JP2014221808A - 糖尿病性網膜症の治療のための組成物及び方法 - Google Patents

Abstract

【課題】糖尿病性網膜症を治療する方法の提供。
【解決手段】リンパ球機能関連抗原−１（ＬＦＡ−１）及び細胞内接着分子−１（ＩＣＡＭ−１）の相互作用を阻害する有効量の治療薬を投与する、糖尿病性網膜症の治療方法。該治療方法において、有効量のＬＦＡアンタゴニストを投与することが好ましい。ＬＦＡアンタゴニストとしては、下式を代表例とする化合物であることが好ましい。

【選択図】なし

Description

本出願は、米国仮特許出願第６０／９９９５７１号（２００７年１０月１９日出願）の利益を主張するものであり、引用することにより全開示内容を本明細書に援用する。

世界中で、失明の最も大きい原因は、糖尿病性網膜症（ＤＲ）であり、これには頻繁に関連障害である糖尿病性黄斑浮腫が含まれる。糖尿病性黄斑浮腫は、糖尿病の合併症の一つであり、身体（特に眼）において、微小血管系損傷、障害、及び変性を引き起こす。視覚機能のこのような損失に続いて職場及び個人的機能を失うことは、個人に多大な影響を及ぼし、総じてその個人を取り囲む社会にも影響を及ぼす。糖尿病を有する個人の大半は、ある程度の糖尿病性網膜症を示し、糖尿病患者の数は増加している。したがって、失明、並びにＤＲ及び関連黄斑浮腫の症状に対するより効果的な治療が必要である。

第１態様では、本発明は、糖尿病性網膜症を患う被験体を治療する方法であって、ＬＦＡ−１及びＩＣＡＭの相互作用を阻害する有効量の治療薬を、必要とする被験体に投与する工程を備える。

第２態様では、黄斑浮腫を患う被験体を治療する方法が提供され、該方法は、ＬＦＡ−１及びＩＣＡＭの相互作用を阻害する有効量の治療薬を、必要とする被験体に投与する工程を備え、これにより、被験体の眼内の黄斑浮腫を減少させる及び／又は予防する。

第３態様では、被験体において糖尿病性網膜症を治療する方法が提供され、該方法は、被験体に、糖尿病性網膜症診断検査を実施する工程と、診断検査の結果に基づき、被験体が糖尿病性網膜症を患っているか否かを決定する工程と、糖尿病性網膜症の診断時に、被験体に、有効量の（ＬＦＡ−１）アンタゴニストを薬学的に許容可能な製剤において投与する工程とを備える。

第４態様では、糖尿病を患う被験体において術後の眼炎症を減少させる及び／又は予防する方法が提供され、該方法は、治療的に有効な量のＬＦＡ−１アンタゴニストを、必要とする被験体に投与する工程を備え、これにより、被験体の眼における術後炎症を減少させる及び／又は予防する。

ある実施形態では、術後の眼炎症は、硝子体切除術、レーザー光凝固治療、光線力学的治療、又はレーシック（ＬＡＳＩＫ）の結果である。その他の実施形態では、診断工程は、被験体の眼の撮像、又は被験体の眼の生体サンプルの分析によって実施される。

本発明のある実施形態では、ＩＣＡＭは、ＩＣＡＭ−１、ＩＣＡＭ−２、又はＩＣＡＭ−３である。ある実施形態では、ＩＣＡＭは、ＩＣＡＭ−１である。本発明のある実施形態では、治療薬は、ＬＦＡ−１アンタゴニストである。本発明のある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストは、ＩＣＡＭ−１結合部位と重複するＬＦＡ−１のαＬサブユニットにおける高親和性結合部位に結合する。本発明のその他の実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストは、ＬＦＡ−１のαＬサブユニットにおいてＩＣＡＭ−１の結合と直接的に競合する。本発明のある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストは、ＬＦＡ−１及びＩＣＡＭの間の相互作用の競合的インヒビターである。本発明のある実施形態において、ＬＦＡ−１アンタゴニストは、ＬＦＡ−１のαＬサブユニットにおいてＩＣＡＭ−１の結合のアロステリックアンタゴニストである。

本発明のある実施形態では、糖尿病性網膜症は、非増殖性である。本発明の幾つかでは、糖尿病性網膜症は、増殖性である。本発明のある実施形態では、糖尿病性網膜症に起因する損傷は、黄斑浮腫、網膜血管新生、網膜にわたる線維血管性成長、視力喪失、基底膜肥厚化、網膜浮腫、又は網膜虚血である。

本発明のある実施形態では、ＬＦＡアンタゴニストは、抗体として提供される。本発明のある実施形態では、ＬＦＡアンタゴニストは、化学式（Ｉ）（化１）、（ＩＩ）（化２）、（ＩＩＩ）（化３）、（ＩＶ）（化４）、（Ｖ）（化５）、又は（ＶＩ）（化６）として提供される。

ある実施形態では、化学式（ＩＩ）の化合物は、化学式（ＩＩ’）（化７）に示される立体化学構造を含んで提供される。

本発明のある実施形態では、化学式（ＩＩＩ）の化合物は、化学式（ＩＩＩ’）（化８）に示される立体化学構造を含んで提供される。

本発明のある実施形態では、ＬＦＡアンタゴニストは、化学式（ＩＡ）（化９）、（ＩＩＡ）（化１０）、又は（ＩＩＢ）（化１１）の化合物として提供される。

本発明のある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストは、以下の構造（化１２）（化１３）（化１４）（化１５）（化１６）（化１７）のうちの１つを備える化合物、及びそれらの薬学的に許容可能な塩及びエステルである。

本発明の実施形態の幾つかにおいて、ＬＦＡ−１アンタゴニストは、化学式（ＶＩＩ）（化１８）、化学式（ＶＩＩＩ）（化１９）、化学式（ＩＸ）（化２０）、化学式（Ｘ）（化２１）、もしくは化学式（ＸＩ）（化２２）、又は、その光学異性体、薬学的に許容可能な塩もしくは溶媒和物である。

本発明のある実施形態では、治療薬は、局所的、経口的、眼周辺、眼内、注射を介して、経鼻的、エアロゾルを介して、挿入を介して、埋め込み型装置を介して、又は滴下を介して投与される。本発明のその他の実施形態では、治療薬は、担体媒体物中において投与され、該担体媒体物が、液滴、洗浄液、ネブライザー液、ジェル、軟膏、エアロゾル、スプレー、ポリマーミクロ及びナノ粒子、溶液、懸濁液、固体、生分解性マトリックス、粉末、結晶、泡状物質、又はリポソームである。本発明のある実施形態では、治療的に有効量の治療薬は、被験体の眼に、局所性又は全身性送達によって送達される。本発明のある実施形態では、注入用投与は、眼内、又は眼周囲に実施される。本発明のある実施形態では、投与は、化合物のジェル、クリーム、粉末、泡状物質、結晶、リポソーム、スプレー、ポリマーミクロもしくはナノスフェア、又は液状懸濁液形態における眼内滴下投与によって達成される。ある実施形態では、ポリマーミクロもしくはナノスフェアは、眼周囲もしくは眼内の注入もしくは移植を介して、治療薬を送達するのに用いられる。

ある実施形態では、治療的に有効量の治療薬は、局所性又は全身性送達を介して、被験体の眼に送達される。

本発明のある実施形態では、治療薬は、担体媒体物中において投与され、該担体媒体物が、液滴、洗浄液、ネブライザー液、ジェル、軟膏、エアロゾル、スプレー、ポリマーミクロ及びナノ粒子、溶液、懸濁液、固体、生分解性マトリックス、粉末、結晶、泡状物質、又はリポソームである。本発明のある実施形態では、局所投与は、ポンプ−カテーテルシステム、注入、連続的又は選択的放出装置、生体吸収性移植物、連続性又は持続性放出製剤、及びコンタクトレンズからなる群から選択される装置を介して、化合物を眼に注入することを含む。本発明のある実施形態では、注入用投与は、眼内、硝子体内、眼周囲、皮下、結膜下、眼球後、又は前房内に、実施される。制御放出製剤もまた本発明のある実施形態において提供される。本発明のある実施形態では、本発明の化合物は、プロドラッグとして製剤される。本発明のある実施形態では、治療薬の製剤は、保存料を含まない。本発明のある実施形態では、治療薬の製剤は、少なくとも１つの保存料を含む。本発明のある実施形態では、治療薬の製剤は、増粘剤を含む。本発明のその他の実施形態では、治療薬の製剤は、ＰＬＧＡミクロ又はナノ粒子を使用する。

本発明のある実施形態では、化合物は、被験体に、約１×１０^−８乃至約１×１０^−１モル／リットルの眼内又は網膜の濃度を達成するために十分な量で投与される。本発明のある実施形態では、化合物は、少なくとも１年に１回投与される。本発明のその他の実施形態では、化合物は、少なくとも１日に１回投与される。本発明のその他の実施形態では、化合物は、少なくとも１週間に１回投与される。本発明のある実施形態では、化合物は、少なくとも１ヶ月に１回投与される。

本発明のある実施形態では、第２の治療薬は、ＬＦＡ−１アンタゴニストの投与の前に、併用して、同時に、又は後に、投与される。ある実施形態では、第２の治療薬は、抗酸化剤、抗炎症剤、抗菌剤、ステロイド剤、プロテインキナーゼＣインヒビター、アンジオテンシン変換酵素インヒビター、血管新生抑制剤、補体インヒビター、及び抗アポトーシス剤からなる群から選択される。本発明のある実施形態では、第２の治療薬は、ＬＦＡ−１上のアロステリック結合部位に結合する抗接着治療薬である。本発明のある実施形態では、第２の治療薬は、抗接着治療抗体又は抗体フラグメントである。

本発明のある実施形態では、診断検査が、ＬＦＡ−１アンタゴニストを用いた治療方法に含まれる。一実施形態において、糖尿病性網膜症に関する診断試験が実施され、病気の診断がなされた後、被験体には、本明細書に記載される如く、ＬＦＡ−１アンタゴニストが投与される。本発明のある実施形態では、診断検査は、被験体の眼の撮像、又は被験体の眼の生体サンプルの分析によって実施される。

その他の態様では、本発明は、ＬＦＡ−１及びＩＣＡＭの相互作用を阻害する治療薬及び薬学的に許容可能な担体を含む眼送達用に製剤された医薬組成物を提供する。ある実施形態では、医薬組成物は、ＬＦＡ−１及びＩＣＡＭの相互作用を阻害する治療薬を含み、これは、化学式（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）、（ＩＸ）、（Ｘ）、又は（ＸＩ）の化合物である。ある実施形態では、医薬組成物は、局所的投与に適切である。ある実施形態では、医薬組成物は、注入を介した投与に適切である。ある実施形態では、医薬組成物は、移植物としての投与に適切である。

その他の態様では、化合物は、本発明の方法における使用のために提供される。本発明の方法において有用な化合物は、抗体、抗体フラグメント、ポリペプチド、ペプチド、ポリマー、及び有機小分子を含む。本発明の方法のその他の実施形態では、抗体ラプティバが、糖尿病性網膜症を治療するための眼用製剤において使用される。

本明細書において記載される全ての刊行物及び特許出願は、各個別の刊行物もしくは特許出願が、参照することによりその全体を援用すると具体的に個別に示されているかの如く、同じ内容を参照することにより、その全体を本明細書に援用する。

ＬＦＡ−１：ＩＣＡＭ−１の相互作用に起因する白血球の回転、付着及び経内皮移動を示す。 ＬＦＡ−１：ＩＣＡＭ−１の相互作用の抗原活性を示す。 ＬＦＡ−１：ＩＣＡＭ−１の相互作用の共刺激機能を示す。 同定方法において有用な小分子アンタゴニストを示す。 化合物５が架橋したＬＦＡ−１のＳＤＳ−ＰＡＧＥ分析を示す。 野生型ＬＦＡ−１又はＩドメインが欠如したＬＦＡ−１を発現する２９３細胞に対する化合物２Ｂ及びＩＣＡＭ−１−Ｉｇの結合を示す。 ＬＦＡ−１／ＩＣＡＭ−１及びＬＦＡ−１／小分子のＥＬＩＳＡにおいて、化合物２Ａ、３、Ａ−２８６９８２及びｓＩＣＡＭ−１によるアンタゴニストの競合を示す。 ＬＦＡ−１／ＩＣＡＭ−１及びＬＦＡ−１／小分子のＥＬＩＳＡにおいて、アンタゴニスト競合からのＩＣ５０値の相関性を示す。 ＬＦＡ−１／ＩＣＡＭ−１及びＬＦＡ−１／小分子のＥＬＩＳＡにおいて、リガンド結合に対するアンタゴニストの効果を示す。 ｓＩＣＡＭ−１及び化合物３拮抗作用のシルド回帰を示す。 炎症性サイトカインの放出時における本発明の直接的競合ＬＦＡ−１アンタゴニストの効果の図示であり、ブドウ球菌エンテロトキシンＢ（ＳＥＢ）で刺激されたヒト末梢血単核球（ＰＢＭＣ）におけるものであり、シクロスポリン−Ａ（ＣｓＡ）の効果と比較される。 本発明の^１４Ｃ標識付した直接的競合ＬＦＡ−１アンタゴニストの局所的投与を介した眼内分布の図示であり、投与後３０分の時間点と４時間の時間点において、放射標識検出によって測定される。

本発明の新規の特性は、添付の請求の範囲において具体的に説明される。本発明の特性及び利点のより良い理解は、本発明の原理が用いられる具体的な実施形態である以下の詳細な記述、及び図面を参照することにより得られる。

Ｉ. 生物学及び疾病：糖尿病性網膜症（ＤＲ）、及びＤＲの治療におけるＬＦＡ−１アンタゴニストの使用
糖尿病は、この疾病を患う個体の身体の全域に見られる悪影響を引き起こす世界的規模の疾病といわれることが多く、個体の年齢が増加するにつれて著しく増大することがある。糖尿病の眼の合併症は、世界中で視力障害及び失明を引き起こす原因である。

総合的作用の１つは、微小毛細血管の自己調節能の障害を引き起こす網膜微小血管における変化の進行であり、糖尿病性網膜症（ＤＲ）として知られる症状である。

糖尿病性網膜症は、大抵、臨床疾病管理に関し２つの分類に分けられる：非増殖（又はバックグラウンド段階）及びその後の増殖段階である。

非増殖性糖尿病性網膜症（ＮＰＤＲ）は、その発症において、正常微小血管構築の異常を示し、網膜毛細血管の変性、嚢状毛細血管瘤、周皮細胞欠損毛細血管、及び毛細血管閉鎖と閉塞の形成に特徴付けられる。作用機構は、糖尿病誘導血管炎症を含み、白血球及び血小板による血管腔の閉塞、続いて周皮細胞及び内皮細胞両方の最終的な死を引き起こす。炎症過程による血管壁への白血球の引き付けと粘着は、白血球を一時的に内皮細胞に粘着させ（白血球停滞）、細胞傷害性因子を放出させ、内皮細胞を殺傷する。損傷を受けた内皮表面は、血小板の粘着、凝集、微小血栓形成、血管閉塞及び虚血を開始する。内皮損傷のその他の結果は、血液網膜関門（ＢＲＢ）における変化であり、血管透過性の増大を引き起こす。このことは、蛍光眼底血管造影中のフルオレセインの漏出、又は光干渉断層撮影（ＯＣＴ）によって評価される網膜肥厚化から明らかである。この漏出の結果は、臨床的に有意な黄斑浮腫、及び網膜におけるリポタンパク質の蓄積（硬性白斑）となる可能性があり、網膜肥厚化の一因となる。この過程が続けば、網膜神経節細胞が失われ、視力障害又は失明を引き起こすことになる。内皮細胞における脈管構造の変化、周皮細胞死、及び毛細血管閉塞に起因する自己調節能の破壊及び網膜血流の減少は、ＤＲ進行のマーカーであり、網膜虚血の発達を引き起こし、これにより、ＤＲのさらに重篤な増殖段階へと発達させることになる。

増殖性ＤＲは、新血管形成又は血管形成を伴い、これは網膜の円板又はその他の位置における網膜虚血によって誘導される。この新規の脈管構造は、硝子体液の出血及び随伴する収縮性線維組織からの網膜剥離を引き起こす可能性がある。

糖尿病性網膜症のこの過程中のいずれの時点においても、黄斑浮腫もしくは糖尿病性黄斑浮腫（ＤＭＥ）が発現する可能性があり、視力機能に深刻な影響を与える。この関連障害の進行は、網膜血管漏出によって予測され、視力喪失の危険性を減少させるために光凝固治療に至ることになる。糖尿病性網膜症の患者の大部分がこの障害も患っているため、これは関連臨床介入標的である。これら損傷又は変性損傷の全ては、機能障害を招く可能性があり、又はさらに視力の完全喪失をもたらし、治療的介入の標的を示す。現在、利用できる効果的な治療的選択肢はない。レーザー光凝固術は、眼の各種領域にレーザーによる火傷を与えることを伴い、多くの新血管形成関連障害の治療において用いられる。新血管形成は、特に、散在性もしくは汎網膜光凝固で一般的に治療される。しかしながら、レーザー治療は、治療領域に対応して永久的盲点を引き起こすことがある。レーザー治療は、持続性もしくは再発性出血も引き起こすことがあり、網膜剥離の危険性を増大させ、あるいは、新血管形成もしくは線維症を誘導する。眼関連障害に対するその他の治療の選択肢は、温熱療法、硝子体切除術、光線力学的治療、放射線治療、外科手術（例えば、過剰な眼組織の除去）等を含む。しかしながら、大抵の事例では、全ての利用可能な治療の選択肢は、治療的効果が限られており、費用の高い手順の繰り返しを必要とし、及び／又は危険な副作用が付随する。

高血糖管理は、この進行を止めるのに十分であるとは証明されていない。多くの手順がＤＲにおける網膜毛細血管閉塞及び毛細血管閉鎖の一因として同定されてきており、微小血栓症、アポトーシス、及び炎症性変化を含み、これは、ＤＲの進行を予防する及び／又は既に生じた損傷を回復に向かわせるための介入点として有用である可能性がある。さらに、ＢＲＢの崩壊及び毛細血管の非かん流の開始における初期変化は、糖尿病性網膜脈管構造への白血球接着として現れる。

接着白血球は、ラットのストレプトゾトシン誘導実験的糖尿病において１週間以内に、網膜内皮細胞の損傷及び死に、時間的に且つ空間的に関連する。ＩＣＡＭ−１及びＣＤ１８の抗体ベースの中和は、白血球接着及び網膜内皮細胞損傷と死の両方を予防することが示されてきた(A. M. Joussen, T. Murata, A. Tsujikawa, B. Kirchof, S-E. Bursell, A. P. Adamis 「Leukocyte- Mediated Endothelial Cell Injury and Death in the Diabetic Retina」 (2001) A, J. Pathol. 158(1): 147-162.)。

接着現象を阻害し、炎症性応答周期を破壊し、及び虚血組織における無細胞毛細血管の形成を予防することは、これら全てがこの疾病段階において生じるために、治療の有利な戦略である可能性がある。リンパ球機能関連抗原−１（ＬＦＡ−１）／細胞内接着分子−１(ＩＣＡＭ−１)の相互作用は、これら分子現象の夫々を媒介する。したがって、本発明のＬＦＡ−１アンタゴニストは、この疾病に観察される１つ又はそれ以上の病理学的症状に対する治療に有用であることができる。

作用機構を制限することを意図するものではないが、本発明の方法は、ＬＦＡ−１及びＩＣＡＭ−１との間の相互作用を阻害することによって、糖尿病性網膜症（ＤＲ）の開始と進行を阻害することを含む。ＬＦＡ−１及びＩＣＡＭ−１は、リンパ球／白血球の接着、移動、及び増殖過程に関与する細胞外受容体領域を有する分子であり、炎症反応のカスケードを引き起こす。好適な実施形態では、このような方法は、インビトロ及びインビボにおいて抗炎症性効果を提供し（例えば、さらなる詳細は以下に記載される）、ＤＲの治療において有用である。

ヒトの血液は、白血球（white blood cells (leukocytes)）を含み、これらは、さらに、好中球、リンパ球（Ｂ及びＴサブタイプを有する）、単球、好酸球、及び好塩基球として分類される。これらのクラスの白血球、好中球、好酸球、好塩基球、及びリンパ球の幾つかは、炎症性障害に含まれる。ＬＦＡ−１は、多数の白血球上で発現する白血球インテグリンの群の１つであり、リガンドとして多数のＩＣＡＭと相互作用するリンパ性インテグリンであると考えられる。これらの相互作用を破壊し、故に免疫／炎症性応答を破壊することは、炎症、詳細には眼の炎症の減少を提供する。

例えば、ＩＣＡＭ−１（ＣＤ５４）は、免疫グロブリンタンパク質スーパーファミリー内の接着受容体ＩＣＡＭファミリー（ＩＣＡＭ−１、ＩＣＡＭ−２、ＩＣＡＭ−３、ＩＣＡＭ−４）のメンバーであり、活性化白血球、皮膚線維芽細胞、及び内皮細胞上で発現する。これは、通常は脈管構造をライニングしている内皮細胞上で発現し、免疫／炎症の開始中に、ＩＬ−１、ＬＰＳ、及びＴＮＦなどのサイトカインへの曝露の際に上方制御される。

最近１０年間にわたり実施された研究は、カスケード内での細胞対細胞の誘発相互作用に焦点を当て、免疫系内における細胞の移動及び活性化に関与する分子現象を解明するのに役立ってきた。細胞内接着分子（ＩＣＡＭ）と白血球インテグリンとの相互作用は、免疫系の機能において役割を果たす。抗原提示、白血球媒介性細胞毒性、Ｔ細胞媒介性細胞毒性、及び白血球経内皮移動（漏出）などの免疫過程は、白血球インテグリンと相互作用するＩＣＡＭによって媒介される細胞接着を必要とする。

ＩＣＡＭ−１とＬＦＡ−１（ＬＦＡ−１は、α_Ｌβ_２及びＣＤ１１ａ／ＣＤ１８とも呼ばれる）との相互作用は、図１に示すように、接着、白血球経内皮移動、傷害部位への移動、及び活性化標的部位でのリンパ球の増殖の過程に関係することが証明されてきた。例えば、現在では、白血球の接着及び経内皮移動の前に、炎症性応答の成分であるサイトカイン／ケモカインの存在が、白血球上で構成的に発現したインテグリンを活性化すると考えられている。血管内皮細胞は、同じサイトカイン／ケモカインの存在に応答して、ＩＣＡＭ−１もまた上方制御する。回転白血球が活性化された内皮細胞に近づくと、それらの進行は、まずこれら上方制御されたＩＣＡＭ−１受容体によって遅くなる。その後、血管内皮細胞表面で発現するＬＦＡ−１とＩＣＡＭ−１との間のリガンド／受容体相互作用が続き、これはリンパ球がそれ以上回転することを阻止する。リンパ球は、次に平板化し、遊走が起こる。この過程は、血管内皮細胞を介したリンパ球遊走及び末梢血からリンパ節へのリンパ球輸送のどちらにおいても重要である。しかしながら、糖尿病性網膜症（ＤＲ）では、上述した如く、白血球停滞は、細胞傷害性因子放出の初期要因であり、局部における内皮細胞を損傷及び／又は殺傷するものである。この損傷は、血液漏出及び炎症を引き起こし、有害反応を継続及び／又は増幅させることになる。

ＬＦＡ−１は、図２に示すように、Ｔ細胞及び抗原提示細胞（ＡＰＣ）の相互作用表面の物理的構造であると定義できる免疫学的シナプスを作り且つ維持するという役割を果たす。ＬＦＡ−１は、ＡＰＣとのＴ細胞結合を安定化させ、これによりＴ細胞の活性化を導く。ＬＦＡ−１とＩＣＡＭ−１との相互作用もまた、図３に示すように、静止Ｔ細胞へと共刺激性シグナルを提供するようにみられる。ＣＤ４＋Ｔ細胞増殖及びサイトカイン合成は、炎症性応答の一部としてこの相互作用によって媒介される。

ＩＣＡＭ−１とＬＦＡ−１との相互作用が免疫／炎症性応答に及ぼす役割を前提とすると、所望の治療結果（例えば、過剰炎症性応答現象における相互作用の阻害）を達成するためにこれらの相互作用を調節することが望ましい。同様に、ＬＦＡ−１は、ＩＣＡＭファミリー内に、多数のシグナル経路に関係する数種のリガンドパートナー（ＩＣＡＭ−１、ＩＣＡＭ−２、及びＩＣＡＭ−３）を有するため、本発明のある実施形態では、これらの相互作用を選択的に調節することが望ましい。本発明のある実施形態では、治療薬は、ＬＦＡ−１と、ＩＣＡＭ−１、ＩＣＡＭ−２、及び／又はＩＣＡＭ−３との関係を妨げるように提供され、このようにして各対の相互作用のための夫々のシグナル経路が調節される。

本明細書に記載された方法及び組成物は、本明細書に記載された経路の１つ又はそれ以上の要素を調節することができる。ＬＦＡ−１とＩＣＡＭ−１との相互作用を阻害することに加えて、本発明の方法及び組成物は、炎症過程の早期又は後期いずれかの部分においても同様に介入することができる。例えば、係留及び経内皮移動の前に、内皮細胞もしくは白血球上のＩＣＡＭ−１もしくはＬＦＡ−１の上方制御（活性化）は、本明細書に記載された方法及び組成物によって調節できる。本発明は、白血球輸送の過程においてＩＣＡＭ−１及びＬＦＡ−１を活性化するサイトカインもしくはケモカインの発現を調節すること、サイトカインもしくはケモカインの輸送を調節すること、停止した白血球の遊走を妨ぐこと、傷害もしくは炎症の部位における白血球増殖に関与する他の機序を介してシグナリングを調節することなどにおいて有用であることができる。

本発明は、ＬＦＡ−１とＩＣＡＭ−１との関係を妨げる治療薬を提供し、免疫細胞による、接着、移動、増殖、及び周囲組織への炎症シグナルの放出を阻害することができる。ある実施形態では、本発明は、ＬＦＡ−１とＩＣＡＭとの間の相互作用を阻害する治療薬を投与する方法を提供する。一例では、治療薬は、ＬＦＡ−１に結合するかＩＣＡＭに結合するかのいずれかである。より詳細には、本発明は、ＬＦＡ−１と、ＩＣＡＭ−１、ＩＣＡＭ−２、及び／又はＩＣＡＭ−３との間の関係を阻害するために、ＬＦＡ−１に結合する治療薬を提供することにより、ＬＦＡ−１アンタゴニストとして作用する。ある実施形態では、本発明によって提供される治療薬は、ＩＣＡＭ−１結合部位と重複するαＬサブユニットにおける高親和性結合部位で結合し、これは、ＬＦＡ−１の直接的競合アンタゴニストである。ある実施形態では、本発明によって提供される治療薬は、ＬＦＡ−１とＩＣＡＭ−１との間の相互作用を阻害するが、ＩＣＡＭ−１結合部位と重複するαＬサブユニットにおける高親和性結合部位を完全には遮断せず、競合的ではあるが、ＬＦＡ−１の直接的競合アンタゴニストではない。ある実施形態では、本発明によって提供される治療薬は、ＩＣＡＭ−１結合部位と重複するαＬサブユニットにおける高親和性結合部位以外の部位で結合し、アロステリックなアンタゴニストである。ある実施形態では、本発明によって提供される治療薬は、アロステリックなアンタゴニストであり競合的であるが、ＬＦＡ−１の直接的競合アンタゴニストではない。本発明のある実施形態では、治療薬は、糖尿病性網膜症、及びその症状に関連する障害を治療するのに有用である。

ＩＩ．本方法において有用な化合物
本明細書で使用する用語「脂肪族」は、１つ又は複数の官能基で任意に置換された、飽和及び不飽和両方の、直鎖状（非分枝状）もしくは分枝状脂肪族炭化水素を含む。当業者には理解されるように、本明細書で対象とする「脂肪族」は、アルキル、アルケニル、アルキニル部分を含むが、それらに限定されない。このようにして、本明細書で使用する用語「アルキル」は、直鎖及び分枝アルキル基を含む。類似の慣例は、「アルケニル」、「アルキニル」などの他の一般名にも当てはまる。

さらに、本明細書で使用する用語「アルキル」、「アルケニル」、「アルキニル」などは、置換基及び非置換基の両方を包含する。特定の実施形態では、本明細書で使用する「低級アルキル」は、約１−６の炭素原子を有する（置換、非置換、分枝状、もしくは非分枝状）のアルキル基を示すために使用される。

特定の実施形態では、本発明で使用されるアルキル、アルケニル、及びアルキニル基は、約１−２０の脂肪族炭素原子を含む。特定の他の実施形態では、本発明で使用されるアルキル、アルケニル、及びアルキニル基は、約１−１０の脂肪族炭素原子を含む。さらに他の実施形態では、本発明で使用されるアルキル、アルケニル、及びアルキニル基は、約１−８の脂肪族炭素原子を含む。さらに他の実施形態では、本発明で使用されるアルキル、アルケニル、及びアルキニル基は、約１−６の脂肪族炭素原子を含む。さらに他の実施形態では、本発明で使用されるアルキル、アルケニル、及びアルキニル基は、約１−４の炭素原子を含む。ここで、具体的な脂肪族基は、例えば、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、アリル、ｎ−ブチル、ｓｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ｎ−ペンチル、ｓｅｃ−ペンチル、イソペンチル、ｔｅｒｔ−ペンチル、ｎ−ヘキシル、ｓｅｃ−ヘキシル部分などを含み、この場合もまた、１つ又はそれ以上の置換基を有することができる。

アルケニル基には、例えば、エテニル、プロペニル、ブテニルなどが含まれるがそれらに限定されない。代表的なアルキニル基には、エチニル、２−プロピニルなどが含まれるがそれらに限定されない。

本明細書で使用する用語「低級アルキレン」は、２つの他の基を一緒に結合する（即ち、一方の端部で、例えばメチレン、エチレン、ブチレンなどの別の基に結合されている）炭化水素鎖を意味する。そのような置換基は、好ましくは、１−１０の炭素、及びより好ましくは１−５の炭素である。そのような基は、好ましくはアミノ、アセチルアミノ（窒素原子を介して結合された低級アルキルカルボニル基）、又はシクロ低級アルキル基で置換されることができる。後者は、好ましくは計３乃至１０のメチレン（結合した炭素を含む）、より好ましくは３乃至６個のメチレンを備える飽和炭化水素環を意味する。

本明細書で使用する用語「脂環式」は、脂肪族及び環状化合物の特性を兼ね備える化合物を意味しており、単環式もしくは多環式脂肪族炭化水素及び架橋シクロアルキル化合物を含むがそれらに限定されず、これらは１つ又はそれ以上の官能基で任意に置換される。

当業者には理解されるように、本明細書で対象とする「脂環式」は、シクロアルキル、シクロアルケニル、及びシクロアルキニル部分を含むがそれらに限定されず、これらは１つ又はそれ以上の官能基で任意に置換される。

そこで代表的な脂環式基は、例えば、シクロプロピル、−ＣＨ_２−シクロプロピル、シクロブチル、−ＣＨ_２−シクロブチル、シクロペンチル、−ＣＨ_２−シクロペンチル、シクロヘキシル、−ＣＨ_２−シクロヘキシル、シクロヘキセニルエチル、シクロヘキサニルエチル、ノルボルニル部分などを含むがそれらに限定されず、この場合もまた、１つ又はそれ以上の置換基を有することができる。

本明細書で使用する用語「アルコキシ」もしくは「アルキルオキシ」は、酸素原子を介した飽和もしくは不飽和親分子部分を意味する。特定の実施形態では、アルキル基は、約１−２０の脂肪族炭素原子を含む。特定の他の実施形態では、アルキル基は、約１−１０の脂肪族炭素原子を含む。さらに他の実施形態では、本発明で使用されるアルキル基は、約１−８の脂肪族炭素原子を含む。さらに他の実施形態では、アルキル基は、約１−６の脂肪族炭素原子を含む。さらに他の実施形態では、アルキル基は、約１−４個の脂肪族炭素原子を含む。アルコキシの例には、メトキシ、エトキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、ｉ−ブトキシ、ｓｅｃ−ブトキシ、ｔｅｒｔ−ブトキシ、ネオペントキシ、ｎ−ヘキシルオキシなどを含むがそれらに限定されない。

本明細書で使用する用語「低級アルコキシ」は、上記で定義した如く低級アルキルを意味し、また上記で定義した如く分枝状もしくは非分枝状であることができ、酸素によって他の基（即ち、アルキルエーテル）へ結合される。

本明細書で使用する用語「チオアルキル」は、硫黄原子を介して親分子部分に結合している飽和もしくは不飽和（即ち、Ｓ−アルケニル及びＳ−アルキニル）基を意味する。特定の実施形態では、アルキル基は、約１−２０の脂肪族炭素原子を含む。特定の他の実施形態では、アルキル基は、約１−１０の脂肪族炭素原子を含む。さらに他の実施形態では、本発明で使用されるアルキル基は、約１−８の脂肪族炭素原子を含む。さらに他の実施形態では、アルキル基は、約１−６の脂肪族炭素原子を含む。さらに他の実施形態では、アルキル基は、約１−４の脂肪族炭素原子を含む。チオアルキルの例には、メチルチオ、エチルチオ、プロピルチオ、イソプロピルチオ、ｎ−ブチルチオなどが含まれるがそれらに限定されない。

本明細書で使用する用語「低級アルキルチオ」は、二価硫黄原子を介して結合された低級アルキル基、例えばメチルメルカプトもしくはイソプロピルメルカプト基を意味する。低級アルキレンチオは、このような基の各端部で結合されたものを意味する。

用語「アルキルアミノ」は、構造−ＮＨＲ’（式中、Ｒ’は、本明細書に定義されるアルキルである）を有する基を意味する。用語「アミノアルキル」は、構造ＮＨ_２Ｒ’−（式中は本明細書に規定したとおりである）を有する基を意味する。特定の実施形態では、アルキル基は、約１−２０の脂肪族炭素原子を含む。特定の他の実施形態では、アルキル基は、約１−１０の脂肪族炭素原子を含む。さらに他の実施形態では、本発明で使用されるアルキル基は、約 の脂肪族炭素原子を含む。さらに他の実施形態では、アルキル基は、約１−６の脂肪族炭素原子を含む。さらに他の実施形態では、アルキル基は、約１−４の脂肪族炭素原子を含む。アルキルアミノの例には、メチルアミノなどが含まれるがそれらに限定されない。

本発明の化合物の上述した脂肪族（及びその他の）部分の置換基のある例には、脂肪族；脂環式；ヘテロ脂肪族；複素環式；芳香族；ヘテロ芳香族；アリール；ヘテロアリール；アルキルアリール；ヘテロアルキルアリール；アルキルヘテロアリール；ヘテロアルキルヘテロアリール；アルコキシ；アリールオキシ；ヘテロアルコキシ；ヘテロアリールオキシ；アルキルチオ；アリールチオ；ヘテロアルキルチオ；Ｒ_ｘには、独立して、脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、複素環式、アリール、ヘテロアリール、アルキルアリール、アルキルヘテロアリール、ヘテロアルキルアリール、もしくはヘテロアルキルヘテロアリール（このとき、上記及び本明細書に記載した脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、複素環式、アルキルアリール、もしくはアルキルヘテロアリール置換基のいずれも、置換もしくは非置換の、分枝状もしくは非分枝状、飽和もしくは不飽和であることができ、上記及び本明細書に記載したアリールもしくはヘテロアリール置換基のいずれも、置換もしくは非置換であることができる）が含まれるがそれらに限定されない。一般に適用できる置換基の追加的な例は、本明細書で記載する実施例に示した特定の実施形態によって具体的に説明する。

一般に、本明細書で使用する用語「芳香族部分」は、好ましくは３−１４の炭素原子を有する安定性単環式もしくは多環式の不飽和部分を意味し、炭素原子の各々が置換もしくは非置換であることができる。特定の実施形態では、用語「芳香族部分」は、各環原子において環の平面に垂直なｐ−軌道を有し、環内のｐｉ電子の数が（４ｎ＋２）（式中、ｎは整数である）であるヒュッケル則を満たす平面環を意味する。芳香族性に関するこれらの基準の１つもしくは全てを満たさない単環式もしくは多環式の不飽和部分は、本明細書では「非芳香族」と定義され、用語「脂環式」に包含される。

