JP2002538215A

JP2002538215A - ガノデルマ・フェイフェリｄｓｍ１３２３９由来の生物学的活性化合物

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Publication number: JP2002538215A
Application number: JP2000603696A
Authority: JP
Inventors: ヴォルフユーリッヒ; ウルリケリンデクイシュト; ロルフヤンセン; ラムジーモターナ
Original assignee: ガノミチンゲゼルシャフトフュールバイオメディツィニッシェフォルシュングミットベシュレンクテルハフツング; ウルリケリンデクイシュト
Priority date: 1999-03-09
Filing date: 2000-03-08
Publication date: 2002-11-12
Also published as: EP1158995A1; DE50002587D1; ATE243042T1; EP1158995B1; WO2000053207A1; AU3657600A; US6726911B1

Abstract

(57)【要約】本発明は、ガノデルマ・フェイフェリ種ＤＳＭ１３２３９の菌類由来の新規な生物学的活性化合物、その製造方法、及びその使用に関する。ガノデルマ・フェイフェリ種ＤＳＭ１３２３９の子実体及び菌糸体から、抗菌活性を有し、かつ製薬及び化粧品の製造用に、並びに魚飼育での使用に適した防腐剤を得ることができる。多耐性細菌に対して活性を有するガノマイシンと呼ばれる抗菌活性物質がその抽出物から分離される。ガノマイシン及びその誘導体の全ての合成は、抗生物質への使用を可能とする。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】説明本発明は新規なガノデルマ・フェイフェリ（Ganoderma pfeifferi）種ＤＳＭ
１３２３９の菌類由来の生物学的活性化合物、製造方法、及びそれらの使用に関
する。ガノデルマ・フェイフェリ種ＤＳＭ１３２３９の子実体及び菌糸体から、
抗菌活性を有し、かつ製薬の及び化粧品の製剤のため、感染が蔓延するのを防止
するため、並びに魚飼育での使用のための防腐剤として適切な抽出物が得られる
。

【０００２】従来技術溶剤での抽出によりガノデルマ属のある菌類から得られる生物学的活性化合物
は、我々によってモノグラム中に記述されかつ要約される（U.リンデクイスト(L
indequist)：ガノデルマ。中でも薬剤学実務のハーゲルス・ハンドブック(Hager
s Handbuch der pharmazeutischen Praxis/Ed).F.ブルックハウゼン(Bruchhause
n)第５版より、全体的に改訂された、スプリンガー出版社(Springer Publisher
s) ベルリン、ハイデンブルク、ニューヨーク、1998年、補遺第２巻、ドロゲン(
Drogen) A-K (Ed. W. ブラシェック(Blaschek), 750-761頁)。以下に、その中で
明確に記載された研究に言及する。

【０００３】現在まで、商業的に利用されたガノデルマ属の薬供給種（drug-supplying spe
cies）は、ガノデルマ・アプラナタム（applanatum）（カノデルマ・アプラナタ
ム子実体）及びガノデルマ・ルシダム（lucidum）（ガノデルマ・ルシダム子実
体）だけである。その価値ある成分のため、ガノデルマ・ルシダムは、アジア諸
国において人工基質として大量に商業的発展を遂げている（ハーガー(Hager)、
文献20,25）。

【０００４】ガノデルマ・ルシダム及びガノデルマ・アプラナタムからの活性物質を抽出す
るために、様々な溶剤が用いられる。現在まで、ジクロロメタン及び酢酸エチル
は使用されていない。

【０００５】これらの菌類の活性物質のうち最も重要な群は、トリテルペン類、多糖類及び
ステロール類である。１００以上のトリテルペンは構造的に解明されている。そ
れらは、とりわけ、ガノデル酸類、ガノデム酸類、ガノデレン酸類、ガノルシド
酸類、ガノスポレル酸類、ルシデン酸類、ガノデリオール類、エポキシガノデリ
オール類、ガノデラール類、ガノデロール類、ルシドン類、ガノデルマノンジオ
ール、ガノデルマノントリオール及びガノデルマトリオールと言われる。異なる
機能群での化合物の異なる名称のため、非常に多くの重複した慣用法と不明瞭さ
がある。その基体はラノスタンであり、該ラノスタンの多くは不飽和であり、環
状系の７位と９位（１１位）にしばしば２つの共有二重結合を有するか、或いは
７位と１１位に２つのオキソ基と共に８位に１つの二重結合を有する。この酸は
、２６位の末端側鎖にカルボキシル基を有する。トリノルトリテルペン酸（Ｃ２
７化合物）、ルシデン酸では、カルボキシル基は２４位にある。この酸のメチル
エステルも存在する。水酸基は部分的にアセチル化されるか、或いはオキソ基に
脱水素化される。そのいくつかは、２つ程の炭素原子（Ｃ２３化合物）への側鎖
の分解がある。

【０００６】前記子実体は発育する間に、菌類のトリテルペンの形態に変化が起こる。菌糸
体の段階では、ガノデル酸が優勢であるが、子実体の成長が進むにつれて、ルシ
デニック酸が次第に発生していく（ハーガー，文献22）。多糖類では、グルカン
類、ヘテロ多糖類及びタンパク質結合多糖類の間で相違がある。

【０００７】さらに、様々なタンパク質類、ステロイド類、ヌクレオチド類及び幾分小さな
分子化合物がガノデルマ・ルシダムの特徴である。

【０００８】主要なステロール類として、エルゴステロール及びエルゴスタ−７，２２−ジ
エノールが確認されている（ハーガー，文献15，56，65）。さらに、過酸化エル
ゴステロール、エルゴスタ−７，２２−ジエン−３β−イル・パルミチン酸塩（
56，66）、６α−及び６β−ヒドロキシエルゴスタ−４，７，２２−トリエン−
３−オン（52）、エルゴスタ−７，２２−ジエン−３β−イル・リノール酸塩、
５α，８α−エピジオキシエルゴスタ−６，２２−ジエン−３β−イル・リノー
ル酸塩及びエルゴスタ−７，２２−ジエン−２β−３α，９α−トリオール（66
）が確認されている。

【０００９】更なる成分は、４０ｍｇ／乾燥子実体１００ｇからの濃度を有するアデノシン
（ハーガー，文献67）と、５'−デオキシ−５'メチルスルフィニルアデノシン（
ハーガー，文献68）である。

【００１０】培養された菌糸体の抽出物から、リングＺｈｉ−８（LZ-8）と呼ばれ、１１０
のアミノ酸からなり、かつ分子量１２，４２０ダルトンを有するポリペプチド（
その末端アミノ酸はアセチル化されている）が分離されている（ハーガー，文献
69，70）。さらに、２つのタンパク質サブユニットからなるレクチン（分子量５
５，６００及び５９，８００ダルトン）及び含有率２．５６％の炭水化物が見出
された（ハーガー，文献72）。

【００１１】Ｇ．ルシダムからの抽出物は、これまで薬剤として使用されている。ガノデル
マ・ルシダム由来の抽出物の作用は、非常に複雑で変化に富み、かつ現在までそ
の抽出物が個々の活性物質を有していることが明白にされることはほとんどなか
った。以下のＧ．ルシダム由来の抽出物の作用は、先行技術に属する。

【００１２】ＣＮＳ（中枢神経系）で作用する抽出物：前記子実体の水抽出物は、ハツカネズミで中枢神経系阻害及び筋弛緩作用を示
す。用量依存方法では、体重１ｋｇ当り凍結乾燥された抽出物の３０，１００及
び３００ｍｇは、同様に、車輪で運動する動物の活動、移動活動及びカフェイン
の中枢神経系刺激作用を抑制する。熱プレート試験（heat plate test）での刺
激閾は増加する。尾圧縮試験（tail pressing test）では、鎮痛作用が生じる。
前記３００ｍｇ／ｋｇは、ストリキニーネ（1.5mg/kg，腹腔内）又はカフェイン
（400mg/kg，腹腔内）投与後の死に至るまでの時間を延ばし、そのアルカロイド
類により誘発された痙攣は影響されない（ハーガー，文献73）。ラットでは、ガ
ノデルマ抽出物が睡眠誘発作用を有すると言われている（ハーガー，文献74）。

【００１３】心臓血管系で作用する抽出物：子実体（1mg/ml）のヘキサン及びメタノール抽出物は、試験官内で培養したハ
ツカネズミの心筋細胞の収縮率をそれぞれ２５％及び８０％とかなり減少させる
。ヘキサン及び水抽出物は、前記濃度で収縮幅を約１５％増加させる。先の作用
の原因となる化合物は、ガノデル酸Ｓ、ガノデラールＡ及びガノデルマノントリ
オールである。この化合物の０．１ｍｇ／ｍｌは、前記収縮を完全に停止する。
前記幅の増大は、ガノデル酸Ｓ、ポルテンステロール（portensterol）及びガノ
デルマノントリオールにより生じる（ハーガー，文献５）。

【００１４】生体内では、凍結乾燥した水抽出物が本能性高血圧症の患者（I群）と軽い高
血圧症又は高血圧症ではない患者（II群）に錠剤の形態で６ヶ月以上経口投与さ
れた（１日当り６錠で抽出物240mg）。I群の患者では上昇していた血圧がかなり
減少したのに対し、II群の患者では影響がなかった。副作用は発現しなかった（
ハーガー，文献76）。

【００１５】餌に５％ガノデルマ・ルシダム粉を含んでいた、自発性高血圧ラットは、４週
間後に対照群と比較すると、対応する餌で、かなり減少した収縮期血圧と減少し
た血漿及び肝臓中の総コレステロール値とを示した（ハーガー，文献77）。

【００１６】モリギワら（ハーガー，文献39）は、試験管内で１０のトリテルペン類におけ
るアンジオテンシン変換酵素の阻害と、抗高血圧作用のこのような別の可能な説
明を見出した。最もよく効くのは、ガノデル酸Ｆ（IC₅₀4.7×10^-6M）であった。
ガノデラールＡ、ガノデロールＡ及びＢ、並びにガノデル酸Ｂ，Ｄ（Ｃ），Ｈ，
Ｋ，Ｓ及びＹが平均１０^-5ＭのＩＣ₅₀の活性を有していた。

【００１７】血液で作用する抽出物：水抽出（抽出物50μl、300mlで抽出した菌類５g）は、試験管内ウシ血小板の
トロンビン誘発性凝集を阻害する。アデノシンは、原因となる活性物質であるこ
とが確認されている（ハーガー，文献67）。他方、粗抽出物は、高いアデノシン
濃度であるにもかかわらずＨＩＶ陽性血友病患者における抗血小板活性を示さな
い。さらに血小板凝集に対する作用が試験管内で検知される活性物質は、５−デ
オキシ−５−メチルスルフィニルアデノシン（ハーガー，文献79）及びガノデル
ミック酸（ganodermic acid）Ｓを含む。５０μｇ／ｍｌの濃度では、このアン
ジオテンシン誘導体は、ウサギ血小板のＡＤＰ誘発性凝集を阻害するが、ＰＡＦ
−刺激性凝集（ハーガー，文献79）を阻害しない。ガノデルミック酸Ｓは、膜活
性を有し、かつ試験管内でホスホイノシトール代謝に影響を与える。その濃度に
従って、ガノデルミック酸Ｓは、試験管内における異なる誘発因子により生じる
ヒト血小板の凝集を促進し又は阻害する（ハーガー，文献80，81）。

【００１８】動物実験では、水抽出物（500mg/kg）は、汎発性血管内凝固が内毒素の反応に
よって生産されたラットにおける血小板値とフィブリノーゲン値の減少、及びプ
ロトロンビン時間の延長を阻害する。試験管内では、５００〜１０００μｇ／ｍ
ｌの濃度でのこの抽出物がトロンビンの反応とコラーゲン誘発性血小板凝集を減
少させる（ハーガー，文献82）。

【００１９】さらに、１５人の健康な提供者と３３人の動脈硬化症の患者からの血小板の凝
集に対する水抽出物の影響が実験された。健康な人の血小板に対する試験管内で
の抽出物の添加は、濃度依存方法で凝集を減少させる。生体内では、患者に抽出
物１ｇの１日３回２週間の経口投与がかなりのＡＤＰ−誘発性血小板凝集の阻害
を生じる（ハーガー，文献83）。

【００２０】消化管で作用する抽出物：いくつかのトリテルペン類（ルシデン酸Ａ，ルシデン酸Ｄ１，ガノデル酸Ａ，
ガノデル酸Ｃ１，ガノデル酸Ｊ，ルシドンＡ，ルシドンＣ）は、かなりの苦味を
有し、これにより消化刺激及び食欲をそそる作用を有するはずである。ルシデン
酸Ｄ１の苦味は、５×１０^-10の希釈液でもまだ識別できる（ハーガー，文献84
）。

【００２１】肝臓で作用する抽出物：試験管内では、ガノデルアルデヒドＡ（肝臓癌細胞に対するED₅₀：10.99μg/m
l；ＫＢ細胞に対するED₅₀：9.75μg/ml）及びエルゴスタ−７，２２−ジエン−
２β，３α，９α−トリオール（肝臓癌細胞に対するED₅₀：1.17μg/ml；ＫＢ細
胞に対するED₅₀：0.89μg/ml）によりヒト肝臓癌細胞（PLC/PRF/5細胞）の及び
ＫＢ細胞の分裂の強い阻害が達成される（ハーガー，文献66）。

【００２２】ガノデル酸Ｔ，Ｕ，Ｖ，Ｗ，Ｘ，Ｚは、用量１０^-4モルで試験管内において肝
臓癌細胞に対する細胞毒素活性をも示す（ハーガー，文献47）。

【００２３】対照的に、ガノデル酸Ｒ及びＳは、試験管内で抗肝毒性作用を有する。ガノデ
ル酸Ｒ及びＳは、培養されたラット肝細胞でガラクトサミン誘発性細胞毒性を減
少させる（ハーガー，文献45）。

【００２４】ラットでは、前記子実体の水抽出物（30及び100mg/kg，腹腔内）は、クロロホ
ルム誘発性肝臓毒性（GOT及びLDHの測定）を減少させる（ハーガー，文献85）。
ハツカネズミでは、アルコール抽出物が肝臓での脂肪の蓄積（それはクロロホル
ムによっても生じる）を拮抗する。さらに、この抽出物は、高用量のジギトキシ
ン及びインドメタシンでの動物の死亡率を減少させる。これらの抽出物は、部分
的に肝臓を切除された動物における肝臓再生を促進する（ハーガー，文献６）。

【００２５】アルカリ処理及びエタノール沈殿によって菌糸体から得ることのできる２つの
多糖分画（0.5〜5mg/ラット/日、４週間）は、実験的に肝硬変を誘発したラット
で抗繊維症作用を示す（ハーガー，文献87）。

【００２６】代謝で作用する抽出物：前記子実体の水及びエタノール抽出物は、ラットでの経口グルコース負荷試験
におけるグルコース及びインシュリン値に対する影響に関して試験された。水抽
出物（50mg/ラット体重200-250g）は、対照ラットと比較して、経口グルコース
投与から１０分後の血糖値をかなり減少させた。１０分後、インシュリン値も対
照群と比較して減少させたが、グルコースを供給してから３０−６０分後、イン
シュリン値は対照群と比較してかなり高い値になっていた。さらに、水抽出物は
、アドレナリンの静脈内投与により誘発した血糖値の増加と、ラット脂肪細胞で
のアドレナリン誘発性脂肪分解を減少させる。小腸からのブドウ糖吸収は影響を
受けなかった。水抽出物の作用は、末梢組織でのグルコース利用の増進に基づく
と推測される。エタノール抽出物はほとんど有効ではなかった（ハーガー，文献
88）。

【００２７】ヒコノら（ハーガー，文献62，63，89）は、ガノデラン（ganoderanes）と呼
ばれる多糖における血糖低下作用を見出した。抗腫瘍活性を有する多糖類とは重
複しない（ハーガー，文献90）。最も活性的な化合物は、ガノデランＢである。
腹腔内投与から３〜７時間後、この化合物３０ｍｇ／ｋｇは、グルコースを負荷
したハツカネズミでの血漿グルコース値をかなり減少させる。正常動物では、こ
の効果はそれほどはっきりとは明言されていない。この血糖減少活性は、血漿中
のインシュリン濃縮の増加とグルコース代謝の増強とに起因すると考えられる（
ハーガー，文献63）。

【００２８】他の代謝作用は、血中コレステロール値に関する。ガノデルマ・ルシダムの水
及びアルコール抽出物は、培養したヒト大動脈の脈管内膜細胞でのコレステロー
ルの蓄積及び細胞の増殖を阻害する。したがって、この菌類の抗動脈硬化特性が
推測される（ハーガー，文献91）。

【００２９】Ｃ−２６（３α，１５α−ジアセトキシ−５α−ラノスタ−７，９（１１），
２４−トリエン−２６−カルボン酸、３α，１５α−ジヒドロキシ−５α−ラノ
スタ−７，９（１１），２４−トリエン−２６−オンカルボン酸）のカルボキシ
ル基を有する、ある酸素で処理されたトリテルペンは、ラットの胃腸管でほとん
ど吸収されない。このように、シトステロールに酷似し、それらは、胃腸管から
食物供給性コレステロールの吸収を減少させ、かつ、このように止血低下作用（
hypolipidemic effect）を有する(ハーガー，文献92、93)。部分合成により変換
され、かつ７位の酸素及び１５α−水酸基を有するガノデル酸誘導体は、２４，
２５−ジヒドロラノステロールからコレステロールの生合成中に１４位の脱メチ
ル化を阻害し、かつ、血中コレステロール値を減少することができるとも言われ
ている（ハーガー，文献94）。

【００３０】免疫系で作用する抽出物：前記子実体の水抽出物は、抗アレルギー性作用を示す。２０〜５００μｇ／ｍ
ｌの濃度では、前記抽出物が、前記化合物の４８／８０（10μg/ml）によって誘
発された腹膜のラット肥満細胞からのヒスタミンの放出を１４〜７０％阻害する
（文献95）。生体内では、前記抽出物は、モルモット(呼吸率及び呼気作用／吸
気作用の比率障害のあるもの)での実験的な喘息、ハツカネズミ(耳の膨潤してい
るもの)での塩化ピクリルにより誘発される接触皮膚炎、及びネズミ（タンパク
質排出、血圧、糸球体での微視的変化を有するもの）での免疫複合体によって生
じる血清腎炎の症状を減少させる。経口投与された用量はそれぞれ５００ｍｇ／
ｋｇであった（文献96）。

【００３１】前記子実体のメタノール抽出物から分離されたガノデル酸Ｃ及びＤは、出発抽
出物の酢酸エチル相のように、試験管内でコンカナバリンＡ又は前記化合物４８
／８０により誘発されるラットの腹膜の肥満細胞からの前記ヒスタミンの放出を
阻害する。２ｍｇ／ｍｌでは、前記化合物が、Ｃｏｎ-Ａ誘発性放出をそれぞれ
８５％及び８０％に減少させ、かつ前記化合物誘発性放出をそれぞれ７０％及び
８０％に減少させる（ハーガー，文献31）。

【００３２】５０、１００及び２００ｍｇ／ｋｇ／日の用量で９日、腹腔内投与で、胚種か
ら唯一精製された抽出物（該胚種のエタノール抽出物の水溶性分画）は、ヒツジ
赤血球、２，４−ジニトロクロロベンゼン又はアロタイプの脾細胞（splenocyte
s）により誘発されるハツカネズミにおけるＤＴＨ反応を阻害する（ハーガー，
文献97）。

【００３３】前記菌糸体から分離した環状Ｚｈｉ−８は、試験管内でＴリンパ球における細
胞分裂促進性作用を有する。６．９ｍｇ／ｋｇの用量で週２度の経口投与では、
この環状Ｚｈｉ−８は、ハツカネズミでのウシ血清アルブミンにより誘発される
過敏症反応を阻害する（文献99）。

【００３４】Ｇ．ルシダム由来のクロロホルム抽出物は、抗アレルギー性作用も示す（JP06
30280028AA）。

【００３５】抗腫瘍活性を有する抽出物：Ｇ．ルシダム由来の抽出物及びそこから分離されるガノデル酸Ａ−Ｚは、抗腫
瘍活性を示す（JP 0040304890 AA）。腹腔内投与において、単独又は細胞分裂抑
制剤（アドリアマイシン、メトトレザト及び他のもの）との組み合わせでの前記
子実体の凍結乾燥された熱水抽出物は、ルイス肺癌腫が腹腔内経路に移植された
シンゲニック（syngenic）Ｃ５７ＢＬ／６ハツカネズミの生存時間をかなり延ば
す。シクロスポリンでこのハツカネズミを前処理することにより、この活性は阻
害された。細胞毒性が検知されることはなかった。腫瘍細胞接種（０日）後の１
，３，５，７及び９日における１０ｍｇ／ｋｇ用量の腹腔内投与により９５％生
存時間が延びた。細胞分裂抑制剤と組み合わせた場合、その作用は部分的にさら
に発現された。この活性は、前記抽出物を含む多糖類により免疫系の刺激に起因
すると考えられる（ハーガー，文献100）。１０日の１０ｍｇ／ｋｇの用量の腹
腔内投与で、前記子実体の熱水抽出物は、ハツカネズミ（ICR）での肉腫１８０
腫瘍の重量を９９％減少させる。３匹のうちの１匹の動物で、完全な退行が生じ
た。原因となる分画は１０，０００ダルトン以上の分子量を有するものだった。
水抽出物とは対照的に、メタノール抽出物は腹腔内又は経口投与では有効ではな
かった（ハーガー，101）。Ｃ３Ｈハツカネズミでの繊維肉腫の成長も、水抽出
物によって阻害される(ハーガー，文献102，103)。

【００３６】用量５〜１００ｍｇ／ｋｇでの腹腔内投与において、様々な溶剤（熱水、３％
シュウ酸アンモニウム溶液、100℃、５％NaOH、30℃及び80℃のものなど）での
抽出により前記子実体から得ることのできる多糖分画は、ＩＣＲ／ＪＣＬハツカ
ネズミに同様に注入された肉腫１８０腫瘍の成長を減少させる（ハーガー，文献
57，58，59）。水溶性多糖２０ｍｇ／ｋｇの１０日の腹腔内投与は、９０％以上
によりハツカネズミの固体肉腫１８０腫瘍の成長を阻害する。この活性に不可欠
な構造として、β−１−３、β−１−４及びβ−１−６結合を有するグルカンが
確認された(ハーガー，文献102)。用量１０ｍｇ／ｋｇ／日の腹腔内投与では、
ソン（Sone）らによって１９８５年に分離されたグルカン分画は、１０日後に５
匹のハツカネズミのうちの４匹のハツカネズミ中の肉腫１８０腫瘍を完全に退行
させた。抗腫瘍活性は、多く枝分かれしたグルカン類で比較的高い（ハーガー，
文献61）。水溶性多糖分画は、白血病Ｐ３８８又はＬ１２１０を有するＢＤＦ１
ハツカネズミ中の腫瘍成長を阻害し、動物の生存時間を延ばした（ハーガー，文
献103）。

【００３７】ＩＣＲハツカネズミに対する腹腔内投与（20mg/kg/日）において、前記多糖タ
ンパク質複合体ルシダンは、肉腫１８０腫瘍の成長を約７０％阻害する（64）。

【００３８】培地濾液から、１０ｍｇ／ｋｇ／日の用量で１０日の経口投与によりハツカネ
ズミの肉腫の１８０腫瘍の成長を９０％以上阻害するアルカリ可溶性グルカン（
1-2及び1-6分枝を有する1-3結合グルコース単位）が抽出された（ハーガー，文
献103）。

【００３９】肉腫１８０を有するハツカネズミに対し多糖類の繰り返し経口投与の５日後、
食細胞活動指数の恒久的増加が起こる（ハーガー，文献105）。分離された大食
細胞における酸素ラジカル類の形成が刺激される(ハーガー，文献103)。

【００４０】混合リンパ球の培養では、ガノデルマ・ルシダム抽出物由来の多糖類が、濃度
依存法での培養開始から１２時間後にＩＬ−２生産を促進し、４日後にＬｙｔ２
＋及びＬ３Ｔ４＋細胞の再生を増強する（ハーガー，文献107）。他の抽出物は
、フリーラジカルで捕捉作用を有し、これにより抗酸化作用を示し（ハーガー，
85，109）、かつ老化過程の遅れを生じる（ハーガー，文献60，112）。２４時間
インキュベート後の多糖類５０μｇ／ｍｌによる成熟した単球／大食細胞におけ
るヒト白血病の単球細胞系統（U 937）の増殖及び分化の促進が記述される（ハ
ーガー，文献111）。多糖類分画の２５及び５０ｍｇ／ｋｇ／日の用量での４日
間の経口投与は、わずか３ヶ月齢の動物での酵素活性値よりも２４ヶ月齢のハツ
カネズミでのＤＮＡポリメラーゼα活性の方が高く回復する。比較的若い動物と
比較した場合の脾細胞（splenocytes）の減少したＩＬ−２生産及び混合リンパ
球培養における活性も、老いた動物では若いハツカネズミの値まで再び増加され
る（ハーガー，文献113)。

【００４１】ガノデル酸を含み、かつ静置培養へ菌糸体を移動した後のＧ．ルシダムの振盪
培養からの抽出によって得ることのできる抽出物は、抗腫瘍活性（JP 4-304890
AA）を有する。水及びエタノールでのＧ．ルシダムからの特別の分画及びその両
方の抽出物の組み合わせに特に有利であることが証明された(JP 0600222423 AA)
。

【００４２】抗菌活性を有する抽出物：試験管内では、メタノール粗抽出物の０．０１〜１ｍｇ／ｍｌは、核分裂性の
（caryogenic）細菌である連鎖球菌ムタン（Streptococcus mutans ）により生
じるプラークの形成を阻害する (S.ハタ、M.ハットリ、T.ナンバ、ファーマコロ
ジー113(1990)、73)。ガノデルマ・ルシダムの菌傘から得ることのできる抽出物
は、ブドウ球菌（staphylococci）(DE 693 18 921 T2)の成長を阻害する。Ｇ．
ルシダム由来の抽出物と抗生物質とを組み合わせることは先行技術の態様である
。しかしながら、拮抗も頻繁に生じるので、抗菌活性は予測することができない
(ケミカル・アブストラクト第131巻182146号)。

【００４３】２０μｇ／ｍｌの濃度では、Ｆ−III−４と呼ばれ、かつガノデル酸を含むと
信じられる子実体からのメタノール抽出物の分画が、様々なＨＩＶ感染細胞の培
養上澄液にある逆転写酵素の活性を４０％に減少させ、したがって潜在的抗エイ
ズ治療薬として一層の関心を受ける（ハーガー，文献114）。ガノデルマタタセ
アエ（Ganodermataceae）族、ポリポラセアエ（Polyporaceae）族又はリコペル
マセアエ（Lycoperdaceae）族の子実体からの抽出により得ることのできるトリ
テルペンは、ＤＮＡポリメラーゼを阻害する(JP 0090-124690 AA)。

【００４４】消炎活性を有する抽出物：水抽出物（2g/kg、前記同様）は、ハツカネズミのカラギーン誘発性耳浮腫に
重要な抗炎症作用を示す（ハーガー，文献115）。耳浮腫(ハツカネズミ)を誘発
するハズ油では、酢酸エチル抽出物の５００μｇ／耳、局所的適用かつ６時間後
に、ヒドロコルチゾンの２００μｇ／耳と同様に有効である。水抽出物（500μg
/耳）はここでは有効ではなかった。酢酸エチル又は水抽出物５００ｍｇ／ｋｇ
の経口投与後の６時間（ハズ油の局所投与前の１時間）には、ヒドロコルチゾン
の１８ｍｇ／ｋｇと同様の強い抗炎症作用があった。ガノデルマ抽出物の作用は
、ヒドロコルチゾンのものよりも長く（24時間）続いた(ハーガー，文献23)。Ｇ
．ルシダム抽出物の抗菌作用は、含浸布として使用された(JP 0110060424 AA)。
さらに、他の担子菌、例えばレンチヌス・エオデス（Lentinus eodes）から、Ｈ
ＩＶに対する活性を示した熱水抽出物は、自己分解した後に得ることができるよ
うになった（DE 689 06 245 T2）。

【００４５】放射線防護活性を有する抽出物：Ｘ線（500及び650 cGy）に動物が曝される前の、及びその照射後の６〜７週齢
のオスＩＣＲハツカネズミに対するガノデルマ・ルシダムの水抽出物の連続的な
腹腔内投与は、前記放射の健康に害のある作用を減少させ、残存する動物の数を
増加させた（ハーガー，文献116）。

【００４６】ガノデルマ属の菌類でのヒドロキノン類の発生についてはこれまで知られてい
ない。とりわけ、ヒドロキノン類は、呼吸鎖及び光合成の不可欠な要素であり、
それゆえ自然界において広範囲に存在する。ヒドロキノン類のフリーラジカル捕
捉特性は、薬理学的に関心があり、かつ薬剤で利用されている。

【００４７】ガノデルマから分離されたヒドロキノンの活性物質の全ての合成に関しては、
次の先行技術を考慮することができる。すなわち、中間体として必要とされる[
２，５−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]フェニル]アセトアルデヒド
の合成は、Ｄ．Ｇ．ハーンガー（Hahngauer）による２，５−ジヒドロキシフェ
ニルエチルアルコールから出発することにより行われる（テトラヘドロン・レッ
ト(Tetrahedron Lett.), 1986年, 27, 5799-5802）。

【００４８】テルペノイド側鎖の合成は、L.チェン（Chen）、G.B. ギル（Gill）、G.パテ
ンデン（Pattenden）、H.シモニアン（Simonian）((J.Chem. Soc., Perkin Tran
s.1, 1996年, 31-44)、F. キド、Y. ノダ、T. マルヤマ、C. カブトウ、A.ヨシ
コシ (J.Org.Chem., 1981年, 46, 4264-4266), M.A.アベリー（Avery）、 M.S.
ベルランダー（Verlander）、 M.グッドマン（Goodman）(J.Org.Chem., 1980年,
45, 2750-2753)、E.J.コレイ（Corey）、M.A. チウス（Tius）, J.ダス（Das）
(J.Amer.Chem.Soc., 1980年, 102, 1742-1744)、E.J. コレイ（Corey）、A. フ
ェンクタテスヴァリン（Venktateswarin）(J.Amer.Chem.Soc.,1972年, 94, 6190
-6191)、 J.A.マーシャル（Marshall）、D.G.クリアリー（Cleary） (J.Org.Che
m., 1986年, 51, 858-863)、T.R.ホエ（Hoye）、M.J.カース（Kurth） (J.Org.C
hem., 1980年, 45, 3549-3554)、 G. ベック（Beck）, D.グンター（Gunther）(
Chem. Ber., 1973年, 106, 2758-2766)、及びD. グラシー（Grassi）、 V.リペ
ナー（Lippuner）, M. アエビ（Aebi）, J.ブラナー（Brunner）, A.バセラー（
Vasella）(J. Amer. Chem. Soc., 1997年, 119, 10992-10999)により再現される
。

【００４９】さらに先行技術はヒドロキノン類のキノン類への酸化を含んでおり、その酸化
は様々な酸化剤を用いることにより達成される（W.M.オウトン(Owton), J. Chem
. Soc., Perkin Trans. 1, 1999年, 2409-2420）。さらに、４位−置換フェノー
ル類を出発物質として用いることも可能である。酢酸エチル中ｔ−ブチルヒドロ
ペルオキシドを用いたルテニウム触媒での酸化では、転位が起こり、２位−置換
キノリン類が得られる（W.M. オウトン(Owton), J. Chem. Soc., Perkin Trans.
1, 1999年, 2409-2420）。多耐性細菌に対する有効性は、様々な方法により現
在まで製造されたヒドロキノン類及びキノン類のいずれも知られていない。

【００５０】モノ−及びジヒドロキノンエーテルは、アルキル化又はアリール化によってヒ
ドロキノンから誘導される。医薬では、ヒドロキノンベンジルエーテル類が皮膚
（肝臓スポット、斑点）の色素沈着過度に対して用いられる（レンプ（Rompp）
化学辞典, ゲオルク・シーメ・パブリシャーズ・シュトゥットガルト(Georg Thi
eme Publishers Stuttgart), ニューヨーク, 第９版, 1995年）。ヒドロキノン
のグルコシドから、とりわけ、アルクトスタフィロス（Arctostaphylos）ウバウ
ルシ(uva-ursi)（ツツジ科、クマコケモモ）の葉で作られるアルブミン、ヒドロ
キノンが、ある条件下で生物内に放出される。後者は、薬の尿での殺菌活性の原
因であるとされている(E.トイシャー(Teuscher)，バイオジーン・アルツナイミッ
テル(Biogene Arzneimittel)，ヴィス(Wiss)，有限会社ベルラクスゲシェルシャ
フト(Verlagsgesellschaft mbH)，シュトゥットガルト 1997年) 。ガノデルマ種
から得ることのできる活性物質と他の抗生物質とのカップリングは、現在まで記
述されていない。化学変換により作用を増強することを目的とする抗生物質にお
けるカップリング反応が概ね知られている。エタノールでのオフロキサシン（of
loxacin）のエステル化は既に知られている：J.S.キーリー(Kiely)、E.ラボルド
(Laborde)、L.E.レシェスキー(Lesheski)、R.A.ブッシュ(Busch)(J. Heterocycl
. Chem.，1991年、28、541-543)。

【００５１】純粋なアルコール類でのペニシリンＧのエステル化も先行技術に属する。例え
ば、M.ムラカミ、M.ハジマ、F.タカミ，M.ヨシオカ（ヘテロサイクル、1990年、
31、2055-264)。先行技術は温和な条件下で転換可能な酵素の使用を含む。

【００５２】セファロスポリン類の合成は、例えば、Ｂ．メガレリウム（B.megaterium）又
は大腸菌菌株からのアシラーゼの触媒作用による７−アミノセファロスポリン酸
及び７−アミノデアセトキシセファロスポリン酸のアシル化によって行われる（
T.フジイ，K.ハナミツ，R.イズミ，T.ヤマグチ及びT.ワタナベ（1973年)、日本
特許7399393号、SNAM、Proetti(1972年)，ベルギー特許782646号）。リパーゼは
、広範囲の基質のエステル化に触媒作用を及ぼす(チング(Ching)ら，Angew.Chem
.101(1989年),711-724)。したがって、基本的には新規な合成抗生物質に達する
ために、ガノデルマ種からの新しい活性物質の誘導体化は、先行技術のこれらの
合成原理によることができる。

【００５３】高木菌類としてのガノデルマ・フェイフェリ（Ganoderma pfeifferi）の存在
はこれまで知られている。しかしながら、ガノデルマ・フェイフェリ菌類からの
生物学的活性化合物は現在まで知られていない。Ｇ．フェイフェリからの抽出物
は、文献で報告されておらず、薬剤として用いられていないことはいうまでもな
い。キノコ栽培場での、又は実験室培地でのガノデルマ・フェイフェリの栽培は
、以前には報告されていない。

【００５４】従来技術の欠点他のガノデルマ種がＧ．ルシダムから分離されたものと同様の化合物を含むこ
とが期待されるかもしれないが、Ｇ．アプラナタム（G.applanatum）の、及び特
にＧ．ルシダムの集中的な医薬の利用とは対照的に、他のガノデルマ種の、及び
特にガノデルマ・フェイフェリの利用は、現在まで不可能であった。したがって
、前記菌類は公然に利用可能であるが、野生の菌類の商業的利用は以前には行わ
れていない。したがって、この菌類の利用可能性は現在まで利用されないままで
ある。

【００５５】抗生物質類は、体内での（intrasomal）適用上、細菌感染の蔓延を防止するこ
とができる、菌類により生産された物質及びそれから形成された誘導体を含んで
いる。

【００５６】いくつかの抽出物の抗菌活性は知られていたが、Ｇ．ルシダム及びＧ．アプラ
ナタムの成分は、抗生物質の開発のために使用されていない。これは、Ｇ．ルシ
ダムからの抽出物の様々な活性が特定の活性物質に起因すると考えることが非常
に困難であるという事実による。それは、個々の物質としての回収又は見込みの
あると思われる全ての合成のための特徴的な抗菌活性を有する物質が、Ｇ．ルシ
ダムとＧ．アプラナタムから分離されていないことを理由に、抗生物質の開発に
対して障害となるべきことを証明する先行技術において述べられたＧ．ルシダム
からの活性物質の広い種類にほかならない。Ｇ．ルシダム及びＧ．アプラナタム
からこれまで分離された活性物質は、個々の物質として充分な抗菌作用を示して
いない。それらの抽出物は、標準化することが困難であり（JP 0610225649 AA）
、それらの抗菌活性が不定であり、したがって、抗生物質として不適当である。

【００５７】しかしながら、抗生物質に課された要求の現状は、抗生物質として使用するた
めの明確な薬物動態学と再現性のある抗菌特性とを有する、充分に特徴づけられ
た活性物質であることが不可欠である。現在まで、この必須条件は、Ｇ．ルシダ
ム又はＧ．アプラナタムから回収された物質によっては満たされなかった。医薬
目的のために使用され得るガノデルマ属の菌類からの活性物質の集中的な調査に
もかかわらず、それらの特性により抗生物質の開発を促進している分離化合物、
化学合成及び誘導化によるそのような活性物質の製造は成功していない。菌類か
ら分離された活性物質の全ての合成は、抗生物質の開発にとって不可欠ではない
が、抗生物質の開発のための必須条件は、この課題の解決により必然的に改善さ
れる。

【００５８】耐性で増加する課題により、先行技術に記述された抽出物及び活性物質によっ
て満たされない抗生物質に対する高い需要がまだある。

【００５９】特に、重篤なグラム陽性細菌感染に対しては、現在、グリコペプチド抗生物質
だけがまだかなり有効である。しかしながら、ブドウ球菌及び腸球菌（enteroco
cci）は、この物質群からの抗生物質に対する耐性を益々持つようになるばかり
ではなく、例えば、シュードモナス（Pseudomonas）属のグラム陰性病原菌も益
々多耐性を持つようになり、今後は、グラム陰性病原菌による感染がもはや臨床
的に安全に蔓延を防止することができないようになる。獣医学でも、有益な動物
の多耐性ブドウ球菌による有用動物の感染が益々脅威となる。耐性を有するよう
になった病原菌がヒトに伝染する可能性から更なる危険が迫っている。さらに、
感染の蔓延防止の課題は、これまで、他の多くの分野で、例えば魚の飼育で、不
十分に解決されているだけである。飼育様式の益々の拡大は、大きな障害になっ
ている。生態学的課題のため、これまでわずか数種類の薬剤だけが魚飼育様式に
おける処理のために承認されただけである。それらの課題は、先行技術に記述さ
れた活性物質では解決することができない。

【００６０】ヒト医薬学と獣医学におけるこの耐性の課題を克服するために、新しい抗生物
質を開発することが早急に必要である。本発明により解決されるべき課題は、さ
らにガノデルマ種を医薬の使用に利用可能とし、抽出物をそこから回収し、かつ
、そのような抽出物から活性物質を分離し、さらに化学的変換によりそれらを開
発することである。特に、それのガノデルマ属及びその誘導体からの未知の活性
物質として提供することにより、特にヒト医薬学と獣医学での感染症治療におい
て、従来の抗生物質に対する細菌耐性の益々の進展により新しい抗生物質の需要
を満たすことが本発明の目的である。

【００６１】抗生物質の開発のための必須条件を改善するために、溶液もまた分離された活
性物質及び化学合成によりそこから誘導される生成物を製造するために見出され
るべきである。

【００６２】この目的は、Ｇ．フェイフェリ種の天然に生息する菌類、キノコ栽培場での培
養Ｇ．フェイフェリＤＳＭ１３２３９、発酵槽での培養Ｇ．フェイフェリＤＳＭ
１３２３９由来の未知の活性物質の回収、培養した菌類からの異なる抽出物の製
造、これらの抽出物からの抗菌活性物質の分離、全て合成によりこれらの活性物
質の製造、及びこれらの活性物質の誘導体化により達成される。

【００６３】Ｇ．フェイフェリ種の菌類は、ブダペスト条約の規定に従って、２０００年１
月１１日ドイツの国際寄託センターＤＳＭＺ、ドイツの有限会社微生物・培養
細胞保管所（Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH）、マシェ
ローダー通り（Mascheroder Weg）１ｂ、Ｄ−３８１２４ブラウシュベイグ（B
raunschweig）に寄託された。

【００６４】本発明により、ガノデルマ・フェイフェリＤＳＭ１３２３９由来の生物学的活
性抽出物が溶剤処理により得られる。

【００６５】本発明による抽出物は、天然に生息するガノデルマ・フェイフェリ種の菌類の
子実体、及びキノコ栽培場で栽培された菌類の子実体の両方から得ることができ
る。

【００６６】この抽出物は、前記菌類がキノコ栽培場の木材基質（wood substrates）で栽
培される場合、この抽出物はガノデルマ・フェイフェリ種ＤＳＭ１３２３９の子
実体から有利に得ることができる。これまで実現されていないＧ．フェイフェリ
の価値ある成分の医薬的利用のための技術的な溶液（technical solution）がそ
れにより達成される。

【００６７】特に有利な方法では、前記菌類の培養がセルロース分解酵素で木材を前処理し
た後に実施された場合に、前記抽出物は、ガノデルマ・フェイフェリ種ＤＳＭ１
３２３９の子実体から得られる。

【００６８】本発明による抽出物は、発酵槽で成長した後のガノデルマ・フェイフェリ種Ｄ
ＳＭ１３２３９の菌糸体から得ることができる。したがって、ガノデルマ種、特
にガノデルマ・フェイフェリＤＳＭ１３２３９の成分の回収のためのもう一つの
技術的な溶液が達成される。発酵槽で成長した後のガノデルマ・フェイフェリ種
ＤＳＭ１３２３９の菌糸体から得られる抽出物が好ましく用いられるが、それは
、その抽出物が子実体の緩慢的な生成に依存しない、生物学的に有効な抽出物及
び化合物の回収のための可能性を開くからである。液体培地にコハク酸アンモニ
ウムを添加することが有利であることが証明された。本発明の抽出物は、ガノデ
ルマ・フェイフェリ種ＤＳＭ１３２３９の菌糸体から得ることができ、そこにお
いて、前記菌類は、投光しかつ振盪する培養法に従って、炭水化物源を有する液
体培地、好ましくは２０〜４０ｇ／１０００Ｌの麦芽抽出物及び初期ｐＨ４．５
−７．５を有する麦芽培地で培養される。特に、木材抽出物、特にブナ材からの
煎出物が単独又はセルロース分解酵素と組み合わせて前記液体培地に添加するこ
とが有利である。

【００６９】天然に生息する菌類又は本方法により栽培された菌類の前記子実体及び／又は
菌糸体から、抽出物は異なる極性の溶剤を用いて得ることができる。冷水又は熱
水、メタノール、エタノール、アセトン、エチルエーテルのような既知の抽出物
は用いられるが、ジクロロメタンや酢酸エチルのように、以前はガノデルマ種の
抽出には用いられなかった溶剤が特に有利である。本発明による抽出物は、親油
性溶剤、特にジクロロメタンを用いて前記子実体又は菌糸体を抽出することによ
り有利に得られる。また本発明の抽出物は、酢酸エチルで前記子実体及び／又は
前記培養培地及び／又は前記菌糸体を抽出することにより得られる。一価アルコ
ール類での抽出により得られる抽出物が特に高収率で回収される。この場合にお
いても、本発明による木材煎出物の添加が有益である。

【００７０】また、本発明に従って、水抽出、好ましくは１０〜８０℃の温度で抽出物を得
ることであって、そこでは、その抽出が水の温度を上昇させて段階的に有利に行
われる。

【００７１】異なる極性を有する溶剤を用いて数段階で抽出を行うことができる。本発明に
よる抽出物は、親油性溶剤での抽出で得られた残留物を抽出することにより得ら
れる。

【００７２】ジクロロメタン抽出残留物を抽出するために一価アルコール類を使用すること
により得られた抽出物は有益である。

【００７３】ジクロロメタン抽出残留物を抽出するために一価アルコール類を使用すること
により得られた抽出物は、酢酸エチルで分配し、さらに溶剤ジクロロメタン／酢
酸エチル４：１での勾配を用いるシリカゲル又はセファデックスによる特に有利
な方法でさらに精製される。

【００７４】ジクロロメタン抽出残留物及び／又はエタノール抽出残留物の水抽出により得
られた抽出物も本発明に従う。

【００７５】天然に生息する菌類又はきのこ栽培場で栽培された子実体及び発酵槽で成長さ
れた後のガノデルマ・フェイフェリ種ＤＫＭＳの菌糸体から得ることのできる抽
出物は、生物学的に活性であることが証明されている。驚くことに、菌糸体由来
のエタノール及び水抽出物が強い抗ウィルス作用を有する。親油性抽出剤を用い
て、グラム陽性細菌に対して有効性を示す抽出物が得られる。本発明により栽培
したガノデルマ・フェイフェリＤＳＭ１３２３９菌株の子実体又は菌糸体の一価
アルコール抽出は、グラム陰性の桿菌に対して有効な抽出物を産出する。アルコ
ール抽出物は、クロロメタン抽出物では達成されない、シュードモナス属の多耐
性細菌に対する特別の有効性を示す。特に活性抽出物は、酢酸エチルで子実体及
び／又は培養培地及び／又は菌糸体及び／又は抽出残留物を抽出することにより
得られる。有利に、一価アルコールでの抽出残留物が用いられる。ジクロロメタ
ン／酢酸エチル勾配を用いたもう一つの分留により、高い抗菌活性を有する分画
が得られる。

【００７６】細菌を阻害することができる付加的な抽出物は、例えば、ジクロロメタン抽出
残留物からエタノール抽出により、並びにジクロロメタン抽出残留物及びエタノ
ール抽出残留物から熱水抽出によりそれぞれ得られることは予測できないかもし
れない。

【００７７】適用の異なる分野では、前記抽出物が直接使用され得る。本発明により培養さ
れたＧ．フェイフェリＤＳＭ１３２３９菌株の子実体又は菌糸体から得ることの
できる抽出物をさらに処理するためのクロマトグラフィー法を使用すること、及
びそれから純粋な活性物質を分離することも本発明に従うものである。

【００７８】予想通り、ガノデロールＢ、アプラノキシジン酸Ｇ又はトリテルペンのような
、Ｇ．ルシダム又はＧ．アプラナタムと区別される活性物質もそれにより得られ
る。しかしながら、驚くことに、未知のトリテルペンである３，２６−ジヒドロ
キシラノスタ−８，２４−ジエン−７−オン（我々はガノデロン(ganoderone)Ｂ
と呼んでいる）のような更なる活性物質がさらに分離され得る。組成３，２６−
ジヒドロキシラノスタ−８，２４−ジエン−７−オンのトリテルペンは、溶剤で
の抽出によりＧ．フェイフェリＤＳＭ１３２３９の子実体及び菌糸体の抽出物か
ら得られ、かつ、著しい生物学的活性を有する。ガノデロンＢは、インフルエン
ザウィルス・タイプＡに対する抗ウィルス活性を有しており、ＣＤ１４＋細胞へ
結合するリポ多糖を阻害する。

【００７９】Ｇ．ルシダム及びＧ．アプラナタムの成分の様々な薬理活性の範囲内では、抗
菌活性物質はまだ低い役割しか果たしていない。したがって、Ｇ．フェイフェリ
ＤＳＭ１３２３９由来の、特に子実体由来の様々な可能性のある抽出物の中に、
Ｇ．ルシダム由来の抽出物と比較して明らかに優れた活性を有する、抗菌活性を
有する製造された抽出物があるということは、予測できなかったかもしれない。
他のガノデルマ種、他の菌類、植物又は動物のいずれかにおいて以前には記述さ
れていなかった、一般式１の生物学的活性物質が得られるということは全く驚く
べきことであった。ガノマイシンと呼ばれる一般式１の化合物は、抗生物質の開
発のための基準構造としては適切である。

【００８０】Ｒ¹−Ｒ⁵残基を有する一般式１の活性物質は、我々が開発した栽培法及び抽出
法により得られる。一般式中、Ｒ¹、Ｒ²及びＲ³は水素を表し、Ｒ⁵はＣＨ₃及び
ＣＨ₂ＯＨを表し、かつ、Ｒ⁴は遊離酸の形で存在する。これらの活性物質は、化
学合成により得ることができ、Ｒ¹、Ｒ²及びＲ³が水素、ハロゲン、アルキル又
はアルコキシ基で表され、かつＲ⁵は−ＣＨ₂−アリール、−ＣＨ₂−アルキル、
−ＣＨ₂−Ｏ−アリール、−ＣＨ₂−Ｏ−アルキル、−ＣＨ₂Ｎ₃、−ＣＨ₂−カル
ボン酸、−ＣＨ₂−アルデヒド又は−ＣＨ₂−アルコール基、−ＣＨ₂ＮＲ９₂、−
ＣＸ₃、−ＣＨＸ₂、−ＣＨ₂Ｘ若しくは−ＣＨ₃で表され、又はヘテロ原子を介し
て炭水化物誘導体と結合した誘導体を与え（但し、Ｘ＝Ｆ，Ｃｌ，Ｂｒであり、
Ｒ９は水素原子、アルキル又はアリール残基である。）、Ｒ⁴は前記遊離酸、酸
ハロゲン化物、アミド、脂肪族若しくは芳香族アルコールを有する塩又はエステ
ル化合物を与えるために選ばれ、かつｎは１から１０までの数である、誘導体を
得る。

【００８１】従来技術の欠点で述べられるように、発見された天然物質もすべて合成によっ
て製造できる場合には、抗生物質の開発に特に有益である。

【００８２】一般式１において次の置換基が供給される活性物質は、様々な合成経路及び出
発化合物類を変えることによる化学合成によって得られる。Ｒ¹、Ｒ²及びＲ³＝Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ又はｎ−アルキル、Ｒ⁴＝ＭｅI、
ＭｅII、アンモニウム、アルキルアンモニウム、アリール又はアルキル、Ｒ⁵＝
Ｈ、アルキル、アリール、Ｒ'ＯＨ、ＣＨＯ、Ｒ'ＣＨＯ、ＣＯＯＨ又はＲ'ＣＯ
ＯＨ（Ｒ'＝アリール又はアルキル）

【００８３】本発明により、この目的は様々な化学方法により達成された。

【００８４】置換された（２，５−ジヒドロキシフェニル）アセトアルデヒド類の使用によ
って、発見された抗菌活性の基礎構造はさらにＲ¹からＲ³の位置で修飾可能であ
る。特有の活性の増幅は、ハロゲン類、特にフッ素、及び環系にメトキシ基で置
換された（２，５−ジヒドロキフェニル）アセトアルデヒド類を導入することに
より達成される。

【００８５】新規な置換ヒドロキノン類及びそれらの誘導体の製造方法は、Ｒ¹−Ｒ³残基で
置換したヒドロキノンのテルペノイド側鎖へのカップリングが、ハロゲンで置換
されたヒドロキノン類から出発し、テルペノイド側鎖の末端エポキシド官能基（
epoxide function）との反応を介して有機金属中間体を経て行われることを特徴
とする。

【００８６】Ｒ¹−Ｒ³残基で置換したヒドロキノンのテルペノイド側鎖へのカップリングが
、ハロゲン置換ヒドロキノン類から出発し、テルペノイド側鎖の末端カルボニル
官能基（carbonyl function）との反応を介して有機金属中間体を経るような方
法において、新規な置換ヒドロキノン類及びそれらの誘導体の製造を行うことも
可能である。

【００８７】新規な置換ヒドロキノン類及びそれらの誘導体の製造のためのもう一つの可能
性は、Ｒ¹−Ｒ³残基で置換したヒドロキノンのテルペノイド側鎖へのカップリン
グが、置換（２，５−ジヒドロキシフェニル）アセトアルデヒド類から出発し、
適切なテルペノイド類から中間的に生成されたカルボアニオンとの反応を介して
行われることを特徴とする。

【００８８】新規な置換ヒドロキノン類及びそれらの誘導体の製造方法は、Ｒ¹−Ｒ³残基で
置換したヒドロキノンのテルペノイド側鎖へのカップリングが、３位の電子求引
性脱離基を生じる置換４−（２，５−ジヒドロキシフェニル）−２−メチリデン
カルボン酸エステル類から出発し、適切なテルペノイド類から中間的に生成され
たカルボアニオンとの反応を介して行われるような方法により行うこともできる
。

【００８９】新規な置換ヒドロキノン類及びそれらの誘導体の製造方法は、遊離活性物質を
得るため又はさらに官能基化を実施するための合成された化合物の段階的な脱保
護により特徴づけられる。

【００９０】異なるα−スルホン化されたカルボニル化合物を用いることにより、異なる側
鎖が得られる。

【００９１】一般式１による活性物質のアルキル化又はアリール化によりによって、モノ−
（一般式２）及びジヒドロキノンエーテル類（一般式３）が得られる。但し、Ｒ ⁶ ，Ｒ⁷はアリール、アルキルである。これらも生物学的に活性である。

【００９２】１８位の炭素原子に置換基として酸無水物を導入することによって、より高い
親水性を有する生物学的活性化合物を得ることができる。無水フタル酸との反応
は、一般式４による活性物質を与える。一般式１によるヒドロキノンの酸化によ
って、対応する生物学的に活性なキノン類（一般式５）が得られる。

【００９３】一般式１の活性物質は、エステル化により酸基を有する抗生物質を結合させる
ことができる。一方では、これは既知の反応を使用する化学経路で行うことがで
きる。本発明の核心は、新しい要素と既知の要素との組み合わせであり、それに
より多耐性細菌による感染症の治療に適切な抗菌性活性化合物の選択が、かなり
拡大される。一般式１の活性物質のための多様な可能性のある反応は、抗生物質
治療に全く新しい経路を開く。本発明により、生物変換によるエステル化を行う
ことが特に有益である。一般式５〜１２の新規な抗菌活性物質及びそれらの製造
方法は、一般式１の活性物質が１１位の炭素原子での結合を介してアミノ基を有
する抗生物質に結合されることを特徴とする。Ｒ⁴＝ＣＨ₃を有する一般式１の活
性物質（それは、１１位の炭素原子でのカップリングを介してアミノ基を有する
抗生物質に結合される）を使用することは、それにより収率が２０％増加し得る
ので、好ましい。

【００９４】Ｇ．フェイフェリＤＳＭ１３２３９から得ることができる、又はシス−１，２
−エポキシプロピルホスホン酸（ホスホマイシン）を用いて合成的に製造される
、一般式１（Ｒ⁵=ＣＨ₂ＯＨ）のヒドロキノン類のエステル化によって、一般式
６による活性物質（それは、ＵＤＰＮ−アセチルＤ−グルコサミニル−３−エノ
ールピロビニルトランスフェラーゼへの結合を介してブドウ球菌の表面に特に強
く結合される）が得られる。したがって、一方では、細菌細胞壁の合成が妨げら
れ、他方では、ヒドロキノン特有の特徴により、細胞周囲の酸化還元電位に影響
され、かつ細胞外酵素の活性はこれにより減縮される。

【００９５】Ｇ．フェイフェリＤＳＭ１３２３９から得ることのできる、又は合成的に製造
される一般式１（Ｒ⁵＝ＣＨ₂ＯＨ）のヒドロキノン類と合成的に製造可能な細胞
壁合阻害剤、ホスホノクロリン（fosfonochlorine）とのカップリングは、特に
細菌細胞壁の極度の障害を生じる一般式７の活性物質を与える。

【００９６】Ｇ．フェイフェリＤＳＭ１３２３９から得ることのできる、又は合成的製造さ
れた一般式１（Ｒ⁵＝ＣＨ₂ＯＨ）のヒドロキノン類のリポサイドマイシン（lipo
sidomycin）への結合は、選択的に細菌のペプチドグルカン合成に影響を及ぼす
ために使用することができる一般式８の活性物質を与える。

【００９７】Ｇ．フェイフェリＤＳＭ１３２３９から得ることのできる、又は合成的に製造
された一般式１（Ｒ⁵＝ＣＨ₂ＯＨ）のヒドロキノン類のセファロスポリンＣでの
エステル化は、一般式９の活性物質を生じる。β−ラクタム抗生物質との反応に
よって得られた一般式１０の活性物質は、細菌のペニシリナーゼを不活性化し、
かつ部分的に既存の耐性を相殺する。もし細菌細胞がペニシリンに対する特有の
高い親和性を示す受容体を形成したことによって前記耐性が生じた場合、細菌細
胞壁でヒドロキノン類の形成が達成される。したがって、ヒドロキノン類は、そ
れらの酵素阻害特性を細菌細胞のすぐ近くで発揮することができる。グラム陽性
細菌は、細胞外酵素の活性に依存するので、抗菌作用はこれにより達成される。

【００９８】Ｇ．フェイフェリＤＳＭ１３２３９から得ることのできる、又は合成的に製造
された一般式１（Ｒ⁵＝ＣＨ₂ＯＨ）のヒドロキノン類のフジジン酸（fusidinic
acid）でのエステル化によって、活性物質１１が得られる。この反応は、表面活
性の増加及び親油性特性の増強を生じる。

【００９９】一般式１（Ｒ⁵＝ＣＨ₂ＯＨ）の活性物質のオフロキサシンとのエステル化は、
活性範囲の拡大を達成し得る活性物質１２を生じる。

【０１００】さらに一般式１の新規な抗菌活性物質は、ヘテロ原子を介して１８位の炭素原
子で炭水化物誘導体に結合することによって得られる。メチル−２，３，４−ト
リ−O−ベンジル−６−デオキシ−６−ヨード−β−Ｄ−グルコピラノシドの反
応は、その炭水化物部分により細菌細胞膜と相互作用する１１−（メチル−２，
３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−６−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノース−６−
イル）オキシ（２(１')Ｚ，５Ｅ，９Ｅ）−２−[２'−(２，５−ジヒドロキフェ
ニル)エチリデン]−６，１０−ジメチル−５，９−ウンデカジエン酸を与える。

【０１０１】したがって、生物内転換及び／又は化学的な誘導化によって一般式１のガノマ
イシンの特性を意図した使用に適合させることができる。

【０１０２】フリーラジカル捕捉剤としての一般式１の化合物及び／又は実施例１による抽
出物の１以上の使用は、防腐技術と様々な疾患の両方で可能である。また、一般
式１の化合物及び／又は中性エンドペプチダーゼの活性及び／又はアンジオテン
シン変換酵素の活性を阻害するための請求項１に記載の抽出物の１以上の使用は
、このプロテアーゼが哺乳動物有機体の機能的制御に関する多くの翻訳後の過程
に関与するため、様々な疾患において可能である。これらの酵素を阻害すること
によって、抗炎症剤、免疫促進剤、鎮痛剤、抗高血圧剤及び抗菌活性が達成され
た。

【０１０３】一般式１の化合物及び／又は多糖類の血清を媒介した結合を阻害するための実
施例１による抽出物の１以上の使用は、ある臨床写真において末梢血管の拡張の
著しい減少と正常化を生じる。

【０１０４】抗菌活性を有する物質及び抽出物としてガノデルマ属の菌類からの生物活性抽
出物及び／又は化合物の技術目的のための防腐剤として使用は、特に、主として
抗菌特性を利用する。

【０１０５】製薬的及び化粧的配合のための添加剤として使用される物質及び抽出物として
のガノデルマ属の菌類からの生物学的活性抽出物及び／又は化合物の使用は、特
に防腐剤として、抗菌活性、フリーラジカル捕捉特性、プロテアーゼ阻害及び生
じる抗炎症作用の好ましい組み合わせを利用する。

【０１０６】活性化し且つ細菌を減少させる食品用添加剤、栄養剤及びヘルスケア剤として
のガノデルマ属の菌類からの生物学的活性抽出物及び／又は化合物の使用は、好
適な特性の組み合わせをも利用し、さらに慢性的な痛みの緩和をも生じる。

【０１０７】ヒト医学及び獣医学における、特に感染の蔓延防止における、単独活性物質と
しての、及び組み合わせ調合剤の形態での適用のためのガノデルマ属の菌類から
の生物学的活性抽出物及び又は化合物の使用は、最近生じた多耐性細菌の蔓延防
止における課題を解決する。ヒト医学では、重大なグラム陽性菌の感染（それは
敗血症の結果として致命的になり得る）の蔓延防止は、益々より困難になってい
る。したがって、広範囲の抗菌活性化合物から選択可能とすることが特に有益で
ある。したがって、一般式１による活性物質を誘導することによる抗菌活性物質
の範囲の拡大は、ヒト医学及び獣医学のための抗菌活性及び異なる適用特性を有
する薬剤を提供するために非常に重要である。これは、特に、多耐性のグラム陽
性菌での使用に当てはまる。獣医学では、細菌が搾乳中に容易に感染し、牛乳を
汚染し得るので、ブドウ球菌感染は、主として牛を保護する際に大きな役割を果
たす。一般式１の活性物質の適用は、全身及び局所の両方で行うことができる。

【０１０８】魚病原性細菌に対する、及び魚飼育での薬剤としての使用は、魚病原性細菌に
対する明らかにされた活性に起因する。

【０１０９】上記特性に起因する特有の利点は、抗菌活性を有する薬剤としての、及びフリ
ーラジカル捕捉剤として使用である。この使用は、そこから分離された抽出物及
び化合物が単独で及び相互の組み合わせで使用されることを特徴とする。明らか
にされた生物学的活性は、１以上の化合物及び／又は抽出物を含む薬剤としての
創作性のある適用の基礎となる。１以上の化合物及び／又は抽出物を含む配合は
、グラム陽性菌の感染の治療用の、及びその感染によりもたらされた敗血症用の
薬剤の製造として特に用いられる。中性エンドペプチダーゼに対するＧ．フェイ
フェリＤＳＭ１３２３９からの抽出物の活性の特有の阻害から、痛みの治療での
使用は、オピエート受容体に作用するオピオイドペプチド及びエンドルフィンの
分解を妨げることにより誘発することができる。他方では、中性エンドペプチダ
ーゼの阻害は、分解の阻害、アルドステロン合成の抑制及び腎臓でのナトリウム
排出の増強をもたらす。したがって、Ｇ．フェイフェリＤＳＭ１３２３９からの
抽出物は、高血圧症の治療で使用することができる。中性のエンドペプチダーゼ
の活性を阻害するためのＧ．フェイフェリＤＳＭ１３２３９から得ることのでき
る化合物及び／又は抽出物の１以上の使用は、可能な適用の本質的拡張を生じる
。したがって、高血圧症、心臓血管疾患及び代謝異常の治療用の薬剤の製造のた
めの本発明による化合物及び又は抽出物の１以上の使用は可能である。

【０１１０】本発明は、いくつかの実施例によって以下に示されるが、これらの実施例に制
限されるものではない。

【０１１１】実施例（実施例１）溶剤処理によるガノデルマ種から得ることのできる抽出物の比較試験方法：Ｇ．フェイフェリの子実体は、ルートウィックスブルク(Ludwigsburg)(メクレ
ンブルクウェスタンポメラニア(Mecklenburg-Western Pomerania))産のブナ（Fa
gus）、Ｇ．ルシダムの子実体は、ハンブルク−フロトベック（Hamburg-Flottbe
ck）産のカシワ（Quercus）、Ｇ．アプラナタムの子実体は、グリーフシュワル
ト（Greifswald）(メクレンブルクウェスタンポメラニア)産のブナ、及びＧ．カ
ノサム（canosum）の子実体はゲルリッツ（Gorlitz）(サクソニー(Saxony))のツ
ガ（Tsuga）から採取された。

【０１１２】新しく採取された子実体は、汚れを落とし、小片に切断し、室温において空気
中で乾燥し、ビーター製粉機中で粉砕し、そして使用されるまでビーター製粉機
中で保持した。これらの子実体の抽出物を生物学的活性の比較試験のために製造
し、かつ試験した。

【０１１３】試験の初期では、寒天拡散試験を用いた。試験する抽出物及び物質を適切な溶
剤（ジクロロメタン、メタノール及び水）を使用してそれぞれ溶解し、かつ異な
る濃度で濾紙シートを適用した。対応する溶剤の２５μｌを染み込ませた比較シ
ートを対照（コントロール）として使用した。アンピシリン(10μg/シート)を参
照物質として用いた。乾いた濾紙シートは最終的に寒天平板上に置いた。基本ス
クリーニングとして、栄養寒天II（VEB免疫プレパラート(Immunpraparate)、ベ
ルリン、ドイツ）を用い、また、患者の採取物から分離された菌株の試験では、
ミュラー−ヒントン II（Mueller-Hinton II）寒天（ベクトン・ディキンソン微
生物学システム、クッキースビル(Cockeysville)、アメリカ）を用いた。接種ワ
イヤー・ループを使用して、少量の試験細菌培地を無菌０．９％のＮａＣｌ溶液
３ｍｌ中に懸濁した。続いて、この細菌懸濁液２００μｌを無菌で液化された僅
かに温かい栄養寒天２０ｍｌに添加し、かつ直径１０ｃｍのペトリ皿に入れた。
凍結した寒天上にシートを置いた後、そのプレートを約２〜３時間８℃で予めイ
ンキュベートし、次いで２４時間３７℃で、定温器中でそのプレートのインキュ
ベーションが行われた。黄色小球菌は例外だった。この細菌は２０℃でその最適
の成長に達するので、この培地を室温でのみ保存した。それらのプレートの評価
を阻害輪（inhibition halo）の直径を測定することにより行った。すべての操
作を無菌状態で行った。

【０１１４】結果：比較試験では、他のガノデルマ種からの抽出物と比較して、Ｇ．フェイフェリ
から得ることのできる、異なる極性の溶剤を用いた抽出物が明らかに高い活動を
示す（表１−４）。

【０１１５】

【表１】

【０１１６】

【表２】

【０１１７】

【表３】

【０１１８】

【表４】

【０１１９】（実施例２）ガノデルマ・フェイフェリ種ＤＳＭ１３２３９の子実体から得ることのできる
抽出物方法：粉末にされた子実体を円筒濾紙に充填し、ソックスレー抽出器でジクロロメタ
ン（Ｅ.メルク社製，ダルムシュタット）を用いて抽出し、脱色（それは通常２
４時間後に生ずる）を完了した。ジクロロメタン残留物を蒸発させた後、その菌
の残留物を２時間に５回一定の振盪を行いながら室温で８０％エタノール（Ｅ.
メルク社製，ダルムシュタット）を用いてそれぞれ抽出した。その菌の残留物を
ブフナー（Buchner）漏斗を使用して分離し、空気中で乾燥した。その後、室温
で２時間に５回それぞれ蒸留水を用いて振盪し、その菌の残留物をブフナー漏斗
を使用して再度分離した。冷水抽出物の残留物を３回７０℃の蒸留水で抽出し、
続いて濾過した。

【０１２０】すべての抽出物を真空回転蒸発装置（ビュッチラボルテケニック(Buchi Labo
rtechnik) AG社製，フラウィル(Flawil)，スイス）中において４０℃で濃縮し、
その後、凍結乾燥した(有限会社ゲフリートロックヌングザンラーゲン(Gefriert
rocknungsanlagen)社製，オステロード(Osterode)，ドイツ)。この態様では、そ
れらは、次の実施例に記述された生物学的活性に対する広範囲な試験に利用可能
であった。

【０１２１】結果：異なる極性溶剤を用いた抽出により貯蔵可能な生物学的活性抽出物をガノデル
マ・フェイフェリの子実体から得ることができる。

【０１２２】（実施例３）ガノデルマ・フェイフェリ種ＤＳＭ１３２３９の子実体、きのこ栽培場の木材
基質で培養された菌類から得ることのできる抽出物方法：新しく採取したＧ．フェイフェリ種の若い子実体から、数片の組織を菌傘と柄
の間の遷移部から無菌はさみで取り除き、室温においてハーゲム（Hagem）寒天
上で培養した。その菌類が可視成長した後、菌糸体の数片を打ち抜き、２−３週
間ハーゲム液体培地に移した。この培地は、クライゼル（Kreisel）及びシャウ
アー（Schauer）(メソデンデスミコロギシェンラボラチルウムス(Methoden d
es mykologischen Laboratoriums), フィッシャー−ベルラック(Fischer-Verlag
)，Jena 1987年)の観察記録（プロトコル）に従って調製した。このようにして
得られた菌糸体を用いて、殺菌したブナ材チップを基質として感染した。適切な
容器の中で２０〜２３℃で８ヶ月間の栽培後に、最初の子実を回収するこができ
た。この子実体を、実施例２に従って生物学的活性のために処理し、試験した。

【０１２３】結果：適切な木材基質上でＧ．フェイフェリの子実体を栽培することは可能である。
このようにして得ることのできる子実体から、生物学的活性抽出物が得られる。

【０１２４】（実施例４）ガノデルマ・フェイフェリ種ＤＳＭ１３２３９の子実体、木材をセルロース分
解酵素で前処理した後の培養菌類から得ることのできる抽出物方法：ブナ材チップをセルロース分解酵素（有限会社アフィナ(Affina)，ベルリン，
ドイツ）の混合物と共に２４時間培養し、続いて実施例３と同様にＧ．フェイフ
ェリをインキュベートした。

【０１２５】結果：基質における初成長の困難な段階は、セルロース分解酵素での前処理により改
善される。これは、初成長を誘発することが困難である菌類の培養を促進する、
技術的な溶液を提供する。それらの抽出物の生物学的活性は、前処理によって影
響を受けない。

【０１２６】（実施例５）発酵槽での初成長後のガノデルマ・フェイフェリ種ＤＳＭ１３２３９の菌糸体
から得ることのできる抽出物方法：新しく採取したガノデルマ・フェイフェリの若い子実体を、無菌条件下で汚れ
を落とし、解体した。菌傘と柄の間の遷移部から、数片の組織を無菌はさみで取
り除き、ハーゲム寒天上で室温で培養した。その菌類が可視成長した後、数片の
菌糸体を打ち抜き、ハーゲム液体培地と共にビューラー（Buhler）ホモジナイザ
ー（エドマンドビューラー，チュービンゲン(Tubingen)，ドイツ）中で細分した
。その後、さらにＨ．クライゼル及びＦ．シャウアー（メソデンデスミコロギ
シェンラボラチルウムス，フィッシャー−ベルラック，ジェナ(Jena)1987年）
によるハーゲム液体培地を用いて２５０ｍｌ三角フラスコで培養を行った。それ
ぞれの培養培地１００ｍｌに対して、上記と同様に調製された接種用懸濁液１０
ｍｌを添加した。３０日間、室温及び一定の光条件下、１２５ｒｐｍの速度の振
盪機（イノーバ(Innova)2100，ニュー・ブランズウィック・サイエンティフィッ
ク社製，エジソン社製，ニュージャージー，アメリカ）により継続的に混合する
状態で培養を行った。さらに１０Ｌ容積のバイオリアクター中へ移してスケール
アップされた。発酵槽に、オートクレープで消毒したＨＡＧＥＭ培地（液体）６
Ｌを添加し、続いて接種用懸濁液６０ｍｌを添加した。発酵槽中の培養は、無菌
空気による一定の通気及び一昼夜継続的に攪拌しながら室温で行った。

【０１２７】前記菌糸体の乾燥重量を決定するため、前記菌糸体を濾過により培地から分離
し、重り付きの結晶皿に移し、実施例２と同様にして凍結乾燥し、乾燥重量を精
密天秤（サルトリアス(Sartorius)，ゲッティンゲン，ドイツ）で測定した。乾
燥した菌糸体を円筒濾紙に充填し、ソックスレー抽出器中で２４時間、ジクロロ
メタン（E．メルク社製，ダルムシュタット）で抽出した。ジクロロメタン残留
物が蒸発した後、菌糸体の残留物を、それぞれ室温で一定に振盪しながら２時間
に３回、８０％エタノール（E.メルク社製，ダルムシュタット）で抽出した。前
記菌糸体残留物をブフナー漏斗で分離し、空気中で乾燥した。その後、室温で２
時間に３回それぞれ蒸留水で振盪し、その菌類の残留物を再度ブフナー漏斗を使
用して分離した。冷水抽出物の残留物を７０℃で蒸留水を用いて３回抽出し、続
いて濾過した。

【０１２８】すべての抽出物を真空回転蒸発装置（ビュッチラボルテケニックAG社製，フ
ラウィル，スイス）において４０℃で濃縮し、その後、凍結乾燥した(有限会社
ゲフリートロックヌングザンラーゲン社製，オステロード，ドイツ)。この形態
では、それらは、次の実施例に記述された生物学的活性に対する広範囲な試験に
利用可能であった。

【０１２９】結果：Ｇ．フェイフェリの培養は、液体培地で実施される。１０Ｌの発酵槽中で培養
することにより、大量の菌糸体の回収が可能である。

【０１３０】平均回収量は１Ｌ当り菌糸体５ｇである。培養した菌類は、番号ＤＳＭ１３２
３９でドイツの有限会社微生物・培養細胞保管所、マシェローダー通り１ｂ、
Ｄ−３８１２４ブラウシュベイグに寄託した。

【０１３１】（実施例６）コハク酸アンモニウム、好ましくは０．１〜１％の濃度での添加による培養条
件の改善方法：試験は、０．１〜１％コハク酸アンモニウムの添加を除いて、実施例５に従っ
て実施された。

【０１３２】結果：０．５％コハク酸アンモニウムの添加により増加した菌糸体が０．３４＋０．
０５６８ｇ／１００ｍｌ〜０．６９１＋０．０４８ｇ／１００ｍｌで回収される
。

【０１３３】（実施例７）ガノデルマ・フェイフェリ種ＤＳＭ１３２３９の菌糸体、投光されかつ振盪さ
れる養成法に従った炭水化物源を有する液体培地で培養される菌類から得ること
のできる抽出物方法：ハーゲム培地、麦芽培地及び合成培地を、実施例５で述べられた方法を使用し
て異なる投光され且つ振盪される養成法に従った微量元素及びビタミン類の特別
な付加での適応性のために試験した。

【０１３４】結果：様々な液体培地は、Ｇ．フェイフェリの培養に適している。好ましくは、２０
〜４０ｇ／１０００Ｌ及び初期ｐＨ４．５−７．５の麦芽抽出物を内容とする麦
芽培地が用いられるべきである。そのような条件下で、０．０６１＋０．０００
６ｇ／１００ｍｌ〜０．６９１＋０．０４８２ｇ／１００ｍｌの菌糸体重量の増
加が３０日間の培養中に達成される。ｐＨ４．５の麦芽培地が使用された場合、
ジクロロメタン抽出物の収率１５％が達成され、それは異なる培養条件の下で達
成された１〜７％の値もかなり上であった。

【０１３５】（実施例８）木材抽出物、特にブナ材からの煎出液を、単独で又はセルロース分解酵素との
組み合わせて液体培地へ添加することによる菌糸体及び抽出物の回収の改善方法：蒸留水３００ｍｌで細分されたブナ材３０ｇを１時間煮ることによって木材煎
出液を調製した。この煎出液を１０％の濃度で実施例６による培養バッチ（batc
hes）に添加した。この試験体の一部には、セルロース分解酵素（有限会社アフ
ィナ(Affina)製、ベルリン，ドイツ）の混合物を同時に添加した。

【０１３６】結果：培養条件の最適化は、菌糸体成長の増加（実施例６による制御：０．３４＋０
．０５６８ｇ；木材抽出物を添加した最適化された培地：１．０７９＋０．１０
９７ｇ／１００ｍｌ；木材浸出液＋セルラーゼ類を有する最適化された培地：１
．４８１＋０．１２ｇ／１００ｍｌ）、及び二次代謝産物の増強された形態を生
じる。３０分の培養時間の後、ジクロロメタンでの抽出に際して、実施例６によ
る抽出物の収量は３０ｍｇ（それは最適化によって１１９ｍｇに増加された）で
あり、エタノール抽出での収量は、１９１ｍｇから４９１ｍｇまで増加した。

【０１３７】（実施例９）子実体又は菌糸体の親油性溶剤での抽出により得られる抽出物方法：粉末にした子実体又は凍結乾燥した菌糸体を円筒濾紙に充填し、２４時間のソ
ックスレー抽出器中の異なる親油性溶剤で抽出した。すべての抽出物を真空回転
蒸発装置（ビュッチラボルテケニックAG社製，フラウィル，スイス）において
４０℃で濃縮し、凍結乾燥し(有限会社ゲフリートロックヌングザンラーゲン社
製，オステロード，ドイツ)、その後、乾燥重量を確定した。

【０１３８】結果：ジクロロメタンは、生物学的活性抽出物を高収率で得るのに最適である。

【０１３９】（実施例１０）酢酸エチルでの培養液の抽出により得ることのできる抽出物方法：菌の培養液を真空回転流動蒸発器（ビュッチラボルテケニックAG社製，フラ
ウィル，スイス）で約５０ｍｌに濃縮し、次いで酢酸エチルで繰り返し振盪する
ことにより抽出した。酢酸エチル相が着色しなくなるまで、その過程を繰り返し
た。

【０１４０】結果：０．１〜０．５％の収率が得られた。実施例１による寒天拡散試験では、抽出
物が１７ｍｍまでの阻害輪でＳ．アウレウスに対する阻害作用を示した。

【０１４１】（実施例１１）親油性溶剤、好ましくはジクロロメタンでの培養した菌糸体の抽出により得る
ことのできる抽出物方法：実施例９とは対照的に、培地を５日後までに採取した。その抽出を実施例９に
従って行い、抗菌活性の測定は、実施例１に従ってＳ．アウレウス及びＭ．フラ
バスに対して行われた。

【０１４２】結果：培養の５日後までに、１８及び１０ｍｍの阻害輪によって抗菌活性がそれぞれ
測定され得る（表５）。

【０１４３】

【表５】

【０１４４】（実施例１２）親油性溶剤でのＧ．フェイフェリの子実体の抽出により得られたエタノール残
留物を抽出することにより得ることのできる抽出物方法：Ｇ．フェイフェリの実施例９による親油性溶剤での抽出により得られた残留物
を、２時間に５回それぞれ室温で一定の攪拌をしながら８０％エタノール（E.メ
ルク社製，ダルムシュタット）で抽出した。その抽出物をブフナー漏斗で濾過し
て分離し、空気中で乾燥した。抗菌活性に対する試験を実施例１に従って行った
。

【０１４５】結果：エタノール抽出物は抗菌活性を有する（表６）。

【０１４６】

【表６】

【０１４７】（実施例１３）ジクロロメタン抽出からの残留物の水抽出により得ることのできる抽出物方法：実施例９による親油性溶剤を用いてＧ．フェイフェリの抽出により得られた残
留物を、２時間に５回それぞれ室温で一定の振盪を行いながら７０℃の熱水で抽
出した。その抽出物をブフナー漏斗で濾過して分離し、空気中で乾燥した。抗菌
活性に対する試験を実施例１に従って行った。

【０１４８】結果：水抽出物は抗菌活性を有する（表７）。

【０１４９】

【表７】

【０１５０】（実施例１４）実施例１２によるエタノール抽出からの残留物の水抽出により得ることのでき
る抽出物方法：親油性溶剤及びアルコールを用いてＧ．フェイフェリの連続抽出によって得ら
れた残留物を、２時間に５回それぞれ室温で一定の振盪を行いながら７０℃の熱
水で抽出した。その抽出物をブフナー漏斗で濾過して分離し、空気中で乾燥した
。抗菌活性に対する試験を実施例１に従って実施した。

【０１５１】結果：エタノール抽出からの残留物の水抽出は抗菌活性を有する（表８）。

【０１５２】

【表８】

【０１５３】（実施例１５）一価アルコール類での抽出によって得られたＧ．フェイフェリの培養菌糸体か
らの抽出物部分的に実施例８による木材煎出物を添加した、実施例７によるＧ．フェイフ
ェリの培地が試験の５日目に採取された。この菌の菌糸体を、２時間に５回それ
ぞれ室温で一定の振盪を行いながら８０％エタノール（E.メルク社製，ダルムシ
ュタット）で抽出した。菌糸体残留物をブフナー漏斗で分離した。その抽出物を
４０℃で真空回転蒸発装置（ビュッチラボルテケニックAG社製，フラウィル，
スイス）で濃縮し、その後、凍結乾燥した（有限会社ゲフリートロックヌングザ
ンラーゲン社製，オステロード，ドイツ）。

【０１５４】結果：アルコール抽出によって、抽出物の収率は、全菌糸体質量の約３分の１の量を
得ることができる（表９）。

【０１５５】

【表９】

【０１５６】（実施例１６）子実体及び培養した菌糸体の水での抽出方法：実施例１による子実体及び実施例５により培養した菌糸体を７０℃の水で抽出
し、更なる試験では、最初に２０℃の水で行い、続いて７０℃の水で抽出した。

【０１５７】結果：菌糸体全質量の約６％量の抽出物が得られた。その抽出物の分離は、抽出が段
階的に行われることにより達成される（表１０）。

【０１５８】

【表１０】

【０１５９】（実施例１７）一価アルコール類での抽出により得られた実施例９による抽出残留物からの抽
出物合成培地及び麦芽培地で培養した菌から得られた実施例９による抽出の残留物
を、試験１５日目に採取し、２時間に２回それぞれ室温で一定の振盪を行いなが
ら８０％エタノール（E.メルク社製，ダルムシュタット）で抽出した。その後、
菌糸体残留物をブフナー漏斗で分離した。その抽出物を４０℃で真空回転蒸発装
置（ビュッチラボルテケニックAG社製，フラウィル，スイス）で濃縮し、その
後、凍結乾燥した（有限会社ゲフリートロックヌングザンラーゲン社製，オステ
ロード，ドイツ）。

【０１６０】結果：エタノール抽出物の高収率が得られた（表１１）。

【０１６１】

【表１１】

【０１６２】（実施例１８）実施例９による抽出残留物から得ることのできる抽出物方法：実施例９によるジクロロメタンを用いて子実体を抽出した後に残った残留物を
実施例１７に従ってエタノールで抽出した。そのエタノール抽出物を続いて水及
び酢酸エチル間で分配した。

【０１６３】結果：酢酸エチル相は抗菌活性を有する（表１２）。

【０１６４】

【表１２】

【０１６５】（実施例１９）シリカゲルを使用する生物学的活性分画中への実施例１８による抽出物の分離方法：実施例１８による酢酸エチル相を、シリカゲルを介して分画した。ジクロロメ
タン／酢酸エチル勾配を溶剤として使用し、さらに酢酸エチル／メタノール勾配
で分画が行われた。

【０１６６】結果：すべて生物活性を有する多くの分画が得された。特に活性を有するものは、ジ
クロロメタン／酢酸エチル４：１で得られた抽出物である（表１３）。

【０１６７】

【表１３】

【０１６８】（実施例２０）セファデックスを使用する生物学的活性分画中への実施例１８による抽出物の
分離方法：実施例１８による酢酸エチル相を、溶剤としてメタノールを使用するセファデ
ックスＬＨ−２０を介して分画した。

【０１６９】結果：範囲が様々である抗菌活性を有する６分画が得られた。

【０１７０】

【表１４】

【０１７１】（実施例２１）３，２６−ジヒドロキシラノスタ−８，２４−ジエン−７−オン（ガノデロン
Ｂ）の分離方法：子実体のジクロロメタン抽出物４００ｍｇを移動相に溶解し、ｎ−ヘキサン：
ジクロロメタン２：７の移動相及び２４ｍｌ／ｈの流量のセファデックスＬＨ−
２０（LKBファルマシア社製，ウプサラ，スウェーデン）で分離した。２４時間
後、メタノールでの濯ぎを行った。薄層クロマトグラフィーのモニタリングによ
り、同じ組成を有する分画を合わせた。０．３８のＲｆ値を有する分画を、メタ
ノール：水＝４：１の移動相を有するセファデックスＬＨ−２０（LKB ファルマ
シア社製，ウプサラ，スウェーデン）でさらに精製した。回収された物質をメタ
ノールから再結晶した。

【０１７２】結果：１６５℃の融点を有するこれまで未知の物質が単離された。そのスペクトルに
よれば、それは３，２６−ジヒドロキシラノスタ−８，２４−ジエン−７−オン
として確認され、ガノデロンＢと呼ばれた。

【０１７３】（実施例２２）２−[２−(２，５−ジヒドロキシフェニル)エチリデン]−１１−ヒドロキシ−
６，１０−ジメチルウンデカ−５，９−ジエン酸（ガノマイシンＡ）の分離方法：子実体のジクロロメタン抽出物４００ｍｇを、移動相に溶解し、ｎ−ヘキサン
：ジクロロメタン２：７の移動相及び２４ｍｌ／ｈの流量のセファデックスＬＨ
−２０(LKB ファルマシア，ウプサラ，スウェーデン)で分離した。２４時間後、
メタノールでの濯ぎを行った。薄層クロマトグラフィーのモニタリングにより、
同じ組成を有する分画を採取した。０．４４のＲｆ値を有する分画を、溶剤とし
てメタノール：水＝４：１の移動相を有するセファデックスＬＨ−２０で再びク
ロマトグラフィーによって分離した。さらに溶剤としてメタノールを用い、流量
１２ｍｌ／ｈで精製を行った。

【０１７４】結果：黄色の油の形態をした、これまで未知の物質が分離された。そのスペクトルに
よれば、それは２−[２−(２，５−ジヒドロキシフェニル)エチリデン]−１１−
ヒドロキシ−６，１０−ジメチルウンデカ−５，９−ジエン酸として確認され、
ガノマイシンＡと呼ばれた。

【０１７５】（実施例２３）ガノデルマ・フェイフェリからの一般式１の更なる活性物質としての２−[２
−(２，５−ジヒドロキシフェニル)エチリデン]−６，１０−ジメチルウンデカ
−５，９−ジエン酸（ガノマイシンＢ）の回収方法：子実体のジクロロメタン抽出物４００ｍｇを、移動相に溶解し、ｎ−ヘキサン
：ジクロロメタン２：７の移動相及び２４ｍｌ／ｈの流量のセファデックスＬＨ
−２０(LKB ファルマシア，ウプサラ，スウェーデン)で分離した。メタノール：
水２：１でさらに精製を行った。０．５８のＲｆ値を有する分画を、アセトン：
ジクロロメタン＝２：１の溶剤を用いるセファデックスＬＨ−２０でのカラムク
ロマトグラフィーにより精製した。

【０１７６】結果：黄色の油の形態をした、これまで未知の物質が単離された。そのスペクトルに
よれば、それは２−[２−(２，５−ジヒドロキシフェニル)エチリデン]−６，１
０−ジメチルウンデカ−５，９−ジエン酸として確認され、ガノマイシンＢと呼
ばれた。

【０１７７】（実施例２４）ガノマイシンＢの合成不活性ガス雰囲気下−７８℃で、ＴＨＦ３５ｍｌに溶解した２−（フェニルチ
オ）酢酸メチルエステル５．１３ｇ（28.14 mmol）を、ＴＨＦ（LDA28.14 mmol
に対応するもの）中の０．６７Ｍのリチウムジイソプロピルアミド溶液(ｎ−ブ
チルリチウム及びジイソプロピルアミンから調製したもの)４２ｍｌに添加した
。４０分間この温度で攪拌した後、ＤＭＳＯ２０ｍｌに溶解したホモゲラニルト
シレート（homogeranyl tosylate）３．５５ｇ(11.00 mmol)を添加する。この溶
液を室温まで温め、さらに１８時間攪拌する。後処理のために、ＮＨ₄Ｃｌ飽和
水溶液を添加する。これを続いて３回それぞれジクロロメタン３０ｍｌで抽出し
、合わせた有機相を、飽和ＣｕＳＯ₄水溶液、飽和ＮａＣｌ水溶液及び蒸留水の
２０ｍｌのそれぞれで連続的に洗浄し、ＭｇＳＯ₄上で乾燥する。溶剤を除去し
た後に残った残留物を、カラムクロマトグラフィー（移動系，ヘプタン：酢酸エ
チル＝７：１）により精製する。収量は、（５Ｅ）−６，１０−ジメチル−２−
(フェニルチオ)−５，９−ウンデカジエン酸メチルエステルの２．３４ｇ（7.04
mmol，64％）であった。この化合物をＴＨＦ８．５ｍｌに溶解し、不活性ガス
雰囲気下−７８℃で、ＴＨＦ（LDAの7.04 mmolに対応するもの）中の０．６７Ｍ
ジイソプロピルアミドリチウム溶液（ｎ−ブチルリチウム及びジイソプロピルア
ミンから調製されるもの）１０．５ｍｌに添加する。この温度で４０分間攪拌し
た後、この溶液を注入器を用いて０℃に温度制御した、新しく再溶融された（re
molten）塩化亜鉛１．３４ｇの入ったフラスコの中に移す。そして、この溶液を
塩化亜鉛のほとんどがすべて溶解するまで（約１０分）０℃で攪拌し、続いてＴ
ＨＦ５ｍｌに溶解した [２，５−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]フェ
ニル]アセトアルデヒド４．８０ｇを添加した。さらに１０分間攪拌した後、飽
和ＮＨ₄Ｃｌ水溶液２５ｍｌを添加した。続いて、これを３回それぞれジクロロ
メタン３０ｍｌで抽出し、合わせた有機相を飽和ＣｕＳＯ₄水溶液、飽和ＮａＣ
ｌ水溶液及び蒸留水のそれぞれ２０ｍｌで連続的に洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥す
る。溶剤を除去した後に残った残留物を、アセトン１５ｍｌ中に溶解する。この
溶液に、Ｎ−エチル−２−フルオロピリジニウムテトラフルオロボレート１．２
８ｇ（6.00mmol）及び新たに精製したトリエチルアミン０．８４ｇ（6.00mmol）
を連続的に添加する。室温で５−１０分攪拌した後、ヨウ化リチウム０．８７ｇ
（6.50mmol）を添加する。その反応混合物を６０℃に加熱し、この温度で１時間
攪拌する。室温まで冷やした後、ジクロロメタン５０ｍｌを添加する。この溶液
を飽和ＣｕＳＯ₄水溶液１５ｍｌ、次いで２回それぞれ蒸留水１５ｍｌで洗浄し
、ＭｇＳＯ₄で乾燥する。カラムクロマトグラフィー (移動系，ヘプタン：酢酸
エチル＝１０：１)により溶剤を精製した後に残った残留物の精製により２つの
異性体（２(１')Ｚ，５Ｅ）−及び（２(１')Ｅ，５Ｅ）−２−[２'−(２，５−
ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]フェニル)エチリデン]−６，１０−ジ
メチル−５，９−ウンデカジエン酸メチルエステルを比率４５：５５で（２(１'
)Ｅ，５Ｅ）に有利に、かつ全収率４８％で生じる。

【０１７８】エステル機能を消失させるために、（２(１')Ｚ，５Ｅ，９Ｅ）−２−[２'−(
２，５−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]フェニル)エチリデン]−６，
１０−ジメチル−５，９−ウンデカジエン酸メチルエステル０．２０ｇを還流下
で４時間、９６％エタノール１０ｍｌ中に水酸化カリウム１．００ｇを含む溶液
中で加熱する。反応混合物を、室温まで冷やした後、濃縮硫酸３ｍｌが添加され
た氷水５０ｍｌ上に注ぐ。その生成物を３回それぞれエーテル１５ｍｌで抽出す
る。合わせた有機相を飽和ＮａＣｌ水溶液１５ｍｌで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥
し、減圧下で濃縮する。この生成物の精製をカラムクロマトグラフィー（移動系
，ヘプタン：酢酸エチル＝６：１）で行う。その収率は、（２(１')Ｚ，５Ｅ，
９Ｅ）−２−[２'−(２，５−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]フェニ
ル)エチリデン]−６，１０−ジメチル−５，９−ウンデカジエン酸８７％であっ
た。

【０１７９】ｔ−ブチルジメチルシリル基を消失させるために、[２'−(２，５−ビス[(ｔ
−ブチルジメチルシリル)オキシ]フェニル)エチリデン]−６，１０−ジメチル−
５，９−ウンデカジエン酸０．１０ｇを無水フッ化カリウム２当量及び４８％Ｈ
Ｂｒ水溶液０．２当量と共にＤＭＦ１０ｍｌに溶解し、次いで、アルゴン雰囲気
下で２４時間、室温で攪拌する。その後、２．０ＭのＨＣｌ水溶液１０ｍｌを添
加し、その反応混合物を３回それぞれエーテル１５ｍｌで抽出する。合わせた有
機相を飽和ＮａＣｌ水溶液１０ｍｌで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、減圧下で濃
縮する。粗生成物の精製をカラムクロマトグラフィー（移動系，ヘプタン：酢酸
エチル＝１：１）で行う。その収率は、ガノマイシンＢ８７％であった。

【０１８０】（実施例２５）有機金属中間体を経たガノマイシンＢの製造方法：アルゴン雰囲気下で、ｔ−ブチルジメチルシリルトリフレート５．８２ｇ（22
.00mmol）を温度を０℃に制御した、クロロホルム２０ｍｌ中に１，４−ヒドロ
キノン１．１０ｇ（10.00mmol）及びトリエチルアミン３．０５ｍｌ（22.00mmol
）を含む溶液に注入器を用いてゆっくり添加する。反応溶液を室温まで温めた後
、１８時間攪拌し、その後氷水５０ｍｌ上に注ぐ。有機相を分離し、水相をクロ
ロホルム１００ｍｌで抽出する。合わせた有機相を１ＭのＨＣｌ水溶液、１Ｍの
ＮａＯＨ水溶液及び飽和炭酸水素塩水溶液で連続的に洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥
する。減圧下で溶剤を除去した後、この生成物を蒸留により精製する。収量は、
１，４−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキソ]ベンゼン３．０５ｇ（9.00mm
ol，90％）であった。

【０１８１】第２の反応段階では、この中間体を四塩化炭素４０ｍｌに溶解し、０℃に冷却
した。激しく攪拌をしながら、四塩化炭素１０ｍｌ中に臭素３．７０ｍｌ（7.20
mmol）を含む反応溶液の温度が５℃を超えないようにゆっくりと滴下する。添加
が完了した後、この温度で攪拌を２時間継続し、その後、後処理のため、蒸留水
、３％チオスルホン酸塩水溶液、１０％ＮａＯＨ水溶液及び再度蒸留水のそれぞ
れで連続的に洗浄する。減圧下で溶剤を除去した後に得られた粗生成物をクロロ
ホルム／アセトニトリルから再結晶した。収量は１，４−ビス[(ｔ−ブチルジメ
チルシリル)オキシ]−２−ブロモベンゼン２．２５ｇ（5.40mmol，60％）であっ
た。

【０１８２】次の反応段階は、グリニャール化合物の製造を含む。すなわち、マグネシウム
削り屑（turning）０．１３ｇ(5.40 mmol)及び無水エーテル１０ｍｌ中の１，４
−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]−２−ブロモベンゼン０．２５ｇを
還流冷却器を備えた三角フラスコ中に詰め込む。反応の始まりは、この溶液の白
濁及び発熱から分かる。その後、激しく攪拌しながら、無水エーテル１００ｍｌ
に溶解した１，４−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]−２−ブロモベン
ゼンをわずかに沸騰させた状態でゆっくりと滴下する。反応が完了した後、この
混合物を還流下でマクネシウムのほとんどすべてが溶解するまで３０分間加熱す
る。元の生成された[２，５−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]フェニル]マ
グネシウム臭化物（5.40mmol）のエーテル溶液をＴＨＦ３０ｍｌで希釈し、−３
０℃まで冷却し、０．１０Ｍのテトラクロロカプレート二リチウム（dilithium
tetrachlorocuprate）溶液２．５０ｍｌを滴下する。この温度で３０分間攪拌し
た後、全溶液を−３０℃まで冷却したＴＨＦ３０ｍｌ中に（Ｅ）−６，１０−ジ
メチル−２−オキシラニルウンデカ−５，９−ジエン−カルボン酸メチルエステ
ル（その合成は以下に記述される）１．４４ｇ（5.40mmol）を含む溶液中に滴下
した。一定の温度で約２時間攪拌した後、反応が完了し、後処理のため、飽和Ｎ
Ｈ₄Ｃｌ溶液１０ｍｌ及び蒸留水１５ｍｌを添加する。相分離した後、水相を再
度エーテル２０ｍｌで抽出し、合わせた有機相を２回それぞれ飽和ＮａＣｌ溶液
１５ｍｌで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥した。溶剤を蒸留した後に得られた残留物
をカラムクロマトグラフィー（移動系，ヘプタン：酢酸エチル＝９：１）により
精製する。収量は（５Ｅ）−２−[２'−(２，５−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシ
リル)オキシ]フェニル)−１'−ヒドロキシエチル]−６，１０−ジメチル−５，
９−ウンデカジエン酸メチルエステル１．８３ｇ（3.02mmol，56％）であった。

【０１８３】０℃に冷却された、（５Ｅ）−２−[２'−(２，５−ビス[(ｔ−ブチルジメチ
ルシリル)オキシ]フェニル)−１'−ヒドロキシエチル]−６，１０−ジメチル−
５，９−ウンデカジエン酸メチルエステル１．６４ｇ（2.72mmol）及びジクロロ
メタン８ｍｌ中にトリエチルアミン１．５２ｍｌを含む溶液にメタンスルホン酸
クロライド０．４２ｍｌ（5.50mmol）を添加した。反応混合物を室温で３時間攪
拌し、その後、ジクロロメタン２０ｍｌで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ₃溶液、０．
１０ＭＨＣｌ水溶液及び飽和ＮａＣｌ溶液のそれぞれの１０ｍｌで洗浄する。有
機相をＭｇＳＯ₄で乾燥した後、溶剤を減圧下で蒸留し、残った残留物をトルエ
ン８ｍｌに溶解し、１，８−ジアザビシクロ[５．４．０]ウンデセン（ＤＢＵ）
を添加した。この溶液を８０℃の温度で１２時間攪拌し、その後、エーテル１５
ｍｌで希釈し、０．１０ＭのＨＣｌ水溶液、飽和ＮａＨＣＯ₃溶液及び飽和Ｎａ
Ｃｌ溶液のそれぞれ１０ｍｌで洗浄した。有機相をＭｇＳＯ₄で乾燥し、かつ、
溶剤を除去した後に得られた残留物をカラムクロマトグラフィー（移動系，ヘプ
タン：酢酸エチル＝１０：１）により精製する。２つの異性体（２(１')Ｚ,５Ｅ
）−及び（２(１')Ｅ,５Ｅ）−２−[２'−(２，５−ビス[(ｔ−ブチルジメチル
シリル)オキシ]フェニル)エチリデン]−６，１０−ジメチル−５，９−ウンデカ
ジエン酸メチルエステルを２０：８０の比率で（２(１')Ｅ,５Ｅ）異性体が有利
に、かつ、全収率８３％で得られる。

【０１８４】 (Ｅ)−６，１０−ジメチル−２−オキシラニルウンデカ−５，９−ジエンカル
ボン酸メチルエステルの合成のため、２Ｍのエーテル中アリルマグネシウムクロ
ライド溶液２７．００ｍｌ（54.00mmol）をＴＨＦ／ＨＭＰＴ（v/v=1/1）中にゲ
ラニルクロライド１．１０ｇ（6.40mmol）を含む溶液に３０分以内に滴下する。
得られた混合物を室温で１５時間攪拌し、その後、飽和ＮＨ₄Ｃｌ水溶液２０ｍ
ｌを添加する。有機相を分離し、水相を４回それぞれジクロロメタン２５ｍｌで
抽出する。合わせた有機相を減圧下で濃縮した。残った残留物をエーテル５０ｍ
ｌに溶解し、２Ｍの塩酸水溶液、飽和ＮａＣｌ水溶液及び蒸留水で連続的に洗浄
し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、そして減圧下で濃縮する。このようにして得られた残
留物の減圧蒸留により(Ｅ)−６，１０−ジメチルウンデカ−１，５，９−トリエ
ン０．８９ｇ（4.99mmol，78％）を与える。

【０１８５】１０分以内に、エーテル中の０．５Ｍビス（３−メチルブタン−２−イル）ボ
ラン溶液２４．７０ｍｌ（12.40mmol）を、十分攪拌したＴＨＦ２５ｍｌ中（Ｅ
）−６，１０−ジメチルウンデカ−１，５，９−トリエン２．００ｇ（11.20mmo
l）の溶液に滴下する。反応混合物を１５時間攪拌し、その後、３ＭのＮａＯＨ
水溶液３．５０ｍｌ及び３０％過酸化水素水溶液３．５０ｍｌを添加する。攪拌
１時間後、その混合物を飽和ＮＨ₄Ｃｌ水溶液１０．００ｍｌで中和し、その水
相を３回それぞれエーテル２０．００ｍｌで抽出する。合わせた有機相をＭｇＳ
Ｏ₄で乾燥し、減圧下で濃縮する。このようにして得られた粗生成物をカラムク
ロマトグラフィー（移動系，ヘプタン：エーテル＝７：３）により精製する。収
量は無色の油としての（Ｅ）−６，１０−ジメチルウンデカ−５，９−ジエン−
１−オル０．８５ｇ（4.261mmol，38％）であった。

【０１８６】室温で、塩化ピリジニウム塩３．５０ｇ（8.90mmol）を１５ｍｌＴＨＦ中に（
Ｅ）−６，１０−ジメチルウンデカ−５，９−ジエン−１−オル０．５０ｇ（2.
60mmol）を含む溶液に添加した。２０時間の攪拌後、全溶液を氷水８０ｍｌ上に
注ぎ、３回それぞれエーテル６０ｍｌで抽出する。合わせた有機抽出物をＭｇＳ
Ｏ₄上で乾燥し、カラムクロマトグラフィー（移動系，ヘプタン：エーテル＝７
：３）により精製する。収量は、無色の油としての（Ｅ）−６，１０−ジメチル
ウンデカ−５，９−ジエンカルボン酸０．１７ｇ（0.81mmol，31％）であった。

【０１８７】 (Ｅ)−６，１０−ジメチルウンデカ−５，９−ジエンカルボン酸１．７０ｇ（
8.08mmol）をメタノール／水１０ｍｌ（v/v=10/1）に溶解し、攪拌しながら、窒
素がもはや発生しなくなるまで１．０Ｍエーテルのジアゾメタン溶液を滴下する
。溶剤混合物を除去して残った残留物をカラムクロマトグラフィー（移動系，ヘ
プタン：エーテル＝７：１）により精製する。その生成物は、無色の油の(Ｅ)−
６，１０−ジメチルウンデカ−５，９−ジエンカルボン酸メチルエステル１．６
８ｇ（7.49mmol，93％）であった。

【０１８８】ＴＨＦ（LDA8.92mmolに対応）中の０．６７Ｍリチウムジイソプロピルアミド
溶液（ｎ−ブチルリチウム及びジイソプロピルアミンから調製されたもの）１４
ｍｌに、ＴＨＦ３ｍｌに溶解した（Ｅ）−６，１０−ジメチルウンデカ−５，９
−ジエンカルボン酸メチルエステル１．５０ｇ（6.69mmol）を−７８℃、不活性
ガス雰囲気下で滴下する。１時間以内に、この溶液を−５０℃に温め、その後、
ギ酸エチルエステル０．８３ｇ（11.15mmol）を添加し、一定の温度でさらに１
時間攪拌する。後処理のため、全反応溶液を氷水５０ｍｌ上に注ぎ、３回それぞ
れエーテル１５ｍｌで抽出する。合わせた有機相を蒸留水２０ｍｌで洗浄し、Ｍ
ｇＳＯ₄で乾燥する。溶剤を除去した後に残った残留物をカラムクロマトグラフ
ィー（移動系，ヘプタン：エーテル＝７：１）又は減圧蒸留により精製する。そ
の収量は、無色の油の(Ｅ)−６，１０−ジメチル−２−ホルミルウンデカ−５，
９−ジエンカルボン酸メチルエステル１．１２ｇ（4.42mmol，66％）であった。

【０１８９】不活性ガス雰囲気下、５０％水素化ナトリウム／フリット中の油分散０．２０
ｇ（4.10mmol）を乾燥ヘキサン１０ｍｌでそれぞれ２度洗浄する。油から遊離さ
れたＮａＨを不活性ガス下三角フラスコに移し、乾燥したＤＭＳＯ２０ｍｌを添
加し、この混合物を攪拌しながら６０℃で加熱する。ＴＨＦ２５ｍｌの添加後、
その反応混合物を０℃に冷やし、注入器により、最初に乾燥したＤＭＳＯ２０ｍ
ｌに溶解したヨウ化トリメチルスルホニウム０．９０ｇ（4.10mmol）、次いでＴ
ＨＦ１５ｍｌに溶解した（Ｅ）−６，１０−ジメチル−２−ホルミルウンデカ−
５，９−ジエンカルボン酸メチルエステル１．０６ｇ（4.20mmol）を添加する。
室温で４８時間攪拌後、その反応は完了する。反応混合物を氷水３００ｍｌ上に
注ぎ、３回それぞれエーテル３０ｍｌで抽出する。合わせた有機相を２回それぞ
れ蒸留水で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥する。溶剤を減圧下で蒸留した後に得られ
た残留物を短いフリットカラム（移動系，ヘプタン：エーテル＝７：１）で精製
する。その収量は、無色の油の(Ｅ)−６，１０−ジメチル−２−オキシラニルウ
ンデカ−５，９−ジエンカルボン酸メチルエステル０．８０ｇ（2.99mmol，73％
）であった。

【０１９０】結果：実施例２４で記述されたのと同様に脱保護が行われ、ガノマイシンＢを生じる
。

【０１９１】（実施例２６）１，４−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]−２−メチルベンゼンから
出発することによるガノマイシンＢの合成方法：０℃に温度を制御したクロロホルム２０ｍｌ中に１，４−ジヒドロキシ−２−
メリルベンゼン１．２４ｇ（10.00mmol）及びトリエチルアミン３．０５ｍｌ（2
2.00mmol）を含む溶液に、アルゴン雰囲気下で注入器を用いてｔ−ブチルジメチ
ルシリルトリフレート５．８２ｇ（22.00mmol）をゆっくり添加する。室温まで
温めた後、この反応溶液を１８時間攪拌し、続いて氷水５０ｍｌ上に注ぐ。有機
相を分離し、水相をクロロホルム１００ｍｌで抽出する。合わせた有機相を連続
的にそれぞれ１ＭのＨＣｌ水溶液１００ｍｌ、１ＭＮａＯＨ水溶液及び飽和炭酸
水素塩水溶液で洗浄し、ＭｓＳＯ₄で乾燥する。減圧下で溶剤を除去した後、生
成物をクロロホルム／アセトニトリルから再結晶により精製する。その収量は、
１，４−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]−２−メチルベンゼン３．３
５ｇ（9.50mmol，95％）であった。

【０１９２】この中間体を還流下で２時間、四塩化炭素２０ｍｌ中のＮ−ブロモスクシミド
１．７７ｇ（9.97mmol）及び過酸化ベンゾイル２０ｍｇと共に加熱する。この溶
液を冷却した後の沈殿した固形物を濾過し、２回それぞれ四塩化炭素１０ｍｌで
洗浄する。濾液を混ぜ合わせ、減圧下で溶剤を除去した後に残った固形物を石油
エーテルから再結晶する。その生成物は、１，４−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシ
リル)オキシ]−２−ブロモメチルベンゼン３．０３ｇ（7.03mmol，74％）であっ
た。これは次にグリニャール化合物の調製用に使用される。還流冷却器を装備し
た三角フラスコに、マグネシウム削り屑０．１３ｇ（5.40mmol）及び１，４−ビ
ス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]−２−ブロモメチルベンゼン０．２６ｇ
（0.60mmol）を無水エーテル１０ｍｌに詰め込む。反応の始まりは、この溶液の
白濁及び発熱から分かる。その後、激しく攪拌しながら、無水エーテル１００ｍ
ｌに溶解した１，４−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]−２−ブロモベ
ンゼンをわずかに沸騰させた状態でゆっくりと滴下する。反応が完了した後、マ
クネシウムのほとんどすべてが溶解するまで、この混合物を還流下で３０分間加
熱する。

【０１９３】その場で生成された[２，５−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]フェ
ニル]メチルマグネシウムブロマイド（5.40mmol）のエーテル溶液をＴＨＦ３０
ｍｌで希釈し、−３０℃まで冷却し、０．１０Ｍの四塩化銅二リチウム溶液２．
５０ｍｌを滴下した。この温度で３０分攪拌した後、全溶液を、−３０℃に冷却
した、ＴＨＦ３０ｍｌ中の(Ｅ)−６，１０−ジメチル−２−ホルミルウンデカ−
５，９−ジエン−カルボン酸メチルエステル（その合成は実施例２５に記述され
る）１．３７ｇ（5.40mmol）を含む溶液に滴下する。一定の温度で約２時間攪拌
した後、その反応を完了し、後処理のため、飽和ＮＨ₄Ｃｌ水溶液１０ｍｌ及び
蒸留水１５ｍｌを添加する。相を分離した後、水相をエーテル２０ｍｌで再抽出
し、合わせた有機相を２回それぞれ飽和ＮａＣｌ水溶液１５ｍｌで洗浄し、Ｍｇ
ＳＯ₄で乾燥する。溶剤を蒸留した後に得られた残留物をカラムクロマトグラフ
ィー（移動系，ヘプタン：酢酸エチル＝９：１）により精製する。収量は、(５
Ｅ)−２−[２'−(２，５−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]フェニル)
−１'−ヒドロキシエチル]−６，１０−ジメチル−５，９−ウンデカジエン酸メ
チルエステル１．８３ｇ（3.02mmol，56％）であった。

【０１９４】乾燥は、実施例２５に記載されたように行い、２つの異性体(２(１')Ｚ,５Ｅ)
−及び(２(１')Ｅ,５Ｅ)−２−[２'−(２，５−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリ
ル)オキシ]フェニル)エチリデン]−６，１０−ジメチル−５，９−ウンデカジエ
ン酸メチルエステルを２０：８０の比率で(２(１')Ｅ,５Ｅ)−異性体を有利に、
かつ全収率８３％で得られる。

【０１９５】結果：脱保護が実施例２４で記述されたように行われ、ガノマイシンＢを生じる。

【０１９６】（実施例２７）テルペノイドフェニルスルホン類から出発することによるガノマイシンＢの合
成方法： [２，５−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]フェニル]アセトアルデヒ
ド４．７６ｇ（12.50mmol）、アクリル酸メチルエステル２．１５ｍｌ（25.00mm
ol）及び１，４−ジアザビシクロ[２．２．２]オクタン０．２８ｇ（2.50mmol）
の混合物を室温で４０日攪拌する。過剰のアクリル酸メチルエステルを除いた溶
剤を除去した後に残った残留物をカラムクロマトグラフィー（移動系，ヘプタン
：酢酸エチル＝１０：１）により精製する。収量は、４−[２，５−ビス[(ｔ−
ブチルジメチルシリル)オキシ]フェニル]−３−ヒドロキシ−２−メチリデンブ
タン酸メチルエステル３．２１ｇ（6.88mmol，55％）であった。

【０１９７】室温で、ピリジン２．８０ｍｌ（34.86mmol）、無水酢酸２．００ｍｌ（21.34
mmol）及び４−(ジメチルアミノ)ピリジン３０ｍｇ（0.24mmol）をジクロロメタ
ン８０ｍｌ中に４−[２，５−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]フェニ
ル]−３−ヒドロキシ−２−メチリデンブタン酸メチルエステル３．２１ｇ（6.8
8mmol）を含む溶液に添加する。この溶液を２時間攪拌し、その後飽和ＮＨ₄Ｃｌ
水溶液２０ｍｌ上に注ぎ、有機相を最初に２回それぞれ飽和ＣｕＳＯ₄水溶液１
０ｍｌ、その後２回それぞれ飽和ＮａＣｌ水溶液１０ｍｌで洗浄し、ＭｇＳＯ₄
で乾燥する。溶剤を蒸留した後、粗生成物をカラムクロマトグラフィー（移動系
，ヘプタン：酢酸エチル＝１０：１）により精製する。収量は、４−[２，５−
ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]フェニル]−３−アセトキシ−２−メ
チリデンブタン酸メチル３．２６ｇ（6.40mmol，93％）であった。

【０１９８】この中間体を次のようにして得られるスルホンと反応させる。ＤＭＦ２０ｍｌ
中ベンゼンスルフィン酸ナトリウム３．７８ｇ（23.03mmol）を攪拌しながらＤ
ＭＦ５ｍｌ中に臭化ゲラニル５．００ｇ（23.03mmol）を含む溶液に添加する。
この混合物を１２０℃で２時間加熱し、冷却し、氷水１００ｇを添加する。続い
てこの溶液を３回それぞれジクロロメタン２０ｍｌで抽出し、合わせた有機相を
最初に２回それぞれ飽和ＣｕＳＯ₄水溶液１５ｍｌ、次いで蒸留水１５ｍｌで洗
浄し、ＭｄＳＯ₄で乾燥する。減圧下で溶剤を除去した後に残った残留物をカラ
ムクロマトグラフィー（移動系，ヘプタン：酢酸エチル＝１０：１）により精製
する。収量は、[(２Ｅ,６Ｅ)−３，７−ジメチル−２，６−オクタジエニル]フ
ェニルスルホン４．７４ｇ（17.04mmol）であった。

【０１９９】ＴＨＦ／１，３−ジメチル−３，４，５，６−テトラヒドロ−２(１Ｈ)ピリミ
ジノン（49ml/12ml）中に[(２Ｅ,６Ｅ)−３，７−ジメチル−２，６−オクタジ
エニル]フェニルスルホン２．２０ｇ（7.90mmol）を含む溶液をアルゴン雰囲気
下−７８℃で１．３０Ｍのヘキサン中ｎ−ブリルリチウム（19.8mmol）溶液１５
．２ｍｌを滴下する。この反応混合物を一定の温度で２０分間攪拌し、続いて１
時間以内に、ＴＨＦ２０ｍｌに溶解した４−[２，５−ビス[(t−ブチルジメチル
シリル)オキシ]フェニル]−３−アセトキシ−２−メチリデンブタン酸メチルエ
ステル４．０２ｇ（7.90mmol）を滴下する。攪拌しながら、２時間以内にこの溶
液を−３０℃まで温め、飽和ＮＨ₄Ｃｌ水溶液６０ｍｌを添加し、この混合物を
４回それぞれエーテル２０ｍｌで抽出する。合わせた有機相を飽和ＮａＣｌ水溶
液１５ｍｌで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥する。カラムクロマトグラフィー（移動
系，ヘプタン：酢酸エチル＝１０：１）により溶剤を蒸留した後に残った残留物
の精製で２つの異性体(２(１')Ｚ,５Ｅ)−及び(２(１')Ｅ,５Ｅ)−２−[２'−(
２，５−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]フェニル)エチリデン]−６，
１０−ジメチル−４−フェニルスルホニル−５，９−ウンデカジエン酸メチルエ
ステルを２７：７３の比率で(２(１')Ｅ,５Ｅ)異性体を有利に、かつ、全収率６
８％で得られる。

【０２００】ＴＨＦ９ｍｌ中に(２(１')Ｅ,５Ｅ)−２−[２'−(２，５−ビス[(ｔ−ブチル
ジメチルシリル)オキシ]フェニル)エチリデン]−６，１０−ジメチル−４−フェ
ニルスルホニル−５，９−ウンデカジエン酸メチルエステル０．２５ｇ（0.34mm
ol）を含む溶液に、ＴＨＦ２．５ｍｌ中にＰｄＣｌ₂／(ｄｐｐｐ)（61mg,0.10mm
ol）を含む溶液を添加する。この反応混合物を０℃で温度制御し、３．５時間以
内に、ＴＨＦ中１．０Ｍのトリエチル水酸化ホウ素リチウム溶液３．４ｍｌを添
加する。一定の温度でさらに２．５時間攪拌した後、この反応混合物をエーテル
３５ｍｌで希釈し、それぞれ１．０ＭのＮａＣＮ水溶液と飽和ＮａＣｌ溶液で洗
浄する。有機相を硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下で濃縮する。残った残留物
の精製をカラムクロマトグラフィー（移動系，ヘプタン：酢酸エチル＝１０：１
）により行う。収量は、(２(１')Ｚ,５Ｅ)−２−[２'−(２，５−ビス[(ｔ−ブ
チルジメチルシリル)オキシ]フェニル)エチリデン]−６，１０−ジメチル−５，
９−ウンデカジエン酸メチルエステル０．１０ｇ（0.17mmol，50％）であった。

【０２０１】結果：実施例２４に記述されたように脱保護が行われ、ガノマイシンＢを生じる。

【０２０２】（実施例２８）ガノマイシンＡの合成中間体として必要とされる[(４Ｅ,８Ｅ)−５，９−ジメチル−１０−[(ｔ−ブ
チルジメリルシリル)オキシ]−４，８−デカジエニル]ヨウ化トリフェニルホス
ホニウムの合成のために、二酸化セレニウム２．８３ｇ（25.47mmol）を９５％
エタノール２０ｍｌ中に酢酸ゲラニル５．００ｇ（25.47mmol）を含む溶液に添
加する。この溶液を還流下で１時間加熱する。冷ました溶液を濾過し、減圧下で
濃縮する。残った残留物を乾燥ジクロロメタン２０ｍｌに溶解し、水酸化ホウ素
ナトリウム１．１６ｇ（30.56mmol）を添加し、この混合物を室温で１０分間攪
拌する。後処理のため、蒸留水２０ｍｌを注意深く添加し、その後、有機相を最
初３％ＮａＨＳＯ₄水溶液１０ｍｌ、次いで蒸留水１０ｍｌで洗浄する。ＭｇＳ
Ｏ₄で乾燥し減圧下で溶剤を除去した後、乾燥したＤＭＦ１０ｍｌに溶解した８
−酢酸ヒドロキシゲラニル（3.30g,15.54mmol,61％）が得られ、その後、塩化ｔ
−ブチルジメチルシリル２．８１ｇ（18.65mmol）及び２．６４ｇ（38.85mmol）
を添加し、この混合物を３５℃で１５時間攪拌する。すべての溶液を氷水１５ｍ
ｌ上に注ぎ、２回それぞれジクロロメタン１０ｍｌで抽出する。合わせた有機相
を最初に３％ＮａＨＳＯ₄水溶液１０ｍｌで、次いで、蒸留水１０ｍｌで洗浄し
、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、減圧下で濃縮する。このようにして得られた残留物を１
％メタノールナトリウム（methanolic sodium）メタノール塩（methanolate）溶
液１０ｍｌに溶解し、室温で１０時間攪拌する。酸性イオン交換体で中和し、か
つ減圧下で溶剤を除去した後、８−[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]ゲラニ
オール（それは、その後に新しく蒸留した２，６−ルチジン２ｍｌに添加される
）、が全収量の３．９９ｇ（14.01mmol）で得られる。得られた溶液を０℃で激
しく攪拌したＤＭＦ７．５ｍｌ中に乾燥ＬｉＣｌを０．６２ｇ（14.70mmol）含
む懸濁液にゆっくりと滴下する。約３０分後に、塩化メタンスルホニル１．１３
ｍｌ（14.70mmol）を添加して白い大きな沈殿物を形成する。室温で６時間攪拌
した後、全ての溶液を氷水５０ｍｌ上に注ぎ、２回それぞれエタノール７５ｍｌ
で抽出する。合わせた有機相を最初に蒸留水３０ｍｌで、次いで飽和ＣｕＳＯ₄
水溶液３０ｍｌで、そして最後に飽和ＮａＣｌ水溶液３０ｍｌで洗浄し、ＭｇＳ
Ｏ₄で乾燥する。溶剤を除去した後、[(２Ｅ,６Ｅ)−２，６−ジメチル−８−ク
ロロ−２，６−オクタジエニル](ｔ−ブチルジメチルシリル)エーテルが、僅か
に黄色の油で全収率の５２％（4.01g,13.24mmol）で得られる。

【０２０３】 −７８℃まで冷却された、ＴＨＦ４０ｍｌ中にヨウ化第一銅（I）１．５２ｇ
（8.00mmol）を含む懸濁液に、攪拌しながら０．７ＭのＴＨＦ中の臭化ビニルマ
グネシウム溶液４３．２ｍｌをゆっくりと添加する。この懸濁液を２０分間攪拌
し、その後、−２５℃まで温め、この温度でさらに３５分間攪拌する。このよう
にして得られたオリーブ色の溶液に、ＴＨＦ２ｍｌに溶解した[(２Ｅ,６Ｅ)−２
，６−ジメチル−８−クロロ−２，６−オクタジエニル](ｔ−ブチルジメチルシ
リル)エーテル４．０１ｇ（13.24mmol）を滴下する。室温で６時間攪拌した後、
エーテル１５０ｍｌを添加し、有機相を蒸留水、３％ＮＨ₄Ｃｌ水溶液、飽和Ｃ
ｕＳＯ₄水溶液及び飽和ＮａＣｌ水溶液のそれぞれ５０ｍｌで連続的に洗浄し、
ＭｇＳＯ₄で乾燥する。減圧下で溶剤を蒸留して得られた残留物をカラムクロマ
トグラフィー（移動系，ヘプタン）で精製する。収量は、[(２Ｅ,６Ｅ)−２，６
−ジメチル−８−クロロ−２，６，９−デカトリエニル](ｔ−ブチルジメチルシ
リル)エーテル３．０４ｇ（10.19mmol，77％）であった。

【０２０４】 −１０℃まで冷却された、新しく調製した１．２ＭのＴＨＦ中のジシアミルボ
レート溶液１８ｍｌに、ＴＨＦ３ｍｌに溶解した[(２Ｅ,６Ｅ)−２，６−ジメチ
ル−８−クロロ−２，６，９−デカトリエニル](ｔ−ブチルジメチルシリル)エ
ーテル３．０４ｇ（10.19mmol）を添加する。得られた黄色の溶液を５．５時間
激しく攪拌する。続いて蒸留水７ｍｌ、３ＭＮａＯＨ水溶液７ｍｌ及び３０％過
酸化水素水溶液７ｍｌを連続して滴下した。室温で１８時間攪拌した後、エーテ
ル１９０ｍｌが添加され、有機相を３回それぞれ蒸留水３０ｍｌで洗浄し、Ｍｇ
ＳＯ₄で乾燥する。減圧下で溶剤を除去した後に得られた残留物をカラムクロマ
トグラフィー（移動系，ヘプタン：エーテル＝２０：１）で精製する。収量は、
(４Ｅ,８Ｅ)−５，９−ジメチル−１０−[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]
−４，８−デカジエン−１−オール２．６３ｇ（8.46mmol，83％）であった。

【０２０５】０℃に冷却した、エーテル１５ｍｌ及びアセトニトリル１０ｍｌ中の(４Ｅ,８
Ｅ)−５，９−ジメチル−１０−[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]−４，８
−デカジエン−１−オール２．６３ｇ（8.46mmol）、トリフェニルホスフェート
２．８９ｇ（11.00mmol）及びイミダゾール０．８０ｇ（11.55mmol）を含む溶液
に、ヨウ素３．０８ｇ（12.10mmol）をゆっくり添加する。攪拌してから４５分
後、エ−テル１５０ｍｌを添加する。有機相を飽和チオ硫酸ナトリウム水溶液、
飽和ＣｕＳＯ₄水溶液及び蒸留水のそれぞれ３０ｍｌで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥
する。溶剤を蒸留した後に得られた残留物をベンゼン１０ｍｌに溶解し、トリフ
ェニルホスフィン２．４７ｇ（9.36mmol）を添加し、この混合物を還流下で２４
時間加熱する。冷却後に残った固形物をジクロロメタン１００ｍｌに溶解し、続
いてこの溶剤を減圧下で蒸留する。残っている油を乾燥したエーテルを添加する
ことにより再結晶化させる。その収量は、ホスホニウム塩４．６４ｇ（6.77mmol
，80％）であった。

【０２０６】 −７８℃に冷却した、ＴＨＦ１０ｍｌ中に[(４Ｅ,８Ｅ)−５，９−ジメチル−
１０−[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]−４，８−デカジエニル]ヨウ化ト
リフェニルホスホニウム２．０６ｇ（3.00mmol）を含む溶液に、０．６５Ｍのト
ルエン中のカリウムビス（トリメチルシリル）アミド溶液９．２ｍｌ（6.00mmol
）を添加する。一定の温度で１．５時間攪拌した後、クロロホルム酸メチルエス
テル２４０μｌ（3.20mmol）を添加する。この溶液を−７８℃で３０分間攪拌し
、その後、ゆっくりと室温まで温めて、再度１．５時間攪拌する。ＴＨＦ３ｍｌ
に溶解した[２，５−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]フェニル]アセト
アルデヒド０．９２ｇ（2.42mmol）を添加した後、この溶液を室温で３２時間攪
拌し、その後、エーテル２５ｍｌで希釈し、飽和ＮＨ₄Ｃｌ水溶液及び蒸留水の
それぞれ１０ｍｌで洗浄する。有機相をＭｇＳＯ₄で乾燥し、かつ溶剤を蒸留し
た後に残った残留物をカラムクロマトグラフィー（移動系，ヘプタン：酢酸エチ
ル＝１０：１）で精製する。２つの異性体、(２(１')Ｚ,５Ｅ,９Ｅ)−及び(２(
１')Ｅ,５Ｅ,９Ｅ)−２−[２'−(２，５−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オ
キシ]フェニル)エチリデン]−６，１０−ジメチル−１１−[(ｔ−ブチルジメチ
ルシリル)オキシ]−５，９−ウンデカジエン酸メチルエステルが、比率１４：８
６で(２(１')Ｅ,５Ｅ,９Ｅ)異性体を有利に、かつ全収率５４％で得られる。

【０２０７】テルペノイド側鎖の末端ＯＨ官能基の脱保護は、５０％ＨＦ水溶液の２当量を
０℃に冷却した、アセトニトリル１５ｍｌ中に(２(１')Ｚ,５Ｅ,９Ｅ)−２−[２
'−(２，５−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]フェニル)エチリデン]−
６，１０−ジメチル−１１−[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]−５，９−ウ
ンデカジエン酸メチルエステル０．５０ｇを含む溶液に添加することにより行う
。１時間後、飽和ＮａＨＣＯ₃水溶液１０ｍｌを添加し、続いてこの反応混合物
を３回それぞれエーテル１０ｍｌで抽出し、合わせた有機相を飽和ＮａＣｌ水溶
液で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥する。溶剤を蒸留した後に残った残留物の精製を
カラムクロマトグラフィー（移動系，ヘプタン：酢酸エチル＝６：１）で行う。
その生成物は、９２％の(５Ｅ,９Ｅ)−２−[２'−(２，５−ビス[(ｔ−ブチルジ
メチルシリル)オキシ]フェニル)エチリデン]−６，１０−ジメチル−１１−ヒド
ロキシ−５，９−ウンデカジエン酸メチルエステルであった。

【０２０８】結果：さらに脱保護が実施例２４に記述されるように行われ、ガノマイシンＡを生じ
る。

【０２０９】（実施例２９） [２，５−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]フェニル]アセトアルデヒ
ドと(Ｅ)−６，１０−ジメチルウンデカ−５，９−ジエンカルボン酸メチルエス
テルとのカップリングによるガノマイシンＢの合成０℃でＴＨＦ３ｍｌ中にジイソプロピルアミン０．４６ｍｌ（3.30mmol）を含
む溶液に２．３３Ｍのエーテル性ｎ−ブチルチリウム溶液１．３９ｍｌ（3.23mm
ol）を滴下する。０℃で２０分間攪拌した後、この溶液を−７８℃まで冷却する
。注入器により、ＴＨＦ３ｍｌに溶解した(Ｅ)−６，１０−ジメチルウンデカ−
５，９−ジエンカルボン酸メチルエステル（それは既に実施例２５で記述されて
いる）０．６６ｇ（2.95mmol）を添加する。一定の温度で１時間攪拌した後、Ｔ
ＨＦ３ｍｌに溶解した[２，５−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]フェ
ニル]アセトアルデヒド０．９２ｇ（2.42mmol）を添加する。−７８℃でさらに
攪拌した後、この反応は完了する。後処理のため、飽和ＮＨ₄Ｃｌ水溶液５ｍｌ
を添加し、次いで、室温まで温める。この反応混合物を３回それぞれエーテル５
ｍｌで抽出し、合わせた有機相を２回それぞれ飽和ＮａＣｌ水溶液で洗浄し、そ
してＭｇＳＯ₄で乾燥する。溶剤を蒸留した後に残った残留物の精製をカラムク
ロマトグラフィー（移動系，ヘプタン：酢酸エチル＝１０：１）で行う。その収
量は、(５Ｅ)−２−[２'，５−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]フェニ
ル]−１'−ヒドロキシエチル]−６，１０−ジメチル−５，９−ウンデカジエン
酸メチルエステル１．１４ｇ（1.80mmol，78％）であった。

【０２１０】実施例２４に記述されているように脱水が行われ、２つの異性体(２(１')Ｅ,
５Ｅ)−及び（２(１')Ｅ,５Ｅ）−２−(２'−(２,５−ビス[(ｔ−ブチルジメチ
ルシリル)オキシ]フェニル)エチリデン)−６，１０−ジメチル−５，９−ウンデ
カジエン酸メチルエステルを２０：８０の比率で(２(１')Ｅ,５Ｅ)異性体を有利
に、かつ収率８３％で得られる。

【０２１１】結果：脱保護が実施例２４に記述されたように行われ、ガノマイシンＢを生じる。

【０２１２】（実施例３０）スルホン組成を変化させることによる一般式１の更なる誘導体の合成方法：実施例２９により製造された４−[２'，５−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル
)オキシ]フェニル]−３−アセトキシ−２−メチリデンブタン酸メチルエステル
を他のスルホン類、例えば、[(２Ｅ,６Ｅ)−３，７−ジメチル−８−[(ｔ−ブチ
ルジメチルシリル)オキシ]−２，６−オクタジエニル]フェニルスルホンと反応
させる。

【０２１３】 [(２Ｅ,６Ｅ)−３，７−ジメチル−８−[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]
−２，６−オクタジエニル]フェニルスルホンは次のようにして得ることができ
る。ＤＭＦ１５ｍｌ中のベンゼンスルフィン酸ナトリウム２．１７ｇ（13.24mmol）
のスラリーに、攪拌しながらＤＭＦ４ｍｌ中に[(２Ｅ,６Ｅ)−２，６−ジメチル
−８−クロロ−２，６−オクタジエニル](ｔ−ブチルジメチルシリル)エーテル
（その合成は既に実施例２８で記述されている）４．０１ｇ（13.24mmol）を含
む溶液を添加する。その混合物を２時間１２０℃で加熱し、冷まし、氷水７０ｇ
を添加する。続いて、この溶液を３回それぞれジクロロメタン１５ｍｌで抽出し
、合わせた有機相を最初に２回それぞれ飽和ＣｕＳＯ₄水溶液で、その後、蒸留
水で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥する。溶剤を減圧下で蒸留した後に残った残留物
をカラムクロマトグラフィー（移動系，ヘプタン：酢酸エチル＝１０：１）で精
製する。その収量は、[(２Ｅ,６Ｅ)−３，７−ジメチル−８−[(ｔ−ブチルジメ
チルシリル)オキシ]−２，６−オクタジエニル]フェニルスルホン３．７３ｇ（9
.14mmol，69％）であった。

【０２１４】結果： [(２Ｅ,６Ｅ)−３，７−ジメチル−８−[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]
−２，６−オクタジエニル]フェニルスルホンは、続いて実施例２４及び２８に
記述されるような脱保護により、ガノマイシンＡを生じる。

【０２１５】（実施例３１）長鎖ガノマイシン相同体の製造ＤＭＦ１２ｍｌ中に(２(１')Ｅ,５Ｅ,９Ｅ)−２−(２'−(２,５−ビス[(ｔ−
ブチルジメチルシリル)オキシ]フェニル)エチリデン)−６，１０−ジメチル−１
１−ヒドロキシ−５，９−ウンデカジエン酸メチルエステル（製造は実施例２８
を参照）１．００ｇ（1.66mmol）、塩化リチウム０．２０ｇ（4.77mmol）及びコ
リジン１．１２ｇ（8.20mmol）を含む溶液に、−３℃で塩化メシル０．４ｍｌ（
5.00mmol）を滴下する。この混合物を１時間以内に３℃まで温め、その後、飽和
ＮａＨＣＯ₃水溶液１０ｍｌ上に注ぐ。このようにして得られた溶液を３回それ
ぞれヘプタン／酢酸エチル（v/v=1/1）で抽出する。合わせた有機相をＭｇＳＯ₄ で乾燥し、減圧下で濃縮する。このようにして得られた(２(１')Ｚ,５Ｅ,９Ｅ)
−２−(２'−(２,５−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]フェニル)エチ
リデン)−６，１０−ジメチル−１１−クロロ−５，９−ウンデカジエン酸メチ
ルエステルをさらに精製しないで反応のために使用する。

【０２１６】ＴＨＦ／１，３−ジメチル−３，４，５，６−テトラヒドロ−２(１Ｈ)−ピリ
ミジノン（10ml/3ml）中に[(２Ｅ,６Ｅ)−３，７−ジメチル−８−[(ｔ−ブチル
ジメチルシリル)オキシ]−２，６−オクタジエニル]フェニルスルホン（製造は
実施例３０を参照）０．６１ｇ（1.50mmol）を含む溶液に、アルゴン雰囲気下、
−７８℃で、１．３０Ｍのヘキサン中ｎ−ブチルリチウム溶液の２．９ｍｌ（3.
76mmol） −ジメチル−１１−クロロ−５，９−ウンデカジエン酸メチルエステルを滴下す
る。この反応混合物を一定の温度で２０分間攪拌し、次いで１時間以内に、ＴＨ
Ｆ４ｍｌに溶解した(２(１')Ｚ,５Ｅ,９Ｅ)−２−(２'−(２,５−ビス[(ｔ−ブ
チルジメチルシリル)オキシ]フェニル)エチリデン)−６，１０−ジメチル−１１
−クロロ−５，９−ウンデカジエン酸メチルエステルを滴下した。攪拌しながら
、この溶液を２時間以内に−３０℃まで温め、飽和ＮＨ₄Ｃｌ水溶液１０ｍｌと
混合し、４回それぞれエーテルで抽出する。合わせた有機相を飽和ＮａＣｌ水溶
液５ｍｌで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥する。溶剤を蒸留した後に残った残留物を
カラムクロマトグラフィーによる精製で、(２(１')Ｚ,５Ｅ,９Ｅ,１３Ｅ,１７Ｅ
)−２−[２'−(２,５−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]フェニル)エチ
リデン]−６,１０,１４,１８−テトラメチル−１１−フェニルスルホニル−１９
−[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]−５,９,１３,１７−ノナデカテトラエ
ン酸メチルエステルを収率６６％（1.09g,1.09mmol）で得る。

【０２１７】結果：フェニルスルホニル官能基の減少は実施例３０に記載されたように行われ、(
２(１')Ｚ,５Ｅ,９Ｅ,１３Ｅ,１７Ｅ)−２−[２'−(２,５−ビス[(ｔ−ブチルジ
メチルシリル)オキシ]フェニル)エチリデン]−６,１０,１４,１８−テトラメチ
ル−１９−[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]−５,９,１３,１７−ノナデカ
テトラエン酸メチルエステルを４８％の収率で生ずる。

【０２１８】そして、(２(１')Ｚ,５Ｅ,９Ｅ,１３Ｅ,１７Ｅ)−２−[２'−(２,５−ビス[(
ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]フェニル)エチリデン]−６,１０,１４,１８
−テトラメチル−１９−[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]−５,９,１３,１
７−ノナデカテトラエン酸メチルエステルで出発し、完全な脱保護を実施例２４
に記述されたように実施する。

【０２１９】結果： (２(１')Ｚ,５Ｅ,９Ｅ,１３Ｅ,１７Ｅ)−２−[２'−(２,５−ジヒドロキシフ
ェニル)エチリデン]−６,１０,１４,１８−テトラメチル−１９−ヒドロキシ−
５,９,１３,１７−ノナデカテトラエン酸を得る。

【０２２０】もう一つの可能性は、実施例２８に従って末端ｔ−ブチルジメチルシリル基だ
けを開裂させることである。

【０２２１】結果： (２(１')Ｚ,５Ｅ,９Ｅ,１３Ｅ,１７Ｅ)−２−[２'−(２,５−ビス[(ｔ−ブチ
ルジメチルシリル)オキシ]フェニル)エチリデン]−６,１０,１４,１８−テトラ
メチル−１９−[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]−５,９,１３,１７−ノナ
デカテトラエン酸メチルエステルを得る。

【０２２２】後者は、再度この実施例に記述された反応順序：末端ＯＨ基の塩素化、スルホ
ン基形成を阻止する反応、フェニルスルホニル基の能の還元、脱保護、に従うこ
とができる。

【０２２３】結果： [(２Ｅ,６Ｅ)−３,７−ジメチル−８−[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]
−２，６−オクタジエニル]フェニルスルホンを使用する場合、(２(１')Ｚ,５Ｅ
,９Ｅ,１３Ｅ,１７Ｅ,２１Ｅ,２５Ｅ)−２−[２'−(２,５−ジヒドロキシフェニ
ル)エチリデン]−６,１０,１４,１８,２２,２６−ヘキサメチル−２７−ヒドロ
キシ−５,９,１３,１７,２１,２５−ヘプタイコサヘキサエン酸を得る。

【０２２４】結果： [(２Ｅ,６Ｅ)−３,７−ジメチル−２，６−オクタジエニル]フェニルスルホン
を使用する場合、(２(１')Ｚ,５Ｅ,９Ｅ,１３Ｅ,１７Ｅ,２１Ｅ,２５Ｅ)−２−[
２'−(２,５−ジヒドロキシフェニル)エチリデン]−６,１０,１４,１８,２２,２
６−ヘキサメチル−５,９,１３,１７,２１,２５−ヘプタイコサヘキサエン酸を
得る。

【０２２５】更なる分子鎖の拡大のためには、前述の反応サイクルが再び用いられる。

【０２２６】（実施例３２）ガノマイシンＡ末端ＯＨ基の官能基化−アジ化物官能基の導入方法：乾燥したＤＭＦ１．００ｍｌ中に(２(１')Ｚ,５Ｅ,９Ｅ)−１１−クロロ−２
−(２'−(２,５−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]フェニル)エチリデ
ン)−６，１０−ジメチル−５，９−ウンデカジエン酸メチルエステル０．３１
ｇ（0.50mmol）を含む溶液にアジ化ナトリウム３６ｍｇ（0.55mmol）を添加する
。この溶液を１２０℃まで加熱し、この温度で６時間攪拌する。冷ました溶液を
氷５ｇ上に注ぎ、３回それぞれエーテルで抽出する。合わせたエーテル分画を硫
酸マグネシウムで乾燥し、続いて減圧下で溶剤を蒸留する。この残った残留物を
カラムクロマトグラフィー（移動系，ヘプタン：酢酸エチル＝１０：１）で精製
する。この収量は、(２(１')Ｚ,５Ｅ,９Ｅ)−１１−アジド−２−(２'−(２,５
−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]フェニル)エチリデン)−６，１０−
ジメチル−５，９−ウンデカジエン酸メチルエステル２４５ｍｇ（0.39mmol,78
％）であった。

【０２２７】結果：実施例２４で記述されたような脱保護により(２(１')Ｚ,５Ｅ,９Ｅ)−１１−
アジド−２−(２'−(２,５−ビスヒドロキシフェニル)エチリデン)−６，１０−
ジメチル−５，９−ウンデカジエン酸を生じる。

【０２２８】（実施例３３）ガノマイシンＡ末端ＯＨ基の官能基化−フッ素原子の導入方法：トリクロロフルオロメタン２．５ｍｌ中にジメチルアミノトリメチルシラン０
．１１ｇ（0.87mmol）を含む溶液に−７８℃でジエチルアミノスルファトリフル
オライド（ＤＡＳＴ）０．１４ｍｌ（1.05mmol）を添加する。この温度で１０分
間攪拌した後、この溶液を室温まで加熱し、次いで再び−７８℃に冷却する。ト
リクロロフルオロメタン１．２５ｍｌに溶解した(２(１')Ｚ,５Ｅ,９Ｅ)−２−[
２'−(２，５−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]フェニル)エチリデン]
−６，１０−ジメチル−１１−ヒドロキシ−５，９−ウンデカジエン酸メチルエ
ステル（調製は実施例２８を参照）３０１ｍｇ（0.50mmol）の添加を注入器によ
り行う。攪拌して４５分後、この溶液を室温まで温め、氷水５ｍｌ上に注ぎ、３
回それぞれエーテル５ｍｌで抽出する。合わせた有機相を飽和ＮａＨＣＯ₃水溶
液及び飽和ＮａＣｌ水溶液のそれぞれ１０ｍｌで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、
減圧下で濃縮する。

【０２２９】残った残留物をカラムクロマトグラフィー（移動系，ヘプタン：酢酸エチル＝
１０：１）で精製する。この収量は、(２(１')Ｚ,５Ｅ,９Ｅ)−２−[２'−(２,
５−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]フェニル)エチリデン]−６，１０
−ジメチル−１１−フルオロ−５，９−ウンデカジエン酸メチルエステル１２７
ｍｇ（0.21mmol,42％）であった。

【０２３０】結果：実施例２３に記述されるように脱保護で、(２(１')Ｚ,５Ｅ,９Ｅ)−２−[２'
−(２,５−ビスヒドロキシフェニル)エチリデン]−６，１０−ジメチル−１１−
フルオロ−５，９−ウンデカジエン酸を生じる。

【０２３１】（実施例３４）ガノマイシンＡ末端ＯＨ基の官能基化−アルデヒド官能基に対する酸化方法：アルゴン下で攪拌した、石油エーテル１５ｍｌ中に活性化二酸化マグネシウム
０．９２ｇ（10.56mmol）を含む懸濁液に、石油エーテル１．０ｍｌに溶解した(
２(１')Ｚ,５Ｅ,９Ｅ)−２−[２'−(２,５−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)
オキシ]フェニル)エチリデン]−６，１０−ジメチル−１１−ヒドロキシ−５，
９−ウンデカジエン酸メチルエステル（調製は実施例２８を参照）３０１ｍｇ（
0.50mmol）を滴下する。激しく攪拌した８時間後、この溶液を珪藻土を介して濾
過し、残った残留物をエーテルで洗浄し、合わせた有機相を硫酸マグネシウムで
乾燥し、減圧下で濃縮する。更なる精製は不要である。この収量は、(２(１')Ｚ
,５Ｅ,９Ｅ)−２−[２'−(２,５−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]フ
ェニル)エチリデン]−１０−ホルミル−６−メチル−５，９−ウンデカジエン酸
メチルエステル２７０ｍｇ（0.45mmol,90％）であった。

【０２３２】結果：実施例２４に記述されるような脱保護で(２(１')Ｚ,５Ｅ,９Ｅ)−２−[２'−(
２,５−ビスヒドロキシフェニル)エチリデン]−１０−ホルミル−６−メチル−
５，９−ウンデカジエン酸を生じる。

【０２３３】（実施例３５）ガノマイシンＡ末端ＯＨ基の官能基化−２つのフッ素原子の導入方法：トリクロロフルオロメタン２．５ｍｌ中にジメチルアミノトリメチルシラン０
．１１ｇ（0.87mmol）を含む溶液に、−７８℃でジエチルアミノスルファトリフ
ルオライド（ＤＡＳＴ）０．１４ｍｌ（1.05mmol）を添加する。この温度で１０
分間攪拌した後、この溶液を室温まで温め、続いて再び−７８℃まで冷却する。
トリクロロフルオロメタン１．２５ｍｌに溶解した(２(１')Ｚ,５Ｅ,９Ｅ)−２
−[２'−(２,５−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]フェニル)エチリデ
ン]−１０−ホルミル−６−メチル−５，９−ウンデカジエン酸メチルエステル
（調製は実施例３２を参照）の添加を注入器により行う。攪拌してから４５分後
に、この溶液を室温まで温め、氷水５ｍｌ上に注いで、３回それぞれエーテル５
ｍｌで抽出する。合わせた有機相を飽和ＮａＨＣＯ₃水溶液及び飽和ＮａＣｌ水
溶液のそれぞれ１０ｍｌで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、減圧下で濃縮する。

【０２３４】残った残留物をカラムクロマトグラフィー（移動系，ヘプタン：酢酸エチル＝
１０：１）で精製する。この収量は、(２(１')Ｚ,５Ｅ,９Ｅ)−２−[２'−(２,
５−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]フェニル)エチリデン]−１１，１
１−ジフルオロ−６，１０−ジメチル−５，９−ウンデカジエン酸メチルエステ
ル１４０ｍｇ（0.23mmol，45％）であった。

【０２３５】結果：実施例２４に記述されるような脱保護で(２(１')Ｚ,５Ｅ,９Ｅ)−２−[２'−(
２,５−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]フェニル)エチリデン]−１１
，１１−ジフルオロ−６，１０−ジメチル−５，９−ウンデカジエン酸を生じる
。

【０２３６】（実施例３６）ガノマイシンＡ末端ＯＨ基の官能基化−ＯＨ官能基のエーテル化方法：ＤＭＦ１．０ｍｌ中に(２(１')Ｚ,５Ｅ,９Ｅ)−２−[２'−(２,５−ビス[(ｔ
−ブチルジメチルシリル)オキシ]フェニル)エチリデン]−６，１０−ジメチル−
１１−ヒドロキシ−５，９−ウンデカジエン酸メチルエステル３０１ｍｇ（0.50
mmol）を含む溶液（調製は実施例２８を参照）を０℃アルゴン雰囲気下でＤＭＦ
０．５ｍｌ中にＮａＨ２０ｍｇ（0.80mmol）を含む懸濁液にゆっくり添加する。
この混合物を一定の温度で３０分間攪拌し、その後室温まで温める。そして、表
１５に詳述されたハロゲン化物０.８２ｍｍｏｌを添加する。この反応混合物を
室温で３６時間攪拌し、氷水１０ｍｌ上に注ぎ、３回それぞれエーテル５ｍｌで
抽出する。合わせた有機相を飽和ＮａＣｌ水溶液１０ｍｌで洗浄し、ＭｇＳＯ₄
で乾燥し、減圧下で濃縮する。残った残留物をカラムクロマトグラフィー（移動
系，ヘプタン：酢酸エチル＝１０：１）で精製する。

【０２３７】

【表１５】

【０２３８】結果：実施例２４に記述されるような脱保護で１１−フェニルメトキシ−，１１−エ
トキシ及び１１−（メチル−２，３，４−トリ−Ｏ−ベンジル−６−デオキシ−
β−グルコピラノース−６−イル）オキシ(２(１')Ｚ，５Ｅ，９Ｅ)−２−[２'
−(２，５−ビスヒドロキシフェニル)エチリデン]−６，１０−ジメチル−５，
９−ウンデカジエン酸を生じる。

【０２３９】（実施例３７）ガノマイシンＡ末端ＯＨ基の官能基化−アミノ官能基の導入方法：乾燥したピリジン２．５ｍｌ中に(２(１')Ｚ,５Ｅ,９Ｅ)−１１−アジド−２
−[２'−(２,５−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]フェニル)エチリデ
ン]−６，１０−ジメチル−５，９−ウンデカジエン酸メチルエステル１５７ｍ
ｇ（0.25mmol）を含む溶液に、トリフェニルホスフィン０．１３ｇ（0.50mmol）
を添加する。室温で約２時間攪拌した後、その反応液をアセトアルデヒド２．５
ｍｌと混合し、室温でさらに１２時間攪拌する。減圧下で溶剤を蒸留した後に残
った残留物をエーテル５ｍｌに溶解し、２回それぞれ３％飽和硫酸水素ナトリウ
ム水溶液で、続いて２回それぞれ蒸留水２．５ｍｌで洗浄する。硫酸マグネシウ
ムで乾燥した後、溶剤を減圧下で蒸留し、残った残留物をカラムクロマトグラフ
ィー（移動系，ヘプタン：酢酸エチル＝１０：１）で精製する。その収量は、(
２(１')Ｚ,５Ｅ,９Ｅ)−１１−(Ｎ−アセチルアミノ)−２−[２'−(２,５−ビス
[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]フェニル)エチリデン]−６，１０−ジメチ
ル−５，９−ウンデカジエン酸メチルエステル２１２ｍｇ（0.33mmol,66％）で
あった。

【０２４０】結果：実施例２４に記述されるような脱保護で(２(１')Ｚ,５Ｅ,９Ｅ)−１１−(Ｎ−
アセチルアミノ)−２−[２'−(２,５−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ
]フェニル)エチリデン]−６，１０−ジメチル−５，９−ウンデカジエン酸を生
じる。

【０２４１】（実施例３８）無水フタル酸との反応方法：無水フタル酸５００ｍｇ（3.38mmol）を還流下でトルエン５ｍｌ中の(２(１')
Ｚ,５Ｅ,９Ｅ)−２−[２'−(２,５−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]
フェニル)エチリデン]−６，１０−ジメチル−１１−ヒドロキシ−５，９−ウン
デカジエン酸メチルエステル３０１ｍｇ（0.50mmol）（調製は実施例２８を参照
）と共に２時間加熱する。冷ました溶液を飽和ＮａＨＣＯ₃水溶液及び飽和Ｎａ
Ｃｌ水溶液でそれぞれ洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、減圧下で濃縮する。残った
残留物をカラムクロマトグラフィー（移動系，ヘプタン：酢酸エチル＝１０：１
）で精製する。その収量は、フタル酸モノエステル７５ｍｇ（0.10mmol,20％）
に加えてフタル酸ジエステル４０ｍｇ（0.03mmol,12％）であった。

【０２４２】結果：一般式１の化合物の親水性がかなり増強される。

【０２４３】（実施例３９）ヒドロキノンの酸化方法：室温で攪拌しながら、塩化メチレン１０ｍｌ中のガノマイシンＢ０．０１ｍｍ
ｏｌを、セリウム（IV）硝酸アンモニウム（アンモニウムヘキサニトラトセレー
ト(IV)＝(NH₄)Ce(NO₃)₆）０．０２ｍｍｏｌと３時間反応させ、その混合物を水
２０ｍｌに添加し、分液漏斗中で振盪し、有機相を分離し、かつ溶剤を除去する
。

【０２４４】結果：ヒドロキノンの酸化は、一般式１の活性物質の適用可能性を広げる。

【０２４５】（実施例４０）グリラーゼ阻害剤オフロキサシンでのエステル化乾燥したピリジン０．５ｍｌ中にオフロキサシン５５ｍｇ（0.15mmol）を含む
溶液に、０℃不活性ガス雰囲気下で無水トリフルオロメタンスルホン酸１０８ｍ
ｇ（0.38mmol）を注入器を用いてゆっくり添加する。この溶液を室温まで温め、
２時間攪拌する。続いて、これに乾燥したピリジン０．５ｍｌに溶解した(２(１
')Ｚ,５Ｅ,９Ｅ)−２−[２'−(２,５−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ
]フェニル)エチリデン]−６，１０−ジメチル−１１−ヒドロキシ−５，９−ウ
ンデカジエン酸メチルエステル（その合成は実施例２８に記載した）９０５ｍｇ
（1.50mmol）を添加する。この反応溶液を室温で２時間攪拌し、その後、氷水５
ｍｌ上に注ぎ、３回それぞれエーテル５ｍｌで抽出する。合わせた有機相を３％
ＮａＨＳＯ₄水溶液及び蒸留水のそれぞれ５ｍｌで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、
減圧下で濃縮する。得られた残留物のＨＰＬＣによる分離（移動系，ヘプタン：
酢酸エチル＝５：１）で一般式１２のオフロキサシンエステル４７ｍｇ（0.05mm
ol,33％）及び未反応の(２(１')Ｚ,５Ｅ,９Ｅ)−２−[２'−(２,５−ビス[(ｔ−
ブチルジメチルシリル)オキシ]フェニル)エチリデン]−６，１０−ジメチル−１
１−ヒドロキシ−５，９−ウンデカジエン酸メチルエステル４０３ｍｇ（0.67mm
ol,44％,使用した質量に基づく）を与える。

【０２４６】（実施例４１）ペニシリンＧでのエステル化 −２０℃に冷却した、乾燥したジクロロメタン１．５０ｍｌ中にペニシリンＧ
１００ｍｇ（0.30mmol）及び(２(１')Ｚ,５Ｅ,９Ｅ)−２−[２'−(２,５−ビス[
(ｔ−ブチルジメチルシリル)オキシ]フェニル)エチリデン]−６，１０−ジメチ
ル−１１−ヒドロキシ−５，９−ウンデカジエン酸メチルエステル（その合成は
実施例２８に記述した）２３５ｍｇ（0.39mmol）を含む溶液に、不活性ガス雰囲
気下でピリジン０．１３ｍｌ（1.64mmol）及びシアヌル酸塩化物７２ｍｇ（0.39
mmol）を添加する。一定温度で２時間攪拌した後、ジクロロメタン５ｍｌ及び１
．０Ｍ硫酸水溶液５ｍｌを添加し、有機相を分離し、その水相を２回以上それぞ
れジクロロメタン５ｍｌで抽出する。合わせた有機相を飽和ＮａＨＣＯ₃水溶液
及び飽和ＮａＣｌ水溶液のそれぞれ５ｍｌで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、減圧
下で濃縮する。得られた残留物のＨＰＬＣによる精製（移動系，ヘプタン：酢酸
エチル＝５：１）で一般式１０の“ペニシリンＧ”エステル４７ｍｇ（0.13mmol
,43％）を与える。

【０２４７】（実施例４２）置換基Ｒ⁵として炭水化物を有する一般式１の活性物質方法：ＤＭＦ１．０ｍｌ中に(２(１')Ｚ,５Ｅ,９Ｅ)−２−[２'−(２,５−ビス[(ｔ
−ブチルジメチルシリル)オキシ]フェニル)エチリデン]−６，１０−ジメチル−
１１−ヒドロキシ−５，９−ウンデカジエン酸メチルエステル３０１ｍｇ（0.50
mmol）を含む溶液（調製は実施例２８による）を、０℃アルゴン雰囲気下でＤＭ
Ｆ０．５ｍｌ中にＮａＨ２０ｍｇ（0.80mmol）を含む懸濁液にゆっくり添加する
。この混合物を一定温度で３０分間攪拌し、その後、室温まで温める。そして、
メチル−２，３，４−トリ−O−ベンジル−６−デオキシ−６−ヨード−β−グ
ルコピラノシド０．８２ｍｍｏｌを添加する。この反応混合物を室温で３６時間
攪拌し、氷水１０ｍｌ上に注ぎ、３回それぞれエーテル５ｍｌで抽出する。合わ
せた有機相を飽和ＮａＣｌ水溶液１０ｍｌで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、減圧
下で濃縮する。残った残留物をカラムクロマトグラフィー（移動系，ヘプタン：
酢酸エチル＝１０：１）で精製する。

【０２４８】結果： (２(１')Ｚ,５Ｅ,９Ｅ)−２−[２'−(２,５−ビス[(ｔ−ブチルジメチルシリ
ル)オキシ]フェニル)エチリデン]−６，１０−ジメチル−１１−[(メチル−２,
３,４−トリ−Ｏ−ベンジル−６−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノース−６−
イル)オキシ]−５,９−ウンデカジエン酸は収率５１％である。脱保護を実施例
２４に記述されたように行い、１１−[(メチル−２,３,４−トリ−Ｏ−ベンジル
−６−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノース−６−イル)オキシ]−(２(１')Ｚ,
５Ｅ,９Ｅ)−２−[２'−(２,５−ビスヒドロキシフェニル)エチリデン]−６,１
０ジメチル−５,９−ウンデカジエン酸を生じる。

【０２４９】（実施例４３）フシジン酸でのエステル化方法：Ｒ⁵＝ＣＨ₂ＯＨを有する前記一般式の化合物を、リパーゼ（2.5%；例えば、カ
ンシダ・ルゴサ又はムコール・ミーヘイ、有限会社シグマ・アルドリッヒ・ケミ
エ）の作用下で、６時間３５℃、１．３５倍等モルの比率で、有機溶剤中でフシ
ジン酸（20mM）と反応させる。反応速度を維持するため、この反応溶液を１００
ｒｐｍでかき回す。濃縮生成物の収率は４０％である。

【０２５０】結果：フシジン酸でのエステル化は、表面活性及び親油特性の増加を引き起こす。

【０２５１】（実施例４５）Ｒ¹−Ｒ³＝Ｈ，Ｒ⁴＝ＣＯＯＨ及びＲ⁵＝ＣＨ₃を有する一般式１の活性物質の
濃縮による新規な抗菌活性物質の製造方法：Ｒ¹−Ｒ³＝Ｈ，Ｒ⁴＝ＣＯＯＨ及びＲ⁵＝ＣＨ₃を有する一般式１の化合物を、
ペニシリンアシラーゼ（0.5%；例えば、大腸菌、有限会社シグマ・アルドリッヒ
・ケミエ製から得られたもの）の作用下、３５℃で４時間、等モルの比率で０．
１Ｍリン酸ナトリウム緩衝液（pH6.0）中で６−アミノペニシラン酸（20mM）と
反応させる。反応速度を維持するため、この反応溶液を１００ｒｐｍでかき回す
。

【０２５２】結果：濃縮生成物の収率は、５３％であった。

【０２５３】（実施例４６）Ｒ¹−Ｒ³＝Ｈ，Ｒ⁴＝ＣＯＯＨ及びＲ⁵＝ＣＨ₃を有し、生体内転換による７−
アミノセファロスポリン酸を有する一般式１の活性物質の濃縮による新規な抗菌
活性物質の製造方法：Ｒ¹−Ｒ³＝Ｈ，Ｒ⁴＝ＣＯＯＨ及びＲ⁵＝ＣＨ₃を有する一般式１の化合物を、
アシラーゼ（0.5%；例えば、トウキョウジョーゾー会社によるバチルス・メガテ
リウム（Bacillus megaterium）から得られるもの、イギリス特許第1,347,665号
）の作用下、３７℃で２時間、等モルの比率で０．１Ｍリン酸ナトリウム緩衝液
（pH7.0）中で７−アミノセファロスポリン酸（20mM）と反応させる。反応速度
を維持するため、この反応溶液を１００ｒｐｍでかき回す。

【０２５４】結果：濃縮生成物の収率は４６％であった。

【０２５５】（実施例４６）Ｒ¹−Ｒ³＝Ｈ，Ｒ⁴＝ＣＯＯＨ及びＲ⁵＝ＣＨ₃を有し、生体内転換による７−
アミノデアセトキシセファロスポリン酸を有する一般式１の活性物質の濃縮によ
る新規な抗菌活性物質の製造方法：Ｒ¹−Ｒ³＝Ｈ，Ｒ⁴＝ＣＯＯＨ及びＲ⁵＝ＣＨ₃を有する一般式１の化合物を、
アシラーゼ（0.5%；例えば、大腸菌から得られるもの）の作用下、３７℃で１０
０分、等モルの比率で０．１Ｍリン酸ナトリウム緩衝液（pH6.0）中で７−アミ
ノデアセトキシセファロスポリン酸（40mM）と反応させる。反応速度を維持する
ため、この反応溶液を１００ｒｐｍでかき回す。

【０２５６】結果：濃縮生成物の収率は５５％及び６０％であった。

【０２５７】（実施例４７）Ｒ¹−Ｒ³＝Ｈ，Ｒ⁴＝ＣＯＯＣＨ₃及びＲ⁵＝ＣＨ₃を有し、生体内転換による７
−アミノセファロスポリン酸を有する一般式１の活性物質の濃縮による新規な抗
菌活性物質の製造製造は、実施例４６に従って行う。収率は６３％である。

【０２５８】（実施例４９）化学ルミネッセンスを使用する抽出物のフリーラジカル捕捉特性の証明証明は、次のようにして確立された。Ａ：ヒト血液３０ｍｌを３７℃で２０分間、ＰＢＳ１７０ｍｌ＋ルミノール（最
終0.33mM）と共に事前にインキュベートした。Ｂ：ヒト血液３０μｌをＰＢＳ１７０ｍｌ＋ルミノール（最終0.33mM）及び希釈
物質２０ｍｌと共に事前にインキュベートした。

【０２５９】Ａに、実施例１１の抽出物の１：１００希釈２０μｌ及びザイモサン(zymosan
)（10mg/ml）２０μｌをピペットで移した。Ｂに対しては、ザイモサン（10mg/ml）２０μｌをピペットで移した。

【０２６０】基準として、ＰＢＳをザイモサンの代わりにＡ及びＢを装備する物質を有する
又は有しない刺激因子を使用した。激しく攪拌した後、ルミネッセンスの速度論
を６０分以上測定した。実験を異日に二人の提供者から採取した血液で行った。

【０２６１】結果：抽出物は、明らかにルミノールで誘発され且つ自発的な酸素フリーラジカルの
放出を阻害するか、又は放出されたフリーラジカルを捕捉する。

【０２６２】（実施例４９）中性エンドペプチダーゼの阻害方法：中性エンドペプチダーゼの特定の阻害の証明は、メルツィヒ（Melzig）ら、フ
ァルマジー（Pharmazie）５１（1996）５０１−５０３によって確立された。

【０２６３】結果：８０％アルコールを使用して子実体から得られた抽出物は、１００μｇ／ｍｌ
の濃度で６８％、２００μｇ／ｍｌで８４％阻害する。

【０２６４】培養した菌糸体の対応するエタノール抽出物で、酵素活性は既に５０μｇ／ｍ
ｌの濃度で７０％阻害した。

【０２６５】子実体及び菌糸体からの水抽出物も有効である。５０μｇ／ｍｌ冷水抽出物と
の温置で、６５％の酵素活性の阻害が見出された。

【０２６６】（実施例５０）プロテアーゼ活性を阻害するための抽出物の使用プロテアーゼは、目に見える有機体（マクロ有機体）の機能調節における多く
の翻訳後過程に関係している。そのプロテアーゼの阻害について、種々多様の薬
理作用が期待されている。実施例１５及び１６による水及びエタノール抽出物に
よる酵素阻害の証明は、メルツィヒら、ファルマジー５１（1996）、５０１−５
０３によるアンジオテンシン変換酵素を用いた典型的な方法で確立された。

【０２６７】結果：水及びエタノール抽出物は、１００−２００μｇ／ｍｌの濃度でアンジオテン
シン変換酵素の阻害を示す。

【０２６８】（実施例５１）血清を媒介としたリポ多糖結合に対する影響方法：試験をグルンバルド（Grunwald）（CD-14エンドトキシン用受容体：試験管内U
ntersuchungen zu Bindungsmodalitaten von LPS und zur einflussung der Exp
ression。研究報告エルンスト−モリツ−アルント−ユニバージテート（Dissert
ation Ernst-Moritz-Arndt-Universitat Greifswald 1993年。）に従って行った
。その試験のため、ＣＤ−１４遺伝子のトランスフェクション後にＣＤ−１４受
容体を発現する、チャイニーズハムスターの子房からの細胞系統が使用された。
リポ多糖は、ＦＩＴＣで標識され、受容体への結合は蛍光強度により測定され
た。

【０２６９】結果：０．１〜０．２％の濃度の実施例２による子実体及び実施例１５による
菌糸体からのエタノール抽出物は、血清を媒介としたリポ多糖結合の４０−６０
％阻害を達成した。同様に、実施例２２及び２３による活性物質はリポ多糖結合
の阻害を生じる。

【０２７０】リポ多糖類は、グラム陰性細菌の感染でその細胞壁から放出される。リポ多糖
結合タンパク質と結合した後、それらは大食細胞（マクロファージ）及び単核細
胞を減少させ、内因子体（endogenous mediators）を放出し、これにより熱、白
い血液写真の変化、及び身体の末梢における異常な血管拡張を生じる。最悪の場
合、リポ多糖結合から敗血症性ショックが生じ得る。

【０２７１】したがって、それらから単離した抽出物及び活性物質は、一方で、それらの抗
菌特性により侵入した細菌の成長を阻害し、他方で、放出したリポ多糖類の結合
を減少させ、製薬としての適用のためのかなりの利点を有する。

【０２７２】（実施例５２）ガノデルマ属の菌類からの生物学的活性抽出物の技術目的の防腐剤としての使
用方法：Ｇ．フェイフェリの子実体からの熱水抽出物を２％の濃度で次の組成を有する
界面活性剤溶液に添加した。アルキルベンゼンスルホン酸塩８．０；アルカンスルホン酸塩８．１；アルキ
ルポリグリコールエーテル３．１；ポリリン酸ナトリウム１．０；香料油０．０
０５；水を１００になるまで添加。この試料及び対応する対照（コントロール）をＳ．アウレウスで汚染した。２
４時間経過後、その１ｍｌを取り出し、カゼイン・ペプチド/ダイズ豆/スープの
中和混合物１０ｍｌを０．３％のツイーン８０、０．３％のレシチン及び０．１
％のシステインと一緒に添加した。続いて、細菌数をカゼイン・ペプチド/ダイ
ズ豆/寒天上で観測した（オキソイド(Oxoid),ユニパス(Unipath)株式会社製、バ
ンジンストーク(Basingstoke)、ハンプシャー,ＧＢ）。

【０２７３】結果：保存されていない対照における細菌数は３．１ｘ１０⁸だったのに対し、保存
されていた試料は、無菌であった。

【０２７４】（実施例５３）フリーラジカルから保護する、製薬的及び化粧的配合用の活性化しかつ細菌を
減少させる添加剤としての適用方法：抗菌活性を実施例１による寒天拡散試験において証明し、かつ、保存特性を滴
定濃度１：１０⁶のＳ．アレウスを接種した油中水スキンケアクリームを用いた
保存負荷試験で証明した。

【０２７５】フリーラジカル捕捉機能の証明は、実施例４８に従って確立された。

【０２７６】結果：アルコール抽出物は抗菌活性を有し、実施例１７によるアルコール抽出物によ
り保護された試料では細菌成長は検知されなかった。

【０２７７】ヒドロキノンの添加は、酸化的腐敗を防ぎ、そのフリーラジカル捕捉特性によ
り皮膚を傷むフリーラジカル形成物からの保護をもたらす。

【０２７８】さらに、ガノデルマ抽出物は、抗炎症作用を有する。これらの特性の組み合わ
せは、化粧品産業での適用のための好適な条件を提示する。

【０２７９】（実施例５４）Ｇ．フェイフェリの菌糸体及び子実体からのアルコール及び水抽出物の、活性
化し、痛みを除去しかつ細菌を減少させる食品用添加剤としての使用方法：実施例４８により証明されるような毒性ラジカル類からの細胞の保護は、Ｇ．
フェイフェリからの抽出物を含む補足食品における栄養生理学では重要であると
も考えられる。栄養の補足は、ビタミンＣ及びＥ並びに酸素ラジカルの解毒のた
めの微量元素のような、抗酸化系の他の補助因子のためにも行われる。Ｇ．フェ
イフェリからの抽出物のこの特定の作用は、ガノデルマ属の他の菌類でも確立さ
れている、以前より既知の免疫促進により非常に有利に補足される。他方、中性
エンドペプチダーゼにおけるＧ．フェイフェリからの抽出物の特定の阻害作用は
、それらがエンセファリナーゼの阻害によりオピエート受容体に作用するニュー
ロペプチド及びエンドルフィンの分解を妨げるので、痛み軽減のために利用する
ことができる。

【０２８０】中性のエンドペプチダーゼの強い阻害により、細胞表面への細菌の吸着阻害、
及びこのような抗ウイルス作用がさらに期待され得る。

【０２８１】結果：フリーラジカル捕捉特性の組み合わせ、免疫促進剤活性、痛みを除去する活性
及び抗菌特性は、栄養剤としての適用に非常に好ましい状況を供給する。

【０２８２】（実施例５５）ヘルスケア剤及び栄養剤としての使用方法：ガノデルマ属の菌類からの水及びアルコール抽出物は、培養したヒト大動脈の
脈管内膜細胞でのコレステロール蓄積及びその細胞の増殖を阻害し、動脈硬化症
から保護する。中性エンドペプチダーゼ及びアンジオテンシン変換酵素の阻害は
、カスケード様方法で構成される酸代謝機能を妨げる。メルツィッヒらのファル
マジー５１（１９９６），５０１−５０３により、実施例４９で確立されている
ような中性エンドペプチダーゼは、腎臓部のナトリウム排出の増強及びこれによ
る血圧の減少を生じる。グレーフェ（Grafe）（バイオケミエデルアンチビオ
キカ，スペクトルムアカデミシャーフェアラーク，ハイデルブルク，ベルリン
，ニューヨーク，1992）によれば、実施例５０で確立されているようなアンジオ
テンシン変換酵素の阻害も血圧低下を生じる。

【０２８３】結果：代謝症候群を示す多くの患者は、コレステロール値の増加と血圧の増加とを結
び付け、ガノデルマ属の菌類の既知の作用がガノデルマ・フェイフェリにおける
血圧減少作用によって非常に有利に補足される。

【０２８４】０．１〜０．２％の濃度での実施例２による子実体及び実施例７による菌糸体
からのエタノール抽出物は、血清媒介リポ多糖結合の阻害を４０−６０％達成す
る。同様に、実施例２２による活性物質はリポ多糖結合の阻害を生じる。

【０２８５】リポ多糖類は、グラム陰性細菌に感染された細胞壁から放出される。リポ多糖
結合タンパク質への結合後、それらは大食細胞及び単核細胞を誘導し内因子体を
放出し、これにより熱、白い血液写真の変化、及び身体の末梢における異常な血
管拡張を引き起こす。最悪の場合、リポ多糖結合から敗血症性ショックが生じ得
る。

【０２８６】したがって、それらから分離した抽出物及び活性物質は、一方で、それらの抗
菌特性により侵入した細菌の成長を阻害し、他方で、放出したリポ多糖類の結合
を減少させ、製薬としての適用のためのかなりの利点を有する。

【０２８７】（実施例５６）ヒト医学及び獣医学における、特に感染の蔓延防止における単一活性物質及び
組み合わせ調合剤の形態としての適用方法：２ｍｇ／ｌの濃度での実施例９による抽出物は、商業的に利用可能な抗生物質
であるアミカジン、トリメタロピン及びフシジン酸のための耐性検定用の標準化
された試験皿に滴下された（センジ−ディスク抗生物質試験皿，ベクトン・ディ
ッキントン微生物学システム，クッキースビル，ＵＳＡ）。抗菌活性は、患者の
採取物から分離された多耐性凝固酵素陰性ブドウ球菌を用いて実施例１に従って
測定された。

【０２８８】結果：本発明による抽出物、そこから分離した活性物質及び従来の抗生物質との組み
合わせは、患者の採取物から分離されたブドウ球菌に対して有効である。

【０２８９】

【表１６】

【０２９０】（実施例５７）ヒト医学及び獣医学における抗菌活性を有する薬剤としての、特に多耐性グラ
ム陽性細菌のための一般式１の置換ヒドロキノン類の使用方法：Ｒ¹−Ｒ³＝Ｈ、Ｒ⁴＝ＣＯＯＨ、Ｒ⁵＝ＣＨ₃を有する一般式１の活性物質は、
実施例１に従った寒天拡散試験でのグラム陽性細菌感染に対する活性が試験され
た。

【０２９１】結果：メチシリン−過敏性ブドウ球菌アウレウス菌株及び北ドイツエピデミー（Epid
emy）菌株のようなメチシリン−耐性菌株のいずれもガノマイシンＢにより阻害
される。患者採取物から分離された多耐性Ｓ．エピデルミディス（S. epidermid
is）及びＳ．へーモリチクス（S. haemolyticus）菌株も阻害される。耐性腸球
菌に対する活性も観察された（表１７）。

【０２９２】

【表１７】

【０２９３】中性エンドペプチダーゼの強い阻害により、細胞表面への細菌吸着及びこれに
よる抗ウイルス作用の阻害がさらに期待され得る。

【０２９４】（実施例５８）魚病原細菌に対する、及び魚飼育における薬剤としての使用方法：魚細菌類は、経済的及び生態学的に関係のある課題を提起する。赤口流行病（
red mouth epidemic）又は赤疫病（red plague）のような魚疾患を生じるグラム
陰性細菌で行われた。スタットリッヒャー・フィシュゾイヒェンベケプフングス
デーエンスト・ニーダーザクセン（Staatlicher Fischseuchenbekapfungsdienst
Niedersachsen）及びフィシュゲスウントハイスツヂエント（Fischgesundheits
dienst）によって供給された細菌の成長は、トリプチダーゼ−大豆寒天（株式会
社シグマ・ケミカル製、セントルイス、ＵＳＡ）上で達成された。その子実体及
び活性物質からの抽出物の試験は、寒天拡散試験で行われた。

【０２９５】結果：特にエーロモナス種に対して、抗菌活性が見出された（表１８）。本発明によ
る抽出物は、天然の物質なので、好適な生態学的な免疫学的寛容が期待される。

【０２９６】

【表１８】

【０２９７】（実施例５９）フリーラジカル捕捉剤としての使用方法：一般式１の活性物質、ガノマイシンＡ及びガノマイシンＢのフリーラジカル捕
捉機能は、医学における使用の可能性を広げる。実施例４８による抽出物の試験
におけるように、証明が確立された。

【０２９８】結果：ガノマイシンＡ及びＢは、１０μｇ／ｍｌの濃度で、ルミノール誘発及び自発
的酸素フリーラジカル放出を阻害する。

【０２９９】フリーラジカル捕捉特性と抗菌特性との組み合わせは、適用のために非常に好
ましい条件を与える。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｋ 31/43 Ａ６１Ｋ 31/43 ４Ｃ０７５ 31/5383 31/5383 ４Ｃ０８６ 31/545 31/545 ４Ｃ０８８ 31/575 31/575 ４Ｃ０９１ 31/662 31/662 ４Ｃ２０６ 31/7072 31/7072 ４Ｈ００６Ａ６１Ｐ 3/00 Ａ６１Ｐ 3/00 ４Ｈ０５０ 3/02 3/02 9/10 9/10 9/12 9/12 31/04 31/04 １７１１７１ 39/06 39/06 43/00 １１１ 43/00 １１１Ｃ０７Ｃ 59/52 Ｃ０７Ｃ 59/52 59/56 59/56 59/74 59/74 Ｃ０７Ｆ 9/40 Ｃ０７Ｆ 9/40 ＤＣ１２Ｎ 9/99 Ｃ１２Ｎ 9/99 // Ｃ０７Ｄ 498/06 Ｃ０７Ｄ 498/06 499/46 499/46 501/32 501/32 Ｃ０７Ｈ 19/067 Ｃ０７Ｈ 19/067 Ｃ０７Ｊ 13/00 Ｃ０７Ｊ 13/00 Ｃ１２Ｎ 1/14 Ｃ１２Ｎ 1/14 ＧＨＣ１２Ｐ 7/62 Ｃ１２Ｐ 7/62 (Ｃ１２Ｎ 1/14 Ｃ１２Ｒ 1:645 Ｃ１２Ｒ 1:645） (Ｃ１２Ｐ 7/62 Ｃ１２Ｒ 1:645） (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ，ＺＷ )，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＡ，ＺＷ (72)発明者ユーリッヒヴォルフドイツ連邦共和国、デー17498 グライフスヴァルト、ヴォールヴェバーシュトラーセ９ (72)発明者リンデクイシュトウルリケドイツ連邦共和国、デー17491 グライフスヴァルト、リーゼマイトナーシュトラーセ６アー (72)発明者ヤンセンロルフドイツ連邦共和国、デー38124 ブラウンシュヴァイヒ、ファルケンベルクシュトラーセ 14 (72)発明者モターナラムジードイツ連邦共和国、デー17487 グライフスヴァルト、フリードリッヒルートヴィッヒヤーンシュトラーセ 15アー、インスティテュートフュールファルマツィーＦターム(参考） 4B018 LB08 LB10 MD10 MD82 ME02 MF01 MF13 4B064 AD75 CA07 CC03 CC04 CD07 CD22 CE08 CE10 4B065 AA71X AC14 BB08 BB18 BB26 BC26 BC48 BD16 CA12 CA41 CA43 CA44 4C057 AA03 DD01 LL10 LL18 4C072 AA02 AA06 BB02 BB06 CC01 CC11 EE07 FF07 GG09 HH08 JJ01 UU01 4C075 BB03 CC02 CC29 CD09 CD16 CD35 DD02 DD15 EE02 EE05 FF01 GG01 HH01 LL01 4C086 AA00 AA02 CB22 CC04 CC10 DA34 EA17 EA19 MA01 MA52 ZA02 ZA42 ZB31 ZB35 ZC17 ZC20 ZC21 ZC37 4C088 AA02 AC17 BA08 ZA02 ZA42 ZB31 ZB35 ZC20 ZC21 ZC37 ZC61 4C091 AA01 BB01 CC01 DD01 EE01 FF01 GG01 HH01 JJ01 KK12 LL03 LL06 MM01 NN12 PA06 PB05 QQ01 4C206 AA01 AA02 AA03 DA22 DB21 DB30 MA01 NA14 ZA02 ZA42 ZC17 ZC20 ZC21 ZC37 4H006 AA01 AA03 AB29 BJ50 BM10 BM71 BN10 BN30 BQ10 BS10 4H050 AA01 AA02 AA03 AB29

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】溶剤処理によりガノデルマ・フェイフェリ（Ganoderma pfei
fferi）ＤＳＭ１３２３９から得ることのできる生物学的活性抽出物。
【請求項２】天然に生息するガノデルマ・フェイフェリ（Ganoderma pfei
fferi）種の菌類の子実体から及び／又はきのこ栽培場で栽培されたガノデルマ
・フェイフェリ（Ganoderma pfeifferi）種ＤＳＭ１３２３９の菌類の子実体か
ら得ることのできる請求項１に記載の抽出物。
【請求項３】前記ガノデルマ・フェイフェリ（Ganoderma pfeifferi）種
ＤＳＭ１３２３９の子実体から得ることのできる抽出物であって、前記菌類が、
きのこ栽培場の木材基質で栽培される請求項１に記載の抽出物。
【請求項４】前記ガノデルマ・フェイフェリ（Ganoderma pfeifferi）種
ＤＳＭ１３２３９の子実体から得ることのできる抽出物であって、前記菌類の培
養がセルロース分解酵素で前処理した木材で行われる請求項３に記載の抽出物。
【請求項５】発酵槽で成長した後のガノデルマ・フェイフェリ（Ganoderm
a pfeifferi）種ＤＳＭ１３２３９の菌糸体から得ることのできる請求項１に記
載の抽出物。
【請求項６】液体培地にコハク酸アンモニウムが添加される請求項５に記
載の抽出物。
【請求項７】前記ガノデルマ・フェイフェリ（Ganoderma pfeifferi）種
ＤＳＭ１３２３９の菌糸体から得ることのできる抽出物であって、前記菌類は、
投光しかつ振盪する培養法に従って、炭水化物源を有する液体培地、好ましくは
２０−４０ｇ／１０００Ｌの麦芽抽出物及び初期ｐＨ値４．５−７．５を有する
麦芽培地で培養される請求項５又は６に記載の抽出物。
【請求項８】木材抽出物、特にブナ材からの煎出物が、単独又はセルロー
ス分解酵素と組み合わせて前記液体培地に添加される請求項５〜７のいずれか一
項に記載の抽出物。
【請求項９】親油性溶剤、特にジクロロメタンでの前記子実体又は菌糸体
の抽出により得られる請求項１〜８のいずれか一項に記載の抽出物。
【請求項１０】一価アルコール類での抽出により得られる請求項１〜８の
いずれか一項に記載の抽出物。
【請求項１１】水抽出、好ましくは１０〜８０℃の温度で得られる抽出物
であって、前記抽出が水の温度を上昇させて段階的に有利に行われる請求項１〜
８のいずれか一項に記載の抽出物。
【請求項１２】前記子実体及び／又は前記培養培地及び／又は前記菌糸体
及び／又は請求項９〜１１に記載の抽出物残留物の酢酸エチルでの抽出により得
られる請求項１〜９のいずれか一項に記載の抽出物。
【請求項１３】請求項９に記載の親油性溶剤での抽出で得られた残留物の
抽出により得られる請求項１〜４のいずれか一項に記載の抽出物。
【請求項１４】請求項９に記載のジクロロメタン抽出残留物の一価アルコ
ール類での抽出、特に酢酸エチルで分配した後、特に有利には移動溶剤ジクロロ
メタン／酢酸エチル４：１を用いる、勾配を用いたシリカゲルで又はセファデッ
クスでさらに精製することにより得られる請求項１〜４のいずれか一項に記載の
抽出物。
【請求項１５】請求項９に記載のジクロロメタン抽出残留物の水抽出によ
り得られる請求項１〜４のいずれか一項に記載の抽出物。
【請求項１６】請求項２０に記載のエタノール抽出残留物の水抽出により
得られる請求項１〜３及び５のいずれか一項に記載の抽出物。
【請求項１７】請求項１〜１６の少なくとも一項に記載の抽出物から得る
ことのできる、組成３，２６−ジヒドロキシルアノスタ−８，２４−ジエン−７
−オンのトリテルペン類。
【請求項１８】Ｒ¹〜Ｒ⁵の残基を有する、請求項１〜１６の少なくとも一
項に記載の抽出物から得ることのできる下記一般式１の活性物質。【化１】［一般式中、Ｒ¹、Ｒ²及びＲ³は水素を表し、Ｒ⁵はＣＨ₃及びＣＨ₂ＯＨを表し、
Ｒ⁴は遊離酸の形で存在し、かつ化学合成によりＲ¹、Ｒ²及びＲ³が水素、ハロゲ
ン、アルキル又はアルコキシ基で表され、Ｒ⁵が−ＣＨ₂−アリール、−ＣＨ₂−
アルキル、−ＣＨ₂−Ｏ−アリール、−ＣＨ₂−Ｏ−アルキル、−ＣＨ₂Ｎ₃、−Ｃ
Ｈ₂−カルボン酸、−ＣＨ₂−アルデヒド又は−ＣＨ₂−アルコール基、−ＣＨ₂Ｎ
Ｒ９₂、−ＣＸ₃、−ＣＨＸ₂、−ＣＨ₂Ｘ若しくは−ＣＨ₃で表され、又はヘテロ
原子を介して炭水化物誘導体と結合し（但し、Ｘ＝Ｆ，Ｃｌ，Ｂｒであり、Ｒ９
は水素原子、アルキル又はアリール残基である。）、Ｒ⁴は前記遊離酸を生成す
るために、酸ハロゲン化物、アミド、脂肪族若しくは芳香族アルコールを有する
塩又はエステル化合物から選ばれ、かつｎは１から１０までの数である、誘導体
を得る。］
【請求項１９】Ｒ¹−Ｒ³残基で置換したヒドロキノンのテルペノイド側鎖
へのカップリングが、ハロゲンで置換されたヒドロキノン類から出発し、Ｒ⁴及
びＲ⁵で置換したテルペノイド側鎖の末端エポキシド官能基との反応を介して有
機金属中間体を経て行われることを特徴とする請求項１２〜１７に記載の新規な
置換ヒドロキノン類及びそれらの誘導体の製造方法。
【請求項２０】Ｒ¹−Ｒ³残基で置換したヒドロキノンのテルペノイド側鎖
へのカップリングが、ハロメチルで置換されたヒドロキノン類から出発し、Ｒ⁴
及びＲ⁵で置換したテルペノイド側鎖のカルボキシル官能基との反応を介して有
機金属中間体を経て行われることを特徴とする請求項１２〜１７に記載の新規な
置換ヒドロキノン類及びそれらの誘導体の製造方法。
【請求項２１】置換したヒドロキノンのテルペノイド側鎖へのカップリン
グが、Ｒ¹−Ｒ³残基で置換した（２，５−ジヒドロキシフェニル）アセトアルデ
ヒド類から出発し、Ｒ⁴及びＲ⁵で置換した適切なテルペノイド類から中間的に生
成されたカルボアニオン類との反応を介して行われることを特徴とする請求項１
２〜１７に記載の新規な置換ヒドロキノン類及びそれらの誘導体の製造方法。
【請求項２２】Ｒ¹−Ｒ³残基で置換したヒドロキノンのテルペノイド側鎖
へのカップリングが、３位の電子求引性脱離基を生じる置換４−（２，５−ジヒ
ドロキシフェニル）−２−メチリデンカルボン酸エステル類から出発し、Ｒ⁵で
置換した適切なテルペノイド類から中間的に生成されたカルボアニオンとの反応
を介して行われることを特徴とする請求項１２〜１７に記載の新規な置換ヒドロ
キノン類及びそれらの誘導体の製造方法。
【請求項２３】請求項１９〜２２に記載の合成された化合物の段階的な脱
保護が、遊離活性物質を得るため又はさらに官能基化を実施するために行われる
ことを特徴とする請求項１２〜１７に記載の新規な置換ヒドロキノン類及びそれ
らの誘導体の製造方法。
【請求項２４】一般式１において次の置換基が提供される請求項１８に記
載の活性物質。Ｒ¹、Ｒ²及びＲ³＝Ｈ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ又はｎ−アルキル、Ｒ⁴＝ＭｅI、ＭｅII、アンモニウム、アルキルアンモニウム、アリール又はア
ルキル、Ｒ⁵＝Ｈ、アルキル、アリール、Ｒ'ＯＨ、ＣＨＯ、Ｒ'ＣＨＯ、ＣＯＯＨ又は
Ｒ'ＣＯＯＨ（Ｒ'＝アリール又はアルキル）
【請求項２５】下記一般式２又は３によるモノ及びジヒドロキノンエステ
ル類の形態の請求項１８に記載の活性物質。【化２】【化３】［但し、Ｒ⁶，Ｒ⁷＝アリール、アルキルである。］
【請求項２６】酸無水物、好ましくは無水フタル酸が、１８位の炭素原子
に置換基として導入される請求項１８〜２１に記載の活性物質。【化４】
【請求項２７】ヒドロキノン類のキノン類への酸化により得ることのでき
る請求項１８〜２６に記載の一般式１〜１２の活性物質。【化５】
【請求項２８】前記エーテル類が対応するキノン類又はヒドロキノン類の
アルキル化又はアリール化により得ることのできる、請求項１８に記載の新規な
置換ヒドロキノンエーテル類の製造方法。
【請求項２９】一般式１の活性物質が酸基を有する抗生物質でエステル化
されることにより連結されることを特徴とする一般式５〜１３に記載の新規な抗
菌活性物質及びそれらの製造方法。【化６】【化７】【化８】【化９】【化１０】【化１１】【化１２】
【請求項３０】一般式１の活性物質が、アミノ基を有する抗生物質と１１
位の炭素原子で結合することにより連結されることを特徴とする新規な抗菌性活
性物質及びその製造方法。
【請求項３１】Ｒ⁴＝ＣＨ₃を有する一般式１の活性物質が、アミノ基を有
する抗生物質と１１位の炭素原子でカップリングすることにより連結されるため
に用いられる請求項５〜１２に記載の新規な抗菌活性物質及びその製造方法。
【請求項３２】一般式１の活性物質が、ヘテロ原子を介して１８位の炭素
で炭水化物誘導体と結合されることを特徴とする一般式１による新規な抗菌活性
物質及びその製造方法。
【請求項３３】前記エステル化及び／又は縮合が生体内転換により行われ
る請求項２９、３０及び３１に記載の新規な抗菌活性物質の製造方法。
【請求項３４】フリーラジカル捕捉剤として請求項１〜２６のいずれか一
項に記載の一以上の化合物及び／又は抽出物の使用。
【請求項３５】中性エンドペプチダーゼの活性を阻害するための請求項１
７〜２６に記載の一以上の化合物及び／又は請求項１〜１６のいずれか一項に記
載の一以上の抽出物の使用。
【請求項３６】アンジオテンシン変換酵素の活性を阻害するための請求項
１〜１６及び／又は請求項２０〜２４のいずれか一項に記載の一以上の化合物及
び／又は抽出物の使用。
【請求項３７】リポ多糖類の血清を媒介とする結合を阻害するための請求
項１〜１６及び／又は請求項２０〜２４のいずれか一項に記載の一以上の化合物
及び／又は抽出物の使用。
【請求項３８】抗菌活性を有する物質及び抽出物、特に技術目的のための
防腐剤として請求項１〜２６に記載のカノデルマ（Ganoderma）属の菌類からの
生物学的活性抽出物及び／又は化合物の使用。
【請求項３９】製薬の及び化粧の配合のための添加剤、特に防腐剤として
、抗菌活性を有する物質及び抽出物としての請求項１〜２６に記載のカノデルマ
（Ganoderma）属の菌類からの生物学的活性抽出物及び／又は化合物の使用。
【請求項４０】活性化し且つ細菌を減少させる食品用添加剤としての並び
に栄養剤としての請求項１〜２６のいずれか一項に記載のカノデルマ（Ganoderm
a）属の菌類からの生物学的活性抽出物及び／又は化合物の使用。
【請求項４１】ヘルスケア剤としての請求項１〜２６に記載のカノデルマ
（Ganoderma）属の菌類からの生物学的活性抽出物及び／又は化合物の使用。
【請求項４２】ヒト医学及び獣医学における、特に感染の蔓延防止におけ
る単一の活性物質及び組み合わせ製剤の形態としての適用のための請求項１〜２
６に記載のカノデルマ（Ganoderma）属の菌類からの生物学的活性抽出物及び／
又は化合物の使用。
【請求項４３】ヒト医薬及び獣医学における抗菌活性を有する薬剤として
の請求項１７〜２６に記載の置換ヒドロキノン類及びそれらの誘導体の使用。
【請求項４４】多耐性グラム陽性菌での請求項３５又は３６に記載の使用
。
【請求項４５】魚病原細菌に対する薬剤として及び魚飼育での使用のため
の請求項３５又は３６に記載の使用。
【請求項４６】抗菌活性剤及びフリーラジカル捕捉剤としての請求項３５
又は３６に記載の使用。
【請求項４７】前記抽出物及びそれから分離された前記化合物が単独で又
は相互の組み合わせで用いられる請求項１〜２６に記載の使用。
【請求項４８】請求項１〜２６のいずれか一項に記載の一以上の化合物及
び／又は抽出物を含む薬剤。
【請求項４９】グラム陽性細菌感染症の治療用薬剤の製造のための請求項
１〜２６のいずれか一項に記載の一以上の化合物及び／又は抽出物を含む薬剤。
【請求項５０】高血圧、心臓血管疾患及び代謝異常の治療用薬剤の製造の
ための請求項１〜２６のいずれか一項に記載の一以上の化合物及び／又は抽出物
の使用。