JP2011521969A - 眼疾患を治療するためのTGF−β受容体阻害剤又はアクチビン様キナーゼ(ALK)5阻害剤、A−83−01及びSB−431542の使用方法及び創傷治療条件 - Google Patents
眼疾患を治療するためのTGF−β受容体阻害剤又はアクチビン様キナーゼ(ALK)5阻害剤、A−83−01及びSB−431542の使用方法及び創傷治療条件 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2011521969A JP2011521969A JP2011511843A JP2011511843A JP2011521969A JP 2011521969 A JP2011521969 A JP 2011521969A JP 2011511843 A JP2011511843 A JP 2011511843A JP 2011511843 A JP2011511843 A JP 2011511843A JP 2011521969 A JP2011521969 A JP 2011521969A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- composition
- kinase
- inhibitor
- activin receptor
- amount
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
- A61K31/4709—Non-condensed quinolines and containing further heterocyclic rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
- A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
- A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
- A61P27/02—Ophthalmic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0048—Eye, e.g. artificial tears
- A61K9/0051—Ocular inserts, ocular implants
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Ophthalmology & Optometry (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
【課題】眼疾患を治療するためのTGF−β受容体阻害剤又はアクチビン様キナーゼ(ALK)5阻害剤、A−83−01及びSB−431542の使用方法及び創傷治療条件を提供する。
【解決手段】アクチビン受容体様キナーゼ5阻害剤の有効量を含む、緑内障ろ過手術後に生じ得る結膜瘢痕化の防止に有用な医薬組成物。同様に開示されるものは、アクチビン受容体様キナーゼ5阻害剤を含む医薬組成物の一定量を適用することを含む眼科手術後に発現し得る角膜の濁り及び結膜瘢痕化の治療方法である。
【選択図】図7
【解決手段】アクチビン受容体様キナーゼ5阻害剤の有効量を含む、緑内障ろ過手術後に生じ得る結膜瘢痕化の防止に有用な医薬組成物。同様に開示されるものは、アクチビン受容体様キナーゼ5阻害剤を含む医薬組成物の一定量を適用することを含む眼科手術後に発現し得る角膜の濁り及び結膜瘢痕化の治療方法である。
【選択図】図7
Description
本願は、2008年5月30日に出願された米国仮出願特許第61/057,461号への優先権を請求する。
この発明の進展は、米国健康支援財団(American Health Assistance Foundation)、G2006−014及び米国国立眼科機構(National Eye Institute)、EY01792からの財政的支援により支持されている。政府機関は本発明に興味を持っている。
背景
眼の線維傷害反応は、特に、緑内障のための外科的治療の結果として、視覚障害及び失明の主な原因である。緑内障は、米国における失明の主な原因であり、2000年に250万人のアメリカ人及び世界中で6500万人の人が該疾患に罹患した。緑内障は視神経頭への損傷並びに神経障害及び視力障害により特徴付けられる疾患である。緑内障の主な危険因子の一つは、房水流出路における異常の結果として生じる眼圧の上昇(IOP)である。緑内障ろ過手術(GFS)は通常、薬物治療がIOPを的確に制御することに失敗した場合に行なわれる。
眼の線維傷害反応は、特に、緑内障のための外科的治療の結果として、視覚障害及び失明の主な原因である。緑内障は、米国における失明の主な原因であり、2000年に250万人のアメリカ人及び世界中で6500万人の人が該疾患に罹患した。緑内障は視神経頭への損傷並びに神経障害及び視力障害により特徴付けられる疾患である。緑内障の主な危険因子の一つは、房水流出路における異常の結果として生じる眼圧の上昇(IOP)である。緑内障ろ過手術(GFS)は通常、薬物治療がIOPを的確に制御することに失敗した場合に行なわれる。
過度の術後瘢痕化が、しばしばGFSの失敗をもたらす。結膜の抗−瘢痕化治療として、ミトマイシン−C(MMC)及び5−フルオロウラシルのような代謝拮抗剤の使用が多くの患者に利益をもたらしているものの、これらは広範な細胞死を引き起こすことによって、その利益をもたらすのであって、低眼圧黄斑症及び感染症のような重度の及び潜在的な失明合併症を伴う。そのため、他の抗−瘢痕化のアプローチが調査されてきている。特に、形質転換成長因子−β(TGF−β)及びその経路が、術後の抗−瘢痕化治療のための標的として浮上した。
図面の簡単な説明
本明細書に組み込まれ且つ本明細書の一部を構成する、添付の図面は、本発明の観点の種々の実施例態様を説明する種々の実施例系、方法等を説明する。図中で説明される成分枠(例えば、四角形、四角形の群又は他の形状)は、枠の1例を表すものと理解され得る。当業者は、1種の要素は、多重要素として設計され得るか又は多重要素は1種の要素として設計され得ると理解し得る。別の要素の内部構成材として示される要素は、外部構成材として実施され得るが、その逆も同じである。更に、要素は、縮尺通りとは限らない。