一般に、本明細書で使用する用語「ヘテロ芳香族部分」は、好ましくは３−１４の炭素原子を有する安定性単環式もしくは多環式の不飽和部分を意味し、炭素原子の各々が置換もしくは非置換であることができる；及び、環状炭素原子の代わりに環内にＯ、Ｓ、及びＮから選択される少なくとも１つのヘテロ原子を含む。特定の実施形態では、用語「ヘテロ芳香族部分」は、少なくとも１つのヘテロ原子を含み、各環原子において環の平面に垂直なｐ−軌道を有し、環内のｐｉ電子の数が（４ｎ＋２）（式中、ｎは整数である）であるヒュッケル則を満たす平面環を意味する。

本明細書に定義された芳香族及びヘテロ芳香族部分は、アルキルもしくはヘテロアルキル部分を介して結合されてよく、したがって、−（アルキル）芳香族、−（ヘテロアルキル）芳香族、−（ヘテロアルキル）ヘテロ芳香族、及び（ヘテロアルキル）ヘテロ芳香族部分もまた含まれることも理解されることである。そこで、本明細書で使用する表現「芳香族もしくはヘテロ芳香族部分」及び「芳香族、（ヘテロアルキル）芳香族、−（ヘテロアルキル）ヘテロ芳香族、及び（ヘテロアルキル）ヘテロ芳香族」は、互換可能である。置換基は、上述した置換基のいずれか、例えば脂肪族部分についてもしくは本明細書に開示した他の部分について言及した置換基を含むがそれらに限定されず、これらは安定性化合物の形成をもたらすものである。

本明細書で使用する用語「アリール」は、当技術分野における本用語の一般的意味と大きく相違せず、少なくとも１つの芳香族環を含む不飽和環状部分を意味する。特定の実施形態では、「アリール」は、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、インダニル、インデニルなどを含むがそれらに限定されない１つ又は２つの芳香族環を有する単環式もしくは二環式炭素環系を意味する。

本明細書で使用する用語「ヘテロアリール」は、当技術分野における本用語の一般的意味と大きく相違せず、５−１０の環原子を有する環状芳香族ラジカルを意味しており、そのうちの１個の環原子は、Ｓ及びＮから選択され；０、１、もしくは２個の環原子はＳ及びＮから独立して選択される追加のヘテロ原子であり；そして残りの環原子は炭素であり、ラジカルは、例えばピリジル、ピラジニル、ピリミジニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、チアゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアジアゾリル、オキサジアゾリル、チオフェニル、フラニル、キノリニル、イソキノリニルなどの環原子のいずれかを介して分子の残りの部分へ結合している。

アリール及びヘテロアリール基（二環式アリール基を含む）は、非置換もしくは置換であることができ、このとき置換とは、その上の１つ又はそれ以上の水素原子と：脂肪族；脂環式；ヘテロ脂肪族；複素環式；芳香族；ヘテロ芳香族；アリール；ヘテロアリール；アルキルアリール；ヘテロアルキルアリール；アルキルヘテロアリール；ヘテロアルキルヘテロアリール；アルコキシ；アリールオキシ；ヘテロアルコキシ；ヘテロアリールオキシ；アルキルチオ；アリールチオ；ヘテロアルキルチオ；ヘテロアリールチオ；Ｆ；Ｃｌ；Ｂｒ；Ｉ；−ＯＨ；−ＮＯ_２；−ＣＮ；−ＣＦ_３；−ＣＨ_２ＣＦ_３；−ＣＨＣｌ_２；−ＣＨ_２ＯＨ；−ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ；−ＣＨ_２ＮＨ_２；−ＣＨ_２ＳＯ_２ＣＨ_３；−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ_ｘ；−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ_ｘ）_２；−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ_ｘ；−ＯＣＯ_２Ｒ_ｘ；−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ_ｘ）_２；−Ｎ（Ｒ_ｘ）_２；−Ｓ（Ｏ）_２Ｒ_ｘ；−ＮＲ_ｘ（ＣＯ）Ｒ_ｘを含むがそれらに限定されない部分の１つもしくはそれ以上との独立交換を含み、式中、Ｒ_ｘは、夫々存在すると、独立して、脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、複素環式、芳香族、ヘテロ芳香族、アリール、ヘテロアリール、アルキルアリール、アルキルヘテロアリール、ヘテロアルキルアリール、もしくはヘテロアルキルヘテロアリールを含み、このとき上記及び本明細書に記載した脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、複素環式、アルキルアリール、もしくはアルキルヘテロアリール置換基のいずれも、置換もしくは非置換、分枝状もしくは非分枝状、飽和もしくは不飽和であることができ、並びに上記及び本明細書に記載した芳香族、ヘテロ芳香族、アリール、ヘテロアリール、−（アルキル）アリール、もしくは−（アルキル）へテロアリール置換基のいずれも、置換もしくは非置換であることができることは理解されることである。さらに、任意の２つの隣接基が一緒になり、４、５、６、もしくは７員の置換もしくは非置換の脂肪族もしくは複素環式部分を示すことができることは理解されることである。一般に適用できる置換基の追加例は、本明細書で記載する実施例に示した具体的な実施形態によって説明する。

本明細書で使用する用語「シクロアルキル」は、好ましくは３乃至７、好ましくは３乃至１０の炭素原子を有する基を特に意味する。適切なシクロアルキルは、脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、もしくは複素環式部分の場合には、脂肪族；脂環式；ヘテロ脂肪族；複素環式；芳香族；ヘテロ芳香族；アリール；ヘテロアリール；アルキルアリール；ヘテロアルキルアリール；アルキルヘテロアリール；ヘテロアルキルヘテロアリール；アルコキシ；アリールオキシ；ヘテロアルコキシ；ヘテロアリールオキシ；アルキルチオ；ヘテロアリールチオ；Ｆ；Ｃｌ；Ｂｒ；Ｉ；−ＯＨ；−ＮＯ_２；−ＣＮ；−ＣＦ_３；−ＣＨ_２ＣＦ_３；−ＣＨＣｌ_２；−ＣＨ_２ＯＨ；−ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ；−ＣＨ_２ＮＨ_２；−ＣＨ_２ＳＯ_２ＣＨ_３；−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ_ｘ；−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ_ｘ）_２；−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ_ｘ；−ＯＣＯ_２Ｒ_ｘ；−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ_ｘ）_２；−Ｎ（Ｒ_ｘ）_２；−Ｓ（Ｏ）_２Ｒ_ｘ；−ＮＲ_ｘ（ＣＯ）Ｒ_ｘを含むがそれらに限定されない置換基で任意に置換されることができるシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルなどが含まれるがそれらに限定されず、式中、Ｒ_ｘは、夫々存在すると、独立して、脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、複素環式、芳香族、ヘテロ芳香族、アリール、ヘテロアリール、アルキルアリール、アルキルヘテロアリール、ヘテロアルキルアリール、もしくはヘテロアルキルヘテロアリールが含むがこれらに限定されず、このとき上記及び本明細書に記載した脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、複素環式、アルキルアリール、もしくはアルキルヘテロアリール置換基のいずれも、置換もしくは非置換、分枝状もしくは非分枝状、飽和もしくは不飽和であることができ、並びに上記及び本明細書に記載した芳香族、ヘテロ芳香族、アリール、もしくはヘテロアリール置換基のいずれも、置換もしくは非置換であることができる。一般に適用できる置換基の追加的な例は、本明細書で記載する実施例に示した具体的な実施形態によって説明する。

本明細書で使用する用語「ヘテロ脂肪族」は、主鎖中の１つ又はそれ以上の炭素原子がヘテロ原子で置換されている脂肪族部分を意味する。そこで、ヘテロ脂肪族基は、炭素原子の代わりに、１つ又はそれ以上の酸素、硫黄、窒素、リン、もしくはケイ素原子を含む脂肪族鎖を意味する。ヘテロ脂肪族部分は、直鎖状もしくは分枝状、及び飽和もしくは不飽和であることができる。特定の実施形態では、ヘテロ脂肪族部分は、その上の１つ又はそれ以上の水素原子と、脂肪族；脂環式；ヘテロ脂肪族；複素環式；芳香族；ヘテロ芳香族；アリール；ヘテロアリール；アルキルアリール；アルキルヘテロアリール；アルコキシ；アリールオキシ；ヘテロアルコキシ；ヘテロアリールオキシ；アルキルチオ；アリールチオ；ヘテロアリールチオ；Ｆ；Ｃｌ；Ｂｒ；Ｉ；−ＯＨ；−ＮＯ_２；−ＣＮ；−ＣＦ_３；−ＣＨ_２ＣＦ_３；−ＣＨＣｌ_２；−ＣＨ_２ＯＨ；−ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ；−ＣＨ_２ＮＨ_２；−ＣＨ_２ＳＯ_２ＣＨ_３；−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ_ｘ；−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ_ｘ）_２；−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ_ｘ；−ＯＣＯ_２Ｒ_ｘ；−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ_ｘ）_２；−Ｎ（Ｒ_ｘ）_２；−Ｓ（Ｏ）_２Ｒ_ｘ；−ＮＲ_ｘ（ＣＯ）Ｒ_ｘを含むがそれらに限定されない１つ又はそれ以上の部分との独立交換によって置換されており、式中、Ｒ_ｘは、夫々存在すると、独立して、脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、複素環式、芳香族、ヘテロ芳香族、アリール、ヘテロアリール、アルキルアリール、アルキルヘテロアリール、ヘテロアルキルアリール、もしくはヘテロアルキルヘテロアリールが含まれるがこれらに限定されず、このとき上記及び本明細書に記載した脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、複素環式、アルキルアリール、もしくはアルキルヘテロアリール置換基のいずれも、置換もしくは非置換、分枝状もしくは非分枝状、飽和もしくは不飽和であることができ、並びに上記及び本明細書に記載した芳香族、ヘテロ芳香族、アリール、もしくはヘテロアリール置換基のいずれも、置換もしくは非置換であることができる。一般に適用できる置換基の追加的な例は、本明細書で記載する実施例に示した特定の実施形態によって具体的に説明する。

本明細書で使用する用語「ヘテロシクロアルキル」、「複素環」、もしくは「複素環式」は、ヘテロ脂肪族及び環式化合物の特性を兼ね備えた化合物を意味しており、５−１６の原子を有する飽和及び不飽和の単環式もしくは多環式環系が含まれるがそれらに限定されず、このとき少なくとも１つの環原子は、Ｓ及びＮ（このとき窒素及び硫黄ヘテロ原子は任意に酸化されることができる）から選択されるヘテロ原子であり、環系は本明細書に定義した１つ又はそれ以上の官能基で任意で置換されている。特定の実施形態では、用語「ヘテロシクロアルキル」、「複素環」、もしくは「複素環式」は、二環式もしくは三環式基を含むがそれらに限定されない非芳香族の５、６、もしくは７員環又は多環式基を意味し、このとき少なくとも１つの環原子のヘテロ原子は、Ｓ及びＮ（このとき窒素及び硫黄ヘテロ原子は任意に酸化されることができる）から選択され、ここには、酸素、硫黄、及び窒素から独立して選択される１−３のヘテロ原子を有する縮合６員環が含まれる。このとき、（ｉ）各５員環は０−２の二重結合を有し、各６員環は０−２の二重結合を有し、及び各７員環は０−３の二重結合を有する、（ｉｉ）窒素及び硫黄ヘテロ原子は任意に酸化されることができる、（ｉｉｉ）窒素ヘテロ原子は、任意で四級化されることができる、及び（ｉｖ）上記の複素環のいずれも、アリールもしくはヘテロアリール環に縮合されることができる。代表的な複素環には、フラニル、ピラニル、ピロリル、チエニル、ピロリジニル、ピラゾリニル、ピラゾリジニル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、オキサゾリル、オキサゾリジニル、イソオキサゾリル、イソキサゾリジニル、ジオキサゾリル、チアジアゾリル、オキサジアゾリル、テトラゾリル、トリアゾリル、チアトリアゾリル、チアジアゾリル、オキサジアゾリル、モルホリニル、チアゾリル、チアゾリジニル、イソチアゾリル、イソチアゾリジニル、ジチアゾリル、ジチアゾリジニル、テトラヒドロフリル、及びそれらのベンゾ融合誘導体などの複素環が含まれるがそれらに限定されない。特定の実施形態では、本明細書で利用かつ使用される「置換複素環、もしくはヘテロシクロアルキルもしくは複素環式」基は、その上の１つ、２つもしくは３つの水素原子が、脂肪族；脂環式；ヘテロ脂肪族；複素環式；芳香族；ヘテロ芳香族；アリール；ヘテロアリール；アルキルアリール；ヘテロアルキルアリール；アルキルヘテロアリール；ヘテロアルキルヘテロアリール；アルコキシ；アリールオキシ；ヘテロアルコキシ；ヘテロアリールオキシ；アルキルチオ；アリールチオ；ヘテロアルキルチオ；ヘテロアリールチオ；Ｆ；Ｃｌ；Ｂｒ；Ｉ；−ＯＨ；−ＮＯ_２；−ＣＮ；−ＣＦ_３；−ＣＨ_２ＣＦ_３；−ＣＨＣｌ_２；−ＣＨ_２ＯＨ；−ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ；−ＣＨ_２ＮＨ_２；−ＣＨ_２ＳＯ_２ＣＨ_３；−Ｃ（＝Ｏ）Ｒ_ｘ；−Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ_ｘ）_２；−ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ_ｘ；−ＯＣＯ_２Ｒ_ｘ；−ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ_ｘ）_２；−Ｎ（Ｒ_ｘ）_２；−Ｓ（Ｏ）_２Ｒ_ｘ；−ＮＲ_ｘ（ＣＯ）Ｒ_ｘを含むがそれらに限定されない部分との独立交換によって置換されている複素環、もしくはヘテロシクロアルキルもしくは複素環式基を意味し、式中、Ｒ_ｘは、夫々存在すると、独立して、脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、複素環式、芳香族、ヘテロ芳香族、アリール、ヘテロアリール、アルキルアリール、アルキルヘテロアリール、ヘテロアルキルアリール、もしくはヘテロアルキルヘテロアリールが含まれるがこれらに限定されず、このとき上記及び本明細書に記載した脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、複素環式、アルキルアリール、もしくはアルキルヘテロアリール置換基のいずれも、置換もしくは非置換、分枝状もしくは非分枝状、飽和もしくは不飽和であることができ、並びに上記及び本明細書に記載した芳香族、ヘテロ芳香族、アリール、もしくはヘテロアリールのいずれも、置換もしくは非置換であることができる。さらに、上記及び本明細書に記載した脂環式もしくは複素環式部分のいずれも、それに融合したアリールもしくはヘテロアリール部分を含むことができることは理解される。

本明細書で使用する用語「ハロ」及び「ハロゲン」は、フッ素、塩素、臭素、及びヨウ素から選択される原子を意味する。

用語「ハロアルキル」は、上記に定義したように、それに結合した１、２、もしくは３のハロゲン原子を有するアルキル基を意味しており、例えば、クロロメチル、ブロモメチル、トリフルオロメチルなどの基によって例示される。

本明細書で使用する用語「アミノ」は、第１級（−ＮＨ_２）、第２級（−ＮＨＲ_ｘ）、第３級（−ＮＲ_ｘＲ_ｙ）、又は第４級アミン（−Ｎ^＋Ｒ_ｘＲ_ｙＲ_ｚ）を意味し、式中、Ｒ_ｙ及びＲ_ｚは、独立して、本明細書に定義した脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、複素環式、芳香族、もしくはヘテロ芳香族部分である。アミノ基の例には、メチルアミノ、ジメチルアミノ、エチルアミノ、ジエチルアミノ、ジエチルアミノカルボニル、イソ−プロピルアミノ、ピペリジノ、トリメチルアミノ、及びプロピルアミノが含まれるがそれらに限定されない。

本明細書で使用する用語「アシル」は、一般式−Ｃ（＝Ｏ）Ｒを有する基を意味し、式中、Ｒは、本明細書に定義した脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、複素環式、芳香族、もしくはヘテロ芳香族部分である。

本明細書で使用する用語「スルホンアミド」は、一般式−ＳＯ_２ＮＲ_ｘＲ_ｙの基を意味し、式中、Ｒ_ｘ及びＲ_ｙは、独立して、水素、又は本明細書に定義した脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、複素環式、芳香族、ヘテロ芳香族、もしくはアシル部分である。

本明細書で使用する用語「ベンズアミド」は、一般式ＰｈＮＲ_ｘの基を意味し、式中、Ｒ_ｘは、水素、又は本明細書に定義した脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、複素環式、芳香族、ヘテロ芳香族、もしくはアシル部分である。

本明細書で使用する用語「Ｃ_１−６アルキリデン」は、ラジカルの両端で自由原子価「−」を有する、１乃至６の炭素原子を有する、炭素及び水素原子のみからなる置換もしくは非置換、直鎖状もしくは分枝状の飽和二価ラジカルを意味する。

本明細書で使用する用語「Ｃ_２−６アルキリデン」は、ラジカルの両端で自由原子価「−」を有する、２乃至６の炭素原子を有する、炭素及び水素原子のみからなる置換もしくは非置換、直鎖状もしくは分枝状の飽和二価ラジカルを意味し、このとき不飽和は二重結合としてのみ存在し、二重結合は鎖の第１炭素と分子の残りとの間に存在することができる。

本明細書で使用する用語「脂肪族」、「ヘテロ脂肪族」、「アルキル」、「アルケニル」、「アルキニル」、「ヘテロアルキル」、「ヘテロアルケニル」、「ヘテロアルキニル」などは、置換基及び非置換の、飽和及び不飽和の、並びに直鎖状及び分枝状の基を含んでいる。同様に、用語「脂環式」、「複素環式」、「ヘテロシクロアルキル」、「複素環」などは、置換及び非置換、並びに飽和及び不飽和基を含む。さらに、用語「シクロアルキル」、「シクロアルケニル」、「シクロアルキニル」、「ヘテロシクロアルキル」、「ヘテロシクロアルケニル」、「ヘテロシクロアルキニル」、「芳香族」、「ヘテロ芳香族」、「アリール」、「ヘテロアリール」などは、置換基及び非置換基の両方を包含する。

本明細書で使用する用語「天然アミノ酸」は、天然型タンパク質：グリシン（Ｇｌｙ）、アラニン（Ａｌａ）、バリン（Ｖａｌ）、ロイシン（Ｌｅｕ）、イソロイシン（Ｉｌｅ）、リシン（Ｌｙｓ）、アルギニン（Ａｒｇ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ）、プロリン（Ｐｒｏ）、セリン（Ｓｅｒ）、トレオニン（Ｔｈｒ）、フェニルアラニン（Ｐｈｅ）、チロシン（Ｔｙｒ）、トリプトファン（Ｔｒｐ）、アスパラギン酸（Ａｓｐ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ）、アスパラギン（Ａｓｎ）、グルタミン（Ｇｌｎ）、システイン（Ｃｙｓ）、及びメチオニン（Ｍｅｔ）に見られる一般の天然型Ｌ−アミノ酸のいずれか一つを意味する。

本明細書で使用する用語「非天然アミノ酸」は、天然アミノ酸ではない全てのアミノ酸を意味する。これには、例えば、α−、β−、Ｄ−、Ｌ−アミノ酸残基、及び一般式（化２３）の化合物が含まれ：式中、側鎖Ｒは、天然で発生するアミノ酸側鎖以外である。

より一般的には、本明細書で使用する用語「アミノ酸」は、天然アミノ酸及び非天然アミノ酸を包含する。

本明細書で使用する用語「バイオイソスター」は、一般に類似の分子形状及び／又は分子体積を有する２つ又はそれ以上の化合物もしくは部分を意味する。特定の実施形態では、バイオイソスターはほぼ同一の電子分布を有する。特定の他の実施形態では、バイオイソスターは類似の生物学的特性を示す。好ましい実施形態では、バイオイソスターは類似の分子形状及び分子体積を有する；ほぼ同一の電子分布を有する；並びに類似の生物学的特性を示す。

本明細書で使用する用語「薬学的に許容可能な誘導体」は、そのような化合物の任意の薬学的に許容可能な塩、エステル、もしくはそのようなエステルの塩、あるいは、被験体に投与されると、本明細書に記載したような化合物を（直接的もしくは間接的に）提供できる他の付加物もしくは誘導体、あるいは、それらの代謝産物もしくは残留物を意味する。このように、薬学的に許容可能な誘導体は、特にプロドラッグを含む。プロドラッグは、通常は薬理学的活性が有意に減少しており、インビボで除去され易く、薬理学的活性種として親分子を産生する追加部分を含む化合物の誘導体である。プロドラッグの例は、インビボで開裂されると目的の化合物を産生するエステルである。広範囲の化合物のプロドラッグ、並びにプロドラッグを作製するために親化合物を誘導体化するための材料及び方法は、公知であり、本発明に適応させることができる。本明細書では以下、特定の例示的な医薬組成物及び薬学的に許容可能な誘導体についてより詳細に記載する。

本明細書で使用する用語「薬学的に許容可能な塩」は、医薬使用のため、好ましくは無用な刺激、アレルギー反応などを伴わずにヒト及び下等動物の組織で使用するのに適切な塩を意味する。アミン、カルボン酸、及び他のタイプの化合物の薬学的に許容可能な塩は、当技術分野においてよく知られている。例えば、S. M. Berge, et al. によってJ Pharmaceutical Sciences, 66に、薬学的に許容可能な塩が詳細に記載されており、参照することにより本明細書に援用する。塩は、本発明の化合物の最終単離及び精製中にインサイチュで、又は以下で概して記載する如く遊離塩基もしくは遊離酸官能基を適切な試薬と反応させることによって個別に調製できる。例えば、遊離塩基官能基は、適切な酸と反応させることができる。さらに、本発明の化合物が酸性部分を有する場合は、それらの適切な薬学的に許容可能な塩には、アルカリ金属塩、例えばナトリウムもしくはカリウム塩；及びアルカリ土類金属塩、例えばカルシウムもしくはマグネシウム塩など、の金属塩が含まれることができる。薬学的に許容可能な非毒性の酸付加塩の例は、例えば塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸、及び過塩素酸などの無機酸、又は例えば酢酸、シュウ酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、コハク酸、もしくはマロン酸などの有機酸を用いて、あるいはイオン交換などの当技術分野において使用される他の方法を用いて形成されたアミノ基の塩である。他の薬学的に許容可能な塩には、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、酪酸塩、カンファラート、カンファースルホン酸塩、クエン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、ジグルクロン酸塩、ドデシル硫酸塩、ギ酸塩、フマル酸塩、グルコヘプトネート、グリセロリン酸塩、グルコン酸塩、ヘルニ硫酸塩（hernisulfate）、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ヨウ化水素酸塩、２−ヒドロキシ−エタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、ラウリン酸塩、ラウリル硫酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩、パルミチン酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３−フェニルプロピオン酸塩、リン酸塩、ピクリン酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、チオシアン酸塩、ｐ−トルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸塩、吉草酸塩などが含まれる。代表的なアルカリもしくはアルカリ土類金属塩には、ナトリウム、リチウム、カリウム、カルシウム、マグネシウムなどが含まれる。その他の薬学的に許容可能な塩には、適切な場合は、例えばハロゲン化物、水酸化物、カルボン酸塩、硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、スルホン酸塩、及びスルホン酸アリールなどの対イオンを用いて形成される非毒性アンモニウム、第３級アンモニウム、及びアミンカチオンが含まれる。

本明細書で使用する用語「薬学的に許容可能なエステル」は、インビボで加水分解するエステルを意味しており、ヒト身体内で容易に分解されて親化合物もしくはその塩を放出するエステルが含まれる。適切なエステル基には、例えば、薬学的に許容可能な脂肪族アルコール化合物（詳細には、各アルキルもしくはアルケニル部分が有利にも６個を超える炭素原子を有さないアルカン、アルケン、エチレングリコール、シクロアルカンなど）に由来するエステル基が含まれる。これらは、単に例示的なものであり、当技術分野において知られているエステルの可能性を決して限定するものではない。

本明細書で使用する用語「薬学的に許容可能なプロドラッグ」は、医薬使用のために、好ましくは無用な毒性、刺激、アレルギー反応などを伴わずに、そしてそれらの意図する使用のために有効であり、並びに可能な場合は本発明の化合物の両性イオン形であり、ヒト及び下等動物の組織と一緒に使用するのに適切な本発明の化合物のプロドラッグを意味する。用語「プロドラッグ」は、例えば血液中での加水分解によって、インビボで迅速に変換されて上記の化学式の親化合物を産生する化合物を意味する。徹底的な考察は、T. Higuchi and V. Stella, Pro-drugs as Novel Delivery Systems, Vol. 14 of the A. C. S. Symposium Series, 及び in Edward B. Roche, ed., Bioreversible Carriers in Drug Design, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987に提供され、どちらも参照することにより本明細書に援用する。

Ｃ. 本発明で有用な化合物である、ＩＣＡＭ−１と相互作用するＬＦＡ−１の直接的競合アンタゴニストもしくはアロステリックアンタゴニスト
ＩＣＡＭ−１結合部位と重複するＬＦＡ−１のαＬサブユニットにおける高親和性結合部位において、ＩＣＡＭ−１と相互作用するＬＦＡ−１の直接的競合アンタゴニストであるアンタゴニストは、例えば、S.M. Keating, K.R. Clark, L. D. Stepanich, F. Arellano, C. P. Edwards, S.C. Bodary, S. A. Spencer, T. R. Gadek, J. C, Marsters Jr., M. H. Beresini, 「Competition between intercellualr adhesion molecule-1 and a small molecule antagonist for a common binding site on the α1 subunit of lymphocyte function-associated antigen-1.」 (2006) Protein Science, 15:290-303に記載される競合結合実験を実施することによって、同定できる。ＩＣＡＭ−１結合部位と重複するＬＦＡ−１上の高親和性部位は、ＬＦＡ−１のαＬサブユニット内のＩドメインのＭＩＤＡＳモチーフを含むことが示されてきた。アロステリック拮抗作用は、競合的であるが直接的な競合ではないことが可能であり、これもこの実験設計を用いて同定できる。

１．ＬＦＡ−１：ＩＣＡＭ相互作用の直接的競合アンタゴニストの結合部位の同定
a. ＬＦＡ−１のαＬサブユニットへの化合物５の架橋結合
このクラスの小分子アンタゴニストの結合部位は、化合物５（化合物３のトリチウム標識された光活性可能な類似体）をＬＦＡ−１へと結合させ、その後に光架橋することによって同定される（図４）。特異的な高親和性架橋結合を最大化するために、放射前に、サンプルをゲル濾過することにより非結合もしくは弱く結合した化合物５を除去することが必要である（図５、レーンｅ対ｆ、及びｇ対ｈ）。ゲル濾過が無い場合、ＬＦＡ−１αサブユニット、βサブユニット、及びヘテロダイマー（約２００，０００におけるバンド）への化合物５の著しい架橋結合が見られ、その一方、非特異的架橋結合は、ゲル濾過サンプルにはみられない（データ示さず）。ゲル濾過条件下では、化合物５は、αＬサブユニットのみに特異的に架橋結合される（図５、レーンｃ及びｇ）。さらに、インキュベーション中に化合物３が存在すると、αＬサブユニットへのトリチウム取り込みを実質的に減少させる（図５のレーンｅ対ｇ）。同様に、化合物３が存在すると、ゲル濾過がある場合、αＬサブユニット、β２サブユニット、及びヘテロダイマーへのトリチウム取り込みを僅かに減少させる（図５のレーンｆ対ｈ）。単離され且つ構造的に損傷を受けていないαＬもしくはβ２サブユニットのゲル濾過されたサンプルが使用された時には、化合物５の架橋結合は生じない（データ示さず）。このように、ゲル濾過後に架橋結合が必要な高親和性結合部位は、損傷を受けていないＬＦＡ−１ヘテロダイマーによって提供される。

架橋結合部位は、親和性標識されたαＬサブユニットをヒドロキシルアミンで断片化し、そのフラグメントを電気泳動的に分離し、その後、放射性標識されたフラグメントにおいてＮ末端シークエンシングを実施し、タンパク質配列内のそれらの位置を決定することによってさらに定義される。２つの配列が同定され、第１の配列は、残基１から（発見された配列：YNLDVRGARSFS (SEQ ID NO 1)）、及び第２の配列は、残基３０から（発見された配列：GVIVGAPGEGNST (SEQ ID NO 2)）開始している。両方のペプチドは、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ上のそれらの大きさ（５０−６０ｋＤａ）によって判断され、約５００アミノ酸長である；このフラグメントの大きさは、ヒドロキシルアミンに関する次の２つの予測切断部位（Ｎ−Ｇ）であるＮ５０７及びＮ５３０と一致する。サブユニットのＣ末端の半分に組み込まれた標識は無い。

ｂ. Ｉドメインが欠如するＬＦＡ−１に対する化合物２の結合の欠如
ＬＦＡ−１への化合物２Ｂ及び関連類似体の結合におけるＩドメインの役割は、Ｉドメインが欠如するαＬサブユニットのコンストラクトを作製することによって示される。β２コンストラクト単独（モック）又はＩドメインが欠如しているコンストラクトもしくは野生型αＬを備えるβ２コンストラクトが２９３細胞内にトランスフェクトされ、トランスフェクトされた細胞への化合物２Ｂの結合が試験される（図６）。化合物２Ｂは、野生型αＬトランスフェクト細胞への実質的な結合を示すが、モック（β２）トランスフェクト細胞への結合と比較して、Ｉドメインが欠如しているαＬでトランスフェクトされた細胞への有意な結合を示さない。トランスフェクタントについても、それらがＩＣＡＭ−１−Ｉｇへ接着する能力について試験され、予想される如く、Ｉドメインが欠如しているＬＦＡ−１トランスフェクト細胞及びモックトランスフェクタントは、結合の識別不能なバックグラウンドレベルを示すが、野生型αＬトランスフェクト細胞は強固な接着を示す（図６Ｂ）。トランスフェクトされた細胞に対するＬＦＡ−１抗体パネルの結合についての評価は、Ｉドメインへマッピングされた抗体による結合の消失とは別に、αＬＩドメインが欠如しているトランスフェクト細胞において、ＬＦＡ−１ヘテロダイマーが無傷として現れたことを示す（データ示さず）。

データは、化合物３及び関連分子が、ＩＣＡＭ−１結合部位と重複するＬＦＡ−１上の高親和性部位へ結合するという結論を支持している。該ＩＣＡＭ−１結合部位は、以前にＬＦＡ−１のαＬサブユニット内のＩドメインのＭＩＤＡＳモチーフを含むことが証明されている。

ＬＦＡ−１上のＩＣＡＭ−１と小分子アンタゴニスト結合部位が極めて接近していることについての確実な証拠は、ＩＣＡＭ−１−Ｉｇ及び化合物２Ｂの両方の結合においてＩドメインの欠如が及ぼす共通作用に見ることができる。化合物２Ｂ及びＩＣＡＭ−１はどちらも、ＩＣＡＭ−１結合部位が位置するドメインであるＩドメインが欠如しているＬＦＡ−１へ結合することができなかった。さらに、Ａ−２８６９８２がＩＣＡＭ−１−Ｉｇ及び化合物２Ｂの両方の結合をアロステリックに修飾する能力は、ＬＦＡ−１αサブユニットのＩドメイン内のＩＤＡＳモチーフ内のＡ−２８６９８２結合部位にそれらの結合部位が極めて近接していることと一致している。ＬＦＡ−１のα鎖への化合物５の選択的光化学的架橋結合は、その結合部位がこのサブユニットの残基３０−５０７内に局在する。上述した発見の全ては、ＬＦＡ−１のα鎖のＩドメイン内に位置した単一高親和性小分子結合部位に一致する。

相対的に高濃度の化合物５を用いて実施した光化学架橋結合の詳細な試験（４．１μＭ、図５）は、ＬＦＡ−１上の追加的な低親和性小分子結合部位についての直接証拠を与える。劇的に相違するタンパク質及び架橋結合パターンが、ゲル濾過の存在下及び不在下で観察される。照射前に非結合及び弱い結合の分子を除去するためにサンプルがゲル濾過される場合は、αサブユニットの高親和性標識のみが観察される。しかしながら、ゲル濾過工程の不在下では、化合物５とＬＦＡ−１との複合体の照射は、結果としてαサブユニットへの高強度架橋結合、及び化合物５との複合体がゲル濾過を生き延びるには弱すぎるβサブユニット内における低親和性結合部位への低強度架橋結合を生じさせる。両方の条件下で、観察された架橋結合は、多くの過剰な化合物３（２９０μＭ）によって部分的に阻害され（図５、レーンｅ及びｇ、ｆ及びＨ）、これは両方の部位への結合の特異的性質を証明する。単離されたαもしくはβサブユニットいずれかへ化合物５を架橋結合させる試みは、ゲル濾過プロセスを生き延びることができる高親和性複合体を提供することに失敗した。結果として、化合物３によって表されるクラスの化合物の高親和性競合的結合は、無傷な全長ＬＦＡ−１ヘテロダイマーの存在を必要とするようである。ＬＦＡ−１サブユニットもしくは単離されたＩドメインいずれかのコンストラクト中のこの結合部位を捕捉する試みは、ＩＣＡＭ−１及び化合物３の小分子類似体（例、ＸＶＡ１４３）に対するＬＦＡ−１の親和性の低下をもたらす。ゲル濾過の不在下で出現する微量のＬＦＡ−１ヘテロダイマーの存在に注目することは特に興味深い（図５、＞２００，０００ダルトンでのバンド）。クマシーブルー染色及びオートラジオグラフィーの両方によって判定されるＬＦＡ−１バンドの強度は、ヘテロダイマーを安定化させるβ鎖上の第２部位への低親和性結合と一致する。

ＳＤＳ−ＰＡＧＥに対するＬＦＡ−１の安定化に関与する結合部位は、βサブユニットのＩ様ドメイン内に存在する可能性がある。上に示した如く、このβサブユニット結合部位は、ＩＣＡＭ−１結合の直接的競合阻害の原因となるαサブユニット内の高親和性結合部位には関連していない。しかしながら、化合物３によるＬＦＡ−１安定化の原因となるβサブユニット結合部位は、低親和性βサブユニット架橋結合部位と同一であることができる。

本明細書で使用したＬＦＡ−１小分子アンタゴニストプローブのクラスのための２つの区別可能な結合部位がある。第１は、ＬＦＡ−１のαＬサブユニット内の高親和性結合部位であり、それを通して小分子及びＬＦＡ−１がゲル濾過過程を生き延びるために十分に安定（例えば、Ｋ_ｄ＜２５ｎＭ）な複合体を形成する。この小分子結合部位は、本明細書でＩＣＡＭ−１結合部位に重複すると報告した結合実験において特徴付けられ、そして、化合物３及び４（化合物４のＩＣ_５０＝１．４ｎＭ）によるＬＦＡ−１／ＩＣＡＭ−１結合の強力な阻害；インビトロでのＬＦＡ−１誘導性リンパ球増殖のそれらの強力な阻害（化合物４のＩＣ_５０＝３ｎＭ）；及びインビボでの免疫系応答のそれらの阻害と相関するものである。第２部位は、ＳＤＳ−ＰＡＧＥ下でのＬＦＡ−１ヘテロダイマーの安定化に関係するβサブユニット内の低親和性結合部位（例えば、Ｋ_ｄ＞１μＭ）である。この部位は、本質的により動態的であり（即ち、より速いオフレート）、ゲル濾過／光分解過程後に残存しない。この第２の低親和性部位の特性は、βサブユニットのＩ様ドメイン内のα／βＩ様アロステリックアンタゴニスト結合部位の特性と一致している。本明細書に記載の、ＬＦＡ−１のβサブユニットへの（おそらくはＩ様ドメインへの）ＩＣＡＭ−１模倣薬の低親和性結合は、おそらく、Ｉ及びＩ様ドメイン間の配列相同性に起因するものであり、詳細には、ＭＩＤＡＳモチーフにおける類似性、及びこのクラスのアンタゴニストに共通するカルボン酸部分に対するそれらの親和性に関する。ＭＡＣ−１を含むインテグリンのβ２ファミリーがこのサブユニットを共有することを前提とすると、β２サブユニット内のＩ様ドメインに対する化合物の親和性は、ＬＦＡ−１に対して特異的なアンタゴニストを選択するために弱められる必要がある。

