JP2011500091A - 抗rsvgタンパク質抗体 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】RSVのGタンパク質の保存されたエピトープに結合し、ヒト被検体に投与したときには最小限の免疫原性である個々のモノクローナル抗体及びフラグメントは、RSV感染を処置することに有用である。
【選択図】図7
Description
Gタンパク質に関する高い親和性及び強力な中和能力を有し、群A及びBの両方のストレインと免疫反応性である抗体を含み、Fタンパク質と比べた場合にRSV Gタンパク質と特異的に免疫反応性である抗体が、RSVに最近感染したことが確認されたヒトのドナーから確認(ないし同定)された。更に、マウスの抗Gタンパク質抗体(初めてAnderson, et al., J. Virol. (1988) 62:4232-4238によって開示された)は、ヒト被検体に投与された場合に、免疫的な拒絶の機会を最小化するように修正(ないし変更)されている。本発明の抗体は、ヒト被検体におけるRSVに対する治療製剤として、そして、RSV抵抗性を増加することにも有用である。特に、サブタイプAのGタンパク質の160−176番目の位置(positions)の内の保存されたモチーフに対する抗体は、既に感染した被検体からウィルスを除去する(ないしクリアする)ことにおいて、そして、RSV感染に特徴的な気道炎症を減少させることにおいて、並びに予防的な使用に関して、治療上有効である。
従来の組み換え技術によって達成される。他には、技術が植物及びトランスジェニック動物(例えば、ウシのミルク)又は単一の細胞系由来の微生物、植物あるいは昆虫[細胞]における抗体を含む組み替え物質の生産のためにも知られている。
[実施例1]
131−2Gのクローニングおよびヒトへの適合化
製造元の指示(RNeasy(登録商標)キット: Qiagen Santa Clarita, Ca)に従って、全ての(total)mRNAを131−2Gハイブリドーマから抽出した。IgγのVH1からVH7の遺伝子ファミリーをターゲットするように設計(ないしデザイン)した7個のファミリー特異的な5´VγFR1プライマー、及び1個のコンセンサス3´Cγ1プライマーを131‐2G重鎖の可変領域の増幅およびシーケンスに使用した。1個のコンセンサス5´Vkプライマーを、各Vkファミリーを増幅するように設計し、1個のカッパー定常領域に特異的な逆(reverse)プライマーを、カッパー軽鎖の増幅とシーケンスに使用した。VHおよびVL転写産物を100ngの全てのRNAから、逆トランスクリプターゼポリメラーゼ連鎖反応(RT-PCR: reverse transcriptase polymerase chain reaction)を用いて増幅した。
131−2Gは、以下に示すIgH−VJ558VHlファミリーのVセグメントを使用する:
131−2Gは、以下に示すIgκV1サブグループのVセグメントを使用する。
抗体(Ab)の、そのコグネイトの(cognate)抗原(Ag)への結合は、高度に特異的な相互作用である。この特異性は、抗体結合サイトと抗原決定因子の間の構造的な相補性に起因する。抗体結合サイトは、主に高頻度可変(hypervariable)、又は相補性決定領域(CDRs)からの残基で構成され、時折、非高頻度可変(non-hypervariable)(又はフレームワーク:framework)領域からの残基が、全体ドメイン構造(overall domain structure)に影響を及ぼし、そして、それにより、結合サイトに影響を及ぼす。
RSV溶解物及び精製したGaタンパク質を使用したウエスタンブロット分析は、131‐2Gがリニア状エピトープを認識することを示唆した。131‐2Gの結合ドメインを、RSV‐GA2タンパク質配列由来の重複するペプチドのセットを使用してマップさせた。図2Aは、保存されたCX3Cモチーフの位置を含むGタンパク質配列を示す。詳細なエピトープマッピングを得るために、1つの残基ずつシフトした12‐mer(12量体)のGa由来ペプチドのファミリーについて、スキャンを実行した。そのようなペプチドのアレイを、1μg/mlの131-2Gモノクローナル抗体でプローブした。131‐2Gの結合を、ヤギ抗マウスペルオキシダーゼ標識抗体と、スーパーシグナル化学発光検出システム(super signal chemiluminescence detection system, Pierce, Rockford IL, USA)とを組み合わせて検出した。図3に概説するように、131‐2G抗体は、RSV-Gaタンパク質の残基157から176までにわたる、8つの連続したペプチドと反応する。131‐2Gによって認識されるエピトープは、ペプチド配列(157)SKPNNDFHFEVF(169)及び(169)HFEVFNFVPCSI(176)の内である。8つのペプチドからの共通配列に基づいて、131‐2Gの結合ドメインを、残基164−168にマップさせた。
[実施例2]
RSV‐Ga/Gbに対する抗体を分泌するヒトB細胞の単離
[実施例3]
