KR100241928B1 - 다공성 박막 위에 전극이 일체로 형성된 정량장치 및 이를 이용한 정량방법 - Google Patents

다공성 박막 위에 전극이 일체로 형성된 정량장치 및 이를 이용한 정량방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 시료가 크로마토그래피적으로 이동할 수 있는 다공성 박막 위에 전극이 일체로 형성된 정량장치 및 이를 이용하여 시료 중에 존재하는 대상물질을 정량하는 방법에 관한 것이다.
본 발명의 정량장치는 다공성 박막의 하단부에는 전처리층을 상단부에는 전극부를 도입한 것으로서, 시료 중의 대상물질을 다공성 박막의 하단부에 적용하여 크로마토그라피적 이동을 통해 전처리를 수행한 후, 상단부의 전극부에서 시료중의 대상물질에 의한 전기량의 변화를 측정함으로써 시료중 대상물질의 량을 정확하게 측정할 수 있다.
본 발명의 전극 조형물을 이용하면 시료의 전처리과정을 별도로 수행할 필요가 없으므로 측정과정이 간단하고, 측정시간이 단축되므로 단시간에 정확하게 대상물질의 정량적인 값을 얻을 수 있으며, 또한 측정이 용이하여 전문 분석요원이 필요없게 되므로 인건비를 줄일 수 있어 경제적이다.

Description

다공성 박막 위에 전극이 일체로 형성된 정량장치 및 이를 이용한 정량방법
제1도는 다공성 박막 위에 전류법 전극의 제조공정도.
제2(a)도는 제1도에 의해 제조된 전류법 전극의 정면도.
제2(b)도는 제2(a)도의 ㄱ-ㄱ′ 직선의 단면도.
제2(c)도는 제2(a)도의 ㄴ-ㄴ′ 직선의 단면도.
제2(d)도는 제2(a)도의 ㄷ-ㄷ′ 직선의 단면도.
제3도는 LDL 측정을 위한 일체형 전류법 전극계의 구조와 측정원리도.
제4도는 일반적인 산화 알루미늄 기판 위에 작동전극으로 전도성 탄소막을 도입한 전류법 전극의 과산화수소에 대한 순환 전압전류도.
제5도는 산화 알루미늄 기판 위에 형성된 전류법 전극의 과산화수소에 대한 감응성을 나타낸 것으로 0.7V의 전압을 걸어주고 0.2M 인산완충용액(pH 7.0)상에서 단일 전극의 과산화수소 농도변화에 대한 검정곡선도.
제6도는 다공성 박막 위에 형성된 전류법 전극의 과산화수소에 대한 감응성을 나타낸 것으로 0.7V의 전압을 걸어주고 전극별로 과산화수소 농도변화에 대한 검정곡선도.
제7도는 다공성 박막 위에 형성된 LDL 콜레스테롤 측정을 위한 전류법 전극계의 총 콜레스테롤중 LDL 콜레스테롤에 대한 감응성을 나타낸 것으로 0.7V의 전압을 걸어주고 전극별로 LDL 콜레스테롤의 농도변화에 대한 검정곡선도.
* 도면의 주요부분에 대한 부호의 설명
10 : 다공성 박막 11a∼11c : 절연막
12 : 작동전극 13 : 보조전극
14 : 기준전극 15 : 회로연결부
[발명의 목적]
[발명이 속하는 기술분야 및 그 분야의 종래기술]
본 발명은 시료가 크로마토그래피적으로 이동할 수 있는 다공성 박막 위에 전극이 일체로 형성된 정량장치 및 이를 이용하여 시료 중에 존재하는 대상물질을 정량하는 방법에 관한 것이다.
좀 더 상세하게는, 본 발명의 정량장치는 다공성 박막의 하단부에는 전처리층을 상단부에는 전극부를 도입한 것으로서, 시료중의 대상물질을 다공성 박막의 하단부에 적용하여 크로마토그래피적 이동을 통해 전처리를 수행한 후, 상단부의 전극부에서 시료중의 대상물질에 의한 전기량의 변화를 측정함으로써 시료중의 대상물질의 량을 정확하게 측정할 수 있다.