本明細書に組み込まれ且つ本明細書の一部を構成する、添付の図面は、本発明の観点の種々の実施例態様を説明する種々の実施例系、方法等を説明する。図中で説明される成分枠(例えば、四角形、四角形の群又は他の形状)は、枠の1例を表すものと理解され得る。当業者は、1種の要素は、多重要素として設計され得るか又は多重要素は1種の要素として設計され得ると理解し得る。別の要素の内部構成材として示される要素は、外部構成材として実施され得るが、その逆も同じである。更に、要素は、縮尺通りとは限らない。
詳細な説明
ここで開示されるものは、哺乳類における緑内障ろ過手術後の眼疾患及び眼球瘢痕化の予防及び治療方法である。好ましくは、該方法は緑内障のろ過手術中又はその後のヒトの患者に対する治療に使用され得る。緑内障ろ過手術(GFS)おいて、眼からの液体の排水を容易にするために新規な排水部位が創出されると、それにより眼における眼圧が低下する。図1に示されるように、ヒトの眼は、他の構成要素中に、結膜12、小柱網14、虹彩16、角膜18、網膜24及び水晶体26を含む。
ここで開示されるものは、哺乳類における緑内障ろ過手術後の眼疾患及び眼球瘢痕化の予防及び治療方法である。好ましくは、該方法は緑内障のろ過手術中又はその後のヒトの患者に対する治療に使用され得る。緑内障ろ過手術(GFS)おいて、眼からの液体の排水を容易にするために新規な排水部位が創出されると、それにより眼における眼圧が低下する。図1に示されるように、ヒトの眼は、他の構成要素中に、結膜12、小柱網14、虹彩16、角膜18、網膜24及び水晶体26を含む。
GFSの間、眼の通常の排水部位(小柱網)14中への排水の代わりに、房水が眼の結膜12の下に創出された新規な“空間”中へ排水される。これを行うために、白眼の中に小さなフラップが作成される。その後、通路の開口部20とろ過胞と呼ばれる貯水部22の間に新規な排水路28が創出される。房水と呼ばれる、前房及び後房中の流体は、その後、新規な排水路28を介して胞22中へ排水され、眼の周囲の血管中へ吸収される。胞22及び/又は新規な排水路28は、傷跡を残し得、そして、該房水が適度に流れ出るのを防ぐ経路を閉ざしてしまうが、胞不全と呼ばれる。
形質転換成長因子−β(TGF−β)は、創傷治癒反応の主要なメディエーターである。眼において、TGF−βは、レーザー手術後の角膜の濁り及び緑内障ろ過手術後の結膜瘢痕化の誘発において関与してきた。加えて、TGF−βの上方調節は、網膜剥離手術の失敗の主原因である、増殖性硝子体網膜症(PVR)に関わっている。
アクチビン受容体様キナーゼ(ALK)5阻害剤は、TGF−βのシグナル伝達経路を遮断し、よって、GFS、硝子体網膜手術、角膜外傷の治療及びLASIKを含む、眼科手術後の角膜の濁り及び瘢痕化を防止するために使用され得る。同様に、ALK−5阻害剤の使用は、現行の抗−瘢痕化薬剤に付随する副作用、例えば、出血、感染、腫脹、瘢痕化、網膜剥離、眼瞼下垂、複視、視力低下又は失明でさえ減少し得る。最終的に、ALK−5阻害剤のヒトの眼への局所適用は、緑内障と関連する眼圧を低下させ得る。
一つの態様において、以下に示される化合物の1種又はそれ以上のものが使用し得る。入手可能な所で、製造業者指定のものが提供されてきている。該化合物は、ミズーリ州、セントルイス、ピー.オー.ボックス14508のシグマ(Sigma)社から入手可能である。
上述の組成物は、ALK−5阻害剤及び医薬的に許容可能なその塩を含み得、それはポリマーキャリア及び投与においてゲル形成が可能なキャリアのような、眼内使用のために好適な医薬ビヒクルの種々のタイプの中に含まれることがある。ビヒクルは、好ましくは水性であり、眼組織と化学的及び物理的に相溶性となるように処方される。例えば、生体内分解性の(又は生体内崩壊性の)ゲル又はコラーゲン挿入物は、胞における阻害剤の有効濃度を保持するために使用され得る。そのようなゲル又は挿入物の使用は、手術部位で活性成分の持続放出を提供する利点を有する。
組成物は、ALK−5阻害剤の有効量を含み得る。好ましくは、組成物は、ALK−5阻害剤の約0.3ないし約15μM、より好ましくは阻害剤の約3ないし約10μMを含み得る。15μMを越える量を含むその組成物もまた使用し得ることは、当業者に理解されることであろう。
当業者が理解するであろうように、上述の組成物は、無菌であるべきであり、敏感な眼内組織、特に、角膜/内皮細胞に対して毒性を示すあらゆる薬剤も含むべきでない。上述の組成物は、当業者に既知の技術に従って処方し得る。
上述の組成物は、種々の技術の手段により手術部位へ適用し得る。例えば、該組成物は、手術の間に又は手術後直ちに、好ましくは4時間以内に注射の手段により、又は手術部位上又は手術部位周囲の眼中へ挿入し得る持続放出ポリマーを用いて適用され得る。該組成物は、角膜の濁りを防止又は減少するために、LASIK後の局所処方で手術部位に適用され得る。
阻害剤及びTGF−β2を用いるインビトロの細胞調製
試料の線維芽細胞は、ニュージーランド白ウサギの眼から得られた。該線維芽細胞は、対象者の眼から単離された結膜組織に由来するものであった。細胞の3ないし5代継代は、イーグル最小必須培地、10%ウシ胎児血清、5%子牛血清、必須アミノ酸及び非必須アミノ酸及び抗生物質から構成される媒体3mLを用いて25cm2フラスコ中で保持された。該細胞が集まった時に、トリプシン処理され及び継代された。
試料の線維芽細胞は、ニュージーランド白ウサギの眼から得られた。該線維芽細胞は、対象者の眼から単離された結膜組織に由来するものであった。細胞の3ないし5代継代は、イーグル最小必須培地、10%ウシ胎児血清、5%子牛血清、必須アミノ酸及び非必須アミノ酸及び抗生物質から構成される媒体3mLを用いて25cm2フラスコ中で保持された。該細胞が集まった時に、トリプシン処理され及び継代された。
6−ウェルプレート中の線維芽細胞培養物は、種々の濃度、0.03、0.1、0.03、1.0、3.0及び10.0μMで、ALK−5阻害剤を含む媒体2mLと一緒に1時間前処理され、更に、TGF−β2(R&Dシステムズ、ミネアポリス、MN)2ng/mLで72時間まで処理された。表1に示されるように、試料1−7は、ALK−5阻害剤A−83−01を用いて及び試料8−14は、ALK−5阻害剤SB431542を用いて調製された。
