JP2010081889A - 乳酸菌検出用pcrプライマー - Google Patents
乳酸菌検出用pcrプライマー Download PDFInfo
- Publication number
- JP2010081889A JP2010081889A JP2008255453A JP2008255453A JP2010081889A JP 2010081889 A JP2010081889 A JP 2010081889A JP 2008255453 A JP2008255453 A JP 2008255453A JP 2008255453 A JP2008255453 A JP 2008255453A JP 2010081889 A JP2010081889 A JP 2010081889A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- lactobacillus
- pcr
- seq
- lactic acid
- kefiranofaciens
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 title claims abstract description 70
- 230000003321 amplification Effects 0.000 claims abstract description 38
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 claims abstract description 38
- 241000108055 Lactobacillus kefiranofaciens Species 0.000 claims abstract description 34
- 239000006356 lactobacillus kefiranofaciens Substances 0.000 claims abstract description 33
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims abstract description 31
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 29
- 101710186984 DNA gyrase subunit B Proteins 0.000 claims abstract description 16
- 241000192130 Leuconostoc mesenteroides Species 0.000 claims abstract description 16
- 241001468191 Lactobacillus kefiri Species 0.000 claims abstract description 14
- 241001643449 Lactobacillus parakefiri Species 0.000 claims abstract description 8
- 241001407638 Lactobacillus kefiranofaciens subsp. kefiranofaciens Species 0.000 claims abstract description 4
- 241001407640 Lactobacillus kefiranofaciens subsp. kefirgranum Species 0.000 claims abstract description 4
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 132
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 claims description 66
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 claims description 66
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 49
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims description 40
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 claims description 21
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 claims description 21
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 20
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 19
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 claims description 10
- 238000011002 quantification Methods 0.000 claims description 9
- 241000894007 species Species 0.000 claims description 8
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims description 7
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 5
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 5
- 235000015141 kefir Nutrition 0.000 abstract description 45
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 26
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 15
- 101150013736 gyrB gene Proteins 0.000 description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 11
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 10
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 8
- 101150012629 parE gene Proteins 0.000 description 6