최근 질병을 진단하고 예방하거나, 식품화학 또는 공업화학분야에서 공정을 조정하기 위하여 또는 환경분야에서 분석하기 위하여 시료중의 유기물 또는 무기물 농도를 측정할 필요성이 증대되고 있다.
이와 같이 혈액 또는 뇨 등 생체시료, 환경시료, 공업시료 또는 식품시료 중에 존재하는 미량의 유기물 또는 무기물 농도를 측정하는 방법으로 초기에는 화학적 방법이 이용되었다. 그러나 이러한 화학적 방법은 혈액중에 존재하는 콜레스테롤 측정방법인 철염-황산 반응(iron salt-sulfuric acid reaction) 또는 p-톨루엔염-황산반응(p-toluene salt-sulfuric acid reaction) 등에서 알 수 있는 바와 같이 실험조건에 매우 민감하고, 다른 물질의 방해작용이 크며, 많은량의 시료가 필요하다는 단점이 있다. 이에 최근 들어서는 항체를 이용하는 면역학적 방법이나 효소를 이용하는 효소적 방법이 이용되고 있다. 이들은 사용되는 시료량이 매우 적고, 선택성과 정확성이 뛰어날 뿐만 아니라, 조작이 쉬워 널리 이용되고 있다.
이러한 면역학적 방법이나 효소적 방법은 그 결과를 직접 관찰할 수 없기 때문에 형광법(fluorometry), 비색측정법(colorimetry), 분광법(spectrometry), 전극계를 이용한 전기화학적방법 등을 이용하여 측정한다.
이들 중 다공성 박막(니트로셀루로오즈 종이, 거름종이 등)을 이용한 크로마토그래피법은 모세관 현상에 의한 시료의 유동화 과정에서 시료중 측정 대상물질을 측정하는데 방해가 되는 물질을 분리 혹은 제거할 수 있으며, 각종 전처리에 필요한 물질층의 도입이 용이하여 임신진단시약, 콜레스테롤 측정시약 등 각종 분야에서 널리 이용되고 있다. 그러나 다공성 박막을 이용한 크로마토그래피법은 주로 색변화에 의한 정성분석이나 발색량의 변화 정도를 눈으로 판단하는 비정량적인 방법에 이용되므로 정확한 수치를 알고자 하는 측정 시스템에 이용하기에는 부적합한 방법이다.
최근에는 시료중 대상물질을 정량하는 방법으로 전극계를 이용한 센서가 널리 이용되고 있다. 전극계를 이용하여 시료 중 대상물질을 정량하는 방법은 면역학적 방법이나 효소에 의해 일어나는 대상물질의 변화를 장착된 전극을 통하여 전기적으로 측정하는 것으로서, 선택성과 정확성이 뛰어난 장점이 있으나, 전처리층의 도입이 용이하지 않아서 시료의 전처리 과정을 수행할 수 없다는 단점이 있다. 전극계를 이용하여 정량하기 위해서는 전처리과정을 별도로 수행하여 시료가 전극계에 적용될 수 있는 상태로 만든 후 전극계에 적용해야만 하고, 이에 따라 전극계를 이용하는 경우에는 측정단계의 복잡화 및 전문요원의 필요성 등의 문제점이 발생한다.
[발명이 이루고자 하는 기술적 과제]
본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하기 위하여 제안된 것으로서, 전극계 측정방법에서 필수 불가결한 시료의 전처리과정과 전극계의 정량과정을 하나의 장치에서 모두 수행할 수 있는 정량장치 및 그 제조방법을 제공하는데 그 목적이 있다.
본 발명의 다른 목적은 이러한 정량장치를 이용하여 시료 중에 존재하는 대상물질을 정량하는 방법을 제공하는 것이다.
