JP2001521507A - ラクトン類の鏡像異性体のクロマトグラフィー分離 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、ラクトン類の鏡像異性体のクロマトグラフィー分離用の固定相としての、Ｎ−アクリロイル−フェニルアラニン−ネオメンチルアミドの光学的に活性な重合体の、それ自体での、架橋結合された形態での、および／または担体と結合されての、使用に関する。

Description

【発明の詳細な説明】 ラクトン類の鏡像異性体のクロマトグラフィー分離 本発明はラクトン類の鏡像異性体のクロマトグラフィー分離用の固定相として の、Ｎ−アクリロイル−フェニルアラニンネオメンチルアミドの光学的に活性な 重合体の、そのままでの、架橋結合された形態での、および／または担体に結合 された形態での、使用に関する。 ＥＰ ３７９ ９１７はＮ−(メタ)−アクリロイルアミノ酸誘導体から誘導され そして、とりわけラクトン誘導体の、鏡像異性体の分離用に適するキラルな固定 相を記載している。ビーズ重合体が分離相として好ましく使用される。 (±)−トランス−(Ｅ)−６−[２−(２,６−ジイソプロピル−４−(４−フルオ ロフェニル)−３−メトキシメチル−ピリド−５−イル)−エテニル]−３,４,５, ６−テトラヒドロ−４−ヒドロキシ−２Ｈ−ピラン−２−オン（Ｉｉ）がキラル な固定相上でクロマトグラフィーにより鏡像異性体に分離されうることもＥＰ ６１７ ０１９から既知である。ＥＰ ６１７ ０１９および４９１ ２２６に記載 されているように、このラクトンは３Ｒ,５Ｓ−(＋)−エリトロ−(Ｅ)−７−[４ −(４−フルオロフェニル)−２,６−ジイソプロピル−５−メトキシメチル−ピ リド−３−イル]−３,５−ジヒドロキシ−ヘプト−６−エン酸ナトリウム（Ａ） に転化され、それはコレステロール生合成を抑制しそしてリポ蛋白質血症の処置 用の薬品中で使用することができる。 ＥＰ ６１７ ０１９は、この分離を例えばＥＰ ３７９ ９１７に挙げられてい るようなキラルな固定相上のクロマトグラフィーにより有利に実施しうることを 記載している。Ｓ−フェニルアラニンｄ−メンチルエステルの重合体が特に適す る相としてそこに挙げられている。 しかしながら、光学的に活性な重合体がアミノ酸アミド類の誘導体である場合 にはラクトン誘導体の分離が特に効率的であることが驚くべきことに今回見いだ された。Ｎ−アクリロイル−フェニルアラニンネオメンチルアミドの重合体が特 に適する。 本発明は従って、一般式（Ｉ） ［式中、 Ｒは有機ラジカルを表しそして Ｘは−ＣＨ₂−ＣＨ₂−または−ＣＨ＝ＣＨ−を表す］ のラクトン類の鏡像異性体のクロマトグラフィー分離用の固定相としての、Ｎ− アクリロイル−Ｓ−フェニルアラニンｄ−ネオメンチルアミドまたはその鏡像異 性体の光学的に活性な重合体の、そのままでの、架橋結合された形態での、およ び／または担体に結合された形態での、使用 に関する。 一般式（Ｉ）のラクトン類（またはその開環生成物）は典型的にはＨＭＧ−Ｃ ｏＡ還元酵素抑制剤として作用する。そのような化合物は、例えば、高リポ蛋白 血症または動脈硬化症の処置に適する。 式（Ｉ）の好ましい化合物は、ラジカルＲが炭素数が６もしくは１２の芳香族 もしくは部分的に飽和した炭素環式環の誘導体、インドール誘導体、ピリジン誘 導体、ピロール誘導体またはエテン誘導体であるＨＭＧ−ＣｏＡ還元酵素抑制剤 である。 このために特に好適な例は下記の化合物である： 特に好ましい態様によると、本発明は(±)−トランス−(Ｅ)−６−[２−(２, ６−ジイソプロピル−４−(４−フルオロフェニル)−３−メトキシメチル−ピリ ド−５−イル)−エテニル]−３,４,５,６−テトラヒドロ−４−ヒドロキシ−２ Ｈ−ピラン−２−オンの鏡像異性体のクロマトグラフィー分離用の固定相として の、Ｎ−アクリロイル−Ｓ−フェニルアラニンｄ−ネオメンチルアミドまたはそ の鏡像異性体の光学的に活性な重合体の、そのままでの、架橋結合された形態で の、および／または担体に結合された形態での、使用に関する。 