JP2015518407A - 発泡性組成物を容器に充填する方法 - Google Patents

Abstract

本発明は、ガスマイクロバブルを含む組成物を調製する方法に関する。より詳細には、本発明はその組成物を容器に充填する方法に関する。調製された組成物は、好ましくは、容器に入った状態で利用可能になった超音波造影剤組成物であり、容器のヘッドスペースはマイクロバブルのガスと同じガスを含む。【選択図】なし

Description

本発明は、ガスマイクロバブルを含む組成物を調製する方法に関する。より詳細には、本発明は容器にその組成物を充填する方法に関する。調製された組成物は、好ましくは、容器に入った状態で利用可能になった超音波造影剤組成物であり、容器のヘッドスペースにはマイクロバブルのガスと同じガスが含まれ、このガスは空気とは異なる。

超音波撮像には、例えば特に心拍動記録法での血管系の研究、及び組織微小血管系の研究において有用な診断ツールが用いられることがよく知られている。このようにして得られた聴覚画像を明瞭にするために様々な超音波造影剤が提案されており、固体粒子の懸濁液、乳化液滴、気泡及びカプセル化されたガス又は液体などがある。最も成功した超音波造影剤は、通常、静脈内注射できるガスの小気泡の分散体から構成されている。もし適切に安定化できれば、マイクロバブルによって、多くの場合有利に低用量で、例えば血管系及び組織微小血管系の非常に有効な超音波可視化が可能になり得る。このような造影剤は、典型的には、ガス分散体を安定化させる物質、例えば乳化剤、油、増粘剤、もしくは砂糖を含むか、又は例えば多孔性ガス含有微粒子又はカプセル化ガスマイクロバブルとして、様々なシステムにガスを混入又は封入させる。マイクロバブルは、超音波造影剤の性能にとって不可欠な性質を有するガスを含み、様々なガスが、マイクロバブルの安定及びエコー源性効果の持続などの性質を強化することが見出されている。あるグループの超音波造影剤は、ガスマイクロバブルの液体組成物を含む既成の調製物として容器に入った状態で調製され送達される。

ガスマイクロバブルを含むそのような液体組成物では、マイクロバブルは、典型的には空気以外のガスを含んでもよく、空気以外のガスを本明細書では分散ガスと呼び、フッ素化ガスなどがある。保存中にマイクロバブルからの分散ガスの漏出を補ったり、回避したりするために、容器のヘッドスペースには、通常マイクロバブルで使用されるものと同じガスであるヘッドスペースガスが充填されている。これがされていなければ、マイクロバブルが漏れるので、時間が経つにつれて、マイクロバブル内の所定量のガスは所望の分散ガスではなく相当量の空気を含むことになる。承認された液体超音波造影剤は、典型的には、ヘッドスペースガスの何パーセントがマイクロバブルガスである必要があるかについて規定されている。そのために、造影剤を製造する際には、充填法は、典型的には、造影剤を充填した後の容器にヘッドスペースガスであるパージガスを送達し、ヘッドスペース内の空気を除去した後に、外栓をする工程を含む。しかしながら、本出願人は、そのように造影剤を調製する際、問題に直面した。造影剤が充填された容器の完全に全てが、確実に、ヘッドスペースに必要量のヘッドスペースガスを含むことが困難であることが分かった。規定に満たないことが分かると、容器や通常バッチ全体を廃棄しなければならない。既存の製造方法では、マイクロバブルの懸濁液を含む調製された造影剤組成物を、バルク容器からポンプで吸い上げ、バイアルに分注した。その後、中栓及び外栓をバイアルの口に取り付ける前に、バイアルの内部及び周囲に、空気より重いヘッドスペースガスを吹き付けることによりバイアルから空気を除去した。しかし、本出願人が直面した問題は、容器に造影剤を充填する時、恐らくベンチュリ効果の結果、空気を含んだ泡沫及び大きな気泡が生成されることがあり、このような大きな気泡は、ヘッドスペースガスを容器に送達する際に残存した。その結果、ヘッドスペースに必要量のヘッドスペースガスが常に得られるとは限らなかった。このような大きな気泡内の空気を分散ガスに置換する方法など、この気泡を取り除く方法をいくつか試したが失敗した。当該技術分野で今もなお必要とされていることは、ヘッドスペースのヘッドスペースガスの量に対する要件を満たした、液体キャリアにガスマイクロバブルを含む組成物が充填された容器を調製する方法である。