RSV‐Ga/Gbに対するヒト抗体のクローニング
単離したヒトB細胞由来の全体の(total)mRNAを、商業的に入手可能なRNA精製キットを使用して抽出した(RNeasy;Qiagen(Germany))。逆転写‐PCRを、全体の(total)RNA調製物と、プライマーとしてのオリゴヌクレオチドとを使用して実行した。各サンプルについて3つのPCR反応を実行した:1つは軽鎖カッパー(κ)、1つは軽鎖ラムダ(λ)、そして1つはガンマ重鎖(γ)について実行した。QIAGEN(登録商標)ワンステップRT−PCRキット(Qiagenカタログ番号210212)を増幅に使用した。一組の(coupled)RT−PCR反応において、cDNAを、RT酵素(Omniscript(登録商標)及び、 Sensiscript(登録商標))の固有の配合(unique blend)で、C‐κ、C‐λ、又は、C‐γ遺伝子のCH1領域のコンセンサス[配列]と対応するアンチセンス配列に特異的プライマーを使用して合成し、RTを、50℃で1時間実行し、次にcDNAのPCR増幅を、高い特異性及び感度のため、HotStarTaq DNAポリメラーゼによって行った。各PCR反応は、5´センスプライマーの混合物を使用した。プライマー配列は、VH、VK及び、VLのリーダー配列に基づいた。PCR反応は、最初のホットスタートを95℃で15分間で行い、次に、95℃で30秒間(変性)、60℃で45秒間(アニーリング)、そして72℃で1分間(伸張)の20サイクルを行った。
第2ラウンドにおいて、5μlの最初の増幅反応のアリコットを適用した。使用したプライマーは、5´BglIIの制限サイト、及び3´XbaIの制限サイトを有する。30回のPCRサイクルを実行した。増幅の第1ラウンド及び第2ラウンドに、同一の条件を使用した。5マイクロリッターの各反応物を、1%アガロースゲル上に載せて分離し、そして、次に、エチジウムブロマイドで染色した。V‐C PCR産物は、それぞれ500及び450bpのVH及びVLの再配置したフラグメントを増幅することが予測される。およそ500bpの分子サイズを有するPCRバンド(複数)はポジティブの結果を示した。PCR産物を精製し(Qiagenゲル精製キット、カタログ番号28704)、そして、抽出したPCR産物を、特異的な定常領域プライマーを使用して直接的にシーケンスした。クローン化したフラグメントの配列を、組み換え体の生産のために調製したプラスミドをシーケンスすることによって確認した。
[実施例4]
本発明の抗体のエピトープマッピング及び親和性の決定
[表1]
*131−2Gと同一のエピトープ
[実施例5]
Gタンパク質との結合に対するウィルス粒子(Virions)との結合の比較
[実施例6]
中和アッセイ
[実施例7]
マウスでの抗G予防
[実施例8]
RSV‐Ga/Gbに対する抗体の治療効果
[実施例9]
感染した被検体における内在性抗体の特異性
Claims (28)
- 単離されたモノクローナル抗体(mAb)又はその免疫反応性のフラグメントであって、
(a)RSウィルス(respiratory syncytial virus:RSV)ストレインA2のGタンパク質の160−176番目の残基の内のエピトープに結合すること、
(b)ヒト被検体に投与されたときには、最小限の免疫原性であること、及び
(c)中和のためのプラーク減少中和試験(plaque reduction neutralization test:PRNT)アッセイにおいて500ng/ml未満のEC50を有すること
を特徴とするモノクローナル抗体又はフラグメント。 - 少なくとも1nMのRSV A2のGタンパク質に関する親和性を有することを特徴とする請求項1に記載のモノクローナル抗体又はフラグメント。
- RSV群BストレインのGタンパク質の対応するエピトープにも結合することを特徴とする請求項1又は2に記載のモノクローナル抗体又はフラグメント。
- 完全抗体の形態であることを特徴とする請求項1に記載のモノクローナル抗体。
- ヒトに適合した形態の131−2Gもしくはその免疫特異的フラグメントであるか、又は、1F12、3G12、1A5、3D3、1G1、2B11、5D8、2D10、3F9、1D4、1G8、6A12もしくは10C6、又はこれらの免疫特異的フラグメントであること、を特徴とする請求項1〜3のいずれか1項に記載のモノクローナル抗体又はフラグメント。
- 完全抗体であることを特徴とする請求項5に記載のモノクローナル抗体。
- 唯一(sole)の有効成分として、単離された請求項1に記載のモノクローナル抗体又はフラグメントを、医薬的に許容可能な賦形剤と共に含むことを特徴とする医薬組成物。
- 唯一の有効成分として、請求項1に記載の前記モノクローナル抗体又はフラグメント、及びRSV群BストレインのGタンパク質と免疫反応性である更なるモノクローナル抗体又はそのフラグメントを、医薬的に許容可能な賦形剤と共に含むことを特徴とする医薬組成物。
- 唯一の有効成分として、請求項1に記載の前記モノクローナル抗体又はフラグメント、及びRSVと免疫反応性の抗体以外の更なる薬剤を、医薬的に許容可能な賦形剤と共に含むことを特徴とする医薬組成物。