本発明はさらに、対応する鏡像異性体混合物がキラルな固定相としてのＮ−ア クリロイル−Ｓ−フェニルアラニンｄ−ネオメンチルアミドまたはその鏡像異性 体の光学的に活性な重合体により、適当な移動相を使用して、鏡像異性体に分離 され、光学的に活性な重合体がそのままで、架橋結合された形態で、および／ま たは担体に結合された形態で使用されることを特徴とする、一般式（Ｉ）のラク トン化合物の鏡像異性体のクロマトグラフィー分離方法にも関する。 一般式（Ｉ）のどのラクトン化合物がこの方法により鏡像異性体に好ましく分 離できるかは以上ですでに述べられている。 本発明に従い使用されるキラルな固定相はＮ−アクリロイル−Ｓ−フェニルア ラニンｄ−ネオメンチルアミドからまたはその鏡像異性体であるＮ−アクリロイ ル−Ｒ−フェニルアラニンｌ−ネオメンチルアミドから誘導される。Ｎ−アクリ ロイル−Ｓ−フェニルアラニンｄ−ネオメンチルアミドから誘導される相が好ま しい。 Ｎ−アクリロイル−Ｓ−フェニルアラニンｄ−ネオメンチルアミドまたはその 鏡像異性体は、例えばＵＳ ５ ２７４ １６７／ＥＰ ３７９ ９１７に記載されているような既知の方法により製造することができる。 本発明に従い使用される光学的に活性なＮ−アクリロイル−フェニルアラニン ネオメンチルアミド重合体は好ましくは、架橋結合された不溶性であるが膨潤性 の重合体の形態で、または微細分割状の無機担体物質に結合された形態で使用さ れる。それは適当な有機溶媒中に可溶性である線状重合体として製造することも できる。０.１〜６０、好ましくは０.１〜２０、モル％の共重合可能な非−キラ ル単量体を重合体中に導入することも可能である。 架橋結合された重合体は５−２００μｍ、好ましくは１０１００μｍ、の粒子 直径を有する微細分割状のビーズの形態で好ましくは存在する。それらはそれ自 体は既知である方法で、例えばＵＳ ５ ２７４ １６７／ＥＰ ３７９ ９１７に 記載されているように、適当な架橋剤を添加しての重合により製造することがで きる。 （ビーズ）重合体の膨潤度は架橋剤（複数の架橋剤）の性質および量により調 節することができる。 実際の使用のためには、１.１〜１０、好ましくは２.０〜７.０、の膨潤度（ Ｑ）を有する（ビーズ）重合体が適すると証されている。 Ｎ−アクリロイル−Ｓ−フェニルアラニンｄ−ネオメンチルアミドまたはその 鏡像異性体の重合体は微細分割状の無機担体物質に、好ましくはシリカゲルに、 結合された形態で固定相として特に好ましく使用される。 フリーラジカルによる重合−活性基でのシリカゲルのコーテイングおよび重合 はそれ自体は既知である方法により実施することができる。 例えば、光学的に活性な重合体はシリカゲル上にそれを物理的に吸着するかま たはそれを共有結合により固定することにより位置づけることができる。後者は 、シリカゲル表面を重合可能な基でコーテイングしそして次に光学的に活性な単 量体との共重合を行うことにより、実施することができる。（メタ）アクリル酸 とエステル化されているシリカゲルジオール相の存在下における光学的に活性な 単量体の重合も広く適用可能である。適する方法は、例えば、ＥＰ ３７９ ９１ ７およびＥＰ ２８２ ７７０に記載されている。 特に好ましい方法によると、シリカゲルを最初にメルカプト基（ＳＨ単位）で コーテイングしそして次に重合条件下で光学的に活性な単量体と反応させる（現 在出願継続中の我々のヨーロッパ特許出願番号９６１１９ ０４５.１参照）。 ＳＨ単位を有する表面上で改質されたシリカゲルは、出発物質を少なくとも１ 個のメルカプト基を含有する化合物と反応させることにより、簡便に得られる。 適する誘導化試薬は原則的に既知であり（V.R．Meyer， 79以下およびそこに引用されている文献）、それらは一般的な形態Ｑ−Ｌ−ＳＨ （ここでＱはシリカゲルのＯＨ基と反応しうる反応性の基を表しそしてＬは対応 する条件下で不活性であり且つシリカゲルとＳＨ基 との間の必要な距離を確保するスペーサー基を表す）を有する。 