JP2012505418A - 液体試験ストリップ及び方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】本液体試験ストリップはチャネルを上面に有する基板を備える。該チャネルは順次つながった第1領域、第2領域、及び第3領域を有する。第1抗体は該第1領域に入れられ、糖類とペルオキシダーゼは該第1領域又は該第2領域に入れられている。同じ抗原の第1抗体とは異なるエピトープを認識するための第2抗体は該第2領域に固定されている。光学基質と糖類オキシダーゼからなる基質試薬とは該第3領域に入れられている。
【選択図】図1B
Description
本発明とその好適な使用態様、他の目的、及び利点とは、添付の図面と実施形態の下記の詳細な説明を参照することで最も良く理解されるであろう。
ステップ21:検体1101を含む体液サンプルを準備する(図1Bに示すように)。
ステップ22:連続して配置された第1領域111、第2領域112、及び第3領域113を有する1つ以上のチャネル11を有する基板10を準備する。第1領域111は体液サンプルを導入するための領域であり、第1抗体1111を有する。第2領域112は中に第2抗体1121が固定されている。第1抗体1111と第2抗体1121とは体液サンプル中の検体1101の異なるエピトープを認識するよう構成されている。従って、第1抗体1111と第2抗体1121が同じ抗原を求めて互いに競合して抗原の認識を妨げない限り、第1抗体1111と第2抗体1121の両方が単クローン抗体(mAbs)か多クローン抗体(pAbs)のいずれかであってよい。光学基質1131と糖類オキシダーゼ1133からなる基質試薬1132とが第3領域113に入れられている。ペルオキシダーゼ1113はHRP(セイヨウワサビペルオキシダーゼ)、AP(アスコルビン酸ペルオキシダーゼ)、又は水素ペルオキシダーゼであってよい。光学基質1131は好ましくは5‐アミノ‐2,3‐ジヒドロ‐1,4‐フタラジンジオンであり、糖類1112は好ましくはグルコースであり、糖類オキシダーゼ1133はグルコースオキシダーゼである。また、糖類1112とペルオキシダーゼ1113は、第1実施形態で説明したのと同様にチャネル11に亘って配置される(図1B、図1F、図1G、及び図1Hを参照)。
10 基板
11 チャネル
111 第1領域
112 第2領域
113 第3領域
1101 検体
1111 第1抗体
1112 糖類
1113 ペルオキシダーゼ
1121 第2抗体
1131 光学基質
1132 基質試薬
1133 糖類オキシダーゼ
Claims (60)
- 連続して配置された、体液サンプルを導入するために使用される第1領域と、第2領域と、第3領域とを有する1つ以上のチャネルを有する基板を備える液体試験ストリップであって、
該体液サンプル中の検体を認識するために該第1領域に入れられた第1抗体と、
該第1領域又は該第2領域に入れられた糖類と、
該第1領域又は該第2領域に入れられたペルオキシダーゼと、
該体液サンプル中の検体を認識するために該第2領域内に固定された第2抗体と、
該第3領域に入れられた光学基質及び基質試薬と
を備え、
該第1抗体と該第2抗体とは該体液サンプル中の該検体の異なるエピトープを認識するよう構成され、該基質試薬は糖類オキシダーゼからなり、
該検体を含む該体液サンプルを該チャネルに導入すると直ちに、該第1抗体、該糖類、及び該ペルオキシダーゼは該体液サンプルと一緒に流れ、該ペルオキシダーゼの一部は、該第1抗体、該検体、及び該第2抗体と結合して該第2領域内に保持され、該ペルオキシダーゼの残りは該体液サンプルと一緒に該第3領域へ流れ、該糖類は該第3領域に到達し該糖類オキシダーゼの触媒作用で過酸化水素を生成し、次に該光学基質は該第3領域に到達した該ペルオキシダーゼの触媒作用により該過酸化水素と反応して光学信号を生成する、液体試験ストリップ。 - 前記第1抗体と前記ペルオキシダーゼは前記第1領域に入れられ、互いに共役する請求項1に記載の液体試験ストリップ。
