JP2009541339A - 生物的防除剤と殺線虫性種子コーティングとの組み合わせ - Google Patents
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Abstract
Description
このような殺真菌剤は、真菌である生物的防除剤が処理に含まれる場合に、生物的防除真菌が殺真菌剤に対する抵抗性を示すように選択され得る。
「生物的防除剤」という用語は、例えば昆虫類、蛛形類、唇脚類、倍脚類等の節足動物である有害生物だけでなく、例えば病原性真菌、細菌および線虫等の植物浸襲および/または植物病原体を阻害するか、または減らす生物、あるいは植物浸襲および/または植物病原体の組み合わせの成長を阻害する、生物のことをいう。
式中、nは0、1または2であり、かつチアゾール環は置換されていてもよい。アバメクチン、アルジカルブ、チオジカルブ(thiadicarb)、ジメトエート、メソミル、式Xの化合物およびオキサミルが、本発明における使用のための好ましい殺線虫剤である。
これらの実施例は、キュウリおよびトマトでの試験における、線虫破壊真菌(nematode-destroying fungus)と組み合わせたアバメクチンの種子処理を評価する。
鉢(直径10 cm)に250 g(乾燥重量)のスチーム殺菌した川底の砂をつめた。6反復をともなう10処理を準備した(表1)。真菌性拮抗剤であるポコニア・クラミドスポリアを、高圧滅菌した湿ったキビ種子上、22℃で、3週間増殖させた。コロニーを形成したキビを、層流フード(laminar flow hood)中で乾燥し、使用するまで、4℃で、無菌で保管した。土壌接種のために、ポコニア・クラミドスポリアのコロニーを形成したキビを、砂と徹底的に混合した。比率1に関しての真菌の個体数密度は、約2000厚壁胞子/土壌ccであり、かつ比率2に関しては、約4000厚壁胞子/土壌ccであった。
キュウリの種子コーティング試験1
試験は高い質であった。試験中、他の病気への罹患はみられなかった。処理間の初期成長の違いを観察し、記録に残した(表2)。低比率のアバメクチンでは、植物成長が改善されず、また根こぶ形成も有意に減少しなかったように、作物への利益を示さなかった(表2)。同様に、低比率のポコニアは、植物成長およびこぶ形成へのいずれの有意な作用も有しなかった。高比率のポコニアは、それ単独で、成長促進またはこぶ形成の低減に関して、それほど良好なわけではなかった。対照的に、0.3 mg/種子の比率のアバメクチンによる線虫の攻撃からの保護は、無処理対照植物と比較して、試験の終了時の植物の乾燥重量および主要なつるの長さだけでなく、初期の植物成長の有意な増大をもたらした。高比率のポコニアといずれの比率のアバメクチンとの組み合わせも、ほとんど全てのパラメータにおいて全ての他の処理より優れており、植物の性能に関して、線虫なしの対照との有意差はなかった(表2)。組み合わせ処理の分析結果を図1に示す。線虫個体数は、卵塊によって表した。無処理対照は最大の卵塊を有し、全ての処理が有意な低減をもたらした。しかしながら、卵塊数の大きな変動による有意差は処理間でみられなかった(表2)。
nt=種子処理なし;n-inf.=rkn(根こぶ線虫、メロイドギネ・インコグニタ 系統1)なし;Pc 1=ポコニア・クラミドスポリア 比率1(2000厚膜胞子/土壌g);Pc 2=ポコニア・クラミドスポリア 比率2(4000厚膜胞子/土壌g);aba=0.1または0.3 mg/種子でのアバメクチン種子コーティング)。
a標準誤差(P=0.05)をともなう平均値。同じカラム内の同一文字は、結果に有意差がなかったことを意味する。