上述した実験は、ＬＦＡ−１αＬサブユニットのＩドメイン内のＭＩＤＡＳモチーフを含むＩＣＡＭ−１結合部位に重複する部位で、ＩＣＡＭ−１に類似する方法で化合物３及び４のＬＦＡ−１への高親和性結合を実証している。このことは、ＩＣＡＭ−１エピトープのそれらの提案模倣性と一致するが、それらがＬＦＡ−１／ＩＣＡＭ−１のα／βＩ様アロステリックアンタゴニストとして機能するといういずれの結論にも一致しない。これらのＩＣＡＭ−１模倣薬のβ２インテグリンサブユニットへの結合は、低親和性にもかかわらず、ＩＣＡＭ−１自体がフィードバック機構の一部としてＩ様ドメイン内の第２部位へ結合するか否かという疑問を提起する。

上記の通り、小分子は、ＬＦＡ−１に独特であるα−Ｌサブユニットへ高親和に結合できることが証明されてきた。結果として、これらの化合物は、Ｍａｃ−１（αＭβ２）に対するＬＦＡ−１（αＬβ２）に関して選択的であることができる。本発明の１つの好適な実施形態は、ＬＦＡ−１の選択的インヒビターを利用し、これは治療安全性において長所を付与できる可能性がある。

２．競合的結合実験
ａ. ＬＦＡ−１／ＩＣＡＭ−１及びＬＦＡ−１／小分子のＥＬＩＳＡにおけるアンタゴニスト競合
化合物２Ａ及び３、Ａ−２８６９８２、並びにｓＩＣＡＭ−１を使用し、ＬＦＡ−１／ＩＣＡＭ−１のＥＬＩＳＡ内への滴定により、ＩＣＡＭ−１−ＩｇのＬＦＡ−１への結合の競合的阻害を例示した。本形態のＬＦＡ−１／ＩＣＡＭ−１アッセイからの形式及び結果は、ＥＬＩＳＡプレート上の直接的なコーティングよりも、ＬＦＡ−１の抗体補足に起因して、さらに強固である。実験は、化合物３（−黒塗りの丸−）、化合物２Ａ（−黒塗りの三角形−）、Ａ−２８６９８２（−黒塗りの菱形−）及びｓＩＣＡＭ−１（−黒塗りの逆三角形−）の１／５連続希釈を添加し、捕捉されたＬＦＡ−１を含むプレート上でＩＣＡＭ−１−Ｉｇ（Ａ）もしくは化合物２Ｂ（Ｂ）のいずれかと一緒にインキュベートすることで実施する。示したデータは、単一実験からの２枚のプレートの平均値であり、数回の独立測定の代表値である。実線はデータの当てはめである。ＩＣ_５０値（ｎＭ）は、レジェンド内に提供される。

ＥＬＩＳＡにおけるこれらのインヒビターについての典型的な競合曲線は、図７Ａに示されている。化合物３は、２ｎＭのＩＣ_５０でＬＦＡ−１へのＩＣＡＭ−１−Ｉｇの結合を強力に阻害する。化合物３の類似体である化合物２Ａは、ほぼ１０倍高いＩＣ_５０値で結合を阻害する。Ａ−２８６９８２及びｓＩＣＡＭ−１は、化合物３の１００倍を超えるＩＣ_５０値でＬＦＡ−１へのＩＣＡＭ−１−Ｉｇ結合を阻害する。

これらの同一化合物がＦＩＴＣ標識小分子アンタゴニストである化合物２ＢのＬＦＡ−１への結合を阻害する能力もまた証明された（図７Ｂ）。化合物２Ａ及び３、並びに可溶性ＩＣＡＭ−１の化合物２Ｂ結合のインヒビターとしての効力は、それらのＩＣＡＭ−１結合のインヒビターとしての効力と類似している。化合物３、化合物２Ａ、及びｓＩＣＡＭ−１は、各々３、５６、及び１，２００ｎＭのＩＣ_５０値で化合物２ＢのＬＦＡ−１への結合を阻害する。Ａ−２８６９８２は、吸光度値における一過性増加によって示されるように、化合物２ＢのＬＦＡ−１への結合を阻害せずにむしろ増強し、減少前に、ほぼ４μＭで最高効果に到達した。

ＬＦＡ−１／小分子及びＬＦＡ−１／ＩＣＡＭ−１のＥＬＩＳＡにおけるＩＣ_５０値の評価は、キストリン（kistrin）由来ペプチド及びこのクラスのＬＦＡ−１小分子アンタゴニストの段階的変化を表す小分子の群を含む大規模なセットの化合物に拡大される。図８に示すように（ＬＦＡ−１：ＩＣＡＭ−１及びＬＦＡ−１：小分子のＥＬＩＳＡにおけるアンタゴニスト競合からのＩＣ５０値の相関性。化合物２Ｂと競合する化合物の多様な群（４種のペプチド、５種の小分子及びｓＩＣＡＭ−１）のＩＣ_５０値は、ＬＦＡ−１への結合についてＩＣＡＭ−１と競合させて決定したＩＣ_５０値に対してプロットした。プロットの勾配は０．９６４であり、ｙ切片は０．２３７、及びＲ＝０．９４０である。各データポイントは２枚のプレートからのＩＣ_５０値の平均値である）、５対数単位の効力にわたって、ｓＩＣＡＭ−１、化合物２Ａ及び３を含むこの多様なセットの化合物に関する２つのリガンド結合アッセイの各々の競合について、ＩＣ_５０値間で良好な相関性（Ｒ＝０．９４）が見られる。リガンドとしてＩＣＡＭ−１及び化合物２Ｂを用いた２回のアンタゴニスト競合ＥＬＩＳＡ間の効力における一般的な傾向は、各化合物が機械的に類似した方法でＩＣＡＭ−１及び小分子リガンドの両方の結合を崩壊させることを明らかにしている。この阻害効力における類似性は、ＩＣＡＭ−１−Ｉｇ及び化合物２ＢがＬＦＡ−１上の同一部位に結合することを証明している。したがって、本発明の化合物は、ＬＦＡ−１の競合的アンタゴニストである。

ｂ. ＬＦＡ−１／ＩＣＡＭ−１及びＬＦＡ−１／小分子のＥＬＩＳＡにおけるリガンド結合のアンタゴニスト調節
目的のリガンドとの直接競合を介して阻害するアンタゴニストは、アンタゴニスト濃度の増加を伴うがリガンドの最高結合の減少を伴わずに、より高く明らかなＥＣ_５０値へのリガンド結合曲線の非飽和性右方向へのシフトを示す。阻害は克服可能となるだろうが、濃度が上昇する直接的競合インヒビターの存在下でリガンド量の増加が必要となる。直接的な競合化合物３、アロステリックアンタゴニストＡ−２８６９８２、及びｓＩＣＡＭ−１が、ＩＣＡＭ−１−Ｉｇ及び化合物２ＢのＬＦＡ−１への結合曲線に及ぼす作用は、直接的競合を示すアンタゴニストの例として図９に示されている。ＬＦＡ−１／ＩＣＡＭ−１及びＬＦＡ−１／小分子のＥＬＩＳＡにおけるアンタゴニストの不在下（−白塗りの菱形−）又は存在下でのＩＣＡＭ−１−Ｉｇ（Ａ、Ｃ、Ｅ）又は化合物２Ｂ（Ｂ、Ｄ、Ｆ）の滴定。アンタゴニストは、２．４（Ａ）及び２．７（Ｂ）μＭのｓＩＣＡＭ−１、０．０４０（Ｃ）、及び０．１０（Ｄ）μＭの化合物３及び２０（Ｅ）、並びに５０（Ｆ）μＭのＡ−２８６９８２で開始する２倍の希釈率で加えられる。アンタゴニスト濃度の順序は、−白抜きの四角形−（最低添加アンタゴニスト濃度）、−白抜きの三角形−、−白抜きの丸−、−黒塗りの菱形−、−黒塗りの四角形−、−黒塗りの三角形−から−黒塗りの丸−（最高アンタゴニスト濃度）である。データの当てはめは実線で示されている。示したデータは、１枚のプレートからであり、少なくとも２回の実験の代表値である。（Ａ−２８６９８２（Ｆ）は化合物２ＢのＬＦＡ−１への結合の増加を生じさせる。）。これとは対照的に、アロステリック阻害剤は、最高結合の減少又は曲線の右方向へのシフトにおける飽和を誘発することによってリガンド結合曲線を変化させることができる。図９Ａに示したように、濃度の増加するｓＩＣＡＭ−１の存在は、ＩＣＡＭ−１−Ｉｇ結合曲線をより高いＥＣ_５０値へと右方向へ明らかにシフトさせる。さらに、ＩＣＡＭ−１−ＩｇのＬＦＡ−１への同一の最高度の結合は、同一の天然リガンドの２つの分子形が受容体上の１つの部位への結合に直接的に競合する場合に予測されるように、ｓＩＣＡＭ−１の存在下及び不在下で観察される。同様に、化合物３の濃度の上昇もまた、ＩＣＡＭ−１−Ｉｇの結合を、最高ＩＣＡＭ−１−Ｉｇ結合における最小変化を伴って、より高いＥＣ_５０値へシフトさせる（図９Ｃ）。競合的アンタゴニストの存在下でのリガンド結合曲線における右方向へのシフトは典型的に平行であるが、これは必ずしも当てはまらない。化合物３の存在下及び不在下でのＬＦＡ−１／ＩＣＡＭ−１−Ｉｇ結合曲線に関する非平行勾配は、この化合物を用いた異種のリガンド結合ＥＬＩＳＡ条件下で完全平衡を達成できないことに起因し得る。リガンド結合ＥＬＩＳＡのＬＦＡ−１／化合物２Ｂ形式では、化合物３の濃度を上昇させると、化合物２Ｂの結合曲線を明確により高いＥＣ_５０値へシフトさせるが、最高結合の減少は伴わない（図９Ｄ）。ｓＩＣＡＭ−１の濃度を上昇させると、さらに同様の効果を示すが（図９Ｂ）、曲線内のシフトの程度は、２．７μＭでのｓＩＣＡＭ−１の最高達成可能濃度によって限定される。そこで、ｓＩＣＡＭ−１及び化合物３の両方がＬＦＡ−１へのＩＣＡＭ−１−Ｉｇ及び化合物２Ｂの結合に及ぼす効果は、上述したように直接競合の特性である。

ＩＣＡＭ−１−Ｉｇ、及び受容体に結合する化合物２Ｂに対するＡ−２８６９８２の効果は、明白に相違する（図９Ｅ及び９Ｆ）。ＬＦＡ−１／ＩＣＡＭ−１ＥＬＩＳＡでは、ＩＣＡＭ−１−Ｉｇ曲線は、より高いＥＣ_５０値へ向かって右方向へシフトする；しかしながら、ＩＣＡＭ−１−ＩｇのＬＦＡ−１への最高結合は、Ａ−２８６９８２の濃度が上昇するにつれて相当減少する。Ａ−２８６９８２濃度の上昇に伴う最高結合の減少及びリガンド結合曲線の右方向シフトは、上述したようにアロステリック阻害を反映している。Ａ−２８６９８２は、リガンド親和性及び結合能力の両方における減少を引き起こす；これは、Ａ−２８６９８２がＩＣＡＭ−１−Ｉｇ結合の克服できないアンタゴニストであることを証明する。これとは対照的に、ＬＦＡ／小分子のＥＬＩＳＡでは、マイクロモル濃度でのＡ−２８６９８２の存在は、化合物２Ｂ結合曲線をより低いＥＣ_５０値へシフトさせ、化合物２ＢのＬＦＡ−１への結合を増強させるようである（図９Ｆ）。Ａ−２８６９８２が化合物２Ｂ及びＩＣＡＭ−１−Ｉｇ結合に及ぼす対照的な効果は、ＬＦＡ−１上のＩＤＡＳ部位への化合物結合の公知のアロステリック効果に起因する可能性がある。Ａ−２８６９８２結合データは、本方法で証明された結合実験においてＬＦＡ−１への小分子及びタンパク質リガンド結合に関するアロステリック阻害についての例示として機能する。

化合物が単一結合部位に関する直接的競合を通してリガンド結合を阻害するか否かを調査するためにシルド分析もまた使用できる。このモデルは、アッセイにおける等活性応答がリガンドによる受容体の同等利用率の結果であり、最高結合がアンタゴニストの存在によって変化しないという前提条件に基づいている。シルド分析では、用量比はアンタゴニストの存在下及び不在下でのＥＣ_５０値の比率であり、等活性応答を導くリガンド濃度の尺度である。この用量比がアンタゴニストの各濃度について決定され、シルド回帰が図１０に示すようにプロットされる。シルド回帰における１の勾配を伴う線形応答は、アンタゴニストによる阻害が直接的に競合的かつ可逆性であることを示している。シルド分析は、最高結合の減少を結果として生じさせないアロステリック阻害剤の場合には、１から有意に逸脱する非線形関係及び／又は勾配を生じさせることになる。ｓＩＣＡＭ−１及び化合物３の両方についてのシルド回帰は、各々１．２６及び１．２４に匹敵する勾配を伴って図１０に示されている。ＬＦＡ−１／ＩＣＡＭ−１リガンド結合ＥＬＩＳＡにおけるｓ−ＩＣＡＭ−１（−黒塗りの三角形−）及び化合物３（−黒塗りの丸−）拮抗作用のシルド回帰は、図５（Ａ）及び（Ｃ）の各々におけるデータからプロットされる。化合物３についてのプロットの勾配は１．２４であり、ｙ切片は１０．９、及びＲ＝０．９９８３２である。ｓＩＣＡＭ−１プロットの勾配は１．２６であり、ｙ切片は８．５１、及びＲ＝０．９９１３１である。シルド分析は直接的競合阻害を証明するために１に近い勾配を備える線形回帰を必要とするが、広範な文献中にどの範囲のシルド値が許容可能であるかについての指針はない。１．２４及び１．２６の勾配は、競合的結合の結論を支持するために使用される多数の公表されたシルド値の限度内に収まるので、これらの勾配値は１から有意に相違するとは考えられない。回帰プロットの線形性及び関係の勾配における類似性は、類似の方法で同一部位へのリガンド（ＩＣＡＭ−１−Ｉｇ）及び両方のアンタゴニスト（ｓＩＣＡＭ−１及び化合物３）の結合と一致している。

Ａ．抗体
数種の適切な抗体が当技術分野において知られている。例えばＩＣＡＭ−１などのＩＣＡＭ、又は例えばＬＦＡ−１などの白血球インテグリンの、これらの分子の一方もしくは両方に対する抗体によるブロッキングは、炎症性応答を阻害できる。以前の試験は、抗ＣＤ１１ａ ＭＡｂがインビトロでの多数のＴ細胞依存性免疫機能及びインビボでの多数の免疫応答に及ぼす作用について試験する。インビトロにおいて、抗ＣＤ１１ａ Ｍａｂは、Ｔ細胞活性化（Kuypers T.W., Roos D. 1989 「Leukocyte membrane adhesion proteins LFA-1, CR3 and p150,95: a review of functional and regulatory aspects」 Res. Immunol., 140:461-465; Fischer A, Durandy A, Sterkers G, Griscelli C. 1986 「Role of the LFA-1 molecule in cellular interactions required for antibody production in humans」 J. Immunol., 136, 3198; 細胞毒性Ｔリンパ球によるＴ標的細胞溶解 (Krensky et al., supra), 免疫コンジュゲートの形成(Sanders VM, Snyder JM, Uhr JW, Vitetta ES., 「Characterization of the physical interaction between antigen-specific B and T cells」. J. Immunol., 137:2395 (1986); Mentzer SJ, Gromkowski SH, Krensky AM, Burakoff SJ, Martz E. 1985 「LFA-1 membrane molecule in the regulation of homotypic adhesions of human B lymphocytesn」 J. Immunol., 135:9)、及びＴ細胞の血管内皮への接着（Lo SK, Van Seventer GA, Levin SM, Wright SD., Two leukocyte receptors (CD11a/CD18 and CD11b/CD18) mediate transient adhesion to endothelium by binding to different ligands., J. Immunol., 143:3325 (1989)を参照のこと）を阻害する。２つの抗ＣＤ１１ａ Ｍａｂ、ＨＩ １１１、及びＧ４３−２５Ｂは、Pharmingen／BD Biosciences社から入手できる。さらに、Ｆ８．８、ＣＢＲ ＬＦＡ １／９、ＢＬ５、Ｍａｙ．０３５、ＴＳ１／１１、ＴＳ１／１２、ＴＳ１／２２、ＴＳ２／１４、２５−３−１、ＭＨＭ２及びエファリズマブを含む試験は、これらの抗体が占めたＬＦＡ−１上の結合部位の範囲を評価した。Lu, C; Shimaoka, M.; Salas, A.; Springer, T.A. 2004, 「The Binding Sites for Competitive Antagonistic, Allosteric Antagonistic, and Agonistic Antibodies to the I Domain of Integrin LFA-1」 J. Immun. 173: 3972-3978及びその中の参考文献を参照のこと。ＬＦＡ−１に対する多数の抗体の中でも、エファリズマブが、ＬＦＡ−１の直接的競合アンタゴニストであることが示される。

このようにして、ＬＦＡ−１に対する多数の抗体は、糖尿病性網膜症の治療に用いられることができ、エファリズマブ（Raptiva）を含む。

Ｂ．小分子
１.ペプチド
ＬＦＡ−１とＩＣＡＭ−１との相互作用を減少させる際に使用するためにペプチドが調査されてきた。ＩｇＧのＦｃ領域を含有していないポリペプチドは、米国特許第５，７４７，０３５号に記載されており、ＬＦＡ−１媒介性障害、詳細には糖尿病性網膜症を治療するために使用できる。ペプチドの２つの使用のうち、第１はＩＣＡＭ−１の調節因子であり、第２はＬＦＡ−１から入手した配列を備えるブロッキングペプチドであり、ＬＦＡ−１とＩＣＡＭ−１との相互作用を減少させるためのものであり、米国特許第５，８４３，８８５号に記載されている。環状ペプチドは、米国特許第６，６３０，４４７号において、ＬＦＡ−１：ＩＣＡＭ−１相互作用の阻害剤として説明されている。

２．有機小分子
ａ.ＬＦＡ−１の直接的競合アンタゴニストである例示化合物
「有機小分子」は、医薬品に用いられる有機分子に匹敵する大きさの有機分子を意味するのに一般的に使用される。用語は、典型的に有機バイオポリマー（例えば、タンパク質、核酸等）を含まない。有機小分子は、大抵の場合、約５０００Ｄａまで、ある実施形態では、約２０００Ｄａまで、その他の実施形態では、約１０００Ｄａまでの範囲である。

ｉ. ある実施形態では、本発明の方法において有用な化合物は、化学式（Ｉ）（化２４）の化合物を含む。

式中、Ｒ^１及びＲ^２は、夫々独立して、水素、アミノ酸側鎖、−(ＣＨ_２)_ｍＯＨ、−(ＣＨ_２)_ｍアリール、−(ＣＨ_２)_ｍへテロアリール（ｍは０−６）、−ＣＨ(Ｒ^１Ａ)(ＯＲ^１Ｂ)、−ＣＨ(Ｒ^１Ａ)(ＮＨＲ^１Ｂ)、Ｕ−Ｔ−Ｑ、又はＵ−Ｔ−Ｑで任意に置換された脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、もしくはヘテロ脂環式部分であり；Ｕは、不在、又は、以下−Ｏ−、−Ｓ(Ｏ)_０−２−、−ＳＯ_２Ｎ(Ｒ^１Ａ)、−Ｎ(Ｒ^１Ａ)−、−Ｎ(Ｒ^１Ａ)Ｃ(＝Ｏ)−、−Ｎ(Ｒ^１Ａ)Ｃ(＝Ｏ)−Ｏ−、−Ｎ(Ｒ^１Ａ)Ｃ(＝Ｏ)−Ｎ(Ｒ^１Ｂ)−、−Ｎ(Ｒ^１Ａ)−ＳＯ_２−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−、アリール、ヘテロアリール、アルキルアリール、アルキルへテロアリール、−Ｃ(＝Ｏ)−Ｎ(Ｒ^１Ａ)−、−ＯＣ(＝Ｏ)Ｎ(Ｒ^１Ａ)−、−Ｃ(＝Ｎ−Ｒ^１Ｅ)−、−Ｃ(＝Ｎ−Ｒ^１Ｅ)−Ｏ−、−Ｃ(＝Ｎ−Ｒ^１Ｅ)−Ｎ(Ｒ^１Ａ)−、−Ｏ−Ｃ(＝Ｎ−Ｒ^１Ｅ)−Ｎ(Ｒ^１Ａ)−、−Ｎ(Ｒ^１Ａ)Ｃ(＝Ｎ−Ｒ^１Ｅ)−、−Ｎ(Ｒ^１Ａ)Ｃ(＝Ｎ−Ｒ^１Ｅ)−Ｏ−、−Ｎ(Ｒ^１Ａ)Ｃ(＝Ｎ−Ｒ^１Ｅ)−Ｎ(Ｒ^１Ｂ)−、−Ｐ(＝Ｏ)(ＯＲ^１Ａ)−Ｏ−、もしくは−Ｐ(＝Ｏ)(Ｒ^１Ａ)−Ｏ−のうちの１つであり；Ｔは、不在、又は、脂肪族、ヘテロ脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アルキルアリール、もしくはアルキルへテロアリール部分であり；及び、Ｑは、水素、ハロゲン、シアノ、イソシアネート、−ＯＲ^１Ｂ；−ＳＲ^１Ｂ；−Ｎ(Ｒ^１Ｂ)_２、−ＮＨＣ(＝Ｏ)ＯＲ^１Ｂ、−ＮＨＣ(＝Ｏ)Ｎ(Ｒ^１Ｂ)_２、−ＮＨＣ(＝Ｏ)Ｒ^１Ｂ、−ＮＨＳＯ_２Ｒ^１Ｂ、ＮＨＳＯ_２Ｎ(Ｒ^１Ｂ)_２、−ＮＨＳＯ_２ＮＨＣ(＝Ｏ)ＯＲ^１Ｂ、−ＮＨＣ(＝Ｏ)ＮＨＳＯ_２Ｒ^１Ｂ、−Ｃ(＝Ｏ)ＮＨＣ(＝Ｏ)ＯＲ^１Ｂ、Ｃ(＝Ｏ)ＮＨＣ(＝Ｏ)Ｒ^１Ｂ、−Ｃ(＝Ｏ)ＮＨＣ(＝Ｏ)Ｎ(Ｒ^１Ｂ)_２、−Ｃ(＝Ｏ)ＮＨＳＯ_２Ｒ^１Ｂ、−Ｃ(＝Ｏ)ＮＨＳＯ_２Ｎ(Ｒ^１Ｂ)_２、Ｃ(＝Ｓ)Ｎ(Ｒ^１Ｂ)_２、−ＳＯ_２Ｒ^１Ｂ、−ＳＯ_２ＯＲ^１Ｂ、−ＳＯ_２Ｎ(Ｒ^１Ｂ)_２、−ＳＯ_２−ＮＨＣ(＝Ｏ)ＯＲ^１Ｂ、−ＯＣ(＝Ｏ)−Ｎ(Ｒ^１Ｂ)_２、−ＯＣ(＝Ｏ)Ｒ^１Ｂ、−ＯＣ(＝Ｏ)ＮＨＣ(＝Ｏ)Ｒ^１Ｂ、−ＯＣ(＝Ｏ)ＮＨＳＯ_２Ｒ^１Ｂ、−ＯＳＯ_２Ｒ^１Ｂ、又は脂肪族、へテロ脂肪族、アリール、もしくはヘテロアリール部分であり、あるいは、ここで、Ｒ^１及びＲ^２は、一緒になると、脂環式もしくは複素環部分であり、又は一緒になると、（化２５）であり、

Ｒ^１Ａ及びＲ^１Ｂは、夫々存在すると、独立して、水素、脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、複素環、アリール、ヘテロアリール、アルキルアリール、もしくはアルキルへテロアリール部分、−Ｃ(＝Ｏ)Ｒ^１Ｃ、又は−Ｃ(＝Ｏ)ＮＲ^１ＣＲ^１Ｄであり；Ｒ^１Ｃ及びＲ^１Ｄは、夫々存在すると、独立して、水素、ヒドロキシル、又は、脂肪族、ヘテロ脂肪族、アリール、ヘテロアリール、アルキルアリール、もしくはアルキルへテロアリール部分であり；及び、Ｒ^１Ｅは、水素、脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、複素環、アリール、ヘテロアリール、アルキルアリール、もしくはアルキルへテロアリール部分、−ＣＮ、−ＯＲ^１Ｃ、−ＮＲ^１ＣＲ^１Ｄ、又は−ＳＯ_２Ｒ^１Ｃであり；
Ｒ^３は、−Ｃ(＝Ｏ)ＯＲ^３Ａ、−Ｃ(＝Ｏ)Ｈ、−ＣＨ_２ＯＲ^３Ａ、−ＣＨ_２ＯＣ(＝Ｏ)−アルキル、−Ｃ(＝Ｏ)ＮＨ(Ｒ^３Ａ).−ＣＨ_２Ｘ^０であり；Ｒ^３Ａは、夫々存在すると、独立して、水素、保護基、脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、ヘテロ脂環式、アリール、ヘテロアリール、アルキルアリール、アルキルへテロアリール、へテロアルキルアリール、ヘテロアルキルへテロアリール部分、又は薬学的に許容可能な塩もしくはエステルであり、あるいは、Ｒ^３Ａは、Ｒ^１及びＲ^２と一緒になると、複素環部分を形成し；Ｘ^０は、Ｆ、Ｂｒ又はＩから選択されるハロゲンであり；
Ｒ^４は、夫々存在すると、独立して、水素、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ_２、脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、ヘテロ脂環式、アリール、ヘテロアリール、アルキルアリール、もしくはアルキルへテロアリール部分であり、あるいは、ＧＲ^Ｇ１であり、Ｇは、−Ｏ−、−Ｓ−、ＮＲ^Ｇ２−、−ＣＯ−、−ＳＯ−、−ＳＯ_２−、Ｃ(＝Ｏ)Ｏ−、−Ｃ(＝Ｏ)ＮＲ^Ｇ２−、Ｃ(＝Ｏ)−、−ＮＲ^Ｇ２Ｃ(＝Ｏ)−、又は−ＳＯ_２ＮＲ^Ｇ２−であり、及びＲ^Ｇ１及びＲ^Ｇ２は、独立して、水素、脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、ヘテロ脂環式、アリール、ヘテロアリール、アルキルアリール、もしくはアルキルへテロアリール部分であり；
ｎは、０−４の整数であり；
ＡＲ^１は、単環式又は多環式アリール、ヘテロアリール、アルキルアリール、アルキルへテロアリール、脂環式又は複素環式部分であり；
Ａ、Ｂ、Ｄ、及びＥは、価数が容認するように単結合又は二重結合のいずれかによって結合され；Ａ、Ｂ、Ｄ、及びＥは、夫々存在すると、独立して、Ｃ＝Ｏ、ＣＲ^ｉＲ^ｉｉ、ＮＲ^ｉ、ＣＲ^ｉ、Ｎ、Ｏ、Ｓ、−Ｓ(＝Ｏ)、又はＳＯ_２であり；Ｒ^ｉ及びＲ^ｉｉは、夫々存在すると、独立して、水素、ハロゲン、−ＣＮ、−ＮＯ_２、脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、ヘテロ脂環式、アリール、ヘテロアリール、アルキルアリール、もしくはアルキルへテロアリール部分であり、あるいは、ＧＲ^Ｇ１であり、ここでＧは、−Ｏ−、−Ｓ−、−ＮＲ^Ｇ２、−ＣＯ−、−ＳＯ−、−Ｃ(＝Ｏ)Ｏ−、−Ｃ(＝Ｏ)ＮＲ^Ｇ２−、−ＯＣ(＝Ｏ)−、−ＮＲ^Ｇ２Ｃ(＝Ｏ)−、又は−ＳＯ_２ＮＲ^Ｇ２−であり、及び、Ｒ^Ｇ１及びＲ^Ｇ２は、独立して、水素、脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、ヘテロ脂環式、アリール、ヘテロアリール、アルキルアリール、もしくはアルキルへテロアリール部分、あるいは、任意の２つの隣接物が一緒になると、脂環式、ヘテロ脂環式、アリール、又はヘテロアリール部分を示し；
ｐは、０−４の整数であり；及び
Ｌは、不在、又はＶ−Ｗ−Ｘ−Ｙ−Ｚであり、Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、及びＺは、夫々存在すると、独立して、不在、Ｃ＝Ｏ、ＮＲ^Ｌ１、−Ｏ−、−Ｃ(Ｒ^Ｌ１)＝、＝Ｃ(Ｒ^Ｌ１)−、−Ｃ(Ｒ^Ｌ１)(Ｒ^Ｌ２)、Ｃ(＝Ｎ−Ｏ Ｒ^Ｌ１)、Ｃ(＝ＮＲ^Ｌ１)、−Ｎ＝、Ｓ(Ｏ)_０−２であり；置換もしくは非置換Ｃ_１−６アルケニリデンもしくはＣ_２−６アルケニリジン鎖であり、ここで、２つまでの非隣接メチレン単位は、独立して、−Ｃ（＝Ｏ）−、−ＣＯ_２−、−Ｃ（＝Ｏ）Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（Ｃ＝Ｏ）ＮＲ^Ｌ３−、−ＯＣ（＝Ｏ）−、−ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲ^Ｌ３−、−ＮＲ^Ｌ３ＮＲ^Ｌ４−、−ＮＲ^Ｌ３ＮＲ^Ｌ４Ｃ（＝Ｏ）−、−ＮＲ^Ｌ３Ｃ（＝Ｏ）−、ＮＲ^Ｌ３ＣＯ_２−、ＮＲ^Ｌ３Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ^Ｌ４−、−Ｓ（＝Ｏ）−、−ＳＯ_２−、−ＮＲ^Ｌ３ＳＯ_２−、−ＳＯ_２ＮＲ^Ｌ３、−ＮＲ^Ｌ３ＳＯ_２ＮＲ^Ｌ４、−Ｏ−、−Ｓ−、もしくは−ＮＲ^Ｌ３−によって任意に置き換えられ；Ｒ^Ｌ３及びＲ^Ｌ４は、夫々存在すると、独立して、水素、アルキル、ヘテロアルキル、アリール、ヘテロアリール、もしくはアシル；又は、脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、ヘテロ脂環式、アリール、ヘテロアリール、アルキルアリール、もしくはアルキルヘテロアリール部分であり；並びに、Ｒ^Ｌ１及びＲ^Ｌ２は、夫々存在すると、独立して、水素、ヒドロキシル、保護ヒドロキシル、アミノ、保護アミノ、チオ、保護チオ、ハロゲン、シアノ、イソシアネート、カルボキシ、カルボキシアルキル、ホルミル、ホルミルオキシ、アジド、ニトロ、ウレイド、チオウレイド、チオシアナト、アルコキシ、アリールオキシ、メルカプト、スルホンアミド、ベンズアミド、トシル、又は脂肪族、脂環式、ヘテロ脂肪族、ヘテロ脂環式、アリール、ヘテロアリール、アルキルアリール、もしくはアルキルヘテロアリール部分である、あるいは、Ｒ^Ｌ１及びＲ^Ｌ２は、１つ又はそれ以上で存在すると、一緒になり、又は、Ｖ、Ｗ、Ｘ、Ｙ、もしくはＺのうちの１つと一緒になり、脂環式もしくは複素環式部分を形成するか、又はアリールもしくはヘテロアリール部分を形成する。

本発明の方法のある好適な実施形態は、化学式（ＩＩ）（化２６）である。

式中、Ｒ^２８は、以下の基（化２７）のうちの１つであり、

式中、Ｒ^２７は、以下の基（化２８）の１つであり、

Ｒ^２９は、水素、薬学的に許容可能な塩又はエステルである。

本発明の方法のある好適な実施形態は、化学式（ＩＩ’）（化２９）である。

ここで、置換基は化学式ＩＩに示すとおりである。

本発明の方法のある特に好適な実施形態は、化学式（ＩＡ）（化３０）、（ＩＩＡ）（化３１）、及び（ＩＩＢ）（化３２）の化合物である。

式中、Ｒ^１７は、水素、薬学的に許容可能な塩又はエステルであり、Ｒ^２７は、化学式（ＩＩ）に示されるとおりである。このクラスの化合物は、米国特許第７３１４９３８に開示される。

ｉｉ.本発明の方法の化合物のその他の一式の好適な実施形態は、化学式（ＩＩＩ）（化３３）の化合物である。

式中、Ｃｙは、ヒドロキシル（−ＯＨ）、メルカプト（−ＳＨ）、チオアルキル、ハロゲン（例えば、Ｆ，Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ等）、オキソ（＝Ｏ）、チオ（＝Ｓ）、アミノ、アミノアルキル、アミジン（−Ｃ（ＮＨ）−ＮＨ_２）、グアニジン（−ＮＨ_２−Ｃ（ＮＨ）−ＮＨ_２）、ニトロ、アルキル、もしくはアルコキシで任意に置換される芳香族炭素環、芳香族複素環、又は非芳香族炭素環もしくは複素環である。特定の実施形態では、Ｃｙは、３−５員環である。好適な実施形態では、Ｃｙは、ヒドロキシル、メルカプト、ハロゲン（好ましくは、ＦもしくはＣｌ）、オキソ（＝Ｏ）、チオ（＝Ｓ）、アミノ、アミジン、グアニジン、ニトロ、アルキル、もしくはアルコキシで任意に置換された５−、もしくは６−員の非芳香族複素環である。より好適な実施形態では、Ｃｙは、ヒドロキシル、オキソ、チオ、Ｃｌ、Ｃ_１−４アルキル（好ましくはメチル）、又はＣ_１−４アルカノイル（好ましくは、アセチル、プロパノイル、もしくはブタノイル）で任意に置換された５員の非芳香族複素環である。より好ましくは、非芳香族複素環は、１つもしくは複数のヘテロ原子（Ｎ、Ｏ、もしくはＳ）を含み、任意に、ヒドロキシル、オキソ、メルカプト、チオ、メチル、アセチル、プロパノイル、又はブチルで置換される。特定の実施形態では、非芳香族複素環は、任意でメチルもしくはアセチルと置換される少なくとも１つの窒素原子を含む。特に好適な実施形態では、非芳香族複素環は、ヒドロキシ、オキソ、メルカプト、チオ、アルキル、もしくはアルカノイルで任意に置換されたピペリジン、ピペラジン、モルホリン、テトラヒドロフラン、テトラヒドロチオフェン、オキサゾリジン、チアゾリジンからなる群から選択される。最も好ましい実施形態では、Ｃｙは、テトラヒドロフラン−２−イル、チアゾリジン−５−イル、チアゾリジン−２−オン−５−イル、並びにチアゾリジン−２−チオン−５−イル、及びピロリジンからなる群から選択される非芳香族複素環である。好ましい実施形態では、Ｃｙは、ヒドロキシル、メルカプト、ハロゲン（好ましくはＦもしくはＣｌ）、オキソ（＝Ｏ）、チオ（＝Ｓ）、アミノ、アミジン、グアニジン、ニトロ、アルキル、もしくはアルコキシで任意に置換された５−又は６−員の芳香族炭素環もしくは複素環である。より好ましい実施形態では、Ｃｙは、ヒドロキシル、オキソ、チオ、Ｃｌ、Ｃ_１−４アルキル（好ましくは、メチル）、又はＣ_１−４アルカノイル（好ましくは、アセチル、プロパノイル、もしくはブタノイル）で任意に置換された５員の芳香族炭素環もしくは複素環である。より好ましくは、芳香族もしくは複素環は、１つ又は複数のヘテロ原子（Ｎ、Ｏ、もしくはＳ）を含み、ヒドロキシル、オキソ、メルカプト、チオ、メチル、アセチル、プロパノイル、もしくはブチルで任意に置換されている。

その他の好ましい実施形態では、Ｃｙは、ヒドロキシル、メルカプト、ハロゲン、オキソ、チオ、アミノ、アミジン、グアニジン、アルキル、アルコキシ、もしくはアシルで任意に置換された３−６員の炭素環である。特定の実施形態では、炭素環は飽和もしくは部分不飽和である。特定の実施形態では、Ｃｙは、シクロプロピル、シクロプロペニル、シクロブチル、シクロブテニル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル、又はシクロヘキセニルからなる群から選択される炭素環である。