- 前記第1抗体はビオチンと更に共役し、前記ペルオキシダーゼはアビジン、ストレプトアビジン、及びニュートラアビジンからなるグループから選択された分子と共役する請求項1に記載の液体試験ストリップ。
- 前記第1抗体は単クローン抗体又は多クローン抗体であり、前記第2抗体は単クローン抗体又は多クローン抗体である請求項1に記載の液体試験ストリップ。
- 前記ペルオキシダーゼはHRP(セイヨウワサビペルオキシダーゼ)、AP(アスコルビン酸ペルオキシダーゼ)、及び水素ペルオキシダーゼからなるグループから選択される請求項1に記載の液体試験ストリップ。
- 前記光学基質は5‐アミノ‐2,3‐ジヒドロ‐1,4‐フタラジンジオンである請求項1に記載の液体試験ストリップ。
- 前記糖類はグルコースであり、前記糖類オキシダーゼはグルコースオキシダーゼである請求項1に記載の液体試験ストリップ。
- 繊維層が前記第1領域の底部に設けられ、前記第1抗体は該繊維層に固定されている請求項1に記載の液体試験ストリップ。
- ニトロセルロース層が前記第2領域と第3領域の各々の底部に設けられ、前記第2抗体は該第2領域の該ニトロセルロース層に固定され、前記基質試薬は該第3領域の該ニトロセルロース層に固定されている請求項1に記載の液体試験ストリップ。
- 前記ニトロセルロース層はニトロセルロース膜である請求項9に記載の液体試験ストリップ。
- 前記ニトロセルロース層は、空洞マトリックス構造を有し、ニトロセルロース溶液を前記第2領域の底部と前記第3領域の底部に注ぎ込み、次に乾燥処理することで作られる請求項9に記載の液体試験ストリップ。
- 前記ニトロセルロース溶液はニトロセルロース粉末をエステル及びケトンを含む溶剤と混合することで調製される請求項11に記載の液体試験ストリップ。
- 前記ニトロセルロース粉末はエステル及びケトンを含む溶剤と1:9の体積比で混合される請求項12に記載の液体試験ストリップ。
- 前記第2抗体は、粉末の形態であり、該第2抗体を含む反応溶液を前記第2領域の前記ニトロセルロース層に注入し次に乾燥処理することで該第2領域の該ニトロセルロース層の空洞マトリックス構造内に入れられている請求項13に記載の液体試験ストリップ。
- 前記乾燥処理は凍結乾燥処理である請求項14に記載の液体試験ストリップ。
- 前記乾燥処理は空気乾燥処理である請求項14に記載の液体試験ストリップ。
- 前記第2抗体は、粉末の形態であり、該第2抗体を含む反応溶液を前記ニトロセルロース溶液と混合し次に乾燥処理することで、該ニトロセルロース溶液が前記ニトロセルロース層を形成し該第2抗体は前記第2領域の該ニトロセルロース層内に粉末の形態で残され、これにより該第2抗体は該第2領域の該ニトロセルロース層の空洞マトリックス構造内に入れられている請求項11に記載の液体試験ストリップ。
- 前記乾燥処理は凍結乾燥処理である請求項17に記載の液体試験ストリップ。
- 前記乾燥処理は空気乾燥処理である請求項17に記載の液体試験ストリップ。
- 前記基質試薬は、粉末の形態であり、該基質試薬を含む反応溶液を前記第3領域の前記ニトロセルロース層に注入し、次に乾燥処理することで該第3領域の該ニトロセルロース層の空洞マトリックス構造内に入れられている請求項11に記載の液体試験ストリップ。
- 前記乾燥処理は凍結乾燥処理である請求項20に記載の液体試験ストリップ。
- 前記乾燥処理は空気乾燥処理である請求項20に記載の液体試験ストリップ。