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 5
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 4
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 4
- 235000015140 cultured milk Nutrition 0.000 description 4
- 235000021067 refined food Nutrition 0.000 description 4
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 4
- 235000013405 beer Nutrition 0.000 description 3
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 3
- 238000013461 design Methods 0.000 description 3
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 3
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 3
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 3
- 238000003505 heat denaturation Methods 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- SERLAGPUMNYUCK-URHLDCCQSA-N (2R,3S,4R,5S)-6-[(3R,4S,5S,6R)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyhexane-1,2,3,4,5-pentol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)COC1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SERLAGPUMNYUCK-URHLDCCQSA-N 0.000 description 2
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 2
- 229920001755 Kefiran Polymers 0.000 description 2
- 239000012807 PCR reagent Substances 0.000 description 2
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 239000005547 deoxyribonucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000002637 deoxyribonucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N ethidium bromide Chemical compound [Br-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CC)=C1C1=CC=CC=C1 ZMMJGEGLRURXTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960005542 ethidium bromide Drugs 0.000 description 2
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 2
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 2
- MPVDXIMFBOLMNW-ISLYRVAYSA-N 7-hydroxy-8-[(E)-phenyldiazenyl]naphthalene-1,3-disulfonic acid Chemical compound OC1=CC=C2C=C(S(O)(=O)=O)C=C(S(O)(=O)=O)C2=C1\N=N\C1=CC=CC=C1 MPVDXIMFBOLMNW-ISLYRVAYSA-N 0.000 description 1
- 101150076489 B gene Proteins 0.000 description 1
- 108010077805 Bacterial Proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000006820 DNA synthesis Effects 0.000 description 1
- 102000016928 DNA-directed DNA polymerase Human genes 0.000 description 1
- 108010014303 DNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 240000001929 Lactobacillus brevis Species 0.000 description 1
- 235000013957 Lactobacillus brevis Nutrition 0.000 description 1
- 241000634997 Leucon Species 0.000 description 1
- 241000192132 Leuconostoc Species 0.000 description 1
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 108091036078 conserved sequence Proteins 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 238000001215 fluorescent labelling Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 230000008821 health effect Effects 0.000 description 1