未改質シリカゲルと形態Ｚ₁Ｚ₂Ｚ₃Ｓｉ−Ｌ−ＳＨ（ここでＺ₁、Ｚ₂およびＺ₃ は互いに独立して炭素数４までのアルキル、ハロゲン、炭素数４までのアルコキ シまたはヒドロキシを表しそしてＬは場合により置換されていてもよい炭素数７ までのアルキレン連鎖を表す）のシランとの反応により、シリカゲルは好ましく コーテイングされる。 反応は塩基触媒作用下でまたは酸媒体中で実施することができる。シリカゲ ルは一般的には１：２０〜１.２：１の官能化試薬(functional ization reagent )対シリカゲルの比で反応する。０.１％〜５％、特に好ましくは０.５％〜３％ 、の硫黄をＳＨ基の形態で含んでなり且つ光学的に活性な重合体が改質されたシ リカゲルのメルカプト基と結合されているシリカゲルが生ずる。 上記の方法に従い、第一段階で、重合可能であるかまたはグラフト化可能であ るモノ−、ジ−もしくはトリアルコキシ−またはモノ−、ジ−もしくはトリクロ ロシラン化合物、好ましくはメルカプトプロピルートリメトキシシラン、メルカ プトプロピル−トリエトキシシラン、メルカプトプロピル−メチル−ジメトキシ シラン、ビス(３−トリメトキシシリルプロピル)テトラスルホン、チオシアナト プロピルトリメトキシシラン、チオシアナトプロピルトリエトキシシラン、ビス (３−トリエトキシシリルプロピル)テトラスルホン、トリメトキシ−ビニルシラ ン、トリエトキシ−ビニルシラン、トリクロロビニルシラン、ジメトキシ−メチ ル−ビニルシラン、ジクロロ−メチル−ビニルシラン、クロロメチ ルビニルシラン、メトキシ−ジメチル−ビニルシラン、メタクリロイルオキシプ ロピル−トリメトキシシラン、メタクリロイルオキシプロピル−トリエトキシシ ラン、グリシジルオキシプロピル−トリエトキシシランまたはグリシジルオキシ プロピル−トリメトキシシラン、特に好ましくは上記のメルカプトシラン類、で シリカゲルがコーテイングされる。メルカプトプロピル−トリメトキシシランお よびメルカプトプロピルトリエトキシシランが特に好ましい。重合可能であるか またはグラフト化可能であるモノ−、ジ−もしくはトリアルコキシ−またはモノ −、ジ−もしくはトリクロロシラン化合物は、シリカゲルを基準にして、５〜１ ２０重量％の量で加えられる。好ましくは、５〜１５重量％のメルカプトシラン 類および８０〜１２０重量％のビニルシラン類が使用される。 第二段階として、例えばトルエン、ベンゼン、クロロベンゼン、クロロホルム 、イソプロパノール、ｎ−ブタノール、シクロヘキサノール、ＭＩＢＫ、酢酸エ チルまたはジオキサンの如き溶媒中のコーテイングされたシリカゲルの懸濁液に 対する、コーテイングされたシリカゲルを基準にして１０〜１００重量％、好ま しくは３０〜６０重量％、の量のＮ−アクリロイル−フェニルアラニンネオメン チルアミドの添加によりフリーラジカル重合が行われ、Ｎ−アクリロイルアミノ 酸ネオメンチルアミドの量を基準にして０.５〜１０重量％、好ましくは１〜５ 重量％、のフリーラジカル連鎖開始剤、例えば、アゾビスイソブチロニトリルま たは過酸化ベンゾイル、が加えられそして混合物が５６〜１１０℃に１〜２４時 間にわたり加熱される。 本発明に従い使用されるシリカゲルは球状であるかまたは不規則的でありそし て１〜２００、好ましくは５〜５０μの平均粒子直径を有する。それらは、例え ばマチェレイ・ウント・ナゲル(Macherey und Nagel)、メルク(Merck)、ＹＭＣ またはアクゾ(Akzo)の会社から商業的に得られる。 ラセミ化合物の分離用に適する移動相は、ラセミ化合物を溶解しうる全ての一 般的な有機溶媒および溶媒混合物である。光学的に活性な重合体がシリカゲルに 化学的に結合されている場合には、重合体は洗い流されないため、キラルな固定 相により生ずる使用有機溶媒に関する制限はない。 