Ｘ_２は、Ｎ、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、もしくはＳＯ_２で置換された１つ又は複数の炭素原子を任意に有し、且つ任意にヒドロキシル、メルカプト、ハロゲン、アミノ、アミノアルキル、ニトロ、オキソ、もしくはチオで置換されているＣ_１−５二価炭化水素リンカーである。好ましい実施形態では、Ｘ_２は、少なくとも１個の炭素原子を有することができる。交換及び置換は、炭化水素鎖内又は一方もしくは両端でアミド部分（−ＮＲＣ（＝Ｏ）−もしくは−Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ−）を形成することができる。Ｘはまた、スルホンアミド（−ＮＲＳＯ_２−もしくは−ＳＯ_２ＮＲ）、アシル、エーテル、チオエーテル、又はアミンである。特定の好ましい実施形態では、Ｘ_２は、基−ＣＨ_２−ＮＲ^１０−Ｃ（Ｏ）−であり、ここで、そのカルボニル−Ｃ（Ｏ）−部分はＣｙに隣接（即ち、共有結合）しており、Ｒ^１０はアルキル（即ち、メチル、及びより好ましくはＨ）である。

Ｋは、ヒドロキシル、メルカプト、ハロゲン、オキソ、チオ、炭化水素、ハロ置換炭化水素、アミノ、アミジン、グアニジン、シアノ、ニトロ、アルコキシ、もしくはアシルで任意に置換された炭素環もしくは複素環である。特定の実施形態では、Ｋは、ハロゲンもしくはヒドロキシルで任意に置換されたアリールもしくはヘテロアリールである。特に好ましい実施形態では、Ｋは、フェニル、フラン−２−イル、チオフェン−２−イル、好ましくはメタ位置でハロゲン（好ましくはＣｌ）もしくはヒドロキシルで置換されたフェニルである。

Ｌ_２は、二価炭化水素であり、任意にＮ、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、もしくはＳＯ_２で交換されている１つ又はそれ以上の炭素原子を有し、且つヒドロキシル、ハロゲン、オキソ、もしくはチオで任意に置換されているか；又は炭化水素の３個の炭素原子がアミノ酸残基と交換されている。好ましくは、Ｌ_２は、長さが原子１０個未満、より好ましくは５個以下、及び最も好ましくは長さが原子５もしくは３個である。特定の実施形態では、Ｌ_２は、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ^１０−ＣＨ_２−、−ＣＨ_２−ＮＲ^１０−Ｃ（Ｏ）−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ^１０−ＣＨ_２−、−ＣＨ（ＯＨ）−（ＣＨ_２）_２−、−（ＣＨ_２）_２−ＣＨ（ＯＨ）−、−（ＣＨ_２）_３−、−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ^１０−ＣＨ（Ｒ_７）−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ^１０−、−ＮＲ^１０−Ｃ（Ｏ）−ＣＨ（Ｒ^１６）−ＮＲ^１０−Ｃ（Ｏ）−、−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ_２−Ｏ−、もしくは−ＣＨ（ＯＨ）−ＣＦ_２−ＣＨ_２−であり、式中、各Ｒ^１０は、独立して、Ｈもしくはアルキルであり、Ｒ^１６は、アミノ酸側鎖である。好ましいアミノ酸側鎖には、フェニルなどの非天然型側鎖もしくは天然型側鎖が含まれる。好ましい側鎖は、Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ａｌａ、Ｇｌｎ、及びＡｓｎからの側鎖である。好ましい実施形態では、Ｌ_２は、−ＣＨ＝ＣＨ−Ｃ（Ｏ）−ＮＲ^１０−ＣＨ_２−であり、式中、その−ＣＨ＝ＣＨ−部分はＫに隣接（即ち、共有結合）している。その他の好ましい実施形態では、Ｌ_２は、−ＣＨ_２−ＮＲ^１０−Ｃ（Ｏ）−であり、式中、そのメチレン部分（−ＣＨ_２−）はＫに隣接している。

Ｒ^５は、Ｈ、ＯＨ、アミノ、Ｏ−炭素環、又はアミノ、炭素環、もしくは複素環で任意に置換されたアルコキシであるか、又は薬学的に許容可能な塩もしくはエステルである。好適な実施形態では、Ｒ^５は、Ｈ、フェニル、又はフェニルなどの炭素環で任意に置換されたＣ_１−４アルコキシである。特定の実施形態では、Ｒ^５はＨである。その他の特定の実施形態では、Ｒ^５は、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、ブチルオキシ、イソブチルオキシ、ｓ−ブチルオキシ、ｔ−ブチルオキシ、フェノキシ、もしくはベンジルオキシである。さらにまたその他の特定の実施形態では、Ｒ^５はＮＨ_２である。特に好ましい実施形態では、Ｒ^５はエトキシである。その他の特に好ましい実施形態では、Ｒ^５はイソブチルオキシである。またその他の特に好ましい実施形態では、Ｒ^５は、アミノで置換されたアルコキシ、例えば２−アミノエトキシ、Ｎ−モルホリノエトキシ、Ｎ，Ｎ−ジアルキルアミノエトキシ、第４級アンモニウムヒドロキシアルコキシ（例、トリメチルアンモニウムヒドロキシエトキシ）である。

Ｒ^６−９は、独立してＨ、ヒドロキシル、メルカプト、ハロゲン、シアノ、アミノ、アミジン、グアニジン、ニトロ、もしくはアルコキシであるか；又はＲ^７及びＲ^８は一緒に、ヒドロキシル、ハロゲン、オキソ、チオ、アミノ、アミジン、グアニジン、もしくはアルコキシで任意に置換された縮合炭素環もしくは複素環を形成する。特定の実施形態では、Ｒ^６及びＲ^７は、独立してＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、もしくはＩである。その他の特定の実施形態では、Ｒ^８及びＲ^９はどちらもＨである。またその他の特定の実施形態では、Ｒ^６及びＲ^７の一方はハロゲンであり、他方は水素もしくはハロゲンである。特定の好ましい実施形態では、Ｒ^７はＣｌであり、一方でＲ^６、Ｒ^８及びＲ^９は各々Ｈである。その他の特に好ましい実施形態では、Ｒ^６及びＲ^７はどちらもＣｌであり、一方でＲ^８及びＲ^９はどちらもＨである。

Ｒ^１０は、Ｈ又は、炭素環もしくは複素環で任意に置換された炭化水素鎖である。好ましい実施形態では、Ｒ^１０は、Ｈ、もしくはアルキル、即ち、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ｉ−ブチル、ｓ−ブチル、もしくはｔ−ブチルである。好ましい実施形態では、Ｒ^１０はＨである。

化学式（ＩＩＩ）のクラスの化合物は、米国特許番号第６６６７３１８号、第６８７２７３５号、及び第６８０３３８４号に開示される。

ｉｉｉ． 本発明の方法の更なる好適な実施形態は、化学式（ＩＶ）（化３４）の化合物である。

式中、Ｒ^１１は、化学式（化３５）のうちの１つの基である。

Ａは、水素、ヒドロキシ、アミノ、又はハロゲンであり、Ｂはアミノ、カルボキシ、水素、ヒドロキシ、シアノ、トリフルオロメチル、ハロゲン、低級アルキル、又は低級アルコキシである。

Ｒ^１２は、化学式（化３６）のうちの１つの基である。

Ｒ^１３は、水素、カルボキシ、又は低級アルキルであり；ｎは０又は１であり；Ｕ_２、Ｖ_２、及びＷ_２は、Ｕ_２とＶ_２との両方が水素ではない条件下で、独立して、水素、ハロゲン、又は低級アルキルであり；Ｘ_３は、カルボニル、フェニル置換低級アルキレン、イミノ、置換イミノ、又はスルホニルであり；Ｙ_２は、アミノ、置換アミノ、低級アルキル、もしくはシクロ低級アルキルのうちの１つ又はそれ以上で置換されることが可能な低級アルキレンであり、あるいは、Ｙ_２は低級アルケニレンもしくは低級アルキレンチオであり；ｋは、０又は１であり；ｋが１である場合、Ｚ_２は、水素、低級アルキルチオ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ_２、アミノであり；ｋが０又は１である場合、Ｚ_２は、１−アダマンチル、ジフェニルメチル、３−［［（５−クロロピリジン−２−イル）アミノ］カルボニル］ピラジン−２−イル、ヒドロキシ、フェニルメトキシ、２−クロロ−４−［［［（３−ヒドロキシフェニル）メチル］アミノ］カルボニル］フェニル、［２，６−ジクロロフェニル）メトキシ］フェニルであり；さらに、ｋが０又は１である場合、Ｚ_２は、同一もしくは相違することができる０乃至３のヘテロ原子を含むシクロアルキルもしくはアリール、又はその環が独立して同一もしくは相違することができる０乃至３のヘテロ原子を含むシクロアルキルもしくはアリールを２もしくは３の環含む縮合環系であることができ、それらの環のいずれかは、非置換、又は、ハロゲン、シアノ、アミノ、置換アミノ、アミノスルホニル、ニトロ、オキソ、ヒドロキシ、アリール、アリールオキシ、非置換低級アルキル、ハロゲン置換低級アルキル、低級アルコキシ置換低級アルキル、低級アルコキシ、低級アルカンスルホニル、低級アルキルチオ、アセチル、アミノカルボニル、ヒドラジノ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、アセトキシのうちの少なくとも１つ、又はさらにアミノ低級アルキルで置換されることができ；及び、Ｒ^２０は、水素、薬学的に許容可能な塩もしくはエステルである。

化学式（ＩＶ）の化合物の一実施形態は、化学式（ＩＶ）（化３７）に示される立体化学構造を有する。

本発明の方法の化合物の好適な一連の実施形態は、化学式（Ｖ）（化３８）の化合物である。

式中、Ｒ^１４は、化学式（化３９）のうちの１つの基である。

式中、Ｒ^１５は、水素、カルボキシ、又は低級アルキルであり；Ｕ_３、Ｖ_３、及びＷ_３は、独立して、水素、ハロゲンであり；あるいは、Ｕ_３、Ｖ_３、及びＷ_３は、Ｕ_３及びＶ_３の両方が水素ではない条件下で、低級アルキルであり；Ｘ_４は、カルボニル、フェニル置換低級アルキレン、イミノ、置換イミノ（シアノを含む）、又はスルホニルであり；Ｙ_３は、低級アルケニレン、低級アルキレンチオであり、あるいは、アミノ、アセチルアミノ、もしくはシクロ低級アルキルで置換可能な低級アルキレンである。

ｋ_２は０又は１であり；ｋ_２が１である場合は、Ｚは、水素、低級アルキルチオ、−ＣＯＯＨ、−ＣＯＮＨ_２−、又はアミノであり；ｋ_２が０又は１である場合は、Ｚ_３は、１−アダマンチル、ジフェニルメチル、３−［［（５−クロロピリジン−２−イル）アミノ］カルボニル］ピラジン−２−イルであり；ｋ_２が０もしくは１である場合は、Ｚは、同一もしくは相違することができる０乃至３のヘテロ原子を含むシクロアルキルもしくはアリール、又はその環が独立して同一もしくは相違することができる０乃至３のヘテロ原子を含むシクロアルキルもしくはアリールを２もしくは３の環含む縮合環系であることができ、それらの環のいずれも非置換、又はハロゲン、シアノ、アミノ、置換アミノ、アミノスルホニル、ニトロ、オキソ、ヒドロキシ、アリール、アリールオキシ、非置換低級アルキル、ハロゲン置換低級アルキル、低級アルコキシ置換低級アルキル、低級アルコキシ、カルボキシ、アルコキシカルボニル、もしくはアセトキシのうちの少なくとも１つで置換されることができ；及び
Ｒ^２１は、水素、その薬学的に許容可能な塩もしくはエステルである。

化学式Ｖの化合物の好適な実施形態は、化学式Ｖ’（化４０）に示される立体化学構造を有する。

化学式ＩＶ及びＶのクラスのその他の化合物は、米国特許第７２１７７２８号、第６３３１６４０号、第６５１５１２４号、及び第６８０３３８４号に開示される。

ｖ．本方法の好適な化合物のその他のクラスは、化学式（ＶＩ）（化４１）に示され、

式中、Ｄ_４は、単環式、二環式、もしくは三環式の飽和、不飽和、もしくは芳香族環であり、各環は環内に５、６もしくは７の原子を有し、ここで環内の原子は炭素であるか、又は、窒素、酸素、及び硫黄の群から選択される１乃至４のヘテロ原子であり、ここで、任意の炭素もしくは硫黄環原子は、任意に酸化されることができ、各環は０−３のＲ^３１で置換され；

Ｌ_３は、
−Ｌ^３−Ｌ^２−Ｌ^１−、
−Ｌ^４−Ｌ^３−Ｌ^２−Ｌ^１−、及び
−Ｌ^５−Ｌ^４−Ｌ^３−Ｌ^２−Ｌ^１−の群から選択される二価連結基であり；

ここで、Ｌ^１は、オキソ（−Ｏ−）、Ｓ（Ｏ）_ｓ、Ｃ（＝Ｏ）、ＣＲ^３２、Ｒ^３２、ＣＲ^３２ｈｅｔ、ＮＲ^３０、又はＮであり；

Ｌ^２は、オキソ（−Ｏ−）、Ｓ（Ｏ）_ｓ、Ｃ（＝Ｏ）、Ｃ（＝Ｎ−Ｏ−Ｒ^３３）、ＣＲ^３４Ｒ^３４’、ＣＲ^３４、ｈｅｔＮＲ^３０、又はＮであり；

Ｌ^３は、オキソ（−Ｏ−）、Ｓ（Ｏ）_ｓ、Ｃ（＝Ｏ）、Ｃ（＝Ｎ−Ｏ−Ｒ^３３）、ＣＲ^３５Ｒ^３５’、ＣＲ^３５、ｈｅｔＮＲ^３０、又はＮであり；

Ｌ^４は、不在であるか、あるいは、オキソ（−Ｏ−）、Ｓ（Ｏ）_ｓ、Ｃ（＝Ｏ）、Ｃ（＝Ｎ−Ｏ−Ｒ^３３）、ＣＲ^３６Ｒ^３６’、ＣＲ^３６、ＮＲ^３０、又はＮであり；

Ｌ^５は、不在であるか、又は、Ｌ^１−Ｌ^３のうちの１つだけがｈｅｔであることができる、及びＬ^１−Ｌ^３のうちの１つがｈｅｔである場合に他のＬ^１−Ｌ^５が不在であることができる条件下で、オキソ（−Ｏ−）、Ｓ（Ｏ）_ｓ、Ｃ（＝Ｏ）、ＣＲ^３７Ｒ^３７’、ＣＲ^３７、ＮＲ^３０、又はＮであり；

ここで、Ｒ^３２、Ｒ^３２’、Ｒ^３４、Ｒ^３４’、Ｒ^３５、Ｒ^３５’、Ｒ^３６、Ｒ^３６’、Ｒ^３７、及びＲ^３７’は、各々独立して、Ｒ^３８、Ｒ^３９、及びＵ−Ｑ−Ｖ−Ｗであり、任意で、Ｒ^２４及びＲ^３４’は、個別もしくは一緒になって、Ｂ上の置換基ＲＰを介してＢ_３と飽和、不飽和、もしくは芳香族縮合環を形成することができ、縮合環は環内に５、６もしくは７の原子を含み、任意でＯ、Ｓ、及びＮの群から選択される１乃至３のヘテロ原子を含み、ここで、Ｓ又はＮのいずれかは任意に酸化されることができ；
任意で、Ｒ^３５及びＲ^３５は、個別もしくは一緒になって、並びにＲ^３６及びＲ^３６’は、個別もしくは一緒になって、Ｄ_３上の置換基Ｒ^３１を介してＤ_３と飽和、不飽和、もしくは芳香族縮合環を形成することができ、縮合環は、環内に５、６もしくは７の原子を含み、任意でＯ、Ｓ、及びＮの群から選択される１−３のヘテロ原子を含み、ここでＳ又はＮのいずれかは任意に酸化されることができ；
さらに任意で、Ｌ^１−Ｌ^５中の各Ｒ^３２−Ｒ^３７、ＮＲ^３０、もしくはＮは、Ｌ^１−Ｌ^５中の任意の他のＲ^３２−Ｒ^３７、ＮＲ^３０、もしくはＮと一緒に、飽和、不飽和、もしくは芳香族いずれかの、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１−３の追加のヘテロ原子を任意に含む５、６もしくは７員の単素環もしくは複素環を形成することができ、ここで任意の炭素もしくは硫黄環原子は、任意に酸化されることができ、各環は０−３のＲ^３１で置換され；及び、ここでｓは０−２であり；Ｂは（化４２）の群から選択され；

ここで、（化４３）は、５、６又は７の原子を含む縮合複素環又は単素環であり、環は、不飽和、部分飽和、もしくは芳香族であり、ヘテロ原子は、１−３のＯ、Ｓ、及びＮから選択され；

Ｙ_３は、ＣＨ又はＮＲ^３０であり；ｎは０、１、３、又は３であり；

Ｇ_３は、水素又はＣ_１−Ｃ_６アルキルから選択され、任意でＧはＴと一緒になって、−Ｖ−Ｗで任意に置換されたＣ_３−Ｃ_６シクロアルキルを形成することができ；

Ｔ_３は、以下
天然型α−アミノ酸側鎖、
及びＵ_４−Ｑ_４−Ｖ_４−Ｗ_４のうちの１つであり；

Ｕ_４は、以下の構造Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_０−Ｃ_６アルキル−Ｑ、Ｃ_２−Ｃ_６アルケニル−Ｑ、及びＣ_２−Ｃ_６アルキニル−Ｑの１つを有する、任意に置換された二価ラジカルであり：ここで、任意のアルキル、アルケニル、もしくはアルキニル上の置換基は、１−３のＲ^３８であり；

Ｑ_４は、不在であるか、又はＯ−、−Ｓ（Ｏ）_ｓ−、−ＳＯ_２−Ｎ（Ｒ^３０）−、−Ｎ（Ｒ^３０）−、−Ｎ（Ｒ^３０）−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｎ（Ｒ^３０）−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｒ^３０）−、
−Ｎ（Ｒ^３０）−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、−Ｎ（Ｒ^３０）−ＳＯ_２−、−Ｃ（＝Ｏ）−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−、−ｈｅｔ−、−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｒ^３０）−、
−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｎ（Ｒ^３０）−、−ＰＯ（ＯＲ^３０）Ｏ−、又はＰ（Ｏ）Ｏ−であり；

ここで、
ｓは、０−２であり、及び
ｈｅｔは、単環式又は二環式の５、６、７、９、又は１０員の複素環であり、各環は、Ｎ、Ｏ、及びＳから選択される１−４のヘテロ原子を含み、ここで複素環は、飽和、部分飽和、もしくは芳香族であることができ、任意のＮもしくはＳは任意に酸化され、複素環は０−３のＲ^４１で置換され、
Ｖ_４は、不在であるか、又は以下の構造Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_３−Ｃ_８シクロアルキル、Ｃ_０−Ｃ_６アルキル−Ｃ_６−Ｃ_１０アリール、及びＣ_０−Ｃ_６アルキル−ｈｅｔのうちの１つで任意に置換された二価基であり；

ここで、任意のアルキル上の置換基は１−３のＲ^３８であり、任意のアリールもしくはｈｅｔ上の置換基は１−３のＲ^３１であり；

Ｗ_４は、水素、ＯＲ^３３、ＳＲ^４２、ＮＲ^３０Ｒ^３０、ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ^４３、ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ^ｎＲ^ｎ、ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ^４３、ＮＨ−ＳＯ_２−Ｒ^３７、ＮＨ−ＳＯ_２−ＮＲ^３０Ｒ^３０、ＮＨ−ＳＯ_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ^４３、ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＳＯ_２−Ｒ^３７、Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ^４３、Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ^４３、Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ^３０Ｒ^３０’、Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＳＯ_２−Ｒ^３７、Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＳＯ_２−ＮＲ^３０Ｒ^３０’、Ｃ（＝Ｓ）−ＮＲ^３０Ｒ^３０’、ＳＯ_２−Ｒ^３７、ＳＯ_２−Ｏ−Ｒ^３７、ＳＯ_２−ＮＲ^３７Ｒ^３７’、ＳＯ_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ^４３、ＳＯ_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ^３０Ｒ^３０’、ＳＯ_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ^４３、Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ^３０Ｒ^３０’、Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ^４３、Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ^４３、Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＳＯ_２Ｒ^４６、又はＯ−ＳＯ_２−Ｒ^３７であり；

Ｒ^４４は、Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ^４５、Ｃ（＝Ｏ）−Ｈ、ＣＨ_２（ＯＨ）、又はＣＨ_２Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ_１−Ｃ_６アルキルであり；

Ｒ^３８は、Ｒ^３８’、又は１−３のＲ^３８’で置換されたＲ^３８’’であり；

ここで、Ｒ^３８’は、水素、ハロ（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、シアノ、イソシアネート、カルボキシ、カルボキシ−Ｃ_１−Ｃ_１１アルキル、アミノ、アミノ−Ｃ_１−Ｃ_８アルキル、アミノカルボニル、カルボキサミド、カルバモイル、カルバモイルオキシ、ホルミル、ホルミルオキシ、アジド、ニトロ、イミダゾイル、ウレイド、チオウレイド、チオシアナト、ヒドロキシ、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシ、メルカプト、スルホンアミド、ｈｅｔ、フェノキシ、フェニル、ベンズアミド、トシル、モルホリノ、モルホリニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピロリニル、イミダゾリル、又はインドリルであり；

Ｒ^３８’’は、Ｃ_０−Ｃ_１０アルキル−Ｑ−Ｃ_０−Ｃ_６アルキル、Ｃ_０−Ｃ_１０アルケニル−Ｑ−Ｃ_０−Ｃ_６アルキル、Ｃ_０−Ｃ_１０アルキニル−Ｑ−Ｃ_０−Ｃ_６アルキル、Ｃ_３−Ｃ_１１シクロアルキル−Ｑ−Ｃ_０−Ｃ_６アルキル、Ｃ_３−Ｃ_１０シクロアルケニル−Ｑ−Ｃ_０−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル−Ｃ_６−Ｃ_１２アリール−Ｑ−Ｃ_０−Ｃ_６アルキル、Ｃ_６−Ｃ_１０アリール−Ｃ_１−Ｃ_６アルキル−Ｑ−Ｃ_０−Ｃ_６アルキル、Ｃ_０−Ｃ_６アルキル−ｈｅｔ−Ｑ−Ｃ_０−Ｃ_６アルキル、Ｃ_０−Ｃ_６アルキル−Ｑ−ｈｅｔ−Ｃ_０−Ｃ_６アルキル、ｈｅｔ−Ｃ_０−Ｃ_６アルキル−Ｑ−Ｃ_０−Ｃ_６アルキル、Ｃ_０−Ｃ_６アルキル−Ｑ−Ｃ_６−Ｃ_１２アリール、又はＱ−Ｃ_１−Ｃ_６アルキルであり；

Ｒ^４３は、水素、及び置換もしくは非置換のＣ_１−Ｃ_１０アルキル、Ｃ_２−Ｃ_１０アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_１０アルキニル、Ｃ_３−Ｃ_１１シクロアルキル、Ｃ_３−Ｃ_１０シクロアルケニル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル−Ｃ_６−Ｃ_１２アリール、Ｃ_６−Ｃ_１０アリール−Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル−ｈｅｔ、ｈｅｔ−Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_６−Ｃ_１２アリール、又はｈｅｔであり、
ここで、任意のアルキル、アルケニル、もしくはアルキニル上の置換基は１−３のＲ^３８であり、任意のアリールもしくはｈｅｔ上の置換基は、１−３のＲ^３１であり；
Ｒ^３１は、Ｒ^４０又はＲ^４１であり；

Ｒ^４１は、ＯＨ、ＯＣＦ_３、ＯＲ^４３、ＳＲ^４２、ハロ（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、ＣＮ、イソシアネート、ＮＯ_２、ＣＦ_３、Ｃ_０−Ｃ_６アルキル−ＮＲ^３０Ｒ^３０’、Ｃ_０−Ｃ_６アルキル−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ^３０Ｒ^３０’、Ｃ_０−Ｃ_６アルキル−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ^３８、Ｃ_１−Ｃ_８アルキル、Ｃ_１−Ｃ_８アルコキシ、Ｃ_２−Ｃ_８アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_８アルキニル、Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルキル、Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルケニル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル−フェニル、フェニル−Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキルオキシカルボニル、フェニル−Ｃ_０−Ｃ_６アルキルオキシ、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル−ｈｅｔ、ｈｅｔ−Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、ＳＯ_２−ｈｅｔ、−Ｏ−Ｃ_６−Ｃ_１２アリール、−ＳＯ_２−Ｃ_６−Ｃ_１２アリール、−ＳＯ_２−Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、又はｈｅｔであり、
ここで、任意のアルキル、アルケニル、もしくはアルキニルは、ＯＨ、ハロ（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、ニトロ、アミノ、及びアミノカルボニルから選択される１−３の基で任意に置換されることができ、任意のアリールもしくはｈｅｔ上の置換基は、１−２のヒドロキシ、ハロ（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、ＣＦ_３、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルコキシ、ニトロ、及びアミノであり；

Ｒ^４２は、Ｓ−Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ（＝Ｏ）−Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ（＝Ｏ）−ＮＲ^３０Ｒ^３０’、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、ハロ（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）−Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、ベンジル、又はフェニルであり；

Ｒ^３０は、Ｒ^４３、ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ^４３、ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ^４３、ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨＲ^４３、ＮＨ−ＳＯ_２−Ｒ^４６、ＮＨ−ＳＯ_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ^４３、ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＳＯ_２−Ｒ^３７、Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ^４３、Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ^４３、Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨＲ^４３、Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ^４３、Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ^４３、Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＳＯ_２−Ｒ^４６、Ｃ（＝Ｏ）−ＮＨ−ＳＯ_２−ＮＨＲ^３７、ＳＯ_２−Ｒ^３７、ＳＯ_２−Ｏ−Ｒ^３７、ＳＯ_２−Ｎ（Ｒ^４３）_２、ＳＯ_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ^４３、ＳＯ_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ^４３、又はＳＯ_２−ＮＨ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ^４３であり；

Ｒ^３０’は、水素、ヒドロキシ、及び置換もしくは非置換のＣ_１−Ｃ_１１アルキル、Ｃ_１−Ｃ_１１アルコキシ、Ｃ_２−Ｃ_１０アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_１０アルキニル、Ｃ_３−Ｃ_１１シクロアルキル、Ｃ_３−Ｃ_１０シクロアルケニル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル−Ｃ_６−Ｃ_１２アリール、Ｃ_６−Ｃ_１０アリール−Ｃ_１−Ｃ_６−アルキル、Ｃ_６−Ｃ_１０アリール−Ｃ_０−Ｃ_６アルキルオキシ、Ｃ_１−Ｃ_６アルキル−ｈｅｔ、ｈｅｔ−Ｃ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_６−Ｃ_１２アリール、ｈｅｔ、Ｃ_１−Ｃ_６アルキルカルボニル、Ｃ_１−Ｃ_８アルコキシカルボニル、Ｃ_３−Ｃ_８シクロアルキルカルボニル、Ｃ_３−Ｃ_８シクロアルコキシカルボニル、Ｃ_６−Ｃ_１１アリールオキシカルボニル、Ｃ_７−Ｃ_１１アリールアルコキシカルボニル、ヘテロアリールアルコキシカルボニル、ヘテロアリールアルキルカルボニル、ヘテロアリールカルボニル、ヘテロアリールアルキルスルホニル、ヘテロアリールスルホニル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキルスルホニル、又はＣ_６−Ｃ_１０アリールスルホニルであり、ここで、任意のアルキル、アルケニル、もしくはアルキニル上の置換基は、１−３のＲ^３８であり、任意のアリール、ｈｅｔ、もしくはヘテロアリール上の置換基は、１−３のＲ^３１であり；

Ｒ^３０及びＲ^３０’は、それらが結合している共通の窒素と一緒になって、以下の構造モルホリニル、ピペラジニル、チアモルホリニル、ピロリジニル、イミダゾリジニル、インドリニル、イソインドリニル、１，２，３，４−テトラヒドロ−キノリニル、１，２，３，４−テトラヒドロ−イソキノリニル、チアゾリジニル、又はアザビシクロノニルのうちの１つを有する任意に置換された複素環を形成することができ、ここで、置換基は１−３のＲ^３８であり；

Ｒ^３３は、水素、及び置換もしくは非置換のＣ_１−Ｃ_６アルキル、Ｃ_１−Ｃ_６アルキルカルボニル、Ｃ_２−Ｃ_６アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_６アルキニル、Ｃ_３−Ｃ_８シクロアルキル、又はベンゾイルであり、ここで、任意のアルキル上の置換基は、１−３のＲ^３８であり、任意のアリール上の置換基は、１−３のＲ^４０であり；

Ｒ^４０は、ＯＨ、ハロ（Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ）、ＣＮ、イソシアネート、ＯＲ^４３、ＳＲ^４２、ＳＯＲ^４３、ＮＯ_２、ＣＦ_３、Ｒ^４３、ＮＲ^３０Ｒ^３０’、ＮＲ^３０Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ^４３、ＮＲＣ（＝Ｏ）−Ｒ^４３、Ｃ_０−Ｃ_６アルキル−ＳＯ_２−Ｒ^４３、Ｃ_０−Ｃ_６アルキル−ＳＯ_２−ＮＲ^３０Ｒ^３０’、Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ^４３、Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−Ｒ^４３、Ｃ（＝Ｏ）−Ｏ−Ｒ^４３、又はＣ（＝Ｏ）−ＮＲ^３０Ｒ^３０’であり、ここで、任意のアルキル、アルケニル、もしくはアルキニル上の置換基は、１−３のＲ^３８であり、任意のアリールもしくはｈｅｔ上の置換基は１−３のＲ^３１であり；

Ｒ^４６は、置換もしくは非置換Ｃ_１−Ｃ_８アルキル、Ｃ_２−Ｃ_８アルケニル、Ｃ_２−Ｃ_８アルキニル、Ｃ_３−Ｃ_８シクロアルキル、Ｃ_３−Ｃ_６シクロアルケニル、Ｃ_０−Ｃ_６アルキル−フェニル、フェニル−Ｃ_０−Ｃ_６アルキル、Ｃ_０−Ｃ_６アルキル−ｈｅｔ、又はｈｅｔ−Ｃ_０−Ｃ_６アルキルであり、
ここで、任意のアルキル、アルケニル、もしくはアルキニル上の置換基は、１−３のＲ^３８であり、任意のアリールもしくはｈｅｔ上の置換基は、１−３のＲ^３１であり；

Ｒ^４５は、置換もしくは非置換ヒドロキシ、Ｃ_１−Ｃ_１１アルコキシ、Ｃ_３−Ｃ_１２シクロアルコキシ、Ｃ_８−Ｃ_１２アラルコキシ、Ｃ_８−Ｃ_１２アルシクロアルコキシ、Ｃ_６−Ｃ_１０アリールオキシ、Ｃ_３−Ｃ_１０アルキルカルボニルオキシアルキルオキシ、Ｃ_３−Ｃ_１０アルコキシカルボニルオキシアルキルオキシ、Ｃ_３−Ｃ_１０アルコキシカルボニルアルキルオキシ、Ｃ_５−Ｃ_１０シクロアルキルカルボニルオキシアルキルオキシ、Ｃ_５−Ｃ_１０シクロアルコキシカルボニルオキシアルキルオキシ、Ｃ_５−Ｃ_１０シクロアルコキシカルボニルアルキルオキシ、Ｃ_８−Ｃ_１２アリールオキシカルボニルアルキルオキシ、Ｃ_８−Ｃ_１２アリールオキシカルボニルオキシアルキルオキシ、Ｃ_８−Ｃ_１２アリールカルボニルオキシアルキルオキシ、Ｃ_５−Ｃ_１０アルコキシアルキルカルボニルオキシアルキルオキシ、（Ｒ^３０）（Ｒ^３０）Ｎ（Ｃ_１−Ｃ_１０アルコキシ）−、（化４４）であり；

ここで、任意のアルキル、アルケニル、もしくはアルキニル上の置換基は、１−３のＲ^３８であり、任意のアリールもしくはｈｅｔ上の置換基は、１−３のＲ^３１であり、及び、

その薬学的に許容可能な塩である。

化学式（Ｉ）−（ＶＩ）の化合物は、薬学的に許容可能な塩、及びエステルを含み、化学式（Ｉ）−（ＶＩ）のプロドラッグ化合物を含み、ここで、Ｒ^３Ａ、Ｒ^５、Ｒ^１０、Ｒ^１７、Ｒ^１８、Ｒ^１９、Ｒ^２０、Ｒ^２１、Ｒ^２９、及びＲ^４４におけるカルボン酸エステルは、低級アルキルもしくはＣＨ_２ＣＨ_２−Ｒ^２２であり、ここでＲ^２２は、以下（化４５）のうちの１つであり：

ここで、Ｒ^２３は、水素もしくはメチルであり、Ｒ^２４は、低級アルキルもしくは低級シクロアルキルである。

化学式（ＶＩ）の化合物の好適な実施形態は、化学式（ＶＩ’）（化４６）に示される立体化学構造を有する。

化学式（ＶＩ）のクラスの化合物は、米国特許公報第２００５０２０３１３５号に開示される。

本明細書に記載されるある化合物は、１又はそれ以上の不斉中心を含むことができ、これにより、個別の立体異性体、個別のジアステレオマー、及びその混合物を含むことができる。さらに、本発明の化合物は、二重結合の幾何異性体を含むことができ、Ｚ及びＥ異性体を含み、純粋な幾何異性体もしくはその混合物として存在することができる。

ある好適な実施形態では、本発明の方法は、以下の化合物（化４７）、並びにそれらの薬学的に許容可能な塩及びエステルを用いて実施される。

本発明の化合物は、以下の化合物（化４８）（化４９）（化５０）（化５１）（化５２）（化５３）（化５４）、並びにそれらの薬学的に許容可能な塩及びエステルを含む。

ｂ． ＬＦＡ−１のアロステリックアンタゴニストである例示化合物
新規なｐ−アリールチオシンナミドのファミリーは、ＬＦＡ−１のアロステリックアンタゴニストとして作用できる。Liu, G.; Link, J.T.; Pei, Z.; Reilly, E.B.; Nguyen, B.; Marsh, K.C.; Okasinski, G.F.; von Geldern, T.W.; Ormes, M.; Fowler, K.; Gallatin, M. 2000 「Discovery of novel p-arylthio cinnamides as antagonists of leukocyte function-associated antigen-1/intracellular adhesion molecule-1 interaction. 1. Identification of an additional binding pocket based on an anilino diaryl sulfide lead.」 J. Med. Chem. 43, 4015-4030を参照のこと。

本発明で提供されるのは、本発明の方法で有用である化学式（ＶＩＩ）（化５５）の化合物であり、米国特許出願公報第２００８０２３４２７１号に開示され：

及びその薬学的に許容可能な塩及びプロドラッグであり、

式中、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４、及びＲ_５は、夫々独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルケノキシ、アルキニル、アルデヒド、アルカノイル、アルコキシ、アミド、アミノ、アリール、アリールオキシ、カルボキシ、シアノ、シクロアルキル、エーテル、エステル、ハロゲン、ヘテロシクリル、ヒドロキシ、ケトン、ニトロ、オキソ、ペルフルオロアルキル、スルホニル、スルホン酸塩、チオ、又はその他のカルボニル含有基であり、Ｒ^６は、非置換アルキル、非置換飽和シクロアルキル、非置換カルボキシアルキル、又は非置換ヘテロシクロアルキルであり、ここで、非置換飽和シクロアルキル、非置換カルボキシアルキル、及び非置換ヘテロシクリルアルキルは、アルキル基を介して化学式（ＶＩＩ）のＮＨに結合され、ここで、非置換カルボキシアルキルは、分岐アルキル鎖を含むが、

ただし、Ｒ_１及びＲ_３の少なくとも１つが、以下Ａ.Ｂ.Ｃ.Ｄ.Ｅ.から選択され：

Ａ. （化５６）として定義されるシス−シンナミド又はトランス−シンナミドから選択されるシンナミドであり、

Ｒ_８及びＲ_９は、夫々独立して、水素、アルデヒド、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アミド、アミノ、アリール、カルボキシ、シアノ、シクロアルキル、エステル、エーテル、ハロゲン、ヒドロキシ、ケトン、ニトロ、スルホン酸塩、スルホニル、チオ、又はその他のカルボニル含有基であり；