- UQVDQSWZQXDUJB-UHFFFAOYSA-N hydron;7h-purin-6-amine;chloride Chemical compound Cl.NC1=NC=NC2=C1NC=N2 UQVDQSWZQXDUJB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000012160 loading buffer Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 102000054765 polymorphisms of proteins Human genes 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 238000012207 quantitative assay Methods 0.000 description 1
- 238000012113 quantitative test Methods 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000012192 staining solution Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 230000031068 symbiosis, encompassing mutualism through parasitism Effects 0.000 description 1
- 238000009281 ultraviolet germicidal irradiation Methods 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
【解決手段】ケフィアグレイン構成乳酸菌のDNAジャイレースサブユニットB遺伝子塩基配列において、他の菌株にはない検出・識別に最適な領域及びこの領域の増幅用PCRプライマーセットを設計し、これを用いて検査することで、簡便で短時間に目的の菌株を個別に検出、識別、定量する。
【選択図】なし
Description
(1)ケフィアグレイン構成乳酸菌、ラクトバシルス・ケフィラノファシエンス(Lactobacillus kefiranofaciens)のDNAジャイレースサブユニットB遺伝子の一部をPCR反応により増幅することで、当該菌株の検出・識別及び/又は定量をすることを特徴とする、配列番号1及び2に記載の塩基配列からなるPCRプライマーセット(F−プライマー(配列番号1)とR−プライマー(配列番号2)のセット)、及び配列番号3に記載の塩基配列からなる該遺伝子の増幅領域DNA。
(2)ケフィアグレイン構成乳酸菌、ラクトバシルス・ケフィーリ(Lactobacillus kefiri)のDNAジャイレースサブユニットB遺伝子の一部をPCR反応により増幅することで、当該菌株の検出・識別及び/又は定量をすることを特徴とする、配列番号4及び5に記載の塩基配列からなるPCRプライマーセット(F−プライマー(配列番号4)とR−プライマー(配列番号5)のセット)、及び配列番号6に記載の塩基配列からなる該遺伝子の増幅領域DNA。
(3)ケフィアグレイン構成乳酸菌、ラクトバシルス・パラケフィーリ(Lactobacillus parakefiri)のDNAジャイレースサブユニットB遺伝子の一部をPCR反応により増幅することで、当該菌株の検出・識別及び/又は定量をすることを特徴とする、配列番号7及び8に記載の塩基配列からなるPCRプライマーセット(F−プライマー(配列番号7)とR−プライマー(配列番号8)のセット)、及び配列番号9に記載の塩基配列からなる該遺伝子の増幅領域DNA。
(4)ケフィアグレイン構成乳酸菌、ロイコノストック・メセンテロイデス(Leuconostoc mesenteroides)のDNAジャイレースサブユニットB遺伝子の一部をPCR反応により増幅することで、当該菌株の検出・識別及び/又は定量をすることを特徴とする、配列番号10及び11に記載の塩基配列からなるPCRプライマーセット(F−プライマー(配列番号10)とR−プライマー(配列番号11)のセット)、及び配列番号12に記載の塩基配列からなる該遺伝子の増幅領域DNA。
(5)ケフィアグレイン構成乳酸菌、ラクトバシルス・ケフィラノファシエンスの亜種ケフィラノファシエンス(Lactobacillus kefiranofaciens subsp. kefiranofaciens)のDNAジャイレースサブユニットB遺伝子の一部をPCR反応により増幅することで、当該菌株の検出・識別及び/又は定量をすることを特徴とする、配列番号13及び14に記載の塩基配列からなるPCRプライマーセット(F−プライマー(配列番号13)とR−プライマー(配列番号14)のセット)、及び配列番号15に記載の塩基配列からなる該遺伝子の増幅領域DNA。
(6)ケフィアグレイン構成乳酸菌、ラクトバシルス・ケフィラノファシエンスの亜種ケフィアグラナム(Lactobacillus kefiranofaciens subsp. kefirgranum)のDNAジャイレースサブユニットB遺伝子の一部をPCR反応により増幅することで、当該菌株の検出・識別及び/又は定量をすることを特徴とする、配列番号14及び16に記載の塩基配列からなるPCRプライマーセット(F−プライマー(配列番号16)とR−プライマー(配列番号14)のセット)、及び配列番号17に記載の塩基配列からなる該遺伝子の増幅領域DNA。
(7)(1)〜(6)に記載のPCRプライマーセット(PCR用のF−プライマーとR−プライマーのセット)を少なくとも1種以上含む、ケフィアグレイン構成乳酸菌、ラクトバシルス・ケフィラノファシエンス(Lactobacillus kefiranofaciens)、その亜種(Lactobacillus kefiranofaciens subsp. kefiranofaciens、Lactobacillus kefiranofaciens subsp. kefirgranum)、ラクトバシルス・ケフィーリ(Lactobacillus kefiri)、ラクトバシルス・パラケフィーリ(Lactobacillus parakefiri)、ロイコノストック・メセンテロイデス(Leuconostoc mesenteroides)のうち少なくとも1種以上の乳酸菌の検出・識別及び/又は定量用PCR検査キット。
(8)(1)〜(6)に記載のPCRプライマーセット(PCR用のF−プライマーとR−プライマーのセット)を少なくとも1種以上使用して、検体のDNAをPCR反応により増幅することで、ケフィアグレイン構成乳酸菌、ラクトバシルス・ケフィラノファシエンス(Lactobacillus kefiranofaciens)、その亜種(Lactobacillus kefiranofaciens subsp. kefiranofaciens、Lactobacillus kefiranofaciens subsp. kefirgranum)、ラクトバシルス・ケフィーリ(Lactobacillus kefiri)、ラクトバシルス・パラケフィーリ(Lactobacillus parakefiri)、ロイコノストック・メセンテロイデス(Leuconostoc mesenteroides)のうち少なくとも1種以上の乳酸菌を検出・識別及び/又は定量する方法。