第二の試験の質は良好であった。他の病気への罹患はみられなかった。結果は第一の試験と同様であった。根こぶ線虫からの初期の保護は、処理していない対照と比較して、明らかで有意な植物成長の違いをもたらした(表3)。植物の乾燥重量およびつるの長さは、処理していない対照と比較して、全ての処理によって増大した(表3)。第一の試験でのように、卵塊数は処理間で著しく異なることはなかった。主に、これは、十分な栄養補給場所を線虫に与えていなかった処理していないもの(処理2)における、阻害された植物成長および貧弱な根系によるものである。従って、線虫保護され、かつそれによってより大きくなった根系は、季節の終わりに、対照よりも大きな線虫個体数を有するかもしれない。高比率のアバメクチンおよび高比率のポコニア・クラミドスポリアの組み合わせは、再び、最も低いこぶ形成評定をもたらした(表3)。
nt=種子処理なし;n-inf.=rkn(根こぶ線虫、メロイドギネ・インコグニタ 系統1)なし;Pc 1=ポコニア・クラミドスポリア 比率1(2000厚膜胞子/土壌g);Pc 2=ポコニア・クラミドスポリア 比率2(4000厚膜胞子/土壌g);aba=0.1または0.3 mg/種子でのアバメクチン種子コーティング)。
a標準誤差(P=0.05)をともなう平均値。同じカラム内の同一文字は、結果に有意差がなかったことを意味する。
温室試験は、蒸気殺菌した砂(250 cm3)をつめたパルプ製の鉢(直径10 cm)の中で実行した。前記のように、生物的防除生物(BCO)であるポコニア・クラミドスポリアを増殖させた。ポコニア・クラミドスポリアを接種したキビ種子を洗浄し(1:2 の重量/体積のキビ種子と滅菌蒸留水、電気ブレンダーで2分間振盪)、100メッシュのふるいを通して、該キビを真菌厚膜胞子から除去した。これらを接種源として作用させ、計算板(counting chamber)(Fuchs-Rosenthal)で数えた。該厚膜胞子を砂と徹底的に混合した。比率1に関しての真菌の個体数密度は、約2000厚壁胞子/土壌gであり、かつ比率2に関しては、約4000厚壁胞子/土壌gであった(表1)。トマト種子(リコペルシクム・エスクレンツム・キュヴェ・タイニー・ティム(Lycopersicum esculentum cv. Tiny Tim))は、0.1 mgもしくは0.3 mgのアバメクチン/種子でコーティングされるか、またはこれ以上の処理を受けなかった(表1)。トマト種子を、市販の種苗用基質の入った播種トレイ中に播種し、2週間後、植物を10 cmのパルプ製鉢に移植した。最初の処理を除いて、それぞれの鉢に、約30000卵のメロイドギネ・インコグニタを侵襲させた。ベールマンファネル法(Baerman funnel)での卵の孵化比率は、5日間、26℃で、約10%であった。それぞれの鉢は徐放性肥料を受けた(Osmocote Vegetable and Bedding Plant food, 14-14-14, The Scotts Company)。鉢を、1処理あたり6反復で、ランダム化完全ブロックデザインにより準備し、温室内で、約24℃±3℃および周囲照明で育成した。必要に応じて、植物に毎日水をやった。植物の丈を測定し、苗条を試験の終了時に切り取った。苗条を、69℃で72時間、乾燥器に入れて、それぞれの植物の重量を測定した。根こぶ形成の程度を0〜10の等級(前記、Zeck, 1971)で評価した。
試験の質は両方とも非常に良好であり、結果は同様であった。従って、データをそれゆえに分析のために併合した。全ての処理が、無処理照合基準(check)と比較して、植物の丈および乾燥重量を増大させた(表4)。概して、組み合わせ処理は、最も高い植物および最大乾燥重量をもつ植物をもたらした。非常に重篤な根こぶ線虫の侵襲にもかかわらず、高比率のBCOと組み合わせた高比率のアバメクチン種子コーティングは、無侵襲の対照と同様の乾燥重量をもたらした。根こぶ形成は、アバメクチンにより、照合基準よりも低い約2の等級分類に低減された。この有効性は、アバメクチン種子コーティングで典型的なものである。BCOとの組み合わせが、低比率のアバメクチンの有効性をわずかに改善しただけであるが、こぶ形成は、どちらの比率のポコニア・クラミドスポリアでもその組み合わせ処理の両方で、劇的に低減された。
