JP2016138046A - 米糠抽出物含有皮膚外用剤 - Google Patents
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Abstract
本発明の課題は、血管内皮細胞の増殖促進剤を提供すること、および、血色を改善し、肌状態改善作用に優れた皮膚外用剤を提供することである。
【解決手段】
アシル化ステロール配糖体を2.7〜4.1質量%、γ−オリザノールを1.4〜2.1質量%、ステアロ・オレオ・レシチン換算で、リン脂質を18〜28質量%含有し、加水分解したときに、加水分解前の質量に対して20〜30質量%のリノール酸、24〜37質量%のオレイン酸、11〜17質量%のパルミチン酸、1.7〜2.6質量%の植物ステロールを含有することを特徴とする米糠抽出物を含有する皮膚外用剤。
【選択図】図1
Description
血管系の疾病は日本人の主な死因であることから、「人は血管と共に老いる」と言われている。皮膚では、自然老化による血管の減少、光老化による血管壁の肥厚、周囲の炎症が確認されている。また加齢ともに皮膚色は「赤みが減り、明度が下がる」と言われており、加齢による毛細血管の減少や血流低下との関係が示唆される。
血管内皮細胞に関しては、高麗人参の実抽出物に血管内皮細胞での一酸化窒素の生成促進、血管内皮細胞の生存改善、血管内皮細胞の移動性増加作用があることが知られている(特許文献3:特開2014−129368号公報)。
(1)アシル化ステロール配糖体を2.7〜4.1質量%、γ−オリザノールを1.4〜2.1質量%、ステアロ・オレオ・レシチン換算で、リン脂質を18〜28質量%含有し、加水分解したときに、加水分解前の質量に対して20〜30質量%のリノール酸、24〜37質量%のオレイン酸、11〜17質量%のパルミチン酸、1.7〜2.6質量%の植物ステロールを含有することを特徴とする米糠抽出物を含有する皮膚外用剤。
(2)アシル化ステロール配糖体を2.7〜4.1質量%、γ−オリザノールを1.4〜2.1質量%、ステアロ・オレオ・レシチン換算で、リン脂質を18〜28質量%含有し、加水分解したときに、加水分解前の質量に対して20〜30質量%のリノール酸、24〜37質量%のオレイン酸、11〜17質量%のパルミチン酸、1.7〜2.6質量%の植物ステロールを含有することを特徴とする米糠抽出物を有効成分とする血管内皮細胞の増殖促進剤。
(1)米糠抽出物を適量秤取し、クロロホルム/メタノール混液(クロロホルム:メタノール=2:1)を加え、メスフラスコにてメスアップする。
(2)(1)で得られた溶液は成分濃度に応じて適宜希釈し、分析用試料溶液とする。
(3)標品はEsterified Steryl Glucoside(フナコシ)とし、高速液体クロマトグラフ法によりアシル化ステロール配糖体の濃度を算出する。
(4)高速液体クロマトグラフ法による分析条件
分析装置:HPLC
移動相A:メタノール:水 = 95:5(v/v)
移動相B:クロロホルム = 100(v/v)
ポンプ:Model 582
solvent delivery system
分析カラム:LiChrospher Si60(5μm)
HPLC−Cartridge(MERCK)
検出器:荷電化粒子検出器(コロナ ダイオネクス社)
Injection Volume:20μL
カラムオーブン:40℃(FLO社 model 502)
分析時間:40min
脱泡装置:uniflows Degasys
Ultimate DV 3003
流速:1mL/min
グラジェント条件
以下に示すとおり
0−15分
移動相A:1% → 25%、移動相B: 99% → 75%
15−20分
移動相A:25% → 90%、移動相B: 75% → 10%
20−25分
移動相A:90%、 移動相B: 10%
25−30分
移動相A:90% → 1%、 移動相B: 10% → 99%
30−40分
移動相A:1%、 移動相B: 99%
γ−オリザノールは、米糠の脂質に含有されるフェルラ酸とステロールのエステルであり、またフェルラ酸24−メチレンシクロアルテニル、フェルラ酸シクロアルテニル、フェルラ酸カンペステリル、フェルラ酸β−シトステリル等の混合物である。
また、具体的な抽出操作を以下に示す。
市場に流通している米糠を選別した後に、ノルマルヘキサンなどの溶媒を用いて脱脂する。得られた油、脱脂糠等の粗原料を蒸留装置により脱溶媒し、さらにノルマルヘキサン、アセトン、エタノール、水などの溶媒によって抽出する。かくして得られた抽出液を、脱溶剤装置を用いて再度脱溶剤することで米糠抽出物を得ることができる。
本発明の皮膚外用剤には、一般的に皮膚外用剤に用いられる保湿剤、油剤、界面活性剤、増粘剤、抗菌剤等の成分を用いることができる。
