JP2001504876A - 新規化合物およびその使用方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 新規高分子体、それらの調製法、それらの医薬処方および抗インフルエンザ剤としてのそれらの使用を本発明は提供する。また本発明は、インフルエンザＡおよびＢウイルスの全ての型の検出に使用できる新規診断法も提供する。本発明高分子化合物は一種またはそれを超す種類の分子（ノイラミニダーゼバインダー）を結合しており、この分子はインフルエンザウイルスノイラミニダーゼの活性部位には結合するがノイラミニダーゼによっては切断されない。

Description

【発明の詳細な説明】 新規化合物およびその使用方法 本発明は新規部類の化学的化合物およびそれらの医薬としての使用に関するも のである。特に本発明は新規高分子体、それらの調製法、それらの医薬処方およ び抗インフルエンザ剤としてのそれらの使用に関する。また本発明はすべての型 のインフルエンザＡおよびＢウイルスの検出に使用できる新規診断法も提供する 。発明の背景 インフルエンザＡおよびＢウイルスは急性呼吸器疾患の主原因であり、米国の みで年間推定３０−５０（百万）の感染を起こす。インフルエンザＡは1919年の "Spanish Flu"等の主要な流行性疫病の原因であり数百万人がこれにより死亡し た。インフルエンザは制御困難な疾病として留まり、著しい罹病率を示し、これ による死亡率は老年もしくは衰弱患者における２次感染によるところが大きい。 抗原性のシフトもしくはドリフトによりワクチン類は絶えず時代遅れとなり、し たがって免疫化は感染防止の有効性約７０％に過ぎない。取締当局により認可さ れたインフルエンザ治療薬はアマンチジンおよびリマンチジンのみであり、これ らはインフルエンザＢに対して無効で、また重い副作用を示すことが知られてい る。 多くのウイルスおよび細菌感染はインフルエンザ様の症状を示すことがある。 呼吸器ウイルスの迅速な同定は、病気初期に最も適切な治療法の採用を医者をし て可能ならしめる。例えば抗細菌治療法の採用や子供・老年者の入院に就いての 決断は、正確な早期診断が可能にする。 臨床材料中のウイルス同定を目的とする実験室的試験法は広く採用され、かつ 各種の異なった検出法が利用できる。Marcel Dekker 1992，Ed E．H．Lennette による教科書”Laboratory Diagnosis of Viral Infections”はインフルエンザ ウイルスを包含する広範囲のウイルスに利用される方法を一般的に論議している 。 インフルエンザＡおよびＢの診断用には多数の試験法が利用できる。インフル ンザウイルスを同定する伝統的方法は細胞培養法の採用であり、この方法は高度 に鋭敏で特異的である。残念乍らインフルエンザウイルスの培養、単離および同 定に必要な時間は２日から１０日の範囲であり、したがって適切な治療法を医者 に手引きするには事実上役立たない。インフルエンザウイルス感染は通常は自己 制限性であるから、治療を有効ならしめるには診断は迅速であらねばならない。 インフルエンザ検出用細胞培養法に加えて、最近ではインフルエンザＡに対し て特異的な迅速直接試験法が幾つか利用できるようになった。このように、モノ クロナール免疫蛍光アッセイ（ＩＦＡ）が報告され（Spada，B．らのJ．Virol.M ethod，1991 33 305）、かつ少なくとも一種の迅速酵素免疫アッセイ（ＥＩＡ） が利用できる（Ryan-Poirier，K．A．らのJ．Clin．Microbiol.，1992 30 1072 ）。インフルエンザＡ用のこれらの迅速検出法に類似した多数の方法が報告され ている；例えばLeonardi，G．P． らのJ．Clin．Microbiol.，1994 32 70参照 、この著者らは治療開始に間に合うウイルス同定および感染制御対策の両方を可 能ならしめ、かつ社会に蔓延中のインフルエンザ株の抗原性構成をモニターする ために、培養単離と併用した直接標本試験を推奨している。 ＩＦＡ法は労力を必要とし、多くの技術的経験を要し、しばしば解釈困難な結 果を招く。他方、ＥＩＡ（Directigen FLU-A；Becton Dickinson Microbiology Systems）法は誤った陽性結果を高水準で与えるので、このアッセイは直接免疫 蛍光試験に追加して、またはその代替として試験室のみで採用すべきことが推奨 されている（Waner，J．L． らのJ．Clin．Microbiol.，1991 29 479）。 最近利用可能なインフルエンザ用迅速アッセイに伴う上記問題点はもとより、 ある種のこれらの方法には他の基本的な欠陥がある。第１に、利用可能ないずれ のアッセイもインフルエンザＢの検出ができず、このことは採用すべき治療法の 型について負の試験結果でさえも医者に疑念を抱かせることを意味する。第２に 、ある種の迅速免疫アッセイ法がインフルエンザＡ蛋白の一つに対する抗体の使 用に依存しているならば、抗原性蛋白構造におけるドリフトまたはシフトを受け たウイルス新株の検出ついては重大な問題になりかねない。インフルエンザＡは この種の変化を経験するその性行で悪名高い。 インフルエンザウイルスの迅速アッセイの他の型は一連の特許明細書に記載が ある（例えば、Liav，A.らのPCT 特許出願第92/12256号）。この方法には、イ ンフルエンザノイラミニダーゼ酵素に対する色素源基質の使用が包含される。換 言すればこのアッセイは、特有のシアリン酸（sialic acid） ・色素複合体分 子をインフルエンザノイラミニダーゼが切断する際に形成する色素の可視化に依 存する。この技法はウイルスノイラミニダーゼおよび酵素の他の形態の存在の間 、特に細菌ノイラミニダーゼの存在の間を容易には区別し得ないので、この方法 の特異性には限界があるように見える。ウイルスノイラミニダーゼの活性は比較 的緩慢なので、この方法の感度は低い。 インフルエンザＡおよびＢは二つの主要な表面糖蛋白質、ヘマグルチニン（Ｈ Ａ）および酵素ノイラミニダーゼ（ＮＡ）を有し、これら両方共に感染には必須 である。ＨＡはウイルスが細胞へ取り付くのに必要であり、一方、ＮＡは細胞表 面からのウイルスの放出に必要であると信じられる。通常約６００の三量体ＨＡ および約５０コピー数のＮＡ四量体単位が各ウイルス粒子表面に存在する。した がって抗インフルエンザ薬剤研究ではＨＡおよびＮＡの両方は格好の潜在的標的 であるが、今日までこれらの部位のいずれかに作用する抗インフルエンザ薬は臨 床用として入手できない。 インフルエンザウイルス血球凝集素は糖蛋白質および糖脂質を含む細胞表面受 容体上のシアリン酸に結合し、これにより細胞へのウイルスの取り付きおよび引 き続く感染のプロセスを開始する。ウイルス粒子の細胞膜への結合の強さはイン フルエンザＨＡの多重コピーと細胞表面上の多重シアリン酸基との間の相互作用 に依存するようにみえる。 多価相互作用についての上記概念を利用して、ヘマグルチニン阻害剤として作 用する２種またはそれを超す種類のシアリン酸誘導体を含む高分子体（macromol ecules）の合成を幾人かの研究者が報告している。ある種の強力なＨＡ阻害剤 が発見されてはいるが、これらの多価高分子体のいずれもがin vivoではインフ ルエンザ感染を阻止するようには見られない。Whitesidersおよび共同研究者に よる最近の報告（J．Amer.，Chem．Soc.，1996118 3789-3800;J．Medicinal Che m.，1995 38 4179-4190）は、インフルエンザ血球凝集素阻害剤の設計にこのア プローチを利用した各種努力の成果を要約している。 幾つかのＮＡの既知阻害剤があり、それらの大半は２−デオキシ−２，３−ジ デヒドロ−Ｎ−アセチルノイラミン酸（ＤＡＮＡ）（MeindlらのVirology，1974 58 457-63）等の、この酵素の天然基質であるノイラミン酸の間近な類似体であ る。国際特許出願第ＷＯ91/16320号公報には、インフルエンザＡおよびＢノイラ ミニダーゼに対してin vitroおよびin vivo両方で極めて活性なＤＡＮＡ類似体 の記載がある。これらの化合物の一つ（化合物Ｉ、ＧＧ１６７または４−グアニ ジノ−ノイ（Ｎｅｕ）５Ａｃ２エン（ｅｎ）と呼称）は臨床試験中であり、イン フルエンザ治療に有望視される（Hayden，F．G．らのJ．Amer．Med．Assoc.，19 96 275 295）。 一層最近では、ノイラミニダーゼ阻害活性を有する芳香族化合物がLuoらの米 国特許第5,453,533号および同第5,512,596号公報（Gilead Sciences，Inc.）に 記載され、また化合物（Ｉ）特に炭素６で側鎖がエーテル結合した化合物の類似 体が国際特許出願ＷＯ96/26933号（Gilead Sciences，Inc．）