JP2001514000A5 - - Google Patents
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Description
【特許請求の範囲】
【請求項１】 (a) 哺乳類中で免疫応答を誘発する能力があるマイコバクテリウム・ポリペプチド由来の少なくとも１つのドメイン、および(b) ファゴリソソーム脱出ドメイン、を含む融合ポリペプチドをコードする組換え核酸分子。
【請求項２】 ファゴリソソーム脱出ドメインがリステリア属の生物に由来する、請求項１に記載の核酸。
【請求項３】 ファゴリソソームドメインが、
(a) 配列番号１に示すヌクレオチド211-1722からのヌクレオチド配列、
(b) (a)からの配列と同一のアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列、および、
(c) (a)または(b)からの配列とストリンジェント条件下でハイブリダイズするヌクレオチド配列、
から選択される核酸分子によってコードされる、請求項１または２に記載の核酸。
【請求項４】 免疫応答を誘発する能力があるドメインがMHCクラスＩ拘束CD8Ｔ細胞応答を誘発する能力があるペプチドまたはポリペプチドである、請求項１〜３のいずれか１項に記載の核酸。
【請求項５】 免疫応答を誘発する能力があるドメインがマイコバクテリウム抗原Ag85B（M.tuberculosis）、Ag85B（M.bovis）、Ag85A（M.tuberculosis）およびESAT-6（M.tuberculosis）、またはこれらの免疫原性フラグメントから選択される、請求項１〜４のいずれか１項に記載の核酸。
【請求項６】 免疫応答を誘発する能力があるドメインが抗原 Ag85Bまたはその免疫原性フラグメントである、請求項５に記載の核酸。
【請求項７】 融合ポリペプチドがシグナルペプチド配列によって先行される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の核酸。
【請求項８】 免疫応答誘発ドメインとファゴリソソームドメインの間にペプチドリンカーが位置する、請求項１〜７のいずれか１項に記載の核酸。
【請求項９】 請求項１〜８のいずれか１項に記載の核酸分子の少なくとも１コピーを含む組換えベクター。
【請求項１０】 核酸分子が発現制御配列に機能し得る形で連結されている、請求項９に記載のベクター。
【請求項１１】 発現制御配列がマイコバクテリア中で活性である、請求項１０に記載のベクター。
【請求項１２】 染色体外ベクターである、請求項９、１０または１１に記載のベクター。
【請求項１３】 染色体ベクターである、請求項９、１０または１１に記載のベクター。
【請求項１４】 請求項１〜８のいずれか１項に記載の組換え核酸分子または請求項９〜１３のいずれか１項に記載のベクターを含む細胞。
【請求項１５】 (a) 哺乳類中で免疫応答を誘発する能力がある少なくとも１つのドメイン、および(b) ファゴリソソーム脱出ドメイン、を含む融合ポリペプチドをコードする少なくとも１つの組換え核酸分子を含む、組換えMycobacterium bovis 細胞。
【請求項１６】 ファゴリソソーム脱出ペプチドまたはポリペプチドをコードする組換え核酸分子を少なくとも１つ含む、組換えMycobacterium bovis 細胞。
【請求項１７】 哺乳類中で免疫応答を誘発する能力があるペプチドまたはポリペプチドをコードする別の組換え核酸分子を少なくとも１つ含む、請求項１６に記載の細胞。
【請求項１８】 免疫応答を誘発する能力があるドメインまたはペプチド若しくはポリペプチドが自己抗原、腫瘍抗原、ウイルス抗原、寄生体抗原、細菌抗原およびそれらの免疫原性フラグメントから選択される、請求項１５または１７に記載の細胞。
【請求項１９】 少なくとも１つの前記組換え核酸分子を発現する能力がある、請求項１４〜１８のいずれか１項に記載の細胞。
【請求項２０】 少なくとも１つの前記核酸分子によってコードされたポリペプチドを分泌する能力がある、請求項１４または１９に記載の細胞。
【請求項２１】 天然のマイコバクテリウム細胞の細胞内持続性に等しいかまたはそれよりも低い、感染マクロファージ中の細胞内持続性を有する、請求項１４〜２０のいずれか１項に記載の細胞。
【請求項２２】 請求項１〜８のいずれか１項に記載の核酸分子によってコードされた組換え融合ポリペプチド。
【請求項２３】 活性成分として、請求項１４〜２１のいずれか１項に記載の細胞または請求項２２に記載のポリペプチドを、任意に、薬学的に許容される希釈剤、担体およびアジュバントとともに含む、医薬組成物。
【請求項２４】 粘膜表面投与または非経口投与に好適な生ワクチンである、請求項２３に記載の組成物。
【請求項２５】 薬学的に有効な量の請求項１４〜２１のいずれか１項に記載の細胞を薬学的に許容される希釈剤、担体およびアジュバントとともに製剤化することを含む、生ワクチンの調製方法。
【請求項２６】 請求項１４に記載の組換え細菌細胞の調製方法であって、
(i) (a)哺乳類中で免疫応答を誘発する能力があるマイコバクテリウム・ポリペプチド由来の少なくとも１つのドメイン、および(b) ファゴリソソーム脱出ドメイン、を含む融合ポリペプチドをコードする組換え核酸分子を細菌細胞中に挿入し、そして、
(ii) (i)によって取得した細胞を好適な条件下で培養する、
各ステップを含む方法。
【請求項２７】 細胞が M.bovis細胞である、請求項２５または２６に記載の方法。
【請求項２８】 請求項１５に記載の組換え細菌細胞の調製方法であって、
(i) (a)哺乳類中で免疫応答を誘発する能力があるポリペプチド由来の少なくとも１つのドメイン、および(b) ファゴリソソーム脱出ドメイン、を含む融合ポリペプチドをコードする組換え核酸分子を Mycobacterium bovis 細胞中に挿入し、そして、
