JP2002502371A - アクリジン誘導体多剤耐性阻害薬の合成 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 式（ＩＩ）のアクリドン酸の中間体と、式（ＩＩＩ）のアミノフェネチルイソキノリンから、カップリングおよび転換などの段階を介して式（Ｉ）のＭＤＲＩを生成する式（Ｉ）のＭＤＲＩの合成。

Description

【発明の詳細な説明】 アクリジン誘導体多剤耐性阻害薬の合成 発明の背景 本発明は、アクリジン誘導体の改良製造法に関する。特に、本発明は、多剤耐 性癌細胞を化学療法剤に対して感作することができる化合物の合成に関する。 Ｎ−｛４−［２−（１，２，３，４−テトラヒドロ−６，７−ジメトキシ−２ −イソキノリニル）−エチル］フェニル｝−９，１０−ジヒドロ−５−メトキシ −９−オキソ−４−アクリジンカルボキサミドとして化学的に知られている多剤 耐性阻害薬（ＭＤＲＩ）及びその生理学的に許容可能な塩は、Laboratories Gla xo S.A.の名称で出願され１９９２年７月２３日に公表されたＷＯ９２／１２１ ３２号明細書に記載されており、及びGlaxo Wellcome Inc.の名称で出願され、 １９９６年４月１８日に公表されたＷＯ９６／１１００７号明細書にも記載され ている。これらの化合物は、化学療法剤に対する多剤耐性癌細胞の感作に有用で あるとして開示されている。 ＷＯ９２／１２１３２号明細書には、ペプチド合成によく用いられるカップリ ング試薬の存在下で化合物を反応させることによって合成されるものとして開示 された。開示されたカップリング試薬としては、ジシクロヘキシルカルボジイミ ド(場合によっては、１−ヒドロキシベンゾトリアゾールの存在下で)、ジフェニ ルホスホリルアジドまたはＮ，Ｎ−カルボニルジイミダゾールが挙げられる。こ の反応に適当な不活性溶媒としては、エーテル、ハロゲン化炭化水素、アミドま たはケトンが挙げられる。 Ｎ−｛４−［２−（１，２，３，４−テトラヒドロ−６，７−ジメトキシ−２ −イソキノリニル）−エチル］フェニル｝−９，１０−ジヒドロ−５−メトキシ −９−オキソ−４−アクリジンカルボキサミド、及びその生理学的に許容可能な 塩及び溶媒和物の合成も、Ne'rina Dodic et al.，Journal of Medicinal Chemi stry，1995，Vol．38，No．13，pp．2418-2426に開示されている。Dodicの合成 経路では、ＷＯ９２／１２１３２号明細書に記載したのと同じカップリング試薬 が用いられた。Dodicの文献において、実施例８４は、Ｎ−｛４−［２−（１， ２，３，４−テトラヒドロ−６，７−ジメトキシ−２−イソキノリニル）−エチ ル］フェニル｝−９，１０−ジヒドロ−５−メトキシ−９−オキソ−４−アクリ ジンカルボキサミドに相当する。 発明の概要 本発明は、多剤耐性阻害薬であるＮ−｛４−［２−（１，２，３，４−テトラ ヒドロ−６，７−ジメトキシ−２−イソキノリニル）−エチル］フェニル｝−９ ，１０−ジヒドロ−５−メトキシ−９−オキソ−４−アクリジンカルボキサミド の塩酸塩の改良合成法を提供する。この方法では、中間体のカップリングの際に 水に不溶性のジイソプロピル尿素副生成物を生じる従来技術によるカップリング 試薬の使用が除かれている。この尿素副生成物は、容易には除去されないもので あった。従来技術では、中間体合成段階中に塩素化溶媒、例えばジクロロメタン の使用も示唆していた。 本発明は、カップリング中間体から形成される副生成物であるテトラメチル尿 素が水溶性であり、容易に除去される改良法も提供する。更に、本発明の方法で は、塩素化溶媒を用いる必要がなく、反応混合物から中間体の直接結晶化を行う ことができる。 本発明は、処理量が増加し、更に高純度の生成物を有する改良法も提供する。 本発明は、式（Ｉ）の塩酸塩であるＮ−｛４−［２−（１，２，３，４−テト ラヒドロ−６，７−ジメトキシ−２−イソキノリニル）−エチル］フェニル｝− ９，１０−ジヒドロ−５−メトキシ−９−オキソ−４−アクリジンカルボキサミ ドの合成のスキームに含まれる合成段階及び中間体を包含する。 