およびC.KimらのJ ．Amer．Chem．Soc.，1997 119 681に記載されている。 化合物（Ｉ）のより単純で一層強力な類似体を幾人かの研究者が発見すべく試 みたが、今日までの報告（例えば、Bamford M．J.，J．Chem．Soc．Perkin Tran s．I，1995，1181）では化合物（Ｉ）の構造、特にグリセロール側鎖におけるい かなる変更でもノイラミニダーゼ結合性を低減させるらしいことを示す。加えて 、ＨＡの状況とは対照的に、ノイラミニダーゼの既知高分子阻害剤もしくは既知 ポリマー阻害剤のいずれかであるようには見えない。シアリン酸含有ポリマーは Royらの米国特許第5,192,661号およびBovinらの米国特許第5,571,836号公報中に 記載があるが、これらの化合物は抗原としての使用または血球凝集素のバインダ ーとしての利用目的に設計された合成ポリシアロシドであった。発明の要約 第１の局面において本発明は、インフルエンザウイルスノイラミニダーゼの活 性部位に結合する一種または２種以上の分子を付着した高分子化合物を提供する 。；これらの分子はここでは”ノイラミニダーゼバインダー”と呼称する。好ま しくは、このノイラミニダーゼバインダーはスペーサーもしくはリンカー基を介 して上記分子に取り付けられるので、ノイラミニダーゼバインダーは高分子骨格 による立体障害は受けない。このノイラミニダーゼバインダーは酵素により切断 されない限り、インフルエンザウイルスノイラミニダーゼの活性部位に結合する 任意の薬剤でありうる。この結合は非可逆的である必要はないが、結合基はＩＣ₅₀ が好ましくは１０^-6Ｍまたはそれ未満の高結合親和性を有するべきである。 本発明は特に新規部類の化学的化合物、およびインフルエンザＡおよびＢの治 療と検出のための治療薬および診断薬としてのそれらの使用に関する。一層詳細 には本発明は、インフルエンザＡまたＢのノイロミニダーゼに結合し、かつ任意 に表面にその化合物を結合させ得る官能性も保有し、または検出可能標識として も利用できるノイラミン酸（シアリン酸）誘導体を結合した高分子体に関する。 予想外にも発明者らは、化合物（Ｉ）がそのシアリン酸構造の７位を通じて官 能化されると、大きな合成もしくは天然ポリマーにこれが結合してインフルエン ザＡおよびＢノイラミニダーゼを抑制し、かつインフルエンザ感染を抑制または 阻害し得る複合体を与えうることを見いだした。化合物（Ｉ）のインフルエンザ ノイラミニダーゼ結合性を破壊するよりも寧ろ、多数の上記化合物およびその類 似化合物は適当なスペーサーによりそれらの７位置を通じて各種高分子と連結す る際には、シアリン酸基当りの平均的結合が実質的に低減しないことを発明者ら は見いだした。かくしてノイラミニダーゼへの結合を通じて、この高分子体はウ イルスに固く結合し、かつおそらくその複合体の大きさと立体効果に起因してイ ンフルエンザビリオンの感染性が低減する。このような高分子化合物は選択的に イフルエンザウイルスに結合すると同時に、表面または検出可能連結基に結合し 得る両方の能力を通じてインフルエンザＡおよびＢウイルスを検出するのにも利 用できる。 本発明高分子化合物の生物学的活性および本発明診断法は、双方ともにインフ ルエンザウイルスノイラミニダーゼの活性部位に特異的に結合し得る、上記高分 子体上のリガンドの利用に基づいており、または臨床標本中のインフルエンザウ イルスを同定するための結合薬および／または検出薬としてのこの種化合物の官 能化誘導体上のリガンドの利用に基づいている。ここでの”ノイラミニダーゼバ インダー”なる用語は、以下これら化合物およびそれらの官能化誘導体を指す。 本発明方法および化合物は非特異的にインフルエンザウイルスノイラミニダーゼ に結合する化合物の存在または不在下のいずれでも機能できる。 好ましい実施態様において本発明は、式（ＩＩ）： （Ｘ−Ｙ）_n−Ｍ−（Ｚ）_m （ＩＩ） ［式中、Ｘはスペーサー基Ｙを介して７位で高分子Ｍに結合したノイラミニダー ゼ結合２，３−デヒドロシアリン酸誘導体（２）であり、Ｚはこの高分子上の任 意の追加的置換基である］ にて表される化合物を提供する。 ノイラミニダーゼ結合部分Ｘは、式（２） ［式中、スペーサーＹはＷ基に結合し、かつ Ｒはアジド基、非置換もしくは置換グアニジノ基、または非置換もしくは置換ア ミノ基を示し； Ｒ²はＣＯＣＨ₃、ＣＯＣＦ₃、ＳＯ₂ＣＨ₃またはＳＯ₂ＣＦ₃を示し； ＷはＯ（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ、Ｏ（Ｃ＝Ｓ）ＮＨ、ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）ＮＨまたはＮＨ（Ｃ ＝Ｓ）ＮＨを表しかつＮＨを通して基Ｙに結合しており； ｍは０から１０００の整数であり；かつ ｎは１から１０００の整数である］ にて表されるシアリン酸誘導体である。 スペーサー基Ｙは炭素、窒素、酸素および硫黄から選択された１０００原子ま での任意に置換された鎖である。 高分子Ｍは分子量１０⁴から１０⁷までの合成もしくは天然ポリマー、蛋白、抗 体、または酵素である。 Ｙ基は一般的には高分子Ｍに共有結合で連結されるが、例えばＭがアビジンで あり、かつＹが末端ビオチン基を有する場合には非共有結合を通じても結合し得 る。 第２の任意置換基Ｚは、２−結合シアリン酸誘導体等の血球凝集素を結び付け る基、またはビオチンもしくは蛍光分子等の検出可能標識として作用し得る基で あってよく、または抗体結合ハプテンであってもよい。この任意置換基Ｚはイン フルエンザの検出を可能にするのに使用できるセイヨウワサビペルオキシダーゼ （ＨＲＰ）またはアルカリ性ホスフアターゼ（ＡＰ）であってもよい。これとは 別に、この基ＺはＮＨ₂、ＳＨ、ＣＯ₂Ｈ、ＣＨＯ、またはＣＨ＝ＣＨ₂等の、一 定表面に高分子を結合するのに適した末端官能性（functionality）を有する基 であってもよい。 他の好ましい実施態様では本発明は、式（ＩＩＡ）： （Ｘ’−Ｙ）_n−Ｍ−（Ｚ）_m （ＩＩＡ） ［式中、Ｘ’は式（２ａ） にて表され、エーテル側腕を通じて連結するノイラミニダーゼ結合シクロヘキセ ニル誘導体であり、 Ｒ、Ｒ²、Ｙ、ｎおよびｍは式（２）で定義したものであり、かつ Ｒ¹およびＷ’は一種または２種以上のハロゲン原子またはアルコキシ、ハロア ルコキシまたは任意に置換されたアリール基により任意に置換された親油性Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキルもしくはアルキレン基である］ にて表されるノイラミニダーゼバインダーを提供する。 適切なスペーサー基Ｙの例中には、アミノアルキル基、（ポリ）アミノ酸、直 鎖ペプチド、オリゴ糖類および多糖類、ポリエチレングリコール単位、およびア ミノ−ジアルキル尿素が包含されるが、これらのみには限定されず、これらのい ずれもが単独または組み合わせで使用できる。典型的にはスペーサー基Ｙは高分 子Ｍ上にアミドもしくはシッフ塩基結合形成に用いる末端アミノ基を有する。 グアニジノもしくはアミノ基Ｒの適切な置換基の例には、メチル、エチル、ア リル、アミノ、シアノまたはニトロが包含される。 適切な高分子体Ｍの例中には、蛋白、酵素、抗体、ポリアクリル酸およびポリ アクリルアミド等の水溶性合成ポリマー、多糖類およびポリアミノ酸が包含され る。診断用に特に適する高分子体の例には、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、セ イヨウワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）、アビジン、およびストレプトアビジ ンもしくはノイトロアビジン（neutravidin）等の関連蛋白、ならびに免疫グロ ブリンが包含される。 インフルエンザ治療に使用される場合の本発明化合物の使用に特に適する高分 子体の例には、多糖類、ポリアクリルアミド、ポリエチレングリコール、ポリ尿 素、ポリ酸、ポリエステル、ポリアミドおよびＮ−（２−ヒドロキシプロピル） メタアクリルアミド（ＨＭＰＡ）等の各種共重合体等の合成ポリマーが包含され 、これらはヒトへの投与に対して安全であることが知られている。当業者におい て は他の医薬として容認されるポリマーにも気づくはずである。 本発明化合物の好ましい一群はＸが式（２）で表されるＧＧ１６７誘導体であ る［式中、Ｒはグアニジン、Ｒ²はアセチル、Ｗは基Ｏ（＝ＣＯ）ＮＨ、スペー サーＹは６から６０の炭素、窒素および酸素原子から作られた鎖である］化合物 （ＩＩ）を含む。 式（ＩＩ）で表される高分子体はインフルエンザＡおよびＢノイラミニダーゼ の阻害剤であり、抗インフルエンザ活性を有する。