試料15及び16は、対照として調製された。試料15は、ALK−5阻害剤又はTGF−β2で処理されなかった。試料16は、TGF−β2 2ng/mLで処理されたが、ALK−5阻害剤で処理されなかった。試料は、以下の表1に示されるように調製された。
CTGFのウエスタンブロッティング
阻害剤及び/又はTGF−β2を用いた処理の後、種々の試料からの細胞は採取され、定量的な評価を提供するためにウエスタンブロッティングが行われた。結膜線維芽細胞はトリトン溶解緩衝液中で溶解された。溶解物中の総タンパク質は、ブラッドフォードタンパク質分析を用いて定量された。タンパク質の等量(20μg/レーン)が10%ドデシル硫酸ナトリウム(SDS)−ポリアクリルアミドゲルに溶解された。タンパク質はその後、ニトロセルロース膜へ転写された。
阻害剤及び/又はTGF−β2を用いた処理の後、種々の試料からの細胞は採取され、定量的な評価を提供するためにウエスタンブロッティングが行われた。結膜線維芽細胞はトリトン溶解緩衝液中で溶解された。溶解物中の総タンパク質は、ブラッドフォードタンパク質分析を用いて定量された。タンパク質の等量(20μg/レーン)が10%ドデシル硫酸ナトリウム(SDS)−ポリアクリルアミドゲルに溶解された。タンパク質はその後、ニトロセルロース膜へ転写された。
1%ウシ血清アルブミンでブロッキングした後、該膜は、ポリクローナルヤギ抗−CTGF(1:200、サンタクルーズ バイオテクノロジー、サンタクルーズ、CA、)でプローブされ、そして、HRP標識−ロバ抗−ヤギIgG(1:1,000;ジャクソン イムノリサーチ、ウエストグローブ、PA)が続いた。TGF−βシグナルは、ピアス(Pierce)(ロックフォールド、IL)製のスーパーシグナル(Super Signal)を使用する高感度化学発光(ECL)により検出された。濃度測定はその後、バンドの強度を測定することにより達成された。
濃度測定は、低下したCTGFタンパク質のバンドの強度、即ち、1μMを超える濃度で試料は、37−38及び42−44kDaを示し、ALK−5阻害剤で処理された試料における減少したタンパク質レベルを示す。膜はまた、内部標準として、ハウスキーピング遺伝子、グリセロアルデヒド3−リン酸デヒドロゲナーゼのためにもプローブされた。図2−3で示されるように、最大阻害の半分の濃度(IC50)が、TGF−β2機能の阻害における各阻害剤の効果を評価するために計算された。阻害剤の濃度が増加するに従って、阻害されるTGF−β2のパーセンテージもまた増加した。該成長因子の阻害のパーセンテージが、投与された各阻害剤の特定の濃度に依存することに留意すべきである。一般的に、該成長因子は、阻害剤の少なくとも1μMでの細胞への適用により、ある程度
阻害された。シグナル経路の阻害を提供するのに3μM程度が必要な場合があった。阻害剤無しに調製された対照試料は、TGF−βシグナル経路の阻害機能を示さなかった。図2−3中、グラフの“−1”境界線は、試料15が試験された場合に見られる、ALK−5阻害剤及びTGF−β無しのTGF−β下流タンパク質の発現パーセンテージを表し、“0”境界線は、各ALK−5阻害剤は添加されないが、TGF−β溶液は添加されて試験される、試料16からの試験データを表す。
阻害された。シグナル経路の阻害を提供するのに3μM程度が必要な場合があった。阻害剤無しに調製された対照試料は、TGF−βシグナル経路の阻害機能を示さなかった。図2−3中、グラフの“−1”境界線は、試料15が試験された場合に見られる、ALK−5阻害剤及びTGF−β無しのTGF−β下流タンパク質の発現パーセンテージを表し、“0”境界線は、各ALK−5阻害剤は添加されないが、TGF−β溶液は添加されて試験される、試料16からの試験データを表す。
阻害剤の低濃度を用いて調製された試料の中には、実際に、シグナル経路の活性において増加を示したものもあったが、阻害剤を用いる効果的な治療は、使用した特定の阻害剤及び手術部位へ適用した阻害剤の濃度に依存するであろうとの結論を導く。更に、長時間に亘り、手術部位において、阻害剤の一定濃度を維持するのが望ましい。従って、局所ゲル、ポリマーインプラント等を伴うような、組成物の持続放出を提供する方法を伴って阻害剤を適用することが望ましくあり得る。
α−SMA及びフィブロネクチンのためのウエスタンブロッティング
各阻害剤での処理後の、フィブロネクチン及びα−SMAタンパク質発現を試験するために、試料1−16において調製されたように、ウサギ結膜線維芽細胞が48ないし72時間培養された。図5で示されるように、A−83−01及びSB−431542はTGF−B2により誘発されるタンパク質発現を効果的に阻害した。A−83−01及びSB−431542で処理された試料における、両タンパク質のバンド強度は、阻害剤で処理されなかった試料のバンドに比べて、減少された。タンパク質レベルの減少は、阻害剤の濃度を高くするほど顕著になる。ブロットはまた、均等なタンパク質負荷を制御するためのβ−アクチンのためにもプローブされる。
各阻害剤での処理後の、フィブロネクチン及びα−SMAタンパク質発現を試験するために、試料1−16において調製されたように、ウサギ結膜線維芽細胞が48ないし72時間培養された。図5で示されるように、A−83−01及びSB−431542はTGF−B2により誘発されるタンパク質発現を効果的に阻害した。A−83−01及びSB−431542で処理された試料における、両タンパク質のバンド強度は、阻害剤で処理されなかった試料のバンドに比べて、減少された。タンパク質レベルの減少は、阻害剤の濃度を高くするほど顕著になる。ブロットはまた、均等なタンパク質負荷を制御するためのβ−アクチンのためにもプローブされる。
表1中で説明されるように、A−83−01及びSB−431642で処理された線維芽細胞におけるα−SMA及びフィブロネクチンの発現は、阻害剤がTGF−β2シグナル経路を遮断する範囲を決定するために測定された。細胞溶解物中のタンパク質(20μg/レーン)は、10%ドデシル硫酸ナトリウム(SDS)−ポリアクリルアミドゲル上で溶解された。タンパク質はニトロセルロースに転写された。1%ウシ血清アルブミンでブロッキングした後、該膜は、モノクローナルマウス抗−α−SMA(1:9,000)でプローブされ、続いて、HRP標識−ヤギ抗−マウスIgG(1:150,000;ジャクソン)でプローブされるか又は、モノクローナルマウス抗−フィブロネクチン(1:1,000)でプローブされ、続いて、HRP標識−ヤギ抗−マウスIgG(1:10,000)でプローブされた。シグナルは、高感度化学発光により検出された。