- 前記基質試薬は、粉末の形態であり、該基質試薬を含む反応溶液を前記ニトロセルロース溶液と混合し次に乾燥処理することで、該ニトロセルロース溶液が前記ニトロセルロース層を形成し該基質試薬は前記第3領域の該ニトロセルロース層内に粉末の形態で残され、これにより該基質試薬は該第3領域の該ニトロセルロース層の空洞マトリックス構造内に入れられている請求項11に記載の液体試験ストリップ。
- 前記乾燥処理は凍結乾燥処理である請求項23に記載の液体試験ストリップ。
- 前記乾燥処理は空気乾燥処理である請求項23に記載の液体試験ストリップ。
- 前記第2領域と第3領域は各々0.3mm以上の幅を有する請求項11に記載の液体試験ストリップ。
- 前記基板は生体適合材料でできている請求項11に記載の液体試験ストリップ。
- 前記チャネルは3μm〜50μmの範囲の表面粗さを有する請求項11に記載の液体試験ストリップ。
- 前記第2領域の前記ニトロセルロース層は前記第3領域のニトロセルロース層と同じ平均厚みを有する請求項11に記載の液体試験ストリップ。
- 前記チャネルは、余分な体液サンプルを収容するための空洞マトリックス構造を有するニトロセルロース層が底部に形成された第4領域を更に有する請求項29に記載の液体試験ストリップ。
- 検体を含む体液サンプルを準備するステップと;
連続して配置された、体液サンプルを導入するために使用される第1領域と、第2領域と、第3領域とを有する1つ以上のチャネルを有する基板を準備するステップと、
ここで、該基板は、
該体液サンプル中の該検体を認識するために該第1領域に入れられた第1抗体と、
該第1領域又は該第2領域に入れられた糖類と、
該第1領域又は該第2領域に入れられたペルオキシダーゼと、
該体液サンプル中の該検体を認識するために該第2領域内に固定された第2抗体と、
該第3領域に入れられた光学基質及び基質試薬と
を更に備え、
該第1抗体と該第2抗体とは該検体の異なるエピトープを認識するよう構成され、該基質試薬は糖類オキシダーゼからなり;
該体液サンプルを該チャネルの該第1領域に導入して、該第1抗体、該糖類、及び該ペルオキシダーゼが該体液サンプルと一緒に流れるのを可能にするステップと;
該検体、該第1抗体、該第2抗体、及び該ペルオキシダーゼの一部は互いに結合して該第2領域内に保持され、
該糖類、結合していない第1抗体、及び該ペルオキシダーゼの結合していない残りは、該体液サンプルと一緒に該第3領域へ流れ、該糖類が該ペルオキシダーゼの触媒作用で過酸化水素を生成し、
次に該光学基質が該第3領域に到達した該ペルオキシダーゼの触媒作用により該過酸化水素と反応して光学信号を生成するようにさせるステップと;
該生成された光学信号を検出するステップと
を含む検出方法。 - 前記第1抗体と前記ペルオキシダーゼは前記第1領域に入れられ、互いに共役する請求項31に記載の検出方法。
- 前記第1抗体はビオチンと更に共役し、前記ペルオキシダーゼはアビジン、ストレプトアビジン、及びニュートラアビジンからなるグループから選択されたアビジンと共役する請求項31に記載の検出方法。
- 前記第1抗体は単クローン抗体又は多クローン抗体であり、前記第2抗体は単クローン抗体又は多クローン抗体である請求項31に記載の検出方法。
- 前記ペルオキシダーゼはHRP(セイヨウワサビペルオキシダーゼ)、AP(アスコルビン酸ペルオキシダーゼ)、及び水素ペルオキシダーゼからなるグループから選択される請求項31に記載の検出方法。
- 前記光学基質は5‐アミノ‐2,3‐ジヒドロ‐1,4‐フタラジンジオンである請求項31に記載の検出方法。
- 前記糖類はグルコースであり、前記糖類オキシダーゼはグルコースオキシダーゼである請求項31に記載の検出方法。