かくして本発明の第２の局面 では、本発明化合物好ましくは式（ＩＩ）もしくは式（ＩＩＡ）の化合物を、ま たは医薬として容認できるそれらの誘導体を、医薬として許容される担体と共に 含む、インフルエンザＡまたはインフルエンザＢ治療のための医薬組成物が提供 される。 第３の局面によれば、本発明化合物好ましくは式（ＩＩ）もしくは式（ＩＩＡ ）の化合物または医薬として容認し得るそれらの誘導体の有効量を、インフルエ ンザ感染の治療を必要とする哺乳類に投与する工程を包含する、ヒトを含めた哺 乳類のインフルエンザ感染の治療方法が提供される。 第４の局面によればインフルエンザウイルス感染の治療薬製造用への本発明化 合物の使用、好ましくは式（ＩＩ）または式（ＩＩＡ）化合物の使用が提供され る。 本発明化合物は他の治療薬例えば他の抗感染剤、特に他の抗ウイルス剤との組 み合わせでも使用できる。したがって本発明のさらなる局面では、一種または２ 種以上の更なる治療活性剤、特に抗ウイルス剤との併用における本発明化合物好 ましくは式（ＩＩ）もしくは式（ＩＩＡ）の化合物、または医薬として容認し得 るそれらの塩もしくはそれらの誘導体を、医薬として容認できる担体と共に含有 する医薬組成物が提供される。 本発明の他の局面では、インフルエンザウイルスノイラミニダーゼの活性部位 に特異的に結合し得る本発明化合物に、インフルエンザウイルスを含むものと疑 がわれる試料を露出する工程を包含する、インフルエンザウイルス検出法が提供 される。 本発明方法はインフルエンザＡおよびインフルエンザＢのすべての型に適用さ れうる。 インフルエンザ検出の場合、本発明化合物（ＩＩ）は共有結合または非特異的 結合のいずれでも、表面に結合することが可能である。スペーサー基Ｙは、ノイ ラミニダーゼ結合単位Ｘが高分子体Ｍの表面に露出し、かつウイルス粒子へと接 近し得るに十分に長くあるべきである。 インフルエンザ検出の場合の本発明方法は、式（ＩＩ）化合物を用いた選択的 捕獲、これによるウイルスの濃縮、引き続く便利な従来型方法のいずれかを採用 するウイルス検出法を利用する；この検出法は固有の選択性を有する必要はない 。例えばバインダー（ＩＩ）は膜もしくはポリマー等の支持材料に付着すること ができ、したがって試料を支持体を通じてまたは支持体上方に通過させるとウイ ルス粒子が選択的に捕獲および濃縮される。したがって本発明の好ましい一実施 態様では、基Ｚは表面に結合し得る官能性において終結する。好ましい多くの官 能価が業界で知られている。 これとは別に、選択的検出アプローチも採用できる；試料中のウイルス粒子は 例えば非特異的に捕獲され、次いでバインダーがウイルス粒子表面のインフルエ ンザノイラミニダーゼに選択的に付着するような条件下で、検出可能標識Ｚを含 む高分子ノイラミニダーゼバインダー（ＩＩ）に露出される。この検出可能標識 を次いで従来型方法のいずれかを用いて検出する。いくつかの検出システムでは 、例えば表面のスポットもしくは線の限られた領域中に試料を集中すると便利で ある。これは各種の方法で遂行できる；例えば試料をフイルターもしくは他の支 持材料上に懸濁もしくは非選択的に捕獲し、次いで上記のような標識バインダー に 露出してもよい。 これとは別の他の局面で本発明は、選択捕獲および選択検出の組み合わせを利 用して簡単で感受性のインフルエンザウイルスの２段検出法を提供することがで きる。これは通常のインフルエンザウイルス粒子がウイルス球表面上に広がる約 １００ノイラミニダーゼ分子を有するという事実を利用したものであり（White, D.0.，Curr．Top．Microbiol．Immunol.，1974 63 1-48）、したがって一種以上 のバインダーに同時に取り付くことができる。 このように、ノイラミニダーゼバインダー化合物（１１）は例えば多孔性膜の 一定長さに亙った狭いバンドとして支持体に結合することができる。次いで試験 試料を膜の他の端部に施して結合化合物のバンドをわたって流れさせる。試料中 のいずれのインフルエンザウイルス粒子もこの膜結合化合物（ＩＩ）によりトラ ップされ、かくして狭いバンド中に保持される。試験の第２段階では、他のノイ ラミニダーゼバインダー（ＩＩ）に取り付けられた検出可能標識を、結合したイ ンフルエンザウイルス粒子のバンドを横切って膜を通じて流す。インフルエンザ ウイルスの存在は、結合化合物の部位における膜中の、観察し得る変化により判 る。本発明方法および化合物は、とりわけMillerらの米国特許第5418135号公報 に記載があるBiostar型光学免疫検定プラットホーム（Biostar Optical Immunoa ssay）（OAI）を用いて利用するのに適することが意図される。 極めて多数の適切な検出システム、例えばビオチン−ストレプトアビジン、セ イヨウワサビペルオキシダーゼもしくはアルカリ性ホスフォターゼ等の酵素シス テム、蛍光システム、化学発光システム、コロイド金、放射性標識および凝集シ ステムが業界では知られている。本発明化合物（ＩＩ）で被覆したコロイド金は 特に便利な検出可能標識になることが考えられる。同様に、高分子体Ｍがセイヨ ウワサビペルオキシダーゼである場合の本発明化合物は、インフルエンザの手近 な検出の場合に理想的であることが期待される。当業者においては適切な検出シ ステムを容易に選択し、かつ通常のトライ・アンド・エラー実験を用いて検出条 件を容易に最適化できるはずである。 式（ＩＩ）の本発明化合物および医薬として容認し得るそれらの塩ならびに誘 導体は次に記載のような各種方法により調製できる。次に概説した調製方法は本 発明の他の局面を形成する。発明の具体的説明 次の非制限的実施例のみを参照しながら本発明を詳細に説明する。 本発明化合物の例中には式（３）の化合物が包含され、式中Ｍは次の表１に掲 げた蛋白の一つである。 本発明化合物のさらなる例中には式（４）の化合物が包含され、式中Ｍは蛋白 アビジンであり、これは基Ｘ−Ｙに非共有結合で結び付き、また下表２に掲げた リガンドＺに共有結合で結び付けられている。 Ｍが合成ポリマーである場合の本発明化合物のさらなる例中には、下表３に示 すような式（５）の化合物が包含され、ここでのシアリン酸基（２）上の置換基 はＲ²＝Ａｃ、Ｒ＝グアニジンおよびＷはＯＣＯＮＨである。 Ｍがデキストラン骨格（分子量５００，０００）である場合の本発明化合物の さらなる例中には、表４に示すような式（６）で表される化合物が包含され、こ こでのノイラミニダーゼ結合基（２）上の置換基はＲ²＝Ａｃ、Ｒ＝グアニジン およびＷはＯＣＯＮＨである。式（６）中の整数ｎ、ｍおよびｐはデキストラン 骨格中のグルコース単位の百分率を与え、このグルコース単位は特定基により置 換され、すなわちｎ、ｍおよびｐの合計が１００にならない場合の残部デキスト ラン骨格は非置換グルコース単位からなる。このデキストラン骨格の各単位に結 び付く各種リガンドに対して３つの可能な結合点があることにも注目すべきであ る。 本発明化合物のさらなる例中には高分子Ｍがデキストランまたはポリアクリル 酸骨格である場合の化合物が包含され、ここでのシアリン酸基（２）上での置換 基はＲ²＝Ａｃ、Ｒ＝グアニジンおよびＷはＯＣＯＮＨであり、かつこの場合の 追加置換基Ｚは例えばベンジル基、ビオチン分子またはフルオレセイン含有基で ある。 ここでの治療についての言及は確定した感染症または症状の治療はもとより、 予防にも及ぶことを当業者は認識するはずである。治療は感染に先立ち、または 感染時に開始し、ウイルスが最早呼吸管に存在しなくなるまで継続するのが好ま しい。本発明化合物の適切な用量は一般的には０．１から１００ｍｇ／ｋｇ／日 の範囲、好ましくは０．２から２０ｍｇ／ｋｇ／日の範囲である。 適切な治療を日に１−４回行い、感染後３−７日間継続する。望ましい用量は １回で投与するか、または適宜の間隔を置いて分割投与してもよい。 治療薬として用いる場合、本発明化合物は原料化学物質として与えることもで きるが、医薬処方として活性成分を与えるのが一般的には好ましい。したがって 本発明は、一種または２種以上の医薬として容認できる担体、および任意に他の 治療用および／または予防用薬剤との併用における、式（ＩＩ）の化合物または 容認し得るその塩もしくは誘導体を含む医薬用処方を提供する。医薬用処方中に は、経口、鼻腔もしくは局所投与、または呼吸管中への吸入もしくは吹き込みに 適する形状が包含される。適当な場合の上記処方は別個の投薬単位で便利に提供 でき、また薬剤業界で周知のいずれの方法によっても調製できる。 一般的には本発明化合物は、溶液もしくは懸濁物もしくは乾燥粉末の形態で投 与できる。本発明方法に従って呼吸管へ投与する際には、上記ノイラミニダーゼ 阻害剤は、呼吸管への投与の場合に当分野で採用するいずれかの方法および処方 により投与できる。 