スキーム１：スキーム２： 発明の詳細な説明 明細書中の記載及び実施例では、下記の略号を用いることがある：ＴＨＦ(テ トラヒドロフラン)、ＤＭＦ（Ｎ,Ｎ−ジメチルホルムアミド)、ＴＢＴＵ(２−（ １Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１，１，３，３−テトラメチルウロニ ウムテトラフルオロボレート)、ＤＭＳＯ(ジメチルスルホキシド)、ｇ(グラム) 、mL(ミリリットル)、ｍｐ(融点)、¹Ｈ−ＮＭＲ(プロトン核磁気共鳴)、ppm(百 万分率)、MHz(メガヘルツ)、及びeq．(モル当量)。特に断らない限り、総ての温 度は℃（摂氏温度）で表す。 ¹Ｈ−ＮＭＲスペクトルは、Bruker ARX-300MHz装置を用い、ＤＭＳＯ中で測定 した。化学シフトは、ＤＭＳＯのような内部標準に対してppmで表した。見かけ の多重線は、ｓ，一重線；ｄ，二重線；ｔ，三重線；ｍ，多重線；ｂｒ．ｓ，幅 広い一重線と呼ぶ。Perkin Elmer DSC7上で測定した。ＨＰＬＣデータは、Hitac hi L-6200Aポンプ、L-4000UV検出器、D-2500積分計で集めた。 合成工程に用いる材料は、ウィスコンシン州、ミルウォーキーのAldric Chemi cal Companyから発売されている。ペプチドカップリング試薬のＴＢＴＵは、英 国、ウエールズにあるPeboc，Llangefui，Anglesey，Gwyneddから発売されてい る。濾過助剤のHarborliteは、英国、ハルにあるHarborliteから発売されている 。 合成工程は、テトラメチルウロニウム塩を基剤とするペプチドカップリング剤 およびテトラメチルウロニウム塩を基剤とする活性剤のようなペプチド合成に用 いるカップリング試薬の存在下で行う。代表的な薬剤としては、ＴＢＴＵ、Ｏ− （ベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ'，Ｎ’−テトラメチルウロニ ウムテトラフルオロボレート、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル） −１，１，３，３−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート、およ びＯ−（１，２−ジヒドロ−２−オキソ−１−ピリジル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ'，Ｎ’ −テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレートが挙げられる。１，１’−カ ルボニルジイミダゾールのような他の酸活性化試薬を、この合成工程で用いるこ とができる。この合成工程は、ピリジンのような芳香族アミン塩基の他にトリエ チルアミンおよびジイソプロピルアミンのようなアルキルアミン塩基中で行うこ とができる。合成工程に適する溶媒としては、極性の非プロトン性溶媒、例えば ＤＭＦまたは１−メチル−２−ピロリジノン、並びにアセトニトリルが挙げられ る。 式（ＩＩ）の化合物を調製するためのスキーム１の出発化合物は、下記の段階 １および２に従って調製される。 段階１ 段階２ 段階１では、式（ＩＩｃ）のメトキシ二酸は、２−アミノ−３−メトキシ安息 香酸(ＩＩａ)、２−ブロモ安息香酸(ＩＩｂ)、炭酸カリウムおよび銅粉末の懸濁 液を形成し、これをエタノール中で攪拌し、少なくとも０．５時間、好ましくは １時間加熱還流することによって得られる。懸濁液を２０〜２５℃まで冷却し、 水を加える。濾過助剤を加え、混合物を濾過する。濾過床を水で洗浄し、合わせ た濾液を濃塩酸を約３０分間かけて加えることによってｐＨ２〜３に調整した。 次に、生成する懸濁液を、１０〜１２℃の反応装置中で少なくとも１時間エージ ングし、固形生成物を濾過によって集め、水で洗浄し、５０℃にて真空で乾燥す る。 段階２では、段階１で形成した式（ＩＩｃ）のメトキシ二酸をアセトニトリル と混合し、加熱還流し、オキシ塩化リンを２時間かけて滴加する。生成する混合 物を、少なくとも１時間、好ましくは２時間加熱還流する。次いで、この混合物 を１０〜１５℃まで冷却する。水を加えて、生成する粘稠なスラリーを還流温度 で２．