米国特許第６，２２０，３１０号明細書

当該技術分野での必要性から、本発明は、ガスマイクロバブルを含む組成物を容器に充填することを含む方法を提供し、充填された各容器について、容器のヘッドスペース内のヘッドスペースガスの量に関する規定を満たすことを保証する。本出願人は、驚くべきことに、造影剤を容器に充填した後、充填容器のヘッドスペースの空気をヘッドスペースガスで置換するより、ヘッドスペースガスをまず空の容器に送達することで容器全体の空気をヘッドスペースガスで置換し、その後容器に組成物を充填することが有利であることを見出した。

第１の態様では、本発明は、液体キャリアにガスマイクロバブルを含む組成物が充填された容器を調製する方法を提供し、この方法は、順に、
ａ）ヘッドスペースガスをパージして容器から空気を除去する工程と、次いで
ｂ）容器に組成物を充填する工程とを含む。

ヘッドスペースガスで空の容器をプレパージフラッシュ（ｐｒｅ ｐｕｒｇｅ ｆｌｕｓｈｉｎｇ）することを含むそのような充填法を使用することによって、気泡は生成されず、組成物が充填された全ての容器がヘッドスペース内のガスに関する規定要件を満たすことが分かった。

この方法は、さらに、充填容器の口に中栓を挿入するか、かつ／又は外栓を取り付けるか、かつ／又は中栓及び／又は外栓の上に圧着されるオーバーシール（ｏｖｅｒ ｓｅａｌ）を取り付けることなどによって、工程ｂ）の後に容器を閉じる任意の工程を含む。本発明の方法で使用される容器は、バイアル、ボトル又は袋である。容器は、ガラス製、又は透明もしくは不透明なプラスチックなどのプラスチック製であってもよく、硬質又は軟質のプラスチック容器のいずれであってもよい。容器のサイズは、例えば３ｍｌ〜５００００ｍｌであり、好ましくは３〜５００ｍｌのバイアル又はボトルである。最も好ましくは、容器は、１回分又は少なくとも１回分の投与量を含む。

組成物は、容器に充填する場合、既成の調製物であり、すなわち、組成物は、注射用水などの生理学的に許容される水性キャリア中のガスマイクロバブルの分散体が好ましい。組成物は、ヒト又は動物である患者に注射できる状態になっているが、注射前に軽く振るだけで均質な懸濁液を得ることができる。組成物は治療用又は診断用のいずれであっても、両用であってもよく、超音波造影剤としては診断用が好ましい。ガスマイクロバブルを含む造影剤が好ましい。なぜなら、マイクロバブル分散体は、適切に安定化できれば、マイクロバブルの低密度及び圧縮容易性から特に効果的な超音波後方散乱体であるからである。マイクロバブルが生物学的標的に対して親和性を有するベクターを含む超音波造影剤も包含される。

本発明の方法で使用されるガスマイクロバブルは、ガスマイクロバブルを包囲できる安定化剤によって安定化され、周囲の液体へのガスの拡散を遅らせ、さらにマイクロバブル同士の結合を防ぐ。また、凝固の途中でガスを取り込み、懸濁液で最初に形成されるゼラチン又はアルブミンマイクロバブルの使用を含むものなど種々の組成物が包含される。或いは、厚いシェル、例えば砂糖、又は他の粘性物質、又は固体粒子、又は乳濁液滴を調製してもよい。米国特許第５，３３４，３８１号のように、別の種類の安定化剤がリン脂質層からできたリポソームに気泡を取り込む。

このような安定化剤は、界面活性剤又はより頑丈なシェル物質（ｓｈｅｌｌ ｍａｔｅｒｉａｌ）であってもよく、例えば、多糖類、脂質類及びタンパク質系物質などのポリマーの群から選択される。最も好ましくは、安定化物質として、リン脂質類又はタンパク質系物質、より好ましくは熱変性生体適合性タンパク質、最も好ましくはヒト血清アルブミンが挙げられる。