Ｂ. 化学式（ＶＩＩ−ａ）（化５７）の置換基であり、

Ｄ、Ｂ、Ｙ、及びＺは、夫々独立して、−ＣＲ^３１＝、−ＣＲ^３２Ｒ^３３−、−Ｃ(Ｏ)−、−Ｏ−、−ＳＯ_２−、−Ｓ−、−Ｎ＝、又は−ＮＲ^３４−であり；

ｎは、０乃至３の整数であり；及びＲ^３１、Ｒ^３２、Ｒ^３３、及びＲ^３４は、夫々独立して、水素、アルキル、カルボキシ、ヒドロキシアルキル、モノアルキルアミノカルボニルアルキル、ジアルキルアミノカルボニルアルキル、又はカルボキシアルキルであり；

Ｃ. （化５８）として定義されるシス−シクロプロパン酸、トランス−シクロプロパン酸、シス−シクロプロパンアミド、及びトランス−シクロプロパンアミドから選択されるシクロプロピル誘導体であり；

Ｒ_３５及びＲ_３６は、夫々独立して、水素、アルキル、カルボキシ、ヒドロキシアルキル、又はカルボキシアルキルであり、及び

Ｒ_３７及びＲ_３８は、夫々独立して、水素、アルキル、カルボキシアルキル、モノアルキルアミノカルボニルアルキル、又はジアルキルアミノカルボニルアルキルであり；

Ｄ. 化学式（ＶＩＩ−ｂ）（化５９）の置換基であり：

Ｒ_８及びＲ_９は、上記に定義された如くであり；

Ｅ. 化学式（ＶＩＩ−ｃ）（化６０）の桂皮酸であり、

Ｒ_８及びＲ_９は、上記に定義された如くであり；

Ｒ_１０及びＲ_１１は、夫々独立して、水素、アルカノイル、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アミド、アリール、アリールアルキル、カルボキシ、シアノ、シクロアルキル、エステル、エーテル、ヘテロシクリル、ヒドロキシ、ケトン、ニトロ、スルホニルチオ、又はその他のカルボニル含有基であり、あるいは、
Ｒ_１０及びＲ_１１は、Ｎと一緒になって、少なくとも１つの置換基を含むヘテロシクリル基を形成し、該置換基は、独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルケノキシ、アルキニル、アルデヒド、アルカノイル、アルコキシ、アミド、アミノ、アリール、アリールオキシ、カルボキシ、シアノ、シクロアルキル、エーテル、エステル、ハロゲン、ヘテロシクリル、ヒドロキシ、ケトン、ニトロ、オキソ、ペルフルオロアルキル、スルホニル、スルホン酸塩、チオ、又はその他のカルボニル含有基であり、あるいは、

Ｒ_１及びＲ_２、及び／又は、Ｒ_４及びＲ_５は、Ｒ_３がシンナミド、化学式（ＶＩＩ−ａ）の置換基、化学式（ＶＩＩ−ｂ）の置換基、又は上記に定義されるシクロプロピル誘導体であるとき、一緒に結合して、５−乃至７−員のシクロアルキル、アリール、又はヘテロシクリル環を形成し；あるいは、Ｒ_２及びＲ_３、及び／又は、Ｒ_３及びＲ_４、及び／又は、Ｒ_４及びＲ_５は、Ｒ_１がシンナミド、化学式（ＶＩＩ−ａ）の置換基、化学式（ＶＩＩ−ｂ）の置換基、及び上記に定義されるシクロプロピル誘導体から選択されるとき、結合して、５−乃至７−員のシクロアルキル、アリール、又はヘテロシクリル環を形成し；及び

Ａｒは、少なくとも１つの置換基を有する置換アリール又は置換へテロアリールであり、該置換基が、独立して、水素、アルキル、アルケニル、アルケノキシ、アルキニル、アルデヒド、アルカノイル、アルコキシ、アミド、アミノ、アリール、アリールオキシ、カルボキシ、シアノ、シクロアルキル、エーテル、エステル、ハロゲン、ヘテロシクリル、ヒドロキシ、ケトン、ニトロ、オキソ、ペルフルオロアルキル、スルホニル、スルホン酸塩、チオ、又はその他のカルボニル含有基である。

化学式（ＶＩＩ）の化合物のある実施形態では、Ｒ６は、以下の構造（化６１）の非置換へテロシクリルアルキルではない。

化学式（ＶＩＩ）の化合物のある例示化合物は、（化６２）を含み、これには、その立体異性体が含まれ、例えば、（化６３）及び（化６４）である。

この一般的なクラスのその他の化合物は、米国特許公開公報第２００４０１１６５１８号、第２００５００１４７４６号、第２００２０１５６３１４号、第２００２０１３２８０７号、第２００８ ０２４９１５７号、及び第２００７００６６５８５号に開示される。

ｉｉ． ＬＦＡ−１の小分子アロステリックアンタゴニストのその他のファミリーは、米国特許公開公報第２００８０１０８６７７号に開示されている。本発明は、化学式（ＶＩＩＩ）（化６５）の化合物、及びそれらの薬学的に許容可能な塩を提供し、これらは本明細書に記載される本発明の方法において有用である。

化学式（ＶＩＩＩ）の化合物において、式中、ｍは、０、１、又は２であり；Ｘは、Ｈ、又は、１もしくはそれ以上の置換基で非置換又は置換されたシクロアルキルもしくはフェニルであり、該置換基は、低級アルキル、ヒドロキシ、又はハロゲンであり；ｎは、０又は１であり；Ｙは、フェニル、フラニル、インドール、又はピロールであり、これらは全て、１又はそれ以上の置換基で非置換又は置換されることができ、該置換基は、独立して、低級アルキル、低級アルコキシ、ハロゲン、（３，５−ジメチルフェノキシ）プロポキシ、又はフェニルであり、ここでフェニルは、１又はそれ以上のハロゲン原子、ニトロ、アミノ、又はカルボキシ基で、さらに置換されることができる。

化学式（ＶＩＩＩ）の一つの例示化合物は、（化６６）である。

ＬＦＡ−１の小分子アロステリックアンタゴニストのさらなるファミリーは、米国特許公開公報第２００８／０２４２７１０号に開示される。本発明のその他の態様は、３ａ，４，５，６−テトラヒドロ−ピロロ１，２−ｂ]−イソチアゾール、及びその薬学的に許容可能な塩を提供し、ここで、硫黄は二酸化物形態であり、これは化学式（ＩＸ）（化６７）の化合物であり、本発明の方法において有用である。

また、例えば、化学式（ＩＸ−a）（化６８）の化合物であり：

式中、点線は、結合又は非結合であり、Ｒ_１は、水素、任意に置換されたアルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アルコキシ、アリール、ヘテロシクリル、ヒドロキシ、ＳＨ，ＳＲ_５、シアノ、ハロゲン、又はアミノであり；あるいは、

点線は、非結合であり、Ｒ_１は、二重結合を介して環系に結合され、オキソであり；

Ｒ_２は、水素であり、あるいは、Ｒ_２は、任意に置換されるシクロアルキル、アリール、又はヘテロシクリルであり；

Ｒ_３は、水素、ＣＯＯＲ_６、又はアミノカルボニルであり、あるいは、Ｒ_３は、任意に置換されるアルキル、アルケニル、アルキニル、アラルキル、アルコキシ、シクロアルキルオキシ、アリールオキシ、又はヘテロシクロオキシであり；

Ｒ_４は、水素、ハロゲン、ヒドロキシ、ＳＨ、任意に置換されたアルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、又はアルキルチオであり、あるいは、Ｒ_４は、トリアルキルシリル等のシリル基、又は、トリアルキルシリルオキシ（例えば、トリ（Ｃ_１−６）アルキルシリル（オキシ））、Ｎ_３、アミノであり、あるいは、

Ｒ_４は、ヘテロ原子として窒素原子を少なくとも１つ含むヘテロシクリルであり、窒素原子を介して、化学式（ＩＸ）の化合物へと結合され、あるいは、

Ｒ_４は、二重結合によって環系に結合され、且つオキソであり；並びに
Ｒ_５及びＲ_６は、夫々独立して、アルキル、アルケニル、アルキニル、シクロアルキル、アリール、又はヘテロシクリルである。

ある実施形態では、化学式（ＩＸ）の化合物は、（化６９）である。

ｉｖ． アロステリック小分子アンタゴニストには、ＬＦＡ−１のＣＤ１１ａドメインに結合するスタチン類が含まれる。Kallen, J., Welzenbach, K., Ramage, P. Geyl, D. Kriwacki, R., Legge, G., Cottens, S., Weitz-Schmidt, G., and Hommel, U. 1999. 「Structural basis for LFA-1 inhibition upon lovastatin binding to the CD11a I-domain」, J. Mol. Biol., 292: 1-9; and Weitz-Schmidt, G., Welzenbach, K., Brinkmann, V., Kamata, T., Kallen, J., Bruns, C., Cottens, S., Takada, Y., and Hommel, U. 2001. Statins selectively inhibit leukocyte function antigen-1 by binding to a novel regulatory integrin site, Nature Med., 7: 687-692; and Frenette, P. S. 2001. 「Locking a leukocyte integrin with statins」, N. Engl. J. Med., 345: 1419-1421.を参照のこと。メビノリン／コンパクチンモチーフに由来する分子もまた、ＬＦＡ−１に対する活性を示す。Welzenbach, K., Hommel, U., and Weitz-Schmidt,G. 2002. 「Small molecule inhibitors induce conformational changes in the I domain and the I-like domain of Lymphocyte Function-Associated Antigen-1」, J. Biol. Chem., 277: 10590-10598, 及び米国特許第６，６３０，４９２号を参照のこと。

化学式（Ｘ）のアロステリックなＬＦＡ−１アンタゴニストのファミリーは、開示されており、本発明の方法において有用である。米国特許第６８１８６３８号を参照のこと。

化学式（Ｘ）（化７０）の化合物は、本発明の方法において使用するのに提供され、

式中、a - - - b 及び α - - - βの夫々は、独立して、単結合又は二重結合のいずれかであり；Ｒ_１は、（化７１）であり、

Ｒ_αは、Ｈ、任意にＯＨで置換されるＣ_１−６アルキル、又はＣ_１−４アルコキシ、Ｃ_２−６アルケニル、又はアリール−Ｃ_１−４アルキルであり；

Ｒ_２は、ＯＨであり；−Ｏ−ＣＯ−Ｒ_５であり；

Ｒ_４は、Ｈ又はＯＲ_１９であり、ここで、Ｒ_１９は、Ｃ_１−６アルキル、ヒドロキシ−Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−４アルコキシ−Ｃ_１−６アルキル、アリール−Ｃ_１−４アルキル、又はＣ_１−４アルコキシカルボニル−Ｃ_１−４アルキルであり；

Ｒ_５は、Ｃ_１−８アルキル、Ｃ_３−７シクロアルキル、Ｃ_３−７シクロアルキル−Ｃ_１−４アルキル、アリール、又はアリール−Ｃ_１−４アルキルであり；あるいは、Ｒ_５は、−Ｏ−Ｒ_６であり、ここで、Ｒ_６は、そのカルボニル残基を介してＯに結合したα−アミノ酸の残基であり；あるいは、Ｒ_５は、−ＣＨＲ_７−−ＣＯＲ_８であり、ここで、Ｒ_７は、Ｈ、Ｃ_１−４アルキル、ヘテロＣ_１−４アルキル、Ｃ_３−７シクロアルキル、Ｃ_３−７シクロアルキル−Ｃ_１−４アルキル、アリール、又はアリール−Ｃ_１−４アルキルであり、及びＲ_８は、ＯＨ、Ｃ_１−４アルコキシ、又はＮＲ_９Ｒ_１０であり；

Ｒ_９及びＲ_１０の夫々は、独立して、ＨもしくはＣ_１−４アルキルであり、あるいは、Ｒ_９及びＲ_１０は、それらが結合する窒素と一緒にヘテロアリール基を形成し；

Ｒ_３は、化学式（Ｘ−ａ）（化７２）のラクタムであり、

Ｒ_３０は、Ｃ_１−８アルキル、Ｃ_３−７シクロアルキル、アリール、Ｃ_３−７シクロアルキル−Ｃ_１−４アルキル、アリール−Ｃ_１−４アルキル、ヘテロアリール、又はヘテロアリール−Ｃ_１−４であり；及び

Ｒ_３１は、ＯＨ、Ｃ_１−４アルコキシ、Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_１−４アルコキシ−カルボニル−Ｃ_１−４アルキル、ヒドロキシ−Ｃ_１−５アルコキシ、Ｃ_１−４アルコキシ−Ｃ_１−５アルコキシ、Ｃ_１−４アルコキシ−カルボニル−Ｃ_１−４アルキル、アミノ−Ｃ_１−４アルコキシ、ＨＯＯＣ−−Ｃ_１−４アルコキシ、ＨＯＯＣ−−Ｃ_１−４アルキル、Ｒ_９ａＲ_１０ａＮ−−Ｃ_１−５アルコキシであり、ここでＲ_９ａ及びＲ_１０ａは、独立してＲ_９又はＲ_１０である

ある実施形態では、上述の定義において「アリール」もしくは「アリール−Ｃ_１−４アルキル」は、どこで使用されていても、ハロゲン、ＯＨ、ＮＲ_１１Ｒ_１２，ＣＯＯＨ、ＣＦ_３、Ｃ_１−４アルキル、ヒドロキシ−Ｃ_１−４アルキル、ヒドロキシ−Ｃ_１アルコキシ、Ｃ_１アルコキシ−カルボニル、シアノ、又はＣＯＮＲ_１１Ｒ_１２で任意に置換された「フェニル」もしくは「ナフチル」であり、Ｒ_１１及びＲ_１２の夫々は、独立して、Ｈ、Ｃ_１−４アルキル、フェニル、ナフチル、フェニル−Ｃ_１−４アルキル、もしくはナフチル−Ｃ_１−４アルキルであり、あるいは、Ｒ_１１及びＲ_１２は、それらが結合して窒素と一緒になってヘテロアリールを形成し；「ヘテロアリール」は、どこで使用されていても、ベンゼン環に任意に縮合された５−もしくは６−員のヘテロアリールであり；遊離形態もしくは塩形態である。

ある実施形態では、化学式（Ｘ）の化合物は以下の化合物（化７３）（化７４）のうちの１つである。

ヒダントインベースのインヒビターのファミリーもまた、アンタゴニストとして使用されることができる。Kelly, T. A., Jeanfavre, D. D., McNeil, D. W., Woska, J. R. Jr., Reilly, P. L., Mainolfi, E. A., Kishimoto, K. M., Nabozny, G. H., Zinter, R., Bormann, B.-J., and Rothlein, R. 1999. 「Cutting edge: a small molecule antagonist of LFA-1-mediated cell adhesion」, J. Immunol., 163: 5173-5177を参照のこと。これら化合物は、ＬＦＡ−１のアロステリックなインヒビターであると考えられている。

化学式（ＸＩ）のヒダントインベースのインヒビターのようなファミリーは、米国特許公開公報第２００６／０１４８８３６号に開示され、本発明の方法において有用である。

化学式（ＸＩ）（化７５）に基づく化合物、及びその光学異性体、その薬学的に許容可能な塩もしくは溶媒和物は、本発明の方法において使用するために提供され、

式中、Ｒ_１６は、（化７６）であり；

各Ｒ_１７は、独立して、−ＯＲ_１８、−ＮＲ_１８Ｒ_１９、−Ｃ(＝Ｏ)Ｒ_１８、−ＣＯ_２Ｒ_１８、−Ｃ(＝Ｏ)ＮＲ_１８Ｒ_１９、−ＮＲ_１８Ｃ(＝Ｏ)Ｒ_１９、−ＮＲ_１８Ｃ(＝Ｏ)ＯＲ_１９、−Ｓ(Ｏ)_ｐＲ_１９、−ＮＲ_１８ＳＯ_２Ｒ_１９、又は−ＳＯ_２ＮＲ_１８Ｒ_１９であり；

Ｒ_１８及びＲ_１９は、独立して、水素、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、又は置換シクロアルキルであり；ｑは、１、２、又は３であり；及び、ｐは、１又は２である。

ある実施形態では、化学式（ＸＩ）の化合物は、（化７７）である。

スピロ−ヒダントイン化合物の一般的なクラスのその他の化合物は、本発明の方法におけるＬＦＡ−１のアロステリックなアンタゴニストとして有用である可能性があり、米国特許公開公報第２００６０１４２３１９号、第２００６００７４０９９号、第２００６００５２４３４号、第２００５０１１９２７９号、第２００５０００４１５３号、第２００４０２５９８９７号、第２００４０２４８９２０号、第２００４０００９９９８号、及び第２００２０１４３０３５号である。

ｃ． その他の小分子アンタゴニスト
小分子インヒビターのその他のファミリーは、刊行物（Gadek, T. R., Burdick, D. J., McDowell, R. S., Stanley, M. S., Marsters, J. C. Jr., Paris, K. J., Oare, D. A., Reynolds, M. E., Ladner, C., Zioncheck, K. A., Lee, W. P., Gribling, P., Dennis, M. S., Skelton, N. J., Tumas, D. B., Clark, K. R., Keating, S. M., Beresini, M. H., Tilley, J. W., Presta, L. G., and Bodary, S. C. 2002. 「Generation of an LFA-1 antagonist by the transfer of the ICAM-1 immunoregulatory epitope to a small molecule」 Science, 295: 1086-1089 and online supplementary material.を参照のこと）、及び特許公報（米国特許第６，８７２, ７３５号、米国特許第６，６６７,３１８号、米国特許第６８０３３８４号、米国特許第６，５１５,１２４号、米国特許第６３３１６４０号を含む）、及び特許出願（米国第２００２０１１９９９４号、米国第２００４００５８９６８号、米国第２００５００８０１１９号、ＷＯ９９／４９８５６号、ＷＯ００／２１９２０号、ＷＯ０１／５８８５３号、ＷＯ０２／５９１１４号、ＷＯ０５／０４４８１７、他）に開示されている。引用された参照文献の内容は、引用することによりその全体を援用する。

本発明の化合物は、当業者に公知である方法によって調製されることができ、あるいは、本明細書に援用された参照文献に開示されており、及び多様な方法で精製することができる。精製方法には、様々な条件下で結晶化もしくは沈殿させることにより、１又はそれ以上の多形体を産生することが含まれる。したがって、本発明は、上述の独創的な化合物、それらの多形体、それらの薬学的に許容可能な塩、それらの薬学的に許容可能な溶媒和物、及びそれらを含む薬学的に許容可能な組成物を包含する。

好適な実施形態の上記例は、幾つかの潜在的な治療薬を示すことを意図したものであり、いかなる方法においても本発明を制限することを意図したものではない。本発明の方法は、抗体、抗体フラグメント、ペプチド、及びその他の合成分子とともに実施されることができ、これはＬＦＡ−１とＩＣＡＭ−１との間の相互作用の選択的、潜在的、及び直接的な競合インヒビターであり、これにより糖尿病性網膜症の症状を治療することができる。

ＩＩ． 治療方法
本明細書で使用する用語「被験体」には、動物、詳細にはヒトと同様に他の哺乳動物が含まれる。

本明細書で使用する用語「治療すること」及びその文法的同等語には、治療的な利益及び／又は予防的な利益を達成することが含まれる。治療的な利益は、治療される基礎障害の根絶又は改善を意味する。さらに、治療的な利益は、被験体が依然として基礎障害を患っている可能性があるにもかかわらず、被験体において改善が観察されるように、基礎障害に関連する生理的症状の１つ又はそれ以上を根絶又は改善することにより達成される。予防的な利益については、組成物は、特定の疾患を発生するリスク状態にある被験体、又は疾患の１つもしくはそれ以上の生理的症状を報告している被験体に、この疾患の診断がまだなされていない場合でさえ、投与することができる。組成物は、生理的症状又は基礎疾患の進行を予防するために被験体に投与することができる。

本発明のある実施形態では、糖尿病性網膜症を治療するために被験体に治療薬を投与する方法が提供される。本発明のある実施形態では、治療薬はＬＦＡ−１アンタゴニストである。ある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストは、ＬＦＡ−１の直接的競合アンタゴニストである。ある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストは、ＬＦＡ−１の競合的アンタゴニストである。ある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストは、ＬＦＡ−１のアロステリックなアンタゴニストである。本発明のある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストは、白血球によって媒介される炎症を調節できる。本発明のその他の実施形態は、眼炎症に関連する炎症を調節するためにＬＦＡ−１アンタゴニストを治療的に有効な量投与する工程によって被験体を治療する。本方法の一実施形態は、ＬＦＡ−１アンタゴニストを治療的に有効な量投与する工程によって糖尿病性網膜症に関連する症状を有する被験体を治療する。本発明の方法のある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストを治療的に有効な量投与する工程によって２型糖尿病の症状を有する被験体を治療する方法が提供される。本発明の方法のある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストを治療的に有効な量投与する工程によって１型糖尿病の症状を有する被験体を治療する方法が提供される。本発明の方法のある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストを治療的に有効な量投与する工程によって被験体の眼における網膜浮腫を減少させ、被験体を治療する方法が提供される。本発明のその他の実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストを治療的に有効な量投与する工程によって黄斑浮腫を減少させ、被験体を治療する方法が提供される。その他の実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストを治療的に有効な量投与する工程によって被験体の眼における基底膜肥厚化を減少させ、被験体を治療する方法が提供される。本発明のさらにその他の実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストを治療的に有効な量投与する工程によって被験体の眼における網膜新血管形成を減少させ、被験体を治療する方法が提供される。本発明のある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストを治療的に有効な量投与する工程によって糖尿病性網膜症に起因する視力喪失を遅らせ、被験体を治療する方法が提供される。ある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストを治療的に有効な量投与する工程によって被験体の眼における網膜虚血を減少させ、被験体を治療する方法が提供される。その他の実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストを治療的に有効な量投与する工程によって、糖尿病性網膜症を患う被験体の眼における網膜にわたる線維血管成長を減少させる方法が提供される。ある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストを治療的に有効な量投与する工程によって、糖尿病性網膜症を患う被験体の眼における糖尿病性網膜症に起因する網膜損傷もしくは変性を減少させる方法が提供される。その他の実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストを治療的に有効な量投与する工程によって糖尿病性網膜症を患う被験体の眼における網膜への非増殖性損傷を制限する方法が提供される。その他の実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストを治療的に有効な量投与する工程によって糖尿病性網膜症を患う被験体の眼における網膜への増殖性損傷を遅くする方法が提供される。その他の実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストを治療的に有効な量投与する工程によって、それを必要とする被験体の眼において、毛細血管上皮細胞への白血球の接着を減少させるもしくは予防する方法が提供される。あるその他の実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストを治療的に有効な量投与する工程によって、それを必要とする被験体の眼において虚血再かん流による損傷を減少させるもしくは予防する方法が提供される。本発明のある実施形態において提供される方法において、糖尿病性網膜症を患う被験体に投与されるＬＦＡ−１アンタゴニストは、ＩＣＡＭ−１結合部位と重複するＬＦＡ−１のαＬサブユニットにおける高親和性結合部位に結合する。本発明のある実施形態は、ＬＦＡ−１／ＩＣＡＭ−１相互作用の直接的競合インヒビターである化合物を利用する。本発明のある実施形態は、ＬＦＡ−１上のＩＣＡＭ−１に関して共通の高親和性結合部位を直接的に競合する化合物を利用する。ある実施形態では、治療を必要とする被験体に、治療的に効果的な量のＬＦＡ−１アンタゴニストを投与する方法が提供され、ＬＦＡ−１アンタゴニストは、化学式（Ｉ）（ＩＩ）（ＩＩ’）（ＩＩＩ）（ＩＩＩ’）（ＶＩ）（ＶＩ’）（Ｖ）、又は（ＶＩ）の化合物である。ある実施形態では、治療を必要とする被験体に、治療的に効果的な量のＬＦＡ−１アンタゴニストを投与する方法が提供され、ＬＦＡ−１アンタゴニストは、化学式（ＶＩＩ）（ＶＩＩＩ）（ＩＸ）（Ｘ）又は（ＸＩ）の化合物である。

眼における糖尿病性合併症に関連可能なその他の治療的介入において、硝子体茎切除術を使用できる。デキサメタゾンは、グルココルチコイドステロイドであり、非糖尿病性被験体と比較して糖尿病性被験体において増強される可能性がある術後炎症を減少させるのに有用であることが示されてきた。したがって、本発明のＬＦＡ−１アンタゴニストを使用することにより炎症を減少させることが好ましい可能性がある。本発明のある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストを、それを必要とする被験体に投与することによって硝子体茎切除術を受けた糖尿病患者における術後炎症を減少させるための方法が提供される。さらに、ある実施形態では、本発明のＬＦＡ−１アンタゴニストは、術後炎症を予防的に減少させるために、硝子体茎切除術の前に被験体に投与されることが可能である。

眼における糖尿病性合併症に関連可能なその他の治療的介入において、光線力学的治療は、閉塞もしくは漏出を正すために使用されることができ、糖尿病被験体における過剰な炎症を引き起こす可能性がある。したがって、炎症を減少させるためには本発明のＬＦＡ−１アンタゴニストの使用が望ましい可能性がある。本発明のある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストを、それを必要とする被験体に投与することによって、光線力学的治療（ＰＤＴ）術を受けた糖尿病被験体における術後炎症を減少させるための方法が提供される。さらに、ある実施形態では、本発明のＬＦＡ−１アンタゴニストは、術後炎症を予防的に減少させるために、ＰＤＴ術の前に被験体に投与されることができる。

眼における糖尿病性合併症に関連可能なその他の治療的介入において、レーザー凝固治療は、閉塞もしくは漏出を正すために使用されることができ、糖尿病被験体における過剰な炎症を引き起こす可能性がある。したがって、炎症を減少させるためには本発明のＬＦＡ−１アンタゴニストの使用が望ましい可能性がある。本発明のある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストを、それを必要とする被験体に投与することによって、レーザー凝固治療術を受けた糖尿病被験体における術後炎症を減少させるための方法が提供される。さらに、ある実施形態では、本発明のＬＦＡ−１アンタゴニストは、術後炎症を予防的に減少させるために、レーザー凝固治療術の前に被験体に投与されることができる。

視覚障害のレーシック（ＬＡＳＩＫ）治療において、糖尿病患者は、角膜上皮の炎症及び異常からの術後合併症の危険性が非糖尿病患者よりも増大した状態にあり、抗炎症治療が必要となる場合がある。本発明のある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストを投与することによって、被験体の眼においてレーシック治療の糖尿病性合併症に起因する炎症を減少させるための方法が提供され、これにより、このような炎症が減少する。投与は、このような炎症を予防的に防ぐもしくは減少させるために、術後もしくは術前に実施される。

ＤＭＥを有する個体は、視力喪失を頻繁に引き起こす白内障成長の大きな危険性を有する。糖尿病性患者は、白内障手術に続く前部及び後部合併症の両方の高い危険性を有する。これらのうち最も重大なものの１つは、虹彩の新血管形成であり、これは血管新生緑内障へと進行する可能性があるためである。その他の前房合併症は、新しく移植された人工水晶体（ＩＯＬ）の表面における沈殿を伴う色素散乱、前房における（炎症からの）線維性滲出液又は膜形成を含む。本発明のある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストを、それを必要とする被験体に投与することによって、ＤＭＥを有する被験体の眼における白内障手術後の前房もしくは後房の合併症を減少させるための方法が提供される。ある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストを、ＤＭＥを有し且つ健康な被験体と比較して白内障を進行させる高い危険性を備える状態である被験体に予防的に投与するための方法が提供され、それにより、白内障の進行を減少させるもしくは予防することになる。

方法は、一般的には、糖尿病性網膜症の治療のための１つ又はそれ以上の薬物を投与することを含み、ここに、眼の網膜もしくは眼球内領域への送達後に、薬物が送達されるもしくは分布される。薬物の合併症は、糖尿病性網膜症を治療する、又は合併症における１もしくはそれ以上の副作用を調節するために使用されることができる。本症状における病理学的事象は、自己調節能の損傷、アポトーシス、虚血、再かん流組織、新血管形成、及び炎症性刺激の組み合わせを特徴とするために、その他の治療薬と併用して本発明のＬＦＡ−１アンタゴニストを投与することにより、付加的もしくは相乗的に介入することが望ましい可能性がある。ある実施形態では、第２の治療薬は、抗酸化剤、抗炎症剤、抗菌剤、血管新生抑制剤、及び／又は抗アポトーシス剤である。本発明のある実施形態では、ＬＦＡ−１への結合と直接的に競合する化合物の投与に加えて、上述の如くアロステリックであるが直接的に競合しないＬＦＡ−１アンタゴニストである追加的な治療薬が投与される可能性があり、潜在的に相乗効果をもたらす。このようなアロステリックなアンタゴニストの例は、ＬＦＡ−１のヒダントインインヒビターのクラスである。アロステリックなアンタゴニストのその他の例は、化学式（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）、（ＩＸ）、（Ｘ）、又は（ＸＩ）の化合物を含む。

本発明のＬＦＡ−１アンタゴニストと併用して、前に、後に、又は同時に投与することが有用な可能性がある治療薬のその他のクラスは、抗接着治療抗体もしくは抗体フラグメントである。

本発明のＬＦＡ−１アンタゴニストと併用して、前に、後に、又は同時に投与することが有用な可能性がある治療薬のその他のクラスは、血管内皮増殖因子を阻害する薬物の群であり、このようにして血管新生開始のその他の経路を標的にすることが可能である。任意のＶＥＧＦインヒビターは、本発明の組成物において使用され、（１）ＶＥＧＦもしくはその受容体に対するモノクローナル抗体の中和、（２）ＶＥＧＦ受容体の小分子チロシンキナーゼインヒビター、（３）ＶＥＧＦのためのデコイ受容体として作用する可溶性ＶＥＧＦ受容体、（４）ＶＥＧＦを特異的に標的とするリボザイム、及び（５）ＶＥＧＦシグナルタンパク質を特異的に標的とするｓｉＲＮＡを含むがこれらに限定されない。ＶＥＧＦに対して活性である抗体のある例は、例えば、ルセンティス（ラニビズマブ）、及びアバスチン（ベバシズマブ）である。オリゴヌクレオチド薬物の例は、例えば、マクジェン（ペガプタニブナトリウム注入）である。小分子チロシンキナーゼインヒビターは、例えば、パゾパニブ、ソラフェニブ、スーテント、及び同様のものを含む。

炎症は、ＤＲによって引き起こされた血管透過性によって、及び白血球接着及び血管新生の過程によって誘導される。したがって、その他の抗炎症剤は、本発明のＬＦＡ−１アンタゴニストと組み合わせて、前に、後に、もしくは同時に投与されることができる。抗炎症剤は、デキサメタゾン、フルオロメタロン（fluoromethalone）、メドリゾン、ベタメタゾン、トリアムシノロン、トリアムシノロンアセトニド、プレドニゾン、プレドニゾロン、ヒドロコルチゾン、リメキソロン、及びその薬学的に許容可能な塩、プレドニカルベート、デフラザコート、ハロメタゾン、チキソコルトール、プレドニリデン、プレドニバール、パラメタゾン、メチルプレドニゾロン、メプレドニゾン、マジプレドン、イソフルプレドン、酢酸ハロプレドン、ハルシノニド、ホルモコータル、フルランドレノロン、フルプレドニゾロン、酢酸フルプレドニデン、酢酸フルペロロン、フルオコルトロン、フルオコルチンブチル（fluocortin butyl）、フルオシノニド、フルオシノロンアセトニド、フルニソリド、フルメタゾン、フルドロコルチゾン、フルクロリニド、エノキソロン、ジフルプレドネート、ジフルコルトロン、二酢酸ジフロラゾン、デソキシメタゾン、デソニド、デシノロン、コルチバゾール、コルチコステロン、コルチゾン、クロプレドノール、クロコルトロン、クロベタゾン、クロベタゾール、クロロプレドニゾン、カフェストール、ブデソニド、ベクロメタゾン、アムシノニド、アロプレグナンアセトニド、アルクロメタゾン、２１−アセトキシプレグネノロン、トラロニド、酢酸ジフロラゾン、デアシルコルチバゾール、ＲＵ−２６９８８、ブデソニド、デアシルコルチバゾール等を含むがそれらに限定されないコルチコステロイド関連薬物から選択される。代替的に、抗炎症剤は、アセトアミノフェン、アセメタシン、アセクロフェナク、アルミノプロフェン、アンフェナク、ベンダザック、ベノキサプロフェン、ブロンフェナク、ブクロクス酸、ブチブフェン、カルプロフェン、セレコキシブ、シンメタシン、クロピラク、ジクロフェナク、エトドラク、エトリコキシブ、フェルビナク、フェンクロズ酸、フェンブフェン、フェノプロフェン、フェンチアザク、フルノキサプロフェン、フルルビプロフェン、イブフェナク、イブプロフェン、インドメタシン、イソフェゾラク、イソキシカム、イソキセパク、インドプロフェン、ケトプロフェン、ロナゾラク、ロキソプロフェン、メフェナム酸、メクロフェナム酸、メロキシカム、メチアジン酸、モフェゾラク、ミロプロフェン、ナプロキセン、ニフルミック（niflumic）、オキサプロジン、ピラゾラク、ピルプロフェン、プラノプロフェン、プロチジン酸、ロフェコキシブ、サリチル酸、及びその誘導体（即ち、例えば、アスピリン）、スリンダク、スプロフェン、スキシブゾン、トリアプロフェン酸（triaprofenic acid）、トルメチン、バルデコキシブ、キセンブシン、キシモプロフェン、ザルトプロフェン、ゾメピラク、アスピリン、アセメトシン、ブマジゾン、カルプロフェナク、クリダナク、ジフルニサル、エンフェナム酸、フェンドサール、フルフェナム酸、フルニキシン、ゲンチジン酸、ケトロラク、メサラミン、それらのプロドラッグ等を含むがそれらに限定されないＮＤＡＩＤの群から選択されることができる。

本発明のＬＦＡ−１アンタゴニストと併用して、前に、後に、又は同時に投与可能な治療薬のその他の群は、ＮＦＫβを阻害することによって網膜症を阻害するとして公知の薬剤の群である。治療薬のこれらのクラスの幾つかは、ＰＡＲＰインヒビター、ベンフォチアミン、又はその他の薬剤を含み、これらはＡＧＥ（終末糖化産物）の遮断、アルドース還元酵素インヒビター、ｉＮＯＳインヒビター、ＦａｓＬインヒビター、又はアンギオポエチン−１に介入する。

酸化ストレスは、ＤＲによって誘発された自己調節及び虚血過程の損傷を有する細胞内に誘導されることができる。したがって、抗酸化剤が、本発明のＬＦＡ−１アンタゴニストと併用して、前に、後に、又は同時に投与するのに有用である可能性がある。本発明の方法に有用である好適な抗酸化剤の例は、アスコルビン酸、トコフェロール、トコトリエノール、カロチノイド、グルタチオン、アルファ−リポ酸、ユビキノール、バイオフラボノイド、カルニチン、及びスーパーオキシドジスムターゼ模倣薬、例えば、２，２，６，６−テトラメチル−１−ピペリジニルオキシ(ＴＥＭＰＯ)、ＤＯＸＹＬ、ＰＲＯＸＹＬ窒素酸化化合物; ４−ヒドロキシ−２，２，６，６−テトラメチル−１−ピペリジニルオキシ(Ｔｅｍｐｏｌ)、Ｍ−４０４０１、Ｍ−４０４０３、Ｍ−４０４０７、Ｍ−４０４１９、Ｍ−４０４８４、Ｍ−４０５８７、Ｍ−４０５８８などを含むがこれらに限定されない。

糖尿病性網膜症のある段階では、網膜虚血が結果的に生じ、さらなる細胞死を引き起こす。本発明のある実施形態では、抗アポトーシス治療薬が、本発明のＬＦＡ−１アンタゴニストと併用して、前に、後に、又は同時に投与されることが可能である方法が提供される。好適な抗アポトーシス剤の例は、例えば、カスパーゼ、カテプシン、及びＴＮＦ−αのインヒビターである。