５時間加熱する。次に、スラリーを１０℃まで冷却して、濾過する。生成 物である式（ＩＩ）のアクリドン酸を水で洗浄した後、アセトニトリルで洗浄し 、５０℃で４８時間真空乾燥する。 式（ＩＩＩ）の化合物を調製するためのスキーム１の出発化合物は、下記の段 階３および４に従って調製される。 段階３ 段階４ 段階３では、式（ＩＩＩｃ）のニトロフェネチルイソキノリンが、式（ＩＩＩ ａ）の４−ニトロフェネチルブロミド、式（ＩＩＩｂ）の６，７−ジメトキシ− １，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン塩酸塩、無水炭酸カリウム、および ヨウ化カリウムをＤＭＦ中で混合することによって得られる。混合物を、窒素雰 囲気下にて攪拌しながら７０℃で１８時間加熱する。混合物を５０℃まで冷却し 、メタノールを加える。混合物を更に３０℃まで冷却し、水を加える。次いで、 混合物を１０℃で１時間攪拌して、濾過し、生成物を水で洗浄し、４５℃で真空 乾燥する。 段階４では、段階３で形成されたニトロフェネチルイソキノリンまたは式（Ｉ ＩＩｃ）をエタノールとＴＨＦの溶液中で１５〜２０°で攪拌し、窒素置換して 、Ｐｄ／Ｃ触媒を加える。再度窒素置換した後、攪拌を停止し、混合物を水素置 換する。攪拌を再開し、水素の吸収が完了するまで混合物を１５〜２５℃に保持 する。反応混合物を濾過し、濾紙をＴＨＦで濯ぎ、合わせた濾液を真空下、５５ 〜６５℃で適当な容積まで濃縮する。ヘキサンを２０〜４０分の時間をかけて加 え、生成するスラリーを０℃まで冷却する。０℃で１．５時間攪拌した後、懸濁 液を濾過し、固形生成物をヘキサンで洗浄し、真空オーブンで４０〜４５℃で乾 燥する。生成する固形生成物は、式（ＩＩＩ）のアミノフェネチルイソキノリン である。 式（ＩＶ）の多剤阻害薬遊離塩基化合物を調製するためのスキーム１の中間体 化合物を、段階５に従って調製する。 段階５ スキーム２の段階５では、中間体化合物である式（ＩＩ）のアクリドン酸と式 （ＩＩＩ）のアミノフェネチルイソキノリンの混合物をＤＭＦ中窒素雰囲気下に て攪拌し、約１０分間で完全に溶解させる。ペプチドカップリング試薬ＴＢＴＵ を加えた後、塩基であるトリエチルアミンを加える。溶液を２０〜２５℃で１〜 ２時間攪拌して、反応を完了させる。イソプロパノール−水の混合物を加え、混 合物を２０〜２５℃で３０〜６０分間攪拌して、結晶化を起こさせる。生成する スラリーである式（ＩＶ）のＭＤＲＩ遊離塩基を濾過して、メタノールで洗浄し た後、水で洗浄し、５０℃までの真空オーブン中で乾燥する。 次いで、粗製のＭＤＲＩ遊離塩基を、３５〜４０℃でＤＭＦに溶解した後、３ ５〜４０℃で約４時間かけてエタノールを加える。次に、生成するスラリー１０ ℃で１時間冷却し、濾過する。生成物をメタノールで洗浄し、５０℃までの真空 オーブンで乾燥する。 スキーム２の式（Ｉ）の化合物であって、式（ＩＶ）のＭＤＲＩ遊離塩基が段 階６に従って式（Ｉ）の塩酸塩に転換されているもの。 段階６ 段階６では、式（ＩＶ）のＭＤＲＩ遊離塩基を氷酢酸中で攪拌懸濁したものを ６５〜７０℃に加熱し、生成する溶液を熱時濾過する。次に、溶液を７０℃まで 再加熱し、加熱して前濾過したエタノールを加える。次に、前濾過した濃塩酸を 、約３０分間かけて加える。生成する溶液を、７０℃で結晶が生成するまで約２ ０分間攪拌した後、１時間かけて２０〜２５℃まで冷却して、濾過する。生成す る濾過ケーキをエタノールで洗浄し、真空オーブンで６５℃で少なくとも７０時 間乾燥する。 実施例 実施例１ メトキシ二酸（式ＩＩｃ） ２−アミノ−３−メトキシ安息香酸（式ＩＩａ）１６４．６ｇ(１モル当量)、 ２−ブロモ安息香酸（式ＩＩｂ）２１７．７ｇ(１．１モル当量)、炭酸カリウム ２７２．３ｇ(２．０モル当量)、および銅粉末１２．５ｇ（０．２モル当量）の 懸濁物をエタノール１５００ｍＬ中で攪拌し、０．５〜３時間、好ましくは１時 間加熱還流する。懸濁液を２０〜２５℃まで冷却し、水１４５０ｍＬを加える。 濾過助剤１５ｇを加え、混合物を濾過する。濾過床を水８７５ｍＬで洗浄 し、合わせた濾液に濃塩酸２５０ｍＬを３０分間かけて加えることによってｐＨ ２〜３に調整する。