生体適合性ガスは、組成物のマイクロバブル及び本発明の第１の工程で用いられてもよい。本発明の第１の工程で使用されるヘッドスペースガスは、マイクロバブルの分散ガスと同じガスが好ましく、用語「ガス」、「分散ガス」及び「ヘッドスペースガス」は、３７℃の正常なヒトの体温で実質的に又は完全に気体（蒸気を含む）状のあらゆる物質（混合物を含む）を含むことを理解されたい。したがって、ガスとして、例えば、窒素、酸素、二酸化炭素、水素、亜酸化窒素、不活性ガス、例えば、ヘリウム、アルゴン、キセノン又はクリプトン；六フッ化硫黄、十フッ化二硫黄又はトリフルオロメチル硫黄ペンタフルオリドなどのフッ化硫黄；六フッ化セレン；テトラメチルシランなどのハロゲン化されていてもよいシラン；低分子量炭化水素（例えば、炭素原子数が７以下）、例えばメタン、エタン、プロパン、ブタン又はペンタンなどのアルカン、シクロブタン又はシクロペンタンなどのシクロアルカン、プロペン又はブテンなどのアルケン、アセチレンなどのアルキン；エーテル；ケトン；エステル；ハロゲン化低分子量炭化水素（例えば、炭素原子数が７以下）；又は上記物質のいずれかの混合物が挙げられる。

ハロゲン化低分子量炭化水素を含む組成物が好ましい。ハロゲン化ガスの少なくとも一部のハロゲン原子がフッ素原子であることが有利である。したがって、生体適合性ハロゲン化炭化水素ガスは、例えば、ブロモクロロジフルオロメタン、クロロジフルオロメタン、ジクロロジフルオロメタン、ブロモトリフルオロメタン、クロロトリフルオロメタン、クロロペンタフルオロエタン、ジクロロテトラフルオロエタン、及びペルフルオロカーボン、例えばペルフルオロメタン、ペルフルオロエタン、ペルフルオロプロパン、ペルフルオロブタン（例えば、ペルフルオロイソブタンなどの他の異性体と混合していてもよいペルフルオロｎ−ブタン）、ペルフルオロペンタン、ペルフルオロヘキサン及びペルフルオロヘプタンなどのペルフルオロアルカン；ペルフルオロプロペン、ペルフルオロブテン（例えばペルフルオロブタ−２−エン）及びペルフルオロブタジエンなどのペルフルオロアルケン；ペルフルオロブタ−２−インなどのペルフルオロアルキン；ペルフルオロシクロブタン、ペルフルオロメチルシクロブタン、ペルフルオロジメチルシクロブタン、ペルフルオロトリメチルシクロブタン、ペルフルオロシクロペンタン、ペルフルオロメチルシクロペンタン、ペルフルオロジメチルシクロペンタン、ペルフルオロシクロヘキサン、ペルフルオロメチルシクロヘキサン、及びペルフルオロシクロヘプタンなどのペルフルオロシクロアルカンから選択してもよい。他のハロゲン化ガスとして、ペルフルオロアセトンなどの、フッ素化ケトン、例えばペルフルオロ化ケトン、及びペルフルオロジエチルエーテルなどの、フッ素化エーテル、例えばペルフルオロ化エーテルが挙げられる。さらに、特に安定したマイクロバブル懸濁液を形成することが知られているフッ化硫黄又はフルオロカーボン（例えばペルフルオロカーボン）などのフッ素化ガスを含む組成物に本発明の方法を使用することが有利であり、ＳＦ₆、ペルフルオロプロパン及びペルフルオロブタンが好ましく、ペルフルオロプロパンが特に好ましい。

最も好ましくは、本発明の方法は、タンパク質を含み、最も好ましくはアルブミンを含み、それらがペルフルオロカーボンガス、最も好ましくはオクタフルオロプロパン（ＯＦＰ）又はペルフルトレンとも呼ばれるペルフルオロプロパンを封入するマイクロバブルを含む組成物を調製するためのものである。

ヘッドスペースガスが空気より重い本発明の方法が好ましい。ヘッドスペースガスは分散ガスと同じガスが好ましく、分散ガスが保存中にマイクロバブルから漏出するとすれば、又はそのようなことが起こった場合、容器のヘッドスペースガスはこれを補うことになる。ヘッドスペースガスが分散ガスとは異なれば、所定量のマイクロバブルは、時間が経つにつれて、所望の分散ガスではなくヘッドスペースガスを含むことになる。本発明のいくつかの実施形態では、代わりに、ヘッドスペースガスが分散ガスとは異なる。例えば、ヘッドスペースのガスが、分散ガスより沸点が低いガスを含んでもよい。これは、例えば容器を冷蔵庫に入れた場合など、冷却した際にヘッドスペースガスが凝縮しないようにするためである。この実施形態では、例えば沸点が異なる２種の異なるペルフルオロ化炭化水素系ガスのように、２種のガスが同類のものである。別の実施形態では、分散ガスが空気であり、ヘッドスペースガスは別のガスであり、好ましくはフッ素化ガスなどのより重いガスである。したがって、保存中、所定量のマイクロバブルは、もとの空気ではなくヘッドスペースガスを含むことが有利である。

本発明の方法は、マイクロバブルの水性組成物の調製に特に有用であり、マイクロバブルは空気以外のガスを含む。本発明によって調製され得る具体的な超音波造影剤として、例えば、限定ではなく例示を目的として、ＢＲ１４、ＭＰ１９５０、Ｏｐｔｉｓｏｎ（登録商標）及びＰＥＳＤＡが挙げられ、Ｏｐｔｉｓｏｎ（登録商標）が特に好ましい。

本発明の方法で使用される組成物は、ガスマイクロバブルの分散体を作製する別の方法、例えば超音波処理、噴霧乾燥、又はコロイドミル（ローターステータ）の使用などによる力学的エネルギーの負荷によって調製可能である。本発明の一実施形態では、方法は、工程ａ）の前に、安定化物質の溶液、好ましくはヒト血清アルブミンの水溶液と、分散させるガスとを、これらを十分混合させるコロイドミルに供給する方法によって組成物を調製する工程段階を含む。ガスマイクロバブルの均質な分散体が調製されると、これをバルク容器に移す。バルク容器は、例えば１０〜１００Ｌ容量の、例えば柔軟な大きな袋である。本発明の工程ｂ）では、工程ａ）で空気をヘッドスペースガスで置換した容器にバルク容器から組成物を分注する。

別のガス含有造影剤の場合、マイクロバブルに含まれるガスの種類、使用される安定化物質、及びガスの気泡からの拡散容易性によって、容器のヘッドスペースに必要なガスの量、すなわちパーセントに対する要件が異なることがある。本発明の方法によって、充填された各容器について、容器のヘッドスペース内の分散ガスの量に関する規定が満たされる。充填容器のヘッドスペースのガス含有率は、典型的には、ガスクロマトグラフィーによって、例えば、統計的な数量の製造容器内のガスの濃度を測定することによって測定される。本発明の一実施形態では、ヘッドスペースの容積の４０〜１００％、例えば少なくとも５０％、又は好ましくは少なくとも６０％、例えば少なくとも７０％のガス含有率が本発明の方法によって達成される。好ましい実施形態である超音波造影剤のＯｐｔｉｓｏｎ（登録商標）の調製には、本発明の方法を使用することで、ヘッドスペースに少なくとも６０％のペルフルオロプロパンガスという規定要件が満たされる。本発明の方法によって充填された容器では、典型的には、容器の全容積の約２０〜５０％がヘッドスペースである。組成物が充填されると、容器の全容積の好ましくは約４０％がヘッドスペースである。例えば、５ｍｌのバイアルでは、組成物が約３ｍｌで、ヘッドスペースが約２ｍｌとなる。上記のように、容器が組成物で充填されると、このヘッドスペースの４０〜１００％をヘッドスペースガスが占める。