- 前記更なる薬剤が抗RSV剤であることを特徴とする請求項9に記載の組成物。
- 唯一の有効成分として、請求項1に記載の前記モノクローナル抗体又はフラグメント、及びRSV群BストレインのGタンパク質と免疫反応性である更なるモノクローナル抗体又はそのフラグメントを、RSVと免疫反応性の抗体以外の更なる化合物及び医薬的に許容可能な賦形剤と共に含む医薬組成物。
- 前記更なる薬剤が抗RSV剤であることを特徴とする請求項11に記載の組成物。
- RSVのFタンパク質と免疫反応性の1つ以上のモノクローナル抗体又はそのフラグメントを更に含むことを特徴とする請求項7〜12のいずれか1項に記載の医薬組成物。
- RSVに感染したヒト被検体において治療上の効果を有することを特徴とする請求項1〜6のいずれか1項に記載のモノクローナル抗体。
- RSVに感染したヒト被検体における気道炎症を減少させることを特徴とする請求項1〜6のいずれか1項に記載のモノクローナル抗体又はフラグメント。
- 請求項1〜6のいずれか1項に記載のモノクローナル抗体又はフラグメントをコードする第1のヌクレオチド配列(1つ以上)を含む1つ以上の核酸分子、又は、前記第1のヌクレオチド配列(1つ以上)に対し、その(ないしはそれらの)全長にわたって相補的な第2のヌクレオチド配列(1つ以上)を含む1つ以上の核酸分子。
- 請求項1〜6のいずれか1項に記載のモノクローナル抗体又はフラグメントを生産する組み換え宿主細胞又は不死化細胞。
- 哺乳類細胞、細菌細胞、昆虫細胞又は植物細胞であることを特徴とする請求項17に記載の組み換え宿主細胞。
- モノクローナル抗体又はその免疫反応性フラグメントを生産する方法であって、
請求項17に記載の細胞を培養するステップ、及び前記モノクローナル抗体又はフラグメントを回収するステップを含む方法。 - 請求項1〜6のいずれか1項に記載のモノクローナル抗体又はフラグメントを生産することを特徴とするヒト以外のトランスジェニック動物、又はトランスジェニック植物。
- RSVに感染した被検体(subject)におけるRSVを処置する方法であって、
そのような処置を必要とする被検体であり、かつ、RSVに感染した被検体に、有効量の請求項1〜6のいずれか1項に記載のモノクローナル抗体又はフラグメントを投与するステップを含む方法。 - ウィルス性の負荷を減少させる結果になることを特徴とする請求項21に記載の方法。
- 前記被検体がヒトであることを特徴とする請求項21に記載の方法。
- RSVに感染した被検体(subject)におけるRSVを処置する方法であって、
そのような処置を必要とする被検体であり、かつ、RSVに感染した被検体に、有効量の請求項7〜12のいずれか1項に記載の医薬組成物を投与するステップを含む方法。 - ウィルス性の負荷を減少させる結果になることを特徴とする請求項24に記載の方法。
- 前記被検体がヒトであることを特徴とする請求項24に記載の方法。
- ヒト被検体におけるRSVによる感染に対する抵抗性を強める方法であって、
そのような抵抗性を必要とするヒト被検体に、有効量の請求項1〜6のいずれか1項に記載のモノクローナル抗体又はフラグメントを投与するステップを含む方法。 - ヒト被検体におけるRSVによる感染に対する抵抗性を強める方法であって、
そのような抵抗性を必要とするヒト被検体に、有効量の請求項7〜12のいずれか1項に記載の医薬組成物を投与することを含む方法。
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Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20150143544A (ko) * | 2013-04-15 | 2015-12-23 | 크루셀 홀란드 비.브이. | Rsv g 단백질에 결합하는 인간 항체 |
KR20150143545A (ko) * | 2013-04-15 | 2015-12-23 | 크루셀 홀란드 비.브이. | Rsv g 단백질에 결합하는 인간 항체 |
JP2021534239A (ja) * | 2018-08-08 | 2021-12-09 | トレリス・バイオサイエンス,エルエルシー | Rsvの改善された受動的および能動的ワクチン |
Families Citing this family (21)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP1599183A2 (en) * | 2002-11-26 | 2005-11-30 | Gilead Sciences, Inc. | Method of drug loading in liposomes by gradient |
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AU2018213374B2 (en) | 2017-01-27 | 2024-09-05 | Ngm Biopharmaceuticals, Inc. | Glucagon receptor binding proteins and methods of use thereof |
JP7445895B2 (ja) * | 2017-10-13 | 2024-03-08 | トレリス・バイオサイエンス・インコーポレーテッド | 呼吸器合胞体ウイルスgタンパク質中央保存領域の立体構造エピトープ |
US12060437B2 (en) | 2018-03-23 | 2024-08-13 | North Carolina State University | Methods and compositions for antibody to high affinity receptor for IgE |
EP3829636A1 (en) | 2018-07-27 | 2021-06-09 | NGM Biopharmaceuticals, Inc. | Use of glucagon receptor antagonists with immunotherapeutic agent |
EP4031171A1 (en) * | 2019-09-20 | 2022-07-27 | Universiteit Antwerpen | A novel human respiratory syncytial virus strain and its use |
WO2024027708A1 (zh) * | 2022-08-02 | 2024-02-08 | 诺纳生物(苏州)有限公司 | Msln抗体药物偶联物 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2007116947A (ja) * | 2005-10-26 | 2007-05-17 | Evec Inc | ヒトgm−csfに結合するヒトのモノクローナル抗体並びにその抗原結合部分 |
WO2007094423A1 (ja) * | 2006-02-15 | 2007-08-23 | Evec Incorporated | ヒトサイトメガロウイルスに結合するヒトのモノクローナル抗体並びにその抗原結合部分 |
WO2007101441A1 (en) * | 2006-03-06 | 2007-09-13 | Symphogen A/S | Recombinant polyclonal antibody for treatment of respiratory syncytial virus infections |
Family Cites Families (11)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
PT705109E (pt) * | 1993-05-25 | 2001-02-28 | American Cyanamid Co | Adjuvantes para vacinas contra virus sinciciais respiratorios |
US6020182A (en) * | 1996-07-12 | 2000-02-01 | Connaught Laboratories Limited | Subunit respiratory syncytial virus vaccine preparation |
FR2766192B1 (fr) * | 1997-07-17 | 2001-07-13 | Pf Medicament | Epitopes du vrs et anticorps les comportant, utiles dans le diagnostic et la therapie |
US6642062B2 (en) | 1998-09-03 | 2003-11-04 | Trellis Bioinformatics, Inc. | Multihued labels |
US7083950B2 (en) | 1998-09-25 | 2006-08-01 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | High affinity fusion proteins and therapeutic and diagnostic methods for use |
WO2000043040A1 (en) | 1999-01-22 | 2000-07-27 | The Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Methods for the prevention and treatment of diseases caused by an inflammatory response mediated by endogenous substance p by using anti-substance p antibodies |
EP1334119B2 (en) * | 2000-10-18 | 2018-11-28 | THE GOVERNMENT OF THE UNITED STATES OF AMERICA, as represented by THE SECRETARY, DEPARTMENT OF HEALTH AND HUMAN SERVICES | Compositions and methods for modulating rsv infection and immunity |
US7413868B2 (en) | 2003-11-05 | 2008-08-19 | Trellis Bioscience, Inc. | Use of particulate labels in bioanalyte detection methods |
CN1986569A (zh) * | 2005-12-23 | 2007-06-27 | 首都儿科研究所 | 人源抗呼吸道合胞病毒中和性基因工程Fab抗体 |
JP2009544014A (ja) | 2006-07-12 | 2009-12-10 | トレリス バイオサイエンス、インク. | セルスポット・アプリケーション |
AU2008316703B2 (en) * | 2007-10-25 | 2012-09-27 | Trellis Bioscience, Inc. | Anti-RSV G protein antibodies |
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Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2007116947A (ja) * | 2005-10-26 | 2007-05-17 | Evec Inc | ヒトgm−csfに結合するヒトのモノクローナル抗体並びにその抗原結合部分 |
WO2007094423A1 (ja) * | 2006-02-15 | 2007-08-23 | Evec Incorporated | ヒトサイトメガロウイルスに結合するヒトのモノクローナル抗体並びにその抗原結合部分 |
WO2007101441A1 (en) * | 2006-03-06 | 2007-09-13 | Symphogen A/S | Recombinant polyclonal antibody for treatment of respiratory syncytial virus infections |
Non-Patent Citations (5)
Title |
---|
J.GEN.VIROL., vol. 70, JPN6013039725, 1989, pages 2953 - 2961, ISSN: 0002604806 * |
JMB, 1992, 224, PP.487-499, JPN6013015126, ISSN: 0002899704 * |
JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY, vol. 23, no. 3, JPN6013039721, 1986, pages 475 - 480, ISSN: 0002604805 * |
JOURNAL OF VIROLOGY, vol. 62, no. 11, JPN6013039718, 1988, pages 4232 - 4238, ISSN: 0002604804 * |
PROC. NATL. ACAD. SCI. U S A., 1992, 89(10), PP.4285-4289, JPN6014016800, ISSN: 0002899705 * |
Cited By (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR20150143544A (ko) * | 2013-04-15 | 2015-12-23 | 크루셀 홀란드 비.브이. | Rsv g 단백질에 결합하는 인간 항체 |
KR20150143545A (ko) * | 2013-04-15 | 2015-12-23 | 크루셀 홀란드 비.브이. | Rsv g 단백질에 결합하는 인간 항체 |
JP2016521969A (ja) * | 2013-04-15 | 2016-07-28 | クルセル ホランド ベー ヴェー | Rsvgタンパク質に結合するヒト抗体 |
JP2016522804A (ja) * | 2013-04-15 | 2016-08-04 | クルセル ホランド ベー ヴェー | Rsvgタンパク質に結合するヒト抗体 |
KR102201554B1 (ko) * | 2013-04-15 | 2021-01-12 | 얀센 백신스 앤드 프리벤션 비.브이. | Rsv g 단백질에 결합하는 인간 항체 |
KR102201555B1 (ko) * | 2013-04-15 | 2021-01-12 | 얀센 백신스 앤드 프리벤션 비.브이. | Rsv g 단백질에 결합하는 인간 항체 |
JP2021534239A (ja) * | 2018-08-08 | 2021-12-09 | トレリス・バイオサイエンス,エルエルシー | Rsvの改善された受動的および能動的ワクチン |
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