JP2007259762A - 微小分析装置及び微少試料の分析方法 - Google Patents
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Abstract
【解決手段】 本発明の微小分析装置は、基板上に微小流路を形成し、該微小流路に臨むように酵素を担持させる酵素担持部とその近傍に凍結乾燥された基質を配置させ、微小流路に試料液を流すことで基質に対応する試料中の酵素活性を分析すること、或いは微小流路に臨むように酵素Aを担持させる酵素A担持部を形成し、該酵素A担持部の近傍の前記微小流路中に凍結乾燥された酵素Bを配置させ、前記微小流路に試料液を流すことで試料液中の酵素Bに対応する基質を分析することを特徴とする。このような本発明の装置では、微小流路内で凍結乾燥された基質または酵素材料の多孔質による毛細管現象との相乗効果が得られ、極めて短い時間での酵素反応による検量も実現される。
【選択図】 図1
Description
凍結乾燥基質:L−γ−グルタミル−L−グルタミン酸とグリシル−グリシン
担持酵素:グルタミン酸オキシダーゼ
(b)測定酵素:グルタミック・オキサロアセテック・トランスアミナーゼ(GOT)
凍結乾燥基質:L−アスパラギン酸とα−ケトグルタル酸
担持酵素:グルタミン酸オキシダーゼ
(c)測定酵素:グルタミック・ピルビック・トランスアミナーゼ(GPT)
凍結乾燥基質:L−アラニンとα−ケトグルタル酸
担持酵素:グルタミン酸オキシダーゼ
(d)測定酵素:ロイシンアミノペプチダーゼ
凍結乾燥基質:ロイシルグルタミン酸
担持酵素:グルタミン酸オキシダーゼ
(e)測定酵素:グルタミナーゼ
凍結乾燥基質:グルタミン
担持酵素:グルタミン酸オキシダーゼ
酵素A: コルステロールオキシダーゼ
酵素B: リポプロティンリパーゼ及びコルステロールエステラーゼ
(ii)測定基質:中性脂肪
酵素A:グリセロリン酸オキシダーゼ
酵素B:リポプロティンリパーゼ及び/叉はグリセロールキナーゼ
(iii)測定基質:クレアチニン
酵素A:サルコシンオキシダーゼ
酵素B:クレアチニナーゼ及び/叉はクレアチナーゼ
11 ガラス基板
12 ポリイミド絶縁層
13 PDMS基板
16 作用極
17 酵素担持膜
18 参照極
19 対極
21 作用極パッド部
22 対極パッド部
23 参照極パッド部
24 注入開口部
25 排出開口部
26 微小流路
30 試料液
31 ガラスウエハ
32 PDMS円盤基板
33 微小流路パターン
Claims (12)
- 基板上に微小流路を形成し、該微小流路に臨むように酵素を担持させる酵素担持部を形成し、該酵素担持部の近傍の前記微小流路中に凍結乾燥された基質を含む担体を配置させ、前記微小流路に試料液を流すことで測定可能な酵素活性を生じさせ、基質に対応する試料中の酵素活性を分析する微小分析装置。
- 前記酵素担持部には電極が形成され、酵素は該電極の表面若しくは近傍に配置されていることを特徴とする請求項1記載の微小分析装置。
- 前記基板上には流路形成層が形成され、前記基板上の前記酵素担持部の周囲で該流路形成層を開口して前記微小流路を形成することを特徴とする請求項1記載の微小分析装置。
- 前記担持させる酵素は酸化還元酵素であり、前記試料液中のガンマ・グルタミルトランスペプチダーゼ(γ‐GTP)、グルタミック・オキサロアセテック・トランスアミナーゼ(GOT)、グルタミック・ピルビック・トランスアミナーゼ(GPT)、ロイシナミノペプチダーゼ叉はグルタミナーゼのいずれかを分析することを特徴とする請求項1記載の微小分析装置。
- 前記基質は、タンパク質及び架橋剤を混ぜた媒体により前記微小流路に臨むように配置されることを特徴とする請求項1記載の微小分析装置。
- 微小流路を形成すると共に該微小流路に臨むように酵素を担持させる酵素担持部を形成する工程と、該酵素担持部の近傍の前記微小流路中に凍結乾燥された基質を含む担体を配置させる工程と、前記微小流路から前記凍結乾燥された基質に試料液を供給する工程とを有し、基質に対応する試料中の酵素活性を分析することを特徴とする微少試料の分析方法。
- 基板上に微小流路を形成し、該微小流路に臨むように酵素Aを担持させる酵素A担持部を形成し、該酵素A担持部の近傍の前記微小流路中に凍結乾燥された酵素Bを配置させ、前記微小流路に試料液を流すことで試料液中の酵素Bに対応する基質を分析する微小分析装置。
- 前記酵素A担持部には電極が形成され、酵素Aは該電極の表面若しくは近傍に配されていることを特徴とする請求項7記載の微小分析装置。
- 前記基板上には流路形成層が形成され、前記基板上の前記酵素A担持部の周囲で該流路形成層を開口して前記微小流路を形成することを特徴とする請求項7記載の微小分析装置。
- 前記酵素Aは酸化還元酵素であり、酵素Bは加水分解酵素、脱水素酵素又はリン酸化酵素であり、前記試料液中のコレステロール、中性脂肪、クレアチニン、尿素、アンモニアのいずれかを分析することを特徴とする請求項7記載の微小分析装置。
- 前記酵素Bは、タンパク質及び架橋剤を混ぜた媒体により前記微小流路に臨むように配置されることを特徴とする請求項7記載の微小分析装置。
- 微小流路を形成する共に該微小流路に臨むように酵素Aを担持させる酵素A担持部を形成する工程と、該酵素A担持部の近傍の前記微小流路中に乾燥された酵素Bを配置させる工程と、前記微小流路から前記乾燥された酵素Bに酵素Bに対応する基質を含む試料液を供給する工程とを有し、試料中の基質を分析することを特徴とする微少試料の分析方法。
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