本発明のＬＦＡ−１アンタゴニストと併用して、前に、後に、又は同時に投与することが有用な可能性があるその他のクラスの治療薬は、捕体インヒビターである。ＬＦＡ−１／ＩＣＡＭ結合事象は、組織における及び血管／毛細血管上皮細胞上におけるＩＣＡＭ上方制御の捕体活性化の下流である。捕体インヒビター及びＬＦＡ−１アンタゴニスト両方の投与は、ＬＦＡ−１発現白血球のさらなる完全な調節を可能にすることができる。捕体インヒビターの一例は、エクリズマブである。その他の捕体インヒビターは、米国特許第７１６６５６８号、第６３１９８９７号、第５８４３８８４号、第５１３５９１６号、及び第５６２４８３７号を含むがこれらに限定されない。

本発明のＬＦＡ−１アンタゴニストと併用して、前に、後に、又は同時に投与することが有用な可能性があるその他のクラスの治療薬は、バックグラウンドＤＭを有する患者における緑内障の管理に使用される薬物であり、バックグラウンドＤＭとは、原発性の開放隅角、閉塞隅角、同様に血管新生緑内障を含む。緑内障に使用される治療薬の幾つかは、プロスタグランジン類似体、例えば、ラタノプロスト、ビマトプロスト、及びトラバプロスト；局所的β−アドレナリン受容体アンタゴニスト、例えば、チモロール、レボブノロール、及びベタキソロール；α２−アドレナリンアゴニスト、例えばブリモニジン；交感神経刺激薬、例えば、エピネフリンもしくはジピベフリン；縮瞳剤、例えば、ピロカルピン；炭酸脱水酵素剤、例えば、ドルゾラミド、ブリンゾラミド、及びアセタゾラマイド；又はフィゾスチグミンを含むがこれらに限定されない。

本発明のＬＦＡ−１アンタゴニストと併用して、前に、後に、又は同時に投与することが有用な可能性があるその他のクラスの治療薬は、抗菌剤である。好適な抗菌剤は、ペニシリン、例えば、アモキシシリン、アンピシリン、アズロシリン、カルベニシリン、クロキサシリン、ジクロキサシリン、フルクロキサシリン、メズロシリン、ナフシリン、ペニシリン、ピペラシリン、チカルシリン等；β−ラクタマーゼインヒビター；カルバペネム、例えば、エルタペネム、イミペネム、メロペネム等；セファロスポリン、例えば、セファクロル、セファマンドール、セフォキシチン、セフプロジル、セフロキシム、セフィキシム、セフジニル、セフジトレン、セフォペラゾン、セフォタキシム、セフポドキシム、セファドロキシル、セフタジジム、セフチブテン、セフチゾキシム、セフトリアキソン、セファゾリン、セフィキシム、セファレキシン、セフェピム等；キノロン、例えば、シプロフロキサシン、エノキサシン、ガチフロキサシン、レボフロキサシン、ロメフロキサシン、モリフロキサシン（morifloxacin）、ノルフロキサシン、オフロキサシン、トロバフロキサシン等；マクロライド、例えば、アジスロマイシン、クラリスロマイシン、ジリスロマイシン、エリスロマイシン、ミルベマイシン、トロレアンドマイシン等；モンバクタム（monbactams）、例えば、アズトレオナム等；テトラサイクリン、例えば、デメクロサイクリン、ドキシサイクリン、ミノサイクリン、オキシテトラサイクリン、テトラサイクリン等；アミノグリコシド、例えば、アミカシン、ゲンタマイシン、カナマイシン、ネオマイシン、ネチルマイシン、パロモマイシン、ストレプトマイシン、トブラマイシン等；カルバセフェム、例えば、ロラカルベフ等；ストレプトグラミン；スルホンアミド、例えば、メファニド（mefanide）、プロントジル、スルファセタミド、スルファメチゾール、スルファニルアミド、スルファサラジン、スルフイソキサゾール、トリメトプリム、トリメトプリム・スルファメトキサゾール等；及び併用薬物、例えば、スルファメトキサゾール、及びトリメトプリム等；及びポリペプチド、例えば、バシトラシン、コリスチン、ポリミキシンＢ等を含むがこれらに限定されない。

本発明のＬＦＡ−１アンタゴニストと併用して、前に、後に、又は同時に投与することが有用な可能性があるその他の治療薬の例は、(a)抗糖尿病剤、例えばインスリン及びインスリン模倣薬、スルホニル尿素（例えば、グリブリド、メグリナチド）、ビグアニド、例えば、メトフォルミン（Glucophage（商標））、α−グルコシダーゼインヒビター（アカルボース）、インスリン感作剤、例えば、チアゾリジノン化合物、ロシグリタゾン（Avandia（商標））、トログリタゾン（Rezulin（商標））、シグリタゾン、ピオグリタゾン（Actos（商標））、及びエングリタゾン；（ｂ）コレステロール低下剤、例えば、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼインヒビター（例えば、ロバスタチン、シンバスタチン、プラバスタチン、フルバスタチン、アトルバスタチン、及びその他のスタチン）、胆汁酸捕捉剤（例えば、コレスチラミン及びコレスチポール）、ビタミンＢ_３（ニコチン酸、もしくはナイアシンとして公知である）、ビタミンＢ_６（ピリドキシン）、ビタミンＢ_１２（シアノコバラミン）、フィブリン酸誘導体（例えば、ゲムフィブロジル、クロフィブレート、フェノフィブラート、及びベンザフィブレート）、プロブコール、ニトログリセリン、及びコレステロール吸収のインヒビター（例えば、β−シトステロール及びアシルＣｏＡ−コレステロール、アシルトランスフェラーゼ（ＡＣＡＴ）インヒビター、例えば、メリナミド）、ＨＭＧ−ＣｏＡ合成インヒビター、スクアレンエポキシダーゼインヒビター、及びスクアラン合成インヒビター；及び（ｃ）抗血栓剤、例えば、血栓溶解剤（例えば、ストレプトキナーゼ、アルテプラーゼ、アニストレプラーゼ、及びレテプラーゼ）、ヘパリン、ヒルジン及びワルファリン誘導体、β−遮断薬（例えば、アテノロール）、β−アドレナリンアゴニスト（例えば、イソプロテレノール）、ＡＣＥインヒビター及び血管拡張剤（例えば、ニトロプルシドナトリウム、塩酸ニカルジピン、ニトログリセリン、及びエナロプリラト）を含むがこれらに限定されない。

ある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストは、糖尿病性網膜症の症状を減少させるために治療的効果を発揮するのに十分な量、平均少なくとも約５、１０、１５、２０、２５、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、９０％超で存在し、あるいは糖尿病性網膜症の症状を実質的に解消するのに十分な量で存在する。

その他の実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストは、被験体の網膜変性を減少させるのに十分な量、平均少なくとも約５、１０、１５、２０、２５、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、９０％超で存在し、あるいは網膜変性を実質的に解消するのに十分な量で存在する。

ある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストは、被験体の治療した眼における網膜浮腫を減少させるのに十分な量、平均少なくとも約５、１０、１５、２０、２５、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、９０％超で存在し、あるいは網膜浮腫を実質的に解消するのに十分な量で存在する。

さらにその他の実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストは、被験体の治療した眼における基底膜の肥厚化を減少させるのに十分な量、平均少なくとも約５、１０、１５、２０、２５、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、９０％超で存在し、あるいは基底膜の肥厚化を実質的に解消するのに十分な量で存在する。

ある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストは、被験体の治療した眼における網膜新血管形成を減少させるのに十分な量、平均少なくとも約５、１０、１５、２０、２５、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、９０％超で存在し、あるいは網膜新血管形成を実質的に解消するのに十分な量で存在する。

ある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストは、被験体の治療した眼における網膜にわたる線維血管成長を減少させるのに十分な量、平均少なくとも約５、１０、１５、２０、２５、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、９０％超で存在し、あるいは網膜にわたる線維血管成長を実質的に解消するのに十分な量で存在する。

ある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストは、被験体の治療した眼における視力喪失を遅らせるのに十分な量、平均少なくとも約５、１０、１５、２０、２５、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、９０％超で存在し、あるいはさらなる視力喪失を実質的に解消するのに十分な量で存在する。

ある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストは、被験体の網膜への非増殖性損傷を制限するのに効果的な量、平均少なくとも約５、１０、１５、２０、２５、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、９０％超で存在し、あるいは網膜への非増殖性損傷を実質的に解消するのに十分な量で存在する。

ある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストは、被験体の網膜への増殖性損傷を遅らせるのに効果的な量、平均少なくとも約５、１０、１５、２０、２５、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、９０％超で存在し、あるいは網膜へのさらなる増殖性損傷を実質的に解消するのに十分な量で存在する。

ある実施形態では、効果的な量のＬＦＡ−１アンタゴニストは、１日用量が約１×１０^−１１、１×１０^−１０、１×１０^−９、１×１０^−８、１×１０^−７、１×１０^−６、１×１０^−５、１×１０^−４、１×１０^−３、１×１０^−２、１×１０^−１、1、１×１０、１×１０^２グラムである。

治療薬の投与は、任意の適切な手段で実施されることができる。ある実施形態では、経口投与で投与される。ある実施形態では、治療薬は、経皮投与で投与される。ある実施形態では、治療薬は、滴下によって投与される。ある実施形態では、治療薬は、注入によって投与される。ある実施形態では、治療薬は、緩徐性硝子体内注入によって投与される。ある実施形態では、治療薬は、緩徐性眼内移植によって投与される。ある実施形態では、治療薬は、眼周囲移植によって投与される。ある実施形態では、治療薬は、局所的に投与される。ある実施形態では、治療薬は、点眼によって局所的に投与される。薬剤の組み合わせが別個の組成物として投与される場合には、それらは同じ経路によって投与されることができ、また異なる経路によって投与されることができる。薬剤の組み合わせが１つの組成物において投与される場合には、それらは任意の適切な経路によって投与されることができる。ある実施形態では、薬物の組み合わせは、１つの組成物として経口投与で投与される。ある実施形態では、薬剤の組み合わせは、１つの組成物として経皮投与で投与される。ある実施形態では、薬剤の組み合わせは、１つの組成物として注入で投与される。ある実施形態では、薬剤の組み合わせは、１つの組成物として局所的に投与される。

本発明のある実施形態において、診断的方法が、本発明の方法を用いた治療を必要とする被験体を同定するために用いられることになる。糖尿病性網膜症の症状を診断するために使用されることが可能な手順の典型的なリストには、例えば、完全な眼科検査（アムスラーグリッド検査及び細隙灯検査を含むことができる）、眼底撮影、蛍光眼底血管造影、光干渉断層撮影、非ミリアディック写真（non-myriadic photography）、及びβ走査超音波、従来の眼検査、光干渉断層撮影、β走査超音波単独、眼底撮影と蛍光眼底血管造影とを備える完全な眼検査が含まれる。

本発明の方法のアンタゴニストは、抗体、抗体フラグメント、ペプチド又は小分子であることができる。ある実施形態では、使用されるＬＦＡ−１アンタゴニストは、抗体ではないペプチドである。その他の実施形態では、使用されるＬＦＡ−１アンタゴニストは小分子である。

本発明のある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストを用いることにより糖尿病性網膜症の症状を治療もしくは予防することは、長期治療を必要とする；したがって、ＬＦＡ−１／ＩＣＡＭ−１相互作用の小分子インヒビターは、局所的投与のための潜在性を有しているために、低価格の商品を用いて目薬として使用されることができる。同様に、経口投与は、低価格の商品における利点を提供する。移植型装置は、生分解性もしくは生体吸収性、又は生分解性徐放性あるいは持続放出性製剤であることができ、眼内もしくは眼周囲組織における眼の近傍に移植もしくは注入され、長期治療に使用される。

その他の実施形態は、眼治療薬としての製剤及び投与に適切な治療薬を用いて、糖尿病性網膜症の症状を治療する方法である。

本発明の化合物のクリーム製剤は、ＬＦＡ−１アンタゴニストを皮膚に局所送達するのに有用である可能性がある。この点で有用な化合物は、ＬＦＡ−１アンタゴニスト及びそれらのプロドラッグを含み、プロドラッグは、皮膚内に入ると活性製剤へと変換される。したがって、まぶたの外面に塗布された皮膚クリームは、まぶたに広がるＬＦＡ−１アンタゴニストをまぶたの内層へと送達し、結膜組織及び副涙腺に介入し、涙液に現れ、このようにして眼内に吸収される。この送達形態は、眼のＬＦＡ−１介在性炎症の治療、特に糖尿病性網膜症の治療に望ましい可能性がある。

ＩＩＩ．投与
本発明の方法は、本明細書に記載の方法のＬＦＡ−１アンタゴニストを送達するために多数の適切な投与様式を利用することができる。身体の罹患領域へのそのような送達は、局所もしくは全身性投与のいずれかを介して達成できる。適切な製剤及び追加的な担体は、Remington 「The Science and Practice of Pharmacy」 (20^th Ed., Lippincott Williams & Wilkins, Baltimore MD)に記載されており、その教示が、全体を参照することにより本明細書に援用される。

ある実施形態では、本発明は、：（ｉ）有効量の治療薬；及び（ｉｉ）経口投与に適切な医薬賦形剤を含む被験者に投与するための医薬組成物を提供する。ある実施形態では、本組成物はさらに：（ｉｉｉ）有効量の第２治療薬を含む。本発明の医薬組成物は、本明細書に開示される任意の分子を含むことができる。

眼障害の炎症を減少させるために、本発明の医薬組成物は、好ましくは網膜、眼内空間、眼表面、相互接続神経支配、結膜、涙腺、又はマイボーム腺に送達される。効果的な治療は、本発明の治療薬を、その他の投与経路の中でも、経口投与、局所投与、注射によって、鼻腔内に、直腸内に、経皮的に、含浸もしくはコーティングされた装置（例えば眼挿入もしくは移植）を介して、又はイオントフォレーゼで投与することを包含できることが想定される。

注射を介した投与に関し、医薬組成物は、眼内に、眼周囲に、筋肉内に、動脈内に、皮下に、もしくは静脈内に注入されることができる。予め選択された期間にわたって医薬組成物を投与するためにポンプ機構を使用することができる。本発明のある実施形態では、薬物を局所的に送達することが望ましいために、注入は、眼周囲、眼内、硝子体内、結膜下、眼球後方、強膜内、又は眼房間（intercamerally）に行なうことができる。本発明のある実施形態では、全身性送達が好ましい。

全身性投与のためには、本発明の化合物を調製して経口投与することができる。治療薬の局部的もしくは全身性分布のいずれかを生じさせることができる投与に関し、本発明の組成物は、鼻腔内、経皮的、又は一部の形態の経口投与によって、例えば消化管（Ｇ．Ｉ．）から吸収されにくい本発明の化合物を包含する口腔洗浄薬もしくはトローチ（ロゼンジ）を使用して投与できる。本発明の組成物の局部的もしくは局所的送達を結果として生じさせることが可能な投与に関し、イオントフォレーシスもしくは局所投与が使用できる。

さらに、本発明の医薬組成物は、ポンプ・カテーテルシステムを介して眼表面に投与できるか、持続的もしくは選択的放出装置内から放出でき、この装置は、例えば、膜等であり、例えばOcusert（商標）System（Alza Corp、パロ・アルト、カリフォルニア州）において使用される膜などであるがそれらに限定されない。医薬組成物は、後に被験者によって装着されるコンタクトレンズ内に包含され、コンタクトレンズによって運ばれることができ、又はコンタクトレンズに付着させることができる。本医薬組成物は、眼表面上にスプレーできる。

代替的に、本発明の医薬組成物は、眼内もしくは眼周囲にポンプ・カテーテルシステムを介して投与されることができ、あるいは、持続性もしくは選択性放出装置内から放出されることができる。医薬組成物は、生分解性の持続性、徐放性、及び／又は遅延性放出製剤を含み、例えば、ＰＬＧＡミクロスフェア、マイクロ粒子、もしくはナノ粒子であり、上述した装置を介して送達される、又は眼内もしくは眼周囲に注入されることができる。

ある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストは単回投与で投与される。ＬＦＡ−１アンタゴニストの単回投与は、急性疾患の治療のためにその他の物質（例えば鎮痛剤）と共投与される時にも使用できる。

ある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニスト（単独又は他の薬物と組み合わせて）は、複数回投与で投与される。投与は、１日当たり約１回、２回、３回、４回、５回、６回、７回、８回、９回、１０回、もしくは１０回を超えることができる。投与は、約１年に１回、１年に２回、６ヶ月毎、４ヵ月毎、３ヶ月毎、６０日毎、１カ月に１回、２週間に１回、１週間に１回、又は１日おきに１回であることができる。一実施形態では、本薬物は鎮痛薬である。その他の実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニスト及び他の治療用物質は、１日に約１回から１日に約１０回まで一緒に投与される。その他の実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニスト及びその他の治療用物質の投与は、約７日間未満にわたり継続される。さらにその他の実施形態では、共投与は、約６、１０、１４、２８日間、２カ月間、６カ月間、又は１年間を超えて継続される。ある場合には、共投与される用量は、例えば慢性炎症用の投与など、必要である限り維持される。

本発明の組成物の投与は、必要な限り持続されることができる。ある実施形態では、本発明の組成物は、１、２、３、４、５、６、７、１４、もしくは２８日間を超えて投与される。ある実施形態では、本発明の組成物は、２８、１４、７、６、５、４、３、２、もしくは１日間未満にわたり投与される。ある実施形態では、本発明の組成物は、例えば慢性痛を治療するために、慢性的且つ継続的に投与される。

本発明の方法におけるＬＦＡ−１アンタゴニストの投与は、日常的実験によって見いだすことができる。１日用量は、約１×１０^−８ｇ乃至５，０００ｍｇの範囲であることができる。１日用量の範囲は、本明細書に記載したＬＦＡ−１アンタゴニスト、例えば使用されるエステルもしくは塩の形状、及び／又は投与経路に依存する可能性がある。例えば、全身性投与のためには、典型的な１日用量の範囲は、例えば、約１−５，０００ｍｇ、もしくは約１−３，０００ｍｇ、もしくは約１−２，０００ｍｇ、もしくは約１−１，０００ｍｇ、もしくは約１−５００ｍｇ、もしくは約１−１００ｍｇ、もしくは約１０−５，０００ｍｇ、もしくは約１０−３，０００ｍｇ、もしくは約１０−２，０００ｍｇ、もしくは約１０−１，０００ｍｇ、もしくは約１０−５００ｍｇ、もしくは約１０−２００ｍｇ、もしくは約１０−１００ｍｇ、もしくは約２０−２，０００ｍｇ、もしくは約２０−１，５００ｍｇ、もしくは約２０−１，０００ｍｇ、もしくは約２０−５００ｍｇ、もしくは約２０−１００ｍｇ、もしくは約５０−５，０００ｍｇ、もしくは約５０−４，０００ｍｇ、もしくは約５０−３，０００ｍｇ、もしくは約５０−２，０００ｍｇ、もしくは約５０−１，０００ｍｇ、もしくは約５０−５００ｍｇ、もしくは約５０−１００ｍｇ、約１００−５，０００ｍｇ、もしくは約１００−４，０００ｍｇ、もしくは約１００−３，０００ｍｇ、もしくは約１００−２，０００ｍｇ、もしくは約１００−１，０００ｍｇ、もしくは約１００−５００ｍｇである。ある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストの１日用量は、約１００、２００、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、もしくは１，０００ｍｇである。ある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストの１日用量は１０ｍｇである。ある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストの１日用量は１００ｍｇである。ある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストの１日用量は５００ｍｇである。ある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストの１日用量は１，０００ｍｇである。

眼表面へ局所送達するために、典型的な１日用量の範囲は、例えば、約１×１０^−８ｇ−５．０ｇ、もしくは約１×１０^−８ｇ−２．５ｇ、もしくは約１×１０^−８ｇ−１．００ｇ、もしくは約１×１０^−８ｇ−０．５ｇ、もしくは約１×１０^−８ｇ−０．２５ｇ、もしくは約１×１０^−８ｇ−０．１ｇ、もしくは約１×１０^−８ｇ−０．０５ｇ、もしくは約１×１０^−８ｇ−０．０２５ｇ、もしくは約１×１０^−８ｇ−１×１０^−２ｇ、もしくは約１×１０^−８ｇ−５×１０^−３ｇ、もしくは約１×１０^−８ｇ−２．５×１０^−３ｇ、もしくは約１×１０^−８ｇ−１×１０^−３ｇ、もしくは約１×１０^−８ｇ−５×１０^−４ｇ、もしくは約１×１０^−７ｇ−５．０ｇ、もしくは約１×１０^−７ｇ−２．５ｇ、もしくは約１×１０^−７ｇ−１．００ｇ、もしくは約１×１０^−７ｇ−０．５ｇ、もしくは約１×１０^−７ｇ−０．２５ｇ、もしくは約１×１０^−７ｇ−０．１ｇ、もしくは約１×１０^−７ｇ−０．０５ｇ、もしくは約１×１０^−７ｇ−０．０２５ｇ、もしくは約１×１０^−７ｇ−１×１０^−２ｇ、もしくは約１×１０^−７ｇ−５×１０^−３ｇ、もしくは約１×１０^−７ｇ−２．５×１０^−３ｇ、もしくは約１×１０^−７ｇ−１×１０^−３ｇ、もしくは約１×１０^−７ｇ−５×１０^−４ｇ、もしくは約１×１０^−６ｇ−５．０ｇ、もしくは約１×１０^−６ｇ−２．５ｇ、もしくは約１×１０^−６ｇ−１ｇ、もしくは約１×１０^−６ｇ−０．５ｇ、もしくは約１×１０^−６ｇ−０．２５ｇ、もしくは約１×１０^−６ｇ−０．１ｇ、もしくは約１×１０^−６ｇ−５×１０^−２ｇ、もしくは約１×１０^−６ｇ−５×１０^−２ｇ、もしくは約１×１０^−６ｇ−２．５×１０^−２ｇ、もしくは約１×１０^−６ｇ−１×１０^−２ｇ、もしくは約１×１０^−６ｇ−５×１０^−３ｇ、もしくは約１×１０^−６ｇ−２．５×１０^−３ｇ、もしくは約１×１０^−６ｇ−１×１０^−３ｇ、もしくは約１×１０^−６ｇ−５×１０^−４ｇ、もしくは約１×１０^−５ｇ−５ｇ、もしくは約１×１０^−５ｇ−２．５ｇ、もしくは約１×１０^−５ｇ−１ｇ、もしくは約１×１０^−５ｇ−０．５ｇ、もしくは約１×１０^−５ｇ−０．２５ｇ、もしくは約１×１０^−５ｇ−０．１ｇ、もしくは約１×１０^−５ｇ−０．０５ｇ、もしくは約１×１０^−５ｇ−２．５×１０^−２ｇ、もしくは約１×１０^−５ｇ−１×１０^−２ｇ、もしくは約１×１０^−５ｇ−５×１０^−３ｇ、もしくは約１×１０^−５ｇ−２．５×１０^−３ｇ、もしくは約１×１０^−５ｇ−１×１０^−３ｇ、もしくは約１×１０^−５ｇ−５×１０^−４ｇである。ある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストの１日用量は、約１×１０^−７、１×１０^−６、１×１０^−５、１×１０^−４、１×１０^−３ｇ、１×１０^−２ｇ、１×１０^１ｇ、もしくは１ｇである。ある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストの１日用量は１×１０^−７ｇである。ある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストの１日用量は１×１０^−５ｇである。ある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストの１日用量は１×１０^−３ｇである。ある実施形態では、ＬＦＡ−１アンタゴニストの１日用量は１×１０^−２ｇである。ある実施形態では、被験体の用量範囲は、約１×１０^−８ｇ−５．０ｇ、もしくは約１×１０^−８ｇ−２．５ｇ、もしくは約１×１０^−８ｇ−１．００ｇ、もしくは約１×１０^−８ｇ−０．５ｇ、もしくは約１×１０^−８ｇ−０．２５ｇ、もしくは約１×１０^−８ｇ−０．１ｇ、もしくは約１×１０^−８ｇ−０．０５ｇ、もしくは約１×１０^−８ｇ−０．０２５ｇ、もしくは約１×１０^−８ｇ−１×１０^−２ｇ、もしくは約１×１０^−８ｇ−５×１０^−３ｇ、もしくは約１×１０^−８ｇ−２．５×１０^−３ｇ、もしくは約１×１０^−８ｇ−１×１０^−３ｇ、もしくは約１×１０^−８ｇ−５×１０^−４ｇ、約１×１０^−７ｇ−５．０ｇ、もしくは約１×１０^−７ｇ−２．５ｇ、もしくは約１×１０^−７ｇ−１．００ｇ、もしくは約１×１０^−７ｇ−０．５ｇ、もしくは約１×１０^−７ｇ−０．２５ｇ、もしくは約１×１０^−７ｇ−０．１ｇ、もしくは約１×１０^−７ｇ−０．０５ｇ、もしくは約１×１０^−７ｇ−０．０２５ｇ、もしくは約１×１０^−７ｇ−１×１０^−２ｇ、もしくは約１×１０^−７ｇ−５×１０^−３ｇ、もしくは約１×１０^−７ｇ−２．５×１０^−３ｇ、もしくは約１×１０^−７ｇ−１×１０^−３ｇ、もしくは約１×１０^−７ｇ−５×１０^−４ｇ、もしくは約１×１０^−６ｇ−５．０ｇ、もしくは約１×１０^−６ｇ−２．５ｇ、もしくは約１×１０^−６ｇ−１ｇ、もしくは約１×１０^−６ｇ−０．５ｇ、もしくは約１×１０^−６ｇ−０．２５ｇ、もしくは約１×１０^−６ｇ−０．１ｇ、もしくは約１×１０^−６ｇ−５×１０^−２ｇ、もしくは約１×１０^−６ｇ−５×１０^−２ｇ、もしくは約１×１０^−６ｇ−２．５×１０^−２ｇ、もしくは約１×１０^−６ｇ−１×１０^−２ｇ、もしくは約１×１０^−６ｇ−５×１０^−３ｇ、もしくは約１×１０^−６ｇ−２．５×１０^−３ｇ、もしくは約１×１０^−６ｇ−１×１０^−３ｇ、もしくは約１×１０^−６ｇ−５×１０^−４ｇ、もしくは約１×１０^−５ｇ−５ｇ、もしくは約１×１０^−５ｇ−２．５ｇ、もしくは約１×１０^−５ｇ−１ｇ、もしくは約１×１０^−５ｇ−０．５ｇ、もしくは約１×１０^−５ｇ−０．２５ｇ、もしくは約１×１０^−５ｇ−０．１ｇ、もしくは約１×１０^−５ｇ−０．０５ｇ、もしくは約１×１０^−５ｇ−２．５×１０^−２ｇ、もしくは約１×１０^−５ｇ−１×１０^−２ｇ、もしくは約１×１０^−５ｇ−５×１０^−３ｇ、もしくは約１×１０^−５ｇ−２．５×１０^−３ｇ、もしくは約１×１０^−５ｇ−１×１０^−３ｇ、もしくは約１×１０^−５ｇ−５×１０^−４ｇである。ある実施形態では、上述した個別用量は、１日に１、２、３、４、５、６、７、８、９、もしくは１０回繰り返される。

本発明のある実施形態では、本発明の点眼液、クリーム、ローション、もしくはその他の局所製剤は、十分な治療薬を、眼内もしくは眼周囲に放出することにより、ＬＦＡ−１アンタゴニストのレベルを投与間で少なくとも約１０ｎＭ、約５０ｎＭ、約１００ｎＭ、約１５０ｎＭ、約２００ｎＭ、約２５０ｎＭ、約３００ｎＭ、約３５０ｎＭ、約５００ｎＭ、約６００ｎＭ、約７００ｎＭ、約８００ｎＭ、約９００ｎＭ、約１ｍＭ、約２ｍＭ、約３ｍＭ、約５ｍＭ、約６ｍＭ、約７ｍＭ、約８ｍＭ、約９ｍＭ、約１０ｍＭ、約１５ｍＭ、約２０ｍＭ、又は約２５ｍＭに維持する。

本発明のある実施形態では、本発明の点眼製剤は、眼内もしくは眼周囲に治療薬を十分に放出することにより、網膜におけるＬＦＡ−１アンタゴニストのレベルを投与間で少なくとも、約１０ｎＭ、約５０ｎＭ、約１００ｎＭ、約１５０ｎＭ、約２００ｎＭ、約２５０ｎＭ、約３００ｎＭ、約３５０ｎＭ、約５００ｎＭ、約６００ｎＭ、約７００ｎＭ、約８００ｎＭ、約９００ｎＭ、約１ｍＭ、約２ｍＭ、約３ｍＭ、約５ｍＭ、約６ｍＭ、約７ｍＭ、約８ｍＭ、約９ｍＭ、約１０ｍＭ、約１５ｍＭ、約２０ｍＭ、又は約２５ｍＭを達成する

他の投与形態に関し、１日用量は、全身性投与に関して記載された範囲の周囲に及ぶことができ、あるいは局所投与に関して記載された範囲の周囲に及ぶことができる。

徐放性もしくは持続性放出の眼内もしくは眼周囲装置及び製剤に関し、ある実施形態において、典型的な用量範囲は、投与期間にわたって放出されるＬＦＡ−１アンタゴニストが約０．１ｍｇ−約１００ｍｇである。その他の実施形態では、約１ｍｇ−約５０ｍｇ、約１−約２５ｍｇ、約５ｍｇ−約１００ｍｇ、約５−約５０ｍｇ、約５−約２５ｍｇ、約１０ｍｇ−約１００ｍｇ、約１０ｍｇ−約５０ｍｇ、約１０ｍｇ−約２５ｍｇ、又は約１５ｍｇ−約５０ｍｇが投与期間にわたって放出される。徐放性放出の眼内もしくは眼周囲装置及び製剤に関する投与期間は、典型的には、約１０日−１年、約３０日−約１年、約６０日−約１年、約３ヶ月−約１年、約４ヶ月−約１年、約５ヶ月−約１年、又は約６ヶ月−１年の範囲である。ある実施形態では、徐放性の眼内もしくは眼周囲装置及び製剤は、治療薬を、約１ヶ月−約９ヶ月、約１ヶ月−約８ヶ月、約１ヶ月−約７ヶ月、約１ヶ月−約６ヶ月、約１ヶ月−約５ヶ月、約１ヶ月−約４ヶ月、約１ヶ月−約３ヶ月の期間にわたって放出する。その他の実施形態では、徐放性製剤及び装置は、治療薬を１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、７ヶ月、８ヶ月、９ヶ月、１０ヶ月、１２ヶ月、１８ヵ年、２年、３０ヶ月、又は３年まで放出する。

本発明のある実施形態では、持続性放出製剤及び／又は移植物は、十分な治療薬を眼内もしくは眼周囲に放出することにより、ＬＦＡ−１アンタゴニストのレベルを少なくとも約１０ｎＭ、約５０ｎＭ、約１００ｎＭ、約１５０ｎＭ、約２００ｎＭ、約２５０ｎＭ、約３００ｎＭ、約３５０ｎＭ、約５００ｎＭ、約６００ｎＭ、約７００ｎＭ、約８００ｎＭ、約９００ｎＭ、約１ｍＭ、約２ｍＭ、約３ｍＭ、約５ｍＭ、約６ｍＭ、約７ｍＭ、約８ｍＭ、約９ｍＭ、約１０ｍＭ、約１５ｍＭ、約２０ｍＭ、又は約２５ｍＭを１年にわたって維持する。本発明のある実施形態では、持続性放出製剤及び／又は移植物は、十分な治療薬を眼内もしくは眼周囲に放出することにより、ＬＦＡ−１アンタゴニストのレベルを少なくとも約１０ｎＭ、約５０ｎＭ、約１００ｎＭ、約１５０ｎＭ、約２００ｎＭ、約２５０ｎＭ、約３００ｎＭ、約３５０ｎＭ、約５００ｎＭ、約６００ｎＭ、約７００ｎＭ、約８００ｎＭ、約９００ｎＭ、約１ｍＭ、約２ｍＭ、約３ｍＭ、約５ｍＭ、約６ｍＭ、約７ｍＭ、約８ｍＭ、約９ｍＭ、約１０ｍＭ、約１５ｍＭ、約２０ｍＭ、又は約２５ｍＭを６ヶ月にわたって維持する。

ＩＶ．製剤
本発明の化合物は、当技術分野において公知の適切な媒体中で、無菌溶液もしくは懸濁液として調製されることができる。適切な製剤及び追加的な担体は、Remington 「The Science and Practice of Pharmacy」 (20^th Ed., Lippincott Williams & Wilkins, Baltimore MD)に記載され、その教示が、全体を参照することにより本明細書に援用される。

注入可能な製剤に関し、媒体は、ゴマ油、コーン油、綿実油、もしくはピーナッツ油を含む水溶液もしくは油性懸濁液、又はエマルジョン、同様に、エリキシル剤、マンニトール、デキストロース、又は無菌水溶液を含む適切であることが当技術分野において公知である媒体、及び類似の医薬用媒体から選択できる。製剤は、生体適合性且つ生分解性である高分子組成物、例えば、ポリ（乳酸−グリコール酸）共重合体等を含むこともできる。このような材料は、マイクロもしくはナノ粒子とされ、薬物が搭載され、さらにコーティングもしくは誘導体化されることにより、優れた持続性放出性能を提供する。眼周囲もしくは眼内注入に好適な媒体は、例えば、注入用の等級水における治療薬の懸濁液、リポソーム、及び親油性物質に適切な媒体を含む。眼周囲もしくは眼内注入のためのその他の媒体は、当技術分野で公知である。

薬剤の濃度は調節が可能であり、緩衝液のｐＨ及び等張性は、静脈注射に適合するように調節され、当技術分野で公知である。

ＬＦＡ−１の任意の形態は、粉砕されることにより、製剤のためのより適切な特性を提供する。粉砕は、より大きい表面積の露出を有するより小さい粒子サイズを提供することができ、インビボもしくは製剤中に、より高速な可溶性を提供することができる。代替的に、より小さい粒子サイズへの粉砕は、初期溶解なしに、生物学的障壁（例えば、皮膚もしくは腸壁）を直接的に通過するための能力を提供し、製剤において固体として使用することを可能とし、温度安定性、寿命、輸送容易性、被験体による使用の容易性という追加的な利点を提供することが可能となる。

経口製剤は、錠剤、カプセル、トローチ、ピル、ウエハー、チューインガム、トローチ（ロゼンジ）、水性溶液もしくは懸濁液、油性懸濁液、シロップ、エリキシル剤、又は分散性粉末もしくは顆粒等であることができ、当技術分野において知られている任意の方法で作製できる。経口製剤は、甘味料、香味剤、着色剤、及び保存剤もまた含むことができる。錠剤形態のための薬学的に許容可能な賦形剤は、非毒性成分もまた含むことができ、例えば、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウム、もしくはリン酸ナトリウムなどの不活性希釈剤である。

経口使用するための錠剤の場合は、一般に使用される担体には、ラクトース及びコーンスターチが含まれ、そしてステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤が一般に添加される。カプセル形態で経口投与するためには、有用な担体は、ラクトース及びコーンスターチを含む。担体及び賦形剤のさらなる非限定的例には、牛乳、砂糖、特定のタイプのクレイ、ゼラチン、ステアリン酸、もしくはその塩、ステアリン酸カルシウム、タルク、植物性脂肪もしくは油、ガム、及びグリコールが含まれる。

本発明の医薬組成物及び投薬形態を形成するために使用可能な界面活性剤は、親水性界面活性剤、親油性界面活性剤、及びそれらの混合物を含むがそれらに限定されない。即ち、親水性界面活性剤の混合物を使用できる、親油性界面活性剤の混合物を使用できる、又は少なくとも１つの親水性界面活性剤と少なくとも１つの親油性界面活性剤との混合物を使用できる。

適切な親水性界面活性剤は、一般に少なくとも１０のＨＬＢ値を有することができ、一方で適切な親油性界面活性剤は、一般に約１０以下のＨＬＢ値を有することができる。非イオン性両親媒性化合物の相対的親水性及び疎水性を特徴付けるために使用される経験的パラメータは、親水性−親油性平衡（「ＨＬＢ」値）である。低いＨＬＢ値を有する界面活性剤はより親油性もしくは疎水性であり、油中でより大きな溶解性を有し、一方で高いＨＬＢ値を有する界面活性剤はより親水性であり、水溶液中で大きな溶解性を有する。親水性界面活性剤は、一般に約１０より大きいＨＬＢ値を有する化合物、並びにＨＬＢ尺度を一般に適用できないアニオン性、カチオン性、又は両性イオン性化合物であると考えられる。同様に、親油性（即ち、疎水性）界面活性剤は、約１０以下のＨＬＢ値を有する化合物である。しかしながら、界面活性剤のＨＬＢ値は、単に工業用、医薬用、及び化粧品用エマルジョンの調製を可能にするために一般に使用される大まかな指針である。

