JP2000513033A

JP2000513033A - ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼインヒビターとして有用なベンゾ（５，６）シクロヘプタピリジン環状尿素およびラクタム

Info

Publication number: JP2000513033A
Application number: JP11504497A
Authority: JP
Inventors: ニョロジ，エフ．ジョージ; ビバルバン，バンチャ; エイ．ピント，パトリック; エム．ギリジャバラバン，ビヨール
Original assignee: Schering Corp
Current assignee: Merck Sharp and Dohme Corp
Priority date: 1997-06-17
Filing date: 1998-06-15
Publication date: 2000-10-03
Anticipated expiration: 2018-06-15
Also published as: HK1024909A1; CN1267297A; AU744182B2; WO1998057963A1; AU7953898A; US5852034A; EP0991644A1; KR20010013892A; ES2195352T3; DE69813554T2; HUP0004521A2; HUP0004521A3; CA2293712C; CA2293712A1; ATE237611T1; JP3515787B2; EP0991644B1; IL133414A0; US6039683A; NZ501570A

Abstract

(57)【要約】 Ras機能を阻害し、それ故、細胞の異常増殖を阻害または処置するために有用な式(Ｉ)の化合物、またはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物を開示する；ここで、ＲおよびＲ²は、ハロであり；Ｒ¹およびＲ³は、Ｈおよびハロであるが、但し少なくとも１つはＨであり；Ｗは、二重結合がC-11位に存在する場合、Ｎ、ＣＨまたはＣであり；Ｒ⁴は-(CH₂)n−Ｒ⁵または(II)であり；Ｒ⁵は(III)であり；Ｒ⁶はＲ⁵または(IV)であり；Ｚ¹およびＺ²は、独立して=Oおよび=Sからなる群から選択され；ｎは、１〜６であり；そしてｎ₁は、０または１である。

Description

【発明の詳細な説明】ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼインヒビターとして有用なベンゾ(5,6)シクロヘプタピリジン環状尿素およびラクタム背景 1995年4月20日に公開された国際公報番号WO95/10516号は、以下の式の化合物を開示する：ここでＲは、ヘテロ原子により-C(=Z)-基の炭素に結合したヘテロシクロアルキル(置換されたピペリジニル(piperidiny)または置換されたピペリジニルメチル) であり得る。化合物はファルネシルタンパク質トランスフェラーゼを阻害するのに有用であると言われる。発明の要旨本発明の化合物は、以下の式Ｉにより表されるか：またはそのN-オキシド、またはその薬学的に受容可能な塩もしくは溶媒和物である。ここで：ＲおよびＲ²は、独立してハロから選択され；Ｒ¹およびＲ³は、独立してＨおよびハロからなる群から選択されるが、但しＲ¹ およびＲ³の少なくとも１つはＨであり；Ｗは、二重結合がC-11位に存在する場合、Ｎ、ＣＨまたはＣであり；Ｚ¹およびＺ²は、独立して=Oおよび=Sからなる群から選択され；ｎは、１〜６であり；そしてｎ₁は、０または１である。本発明の化合物において、好ましくはＲはBrであり、Ｒ²はハロであり、そしてＲ¹はハロであり；またはＲはBrであり、Ｒ²はハロであり、そしてＲ³はハロであり；またはＲはBrであり、Ｒ²はハロであり、そしてＲ¹およびＲ³はそれぞれＨである。Ｒ²は好ましくはBrまたはClである。Ｒ¹およびＲ³がハロである場合、好ましくはBrまたはClである。Ｚ¹は好ましくは=Oである。Ｚ²は好ましくは =Oである。Ｗは好ましくはＣＨである。ｎについての好ましい値は１〜３である。Ｒ⁵およびＲ⁶は、ｎ₁は好ましくは１であり、そして得られるピペリジニル基は好ましくは炭素環メンバーの４位でメチレンに結合している。本発明の化合物は：(i)インビトロで、ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼを強力に阻害するが、ゲラニルゲラニルタンパク質トランスフェラーゼI を阻害しない；(ii)ファルネシルアクセプターであるトランスフォーミングRas の形態によって誘導される表現型の変化をブロックするが、操作されてゲラニルゲラニルアクセプターとなったトランスフォーミングRasの形態によって誘導される表現型の変化をブロックしない；(iii)ファルネシルアクセプターであるRas の細胞内プロセシングをブロックするが、操作されてゲラニルゲラニルアクセプターとなったRasの細胞内プロセシングをブロックしない；および(iv)トランスフォーミングRasによって誘導される培養中の異常細胞増殖をブロックする。本発明の化合物は、ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼおよびオンコジーンタンパク質Rasのファルネシル化を阻害する。本発明はさらに、哺乳動物( 特にヒト)中のrasファルネシルタンパク質トランスフェラーゼを、上記三環式化合物の有効量を投与することによって阻害する方法を提供する。ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼを阻害するために本発明の化合物を患者に投与することは、下記の癌の処置に有用である。本発明は、本発明の化合物の有効量を投与することによって、異常増殖細胞( 形質転換細胞を包含する)を阻害または処置する方法を提供する。細胞の異常増殖とは正常な調節機能とは独立した細胞の増殖をいう(例えば、接触阻害の欠如) 。これは以下の細胞の異常増殖を包含する：(1)活性化Rasオンコジーンを発現する腫瘍細胞(腫瘍)；(2)Rasタンパク質が他の遺伝子の発癌性変異の結果として活性化される脛瘍細胞；および(3)異常なRas活性化が生じる他の増殖性疾患の良性および悪性の細胞。本発明はまた、腫瘍の増殖を阻害または処置するための方法を提供する。この方法は、そのような処置を必要とする哺乳動物(例えばヒト)に、有効量の本明細書に記載の三環式化合物を投与することによってなされる。特に本発明は、上記化合物の有効量を投与することによって活性化Rasオンコジーンを発現する腫瘍の増殖を阻害または処置する方法を提供する。阻害または処置され得る腫瘍の例としては、乳癌、前立腺癌、肺癌(例えば肺腺癌)、膵臓癌(例えば膵臓癌(例えば外分泌性膵臓癌など))、結腸癌(例えば結腸直腸癌(例えば結腸腺癌および結腸腺腫など))、骨髄白血病(例えば、急性骨髄性白血病(AML))、甲状腺濾胞腫瘍、脊髄形成異常症候群(MDS)、膀胱癌および表皮癌が挙げられるが、これらに限定されない。本発明はまた、増殖性疾患(良性および悪性の両方)を阻害または処置するための方法を提供すると考えられる。ここでRasタンパク質は他の遺伝子中の発癌性変異の結果として異常に活性化される(すなわちRas遺伝子自体が変異によって発癌性形態に活性化されているのではない)。この阻害または処置は、本明細書に記載の三環式化合物の有効量をそのような処置を必要とする哺乳動物(例えばヒト)に投与することによって達成される。例えば、良性の増殖性異常である神経線維腫症、または変異またはチロシンキナーゼオンコジーン(例えば、neu、src 、abl、lckおよびfyn)の過剰発現によってRasが活性化される腫瘍が、本明細書に記載の三環式化合物によって阻害または処置され得る。本発明の方法で有用な三環式化合物は細胞の異常増殖を阻害または処置する。理論に拘束されることを望むものではないが、これらの化合物は、ras p21のようなGタンパク質の機能をGタンパク質のイソプレニル化をブロックすることによって阻害することによって機能し得、その結果これらの化合物は腫瘍の増殖または癌のような増殖性疾患の治療に有用なものなるものと考えられる。理論に拘束されることを望むものではないが、これらの化合物はrasファルネシルタンパク質トランスフェラーゼを阻害し、それゆえras形質転換細胞に対する抗増殖活性を示すと考えられる。発明の詳細な説明本明細書において、以下の用語は他に断りのない限り下記のように定義される： MH⁺は質量スペクトルにおける分子の分子イオン＋水素を表す； Buはブチルを表し；Etはエチルを表し；Meはメチルを表し；Phはフェニルを表し；そしてハロはフルオロ、クロロ、ブロモおよびヨードを表す。以下の溶媒および試薬は、以下に示す略語で本明細書で表され得る：テトラヒドロフラン(THF)；エタノール(EtOH)；メタノール(MeOH)；酢酸(HOAcまたはAcOH )；酢酸エチル(EtOAc)；N,N-ジメチルホルムアミド(DMF)；トリフルオロ酢酸(TF A)；無水トリフルオロ酢酸(TFAA)；1-ヒドロキシベンゾトリアゾール(HOBT)；m- クロロ過安息香酸(MCPBA)；トリエチルアミン(Et₃N)；ジエチルエーテル(Et₂O) ；エチルクロロホルメート(ClCO₂Et)；ならびに1-(3-ジメチルアミノプロピル)- 3-エチルカルボジイミド塩酸塩(DEC)。Ｗおよび任意の二重結合に関する式Ｉの代表的な構造は以下の通りである：環系内に引かれた線は、示された結合が任意の置換可能の環炭素原子に付加し得ることを示す。本発明の特定の化合物は異なる異性体(例えば、エナンチオマーおよびジアステレオマー)形態で存在し得る。本発明は、純粋形態および混合物(ラセミ混合物を包含する)の両方で、このようなすべての異性体を意図する。エノール形態もまた包含される。特定の三環式化合物は自然の状態では酸性であり得る。例えば、カルボキシルまたはフェノール性ヒドロキシル基を有する化合物である。これらの化合物は、薬学的に受容可能な塩を形成し得る。このような塩の例は、ナトリウム、カリウム、カルシウム、アルミニウム、金、および銀の塩を包含し得る。また、薬学的に受容可能なアミン、例えば、アンモニア、アルキルアミン、ヒドロキシアルキルアミン、N-メチルグルカミンなどによって形成される塩も意図される。特定の塩基性三環式化合物もまた薬学的に受容可能な塩、例えば酸付加塩を形成する。例えば、ピリド窒素原子は強酸との塩を形成し得るが、他方、アミノ基のような塩基性置換基を有する化合物も弱酸との塩を形成し得る。塩の形成に適した酸の例は、塩酸、硫酸、リン酸、酢酸、クエン酸、シュウ酸、マロン酸、サリチル酸、リンゴ酸、フマル酸、コハク酸、アスコルビン酸、マレイン酸、メタンスルホン酸ならびに当業者に周知の他の無機酸およびカルボン酸である。塩は遊離塩基形態を十分な量の所望の酸と接触させて、従来の方法で塩を生成することによって調製される。遊離塩基形態は、塩を適切な希薄塩基水溶液、例えばNa OH、炭酸カリウム、アンモニア、および重炭酸ナトリウムの希薄水溶液で処理することによって再生され得る。遊離塩基形態はある種の物理特性、例えば極性溶媒への溶解度において、その対応の塩形態といくぶん異なるが、酸および塩基の塩はそれ以外はその対応する遊離塩基形態と本発明の目的に関して同等である。このような酸および塩基の塩はすべて、本発明の範囲内の薬学的に受容可能な塩であることが意図され、そして酸および塩基の塩はすべて本発明の目的に関して対応の化合物の遊離形態と等価であると見なされる。本発明の化合物は、以下の実施例に記載される方法により、またWO95/10516( 例えば、式400.00の化合物を調製する方法を参照のこと)に記載の方法を使用することにより生成され得る。本発明の化合物(Ｚ¹およびＺ²は=Oである)は式IIまたはIIIの化合物を反応させることにより調製され得る：ここで全ての他の置換基は式Ｉについて定義された通りであり、それぞれ式HOOC -(CH₂)_n-NHR⁷またはHOOC-(CH₂)_n3-NHR⁷の酸を有し、ここでｎは上で定義された通りであり、そしてＲ⁷はt-ブトキシカルボニル(BOC)のようなアミノ保護基である。反応は標準アミド結合条件を使用して行われ、例えば、反応は室温で、DMFのような不活性溶媒中で、1-(3-ジメチルアミノプロピル)-3-エチルカルボジイミド塩酸塩のような縮合剤、N-メチルモルホリンのような塩基および1-ヒドロキシベンゾトリアゾールのような活性化剤の存在下で行われる。次いで、Ｒ⁷保護基は、例えばトリフルオロ酢酸での処理により除去されて、式IIＡまたはIIIＡの対応するアミンを得る：式Ｉ化合物(Ｒ⁵およびＲ⁶は環状ラクタムを含む)を調製するために、式IIＡまたはIIIＡの化合物は4-ブロモブチリルクロリドまたは4-ブロモバレリルクロリドと反応され、続いてNaHのような試薬で環化される。式Ｉの化合物(Ｒ⁵またはＲ⁶は環状尿素を含む)は式IIＡまたはIIIＡのアミンと2-ブロモエチルイソシアネートまたは3-クロロプロピルイソシアネートとを反応させることによって同様に調製され、すでに述べたように続いてNaHのような試薬で環化される。あるいは式IIＡまたはIIIＡのアミンは上記のように標準アミド結合条件下でラクタム-置換アセテートと反応され得る。Ｚ¹、またはＺ¹およびＺ²が硫黄を表す場合、式Ｉの化合物(Ｚ¹、またはＺ¹およびＺ²は酸素である)は、P₂S₅、Lawesson試薬または酸素の代わりに硫黄を導入し得る他の試薬と反応される。反応はピリジン、トルエンまたは他の適切な溶媒中、高温で起こり得る。Ｚ¹およびＺ²が異なる化合物について、酸素から硫黄への形態の転換は、出発物質(すなわち、式IIIＡの化合物およびアルカノイルクロリドまたはイソシアネート)が反応される前に、行われ得る。三環部分の環ＩのピリジルN-オキシドを含む式Ｉの化合物は、当該分野で周知の手順によって調製され得る。例えば、式IIの化合物(ＷはＣまたはＣＨである) は、適切な有機溶媒(例えば、CH₂Cl₂(通常、無水))中、適切な温度で、MCPBAと反応され得、式IIａのN-オキシドを得る。一般的には、式IIの有機溶媒溶液は、MCPBAを添加する前に、約０℃まで冷却される。次いで、反応系は反応期間中、室温まで加温される。所望の生成物は、標準分離手段で回収され得る。例えば、反応混合物は適切な塩基(例えば、飽和NaH CO₃またはNaOH(例えば、1N NaOH))の水溶液で洗浄され、次いで無水MgSO₄で乾燥され得、そして生成物を含む溶液を、減圧濃縮し得る。生成物を標準的な手段( 例えば、シリカゲルを使用するクロマトグラフィー(例えば、フラッシュカラムクロマトグラフィー))により精製し得る。式IIの化合物は当該分野で公知の方法によって調製される(例えば、WO95/1051 6、米国特許第5,151,423号および以下に記載されるものに記載される方法によって)。式IIの化合物(三環構造におけるピリジン環のC-3位はブロモにより置換されている)はまた、以下の工程を含む手順によって調製され得る： (a)式のアミド(ここでR^11aはBrであり、R^5aは水素であり、かつR^6aはC₁-C₆アルキル、アリールまたはヘテロアリールである；R^5aはC₁-C₆アルキル、アリールまたはヘテロアリールであり、かつR^6aは水素である；R^5aおよびR^6aは独立してC₁-C₆アルキルおよびアリールからなる群から選択される；あるいはR^5aおよびR^6aはそれらが結合する窒素と一緒になって、4個から6個の炭素原子、または3個から5個の炭素原子を含み、そして-O-および-NR^9a-(ここでR^9aはH、C₁-C₆アルキルまたはフェニル)からなる群から選択される1個のヘテロ部分を含む環を形成する)を式の化合物(ここでR^1a、R^2a、R^3aおよびR^4aは独立して水素およびハロからなる群から選択され、そしてR^7aはClまたはBrである)と、強塩基の存在下で反応させて、式の化合物を得る工程； (b)工程(a)の化合物を (i)POCl₃と反応させて、式のシアノ化合物を得る工程；あるいは (ii)DIBALHと反応させて、式のアルデヒドを得る工程； (c)上記シアノ化合物またはアルデヒドを式のピペリジン誘導体に(ここでLはClおよびBrからなる群から選択される脱離基である)と反応させて、各々、下式のアルデヒドまたはアルコールを得る工程； (d)(i)上記アルデヒドをCF₃SO₃Hで環化して、式IIの化合物(ここで点線は二重結合を表す)を得る工程；または (d)(ii)上記アルコールをポリリン酸で環化して、式IIの化合物(ここで点線は単結合を表す)を得る工程。 WO95／10516、米国特許第5,151,423号に開示され、そして後に説明する式IIの化合物の調製方法は、三環式ケトン中間体を用いる。式のこのような中間体(ここでR^11b、R^1a、R^2a、R^3aおよびR^4aは独立して、水素およびハロからなる群から選択される)は以下のプロセスによって調製され得る。このプロセスは下記の工程を包含する： (a)式の化合物を (i)式NHR^5aR^6aのアミン(ここでR^5aおよびR^6aは上記プロセス中で定義した通り)と、パラジウム触媒および一酸化炭素の存在下で反応させて、式：のアミドを得る工程；または (ii)式R^10aOHのアルコール(ここでR^10aはC₁-C₆低級アルキルまたはC₃-C₆シクロアルキルである)と、パラジウム触媒および一酸化炭素の存在下で反応させて、式：のエステルを得、次いでこのエステルを式NHR^5aR^6aのアミンと反応させて、アミドを得る工程； (b)上記アミドを式のヨード置換ベンジル化合物(ここでR^1a、R^2a、R^3a、R^4aおよびR^7aは上記の通りである)と、強塩基の存在下で反応させて、式の化合物を得る工程；および (c)工程(b)の化合物を、式R^8aMgL(ここでR^8aはC₁-C₈アルキル、アリールまたはヘテロアリールであり、そしてLはBrまたはClである)の試薬で環化する工程( ただし環化に先だって、R^5aまたはR^6aが水素である化合物を適切なN-保護基と反応させる)。式IIの化合物の(+)-異性体(ここでXはCHである)は、エステル交換を触媒する酵素を含むプロセスを用いることによって、高いエナンチオ選択性を有して調製され得る。好ましくは、式IIのラセミ化合物(ここでXはＣであり、二重結合が存在し、そしてＲ³はHでない)を、酵素(例えば、Toyobo LIP-300)およびアシル化剤(例えば、トリフルオロエチル(trifluoroethly)イソブチレート)と反応させる；次いで、得られる(+)-アミドを加水分解(例えばH₂SO₄のような酸と還流することにより)して、対応する光学的に富化された(+)-異性体(ここでＸはCHであり、そしてＲ³はHでない)を得る。あるいは、まず、式IIのラセミ化合物(ここでXはC であり、二重結合が存在し、そしてＲ³はIIでない)は、対応する式IIのラセミ化合物(ここでXはCHである)に還元され、次いで酵素(Toyobo LIP-300)および上記のようなアシル化剤で処理されて、(+)-アミドを得、これを加水分解して光学的に富化された(+)-異性体を得る。式IIIの化合物は当該分野で公知の手順により式IIの化合物から調製され得る( 例えば、1-N-t-ブトキシ-カルボニルピペラジニル-4-酢酸と式IIの化合物とを上記の標準アミド結合条件下で反応することによって)。本発明に有用な化合物は、以下の調製実施例により例示されるが、これらは本開示の範囲を限定すると解釈されるべきではない。本発明の範囲内の代替機構経路および類似の構造は当業者に明らかであり得る。調製実施例１工程Ａ：４-(８-クロロ-３-ブロモ-5,6-ジヒドロ-11H-ベンゾ[5,6]シクロヘプタ[1,2-b ]ピリジン-11-イリデン)-1-ピペリジン-1-カルボン酸エチルエステル(25.86ｇ、 55.9mmol)と濃Ｈ₂ＳＯ₄(250mL)とを-5℃で合わせ、次いでＮａＮＯ₃(4.8ｇ、56. 4mmol)を添加し、そして２時間撹拌する。この混合物を氷(600ｇ)に注ぎ、そして濃ＮＨ₄ＯＨ（水溶液）で塩基性化する。この混合物を濾過し、水(300mL)で洗浄し、次いでＣＨ₂Ｃｌ₂(500mL)で抽出する。抽出物を水(200mL)で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、次いで濾過し、そして減圧下で残渣となるまで濃縮する。この残渣をクロマトグラフ（シリカゲル、10％ＥｔＯＡｃ／ＣＨ₂Ｃｌ₂）して、24.4 ｇ（収率86％）の生成物を得る。ｍ.ｐ.＝165〜167℃、質量スペクトル：ＭＨ⁺ ＝506、508(ＣＩ)。元素分析：計算値−Ｃ，52.13;Ｈ，4.17;Ｎ，8.29。測定値−Ｃ，52.18;Ｈ，4.51;Ｎ，8.16。工程Ｂ：工程Ａの生成物(20ｇ、40.5mmol)と濃Ｈ₂ＳＯ₄(200mL)とを20℃で合わせ、次いでこの混合物を０℃に冷却する。1,3-ジブロモ-5,5-ジメチル-ヒダントイン(7 .12ｇ、24.89mmol)をこの混合物に添加し、そして３時間20℃で撹拌する。０℃ に冷却し、追加のジブロモヒダントイン(1.0ｇ、3.5mmol)を添加し、そして20℃ で２時間撹拌する。この混合物を氷(400ｇ)に注ぎ、濃ＮＨ₄ＯＨ（水溶液）を用いて０℃で塩基性化し、そして得られた固体を濾過によって収集する。この固体を水(300mL)で洗浄し、アセトン(200mL)中でスラリー化し、そして濾過し、19.7 9ｇ（収率85.6％）の生成物を得る。ｍ.ｐ.＝236〜237℃、質量スペクトル：ＭＨ⁺＝586(ＣＩ)。元素分析：計算値−Ｃ，45.11;Ｈ，3.44;Ｎ，7.17。測定値−Ｃ，44.95;Ｈ，3.57;Ｎ，7.16。工程Ｃ：Ｆｅやすりくず（filing）(25ｇ、447mmol)、ＣａＣｌ₂(10ｇ(90mmol))、および90:10ＥｔＯＨ／水（700mL）中での工程Ｂの生成物(20ｇ、34.19mmol)の懸過し、そして濾過ケーキを熱ＥｔＯＨ(２×200mL)で洗浄する。濾液と洗浄液とを合わせ、そして減圧下で残渣となるまで濃縮する。残渣をＣＨ₂Ｃｌ₂(600mL) で抽出し、水(300mL)で洗浄し、そしてＭｇＳＯ₄で乾燥する。濾過し、そして減圧下で残渣となるまで濃縮し、次いでクロマトグラフ（シリカゲル、30％ＥｔＯＡｃ／ＣＨ₂Ｃｌ₂）して、11.4ｇ（収率60％）の生成物を得る。ｍ.ｐ.＝211〜2 12℃、質量スペクトル：ＭＨ⁺＝556(ＣＩ)。元素分析：計算値−Ｃ，47.55;Ｈ，3.99;Ｎ，7.56。測定値−Ｃ，47.45;Ｈ，4.31;Ｎ，7.49。工程Ｄ：工程Ｃの生成物(20ｇ、35.9mmol)を、−10℃で、ＮａＮＯ₂(８ｇ、116mmol)の濃ＨＣｌ(120mL)水溶液にゆっくりと（分割して）添加する。得られた混合物を０℃で２時間撹拌し、次いで50％Ｈ₃ＰＯ₂(150mL、1.44mole)に０℃で１時間かけてゆっくりと添加（滴下）する。０℃で３時間撹拌し、次いで氷(600ｇ)に注ぎ、そして濃ＮＨ₄ＯＨ（水溶液）で塩基性化する。ＣＨ₂Ｃｌ₂(２×300mL)で抽出し、この抽出物をＭｇＳＯ₄で乾燥し、次いで濾過し、そして減圧下で残渣となるまで濃縮する。この残渣をクロマトグラフ（シリカゲル、25％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）して、13.67ｇ（収率70％）の生成物を得る。ｍ.ｐ.＝163〜165℃、質量スペクトル：ＭＨ⁺＝541(ＣＩ)。元素分析：計算値−Ｃ，48.97;Ｈ，4.05;Ｎ，5.22。測定値−Ｃ，48.86;Ｈ，3.91;Ｎ，5.18。工程Ｅ：工程Ｄの生成物(6.8ｇ、12.59mmol)と濃ＨＣｌ（水溶液）(100mL)とを合わせ、そして85℃で一晩撹拌する。この混合物を冷却し、氷(300ｇ)に注ぎ、そして濃ＮＨ₄ＯＨ（水溶液）で塩基性化する。ＣＨ₂Ｃｌ₂(２×300mL)で抽出し、そしてこの抽出物をＭｇＳＯ₄で乾燥する。濾過し、そして減圧下で残渣となるまで濃縮し、クロマトグラフ（シリカゲル、10％ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ＋２％ＮＨ₄ ＯＨ（水溶液））して、5.4ｇ（収率92％）の標題化合物を得る。ｍ.ｐ.＝172〜 174℃、質量スペクトル：ＭＨ⁺＝469(FAB)。元素分析：計算値−Ｃ，48.69;Ｈ，3.65;Ｎ，5.97。測定値−Ｃ，48.83;Ｈ，3.80;Ｎ，5.97。調製実施例２工程Ａ：濃HClに溶解しそして約100℃まで16時間加熱することによって、４-(８-クロロ-３-ブロモ-5,6-ジヒドロ-11H-ベンゾ[5,6]シクロヘプタ[1,2-b]ピリジン-11- イリデン)-1-ピペリジン-1-カルボン酸エチルエステル(2.42ｇ)を加水分解する。混合物を冷却し、1M NaOH(水溶液)で中和する。CH₂Cl₂で抽出し、抽出物をMgS O₄で乾燥させ、濾過し、そして減圧下で濃縮して、1.39g(収率69％)の生成物を得る。工程Ｂ：工程Ａの生成物(１ｇ、2.48mmol)と乾燥トルエン(25mL)とを合わせ、トルエン中の１ＭＤＩＢＡＬ(2.5mL)を添加し、そしてこの混合物を還流下で加熱する。 0.5時間後、トルエン中の１ＭＤＡＢＡＬ(2.5mL)をさらに添加し、そして還流下で１時間加熱する。（反応を、50％ＭｅＯＨ／ＣＨ₂Ｃｌ₂＋ＮＨ₄ＯＨ（水溶液）を用いるＴＬＣによってモニタリングする。）この混合物を室温まで冷却し、50mLの１ＮＨＣｌ（水溶液）を添加し、そして５分間撹拌する。１ＮＮａＯＨ（水溶液）(100mL)を添加し、次いでＥｔＯＡｃ(３×150mL)で抽出する。この抽出物をＭｇＳＯ₄で乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮し、1.1ｇの標題化合物を得る。調製実施例３［ラセミならびに(+)-および(-)-異性体］工程Ａ：調製実施例１の工程Ｄの生成物の16.6g（0.03mol）を、CH₃CNおよび水の3:1溶液（212.65mL CH₃CNおよび70.8mLの水）と合わせ、そして得られるスラリーを室温にて一晩撹拌する。32.833g（0.153mol）のNaIO₄、次いで0.31g（2.30mmol）のRuO₂を添加し、そして室温にて撹拌して1.39g（69％収率）の生成物を得る。（RuOの添加は、発熱反応を伴い、そして温度は、20℃〜30℃に上昇する。）混合物を1.3時間撹拌し（温度は約30分後25℃まで戻った）、次いで濾過して固体を除去し、そしてCH₂Cl₂で固体を洗浄する。濾液を真空下で残渣まで濃縮し、そして残渣をCH₂Cl₂に溶解する。不溶性固体を濾過して除去し、そしてCH₂Cl₂で固体を洗浄する。濾液を水で洗浄し、約200mLの容量に濃縮し、そして漂白剤で、次いで水で洗浄する。6N HCl（水性）で抽出する。水性抽出物を０ ℃に冷却し、そして50％NaOH（水性）をゆっくり添加して温度を＜30℃に保ちながらpH＝4に調節する。CH₂Cl₂で２回抽出し、MgSO₄で乾燥し、そして真空下で残渣まで濃縮する。20mLのEtOH中で残渣をスラリーにし、そして０℃まで冷却する。濾過によって得られる固体を集め、そして真空下で固体を乾燥して7.95g 工程Ｂ：工程Ａの生成物の21.58g（53.75mmol）およびEtOHとトルエンとの無水1:1混合物500mLを合わせ、1.43g（37.8mmol）のNaBH₄を添加し、そして混合物を10分間還流で加熱する。混合物を０℃に冷却し、100mLの水を添加し、次いで温度を＜1 0℃に保ちながら1M HCl（水性）でpH＝4〜5に調節する。250mLのEtOAcを添加し、そして層を分離する。有機層をブラインで洗浄し（３×50mL）、次いでNa₂SO₄ で乾燥させる。真空下で残渣（24.01g）にまで濃縮し、そして残渣をクロマトグラフにかけて（シリカゲル、30％ヘキサン／CH₂Cl₂）生成物を得る。不純な画工程Ｃ：工程Ｂの生成物の18.57g（46.02mmol）および500mLのCHCl₃を合わせ、次いで6 .70mL（91.2mmol）のSOCl₂を添加し、そして混合物を室温にて４時間撹拌する。 800mLのTHF中のピペラジン(35.6g（0.413mol）)の溶液を５分かけて添加し、そして混合物を室温にて１時間撹拌する。混合物を還流で一晩加熱し、次いで室温まで冷却し、そして混合物を1LのCH₂Cl₂で希釈する。水（５×200mL）で洗浄し、そして水性洗浄液をCHCl₃（３×100mL）で抽出する。有機溶液のすべてを合わせ、ブライン（３×200mL）で洗浄し、そしてMgSO₄で乾燥させる。真空下で残渣まで濃縮し、そしてクロマトグラフにかけて（シリカゲル、５％、7.5％、10％M eOH／CH₂Cl₂＋NH₄OHのグラジエント）ラセミ混合物として18.49gの表題の化合物を得る。工程Ｄ−エナンチオマーの分離工程Ｃのラセミの表題化合物を、調製用キラルクロマトグラフイー（Chiralpa ck AD，5cm×50cmカラム，流速100mL/分，20％iPrOH/ヘキサン＋0.2％ジエチルアミン）によって分離して、9.14gの(+)-異性体および9.30gの(-)-異性体を得る。 (+)-異性体についての物理化学データ：融点＝74.5℃〜77.5℃；質量スペクトルMH⁺=471.9；[a]＝＋97.4°(8.48mg/2mL MeOH)。 (-)-異性体についての物理化学データ：融点＝82.9℃〜84.5℃；質量スペクトルMH⁺=471.8；[a]＝−97.4°(8.32mg/2mL MeOH)。調製実施例４工程Ａ： 15g（38.5mmol）の4-(8-クロロ-3-ブロモ-5,6-ジヒドロ-11H-ベンゾ[5,6]シクロヘプタ[1,2-b]ピリジン-11-イリデン)-1-ピペリジン-1-カルボン酸エチルエステルおよび150mLの濃H₂SO₄を−５℃にて合わせ、次いで3.89g（38.5mmol）のKNO₃ を添加し、そして４時間撹拌する。混合物を3Lの氷に注ぎ、そして50％NaOH（水性）で塩基性にする。CH₂Cl₂で抽出し、MgSO₄で乾燥させ、次いで濾過しそして真空下で残渣まで濃縮する。残渣をアセトンから再結晶して、6.69gの生成工程Ｂ：工程Ａの生成物の6.69g（13.1mmol）および100mLの85％EtOH/水を合わせ、次いで0.66g（5.9mmol)のCaCl₂および6.56g（117.9mmol）のFeを添加し、そして濾過ケーキを熱EtOHでリンスする。真空下で濾液を濃縮して、7.72gの生成物を得る。質量スペクトル：MH⁺＝478.0工程Ｃ：工程Ｂの生成物の7.70gおよび35mLのHOAcを合わせ、次いでHOAc中のBr₂の溶液 (45mL)を添加し、そして混合物を室温にて一晩撹拌する。300mLの1N NaOH（水性）、次いで75mLの50％NaOH（水性）を添加し、そしてEtOAcで抽出する。抽出物をMgSO₄で乾燥させ、そして真空下で残渣まで濃縮する。残渣をクロマトグラフにかけ（シリカゲル、20％〜30％EtOAc/ヘキサン）、3.47gの生成物を（他の1.2 8gの部分精製した生成物とともに）得る。質量スペクトル：MH⁺＝555.9。工程Ｄ： 0.557g（5.4mmol）のt-ブチルニトライトおよび3mLのDMFを合わせ、そして混合物を60℃〜70℃で加熱する。工程Ｃの生成物の2.00g（3.6mmol）および4mLのD MFの混合物をゆっくり添加し（一滴ずつ）、次いで混合物を室温まで冷却する。 40℃でさらに0.64mLのt-ブチルニトライトを添加し、そして混合物を60℃〜70℃ まで0.5時間再加熱する。室温まで冷却し、そして混合物を150mLの水に注ぐ。CH₂ Cl₂で抽出し、抽出物をMgSO₄で乾燥させ、そして真空下で残渣まで濃縮する。残渣をクロマトグラフにかけ（シリカゲル、10％〜20％EtOAc/ヘキサン）、0.74 gの生成物を得る。質量スペクトル：MH⁺＝541.0。工程Ｅ：工程Ｄの生成物の0.70g（1.4mmol）および8mLの濃HCl（水性）を合わせ、そして混合物を還流で一晩加熱する。30mLの1N NaOH（水性）、次いで5mLの50％NaOH （水性）を添加し、そしてCH₂Cl₂で抽出する。抽出物をMgSO₄で乾燥させ、そして真空下で濃縮して0.59gの表題の化合物を得る。質量スペクトル：M⁺＝468.7。融点＝123.9℃〜124.2℃。調製実施例５［ラセミならびに(+)-および(-)-異性体］工程Ａ：調製実施例４からの8.1gの表題の化合物のトルエン溶液を調製し、そしてトルエン中17.3mLのDIBALの1M溶液を添加する。混合物を還流で加熱し、そしてさらに21mLの1M DIBAL/トルエン溶液を40分間かけてゆっくり添加する（一滴ずつ）。反応混合物を約０℃まで冷却し、そして700mLの1M HCl（水性）を添加する。有機相を分離しそして捨てる。水相をCH₂Cl₂で洗浄し、抽出物を捨て、次いで50 ％NaOH（水性）を添加することによって水相を塩基性にする。CH₂Cl₂で抽出し、抽出物をMgSO₄で乾燥させ、そして真空下で濃縮して7.30gの表題の化合物を得、これはエナンチオマーのラセミ混合物である。工程Ｂ−エナンチオマーの分離：工程Ａのラセミ表題化合物を、調製用キラルクロマトグラフィー（Chiralpack AD，5cm×50cmカラム、20％iPrOH/ヘキサン＋0.2％ジエチルアミンを使用する）によって分離して、表題化合物の(+)+異性体および(-)-異性体を得る。 (+)-異性体についての物理化学データ：融点＝148.8℃；質量スペクトルMH⁺＝ 469；[a]＝＋65.6°(mg/2mL MeOH)。 (-)-異性体についての物理化学データ：融点＝112℃；質量スペクトルMH⁺＝46 9；[a]＝−65.2°(mg/2mL MeOH)。調製実施例６［ラセミならびに(+)-および(-)-異性体］工程Ａ： 40.0g（0.124mol）の出発ケトンおよび200mLのH₂SO₄を合わせ、そして０℃まで冷却する。13.78g（0.136mol）のKNO₃を1.5時間かけてゆっくり添加し、次いで室温まで温め、そして一晩撹拌する。調製実施例１の工程Ａの記載と実質的に同じ手順を使用して反応を行う。クロマトグラフ（シリカゲル、20％、30％、40 ％、50％EtOAc/ヘキサン、次いで100％EtOAc）にかけて、28gの9-ニトロ生成物を、より少量の7-ニトロ生成物ならびに19gの7-ニトロおよび9-ニトロ化合物の混合物とともに得る。工程Ｂ：調製実施例１の工程Ｃの記載と実質的に同じ手順を使用して、工程Ａの28g（7 6.2mmol）の9-ニトロ生成物、400mLの85％EtOH/水、3.8g（34.3mmol）のCaCl₂、および38.28g（0.685mol）のFeを反応させて、24gの生成物を得る。工程Ｃ：工程Ｂの13g（38.5mmol）の生成物、140mLのHOAcを合わせ、そしてHOAc(10mL) 中のBr₂(2.95mL，57.8mmol)の溶液を20分かけてゆっくり添加する。反応混合物を室温にて撹拌し、次いで真空下で残渣まで濃縮する。CH₂Cl₂および水を添加し、次いで50％NaOH（水性）でpH＝8〜9に調節する。有機相を水、次いでブラインで洗浄し、そしてNa₂SO₄で乾燥させる。真空下で濃縮して、11.3gの生成物を得る。工程Ｄ： 100mLの濃HCl（水性）を０℃まで冷却し、次いで5.61g（81.4mmol）のNaNO₂を添加し、そして10分間撹拌する。工程Ｃの11.3g（27.1mmol）の生成物をゆっくり添加し（一部ずつ）、そして混合物を０℃〜３℃にて2.25時間撹拌する。180m Lの50％H₃PO₂（水性）をゆっくり添加し（一滴ずつ）、そして混合物を０℃にて一晩放置する。150mLの50％NaOHを30分かけてゆっくり添加して（一滴ずつ）、p H＝9に調節し、次いでCH₂Cl₂で抽出する。抽出物を水、次いでブラインで洗浄し、そしてNa₂SO₄で乾燥させる。真空下で残渣まで濃縮し、そしてクロマトグラフ（シリカゲル、２％EtOAc/CH₂Cl₂）にかけて8.6gの生成物を得る。工程Ｅ：工程Ｄの8.6g（21.4mmol）の生成物および300mLのMeOHを合わせ、そして０℃ 〜２℃まで冷却する。1.21g（32.1mmol）のNaBH₄を添加し、約０℃にて１時間撹拌する。さらに0.121g（3.21mmol）のNaBH₄を添加し、０℃にて２時間撹拌し、次いで０℃にて一晩放置する。真空下で残渣まで濃縮し、次いでCH₂Cl₂と水との間で残渣を分配する。有機相を分離し、そして真空下で濃縮して（50℃）、8.2g の生成物を得る。工程Ｆ：工程Ｅの8.2g（20.3mmol）の生成物および160mLのCH₂Cl₂を合わせ、０℃まで冷却し、次いで14.8mL（203mmol）のSOCl₂を30分かけてゆっくり添加する（一滴ずつ）。混合物を室温まで温め、そして4.5時間撹拌し、次いで真空下で残渣まで濃縮し、CH₂Cl₂を添加し、そして1N NaOH（水性）、次いでブラインで洗浄し、そしてNa₂SO₄で乾燥させる。真空下で残渣まで濃縮し、次いで乾燥THFおよび8 .7g（101mmol）のピペラジンを添加し、そして室温にて一晩撹拌する。真空下で残渣まで濃縮し、CH₂Cl₂を添加し、そして0.25N NaOH（水性）、水、次いでブラインで洗浄する。Na₂SO₄で乾燥させ、そして真空下で濃縮して9.46gの粗生成物を得る。クロマトグラフ（シリカゲル、５％MeOH/CH₂Cl₂＋NH₃）にかけ工程Ｇ−エナンチオマーの分離：工程Ｆからのラセミの表題化合物（5.7g）を、30％iPrOH/ヘキサン＋0.2％ジエチルアミンを使用して、調製実施例３の工程Ｄに記載のようにクロマトグラフにかけて、表題化合物の2.88gのR-(+)-異性体および2.77gのS-(-)-異性体を得る。 R-(+)-異性体についての物理化学データ：質量スペクトルMH⁺＝470.0；[a]＝＋12.1°(10.9mg/2mL MeOH)。 S-(-)-異性体についての物理化学データ：質量スペクトルMH⁺＝470.0；[a]＝ −13.2°(11.51mg/2mL MeOH)。調製実施例７［ラセミならびに(+)-および(-)-異性体］工程Ａ：調製実施例１の工程Ｄからの13g（33.3mmol）の表題化合物および300mLのトルエンを20℃にて合わせ、次いでトルエン中の32.5mL（32.5mmol）のDIBALの1M溶液を添加する。混合物を還流で１時間加熱し、20℃まで冷却し、さらに32.5mLの 1M DIBAL溶液を添加し、そして還流で１時間加熱する。混合物を20℃まで冷却し、そしてこれを400gの氷、500mLのEtOAc、および300mLの10％NaOH（水性）の混合物中に注ぐ。水層をCH₂Cl₂（３×200mL）で抽出し、有機層をMgSO₄で乾燥させ、次いで真空下で残渣まで濃縮する。クロマトグラフ（シリカゲル、12％MeOH/C H₂Cl₂＋４％NH₄OH）にかけて、10.4gの表題化合物をラセミ体として得る。質量工程Ｂ−エナンチオマーの分離：工程Ａのラセミ表題化合物を、調製用キラルクロマトグラフィー（Chiralpack AD，5cm×50cmカラム、５％iPrOH/ヘキサン＋0.2％ジエチルアミンを使用する）によって分離して、表題化合物の(+)-異性体および(-)-異性体を得る。 (+)-異性体についての物理化学データ：質量スペクトルMH⁺＝470.9（FA (-)-異性体についての物理化学データ：質量スペクトルMH⁺＝470.9（FA 調製実施例８［ラセミならびにR-(+)-およびＳ-(-)-異性体］ 4-(8-クロロ-3-ブロモ-5,6-ジヒドロ-11H-ベンゾ[5,6]シクロヘプタ-[1,2-b] ピリジン-11-イリデン)-1-ピペリジン-1-カルボン酸エチルエステルを、調製実施例３、工程Ａ〜Ｄの記載と実質的に同じ手順で処理し、工程Ｃの生成物としてラセミ体の表題化合物、ならびに工程Ｄの生成物として、表題化合物のR-(+)-異性体およびをS-(-)-異性体を得る。調製実施例９工程Ａ： 9.90g(18.9mmol)の調製実施例４、工程Bの生成物を150mL CH₂Cl₂および200mL のCH₃CN中に溶解し、そして60℃まで加熱する。2.77g(20.8mmol)のN-クロロスクシンイミドを添加し、そしてTLC(30％EtOAc/H₂O)により反応をモニターしながら３時間加熱還流する。追加の2.35g(10.4mmol)のN-クロロスクシンイミドを添加し、そしてさらに45分還流する。反応混合物を室温まで冷却し、1N NaOHおよびC H₂Cl₂で抽出する。CH₂Cl₂層をMgSO₄で乾燥し、濾過し、そしてフラッシュクロマトグラフィー(1200mLの順相のシリカゲル、30％EtOAc/H₂Oで溶出)で精製して、6 .24gの所望の生成物を得る。M.p.193〜195.4℃。工程Ｂ： 160mLの濃HClに、-10℃で、2.07g(30.1mmol)NaNO₂を添加し、10分間攪拌する。5.18g(10.1mmol)の工程Ａの生成物を添加し、反応混合物を-10℃から0℃へ2時間加温する。反応系を-10℃まで冷却し、100mL H₃PO₂を添加し、そして一晩静置する。反応混合物を抽出するために、砕いた氷に注ぎ、そして50％NaOH/CH₂Cl₂ で塩基性化する。有機層をMgS0₄で乾燥し、濾過し、そして乾燥するまで濃縮する。フラッシュクロマトグラフィー(600mLの順相のシリカゲル、20％EtOAc/ヘキサンで溶出)で精製して3.98gの生成物を得る。質量スペクトル：MH⁺=497.2。工程Ｃ： 100mLの濃HCLに3.9gの工程Ｂの生成物を溶解し、そして一晩還流する。混合物を冷却し、50％w/w NaOHで塩基性化し、そして得られた混合物をCH₂Cl₂で抽出する。CH₂Cl₂層をMgSO₄で乾燥し、溶媒をエバポレートし、そして真空下で乾燥して、3.09gの所望の生成物を得る。質量スペクトル：MH⁺=424.9。工程Ｄ調製実施例５に記載されるのと同様の手順を使用して、1.73gの所望の生成物を得る。m.p.169.6〜170.1℃；[ａ]＝＋48.2°(ｃ＝１、MeOH)。調製実施例１０工程Ａ：無水DMF中の1.33gの調製実施例５、工程Ｂの化合物の(+)-エナンチオマーと、 1.37gの1-N-t-ブトキシカルボニルピペリジニル-4-酢酸、およびDEC、HOBTならびにN-メチルモルホリンを合わせる。室温で一晩、混合物を攪拌する。真空で濃縮して、DMFを除去し、そして50mLの飽和NaHCO₃(水溶液)を添加する。CH₂Cl₂(２ ×250mL)で抽出し、抽出物を50mLのブラインで洗浄し、そしてMgSO₄で乾燥する。真空で残渣まで濃縮し、そしてクロマトグラフ(シリカゲル、２％CH₃OH/CH₂Cl₂ ＋10％NH₄OH)にかけて、2.78gの生成物を得る。質量スペクトル：MH⁺=694.0(FA B)；[α]＝＋34.1°(5.45mg/2mL、MeOH)。工程Ｂ： 2.78gの工程Ａの生成物およびCH₂Cl₂を合わせ、次いで０℃まで冷却し、そしてTFAを添加する。混合物を０℃で３時間攪拌し、次いで1N NaOH(水溶液)、続いて50％NaoH(水溶液)を添加する。CH₂Cl₂で抽出し、MgSO₄で乾燥し、真空で濃縮して1.72gの生成物を得る。M.p.＝104.1℃；質量スペクトル：MH⁺＝594；[α]＝＋53.4°(11.42mg/2mL、CH₃OH)。調製実施例１１ (+)-1-(アミノアセチル)-4-(3-ジブロモ-8-クロロ-6,11-ジヒドロ-5H-ベンゾ[5, 6]シクロ−ヘプタ[1,2-b]ピリジン-11-イル)ピペリジン工程１：(+)-1,1-ジメチルエチル[2-[4-(3,10-ジブロモ-8-クロロ-6,11-ジヒドロ-5H-ベンゾ[5,6]シクロ-ヘプタ[1,2-b]ピリジン-11-イル)-1-ピペリジニル]-2 -オキソエチル]-カーバメート調製実施例５の生成物(＋-異性体)(0.4g、0.85mmol)をDMF(10mL)に溶解し、次いで約4℃に冷却した。次いで、BOC-グリシン(0.19g、1.1mmol)を添加し、続いてDEC(0.2g、1.1mmol)、HOBT(0.15g、1.1mmol)および4-メチルモルホリン(0.11g 、0.12μＬ、1.1mmol)を添加した。反応系を室温で一晩攪拌し、次いで真空で残渣まで濃縮し、そしてCH₂Cl₂と飽和NaHCO₃(水溶液)との間で分配した。水相をさらにCH₂Cl₂で抽出し、合わせたCH₂Cl₂画分をMgSO₄で乾燥し、真空で濃縮して残渣を得た。この残渣を溶出液として５％(NH₃飽和CH₃OH)/CH₂Cl₂を使用して、シリカゲルカラムでクロマトグラフにかけ、表題化合物を白色固体として得た：0. 52g、収率99％、m.p.＝95〜96℃、MH⁺＝628。工程２：工程１の生成物(2.65g、4.2mmol)をCH₂Cl₂(20mL)に溶解し、そして０℃まで冷却した。次いで、トリフルオロ酢酸(10mL)を添加した。反応混合物を室温で4時間攪拌し、次いで氷に注ぎ、そして50％(w/v)水性NaOHを使用して、pHを10に調整した。反応混合物をCH₂Cl₂で抽出し、合わせたCH₂Cl₂抽出液をH₂Oおよびブラインで洗浄し、そしてNa₂SO₄で乾燥した。溶媒をロータリーエバポレーションによって除去して表題化合物を白色固体として得た：2.18g、収率98％、m.p.＝150 〜152℃、MH⁺＝528。調製実施例１２ (+)-1-(3-アミノ-1-オキソプロピル)-4-(3-ジブロモ-8-クロロ-6,11-ジヒドロ-5 H-ベンゾ[5,6]シクロ-ヘプタ[1,2-b]ピリジン-11-イル)ピペリジン工程１：(+)-1,1-ジメチルエチル[3-[4-(3,10-ジブロモ-8-クロロ-6,11-ジヒドロ-5H-ベンゾ[5,6]シクロ-ヘプタ[1,2-b]ピリジン-11-イル)-1-ピペリジニル]-2 -オキソプロピル]-カーバメート BOC-β-アラニンをBOC-グリシンの代わりに使用したことを除いて、調製実施例11、工程１についての記載と本質的に同じ手順に従い表題化合物を調製して、白色固体を得た。収率＝99％、MH⁺＝642。工程２：調製実施例11、工程２における記載と本質的に同じ手順に従い表題化合物を調製して白色固体を得た。収率＝100％、m.p.＝136〜137℃、MH⁺＝642。調製実施例１３ (+)-4-(3,10-ジブロモ-8-クロロ-6,11-ジヒドロ-5H-ベンゾ[5,6]シクロ-ヘプタ- [1,2-b]ピリジン-11-イル)-1-[4-アミノ]-1-オキソブチル]ピペリジン工程１：(+)-1,1-ジメチルエチル[4-[4-(3,10-ジブロモ-8-クロロ-6,11-ジヒドロ-5h-ベンゾ[5,6]シクロ-ヘプタ[1,2-b]ピリジン-11-イル)-1-ピペリジニル]-2 -オキソブチル]-カルボキサミド BOC-α-アミノ酪酸をBOC-グリシンの代わりに使用したことを除いて、調製実施例11、工程１についての記載と本質的に同じ手順に従い表題化合物を調製して、白色固体を得た。収率＝79％、m.p.＝102〜103℃、MH+＝781。工程２：調製実施例11、工程２についての記載と本質的に同じ手順に従い表題化合物を調製して白色固体を得た。収率＝94％、m.p.＝114〜115℃、MH⁺=681。調製実施例１４ (+)-1-(アミノアセチル)-4-[2-[4-(3,10-ジブロモ-8-クロロ-6,11-ジヒドロ-5H- ベンゾ[5,6]シクロ-ヘプタ[1,2-b]ピリジン-11-イル)-1-ピペリジニル]-2-オキソエチル]ピペリジン工程１：(+)-1,1-ジメチルエチル[2-[4-[2-[4-(3,10-ジブロモ-8-クロロ-6,11- ジヒドロ-5H-ベンゾ[5,6]シクロ-ヘプタ[1,2-b]ピリジン-11-イル)-1-ピペリジニル]-2-オキソエチル]-1-ピペリジニル]-2-オキソエチル]カーバメート調製実施例10の化合物(＋-異性体)を調製実施例５からの化合物の代わりに使用したことを除いて、調製実施例11、工程１についての記載と本質的に同じ手順に従い表題化合物を調製して、白色固体を得た。収率＝82％、m.p.＝98〜99℃、 MH⁺＝753。工程２：調製実施例11、工程２についての記載と本質的に同じ手順に従い表題化合物を調製して白色固体を得た。収率＝89％、m.p.＝130〜131℃、MH⁺＝653。調製実施例１５ (+)-1-(3-アミノ-1-オキソプロピル)-4-[2-[4-(3,10-ジブロモ-8-クロロ-6,11- ジヒドロ-5H-ベンゾ[5,6]シクロ-ヘプタ[1,2-b]ピリジン-11-イル)-1-ピペリジニル]-2-オキソエチル]ピペリジン工程１：(+)-1,1-ジメチルエチル[3-[4-[2-[4-(3,10-ジブロモ-8-クロロ-6,11- ジヒドロ-5H-ベンゾ[5,6]シクロ-ヘプタ[1,2-b]ピリジン-11-イル)-1-ピペリジニル]-2-オキソエチル]-1-ピペリジニル]-3-オキソプロピル]カーバメート調製実施例10の化合物を調製実施例５の化合物の代わりに使用したことを除いて、調製実施例12、工程１についての記載と本質的に同じ手順に従い表題化合物を調製して、白色固体を得た。収率＝84％、m.p.＝87〜88℃、MH⁺＝767。工程２：調製実施例11、工程２についての記載と本質的に同じ手順に従い表題化合物を調製して白色固体を得た。収率＝84％、m.p.＝120〜121℃、MH⁺＝667。調製実施例１６ (+)-1-(4-アミノ-1-オキソブチル)-4-[2-[4-(3,10-ジブロモ-8-クロロ-6,11-ジヒドロ-5H-ベンゾ[5,6]シクロ-ヘプタ[1,2-b]ピリジン-11-イル)-1-ピペリジニル]-2-オキソエチル]ピペリジン工程１：(+)-1,1-ジメチルエチル[4-[4-[2-[4-(3,10-ジブロモ-8-クロロ-6,11- ジヒドロ-5H-ベンゾ[5,6]シクロ-ヘプタ[1,2-b]ピリジン-11-イル)-1-ピペリジニル]-2-オキソエチル]-1-ピペリジニル]-4-オキソプロピル]カーバメート調製実施例10の化合物を調製実施例５の化合物の代わりに使用したことを除いて、調製実施例13、工程１についての記載と本質的に同じ手順に従い表題化合物を調製して、白色固体を得た。収率＝79％、m.p.＝102〜103℃、MH⁺＝782。工程２：調製実施例11、工程２についての記載と本質的に同じ手順に従い表題化合物を調製して白色固体を得た。収率＝94％、m.p.＝114〜115℃、MH⁺＝681。調製実施例１７ 2g(12.7mmol)のメチル2-オキソ-1-ピロリジンアセテートを20mLのEtOH中に溶解し、次いで20mLの1M LiOHを添加する。反応混合物を１６時間室温で攪拌する。溶媒を取り去り、得られた物質を水に溶解し、そしてpHを約４に調整する。反応混合物を濃縮して、生成物を得る。質量スペクトル：MH⁺＝144。実施例１ (+)-4-(3,10-ジブロモ-8-クロロ-6,11-ジヒドロ-5H-ベンゾ[5,6]シクロヘプタ-[ 1,2-b]ピリジン-11-イル)-1-[(2-オキソ-1-ピロリジニル)アセチル]ピペリジン調製実施例１５の化合物(0.15g、0.32mmol)をDMF(5mL)に溶解し、次いで約4℃ まで冷却した。次いで、調製実施例１７の化合物(0.06g、0.4mmol)を添加し、続いてDEC(0.08g、0.4mmol)、HOBT(0.6g、0.4mmol)および4-メチルモルホリン(0.0 4g、50μＬ、0.4mmol)を添加し、次いで反応系を室温で一晩攪拌した。反応混合物を残渣まで真空で濃縮し、この残渣をCH₂Cl₂と飽和NaHCO₃(水溶液)との間で分配した。水相をさらにCH₂Cl₂で抽出し、合わせたCH₂Cl₂画分をMgSO₄で乾燥し、そして真空で濃縮して残渣を得た。この残渣を溶出液として５％(NH₃飽和CH₃OH) /CH₂Cl₂を使用して、シリカゲルカラムでクロマトグラフにかけ、表題化合物を白色固体として得た：0.11g、収率61％、m.p.＝118〜119℃、MH⁺＝596。実施例２ (+)-4-(3,10-ジブロモ-8-クロロ-6,11-ジヒドロ-5H-ベンゾ[5,6]シクロヘプタ-[ 1,2-b]ピリジン-11-イル)-1-[(1-オキソ-3-(2-オキソ-1-ピロリジニル)プロピル ]ピペリジン調製実施例１２の表題化合物(0.4g、0.74mmol)をCH₂Cl₂(10mL)に溶解し、次いで4-ブロモブチリルクロリド(0.2g、0.13mL、1.11mmol)およびEt₃N(0.164g、0.2 3ml、1.62mmol)を添加した。反応混合物を16時間室温で攪拌した。反応混合物を飽和NaHCO₃とCH₂Cl₂との間で分配した。水相をCH₂Cl₂で抽出し、合わせたCH₂Cl₂ 抽出物をMgSO₄で乾燥し、そして溶媒をロータリーエバポレーションによって除去した。得られた生成物をTHF(10mL)に溶解し、-10℃まで冷却し、NaH(0.09g、3 .7mmol)を添加し、そして反応混合物を16時間攪拌し、温度を室温にした。次いで、反応混合物を飽和NaHCO₃とEtOAcとの間で分配した。有機相をMgSO₄で乾燥し、そしてシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーにより、３％CH₃OH(NH₃で飽和)/CH₂Cl₂で溶出して精製し、表題化合物を白色固体として得た(0.07g)、m.p .＝128〜129℃、MH⁺＝610。実施例３ (+)-4-(3,10-ジブロモ-8-クロロ-6,11-ジヒドロ-5H-ベンゾ[5,6]シクロヘプタ-[ 1,2-b]ピリジン-11-イル)-1-[1-オキソ-4-(2-オキソ-1-ピロリジニル)ブチル]ピペリジン実施例２についての記載と本質的に同じ手順にしたがって、表題化合物を調製実施例13の生成物から調製し、白色固体を得る。m.p.＝127〜128℃、MH＝624。実施例４ (+)-4-(3,10-ジブロモ-8-クロロ-6,11-ジヒドロ-5H-ベンゾ[5,6]シクロヘプタ-[ 1,2-b]ピリジン-11-イル)-1-[(2-オキソ-1-ピペリジニル)アセチル]ピペリジン 4-ブロモバレリルクロリドを4ブロモブチリルクロリドの代わりに使用したことを除いては、実施例２についての記載と本質的に同じ手順にしたがって、表題化合物を調製実施例１１の生成物から調製し、白色固体を得た。収率＝50％、m.p.＝138〜139℃、MH＝610。実施例５ (+)-4-(3,10-ジブロモ-8-クロロ-6,1l-ジヒドロ-5H-ベンゾ[5,6]シクロヘプタ-[ 1,2-b]ピリジン-11-イル)-1-[1-オキソ-3-(2-オキソ-1-ピペリジニル)プロピル] ピペリジン 4-ブロモバレリルクロリドを4-ブロモブチリルクロリドの代わりに使用したことを除いては、実施例２についての記載と本質的に同じ手順にしたがって、表題化合物を調製実施例12の生成物から調製し、白色固体を得た。収率＝50％、m.p.＝138〜139℃、MH＝610。実施例６ (+)-4-(3,10-ジブロモ-8-クロロ-6,11-ジヒドロ-5H-ベンゾ[5,6]シクロヘプタ-[ 1,2-b]ピリジン-11-イル)-1-[1-オキソ-4-(2-オキソ-1-ピペリジニル)ブチル]ピペリジン 4-ブロモバレリルクロリドを4-ブロモブチリルクロリドの代わりに使用したことを除いては、実施例２についての記載と本質的に同じ手順にしたがって、表題化合物を調製実施例13の生成物から調製し、白色固体を得た。収率＝81％、m.p.＝101〜102℃、MH＝638。実施例７ (+)-4-(3,10-ジブロモ-8-クロロ-6,11-ジヒドロ-5H-ベンゾ[5,6]シクロヘプタ-[ 1,2-b]ピリジン-11-イル)-1-[(2-オキソ-1-イミダゾリジニル)アセチル]ピペリジン調製実施例１１の生成物(2.08g、3.9mmol)をCH₂Cl₂(20mL)に溶解し、そして2- ブロモエチルイソシアネート(0.8g、0.5mL、7.9mmol)を添加した。反応混合物を 16時間室温で攪拌した。反応混合物を飽和NaHCO₃とCH₂Cl₂との間で分配した。水相をCH₂Cl₂で抽出し、合わせたCH₂Cl₂抽出物をMgSO₄で乾燥し、そして溶媒をロータリーエバポレーションによって除去した。得られた生成物をTHF(20mL)に溶解し、-10℃まで冷却し、NaH(0.46g、19.5mmol)を添加し、そして反応混合物を1 6時間攪拌し、温度を室温にした。次いで、反応混合物を飽和NaHCO₃とEtOAcとの間で分配した。有機相をMgSO₄で乾燥し、そしてシリカゲルのフラッシュクロマトグラフィーにより、5％CH₃OH(NH₃で飽和)/CH₂Cl₂で溶出して精製し、表題化合物を白色固体として得た：1.95g、収率＝80％、m.p.＝167〜168℃、MH⁺＝597。実施例８ (+)-4-(3,10-ジブロモ-8-クロロ-6,11-ジヒドロ-5H-ベンゾ[5,6]シクロヘプタ-[ 1,2-b]ピリジン-11-イル)-1-[3-(2-オキソイミダゾリジニル)-1-オキソプロピル ]ピペリジン実施例7についての記載と本質的に同じ手順にしたがって、表題化合物を調製実施例12の生成物から調製し、白色固体を得る。収率＝45％、m.p.＝202〜203℃、MH⁺＝611。実施例９ ((+)-4-(3,10-ジブロモ-8-クロロ-6,11-ジヒドロ-5H-ベンゾ[5,6]シクロヘプタ- [1,2-b]ピリジン-11-イル)-1-[1-オキソ-4-(2-オキソ-1-イミダゾリジニル)ブチル]ピペリジン実施例7についての記載と本質的に同じ手順にしたがって、表題化合物を調製実施例13の生成物から調製し、白色固体を得る。収率＝52％、m.p.＝120〜123℃、MH⁺＝625。実施例１０ (+)-4-(3,10-ジブロモ-8-クロロ-6,11-ジヒドロ-5H-ベンゾ[5,6]シクロヘプタ-[ 1,2-b]ピリジン-11-イル)-1-[（ヘキサヒドロ-2-オキソ-1-ピリミジニル）アセチル]ピペリジン実施例7についての記載と本質的に同じ手順にしたがい、3-クロロプロピルイソシアネートを2-ブロモエチルイソシアネートに置き換えて、表題化合物を調製実施例11の生成物から調製し、白色固体を得る。収率＝56％、m.p.＝155〜156℃、MH⁺＝611。実施例１１ (+)-4-(3,10-ジブロモ-8-クロロ-6,11-ジヒドロ-5H-ベンゾ[5,6]シクロヘプタ-[ 1,2-b]ピリジン-11-イル)-1-[1-オキソ-3-(ヘキサヒドロ-2-オキソ-1-ピリミジニル)-オキソプロピル]ピペリジン実施例10についての記載と本質的に同じ手順にしたがって、表題化合物を調製実施例12の生成物から調製し、白色固体を得る。収率＝40％、m.p.＝135〜136℃、MH⁺＝625。実施例１２ (+)-4-(3,10-ジブロモ-8-クロロ-6,11-ジヒドロ-5H-ベンゾ[5,6]シクロヘプタ-[ 1,2-b]ピリジン-11-イル)-1-[4-(ヘキサヒドロ(hexahydo)-2-オキソ-1-ピリミジニル)オキソブチル]ピペリジン実施例10についての記載と本質的に同じ手順にしたがって、表題化合物を調製実施例13の生成物から調製し、白色固体を得る。収率＝63％、m.p.＝157〜158℃、MH⁺＝639。上記出発物質および適切な手順を使用して、以下の構造の化合物を調製する： FPT IC₅₀（ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼの阻害、インビトロ酵素アッセイ）、COS細胞IC₅₀（細胞ベースのアッセイ）、GGPT IC₅₀（ゲラニルゲラニルタンパク質トランスフェラーゼの阻害、インビトロ酵素アッセイ）、Cell Mat Assay、および抗肺瘍活性（インビボ抗腫瘍研究）を、WO 95/10516に記載のアッセイ手順によって決定した。アッセイについての試験プロトコールを使用して、ヒト腫瘍細胞増殖の阻害を決定した。軟寒天アッセイは以下の通りである：足場非依存性増殖は、腫瘍発生細胞株の特徴である。ヒト腫瘍細胞を、0.3％アガロースおよび所定の濃度のファルネシルトランスフェラーゼインヒビターを含む増殖培地に懸濁する。溶液を、上部層と同じ濃度のファルネシルトランスフェラーゼインヒビターを含む0.6％アガロースで凝固した増殖培地上に積層する。上部層を凝固した後、プレートを、５％CO₂下で37℃にて10〜16日間インキュベートしてコロニーを生長させ得る。インキュベーション後、コロニーを、MTT( 3-[4,5-ジメチルチアゾール-2-イル]-2,5-ジフェニルテトラゾリウムブロミド、チアゾールブルー）の溶液（PBS中１mg/mL）を寒天に積層することによって染色する。Ras変異状態をELISA(Oncogene Science)により決定した。コロニーを計数し、そしてIC₅₀を決定する。本発明の化合物について決定されたFPT IC₅₀値は、0.0014〜0.085μＭの範囲であった。 COS細胞におけるrasプロセシングの阻害についてのIC₅₀値は、本発明の化合物について＜0.010〜0.16μＭの範囲であった。 H ras NIH 3T3を活性化した腫瘍細胞株を使用する軟寒天アッセイの結果は、本発明の化合物について0.145〜＞0.500の範囲であった。本発明によって記載される化合物から薬学的組成物を調製するために、不活性で薬学的に受容可能なキャリアは、固体または液体のいずれかであり得る。固体形態調製物は、粉末、錠剤、分散顆粒、カプセル、オブラート、および座薬を含む。粉末および錠剤を、約５〜約70％の活性な成分から構成し得る。適切な固体キャリア（例えば、炭酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、糖、ラクトース）は、当該分野で公知である。錠剤、粉末、オブラート、およびカプセルを、経口投与のために適切な固体投薬形態として使用し得る。座薬を調製するために、低融点ワックス（例えば、脂肪酸グリセリドの混合物またはココアバター）を、まず溶融し、そして活性成分を、撹拌することによってその中に均一に分散させる。次いで、溶融した均一な混合物を、都合の良い大きさの鋳型に注ぎ、冷却させ、そしてそれによって凝固させる。液体形態調製物は、溶液、懸濁液、およびエマルジョンを含む。例として、非経口的注入のためには、水または水−プロピレングリコール溶液が、言及され得る。液体形態調製物はまた、鼻内投与のための溶液を含み得る。吸入剤に適切なエアロゾル調製物は、溶液および粉末形態の固体を含み得、それは薬学的に受容可能なキャリア（例えば、不活性な圧縮ガス）との組合せであり得る。使用する少し前に、経口または非経口投与のいずれかのために液体形態調製物に変換されることを意図される固体形態調製物もまた含まれる。このような液体形態は、溶液、懸濁液、およびエマルジョンを含む。本発明の化合物はまた、経皮的に送達され得る。経皮組成物は、クリーム、ローション、エアロゾル、および／またはエマルジョンの形態をとり得、そしてこの目的のために当該分野では従来通りのマトリックスまたはリザーバータイプの経皮パッチ中に含まれ得る。好ましくは、化合物を、経口的に投与する。好ましくは、薬学的調製物は、単位投薬形態である。このような形態では、調製物は、適切な量（例えば、所望の目的を達成するために有効な量）の活性成分を含有する単位用量に再分割される。調製物の単位用量中の活性化合物の量を、特定の適用に従って約0.1mg〜1000m g、より好ましくは約１mg〜300mgに変動され得るかまたは調節され得る。実際に用いる投薬量は、患者の条件および処置する症状の重度に依存して変動され得る。特定の状況のための適切な投薬量の決定は、当業者の範囲内である。一般に、処置は、化合物の最適な用量未満である、より少量の投薬で開始される。その後、投薬量は、その状況下の最適な効果が達せられるまで、少量ずつ増加させる。便宜上、所望ならば、全一日投薬は分割し得、そして一日の間分配して投与し得る。本発明の化合物およびその薬学的に受容可能な塩の投与の量および頻度は、患者の年齢、状態、および大きさならびに処置する症状の重度のような要因を考慮する担当臨床医の判断に従って調節される。代表的な推薦投薬処方は、腫瘍増殖をブロックする２〜４分割投薬で、10mg/日〜2000mg/日、好ましくは、10mg/日〜1000mg/日の経口投与である。この投薬量範囲内で投与された場合、化合物は無毒である。以下は、本発明の化合物を含む薬学的投薬形態の例である。薬学的組成物局面における本発明の範囲は、提供された例によって限定されるものではない。薬学的投薬形態の例実施例Ａ錠剤製造方法適切なミキサーで品目番号１および２を、10〜15分間混合する。品目番号３を用いて混合物を顆粒化する。必要に応じて、湿顆粒を粗いふるい（例えば、1/4" ，0.63cm）を通して製粉する。湿顆粒を乾燥させる。必要に応じて、乾燥した顆粒をふるいにかけ、そして品目番号４と混合し、そして10〜15分間混合する。品目番号５を添加し、そして１〜３分間混合する。混合物を適切な大きさに圧縮し、そして適切な錠剤機械で計量する。実施例Ｂカプセル製造方法適切なブレンダー中で品目番号１、２、および３を10〜15分間混合する。品目番号４を添加し、そして１〜３分間混合する。混合物を、適切なカプセル化機械で適切な２片硬ゼラチンカプセル中に充填する。本発明は上記の特定の実施態様に結びつけて記載されているが、その多くの代替、改変、および変更は、当業者に明らかである。全てのこのような代替、改変、および変更は、本発明の精神および範囲内にあると意図される。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｐ 43/00 １１１Ａ６１Ｐ 43/00 １１１ (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＺ，ＥＥ，ＧＥ，ＧＷ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＧ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ (72)発明者ピント，パトリックエイ. アメリカ合衆国ニュージャージー 07950，モーリスプレインズ，バトルリッジロード 34 (72)発明者ギリジャバラバン，ビヨールエム. アメリカ合衆国ニュージャージー 07054，パーシッパニー，メイプルウッドドライブ 10

Claims

【特許請求の範囲】１．以下の構造式により表される化合物またはそのN-オキシド、あるいはその薬学的に受容可能な塩または溶媒和物：ここで、ＲおよびＲ²は、独立してハロから選択され；Ｒ¹およびＲ³は、独立してＨおよびハロからなる群から選択されるが、但しＲ¹ およびＲ³の少なくとも１つはＨであり；Ｗは、二重結合がC-11位に存在する場合、Ｎ、ＣＨまたはＣであり；Ｚ¹およびＺ²は、独立して=Oおよび=Sからなる群から選択され；ｎは、１〜６であり；そしてｎ₁は、０または１である。２．以下からなる群から選択される請求項１に記載の化合物：３．薬学的に受容可能なキャリアと組み合わせて請求項１または２に記載の化合物の有効量を含む、細胞の異常増殖を阻害するための薬学的組成物。