ここで挙げられ移動相の例は、炭化水素類、例えばベンゼン、トルエン、キシ レン、ペンタン、ヘキサンおよびヘプタン、エーテル類、例えばジエチルエーテ ル、ｔ−ブチルメチルエーテル、ジオキサンおよびテトラヒドロフラン、ハロゲ ノ炭化水素類、例えば塩化メチレン、クロロホルムおよびクロロベンゼン、アル コール類、例えばｎ−ブタノール、ｎ−プロパノール、ｉ−プロパノール、エタ ノールおよびメタノール、アセトン、メチルエチルケトン、アセトニトリル、酢 酸エチル、ジメチルホルムアミドおよび上記の溶媒の混合物である。特に好まし い移動相はトルエンとテトラヒドロフランとの１０：１〜１：１０、好ましくは ５：１〜１：５、の比の混合物である。 分離は原則として液体クロマトグラフィーによる一般的な分離条件下で行われ る。それらは分析規模および製造規模の両者で行うことができ る。 Ｎ−アクリロイル−(Ｓ)−フェニルアラニンｄ−ネオメンチルアミドまたはそ の鏡像異性体の光学的に活性な重合体がその上に結合したシリカゲルが充填され ている個別カラム上で、一般式（Ｉ）の化合物の効率的な分離が達成される。こ れが個別カラム上のバッチ操作によるのではなく例えばＥＰ ５８６ ３８５に記 載されているような模擬移動床方法に従い設計された連続方法で使用される場合 に、この分離は特に有利である。 ラセミ化合物の分離のための重合体の能力は、２種の鏡像異性体（１）および （２）に関する容量比（ｋ₁₍₂₎'値）およびそれから得られるエナンチオ選択値 αにより表わされる。これらのクロマトグラフィーパラメーターは下記の通りに 定義される： 容量比ｋ₁₍₂₎'＝（ｔ₁₍₂₎−ｔ₍₀₎）／ｔ₍₀₎、および エナンチオ選択値＝α＝ｋ₂'／ｋ₁' ｔ₍₀₎＝カラムの不感時間（ｄｅａｄ ｔｉｍｅ） ｔ₁₍₂₎＝最初に溶離された鏡像異性体１またはその後に溶離された鏡像 異性体２の保持時間実施例 実施例１ ３０ｇのメルカプトプロピルトリメトキシシラン、９ｇのｐ−トルエンスルホ ン酸および２.４ｍｌの水を、１０μの平均粒子直径を有する３００ｇの乾燥さ れた非規則的シリカゲル(マチェレイ・アンド・ナゲ ル(Macherey & Nagel)からのポリゴシル(Polygosil)１００／１０μ)の３リット ルのトルエン中懸濁液に加え、そして混合物を還流下で８時間加熱する。固体を フリット上で吸引濾別し、塩化メチレンで、塩化メチレン／メタノール１：１で 、そして塩化メチレンでさらに２回洗浄し、そして高真空下で２４時間乾燥する 。実施例２ ３ｇの実施例１からのコーテイングされたシリカゲルを最初に１２ｍｌのトル エン中に加え、１.２ｇのＮ−アクリロイル−Ｌ−フェニルアラニンｄ−ネオメ ンチルアミドおよび２０ｍｇのアゾビスイソブチロニトリルを加え、そして混合 物を６０℃で１２時間加熱する。０.２ｇの２,２−メチレン−ビス−６,６−ジ シクロヘキシル−４,４−メチルフェノールおよび３ｍｌのビストリメチルシリ ルアセトアミドを次に加え、そして混合物を還流下で４時間にわたり沸騰させる 。固体をＧ４フリット上で吸引濾別し、塩化メチレン、メタノール／塩化メチレ ン１：１、トルエン、イソプロパノールおよび再び塩化メチレンで洗浄し、そし て高真空下で１０時間乾燥する。 ２０.３重量％の重合体コーテイングに相当する１.６％の窒素含有量（元素分 析により測定される）を有する３.２１ｇのシリカゲルが得られる。実施例３ （分離例） シリカゲルに結合された重合体（実施例１および２に記載されている通りにし て製造される）を鋼カラム（内径４.６ｍｍ；長さ２５０ｍｍ） の中で使用した。溶離をトルエン／テトラヒドロフラン（３：１）混合物を用い て行った。移動相の流速は１ｍｌ／分であった。 ラセミ化合物：(±)−トランス−(Ｅ)−６−[２−(２,６−ジイソプロピル−４ −(４−フルオロフェニル)−３−メトキシメチル−ピリド−５−イル)−エテニ ル]−３,４,５,６−テトラヒドロ−４−ヒドロキシ−２Ｈ−ピラン−２−オン（ Ｉｉ） 相対容量ｋ₁'：０.４７ 相対容量ｋ₂'：２.７３ エナンチオ選択性α：５.８２