親水性界面活性剤は、イオン性又は非イオン性のいずれかであることができる。適切なイオン性界面活性剤は、アルキルアンモニウム塩；フシジン酸塩；アミノ酸、オリゴペプチド、及びポリペプチドの脂肪酸誘導体；アミノ酸、オリゴペプチド、及びポリペプチドのグリセリド誘導体；レシチン及び水素添加レシチン；リゾレシチン及び水素添加リゾレシチン；リン脂質及びその誘導体；リゾリン脂質及びその誘導体；カルニチン脂肪酸エステル塩；アルキル硫酸の塩；脂肪酸塩；ドキュセートナトリウム；アシルラクチレート；モノ−及びジ−グリセリドのモノ−及びジアセチル化酒石酸エステル；スクシニル化モノ−及びジグリセリド；モノ−及びジグリセリドのクエン酸エステル；並びにそれらの混合物を含むがそれらに限定されない。

上記の群内で、好ましいイオン性界面活性剤は、例として：レシチン、リゾレシチン、リン脂質、リゾリン脂質、及びそれらの誘導体；カルニチン脂肪酸エステル塩；アルキル硫酸塩；脂肪酸塩；ドキュセートナトリウム；アシルラクチレート；モノ−及びジ−グリセリドのモノ−及びジ−アセチル化酒石酸エステル；スクシニル化モノ−及びジ−グリセリド；モノ−及びジ−グリセリドのクエン酸エステル；並びにそれらの混合物を含む。

イオン性界面活性剤は、レシチン、リゾレシチン、ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジン酸、ホスファチジルセリン、リゾホスファチジルコリン、リゾホスファチジルエタノールアミン、リゾホスファチジルグリセロール、リゾホスファチジン酸、リゾホスファチジルセリン、ＰＥＧ−ホスファチジルエタノールアミン、ＰＶＰ−ホスファチジルエタノールアミン、脂肪酸のラクチル酸エステル、ステアロイル−２−ラクチレート、ラクチル酸ステアロイル、スクシニル化モノグリセリド、モノ／ジグリセリドのモノ／ジアセチル化酒石酸エステル、モノ／ジグリセリドのクエン酸エステル、コリルサルコシン、カプロン酸塩、カプリル酸塩、カプリン酸塩、ラウリン酸塩、ミリスチン酸塩、パルミチン酸塩、オレイン酸塩、リシノール酸塩、リノール酸塩、リノレン酸塩、ステアリン酸塩、ラウリル硫酸塩、テラセシル（teracecyl）硫酸塩、ドキュセート、ラウロイルカルニチン、パルミトイルカルニチン、ミリストイルカルニチン、並びにそれらの塩及び混合物のイオン化形態であることができる。

親水性非イオン性界面活性剤は、アルキルグリコシド；アルキルマルトシド；アルキルチオグルコシド；ラウリルマクロゴールグリセリド；ポリエチレングリコールアルキルエーテルなどのポリオキシアルキレンアルキルエーテル；ポリエチレングリコールアルキルフェノールなどのポリオキシアルキレンアルキルフェノール；ポリエチレングリコール脂肪酸モノエステル及びポリエチレングリコール脂肪酸ジエステルなどのポリオキシアルキレンアルキルフェノール脂肪酸エステル；ポリエチレングリコールグリセロール脂肪酸エステル；ポリグリセロール脂肪酸エステル；ポリエチレングリコールソルビタン脂肪酸エステルなどのポリオキシアルキレンソルビタン脂肪酸エステル；グリセリド、植物油、水素添加植物油、脂肪酸、及びステロールからなる群の少なくとも１つのメンバーとのポリオールの親水性エステル交換生成物；ポリオキシエチレンステロール、それらの誘導体及び類似体；ポリオキシエチル化ビタミン及びそれらの誘導体；ポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンブロックコポリマー；及びそれらの混合物；ポリエチレングリコールソルビタン脂肪酸エステル、並びにポリオールと、トリグリセリド、植物油、及び水素添加植物油からなる群の少なくとも１つのメンバーとの親水性エステル交換生成物を含むことができるが、それらに限定されない。ポリオールは、グリセロール、エチレングリコール、ポリエチレングリコール、ソルビトール、プロピレングリコール、ペンタエリトリトール、又は糖類であることができる。

他の親水性非イオン性界面活性剤は、制限するものではないが、ＰＥＧ−１０ラウレート、ＰＥＧ−１２ラウレート、ＰＥＧ−２０ラウレート、ＰＥＧ−３２ラウレート、ＰＥＧ−３２ジラウレート、ＰＥＧ−１２オレエート、ＰＥＧ−１５オレエート、ＰＥＧ−２０オレエート、ＰＥＧ−２０ジオレエート、ＰＥＧ−３２オレエート、ＰＥＧ−２００オレエート、ＰＥＧ−４００オレエート、ＰＥＧ−１５ステアレート、ＰＥＧ−３２ジステアレート、ＰＥＧ−４０ステアレート、ＰＥＧ−１００ステアレート、ＰＥＧ−２０ジラウレート、ＰＥＧ−２５グリセリルトリオレエート、ＰＥＧ−３２ジオレエート、ＰＥＧ−２０グリセリルラウレート、ＰＥＧ−３０グリセリルラウレート、ＰＥＧ−２０グリセリルステアレート、ＰＥＧ−２０グリセリルオレエート、ＰＥＧ−３０グリセリルオレエート、ＰＥＧ−３０グリセリルラウレート、ＰＥＧ−４０グリセリルラウレート、ＰＥＧ−４０パーム核油、ＰＥＧ−５０水素添加ヒマシ油、ＰＥＧ−４０ヒマシ油、ＰＥＧ−３５ヒマシ油、ＰＥＧ−６０ヒマシ油、ＰＥＧ−４０水素添加ヒマシ油、ＰＥＧ−６０水素添加ヒマシ油、ＰＥＧ−６０コーン油、ＰＥＧ−６カプリン酸／カプリル酸グリセリド、ＰＥＧ−８カプリン酸／カプリル酸グリセリド、ポリグリセリル−１０ラウレート、ＰＥＧ−３０コレステロール、ＰＥＧ−２５フィトステロール、ＰＥＧ−３０大豆ステロール、ＰＥＧ−２０トリオレエート、ＰＥＧ−４０ソルビタンオレエート、ＰＥＧ−８０ソルビタンラウレート、ポリソルベート２０、ポリソルベート８０、ＰＯＥ−９ラウリルエーテル、ＰＯＥ−２３ラウリルエーテル、ＰＯＥ−１０オレイルエーテル、ＰＯＥ−２０オレイルエーテル、ＰＯＥ−２０ステアリルエーテル、トコフェリルＰＥＧ−１００スクシネート、ＰＥＧ−２４コレステロール、ポリグリセリル−１０オレエート、Ｔｗｅｅｎ４０、Ｔｗｅｅｎ６０、スクロースモノステアレート、スクロースモノラウレート、スクロースモノパルミテート、ＰＥＧ１０−１００ノニルフェノールシリーズ、ＰＥＧ１５−１００オクチルフェノールシリーズ、並びにポロキサマーを含む。

適切な親油性界面活性剤は、単に例としてだけであるが：脂肪アルコール；グリセロール脂肪酸エステル；アセチル化グリセロール脂肪酸エステル；低級アルコール脂肪酸エステル；プロピレングリコール脂肪酸エステル；ソルビタン脂肪酸エステル；ポリエチレングリコールソルビタン脂肪酸エステル；ステロール及びステロール誘導体；ポリオキシエチル化ステロール及びステロール誘導体；ポリエチレングリコールアルキルエーテル；糖エステル；糖エーテル；モノ−及びジ−グリセリドの乳酸誘導体；ポリオールと、グリセリド、植物油、水素添加植物油、脂肪酸、及びステロールからなる群から選択される少なくとも１つのメンバーとの疎水性エステル交換生成物；油溶性ビタミン／ビタミン誘導体；並びにそれらの混合物を含む。この群内で、好ましい親油性界面活性剤は、グリセロール脂肪酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸エステル、及びそれらの混合物を含み、又はポリオールと、植物油、水素添加植物油、及びトリグリセリドからなる群の少なくとも１つのメンバーとの疎水性エステル交換生成物である。

界面活性剤は、その使用が相反しない限り、本発明の任意の製剤中に使用できる。本発明のある実施形態では、界面活性剤の不使用又は限定されたクラスの界面活性剤の使用が好ましい。

その他の適切な水溶性媒体は、リンゲル液及び等張食塩水を含むがこれらに限定されない。水溶性懸濁液は、セルロース誘導体、アルギン酸ナトリウム、ポリビニル−ピロリドン、及びトラガカントゴム等の懸濁剤、レシチン等の湿潤剤を含むことができる。水溶性懸濁液のための適切な保存料は、メチル、及びｎ−プロピル、ｐ−パラオキシ安息香酸を含む。

本発明の医薬組成物及び投薬形態を形成するのに使用可能なキレート剤は、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ＥＤＴＡ二ナトリウム、エデト酸カルシウム二ナトリウム、ＥＤＴＡ三ナトリウム、アルブミン、トランスフェリン、デスフェロキサミン、デスフェラル（desferal）、デスフェロキサミンメシラート、ＥＤＴＡ四ナトリウム、及びＥＤＴＡ二カリウム、メタケイ酸ナトリウム、又はこれらいずれかの組み合わせを含むがこれらに限定されない。

本発明の医薬組成物及び投薬形態を形成するのに使用可能な保存料は、ピュライト（purite）、過酸化物、過ホウ酸塩、イミダゾリジニル尿素、ジアゾリジニル尿素、フェノキシエタノール、塩化ベンザルコニウムを含む塩化アルコニウム、メチルパラベン、エチルパラベン、及びプロピルパラベンを含むがこれらに限定されない。

本発明の医薬組成物及び投薬形態を形成するのに使用可能な増粘剤は、ミリスチン酸イソプロピル、パルミチン酸イソプロピル、ネオペンタン酸イソデシル、スクアレン、鉱油、Ｃ_１２−Ｃ_１５安息香酸及び水素添加ポリイソブテンを含むがこれらに限定されない。特に好適であるのは、最終製品のその他の化合物の妨害をしない剤であり、例えば非イオン性増粘剤である。追加的な増粘剤の選択肢は、当業者内では公知である。

本発明の医薬組成物及び投薬形態を形成するのに使用可能な抗酸化剤は、没食子酸のプロピル、オクチル、及びドデシルエステル、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ、通常はオルソ及びメタ異性体の混合物として購入される）、緑茶抽出物、尿酸、システイン、ピルビン酸塩、ノルジヒドログアヤレト酸、アスコルビン酸、アスコルビン酸の塩、例えば、パルミチン酸アスコルビル、アスコルビン酸ナトリウム、アスコルビルグルコサミン、ビタミンＥ（例えば、a−トコフェロール等のトコフェロール）、ビタミンＥの誘導体（例えば、酢酸トコフェロール）、レチノイド、例えば、レチノイン酸、レチノール、トランス−レチノール、シス−レチノール、トランス−レチノールとシス−レチノールの混合物、３−デヒドロレチノール、及びビタミンＡの誘導体（例えば、酢酸レチニル、レチナール、及びパルミチン酸レチニル（パルミチン酸テチニル（tetinyl palmitate）としても公知である））、クエン酸ナトリウム、亜硫酸ナトリウム、リコピン、アントシアニド（anthocyanids）、バイオフラビノイド（例えば、ヘスペリチン、ナリンゲニン、ルチン、ケルセチン）、スーパーオキシドジスムターゼ、グルタチオンペルオキシダーゼ、ブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、インドール−３−カルビノール、ピクノジェノール、メラトニン、スルフォラファン、プレグネノロン、リポ酸、及び４−ヒドロキシ−５−メチル−３［２Ｈ］−フラノンを含むがこれらに限定されない。

経口投与のために本発明の化合物を調製する場合には、消化（ＧＩ）管からの吸収を増強するために胃内滞留型製剤を利用するのが望ましいことがある。数時間にわたり胃内に保持される製剤は、本発明の化合物を緩徐に放出して、本発明のある実施形態では好ましい可能性がある徐放性を提供できる。そのような胃内滞留型製剤の開示は、Klausner, E.A.; Lavy, E.; Barta, M.; Cserepes, E.; Friedman, M.; Hoffman, A. 2003 「Novel gastroretentive dosage forms: evaluation of gastroretentivity and its effect on levodopa in humans.」 Pharm. Res. 20, 1466-73, Hoffman, A.; Stepensky, D.; Lavy, E.; Eyal, S. Klausner, E.; Friedman, M. 2004 「Pharmacokinetic and pharmacodynamic aspects of gastroretentive dosage forms」 Int. J. Pharm. 11, 141-53, Streubel, A.; Siepmann, J.; Bodmeier, R.; 2006 「Gastroretentive drug delivery systems」 Expert Opin. Drug Deliver. 3, 217-3, and Chavanpatil, M.D.; Jain, P.; Chaudhari, S.; Shear, R.; Vavia, P.R. 「Novel sustained release, swellable and bioadhesive gastroretentive drug delivery system for olfoxacin」 Int. J. Pharm. 2006 epub March 24に見いだすことができる。拡張性、浮遊性及び生体接着技術を利用して、本発明の化合物の吸収を最大化することができる。

鼻内投与は、被験者が吸入する、本発明の化合物からなる呼吸用粒子のエアロゾル懸濁液を利用できる。本発明の化合物は、肺吸収によって血流内に吸収されるか、又は鼻涙管を介して涙腺組織に接触し、引き続いて医薬有効量で網膜組織へ送達される。呼吸用粒子は、吸収に有効であることが当技術分野において知られているように、適切な粒径の粒子を備える固体もしくは液体であることができる。吸入もしくは送気のための組成物には、薬学的に許容可能な水性もしくは有機溶媒における溶液及び懸濁液、又はそれらの混合物、及び粉末が含まれる。液体もしくは固体組成物は、上述したように適切な薬学的に許容可能な賦形剤を含むことができる。好ましくは、本組成物は、局所もしくは全身性効果のために経口もしくは経鼻呼吸経路によって投与される。好ましくは薬学的に許容可能な溶媒中の組成物は、不活性ガスの使用によって噴霧化できる。噴霧化された溶液は、噴霧化器具から直接的に吸入できるか、あるいは噴霧化器具は、フェースマスクテント、もしくは間欠的陽圧呼吸装置に取り付けることができる。溶液、懸濁液、もしくは粉末組成物は、適切な方法で製剤を送達する器具から、好ましくは経口もしくは経鼻的に投与できる。

経皮的投与のためには、当技術分野において公知である任意の適切な製剤を、溶液、液滴、懸濁液、ゲル、粉末、クリーム、油、固形、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）ベースの溶液、又はパッチもしくは当技術分野において知られている他の送達システムに使用するためのリポソーム製剤のいずれかとして利用できる。医薬組成物はさらに、皮膚の角質層透過性障壁を越える治療分子の浸透を増加させるもしくは送達を補助する化合物である適切な固体もしくはゲル相担体もしくは賦形剤を含むことができる。これらの浸透促進分子の多数が、局所用製剤の分野における当業者に公知である。そのような担体及び賦形剤の例は、湿潤剤（例、尿素）、グリコール（例、プロピレングリコール）、アルコール（例、エタノール）、脂肪酸（例、オレイン酸）、界面活性剤（例、ミリスチン酸イソプロピル及びラウリル硫酸ナトリウム）、ピロリドン、グリセロールモノラウレート、スルホキシド、テルペン（例、メントール）、アミン、アミド、アルカン、アルカノール、水、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、様々な糖類、デンプン、セルロース誘導体、ゼラチン、並びにポリエチレングリコールなどのポリマーを含むがそれらに限定されない。医薬品を送達するための経皮パッチの構造及び使用は、当技術分野においてよく知られている。例えば、米国特許第５，０２３，２５２号、第４，９９２，４４５号、及び第５，００１，１３９号を参照されたい。そのようなパッチは、医薬品の持続性、拍動性、又はオンデマンド送達のために構築できる。

局所投与のためには、眼科学の分野において使用される局所的眼投与のための全製剤（例えば、点眼剤、挿入物、アイパック、含浸コンタクトレンズ、ポンプデリバリーシステム、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）ベース溶液の懸濁液、リポソーム、及び眼軟膏）、並びに皮膚学及び耳鼻咽喉科学の分野において外用するための全製剤（例えば、軟膏（ointment）、クリーム、ゲル、粉末、軟膏（salve）、ローション、結晶形態、発泡、及びスプレー）は、当技術分野において知られているように利用できる。ある実施形態では、本発明のあるＬＦＡ−１アンタゴニストの並外れた溶解性により、眼領域に治療的関連用量を送達できる濃縮溶液の製剤が可能となる。追加的に、鼻腔の皮膚及び粘膜への局所投与のための全ての適切な製剤は、本発明の化合物を送達するために使用されることができる。本発明の医薬組成物は、局所もしくは経口投与のためのリポソーム製剤であることができ、これらのうちいずれもが、本発明の目的に適切であることが当技術分野において知られている。

本発明の医薬組成物及び製剤を形成するために使用できる潤滑剤は、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、鉱油、軽油、グリセリン、ソルビトール、マンニトール、ポリエチレングリコール、その他のグリコール、ステアリン酸、ラウリル硫酸ナトリウム、タルク、水素添加植物油（例えば、落花生油、綿実油、ヒマワリ油、ゴマ油、オリーブ油、コーン油、及び大豆油）、ステアリン酸亜鉛、オレイン酸エチル、ラウリン酸エチル、寒天、又はそれらの混合物を含むがそれらに限定されない。追加の潤滑剤は、例えば、シロイドシリカゲル、合成シリカの凝固エアロゾル、又はそれらの混合物を含む。潤滑剤は、医薬組成物の約１重量％未満の量で任意に添加することができる。

皮膚保護剤は、化学性刺激物及び／又は物理的刺激物（例えば、紫外線）に対して皮膚を保護する剤であり、日焼け止め剤、抗ニキビ添加剤、シワ取り及び抗皮膚萎縮剤を含む。皮膚保護剤として適切な日焼け止め剤は、２−エチルヘキシル ｐ−メトキシ桂皮酸、２−エチルヘキシル Ｎ，Ｎ−ジメチル−ｐ−アミノ安息香酸塩、ｐ−アミノ安息香酸、２−フェニルベンゾイミダゾール−５−スルホン酸、オクトクリレン、オキシベンゾン、サリチル酸ホモメンチル（homomenthyl salicylate）、サリチル酸オクチル、４，４’−メトキシ−ｔ−ブチルジベンゾイルメタン、４−イソプロピルブチルジベンゾイルメタン、３−ベンジリデンカンファー、３−（４−メチルベンジリデン）カンファー、アンタニラート（anthanilates）、超微細二酸化チタン、酸化亜鉛、酸化鉄、シリカ、２，４−ジヒドロキシベンゾフェノンの４−Ｎ，Ｎ−（２−エチルヘキシル）メチルアミノ安息香酸エステル、４−ヒドロキシジベンゾイメタンを備える４−Ｎ，Ｎ−（２−エチルヘキシル）−メチルアミノ安息香酸エステル、２−ヒドロキシ−４−（２−ヒドロキシエトキシ）ベンゾフェノンの４−Ｎ，Ｎ−（２−エチルヘキシル）−メチルアミノ安息香酸エステル、及び４−（２−ヒドロキシエトキシ）ジベンゾイルメタンの４−Ｎ，Ｎ−（２−エチルヘキシル）−メチルアミノ安息香酸エステルを含む。適切な抗ニキビ剤は、サリチル酸；５−オクタノイルサリチル酸；レゾルシノール；レチノイド、例えば、レチノイン酸及びその誘導体；システイン以外の硫黄含有Ｄ及びＬアミノ酸；リポ酸；抗生剤及び抗菌剤、例えば、過酸化ベンゾイル、オクトピロックス、テトラサイクリン、２，４，４’−トリクロロ−２’−ヒドロキシジフェニルエーテル、３，４，４’−トリクロロバニリド、アゼライン酸、フェノキシエタノール、フェノキシプロパノール、フェノキシイソプロパノール、酢酸エチル、クリンダマイシン、及びメルクロサイクリン（melclocycline）；フラボノイド；シムノール硫酸塩、デオキシコール酸塩、及びコール酸塩などの胆汁塩を含む。シワ取り及び抗皮膚萎縮剤の例は、レチノイン酸及びその誘導体、レチノール、レチニルエステル、サリチル酸及びその誘導体、システイン以外の硫黄含有Ｄ及びＬアミノ酸；α−ヒドロキシ酸（例えば、グリコール酸及び乳酸）、フィチン酸、リポ酸、及びリゾホスファチジン酸を含む。

製剤は、組成物のその他の成分に起因する皮膚刺激もしくは皮膚損傷の可能性を最小限にするもしくは解消するために、刺激緩和添加剤を含むことができる。適切な刺激緩和添加剤は、例えば、：−トコフェロール；モノアミン酸化酵素インヒビター、部分的にフェニルアルコール、例えば２−フェニル−１−エタノール；グリセリン；サリチル酸及びサリチル酸塩；アスコルビン酸及びアスコルビン酸塩；イオノフォア、例えばモネンシン；両親媒性アミン；塩化アンモニウム；Ｎ−アセチルシステイン；シス−ウロカニン酸；カプサイシン；及びクロロキンを含む。刺激緩和添加剤は、存在する場合には、本製剤中に、刺激もしくは皮膚損傷を緩和するのに効果的な濃度で含まれることができ、典型的には、組成物の約２０重量％以下、より典型的には組成物の５重量％以下で存在する。

乾燥感覚調整剤は、エマルションに添加した場合、そのエマルションが乾燥した時に「乾燥時の感覚」を付与する剤である。乾燥感覚調整剤は、タルク、カオリン、チョーク、酸化亜鉛、シリコーン溶液、硫酸バリウム等の無機塩類、表面処理シリカ、沈殿シリカ、ヒュームド・シリカを含み、ヒュームド・シリカとしては、アメリカ合衆国ニューヨーク州ニューヨークのDegussa Inc.から利用可能なAerosil等が挙げられる。その他の乾燥感覚調整剤は、エピクロルヒドリン架橋グリセリルスターチであり、この種類は、米国特許第６，４８８，９１６号に開示されている。

その他の薬剤、例えば、保存時の損傷を防ぐ（即ち、酵母及びカビ等の微生物の成長を阻害する）ための抗菌剤などもまた添加されることが可能である。適切な抗菌剤は、典型的には、ｐ−ヒドロキシ安息香酸のメチル及びプロピルエステル（即ち、メチル及びプロピルパラベン）、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸、イミド尿素、ピュライト(purite)、過酸化物、過ホウ酸塩、及びその組み合わせからなる群から選択される。

製剤は、審美剤を含むこともできる。審美剤の例は、香料、顔料、着色剤、エッセンシャルオイル、皮膚感覚剤及び収斂剤を含む。適切な審美剤は、チョウジ油、メントール、カンファー、ユーカリ油、オイゲノール、乳酸メチル、ビサボロール、マンサク蒸留物（推奨）、及び緑茶抽出物（推奨）を含む。

香料は、審美的に魅力のある芳香を日焼け止め組成物に付与することができる芳香物質である。典型的な香料は、植物源（例えば、バラの花びら、クチナシの花、ジャスミンの花等）から抽出される芳香材料を含み、これらは、単独で使用でき、又は任意に組み合わせて使用することにより、エッセンシャルオイルを作り出すことができる。代替的に、アルコール抽出物が、香料を構成するために調製されることができる。しかしながら、天然物質から香料を得ることは比較的費用が高いために、現在の傾向は、合成的に調製された香料を特に大量生産品においては使用する。１つ又はそれ以上の香料は、約０．００１乃至約５重量％、好ましくは、約０．０１乃至約０．５重量％の範囲で、任意に日焼け止め組成物に含まれることができる。追加的な保存料は、必要に応じて使用されることができ、公知の保存組成物を含み、特に、ベンジルアルコール、フェニルエチルアルコール及び安息香酸、ジアゾリジニル、尿素、クロルフェネシン、ヨードプロピニル及びカルバミン酸ブチル等である。

さらに、本発明の化合物は、局所的、眼内、眼周囲、もしくは全身性投与のために、挿入物の上、内、もしくは接着させて、持続放出製剤に使用される生体適合性ポリマーに放出可能に取り付け可能であることが想定される。生体適合性ポリマーからの制御放出は、水溶性ポリマーとともに用いられ、滴下用製剤も形成することが可能である。生体適合性ポリマー（例えば、ＰＬＧＡマイクロスフィア、マイクロ粒子もしくはナノ粒子）からの制御放出は、持続性放出投与用の眼内移植もしくは注入に適切な製剤内にも利用されることができる。任意の適切な生分解性及び生体適合性ポリマーもしくはマトリックスもまた使用できる。

点眼剤は、活性成分を無菌水溶液（例えば、生理食塩水、緩衝液等）に溶解させることによって、又は、使用前に溶解させる粉末組成物と組み合わせることによって、調製されることができる。その他の媒体は、当技術分野で公知である如く、選択されることができ、：平衡塩溶液、食塩水、ポリエチレングリコールなどの水溶性ポリエーテル、ポリビニルアルコール及びポビドンなどのポリビニル、メチルセルロース及びヒドロキシプロピルメチルセルロースなどのセルロース誘導体、鉱油及び白色ワセリンなどの石油誘導体、ラノリンなどの動物性脂肪、カルボキシポリメチレンゲルなどのアクリル酸のポリマー、ピーナッツ油などの植物油、及びデキストランなどの多糖類、並びにヒアルロン酸ナトリウムなどのグリコサミノグリカンを含むがそれらに限定されない。所望であれば、点眼剤で通常使用される添加物を添加できる。そのような添加物は、等張化剤（例えば、塩化ナトリウムなど）、緩衝剤（例えば、ホウ酸、リン酸一水素ナトリウム、リン酸二水素ナトリウムなど）、保存料（例えば、塩化ベンズアルコニウム、塩化ベンゼトニウム、クロロブタノールなど）、増粘剤（例えば、ラクトース、マンニトール、マルトースなどの糖類；例えば、ヒアルロン酸、もしくはヒアルロン酸ナトリウム、ヒアルロン酸カリウムなどのその塩；例えば、硫酸コンドロイチンなどのムコ多糖；例えば、ポリアクリル酸ナトリウム、カルボキシビニルポリマー、架橋ポリアクリレート、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、又は当業者に公知の他の物質）を含む。

本組成物の成分の溶解度は、組成物中の界面活性剤もしくは他の適切な共溶媒によって増強することができる。そのような共溶媒は、ポリソルベート２０、６０、及び８０、Pluronic Ｆ６８、Ｆ−８４、及びＰ−１０３、シクロデキストリン、又は当業者に公知の他の物質を含む。そのような共溶媒は、約０．０１重量％−２重量％のレベルで使用できる。

本発明の組成物は、保存料を含有しない無菌単位用量タイプとして調製できる。

本発明の組成物は、多用量形態で包装できる。使用中の細菌汚染を防止するために、保存料が好ましいことがある。適切な保存料は、塩化ベンズアルコニウム、チメロサール、クロロブタノール、メチルパラベン、プロピルパラベン、フェニルエチルアルコール、エデト酸二ナトリウム、ソルビン酸、過ホウ酸ナトリウム、Onamer M、又は当業者に公知の他の物質を含む。先行技術の眼科用製品では、そのような保存料は０．００４％−０．０２％のレベルで使用できる。本出願の組成物では、保存料、好ましくは、塩化ベンズアルコニウムは、０．００１重量％−０．０１重量％未満、例えば０．００１重量％−０．００８重量％、好ましくは約０．００５重量％のレベルで使用できる。０．００５％の塩化ベンズアルコニウムの濃度は、本発明の組成物を細菌による攻撃から保護するために十分である可能性があることが発見されている。

本発明において使用される有効成分の投与量及び投与回数は、患者の性別、年齢、及び体重、治療される症状、望ましい治療効果、投与経路及び治療期間によって変動する。成人用の点眼剤については、本発明の化合物を含む製剤の濃度範囲は、約０．０００１−１０．０（Ｗ／Ｖ）％、約０．００５−１０．０（Ｗ／Ｖ）％、約０．０１−１０．０（Ｗ／Ｖ）％、約０．０５−１０．０（Ｗ／Ｖ）％、約０．１−１０．０（Ｗ／Ｖ）％、約０．５−１０．０（Ｗ／Ｖ）％、約１．０−１０．０（Ｗ／Ｖ）％、約２０−１０．０（Ｗ／Ｖ）％、約３．０−１０．０（Ｗ／Ｖ）％、約４．０−１０．０（Ｗ／Ｖ）％、又は約５．０−１０．０（Ｗ／Ｖ）％であることができる。本発明の一実施形態は、本発明の化合物の約１．０−１０．０（Ｗ／Ｖ）％の製剤を有している。本発明の一実施形態は、本発明の化合物の約０．０１−１０．０（Ｗ／Ｖ）％の製剤を有している。本発明の一実施形態は、本発明の化合物の約５．０−１０．０（Ｗ／Ｖ）％の製剤を有している。本投与は、各眼につき１日に数回、好ましくは１−１０回、より好ましくは１−４回、最も好ましくは１日１回投与されることができる。投与される滴のサイズの範囲は、約１０−１００μｌ、約１０−９０μｌ、約１０−８０μｌ、約１０−７０μｌ、約１０−６０μｌ、約１０−５０μｌ、約１０−４０μｌ、約１０−３０μｌ、約２０−１００μｌ、約２０−９０μｌ、約２０−８０μｌ、約２０−７０μｌ、約２０−６０μｌ、約２０−５０μｌ、約２０−４０μｌ、又は約２０−３０μｌであることができる。本発明の一実施形態は、約１０−約３０μｌの範囲の滴を投与する。本発明の一実施形態は、約１０−約１００μｌの範囲の滴を投与する。本発明の一実施形態は、約２０−約５０μｌの範囲の滴を投与する。本発明の一実施形態は、約２０−約４０μｌの範囲の滴を投与する。本発明の一実施形態は、約１０−約６０μＬの範囲の滴を投与する。

本発明の製剤は、１回につき、数滴、１−４滴、好ましくは１−３滴、より好ましくは１−２滴、及び最も好ましくは１日当たり１滴を投与されることができる。一実施形態では、本発明の製剤は、１回につき約１滴で、１日に１回投与される。

軟膏、クリーム、ローション、もしくはスプレーの製剤については、製剤中の本発明の化合物の濃度範囲は、約０．０００１−１０．０（Ｗ／Ｖ）％、約０．００５−１０．０（Ｗ／Ｖ）％、約０．０１−１０．０（Ｗ／Ｖ）％、約０．０５−１０．０（Ｗ／Ｖ）％、約０．１−１０．０（Ｗ／Ｖ）％、約０．５−１０．０（Ｗ／Ｖ）％、約１．０−１０．０（Ｗ／Ｖ）％、約２０−１０．０（Ｗ／Ｖ）％、約３．０−１０．０（Ｗ／Ｖ）％、約４．０−１０．０（Ｗ／Ｖ）％、又は約５．０−１０．０（Ｗ／Ｖ）％であることができる。本発明の一実施形態は、本発明の化合物の約１．０−１０．０（Ｗ／Ｖ）％の製剤を有している。本発明の一実施形態は、本発明の化合物の約０．０１−１０．０（Ｗ／Ｖ）％の製剤を有している。本発明の一実施形態は、本発明の化合物の約５．０−１０．０（Ｗ／Ｖ）％の製剤を有している。これらの製剤は、１日に数回、好ましくは１−６回、より好ましくは１−４回、最も好ましくは１日１回塗布又はスプレーされることができる。各成分の配合比は、炎症もしくは感染の程度に基づいて適切に増減させることができる。

本発明の製剤は、それらが本発明の目的に相反さない限り、他の薬理学的有効成分をさらに含むことができる。複数の有効成分の組み合わせでは、それらの各含量は、それらの効果及び安全性を考慮に入れて適切に増減させることができる。

Ｖ．キット
本発明は、キットもまた提供する。キットは、適切な包装内の本発明の化合物、及び使用説明書、臨床試験についての考察、副作用の一覧などを含むことができる文書資料を含む。キットは、本発明のＬＦＡ−１アンタゴニストと共投与される別の治療薬をさらに含有することができる。ある実施形態では、治療薬及び本発明のＬＦＡ−１アンタゴニストは、キット内の個別容器内の個別組成物として提供される。ある実施形態では、治療薬及び本発明のＬＦＡ−１アンタゴニストは、キット内の容器内の単独組成物として提供される。適切な包装及び使用のための追加物品（例えば、液体調合液の計量カップ、空気への曝露を最小限にするためのホイル包装、ディスペンサーなど）は、当技術分野において知られており、キット内に含めることができる。

ＶＩ．実施例
＜実施例１：親和性測定＞
ＬＦＡ−１のための小分子の親和性は、蛍光偏光（ＦＰ）を用いて、上述した如く小分子アンタゴニスト（化合物１（図２））を備える競合形態において測定される。全ての測定値、５０ｍＭのＨｅｐｅｓ、ｐＨ７．２、１５０ｍＭのＮａＣｌ、０．０５%のｎ−オクチルグルコシド、及び０．０５％のウシγグロブリン(ＢＧＧ)、並びに、１ｍＭのＭｎＣｌ_２か１ｍＭのＣａＣｌ_２及び１ｍＭのＭｇＣｌ_２のいずれかを含む緩衝液において実施される。ＬＦＡ−１への化合物１の親和性は、まず、ＭｎＣｌ_２かＣａＣｌ_２及びＭｇＣｌ_２かのいずれかを含む緩衝液における１μＭから開始するＬＦＡ−１の連続希釈へと、２ｎＭの化合物１を添加することによって測定される。競合実験は、２ｎＭの化合物１にアンタゴニストの連続希釈を添加することによって実施される（３ｎＭのＬＦＡ−１（ＭｎＣｌ_２中）もしくは４０ｎＭのＬＦＡ−１（ＣａＣｌ_２及びＭｇＣｌ_２中）を使用）。ＩＣＡＭ−１−Ｉｇ競合実験において、ＬＦＡ−１濃度は、２つの二価陽イオン緩衝状態における２及び２０ｎＭのＬＦＡ−１へと下げられ、ＩＣＡＭ−１−Ｉｇによる阻害を最大限化する。実験で使用される異なるＬＦＡ−１濃度は、親和性計算（以下を参照）において検討される。溶液は９６ウェルの黒色ＨＥ９６プレート（Molecular Devices、サニーベール、カリフォルニア州）内で、２時間３７℃でインキュベートされる。蛍光偏光（ＦＰ）測定は、４８５ｎｍでの励起、５３０ｎｍでの発光、及び５０５ｎｍの二色性フィルターを用いて、Analystプレートリーダー（Molecular Devices、サニーベール、カリフォルニア州）上で実施される。全ての生の強度データは、化合物１を用いずに適切なサンプルから測定した強度を減算することによってバックグラウンド発光について補正される。ＬＦＡ−１結合及びアンタゴニスト競合データは、ＬＦＡ−１滴定のためのＥＣ_５０値及びアンタゴニストのＩＣ_５０値を入手するために、KaleidaGraphソフトウエア（Synergy Software、レディング、ペンシルベニア州）を用いて４パラメータ方程式の非線形最小二乗適合法を用いて分析される。データを当てはめるために使用する方程式は、Ｙ＝（（Ａ−Ｄ）／（１＋（Ｘ／Ｃ）＾Ｂ））＋Ｄであり、式中、Ｙはアッセイ応答であり、Ａは上方漸近線でのＹ値であり、Ｂは勾配係数であり、ＣはＩＣ_５０もしくはＥＣ_５０であり、そしてＤは下方漸近線でのＹ値である。一般に、以下で記載する同種ＦＰ及び異種ＥＬＩＳＡ形態の両方で測定したデータは、比較的大きな信号対バックグラウンドの比率を含み、当てはめにおける誤差推定値は、典型的には当てはめられたパラメータの最終値の１０％未満である。Ａ−２８６９８２を含む、及び含まない化合物１についてのＬＦＡ−１の平衡解離定数（Ｋ_ｄ）は、クロッツ及びヒル（Klotz and Hill）分析を用いて計算される。ＬＦＡ−１に対するアンタゴニストの親和性（Ｋ_ｉ）はＩＣ_５０値、化合物１／ＬＦＡ−１のＫ_ｄ、並びに競合実験における化合物１及びＬＦＡ−１の濃度を用いて計算される。

