JP2003525923A - 水溶液からの有機酸の回収方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 溶液からの所望の有機酸の回収方法には、少なくとも１種の所望の有機酸又はその酸アニオンを含有する水溶液を得る工程、この水溶液中のプロトン濃度を、少なくとも部分的に、回収すべき所望の有機酸の酸アニオン及び／又は所望の有機酸よりも弱い酸アニオンと会合させるのに必要な利用可能なプロトンの量により選択される所望のプロトン濃度で、所望のレベルに調節する工程並びに少なくとも１種の所望の有機酸の少なくとも一部を、水相から回収する工程が含まれる。所望のプロトン濃度は、所望の有機酸のアニオン及び所望の有機酸よりも弱い酸アニオンと会合させるのに必要なプロトンの量よりも多い、これよりも少ない又はこれに実質的に等しい、利用可能なプロトンの量を基準にすることができる。適当な有機酸の具体例には、これらに限定されないが、アスコルビン酸、コハク酸、酒石酸、グリコン酸、グロン酸、クエン酸、乳酸、リンゴ酸、マレイン酸、酢酸、ギ酸、グルコン酸、ピルビン酸、プロピオン酸、酪酸、イタコン酸及びこれらの混合物が含まれる。本発明の一つの態様は、発酵ブロスのような水溶液からの２−ケト−Ｌ−グロン酸（ＫＬＧ）の回収に関する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】発明の背景 確認 本発明は、米国標準及び技術研究所(National Institute of Standards and T
echnology)の高等技術プログラム(Advanced Technology Program)により与えら
れた共同研究契約第70NANB5H1138号の下で、米国政府援助によりなされた。米国
政府は、本発明に於いて一定の権利を有する。

【０００２】発明の分野 本発明は、溶液からの、有機酸、特に易分解性有機酸の改良された回収方法に
関する。

【０００３】発明の背景 溶液から有機酸を回収することが、しばしば必要である。この目的のために、
有機酸を含有する溶液は、種々の化学反応及び発酵方法のような生物学的方法か
ら生じるものとすることができる。

【０００４】 酸回収に関する典型的なアプローチには、酸のカルボキシレート又は塩の形を
所望のｐＨレベルに到達するようにプロトン化することが含まれる。

【０００５】 例えば、シリンジ酸(syringic acid)の製造方法が、特許文献１に教示されて
おり、この方法では、酸の二重アルカリ塩を含有する水溶液が、塩酸又は硫酸の
ような強酸で酸性にされ、続いてカルボン酸生成物が結晶化されている。強酸添
加の量は、溶液のｐＨを３にするために十分なものである。

【０００６】 特許文献２には、ナフトキノン抽出及びフタル酸結晶化からの中性にされた濾
液を再循環させることによって生成された水性溶媒で、ガス流からナフトキノン
及びフタル酸を回収する方法が記載されている。この濾液は、未回収のフタル酸
を中和することなく、硫酸及びマレイン酸副生物のみを中和するために、１．２
〜２．５、好ましくは１．５〜２．２のｐＨに塩基で処理されている。

【０００７】 この方法に於いて、３，６−ジクロロピコリン酸の塩の水溶液から３，６−ジ
クロロピコリン酸を回収する塩酸による酸性化は、特許文献３に教示されている
。再び、酸性化のレベルを決定するために、ｐＨが使用されている。

【０００８】 コバルトカルボニル触媒を使用するカルボニル化により製造された、カルボン
酸、特に、Ｎ−アセチル−ＤＬ−フェニルアラニンカルボン酸の回収は、特許文
献４に教示されている。コバルト塩及び任意の有機相を除去した後、カルボン酸
を、酸、特に塩酸、硫酸又はリン酸のような鉱酸で、目標ｐＨ１に基づく酸添加
の量で沈殿させることにより、水相からカルボン酸が回収されている。

【０００９】 Ｎ−メチルイミノ二酢酸の二ナトリウム塩を含有する水溶液からのＮ−メチル
イミノ二酢酸の回収は、特許文献５に記載されている。この方法に於いて、溶液
は硫酸を使用して酸性にされ、濃縮されて、硫酸ナトリウムを沈殿させる。酸性
化は、このカルボン酸の等電点である約２を目標に、溶液ｐＨにより制御されて
いる。

【００１０】 ジカルボン酸を、その二ナトリウム塩含有水溶液から結晶化回収することは、
特許文献６にも教示されている。この場合に、有機酸は１，３−又は１，４−シ
クロヘキサンジカルボン酸であり、プロトン化は塩酸又は硫酸により、溶液ｐＨ
による酸性化工程の正確な制御は、１，４−及び１，３−異性体について、それ
ぞれ２．８及び２．６の好ましい目標値で再び強調されている。

【００１１】 ブタ胆汁からのヒオデオキシコリン酸(hyodeoxycholic acid）の回収が、特許
文献７に教示されている。他の胆汁酸及び胆汁成分から、そのマグネシウム塩と
してこの酸を単離した後、固体ヒオデオキシコリン酸マグネシウム塩を酢酸エチ
ル水溶液中に懸濁させ、鉱酸で酸性にして、酸の形とする。所望のｐＨ１〜３の
酸性化を制御する、溶液ｐＨが使用されている。

【００１２】 塩基性条件下での、ビス（アミドカルボン酸）、特にＮ，Ｎ’−テレフタロイ
ル−ジ（６−アミノカプロン酸）の製造が、特許文献８に記載されており、この
方法では、生成物は選択的沈殿により回収される。硫酸を使用してｐＨを下げ、
最高の純度を与えるとして、約５．５〜６．５のｐＨで有機酸を沈殿させること
が開示されている。

【００１３】 マレイン酸からＬ−アスパラギン酸を製造する酵素的方法が、特許文献９に教
示されており、この方法では、反応はそれらのアンモニウム塩の形で酸により起
こる。２．８のＬ−アスパラギン酸の等電点への酸性化が、改良された回収率を
与えるとして開示されている。

【００１４】 予備生成のためのｐＨへのこの依存も、発酵ブロスからの有機酸回収の状況で
普及している。

【００１５】 例えば、発酵及びそれに続く抽出を使用する回収による乳酸の製造が、特許文
献１０に記載されている。抽出の前に、発酵ブロスは、所望のｐＨレベルに酸性
化される。

【００１６】 発酵ブロスからの乳酸エステル及び乳酸の回収が、特許文献１１に記載されて
おり、この場合に、乳酸塩が炭素数４〜５のアルコールの存在下で酸性化されて
いる。硫酸のような強酸を、ｐＨが１．０〜１．６になるまで添加している。

【００１７】 発酵ブロスのような水溶液からの、有機酸、特に乳酸の回収方法が、特許文献
１２に教示されており、この方法では、溶液は抽出の前に酸性化されている。抽
出の前及び間にｐＨを１〜４．５にするために、鉱酸が使用されている。

【００１８】 その広範囲の用途にも拘わらず、ｐＨベースの技術は、一貫して有効であるか
又は予想可能であることも示さなかった。

【００１９】 例えば、有機化合物の酸の形が塩の形よりも溶解性でない場合には、所望のカ
ルボン酸は、所望の生成物よりも大きい酸解離定数又はより小さい酸解離定数（
ｐＫ_a）を有するより強い酸の添加によって、選択的に沈殿させることができる
。或る場合には、この酸性化を増大させると、有機酸の溶解度が減少し、回収率
を改良することができる。

【００２０】 しかしながら、他の場合に、所望の酸は強酸の存在下で分解する。このような
場合に、減少した酸の溶解度にも拘わらず、酸性化すると回収率は実際には低下
する。有機不純物又は無機不純物の存在は、回収工程を更に複雑にする機能を果
たすのみである。例えば、このような不純物は、カチオン成分及びアニオン成分
に解離することができ、これらはプロトンをカルボン酸と競合させるか又は工程
の中にプロトンを与えることができる。何れにしても結果は望ましくない。

【００２１】 即ち、プロトンのための競合は、所望の有機酸の回収率を効率的に低下させ、
一方、工程の中へのプロトンの付与は、所望の酸の分解を起こし得る。更に、こ
のような不純物のレベルは、典型的に、所望の有機酸に対して小さいけれども、
このような不純物は、工程の間の濃縮されるようになり、そうしてその効果を更
に拡大し得る。

【００２２】 上記のことを考慮して、現存するプロトン化技術は、水溶液から所望の有機酸
を安定して取り出すためには有効ではないことが明らかである。

【００２３】 第二の問題点は、回収すべき酸と会合したもの以外のアニオンの存在に関する
。水溶液からの有機酸の回収に於いて、溶液中に存在する他のアニオンの濃度は
、回収方法の有効性に強く影響し得ることが認められる。このために、技術は、
回収方法を改良するための試みに於いて、望ましくないアニオンを除去すること
並びに溶液ｐＨを調節することの方向に関心が向けられた。イオン交換技術が使
用されたが、同じように効果がない。

【００２４】 これに関して、所望の酸のカルボキシレート又は塩の形は、水溶液を、カチオ
ン交換樹脂の水素又は遊離酸の形で処理することによって、酸の形に転化させる
ことができる。このイオン交換技術は、無機カチオンの全部ではないにしても大
部分を、水溶液から除去することができるが、これはまたそれ自体の問題を導入
する。

【００２５】 例えば、この樹脂は、溶液中の他のアニオンもプロトン化する。前記の場合の
ように、これは有害な影響に至り得る。特に、得られる不純物酸は、性質が有機
であっても無機であっても、しばしば所望の有機酸よりも強く、それ故所望の酸
の分解に至り得る。イオン交換方法は、溶液を更に希釈し、回収率に於けるなお
一層の低下に至り得る。

【００２６】 従って、所望の有機酸、特に、易分解性有機酸を有効に回収する方法について
の要求がなお存在する。

【００２７】 本発明者等にとって特に関心のある一つの有機酸は、２−ケト−Ｌ−グロン酸
（ＫＬＧ）である。この目的のために、２−ケト−Ｌ−グロン酸の回収のための
技術は、また、当該技術分野で認められている。しかしながら、ＫＬＧの回収の
ための現存する技術は、前記のｐＨ及びイオン交換問題に加えて、種々の問題に
直面している。

【００２８】 例えば、特許文献１３及び特許文献１４に記載されているもののような、これ
らの技術の多くは、そのアルカリ又はアルカリ土類塩の形でこの酸を結晶化回収
し、続いて硫酸のような酸で処理することによって酸の形に転化させることを教
示している。このような方法は、次のエステル化のような転化工程のために、水
性酸性化媒体から２−ケト−Ｌ−グロン酸を分離するために、なお他の結晶化工
程を必要とする限りに於いて、種々の問題を導入する。

【００２９】 更に、固体２−ケト−Ｌ−グロン酸製品の製造に於いて、結晶化又は抽出を使
用してカルボン酸を回収する前に、アニオン交換樹脂で水溶液を処理することが
必要であることは、技術認識された信念である（例えば、特許文献１５及び特許
文献１６参照）。

【００３０】 それで、この要求は、発酵ブロスのような水溶液からＫＬＧを回収するための
改良された方法について特に大きい。

【００３１】

【特許文献１】 米国特許第４，１９１，８４１号明細書

【特許文献２】 米国特許第４，２０２，８２８号明細書

【特許文献３】 米国特許第４，３３４，０７４号明細書

【特許文献４】 米国特許第４，６９９，９９９号明細書

【特許文献５】 米国特許第５，１５９，１１０号明細書

【特許文献６】 米国特許第５，２０２，４７５号明細書

【特許文献７】 米国特許第５，３４９，０７４号明細書

【特許文献８】 米国特許第５，４１０，０７６号明細書

【特許文献９】 米国特許第５，７４１，６８１号明細書

【特許文献１０】 米国特許第４，７７１，００１号明細書

【特許文献１１】 米国特許第５，２１０，２９６号明細書

【特許文献１２】 米国特許第５，４２６，２１９号明細書

【特許文献１３】 米国特許第２，４２１，６１１号明細書

【特許文献１４】 米国特許第２，４２１，６１２号明細書

【特許文献１５】 米国特許第４，９９０，４４１号明細書

【特許文献１６】 米国特許第５，２０２，４７６号明細書

【００３２】発明の要約 本発明は、少なくとも部分的に、所望の有機酸を回収するのに最適の溶液組成
は、溶液中の有機酸の濃度の知識と共に又は無しで、ｐＨ測定値によっては有効
に決定できないと言う驚くべき知見に基づいている。

【００３３】 その代わりに、本発明の方法には、水相中のプロトンレベルを、所望のプロト
ン濃度（但し、このプロトン濃度は、少なくとも部分的に、回収すべき有機酸及
び回収すべき有機酸よりも弱い酸アニオンと会合させるのに必要なプロトンの量
に対して選択される）に調節することが含まれる。

【００３４】 本発明は、少なくとも部分的に、所望の酸の回収率を最適化するために、溶液
から他のアニオンを除去する必要はないと言う更に驚くべき知見に基づいている
。従って、本発明の方法は、水性環境から種々の酸を分離するのに有効に使用す
ることができる。

【００３５】 本発明の一つの面は、 （ａ）少なくとも１種の所望の有機酸又はその酸アニオンを含有する水溶液を
準備し、 （ｂ）前記水溶液中のプロトン濃度を、少なくとも部分的に、所望の有機酸の
酸アニオン及び／又は所望の有機酸よりも弱い酸アニオンと会合させるのに必要
な利用可能なプロトンの量により選択される所望のプロトン濃度で、所望のレベ
ルに調節し、そして （ｃ）少なくとも１種の所望の有機酸の少なくとも一部を水相から回収する 各工程を含んでなる、溶液からの所望の有機酸を回収する方法に関する。

【００３６】 これに関して、所望のプロトン濃度は、所望の有機酸（単数又は複数、この明
細書において同じ）のアニオン及び所望の有機酸よりも弱い酸アニオンと会合さ
せるのに必要なプロトンの量よりも多い、これよりも少ない又はこれに実質的に
等しい、利用可能なプロトンの量を基準にすることができる。

【００３７】 適当な有機酸の具体例には、アスコルビン酸、コハク酸、酒石酸、グリコン酸
(glyconic acid)、グロン酸(gulonic acid）、クエン酸、乳酸、リンゴ酸、マレ
イン酸、酢酸、ギ酸、ピルビン酸、プロピオン酸、グルコン酸、酪酸、イタコン
酸及びこれらの混合物が含まれる。

【００３８】 本発明の一つの態様は、発酵ブロスのような水溶液からの２−ケト−Ｌ−グロ
ン酸（ＫＬＧ）の回収に関する。

【００３９】好ましい態様の詳細な説明 前記のように、本発明は、溶液、好ましくは水溶液からの、有機酸、特に易分
解性有機酸の回収方法に関する。

【００４０】 「易分解性」によって、強酸の存在下で分解される有機酸を指す。 更に、好ましい有機酸には、酸の塩の形が、酸自体よりも溶媒中に一層溶解性
であるこれらの酸が含まれる。

【００４１】 本発明に於いて任意の有機酸を使用することができるが、カルボン酸が好まし
い。本発明の方法により回収することができる適当な有機酸の具体例には、コハ
ク酸、酒石酸、グルコン酸、グリコン酸、クエン酸、乳酸、リンゴ酸、マレイン
酸、酢酸、ギ酸、ピルビン酸、プロピオン酸、酪酸、イタコン酸、アスコルビン
酸及びグロン酸が含まれる。

【００４２】 前記のように、酸は、酸又はそのアニオンの形で存在していてよい。酸の少な
くとも一部は、そのアニオンの形で存在することが好ましい。適当な水イオンの
例には、アルカリ及びアルカリ土類塩が含まれ、適当な対イオンの具体例には、
ナトリウム、カリウム及びカルシウムが含まれる。この酸は、アンモニウムの形
で存在することもできる。

【００４３】 溶液には、他の酸、酸アニオン及び／又は中性有機化合物を含む種々の他の成
分が含まれていてもよい。適当な酸アニオンの具体例には、とりわけリン酸塩、
硫酸塩、硝酸塩及び塩化物が含まれ、他方、適当な中性有機化合物には、糖、ア
ルデヒド及びケトンが含まれる。

【００４４】 更に、具体的な水溶液の性質及び用途に依存して、他の成分が存在してもよい
。例えば、発酵から製造された水溶液で、特に、発酵ブロスからの２−ケト−Ｌ
−グロン酸の回収で本発明を使用する際に、アンモニア、炭酸カルシウム、水酸
化カルシウム、水酸化ナトリウム、重炭酸ナトリウム、炭酸ナトリウム水溶液等
のような適当な塩基を添加して、有機酸生成物をカルボキシレート又は塩の形に
転化することにより、ｐＨを中性又は中性付近に保持することができる。更に、
未反応の糖及びその他の供給材料が存在してよい。

【００４５】 前記のように、本発明は、溶液からの他のアニオンを除去することなく実施す
ることができる。

【００４６】 本発明の方法の第一面には、プロトン濃度を調節する工程が含まれる。この工
程に於いて、水溶液は、少なくとも部分的に、所望の有機酸、例えば、回収すべ
きこれらの有機酸及び所望の有機酸よりも弱い酸アニオンと会合(associate）さ
せるのに必要なプロトンの量に基づく所望のプロトン濃度で、所望のプロトン濃
度を得るようにプロトン化される。従って、本発明方法のこの工程には、好まし
くは、（ｉ）所望の有機酸のプロトン化の状態を決定すること及び次いで（ｉｉ
）プロトン濃度を所望のレベルに調節することが含まれる。この調節のこれらの
好ましい面のそれぞれを、以下詳細に検討する。

【００４７】 有機酸のプロトン化の状態は、当量点に対して関連づけられる。本発明の状況
に於いて、溶液が所望の有機酸及び関心のある有機酸よりも弱い任意の酸アニオ
ン、有機物又は無機物と会合させるのに十分であるが、この酸よりも強い酸アニ
オン、有機物又は無機物と会合させるのには十分ではないプロトンを含有する場
合には、酸は当量であると考えられる。

【００４８】 この定義は、所望の有機酸及びより弱い酸アニオンが溶液中で完全に会合し、
より強い酸アニオンが完全に解離することを示すことを意味しないが、所望の有
機酸アニオン及びより弱い酸アニオンと会合させるのに利用可能な十分なプロト
ンが存在し、より強い酸アニオン不純物のためには何も残っていないことを示す
ことを意味しないことを認めることが重要である。

【００４９】 更に、与えられた溶液中で種々のアニオンとのプロトン会合の程度は、化学平
衡の原理により指定されることが認められる。そして、平衡でも、所望の有機酸
の幾らかの解離及びより強い酸アニオンとのプロトン会合が存在する。

【００５０】 プロトン化の状態を決定するための技術は、本発明にとって重要ではない。こ
の目的のために、好ましい技術には、電荷バランス、滴定及び分光法が含まれる
。

【００５１】 イオン電荷バランスに関して、有機酸のプロトン化の状態は、水溶液の組成分
析を使用して決定することができる。解離によりカチオン又はアニオンを形成す
ることができる任意の種の濃度並びに存在するイオン化可能な化学種の解離定数
を知らなければならない。これには、溶液中に一般的にカチオンとして存在する
アルカリ金属及びアルカリ土類金属のような無機化学種並びに強酸アニオンを示
す硫黄、リン、塩素等が含まれる。そして、所望の有機酸の濃度及び顕著な量で
存在する全ての他の有機酸不純物を知らなくてはならない。プロトンではなくて
無機カチオンによりこれらのアニオンの負電荷に対抗することが望ましいとき、
関連の有機酸よりも強い酸を形成することができる任意の化学種の濃度を知るこ
とが、特に重要である。

【００５２】 電荷バランスにより、水溶液中のプロトンの全濃度は、下記の式： ［Ｈ］_Total＝Σ（ν_i［Ａ_i］）−Σ（ν_j［Ｃ_j］） （式中、［Ａ_i］は、その完全に解離した状態で、−ν_iの負電荷を有するアニオ
ン性化学種ｉのモル濃度であり、［Ｃ_j］は、＋ν_jの正電荷を有する無機（即ち
、プロトンを出す）カチオン性化学種ｊのモル濃度である） により与えられる。また、これは、これらのプロトンの全てが溶液中で解離する
ことを示すことを意味しない。全プロトン濃度［Ｈ］_Totalは、単純に、それら
を任意の特定の化学種に帰属させる前の会合した及び解離したプロトンの合計を
表す。

【００５３】 例えば、無機化学種Ｃａ、Ｋ、Ｎａ、Ｍｇ、Ｓ、Ｐ及びＣｌ並びに有機酸Ｏを
含有する溶液中で、全プロトン濃度は、 [Ｈ]_Total＝[Ｏ]＋２[Ｓ]＋３[Ｐ]＋[Ｃｌ]−(２[Ｃａ]＋[Ｋ]＋[Ｎａ]＋２[Ｍ
ｇ]） によって与えられる。

【００５４】 これは、有機酸は単一のカルボキシル基を含有し、硫黄は硫酸塩アニオン（Ｓ
Ｏ₄ ^2-）として存在し、リンはリン酸塩アニオン（ＰＯ₄ ^3-）として存在し、そし
て全ての塩素は無機塩化物であると仮定する。当業者は、例えば、有機酸若しく
は追加の有機酸に複数のカルボキシル基又は無機電解質を含有する他のケースに
ついて、適切にこの関係を容易に適用することができる。

【００５５】 有機酸のプロトン化の状態は、この全量の幾らかを、関心の有機酸よりも弱い
（より高いｐＫ_a）、存在する全ての酸アニオンに対して帰属させた後に、有機
酸と会合するために利用可能なプロトンの濃度を決定することによって見出され
る。利用可能なプロトンのこの濃度、［Ｈ]_Availは、 ［Ｈ]_Avail＝［Ｈ]_Total−Σ（η_k［Ｗ_k］） （式中、［Ｗ_k］は、η_kプロトンと会合した後に有機酸アニオンよりも弱いまま
である弱酸アニオンｋの濃度である） により与えられる。（モノカルボン酸について）利用可能なプロトンの有機酸に
対するモル比が等価で１に等しいとすると、この比は、プロトン化の程度の定量
的測定値として使用することができる。

【００５６】 例えば、上記の例に於いて、有機酸ＯのｐＫ_aが２．５である場合、有機酸Ｏ
をプロトン化するために必要な条件で、リン酸塩アニオンは２個のプロトンと会
合して、リン酸二水素アニオンＨ₂ＰＯ₄ ^-を形成し、そうしてこの例について、 ［Ｈ]_Avail＝［Ｈ]_Total−２［Ｐ］ である。

【００５７】 塩酸、リン酸の第三プロトン及び硫酸の両プロトンのｐＫ_aは、この場合に有
機酸のそれよりも低く、有機酸のために利用可能な十分なプロトンのみで溶液か
ら出ることは、これらのより強い酸の生成を防止する助けになる。また、溶液が
等価であるときでも、所望の有機酸の幾らかの解離及び強酸アニオンとのプロト
ン会合が存在するであろう。しかしながら、有機酸を、抽出又は結晶化により溶
液から除去するとき、これらのより強い酸は、それらのアニオンと会合した任意
のプロトンをより弱い有機酸に与えるであろう。

【００５８】 プロトン化の状態を決定するための他の方法には、滴定の使用が含まれる。利
用可能なプロトン及び有機酸のモル濃度が等しいとき、溶液は等価であるとする
と、等価に達するために加える（取り去る）ためのプロトンのモル量、Ｈ_Eqは、 Ｈ_Eq＝Ｏ−Ｈ_Avail （式中、Ｏは、存在する有機酸Ｏのモル量であり、Ｈ_Availは、溶液中の利用可
能なプロトンのモル量である） によって与えられる。典型的に、Ｈ_Eqは、水溶媒中で強酸滴定剤で滴定すること
によって決定される。しかしながら、２−ケト−Ｌ−グロン酸（ＫＬＧ）のよう
な比較的強い有機酸について、Ｈ_Eqは、この有機酸アニオンは、適切な終点を与
えるには弱すぎる塩基であるので、水中で強酸での滴定により決定することはで
きない。

【００５９】 非プロトン性又は少なくとも非常に弱い酸である任意の溶媒を、このような有
機酸の滴定で使用することができる。更に、好ましい溶媒の選択は、問題の酸に
依存する。特に、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）が、それが非プロトン性で
あり、滴定成分のための良好な溶媒であるので、ＫＬＧ溶液で良好な終点を得る
ために好ましい。

【００６０】 他の酸又は塩基化学種の存在は、酸溶液の滴定を複雑にするおそれがある。例
えば、ＤＭＳＯ中で行われるＫＬＧ滴定と関連させて、硫酸塩はＫＬＧアニオン
と共に弱塩基として作用し、等価に達するために必要である酸の量に於ける誤差
に至る。滴定の前に過剰の塩化バリウムを添加すると、硫酸塩により起こる問題
が排除される。 ３ＢａＣｌ₂＋ＳＯ₄ ^2-＋２ＨＳＯ₄ ^- → ３ＢａＳＯ₄＋６Ｃｌ^-＋２Ｈ⁺ 硫酸塩及び滴定に於ける妨害は除去され、重硫酸塩と会合したプロトンは遊離し
て、有機酸をプロトン化する。それで、解離した有機酸アニオン及びその他の弱
酸アニオンのみが滴定され、滴定で等価に達するための酸の量は、溶液中で等価
に達するために必要である量を反映する。

【００６１】 塩化バリウムの添加は、ＤＭＳＯ中の硫酸塩問題のための便利な補正を与える
が、イオンクロマトグラフィー又は他の技術により決定したとき、それ及び硫酸
塩の量に基づいて行われた補正無しに、滴定を行うことができた。同様の考慮を
、顕著な濃度で存在する他の成分について行うことができた。また、利用可能な
プロトンが有機酸をプロトン化するために必要であるものを越える場合について
、滴定を、強塩基により又はその代わりに、既知量の塩基を添加し、酸で逆滴定
することによって実施することができた。

【００６２】 プロトン化工程の第二の面には、少なくとも部分的に、所望の有機酸のプロト
ン化の状態に基づいてプロトン濃度を調節することが含まれる。この調節技術に
は、回収すべき特定の有機酸に依存する１個又はそれ以上の工程が含まれてよい
。

【００６３】 例えば、所望の有機酸の塩の形を含有する水溶液を使用するとき、調節は、適
切な量の強酸を添加することにより一工程で実施することができる。強酸により
、回収される有機酸に比較して強い酸が意味される。好ましい有機酸と共に使用
するための強酸の適当な例には、塩酸、硫酸、硝酸及びリン酸が含まれる。

【００６４】 また、二工程方法を使用することができる。この態様に於いて、酸イオンの全
て、即ち弱酸と強酸の両方を、続いて強酸のみの中和のための適切な量の塩基を
を添加することによって、カチオン交換樹脂の水素又は酸形でプロトン化するこ
とができる。

【００６５】 適当なカチオン交換樹脂の特別の例には、アンバーセプ(Ambersep)２００Ｈ、
アンバーライト(Amberlite)ＩＲ−１１８Ｈ形、ダウエックス(Dowex)５０Ｘ２−
１００、５０Ｘ２−２００、５０Ｘ２−４００、５０Ｘ８−２００、５０Ｘ８−
４００、ＨＢＫ−５３０Ｈ形及びＨＢＫ−５５０Ｈ形のようなスルホン化ポリス
チレン樹脂が含まれる。

【００６６】 中和に使用される特定の塩基に依存して、二工程方法は、不溶性又は僅かに可
溶性の塩を形成することができるカルシウムのような無機カチオンの全てを最初
に除去することにより、有機酸生成物中の無機塩不純物を除去するという利点を
有する。更に、これは、カチオン交換によって生成される強酸が中和されて、分
解問題を回避するという点で、カチオン交換樹脂単独を使用することよりも優れ
ている。

【００６７】 二工程方法に関する別の態様に於いて、カルボキシレート含有溶液からなるス
リップ流(slip stream)をカチオン交換工程の周りに迂回させ、そこで生成され
る強酸を中和するために使用することができる。

【００６８】 更に他の態様には、三工程プロトン化技術が含まれる。適当な三工程技術には
、 （１）強酸で処理し、続いて任意の沈殿した塩を除去することによる、カルボ
キシレートのバルクのその酸の形への転化、 （２）カチオン交換樹脂の水素又は酸の形により、任意の残留する酸イオンを
プロトン化すること並びに最後に、 （３）得られる強酸を中和するために適当量の塩基を添加すること が含まれる。 適当な塩基の具体例には、水酸化ナトリウム及び水酸化カリウムが含まれる。

【００６９】 この技術は、塩を生成するカチオンが、硫酸又は塩酸のような鉱酸で酸性化し
た際に、不溶性又は僅かに可溶性の塩が生成する場合に、カチオン交換樹脂への
負荷を減少させることが重要であるような本発明の方法で、有効に使用すること
ができる。

【００７０】 技術のそれぞれに於いて、プロトン濃度は、所望の有機酸のプロトン化の状態
に基づく任意の所望のレベルに調節することができる。この目的のために、回収
すべき特別の酸及び使用する水溶液に依存して、オーバープロトン化する、即ち
、等価レベルよりも大きいプロトン濃度を与えること及びアンダープロトン化す
ることの両方は、本発明の範囲内である。

【００７１】 特に、前記のように、オーバープロトン化は、次の蒸発又は濃縮工程の間の有
機酸の分解に至るかもしれず、他方、アンダープロトン化は、有機酸の幾らかを
そのカルボン酸の形のままにし、これは潜在的に、有機酸生成物中の塩不純物又
は酸生成物のより低い収率に至り得る。しかしながら、プロトン化の状態を決定
し、使用するための能力及びプロトン濃度を決定することは、本発明の重要な面
である。この目的のために、殆どの場合に、有機酸がその等価状態にあるように
、プロトン濃度を調節することが好ましい。

【００７２】 所望のプロトン濃度は、除去すべき明確な有機酸、システム内の他のアニオン
等を含む多くの要因に依存する。

【００７３】 溶解度は、一般的に、利用可能なプロトンの有機酸に対する高い比で最小にさ
れるので、回収率を最大にするために、水溶液を等価に対してオーバープロトン
化することが、しばしば好ましい。オーバープロトン化が望ましい場合に、プロ
トン濃度は、好ましくは、等価よりも約１〜約１０モル％高い。

【００７４】 しかしながら、ある状況では、オーバープロトン化条件は、次の回収、例えば
、蒸発又は濃縮工程の間の有機酸の分解に至るかもしれない。このような場合に
、アンダープロトン化が好ましい。アンダープロトン化の場合に、好ましプロト
ン化濃度は、等価よりも約１〜約１０モル％程度低い。

【００７５】 他方、溶液をアンダープロトン化することは、有機酸の幾らかをそのカルボキ
シレート形のままにし、潜在的に、有機酸生成物中の塩不純物又はより低い収率
に至る。結晶化による回収を最適化するためには、許容できない分解損失に至る
ことなく溶解度を最小にするように、供給物をプロトン化することが必要である
。

【００７６】 従って、多くの場合に、有機酸が等価状態であるようにプロトン濃度を調節す
ることが最適であろう。

【００７７】 これは、供給物のプロトン化の状態を、顕著な有機酸回収後に残留する溶液の
ものに関連づけることによって示すことができる。物質収支により、供給物中の
利用可能なプロトンの有機酸Ｏに対する比（［Ｈ］_Avail／［Ｏ］）^Fと、酸の分
別回収ｒ後の濾液又は母液中のそれ（［Ｈ］_Avail／［Ｏ］）^MLとの間の下記の
関係を導くことができる。

【００７８】

【数１】

【００７９】 この方程式を、８５〜１１５％の供給［Ｈ］_Avail／［Ｏ］値について、分別
回収の関数として、図１にプロットする。８５％以上の有機酸回収率で、母液中
のプロトン化レベルは、等価（即ち、１００％）以外の初期プロトン化のための
供給物のものから著しく逸脱している。これらの逸脱は、溶解度、分解及びそれ
で実際に到達できる回収率に劇的に影響を与える。そこで、溶解度又は分解問題
のために１００％から離れた［Ｈ］_Avail／［Ｏ］比で次の回収工程を運転する
ことが望ましくない場合には、供給物を等価までプロトン化しなくてはならない
。

【００８０】 本発明のための好ましい応用は、アスコルビン酸の生成及び、特に２−ケト−
Ｌ−グロン酸の回収に関する。

【００８１】 この目的のために、２−ケト−Ｌ−グロン酸は、発酵、ライヒシュタイン法及
びジアクトン(diactone)２−ケト−Ｌ−グロン酸（２，３；４，６−ジイソプロ
ピリデン−オキソ−Ｌ−グロン酸）一水和物又はその無水物の加水分解を含む、
当該技術分野で認められた任意の技術により製造することができる。

【００８２】 また、本発明の方法は、水溶液、特に、本発明の背景で検討したカルボキシル
起源を含有するこれらの水溶液からの種々の有機酸の回収で使用することができ
る。

【００８３】 プロトン濃度を調節することに続いて、所望の有機酸が水相から除去される。
この目的のために、回収のための的確な方法は、当該技術分野で認められた任意
の回収技術を本発明内で使用することができる点で、請求の範囲に記載された発
明にとって重要ではない。

【００８４】 例えば、適当な技術には、水相から酸を結晶化させ、続いて、濾過、遠心分離
、デカンテーション、抽出及び／又は噴霧乾燥を行うことによって、所望の有機
酸を単離することが含まれる。

【００８５】 本発明の方法には、また、そこで生成した種々の流れを再循環又は再使用する
ことが含まれる。例えば、このような再循環物には、任意の残留する有機酸の追
加の除去を与えるために出発材料の中に再循環される、回収の後で残留する水相
が含まれる。

【００８６】 更に、この再循環流は、適当なアニオン又はカチオン交換樹脂と接触させ、そ
の後、水溶液の中に再導入することができる。

【００８７】 この所望の有機酸は、任意の当該技術分野で認められた方法で使用することが
できる。例えば、水性発酵ブロスからＫＬＧを除去すべき場合、このＫＬＧをア
スコルビン酸の生成で使用することができる。種々の有機酸のための他の用途は
、当該技術分野でよく認められており、そのこと自体をここで詳細に説明する必
要はない。

【００８８】 本発明は、水溶液をアニオン交換樹脂と接触させる必要なく、有機酸の所望の
カルボキシレート又は塩の形を含有する水性流中で適切なプロトン濃度を与える
ことができる。更に、この方法は、所望の有機酸生成物の回収が、次の回収工程
の間に最大になるようにする。最後に、本発明は、この回収を費用効果的方法で
提供することができる。

【００８９】 本発明を、或る特定の実施例について記載する。しかしながら、これらの実施
例は本来例示のみであり、本発明の範囲を決して限定しないことが認められるべ
きである。

【００９０】実施例 下記の例は、結晶化による発酵ブロスからの２−ケト−Ｌ−グロン酸（ＫＬＧ
）の回収に関する。例１〜４４は、結晶化の前にＫＬＧをプロトン化する先行技
術の方法を表し、一方、例４５〜７０は、本発明に於ける有機酸の適切なプロト
ン化を反映している。全ての場合に、ＫＬＧ含有ブロスは、組換えＤＮＡ有機体
及びＣａ（ＯＨ）₂添加により５〜６に制御されたｐＨで、グルコース及びフル
クトース供給物の好気的発酵により製造した。下記の例に記載したように、ブロ
スは、典型的に、硫酸によりｐＨ約２に酸性化し、そして活性炭及び濾過を使用
して清澄にして、細胞、石膏及びその他の無機塩を全ての追加の処理の前に除去
した。

【００９１】例１ 硫酸でｐＨ約２に酸性化し、炭素処理し、そしてミクロ濾過して、細胞、炭素
及びその他の固体を除去した後、３０３１グラムの表Ｉに示す組成を有するブロ
スを、１０℃での蒸発結晶化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｋ、Ｎａ
及びＰ）の平均濃度が、供給物中のものに対して、母液又は濾液中で７．５２の
係数ほど増加する点まで蒸発させ、２３１２．６グラムの留出物を回収した。真
空濾過、メタノール洗浄及び乾燥の後、７７．９％のＫＬＧ回収率に相当する、
３６１．１グラムの８６．６重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収し
た。母液の組成を表IIに示す。供給物中の電荷バランスによって決定したときの
利用可能なプロトンのＫＬＧに対する比（８７．５％）を、母液中の比（６０．
９％）に対して比較することによって、供給物ブロスはアンダープロトン化され
、ＫＬＧが結晶化したとき、よりプロトン不足になったことが明らかになる。こ
れはまた、供給物中の１．８から母液中の２．０８へのｐＨ上昇によって反映さ
れた。

【００９２】例２ 連続式結晶化方法に於ける母液再循環をシミュレートするために、例１に記載
された回分式結晶化からの母液１６０グラムを、２４４１．２グラムの同じ新し
い供給物と一緒にし、１０℃での蒸発結晶化に付した。このブロスを、可溶性無
機物（Ｋ、Ｎａ及びＰ）の平均濃度が、新しい供給物中のものに対して、母液又
は濾液中で６．００の係数ほど増加する点まで蒸発させ、１７７２．２グラムの
留出物を回収した。真空濾過、メタノール洗浄及び乾燥の後、４１．８％のＫＬ
Ｇ回収率に相当する、１８５．２３グラムの８５．９重量％純度（無水物基準）
のＫＬＧ生成物を回収した。得られた母液の組成を表IIに示す。例１からの母液
が新しい供給物よりもアンダープロトン化された（６０．９％対８７．５％）こ
とを考えれば、利用可能なプロトンのＫＬＧに対する比が、この母液中で一層低
かった（４３．５％）ことは驚くべきことではない。このアンダープロトン化は
、おそらく劣ったＫＬＧ回収率に寄与したと思われ、カルボキシレート溶液の酸
性化を制御するために、単独でｐＨに頼ったことの欠点を示している。

【００９３】例３ 硫酸でｐＨ約２に酸性化し、炭素処理し、そしてミクロ濾過して、細胞、炭素
及びその他の固体を除去した後、例１及び２で新しい供給物として使用したもの
と同じブロスを、カチオン交換樹脂の水素形と接触させることによって更に前処
理した。得られたブロスは表Ｉに示した組成を有しており、この３０００．５グ
ラムを、１０℃での蒸発結晶化に付した。このブロスを、リン濃度が、供給物中
のものに対して、母液又は濾液中で４．９０の係数ほど増加する点まで蒸発させ
、２２４０グラムの留出物を回収した。真空濾過、メタノール洗浄及び乾燥の後
、５２．６％のＫＬＧ回収率に相当する、２１５．０グラムの８８．１重量％純
度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。母液の組成を表IIに示す。例１と
は反対に、供給物中の利用可能なプロトンのＫＬＧに対する比（１１２．１％）
を、母液中の比（１３２．４％）に対して比較することによって、供給物ブロス
はオーバープロトン化され、ＫＬＧが一層結晶化するようになったことが明らか
になる。これはまた、供給物中の１．８から母液中の０．４４へのｐＨ低下及び
母液中のＫＬＧ分解の副生物であるアスコルビン酸の出現（１．３９重量％）に
よって反映された。本例は、更に、電荷バランスによれば、例１中の供給物はア
ンダープロトン化され、一方本例の場合には供給物はオーバープロトン化された
けれども、新しい供給物ｐＨは例１に於けると同じ（１．８）であったので、プ
ロトン化の尺度としてｐＨを使用することの不適切さを示している。

【００９４】例４ 連続式結晶化方法に於ける母液再循環をシミュレートするために、例３に記載
された回分式結晶化からの母液４２３．６グラムを、２４４０．６グラムの同じ
新しい供給物と一緒にし、１０℃での蒸発結晶化に付した。このブロスを、リン
濃度が、新しい供給物中のものに対して、母液又は濾液中で８．６３の係数ほど
増加する点まで蒸発させ、２０００．７グラムの留出物を回収した。真空濾過、
メタノール洗浄及び乾燥の後、６７．９％のＫＬＧ回収率に相当する、３００．
８８グラムの８６．８重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。得
られた母液の組成を表IIに示す。例３からの母液が新しい供給物よりも一層オー
バープロトン化された（１３２．４％対１１２．１％）ことを考えれば、利用可
能なプロトンのＫＬＧに対する比が、この母液中で一層高かった（１７８．５％
）ことは驚くべきことではない。分解によるＫＬＧ損失も、母液中の増加したア
スコルビン酸レベル（２．２８重量％）によって反映されるように、より高かっ
た。

【００９５】例５ 連続式結晶化方法に於ける母液再循環をシミュレートするために、例４に記載
された回分式結晶化からの母液４９０グラムを、２４３３．１グラムの例３及び
４で使用した同じ新しい供給物と一緒にし、１０℃での蒸発結晶化に付した。こ
のブロスを、リン濃度が、新しい供給物中のものに対して、母液又は濾液中で１
１．７６の係数ほど増加する点まで蒸発させ、２０００．８グラムの留出物を回
収した。真空濾過、メタノール洗浄及び乾燥の後、６５．２％のＫＬＧ回収率に
相当する、２８５．５３グラムの８４．５重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生
成物を回収した。得られた母液の組成を表IIに示す。例４からの母液が新しい供
給物よりもなお一層オーバープロトン化された（１７８．５％対１１２．１％）
ことを考えれば、利用可能なプロトンのＫＬＧに対する比が、この母液中でなお
一層高かった（２０３．２％）ことは驚くべきことではない。分解によるＫＬＧ
損失も、母液中の増加したアスコルビン酸レベル（２．８１重量％）によって反
映されるように、より高かった。

【００９６】例６ 細胞を除去するためにｐＨ約７でミクロ濾過し、硫酸でｐＨ約２に酸性化し、
炭素処理し、そして濾過して、炭素及びその他の固体を除去した後、ブロスを、
更に硫酸を添加し、濾過し、そしてカチオン交換樹脂の水素形と接触させること
によって更に前処理した。追加の硫酸は、ＫＬＧを完全にプロトン化することを
意図しており、ブロス中のＫＬＧとのプロトン会合の程度のＣ¹³ ＮＭＲ測定に
基づいていた。得られたブロスは表Ｉに示した組成を有しており、この３０００
．２グラムを、１０℃での蒸発結晶化に付した。このブロスを、リンの濃度が、
供給物中のものに対して、母液又は濾液中で６．３２の係数ほど増加する点まで
蒸発させ、２３８７．６グラムの留出物を回収した。真空濾過、メタノール洗浄
及び乾燥の後、７６．９％のＫＬＧ回収率に相当する、２３４．８５グラムの８
７．４重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。母液の組成を表II
に示す。追加の硫酸とカチオン交換との組合せにより、１３６．６％の、供給物
中の利用可能なプロトンのＫＬＧに対する比によって反映されるようにオーバー
プロトン化に至り、これは、この比が母液中で２６１．４％に増加したので一層
ＫＬＧが結晶化されるようになった。また、母液には２．８５重量％のアスコル
ビン酸が含有されていたので、ＫＬＧ分解についての証拠が存在した。

【００９７】例７ 連続式結晶化方法に於ける母液再循環をシミュレートするために、例６に記載
された回分式結晶化からの母液２１７．７グラムを、２６４０．３グラムの同じ
新しい供給物と一緒にし、１０℃での蒸発結晶化に付した。このブロスを、リン
濃度が、新しい供給物中のものに対して、母液又は濾液中で１４．９３の係数ほ
ど増加する点まで蒸発させ、２２３９．９グラムの留出物を回収した。得られた
母液の組成を表IIに示す。例６からの母液が新しい供給物よりも一層オーバープ
ロトン化された（２６１．４％対１３６．６％）ことを考えれば、利用可能なプ
ロトンのＫＬＧに対する比（３００．２％）及びアスコルビン酸レベル（３．１
４重量％）の両方が、この母液中で一層高かったことは驚くべきことではない。

【００９８】例８ 本例のための供給物ブロスは、なお一層多い硫酸を、カチオン交換の前に添加
した以外は、例６に記載したものと同じに前処理した。得られたブロスは表Ｉに
示した組成を有しており、この３０００．４グラムを、１０℃での蒸発結晶化に
付した。このブロスを、リン濃度が、供給物中のものに対して、母液又は濾液中
で６．１６の係数ほど増加する点まで蒸発させ、２３１７．６グラムの留出物を
回収した。真空濾過、メタノール洗浄及び乾燥の後、５９．９％のＫＬＧ回収率
に相当する、２３０．４２グラムの８４．９重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ
生成物を回収した。母液の組成を表IIに示す。追加の硫酸とカチオン交換との組
合せにより、１４３．８％の、供給物中の利用可能なプロトンのＫＬＧに対する
比によって反映されるように一層大きいオーバープロトン化に至り、これは、こ
の比が母液中で３２９．８％に増加したので一層ＫＬＧが結晶化されるようにな
った。また、母液には２．０重量％のアスコルビン酸が含有されていたので、Ｋ
ＬＧ分解についての証拠が存在した。

【００９９】例９ 連続式結晶化方法に於ける母液再循環をシミュレートするために、例８に記載
された回分式結晶化からの母液３２３．６グラムを、２５８０．１グラムの同じ
新しい供給物と一緒にし、１０℃での蒸発結晶化に付した。このブロスを、リン
濃度が、新しい供給物中のものに対して、母液又は濾液中で１０．２５の係数ほ
ど増加する点まで蒸発させ、２１８９．２グラムの留出物を回収した。真空濾過
、メタノール洗浄及び乾燥の後、６７．２％のＫＬＧ回収率に相当する、２４２
．５４グラムの８９．６重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。
得られた母液の組成を表IIに示す。例８からの母液が新しい供給物よりも一層オ
ーバープロトン化された（３２９．８％対１４３．８％）ことを考えれば、利用
可能なプロトンのＫＬＧに対する比が、この母液中で一層高かった（６０４．２
％）ことは驚くべきことではない。分解によるＫＬＧ損失も、母液中の増加した
アスコルビン酸レベル（３．３７重量％）によって反映されるように、より高か
った。

【０１００】例１０ 連続式結晶化方法に於ける母液再循環を更にシミュレートするために、例９に
記載された回分式結晶化からの母液２１３．９グラムを、２５１０．３グラムの
例８及び９で使用した同じ新しい供給物と一緒にし、１０℃での蒸発結晶化に付
した。このブロスを、リン濃度が、新しい供給物中のものに対して、母液又は濾
液中で８．９５の係数ほど増加する点まで蒸発させ、２１２１．７グラムの留出
物を回収した。真空濾過、メタノール洗浄及び乾燥の後、７１．３％のＫＬＧ回
収率に相当する、２４２．２１グラムの８６．７重量％純度（無水物基準）のＫ
ＬＧ生成物を回収した。得られた母液の組成を表IIに示す。このブロスは、、例
９に於けるものほど多く蒸発により濃縮しなかったので、母液中の利用可能なプ
ロトンのＫＬＧに対する比は、幾らか低かった（５０３．１％対６０４．２％）
。しかしながら、母液中の３．２１重量％のＫＬＧ分解生成物であるアスコルビ
ン酸により、これは明らかにオーバープロトン化されていた。

【０１０１】例１１ 硫酸でｐＨ約２に酸性化し、炭素処理し、そしてミクロ濾過して、細胞、炭素
及びその他の固体を除去した後、例１及び２に於いて新しい供給物として使用し
た同じブロスを、更に硫酸を添加し、濾過し、そしてカチオン交換樹脂の水素形
と接触させることによって更に前処理した。追加の硫酸は、ブロス中のＫＬＧと
のプロトン会合の程度のＣ¹³ ＮＭＲ測定に基づいた、ＫＬＧを完全にプロトン
化するために必要なものを越えていた。得られたブロスは表Ｉに示した組成を有
しており、この３００４グラムを、１０℃での蒸発結晶化に付した。このブロス
を、リン濃度が、供給物中のものに対して、母液又は濾液中で４．０２の係数ほ
ど増加する点まで蒸発させ、２１３３．４グラムの留出物を回収した。真空濾過
、メタノール洗浄及び乾燥の後、４８．１％のＫＬＧ回収率に相当する、２０５
．２７グラムの８６．５重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。
母液の組成を表IIに示す。追加の硫酸とカチオン交換との組合せにより、１４１
．３％の、供給物中の利用可能なプロトンのＫＬＧに対する比によって反映され
るようにオーバープロトン化に至り、これは、この比が母液中で２１５．５％に
増加したので一層ＫＬＧが結晶化されるようになった。また、母液には１．３５
重量％のアスコルビン酸が含有されていたので、ＫＬＧ分解についての証拠が存
在した。

【０１０２】例１２ 連続式結晶化方法に於ける母液再循環をシミュレートするために、例１１に記
載された回分式結晶化からの母液５９０グラムを、２６１０．１グラムの同じ新
しい供給物と一緒にし、１０℃での蒸発結晶化に付した。このブロスを、リン濃
度が、新しい供給物中のものに対して、母液又は濾液中で５．９０の係数ほど増
加する点まで蒸発させ、２０７５．２グラムの留出物を回収した。真空濾過、メ
タノール洗浄及び乾燥の後、５１．８％のＫＬＧ回収率に相当する、２５０．６
６グラムの８８．２重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。得ら
れた母液の組成を表IIに示す。例１１からの母液が新しい供給物よりも一層オー
バープロトン化された（２１５．５％対１４１．３％）ことを考えれば、利用可
能なプロトンのＫＬＧに対する比が、この母液中で一層高かった（２８８．８％
）ことは驚くべきことではない。分解によるＫＬＧ損失も、母液中の増加したア
スコルビン酸レベル（２．１２重量％）によって反映されるように、より高かっ
た。

【０１０３】例１３ 連続式結晶化方法に於ける母液再循環を更にシミュレートするために、例１２
に記載された回分式結晶化からの母液６８０グラムを、２４５０．２グラムの例
１１及び１２で使用した同じ新しい供給物と一緒にし、１０℃での蒸発結晶化に
付した。このブロスを、リン濃度が、新しい供給物中のものに対して、母液又は
濾液中で１１．９１の係数ほど増加する点まで蒸発させ、２２１０．４グラムの
留出物を回収した。真空濾過、メタノール洗浄及び乾燥の後、６９．４％のＫＬ
Ｇ回収率に相当する、３４４．８２グラムの８２．５重量％純度（無水物基準）
のＫＬＧ生成物を回収した。得られた母液の組成を表IIに示す。蒸発による高い
濃縮度及びオーバープロトン化した供給物は組み合わさって、６０６．４％の利
用可能なプロトンのＫＬＧに対する非常に高い比及びこの母液中の４．８７重量
％の高いアスコルビン酸レベルに至る。

【０１０４】例１４ 細胞を除去するためにｐＨ約７でミクロ濾過し、硫酸でｐＨ約２に酸性化し、
炭素処理し、そして濾過して、炭素及びその他の固体を除去した後、ブロスを、
カチオン交換樹脂の水素形と接触させることによって更に前処理した。得られた
ブロスは表Ｉに示した組成を有しており、この３０００．１グラムを、１０℃で
の蒸発結晶化に付した。このブロスを、リンの濃度が、供給物中のものに対して
、母液又は濾液中で５．０３の係数ほど増加する点まで蒸発させ、２２３６．７
グラムの留出物を回収した。真空濾過、メタノール洗浄及び乾燥の後、３６．１
％のＫＬＧ回収率に相当する、１００．５６グラムの８９．４重量％純度（無水
物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。母液の組成を表IIに示す。カチオン交換は
、１１２．７％の、供給物中の利用可能なプロトンのＫＬＧに対する比によって
反映されるように僅かなオーバープロトン化に至り、これは、この比が母液中で
１１９．８％に増加したので結晶化の間に僅かだけ大きくなった。これらの比較
的穏和な条件でのＫＬＧの分解はこの母液中の０．５３重量％の低アスコルビン
酸レベルを反映して最小であった。また、ｐＨは、例３とよく似て供給物中の１
．８から母液中の０．４まで低下し、一方、電荷バランスにより決定したときの
母液のオーバープロトン化（１１９．８％対１３２．４％）及びアスコルビン酸
レベル（０．５３重量％対１．３９重量％）により示されるＫＬＧ分解の両方は
本例に於いてより低かったので、ｐＨはプロトン化のための劣った尺度であった
。

【０１０５】例１５ 連続式結晶化方法に於ける母液再循環をシミュレートするために、例１４に記
載された回分式結晶化からの母液５１１．６グラムを、２８４０．２グラムの同
じ新しい供給物と一緒にし、１０℃での蒸発結晶化に付した。このブロスを、リ
ン濃度が、新しい供給物中のものに対して、母液又は濾液中で７．０３の係数ほ
ど増加する点まで蒸発させ、２２１７．１グラムの留出物を回収した。真空濾過
、メタノール洗浄及び乾燥の後、５９．７％のＫＬＧ回収率に相当する、２４９
．７７グラムの８８．９重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。
得られた母液の組成を表IIに示す。新しい供給物のプロトン化レベル（１１２．
７％）と母液供給物のプロトン化レベル（１１９．８％）とは類似しており、供
給物は高度に濃縮されておらず、母液中の利用可能なプロトンのＫＬＧに対する
比は、本例に於いて１３２．６％に適度にのみ増加した。同様に、母液ｐＨ（０
．３５）及びアスコルビン酸レベル（０．９３重量％）は、適度のみのオーバー
プロトン化を示した。

【０１０６】例１６ 連続式結晶化方法に於ける母液再循環を更にシミュレートするために、例１５
に記載された回分式結晶化からの母液７４１．１グラムを、２５４０．１グラム
の例１４及び１５で使用した同じ新しい供給物と一緒にし、１０℃での蒸発結晶
化に付した。このブロスを、リン濃度が、新しい供給物中のものに対して、母液
又は濾液中で９．０７の係数ほど増加する点まで蒸発させ、２１３７．１グラム
の留出物を回収した。真空濾過、メタノール洗浄及び乾燥の後、４９．２％のＫ
ＬＧ回収率に相当する、２０６．３９グラムの８９．７重量％純度（無水物基準
）のＫＬＧ生成物を回収した。得られた母液の組成を表IIに示す。母液中の利用
可能なプロトンのＫＬＧに対する比（１４６．８％）、アスコルビン酸レベル（
１．６７重量％）及び母液ｐＨ（０．１５）によって示されるように、オーバー
プロトン化は、本例に於いて例１５に於けるよりも高かった。

【０１０７】例１７ 硫酸でｐＨ約２に酸性化し、炭素処理し、そしてミクロ濾過して、細胞、炭素
及びその他の固体を除去した後、例１及び２に於いて新しい供給物として使用し
た同じブロスを、更に硫酸を添加し、濾過することによって更に前処理した。追
加の硫酸は、ブロス中のＫＬＧとのプロトン会合の程度のＣ¹³ ＮＭＲ測定に基
づいた、ＫＬＧを完全にプロトン化するために必要なものであった。得られたブ
ロスは表Ｉに示した組成を有しており、この３０００グラムを、１０℃での蒸発
結晶化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｋ、Ｎａ、Ｍｇ及びＰ）の平均
濃度が、供給物中のものに対して、母液又は濾液中で８．７６の係数ほど増加す
る点まで蒸発させ、２３０４．１グラムの留出物を回収した。真空濾過、メタノ
ール洗浄及び乾燥の後、６５．８％のＫＬＧ回収率に相当する、３０１．５８グ
ラムの８６．６重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。母液の組
成を表IIに示す。追加の硫酸は単独で、１１０．７％の、供給物中の利用可能な
プロトンのＫＬＧに対する比によって反映されるようにオーバープロトン化に至
り、これは、この比が母液中で１６１．２％に増加したので一層ＫＬＧが結晶化
されるようになった。本例は、更に、電荷バランスにより決定したとき同様の利
用可能なプロトンのＫＬＧに対する比を有しているにも拘わらず、本例に於ける
供給物のｐＨが１．４１であり、一方、例３及び４に於ける供給物についてのｐ
Ｈが共に１．８であったので、プロトン化の尺度としてｐＨを使用することの欠
点を示している（表Ｉ）。

【０１０８】例１８ 連続式結晶化方法に於ける母液再循環をシミュレートするために、例１７に記
載された回分式結晶化からの母液１８４．１グラムを、３０００．９グラムの同
じ新しい供給物と一緒にし、１０℃での蒸発結晶化に付した。このブロスを、可
溶性無機物（Ｋ、Ｎａ、Ｍｇ及びＰ）の平均濃度が、新しい供給物中のものに対
して、母液又は濾液中で８．０３の係数ほど増加する点まで蒸発させ、２４４１
．５グラムの留出物を回収した。真空濾過、メタノール洗浄及び乾燥の後、６２
．４％のＫＬＧ回収率に相当する、３０６．８１グラムの８８．７重量％純度（
無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。得られた母液の組成を表IIに示す。供
給物は、蒸発により例１７に於けると殆ど同様に濃縮されたので、母液中の利用
可能なプロトンのＫＬＧに対する比は、本例に於いて僅かに低かった（１４８．
４％対１６１．２％）。

【０１０９】例１９ 連続式結晶化方法に於ける母液再循環を更にシミュレートするために、例１８
に記載された回分式結晶化からの母液４６６．２グラムを、２６６３．１グラム
の例１７及び１８で使用した同じ新しい供給物と一緒にし、１０℃での蒸発結晶
化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｋ、Ｎａ、Ｍｇ及びＰ）の平均濃度
が、新しい供給物中のものに対して、母液又は濾液中で１０．７８の係数ほど増
加する点まで蒸発させ、２１６５．３グラムの留出物を回収した。真空濾過、メ
タノール洗浄及び乾燥の後、６４．８％のＫＬＧ回収率に相当する、３４１．８
５グラムの８６．７重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。得ら
れた母液の組成を表IIに示す。蒸発によるより高い濃縮度に一致して、母液中の
利用可能なプロトンのＫＬＧに対する比（１７２．７％）によって示されるよう
に、オーバープロトン化は、本例に於いて例１７及び１８に於けるよりも幾らか
高かった。

【０１１０】例２０ 細胞を除去するためにｐＨ約７でミクロ濾過し、硫酸でｐＨ約２に酸性化し、
炭素処理し、そして濾過して、炭素及びその他の固体を除去した後、ブロスを、
更に硫酸を添加し、濾過することによって更に前処理した。追加の硫酸は、ブロ
ス中のＫＬＧとのプロトン会合の程度のＣ¹³ ＮＭＲ測定に基づいた、ＫＬＧを
完全にプロトン化するために必要なものであった。得られたブロスは表Ｉに示し
た組成を有しており、この３０００．３グラムを、１０℃での蒸発結晶化に付し
た。このブロスを、可溶性無機物（Ｋ、Ｎａ、Ｍｇ及びＰ）の平均濃度が、供給
物中のものに対して、母液又は濾液中で８．７７の係数ほど増加する点まで蒸発
させ、２３０２．１グラムの留出物を回収した。真空濾過、メタノール洗浄及び
乾燥の後、５７．０％のＫＬＧ回収率に相当する、２５０．２５グラムの８４．
４重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。母液の組成を表IIに示
す。追加の硫酸は単独で、１１０．０％の、供給物中の利用可能なプロトンのＫ
ＬＧに対する比によって反映されるようにオーバープロトン化に至り、これは、
この比が母液中で１５１．１％に増加したので一層ＫＬＧが結晶化されるように
なった。新しい供給物中の１．４４から母液中の０．６３にｐＨを低下すること
は、また、この増加する酸性化を示した。

【０１１１】 これらの結果を例１７からの結果と比較することによって、類似のプロトン化
レベルから出発し、同じ係数により濃縮し、そして母液中の同じＫＬＧ溶解度を
得るにも拘わらず、ＫＬＧ回収率及び母液プロトン化の両方は、本例に於いて例
１７に於けるよりも低かった。これは、本例について前処理した供給物中のより
低いＫＬＧ濃度を反映しており、単純な物質収支モデルを使用して合理的に説明
できる。

【０１１２】例２１ 連続式結晶化方法に於ける母液再循環をシミュレートするために、例２０に記
載された回分式結晶化からの母液２６０．９グラムを、３０００．１グラムの同
じ新しい供給物と一緒にし、１０℃での蒸発結晶化に付した。このブロスを、可
溶性無機物（Ｋ、Ｎａ、Ｍｇ及びＰ）の平均濃度が、新しい供給物中のものに対
して、母液又は濾液中で１１．３８の係数ほど増加する点まで蒸発させ、２４０
０グラムの留出物を回収した。真空濾過、メタノール洗浄及び乾燥の後、６５．
７％のＫＬＧ回収率に相当する、３２３．３７グラムの８６．６重量％純度（無
水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。得られた母液の組成を表IIに示す。オー
バープロトン化された供給物及び比較的高い濃縮度は、例２０からのものに比較
して、この母液中の、利用可能なプロトンのＫＬＧに対するより高い比（１７６
．５％）及びより低いｐＨ（０．５７）に至った。

【０１１３】例２２ 連続式結晶化方法に於ける母液再循環を更にシミュレートするために、例２１
に記載された回分式結晶化からの母液３６０グラムを、２４９０グラムの例２０
及び２１で使用した同じ新しい供給物と一緒にし、１０℃での蒸発結晶化に付し
た。このブロスを、可溶性無機物（Ｋ、Ｎａ、Ｍｇ及びＰ）の平均濃度が、新し
い供給物中のものに対して、母液又は濾液中で１２．２５の係数ほど増加する点
まで蒸発させ、２０９０．９グラムの留出物を回収した。真空濾過、メタノール
洗浄及び乾燥の後、６７．３％のＫＬＧ回収率に相当する、２９９．４６グラム
の８４．８重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。得られた母液
の組成を表IIに示す。蒸発による僅かにより高い濃縮度に一致して、母液中の利
用可能なプロトンのＫＬＧに対する比（１８１．０％）によって示されるように
、オーバープロトン化は、本例に於いて例２０及び２１に於けるよりも僅かに高
かった。

【０１１４】例２３ 細胞を除去するためにｐＨ約７でミクロ濾過し、硫酸でｐＨ約２に酸性化し、
炭素処理し、そして濾過して、炭素及びその他の固体を除去した後、例６〜１０
、１４〜１６及び２０〜２２で新しい供給物を製造するために使用した同じブロ
スを、更に前処理しないで結晶化させた。このアンダー酸性化したブロスは、表
Ｉに示した組成を有しており、この３０００グラムを、１０℃での蒸発結晶化に
付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｋ、Ｎａ、Ｍｇ及びＰ）の平均濃度が、
供給物中のものに対して、母液又は濾液中で７．７３の係数ほど増加する点まで
蒸発させ、２２２５．６グラムの留出物を回収した。真空濾過、メタノール洗浄
及び乾燥の後、５３．５％のＫＬＧ回収率に相当する、２３７．２７グラムの８
２．０重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。母液の組成を表II
に示す。供給物中の利用可能なプロトンのＫＬＧに対する比（８９．３％）を、
母液中のそれ（６８．６％）に対して比較することによって、供給物ブロスはア
ンダープロトン化され、ＫＬＧが結晶化したとき、より一層プロトン不足になっ
たことが明らかになる。

【０１１５】例２４ 連続式結晶化方法に於ける母液再循環をシミュレートするために、例２３に記
載された回分式結晶化からの母液２２５．８グラムを、２８００．６グラムの同
じ新しい供給物と一緒にし、１０℃での蒸発結晶化に付した。このブロスを、可
溶性無機物（Ｋ、Ｎａ、Ｍｇ及びＰ）の平均濃度が、新しい供給物中のものに対
して、母液又は濾液中で９．７７の係数ほど増加する点まで蒸発させ、２２６３
．９グラムの留出物を回収した。真空濾過、メタノール洗浄及び乾燥の後、６０
．９％のＫＬＧ回収率に相当する、３０７．９６グラムの８０．９重量％純度（
無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。得られた母液の組成を表IIに示す。増
加した濃縮係数及びより一層アンダープロトン化された母液を新しい供給物に添
加することにより、例２３に比較したとき、利用可能なプロトンのＫＬＧに対す
る比（６３．０％対６８．６％）及びｐＨ（２．１８対２．１４）の両方によっ
て反映されるように、本例に於いて、より大きい程度のプロトン不足に至る。

【０１１６】例２５ 連続式結晶化方法に於ける母液再循環を更にシミュレートするために、例２４
に記載された回分式結晶化からの母液２３４．２グラムを、２８００．１グラム
の例２３及び２４で使用した同じ新しい供給物と一緒にし、１０℃での蒸発結晶
化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｋ、Ｎａ、Ｍｇ及びＰ）の平均濃度
が、新しい供給物中のものに対して、母液又は濾液中で１０．３２の係数ほど増
加する点まで蒸発させ、２２５０グラムの留出物を回収した。真空濾過、メタノ
ール洗浄及び乾燥の後、６６．３％のＫＬＧ回収率に相当する、３４０．１６グ
ラムの８１．２重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。得られた
母液の組成を表IIに示す。再び、この母液は、その利用可能なプロトンのＫＬＧ
に対する比（６３．４％）及びｐＨ（２．２３）の両方によって反映されるよう
に、アンダープロトン化された。

【０１１７】例２６ 例２３〜２５で新しい供給物として使用した同じブロスを、例６及び７に於い
て使用した新しい供給物と同様に、更に硫酸を添加し、濾過し、カチオン交換樹
脂の水素形と接触させることによって更に前処理した。追加の硫酸は、ＫＬＧを
完全にプロトン化することを意図しており、ブロス中のＫＬＧとのプロトン会合
の程度のＣ¹³ ＮＭＲ測定に基づいていた。得られたブロスは表Ｉに示した組成
を有しており、この３０００グラムを、１０℃での蒸発結晶化に付した。このブ
ロスを、可溶性無機物（Ｋ、Ｎａ及びＰ）の平均濃度が、供給物中のものに対し
て、母液又は濾液中で５．７６の係数ほど増加する点まで蒸発させ、２２２４．
１グラムの留出物を回収した。真空濾過、メタノール洗浄及び乾燥の後、５１．
６％のＫＬＧ回収率に相当する、２１１．０６グラムの９０．１重量％純度（無
水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。母液の組成を表IIに示す。追加の硫酸と
カチオン交換との組合せにより、１３３．３％の、供給物中の利用可能なプロト
ンのＫＬＧに対する比によって反映されるようにオーバープロトン化に至り、こ
れは、この比が母液中で２３９．３％に増加したので一層ＫＬＧが結晶化される
ようになった。

【０１１８】例２７ 連続式結晶化方法に於ける母液再循環をシミュレートするために、例２６に記
載された回分式結晶化からの母液４０７．６グラムを、２９５９．６グラムの同
じ新しい供給物と一緒にし、１０℃での蒸発結晶化に付した。このブロスを、可
溶性無機物（Ｋ、Ｎａ及びＰ）の平均濃度が、新しい供給物中のものに対して、
母液又は濾液中で９．５２の係数ほど増加する点まで蒸発させ、２１５８．６グ
ラムの留出物を回収した。真空濾過、メタノール洗浄及び乾燥の後、５３．５％
のＫＬＧ回収率に相当する、２６７．４１グラムの８６．５重量％純度（無水物
基準）のＫＬＧ生成物を回収した。得られた母液の組成を表IIに示す。例２６と
比較して、増加した濃縮係数及びより一層オーバープロトン化された母液を新し
い供給物に添加することにより、利用可能なプロトンのＫＬＧに対する比（３７
７．１％対２３９．３％）によって反映されるように、プロトンのより大きい余
剰に至った。また、母液が１．４重量％のアスコルビン酸を含有していたので、
ＫＬＧ分解についての証拠が存在していた。

【０１１９】例２８ 連続式結晶化方法に於ける母液再循環を更にシミュレートするために、例２７
に記載された回分式結晶化からの母液３２９．５グラムを、２５１９．５グラム
の例２６及び２７で使用した同じ新しい供給物と一緒にし、１０℃での蒸発結晶
化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｋ、Ｎａ及びＰ）の平均濃度が、新
しい供給物中のものに対して、母液又は濾液中で１０．３２の係数ほど増加する
点まで蒸発させ、２０５３．４グラムの留出物を回収した。真空濾過、メタノー
ル洗浄及び乾燥の後、６０．２％のＫＬＧ回収率に相当する、２４７．１８グラ
ムの８６．８重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。得られた母
液の組成を表IIに示す。再び、この母液は、その利用可能なプロトンのＫＬＧに
対する比（３９５．２％）及びアスコルビン酸含有量（２．０２重量％）の両方
によって反映されるように、オーバープロトン化されていた。

【０１２０】例２９ 硫酸でｐＨ約２に酸性化し、炭素処理し、そしてミクロ濾過して、細胞、炭素
及びその他の固体を除去した後、例１及び２に於いて新しい供給物として使用し
た同じブロスを、カチオン交換樹脂の水素形と接触させることによって更に前処
理した。得られたブロスは表Ｉに示した組成を有しており、この３０００．２グ
ラムを、１０℃での蒸発結晶化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｋ、Ｎ
ａ及びＰ）の平均濃度が、供給物中のものに対して、母液又は濾液中で５．６５
の係数ほど増加する点まで蒸発させ、２２３１．３グラムの留出物を回収した。
真空濾過、メタノール洗浄及び乾燥の後、６９．４％のＫＬＧ回収率に相当する
、２６１．２８グラムの８８．８重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回
収した。母液の組成を表IIに示す。カチオン交換により、１０９．０％の、供給
物中の利用可能なプロトンのＫＬＧに対する比によって反映されるように僅かな
オーバープロトン化に至り、これは、この比が母液中で１２６．９％に増加した
ので一層ＫＬＧが結晶化されるようになった。

【０１２１】例３０ 連続式結晶化方法に於ける母液再循環をシミュレートするために、例２９に記
載された回分式結晶化からの母液３５０．３グラムを、２５６０グラムの同じ新
しい供給物と一緒にし、１０℃での蒸発結晶化に付した。このブロスを、可溶性
無機物（Ｋ、Ｎａ及びＰ）の平均濃度が、新しい供給物中のものに対して、母液
又は濾液中で１０．０３の係数ほど増加する点まで蒸発させ、２１６７．８グラ
ムの留出物を回収した。真空濾過、メタノール洗浄及び乾燥の後、７１．９％の
ＫＬＧ回収率に相当する、２９４．０４グラムの８８．８重量％純度（無水物基
準）のＫＬＧ生成物を回収した。得られた母液の組成を表IIに示す。オーバープ
ロトン化された供給物及び比較的高いの濃縮度は、例２９からのものに比較して
、この母液中の利用可能なプロトンのＫＬＧに対するより高い比（１５９．９％
）に至った。

【０１２２】例３１ 連続式結晶化方法に於ける母液再循環を更にシミュレートするために、例３０
に記載された回分式結晶化からの母液２８９グラムを、２５２２．８グラムの例
２９及び３０で使用した同じ新しい供給物と一緒にし、１０℃での蒸発結晶化に
付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｋ、Ｎａ及びＰ）の平均濃度が、新しい
供給物中のものに対して、母液又は濾液中で１３．２３の係数ほど増加する点ま
で蒸発させ、２１１６．５グラムの留出物を回収した。真空濾過、メタノール洗
浄及び乾燥の後、７６．９％のＫＬＧ回収率に相当する、３１７．１８グラムの
８１．１重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。得られた母液の
組成を表IIに示す。再び、この母液は、その利用可能なプロトンのＫＬＧに対す
る比（１７７．４％）によって反映されるように、オーバープロトン化されてい
た。

【０１２３】例３２ 例２３〜２５で新しい供給物として使用した同じブロスを、例６、７及び２６
〜２８に於いて使用した新しい供給物と同様に、更に硫酸を添加し、濾過し、カ
チオン交換樹脂の水素形と接触させることによって更に前処理した。追加の硫酸
は、ＫＬＧを完全にプロトン化することを意図しており、ブロス中のＫＬＧとの
プロトン会合の程度のＣ¹³ ＮＭＲ測定に基づいていた。得られたブロスは表Ｉ
に示した組成を有しており、この３１００．４グラムを、１０℃での蒸発結晶化
に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｎａ及びＰ）の平均濃度が、供給物中
のものに対して、母液又は濾液中で５．９５の係数ほど増加する点まで蒸発させ
、２３４１グラムの留出物を回収した。真空濾過、メタノール洗浄及び乾燥の後
、６１．４％のＫＬＧ回収率に相当する、２４６．８４グラムの８８．４重量％
純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。母液の組成を表IIに示す。追加
の硫酸とカチオン交換との組合せにより、１３３．７％の、供給物中の利用可能
なプロトンのＫＬＧに対する比によって反映されるようにオーバープロトン化に
至り、これは、この比が母液中で２４２．７％に増加したので一層ＫＬＧが結晶
化されるようになった。

【０１２４】例３３ 連続式結晶化方法に於ける母液再循環をシミュレートするために、例３２に記
載された回分式結晶化からの母液３８１．７グラムを、２６６３．９グラムの同
じ新しい供給物と一緒にし、１０℃での蒸発結晶化に付した。このブロスを、可
溶性無機物（Ｎａ及びＰ）の平均濃度が、新しい供給物中のものに対して、母液
又は濾液中で１０．９４の係数ほど増加する点まで蒸発させ、２２３１．１グラ
ムの留出物を回収した。真空濾過、メタノール洗浄及び乾燥の後、７０．０％の
ＫＬＧ回収率に相当する、２９９．６３グラムの８５．７重量％純度（無水物基
準）のＫＬＧ生成物を回収した。得られた母液の組成を表IIに示す。例３２と比
較して、増加した濃縮係数及びより一層オーバープロトン化された母液を新しい
供給物に添加することにより、利用可能なプロトンのＫＬＧに対する比（４４８
．６％対２４２．７％）によって反映されるように、プロトンのより大きい余剰
に至った。また、母液が１．４重量％のアスコルビン酸を含有していたので、Ｋ
ＬＧ分解についての証拠が存在していた。

【０１２５】例３４ 連続式結晶化方法に於ける母液再循環を更にシミュレートするために、例３３
に記載された回分式結晶化からの母液３０８．３グラムを、２６００グラムの例
３２及び３３で使用した同じ新しい供給物と一緒にし、１０℃での蒸発結晶化に
付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｎａ及びＰ）の平均濃度が、新しい供給
物中のものに対して、母液又は濾液中で１２．７１の係数ほど増加する点まで蒸
発させ、２１８９．９グラムの留出物を回収した。真空濾過、メタノール洗浄及
び乾燥の後、７６．４％のＫＬＧ回収率に相当する、３１８．３６グラムの８０
．５重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。得られた母液の組成
を表IIに示す。再び、この母液は、その利用可能なプロトンのＫＬＧに対する比
（４６３．１％）及びアスコルビン酸含有量（２．６５重量％）の両方によって
反映されるように、オーバープロトン化されていた。

【０１２６】 例１〜３４からの結晶化結果の解析は、ＫＬＧ溶解度及び分解へのプロトン化
の影響を示している。図２に示されるように、ＫＬＧ溶解度は、母液中の利用可
能なプロトンのＫＬＧに対する比が増加したとき、減少する。結晶化による回収
は、溶解度が減少したとき改良されると考えると、これらの結果は、回収を最大
にするために、結晶化器内でプロトン化をできるだけ高くすべきであることを示
唆している。しかしながら、図３に示されるように、アスコルビン酸含有量によ
って測定したときのＫＬＧ分解も、母液中の利用可能なプロトンのＫＬＧに対す
る比が増加したとき増加する。例３５〜４４は、アニオン交換、慎重な酸性化及
び緩衝を使用する、ＫＬＧ結晶化への供給物プロトン化の影響を適度にするため
の初期の試みを反映している。

【０１２７】例３５ 硫酸でｐＨ約２に酸性化し、炭素処理し、そしてミクロ濾過して、細胞、炭素
及びその他の固体を除去した後、例１及び２に於いて新しい供給物として使用し
た同じブロスを、カチオン交換樹脂の水素形と接触させ、続いてアニオン交換樹
脂のヒドロキシル形と接触させることによって更に前処理した。得られたブロス
は表Ｉに示した組成を有しており、この９０１３．５グラムを、１０℃での蒸発
結晶化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｃａ、Ｋ、Ｎａ及びＭｇ）の平
均濃度が、供給物中のものに対して、母液又は濾液中で４．０１の係数ほど増加
する点まで蒸発させ、６４９７．７グラムの留出物を回収した。真空濾過、２回
の水洗浄及び乾燥の後、２４．７％のＫＬＧ回収率に相当する、２０９．３０グ
ラムの８８．２重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。得られた
母液の組成を表IIに示す。アニオン交換は、無機アニオン（即ち、Ｐ、Ｓ及びＣ
ｌ）を除去する際に非常に有効であったけれども、カチオン交換は不完全であり
、幾らかの無機カチオン（即ち、Ｃａ、Ｋ、Ｎａ及びＭｇ）を供給物ブロスの中
に残した。その結果、前処理した供給物は、比較的低い濃縮度及びＫＬＧ結晶化
のために、結晶化の際に非常に僅か変化した（９６．９％）、９５．２％の、供
給物中の利用可能なプロトンのＫＬＧに対する比によって反映されるようにアン
ダープロトン化された。

【０１２８】例３６ 連続式結晶化方法に於ける母液再循環をシミュレートするために、例３５に記
載された回分式結晶化からの母液２１８８．３グラムを、１０℃での更なる蒸発
結晶化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｃａ、Ｋ、Ｎａ及びＭｇ）の平
均濃度が、新しい供給物中のものに対して、母液又は濾液中で１６．３７の係数
ほど増加する点まで蒸発させ、１１４１．３グラムの留出物を回収した。真空濾
過、２回の水洗浄及び乾燥の後、７１．４％のＫＬＧ回収率に相当する、４９９
．０３グラムの７８．８重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。
得られた母液の組成を表IIに示す。例３５に比較して、増加した濃度は、利用可
能なプロトンのＫＬＧに対する比（８８．５％対９６．９％）及び母液ｐＨ（１
．８対１．４９）の両方によって反映されるように、より大きいプロトンの不足
に至った。本例は、溶液を適切にプロトン化する手段として、単純にカチオン交
換に続いてアニオン交換することの欠点を示している。イオン交換工程が殆ど完
全に実施されない場合、得られる溶液はなお不適切にプロトン化されるであろう
。

【０１２９】例３７ 硫酸でｐＨ約２に酸性化し、炭素処理し、そしてミクロ濾過して、細胞、炭素
及びその他の固体を除去した後、例１及び２に於いて新しい供給物として使用し
た同じブロスを、例３５と同様にして、カチオン交換樹脂の水素形と接触させ、
続いてアニオン交換樹脂のヒドロキシル形と接触させることによって更に前処理
した。得られたブロスは表Ｉに示した組成を有しており、この８９９９．９グラ
ムを、１０℃での蒸発結晶化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｃａ、Ｋ
、Ｎａ及びＭｇ）の平均濃度が、供給物中のものに対して、母液又は濾液中で３
．９２の係数ほど増加する点まで蒸発させ、６４５０．１グラムの留出物を回収
した。真空濾過、２回の水洗浄及び乾燥の後、２３．４％のＫＬＧ回収率に相当
する、２０３．５９グラムの８６．８重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物
を回収した。母液の組成を表IIに示す。再び、アニオン交換は、無機アニオン（
即ち、Ｐ、Ｓ及びＣｌ）を除去する際に非常に有効であったが、カチオン交換は
不完全であり、幾らかの無機カチオン（即ち、Ｃａ、Ｋ、Ｎａ及びＭｇ）を供給
物ブロスの中に残した。その結果、前処理した供給物は、比較的低い濃縮度及び
ＫＬＧ結晶化のために、結晶化の際に非常に僅か変化した（９７．１％）、９５
．３％の、供給物中の利用可能なプロトンのＫＬＧに対する比によって反映され
るようにアンダープロトン化された。

【０１３０】例３８ 連続式結晶化方法に於ける母液再循環をシミュレートするために、例３７に記
載された回分式結晶化からの母液２２１１．４グラムを、１０℃での更なる蒸発
結晶化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｃａ、Ｋ、Ｎａ及びＭｇ）の平
均濃度が、新しい供給物中のものに対して、母液又は濾液中で１６．５７の係数
ほど増加する点まで蒸発させ、１１６１．６グラムの留出物を回収した。真空濾
過、２回の水洗浄及び乾燥の後、７２．６％のＫＬＧ回収率に相当する、４８５
．３グラムの７８．８重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。得
られた母液の組成を表IIに示す。例３７に比較して、増加した濃度は、利用可能
なプロトンのＫＬＧに対する比（８９．０％対９７．１％）及び母液ｐＨ（１．
８３対１．５）の両方によって反映されるように、より大きいプロトンの不足に
至った。再び、本例は、溶液を適切にプロトン化する手段として、単純にカチオ
ン交換に続いてアニオン交換することの欠点を示している。

【０１３１】例３９ 硫酸でｐＨ約２に酸性化し、炭素処理し、そしてミクロ濾過して、細胞、炭素
及びその他の固体を除去した後、例１及び２に於いて新しい供給物として使用し
た同じブロスを、例１７と同様にして、更に硫酸を添加し、濾過することによっ
て更に前処理した。追加の硫酸は、ブロス中のＫＬＧとのプロトン会合の程度の
Ｃ¹³ ＮＭＲ測定に基づいて、ＫＬＧを完全にプロトン化するために必要なもの
であった。得られたブロスは表Ｉに示した組成を有しており、この９００１．６
グラムを、１０℃での蒸発結晶化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｋ、
Ｎａ、Ｍｇ、Ｐ及びＣｌ）の平均濃度が、供給物中のものに対して、母液又は濾
液中で５．０５の係数ほど増加する点まで蒸発させ、６３９１．８グラムの留出
物を回収した。真空濾過、２回の水洗浄及び乾燥の後、５８．４％のＫＬＧ回収
率に相当する、７９７．４グラムの７９．６重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ
生成物を回収した。母液の組成を表IIに示す。追加の硫酸は単独で、１１１．４
％の、供給物中の利用可能なプロトンのＫＬＧに対する比によって反映されるよ
うにオーバープロトン化に至り、これは、この比が母液中で１３０．５％に増加
したので一層ＫＬＧが結晶化されるようになった。

【０１３２】例４０ 連続式結晶化方法に於ける母液再循環をシミュレートするために、例３９に記
載された回分式結晶化からの母液１２２６グラムを、１０℃での更なる蒸発結晶
化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｋ、Ｎａ、Ｍｇ、Ｐ及びＣｌ）の平
均濃度が、新しい供給物中のものに対して、母液又は濾液中で１２．１７の係数
ほど増加する点まで蒸発させ、４９１．７グラムの留出物を回収した。真空濾過
、２回の水洗浄及び乾燥の後、５７．６％のＫＬＧ回収率に相当する、２３２．
２グラムの７０．４重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。得ら
れた母液の組成を表IIに示す。例３９と比較して、増加した濃度により、利用可
能なプロトンのＫＬＧに対する比（１９９．１％対１３０．５％）及び母液ｐＨ
（０．４６対０．９１）の両方によって反映されるように、プロトンのより大き
い余剰に至った。また、母液中のアスコルビン酸レベルが２．４１重量％であっ
たので、ＫＬＧ分解についての証拠が存在していた。

【０１３３】例４１ 硫酸でｐＨ約２に酸性化し、炭素処理し、そしてミクロ濾過して、細胞、炭素
及びその他の固体を除去した後、例１及び２に於いて新しい供給物として使用し
た同じブロスを、例１７及び３９と同様にして、更に硫酸を添加し、濾過するこ
とによって更に前処理した。追加の硫酸は、ブロス中のＫＬＧとのプロトン会合
の程度のＣ¹³ ＮＭＲ測定に基づいて、ＫＬＧを完全にプロトン化するために必
要なものであった。得られたブロスは表Ｉに示した組成を有しており、この９０
００グラムを、１０℃での蒸発結晶化に付した。このブロスを、可溶性無機物（
Ｋ、Ｎａ、Ｍｇ、Ｐ及びＣｌ）の平均濃度が、供給物中のものに対して、母液又
は濾液中で４．７６の係数ほど増加する点まで蒸発させ、６３４６．１グラムの
留出物を回収した。真空濾過、２回の水洗浄及び乾燥の後、６２．２％のＫＬＧ
回収率に相当する、７６７．１グラムの８７．８重量％純度（無水物基準）のＫ
ＬＧ生成物を回収した。母液の組成を表IIに示す。追加の硫酸は単独で、１１０
．２％の、供給物中の利用可能なプロトンのＫＬＧに対する比によって反映され
るようにオーバープロトン化に至り、これは、この比が母液中で１２７．３％に
増加したので一層ＫＬＧが結晶化されるようになった。

【０１３４】例４２ 連続式結晶化方法に於ける母液再循環をシミュレートするために、例４１に記
載された回分式結晶化からの母液１４５８．４グラムを、１０℃での更なる蒸発
結晶化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｋ、Ｎａ、Ｍｇ、Ｐ及びＣｌ）
の平均濃度が、新しい供給物中のものに対して、母液又は濾液中で１２．１３の
係数ほど増加する点まで蒸発させ、６７１．０グラムの留出物を回収した。真空
濾過、２回の水洗浄及び乾燥の後、６５．７％のＫＬＧ回収率に相当する、２９
３．４グラムの７３．０重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。
得られた母液の組成を表IIに示す。例４１と比較して、増加した濃度により、利
用可能なプロトンのＫＬＧに対する比（１９３．５％対１２７．３％）及び母液
ｐＨ（０．７１対１．０５）の両方によって反映されるように、プロトンのより
大きい余剰に至った。また、母液中のアスコルビン酸レベルが１．８２重量％で
あったので、ＫＬＧ分解についての証拠が存在していた。

【０１３５】例４３ 例２３〜２５に於いて新しい供給物として使用した同じブロスを、例１４〜１
６に於いて使用した新しい供給物と同様にして、カチオン交換樹脂の水素形と接
触させることによって更に前処理した。続いて硫酸ナトリウム塩を、蒸発の際の
増加するプロトン濃度を適度にする試みに於いて、ブロスに添加した。得られた
ブロスは表Ｉに示した組成を有しており、この９０００．２グラムを、１０℃で
の蒸発結晶化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｎａ及びＰ）の平均濃度
が、供給物中のものに対して、母液又は濾液中で６．２１の係数ほど増加する点
まで蒸発させ、６８５８．７グラムの留出物を回収した。真空濾過、２回の水洗
浄及び乾燥の後、６７．４％のＫＬＧ回収率に相当する、７２０．１グラムの８
６．６重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。母液の組成を表II
に示す。硫酸ナトリウム添加は、供給物中の利用可能なプロトンのＫＬＧに対す
る比が１１０．１％であり、母液中で１３４．８％まで増加し、一方ｐＨが１．
５５から０．６５まで低下したので、カチオン交換から得られるオーバープロト
ン化を減少させる上で無効であった。

【０１３６】例４４ 連続式結晶化方法に於ける母液再循環をシミュレートするために、例４３に記
載された回分式結晶化からの母液１１１０．７グラムを、１０℃での更なる蒸発
結晶化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｎａ及びＰ）の平均濃度が、新
しい供給物中のものに対して、母液又は濾液中で１４．２４の係数ほど増加する
点まで蒸発させ、４５０．３グラムの留出物を回収した。真空濾過、２回の水洗
浄及び乾燥の後、６３．１％のＫＬＧ回収率に相当する、１８２．４グラムの７
４．８重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。得られた母液の組
成を表IIに示す。例４３と比較して、増加した濃度により、利用可能なプロトン
のＫＬＧに対する比（２０２．５％対１３４．８％）によって反映されるように
、プロトンのより大きい余剰に至った。また、母液中のアスコルビン酸レベルが
１．５７重量％であったので、ＫＬＧ分解についての証拠が存在していた。

【０１３７】 これらのケース（例１〜４４）の全てに於いて、電荷バランス計算又は滴定に
基づいて、前処理したブロスのプロトン化レベルを調節するための試みは行わな
かった。その結果、結晶化供給物は、アンダー酸性化又はオーバー酸性化であり
、蒸発による濃縮の際に、それぞれ高いＫＬＧ溶解度又はＫＬＧ分解に至った。
以下の例に於いて、ＫＬＧプロトン化を、結晶化の前の最終工程又は酸添加工程
に於いて、利用可能なプロトンのＫＬＧに対するモル比が１（即ち、等価）であ
ることを目標とするように調節した。

【０１３８】例４５ 例２３〜２５に於いて新しい供給物として使用した同じブロスを、例１４〜１
６に於いて使用した新しい供給物と同様にして、カチオン交換樹脂の水素形と接
触させることによって更に前処理した。３個の別々の回分を、表III に示す組成
で製造した（４５Ａ、４５Ｂ及び４５Ｃと指定する）。電荷バランス計算に基づ
いて、水酸化ナトリウム（２．４グラム／ｋｇブロス）を、ブレンドしたブロス
に添加して、利用可能なプロトンのＫＬＧに対する比を１００％付近にした。得
られたブロスは表Ｉに示した組成を有しており、この９０００グラムを、１０℃
での蒸発結晶化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｎａ及びＰ）の平均濃
度が、供給物中のものに対して、母液又は濾液中で６．６９の係数ほど増加する
点まで蒸発させ、６８６９．２グラムの留出物を回収した。真空濾過、２回の水
洗浄及び乾燥の後、６３．２％のＫＬＧ回収率に相当する、７００．４グラムの
８４．１重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。母液の組成を表
IIに示す。水酸化ナトリウム添加は、供給物中の利用可能なプロトンのＫＬＧに
対する比が１０１．９％であり、母液中で僅かに１０５．７％まで増加したので
、カチオン交換から得られるオーバープロトン化を減少させる上で非常に有効で
あった。

【０１３９】例４６ 連続式結晶化方法に於ける母液再循環をシミュレートするために、例４５に記
載された回分式結晶化からの母液１１０９．８グラムを、１０℃での更なる蒸発
結晶化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｎａ及びＰ）の平均濃度が、新
しい供給物中のものに対して、母液又は濾液中で１４．７７の係数ほど増加する
点まで蒸発させ、４５１．７グラムの留出物を回収した。真空濾過、２回の水洗
浄及び乾燥の後、５１．７％のＫＬＧ回収率に相当する、１４８．６グラムの８
２．９重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。得られた母液の組
成を表IIに示す。増加した濃度及びＫＬＧ沈殿と一致して、母液中の利用可能な
プロトンのＫＬＧに対する比（１１３．５％対例４５に於ける１０５．７％）に
より反映されるように、プロトンの僅かに大きい余剰が存在した。しかしながら
、このオーバー酸性化の程度は、例４４（この場合、水酸化ナトリウムの代わり
に、硫酸ナトリウムを同じカチオン交換したブロスに添加した）に於いて類似の
濃度レベルで観察されたものに対して、非常に僅かであった。ＫＬＧ分解の程度
は、母液中のアスコルビン酸レベルが、例４４に於ける１．５７重量％に比較し
て、本例に於いては僅かに０．８８重量％であったので、減少した。

【０１４０】例４７ 表Ｉに於いて殆ど同一の組成によって示唆されるので、例４５に於いて新しい
供給物として使用した同じブロス９０００．４グラムを、再び、１０℃での蒸発
結晶化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｎａ及びＰ）の平均濃度が、供
給物中のものに対して、母液又は濾液中で６．４８の係数ほど増加する点まで蒸
発させ、６９０２．４グラムの留出物を回収した。真空濾過、２回の水洗浄及び
乾燥の後、６５．２％のＫＬＧ回収率に相当する、７０８．５グラムの８５．９
重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。母液の組成を表IIに示す
。再び、水酸化ナトリウム添加は、供給物中の利用可能なプロトンのＫＬＧに対
する比が１０２．１％であり、母液中で僅かに１０５．６％まで増加したので、
カチオン交換から得られるオーバープロトン化を減少させる上で非常に有効であ
った。

【０１４１】例４８ 連続式結晶化方法に於ける母液再循環をシミュレートするために、例４７に記
載された回分式結晶化からの母液１１１７．８グラムを、１０℃での更なる蒸発
結晶化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｎａ及びＰ）の平均濃度が、新
しい供給物中のものに対して、母液又は濾液中で１５．２４の係数ほど増加する
点まで蒸発させ、４５２．３グラムの留出物を回収した。真空濾過、２回の水洗
浄及び乾燥の後、７０．９％のＫＬＧ回収率に相当する、２４８．８グラムの７
０．４重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。得られた母液の組
成を表IIに示す。例４６に対して増加した濃度及びＫＬＧ沈殿と一致して、母液
中の利用可能なプロトンのＫＬＧに対する比（１１７．７％対１１３．５％）に
より反映されるように、プロトンの僅かに大きい余剰が存在した。再び、しかし
ながら、このオーバー酸性化の程度は、例４４（この場合、水酸化ナトリウムの
代わりに、硫酸ナトリウムを同じカチオン交換したブロスに添加した）に於いて
観察されたものに対して、非常に僅かであった。ＫＬＧ分解の程度は、母液中の
アスコルビン酸レベルが、僅かに０．８９重量％であったので、再び低かった。

【０１４２】例４９ 硫酸でｐＨ約２に酸性化し、炭素処理し、そしてミクロ濾過して、細胞、炭素
及びその他の固体を除去した後、ブロスをカチオン交換樹脂の水素形と接触させ
ることによって、更に前処理した。２個の別々の回分を、表III に示す組成で製
造した（４９Ａ及び４９Ｂと指定する）。それぞれの１ｍＬのサンプルを、１０
０ｍＬ滴定容器に移し、０．２ｍＬの１Ｍ塩化バリウム溶液と混合した。（この
塩化バリウムの量は、サンプル中に存在する硫酸塩に対して過剰であった）。そ
れぞれの溶液に、７５ｍＬのジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）及び０．３ｍＬ
の０．５Ｍ水酸化ナトリウムを添加した。次いで、それぞれの溶液を、ＤＭＳＯ
中のトリフル酸ナトリウム(sodium triflic acid)の０．１Ｍ溶液で、等価まで
滴定した。滴定により、溶液４９Ａ及び４９Ｂをそれぞれ等価にするために、ブ
ロス１ｋｇ当たり０．０４４５及び０．０３２６モルの塩基が必要であった。

【０１４３】 これらのブロスについて、電荷バランス計算も実施した。電荷バランスによっ
て、溶液４９Ａ及び４９Ｂをそれぞれ等価にし、それによってプロトン化の状態
を測定するための有効な手段として何れかの方法を確立するために、ブロス１ｋ
ｇ当たり０．０４４５及び０．０３２４モルの塩基が必要であった。

【０１４４】 ブロス４９Ａ及び４９Ｂを等価にするために、ブロス４９Ａ及び４９Ｂ１ｋｇ
当たり、それぞれ１．７８グラム及び１．３１グラムのＮａＯＨを添加した後、
これらのブロスを一緒にブレンドした。得られたブロスは表Ｉに示した組成を有
しており、この６５００．１グラムを、１０℃での蒸発結晶化に付した。このブ
ロスを、可溶性無機物（Ｎａ、Ｍｇ及びＰ）の平均濃度が、供給物中のものに対
して、母液又は濾液中で５．３６の係数ほど増加する点まで蒸発させ、４５９６
．７グラムの留出物を回収した。真空濾過、２回の水洗浄及び乾燥の後、６９．
６％のＫＬＧ回収率に相当する、６９５．５グラムの９０．４重量％純度（無水
物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。母液の組成を表IIに示す。再び、水酸化ナ
トリウム添加は、供給物中の利用可能なプロトンのＫＬＧに対する比が１００．
７％であり、母液中で僅かに１０１．４％まで増加したので、カチオン交換から
得られるオーバープロトン化を減少させる上で非常に有効であった。これは、ま
た、供給物中の１．３６から母液中の１．１８までのｐＨに於ける僅かな低下に
よって反映された。

【０１４５】例５０ 連続式結晶化方法に於ける母液再循環をシミュレートするために、例４９に記
載された回分式結晶化からの母液８９４．７グラムを、１０℃での更なる蒸発結
晶化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｎａ、Ｍｇ及びＰ）の平均濃度が
、新しい供給物中のものに対して、母液又は濾液中で１６．０７の係数ほど増加
する点まで蒸発させ、３９６．６グラムの留出物を回収した。真空濾過、２回の
水洗浄及び乾燥の後、６２．５％のＫＬＧ回収率に相当する、１９４．５グラム
の７７．０重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。得られた母液
の組成を表IIに示す。例４９に対して増加した濃度及びＫＬＧ沈殿と一致して、
母液中の利用可能なプロトンのＫＬＧに対する比（１０５．３％対１０１．４％
）により反映されるように、プロトンの僅かに大きい余剰が存在した。再び、し
かしながら、このオーバー酸性化の程度は、第二段の母液のｐＨが僅かに１．１
３に低下したので非常に僅かであった。

【０１４６】例５１ 表Ｉに於いて殆ど同一の組成によって示唆されるので、例４９に於いて新しい
供給物として使用した同じブロス６５００．５グラムを、再び、１０℃での蒸発
結晶化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｎａ、Ｍｇ及びＰ）の平均濃度
が、供給物中のものに対して、母液又は濾液中で５．３１の係数ほど増加する点
まで蒸発させ、４６１２．１グラムの留出物を回収した。真空濾過、２回の水洗
浄及び乾燥の後、６５．８％のＫＬＧ回収率に相当する、６８３．７グラムの８
４．７重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。母液の組成を表II
に示す。再び、水酸化ナトリウム添加は、供給物中の利用可能なプロトンのＫＬ
Ｇに対する比が１００．６％であり、母液中で僅かに１０１．６％まで増加した
ので、カチオン交換から得られるオーバープロトン化を減少させる上で非常に有
効であった。これはまた、供給物中の１．３３から母液中の１．２１までのｐＨ
に於ける僅かな低下によって反映された。

【０１４７】例５２ 連続式結晶化方法に於ける母液再循環をシミュレートするために、例５１に記
載された回分式結晶化からの母液１０４５．９グラムを、１０℃での更なる蒸発
結晶化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｎａ、Ｍｇ及びＰ）の平均濃度
が、新しい供給物中のものに対して、母液又は濾液中で１３．７９の係数ほど増
加する点まで蒸発させ、４３９．６グラムの留出物を回収した。真空濾過、２回
の水洗浄及び乾燥の後、６３．０％のＫＬＧ回収率に相当する、１９２．６グラ
ムの８５．９重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。得られた母
液の組成を表IIに示す。例５１に対して増加した濃度及びＫＬＧ沈殿と一致して
、母液中の利用可能なプロトンのＫＬＧに対する比（１０４．０％対１０１．６
％）により反映されるように、プロトンの僅かに大きい余剰が存在した。再び、
しかしながら、このオーバー酸性化の程度は、第二段の母液のｐＨが僅かに１．
１８に低下し、アスコルビン酸含有量が僅かに１．０２重量％であったので非常
に僅かであった。

【０１４８】例５３ 硫酸でｐＨ約２に酸性化し、炭素処理し、そしてミクロ濾過して、細胞、炭素
及びその他の固体を除去した後、ブロスをカチオン交換樹脂の水素形と接触させ
ることによって、更に前処理した。このカチオン交換したブロスの一部を、アニ
オン交換樹脂のヒドロキシル形と接触させることによって、更に前処理した。新
しい供給物のカチオン交換及び再循環した母液のアニオン交換による連続結晶化
方法をシミュレートするために、カチオン交換したのみのブロスの幾らかを、カ
チオン交換及びアニオン交換したブロス並びに水酸化ナトリウムと、一緒にした
供給物がほぼ等価であるように一緒にした。得られたブロスは表Ｉに示した組成
を有しており、この９００２．４グラムを、１０℃での蒸発結晶化に付した。こ
のブロスを、可溶性無機物（Ｎａ、Ｓ及びＰ）の平均濃度が、供給物中のものに
対して、母液又は濾液中で７．６５の係数ほど増加する点まで蒸発させ、７１３
１．８グラムの留出物を回収した。真空濾過、２回の水洗浄及び乾燥の後、６７
．５％のＫＬＧ回収率に相当する、６５２．４グラムの８７．０重量％純度（無
水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。母液の組成を表IIに示す。部分アニオン
交換及び水酸化ナトリウム添加の組合せは、供給物中の利用可能なプロトンのＫ
ＬＧに対する比が１０２．０％であり、母液中で僅かに１０６．７％まで増加し
たので、カチオン交換から得られるオーバープロトン化を減少させる上で有効で
あった。

【０１４９】例５４ 母液再循環及び濃度を増加させることからの増加した回収率を更にシミュレー
トするために、例５３に記載された回分式結晶化からの母液９７１．６グラムを
、１０℃での更なる蒸発結晶化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｎａ、
Ｓ及びＰ）の平均濃度が、新しい供給物中のものに対して、母液又は濾液中で１
９．９２の係数ほど増加する点まで蒸発させ、４６６．９グラムの留出物を回収
した。真空濾過、２回の水洗浄及び乾燥の後、５３．５％のＫＬＧ回収率に相当
する、１４７．４グラムの８１．８重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を
回収した。得られた母液の組成を表IIに示す。例５３に対して増加した濃度及び
ＫＬＧ沈殿と一致して、母液中の利用可能なプロトンのＫＬＧに対する比（１１
９．７％対１０６．７％）により反映されるように、プロトンのより大きい余剰
が存在した。殆ど２０倍の濃度でも、このオーバー酸性化の程度は、第二段の母
液のｐＨが僅かに０．６３に低下し、アスコルビン酸含有量は僅かに１．５１重
量％であったので僅かであった。

【０１５０】例５５ 表Ｉに於いて殆ど同一の組成によって示唆されるので、例５３に於いて新しい
供給物として使用した同じブロス９０００．１グラムを、再び、１０℃での蒸発
結晶化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｎａ、Ｓ及びＰ）の平均濃度が
、供給物中のものに対して、母液又は濾液中で７．３０の係数ほど増加する点ま
で蒸発させ、７１１８．２グラムの留出物を回収した。真空濾過、２回の水洗浄
及び乾燥の後、６９．１％のＫＬＧ回収率に相当する、６４７．６グラムの８９
．２重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。母液の組成を表IIに
示す。再び、部分アニオン交換と水酸化ナトリウム添加との組合せは、供給物中
の利用可能なプロトンのＫＬＧに対する比が１０２．１％であり、母液中で僅か
に１０５．９％まで増加したので、カチオン交換から得られるオーバープロトン
化を減少させる上で有効であった。

【０１５１】例５６ 母液再循環及び濃度を増加させることからの増加した回収率を更にシミュレー
トするために、例５５に記載された回分式結晶化からの母液９９７．３グラムを
、１０℃での更なる蒸発結晶化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｎａ、
Ｓ及びＰ）の平均濃度が、新しい供給物中のものに対して、母液又は濾液中で１
６．８５の係数ほど増加する点まで蒸発させ、５１４．８グラムの留出物を回収
した。真空濾過、２回の水洗浄及び乾燥の後、５７．３％のＫＬＧ回収率に相当
する、１５６．４グラムの８４．５重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を
回収した。得られた母液の組成を表IIに示す。例５５に対して増加した濃度及び
ＫＬＧ沈殿と一致して、母液中の利用可能なプロトンのＫＬＧに対する比（１１
５．２％対１０５．９％）により反映されるように、プロトンのより大きい余剰
が存在した。例５４に対して、僅かに高い第二段階母液のｐＨ（０．６６対０．
６３）及び低いアスコルビン酸レベル（１．２７対１．５１重量％）は、より小
さい濃縮度を反映していると思われる。

【０１５２】例５７ 細胞を除去するためにｐＨ約５．５でミクロ濾過し、硫酸でｐＨ約２．３に酸
性化し、炭素処理し、そして濾過して、炭素及びその他の固体を除去した後、ブ
ロスを、更に硫酸を添加すること（ｐＨ１．８に）、濾過及びカチオン交換樹脂
の水素形と接触させることによって、更に前処理した。表III に於ける前処理し
たブロス組成を使用する電荷バランス計算に基づいて、水酸化ナトリウム（２．
９４グラム／ｋｇブロス）を、ブレンドしたブロスに添加して、それをほぼ等価
にした。得られたブロスは表Ｉに示した組成を有しており、この９０００グラム
を、１０℃での蒸発結晶化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｋ、Ｎａ、
Ｍｇ、Ｃｌ及びＰ）の平均濃度が、供給物中のものに対して、母液又は濾液中で
７．６３の係数ほど増加する点まで蒸発させ、６９７２．９グラムの留出物を回
収した。真空濾過、２回の水洗浄及び乾燥の後、７６．５％のＫＬＧ回収率に相
当する、８６９．３グラムの８７．９重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物
を回収した。母液の組成を表IIに示す。水酸化ナトリウム添加は、供給物中の利
用可能なプロトンのＫＬＧに対する比が９９．６％であり、母液中で僅かに１０
０．８％まで増加したので、カチオン交換から得られるオーバープロトン化を減
少させる上で非常に有効であった。これはまた、１．５２から１．２５へのｐＨ
に於ける小さい低下及び生じたアスコルビン酸の低レベル（０．３４重量％）に
よっても反映された。

【０１５３】例５８ 表Ｉに於いて殆ど同一の組成によって示唆されるので、例５７に於いて新しい
供給物として使用した同じブロス９０００．４グラムを、再び、１０℃での蒸発
結晶化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｋ、Ｎａ、Ｍｇ、Ｃｌ及びＰ）
の平均濃度が、供給物中のものに対して、母液又は濾液中で７．３７の係数ほど
増加する点まで蒸発させ、６９５５．５グラムの留出物を回収した。真空濾過、
２回の水洗浄及び乾燥の後、６４．６％のＫＬＧ回収率に相当する、８３８．６
グラムの８２．７重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。母液の
組成を表IIに示す。再び、水酸化ナトリウム添加は、供給物中の利用可能なプロ
トンのＫＬＧに対する比が１００．６％であり、母液中で僅かに１０１．６％ま
で増加したので、カチオン交換から得られるオーバープロトン化を減少させる上
で有効であった。これはまた、供給物中の１．５２から母液中の１．３へのｐＨ
に於ける小さい低下及び０．３７重量％の低いアスコルビン酸レベルによっても
反映された。

【０１５４】例５９ 細胞を除去するためにｐＨ約５．５でミクロ濾過し、硫酸でｐＨ約２．３に酸
性化し、炭素処理し、そして濾過して、炭素及びその他の固体を除去した後、ブ
ロスを、更に硫酸を添加すること（ｐＨ１．８に）、濾過及びカチオン交換樹脂
の水素形と接触させることによって、更に前処理した。このカチオン交換したブ
ロスの一部を、アニオン交換樹脂のヒドロキシル形と接触させることによって更
に前処理した。新しい供給物のカチオン交換及び再循環した母液のアニオン交換
による連続結晶化方法をシミュレートするために、カチオン交換したのみのブロ
スの幾らかを、カチオン交換及びアニオン交換したブロス並びに水酸化ナトリウ
ム及び硫酸の両方と、一緒にした供給物がほぼ等価であるように一緒にした。得
られたブロスは表Ｉに示した組成を有しており、この９０００．４グラムを、１
０℃での蒸発結晶化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｋ、Ｎａ、Ｍｇ、
Ｃｌ及びＰ）の平均濃度が、供給物中のものに対して、母液又は濾液中で６．９
６の係数ほど増加する点まで蒸発させ、７００１グラムの留出物を回収した。真
空濾過、２回の水洗浄及び乾燥の後、６４．０％のＫＬＧ回収率に相当する、７
２０．２グラムの８６．３重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した
。母液の組成を表IIに示す。部分アニオン交換及び水酸化ナトリウム添加の組合
せは、供給物中の利用可能なプロトンのＫＬＧに対する比が１００．８％であり
、母液中で僅かに１０３．０％まで増加したので、カチオン交換から得られるオ
ーバープロトン化を減少させる上で有効であった。これはまた、供給物中の１．
５１から母液中の１．３４へのｐＨに於ける小さい低下及び０．４０重量％の低
いアスコルビン酸レベルによっても反映された。

【０１５５】例６０ 表Ｉに於いて殆ど同一の組成によって示唆されるので、例５９に於いて新しい
供給物として使用した同じブロス９０００．１グラムを、再び、１０℃での蒸発
結晶化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｋ、Ｎａ、Ｍｇ、Ｃｌ及びＰ）
の平均濃度が、供給物中のものに対して、母液又は濾液中で７．０５の係数ほど
増加する点まで蒸発させ、７００１．２グラムの留出物を回収した。真空濾過、
２回の水洗浄及び乾燥の後、６７．６％のＫＬＧ回収率に相当する、７００．８
グラムの８７．１重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。母液の
組成を表IIに示す。再び、部分アニオン交換及び水酸化ナトリウム添加の組合せ
は、供給物中の利用可能なプロトンのＫＬＧに対する比が１０１．０％であり、
母液中で僅かに１０２．９％まで増加したので、カチオン交換から得られるオー
バープロトン化を減少させる上で有効であった。そして、ＫＬＧ分解は、母液中
の０．４４重量％の低いアスコルビン酸レベルによって示されるように、最小で
あった。

【０１５６】例６１ 細胞を除去するためにｐＨ約５．５でミクロ濾過し、硫酸でｐＨ約２に酸性化
し、炭素処理し、そして濾過して、炭素及びその他の固体を除去した後、ブロス
を、カチオン交換樹脂の水素形と接触させることによって更に前処理した。この
カチオン交換したブロスの一部を、アニオン交換樹脂のヒドロキシル形と接触さ
せることによって更に前処理した。新しい供給物のカチオン交換及び再循環した
母液のアニオン交換による連続結晶化方法をシミュレートするために、カチオン
交換したのみのブロスの幾らかを、カチオン交換及びアニオン交換したブロスと
、コンポジット供給物がほぼ等価であるように一緒にした。得られたブロスは表
Ｉに示した組成を有しており、この９０００．１グラムを、１０℃での蒸発結晶
化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｋ、Ｎａ、Ｍｇ及びＰ）の平均濃度
が、供給物中のものに対して、母液又は濾液中で９．８２の係数ほど増加する点
まで蒸発させ、７４１２．７グラムの留出物を回収した。真空濾過、２回の水洗
浄及び乾燥の後、７０．３％のＫＬＧ回収率に相当する、６７１．１グラムの８
５．５重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。母液の組成を表II
に示す。カチオン交換が比較的不完全であったので、供給物は、９７．７％の利
用可能なプロトンのＫＬＧに対する比によって反映されるように幾らかアンダー
プロトン化され、得られる母液中で僅かに一層そのように（９３．５％）なった
。

【０１５７】例６２ 表Ｉに於いて殆ど同一の組成によって示唆されるので、例６１に於いて新しい
供給物として使用した同じブロス９０００．７グラムを、再び、１０℃での蒸発
結晶化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｋ、Ｎａ、Ｍｇ、Ｃｌ及びＰ）
の平均濃度が、供給物中のものに対して、母液又は濾液中で９．２６の係数ほど
増加する点まで蒸発させ、７３６６．２グラムの留出物を回収した。真空濾過、
２回の水洗浄及び乾燥の後、７４．９％のＫＬＧ回収率に相当する、６３０．１
グラムの８７．９重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。母液の
組成を表IIに示す。再び、カチオン交換が比較的不完全であったので、供給物は
、９７．４％の利用可能なプロトンのＫＬＧに対する比によって反映されるよう
に幾らかアンダープロトン化され、得られる母液中で僅かに一層そのよう（９３
．５％）になった。ＫＬＧ分解は、母液中の０．３７重量％の低いアスコルビン
酸レベルによって示されるように、最小であった。

【０１５８】例６３ 細胞を除去するためにｐＨ約５．５でミクロ濾過し、硫酸でｐＨ約２に酸性化
し、炭素処理し、そして濾過して、炭素及びその他の固体を除去した後、ブロス
を、カチオン交換樹脂の水素形と接触させることによって更に前処理した。表II
I に於ける前処理したブロス組成を使用する電荷バランス計算に基づいて、水酸
化ナトリウム（７．５グラム／ｋｇブロス）を、ブレンドしたブロスに添加して
、それをほぼ等価にした。得られたブロスは表Ｉに示した組成を有しており、こ
の８９９９．５グラムを、１０℃での蒸発結晶化に付した。このブロスを、可溶
性無機物（Ｎａ、Ｍｇ、Ｃｌ及びＰ）の平均濃度が、供給物中のものに対して、
母液又は濾液中で７．１２の係数ほど増加する点まで蒸発させ、６５４１．２グ
ラムの留出物を回収した。真空濾過、２回の水洗浄及び乾燥の後、７２．３％の
ＫＬＧ回収率に相当する、９７５．７グラムの８０．６重量％純度（無水物基準
）のＫＬＧ生成物を回収した。母液の組成を表IIに示す。水酸化ナトリウム添加
は、供給物中の利用可能なプロトンのＫＬＧに対する比が１０２．３％であり、
母液中で僅かに１０６．２％まで増加したので、カチオン交換から得られるオー
バープロトン化を減少させる上で有効であった。ＫＬＧ分解は、母液中の０．６
０重量％の低いアスコルビン酸レベルによって示されるように、最小であった。

【０１５９】例６４ 連続式結晶化方法に於ける母液再循環をシミュレートするために、例６３に記
載された回分式結晶化からの母液９２１．５グラムを、１０℃での更なる蒸発結
晶化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｎａ、Ｍｇ、Ｃｌ及びＰ）の平均
濃度が、新しい供給物中のものに対して、母液又は濾液中で８．７４の係数ほど
増加する点まで蒸発させ、２３２．２グラムの留出物を回収した。真空濾過、２
回の水洗浄及び乾燥の後、２７．５％のＫＬＧ回収率に相当する、７３．３グラ
ムの７６．０重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。得られた母
液の組成を表IIに示す。例６３に対して増加した濃度及びＫＬＧ沈殿と一致して
、母液中の利用可能なプロトンのＫＬＧに対する比（１１６．０％対１０６．２
％）により反映されるように、プロトンのより大きい余剰が存在した。再び、し
かしながら、このオーバー酸性化の程度は、第二段の母液のアスコルビン酸含有
量が僅かに０．９４重量％であったので非常に僅かであった。

【０１６０】例６５ 細胞を除去するためにｐＨ約５．５でミクロ濾過し、硫酸でｐＨ約２に酸性化
し、炭素処理し、そして濾過して、炭素及びその他の固体を除去した後、ブロス
を、カチオン交換樹脂の水素形と接触させることによって更に前処理した。この
カチオン交換したブロスの一部を、アニオン交換樹脂のヒドロキシル形と接触さ
せることによって更に前処理した。新しい供給物のカチオン交換及び再循環した
母液のアニオン交換による連続結晶化方法をシミュレートするために、カチオン
交換したのみのブロスの幾らかを、カチオン交換及びアニオン交換したブロス並
びに水酸化ナトリウムと、コンポジット供給物がほぼ等価であるように一緒にし
た。得られたブロスは表Ｉに示した組成を有しており、この９０００．１グラム
を、１０℃での蒸発結晶化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｓ、Ｃｌ及
びＰ）の平均濃度が、供給物中のものに対して、母液又は濾液中で６．０５の係
数ほど増加する点まで蒸発させ、６７１７．２グラムの留出物を回収した。真空
濾過、２回の水洗浄及び乾燥の後、５５．４％のＫＬＧ回収率に相当する、６５
５グラムの８５．７重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。母液
の組成を表IIに示す。部分アニオン交換及び水酸化ナトリウム添加の組合せは、
供給物中の利用可能なプロトンのＫＬＧに対する比が１００．４％であり、母液
中で僅かに１０１．７％まで増加したので、カチオン交換から得られるオーバー
プロトン化を減少させる上で有効であった。ＫＬＧ分解も、母液中の０．４１重
量％のアスコルビン酸レベルによって反映されるように低かった。

【０１６１】例６６ 母液再循環及び濃度を増加させることからの増加した回収率を更にシミュレー
トするために、例６５に記載された回分式結晶化からの母液９３４．２グラムを
、１０℃での更なる蒸発結晶化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｓ、Ｃ
ｌ及びＰ）の平均濃度が、新しい供給物中のものに対して、母液又は濾液中で２
７．０２の係数ほど増加する点まで蒸発させ、４７６．８グラムの留出物を回収
した。真空濾過、２回の水洗浄及び乾燥の後、６６．７％のＫＬＧ回収率に相当
する、１９４．２グラムの７９．３重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を
回収した。得られた母液の組成を表IIに示す。ほぼ３０倍の濃縮でも、利用可能
なプロトンのＫＬＧに対する比は僅かに１０８．１％にまで増加したので、母液
はほぼ等価のままであった。

【０１６２】例６７ 細胞を除去するためにｐＨ約５．５でミクロ濾過し、硫酸でｐＨ約２に酸性化
し、炭素処理し、そして濾過して固体を除去した後、ブロスを、カチオン交換樹
脂の水素形と接触させることによって更に前処理した。このカチオン交換したブ
ロスの一部を、アニオン交換樹脂のヒドロキシル形と接触させることによって更
に前処理した。新しい供給物のカチオン交換及び再循環した母液のアニオン交換
による連続結晶化方法をシミュレートするために、カチオン交換したのみのブロ
スの幾らかを、カチオン交換及びアニオン交換したブロス並びに水酸化ナトリウ
ムと、コンポジット供給物がほぼ等価であるように一緒にした。得られたブロス
は表Ｉに示した組成を有しており、この９０００．２グラムを、１０℃での蒸発
結晶化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｎａ、Ｓ、Ｃｌ及びＰ）の平均
濃度が、供給物中のものに対して、母液又は濾液中で６．８７の係数ほど増加す
る点まで蒸発させ、６９２５グラムの留出物を回収した。真空濾過、２回の水洗
浄及び乾燥の後、５８．９％のＫＬＧ回収率に相当する、６８９．７グラムの８
５．６重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。母液の組成を表II
に示す。再び、部分アニオン交換及び水酸化ナトリウム添加の組合せは、供給物
中の利用可能なプロトンのＫＬＧに対する比が１００．３％であり、母液中で僅
かに１０１．８％まで増加したので、カチオン交換から得られるオーバープロト
ン化を減少させる上で有効であった。

【０１６３】例６８ 母液再循環及び濃度を増加させることからの増加した回収率を更にシミュレー
トするために、例６７に記載された回分式結晶化からの母液１０５４．９グラム
を、１０℃での更なる蒸発結晶化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｎａ
、Ｓ、Ｃｌ及びＰ）の平均濃度が、新しい供給物中のものに対して、母液又は濾
液中で１６．３３の係数ほど増加する点まで蒸発させ、５２２．３グラムの留出
物を回収した。真空濾過、２回の水洗浄及び乾燥の後、５１．１％のＫＬＧ回収
率に相当する、１７７．３グラムの７４．３重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ
生成物を回収した。得られた母液の組成を表IIに示す。再び、部分アニオン交換
及び水酸化ナトリウム添加の組合せは、利用可能なプロトンのＫＬＧに対する比
が、第二段母液中で僅かに１０６．２％まで増加したので、カチオン交換から得
られるオーバープロトン化を減少させる上で有効であった。

【０１６４】例６９ 細胞を除去するためにｐＨ約５．５でミクロ濾過し、硫酸でｐＨ約２に酸性化
し、炭素処理し、そしてミクロ濾過して細胞、炭素及びその他の固体を除去した
後、ブロスを、更に硫酸を添加すること及び濾過によって更に前処理した。表II
I に於ける前処理したブロス組成を使用する電荷バランス計算に基づいて、追加
の硫酸（５．３１グラム／ｋｇブロス）は、溶液をほぼ等価にするために必要な
ものであった。得られたブロスは表Ｉに示した組成を有しており、この９０００
グラムを、１０℃での蒸発結晶化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｋ、
Ｎａ、Ｍｇ、Ｃｌ及びＰ）の平均濃度が、供給物中のものに対して、母液又は濾
液中で４．８９の係数ほど増加する点まで蒸発させ、６２３６．４グラムの留出
物を回収した。真空濾過、２回の水洗浄及び乾燥の後、６０．０％のＫＬＧ回収
率に相当する、８６１．６グラムの８３．５重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ
生成物を回収した。母液の組成を表IIに示す。明らかに、供給物は、９７．０％
の利用可能なプロトンのＫＬＧに対する比によって反映されるように幾らかアン
ダープロトン化され、得られる母液中で僅かに一層そのよう（９４．０％）にな
ったので、添加した硫酸の量は、等価に達するためには不十分であった。

【０１６５】例７０ 連続式結晶化方法に於ける母液再循環をシミュレートするために、例６９に記
載された回分式結晶化からの母液１４３４．４グラムを、１０℃での更なる蒸発
結晶化に付した。このブロスを、可溶性無機物（Ｋ、Ｎａ、Ｍｇ、Ｃｌ及びＰ）
の平均濃度が、新しい供給物中のものに対して、母液又は濾液中で１１．６３の
係数ほど増加する点まで蒸発させ、６６４．６グラムの留出物を回収した。真空
濾過、２回の水洗浄及び乾燥の後、５６．４％のＫＬＧ回収率に相当する、２５
７．４グラムの８２．１重量％純度（無水物基準）のＫＬＧ生成物を回収した。
得られた母液の組成を表IIに示す。例６３に対して増加した濃度及びＫＬＧ沈殿
と一致して、母液中の利用可能なプロトンのＫＬＧに対する比（８８．２４％対
９４．０％）により反映されるように、プロトンのより大きい不足が存在した。
再び、しかしながら、このアンダー酸性化の程度は、非常に僅かであった。そし
て、僅かに０．８２重量％の第二段母液のアスコルビン酸含有量は、ＫＬＧ分解
を回避するためにイオン交換が必要ないことを示している。

【０１６６】

【表１】

【０１６７】

【表２】

【０１６８】

【表３】

【０１６９】

【表４】

【０１７０】 本発明を、その或る態様の項で説明したが、種々の置換、修正、変更、削除及
び他の変更を、その精神から逸脱することなく行うことができることが認められ
るであろう。従って、本発明の範囲は、その均等物を含む前記の請求の範囲によ
ってのみ修正すべきである。

【図面の簡単な説明】

【図１】 回収方法の間の溶液の不適切なプロトン化に付随する問題を示す。

【図２】 増加するプロトン化に付随する溶解度に於ける減少を示す。

【図３】 増加するプロトン化に伴う母液中のアスコルビン酸の増加を示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｂ０１Ｄ 9/02 ６０８ Ｂ０１Ｄ 9/02 ６０８Ｚ ６１０ ６１０Ｚ ６１３ ６１３ ６１５ ６１５Ａ ６２５ ６２５Ｚ Ｃ０７Ｃ 51/47 Ｃ０７Ｃ 51/47 59/215 59/215 (72)発明者 ティンダル，ジョージ ウィリアム アメリカ合衆国，テネシー 37642，チャ ーチ ヒル，クリスチャン ベンド ロー ド 888 (72)発明者 パーリ，スティーブン トーマス アメリカ合衆国，テネシー 37664，キン グスポート，ペッパー ツリー ドライブ 180 (72)発明者 オミーダーラ，ルアイリ セオサムー アメリカ合衆国，テネシー 37660−5854， キングスポート，ジョン ビー．デニス 2601 ＃2102 (72)発明者 シンク，チェスター ウェイン アメリカ合衆国，テネシー 37660−3410， キングスポート，チペンデイル ロード 720 (72)発明者 アルムガム，バスカー ケー． アメリカ合衆国，テネシー 37664，キン グスポート，レイク バリー コート 3909 (72)発明者 ハッブス，ジョン クラーク アメリカ合衆国，テネシー 37664−5744， キングスポート，ベル ハロウ ロード 507 Ｆターム(参考） 4H006 AA02 AD15 AD17 BC53 BN10 BR10 BS10

Claims (58)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 （ａ）少なくとも１種の所望の有機酸又はその酸アニオンを
   含有する水溶液を準備し、 （ｂ）前記水溶液中のプロトン濃度を、少なくとも部分的に、所望の有機酸の
   酸アニオン及び／又は所望の有機酸よりも弱い酸アニオンと会合させるのに必要
   な利用可能なプロトンの量により選択される所望のプロトン濃度で、所望のレベ
   ルに調節し、そして （ｃ）少なくとも１種の所望の有機酸の少なくとも一部を水相から回収する 各工程を含んでなる溶液からの所望の有機酸を回収する方法。
2. 【請求項２】 所望のプロトン濃度が、所望の有機酸のアニオン及び所望の
   有機酸よりも弱い酸アニオンと会合させるのに必要なプロトンの量に実質的に等
   しい、利用可能なプロトンの量を基準にする、請求項１に記載の方法。
3. 【請求項３】 所望のプロトン濃度が、所望の有機酸のアニオン及び所望の
   有機酸よりも弱い酸アニオンと会合させるのに必要なプロトンの量よりも多い利
   用可能なプロトンの量を基準にする、請求項１に記載の方法。
4. 【請求項４】 所望のプロトン濃度が、所望の有機酸及び所望の有機酸より
   も弱い酸アニオンと会合させるのに必要なプロトンの量よりも約１％〜約１０％
   多いプロトンの量を基準にする、請求項３に記載の方法。
5. 【請求項５】 所望のプロトン濃度が、所望の有機酸のアニオン及び所望の
   有機酸よりも弱い酸アニオンと会合させるのに必要なプロトンの量よりも少ない
   利用可能なプロトンの量を基準にする、請求項１に記載の方法。
6. 【請求項６】 所望のプロトン濃度が、所望の有機酸及び所望の有機酸より
   も弱い酸アニオンと会合させるのに必要なプロトンの量よりも約１％〜約１０％
   少ないプロトンの量を基準にする、請求項５に記載の方法。
7. 【請求項７】 少なくとも１種の所望の有機酸が、その有機酸の塩形が酸自
   体よりも多く水中に可溶性である酸である、請求項１に記載の方法。
8. 【請求項８】 少なくとも１種の所望の有機酸が、酸触媒作用分解を受けや
   すい、請求項１に記載の方法。
9. 【請求項９】 少なくとも１種の所望の有機酸が、アスコルビン酸、コハク
   酸、酒石酸、グリコン酸、グルコン酸、グロン酸、クエン酸、乳酸、リンゴ酸、
   マレイン酸、酢酸、ギ酸、ピルビン酸、プロピオン酸、酪酸、イタコン酸及びこ
   れらの混合物からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
10. 【請求項１０】 少なくとも１種の所望の有機酸がカルボン酸である、請求
    項１に記載の方法。
11. 【請求項１１】 少なくとも１種の所望の有機酸が、アルカリ塩又はアルカ
    リ土類塩の形である、請求項１に記載の方法。
12. 【請求項１２】 対イオンが、ナトリウム、カリウム又はカルシウムである
    、請求項１１に記載の方法。
13. 【請求項１３】 少なくとも１種の所望の有機酸が、少なくとも部分的にア
    ンモニウムの形で存在する、請求項１に記載の方法。
14. 【請求項１４】 少なくとも１種の所望の有機酸が、少なくとも部分的にそ
    のアニオンの形で存在する、請求項１に記載の方法。
15. 【請求項１５】 水溶液に、更に、追加の酸アニオンが含有されている、請
    求項１に記載の方法。
16. 【請求項１６】 追加の酸アニオンが、リン酸塩、硫酸塩、硝酸塩及び塩化
    物の中から選択される、請求項１に記載の方法。
17. 【請求項１７】 水溶液が、未反応糖を含有する発酵ブロスを含む、請求項
    １に記載の方法。
18. 【請求項１８】 調節工程（ｂ）が、少なくとも１種の酸を水溶液の中に導
    入する工程（ｉ）を含む、請求項１に記載の方法。
19. 【請求項１９】 少なくとも１種の酸が、回収される有機酸に比較して強酸
    である、請求項１８に記載の方法。
20. 【請求項２０】 酸が、硫酸、塩酸、硝酸及びリン酸の中から選択される、
    請求項１８に記載の方法。
21. 【請求項２１】 工程（ｂ）（ｉ）で導入する酸の量が、水溶液中に存在す
    る任意の有機酸塩の少なくとも一部を、その酸の形に転化させるのに有効な量で
    ある、請求項１８に記載の方法。
22. 【請求項２２】 工程（ｉ）で製造された任意の沈殿した塩の少なくとも一
    部を除去する工程（ｂ）（ｉｉ）を更に含む、請求項２１に記載の方法。
23. 【請求項２３】 水溶液を、その水素又は酸の形であるカチオン交換樹脂と
    更に接触させる工程（ｂ）（ｉｉｉ）を含む、請求項２２に記載の方法。
24. 【請求項２４】 カチオン交換樹脂がスルホン化ポリスチレン樹脂を含む、
    請求項２３に記載の方法。
25. 【請求項２５】 調節工程が、少なくとも１種の塩基を、工程（ｉｉｉ）に
    より生成された任意の強酸の少なくとも一部を中和するのに有効な量で導入する
    工程（ｂ）（ｉｖ）を更に含む、請求項２３に記載の方法。
26. 【請求項２６】 塩基が、水酸化ナトリウム及び水酸化カリウムの中から選
    択される、請求項２５に記載の方法。
27. 【請求項２７】 塩基が、回収すべき有機酸の塩の形である、請求項２５に
    記載の方法。
28. 【請求項２８】 工程（ｃ）から回収された流れの少なくとも一部を、工程
    （ｂ）の前又は間の点に再循環させることを更に含む、請求項１に記載の方法。
29. 【請求項２９】 再循環物を、水溶液の中に導入する前にアニオン交換樹脂
    と接触させる、請求項２７に記載の方法。
30. 【請求項３０】 工程（ｃ）から回収された流れの少なくとも一部を、工程
    （ｂ）（ｉ）の後の点に再循環させることを更に含む、請求項２８に記載の方法
    。
31. 【請求項３１】 工程（ｃ）から回収された流れの少なくとも一部を、工程
    （ｂ）（ｉｉ）の後の点に再循環させることを更に含む、請求項２２に記載の方
    法。
32. 【請求項３２】 調節工程が、水溶液を、その水素又は酸の形であるカチオ
    ン交換樹脂と接触させる工程（ｉ）を含む、請求項１に記載の方法。
33. 【請求項３３】 カチオン交換樹脂がスルホン化ポリスチレン樹脂を含む、
    請求項３１に記載の方法。
34. 【請求項３４】 調節工程が、少なくとも１種の塩基を、工程（ｉ）により
    生成された任意の強酸の少なくとも一部を中和させるのに有効な量で導入する工
    程（ｉｉ）を更に含む、請求項３１に記載の方法。
35. 【請求項３５】 塩基が、水酸化ナトリウム及び水酸化カリウムの中から選
    択される、請求項３３に記載の方法。
36. 【請求項３６】 塩基が、回収すべき有機酸の塩の形である、請求項３３に
    記載の方法。
37. 【請求項３７】 工程（ｃ）から回収された流れの少なくとも一部を、工程
    （ｂ）（ｉ）の後の点に再循環させることを更に含む、請求項３３に記載の方法
    。
38. 【請求項３８】 再循環物を、水相の中に導入する前にアニオン交換樹脂と
    接触させる、請求項３６に記載の方法。
39. 【請求項３９】 工程（ｃ）が、少なくとも１種の所望の有機酸を単離する
    ことを含む、請求項１に記載の方法。
40. 【請求項４０】 単離工程が、水溶液から所望の有機酸を結晶化させる工程
    （ｉ）及び濾過、デカンテーション、遠心分離、抽出及び／又は噴霧乾燥の少な
    くとも１種の工程（ｉｉ）の両方を含む、請求項３９に記載の方法。
41. 【請求項４１】 水溶液の中に導入するために、工程（ｃ）（ｉｉ）から回
    収された流れの少なくとも一部を再循環させることを更に含む、請求項４０に記
    載の方法。
42. 【請求項４２】 再循環物を、水溶液の中に導入する前にアニオン交換樹脂
    と接触させる、請求項４１に記載の方法。
43. 【請求項４３】 有機酸が２−ケト−Ｌ−グロン酸又は２−ケト−Ｄ−グル
    コン酸である、請求項１に記載の方法。
44. 【請求項４４】 工程（ａ）が、発酵反応により、２−ケト−Ｌ−グロン酸
    又は２−ケト−Ｄ−グルコン酸を製造することを含む、請求項４３に記載の方法
    。
45. 【請求項４５】 発酵反応を、少なくとも１種の有機体及び／又は酵素の存
    在下で実施する、請求項４４に記載の方法。
46. 【請求項４６】 ２−ケト−Ｌ−グロン酸又は２−ケト−Ｄ−グルコン酸を
    アスコルビン酸及び／又はエリソルビン酸に転化する工程（ｄ）を更に含む、請
    求項４３に記載の方法。
47. 【請求項４７】 水溶液をアニオン交換樹脂と接触させることを含まない、
    請求項１に記載の方法。
48. 【請求項４８】 所望のプロトン濃度の決定が、非プロトン性溶媒中での滴
    定を含む、請求項１に記載の方法。
49. 【請求項４９】 非プロトン性溶媒がＤＭＳＯである、請求項４８に記載の
    方法。
50. 【請求項５０】 少なくとも１種の所望の有機酸よりも強い酸アニオンで硫
    酸塩を置き換えながら、溶液中に存在する硫酸塩の少なくとも一部を沈殿させる
    ことができる、少なくとも１種の塩を添加することを更に含む、請求項４９に記
    載の方法。
51. 【請求項５１】 少なくとも１種の塩が、バリウム、マグネシウム又はスト
    ロンチウム塩である、請求項５０に記載の方法。
52. 【請求項５２】 塩が、塩化バリウム、過塩素酸バリウム、臭化バリウム、
    過塩素酸マグネシウム又はこれらの混合物である、請求項５１に記載の方法。
53. 【請求項５３】 請求項１に記載の方法により製造された有機酸。
54. 【請求項５４】 ２−ケト−Ｌ−グロン酸並びに２−ケト−Ｌ−グロン酸及
    び２−ケト−Ｌ−グロン酸よりも弱い酸アニオンと会合させるのに必要なプロト
    ンの量に実質的に等しい、予定されたプロトン濃度を含有する水溶液を含んでな
    る組成物。
55. 【請求項５５】 ２−ケト−Ｌ−グロン酸並びに２−ケト−Ｌ−グロン酸及
    び２−ケト−Ｌ−グロン酸よりも弱い酸アニオンと会合させるのに必要なプロト
    ンの量よりも高い、予定されたプロトン濃度を含有する水溶液を含んでなる組成
    物。
56. 【請求項５６】 予定されたプロトン濃度が、２−ケト−Ｌ−グロン酸及び
    ２−ケト−Ｌ−グロン酸よりも弱い酸アニオンと会合させるのに必要なプロトン
    の量よりも約１〜約１０％高い、請求項５５に記載の組成物。
57. 【請求項５７】 ２−ケト−Ｌ−グロン酸並びに２−ケト−Ｌ−グロン酸及
    び２−ケト−Ｌ−グロン酸よりも弱い酸アニオンと会合させるのに必要なプロト
    ンの量よりも低い、予定されたプロトン濃度を含有する水相を含んでなる組成物
    。
58. 【請求項５８】 予定されたプロトン濃度が、２−ケト−Ｌ−グロン酸及び
    ２−ケト−Ｌ−グロン酸よりも弱い酸アニオンと会合させるのに必要なプロトン
    の量よりも約１〜約１０％低い、請求項５７に記載の組成物。