(9)(7)に記載のPCR検査キットを使用することを特徴とする、(8)に記載の乳酸菌を検出・識別及び/又は定量する方法。
検査に用いた検出・識別標的菌株(8株)及び標的菌株以外の乳酸菌(7株)については表1に示した。菌株名に記載されるJCMおよびNBRCは、菌株分譲機関を示している。菌株名にJCMと記載されているものは、独立行政法人理化学研究所バイオリソースセンター微生物材料開発室より入手し、菌株名にNBRCと記載されているものは、独立行政法人製品評価技術基盤機構バイオテクノロジー本部生物遺伝資源部門から入手した。また、菌株名の最後に「T」とつくものは、Type Strain(基準株)であることを示している。
検出・識別標的菌株のgyrB遺伝子配列情報とgyrB遺伝子の塩基配列が公知である様々な乳酸菌の配列情報を比較し、通常のPCR検査に適用可能な領域及びプライマーであること、目的の菌株の目的領域のみを増幅、検出し、目的の菌株の他の領域や他の菌株では増幅反応を行わないプライマーであること、増幅後のDNAについて特別な操作を必要としないこと、リアルタイムPCR検査にも適用可能な100bp前後の長さの増幅領域であることを設計基準として、各標的菌株の特異的プライマーセット(図1)及び増幅領域(図2)を設計した。
上述の設計した各菌株を特異的に検出するためのプライマーは、全て定法に従い、単体のデオキシリボヌクレオチドからDNA合成を行って作製した。
各プライマーセットにつき、表2及び表3に示す組成でPCR反応液を調製した。
株式会社不二家で保有しているケフィアグレイン(Kefir grain F20)20mgから、DNeasy Blood & Tissue Kit(QIAGEN社製品)を用いて抽出したものをDNA溶液として使用し、各プライマーセットにつき表2及び表3に示す組成でPCR反応液を調製した。これを、各プライマーセットについて実施例3と同じ条件でPCR増幅反応を行い、同じ条件でゲル電気泳動によってPCR増幅産物を確認した。
本発明は、ケフィアグレイン構成乳酸菌、ラクトバシルス・ケフィラノファシエンス、ラクトバシルス・ケフィーリ、ラクトバシルス・パラケフィーリ、ロイコノストック・メセンテロイデス及び、ラクトバシルス・ケフィラノファシエンスの亜種ケフィラノファシエンス、亜種ケフィアグラナムのすくなくともひとつについて、PCR検査によって簡便に短時間に検出・識別及び/又は定量するために使用することを特徴とする、各配列番号に示される塩基配列からなるPCRプライマーセット、その増幅領域DNA、及びこれらを用いた検査方法に関するものである。
本発明によれば、ケフィアグレイン構成乳酸菌のDNAジャイレースサブユニットB遺伝子塩基配列において、他の菌株にはない検出・識別に最適な領域及びこの領域の増幅用PCRプライマーセットを設計し、これを用いて検査することにより、簡便で短時間に目的の菌株を個別に検出、識別、定量することがはじめて可能となった。
Claims (9)
- ケフィアグレイン構成乳酸菌、ラクトバシルス・ケフィラノファシエンス(Lactobacillus kefiranofaciens)のDNAジャイレースサブユニットB遺伝子の一部をPCR反応により増幅することで、当該菌株の検出・識別及び/又は定量をすることを特徴とする、配列番号1及び2に記載の塩基配列からなるPCRプライマーセット、及び配列番号3に記載の塩基配列からなる該遺伝子の増幅領域DNA。
- ケフィアグレイン構成乳酸菌、ラクトバシルス・ケフィーリ(Lactobacillus kefiri)のDNAジャイレースサブユニットB遺伝子の一部をPCR反応により増幅することで、当該菌株の検出・識別及び/又は定量をすることを特徴とする、配列番号4及び5に記載の塩基配列からなるPCRプライマーセット、及び配列番号6に記載の塩基配列からなる該遺伝子の増幅領域DNA。
- ケフィアグレイン構成乳酸菌である、ラクトバシルス・パラケフィーリ(Lactobacillus parakefiri)のDNAジャイレースサブユニットB遺伝子の一部をPCR反応により増幅することで、当該菌株の検出・識別及び/又は定量をすることを特徴とする、配列番号7及び8に記載の塩基配列からなるPCRプライマーセット、及び配列番号9に記載の塩基配列からなる該遺伝子の増幅領域DNA。
- ケフィアグレイン構成乳酸菌である、ロイコノストック・メセンテロイデス(Leuconostoc mesenteroides)のDNAジャイレースサブユニットB遺伝子の一部をPCR反応により増幅することで、当該菌株の検出・識別及び/又は定量をすることを特徴とする、配列番号10及び11に記載の塩基配列からなるPCRプライマーセット、及び配列番号12に記載の塩基配列からなる該遺伝子の増幅領域DNA。
- ケフィアグレイン構成乳酸菌である、ラクトバシルス・ケフィラノファシエンスの亜種ケフィラノファシエンス(Lactobacillus kefiranofaciens subsp. kefiranofaciens)のDNAジャイレースサブユニットB遺伝子の一部をPCR反応により増幅することで、当該菌株の検出・識別及び/又は定量をすることを特徴とする、配列番号13及び14に記載の塩基配列からなるPCRプライマーセット、及び配列番号15に記載の塩基配列からなる該遺伝子の増幅領域DNA。
- ケフィアグレイン構成乳酸菌である、ラクトバシルス・ケフィラノファシエンスの亜種ケフィアグラナム(Lactobacillus kefiranofaciens subsp. kefirgranum)のDNAジャイレースサブユニットB遺伝子の一部をPCR反応により増幅することで、当該菌株の検出・識別及び/又は定量をすることを特徴とする、配列番号14及び16に記載の塩基配列からなるPCRプライマーセット、及び配列番号17に記載の塩基配列からなる該遺伝子の増幅領域DNA。
- 請求項1〜6に記載のPCRプライマーセットを少なくとも1種以上含む、ケフィアグレイン構成乳酸菌、ラクトバシルス・ケフィラノファシエンス(Lactobacillus kefiranofaciens)、その亜種(Lactobacillus kefiranofaciens subsp. kefiranofaciens、Lactobacillus kefiranofaciens subsp. kefirgranum)、ラクトバシルス・ケフィーリ(Lactobacillus kefiri)、ラクトバシルス・パラケフィーリ(Lactobacillus parakefiri)、ロイコノストック・メセンテロイデス(Leuconostoc mesenteroides)のうち少なくとも1種以上の乳酸菌の検出・識別及び/又は定量用PCR検査キット。