[발명의 구성 및 작용]
본 발명은 다공성 박막을 이용한 크로마토그래피법의 장점과 전극계를 이용한 전극법의 장점을 모두 이용하기 위하여 다공성 박막 위에 전극계를 직접 형성하는 일체형 전극을 개발하여 시료의 전처리 단계는 다공성 박막의 하단부에 전처리층을 도입함으로써 수행하고, 이와 같이 전처리층을 거치면서 측정이 용이하게 된 대상물질을 상단부의 전극부에서 전기량의 변화를 측정함에 의해 정량 분석하는 것을 특징으로 한다.
본 발명에 사용될 수 있는 다공성 박막은, 시료가 크로마토그래피적으로 이동할 수 있는 것이면 모두 가능하며, 그 중 니트로셀루로오즈 종이 또는 거름종이 등의 종이류, 친수성 고분자 등의 유기고분자류, 또는 흡습성 세라믹 등의 무기 고분자류가 바람직하며, 특히 니트로셀루로오즈 종이가 바람직하다.
다공성 박막의 하단부에는 각종 전처리층이 도입될 수 있다. 전처리층에는 시료중에서 측정에 방해가 되는 방해물질을 제거하는 층, 시료중 측정 대상물질을 전극이 감지할 수 있는 물질로 전환시키는 층, 전극이 측정 대상물질을 감지할 수 있는 최적의 조건을 만들어줄 수 있는 층 등이 있을 수 있다.
방해물질을 제거하는 층에는 시료 중에 존재하는 각종 항원과 반응하여 항원을 제거하는 항체층, 중금속과 반응하여 중금속을 제거하는 EDTA층 등이 있을 수 있고, 시료중 측정 대상물질을 전극이 감지할 수 있는 물질로 전환시킬 수 있는 층에는 효소층이 있을 수 있으며, 시료 중 측정 대상물질을 전극이 감지할 수 있는 최적의 조건으로 만들어주는 층에는 완충용액층 또는 계면활성제층 등이 있을 수 있다.
또한 다공성 박막의 상단부에는 전압전류법(voltammetry) 전극계, 폴라로그라피(polarography) 전극계, 전류법(amperometry) 전극계, 전위차법(potentiometry) 전극계, 전도도법(conductance method) 전극계 등이 형성될 수 있다.
이하 본 발명의 일 실시예로 다공성 박막 위에 형성되는 전극계 및 그 제조방법과 적용에 대해 설명한다.
전극계를 형성하는 전극 조형물의 구조는 제2(a)도 내지 제2(d)도에 나타낸 바와 같이 기판인 다공성 박막(10)과; 상기 다공성 박막(10)의 중앙부 및 하단부에 부착되어 시료의 투과에 의한 회로연결부(15)의 산화를 막아주는 절연막(11a)(11b)과; 상기 중앙부 절연막(11a)의 끝부분과 겹쳐 형성되는 작동전극(working electrode : 12), 보조전극(Counter electrode)(13) 및 기준전극(reference electrode)(14)과; 상기 전극(12∼14)을 장치의 회로와 연결하는 회로연결부(15)와; 상기 전극(12∼14)의 단락을 방지하는 절연막(11c)으로 이루어진다.
이와 같은 전극계의 제조방법을 제1도를 참조하여 상세하게 설명한다.
우선 니트로셀루로오즈 종이, 거름종이 등의 종이류, 친수성 고분자 등의 유기 고분자류, 및 흡습성 세라믹 등의 무기 고분자류 등과 같은 다공성 박막(10) 위에 은에폭시 등으로 이루어지는 회로연결부(15)가 시료의 투과로 인해 산화되는 것을 방지하기 위하여 절연막(11a)(11b)을 입혀준다(공정 1).
다음으로 전도성 탄소 페이스트(conducting carbon paste)나 산화 루세니움(RuO2) 페이스트 등의 중금속 산화물류와 금, 백금 등의 귀금속류 등을 이용하여 작동전극(12) 및 보조전극(13)을 형성하고 나서, 은/염화은(Ag/AgCl) 등을 사용하여 기준전극(14)을 형성한다(공정 2).