溶液および懸濁物は一般的には水性であり、例えば水単独または水および生理 学的に容認される共溶媒（例えばエタノール、プロピレングリコール、ｐｅｇ４ ００等のポリエチレングリコール）から調製される。かかる溶液もしくは懸濁液 は、他の賦形剤例えば保存料（塩化ベンザルコニウムなど）、溶解剤／界面活性 剤（ポリソルベート（例えばTween 80）等）、緩衝剤、等張力調整剤（例えば塩 化ナトリウム）、吸収増進剤および粘度増進剤を追加的に含有できる。懸濁物は 懸濁剤（例えば微晶質セルロース、ナトリウムカルボキシメチルセルロース）を 追加的に含有してもよい。 溶液または懸濁物は在来型手段、例えばドロッパー、ピペットまたはスプレー 使用の手段で鼻腔に施す。処方は１回服用または多重服用形で提供できる。スプ レーは例えば計量型噴霧スプレーポンプの手段により遂行できる。呼吸管中への 投与もエーロゾル処方の手段で遂行でき、この場合の化合物はクロロフルオロカ ーボン（ＣＦＣ）または他の適当な気体等の適切な推進剤を用いた加圧パック中 に提供される。 別法として上記化合物は乾燥粉末の形態、例えばラクトース、澱粉、澱粉誘導 体およびポリビニルピロリドン等適切な基剤中における上記化合物の粉末混合物 のミックス形態で提供されてもよい。結果的には上記粉末は鼻腔中でゲルを形成 するはずである。鼻腔内投与を包含する呼吸管への投与を意図した処方では、一 般には上記化合物は例えば５ミクロン程度またはそれ未満の小粒子径を有してい る。かかる粒子径は業界既知の手法で得られる。 本発明化合物は数工程で調製され、第１部は一般に式Ｘ−Ｙ（式中ＸおよびＹ は上記したと同じ）で表されるノイラミニダーゼ結合シアリン酸誘導体の合成で ある。 ７位に適切な官能性を有するシアリン酸誘導体（２）の合成法は英国特許出願 第9516276.4号および国際特許出願ＰＣＴ／ＡＵ 97/00190号公報に記載がある。 適切なシアリン酸誘導体Ｘ−Ｙの例を下表５に示すが、式中Ｒ²、ＲおよびＷ は上記したように部分Ｘ上の置換基である。 本発明化合物の調製のための第２の部分は、高分子Ｍにノイラミニダーゼ結合 単位Ｘ−Ｙを結び付ける工程を包含する。蛋白型の高分子Ｍに単位Ｘ−Ｙを共有 結合で取り付ける場合の複合化は、周知の標準クロスカップリング法（例えばS ．S．Wongの”Chemistry of Protein Conjugation and Cross-Linking”CRC Pre ss，1991;G．T．Hermansonの"Bioconjugate Techniques"Academic Press，1996 ）を用いて一般的に実施できる。 合成ポリマーの場合は、適切な活性化された置換基を有する予備形成ポリマー 骨格に単位Ｘ−Ｙを付け足してもよい。例えば基Ｙが末端アミノ官能性を有する ならば、これはポリアクリレート骨格上の活性化されたエステル置換基と反応で きる。これとは別に、末端オレフイン等の適切な重合可能置換基を有する単位Ｘ −Ｙは重合または好ましくは他のオレフインと共重合して、高分子骨格を形成し 得る。例えば（R．RoyのTrends in Glycoscience and Glycotechnology，1996 8 79-99;N．V．BovinおよびH．J．GabiusらのChem．Soc．Reviews.，1995 413 参照）。実施例１ ＧＧ１６７−ウシ血清アルブミン−ビオチン複合体（３ａ） の調製 （ａ） ５−アセトアミド−７−（６’−（６”−アミノカプロイル）アミノ ヘキシル）−カルバモイルオキシ−４−グアニジノ−２，３，４，５−テトラデ オキシ−Ｄ−グリセロ−Ｄ−ガラクト−ノン−２−エノピラノソン酸（enopyran osonic acid）（２ｂ）（７−（６−アミノカプロイル）アミノ−ヘキシルカル バモイルオキシ−ＧＧ１６７）の調製。 アセトン（２．５ｍｌ）、水（１００μｌ）、Ｎ−メチルモルホリン（４μｌ 、３６μｍｏｌ）およびトリエチルアミン（２１μｌ、１４７μｍｏｌ）の混合 物中に６−（ｔ−ブチルオキシカルボニルアミノ）カプロン酸（３４ｍｇ、１４ ７ μｍｏｌ）を溶解した。この溶液を−１２℃に冷却し、次いでイソブチルクロロ ホルメート（２１μｌ、１６１μｍｏｌ）を添加した。この溶液を１２分間撹拌 した。 トリエチルアミン（４０μｌ、２８７μｍｏｌ）を含む水／アセトン（１：１ 、２ｍｌ）中にメチル５−アセトアミド−７−（６’−アミノヘキシル）−カル バモイルオキシ−４−グアニジノ−８，９−モノカルボニルジオキシ−２，３， ４，５−テトラデオキシ−Ｄ−グリセロ−Ｄ−ガラクト−ノン−２−エノピラノ ソネートトリフルオロ酢酸塩（７９ｍｇ、９２μｍｏｌ）を溶解した。この塩基 性溶液を０℃に冷却し、前記反応混合物中に一度に添加した。この混合物を室温 まで温め、４時間撹拌した。 減圧下に溶媒を除去した。粗生成物をメタノール／水（１：１、４ｍｌ）中に 取り上げ、次いでトリエチルアミン（１ｍｌ）を加えた。アルゴン中、溶液を一 夜撹拌した。溶媒を回転蒸発器で除き、残渣をメタノール中に溶解し、シリカゲ ル（１．５ｇ）上に吸着させた。酢酸エチル／イソプロパノール／水（１００／ ７５／２５）を用いて溶離するシリカゲル（１０ｇ）上でのクロマトグラフイー にかけると、生成物（５３ｍｇ、７７μｍｏｌ、８４％）を与えた。 ｔ−Boc保護糖を酢酸エチル／トルエン中に溶解し、蒸発・乾燥させた。この 物質をトリフルオロ酢酸（３ｍｌ）中に溶解し、アルゴン雰囲気中、室温で１時 間撹拌した。減圧下に溶媒を除き、残りのトリフルオロ酢酸を先ずジクロロメタ ン、次いで３回分の水／メタノールを用いた共蒸発により除去した。次いで試料 を水中に溶解し、濾過し、凍結乾燥するとtris TFA塩としての生成物（１４１ｍ ｇ、１５２μｍｏｌ）を与えた。 質量スペクトル（FAB）：588（M+１） （ｂ） ＧＧ１６７誘導体（２ｂ）およびウシ血清アルブミン−（６−アミノ カプロイルビオチン）₈間の複合体の調製 蛋白カップリング緩衝液：０．１Ｎ ＮａＨＣＯ₃／０．２Ｍ ＮａＣｌ 透析緩衝液：２０ｍＭ ＫＨ₂ＰＯ₄／０．１５Ｍ ＮａＣｌ、ｐＨ６．５ ＢＳＡ−（カプロイル−ビオチン）₈（３ｍｇ、４３ｎｍｏｌ、Pierce）を上 記カップリング緩衝液（７．５ｍｌ）中に溶解し、３０分間緩やかに撹拌した。 Bis-（Ｎ-ヒドロキシスルホスクシン酸イミド）スベレート(suberate)（１２ ｍｇ、２１μｍｏｌ Pierce）をカップリング緩衝液（１ｍｌ）中に溶解し、カ ップリング緩衝液（１．５ｍｌ）中で実施例１（ａ）（１９．５ｍｇ、２１μｍ ｏｌ）からの化合物（２ｂ）の塩基性溶液に直接添加した。７．５分間撹拌して 反応を進行させた。誘導されたＧＧ１６７溶液中に次いでＢＳＡ−ビオチン溶液 を滴下し、混合物を室温で１．５時間撹拌した。この溶液を凍結乾燥し、水（３ ．０ｍｌ）中に溶解し、透析緩衝液（３×１．５Ｌ、セルロースチューブ、１２ ，０００ＭＷカットオフ）に対して透析した。 混合物を凍結乾燥し，水（２．５ｍｌ）中に取り上げ、ＰＤ−１０カラム（Ph armacia）上で脱塩し、次いで凍結乾燥すると生成物（３ａ）（２．５ｍｇ）を 与えた。 糖取り込み（蛋白分子当り３０ＧＧ１６７単位）の算定はグアニジン基に対す る比色分析アッセイに準拠した（Sakaguchi反応、Can．J．Chem.，1958 36 1541 参照）。実施例２ ウシ血清γグロブリン−（６−アミノカプロイルビオチン）₁₈ −（ＧＧ１６７−７−カルバメート−１，６−ジアミノヘキサ ン−６−アミノカプロン酸アミド−スベリン酸アミド）₆₀（３ ｂ）の調製 ウシγグロブリン（３ｍｇ、２０ｎｍｏｌ、Sigma）をカップリング緩衝液（ １ｍｌ）中に溶解し、３０分間撹拌した。 カップリング緩衝液中のＮ−ヒドロキシスルホスクシンイミジル−Ｎ−ビオチ ニル−６−アミノカプロエート（１．８ｍＭ、２８０μｌ、０．５μｍｏｌ）を この蛋白溶液中に加え、室温で１時間撹拌して反応させた。 次いで反応混合物をカップリング緩衝液で７．５ｍｌに希釈し、実施例１（ｂ と同一条件下に実施例１（ａ）からのＧＧ１６７−７−カルバメート−１，６− ジアミノヘキサン−６−アミノカプロン酸アミドおよびビス（ｎ−ヒドロキシス ルホスクシンイミジル）スベレートと反応させた。 凍結乾燥させたγ−グロブリン複合体（３ｂ）の収量は２．５ｍｇであった。実施例３ 化合物２ｃとセイヨウワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）との 間の複合体３ｆの調製 よく確立した過ヨウ素酸酸化法（例えばG.T．Hermansonの”Bioconjugate Tec hniques”Academic Press，1996 472参照）に従って化合物２ｃをＨＲＰに結合 させて化合物３ｆを得た。 