JP2008074866A

JP2008074866A - 遺伝子の保管及び伝達の可能な生−無機ハイブリッド複合体及びその製造方法

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Publication number: JP2008074866A
Application number: JP2007292357A
Authority: JP
Inventors: Jin Ho Choy; ホーチョイジン; Seo Young Kwak; ヤンカクソー; John Sang Park; サンパクゾン
Original assignee: Nanohybrid Co Ltd
Current assignee: Nanohybrid Co Ltd
Priority date: 1998-09-11
Filing date: 2007-11-09
Publication date: 2008-04-03
Anticipated expiration: 2019-09-10
Also published as: KR20000019408A; DE69940334D1; JP5081589B2; JP4812054B2; EP0987328A2; US6329515B1; ATE421582T1; KR100359716B1; EP0987328A3; JP2000086694A; EP0987328B1

Abstract

【課題】層状構造を有する無機物を担体としてＤＮＡなどの生体物質をイオン交換させることで生成される生−無機ハイブリッド複合体及びその製造方法を提供する。
【解決手段】下記化学式１で表示される本発明の生−無機ハイブリッド複合体は金属陽イオン、Ｍ（II）［ａ］とＮ（III）［ｂ］の比を１／５≦ｂ／ａ＋ｂ≦１／２に混合したＭ（II）とＮ（III）塩の水溶液を塩基性物質で共沈させることにより、層間に陰イオンが挿入された安定した金属二重層水酸化物を形成する段階と、層間の陰イオンを生体物質でイオン交換反応させて層電荷を補償する段階とを有する。
＜化学式１＞
［Ｍ^２− _１−ｘＮ^３− _ｘ（ＯＨ）_２］［Ａ_ＢＩＯ ^ｎ−］_ｘ／ｎ・ｙＨ_２Ｏ
前記式において、Ｍは２価金属陽イオン、Ｎは３価金属陽イオン、Ａ_ＢＩＯはｎ電荷の陰イオン系生体物質種、ｘは、０＜ｘ＜１の小数、ｙは、０＜ｙの正数である。
【選択図】図６

Description

本発明は層状構造を有する無機物を担体として、ＤＮＡを含む生体物質をイオン交換させて生成する、遺伝子の保管及び伝達の可能な生−無機ハイブリッド複合体及びその製造方法に関するものである。

一般に、層状構造を有する無機化合物は、その大部分が層間に多様な物質を含めえる特徴を持っている（層状無機化合物の例：アルミのシリケート、メタルフォスゲートなど）。格子層をなす金属イオンを異質同像置換させて層電荷を発生させるか、層状を改質させて、物理化学的吸着特性を付与することにより、多様な機能性ゲスト（guest）化学種を層間に導入させることができる。更に、多孔の大きさを調節して、選択的大きさの分子を物理的に吸着させる方法もよく知られている（多孔性無機化合物の例：架橋化粘土、ＭＣＭ−４１など）。このような層状構造を有する無機化合物の一つである金属イオン層水酸化物（layered double hydroxides；以下、ＬＤＨ）は陰イオン粘土（anionic clays）と呼ばれ、陽電荷を呈する金属水酸化物層と層間にこの陽電荷を相殺させる陰イオンと水とから構成されている。この複合体は、一般的に下記の化学式で表現できる。

［Ｍ^２− _１−ｘＮ^３− _ｘ（ＯＨ_２）］［Ａ^ｎ−］_ｘ／ｎ・ｙＨ_２Ｏ
前記式において、Ｍは２価金属陽イオンで、アルカリ土金属又は遷移金属、例えば、Ｍｇ^２−、Ｎｉ^２−、Ｃｕ^２−、Ｚｎ^２−などであり、
Ｎは３価金属陽イオンで、遷移金属、例えば、Ａｌ^３−、Ｃｒ^３−、Ｆｅ^３−、Ｖ^３−、Ｇａ^３−などであり、
Ａはｎ電荷を呈する陰イオン系化学種で、例えば、ＮＯ_３ ⁻、ＣＯ_３ ^２−、Ｃｌ−、ＳＯ_４ ^２−、メタレート（metalate）、有機酸の陰イオンなどであり、
ｘは０より大きく１より小さい小数であり、
ｙは０より大きい正数である。

