずれかに記載のエレクトロポレーション装置。
171.更に前記第1の電極の少なくとも一部と前記第2の電極の少なくとも一部の間に配置された磁気感受性材料(MSM)を含む実施形態165から170のいずれかに記載のエレクトロポレーション装置。
172.前記MSMが少なくともワイヤー、金属被覆繊維、スチールウール及び/又は金属球を含む実施形態171に記載のエレクトロポレーション装置。
173.前記MSMが電気絶縁体で被覆されており、前記MSMが一定距離を維持している実施形態171又は172に記載のエレクトロポレーション装置。
174.前記第1の電極及び/又は前記第2の電極がアルミニウムであり、前記MSMが強磁性体である実施形態171から173のいずれかに記載のエレクトロポレーション装置。
175.前記一定距離が0.1cm以上0.4cm以下である実施形態165から174のいずれかに記載のエレクトロポレーション装置。
176.標的細胞と非標的細胞を含む試料から標的細胞を単離・遺伝子改変・製剤化するためのデバイスであって、
試料投入口、緩衝液投入口及び処理チャンバーを備える前記対象試料のプロセシング用回路と;
前記回路の1個以上の流路を選択的に閉じるための複数の弁と;
前記対象試料の標的細胞を前記対象試料の非標的細胞から分離するための1個以上の標的細胞セレクターと;
前記回路の少なくとも一部を通して前記対象試料を灌流させるためのポンプと;
前記処理チャンバー、前記複数の弁、前記標的細胞セレクター及び前記ポンプの動作を制御するための1個以上のプロセッサと;
前記1個以上のプロセッサにより実行されたときに、
前記対象試料を前記処理チャンバーから前記標的細胞セレクターへと灌流させる作業と;
複数のセレクターを連携して使用する場合には、前記標的細胞セレクターの動作により前記標的細胞を前記非標的細胞から同時又はタンデムに分離する作業と;
前記標的細胞を前記処理チャンバーに戻す作業と;
前記処理チャンバー及び/又は前記標的細胞セレクター内の前記標的細胞に遺伝子モディファイヤーを導入し、遺伝子改変された標的細胞を作製する作業と;
前記遺伝子改変された標的細胞を対象への投与用製剤として製剤化する作業を前記ポイントオブケア及び/又はポータブルデバイスの1個以上のハードウェアコンポーネントに実施させるメモリ格納命令を含み、
前記デバイスがポイントオブケア及び/又はポータブルデバイスである前記デバイス。
177.前記処理チャンバーが遠心機の内部チャンバーを形成する実施形態176に記載のデバイス。
178.前記標的細胞セレクターが磁気細胞セレクター及び/又はフローサイトメーター及び/又はフロー式セルソーターを含む実施形態176又は177に記載のデバイス。
179.前記標的細胞セレクターが前方、後方及び側方光散乱特性、蛍光色素吸光度並びに発光スペクトルを利用して標的細胞を非標的細胞から分離するフロー式セルソーターを含む実施形態176から178のいずれかに記載のデバイス。
180.前記標的細胞セレクターがフロースルーエレクトロポレーション装置を含み、前記エレクトロポレーション装置が、
試料入口と試料出口を備えており、試料に対して不透過性であるハウジングと;
前記ハウジング内に配置された第1の電極及び第2の電極を含み、
少なくとも1個の電極間隙を規定するように、前記第1の電極の少なくとも一部が前記第2の電極の少なくとも一部から一定の距離に配置されており、前記対象試料が前記対象試料入口から前記対象試料出口に流れるように、前記電極間隙の少なくとも一部が試料通路を形成する実施形態176から179のいずれかに記載のデバイス。
181.更に前記処理チャンバーと連結されたガスレギュレーターを含む実施形態176から180のいずれかに記載のデバイス。
182.前記ガスレギュレーターが窒素ガス(N2)に対応する第1の分圧と、炭酸ガス(CO2)に対応する第2の分圧と、酸素ガス(O2)に対応する第3の分圧を選択的に制御するように構成されている実施形態181に記載のデバイス。
183.前記メモリ格納命令が、前記1個以上のプロセッサにより実行されたときに、前記処理チャンバー内にインキュベーション環境を形成・維持する作業を前記ポイントオブケア及び/又はポータブルデバイスの1個以上のハードウェアコンポーネントに実施させる実施形態176から182のいずれかに記載のデバイス。
184.前記形成・維持されるインキュベーション環境が特定の温度範囲又は混合ガスを含む実施形態183に記載のデバイス。
185.前記メモリ格納命令が更に、前記灌流前に前記対象試料に標的細胞一次標識物質を加えて前記処理チャンバー内で標識懸濁液を形成する作業を前記1個以上のハードウェアコンポーネントに実施させる実施形態176から184のいずれかに記載のデバイス。
186.前記メモリ格納命令が更に、前記処理チャンバー内にインキュベーション環境を維持し、前記標的細胞一次標識物質と前記標的細胞の結合を助長する作業を前記1個以上のハードウェアコンポーネントに実施させる実施形態176から185のいずれかに記載のデバイス。
187.前記メモリ格納命令が更に、前記処理チャンバー内で前記標識懸濁液を撹拌し、前記標的細胞一次標識物質と前記標的細胞の結合を誘導する作業を前記1個以上のハードウェアコンポーネントに実施させる実施形態176から186のいずれかに記載のデバイス。
188.前記撹拌が遠心機モーターの運転により前記処理チャンバーを少なくとも部分的に回転させる工程を含む実施形態187に記載のデバイス。
189.前記撹拌が前記標識懸濁液の超音波撹拌を含む実施形態187又は188に記載のデバイス。
190.前記メモリ格納命令が更に前記撹拌後に、結合していない過剰量の前記標的細胞一次標識物質を除去する作業を前記1個以上のハードウェアコンポーネントに実施させる実施形態187から189のいずれかに記載のデバイス。
191.前記一次標識物質が免疫磁気ビーズ又は抗体を含み、前記標識懸濁液が第1の緩衝溶液を含む実施形態185から190のいずれかに記載のデバイス。
192.前記メモリ格納命令が更に、
[a]前記処理チャンバー内の前記標的細胞に形質導入培地を導入する工程と;
[b]遠心により前記処理チャンバー内の前記標的細胞をペレット化する工程と;
[c]前記ペレット化中に形成された上清体積を除去する工程と;
前記遺伝子モディファイヤーを前記処理チャンバーに導入する前に工程[a]〜[c]の反復サイクルを少なくとも1回実施する工程を含む作業を前記1個以上のハードウェアコンポーネントに実施させる実施形態176から191のいずれかに記載のデバイス。
193.前記メモリ格納命令が更に、
前記対象試料のヘマトクリット値を測定する工程と;
前記ヘマトクリット値が所定のヘマトクリット値閾値を上回るという判定に基づき、前記血液試料で赤血球(RBC)除去プロトコールを実施する工程
を含む作業を前記1個以上のハードウェアコンポーネントに実施させる実施形態176から192のいずれかに記載のデバイス。
194.前記対象試料のヘマトクリット値を測定する工程が前記処理チャンバー内で前記対象試料を遠心して前記対象試料を赤血球層に分離する工程を含む実施形態193に記載のデバイス。
195.前記対象試料のヘマトクリット値を測定する工程が前方光散乱又は後方光散乱の一方又は両方により前記対象試料の1種以上の光学特性を測定する工程を含む実施形態193又は194に記載のデバイス。
196.前記RBC除去プロトコールが、
骨髄及び/又は末梢血を含む前記対象試料に第1の緩衝液を加える工程と;
前記処理チャンバー内で遠心することにより、前記対象試料の複数のRBCの連銭形成を開始する工程と;
前記対象試料を前記処理チャンバーから沈降容器へと灌流させる工程と;
前記沈降容器から前記対象試料のRBC高含有画分の段階的除去を実施する工程と;
第2の緩衝液で上清を洗浄することにより前記対象試料から前記第1の緩衝液を除去する工程を含む実施形態193から195のいずれかに記載のデバイス。
197.前記所定のヘマトクリット値閾値が25%であり、前記第1の緩衝液がヘタスターチ系培地であり、前記第2の緩衝液がリン酸緩衝塩類溶液(PBS)とエチレンジアミン四酢酸(EDTA)を含む実施形態193から196のいずれかに記載のデバイス。
198.前記対象試料から前記第1の緩衝液を除去する工程が前記沈降容器から前記対象試料のRBC高含有画分の段階的除去の実施の完了を確認するユーザー入力の受信に応答して開始される実施形態196又は197に記載のデバイス。
199.前記RBC除去プロトコールが更に、
前記対象試料から前記第1の緩衝液を除去する工程後に、前記処理チャンバー内で前記対象試料の遠心と吸引により前記対象試料を濃縮する工程を含む実施形態196から198のいずれかに記載のデバイス。
200.前記単離・遺伝子改変・製剤化された細胞が現行の適正製造規範に適合する実施形態176から199のいずれかに記載のデバイス。
201.現行の適正製造規範の適合が以下の試験を含む放出試験により確認される実施形態200に記載のデバイス。
ステップ/注記。骨髄は常駐施設で獣医学標準実施ガイドラインに従って手術/処置室で採取すべきである。
サブステップ/注記。採取した骨髄はフィルターセットに通し、凝固を防ぐためにACDとヘパリンで希釈すべきである。
サブステップ/注記。輸送が必要な場合には、バイオハザード・適用免除ヒト由来検体のラベルを付けた温度制御容器に骨髄産物を入れて室温で移送する。
ステップ/注記。プロセシングしようとする骨髄産物の出発時の体積を記録する。
ステップ/注記。インプロセステスト用に出発時の骨髄産物の試料を採取する。
ステップ/注記。出発時の骨髄産物で全血球算定と変動解析を実施する。
ステップ/注記。赤血球(RBC)除去に備え、総ヘマトクリット値(HCT)が≦25%となるように出発時の骨髄産物をPlasmalyte Aで希釈する。
サブステップ/注記。バイオセーフティキャビネット内で骨髄産物バッグにPlasmalyte Aを加え、よく混ぜる。
サブステップ/注記。希釈後の骨髄産物の体積を記録する。
ステップ/注記。バイオセーフティキャビネット内で25%HSA60mLを加えることによりCliniMACS PBS/EDTA緩衝液3Lを調製し、よく混ぜる。
ステップ/注記。TS100チューブセットパッケージを開封し、「V5」及び「V7」のラベルの付いたチューブを夫々弁5及び7に配置する。
ステップ/注記。漏斗形クライオバッグをV5でチューブセットに無菌溶接する。
サブステップ/注記。沈降体積に適したバッグ容積を選択する。
サブステップ/注記。無菌溶接中にチューブクランプを取り外す。
サブステップ/注記。溶接部がV5で締め付けられないようにするために、溶接部と接合部の間に十分にチューブを残すように注意する。
ステップ/注記。無針スパイクアダプターの雌型末端を滅菌し、利用可能なルアー接続を使用してV7でチューブセットに連結する。
ステップ/注記。V7の無針スパイクアダプターをHESバッグの滅菌ポートに挿入する。
ステップ/注記。希釈後の骨髄産物をチューブセット上の産物添加バッグに連結する。
サブステップ/注記。希釈後の骨髄体積が≦60mLの場合には、60mLシリンジを使用し、ルアーコネクターを介して希釈後の骨髄産物を産物添加バッグに注入する。
サブステップ/注記。希釈後の骨髄体積が>60mLの場合には、骨髄産物バッグを産物添加バッグの上部ポートに無菌溶接又は差し込む。
ステップ/注記。Prodigy CliniMACSデバイスの電源をオンにする。
ステップ/注記。「ユーザープログラム」を選択し、プログラムJ1を選択する。
ステップ/注記。デバイス命令に従ってTS100チューブセットのインストールを開始するためのプログラムを実行する。
サブステップ/注記。新しいTS100チューブセットのインストールを促すプロンプトに従う。
ステップ/注記。デバイスにプロンプトが現れたときに、希釈後の骨髄産物の体積を手動入力する。
ステップ/注記。25%のHCT%値を手動入力する。
ステップ/注記。沈降の目的で産物をチューブセットに仕込むために必要な段階数を手動入力する。
サブステップ/注記。必要な段階数を決定するためには、希釈後の骨髄体積(mL)を段階毎に300mLで割り、次の整数に切り上げる。
ステップ/注記。HES及びCliniMACS PBS/EDTA緩衝液に適したチューブセット接続を確保するように促すプロンプトがデバイスに現れたときに、接続を確認し、「イエス」と答える。
ステップ/注記。沈降バッグに適したチューブセット接続を確保するように促すプロンプトがデバイスに現れたときに、接続を確認し、「イエス」と答える。
サブステップ/注記。デバイスはRBC沈降用のプロセシングプログラムを自動的に開始する。
ステップ/注記。デバイスがプログラムの自動部分を開始すると、30分間の沈降時間の終了までユーザー操作の必要はなくなる。
サブステップ/注記。RBC除去を開始する準備ができているかどうかのプロンプトがデバイスに現れたときに、沈降が完了しているならば、「イエス」と答え、RBC除去を開始する。更に沈降が必要ならば、「ノー」と答え、沈降待機時間を再開する。
サブステップ/注記。沈降を完了させるために更に10〜30分間待機する。
サブステップ/注記。所望の沈降時間で「OK」を押す。
サブステップ/注記。「イエス」と答え、RBC除去を続ける。
ステップ/注記。RBC沈降層から除去する初期体積(mL)を入力する。目標除去体積はRBC層の上の白血球ペレットを乱さず且つRBC沈降体積を≦30mLに維持するようにすべきである。
サブステップ/注記。除去されるRBC沈降の初期体積が沈降バッグ内の利用可能な容積を越えない限り、この目的を達成するために任意数の体積を除去できる。
サブステップ/注記。追加体積のRBC沈降を除去するためには、RBC除去を続けるように促すプロンプトがデバイスに現れたときに「イエス」と答えた後、除去したい体積(mL)を入力する。
ステップ/注記。満足なレベルのRBC除去が達成されたら、RBC除去を続けるように促すプロンプトがデバイスに現れたときに「ノー」と答える。
ステップ/注記。RBC除去を完了し、プログラムを続けたいと確信しているかどうかのプロンプトがデバイスに現れたときに、「イエス」と答える。
ステップ/注記。デバイスは完了するまでプログラムを続け、完了したら自動的に停止し、プログラム詳細を保存する。
サブステップ/注記。プログラムの終わりにRBC低下画分がデバイスチャンバー内に存在する。
ステップ/注記。ツールメニューにある「チャンバーアウト」プログラムを選択し、実行する。
サブステップ/注記。チューブセット上のチャンバーに接続された2本のチューブの各々に雌−雌ルアーカプラーを接続する。
サブステップ/注記。フィッティングからのルアーキャップを使用し、除去前にチャンバーポートにキャップを装着する。
サブステップ/注記。キャップを装着したチャンバーをバイオセーフティキャビネットに移す。
ステップ/注記。バイオセーフティキャビネット内で、60mLシリンジをチャンバーの上部ポートに連結する。
ステップ/注記。チャンバーを静かに傾け、RBCを除去した細胞懸濁液を吸引ポートにプールし、シリンジプランジャーをゆっくりと引き、RBCを除去した細胞懸濁液の全量をシリンジ内に移す。
ステップ/注記。RBCを除去した細胞懸濁液の体積を記録する。
ステップ/注記。収率試験用試料を抽出し、全血球算定と変動解析を行う。
ステップ/注記。RBC低下細胞画分を効率的に標識するために必要な12.8抗体とストレプトアビジンマイクロビーズの所要体積を計算する。
ステップ/注記。計算した体積の12.8抗体と最終体積1mLまでの自家血清を10mLシリンジ内に移し、プランジャーを引き、空気9mLをシリンジに加える。シリンジにラベルを貼付する。
ステップ/注記。計算した体積のストレプトアビジン被覆マイクロビーズを別の10mLシリンジに移し、プランジャーを引き、最終体積10mLまでの空気を加える。
ステップ/注記。デバイスに移すために両方のシリンジに無菌下でキャップを装着し、ラベルを貼付する。
ステップ/注記。デバイスでユーザープログラムの下にプログラムJ3を選択する。