次に、生成する懸濁液を反応装置で１０〜１２℃で少なくと も１時間エージングし、固形生成物を濾過によって集め、水１４５０ｍＬで洗浄 し、５０℃で真空乾燥する。標記化合物の予想収量は、理論収率で９５％である 。 実施例２ アクリドン酸（式ＩＩ） メトキシ二酸（式ＩＩｃ）２８０．０ｇ（１モル当量）をアセトニトリル２３ ００ｍＬと混合したものを加熱還流し、オキシ塩化リン２００ｍＬ（２．２モル 当量）を２時間かけて滴加する。混合物を１〜５時間、好ましくは２時間加熱還 流する。混合物を次に、１０〜１５℃まで冷却する。混合物に、水１７００ｍＬ を加え、生成する粘稠なスラリーを２．５時間加熱還流する。次いで、スラリー を１０℃まで冷却し、濾過する。得られる生成物を水８５０ｍＬで２回洗浄し、 アセトニトリル８５０ｍＬで２回洗浄し、５０℃で４８時間真空乾燥する。標記 化合物の予想収率は、理論収率で９５％である。 実施例３ ニトロフェネチルイソキノリン（式ＩＩＩｃ） ４−ニトロフェネチルブロミド（式ＩＩＩａ）３０２ｇ(１モル当量)、６，７ −ジメトキシ−１，２，３，４−テトラヒドロイソキノリン塩酸塩（式ＩＩＩｂ ）３０２ｇ(１モル当量)、無水炭酸カリウム１８１ｇ(１．１モル当量)、および ヨウ化カリウム４５ｇ（０．２モル当量）をＤＭＦ１５００ｍＬ中で混合したも のを、窒素雰囲気下にて攪拌しながら７０℃で１２〜２４時間、好ましく は１８時間加熱する。混合物を５０℃まで冷却し、メタノール４５０ｍＬを加え る。次いで、混合物を３０℃まで冷却した後、水３０００ｍＬを加える。混合物 を１０℃で１時間攪拌して濾過し、生成物を水１５００ｍＬで２回洗浄し、４５ ℃で真空乾燥する。標記化合物の予想収率は、理論終始津で９０％である。 実施例４ アミノフェネチルイソキノリン（式ＩＩＩ） ニトロフェネチルイソキノリン（式ＩＩＩｃ）２３０．０ｇ（１モル当量）を エタノール１７００ｍＬおよびＴＨＦ１７００ｍＬに１５〜２０℃で攪拌溶解し たものを窒素置換し、Ｐｄ／Ｃ触媒４６ｇを加える。再度窒素置換を行った後、 攪拌を停止し、混合物を水素置換する。攪拌を再開し、水素の吸収が終わるまで （１〜２０時間）混合物を１５〜２５℃に保持する。反応混合物を濾過し、フィ ルターをＴＨＦ９００ｍＬで洗浄した後、合わせた濾液を真空下にて５５〜６５ ℃で７倍容積まで濃縮する。濃縮した濾液にヘキサン２０００ｍＬを２０〜４０ 分間かけて加え、生成するスラリーを０℃まで冷却する。０℃で１．５時間攪拌 した後、懸濁液を濾過し、固形生成物をヘキサン４５０ｍＬで洗浄し、真空オー ブンで４０〜４５℃で乾燥する。標記化合物の予想収量は、理論収率で８９％で ある。 実施例５ ＭＤＲＩ遊離塩基（式ＩＶ） アクリドン酸（式ＩＩ）２００．０ｇ（１モル当量）とアミノフェネチルイソ キノリン（式ＩＩＩ）２３２．１ｇ（１モル当量）の混合物を、ＤＭＦ２０００ ｍＬ中で２０〜２５℃にて約１０分間で完全に溶解し終わるまで攪拌する。この 混合物に、ペプチドカップリング試薬であるＴＢＴＵ２５０．５ｇ（１．０５モ ル当量）を加えた後、塩基であるトリエチルアミン２１８ｍＬ（２．１モル当量 ）を加える。生成する溶液を、２０〜２５℃にて反応が完了するまで１〜２時間 攪拌する。イソプロパノール１０００ｍＬと１０００ｍＬとの１：１混合物を加 え、混合物を結晶化が起こるまで２０〜２５℃にて攪拌する（３０〜６０分間） 。生成するスラリーを濾過し、メタノール１６００ｍＬで洗浄した後、水１６０ ０ｍＬで洗浄する。スラリーを真空オーブンで５０℃以下で乾燥する。 粗製のＭＤＲＩ遊離塩基（式ＩＶ）を次に３５〜４０℃のＤＭＦ１８００ｍＬ に溶解した後、３５〜４０℃にてエタノール３６００ｍＬを約４時間かけて添加 することによって再結晶する。次いで、生成するスラリーを１０℃まで１時間冷 却し、濾過する。生成物をメタノール１０００ｍＬで洗浄し、真空にて５０℃以 下で乾燥する。標記化合物の予想収量は、理論収率で７０〜７５％である。 実施例６ ＭＤＲＩ原薬（式Ｉ） ＭＤＲＩ遊離塩基（式ＩＶ）２０．０ｇ（１モル当量）を氷酢酸８０ｍＬ中に 懸濁したものを６５〜７０℃に加熱し、生成する溶液を濾過する。次に、溶液を ７０℃まで再加熱し、前濾過したエタノール（７０℃）２４０ｍＬを加える。こ の溶液に、前濾過した濃塩酸４．