- 請求項1〜6に記載のPCRプライマーセットを少なくとも1種以上使用して、検体のDNAをPCR反応により増幅することで、ケフィアグレイン構成乳酸菌、ラクトバシルス・ケフィラノファシエンス(Lactobacillus kefiranofaciens)、その亜種(Lactobacillus kefiranofaciens subsp. kefiranofaciens、Lactobacillus kefiranofaciens subsp. kefirgranum)、ラクトバシルス・ケフィーリ(Lactobacillus kefiri)、ラクトバシルス・パラケフィーリ(Lactobacillus parakefiri)、ロイコノストック・メセンテロイデス(Leuconostoc mesenteroides)のうち少なくとも1種以上の乳酸菌を検出・識別及び/又は定量する方法。
- 請求項7に記載のPCR検査キットを使用することを特徴とする、請求項8に記載の乳酸菌を検出・識別及び/又は定量する方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2008255453A JP5048622B2 (ja) | 2008-09-30 | 2008-09-30 | 乳酸菌検出用pcrプライマー |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2008255453A JP5048622B2 (ja) | 2008-09-30 | 2008-09-30 | 乳酸菌検出用pcrプライマー |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2010081889A true JP2010081889A (ja) | 2010-04-15 |
JP5048622B2 JP5048622B2 (ja) | 2012-10-17 |
Family
ID=42246472
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2008255453A Active JP5048622B2 (ja) | 2008-09-30 | 2008-09-30 | 乳酸菌検出用pcrプライマー |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP5048622B2 (ja) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR101767744B1 (ko) | 2015-10-14 | 2017-08-14 | 건국대학교 산학협력단 | Lactobacillus kefiri 유산균 특이 신속 정량 검출용 프라이머, 프로브 세트 및 이를 이용한 실시간 PCR 방법 |
KR101799788B1 (ko) | 2017-06-15 | 2017-11-21 | 한국식품연구원 | 류코노스톡 메센테로이드 WiKim33 검출용 프라이머 세트, 조성물 키트 및 이를 이용한 검출 방법 |
KR101906510B1 (ko) | 2018-02-07 | 2018-10-10 | 한국식품연구원 | 류코노스톡 메센테로이드 WiKim32 검출용 프라이머 세트, 조성물 키트 및 이를 이용한 검출 방법 |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR101616180B1 (ko) * | 2014-04-04 | 2016-04-27 | 건국대학교 산학협력단 | 케피어 발효유 감별 및 락토바실러스 케피라노팍시엔스 유산균 특이적인 정량 검출용 조성물 및 그 검출 방법 |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH07213299A (ja) * | 1994-02-02 | 1995-08-15 | Kaiyo Bio Technol Kenkyusho:Kk | Dnaジャイレース遺伝子による細菌の同定・検出法 |
JPH11290079A (ja) * | 1998-04-10 | 1999-10-26 | Marine Biotechnol Inst Co Ltd | ジャイレース遺伝子を用いた結核菌群構成細菌の同定・検出方法 |
JP2003250557A (ja) * | 2002-02-28 | 2003-09-09 | Sapporo Breweries Ltd | ジャイレース遺伝子を用いてラクトバチルス・ブレビス菌のビール混濁性を判定する方法 |
JP2005229839A (ja) * | 2004-02-17 | 2005-09-02 | Sapporo Breweries Ltd | 乳酸菌の検出・識別方法 |
JP2006320334A (ja) * | 2006-07-18 | 2006-11-30 | Marine Biotechnol Inst Co Ltd | 核酸断片を用いたレジオネラ菌の検出及び同定方法 |
WO2008121444A2 (en) * | 2007-02-12 | 2008-10-09 | The United States Of America, As Represented By The Secretary Of Agriculture | Genetic methods for speciating campylobacter |
-
2008
- 2008-09-30 JP JP2008255453A patent/JP5048622B2/ja active Active
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH07213299A (ja) * | 1994-02-02 | 1995-08-15 | Kaiyo Bio Technol Kenkyusho:Kk | Dnaジャイレース遺伝子による細菌の同定・検出法 |
JPH11290079A (ja) * | 1998-04-10 | 1999-10-26 | Marine Biotechnol Inst Co Ltd | ジャイレース遺伝子を用いた結核菌群構成細菌の同定・検出方法 |
JP2003250557A (ja) * | 2002-02-28 | 2003-09-09 | Sapporo Breweries Ltd | ジャイレース遺伝子を用いてラクトバチルス・ブレビス菌のビール混濁性を判定する方法 |
JP2005229839A (ja) * | 2004-02-17 | 2005-09-02 | Sapporo Breweries Ltd | 乳酸菌の検出・識別方法 |
