JP2003284549A - 細胞単離方法 - Google Patents
細胞単離方法Info
- Publication number
- JP2003284549A JP2003284549A JP2003014385A JP2003014385A JP2003284549A JP 2003284549 A JP2003284549 A JP 2003284549A JP 2003014385 A JP2003014385 A JP 2003014385A JP 2003014385 A JP2003014385 A JP 2003014385A JP 2003284549 A JP2003284549 A JP 2003284549A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- sample
- cell
- substrate
- cells
- laser beam
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M47/00—Means for after-treatment of the produced biomass or of the fermentation or metabolic products, e.g. storage of biomass
- C12M47/04—Cell isolation or sorting
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Sampling And Sample Adjustment (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】 採取したい細胞を確実に、しかも効率よく採
取すること。 【解決手段】 スライドガラス８上に載置された細胞ａ
を有する標本に対してレーザビームを照射して細胞ａ部
分以外の不要な標本部分を基板上から取り除き、次に、
筒体４０における一方の開口部の中に細胞ａを入れて筒
体４０を基板上に設置し、次に、スライドガラス８と筒
体４０とにより形成される容器内に剥離剤４２を注入し
て細胞ａを基板から剥離し、剥離剤４２中に浮遊する細
胞ａを採取する。
取すること。 【解決手段】 スライドガラス８上に載置された細胞ａ
を有する標本に対してレーザビームを照射して細胞ａ部
分以外の不要な標本部分を基板上から取り除き、次に、
筒体４０における一方の開口部の中に細胞ａを入れて筒
体４０を基板上に設置し、次に、スライドガラス８と筒
体４０とにより形成される容器内に剥離剤４２を注入し
て細胞ａを基板から剥離し、剥離剤４２中に浮遊する細
胞ａを採取する。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、基板上の標本の中
から解析しようとする特定の細胞又は細胞集団を選別
し、分離取得するための細胞又は細胞内の解析対象試料
を単離する細胞単離方法に関する。
から解析しようとする特定の細胞又は細胞集団を選別
し、分離取得するための細胞又は細胞内の解析対象試料
を単離する細胞単離方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】遺伝子の機能を解析しようとする研究
は、現在最も関心の高いものである。遺伝子機能の解析
の研究は、標本中から細胞を取得する。遺伝子機能の解
析のための試料は、細胞中から直接採取される。細胞又
は試料を採取する装置は、各種開発されて使用されてい
る。
は、現在最も関心の高いものである。遺伝子機能の解析
の研究は、標本中から細胞を取得する。遺伝子機能の解
析のための試料は、細胞中から直接採取される。細胞又
は試料を採取する装置は、各種開発されて使用されてい
る。
【０００３】標本の切片から細胞を採取する各種細胞採
取方法について説明する。
取方法について説明する。
【０００４】（１）切片状の標本が薄膜プレート上に固
定される。切片状の標本は、例えば遺伝子の機能などを
解析するために採取したい細胞を有する。紫外線波長領
域のレーザビーム（ＵＶレーザビーム）が細胞の輪郭に
沿って薄膜プレート上に照射される。これにより、標本
中の採取したい細胞が薄膜プレートと共に切り離され
る。
定される。切片状の標本は、例えば遺伝子の機能などを
解析するために採取したい細胞を有する。紫外線波長領
域のレーザビーム（ＵＶレーザビーム）が細胞の輪郭に
沿って薄膜プレート上に照射される。これにより、標本
中の採取したい細胞が薄膜プレートと共に切り離され
る。
【０００５】次に、薄膜プレートに対してフォーカスの
ずれたＵＶレーザビームが切り離し部分に照射される。
これにより、標本中の切り離し部分が飛ばされる。この
結果、採取する細胞が取得される。例えば特許文献１が
挙げられる。
ずれたＵＶレーザビームが切り離し部分に照射される。
これにより、標本中の切り離し部分が飛ばされる。この
結果、採取する細胞が取得される。例えば特許文献１が
挙げられる。
【０００６】（２）転写フィルムを張り付けた採取用の
透明キャップが用いられる。透明キャップは、採取した
い細胞を有する標本上に載置される。標本中の採取した
い細胞を有する部分にＩＲレーザビームが透明キャップ
を透過して照射される。これにより、転写フィルム面に
採取したい細胞部分が付着する。例えば特許文献２、
３、４が挙げられる。
透明キャップが用いられる。透明キャップは、採取した
い細胞を有する標本上に載置される。標本中の採取した
い細胞を有する部分にＩＲレーザビームが透明キャップ
を透過して照射される。これにより、転写フィルム面に
採取したい細胞部分が付着する。例えば特許文献２、
３、４が挙げられる。
【０００７】（３）標本がフィルム上に張り付けられ
る。フィルム上で標本を貼り付けた面が下方に向けられ
る。この状態で、上方からＵＶレーザビームが細胞の輪
郭に沿って照射される。これにより、採取する細胞の周
囲が切り取られる。
る。フィルム上で標本を貼り付けた面が下方に向けられ
る。この状態で、上方からＵＶレーザビームが細胞の輪
郭に沿って照射される。これにより、採取する細胞の周
囲が切り取られる。
【０００８】次に、ＵＶレーザビームがフィルムに照射
される。これにより採取する細胞は、フィルムから離れ
て下方にセットされた受皿に落とし込まれる。例えば特
許文献５、６が挙げられる。
される。これにより採取する細胞は、フィルムから離れ
て下方にセットされた受皿に落とし込まれる。例えば特
許文献５、６が挙げられる。
【０００９】
【特許文献１】米国特許５９９８１２９号公報
【００１０】
【特許文献２】特開２０００−２６６６４９号公報
【００１１】
【特許文献３】特表２００１−５１９８９８号公報
【００１２】
【特許文献４】特表２００２−５０３３４５号公報
【００１３】
【特許文献５】特開２００２−１７４７７８号公報
【００１４】
【特許文献６】特開２００２−１５６３１６号公報
【００１５】
【発明が解決しようとする課題】しかしながら、(１)の
方法は、採取したい細胞を薄膜プレートと共に切り離し
た後、フォーカスのずれたＵＶレーザビームを照射して
切り離し部分を飛ばす。このため、採取すべき細胞がど
こに行ったか分からなくなる。細胞を紛失することが多
々ある。又、ＵＶレーザビームによる細胞の変質も予想
される。
方法は、採取したい細胞を薄膜プレートと共に切り離し
た後、フォーカスのずれたＵＶレーザビームを照射して
切り離し部分を飛ばす。このため、採取すべき細胞がど
こに行ったか分からなくなる。細胞を紛失することが多
々ある。又、ＵＶレーザビームによる細胞の変質も予想
される。
【００１６】又、採取した細胞にゴミなどの異物が混入
しやすい。標本を事前に薄膜プレート上に固定する必要
がある。このため、細胞の採取作業は、手間を必要と
し、面倒である。
しやすい。標本を事前に薄膜プレート上に固定する必要
がある。このため、細胞の採取作業は、手間を必要と
し、面倒である。
【００１７】（２）の方法は、透明キャップを透過して
ＩＲレーザビームを標本中の採取したい細胞に照射す
る。このため、採取したい細胞に照射するＩＲレーザビ
ームのスポット径を小さくできない。ＩＲレーザビーム
のスポット径は、採取したい細胞の大きさよりも大きく
なる場合もある。採取したい細胞の大きさよりも大きな
スポット径のレーザビームを照射すると、採取したい細
胞と共に、その周囲の不必要な細胞も転写フィルム面に
付着する。例えば１０ミクロンのスポット径で５ミクロ
ン以下の極小の細胞を採取する場合、周囲の不必要な細
胞も転写フィルム面に付着する。
ＩＲレーザビームを標本中の採取したい細胞に照射す
る。このため、採取したい細胞に照射するＩＲレーザビ
ームのスポット径を小さくできない。ＩＲレーザビーム
のスポット径は、採取したい細胞の大きさよりも大きく
なる場合もある。採取したい細胞の大きさよりも大きな
スポット径のレーザビームを照射すると、採取したい細
胞と共に、その周囲の不必要な細胞も転写フィルム面に
付着する。例えば１０ミクロンのスポット径で５ミクロ
ン以下の極小の細胞を採取する場合、周囲の不必要な細
胞も転写フィルム面に付着する。
【００１８】転写フィルム面に採取する細胞を付着させ
るので、細胞の渇き具合などによっては、細胞を転写フ
ィルム面に具合よく付着できず、細胞の採取ができない
こともある。濡れた状態の細胞の採取は不可能である。
細胞の転写フィルム面に対する付着は、細胞の渇き具合
などの細胞の条件に影響される。換言すれば、細胞を採
取可能になるためには、細胞の条件に限定される。
るので、細胞の渇き具合などによっては、細胞を転写フ
ィルム面に具合よく付着できず、細胞の採取ができない
こともある。濡れた状態の細胞の採取は不可能である。
細胞の転写フィルム面に対する付着は、細胞の渇き具合
などの細胞の条件に影響される。換言すれば、細胞を採
取可能になるためには、細胞の条件に限定される。
【００１９】標本に照射するＩＲレーザビームの出力を
大きくすると、細胞部分を転写フィルム面に付着させて
細胞を採取する効率がよくなる。その反面、ＩＲレーザ
ビームの出力を大きくすると、細胞が焼けてしまう。
大きくすると、細胞部分を転写フィルム面に付着させて
細胞を採取する効率がよくなる。その反面、ＩＲレーザ
ビームの出力を大きくすると、細胞が焼けてしまう。
【００２０】（３）の方法は、ＵＶレーザビームの照射
により採取する細胞部分を下方にセットされた受皿に落
とし込む。このため、採取すべき細胞がどこに行ったか
分からなくなる。又、取得した細胞にゴミなどの異物が
混入しやすい。ＵＶレーザビームによる細胞の変質も予
想される。
により採取する細胞部分を下方にセットされた受皿に落
とし込む。このため、採取すべき細胞がどこに行ったか
分からなくなる。又、取得した細胞にゴミなどの異物が
混入しやすい。ＵＶレーザビームによる細胞の変質も予
想される。
【００２１】以上のような問題点を纏めると、
（ａ）採取したい細胞を採取するのに時間がかかる。そ
のうえ採取時に細胞が紛失しやすい。
のうえ採取時に細胞が紛失しやすい。
【００２２】（ｂ）小さな細胞の取得が難しい。標本の
乾燥状態などから採取可能な細胞が限定される。
乾燥状態などから採取可能な細胞が限定される。
【００２３】（ｃ）ＵＶレーザビームによる細胞の変質
などの原因で十分な品質の細胞が多量に短時間で取得で
きない。
などの原因で十分な品質の細胞が多量に短時間で取得で
きない。
【００２４】そこで本発明は、採取したい細胞を確実
に、しかも効率よく採取できる細胞単離方法を提供する
ことを目的とする
に、しかも効率よく採取できる細胞単離方法を提供する
ことを目的とする
【００２５】
【課題を解決するための手段】本発明は、基板上に載置
され細胞を有する標本に対してレーザビームを照射して
細胞部分以外の不要な標本部分を基板上から取り除き、
両端に各開口部を有する筒状体を用い、筒状体における
一方の開口部の中に細胞部分を入れて筒状体を前記基板
上に設置し、基板と筒状体とにより形成される容器内に
剥離剤を注入して細胞部分を基板から剥離し、剥離剤中
に浮遊する細胞部分を採取する細胞単離方法である。
され細胞を有する標本に対してレーザビームを照射して
細胞部分以外の不要な標本部分を基板上から取り除き、
両端に各開口部を有する筒状体を用い、筒状体における
一方の開口部の中に細胞部分を入れて筒状体を前記基板
上に設置し、基板と筒状体とにより形成される容器内に
剥離剤を注入して細胞部分を基板から剥離し、剥離剤中
に浮遊する細胞部分を採取する細胞単離方法である。
【００２６】本発明は、基板上に載置され細胞を有する
標本に対してレーザビームを照射して細胞部分以外の不
要な標本部分を基板上から取り除き、両端に各開口部を
有する筒状体を用い、筒状体における一方の開口部の中
に細胞部分を入れて筒状体を基板上に設置し、基板と筒
状体とにより形成される容器内に細胞中に存在する試料
を溶出する溶液を注入し、溶液中に溶出した試料を採取
する細胞又は細胞内の解析対象試料を単離する細胞単離
方法である。
標本に対してレーザビームを照射して細胞部分以外の不
要な標本部分を基板上から取り除き、両端に各開口部を
有する筒状体を用い、筒状体における一方の開口部の中
に細胞部分を入れて筒状体を基板上に設置し、基板と筒
状体とにより形成される容器内に細胞中に存在する試料
を溶出する溶液を注入し、溶液中に溶出した試料を採取
する細胞又は細胞内の解析対象試料を単離する細胞単離
方法である。
【００２７】本発明は、基板上に載置され細胞を有する
標本に対してレーザビームを照射して細胞部分以外の不
要な標本部分を変質し、両端に各開口部を有する筒状体
を用い、筒状体における一方の開口部の中に細胞部分を
入れて筒状体を基板上に設置し、基板と筒状体とにより
形成される容器内に剥離剤を注入して細胞部分を基板か
ら剥離し、剥離剤中に浮遊する細胞部分を採取する細胞
単離方法である。
標本に対してレーザビームを照射して細胞部分以外の不
要な標本部分を変質し、両端に各開口部を有する筒状体
を用い、筒状体における一方の開口部の中に細胞部分を
入れて筒状体を基板上に設置し、基板と筒状体とにより
形成される容器内に剥離剤を注入して細胞部分を基板か
ら剥離し、剥離剤中に浮遊する細胞部分を採取する細胞
単離方法である。
【００２８】本発明は、基板上に載置され細胞を有する
標本に対して紫外光を照射して細胞部分以外の不要な標
本部分を変質し、両端に各開口部を有する筒状体を用
い、筒状体における一方の開口部の中に細胞部分を入れ
て筒状体を基板上に設置し、基板と筒状体とにより形成
される容器内に剥離剤を注入して細胞部分を基板から剥
離し、剥離剤中に浮遊する細胞部分を採取する細胞又は
細胞内の解析対象試料を単離する細胞単離方法である。
標本に対して紫外光を照射して細胞部分以外の不要な標
本部分を変質し、両端に各開口部を有する筒状体を用
い、筒状体における一方の開口部の中に細胞部分を入れ
て筒状体を基板上に設置し、基板と筒状体とにより形成
される容器内に剥離剤を注入して細胞部分を基板から剥
離し、剥離剤中に浮遊する細胞部分を採取する細胞又は
細胞内の解析対象試料を単離する細胞単離方法である。
【００２９】
【発明の実施の形態】以下、本発明の第１の実施の形態
を図面に従い説明する。
を図面に従い説明する。
【００３０】図１は本発明の細胞取得方法に用いる倒立
型顕微鏡の構成図である。照明用光源１は、例えばハロ
ゲンランプを用いる。照明用光源１は、可視光線を出力
する。視野絞り２、開口絞り３及びダイクロイックミラ
ー４が照明用光源１から出力される可視光線の光路上に
設けられている。
型顕微鏡の構成図である。照明用光源１は、例えばハロ
ゲンランプを用いる。照明用光源１は、可視光線を出力
する。視野絞り２、開口絞り３及びダイクロイックミラ
ー４が照明用光源１から出力される可視光線の光路上に
設けられている。
【００３１】視野絞り２及び開口絞り３は、一般的な顕
微鏡の光学系を構成する。ダイクロイックミラー４は、
可視光線を光軸ｐの下方に向って反射する。
微鏡の光学系を構成する。ダイクロイックミラー４は、
可視光線を光軸ｐの下方に向って反射する。
【００３２】レーザ用対物レンズ５がダイクロイックミ
ラー４の反射光路（光軸ｐ）上に設けられている。レー
ザ用対物レンズ５は、照明用光源１から出力された可視
光線を集光して標本７に照射する。レーザ用対物レンズ
５は、コンデンサレンズとして機能する。
ラー４の反射光路（光軸ｐ）上に設けられている。レー
ザ用対物レンズ５は、照明用光源１から出力された可視
光線を集光して標本７に照射する。レーザ用対物レンズ
５は、コンデンサレンズとして機能する。
【００３３】ステージ６は、ダイクロイックミラー４の
反射光路上に設けられている。ステージ６上に標本７を
載せるスライドガラス８が載置されている。ステージ６
は、Ｘ方向とＹ方向との各モータ６ａ、６ｂを有する。
ステージ６は、Ｘ方向のモータ６ａの駆動によりＸ方向
に移動する。ステージ６は、Ｙ方向のモータ６ｂの駆動
によりＹ方向に移動する。ステージ駆動部９は、Ｘ方向
とＹ方向との各モータ６ａ、６ｂを駆動する。
反射光路上に設けられている。ステージ６上に標本７を
載せるスライドガラス８が載置されている。ステージ６
は、Ｘ方向とＹ方向との各モータ６ａ、６ｂを有する。
ステージ６は、Ｘ方向のモータ６ａの駆動によりＸ方向
に移動する。ステージ６は、Ｙ方向のモータ６ｂの駆動
によりＹ方向に移動する。ステージ駆動部９は、Ｘ方向
とＹ方向との各モータ６ａ、６ｂを駆動する。
【００３４】標本７は、組織切片や培養細胞などで例え
ば遺伝子機能の解析に用いられる。細胞の核などを蛍光
染色して蛍光観察しながら細胞を取得する場合、標本７
は、予め蛍光色素を塗布されている。
ば遺伝子機能の解析に用いられる。細胞の核などを蛍光
染色して蛍光観察しながら細胞を取得する場合、標本７
は、予め蛍光色素を塗布されている。
【００３５】観察用対物レンズ１０、ダイクロイックミ
ラー１１、ＵＶバリアフィルタ１２、結像レンズ１３及
びハーフミラー１４が標本７を透過する光軸ｐ上に設け
られている。
ラー１１、ＵＶバリアフィルタ１２、結像レンズ１３及
びハーフミラー１４が標本７を透過する光軸ｐ上に設け
られている。
【００３６】ＣＣＤカメラ１５は、ハーフミラー１４の
反射光路上に設けられている。ＣＣＤカメラ１５は、ハ
ーフミラー１４を介して結像レンズ１３の結像位置に配
置されている。ＣＣＤカメラ１５は、結像レンズ１３に
より結像された像を撮像して画像信号を出力する。
反射光路上に設けられている。ＣＣＤカメラ１５は、ハ
ーフミラー１４を介して結像レンズ１３の結像位置に配
置されている。ＣＣＤカメラ１５は、結像レンズ１３に
より結像された像を撮像して画像信号を出力する。
【００３７】画像処理及びステージ制御装置１６は、Ｃ
ＣＤカメラ１５から出力された画像信号を入力し、画像
信号を画像処理して画像データを取得し、画像データを
ディスプレイ１７に表示する。
ＣＤカメラ１５から出力された画像信号を入力し、画像
信号を画像処理して画像データを取得し、画像データを
ディスプレイ１７に表示する。
【００３８】画像処理及びステージ制御装置１６は、キ
ーボート及びマウスなどの操作部１８を接続する。操作
部１８は、観察者によるステージ６の移動方向及び移動
量の操作を受け、この操作指令を発生する。画像処理及
びステージ制御装置１６は、操作部１８からの操作指令
を受け、操作指令に従ったステージ６の移動制御信号を
ステージ駆動部９に送出する。
ーボート及びマウスなどの操作部１８を接続する。操作
部１８は、観察者によるステージ６の移動方向及び移動
量の操作を受け、この操作指令を発生する。画像処理及
びステージ制御装置１６は、操作部１８からの操作指令
を受け、操作指令に従ったステージ６の移動制御信号を
ステージ駆動部９に送出する。
【００３９】ミラー１９がハーフミラー１４の透過光路
上に設けられている。リレーレンズ２０、ＵＶカットフ
ィルタ２１及び接眼レンズ２２がミラー１９の反射光路
上に設けられている。
上に設けられている。リレーレンズ２０、ＵＶカットフ
ィルタ２１及び接眼レンズ２２がミラー１９の反射光路
上に設けられている。
【００４０】一方、ＵＶレーザヘッド２３がレーザ用対
物レンズ５及びダイクロイックミラー４を通る光軸ｐ上
に設けられている。ＵＶレーザヘッド２３とダイクロイ
ックミラー４との間の光軸ｐ上にＵＶ結像レンズ２４が
設けられている。
物レンズ５及びダイクロイックミラー４を通る光軸ｐ上
に設けられている。ＵＶレーザヘッド２３とダイクロイ
ックミラー４との間の光軸ｐ上にＵＶ結像レンズ２４が
設けられている。
【００４１】ＵＶレーザヘッド２３は、レーザ光源２３
ａを有する。ＵＶレーザヘッド２３は、紫外領域の波長
のレーザビームを出力する。ＵＶレーザヘッド２３から
出力されるレーザビームは、標本７中に有する複数の細
胞のうち採取したい細胞以外の不必要な細胞をスライド
ガラス８上から取り除く。
ａを有する。ＵＶレーザヘッド２３は、紫外領域の波長
のレーザビームを出力する。ＵＶレーザヘッド２３から
出力されるレーザビームは、標本７中に有する複数の細
胞のうち採取したい細胞以外の不必要な細胞をスライド
ガラス８上から取り除く。
【００４２】ＵＶレーザヘッド２３から出力されるレー
ザビームのエネルギは、スライドガラス８上の不必要な
細胞をスライドガラス８上から取り除く程度に設定され
ている。
ザビームのエネルギは、スライドガラス８上の不必要な
細胞をスライドガラス８上から取り除く程度に設定され
ている。
【００４３】ＵＶレーザヘッド２３は、可変スリット２
５及びＬＥＤ２６を有する。可変スリット２５は、例え
ば円形又は四辺形の開口部を有する。可変スリット２５
は、開口部の径の大きさを可変可能である。可変スリッ
ト２５は、ＵＶレーザヘッド２３から出力されるレーザ
ビームのスポット径を可変する。
５及びＬＥＤ２６を有する。可変スリット２５は、例え
ば円形又は四辺形の開口部を有する。可変スリット２５
は、開口部の径の大きさを可変可能である。可変スリッ
ト２５は、ＵＶレーザヘッド２３から出力されるレーザ
ビームのスポット径を可変する。
【００４４】ＬＥＤ２６は、ＬＥＤ光を出力する。ＬＥ
Ｄ光は、可視光線の波長の光、例えば赤色の可視光であ
る。
Ｄ光は、可視光線の波長の光、例えば赤色の可視光であ
る。
【００４５】ダイクロイックミラー２７がＬＥＤ光の光
路上に設けられている。ダイクロイックミラー２７は、
ＬＥＤ２６から出力されたＬＥＤ光をＵＶレーザヘッド
２３から出力されるレーザビームの光軸ｐ上に向けて反
射する。
路上に設けられている。ダイクロイックミラー２７は、
ＬＥＤ２６から出力されたＬＥＤ光をＵＶレーザヘッド
２３から出力されるレーザビームの光軸ｐ上に向けて反
射する。
【００４６】これにより、ＬＥＤ光は、ＬＥＤ光とＵＶ
レーザビームの波長に対して透過性を持つダイクロイッ
クミラー２７を通過し、標本７におけるレーザビームの
照射位置と同一位置に照射される。標本７上に照射され
た赤色のＬＥＤ光は、標本７上に照射するレーザビーム
の照射位置を表示する。
レーザビームの波長に対して透過性を持つダイクロイッ
クミラー２７を通過し、標本７におけるレーザビームの
照射位置と同一位置に照射される。標本７上に照射され
た赤色のＬＥＤ光は、標本７上に照射するレーザビーム
の照射位置を表示する。
【００４７】蛍光励起用光源２８及びＵＶバンドパスフ
ィルタ２９がダイクロイックミラー１１の反射光路上に
設けられている。蛍光励起用光源２８は、ステージ６の
下方に設けられている。蛍光励起用光源２８は、紫外光
を出力する。蛍光励起用光源２８は、例えば水銀ランプ
である。
ィルタ２９がダイクロイックミラー１１の反射光路上に
設けられている。蛍光励起用光源２８は、ステージ６の
下方に設けられている。蛍光励起用光源２８は、紫外光
を出力する。蛍光励起用光源２８は、例えば水銀ランプ
である。
【００４８】蛍光励起用光源２８から出力される紫外光
は、ＵＶバンドパスフィルタ２９を透過し、ダイクロイ
ックミラー１１で反射し、観察用対物レンズ１０を通っ
て標本７に照射される。蛍光励起用光源２８から出力さ
れる紫外光は、標本７に予め塗布された蛍光色素を励起
する。
は、ＵＶバンドパスフィルタ２９を透過し、ダイクロイ
ックミラー１１で反射し、観察用対物レンズ１０を通っ
て標本７に照射される。蛍光励起用光源２８から出力さ
れる紫外光は、標本７に予め塗布された蛍光色素を励起
する。
【００４９】エアーブロー３０は、ステージ６の斜め上
方に設けられている。エアーブロー３０は、ステージ６
上に載置されている標本７に向ってエアーを吹き付け
る。標本７における不必要な細胞をスライドガラス８上
から取り除く場合、不必要な細胞の破片が発生する。不
必要な細胞の破片は、エアーブロー３０により吹き付け
られるエアーによってスライドガラス８上から吹き飛ば
される。
方に設けられている。エアーブロー３０は、ステージ６
上に載置されている標本７に向ってエアーを吹き付け
る。標本７における不必要な細胞をスライドガラス８上
から取り除く場合、不必要な細胞の破片が発生する。不
必要な細胞の破片は、エアーブロー３０により吹き付け
られるエアーによってスライドガラス８上から吹き飛ば
される。
【００５０】エアー吸引機３１は、ステージ６の斜め上
方に設けられている。エアー吸引機３１は、例えばステ
ージ６上の標本７を介してエアーブロー３０と対峙す
る。エアー吸引機３１は、エアーを吸引し、エアーブロ
ー３０のエアー吹き付けによって飛ばされた細胞の破片
を吸引する。
方に設けられている。エアー吸引機３１は、例えばステ
ージ６上の標本７を介してエアーブロー３０と対峙す
る。エアー吸引機３１は、エアーを吸引し、エアーブロ
ー３０のエアー吹き付けによって飛ばされた細胞の破片
を吸引する。
【００５１】次に、標本７中に存在する細胞の採取方法
について説明する。
について説明する。
【００５２】標本７がスライドガラス８上に載置され
る。スライドガラス８は、ステージ６上に載置される。
る。スライドガラス８は、ステージ６上に載置される。
【００５３】照明用光源１は、可視光線を出力する。可
視光線は、視野絞り２、開口絞り３を通り、ダイクロイ
ックミラー４で反射し、レーザ用対物レンズ５を通して
標本７に照射される。標本７に照射された可視光線の一
部は、標本７を透過する。
視光線は、視野絞り２、開口絞り３を通り、ダイクロイ
ックミラー４で反射し、レーザ用対物レンズ５を通して
標本７に照射される。標本７に照射された可視光線の一
部は、標本７を透過する。
【００５４】標本７を透過した光は、観察用対物レンズ
１０を通り、ダイクロイックミラー１１、ＵＶバリアフ
ィルタ１２を透過し、結像レンズ１３により結像され
る。
１０を通り、ダイクロイックミラー１１、ＵＶバリアフ
ィルタ１２を透過し、結像レンズ１３により結像され
る。
【００５５】ＣＣＤカメラ１５は、ハーフミラー１４を
介して結像レンズ１３により結像された標本７の拡大像
を撮像して画像信号を出力する。
介して結像レンズ１３により結像された標本７の拡大像
を撮像して画像信号を出力する。
【００５６】画像処理及びステージ制御装置１６は、Ｃ
ＣＤカメラ１５から出力された画像信号を入力し、画像
信号を画像処理して画像データを取得し、画像データを
ディスプレイ１７に表示する。
ＣＤカメラ１５から出力された画像信号を入力し、画像
信号を画像処理して画像データを取得し、画像データを
ディスプレイ１７に表示する。
【００５７】これと共に、結像レンズ１３により結像さ
れた標本７の像は、ミラー１９で反射し、リレーレンズ
２０、ＵＶカットフィルタ２１を通って接眼レンズ２２
に入射する。観察者は、接眼レンズ２２を覗くことによ
り拡大された標本７の像を目視観察する。
れた標本７の像は、ミラー１９で反射し、リレーレンズ
２０、ＵＶカットフィルタ２１を通って接眼レンズ２２
に入射する。観察者は、接眼レンズ２２を覗くことによ
り拡大された標本７の像を目視観察する。
【００５８】観察者は、ディスプレス１７に表示される
標本７の拡大像又は接眼レンズ２２を覗いて標本７の拡
大像を観察しながら標本７中から採取したい細胞を決定
する。
標本７の拡大像又は接眼レンズ２２を覗いて標本７の拡
大像を観察しながら標本７中から採取したい細胞を決定
する。
【００５９】標本７中から細胞ａを採取する場合、図２
に示す筒体４０を用いる。筒体４０は、例えばプラスチ
ックや金属、ガラス材料からなる。筒体４０は、円筒形
状に形成され、両端に円形の各開口部を形成する。筒体
４０の径は、採取する細胞ａよりも大きければよい。筒
体４０のサイズは、一例として外径４〜１１ｍｍ、内径
３〜１０ｍｍ、長さ５〜１０ｍｍである。筒体４０のサ
イズは、一例のサイズよりも小さいものもある。
に示す筒体４０を用いる。筒体４０は、例えばプラスチ
ックや金属、ガラス材料からなる。筒体４０は、円筒形
状に形成され、両端に円形の各開口部を形成する。筒体
４０の径は、採取する細胞ａよりも大きければよい。筒
体４０のサイズは、一例として外径４〜１１ｍｍ、内径
３〜１０ｍｍ、長さ５〜１０ｍｍである。筒体４０のサ
イズは、一例のサイズよりも小さいものもある。
【００６０】標本７が筒体４０の内径よりも大きけれ
ば、採取する細胞ａを有する標本部分ｄをトリミングす
る。筒体４０の開口部の形状が円形であれば、図３に示
すように標本７中の採取した細胞ａを有する標本部分ｄ
を円形にトリミングする。標本７が筒体４０の内径より
も小さければ、トリミングの必要はない。
ば、採取する細胞ａを有する標本部分ｄをトリミングす
る。筒体４０の開口部の形状が円形であれば、図３に示
すように標本７中の採取した細胞ａを有する標本部分ｄ
を円形にトリミングする。標本７が筒体４０の内径より
も小さければ、トリミングの必要はない。
【００６１】筒体４０は、円形の各開口部を有するもの
に限らず、他の形状の開口部を有するものでもよい。例
えば、筒体４０の開口部の形状が四辺形状の場合、トリ
ミングする標本部分ｄの形状は、図４に示すように標本
７中の採取する細胞ａを有する四辺形状になる。
に限らず、他の形状の開口部を有するものでもよい。例
えば、筒体４０の開口部の形状が四辺形状の場合、トリ
ミングする標本部分ｄの形状は、図４に示すように標本
７中の採取する細胞ａを有する四辺形状になる。
【００６２】採取する細胞ａを有する標本部分ｄのトリ
ミングについて説明する。
ミングについて説明する。
【００６３】ＵＶレーザヘッド２１の可変スリット２２
は、例えば円形の開口部を用いる。可変スリット２２
は、スリット径を例えば図２に示すように筒体４０の壁
の厚さＳ１と略同等のスポット径ｓ１になるように設定
する。
は、例えば円形の開口部を用いる。可変スリット２２
は、スリット径を例えば図２に示すように筒体４０の壁
の厚さＳ１と略同等のスポット径ｓ１になるように設定
する。
【００６４】一方、ＬＥＤ２６から赤色のＬＥＤ光が出
力される。ＬＥＤ光は、ダイクロイックミラー２７で反
射し、可変スリット２５に入射する。ＬＥＤ光は、可変
スリット２５の開口部を通過することにより、スポット
径ｓ１の円形のＬＥＤ光に成形される。
力される。ＬＥＤ光は、ダイクロイックミラー２７で反
射し、可変スリット２５に入射する。ＬＥＤ光は、可変
スリット２５の開口部を通過することにより、スポット
径ｓ１の円形のＬＥＤ光に成形される。
【００６５】スポット径ｓ１のＬＥＤ光は、ＵＶ結像レ
ンズ２４、レーザ用対物レンズ５を通して標本７に照射
される。このときダイクロイックミラー４を透過したス
ポット径ｓ１のＬＥＤ光は、ＵＶレーザヘッド２３から
出力されるレーザビームの光軸ｐ上に進行する。スポッ
ト径ｓ１のＬＥＤ光は、標本７におけるレーザビームの
照射位置と同一位置を赤色で照射する。
ンズ２４、レーザ用対物レンズ５を通して標本７に照射
される。このときダイクロイックミラー４を透過したス
ポット径ｓ１のＬＥＤ光は、ＵＶレーザヘッド２３から
出力されるレーザビームの光軸ｐ上に進行する。スポッ
ト径ｓ１のＬＥＤ光は、標本７におけるレーザビームの
照射位置と同一位置を赤色で照射する。
【００６６】ＣＣＤカメラ１５は、標本７の拡大像を撮
像して画像信号を出力する。画像処理及びステージ制御
装置１６は、ＣＣＤカメラ１５から出力された画像信号
を入力し、画像信号を画像処理して画像データを取得
し、赤色のスポット径ｓ１のＬＥＤ光の照射された標本
７の画像データをディスプレイ１７に表示する。
像して画像信号を出力する。画像処理及びステージ制御
装置１６は、ＣＣＤカメラ１５から出力された画像信号
を入力し、画像信号を画像処理して画像データを取得
し、赤色のスポット径ｓ１のＬＥＤ光の照射された標本
７の画像データをディスプレイ１７に表示する。
【００６７】観察者は、ディスプレス１５に表示されて
いる標本７を観察しながら標本部分ｄを残し、標本部分
ｄの周囲の標本７の部分をスライドガラス８上から取り
除くレーザビームの照射ルートＲ１を決定する。
いる標本７を観察しながら標本部分ｄを残し、標本部分
ｄの周囲の標本７の部分をスライドガラス８上から取り
除くレーザビームの照射ルートＲ１を決定する。
【００６８】レーザビームの照射ルートＲ１は、円形の
開口部の筒体４０を用いる場合、図３に示すように円形
である。レーザビームの照射ルートＲ１は、四辺形の開
口部の筒体４０を用いる場合、図４に示すように四辺形
である。
開口部の筒体４０を用いる場合、図３に示すように円形
である。レーザビームの照射ルートＲ１は、四辺形の開
口部の筒体４０を用いる場合、図４に示すように四辺形
である。
【００６９】次に、ＵＶレーザヘッド２３は、例えば１
ショット毎にレーザビームを出力する。レーザビームの
エネルギは、スライドガラス８上の不必要な標本部分ｄ
の外周部分をスライドガラス８上から取り除く程度に設
定されている。なお、レーザビームのエネルギは、周囲
環境に多少の湿気があっても採取したい細胞ａ以外の不
要部分を完全に吹き飛ばす程度に設定することが好まし
い。
ショット毎にレーザビームを出力する。レーザビームの
エネルギは、スライドガラス８上の不必要な標本部分ｄ
の外周部分をスライドガラス８上から取り除く程度に設
定されている。なお、レーザビームのエネルギは、周囲
環境に多少の湿気があっても採取したい細胞ａ以外の不
要部分を完全に吹き飛ばす程度に設定することが好まし
い。
【００７０】レーザビームは、ＵＶ結像レンズ２４、ダ
イクロイックミラー４、レーザ用対物レンズ５を通って
標本７の照射ルートＲ１上に照射される。
イクロイックミラー４、レーザ用対物レンズ５を通って
標本７の照射ルートＲ１上に照射される。
【００７１】観察者は、ディスプレス１７に表示される
標本７上のＬＥＤ光の照射位置又は接眼レンズ２２を覗
いてＬＥＤ光の照射位置を確認する。観察者は、ＬＥＤ
光の照射位置を照射ルートＲ１上になるように確認しな
がらキーボート及びマウスなどの操作部１８を操作す
る。
標本７上のＬＥＤ光の照射位置又は接眼レンズ２２を覗
いてＬＥＤ光の照射位置を確認する。観察者は、ＬＥＤ
光の照射位置を照射ルートＲ１上になるように確認しな
がらキーボート及びマウスなどの操作部１８を操作す
る。
【００７２】画像処理及びステージ制御装置１６は、操
作部１８からのステージ６の移動方向及び移動量の操作
に応じた操作指令を受け、操作指令に従ったステージ６
の移動制御信号をステージ駆動部９に送出する。
作部１８からのステージ６の移動方向及び移動量の操作
に応じた操作指令を受け、操作指令に従ったステージ６
の移動制御信号をステージ駆動部９に送出する。
【００７３】ステージ６は、例えば１ショットのレーザ
ビーム毎に、標本７上のＬＥＤ光の照射位置を照射ルー
トＲ１上になるようにＸＹ方向に移動する。ステージ６
のＸＹ方向の移動により１ショット毎のレーザビーム
は、それぞれ標本７上の照射ルートＲ１上に移動しなが
ら照射される。
ビーム毎に、標本７上のＬＥＤ光の照射位置を照射ルー
トＲ１上になるようにＸＹ方向に移動する。ステージ６
のＸＹ方向の移動により１ショット毎のレーザビーム
は、それぞれ標本７上の照射ルートＲ１上に移動しなが
ら照射される。
【００７４】レーザビームの照射された照射ルートＲ１
上の標本７の各部分は、それぞれスライドガラス８上か
ら取り除かれる。これにより、図３に示すように採取す
る細胞ａを有する標本部分ｄが円形にトリミングされ
る。又、図４に示すように採取する細胞ａを有する標本
部分ｄが四辺形にトリミングされる。
上の標本７の各部分は、それぞれスライドガラス８上か
ら取り除かれる。これにより、図３に示すように採取す
る細胞ａを有する標本部分ｄが円形にトリミングされ
る。又、図４に示すように採取する細胞ａを有する標本
部分ｄが四辺形にトリミングされる。
【００７５】なお、各照射ルートＲ１、Ｒ２のＸＹ座標
位置は、予め画像処理及びステージ制御装置１６に記憶
させてもよい。すなわち、レーザビームの各照射ルート
Ｒ１、Ｒ２が決定された後、標本７上にＬＥＤ光を照射
する。観察者は、操作部１８を操作してステージ６をＸ
Ｙ方向に移動し、ＬＥＤ光を照射ルートＲ１、Ｒ２に従
って移動させる。
位置は、予め画像処理及びステージ制御装置１６に記憶
させてもよい。すなわち、レーザビームの各照射ルート
Ｒ１、Ｒ２が決定された後、標本７上にＬＥＤ光を照射
する。観察者は、操作部１８を操作してステージ６をＸ
Ｙ方向に移動し、ＬＥＤ光を照射ルートＲ１、Ｒ２に従
って移動させる。
【００７６】このとき、画像処理及びステージ制御装置
１６は、操作部１８からのステージ６の移動方向及び移
動量を読み取り、これら移動方向及び移動量からステー
ジ６の照射ルートＲ１、Ｒ２のＸＹ座標位置を算出す
る。画像処理及びステージ制御装置１６は、算出した照
射ルートＲ１、Ｒ２のＸＹ座標位置を内部メモリに記憶
する。
１６は、操作部１８からのステージ６の移動方向及び移
動量を読み取り、これら移動方向及び移動量からステー
ジ６の照射ルートＲ１、Ｒ２のＸＹ座標位置を算出す
る。画像処理及びステージ制御装置１６は、算出した照
射ルートＲ１、Ｒ２のＸＹ座標位置を内部メモリに記憶
する。
【００７７】画像処理及びステージ制御装置１６は、内
部メモリに記憶された各照射ルートＲ１、Ｒ２のＸＹ座
標位置を読み出し、このＸＹ座標位置に従ってステージ
６の移動制御信号をステージ駆動部９に送出する。
部メモリに記憶された各照射ルートＲ１、Ｒ２のＸＹ座
標位置を読み出し、このＸＹ座標位置に従ってステージ
６の移動制御信号をステージ駆動部９に送出する。
【００７８】ステージ６は、自動的にレーザビームの照
射位置を照射ルートＲ１、Ｒ２上にするようにＸＹ方向
に移動する。これと共にＵＶレーザヘッド２３は、所定
期間毎に１ショットのレーザビームを出力する。
射位置を照射ルートＲ１、Ｒ２上にするようにＸＹ方向
に移動する。これと共にＵＶレーザヘッド２３は、所定
期間毎に１ショットのレーザビームを出力する。
【００７９】レーザビームの照射された照射ルート
Ｒ１、Ｒ２上の標本７の部分は、スライドガラス８上か
ら取り除かれる。これにより、図３に示すように採取す
る細胞ａを有する標本部分ｄが自動的に円形にトリミン
グされる。又、図４に示すように採取する細胞ａを有す
る標本部分ｄが自動的に四辺形にトリミングされる。
Ｒ１、Ｒ２上の標本７の部分は、スライドガラス８上か
ら取り除かれる。これにより、図３に示すように採取す
る細胞ａを有する標本部分ｄが自動的に円形にトリミン
グされる。又、図４に示すように採取する細胞ａを有す
る標本部分ｄが自動的に四辺形にトリミングされる。
【００８０】レーザビームを標本７に照射すると、標本
７の破片が切り取られる。切り取られた破片は、例えば
スライドガラス８の上方に飛び散る。
７の破片が切り取られる。切り取られた破片は、例えば
スライドガラス８の上方に飛び散る。
【００８１】エアーブロー３０は、スライドガラス８の
上方にエアー吹き付ける。スライドガラス８の上方に飛
び散る標本７の破片は、エアーブロー３０から吹き付け
られたエアーによってスライドガラス８の上方から飛ば
される。
上方にエアー吹き付ける。スライドガラス８の上方に飛
び散る標本７の破片は、エアーブロー３０から吹き付け
られたエアーによってスライドガラス８の上方から飛ば
される。
【００８２】エアー吸引機３１は、エアーを吸引し、エ
アーブロー３０のエアー吹き付けによって飛ばされた標
本７の破片を吸引する。
アーブロー３０のエアー吹き付けによって飛ばされた標
本７の破片を吸引する。
【００８３】これにより、スライドガラス８の上方に飛
び散る標本７の破片は、スライドガラス８上から除去さ
れる。
び散る標本７の破片は、スライドガラス８上から除去さ
れる。
【００８４】標本部分ｄのトリミングは、次の方法で行
ってもよい。
ってもよい。
【００８５】予め標本７は、蛍光色素により塗布され
る。
る。
【００８６】蛍光励起用光源２８は、紫外光を放射す
る。蛍光励起用光源２８から放射された紫外光は、ＵＶ
バンドパスフィルタ２９を透過してダイクロイックミラ
ー１１に入射する。紫外光は、ダイクロイックミラー１
１で上方に反射し、観察用対物レンズ１０を通して標本
７に照射される。標本７に塗布された蛍光色素は、励起
されて発光する。
る。蛍光励起用光源２８から放射された紫外光は、ＵＶ
バンドパスフィルタ２９を透過してダイクロイックミラ
ー１１に入射する。紫外光は、ダイクロイックミラー１
１で上方に反射し、観察用対物レンズ１０を通して標本
７に照射される。標本７に塗布された蛍光色素は、励起
されて発光する。
【００８７】標本７からの蛍光は、観察用対物レンズ１
０からダイクロイックミラー１１、ＵＶバリアフィルタ
１２を透過し、結像レンズ１３により結像される。
０からダイクロイックミラー１１、ＵＶバリアフィルタ
１２を透過し、結像レンズ１３により結像される。
【００８８】ＣＣＤカメラ１５は、標本７の拡大像及び
蛍光を撮像して画像信号を出力する。画像処理及びステ
ージ制御装置１６は、ＣＣＤカメラ１５から出力された
画像信号を入力し、画像信号を画像処理して画像データ
を取得し、蛍光を発する標本７の画像データをディスプ
レイ１７に表示する。
蛍光を撮像して画像信号を出力する。画像処理及びステ
ージ制御装置１６は、ＣＣＤカメラ１５から出力された
画像信号を入力し、画像信号を画像処理して画像データ
を取得し、蛍光を発する標本７の画像データをディスプ
レイ１７に表示する。
【００８９】これと同時に、標本７の像及び蛍光は、ミ
ラー１９で反射し、リレーレンズ２０、ＵＶカットフィ
ルタ２１を通って接眼レンズ２２に入射する。これによ
り、観察者は、接眼レンズ２２を覗くことにより蛍光を
発する標本７の拡大像を目視観察する。
ラー１９で反射し、リレーレンズ２０、ＵＶカットフィ
ルタ２１を通って接眼レンズ２２に入射する。これによ
り、観察者は、接眼レンズ２２を覗くことにより蛍光を
発する標本７の拡大像を目視観察する。
【００９０】観察者は、ディスプレス１７に表示される
標本７の拡大像及び蛍光、又は接眼レンズ２２を覗いて
標本７の拡大像及び蛍光を観察する。観察者は、標本７
の拡大像及び蛍光を観察しながら標本７中から採取した
い細胞ａを決定できる。
標本７の拡大像及び蛍光、又は接眼レンズ２２を覗いて
標本７の拡大像及び蛍光を観察する。観察者は、標本７
の拡大像及び蛍光を観察しながら標本７中から採取した
い細胞ａを決定できる。
【００９１】標本７に塗布された蛍光色素が発光するの
で、可視光線を用いた場合と比較して採取したい細胞ａ
は、さらに決定し易い。コンピュータを使った画像認識
により、採取したい細胞ａを自動で選択することも可能
である。
で、可視光線を用いた場合と比較して採取したい細胞ａ
は、さらに決定し易い。コンピュータを使った画像認識
により、採取したい細胞ａを自動で選択することも可能
である。
【００９２】次に、採取したい細胞ａを有する標本ｄか
ら採取したい細胞ａだけを残し、それ以外の細胞を除去
する手順について図８を参照して説明する。
ら採取したい細胞ａだけを残し、それ以外の細胞を除去
する手順について図８を参照して説明する。
【００９３】可変スリット２５は、開口部の径の大きさ
を最大にする。可変スリット２５は、ＵＶレーザヘッド
２３から出力されるレーザビームのスポット径を大きく
する。図８に示すように採取したい細胞ａから離れた細
胞ａは、大きなスポット径ｓ ２のレーザビームにより照
射される。
を最大にする。可変スリット２５は、ＵＶレーザヘッド
２３から出力されるレーザビームのスポット径を大きく
する。図８に示すように採取したい細胞ａから離れた細
胞ａは、大きなスポット径ｓ ２のレーザビームにより照
射される。
【００９４】次に、可変スリット２５は、開口部の径の
大きさを小さくする。採取したい細胞ａの周りは、小さ
なスポット径ｓ３のレーザビームにより丁寧に、すなわ
ち細胞ａの周り沿って正確に照射する。採取したい細胞
ａだけが残る。
大きさを小さくする。採取したい細胞ａの周りは、小さ
なスポット径ｓ３のレーザビームにより丁寧に、すなわ
ち細胞ａの周り沿って正確に照射する。採取したい細胞
ａだけが残る。
【００９５】次に、図２に示す筒体４０が用意される。
接着剤４１が筒体４０の一方の開口部に塗布される。筒
体４０とスライドガラス８などの基板との接着は、剥離
又は抽出のための溶液によって影響を受けない例えばグ
リース、パラフィン又は各種接着剤を用いる。予め接着
剤を塗布した使い捨ての厚手のシール又は筒体を用いて
もよい。
接着剤４１が筒体４０の一方の開口部に塗布される。筒
体４０とスライドガラス８などの基板との接着は、剥離
又は抽出のための溶液によって影響を受けない例えばグ
リース、パラフィン又は各種接着剤を用いる。予め接着
剤を塗布した使い捨ての厚手のシール又は筒体を用いて
もよい。
【００９６】筒体４０は、一方の開口部を下方に向けて
スライドガラス８の上面に垂直に立設される。筒体４０
をスライドガラス８の上面に立設する場合、細胞ａを有
する標本部分ｄが一方の開口部内に入れられる。
スライドガラス８の上面に垂直に立設される。筒体４０
をスライドガラス８の上面に立設する場合、細胞ａを有
する標本部分ｄが一方の開口部内に入れられる。
【００９７】次に、筒体４０は、スライドガラス８側に
対して軽く押し付けられる。これにより、筒体４０とス
ライドガラス８との接着は、確実な状態になる。接着剤
４１が硬化すると、筒体４０とスライドガラス８とによ
って液密の容器が形成される。筒体４０及びスライドガ
ラス８は、ステージ６上から取り外される。
対して軽く押し付けられる。これにより、筒体４０とス
ライドガラス８との接着は、確実な状態になる。接着剤
４１が硬化すると、筒体４０とスライドガラス８とによ
って液密の容器が形成される。筒体４０及びスライドガ
ラス８は、ステージ６上から取り外される。
【００９８】次に、剥離剤４２が図５に示すように筒体
４０とスライドガラス８とにより形成される容器内に注
入される。剥離剤４２は、例えばキシレンなどの有機溶
媒又は界面活性剤などである。剥離剤４２は、スライド
ガラス８からの細胞ａの剥離を促進する。図６はスライ
ドガラス８から剥離された細胞ａを示す。剥離された細
胞ａは、剥離剤４２中に浮遊する。
４０とスライドガラス８とにより形成される容器内に注
入される。剥離剤４２は、例えばキシレンなどの有機溶
媒又は界面活性剤などである。剥離剤４２は、スライド
ガラス８からの細胞ａの剥離を促進する。図６はスライ
ドガラス８から剥離された細胞ａを示す。剥離された細
胞ａは、剥離剤４２中に浮遊する。
【００９９】次に、剥離剤４２中に浮遊する細胞ａは、
剥離剤４２と共にスポイトなどにより吸引される。スポ
イトにより吸引された細胞ａは、新しい別の容器などに
移し替えられる。この結果、細胞ａの採取が終了する。
剥離剤４２と共にスポイトなどにより吸引される。スポ
イトにより吸引された細胞ａは、新しい別の容器などに
移し替えられる。この結果、細胞ａの採取が終了する。
【０１００】このように上記第１の実施の形態であれ
ば、筒体４０の開口部の内径よりも小さい標本部分ｄを
開口部内に入れて筒体４０をスライドガラス８上に立設
し、筒体４０とスライドガラス８との間を接着剤４１に
より液密に形成し、筒体４０とスライドガラス８とによ
り形成される容器内に剥離剤４２を注入し、採取したい
細胞ａをスライドガラス８から剥離して剥離剤４２中に
浮遊させて採取する。
ば、筒体４０の開口部の内径よりも小さい標本部分ｄを
開口部内に入れて筒体４０をスライドガラス８上に立設
し、筒体４０とスライドガラス８との間を接着剤４１に
より液密に形成し、筒体４０とスライドガラス８とによ
り形成される容器内に剥離剤４２を注入し、採取したい
細胞ａをスライドガラス８から剥離して剥離剤４２中に
浮遊させて採取する。
【０１０１】従って、標本７に有する採取すべき細胞ａ
を確実に採取できる。これにより、従来のように細胞ａ
がどこに行ったか分らなくなることがない。細胞ａを紛
失することを皆無にできる。採取した細胞ａにゴミなど
の異物が混入するようなことも確実に防止できる。
を確実に採取できる。これにより、従来のように細胞ａ
がどこに行ったか分らなくなることがない。細胞ａを紛
失することを皆無にできる。採取した細胞ａにゴミなど
の異物が混入するようなことも確実に防止できる。
【０１０２】上記第１の実施の形態は、最初にスライド
ガラス８上に標本７を載置するので、従来のように特殊
な薄膜プレートやフィルムを一切使用しない。薄膜プレ
ートやフィルムへの標本７の貼り付け作業などを無くす
ことができる。これにより、上記第１の実施の形態は、
細胞ａの採取作業を簡単化できかつ効率よくできる。し
かも経済的にも有利である。
ガラス８上に標本７を載置するので、従来のように特殊
な薄膜プレートやフィルムを一切使用しない。薄膜プレ
ートやフィルムへの標本７の貼り付け作業などを無くす
ことができる。これにより、上記第１の実施の形態は、
細胞ａの採取作業を簡単化できかつ効率よくできる。し
かも経済的にも有利である。
【０１０３】上記第１の実施の形態は、従来における細
胞採取用の透明キャップなどを用いないので、レーザビ
ームのスポット径を小さくできる。よって、採取したい
細胞ａが極小であっても、採取したい細胞ａを残し、そ
れ以外の細胞にレーザビームを照射することができる。
胞採取用の透明キャップなどを用いないので、レーザビ
ームのスポット径を小さくできる。よって、採取したい
細胞ａが極小であっても、採取したい細胞ａを残し、そ
れ以外の細胞にレーザビームを照射することができる。
【０１０４】上記第１の実施の形態は、転写フィルムな
どの特殊なものを使用しない。よって、作業の手間が省
け、消耗品の費用も削減できる。
どの特殊なものを使用しない。よって、作業の手間が省
け、消耗品の費用も削減できる。
【０１０５】一般に、細胞や細胞に含まれる遺伝子など
の機能を解析する場合は、目的とする細胞以外の細胞又
はその遺伝子の混入を減らして試料の純度を高めること
が要求される。又、標本切片から必要な細胞を選択して
取得するのに時間が掛かるので、細胞取得の効率化が求
められている。
の機能を解析する場合は、目的とする細胞以外の細胞又
はその遺伝子の混入を減らして試料の純度を高めること
が要求される。又、標本切片から必要な細胞を選択して
取得するのに時間が掛かるので、細胞取得の効率化が求
められている。
【０１０６】これに対して上記第１の実施の形態によれ
ば、不必要な細胞を除去して必要な細胞のみを一度に多
数取得できるので、高純度の試料が効率的に取得でき
る。
ば、不必要な細胞を除去して必要な細胞のみを一度に多
数取得できるので、高純度の試料が効率的に取得でき
る。
【０１０７】上記第１の実施の形態は、筒体４０中に剥
離剤４２を注入し、採取したい細胞ａをスライドガラス
８から剥離させて剥離剤４２中に浮遊させて採取する。
この細胞採取方法は、細胞ａの核の形状をできるだけ保
持することを必要とする研究、例えばフローサイトメト
リーなどの解析に有効である。
離剤４２を注入し、採取したい細胞ａをスライドガラス
８から剥離させて剥離剤４２中に浮遊させて採取する。
この細胞採取方法は、細胞ａの核の形状をできるだけ保
持することを必要とする研究、例えばフローサイトメト
リーなどの解析に有効である。
【０１０８】上記第１の実施の形態は、適宜変形して実
施できる。
施できる。
【０１０９】例えば、筒体４０とスライドガラス８の間
は、必ずしも接着剤４１を使用しなくともよい。接着剤
４１を使用しない場合は、例えば筒体４０の開口部に薄
くグリースを塗ってもよい。これにより、剥離剤４２が
筒体４０とスライドガラス８の間から漏れないようにし
てもよい。
は、必ずしも接着剤４１を使用しなくともよい。接着剤
４１を使用しない場合は、例えば筒体４０の開口部に薄
くグリースを塗ってもよい。これにより、剥離剤４２が
筒体４０とスライドガラス８の間から漏れないようにし
てもよい。
【０１１０】筒体４０の材質は、ガラス製に限らず、プ
ラスチック又は金属製のものなど他の材料を用いたもの
も適用できる。
ラスチック又は金属製のものなど他の材料を用いたもの
も適用できる。
【０１１１】又、図９に示すように筒体４０の片側の開
口部には、薄い樹脂により形成された透明フィルム６０
を貼り付けたものも使用できる。この場合、剥離液／抽
出液６１の注入・回収は、例えばスポイト、ピペット、
シリンジ６２などを用いる。
口部には、薄い樹脂により形成された透明フィルム６０
を貼り付けたものも使用できる。この場合、剥離液／抽
出液６１の注入・回収は、例えばスポイト、ピペット、
シリンジ６２などを用いる。
【０１１２】次に、透明フィルム６０を剥がし、剥離液
／抽出液６１を筒体４０内に注入する。
／抽出液６１を筒体４０内に注入する。
【０１１３】次に、透明フィルム６０により密閉した状
態で剥離液／抽出液６１を反応させる。
態で剥離液／抽出液６１を反応させる。
【０１１４】この後、透明フィルム６０を剥がし、例え
ばスポイト、ピペット、シリンジ６２などにより溶液を
回収する。
ばスポイト、ピペット、シリンジ６２などにより溶液を
回収する。
【０１１５】このようにすると筒体４０内への異物の混
入を防止できる。
入を防止できる。
【０１１６】上記第１の実施の形態は、例えばフローサ
イトメトリーなどの解析に有効であることを述べた。こ
れに対して、例えば核酸（ＤＮＡ、ＲＮＡ）や蛋白の解
析などの研究がある。この研究は、スライドガラス８か
らの細胞ａの剥離を必要としない。
イトメトリーなどの解析に有効であることを述べた。こ
れに対して、例えば核酸（ＤＮＡ、ＲＮＡ）や蛋白の解
析などの研究がある。この研究は、スライドガラス８か
らの細胞ａの剥離を必要としない。
【０１１７】すなわち、図２に示すようにスライドガラ
ス８上に筒体４０を接着固定する。次に、スライドガラ
ス８をステージ６から取り外す。
ス８上に筒体４０を接着固定する。次に、スライドガラ
ス８をステージ６から取り外す。
【０１１８】次に、図５に示すように筒体４０中に剥離
剤４２に代えて細胞ａ中から直接採取目的とする試料、
例えば核酸（ＤＮＡ、ＲＮＡ）や蛋白を抽出する溶液を
注入する。この溶液は、例えば核酸抽出キットとして市
販されているものなどを利用できる。
剤４２に代えて細胞ａ中から直接採取目的とする試料、
例えば核酸（ＤＮＡ、ＲＮＡ）や蛋白を抽出する溶液を
注入する。この溶液は、例えば核酸抽出キットとして市
販されているものなどを利用できる。
【０１１９】溶液中に例えば核酸（ＤＮＡ、ＲＮＡ）や
蛋白などの試料が溶出すると、上記第１の実施の形態と
同様に、スポイトなどで溶液中に溶出された試料を吸引
し、新しい別の容器などに移し替える。
蛋白などの試料が溶出すると、上記第１の実施の形態と
同様に、スポイトなどで溶液中に溶出された試料を吸引
し、新しい別の容器などに移し替える。
【０１２０】このように採取した例えば核酸（ＤＮＡ、
ＲＮＡ）や蛋白を用いて、これら例えば核酸（ＤＮＡ、
ＲＮＡ）や蛋白の解析ができる。
ＲＮＡ）や蛋白を用いて、これら例えば核酸（ＤＮＡ、
ＲＮＡ）や蛋白の解析ができる。
【０１２１】次に、本発明の第２の実施の形態について
説明する。なお、図１と同一部分には同一部号を付して
その詳しい説明は省略する。
説明する。なお、図１と同一部分には同一部号を付して
その詳しい説明は省略する。
【０１２２】図７は本発明の細胞取得方法に用いる倒立
型顕微鏡の構成図である。ＵＶレーザヘッド２３は、紫
外領域の波長のレーザビームを出力する。ＵＶレーザヘ
ッド２３から出力されるレーザビームは、標本７中に有
する複数の細胞のうち採取したい細胞ａを残し、採取し
たい細胞ａ以外の不必要な標本部分を変質するエネルギ
に設定される。不必要な標本部分の変質は、核酸の断片
化などにより、核酸又は細胞の基本的特性を変化させる
ことである。
型顕微鏡の構成図である。ＵＶレーザヘッド２３は、紫
外領域の波長のレーザビームを出力する。ＵＶレーザヘ
ッド２３から出力されるレーザビームは、標本７中に有
する複数の細胞のうち採取したい細胞ａを残し、採取し
たい細胞ａ以外の不必要な標本部分を変質するエネルギ
に設定される。不必要な標本部分の変質は、核酸の断片
化などにより、核酸又は細胞の基本的特性を変化させる
ことである。
【０１２３】ステージ６は、測長部５０を有する。測長
部５０は、ステージ６のＸＹ方向に移動するＸＹ座標を
測定し、ＸＹ座標測定信号を出力する。
部５０は、ステージ６のＸＹ方向に移動するＸＹ座標を
測定し、ＸＹ座標測定信号を出力する。
【０１２４】画像処理及びステージ制御装置１６は、測
長部５０から出力されたＸＹ座標測定信号を入力し、Ｘ
Ｙ座標測定信号から標本７に照射されるレーザビームの
照射位置を算出する。
長部５０から出力されたＸＹ座標測定信号を入力し、Ｘ
Ｙ座標測定信号から標本７に照射されるレーザビームの
照射位置を算出する。
【０１２５】画像処理及びステージ制御装置１６は、Ｃ
ＣＤカメラ１５から出力された画像信号を画像処理して
標本７の画像データを取得し、かつ画像データ中にレー
ザビームの照射位置を示す色付け表示部の画像データを
重ね合わせる。色付け表示部は、例えば赤色が好まし
い。
ＣＤカメラ１５から出力された画像信号を画像処理して
標本７の画像データを取得し、かつ画像データ中にレー
ザビームの照射位置を示す色付け表示部の画像データを
重ね合わせる。色付け表示部は、例えば赤色が好まし
い。
【０１２６】画像処理及びステージ制御装置１６は、標
本７の画像データとレーザビームの照射位置を示す色付
け表示部の画像データとを重ね合わせてディスプレイ１
７に表示する。
本７の画像データとレーザビームの照射位置を示す色付
け表示部の画像データとを重ね合わせてディスプレイ１
７に表示する。
【０１２７】次に、標本７中に存在する細胞ａの採取方
法について説明する。
法について説明する。
【０１２８】上記第１の実施の形態と同様に、観察者
は、ディスプレス１７に表示される標本７の拡大像又は
接眼レンズ２２を覗いて標本７の拡大像を観察しながら
例えば図８に示す標本７中から採取したい各細胞ａを決
定する。
は、ディスプレス１７に表示される標本７の拡大像又は
接眼レンズ２２を覗いて標本７の拡大像を観察しながら
例えば図８に示す標本７中から採取したい各細胞ａを決
定する。
【０１２９】次に、標本７中の採取すべき各細胞ａを残
し、それ以外の細胞にレーザビームを照射する。
し、それ以外の細胞にレーザビームを照射する。
【０１３０】採取したい細胞ａから離れた細胞は、大き
なスポット径ｓ２でレーザビームを照射する。
なスポット径ｓ２でレーザビームを照射する。
【０１３１】次に、可変スリット２５により小さなスポ
ット径ｓ３にして、採取したい細胞ａの周りを丁寧に、
すなわち細胞ａの周り沿って正確に照射して採取したい
細胞ａだけを残す。
ット径ｓ３にして、採取したい細胞ａの周りを丁寧に、
すなわち細胞ａの周り沿って正確に照射して採取したい
細胞ａだけを残す。
【０１３２】上記第１の実施の形態では、レーザスポッ
ト径の大きさを可変スリット２５により調整したが、本
第２の実施の形態では、不要な細胞の核酸を断片化する
だけのレーザエネルギを有すればよい。核酸を断片化す
るレーザエネルギは、細胞ごと取り除くエネルギよりも
小さい。これにより、レーザヘッド２３に代って水銀ラ
ンプなどを用いて不要な細胞の核酸を断片化させ、核酸
又は細胞の基本的特性を変化させることが可能である。
又、レーザ用対物レンズ５は、低倍率のものに切り換え
てレーザスポット径を大きくすることができる。
ト径の大きさを可変スリット２５により調整したが、本
第２の実施の形態では、不要な細胞の核酸を断片化する
だけのレーザエネルギを有すればよい。核酸を断片化す
るレーザエネルギは、細胞ごと取り除くエネルギよりも
小さい。これにより、レーザヘッド２３に代って水銀ラ
ンプなどを用いて不要な細胞の核酸を断片化させ、核酸
又は細胞の基本的特性を変化させることが可能である。
又、レーザ用対物レンズ５は、低倍率のものに切り換え
てレーザスポット径を大きくすることができる。
【０１３３】レーザ用対物レンズ５は、例えば低倍率の
５倍程度に切り換える。
５倍程度に切り換える。
【０１３４】一方、測長部５０は、ステージ６のＸＹ方
向に移動するＸＹ座標を測定し、ＸＹ座標測定信号を出
力する。
向に移動するＸＹ座標を測定し、ＸＹ座標測定信号を出
力する。
【０１３５】画像処理及びステージ制御装置１６は、測
長部５０から出力されたＸＹ座標測定信号を入力し、Ｘ
Ｙ座標測定信号から標本７に照射されるレーザビームの
照射位置を算出する。
長部５０から出力されたＸＹ座標測定信号を入力し、Ｘ
Ｙ座標測定信号から標本７に照射されるレーザビームの
照射位置を算出する。
【０１３６】画像処理及びステージ制御装置１６は、Ｃ
ＣＤカメラ１５から出力された画像信号を画像処理して
標本７の画像データを取得し、この画像データとレーザ
ビームの照射位置を示す例えば赤色の色付け表示部の画
像データとを重ね合わせる。
ＣＤカメラ１５から出力された画像信号を画像処理して
標本７の画像データを取得し、この画像データとレーザ
ビームの照射位置を示す例えば赤色の色付け表示部の画
像データとを重ね合わせる。
【０１３７】画像処理及びステージ制御装置１６は、標
本７の画像データとレーザビームの照射位置を示す色付
け表示部の画像データとを重ね合わせてディスプレイ１
７に表示する。
本７の画像データとレーザビームの照射位置を示す色付
け表示部の画像データとを重ね合わせてディスプレイ１
７に表示する。
【０１３８】観察者は、操作部１８を操作し、ディスプ
レス１７に表示されている標本７の画像とレーザビーム
の照射位置を示す色付け表示部とを確認しながら、スポ
ット径ｓ２のレーザビームの照射位置を各細胞ａの周辺
部分に１ショット毎に移動させる。
レス１７に表示されている標本７の画像とレーザビーム
の照射位置を示す色付け表示部とを確認しながら、スポ
ット径ｓ２のレーザビームの照射位置を各細胞ａの周辺
部分に１ショット毎に移動させる。
【０１３９】スポット径ｓ２のレーザビームの照射は、
各細胞ａの周囲の標本７に対して行う。なお、図８にお
いてスポット径ｓ２のレーザビームの照射位置を全て図
示することはしていない。
各細胞ａの周囲の標本７に対して行う。なお、図８にお
いてスポット径ｓ２のレーザビームの照射位置を全て図
示することはしていない。
【０１４０】スポット径ｓ２のレーザビームの照射され
た標本７の部分は、核酸などの断片化により核酸又は細
胞の基本特性が変化する。
た標本７の部分は、核酸などの断片化により核酸又は細
胞の基本特性が変化する。
【０１４１】次に、ＵＶレーザヘッド２１の可変スリッ
ト２２は、円形の開口部の径を例えば図８に示すように
細胞ａよりも小さいスリット幅Ｓ３に設定する。これに
より、標本７上に照射されるレーザビームのスポット径
はｓ３になる。
ト２２は、円形の開口部の径を例えば図８に示すように
細胞ａよりも小さいスリット幅Ｓ３に設定する。これに
より、標本７上に照射されるレーザビームのスポット径
はｓ３になる。
【０１４２】なお、レーザ用対物レンズ５を高倍率例え
ば倍率５０倍程度に切り換え、レーザ用対物レンズ５の
前方にＮＤフィルタを配置してもよい。
ば倍率５０倍程度に切り換え、レーザ用対物レンズ５の
前方にＮＤフィルタを配置してもよい。
【０１４３】観察者は、ディスプレス１７に表示されて
いる標本７を観察しながら各細胞ａを残し、各細胞ａに
隣接する周囲の標本７を変質させるレーザビームの各照
射ルートＲ３、Ｒ４を決定する。
いる標本７を観察しながら各細胞ａを残し、各細胞ａに
隣接する周囲の標本７を変質させるレーザビームの各照
射ルートＲ３、Ｒ４を決定する。
【０１４４】観察者は、ディスプレス１７に表示される
標本７の画像とレーザビームの照射位置を示す色付け表
示部を確認しながら、レーザビームの照射位置を照射ル
ートＲ３又はＲ４上になるように操作部１８を操作す
る。
標本７の画像とレーザビームの照射位置を示す色付け表
示部を確認しながら、レーザビームの照射位置を照射ル
ートＲ３又はＲ４上になるように操作部１８を操作す
る。
【０１４５】画像処理及びステージ制御装置１６は、操
作部１８からのステージ６の移動方向及び移動量の操作
に応じた操作指令を受け、操作指令に従ったステージ６
の移動制御信号をステージ駆動部９に送出する。
作部１８からのステージ６の移動方向及び移動量の操作
に応じた操作指令を受け、操作指令に従ったステージ６
の移動制御信号をステージ駆動部９に送出する。
【０１４６】これにより、ステージ６は、例えば１ショ
ットのレーザビーム毎に、照射ルートＲ２又はＲ３上に
なるようにＸＹ方向に移動する。
ットのレーザビーム毎に、照射ルートＲ２又はＲ３上に
なるようにＸＹ方向に移動する。
【０１４７】ＵＶレーザヘッド２３から例えば１ショッ
ト毎にレーザビームが出力されると、レーザビームは、
ＵＶ結像レンズ２４、ダイクロイックミラー４、レーザ
用対物レンズ５を通って照射ルートＲ３上に照射され、
続いて照射ルートＲ４上に照射される。なお、レーザビ
ームは、照射ルートＲ４上に照射し、続いて照射ルート
Ｒ３上に照射してもよい。
ト毎にレーザビームが出力されると、レーザビームは、
ＵＶ結像レンズ２４、ダイクロイックミラー４、レーザ
用対物レンズ５を通って照射ルートＲ３上に照射され、
続いて照射ルートＲ４上に照射される。なお、レーザビ
ームは、照射ルートＲ４上に照射し、続いて照射ルート
Ｒ３上に照射してもよい。
【０１４８】レーザビームのエネルギは、各細胞ａに隣
接する周囲の標本７を変質させる程度に設定されてい
る。従って、レーザビームの照射された各照射ルートＲ
３、Ｒ ４上の標本７の部分は、核酸などの断片化により
核酸又は細胞の基本特性が変化する。
接する周囲の標本７を変質させる程度に設定されてい
る。従って、レーザビームの照射された各照射ルートＲ
３、Ｒ ４上の標本７の部分は、核酸などの断片化により
核酸又は細胞の基本特性が変化する。
【０１４９】なお、各照射ルートＲ３、Ｒ４のＸＹ座標
位置は、予め画像処理及びステージ制御装置１６に記憶
させてもよい。すなわち、レーザビームの各照射ルート
Ｒ３、Ｒ４が決定された後、観察者は、操作部１８を操
作してステージ６をＸＹ方向に移動し、レーザビームの
照射位置を示す色付け表示部を各照射ルートＲ３、Ｒ ４
毎に従ってそれぞれ移動させる。
位置は、予め画像処理及びステージ制御装置１６に記憶
させてもよい。すなわち、レーザビームの各照射ルート
Ｒ３、Ｒ４が決定された後、観察者は、操作部１８を操
作してステージ６をＸＹ方向に移動し、レーザビームの
照射位置を示す色付け表示部を各照射ルートＲ３、Ｒ ４
毎に従ってそれぞれ移動させる。
【０１５０】このとき、画像処理及びステージ制御装置
１６は、操作部１８からのステージ６の移動方向及び移
動量を読み取り、これら移動方向及び移動量からステー
ジ６の各照射ルートＲ３、Ｒ４毎のＸＹ座標位置をそれ
ぞれ算出する。画像処理及びステージ制御装置１６は、
算出した各照射ルートＲ３、Ｒ４毎のＸＹ座標位置を内
部メモリに記憶する。
１６は、操作部１８からのステージ６の移動方向及び移
動量を読み取り、これら移動方向及び移動量からステー
ジ６の各照射ルートＲ３、Ｒ４毎のＸＹ座標位置をそれ
ぞれ算出する。画像処理及びステージ制御装置１６は、
算出した各照射ルートＲ３、Ｒ４毎のＸＹ座標位置を内
部メモリに記憶する。
【０１５１】画像処理及びステージ制御装置１６は、内
部メモリに記憶された各照射ルートＲ３、Ｒ４毎のＸＹ
座標位置を読み出し、このＸＹ座標位置に従ってステー
ジ６の移動制御信号をステージ駆動部９に送出する。
部メモリに記憶された各照射ルートＲ３、Ｒ４毎のＸＹ
座標位置を読み出し、このＸＹ座標位置に従ってステー
ジ６の移動制御信号をステージ駆動部９に送出する。
【０１５２】ステージ６は、自動的にレーザビームの照
射位置を各照射ルートＲ３、Ｒ４毎にそれぞれＸＹ方向
に移動する。これと共にＵＶレーザヘッド２３は、所定
期間毎に１ショットのレーザビームを出力する。
射位置を各照射ルートＲ３、Ｒ４毎にそれぞれＸＹ方向
に移動する。これと共にＵＶレーザヘッド２３は、所定
期間毎に１ショットのレーザビームを出力する。
【０１５３】これにより、各照射ルートＲ３、Ｒ４上の
標本７の部分は、自動的にレーザビームの照射を受けて
細胞内の核酸などの断片化により、核酸又は細胞の基本
的特性が変化する。
標本７の部分は、自動的にレーザビームの照射を受けて
細胞内の核酸などの断片化により、核酸又は細胞の基本
的特性が変化する。
【０１５４】次に、上記第１の実施の形態と同様に、図
２に示す筒体４０が用意される。筒体４０は、スライド
ガラス８上に接着固定される。
２に示す筒体４０が用意される。筒体４０は、スライド
ガラス８上に接着固定される。
【０１５５】次に、図５に示すように筒体４０中に細胞
ａ中から試料、例えば核酸（ＤＮＡ、ＲＮＡ）や蛋白を
抽出する溶液が注入される。
ａ中から試料、例えば核酸（ＤＮＡ、ＲＮＡ）や蛋白を
抽出する溶液が注入される。
【０１５６】溶液中に例えば核酸（ＤＮＡ、ＲＮＡ）や
蛋白などの試料が溶出すると、試料は、スポイトなどに
より吸引され、新しい別の容器などに移し替えられる。
蛋白などの試料が溶出すると、試料は、スポイトなどに
より吸引され、新しい別の容器などに移し替えられる。
【０１５７】一方、細胞ａをスライドガラス８上から剥
離する場合、図２に示すように筒体４０は、接着剤４１
によりスライドガラス８上に接着固定される。
離する場合、図２に示すように筒体４０は、接着剤４１
によりスライドガラス８上に接着固定される。
【０１５８】次に、剥離剤４２が図５に示すように筒体
４０とスライドガラス８とにより形成される容器内に注
入される。剥離剤４２は、図６に示すようにスライドガ
ラス８からの細胞ａの剥離を促進する。
４０とスライドガラス８とにより形成される容器内に注
入される。剥離剤４２は、図６に示すようにスライドガ
ラス８からの細胞ａの剥離を促進する。
【０１５９】次に、剥離剤４２中に浮遊する細胞ａは、
剥離剤４２と共にスポイトなどにより吸引される。スポ
イトにより吸引された細胞ａは、新しい別の容器などに
移し替えられる。この結果、細胞ａの採取が終了する。
剥離剤４２と共にスポイトなどにより吸引される。スポ
イトにより吸引された細胞ａは、新しい別の容器などに
移し替えられる。この結果、細胞ａの採取が終了する。
【０１６０】このように上記第２の実施の形態によれ
ば、標本７における採取したい細胞ａ以外の不要な標本
部分ｄに対してレーザビームを照射し、不要な標本部分
ｄの核酸などを断片化させ、核酸又は細胞の基本特性を
変化させる。
ば、標本７における採取したい細胞ａ以外の不要な標本
部分ｄに対してレーザビームを照射し、不要な標本部分
ｄの核酸などを断片化させ、核酸又は細胞の基本特性を
変化させる。
【０１６１】この後、筒体４０中に細胞ａ中から試料、
例えば核酸（ＤＮＡ、ＲＮＡ）や蛋白を抽出する溶液を
注入し、例えば核酸（ＤＮＡ、ＲＮＡ）や蛋白などの試
料を溶出する。又、筒体４０とスライドガラス８とによ
り形成される容器内に剥離剤４２を注入し、採取したい
細胞ａをスライドガラス８から剥離して剥離剤４２中に
浮遊させて採取する。
例えば核酸（ＤＮＡ、ＲＮＡ）や蛋白を抽出する溶液を
注入し、例えば核酸（ＤＮＡ、ＲＮＡ）や蛋白などの試
料を溶出する。又、筒体４０とスライドガラス８とによ
り形成される容器内に剥離剤４２を注入し、採取したい
細胞ａをスライドガラス８から剥離して剥離剤４２中に
浮遊させて採取する。
【０１６２】このように第２の実施の形態は、レーザビ
ームを照射して不要な標本部分ｄの細胞の核酸などを断
片化し、核酸又は細胞の基本特性を変化させるので、主
に生の標本７から例えば核酸（ＤＮＡ、ＲＮＡ）や蛋白
などの試料を抽出する場合に有効である。
ームを照射して不要な標本部分ｄの細胞の核酸などを断
片化し、核酸又は細胞の基本特性を変化させるので、主
に生の標本７から例えば核酸（ＤＮＡ、ＲＮＡ）や蛋白
などの試料を抽出する場合に有効である。
【０１６３】生の標本は、水分を含んでいる。生の標本
７にエネルギの大きいレーザビームを照射すると、標本
７中の水分の沸騰により標本７がカットできない。
７にエネルギの大きいレーザビームを照射すると、標本
７中の水分の沸騰により標本７がカットできない。
【０１６４】これに対して第２の実施の形態におけるレ
ーザビームのエネルギは、不要な標本部分ｄの核酸など
を断片化させ、核酸又は細胞の基本特性を変化させるの
に必要なエネルギである。レーザビームのエネルギは、
実験結果として例えばＤＮＡの断片化の場合には、波長
２６６ｎｍで、６０μｍ四方の正方形の面積に対して
０．０７５ｍＪを得ている。なお、レーザビームのエネ
ルギは、０．０７５ｍＪよりも小さくても核酸などを断
片化し、核酸又は細胞の基本特性を変化させることを可
能とする。
ーザビームのエネルギは、不要な標本部分ｄの核酸など
を断片化させ、核酸又は細胞の基本特性を変化させるの
に必要なエネルギである。レーザビームのエネルギは、
実験結果として例えばＤＮＡの断片化の場合には、波長
２６６ｎｍで、６０μｍ四方の正方形の面積に対して
０．０７５ｍＪを得ている。なお、レーザビームのエネ
ルギは、０．０７５ｍＪよりも小さくても核酸などを断
片化し、核酸又は細胞の基本特性を変化させることを可
能とする。
【０１６５】採取するに必要な細胞ａ以外の不要な標本
部分を変質する場合、先ず、各細胞ａの周りの不要な標
本部分ｄに大きなスポット径ｓ２のレーザビームを照射
し、次に、各細胞ａに隣接する周囲の不要な標本部分ｄ
に小さいスポット径ｓ３のレーザビームを照射する。こ
れにより、不要な標本部分ｄに照射するレーザビームの
回数を少なくできる。広い領域の不要な標本部分ｄの変
質が短時間でできる。
部分を変質する場合、先ず、各細胞ａの周りの不要な標
本部分ｄに大きなスポット径ｓ２のレーザビームを照射
し、次に、各細胞ａに隣接する周囲の不要な標本部分ｄ
に小さいスポット径ｓ３のレーザビームを照射する。こ
れにより、不要な標本部分ｄに照射するレーザビームの
回数を少なくできる。広い領域の不要な標本部分ｄの変
質が短時間でできる。
【０１６６】上記第１の実施の形態のように不要な標本
部分ｄをスライドガラス８上から飛ばす場合、レーザ用
対物レンズ５は、一般的に倍率５０倍程度を用いる。こ
れに対して上記第２の実施の形態は、倍率５倍程度のレ
ーザ用対物レンズ５を用いればよい。これにより、上記
第２の実施の形態は、倍率５０倍のレーザ用対物レンズ
５を用いた場合と比較して、レーザビームのスポット領
域を１００倍に広げることができる。
部分ｄをスライドガラス８上から飛ばす場合、レーザ用
対物レンズ５は、一般的に倍率５０倍程度を用いる。こ
れに対して上記第２の実施の形態は、倍率５倍程度のレ
ーザ用対物レンズ５を用いればよい。これにより、上記
第２の実施の形態は、倍率５０倍のレーザ用対物レンズ
５を用いた場合と比較して、レーザビームのスポット領
域を１００倍に広げることができる。
【０１６７】不要な標本部分ｄの細胞を変質するので、
レーザビームを標本７に照射したときに標本７の破片が
飛び散ることはない。これにより、エアーブロー３０及
びエアー吸引機３１は、不要になる。
レーザビームを標本７に照射したときに標本７の破片が
飛び散ることはない。これにより、エアーブロー３０及
びエアー吸引機３１は、不要になる。
【０１６８】ディスプレイ１７には、標本７の画像デー
タ中にレーザビームの照射位置を示す例えば赤色の色付
け表示部の画像データを重ね合わせて表示する。観察者
は、ディスプレイ１７の画像を確認しながら標本７にレ
ーザビームを照射できる。これにより、採取する細胞ａ
に隣接する周囲及びその他の不要な標本部分ｄを確実に
変質できる。
タ中にレーザビームの照射位置を示す例えば赤色の色付
け表示部の画像データを重ね合わせて表示する。観察者
は、ディスプレイ１７の画像を確認しながら標本７にレ
ーザビームを照射できる。これにより、採取する細胞ａ
に隣接する周囲及びその他の不要な標本部分ｄを確実に
変質できる。
【０１６９】上記第２の実施の形態では、レーザビーム
のエネルギを細胞を変質する程度に設定しているが、光
源として例えば、水銀ランプ又はキセノンランプを用い
てもよい。水銀ランプ又はキセノンランプから放射され
る光を細胞に照射しても、核酸などを断片化し、核酸又
は細胞の基本特性を変化させることは可能である。
のエネルギを細胞を変質する程度に設定しているが、光
源として例えば、水銀ランプ又はキセノンランプを用い
てもよい。水銀ランプ又はキセノンランプから放射され
る光を細胞に照射しても、核酸などを断片化し、核酸又
は細胞の基本特性を変化させることは可能である。
【０１７０】なお、本発明は、上記第１及び第２の実施
の形態に限定されるものでなく、実施段階ではその要旨
を逸脱しない範囲で種々に変形することが可能である。
の形態に限定されるものでなく、実施段階ではその要旨
を逸脱しない範囲で種々に変形することが可能である。
【０１７１】さらに、上記実施形態には、種々の段階の
発明が含まれており、開示されている複数の構成要件に
おける適宜な組み合わせにより種々の発明が抽出でき
る。例えば、実施形態に示されている全構成要件から幾
つかの構成要件が削除されても、発明が解決しようとす
る課題の欄で述べた課題が解決でき、発明の効果の欄で
述べられている効果が得られる場合には、この構成要件
が削除された構成が発明として抽出できる。
発明が含まれており、開示されている複数の構成要件に
おける適宜な組み合わせにより種々の発明が抽出でき
る。例えば、実施形態に示されている全構成要件から幾
つかの構成要件が削除されても、発明が解決しようとす
る課題の欄で述べた課題が解決でき、発明の効果の欄で
述べられている効果が得られる場合には、この構成要件
が削除された構成が発明として抽出できる。
【０１７２】
【発明の効果】以上詳記したように本発明によれば、採
取したい細胞を確実に、しかも効率よく採取できる細胞
単離方法を提供できる。
取したい細胞を確実に、しかも効率よく採取できる細胞
単離方法を提供できる。
【図１】本発明の細胞単離方法の第１の実施の形態に用
いる倒立型顕微鏡の構成図。
いる倒立型顕微鏡の構成図。
【図２】本発明の第１の実施の形態における細胞の採取
に用いる筒体を示す図。
に用いる筒体を示す図。
【図３】本発明の第１及び第２の実施の形態における細
胞のトリミングを示す図。
胞のトリミングを示す図。
【図４】本発明の第１及び第２の実施の形態における細
胞のトリミングを示す図。
胞のトリミングを示す図。
【図５】本発明の第１及び第２の実施の形態における剥
離剤の注入を示す図。
離剤の注入を示す図。
【図６】本発明の第１及び第２の実施の形態における細
胞の剥離した状態を示す図。
胞の剥離した状態を示す図。
【図７】本発明の細胞取得方法の第２の実施の形態に用
いる倒立型顕微鏡の構成図。
いる倒立型顕微鏡の構成図。
【図８】本発明の第１及び第２の実施の形態における不
要な細胞へのレーザ照射を示す図。
要な細胞へのレーザ照射を示す図。
【図９】本発明の第１及び第２の実施の形態における細
胞の採取方法の一例を示す図。
胞の採取方法の一例を示す図。
１：照明用光源、２：視野絞り、３：開口絞り、４：ダ
イクロイックミラー、５：レーザ用対物レンズ、６：ス
テージ、７：標本、８：スライドガラス、６ａ，６ｂ：
モータ、９：ステージ駆動部、１０：観察用対物レン
ズ、１１：ダイクロイックミラー、１２：ＵＶバリアフ
ィルタ、１３：結像レンズ、１４：ハーフミラー、１
５：ＣＣＤカメラ、１６：画像処理及びステージ制御装
置、１７：ディスプレイ、１８：操作部、１９：ミラ
ー、２０：リレーレンズ、２１：ＵＶカットフィルタ、
２２：接眼レンズ、２３：ＵＶレーザヘッド、２４：Ｕ
Ｖ結像レンズ、２３ａ：レーザ光源、２５：可変スリッ
ト、２６：ＬＥＤ、２７：ダイクロイックミラー、２
８：蛍光励起用光源、２９：ＵＶバンドパスフィルタ、
３０：エアーブロー、３１：エアー吸引機、４０：筒
体、４１：接着剤、４２：剥離剤、５０：測長部、６
０：透明フィルム、６１：剥離液／抽出液、６２：スポ
イト，ピペット，シリンジ。
イクロイックミラー、５：レーザ用対物レンズ、６：ス
テージ、７：標本、８：スライドガラス、６ａ，６ｂ：
モータ、９：ステージ駆動部、１０：観察用対物レン
ズ、１１：ダイクロイックミラー、１２：ＵＶバリアフ
ィルタ、１３：結像レンズ、１４：ハーフミラー、１
５：ＣＣＤカメラ、１６：画像処理及びステージ制御装
置、１７：ディスプレイ、１８：操作部、１９：ミラ
ー、２０：リレーレンズ、２１：ＵＶカットフィルタ、
２２：接眼レンズ、２３：ＵＶレーザヘッド、２４：Ｕ
Ｖ結像レンズ、２３ａ：レーザ光源、２５：可変スリッ
ト、２６：ＬＥＤ、２７：ダイクロイックミラー、２
８：蛍光励起用光源、２９：ＵＶバンドパスフィルタ、
３０：エアーブロー、３１：エアー吸引機、４０：筒
体、４１：接着剤、４２：剥離剤、５０：測長部、６
０：透明フィルム、６１：剥離液／抽出液、６２：スポ
イト，ピペット，シリンジ。
Claims (24)
- 【請求項１】 基板上に載置され細胞を有する標本に対
してレーザビームを照射して前記細胞部分以外の不要な
前記標本部分を前記基板上から取り除き、 両端に各開口部を有する筒状体を用い、前記筒状体にお
ける一方の前記開口部の中に前記細胞部分を入れて前記
筒状体を前記基板上に設置し、 前記基板と前記筒状体とにより形成される容器内に剥離
剤を注入して前記細胞部分を前記基板から剥離し、 前記剥離剤中に浮遊する前記細胞部分を採取することを
特徴とする細胞単離方法。 - 【請求項２】 基板上に載置され細胞を有する標本に対
してレーザビームを照射して前記細胞部分以外の不要な
前記標本部分を前記基板上から取り除き、 両端に各開口部を有する筒状体を用い、前記筒状体にお
ける一方の前記開口部の中に前記細胞部分を入れて前記
筒状体を前記基板上に設置し、 前記基板と前記筒状体とにより形成される容器内に前記
細胞中に存在する試料を溶出する溶液を注入し、 前記溶液中に溶出した前記試料を採取することを特徴と
する細胞単離方法。 - 【請求項３】 基板上に載置され細胞を有する標本に対
してレーザビームを照射して前記細胞部分以外の不要な
前記標本部分を変質し、 両端に各開口部を有する筒状体を用い、前記筒状体にお
ける一方の前記開口部の中に前記細胞部分を入れて前記
筒状体を前記基板上に設置し、 前記基板と前記筒状体とにより形成される容器内に剥離
剤を注入して前記細胞部分を前記基板から剥離し、 前記剥離剤中に浮遊する前記細胞部分を採取することを
特徴とする細胞単離方法。 - 【請求項４】 基板上に載置され細胞を有する標本に対
してレーザビームを照射して前記細胞部分以外の不要な
前記標本部分を変質し、 両端に各開口部を有する筒状体を用い、前記筒状体にお
ける一方の前記開口部の中に前記細胞部分を入れて前記
筒状体を前記基板上に設置し、 前記基板と前記筒状体とにより形成される容器内に前記
細胞中に存在する試料を溶出する溶液を注入し、 前記溶液中に溶出した前記試料を採取することを特徴と
する細胞単離方法。 - 【請求項５】 不要な前記標本部分に照射して前記標本
部分を前記基板上から取り除く前記レーザビームのエネ
ルギは、不要な前記標本部分を前記基板から完全に吹き
飛ばす程度に設定されることを特徴とする請求項１又は
２記載の細胞単離方法。 - 【請求項６】 不要な前記標本部分を前記基板上から取
り除く前記レーザビームのエネルギは、不要な前記標本
部分を焼く又は破砕する程度に設定されることを特徴と
する請求項１又は２記載の細胞単離方法。 - 【請求項７】 不要な前記標本部分に前記レーザビーム
を照射して前記標本部分を前記基板から取り除く場合、
前記標本に向ってエアーを吹き付けて前記標本から飛び
散る破片を飛ばし、かつ前記標本から飛ばされた前記破
片を吸引することを特徴とする請求項１又は２記載の細
胞単離方法。 - 【請求項８】 前記剥離剤は、キシレンなどの有機溶媒
であることを特徴とする請求項１又は３項記載の細胞単
離方法。 - 【請求項９】 前記剥離剤中に浮遊する前記細胞の採取
は、前記剥離剤中の前記細胞をスポイト、ピペット又は
シリンジなどにより吸引し、 前記基板と前記筒状体とにより形成される容器とは別の
容器内に前記スポイト、前記ピペット又は前記シリンジ
などの中の前記細胞を移し替えることを特徴とする請求
項１又は３項記載の細胞単離方法。 - 【請求項１０】 前記溶液中に溶出した前記試料の採取
は、前記溶液中の前記試料をスポイト、ピペット又はシ
リンジなどにより吸引し、 前記基板と前記筒状体とにより形成される容器とは別の
容器内に前記スポイト、前記ピペット又は前記シリンジ
などの中の前記細胞を移し替えることを特徴とする請求
項１又は３項記載の細胞単離方法。 - 【請求項１１】 前記溶液により前記試料として少なく
ともＤＮＡ、ＲＮＡ又は蛋白を前記細胞から抽出するこ
とを特徴とする請求項１又は３項記載の細胞単離方法。 - 【請求項１２】 前記レーザビームの波長は、紫外領域
に設定されたことを特徴とする請求項１乃至４のうちい
ずれか１項記載の細胞単離方法。 - 【請求項１３】 前記筒状体は、ガラス、金属又はプラ
スチックからなることを特徴とする請求項１乃至４のう
ちいずれか１項記載の細胞単離方法。 - 【請求項１４】 前記筒状体は、一方の前記開口部に樹
脂により形成された薄膜を貼り付けたことを特徴とする
請求項１乃至４のうちいずれか１項記載の細胞単離方
法。 - 【請求項１５】 前記筒状体は、前記基板上に液密に立
設されることを特徴とする請求項１乃至４のうちいずれ
か１項記載の細胞単離方法。 - 【請求項１６】 前記筒状体は、前記基板上に接着剤に
より固定されることを特徴とする請求項１乃至４のうち
いずれか１項記載の細胞単離方法。 - 【請求項１７】 前記筒状体は、前記基板との間を前記
基板上に塗布されたグリースなどにより塞ぐことを特徴
とする請求項１乃至４のうちいずれか１項記載の細胞単
離方法。 - 【請求項１８】 前記標本に蛍光色素を塗布して前記細
胞を染色し、 前記標本に紫外光を照射して前記染色された前記細胞の
前記蛍光色素を発光させ、 前記発光した前記細胞を観察して前記採取する前記細胞
を決定することを特徴とする請求項１乃至４のうちいず
れか１項記載の細胞単離方法。 - 【請求項１９】 標本の像を拡大する顕微鏡とレーザビ
ームを出力するレーザヘッドとは、前記顕微鏡の光軸と
前記レーザヘッドから出力される前記レーザビームの光
軸とを一致して設け、 前記レーザヘッドから出力される前記レーザビームの光
軸と同軸上に指標用の光を指標用光源から出力し、 前記顕微鏡により拡大された前記標本像及び前記標本上
に照射された前記指標用の光を撮像装置により撮像して
前記標本像及び前記指標用の光を表示装置により表示
し、 前記表示装置に表示された前記標本像及び前記指標用の
光を観察しながら前記レーザビームを前記標本上に走査
し、採取したい前記細胞部分以外の不要な前記標本部分
を前記基板から取り除く、又は採取したい前記細胞部分
以外の不要な前記標本部分を変質することを特徴とする
請求項１乃至４のうちいずれか１項記載の細胞単離方
法。 - 【請求項２０】 不要な前記標本部分を変質する前記レ
ーザビームのエネルギは、不要な前記標本部分を前記基
板から取り除くときのレーザビームのエネルギよりも低
く設定されることを特徴とする請求項３又は４記載の細
胞単離方法。 - 【請求項２１】 前記レーザビーム径は変更可能であ
り、不要な前記標本部分を変質する場合、 前記細胞部分に隣接する不要な前記標本部分に照射する
前記レーザビーム径を前記細胞部分の大きさよりも小さ
い第１の径に設定し、 前記細胞部分から所定距離だけ離れた不要な前記標本部
分に照射する前記レーザビーム径を前記第１の径よりも
大きな第２の径に設定することを特徴とする請求項２記
載の細胞単離方法。 - 【請求項２２】 前記レーザビーム径は変更可能であ
り、不要な前記標本部分を変質する場合、 前記細胞部分に隣接する不要な前記標本部分に照射する
前記レーザビーム径を前記細胞部分の大きさよりも小さ
い第１の径に設定し、 前記細胞部分から所定距離だけ離れた不要な前記標本部
分に照射する前記レーザビーム径を前記第１の径よりも
大きな第２の径に設定されることを特徴とする請求項３
記載の細胞単離方法。 - 【請求項２３】 基板上に載置され細胞を有する標本に
対して紫外光を照射して前記細胞部分以外の不要な前記
標本部分を変質し、 両端に各開口部を有する筒状体を用い、前記筒状体にお
ける一方の前記開口部の中に前記細胞部分を入れて前記
筒状体を前記基板上に設置し、 前記基板と前記筒状体とにより形成される容器内に剥離
剤を注入して前記細胞部分を前記基板から剥離し、 前記剥離剤中に浮遊する前記細胞部分を採取することを
特徴とする細胞単離方法。 - 【請求項２４】 基板上に載置され細胞を有する標本に
対して紫外光を照射して前記細胞部分以外の不要な前記
標本部分を変質し、 両端に各開口部を有する筒状体を用い、前記筒状体にお
ける一方の前記開口部の中に 前記細胞部分を入れて前
記筒状体を前記基板上に設置し、 前記基板と前記筒状体とにより形成される容器内に前記
細胞中に存在する試料を溶出する溶液を注入し、 前記溶液中に溶出した前記試料を採取することを特徴と
する細胞単離方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2003014385A JP3820227B2 (ja) | 2002-01-23 | 2003-01-23 | 細胞単離方法 |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2002-14643 | 2002-01-23 | ||
| JP2002014643 | 2002-01-23 | ||
| JP2003014385A JP3820227B2 (ja) | 2002-01-23 | 2003-01-23 | 細胞単離方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2003284549A true JP2003284549A (ja) | 2003-10-07 |
| JP3820227B2 JP3820227B2 (ja) | 2006-09-13 |
Family
ID=29253123
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2003014385A Expired - Fee Related JP3820227B2 (ja) | 2002-01-23 | 2003-01-23 | 細胞単離方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3820227B2 (ja) |
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007532918A (ja) * | 2004-04-16 | 2007-11-15 | チュー，ウェイシン | 組織標本からの生体分子抽出装置 |
| JP2008000008A (ja) * | 2006-06-20 | 2008-01-10 | Seiko Instruments Inc | 細胞剥離方法 |
| JP2008046135A (ja) * | 2006-08-11 | 2008-02-28 | Molecular Machines & Industries Ag | 標本を切断し、切り分けた標本を採集する方法および装置 |
| JP2014502509A (ja) * | 2010-12-28 | 2014-02-03 | サニゲン カンパニー，リミテッド | 非接触分割システムを使用して固体表面から微生物試料を収集する方法及び固体表面を分割する装置 |
| WO2015151301A1 (ja) * | 2014-03-31 | 2015-10-08 | 三菱マテリアル株式会社 | サンプリング位置表示装置、サンプリング方法 |
| JP2016522900A (ja) * | 2013-05-15 | 2016-08-04 | コーニンクレッカ フィリップス エヌ ヴェＫｏｎｉｎｋｌｉｊｋｅ Ｐｈｉｌｉｐｓ Ｎ．Ｖ． | 試料からの組織分離 |
| WO2020003883A1 (ja) * | 2018-06-29 | 2020-01-02 | 株式会社片岡製作所 | 細胞処理装置および細胞のレーザ処理方法 |
| US11499129B2 (en) | 2017-02-13 | 2022-11-15 | Kataoka Corporation | Cell treatment apparatus |
| US11499133B2 (en) | 2017-02-13 | 2022-11-15 | Kataoka Corporation | Cell treatment apparatus and method for treating object to be treated |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP5162738B2 (ja) * | 2008-06-18 | 2013-03-13 | 学校法人東京医科大学 | 生細胞、生細胞内の構造物等の単離及び採取方法 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH06213789A (ja) * | 1992-09-29 | 1994-08-05 | F Hoffmann La Roche Ag | 細胞学的物質の顕微鏡スライドへの付着、染色のための装置 |
| JPH11148887A (ja) * | 1997-11-17 | 1999-06-02 | Japan Science & Technology Corp | 生体サンプルの切断方法および切断片回収方法、 並びにそのための装置 |
| JP2000504824A (ja) * | 1996-02-05 | 2000-04-18 | ペー・アー・エル・エム・ゲーエムベーハー | レーザー照射を用いる平坦に配置される生物学的対象への非接触顕微注射、分別及び採取方法並びに装置 |
| JP2001091418A (ja) * | 1999-09-21 | 2001-04-06 | Olympus Optical Co Ltd | Ｌｃｍ用標本 |
| JP2002532680A (ja) * | 1998-12-10 | 2002-10-02 | ザ ガバメント オブ ザ ユナイテッド ステイツ オブ アメリカ， リプリゼンテッド バイ ザ セクレタリー オブ ザ デパートメント オブ ヘルス アンド ヒューマン サービシーズ | 非接触レーザーキャプチャ顕微解剖のための設計 |
-
2003
- 2003-01-23 JP JP2003014385A patent/JP3820227B2/ja not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH06213789A (ja) * | 1992-09-29 | 1994-08-05 | F Hoffmann La Roche Ag | 細胞学的物質の顕微鏡スライドへの付着、染色のための装置 |
| JP2000504824A (ja) * | 1996-02-05 | 2000-04-18 | ペー・アー・エル・エム・ゲーエムベーハー | レーザー照射を用いる平坦に配置される生物学的対象への非接触顕微注射、分別及び採取方法並びに装置 |
| JPH11148887A (ja) * | 1997-11-17 | 1999-06-02 | Japan Science & Technology Corp | 生体サンプルの切断方法および切断片回収方法、 並びにそのための装置 |
| JP2002532680A (ja) * | 1998-12-10 | 2002-10-02 | ザ ガバメント オブ ザ ユナイテッド ステイツ オブ アメリカ， リプリゼンテッド バイ ザ セクレタリー オブ ザ デパートメント オブ ヘルス アンド ヒューマン サービシーズ | 非接触レーザーキャプチャ顕微解剖のための設計 |
| JP2001091418A (ja) * | 1999-09-21 | 2001-04-06 | Olympus Optical Co Ltd | Ｌｃｍ用標本 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 組織培養工学, vol. Vol. 27(2), JPNX006013940, 2001, pages 72 - 75, ISSN: 0000727074 * |
| 組織培養工学, vol. Vol. 27(2), JPNX006026011, 2001, pages 72 - 75, ISSN: 0000747037 * |
Cited By (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2007532918A (ja) * | 2004-04-16 | 2007-11-15 | チュー，ウェイシン | 組織標本からの生体分子抽出装置 |
| JP2008000008A (ja) * | 2006-06-20 | 2008-01-10 | Seiko Instruments Inc | 細胞剥離方法 |
| JP2008046135A (ja) * | 2006-08-11 | 2008-02-28 | Molecular Machines & Industries Ag | 標本を切断し、切り分けた標本を採集する方法および装置 |
| JP2014502509A (ja) * | 2010-12-28 | 2014-02-03 | サニゲン カンパニー，リミテッド | 非接触分割システムを使用して固体表面から微生物試料を収集する方法及び固体表面を分割する装置 |
| JP2016522900A (ja) * | 2013-05-15 | 2016-08-04 | コーニンクレッカ フィリップス エヌ ヴェＫｏｎｉｎｋｌｉｊｋｅ Ｐｈｉｌｉｐｓ Ｎ．Ｖ． | 試料からの組織分離 |
| JP2015194381A (ja) * | 2014-03-31 | 2015-11-05 | 三菱マテリアル株式会社 | サンプリング位置表示装置、サンプリング方法 |
| WO2015151301A1 (ja) * | 2014-03-31 | 2015-10-08 | 三菱マテリアル株式会社 | サンプリング位置表示装置、サンプリング方法 |
| US10330572B2 (en) | 2014-03-31 | 2019-06-25 | Mitsubishi Materials Corporation | Sampling location displaying apparatus and sampling method |
| US11499129B2 (en) | 2017-02-13 | 2022-11-15 | Kataoka Corporation | Cell treatment apparatus |
| US11499133B2 (en) | 2017-02-13 | 2022-11-15 | Kataoka Corporation | Cell treatment apparatus and method for treating object to be treated |
| WO2020003883A1 (ja) * | 2018-06-29 | 2020-01-02 | 株式会社片岡製作所 | 細胞処理装置および細胞のレーザ処理方法 |
| JP2020000169A (ja) * | 2018-06-29 | 2020-01-09 | 株式会社片岡製作所 | 細胞処理装置および細胞のレーザ処理方法 |
| US11560540B2 (en) | 2018-06-29 | 2023-01-24 | Kataoka Corporation | Cell treatment apparatus and method for treating cells with lasers |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3820227B2 (ja) | 2006-09-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US7148966B2 (en) | Automated laser capture microdissection | |
| US9279749B2 (en) | Laser microdissection method and apparatus | |
| EP2290424B1 (en) | Fluorescence image producing method, fluorescence image producing apparatus, and fluorescence image producing program | |
| WO2012091056A1 (ja) | 血液中の標的細胞の検査方法、標的細胞検索装置、及びバイオチップ | |
| US9719894B2 (en) | Specimen collector for collecting a laser micro-dissectate | |
| US20020090122A1 (en) | Road map image guide for automated microdissection | |
| JP3820227B2 (ja) | 細胞単離方法 | |
| US8797644B2 (en) | Capillary-based cell and tissue acquisition system (CTAS) | |
| US20080176307A1 (en) | Method of isolating cell or sample to be analyzed in cell | |
| US7456938B2 (en) | Laser microdissection on inverted polymer films | |
| JP7287427B2 (ja) | 細胞吸引支援装置および細胞吸引支援装置の制御方法 | |
| JP3924870B2 (ja) | 有形成分分析装置及び有形成分分析方法 | |
| WO2019097873A1 (ja) | 組織切片の特定領域からの生体分子採取方法および装置 | |
| JP2000206011A (ja) | 微細物体の自動採取装置および採取方法 | |
| JP6685387B2 (ja) | 細胞検出方法 | |
| JP2007010685A (ja) | 有形成分分析装置及び有形成分分析方法 | |
| JP3582390B2 (ja) | 微細物体の自動探索装置 | |
| JP2000232873A (ja) | 培養器に付着する細胞の分離装置および分離方法 | |
| JP2001208982A (ja) | 微細物体の操作方法 | |
| JP2001041928A (ja) | 試料成分分離装置 | |
| JP2023502971A (ja) | レーザ捕捉顕微解剖装置、システム、および、方法 | |
| JP2023017601A (ja) | 支援システム、支援方法、情報処理装置、及びプログラム |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20060404 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20060522 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20060613 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20060616 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090623 Year of fee payment: 3 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100623 Year of fee payment: 4 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110623 Year of fee payment: 5 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120623 Year of fee payment: 6 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |