JP2016522900A - 試料からの組織分離 - Google Patents
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Abstract
Description
(a)試料−ROIにて開口部を有するカバーシートの生成、
(b)ステップ(a)の前、間、又は後で行うことができる、試料への上記カバーシートの適用、
を含む。
− 扱いにくい手作業による手順
− スライドからの試料材料の不正確な選択
− 手作業による手順による汚染のリスク
− 不正確な選択による誤診のリスク
− 選択された材料の証拠文献の欠如
− 標準化及び再現性の欠如。
− 試料−ROIにて開口部24を有するカバーシート20を提供する「構造化ユニット」410、
− 上記の開口部24を介して試料−ROIから試料材料を除去する除去ユニット420、
を含む。
(i)高粘度の材料を加熱するステップ、
(ii)低粘度の前駆材料を使用し、プリント後にそれを変えるステップ、又は
(iii)低粘度の溶媒において材料の溶液を作製し、プリント後にその溶媒を除去するステップ、
において達成することができる。
記載されるアプローチを、QiagenのアッセイmiRNeasy FFPEによるRNA抽出を使用した、FFPE癌細胞SKBR3からのmRNAの選択的抽出に対する実験において試験した。以下のプロトコル:すなわち、
− 4つの切片の4μm厚のホルマリン固定パラフィン包埋SKBR3細胞のブロックからのカット、
− 脱パラフィン:3×キシレン 8分;100%EtOH 5分&30秒
− 開口部を含有する黒いテープ(Metamark E−series,UK)の適用
− 黒いテープの上でハイブリダイゼーションチャンバの適用、
− 抽出:100μl/試料への240μl PKD+50μl プロテイナーゼKの注入、チャンバの閉鎖;60℃にて15分、次に、80℃にて15分維持、
− ハイブリダイゼーションチャンバから流体の取出し、及び、100μl PKDの添加
− RNA精製、cDNA反応及びPCR
を適用した。
Claims (14)
- 生物学的試料における試料−ROIと呼ばれる関心のある領域からの材料の分離に対する試料分離装置であって、前記試料−ROIにて開口部を有するカバーシートを提供する構造化ユニットを含み、前記開口部を介して、試料材料を前記試料−ROIから除去することができる、試料分離装置。
- 生物学的試料における試料−ROIと呼ばれる関心のある領域からの材料の分離に対する方法であって、
(a)前記試料−ROIにて開口部を有するカバーシートが生成されるステップ、
(b)ステップ(a)の前、間又は後で、前記試料へ前記カバーシートが適用されるステップ、
(c)試料材料が、前記カバーシートの前記開口部を介して前記試料−ROIから除去されるステップ、
を含む方法。 - 前記カバーシートは、1つの側に接着剤を含む、請求項1に記載の試料分離装置、又は、請求項2に記載の方法。
- 前記開口部は、カッティングによって及び/又はリソグラフィーによって生成される、請求項1に記載の試料分離装置、又は、請求項2に記載の方法。
- 前記開口部を有するカバーシートは、特にプリント又はプロットプロセスにおいて、材料を堆積させることによって逐次的に積層される、請求項1に記載の試料分離装置、又は、請求項2に記載の方法。
- 堆積される前記材料は、特に、加熱、冷却、放射線への曝露及び/又は試薬への曝露によって、堆積後に物理的及び/又は化学的に変えられる、請求項5に記載の試料分離装置又は方法。
- 前記試料は、キャリアの上、特に顕微鏡スライドガラスの上に配置される、請求項1に記載の試料分離装置、又は、請求項2に記載の方法。
- 前記試料−ROIでの前記試料材料は、加熱される、冷却される、試薬、特に緩衝液等の溶液へ曝露される、及び/又は、溶解される、請求項1に記載の試料分離装置、又は、請求項2に記載の方法。
- カバーが、前記開口部の上に配置される、請求項1に記載の試料分離装置、又は、請求項2に記載の方法。
- アクチュエータが、電磁放射、熱及び/又は超音波等のエネルギーを前記試料に加えるために提供される、請求項1に記載の試料分離装置、又は、請求項2に記載の方法。
- 前記試料−ROIは、前記試料に関する画像、特に、前記試料自体の画像、又は、前記試料と同じ材料から生成されるさらなる試料の画像における画像−ROIと呼ばれる関心のある領域から得られる、請求項1に記載の試料分離装置、又は、請求項2に記載の方法。
- 前記試料−ROIの誘導、及び/又は、前記画像−ROIの選択は、前記カバーシートの構造化の能力を考慮に入れながら実行される、請求項11に記載の試料分離装置又は方法。
- 前記試料の画像が、前記試料−ROIからの試料材料の除去の前及び/又は後で生成される、請求項1に記載の試料分離装置、又は、請求項2に記載の方法。
- 分子アッセイが、前記試料−ROIから得られた試料材料を用いて実行される、請求項1に記載の試料分離装置、又は、請求項2に記載の方法。
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