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 3/06 Ａ６１Ｐ 3/06 9/10 １０１ 9/10 １０１ Ｃ０７Ｄ 405/06 Ｃ０７Ｄ 405/06 Ｃ０８Ｆ 20/54 Ｃ０８Ｆ 20/54 // Ｃ０７Ｂ 57/00 ３４０ Ｃ０７Ｂ 57/00 ３４０ (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，Ｌ Ｕ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ， ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，Ｍ Ｗ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ， ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，Ｅ Ｓ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＧＷ，ＨＵ，ＩＤ ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ， ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，Ｍ Ｇ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ， ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，Ｖ Ｎ，ＹＵ，ＺＷ (72)発明者 ミヘル，シユテフアン ドイツ連邦共和国デー―51373レーフエル クーゼン・ハイマンシユトラーセ57 (72)発明者 ベマー，ブルノ ドイツ連邦共和国デー―51467ベルギツシ ユグラートバツハ・マクス―プランク―シ ユトラーセ53 (72)発明者 ツベーリング，ウベ ドイツ連邦共和国デー―40589デユツセル ドルフ・ヒメルガイスターラントシユトラ ーセ79

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．一般式（Ｉ） ［式中、 Ｒは有機ラジカルを表しそして Ｘは−ＣＨ₂−ＣＨ₂−または−ＣＨ＝ＣＨ−を表す］ のラクトン類の鏡像異性体のクロマトグラフィー分離用の固定相としての、Ｎ− アクリロイル−Ｓ−フェニルアラニンｄ−ネオメンチルアミドまたはその鏡像異 性体の光学的に活性な重合体の、そのままでの、架橋結合された形態での、およ び／または担体に結合された形態での、使用。 ２． からなる群から選択されるラクトンの鏡像異性体のクロマトグラフィー分離のた めの請求の範囲第１項記載の光学的に活性な重合体の使用。 ３．(±)−トランス−(Ｅ)−６−[２−(２,６−ジイソプロピル−４−(４−フル オロフェニル)−３−メトキシメチル−ピリド−５−イル)−エテニル]−３,４, ５,６−テトラヒドロ−４−ヒドロキシ−２Ｈ−ピラン−２−オンの鏡像異性体 のクロマトグラフィー分離のための請求の範囲第１項記載の光学的に活性な重合 体の使用。 ４．光学的に活性な重合体がシリカゲルに結合された形態で使用されることを特 徴とする、請求の範囲第１項記載の光学的に活性な重合体の使用。 ５．光学的に活性な重合体が対応する改質されたシリカゲルからのメルカプト基 を介して結合していることを特徴とする、請求の範囲第４項記載の光学的に活性 な重合体の使用。 ６．鏡像異性体混合物がキラルな固定相としてのＮ−アクリロイル−Ｓ−フェニ ルアラニンｄ−ネオメンチルアミドまたはその鏡像異性体の光 学的に活性な重合体により、適当な移動相を使用して、鏡像異性体に分離され、 光学的に活性な重合体がそのままで、架橋結合された形態で、および／または担 体に結合された形態で使用されることを特徴とする、請求の範囲第１項記載の一 般式（Ｉ）のラクトン類の鏡像異性体のクロマトグラフィー分離方法。 ７．トルエンおよびテトラヒドロフランの混合物が移動相として使用されること を特徴とする、請求の範囲第６項記載の方法。 ８．光学的に活性な重合体がシリカゲルに結合された形態で固定相として使用さ れることを特徴とする、請求の範囲第６項記載の方法。