＜実施例２：ＬＦＡ−１／ＩＣＡＭ−１及びＬＦＡ−１／小分子の酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）＞
（Ａ）アンタゴニストの競合：小分子及びｓＩＣＡＭ−１は、ＩＣＡＭ−１−Ｉｇもしくはフルオレセイン標識小分子アンタゴニストである化合物２ＢのＬＦＡ−１への結合を競合形態で分離させる能力についてアッセイされる。化合物２Ｂは、化合物１と類似しているが、抗フルオレセイン検出抗体の結合を最大化するための小分子とフルオレセインとの間のより長いリンカーを備える。９６ウェルプレートは、４℃で一晩かけてリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中の５μｇ／ｍＬ（３３．３ｎＭ）のマウス抗ヒトβ２インテグリン（非官能的ブロッキング抗体）でコーティングされる。これらのプレートは、室温で１時間、アッセイ緩衝液（２０ｍＭのＨｅｐｅｓ、ｐＨ７．２、１４０ｍＭのＮａＣｌ、１ｍＭのＭｎＣｌ_２、０．５％のウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、及び０．０５％のＴｗｅｅｎ−２０）を用いてブロックされる。緩衝液（５０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．５、１００ｍＭのＮａＣｌ、１ｍＭのＭｎＣｌ_２、及び０．０５％のＴｗｅｅｎ−２０）中で洗浄した後、８ｎＭのＬＦＡ−１（ＬＦＡ−１／ＩＣＡＭ−１のＥＬＩＳＡ）もしくは２ｎＭのＬＦＡ−１（ＬＦＡ−１／小分子のＥＬＩＳＡ）が添加され、その後に３７℃で１時間にわたりインキュベートされる。これらのプレートが洗浄され、ＬＦＡ−１／ＩＣＡＭ−１ ＥＬＩＳＡについては、連続希釈の小分子アンタゴニストもしくはｓＩＣＡＭ−１がプレートへ３０分間にわたり加えられ、次に３７℃で２時間にわたり０．８９ｎＭのＩＣＡＭ−１−Ｉｇ（最終濃度）が加えられる。さらに洗浄した後、ヤギ抗ｈｕＩｇＧ（Ｆｃ特異的）−ＨＲＰが加えられ、３７℃で１時間にわたりインキュベートされる。ＬＦＡ−１／小分子のＥＬＩＳＡでは、希釈したアンタゴニスト及び２５ｎＭの化合物２Ｂがプレートに同時に加えられ、その後３７℃で２時間インキュベートされる。１回の洗浄後にヒツジ抗フルオレセイン−ＨＲＰが加えられ、３７℃で１時間インキュベートされる。両方のアッセイに関し、洗浄後、結合したＨＲＰ−コンジュゲート抗体は、テトラメチルベンジジン（ＴＭＢ）を添加し、反応を停止させるために１ＭのＨ_３ＰＯ_４を添加した後に４５０ｎｍで生成物の吸光度を測定することによって検出される。各曲線についてのＩＣ_５０値は、KaleidaGraphソフトウエアを用いて上述した４パラメータ方程式に当てはめることによって決定される。

（Ｂ）リガンドの結合：ＬＦＡ−１／ＩＣＡＭ−１及びＬＦＡ−１／小分子のＥＬＩＳＡは、ＩＣＡＭ−１−Ｉｇもしくは化合物２Ｂいずれかの連続希釈がアンタゴニストの存在下もしくは不在下のいずれかでプレートへ加えられたこと以外は、上述の如く実施される。全ての場合において、リガンドはアンタゴニストと同時に加えられる。プレートは、洗浄及び検出抗体の添加前に、アンタゴニスト及びリガンド添加後の平衡条件に近付けるために、３７℃で６時間インキュベートされる。各曲線のＥＣ_５０値は、上述したように４パラメータモデルを用いて当てはめによって決定される。アンタゴニストの存在下及び不在下で生成されたＥＣ_５０値は、シルド回帰によって分析される。アンタゴニスト濃度に対する対数（濃度比−１）のシルドプロットは、（濃度比−１）＝（（アンタゴニスト存在下のリガンドＥＣ_５０）／（アンタゴニスト不在下のリガンドＥＣ_５０））−１から計算する。アンタゴニスト濃度に対する対数（濃度比−１）のプロットの勾配は、この線を一次方程式Ｙ＝Ａ＋ＢＸに当てはめることによって計算する。

＜実施例３：化合物３の放射標識した光活性可能な類似体のＬＦＡ−１への架橋結合＞
全長ヒト膜結合ＬＦＡ−１もしくはＢＳＡ（２０ｍＭのＨｅｐｅｓ中０．３５ｍｇ／ｍＬ［各々、１．４及び５．３μＭ］、１５０ｍＭのＮａＣｌ、５ｍＭのＣａＣｌ_２、５ｍＭのＭｇＣｌ_２、１ｍＭのＭｎＣｌ_２、及び１％のｎ−オクチルグルコシド、ｐＨ７．２）は、２９０μＭの化合物３の存在下もしくは不在下のいずれかで、化合物３のトリチウム標識光活性可能類似体である４．１μＭの化合物５とともに、３７℃で一晩インキュベートされる。化合物５対ＬＦＡ−１のモル比は３：１である。１％のＢＳＡでプレコーティングした９６ウェルプレートがインキュベーションに使用される。架橋結合の直前に、過剰の化合物５は、同一緩衝液を用いて平衡化させた９６ウェル形態でＧ−２５マイクロスピンカラムを用いたゲル濾過によって迅速に除去される。ＬＦＡ−１／化合物５の複合体は、高圧水銀蒸気ランプ（４５０ワット、Ace glass社、バインランド、ニュージャージー州）へ曝露させることによって架橋結合される。照射中、サンプルは、氷上で冷却され、タンパク質分解を最小限に抑えるためのホウケイ酸塩の厚さ５ｍｍのプレートによって保護される。残留している未結合化合物５は、上述したようにゲル濾過（Ｇ−２５）によって除去される。架橋複合体は、次に８Ｍ塩酸グアニジン（ＧｕＨＣｌ）中で変性され、還元され、アルキル化される。処理したタンパク質は、ＳＤＳ−ＰＡＧＥに供した後、クマシーブルー染色される。放射標識タンパク質は、オートラジオグラフィーによって視認される。

化合物５の結合部位を同定するために、処理されたαＬ及びβ２サブユニットは、６ＭのＧｕＨＣｌ、２０ｍＭのＨｅｐｅｓ、１０ｍＭのＥＤＴＡ、ｐＨ６．８の存在下でサイズ排除クロマトグラフィーによって分離され、次に７ＭのＧｕＨＣｌを含む１０％酢酸中の２．６Ｍのヒドロキシルアミンを用いて７５℃で４時間にわたり化学的に開裂される。放射標識タンパク質フラグメントは、ＳＤＳ−ＰＡＧＥによって分離され、オートラジオグラフィーによって視認されるか、又はポリフッ化ビニリデン膜上に移され、クマシーブルーで染色され、その後Ｎ末端タンパク質シーケンシングによって同定される。

＜実施例４：Ｉドメインが欠如しているαＬコンストラクトの作製＞
使用したコンストラクトであるｐＬＦＡ．ｈｕＩＤ．Δｐは、ＩドメインのＮａｒ１制限部位５’からＩドメイン（ここで、Ｉドメインの第１ＰｆｌＭ１制限部位３’が除去されている）の第２ＰｆｌＭ１制限部位３’へのαＬ遺伝子の配列を含む（Edwards et al. 1995）。Ｉドメインが欠如する突然変異体を作製するために、以下のプライマー：フォワードプライマーＣＡＣＴＧＴＧＧＣＧＣＣＣＴＧＧＴＴＴＴＣＡＧＧＡＡＧＧＴＡＧＴＧＧＡＴＣＡＧＧＣＡＣＡＡＧＣＡＡＡＣＡＧＧＡＣＣＴＧＡＣＴＴＣ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ３）（Ｎａｒ１部位からＩドメインの開始までの配列、ＧＳＧＳＧ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ３）をコードするＤＮＡの配列、及びＩドメインの末端後のαＬ配列の２３ｂｐを含む）が作製され、及び、リバースプライマーＴＣＴＧＡＧＣＣＡＴＧＴＧＣＴＧＧＴＡＴＣＧＡＧＧＧＧＣ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ５）（Ｉドメイン後の第２ＰｆｌＭ１制限部位でプライミングする）が作製される。ＰＣＲは、これらのプライマー、及びＩドメイン内の一部位で切断するＢｇｌＩＩを用いて線形化したｐＬＦＡ．ｈｕＩＤ．Δｐを用いて実施される。Ｎａｒ１部位から第２ＰｆｌＭ１部位までの配列を含む（その中で、Ｃ１２５からＧ３１１までの全ＩドメインがＧＳＧＳＧをコードするＤＮＡ配列で置換されている）ＤＮＡフラグメントが、増幅される。ＤＮＡのこの断片が精製され、Ｎａｒ１及びＰｆｌＭ１を用いて消化され、対応するＮａｒ１及びＰｆｌＭ１部位でヒトαＬプラスミド（ｐＲＫＬＦＡαｍ）内へ挿入される。ＧＳＧＳＧをコードするＤＮＡ配列の正確な挿入は、配列分析によって確認される。

＜実施例５：Ｉドメインが欠如しているＬＦＡ−１のＩＣＡＭ−１もしくは化合物２Ｂへの結合＞
２９３細胞は、β２コンストラクト単独（モック）、又は野生型αＬコンストラクト（ｗｔ）もしくはＩドメインが欠けているαＬコンストラクト（Ｉ−ｌｅｓｓ）いずれかを用いてトランスフェクトされ、３日間にわたり回復させる。これらの細胞は、剥離され、接着緩衝液中に再懸濁される（０．０２ＭのＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．２、０．１４ＭのＮａＣｌ、０．２％のグルコース）。ＩＣＡＭ−１−Ｉｇが結合したプレートへの結合は、（Edwards et al.1998）に記載される如く実施される。化合物２Ｂの結合のために、丸底９６ウェルプレート内の１ウェル当たり、０．５％のＢＧＧ、０．１ｍＭのＭｎＣｌ_２、１□ｇ／ｍＬの抗β２活性化抗体ＭＥＭ−４８、及び１μＭの化合物２Ｂを含む接着緩衝液中に、２×１０^５細胞が加えられる。これらの細胞は、３７℃で１時間インキュベートされ、低温ＰＢＳで洗浄され、１％のホルムアルデヒド／ＰＢＳで固定される。細胞は次に、１：５００の希釈率のヒツジ抗フルオレセイン−ＨＲＰを用いて室温で１時間インキュベートされ、ＰＢＳで洗浄され、ＴＭＢとともに１５分間インキュベートされる。この反応は、１ＭのＨ_３ＰＯ_４で停止し、４５０ｎｍで読み取られる。同時に、トランスフェクタントは、表面発現したαＬ／β２複合体の構造的完全性、及びＩドメインの存在もしくは不在について、公知の結合エピトープを有する抗体のパネルを用いるＦＡＣＳ分析によって試験される。

＜実施例６：ストレプトゾトシン誘導型ラット糖尿病性網膜症モデル＞
１５匹の成体実験用ラット（スプラーグドーリー）は、腹腔内に、１日目にストレプトゾトシン（ＳＺＴ）とともに６５ｍｇ／ｋｇ注入されることにより、高血糖性とされ、糖尿病が誘発される。５つの追加的なラットは、類似の量の生理食塩水で処理され、非糖尿病対照群が作製される。その後、毎日、計６日間、８匹の糖尿病ラットに、各眼に適切な担体媒体物中のＬＦＡ−１アンタゴニストが滴下される。７匹の糖尿病動物には、同じ投与スケジュールに基づき、同量の担体媒体物単独が同様に滴下される。非糖尿病対照群の動物には、担体媒体物が単独で滴下され、正常血糖のままである。

１４日目に、全動物の眼は、蛍光眼底血管造影法によって検査される。３群からの全ての動物は、その後犠牲となり、それらの眼は外科的に除去され、網膜組織がそれら眼から単離される。網膜組織は、マイクロピクトグラフ（micropictograph）によって検査される。微小血管系の異常が糖尿病対照の角膜組織内に進行する程度、糖尿病治療群におけるＬＦＡ−１アンタゴニストの投与によるそれらの阻害、及び正常血糖性対照群との比較は、顕微鏡写真の標準化形態計測による解析によって定量化される。

＜実施例７：ヒトＴ細胞接着アッセイ＞
Ｔ細胞接着アッセイは、ヒトＴリンパ球細胞系ＨｕＴ７８（ＡＴＣＣ ＴＩＢ−１６１）を用いて実施される。ヤギ抗ＨｕＩｇＧ（Ｆｃ）は、ＰＢＳ中で２μｇ／ｍｌに希釈され、９６ウェルプレートは、５０μｌ／ウェルで１時間かけて３７℃でコーティングされる。プレートは、ＰＢＳで洗浄され、ＰＢＳ中１％のＢＳＡを用いて室温で１時間にわたりブロックされる。５ドメインＩＣＡＭ−Ｉｇは、ＰＢＳ中で１００ｎｇ／ｍＬに希釈され、５０μｌ／ウェルが４℃でプレートＯ／Ｎへ加えられる。ＨｕＴ７８細胞は、１００ｇで遠心分離され、細胞ペレットが５％ＣＯ_２インキュベーター内で５ｍＭのＥＤＴＡにより約５分間にわたり３７℃で処理される。細胞は、０．１４ＭのＮａＣｌ、０．０２ＭのＨｅｐｅｓ、０．２％のグルコース、及び０．１ｍＭのＭｎＣｌ_２（アッセイ緩衝液）で洗浄され、遠心分離される。細胞はアッセイ緩衝液中で３．０×１０^６ｃ．ｍＬへ再懸濁される。インヒビターは、アッセイ緩衝液中で２×の最終濃度へ希釈され、室温で３０分間にわたりＨｕＴ７８細胞と一緒にプレインキュベートされる。１００μＬ／ウェルの細胞及びインヒビターがプレートに加えられ、室温で１時間インキュベートされる。１００μｌ／ウェルのＰＢＳが加えられ、プレートが密封され、５分間にわたり１００ｇで反転され遠心分離される。付着しなかった細胞はプレートからはじき飛ばされ、過剰のＰＢＳはペーパータオル上に拭き取られる。６０μｌ／ウェルのｐ−ニトロフェニルｎ−アセチル−β−Ｄ−グルコサミニド（１００ｍＬのクエン酸緩衝液に対し０．２５７ｇ）がプレートに加えられ、３７℃で１．５時間インキュベートされる。酵素反応は９０μｌ／ウェルの５０ｍＭのグリシン／５ｍＭのＥＤＴＡを用いて停止され、４０５ｎＭでプレートリーダーにて読み取られる。５ｄＩＣＡＭ−ＩｇへのＨＵＴ７８細胞の接着は、Landegren, U. (1984). J. Immunol. Methods 57, 379-388のｐ−ニトロフェニルｎ−アセチル−β−Ｄ−グルコサミニド法を用いて測定される。結果は表１（表１−１乃至表１−１０）に示される。

上記表１に示されるスケールは以下のＥＣ_５０値を示し：*は３μＭ以下であり、**は３００ｎＭ以下であり、***は１００ｎＭ以下であり、****は５０ｎＭ以下である。
表内のスケールは、以下の溶解度を示し：＋は１０ｍｇ／ｍＬより大きく、＋＋は５０ｍｇ／ｍＬより大きく、＋＋＋は１００ｍｇ／ｍｌよりも大きい。

＜実施例８：ヒト末梢血中単球（ＰＢＭＣ）からのサイトカインの抗原刺激放出のインビトロ抑制＞
本発明の直接的競合ＬＦＡ−１アンタゴニストは、炎症性サイトカインの放出を抑制するその能力が、ヒトブドウ球エンテロトキシンＢ（ＳＥＢ）で刺激されたヒト菌血中単球（ＰＢＭＣ）において、評価される。アンタゴニストの原液であるレバミピド（粘膜保護剤）、及びシクロスポリンＡ（ＣｓＡ）が培養培地に調製され、希釈液が培養培地の添加によって調製されることにより、所望の濃度が達成される。陰性対照は、ＳＥＢ刺激無しに調製される。媒体（０．２５％ＤＭＳＯ／培地）を用いたＳＥＢ刺激は、陽性対照として使用される。

ヒトＰＢＭＣは、凍結保存培地において冷凍されていたものが解凍され、ＲＰＭＩ培養培地（成長培地において１０％ＦＢＳを含む）を用いて洗浄され、１８０μｌ培養培地を含む２０，０００細胞／ウェルにおいて９６ウェルプレート上に蒔かれる。細胞はアンタゴニスト（レバミピドもしくはＣｓＡ）の存在下で、ＳＥＢとの刺激前に１時間インキュベートされる。ＳＥＢが１ｎｇ／ｍｌで添加され、細胞上清が６、１６、及び４８時間の時点で採集される。アッセイ上清におけるサイトカインレベルは、Ｌｕｍｉｎｅｘマルチプレックスアッセイを用いて決定される。

アンタゴニストは、用量増加に伴う炎症性サイトカイン（特にＴ細胞制御サイトカイン、ＩＬ−２、及びＩＬ−４）の放出の潜在的な抑制を示す。結果は、表２、３、及び４に示され、図１１に図示される。直接的競合ＬＦＡ−１アンタゴニストを用いた５０％を超えて阻害されるサイトカイン放出のパターンは、ＣｓＡと比較してみられるものと類似する。この類似性の例外は、ＩＬ−３、ＩＬ−６、及びＩＬ−１２ｐ４０であり、Ｔ細胞介在性炎症に対して重要であることが示されていない。

＜実施例９：ＬＦＡ−１アンタゴニストの製剤＞
本発明の直接的競合ＬＦＡ−１アンタゴニストは、様々な経路による投与用のゲル、ローション、軟膏、及び溶液として投与するための幾つかの組成物に製剤され、この様々な経路とは、局所、滴下を介して、エアロゾル、経皮パッチ、挿入を介して、もしくは経口投与を含むがこれらに限定されない。

＜実施例１０ 局所塗布後、本発明のＬＦＡ−１の直接的競合アンタゴニストのインビトロ経皮吸収＞
インビボの局所塗布後の生物学的利用能が、インビトロ経皮吸収試験を用いて評価され、これには、出典Skelly et al., Pharmaceutical Research 1987 4(3): 265-276, 「FDA and AAPS Report of the Workshop on Principles and Practices of In-Vitro Percutaneous Penetration Studies: Relevance to Bioavailability and Bioequivalence」の手順が用いられる。

製剤１−９は、５ｍｇ／ｃｍ^２の単一臨床関連用量（３０−３５μｇ用量に相当する）において、単一ドナーから切除された皮節ヒト皮膚組織に適用される。組織の厚みの範囲は、０．０２３乃至０．０３９インチ（０．５８４乃至０．９９１ｍｍ）であり、厚み０．０３０＋／−０．００４インチ（０．７７３＋／−０．１１１ｍｍ）の平均＋／−標準偏差であり、変動係数１４．４％である。組織サンプルは、Ｂｒｏｎａｕｇｈフロースルー拡散細胞上に載置される。細胞は、循環型ウォーターバスを用いて３２℃の一定温度で維持される。細胞は、０．６４ｃｍ^２の公称拡散面積を有する。ｐＨ７．４のＰＢＳは、０．１％のアジ化ナトリウム及び４％のウシ血清アルブミンとともに、載置された組織の下に受容体相として用いられる。新たな受容体相が継続して組織下でポンプされ、その流速は公称１．０ｍｌ／時間であり、６時間間隔で採集される。受容体相が分析のために採集される。

組織サンプルは、製剤１−９に２４時間さらされる。その時間点において角質層上に存在する過剰な製剤は、Ｄ−Squameストリッピングディスクで取り除かれる。テープストリップは廃棄される。表皮及び真皮は、鈍的切開によって分離される。表皮、真皮、及び受容体相は、ＬＦＡ−１アンタゴニストの含有量について分析される。結果は、表１１に示される。

製剤９を除く全ての製剤（９９％のＤＭＳＯを含む）のＬＦＡ−１アンタゴニストの組織浸透レベル（受容体相）は、０．５４ｎｇ／ｍｌ（投与量の０．０１３％に相当する）の定量制限より下である。製剤９は、反対に、投与量の１．４％という条件下では、２４時間の曝露期間にわたって皮膚組織の全層を超えて透過する。

２４時間の曝露期間にわたるＬＦＡ−１アンタゴニストの表皮沈着は、非常に高く、表皮の上層に保持された高割合の投与量に一致する。表１０に報告されるレベルは、小量のサンプルから得られるものであり、再分析することができず、したがって、表皮に存在する薬物量を低く見積もっていると考えられる。

真皮への分析データは、ＬＦＡ−１アンタゴニストのために構築される直線範囲内に収まり、定量的である。２４時間の曝露後のＬＦＡ−１アンタゴニストの真皮沈着は、投与量の０．６６％（製剤６、０．２５８μg／ｃｍ^２）乃至４．４％（製剤７、３４．３μg／ｃｍ^２）である。真皮におけるＬＦＡ−１アンタゴニストの濃度は、真皮における製剤１乃至９に関し、６．７μＭ（製剤６）もしくはそれより大きい（即ち、製剤７は、真皮において５４．１μＭの濃度を提供する）として計算される。これらの濃度は、実施例７に示されるとともに表１に対応するＬＦＡ−１アンタゴニストのクラスによる炎症性サイトカインの放出を阻害する際の半分最大効果に関する、インビトロのＥＣ５０濃度を軽く超える。したがって、これらの結果は、１％Ｗ／ＷのＬＦＡ−１アンタゴニストを含む各種製剤の能力を予測し、サイトカイン放出のインビボ抑制を治療的に有効なレベルにおいて提供する。

＜実施例１１：Ｔ細胞増殖アッセイ＞
このアッセイは、抗原提示細胞と相互作用すると、Ｔ細胞受容体及びＬＦＡ−１の関連によって誘導される活性化に起因するリンパ球増殖のインビトロモデルである（Springer, Nature 346: 425 (1990)）。

マイクロタイタープレート（Ｎｕｎｃ９６ウェルＥＬＩＳＡ認定）は、無菌ＰＢＳ中の５０μＬの２μｇ／ｍＬのヤギ抗ヒトＦｃ（ＣａｌｔａｇＨ１０７００）及びＣＤ３に対する５０μＬの０．０７μｇ／ｍＬのモノクローナル抗体（Immunotech０１７８）を用いて４℃で一晩かけてプレコーティングされる。翌日、コーティング溶液が吸引される。次にプレートがＰＢＳで２回洗浄され、１００μＬの１７ｎｇ／ｍＬの５ｄ−ＩＣＡＭ−Ｉｇが３７℃で４時間にわたり加えられる。プレートは、ＣＤ４＋Ｔ細胞を添加する前にＰＢＳで２回洗浄される。末梢血由来のリンパ球は、健常ドナーから採血したヘパリン添加全血から分離される。代替法は、白血球泳動法を通して健常ドナーから全血を入手する方法である。血液は、食塩水で１：１に希釈され、層形成し、ＬＳＭ上で３０分間にわたり２５００×ｇで遠心分離される（１００ｍＬにつき６．２ｇのFicoll及び９．４ｇのジアトリゾ酸ナトリウム）（Organon Technica、ニュージャージー州）。単球は、骨髄性細胞枯渇試薬法を用いて枯渇される（Myeloclear, Cedarlane Labs、ホーンビー、オンタリオ州、カナダ）。ＰＢＬは、９０％の熱不活化ウシ胎児血清及び１０％のＤＭＳＯ中に再懸濁され、アリコート作製され、そして液体窒素中に保存される。解凍後、細胞は１０％熱不活化ウシ胎児血清（Intergen、パーチェス、ニューヨーク州）、１ｍＭのピルビン酸ナトリウム、３ｍＭのＬ−グルタミン、１ｍＭの非必須アミノ酸、５００μｇ／ｍｌのペニシリン、５０μｇ／ｍｌのストレプトマイシン、５０μｇ／ｍｌのゲンタマイシン（Gibco）が補充されたＲＰＭＩ１６４０培地（Gibco、グランドアイランド、ニューヨーク州）中に再懸濁される。

ＣＤ４＋Ｔ細胞の精製は、負の選択法（ヒトＣＤ４セルリカバリーカラムキット# CL110-5 Accurate）によって入手される。マイクロタイタープレートの１ウェル当たり１００，０００個の精製されたＣＤ４＋Ｔ細胞（純度９０％）が、１００ｍＬの培養培地（１０％の熱不活化ＦＢＳ（Intergen）、０．１ｍＭの非必須アミノ酸、１ｎＭのピルビン酸ナトリウム、１００単位／ｍＬのペニシリン、１００μｇ／ｍＬのストレプトマイシン、５０μｇ／ｍＬのゲンタマイシン、１０ｍＭのＨｅｐｅｓ及び２ｍＭのグルタミンを補給したＲＰＭＩ１６４０（Gibco））中、５％ＣＯ_２中で３７℃にて７２時間にわたり培養される。インヒビターは、培養開始時にプレートに加えられる。これらの培養中の増殖応答は、細胞を採取する前の６時間にわたり１μＣｉ／ウェルの滴定チミジンを添加することによって測定される。放射能標識の取り込みは、液体シンチレーション計数によって測定される（Packard ９６ウェルハーベスター及びカウンター）。結果は、分当たりのカウント（ｃｐｍ）で表される。

＜実施例１２：インビトロ混合リンパ球培養モデル＞
移植のインビトロモデルである混合リンパ球培養モデル（A. J. Cunningham, 「Understanding Immunology, Transplantation Immunology」 pages 157-159 (1978)は、ヒト混合リンパ球応答の増殖群及びエフェクター群の両方において様々なＬＦＡ−１アンタゴニストの作用について試験する。

細胞の単離：末梢血（ＰＢＭＣ）由来の単核球は、健常ドナーから採血したヘパリン添加全血から分離される。血液は食塩水で１：１に希釈され、層形成し、ＬＳＭ上で３０分間にわたり２５００×ｇで遠心分離される（１００ｍＬにつき６．２ｇのFicoll及び９．４ｇのジアトリゾ酸ナトリウム）（Organon Technica、ニュージャージー州）。代替法は、白血球泳動法を通して健常ドナーから全血を入手する方法である。ＰＢＭＣは、上述したように分離され、９０％の熱不活化ウシ胎児血清及び１０％のＤＭＳＯ中に再懸濁され、アリコート作製され、そして液体窒素中に保存される。解凍後、細胞は１０％熱不活化ウシ胎児血清（Intergen、パーチェス、ニューヨーク州）、１ｍＭのピルビン酸ナトリウム、３ｍＭのＬ−グルタミン、１ｍＭの非必須アミノ酸、５００μｇ／ｍｌのペニシリン、５０μｇ／ｍｌのストレプトマイシン、５０μｇ／ｍｌのゲンタマイシン（Gibco）が補充されたＲＰＭＩ１６４０培地（Gibco、グランドアイランド、ニューヨーク州）中に再懸濁される。

混合リンパ球応答（ＭＬＲ）：一方向ヒト混合リンパ球培養は、９６ウェルの平底マイクロタイタープレート内で構築される。１．５×１０^５のレスポンダーＰＢＭＣは、２００μＬの完全培地中で、同等数の同種照射された（３，０００ラッドで３分５２秒間）スティミュレーターＰＢＭＳｃと一緒に共培養される。ＬＦＡ−１アンタゴニストは培養開始時に加えられる。培養は、３７℃の５％ＣＯ_２中で６日間にわたりインキュベートされ、次に６時間にわたり１ＭＣｉ／ウェルの３Ｈ−チミジン（６．７Ｃｉ／ｍｍｏｌ、ＮＥＮ、ボストン、マサチューセッツ州）を用いてパルスされる。培養は、Packardセルハーベスター（Packard、キャンベラ、カナダ）上に採取される。［^３Ｈ］ＴｄＲの取り込みは、液体シンチレーション計数によって測定される。結果は、分当たりのカウント（ｃｐｍ）で表示される。

＜実施例１３：ジャーカット細胞を用いたＴ細胞接着アッセイ＞
本研究の目的は、インビトロ曝露後、ジャーカット細胞のＩＣＡＭ−１への付着に対するＬＦＡ−１アンタゴニストの抗接着特性を評価することである。
ＬＦＡ−１アンタゴニストと陽性対照の原液は、ＤＭＳＯ／水（１：１）において調製され、アッセイ培地に希釈され、その結果生じた希釈物は、アッセイ培地の添加によって調製され、所望の濃度となる。報告されたＬＦＡ−１アンタゴニストは、陽性対照として使用される。

ジャーカット細胞は、８μＭのＢＣＥＣＦ−ＡＭ（２’，７’−ビス−(２−カルボキシエチル)−５−(及び−６)− カルボキシフルオレセイン）溶液で成長培地において室温で１５分にわたり標識付けられる。標識細胞は、９６ウェルプレートの各ウェル（各ウェルに５００，０００細胞）内の７０μＬのアッセイ培地において、アッセイ培地における７０μＬのＬＦＡ−１アンタゴニストもしくは陽性対照とともに、３７℃で３０分間インキュベートされる。本蛍光標識ジャーカット細胞懸濁液の１００μＬアリコートは、ＬＦＡ−１アンタゴニストもしくは陽性対照の存在下で９６ウェルプレートのウェル内に入ることが可能であり、この９６ウェルプレートは、Ｆｃキメラとして発現する組換えヒトＩＣＡＭ−１で、１時間かけて３７℃でコーティングされたものである。非接着細胞は、洗浄、及び１００ｇで１分間遠心分離することによって取り除かれる。接着細胞は、蛍光プレートリーダーにおける接着蛍光単位として決定される。

＜実施例１４ 局所適用を介した本発明の直接的競合ＬＦＡ−１アンタゴニストの血流への皮膚送達＞
検査は、皮膚上の局所適用を介した本発明の直接的競合ＬＦＡ−１アンタゴニストの血流への送達を決定するために実施される。ゲル（製剤＃１として製剤される、表５）、ローション（製剤＃３として製剤される、表６）、軟膏（製剤＃５として製剤される、表６）、及び１％ＤＭＳＯ溶液（対照）製剤は、雄のスプラーグドーリーラットにおいて評価され、表１２に示される。

（用量投与） 動物は、本研究のために絶食させていない。全ての単回用量及び複数回用量は、固定的に投与される（２００μＬ製剤／動物／用量）。ロード及び空用量の装置重量は、投与される実際の製剤の重量を決定するために記録される。

（皮膚） 群１乃至４（群１（ゲル）；群２（軟膏）；群３（ローション）；群４（ＤＭＳＯ）、の１日研究、データ示さず）における皮膚投与に関し、各動物は、１日目に背面皮膚において単回局所塗布を受ける。群６乃至９（群６（ゲル）；群７（軟膏）；群８（ローション）；群９（ＤＭＳＯ、皮膚））における皮膚投与に関し、各動物は、背面皮膚に毎日３回の局所塗布（約４時間空けて）を７日間連続して受ける。

（皮内） 群５（ＤＭＳＯ、皮内）における各動物に関し、単回２００μＬの皮内用量が１日目に２回に分けて投与され、１００μＬの注入が、注射器と針を介して肩甲骨下領域の剃毛域に連続して投与される。

（サンプル採集：血液（全群）） 研究群に基づいた適用可能な最終用量投与のために、血液が、各動物から、投与前、投与後０．２５、０．５、１、２、及び４時間に採集される。

（サンプル採集：適用部位（皮膚群のみ）） 末梢血液サンプルのための犠牲後、被験物質製剤に曝露された皮膚切片が切除される。角質層及び皮膚表面上に残る任意の吸収されない被験物質製剤がテープストリッピングにより取り除かれる。ストリップは、各動物に対する１つのサンプルバイアル内に混合され、残りの皮膚切片は第２のサンプルバイアル内に配される。サンプルの重量が記録される。

（結果：）表１３におけるデータは、相当量の薬物が、試験製剤において皮膚を浸透し、真皮及び表皮内の毛細血管から吸収された後に血漿循環において検出されることを示す。

＜実施例１５ ラットの眼における薬物動態＞
ラットモデルは、眼における組織（特に、網膜）に対する直接的競合ＬＦＡ−１アンタゴニストの分布を測定するために使用される（S. P. Ayalasomayajula, and U. B. Kompella, European Journal of Pharmacology, (2003)」 Celecoxib, a selective cyclooxgenase-2 inhibitor, inhibits retinal vascular endothelial growth factor expression and vascular leakage in a streptozotocin- induced diabetic rat model」, 458: 283-289.を参照のこと）。本発明の^１４Ｃ放射性標識ＬＦＡ−１アンタゴニストの１％溶液製剤の一滴（製剤１２、表９、又は製剤１５、表１０）が、ラットの眼に投与され、放射活性が時間をかけて生じる。ｔ＝３０分及びｔ＝４時間のデータは、図１２に図示される。図１２において、各解剖領域で測定される放射性標識アンタゴニストの濃度は、標識に伴う解剖領域に対応するボックスのグレースケールの増加によって示される。このデータに関する数値は表１４に示され、１グラム組織ごとの放射性標識ＬＦＡ−１アンタゴニストのナノグラム等量である。

結果は、ＬＦＡ−１アンタゴニストの治療レベルが網膜において実現されることを示し、投与後４時間の時間点まで及び、ここで５０ｎｇ／ｇ濃度の薬物が網膜において見られる。これは、白血球接着の阻害及び糖尿病性黄斑浮腫／糖尿病性網膜症の機能の阻害に必要とされる１０ｎＭの予測閾値よりもはるかに高く、約２乃至６ｎＭのＨｕＴ７８細胞接着アッセイにおけるＩＣ_５０を伴うアンタゴニストに対するものである。

＜実施例１６：ヒトの第Ｉ相試験＞
健常な被験体が登録される。ＬＦＡ−１アンタゴニストの単回及び複数回両方の投与のランダム且つ制御された用量漸増試験が実施される。７人の被験体夫々のコホート（５治療、２プラセボ）は、無菌中性等張性緩衝水溶液として調製した各６−８用量レベルのＬＦＡ−１アンタゴニストで処置される。被験体は、１日目に単回滴下を受ける。サンプルは、その後の一週間にわたって薬物動態及び薬力学的評価のために入手される。８日目から始めて、被験体は、計１４日間にわたり同一用量のＬＦＡ−１アンタゴニストを毎日受ける。ＰＫ／ＰＤ評価、安全性実験室試験、眼科検査、角膜染色、及び蛍光眼底血管造影が評価される。

＜実施例１７：ヒトの第ＩＩ相試験＞
糖尿病性網膜症を患う成人被験体が、重要な対象／除外基準によって規定された糖尿病性黄斑変性を有する及び有さない被験体として２群に分けられ、登録される。ＬＦＡ−１アンタゴニストのランダム且つ制御された用量検索試験が実施される。３群の被験体には、担体媒体物単独か、又は中性緩衝等張性水溶液として調製したＬＦＡ−１アンタゴニストの２つの用量レベルのうちの１つかのいずれかが、１２週間にわたり毎日滴下される。被験体は、３カ月間のフォローアップ期間にわたり、蛍光眼底観察法、眼底撮影法、及び総合視力検査における安全性及び改善の証拠について追跡調査が行われる。

本発明のより好ましい実施形態が示され本明細書に記載されるが、当業者にとっては、このような実施形態がほんの一例として提供されていることは明らである。今では、本発明を逸脱することなく、多数の変動、変化、及び置換が、当業者には思い浮かぶことになる。本発明を実施する際、本発明の実施形態に対して各種の代替形態が使用されることは理解されるべきである。以下の請求の範囲は、本発明の範囲を定義すること、並びに、方法及び構造をこれら請求の範囲内に定義し、それらの同等物がこの範囲に含まれることを意図したものである。

Claims (1)

1. 明細書中に記載された発明。