本発明の方法では、ヘッドスペースガスを含むタンクに接続されたパージニードル（ｐｕｒｇｉｎｇ ｎｅｅｄｌｅ）を容器に入れ、空の容器にヘッドスペースガスをプレパージ（ｐｒｅ−ｐｕｒｇｅ）する。パージで空気を除去する場合、容器の底部にニードルを向けることが好ましい。容器からニードルを外す時、パージニードルを取り除く際に空気が入らないようにパージを継続することが好ましい。空の容器には、２００〜８００ｃｃ／分、例えば４００〜６００ｃｃ／分、好ましくは約５００ｃｃ／分の速度でヘッドスペースガスをパージする。必要なガス流速はまた使用するバイアルのサイズによって変わる。ヘッドスペースガスは空気より重いことが好ましいため、組成物を充填する間、ガスは容器内に留まる。組成物を充填する間、泡沫又は大きな気泡が生成することはなく、充填が終了すると、ヘッドスペースガスはきちんと組成物の上にくるようになる。もし充填中に気泡が生成されれば、気泡は使用したパージガスしか含まず、ヘッドスペースガスの含有率は減少しない。容器に組成物を充填する工程は、パージで容器から空気を除去する工程の後に続いて行うことが好ましく、例えば、パージによる空気の除去を終えてから１０秒以内、例えば５秒以内に行う。その後続いて、容器を閉じることが好ましい。本発明の方法を使用すると、泡沫生成の問題がなく迅速に充填を行うことができ、組成物を含む容器を備えた多くのパッケージを毎日調製することができる。本発明の方法を使用すると、例えば容器のサイズなどいくつかの要因に応じて、１時間当たり約２０００〜３０００個の容器に充填することができる。組成物を充填した５ｍｌのバイアルを製造する場合、例えば、１日当たり約２０〜５００００個のバイアルに充填することができ、経済的に採算がとれる方法となる。

本発明の方法を使用すると、泡沫の生成によって充填が中断されることも、容器が廃棄されることもなく、ヘッドスペース内の所定量のヘッドスペースガスに対する要件が達成される。マイクロバブル中のガスとヘッドスペース内のガスが平衡となり、保存中にマイクロバブルが安定するようになる。充填し、外栓をした後に、マイクロバブルは浮き、表面で層を生成し得る。患者に注射する前に均質な懸濁液を得るために、軽く振って再懸濁させることが必要であってもよい。

第２の態様では、本発明は、第１の態様の方法によって調製された組成物を含む容器を提供する。組成物は治療用又は診断用のいずれであっても、両用であってもよく、超音波造影剤としては診断用が好ましい。種々の撮像技術を超音波用途で用いてもよく、例えば、基本波及び高調波のＢモード撮像、並びに基本波及び高調波のドップラー撮像などがある。所望により三次元撮像技術を使用してもよい。相関法に基づく超音波撮像法に造影剤を使用してもよい。

別の態様では、本発明は、液体キャリアにガスマイクロバブルを含む組成物が充填された容器を調製する方法で使用する装置を提供し、装置は、
ｉ）プレパージフラッシング装置、及び
ｉｉ）組成物を容器に分注するための分注機（ｄｉｓｐｅｎｓｅ ｅｎｔｉｔｙ）を含む。

フラッシング装置は、容器にヘッドスペースガスを送達するために、ヘッドスペースガスを含むタンクに接続された少なくとも１つのパージニードルを備えることが好ましい。分注機は、例えば、バルク容器に接続されたチューブを備え、ポンプが、チューブを通してバルク容器から組成物を吸い上げ、容器に分注する。チューブはさらに、容器に充填するためのニードルと接続してもよい。装置は、さらに、天井を介して結合した２つの壁を備えるトンネルを備えることが好ましく、天井は１つ以上の開口部、好ましくは少なくとも２つ備える。トンネルを使用することでベンチュリ効果が減少することが分かっている。パージニードルは、天井の開口部のうちの１つに挿入され、そして容器の口に挿入されるように設計されている。本発明の方法の工程ａ）の前に、空の容器を装置のトンネルに搬送するコンベヤベルトに空の容器を配置し、パージニードルをまずトンネルの開口部に挿入し、そして容器の口に挿入し、容器の底部にニードルを向け、ヘッドスペースガスをパージし容器から空気を除去する。その後、パージを継続しながらパージニードルを外し、その後続いて、好ましくはパージが終了してから数秒以内に、装置の分注機を使用して容器に組成物を充填する。分注機のチューブ、又はチューブに接続された充填ニードルは、トンネルの別の開口部を通して、プレパージにより空気が除去された容器の口に挿入される。一セットの容器がプレパージにより空気が除去されると、容器が充填され、その間に新たなセットの容器がパージされる。続いて、容器に中栓をし、外栓をする。この態様には、ガス及び安定化物質の選択について第１の態様と同じ特徴がある。

ここで、以下の非限定的な実施例を参照して本発明を説明する。

比較例−ポストパージ（ｐｏｓｔ−ｐｕｒｇｅ）による空気の除去を用いた容器へのＯｐｔｉｓｏｎ（登録商標）の充填
グローニンガー充填機（Ｇｒｏｎｉｎｇｅｒ Ｆｉｌｌｉｎｇ Ｍａｃｈｉｎｅ）を使用して、Ｏｐｔｉｓｏｎ（登録商標）充填バイアルに、無菌的に分注し、中栓をし、外栓をし、圧着した。

蠕動ポンプによってバルク容器からＯｐｔｉｓｏｎ溶液を吸い上げ、５００個の３ｍｌのバイアルに分注した。ポンプ速度を１４０ｒｐｍに、ポンプ加速度を１００％に設定した。その後、３００ｃｃ／分の流量でトンネルの内部及びその下にペルフルオロプロパンガス（ＯＦＰ）を流すことにより、バイアルから空気を除去した。その後、グローニンガー充填機により、中栓をし、外栓をし、外栓を圧着した。

ある生産ロットについてヘッドスペースのペルフルオロプロパンを検査する際、９０個の試料を検査し、これらのうち３個がヘッドスペースの少なくとも６０％というヘッドスペースの基準を満たしていなかった。この３個の欠陥試料は、運転の終わりごろに採取された。検査結果を検証するため、反復及び追加の実験室検査を行った。これらの検査では、３個の欠陥ヘッドスペース試料及び数個の合格試料を再検査した。検査結果から、合格試料と欠陥試料の双方がもとの検査と同一であった。この方法を使用して得られたヘッドスペースのペルフルオロプロパンの平均含有率は６５％であった。

バイアルにＯｐｔｉｓｏｎ組成物を充填する際、バイアル内で大きな気泡が認められた。ポストパージの工程で、大きな気泡中のガスはペルフルオロプロパンで置換されなかった。保存中、大きな気泡ははじけ、これらの気泡のガスとヘッドスペースガスが混合した。大きな気泡中のガスが空気であるため、その結果、ヘッドスペースのペルフルオロプロパンガスの総含有率は減少した。気泡がはじけた後、ヘッドスペースのペルフルオロプロパン含有率について、大きな気泡を含むバイアルを検査した。大きな気泡を含むバイアルは全て、ヘッドスペースのペルフルオロプロパンの規格を満たしておらず、ヘッドスペースの４０％がペルフルオロプロパンという低い値であった。

プレパージで空気を除去する特許請求する方法を用いた容器へのＯｐｔｉｓｏｎ（登録商標）の充填
グローニンガー充填機を使用して、Ｏｐｔｉｓｏｎ（登録商標）充填バイアルに、無菌的に分注し、中栓をし、外栓をし、圧着した。

実施例１に記載される調査研究により、充填後パージ（ｐｏｓｔ ｆｉｌｌ ｐｕｒｇｅ）の使用では、ヘッドスペースのペルフルオロプロパン含有率を最適化できないことが示された。しかし、充填前に、空のバイアルに、５００ｃｃ／分のパージ速度でペルフルオロプロパンを充填前パージ（ｐｒｅ−ｆｉｌｌ ｐｕｒｇｅ）すると、ヘッドスペースのペルフルオロプロパン含量率が著しく改善することが分かった。