免疫細胞蛍光発光顕微鏡画像化技術
別の実施例において、結膜線維芽細胞は8−ウェルチャンバースライド上で培養された。該試料は試料5−6及び13−16として調製され、72時間培養された。阻害剤処理の後、線維芽細胞培養物は各々、4%パラホルムアルデヒドを用いて又はアレクサフロウ(Alexa Fluor)のための氷冷法若しくはFITC染色を用いて固定された。透過化の後、細胞培養物は、ポリクローナルヤギ抗−CTGF(1:50、サンタクルーズ)で培養され、続いて、アレクサフロウ ロバ抗−ヤギIgG(10μg/mL、インビトロジェン)、モノクローナルマウス抗−フィブロネクチン(10μg/mL、インビトロジェン)又はモノクローナルマウス抗−α−SMA(1:400、シグマ)で培養され、続いてFITCヤギ抗−マウスIgG(1:100、ジャクソン イムノリサーチ)で培養された。細胞培養物は、DAPIを伴う水性マウント媒体を用いてマウントされ、蛍光顕微鏡検査法により観察された。
別の実施例において、結膜線維芽細胞は8−ウェルチャンバースライド上で培養された。該試料は試料5−6及び13−16として調製され、72時間培養された。阻害剤処理の後、線維芽細胞培養物は各々、4%パラホルムアルデヒドを用いて又はアレクサフロウ(Alexa Fluor)のための氷冷法若しくはFITC染色を用いて固定された。透過化の後、細胞培養物は、ポリクローナルヤギ抗−CTGF(1:50、サンタクルーズ)で培養され、続いて、アレクサフロウ ロバ抗−ヤギIgG(10μg/mL、インビトロジェン)、モノクローナルマウス抗−フィブロネクチン(10μg/mL、インビトロジェン)又はモノクローナルマウス抗−α−SMA(1:400、シグマ)で培養され、続いてFITCヤギ抗−マウスIgG(1:100、ジャクソン イムノリサーチ)で培養された。細胞培養物は、DAPIを伴う水性マウント媒体を用いてマウントされ、蛍光顕微鏡検査法により観察された。
図6に示されるように、CTGF、フィブロネクチン及びα−SMAは、FITC又はアレクサフロウ標識(緑)で視覚化された。核種はDAPI(青)で染色された。CTG
F、α−SMA及びフィブロネクチンのための染色における劇的な増加が、TGF−β2培養後に観察された。TGF−β2−誘導タンパク質の染色強度は、細胞がA−83−01又はSB431542阻害剤と同時に処理された場合、大きく低下した。何れの阻害剤のバー50μMで処理された試料においても、明白な細胞死は観察されなかった。
F、α−SMA及びフィブロネクチンのための染色における劇的な増加が、TGF−β2培養後に観察された。TGF−β2−誘導タンパク質の染色強度は、細胞がA−83−01又はSB431542阻害剤と同時に処理された場合、大きく低下した。何れの阻害剤のバー50μMで処理された試料においても、明白な細胞死は観察されなかった。
線維芽細胞形態
別の実施例において、ウサギ線維芽細胞は、2ng/mLに代えて、5ng/mLのTGF−β2を試料に添加した以外は、試料6、14、15及び16と同様にして調製された。該細胞培養物の形態は、図7において示されるように、位相差顕微鏡法により視覚化された。TGF−β2で処理された細胞において、筋線維芽細胞様の外観が観察された。該TGF−β2誘導形態学的変化は、A−83−01又はSB431542の添加により回避されるように思われた。阻害剤で処理された試料に、明白な細胞死は観察されなかった。
別の実施例において、ウサギ線維芽細胞は、2ng/mLに代えて、5ng/mLのTGF−β2を試料に添加した以外は、試料6、14、15及び16と同様にして調製された。該細胞培養物の形態は、図7において示されるように、位相差顕微鏡法により視覚化された。TGF−β2で処理された細胞において、筋線維芽細胞様の外観が観察された。該TGF−β2誘導形態学的変化は、A−83−01又はSB431542の添加により回避されるように思われた。阻害剤で処理された試料に、明白な細胞死は観察されなかった。
ALK阻害剤、A−83−01及びSB−431542は、ウサギの培養結膜線維芽細胞における創傷治癒に関連するTGF−β2活性を効果的に遮断する。何れの阻害剤で調製された細胞培養物においても、明確な細胞毒性は観察されなかった。よって、これらの阻害剤は、特に、緑内障ろ過手術のための、眼球抗−瘢痕化剤として使用し得る。
実施例の方法及び組成物は、記載された実施例により説明され、また、該実施例はかなり詳細に述べられているが、それは、該添付の請求項の範囲を制限したり、多少なりとも、そのような詳細まで限定したりするという出願人の意図ではない。もちろん、ここに記載される、システム、方法、デバイス等を記載するという目的で、成分又は方法論の考えられる組み合わせ全てを記載することは可能でない。更なる利点及び改良は、当業者にとって容易であると考えられる。従って、本発明は、提示及び記載された、特定の細目、代表的な装置及び説明に役立つ実施例に限定されない。よって、この出願は、添付の請求項の範囲に含まれる変更、改良、変化を包含することを目的とする。更に、前述の説明は本発明の範囲を限定することを意味しない。むしろ、本発明の範囲は、添付された請求項及びそれらの等価物により決定される。
Claims (18)
- 眼科手術及び/又は眼球外傷に伴う瘢痕組織の形成を減少する方法であって、
成長因子−βを形質転換するシグナル伝達経路を阻害するのに充分な量で、下記式
- 前記アクチビン受容体様キナーゼ5阻害剤が、約1.0ないし約10.0μMの量で前記組成物中に存在する請求項1記載の方法。
- 前記アクチビン受容体様キナーゼ5阻害剤が、下記式
- 前記アクチビン受容体様キナーゼ5阻害剤が、下記式
- 前記組成物が更に、持続放出ポリマーキャリアを含む請求項1記載の方法。
- 前記組成物が更に、患者の眼の手術部位への投与においてゲル形成が可能なキャリア媒体を含む請求項1記載の方法。
