JP2014502150A - 神経疾患免疫治療のための方法及び組成物 - Google Patents
神経疾患免疫治療のための方法及び組成物 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2014502150A JP2014502150A JP2013538846A JP2013538846A JP2014502150A JP 2014502150 A JP2014502150 A JP 2014502150A JP 2013538846 A JP2013538846 A JP 2013538846A JP 2013538846 A JP2013538846 A JP 2013538846A JP 2014502150 A JP2014502150 A JP 2014502150A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- antibody
- seq
- hvr
- bace1
- amino acid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/40—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
- A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
- A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
- A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
- A61K47/6871—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting an enzyme
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
- A61P21/02—Muscle relaxants, e.g. for tetanus or cramps
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
- A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/20—Hypnotics; Sedatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
- A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/02—Ophthalmic agents
- A61P27/06—Antiglaucoma agents or miotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
- C12P21/005—Glycopeptides, glycoproteins
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/573—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for enzymes or isoenzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/51—Complete heavy chain or Fd fragment, i.e. VH + CH1
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/515—Complete light chain, i.e. VL + CL
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Ophthalmology & Optometry (AREA)
- Psychology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
Abstract
Description
この出願は、2010年11月10日に出願された米国仮出願第61/456,642号、2010年11月30日に出願された米国仮出願第61/418,310号、2010年12月1日に出願された米国仮出願61/418,850第、及び2010年12月22日に出願された米国仮出願第61/426,425号の優先権を主張するものであり、その全てをそれらの全体において出典明記によりここに援用する。
本発明は一般的に、BACE1アンタゴニストであって例えばBACE1活性を阻害又は低下する抗体、及びこのような抗体を含んでなる組成物に関する。更なる実施態様は、様々な神経学的疾患又は障害の治療及び診断のための方法、並びに患者におけるAPP及び/又はAβポリペプチドを低減する方法を含む。
から成る群から選択されるアミノ酸配列を有する可変重(VH)鎖を含む抗体が提供される。一態様では、抗体は配列番号:21のVH鎖アミノ酸配列を含む。
I.定義
ここでの目的のための「アクセプターヒトフレームワーク」は、下に定義するヒト免疫グロブリンフレームワーク又はヒトコンセンサスフレームワーク由来の軽鎖可変ドメイン(VL)フレームワーク又は重鎖可変ドメイン(VH)フレームワークのアミノ酸配列を含んでなる。ヒト免疫グロブリンフレームワーク又はヒトコンセンサスフレームワーク「由来の」アクセプターヒトフレームワークは、その同じアミノ酸配列を含んでもよく、又はアミノ酸配列変化を有してもよい。幾つかの実施態様では、アミノ酸変化の数は、10以下、9以下、8以下、7以下、6以下、5以下、4以下、3以下、又は2以下である。幾つかの実施態様では、VLアクセプターヒトフレームワークは、VLヒト免疫グロブリンフレームワーク配列又はヒトコンセンサスフレームワーク配列と配列において同一である。
分率X/Yの100倍
ここで、Xは配列アラインメントプログラムALIGN-2のA及びBのプログラムアラインメントによって同一であると一致したスコアのアミノ酸残基の数であり、YはBの全アミノ酸残基数である。アミノ酸配列Aの長さがアミノ酸配列Bの長さと異なる場合、AのBに対する%アミノ酸配列同一性は、BのAに対する%アミノ酸配列同一性とは異なることは理解されるであろう。特に断らない限りは、ここでの全ての%アミノ酸配列同一性値は、直ぐ上のパラグラフに示したようにALIGN-2コンピュータプログラムを用いて得られる。
MAQALPWLLLWMGAGVLPAHGTQHGIRLPLRSGLGGAPLGLRLPRETDEEPEEPGRRGSFVEMVDNLRGKSGQGYYVEMTVGSPPQTLNILVDTGSSNFAVGAAPHPFLHRYYQRQLSSTYRDLRKGVYVPYTQGKWEGELGTDLVSIPHGPNVTVRANIAAITESDKFFINGSNWEGILGLAYAEIARPDDSLEPFFDSLVKQTHVPNLFSLQLCGAGFPLNQSEVLASVGGSMIIGGIDHSLYTGSLWYTPIRREWYYEVIIVRVEINGQDLKMDCKEYNYDKSIVDSGTTNLRLPKKVFEAAVKSIKAASSTEKFPDGFWLGEQLVCWQAGTTPWNIFPVISLYLMGEVTNQSFRITILPQQYLRPVEDVATSQDDCYKFAISQSSTGTVMGAVIMEGFYVVFDRARKRIGFAVSACHVHDEFRTAAVEGPFVTLDMEDCGYNIPQTDESTLMTIAYVMAAICALFMLPLCLMVCQWCCLRCLRQQHDDFADDISLLK(配列番号:49)
一態様では、発明は、一つには、BACE1に結合し、BACE1活性を低減及び/又は阻害する抗体に基づく。ある実施態様では、BACE1の活性部位又はエキソサイトに結合する抗体が提供される。
一態様では、発明は、(a)配列番号:22、23、26、28、45、68、71、72、73又は120のアミノ酸配列を含んでなるHVR-H1;(b)配列番号:24、29、46、69、74、75、76、77、78又は121のアミノ酸配列を含んでなるHVR-H2;(c)配列番号:25、30、47、70、79又は122のアミノ酸配列を含んでなるHVR-H3;(d)配列番号:7、8、17、35又は42のアミノ酸配列を含んでなるHVR-L1;(e)配列番号:9、10、18、36−39、41、43、56、58、59、60、61、62、63、64又は118のアミノ酸配列を含んでなるHVR-L2;及び(f)配列番号:11−16、19、40、44、57、65、66、67又は119のアミノ酸配列を含んでなるHVR-L3から選択される少なくとも1、2、3、4、5、又は6のHVRを含んでなる抗BACE1抗体を提供する。
HVR-H1(配列番号:26):位置5及び8;
HVR-L1(配列番号:17):位置5、7、8、9及び10;
HVR-L2(配列番号:18):位置1又はHVR-L2(配列番号:41)位置1及び4;及び
HVR-L3(配列番号:19):位置3、4、5、6、7及び8。
HVR-H1(配列番号:26):位置5にセリン又はロイシン及び位置8にアラニン又はグリシン;
HVR-L1(配列番号:17):位置5にアスパラギン酸又はバリン;位置7にセリン又はアラニン;位置8にスレオニン又はアスパラギン;位置9にセリン又はアラニン及び位置10にバリン又はロイシン;
HVR-L2(配列番号:18):位置1にセリン又はロイシン又はHVR-L2(配列番号:41)位置1にセリン、チロシン又はトリプトファン又は位置4にチロシン、セリン又はトリプトファン;及び
HVR-L3(配列番号:19):位置3にセリン、フェニルアラニン、グリシン、アスパラギン酸又はチロシン;位置4にチロシン又はプロリン、位置5にセリン、アラニン、スレオニン又はアスパラギン;位置6にチロシン、スレオニン、アスパラギン酸又はセリン、位置7にアスパラギン酸、セリン、プロリン又はロイシン及び位置8にプロリン又はスレオニン。
HVR-H1(配列番号:26):S5L及びA8G;
HVR-L1(配列番号:17):D5V;S7A;T8N;S9A及びV10L;
HVR-L2(配列番号:18):S1L又はHVR-L2(配列番号:41)位置S1W又はY及びS4W;及び
HVR-L3(配列番号:19):位置S3F、G、D又はYl;Y4P、S又はA;T5N;T6Y、D又はS;P7L及びP8T。
HVR-H1(配列番号:120):位置2、3、5、6、7及び8;
HVR-H2(配列番号:121):位置1、2、6、7、9、10、及び11;
HVR-H3(配列番号:122)位置1、3、4、5、6、7、及び8
HVR-L1(配列番号:42):位置5、7、8、9及び10;
HVR-L2(配列番号:118):位置1、4、5及び7;及び
HVR-L3(配列番号:119):位置3、4、5、6、7及び8。
ある実施態様では、ここに提供されるように置換は保存的置換である。
ある実施態様では、ここに提供される抗体は、≦1μM、≦100nM、≦10nM、≦1nM、≦0.1nM、≦0.01nM、又は≦0.001nM(例えば10−8M以下、例えば10−8M〜10−13M、例えば10−9M〜10−13M)の解離定数(Kd)を有する。
ある実施態様では、ここに提供される抗体は抗体断片である。抗体断片は、限定しないが、Fab、Fab'、Fab'-SH、F(ab')2、Fv、及びscFv断片、及び以下に記載の他の断片を含む。所定の抗体断片の概説については、Hudson等 Nat. Med. 9:129-134 (2003)を参照のこと。scFv断片の概説については、例えばPluckthun, The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, vol. 113, Rosenburg及びMoore編,(Springer-Verlag, New York), pp. 269-315 (1994)を参照のこと;また国際公開第93/16185号;及び米国特許第5571894号及び第5587458号を参照のこと。サルベージレセプター結合エピトープ残基を含みインビボ半減期が増加したFab及びF(ab')2断片の検討については、米国特許第5869046号を参照のこと。
ある実施態様では、ここで提供される抗体はキメラ抗体である。あるキメラ抗体は、例えば米国特許第4816567号;及びMorrison等, PNAS USA, 81:6851-6855 (1984)に記載されている。一例では、キメラ抗体は非ヒト可変領域(例えば、マウス、ラット、ハムスター、ウサギ、又は非ヒト霊長類、例えばサル由来の可変領域)とヒト定常領域を含む。更なる例では、キメラ抗体はクラス又はサブクラスが親抗体のものとは変化せられた「クラススイッチ」抗体である。キメラ抗体はその抗原結合断片を含む。
ある実施態様では、ここで提供される抗体はヒト抗体である。ヒト抗体は、当該技術分野で知られている様々な技術を使用して産生せしめることができる。ヒト抗体は、一般的に、van Dijk及びvan de Winkel, Curr. Opin. Pharmacol. 5: 368-74 (2001)及びLonberg, Curr. Opin. Immunol. 20:450-459 (2008)に記載されている。
本発明の抗体は、所望の活性を有する抗体についてコンビナトリアルライブラリーをスクリーニングすることにより単離することができる。例えば、ファージディスプレイライブラリーを作製し、所望の結合特性を有する抗体について、そのようなライブラリーをスクリーニングするための様々な方法が当該技術分野で知られている。このような方法は、例えばHoogenboom等 Methods in Molecular Biology 178:1-37 (O'Brien等編, Human Press, Totowa, NJ, 2001)において概説され、更に例えばMcCafferty等, Nature 348:552-554;Clackson等, Nature 352: 624-628 (1991);Marks等, J. Mol. Biol. 222: 581-597 (1992);Marks及びBradbury, Methods in Molecular Biology 248:161-175(Lo編, Human Press, Totowa, NJ, 2003);Sidhu等, J. Mol. Biol. 338(2): 299-310 (2004);Lee等, J. Mol. Biol. 340(5): 1073-1093 (2004);Fellouse, PNAS USA 101(34): 12467-12472 (2004);及びLee等, J. Immunol. Methods 284(1-2): 119-132(2004)に記載されている。
ある実施態様では、ここで提供される抗体は多重特異性抗体、例えば二重特異性抗体である。多重特異性抗体は、少なくとも二つの異なる部位に対して結合特異性を有するモノクローナル抗体である。ある種の実施態様では、結合特異性の一つはBACE1に対してであり、他方は任意の他の抗原に対してである。ある実施態様では、二重特異性抗体は、BACE1の二つの異なるエピトープに結合しうる。また二重特異性抗体はBACE1を発現する細胞に細胞傷害剤を局在化させるために使用することができる。二重特異性抗体は、完全長抗体又は抗体断片として調製することができる。
ある実施態様では、ここに提供される抗体のアミノ酸配列変異体が考えられる。例えば、抗体の結合親和性及び/又は他の生物学的性質を改善させることが望ましい場合がある。抗体のアミノ酸配列変異体は、抗体をコードするヌクレオチド配列中に適切な修飾を導入して、又はペプチド合成により調製されうる。そのような修飾は、抗体のアミノ酸配列内の残基の、例えば、欠失、及び/又は挿入及び/又は置換を含む。最終コンストラクトが所望の特性、例えば抗原結合性を有している限り、欠失、挿入、及び置換をどのように組合せて、最終コンストラクトに到達してもよい。
ある実施態様では、一又は複数のアミノ酸置換を有する抗体変異体が提供される。置換突然変異誘発のために関心ある部位はHVR及びFRを含む。保存的置換は、「保存的置換」と題して表1に示す。より実質的な変化は「例示的置換」との項目で表1に提供され、アミノ酸側鎖クラスを基準にして以下に更に記載される。アミノ酸置換は関心ある抗体に導入され得、生成物が所望の活性、例えば保持された/改善された抗原結合性、低減した免疫原性、改善されたADCC又はCDCについて、スクリーニングされる。
(1)疎水性:ノルロイシン、Met、Ala、Val、Leu、Ile;
(2)中性親水性:Cys、Ser、Thr、Asn、Gln;
(3)酸性:Asp、Glu;
(4)塩基性:His、Lys、Arg;
(5)鎖配向に影響を及ぼす残基:Gly、Pro;
(6)芳香族:Trp、Tyr、Phe。
ある実施態様では、ここで提供される抗体は、抗体がグリコシル化される度合いを増大又は減少させるように改変される。抗体へのグリコシル化部位の付加又は欠失は、アミノ酸配列を、一又は複数のグリコシル化部位が作られ又は除去されるように改変させることによって、簡便に達成されうる。