４ｍＬ（１．５モル当量）を約３０分間かけて 加える。生成する溶液を結晶が生じるまで約２０分間７０℃で撹攪拌し、１時間 かけて２０〜２５℃まで冷却して、濾過する。生成する濾過ケーキをエタノール １２０ｍＬで２回洗浄し、真空オーブン中で６５℃にて少なくとも７０時間乾燥 する。標記化合物の予想収量は、理論収率で９０％である。 分析値 C₃₄H₃₃N₃O₅・ＨＣｌ・0.5Ｈ₂Ｏに対する計算値：Ｃ，67.04；Ｈ，5.57；Ｎ，6.9 0；Ｃｌ，５．８２。 実測値：Ｃ，67.00；Ｈ，5.78；Ｎ，6.89；Ｃｌ，５．８７。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ， ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，Ｌ Ｓ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ， ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，Ｅ Ｅ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＧＷ，ＨＵ ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ， ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，Ｍ Ｄ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ， ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，Ｕ Ｚ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ (72)発明者 キャサリーン、ジェイ．メイダー アメリカ合衆国ノースカロライナ州、ダラ ム、ユニバーシティ、ドライブ、4727 ト リメリス、インコーポレーテッド内 (72)発明者 カルム、ストローン イギリス国モントローズ、コブデン、スト リート グラクソ、ウェルカム、ピーエル シー内

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １． 式（ＩＶ） の化合物の合成法であって、 （ｉ）式（ＩＩ） の化合物と、式（ＩＩＩ） の化合物をカップリング試薬の存在下にて反応させて、式（ＩＶ）の遊離塩基を 生成させ、 （ｉｉ） 場合によっては、式（ＩＶ）の化合物を式（Ｉ） のＨＣｌ塩に転換する 工程を含んでなる、方法。 ２． カップリング試薬がテトラメチルウロニウムを基剤とするペプチドカッ プリング試薬である、請求項１に記載の方法。 ３． カップリング試薬が２−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−１ ，１，３，３−テトラメチルウロニウムテトラフルオロボレートである、請求項 ２に記載の方法。 ４． アミン塩基をも含む、請求項２に記載の方法。 ５． アミン塩基がトリエチルアミンである、請求項４に記載の方法。 ６． 反応が約２０〜２５℃で起こる、請求項１に記載の方法。 ７． 反応が少なくとも１時間起こる、請求項１に記載の方法。 ８． 上記カップリングエ程を約２０〜２５℃で行う、請求項１に記載の方法 。 ９． 化合物（ＩＩ）および（ＩＩＩ）を極性の非プロトン性溶媒に溶解した 後、カップリング剤を添加する、請求項１に記載の方法。 １０． 極性の非プロトン性溶媒がジメチルホルムアミドである、請求項９に 記載の方法。 １１． 式（Ｉ） の化合物の合成法であって、 ｉ） 式（ＩＩ） のアクリドン酸と、式（ＩＩＩ）のアミノフェネチルイソキノリンとを、アミン塩基の存在下にてテトラメチルウ ロニウムを基剤とするペプチドカップリング剤と反応させて、式（ＩＶ） の遊離塩基を生成させ、 ｉｉ） 式（ＩＶ）の遊離塩基を式（Ｉ）の化合物に転換する 工程を含んでなる、方法。 １２． 式（ＩＶ）の遊離塩基を氷酢酸の存在下にて転換する、請求項１１ に記載の方法。 １３． 上記カップリング工程が約３時間起こる、請求項１１に記載の方法。