JP2008522165A - 分析物を検出するための装置および方法 - Google Patents
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- G01N2333/91097—Hexosyltransferases (general) (2.4.1)
Abstract
Description
本出願は、米国暫定特許出願第60/630,152号(2004年11月24日出願)の開示の利益に依存し、これを主張するものであり、その全体の開示は、参照することによりその全体が本願明細書に組み込まれる。
−任意に、全ての試薬および装置を使用前に室温に戻す。
−各検査検体に対し1つのカセット(装置)を準備する。
−希釈剤0.4〜0.6ml(例えば0.425mlまたは0.5ml)をプラスチックのスポイトを使用して各希釈試験管に添加する。
−移動前に検体を均一に懸濁(例えばボルテックス)させる。液体あるいは半固体の検体については、最初の目盛りから最後の目盛り(25μl)の中間まで検体を吸う。検体を希釈剤に吐出する。同じピペットを使用し、希釈した検体を静かに吸引して、その混合液を吐出することを何度か行って混合する。成形されたあるいは固体の検体については、検体を完全に十分に混合する。木製の塗布棒を使用して、検体の少量を(直径約2mm)希釈剤に移動する。その塗布棒を使用して、検体を乳化する。任意の対照として、陽性対照あるいは陰性対照(検体希釈剤)1滴を0.4mlの希釈剤を入れた試験官に添加する。
−複合体1滴を希釈した検体に添加し、ボルテックスを行なって試験管の中身を混合する。
−検体につき1つ、陽性あるいは陰性対照につき1つの必要な数のカセットを取得する。
膜カセットに適切にラベルをつける。
−調合した試料を取得する。使い捨てトランスファーピペットを使用して、300〜400μlの希釈した試料−複合体混合液をカセットの試料ポートに移動し、そのカセットを室温で15分間培養する。増加する濡れ領域は、結果窓で見ることができる。ぬれ領域が結果窓に現れない場合は、希釈剤100μlを試料ポートに添加し、さらに5分間待つ。
−15分後、洗浄用緩衝剤300μlを反応ポートに加える。洗浄用緩衝剤が完全に反応ポートに入るようにする。
−基質2滴を反応ポートに添加し、カセットを10分間室温で培養させる。10分の終了時、検出窓から結果を読み取る。対照線を示す色付き線(青など)の様子を観察する(図21A参照)。線は、薄いものから濃いものまでが見られる。
Claims (44)
- 液体試料内の少なくとも1つの対象物質を検出する方法であって、
前記対象物質を含む、または含むと思われる液体試料を提供するステップと、
多孔質材料を少なくとも部分的に湿らせるに十分な量の前記液体試料を、前記多孔質材料に塗布するステップと、
前記多孔質材料を、直接的または間接的に前記対象物質を結合することができる、少なくとも1つの特定結合対メンバーを含む多孔質膜と接触させるステップと、
前記多孔質材料内に存在する液体が前記多孔質膜の内側、外側、内部、および/またはその周辺に拡散するように、前記多孔質材料と多孔質膜との接触を十分な時間保持するステップであって、
前記多孔質膜の内側、外側、内部、および/またはその周辺への前記液体の拡散によって、前記対象物質が存在する場合に、前記特定結合対メンバーへの直接的または間接的な接触をもたらすステップと、
前記特定結合対メンバーおよび前記対象物質を含む錯体の有無を検出するステップであって、
前記少なくとも1つの錯体の存在が、前記液体試料内に前記対象物質が少なくとも1つ存在することを示すステップと、を含む方法。 - 前記多孔質材料および多孔質膜を含む装置を提供するステップをさらに含む、請求項1に記載の方法。
- 前記多孔質材料は、前記液体試料をろ過して設定値よりも大きいサイズの物質を取り除く、請求項1に記載の方法。