ｘによって金属比を変化させることで層電荷密度を調節し得る特徴があり、Ａで示す多様な陰イオンはイオン交換反応及び共沈反応により簡単に水酸化物層間に導入することができる。

金属二重層水酸化物とその誘導体は、触媒反応での技術的な重要性のため、分離技術、光学、医学、光学などの分野で、層状ナノ複合体としてかなりの関心を浴びており、これに対する研究が進行されている。例えば、文献［“Ordering of intercalated water and carbonate anions in hydrotalcite-An NMR study”,Journal Physical Chemistry, 1994, 98, 4050-4054］では、ヒドロタルサイト（hydrotalcite）［Mg₃Al(OH)₈］⁺［0.5CO₃・mH₂O］^-（マグネシウムとアルミニウムを基にする金属二重層水酸化物のような構造を有する化合物の鉱物名）の層間陰イオン（carbonate）と層間水の構造を¹Ｈと¹³ＣＮＭＲを用いて解明した。文献［“Layered double hydroxides intercalated by polyoxometalate anions with keggin(α-H₂W₁₂O₄₀ ^6-), dawson(α-P₂W₁₈O₆₂ ^6-), and finke(Co₄(H₂O)₂(PW₉O₃₄)₂ ^10-)structure”, Inorganic Chemistry, 1996, 35, 6853-6860］には、水酸化物とアジフェートが層間挿入されたＭｇ_３ＡｌＬＤＨの前駆体とから、イオン交換反応により、ポリオキソメタレート（Ｐ₂Ｗ₁₈Ｏ₆₂ ^6-又はＣｏ₄（Ｈ₂Ｏ）₂（ＰＷ₉Ｏ₃₄）₂ ¹⁰⁻に架橋化させる合成法及びそれに対する構造的、熱的性質の評価結果について記載されている。文献［“Crystal structure of somedouble hydroxide minerals”, Mineralogical Magazine, 1973, 39[304], 377-389］には、いくつかのＬＤＨの構造的特徴と可能な金属陽イオン及び有り触れた層間陰イオンの種類及び構造について紹介されている。文献［“Hydrotalcite-type anionic clays：Preparation, properties and applications”, Catalysis Today, 1991, 11, 173-301］には、ＬＤＨの歴史的背景及び可能な構成成分（例えば、金属陽イオン及び層間陰イオンの種類）、構造的性質及び応用性などがすべて記載されている。

一方、既存に遺伝子伝達体として使用されてきたバクテリア又は陽イオンのリポソーム複合体は、自体の毒性による副作用又は免疫反応及び低い発現率などの問題点を随伴したので、新規の生体物質保管体及び伝達体が要求されてきた。

本発明の目的は、大部分の遺伝物質が燐酸イオンを含んでいて、陰電荷を呈する構造的特徴に着眼し、陰イオン交換反応により金属二重層水酸化物の層間に遺伝物質を挿入させることで、生−無機ハイブリッド複合体を製造することである。金属二重層水酸化物は酸性条件で溶け、中性又は塩基性領域では非常に安定した特性がある。このような特性は、易しく遺伝子又は生体物質を望むとおりに入れたり、取り出したりし得るようにし、よって遺伝子又はほかの生体物質などの保管体又は伝達体としての可能性を付与することができると思われる。また、本発明による物質は、従来のバクテリア又は陽イオンリポソーム複合体と異なり、人体に無害な金属水酸化物から構成されているだけでなく、発現又は人為的に適切に調節し得る利点がある。本発明は金属水酸化物を生体物質の保管体及び運搬体として使用し得るようにする最初の試しとしても大きい意義を有する。

前記目的を達成するため、本発明は、金属二重層水酸化物を担体として生体物質をイオン交換させることにより生成される、遺伝子の保管及び伝達が可能であり、安定性及び可逆的解離性がある下記化学式１の生−無機ハイブリッド複合体を提供する。

＜化学式１＞
［Ｍ^２− _１−ｘＮ^３− _ｘ（ＯＨ）_２］［Ａ_ＢＩＯ ^ｎ−］_ｘ／ｎ・ｙＨ_２Ｏ
前記式において、Ｍは２価金属陽イオンであり、
Ｎは３価金属陽イオンであり、
Ａ_ＢＩＯはｎ電荷を呈する陰イオン系生体物質種であり、
ｘは０より大きく１より小さい小数であり、
ｙは０より大きい正数である。

以下、本発明をより詳細に説明する。

本発明の金属二重層水酸化物を担体として生体物質をイオン交換させることにより生成される、遺伝子の保管及び伝達が可能であり、安定性及び可逆的解離性がある生−無機ハイブリッド複合体は下記化学式１で表示される。

特に、Ｍ及びＮとしてはすべてのアルカリ土金属及び遷移金属が可能であるが、好ましくは、それぞれＭｇ及びＡｌである。

特に、Ａ_ＢＩＯはヌクレオシド５−１燐酸塩陰イオン基及びヌクレオシド３燐酸塩又は５００〜１，０００bp大きさの遺伝子の陰イオン基であり得る。

層電荷を補償するＡ_ＢＩＯの一種であるヌクレオシド−１燐酸塩は遺伝子を構成する単位体としてよく知られた分子であり、ヌクレオシドは塩基と糖から構成され、糖に燐酸基がナトリウム塩の形態として結合されて、水溶液で陰電荷を呈するものと期待される。

前記化学式１の生−無機複合ハイブリッドの製造方法はつぎのようである。一般に、金属陽イオン、Ｍ（II）［ａ］とＮ（III）［ｂ］の比を１／５≦ｂ／ａ＋ｂ≦１／２に混合した塩の水溶液を塩基性物質で共沈させることにより、ブルサイト（brucite：Ｍｇ（ＯＨ）_２）構造のＭ（II）の位置にＮ（III）が異質同像置換されて、格子層に過量の陽電荷が誘導される。このように発生した層電荷を相殺させるため、反応溶液中の陰イオンが層間に導入されて、層間に陰イオンが挿入された安定した金属二重層水酸化物を形成する。層間の陰イオンを、いくつかの生体物質、具体的に、ヌクレオシド５−１燐酸塩、ヌクレオシド燐酸塩又は５００〜１，０００bp大きさの遺伝子、つまりＤＮＡ又はＲＮＡでイオン交換反応させて層電荷を補償することにより、前記化学式１の生−無機複合ハイブリッドが得られる。

本発明では、前述したように、陰電荷を有する生体物質を金属水酸化物層間にイオン交換させることにより、２種の相違した物質が静電気的引力で結合されて安定した構造を維持するようにし、かつ要求される場合、イオン交換反応、又は金属水酸化物を選択的に溶かすことにより、元の遺伝物質を変形されていない状態に回収することができる。

本発明で使用した金属二重層水酸化物は、人体に無害な金属、特にマグネシウム又はアルミニウムから構成される場合、つまりＭがＭｇであり、ＮがＡｌである場合には、酸性条件で易しく溶けてイオン化可能であり、これら金属イオンは代謝作用により適切に身体の外に放出し得るものとしてよく知られている（マグネシウムとアルミニウムの水酸化物は胃壁の保護のための制酸剤として広く用いられている）。また、金属によって、酸性条件下で溶解される程度が異なるので、２価、３価の金属イオンを適切に考案すると、人為的に発現時間を調節することができる。

本発明は、以下の実施例及び比較例によりもっと詳細に説明され、本発明の生成物に対する特性はつぎのような条件下でそれぞれ評価された。

＜特性評価条件＞
１）赤外線スペクトルを用いる評価
・試料の前処理：ＫＢｒと混合してディスク形態に圧縮した後、測定
・測定機器：パーキン−エルマー（Perkin-elmer）分光計
・測定周波数範囲：４００〜４，０００cm^-1
２）電気泳動法を用いる評価
ｉ）ｐＨに対する評価
・試料の前処理：ＨＣｌでｐＨを調節し、１時間程度常温で処理
・測定方法：ブロム化エチジウム（ethidium bromide）で処理（又は染色）し、０．７％アガロースゲル（agarose gel）上に置き、電気泳動実施
・測定範囲：ｐＨ７、６、５、４、３、２、１
ii）ＤＮａｓｅＩに対する評価
・試料の前処理：ＤＮａｓｅＩで常温で０．５、１、２４時間処理
ＤＮａｓｅＩで常温で１時間処理した後、これを混合溶液（０．２ＭＮａＣｌ、４０mM ＥＤＴＡ、１％ＳＤＳ）でクエンチングさせ、ｐＨ２で１時間処理
・測定方法：０，７％アガロースゲル上に置き、電気泳動実施
＜実施例１＞
Ｍｇ（II）とＡｌ（III）の比が３：１となるように、Ｍｇ（ＮＯ_３）_２とＡｌ（ＮＯ_３）_３を混合した溶液に０．２ＭＮａＯＨ溶液を滴加して共沈させることにより沈殿を得、これを洗浄し、遠心分離させて、層間に硝酸陰イオンが導入された金属二重層水酸化物（ＭｇＡｌ（ＮＯ_３）−ＬＤＨ、以下、ＮＯ_３−ＬＤＨ）を合成した。全過程は空気中のＣＯ_２による汚染を防ぐため、窒素雰囲気中で行った。

合成した金属二重層水酸化物（ＮＯ_３−ＬＤＨ）のＸ線回折結果は図１（ａ）に、赤外線分光スペクトルは図２（ｂ）に示す。

このように得た金属二重層水酸化物（ＮＯ_３−ＬＤＨ）懸濁液（１mg/L mL Ｈ_２Ｏ）に、沸騰した蒸留水で溶かしたサイチジン−５−１燐酸塩（cydidine-5-monophosphate(CMP)）１０mgを混ぜ合わせ、５０℃の恒温槽で２４時間反応させた。イオン交換反応が終わった後、沸騰させた蒸留水で３回にわたって生成物を洗浄して過量の燐酸塩を完全に除去し、７０℃のオーブンで乾燥させた。

乾燥後、得られた生成物に対するＸ−線回折分析結果は図１（ｂ）に示し、赤外線分光スペクトルは図２（ｂ）に示した。層間距離がＣＭＰの大きさに相応し、赤外線スペクトルの吸収ピークがＣＭＰの特徴的な作用基と一致することから、ＣＭＰがＬＤＨ層間に安定化されていることが分かった。これに基づいてＬＤＨ層間で予想されるＣＭＰの可能な配列を図６（ａ）に示した。

＜実施例２＞
実施例１で得た金属二重層水酸化物（ＮＯ_３−ＬＤＨ）懸濁液（１mg/L mL Ｈ_２Ｏ）に、実施例１と同方法により、沸騰した蒸留水に溶解したアデノシン５−１燐酸塩（adenosine 5-monophosphate(AMP)）１０mgを混ぜ合わせ、５０℃の恒温槽で２４時間反応させた。イオン交換反応が終わった後、沸騰した蒸留水で３回にわたって生成物を洗浄して過量の燐酸塩を完全に除去し、７０℃のオーブンで乾燥させた。

乾燥後、得られた生成物に対するＸ−線回折分析結果は図１（ｃ）に示し、赤外線分光スペクトルは図２（ｃ）に示した。層間距離がＡＭＰの大きさに相応し、赤外線スペクトルの吸収ピークがＡＭＰの特徴的な作用基と一致することから、ＡＭＰがＬＤＨ層間に安定化されていることが分かった。同様に、ＬＤＨ層間で予想されるＡＭＰの可能な配列を図６（ｂ）に示した。

＜実施例３＞
実施例１で得た金属二重層水酸化物（ＮＯ_３−ＬＤＨ）懸濁液（１mg/L mL Ｈ_２Ｏ）に、実施例１と同方法により、沸かした蒸留水で溶かしたグアノシン５−１燐酸塩（guanosine 5-monophosphate(GMP)）１０mgを混ぜ合わせ、５０℃の恒温槽で２４時間反応させた。イオン交換反応が終わった後、沸騰した蒸留水で３回にわたって生成物を洗浄して過量の燐酸塩を完全に除去し、７０℃のオーブンで乾燥させた。

乾燥後、得られた生成物に対するＸ−線回折分析結果は図１（ｄ）に示し、赤外線分光スペクトルは図２（ｄ）に示した。層間距離がＧＭＰの大きさに相応し、赤外線スペクトルの吸収ピークがＧＭＰの特徴的な作用基と一致することから、ＧＭＰがＬＤＨ層間に安定化されていることが分かった。同様に、ＬＤＨ層間で予想されるＧＭＰの可能な配列を図６（ｃ）に示した。

＜実施例４＞
実施例１で得た金属二重層水酸化物（ＮＯ_３−ＬＤＨ）懸濁液（１mg/L mL Ｈ_２Ｏ）に、実施例１と同方法により、沸騰させた蒸留水で溶かしたヘリングテステス（Herring testes）ＤＮＡ（以下、ＤＮＡ）１０mgを混ぜ合わせ、５０℃の恒温槽で２４時間反応させた。イオン交換反応が終わった後、沸騰した蒸留水で３回にわたって生成物を洗浄して過量のＤＮＡを完全に除去し、７０℃のオーブンで乾燥させた。

乾燥後、得られた生成物に対するＸ−線回折分析結果は図１（ｅ）に示し、赤外線分光スペクトルは図２（ｅ）に示した。層間距離がＤＮＡの厚さに相応し、赤外線スペクトルの吸収ピークがＤＮＡの特徴的な作用基と一致することから、ＤＮＡがＬＤＨ層間に安定化されていることが分かった。

図３はＤＮＡ−ＬＤＨをｐＨ変化条件で電気泳動させた結果を示すもので、レーン４から８までは、電気泳動による引かれがないことから、ＤＮＡの陰電荷がＬＤＨ層間で補償された状態であることが分かる。反面、レーン９と１０では引かれが現れることから、ｐＨ３未満、特にｐＨ２以下では、ＬＤＨの層が溶けて、層内のＤＮＡが放出されて引かれるこ判断される。この際に、引かれ程度をレーン３と比較してみると、最初の状態のままで維持されたことが分かる。

図４はＤＮＡ−ＬＤＨをＤＮａｓｅＩで処理して、時間による変化を観察した結果である。ＤＮａｓｅＩとはＤＮＡを選択的に分解させる酵素である。レーン６、８、１０はレーン４と同一であることから、層内のＤＮＡがそのまま維持されることが分かった。このことは、ＤＮＡのみを同一条件で処理したレーン５、７、９と比較するととき、かなり対照的な結果である。これをより確実に確認するため、レーン８の試料を取ってＤＮａｓｅＩの作用をクエンチングさせ、ｐＨ２で１時間処理して、層間のＤＮＡが放出されるようにしたところ、レーン１１で見えるように、層間のＤＮＡがそのまま保存されていることが分かった。ＬＤＨの層内にＤＮＡを挿入し、次いで、ＤＮａｓｅＩで処理した後、層間のＤＮＡが保存された状態を図７に概略的に示した。したがって、ＬＤＨがＤＮＡ及び生体物質を保管するのに非常に安定した担体であり、易しく解離させ得る優秀な特性を有することを確認することができた。

＜実施例５＞
実施例２と同様に、実施例１で得た金属二重層水酸化物（ＮＯ_３−ＬＤＨ）懸濁液（１mg/L mL Ｈ_２Ｏ）に、実施例１と同方法により、沸かした蒸留水で溶かしたアデノシン５−燐酸塩（ＡＴＰ）１０mgを混ぜ合わせ、５０℃の恒温槽で２４時間反応させた。イオン交換反応が終わった後、沸かした蒸留水で３回にわたって生成物を洗浄して過量のＡＴＰをすっかり除去し、オーブンで乾燥させた。

乾燥後、得られた生成物に対するＸ−線回折分析結果は図５（ｂ）に示した。層間距離を示す００ｌピークの位置が出発物質に対して低い角度に移されたことから、層と層との間が膨張し、これはＡＴＰの厚さに相応するので、これらがＬＤＨ層間に安定されていることが分かった。

＜実施例６＞
実施例２と同様に、実施例１で得た金属二重層水酸化物（ＮＯ_３−ＬＤＨ）懸濁液（１mg/L mL Ｈ_２Ｏ）に、実施例１と同方法により、沸かした蒸留水で溶かしたアンチセンス単一ストランド（antisense single strand）ＲＮＡ（以下、ＲＮＡ）１０mgを混ぜ合わせ、５０℃の恒温槽で２４時間反応させた。イオン交換反応が終わった後、沸かした蒸留水で３回にわたって生成物を洗浄して過量のＲＮＡをすっかり除去し、オーブンで乾燥させた。

乾燥後、得られた生成物に対するＸ−線回折分析結果は図５（ｃ）に示した。層間距離を示す００ｌピークの位置が出発物質に対して低い角度に移されたことから、層と層との間が膨張し、これはＲＮＡの厚さに相応するので、これらがＬＤＨ層間に安定されていることが分かった。

（発明の効果）
以上説明したように、本発明によると、人体に無害であり、可逆的に易しく解離され、遺伝子の保管及び伝達が可能であり、安定した生−無機ハイブリッド複合体が得られる。

本発明による合成方法により製造された実施例１のヌクレオシド−１燐酸塩及びＤＮＡ−層状構造化合物（金属二重層水酸化物：ＬＤＨ）複合体のＸ−線回折図で、（ａ）はＬＤＨ、（ｂ）はＣＭＰ−ＬＤＨ、（ｃ）はＡＭＰ−ＬＤＨ、（ｄ）はＧＭＰ−ＬＤＨ、（ｅ）はＤＮＡ−ＬＤＨのＸ−線回折図である。前記と同一の誘導体に対する赤外線分光スペクトルである。実施例１のＤＮＡ−ＬＤＨ複合体のｐＨ変化による解離程度を電気泳動法により観察した結果図で、レーン１はλ／ヒンド（Hind）IIIカット（cut）ＤＮＡマーカー（maker）（下に、２３．１、９．４、６．５、４．３、２．３、２．０kbp）、レーン２は５００bpマーカー、レーン３は本合成に使用されたＤＮＡ、レーン４から１０まではＤＮＡ−ＬＤＨ複合体をそれぞれｐＨ７．６、５、４、３、２、１で処理した後電気泳動させた結果図である。実施例１のＤＮＡ−ＬＤＨの複合体をジオキシリボヌクレアセ（ＤＮａｓｅ）Ｉで処理して電気泳動させた結果図で、レーン１、２及び３は図３と同一マーカー、レーン４はＤＮＡ−ＬＤＨをそのまま使用したもの、レーン５、７，９はＤＮＡのみをＤＮａｓｅＩで０．５、１、２４時間処理した結果、レーン６、８、１０はＤＮＡ−ＬＤＨの複合体を同一方法でＤＮａｓｅＩで０．５、１、２４時間それぞれ処理最多結果、レーン１１はＤＮＡ−ＬＤＨの複合体をＤＮａｓｅＩで１時間処理した跡、これをクエンチングさせ、ｐＨ２で１時間放置した後、電気泳動させた結果を示す図である。本発明により合成された（ａ）ＬＤＨ（ＮＯ3形態）、（ｂ）ＡＴＰ−ＬＤＨ、（ｃ）ＲＮＡ−ＬＤＨ、（ｄ）ＤＮＡ−ＬＤＨのＸ線回折図である。（ａ）ＣＭＰ−ＬＤＨ、（ｂ）ＡＭＰ−ＬＤＨ、（ｃ）ＧＭＰ−ＬＤＨの概略図である。実施例によるＬＤＨ−ＤＮＡハイブリッド形成及びＤＮａｓｅＩによる処理過程の概略模式図である

符号の説明

１水酸化物層

Claims

金属二重層水酸化物を担体として生体物質をイオン交換させることにより生成される、遺伝子の保管及び伝達が可能であり、安定性及び可逆的解離性がある下記化学式１の生−無機ハイブリッド複合体。
＜化学式１＞
［Ｍ^２− _１−ｘＮ^３− _ｘ（ＯＨ）_２］［Ａ_ＢＩＯ ^ｎ−］_ｘ／ｎ・ｙＨ_２Ｏ
前記式において、Ｍは２価金属陽イオンであり、
Ｎは３価金属陽イオンであり、
Ａ_ＢＩＯはｎ電荷を呈する陰イオン系生体物質種であり、
ｘは０より大きく１より小さい小数であり、
ｙは０より大きい正数である。
ＭがＭｇであり、ＮがＡｌであることを特徴とする請求項１記載の生−無機ハイブリッド複合体。
Ａ_ＢＩＯがヌクレオシド５−１燐酸塩、ヌクレオシド３燐酸塩、ＤＮＡ又はＲＮＡ陰イオン基であることを特徴とする請求項１記載の生−無機ハイブリッド複合体。
金属陽イオン、Ｍ（II）［ａ］とＮ（III）［ｂ］の比を１／５≦ｂ／ａ＋ｂ≦１／２に混合したＭ（II）とＮ（III）塩の水溶液を塩基性物質で共沈させることにより、層間に陰イオンが挿入された安定した金属二重層水酸化物を形成する段階と、
層間の陰イオンを生体物質でイオン交換反応させて層電荷を補償する段階とからなる、下記化学式１の生−無機ハイブリッド複合体の製造方法。
＜化学式１＞
［Ｍ^２− _１−ｘＮ^３− _ｘ（ＯＨ）_２］［Ａ_ＢＩＯ ^ｎ−］_ｘ／ｎ・ｙＨ_２Ｏ
前記式において、Ｍは２価金属陽イオンであり、
Ｎは３価金属陽イオンであり、
Ａ_ＢＩＯはｎ電荷を呈する陰イオン系生体物質種であり、
ｘは０より大きく１より小さい小数であり、
ｙは０より大きい正数である。
ＭがＭｇであり、ＮがＡｌであることを特徴とする請求項４記載の生−無機ハイブリッド複合体の製造方法。
Ａ_ＢＩＯがヌクレオシド５−１燐酸塩、ヌクレオシド３燐酸塩、ＤＮＡ又はＲＮＡ陰イオン基であることを特徴とする請求項４記載の生−無機ハイブリッド複合体の製造方法。
請求項１の生−無機ハイブリッド複合体を酸性条件で処理して生体物質を金属二重層水酸化物担体から解離する方法。
ＭがＭｇであり、ＮがＡｌであり、酸性条件がｐＨ３未満であることを特徴とする請求項７記載の方法。