- 眼科手術に伴う瘢痕組織の形成を減少する方法であって、
成長因子−βを形質転換するシグナル伝達経路を阻害するのに充分な量で、下記式
- 前記アクチビン受容体様キナーゼ5阻害剤が、約1.0ないし約10.0μMの量で前記組成物中に存在する請求項7記載の方法。
- 前記アクチビン受容体様キナーゼ5阻害剤が、下記式
- 前記アクチビン受容体様キナーゼ5阻害剤が、
- 前記組成物が更に、患者の眼の手術部位へ投与してゲル形成が可能なキャリア媒体を含む請求項7記載の方法。
- 医薬組成物であって、該組成物は、手術後の眼球の瘢痕化の防止に有用であり、下記式
- 前記アクチビン受容体様キナーゼ5阻害剤の医薬的に許容可能な塩を含む請求項12記載の組成物。
- 前記アクチビン受容体様キナーゼ5阻害剤が、約1.0ないし約10.0μMの量で前記組成物中に存在する請求項12記載の組成物。
- 前記アクチビン受容体様キナーゼ5阻害剤が、下記式
- 前記アクチビン受容体様キナーゼ5阻害剤が、下記式
- 前記組成物が更に、ポリマーキャリアを含む請求項12記載の組成物。
- 前記組成物が更に、患者の眼の手術部位へ投与してゲル形成が可能なキャリア媒体を含む請求項12記載の組成物。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US5746108P | 2008-05-30 | 2008-05-30 | |
US61/057,461 | 2008-05-30 | ||
PCT/US2009/045607 WO2009146408A1 (en) | 2008-05-30 | 2009-05-29 | Methods for using tgf-b receptor inhibitors or activin-like kinase (alk) 5 inhibitors a-83-01 and sb-431542 to treat eye disease and wound healing conditions |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2011521969A true JP2011521969A (ja) | 2011-07-28 |
JP2011521969A5 JP2011521969A5 (ja) | 2011-09-08 |
Family
ID=41377599
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2011511843A Pending JP2011521969A (ja) | 2008-05-30 | 2009-05-29 | 眼疾患を治療するためのTGF−β受容体阻害剤又はアクチビン様キナーゼ(ALK)5阻害剤、A−83−01及びSB−431542の使用方法及び創傷治療条件 |
Country Status (5)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20100087486A1 (ja) |
EP (1) | EP2285380A4 (ja) |
JP (1) | JP2011521969A (ja) |
CN (1) | CN102083439A (ja) |
WO (1) | WO2009146408A1 (ja) |
Families Citing this family (30)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2010121162A1 (en) * | 2009-04-17 | 2010-10-21 | Summa Health Systems Llc | Use of transforming growth factor-b receptor inhibitors to suppress ocular scarring |
KR20140003395A (ko) * | 2010-08-17 | 2014-01-09 | 알러간, 인코포레이티드 | 각막 혼탁 치료용 ep2 또는 ep4 항진제들 |
ES2884095T3 (es) | 2012-11-02 | 2021-12-10 | Celgene Corp | Antagonistas de activina-actrii y usos para el tratamiento de trastornos óseos y otros trastornos |
WO2014168264A1 (ja) | 2013-04-12 | 2014-10-16 | 国立大学法人京都大学 | 肺胞上皮前駆細胞の誘導方法 |
WO2014185358A1 (ja) | 2013-05-14 | 2014-11-20 | 国立大学法人京都大学 | 効率的な心筋細胞の誘導方法 |
JP6403217B2 (ja) | 2013-07-30 | 2018-10-10 | 京都府公立大学法人 | 角膜内皮ecm治療薬 |
US9796962B2 (en) | 2013-08-07 | 2017-10-24 | Kyoto University | Method for generating pancreatic hormone-producing cells |
KR102320537B1 (ko) | 2013-09-05 | 2021-11-01 | 고쿠리츠 다이가쿠 호진 교토 다이가쿠 | 신규 도파민 생산 신경 전구 세포의 유도 방법 |
EP3804760A1 (en) | 2013-10-31 | 2021-04-14 | Kyoto Prefectural Public University Corporation | Therapeutic drug for diseases related to endoplasmic reticulum cell death in corneal endothelium |
CN106536718B (zh) | 2014-05-21 | 2021-04-27 | 国立大学法人京都大学 | 胰芽细胞的制造方法及含有胰芽细胞的胰疾病治疗剂 |
JP7072507B2 (ja) | 2015-11-23 | 2022-05-20 | アクセルロン ファーマ インコーポレイテッド | 眼の障害を処置するための方法 |
JP7011260B2 (ja) | 2016-04-22 | 2022-02-10 | 国立大学法人京都大学 | ドーパミン産生神経前駆細胞の製造方法 |
CN106282092A (zh) * | 2016-09-07 | 2017-01-04 | 山东省眼科研究所 | 一种角膜内皮分离和扩增培养液 |
CN117802033A (zh) | 2017-05-25 | 2024-04-02 | 国立大学法人京都大学 | 由多能干细胞制造中胚层谱系原条细胞的方法 |
JP7414530B2 (ja) | 2018-02-19 | 2024-01-16 | 住友ファーマ株式会社 | 細胞凝集体、細胞凝集体の混合物及びそれらの製造方法 |
US20210332329A1 (en) | 2018-07-23 | 2021-10-28 | Kyoto University | Novel renal progenitor cell marker and method for concentrating renal progenitor cells using same |
WO2020230832A1 (ja) | 2019-05-15 | 2020-11-19 | 味の素株式会社 | 神経堤細胞または角膜上皮細胞の純化方法 |
EP3974519A4 (en) | 2019-05-20 | 2023-07-12 | Ajinomoto Co., Inc. | EXPANSION CULTURE METHOD FOR CARTILAGE OR BONE PRECURSOR CELLS |
KR20220052946A (ko) | 2019-09-06 | 2022-04-28 | 각고호우징 게이오기주크 | 글리아 전구 세포를 포함하는 세포 응집체의 제조 방법 |
US20220380732A1 (en) | 2019-10-01 | 2022-12-01 | Kyoto University | Method for isolating ureteric bud tip cells |
CA3175573A1 (en) | 2020-03-19 | 2021-09-23 | Orizuru Therapeutics, Inc. | Cardiomyocyte purification method |
US20230212519A1 (en) | 2020-03-19 | 2023-07-06 | Orizuru Therapeutics, Inc. | Method for purifying cardiomyocytes |
US20230256024A1 (en) | 2020-07-13 | 2023-08-17 | Kyoto University | Skeletal muscle precursor cells and method for purifying same, composition for treating myogenic diseases, and method for producing cell group containing skeletal muscle precursor cells |
EP4276172A1 (en) | 2021-01-08 | 2023-11-15 | Kyoto University | Medium for culturing and expanding nephron progenitor cells, method for culturing and expanding nephron progenitor cells, and method for producing renal organoids |
EP4353243A1 (en) | 2021-06-10 | 2024-04-17 | Ajinomoto Co., Inc. | Method for producing mesenchymal stem cells |
JPWO2022265086A1 (ja) | 2021-06-17 | 2022-12-22 | ||
US20240240157A1 (en) | 2021-07-15 | 2024-07-18 | Cellfiber Co., Ltd. | Structure and Use Thereof |
WO2023017848A1 (ja) | 2021-08-11 | 2023-02-16 | 国立大学法人京都大学 | 腎間質前駆細胞の製造方法並びにエリスロポエチン産生細胞、およびレニン産生細胞の製造方法 |
WO2023149407A1 (ja) | 2022-02-01 | 2023-08-10 | 国立大学法人京都大学 | 肺間葉細胞の製造方法および肺間葉細胞 |
WO2023153464A1 (ja) | 2022-02-09 | 2023-08-17 | 住友ファーマ株式会社 | 多能性幹細胞から中脳底板領域の神経系細胞への分化における、培養液中の細胞の分化能を判定する方法 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2005527590A (ja) * | 2002-04-04 | 2005-09-15 | バイオジェン, インコーポレイテッド | 三置換ヘテロアリールおよびそれらを製造し使用する方法 |
JP2007533734A (ja) * | 2004-04-21 | 2007-11-22 | アイエヌ2ジェン カンパニー リミテッド | Alk5及び/又はalk4の抑制剤としての2−ピリジル置換イミダゾール類 |
WO2008006583A1 (en) * | 2006-07-14 | 2008-01-17 | Novartis Ag | Pyrimidine derivatives as alk-5 inhibitors |
Family Cites Families (16)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5470881A (en) * | 1993-09-09 | 1995-11-28 | West Virginia University Research Corporation | Urea ophthalmic ointment and solution |
US5449671A (en) * | 1993-09-29 | 1995-09-12 | Alcon Laboratories, Inc. | Use of TGF-β3, to prevent or retard fistula closure following glaucoma filtration surgery |
JPH08503968A (ja) * | 1993-09-29 | 1996-04-30 | アルコン ラボラトリーズ,インコーポレイテッド | 増殖因子と代謝拮抗物質を含有する組成物 |
WO1995009004A1 (en) * | 1993-09-29 | 1995-04-06 | Alcon Laboratories, Inc. | Compositions containing growth factors and antiplastic agents |
US5486534A (en) * | 1994-07-21 | 1996-01-23 | G. D. Searle & Co. | 3,4-substituted pyrazoles for the treatment of inflammation |
US6063396A (en) * | 1994-10-26 | 2000-05-16 | Houston Biotechnology Incorporated | Methods and compositions for the modulation of cell proliferation and wound healing |
US6184226B1 (en) * | 1998-08-28 | 2001-02-06 | Scios Inc. | Quinazoline derivatives as inhibitors of P-38 α |
WO2003057670A2 (en) * | 2001-12-28 | 2003-07-17 | Guilford Pharmaceuticals Inc. | Indoles as naaladase inhibitors |
AU2003300099A1 (en) * | 2003-01-02 | 2004-07-29 | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | COMPOSITIONS AND METHODS FOR INHIBITING TGF-Beta |
US7189733B2 (en) * | 2003-03-12 | 2007-03-13 | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for inhibiting TGF-β |
EP1633718B1 (en) * | 2003-06-17 | 2012-06-06 | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | COMPOSITIONS AND METHODS FOR INHIBITING TGF-s |
US7098222B2 (en) * | 2004-05-12 | 2006-08-29 | Abbott Laboratories | Bicyclic-substituted amines having cyclic-substituted monocyclic substituents |
US20050256118A1 (en) * | 2004-05-12 | 2005-11-17 | Altenbach Robert J | Bicyclic-substituted amines having cyclic-substituted monocyclic substituents |
US20060234911A1 (en) * | 2005-03-24 | 2006-10-19 | Hoffmann F M | Method of reversing epithelial mesenchymal transition |
WO2007070866A2 (en) * | 2005-12-16 | 2007-06-21 | Alcon, Inc. | Control of intraocular pressure using alk5 modulation agents |
US7524640B2 (en) * | 2006-08-06 | 2009-04-28 | Children's Medical Center Corporation | Inhibiting Smad2/3 signaling promotes neurite outgrowth in dorsal root ganglia |
-
2009
- 2009-05-29 CN CN2009801199382A patent/CN102083439A/zh active Pending
- 2009-05-29 US US12/474,370 patent/US20100087486A1/en not_active Abandoned
- 2009-05-29 WO PCT/US2009/045607 patent/WO2009146408A1/en active Application Filing
- 2009-05-29 JP JP2011511843A patent/JP2011521969A/ja active Pending
- 2009-05-29 EP EP09755769A patent/EP2285380A4/en not_active Withdrawn
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2005527590A (ja) * | 2002-04-04 | 2005-09-15 | バイオジェン, インコーポレイテッド | 三置換ヘテロアリールおよびそれらを製造し使用する方法 |
JP2007533734A (ja) * | 2004-04-21 | 2007-11-22 | アイエヌ2ジェン カンパニー リミテッド | Alk5及び/又はalk4の抑制剤としての2−ピリジル置換イミダゾール類 |
WO2008006583A1 (en) * | 2006-07-14 | 2008-01-17 | Novartis Ag | Pyrimidine derivatives as alk-5 inhibitors |
Non-Patent Citations (5)
Title |
---|
JPN6013041065; Liu Xing-Jun et al.: Biotechnology letters Vol.27, No.20, 2005, p.1609-15 * |
JPN6013041067; Tojo,M. et al.: Cancer science Vol.96, No.11, 2005, p.791-800 * |
JPN6013041069; 雑賀司珠也: 臨床眼科 Vol.61, No.2, 2007, p.156-163 * |
JPN6013041072; 新田信一: あたらしい眼科 Vol.18, No.1, 2001, p.3-7 * |
JPN6013041074; 高橋保志: 医薬ジャーナル Vol.34, 増刊号, 1998, p.237-242 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN102083439A (zh) | 2011-06-01 |
EP2285380A4 (en) | 2012-03-14 |
WO2009146408A1 (en) | 2009-12-03 |
WO2009146408A9 (en) | 2010-12-02 |
US20100087486A1 (en) | 2010-04-08 |
EP2285380A1 (en) | 2011-02-23 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP2011521969A (ja) | 眼疾患を治療するためのTGF−β受容体阻害剤又はアクチビン様キナーゼ(ALK)5阻害剤、A−83−01及びSB−431542の使用方法及び創傷治療条件 | |
JP2012524073A (ja) | 眼球瘢痕化を抑制するための形質転換成長因子−β受容体阻害剤の使用 | |
Morales et al. | Intraoperative mitomycin and corneal endothelium after photorefractive keratectomy | |
JP2024069363A (ja) | 翼状片を治療するための組成物及び方法 | |
CN109996814B (zh) | 多激酶抑制剂及在眼部纤维化中的用途 | |
TWI720582B (zh) | VEGF和TGFβ的多激酶抑制劑及其用途 | |
WO2014174747A1 (ja) | 眼底疾患治療剤 | |
WO2007050720A1 (en) | Loteprednol etabonate against vascular dysfunction in the eye | |
EP3808352A1 (en) | Use of salidroside and derivative thereof in preparation of inhibitor medicament for diseases of ophthalmic fibrosis caused by abnormalities of extracellular matrix proteins | |
JP6861634B2 (ja) | 眼疾患を処置するための組成物及び方法 | |
KR20010040457A (ko) | 안약 조성물 | |
JP2016514123A (ja) | ジピリダモールを用いる眼疾患の治療において使用するための組成物 | |
JP2023509336A (ja) | 過剰血管新生に関連する眼疾患を治療する化合物 | |
WO2014142469A2 (ko) | 안과 염증 질환 치료용 점안제 조성물 및 이의 제조 방법 | |
WO2019117813A1 (en) | Focal adhesion kinase targeted therapeutics for the treatment of glaucoma and fibrosis | |
JPH08503968A (ja) | 増殖因子と代謝拮抗物質を含有する組成物 | |
Gillies et al. | Topical interferon alpha 2b for corneal haze after excimer laser photorefractive keratectomy | |
TW201717958A (zh) | 眼壓下降增強劑 | |
Ianchulev | Suprachoroidal space as a therapeutic target | |
JP7429500B2 (ja) | 角膜上皮障害治療剤 | |
KR102068697B1 (ko) | 염증성 안구표면질환의 예방 또는 치료용 조성물 | |
JP2018083778A (ja) | 濾過胞を維持するための組成物 | |
Dubey et al. | Management of neovascular glaucoma | |
Wang et al. | Celastrol alleviates subconjunctival fibrosis induced by silicone implants mimicking glaucoma surgery | |
Das et al. | Pterygium Excision with Adjunctive Subconjunctival Bevacizumab |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20110526 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20120412 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20130828 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20140212 |