이때 작동전극(12), 보조전극(13) 및 기준전극(14)은 다공성 박막 위에 떨어진 시료가 이를 투과하여 반응해야 하므로 절연막(11a)의 끝부분과는 아주 조금 겹치고 다공성 박막(10) 위에 바로 형성되도록 한다.
다음으로 은(Ag) 등을 이용하여 이들 전극을 회로에 연결시켜 주기 위한 회로연결부(15)를 형성하고(공정 3), 마지막으로 전극의 단락을 방지하기 위하여 다시 한번 절연막(11c)을 입혀준다(공정 4).
각 공정에서 물질들은 실크 스크린법(silk screen method)에 의해 형성되고 성형한 후에는 일정온도(예 : 50∼150℃ 정도)에서 일정시간(예 : 약 15∼30분) 열처리를 하여 전극형성 물질 등의 구조 치밀화를 기하였다.
제2(a)도는 제1도의 공정에 의해 제작된 전극의 정면도이고, 제2(b)도는 ㄱ-ㄱ′ 직선의 단면도이며, 제2(c)도는 ㄴ-ㄴ′ 직선의 단면도이고, 제2(d)도는 ㄷ-ㄷ′ 직선의 단면도를 나타낸 것이다. 도면에서 볼 수 있는 바와 같이 회로연결부(15)는 아래 위로 절연막(11a)(11c)에 싸여 있어 시료의 투과에 의한 금속의 산화가 방지되며, 시료 면접부에 떨어진 시료가 다공성 박막(10) 위에서 모세관 현상에 의해 전극부에 도달하여 반응을 일으키게 됨을 알 수 있다.
상기와 같은 본 발명의 정량장치를 이용하여 시료 중 대상물질을 정량하는 방법을 혈중 콜레스테롤의 측정을 예를 들어 설명한다.
콜레스테롤의 정량방법은 하나의 예에 불과한 것으로 전처리층을 다양하게 도입함에 의하여 다양한 물질을 측정할 수 있음을 밝혀두는 바이다.
콜레스테롤에는 고밀도 지단백질(High Density Lipoprotein : 이하 HDL이라 한다), 저밀도 지단백질(Low Density Lipoprotein : 이하 LDL이라 한다) 및 초저밀도 지단백질(Very Low Density Lipoprotein : 이하 VLDL이라 한다)로 구성되며, 이중 HDL은 혈중농도가 증가할수록 동맥경화, 심근경색 등과 같은 혈관질환의 발병확률이 감소하며, LDL은 혈중농도가 증가할수록 혈액내의 혈전과 지방의 축적을 야기시키고 동맥경화를 일으키는 것으로 알려져 있다. 따라서 동맥경화 등을 진단하기 위하여서는 혈중 LDL의 농도 또는 혈중 HLD의 농도를 측정하는 것이 필요하며, 혈중 LDL의 농도를 측정하기 위해서는 HDL과 VLDL에 특이성이 있는 항체를 사용하여 이 두 지단백질을 제거한 후 LDL을 측정하여야 하고, 혈중 HDL의 농도를 측정하기 위해서는 LDL과 VLDL에 특이성이 있는 항체를 사용하여 이 두 지단백질을 제거한 후 HDL의 농도를 측정하여야 한다.
혈중 LDL의 농도를 측정하는 방법을 살펴보면 우선 HDL 항체 및 VLDL 항체를 이용하여 HDL과 VLDL을 제거한 후, 계면활성제를 가하여 콜레스테롤 에스테르로 변화시키고, 이어서 이 콜레스테롤 에스테르를 콜레스테롤 에스테레이즈(Cholesterol Esterase; 이하 CED라 한다)로 가수분해하여 콜레스테롤을 얻은 다음, 이 콜레스테롤을 콜레스테롤 옥시데이즈(Cholesterol Oxidase; 이하 COD라 한다)와 반응시키면 콜레스트-4-엔-3-온과 과산화수소를 발생하고, 발생된 과산화수소와 전류법 전극계가 산화, 환원반응을 하여 전류를 발생하게 된다. 상기 과정을 반응식으로 나타내면 다음과 같으며, 형성된 전극의 구조와 감응원리는 제3도에 나타내었다.