- 前記ろ過は、前記多孔質材料を通った前記液体試料からの液体の不連続な入り込みによるものである、請求項3に記載の方法。
- 前記液体は、2つ以上の対象物質を含む、請求項1に記載の方法。
- 各対象物質は、互いに異なる対象物質である、請求項5に記載の方法。
- 前記液体は、糞便、血液、食品、または環境試料を含む、請求項5に記載の方法。
- 前記対象物質は、クロストリジウム・ディフィシール毒素A、クロストリジウム・ディフィシール毒素B、またはその両方である、請求項1に記載の方法。
- 前記対象物質は、1つ以上の毒素、細菌、ウイルス、細菌産物、酵素、または寄生体である、請求項1に記載の方法。
- 前記対象物質は、グルタミン酸脱水素酵素である、請求項1に記載の方法。
- 前記物質は、動物またはヒトの生成物である、請求項1に記載の方法。
- 前記物質は、抗体またはラクトフェリンである、請求項1に記載の方法。
- 前記特定結合対メンバーのうちの1つ以上が抗体であり、前記抗体のそれぞれが異なるか、または1つ以上の他のものと同じである、請求項1に記載の方法。
- 前記錯体の存在を検出する前に、前記膜を洗浄するステップをさらに含む、請求項1に記載の方法。
- 前記多孔質材料に前記液体試料を塗布するステップは、前記多孔質膜から空間的に分離された、前記多孔質材料上の1つの位置において前記液体試料を塗布するステップを含み、それによって、前記液体試料の少なくとも前記液体が前記多孔質材料に移動し、次いで前記多孔質膜に移動する、請求項1に記載の方法。
- 前記液体試料は、前記多孔質材料を通って、入り込みプロセスを介して前記多孔質膜に移動する、請求項15に記載の方法。
- 前記膜、前記多孔質材料、またはその両方に物理的な力を加えるステップをさらに含む、請求項1に記載の方法。
- 検出するステップは、対象物質に結合された標識から発せられたシグナルを認識するステップを含む、請求項1に記載の方法。
- 前記シグナルは、前記特定結合対メンバー内、またはその周辺に形成された有色の沈殿生成物によって生成される、請求項18に記載の方法。
- 前記多孔質材料に前記液体試料を塗布する前に、標識複合体を前記液体試料と混合するステップをさらに含む、請求項1に記載の方法。
- 前記標識複合体は、ラテックスビードまたは他の有色粒子、コロイド状金粒子、または基質と結合して検出可能なシグナルを作成する反応性物質を含む、請求項20に記載の方法。
- 前記シグナルは、非視覚的なシグナルである、請求項18に記載の方法。
- 前記方法は、1つ以上の核酸を検出し、または1つ以上の核酸は、特定結合対メンバーである、請求項1に記載の方法。
- 液体試料内の少なくとも1つの対象物質を検出するための装置であって、
(a)前記液体試料を受けるための多孔質材料を含む受け具であって、前記液体試料の少なくとも一部を吸収して透過することができる前記多孔質材料と、
(b)前記対象物質または前記対象物質に結合された物質に対して特異的である特定結合対メンバーを含む多孔質膜と、を備え、
前記受け具および多孔質膜は、前記多孔質膜が、前記特定結合対メンバーを含む前記多孔質膜の少なくとも一部にわたって、前記多孔質材料と直接接触できるようにそれぞれ成形される装置。 - 前記受け具を含む容器をさらに備える、請求項24に記載の装置。
- 前記多孔質膜のための把持部をさらに備える、請求項24に記載の装置。
- 洗浄液受けパッドをさらに備える、請求項24に記載の装置。
- 液体試料塗布パッドをさらに備える、請求項24に記載の装置。
- ろ過パッドをさらに備える、請求項24に記載の装置。
- 前記装置は、前記多孔質材料および前記多孔質膜を含む反応パッドを含む容器を備え、前記容器は、前記多孔質膜のための把持部を備え、
前記容器は、前記多孔質材料の少なくとも一部が加圧されるように、前記多孔質膜および/または前記多孔質材料に作用する圧力を生じさせる、請求項24に記載の装置。 - 前記圧力は、前記多孔質膜の少なくとも一部にわたって、前記多孔質膜および前記多孔質材料を直接接触させる、請求項30に記載の装置。
- 前記圧力によって、液体が、受動拡散によって前記多孔質膜と前記多孔質材料との間を通過できる、請求項30に記載の装置。
- 液体試料内の少なくとも1つの対象物質を検出するための装置であって、
(a)前記液体試料を受けるための多孔質材料を含む受け具であって、前記液体試料の少なくとも一部を吸収して透過することができる前記多孔質材料と、
(b)前記対象物質または前記対象物質に結合された物質に対して特異的である特定結合対メンバーを含む多孔質膜と、を備え、
前記受け具および多孔質膜は、前記多孔質膜が、前記特定結合対メンバーを含む前記多孔質膜の少なくとも一部にわたって、前記多孔質材料と直接接触できるようにそれぞれ成形され、
前記多孔質膜および多孔質材料は、異なる化学構造を有する異なる要素である装置。 - 前記多孔質膜および多孔質材料は、前記多孔質材料に塗布された液体試料が、前記多孔質膜の内側、外側、内部、およびその周辺に拡散するように、物理的に接触する、請求項33に記載の装置。
- 前記多孔質膜と多孔質材料との間の物理的接触は、前記装置の感度が改善されるように発生される、請求項33に記載の装置。
- 前記多孔質材料と多孔質膜は、前記対象物質が、前記装置に対する一方向の様態で前記多孔質膜を横断して前記対象物質を検出する必要がないように、互いに接触して構成される、請求項33に記載の装置。
- 前記多孔質材料と多孔質膜は、それら2つの間に液体の単一な、無方向性の拡散が生じるような方法で互いに接触する、請求項33に記載の装置。
- 液体試料内の対象物質の存在または量を検出するための装置であって、
前記液体試料を受けるための試料受けゾーンであって、
多孔質材料上に存在する前記試料受けゾーンと、
前記試料受けゾーンで受けた前記液体試料をろ過するための試料ろ過ゾーンであって、
多孔質材料上に存在する前記試料ろ過ゾーンと、
前記対象物質または前記対象物質に結合された物質に、特異的に結合する検出ゾーンにおいて、特定結合メンバーを備える多孔質膜と、を備え、
前記多孔質膜は、前記多孔質材料のうちのいずれとも同じ要素ではなく、
前記多孔質材料および多孔質膜は、前記検出ゾーンの一部を含む少なくとも1つの領域上で物理的に接触し、
前記多孔質材料および多孔質膜は、前記液体試料内に存在する液体が、前記検出ゾーンの少なくとも一部を含む領域において、実質的に任意の無方向性の様態で、前記多孔質膜の内側、外側、内部、および/またはその周辺に拡散できるような構成で物理的に接触する装置。 - 前記多孔質材料および多孔質膜の少なくとも一部を含む容器をさらに備える、請求項38に記載の装置。
- 洗浄液受けゾーンを含む多孔質材料をさらに備える、請求項39に記載の装置。
- 受け具と、
少なくとも1つの対象物質または前記物質に結合された物質に特異的に結合する、少なくとも1つの特定結合対メンバーを含む多孔質膜と、を含む装置であって、
前記受け具は、塗布ゾーンと、ろ過ゾーンと、反応ゾーンとを備え、
前記受け具および前記多孔質膜は、前記特定結合対メンバーと前記反応ゾーンの少なくとも一部を含む、前記多孔質膜の少なくとも一部上で物理的に接触する装置。 - 前記受け具または前記多孔質膜と物理的に接触する、洗浄受けパッドをさらに備える、請求項41に記載の装置。
- 洗浄受けパッドと、液体不透過性膜と、をさらに備え、
前記洗浄受けパッドは、前記受け具に隣接し、前記液体不透過性膜は、前記受け具と洗浄受けパッドとの間に挿入され、これらの両方と物理的に接触する、請求項41に記載の装置。 - 前記不透過性膜を取り除くことによって、前記受け具と洗浄受けパッドの少なくとも一部の間で物理的な接触がもたらされる、請求項43に記載の装置。
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