JP2005526260A - 分析対象物計測 - Google Patents
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- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/001—Enzyme electrodes
Abstract
Description
ホースラディッシュペルオキシダーゼ@400U/ml
コレステロールオキシダーゼ@700U/ml
コレステロールエステラーゼ@700U/ml
0.08Mフェリシアン化カリウム
0.1M塩化カリウム
0.1Mリン酸カリウム、pH7.4
100g/dm-3Triton-X 100
0.2g/ml Sephadex G25
グリセロールリン酸オキシダーゼ@4500U/ml
グリセロールキナーゼ@4500U/ml
リパーゼ@100000U/ml
0.2M塩化カリウム
0.2Mフェリシアン化酸カリウム
0.025Mアデノシン三リン酸
0.002M硫酸アンモニウム
0.002M塩化マグネシウム
0.1g/ml Sephadex G25
英国特許出願第0130684.4号に開示されているタイプの電極に対して計測を実施した。作用電極は、250μmのmelonex上基板にプリントされたCoates炭素であった。これを、125μmのmelonex下基板に被着してウェルを形成した。Ag/AgClを上基板にプリントした。バイオセンサコーティング溶液の成分(濃度)は、ヘキサアンミンルテニウム(III)塩化物(4.8mM)、NAD+(0.8mM)、PdR(1.6μM)、ポリマー洗浄剤(2.5mM)及びグルコースデヒドロゲナーゼ(1U/バイオセンサ)であった。
電極は、例1におけるようにして、250μmのPET層に7μmのCoates炭素インク層をスクリーンプリントしたのち30μmのDuPont 5036絶縁層をスクリーンプリントしたものから構成した。この層を穿孔して直径1mmの穴を開けたのち、感圧積層を使用して125μmのPETベース層に被着し、共通のAg/AgCl(Ercon E0430-128を使用)対参照を細片の一番上に配した。
電極は、例1におけるようにして、250μmのPET層に20μmのCoates 268203炭素インク層をスクリーンプリントしたのち30μmのRonseal絶縁層をスクリーンプリントしたものから構成した。この層を穿孔して直径1mmの穴を開けたのち、7841シート接着剤を使用してPETベース層に被着し、共通のAg/AgCl(Ercon E0430-128)対参照を細片の一番上に配した。
電極は、例1におけるようにして、250μmのPET層に7μmのCoates炭素インク268203層をスクリーンプリントしたのち30μmのDuPont5036絶縁層をスクリーンプリントしたものから構成した。この層を穿孔して直径1mmの穴を開けたのち、感圧積層を使用して125μmのPETベース層に被着し、共通のAg/AgCl(Ercon E0430-128を使用)対基準を細片の一番上に配した。
電極は、例1におけるようにして、250μmのPET層に15μmのCoates炭素インク26-8203層をスクリーンプリントしたのち30μmのRonseal層をスクリーンプリントしたものから構成した。この層を穿孔して直径1mmの穴を開けたのち、ARcare7841シート接着剤を使用して125μmのPETベース層に被着し、共通のAg/AgCl対基準を細片の一番上に配した。
電極は、例1におけるようにして、250μmのPET層に15μmのCoates炭素インク26-8203層をスクリーンプリントしたのち30μmのRonseal層をスクリーンプリントしたものから構成した。この層を穿孔して直径1mmの穴を開けたのち、ARcare7841シート接着剤を使用して125μmのPETベース層に被着し、共通のAg/AgCl対基準を細片の一番上に配した。
Claims (19)
- 試料中の分析対象物の濃度を測定する方法であって、前記分析対象物と反応することができる酵素と、ひとたび前記酵素が分析対象物と反応したならば前記酵素によって酸化又は還元されることによって転換されることができる酸化還元媒介物と、を含むマイクロ電極に、試料を接触させ、分析対象物を酵素と反応させ、そこで電極に電位を印加し、転換された媒介物の得られた濃度を電気化学的に計測することを含む方法。
- 生じた電流から生じた濃度を計測する、請求項1記載の方法。
- マイクロ電極が、作用電極、対電極及び基準電極を含む、請求項1又は2記載の方法。
- 対電極と基準電極とが組み合わされている、請求項3記載の方法。
- 作用電極が、パラジウム、白金、金又は炭素でできており、対電極が、炭素、Ag/AgCl、Ag/Ag2SO4、パラジウム、金、白金、Cu/CuSo4、Hg/HgO、Hg/HgCl2、Hg/HgSO4又はZu/ZuSO4でできている、請求項3又は4記載の方法。
- 媒介物が、フェリシアン化物、フェナジンエトスルフェート、フェナジンメトスルフェート、1−メトキシフェナジンメトスルフェート、フェニレンジアミン又はルテニウムヘキサミンである、請求項1〜5のいずれか1項記載の方法。
- 酵素が、グルコースデヒドロゲナーゼ、コレステロールエステラーゼ、ホースラディッシュペルオキシダーゼ、コレステロールデヒドロゲナーゼ、コレステロールオキシダーゼ、リポタンパク質リパーゼ、グリセロールキナーゼ、グリセロールデヒドロゲナーゼ、グリセロール−3−リン酸オキシダーゼ、乳酸オキシダーゼ又は乳酸デヒドロゲナーゼである、請求項1〜6のいずれか1項記載の方法。
- 試料をマイクロ電極に塗布したのち0.5〜60秒の時間を経過させ、その後で電極に電位を印加し、その後5秒以内に電気化学的計測を実施することを含む、請求項1〜7のいずれか1項記載の方法。
- 印加される電位が−2〜+2ボルトである、請求項8記載の方法。
- 電位を印加した10〜500ミリ秒後に計測を実施する、請求項8又は9記載の方法。
- 10〜100回の計測を実施する、請求項8〜10のいずれか1項記載の方法。
- 直接的な読みを提供するためにマイクロ電極が事前に較正されている、請求項1〜11のいずれか1項記載の方法。
- 媒介物が分析対象物に対して過剰に存在する、請求項1〜12のいずれか1項記載の方法。
- 反応した媒介物が、分析対象物とで1:1の電子比に相当する濃度で存在する、請求項1〜13のいずれか1項記載の方法。
- 試料中の分析対象物の濃度を測定する方法であって、前記分析対象物と反応することができる酵素と、ひとたび前記酵素が分析対象物と反応したならば前記酵素によって酸化又は還元されることによって転換されることができる酸化還元媒介物と、を含むマイクロ電極に、試料を接触させ、分析対象物を酵素と反応させ、そこで電極に電位を印加し、得られる電流を計測し、電位を逆転させ、電流を再び計測し、二つの電流を比又は割合として表し、それから分析対象物の濃度を直接測定することを含む方法。
- 請求項1〜14のいずれか1項の特徴の一以上を含む、請求項15記載の方法。
- 実質的に例のいずれか一つに記載されたとおりである、請求項1又は15記載の方法。
- 作用電極、対電極及び基準電極と、試料がそれに塗布された後の所定の時点で正又は負の電位を電極に印加するための手段と、その後1秒以下の設定時間で得られた電流を測定するための手段と、電極の電位を逆転させ、逆転したのち設定時間で得られた電流を測定するための手段とを含むマイクロ電極。
- 前記すべての手段が一つのプロセッサ/マイクロチップによって提供されている、請求項18記載のマイクロ電極。
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