ある実施態様では、一又は複数のアミノ酸修飾が、ここに提供される抗体のFc領域に導入され、それによりFc領域変異体を産生せしめてもよい。Fc領域変異体は、一又は複数のアミノ酸位置にアミノ酸修飾(例えば、置換)を含んでなるヒトFc領域配列(例えば、ヒトIgG1、IgG2、IgG3、又はIgG4Fc領域)を含みうる。
ある実施態様では、システイン操作抗体、例えば抗体の一又は複数の残基がシステイン残基で置換される「thioMAbs」を作ることが望ましいことがある。特定の実施態様では、置換される残基が抗体の接近可能な部位で生じる。これらの残基をシステインと置換することによって、反応性チオール基が抗体の接近可能な部位に位置させられ、抗体を他の部分、例えば薬剤部分又はリンカー薬剤部分に結合させ、ここで更に記載されるように免疫コンジュゲートを作るために使用されうる。ある実施態様では、以下の残基の任意の一又は複数がシステインと置換されうる:軽鎖のV205(カバット番号付け);重鎖のA118(EU番号付け);及び重鎖Fc領域のS400(EU番号付け)。システイン操作抗体は、例えば米国特許第7521541号に記載されるようにして、産生されうる。
ある実施態様では、ここに提供される抗体は、当該技術分野において知られ直ぐに利用できる更なる非タンパク質性部分を含むように更に修飾することができる。抗体の誘導体化に適した部分は、限定しないが、水溶性ポリマーを含む。水溶性ポリマーの非限定的な例には、限定されるものではないが、ポリエチレングリコール(PEG)、エチレングリコール/プロピレングリコールのコポリマー、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリ-1,3-ジオキソラン、ポリ-1,3,6-トリオキサン、エチレン/無水マレイン酸コポリマー、ポリアミノ酸(ホモポリマーかランダムコポリマー)、及びデキストラン又はポリ(n-ビニルピロリドン)ポリエチレングリコール、プロピレングリコールホモポリマー、プロリプロピレンオキシド/エチレンオキシドコポリマー、ポリオキシエチレン化ポリオール(例えばグリセロール)、ポリビニルアルコール、及びそれらの混合物が含まれる。ポリエチレングリコールプロピオンアルデヒドは水中におけるその安定性のために製造の際に有利でありうる。ポリマーは任意の分子量であってよく、分枝状でも非分枝状でもよい。抗体に結合するポリマーの数は変化してもよく、一を超えるポリマーが結合する場合、それらは同じでも異なった分子でもよい。一般に、誘導体化に使用されるポリマーの数及び/又はタイプは、限定されるものではないが、抗体誘導体が定まった条件下での治療に使用されるかどうか等を含む、改善される抗体の特定の性質又は機能を含む考慮事項に基づいて決定することができる。
抗体は、例えば米国特許第4816567号に記載されているように、組換え法及び構成物を使用して製造することができる。一実施態様では、ここに記載の抗BACE1抗体をコードする単離核酸が提供される。このような核酸は、VLを含んでなるアミノ酸配列及び/又は抗体のVHを含んでなるアミノ酸配列(例えば、抗体の軽及び/重鎖)をコードしてもよい。更なる実施態様では、このような核酸を含んでなる一又は複数のベクター(例えば、発現ベクター)が提供される。更なる実施態様では、このような核酸を含んでなる宿主細胞が提供される。このような一実施態様では、宿主細胞は、(1)抗体のVLを含んでなるアミノ酸配列及び抗体のVHを含んでなるアミノ酸配列をコードする核酸を含んでなるベクター、又は(2)抗体のVLを含んでなるアミノ酸配列をコードする核酸を含んでなる第一ベクター、及び抗体のVHを含んでなるアミノ酸配列をコードする核酸を含んでなる第2ベクターを含む(例えば、これらによって形質転換される)。一実施態様では、宿主細胞は真核生物、例えばチャイニーズハムスター卵巣(CHO)細胞又はリンパ球系細胞(例えばY0、NS0、Sp20細胞)である。一実施態様では、抗BACE1抗体の作製方法が提供され、該方法は、上に提供された抗体をコードする核酸を含む宿主細胞を、抗体の発現に適した条件下で、培養し、場合によっては宿主細胞(又は宿主細胞培養培地)から抗体を回収することを含む。
ここに提供される抗BACE1抗体は、当分野で知られている様々なアッセイによってそれらの物理的/化学的特性について同定、スクリーニング、又は特徴付けされうる。
一態様では、発明の抗体は、知られている方法、例えばELISA、ウエスタンブロット等によってその抗原結合活性について試験される。
一態様では、生物学的活性を有するその抗BACE1抗体を同定するためのアッセイが提供される。生物学的活性は、例えばBACE1アスパルチルプロテアーゼ活性の阻害又は低減;又はBACE1によるAPP切断の阻害又は低減;又はAβ生産の阻害又は低減を含む。インビボ及び/又はインビトロにおいてこのような生物学的活性を有する抗体も提供される。
発明はまた、一又は複数の細胞傷害性物質、例えば化学療法物質又は薬物、増殖阻害物質、毒素(例えば、タンパク質毒素、細菌、真菌、植物、又は動物起源の酵素的活性毒素、又はその断片)、又は放射性同位体にコンジュゲートされたここの抗BACE1抗体を含んでなるイムノコンジュゲートを提供する。
ある実施態様では、ここに提供される何れかの抗BACE1抗体は生物学的サンプルにおけるBACE1の存在の検出に有用である。「検出」なる用語は、ここで使用される場合、定量的又は定性的検出を包含する。ある実施態様では、生物学的サンプルは細胞又は組織、例えば血清、血漿、唾液、胃液分泌物、粘液、脳脊髄液、リンパ液、神経組織、脳組織、心臓組織又は血管組織を含む。
ここに記載された抗BACE1抗体の薬学的製剤は、凍結乾燥製剤又は水溶液の形態で、一又は複数の任意の薬学的に許容される担体(Remington's Pharmaceutical Sciences 16版, Osol,A.編(1980))と所望の度合いの純度を有する抗体を混合することにより調製される。薬学的に許容される担体は用いられる用量及び濃度でレシピエントに一般に非毒性であり、限定しないが、緩衝剤、例えばリン酸塩、クエン酸塩、及び他の有機酸;抗酸化剤、例えばアスコルビン酸及びメチオニン;保存料(例えば塩化オクタデシルジメチルベンジルアンモニウム;塩化ヘキサメトニウム;塩化ベンザルコニウム;塩化ベンゼトニウム;フェノール、ブチル又はベンジルアルコール;アルキルパラベン、例えばメチル又はプロピルパラベン;カテコール;レゾルシノール;シクロヘキサノール;3-ペンタノール;及びm-クレゾール);低分子量(約10残基未満)のポリペプチド;タンパク質、例えば血清アルブミン、ゼラチン又は免疫グロブリン;親水性重合体、例えばポリビニルピロリドン;アミノ酸、例えばグリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン又はリジン;単糖類、二糖類及び他の炭水化物、例えばグルコース、マンノース又はデキストリン;キレート剤、例えばEDTA;糖類、例えばスクロース、マンニトール、トレハロース又はソルビトール;塩形成対イオン、例えばナトリウム;金属錯体(例えばZn-タンパク質錯体);及び/又は非イオン性界面活性剤、例えばポリエチレングリコール(PEG)を含む。ここでの例示的な薬学的に許容可能な担体は、可溶性中性活性ヒアルロニダーゼ糖タンパク質(sHASEGP)、例えばヒト可溶性PH-20ヒアルロニダーゼ糖タンパク質、例えばrHuPH20(HYLENEX(登録商標), Baxter International, Inc.)のような間質薬剤分散剤を更に含む。rHuPH20を含むある種の例示的sHASEGPs及び使用方法は米国特許出願公開第2005/0260186号及び第2006/0104968号に記載されている。一態様では、sHASEGPは一又は複数のグリコサミノグリカナーゼ、例えばコンドロイチナーゼと組み合わせられる。
ここに提供される抗BACE1抗体の何れかは、治療方法において使用されうる。
当該発明のもう1つの局面において、前記した障害の治療、予防および/または診断で有用な材料を含有する製品が提供される。該製品は、容器および該容器上の、または該容器に付随するラベルまたは添付文書を含む。適当な容器は、例えば、瓶、バイアル、シリンジ、IV溶液バッグ等を含む。該容器はガラスまたはプラスチックのような種々の材料から形成することができる。該容器は、単独の、または該疾患を治療し、予防し、および/または診断するのに有効なもう1つの組成物と組み合わされた組成物を保有し、および滅菌アクセスポートを有してもよい(例えば、該容器は皮下注射針を刺すことができるストッパーを有する静脈内溶液バッグまたはバイアルであってよい)。該組成物中の少なくとも1つの活性な剤は当該発明の抗体である。該ラベルまたは添付文書は、該組成物が選択された疾患を治療するのに用いられることを示す。さらに、該製品は、(a)組成物がその中に含有された第一の容器、ここに、該組成物は当該発明の抗体を含み;および(b)組成物がその中に含有された第二の容器、ここに、該組成物はさらなる細胞傷害性またはそうでなければ治療剤を含む、を含むことができる。当該発明のこの実施態様における製品は、さらに、該組成物を用いて、特定の疾患を治療することができることを示す添付文書を含んでもよい。別法として、または加えて、該製品は、さらに、注射用の静菌性水(BWFI)、リン酸緩衝化生理食塩水、リンゲル液およびデキストロース溶液のような医薬上許容される緩衝液を含む第二の(または第三の)容器を含んでもよい。それは、さらに、他の緩衝液、希釈剤、フィルター、針、およびシリンジを含めた、商業的およびユーザーの観点から望ましい他の材料を含んでもよい。
以下は発明の方法及び組成物の実施例である。上記の一般的な説明のもと、様々な他の実施態様が実施されうることが理解される。
BACE1に特異的に結合する抗体を、ヒトBACE1細胞外ドメイン、配列番号:49のアミノ酸1−457に対し2つの異なるタイプのファージディスプレイ抗体ライブラリー(一方は天然多様性(VH及びVH/VL)を有するものであり、他方は特定のアミノ酸セット(YSGX)に人工的に制限された特定のCDR領域に多様性を有するもの)をパニングすることによって生成した。
ファージディスプレイされた抗BACE1クローンの選択
ビオチン化ヒトBACE-1(配列番号:49の1-457)をライブラリーソーティングの抗原として使用した。天然多様性ファージライブラリーを、交互ニュートラアビジン/ストレプトアビジンプレートに事前捕獲されたビオチン化BACE-1に対して4ラウンドソーティングした。ソーティングの第一ラウンドでは、NUNC 96ウェル Maxisorpイムノプレートをまず10μg/mLニュートラアビジン(Fisher Scientific, #21125)でコートし、ファージブロッキングバッファーPBST(リン酸緩衝食塩水(PBS)及び1%(w/v)ウシ血清アルブミン(BSA)及び0.05%(v/v)Tween 20)で一晩ブロッキングした。最初に、10μg/mLビオチン化BACE-1をイムノプレート上に30分間捕獲した。交代ファージライブラリーVH (see e.g., Lee等, J. Immunol. Meth. 284:119-132 (2004))及びVH/VL (see Liang等, J. Mol. Biol. 366: 815-829 (2007))を、ファージブロッキングバッファーPBSTで事前にブロッキングし、その後プレートに加え、室温で一晩インキュベートした。プレートをPBT(0.05% Tween 20のPBS)で次の日10x洗浄し、結合ファージを1mLの50mM HCl及び500mMのNaClで30分間溶出し、600μLの1M Tris塩基(pH 8.0)で中和した。回収したファージを大腸菌XL-1 Blue細胞において増幅させた。その後の選択ラウンド中、増殖したファージライブラリーをまずPBST/BSA中において50μlのDynabeads(登録商標) MyOneTM ストレプトアビジン T1 (Invitrogen, # 65601)でプレ吸収し、室温で30分間インキュベートした。ニュートラアビジンに結合したファージ粒子を、Dynabeads(登録商標)の除去によりファージストックから取り除いた。次いで非結合ファージをストレプトアビジンプレート上にディスプレイされたBACE-1抗原に加え、インキュベーション時間を2-3時間に低減した。プレート洗浄のストリンジェンシーを徐々に増加させた。
BACE1はアミロイド前駆タンパク質を、その膜貫通ドメインに近い、細胞の表面に近接したポイントで通常切断するアスパルチルプロテアーゼである。したがって、特定のBACE1基質に対するBACE1タンパク質分解活性を調節する上記抗体の能力を、ホモジニアス時間分解蛍光(HTRF)アッセイを使用してインビトロで評価した。
ライブラリーを次のようにYW412.8抗体を親和性成熟するために構築した。全CDR-L3位置に終止コドン(TAA)を有し、M13バクテリオファージ)の表面上に一価のFabを提示するファージミドpW0703(ファージミドpV0350-2b由来(Lee等, J. Mol. Biol. 340, 1073-1093 (2004))を、親和性成熟のための天然多様性ライブラリーから興味のクローンの重鎖可変ドメイン(VH)を移植するためのライブラリー鋳型として使用した。ハード及びソフトランダム化方策の双方を親和性成熟に使用した。ハードランダム化では、選択された位置の3つの軽鎖CDRを有する一軽鎖ライブラリーを、天然ヒト抗体を模倣するために設計されたアミノ酸を使用してランダム化し、設計DNA縮重はLee等(J. Mol.Biol.340, 1073-1093 (2004))に記載される通りであった。ソフトランダム化では、CDR-L3の位置91-94及び96、CDR-H1の28-31及び34-35、CDR-H2の50、52、及び53-58、CDR-H3の95-99及び100Aの残基を標的にした;CDRループの2つの異なる組合せ、L3/H1/H2及びL3/H3をランダム化のために選択した。選択した位置におよそ50%の変異率を導入するソフトランダム化条件を得るために、変異誘発DNAを、野生型ヌクレオチドを好む70-10-10-10混合物で合成した(Gallop等, J. Med.Chem.37:1233-1251 (1994))。
相補性決定領域(CDR)に制限化学多様性を有するミニマル合成抗体ライブラリーを構築が構築され、Fellouse, F.A.et al.J. Mol.Biol.373:924-940 (2007)に過去に記載されるように、様々なタンパク質に対する高親和性抗体バインダーの獲得に効果的であることが示されている。YSGXライブラリーと命名される合成多様性ライブラリーを、溶液ソーティングによりBACE1に対する阻害抗体を探索するために使用した。結合のパニングを下記のように5回実施した。
ビオチン化ヒトBACE-1(配列番号:49の1−457)をライブラリーソーティングの抗原として使用した。パニングの第一ラウンドでは、20μgのビオチン化BACE1を4℃で1.5時間1x1013pfu/mlの濃度で1mLのライブラリーでインキュベートした。標的に結合したファージを、ブロッキングバッファー(PBS,0.5%(w/v)ウシ血清アルブミン)で事前にブロックした200μlのDynabeads(登録商標)MyOneストレプトアビジンで15分間捕獲した。結合したファージを0.1MのHClで溶出し、すぐに1MのTris塩基で中和した。溶出ファージを前述のように標準プロトコルに従って増幅した(Sidhu, S.S.等 Methods Enzymol. 328: 333-363 (2000))。第二ラウンドを第一ラウンドと同じように実施し、10μgのビオチン化BACE1を使用し400μlの増幅ファージでインキュベートした。その後の全てのラウンドでは、2μgのビオチン化BACE1を400μlの増幅ファージでインキュベートした。ビオチン化BACE1に結合したファージを、ニュートラアビジン又はストレプトアビジン(ラウンド間で交互)で事前にコートされブロッキングバッファーでブロックされたMaxisorpイムノプレート(NUNC)を使用して15分間捕獲した。
YSGXライブラリーのパニングは、BACE1に結合する18のユニーククローンの同定をもたらした。図3を参照。これらのクローンに対応するFabタンパク質を次のように精製した。終止コドンを、Fabをコードするファージミドの重鎖及び遺伝子3間に導入した。得られたファージミドを大腸菌株34B8に形質転換した。単一コロニーを、50μg/mlのカルベニシリンで補充された30mLのLB培地において37℃で一晩増殖させた。一晩した培養物(5mL)をカルベニシリン(50μg/ml)で補充された500mLの完全C.R.A.P.培地に播種し、24時間30℃で増殖させた。Fabタンパク質を、標準的な方法によりプロテインAアガロースビーズを使用して精製した。