JP2006320334A (ja) * | 2006-07-18 | 2006-11-30 | Marine Biotechnol Inst Co Ltd | 核酸断片を用いたレジオネラ菌の検出及び同定方法 |
WO2008121444A2 (en) * | 2007-02-12 | 2008-10-09 | The United States Of America, As Represented By The Secretary Of Agriculture | Genetic methods for speciating campylobacter |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR101767744B1 (ko) | 2015-10-14 | 2017-08-14 | 건국대학교 산학협력단 | Lactobacillus kefiri 유산균 특이 신속 정량 검출용 프라이머, 프로브 세트 및 이를 이용한 실시간 PCR 방법 |
KR101799788B1 (ko) | 2017-06-15 | 2017-11-21 | 한국식품연구원 | 류코노스톡 메센테로이드 WiKim33 검출용 프라이머 세트, 조성물 키트 및 이를 이용한 검출 방법 |
KR101906510B1 (ko) | 2018-02-07 | 2018-10-10 | 한국식품연구원 | 류코노스톡 메센테로이드 WiKim32 검출용 프라이머 세트, 조성물 키트 및 이를 이용한 검출 방법 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP5048622B2 (ja) | 2012-10-17 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP5238248B2 (ja) | rRNAを標的とした微生物の定量的解析方法 | |
JP5048622B2 (ja) | 乳酸菌検出用pcrプライマー | |
CN116042902A (zh) | 一种同时检测六种念珠菌的实时荧光核酸恒温扩增检测试剂盒及其专用引物和探针 | |
Deng et al. | Detection of culturable and viable but non‐culturable cells of beer spoilage lactic acid bacteria by combined use of propidium monoazide and horA‐specific polymerase chain reaction | |
EP1563101A1 (en) | Method for the identification of sulfo-reducing bacteria | |
JP3525259B2 (ja) | ペクチネータス属菌の検出 | |
Oldham et al. | Methods for detection and identification of beer-spoilage microbes | |
KR101299627B1 (ko) | 식중독 세균 동시 검출용 프라이머 및 이의 용도 | |
KR102084862B1 (ko) | 실시간 중합효소연쇄반응을 이용한 초산균의 검출 및 정량 방법 | |
KR20180053831A (ko) | 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis) 특이적 프라이머 및 이를 이용한 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis) 검출방법 | |
JP4117475B2 (ja) | プライマーセット及び細菌の検出方法 | |
JPH1118780A (ja) | 乳酸菌検出用オリゴヌクレオチド及びそれを用いた判定法 | |
JP2005229839A (ja) | 乳酸菌の検出・識別方法 | |
WO2019221219A1 (ja) | 細菌の検査方法、細菌の検査用マイクロアレイ、細菌の検査用キット、細菌の検査用プローブセット、及び細菌の検査用プライマーセット | |
TWI692528B (zh) | 用於檢測大腸桿菌之方法以及使用之分子標記 | |
JP2005525804A (ja) | insituハイブリダイゼーションおよびフローサイトメトリーを用いる微生物の同定方法 | |
Klaubauf et al. | Research Tools and Methods for the Analysis of Microbiota in Dairy Products | |
JP2005006556A (ja) | ビール有害菌の検出方法 | |
KR102655121B1 (ko) | 락토바실러스 사케이 k040706 균주 검출용 프라이머 세트 및 이의 용도 | |
US20050048524A1 (en) | Molecular biological identification techniques for microorganisms | |
JP2012187067A (ja) | ラクトバチルス属細菌の定量方法 | |
JP2008005779A (ja) | ラクトバチルス・ブレビス検出のためのプライマーおよびそれを用いた検出法 | |
KR101657043B1 (ko) | 그람양성 식중독 유발 세균 검출용 올리고뉴클레오타이드 및 이의 용도 | |
JP2019201626A (ja) | 細菌の検査方法、細菌の検査用マイクロアレイ、細菌の検査用キット、細菌の検査用プローブセット、及び細菌の検査用プライマーセット | |
JP6400981B2 (ja) | タラロマイセス属に属する種の検出に用いられるオリゴヌクレオチド及びプライマー対、並びにタラロマイセス属に属する種の検出キット及び検出方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20110913 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20111028 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20120710 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20120719 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20150727 Year of fee payment: 3 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5048622 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |