JP2006306832A - 歯肉上皮細胞伸展阻害剤 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】 赤ブドウ(Vitis vinifera L.)、ローズマリー(Rosmarinus officinalis L.)、イチョウ(Ginkgo biloba L.)、セントジョンズワート(Hypericum perforatum L.)およびアムラ(Emblic officinalis Gaertn.)から選択された原料植物を溶媒で抽出して得られた分離成分を含む歯肉上皮細胞伸展阻害剤、および歯肉炎や歯周炎などの口腔内疾患を処置するための同阻害剤を含む口腔用組成物。
【選択図】 なし
Description
中田、岡田、「呼吸」、18、4、pp.365-371 (1999) 吉原、新名、「炎症と免疫」、2、pp.177-185 (1994) M.Kylmaniemi, et al: J.Dent Res., 75, pp.919-926 (1996) M. Makela, et al: J.Dent Res., 73, pp.1397-1406 (1994) A.Haerian, et al: J.Clin Periodontol., 22, pp.505-509 (1995)
歯肉組織が健康なヒトの口腔内から、歯肉上皮組織(約5.0mm×約5.0mmの切片)を採取した。 採取した組織片を、リン酸緩衝液(1×105U/ml ペニシリン、100μg/ml ストレプトマイシン、80μg/ml カナマイシンを含有)に浸漬して、24時間以内に、外科用メスで、約0.5mm×約0.5mmの小切片に裁断した。 この小切片を、I型コラーゲンコート6ウェルプレートのウェルに静置した。 小切片とコラーゲンとの癒着を確認してから、初代培養培地(L-グルタミン、10% FBS、10pg/ml EGF、80μg/ml カナマイシン含有のDMEM/Ham's F12培地(大日本製薬製))をウェルに静かに注いだ。 こうして調製された培養系を、37℃、5%二酸化炭素の条件下で培養を行い、2日に1度の割合で、初代培養培地を新鮮なものと交換した。
まず、歯周炎を人工的に誘発するための炎症誘導用培地を調製した。 炎症誘発物質である、組換えヒトTNF-αを、PEPROTECH社より購入した(Size B vial: 50μg、300-01A; Lot No. 121CY25)。 組換えヒトTNF-αの50μgを、室温下で、1時間放置した後に、卓上遠心分離器に適用した。 遠心分離して得られた沈殿物を、500μlの蒸留水に溶解し、0.1mg/ml Tris緩衝液を加えた後に、得られた水溶液の36μlを、3.564mlの生理食塩水(PBS(-))にさらに溶解した。 こうして得たPBS溶液を、セラムチューブに1.2mlずつ分注して、−20℃の温度下で保存した。 なお、残余の水溶液については、セラムチューブに100μlずつ分注して、−20℃の温度下で保存した。 PBS溶液の1.2ml(1μg/mlのTNF-α含有)を、10.8mlのEpiLife培地(血清および抗生物質を含まず)に溶解し、そして、0.2μmの孔径のフィルターを用いて濾過および滅菌をして、炎症誘導用培地を得た。
次に、本願発明の歯肉上皮細胞伸展阻害剤の生体での活性を、アムラを溶媒で抽出して得た分離成分に関して検証を行った。
前出の実施例で歯肉上皮細胞の伸展阻害効果が実証された植物抽出物(0.5%)を配合してなる、各種用途の口腔用組成物を調製した。 なお、本実施例での成分配合量の単位は、特に断りのない限り、重量%で表示してある。
以下の表4に記載の材料を、常温下で、混合および練合して練歯磨剤を調製した。
以下の表5に記載の材料を、常温下で、混合および練合して練歯磨剤を調製した。
以下の表6に記載の材料を、常温下で、混液して洗口液を調製した。
以下の表7に記載の材料を、常温下で、混合して口腔用パスタを調製した。
Claims (4)
- 赤ブドウ(Vitis vinifera L.)、ローズマリー(Rosmarinus officinalis L.)、イチョウ(Ginkgo biloba L.)、セントジョンズワート(Hypericum perforatum L.)、アムラ(Emblic officinalis Gaertn.)、および、これらの組み合わせからなるグループから選択された原料植物を溶媒で抽出して得られた分離成分を含み、かつ哺乳動物での歯肉上皮組織の不正常な伸展を阻害する、ことを特徴とする歯肉上皮細胞伸展阻害剤。
- 乾燥エキスの形態である請求項1に記載の歯肉上皮細胞伸展阻害剤。
- 前記哺乳動物が、ラットである請求項1または2に記載の歯肉上皮細胞伸展阻害剤。
- 請求項1乃至3のいずれかに記載の歯肉上皮細胞伸展阻害剤を含む口腔用組成物。
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