JP2008119474A - 血球を再循環洗浄するのに用いる方法、バッグおよび使い捨てセット - Google Patents
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Abstract
【解決手段】頂部出口ポート2と底部入口ポート1を有する、血球を再循環洗浄するためのバッグ5または貯槽;およびバッグ5を、回転膜濾過器6とともに使用して、血球を再循環洗浄する方法を提供する。この本発明の方法は、磁気血球選択器機または独立型血球洗浄装置に利用できる。
【選択図】図2
Description
上記の米国特許および国際特許願公開公報は各々、本願に援用するものである。
本発明には、血球を再循環洗浄するのに用いる方法、バッグおよび使い捨てセットが含まれている。本発明は、磁気血球選択器機で血球を洗浄するのに使用できるが、全血または他の血球製品を洗浄するのに使用することもできる。
本発明の再循環洗浄バッグは、頂部ポートと底部ポートを有する可撓性プラスチック製バッグである。一実施態様で、半剛性プラスチックメッシュのチューブからなる一体の粗いフィルターが、頂部ポートからバッグ内中に延びている。このフィルターは、より大きな血球凝集体に対し、ゆるやかな抵抗を与える。
本発明の他の実施態様では、再循環洗浄法を開始する際に、再循環洗浄バッグに、磁気血球選択法で選択された血球、および選択された血球を、血球/磁気ビーズ接合体から解放させるのに使用したペプチド解放剤が入っており、濾液は緩衝溶液によるペプチド解放剤の溶液を含有し、そして血球の濃縮懸濁液のペプチド解放剤の含有量が、所望のレベルまで減少するまで再循環洗浄が続けられる。
IsoFlow (商標)再循環洗浄バッグ
図1に、IsoFlow (商標)バッグ全体を番号5で示してある。そのバッグは例えば可撓性プラスチックで製造され、底部ポート1と頂部ポート2を備えている。半剛性のプラスチック製メッシュで製造されたチューブ3からなる一体の目の粗いフィルターが、頂部ポートからバッグ内に、バッグの底部から約0.5〜3インチ以内、好ましくは約1インチまで延びている。
図2に示す本発明の使い捨てセットは、IsoFlow バッグ5、および回転膜濾過器6と緩衝溶液が入っているバッグを接続するための配管を含む関連配管を備えている。回転膜濾過器6(時には、単に、“回転膜”または“スピナー(spinner )”と呼ぶ)は、Duffの米国特許第5,234,608 号の図2に示す構造を有している。その膜は、公称4ミクロンのポリカーボネート製膜である。
図3は、独立型血球洗浄装置、すなわち、Isolex300i器機の磁気血球選択機能のような血球選択機能をもっていない装置に使用するように構成された本発明の使い捨てセットを示す。
その使い捨てセットは、頂部ポート2と底部ポート1を有するIsoflow バッグ5;血球の希釈懸濁液用の入口ポート11、血球の濃縮懸濁液用の出口ポート14および濾液用の出口ポート24を有する回転膜濾過器6;ならびに入口ポート29を有する濾液バッグ30を具備している。
本発明の再循環洗浄法を実施する場合、濾液流量(f)は一般に、約70ml/min に固定される。血球を洗浄回路内に移送中、再循環流量(r)によって、一次圧力調整が(以下に述べる濃度比を利用して)行われ、その流量は14ml/min から70ml/min まで変動する。再循環段階において、再循環流量は約24〜70ml/min の範囲内である。緩衝溶液の流量(b)は、0〜70ml/min の範囲内であり、最小スケールの容積を、二次圧力調整機構として維持する。回転膜濾過器のローターは、通常の処理を行っている間、最高3700RPM と最低約2340RPM で作動する。
式中、i=個別の時間間隔
FSRi=時間ti における出発残留物のフラクション
FSRi-1=時間 ti-1における出発残留物のフラクション
Fi=時間間隔 i-1〜i で測定された流量f(単位:ml)で移動した濾液の容積
Bi=時間間隔 i-1〜i で測定された流量b(単位:ml)で移動した緩衝溶液の容積
Ci=IsoFlow バッグ5からの流量、および未洗浄血球の追加流量(追加された場合)を含む時間間隔iで測定された流量e(単位:ml)で移動した血球原料
Vi=時間間隔iにおける血球生成物の容積(ml)
TA=目標アドミタンス(Target Admittance )
抗体および解放剤を洗浄する場合の目標アドミタンスは、 0.7〜1.2 であり、好ましい設定値は1であることが見出された。Isolex300iでCD34+ を選択するのに利用される抗体の最適レベルは、50〜150 μgの範囲内であることが見出された。
血球のサイクル数 Si= ∫(Rj+Fj+Bj)/Vj= ∫Cj/Vj
式中、
Rj=時間間隔jで測定された流量rで移動した再循環容積(単位:ml)、および
血球のサイクル数Si=血球生成物が時間間隔iで経験した、回転膜装置を通過するサイクル数。
Claims (9)
- 頂部ポートと底部ポート、および頂部ポートからバッグ中に延びる半剛性のプラスチック製メッシュのチューブからなる一体の粗いフィルターを有する血球の再循環洗浄用の可撓性プラスチック製のバッグまたは貯槽。
- 頂部ポートと底部ポート、および頂部ポートからバッグ中に延びるプラスチック製配管からなる頂部の泡トラップを有する血球の再循環洗浄用の可撓性プラスチック製のバッグまたは貯槽。
- 頂部ポートと底部ポート、頂部ポートからバッグ中に延びて底部末端が閉鎖されている半剛性プラスチック性メッシュのチューブからなる一体の粗いフィルター、および頂部ポートからバッグ中に、前記メッシュチューブの内側に延びるプラスチック製配管からなる、頂部に位置する泡トラップを有する血球の再循環洗浄用の可撓性プラスチック製バッグ。
- メッシュチューブが十分剛性であるから、バッグに減圧がかかって、バッグをしぼむ場合、メッシュチューブがバッグ内に開放経路を保持して、底部ポートに入る緩衝溶液中の血球が頂部ポートまで移動できる請求項3に記載のバッグ。
- 頂部ポートおよび底部ポートを有する再循環洗浄バッグ;緩衝溶液中の血球希釈懸濁液用の入口ポート、濾液用の第一出口ポートおよび緩衝溶液中の血球濃縮懸液用の第二出口ポートを有する回転膜濾過器;および濾液バッグ、さらに緩衝溶液バッグ用の配管を含む関連配管を含んでなる血球の再循環洗浄用使い捨てセットであって;
プラスチック製配管が再循環洗浄バッグの頂部ポートを混合領域に接続し、一方の末端に緩衝溶液バッグのスパイクカプラーを有するプラスチック製配管が同じ混合領域に接続され、その混合領域が、プラスチック製配管によって、回転膜濾過器の入口ポートに接続され、回転膜濾過器の第一出口ポートが、プラスチック製配管によって、濾液バッグの入口ポートに接続され、そして、回転膜濾過器の第二出口ポートが、プラスチック製配管によって、再循環洗浄バッグの底部ポートに接続されている使い捨てセット。 - 再循環洗浄バッグが、頂部ポートからバッグ中に延びる半剛性プラスチック製メッシュのチューブを含んでいる請求項5に記載の使い捨てセット。
- 再循環洗浄バッグが、頂部ポートからバッグ中に延びるプラスチック製配管からなる泡トラップを、頂部に備えている請求項5に記載の使い捨てセット。
- 再循環洗浄バッグが、頂部ポートからバッグ内に延びかつ底部末端が閉鎖されている半剛性プラスチック製メッシュのチューブ、および頂部ポートからバッグ中に、前記メッシュチューブの内側に延びるプラスチック製配管からなる頂部に位置する泡トラップを含んでいる一体の粗いフィルターを備えている請求項5に記載の使い捨てセット。
- 緩衝溶液中の抗体懸濁液用バッグ、緩衝液によるペプチド解放剤の溶液用バッグ、緩衝溶液中の選択された血球の懸濁液用バッグ、および緩衝溶液中の選択されなかった血球の懸濁液用バッグを含めて、磁気血球選択器機に使用するバッグ類と関連配管も含む請求項5に記載の使い捨てセット。
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