サブステップ/注記。プロンプトが現れたときに、12.8抗体/自己血清を入れたシリンジとストレプトアビジンマイクロビーズを入れたシリンジを無菌接続する。
サブステップ/注記。チューブ接続を確認するように促すプロンプトがデバイスに現れたときに、接続が正しいことを確認し、「イエス」を押す。
サブステップ/注記。デバイスは自動的にプログラムを開始する。
サブステップ/注記。合計プログラム実行時間は45分間である。
ステップ/注記。デバイスは完了するまでプログラムを続け、完了したら自動的に停止し、プログラム詳細を保存する。
サブステップ/注記。プログラムの終わりにCD34標識画分がデバイスチャンバー内に存在する。
ステップ/注記。デバイスでユーザープログラムの下にプログラムJ4を選択する。
サブステップ/注記。デバイス命令に従ってプログラムを実行する。
サブステップ/注記。デバイスは自動的にプログラムを開始する。
サブステップ/注記。合計プログラム実行時間は45分間である。
ステップ/注記。デバイスは完了するまでプログラムを続け、完了したら自動的に停止し、プログラム詳細を保存する。
サブステップ/注記。プログラムの終わりにCD34高含有細胞画分が「標的細胞バッグ」内に存在する。
サブステップ/注記。プログラムの終わりに「陰性画分」のラベルを付けたバッグ内にCD34低下画分が存在する。
ステップ/注記。隣接するルアー接続の真上にチューブをヒートシールすることにより標的細胞バッグをデバイスチューブセットから取り外す。
ステップ/注記。標的細胞バッグをバイオセーフティキャビネットに移し、細胞収率の測定用に0.5mL試料を抽出する。最終体積は45mLである。
ステップ/注記。「ツール」メニューを開いて「TS取り外し」プログラムを選択することによりTS100チューブセットをデバイスから取り外す。
サブステップ/注記。全チューブ弁が閉じていることを確認し、プログラム開始前に流体バッグに通じる全チューブをヒートシールする。
サブステップ/注記。完了までデバイスプロンプトに従ってプログラムを実行する。
ステップ/注記。弁4(V4)でチューブのルアーフィッティングに無針スパイクを接続することによりTS730チューブセットを準備する。
ステップ/注記。造血幹細胞用完全形質導入培地を入れたバッグにV4チューブを差し込む。
*ステップ/注記。必要な体積の濃縮レンチウイルスを適当な寸法のシリンジ内に吸引し、弁5(V5)でチューブのルアーフィッティングに接続する。
**ステップ/注記。標準標的細胞バッグをチューブセットから取り外す。
ステップ/注記。標準標的細胞バッグの代わりにCD34高含有細胞画分を含むTS100チューブセットからの標的細胞バッグをチューブセットに接続する。
ステップ/注記。ユーザープログラムメニューからプログラムJ6を選択し、「実行」を押す。
ステップ/注記。TS730チューブセットをインストールするように促すデバイスプロンプトに従い、高含有画分を含む標的細胞バッグを逆さに吊るして排出させる。
ステップ/注記。チューブ接続を確認するように促すプロンプトがデバイスに現れたときに、接続が正しいことを確認し、「イエス」を押す。
サブステップ/注記。デバイスは自動的にプログラムを開始する。
サブステップ/注記。合計プログラム実行時間は57分間である。
ステップ/注記。デバイスは完了するまでプログラムを続け、完了したら自動的に停止し、プログラム詳細を保存する。
サブステップ/注記。オプション:デバイスが濃縮レンチウイルスを細胞に添加後、チャンバーは30分間の低速遠心(「スピノキュレーション」と言う。)を開始する。「OK」を押して遠心を停止した後に「イエス」を押してプログラムを中止することによりスピノキュレーションを停止する。
サブステップ/注記。プログラムの終わりにCD34高含有細胞画分と形質導入用レンチウイルスベクターがデバイスチャンバー内に存在する。
ステップ/注記。ユーザープログラムメニューからプログラムJ8を選択し、「実行」を押す。
サブステップ/注記。デバイスは自動的にプログラムを開始する。
サブステップ/注記。合計プログラム実行時間はフレキシブルである。
ステップ/注記。ユーザーが「OK」を押した後に「イエス」を押してプログラム中止コマンドを確認することによりプログラムを中止するまでデバイスはプログラムを続ける。その後、完了すると、デバイスはプログラム詳細を保存する。
ステップ/注記。オプション:バイオセーフティキャビネット内で、必要な体積の濃縮レンチウイルスの第2のアリコートを適当な寸法のシリンジ内に吸引し、弁5(V5)のチューブのルアーフィッティングに接続する。
サブステップ/注記。ユーザープログラムメニューからプログラムJ7を選択し、「実行」を押す。
サブステップ/注記。デバイスは自動的にプログラムを開始する。
サブステップ/注記。合計プログラム実行時間は5分間である。
サブステップ/注記。プログラムは完了まで実行し、自動的に停止し、プログラム詳細を保存する。
サブステップ/注記。J7プログラムの完了後に上記ステップ*、**に従ってJ8プログラムを再開する。
ステップ/注記。回収に備え、Plasmalyte Aの第2の1Lバッグに接続されたPlasmalyte A緩衝液の1Lバッグに無針スパイクアダプターを差し込む。
ステップ/注記。無針スパイクルアーを介してV4の完全形質導入培地をPlasmalyte Aに交換する。
ステップ/注記。バイオセーフティキャビネット内で400mLクライオバッグにPlasmalyte A60mLを注入する。
ステップ/注記。TS730の標的細胞バッグを、Plasmalyte Aを入れたクライオバッグに交換する。
ステップ/注記。クライオバッグから廃棄物バッグへの弁経路を手動で開き、チューブを通してPlasmalyte Aを排出させる。
ステップ/注記。形質導入した細胞産物を輸液用に回収するために、ユーザープログラムメニューからプログラムJ9を選択し、「実行」を押す。
ステップ/注記。チューブ接続を確認するように促すプロンプトがデバイスに現れたときに、接続が正しいことを確認し、「イエス」を押す。
サブステップ/注記。デバイスは自動的にプログラムを開始する。
サブステップ/注記。合計プログラム実行時間は50分間である。
ステップ/注記。デバイスは完了するまでプログラムを続け、完了したら自動的に停止し、プログラム詳細を保存する。
ステップ/注記。放出試験と輸液用の最終細胞産物は弁22のクライオバッグ内に存在する。
ステップ/注記。骨髄は常駐施設で臨床標準実施ガイドラインに従って手術室で採取すべきである。
サブステップ/注記。採取した骨髄はフィルターセットに通し、凝固を防ぐためにACDとヘパリンで希釈すべきである。
サブステップ/注記。輸送が必要な場合には、バイオハザード・適用免除ヒト由来検体のラベルを付けた温度制御容器に骨髄産物を入れて室温で移送する。
ステップ/注記。プロセシングしようとする骨髄産物の出発時の体積を記録する。
ステップ/注記。インプロセステスト用に出発時の骨髄産物の試料を採取する。
ステップ/注記。出発時の骨髄産物で全血球算定と変動解析を実施する。
ステップ/注記。赤血球(RBC)除去に備え、総ヘマトクリット値(HCT)が≦25%となるように出発時の骨髄産物をPlasmalyte Aで希釈する。
サブステップ/注記。バイオセーフティキャビネット内で骨髄産物バッグにPlasmalyte Aを加え、よく混ぜる。
サブステップ/注記。希釈後の骨髄産物の体積を記録する。
ステップ/注記。バイオセーフティキャビネット内で25%HSA60mLを加えることによりCliniMACS PBS/EDTA緩衝液3Lを調製し、よく混ぜる。
ステップ/注記。TS100チューブセットパッケージを開封し、「V5」及び「V7」のラベルの付いたチューブを夫々弁5及び7に配置する。
ステップ/注記。漏斗形クライオバッグをV5でチューブセットに無菌溶接する。
サブステップ/注記。沈降体積に適したバッグ容積を選択する。
サブステップ/注記。無菌溶接中にチューブクランプを取り外す。
サブステップ/注記。溶接部がV5で締め付けられないようにするために、溶接部と接合部の間に十分にチューブを残すように注意する。
ステップ/注記。無針スパイクアダプターの雌型末端を滅菌し、利用可能なルアー接続を使用してV7でチューブセットに連結する。
ステップ/注記。V7の無針スパイクアダプターをHESバッグ上の滅菌ポートに挿入する。
ステップ/注記。希釈後の骨髄産物をチューブセット上の産物添加バッグに連結する。
サブステップ/注記。希釈後の骨髄体積が≦60mLの場合には、60mLシリンジを使用し、ルアーコネクターを介して希釈後の骨髄産物を産物添加バッグに注入する。
サブステップ/注記。希釈後の骨髄体積が>60mLの場合には、骨髄産物バッグを産物添加バッグの上部ポートに無菌溶接又は差し込む。
ステップ/注記。Prodigy CliniMACSデバイスの電源をオンにする。
ステップ/注記。「ユーザープログラム」を選択し、プログラムJ1を選択する。
ステップ/注記。デバイス命令に従ってTS100チューブセットのインストールを開始するためのプログラムを実行する。
サブステップ/注記。新しいTS100チューブセットのインストールを促すプロンプトに従う。
ステップ/注記。デバイスにプロンプトが現れたときに、希釈後の骨髄産物の体積を手動入力する。
ステップ/注記。25%のHCT%値を手動入力する。
ステップ/注記。沈降の目的で産物をチューブセットに仕込むために必要な段階数を手動入力する。
サブステップ/注記。必要な段階数を決定するためには、希釈後の骨髄体積(mL)を段階毎に300mLで割り、次の整数に切り上げる。
ステップ/注記。HES及びCliniMACS PBS/EDTA緩衝液に適したチューブセット接続を確保するように促すプロンプトがデバイスに現れたときに、接続を確認し、「イエス」と答える。
ステップ/注記。沈降バッグに適したチューブセット接続を確保するように促すプロンプトがデバイスに現れたときに、接続を確認し、「イエス」と答える。
サブステップ/注記。デバイスはRBC沈降用のプロセシングプログラムを自動的に開始する。
ステップ/注記。デバイスがプログラムの自動部分を開始すると、30分間の沈降時間の終了までユーザー操作の必要はなくなる。
サブステップ/注記。RBC除去を開始する準備ができているかどうかのプロンプトがデバイスに現れたときに、沈降が完了しているならば、「イエス」と答え、RBC除去を開始する。更に沈降が必要ならば、「ノー」と答え、沈降待機時間を再開する。
サブステップ/注記。沈降を完了させるために更に10〜30分間待機する。
サブステップ/注記。所望の沈降時間で「OK」を押す。
サブステップ/注記。「イエス」と答え、RBC除去を続ける。
ステップ/注記。RBC沈降層から除去する初期体積(mL)を入力する。目標除去体積はRBC層の上の白血球ペレットを乱さず且つRBC沈降体積を≦30mLに維持するようにすべきである。
サブステップ/注記。除去されるRBC沈降の初期体積が沈降バッグ内の利用可能な容積を越えない限り、この目的を達成するために任意数の体積を除去できる。
サブステップ/注記。追加体積のRBC沈降を除去するためには、RBC除去を続けるように促すプロンプトがデバイスに現れたときに「イエス」と答え、除去したい体積(mL)を入力する。
ステップ/注記。満足なレベルのRBC除去が達成されたら、RBC除去を続けるように促すプロンプトがデバイスに現れたときに「ノー」と答える。
ステップ/注記。RBC除去を完了し、プログラムを続けたいと確信しているかどうかのプロンプトがデバイスに現れたときに、「イエス」と答える。
ステップ/注記。デバイスは完了するまでプログラムを続け、完了したら自動的に停止し、プログラム詳細を保存する。
サブステップ/注記。プログラムの終わりにRBC低下画分がデバイスチャンバー内に存在する。
ステップ/注記。バイオセーフティキャビネット内でバイアル1本(7.5mL)分のCliniMACS CD34マイクロビーズとGAMMAGARD(IVIg)3mLを30mLシリンジに移し、プランジャーを引いて空気19.5mLをシリンジに加える。
ステップ/注記。デバイスに移すためにシリンジに無菌下でキャップを装着する。
ステップ/注記。デバイスでユーザープログラムの下にプログラム「J2」を選択する。
サブステップ/注記。プロンプトが現れたときに、CliniMACS CD34マイクロビーズとGAMMAGARD(IVIg)を入れたシリンジを無菌接続する。
サブステップ/注記。チューブ接続を確認するように促すプロンプトがデバイスに現れたときに、接続が正しいことを確認し、「イエス」を押す。
サブステップ/注記。デバイスは自動的にプログラムを開始する。
サブステップ/注記。合計プログラム実行時間は45分間である。
ステップ/注記。デバイスは完了するまでプログラムを続け、完了したら自動的に停止し、プログラム詳細を保存する。
サブステップ/注記。プログラムの終わりにCD34標識画分がデバイスチャンバー内に存在する。
ステップ/注記。デバイスでユーザープログラムの下にプログラムJ4を選択する。
サブステップ/注記。デバイス命令に従ってプログラムを実行する。
サブステップ/注記。デバイスは自動的にプログラムを開始する。
サブステップ/注記。合計プログラム実行時間は45分間である。
ステップ/注記。デバイスは完了するまでプログラムを続け、完了したら自動的に停止し、プログラム詳細を保存する。
サブステップ/注記。プログラムの終わりにCD34高含有細胞画分が「標的細胞バッグ」内に存在する。
サブステップ/注記。プログラムの終わりに「陰性画分」のラベルを付けたバッグ内にCD34低下画分が存在する。
ステップ/注記。隣接するルアー接続の真上にチューブをヒートシールすることにより標的細胞バッグをデバイスチューブセットから取り外す。
ステップ/注記。標的細胞バッグをバイオセーフティキャビネットに移し、細胞収率の測定用に0.5mL試料を抽出する。最終体積は45mLである。
ステップ/注記。「ツール」メニューを開いて「TS取り外し」プログラムを選択することによりTS100チューブセットをデバイスから取り外す。
サブステップ/注記。全チューブ弁が閉じていることを確認し、プログラム開始前に流体バッグに通じる全チューブをヒートシールする。
サブステップ/注記。完了までデバイスプロンプトに従ってプログラムを実行する。
ステップ/注記。弁4(V4)でチューブのルアーフィッティングに無針スパイクを接続することによりTS730チューブセットを準備する。
ステップ/注記。造血幹細胞用完全形質導入培地を入れたバッグにV4チューブを差し込む。
ステップ/注記。必要な体積の濃縮レンチウイルスを適当な寸法のシリンジ内に吸引し、弁5(V5)でチューブのルアーフィッティングに接続する。
ステップ/注記。標準標的細胞バッグをチューブセットから取り外す。
ステップ/注記。標準標的細胞バッグの代わりにCD34高含有細胞画分を含むTS100チューブセットからの標的細胞バッグをチューブセットに接続する。
ステップ/注記。ユーザープログラムメニューからプログラムJ6を選択し、「実行」を押す。
ステップ/注記。TS730チューブセットをインストールするように促すデバイスプロンプトに従い、高含有画分を含む標的細胞バッグを逆さに吊るして排出させる。
ステップ/注記。チューブ接続を確認するように促すプロンプトがデバイスに現れたときに、接続が正しいことを確認し、「イエス」を押す。
サブステップ/注記。デバイスは自動的にプログラムを開始する。
サブステップ/注記。合計プログラム実行時間は57分間である。
ステップ/注記。デバイスは完了するまでプログラムを続け、完了したら自動的に停止し、プログラム詳細を保存する。
サブステップ/注記。オプション:デバイスが濃縮レンチウイルスを細胞に添加後、チャンバーは30分間の低速遠心(「スピノキュレーション」と言う。)を開始する。「OK」を押して遠心を停止した後に「イエス」を押してプログラムを中止することによりスピノキュレーションを停止する。
サブステップ/注記。プログラムの終わりにCD34高含有細胞画分と形質導入用レンチウイルスベクターがデバイスチャンバー内に存在する。
*ステップ/注記。ユーザープログラムメニューからプログラムJ8を選択し、「実行」を押す。
サブステップ/注記。デバイスは自動的にプログラムを開始する。
サブステップ/注記。合計プログラム実行時間はフレキシブルである。
**ステップ/注記。ユーザーが「OK」を押した後に「イエス」を押してプログラム中止コマンドを確認することによりプログラムを中止するまでデバイスはプログラムを続ける。その後、完了すると、デバイスはプログラム詳細を保存する。
ステップ/注記。オプション:バイオセーフティキャビネット内で、必要な体積の濃縮レンチウイルスの第2のアリコートを適当な寸法のシリンジ内に吸引し、弁5(V5)のルアーフィッティングのチューブに接続する。
サブステップ/注記。ユーザープログラムメニューからプログラムJ7を選択し、「実行」を押す。
サブステップ/注記。デバイスは自動的にプログラムを開始する。
サブステップ/注記。合計プログラム実行時間は5分間である。
サブステップ/注記。プログラムは完了まで実行し、自動的に停止し、プログラム詳細を保存する。
サブステップ/注記。J7プログラムの完了後に上記ステップ*、**に従ってJ8プログラムを再開する。
ステップ/注記。回収に備え、Plasmalyte Aの第2の1Lバッグに接続されたPlasmalyte A緩衝液の1Lバッグに無針スパイクアダプターを差し込む。
ステップ/注記。無針スパイクルアーを介してV4の完全形質導入培地をPlasmalyte Aに交換する。
ステップ/注記。バイオセーフティキャビネット内で400mLクライオバッグにPlasmalyte A60mLを注入する。
ステップ/注記。TS730の標的細胞バッグを、Plasmalyte Aを入れたクライオバッグに交換する。
ステップ/注記。クライオバッグから廃棄物バッグへの弁経路を手動で開き、チューブを通してPlasmalyte Aを排出させる。
ステップ/注記。形質導入した細胞産物を輸液用に回収するために、ユーザープログラムメニューからプログラムJ9を選択し、「実行」を押す。
ステップ/注記。チューブ接続を確認するように促すプロンプトがデバイスに現れたときに、接続が正しいことを確認し、「イエス」を押す。
サブステップ/注記。デバイスは自動的にプログラムを開始する。
サブステップ/注記。合計プログラム実行時間は50分間である。
ステップ/注記。デバイスは完了するまでプログラムを続け、完了したら自動的に停止し、プログラム詳細を保存する。
ステップ/注記。放出試験と輸液用の最終細胞産物は弁22のクライオバッグ内に存在する。
ステップ/注記。ロイコアフェレーシスは常駐施設で臨床標準実施ガイドラインに従って実施すべきである。
サブステップ/注記。輸送が必要な場合には、バイオハザード・適用免除ヒト由来検体のラベルを付けた温度制御容器に骨髄産物を入れて室温で移送する。
ステップ/注記。プロセシングしようとするアフェレーシス産物の出発時の体積を記録する。出発物質体積が<270mLであるならば、下記***に進む。
ステップ/注記。出発物質体積が≧270mLであるならば、
*サブステップ/注記。出発時の骨髄産物を最大産物バッグ容積までPlasmalyte Aで希釈する。
サブステップ/注記。産物バッグをブレーキなしで遠心し、細胞をペレット化する。
サブステップ/注記。バッグプレスを使用し、細胞ペレットを入れた産物バッグの総容積を≦200mLまで減らす。
***ステップ/注記。インプロセステスト用に出発時のアフェレーシス産物の試料を採取する。
ステップ/注記。出発時のアフェレーシス産物で全血球算定と変動解析を実施する。
サブステップ/注記。前記産物のヘマトクリット(HCT)含量を記録する。
サブステップ/注記。出発時のHCT含量が>25%であるならば、HCT含量を≦25%まで減らすために十分な体積のPlasmalyte Aを加える。
サブステップ/注記。バイオセーフティキャビネット内で骨髄産物バッグにPlasmalyte Aを加え、よく混ぜる。
サブステップ/注記。希釈後の産物体積を記録する。
サブステップ/注記。希釈後の産物体積が≧270mLであるならば、上記*に進む。
サブステップ/注記。希釈後の産物体積が<270mLであるならば、下記ステップ**に進む。
ステップ/注記。バイオセーフティキャビネット内で25%HSA60mLを加えることによりCliniMACS PBS/EDTA緩衝液3Lを調製し、よく混ぜる。
**ステップ/注記。バイオセーフティキャビネット内でバイアル1本(7.5mL)分のCliniMACS CD34マイクロビーズとGAMMAGARD(IVIg)3mLを30mLシリンジに移し、プランジャーを引いて空気19.5mLをシリンジに加える。
ステップ/注記。TS100チューブセットパッケージを開封し、バイオセーフティキャビネット内に移す。
ステップ/注記。HSAを添加したCliniMACS PBS/EDTA緩衝液を弁4(V4)でチューブスパイクに連結する。
ステップ/注記。提供されるルアー接続によりマイクロビーズとIVIgを入れたシリンジを弁5(V5)でチューブセットに連結する。
ステップ/注記。アフェレーシス産物をチューブセット上の弁8(V8)の産物添加バッグに連結する。
ステップ/注記。Prodigy CliniMACSデバイスの電源をオンにする。
ステップ/注記。「ユーザープログラム」を選択し、プログラムJ5を選択する。
ステップ/注記。デバイス命令に従ってTS100チューブセットのインストールを開始するためのプログラムを実行する。
サブステップ/注記。新しいTS100チューブセットのインストールを促すプロンプトに従う。
ステップ/注記。デバイスにプロンプトが現れたときに、アフェレーシス産物の体積を手動入力する。
ステップ/注記。25%のHCT%値を手動入力する。
ステップ/注記。適切なチューブセット接続を確保するように促すプロンプトがデバイスに現れたときに、接続を確認し、「イエス」と答える。
サブステップ/注記。デバイスは準備、CD34標識及び磁気カラム選択のプロセシングプログラムを自動的に開始する。
ステップ/注記。デバイスがプログラムの自動部分を開始すると、ユーザー操作の必要はなくなる。プログラム実行時間は75分間である。
ステップ/注記。デバイスは完了するまでプログラムを続け、完了したら自動的に停止し、プログラム詳細を保存する。
サブステップ/注記。プログラムの終わりにCD34高含有細胞画分が「標的細胞バッグ」内に存在する。
サブステップ/注記。プログラムの終わりに「陰性画分」のラベルを付けたバッグ内にCD34低下画分が存在する。
ステップ/注記。隣接するルアー接続の真上にチューブをヒートシールすることにより標的細胞バッグをデバイスチューブセットから取り外す。
ステップ/注記。標的細胞バッグをバイオセーフティキャビネットに移し、細胞収率の測定用に0.5mL試料を抽出する。最終体積は45mLである。
ステップ/注記。「ツール」メニューを開いて「TS取り外し」プログラムを選択することによりTS100チューブセットをデバイスから取り外す。
全チューブ弁が閉じていることを確認し、プログラム開始前に流体バッグに通じる全チューブをヒートシールする。
完了までデバイスプロンプトに従ってプログラムを実行する。
ステップ/注記。弁4(V4)のチューブのルアーフィッティングに無針スパイクを接続することによりTS730チューブセットを準備する。
ステップ/注記。造血幹細胞用完全形質導入培地を入れたバッグにV4チューブを差し込む。
ステップ/注記。必要な体積の濃縮レンチウイルスを適当な寸法のシリンジ内に吸引し、弁5(V5)のチューブのルアーフィッティングに接続する。
ステップ/注記。標準標的細胞バッグをチューブセットから取り外す。
ステップ/注記。標準標的細胞バッグの代わりにCD34高含有細胞画分を含むTS100チューブセットからの標的細胞バッグをチューブセットに接続する。
ステップ/注記。ユーザープログラムメニューからプログラムJ6を選択し、「実行」を押す。
ステップ/注記。TS730チューブセットをインストールするように促すデバイスプロンプトに従い、高含有画分を含む標的細胞バッグを逆さに吊るして排出させる。
ステップ/注記。チューブ接続を確認するように促すプロンプトがデバイスに現れたときに、接続が正しいことを確認し、「イエス」を押す。
サブステップ/注記。デバイスは自動的にプログラムを開始する。
サブステップ/注記。合計プログラム実行時間は57分間である。
ステップ/注記。デバイスは完了するまでプログラムを続け、完了したら自動的に停止し、プログラム詳細を保存する。
サブステップ/注記。オプション:デバイスが濃縮レンチウイルスを細胞に添加後、チャンバーは30分間の低速遠心(「スピノキュレーション」と言う。)を開始する。「OK」を押して遠心を停止した後に「イエス」を押してプログラムを中止することによりスピノキュレーションを停止する。
サブステップ/注記。プログラムの終わりにCD34高含有細胞画分と形質導入用レンチウイルスベクターがデバイスチャンバー内に存在する。
ステップ/注記。ユーザープログラムメニューからプログラムJ8を選択し、「実行」を押す。
サブステップ/注記。デバイスは自動的にプログラムを開始する。
サブステップ/注記。合計プログラム実行時間はフレキシブルである。
ステップ/注記。ユーザーが「OK」を押した後に「イエス」を押してプログラム中止コマンドを確認することによりプログラムを中止するまでデバイスはプログラムを続ける。その後、完了すると、デバイスはプログラム詳細を保存する。
ステップ/注記。オプション:バイオセーフティキャビネット内で必要な体積の濃縮レンチウイルスの第2のアリコートを適当な寸法のシリンジ内に吸引し、弁5(V5)のチューブのルアーフィッティングに接続する。
サブステップ/注記。ユーザープログラムメニューからプログラムJ7を選択し、「実行」を押す。
サブステップ/注記。デバイスは自動的にプログラムを開始する。
サブステップ/注記。合計プログラム実行時間は5分間である。
サブステップ/注記。プログラムは完了まで実行し、自動的に停止し、プログラム詳細を保存する。
サブステップ/注記。J7プログラムの完了後に上記に従ってJ8プログラムを再開する。
ステップ/注記。精製/製剤化に備え、Plasmalyte Aの第2の1Lバッグに接続したPlasmalyte A緩衝液の1Lバッグに無針スパイクアダプターを差し込む。
ステップ/注記無針スパイクルアーを介して。V4の完全形質導入培地をPlasmalyte Aに交換する。
ステップ/注記。バイオセーフティキャビネット内でPlasmalyte A60mLを400mLクライオバッグに注入する。
ステップ/注記。TS730の標的細胞バッグを、Plasmalyte Aを入れたクライオバッグに交換する。
ステップ/注記。クライオバッグから廃棄物バッグへの弁経路を手動で開き、チューブを通してPlasmalyte Aを排出させる。
ステップ/注記。形質導入した細胞産物を輸液用に精製/製剤化するために、ユーザープログラムメニューからプログラムJ9を選択し、「実行」を押す。
ステップ/注記。チューブ接続を確認するように促すプロンプトがデバイスに現れたときに、接続が正しいことを確認し、「イエス」を押す。
サブステップ/注記。デバイスは自動的にプログラムを開始する。
サブステップ/注記。合計プログラム実行時間は50分間である。
ステップ/注記。デバイスは完了するまでプログラムを続け、完了したら自動的に停止し、プログラム詳細を保存する。
ステップ/注記。放出試験と輸液用の最終細胞産物は弁22のクライオバッグ内に存在する。
本開示は遺伝子改変細胞のエクスビボ単離・作製・製剤化用プラットフォームを提供する。前記プラットフォームはユーザー入力を最小限にして標的細胞の遺伝子改変を半自動的に実施するようにポイントオブケア及び/又はポータブルデバイスへのソフトウェア命令を実行することができ、遺伝子治療をより広く利用できるようにする。
Claims (201)
- 対象試料から得た標的細胞を単離・遺伝子改変・製剤化する方法であって、前記方法が、
(i)試料投入口、緩衝液投入口及び処理チャンバーを備える前記対象試料のプロセシング用回路と;
前記回路の1個以上の流路を選択的に閉じるための複数の弁と;
前記対象試料の前記標的細胞を前記対象試料の非標的細胞から分離するための1個以上の標的細胞セレクターと;
前記回路の少なくとも一部を通して前記対象試料を灌流させるための少なくとも1個のポンプと;
前記処理チャンバー、前記複数の弁、前記標的細胞セレクター及び前記ポンプの動作を制御するために1個以上のプロセッサにより実行可能なメモリ格納命令
を含むポイントオブケア及び/又はポータブルデバイスに前記対象試料を仕込む工程と;
(ii)前記1個以上のプロセッサによる前記命令の実行を開始し、
前記対象試料を前記処理チャンバーから前記標的細胞セレクターへと移送する作業と;
2個以上のセレクターを使用する場合には、前記標的細胞セレクターの動作により前記標的細胞を前記非標的細胞から同時又はタンデムに分離する作業と;
前記標的細胞を前記処理チャンバーに戻す作業と;
前記処理チャンバー及び/又は前記標的細胞セレクター内の前記標的細胞に遺伝子モディファイヤーを導入し、遺伝子改変された標的細胞を作製する作業と;
前記遺伝子改変された標的細胞を対象への投与用製剤として製剤化する作業を
前記複数の弁、前記1個以上の標的細胞セレクター、又は前記少なくとも1個のポンプのうちの少なくとも1種に実施させる工程を含む前記方法。 - 前記実行を開始する工程がSW1、SW2、SW3、SW4、SW6、SW7、SW8及び/又はSW9の1種以上の実行を開始する工程を含む請求項1に記載の方法。
- 前記実行を開始する工程がSW1、記述1、2、3もしくは4;SW2、記述1、2、3もしくは4;SW3、記述1、2、3もしくは4;SW4、記述1、2、3、4もしくは5;SW6、記述1、2、3、4もしくは5;SW7、記述1、2、3、4もしくは5;SW8、記述1、2、3、4もしくは5;及び/又はSW9、記述1、2、3、4もしくは5の1種以上の実行を開始する工程を含む請求項1に記載の方法。
- 前記実行を開始する工程がJ1、J2、J3、J4、J6、J7、J8及び/又はJ9の1種以上の実行を開始する工程を含む請求項1に記載の方法。
- 更に前記対象試料の初期体積を測定する工程を含む請求項1に記載の方法。
- 更に前記仕込み工程の前に前記対象試料のヘマトクリット値を測定する工程を含む請求項1に記載の方法。
- 更に一定体積の緩衝液を前記対象試料に添加し、前記ヘマトクリット値を少なくとも25%まで低下させる工程を含む請求項1に記載の方法。
- 更に前記緩衝液の添加後に前記対象試料のヘマトクリット値を測定する工程を含む請求項7に記載の方法。
- 更に前記希釈後の対象試料の体積を測定する工程を含む請求項7に記載の方法。
- 更に25%のヘマトクリット値を前記デバイスのユーザーインターフェースに入力する工程を含む請求項1に記載の方法。
- 現行の適正製造規範(Current Good Manufacturing Practices)の適合を確認するための放出試験を実施する工程を含む請求項1に記載の方法。
- 前記遺伝子モディファイヤーを導入する工程が免疫介在性疾患、遺伝性遺伝子疾患、血液障害、リソソーム蓄積症、過剰増殖性疾患又は感染症を治療するために遺伝子を挿入又は改変する請求項1に記載の方法。
- 前記免疫介在性疾患がグレーブス病、関節リウマチ、悪性貧血、多発性硬化症(MS)、炎症性腸疾患、全身性エリテマトーデス(SLE)、重症複合免疫不全症(SCID)、アデノシン・デアミナーゼ欠損SCID(ADA−SCID)又はウィスコット・アルドリッチ症候群(WAS)である請求項14に記載の方法。
- 前記遺伝性遺伝子疾患が慢性肉芽腫症(CGD)、ファンコーニ貧血(FA)、シュワッハマン・ダイアモンド・ブラックファン貧血(DBA)、先天性角化不全症(DKC)、ピルビン酸キナーゼ欠損症(PKD)、嚢胞性線維症(CF)、肺胞蛋白症(PAP)、バッテン病、副腎白質ジストロフィー(ALD)、異染性白質ジストロフィー(MLD)、筋ジストロフィー(MD)、パーキンソン病、アルツハイマー病又は筋萎縮性側索硬化症(ALS;ルー・ゲーリッグ病)である請求項14に記載の方法。
- 前記血液障害がサラセミアや鎌状赤血球貧血症等の異常ヘモグロビン症である請求項14に記載の方法。
- 前記リソソーム蓄積症がムコ多糖症(MPS)I型、MPS II型、MPS III型、MPS IV型、MPS V型、MPS VI型、MPS VII型、α−マンノース症、β−マンノース症、テイ=サックス病、ポンペ病、ゴーシェ病又はファブリー病である請求項14に記載の方法。
- 前記過剰増殖性疾患が癌である請求項14に記載の方法。
- 前記感染症がHIV、麻疹ウイルス、コロナウイルス、アミノペプチダーゼ−N、LCMV/ラッサ熱ウイルス、細菌及び/又は寄生虫による感染に起因する請求項14に記載の方法。
- 前記単離・遺伝子改変・製剤化された細胞が造血幹細胞(HSC)、造血前駆細胞(HPC)、造血幹・前駆細胞(HSPC)、T細胞、ナチュラルキラー細胞、B細胞、マクロファージ、単球、間葉系幹細胞(MSC)、白血球(WBC)、単核細胞(MNC)、内皮細胞(EC)、間質細胞及び/又は骨髄線維芽細胞である請求項1に記載の方法。
- 前記単離・遺伝子改変・製剤化された細胞がCD34+HSPCである請求項1に記載の方法。
- 前記遺伝子がABCD1、ABCA3、ABL1、ADA、AKT1、APC、APP、ARSA、ARSB、BCL11A、BLC1、BLC6、BRCA1、BRCA2、BRIP1、C9ORF72、C46又は他のCペプチド、CAR、CAS9、C−CAM、CBFA1、CBL、CCR5、CD4、CD19、CD40、CDA、CFTR、CLN3、C−MYC、CRE、CSCR4、CSFIR、CTLA、CTS−1、CYB5R3、DCC、DHFR、DKC1、DLL1、DMD、EGFR、ERBA、ERBB、EBRB2、ETS1、ETS2、ETV6、F8、F9、FANCA、FANCB、FANCC、FANCD2、FANCE、FANCF、FANCG、FANCI、FANCL、FANCM、FasL、FCC、FGR、FOX、FUS、FUS1、FYN、GALNS、GATA1、GLB1、GNS、GUSB、HBB、HBD、HBE1、HBG1、HBG2、HCR、HGSNAT、HOXB4、HRAS、HYAL1、ICAM−1、iカスパーゼ、IDUA、IDS、JUN、KLF4、KRAS、LCK、LRRK2、LYN、MCC、MDM2、MGMT、MLL、MMAC1、MYB、MEN−I、MEN−II、MYC、NAGLU、NANOG、NF−1、NF−2、NKX2.1、NOTCH、OCT4、p16、p21、p27、p53、p57、p73、PALB2、PARK2、PARK7、phox、PINK1、PK、PSEN1、PSEN2、PTPN22、RAD51C、ras、RPL3〜RPL40、RPLP0、RPLP1、RPLP2、RPS2〜RPS30、RPSA、SFTPB、SFTPC、SGSH、SLX4、SNCA、SOD1、SOX2、TERC、TERT、TDP43、TINF2、TK、ユビキリン2、VHL、WAS及びWT−1の1種以上である請求項14に記載の方法。
- 更に投与を必要とする対象に前記単離・遺伝子改変・製剤化された細胞を治療有効量で投与する工程を含む請求項1に記載の方法。
- 前記単離・遺伝子改変・製剤化された細胞の前記治療有効量が対象体重1kg当たり≧2.5E+05である請求項24に記載の方法。
- 前記単離・遺伝子改変・製剤化された細胞の前記治療有効量が対象体重1kg当たり細胞2×106個である請求項24に記載の方法。
- 前記遺伝子モディファイヤーが非組込み型ベクターを含む請求項14に記載の方法。
- 前記遺伝子モディファイヤーがウイルスベクターを含む請求項14に記載の方法。
- 前記遺伝子モディファイヤーがレンチウイルスベクターを含む請求項14に記載の方法。
- 前記レンチウイルスベクターがシュードタイプエンベロープ糖タンパク質とレンチウイルスRNA分子を含む請求項29に記載の方法。
- 前記シュードタイプエンベロープ糖タンパク質が水泡性口内炎ウイルス糖タンパク質(VSVG)、Cocalウイルス糖タンパク質(cocal)、ネコ内在性ウイルス糖タンパク質(RD114)又は改変型フォーミーウイルス糖タンパク質(mFoamy)を含む請求項30に記載の方法。
- 前記レンチウイルスRNA分子がHIV−1由来自己不活性化型レンチウイルスバックボーンを含む請求項30に記載の方法。
- 前記レンチウイルスRNA分子が組込み欠損型のHIV−1由来自己不活性化型レンチウイルスバックボーンを含む請求項30に記載の方法。
- 前記遺伝子モディファイヤーがガンマレトロウイルスベクターを含む請求項14に記載の方法。
- 前記ガンマレトロウイルスベクターがシュードタイプエンベロープ糖タンパク質とガンマレトロウイルスRNA分子を含む請求項34に記載の方法。
- 前記シュードタイプエンベロープ糖タンパク質がテナガザル白血病ウイルス糖タンパク質(GALV)又はネコ内在性ウイルスエンベロープ(RD114)を含む請求項35に記載の方法。
- 前記ガンマレトロウイルスRNA分子が自己不活性化型ガンマレトロウイルスバックボーンを含む請求項35に記載の方法。
- 前記ガンマレトロウイルスRNA分子が組込み欠損型の自己不活性化型ガンマレトロウイルスバックボーンを含む請求項35に記載の方法。
- 前記遺伝子モディファイヤーがフォーミーウイルスベクターを含む請求項14に記載の方法。
- 前記フォーミーウイルスベクターがシュードタイプエンベロープ糖タンパク質とフォーミーウイルスRNA分子を含む請求項39に記載の方法。
- 前記シュードタイプエンベロープ糖タンパク質がフォーミーウイルスエンベロープタンパク質(Foamy)又は改変型フォーミーウイルスエンベロープタンパク質(mFoamy)を含む請求項40に記載の方法。
- 前記フォーミーウイルスRNA分子が自己不活性化型フォーミーウイルスバックボーンを含む請求項40に記載の方法。
- 前記フォーミーウイルスRNA分子が組込み欠損型の自己不活性化型フォーミーウイルスバックボーンを含む請求項40に記載の方法。
- 前記遺伝子モディファイヤーがアルファレトロウイルスベクターを含む請求項14に記載の方法。
- 前記アルファレトロウイルスベクターがシュードタイプエンベロープ糖タンパク質とアルファレトロウイルスRNA分子を含む請求項44に記載の方法。
- 前記シュードタイプエンベロープ糖タンパク質が水泡性口内炎ウイルス糖タンパク質(VSVG)、Cocalウイルス糖タンパク質(cocal)、ネコ内在性ウイルス糖タンパク質(RD114)又は改変型フォーミーウイルス糖タンパク質(mFoamy)を含む請求項45に記載の方法。
- 前記アルファレトロウイルスRNA分子が自己不活性化型アルファレトロウイルスバックボーンを含む請求項45に記載の方法。
- 前記遺伝子モディファイヤーが1種以上のプロモーターエレメント、選択カセット、エンハンサーエレメント、インシュレーターエレメント、調節エレメント及び転写/翻訳エンハンサーエレメントを更に含むレンチウイルス、ガンマレトロウイルス、フォーミーウイルス又はアルファレトロウイルスベクターを含む請求項14に記載の方法。
- 前記転写/翻訳エンハンサーエレメントがウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメントの一部、2Aウイルス融合エレメント又は配列内リボソーム進入部位(IRES)配列を含む請求項48に記載の方法。
- 前記遺伝子モディファイヤーが裸のDNA、裸のmRNA、アデノウイルスベクターもしくはアデノ随伴ウイルスベクター、ガイドRNA、ジンクフィンガー、メガヌクレアーゼ、TALEN、メガヌクレアーゼ−TALEN融合体(megaTAL)及び/又は相同領域に挟まれた遺伝子を含む請求項14に記載の方法。
- 前記デバイスに連結したチューブセットに1個以上の漏斗形クライオバッグを無菌溶接する工程を含む請求項1に記載の方法。
- 予想沈降体積に適したバッグ容積を選択する工程を含む請求項1に記載の方法。
- 前記対象試料を沈降させるために前記チューブセットに仕込むために必要な段階数を入力する工程を含み、前記必要な段階数が前記希釈後の試料体積(mL)を段階毎に300mLで割り、次の整数に切り上げることにより得られる請求項1に記載の方法。
- 沈降が完了し、RBC除去を開始してもよいことを前記デバイスに通知する工程を含む請求項1に記載の方法。
- RBC沈降層から除去する初期体積(mL)を入力する工程を含む請求項1に記載の方法。
- CD3、CD4、CD8、CD13、CD14、CD15、CD16、CD19、CD20、CD34、CD45、CD45RA、CD45RO、CD49f、CD50、CD56、CD71、CD90又はCD133と選択的に結合するビーズ又は抗体を前記デバイスに仕込む工程を含む請求項1に記載の方法。
- マイクロビーズとIVIgを前記デバイスに仕込む工程を含む請求項1に記載の方法。
- 標的細胞を収容した標的細胞バッグのルアー接続部の上部にチューブセットをシールする工程を含む請求項1に記載の方法。
- 形質導入培地を前記デバイスに仕込む工程を含む請求項1に記載の方法。
- 前記形質導入培地が基礎培地と、サイトカイン及び/又はケモカインと、細胞生存と遺伝子導入を助長するための添加物を含む請求項59に記載の方法。
- 前記サイトカイン/ケモカインが組換えヒト顆粒球コロニー刺激因子(G−CSF)、幹細胞因子(SCF)、トロンボポエチン(TPO)、flightless 3リガンド(flt3又はflt3L)及びインターロイキンを含む請求項60に記載の方法。
- 前記インターロイキンがインターロイキン3(IL−3)及び/又はインターロイキン6(IL−6)を含む請求項61に記載の方法。
- 記添加物が芳香族炭化水素受容体拮抗薬、ピリミドインドール誘導体、グルココルチコイド受容体拮抗薬、プロタミン硫酸塩、ラパマイシン、ポリブレン、フィブロネクチンフラグメント、プロスタグランジン、抗酸化剤及び/又は非ステロイド性抗炎症薬を含む請求項60に記載の方法。
- 前記芳香族炭化水素受容体拮抗薬がStemRegenin1、GNF351及び/又はCH223191を含む請求項63に記載の方法。
- 前記ピリミドインドール誘導体がUM171及び/又はUM118428を含む請求項63に記載の方法。
- 前記グルココルチコイド受容体拮抗薬がミフェプリストン、RU−43044、ミコナゾール、11−オキサコルチゾール、11−オキサプレドニゾロン及び/又はデキサメタゾンメシラートを含む請求項63に記載の方法。
- プロスタグランジンがプロスタグランジンE2を含む請求項63に記載の方法。
- 前記非ステロイド性抗炎症薬がセレコキシブ、ジクロフェナク、ジフルニサル、エトドラク、イブプロフェン、インドメタシン、ケトプロフェン、ナブメトン、ナプロキセン、オキサプロジン、ピロキシカム、サルサレート、スリンダク及び/又はトルメチンを含む請求項63に記載の方法。
- 一定体積の濃縮レンチウイルス、ガンマレトロウイルス、フォーミーウイルス又はアルファレトロウイルスを適当な寸法のシリンジ内に吸引する工程と、前記シリンジをルアーフィッティングに接続する工程を含む請求項1に記載の方法。
- 第2の体積の濃縮レンチウイルス、ガンマレトロウイルス、フォーミーウイルス又はアルファレトロウイルスを適当な寸法のシリンジ内に吸引する工程と、前記シリンジをルアーフィッティングに接続する工程を含む請求項1に記載の方法。
- 無針スパイクアダプターを製剤化用緩衝液のバッグに差し込む工程を含む請求項1に記載の方法。
- 標的細胞バッグを製剤化用緩衝液のバッグに交換する工程を含む請求項1に記載の方法。
- クライオバッグから廃棄物バッグへの弁経路を手動で開き、チューブセットを通して製剤化用緩衝液を排出させる工程を含む請求項1に記載の方法。
- 対象試料から得られた標的細胞を単離・遺伝子改変・製剤化するためのキットであって、前記キットが遺伝子モディファイヤーと、試料プロセシング、ソフトウェアプログラム使用、並びに/又はポイントオブケア及び/もしくはポータブルデバイスで使用するためのユーザーインターフェースガイドラインに関する説明書を含む前記キット。
- SW1、記述1、2、3もしくは4;SW2、記述1、2、3もしくは4;SW3、記述1、2、3もしくは4;SW4、記述1、2、3、4もしくは5;SW6、記述1、2、3、4もしくは5;SW7、記述1、2、3、4もしくは5;SW8、記述1、2、3、4もしくは5;及び/又はSW9、記述1、2、3、4もしくは5のの1種以上の使用説明書を含む請求項74に記載のキット。
- J1、J2、J3、J4、J6、J7、J8又はJ9のの1種以上の使用説明書を含む請求項74に記載のキット。
- 前記説明書が前記対象試料の出発時の体積を測定するように指示する請求項74に記載のキット。
- 前記説明書が前記仕込み工程の前に前記対象試料のヘマトクリット値を測定するように指示する請求項74に記載のキット。
- 前記説明書が一定体積の緩衝液を前記対象試料に添加し、前記ヘマトクリット値を25%まで低下させるように指示する請求項74に記載のキット。
- 前記説明書が前記緩衝液の添加後に前記対象試料のヘマトクリット値を測定するように指示する請求項79に記載のキット。
- 前記説明書が希釈後の試料の体積を測定するように指示する請求項74に記載のキット。
- 前記説明書が25%のヘマトクリット値を前記デバイスのユーザーインターフェースに入力するように指示する請求項74に記載のキット。
- 前記説明書が前記デバイスに連結したチューブセットに1個以上の漏斗形クライオバッグを無菌溶接するように指示する請求項74に記載のキット。
- 前記説明書が予想沈降体積に適したバッグ容積を選択するように指示する請求項74に記載のキット。
- 前記説明書が前記対象試料を沈降させるために前記チューブセットに仕込むために必要な段階数を入力することを指示し、前記必要な段階数が前記希釈後の試料体積(mL)を段階毎に300mLで割り、次の整数に切り上げることにより得られる請求項74に記載のキット。
- 沈降が完了し、RBC除去を開始してもよいことを前記デバイスに通知するように前記説明書が指示する請求項74に記載のキット。
- 前記説明書がRBC沈降層から除去する初期体積(mL)を入力するように指示する請求項74に記載のキット。
- 前記説明書が造血幹細胞(HSC)、造血前駆細胞(HPC)、造血幹・前駆細胞(HSPC)、T細胞、ナチュラルキラー細胞、B細胞、マクロファージ、単球、間葉系幹細胞(MSC)、白血球(WBC)、単核細胞(MNC)、内皮細胞(EC)、間質細胞及び/又は骨髄線維芽細胞から選択される細胞の単離・遺伝子改変・製剤化を指示する請求項74に記載のキット。
- 前記説明書がCD34+HSPCの単離・遺伝子改変・製剤化を指示する請求項74に記載のキット。
- 前記説明書がCD3、CD4、CD8、CD13、CD14、CD15、CD16、CD19、CD20、CD34、CD45、CD45RA、CD45RO、CD49f、CD50、CD56、CD71、CD90又はCD133と選択的に結合するビーズ又は抗体を前記デバイスに仕込むように指示する請求項74に記載のキット。
- 前記説明書がマイクロビーズとIVIgを前記デバイスに仕込むように指示する請求項74に記載のキット。
- 前記説明書が標的細胞を収容した標的細胞バッグのルアー接続部の上部にチューブセットをシールするように指示する請求項74に記載のキット。
- 前記説明書が形質導入培地を前記デバイスに仕込むように指示する請求項74に記載のキット。
- 前記説明書が一定体積の濃縮レンチウイルス、ガンマレトロウイルス、フォーミーウイルス又はアルファレトロウイルスを適当な寸法のシリンジ内に吸引し、前記シリンジをルアーフィッティングに接続するように指示する請求項74に記載のキット。
- 前記説明書が第2の体積の濃縮レンチウイルス、ガンマレトロウイルス、フォーミーウイルス又はアルファレトロウイルスを適当な寸法のシリンジ内に吸引し、前記シリンジをルアーフィッティングに接続するように指示する請求項95に記載のキット。
- 前記説明書が無針スパイクアダプターを製剤化用緩衝液のバッグに差し込むように指示する請求項74に記載のキット。
- 前記説明書が標的細胞バッグを製剤化用緩衝液のバッグに交換するように指示する請求項74に記載のキット。
- 前記説明書がクライオバッグから廃棄物バッグへの弁経路を手動で開き、チューブセットを通して製剤化用緩衝液を排出させるように指示する請求項74に記載のキット。
- 前記説明書が現行の適正製造規範の適合を確認するために放出試験を実施するように指示する請求項74に記載のキット。
- 前記説明書が投与を必要とする対象に前記単離・遺伝子改変・製剤化された細胞を治療有効量で投与するように指示する請求項74に記載のキット。
- 前記単離・遺伝子改変・製剤化された細胞の前記治療有効量が対象体重1kg当たり≧2.5E+05である請求項102に記載のキット。
- 前記単離・遺伝子改変・製剤化された細胞の前記治療有効量が対象体重1kg当たり細胞2×106個である請求項102に記載のキット。
- 免疫介在性疾患、遺伝性遺伝子疾患、血液障害、リソソーム蓄積症、過剰増殖性疾患又は感染症を治療するために遺伝子を挿入又は改変するための遺伝子モディファイヤーを含む請求項74に記載のキット。
- 前記免疫介在性疾患がグレーブス病、関節リウマチ、悪性貧血、多発性硬化症(MS)、炎症性腸疾患、全身性エリテマトーデス(SLE)、重症複合免疫不全症(SCID)、アデノシン・デアミナーゼ欠損SCID(ADA−SCID)又はウィスコット・アルドリッチ症候群(WAS)である請求項105に記載のキット。
- 前記遺伝性遺伝子疾患が慢性肉芽腫症(CGD)、ファンコーニ貧血(FA)、シュワッハマン・ダイアモンド・ブラックファン貧血(DBA)、先天性角化不全症(DKC)、ピルビン酸キナーゼ欠損症(PKD)、嚢胞性線維症(CF)、肺胞蛋白症(PAP)、バッテン病、副腎白質ジストロフィー(ALD)、異染性白質ジストロフィー(MLD)、筋ジストロフィー(MD)、パーキンソン病、アルツハイマー病又は筋萎縮性側索硬化症(ALS;ルー・ゲーリッグ病)である請求項105に記載のキット。
- 前記血液障害がサラセミアや鎌状赤血球貧血症等の異常ヘモグロビン症である請求項105に記載のキット。
- 前記リソソーム蓄積症がムコ多糖症(MPS)I型、MPS II型、MPS III型、MPS IV型、MPS V型、MPS VI型、MPS VII型、α−マンノース症、β−マンノース症、テイ=サックス病、ポンペ病、ゴーシェ病又はファブリー病である請求項105に記載のキット。
- 前記過剰増殖性疾患が癌である請求項105に記載のキット。
- 前記感染症がHIV、麻疹ウイルス、コロナウイルス、アミノペプチダーゼ−N、LCMV/ラッサ熱ウイルス、細菌及び/又は寄生虫による感染に起因する請求項105に記載のキット。
- 前記遺伝子がABCD1、ABCA3、ABL1、ADA、AKT1、APC、APP、ARSA、ARSB、BCL11A、BLC1、BLC6、BRCA1、BRCA2、BRIP1、C9ORF72、C46又は他のCペプチド、CAR、CAS9、C−CAM、CBFA1、CBL、CCR5、CD4、CD19、CD40、CDA、CFTR、CLN3、C−MYC、CRE、CSCR4、CSFIR、CTLA、CTS−1、CYB5R3、DCC、DHFR、DKC1、DLL1、DMD、EGFR、ERBA、ERBB、EBRB2、ETS1、ETS2、ETV6、F8、F9、FANCA、FANCB、FANCC、FANCD2、FANCE、FANCF、FANCG、FANCI、FANCL、FANCM、FasL、FCC、FGR、FOX、FUS、FUS1、FYN、GALNS、GATA1、GLB1、GNS、GUSB、HBB、HBD、HBE1、HBG1、HBG2、HCR、HGSNAT、HOXB4、HRAS、HYAL1、ICAM−1、iカスパーゼ、IDUA、IDS、JUN、KLF4、KRAS、LCK、LRRK2、LYN、MCC、MDM2、MGMT、MLL、MMAC1、MYB、MEN−I、MEN−II、MYC、NAGLU、NANOG、NF−1、NF−2、NKX2.1、NOTCH、OCT4、p16、p21、p27、p53、p57、p73、PALB2、PARK2、PARK7、phox、PINK1、PK、PSEN1、PSEN2、PTPN22、RAD51C、ras、RPL3〜RPL40、RPLP0、RPLP1、RPLP2、RPS2〜RPS30、RPSA、SFTPB、SFTPC、SGSH、SLX4、SNCA、SOD1、SOX2、TERC、TERT、TDP43、TINF2、TK、ユビキリン2、VHL、WAS及びWT−1の1種以上である請求項105に記載のキット。
- 前記遺伝子モディファイヤーがウイルスベクターを含む請求項105に記載のキット。
- 前記遺伝子モディファイヤーが非組込み型ベクターを含む請求項105に記載のキット。
- 前記遺伝子モディファイヤーがレンチウイルスベクターを含む請求項105に記載のキット。
- 前記レンチウイルスベクターがシュードタイプエンベロープ糖タンパク質とレンチウイルスRNA分子を含む請求項115に記載のキット。
- 前記シュードタイプエンベロープ糖タンパク質が水泡性口内炎ウイルス糖タンパク質(VSVG)、Cocalウイルス糖タンパク質(cocal)、ネコ内在性ウイルス糖タンパク質(RD114)又は改変型フォーミーウイルス糖タンパク質(mFoamy)を含む請求項116に記載のキット。
- 前記レンチウイルスRNA分子がHIV−1由来自己不活性化型レンチウイルスバックボーンを含む請求項116に記載のキット。
- 前記レンチウイルスRNA分子が組込み欠損型のHIV−1由来自己不活性化型レンチウイルスバックボーンを含む請求項116に記載のキット。
- 前記遺伝子モディファイヤーがガンマレトロウイルスベクターを含む請求項105に記載のキット。
- 前記ガンマレトロウイルスベクターがシュードタイプエンベロープ糖タンパク質とガンマレトロウイルスRNA分子を含む請求項120に記載のキット。
- 前記シュードタイプエンベロープ糖タンパク質がテナガザル白血病ウイルス糖タンパク質(GALV)又はネコ内在性ウイルスエンベロープ(RD114)を含む請求項121に記載のキット。
- 前記ガンマレトロウイルスRNA分子が自己不活性化型ガンマレトロウイルスバックボーンを含む請求項121に記載のキット。
- 前記ガンマレトロウイルスRNA分子が組込み欠損型の自己不活性化型ガンマレトロウイルスバックボーンを含む請求項121に記載のキット。
- 前記遺伝子モディファイヤーがフォーミーウイルスベクターを含む請求項105に記載のキット。
- 前記フォーミーウイルスベクターがシュードタイプエンベロープ糖タンパク質とフォーミーウイルスRNA分子を含む請求項125に記載のキット。
- 前記シュードタイプエンベロープ糖タンパク質がフォーミーウイルスエンベロープタンパク質(Foamy)又は改変型フォーミーウイルスエンベロープタンパク質(mFoamy)を含む請求項126に記載のキット。
- 前記フォーミーウイルスRNA分子が自己不活性化型フォーミーウイルスバックボーンを含む請求項126に記載のキット。
- 前記フォーミーウイルスRNA分子が組込み欠損型の自己不活性化型フォーミーウイルスバックボーンを含む請求項126に記載のキット。
- 前記遺伝子モディファイヤーがアルファレトロウイルスベクターを含む請求項105に記載のキット。
- 前記アルファレトロウイルスベクターがシュードタイプエンベロープ糖タンパク質とアルファレトロウイルスRNA分子を含む請求項130に記載のキット。
- 前記シュードタイプエンベロープ糖タンパク質が水泡性口内炎ウイルス糖タンパク質(VSVG)、Cocalウイルス糖タンパク質(cocal)、ネコ内在性ウイルス糖タンパク質(RD114)又は改変型フォーミーウイルス糖タンパク質(mFoamy)を含む請求項131に記載のキット。
- 前記アルファレトロウイルスRNA分子が自己不活性化型アルファレトロウイルスバックボーンを含む請求項131に記載のキット。
- 前記遺伝子モディファイヤーが1種以上のプロモーターエレメント、選択カセット、エンハンサーエレメント、インシュレーターエレメント、調節エレメント及び転写/翻訳エンハンサーエレメントを更に含むレンチウイルス、ガンマレトロウイルス、フォーミーウイルス又はアルファレトロウイルスベクターを含む請求項105に記載のキット。
- 前記転写/翻訳エンハンサーエレメントがウッドチャック肝炎ウイルス転写後調節エレメントの一部、2Aウイルス融合エレメント又は配列内リボソーム進入部位(IRES)配列を含む請求項134に記載のキット。
- 前記遺伝子モディファイヤーが裸のDNA、裸のmRNA、アデノウイルスベクターもしくはアデノ随伴ウイルスベクター、ガイドRNA、ジンクフィンガー、メガヌクレアーゼ、TALEN、メガヌクレアーゼ−TALEN融合体(megaTAL)及び/又は相同領域に挟まれた遺伝子を含む請求項105に記載のキット。
- 更に形質導入培地を含む請求項74に記載のキット。
- 前記形質導入培地が基礎培地と、サイトカイン及び/又はケモカインと、細胞生存と遺伝子導入を助長するための添加物を含む請求項137に記載のキット。
- 前記サイトカイン/ケモカインが組換えヒト顆粒球コロニー刺激因子(G−CSF)、幹細胞因子(SCF)、トロンボポエチン(TPO)、flightless 3リガンド(flt3又はflt3L)及びインターロイキンを含む請求項138に記載のキット。
- 前記インターロイキンがインターロイキン3(IL−3)及び/又はインターロイキン6(IL−6)を含む請求項139に記載のキット。
- 前記添加物が芳香族炭化水素受容体拮抗薬、ピリミドインドール誘導体、グルココルチコイド受容体拮抗薬、プロタミン硫酸塩、ラパマイシン、ポリブレン、フィブロネクチンフラグメント、プロスタグランジン、抗酸化剤又は非ステロイド性抗炎症薬を含む請求項138に記載のキット。
- 前記芳香族炭化水素受容体拮抗薬がStemRegenin1、GNF351及び/又はCH223191を含む請求項141に記載のキット。
- 前記ピリミドインドール誘導体がUM171及び/又はUM118428を含む請求項141に記載のキット。
- 前記グルココルチコイド受容体拮抗薬がミフェプリストン、RU−43044、ミコナゾール、11−オキサコルチゾール、11−オキサプレドニゾロン及び/又はデキサメタゾンメシラートを含む請求項141に記載のキット。
- プロスタグランジンがプロスタグランジンE2を含む請求項141に記載のキット。
- 前記非ステロイド性抗炎症薬がセレコキシブ、ジクロフェナク、ジフルニサル、エトドラク、イブプロフェン、インドメタシン、ケトプロフェン、ナブメトン、ナプロキセン、オキサプロジン、ピロキシカム、サルサレート、スリンダク及び/又はトルメチンを含む請求項141に記載のキット。
- 更に滅菌済みチューブセットを含む請求項74に記載のキット。
- 更に医薬的に許容される成分を含む請求項74に記載のキット。
- 前記医薬的に許容される成分が静脈内輸液用塩類溶液を含む請求項148に記載のキット。
- 更にヒト血清アルブミンを含む請求項74に記載のキット。
- 更にヘタスターチ含有塩類溶液を含む請求項74に記載のキット。
- 更に緩衝液を含む請求項74に記載のキット。
- 前記緩衝液がPBS/EDTAである請求項152に記載のキット。
- 更にCD3、CD4、CD8、CD13、CD14、CD15、CD16、CD19、CD20、CD34、CD45、CD45RA、CD45RO、CD49f、CD50、CD56、CD71、CD90又はCD133と選択的に結合するビーズ又は抗体を含む請求項74に記載のキット。
- 更にビオチン化抗CD34抗体を含む請求項74に記載のキット。
- 前記ビオチン化抗CD34抗体がクローン12.8である請求項155に記載のキット。
- 更にCD34マイクロビーズを含む請求項74に記載のキット。
- 更にブロッキング剤を含む請求項74に記載のキット。
- 前記ブロッキング剤が自家血清である請求項158に記載のキット。
- 更にストレプトアビジンで被覆したマイクロビーズを含む請求項74に記載のキット。
- 更に漏斗形クライオバッグを含む請求項74に記載のキット。
- 更に無針スパイクアダプターを含む請求項74に記載のキット。
- 更にシリンジを含む請求項74に記載のキット。
- 前記シリンジが60mL及び/又は30mLシリンジである請求項163に記載のキット。
- 試料入口と試料出口を備えており、試料に対して不透過性であるハウジングと;
前記ハウジング内に配置された第1の電極及び第2の電極を含むフロースルーエレクトロポレーション装置であって、少なくとも1個の電極間隙を規定するように、前記第1の電極の少なくともの一部が前記第2の電極の少なくとも一部から一定の距離に配置されており、前記対象試料が前記対象試料入口から前記対象試料出口に流れるように、前記電極間隙の少なくとも一部が対象試料通路を形成する前記エレクトロポレーション装置。 - 前記第1の電極又は前記第2の電極の少なくとも一方が磁気感受性である請求項165に記載のエレクトロポレーション装置。
- 更に前記第1の電極に対応する第1の末端と、前記第2の電極に対応する第2の末端を含み、前記第1の電極と前記第2の電極が各々前記ハウジングから突出している請求項165に記載のエレクトロポレーション装置。
- 前記少なくとも1個の電極間隙が前記第1の電極と前記第2の電極の間に配置された1個以上の絶縁体により維持されている請求項165に記載のエレクトロポレーション装置。
- 前記第1の電極が第1群の突起を含み、前記第2の電極が第2群の突起を含み、少なくとも1個の電極間隙が少なくとも2個の電極間隙を含むように、前記第1群の突起の少なくとも一部が前記第2群の突起の少なくとも一部の間に配置されている請求項165に記載のエレクトロポレーション装置。
- 前記対象試料通路の少なくとも一部が前記第1群の突起に対応する第1群の細孔と、前記第2群の突起に対応する第2群の細孔により形成される請求項165に記載のエレクトロポレーション装置。
- 更に前記第1の電極の少なくとも一部と前記第2の電極の少なくとも一部の間に配置された磁気感受性材料(MSM)を含む請求項165に記載のエレクトロポレーション装置。
- 前記MSMが少なくともワイヤー、金属被覆繊維、スチールウール及び/又は金属球を含む請求項171に記載のエレクトロポレーション装置。
- 前記MSMが電気絶縁体で被覆されており、前記MSMが一定距離を維持している請求項171に記載のエレクトロポレーション装置。
- 前記第1の電極及び/又は前記第2の電極がアルミニウムであり、前記MSMが強磁性体である請求項171に記載のエレクトロポレーション装置。
- 前記一定距離が0.1cm以上0.4cm以下である請求項173に記載のエレクトロポレーション装置。
- 標的細胞と非標的細胞を含む試料から標的細胞を単離・遺伝子改変・製剤化するためのデバイスであって、
試料投入口、緩衝液投入口及び処理チャンバーを備える前記対象試料のプロセシング用回路と;
前記回路の1個以上の流路を選択的に閉じるための複数の弁と;
前記対象試料の標的細胞を前記対象試料の非標的細胞から分離するための1個以上の標的細胞セレクターと;
前記回路の少なくとも一部を通して前記対象試料を灌流させるためのポンプと;
前記処理チャンバー、前記複数の弁、前記標的細胞セレクター及び前記ポンプの動作を制御するための1個以上のプロセッサと;
前記1個以上のプロセッサにより実行されたときに、
前記対象試料を前記処理チャンバーから前記標的細胞セレクターへと灌流させる作業と;
複数のセレクターを連携して使用する場合には、前記標的細胞セレクターの動作により前記標的細胞を前記非標的細胞から同時又はタンデムに分離する作業と;
前記標的細胞を前記処理チャンバーに戻す作業と;
前記処理チャンバー及び/又は前記標的細胞セレクター内の前記標的細胞に遺伝子モディファイヤーを導入し、遺伝子改変された標的細胞を作製する作業と;
前記遺伝子改変された標的細胞を対象への投与用製剤として製剤化する作業を前記ポイントオブケア及び/又はポータブルデバイスの1個以上のハードウェアコンポーネントに実施させるメモリ格納命令
を含み、前記デバイスがポイントオブケア及び/又はポータブルデバイスである前記デバイス。 - 前記処理チャンバーが遠心機の内部チャンバーを形成する請求項176に記載のデバイス。
- 前記標的細胞セレクターが磁気細胞セレクター及び/又はフローサイトメーター及び/又はフロー式セルソーターを含む請求項176に記載のデバイス。
- 前記標的細胞セレクターが前方、後方及び側方光散乱特性、蛍光色素吸光度並びに発光スペクトルを利用して標的細胞を非標的細胞から分離するフロー式セルソーターを含む請求項176に記載のデバイス。
- 前記標的細胞セレクターがフロースルーエレクトロポレーション装置を含み、前記エレクトロポレーション装置が、
試料入口と試料出口を備えており、試料に対して不透過性であるハウジングと;
前記ハウジング内に配置された第1の電極及び第2の電極を含み、
少なくとも1個の電極間隙を規定するように、前記第1の電極の少なくとも一部が前記第2の電極の少なくとも一部から一定の距離に配置されており、前記対象試料が前記対象試料入口から前記対象試料出口に流れるように、前記電極間隙の少なくとも一部が対象試料通路を形成する請求項176に記載のデバイス。 - 更に前記処理チャンバーと連結されたガスレギュレーターを含む請求項176に記載のデバイス。
- 前記ガスレギュレーターが窒素ガス(N2)に対応する第1の分圧と、炭酸ガス(CO2)に対応する第2の分圧と、酸素ガス(O2)に対応する第3の分圧を選択的に制御するように構成されている請求項181に記載のデバイス。
- 前記メモリ格納命令が、前記1個以上のプロセッサにより実行されたときに、前記処理チャンバー内にインキュベーション環境を形成・維持する作業を前記ポイントオブケア及び/又はポータブルデバイスの1個以上のハードウェアコンポーネントに実施させる請求項176に記載のデバイス。
- 前記形成・維持されるインキュベーション環境が特定の温度範囲又は混合ガスを含む請求項183に記載のデバイス。
- 前記メモリ格納命令が更に、前記灌流前に前記対象試料に標的細胞一次標識物質を加えて前記処理チャンバー内で標識懸濁液を形成する作業を前記1個以上のハードウェアコンポーネントに実施させる請求項176に記載のデバイス。
- 前記メモリ格納命令が更に、前記処理チャンバー内にインキュベーション環境を維持し、前記標的細胞一次標識物質と前記標的細胞の結合を助長する作業を前記1個以上のハードウェアコンポーネントに実施させる請求項176に記載のデバイス。
- 前記メモリ格納命令が更に、前記処理チャンバー内で前記標識懸濁液を撹拌し、前記標的細胞一次標識物質と前記標的細胞の結合を誘導する作業を前記1個以上のハードウェアコンポーネントに実施させる請求項176に記載のデバイス。
- 前記撹拌が遠心機モーターの運転により前記処理チャンバーを少なくとも部分的に回転させる工程を含む請求項187に記載のデバイス。
- 前記撹拌が前記標識懸濁液の超音波撹拌を含む請求項187に記載のデバイス。
- 前記メモリ格納命令が更に前記撹拌後に、結合していない過剰量の前記標的細胞一次標識物質を除去する作業を前記1個以上のハードウェアコンポーネントに実施させる請求項187に記載のデバイス。
- 前記一次標識物質が免疫磁気ビーズを含み、前記標識懸濁液が第1の緩衝溶液を含む請求項185に記載のデバイス。
- 前記メモリ格納命令が更に、
[a]前記処理チャンバー内の前記標的細胞に形質導入培地を導入する工程と;
[b]遠心により前記処理チャンバー内の前記標的細胞をペレット化する工程と;
[c]前記ペレット化中に形成された上清体積を除去する工程と;
前記遺伝子モディファイヤーを前記処理チャンバーに導入する前に工程[a]〜[c]の反復サイクルを少なくとも1回実施する工程を含む作業を前記1個以上のハードウェアコンポーネントに実施させる請求項176に記載のデバイス。 - 前記メモリ格納命令が更に、
前記対象試料のヘマトクリット値を測定する工程と;
前記ヘマトクリット値が所定のヘマトクリット値閾値を上回るという判定に基づき、前記血液試料で赤血球(RBC)除去プロトコールを実施する工程
を含む作業を前記1個以上のハードウェアコンポーネントに実施させる請求項176に記載のデバイス。 - 前記対象試料のヘマトクリット値を測定する工程が前記処理チャンバー内で前記対象試料を遠心して前記対象試料を赤血球層に分離する工程を含む請求項193に記載のデバイス。
- 前記対象試料のヘマトクリット値を測定する工程が前方光散乱又は後方光散乱の一方又は両方により前記対象試料の1種以上の光学特性を測定する工程を含む請求項193に記載のデバイス。
- 前記RBC除去プロトコールが、
骨髄及び/又は末梢血を含む前記対象試料に第1の緩衝液を加える工程と;
前記処理チャンバー内で遠心することにより、前記対象試料の複数のRBCの連銭形成を開始する工程と;
前記対象試料を前記処理チャンバーから沈降容器へと灌流させる工程と;
前記沈降容器から前記対象試料のRBC高含有画分の段階的除去を実施する工程と;
第2の緩衝液で上清を洗浄することにより前記対象試料から前記第1の緩衝液を除去する工程を含む請求項193に記載のデバイス。 - 前記所定のヘマトクリット値閾値が25%であり、前記第1の緩衝液がヘタスターチ系培地であり、前記第2の緩衝液がリン酸緩衝塩類溶液(PBS)とエチレンジアミン四酢酸(EDTA)を含む請求項193に記載のデバイス。
- 前記対象試料から前記第1の緩衝液を除去する工程が前記沈降容器から前記対象試料のRBC高含有画分の段階的除去の実施の完了を確認するユーザー入力の受信に応答して開始される請求項196に記載のデバイス。
- 前記RBC除去プロトコールが更に、
前記対象試料から前記第1の緩衝液を除去する工程後に、前記処理チャンバー内で前記対象試料の遠心と吸引により前記対象試料を濃縮する工程を含む請求項193に記載のデバイス。 - 前記単離・遺伝子改変・製剤化された細胞が現行の適正製造規範に適合する請求項176に記載のデバイス。
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Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2021534818A (ja) * | 2018-08-24 | 2021-12-16 | シーエスエル ベーリング ジーン セラピー インコーポレイテッド | 無血清培地におけるベクター産生 |
Families Citing this family (64)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2009072006A2 (en) | 2007-12-07 | 2009-06-11 | Miltenyi Biotec Gmbh | A centrifuge for separating a sample into at least two components |
WO2016118780A1 (en) | 2015-01-21 | 2016-07-28 | Fred Hutchinson Cancer Research Center | Point-of-care and/or portable platform for gene therapy |
SG11201707182WA (en) * | 2015-03-05 | 2017-10-30 | Hutchinson Fred Cancer Res | Immunomodulatory fusion proteins and uses thereof |
GB201508025D0 (en) | 2015-05-11 | 2015-06-24 | Ucl Business Plc | Fabry disease gene therapy |
CN114717183A (zh) | 2015-08-31 | 2022-07-08 | 爱平世股份有限公司 | 多能干细胞制造系统和生产诱导多能干细胞的方法 |
US9988624B2 (en) | 2015-12-07 | 2018-06-05 | Zymergen Inc. | Microbial strain improvement by a HTP genomic engineering platform |
US11208649B2 (en) | 2015-12-07 | 2021-12-28 | Zymergen Inc. | HTP genomic engineering platform |
CN109641063B (zh) | 2016-04-20 | 2022-11-15 | 能源环境和技术研究中心O.A., M.P. | 用于增强pklr的基因表达的组合物和方法 |
MX2019002699A (es) * | 2016-09-08 | 2019-12-16 | Centro De Investig Energeticas Medioambientales Y Tecnologicas O A M P | Terapia genica para pacientes con anemia de fanconi. |
CN106480096B (zh) * | 2016-09-30 | 2019-04-02 | 陕西慧康生物科技有限责任公司 | 表达载体及重组细胞 |
JP6976652B2 (ja) * | 2016-09-30 | 2021-12-08 | アークレイ株式会社 | 粒子の分離方法、分離装置及び分離システム |
TW201839136A (zh) | 2017-02-06 | 2018-11-01 | 瑞士商諾華公司 | 治療血色素異常症之組合物及方法 |
EP3595706A1 (en) | 2017-03-17 | 2020-01-22 | Fred Hutchinson Cancer Research Center | Immunomodulatory fusion proteins and uses thereof |
JP2020517720A (ja) * | 2017-04-27 | 2020-06-18 | フレッド ハッチンソン キャンサー リサーチ センター | ネガティブ選択により誘導されるcd34+幹細胞を含む治療用製剤 |
WO2018226762A1 (en) | 2017-06-05 | 2018-12-13 | Fred Hutchinson Cancer Research Center | Genomic safe harbors for genetic therapies in human stem cells and engineered nanoparticles to provide targeted genetic therapies |
RU2755308C2 (ru) | 2017-06-30 | 2021-09-15 | Инскрипта, Инк. | Автоматизированный многомодульный инструмент для редактирования клеток (варианты) |
US10738327B2 (en) | 2017-08-28 | 2020-08-11 | Inscripta, Inc. | Electroporation cuvettes for automation |
KR102546681B1 (ko) | 2017-09-01 | 2023-06-22 | 론차 콜로그네 게엠베하 | 엔드-투-엔드 세포 요법의 자동화 |
WO2019068022A1 (en) | 2017-09-30 | 2019-04-04 | Inscripta, Inc. | CONTINUOUS FLOW ELECTROPORATION INSTRUMENTATION |
WO2019070740A2 (en) * | 2017-10-02 | 2019-04-11 | Fred Hutchinson Cancer Research Center | LUTENING HORMONE RECEPTOR BINDING AGENTS AND LUTINISING HORMONE AGONISTS FOR IDENTIFICATION, MULTIPLICATION, REMOVAL AND MODIFICATION OF PRIMITIVE STEM CELL POPULATIONS |
US11642422B2 (en) | 2017-10-16 | 2023-05-09 | Centro de Investigaciones Energéticas, Medioambientales y Tecnológicas, O.A, M.P. | Lentiviral vectors for delivery of PKLR to treat pyruvate kinase deficiency |
US10696961B2 (en) | 2017-12-01 | 2020-06-30 | Global Life Sciences Solutions Usa Llc | Magnetic cell isolation techniques |
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US10889792B2 (en) | 2018-02-09 | 2021-01-12 | Global Life Sciences Solutions Usa Llc | Cell expansion vessel systems and methods |
US11920119B2 (en) | 2018-02-09 | 2024-03-05 | Global Life Sciences Solutions Usa Llc | Systems and methods for bioprocessing |
EP3749743A1 (en) * | 2018-02-09 | 2020-12-16 | Global Life Sciences Solutions USA LLC | System and method for fluid flow management in a bioprocessing system |
US11414639B2 (en) | 2018-02-09 | 2022-08-16 | Global Life Sciences Solutions Usa Llc | Bioprocessing vessel |
US11371007B2 (en) | 2018-02-09 | 2022-06-28 | Global Life Sciences Solutions Usa Llc | System and method for fluid flow management in a bioprocessing system |
US20210047619A1 (en) * | 2018-03-16 | 2021-02-18 | Immusoft Corporation | B cells genetically engineered to secrete follistatin and methods of using the same to treat follistatin-related diseases, conditions, disorders and to enhance muscle growth and strength |
CN112204131A (zh) | 2018-03-29 | 2021-01-08 | 因思科瑞普特公司 | 用于诱导和转化的细胞生长速率的自动化控制 |
BR112020020841A2 (pt) * | 2018-04-11 | 2021-01-19 | Fundacion Para La Investigacion Biomedica Del Hospital Infantil Universitario Nino Jesus | Composições e métodos para transplante de célulastronco |
WO2019200004A1 (en) | 2018-04-13 | 2019-10-17 | Inscripta, Inc. | Automated cell processing instruments comprising reagent cartridges |
US10526598B2 (en) | 2018-04-24 | 2020-01-07 | Inscripta, Inc. | Methods for identifying T-cell receptor antigens |
US10858761B2 (en) | 2018-04-24 | 2020-12-08 | Inscripta, Inc. | Nucleic acid-guided editing of exogenous polynucleotides in heterologous cells |
WO2019209926A1 (en) | 2018-04-24 | 2019-10-31 | Inscripta, Inc. | Automated instrumentation for production of peptide libraries |
ES2920492T3 (es) * | 2018-06-06 | 2022-08-04 | Limula Sa | Aparato y procedimiento para la producción automatizada de células modificadas por ingeniería genética a partir de líquidos biológicos |
EP3813974A4 (en) | 2018-06-30 | 2022-08-03 | Inscripta, Inc. | INSTRUMENTS, MODULES AND METHODS FOR ENHANCED DETECTION OF EDITED SEQUENCES IN LIVING CELLS |
US11142740B2 (en) | 2018-08-14 | 2021-10-12 | Inscripta, Inc. | Detection of nuclease edited sequences in automated modules and instruments |
US10752874B2 (en) | 2018-08-14 | 2020-08-25 | Inscripta, Inc. | Instruments, modules, and methods for improved detection of edited sequences in live cells |
US10532324B1 (en) | 2018-08-14 | 2020-01-14 | Inscripta, Inc. | Instruments, modules, and methods for improved detection of edited sequences in live cells |
WO2020081149A2 (en) | 2018-08-30 | 2020-04-23 | Inscripta, Inc. | Improved detection of nuclease edited sequences in automated modules and instruments |
TW202020136A (zh) * | 2018-10-23 | 2020-06-01 | 日商帝人股份有限公司 | 過濾用過濾器、附有過濾器的容器、及細胞懸浮液中之異物去除方法 |
CN109668873B (zh) * | 2018-12-05 | 2021-03-16 | 山东恒业生物技术有限公司 | 一种活载体疫苗活性检测装置及其使用方法 |
CA3123314A1 (en) | 2018-12-21 | 2020-06-25 | Octane Biotech Inc. | Carousel for modular biologic production units |
KR20210108406A (ko) | 2018-12-21 | 2021-09-02 | 론자 워커스빌 아이엔씨. | 바이러스 벡터의 자동화된 생산 |
CN109777832B (zh) * | 2019-02-01 | 2020-08-04 | 国家卫生健康委科学技术研究所 | 碱基编辑模拟、修复与甘露糖苷贮积症相关的man2b1c2248t突变的试剂和方法 |
US11773365B2 (en) | 2019-02-08 | 2023-10-03 | Lonza Walkersville, Inc. | Cell concentration methods and devices for use in automated bioreactors |
AU2020285638A1 (en) * | 2019-05-24 | 2021-12-23 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Gene therapy for alzheimer's disease |
US10907125B2 (en) | 2019-06-20 | 2021-02-02 | Inscripta, Inc. | Flow through electroporation modules and instrumentation |
AU2020297499A1 (en) | 2019-06-21 | 2022-02-03 | Inscripta, Inc. | Genome-wide rationally-designed mutations leading to enhanced lysine production in E. coli |
US10927385B2 (en) | 2019-06-25 | 2021-02-23 | Inscripta, Inc. | Increased nucleic-acid guided cell editing in yeast |
CN110295177B (zh) * | 2019-07-31 | 2021-06-08 | 西南大学 | 超量表达甘蓝型油菜及其亲本物种的myb43在改善植物株型及提高产量中的应用 |
CN110790842B (zh) * | 2019-11-25 | 2021-03-30 | 贵州康钦承平生物科技有限公司 | 一种FasL-CAR融合蛋白和表达融合蛋白的T细胞及其制备方法和应用 |
US10689669B1 (en) | 2020-01-11 | 2020-06-23 | Inscripta, Inc. | Automated multi-module cell processing methods, instruments, and systems |
EP4096770A1 (en) | 2020-01-27 | 2022-12-07 | Inscripta, Inc. | Electroporation modules and instrumentation |
US20210332388A1 (en) | 2020-04-24 | 2021-10-28 | Inscripta, Inc. | Compositions, methods, modules and instruments for automated nucleic acid-guided nuclease editing in mammalian cells |
US11787841B2 (en) | 2020-05-19 | 2023-10-17 | Inscripta, Inc. | Rationally-designed mutations to the thrA gene for enhanced lysine production in E. coli |
CN111849913B (zh) * | 2020-07-31 | 2021-05-25 | 南京北恒生物科技有限公司 | 工程化免疫细胞及其用途 |
MX2023001615A (es) | 2020-08-07 | 2023-03-08 | Spacecraft Seven Llc | Genoterapia con placofilina-2 (pkp2) mediante el uso de vector de aav. |
CN113030216B (zh) * | 2021-03-16 | 2023-03-14 | 商丘师范学院 | 一种检测17 β-雌二醇的电化学传感器及其制备和使用方法 |
WO2023150285A1 (en) | 2022-02-04 | 2023-08-10 | Elixirgen Therapeutics, Inc. | Cell therapy protocol systems and methods |
WO2023180465A1 (en) * | 2022-03-23 | 2023-09-28 | University Of Twente | A magnetic micro-needle to isolate single immunomagnetically labeled cells |
WO2023246851A1 (zh) * | 2022-06-24 | 2023-12-28 | 北京昌平实验室 | 便携式体外血液细胞基因编辑或修饰系统 |
WO2024077052A1 (en) * | 2022-10-04 | 2024-04-11 | Emergent Product Development Gaithersburg Inc. | Novel vsv virus formulations |
Citations (16)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2002534482A (ja) * | 1999-01-15 | 2002-10-15 | ザ、ボード、オブ、トラスティーズ、オブ、ザ、リーランド、スタンフォード、ジュニア、ユニバーシティ | 全身系メモリーt細胞の移動の調節 |
JP2003506075A (ja) * | 1999-08-05 | 2003-02-18 | エムシーエル エルエルシー | 多能性成人幹細胞およびそれを単離する方法 |
JP2003534791A (ja) * | 2000-05-29 | 2003-11-25 | カントンスピタル バーゼル | 組織エンジニアリングのためのエイコサノイドの使用方法 |
WO2004022731A1 (ja) * | 2002-09-04 | 2004-03-18 | Dnavec Research Inc. | シアル酸結合活性を有する膜蛋白質をエンベロープに含むウイルスベクターをグラム陽性菌由来ノイラミニダーゼを用いて製造する方法 |
JP2005532829A (ja) * | 2002-07-18 | 2005-11-04 | インヴィトロジェン コーポレーション | 組換え部位を含むウイルスベクター |
JP2005336080A (ja) * | 2004-05-26 | 2005-12-08 | Asahi Kasei Medical Co Ltd | 血管新生療法用細胞の分離回収方法および分離回収システム |
JP2009017884A (ja) * | 2001-05-30 | 2009-01-29 | Chromos Molecular Systems Inc | 染色体に基くプラットホーム |
WO2009020201A1 (ja) * | 2007-08-08 | 2009-02-12 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. | 単離された細胞集団 |
JP2011505890A (ja) * | 2007-12-07 | 2011-03-03 | ミルテンイ バイオテック ゲーエムベーハー | 試料処理システムおよび方法 |
US20120164118A1 (en) * | 2009-05-04 | 2012-06-28 | Fred Hutchinson Cancer Research Center | Cocal vesiculovirus envelope pseudotyped retroviral vectors |
JP2013039128A (ja) * | 2003-12-19 | 2013-02-28 | Omnicyte Ltd | 幹細胞 |
JP2013071915A (ja) * | 2011-09-28 | 2013-04-22 | Biotherapy Institute Of Japan | Nk細胞強化型血液製剤の製造方法 |
US20130216506A1 (en) * | 2012-02-21 | 2013-08-22 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Bioreactor for Isolation of Rare Cells and Methods of Use |
JP2014037433A (ja) * | 2009-10-23 | 2014-02-27 | Amorcyte Inc | 血管の機能不全による進行性心筋傷害治療のための組成物および方法 |
JP2014522826A (ja) * | 2011-06-30 | 2014-09-08 | ジェネトン | ウイルス感染増強特性を有するペプチドおよびその使用 |
US20140315311A1 (en) * | 2011-11-18 | 2014-10-23 | Miltenyi Biotec Gmbh | Method and device for cell modification |
Family Cites Families (31)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5004681B1 (en) | 1987-11-12 | 2000-04-11 | Biocyte Corp | Preservation of fetal and neonatal hematopoietic stem and progenitor cells of the blood |
GB9105383D0 (en) | 1991-03-14 | 1991-05-01 | Immunology Ltd | An immunotherapeutic for cervical cancer |
WO1993012141A1 (en) | 1991-12-11 | 1993-06-24 | Yale University | Nucleotide and protein sequences of the serrate gene and methods based thereon |
US5869282A (en) | 1991-12-11 | 1999-02-09 | Imperial Cancer Research Technology, Ltd. | Nucleotide and protein sequences of the serrate gene and methods based thereon |
US5545130A (en) | 1992-04-08 | 1996-08-13 | Genetronics, Inc. | Flow through electroporation method |
US5604090A (en) | 1994-06-06 | 1997-02-18 | Fred Hutchinson Cancer Research Center | Method for increasing transduction of cells by adeno-associated virus vectors |
US5705059A (en) | 1995-02-27 | 1998-01-06 | Miltenyi; Stefan | Magnetic separation apparatus |
AU723939B2 (en) | 1995-06-28 | 2000-09-07 | Imperial Cancer Research Technology Ltd | Nucleotide and protein sequences of vertebrate delta genes and methods based thereon |
US7015037B1 (en) | 1999-08-05 | 2006-03-21 | Regents Of The University Of Minnesota | Multiponent adult stem cells and methods for isolation |
EP1207961B1 (en) | 1999-09-03 | 2006-03-15 | Miltenyi Biotec GmbH | Methods of modification of selected cells in a magnetic cell separation column |
US7399633B2 (en) | 2000-10-27 | 2008-07-15 | Fred Hutchinson Cancer Research Center | Methods for immortalizing cells |
US20040214314A1 (en) | 2001-11-02 | 2004-10-28 | Friedrich Srienc | High throughput bioreactor |
US7078227B2 (en) | 2004-03-26 | 2006-07-18 | Molecular Transfer | Ready-to-use electroporation cuvette including frozen electrocompetent cells |
US20050277183A1 (en) | 2004-05-18 | 2005-12-15 | Ronald Lee | Electroporation cuvette |
KR101544292B1 (ko) | 2004-10-25 | 2015-08-12 | 셀러랜트 세라퓨틱스 인코퍼레이티드 | 골수형 세포군의 증량 방법 및 그의 용도 |
CN101421393B (zh) | 2006-02-14 | 2013-08-14 | 塞勒兰特治疗公司 | 提高造血干细胞植入的方法和组合物 |
WO2007095201A2 (en) | 2006-02-15 | 2007-08-23 | The Regents Of The University Of California | Pseudotyped retroviral vectors and methods of use thereof |
WO2007145227A1 (ja) | 2006-06-14 | 2007-12-21 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | 造血幹細胞増加促進剤 |
EP3342872A1 (en) | 2007-12-11 | 2018-07-04 | The University of North Carolina at Chapel Hill | Polypurine tract modified retroviral vectors |
US8043838B2 (en) | 2008-02-20 | 2011-10-25 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Electroporation cuvette with spatially variable electric field |
US20100009424A1 (en) * | 2008-07-14 | 2010-01-14 | Natasha Forde | Sonoporation systems and methods |
PE20100362A1 (es) | 2008-10-30 | 2010-05-27 | Irm Llc | Derivados de purina que expanden las celulas madre hematopoyeticas |
US20100210989A1 (en) * | 2008-12-23 | 2010-08-19 | Janet Lesley Macpherson | Processing blood |
EP2419113B1 (en) * | 2009-04-13 | 2017-05-10 | Apceth GmbH & Co. KG | Engineered mesenchymal stem cells and method of using same to treat tumors |
WO2011127470A1 (en) | 2010-04-09 | 2011-10-13 | Fred Hutchinson Cancer Research Center | Compositions and methods for providing hematopoietic function without hla matching |
US20130095080A1 (en) | 2010-04-09 | 2013-04-18 | Fred Hutchinson Cancer Reserach Center | Compositions and methods for providing hematopoietic function |
US9405700B2 (en) | 2010-11-04 | 2016-08-02 | Sonics, Inc. | Methods and apparatus for virtualization in an integrated circuit |
TR201909582T4 (tr) * | 2012-01-27 | 2019-07-22 | Univ Montreal | Pirimido[4,5-b]indol türevleri ve hematopoetik kök hücrelerinin ekspresyonunda bunlarin kullanimi. |
US20150328260A1 (en) | 2012-12-18 | 2015-11-19 | Robert Chow | Blood cell preparations and related methods (gen 8) |
WO2015162211A1 (en) | 2014-04-24 | 2015-10-29 | Miltenyi Biotec Gmbh | Method for automated generation of genetically modified t cells |
WO2016118780A1 (en) * | 2015-01-21 | 2016-07-28 | Fred Hutchinson Cancer Research Center | Point-of-care and/or portable platform for gene therapy |
-
2016
- 2016-01-21 WO PCT/US2016/014378 patent/WO2016118780A1/en active Application Filing
- 2016-01-21 JP JP2017538349A patent/JP6734283B2/ja active Active
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- 2016-01-21 US US15/545,555 patent/US10350245B2/en active Active
-
2019
- 2019-05-24 US US16/422,876 patent/US10828333B2/en active Active
-
2020
- 2020-07-07 US US16/922,981 patent/US20210052658A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (16)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2002534482A (ja) * | 1999-01-15 | 2002-10-15 | ザ、ボード、オブ、トラスティーズ、オブ、ザ、リーランド、スタンフォード、ジュニア、ユニバーシティ | 全身系メモリーt細胞の移動の調節 |
JP2003506075A (ja) * | 1999-08-05 | 2003-02-18 | エムシーエル エルエルシー | 多能性成人幹細胞およびそれを単離する方法 |
JP2003534791A (ja) * | 2000-05-29 | 2003-11-25 | カントンスピタル バーゼル | 組織エンジニアリングのためのエイコサノイドの使用方法 |
JP2009017884A (ja) * | 2001-05-30 | 2009-01-29 | Chromos Molecular Systems Inc | 染色体に基くプラットホーム |
JP2005532829A (ja) * | 2002-07-18 | 2005-11-04 | インヴィトロジェン コーポレーション | 組換え部位を含むウイルスベクター |
WO2004022731A1 (ja) * | 2002-09-04 | 2004-03-18 | Dnavec Research Inc. | シアル酸結合活性を有する膜蛋白質をエンベロープに含むウイルスベクターをグラム陽性菌由来ノイラミニダーゼを用いて製造する方法 |
JP2013039128A (ja) * | 2003-12-19 | 2013-02-28 | Omnicyte Ltd | 幹細胞 |
JP2005336080A (ja) * | 2004-05-26 | 2005-12-08 | Asahi Kasei Medical Co Ltd | 血管新生療法用細胞の分離回収方法および分離回収システム |
WO2009020201A1 (ja) * | 2007-08-08 | 2009-02-12 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. | 単離された細胞集団 |
JP2011505890A (ja) * | 2007-12-07 | 2011-03-03 | ミルテンイ バイオテック ゲーエムベーハー | 試料処理システムおよび方法 |
US20120164118A1 (en) * | 2009-05-04 | 2012-06-28 | Fred Hutchinson Cancer Research Center | Cocal vesiculovirus envelope pseudotyped retroviral vectors |
JP2014037433A (ja) * | 2009-10-23 | 2014-02-27 | Amorcyte Inc | 血管の機能不全による進行性心筋傷害治療のための組成物および方法 |
JP2014522826A (ja) * | 2011-06-30 | 2014-09-08 | ジェネトン | ウイルス感染増強特性を有するペプチドおよびその使用 |
JP2013071915A (ja) * | 2011-09-28 | 2013-04-22 | Biotherapy Institute Of Japan | Nk細胞強化型血液製剤の製造方法 |
US20140315311A1 (en) * | 2011-11-18 | 2014-10-23 | Miltenyi Biotec Gmbh | Method and device for cell modification |
US20130216506A1 (en) * | 2012-02-21 | 2013-08-22 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Bioreactor for Isolation of Rare Cells and Methods of Use |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
COLLINS, N.H.: "Chapter 18 Product Review, Release, and Administration", CELL THERAPY, JPN6019037306, 2009, pages 215 - 228, ISSN: 0004122512 * |
DONNENBERG, A.D. ET AL.: "Intra-operative preparation of autologous bone marrow-derived CD34-enriched cellular products for ca", CYTOTHERAPY, vol. 13, JPN6019037308, 2011, pages 441 - 448, XP055466306, ISSN: 0004122514, DOI: 10.3109/14653249.2010.529888 * |
SCHLENKE, P. ET AL.: "How do I collect and process stem cells?", ISBT SCIENCE SERIES, vol. 5, JPN6019037307, 2010, pages 136 - 140, ISSN: 0004122513 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2021534818A (ja) * | 2018-08-24 | 2021-12-16 | シーエスエル ベーリング ジーン セラピー インコーポレイテッド | 無血清培地におけるベクター産生 |
JP7470119B2 (ja) | 2018-08-24 | 2024-04-17 | シーエスエル ベーリング ジーン セラピー インコーポレイテッド | 無血清培地におけるベクター産生 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP6734283B2 (ja) | 2020-08-05 |
US20190365817A1 (en) | 2019-12-05 |
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WO2016118780A1 (en) | 2016-07-28 |
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Seymour et al. | European Society of Gene and Cell Therapy British Society for Gene Therapy Collaborative Congress 2011 October 27–31, 2011 The Brighton Centre, Brighton United Kingdom |
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