nt=種子処理なし;n-inf.=rkn(根こぶ線虫、メロイドギネ・インコグニタ 系統1)なし;Pc 1=ポコニア・クラミドスポリア 比率1(2000厚膜胞子/土壌g);Pc 2=ポコニア・クラミドスポリア 比率2(4000厚膜胞子/土壌g);aba=0.1または0.3 mg/種子でのアバメクチン種子コーティング)。a標準誤差(P=0.05)をともなう平均値。同じカラム内の同一文字は、結果に有意差がなかったことを意味する。
nt=種子処理なし;n-inf.=rkn(根こぶ線虫、メロイドギネ・インコグニタ 系統1)なし;Pc 1=ポコニア・クラミドスポリア 比率1(2000厚膜胞子/土壌g);Pc 2=ポコニア・クラミドスポリア 比率2(4000厚膜胞子/土壌g);aba=0.1または0.3 mg/種子でのアバメクチン種子コーティング)。a標準誤差(P=0.05)をともなう平均値。同じカラム内の同一文字は、結果に有意差がなかったことを意味する。
nt=種子処理なし;n-inf.=rkn(根こぶ線虫、メロイドギネ・インコグニタ 系統1)なし;Pc 1=ポコニア・クラミドスポリア 比率1(2000厚膜胞子/土壌g);Pc 2=ポコニア・クラミドスポリア 比率2(4000厚膜胞子/土壌g);aba=0.1または0.3 mg/種子でのアバメクチン種子コーティング)。a標準誤差(P=0.05)をともなう平均値。同じカラム内の同一文字は、結果に有意差がなかったことを意味する。
9個のミニプロット(直径3 m、深さ12 cm)に、著しい植物寄生性線虫の侵襲がない、隣接する畑から得た約350000 cm3の畑土壌(砂壌土、pH 7.2)をそれぞれつめた。トマトの種苗(リコペルシクム・エスクレンツム・キュヴェ・タイニー・ティム)は、アバメクチン処理した種子(0.3 mg a.i./種子)から、またはエプロン/マキシム(Apron/Maxim)処理した種子から育てた。それらを、市販の移植用基質(Sunshine mix)を備えた種苗トレイにまいた。該基質は、無改良のものまたはポコニア・クラミドスポリア(4000厚膜胞子/基質cm3)で改良したものであった。温室内で3週間後、種苗を9個のミニプロット中に移植した。それぞれのプロットは、4処理で、かつ1処理あたり3植物での任意配列ブロックであった。メロイドギネ・インコグニタ 系統1の10,000個の卵を、それぞれの移植体から約5 cmにある5 cmの深さの3つの穴に散布することにより、それぞれの植え付け範囲を侵襲させた。プロットに、低圧灌水法により灌水し、局所基準に従って施肥した。約10週間後、植物に果実が実り、その後3週間の間に3回収穫した。果実の数および重量を取得した。全てのデータをANOVA、およびフィッシャーのLSDによる平均値の区別(P=0.05)に供した。
試験の質は非常に良好であった。殺線虫種子コーティングおよびBCDの両方ともで、有意に収穫量が増加した(表7)。1植物あたりの平均の果実の数および平均の総果実重量の両方が、処理に応じて増加した。初期の試験と対照的に、BOCは、収量反応に関して化学処理と違いがなかった。しかしながら、ポコニア・クラミドスポリアおよびアバメクチンの組み合わせ処理は、両方の単独適用より優れていた。温室試験と対照的に、収穫時の卵の個体数は、組み合わせ処理において最高であった。これは、自然の畑土壌中で、根こぶ線虫に寄生された根部の破壊を増大させることが頻繁である、他の微生物の役割を指示するものであるかもしれない。線虫のための栄養補給場所を豊富に与えたので、保護された根部は、通常、最も大きく、かつ最も健康である根系を有する。
この計画において、我々は、根こぶ線虫に対する有効性ついての、アバメクチン種子コーティングとパスツリア・ペネトランスの土壌適用との組み合わせの利益の可能性、および植物生産に対する利益の可能性を評価した。
試験した侵襲レベルで、無処理照合基準における根こぶ形成は重篤であった(表8)。アバメクチン種子コーティングは、こぶ形成を、通常認められる有効性の範囲内である約2の等級分類まで減らした。生物的防除剤は根こぶ形成をわずかしか低減しなかった。アバメクチンおよび生物的防除剤であるパスツリア・ペネトランスの両方の組み合わせは、最も低いごぶ形成評定をもたらし、対照と比較して植物の先端の重量を有意に増加させた。さらには、それは、試験の終了時に、根こぶ線虫の個体数レベルを有意に下げた唯一の処理であった。その結果は、アバメクチン種子コーティングおよび細菌の組み合わせた使用による相乗作用を実証する。
*コーティングした種子(0.3 mg a.i./種子)
**混和した土壌(1x10E5/土壌g)
平均値±標準誤差;同一文字は、フィッシャーの保護LSD(0.01)により、有意差がなかったことを意味する。
平均値±標準誤差;同一文字は、log (x+1) 変換後のフィッシャーの保護LSD(0.01)により、有意差がなかったことを意味する。
Claims (51)
- 殺線虫剤を含む農薬組成物を植物繁殖物質に適用する段階;および、少なくとも1種の生物的防除剤を適用する段階を含む、植物を処理する方法。
- 少なくとも1種の殺線虫剤を含む農薬組成物を植物繁殖物質に適用する段階;および、植物を移植する前に少なくとも1種の生物的防除剤を適用する段階を含む、植物の移植時の健康状態を改善する方法。
- 農薬組成物を植物繁殖物質に適用する段階が、植物繁殖物質を植える植え付け用培地を農薬組成物で処理する段階を含む、請求項1または2記載の方法。
- 農薬組成物を植物繁殖物質に適用する段階が、植物繁殖物質を農薬組成物で処理する段階を含む、請求項1または2記載の方法。
- 殺線虫剤がアベルメクチンである、請求項1または2記載の方法。
- アベルメクチンがアバメクチンである、請求項3記載の方法。
- 植物繁殖物質が種子である、前記請求項のいずれか一項記載の方法。
- 少なくとも1種の生物的防除剤を適用する段階が、移植する前に植物繁殖物質を少なくとも1種の生物的防除剤で処理する段階を含む、前記請求項のいずれか一項記載の方法。
- 少なくとも1種の生物的防除剤を適用する段階が、植物繁殖物質を植える植え付け用培地に少なくとも1種の生物的防除剤を接種する段階を含む、請求項1〜7のいずれか一項記載の方法。
- 植え付け用培地に少なくとも1種の生物的防除剤を接種する段階が、植物繁殖物質を植える前に行われる、請求項9記載の方法。
- 植え付け用培地に生物的防除剤を接種する段階が、植物繁殖物質を植えるのと同時に行われる、請求項9記載の方法。
- 少なくとも1種の生物的防除剤が、線虫拮抗性生物的防除剤である、前記請求項のいずれか一項記載の方法。
- 少なくとも1種の生物的防除剤が、内部寄生真菌である、前記請求項のいずれか一項記載の方法。
- 真菌が、ツボカビ綱(Chytridiomycetes)、卵菌綱(Oomycetes)、接合菌綱(Zygomycetes)、不完全菌綱(Deuteromycetes)、および担子菌綱(Basidiomycetes)より選択されるメンバーである、請求項13記載の方法。