Figure kpo00002
전류법전극계를 이용한 H2O2의 산화환원 반응식은 다음과 같다.
Figure kpo00003
이상은 콜레스테롤 측정을 적용한 것이며, 마찬가지로 전극 조형물의 다공성 박막 위에 도입되는 전처리과정에 필요한 층을 달리하여 전처리 과정에서 생성된 생성물에 의한 전기량의 변화를 측정함으로써 혈액 또는 뇨 등 생체시료, 환경시료, 공업시료 또는 식품음료중의 다양한 유기물 또는 무기물 농도를 정량할 수 있다.
상기와 같이 다공성 박막 위에 전극계가 형성된 본 발명의 정량장치의 응용가능성을 알아보기 위하여 효소반응에 의한 최종 생성물질 중의 하나인 과산화수소(H2O2)를 측정하였다. 이를 위해 먼저 일반적인 산화 알루미늄 기판 위에 작동전극과 보조전극으로 전도성 탄소전극을 사용하고 기준전극으로 은/염화은 전극을 도입한 전류법 전극의 과산화수소에 대한 산화전위를 알기 위하여 제4도에서와 같이 순화전압전류도(cycle voltmogram)를 그려보았다. 제4도에서 나타나 있는 바와 같이 0.7V 이상에서부터 산화가 일어남을 알 수 있다.
또한 본 발명에 의한 다공성 박막 전류법 전극은 한 농도의 시료를 보고나면 다시 사용할 수 없으므로 실제 응용에서는 검정곡선을 얻는 전극과 시료값을 얻는 전극이 달라지게 된다. 따라서, 본 발명에 의한 전극은 전극별 재현성(sensor to sensor reproducibility)이 전극의 신뢰도에 매우 중요한 영향을 미치게 된다. 따라서, 이들 전극의 전극별 재현성 실험을 위하여 같은 조성의 전극물질을 다공성 박막이 아닌 일반적인 산화 알루미늄 기판 위에 성형한 전극과 비교하여 전극의 재현성 및 감응성을 평가하였다(제5도 및 제6도 참조).
제5도는 작동전극과 보조전극으로 전도성 탄소전극을 사용하고, 기준전극으로 은/염화은 전극을 사용하여 일반적인 산화 알루미늄 기판 위에 성형한 전극을 0.7V의 전위를 걸어주고, 0.2M 인산 완충용액(pH 7.0) 50㎖에서 30% 과산화수소를 5㎕가함으로써 농도를 변화시켰을 때의 검정곡선을 나타낸 것으로, 0.88∼5.28mM 농도영역에서 직선성을 나타냄을 볼 수 있다.
제6도는 같은 조성의 전극물질을 사용하여 본 발명에 의해 제작된 다공성 전류법 전극의 과산화수소에 대한 검정곡선을 나타낸 것이다.
주요 관심 농도영역인 0.44∼3.4mM 사이에서 우수한 직선성을 나타냄을 알 수 있다. 제5도와 제6도의 도면을 비교하면 각각 다른 전극을 사용하여 측정값을 얻을 다공성 박막 전류법 전극의 검정곡선과 한 전극에서 얻은 산화 알루미늄 전류법 전극의 검정곡선의 직선성과 감응성이 매우 유사하므로 다공성 박막 전류법 전극의 재현성이 매우 우수함을 알 수 있다.
이하, 본 발명을 실시예에 의거하여 상세히 설명하는 바, 하기 실시예는 본 발명을 예시한 것일 뿐 본 발명의 청구범위가 실시예에 의하여 한정되는 것은 아니다.
[실시예 1]
[LDL 콜레스테롤의 정량]
1. 정량장치의 제조
니트로셀루로오스 종이 상단부에 전극부를 형성하고 하단부에는 전처리 과정에 필요한 항체층, 세척제층 및 효소층을 순차적으로 도입하였다.(제3도 참조)
1) 전처리층의 도입
항체층에는 HDL 항체층과 VLDL 항체층을 도입하였고, 세척제층으로는 계면활성제인 트리톤 X-100을 도입하였다. 다음 효소층으로는 콜레스테롤 에스테네이즈층과 콜레스테롤 옥시데이즈층을 도입하였다.