- 繊維層が前記第1領域の底部に設けられ、前記第1抗体は該繊維層に固定されている請求項31に記載の検出方法。
- ニトロセルロース層が前記第2領域と第3領域の各々の底部に設けられ、前記第2抗体は該第2領域の該ニトロセルロース層に固定され、前記基質試薬は該第3領域の該ニトロセルロース層に固定されている請求項31に記載の検出方法。
- 前記ニトロセルロース層はニトロセルロース膜である請求項39に記載の検出方法。
- 前記ニトロセルロース層は、空洞マトリックス構造を有し、ニトロセルロース溶液を前記第2領域の底部と前記第3領域の底部に注ぎ込み、次に乾燥処理することで作られる請求項39に記載の検出方法。
- 前記ニトロセルロース溶液はニトロセルロース粉末をエステル及びケトンを含む溶剤と混合することで調製される請求項41に記載の検出方法。
- 前記ニトロセルロース粉末はエステル及びケトンを含む溶剤と1:9の体積比で混合される請求項42に記載の検出方法。
- 前記第2抗体は、粉末の形態であり、該第2抗体を含む反応溶液を前記第2領域の前記ニトロセルロース層に注入し次に乾燥処理することで該第2領域の該ニトロセルロース層の空洞マトリックス構造内に入れられている請求項43に記載の検出方法。
- 前記乾燥処理は凍結乾燥処理である請求項44に記載の検出方法。
- 前記乾燥処理は空気乾燥処理である請求項44に記載の検出方法。
- 前記第2抗体は、粉末の形態であり、該第2抗体を含む反応溶液を前記ニトロセルロース溶液と混合し次に乾燥処理することで、該ニトロセルロース溶液が前記ニトロセルロース層を形成し該第2抗体は前記第2領域の該ニトロセルロース層内に粉末の形態で残され、これにより該第2抗体は該第2領域の該ニトロセルロース層の空洞マトリックス構造内に入れられている請求項41に記載の検出方法。
- 前記乾燥処理は凍結乾燥処理である請求項47に記載の検出方法。
- 前記乾燥処理は空気乾燥処理である請求項47に記載の検出方法。
- 前記基質試薬は、粉末の形態であり、該基質試薬を含む反応溶液を前記第3領域の前記ニトロセルロース層に注入し、次に乾燥処理することで該第3領域の該ニトロセルロース層の空洞マトリックス構造内に入れられている請求項41に記載の検出方法。
- 前記乾燥処理は凍結乾燥処理である請求項50に記載の検出方法。
- 前記乾燥処理は空気乾燥処理である請求項50に記載の検出方法。
- 前記基質試薬は、粉末の形態であり、該基質試薬を含む反応溶液を前記ニトロセルロース溶液と混合し次に乾燥処理することで、該ニトロセルロース溶液が前記ニトロセルロース層を形成し該基質試薬は前記第3領域の該ニトロセルロース層内に粉末の形態で残され、これにより該基質試薬は該第3領域の該ニトロセルロース層の空洞マトリックス構造内に入れられている請求項41に記載の検出方法。
- 前記乾燥処理は凍結乾燥処理である請求項53に記載の検出方法。
- 前記乾燥処理は空気乾燥処理である請求項53に記載の検出方法。
- 前記第2領域と第3領域は各々0.3mm以上の幅を有する請求項41に記載の検出方法。
- 前記基板は生体適合材料でできている請求項39に記載の検出方法。
- 前記チャネルは3μm〜50μmの範囲の表面粗さを有する請求項41に記載の検出方法。
- 前記第2領域の前記ニトロセルロース層は前記第3領域のニトロセルロース層と同じ平均厚みを有する請求項41に記載の検出方法。
- 前記チャネルは、余分な体液サンプルを収容するための空洞マトリックス構造を有するニトロセルロース層が底部に形成された第4領域を更に有する請求項59に記載の検出方法。
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