- 真菌が、カテナリア(Catenaria)、ミゾシチウム(Myzocytium)、ハプトグロッサ(Haptoglossa)、メリスタクルム(Meristacrum)、ダクチレラ(Dactylella)、ペシロミセス(Paecilomyces)、セファロスポリウム(Cephalosporium)、メリア(Meria)、ハルポスポリウム(Harposporium)、ネマトクトヌス(Nematoctonus)、ロパロミセス(Rhopalomyces)、ベルティシリウム(Verticillium)、ポコニア(Pochonia)、サプロレグニア(Saprolegnia)、シリンドロカルポン(Cylindrocarpon)、ミロセシウム(Myrothesium)、ネマトフトラ(Nematophthora)、ヒルステラ(Hirsutella)、およびモナクロスポリウム(Monoacrosporium)より選択される、請求項13記載の方法。
- 真菌が、ポコニア・クラミドスポリア(Pochonia chlamydosporia)およびミロセシウム・ヴェルカリア(Myrothecium verrucaria)より選択される、請求項13記載の方法。
- 少なくとも1種の生物的防除剤が、パスツリア(Pasteuria)種、リゾバクテリア(rhizobacteria)、および菌根菌(mycorrhizae)より選択される、請求項1〜12のいずれか一項記載の方法。
- 少なくとも1種の生物的防除剤が細菌である、請求項1〜12のいずれか一項記載の方法。
- 細菌が、パスツリア(Pasteuria)、シュードモナス(Pseudomonas)、コリネバクテリウム(Corynebacterium)、およびバチルス(Bacillus)より選択される、請求項18記載の方法。
- 第二の生物的防除剤を適用する段階をさらに含む、請求項13〜16のいずれか一項記載の方法。
- 第二の生物的防除剤が、第二の内部寄生真菌である、請求項20記載の方法。
- 細菌である第二の生物的防除剤を適用する段階をさらに含む、請求項20記載の方法。
- 農薬組成物が少なくとも1種の殺真菌剤を含み、少なくとも1種の生物的防除剤が該殺真菌剤に対する抵抗性を示す、前記請求項のいずれか一項記載の方法。
- 農薬組成物が、少なくとも1種の付加的な殺虫剤、殺線虫剤、殺ダニ剤または軟体動物駆除剤を含む、前記請求項のいずれか一項記載の方法。
- 少なくとも1種の付加的な殺虫剤、殺線虫剤、殺ダニ剤または軟体動物駆除剤が、アルジカルブ、チアジカルブ、オキサミル、メソミル、シアノイミン、アセタミプリド、ニトロメチレン系ニテンピラム、クロチアニジン、ジメトエート、ジノテフラン、フィプロニル、ルフェヌロン、ピリポキシフェン(pyripfoxyfen)、チアクロプリド、フルキソフェニム、イミダクロプリド、チアメトキサム、ベータ・シフルトリン、フェノキシカルブ、ラムダ・シハロトリン、ジアフェンチウロン、ピメトロジン、ダイアジノン、ジスルホトン、プロフェノホス、フラチオカルブ、シロマジン、クロラントラニリプロール(Rynaxapyr)、シペルメトリン、タウ・フルバリナート、テフルトリン、バシルス・チューリンゲンシス(Bacillus thuringiensis)生成物、および下記式Xの化合物より選択される、請求項24記載の方法:
式中、nは0、1または2である。 - 農薬組成物が少なくとも1種の付加的な殺真菌剤をさらに含む、請求項24記載の方法。
- 少なくとも1種の殺線虫剤の有効量、および少なくとも1種の生物的防除剤の有効量を含む、農薬防除剤(pesticide control agent)を含む組み合わせ組成物。
- 殺線虫剤がアベルメクチンである、請求項28記載の組み合わせ組成物。
- アベルメクチンがアバメクチンである、請求項29記載の組み合わせ組成物。
- 少なくとも1種の生物的防除剤が抗線虫性生物的防除剤である、請求項28〜30のいずれか一項記載の組み合わせ組成物。