2) 전극부의 제조
절연막을 입혀준 후 백금으로 작동전극 및 보조전극을 형성하고, 은/염화은으로 기준전극을 형성하였다. 은을 이용하여 이들 전극을 회로에 연결시켜 주고 마지막으로 다시 한 번 절연막을 입혀주었다.
2. 정량방법.
LDL 콜레스테롤 측정을 위한 일체형 전극의 하단부에 LDL 콜레스테롤의 농도를 알고 있는 표준용액을 수 ㎕ 떨어뜨려 측정하였다. 제7도는 다공성 박막 위에 형성된 LDL 콜레스테롤 측정을 위한 전류법 전극계의 총 콜레스테롤 중 LDL 콜레스테롤에 대한 검정곡선도를 나타낸 것으로, 혈중 LDL 콜레스테롤의 농도범위인 30-350mg/100㎖ 사이에서 각각 다른 전극을 사용한 측정에서도 우수한 진선성과 재현성을 나타냄을 알 수 있었다.

Claims (17)

  1. 시료가 크로마토그래피적 이동 가능한 기판인 다공성 박막(10)과; 다공성 박막 하단부의 전처리층과; 절연막(11a)(11b)(11c)과, 작동전극(12), 보조전극(13) 및 기준전극(14)과, 회로연결부(15)로 이루어지는 다공성 박막 상단부의 전극부로 이루어지는 것을 특징으로 하는 유·무기물을 정량하기 위한 장치.
  2. 제1항에 있어서, 전극부는 전압전류법 전극계, 폴라로그라피 전류법 전극계, 전위차법 전극계 또는 전도도법 전극계인 것을 특징으로 하는 유·무기물을 정량하기 위한 장치.
  3. 제1항에 있어서, 전처리층은 방해물질을 제거하는 층, 시료 중 측정대상물질을 전극이 감지할 수 있는 물질로 전환시키는 층, 전극이 측정대상물질을 감지할 수 있는 최적의 상태로 만들어주는 층 등인 것을 특징으로 하는 유·무기물을 정량하기 위한 장치.
  4. 제3항에 있어서, 방해물질을 제거하는 층에는 항체층, EDTA층이 포함되는 것을 특징으로 하는 유·무기물을 정량하기 위한 장치.
  5. 제3항에 있어서, 시료 중 측정 대상물질을 전극이 감지할 수 있는 물질로 전환시키는 층에는 효소층이 포함되는 것을 특징으로 하는 유·무기물을 정량하기 위한 장치.
  6. 제3항에 있어서, 전극이 측정대상 물질을 감지할 수 있는 최적의 상태로 만들어주는 층에는 완충용액층 또는 계면활성제층이 포함되는 것을 특징으로 하는 유·무기물을 정량하기 위한 장치.
  7. 제1항에 있어서, 상기 다공성 박막(10)이 니트로셀룰로즈 종이, 거름종이 등의 종이류, 친수성 고분자 등의 유기 고분자류 또는 흡습성 세라믹 등의 무기 고분자류인 것을 특징으로 하는 유·무기물을 정량하기 위한 장치.
  8. 제1항에 있어서, 전극부는 다공성 박막(10)의 중앙부 및 하단부에 부착되어 시료의 투과에 의한 회로연결부(15)의 산화를 막아 주는 절연막(11a)(11b)과; 상기 중앙부 절연막(11a)의 끝부분과 겹쳐 형성되는 작동전극(12), 보조전극(13) 및 기준전극(14)과; 상기 전극(12∼14)을 장치의 회로와 연결하는 회로연결부(15)와; 상기 전극(12∼14)의 단락을 방지하는 절연막(11c)으로 이루어지는 것을 특징으로 하는 유·무기물을 정량하기 위한 장치.
  9. 제8항에 있어서, 상기 작동전극(12)이 전도성 탄소 페이스트, 산화 루세니움 페이스트 등의 중금속 산화물류 또는 금, 백금 등의 귀금속류인 것을 특징으로 하는 유·무기물을 정량하기 위한 장치.
  10. 제8항에 있어서, 상기 보조전극(13)이 전도성 탄소 페이스트나 금, 백금 등의 귀금속류인 것을 특징으로 하는 유·무기물을 정량하기 위한 장치.
  11. 제8항에 있어서, 상기 기준전극(14)이 은, 은 에폭시 또는 은/염화은(Ag/AgCl) 또는 은/은이온인 것을 특징으로 하는 유·무기물을 정량하기 위한 장치.
  12. 제1항에 있어서, 혈중의 콜레스테롤을 측정하기 위하여 다공성 박막의 하단부에는 HDL 및 VLDL 항체층, 계면활성제층, CED 효소층 및 COD 효소층으로 구성된 전처리층이 도입되고, 다공성 박막의 상단부에는 전극부가 도입되어 혈중 콜레스테롤의 농도를 측정하는 것을 특징으로 하는 유·무기물을 정량하기 위한 장치.
  13. 제1항의 정량장치를 제조함에 있어 다공성 박막 위에 회로연결부가 시료의 투과로 인해 산화되는 것을 방지하기 위하여 절연막을 입혀주는 제1공정과; 다공성 박막 위에 떨어진 시료가 이를 투과하여 반응하도록 다공성 박막 위에 바로 전도성 물질로 이용하여 작동전극 및 보조전극을 형성하고, 기준전극을 형성하는 제2공정과; 전도성 물질로 상기 전극을 회로에 연결시켜 주기 위한 회로연결부를 형성하는 제3공정과; 상기 전극의 단락을 방지하기 위하여 다시 한 번 절연막을 입혀주는 제4공정을 포함하여 이루어지며, 상기 공정의 물질들을 실크 스크린법에 의해 형성되는 것을 특징으로 하는 유·무기물을 정량하기 위한 장치의 제조방법.
  14. 제13항에 있어서, 각 공정의 수행 후, 전극형성 물질 등의 구조 치밀화를 위해 일정온도에서 일정시간 열처리하는 공정을 더 포함하여 이루어지는 것을 특징으로 하는 유·무기물을 정량하기 위한 장치의 제조방법.
  15. 제1항의 정량장치를 센서로 이용함에 있어 다공성 박막층의 하단부에 도입된 전처리층에서 시료에 대하여 전처리를 수행하여 측정이 용이하게 된 측정 대상물질이 다공성 박막 상단부의 전극부에서 일으키는 전기량의 변화를 측정하여 시료중 대상물질을 정량하는 것을 특징으로 하는 유·무기물의 정량방법.
  16. 제15항에 있어서, 측정 대상물질은 혈액 또는 뇨 등 생체시료, 환경시료, 공업시료 또는 식품시료 중의 각종 유·무기물인 것을 특징으로 하는 유·무기물의 정량방법.
  17. 제16항에 있어서, 전처리과정에 필요한 항체층, 세척층 및 효소반응에 필요한 효소층(CED,COD)이 순차적으로 도입되어 있는 다공성 박막의 밑 부위에서, 크로마토그래피 이동되는 시료(혈액)중 HDL과 VLDL를 항체층에서 고정화하고, LDL은 세척제층을 통과하면서 콜레스테롤 에스테르로 변화되고, 이 콜레스테롤 에스테르는 CED 효소층에 의해 가수분해되어 콜레스테롤로 변화되고, 다시 콜레스테롤은 COD 효소층과 반응하여 콜레스트-4-엔-3-온과 과산화수소를 발생시키고, 발생된 과산화수소와 전극이 산화-환원 반응하여 발생하는 전류를 측정하여 혈중 콜레스트레롤을 정량하는 것을 특징으로 하는 유·무기물의 정량방법.
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