最初のパニングプロセスによって得られた親阻害抗体の結合親和性を改善するために、Fab5、8、12、14及び19の全3つのCDR-LCをランダム化して新しいファージライブラリーを設計した。これらの5つの抗体をそれらの異なるエピトープに基づいて2つのサブグループに分けた−Fab5、8及び12をグループ1、Fab14及び19をグループ2とした。個々のクローンの一本鎖DNA(ssDNA)をライブラリー構築の鋳型として精製した。グループ1のssDNA鋳型を親和性成熟ライブラリー1(LC-lib1として設計)のために一つにプールし、グループ2をライブラリー2(LC-lib2)のためにプールした。化学多様性を、分子認識について天然アミノ酸の機能的能力に基づいてランダム化CDR内に制限した。Birtalan, S.等Mol Biosyst.6:1186-1194 (2010)を参照。ミニマル多様性(Tyr及びSer二元コドン)、セミミニマル多様性(Tyr,Ser,Gly及びTrp三元コドン)及び10アミノ酸を含む更なる多様性を、高親和性を得るために混合した。2つの親和性成熟ライブラリー、LC-lib1及びLC-lib2を同セットのオリゴヌクレオチドを使用して構築し、上記のように全3つのCDR-LCを同時にランダム化した。親和性成熟では、全3つのCDR-LC(相補性決定領域-軽鎖)を、一次ソーティング由来の選択クローンについて固定CDR-HC(相補性決定領域-重鎖)とランダム化した。
上記のように、抗体をBACE1への機能及びエピトープ結合について同定した。親及び親和性成熟抗体を、下記のアッセイを使用して更に特徴付けた。
YW412.8.31の結合キネティクスを評価した。簡潔には、抗BACE1 IgGの結合親和性を、BIAcoreTM-3000 instrumentを使用して表面プラズモン共鳴(SPR)によって測定した。YW412.8.31 抗BACE1ヒトIgGをCM5バイオセンサーチップ上にコートされたマウス抗ヒトFc抗体(GE Healthcare, cat# BR-1008-39)によって捕獲し、およそ100反応単位(RU)を得た。キネティクス測定のために、2倍の段階希釈(0.98nM〜125nM)のヒトBACE1 ECD又はマウスBACE1 ECD(アミノ酸1-457)を25℃、30μl/分の流量でPBTバッファー(0.05% Tween 20のPBS)に注入した。会合速度(kon)及び解離速度(koff)を、単純一対一ラングミュア結合モデル(BIAcoreTM Evaluation Software version 3.2)を使用して算出した。平衡解離定数(KD)を比koff/konとして算出した。pH7.0でのYW412.8.31結合の結果を表4に示す。
加えて、特定のBACE基質に対するBACE1タンパク質分解活性を調節する抗体の能力を、BACE1のヒト組換え細胞外ドメインを用い2つの活性アッセイ:HTRFアッセイ及びマイクロ流体キャピラリー電気泳動(MCE)アッセイを使用してインビトロで評価した。
APPプロセシングへの抗BACE1抗体の観察されたインビトロ阻害作用がまた細胞状況において存在するか決定するために、インビボ研究を実施した。野生型ヒトアミロイド前駆体タンパク質を安定して発現する293-HEK細胞におけるAβ1−40生産を阻害する抗体の能力を以下のように評価した。293-APPWT細胞を96-ウェルプレートにおいて3x104細胞/ウェルの密度で一晩播種した。抗BACE1抗体又はコントロールIgG1抗体を有する50μlの新鮮な培地(DMEM+10%FBS)を、37oCで24時間細胞と共にインキュベートした。三環系小分子BACE1インヒビター(BACE1 SMI)をまたコントロールとして使用した((Compound 8e - Charrier, N.等 J. Med. Chem. 51:3313-3317 (2008))。細胞培地を回収し、製造者の指示に従ってAβ1-40 HTRF(登録商標)アッセイ(CisBio)を使用してAβ1-40の存在についてアッセイした。Aβ1-40値を細胞生存率について正規化し、CellTiter-Glo Luminescent Cell Viability Assay(Promega)を使用して決定した。実験を少なくとも3回実施し、各実験における各ポイントを二つ組において反復した。データをfour-parameter non-linear regression curve-fitting program(Kaleidagraph, Synergy Software)を使用してプロットした。
BACE1は細胞内、特にゴルジにおいて発現されることが知られている。YW412.8.31が細胞内環境においてBACE1と相互作用するか否か確かめるために、内部移行研究を実施した。BACE1+/+又はBACE1−/−マウスから、一セットのニューロン培養物をE13.5後根神経節(DRG)外植片から調製し、第二セットのニューロン培養物をE16.5解離皮質ニューロンから調製し、37℃で24又は72時間それぞれ培養した。0.5μMのYW412.8.31抗BACE1抗体を有する培地を30分〜2時間の様々な期間で培養物に加え、4℃又は37℃の何れかでインキュベートした。処理後、非結合抗体をPBSで十分に洗浄した。培養物を4%パラホルムアルデヒドで20分間室温で固定し、選択したサンプルをまた0.1%Triton X-100で透過処理した。結合した抗体を、製造者の指示に従って二次Alexa 568-コンジュゲート化抗ヒトIgG1抗体(Molecular Probes)を使用して検出した。
ヒトBACE1に対する特定の抗BACE1抗体の結合部位を同定するために更なる研究を実施した。一セットの実験では、どの抗体が競合結合を示すか決定するために、BACE1(hBACE1)への抗体の結合を既知の活性部位又はエキソサイトBACE1結合ペプチドの有無において評価した。第二セットの実験では、三次元結合部位を決定するために、抗BACE1 FabをヒトBACE1細胞外ドメインと共結晶化させた。
発明の抗BACE1抗体のBACE1上の結合部位を決定する間接的方法として、競合ELISAを実施した。簡潔には、抗体YW412.8IgG(1μg/ml)を4℃で一晩NUNC96ウェルMaxisorpイムノプレートにコートし、ブロッキングバッファーPBST(PBS及び1%BSA及び0.05%Tween20)で1時間室温でブロックした。抗BACE1抗体YW412.8又はhBACE1結合ペプチドの段階希釈を所定量のビオチン化hBACE1でインキュベートし、室温で60分間インキュベートした。次いで段階希釈をYW412.8コート化プレートに加え、室温で30分間インキュベートした。その後、プレートを洗浄バッファー(0.05%T-20のPBS)で洗浄し、室温で30分間、西洋ワサビペルオキシダーゼ(HRP)で標識されたストレプトアビジンを加えて処理した。次いでプレートを洗浄し、テトラメチルベンジジン(TMB)基質で処理した。捕獲ビオチン化hBACE1に結合したHRP-コンジュゲートストレプトアビジンを、標準的な技術を使用して630nmの波長で測定した。
BACE1とのYW412.8抗体の相互作用をより良く理解するために、YW412.8.31Fabをヒト組換えBACE1細胞外ドメインの細胞外ドメインと共結晶化した。
C末端His6タグ(配列番号:210)を伴うBACE1(配列番号:49のアミノ酸57-453)DNAのタンパク質発現及び精製をBlue Heronで合成し、pET29a(+)ベクター(Novagen)にクローン化し、BL21(DE3)細胞(Invitrogen)に形質転換した。発現を、1mMのイソプロピル β-D-1-チオガラクトピラノシド(IPTG)導入により37oCで4時間実施した。細胞をマイクロフルダイザーで溶解し、封入体(BACE1を含む)を単離し、TE(10mM Tris pH8.0及び1mM エチレンジアミン四酢酸(EDTA))バッファーで2回洗浄した。12,000rpmで30分間の遠心分離の前に、タンパク質可溶化を7.5M尿素、100mM AMPSO pH10.8及び100mM β-メルカプトエタノール(BME)を使用して室温で2時間実施した。次いで上澄みを7.5M尿素、100mM AMPSO pH10.8で希釈し、約1.5-2.0のOD280を得た。タンパク質リフォールディングを、まず冷却水において可溶化BACE1を1:20に希釈し、次いでリフォールディングを生じさせるために4oCで3週間サンプルを穏やかに撹拌することによって実施した。リフォールディングしたBACE1の精製は3つのカラムクロマトグラフィー工程を含んだ。まず、BACE1を20mM Tris pH 8.0及び0.4M尿素でプレ平衡化された50ml Q sepharose Fast Flow(GE Healthcare)カラムにロードし、0-0.5M NaClの塩勾配で溶出した。ピーク画分をプールし、20mM Tris pH 8.0バッファーで5倍に希釈し、SourceTM15Qカラム(GE Healthcare)にロードした。BACE1を溶出するために0-0.3M NaClの勾配を使用した。BACE1タンパク質を有する画分をプールし、濃縮し、そして25mM Hepes pH 7.5、150mM NaClにおいてSuperdexTM S75カラム(GE Healthcare)において更に精製した。
精製BACE1タンパク質(配列番号:49のアミノ酸57〜453)を1:1.5モル比(Fabの過剰)で精製YW412.8.31 Fabと混合した。複合体を氷上で1時間インキュベートし、S200 26/60 gel filtration column(GE Healthcare)において精製し、過剰Fabからそれを分離した。次いで複合体を15mg/mlに濃縮した。結晶化を、20% PEG 4000、0.1MのTris pH 8.5及び0.2Mの酢酸ナトリウムを有する1μlのウェル溶液と混合した1μlのBACE1/Fab複合体を用いてsitting drop vapor diffusion 法によって実施した。次いで結晶化ドロップを19℃でインキュベートした。結晶は4日後出現し、更に2日間成長した。次いで結晶を収集し、母液及び20%グリセロールを有する凍結保護溶液において急速冷凍させた。
回折データをStanford Synchrotron Radiation Facility(SSRL) beam line 7-1で単色X線ビーム(12658.4eV)を使用して収集した。X線検出装置は、結晶から430mm離して置かれたADSC quantum-315 CCD検出器だった。完全なデータセットの収集のために回転法を単一結晶に適用し、0.5°オシレーション/フレーム及び180°のトータルウェッジサイズを用いた。次いでデータをインデックス化し、統合し、プログラムHKL2000(登録商標) (HLK Research, Inc.)を使用してスケーリングした。
1Rsym=S|Ihi−Ih|/SIhi、ここでIhiは反射hのi番目の対象関連観察のスケール強度であり、Ihは平均値である。
2括弧内の値は(1.97−1.90Å)である最外郭分解能のものである。
3Rcryst=Sh|Foh−Fch|/ShFoh、ここでFoh及びFchは反射hの観察及び算出構造因子振幅である。
4Rfreeの値は精密化に含まれていない5%のランダムに選択した反射についての算出である。
インビボでのYW412.8.31の効果を評価した。BACE1特異性阻害剤が達成できる最大Ab1−40低減を得るために、BACE1+/+コントロールと比較したBACE1−/−マウスの血漿及び前脳におけるAb1−40生産に対するBACE1の寄与を調査した。BACE1−/−マウスにおいて血漿Ab1−40シグナルは45%低減し、脳Ab1−40シグナルは80%低減した(図16、パネルA)。これらの結果は、BACE1が確かに前脳において主要なb-セクレターゼであるが、周辺においてはBACE1は部分的なAb1−40生産のみを占め、残りは他のb-セクレターゼから生じるこをを示す。
簡潔には、5ヶ月のヒトAPP-発現マウスを、毎4日、計3投与(すなわち1、5、及び9日目)の腹腔内注入によって30mg/kg又は100mg/kgYW412.8.31抗体又はビヒクルで処理した。動物を最終投与後2時間で安楽死させた。血清、血漿、及び脳を収集し加工した。血漿、皮質及び海馬を、製造者の指示に従ってアミロイドベータ(Aβ)ELISA試験キット(The Genetics Company)を使用して可溶性Aβ1−40及びAβ1−42のレベルについて分析した。薬物動態分析を血清及び脳ホモジネートにおいて実施した。
アミロイド形成プロセシングを調節する抗BACE1抗体YW412.8.31の能力をまた、野生型マウスにおいて評価した。簡潔には、実験を上記のように実施した。単一用量のコントロールIgG抗体又はYW412.8.31抗BACE1抗体(50mg/kg)を野生型マウスに静脈内(IV)注入によって全身性に送達させた。24又は48時間後、血漿及び脳サンプルを収集し、Aβ1−40レベルを分析した。血漿及び脳における全マウスAβ1−40の濃度を、全抗BACE1抗体濃度を測定する下記の類似な手順に従って、サンドイッチELISAを使用して決定した。簡潔には、Aβ1−40のC末端に特異的なウサギモノクローナル抗体(Millipore, Bedford, MA)をプレート上にコートし、ビオチン化抗マウスAβモノクローナル抗体M3.2 (Covance, Dedham, MA)を検出に使用した。アッセイは血漿において1.96pg/ml、脳において39.1pg/gの定量下限を有した。図16、パネルBに示すように、血漿Aβ1−40は35%低減され、皮質Aβ1−40は20%低減された。
カニクイザルにIV送達によってコントロールIgG又はYW412.8.31抗BACE1抗体(30mg/kg)を投与した。個々動物の各々における平均ベースラインAβ1−40レベルを設定するために投与の7日前まで、次いで投与後様々な時点で血漿及びCSFをサンプリングた。サル血清及びCSFサンプルにおける全抗BACE1又はコントロール抗体濃度を、コート及び検出双方としてサル吸着ヤギ抗ヒトIgGポリクローナル抗体(Bethyl, Montgomery, TX)を使用して測定した。サルにおける遊離抗BACE1抗体濃度を、コートとしてBACE1 ECD及び検出のためにサル吸着ヤギ抗ヒトIgG抗体(Bethyl)を使用して決定した。全及び遊離抗BACE1サルアッセイ双方は、血清又はCSFにおいて6.25ng/mlのLLOQ値を有した。PKはサルに投与されたIgG1について予測された通りであり、予測した曝露を示す。
YW412.8.31抗体を、前に記載した結晶構造に提供される構造データに従って親和性成熟した。BACE1と接触する抗体残基を、YW412.8.31抗体の親和性を増強するために変異させた。この方策によって生成される親和性成熟クローンは、命名法YW412.8.31xSを有する。YW412.8.31親和性成熟クローンはまた、前述したように全CDRのソフトランダム化ターゲティングにより生成され、命名法YW412.8.31xを有する。BACE1に結合したクローンの重鎖可変配列及び軽鎖可変配列を図23(A)β(C)及び24(A)β(C)に記載する。
Claims (73)
- BACE1ポリペプチドの活性を低減又は阻害するBACE1に結合する単離された抗体又はその断片。
- 抗体がBACE1の活性部位に結合する請求項1に記載の抗体。
- 抗体がBACE1のエキソサイトに結合する請求項1に記載の抗体。
- 配列番号:7−19、22−26、28−30、35−47、56−79及び118−122から成る群から選択される少なくとも一つの超可変領域(HVR)配列を含んでなる請求項1に記載の抗体。
- HVR-H1、HVR-H2及びHVR-H3から成る群から選択される少なくとも一つの配列を含んでなる請求項1に記載の抗体であって、HVR-H1がアミノ酸配列GFX30FX31X32X33X34IH(配列番号:45)を含み(上式中、X30=N又はT;X31=S、L又はY;X32=G又はY;X33=Y又はS;及びX34=A、G又はS);HVR-H2がアミノ酸配列X35X36ISPX37X38GX39TX40YADSVKG(配列番号:46)を含み(上式中、X35=A又はG;X36=W又はS;X37=A又はY;X38=G又はS;X39=S又はY;及びX40=D又はS);そしてHVR-H3がアミノ酸配列X41PX42X43X44X45X46X47MDY(配列番号:47)を含む(上式中、X41=Q又はG;X42=T又はF;X43=H又はS;X44=Y又はP;X45=Y又はW;X46=Y又はV、及びX47が配列YAKGYKA(配列番号:48)を含んでいてもよい)抗体。
- HVR-H1、HVR-H2及びHVR-H3から成る群から選択される少なくとも一つの配列を含んでなる請求項1に記載の抗体であって、HVR-H1がアミノ酸配列GX71X72X73X74X75X76X77IH(配列番号:120)を含み(上式中、X71=F又はY;X72=F、N又はT;X73=F又はY;X74=L、Q、I、S又はY;X75=G又はY;X76=Y又はS;及びX77=A、G又はS);HVR-H2がアミノ酸配列X78X79ISPX80X81GX82X83X84YADSVKG(配列番号:121)を含み(上式中、X78=A又はG;X79=W又はS;X80=A、S、Q又はY;X81=G又はS;X82=S、K、L又はY;X83=T又はY;及びX84=D又はS);そしてHVR-H3がアミノ酸配列X85PX86X87X88X89X90X91MDY(配列番号:122)を含む(上式中、X85=Q又はG;X86=T又はF;X87=H、Y又はS;X88=Y又はP;X89=Y又はW;X90=Y又はV、及びX91が配列YAKGYKA(配列番号:48)を含んでいてもよい)抗体。