- 農薬防除剤および生物的防除剤を適用した種子または植物をさらに含む、請求項28〜31のいずれか一項記載の組み合わせ組成物。
- 植え付け用培地をさらに含み、容器中に含有されている、請求項32記載の組み合わせ組成物。
- 農薬組成物が、少なくとも1種の付加的な殺虫剤、殺線虫剤、殺ダニ剤または軟体動物駆除剤を含む、請求項28〜33のいずれか一項記載の組み合わせ組成物。
- 少なくとも1種の付加的な殺虫剤、殺線虫剤、殺ダニ剤および/または軟体動物駆除剤が、アルジカルブ、チアジカルブ、オキサミル、メソミル、シアノイミン、アセタミプリド、ニトロメチレン系ニテンピラム、クロチアニジン、ジメトエート、ジノテフラン、フィプロニル、ルフェヌロン、ピリポキシフェン、クロラントラニリプロール(Rynaxapyr)、チアクロプリド、フルキソフェニム、イミダクロプリド、チアメトキサム、ベータ・シフルトリン、フェノキシカルブ、ラムダ・シハロトリン、ジアフェンチウロン、ピメトロジン、ダイアジノン、ジスルホトン、プロフェノホス、フラチオカルブ、シロマジン、シペルメトリン、タウ・フルバリナート、テフルトリン、バシルス・チューリンゲンシス生成物、クロラントラニリプロール、および下記式Xの化合物からなる群より選択される、請求項34記載の組み合わせ組成物:
式中、nは0、1または2である。 - 農薬組成物が、少なくとも1種の付加的な殺真菌剤をさらに含む、請求項28〜35のいずれか一項記載の組み合わせ組成物。
- 少なくとも1種の生物的防除剤が内部寄生真菌である、請求項28〜37のいずれか一項記載の組み合わせ組成物。
- 真菌が、カテナリア、ミゾシチウム、ハプトグロッサ、メリスタクルム、ダクチレラ、ペシロミセス、セファロスポリウム、メリア、ハルポスポリウム、ネマトクトヌス、ミロセシウム、ロパロミセス、ベルティシリウム、ポコニア、サプロレグニア、シリンドロカルポン、ネマトフトラ、ヒルステラ、およびモナクロスポリウムより選択されるメンバーである、請求項38記載の組み合わせ組成物。
- 真菌が、ポコニア・クラミドスポリアおよびミロセシウム・ヴェルカリアより選択される、請求項38記載の組み合わせ組成物。
- 少なくとも1種の生物的防除剤が細菌である、請求項28〜37のいずれか一項記載の組み合わせ組成物。
- 細菌がリゾバクテリウム(rhizobacterium)である、請求項41記載の組み合わせ組成物。
- 細菌が、パスツリア、シュードモナス、コリネバクテリウム、およびバチルスより選択される、請求項41記載の組み合わせ組成物。
- 少なくとも1種の付加的な生物的防除剤をさらに含む、請求項28〜43のいずれか一項記載の組み合わせ組成物。
- 少なくとも1種の付加的な線虫拮抗性生物的防除剤をさらに含む、請求項38〜40のいずれか一項記載の組み合わせ組成物。
- 少なくとも1種の付加的な線虫拮抗性生物的防除剤が第二の内部寄生真菌である、請求項45記載の組み合わせ組成物。
- 少なくとも1種の付加的な生物的防除剤が細菌である、請求項45記載の組み合わせ組成物。
- 農薬防除剤が殺真菌剤をさらに含み、生物的防除剤が該殺真菌剤に対する抵抗性を示す、請求項28〜47のいずれか一項記載の組み合わせ組成物。
- 請求項28〜48のいずれか一項記載の組み合わせ組成物で処理した、植物繁殖物質。
- 農薬組成物を植物繁殖物質の座(locus)に適用し、かつ生物的防除剤を植物繁殖物質の座に別に接種する、請求項1〜27のいずれか一項記載の方法。
- 請求項28〜48のいずれか一項記載の組み合わせ組成物を土壌に適用する、請求項50記載の方法。
Applications Claiming Priority (3)
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