市場に流通している米糠を選別し胚乳や異物を除いた米糠を得た。得られた選別済みの米糠10kgに対して50Lのノルマルヘキサンを用い脱脂した。この脱脂作業を1回繰り返し、脱脂米糠を得た。得られた脱脂米糠から蒸留装置により溶媒を除去した。
得られた脱脂米糠8kgに対し、50Lの割合でエタノールを用いて70±3℃の温度条件にて1時間還流抽出した。これを3回繰り返し、得られた抽出液について、脱溶剤装置を用いてエタノールを除去した。米糠抽出物中のアシル化ステロール配糖体、γ−オリザノール、ステアロ・オレオ・レシチン換算のリン脂質の濃度並びに、加水分解前の質量に対する、加水分解後のリノール酸、オレイン酸、パルミチン酸、植物ステロールの濃度を下記の表1に示す。
試料
製造例1の米糠抽出物
米胚芽油(米胚芽油ガンマ30N(トリグリセライドを70質量%、γ−オリザノール30質量%含有 築野食品工業(株)製))
DMSO(実施例1の米糠抽出物および米胚芽油ガンマ30N希釈用、並びに対照試料)
正常ヒト微小血管内皮細胞(HMVEC)をhFGF−B不含培地を用いて播種後、翌日各試料含有培地を追添加し、さらに3日培養を行った。
試料は、製造例1の米糠抽出物と米胚芽油それぞれ、培地中の濃度が0.001%、0.01%となるように添加した。製造例1の米糠抽出物と米胚芽油はDMSOに溶解して培地に添加した。DMSOの培地中の濃度は1%とした。DMSOのみ、培地中に1%添加したものをコントロールとした。各試料の検体数は3(n=3)とした。
3日培養後、Hoechst33342試薬によって細胞のDNAを染色し、蛍光強度(Ex=355nm, Em=460nm)を測定した。蛍光強度はDNA量すなわち細胞の量に比例する。
コントロールの蛍光強度を100としたときの、各検体の蛍光強度の相対値を図1に示す。製造例1の米糠抽出物は濃度依存的に正常ヒト微小血管内皮細胞の増殖を促進した。製造例1の米糠抽出物と米胚芽油を比較すると、0.01%添加時において、4倍((135.5−100)÷(108.7−100))の細胞増殖効果を示した。製造例1の米糠抽出物を0.01%添加した試験結果のコントロールに対するT−Testはp<0.05であった。
(成分) (質量%)
1. トコフェリルリン酸ナトリウム 1.2
2. ポリオキシブチレンポリオキシエチレンポリオキシプロピレングリセリルエーテル
(3B.O.)(8E.O.)(5P.O.) 3
3. グリセリン 3
4. 精製水 0.2
5. オクタン酸セチル 12
6. 製造例1の米糠抽出物 0.01
7. ジプロピレングリコール 4
8. 1,3−ブチレングリコール 4
9. ベタイン 3
10. キサンタンガム 0.1
11.ローカストビーンガム 0.1
12.カルボキシビニルポリマー 0.1
13.水酸化カリウム 0.03
14.フェノキシエタノール 0.2
15.精製水 残余
(製法)
80℃で混合した成分1〜4の中に、80℃で混合した成分5、6を徐々に加えて混合し、次に80℃に加熱した成分7〜15を加え、冷却して乳液とする。
得られた乳液を1か月連用した結果、血色が改善し、肌が明るくなった。
(成分) (質量%)
1. マカデミアナッツ油 5
2. トリオクタノイン 5
3. ホホバ油 3
4. 製造例1の米糠抽出物 0.1
5. ベヘニルアルコール 1
6. モノステアリン酸ポリオキシエチレンソルビタン(20EO) 1.5
7. モノステアリン酸グリセリル 1
8. グリセリン 4
9. ジプロピレングリコール 4
10.1,3−ブチレングリコール 4
11.ベタイン 3
12.キサンタンガム 0.2
13.フェノキシエタノール 0.2
14.精製水 残余
(製法)
成分1〜7を80度で撹拌混合して油相を調製する。成分8〜14を80度で撹拌混合して水相を調製する。80度で油相に水相を添加してホモミキサーで乳化し、クリームを調製する。
得られたクリームを1か月連用した結果、血色が改善し、肌が明るくなった。
Claims (2)
- アシル化ステロール配糖体を2.7〜4.1質量%、γ−オリザノールを1.4〜2.1質量%、ステアロ・オレオ・レシチン換算で、リン脂質を18〜28質量%含有し、加水分解したときに、加水分解前の質量に対して20〜30質量%のリノール酸、24〜37質量%のオレイン酸、11〜17質量%のパルミチン酸、1.7〜2.6質量%の植物ステロールを含有することを特徴とする米糠抽出物を含有する皮膚外用剤。
- アシル化ステロール配糖体を2.7〜4.1質量%、γ−オリザノールを1.4〜2.1質量%、ステアロ・オレオ・レシチン換算で、リン脂質を18〜28質量%含有し、加水分解したときに、加水分解前の質量に対して20〜30質量%のリノール酸、24〜37質量%のオレイン酸、11〜17質量%のパルミチン酸、1.7〜2.6質量%の植物ステロールを含有することを特徴とする米糠抽出物を有効成分とする血管内皮細胞の増殖促進剤。
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