- HVR-H1、HVR-H2及びHVR-H3から成る群から選択される少なくとも一つの配列を含んでなる請求項1に記載の抗体であって、HVR-H1がアミノ酸配列GX53X54X55X56GYGIH(配列番号:68)を含み(上式中、X53=F又はY;X54=T又はF;X55=F又はY;X56=L、Q又はI)、HVR-H2がアミノ酸配列GWISPX57X58GX59X60DYADSVKG(配列番号:69)を含み(上式中、X57=A、S又はQ;X58=G又はS;X59=S、K又はL;X60=T又はY)、HVR-H3配列がアミノ酸配列GPFX61PWVMDY(配列番号:70)(上式中、X61=S又はY)又は配列番号:79のアミノ酸配列を含んでなる抗体。
- アミノ酸配列GFTFX13GYX14IH(配列番号:26)(上式中、X13=S又はL及びX14=A又はG)を含んでなるHVR-H1配列を含んでなる請求項5に記載の抗体。
- 配列番号:22;配列番号:23;配列番号:28及び配列番号:71−73から成る群から選択されるアミノ酸配列を含んでなるHVR-H1配列を含んでなる請求項6に記載の抗体。
- 配列番号:24;配列番号:29及び配列番号:74−78から選択されるアミノ酸配列を含んでなるHVR-H2配列を含んでなる請求項6に記載の抗体。
- 配列番号:25;配列番号:30及び配列番号:79から選択されるアミノ酸配列を含んでなるHVR-H3配列を含んでなる請求項6に記載の抗体。
- 図1(B)におけるクローンYW412.8、YW412.8.31、YW412.8.30、YW412.8.2、YW412.8.29及びYW412.8.51又は図24(A)−(C)におけるクローンに記載されるものに対応するHVR-H1、HVR-H2、及びHVR-H3配列を含んでなる請求項6に記載の抗体。
- 図2(B)におけるクローンFab12、LC6、LC9及びLC10に記載されるものに対応するHVR-H1、HVR-H2、及びHVR-H3配列を含んでなる請求項6に記載の抗体。
- 配列番号:22又は23のHVR-H1配列、配列番号:24のHVR-H2配列及び配列番号:25のHVR-H3配列を含んでなる請求項6に記載の抗体。
- HVR-H1配列が配列番号:23である請求項14に記載の抗体。
- 配列番号:28のHVR-H1配列、配列番号:29のHVR-H2配列及び配列番号:30のHVR-H3配列を含んでなる請求項6に記載の抗体。
- 配列番号:20、21、27及び80−98から成る群から選択されるアミノ酸配列を有するVH鎖を含んでなる請求項6に記載の抗体。
- VH鎖アミノ酸配列が配列番号:21である請求項16に記載の抗体。
- HVR-L1、HVR-L2及びHVR-L3の群から選択される少なくとも一つの配列を含んでなる請求項1に記載の抗体であって、HVR-L1がアミノ酸配列RASQX17VX18X19X20X21A(配列番号:42)を含み(上式中、X17=S、D又はV;X18=S又はA;X19=S、T又はN;X20=A又はS;X21=V又はL)、HVR-L2がアミノ酸配列X22ASX23LYS(配列番号:43)を含み(上式中、X22=S、W、Y又はL;X23=F、S又はW)、そしてHVR-L3がアミノ酸配列QQX24X25X26X27X28X29T(配列番号:44)を含む(上式中、X24=S、F、G、D又はY;X25=Y、P、S又はA;X26=Y、T又はN;X27=T、Y、D又はS;X28=P又はL;及びX29=F、P又はT)抗体。
- HVR-L1、HVR-L2及びHVR-L3の群から選択される少なくとも一つの配列を含んでなる請求項1に記載の抗体であって、HVR-L1がアミノ酸配列RASQX17VX18X19X20X21A(配列番号:42)を含み(上式中、X17=S、D又はV;X18=S又はA;X19=S、T又はN;X20=A又はS;X21=V又はL)、HVR-L2がアミノ酸配列X62ASX63X64YX65(配列番号:118)を含み(上式中、X62=S、W、Y、F又はL;X63=F、S、Y又はW;X64=L又はR;X65=S、P、R、K又はW)、そしてHVR-L3がアミノ酸配列QQX66X67X68X69X70X71T(配列番号:119)を含む(上式中、X66=S、F、G、D又はY;X67=Y、P、S又はA;X68=Y、T又はN;X69=T、Y、D又はS;X70=P、Q、S、K又はL;及びX71=F、P又はT)抗体。
- HVR-L1、HVR-L2及びHVR-L3から成る群から選択される少なくとも一つの配列を含んでなる請求項1に記載の抗体であって、HVR-L1がアミノ酸配列RASQX1VX2X3X4X5A(配列番号:17)を含み(上式中、X1=D又はV;X2=S又はA;X3=T又はN;X4=S又はA;X5=V又はL)で、HVR-L2がアミノ酸配列X48ASX49X50YX51(配列番号:56)を含み(上式中、X48=S又はF;X49=F又はY;X50=L又はR;X51=S、P、R、K又はW)、そしてHVR-L3がアミノ酸配列QQFPTYX52PT(配列番号:57)を含む(上式中、X52=L、Q、S又はK)抗体。
- アミノ酸配列RASQX1VX2X3X4X5A(配列番号:17)(上式中、X1=D又はV;X2=S又はA;X3=T又はN;X4=S又はA;X5=V又はL)を含んでなるHVR-L1配列を含んでなる請求項17に記載の抗体。
- アミノ酸配列X6ASFLYS(配列番号:18)又はX15ASX16LYS(配列番号:41)(上式中、X6=S又はL;X15=S、W又はY;及びX16=S又はW)を含んでなるHVR-L2配列を含んでなる請求項19に記載の抗体。
- アミノ酸配列QQX7X8X9X10X11X12T(配列番号:19)(上式中、X7=S、F、G、D又はY;X8=Y、P、S,又はA;X9=T又はN;X10=T、Y、D又はS;X11=P又はL;X12=P又はT)を含んでなるHVR-L3配列を含んでなる請求項19に記載の抗体。
- 配列番号:7、配列番号:8又は列番号:35から成る群から選択されるアミノ酸配列を含んでなるHVR-L1配列を含んでなる請求項19に記載の抗体。
- 配列番号:9、配列番号:10、配列番号:36−39及び配列番号:58−64から成る群から選択されるアミノ酸配列を含んでなるHVR-L2配列を含んでなる請求項20に記載の抗体。
- 配列番号:11−16、配列番号:40及び配列番号:65−67から成る群から選択されるアミノ酸配列を含んでなるHVR-L3配列を含んでなる請求項20に記載の抗体。
- 図1(A)におけるクローンYW412.8、YW412.8.31、YW412.8.30、YW412.8.2、YW412.8.29及びYW412.8.51及び図23(A)−(C)におけるクローンに記載されるものに対応するHVR-L1、HVR-L2及びHVR-L3配列を含んでなる請求項20に記載の抗体。
- 図2(A)におけるクローンFab12、LC6、LC9及びLC10に記載されるものに対応するHVR-L1、HVR-L2及びHVR-L3配列を含んでなる請求項20に記載の抗体。
- 配列番号:7又は配列番号:8のHVR-L1配列;配列番号:9又は配列番号:10のHVR-L2配列;及び配列番号:11−16から成る群から選択されるHVR-L3配列を含んでなる請求項20に記載の抗体。
- HVR-L1配列が配列番号:7であり、HVR-L2配列が配列番号:9であり、そしてHVR-L3配列が配列番号:12である請求項30に記載の抗体。
- 配列番号:35のHVR-L1配列;配列番号:36−39から成る群から選択されるHVR-L2配列及び配列番号:40のHVR-L3配列を含んでなる請求項20に記載の抗体。
- 配列番号:1−6、31−34及び99−117から成る群から選択されるアミノ酸配列を有するVL鎖配列を含んでなる請求項20に記載の抗体。
- VL鎖アミノ酸配列が配列番号:2である請求項33に記載の抗体。
- 配列番号:7のアミノ酸配列を含んでなるHVR-L1、配列番号:9のアミノ酸配列を含んでなるHVR-L2及び配列番号:12のアミノ酸配列を含んでなるHVR-L3を更に含んでなる請求項15に記載の抗体。
- 配列番号:21のアミノ酸配列を含んでなるVH鎖を更に含んでなる請求項34に記載の抗体。
- 配列番号:49の314SER;316GLU;317LYS;327GLN;330CYS;331TRP;332GLN;335THR;及び378ASPから成る群から選択されるBACE1の少なくとも一つのアミノ酸残基を含んでなるエピトープに結合する単離された抗体又はその断片。
- エピトープが配列番号:49の314SER;316GLU;317LYS;327GLN;330CYS;331TRP;332GLN;335THR;及び378ASPを含む請求項37に記載の抗体。
- 配列番号:49のアミノ酸315−318;配列番号:49のアミノ酸331−335;配列番号:49のアミノ酸370−381;及びその何れかの組合せから成る群から選択されるBACE1の少なくとも一つのアミノ酸領域を含んでなるエピトープに結合する単離された抗体又はその断片。
- エピトープが配列番号:49のアミノ酸315−318、331−335及び370−381を含む請求項39に記載の抗体。
- BACE1のエピトープに結合し、結合によりBACE1のP6及びP7部位の構造におけるコンホメーション変化をもたらす単離された抗体又はその断片。
- BACE1のエピトープに結合し、結合により配列番号:49のアミノ酸218−231がランダムなループ構造を採用するように誘導する単離された抗体又はその断片。
- BACE1の活性を低減又は阻害する請求項37−42に記載の抗体。
- モノクローナル抗体である請求項1−43の何れか一項に記載の抗体。
- ヒト、ヒト化、又はキメラ抗体である請求項1−44の何れか一項に記載の抗体。
- 抗体断片である請求項1−45の何れか一項に記載の抗体。
- 完全長IgG1抗体である請求項1−45の何れか一項に記載の抗体。
- 請求項1−47の何れか一項に記載の抗体をコードする単離された核酸。
- 請求項48の核酸を含んでなる宿主細胞。
- 抗体が生産されるように請求項49の宿主細胞を培養することを含んでなる抗体を生産する方法。
- 請求項1−47の何れか一項に記載の抗体及び細胞傷害性物質を含んでなるイムノコンジュゲート。
- 請求項1−47の何れか一項に記載の抗体及び薬学的に許容可能な担体を含んでなる薬学的製剤。
- 有効量の請求項1−47の何れか一項に記載の抗体を個体に投与することを含んでなる、神経疾患又は傷害を有する個体を治療する方法。
- 神経疾患又は障害を患っているか又は罹患する危険性がある患者におけるアミロイド斑を低減する方法であって、有効量の請求項1−47の何れか一項に記載の抗体を個体に投与することを含んでなる方法。
- 神経疾患又は障害を患っているか又は発症する危険性がある患者におけるアミロイド斑形成を阻害する方法であって、有効量の請求項1−47の何れか一項に記載の抗体を個体に投与することを含んでなる方法。
- 神経疾患又は障害がアルツハイマー病(AD)、外傷性脳損傷、脳卒中、緑内障、認知症、筋ジストロフィー(MD)、多発性硬化症(MS)、筋萎縮性側索硬化症(ALS)、嚢胞性線維症、アンジェルマン症候群、リドル症候群、パジェット病、外傷性脳損傷、レビー小体病、ポストポリオ症候群、シャイ・ドレーガー症候群、オリーブ橋小脳萎縮症、パーキンソン病、多系統萎縮症、線条体黒質変性症、核上性麻痺、ウシ海綿状脳症、スクレピー、クロイツフェルト・ヤコブ病、クールー、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、慢性消耗病、致死性家族性不眠症、球麻痺、運動ニューロン疾患、カナバン病、ハンチントン病、神経セロイドリポフスチン症、アレキサンダー病、トゥレット症候群、メンケスキンキーヘア症候群、コケイン症候群、Hallervorden-Spatz症候群、ラフォラ病、レット症候群、肝レンズ核変性症、レッシュ・ナイハン症候群、及びUnverricht-Lundborg症候群、ピック病、及び脊髄小脳失調症から成る群から選択される請求項53−55の何れか一項に記載の方法。
- 神経疾患又は障害がアルツハイマー病、脳卒中、脳外傷及び緑内障から成る群から選択される請求項56に記載の方法。
- 患者におけるアミロイド-b(Ab)タンパク質を低減する方法であって、有効量の請求項1−47の何れか一項に記載の抗体を患者に投与することを含んでなる方法。
- 患者が神経疾患又は障害を患っているか又は罹患する危険性がある請求項58に記載の方法。
- 神経疾患又は障害がアルツハイマー病、脳卒中、脳外傷及び緑内障から成る群から選択される請求項59に記載の方法。
- 患者における神経疾患又は障害を診断する方法であって、患者から単離された生体サンプルを、BACE1ポリペプチドへの抗体の結合に適切な条件下で請求項1−47の何れか一項に記載の抗体と接触させる工程、及び抗体及びBACE1ポリペプチド間で複合体が形成されたかを検出する工程を含んでなる方法。
- 患者が抗BACE1抗体での治療に適格かを決定する方法であって、患者から単離された生体サンプルを、BACE1ポリペプチドへの抗体の結合に適切な条件下で請求項1−47の何れか一項に記載の抗体と接触させる工程、抗体及びBACE1ポリペプチド間で複合体が形成されたかを検出する工程を含んでなり、抗体及びBACE1間の複合体の存在が抗BACE1抗体での治療に適格な患者を示す方法。
- 生体サンプルが血清、血漿、唾液、胃液分泌、粘液、脳脊髄液、リンパ液、神経組織、脳組織、心臓組織又は血管組織から成る群から選択される請求項61又は62に記載の方法。
- 医薬としての使用のための請求項1−47の何れか一項に記載の抗体。
- アルツハイマー病(AD)、外傷性脳損傷、脳卒中、緑内障、認知症、筋ジストロフィー(MD)、多発性硬化症(MS)、筋萎縮性側索硬化症(ALS)、嚢胞性線維症、アンジェルマン症候群、リドル症候群、パジェット病、外傷性脳損傷、レビー小体病、ポストポリオ症候群、シャイ・ドレーガー症候群、オリーブ橋小脳萎縮症、パーキンソン病、多系統萎縮症、線条体黒質変性症、核上性麻痺、ウシ海綿状脳症、スクレピー、クロイツフェルト・ヤコブ病、クールー、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、慢性消耗病、致死性家族性不眠症、球麻痺、運動ニューロン疾患、カナバン病、ハンチントン病、神経セロイドリポフスチン症、アレキサンダー病、トゥレット症候群、メンケスキンキーヘア症候群、コケイン症候群、Hallervorden-Spatz症候群、ラフォラ病、レット症候群、肝レンズ核変性症、レッシュ・ナイハン症候群、及びUnverricht-Lundborg症候群、ピック病、及び脊髄小脳失調症から成る群から選択される神経障害の治療における使用のための請求項1−47の何れか一項に記載の抗体。
- アミロイド-b(Ab)タンパク質生産の低下及び/又は阻害における使用のための請求項1−47の何れか一項に記載の抗体。
- 医薬の製造における請求項1−47の何れか一項に記載の抗体の使用。
- 医薬が、アルツハイマー病(AD)、外傷性脳損傷、脳卒中、緑内障、認知症、筋ジストロフィー(MD)、多発性硬化症(MS)、筋萎縮性側索硬化症(ALS)、嚢胞性線維症、アンジェルマン症候群、リドル症候群、パジェット病、外傷性脳損傷、レビー小体病、ポストポリオ症候群、シャイ・ドレーガー症候群、オリーブ橋小脳萎縮症、パーキンソン病、多系統萎縮症、線条体黒質変性症、核上性麻痺、ウシ海綿状脳症、スクレピー、クロイツフェルト・ヤコブ病、クールー、ゲルストマン・シュトロイスラー・シャインカー病、慢性消耗病、致死性家族性不眠症、球麻痺、運動ニューロン疾患、カナバン病、ハンチントン病、神経セロイドリポフスチン症、アレキサンダー病、トゥレット症候群、メンケスキンキーヘア症候群、コケイン症候群、Hallervorden-Spatz症候群、ラフォラ病、レット症候群、肝レンズ核変性症、レッシュ・ナイハン症候群、及びUnverricht-Lundborg症候群、ピック病、及び脊髄小脳失調症から成る群から選択される神経障害の治療のためである請求項67に記載の使用。
- 医薬がアミロイド-b(Ab)タンパク質生産を低減及び/又は阻害するためである請求項67に記載の使用。
- 配列番号:49の314SER;316GLU;317LYS;327GLN;330CYS;331TRP;332GLN;335THR;及び378ASPから成る群から選択されるアミノ酸に対応するBACE1の少なくとも一つのアミノ酸残基を含んでなる、抗体又はその断片によって特異的に認識されるBACE1エピトープ。
- エピトープが配列番号:49の314SER;316GLU;317LYS;327GLN;330CYS;331TRP;332GLN;335THR;及び378ASPに対応するアミノ酸を含む請求項70に記載のBACE1エピトープ。
- 配列番号:49のアミノ酸315−318;配列番号:40のアミノ酸331−335;配列番号:49のアミノ酸370−381;及びその何れかの組合せから成る群から選択されるBACE1の少なくとも一つのアミノ酸領域を含んでなる、抗体又はその断片によって特異的に認識されるBACE1エピトープ。
- エピトープが配列番号:49のアミノ酸315−318、331−335及び370−381を含む請求項72に記載のBACE1エピトープ。
Applications Claiming Priority (9)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US45664210P | 2010-11-10 | 2010-11-10 | |
US61/456,642 | 2010-11-10 | ||
US41831010P | 2010-11-30 | 2010-11-30 | |
US61/418,310 | 2010-11-30 | ||
US41885010P | 2010-12-01 | 2010-12-01 | |
US61/418,850 | 2010-12-01 | ||
US201061426425P | 2010-12-22 | 2010-12-22 | |
US61/426,425 | 2010-12-22 | ||
PCT/US2011/059964 WO2012064836A1 (en) | 2010-11-10 | 2011-11-09 | Methods and compositions for neural disease immunotherapy |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2017018384A Division JP2017137312A (ja) | 2010-11-10 | 2017-02-03 | 神経疾患免疫治療のための方法及び組成物 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2014502150A true JP2014502150A (ja) | 2014-01-30 |
JP2014502150A5 JP2014502150A5 (ja) | 2014-12-25 |
JP6163429B2 JP6163429B2 (ja) | 2017-07-12 |
Family
ID=45002151
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2013538846A Active JP6163429B2 (ja) | 2010-11-10 | 2011-11-09 | 神経疾患免疫治療のための方法及び組成物 |
JP2017018384A Pending JP2017137312A (ja) | 2010-11-10 | 2017-02-03 | 神経疾患免疫治療のための方法及び組成物 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2017018384A Pending JP2017137312A (ja) | 2010-11-10 | 2017-02-03 | 神経疾患免疫治療のための方法及び組成物 |
Country Status (21)
Country | Link |
---|---|
US (3) | US8772457B2 (ja) |
EP (2) | EP2638070B1 (ja) |
JP (2) | JP6163429B2 (ja) |
KR (1) | KR20130133205A (ja) |
CN (1) | CN103228674B (ja) |
AR (1) | AR083819A1 (ja) |
AU (1) | AU2011326564A1 (ja) |
CA (1) | CA2815840A1 (ja) |
CL (1) | CL2013001290A1 (ja) |
CO (1) | CO6690815A2 (ja) |
EA (1) | EA201390669A1 (ja) |
EC (1) | ECSP13012673A (ja) |
ES (1) | ES2607086T3 (ja) |
IL (1) | IL226106A0 (ja) |
MA (1) | MA34722B1 (ja) |
MX (1) | MX346500B (ja) |
PE (1) | PE20140238A1 (ja) |
SG (1) | SG190682A1 (ja) |
TW (1) | TW201300417A (ja) |
WO (1) | WO2012064836A1 (ja) |
ZA (1) | ZA201302980B (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2018505651A (ja) * | 2014-11-19 | 2018-03-01 | ジェネンテック, インコーポレイテッド | BACElに対する抗体及び神経疾患免疫療法のためのその使用 |
Families Citing this family (16)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CA2815840A1 (en) | 2010-11-10 | 2012-05-18 | Genentech, Inc. | Methods and compositions for neural disease immunotherapy |
CN103852579B (zh) * | 2012-12-05 | 2018-02-23 | 姚钧 | 一种人体血清Aβ的定量检测方法 |
US10640549B2 (en) | 2014-10-17 | 2020-05-05 | University Of Virginia Patent Foundation | Recombinant antibodies that recognize the C-terminal domains of Ebola virus nucleoprotein |
CN107250158B (zh) | 2014-11-19 | 2022-03-25 | 基因泰克公司 | 抗转铁蛋白受体/抗bace1多特异性抗体和使用方法 |
EP3101424B1 (en) * | 2015-06-04 | 2023-01-04 | Euroimmun Medizinische Labordiagnostika AG | Diagnosis of a neuroautoimmune disease |
CA2991856A1 (en) * | 2015-07-21 | 2017-01-26 | Bioarctic Neuroscience Ab | Method for treatment of traumatic brain injury targeting aggregated peptides |
JP2019511500A (ja) * | 2016-03-15 | 2019-04-25 | アストラゼネカ・アクチエボラーグAstrazeneca Aktiebolag | アミロイドベータの蓄積に関連する障害の処置のためのbace阻害剤と抗体または抗原結合性断片との組合せ |
CN106084057A (zh) * | 2016-06-13 | 2016-11-09 | 东北师范大学 | Bace1剪切型高效价抗体的制备及应用 |
CN107475260B (zh) * | 2017-09-08 | 2020-12-04 | 东北师范大学 | 抑制大脑中Aβ累积的BACE1亚型的功能研发及应用 |
CN107523579A (zh) * | 2017-09-08 | 2017-12-29 | 东北师范大学 | 促进大脑中Aβ累积的BACE1亚型的功能研发及应用 |
KR102162129B1 (ko) | 2017-10-27 | 2020-10-06 | 뉴욕 유니버시티 | 항-갈렉틴-9 항체 및 이의 용도 |
WO2019094608A1 (en) | 2017-11-08 | 2019-05-16 | Denali Therapeutics Inc. | Anti-bace1 antibodies and methods of use thereof |
US10350226B1 (en) | 2018-06-27 | 2019-07-16 | Joshua O. Atiba | Therapy and prevention of prion protein complex infections |
WO2020132230A2 (en) | 2018-12-20 | 2020-06-25 | Genentech, Inc. | Modified antibody fcs and methods of use |
AU2020266677A1 (en) * | 2019-05-01 | 2022-01-06 | New York University | Anti-Galectin-9 antibodies and uses thereof |
WO2024008755A1 (en) | 2022-07-04 | 2024-01-11 | Vib Vzw | Blood-cerebrospinal fluid barrier crossing antibodies |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2009121948A2 (en) * | 2008-04-03 | 2009-10-08 | Vib Vzw | Single domain antibodies capable of modulating bace activity |
JP2009538629A (ja) * | 2006-05-30 | 2009-11-12 | ジェネンテック・インコーポレーテッド | 抗体およびイムノコンジュゲートとこれらの使用方法 |
WO2009155609A1 (en) * | 2008-06-20 | 2009-12-23 | Oklahoma Medical Research Foundation | IMMUNOGENIC MEMAPSIN 2 β-SECRETASE PEPTIDES AND METHODS OF USE |
JP2010523469A (ja) * | 2007-03-30 | 2010-07-15 | ジェネンテック, インコーポレイテッド | 抗体及びイムノコンジュゲートとこれらの使用方法 |
WO2010146058A1 (en) * | 2009-06-15 | 2010-12-23 | Vib Vzw | Bace1 inhibitory antibodies |
Family Cites Families (154)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4816567A (en) | 1983-04-08 | 1989-03-28 | Genentech, Inc. | Recombinant immunoglobin preparations |
US4737456A (en) | 1985-05-09 | 1988-04-12 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Reducing interference in ligand-receptor binding assays |
US4676980A (en) | 1985-09-23 | 1987-06-30 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Target specific cross-linked heteroantibodies |
US6548640B1 (en) | 1986-03-27 | 2003-04-15 | Btg International Limited | Altered antibodies |
IL85035A0 (en) | 1987-01-08 | 1988-06-30 | Int Genetic Eng | Polynucleotide molecule,a chimeric antibody with specificity for human b cell surface antigen,a process for the preparation and methods utilizing the same |
JP3101690B2 (ja) | 1987-03-18 | 2000-10-23 | エス・ビィ・2・インコーポレイテッド | 変性抗体の、または変性抗体に関する改良 |
US5770701A (en) | 1987-10-30 | 1998-06-23 | American Cyanamid Company | Process for preparing targeted forms of methyltrithio antitumor agents |
US5606040A (en) | 1987-10-30 | 1997-02-25 | American Cyanamid Company | Antitumor and antibacterial substituted disulfide derivatives prepared from compounds possessing a methyl-trithio group |
JP2919890B2 (ja) | 1988-11-11 | 1999-07-19 | メディカル リサーチ カウンスル | 単一ドメインリガンド、そのリガンドからなる受容体、その製造方法、ならびにそのリガンドおよび受容体の使用 |
DE3920358A1 (de) | 1989-06-22 | 1991-01-17 | Behringwerke Ag | Bispezifische und oligospezifische, mono- und oligovalente antikoerperkonstrukte, ihre herstellung und verwendung |
CA2026147C (en) | 1989-10-25 | 2006-02-07 | Ravi J. Chari | Cytotoxic agents comprising maytansinoids and their therapeutic use |
US5208020A (en) | 1989-10-25 | 1993-05-04 | Immunogen Inc. | Cytotoxic agents comprising maytansinoids and their therapeutic use |
US5959177A (en) | 1989-10-27 | 1999-09-28 | The Scripps Research Institute | Transgenic plants expressing assembled secretory antibodies |
US6075181A (en) | 1990-01-12 | 2000-06-13 | Abgenix, Inc. | Human antibodies derived from immunized xenomice |
US6150584A (en) | 1990-01-12 | 2000-11-21 | Abgenix, Inc. | Human antibodies derived from immunized xenomice |
US5268164A (en) | 1990-04-23 | 1993-12-07 | Alkermes, Inc. | Increasing blood-brain barrier permeability with permeabilizer peptides |
US5112596A (en) | 1990-04-23 | 1992-05-12 | Alkermes, Inc. | Method for increasing blood-brain barrier permeability by administering a bradykinin agonist of blood-brain barrier permeability |
US5200339A (en) | 1990-08-17 | 1993-04-06 | Abraham Carmela R | Proteases causing abnormal degradation of amyloid β-protein precursor |
JPH06503948A (ja) | 1990-08-17 | 1994-05-12 | ボストン・ユニヴァーシティー | アミロイドβ―蛋白質のプレカーサーの異常分解をひき起こすプロテアーゼ |
US5770429A (en) | 1990-08-29 | 1998-06-23 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies |
DK0564531T3 (da) | 1990-12-03 | 1998-09-28 | Genentech Inc | Berigelsesfremgangsmåde for variantproteiner med ændrede bindingsegenskaber |
US5571894A (en) | 1991-02-05 | 1996-11-05 | Ciba-Geigy Corporation | Recombinant antibodies specific for a growth factor receptor |
CA2103059C (en) | 1991-06-14 | 2005-03-22 | Paul J. Carter | Method for making humanized antibodies |
GB9114948D0 (en) | 1991-07-11 | 1991-08-28 | Pfizer Ltd | Process for preparing sertraline intermediates |
WO1993006217A1 (en) | 1991-09-19 | 1993-04-01 | Genentech, Inc. | EXPRESSION IN E. COLI OF ANTIBODY FRAGMENTS HAVING AT LEAST A CYSTEINE PRESENT AS A FREE THIOL, USE FOR THE PRODUCTION OF BIFUNCTIONAL F(ab')2 ANTIBODIES |
US5587458A (en) | 1991-10-07 | 1996-12-24 | Aronex Pharmaceuticals, Inc. | Anti-erbB-2 antibodies, combinations thereof, and therapeutic and diagnostic uses thereof |
WO1993008829A1 (en) | 1991-11-04 | 1993-05-13 | The Regents Of The University Of California | Compositions that mediate killing of hiv-infected cells |
EP0625200B1 (en) | 1992-02-06 | 2005-05-11 | Chiron Corporation | Biosynthetic binding protein for cancer marker |
WO1994002178A1 (en) | 1992-07-27 | 1994-02-03 | The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Targeting of liposomes to the blood-brain barrier |
PL174721B1 (pl) | 1992-11-13 | 1998-09-30 | Idec Pharma Corp | Przeciwciało monoklonalne anty-CD20 |
US5635483A (en) | 1992-12-03 | 1997-06-03 | Arizona Board Of Regents Acting On Behalf Of Arizona State University | Tumor inhibiting tetrapeptide bearing modified phenethyl amides |
US5780588A (en) | 1993-01-26 | 1998-07-14 | Arizona Board Of Regents | Elucidation and synthesis of selected pentapeptides |
WO1994029351A2 (en) | 1993-06-16 | 1994-12-22 | Celltech Limited | Antibodies |
US5773001A (en) | 1994-06-03 | 1998-06-30 | American Cyanamid Company | Conjugates of methyltrithio antitumor agents and intermediates for their synthesis |
US5789199A (en) | 1994-11-03 | 1998-08-04 | Genentech, Inc. | Process for bacterial production of polypeptides |
US5731168A (en) | 1995-03-01 | 1998-03-24 | Genentech, Inc. | Method for making heteromultimeric polypeptides |
US5840523A (en) | 1995-03-01 | 1998-11-24 | Genetech, Inc. | Methods and compositions for secretion of heterologous polypeptides |
US5869046A (en) | 1995-04-14 | 1999-02-09 | Genentech, Inc. | Altered polypeptides with increased half-life |
US6329163B1 (en) | 1995-06-07 | 2001-12-11 | Elan Pharmaceuticals, Inc. | Assays for detecting β-secretase inhibition |
WO1996040885A2 (en) | 1995-06-07 | 1996-12-19 | Athena Neurosciences, Inc. | β-SECRETASE, ANTIBODIES TO β-SECRETASE, AND ASSAYS FOR DETECTING β-SECRETASE INHIBITION |
US5714586A (en) | 1995-06-07 | 1998-02-03 | American Cyanamid Company | Methods for the preparation of monomeric calicheamicin derivative/carrier conjugates |
US5744346A (en) | 1995-06-07 | 1998-04-28 | Athena Neurosciences, Inc. | β-secretase |
US5712374A (en) | 1995-06-07 | 1998-01-27 | American Cyanamid Company | Method for the preparation of substantiallly monomeric calicheamicin derivative/carrier conjugates |
US6221645B1 (en) | 1995-06-07 | 2001-04-24 | Elan Pharmaceuticals, Inc. | β-secretase antibody |
US6267958B1 (en) | 1995-07-27 | 2001-07-31 | Genentech, Inc. | Protein formulation |
GB9603256D0 (en) | 1996-02-16 | 1996-04-17 | Wellcome Found | Antibodies |
AU1684097A (en) | 1996-12-11 | 1998-07-03 | Athena Neurosciences, Inc. | Beta-secretase isolated from human 293 cells |
GB9701684D0 (en) | 1997-01-28 | 1997-03-19 | Smithkline Beecham Plc | Novel compounds |
US6171586B1 (en) | 1997-06-13 | 2001-01-09 | Genentech, Inc. | Antibody formulation |
PT994903E (pt) | 1997-06-24 | 2005-10-31 | Genentech Inc | Metodos e composicoes para glicoproteinas galactosiladas |
US6040498A (en) | 1998-08-11 | 2000-03-21 | North Caroline State University | Genetically engineered duckweed |
WO1999022764A1 (en) | 1997-10-31 | 1999-05-14 | Genentech, Inc. | Methods and compositions comprising glycoprotein glycoforms |
US6610833B1 (en) | 1997-11-24 | 2003-08-26 | The Institute For Human Genetics And Biochemistry | Monoclonal human natural antibodies |
WO1999029888A1 (en) | 1997-12-05 | 1999-06-17 | The Scripps Research Institute | Humanization of murine antibody |
US6194551B1 (en) | 1998-04-02 | 2001-02-27 | Genentech, Inc. | Polypeptide variants |
PT1068241E (pt) | 1998-04-02 | 2007-11-19 | Genentech Inc | Variantes de anticorpos e respectivos fragmentos |
DK2180007T4 (da) | 1998-04-20 | 2017-11-27 | Roche Glycart Ag | Glycosyleringsteknik for antistoffer til forbedring af antistofafhængig cellecytotoxicitet |
US6699671B1 (en) | 1998-09-24 | 2004-03-02 | Pharmacia & Upjohn Company | Alzheimer's disease secretase, APP substrates therefor, and uses therefor |
US7456007B1 (en) | 1998-12-31 | 2008-11-25 | Elan Pharmaceuticals, Inc. | β-secretase enzyme compositions and methods |
US7115410B1 (en) | 1999-02-10 | 2006-10-03 | Elan Pharmaceuticals, Inc. | β-secretase enzyme compositions and methods |
US6737056B1 (en) | 1999-01-15 | 2004-05-18 | Genentech, Inc. | Polypeptide variants with altered effector function |
MXPA01007170A (es) | 1999-01-15 | 2002-07-30 | Genentech Inc | Variantes de polipeptidos con funcion efectora alterada. |
WO2000047618A2 (en) | 1999-02-10 | 2000-08-17 | Elan Pharmaceuticals, Inc. | HUMAN β-SECRETASE ENZYME, INHIBITORS AND THEIR COMPOSITIONS AND USES |
AU3770800A (en) | 1999-03-26 | 2000-10-16 | Amgen, Inc. | Beta secretase genes and polypeptides |
EP2275540B1 (en) | 1999-04-09 | 2016-03-23 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. | Method for controlling the activity of immunologically functional molecule |
US6545127B1 (en) | 1999-06-28 | 2003-04-08 | Oklahoma Medical Research Foundation | Catalytically active recombinant memapsin and methods of use thereof |
BR0014480A (pt) | 1999-10-04 | 2002-06-11 | Medicago Inc | Método para regular a transcrição de genes estranhos |
US7125978B1 (en) | 1999-10-04 | 2006-10-24 | Medicago Inc. | Promoter for regulating expression of foreign genes |
JP4668498B2 (ja) | 1999-10-19 | 2011-04-13 | 協和発酵キリン株式会社 | ポリペプチドの製造方法 |
GB9924957D0 (en) | 1999-10-21 | 1999-12-22 | Smithkline Beecham Plc | Novel treatment |
US7514408B1 (en) | 1999-12-02 | 2009-04-07 | Elan Pharmaceuticals, Inc. | β-secretase enzyme compositions and methods |
JP2003516755A (ja) | 1999-12-15 | 2003-05-20 | ジェネンテック・インコーポレーテッド | ショットガン走査、すなわち機能性タンパク質エピトープをマッピングするための組み合わせ方法 |
AU767394C (en) | 1999-12-29 | 2005-04-21 | Immunogen, Inc. | Cytotoxic agents comprising modified doxorubicins and daunorubicins and their therapeutic use |
SI2857516T1 (sl) | 2000-04-11 | 2017-09-29 | Genentech, Inc. | Multivalentna protitelesa in njihove uporabe |
JP2004504018A (ja) | 2000-07-19 | 2004-02-12 | ファルマシア・アンド・アップジョン・カンパニー | β−セレクターゼ活性の基質およびアッセイ |
US6514221B2 (en) | 2000-07-27 | 2003-02-04 | Brigham And Women's Hospital, Inc. | Blood-brain barrier opening |
US7630838B2 (en) | 2000-09-22 | 2009-12-08 | American Home Products Corporation | Method for identifying agents that interact with beta-site APP cleaving enzyme (BACE) |
US6946292B2 (en) | 2000-10-06 | 2005-09-20 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Cells producing antibody compositions with increased antibody dependent cytotoxic activity |
MXPA03002974A (es) | 2000-10-06 | 2004-05-05 | Kyowa Hakko Kogyo Kk | Celulas que producen composiciones de anticuerpo. |
US7064191B2 (en) | 2000-10-06 | 2006-06-20 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Process for purifying antibody |
AU2002243391A1 (en) | 2000-10-27 | 2002-06-24 | The Johns Hopkins University School Of Medicine | Beta-secretase transgenic organisms, anti-beta-secretase antibodies, and methods of use thereof |
US6596541B2 (en) | 2000-10-31 | 2003-07-22 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods of modifying eukaryotic cells |
US20030083299A1 (en) | 2000-11-04 | 2003-05-01 | Ferguson Ian A. | Non-invasive delivery of polypeptides through the blood-brain barrier |
ES2295228T3 (es) | 2000-11-30 | 2008-04-16 | Medarex, Inc. | Roedores transcromosomicos transgenicos para la preparacion de anticuerpos humanos. |
US7217556B1 (en) | 2000-12-23 | 2007-05-15 | Pfizer Inc | Crystallization and structure determination of glycosylated human beta secretase, an enzyme implicated in Alzheimer's disease |
US7601528B1 (en) | 2000-12-23 | 2009-10-13 | Elan Pharmaceuticals, Inc. | Crystallization and structure determination of glycosylated human beta secretase, an enzyme implicated in alzheimer's disease |
AU2002239727C1 (en) | 2000-12-28 | 2005-12-22 | Oklahoma Medical Research Foundation | Inhibitors of memapsin 2 and use thereof |
DE10121982B4 (de) | 2001-05-05 | 2008-01-24 | Lts Lohmann Therapie-Systeme Ag | Nanopartikel aus Protein mit gekoppeltem Apolipoprotein E zur Überwindung der Blut-Hirn-Schranke und Verfahren zu ihrer Herstellung |
US7384773B1 (en) | 2001-05-10 | 2008-06-10 | Pfizer Inc | Crystal of HIV protease-cleaved human beta secretase and method for crystallization thereof |
WO2002094985A2 (en) | 2001-05-22 | 2002-11-28 | Merck & Co., Inc. | Beta-secretase substrates and uses thereof |
MXPA04001072A (es) | 2001-08-03 | 2005-02-17 | Glycart Biotechnology Ag | Variantes de glicosilacion de anticuerpos que tienen citotoxicidad celulares dependiente de anticuerpos incrementada. |
WO2003039454A2 (en) | 2001-10-23 | 2003-05-15 | Oklahoma Medical Research Foundation | Beta-secretase inhibitors and methods of use |
BR0213761A (pt) | 2001-10-25 | 2005-04-12 | Genentech Inc | Composições, preparação farmacêutica, artigo industrializado, método de tratamento de mamìferos, célula hospedeira, método para a produção de uma glicoproteìna e uso da composição |
US20040093621A1 (en) | 2001-12-25 | 2004-05-13 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd | Antibody composition which specifically binds to CD20 |
US20030224512A1 (en) | 2002-05-31 | 2003-12-04 | Isis Pharmaceuticals Inc. | Antisense modulation of beta-site APP-cleaving enzyme expression |
WO2003085119A1 (fr) | 2002-04-09 | 2003-10-16 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Procede d'amelioration de l'activite d'une composition d'anticorps de liaison avec le recepteur fc$g(g) iiia |
AU2003236019A1 (en) | 2002-04-09 | 2003-10-20 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. | Drug containing antibody composition appropriate for patient suffering from Fc Gamma RIIIa polymorphism |
ATE503829T1 (de) | 2002-04-09 | 2011-04-15 | Kyowa Hakko Kirin Co Ltd | Zelle mit erniedrigter oder deletierter aktivität eines am gdp-fucosetransport beteiligten proteins |
WO2003085107A1 (fr) | 2002-04-09 | 2003-10-16 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Cellules à génome modifié |
CA2481837A1 (en) | 2002-04-09 | 2003-10-16 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Production process for antibody composition |
US7691568B2 (en) | 2002-04-09 | 2010-04-06 | Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd | Antibody composition-containing medicament |
US7166454B1 (en) | 2002-05-24 | 2007-01-23 | Schering Corporation | Codon-optimized β-secretase and methods of refolding and processing |
EP2305710A3 (en) * | 2002-06-03 | 2013-05-29 | Genentech, Inc. | Synthetic antibody phage libraries |
EP1513879B1 (en) | 2002-06-03 | 2018-08-22 | Genentech, Inc. | Synthetic antibody phage libraries |
US7361740B2 (en) | 2002-10-15 | 2008-04-22 | Pdl Biopharma, Inc. | Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis |
US7314726B2 (en) | 2002-10-15 | 2008-01-01 | Bristol-Myers Squibb Company | Beta secretase exosite binding peptides and methods for identifying beta secretase modulators |
KR101111477B1 (ko) | 2002-12-03 | 2012-02-23 | 블랜체트 록펠러 뉴로사이언시즈 인스티튜트 | 치료제와 연결된 콜레스테롤을 포함하는 접합체 |
RS51318B (sr) | 2002-12-16 | 2010-12-31 | Genentech Inc. | Varijante imunoglobulina i njihova upotreba |
CA2510003A1 (en) | 2003-01-16 | 2004-08-05 | Genentech, Inc. | Synthetic antibody phage libraries |
US20060104968A1 (en) | 2003-03-05 | 2006-05-18 | Halozyme, Inc. | Soluble glycosaminoglycanases and methods of preparing and using soluble glycosaminogly ycanases |
US7871607B2 (en) | 2003-03-05 | 2011-01-18 | Halozyme, Inc. | Soluble glycosaminoglycanases and methods of preparing and using soluble glycosaminoglycanases |
WO2004099402A1 (en) | 2003-05-02 | 2004-11-18 | Elan Pharmaceuticals, Inc. | Glycosylation variants of bace |
AU2004260884B2 (en) * | 2003-07-22 | 2009-11-19 | Crucell Holland B.V. | Binding molecules against SARS-coronavirus and uses thereof |
US7758859B2 (en) * | 2003-08-01 | 2010-07-20 | Genentech, Inc. | Anti-VEGF antibodies |
US20050106667A1 (en) * | 2003-08-01 | 2005-05-19 | Genentech, Inc | Binding polypeptides with restricted diversity sequences |
WO2005014815A1 (en) | 2003-08-08 | 2005-02-17 | President And Fellows Of Harvard College | siRNA BASED METHODS FOR TREATING ALZHEIMER’S DISEASE |
CA2542046A1 (en) | 2003-10-08 | 2005-04-21 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Fused protein composition |
EP1705251A4 (en) | 2003-10-09 | 2009-10-28 | Kyowa Hakko Kirin Co Ltd | PROCESS FOR PRODUCING ANTIBODY COMPOSITION BY RNA INHIBITION OF FUNCTION OF $ G (A) 1,6-FUCOSYLTRANSFERASE |
US20070149763A1 (en) | 2003-10-15 | 2007-06-28 | Bristol-Myers Squibb Company | Beta secretase exosite binding peptides and methods for identifying beta secretase modulators |
CA2544865C (en) | 2003-11-05 | 2019-07-09 | Glycart Biotechnology Ag | Cd20 antibodies with increased fc receptor binding affinity and effector function |
SG195524A1 (en) | 2003-11-06 | 2013-12-30 | Seattle Genetics Inc | Monomethylvaline compounds capable of conjugation to ligands |
JP2007510425A (ja) * | 2003-11-06 | 2007-04-26 | エグゾニ・テラピューティック・ソシエテ・アノニム | BACE455、ヒトβ−セクレターゼの選択的スプライシング変異体 |
US7413737B2 (en) * | 2003-11-14 | 2008-08-19 | Massachusetts Institute Of Technology | Anti-hydroxylase antibodies and uses thereof |
WO2005053742A1 (ja) | 2003-12-04 | 2005-06-16 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | 抗体組成物を含有する医薬 |
NZ550217A (en) | 2004-03-31 | 2009-11-27 | Genentech Inc | Humanized anti-TGF-beta antibodies |
US7785903B2 (en) | 2004-04-09 | 2010-08-31 | Genentech, Inc. | Variable domain library and uses |
EP2374817B1 (en) | 2004-04-13 | 2017-09-06 | F. Hoffmann-La Roche AG | Anti-P-selectin antibodies |
TWI309240B (en) | 2004-09-17 | 2009-05-01 | Hoffmann La Roche | Anti-ox40l antibodies |
AU2005286607B2 (en) | 2004-09-23 | 2011-01-27 | Genentech, Inc. | Cysteine engineered antibodies and conjugates |
EP1801232B1 (en) | 2004-10-01 | 2012-03-14 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Method of screening transmembrane enzyme inhibitory substance |
ZA200701789B (en) * | 2004-10-04 | 2008-11-26 | Genentech Inc | Modulators of hepatocyte growth factor activator |
JO3000B1 (ar) | 2004-10-20 | 2016-09-05 | Genentech Inc | مركبات أجسام مضادة . |
EP1922083A2 (en) | 2005-08-10 | 2008-05-21 | Oklahoma Medical Research Foundation | Truncated memapsin 2 for use for treating alzheimer's disease |