５００個の３ｍｌのバイアル（空のバイアル）の内部及び周囲に、５００ｃｃ／分の流量でペルフルオロプロパンガスを吹き付けることにより、バイアルから空気を除去した。その後、蠕動ポンプによってバルク容器からＯｐｔｉｓｏｎ溶液を吸い上げ、バイアルに分注した。ポンプ速度を１００ｒｐｍに、ポンプ加速度を５０％に設定した。その後、グローニンガー充填機により、中栓をし、外栓をし、外栓を圧着した。

５００個のバイアルのうち９０個のバイアルについて、工程の途中にヘッドスペースを分析するために取り出し、生成されている大きな気泡を検査した。

この充填前パージ工程を行うために、製品充填ニードルを、ある位置から、充填後ペルフルオロプロパンパージニードルがこれまで配置されていた下方の位置まで移動させた。パージの間、パージニードルをバイアルの底部まで下げた。充填前パージニードルと製品充填ニードルをこの位置にすることで、ヘッドスペースのペルフルオロプロパンをさらに最適化した。

このプレパージ法を使用して得られたヘッドスペースのペルフルオロプロパンの平均含有率は７５％であった。したがって、ペルフルオロプロパンガスを３００ｃｃ／分で分注バイアルに充填後パージする代わりに、５００ｃｃ／分で空のバイアルにプレパージすることにより、平均値が６５％から７５％まで改善されることが確認された。全てバイアルが、ヘッドスペースの少なくとも６０％というヘッドスペースの基準を満たした。さらに、ヘッドスペースのペルフルオロプロパンのばらつきが少なくなったことが分かり、標準偏差が７．４から１．９に減少した。

重要なことは、パージの間、パージニードルをバイアルの底部まで下げ、空気を追い出せたことであった。もしニードルをバイアルの首の上部までしか下げなかったら、ペルフルオロプロパンはバイアル内のガスと混合し、空気を追い出せなかったであろう。この方法の使用を使用することで、充填中に生成される大きな気泡はいずれも空気ではなくペルフルオロプロパンを含み、ヘッドスペースのペルフルオロプロパン含有率が減少することはない。

工程能力の計算は、充填バイアルからのデータに対して６シグマリミットを使用して行った。その結果、充填法は安定しており、推奨のプレパージパラメーターを使用して欠陥となるバイアルはなかった。

Claims (11)

1. 液体キャリアにガスマイクロバブルを含む組成物が充填された容器を調製する方法であって、
   ａ）ヘッドスペースガスをパージして容器から空気を除去する工程と、次いで
   ｂ）容器に組成物を充填する工程と
   を上記順序で含む、方法。
2. 工程ａ）で使用したヘッドスペースガスが、マイクロバブルのガスと同じガスである、請求項１記載の方法。
3. ヘッドスペースガスが空気より重い生体適合性ガスである、請求項１又は２記載の方法。
4. ヘッドスペースガスがハロゲン化ガスである、請求項１乃至請求項３のいずれか１項記載の方法。
5. マイクロバブルが、ポリマーである安定化物質を含む、請求項１乃至請求項４のいずれか１項記載の方法。
6. マイクロバブルの安定化物質がタンパク質系材料である、請求項１乃至請求項５のいずれか１項記載の方法。
7. 容器を閉じる工程をさらに含む、請求項１乃至請求項６のいずれか１項記載の方法。
8. ヘッドスペースの容積の４０〜１００％をヘッドスペースガスが占める容器を提供する、請求項１乃至請求項７のいずれか１項記載の方法。
9. 工程ａ）で、２００〜８００ｃｃ／分の速度でヘッドスペースガスを空の容器にパージする、請求項１乃至請求項８のいずれか１項記載の方法。
10. 水性キャリアにガスマイクロバブルを含む組成物が充填された容器を調製する方法で使用する装置であって、
    ｉ）プレパージフラッシング装置、及び
    ｉｉ）組成物を容器に分注するための分注機
    を備える装置。
11. ２つの壁及び天井を備えるトンネルをさらに備え、天井が開口部を備え、フラッシング装置のパージニードルを開口部及び容器に挿入することができる、請求項１０記載の装置。