JP3551917B2

JP3551917B2 - 反応容器及びそれを用いる反応装置

Info

Publication number: JP3551917B2
Application number: JP2000362587A
Authority: JP
Inventors: 伸中村
Original assignee: Shimadzu Corp
Current assignee: Shimadzu Corp
Priority date: 2000-11-29
Filing date: 2000-11-29
Publication date: 2004-08-11
Anticipated expiration: 2020-11-29
Also published as: JP2002159285A

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、一対の板状部材を貼り合わせてなる反応容器と、その反応容器を用いて遺伝子増幅反応を行なわせるための反応装置に関するものである。
そのような反応容器は遺伝子増幅反応を含む化学反応一般に用いられ、また、反応装置は生化学分野や臨床分野において使用され、特にＤＮＡ（デオキシリボ核酸）解析分野においてサンプルの増幅のために使用される。
【０００２】
【従来の技術】
ＤＮＡを増幅する方法として、ＰＣＲ（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ）法がある。ＰＣＲ法では、ＤＮＡ鎖の熱変性、プライマーの結合及びＤＮＡポリメラーゼによる相補鎖の合成を繰り返し行なうことによってＤＮＡの増幅を行なう。
ＰＣＲ法を用いてＤＮＡを増幅する反応装置として種々のものが提案されている。例えば、ガラスキャピラリー反応容器を用いるＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒｓｙｓｔｅｍ（Ｒｏｃｈｅ社（スイス国）の製品）や、平薄キュベット型反応容器を用いるＩ−ＣＯＲＥＭｏｄｕｌｅ／ＳｍａｒｔＣｙｃｌｅｒｓｙｓｔｅｍ（Ｃｅｐｈｅｉｄ社（米国）の製品）などがある。
【０００３】
また、基板の表面に溝を形成し、その溝をカバープレートで覆うことによりチャンネル（流路）を形成し、基板又はカバープレートのチャンネルの両端に対応する位置にチャンネルに達する穴をリザーバとして形成したマイクロチップを用い、１つのリザーバ内でＰＣＲを行なわせ、ＰＣＲ産物を電気泳動によりチャンネル内に注入して分離検出する方法が提案されている（Julia Khandurina et al./ Anal. Chem., 2000, 72(13), 2995-3000 文献参照）。ＰＣＲを行なわせるリザーバの容量は１０〜２０μＬである。
従来、多数のサンプルを取り扱う反応容器として、容量が１００〜１０００μＬ程度のウエルがプラスチック製の基板の一表面に多数設けられたマイクロタイタープレート（ＭＴＰ）が用いられている。ＭＴＰとしては、ウエルが９ｍｍピッチで１２×８個形成された９６穴ＭＴＰや、ウエルが４.５ｍｍピッチで２４×１６個形成された３８４穴ＭＴＰなどが用いられる。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】
上記の従来技術の場合、ＰＣＲ法を行なうために２０μＬ程度の反応ボリュームが必要である。ＤＮＡ分析、特にＤＮＡシーケンスの場合、分析ランニングコストの大半はサンガー反応ＰＣＲ試薬であり、ＰＣＲに要する反応ボリュームを下げることが望まれている。