ＨＲＰ（ＩＶ−Ａ型、Sigma Aldrich P-6782、５ｍｇ、１１４ｎｍｏｌ）を 酢酸ナトリウム／塩化ナトリウム緩衝液（５ｍＭ／１５０ｍＭ、ｐＨ４．５、５ ００μｌ）中に溶解した。新しく調製した過ヨウ素酸ナトリウム溶液（酢酸ナト リウム／塩化ナトリウム緩衝溶液中８８ｍＭ、５０μｌ、４．４ｍｍｏｌ）をこ れに添加し、次いで暗室温中２０分放置して反応させた。この混合物を、予め酢 酸ナトリウム緩衝液（５ｍＭ、ｐＨ４．５）を用いて予備的に平衡させたＰＤ− １０カラム（Pharmacia Biotech，Sephadex G-25）を用いたクロマトグラフイー にかけ、溶離物を凍結乾燥した。 化合物２ｃ（３．９ｍｇ、３．７５μｍｏｌ）を含む炭酸ナトリウム緩衝液（ ０．２Ｍ、ｐＨ９．５、１ｍｌ）中に、酸化されたＨＲＰを４℃で溶解し、４℃ で一夜放置して反応させた。ナトリウムシアノボロハイドライド（１Ｎ ＮａＯ Ｈ中５Ｍ、１０μｌ、５０μｍｏｌ）を添加し、４℃で一夜放置して反応させた 。エタノールアミン溶液（１Ｍ、ｐＨ９．５、５０μｌ、５０μｍｏｌ）を添加 し、室温で３０分間放置して反応させ、次いで蒸留水で予め平衡化したＰＤ−１ ０カラムを用いてクロマトグラフイーにかけた。溶離物を凍結乾燥すると、薄褐 色粉末としてのＨＲＰ−化合物２ｃ複合体を与えた。実施例４ 蛋白−ＧＧ１６７複合体３ｃ、３ｄおよび３ｇ−３ｊの調製 化合物３ｃ、３ｄおよび３ｇ−３ｊは、ビス（Ｎ−ヒドロキシスルホスクシン イミド）スベレートを用いて化合物２ｃまたは２ｇのいずれかを用いて適当な蛋 白を結合し、次いで実施例１の（ｂ）項記載と同一方法により調製した。実施例５ アビジンおよびＧＧ１６７−ビオチン複合体間のビオチニル化 複合体（４ｄ）の調製 （ａ） Ｂｏｃ−保護テトラ（６−アミノカプロン酸）を用い、実施例１に記 載したと類似の方法に従って、５−アセトアミド−７−（６’−（６”一（６’ ” −ビオチニルアミノカプロイル）−トリアミノカプロイル）アミノヘキシル）− カルバモイルオキシ−４−グアニジノ−２，３，４，５−テトラデオキシ−Ｄ− グリセロ−Ｄ−ガラクトーノン−２−エノピラノソン酸（２ｅ）を調製した。 （ｂ） 水（５００μｌ）中の化合物（２ｅ）（０．５ｍｇ、０．４３４μｍ ｏｌ）の溶液中にアビジン（３ｍｇ、０．０４４５μｍｏｌ）を室温で２時間か けて溶解した。スルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド−カプロイルアミノ−ビ オチン（Pierce#21335）（１０００μｇ、１．７９８μｍｏｌ）および炭酸水素 ナトリウム（１０００μｇ、１１．９μｍｏｌ）の水（２４０μｌ）溶液を上記 生成溶液中に加えた。全混合物を室温で４５分間放置し、次いで透析管（分子量 カットオフ１２，０００）中に置いた。各場合４５分の浸漬時間で５０ｍＭＮａ ＨＣＯ₃溶液（４×２５０ｍｌ）および水（８×２５０ｍｌ）に対して引き続い て管を透析した。室温で一夜、水（５００ｍｌ）に対して最終的に管を透析した 。透析管からの生成溶液のｐＨを炭酸水素ナトリウムを用いて６．５−７．０に 調整し、次いで凍結乾燥すると標題複合体（４ｃ）（３ｍｇ、８９％）が白色固 体として得られた。この複合体は四つのアビジン結合部位を介して結合した四つ のＧＧ１６７−ビオチンン分子、および次いで約８から１０の共有結合ビオチン リガンドで置換されたアビジン骨格を含む。この複合体の図式を図１に示し、こ こでＡはアビジン、Ｂはビオチン、およびＳはＧＧ１６７糖分子を示す。実施例６ 各種ＧＧ１６７−リガンドで置換されたポリアクリルアミド（ ５ａ）−（５ｅ）の調製 （ａ） Ferrutiらの記載（Polymer，1972，13，462頁）に従って（Ｎ−（ア クリロイルオキシ）スクシンイミドからポリ（Ｎ−（アクリロイルオキシ）スク シンイミド）（ｐＮＡＳ）を調製した。このｐＮＡＳの¹Ｈｎ．ｍ．ｒ．スペク トルおよび赤外スペクトルは文献中に以前に報告されたものと矛盾しなかった。 このｐＮＡＳバッチの試料を濃アンモニアで数時間室温処理してポリアクリルア ミドに転化したところ、透析ポリアクリルアミドの分子量は粘度測定を用いて約 ５０，０００であることが判った。 （ｂ） 化合物（５ｃ）の場合について次に輪郭を示した一般的方法に従って 、ポリアクリルアミド（５ａ）−（５ｅ）を取り込んだ各種ＧＧ１６７誘導体を ｐＮＡＳの一バッチから調製した。 化合物（２ｆ）（３．８ｍｇ、６．２μｍｏｌ）のＤＭＦ（０．５ｍｌ）溶液 中にｐＮＡＳ（１０ｍｇ、ＮＡＳの５９μｍｏｌ）のジメチルホルムアミド（Ｄ ＭＦ、０．５ｍｌ）溶液を撹拌しながら室温で添加した。トリエチルアミン（１ ０μｌ、７０ｐｍｏｌ）を添加し、この透明溶液を室温で一夜撹拌し、次いで６ ５℃で５時間加熱し、室温で再度一夜撹拌した。希釈アンモニア水溶液（６ｍｌ 、３％溶液）を反応混合物に加え、透明溶液を室温で２４時間放置した。減圧下 に反応混合物を蒸発・乾固し、残渣を水（３ｍｌ）中に溶解し、透析管（ＭＷカ ットオフ１２，０００）中に置き、水（５００ｍｌ、ｐＨ６）に対して２４時間 透析した。この溶液を凍結乾燥すると白色固体（５ｍｇ）としてのＧＧ１６７含 有ポリアクリルアミド（５ｃ）を与えた。¹Ｈｎ．ｍ．ｒ．スペクトル（３００ ＭＨｚ）は次の広い信号を示した：（Ｄ₂Ｏ）δ5.7,4.4-4.6,4.1,3.3-3.7，3.0 ，2.0-2.5，1.9，1.1-1.8。上記ポリマーおよびスペーサー鎖（δ1.0-3.2、1.9 におけるＮ−アセチルピークを引いた）の場合の積算（integral）をシアリン酸 プロトン（δ5.7-3.2）の場合の積算と比較すると、ＧＧ１６７単位の取り込み の程度は約１０％であると見積もられた。実施例７ ＧＧ１６７リガンドおよびビオチンリガンド両方を有するポリ アクリルアミド５１の調製 ｐＮＡＳ（１７０ｍｇ、１ｍｍｏｌのＮＡＳ）（ＭＷ約５０，０００）のＤＭ Ｆ（３ｍｌ）溶液を室温で撹拌し、化合物２ａ（ＴＦＡ塩、３０ｍｇ、５０μｍ ｏｌ）およびＮ−６−アミノヘキシル−ビオチンアミド（７ｍｇ、２０μｍｏｌ ）のＤＭＦ（２ｍｌ）溶液を添加した。トリエチルアミン（５μｌ）を加え、反 応混合物を２０°で２４時間撹拌した。希釈アンモニア（２０ｍｌ、５０％）を この混合物中に加え、さらに２４時間撹拌した。反応混合物を蒸発・乾燥し、残 渣を水（１０ｍｌ）に溶解し、２日間水中で透析（１×４リットル、ＭＷカット オフ１２，０００のチューブ）した。Sakaguchiグアニジン色試験では、管中に 残留した液体から陽性結果が得られたが、最終透析水の濃縮試料からは得られな かった。透析管からの液体を凍結乾燥させるとクリーム綿毛様固体（７１ｍｇ） としての５１を与えた。ポリマー上のリガンドの程度はＮＭＲ積算により推定し たが、出発アミンのほぼ完全な取り込みとは矛盾しなかった。実施例８ ＧＧ１６７含有ポリアクリルアミド５ｉ、５ｋ、５ｍおび５ｎ の調製 ＧＧ１６７誘導体（２ａまたは２ｃ）、およびベンジルアミン、Ｎ−６−アミ ノヘキシル−フルオレセインまたはアミノエタンチオールのいずれかの適当な混 合物とｐＮＡＳとを実施例７記載と類似の手法に従って反応させ、化合物５ｉ、 ５ｋ、５ｍおび５ｎのそれぞれを調製した。化合物５ｉおよび５ｋ（および化合 物５ｈおよび５ｊ）の調製に対しては、一層高分子量（＞２００Ｋｄ）のｐＮＡ Ｓを使用した。実施例９ 多重ＧＧ１６７（７−オキシカルバモイルヘキシルアミノカル ボニルオキシ−４−グアニジノ−ノイ（Ｎｅｕ）５Ａｃ２エン （ｅｎ））（３．５ｍｏｌ％）およびＮ−ベンジルカルバモイ ルオキシ（１６．８ｍｏｌ％）置換基を有するデキストラン（ ＭＷ５００ｋＤａ）の調製 デキストラン（ＭＷ５００，０００）［１００ｍｇ、０．６１７ｍｍｏｌ（単 位ＭＷ１６２基準）］のＤＭＳＯ（５ｍｌ）溶液中にｐ−ニトロフエニルクロロ ホルメート（５１０ｍｇ、２．５３ｍｍｏｌ）および４−ジメチルアミノピリジ ン（３０９ｍｇ、２．５３ｍｍｏｌ）を加えた。先ず室温で１時間、次いで３５ −４０℃で３時間、この混合物をアルゴン雰囲気中で撹拌した。ピリジン（５ｍ ｌ）中のベンジルアミン（１２．５ｍｇ、０．１１７ｍｍｏｌ）および４−ジメ チルアミノピリジン（４０ｍｇ、０．３２７ｍｍｏｌ）の溶液と上記生成溶液と を併合した。アルゴン雰囲気下に反応混合物を室温で１６時間撹拌し、次いで高 減圧下に蒸発・乾固させた。残渣を２％炭酸カリウム溶液（２５ｍｌ）中で５０ ℃で３時間撹拌し、透明溶液を生成させ、次いでこの溶液のｐＨを３Ｍ ＨＣｌ で７に調製した。生成溶液を室温で３日間、水に対して透析し、凍結乾燥すると¹ Ｈｎ．ｍ．ｒ．（Ｄ₂Ｏ）で示されるオキシカルバモイルメチレンベンゼン１６ ．８モル％を含む白色固体としてのベンジル化デキストラン（９５ｍｇ、８３． ４％）を与えた。 ベンジル化デキストラン（５ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ）のＤＭＳＯ（０．２ ５ｍｌ）溶液中にｐ−ニトロフエニルクロロホルメート（１２．８ｍｇ、０．０ ６３ｍｍｏｌ）および４−ジメチルアミノピリジン（７．８ｍｇ、０．０６３ｍ ｍｏｌ）を加えた。この溶液をアルゴン下に室温で１時間、次いで３５−４０℃ で３時間撹拌した。その後、これをピリジン（０．２５ｍｌ）およびＤＭＳＯ（ ０．２５ｍｌ）の混合物中の化合物２ａ（０．５ｍｇ、０．００１０５ｍｍｏｌ ）溶液と併合した。反応混合物を室温で１６時間撹拌し、次いで高減圧下に蒸発 ・乾燥させた。残渣を１％炭酸カリウム溶液（５ｍｌ）中で激しく４．５時間撹 拌すると透明溶液が得られた。次いで溶液のｐＨを３Ｍ ＨＣｌで７．５に調整 し、室温で２４時間水に対して透析し、最後に凍結乾燥すると白色固体としての 標題ポリマー（４．５ｍｇ、８２％）を与えた。¹Ｈ−ｎ．ｍ．ｒ．（Ｄ₂Ｏ）に よれば、担体の１００グルコース単位当り化合物２ａの３．５分子およびベンジ ルアミンの１６．８分子を保持するポリマーであることを示した。このポリマー のＭＷは６２３ＫＤａと見積もられ、７−アミノヘキシルアミノカルボニルオキ シ−４−グアニジノ−ノイ５Ａｃ２エンの１単位に対する平均分子量は５７７０ であった。実施例１０ 多価ＧＧ１６７（７−オキシアセトアミドヘキシルアミノカル ボニルオキシ−４−グアニジノ−ノイ５Ａｃ２エン）（３モル ％）、Ｎ−ベンジルアセトアミド−２−オキシ（１７モル％） および２−オキシアセテート（２０％）のデキストラン／５０ ０ＫＤａ上での調製 氷浴中のデキストラン（ＭＷ５００，０００）［５０ｍｇ、０．３０８ｍｍｏ ｌ（単位ＭＷ１６２基準）水（０．３ｍｌ）溶液中に水酸化カリウム（１３８ｍ ｇ、２．４６ｍｍｏｌ）水（０．１ｍｌ）溶液を加えた。この混合物を０−５℃ で２０分間撹拌し、次いでクロロ酢酸（１０２ｍｇ、１．０７ｍｍｏｌ）を添加 した。生成混合物を７０−８０℃で２０分間、次いで室温で２時間撹拌した。反 応混合物をメタノール（２５ｍｌ）で希釈し、濾過により白色沈殿を捕集し、新 鮮なメタノール（２５ｍｌ）で完全に洗浄し、乾燥した。全操作をさらに一度繰 り返すと、タイトレーションで決定されるように約４０モル％のオキシ酢酸カリ ウム塩を含む白色固体としての生成物を与える。 この酢酸ポリマー（１０ｍｇ、０．０５ｍｍｏｌ）水（０．４ｍｌ）溶液中に 、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド・塩酸塩（ １６ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）およびスルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（ １７．４ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）を加えた。混合物を室温で２０分撹拌し、次 いでベンジルアミン（１２．８ｍｇ、０．１１８ｍｍｏｌ）のメタノール（０． ２ｍｌ）溶液と併合した。生成混合物を室温で３時間撹拌し、減圧下に濃縮して 乾燥させた。残渣をＮａＨＣＯ₃（５０ｍｇ）含有水（１０ｍｌ）中で５０℃で 撹拌して透明溶液を生成させ、この溶液を３日間水に対して透析し、凍結乾燥す ると¹Ｈｎ．ｍ．ｒ．で示されるように１７モル％オキシアセトアミドメチレン ベンゼンを含む白色固体としての生成物（９ｍｇ、８６％）を与えた。 このポリマー（５ｍｇ、０．０２３９ｍｍｏｌ）の水（０．２ｍｌ）溶液中に 、１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド・塩酸塩（ ８ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）およびスルホ−Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド（８ ．７ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で２０分間撹拌し、次 いでピリジン（０．１ｍｌ）中の化合物２ａ（１ｍｇ、０．００２１ｍｍｏｌ） および４−ジメチルアミノピリジン（３ｍｇ、０．０２４ｍｍｏｌ）の溶液と併 合した。反応混合物を室温で３時間撹拌し、次いで蒸発・乾固させた。残渣を１ ％ＮａＨＣＯ₃溶液（５ｍｌ）中で撹拌し、透明溶液を形成させた。水中での２ ４ 時間の透析後、溶液を凍結乾燥すると白色固体としての標題ポリマーが得られた （４．５ｇ、８４％）。 酸タイトレーションおよび¹Ｈ−ｎ．ｍ．ｒ．（Ｄ₂Ｏ）によれば、担体の１０ ０グルコース単位当りベンジルアミン１７モル％、ＧＧ１６７（７−アミノヘキ シルアミノカルボニルオキシ−４−グアニジノ−ノイ５Ａｃ２エン）３モル％、 および酢酸塩20モル％を上記ポリマーが保有することを示した。このポリマーの ＭＷは６８３ＫＤａであり、一つの重合体７−アミノ−ヘキシルアミノ−カルボ ニルオキシ−４−グアニジノ−ノイ５Ａｃ２エンに対する平均ＭＷは７４２０と 見積もられた。実施例１１ 重合体多価７−｛６’−｛６”−［６’”−（６””−（６’ ””−アミノカプロイル）−アミノカプロイル）−アミノカプ ロイル］−アミノカプロイル｝−アミノヘキシル｝−カルバモ イルオキシ−４−グアニジノ−ノイ５Ａｃ２エン（１４モル％ ）の酸化デキストラン／５００ｋＤａ上での調製 水（０．４ｍｌ）中のデキストラン（ＭＷ５００，０００）［２０ｍｇ、０． １２３ｍｍｏｌ（単位ＭＷ１６２基準）］溶液中に、氷浴温度で過ヨウ素酸ナト リウム（１５．６ｍｇ、０．０７３ｍｍｏｌ）水（０．４ｍｌ）溶液を滴下した 。反応混合物を５℃で２時間、次いで室温で２時間撹拌した。生成混合物を水（ １．２ｍｌ）で希釈し、Sephadex G-25（１０ｍｌ）カラムを通過させた。カラ ムを水（３ｍｌ）で溶離した。溶出液を凍結乾燥すると白色固体としての部分酸 化デキストラン（１８ｍｇ、９０％）を与えた。 上記酸化デキストラン（３ｍｇ、０．０１８ｍｍｏｌ）水（０．６ｍｌ）溶液 中に、炭酸水素ナトリウム（１５ｍｇ、０．１７８ｍｍｏｌ）および化合物２ｃ ・ＴＦＡ塩（６ｍｇ、０．００５７ｍｍｏｌ）を加えた。全混合物を室温で１時 間攪拌し次いで氷浴温度で撹拌した。ナトリウムシアノボロヒドリド（１００ｍ ｇ、１．５９ｍｍｏｌ）をこの冷混合物中に分割添加した。氷浴温度で反応混合 物を１時間撹拌、５℃で１６時間放置し、次いでナトリウムシアノボロヒドリド （１００ｍｇ、１．５９ｍｍｏｌ）でさらに処理し、５℃で１時間、室温で２時 間撹拌し、最後に水に対して２４時間透析し、凍結乾燥すると白色固体としての 標題ポリマー（３ｍｇ）を与えた。 ¹Ｈ−ｎ．ｍ．ｒ．（Ｄ₂Ｏ）によれば、部分酸化デキストラン分子当り７−｛ ６’−｛６”−［６’”−（６””−（６’””−アミノカプロイル）−アミノ カプロイル）−アミノカプロイル］−アミノカプロイル｝−アミノヘキシル｝− カルバモイル−オキシ−４−グアニジノ−ノイ５Ａｃ２エン（化合物２ｃ）約４ ３０分子を上記ポリマーが保有することを示した。したがって上記ポリマーのＭ Ｗは８６ＯＫＤａと見積もられ、４−グアニジノ−ノイ５Ａｃ２エンの各単位に 対する平均ＭＷは２，０００と見積もられた。実施例１２ 重合体多価７−スベラモイル−ヘキシル−カルバモイルオキシ −４−グアニジノ−ノイ５Ａｃ２エン（５モル％）のポリリシ ン／７０−１５０ｋＤａ上での調製 ７−アミノヘキシル−カルバモイルオキシ−４−グアニジノ−ノイ５Ａｃ２エ ン（化合物２ａ、６．４ｍｇ、０．０１３５ｍｍｏｌ）およびジスクシンイミジ ルスベレート（５ｍｇ、０．０１３５ｍｍｏｌ）のピリジン（０．１ｍｌ）とＤ ＭＦ（０．１ｍｌ）混合物中の溶液を３０℃で３時間撹拌し、高減圧下に蒸発乾 燥した。残渣をエーテル（１０ｍｌ×３）中に取り上げ、乾燥し活性化エステル を得た。次いでこれを水（０．４ｍｌ）、ＤＭＳＯ（０．２５ｍｌ）、ＤＭＦ（ ０．６ｍｌ）、およびピリジン（０．４ｍｌ）の混合物中のポリリシン・ＨＢｒ 塩（ＭＷ７０，０００−１５０，０００）（１０ｍｇ、０．０４８５ｍｍｏｌ） 溶液と併合した。生成混合物を室温で１０時間撹拌し、次いで水に対して７２時 間透析した。透析物を水（１０ｍｌ）で希釈し、５０℃に加熱し、次いで濾過し た。濾液を凍結乾燥すると白色固体としての標題ポリマー（５ｍｇ）を与えた。 ¹Ｈ−ｎｍｒ（Ｄ₂Ｏ）によれば、担体の１００リシン単位当り７−スベラモイ ル−ヘキシルカルバモイルオキシ−４−グアニジノ−ノイ５Ａｃ２エンの５分子 を上記ポリマーが保有していることを示した。したがって一つの重合体４−グア ニジノ−ノイ５Ａｃ２エンに対する平均分子量は５１４０であった。実施例１３ 重合体多価７−｛２’−［２”−（２”’−アミノエトキシ） −エトキシ］−エチル｝−カルバモイルオキシ−４−グアニジ ノ−ノイ５Ａｃ２エン（３．２モル％）のポリグルタミン酸／ ５０〜１００ｋＤａ上での調製 １−（３−ジメチルアミノプロピル）−３−エチルカルボジイミド・塩酸塩（ ９．６ｍｇ、０．０５０ｍｍｏｌ）およびＮ−ヒドロキシスルホスクシンイミド （１０．９ｍｇ、０．０５０ｍｍｏｌ）をポリグルタミン酸ナトリウム塩（ＭＷ ５０，０００〜１００，０００）（１０ｍｇ、０．０６５７ｍｍｏｌ）水（０． ６ｍｌ）溶液中に添加した。混合物を室温で２５分間撹拌し、次いで水（０．１ ｍｌ）およびピリジン（０．１ｍｌ）中の７−｛２’−［２”−（２”’−アミ ノエトキシ）−エトキシ］−エチル｝−カルバモイルオキシ−４−グアニジノ− ノイ５Ａｃ２エン・ＴＦＡ塩（化合物２ｄ）４．１ｍｇ、０．００８１ｍｍｏｌ ）溶液と併合した。生成混合物を室温で２時間撹拌し、次いで水に対して３日間 透析し、最後に凍結乾燥すると白色固体としての標題ポリマー（９．５ｍｇ）を 与えた。 ¹Ｈ−ｎｍｒ（Ｄ₂Ｏ）によれば、担体の１００グルタミン酸単位当り７−｛２ ’−［２”−（２”’−アミノエトキシ）−エトキシ］−エチル｝−カルバモイ ルオキシ−４−グアニジノ−ノイ５Ａｃ２エンの３．２分子を上記ポリマー が保有していることを示した。一つの重合体４−グアニジノ−ノイ５Ａｃ２エン に対する平均分子量は５２５０であった。実施例１４ 化合物２ｃおよびセイヨウワサビペルオキシダーゼと複合化し たＮ−ヒドロキシエチルポリアクリルアミドの調製 ＤＭＦ（１ｍｌ）中のｐＮＡＳ（実施例６のｂ項参照）（２０ｍｇ、０．１１ ８ｍｍｏｌのＮＡＳ）溶液中に化合物（２ｃ）ＴＦＡ塩（６ｍｇ、０．００５７ ｍｍｏｌ）を添加した。トリエチルアミン（２０μｌ）をこの透明溶液に加え、 室温で３日間撹拌した。上記反応混合物の半分を水（４ｍｌ）中のセイヨウワサ ビペルオキシダーゼ（１７ｍｇ）溶液に加え、混合物を数日間４℃で放置した。 エタノールアミン（１０％水溶液の０．５ｍｌ）をこの混合物中に加え、残部の ポリアクリレート活性化エステルを冷却した。２時間後に反応混合物を水に対し て３日間透析し、次いで透析物を凍結乾燥すると綿毛状の淡褐色粉末としての重 合複合体を与えた。実施例１５ インフルエンザウイルスノイラミニダーゼへの本発明化合物 の結合の測定 ２種のインフルエンザＡウイルスおよび一種のインフルエンザＢウイ ルスを試験に用いて全ウイルスインフルエンザノイラミニダーゼへの上記化合物 の結合能力を試験した。インフルエンザＡのreassortantsはＡ／ＮＷＳ／３４− tern／Australia/G70C/75（Ｈ1Ｎ9）またはＡ／ＮＷＳ／Tokyo／３／６７／Ｈ1 Ｎ2のいずれかであり、インフルエンザＢ株はＢ／Victoria／０２／８７であっ た。文献記載の手法（Potier，M．らのAnal．Biochem.，1979 94 287）に従って ノイラミニダーゼアッセイを行い、測定した阻害定数（ＩＣ₅₀）を表６に要 約する。 この高分子に対する阻害定数は、付着ＧＧ１６７誘導体の単位当りの分子量、 例えばアクリルアミド単位の１０％に結合したＧＧ１６７由来分子を有するポリ アクリルアミド５ｃの単位当りの分子量に基づいて計算したが、分子量１２９３ であると決定された。 実施例１６ 化合物Ｎｏ．４ｄを用いたＥＬＩＳＡ板上でのインフルエンザ ウイルスの検出 リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）中のＮＷＳ／Ｇ７０ＣインフルエンザＡウイルス 約１×１０⁸ｐｆｕ／ｍｌのウイルス溶液（５０μｌ）を９６−ウエルＥＬＩＳ Ａ（Dynatech）板のウエル中に直接加え、４℃で一夜放置してウイルスを結合さ せた。洗浄後、板を標準法に従ってＰＢＳ−Ｔｗｅｅｎ２０を用いてブロックし 、次いで化合物Ｎｏ．４ｄの連続希薄液をＧＧ１６７単位の１μＭ濃度から始め て１０^-10Ｍへと低下させてＥＬＩＳＡ板列の一つに加えた。対照として、ビオ チン化モノクローナル抗ノイラミニダーゼＮＣ１０抗体（L．C．Gruen，J．Immu no logical Methods，1994 168 91）の連続希釈液をＥＬＩＳＡ板の他の列に加 えた。１時間保温後、この板を洗浄して未結合化合物を除き、次いで色素原物質 としてＡＢＴＳ（Sigma）および約３０分保温を用いてストレプトアビジン−Ｈ ＲＰＯ（Boehringer-Mannheim）を用いてウイルスを検出した。 約１０^-9Ｍを上回る化合物Ｎｏ．４ｄの濃度はウイルスの検出を許容し、かつ 化合物濃度の増加と並行して一層強度が高められた信号が観察された。このよう にウエル当り約５×１０⁶ウイルス粒子が化合物Ｎｏ．４ｄを用いて容易に検出 できた。ビオチン化抗体対照は類似レベルの信号を与えた。実施例１７ インフルエンザウイルスと化合物Ｎｏ．３ａとの間の複合体の 捕獲と検出 ＧＧ１６７−ビオチン誘導体を用いてウイルス粒子を被覆するために、ＮＷＳ ／Ｇ７０ＣインフルエンザＡウイルス（１×１０⁸ｐｆｕ／ｍｌ）の溶液１０μ ｌをＥＬＩＳＡ板の別個の列のウエル中に各種濃度の化合物３ａを用いて１時間 予備保温した。１μＭ濃度のＧＧ１６７単位から始めて０．００００１μＭまで の化合物Ｎｏ．３ａの半ｌｏｇ₁₀希釈液を用いた。次いで予めアビジンで被覆し たＥＬＩＳＡ板へウイルス−化合物複合体を移し、１時間保温して捕獲させた。 この板をＰＢＳ−Ｔｗｅｅｎ２０中で洗浄し、捕獲ウイルスを標準手法に従って ウイルス血球凝集素に対するポリクローナルウサギ抗体を用いて検出した。 化合物Ｎｏ．３ａを０．１μＭ濃度で用いた場合に最良の結果が得られ、１０⁶ ｐｆｕでのウイルスの検出を明らかに可能にした。一層の高濃度におけるこの 化合物は、遊離の化合物Ｎｏ．３ａがアビジン部位の幾らかを多分ブロックする ために、この信号は弱くなるが、一方、全てのウイルス粒子に完全に結合するに は不十分な化合物の存在に多分起因して、一層の低濃度（＜０．００１μＭ）で は検出信号は同様に弱くなる。実施例１８ ストレプトアビジン−セイヨウワサビペルオキシダーゼを用い たインフルエンザウイルス−ＧＧ１６７−蛋白−ビオチン複合 体の直接検出 実施例１７の記載と同じ手法に従い化合物４ｄを用い、抗赤血球凝集素抗体の 代わりに、ストレプトアビジン−セイヨウワサビペルオキシダーゼを用いた結合 ウイルスの直接検出を同様に観察した。実施例１９ 本発明高分子体によるインフルエンザ血球凝集阻止 文献記載（例えばJ．Amer．Chem．Soc.，1997，119 4103およびその引例参照 ）の標準法に従って、インフルエンザ株Ｘ−３１（Ｈ3Ｎ2）、Ｇ７０ＣおよびＴ ｏｋｙｏ Ａの血球凝集阻止（ＨＡＩ）能力を試験した。マイクロタイター板１ ２ウエルにわたって２倍連続希釈したＰＢＳ中の重合体ＧＧ１６７複合体の溶液 を用いて上記ＨＡＩアッセイを遂行した。ＰＢＳ中４ＨＡ単位に希釈したウイル ス懸濁液をウエル中に加えた。４℃で２時間後、チキン赤血球の０．５％懸濁液 を各ウエルに加えた。４℃で１時間後、赤血球の凝集を妨げた阻害剤の最低 濃度を測定した。結果を表７に要約する。実施例２０ 本発明高分子体によるインフルエンザウイルス複製の抑制 文献（例えばWatanabeらのJ．Virological Methods，1994，48，257）記載の 標準法に従って、インフルエンザＡウイルスの複製抑制能力を試験した。このア ッセイはＭＤＣＫ細胞を用いて行い、結果を表８に示す。半対数曲線フィッティ ングの場合の回帰分析プログラムを用いて計算した、細胞変性効果を５０％［Ｉ Ｄ₅₀（μｇ／ｍｌ）］により抑制する最低化合物濃度としての結果を示す。結果 によれば、高分子に付着したＧＧ１６７誘導体を有する全ての高分子体は、それ ら自体の非置換骨格よりもインフルエンザウイルスに対して一層活性であること を示す。この結果はまた、重合体化合物の多くが単純単量体リガンド（化合物２ ｃ）よりも一層活性であり、ＧＧ１６７単位のモル濃度基準で計算した場合には 特にそうであることを示す。各化合物の治療指数は最低細胞毒薬剤濃度（ＭＴＣ ）をＩＤ₅₀で除して計算した。 明確さおよび理解の目的で本発明の詳細について記載してきたが、ここに記載 の実施態様と方法について本明細書記載の発明概念範囲から逸脱すること無く各 種の修飾および変更をなし得るであろうことは当業者には明瞭なはずである。 本明細書において文献を掲げたが、この引用によりこれらの文献を本明細書中 に包含する。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｃ０７Ｋ 14/765 Ｃ０７Ｋ 14/765 16/06 16/06 Ｃ０８Ｂ 37/02 Ｃ０８Ｂ 37/02 Ｃ０８Ｆ 8/32 Ｃ０８Ｆ 8/32 Ｃ０８Ｇ 63/91 Ｃ０８Ｇ 63/91 65/329 65/329 69/48 69/48 Ｇ０１Ｎ 33/569 Ｇ０１Ｎ 33/569 Ｌ // Ａ６１Ｋ 38/00 Ａ６１Ｋ 39/395 Ａ 39/395 37/02 (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，Ｌ Ｕ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ， ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，Ｓ Ｄ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ， ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，Ｆ Ｉ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ， ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，Ｍ Ｗ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ， ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ (72)発明者 ウェン―ヤン、ウー オーストラリア連邦ビクトリア州、マウン ト、ウェイバリー、マンロー、アベニュ、 34 (72)発明者 ベティ、ジン オーストラリア連邦ビクトリア州、マウン ト、ウェイバリー、マンロー、アベニュ、 34 (72)発明者 ガイ、ワイ．クリップナー オーストラリア連邦ビクトリア州、グレ ン、ウェイバリー、サイプレス、アベニ ュ、58

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １． インフルエンザウイルスノイラミニダーゼの活性部位には結合するがノ イラミニダーゼによっては切断されない一種または２種以上の分子（ノイラミニ ダーゼバインダー）を結合した高分子化合物。 ２． 高分子の骨格による立体障害をノイラミニダーゼバインーが受けないよ うにスペーサーもしくはリンカー基を介してノイラミニダーゼバインダーが上記 分子に結合してなる、請求項１記載の高分子化合物。 ３． ノイラミニダーゼバインダーのＩＣ₅₀が１０^-6Ｍまたはこれより小さい 、請求項１または２記載の高分子化合物。 ４． ノイラミニダーゼバインダーがシアリン酸誘導体である、請求項１から ３のいずれか１項に記載の高分子化合物。 ５． シアリン酸化合物が、シアリン酸構造の７位を介して官能化された化合 物（Ｉ） である、請求項４記載の高分子化合物。 ６． 次式（ＩＩ）： （Ｘ−Ｙ）_n−Ｍ−（Ｚ）_m （ＩＩ） ［式中、Ｘはスペーサー基Ｙを介して７位で高分子Ｍに連結しているノイラミニ ダーゼ結合２，３−デヒドロシアリン酸誘導体（２） であり、かつＺは高分子上の任意の追加的置換基であり、 スペーサーＹはＷ基に結合し、かつ Ｒはアジド基、非置換もしくは置換グアニジノ基、または非置換もしくは置換ア ミノ基を示し； Ｒ²はＣＯＣＨ₃、ＣＯＣＦ₃、ＳＯ₂ＣＨ₃またはＳＯ₂ＣＦ₃を示し； ＷはＯ（Ｃ＝Ｏ）ＮＨ、Ｏ（Ｃ＝Ｓ）ＮＨ、ＮＨ（Ｃ＝Ｏ）ＮＨまたはＮＨ（Ｃ ＝Ｓ）ＮＨを表しかつＮＨを通じて基Ｙに結合しており； ｍは０から１０００の整数であり；かつ ｎは１から１０００の整数であり、このスペーサー基Ｙは炭素、窒素、酸素お よび硫黄から選択された１０００原子までの、任意に置換された鎖であり； 高分子Ｍは共有結合もしくは非共有結合でスペーサー基Ｙに連結した、分子量１ ０⁴から１０⁷までの合成もしくは天然ポリマー、蛋白、抗体または酵素である］ にて表される、請求項１から５のいずれか一項記載の高分子化合物。 ７． 次式（ＩＩＡ）： （Ｘ’−Ｙ）_n−Ｍ−（Ｚ）_m （ＩＩＡ） ［式中、Ｘ’はエーテル側腕を通じて連結した式（２ａ） にて表されるノイラミニダーゼ結合シクロヘキセニル誘導体であり、 Ｒ、Ｒ²、Ｙ、ｎおよびｍは請求項６で定義したものであり、 Ｒ¹およびＷ’は一種または２種以上のハロゲン原子もしくはアルコキシ、ハロ アルコキシまたは任意に置換されたアリール基により任意に置換された親油性Ｃ₁ −Ｃ₁₂アルキルもしくはアルキレン基である］ にて表される、請求項１から３のいずれか１項に記載の高分子化合物。 ８． Ｚが、血球凝集素を結合する基である、請求項６または７記載の高分子 化合物。 ９． Ｚが、検出可能標識として作用し得る基である、請求項６または７記載 の高分子化合物。 １０． Ｚが、ビオチンまたは蛍光分子である、請求項７記載の高分子化合物 。 １１． Ｚが、検出アッセイに使用するのに適した酵素である、請求項６また は７記載の高分子化合物。 １２． Ｚが、表面に上記高分子を結合させるのに適した末端官能性を有する 基である、請求項６または７記載の高分子化合物。 １３． Ｚが、ＮＨ₂、ＳＨ、ＣＯ₂Ｈ、ＣＨＯまたはＣＨ＝ＣＨ₂である、請 求項１２記載の高分子化合物。 １４． スペーサー基Ｙが、いずれも単独または組合せで使用可能なアミノア ルキル基、（ポリ）アミノ酸、直鎖ペプチド、オリゴ糖および多糖、ポリエチレ ングリコール単位、ならびにアミノジアルキル尿素からなる群から選択される、 請求項６から１３のいずれか一項記載の高分子化合物。 １５． Ｙが末端アミノ基を有する、請求項１４記載の高分子化合物。 １６． 高分子Ｍが、蛋白、酵素、抗体、水溶性合成ポリマー、多糖およびポ リミノ酸からなる群から選択される、請求項６から１５のいずれか一項記載の高 分子化合物。 １７． 高分子Ｍが、血清アルブミン（ＢＳＡ）、セイヨウワサビペルオキシ ダーゼ（ＨＲＰ）、アビジン、ストレプトアビジンまたはノイトロアビジン、お よび免疫グロブリンからなる群から選択される、請求項６から１５のいずれか一 項記載の高分子化合物。 １８． 高分子Ｍが多糖、ポリアクリルアミド、ポリエチレングリコール、ポ リ尿素、ポリ酸、ポリエステル、ポリアミドおよびＮ−（２−ヒドロキシ−プロ ピル）メタクリルアミド（ＨＭＰＡ）、からなる群から選択され、上記高分子が 医薬として容認し得るものである、請求項６から１５のいずれか一項記載の高分 子化合物。 １９． Ｒが、メチル、エチル、アリル、アミノ、シアノまたはニトロ基で置 換されたグアニジノまたはアミノ基である、請求項６から１８のいずれか一項記 載の高分子化合物。 ２０． Ｘが式（２）の化合物であり、式中のＲがグアニジンであり、Ｒ²が アセチルであり、Ｗが基Ｏ（＝ＣＯ）ＮＨであり、スペーサーＹが６から６０の 炭素、窒素および酸素原子からなる鎖である、請求項６記載の高分子化合物。 ２１． インフルエンザウイルスノイラミニダーゼの活性部位に特異的に結合 し得る、請求項１から２０のいずれか一項記載の化合物に、インフルエンザウイ ルスを含むと疑がわれる試料を露出する工程を包含する、インフルエンザウイル スの検出方法。 ２２． 上記化合物が共有結合または非特異的結合により表面に結合し、かつ この場合のスペーサー基Ｙは、ノイラミニダーゼ結合単位Ｘが高分子Ｍの表面に さらされてウイルス粒子へと接近できるのに十分な長さを有する、請求項２１記 載の方法。 ２３． 選択的捕獲アッセイ、選択的検出アッセイ、または選択的捕獲−選択 的検出の組み合わせアッセイである、請求項２１または２２記載の方法。 ２４． 本発明化合物、好ましくは請求項１から７、１３、１４および１８か ら２０のいずれか一項記載の化合物または医薬として容認できるそれらの誘導体 を、医薬として容認できる担体と共に含むインフルエンザＡまたはインフルエン ザＢの治療用組成物であって、ノイラミニダーゼに対するこの化合物のＩＤ₅₀が ５μｇ／ｍｌ未満である組成物。 ２５． この化合物が請求項６または請求項７記載の化合物である、請求項２ ４記載の組成物。 ２６． 一種または２種以上の追加的治療活性剤をさらに含む、請求項２４ま たは２５記載の組成物。 ２７． 追加的治療活性剤が抗ウイルス剤である、請求項２６記載の組成物。 ２８． 本発明化合物、好ましくは請求項１から７、１３、１４および１８か ら２０のいずれか一項記載の化合物、または医薬として容認できるそれらの誘導 体の有効量を治療を必要とする哺乳類に投与する工程を包含する、ヒトを含めた 哺乳類におけるインフルエンザ感染の治療方法であって、ノイラミニダーゼに対 する上記化合物のＩＤ₅₀が５μｇ／ｍｌ未満である治療方法。 ２９． インフルエンザウイルス感染の治療用医薬を製造するための、請求項 １から７、１３、１４および１８から２０のいずれか一項記載の化合物の使用で あって、この化合物のノイラミニダーゼに対するＩＤ₅₀が５μｇ／ｍｌ未満であ る使用。