EP2465870A1 (en) | 2005-11-07 | 2012-06-20 | Genentech, Inc. | Binding polypeptides with diversified and consensus VH/VL hypervariable sequences |
UA96139C2 (uk) * | 2005-11-08 | 2011-10-10 | Дженентек, Інк. | Антитіло до нейропіліну-1 (nrp1) |
US20070237764A1 (en) | 2005-12-02 | 2007-10-11 | Genentech, Inc. | Binding polypeptides with restricted diversity sequences |
AU2007248444B2 (en) * | 2006-01-05 | 2012-10-25 | Genentech, Inc. | Anti-EphB4 antibodies and methods using same |
TWI557138B (zh) * | 2006-01-20 | 2016-11-11 | 建南德克公司 | 抗-ephrinb2抗體及使用該抗體的方法 |
EP2016101A2 (en) | 2006-05-09 | 2009-01-21 | Genentech, Inc. | Binding polypeptides with optimized scaffolds |
WO2008027236A2 (en) | 2006-08-30 | 2008-03-06 | Genentech, Inc. | Multispecific antibodies |
ES2535637T3 (es) | 2006-10-27 | 2015-05-13 | Genentech, Inc. | Anticuerpos e inmunoconjugados y usos para los mismos |
US20100047232A1 (en) * | 2006-11-14 | 2010-02-25 | Jasvinder Atwal | Modulators of neuronal regeneration |
US20080226635A1 (en) | 2006-12-22 | 2008-09-18 | Hans Koll | Antibodies against insulin-like growth factor I receptor and uses thereof |
PE20081760A1 (es) * | 2007-02-09 | 2009-01-01 | Genentech Inc | Anticuerpos anti-robo4 y sus usos |
EP2139496A2 (en) | 2007-04-19 | 2010-01-06 | Vib Vzw | Oligonucleotide compositions for the treatment of alzheimer's disease |
CN100592373C (zh) | 2007-05-25 | 2010-02-24 | 群康科技(深圳)有限公司 | 液晶显示面板驱动装置及其驱动方法 |
PT2235064E (pt) | 2008-01-07 | 2016-03-01 | Amgen Inc | Método de preparação de moléculas heterodiméricas de fc de anticorpos utilizando efeitos de indução eletrostática |
TW201019959A (en) * | 2008-08-19 | 2010-06-01 | Regeneron Pharma | Human antibodies to human RANKL |
US8790642B2 (en) * | 2008-08-29 | 2014-07-29 | Genentech, Inc. | Cross-reactive and bispecific anti-IL-17A/F antibodies |
US20100233156A1 (en) | 2009-03-09 | 2010-09-16 | Georgetown University | Treating Central Nervous System Injury with Beta and Gamma Secretase Inhibitors |
CA2815840A1 (en) | 2010-11-10 | 2012-05-18 | Genentech, Inc. | Methods and compositions for neural disease immunotherapy |
TWI689314B (zh) | 2010-11-30 | 2020-04-01 | 建南德克公司 | 低親和力血腦障壁受體抗體及其用途 |
CA2828662A1 (en) | 2011-04-20 | 2012-10-26 | Roche Glycart Ag | Method and constructs for the ph dependent passage of the blood-brain-barrier |
US20150353639A1 (en) | 2012-05-21 | 2015-12-10 | Genentech, Inc. | Methods for improving safety of blood-brain barrier transport |
-
2011
- 2011-11-09 CA CA2815840A patent/CA2815840A1/en not_active Abandoned
- 2011-11-09 TW TW100140956A patent/TW201300417A/zh unknown
- 2011-11-09 EP EP11785551.0A patent/EP2638070B1/en active Active
- 2011-11-09 AU AU2011326564A patent/AU2011326564A1/en not_active Abandoned
- 2011-11-09 KR KR1020137014711A patent/KR20130133205A/ko not_active Application Discontinuation
- 2011-11-09 SG SG2013034947A patent/SG190682A1/en unknown
- 2011-11-09 WO PCT/US2011/059964 patent/WO2012064836A1/en active Application Filing
- 2011-11-09 EA EA201390669A patent/EA201390669A1/ru unknown
- 2011-11-09 CN CN201180054386.9A patent/CN103228674B/zh active Active
- 2011-11-09 AR ARP110104190A patent/AR083819A1/es unknown
- 2011-11-09 ES ES11785551.0T patent/ES2607086T3/es active Active
- 2011-11-09 MX MX2013004629A patent/MX346500B/es active IP Right Grant
- 2011-11-09 PE PE2013000968A patent/PE20140238A1/es not_active Application Discontinuation
- 2011-11-09 JP JP2013538846A patent/JP6163429B2/ja active Active
- 2011-11-09 EP EP16194064.8A patent/EP3176184B1/en active Active
- 2011-11-09 US US13/292,633 patent/US8772457B2/en active Active
-
2013
- 2013-04-24 ZA ZA2013/02980A patent/ZA201302980B/en unknown
- 2013-04-26 CO CO13106682A patent/CO6690815A2/es unknown
- 2013-05-02 IL IL226106A patent/IL226106A0/en unknown
- 2013-05-09 CL CL2013001290A patent/CL2013001290A1/es unknown
- 2013-06-05 MA MA35976A patent/MA34722B1/fr unknown
- 2013-06-10 EC ECSP13012673 patent/ECSP13012673A/es unknown
-
2014
- 2014-05-30 US US14/292,461 patent/US9453079B2/en active Active
-
2016
- 2016-08-11 US US15/234,649 patent/US9879094B2/en active Active
-
2017
- 2017-02-03 JP JP2017018384A patent/JP2017137312A/ja active Pending
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2009538629A (ja) * | 2006-05-30 | 2009-11-12 | ジェネンテック・インコーポレーテッド | 抗体およびイムノコンジュゲートとこれらの使用方法 |
JP2010523469A (ja) * | 2007-03-30 | 2010-07-15 | ジェネンテック, インコーポレイテッド | 抗体及びイムノコンジュゲートとこれらの使用方法 |
WO2009121948A2 (en) * | 2008-04-03 | 2009-10-08 | Vib Vzw | Single domain antibodies capable of modulating bace activity |
WO2009155609A1 (en) * | 2008-06-20 | 2009-12-23 | Oklahoma Medical Research Foundation | IMMUNOGENIC MEMAPSIN 2 β-SECRETASE PEPTIDES AND METHODS OF USE |
WO2010146058A1 (en) * | 2009-06-15 | 2010-12-23 | Vib Vzw | Bace1 inhibitory antibodies |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
BLOOD, 2007, VOL.110, NO.2, P.616-623, JPN6015048466, ISSN: 0003207529 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2018505651A (ja) * | 2014-11-19 | 2018-03-01 | ジェネンテック, インコーポレイテッド | BACElに対する抗体及び神経疾患免疫療法のためのその使用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
ES2607086T3 (es) | 2017-03-29 |
EP3176184A1 (en) | 2017-06-07 |
EA201390669A1 (ru) | 2013-11-29 |
JP2017137312A (ja) | 2017-08-10 |
CN103228674A (zh) | 2013-07-31 |
KR20130133205A (ko) | 2013-12-06 |
EP3176184B1 (en) | 2020-02-19 |
EP2638070B1 (en) | 2016-10-19 |
CO6690815A2 (es) | 2013-06-17 |
US20140286963A1 (en) | 2014-09-25 |
CL2013001290A1 (es) | 2013-11-15 |
US9453079B2 (en) | 2016-09-27 |
AR083819A1 (es) | 2013-03-27 |
US20170058049A1 (en) | 2017-03-02 |
US9879094B2 (en) | 2018-01-30 |
EP2638070A1 (en) | 2013-09-18 |
ECSP13012673A (es) | 2013-08-30 |
WO2012064836A9 (en) | 2012-07-05 |
MX2013004629A (es) | 2013-06-28 |
ZA201302980B (en) | 2014-07-30 |
CN103228674B (zh) | 2019-07-05 |
PE20140238A1 (es) | 2014-03-07 |
SG190682A1 (en) | 2013-07-31 |
US20120148599A1 (en) | 2012-06-14 |
CA2815840A1 (en) | 2012-05-18 |
MA34722B1 (fr) | 2013-12-03 |
US8772457B2 (en) | 2014-07-08 |
TW201300417A (zh) | 2013-01-01 |
WO2012064836A1 (en) | 2012-05-18 |
JP6163429B2 (ja) | 2017-07-12 |
AU2011326564A1 (en) | 2013-05-09 |
IL226106A0 (en) | 2013-06-27 |
MX346500B (es) | 2017-03-22 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6163429B2 (ja) | 神経疾患免疫治療のための方法及び組成物 | |
US11746160B2 (en) | Antibodies against BACE1 and use thereof for neural disease immunotherapy | |
TWI631135B (zh) | 抗jagged1抗體及使用方法 | |
JP6242813B2 (ja) | 抗lrp5抗体及び使用方法 | |
TWI545132B (zh) | 人類化抗-TAU(pS422)抗體及使用方法 | |
JP6568514B2 (ja) | 抗タウ抗体及び使用方法 | |
JP2014511106A (ja) | 抗pcsk9抗体及び使用方法 | |
RU2666990C2 (ru) | Антитела к jagged и способы их применения | |
TW201708254A (zh) | 人類化抗τ(pS422)抗體及使用方法 | |
CN114096562A (zh) | 抗原结合分子、药物组合物和方法 | |
KR20240054896A (ko) | 항C1s 항체의 사용 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20141107 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20141107 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20151201 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20160224 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20160601 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20161004 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20170203 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20170317 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20170523 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20170619 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6163429 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |