JP2003121344A5 - - Google Patents

Description

こうしたＤＮＡの２重鎖構造の安定性を示す指標値である融解温度（以下「Ｔｍ値」という）の測定は、一般に次のような手順で行われる。ＤＮＡが２本鎖から１本鎖に変化すると、波長２６０ｎｍ付近の紫外光の吸光度が上昇する。そこで、ＤＮＡ溶液を低温度から徐々に加温しつつ、又は逆に高温度から徐々に冷却しつつ所定の紫外波長での吸光度を紫外可視分光光度計を用いて繰り返し測定し、横軸を温度、縦軸を吸光度とした図４に示すような熱融解曲線を作成する。そして、その熱融解曲線に基づいて（通常、吸光度上昇の中点をとって）Ｔｍ値を求める。

測光部１にあっては、光源２から発した光は分光器３に入射され、ここで所望の波長を有する単色光が取り出される。ここで波長としては、２３０〜２８０ｎｍ位の範囲内の紫外光が利用されることが多い。この単色光は反射鏡４によりセクタ鏡５に送られ、セクタ鏡５により試料側光束Ｓと対照側光束Ｒの２光束に分割される。また、セクタ鏡５には光の遮蔽部が設けられており、試料側光束Ｓ及び対照側光束Ｒの発生期間と交互に遮光期間が発生するようにしている。試料側光束Ｓは反射鏡６を介して、試料ユニット３０に備えられたマルチセル３２のうちの１つのセルに照射され、そのセルを通過した光は反射鏡８、１０を介して光検出器１１の受光面に送られる。他方、対照側光束Ｒは反射鏡７を介して試料ユニット３０内のアパーチャ板３１に照射され、アパーチャ板３１を通過することによって試料側と光束径が揃えられ、その光が反射鏡９を介して同じく光検出器１１の受光面に送られる。なお、アパーチャ板３１の代わりにダミーのセルを配置してもよい。