JP2001240600A

JP2001240600A - ペプチドの精製方法

Info

Publication number: JP2001240600A
Application number: JP2000056726A
Authority: JP
Inventors: Hiroyuki Fujita; 裕之藤田
Original assignee: Nippon Synthetic Chemical Industry Co Ltd
Current assignee: Nippon Synthetic Chemical Industry Co Ltd
Priority date: 2000-03-02
Filing date: 2000-03-02
Publication date: 2001-09-04
Anticipated expiration: 2020-03-02
Also published as: JP4295886B2

Abstract

(57)【要約】【課題】蛋白質を加水分解して得られたアンギオテン
シン変換酵素阻害ペプチド含有溶液から、苦みや臭いが
なく、アンギオテンシン変換酵素阻害活性の低下させな
いアンギオテンシン変換酵素阻害ペプチドの精製方法を
提供すること。【解決手段】蛋白質を水性媒体中で蛋白質分解酵素によ
り加水分解して得られたアンギオテンシン変換酵素阻害
ペプチド含有溶液を、平均細孔直径３ｎｍ以下の活性炭
を用いて処理する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、血圧降下剤または
血圧降下食品として有用であるアンギオテンシン変換酵
素阻害ペプチドの精製方法に関する。

【０００２】

【従来の技術】アンギオテンシン変換酵素は、主として
肺や血管内皮細胞、腎近位尿細管に存在し、アンギオテ
ンシンＩ（Ａｓｐ−Ａｒｇ−Ｖａｌ−Ｔｙｒ−Ｉｌｅ−
Ｈｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ）に作用し
て、アンギオテンシンIのＣ末端よりジペプチド（Ｈｉ
ｓ⁹−Ｌｅｕ¹⁰）を開裂遊離させ、強力な昇圧作用を有
するアンギオテンシンＩＩを生成させる酵素である。

【０００３】また、この酵素は生体内降圧物質であるブ
ラジキニンを分解し不活化する作用も併有し、昇圧系に
強力に関与している。従来より、アンギオテンシン変換
酵素の活性を阻害すれば、降圧に働き、臨床的には高血
圧症の予防、治療に有効であると考えられている。最近
ではプロリン誘導体であるカプトプリルが合成され、降
圧活性が確認されて以来、種々のアンギオテンシン変換
酵素阻害物質の合成研究が盛んであり、又天然物からの
取得も試みられているところである。天然物由来のアン
ギオテンシン変換酵素阻害剤は食品あるいは食品原料か
ら得られるので低毒性で安全性の高い降圧剤となること
が期待されるからである。しかしながら、天然物由来の
蛋白質を酵素により加水分解して得られるペプチド中に
は苦味ペプチドが多量に含有されており、かかるアンギ
オテンシン変換酵素阻害剤としての利用に制限を与えて
いる。

【０００４】かかる対策として、イ）ペプチドにロイシ
ンアミノペプチターゼやカルボキシペプチターゼを作用
させる方法（佐藤泰，関口義彰，千葉善根，猪飼勝弘，
農化，43,286,(1969)、S.Arai, M.Yamashita, H.Kato,
M.Fujimaki, Agr.Biol.Chem., 34,729,(1970))、ロ）ペ
プチドにα−キモトリプシンを作用させてプラスティン
とする方法（M.Fujimaki, M.Yamashita, S.Arai, H.Kat
o, Agr.Biol.Chem., 34, 483, 1325(1970)）、ハ）合成
吸着剤にアンギオテンシン変換酵素阻害ペプチドを吸着
させ、有機溶媒により溶出する方法（特開平４−３４１
１９３号公報）、ニ）疎水性吸着剤に苦味ペプチドを吸
着させ除去する方法（特開平４−１９０７９７号公報）
などが挙げられる。しかしながら、イ）及びロ）の方法
ではペプチドの一次構造が変わってしまい、ハ）及び
ニ）では苦味ペプチドの除去効率が悪く工業的な方法と
は言い難い。故にペプチドの一次構造を変えずに苦味ペ
プチドを効率良く除去できる新たな方法が望まれてい
る。

【０００５】そこで本出願人も特開平６−２９８７９４
号公報で、蛋白質を水性媒体中で蛋白分解酵素により加
水分解して得られたアンギオテンシン変換酵素阻害剤含
有ペプチド溶液を精製するにあたり、加水分解反応溶
液から不溶物を除去したのち、該ペプチド濃度を１０重
量％以上の溶液とし、該溶液を合成吸着剤と接触さ
せ、非吸着画分を分収し、該合成吸着剤を水または塩
水溶液で洗浄して更に非吸着画分を回収する方法を開示
した。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】しかしながら、上記合
成吸着剤による精製により、苦みは除去できるものの、
素材由来の臭いが残り、また、ペプチドの回収率が７０
〜７５％程度とやや悪かった。そこで、本発明者は、そ
の他のペプチドの精製手段を探索し、通常着色成分や不
純物の除去に用いられる活性炭について注目した。しか
し活性炭でアンギオテンシン変換酵素阻害ペプチドの精
製を行うと、苦みペプチドが除去出来なかったり、アン
ギオテンシン変換酵素阻害活性が低下したりすることが
たびたび発生し、活性炭の性能面をより深く検討する必
要があると考えられた。

【０００７】

【課題を解決するための手段】しかるに本発明者はかか
る課題を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、蛋白質を水
性媒体中で蛋白質分解酵素により加水分解して得られた
アンギオテンシン変換酵素阻害ペプチド含有溶液を、平
均細孔直径３ｎｍ以下の活性炭を用いて処理することに
より、阻害活性を低下させることなく、苦みや臭いが除
去できることを見いだし本発明を完成するに至った。

【０００８】

【発明の実施の形態】以下、本発明について詳述する。
本発明においては、まず蛋白質を水性媒体中で蛋白分解
酵素により加水分解してアンギオテンシン変換酵素阻害
剤ペプチド（以下ＡＣＥ阻害ペプチドと称する）含有溶
液を得る。本発明で用いられる蛋白質としては天然物由
来のものであれば特に制限はなく、動物性蛋白質、植物
性蛋白質いずれでも良い。具体的には魚肉、貝肉、豚
肉、牛肉、鶏肉、卵白等の動物性蛋白質や、トウモロコ
シ、大豆、米、小麦等の植物性蛋白質が挙げられ、特に
臭いをもつ魚肉が適している。本発明における蛋白分解
酵素としては、サーモライシン、ペプシン、トリプシ
ン、キモトリプシン等公知の蛋白分解酵素及び微生物が
生産する蛋白分解酵素等いずれも使用可能である。本発
明における水性媒体としては特に限定はなく、水、エタ
ノール、メタノール等のアルコール、ナトリウム、カリ
ウム、マグムシウム、カルシウム等の塩酸塩、硫酸塩、
炭酸塩の水溶液などが挙げられる。

【０００９】蛋白質を酵素で加水分解するには、蛋白質
の性状により処方は異なるが、難溶性の場合には熱水に
蛋白質を混合し強力な撹拌でホモジナイズした後、固形
分０．１〜５０重量％程度の溶解液又は懸濁液とした
後、酵素を蛋白質に対して、０．００１〜５０重量％、
好ましくは０．１〜１５重量％添加し、５〜９０℃、好
ましくは２０〜７０℃で、１分〜３日間の反応条件下
で、分解率５％以上になるまで静置又は撹拌下で加水分
解し、ＡＣＥ阻害ペプチド含有溶液を得る。該分解率は
全窒素に対するアミノ酸窒素の％で表す。測定方法は、
Journal of Agricultural and Food Chemistry 24 No.6
1090〜1093(1976)に基づく。

【００１０】本発明では、上記で得られたＡＣＥ阻害ペ
プチド含有溶液を平均細孔直径が３ｎｍ以下好ましく
は、１〜３ｎｍの活性炭を用いて精製することを最大の
特徴とするもので以下かかる精製法について述べる。上
記ＡＣＥ阻害ペプチド含有溶液は、そのまま上記の活性
炭による精製工程に入ってもよいが、まず上記で生成さ
せた加水分解生成物から不溶物を分離除去して液体分を
回収するのが好ましい。不溶物の除去にあたっては、遠
心分離、濾過、デカンテーションなどの通常の固液分離
方法のいずれかが採用される。不溶物を除去した後の液
体分はＡＣＥ阻害ペプチド濃度が１重量％以上、好まし
くは５〜３０重量％の溶液となるように濃縮されるのが
好ましい。濃縮方法としてはフラッシュ式、遠心薄膜式
などの減圧濃縮法、限外濾過膜濃縮法、逆浸透膜濃縮法
などが採用される。

【００１１】次いで、該ＡＣＥ阻害ペプチド含有溶液を
平均細孔直径３ｎｍ以下の活性炭と接触させ、非吸着画
分を回収する。活性炭の平均細孔直径としては、３ｎｍ
以下であることが必要で、３ｎｍを越えると苦みや臭い
が除去できなくなり不適当である。かかる平均細孔直径
として好ましくは１〜３ｎｍである。１ｎｍ未満では、
苦みや臭いが充分除去できない場合がある。かかる平均
細孔直径は窒素ガス吸着法により測定される。測定装置
としては例えば、Ｍｉｃｒｉｔｉｅｓ社製「ＡＳＡＰ２
４００」が用いられる。

【００１２】上記における特定の平均細孔直径をもつ活
性炭としては、水蒸気、二酸化炭素、空気などの酸化性
ガスで賦活した活性炭が挙げられ、好ましくは水蒸気で
賦活した活性炭である。賦活方法としては、特に制限さ
れるものではないが、平均粒子径が０．００１〜１０ｍ
ｍ程度の木材、椰子殻、石炭等の炭化物に、７５０〜１
０００℃の水蒸気を吹付けて３０〜４８時間程度賦活す
ることにより水蒸気で賦活した活性炭が調製される。具
体的には、武田薬品工業株式会社製「白鷺ＡＷ５０」、
「白鷺Ａ」、「白鷺Ｍ」、「白鷺Ｃ」、「白鷺Ｐ」、
「水道用白鷺ＣＷ」、「白鷺ＰＨＣ」、「モルシーボン
ＮＧＰ_X」、「粒状白鷺ＷＨＡ」等が挙げられる。

【００１３】更に上記活性炭の細孔容積としては、０．
０１〜０．８ｃｃ／ｇが好ましく、更には０．１〜０．
７ｃｃ／ｇである。かかる細孔容積が０．０１ｃｃ／ｇ
未満では、臭いや苦みが完全に取れない場合があり、
０．８ｃｃ／ｇを越えるとＡＣＥ阻害活性が低下する場
合がある。また、上記活性炭の比表面積も８００〜１３
００ｍ²／ｇが好ましく、更には９００〜１２００ｍ²／
ｇである。かかる比表面積が８００ｍ²／ｇ未満では、
臭いや苦みが完全に取れない場合があり、１２００ｍ²
／ｇを越えるとＡＣＥ阻害活性が低下し、収率も低下す
る場合がある。なお、上記の細孔容積、比表面積も上記
窒素吸着法により測定される値である。

【００１４】ＡＣＥ阻害ペプチド含有溶液を上記活性炭
を用いて処理する方法としては、バッチ式の処理、連続
カラムによる処理のいずれでもよいが、処理効率の点で
バッチ式の方が好ましい。バッチ式で処理する場合に
は、ＡＣＥ阻害ペプチド含有溶液の濃度を１〜５０重量
％（好ましくは５〜３０重量％）の調整した後、該ペプ
チドに対して１０〜１００重量％の活性炭を用いるのが
好ましく、更には１５〜８０重量％である。１０重量％
未満では、苦みや臭いが充分に除去されない場合があ
り、１００重量％を越えると、ＡＣＥ阻害活性が低下
し、収率も低下する場合があり好ましくない。活性炭を
添加後、５〜８０℃（好ましくは３０〜７０℃）で、３
０〜１２０分程度撹拌した後、活性炭を濾紙、濾布、ガ
ラスフィルター、遠心分離等で除去して非吸着画分を回
収すればよい。なお、活性炭を濾過する際に活性炭が濾
液にもれるのを防ぐために、活性炭と同時にケイソウ土
を添加して濾過したり、予めケイソウ土を水等で分散し
た後、濾紙、濾布、ガラスフィルターで濾過して、ケイ
ソウ土の層を形成してから活性炭を濾過してもよい。

【００１５】連続カラムにより処理する場合には、ＡＣ
Ｅ阻害ペプチド溶液の濃度１〜２０重量％の水溶液を線
速度（ＬＶ）を３ｃｍ／時間以上、空間速度（ＳＶ）を
３／時間以下程度になるように活性炭を充填したカラム
に導入すればよい。

【００１６】上記の活性炭での吸着処理後の活性炭は必
要に応じて水洗浄され、非吸着画分が回収される。回収
時に吸着した苦味成分の溶離が見られる場合に、塩水溶
液を使用することもある。塩水溶液とは特に制限はなく
ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウムなど
の塩酸塩、炭酸塩、硫酸塩などの塩の水溶液が挙げられ
る。特に、塩化ナトリウムの水溶液が実用的である。該
水溶液の使用濃度は１重量％〜飽和濃度、好ましくは５
〜２０重量％であり、使用量は活性炭の充填容積の１〜
３倍量が好ましい。

【００１７】本発明の精製方法で得られたＡＣＥ阻害ペ
プチド溶液は必要に応じて濃縮乾固、フリーズドライ、
スプレードライ、真空乾燥等の方法で粉末化され、医薬
品、健康食品（健康補助食品）として用いられたり、苦
みがなく臭いもないのでそのまま食品に添加して用いら
れる。

【００１８】医薬品や健康食品として用いられる場合、
ペプチド単独あるいは製剤用担体と混合して調製した製
剤の形で使用される。製剤用担体としては、製剤分野に
おいて常用され、かつペプチドと反応しない物質が用い
られる。具体的には、例えば乳糖、ブドウ糖、マンニッ
ト、デキストリン、シクロデキストリン、デンプン、庶
糖、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム、合成ケイ酸ア
ルミニウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、
ヒドロキシプロピルデンプン、カルボキシメチルセルロ
ースカルシウム、メチルセルロース、ゼラチン、アラビ
アゴム、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプ
ロピルメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、ポリ
ビニルアルコール、軽質無水ケイ酸、ステアリン酸マグ
ネシウム、タルク、トラガント、ベントナイト、ビーガ
ム、酸化チタン、ソルビタン脂肪酸エステル、ラウリル
硫酸ナトリウム、グリセリン、脂肪酸グリセリンエステ
ル、精製ラノリン、グリセロゼラチン、ポリソルベー
ト、マクロゴール、植物油、ロウ、流動パラフィン、白
色ワセリン、フルオロカーボン、非イオン界面活性剤、
プロピレングリコール等が挙げられる。剤型としては、
錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、シロップ剤、懸濁
剤、注射剤等が挙げられる。これらの製剤は常法に従っ
て調製される。上記で製剤された医薬品や健康食品は、
血圧降下、心筋肥大防止、脳卒中防止、の目的で用いら
れ、例えば健康食品としては以下のものが挙げられる。

【００１９】イ）サポニン含有食品（オタネニンジン根
含有食品、エゾウコギ含有食品）ロ）糖含有食品〔オリゴ糖（フラクトオリゴ糖含有食
品、イソマルトオリゴ糖含有食品、ガラクトオリゴ糖含
有食品）、多糖類（シイタケ含有食品、ムコ多糖、蛋白
含有食品、コンドロイチン硫酸含有食品、マンネンタケ
（霊芝）含有食品、キチン、キトサン含有食品ハ）ミネラル含有食品（カルシウム含有食品、アルファ
ルファ含有食品、プルーンエキス食品、β−カロチン含
有食品ニ）油脂含有食品ビタミンＥ含有油脂〔麦（小麦、鳩麦）胚芽油、大豆胚
芽油、米胚芽油〕エイコサペンタエン酸含有食品、大豆
レシチン含有食品、γ−リノレン酸含有食品（月見草
油、ボラージ油）、ドコサヘキサエン酸含有食品ホ）蛋白質含有食品大豆蛋白含有食品、カゼイン、ホエー蛋白、鯉加工食品ヘ）タウリン牡加工食品、シジミ加工食品、緑イ貝加工食品

【００２０】また、具体的にペプチドが添加される食品
としては、以下のものが挙げられる。（１）農水産加工品はるさめ、こしあん、こんにゃく、パン、麺類（即席め
ん、パスタ、生めん、乾めん）、餅、シリアル食品、大
豆加工品（豆腐、豆乳、納豆、凍豆腐）、水産加工品
〔練り製品、（かに風味）蒲鉾、（魚肉）ハム、（魚
肉）ソーセージ、（魚肉）ウィンナー、ふりかけ、お茶
づけのり〕、缶詰（シーチキン、オイルサーディン、
焼鳥）、レトルト食品（カレー、シチュー、スパゲティ
ー）（２）乳製品牛乳、加工乳、乳酸菌飲料、バター、チーズ、練乳、粉
乳（３）菓子ケーキ、ムース、（粉末）デザート、アイスクリーム、
飴、チョコレート、グミ、キャンディー、クッキー、ウ
エハース、ゼリー（４）調味料味噌、醤油、うま味（風味）調味料、（粉末）天然調味
料、ソース、ドレッシング、焼き肉のたれ、みりん、カ
レー、シチュー、香辛料、スパイス、ヨーグルト（５）飲料清涼飲料（炭酸飲料、果実飲料、スポーツドリンク、栄
養飲料）、嗜好飲料（コーヒー、ココア、麦汁）、みそ
汁、スープ

【００２１】ＡＣＥ阻害ペプチドの投与量（摂取量）
は、投与方法、患者の症状、年令等により異なるが、通
常１回０.００１〜５０００ｍｇ、好ましくは０．０１
〜２０００ｍｇを１日当たり１〜３回である。上記の製
剤あるいは食品は、ＡＣＥ阻害ペプチドを０.０１重量
％以上、好ましくは０.５〜１００重量％の割合で含有
することができる。これらの製剤あるいは食品は、治療
上価値ある他の成分を含有していてもよい。

【００２２】

【実施例】以下、本発明を実施例を挙げて更に詳しく説
明する。実施例１カツオ節（蛋白質含量７０重量％）５０ｇに水４０ｍｌ
を加え充分ホモジナイズし、水酸化ナトリウムでｐＨ
７．０とし、サーモライシンを０．６ｇ（蛋白質に対し
て１．７重量％）添加後、６０℃で５時間静置反応を行
った（分解率２８．６％）。その後、１００℃で１０分
間煮沸後放置して、３０００×ｇで遠心分離して得られ
た上澄み液を得た。残渣には水８０ｍｌを添加して撹拌
後、再度同条件で遠心分離して上澄み液を得た。上澄み
液を合わせて、ペプチド濃度７．１重量％の上澄液１４
０ｍｌを得た。

【００２３】上記の如く調製したＡＣＥ阻害ペプチド含
有溶液をロータリーエバポレターでペプチド濃度１０重
量％に濃縮し、かかる溶液１００ｍｌに、活性炭（武田
薬品工業（株）製「白鷺Ａ５０Ｗ」、平均細孔直径２．
３５ｎｍ、比表面積１０２０ｍ²／ｇ、細孔容積０．６
０ｃｃ／ｇ、含水率５０％）４ｇを加えて、６０℃で１
時間攪拌し、更にケイソウ土５ｇを加えて撹拌した後、
濾過し吸着画分を回収した。かかる回収液についてペプ
チド回収率、ＡＣＥ阻害活性の測定及び苦味、臭いの官
能テストを行った。

【００２４】ペプチド回収率精製前のＡＣＥ阻害ペプチド含有溶液中のペプチドに対
して、精製後のペプチドの回収率をケルダール法により
測定した。

【００２５】ＡＣＥ阻害活性の測定ＡＣＥ阻害活性の測定は、ＣｈｅｕｎｇとＣｕｓｈｍａ
ｎの方法〔ＢｉｏｃｈｅｍｉｃａｌＰｈａｒａｍａｃ
ｏｌｏｇｙ２０，１６３７(１９７１)〕に準じて以下
の方法で行った。酵素基質；Ｂｚ（ベンジル）−Ｇｌｙ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ
（８６ｍｇを水８ｍｌとリン酸緩衝液８ｍｌに溶解した
溶液）酵素；うさぎの肺のアセトンパウダー（シグマ社製）（１ｇを５０ｍＭのリン酸緩衝液１０ｍｌ中で粉砕した
後、遠心分離した上澄液）上記の酵素基質を１００μｌ、酵素溶液を１２μｌ及び
本発明の所定濃度のペプチドを混合し、水で全体を２５
０μｌとした後、３７℃で３０分間反応を行った。

【００２６】反応は１Ｎ−ＨＣｌの２５０μｌを用いて
終了させた。反応終了液に酢酸エチル１．５ｍｌを入れ
Ｖｏｒｔｅｘで１５秒撹拌し、それを遠心分離した。酢
酸エチル層から１．０ｍｌをとり出して、酢酸エチルを
留去し、それに１ｍｌの蒸留水を入れて残渣を溶解し、
抽出された馬尿酸の紫外吸収２２８ｎｍの値（Ｏ
Ｄ₂₂₈）を測定した。ＡＣＥ阻害率はペプチドなしで反
応したときのＯＤ₂₂₈を１００％とし、反応時間０分の
ときのＯＤ₂₂₈を０％として求め阻害率５０％の時のペ
プチドの濃度ＩＣ₅₀（μｇＰｒｏ／ｍｌ）で活性を表示
した。苦みの官能テスト上記回収液を凍結乾燥して得られた粉末を１０名のパネ
ラーで評価した。評価は、苦味を全く感じない場合を１
０点、苦みを少し感じる場合を５点、苦味を強く感じる
場合を０点とし、パネラー１０名の評価点数を合計して
算出した。臭いの官能テスト上記処理液を凍結乾燥して得られた粉末を１０名のパネ
ラーで評価した。評価は、臭いを全く感じない場合を１
０点、臭いを少し感じる場合を５点、臭いを強く感じる
場合を０点とし、パネラー１０名の評価点数を合計して
算出した。

【００２７】実施例２実施例１で活性炭の添加量を６ｇにした以外は同様に処
理して、実施例１と同様に評価した。

【００２８】実施例３実施例１で活性炭として、活性炭（武田薬品工業（株）
製「白鷺Ｐ」、平均細孔直径２．０５ｎｍ、比表面積１
０００ｍ²／ｇ、細孔容積０．５８ｃｃ／ｇ、含水率３
％）を用いた以外は同様に処理して、実施例１と同様に
評価した。

【００２９】実施例４実施例１においてサーモライシンを同重量のペプシンに
替えて実験を行った。ペプシンの作用条件としては塩酸
でｐＨ１．６として、反応温度は３７℃で５時間静置反
応した。以下同様に処理して実施例１と同様に評価し
た。

【００３０】実施例５実施例１において、かつお節の替りに鶏肉を用いた以外
は同様に処理して、同様に評価した。

【００３１】比較例１実施例１において、塩化亜鉛水溶液で賦活した活性炭
（武田薬品工業（株）製「カルボラフィン」、平均細孔
直径３．６５ｎｍ、比表面積１４５０ｍ²／ｇ、細孔容
積１．１９ｃｃ／ｇ、含水率３％）４ｇを用いた以外は
実施例１と同様に処理して同様に評価した。実施例１〜
５、比較例１の結果は表１にまとめて示す。

【００３２】〔表１〕ペプチドＡＣＥ阻害活性苦味の官能臭いの官能回収率（％） (μｇPro./ｍｌ) テストテスト実施例１９５５５９０９０実施例２９２５６９５９５実施例３９３５６９５９５実施例４９５６０９０９０実施例５９５５９９０９０比較例１９１６８７０６５

【００３３】

【発明の効果】蛋白質を加水分解して得られたアンギオ
テンシン変換酵素阻害ペプチド含有溶液を、平均細孔直
径３ｎｍ以下の活性炭を用いて処理する本発明の精製方
法により、ＡＣＥ阻害ペプチド含有溶液からＡＣＥ阻害
活性を低下させることなく苦みや臭いを除くことがで
き、血圧降下剤又は血圧降下食品として有用なペプチド
が収得できる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続きＦターム(参考） 4B018 LB01 LB02 LB05 LB06 LB07 LB08 LB09 MD20 ME04 MF12 4B064 AG23 CA21 CB05 CD20 CE02 CE09 DA01 DA10 4C084 AA06 BA44 DC40 ZA421 ZA422 ZC171 ZC172 4H045 AA20 CA52 DA57 EA01 EA23 FA70 GA15 GA20

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】蛋白質を水性媒体中で蛋白質分解酵素に
より加水分解して得られたアンギオテンシン変換酵素阻
害ペプチド含有溶液を、平均細孔直径３ｎｍ以下の活性
炭を用いて処理することを特徴とするペプチドの精製方
法。
【請求項２】活性炭が水蒸気で賦活した活性炭である
ことを特徴とする請求項１記載のペプチドの精製方法。
【請求項３】活性炭を上記ペプチドに対して１０〜１
００重量％用いることを特徴とする請求項１あるいは２
記載のペプチドの精製方法。
【請求項４】蛋白質が魚肉であることを特徴とする請
求項１〜３いずれか記載の精製方法。