(ii) (i)によって取得した細胞を好適な条件下で培養する、
各ステップを含む方法。
【請求項２９】 請求項１６に記載の組換え細菌細胞の調製方法であって、
(i) ファゴリソソーム脱出ペプチドまたはポリペプチドをコードする組換え核酸分子を Mycobacterium bovis 細胞中に挿入し、そして、
(ii) (i)によって取得した細胞を好適な条件下で培養する、
各ステップを含む方法。
【請求項３０】 哺乳類中で免疫応答を誘発する能力があるペプチドまたはポリペプチドをコードする別の組換え核酸分子をMycobacterium bovis 細胞に少なくとも１つ挿入することを含む、請求項２８または２９に記載の方法。
【請求項３１】 免疫応答を誘発する能力があるドメインまたはペプチド若しくはポリペプチドが自己抗原、腫瘍抗原、ウイルス抗原、寄生体抗原、細菌抗原およびそれらの免疫原性フラグメントから選択される、請求項２８または３０に記載の方法。
【請求項１】 (a) 哺乳類中で免疫応答を誘発する能力があるマイコバクテリウム・ポリペプチド由来の少なくとも１つのドメイン、および(b) ファゴリソソーム脱出ドメイン、を含む融合ポリペプチドをコードする組換え核酸分子。
【請求項２】 ファゴリソソーム脱出ドメインがリステリア属の生物に由来する、請求項１に記載の核酸。
【請求項３】 ファゴリソソームドメインが、
(a) 配列番号１に示すヌクレオチド211-1722からのヌクレオチド配列、
(b) (a)からの配列と同一のアミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列、および、
(c) (a)または(b)からの配列とストリンジェント条件下でハイブリダイズするヌクレオチド配列、
から選択される核酸分子によってコードされる、請求項１または２に記載の核酸。
【請求項４】 免疫応答を誘発する能力があるドメインがMHCクラスＩ拘束CD8Ｔ細胞応答を誘発する能力があるペプチドまたはポリペプチドである、請求項１〜３のいずれか１項に記載の核酸。
【請求項５】 免疫応答を誘発する能力があるドメインがマイコバクテリウム抗原Ag85B（M.tuberculosis）、Ag85B（M.bovis）、Ag85A（M.tuberculosis）およびESAT-6（M.tuberculosis）、またはこれらの免疫原性フラグメントから選択される、請求項１〜４のいずれか１項に記載の核酸。
【請求項６】 免疫応答を誘発する能力があるドメインが抗原 Ag85Bまたはその免疫原性フラグメントである、請求項５に記載の核酸。
【請求項７】 融合ポリペプチドがシグナルペプチド配列によって先行される、請求項１〜６のいずれか１項に記載の核酸。
【請求項８】 免疫応答誘発ドメインとファゴリソソームドメインの間にペプチドリンカーが位置する、請求項１〜７のいずれか１項に記載の核酸。
【請求項９】 請求項１〜８のいずれか１項に記載の核酸分子の少なくとも１コピーを含む組換えベクター。
【請求項１０】 核酸分子が発現制御配列に機能し得る形で連結されている、請求項９に記載のベクター。
【請求項１１】 発現制御配列がマイコバクテリア中で活性である、請求項１０に記載のベクター。
【請求項１２】 染色体外ベクターである、請求項９、１０または１１に記載のベクター。
【請求項１３】 染色体ベクターである、請求項９、１０または１１に記載のベクター。
【請求項１４】 請求項１〜８のいずれか１項に記載の組換え核酸分子または請求項９〜１３のいずれか１項に記載のベクターを含む細胞。
【請求項１５】 (a) 哺乳類中で免疫応答を誘発する能力がある少なくとも１つのドメイン、および(b) ファゴリソソーム脱出ドメイン、を含む融合ポリペプチドをコードする少なくとも１つの組換え核酸分子を含む、組換えMycobacterium bovis 細胞。
【請求項１６】 ファゴリソソーム脱出ペプチドまたはポリペプチドをコードする組換え核酸分子を少なくとも１つ含む、組換えMycobacterium bovis 細胞。
【請求項１７】 哺乳類中で免疫応答を誘発する能力があるペプチドまたはポリペプチドをコードする別の組換え核酸分子を少なくとも１つ含む、請求項１６に記載の細胞。
【請求項１８】 免疫応答を誘発する能力があるドメインまたはペプチド若しくはポリペプチドが自己抗原、腫瘍抗原、ウイルス抗原、寄生体抗原、細菌抗原およびそれらの免疫原性フラグメントから選択される、請求項１５または１７に記載の細胞。
【請求項１９】 少なくとも１つの前記組換え核酸分子を発現する能力がある、請求項１４〜１８のいずれか１項に記載の細胞。
【請求項２０】 少なくとも１つの前記核酸分子によってコードされたポリペプチドを分泌する能力がある、請求項１４または１９に記載の細胞。
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(i) (a)哺乳類中で免疫応答を誘発する能力があるマイコバクテリウム・ポリペプチド由来の少なくとも１つのドメイン、および(b) ファゴリソソーム脱出ドメイン、を含む融合ポリペプチドをコードする組換え核酸分子を細菌細胞中に挿入し、そして、
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【請求項２７】 細胞が M.bovis細胞である、請求項２５または２６に記載の方法。
【請求項２８】 請求項１５に記載の組換え細菌細胞の調製方法であって、
(i) (a)哺乳類中で免疫応答を誘発する能力があるポリペプチド由来の少なくとも１つのドメイン、および(b) ファゴリソソーム脱出ドメイン、を含む融合ポリペプチドをコードする組換え核酸分子を Mycobacterium bovis 細胞中に挿入し、そして、
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