本発明の第１の目的は、ＰＣＲなどの遺伝子増幅反応を含む化学反応一般の反応ボリュームを低減できるとともに、一次元又は二次元に並ぶ複数のウエルに溶液を同時に分注するための分注器具など、ＭＴＰ用として用いられている機器を適用することのできる反応容器を提供することである。
本発明の第２の目的は、本発明にかかる反応容器を用いて遺伝子増幅反応を行なうことができる反応装置を提供することである。
【０００５】
【課題を解決するための手段】
本発明にかかる反応容器は、一対の板状部材を備え、少なくとも一方の板状部材の表面に複数の溝が形成され、一方の板状部材には上記溝の両端に対応する位置に貫通孔が形成され、これらの板状部材が溝を内側にして貼り合わされて上記溝により反応を行なわせるための空間を形成しており、前記貫通孔の同一ライン上の配置は、マイクロタイタープレートフォーマットのピッチの整数（１以上)分の１となっているものである。
ここでＭＴＰフォーマットとは、ＭＴＰのウエルの配列をいう。
【０００６】
一対の板状部材が貼り合わされて形成される流路（チャンネルとも言う）は、半導体フォトリソグラフィー技術及びエッチング技術やマイクロマシニング技術などを用いることにより、小容量に形成することができる。そのチャンネル内でＰＣＲ法などの遺伝子増幅反応を行なうことにより、遺伝子増幅反応の反応ボリュームを下げることができる。また、一方の板状部材に形成された貫通孔は、チャンネル内に溶液を注入したり、溶液を収容したりするためのリザーバとして用いられる。
本発明にかかる反応容器の用途は遺伝子増幅反応に限定されるものではなく、化学反応一般に用いることができ、化学反応の反応ボリュームを下げることができる。
また、本発明にかかる反応容器を構成する貫通孔の同一ライン上の配置をＭＴＰフォーマットのピッチの１／ｎ（ｎは１以上の整数）にしたので、一次元又は二次元に並ぶ複数のウエルに溶液を同時に分注するための分注器具など、ＭＴＰ用として用いられている機器を本発明にかかる反応容器に適用することができるようになる。
【０００７】
本発明にかかる反応装置は、上記反応容器を保持するための反応容器保持部と、上記反応容器を予め設定された恒温又は温度サイクルで温調する温調機構とを備えたものである。
【０００８】
上記反応容器を反応容器保持部に保持し、上記反応容器の流路内に遺伝子増幅用の反応溶液を注入した後、又は予め流路内に遺伝子増幅用の反応溶液を注入した上記反応容器を反応容器保持部に保持した後、温調機構により反応容器の流路内を注入された反応溶液に応じて予め設定された恒温又は温度サイクルで温調することにより、上記反応容器の流路内で遺伝子増幅反応を行なわせる。
【０００９】
本発明にかかる反応容器及び反応装置は、予め設定された恒温で増幅反応を行なわせるＬＡＭＰ法やＩＣＡＮ法、ＩＮＶＡＤＥＲ法、ＲＣＡＴ法、又は予め設定された温度サイクルで増幅反応を行なわせるＰＣＲ法など、種々の遺伝子増幅法に適用されるものである。
【００１１】
本発明にかかる反応容器において、貫通孔の配置に対応し、貫通孔に嵌合される突起部分を備えた蓋部材をさらに備えていることが好ましい。その結果、反応溶液の蒸発を抑制することができる。
【００１２】
本発明にかかる反応装置において、遺伝子増幅反応に必要な試薬を収容する試薬保持部と、試薬保持部に収容された試薬を反応容器の貫通孔に分注する試薬分注機構とをさらに備えていることが好ましい。その結果、反応容器を反応容器保持部に設置した後、自動で遺伝子増幅反応を行なうことができるようになる。
【００１３】
チャンネル内の反応溶液を取り出す際、チャンネルの一端側の貫通穴に希釈液を満たした後、遠心機を用いて希釈液をチャンネル内に注入し、希釈液を注入した貫通穴とは反対側の貫通孔にチャンネル内の反応溶液を出す方法が考えられる。
そこで、本発明にかかる反応装置において、分注機構は貫通孔に希釈液を分注する機能をさらに備えていることが好ましい。その結果、貫通穴に希釈液を注入するまでの工程を自動化することができる。
【００１４】
反応容器の流路内のサンプルを光学的に検出モニターする光学的モニター機構をさらに備えていることが好ましい。その結果、流路内の遺伝子増幅反応のリアルタイムモニターが実現可能となる。
【００１５】
【発明の実施の形態】
図１は反応容器の一実施例を示す図であり、（Ａ）は平面図、（Ｂ）は（Ａ）のＢ−Ｂ位置を示す断面図、（Ｃ）は（Ａ）のＣ−Ｃ位置を拡大して示す断面図である。
反応容器（以下、反応容器チップという）１は、例えばホウケイ酸、石英ガラス、又はポリジメチルシロキサンなどの樹脂からなる一対の板状基板１ａ，１ｂにより構成される。基板１ａ，１ｂの寸法は、例えば長さＬが１０〜１５０ｍｍ、幅Ｗが６０〜１５０ｍｍ、厚さＨが１.１〜３ｍｍである。
【００１６】
一方の基板１ｂの表面に半導体フォトリソグラフィー技術及びエッチング技術や、鋳型形成などのマイクロマシニング技術により、複数のチャンネル３が互いに平行に形成されている。チャンネル３の寸法は、例えば長さＬｃが５０〜１００ｍｍ、幅Ｗｃが５０〜５００μｍ、深さＤが２０〜１００μｍである。チャンネル３は、隣り合うチャンネル３，３をチャンネル３の長さ方向に交互にずらしてちどり状に配置されている。
【００１７】
他方の基板１ａにはチャンネル３の両端に対応する位置に貫通孔がリザーバ５として設けられている。基板１ａの幅方向の同一ライン上に並ぶリザーバ５，５の間隔Ｐは、現行ＭＴＰフォーマットのピッチの１／ｎ（ｎは整数）に形成されている。ＭＴＰフォーマットのピッチは４.５ｍｍ又は９.０ｍｍであり、間隔Ｐは、例えばｎが１のとき４.５ｍｍ又は９.０ｍｍ、ｎが２のとき２.２５ｍｍ又は４.５ｍｍ、ｎが３のとき１.５ｍｍ又は３.０ｍｍ、ｎが４のとき１.１２５ｍｍ又は２.２５ｍｍ、ｎが５のとき０.９ｍｍ又は１.８ｍｍ、ｎが６のとき０.７５ｍｍ又は１.５ｍｍ、ｎが９のとき０.５ｍｍ又は１ｍｍ、ｎが１０のとき０.４５ｍｍ又は０.９ｍｍである。リザーバ５の寸法は、例えば直径が０.２〜３ｍｍである。
反応容器チップ１は、両基板１ａ，１ｂを（Ｂ）及び（Ｃ）に示すように重ねて接合した状態で使用される。
【００１８】
この実施例において、チャンネル３の最小体積は、チャンネル３の寸法が長さＬｃ＝５０ｍｍ、幅Ｗｃ＝５０μｍ、深さＤ＝２０μｍのときで０．０５μＬである。チャンネル３の最大体積は、チャンネル３の寸法が長さＬｃ＝１００ｍｍ、幅Ｗｃ＝５００μｍ、深さＤ＝１００μｍのときで５μＬである。
リザーバ５の最小体積は、基板１ａの厚さＨが１．１ｍｍのときで０．９ｍＬである。リザーバ５の最大体積は、基板１ａの厚さＨが３ｍｍのときで２１ｍＬである。
【００１９】
図２は、反応容器チップ１の蓋部材を示す側面図である。
蓋部材７は、例えばポリプロピレン、ポリエチレンなどの樹脂や、シリコーン樹脂などのエラストマーによって形成され、反応容器チップ１の基板１ａの長さ寸法及び幅寸法をもつ板状部分７ａと、リザーバ５の配置に対応して板状部分７ａに設けられた突起部分７ｂにより構成されている。蓋部材７は突起部分７ｂを対応するリザーバ５にそれぞれ嵌合して使用され、リザーバ５を密閉する。
【００２０】
図３は、反応装置の一実施例を示す概略斜視図である。
装置本体９の上部に、反応容器チップ１を収容する反応チャンバー（反応容器保持部）１１が設けられている。反応容器チップ１は基板１ａを上方にしてチャンバー１１内に設置される。装置本体９の上部には開閉可能なカバー１３が設けられている。装置の運転時には、カバー１３が装置本体８に密着して閉じられ、反応チャンバー１１内に収容された反応容器チップ１は外部から遮断される。反応チャンバー１１の底面に対向して、装置本体９内部にペルチェ素子などの温調機構（図示は省略）が設けられている。装置本体９の前面１５には、温度変化を表示する表示部や、恒温設定や温度変化プログラムを入力するための設定入力キーなどが配置されている。
【００２１】
図４は、図３の反応装置に隣接して設けられるディスペンサー（試薬分注機構）を一部断面で示す概略斜視図である。このディスペンサーは本発明にかかる反応装置を構成するものである。
ディスペンサー１７は、溶液の吸引吐出を行なうためのシリンジ１７ａと、使い捨て式であり、先端が溶液内に進入するノズル１７ｂと、シリンジ１７とノズル１７ｂの基端部とを接続するチューブ１７ｃにより構成されている。ノズル１７ｂは移動機構（図示は省略）により、３次元方向に移動される。ノズル１７ｂの移動範囲内に、ＤＮＡサンプルを収容するサンプル容器１９ａ、ＰＣＲ用のサンガー反応Ｐｒｅ−ｍｉｘ溶液を収容するＰｒｅ−ｍｉｘ容器１９ｂ、プライマー溶液を収容するプライマー容器１９ｃ、及び希釈液としてのシーケシング用ローディングバッファ又はＭｉｌｌｉ−Ｑ水を収容する希釈液容器１９ｄが試薬保持部１９に配置されている。図４では図示は省略するが、ノズル１７ｂの移動範囲には、反応容器チップ１のリザーバ５も含まれる。
【００２２】
次に、図１から図４を用いて図３及び図４に示す実施例の動作を説明する。
反応チャンバー１１に反応容器チップ１を収容した後、ディスペンサー１７を駆動させて、Ｐｒｅ−ｍｉｘ溶液、プライマー溶液、ＤＮＡサンプルの順に所定量をノズル１７ｂ内に吸い上げる。
ノズル１７ｂを移動させ、吸引したＰｒｅ−ｍｉｘ溶液、プライマー溶液及びＤＮＡサンプルの混合溶液からなる反応溶液をチャンネル３の一端側のリザーバ５底面に吐出する。リザーバ５内に注入された反応溶液は、毛細管現象によりチャンネル３内に導入される。同様にして、各チャンネル３の一端側のリザーバ５に反応溶液を分注する。
【００２３】
ここでは、１種類のＤＮＡサンプルしか用意していないが、試薬保持部１９に複数のＤＮＡサンプルが配置されている場合には、Ｐｒｅ−ｍｉｘ溶液及びプライマー溶液とともに、各サンプルをそれぞれ異なるリザーバ５内に分注する。ノズル１７ｂは使い捨て式であり、サンプルごとにノズル１７ｂを交換して使用する。
また、ノズル１７ｂは使い捨て式であるが、本発明はこれに限定されるものではなく、洗浄ポートを設けてノズル１７ｂを洗浄して繰り返し使用するようにしてもよい。
【００２４】
各チャンネル３の一端側のリザーバ５に反応溶液を分注した後、図２に示す蓋部材７によりすべてのリザーバ５を密閉した後、カバー１３を閉じて反応チャンバー１１を密閉する。
反応装置８により、反応チャンバー１１内を所定の温度サイクルで温調し、ＰＣＲによりＤＮＡサンプルを増幅する。ここでは、ＰＣＲ用のＰｒｅ−ｍｉｘ溶液を用いているので反応チャンバー１１内を所定の温度サイクルで温調しているが、本発明はこれに限定されるものではなく、ＬＡＭＰ法やＩＣＡＮ法、ＩＮＶＡＤＥＲ法、ＲＣＡＴ法など、予め設定された恒温で増幅反応を行なわせる増幅方法を用いる場合には、その方法に適したＰｒｅ−ｍｉｘ溶液を準備し、予め設定された恒温でチャンバー１１内を温調するようにすることができる。
この実施例によれば、チャンネル３内で０．０５〜５μＬの反応ボリュームでＤＮＡの増幅反応を行なわせることができる。
【００２５】
次に、チャンネル内の反応溶液を取り出す操作を説明する。
増幅反応終了後、ディスペンサー１７を駆動させ、希釈液容器１９ｄに収容された希釈液を各チャンネル３の一端側のリザーバ５に分注する。
反応容器チップ１を反応チャンバー１１から取り出し、例えばＭＴＰ遠心機などの遠心機に設置し、図５（Ａ）に示すように穏やかに遠心させる。図５（Ｂ）に示すように、リザーバ５ａ内に分注された希釈液２１（遠心処理前参照）は遠心力によってチャンネル３内に注入される。チャンネル３内の反応溶液２３は希釈液２１によって、もう片側のリザーバ５ｂに押し出され、リザーバ５ｂ内で希釈液によって希釈され、希釈反応溶液２５となる（遠心処理後参照）。
リザーバ５ｂ内の希釈反応溶液２５をディスペンサーなどの吸引機器により吸引して回収する。その後、電気泳動分離などにより、回収した希釈反応溶液２５の解析を行なう。
【００２６】
図６は、反応装置の他の実施例を示す概略構成図である。
反応容器チップ１のチャンネル３を含む領域に励起光を照射し、チャンネル３からの蛍光を検出する光学的モニター機構２７が反応チャンバー１１の底面側に設けられている。
モニター機構２７には、励起光源レーザ装置２９が設けられている。レーザ装置２９としては、例えばアルゴン（Ａｒ）レーザやクリプトン（Ｋｒ）レーザ、ヘリウムネオン（Ｈｅ−Ｎｅ）レーザ、ネオジム（Ｎｄ）−ＹＡＧ（Ｙ_３Ａｌ_５Ｏ_１２）などのＮｄイオン固体レーザ、半導体レーザ（ＬａｓｅｒＤｉｏｄｅ：ＬＤ）、光第２高調波発生（ＳＨＧ）現象を利用した固体レーザなど、種々のレーザ装置を用いることができる。
【００２７】
レーザ装置２９からの励起光の光路にはその励起光を平行光にするビームエキスパンダ３１が設けられている。ビームエキスパンダ３１からの励起光の光路には反射ミラー３３が設けられている。
反射ミラー３３により反射された励起光の光路にはその励起光を広げるレンズ３５が設けられている。レンズ３５からの励起光の光路には、反応チャンバー１１の底面側に配置され、レンズ３５からの励起光を反応容器チップ１の底面側へ反射するダイクロイックミラー３７が設けられている。ダイクロイックミラー３７は励起光を反射し、反応容器チップ１側からの蛍光を透過するような波長特性のものを用いる。
【００２８】
ダイクロイックミラー３７の反応チャンバー１１とは反対側に、分光フィルター３９が設けられている。分光フィルター３９はダイクロイックミラー３７を透過した反応容器チップ１からの蛍光のうち、所定の蛍光波長の光のみを透過するものである。ダイクロイックミラー３７及び分光フィルター３９の仕様は、サンプルの標識に使用する蛍光物質とレーザ装置２９が発振する励起光の波長により決定される。
分光フィルター３９を透過した蛍光の光路にはその蛍光をＣＣＤ（ＣｈａｒｇｅＣｏｕｐｌｅｄＤｅｖｉｃｅ）４３の受光面に結像するためのレンズ４１が設けられている。
ＣＣＤ４３には、ＣＣＤ４３の動作を制御し、ＣＣＤ４３の検出信号を処理するためのＣＰＵ（中央演算処理装置）４５が電気的に接続されている。
【００２９】
モニター機構２７は、増幅反応時に、反応容器チップ１のチャンネル３における、ＰＣＲ産物であるＤＮＡの二重螺旋構造に挟み込まれた蛍光標識を検出することにより、ＰＣＲ産物の量を検出する。これにより、ＰＣＲのリアルタイムモニターが可能になる。
【００３０】
図６のモニター機構２７では励起光源としてレーザ装置を用いているが、他の光源、例えばＬＥＤ（ＬｉｇｈｔＥｍｉｔｔｉｎｇＤｅｖｉｃｅ）を用いてもよい。ＬＥＤの配置は、例えばレンズ３５のダイクロイックミラー３７とは反対側に配置してもよいし、反応チャンバー１１の上方にＬＥＤアレイとして配置してもよい。反応チャンバー１１の上方にＬＥＤを配置する場合、ダイクロイックミラー３７は必要ない。ＬＥＤとしては、例えば発振周波数４８０ｎｍの青色ＬＥＤを用いることができる。ただし、本発明で用いるＬＥＤは青色ＬＥＤに限定されるものではなく、用いる蛍光物質に応じて他の色、すなわち他の波長の光を発光するＬＥＤを用いることができる。
【００３１】
図６のモニター機構２７はチャンネル３からの蛍光を検出しているが、本発明はこれに限定されるものではなく、例えば紫外線吸収によりチャンネル３内の増幅物を検出するなど、チャンネル３内の増幅物を検出できる光学的機構であればどのような機構であってもよい。
【００３２】
上記の実施例では、反応容器チップ１として、厚さが同じ基板１ａ，１ｂを用いているが、本発明はこれに限定されるものではなく、厚さが異なる一対の基板を用いてもよい。
また、上記の実施例では、チャンネル３が形成された基板１ｂとは異なる基板１ａにリザーバ５用の貫通孔を形成しているが、本発明はこれに限定されるものではなく、基板１ｂにリザーバ用の貫通孔を設けてもよい。
【００３３】
上記の実施例では反応容器チップ１は基板１ａにリザーバ５用の貫通孔を形成した後、基板１ａ，１ｂを重ね合わせて形成しているが、本発明はこれに限定されるものではなく、一対の基板を重ね合わせた後、いずれかの基板の、張り合わせた表面とは反対側の表面からチャンネルに到達するリザーバ用の貫通孔を形成してもよい。
また、上記の実施例では反応容器チップ１は基板１ａのみにリザーバ５用の貫通孔を形成しているが、本発明はこれに限定されるものではなく、貫通孔が形成される一方の基板とは異なる他方の基板の、一方の基板と張り合わされる側の表面の貫通孔に対応する位置に凹部を形成し、その凹部及び貫通孔によりリザーバを構成するようにしてもよい。
【００３４】
【発明の効果】
本発明にかかる反応容器は、一対の板状部材を備え、少なくとも一方の板状部材の表面に１又は複数の溝が形成され、一方の板状部材には上記溝の両端に対応する位置に貫通孔が形成され、これらの板状部材が溝を内側にして貼り合わされて上記溝により遺伝子増幅反応を行なわせるための空間を形成してなるものであるので、反応を行なわせるための空間を小容量に形成することができ、反応ボリュームを下げることができる。
【００３５】
また、貫通孔の配置は、ＭＴＰフォーマットのピッチの１／ｎ（ｎは１以上の整数）であるようにしたので、ＭＴＰ用の機器を適用することができる。
【００３６】
本発明にかかる反応容器において、貫通孔の配置に対応し、貫通孔に嵌合される突起部分を備えた蓋部材をさらに備えているようにすれば、反応溶液の蒸発を抑制することができる。
【００３７】
本発明にかかる反応装置は、上記反応容器を保持するための反応容器保持部と、上記反応容器を予め設定された恒温又は温度サイクルで温調する温調機構とを備え、上記反応容器を反応容器保持部に保持し、上記反応容器の流路内に遺伝子増幅用の反応溶液を注入した後、又は予め流路内に遺伝子増幅用の反応溶液を注入した上記反応容器を反応容器保持部に保持した後、温調機構により反応容器の流路内を注入された反応溶液に応じて予め設定された恒温又は温度サイクルで温調するようにしたので、上記反応容器のチャンネル内で遺伝子増幅反応を行なわせることができる。
【００３８】
本発明にかかる反応装置において、遺伝子増幅反応に必要な試薬を収容する試薬保持部と、試薬保持部に収容された試薬を反応容器の貫通孔に分注する試薬分注機構とをさらに備えているようにすれば、反応容器を反応容器保持部に設置した後、自動で遺伝子増幅反応を行なうことができるようになる。
【００３９】
本発明にかかる反応装置において、分注機構は貫通孔に希釈液を分注する機能をさらに備えているようにすれば、遠心機を用いてチャンネル内の反応溶液を取り出す際に、貫通穴に希釈液を注入するまでの工程を自動化することができる。
【００４０】
反応容器の流路内のサンプルを光学的に検出モニターする光学的モニター機構をさらに備えているようにすれば、流路内の遺伝子増幅反応のリアルタイムモニターを行なうことができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】反応容器の一実施例を示す図であり、（Ａ）は平面図、（Ｂ）は（Ａ）のＢ−Ｂ位置を示す断面図、（Ｃ）は（Ａ）のＣ−Ｃ位置を拡大して示す断面図である。
【図２】反応容器チップ１の蓋部材を示す側面図である。
【図３】反応装置の一実施例を示す概略斜視図である。
【図４】同反応装置に隣接して設けられるディスペンサー（試薬分注機構）を一部断面で示す概略斜視図である。
【図５】（Ａ）は遠心処理を示す概略構成図であり、（Ｂ）はリザーバ５に希釈液を分注した後、遠心処理にかける前及びかけた後の反応容器反応容器チップ１内を示す断面図である。
【図６】反応装置の他の実施例を示す概略構成図である。
【符号の説明】
１反応容器チップ
３チャンネル
５リザーバ
７蓋部材
９反応装置本体
１１反応チャンバー
１３カバー
１５反応装置前面
１７ディスペンサー
１７ａシリンジ
１７ｂノズル
１７ｃチューブ
１９試薬保持部
１９ａサンプル容器
１９ｂサンガー反応Ｐｒｅ−ｍｉｘ溶液
１９ｃプライマー容器
１９ｄ希釈液容器
２１希釈液
２３反応溶液
２５希釈反応溶液
２７光学的モニター機構
２９励起光源レーザ装置
３１ビームエキスパンダ
３３反射ミラー
３５，４１レンズ
３７ダイクロイックミラー
３９分光フィルター
４３ＣＣＤ
４５ＣＰＵ

Claims

一対の板状部材を備え、少なくとも一方の板状部材の表面に複数の溝が形成され、一方の板状部材には前記溝の両端に対応する位置に貫通孔が形成され、これらの板状部材が前記溝を内側にして貼り合わされて前記溝により反応を行なわせるための空間を形成しており、前記貫通孔の同一ライン上の配置は、マイクロタイタープレートフォーマットのピッチの整数（１以上)分の１である反応容器。
前記貫通孔の配置に対応し、前記貫通孔に嵌合される突起部分を備えた蓋部材をさらに備えた請求項１に記載の反応容器。
請求項１又は２に記載の反応容器を保持するための反応容器保持部と、前記反応容器を予め設定された恒温又は温度サイクルで温調する温調機構とを備えたことを特徴とする反応装置。
遺伝子増幅反応に必要な試薬を収容する試薬保持部と、前記試薬保持部に収容された試薬を前記反応容器の前記貫通孔に分注する試薬分注機構とをさらに備えた請求項３に記載の反応装置。
前記分注機構は前記貫通孔に希釈液を分注する機能をさらに備えた請求項４に記載の反応装置。
前記反応容器の前記流路内のサンプルを光学的に検出モニターする光学的モニター機構をさらに備えた請求項３、４又は５のいずれかに記載の反応装置。